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特表2024-506626抗ＣＤ１１２Ｒ抗体及びその用途

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-02-14

(54)【発明の名称】抗ＣＤ１１２Ｒ抗体及びその用途

(51)【国際特許分類】

C12N 15/13 20060101AFI20240206BHJP

C07K 16/28 20060101ALI20240206BHJP

C12N 15/85 20060101ALI20240206BHJP

C12N 5/10 20060101ALI20240206BHJP

C12N 15/62 20060101ALI20240206BHJP

C07K 16/46 20060101ALI20240206BHJP

C12N 15/63 20060101ALI20240206BHJP

A61P 35/00 20060101ALI20240206BHJP

A61K 47/68 20170101ALI20240206BHJP

A61K 45/00 20060101ALI20240206BHJP

A61K 48/00 20060101ALI20240206BHJP

A61K 39/395 20060101ALI20240206BHJP

A61P 37/04 20060101ALI20240206BHJP

A61K 35/12 20150101ALI20240206BHJP

C12P 21/08 20060101ALI20240206BHJP

【ＦＩ】

C12N15/13 ZNA

C07K16/28

C12N15/85 Z

C12N5/10

C12N15/62 Z

C07K16/46

C12N15/63 Z

A61P35/00

A61K47/68

A61K45/00

A61K48/00

A61K39/395 T

A61K39/395 U

A61P37/04

A61K35/12

C12P21/08

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023547898

(86)(22)【出願日】2022-02-08

(85)【翻訳文提出日】2023-08-25

(86)【国際出願番号】 CN2022075502

(87)【国際公開番号】W WO2022171080

(87)【国際公開日】2022-08-18

(31)【優先権主張番号】202110178859.1

(32)【優先日】2021-02-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】320000850

【氏名又は名称】上海君▲実▼生物医▲薬▼科技股▲分▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＳＨＡＮＧＨＡＩＪＵＮＳＨＩＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳＣＯ．，ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｆｌｏｏｒ１３，Ｂｕｉｌｄｉｎｇ２，Ｎｏｓ．３６ａｎｄ５８，ＨａｉｑｕＲｏａｄ，ＰｉｌｏｔＦｒｅｅＴｒａｄｅＺｏｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２１０ＣＨＩＮＡ

(71)【出願人】

【識別番号】519301559

【氏名又は名称】▲蘇▼州君盟生物医▲薬▼科技有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】110001070

【氏名又は名称】弁理士法人エスエス国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼丹丹

(72)【発明者】

【氏名】▲張▼静

(72)【発明者】

【氏名】周岳▲華▼

(72)【発明者】

【氏名】姚▲剣▼

(72)【発明者】

【氏名】▲趙▼▲強▼

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼▲輝▼

(72)【発明者】

【氏名】▲馮▼▲輝▼

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C076

4C084

4C085

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG26

4B064CA10

4B064CA19

4B064CC24

4B064DA01

4B065AA90Y

4B065AA91X

4B065AB01

4B065AC14

4B065AC20

4B065BA02

4B065CA25

4B065CA44

4C076AA95

4C076CC27

4C076CC41

4C076EE59

4C076FF70

4C084AA19

4C084NA05

4C084ZB091

4C084ZB092

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC752

4C085AA14

4C085BB36

4C085BB41

4C085BB43

4C085BB44

4C085EE01

4C085EE03

4C087AA01

4C087AA02

4C087AA03

4C087BB65

4C087CA04

4C087CA12

4C087NA14

4C087ZB09

4C087ZB26

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA40

4H045BA50

4H045CA40

4H045DA75

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本発明はＣＤ１１２Ｒと特異的に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント及びこれらを含む組成物を提供する。本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントをコードする核酸分子、本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントを発現するベクター及び宿主細胞、並びに本発明に係る抗体又はその抗原結合フラグメントの治療及び診断方法と用途を更に提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントであって、前記抗体又はその抗原結合フラグメントに含まれるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３は、それぞれ下記の通りであり、即ち、
ＨＣＤＲ１はＳＹＨＭＳであり、
ＨＣＤＲ２はＡＩＸ₁Ｘ₂Ｘ₃Ｘ₄Ｘ₅Ｘ₆ＴＹＹＸ₇ＤＴＶＫＧであり、そのうち、Ｘ₁はＮ又はＳであり、Ｘ₂はＳ又はＲであり、Ｘ₃はＮ又はＤであり、Ｘ₄はＤ又はＧ又はＶであり、Ｘ₅はＩ又はＤであり、Ｘ₆はＮ又はＳであり、Ｘ₇はＬ又はＰであり、
ＨＣＤＲ３はＨＥＤＹＸ₈ＧＦＡＭＤＸ₉であり、そのうち、Ｘ₈はＹ又はＦであり、Ｘ₉はＹ又はＳであり、
ＬＣＤＲ１はＫＡＳＱＳＶＸ₁₀ＮＤＶＡであり、そのうち、Ｘ₁₀はＴ又はＳであり、
ＬＣＤＲ２はＹＶＳＸ₁₁Ｘ₁₂Ｘ₁₃Ｔであり、そのうち、Ｘ₁₁はＮ又はＨであり、Ｘ₁₂はＨ又はＲであり、Ｘ₁₃はＹ又はＦであり、
ＬＣＤＲ３はＸ₁₄ＱＡＹＲＳＰＷＴであり、Ｘ₁₄はＱ又はＨであり、
好ましくは、前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３に示されるＨＣＤＲ１と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１４、４１、５０又は６８に示されるＨＣＤＲ２と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１５又は４２に示されるＨＣＤＲ３と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：４３又は５２に示されるＬＣＤＲ１と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：４４、５３又は７１に示されるＬＣＤＲ２と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：５４又は７２に示されるＬＣＤＲ３と、を含む、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項2】

抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントであって、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、
前記重鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、を含み、
前記軽鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、を含み、
好ましくは、前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＸＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、を含み、
更に好ましくは、前記抗体又はその抗原結合フラグメントは重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、
（Ｉ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＩＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＩＶ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（Ｖ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＶＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＶＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＶＩＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＩＸ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（Ｘ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＩＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＩＶ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＶ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＶＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＶＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＶＩＩＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＩＸ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＸ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（ＸＸＩ）前記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１４２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、
抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項3】

請求項１又は２に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントであって、
（Ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２４又は１２５に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６に示される軽鎖可変領域と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、若しくは
アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３１に示される軽鎖可変領域と、を含み、
好ましくは、前記抗体は、
（Ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖と、若しくは
（ＩＩ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３４又は１３５に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３３に示される軽鎖と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３７又は１３８に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３６に示される軽鎖と、或いは、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１４０又は１４１に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３９に示される軽鎖と、を含む、
請求項１又は２に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項4】

前記抗体がマウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又は完全ヒト抗体から選ばれ、前記抗原結合フラグメントがＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂから選ばれる、請求項１～３の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項5】

前記抗体又はその抗原結合フラグメントは任意のＩｇＧサブタイプであり、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４であり、好ましくは、ＩｇＧ１サブタイプ又はＩｇＧ４サブタイプである、請求項１～４の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項6】

下記特性、即ち、
（Ｉ）結合するヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質のエピトープと請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントとの結合が同じ、完全に重なり、又は部分的に重なること、
（ＩＩ）請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントとヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質のエピトープに対して競合的に結合すること、の少なくとも１つを有する、
単離抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント。

【請求項7】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド分子。

【請求項8】

請求項７に記載のポリヌクレオチド分子を含み、好ましくは、ベクターが真核発現ベクターである、発現ベクター。

【請求項9】

請求項７に記載のポリヌクレオチド分子、又は、請求項８に記載の発現ベクターを含み、好ましくは、宿主細胞が真核細胞であり、より好ましくは、哺乳動物細胞である、宿主細胞。

【請求項10】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントの製造方法であって、前記抗体又はその抗原結合フラグメントの発現に適する条件で、請求項９に記載の宿主細胞に前記抗体又はその抗原結合フラグメントを発現すると共に、発現する抗体又はその抗原結合フラグメントを前記宿主細胞から回収すること、を含む、方法。

【請求項11】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントの、軽鎖可変領域と重鎖可変領域を含む、多重特異性抗体。

【請求項12】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントの、軽鎖可変領域と重鎖可変領域を含む、単鎖抗体。

【請求項13】

治療剤又は診断剤と抱合する、請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントを含む、免疫抱合体。

【請求項14】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子、請求項８に記載の発現ベクター、或いは請求項９に記載の宿主細胞、及び薬学的に許容されるベクター又は賦形剤、を含む、医薬組成物。

【請求項15】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは請求項１４に記載の医薬組成物、及び１種又は複数種の別の治療剤、を含み、好ましくは、前記治療剤が抗ＰＤ‐１抗体、ＰＤ‐Ｌ１抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体から選ばれる１種又は複数種であり、より好ましくは、前記治療剤が抗ＴＩＧＩＴ抗体、又は抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体との組合せである、薬物の組合せ。

【請求項16】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子、請求項８に記載の発現ベクター、請求項９に記載の宿主細胞、請求項１４に記載の医薬組成物、或いは請求項１５に記載の薬物の組合せの、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の製造における用途であって、好ましくは、前記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、前記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、用途。

【請求項17】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子、請求項８に記載の発現ベクター、請求項９に記載の宿主細胞、請求項１４に記載の医薬組成物、或いは請求項１５に記載の薬物の組合せを含む、試薬キット。

【請求項18】

請求項１～５の何れか一項に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは前記抗体又はその抗原結合フラグメントを含む検出組成物、或いは請求項６に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメントを利用して、サンプルにおけるＣＤ１１２Ｒの存在を検出する方法であって、前記抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは前記抗体又はその抗原結合フラグメントを含む検出組成物を前記サンプルに接触させるステップを含む、方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

【背景技術】

【0002】

免疫系は様々な細胞タイプからなる高度で複雑なシステムであり、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、抗原提示細胞、樹状細胞、単球、マクロファージを含むが、これらに限定されない。これらの細胞は、その相互作用及び応答を制御するために、複雑で巧妙なシステムを持っている。細胞は、活性化と抑制のメカニズム及びフィードバック回路によって、反応に対する制御が保持されると共に、制御されない免疫反応（例えば、自己免疫疾患）によるデメリットが許可されない。

【0003】

ＣＤ１１２Ｒ（ＰＶＲＩＧ）は、ポリオウイルス受容体に関する免疫グロブリンドメインを含むタンパク質、Ｑ６ＤＫＩ７又はＣ７ｏｒｆ１５とも呼ばれ、長さが３２６個のアミノ酸である膜貫通ドメインタンパク質であり、シグナルペプチド（アミノ酸１～４０にわたる）、細胞外ドメイン（アミノ酸４１～１７１にわたる）、膜貫通ドメイン（アミノ酸１７２～１９０にわたる）、細胞質ドメイン（アミノ酸１９１～３２６にわたる）を有する。ＣＤ１１２Ｒはポリオウイルス受容体に関するタンパク質２（ＰＶＬＲ２、また、ｎｅｃｔｉｎ‐２、ＣＤ１１２又はヘルペスウイルス侵入メディエータＢ（ＨＶＥＢ）、ヒト細胞膜糖タンパク質とも呼ばれる）、即ちＣＤ１１２Ｒの結合リガンドと結合する。

【0004】

抗ＣＤ１１２Ｒ免疫療法の投与によって、免疫応答の増加、増強、維持に繋がるチャンスが提供される。ＣＤ１１２Ｒは主にＴ細胞とＮＫ細胞によって発現される抑制性受容体であり、活性化受容体ＣＤ２２６とＣＤ１１２に対して競合的に結合する。ＣＤ１１２とＣＤ１１２Ｒとの相互作用がＣＤ１１２とＣＤ２２６との相互作用よりも高い親和力を有するため、ＣＤ２２６媒介の細胞活性化は効果的に調整される。ＣＤ１１２と相互作用する抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を遮断することで、抑制性シグナルのＣＤ１１２Ｒ下流への伝達が直接的に制限されると共に、ＣＤ２２６とＣＤ１１２との相互作用を増加させることで、免疫細胞の活性化が一層促進される。

【0005】

抗ＣＤ１１２Ｒ抗体による治療によって抑制シグナルをダウンレギュレートするチャンスが提供され、当該抑制シグナルは、ＣＤ１１２Ｒを発現する免疫細胞と腫瘍微小環境における腫瘍細胞及び／又は骨髄系細胞でのＣＤ１１２とが結合する場合に発生できると共に、抗腫瘍免疫反応の増強、増加、維持にも繋がる。

【0006】

現在、抗ＣＤ１１２Ｒのモノクローナル抗体薬物は、臨床前のＳＲＦ８１３（ＳｕｒｆａｃｅＯｎｃｏｌｏｇｙ）だけであり、更に多くの新型抗ＣＤ１１２Ｒ抗体が依然として必要とされている。

【発明の概要】

【0007】

本発明は、ヒトＣＤ１１２Ｒに対する高親和力と高特異性などの優位性を有する、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。本発明に係る抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントは、単独の療法として、或いはその他の療法／又はその他の抗がん剤との併用投与で、例えば、がんの治療に適用される。
一様態において、本発明は、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントであって、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、

【0008】

上記重鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0009】

（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0010】

（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0011】

（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0012】

（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0013】

（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0014】

（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0015】

（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0016】

（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0017】

（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0018】

（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0019】

（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0020】

（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0021】

（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは

【0022】

（ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、を含み、

【0023】

上記軽鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0024】

（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0025】

（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0026】

（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0027】

（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0028】

（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0029】

（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0030】

（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0031】

（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0032】

（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0033】

（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0034】

（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0035】

（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは

【0036】

（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるアミノ酸配列とそれぞれ１、２又は３個のアミノ酸の差異を有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、
を含む、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。

【0037】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0038】

（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0039】

（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0040】

（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１６、ＳＥＱＩＤＮＯ：１７、ＳＥＱＩＤＮＯ：１８に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0041】

（Ｖ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２２、ＳＥＱＩＤＮＯ：２３、ＳＥＱＩＤＮＯ：２４に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２５、ＳＥＱＩＤＮＯ：２６、ＳＥＱＩＤＮＯ：２７に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0042】

（ＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３１、ＳＥＱＩＤＮＯ：３２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３３に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0043】

（ＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３４、ＳＥＱＩＤＮＯ：３５、ＳＥＱＩＤＮＯ：３６に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：３７、ＳＥＱＩＤＮＯ：３８、ＳＥＱＩＤＮＯ：３９に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0044】

（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0045】

（ＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：２８、ＳＥＱＩＤＮＯ：２９、ＳＥＱＩＤＮＯ：３０に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４６、ＳＥＱＩＤＮＯ：４７、ＳＥＱＩＤＮＯ：４８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0046】

（Ｘ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0047】

（ＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５５、ＳＥＱＩＤＮＯ：５６、ＳＥＱＩＤＮＯ：５７に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５８、ＳＥＱＩＤＮＯ：５９、ＳＥＱＩＤＮＯ：６０に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0048】

（ＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６１、ＳＥＱＩＤＮＯ：６２、ＳＥＱＩＤＮＯ：６３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６４、ＳＥＱＩＤＮＯ：６５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0049】

（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0050】

（ＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７３、ＳＥＱＩＤＮＯ：７４、ＳＥＱＩＤＮＯ：７５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７６、ＳＥＱＩＤＮＯ：７７、ＳＥＱＩＤＮＯ：７８に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0051】

（ＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７９、ＳＥＱＩＤＮＯ：８０、ＳＥＱＩＤＮＯ：８１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：８２、ＳＥＱＩＤＮＯ：８３、ＳＥＱＩＤＮＯ：８４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0052】

（ＸＶＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0053】

（ＸＶＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0054】

（ＸＶＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0055】

（ＸＩＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0056】

（ＸＸ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0057】

（ＸＸＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0058】

（ＸＸＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0059】

（ＸＸＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0060】

（ＸＸＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0061】

（ＸＸＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１９、ＳＥＱＩＤＮＯ：２０、ＳＥＱＩＤＮＯ：２１に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、を含む。

【0062】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体はマウス抗体又はキメラ抗体である。
幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、
（Ｉ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0063】

（ＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0064】

（ＩＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0065】

（ＩＶ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0066】

（Ｖ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0067】

（ＶＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0068】

（ＶＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0069】

（ＶＩＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0070】

（ＩＸ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0071】

（Ｘ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0072】

（ＸＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0073】

（ＸＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０７に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０８に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0074】

（ＸＩＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0075】

（ＸＩＶ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１１に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0076】

（ＸＶ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0077】

（ＸＶＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0078】

（ＸＶＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0079】

（ＸＶＩＩＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0080】

（ＸＩＸ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１００に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0081】

（ＸＸ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0082】

（ＸＸＩ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：１４２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：９２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0083】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体はヒト化抗体である。
幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0084】

（ＩＩ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0085】

（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0086】

（ＩＶ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２４又は１２５に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0087】

（Ｖ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0088】

（ＶＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0089】

（ＶＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0090】

（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは

【0091】

（ＩＸ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３１に示される軽鎖可変領域と、を含む。

【0092】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖と、若しくは

【0093】

（ＩＩ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖と、若しくは

【0094】

（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３４又は１３５に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３３に示される軽鎖と、若しくは

【0095】

（ＩＶ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３７又は１３８に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３６に示される軽鎖と、若しくは

【0096】

（Ｖ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１４０又は１４１に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３９に示される軽鎖と、を含む。

【0097】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト抗体、或いはその抗原結合フラグメントである。

【0098】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントにおいて、上記抗原結合フラグメントがＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂである。

【0099】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントにおいて、抗体又はその抗原結合フラグメントは任意のＩｇＧサブタイプであり、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４であり、好ましくは、ＩｇＧ１サブタイプ又はＩｇＧ４サブタイプである。

【0100】

別の様態において、本発明は、下記特性、即ち、
（１）結合するヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質のエピトープと本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントとの結合が同じ、完全に重なり、又は部分的に重なること、
（２）本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントとヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質のエピトープに対して競合的に結合すること、の１つ又は複数を有する、単離抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。

【0101】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、下記特性、即ち、
（１）ヒト／カニクイザルＣＤ１１２Ｒタンパク質と高親和力で結合すること、
（２）ヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質とヒトＣＤ１１２又はヒトＣＤ１１２発現細胞との結合を抑制又は遮断すること、の１つ又は複数を有する。

【0102】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体はモノクローナル抗体である。
本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントの軽鎖可変領域と重鎖可変領域を含む、多重特異性抗体を更に提供する。
本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントの軽鎖可変領域と重鎖可変領域を含む、単鎖抗体を更に提供する。

【0103】

本発明は、治療剤又は診断剤と抱合する、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントを含む、免疫抱合体を更に提供する。
別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド分子を提供する。
別の様態において、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子を含み、好ましくは、ベクターが真核発現ベクターである、発現ベクターを提供する。
別の様態において、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子又は本明細書に記載の発現ベクターを含み、好ましくは、宿主細胞が真核細胞であり、より好ましくは、哺乳動物細胞である、宿主細胞を提供する。

【0104】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントの製造方法であって、上記抗体又はその抗原結合フラグメントの発現に適する条件で、本明細書に記載の宿主細胞に上記抗体又はその抗原結合フラグメントを発現すると共に、発現する抗体又はその抗原結合フラグメントを上記宿主細胞から回収すること、を含む、方法を提供する。

【0105】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、及び薬学的に許容されるベクター又は賦形剤、を含む医薬組成物を提供する。

【0106】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは医薬組成物と、１種又は複数種の別の治療剤と、を含む薬物の組合せを提供する。
幾つかの実施形態において、本発明に記載の薬物の組合せにおいて、上記別の治療剤が抗ＰＤ‐１抗体、ＰＤ‐Ｌ１抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体から選ばれる１種又は複数種であり、好ましくは、上記別の治療剤が抗ＴＩＧＩＴ抗体、又は抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体との組合せである。

【0107】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、本明細書に記載の医薬組成物、或いは本明細書に記載の薬物の組合せの、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の製造における用途であって、好ましくは、上記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、上記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、用途を提供する。

【0108】

【0109】

別の様態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症を治療及び／又は予防する方法であって、必要とされる受検者に本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、本明細書に記載の医薬組成物、或いは本明細書に記載の薬物の組合せを治療又は予防有効量で投与することを含み、好ましくは、上記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、上記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、方法を提供する。

【0110】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントと別の治療剤を組合せで投与し、上記別の治療剤が抗ＰＤ‐１抗体、ＰＤ‐Ｌ１抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体から選ばれる１種又は複数種であり、好ましくは、上記別の治療剤が抗ＴＩＧＩＴ抗体、又は抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体との組合せである。

【0111】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、或いは本明細書に記載の医薬組成物、及び１種又は複数種の別の治療剤、を含む薬物の組合せを提供する。

【0112】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、本明細書に記載の医薬組成物、或いは本明細書に記載の薬物の組合せを含み、好ましくは、投与装置を更に含む、試薬キットを提供する。

【0113】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは上記抗体又はその抗原結合フラグメントを含む検出組成物を利用して、サンプルにおけるＣＤ１１２Ｒの存在を検出する方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0114】

【図1】ダブルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用の活性検出である。

【図2a】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2b】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2c】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2d】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2e】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2f】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2g】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図2h】トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【0115】

【図3a】ＦＡＣＳ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とＣＨＯ‐ｈＣＤ１１２発現細胞との結合である。

【図3b】ＦＡＣＳ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とＣＨＯ‐ｈＣＤ１１２発現細胞との結合である。

【図4a】ＥＬＩＳＡ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とカニクイザルＣＤ１１２Ｒとの結合である。

【図4b】ＥＬＩＳＡ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とカニクイザルＣＤ１１２Ｒとの結合である。

【図5a】ＦＡＣＳ法によって検出される、ＣＤ１１２Ｒタンパク質とヒトＣＨＯ‐ＣＤ１１２細胞との結合への抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体による遮断である。

【図5b】ＦＡＣＳ法によって検出される、ＣＤ１１２Ｒタンパク質とヒトＣＨＯ‐ＣＤ１１２細胞との結合への抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体による遮断である。

【0116】

【図6a】ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性である。

【図6b】ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性である。

【図6c】ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性である。

【図6d】ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性である。

【図6e】ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性である。

【0117】

【図7a】ＥＬＩＳＡ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とカニクイザル及びマウスＣＤ１１２Ｒとの結合である。

【図7b】ＥＬＩＳＡ法によって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とカニクイザル及びマウスＣＤ１１２Ｒとの結合である。

【図8】ダブルレポーター遺伝子システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用の活性である。

【図9】トリプルレポーター遺伝子システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性である。

【図10】抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体及びその併用の、腫瘍成長への抑制作用である。

【発明を実施するための形態】

【0118】

＜定義＞
特に断りのない限り、本発明の実施にあたって、分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生物化学、免疫学などの通常技術を採用するが、これらは本分野の技術範囲内である。

【0119】

本発明をより容易に理解できるように、技術用語を以下のように定義する。本明細書のその他の部分で明確に定義しない限り、本明細書で使用される技術用語は、本発明の当業者が通常理解する意味を有する。本分野の定義及び用語について、専門者がＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ）を参照する。アミノ酸残基の略称は、本分野で使用される、２０種類の常用Ｌ‐アミノ酸の１つを表す、標準３文字及び／又は１文字のコードである。本明細書で別途で明確に説明しない限り、本明細書（請求項を含む）で使用される単数表現は対応する複数の意味を含む。

【0120】

用語「約」は数値と共に使用される時、下限として指定された数値より５％小さく、上限として指定された数値より５％大きい範囲内の数値を含み、開示された方法に適用できる変化であって、±５％、±２％、±１％、±０．１％などの変化を含むが、これらに限定されないことを意味する。

【0121】

用語「及び／又は」はオプションの何れか１つ、或いはオプションの何れか２つ又はそれ以上の組合せを意味すると理解すべきである。

【0122】

本明細書で使用されるように、用語「又は」は上記に定義される「及び／又は」と同じ意味を有すると理解すべきである。例えば、リストの項目を分解する場合、「又は」或いは「及び／又は」は網羅的なものとして解釈すべきであり、即ち、数量又は要素リストの少なくとも１つの項目を含むが、複数の項目も含み、及びそれ以外にリストされていない任意の項目も含む。相反する用語、例えば、「１つだけ」又は「確かに１つ」或いは請求項における「…からなる」などを明確に使用する場合に限って、リストされる１つの数字又はリストの１つの要素だけを指す。

【0123】

相反する場合を明確に示していない限り、本明細書で使用されるように、言葉「１」及び「１つ」は「少なくとも１つ」と理解すべきである。

【0124】

用語「ＣＤ１１２Ｒ」「ＰＶＲに関する免疫グロブリンドメイン」「ＣＤ１１２受容体」「ポリオウイルス受容体に関する免疫グロブリンドメイン」「Ｎｅｃｔｉｎ‐２受容体」「Ｃ７ｏｒｆｌ５」「膜貫通タンパク質ＰＶＲＩＧ」は互いに交換して使用することができ、特に断りのない限り、ヒトＣＤ１１２Ｒの変異体、サブタイプ、ホモログ、又はその他の種のＣＤ１１２Ｒ、及びＣＤ１１２Ｒの少なくとも１つの共通エピトープを有するアナログを含む。当該用語は、未処理の全長ＣＤ１１２Ｒ、及び細胞内処理によって産生される任意形態のＣＤ１１２Ｒを含む。当該用語は、「全長」の未処理ＣＤ１１２Ｒ、及び、スプライシング変異体又は対立遺伝子変異体などの、細胞内処理によって産生される任意形態のＣＤ１１２Ｒ又はその任意のフラグメントを含む。

【0125】

一実施形態において、ＣＤ１１２Ｒとは、ヒト又はカニクイザルに由来するＣＤ１１２Ｒの全長又はそのフラグメント（例えば、そのシグナルペプチドが欠如される成熟フラグメント）である。

【0126】

用語「ヒトＣＤ１１２Ｒ」とはヒト配列ＣＤ１１２Ｒを指し、例えば、ＮＣＢＩ登録番号ＮＭ＿０２４０７０ヒトＣＤ１１２Ｒを有する完全アミノ酸配列である。ヒトＣＤ１１２Ｒ配列は例えば保存変異又は非保存領域における変異を有することで、ＮＣＢＩ登録番号ＮＭ＿０２４０７０を有するヒトＣＤ１１２Ｒと異なると共に、ＣＤ１１２ＲはＮＣＢＩ登録番号ＮＭ＿０２４０７０を有するヒトＣＤ１１２Ｒとほぼ同じ生理機能を有する。

【0127】

用語「アミノ酸配列同一性のパーセンテージ（％）」又は略称「同一性」は、配列同一性の最大パーセンテージを得るためにアミノ酸配列をアラインメントして（必要とされる場合にギャップを導入して）、任意の保存置換も配列同一性の部分としない場合、候補アミノ酸配列におけるアミノ酸残基がアラインメント用アミノ酸配列におけるアミノ酸残基と同様であるパーセンテージと定義される。アミノ酸配列同一性のパーセンテージを測定するには、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ‐２、ＡＬＩＧＮ又はＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）など、一般的に入手できるパソコンソフトウェアを利用するような、本分野の様々な方法を用いて配列をアラインメントする。当業者は、比較される配列の全長に対して最も広範囲でアラインメントするには必要とされる如何なるアルゴリズムを含む、測定及びアラインメントの適切なパラメータを決めることができる。

【0128】

用語「免疫応答」とは、例えば、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球と上記細胞又は肝から産生される可溶性高分子（抗体、サイトカイン及び補体を含む）の効果を指し、当該効果により、侵入病原体、病原体を感染した細胞又は組織、がん細胞又は自体免疫又は病理学的炎症の場合の正常なヒト細胞又は組織が人体から選択的に損害、破壊又は除去される。

【0129】

用語「シグナル伝達経路」又は「シグナル伝達活性」とは、通常、例えば、成長因子と受容体との結合などのタンパク質間の相互作用による生物化学因果関係であり、上記関係によりシグナルが細胞の一部から細胞の他部まで伝達される。一般的に、伝達はシグナル伝達を引き起こす一連反応において、１種類又は複数種類のタンパク質における１つ又は複数のチロシン、セリン又はトレオニン残基の特定リン酸化を含む。通常、最後から二番目のプロセスが細胞核イベントを含むことから、遺伝子発現の変化が発生される。

【0130】

用語「活性」又は「生理活性」、或いは用語「生物性質」又は「生物特徴」はここで相互に交換使用可能であり、エピトープ／抗原親和性及び特異性、インビボ又はインビトロにおいてＣＤ１１２Ｒ活性を中和又は拮抗する能力、ＩＣ５０、抗体のインビボ安定性及び抗体の免疫原性質を含むが、これらに限定されない。本分野における周知の評定できる抗体のその他の生物学性質又は特徴は、例えば、交差反応性（即ち、通常、ターゲットペプチドの非ヒトホモログ、或いはその他のタンパク質又は組織との交差反応性）、哺乳類動物細胞におけるタンパク質の高発現レベルを保持する能力を含む。本分野における周知の技術を利用して前述した性質又は特徴を観察、測定又は評価するが、上記技術は、ＥＬＩＳＡ、ＦＡＣＳ又はＢＩＡＣＯＲＥなどのイオン共振分析、制限を受けないインビボ又はインビトロにおける中和測定、受容体結合、サイトカイン又は成長因子の産生及び／又は分泌、シグナル伝達、異なる由来（ヒト、霊長類又は如何なるその他の由来）の組織断片の免疫組織化学を含むが、これらに限定されない。

【0131】

用語「抗体」とは希望の生理活性を有する任意の形態の抗体を指す。したがって、最も広義に使用される場合、それは、具体的には、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体、及びキャメル化単一ドメイン抗体を含むが、これらに限定されない。

【0132】

用語「単離抗体」とは結合化合物の精製状態を指し、且つこのような場合、当該分子が実質的にその他の生物分子、例えば、核酸、タンパク質、脂質、糖、細胞破片と成長培地などのその他の物質を含まないことを意味する。用語「単離（した）」は、本明細書の上記結合化合物の実験又は治療への使用を明らかに干渉する量で存在しない限り、このような物質が完全に存在しない、或いは水、緩衝液又は塩が存在しないことを意味するのではない。

【0133】

用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均質な抗体群から得る抗体であり、即ち、天然に存在し得る少量の変異以外、この群からなる各抗体は同じである。モノクローナル抗体は高い特異性を持ち、単一の抗原エピトープに対するものである。それに対して、通常の（ポリクローナル）抗体製造物は、通常、異なるエピトープに対する大量の（又は異なるエピトープに対して特異性を有する）抗体を含む。修飾語「モノクローナル」は、実質的に均質な抗体群から得る抗体の特徴を示し、任意の特定の方法を通じて抗体を産生する必要があると解釈されない。

【0134】

用語「全長抗体」とは、天然に存在する場合、少なくとも４本のペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子であり、２本の重（Ｈ）鎖と２本の軽（Ｌ）鎖がジスルフィド結合により互いに連結される。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＶＨと略される）と重鎖定常領域（本明細書においてＣＨと略される）からなる。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３の３つのドメインからなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＶＬと略される）と軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣＬからなる。ＶＨ領域とＶＬ領域は、高可変性を有する相補性決定領域（ＣＤＲ）と、その間にフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存される領域と、更に細かく区分することができる。各ＶＨ領域又はＶＬ領域は、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ基端末からカルボキシル基端末まで配列された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲからなる。重鎖と軽鎖の可変領域は抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫グロブリンが宿主組織又は因子（免疫系の各細胞（例えば、エフェクター細胞）と代表的な補体系の第一成分（Ｃｌｑ）を含む）に対する結合を仲介することができる。

【0135】

用語抗体（「親抗体」）の「抗原結合フラグメント」は抗体のフラグメント又は誘導体を含むが、通常、親抗体の抗原結合領域又は可変領域（例えば、１つ又は複数のＣＤＲ）の少なくとも１つのフラグメントを含み、親抗体の少なくとも一部の結合特異性を保持している。抗体結合フラグメントの実例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメント、二重抗体、線形抗体、ｓｃ‐Ｆｖなどの単鎖抗体分子、抗体フラグメントから形成されるナノ抗体（ｎａｎｏｂｏｄｙ）、及び多重特異性抗体を含むが、これらに限定されない。抗原結合活性がモル濃度で示される場合、結合フラグメント又は誘導体は、通常、その抗原結合活性の少なくとも１０％を保持する。結合フラグメント又は誘導体が親抗体の抗原結合親和力の少なくとも２０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％又はより高い親和力を保持することは好ましい。抗体の抗原結合フラグメントは、その生理活性を明らかに変えない保存又は非保存アミノ酸置換（抗体の「保存的変異体」又は「機能保存的変異体」をいう）を含むことが期待される。用語「結合化合物」とは抗体及びその結合フラグメントの両者を指す。

【0136】

用語「単鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」抗体とは、抗体のＶＨとＶＬドメインを含む抗体フラグメントを指し、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。Ｆｖポリペプチドは一般にはＶＨとＶＬドメインの間のポリペプチドリンカーを更に含み、それにより、ｓｃＦｖは抗原結合用の希望の構造を形成できる。

【0137】

用語「ドメイン抗体」とは、重鎖可変領域又は軽鎖可変領域だけを含有する免疫機能性免疫グロブリンフラグメントである。幾つかの場合、２個以上のＶＨ領域はペプチドリンカーと共有結合して二価ドメイン抗体を形成する。二価ドメイン抗体の２個のＶＨ領域は、同じ又は異なる抗原にターゲティングできる。

【0138】

用語「二価抗体」とは２個の抗原結合部位を含む。幾つかの場合、２個の結合部位は同じ抗原特異性を有する。しかしながら、二価抗体は二重特異性であってもよい。

【0139】

用語「二重抗体」とは、２個の抗原結合部位を有する小さな抗体フラグメントを指し、上記フラグメントは、同一ポリペプチド鎖（ＶＨーＶＬ又はＶＬーＶＨ）において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同一鎖の２個のドメインの間のペアリングが不可能になるほど短いリンカーを使用することにより、当該ドメインと別の鎖の相補ドメインがペアリングされて２個の抗原結合部位を産生する。

【0140】

用語「マウス抗体」又は「ハイブリドーマ抗体」は本開示において本分野の知識とスキルに基づいて製造された抗ヒトＣＤ１１２Ｒのモノクローナル抗体である。製造する場合、ＣＤ１１２Ｒ抗原を試験対象に注射してから、所望の配列又は機能特性を有する抗体を発現するハイブリドーマを単離する。

【0141】

用語「キメラ抗体」とは、第１の抗体の可変ドメインと第２の抗体の定常ドメインとを有する抗体であり、第１の抗体と第２の抗体は異なる種に由来する。通常、可変ドメインは齧歯動物などの抗体（「親抗体」）から入手し、定常ドメイン配列はヒト抗体から入手し、それにより、親齧歯動物抗体に比べて、得たキメラ抗体は、ヒト受検者において不良免疫応答を誘導する可能性が比較的低い。

【0142】

用語「ヒト化抗体」とは、ヒトと非ヒト（例えばマウス、ラット）抗体に由来する配列を含有する抗体の形態である。一般には、ヒト化抗体は、実質的に全ての少なくとも１個、通常、２個の可変ドメインを含み、ここで、全て又は実質的に全ての超可変ループは、非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに相当し、全て又は実質的に全てのフレームワーク（ＦＲ）領域は、ヒト免疫グロブリン配列のフレームワーク領域である。ヒト化抗体は、任意に少なくとも一部のヒト免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）を含む。

【0143】

用語「完全ヒト抗体」とはヒト免疫グロブリンタンパク質配列だけ含む抗体である。例えば、マウス、マウス細胞又はマウス細胞由来のハイブリドーマに産生される場合、完全ヒト抗体がマウス糖鎖を含んでもよい。同様に、「マウス抗体」とはマウス免疫グロブリン配列だけ含む抗体である。或いは、ラット、ラット細胞又はラット細胞由来のハイブリドーマに産生される場合、完全ヒト抗体がラット糖鎖を含んでもよい。同様に、「ラット抗体」とはラット免疫グロブリン配列だけ含む抗体である。

【0144】

「アイソタイプ」抗体とは重鎖定常領域遺伝子により提供される抗体種類（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４などのＩｇＧ）である。アイソタイプはこれらの種類の１つの修飾形態を更に含み、そのうち、例えば、エフェクター機能又はＦｃ受容体に対する結合の増強又は低減など、Ｆｃ機能を変更するように修飾が産生される。

【0145】

本明細書で使用される用語「Ｆｃ領域」は少なくとも一部の定常領域を含む免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するためのものである。当該用語は天然配列Ｆｃ領域と変異Ｆｃ領域を含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域はＣｙｓ２２６又はＰｒｏ２３０から重鎖のカルボキシル基末端まで延びる。しかし、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は存在してもよく、或いは存在しなくてもよい（ここの番号はＥＵ番号付けシステムに基づき、ＥＵインデックスとも呼ばれ、例えば、Ｒａｂａｔら、ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈＥｄ．ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１）。

【0146】

用語「エピトープ」は抗体と特異的に結合できるタンパク質決定基である。エピトープは、通常、アミノ酸又は糖側鎖などの様々な化学活性表面分子からなると共に、特定の立体構造特徴と特定の電荷特徴を有する。構造的エピトープと非構造的エピトープとの区別は、変性溶剤の存在で後者ではなく前者との結合の喪失にある。

【0147】

本明細書で記述される用語「交差反応」とは、ヒト、サル、及び／又はマウス（マウス又はラット）の同じ標的分子の抗原フラグメントとの結合である。したがって、「交差反応」は異なる種に発現する同一の分子Ｘとの種同士反応と理解すべきである。ヒトＣＤ１１２Ｒ、サル、及び／又はマウスＣＤ１１２Ｒ（マウス又はラット）のモノクローナル抗体の交差反応の特異性の識別はＦＡＣＳ分析により決定できる。

【0148】

「親和力」又は「結合親和力」とは結合対のメンバー同士の相互作用を反映する固有結合親和力を指す。分子ＸとそのリガンドＹとの親和力は、通常、平衡解離定数（Ｋ_D）で表し、平衡解離定数は解離速度定数と結合速度定数（それぞれｋ_dis及びｋ_on）との比である。親和力は本分野における既知の通常方法により測定できる。親和力を測定するための１つの具体的な方法は本明細書に記載されるＦｏｒｔｅＢｉｏ動力学結合測定法である。

【0149】

用語タンパク質又は細胞と「結合しない」とは、タンパク質又は細胞と結合しないこと、或いはこれらと高親和力で結合しないことを指し、即ち、タンパク質又は細胞と結合するＫ_Dは１．０×１０‐⁶Ｍ以上であり、より好ましくは、１．０×１０‐⁵Ｍ以上であり、より好ましくは、１．０×１０‐⁴Ｍ以上、１．０×１０‐³Ｍ以上であり、更に好ましくは、１．０×１０‐²Ｍ以上である。

【0150】

ＩｇＧ抗体にとって、用語「高親和性」とは、抗原に対するＫ_Dは１．０×１０‐⁶Ｍ以下であり、好ましくは、５．０×１０‐⁸Ｍ以下であり、より好ましくは、１．０×１０‐⁸Ｍ以下であり、５．０×１０‐⁹Ｍ以下であり、更に好ましくは、１．０×１０‐⁹Ｍ以下である。その他の抗体サブタイプにとって、「高親和性」結合は変わる可能性がある。例えば、ＩｇＭサブタイプの「高親和性」結合とは、Ｋ_Dは１０‐⁶Ｍ以下であり、好ましくは、１０‐⁷Ｍ以下であり、より好ましくは、１０‐⁸Ｍ以下である。

【0151】

用語「抗体依存性細胞毒性」「細胞媒介の抗体依存性細胞毒性」又は「ＡＤＣＣ」とは細胞媒介の免疫防御であり、細胞膜表面抗原と抗体（例えば、Ｃｌａｕｄｉｎ１８．２抗体）とが結合する標的細胞（例えばがん細胞）を免疫系エフェクター細胞により積極的に分解する。

【0152】

用語「補体依存性細胞毒性」又は「ＣＤＣ」とはＩｇＧ及びＩｇＭ抗体のエフェクター機能であり、表面抗原と結合する場合、膜侵襲複合体の形成及び標的細胞の分解を含む代表的な補体ルートが誘発される。本発明に係る抗体とＣｌａｕｄｉｎ１８．２とが結合する場合、がん細胞に対するＣＤＣが誘発される。

【0153】

用語「核酸」「ポリヌクレオチド」「核酸分子」及び「ポリヌクレオチド分子」とはデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）及びその単鎖又は二本鎖形態のポリマーである。明確な制限がない限り、用語は、参照核酸と類似する結合性質を有し、天然に存在するヌクレオチドと類似する形態で代謝される、既知天然ヌクレオチドの類似物を含有する核酸を含む（Ｋａｒｉｋｏらに所有するアメリカ特許Ｎｏ．８，２７８，０３６を参照。それには、ウリジンがシュードウリジンで代用されるｍＲＮＡ分子、上記ｍＲＮＡ分子の合成方法、及びインビボで治療性タンパク質の送達に利用される方法が開示された）。特に断りのない限り、特定の核酸配列は、その保存・修飾された変異体（例えば、縮重コドンの置換）、対立遺伝子、オーソログ、ＳＮＰ、相補配列、及び明確に示された配列、を更に含蓄する。具体的に、縮重コドンの置換は、その１つ又は複数の選択的（又は全部）コドンの３番目がミックス塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換された配列の生成により実現される（Ｂａｔｚｅｒら、ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＲｅｓ．１９：５０８１（１９９１）；Ｏｈｔｓｕｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５‐２６０８（１９８５）；Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ８：９１‐９８（１９９４））。

【0154】

「構築体」とは任意の組換えポリヌクレオチド分子（例えば、プラスミド、コスミド、ウイルス、自律複製ポリヌクレオチド分子、バクテリオファージ、線状又は環状の単鎖又は二本鎖ＤＮＡ又はＲＮＡポリヌクレオチド分子）であり、任意の由来により誘導され、ゲノムと整合又は自律複製可能であり、機能操作の方式で１つ又は複数のポリヌクレオチド分子と連結される（即ち、操作可能で連結される）ようなポリヌクレオチド分子を構成する。組換え構築体は、通常、転写開始調節配列と操作可能で連結される本発明のポリヌクレオチドを含むが、これらの配列が宿主細胞におけるポリヌクレオチドの転写を誘導する。異種及び非異種（即ち、内因性）プロモーターの両者を使用して本発明の核酸の発現を誘導する。

【0155】

「ベクター」とは任意の組換えポリヌクレオチド構築体であり、当該構築体が形質転換の目的として利用されてもよい（即ち、異種ＤＮＡを宿主細胞に導入する）。ベクターの１種類は「プラスミド」であり、環状二本鎖ＤＮＡ環であり、その他のＤＮＡセグメントを当該環に連結してもよい。ベクターのもう１種類はウイルスベクターであり、その他のＤＮＡセグメントをウイルスゲノムに連結してもよい。幾つかのベクターが導入先の宿主細胞において自律複製できる（例えば、細菌の複製開始点を有する細菌ベクター及びエピソーマル哺乳類動物ベクター）。宿主細胞に導入された場合、その他のベクター（例えば、非エピソーマル哺乳類動物ベクター）が宿主細胞のゲノムに整合されるため、宿主ゲノムと一緒に複製する。また、幾つかのベクターが操作的に連結される遺伝子の発現を誘導できる。本明細書ではこれらのベクターを「発現ベクター」と呼ぶ。

【0156】

本明細書で使用される用語「発現ベクター」とは、宿主細胞に形質転換、トランスフェクション又は伝達される際に、標的遺伝子を複製及び発現できる核酸分子である。発現ベクターは、ベクター維持及び必要な場合に宿主において増幅ができるように、１つ又は複数の表現型選択マーカー及び複製開始点を含む。

【0157】

文脈から別に明確に規定しない限り、細胞又は受容体について使用される「活性化」「刺激」と「処理」、例えば細胞又は受容体について使用されるリガンド活性化、刺激又は処理は同じ定義を有する。「リガンド」は天然リガンドと合成リガンド、例えばサイトカイン、サイトカイン変異体、アナログ、変異タンパク質、及び抗体由来の結合化合物を含む。「リガンド」は、小分子、例えばサイトカインのペプチド模倣物や抗体のペプチド模倣物も含む。「活性化」は内部メカニズム及び外部や環境の要因により調整された細胞の活性化を指す。「応答／反応」、例えば細胞、組織、器官又は生体の応答は、生化学又は生理学的行動（例えば生物学的区画内の濃度、密度、接着又は移動、遺伝子発現速度又は分化状態）の変化を含み、ここで、変化は、活性化、刺激又は処理に関連するか、又は例えば遺伝子プログラミングなどの内部メカニズムに関連する。

【0158】

本明細書で使用されるように、一実施形態において、用語任意の疾患又は病症の「治療」又は「療治」とは、疾患又は病症の改善（即ち、疾患の発展又はその臨床症状の少なくとも１つの軽減、阻止又は減少）を意味する。別の一実施形態において、「治療」又は「療治」とは、患者が認識できない物理パラメータを含む少なくとも１つの身体パラメータの軽減又は改善を指す。別の一実施形態において、「治療」又は「療治」とは、身体（例えば、認識できる症状の安定）、生理（例えば、身体パラメータの安定）、又は両方において疾患又は病症を調整することを指す。本明細書で明確に説明しない限り、疾患の治療及び／又は予防を評価するための方法は本分野において通常既知である。

【0159】

「受検者」とは任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語「非ヒト動物」とは、例えば、非ヒト霊長類動物、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類動物、爬虫類動物など、哺乳類動物及び非哺乳類動物の全ての脊椎動物を含む。本明細書で使用されるように、用語「ｃｙｎｏ」又は「カニクイザル」とはカニクイザルを指す。

【0160】

１つ又は複数のその他の治療剤との「併用」投与は、同時（共同）投与及び任意順番の連続投与を含む。

【0161】

「治療有効量」「治療有効用量」及び「有効量」とは、本発明のＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントを単独で又はその他の治療薬物との組合せで細胞、組織又は受検者に投与する場合、１種類又は複数種類の疾患又は病状の症状或いは当該疾患又は病状の発展を有効的に予防又は改善する量を指す。治療有効用量は、例えば、関連医学病状を治療、完治、予防又は改善する量、或いはこれらの病状の治療、完治、予防又は改善のスピードを向上させる量など、症状改善に十分な抗体又はその抗原結合フラグメントの量を指す。個体に活性成分を単独で投与する場合、治療有効用量とは当該成分の量だけである。組合せで投与する場合、組合せ投与、逐次投与又は同時投与にも関わらず、治療有効用量とは治療効果が出る活性成分の合計量である。治療剤の有効量は、診断標準又はパラメータを少なくとも１０％向上させるが、通常は少なくとも２０％であり、好ましくは少なくとも約３０％であり、更に好ましくは少なくとも４０％であり、最も好ましくは少なくとも５０％である。

【0162】

「薬学的に許容されるベクター」とは薬物製剤又は組成物における活性成分を除く、受検者にとって毒性のない成分である。薬学的に許容されるベクターは、緩衝剤、賦形剤、安定剤又は防腐剤を含むが、これらに限定されない。

【0163】

本明細書において、用語「がん」とは異常に高いレベルの増殖及び成長を示す細胞群である。がんは良性（良性腫瘍とも呼ばれる）、前悪又は悪性であってもよい。がん細胞は固形がん細胞又は白血病がん細胞であってもよい。本明細書で使用される用語「腫瘍」とはがんを含む１つ又は複数の細胞である。本明細書において、用語「腫瘍成長」とはがんを含む１種又は複数種の細胞の増殖又は成長であり、がんのサイズ増大又は進展に繋がる。

【0164】

＜抗ＣＤ１１２Ｒ抗体＞
一様態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒと特異的に結合する抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。用語「抗ＣＤ１１２Ｒ抗体」「抗ＣＤ１１２Ｒ」「ＣＤ１１２Ｒ抗体」又は「ＣＤ１１２Ｒと結合する抗体」とは、ＣＤ１１２Ｒにターゲティングする診断剤及び／又は治療剤として利用できるように、十分な親和力でＣＤ１１２Ｒタンパク質又はそのフラグメントと結合する抗体を指す。

【0165】

幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒタンパク質と結合する抗体を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＤ１１２ＲとＣＤ１１２タンパク質との結合を遮断する抗体を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＤ２２６、Ｔ細胞及び／又はＮＫ細胞の活性化を増強させる抗体を提供する。

【0166】

幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体はヒト又はカニクイザルＣＤ１１２Ｒタンパク質と結合する。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体はヒトＣＤ１１２Ｒと結合すると共に、ヒトＣＤ１１２ＲとヒトＣＤ１１２タンパク質との相互作用を遮断する。

【0167】

幾つかの実施形態において、本発明に係る抗ＣＤ１１２Ｒ抗体は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２、ＳＥＱＩＤＮＯ：３に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４、ＳＥＱＩＤＮＯ：５、ＳＥＱＩＤＮＯ：６に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域と、若しくは

【0168】

【0169】

【0170】

【0171】

【0172】

【0173】

【0174】

【0175】

【0176】

【0177】

【0178】

【0179】

【0180】

【0181】

【0182】

【0183】

【0184】

【0185】

【0186】

【0187】

【0188】

【0189】

【0190】

【0191】

【0192】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、
上記重鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：１３、ＳＥＱＩＤＮＯ：１４、ＳＥＱＩＤＮＯ：１５に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４０、ＳＥＱＩＤＮＯ：４１、ＳＥＱＩＤＮＯ：４２に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４９、ＳＥＱＩＤＮＯ：５０、ＳＥＱＩＤＮＯ：５１に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：６７、ＳＥＱＩＤＮＯ：６８、ＳＥＱＩＤＮＯ：６９に示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、を含み、

【0193】

上記軽鎖可変領域は、
（Ｉ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：４３、ＳＥＱＩＤＮＯ：４４、ＳＥＱＩＤＮＯ：４５に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：５２、ＳＥＱＩＤＮＯ：５３、ＳＥＱＩＤＮＯ：５４に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がそれぞれＳＥＱＩＤＮＯ：７０、ＳＥＱＩＤＮＯ：７１、ＳＥＱＩＤＮＯ：７２に示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、を含む。

【0194】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（１）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３と、若しくは
（２）ＳＥＱＩＤＮＯ：１２４又は１２５に示される重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２６に示される軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３と、若しくは
（３）ＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２６、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３と、若しくは
（４）ＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３と、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３と、を含む。

【0195】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、
（Ｉ）上記重鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８５に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、上記軽鎖可変領域はＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列を含み、或いは、ＳＥＱＩＤＮＯ：８６に示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは

【0196】

【0197】

【0198】

【0199】

【0200】

【0201】

【0202】

【0203】

【0204】

【0205】

【0206】

【0207】

【0208】

【0209】

【0210】

【0211】

【0212】

【0213】

【0214】

【0215】

【0216】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに含まれるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３はそれぞれ下記の通りであり、即ち、
ＨＣＤＲ１はＳＹＨＭＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１３）であり、
ＨＣＤＲ２はＡＩＸ₁Ｘ₂Ｘ₃Ｘ₄Ｘ₅Ｘ₆ＴＹＹＸ₇ＤＴＶＫＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１４６）であり、そのうち、Ｘ₁はＮ又はＳであり、Ｘ₂はＳ又はＲであり、Ｘ₃はＮ又はＤであり、Ｘ₄はＤ又はＧ又はＶであり、Ｘ₅はＩ又はＤであり、Ｘ₆はＮ又はＳであり、Ｘ₇はＬ又はＰであり、
ＨＣＤＲ３はＨＥＤＹＸ₈ＧＦＡＭＤＸ₉（ＳＥＱＩＤＮＯ：１４７）であり、そのうち、Ｘ₈はＹ又はＦであり、Ｘ₉はＹ又はＳであり、

【0217】

ＬＣＤＲ１はＫＡＳＱＳＶＸ₁₀ＮＤＶＡ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１４８）であり、そのうち、Ｘ₁₀はＴ又はＳであり、
ＬＣＤＲ２はＹＶＳＸ₁₁Ｘ₁₂Ｘ₁₃Ｔ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１４９）であり、そのうち、Ｘ₁₁はＮ又はＨであり、Ｘ₁₂はＨ又はＲであり、Ｘ₁₃はＹ又はＦであり、
ＬＣＤＲ３はＸ₁₄ＱＡＹＲＳＰＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１５０）であり、Ｘ₁₄はＱ又はＨである。

【0218】

上記置換において、Ｎ、Ｔ、Ｓなどは極性無電荷脂肪族アミノ酸であり、Ｓ、Ｒ、Ｎ、Ｄなどは極性脂肪族アミノ酸であり、Ｄ、Ｇ、Ｖ、Ｉなどは脂肪族アミノ酸であり、Ｌ、Ｐなどは非極性アミノ酸であり、Ｙ、Ｆなどは芳香族アミノ酸であり、Ｙ、Ｓなどは極性無電荷アミノ酸であり、Ｎ、Ｑ、Ｈなどは極性アミノ酸であり、Ｈ、Ｒなどは極性電荷アミノ酸である。したがって、これらのアミノ酸で互いに置換でき、得られたＣＤＲは抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の構築に利用される場合、本明細書に記載の結合活性が依然として保持されている。

【0219】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントに含まれる、ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１３に示され、ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１４、４１、５０又は６８のアミノ酸配列に示され、ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１５又は４２のアミノ酸配列に示され、ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：４３又は５２のアミノ酸配列に示され、ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：４４、５３又は７１のアミノ酸配列に示され、ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：５４又は７２のアミノ酸配列に示される。

【0220】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。

【0221】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２４、１２５、１２８、１２９又は１３０の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２６、１２７、１３１又は１３２の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。

【0222】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２４又は１２５に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２６、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＶ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２２、１２３、１２７、１３１又は１３２に示される軽鎖可変領域と、を含む。

【0223】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１１８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２８に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２７に示される軽鎖可変領域と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１２９に示される重鎖可変領域と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３１に示される軽鎖可変領域と、を含む。

【0224】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖と、を含む。

【0225】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３４、１３５、１３７、１３８、１４０又は１４１の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖と、
ＳＥＱＩＤＮＯ：１３３、１３６又は１３９の何れか１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖と、を含む。

【0226】

幾つかの実施形態において、本発明に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（Ｉ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３４又は１３５に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３３に示される軽鎖と、若しくは
（ＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３７又は１３８に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３６に示される軽鎖と、若しくは
（ＩＩＩ）アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１４０又は１４１に示される重鎖と、アミノ酸配列がＳＥＱＩＤＮＯ：１３９に示される軽鎖と、を含む。

【0227】

【0228】

抗体を産生するための任意の適切な方法で本発明の抗体を産生してもよい。任意の適切な形態のＣＤ１１２Ｒが抗体を産生する免疫原（抗原）として利用されてもよい。非限定的に例示することで、任意のＣＤ１１２Ｒ変異体又はそのフラグメントが免疫原として利用されてもよい。幾つかの実施形態において、マウス由来のモノクローナル抗ヒトＣＤ１１２Ｒ抗体を産生するハイブリドーマ細胞は、本分野における周知の方法により産生してもよい。

【0229】

齧歯動物（例えばマウス）由来の抗体はインビボで治療薬物として利用される場合、不必要な抗体免疫原性を引き起こす可能性があり、繰返し使用により人体の治療性抗体に対する免疫応答が発生され、これらの免疫応答により少なくとも治療効果の喪失、最悪の場合潜在的に致命的なアナフィラキシーが発生される。齧歯動物抗体の免疫原性を低減させる方法の１つはキメラ抗体の産生を含み、この場合、マウス可変領域とヒト定常領域を融合する（Ｌｉｕら（１９８７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８４：３４３９‐４３）。しかしながら、キメラ抗体における完全齧歯動物可変領域の保留が患者において依然として有害な免疫原性を引き起こす。齧歯動物の可変ドメインの相補性決定領域（ＣＤＲ）ループをヒトのフレームワークに移植する（即ちヒト化）ことは、既に齧歯動物配列を最低に低減させることに更に用いられる（Ｊｏｎｅｓら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４）。

【0230】

本発明に係る抗ヒトＣＤ１１２Ｒマウス抗体の軽鎖及び重鎖可変領域並びにＣＤＲのアミノ酸配列は表１に示される。

【0231】

【表A-1】

【0232】

【表A-2】

【0233】

【表B-1】

【0234】

【表B-2】

【0235】

【表B-3】

【0236】

【表B-4】

【0237】

【表B-5】

【0238】

【表B-6】

【0239】

【表B-7】

【0240】

【表B-8】

【0241】

【表B-9】

【0242】

【表B-10】

【0243】

【表B-11】

【0244】

【表B-12】

【0245】

【表B-13】

【0246】

【表B-14】

【0247】

【表B-15】

【0248】

幾つかの実施形態において、本発明のキメラ又はヒト化抗体は、上記製造されたマウスモノクローナルハイブリドーマ抗体の配列に基づいて製造してもよい。重鎖及び軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、標的マウスハイブリドーマから得られてもよい、非マウス（例えばヒト）免疫グロブリン配列を含むように、標準分子生物学技術を利用して工程改良を行う。

【0249】

幾つかの実施形態において、本発明に記載のキメラＣＤ１１２Ｒ抗体は、本分野における既知の方法を利用して、ハイブリドーマ由来の免疫グロブリン重鎖及び軽鎖可変領域とヒトＩｇＧ定常領域を有効的に連結して（例えばＣａｂｉｌｌｙらに所有するアメリカ特許Ｎｏ．４，８１６，５６７を参照）、キメラ型重鎖及びキメラ型軽鎖を得て製造する。幾つかの実施形態において、本発明に係るキメラ抗体に含まれる定常領域は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４など、任意のヒトＩｇＧサブタイプから選ばれてもよく、好ましくは、ＩｇＧ４である。

【0250】

幾つかの実施形態において、本発明に係るキメラＣＤ１１２Ｒ抗体は、キメラ型軽鎖及びキメラ型重鎖の発現プラスミドの「混合及びペアリング」により発現細胞にトランスフェクションして得られてもよく、これらの「混合及びペアリング」により得られた抗体とＣＤ１１２Ｒとの結合が上記結合測定及びその他の通常結合測定（例えば、ＥＬＩＳＡ）により測定する。

【0251】

本発明に記載の抗体の可変領域ＣＤＲにおける精確なアミノ酸配列の境界は、多くの周知形態の任意の形態により決定されてもよく、抗体の立体構造とＣＤＲリングのトポロジーに基づくＣｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａら（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ３４２：８７７‐８８３；Ａｌ‐Ｌａｚｉｋａｎｉら、「Ｓｔａｎｄａｒｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｃａｎｏｎｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７‐９４８（１９９７））、抗体配列の可変性に基づくＫａｂａｔ（Ｋａｂａｔら、ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，４ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ（１９８７））、ＡｂＭ（ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＢａｔｈ）、Ｃｏｎｔａｃｔ（ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｌｅｇｅＬｏｎｄｏｎ）、国際的ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓｄａｔａｂａｓｅ（ＩＭＧＴ）（１９９９ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２７，２０９‐２１２）、及び大量の結晶構造が利用されるアフィニティ伝播クラスタリング（ａｆｆｉｎｉｔｙｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づくＮｏｒｔｈＣＤＲ定義を含む。

【0252】

特に断らない限り、本発明に係る抗体のＣＤＲは、当業者が本分野の任意形態（例えば、異なる割り当てシステム又は組合せ）により境界を決定することができる。

【0253】

異なる割り当てシステムにより得られた同一抗体の可変領域のＣＤＲの境界には、差異がある可能性があることを認識すべきである。即ち、異なる割り当てシステムで定義された同一抗体の可変領域のＣＤＲ配列には違いがある。従って、本発明で定義された具体的なＣＤＲ配列により抗体が限定される場合、上記抗体の範囲には、可変領域配列が上記具体的なＣＤＲ配列を含むが、異なる形態（例えば、異なる割り当てシステム又は組合せ）が使用されることにより、かかるＣＤＲ境界が本発明で定義された具体的なＣＤＲ境界と異なるような抗体も含まれる。

【0254】

異なる特異性（即ち、異なる抗原に対する異なる結合部位）を有する抗体は、異なるＣＤＲを有する。しかし、抗体と抗体との間にあるＣＤＲが異なるにもかかわらず、ＣＤＲには限られた数のアミノ酸位置のみが抗原結合に直接参与する。Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ及びＮｏｒｔｈ方法のうちの少なくとも２種を用いて、最小重複領域を決定することで、抗原結合用の「最小結合単位」を提供することができる。最小結合単位はＣＤＲの１つのサブ部分であってもよい。当業者が明らかにしたように、抗体の構造とタンパク質のフォールディングによって、ＣＤＲ配列の残り部分の残基を決定することができる。従って、本発明は、本明細書に提供される如何なるＣＤＲの変異体も考慮する。例えば、１つのＣＤＲの変異体において、最小結合単位のアミノ酸残基はそのまま保持することができ、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａに基づいて定義された残りのＣＤＲ残基は保守的なアミノ酸残基で置換されることができる。

【0255】

本発明は様々なキメラ型重鎖及び軽鎖の発現プラスミドを混合・ペアリングし、発現細胞にトランスフェクションして、７２種類の抗ヒトＣＤ１１２Ｒキメラ抗体（番号及びペアリング方式は表２を参照）を得た。

【0256】

【表C】

【0257】

本発明に記載のヒト化抗体は、本分野における既知の方法を利用してマウスＣＤＲ領域をヒト生殖細胞系フレームワーク領域に挿入してもよい。Ｗｉｎｔｅｒらのアメリカ特許Ｎｏ．５，２２５，５３９及びＱｕｅｅｎらのアメリカ特許Ｎｏ．５，５３０，１０１；５，５８５，０８９；５，６９３，７６２及び６，１８０，３７０を参照する。

【0258】

本発明に係る抗ヒトＣＤ１１２Ｒヒト化抗体の軽鎖及び重鎖可変領域並びにＣＤＲのアミノ酸配列は下記に示される。

【0259】

【表D-1】

【0260】

【表D-2】

【0261】

【表D-3】

【0262】

【表D-4】

【0263】

本発明に係るヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の番号並びにその重鎖及び軽鎖可変領域の由来は表３を参照する。

【0264】

【表E】

【0265】

抗体Ｈｕ１６、Ｈｕ５２、Ｈｕ５９の軽鎖及び重鎖アミノ酸配列は下記に示され、その他のヒト化抗体ＬＣ及びＨＣの可変領域以外の配列はＨｕ１６、Ｈｕ５２、Ｈｕ５９に対応する配列と同様であり、そのうち、生物学測定を行うヒト化抗体はＩｇＧ４重鎖である。

【0266】

【表F-1】

【0267】

【表F-2】

【0268】

【表F-3】

【0269】

【表F-4】

【0270】

【表F-5】

【0271】

幾つかの実施形態において、アミノ酸変化はアミノ酸の欠失、挿入又は置換を含む。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントは、アミノ酸の欠失、挿入又は置換によって変異が行われたが、上記抗体（特に、上記配列で説明されたＣＤＲ領域）と少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を備えるそれらの抗体を含む。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体は、具体的な配列で説明されたＣＤＲ領域と比較する場合、ＣＤＲ領域におけるアミノ酸の欠失、挿入又は置換を行ったアミノ酸変異が１、２、３、４又は５個を超えない。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体は、具体的な配列におけるフレームワーク領域と比較する場合、フレームワーク領域におけるアミノ酸の欠失、挿入又は置換を行ったアミノ酸変異が１、２、３、４又は５個を超えない。

【0272】

幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体をコードするポリヌクレオチド分子は、ヌクレオチドの欠失、挿入又は置換によって変異が行われたが、上記に記載される配列で説明されたＣＤＲ対応コード領域と少なくとも約６０、７０、８０、９０、９５又は１００％の同一性を有するポリヌクレオチド分子を含む。

【0273】

幾つかの実施形態において、下記に示されるように、ＣＤ１１２Ｒ抗体はＩｇＧ抗体であり、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４抗体、或いはその修飾形態である。

【0274】

幾つかの実施形態において、本明細書に係る抗体のＦｃ領域に１つ又は複数のアミノ酸修飾を導入してＦｃ領域の変異体を産生することができる。Ｆｃ領域の変異体は、１つ又は複数のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば置換）が含まれるヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃ領域）を含んでもよい。

【0275】

幾つかの実施形態において、例えば、「チオＭＡｂ」など、その１つ又は複数の残基がシステイン残基で置換された、システイン工程により改造された抗体を産生する必要がある。

【0276】

幾つかの実施形態において、本明細書に係る抗体は、更に修飾により本分野で既知且つ容易に入手できるその他のタンパク質以外の部分を含んでもよい。抗体の誘導効果に適される部分は、水溶性ポリマーを含むが、これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ‐１，３‐ジオキサン、ポリ‐１，３，６‐トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマー）、デキストラン又はポリ（ｎ‐ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセリン）、ポリビニルアルコール、及びこれらの混合物を含むが、これらに限定されない。

【0277】

＜抗体発現＞
別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントをコードする、ポリヌクレオチド分子を提供する。上記ポリヌクレオチド分子は、抗体の軽鎖可変領域及び／又は重鎖可変領域のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド分子を含んでもよく、或いは抗体の軽鎖及び／又は重鎖のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド分子を含んでもよい。

【0278】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子を含み、好ましくは、ベクターが真核発現ベクターである、発現ベクターを提供する。幾つかの実施形態において、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子が１つ又は複数の発現ベクターに含まれる。

【0279】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子又は本明細書に記載の発現ベクターを含み、好ましくは、宿主細胞が真核細胞であり、より好ましくは、哺乳動物細胞である、宿主細胞を提供する。

【0280】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメントの製造のための方法であって、上記抗体又はその抗原結合フラグメントの発現に適する条件で、本明細書に記載の宿主細胞に上記抗体又はその抗原結合フラグメントを発現すると共に、発現する抗体又はその抗原結合フラグメントを上記宿主細胞から回収すること、を含む、方法を提供する。

【0281】

本発明は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）から得られる大量の不死化細胞系を含む、本発明の組換え抗体を発現するための哺乳類動物宿主細胞を提供する。特に、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳ０、ＳＰ２／０細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞がん細胞、Ａ５４９細胞、２９３Ｔ細胞及び大量のその他の細胞系を含む。哺乳類動物宿主細胞は、ヒト、マウス、ラット、イヌ、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、ハムスターの細胞を含む。どの細胞系が高発現レベルを有するかについて測定することで、特に好ましい細胞系を選択する。

【0282】

一実施形態において、本発明は、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の製造方法であって、発現ベクターを哺乳類動物宿主細胞に導入する場合、宿主細胞を十分な一定時間で培養することで、抗体が宿主細胞に発現すること、或いは更に好ましくは抗体が宿主細胞の成長培地に分泌することを許可するように、抗体を産生すること、を含む、方法を提供する。標準タンパク質精製方法により培地から抗体を回収する。

【0283】

異なる細胞系で発現される、又は遺伝子組換え動物で発現される抗体同士が異なるグリコシル化を示す可能性がある。しかしながら、抗体のグリコシル化にも関わらず、本明細書に係る核酸分子によりコードされる、又は本明細書に係るアミノ酸配列を含む、全ての抗体が本発明の構成部分である。同様に、幾つかの実施形態において、非フコシル化抗体の糖構造が天然ヒト血清ＩｇＧの一般的な成分であるため、通常、インビトロ及びインビボにおいてそのフコシル化対応物より更に強力な効果を持つとともに、免疫原性である可能性がないことから、非フコシル化抗体が優位性を持つ。

【0284】

＜医薬組成物及び薬物製剤＞
別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、或いは本明細書に記載の宿主細胞、及び薬学的に許容されるベクター又は賦形剤、を含む医薬組成物を提供する。本発明に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体又はその医薬組成物は、製剤のうちの適切な担体、賦形剤及びその他の試薬と整合して併用投与することで、改善された転移、送達、耐性などを提供できると理解すべきである。

【0285】

用語「医薬組成物」とは、その中に含む活性成分の生物活性が有効的な形態で存在すると共に、上記製剤の投与を受ける受検者に対して許容されない毒性があるその他の成分を含まない製剤である。

【0286】

所定の純度を有する本発明に係る抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を１つ又は複数の任意の薬用補助材料（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，１６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄｉｔｅｄｂｙＯｓｏｌ，Ａ．（１９８０））と混合することで、本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を含む薬物製剤を製造できるが、好ましくは、水溶液又は凍結乾燥製剤の形態である。

【0287】

本発明に係る医薬組成物又は製剤は、１つ又は複数のその他の活性成分を更に含んでもよく、上記活性成分が治療される特定の適応症にとって必要とされるものであり、好ましくは、互いに悪い影響を与えない相補性活性のような活性成分を有する。幾つかの実施形態において、その他の活性成分は、化学療法剤、免疫チェックポイント抑製剤、成長抑製剤、抗生物質又は既知の各種抗腫瘍又は抗がん剤であり、上記活性成分が目的用途に対して有効である量の適切な組合せで存在する。幾つかの実施形態において、本発明に係る医薬組成物は、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体をコードするポリヌクレオチド分子の組成物を更に含む。

【0288】

【0289】

一実施形態において、本発明に記載の薬物の組合せにおいて、上記別の治療剤が抗ＰＤ‐１抗体、抗ＰＤ‐Ｌ１抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体から選ばれる１種又は複数種であり、好ましくは、上記別の治療剤が抗ＴＩＧＩＴ抗体、又は抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体との組合せである。

【0290】

一実施形態において、本発明に記載の抗ＰＤ‐１抗体はｎｉｖｏｌｕｍａｂ、ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、ｔｏｒｉｐａｌｉｍａｂ、Ｓｉｎｔｉｌｉｍａｂ、Ｃａｍｒｅｌｉｚｕｍａｂ、Ｔｉｓｌｅｌｉｚｕｍａｂ、Ｃｅｍｉｐｌｉｍａｂから選ばれる１種又は複数種であり、好ましくはｔｏｒｉｐａｌｉｍａｂである。
一実施形態において、本発明に記載の抗ＰＤ‐Ｌ１抗体はａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ、ａｖｅｌｕｍａｂ、ｄｕｒｖａｌｕｍａｂから選ばれる。

【0291】

一実施形態において、本発明に係る抗ＴＩＧＩＴ抗体の実施例はＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３に記載される。本発明に記載の抗ＴＩＧＩＴ抗体はＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３に記載される何れか１つの抗ＴＩＧＩＴ抗体を含み、好ましくはヒト化抗体ｈｕ２０である。

【0292】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、或いは本明細書に記載の医薬組成物を含む、試薬キットを提供する。

【0293】

＜医薬用途及び治療方法＞
本明細書に係る任意の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体は治療方法に利用できる。「抗体」を検討する場合、抗体を含む組成物も含むと理解すべきである。本発明に係る抗ＣＤ１１２Ｒ抗体は治療有効量又は予防有効量で本発明の何れか１つの実施形態に記載の治療又は予防方法に利用できる。

【0294】

別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、或いは本明細書に記載の医薬組成物の、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症を治療及び／又は予防するための薬物の製造における用途であって、好ましくは、上記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、上記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、用途を提供する。幾つかの実施形態において、当該薬物は腫瘍に罹患した受検者において抗腫瘍免疫応答を増強、増加及び／又は維持するために利用される。幾つかの実施形態において、当該薬物はＣＤ１１２とＣＤ２２６との相互作用を増強するために利用される。

【0295】

別の様態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症の治療及び／又は予防に利用され、好ましくは、上記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、上記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、或いは本明細書に記載の医薬組成物を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、腫瘍に罹患した受検者において抗腫瘍免疫応答を増強、増加及び／又は維持するための抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＤ２２６とＣＤ１１２との相互作用を増強するための抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を提供する。

【0296】

別の様態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒ媒介の疾患又は病症を治療及び／又は予防する方法であって、必要とされる受検者に本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、本明細書に記載のポリヌクレオチド分子、本明細書に記載の発現ベクター、本明細書に記載の宿主細胞、或いは本明細書に記載の医薬組成物又は薬物の組合せを投与することを含み、好ましくは、上記疾患又は病症ががんであり、より好ましくは、上記がんがメラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれる、方法を提供する。幾つかの実施形態において、本発明は、ＣＤ１１２Ｒを遮断する必要がある疾患及び／又は病症を治療するための方法であって、必要とされる受検者に本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を投与することを含む、方法を提供する。幾つかの実施形態において、腫瘍に罹患した受検者において抗腫瘍免疫応答を増強、増加及び／又は維持するための方法であって、必要とされる受検者に本明細書に記載の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を投与することを含む、方法を提供する。

【0297】

幾つかの実施形態において、本明細書に記載のがん又は腫瘍は、メラノーマ、腎がん、前立腺がん、乳がん、結腸がん、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、子宮がん、卵巣がん、直腸がんから選ばれてもよい。

【0298】

幾つかの実施形態において、本発明に係る投与方式は、経口投与、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、動脈内投与、関節内投与（例えば関節炎に罹った関節において）、吸入、エアロゾル送達又は腫瘍内投与などを含むが、これらに限定されない。

【0299】

本発明は、受検者に治療有効量で併用投与する１つ又は複数の療法（例えば、治療法及び／又はその他の治療剤）を更に提供する。幾つかの実施形態において、上記療法は、手術治療及び／又は放射線治療を含む。本発明に係る抗体を単独で又は療法のうちのその他の治療剤との組合せで使用してもよい。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体は少なくとも１つの別の治療剤と併用投与する。例えば、抗ＰＤ‐１抗体、抗ＰＤ‐Ｌ１抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１つ又は複数である。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体は抗ＴＩＧＩＴ抗体と組合せで投与する。幾つかの実施形態において、本発明に係る抗体は抗ＰＤ‐１抗体及び抗ＴＩＧＩＴ抗体と組合せで投与する。

【0300】

＜診断及び検出に利用される方法＞
別の様態において、本発明は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントを利用して、サンプルにおけるＣＤ１１２Ｒの存在を検出する方法を提供する。本明細書で使用される用語「検出」は、定量的検出又は定性的検出を含む。幾つかの実施形態において、上記サンプルは生物サンプルである。幾つかの実施形態において、生物サンプルは、血、血清又は生物に由来するその他の液体サンプルである。幾つかの実施形態において、生物サンプルは細胞又は組織を含む。上記方法は、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは上記抗体又はその抗原結合フラグメントを含む検出組成物をサンプルに接触させるステップと、上記抗体又はその抗原結合フラグメントとＣＤ１１２Ｒとの結合により産生される結合物又は結合シグナルの存在を検出するステップと、を含む。検出用途に利用される場合、上記結合物を形成したか否かを示すために、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントは標識可能である。

【0301】

本発明は上記特定の実施形態の全ての組合せを含む。本発明の更なる実施形態及び適用可能な完全範囲は、下記に提供される具体的な説明により明らかになる。しかしながら、本発明の好適な実施形態を具体的に説明及び特定の実施例で指示したが、本発明の趣旨及び範囲内にある各変更及び補正がこれらの具体的な説明により当業者にとって明らかになるため、説明の形だけでこれらの説明及び実施例を提供すると理解すべきである。全ての目的から、前言を含む本明細書で引用される全ての開示物、特許及び出願は引用の形で本明細書に添加される。

【0302】

本発明に係る化合物は、下記に挙げられる具体的な実施形態、これらとその他の方法との結合により形成される実施形態、当業者が熟知する同等な置換方式を含む、当業者が熟知する様々な合成方法により製造でき、好適な実施形態が本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。

【0303】

本発明は下記の略語を用いる。
ｈｉｓ‐ｔａｇはヒスチジンタグを示す。
Ｆｃｔａｇは結晶性フラグメントタグを示す。
ＥＣＤは細胞外ドメインを示す。
ＰＥＩはポリエチレンイミンを示す。
ＢＳＡはウシ血清アルブミンを示す。
ＰＢＳはリン酸塩緩衝液を示す。
ＦＢＳはウシ胎児血清を示す。
ＣＦＳＥはカルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステルを示す。
ＡＰＣはアロフィコシアニンを示す。
ＮＡ‐ＰＥはフィコエリトリンで標識される中性アビジンを示す。
ＰＥはフィコエリトリンを示す。
ＴＭＢは３，３’，５，５’‐テトラメチルベンジジンを示す。
ＨＥＰＥＳは２‐［４‐（２‐ヒドロキシエチル）‐１‐ピペラジニル］‐エタンスルホン酸緩衝液を示す。
ＤＴＴはジチオスレイトールを示す。

【実施例】

【0304】

下記実施例を利用して本発明を説明するが、本発明の範囲を限定することを意図しない。本明細書は既に本発明について詳しく説明し、その具体的な実施形態も開示した。当業者にとって、本発明の要旨及び範囲を逸脱しない前提で本発明の具体的な実施形態に対して様々な変化及び改善を行うことが明らかである。

【0305】

＜実施例１、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の活性検出に利用される組換えタンパク質の製造＞
通常のＰＣＲ技術によりＣＤ１１２Ｒ細胞外ドメインをコードするｃＤＮＡ配列を増幅させ、通常のクローン技術により増幅されたフラグメントを自己構築された真核発現プラスミド系（ＭＸ２‐ｍＦｃ、マウスＩｇＧ２ａＦｃ領域を含む）にクローニングし、その中にピューロマイシン選定系が含まれることで、組換え融合タンパク質発現プラスミドｈＣＤ１１２ＲＥＣＤｍＦＣを産生した。発現細胞２９３ＥによりｈＣＤ１１２ＲｍＦＣ組換えタンパク質を発現及び精製して得た。

【0306】

そのうち、ヒトＣＤ１１２Ｒ細胞外ドメイン（ｈＣＤ１１２ＲＥＣＤ）アミノ酸配列はＮＣＢＩ登録番号ＮＭ＿０２４０７０のＭｅｔ１‐Ａｌａ１６０番目アミノ酸であり、本発明に係る抗体の活性検出に利用される。

【0307】

＜実施例２、マウスハイブリドーマ細胞の製造＞
（２．１、動物免疫）
ｈＣＤ１１２Ｒ‐Ｆｃ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓから購入、ロット番号９３６５‐ＰＶ）組換えタンパク質を抗原として５匹のＢＡＬＢ／ｃマウス（ＳｉｍｏｎｓｅｎＬａｂｏｒｉｔｏｒｉｅｓｏｆＧｉｌｒｏｙから購入、雌ＢＡＬＢ／ｃ、８週間）に対して免疫を行った。最初に免疫を行った後（５０μｇ／匹）、１週間又は２週間おきにブースト免疫を１回行い（２５μｇ／匹）、免疫を合計６回行った。

【0308】

（２．２、細胞融合）
最後のブースト免疫後４日目に、マウスの鼠径リンパ節、膝窩リンパ節、脾臓を取り、生理食塩水でミーリングした後、リンパ球を多く含む懸濁液を、通常のエレクトロトランスフェクション方法によりマウス骨髄腫細胞Ｓｐ２／０と融合した。融合産物を１：５０ＨＡＴ（ヒポキサンチン、アメトプテリン、チミジン）が含まれるＤＭＥＭ完全培地で５日間培養して、融合に成功した細胞（ハイブリドーマ細胞）を選定した。次に、選定が終了するまで、１：５０ＨＴ（ヒポキサンチン、チミジン）が含まれるＤＭＥＭ完全培地に置換する。

【0309】

ＤＭＥＭ完全培地の配合率は１５％のＦＢＳ（ウシ胎児血清）＋１：５０のＬ‐グルタミン＋１００Ｕ／ｍＬのマイシリン＋１：１００のＯＰＩ（オキサロ酢酸、ピルビン酸、インスリン）であり、インキュベーター条件は８％のＣＯ₂、３７℃である。

【0310】

＜実施例３、マウスハイブリドーマ細胞の選定及び得られた抗ＣＤ１１２Ｒマウス抗体の性能検出＞
９６００株の異なるポリクローナルハイブリドーマ細胞において、ＥＬＩＳＡと結合することで、１８１株のハイブリドーマ細胞を選定して、その分泌した抗体がｈＣＤ１１２Ｒと特異的に結合できる。これらの結合が陽性である１８１株のハイブリドーマ細胞のうち、４０株のハイブリドーマ細胞に発現した抗体は、ＦＡＣＳにおいてｈＣＤ１１２Ｒと細胞表面に発現したｈＣＤ１１２との結合を遮断できる。その後のＥＬＩＳＡ遮断実験において、上記４０株のポリクローナル細胞株からｈＣＤ１１２ＲとｈＣＤ１１２との結合を遮断できる２２株を決定できた。ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＡ遮断実験の両方において陽性を示したこれらの２２株のハイブリドーマ細胞のポリクローナルから１５株を選定してサブクローンを行った。

【0311】

サブクローンにより選定して１５株の遮断型モノクローナル細胞株を得た。その分泌した抗体に対して精製及び分析を行った。モノクローナルハイブリドーマ細胞からｍＲＮＡを抽出して、抗体の可変領域に対してシークエンシングを行った。インビトロ薬物効果実験、並びにＰＤ‐１モノクローナル抗体及びＴＩＧＩＴモノクローナル抗体との併用によって、最終的に組換え発現に利用される、Ｔ細胞の活性化を促進できる、８株の候補モノクローナルハイブリドーマ株を決定した。番号はそれぞれ２Ｇ１０．１、３Ｄ２．１、４Ｅ２、４Ｅ５．１、５Ｂ２．１、５Ｃ１０．１、６Ａ１０．１、７Ｃ２．１．であり、その後のキメラ抗体の構築においてそれぞれ２Ｇ１０、３Ｄ２、４Ｅ２、４Ｅ５、５Ｂ２、５Ｃ１０、６Ａ１０、７Ｃ２と略される。
実験方法は下記に示される。

【0312】

（３．１、ＥＬＩＳＡ方法によって検出される、ｈＣＤ１１２ＲとｈＣＤ１１２との結合のハイブリドーマ抗体による遮断）
９６ウェルＭａｘｉＳｏｒｐプレート（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＮｕｎｃ）を２μｇ／ｍＬのｈＣＤ１１２（マウスＦｃタグ、君盟製造）でコーティングしてから、１％のＢＳＡでブロックした。最終濃度０．５μｇ／ｍＬのｈＣＤ１１２Ｒとハイブリドーマ培養液の上清をマイクロウェルプレートで３０分間共インキュベートした。混合物をＭａｘｉＳｏｒｐプレートに移動して、更に３０分間インキュベートした。西洋ワサビペルオキシダーゼで標識されるヤギ抗ヒト二次抗体によって検出した。

【0313】

結果によれば、本発明に係るハイブリドーマ抗体はｈＣＤ１１２ＲとｈＣＤ１１２との結合を効果的に遮断できる。

【0314】

（３．２、Ｂｉａｃｏｒｅによって検出される、抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体とｈＣＤ１１２ＲｍＦｃとの親和力の研究）
ＢｉａｃｏｒｅＴ２００によって抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体と組換えｈＣＤ１１２ＲｍＦｃタンパク質との結合親和力を検出した。ＣＭ５チップ表面にヤギ抗ヒトＦｃ抗体フラグメント（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と結合し、チップでそれぞれ抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体を捕捉してから、異なる濃度の組換えｈＣＤ１１２ＲｍＦｃタンパク質をＣＭ５チップに注入した。表４に示されるように、１５個の抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体と組換えｈＣＤ１１２ＲｍＦとの親和力が何れも比較的高い。

【0315】

【表G】

【0316】

（３．３、ＦＡＣＳによって検出される、ｈＣＤ１１２Ｒと細胞表面ｈＣＤ１１２との結合のハイブリドーマ抗体による遮断）
自己構築されるヒトＣＤ１１２を過剰発現する細胞ＣＨＯＣＤ１１２、染色緩衝液（ＰＢＳ＋１％のＦＢＳ）に配置されるｈＣＤ１１２ＲｍＦｃタンパク質溶液（０．５μｇ／ｍＬ）、異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体又は対照抗体（開始濃度１００μｇ／ｍＬ、３倍希釈、１０個の濃度勾配）を４℃条件で３０ｍｉｎ共インキュベートした。次に、染色緩衝液で結合していない抗体を洗浄して、更に細胞と染色緩衝液で配置される１％（ｖ／ｖ）が含まれるヤギ抗マウスＩｇＧＦｃ蛍光二次抗体（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を４℃条件で遮光で３０分間インキュベートした。最後にフローサイトメーターにより細胞を集めて、細胞表面に結合する蛍光抗体を検出した。ＦｌｏｗＪｏによりオリジナルデータを分析してＭＦＩ値を得ると共に、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター曲線のフィッティングを行ってＩＣ５０値を得た。

【0317】

結果が表５に示されるように、本発明に係るハイブリドーマ抗体はｈＣＤ１１２ＲとｈＣＤ１１２との結合を効果的に遮断できる。

【0318】

【表H】

【0319】

（３．４ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおけるハイブリドーマ抗体の活性検出）
自己構築される標的細胞ＣＨＯＣＤ１１２（ヒトＣＤ１１２とＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレートに一晩プレーティングした。翌日に細胞ウェルにおける培地を吸い尽くしてから、実験緩衝液（ＲＰＭＩ１６４０（１Ｘ）（Ｇｉｂｃｏから購入、Ｃａｔ＃２２４００‐０７１）＋２％のＦＢＳ）を利用して異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体又は対照抗体（開始濃度３０μｇ／ｍＬ、３倍希釈、合計８個の濃度勾配）を標的細胞に入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、自己構築されるエフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＣＤ１１２Ｒ（ヒトＣＤ１１２Ｒとｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で細胞プレートに入れて、３７℃インキュベーターで６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダーにより化学発光シグナルを検出した。ＧｒａｐｈＰａｄｐｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター回帰曲線のフィッティングを行って、ＥＣ５０値を計算した。陽性対照はＲｅｆ（コロラド大学抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１７０２４０６１３配列により発現及び精製して得た）である。

【0320】

結果によれば、本発明に係るハイブリドーマ抗体は、ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子システムにおけるＣＤ１１２ＲとＣＤ１１２との相互作用を効果的に遮断して、Ｔ細胞の活性化を促進できる。

【0321】

そのうち、ハイブリドーマ抗体２Ｇ１０．１、５Ｃ１０．１、３Ｄ２．１、４Ｅ２のＥＣ５０はそれぞれ７２．９１ｎｇ／ｍＬ、４０．３６ｎｇ／ｍＬ、４９．２８ｎｇ／ｍＬ、６１．２６ｎｇ／ｍＬであり、対照抗体Ｒｅｆ（９２０．４ｎｇ／ｍＬ）より明らかに優れた。７Ｃ２．１、６Ａ１０．１のＥＣ５０はそれぞれ３７．９４ｎｇ／ｍＬ、５０．７３ｎｇ／ｍＬであり、対照抗体Ｒｅｆ（８７０．９ｎｇ／ｍＬ）より明らかに優れた。４Ｅ５．１のＥＣ５０は５５．１９ｎｇ／ｍＬであり、対照抗体Ｒｅｆ（８６６．３ｎｇ／ｍＬ）より明らかに優れた。

【0322】

（３．５ダブルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＣＤ１１２細胞（ｈＣＤ１１２とＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｃａｔ＃３９１７）に一晩プレーティングしてから、固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体及び異なる濃度（０．５ｎｇ／ｍＬ～３０μｇ／ｍＬ、３倍希釈）の抗ＴＩＧＩＴ抗体を入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、エフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＰＤ‐１ＴＩＧＴＩＣＤ１１２Ｒ（ヒトＰＤ‐１、ヒトＴＩＧＩＴ、ヒトＣＤ１１２Ｒ、ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で標的細胞に入れて、３７℃インキュベーターで４～６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ＃Ｅ６１２０）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダーにより化学発光シグナルを検出した。

【0323】

抗ＴＩＧＩＴ抗体（ＪＳ００６）はＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３における抗ＴＩＧＩＴヒト化抗体ｈｕ２０に由来する。
ハイブリドーマ抗体は２Ｇ１０．１、３Ｄ２．１、４Ｅ２、４Ｅ５．１、５Ｂ２．１、５Ｃ１０．１、６Ａ１０．１、７Ｃ２．１である。

【0324】

図１の用量依存曲線に示されるように、ダブルレポーター遺伝子システムにおいて、本発明に係るハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体を併用した場合、ルシフェラーゼレポーター遺伝子ＮＦＡＴシグナルが抗ＴＩＧＩＴ抗体単独投与群より明らかに高いため、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用は明らかなシナジー効果を有する。

【0325】

（３．６トリプルレポーター遺伝子システムにおけるハイブリドーマ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＰＤ‐Ｌ１ＣＤ１１２細胞（ｈＰＤ‐Ｌ１、ｈＣＤ１１２、ＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｃａｔ＃３９１７）に一晩プレーティングしてから、異なる濃度（０．５ｎｇ／ｍＬ～１０μｇ／ｍＬ、３倍希釈）の抗ＰＤ‐１抗体及び固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＴＩＧＩＴ抗体と固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマ抗体を入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、エフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＰＤ‐１ＴＩＧＴＩＣＤ１１２Ｒ（ヒトＰＤ‐１、ヒトＴＩＧＩＴ、ヒトＣＤ１１２Ｒ、ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で標的細胞に入れて、３７℃インキュベーターで４～６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ＃Ｅ６１２０）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダーにより化学発光シグナルを検出した。

【0326】

抗ＴＩＧＩＴ抗体（ＪＳ００６）はＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３における抗ＴＩＧＩＴヒト化抗体ｈｕ２０に由来する。
抗ＰＤ‐１抗体（ＪＳ００１）は君実生物のトリパリマブに由来する。
ハイブリドーマ抗体は２Ｇ１０．１、３Ｄ２．１、４Ｅ２、４Ｅ５．１、５Ｂ２．１、５Ｃ１０．１、６Ａ１０．１、７Ｃ２．１である。

【0327】

図２（ａ～ｈ）に示されるように、検出結果によれば、抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマモノクローナル抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用群は、抗ＰＤ‐１抗体単独投群及び抗ＰＤ‐１抗体と０．３μｇ／ｍＬの抗ＣＤ１１２Ｒハイブリドーマモノクローナル抗体との併用群より、ルシフェラーゼレポーター遺伝子ＮＦＡＴシグナルが明らかに高いため、抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体及び抗ＣＤ１１２Ｒ抗体との併用は明らかなシナジー効果を有する。

【0328】

＜実施例４、抗ＣＤ１１２Ｒマウス抗体の可変領域配列の測定（Ｋａｂａｔ又はＩＭＧＴにより示される）＞
縮重プライマーＰＣＲに基づく方法により、抗ＣＤ１１２Ｒマウス抗体の可変領域に対応するＤＮＡコード配列を測定した。候補ハイブリドーマ細胞を培養して、１０００ｒｐｍで遠心分離して細胞を集め、Ｔｒｉｚｏｌにより総ＲＮＡを抽出した。これをテンプレートとして第１の鎖ｃＤＮＡを合成してから、第１の鎖ｃＤＮＡを後続のテンプレートとして、ＰＣＲにより対応する可変領域ＤＮＡコード配列を増幅する。増幅反応に使用されるプライマー配列と抗体の可変領域第１のフレームワーク領域及び定常領域と相補する（Ｌａｒｒｉｃｋ，Ｊ．Ｗ．ら、１９９０，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，３２，１２１‐１２８及びＣｏｌｏｍａ，Ｊ．Ｊ．ら、（１９９１）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１１，１５２‐１５６）。５０μｌ反応系にｃＤＮＡ１μｌ、１０×ＰＣＲ緩衝液５μｌ、上流及び下流プライマーそれぞれ１μｌ（２５ｐｍｏｌ）、ｄＮＴＰ１μｌ、２５ｍｍｏｌＰＬＭｇＣｌ₂ １μｌ、Ｈ₂Ｏ３９μｌをそれぞれ入れ、９５℃で１０ｍｉｎ前変性して、Ｔａｑ酵素１μｌを入れ、温度サイクルに進んで、ＰＣＲ増幅を行った。反応条件は、９４℃で１ｍｉｎ変性し、５８℃で１ｍｉｎアニーリングし、７２℃で１５ｓ伸ばし、計３２サイクル実施してから、７２℃で１０ｍｉｎ保温する。ＰＣＲ産物を回収して精製する。増幅産物に対してシークエンシングを行って、抗ヒトＣＤ１１２Ｒマウス抗体の重鎖可変領域と軽鎖可変領域のアミノ酸配列を得た。

【0329】

ＮＣＢＩＩｇ‐Ｂｌａｓｔ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｒｏｊｅｃｔｓ／ｉｇｂｌａｓｔ／）を用いて生殖細胞系と再配置Ｉｇ可変領域配列データベースから共有配列を検索した。Ｋａｂａｔ（Ｗｕ，Ｔ．Ｔ及びＫａｂａｔ，Ｅ．Ａ．１９７０Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１３２：２１１‐２５０）及びＩＭＧＴシステム（ＬｅｆｒａｎｃＭ．‐Ｐ．ら、１９９９ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２７，２０９‐２１２）に基づき、配列注釈及びインターネットに基づく配列分析（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴ＿ｖｑｕｅｓｔ／ｖｑｕｅｓｔとｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｇｂｌａｓｔ／）を通じて相補性決定領域（ＣＤＲ）アミノ酸配列を同定した。

【0330】

選択された抗ＣＤ１１２Ｒマウス抗体の軽鎖及び重鎖可変領域並びにＣＤＲのアミノ酸配列は表１に示される。そのうち、ＰＣＲシークエンシング分析によれば、ハイブリドーマ細胞４Ｅ２は、重鎖可変領域４Ｅ２‐ＶＨ１と４Ｅ２‐ＶＨ２をそれぞれ含む２本の重鎖を含む。

【0331】

＜実施例５、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の構築＞
ハイブリドーマ細胞発現抗体の発現量、活性、タイプなどを考慮した上で、抗ヒトＣＤ１１２Ｒマウス抗体２Ｇ１０、４Ｅ２ＨＣ１、４Ｅ２ＨＣ２、４Ｅ５ＨＣ、５Ｂ２、６Ａ１０、７Ｃ２、５Ｃ１０、３Ｄ２の軽鎖及び重鎖可変領域を選定して、抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体を構築した。

【0332】

ヒト血細胞（北京血液研究所から入手）から重鎖定常領域Ｆｃ及び軽鎖定常領域κのコード配列をクローニングして、ｐＣＤＮＡ３．１プラスミドに導入した。前述した抗ヒトＣＤ１１２Ｒマウス抗体の重鎖及び軽鎖可変領域コード配列はＧｅｎｓｃｒｉｐｔ社により合成された。様々な抗ヒトＣＤ１１２Ｒマウス抗体の重鎖可変領域コード配列及び軽鎖可変領域コード配列はＢｓｐｑＩによりダイジェストしてから、表２に示される様々な組合せを利用して、定常領域コード配列を導入したｐＣＤＮＡ３．１プラスミドに導入すると共に、シークエンシングにより正確なクローニングを決定した。様々なキメラ型重鎖及び軽鎖の発現プラスミドを混合・ペアリングし、発現細胞にトランスフェクションして、７２種類の抗ヒトＣＤ１１２Ｒキメラ抗体（番号及びペアリング方式は表２を参照）を得た。後続の実験材料の全てはこのプラスミドを細胞にトランスフェクションしてから抽出して得た。

【0333】

＜実施例６、キメラ抗体の選定＞
（６．１抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とヒトＣＨＯ‐ＣＤ１１２Ｒ発現細胞との結合）
ヒトＣＤ１１２Ｒを過剰発現するＣＨＯ‐ＣＤ１１２Ｒ細胞（君実により自己構築されるが、ＣＤ１１２Ｒを過剰発現する安定発現細胞株を構築するＣＤ１１２Ｒのアミノ酸配列はＮＣＢＩ登録番号Ｑ６ＤＫＩ７のＭｅｔ１‐Ａｒｇ３２６番目アミノ酸）を、異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体（開始濃度５０μｇ／ｍＬ、５倍希釈、計１２個の濃度勾配）のそれぞれと４℃で３０ｍｉｎインキュベートしてから、洗浄して、蛍光標識された二次抗体と４℃条件で遮光で３０分間インキュベートした。最後にフローサイトメーター（ＢＤＣａｎｔｏＩＩ）により細胞を集めて、細胞表面に結合する蛍光抗体を検出した。ＦｌｏｗＪｏによりオリジナルデータを分析してＭＦＩ値を得ると共に、ＧｒａｐｈＰａｄにより抗体用量依存性の結合曲線のフィッティング（図３、ａとｂ）を行って、ＥＣ５０（表３）を計算した。陽性対照と陰性対照はそれぞれＲｅｆ（コロラド大学抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１７０２４０６１３配列により発現及び精製して得た）と抗ＫＬＨｈｕ‐ＩｇＧ４抗体である。

【0334】

図３と表６に示されるように、本発明に係る大部分の抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体は、ＣＨＯ‐ＣＤ１１２Ｒ細胞表面に高発現するヒトＣＤ１１２Ｒと高親和力で結合できるため、結合活性が対照抗体Ｒｅｆより明らかに優れた。

【0335】

【表I】

【0336】

注記：「＊」は対照抗体Ｒｅｆと抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とのＥＣ５０比を示す。「ＮＡ」は未検出を示す。

【0337】

（６．２抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とカニクイザルＣＤ１１２Ｒとの結合）
固定濃度の組換えカニクイザルＣＤ１１２Ｒ抗原（Ａｃｒｏｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｃａｔ＃ＰＶＧ‐Ｃ５２５９）でプレートにコーティングして、勾配希釈した抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体（１μｇ／ｍＬで開始、２．５倍勾配希釈、計１２個の濃度）を利用してこれらと結合し、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）に結合するマウス抗ヒトＩｇＧ４Ｆｃ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ、９２００‐０５）を５０００倍希釈して検出抗体として検出してから、０．１ｍｇ／ｍＬのＴＭＢで顕色させ、最後に２Ｍの塩酸で反応を停止させて、４２０ｎｍ／６２０ｎｍでプレートを読取った。４パラメーターロガリズム回帰（４ＰＬ）モデルを利用してＥＣ５０のフィッティングを行った。

【0338】

陽性対照はＲｅｆ（コロラド大学抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１７０２４０６１３配列により発現及び精製して得た）である。

【0339】

図４（ａとｂ）及び表７に示されるように、下記１４個のキメラ抗体のうち、カニクイザルＣＤ１１２Ｒと結合しないｃｈｉ１８以外に、その他の１３個の抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体は、全てカニクイザルＣＤ１１２Ｒと結合する。

【0340】

【表J】

【0341】

注記：「＊」は対照抗体Ｒｅｆと抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とのＥＣ５０比を示す。

【0342】

（６．３ＣＤ１１２Ｒタンパク質とヒトＣＨＯ‐ＣＤ１１２発現細胞との結合への抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体による遮断）
ヒトＣＤ１１２を過剰発現する細胞ＣＨＯＣＤ１１２、染色緩衝液（ＰＢＳ＋１％のＦＢＳ）に配置されるｈＣＤ１１２ＲｍＦｃタンパク質溶液（５μｇ／ｍＬ）、異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体又は対照抗体（開始濃度１００μｇ／ｍＬ、３倍希釈、１０個の濃度勾配）を４℃条件で３０ｍｉｎ共インキュベートした。次に、染色緩衝液で結合していない抗体を洗浄して、更に細胞と染色緩衝液で配置される１％（ｖ／ｖ）が含まれるヤギ抗マウスＩｇＧＦｃ蛍光二次抗体（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を４℃条件で遮光で３０分間インキュベートした。最後にフローサイトメーター（ＢＤＣａｎｔｏＩＩ）により細胞を集めて、細胞表面に結合する蛍光抗体を検出した。ＦｌｏｗＪｏによりオリジナルデータを分析してＭＦＩ値を得ると共に、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター曲線のフィッティングを行ってＩＣ５０値を得た。陽性対照と陰性対照はそれぞれＲｅｆ（コロラド大学抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１７０２４０６１３配列により発現及び精製して得た）と抗ＫＬＨｈｕ‐ＩｇＧ４抗体である。

【0343】

図５（ａとｂ）及び表８に示されるように、下記１３個のキメラ抗体はＣＤ１１２Ｒタンパク質とＣＨＯ‐ＣＤ１１２細胞との結合を効果的に遮断できる。

【0344】

【表K】

【0345】

注記：「＊」は対照抗体Ｒｅｆと抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とのＥＣ５０比を示す。

【0346】

（６．４ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＣＤ１１２（君実生物により自己構築されるが、ヒトＣＤ１１２とＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）細胞を１ウェル当たり５×１０⁴の細胞数で９６ウェル白色平底プレートに一晩プレーティングした。翌日に細胞ウェルにおける培地を吸い尽くしてから、実験緩衝液（ＲＰＭＩ１６４０（１Ｘ）（Ｇｉｂｃｏから購入、Ｃａｔ＃２２４００‐０７１）＋２％のＦＢＳ）を利用して異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体又は対照抗体（開始濃度３μｇ／ｍＬ、３倍希釈、合計１０個の濃度勾配）を標的細胞に入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、自己構築されるエフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＣＤ１１２Ｒ（ヒトＣＤ１１２Ｒとｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で細胞プレートに入れて、３７℃インキュベーターで６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダー（ＴＥＣＡＮＭ１０００ｐｒｏ）により化学発光シグナルを検出した。ＧｒａｐｈＰａｄｐｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター回帰曲線のフィッティングを行って、ＥＣ５０値を計算した。陽性対照と陰性対照はそれぞれＲｅｆ（コロラド大学抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１７０２４０６１３配列により発現及び精製して得た）と抗ＫＬＨｈｕ‐ＩｇＧ４抗体である。

【0347】

図６（ａ～ｅ）及び表９に示されるように、下記１３個のキメラ抗体は、ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子システムにおけるＣＤ１１２ＲとＣＤ１１２との相互作用を効果的に遮断して、Ｔ細胞の活性化を促進できる。そのうち、ｃｈｉ４６、ｃｈｉ５４、ｃｈｉ４５、ｃｈｉ６２、ｃｈｉ５３、ｃｈｉ５５、ｃｈｉ４７の７個のキメラ抗体の活性はＲｅｆより、相対活性が２０倍以上である。

【0348】

上記７個のキメラ抗体の重鎖及び軽鎖を選択してそれぞれヒト化設計と改変を行った。

【0349】

【表L】

【0350】

注記：「＊」は対照抗体Ｒｅｆと抗ＣＤ１１２Ｒキメラ抗体とのＥＣ５０比を示す。

【0351】

＜実施例７、抗体の可変領域のヒト化改変＞
抗体の可変領域のヒト化改変について、まず、ＮＣＢＩ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｇｂｌａｓｔ／）サイトのヒト免疫グロブリン遺伝子データベースから、マウス抗体のｃＤＮＡ配列と同源であるヒト生殖細胞系ＩｇＧ遺伝子を検索して、更にＫａｂａｔ番号付けシステム又はＩＭＧＴ番号付けシステムにより可変領域ＣＤＲのアミノ酸配列及びその精確な境界を定義した。原則的にマウス抗体と高い相同性を有するヒトＩＧＨＶをヒト化テンプレートとして選択して、ＣＤＲグラフティングにより抗体の可変領域のヒト化を実施した。

【0352】

上記で得たマウス抗体の配列に従って、ヒト化改変を行った。簡単に言えば、ヒト化改変の過程には、以下のステップを含む。Ａ．マウス抗体の遺伝子配列とヒト胚性抗体の遺伝子配列とをアラインメントし、相同性の高い配列を探す。Ｂ．ＨＬＡーＤＲ親和性を分析して調べて、親和力の低いヒト胚性フレームワーク配列を選択する。Ｃ．コンピュータシミュレーション技術を利用して、分子ドッキングにより可変領域及びその周辺のフレームワークアミノ酸配列を分析し、その空間的な結合方式を調べる。静電力、ファンデルワールス力、親疎水性やエントロピー値を計算することで、マウス抗体の遺伝子配列のうち、ヒトＣＤ１１２Ｒと作用して空間フレームワークをメンテナンスする重要な単一のアミノ酸を分析し、それを、選択されたヒト胚性遺伝子フレームワークにグラフトし、これに基づいて、保留しなければならないフレームワーク領域のアミノ酸の部位をマークし、ヒト化抗体を合成した。これに基づいて複数種のヒト化抗体の可変領域が得られた。設計したヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の可変領域について様々な組合せを行って、６０種類のヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体（番号及びアミノ酸配列は表３を参照）を得た。

【0353】

＜実施例８、ヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体の選定＞
（８．１抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質との結合）
固定濃度のｈＣＤ１１２Ｒ‐ＥＣＤ‐ｍＦＣタンパク質（１．５μｇ／ｍＬ）でプレートにコーティングして、勾配希釈したヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体（１μｇ／ｍＬで開始、２．５倍勾配希釈、計１２個の濃度）を利用してこれらと結合し、ＨＲＰに結合するヤギ抗ヒト抗体ＩｇＧ（Ｆｃ特異性）（Ｓｉｇｍａ、Ａ０１７０）を５０００倍希釈して検出抗体として検出してから、０．１ｍｇ／ｍＬのＴＭＢで顕色させ、最後に２Ｍの塩酸で反応を停止させて、４２０ｎｍ／６２０ｎｍでプレートを読取った。４パラメーターロガリズム回帰（４ＰＬ）モデルを利用してＥＣ５０のフィッティングを行った。陽性対照はＣＯＭ７０１（Ｃｏｍｐｕｇｅｎの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１８０２８０５０６Ａ１配列により発現及び精製して得た）と抗ＫＬＨｈｕ‐ＩｇＧ４抗体である。

【0354】

表１０に示されるように、６０個の抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体は、組換えヒトＣＤ１１２Ｒタンパク質と高親和力で結合できる。

【0355】

【表M-1】

【0356】

【表M-2】

【0357】

注記：「＊」は対照抗体ＣＯＭ７０１と抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とのＥＣ５０比を示す。本明細書に係る抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体の番号におけるＨｕとｈｕは同じ意味を有し、互いに交換して使用することができる。例えば、Ｈｕ‐０１、Ｈｕ０１、ｈｕ‐０１、ｈｕ０１、ｈｕ‐１、ｈｕ１は同じヒト化抗体を示す。

【0358】

（８．２ＣＤ１１２Ｒタンパク質とＣＨＯ‐ＣＤ１１２発現細胞との結合の抗ＣＤ１１２ヒト化抗体による遮断）
ヒトＣＤ１１２を過剰発現する細胞ＣＨＯＣＤ１１２、染色緩衝液（ＰＢＳ＋１％のＦＢＳ）に配置されるｈＣＤ１１２ＲｍＦｃタンパク質溶液（５μｇ／ｍＬ）、異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体又は対照抗体（開始濃度１００μｇ／ｍＬ、３倍希釈、１０個の濃度勾配）を４℃条件で３０ｍｉｎ共インキュベートした。次に、染色緩衝液で結合していない抗体を洗浄して、更に細胞と染色緩衝液で配置される１％（ｖ／ｖ）が含まれるヤギ抗マウスＩｇＧＦｃ蛍光二次抗体（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を４℃条件で遮光で３０分間インキュベートした。最後にフローサイトメーター（ＢＤＣａｎｔｏＩＩ）により細胞を集めて、細胞表面に結合する蛍光抗体を検出した。ＦｌｏｗＪｏによりオリジナルデータを分析してＭＦＩ値を得ると共に、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター曲線のフィッティングを行ってＩＣ₅₀値を得た。陽性対照と陰性対照はそれぞれＣＯＭ７０１（Ｃｏｍｐｕｇｅｎの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１８０２８０５０６Ａ１配列により発現及び精製して得た）と抗ＫＬＨｈｕ‐ＩｇＧ４抗体である。

【0359】

表１１に示されるように、下記６０個のキメラ抗体は、ＣＤ１１２Ｒタンパク質とＣＨＯ‐ＣＤ１１２発現細胞との結合を効果的に遮断できる。

【0360】

【表N-1】

【0361】

【表N-2】

【0362】

注記：「＊」は対照抗体ＣＯＭ７０１と抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とのＩＣ５０比を示す。

【0363】

（８．３ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子検出システムにおける抗ＣＤ１１２ヒト化抗体の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＣＤ１１２（ｈＣＤ１１２とＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）細胞を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレートに一晩プレーティングした。翌日に細胞ウェルにおける培地を吸い尽くしてから、実験緩衝液（ＲＰＭＩ１６４０（１Ｘ）＋２％のＦＢＳ）を利用して異なる濃度の抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体又は対照抗体（開始濃度３μｇ／ｍＬ、３倍希釈、合計１０個の濃度勾配）を標的細胞に入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、エフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＣＤ１１２Ｒ（ヒトＣＤ１１２Ｒとｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０５個の細胞数で細胞プレートに入れて、３７℃インキュベーターで６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダー（ＴＥＣＡＮＭ１０００ｐｒｏ）により化学発光シグナルを検出した。ＧｒａｐｈＰａｄｐｒｉｓｍソフトウェアにより４パラメーター回帰曲線のフィッティングを行って、ＥＣ₅₀値を計算した。陽性対照はＣＯＭ７０１（Ｃｏｍｐｕｇｅｎの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１８０２８０５０６Ａ１配列により発現及び精製して得た）である。

【0364】

表１２に示されるように、下記６０個のヒト化抗体のうち、ｈｕ‐５７以外に、その他の５９個の抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体は、ＣＤ１１２Ｒ／ＣＤ１１２レポーター遺伝子システムにおけるＣＤ１１２ＲとＣＤ１１２との相互作用を効果的に遮断して、Ｔ細胞の活性化を促進できる。そのうち、ｈｕ‐５２、ｈｕ‐５１、ｈｕ‐５３、ｈｕ‐５９、ｈｕ‐５４、ｈｕ‐５５の６個のヒト化抗体の活性はＲｅｆ（ＣＧＥＮ）より、相対活性が３倍以上である。また、ｈｕ‐１６、ｈｕ‐３９、ｈｕ‐４５、ｈｕ‐５８、ｈｕ‐５６、ｈｕ‐６０の６個のヒト化抗体の活性はＲｅｆ（ＣＧＥＮ）より、相対活性が２．５～３倍である。

【0365】

【表O-1】

【0366】

【表O-2】

【0367】

注記：「＊」は対照抗体ＣＯＭ７０１と抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とのＥＣ５０比を示す。

【0368】

（８．４抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体とカニクイザル及びマウスＣＤ１１２Ｒとの結合活性）
固定濃度の組換えカニクイザルＣＤ１１２Ｒ抗原（Ａｃｒｏｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入、Ｃａｔ＃ＰＶＧ‐Ｃ５２５９）、マウスＣＤ１１２Ｒ抗原（Ａｃｒｏｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入、Ｃａｔ＃ＰＶＧ‐Ｍ５２５７）でそれぞれプレートにコーティングして、勾配希釈した抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体（１μｇ／ｍＬで開始、２．５倍勾配希釈、計１２個の濃度）を利用してこれらと結合し、ＨＲＰに結合するマウス抗ヒトＩｇＧ４Ｆｃ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ、９２００‐０５）を５０００倍希釈して検出抗体として検出してから、０．１ｍｇ／ｍＬのＴＭＢで顕色させ、最後に２Ｍの塩酸で反応を停止させて、４２０ｎｍ／６２０ｎｍでプレートを読取った。４パラメーターロガリズム回帰（４ＰＬ）モデルを利用してＥＣ５０のフィッティングを行った。

【0369】

図７（ａとｂ）に示されるように、ｈｕ１６、ｈｕ５２、ｈｕ５９はカニクイザルＣＤ１１２Ｒと高親和力で結合でき、ＥＣ５０はそれぞれ２．９２ｎｇ／ｍＬ、３．０８７ｎｇ／ｍＬ、２．６２２ｎｇ／ｍＬであるが、マウスＣＤ１１２Ｒとの結合活性がない。

【0370】

（８．５ダブルレポーター遺伝子システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＣＤ１１２細胞（ｈＣＤ１１２とＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｃａｔ＃３９１７）に一晩プレーティングしてから、異なる濃度（０．１５ｎｇ／ｍＬ～３μｇ／ｍＬ、３倍希釈）の抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体及び固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＴＩＧＩＴ抗体を入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、エフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＰＤ‐１ＴＩＧＴＩＣＤ１１２Ｒ（ヒトＰＤ‐１、ヒトＴＩＧＩＴ、ヒトＣＤ１１２Ｒ、ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で標的細胞に入れて、３７℃インキュベーターで４～６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ＃Ｅ６１２０）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダー（ＴＥＣＡＮＭ１０００ｐｒｏ）により化学発光シグナルを検出した。

【0371】

抗ＴＩＧＩＴ抗体（ＪＳ００６）はＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３における抗ＴＩＧＩＴヒト化抗体ｈｕ２０に由来する。
陽性対照はＣＯＭ７０１（Ｃｏｍｐｕｇｅｎの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１８０２８０５０６Ａ１配列により発現及び精製して得た）である。

【0372】

図８の用量依存曲線に示されるように、ダブルレポーター遺伝子システムにおいて、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体ｈｕ１６、ｈｕ５２、ｈｕ５９と抗ＴＩＧＩＴ抗体を併用した場合、ルシフェラーゼレポーター遺伝子ＮＦＡＴシグナルが抗ＣＤ１１２Ｒ抗体単独投与群より明らかに高いため、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用は明らかなシナジー効果を有し、３個のヒト化抗ＣＤ１１２Ｒ抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体の併用群の薬物効果はＣＯＭ７０１併用群より明らかに優れた。

【0373】

（８．６トリプルレポーター遺伝子システムにおける抗ＣＤ１１２Ｒヒト化抗体と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用の活性検出）
標的細胞ＣＨＯＰＤ‐Ｌ１ＣＤ１１２細胞（ｈＰＤ‐Ｌ１、ｈＣＤ１１２、ＣＤ３ｓｃＦｖを安定的に発現）を１ウェル当たり５×１０⁴個の細胞数で９６ウェル白色平底プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｃａｔ＃３９１７）に一晩プレーティングしてから、異なる濃度（０．５ｎｇ／ｍＬ～１０μｇ／ｍＬ、３倍希釈）の抗ＰＤ‐１抗体及び固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＴＩＧＩＴ抗体と固定濃度（０．３μｇ／ｍＬ）の抗ＣＤ１１２Ｒ抗体を入れて、３７℃で３０分間インキュベートした。次に、エフェクター細胞ＪｕｒｋａｔＰＤ‐１ＴＩＧＴＩＣＤ１１２Ｒ（ヒトＰＤ‐１、ヒトＴＩＧＩＴ、ヒトＣＤ１１２Ｒ、ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦＡＴ‐ＲＥを安定的に発現）を１ウェル当たり１×１０⁵個の細胞数で標的細胞に入れて、３７℃インキュベーターで４～６時間共インキュベートした。最後に細胞抗体混合系にＯＮＥ‐Ｇｌｏルシフェラーゼ検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ＃Ｅ６１２０）を入れて、マルチモードマイクロプレートリーダー（ＴＥＣＡＮＭ１０００ｐｒｏ）により化学発光シグナルを検出した。

【0374】

抗ＴＩＧＩＴ抗体（ＪＳ００６）はＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３における抗ＴＩＧＩＴヒト化抗体ｈｕ２０に由来する。
抗ＰＤ‐１抗体（ＪＳ００１）は君実生物のトリパリマブに由来する。
陽性対照はＣＯＭ７０１（Ｃｏｍｐｕｇｅｎの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、ＵＳ２０１８０２８０５０６Ａ１配列により発現及び精製して得た）である。

【0375】

図９の用量依存曲線に示されるように、トリプルレポーター遺伝子システムにおいて、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体ｈｕ１６、ｈｕ５２、ｈｕ５９と抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ‐１抗体との併用群は、抗ＰＤ‐１抗体単独投与群及び抗ＰＤ‐１抗体と０．３μｇ／ｍＬの抗ＴＩＧＩＴ抗体との併用群より、ルシフェラーゼレポーター遺伝子ＮＦＡＴシグナルが明らかに高いため、抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ‐１抗体及び抗ＣＤ１１２Ｒ抗体との併用は明らかなシナジー効果を有する。

【0376】

＜実施例９、ヒトメラノーマＡ３７５とＰＢＭＣ皮下移植腫瘍との混合モデルにおける抗ＣＤ１１２Ｒ抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体及びその併用の薬力学評価＞
実験動物は、４８匹のＮＣＧマウス、雌、６～８週齢、体重約１８～２２ｇである。江蘇集萃薬康生物科技有限公司から購入する。
抗ＴＩＧＩＴ抗体（ＪＳ００６）はＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１０１８８３における抗ＴＩＧＩＴヒト化抗体ｈｕ２０に由来する。
抗ＣＤ１１２Ｒ抗体は本明細書に記載のヒト化抗体ｈｕ５２である。

【0377】

Ａ３７５細胞は１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）が含まれるＤＭＥＭ培養液に培養する。対数増殖期のＡ３７５細胞を集め、ＨＢＳＳ（Ｈａｎｋ’ｓ平衡塩溶液）を適切な濃度となるように再懸濁させて、ＮＣＧマウス皮下腫瘍の接種に利用する。共培養実験に利用されるＡ３７５細胞はＭｉｔｏｍｙｃｉｎＣ（マイトマイシンＣ）で２ｈ処理してから、ＰＢＳで３回洗浄した。凍結保存するＰＢＭＣを取り、蘇生させて計数し、得られたＰＢＭＣをＭｉｔｏｍｙｃｉｎＣにより処理されたＡ３７５細胞に入れ、ＰＢＭＣとＡ３７５を５日間共培養し、培養液はＩＬ‐２と１０％のＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培養液である。ＰＢＭＣとＡ３７５を５日間共培養した後、ＰＢＭＣと新しく消化されたＡ３７５細胞を収集し、ＰＢＭＣ４×１０⁵個、Ａ３７５細胞４×１０⁶個、０．２ｍＬ／匹（５０％のＭａｔｒｉｇｅｌ（マトリゲル）を含む）でＮＣＧマウス右側皮下に接種した。接種当日を０日目とする。マウス体重に基づいて、ランダムに群分けして投与する。詳しい投与方法、投与量、投与ルートは表１３を参照する。

【0378】

【表P】

【0379】

注記：Ｎ：動物使用数量、ｉ．ｐ．：腹腔注射、Ｑ３Ｄ：３日ごとに１回投与する。投与体積：担腫瘍マウスの体重に基づいて投与体積を調整する（０．１ｍＬ／１０ｇ）。
実験開始後、腫瘍体積とマウス体重を週２回測定し、実験結果は表１４と図１０を参照する。

【0380】

【表Q】

【0381】

注記：ｐ＜０．０５の場合、明らかな差を有することと見なす。Ｔ／Ｃ（％）は相対腫瘍増殖率であり、即ち、ある時点における対照群に対する投与群の腫瘍体積のパーセンテージであり、ＴとＣはある特定時点における投与群と対照群のそれぞれの腫瘍体積（ＴＶ）である。腫瘍成長に対する抑制率ＴＧＩ（％）＝（１‐Ｔ／Ｃ）×１００％。

【0382】

実験終了時（投与２５日目後）に、対照群と比較すれば、抗ＣＤ１１２Ｒ抗体ｈｕ５２の３０ｍｇ／ｋｇにおける用量レベルでは、腫瘍成長を明らかに抑制した。腫瘍成長に対する抑制率は３７．６８％（ｐ＜０．０５）である。３０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＤ１１２Ｒ抗体ｈｕ５２と３０ｍｇ／ｋｇのＪＳ００６との併用は明らかな共同抗腫瘍効果を示し、腫瘍成長に対する抑制率は５８．３０％（ｐ＜０．０１）である。

【図1】