特表 2024-505921 非晶質二価金属炭酸塩を含む粒子

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-02-08

(54)【発明の名称】非晶質二価金属炭酸塩を含む粒子

(51)【国際特許分類】

   A61K 33/10 20060101AFI20240201BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 47/04 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 47/10 20170101ALI20240201BHJP

   A61K 47/24 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 33/30 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 33/26 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 33/34 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 33/24 20190101ALI20240201BHJP

   A61K 33/32 20060101ALI20240201BHJP

   A61P 3/12 20060101ALI20240201BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20240201BHJP

   A61P 7/08 20060101ALI20240201BHJP

   A23L 33/16 20160101ALI20240201BHJP

【ＦＩ】

A61K33/10

A61K9/10

A61K47/04

A61K47/10

A61K47/24

A61K47/12

A61K33/30

A61K33/26

A61K33/34

A61K33/24

A61K33/32

A61P3/12

A61K9/14

A61P7/08

A23L33/16

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023545985

(86)(22)【出願日】2022-01-27

(85)【翻訳文提出日】2023-09-13

(86)【国際出願番号】 IL2022050122

(87)【国際公開番号】W WO2022162667

(87)【国際公開日】2022-08-04

(31)【優先権主張番号】63/142,631

(32)【優先日】2021-01-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/243,770

(32)【優先日】2021-09-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523285177

【氏名又は名称】アモールフィカル リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100202751

【弁理士】

【氏名又は名称】岩堀 明代

(74)【代理人】

【識別番号】100208580

【弁理士】

【氏名又は名称】三好 玲奈

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】ベン，ヨッシー

(72)【発明者】

【氏名】ブラム，イーガル

(72)【発明者】

【氏名】イロス，ロニ アントワーヌ

(72)【発明者】

【氏名】アシュケナージ，ベン

【テーマコード（参考）】

4B018

4C076

4C086

【Ｆターム（参考）】

4B018LB10

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4C086MA05

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4C086NA03

4C086ZC21

(57)【要約】

本発明は、粒子を含む組成物を提供し、粒子は第１の二価金属の炭酸塩種及び第２の二価金属の炭酸塩種を含み、粒子は、非晶質であり、第１の二価金属及び第２の二価金属は、＋２の酸化状態にあり；かつ第１の二価金属及び第２の二価金属は、それぞれ独立して、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｍｇ及びＣｒから選択される。さらに提供されるのは、その任意の誘導体を含む二価金属炭酸塩と、少なくとも１種の安定剤とを含む組成物であり、二価金属は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｍｎ、Ｍｇ、及びＮｉから選択され、任意に、２０～２００ｍ^２／ｇのＢＥＴにより特徴づけられる。開示される粒子の組成物を含む医薬組成物又は栄養補助食品組成物もまた、提供される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

複数の粒子を含む組成物であって、前記複数の粒子の各々が第１の二価金属、第２の二価金属、及び炭酸塩種を含み、前記粒子が５～５００ｎｍの粒径を有し、かつ前記炭酸塩種の総重量の少なくとも７０％が非晶質であり；
前記第１の二価金属及び前記第２の二価金属のいずれか一方が、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒを含む群から選択され；かつ
前記第１の二価金属と前記第２の二価金属のモル比が、１０:０．０５～１:１である、
複数の粒子を含む組成物。

【請求項2】

前記粒子が、安定剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記粒子内の前記安定剤と前記第１の二価金属のモル比が、１：１００～２５：１００である、請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

前記安定剤が、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される、請求項２又は３に記載の組成物。

【請求項5】

前記ポリリン酸が、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

第３の金属をさらに含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項7】

前記粒子内の前記第１の二価金属のｗ／ｗ濃度が、２０～５５％であり、かつ前記第１の二価金属及び前記第２の二価金属が、前記粒子内で実質的に均一に分布される、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物内の炭酸塩種の総重量の少なくとも９０％、又は少なくとも９５％が、非晶質である、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項9】

前記第１の二価金属が、Ｃａであり、かつ前記第２の二価金属が独立して、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｒ、Ｍｎ、及びＭｇ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項10】

粉末の形態であり、かつ前記炭酸塩種の総重量の少なくとも９５％が、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間前記組成物の保存時に非晶質のままである、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物の含水率が、１～３０重量％である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項12】

前記第１の二価金属及び前記第２の二価金属が、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｇ、Ｍｎ及びＣｒからなる群から選択され；かつ
前記第１の二価金属と前記第２の二価金属のモル比が、少なくとも１％である、
請求項２～９のいずれか一項に記載の組成物及び医薬として許容される液体担体。

【請求項13】

前記液体担体が、水溶液であり、かつ前記組成物が、懸濁液の形態である、請求項１２に記載の組成物。

【請求項14】

前記炭酸塩種の総重量の少なくとも約８０％が、少なくとも１ｄの期間前記組成物内で非晶質のままである、請求項１２及び１３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項15】

複数の粒子を含む、組成物であって、前記複数の粒子の各々がその任意の誘導体を含む二価金属炭酸塩、および少なくとも１種の安定剤を含み、前記粒子が、５～５００ｎｍの直径を有し、かつ前記二価金属炭酸塩の少なくとも７０重量％が、非晶質であり；
前記二価金属が、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、及びＭｇを含む群から選択され；かつ
前記二価金属と前記少なくとも１種の安定剤のモル比が、１００:１～１００:２５である、
組成物。

【請求項16】

前記二価金属がＭｇであるならば、前記複数の粒子が、最大２００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積により特徴づけられる、請求項１５に記載の組成物。

【請求項17】

前記安定剤が、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される、請求項１５又は１６に記載の組成物。

【請求項18】

前記ポリリン酸が、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項１７に記載の組成物。

【請求項19】

前記二価金属炭酸塩又はその水和物が、Ｚｎ又はＭｇである、請求項１５～１８のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項20】

前記粒子内の前記二価金属の重量含有量が、２０～６０％である、請求項１５～１９のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項21】

前記組成物内の前記二価金属炭酸塩の少なくとも９０重量％、又は少なくとも９５重量％が、非晶質である、請求項１５～２０のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項22】

医薬として許容される担体をさらに含む、請求項１５～２１のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項23】

前記医薬として許容される担体が、液体担体でありかつ前記組成物が、懸濁液の形態である、請求項２２に記載の組成物。

【請求項24】

前記懸濁液が、少なくとも１時間実質的に安定である、請求項２３に記載の組成物。

【請求項25】

前記二価金属が、Ｚｎ又はＭｇである、請求項１５～２１のいずれか一項に記載の組成物及び医薬として許容される液体担体。

【請求項26】

前記二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも約８０％が、少なくとも１ｄの期間前記液体組成物内で非晶質のままである、請求項２３～２５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項27】

粉末の形態であり、かつ前記二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも９５％が、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間前記組成物の保存時に非晶質のままである、請求項１５～２１のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項28】

前記粉末の含水率が、１～３０重量％である、請求項２７に記載の組成物。

【請求項29】

複数の粒子を含む組成物であって、前記複数の粒子の各々が第１の二価金属、第２の二価金属、炭酸塩種及び安定剤を含み、前記粒子が５～５００ｎｍの粒径を有し、かつ前記組成物内の前記炭酸塩種の総重量の少なくとも７０％が非晶質であり；
前記第１の二価金属が、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択され；
前記第２の二価金属が、Ｍｇであり；かつ
前記第１の二価金属と前記第２の二価金属のモル比が、１０：０．０．０５～１０．０：９．９である、
複数の粒子を含む組成物。

【請求項30】

前記粒子内の前記安定剤と前記第１の二価金属のモル比が、１：１００～２５：１００である、請求項２９に記載の組成物。

【請求項31】

前記安定剤が、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される、請求項２９又は３０に記載の組成物。

【請求項32】

前記ポリリン酸が、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項３１に記載の組成物。

【請求項33】

前記粒子内の前記第１の二価金属のｗ／ｗ濃度が、２０～５５％である、請求項２９～３２のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項34】

前記第１の二価金属とＭｇのモル比が、１０：０．０５～１：１、又は１０：０．０５～１０：３である、請求項２９～３３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項35】

医薬として許容される担体をさらに含む、請求項２９～３４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項36】

前記医薬として許容される担体が、液体担体でありかつ前記組成物が、懸濁液の形態である、請求項３５に記載の組成物。

【請求項37】

前記懸濁液が、少なくとも１時間実質的に安定である、請求項３６に記載の組成物。

【請求項38】

前記炭酸塩種の総重量の少なくとも約８０％が、少なくとも１ｄの期間前記組成物内で非晶質のままである、請求項３６又は３７に記載の組成物。

【請求項39】

前記組成物の含水率が、１～３０重量％である、請求項２９～３５のいずれか一項記載の組成物。

【請求項40】

粉末の形態であり、かつ前記炭酸塩種の総重量の少なくとも９５％が、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間前記組成物の保存時に非晶質のままである、請求項３９に記載の組成物。

【請求項41】

前記粒子が、２０～２００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積により特徴づけられる、請求項１～４０のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項42】

前記安定剤が、前記粒子内で実質的に均一に分布される、請求項２～４１のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項43】

前記二価金属が、二価金属塩、水酸化物、ヒドロキシル、酸化物、水和物又はそれらの任意の組み合わせの形態である、請求項１～４２のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項44】

前記複数の粒子の少なくとも一部が、凝集体又は凝集物の形態である、請求項１～４３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項45】

前記凝集体又は凝集物が、０.１～２００μｍの平均粒径を有することにより特徴づけられる、請求項４４に記載の組成物。

【請求項46】

前記粒子の全二価金属含有量に対する前記炭酸塩種のモル比が、０．１：１～１：１である、請求項１～４５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項47】

前記炭酸塩種が、（ｉ）前記第１の二価金属の金属炭酸塩、（ｉｉ）前記第２の二価金属の金属炭酸塩又は（ｉ）と（ＩＩ）の両方の形態である、請求項１～４６のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項48】

医薬組成物又は栄養補助食品組成物である、請求項１～４７のいずれか一項記載の組成物。

【請求項49】

前記粒子の治療的有効量又は栄養補助食品的有効量を含む、請求項４８に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願への相互参照
本出願は、２０２１年１月２８日に出願した「非晶質二価金属炭酸塩を含む粒子」と題する米国仮特許出願第６３／１４２，６３１号、及び２０２１年９月１４日に出願した「非晶質二価金属炭酸塩を含む粒子」と題する米国仮特許出願第６３／２４３，７７０号の優先権の利益を主張する。両出願の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

発明の分野
本発明は一般に、非晶質二価金属炭酸塩を含むナノ粒子の分野に関する。

【背景技術】

【0003】

背景
局所的又は全身性のアシドーシス状態（ｐＨ＜７.３５）は、広範囲の重篤な疾患及び身体エネルギーストレスの直接的で有害な結果であり、それらは疾患進行及び身体ストレスを増強する。このような塩基性物質を過剰反応させて望ましくないアルカローシス状態（ｐＨ＞７.４５）を生成することなく、制御された様式で、安全にかつ「ちょうどいいタイミング」の適時で、過剰な酸性度を中和する能力は、アシドーシス療法として非常に望まれている。二価金属炭酸塩の固体ナノ粒子、及びある程度に、より高い原子価の金属炭酸塩は、主に二価金属炭酸塩と均一に会合して、それらの溶解度がｐＨ６.５～７.３５の範囲で十分であるならば、かつナノ粒子が血液又は他の体液に直接送達されるか、又は粘膜を介した融合により送達され得るならば、この所望される能力を提供できる。

【0004】

いくつかの非アルカリ金属イオンは、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｒ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｍｎ、及びＮｉを含み、生物種が必要とする栄養素として高度に又は軽度に必要とされる。後者の主な機能は、酵素の活性中心における補因子としてのそれらの関与であり、したがって、全体の金属含有量の１％をはるかに下回る微量レベルで必要である。このような金属は、それらが体液によって容易に洗い流されず、かつそれらがゆっくりと放出されるならば、より良好に吸収され得る。そのような金属炭酸塩及びそれらの組み合わせのナノメートル粒子は、それらのナノメートル形態で血液系に輸血でき、その時初めて金属イオンの利用を最大化するためにゆっくりと放出される。

【0005】

さらなる利点が、溶解速度及び患部の最終ｐＨを制御できれば、得られる。そのような活性は、低速又は高速の放出、標的化された放出、及びニーズの条件ごとに制御された放出を可能にする。炭酸イオンは、アシドーシスのｐＨ範囲で、主に、非常に生物に必須な重炭酸イオンへと、又はより少ない程度にＣＯ_２へと変換する非常に効率的な中和剤として機能し得る。したがって、中和生成物は、それ自体が身体機能に非常に有用であるか、又は通常の呼吸もしくは腎体機能により取り込まれおよび除去される。

【0006】

炭酸アニオンの使用は、胃代謝状態でのみそれらの治療活性について考慮された。通常のｐＨ＜７.３５の細胞外酸性度レベル、すなわちアシドーシス状態、を有する身体の他の部分に炭酸イオンを送達するための固体であるが効率的な供給源として二価金属の炭酸塩を利用することは、考慮されなかった。

【0007】

このような二価金属炭酸塩の溶解速度は、所望の二価炭酸塩の好ましい相が非晶質である場合、炭酸塩を構成する選択された金属又は金属の組み合せ、その結晶性の段階及び相、並びに組み込まれる様々な安定剤に基づき調整できる。

【0008】

炭酸アニオンの使用は、胃代謝状態でのみそれらの治療活性について考慮された。通常のｐＨ＜７.３５の細胞外酸性度レベル、すなわちアシドーシス状態、を有する身体の他の部分に炭酸イオンを送達するための固体であるが効率的な供給源として二価金属の炭酸塩を利用することは、考慮されなかった。

【0009】

このような二価金属炭酸塩の溶解速度は、所望の二価炭酸塩の好ましい相が非晶質である場合、炭酸塩を構成する選択された金属又は金属の組み合せ、その結晶性の段階及び相、並びに組み込まれる様々な安定剤に基づき調整できる。

【0010】

Ｆｅ、及びＺｎなどの二価金属原子は、細胞、タンパク質、及び生化学的レベルでの機能を含む、人体の様々な生体系において重要な役割を果たす。したがって、それらの金属と炭酸塩の両方の実体を徐放様式で放出できる、ナノメートルの二価金属及び混合された金属炭酸塩としてそれらを標的組織及び身体系に運ぶ能力を有することは、都合がよい。

【0011】

非晶質でかつナノメートルのジビニル金属炭酸塩及び混合されたジビニル金属炭酸塩は通常、不安定であり、特に懸濁液に入れられるか、又は湿気及び高温にさらされると、急速に結晶化する傾向がある。合成、処理、及び保存は、特に二価金属炭酸塩の懸濁液の形態において、重大な課題であることが見出された。結晶化は主に、水と湿気の存在下で速い。したがって、このような所望のナノメートル組成物を安定化することが望まれる。

【0012】

関連技術の前述の例及びそれに関連する制限は、例示であり、排他的ではないと意図される。関連技術の他の制限は、本明細書を読むと当業者には明らかになるであろう。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

第１の態様により、第１の二価金属の炭酸塩種及び第２の二価金属の炭酸塩種を含む粒子を含む組成物が提供され；粒子は、５～５００ｎｍ、又は５～２００ｎｍの平均直径を有し、組成物の少なくとも７０重量％は、非晶質であり；第１の二価金属及び第２の二価金属のいずれか一方は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択され；第１の二価金属と第２の二価金属のモル比は、１０:０．１～３:１である。

【0014】

別の態様により、その任意の誘導体を含む二価金属炭酸塩と、少なくとも１種の安定剤を含む組成物が提供され；粒子は、５～５００ｎｍ、又は５～２００ｎｍの平均直径を有し、二価金属炭酸塩の少なくとも７０重量％は、非晶質であり；二価金属は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、及びＭｎからなる群から選択され；二価金属と少なくとも１種の安定剤のモル比は、１００:１～１００:２５である。

【0015】

別の態様により、本明細書に開示される複数の粒子、及び許容される担体を含む組成物が提供される。

【0016】

いくつかの実施形態において、粒子は、安定剤をさらに含む。

【0017】

いくつかの実施形態において、粒子内の安定剤と第１の二価金属のモル比は、１:１００～２５：１００である。

【0018】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される。

【0019】

いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0020】

いくつかの実施形態において、組成物の含水率は、１～３０重量％である。

【0021】

いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属のｗ／ｗ濃度は、２０～４０％である。

【0022】

いくつかの実施形態において、粒子は、適切な条件下で少なくとも２４時間安定である。

【0023】

ある実施形態において、二価金属炭酸塩又はその水和物は、Ｚｎである。

【0024】

いくつかの実施形態において、粒子内の二価金属の重量含有量は、２０～６０％である。

【0025】

いくつかの実施形態において、複数の粒子の少なくとも一部は、凝集体又は凝集物の形態である。

【0026】

いくつかの実施形態において、凝集体又は凝集物は、０.１～１０μｍの平均直径を有することを特徴とする。

【0027】

いくつかの実施形態において、組成物は、（ｉ）固体組成物又は（ｉｉ）懸濁液の形態である。

【0028】

いくつかの実施形態において、組成物は、医薬組成物又は栄養補助食品組成物である。

【0029】

別の態様により、複数の粒子を含む組成物が提供され、複数の粒子の各々は、その任意の誘導体を含む二価金属炭酸塩と、少なくとも１種の安定剤を含み、粒子は、５～５００ｎｍの直径を有し、二価金属炭酸塩の少なくとも７０重量％は、非晶質であり；二価金属は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＭｇからなる群から選択され；二価金属と少なくとも１種の安定剤のモル比は、１００:１～１００:２５である。

【0030】

いくつかの実施形態において、二価金属は、Ｍｇであり、次いで複数の粒子は、最大２００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積を特徴とする。

【0031】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される。

【0032】

いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0033】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩又はその水和物は、Ｚｎ又はＭｇである。

【0034】

いくつかの実施形態において、粒子内の二価金属の重量含有量は、２０～６０％である。

【0035】

いくつかの実施形態において、組成物内の二価金属炭酸塩の少なくとも９０重量％、又は少なくとも９５重量％は、非晶質である。

【0036】

いくつかの実施形態において、組成物は、医薬として許容される担体をさらに含む。

【0037】

いくつかの実施形態において、医薬として許容される担体は、液体担体であり、組成物は、懸濁液の形態である。

【0038】

いくつかの実施形態において、懸濁液は、少なくとも１時間、実質的に安定である。

【0039】

いくつかの実施形態において、組成物は、本発明の粒子及び医薬として許容される液体担体を含み、二価金属は、Ｚｎ、及びＭｇからなる群から選択される。

【0040】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも約８０％は、少なくとも１ｄの期間、液体組成物内で非晶質のままである。

【0041】

いくつかの実施形態において、組成物は、粉末の形態であり、二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも９５％は、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間、組成物の保存の際に非晶質のままである。

【0042】

いくつかの実施形態において、粉末の含水率は、１～３０重量％である。

【0043】

別の態様により、複数の粒子を含む組成物が提供され、複数の粒子の各々は、第１の二価金属、第２の二価金属、炭酸塩種及び安定剤を含み；粒子は、５～５００ｎｍの粒径を有し、組成物内の炭酸塩種の総重量の少なくとも７０％は、非晶質であり；第１の二価金属は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択され；第２の二価金属は、Ｍｇであり；第１の二価金属と第２の二価金属とのモル比は、１０：０．０．０５～１０．０：９．９である。

【0044】

いくつかの実施形態において、粒子内の安定剤と第１の二価金属のモル比は、１：１００～２５：１００である。

【0045】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される。

【0046】

いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、二リン酸、三リン酸、トリメタリン酸、ヘキサメタリン酸、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0047】

いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属のｗ／ｗ濃度は、２０～５５％である。

【0048】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属とＭｇのモル比は、１０:０．０５～１:１、又は１０：０．０５～１０：３である。

【0049】

いくつかの実施形態において、組成物は、医薬として許容される担体をさらに含む。

【0050】

いくつかの実施形態において、医薬として許容される担体は、液体担体であり、組成物は、懸濁液の形態である。

【0051】

いくつかの実施形態において、懸濁液は、少なくとも１時間、実質的に安定である。

【0052】

いくつかの実施形態において、炭酸塩種の総重量の少なくとも約８０％は、少なくとも１ｄの期間、組成物内で非晶質のままである。

【0053】

いくつかの実施形態において、組成物の含水率は、１～３０重量％である。

【0054】

いくつかの実施形態において、組成物は、粉末の形態であり、炭酸塩種の総重量の少なくとも９５％は、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間、組成物の保存の際に非晶質のままである。

【0055】

いくつかの実施形態において、粒子は、２０～２００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積を特徴とする。

【0056】

いくつかの実施形態において、安定剤は、粒子内で実質的に均質に分布される。

【0057】

いくつかの実施形態において、二価金属は、二価金属塩、水酸化物、ヒドロキシル、酸化物、水和物又はそれらの任意の組み合わせの形態である。

【0058】

いくつかの実施形態において、複数の粒子の少なくとも一部は、凝集体又は凝集物の形態である。

【0059】

いくつかの実施形態において、凝集体又は凝集物は、０.１～２００μｍの平均粒径を有することを特徴とする。

【0060】

いくつかの実施形態において、粒子の全二価金属の含有量に対する炭酸塩種のモル比は、０.１:１～１:１である。

【0061】

いくつかの実施形態において、炭酸塩種は、（ｉ）第１の二価金属の金属炭酸塩、（ｉｉ）第２の二価金属の金属炭酸塩又は（ｉ）と（ｉｉ）の両方の形態である。

【0062】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、医薬組成物又は栄養補助食品組成物である。

【0063】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、粒子の治療的有効量又は栄養補助食品として有効な量を含む。

【0064】

上記の例示的な態様及び実施形態に加えて、さらなる態様及び実施形態が、以下の詳細な説明の研究によって明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0065】

【図1】図１は、１０～１００ｎｍの範囲の凝集した一次ナノ粒子からなるＡＣＣ、ＡＭＣ、ＡＺＣ、及びメタ－ＡＣＣを含む凝集した非晶質金属炭酸塩ナノ粒子のＳＥＭ画像を表す顕微鏡写真を含む。

【図2】図２は、本発明の例示的な組成物のＴＧＡ曲線を表すグラフを含む。Ｍ－ＡＣＣ－ＴＰは、次の最大率の温度:約９０℃（吸着水の喪失）；約２４０℃（複合水及びトラップ水の喪失）；約４００℃（－ＯＨ基の縮合による水）；約６８０℃（炭酸塩分解によるＣＯ_２）、での重量減少の４つの顕著な領域を明らかにする。

【図3】図３は、本発明の例示的な非晶質金属炭酸塩及び金属含有ＡＣＣのＸＲＤパターンを表すグラフを含む。

【図4】図４は、本発明の例示的な非晶質金属炭酸塩の固体状態^１３Ｃ ＮＭＲ分析を表すグラフを含む。

【図5】図５は、合成中に添加した三リン酸安定剤の関数（カルシウムに対するモル比）として、本発明の例示的な組成物の炭酸塩の割合（カルシウムに対するモル比）を表すグラフを含む。

【図6】図６は、Ｃａ／ＰＳモル比の関数として、全ＡＣＣ粒子中へのホスホセリン（ＰＳ）安定剤の組み込み及び／又は粒子の外表面への吸着を示すグラフを含む。

【図7】図７は、Ｃａ／ＴＰＰモル比の関数として、全ＡＣＣ粒子中へのトリポリリン酸（ＴＰＰ）安定剤の組み込み及び／又は粒子の外表面への吸着を示すグラフを含む。

【図8】図８は、タンパク質濃度を示すグラフを含む。Ａ５４９細胞を、異なる処理で３継代増殖させた。３継代後に、細胞を、３重でカテプシンＢアッセイに供した。各処理から５０μｌを、アッセイのために採取した。ＡＦＣ（７－アミノ－４－トリフルオロメチルクマリン）蛍光マーカーを使用して、カテプシンＢ活性についての標準曲線を作成する（Ｏ．Ｄ＝光学密度を活性に変換する）。^＊＊＊＊Ｐ値＜０.０００１。

【図9】図９は、バンクからの倍数変化として提示されるタンパク質濃度を示すグラフを含む。Ａ５４９細胞を、異なる処理で３継代増殖させた。３継代後に、細胞を、３重でカテプシンＢアッセイに供した。各処理から５０μｌを、アッセイのために採取した。通常の一元配置ＡＮＯＶＡ、^＊＊＊＊Ｐ値＜０.０００１。

【発明を実施するための形態】

【0066】

詳細な説明
一態様により、複数の粒子を含む組成物が提供され、各粒子は、第１の二価金属及び第２の二価金属を含む炭酸塩種を含み；組成物中の炭酸塩種の少なくとも７０重量％は、非晶質であり；第１の二価金属及び第２の二価金属のいずれか一方は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。いくつかの実施形態において、第２の二価金属は、１以上の金属を含む。

【0067】

別の態様により、複数の粒子を含む組成物が提供され、各粒子は、第１の金属及び第２の金属を含む炭酸塩種を含み；組成物中の炭酸塩種の少なくとも７０重量％、又は少なくとも９９重量％は、非晶質であり；第１の金属及び第２の金属のいずれか一方は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。

【0068】

別の態様により、複数の粒子を含む組成物が提供され、各粒子は、第１の金属及び第２の金属を含む炭酸塩種を含み、さらに安定剤を含み；組成物中の炭酸塩種の少なくとも７０重量％、又は少なくとも９９重量％は、非晶質であり；第１の二価金属及び第２の二価金属のいずれか一方は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｍｇ、又はＣｒから選択され、複数の粒子は、最大５００ｍ^２／ｇ、又は最大２００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積を特徴とする。

【0069】

粒子
いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、５～２００ｎｍの平均粒径を有するナノ粒子である。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、５～９００ｎｍの平均粒径を有するナノ粒子である。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、二価金属炭酸塩種を含む。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、炭酸塩基と二価金属を含む。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、単一の金属炭酸塩種を含む。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、単一の二価金属種を含む。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、単一の二価金属炭酸塩種を含み、組成物内の炭酸塩種の少なくとも７０重量％、少なくとも７５重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％、又は少なくとも９９重量％は、それらの間の任意の範囲を含み、非晶質である。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、非晶質金属炭酸塩粒子である。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、ナノ粒子である。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、非晶質金属炭酸塩ナノ粒子であり、金属は、二価金属、三価金属、又は四価金属を含む。

【0070】

いくつかの実施形態において、金属（例えば、二価金属）は、複数の化学的に異なる金属種を含む。いくつかの実施形態において、二価金属は、第１の金属原子及び第２の金属原子を含み、第１の金属原子及び第２の金属原子は独立して、Ｃａ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され、第１の金属原子がＣａである場合、第２の金属原子は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｃｒ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。

【0071】

いくつかの実施形態において、用語「二価金属炭酸塩種」及び「炭酸塩種」は、本明細書において互換的に使用される。

【0072】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される単一の二価金属を含む。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、複数の二価金属を含み、複数の二価金属は、第１の金属原子及び第２の金属原子を含み、第１の金属原子及び第２の金属原子は独立して、Ｃａ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され、第１の金属原子がＣａである場合、第２の金属原子は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｃｒ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。

【0073】

いくつかの実施形態において、本発明の二価金属炭酸塩種は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、本発明の非晶質金属炭酸塩種又は非晶質多価金属炭酸塩は、追加の安定剤によりさらに安定化される。

【0074】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、追加の金属原子（例えば、残りの一価金属原子、例えば、Ｎａ、Ｌｉ、Ｋ及びＳｒ、又はより高い原子価の金属、例えば、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＶ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩＩ）及びＮｉ（ＩＶ）をさらに含む。いくつかの実施形態において、追加の金属原子は、非活性成分である。いくつかの実施形態において、追加の金属原子は、本発明の粒子内に微量で存在する。

【0075】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、追加の金属（一価金属、二価金属、三価金属、又はそれらの任意の組み合わせなど）を実質的に欠く。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、炭酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、及びリン酸ナトリウムなどの、その任意の塩を含む微量の一価金属を含む。

【0076】

本明細書で使用される、用語「二価金属」は、酸化状態（ＩＩ）にある金属を指す。本明細書で使用される、用語「一価金属」は、酸化状態（Ｉ）にある金属を指す。より高い原子価の金属は、「三価」及び「四価」金属であり得る。いくつかの実施形態において、本発明の二価金属は、本質的にＩＩの酸化状態の金属からなり、金属は、本明細書に記載の元素から選択される。

【0077】

いくつかの実施形態において、本明細書の粒子の金属含有量の少なくとも７０重量％、８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも８７重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９２重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９７重量％、少なくとも９８重量％、少なくとも９９重量％は、１以上の二価金属（複数可）で構成され、１以上の二価金属（複数可）は、本明細書に記載の通りである。

【0078】

いくつかの実施形態において、本明細書の組成物の金属含有量の少なくとも７０重量％、８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも８７重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９２重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９７重量％、少なくとも９８重量％、又は少なくとも９９重量％は、１以上の二価金属（複数可）で構成され、１以上の二価金属（複数可）は、本明細書に記載の通りである。

【0079】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、安定剤をさらに含む。用語「安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ ａｇｅｎｔ）」及び「安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ）」は、本明細書において互換的に使用され、製造、製剤化、保存及び／又は使用中に、粒子内の二価金属炭酸塩を非晶質状態に保つことに寄与する任意の物質（例えば、有機又は無機分子、及び／又はその塩）を指す。ある実施形態において、安定剤は、単一の薬剤である。他の実施形態において、いくつかの安定剤の使用が、包含される。いくつかの実施形態において、安定剤は、有機もしくは無機のオリゴマー又はポリマーである。

【0080】

いくつかの実施形態において、本発明の炭酸塩種は、非晶質状態にあり、少なくとも１種の安定剤によって安定化され、非晶質は、本明細書以下に記載される通りである。いくつかの実施形態において、本発明の二価金属炭酸塩種は、非晶質状態にあり、第２の二価金属種によって少なくとも部分的に安定化される。

【0081】

安定剤は、限定されないが、ヒドロキシル基、カルボキシル基、エステル基、アミン基、ホスフィノ基、ホスホノ基、リン酸基、スルホニル基、硫酸基又はスルフィノ基から選択される１以上の官能基を有する分子を含み得る。水酸化物と組み合わされたヒドロキシ含有化合物は、任意にまた、カルボキシルなどのような他の官能基も含有するが、ヒドロキシルはエステル化されない。

【0082】

いくつかの実施形態により、安定剤は、哺乳動物細胞又は生物、特にヒトに対して低い毒性を有するか又は全く毒性を有しない。いくつかの実施形態により、安定剤は、食品、栄養補助食品又は医薬品グレードのものである。いくつかの実施形態において、安定剤は、有機酸、リン酸化、ホスホン化、硫酸化又はスルホン酸化された有機化合物、ヒドロキシカルボン酸のリン酸エステル又は硫酸エステル、グルコース及びその誘導体、多糖、リン酸化アミノ酸、ビスホスホン酸、ポリホスホン酸、有機ポリリン酸、無機ポリリン酸、ヒドロキシル含有有機化合物及びポリオール、タンパク質、その誘導体、二価金属原子（例えば、Ｍｇ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｆｅ）、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0083】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ポリリン酸、ホスホセリン、アデノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、フィチン酸、クエン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸、エチドロン酸、ピロリン酸、エタノール、及びそれらの任意の組み合せからなる群から選択される。

【0084】

いくつかの実施形態において、安定剤は、各出現において独立して、１０有機酸、リン酸化、ホスホン酸化、硫酸化又はスルホン化された有機化合物、ヒドロキシルカルボン酸のリン酸エステル又は硫酸エステル、有機アミン化合物、ヒドロキシルを含む有機化合物、有機リン化合物又はその塩、リン酸化アミノ酸及びその誘導体、ビスホスホン酸化合物、有機リン化合物、有機ホスホン酸化合物、無機亜リン酸、上で定義される複数の官能基を有する有機化合物、無機リン酸化合物及び無機ポリリン酸化合物、ポリリン酸鎖を有する有機化合物、有機界面活性剤、生体必須無機イオン、又はそれらの任意の組み合わせである。

【0085】

いくつかの実施形態において、安定剤は、有機酸である。いくつかの実施形態において、有機酸は、アスコルビン酸、クエン酸、乳酸、酢酸、シュウ酸、マロン酸、グルタコン酸、コハク酸、マレイン酸、乳酸、アコニット酸から選択され、かつ任意に、少なくとも２つのカルボキシル基を有し、分子量が２５０ｇ／モル以下の化合物、例えば、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸などを含む。いくつかの実施形態において、安定剤は、クエン酸である。

【0086】

いくつかの実施形態において、ヒドロキシルカルボン酸のリン酸エステルは、ホスホエノールピルビン酸である。いくつかの実施形態において、ヒドロキシルカルボン酸のリン酸エステル又は硫酸エステルは、アミノ酸、例えば、リン酸化アミノ酸を含む。そのようなエステルの例は、ホスホセリン、ホスホスレオニン、スルホセリン、スルホスレオニン及びホスホクレアチンである。

【0087】

いくつかの実施形態において、水酸化物と組み合わされたヒドロキシル含有化合物は、例えば、スクロースのような単糖、二糖、三糖、オリゴ糖、及び多糖類、又はグリセロールのような他のポリオールを含む。いくつかの実施形態において、ヒドロキシル含有化合物は、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸などのようなヒドロキシ酸、又はセリンもしくはスレオニンなどのヒドロキシル含有アミノ酸をさらに含み得る。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0088】

安定剤のいくつかの具体的な限定されない例としては、フィチン酸、クエン酸、二塩基性ピロリン酸ナトリウム、アデノシン５'－モノリン酸（ＡＭＰ）ナトリウム塩、アデノシン５ ５'－二リン酸（ＡＤＰ）ナトリウム塩及びアデノシン５'－三リン酸（ＡＴＰ）二ナトリウム塩水和物、ホスホセリン、リン酸化アミノ酸、食品グレードの界面活性剤、ステアロイル乳酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせが挙げられる。

【0089】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ヒドロキシルカルボン酸のリン酸エステル又は硫酸エステル、例えば、ホスホエノールピルビン酸、ホスホセリン、ホスホスレオニン、スルホセリン又はスルホスレオニン、並びに単糖、二糖、三糖、オリゴ糖及び多糖から選択されるヒドロキシル含有有機化合物、例えば、スクロース、マンノース、グルコースから選択される少なくとも１種の成分を含む。ヒドロキシル含有化合物は、少なくとも１種の水酸化アルカリ、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどをさらに含み得る。リン酸化酸は、オリゴペプチド及びポリペプチド中に存在し得る。いくつかの実施形態において、安定剤は、モノカルボン酸又は複数のカルボン酸から選択される有機酸、例えば、ジカルボン酸又はトリカルボン酸である。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。いくつかの実施形態において、有機酸は、上記の通りである。

【0090】

いくつかの実施形態において、安定剤は、リン酸化アミノ酸、ポリオール及びそれらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、リン酸化化合物によって安定化され、リン酸化は、有機化合物のヒドロキシル基上で行われる。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、クエン酸、ホスホセリン、ホスホスレオニン又はそれらの任意の組み合わせから選択される化合物によって安定化される。リン酸基、亜リン酸基、ホスホン酸基及びそれらの塩又はエステルを含有する安定剤の非限定的な例としては、フィチン酸、ジメチルリン酸、トリメチルリン酸、ピロリン酸ナトリウム、ピロリン酸テトラエチル、リブロースビスリン酸、エチドロン酸及び他の医療用ビスホスホン酸、３－ホスホグリセリン酸、グリセルアルデヒド３－リン酸、１－デオキシ－Ｄ－キシルロース－５－リン酸ナトリウム塩、ジエチレントリアミンペンタキス（メチルホスホン酸）、３０－ニトリロトリ（メチルホスホン酸）、５－ホスホ－Ｄ－リボース１－二リン酸五ナトリウム塩、アデノシン５'－二リン酸ナトリウム塩、アデノシン５'－三リン酸二ナトリウム塩水和物、α－Ｄ－ガラクトサミン１－リン酸、２－ホスホ－Ｌ－アスコルビン酸三ナトリウム塩、α－Ｄ－ガラクトース１－リン酸二カリウム塩五水和物、α－Ｄ－ガラクトサミン１－リン酸、Ｏ－ホスホリルエタノールアミン、２ナトリウム塩水和物、２，３－ジホスホ－Ｄ－グリセリン酸五ナトリウム塩、ホスホ（エノール）ピルビン酸一ナトリウム塩水和物、Ｄ－グリセルアルデヒド３－リン酸、ｓｎ－グリセロール３－リン酸リチウム塩、Ｄ－（－）－３－ホスホグリセリン酸二ナトリウム塩、Ｄ－グルコース６－リン酸ナトリウム塩、ホスファチジン酸、イバンドロン酸ナトリウム塩、５－ホスホノ酢酸、ＤＬ－２－アミノ－３－ホスホノプロピオン酸又はそれらの組み合わせが挙げられる。生体必須無機イオンは、とりわけ、酸化物の相中のＮａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｐ、Ｓ、Ｎ、ＰもしくはＳ、又はアンモニアもしくはニトロ基としてのＮを含み得る。

【0091】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ポリリン酸又はその医薬として許容される塩である。いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、ポリリン酸のナトリウム、カリウム、及び任意の他の必須の塩からなる群から選択される生理学的に適合性のある水溶性ポリリン酸である。いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、有機又は無機のポリリン酸である。本明細書で使用される用語「ポリリン酸」は、リン酸（ＰＯ_４ ^３－)のポリマーエステルを指す。いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、ポリリン酸ナトリウム及びカリウムからなる群から選択される生理学的に適合性のある水溶性ポリリン酸塩である。いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、無機ポリリン酸又はその医薬として許容される塩である。

【0092】

そのような塩の非限定的な例としては、Ｎａ、Ｋ、及びＮＨ_４カチオンが挙げられる。いくつかの実施形態により、無機リン酸は、２～１０個のリン酸基、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のリン酸基を含む。いくつかの実施形態において、ポリリン酸は、ピロリン酸、三リン酸、及びヘキサメタリン酸から選択される。いくつかの実施形態において、安定剤は、ピロリン酸又はその医薬として許容される塩、例えば、ピロリン酸ナトリウムである。いくつかの実施形態において、安定剤は、三リン酸又はその医薬として許容される塩、例えば、三リン酸ナトリウムである。用語「三リン酸」及び「トリポリリン酸」は、本明細書において互換的に使用される。いくつかの実施形態において、安定剤は、ヘキサメタリン酸又はその医薬として許容される塩、例えば、ヘキサメタリン酸ナトリウムである。

【0093】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ビスホスホン酸又はその医薬として許容される塩である。このような塩の非限定的な例としては、Ｎａ、Ｋ、及びＮＨ_４カチオンが挙げられる。

【0094】

本明細書で使用される用語「ビスホスホン酸」は、２つのホスホン酸（ＰＯ（ＯＨ）_２）基を有する有機化合物を指す。この用語はさらに、ＰＯ_３－有機－ＰＯ_３の骨格を有する化合物に関する。最も一般的なのは、骨粗鬆症を治療するための医薬品として使用される一連のビスホスホン酸である。いくつかの実施形態において、ビスホスホン酸は、エチドロン酸、ゾレドロン酸、メドロン酸、アレンドロン酸及びその医薬として許容される塩からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、安定剤は、エチドロン酸又はその医薬として許容される塩である。いくつかの実施形態において、安定剤は、ゾレドロン酸又はその医薬として許容される塩である。いくつかの実施形態において、安定剤は、メドロン酸又はその医薬として許容される塩である。いくつかの実施形態において、安定剤は、アレンドロン酸又はその医薬として許容される塩である。

【0095】

いくつかの実施形態において、安定剤は、リン酸化されたアミノ酸である。いくつかの実施形態において、リン酸化されたアミノ酸は、ホスホセリンである。いくつかの実施形態において、リン酸化されたアミノ酸は、ホスホスレオニンである。

【0096】

いくつかの実施形態において、本発明の二価金属炭酸塩種は、２種以上の安定剤、例えば、２種又はそれより多くの安定剤によって安定化された、非晶質状態にある（本明細書において「非晶質炭酸塩種」としても使用される）。いくつかの実施形態において、本発明の粒子及び／又はそれを含む組成物のいずれかは、単一の非晶質炭酸塩種を含む。いくつかの実施形態において、本発明の粒子及び／又は組成物中の非晶質炭酸塩種は、化学的に同一である（図４に例示されるような固体ＮＭＲデータに基づく）。

【0097】

いくつかの実施形態において、２種以上の安定剤、例えば、２、３又は４種の化学的に異なる安定剤種が、含まれる。いくつかの実施形態において、粒子は、第１の安定剤及び第２の安定剤を含む。いくつかの実施形態において、第１の安定剤及び第２の安定剤は、同じである。いくつかの実施形態において、第１の安定剤及び第２の安定剤は、異なる安定剤である。いくつかの実施形態において、第１及び第２の安定剤はそれぞれ独立して、本明細書で上に記載される通りである。いくつかの実施形態において、非晶質炭酸塩種は、３種以上の安定剤を含み、１種以上の安定剤は、本発明の粒子の形成及び沈殿の間にそれに添加される。

【0098】

いくつかの実施形態において、非晶質炭酸塩種は、ホスホセリンとクエン酸の組み合わせによって安定化される。いくつかの実施形態において、非晶質炭酸塩種は、三リン酸とクエン酸の組み合わせによって安定化される。

【0099】

いくつかの実施形態において、非晶質炭酸塩種は、三リン酸によって安定化される。

【0100】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種（例えば、非晶質炭酸塩種）の少なくとも一部は、安定剤に結合される。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種と安定剤は、本明細書に記載されるように、共有結合及び／又は非共有結合により結合される。いくつかの実施形態において、安定剤は、二価金属炭酸塩種（例えば、非晶質炭酸塩種）中に組み込まれる。いくつかの実施形態において、安定剤は、二価金属炭酸塩種（例えば、非晶質炭酸塩種）内で均一に分布される。

【0101】

いくつかの実施形態において、安定剤は、リン酸ベースの安定剤（例えば、本明細書の上で定義される一リン酸、二リン酸もしくは三リン酸、ポリリン酸、又はビスホスホン酸など）であり、粒子内の安定剤のＰ原子と二価金属原子（例えば、第１の二価金属）のモル比（Ｐ：Ｍモル比）は、１：１００～５０：１００、１：１００～３：１００、３：１００～５：１００、５：１００～１０：１００、１０：１００～１５：１００、１５：１００～２０：１００、２０:１００～３０:１００、３０:１００～４０:１００であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0102】

いくつかの実施形態において、Ｐ：Ｍモル比は、４:１００～１５:１００、４:１００～８:１００、８:１００～１０:１００、１０:１００～１２:１００、１２:１００～１５:１００であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0103】

いくつかの実施形態において、粒子（例えば、単一の金属炭酸塩ベースの粒子）内の安定剤と二価金属原子（例えば、第１の二価金属）のモル比は、１：１００～１５：１００、１：１００～３：１００、３：１００～５：１００、５：１００～８：１００、８：１００～１０：１００、１０：１００～１２：１００、１２：１００～１５：１００、１５：１００～２０：１００、２０：１００～２５：１００、２５：１００～３０：１００であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、安定剤と二価金属原子のモル比は、少なくとも０．５％、少なくとも０．８％、少なくとも１％、少なくとも１．１％、少なくとも１．５％、少なくとも２％、少なくとも４％、少なくとも８％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、安定剤と二価金属原子の重量比は、少なくとも５％、少なくとも８％、少なくとも１０％、少なくとも２０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。特定の理論に縛られることなく、少なくとも８重量％、又は少なくとも１０重量％の安定剤（金属に対して）が、本発明の安定な粒子（例えば、単一の金属粒子）を得るために必要であると仮定され、用語「安定な」は、本明細書に記載されるとおりである（例えば、乾燥粒子及び／又はそれを含む粉末状組成物が、適切な条件下で少なくとも１ヶ月間、非晶質状態で二価金属炭酸塩（混合金属炭酸塩も含む）の総重量の少なくとも８０％、又は少なくとも９５％を保持する能力を指す）。

【0104】

いくつかの実施形態において、安定剤は、その任意の塩を含む三リン酸であるか又は三リン酸を含む。

【0105】

いくつかの実施形態において、安定剤は、ピロリン酸、三リン酸、ヘキサメタリン酸又はその医薬として許容される塩などの、ポリリン酸であり、Ｐ：Ｍモル比は、本明細書に記載の通りである（例えば、４:１００～１５:１００）。いくつかの実施形態において、安定剤は、アレンドロン酸、エチドロン酸、ゾレドロン酸又はメドロン酸などの、ビスホスホン酸であり、Ｐ：Ｍモル比は、本明細書に記載の通りである（例えば、４:１００～１５:１００）。

【0106】

いくつかの実施形態において、本発明の安定剤の少なくとも８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも８７重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９２重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９７重量％、少なくとも９８重量％、又は少なくとも９９重量％は、本明細書の上で記載される通りであるか、又はそれらの間の任意の値及び範囲である。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0107】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子又はナノ粒子（本明細書では「一次粒子」としても使用される）は、５～９００ｎｍ、５～９００ｎｍ、５～１０ｎｍ、１０～５０ｎｍ、２０～８０ｎｍ、２０～１５０ｎｍ、５０～１００ｎｍ、１００～２００ｎｍ、２００～３００ｎｍ、３００～４００ｎｍ、４００～５００ｎｍ、５００～７００ｎｍ、７００～９００ｎｍの、それらの間の任意の範囲又は値を含む平均サイズ（例えば、平均直径）を有する。いくつかの実施形態において、本発明の粒子、又はナノ粒子（本明細書では「一次粒子」としても使用される）は、５～２００ｎｍ、５～２００ｎｍ、５～１０ｎｍ、１０～５０ｎｍ、２０～８０ｎｍ、２０～１５０ｎｍ、５０～１００ｎｍ、１００～２００ｎｍの、それらの間の任意の範囲又は値を含む平均サイズ（例えば、平均直径）を有する。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。いくつかの実施形態において、用語「平均サイズ」及び用語「平均粒径」は、本明細書において互換的に使用される。

【0108】

本明細書で使用される用語「一次」は、合成中に形成される塩基性粒子を指し、これはさらに、より大きな粒子及び粒子のネットワーク（例えば、二次粒子）へと融合、凝集（ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ）、及び／又は凝集（ａｇｇｒｅｇａｔｅ）され得る。

【0109】

本明細書で使用される用語「直径」又は「サイズ」は、所与の粒子の一方の側から他方の側への最大距離を指す。円形又は円形に近い粒子（例えば、球状又は長方形の粒子）では、サイズ及び直径は、本明細書の下で記載されるように、数学的に等しい。いくつかの実施形態において、用語「粒径」は、ナノ粒子の平均断面サイズを指す。用語「乾燥直径」は、当技術分野において認識されており、本明細書では物理的直径を指すために使用される。粒子のサイズは、透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）又は走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）イメージングを用いて評価され得る。凝集がない場合、粒径と分布を定義するための他の技術がある。

【0110】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子の少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％は、５～９００ｎｍ、５～９００ｎｍ、５～１０ｎｍ、１０～５０ｎｍ、２０～８０ｎｍ、２０～１５０ｎｍ、２０～２００ｎｍ、１０～２００ｎｍ、２０～６０ｎｍ、２０～４０ｎｍ、４０～６０ｎｍ、５０～１００ｎｍ、１００～２００ｎｍ、２００～３００ｎｍ、３００～４００ｎｍ、４００～５００ｎｍ、５００～７００ｎｍ、又は７００～９００ｎｍの、それらの間の任意の範囲又は値を含む粒径（例えば、一次粒子の平均サイズ）を有する。いくつかの実施形態において、本発明の粒子の少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％は、５～２００ｎｍ、５～２００ｎｍ、５～１０ｎｍ、１０～５０ｎｍ、２０～８０ｎｍ、２０～１５０ｎｍ、５０～１００ｎｍ、１００～２００ｎｍの、それらの間の任意の範囲又は値を含む粒径（例えば、一次粒子の平均サイズ）を有する。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0111】

いくつかの実施形態において、用語「平均断面サイズ」は、粒子の少なくとも例えば、８０％、９０％、もしくは９５％の平均、又はいくつかの実施形態において、複数のナノ粒子の中央値サイズのいずれかを指し得る。いくつかの実施形態において、用語「平均断面サイズ」は、複数のナノ粒子の数平均を指す。いくつかの実施形態において、用語「平均断面サイズ」は、実質的に球状の粒子の平均直径を指し得る。

【0112】

本明細書で使用される用語「粒子」は、本発明の別々のサブミクロン粒子又はナノ粒子、及びそれらの凝集体又は凝集物を指す。いくつかの実施形態において、用語「粒子」は、一次粒子を指す。いくつかの実施形態において、一次粒子は、凝集でき、凝集体（又は二次粒子）の形成をもたらす。本発明の粒子は、球、楕円体、長方形、又は不定形の形状などの、任意の三次元幾何学的形状を有し得る。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、実質的に同じ幾何学的形状又は異なる形状を有する。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、均一な幾何学的形状を欠く。

【0113】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、固体状態にある。いくつかの実施形態において、本発明の粒子を含む組成物は、粉末の形態（例えば、本明細書に記載の含水率を有する乾燥粉末）である。

【0114】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、炭酸カルシウムであるか又は炭酸カルシウムを含む。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種は、炭酸マンガンである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属の炭酸塩種は、炭酸亜鉛である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属の炭酸塩種は、第１の二価金属と第２の二価金属の混合物、及び任意に第３の金属（複数可）を含む。

【0115】

いくつかの実施形態において、粒子は実質的に、均一である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属、第２の二価金属、及び任意に第３の金属は、本発明の粒子内で均一に分布される。いくつかの実施形態において、粒子は、粒子体積全体にわたり実質的に均質であり、用語「均質な」は、粒子及び／又はそれを含む組成物の全体積内の（ｉ）安定剤；並びに／又は（ｉｉ）金属（例えば、第１の二価金属、第２の二価金属及び／又は第３の金属（複数可））の実質的に均質な分布を指す。いくつかの実施形態において、安定剤は、粒子の全体積内に位置する。

【0116】

いくつかの実施形態において、安定剤及び１種以上の二価金属（複数可）は、粒子全体内で均一に混合される。いくつかの実施形態において、安定剤は、非晶質金属（複数可）の炭酸塩により形成されるマトリックス内で実質的に均一に分布される。いくつかの実施形態において、安定剤は、共有結合により及び／又はイオン結合により金属カチオン（複数可）に化学的に結合される。

【0117】

いくつかの実施形態において、粒子は、粒子体積全体にわたって実質的に均質であり、シェルを欠く。いくつかの実施形態において、粒子は、外部マトリックスを欠く。いくつかの実施形態において、粒子は実質的に、層を欠く。

【0118】

いくつかの実施形態において、粒子は、シェルをさらに含み、シェルは、安定剤及び／又は第２の非晶質金属炭酸塩（例えば、第２の金属の炭酸塩及び／又は追加の金属の炭酸塩）を実質的に含む。いくつかの実施形態において、安定剤及び又は第２の金属は、粒子の外側部分に（例えば、シェル内に）位置する。いくつかの実施形態において、安定剤及び／又は第２の金属は、粒子の全体積内及び粒子の外側部分（例えば、シェル）に位置する。本発明者らによって得られた実験的証拠（実施例６参照）に基づいて、安定剤及び／又は第２の金属は、粒子の内部及び外側部分に位置すると結論付けられた。

【0119】

さらに、工業的規模の合成のためには、粒子全体への安定剤の実質的な組み込みを容易にするために、製造工程中に十分な量の安定剤（本明細書に開示されるような）を組み入れることが非常に重要である。これと対照的に、外側部（シェル）に吸着された安定剤を有する粒子は、乾燥工程中の非晶質炭酸塩の結晶化などにより、安定性に劣るという特徴がある。

【0120】

いくつかの実施形態において、本発明の安定な粒子は、粒子の全体（又はコア）部分に位置する安定剤を実質的に含む。いくつかの実施形態において、少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも７０重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％の、それらの間の任意の範囲を含む重量％の安定剤が、粒子の全部分（コア）に位置する。

【0121】

いくつかの実施形態において、粒子は、コアシェル粒子であり、コアは、実質的に均質であり、本明細書に記載のように、１以上の非晶質二価金属（複数可）の炭酸塩と、安定剤とを含む。いくつかの実施形態において、シェルは、実質的に及び任意に、安定剤、非晶質金属炭酸塩、金属酸化物／金属水酸化物を含む。いくつかの実施形態において、コアは、第１の二価金属を含み、シェルは、第２の二価金属及び任意に安定剤を実質的に含む。

【0122】

いくつかの実施形態において、コア内の安定剤、炭酸塩と二価金属（複数可）の比は、本明細書に（「粒子」節で）記載される通りである。いくつかの実施形態において、コアシェル粒子は、外側シェルを含み、シェルは実質的に、安定剤及び／又は第２のもしくはそれより多い金属炭酸塩を含む。コアシェル粒子は、方法の節で記載されるように、二段階の安定剤及び又は第２のもしくはそれより多い金属の添加の結果として得られると推測される。さらに、外側シェルは、粒子全体に水分バリアを提供し、そのため粒子の溶解及び／又は不安定化を（例えば、非晶質金属炭酸塩の結晶状態への変換によって）阻害すると想定される。したがって、外側シェルは、長期保存時及び／又は水溶液（例えば、懸濁液中の）との接触時に粒子の安定性を延長すると推測される。

【0123】

いくつかの実施形態において、コアとシェルのｗ／ｗ比は、１０００:１～１０:１、１０００:１～１００:１、１０００:１～５００:１、５００:１～１００:１、１００:１～５０:１、５０:１～１０:１、５０:１～３０:１、３０:１～１０:１であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0124】

いくつかの実施形態において、コア内の安定剤とシェル内の安定剤のｗ／ｗ比は、２０:１～１:１、２０:１～１０:１、１０:１～５:１、５:１～３:１、３:１～１:１、５:１～２:１、２:１～１:１、２０:１～１:２０であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0125】

いくつかの実施形態において、シェルの少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９７重量％、少なくとも９９重量％は、安定剤及び／又はその塩で構成される。

【0126】

いくつかの実施形態において、粒子はさらに、金属塩を含む。いくつかの実施形態において、金属塩は、金属カチオン（例えば、二価、一価、及び／又は三価の金属）並びにアニオン（例えば、対アニオン）を含む。いくつかの実施形態において、アニオンは、ハロゲン化物（例えば、塩化物、フッ化物、臭化物、ヨウ化物）、酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。

【0127】

いくつかの実施形態において、粒子はさらに、アニオンを含む。いくつかの実施形態において、アニオンは、ハロゲン化物（例えば、塩化物、フッ化物、臭化物、ヨウ化物）、酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。

【0128】

いくつかの実施形態において、粒子はさらに、（ｉ）第１の二価金属及び／又は第２の金属又は同じ種類の金属を有する金属の１つ、及び任意に第３の金属のメタ－酸素－金属結合（ｍｅｔａ－ｏｘｙｇｅｎ－ｍｅｔａｌ ｂｏｎｄ）（本明細書では金属酸化物とも呼ばれる）；（ｉｉ）第１の二価金属及び／又は第２の金属、及び任意に第３もしくはそれ以上の金属のヒドロキシル（本明細書では、金属水酸化物とも呼ばれる）、又は（ｉ）と（ｉｉ）の両方を含む。いくつかの実施形態において、粒子内及び／又はそれを含む組成物内の金属酸化物及び／又は金属水酸化物のいずれかのｗ／ｗ含有量は、粒子中の金属の総量の１～３０モル％である。

【0129】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩種の少なくとも７０重量％、少なくとも７５重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも８７重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９２重量％、少なくとも９５重量％、少なくとも９７重量％、少なくとも９８重量％、少なくとも９９重量％、それらの間の任意の範囲又は値を含む重量％は、非晶質である。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。

【0130】

いくつかの実施形態において、組成物の少なくとも７０重量％、少なくとも７５重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも８５重量％、少なくとも８７重量％、又は少なくとも９０重量％、又はそれらの間の任意の値及び範囲は、非晶質である。それぞれの可能性は、本発明の別々の実施形態を表す。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される金属炭酸塩組成物の結晶化度は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＤ）によって決定される。いくつかの実施形態において、用語「非晶質」は、非結晶性組成物（例えば、結晶格子を欠く）を指す。いくつかの実施形態において、非晶質相は、結晶相において組織化された秩序のようなものが観察されたが結晶Ｘ線回折パターン又は電子回折パターンには顕著な特徴がないか又は全くない、１～ｎｍの範囲のドメインを含む。

【0131】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属の非晶質炭酸塩種を含む本発明の組成物は、二価金属炭酸塩の結晶格子の対応するピークを実質的に欠くＸＲＤパターンにより特徴づけられる。いくつかの実施形態において、本発明の組成物（例えば、粉末状組成物）のＸＲＤパターンは、本明細書の下で記載のように得られる（材料及び方法を参照されたい）。いくつかの実施形態において、組成物の結晶化の割合は、ナノメートルサイズ結晶粒を示す、それらの基部で幅が広い右位置の対応するピークを有するＸＲＤパターンを表す。

【0132】

「対応するピークを実質的に欠く」は、本発明の組成物のＸＲＤパターンが、ＸＲＤ分析計によって積分され得る結晶相の少なくとも１つの主な対応ピークを含まず、かつ完全に非晶質相と物質の対応する結晶相の様々な比を混合することにより確立された実験曲線の３０％を超えて積分されないことを意味する。別の実施形態において、「実質的に欠く」は、結晶性二価金属炭酸塩の３０、２０重量％、又は１０重量％以下を意味する。別の実施形態において、「実質的に欠く」は、結晶性二価金属炭酸塩の５重量％以下を意味する。別の実施形態において、「実質的に欠く」は、結晶性二価金属炭酸塩の１重量％以下を意味する。

【0133】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、粒子の１～３０重量％、１～５重量％、５～８重量％、８～１０重量％、１０～１５重量％、１５～１８重量％、１８～２０重量％、２０～３０重量％、それらの間の任意の範囲又は値を含む含水率を有する。

【0134】

いくつかの実施形態において、粒子の含水率は、それらの間の任意の範囲又は値を含み粒子の最大でも２０重量％、最大でも１８重量％、最大でも１５重量％、最大でも１０重量％、最大でも８重量％である。

【0135】

本明細書で使用する用語「含水率」は、本発明の粒子に物理的又は化学的に結合された（例えば、金属原子と水の複合体もしくは付加物を形成するか、又は水素結合によって結合された）任意の水分子を指す。いくつかの実施形態において、含水率は、静電結合、親水性結合、又は水素結合により粒子の外表面に物理的に吸着された水分子を含む。そのような水分子は、室温～１５０℃の温度範囲で気化され得る。それは、粒子内のナノメートル細孔に閉じ込められるか、又は炭酸塩分子ネットワークの金属原子のいくつかと複合体化される（付加物を形成する）か、又はヒドロキシル原子もしくは酸素原子と水素結合を形成する水分子であり得る。このような水は通常、１５０～２５０℃で気化される。いくつかの実施形態において、含水率は、組成物の金属、リン又は炭素原子のいずれかに結合されたヒドロキシ基に由来し、これは縮合され、通常２００～３５０℃で水分子を放出しながらＭ－Ｏ－Ｃ、Ｍ－Ｏ－Ｐ及びＭ－Ｏ－Ｍ結合を形成し得る。

【0136】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、非晶質金属炭酸塩を含み、金属は、１～３０モル％のヒドロキシル基に結合される（本明細書では「含水率」とも呼ばれる）。いくつかの実施形態において、ヒドロキシル基は、例えば、Ｍｇ－ＯＨ又はＺｎ－ＯＨ結合を形成するように、金属に共有結合される。いくつかの実施形態において、金属は、リン（Ｐ－ＯＨ）、硫黄（Ｓ－ＯＨ）、炭素（Ｃ－ＯＨ）、有機酸（Ｃ－ＯＨ）、及び／又はカルボキシル基に由来する官能基、又はそれらの任意の組み合わせを含む有機ヒドロキシ化合物に由来するヒドロキシル基に結合される。

【0137】

いくつかの実施形態において、粒子は、ヒドロキシル、金属原子に結合された複合水（「水和された」、「付加物」、「リガンド」）、酸化物又はオキソ基及びオキソ結合からなる粒子の分子ネットワークに組み込まれた化学基を含む。いくつかの実施形態において、含水率は、本発明の粒子内に吸着された又は埋め込まれた任意の水分子をさらに含む。水及び／又は酸化物の含有量は、それぞれの種の正確な含有量（吸着水、複合水、ヒドロキシル化金属含有量など）の推定を含む、熱重量分析（ＴＧＡ）により検出できる。

【0138】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は実質的に、中空粒子を欠く。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は実質的に、メソポーラス粒子を欠く。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は実質的に、非多孔質である。いくつかの実施形態において、形成されたナノ細孔は、閉じた気孔の形態であり、すなわち、それらは、周囲条件下で気体及び液体の吸着又は脱着を起こしにくい。いくつかの実施形態において、粒子の多孔度は、０.１～３０体積％、１～５体積％、５～１０体積％、１０～２０体積％であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0139】

いくつかの実施形態において、粒子及び／又はそれを含む組成物は、最大でも２００ｍ^２／ｇ、最大でも１５０ｍ^２／ｇ、最大でも１００ｍ^２／ｇ、最大でも５０ｍ^２／ｇの、それらの間の任意の範囲を含むＢＥＴ表面積により特徴づけられる。

【0140】

いくつかの実施形態において、粒子及び／又はそれを含む組成物は、２０～２００ｍ^２／ｇ、３０～１５０ｍ^２／ｇ、２０～１５０ｍ^２／ｇ、２０～１１０ｍ^２／ｇ、３０～１５０ｍ^２／ｇ、３０～１００ｍ^２／ｇ、１００～１１０ｍ^２／ｇ、１１０～１５０ｍ^２／ｇ、１５０～２００ｍ^２／ｇの、それらの間の任意の範囲を含むＢＥＴ表面積により特徴づけられる。

【0141】

いくつかの実施形態において、粒子及び／又はそれを含む組成物は、０.５～１０ｎｍ、１～５ｎｍ、２～１０ｎｍ、２～３ｎｍ、１～３ｎｍの、それらの間の任意の範囲を含む平均細孔サイズにより特徴づけられる。

【0142】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、合成の非晶質二価金属炭酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される非晶質二価金属炭酸塩は、合成の二価金属炭酸塩である。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される非晶質二価金属炭酸塩は、本明細書に開示される方法のいずれか１つに従って製造される。いくつかの実施形態において、本発明の粒子は、天然の非晶質二価金属炭酸塩を実質的に欠く。

【0143】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子（粉末の形態で）は、少なくとも５０ｄ、少なくとも１００ｄ、少なくとも２００ｄ、少なくとも３００ｄ、少なくとも１年（ｙ）、少なくとも２ｙ、少なくとも３ｙの、それらの間の任意の範囲又は値を含む期間、安定である。

【0144】

いくつかの実施形態において、水性製剤（懸濁液など）の形態の本発明の粒子（例えば、金属に対して少なくとも０.５モル％、又は少なくとも１モル％の安定剤を含む）は、少なくとも２４時間、少なくとも２日間（ｄ）、少なくとも７ｄ、少なくとも１０ｄ、少なくとも２０ｄ、少なくとも３０ｄ、少なくとも４０ｄ、少なくとも５０ｄの、それら間の任意の範囲又は値を含む期間、安定である。

【0145】

いくつかの実施形態において、水性製剤中で「安定な」と言われる本発明の粒子は、二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも約８０％が、少なくとも２４時間、少なくとも２日（ｄ）、少なくとも７ｄ、それらの間の任意の範囲又は値を含む期間、４０℃未満、又は３５℃未満、３０℃未満又は周囲温度（約２０～約２５℃）での水性製剤の保存の際に、非晶質のままであることを示す。

【0146】

その任意の文法的形態を含む用語「安定な」（又は安定な粒子という用語）は、本明細書で使用されるように、炭酸カルシウムが、粒子及び／又はそれを含む組成物の総重量の約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、約５％又はそれら未満の結晶性二価金属炭酸塩を有する固体形態で、長期間（本明細書に記載の適切な条件下で）非晶質形態で維持されることを示す。具体的には、その任意の文法的形態を含む用語「安定な」（又は安定な粒子という用語）は、本明細書で使用されるように、二価金属炭酸塩の総重量の少なくとも８０％、又は少なくとも９５％が、少なくとも１ヶ月、少なくとも１００ｄ、少なくとも２００ｄ、少なくとも３００ｄ、少なくとも１年（ｙ）、少なくとも２ｙ、少なくとも３ｙの、それらの間の任意の範囲又は値を含む期間、適切な条件下での組成物の保存時に、非晶質のままであることを示す。

【0147】

いくつかの実施形態において、安定な粒子は、二価金属炭酸塩種の崩壊、凝集、及び／又は結晶化を実質的に欠く。いくつかの実施形態において、安定な粒子は、その物理的及び／又は化学的特性を実質的に保持する。いくつかの実施形態において、安定な粒子は、その構造及び／又は幾何学的形状を実質的に保持する。いくつかの実施形態において、安定な粒子は、そのサイズ又は他の任意の物理的パラメータを実質的に保持する。いくつかの実施形態において、安定な粒子は、粒子の化学的安定性を指す（例えば、酸化を欠いている）。いくつかの実施形態において、安定な粒子は、化学的に不活性な粒子である。

【0148】

いくつかの実施形態において、粒子は、本明細書に記載の期間、適切な条件下での保存時に安定である。いくつかの実施形態において、適切な条件は、最大でも４０℃、最大でも３０℃、最大でも１０℃、最大でも０℃、最大でも－１０℃の、それらの間の任意の範囲又は値を含む温度を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、－８０℃～５０℃の、それらの間の任意の範囲又は値を含む温度を含む。

【0149】

いくつかの実施形態において、適切な条件は、保存条件を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、棚上の条件を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、エンドユーザが本明細書に開示される組成物を保存する又は保持する条件を含む。

【0150】

いくつかの実施形態において、適切な条件は、本明細書に開示される組成物の活性が保持される又は維持される条件を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、粒子が閉鎖され乾燥した条件（例えば、３０％未満、２０％未満、又は１０％未満などの湿度含有量）で保たれ、真空、水スカベンジャーの分離容器、例えば、シリカゲル、モレキュラーシーブ、又はエアロゾルを使用して維持される条件を含む。

【0151】

いくつかの実施形態において、適切な条件は、少なくとも７.５、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０の、それらの間の任意の範囲又は値を含むｐＨでの懸濁液を含む。

【0152】

いくつかの実施形態において、粒子（例えば、一次粒子及び／又は二次粒子）は、上述したｐＨレベルに達するまで、９、８、７又は６未満のｐＨでわずかな溶解を受ける。

【0153】

いくつかの実施形態において、適切な条件は、それらの間の任意の範囲又は値を含む１０～６０％の範囲の相対湿度を含む。

【0154】

いくつかの実施形態において、粒子の少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％は、安定であり、安定とは、本明細書で上に記載した通りである。

【0155】

いくつかの実施形態において、本発明の安定な粒子は、粒子の２０重量％未満、１８重量％未満、１５重量％未満、１３重量％未満、１０重量％未満の、それらの間の任意の範囲又は値を含む含水率により特徴づけられ、安定とは、本明細書に記載の通りである。

【0156】

非晶質の単一の二価金属炭酸塩の粒子
本発明の一態様において、各粒子が二価金属炭酸塩種（例えば、任意のさらなる種類の結合を伴いまたは伴わず）を含む本発明の複数の粒子（本明細書では単一の二価金属粒子とも呼ばれる）、及び本発明の安定剤が提供され；二価金属炭酸塩（本明細書において「炭酸塩種」とも呼ばれる）の少なくとも７０重量％は、非晶質状態にあり、二価金属は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択され；二価金属と安定剤のモル比は、１００:１～４:１である。いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択される単一の二価金属種を含む。いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子は、本明細書に記載の単一の二価金属種と、少なくとも５重量％、少なくとも８重量％、少なくとも１０重量％の安定剤とを含み、安定剤は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、本発明の二価金属は、＋２の酸化状態にある金属であるか又はそれを含む。

【0157】

本発明の別の態様において、各粒子が二価金属炭酸塩種（例えば、任意のさらなる種類の結合を伴いまたは伴わず）を含む本発明の複数の単一の二価金属粒子、及び本発明の安定剤が提供され；二価金属炭酸塩の少なくとも７０重量％は、非晶質状態にあり、二価金属は、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択され；二価金属と安定剤のモル比は、１００:１～４:１であり；複数の粒子は、最大でも５００ｍ^２／ｇ、最大でも２００ｍ^２／ｇ、最大でも１００ｍ^２／ｇ、又は少なくとも２５ｍ^２／ｇ、少なくとも５０ｍ^２／ｇ、少なくとも１００メートルｍ^２／ｇの、それらの間の任意の範囲を含むＢＥＴ表面積によって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子は、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒからなる群から選択される単一の二価金属種を含み、最大でも５００ｍ^２／ｇ、最大でも２００ｍ^２／ｇ、最大でも１００ｍ^２／ｇ、又は少なくとも２５ｍ^２／ｇ、少なくとも５０ｍ^２／ｇ、少なくとも１００ｍ^２／ｇの、それらの間の任意の範囲を含むＢＥＴ表面積によって特徴付けられる。

【0158】

いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子内の二価金属と安定剤のモル比は、１００:１～１００:２５、１００:１～１００:５、１００:５～１００:７、１００:５～１００:２５、１００:３～１００:２５、１００:７～１００:１５、１００:７～１００:１０、１００:１０～１００:２０、１００:１０～１００:１５、１００:１５～１００:２５、１００:２０～１００:２５であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0159】

いくつかの実施形態において、安定剤と二価金属のモル比は、少なくとも１％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも７％、少なくとも１０％であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0160】

いくつかの実施形態において、全二価金属含有量（例えば、第１の二価金属、及び１以上の第２の二価金属（複数可）を含む）と安定剤の重量比は、５～２０％、５～８％、８～１０％、８～２０％、１０～２０％、２０～３０％であり、それらの間の任意の範囲を含む。

【0161】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩は、炭酸塩種及び二価金属原子を含む。いくつかの実施形態において、二価金属原子は、単一の二価金属である。

【0162】

いくつかの実施形態において、粒径は、本明細書で上に記載される通りである。

【0163】

いくつかの実施形態において、粒子は、安定剤を含み、安定剤は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属と安定剤のモル比は、本明細書で上に記載される通りである。いくつかの実施形態において、二価金属と安定剤のモル比は、本明細書で上に記載される通りである。

【0164】

いくつかの実施形態において、二価金属は、Ｚｎであり、二価金属と安定剤（例えば、三リン酸）のモル比は、本明細書に記載の通りである。

【0165】

いくつかの実施形態において、粒子内の安定剤と二価金属のｗ／ｗ比は、本明細書に記載の通りである。

【0166】

いくつかの実施形態において、粒子の含水率は、本明細書に記載の通り（例えば、１～３０重量％）である。

【0167】

いくつかの実施形態において、粒子内の二価金属のｗ／ｗ濃度は、粒子の全乾燥重量の２０～７０％、２０～３０％、３０～３５％、３５～３８％、３８～４０％、４０～５０％、５０～６０％、６０～７０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0168】

いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子内の炭酸塩のｗ／ｗ濃度は、粒子の全乾燥重量の１～４０％、１～１０％、１０～４０％、１０～２０％、２０～４０％、２０～３０％、３０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0169】

いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子内の炭酸塩と二価金属のモル比は、１０:１～１:１、１０:１～８:１、１０:１～５:１、８:１～５:１、５:１～３:１、３:１～１:１であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0170】

いくつかの実施形態において、粒子の全金属含有量に対する二価金属のｗ／ｗ比は、粒子の全乾燥重量の５０～９９％、５０～６０％、６０～７０％、７０～８０％、８０～８５％、８５～９０％、９０～９２％、９２～９５％、９５～９７％、９７～９９％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0171】

いくつかの実施形態において、粒子は、二価の金属酸化物を実質的に欠く。いくつかの実施形態において、粒子内の二価金属酸化物の含有量は、二価金属の重量含有量に対し、最大で１０％、最大で８％、最大で５％、最大で１％、最大で０.１％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0172】

いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子は、本明細書に記載されるように、適切な条件下にて乾燥状態で、少なくとも１ヶ月、少なくとも３ｍ、少なくとも６ｍ、少なくとも１２ｍの期間、実質的に安定である。

【0173】

いくつかの実施形態において、単一の二価金属粒子は、本明細書に記載の適切な条件下にて水性懸濁液中で少なくとも１日、少なくとも２ｄ、少なくとも３ｄ、少なくとも１週間、少なくとも１ヶ月間、実質的に安定である。

【0174】

いくつかの実施形態において、乾燥状態及び／又は懸濁液中の粒子を安定化させるために十分な単一の二価金属粒子内の安定剤の含有量（例えば、モル比、又はｗ／ｗ比）は、本明細書に記載の通りである。

【0175】

いくつかの実施形態により、単一の二価金属粒子の製造の方法が提供され、方法は、二価金属カチオン（例えば、ハロゲン化物（例えば、塩化物、フッ化物、臭化物、ヨウ化物）、酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、又はそれらの任意の組み合わせなどの、炭酸塩でない対アニオンを含む、解離した二価金属塩の形態で）を含む第１の水性組成物と炭酸アニオンを含む第２の水性組成物を適切な条件下で接触させること、それにより単一の二価金属粒子を取得することを含む。いくつかの実施形態において、接触させることは、混合物の形成をもたらす。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び／又は第２の水性組成物は、その中に溶解された又は分散された安定剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、本方法は、接触させる工程に続いて又はそれと同時に混合物に安定剤溶液を添加することをさらに含む。

【0176】

いくつかの実施形態において、本方法は、単一の二価金属粒子を取得するために、水溶液から粒子を分離することをさらに含む。いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書に開示されるような含水率（最大で３０重量％）により特徴づけられる、本発明の乾燥した単一の二価金属粒子を取得するのに十分な条件下で粒子を乾燥させることをさらに含む。

【0177】

いくつかの実施形態において、接触させることは、混合すること、攪拌すること、振盪すること、又は当技術分野で公知の任意の他の方法によって行われる。いくつかの実施形態において、適切な条件は、３～５０℃、３～１０℃、３～３０℃、３～２５℃、１０～５０℃、１０～３０℃、１０～４０℃、３～１０℃、１０～２０℃、２０～５０℃、２０～３０℃の、それらの間の任意の範囲を含む温度を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、少なくとも１秒、少なくとも１分の、又はそれより多い接触させる時間を含む。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、本発明の粒子を形成するために十分である。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、第１の水性組成物内の最初の二価金属含有量の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％（それらの間の任意の範囲又は値を含む）、又はそれより多くと炭酸塩を反応させるために十分である。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、最初の二価金属の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％（それらの間の任意の範囲又は値を含む）、又はそれより多くを非晶質二価金属炭酸塩（例えば、本発明の粒子の形態で）に変換するために十分である。変換は、当技術分野で公知の任意の分析技術（例えば、ＩＣＰ、ＮＭＲなど）によってモニターできる。さらに、変換は、混合物を形成する粒子の沈殿をモニターすることによりモニターできる。そのため、粒子形成工程の終点は、沈殿の実質的な停止により示される。

【0178】

いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び第２の水性組成物は、水溶液である。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び第２の水性組成物は、それぞれ十分な量の二価金属及び／又は炭酸塩を含む。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物中の二価金属カチオンの濃度は、１ｍＭ～１０Ｍ、１ｍＭ～１０ｍＭ、１０ｍＭ～１００ｍＭ、１００ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～３００ｍＭ、３００ｍＭ～５００ｍＭ、５００ｍＭ～１Ｍであり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、第２の水性組成物中の炭酸塩の濃度は、１ｍＭ～１０Ｍ、１ｍＭ～１０ｍＭ、１０ｍＭ～１００ｍＭ、１００ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～３００ｍＭ、３００ｍＭ～５００ｍＭ、５００ｍＭ～１Ｍであり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0179】

いくつかの実施形態において、混合物内の二価金属に対する安定剤のモル比は、０.５～３０％、０.５～１０％、０.５～１％、１～３０％、１～５％、５～１０％、１０～３０％、少なくとも０.５％、少なくとも０.８％、少なくとも１％、少なくとも１.１％、少なくとも１.５％、少なくとも２％、少なくとも４％、少なくとも８％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0180】

いくつかの実施形態において、混合物内の二価金属に対する炭酸塩のモル比は、約０.５:１～約２:１、約０.５:１～約０.７:１、約０.７:１～約１:１、約１:１～約１:１.５、約１:１.５～約１:２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0181】

混合された非晶質金属炭酸塩粒子
本発明の別の態様において、本発明の粒子は、第１の二価金属炭酸塩と第２の二価金属炭酸塩の混合物を含み、第１の二価金属及び第２の二価金属はそれぞれ独立して、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され、粒子及び／又は組成物内の炭酸塩（又は金属炭酸塩）の少なくとも７０重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％は、非晶質である。本発明の別の態様において、本発明の粒子は、第１の二価金属、第２の二価金属と炭酸塩種の混合物を含み、第１の二価金属及び第２の二価金属はそれぞれ独立して、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され、粒子内の炭酸塩種の少なくとも７０重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％、少なくとも９５重量％は非晶質であり、第１の二価金属及び第２の二価金属は、化学的に異なる金属種である。

【0182】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属炭酸塩と第２の二価金属炭酸塩の混合物を含む本発明の粒子は、本明細書では混合された粒子と呼ばれる。いくつかの実施形態において、混合された粒子は、非晶質金属炭酸塩粒子である。いくつかの実施形態において、混合された粒子は、非晶質金属炭酸塩ナノ粒子である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｚｎ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、及びＣｒ（ＩＩ）を含む群から選択される。いくつかの実施形態において、第２の二価金属は、Ｚｎ（ＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、及びＣｒ（ＩＩ）を含む群、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの実施形態において、本発明の第２の二価金属及び第１の二価金属は、＋２の酸化状態の金属である。

【0183】

いくつかの実施形態において、乾燥状態及び／又は懸濁液中の粒子を安定化させるために十分な混合された粒子内の第２の二価金属の含有量（例えば、モル比、又はｗ／ｗ比）は、本明細書に記載の通りである。

【0184】

いくつかの実施形態において、本発明の混合された粒子は、安定剤を欠き、粒子内の第１の二価金属と第２の二価金属のモル比は、１０：０．３～１０：２、１０：０．３～１０：０．４、１０：０．４～１０：０．５、１０：０．５～１０：０．７、１０：０．７～１０：０．８、１０：０．８～１０：１、１０：１～１０：２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0185】

いくつかの実施形態において、混合された粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属のモル比は、少なくとも０.５％、少なくとも１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％である、又はそれより多く、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、混合された粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属の重量比は、０．５～４０％、１～３０％、５～２０％、１０～４０％、０．５～３０％、１０～２０％、１０～２５％、５～２０％、２０～４０％、２０～３０％、３０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0186】

いくつかの実施形態において、混合された粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属の重量比は、少なくとも６％、少なくとも８％、少なくとも１０％である、又はそれより多く、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、混合された粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属の重量比は、６～４０％、６～３０％、６～１０％、８～４０％、８～４０％、８～１０％、１０～３０％、１０～２０％、１０～２５％、８～２０％、２０～４０％、２０～３０％、３０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0187】

いくつかの実施形態において、本発明の混合された粒子は、本明細書に記載の通りであり、粒子内の第１の二価金属に対する第２の二価金属の重量比は、少なくとも６％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。１０～２０重量％の第２の二価金属の含有量（第１の二価金属に対して）を有する例示的な混合された粒子が、うまく合成され、乾燥固体状態におけるそれらの安定性が、確認された。本発明者らは、第２の金属の重量比が６％未満になると、安定性が劣る粒子をもたらす、かつ／又は工業的規模の用途には向かないと推測している。

【0188】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａを欠き、第２の二価金属は、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。

【0189】

別の実施形態により、本発明の粒子（本明細書では「混合され安定化された粒子」とも呼ばれる）は、第１の金属及び第２の金属を含む炭酸塩種を含み、さらに安定剤を含み；組成物内の炭酸塩種の少なくとも７０重量％、又は少なくとも９９重量％（間の任意の範囲を含む）は、非晶質であり；第１の二価金属及び第２の二価金属のいずれか一方が、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｍｇ、及びＣｒ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの実施形態において、複数の混合され安定化された粒子を含む組成物（例えば、液体の又は粉末状の組成物）が、提供される。いくつかの実施形態において、第１の金属は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、及びＣｒから選択され、第２の金属は、Ｍｇであり、混合され安定化された粒子内の安定剤と第１の二価金属のモル比は、間の任意の範囲を含む１:１００～２５:１００である。

【0190】

いくつかの実施形態において、粒子（例えば、安定化され混合された粒子）内の第２の二価金属と第１の二価金属の重量比は、少なくとも０．５％、少なくとも１％、少なくとも１．５％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも５％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0191】

いくつかの実施形態において、安定化され混合された粒子内の二価金属と第１の二価金属の重量比は、１～４０％、１～３０％、１～１０％、１０～３０％、１～２０％、２～１０％、２～３０％、２～２０％、１０～２５％、８～２０％、２０～４０％、２０～３０％、３０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0192】

いくつかの実施形態において、安定化され混合された粒子は、安定剤をさらに含み、安定剤は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、安定化され混合された粒子内の第１の二価金属と安定剤のモル比は、本明細書の上で記載される通りである。安定剤は、水性製剤（例えば、懸濁液又は分散液）中の及び／又は非常に湿った環境における粒子の安定性を実質的に増強すると仮定される。安定剤は、大規模製造中に、特にスケーリングされた製品の乾燥工程中に粒子の安定性を実質的に高めると仮定される。

【0193】

いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子内の安定剤と第１の二価金属のｗ／ｗ比は、間の任意の範囲を含む少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％である。

【0194】

いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子内の安定剤と全金属含有量（第１の金属及び第２の金属）のモル比は、間の任意の範囲を含む少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも１０％である。

【0195】

いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子内の安定剤と全金属含有量（第１の金属及び第２の金属）の重量比は、間の任意の範囲を含む少なくとも８％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも１０％である。

【0196】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、Ｃａと安定剤（例えば、三リン酸）のモル比は、１００:１～１００：３０、１００:１～２０、１００:０．５～１００：１０、１００:１～１００：１０、１００:２～１００：１０であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0197】

いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子内の安定剤と第１の二価金属のｗ／ｗ比は、０．１:１０～２．５:１０、０．１:１０～０．７:１０、０．７:１０～０．９:１０、０．９:１０～１．１:１０、１．１:１０～１．５:１０、１．５:１０～２:１０、２:１０～２．５:１０であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0198】

いくつかの実施形態において、粒子内の安定剤と第１の二価金属（例えば、混合され安定化された粒子）のｗ／ｗ比は、少なくとも５％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0199】

いくつかの実施形態において、粒子内の安定剤と第１の二価金属（例えば、混合され安定化された粒子）のモル比は、少なくとも０．５％、少なくとも０．７％、少なくとも０．８％、少なくとも０．９％、少なくとも１％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0200】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子（例えば、混合され安定化された粒子）は、第１の二価非晶質金属炭酸塩と第２の又はそれより多い非晶質金属炭酸塩の混合物を含み、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり；粒子は、本発明の安定剤をさらに含み；粒子は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられ；かつ粒子は、非晶質金属炭酸塩粒子である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり、ＭｇとＣａのモル比は、少なくともlモル％であり、粒子は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられる。

【0201】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり、粒子（例えば、混合され安定化された粒子又は混合された粒子）は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられ、ＣａとＭｇのモル比は、間の任意の範囲を含む５：１～２:１、５：１～３:１、５：１～４:１、４：１～２:１、４：１～３:１、３：１～２:１である。

【0202】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり、粒子（例えば、混合され安定化された粒子又は混合された粒子）は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられ、ＣａとＭｇのモル比は、５:１～２:１であり；粒子は、適切な条件（例えば、間の任意の範囲を含む－１５～４０℃、又は０～２５℃、又は５～４０℃、又は０～３０℃の温度）下にて粉末形態での保存の際に、間の任意の範囲を含む少なくとも１ｍ、少なくとも１ｙの間、安定である。

【0203】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａを欠き、第２の二価金属は、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択される。

【0204】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の二価金属は、本明細書の上で記載される通りである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の二価金属は独立して、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され；第１の二価金属と第２の二価金属は、異なる金属である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の二価金属は独立して、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、又はＣｒから選択され；第１の二価金属と第２の二価金属は、異なる金属である。

【0205】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｚｎ及び／又はＦｅである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｒ及びＭｇから選択される。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｍｇであり、第２の二価金属は、Ｚｎ及び／又はＦｅである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｚｎであり、第２の二価金属は、Ｃａ、Ｍｇ、及び／又はＦｅである。

【0206】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、単一の二価金属であるか又はそれを含む。いくつかの実施形態において、粒子（例えば、混合された粒子）は、第３の金属をさらに含む。いくつかの実施形態において、第３の金属は、Ｃａ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｍｇ及びＣｒのいずれか、又はそれらの組み合わせを含む。

【0207】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の金属の二価金属炭酸塩種は、粒子内で結合され、結合は、共有結合及び／又はイオン結合によるものである。いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の金属は、粒子内で均一に分布される。いくつかの実施形態において、粒子は、１以上の二価金属又は１以上の安定剤に富む領域からなる複合体の形態である。いくつかの実施形態において、粒子は、複合体の形態であり、複合体の構造は、コアシェル構造の形態である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属及び第２の二価金属、及び炭酸塩種は、複合体を形成するように互いに結合される。いくつかの実施形態において、複合体は、本発明の複数の粒子の形態である。

【0208】

いくつかの実施形態において、第二の金属の存在は、各々個々に調製された金属炭酸塩と比較して、粒子及び／又はそれを含む組成物の全体的な水性溶解度（又は分散性）に影響を及ぼす。いくつかの実施形態において、第２の金属（例えば、第２の二価金属）は、粒子を安定化させるために十分な量で粒子内に存在し、十分な量は任意に、第２の金属の化学組成によりあらかじめ決定される。いくつかの実施形態において、十分な量は、特定の金属原子及び／又はその酸化状態に応じて変化し得る。いくつかの実施形態において、十分な量は、本明細書に記載の通りである（例えば、粒子又は組成物中の第１の金属含有量に対して少なくとも０．５モル％、又は少なくともlモル％）。

【0209】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、第１の二価金属の炭酸塩種及び第２の二価金属の炭酸塩種を含む本発明の複数の混合粒子を含み、組成物の少なくとも一部は、非晶質である。いくつかの実施形態において、非晶質は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、本発明の組成物及び／又は粒子は、第１の二価金属及び第２の又はそれより多い二価金属を含む混合された二価金属炭酸塩種を含み、混合された二価金属炭酸塩種の少なくとも一部は、非晶質である。

【0210】

いくつかの実施形態において、第１の二価金属の炭酸塩種は、本発明の粒子内にマトリックス（又は分子ネットワーク）を形成する。いくつかの実施形態において、第２の二価金属（又は第２の二価金属の炭酸塩種）は、粒子のマトリックス内に包み込まれるか又は埋め込まれる。いくつかの実施形態において、第２の二価金属は、マトリックス内に組み込まれる。いくつかの実施形態において、第２の二価金属は、マトリックス内で均一に分布される。いくつかの実施形態において、マトリックスは、第２の二価金属原子でドープされる。いくつかの実施形態において、第１の二価金属を有する粒子は、第２の二価金属原子で被覆されてコアシェル粒子を形成する。

【0211】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、化学的に同一の粒子、又は化学的に異なる粒子を含む。

【0212】

いくつかの実施形態において、粒子（例えば、混合された粒子及び／又は安定化され混合された粒子）内の第１の二価金属と第２の二価金属のモル比は、１０：０．１～１０：３、１０：０．１～１０：０．２、１０：０．２～１０：０．５、１０：０．５～１０：０．７、１０：０．７～１０：０．９、１０：０．９～１０：１、１０：１～１０：１．５、１０：１．５～１０：２、１０：２～１０：３、１０：０．７～１０：５、１０：０．７～１０：４、１０：０．７～１０：３であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、粒子（例えば、混合された粒子及び／又は安定化され混合された粒子）内の第２の二価金属と第１の二価金属のモル比は、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも１０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0213】

いくつかの実施形態において、粒子（例えば、混合された粒子及び／又は安定化され混合された粒子）内の第２の二価金属と第１の二価金属のモル比は、８～３３％、６～５０％、６～４０％、８～４０％、８～３５％、８～３３％、８～３０％、１０～４０％、８～１０％、１０～２０％、１０～３０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0214】

いくつかの実施形態において、安定な混合された粒子及び／又は安定化され混合された粒子は、第１の二価金属炭酸塩及び第２の二価金属炭酸塩を含み、粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属のモル比は、６～５０％、８～５０％、８～４０％、８～３５％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含み、「安定な」は、本明細書に開示されるような粉末状組成物の安定性を指す。

【0215】

いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属と第２の二価金属のｗ／ｗ比は、１０:０.１～１０:２、１０:０.１～１０:０．２、１０:０.２～１０:０．５、１０:０.５～１０:０．７、１０:０.７～１０:０．９、１０:０.９～１０:１、１０:１～１０:１．５、１０:１．５～１０:２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属と第２の二価金属のｗ／ｗ比は、１０:０.１～１０:１．５であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0216】

いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子又は混合された粒子の粒径は、本明細書の上で（「粒子」節で）記載される通りである。

【0217】

いくつかの実施形態において、複数の粒子（例えば、混合され安定化された粒子又は混合された粒子）は、最大でも５００ｍ^２／ｇ、又は最大でも２００ｍ^２／ｇ、又は最大でも１００ｍ^２／ｇのＢＥＴ表面積により特徴づけられる。

【0218】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子（例えば、混合された粒子）は、第１の二価非晶質金属炭酸塩と第２の非晶質二価金属炭酸塩の混合物を含み、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり；粒子は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられ；粒子は、非晶質金属炭酸塩粒子である。いくつかの実施形態において、第１の二価金属は、Ｃａであり、第２の二価金属は、Ｍｇであり、ＭｇとＣａのモル比は、少なくともlモル％であり、粒子は、本明細書の上で記載されるＢＥＴ表面積により特徴づけられる。

【0219】

いくつかの実施形態において、混合された粒子（例えば、混合された粒子又は安定化され混合された粒子）内の炭酸塩のｗ／ｗ濃度は、粒子の全乾燥重量の１～４０％、１～１０％、１０～４０％、１０～２０％、２０～４０％、２０～３０％、３０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0220】

いくつかの実施形態において、混合された粒子（例えば、混合された粒子又は安定化され混合された粒子）内の炭酸塩と第１の二価金属のモル比は、１０:１～１:１、１０:１～８:１、１０:１～５:１、８:１～５:１、５:１～３:１、３:１～１:１であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0221】

いくつかの実施形態において、本発明の粒子（例えば、混合された粒子、及び／又は混合され安定化された粒子）のいずれか１つは、粉末状組成物の形態で安定であり、安定なとは本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、本発明の粒子（例えば、混合された粒子及び／又は混合され安定化された粒子）のいずれか１つは、水性製剤の形態で、１分（ｍｉｎ）～２４ｈ、１分～１ｈ、１分～１０分、１分～３０分、１分～４８ｈ、１分～２ｈ、１分～１０ｈ、１分～１５ｈ、１分～２０ｈ、１０～２４ｈ、１０～４８ｈ、それらの間の任意の範囲又は値を含む期間、安定である。

【0222】

いくつかの実施形態において、混合された粒子及び／又は混合され安定化された粒子は、第３の金属をさらに含む。いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属と第３の金属のモル比は、１０:０.１～１０：１、１０：０．３～１０:０.４、１０:０.４～１０:０.５、１０:０.５～１０:０.７、１０:０.７～１０:０.８、１０:０.８～１０:１であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0223】

いくつかの実施形態において、安定化され混合された粒子の安定な分散体が提供され、粒子は、（ｉ）第１の二価金属炭酸塩と第２の二価金属炭酸塩、および任意に第３の又はそれより多い金属を含み、粒子内の第２の二価金属と第１の二価金属のモル比は、１～５０％、５～５０％、５～４０％、５～３５％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含み；少なくとも０．５％、少なくとも０．７％、少なくとも０．８％、少なくとも０．９％、少なくとも１％、少なくとも５％の、それらの間の任意の範囲又は値を含む％の安定剤と第一の金属のモル比で安定剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、混合された粒子の分散安定性は、本明細書に開示されるような水性分散体の安定性を指す（例えば、少なくとも７日の期間、少なくとも約８０％の非晶質金属炭酸塩の保持）。

【0224】

いくつかの実施形態において、乾燥粒子の含水率は、本明細書に記載の通りである（例えば、１～３０重量％）。

【0225】

いくつかの実施形態において、粒子内の第１の二価金属のｗ／ｗ濃度は、粒子の全乾燥重量の２０～７０％、２０～３０％、３０～３５％、３５～３８％、３８～４０％、４０～５０％、５０～６０％、６０～７０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0226】

いくつかの実施形態において、粒子の全金属含有量に対する第１の二価金属のｗ／ｗ比は、粒子の全乾燥重量の５０～９９％、５０～６０％、６０～７０％、７０～８０％、８０～８５％、８５～９０％、９０～９２％、９２～９５％、９５～９７％、９７～９９％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0227】

いくつかの実施形態において、粒子内の第２の二価金属のｗ／ｗ濃度は、粒子の全乾燥重量の０．１～４０％、０．１～３０％、０．５～２０％、１～１０％、３～５％、５～１０％、１０～４０％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0228】

いくつかの実施形態において、粒子は、金属酸化物又は金属－オキソ結合を実質的に欠く。いくつかの実施形態において、粒子内の金属酸化物結合の含有量は、二価金属の重量含有量に対して、最大で１０％、最大で８％、最大で５％、最大で１％、最大で０．１％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0229】

いくつかの実施形態において、乾燥粒子（混合された粒子及び混合され安定化された粒子）は、本明細書の上で記載される適切な条件下で保存される場合、乾燥状態で少なくとも１ヶ月、少なくとも６ｍ、少なくとも１２ｍの間、安定である。

【0230】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、二価金属炭酸塩前駆体（例えば、炭酸塩でない対イオンを含む二価金属塩）を含む第１の区画；及び一価炭酸塩（例えば、炭酸ナトリウム、又は任意のアルカリ金属炭酸塩）を含む第２の区画を含むキットの形態である。いくつかの実施形態において、キット内の二価金属炭酸塩前駆体の二価金属と一価炭酸塩のｗ／ｗ比は、約０．５:１～約２:１、約０．５:１～約０．７:１、約０．７:１～約１:１、約１:１～約１:１.５、約１:１.５～約１:２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0231】

いくつかの実施形態において、第１の区画及び／又は第２の区画は、安定剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、キット内の二価金属炭酸塩前駆体の二価金属と安定剤のモル比は、０．５～３０％、０．５～１０％、０．５～１％、１～３０％、１～５％、５～１０％、１０～３０％、少なくとも０.５％、少なくとも０．８％、少なくとも１％、少なくとも１.１％、少なくとも１.５％、少なくとも２％、少なくとも４％、少なくとも８％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0232】

いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩前駆体は、単一の二価金属種を含む。いくつかの実施形態において、二価金属炭酸塩前駆体は、複数の二価金属種（例えば、本明細書に開示される第１の二価金属及び第２の二価金属）を含む。

【0233】

いくつかの実施形態において、キット内の第１の二価金属と第２の二価金属のモル比は、本明細書に記載の通りである（例えば、間の任意の範囲を含む１０:０．０５～１:１）。

【0234】

いくつかの実施形態により、本発明の混合された粒子を製造する方法が提供され、方法は、適切な条件下で、第１の二価金属のカチオン及び第２の二価金属のカチオン（例えば、炭酸塩でない対アニオン、そのようなハロゲン化物（例えば、塩化物、フッ化物、臭化物、ヨウ化物）、酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、又はそれらの任意の組み合わせを含む、解離した二価金属塩の形態で）を含む第１の水性組成物と、炭酸アニオンを含む第２の水性組成物を接触させること、それにより本発明の混合された粒子を取得することを含む。

【0235】

いくつかの実施形態において、本発明の混合され安定化された粒子を製造する方法が提供され、方法は、適切な条件下で、第１の二価金属のカチオン及び第２の二価金属のカチオン（例えば、炭酸塩でない対アニオン、そのようなハロゲン化物（例えば、塩化物、フッ化物、臭化物、ヨウ化物）、酢酸塩、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、又はそれらの任意の組み合わせを含む、解離した二価金属塩の形態で）を含む第１の水性組成物と、炭酸アニオンを含む第２の水性組成物を接触させること、それにより本発明の混合され安定化された粒子を取得することを含み、第１の水性組成物及び／又は第２の水性組成物は、その中に溶解された又は分散された安定剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び／又は第２の水性組成物は、安定剤を実質的に欠き、本方法は、接触させる工程に続いて又はそれと同時に混合物に安定剤溶液を添加することをさらに含む。

【0236】

いくつかの実施形態において、本方法は、本発明の混合された粒子（及び／又は安定化され混合された粒子）を取得するために、水溶液から粒子を分離することをさらに含む。いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書に開示されるような含水率（最大３０重量％）を特徴とする、本発明の乾燥した混合された粒子（及び／又は安定化され混合された粒子）を取得するのに十分な条件下で粒子を乾燥させることをさらに含む。

【0237】

いくつかの実施形態において、接触させることは、混合すること、攪拌すること、振盪すること、又は当技術分野で公知の任意の他の方法により行われる。いくつかの実施形態において、適切な条件は、間の任意の範囲を含む、３～５０℃、３～１０℃、３～３０℃、３～２５℃、１０～５０℃、１０～３０℃、１０～４０℃、３～１０℃、１０～２０℃、２０～５０℃、２０～３０℃の温度を含む。いくつかの実施形態において、適切な条件は、少なくとも１秒、少なくとも１分の、又はそれより多い接触させる時間を含む。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、本発明の粒子を形成するために十分である。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、第１の水性組成物内の最初の二価金属含有量の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％（それらの間の任意の範囲又は値を含む）、又はそれより多くと炭酸塩を反応させるために十分である。いくつかの実施形態において、接触させる時間は、最初の二価金属の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％（それらの間の任意の範囲又は値を含む）、又はそれより多くを非晶質二価金属炭酸塩（例えば、本発明の粒子の形態の）へと変換するために十分である。いくつかの実施形態において、最初の二価金属は、第１の水性組成物中の第１の二価金属及び第２の二価金属の最初の重量含有量を指す。

【0238】

変換は、当技術分野で公知の任意の分析技術（例えば、ＩＣＰ、ＮＭＲなど）によってモニターできる。さらに、変換は、混合物を形成する粒子の沈殿をモニターすることによりモニターできる。そのため、粒子形成工程の終点は、実質的な沈殿の停止により示される。

【0239】

いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び第２の水性組成物は、水溶液である。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物及び第２の水性組成物は、十分な量の各二価金属及び／又は炭酸塩を含む。いくつかの実施形態において、第１の水性組成物内の二価金属カチオン（本明細書に開示される第１及び第２の二価金属）の濃度はそれぞれ独立して、１ｍＭ～１０Ｍ、１ｍＭ～１０ｍＭ、１０ｍＭ～１００ｍＭ、１００ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～３００ｍＭ、３００ｍＭ～５００ｍＭ、５００ｍＭ～１Ｍであり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。いくつかの実施形態において、第２の水性組成物内の炭酸塩の濃度は、１ｍＭ～１０Ｍ、１ｍＭ～１０ｍＭ、１０ｍＭ～１００ｍＭ、１００ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～３００ｍＭ、３００ｍＭ～５００ｍＭ、５００ｍＭ～１Ｍであり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0240】

いくつかの実施形態において、混合物内の二価金属に対する安定剤のモル比は、０.５～３０％、０.５～１０％、０.５～１％、１～３０％、１～５％、５～１０％、１０～３０％、少なくとも０.５％、少なくとも０.８％と、少なくとも１％、少なくとも１.１％、少なくとも１.５％、少なくとも２％、少なくとも４％、少なくとも８％であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0241】

いくつかの実施形態において、混合物内の二価金属に対する炭酸塩のモル比は、約０.５:１～約２:１、約０.５:１～約０.７:１、約０.７:１～約１:１、約１:１～約１:１.５、約１:１.５～約１:２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0242】

いくつかの実施形態において、第１の水性組成物内の第１の二価金属と第２の二価金属のモル比は、１０:０．０５～１:１、１０:０．０５～１:０．１、１０:０．１～１:０．２、１０:０．２～１:１、１０:０．２～１:０．１、１０:０．２～１:０．５、１０:０．２～１:０．３、１０:０．３～１０:２、１０:０．３～１０:０．４、１０:０．４～１０:０．５、１０:０．５～１０:０．７、１０:０．７～１:０．８、１０:０．８～１０:１、１０:１～１０:２であり、それらの間の任意の範囲又は値を含む。

【0243】

組成物
いくつかの実施形態において、本発明の複数の粒子（例えば、単一の二価金属粒子、混合された粒子、混合され安定化された粒子、それらの任意の組み合わせを含む）を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態において、組成物は、実質的に、単一の粒子種又は複数の化学的に異なる粒子を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、治療的有効量の本発明の粒子を含む医薬組成物である。いくつかの実施形態において、組成物は、治療的有効量の非晶質二価金属炭酸塩を含む医薬組成物である。いくつかの実施形態において、組成物は、栄養補助食品として有効な量の本発明の粒子を含む栄養補助食品組成物である。いくつかの実施形態において、組成物は、栄養補助食品として有効な量の非晶質二価金属炭酸塩を含む栄養補助食品組成物である。

【0244】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、本発明の複数の粒子を含む。いくつかの実施形態において、本発明の複数の粒子は、組成物中の凝集体の形態である（例えば、粉末状組成物）。いくつかの実施形態において、本発明の複数の粒子は、本明細書で二次粒子としても称される、粒子クラスター又は凝集体の形態である。

【0245】

いくつかの実施形態において、二次粒子は安定であり、安定は、本明細書に記載の通りである。いくつかの実施形態において、二次粒子は、固体の形態である。

【0246】

いくつかの実施形態において、二次粒子は、間の任意の範囲を含む０.１～５００μｍ、０.５～１μｍ、１～２μｍ、２～５μｍ、０.１～１０μｍ、１～１００μｍの範囲の粒径により特徴づけられる。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、複数の二次粒子を含む。

【0247】

いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、生物活性でない又は治療的もしくは栄養的でない添加剤又は賦形剤（例えば、固結防止剤、乾燥剤、抗酸化剤、防腐剤など）をさらに含む。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、乾燥製剤である。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、投与のために封入される（例えば、カプセル又はゲルの内部に）。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、投与のために錠剤へと圧縮される。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、内部及び局所使用を含む様々な投与のために懸濁液、液体又は半液体で製剤化される。いくつかの実施形態において、粉末状組成物は、細胞培地中で製剤化される。

【0248】

いくつかの実施形態において、組成物内の添加剤のｗ／ｗ濃度は、間の任意の範囲を含む０.０１～２０％である。

【0249】

いくつかの実施形態において、粉末状組成物の含水率は、３０、２０又は１０％ｗ／ｗ未満である。いくつかの実施形態において、粉末状組成物の含水率は、５％ｗ／ｗ未満である。いくつかの実施形態において、粉末状組成物の含水率は、２％ｗ／ｗ未満である。いくつかの実施形態において、粉末状組成物の含水率は、１％ｗ／ｗ未満である。

【0250】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、本発明の複数の粒子と、許容される担体とを含む。いくつかの実施形態において、許容される担体は、医薬的に許容される担体である。いくつかの実施形態において、許容される担体は、栄養補助食品として許容される担体である。いくつかの実施形態において、許容される担体は、細胞培養に許容される担体である。いくつかの実施形態において、許容される担体は、生理学的に許容される液体である。いくつかの実施形態において、許容される担体は、生理食塩水である。いくつかの実施形態において、許容される担体は、血清である。

【0251】

いくつかの実施形態において、組成物内の担体のｗ／ｗ濃度は、間の任意の範囲を含む１～９９％である。

【0252】

いくつかの実施形態において、組成物は、製剤である。いくつかの実施形態において、組成物は、懸濁液である。「懸濁液」及び「分散」という言葉は、本明細書で交換可能である。いくつかの実施形態において、粒子（例えば、一次粒子及び／又は二次粒子）は、水溶液に懸濁される。いくつかの実施形態において、組成物は、安定な懸濁液である。いくつかの実施形態において、粒子は、水性溶媒中で安定な分散液を形成する。いくつかの実施形態において、安定な分散液は、粒子の実質的な凝集を実質的に欠く。いくつかの実施形態において、安定な分散液は、少なくとも１０分間、粒子の沈殿を実質的に欠く。

【0253】

いくつかの実施形態において、組成物は、本発明の混合され安定化された粒子を含む水性製剤である。いくつかの実施形態において、混合され安定化された粒子を含む水性製剤は、間の任意の範囲を含む４０℃未満、３０℃未満、２５℃未満の温度で保存した場合、少なくとも４８時間、少なくとも７ｄ、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ｍ、少なくとも３ｍ、少なくとも６ｍの間、安定である。

【0254】

いくつかの実施形態において、組成物は、本発明の混合された粒子を含む、水性製剤である。いくつかの実施形態において、安定化された粒子を含む水性製剤は、間の任意の範囲を含む４０℃未満、３０℃未満、２５℃未満の温度で保存される場合、少なくとも２４ｈ、少なくとも４８ｈ、少なくとも７２ｈの間、安定である。

【0255】

いくつかの実施形態において、組成物は、その中に分散された本発明の粒子の治療的有効量を含む、水性製剤である。

【0256】

いくつかの実施形態において、組成物は、極性溶媒をさらに含む。いくつかの実施形態において、極性溶媒は、水混和性溶媒である。

【0257】

いくつかの実施形態において、許容される担体は、水を含む。いくつかの実施形態において、許容される担体は、水性緩衝溶液を含む。

【0258】

いくつかの実施形態において、組成物は、水性組成物（例えば、分散液）であり、水性組成物は、間の任意の範囲を含む少なくとも７、少なくとも７.５、少なくとも８のｐＨ値で安定である。

【0259】

いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも７０％ｗ／ｗの水を含む。いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも７５％ｗ／ｗの水を含む。いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも８５％ｗ／ｗの水を含む。いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも９０％ｗ／ｗの水を含む。いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも９５％ｗ／ｗの水を含む。いくつかの実施形態において、水性組成物は、少なくとも９９％ｗ／ｗの水を含む。

【0260】

いくつかの実施形態において、担体は、生理学的に許容される担体である。一実施形態において、互換的に使用される語句「生理学的に許容される担体」及び「医薬として許容される担体」は、生物に著しい刺激を引き起こさず、かつ投与された化合物の生物学的活性及び特性を阻害しない担体又は希釈剤を指す。アジュバントはこれらの語句に含まれる。一実施形態において、「賦形剤」は、活性成分の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される不活性物質を指す。一実施形態において、賦形剤は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖及びデンプンの種類、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油及びポリエチレングリコールを含む。

【0261】

本明細書で使用される用語「担体」、「賦形剤」、又は「アジュバント」は、活性剤でない医薬組成物の任意の成分を指す。本明細書で使用される、用語「医薬として許容される担体」は、無毒で不活性な固体、半固体、液体の充填剤、希釈剤、封入材料、任意の種類の製剤補助剤、又は単に生理食塩水などの滅菌水性媒体を指す。医薬として許容される担体として機能できる物質のいくつかの例としては、糖、例えば、ラクトース、グルコース及びスクロース、デンプン、例えば、コーンスターチ及びバレイショデンプン、セルロース及びその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロース；粉末トラガカント；麦芽、ゼラチン、タルク；賦形剤、例えば、ココアバター及び坐剤ワックス；油類、例えば、落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油；グリコール、例えば、プロピレングリコール、ポリオール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコール；エステル類、例えば、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチル、寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張生理食塩水、リンゲル溶液；エチルアルコール及びリン酸緩衝液、並びに医薬製剤に使用される他の非毒性適合性物質が挙げられる。本明細書で担体として機能できる物質のいくつかの非限定的な例としては、糖、デンプン、セルロース及びその誘導体、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、硫酸カルシウム、植物油、ポリオール、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張生理食塩水、リン酸緩衝溶液、カカオバター（坐剤基剤）、乳化剤並びに他の医薬製剤において使用される他の非毒性の医薬として適合性のある物質が挙げられる。湿潤剤及び滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、並びに着色剤、香味剤、賦形剤、安定剤、抗酸化剤、及び防腐剤もまた、存在してよい。任意の非毒性、不活性、及び有効な担体が、本明細書で企図される組成物を製剤化するために使用されてよい。この点に関して適切な医薬として許容される担体、賦形剤、及び希釈剤は、当業者に周知であり、例えば、Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ，第１３版，Ｂｕｄａｖａｒｉら（編），Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，Ｎ．Ｊ．（２００１）；ｔｈｅ ＣＴＦＡ（化粧品、トイレタリー、フレグランス協会）国際化粧品成分辞書及びハンドブック（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ａｎｄ Ｈａｎｄｂｏｏｋ）、第１０版（２００４）；及び「不活性成分ガイド（Ｉｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕｉｄｅ）」米国食品医薬品局（ＦＤＡ）医薬品評価研究センター（ＣＤＥＲ）管理局に記載のものであり、これらの全ての内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本組成物中の有用な医薬として許容される賦形剤、担体及び希釈剤の例としては、蒸留水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、ハンクス溶液、及びＤＭＳＯが挙げられる。これらの追加の不活性成分、及び有効な製剤及び投与手順は、当技術分野で周知であり、標準的なテキストブック、例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｏｏｄｍａｎの：「治療の薬理学的基礎（Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｅｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）」、第８版、Ｇｉｌｍａｎら（編）Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ（１９９０）；レミントンの薬学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ.,Ｅａｓｔｏｎ,Ｐａ．（１９９０）；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：科学と薬学の実践（Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ），第２１版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，（２００５）に記載されており、それらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に記載の組成物はまた、人工的に作製された構造、例えば、リポソーム、ＩＳＣＯＭＳ、徐放性粒子、及び血清中のペプチド又はポリペプチドの半減期を増加させる他のビヒクルに含まれてもよい。リポソームは、エマルション、フォーム、ミセル、不溶性単分子膜、液晶、リン脂質分散液、ラメラ層などを含む。本明細書に記載のペプチドとの使用のためのリポソームは、中性のおよび負に帯電したリン脂質及びステロール、例えば、コレステロールを一般に含む、標準的な小胞形成脂質から形成される。脂質の選択は一般に、リポソームサイズ及び血液中の安定性などの考慮事項により決定される。例えば、Ｃｏｌｉｇａｎ，Ｊ．Ｅ．ら，タンパク質科学の最新プロトコル（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ），１９９９，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ.，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋにより概説されるような、リポソームを調製するための様々な方法が利用可能であり、米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号、同第４，８３７，０２８号、及び同第５，０１９，３６９号も参照されたい。

【0262】

いくつかの実施形態において、組成物は、栄養補助食品組成物である。いくつかの実施形態において、栄養補助食品組成物は、食品添加物をさらに含む。食品添加物の非限定的な例は、フラボノイド、カルニチン、コリン、ビタミン、疎水性ビタミン、多価不飽和脂肪酸、コエンザイムＱ、クレアチン、ジチオールチオン、フィトステロール、多糖類、栄養補助食品、抗酸化剤、植物エストロゲン、グルコシノレート、ポリフェノール、アントシアニン、又はそれらの任意の組み合わせを含むが、これらに限定されない。

【0263】

いくつかの実施形態により、活性薬剤を対象に補充する方法が提供され、方法は、本発明の組成物の栄養補助食品として有効な量を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、活性剤は、第１の二価金属、第２の二価金属、又はその両方を含む。いくつかの実施形態において、活性剤は、炭酸塩種を含む。いくつかの実施形態において、活性剤は、第１の二価金属炭酸塩、第２の二価金属炭酸塩、又はその両方を含む。

【0264】

いくつかの実施形態によると、細胞におけるカテプシン活性を調節する又はそれに影響を与えることを含む方法が、提供される。いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書に開示される粒子、又は本明細書に開示される粒子を含む組成物の有効量と細胞を接触させることを含む。

【0265】

いくつかの実施形態において、細胞は、対象の細胞である。いくつかの実施形態において、細胞は、対象から得られるか、又は対象に由来する。いくつかの実施形態において、細胞は、対象中にある。

【0266】

いくつかの態様において、細胞は、対象中にあり、接触させることは、本明細書に開示される粒子、又は本明細書に開示される粒子を含む医薬組成物の治療的有効量を対象に投与することを含む。

【0267】

いくつかの実施形態において、それを必要とする対象におけるカテプシンに関連するもしくは関連付けられる疾患又は障害を治療すること、予防すること、改善すること、又はそれらの任意の組み合わせを含む方法が、提供される。

【0268】

いくつかの実施形態により、疾患又は障害の治療における使用のための、本明細書に開示される粒子を含む医薬組成物が、提供される。

【0269】

いくつかの実施形態において、疾患又は障害は、それを必要とする対象におけるカテプシンに関連するかもしくは関連付けられる疾患又は障害である。

【0270】

いくつかの実施形態において、カテプシンに関連するかもしくは関連付けられる疾患又は障害は、細胞増殖関連疾患を含む。

【0271】

いくつかの実施形態において、細胞増殖関連疾患は、癌を含む。

【0272】

いくつかの実施形態において、癌は、肺癌を含む。

【0273】

いくつかの実施形態において、肺癌は、肺細胞腫を含む。

【0274】

本明細書で使用される場合、用語「カテプシンに関連するかもしくは関連付けられる疾患又は障害」は、カテプシンの発現及び／又は活性が、疾患もしくは障害の病因及び／又は病態生理学において、関与する、増殖する、増加する、生じる、誘導する、関与する、それらの任意の組み合わせ、又はそれらの任意の等価物である任意の疾患又は障害を包含する。

【0275】

いくつかの実施形態において、発現は、ｍＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、又はその両方を含む。

【0276】

いくつかの実施形態において、調節すること又は影響を与えることは、カテプシンの活性を阻害する、低下させる、遮断する、低減する、減少させる、その任意の等価物、又はそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、カテプシンは、好酸性カテプシンを含む。いくつかの実施形態において、カテプシンは、複数のカテプシンを含む。いくつかの実施形態により、本発明は、それを必要とする対象における好酸性カテプシンの活性を低下させる方法を提供する。

【0277】

いくつかの実施形態において、カテプシンは、Ｂ、Ｋ、Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｆ、Ｈ、Ｌ、Ｏ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｄ、Ｅ、又はそれらの任意の組み合わせから選択される。

【0278】

いくつかの実施形態において、カテプシンは、カテプシンＢ、カテプシンＫ、又はその両方を含むか、又はそれらである。

【0279】

いくつかの実施形態において、治療することは、対象において、又は対象から得られるもしくは由来する細胞において、好酸性カテプシンの活性を低下させることを含む。

【0280】

本明細書で使用される用語「カテプシン」は、細胞タンパク質代謝回転において重要な役割を有するリソソームプロテアーゼのグループに属するタンパク質を指す。本明細書で使用される用語「カテプシン」は、セリンプロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、及びシステインプロテアーゼを包含する。それらの触媒機構に基づいて、カテプシンは、セリン（Ａ及びＧ）、システイン（Ｂ、Ｃ、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｏ、Ｓ、Ｖ、Ｗ及びＸ）並びにアスパラギン酸プロテアーゼ（Ｄ及びＥ）に細分される。カテプシンのほとんどは、好酸性カテプシンであり、例えば、弱酸性～酸性の環境において最も活性が高い。例外は、カテプシンＳであり、それは非好酸性カテプシンであり、生理学的条件下で、さらには弱アルカリ性条件下で活性がある。いくつかの実施形態により、カテプシンは、ヒトカテプシンである。

【0281】

いくつかの実施形態により、本方法は、カテプシンＢの活性を低下させることを含む。他の実施形態により、本方法は、カテプシンＫの活性を低下させることを含む。別の実施形態により、本方法は、カテプシンＢ及びＫの活性を低下させることを含む。

【0282】

本明細書で使用される、疾患、障害、もしくは状態の「治療」又は「治療すること」という用語は、その少なくとも１種の症状の緩和、その重症度の低下、又はその進行の阻害を包含する。治療は、病気、障害、又は状態が完全に治癒することを意味する必要はない。有効な治療であるために、本明細書の有用な組成物は、疾患、障害、又は状態の重症度を低下させること、それと関連付けられる症状の重症度を低下させること、患者又は対象の生活の質を改善すること、又は患者のもしくは患者から他者への感染性の可能性を低下させることしか必要としない。

【0283】

本明細書で使用される、疾患、障害、又は状態の「予防」という用語は、疾患、障害、もしくは状態の発症の遅延、予防、抑制、又は阻害を包含する。本明細書に記載の主題に従い使用される、用語「予防」は、対象が、疾患／障害プロセスの誘発又は発症に先立ち本明細書に記載の組成物（複数）又は組成物に曝露される、予防のプロセスに関する。用語「抑制」は、疾患／障害プロセスがすでに始まっているが状態の明らかな症状がまだ認められていない、状態を説明するために使用される。そのため、個体の細胞は、疾患／障害を有する可能性があるが、疾患／障害の外部徴候はまだ、臨床的に認められていない。いずれの場合も、予防という用語は、予防と抑制の両方を包含するために適用できる。逆に、用語「治療」は、臨床症状が患者において既に認められている既存の状態と戦うための活性剤の臨床適用を指す。

【0284】

本明細書で使用される、「治療すること」は、改善すること及び／又は防止することを含む。

【0285】

いくつかの実施形態において、改善することは、本明細書に記載の疾患と関連付けられる少なくとも１種の症状を緩和することを含む。

【0286】

本明細書で使用される、用語「投与すること」、「投与」及び同様の用語は、健全な医療行為において、治療効果が提供されるような様式で対象に活性薬剤を含有する組成物を送達する、任意の方法を指す。

【0287】

本明細書で使用される、用語「対象」又は「個体」又は「動物」又は「患者」又は「哺乳動物」は、治療が望まれる任意の対象、特に哺乳動物対象、例えば、ヒトを指す。

【0288】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物の治療的有効用量が、投与される。用語「治療的有効量」は、哺乳動物における疾患又は障害を治療するために有効な薬物の量を指す。用語「治療的有効量」は、所望の治療的又は予防的結果を達成するために、必要な投薬量で及び期間の間有効な量を指す。正確な剤形と投薬計画は、患者の状態に応じて医師によって決定される。

【0289】

いくつかの実施形態において、本発明の組成物の栄養補助食品として有効な用量が、投与される。用語「栄養補助食品として有効な量」は、活性剤を対象に補充するために有効な活性剤の量を指す。用語「治療的有効量」は、対象の体内で濃度を高めるために、任意に活性剤の所定の濃度を達成するように、必要な投薬量で及び期間の間有効な量を指す。正確な投薬量は、活性剤の所望の所定の濃度及び生物内の活性剤の初期量に依存して変化し得る。

【0290】

投与される投薬量は、レシピエントの年齢、健康状態、及び体重、同時治療の種類、もしあれば、治療の頻度、及び所望の作用の性質に依存するであろう。医薬組成物の投与経路は、治療される疾患又は状態に依存する。適切な投与経路は、非経口注射、例えば、皮内、静脈内、筋肉内、病変内、皮下、くも膜下腔内、及び当技術分野で公知の任意の他の注射様式を含むが、これらに限定されない。他の経路によって投与されるペプチドのバイオアベイラビリティは、好適な組成物を使用することにより、非経口注射を介して投与される場合よりも低くなり得るが、経皮、経口、直腸、膣、局所、経鼻、吸入及び眼の治療様式を介して本発明の組成物を投与することが可能であることが想定される。加えて、脳室内及び髄腔内注射を含む、任意の適切な経路により本発明の医薬組成物を導入することが望ましい場合があり；脳室内注射は、例えば、リザーバーに取り付けられた脳室内カテーテルにより容易になり得る。

【0291】

いくつかの実施形態において、組成物は、経口的に送達される。いくつかの実施形態において、組成物は、経口組成物である。いくつかの実施形態において、組成物はさらに、経口的に許容される担体、賦形剤、又は希釈剤を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、経口送達用に製剤化される。

【0292】

全般
本明細書で使用される、用語「約」は、±１０％を指す。

【0293】

用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「有する」及びそれらの同根語は、「含むが、それらに限定されない」を意味する。用語「からなる」は、「含み、それらに限定される」ことを意味する。用語「本質的にからなる」は、組成物、方法又は構造が追加の成分、工程及び／又は部分を含み得ることを意味するが、追加の成分、工程及び／又は部分が特許請求される組成物、方法又は構造の基本的かつ新規な特徴を実質的に変えない場合に限る。

【0294】

言葉「例示的」は、本明細書において、「例、実例又はイラストとして役立つ」ことを意味するために使用される。「例示的」として記載される任意の実施形態は、必ずしも他の実施形態よりも好ましい又は有利であると解釈されるべきではなく、かつ／又は他の実施形態からの特徴の組み込みを排除するものではない。

【0295】

言葉「任意に」は、本明細書において、「いくつかの実施形態で提供され、他の実施形態では提供されない」ことを意味するために使用される。本発明の任意の特定の実施形態は、そのような特徴が矛盾しない限り、複数の「任意の」特徴を含み得る。

【0296】

本明細書で使用される、単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」」及び「その」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数形の参照を含む。例えば、「化合物」又は「少なくとも１つの化合物」という用語は、それらの混合物を含む、複数の化合物を含み得る。

【0297】

本明細書で使用される場合、用語「実質的に」は、それらの間の任意の範囲又は値を含む、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％を指す。

【0298】

本出願全体を通して、本発明の様々な実施形態は、範囲形式で提示されてよい。範囲形式での記述は単に便宜と簡潔さのためであり、本発明の範囲に柔軟な制限がないと解釈されるべきではないことを理解されたい。したがって、範囲の記述は、全ての可能なサブ範囲及びその範囲内の個々の数値を具体的に開示していると考えるべきである。例えば、１～６などの範囲の記述は、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６などのサブ範囲、並びにその範囲内の個々の数字、例えば、１、２、３、４、５、及び６を具体的に開示していると考えるべきである。これは、範囲の幅に関係なく適用される。

【0299】

数値範囲が本明細書に示されるときはいつでも、示される範囲内の任意の引用される数字（少数又は整数）を含むことを意味する。第１の指示番号と第２の指示番号「の範囲（ｒａｎｇｉｎｇ）／範囲（ｒａｎｇｅｓ）」及び第１の指示番号「から」第２の指示番号「までの範囲（ｒａｎｇｉｎｇ）／範囲（ｒａｎｇｅｓ）」という語句は、本明細書では互換的に使用され、第１及び第２の指示された数、並びにそれらの間の全ての小数及び整数を含むことを意味する。

【0300】

本明細書で使用される、用語「方法」は、化学の、薬理学の、生物学の、生化学の及び医学の分野の実践者により知られているか、又は既知の様式、手段、技術及び手順から容易に開発された様式、手段、技術及び手順を含むが、これらに限定されない、所与のタスクを達成するための様式、手段、技術及び手順を指す。

【0301】

本明細書で使用される、用語「治療すること」は、状態を無効にする、実質的に阻害する、その進行を遅らせる又は逆転させること、状態の臨床的もしくは美学的症状を実質的に改善すること、又は状態の臨床的もしくは美学的症状の出現を実質的に防止することを含む。

【0302】

「Ａ、Ｂ、及びＣなどの少なくとも１つ」に類似した慣例が使用される場合、一般にそのような構成は、当業者が慣例を理解するという意味で意図される（例えば、「Ａ、Ｂ、及びＣの少なくとも１つを有するシステム」は、Ａのみ、Ｂのみ、Ｃのみ、ＡとＢを一緒に、ＡとＣを一緒に、ＢとＣを一緒に、及び／又はＡとＢとＣを一緒に、などを有するシステムを含むが、それらに限定されない）。２以上の別の用語を提示する事実上任意の離接的な単語及び／又は語句は、説明、特許請求の範囲、又は図面のいずれにおいても、用語の１つ、用語のいずれか、又は両方の用語を含む可能性を企図すると理解されるべきであることを当業者ならさらに理解するであろう。例えば、語句「Ａ又はＢ」は、「Ａ」又は「Ｂ」又は「ＡとＢ」の可能性を含むと理解される。

【0303】

本明細書で使用される他の用語は、当技術分野においてそれらの周知の意味により定義されると意図される。

【0304】

本発明のさらなる目的、利点、及び新規の特徴は、限定することを意図しない以下の実施例の検討時に当業者に明らかになるであろう。さらに、本明細書の上で詳述した及び以下の特許請求の範囲の節で請求される本発明の様々な実施形態及び態様のそれぞれは、以下の実施例において実験的な支持を得る。

【0305】

実施例
材料と方法
非晶質炭酸亜鉛（ＡＺＣ）の調製；１０％ＴＰで任意に安定化される１％Ｚｎ懸濁液
典型的な手順で、塩化亜鉛溶液（１００ｍlの水、５.２１ｇの塩化亜鉛、３８.２ミリモル）、炭酸ナトリウム溶液（１００ｍlの水、４.０５ｇの炭酸ナトリウム、３８.２ミリモル）及びトリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）溶液（５０ｍlの水、０.５３ｇのトリポリリン酸ナトリウム、１.４ミリモル）を、攪拌機を用いて室温で混合して、トリポリリン酸で安定化された非晶質炭酸亜鉛（ＡＺＣ）を沈殿させた。溶液の混合を、以下の順序で行った：最初にＳＴＰＰ溶液（上記実施例１に記載）をそれぞれ２等分した（２５ｍlの水、０．２７ｇのトリポリリン酸ナトリウム）。一部を、攪拌しながら塩化亜鉛溶液に添加し、ＡＺＣナノ粒子を形成させた。一方で、ＳＴＰＰ溶液の第２の部分を、ＡＺＣナノ粒子の形成後に添加し、ＡＺＣ－ＳＴＰＰ安定化乳白色懸濁液を得た。ＡＺＣを、ブフナーを用いて濾過し、多量のエタノールで洗浄し、３０分未満の間１００℃で換気弁付きオーブンにより乾燥させて、収量２．７ｇで粉末を得た。

【0306】

様々な割合のＳＴＰＰを有するＡＺＣを、安定剤の最適レベルを特定するために、同じ手順に従い合成した。ＡＺＣを、ブフナーを用いて濾過し、大量のエタノールで洗浄し、３０分未満の間１００℃で換気弁付きオーブンにより乾燥させて、収量４.４ｇで粉末を得た。エタノールを、この一連の実施例において、発達する非晶質相を迅速に乾燥させるための効率的な手段として使用した。しかし、大規模で保存可能な粉末を達成するためのそのような生成物を乾燥させる他のモードが、実行可能である。

【0307】

この手順に従って得られた粉末を、Ｘ線回折、ＩＣＰ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、ＳＥＭを用いて分析した。懸濁液と選択された乾燥粉末の両方を、それらの短期の（懸濁液）及び長期の（粉末）安定性について分析した。懸濁液の安定性はまた、短期間内に発達する非晶質相をスクリーニングし評価するための優れた手法でもある。懸濁液をまた、それらの本来のｐＨレベル及び懸濁液の安定性（すなわち、粒子が容器の底に沈降するのにかかる時間、及び時間がたっても懸濁されたまま残る粒子の一部があるかどうか）についても試験した。

【0308】

あるいは、非晶質炭酸亜鉛を、安定剤を添加することなく、本明細書の上で記載される方法に従い調製した。

【0309】

トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）により安定化される、ＡＣＣ中の混合された非晶質金属炭酸塩と金属封入体の調製のための例示的方法
Ａ：ＡＣＣ合成の間及び後の第２の金属及び安定剤の組み込み
典型的な手順は、（１）塩化カルシウム二水和物溶液（８０ｍlの水、７.３５ｇの塩化カルシウム二水和物；５０.０ミリモル）；（２）炭酸ナトリウム溶液（８０ｍlの水、５.３ｇの炭酸ナトリウム；５０.０ミリモル）；及び任意に（３）トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）溶液である、典型的な安定剤（０.７４ｇのトリポリリン酸ナトリウム；２.０ミリモル；１０％ｗ／ｗのＣａＣｌ_２．２Ｈ_２Ｏ）；（４）Ｍ／Ｃａ試薬の様々な重量比で異なる濃度にて添加した、第２の金属（Ｍ）溶液、を混合することからなる。ＦｅＳＯ_４として添加したＦｅを除いて、ほとんどの金属を、塩化物化合物の水和物として添加した。例えば、Ｃａ炭酸塩中にＺｎ、Ｍｇ及びＦｅを含むＡＣＣを、Ｍ／Ｃａの様々な試薬の重量分率ｗ／ｗで合成し、他の比率を、カルシウム試薬含有量と比較したｗ／ｗで与える。

【0310】

反応液を混合する一つの方法は、以下の通りであった。安定剤を、第２の金属との混合物として添加し、混合溶液の最終体積を、２等分した。第１の部分を、炭酸ナトリウム水溶液と混合する前に塩化カルシウム二水和物溶液に添加し、第２の部分を、攪拌される塩化カルシウム二水和物溶液に炭酸ナトリウム溶液を添加した後で、及びナノ粒子凝集体の沈殿後に添加した。混合された溶液の最終体積を、ｗ／ｖにより計算して、懸濁液中のカルシウムの０.４５％、１％又は他の濃度を得るように調整した。低い割合の第２の金属（最大で１０重量％）の場合、炭酸イオンは、カルシウムイオンと比較して等モル量で存在した。

【0311】

安定化されたＭ－ＡＣＣを、ブフナーを用いて濾過し、大量のエタノールで洗浄し、３０分未満の間１００℃で換気弁付きオーブンにより乾燥させて、収量４～５ｇの範囲で粉末を得た。より大規模な生成量の場合、エタノール洗浄を、省く。しかし、大規模で保存可能な粉末を得るためのそのような生成物を乾燥させる他のモードが、実行可能である。

【0312】

この手順に従って得られた粉末を、Ｘ線回折、ＩＣＰ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、ＳＥＭを用いて分析した。懸濁液と選択された乾燥粉末の両方を、それらの短期の（懸濁液）及び長期の（粉末）安定性について分析した。懸濁液の安定性は、短期間内に発達する非晶質相をスクリーニングし評価するための優れた手法でもある。懸濁液をまた、それらの本来のｐＨレベル及び懸濁液の安定性（すなわち、粒子が容器の底に沈降するのにかかる時間、及び時間がたっても懸濁されたまま残る粒子の一部があるかどうか）についても試験した。

【0313】

Ｂ：ＡＣＣナノ粒子の形成の間の第２の金属の組み込み
Ａと同じ溶液を、調製した。しかし、この場合、第２の金属溶液を、他の試薬溶液の添加の前に塩化カルシウム溶液に完全に添加した。次いで、炭酸ナトリウム溶液を、金属溶液に素早く添加し、続いて、反応溶液に添加する最後の溶液として安定剤（例えば、ＳＴＰＰ）を直ちに添加した。得られた金属炭酸塩粉末の単離、乾燥及び分析を、Ａでのように行った。

【0314】

Ｃ：ＡＣＣナノ粒子の形成の後の第２の金属の組み込み
Ａと同じ溶液を、調製した。しかし、この場合、安定剤溶液を、塩化カルシウム溶液に最初に添加した。次いで、炭酸ナトリウム溶液を、第１の溶液に素早く添加し、続いて、反応溶液に添加する最後の溶液として第２の金属溶液を直ちに添加した。得られた金属炭酸塩粉末の単離、乾燥及び分析を、Ａでのように行った。

【0315】

Ｄ：ＡＣＣの形成の前の第２の金属及び形成の間と後に添加される安定剤の組み込み
Ａと同じ溶液を、調製した。しかし、この場合、第２の金属溶液を、他の任意の試薬溶液を添加する前に、塩化カルシウム溶液に完全に添加した。次いで、安定剤の半分を、混合された金属溶液に添加した。次の工程で、炭酸ナトリウム溶液を、金属溶液に急速に添加して、混合された粒子（ＡＣＣ及び第２の金属を含む）を形成させ、続いて、安定剤溶液（例えば、ＳＴＰＰ）の第２の半分を直ちに添加した。得られた金属炭酸塩粉末の単離、乾燥及び分析を、Ａでのように行った。

【0316】

さらに、安定化されない混合された金属炭酸塩を、安定剤の添加なしに、本明細書で上に記載される方法に従い調製した。

【0317】

本発明の非晶質粒子の合成のために、Ａで開示される塩化カルシウム（又は任意の他の金属塩化物）は、任意の好適な水溶性金属塩、例えば、硫酸金属及び／又は硝酸金属で置き換えられてよいことは、明らかなはずである。さらに、Ｎａ－、Ｋ－、及び／又はＮＨ４－炭酸塩並びにジメチル炭酸塩などの有機炭酸塩などの、任意の炭酸塩源が、利用され得る。

【0318】

実施例１
合成されたＡＣＣ、ＡＭＣ、ＡＺＣ、及びＭ－ＡＣＣの主要元素の分析
表１は、上記の材料及び方法において使用される試薬の導入時の量に基づくＣａ：Ｍ：Ｐモル比を要約し、誘導結合プラズマ（ＩＣＰ）分析を用いて、最終乾燥非晶質粉末において分析された実際の比とこれらの比を比較する。得られた非晶質材料の大部分は、ＡＣＣフレームワーク中への他の金属の封入によって提供されるいくらかの安定化に加えて、安定剤としての三リン酸により安定化される。

【0319】

図１は、本明細書に記載の手順のいずれかに従って得られた、非晶質金属炭酸塩ナノ粒子クラスターの走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）画像を示す。全体的なパターンは、大きなクラスター粒子へと凝集した（ａｇｇｒｅｇａｔｅ）／凝集した（ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ）一次ナノ粒子からなり、ナノ粒子（二次粒子）間で様々な程度のネッキングがある。ナノ粒子サイズの範囲は、１０～１００ｎｍである。

【0320】

表１.安定化された非晶質金属及び混合された金属炭酸塩と安定化されない非晶質金属及び混合された金属炭酸塩の計算値に対する元素分析
合成名を解読する方法：「１％Ｃａ－６％ｗ／ｗ Ｚｎ（ｉｎｔ）／Ｃａ－１０％ＴＰ（ｅｘｔ）」は、懸濁液中の総カルシウム１％；カルシウムと比較した金属（亜鉛）の割合は６重量％であり；カルシウムと比較した安定剤の割合（ＴＰ）は１０重量％であり；Ｚｎ溶液を、最初の反応で加え、かつＴＰを、沈殿後に添加した、ことを意味する。ｉｎｔ.又はｅｘｔ.が言及されない場合は、金属溶液を、最初にカルシウム溶液に添加し、安定剤を、炭酸塩の形成中に半分添加し、最初の沈殿後に半分添加した。
^＊実験の命名法：ＡＣＣ＝非晶質炭酸カルシウム、ＡＭＣ＝非晶質炭酸マグネシウム、ＡＺＣ＝非晶質炭酸亜鉛；安定剤：ＴＰ＝三リン酸、ＰＳ＝ホスホセリン、ＣＡ＝クエン酸；ｉｎｔ＝カルシウム溶液と炭酸塩溶液の最初の混合中の試薬の添加、ｅｘｔ＝最初のＡＣＣ沈殿後の試薬の添加；ｗ／ｗ＝重量対重量比；Ｘ％ＴＰ又は別の安定剤は、金属試薬の重量と比較したトリポリリン酸ナトリウムの重量％を意味する。

【表1】

【0321】

さらに、２５℃で（４０℃でインキュベートした場合を除く）乾燥条件下にて保存された、合成された非晶質金属炭酸塩（乾燥粉末の形態で）の長期安定性を、評価した。結果を下の表１Ａにまとめる。

【表2】

【0322】

数ヶ月間室温にて「乾燥」粉末の形態（通常、８～１５重量％の水を含む）で保存した、追加の非晶質金属炭酸塩（すなわち、本発明の単一の二価粒子）及び混合された金属炭酸塩（すなわち、混合された粒子及び混合され安定化された粒子）の長期安定性を、ＸＲＤ分析に基づいて評価した。

【0323】

この目的のために、本発明者らは、（ｉ）本発明の単一の二価粒子：約１０％ｗ／ｗの安定剤（金属に対して）を有するＡＺＣ、ＡＭＣ；及び（ｉｉ）本発明の混合された二価粒子及び安定化され混合された二価粒子：安定剤を有するＣａ／Ｚｎ[Ｃａに対して２～１０％ｗ／ｗのＺｎ]、Ｚｎは粒子の内部又は外部に位置する；安定剤を含まないＣａ／Ｚｎ[約１０～２０％ｗ／ｗのＺｎ]；安定剤を含まないＣａ／Ｍｇ（Ｃａに対して１０～２０％ｗ／ｗのＭｇ）、約１０％ｗ／ｗの安定剤を有するＣａ／Ｍｇ（Ｃａに対して５～１０％ｗ／ｗのＭｇ）；安定剤を含むＣａ／Ｆｅ（ＩＩ）（Ｃａに対して約２～４％ｗ／ｗのＦｅ）；安定剤なしのＣａ／Ｆｅ（ＩＩ）（Ｃａに対して１０～２０％ｗ／ｗのＦｅ）、の良好な合成及び長期安定性（少なくとも３ヶ月、及び最大で１２ヶ月以上）を実証した。

【0324】

実施例２
例示的な非晶質金属及び混合された金属炭酸塩の組成
表２は、材料及び方法の節で得られた非晶質金属及び混合された金属炭酸塩の組成を要約する。材料の組成の近似分析は、ＩＣＰ分析と熱重量分析（ＴＧＡ）の組み合わせに基づく。これらの材料の典型的なＴＧＡは、重量損失が（ａ）軽く吸着された水；（ｂ）しっかりと吸着された水（分子構造に複合体化され、かつ／又はナノメートルの細孔に閉じ込められている）；（ｃ）ぶら下がっているヒドロキシル基（Ｍ－Ｏ－Ｈ、Ｐ－ＯＨ及びＣ－Ｏ－Ｈ）の高温縮合中に発生した水、その際２つの－ＯＨ基が縮合してＭ－Ｏ－Ｍ、Ｍ－Ｏ－Ｐ及びＭ－Ｏ－Ｃ結合を形成し、水分子が放出される；及び（ｄ）炭酸塩の金属酸化物への高温分解によるＣＯ_２の放出及び放出されるＣＯ_２、と関連付けられる温度の範囲を示す。

【0325】

図２は、そのような典型的なＴＧＡの２つの例を表す。上記の範囲はいずれも広いので、それらは、それらの化学的活性において重複していることに留意すべきである。したがって、割り当てられた重量損失は、ある程度の範囲にある。図２で表されるように、Ｍ－ＡＣＣ－ＴＰのＴＧＡは、次の最大速度温度での重量損失の４つの顕著な領域を明らかにする：約９０℃（吸着水の損失）；約２４０℃（複合体化されトラップされた水の損失）；約４００℃（－ＯＨ基の縮合による水）；約６８℃（炭酸塩分解によるＣＯ_２）。

【0326】

表２.ＩＣＰ及びＴＧＡ分析に基づく材料と方法で得られた非晶質金属炭酸塩及び混合された金属炭酸塩の組成

【表3】

【0327】

実験データに基づいて、本発明者らは、粒子が、粒子の第１の金属含有量に対し、１～３０モル％の範囲の量でなどの、金属酸化物（複数可）をさらに含むと仮定した。特定の理論に縛られることなく、金属水酸化物（表２）の少なくともいくらかは、金属酸化物の形態、又は混合された金属酸化物／金属水酸化物の形態であり得ることが推定される。

【0328】

実施例３
それらの反応懸濁液中で調製される際の、安定化された非晶質金属炭酸塩の懸濁液の安定性
水性液体中の非晶質金属炭酸塩の安定性は、非常に限られている。懸濁液中の非晶質金属炭酸塩の安定性の持続時間を延長することは重要である。それにもかかわらず、乾燥粉末で得られる長期安定性と比較して、より短い懸濁液の安定性の期間は、材料の安定性を迅速にスクリーニングする優れた方法を提供する。表３は、それらの反応溶液中で調製された、様々な非晶質金属炭酸塩の懸濁液の一連の安定性試験を示す。非晶質金属炭酸塩の典型的なＸＲＤを、図３に提示する。

【0329】

非晶質金属炭酸塩を、本明細書の上で開示されるように合成した。一般的な非限定的な手順に従って、合成を、合計１モル当量の金属塩化物及び／又は硫酸金属を含む溶液に１当量の炭酸ナトリウムを添加することにより行った。安定剤としてポリ三リン酸ナトリウムの溶液を、ほとんどの場合添加し、安定剤の半分を炭酸ナトリウムと共に添加し、および半分を沈殿の直後に添加する様式で主に添加した。

【0330】

場合によっては、塩化亜鉛溶液を、（ａ）塩化カルシウムと共に（ｉｎｔ）、ＡＣＣ沈殿後に（ｅｘｔ.）又は（ｃ）組み合わせた様式で（ｉｎｔ／ｅｘｔ）、ほとんどのＡＣＣ合成に添加した。場合によっては、安定剤を添加しなかった。金属の符号の前の％数字は、懸濁液中のこの金属の総重量％を示す。

【0331】

表３.ＸＲＤ分析によりモニターされる、懸濁液の安定性試験

【表4】

【0332】

さらに、本発明者らは、約１０％の安定剤を含むＣａ／Ｍｇ（約５～１０％ｗ／ｗのＭｇ）、４モル％の安定剤を含む又は含まないＣａ／Ｍｇ（約１０～３０モル％のＭｇ）；安定剤を含む又は含まないＣａ／Ｚｎ（約５～１０％ｗ／ｗのＺｎ）；４モル％の安定剤を含むＣａ／Ｚｎ（約１０～３０モル％のＺｎ）；ＡＺＣ（約１０％の安定剤を含む）；約１０％の安定剤を含むＣａ／Ｆｅ（ＩＩ）（約５～１０％ｗ／ｗのＦｅ）；約４モル％の安定剤を含むＣａ／Ｆｅ（ＩＩ）（約３０モル％ｗ／ｗのＦｅ）；約１０％の安定剤を含むＣａ／Ｃｒ（ＩＩ）（約５～１０％ｗ／ｗのＣｒ）；約１０％の安定剤を含むＣａ／Ｍｎ（約５～１０％ｗ／ｗのＭｎ）などの、本発明の様々な非晶質金属炭酸塩粒子の懸濁液の安定性（少なくとも７日間）を良好に確認した。

【0333】

さらに、本発明者らは、３種の二価金属粒子：８５％のＣａ：１０％のＭｇ：５％のＺｎ、および１０％のＴＰを含むＣａ／Ｍｇ／Ｚｎ非晶質炭酸塩の懸濁液の安定性（少なくとも７日間）を良好に確認した。

【0334】

本発明の追加の単一の二価の混合された粒子／混合され安定化された粒子を、本明細書の下に記載のように合成した。続いて、合成した粒子の水性懸濁液の安定性を検討した。長期安定性試験の結果を、表３Ａに要約する。

【0335】

第１の金属としてＣａを含み、かつ金属（Ｍ）（Ｍ＝Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃｒ、Ｍｇ、Ｍｎ）及び安定剤（トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰもしくはＴＰＰ）又はホスホセリン（ＰＳ）をさらに含む安定化され混合された粒子の調製のための一般的方法

【0336】

典型的な手順で、金属塩又は混合された金属塩（好ましくは、塩化物、硝酸塩又は硫酸塩）溶液（０．０５モルの金属イオンを含む８０ｍｌの水）を、炭酸ナトリウム溶液（８０ｍlの水、５.３ｇの炭酸ナトリウム、０.０５モル）と混合する。

【0337】

場合によって、トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）溶液（通常０.７４ｇのトリポリリン酸ナトリウム；重量で１０％ｗ／ｗの金属試薬又はその５モル％として通常添加される）を、金属溶液を炭酸塩溶液と混合する間に、混合する後で、又は混合する間と後での両方で、安定剤として添加する。他の場合では、ホスホセリン（ＰＳ）を溶液形態で添加する（通常０.９２５ｇのホスホセリン、０．００５モルのＰＳ、１０％モル／モルの組み合わされた金属）。

【0338】

多くの場合、金属（Ｍ）を、異なる濃度で、以下の比率Ｍ／Ｃａ（例えば、Ｃａ中のＺｎ、Ｃａ中のＦｅ、Ｃａ中のＭｇ、又はＣａ中のＣｒ）で、一次金属のモルの様々な重量％又はモル％にて、以下の濃度範囲：一次金属（例えば、カルシウム）の１～３０％モル／モルで添加した。

【0339】

混合された安定剤は時には、安定剤１、２又はそれより多い安定剤の混合物のいずれかとして添加され、そのうちのそれらの最終体積を、２等分し、第１の部分を、金属及び炭酸塩試薬を混合する前に反応溶液の１つに連続して添加した。次いで第２の部分を、金属塩溶液（混合された安定剤の第１の部分を含む）に炭酸ナトリウム溶液を添加した直後に添加した。このプロセスを、「４パック」反応又は内部／外部として定義する。典型的な反応では、混合された安定剤溶液の最終容量は４０ｍｌの容量に達する必要があるため、最終反応容量は、約１～２％ｗ／ｖの金属濃度を達成するために２００ｍｌを超えない。

【0340】

別の方法は、金属炭酸塩の形成前に、反応物溶液の１つに安定剤（複数可）を添加することを含む。この場合、安定剤を、「内部」として定義する。あるいは、安定剤溶液は、最初の反応及び大部分の金属炭酸塩の沈殿の後に添加されてよい。その際安定剤を、「外部」として定義する。

【0341】

試薬として用いられる金属イオンの合計は、炭酸イオンと比較して等モル量である。非晶質金属炭酸塩の最終生成物を、ブフナーを用いて真空濾過し、大量のエタノールで洗浄し、３０分未満の間１００℃で換気弁付きオーブンにより乾燥させた。同等の工業プロセスでは、膨大な量を、様々な工業用乾燥機及びオーブンにより乾燥でき、安全性、環境及びコストの目的のために、エタノールで洗浄する必要はない。上で得られた粉末を、Ｘ線回折、ＩＣＰ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、ＳＥＭ、ＢＥＴを用いて、いくつかの場合ＴＥＭにより分析した。

【0342】

表３Ａ：ホスホセリンにより安定化された、様々な非晶質金属炭酸塩の懸濁液の安定性

【表5】

【0343】

さらに、５％モルのＭｇ（Ｃａに対して）を有するＣａ／Ｍｇ粒子及び３０モル％のＰＳで安定化されたＣａ／Ｍｇ粒子の懸濁液の安定性を、検討した。得られた懸濁液は、少なくとも約２４時間、実質的に安定であった。

【0344】

表３Ａは、安定剤を２等分する（それぞれ２.５モル％）典型的な「４パック」合成に添加されるカルシウム及び炭酸塩試薬の量と比較した、５モル％のホスホセリンで安定化された、選択された非晶質金属炭酸塩の安定性を要約する。次いで一部を、反応が始まる前に、塩化カルシウム溶液又は水酸化ナトリウム溶液のいずれかに添加する。安定剤の半分（２.５モル％）を、塩化カルシウムとの混合前に炭酸ナトリウム溶液に添加し、半分を、カルシウム及び炭酸試薬の完了後２分以内に添加した。

【0345】

命名法：「ＡＣＣ－懸濁液－０.４５％Ｃａ－５％モルのＰＳ－３０％モルのＭｇ－４ＰＡＣＫＳ－Ｔｚ」は、０.４５％カルシウムを含有し、５モル％のホスホセリンにより安定化されたＡＣＣ懸濁液であり、そのうち、カルシウムと比較して３０モル％が存在することを意味する。安定剤を、４パックプロセス（上記の通り）において添加した。Ｔｚ＝時間ゼロ；１日、２日などは、ＸＲＤ分析の前に保存された懸濁液の日数を意味する。ＡＣＣ＝非晶質炭酸亜鉛；ＡＺＣ＝非晶質炭酸亜鉛；ＡＭＣ＝非晶質炭酸マグネシウム。

【0346】

表３Ａにより表されるように、ホスホセリン及びポリ三リン酸はいずれも、本発明の粒子の水性懸濁液を安定化できる。特に、Ｚｎとの組み合わせで、ＰＳは非常に安定な非晶質炭酸塩粒子をもたらす。懸濁液の安定性を、懸濁液から粉末を濾過し乾燥させること、およびＸＲＤにより非晶質状態を測定することにより分析した。

【0347】

特定の理論に縛られることなく、実験データに基づいて、本発明者らは、追加の安定化化合物を含まない非晶質水性製剤は、水性懸濁液の形態で保存される場合限られた安定性しか有しないと仮定した。非晶質金属炭酸塩の水性懸濁液は、ほとんどの場合、約２４時間安定であることが観察された。

【0348】

特定の理論に縛られることなく、実験データに基づいて、本発明者らは、金属試薬の重量に対して約１０重量％の安定剤（又は第１の金属に対して少なくとも１モル％）が、水性懸濁液中の試験された金属炭酸塩の非晶質相を安定化させるのに十分であると仮定した。合成された非晶質金属炭酸塩のほとんどは、実質的な懸濁液の安定性を示し、５０日を超える期間の間非晶質状態で金属炭酸塩の少なくとも９５％を保持した。

【0349】

第１の金属としてＣａを有し、追加の二価金属をさらに含む混合された（及び／又は混合され安定化された）粒子の非晶質相の安定性は、基本的な合成法により提供される類似の形態を明らかにした。Ｃａに対し１～３０モル％の第２の二価金属を含有する組成物は、効率的に合成された。第１の二価金属に対し０．５モル％未満、又は１モル％未満の第２の二価金属は、不安定な粒子をもたらすか、又は工業プロセスに適用できないであろう（例えば、金属炭酸塩の結晶化をもたらす）ということが、さらに仮定される。

【0350】

実施例４
様々な割合のＺｎ及び三リン酸により安定化された非晶質Ｚｎ－ＡＣＣの調製時の懸濁液の安定性
一連のＺｎ－ＡＣＣ－ＴＰ組成物を、最初の沈殿反応中又はそれが起こった後のいずれかに、Ｚｎ試薬及び／又は三リン酸を組み込むことによって合成した。安定性の結果を、表４に提示する。反応懸濁液は、以前の実施例で使用した、通常の１０％ＴＰよりもＣａに対する低いＴＰの比率にもかかわらず、全ての場合において十分な安定性を示す。したがって、Ｚｎはそれ自体で安定化効果を示すと結論付けられる。実際に、より高い安定性が、Ｚｎの割合が２倍になると、得られる。

【0351】

表４．ＴＰにより安定化されたＺＮ－ＡＣＣを含む懸濁液の安定性

【表6】

【0352】

したがって、表４で示される実験データに基づいて、本発明の混合され安定化された粒子内の第１の金属に対する安定剤の最小重量比は、約６％以下であると仮定される。

【0353】

実施例５
培地中の酸性化血清に対する様々なＡＣＣ及びＣＣＣ懸濁液の効果
本発明者らは、異なる安定剤と共に製剤化される安定剤を含む及び含まないＡＣＣ、ＡＭＣ、ＡＺＣ及び様々なＭ－ＡＣＣの、１０％（ｖ／ｖ）血清を補充した培地のｐＨに影響を及ぼす能力を評価した。この実施例は、血清が腫瘍及び炎症の周りに見られるレベルで酸性化されたときの迅速なｐＨ応答を実証する。それはまた、最終的なｐＨレベルの制御が処方の組成により実行可能であることも実証し、ここで金属と安定剤の種類及び量がそれらのｐＨ調節能力に影響する。この実施例はまた、どのように様々な製剤が、（ａ）調製時の新鮮な懸濁液中でそれらの安定性を維持するか、（ｂ）懸濁液の初期ｐＨに影響するか、かつ（ｃ）様々な製剤の非晶質相の安定性を維持するか、を記録する。

【0354】

１８ｍｌの培地ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｂｅｉｔ Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）に、２ｍｌのウシ胎児血清（ＦＢＳ，Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｂｅｉｔ Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌ）を添加した。溶液を、滅菌組織試料カップ内に置き、穴を、カップの上部に開け、そこへｐＨプローブを挿入した。カップを、マグネチック攪拌機（ＪＢ－１０ ｓｔｉｒｒｅｒ，Ｉｎｅｓａ，Ｃｈｉｎａ）に置き、溶液を、測定中に絶えず攪拌した。ｐＨメーター（ＭｅｓｕＬａｂ，ＰＸＳＪ－２１６Ｆ ｉｏｎ ｍｅｔｅｒ，ＭＲＣ，Ｉｓｒａｅｌ）を、ＰＣに接続し、ｐＨ測定値のデータロギングを、ソフトウェアＲＥＸＤＣ２．０を使用して行った。

【0355】

システムを設定し、ｐＨ測定及びデータロギングを開始した後、２０.５μｌ量の乳酸を、ｐＨをわずかに酸性のｐＨに低下させるために、溶液に添加した。数秒後、及びｐＨの安定化後に、新たに調製した３ｍｌ量のＡＣＣ懸濁液を、溶液に添加した。

【0356】

下の表５は、懸濁液の組成の関数としてｐＨ曲線の即時及び長期の変化を要約する。この表はまた、時間の関数として様々な製剤の非晶質相の安定性を示す。

【0357】

表５．本発明の様々な粒子の添加時の血清の時間依存的ｐＨ

【表7】

合成名を解読する方法：「１％Ｃａ－６％ｗ／ｗ Ｚｎ（ｉｎｔ）／Ｃａ－１０％ＴＰ（ｅｘｔ）」は、懸濁液中１％の総カルシウム；カルシウムと比較した金属（亜鉛）の割合が、６重量％であり、カルシウムと比較した安定剤の割合（ＴＰ）が、１０重量％であり；Ｚｎ溶液を、反応初期に加え、ＴＰを、沈殿後に添加した、ことを意味する。ｉｎｔ.又はｅｘｔ.が言及されない場合、金属溶液を、最初にカルシウム溶液に添加し、安定剤を、炭酸塩の形成中に半分を添加し、最初の沈殿後に半分を添加した。

【0358】

実施例６
本発明者らは、安定剤がＡＣＣ粒子のバルク中に組み込まれることを実証した。

【0359】

ＡＣＣの典型的な合成において、ポリ三リン酸（３つのリン酸のみの鎖を有する「ＴＰ」又はトリポリリン酸ナトリウムを表す、「ＳＴＰＰ」）を、ＡＣＣの形成の間及び後に添加し、添加されるＴＰの量は、様々であった：合成に添加されるカルシウム試薬の量と比較して５、１０及び１５モル％。ＴＰのこれらの量を、以下のように添加した：（ａ）半分（０．５０）を、炭酸塩溶液と同時に反応溶液に導入し；（ｂ）半分（０．５０）を、懸濁液の非常に急速な形成の完了直後に添加した。ＡＣＣの低い溶解度に基づき、ＡＣＣ形成は数秒以内に完了すると仮定され、なぜなら懸濁及びその色の濃さは、カルシウムと炭酸塩の透明溶液を混合して数秒以内に達成されるからである。

【0360】

上記の懸濁液で得られた粉末を、十分に洗浄し、乾燥させ、１００％非晶質であることを確認した。洗浄手順により、ＡＣＣと化学的に相互作用していないＳＴＰＰを含むいかなる微量な試薬。

【0361】

試料を、ＩＣＰ（Ｃａ、Ｐ、Ｎａ及びＣｌの定量的レベルを決定するため）、ＴＧＡ（放出されたＣＯ_２の測定による炭酸塩の定量的決定のため）、固体ＮＭＲ（図４を参照されたい）、ＳＥＭ（図１を参照されたい）及びＴＥＭに供した。

【0362】

ＩＣＰとＴＧＡの組み合わされた分析の結果を、図５にまとめた。特定の理論に縛られることなく、図５に表されるグラフのみに基づき、本発明者らは、以下のように結論付けた：
（１）ＴＰの組み込みは、定量的であり、ほぼ直線的であり、その濃度が増加するにつれてわずかに速度が低下する。これは、別の試薬と反応する際に試薬（この場合は炭酸イオン）間で競合がある場合の、典型的な状況である。
（２）ＴＰの組み込みは定量的であるが、それは、両工程で反応中に導入される、ＳＴＰＰの合計量にならない。ＡＣＣと相互作用していない残留する可溶性ＴＰの大部分は、第２工程に由来し、粉末としてのＡＣＣの単離中に洗い流されると想定される。
（３）同時に、炭酸塩の量は、定量的に、また、ＳＴＰＰ濃度と直線的な関係で、低下される。しかし、炭酸塩当量の低下は、組み込まれたＴＰの当量の約５～６倍である。これは、ＴＰ分子の各リン酸単位が、２．５のＣａ：ＴＰ能力のうち、平均して、１．５～２個のカルシウムイオンを占めることを意味する。表面で吸着されたＴＰは、カルシウムイオンにそれほど結合しないと予想される。
（４）低濃度のＳＴＰＰでは、炭酸塩の低下は、わずかに湾曲しており、最初はＡＣＣ粒子表面へのＴＰの化学結合吸着が、ＴＰの単層による表面の飽和が達成されるまで、より優勢であることを示唆している。

【0363】

上記の観察は、本発明の非晶質金属炭酸塩粒子の分子ネットワーク内部への安定剤の組み込みの強力な証拠を与える。これらの結論はまた、次の観察結果により裏付けられる：（ｉ）ＳＥＭ分析とＴＥＭ分析の両方（図１及び５）は、凝集した球状の一次粒子の類似の均質な形態を明らかにする；（ｉｉ）ＴＥＭを用いて行ったマッピングは、Ｃａの分布のような粒子内のＰの均一な分布を明らかにする。粒子の表面で観察されるより高い強度のＰはなく、ＴＰが全粒子内で及び粒子の表面で実質的に均一に分布されることを示す。

【0364】

図６及び７は、（ａ）安定剤の種類、（ｂ）添加された安定剤の量、及び（ｃ）安定剤が添加される様式（合成の一部として、合成の後で又はその両方）、の関数として、本発明の全粒子内に及び／又はその表面でホスホセリン及びトリポリリン酸安定剤を組み込むレベルを示す。並行して、実験結果に基づき、本発明者らは、ＣＯ３含有量の低下があると仮定した。ＰＳとＴＰＰの両方はわずかに異なる挙動を示すが、安定剤は比較的速く表面積を飽和させることができ、かつ炭酸アニオンを置換することにより構造中に取り込まれることが明らかである。安定剤が合成の一部として添加されるほど、それは、粒子中にますます取り込まれた。特定の理論に縛られることなく、ＴＰＰは、ＰＳと比較して全体的に顕著に高い割合で組み込まれ、およびまた、はるかに多くの炭酸塩単位を置き換えると仮定される。

【0365】

さらに、安定剤の位置は、とりわけ、非晶質金属炭酸塩に対する安定剤の比率によって予め定められることが観察された（図６及び７により表されるように）。特に、本発明の粒子の合成中に３モル％を超える安定剤を加えることにより、安定剤は主として粒子の内部に位置付けられると仮定される。安定剤の位置は、とりわけ（ｉ）製造プロセス（例えば、安定剤が金属炭酸塩粒子形成と同時に又はその後に添加されたかどうか）；（ｉｉ）製造プロセスにおける安定剤の濃度及び（ｉｉｉ）安定剤の化学組成、によりあらかじめ決定されるとさらに仮定される。

【0366】

実施例７
ＢＥＴ測定
多数の非晶質金属炭酸塩粉末を、それらの多孔度及びＢＥＴ表面積を決定するために分析した。表６は、ＢＥＴにより測定した表面積を要約する。

【0367】

表６：本発明の例示的な粉末状組成物のＢＥＴ表面

【表8】

【0368】

全ての様々な純粋な及び混合された金属炭酸塩の表面積の範囲は、３４～１０６ｍ^２／ｇの範囲である。全体で、Ｆｅ（ＩＩ）を含まない本発明の全ての試験した様々な非晶質炭酸塩粒子（例えば、単一の二価金属粒子及び混合された金属粒子／混合され安定化された金属粒子）の表面積は、３０～７０ｍ^２／ｇの範囲であり、ＳＥＭ及びＴＥＭ分析によって実際に決定されるように、２０～６０ｎｍの範囲の平均粒径を有するナノ粒子を示す。Ｆｅ（ＩＩ）を含有する本発明の例示的な粒子は、７０～１０５ｍ^２／ｇの表面積を提供し、２０ｎｍ未満の平均粒径を有するナノ粒子を示す。

【0369】

ＡＣＣ ６重量％のＳＴＰＰのＢＪＨ細孔径及び細孔容積分析は、これらのナノ粒子が、約１～２ｎｍの細孔径直径を有し、０．０６～０．１０ｃｃ／ｇのレベルで非常に低い開孔率を有することを明らかにする。

【0370】

実施例８
非晶質金属炭酸塩の固体ＮＭＲ及びＴＥＭ分析
本発明の例示的な単一の１００％非晶質金属炭酸塩粒子及び混合された粒子（ＡＣＣ内の第２の金属）の固体^１３Ｃ ＮＭＲ分析を、安定剤としてポリ三リン酸を用いて、又は安定剤なしで行った。炭酸塩の蓄積された及び全体のＡ単一ピークが、図４に示すように、全ての材料について観察される。ＡＣＣ及びＡＣＣ内に組み込まれた全金属は、１６８．５±１．０ｐｐｍの範囲に最大の高さを有する炭酸塩の広いピークを示す。これは、方解石の炭酸塩ピークが現れるのと同じ場所である。しかし、後者のピークは、非晶質炭酸塩よりはるかに鋭い。

【0371】

一リン酸及び二リン酸（ピロリン酸）によって安定化されたＡＣＣの炭酸塩ピークは、同じｐｐｍ範囲及び幅にあった。ホスホセリンで安定化されたＡＣＣの炭酸塩もまた、１６８.６ｐｐｍに最大ピークを有することに留意すべきである。したがって、炭酸塩のピーク位置は、安定剤の種類及びＡＣＣマトリックス内の追加の金属の存在により著しく影響されない。

【0372】

Ｍｇ及びＺｎなどの金属を含有する本発明の追加の例示的な単一の金属炭酸塩粒子の炭酸塩ピークは、わずかにシフトした、単一のブロードな炭酸塩ピークも有する。非晶質Ｍｇ炭酸塩とＺｎ炭酸塩の場合の最大ピークは、それぞれ、１６６.１と１６５.３である。

【0373】

本発明の例示的な組成物のＣａ及びＰのエネルギー分散型Ｘ線分光法（ＥＤＳ）マッピングを含む、様々な合成金属炭酸塩の高分解能透過型電子顕微鏡（ＨＲ－ＴＥＭ）分析を、行った。

【0374】

ＴＥＭ分析に基づいて、本発明者らは、いくらかの粒子が２～１０ｎｍの範囲の、最小の多孔性、おそらく密な多孔性により特徴づけられると結論付けた。そのような密な多孔性は、本発明の例示的な組成物のＴＧＡ分析によって示されるように、単なる吸着を超えて水を捕捉すると予想される。

【0375】

さらに、ＴＥＭ分析に基づいて、本発明者らは、本発明の例示的な粒子が、多孔性を実質的に欠いていると結論付けた（非晶質炭酸マグネシウム（ＡＭＣ）、又は１０％トリポリリン酸により安定化された非晶質亜鉛ＡＺＣなど）。Ｃａ（赤）元素とＰ（青）元素のＥＤＳマッピングは、粒子にわたるＰの均一な分布を示す。そのような均一な分布は、粒子の内部分子構造内のリン酸安定剤の均一な組み込みの別の証拠である。

【0376】

実施例９
カテプシン活性に対する安定化された非晶質炭酸塩金属の影響
材料と方法
培地
全ての材料を、別段の定めがない限り、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ－Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｂｅｉｔ Ｈａｅｍｅｋ，Ｉｓｒａｅｌから購入した。完全培地は、９０％ダルベッコ改変イーグル培地－栄養混合物Ｆ－１２（ＤＭＥＭ－Ｆ１２）カルシウム除去、１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、２ｍＭグルタミン、ペニシリンＧナトリウム塩：１０，０００ユニット／ｍＬ、硫酸ストレプトマイシン：１０ｍｇ／ｍＬ（Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ）で構成された。１ｍＭの最終濃度で塩化カルシウムを、バンク増殖用の又は他の金属炭酸塩試験用の培地に添加した。

【0377】

解凍と培養
全ての手順を、層流フード中で、無菌条件下で行った。Ａ５４９癌細胞の１つの凍結アンプルを、３７℃の水浴中で解凍し、５ｍｌの完全培地及び１ｍＭの塩化カルシウムを補充した２つのＴ－２５フラスコ（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｉｎｃ，ＮＹ，ＵＳＡ）に播種した。翌日、培地を交換した。次いで、培地を、週に２回交換した。細胞がコンフルエントに達した後、細胞を、新しいＴ－２５フラスコ中に１：１０の分割比で継代培養した。細胞を、９グループに分けた。

【0378】

試験したグループ：（１）１ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）を添加した完全培地（カルシウム除去）（本明細書ではバンク）；（２）完全培地（カルシウム除去）２ｍＭのＣａ^＋２及び結晶性炭酸カルシウム＝ＣＣＣに由来する炭酸塩を有する培地（本明細書ではＣＣＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への４０μｌの懸濁液；（３）完全培地（カルシウム除去）ＣａＣｌ_２からの１ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）及びＡＭＣからの１．２ｍＭのＭｇ^＋２と炭酸塩を添加した培地（本明細書ではＡＭＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への２４μｌの懸濁液；（４）完全培地（カルシウム除去）ＣａＣｌ_２からの１ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）及びＡＺＣからの１０μＭのＺｎ^＋２と炭酸塩を添加した培地（本明細書ではＡＺＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への０．２μｌの懸濁液；（５）完全培地（カルシウム除去）ＡＣＣからの１．８ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）及びＡＣＣ－ＡＭＣ（ＡＣＭＣ）からの０．２ｍＭのＭｇ^＋２と炭酸塩を添加した培地（本明細書ではＡＣＭＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への４０μｌの懸濁液；（６）完全培地（カルシウム除去）ＡＣＣからの１．９９ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）及びＡＣＣ－ＡＺＣ（ＡＣＺＣ）からの１０μＭのＺｎ^＋２と炭酸塩を添加した培地（本明細書ではＡＣＺＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への４０μｌの懸濁液；（７）完全培地（カルシウム除去）ＡＣＣからの１．７９ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）及びＡＣＣ－ＡＭＣ－ＡＺＣ（ＡＣＭＺＣ）からの０．２ｍＭのＭｇ^＋２と１０μＭのＺｎ^＋２と炭酸塩を添加した培地（本明細書ではＡＣＭＺＣ試験グループ）。１ｍｌの培地中への４０μｌの懸濁液。

【0379】

各グループは、２つの複製（重複）を含んだ。培養を、３～５継代続け、次いで、細胞の一部（各グループからの）を、凍結バンクを作製するために拡張し、他の細胞を、カテプシンＢ活性試験のために採取した。培地を、処理を含み、新しい培地と週に２回交換した。全ての処理溶液：ＡＣＣ、ＣＣＣ、ＡＭＣ、ＡＺＣ、ＡＣＭＣ、ＡＣＺＣ、ＡＣＭＺＣ、ＭｇＣｌ_２、ＺｎＣｌ_２及びＣａＣｌ_２を、週に１回新たに調製した。細胞がコンフルエントに達したら、細胞を、同じ個々の処理を含み、新しい培地で週に２回、希釈比１：１０で新しいフラスコ中に継代培養した。全ての処理を、一緒に継代培養した。

【0380】

３～５継代後、細胞を、カテプシンＢ溶解緩衝液中で溶解し、各試料についてのタンパク質量／濃度を、５９５ｎｍの分光光度計でブラッドフォード試薬を用いて測定し及び決定した。全グループのカテプシンＢ活性を、測定した。アッセイのために、２０マイクロリットルを、各グループから採取し、タンパク質量に応じて結果の正規化を、行った。

【0381】

測定を、Ａｂｃａｍ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ）によるカテプシンＢ活性アッセイキット（Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ）（ａｂ６５３００）を用いて行った。溶解物を、キット説明書に従って処理した、すなわちカテプシンＢ基質と１時間、３７℃でインキュベートして、リソソームタンパク質の活性を特定した。カルシウム、マグネシウム、亜鉛及び炭酸塩のサプリメント供給源と濃度は、上記の試験グループで詳しく説明されている。

【0382】

Ａ５４９ヒト肺癌細胞におけるカテプシンＢ活性に対する非晶質金属炭酸塩の効果を、ＣＣＣ及び無処理と比較した。結果を、炭酸塩を添加した場合と添加しない場合の、同じ追加の金属及び濃度での継代培養の一対を比較するグラフにプロットした。データを、平均±ＳＥＭとして提示する（図８～９）。

【0383】

ストック溶液の調製
塩化カルシウム二水和物－ＣａＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ－容量１Ｌ。０.９Ｌの二回蒸留した水（ＤＤＷ）に、１８.３５ｇのＣａＣｌ_２・２Ｈ_２を量り入れ、十分に混合する。ＤＤＷを加えて１Ｌの容量にする。

【0384】

炭酸ナトリウム－Ｎａ_２ＣＯ_３－容量１Ｌ。０.９ＬのＤＤＷに、１３.２３ｇのＮａ_２ＣＯ_３を量り入れ、十分に混合する。ＤＤＷを加えて１Ｌの容量にする。

【0385】

ペンタ三リン酸ナトリウム（ＴＰ）－容量０.５Ｌ。０.４ＬのＤＤＷに、１.８３６ｇのＴＰを量り入れ、十分に混合する。ＤＤＷを加えて０．５Ｌの容量にする。

【0386】

塩化亜鉛（ＺｎＣｌ_２）－容量１Ｌ。０.９ＬのＤＤＷに、１７.０４ｇのＺｎＣｌ_２を量り入れ、十分に混合する。ＤＤＷを加えて１Ｌの容量にする。

【0387】

塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）－容量１Ｌ。０.９ＬのＤＤＷに、２５.４１ｇのＭｇＣｌ_２を量り入れ、十分に混合する。ＤＤＷを加えて１Ｌの容量にする。

【0388】

懸濁液及び溶液の調製
懸濁液を、滅菌マグネット攪拌機を用いてきれいな容器中で、下の表１～１０に見られる以下の工程に従いストック溶液から調製した。
表７：ストック溶液からのＣＣＣ溶液の調製

【表9】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。
表８：ストック溶液からのＡＭＣ溶液の調製

【表10】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。
表９：ストック溶液からのＡＺＣ溶液の調製

【表11】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。
表１０：ストック溶液からのＡＣＣ－ＡＭＣ（ＡＣＭＣ）溶液の調製

【表12】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。
表１１：ストック溶液からのＡＣＣ－ＡＺＣ（ＡＣＺＣ）溶液の調製

【表13】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。
表１２：ストック溶液からのＡＣＣ－ＡＭＣ－ＡＺＣ（ＡＣＭＺＣ）溶液の調製

【表14】

均一なコロイド乳白色溶液が得られるまで、少なくとも３０秒間十分に混合する。

【0389】

細胞培地サプリメントとして製剤化されるナノメトリックＣＣＣ懸濁液の調製
３６ｍｌの２．０６８８％の塩化カルシウム二水和物を、２４ｍｌの滅菌水と混合する。次いで、４０ｍｌの１．２９９％の炭酸ナトリウム溶液を、添加してＣＣＣを沈殿させる。得られたＣＣＣ懸濁液（調製の１時間後）を、培養液へのサプリメントとして使用する。懸濁液を、最終濃度２ｍＭのカルシウムイオンに添加する（１ｍｌ培地中に４０μｌのＡＣＣ懸濁液）。

【0390】

結果は、非晶質金属炭酸塩が、陰性対照及びＣＣＣと比較して、カテプシンの量及び／又は活性を顕著に低下させたことを示す。特に、ＡＣＭＣ、ＡＣＺＣ、及びＡＣＭＺＣなどの、２又は３種の金属炭酸塩の組み合わせは、この程度まで効力が高いことが示された（図８～９）。

【0391】

本発明者らは現在、一般に知られている模擬消化プロトコルに基づいて実験的研究を行っている。簡単に説明すると、本発明の粒子を、ｐＨ１.５でＨＣｌ溶液と接触させる。本発明の粒子（例えば、混合された金属炭酸塩粒子）を、ＨＣｌ溶液と接触する前に秤量する。続いて、溶液相中の金属カチオンの濃度を、金属カチオンの濃度により示される非晶質炭酸塩粒子の溶解を評価するために、推定する（例えば、ＩＣＰによって）。粒子の溶解は、活性剤を含む（例えば、１以上の二価金属カチオン及び／又は炭酸アニオンを含む）粒子の潜在的なバイオアベイラビリティを示すはずである。

【0392】

本発明者らによって得られた予備データに基づいて、固体粒子の少なくとも部分的な溶解が、観察された。さらに、ＨＣｌ溶液のｐＨが上昇し（ｐＨ１．５から）、定常状態のｐＨを形成することが観察された。

【0393】

本発明のある特徴が本明細書に記載されているが、多くの修正、置換、変更、及び均等物を当業者なら思いつくであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の趣旨の範囲内にある全てのそのような修正及び変更を包含すると意図されることを理解されたい。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【国際調査報告】