ホーム > 特許ランキング > モルフォシス・アーゲー
知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
特表2024-507986抗体関連型移植拒絶反応の治療に使用するための抗ＣＤ３８抗体
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-02-21
(54)【発明の名称】抗体関連型移植拒絶反応の治療に使用するための抗ＣＤ３８抗体
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20240214BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20240214BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20240214BHJP
C12N 15/13 20060101ALI20240214BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61K39/395 D ZNA
A61P37/06
C07K16/28
C12N15/13
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023552183
(86)(22)【出願日】2022-03-01
(85)【翻訳文提出日】2023-08-28
(86)【国際出願番号】 EP2022055080
(87)【国際公開番号】W WO2022184676
(87)【国際公開日】2022-09-09
(31)【優先権主張番号】21159860.2
(32)【優先日】2021-03-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】316005432
【氏名又は名称】モルフォシス・アーゲー
(74)【代理人】
【識別番号】110001302
【氏名又は名称】弁理士法人北青山インターナショナル
(72)【発明者】
【氏名】シュタイドル，ステファン
(72)【発明者】
【氏名】ヘルトレ，ステファン
(72)【発明者】
【氏名】ボックスハンマー，ライナー
【テーマコード（参考）】
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085BB36
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA09
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、移植の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の予防及び／又は治療における抗ＣＤ３８抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの使用に関する。本発明に従うと、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂは、抗体関連型移植腎拒絶反応に有効である。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ヒト対象における移植臓器の抗体関連型拒絶反応の治療及び／又は予防に使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項2】
前記移植臓器は、腎臓、心臓、肝臓、肺、膵臓、胃、皮膚又は腸の移植である、請求項１に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項3】
前記抗体は、アミノ酸配列配列番号１のＨＣＤＲ１領域、アミノ酸配列配列番号２のＨＣＤＲ２領域、アミノ酸配列配列番号３のＨＣＤＲ３領域、及びアミノ酸配列配列番号４のＬＣＤＲ１領域、アミノ酸配列配列番号５のＬＣＤＲ２領域、及びアミノ酸配列配列番号６のＬＣＤＲ３領域を含む、請求項１又は請求項２に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項4】
前記抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片は、配列番号７の重鎖可変（ＶＨ）領域及び配列番号８の軽鎖可変（ＶＬ）領域を含む、請求項３に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項5】
ＣＤ３８に特異的な前記抗体又は抗体断片は、ＩｇＧ１である、請求項１～４のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項6】
ＣＤ３８に特異的な前記抗体又は抗体断片は、ヒト抗体である、請求項１～５のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項7】
ＣＤ３８に特異的な前記抗体又は抗体断片は、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂである、請求項１～６のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項8】
前記抗体は、ＡＤＣＣ及び／又はＡＤＣＰにより形質細胞を枯渇させる、請求項１～７のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項9】
前記抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を投与すると、ＣＤ３８＋抗体分泌細胞が減少する、請求項１～８のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項10】
前記抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を投与すると、抗ＨＬＡ抗体レベルが減少する、請求項１～９のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項11】
前記抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を投与すると、クラスＩ及び／又はクラスＩＩ抗ＨＬＡ抗体レベルが減少する、請求項１０に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項12】
前記抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を投与すると、抗ＤＱ５抗体レベルが減少する、請求項１１に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項13】
前記抗体又は抗体断片は、１６ｍｇ／ｋｇで静脈内に投与される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項14】
前記抗体又は抗体断片は、少なくとも２回、少なくとも５回、少なくとも７回、又は少なくとも９回投与される、請求項１３に記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。
【請求項15】
治療予定の前記対象は、ＣＫＤ－ＥＰＩ式にしたがってｅＧＦＲ≧２０ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２によって特徴づけられる、請求項１～１４のいずれかに記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、臓器移植（例えば腎移植）の分野に関する。特に、本開示は、抗体関連型移植拒絶反応（ＡＢＭＲ）の患者の治療に使用するための抗ＣＤ３８抗体に関する。本開示は、抗ＣＤ３８抗体を用いる、抗体分泌細胞を低減させるための、及び移植臓器上に存在する１つ又は複数の抗原に対する特異性を有する抗体レベルを低減させるための方法を提供する。本発明に従って、抗ＣＤ３８抗体は、単独で又は１つ又は複数の免疫抑制剤と併せて、ＡＢＭＲの治療及び／又は予防に有効であることができる。本発明による使用するための抗ＣＤ３８抗体は、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（ＭＯＲ２０２）を含む。
【背景技術】
【0002】
臓器移植は、損傷された又は欠損した臓器を置き換えるために、臓器を対象（ドナー）の体から取り除き、レシピエント（ホスト）の体に配置する医療処置である。移植は、末期臓器不全にかかった患者が選択する治療である。同一の種の２個の対象間の移植は主に、ホストの免疫系による臓器拒絶反応を低減するために実行される（いわゆる同種移植）。しかしながら、ホスト免疫系は、よく適合した移植片でさえ認識し、最終的に移植片を破壊することができる。
【0003】
以前に、Ｔ細胞関連型拒絶（ＴＣＭＲ）による移植片損傷のみの原因となるアロ反応性Ｔ細胞が支持された。一方で、抗ドナー同種抗体が長期的移植生着の追加の重要な障害であると証明された。このいわゆる抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）は、臓器移植後の移植片機能損失に寄与することが多い。抗ドナー特異的抗体（ＤＳＡ）、例えば抗ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）抗体は、おそらく細胞性メカニズムの抗体介在性活性化（例えばナチュラルキラー細胞の活性化）と併せて、慢性移植片損傷の主要なトリガーである。腎移植においては、ＡＢＭＲは、同種移植片機能不全及び慢性同種移植片損傷の主要な原因の１つである。移植腎の拒絶は、通常抗ＨＬＡ ＤＳＡによって引き起こされ、糸球体濾過量（ＧＦＲ）の漸進的減少、蛋白尿の上昇、及び腎不全と関連する。
【0004】
ＡＢＭＲの様々な治療戦略を評価する先行技術に多くの研究が存在する。既知の戦略としては、例えば
・クロリムス、ミコフェノール酸モフェチル及びベラタセプト（ＣＴＬＡ－４ Ｆｃ－融合）での免疫抑制（Ｔｈｅｒｕｖａｔｈ，ＴＰら、２００１，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，７２：７７－８３；Ｓｃｈｗａｒｚ，Ｃら、２０１５，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２８：８２０－８２７）、
・抗ＣＤ２０リツキシマブ投与の有無に関わらず高用量静脈内免疫グロブリン投与を含む免疫調節処置（Ｆｅｈｒ，Ｔら、２００９，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，８７：１８３７－１８４１）、
・プロテアソーム阻害剤ボルテゾミブ（Ｗａｌｓｈ，ＲＣら、２０１２，Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，８１：１０６７－１０７４）又は
・補体阻害剤（Ｅｓｋａｎｄａｒｙ，Ｆら、２０１７，Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，１８：９１６－９２６）が挙げられる。
・クロリムス、ミコフェノール酸モフェチル及びベラタセプト（ＣＴＬＡ－４ Ｆｃ－融合）での免疫抑制（Ｔｈｅｒｕｖａｔｈ，ＴＰら、２００１，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，７２：７７－８３；Ｓｃｈｗａｒｚ，Ｃら、２０１５，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２８：８２０－８２７）、
・抗ＣＤ２０リツキシマブ投与の有無に関わらず高用量静脈内免疫グロブリン投与を含む免疫調節処置（Ｆｅｈｒ，Ｔら、２００９，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，８７：１８３７－１８４１）、
・プロテアソーム阻害剤ボルテゾミブ（Ｗａｌｓｈ，ＲＣら、２０１２，Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ，８１：１０６７－１０７４）又は
・補体阻害剤（Ｅｓｋａｎｄａｒｙ，Ｆら、２０１７，Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，１８：９１６－９２６）が挙げられる。
【0005】
しかしながら、これらの戦略によっても長期的経過の著しい改善は充分には達成できなかった。したがって、長期的移植生着の治療選択肢は、依然として改善される必要がある。
【0006】
有望な標的は、ＣＤ３８であってよく、これは主に免疫及び造血細胞上に発現し、抗体産生形質細胞上の発現レベルが特に高い。同種抗体産生形質細胞のＡＢＭＲにおける重要な役割を考慮すると（ＤＳＡが傷害の原因である場合）、ＣＤ３８による効果的な形質細胞枯渇は、持続的なＤＳＡ減少を達成するための移植医薬において有用であってもよい。
【0007】
抗ＣＤ３８抗体でＡＢＭＲに対抗するという概念は、ダラツムマブでの先行技術に示されている。腎移植したアカゲザルモデルにおいては、ダラツムマブはドナー特異的抗体を減少させ、長期的移植腎生着を達成した（Ｋｗｕｎ，Ｊら、２０１９，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，３０：１２０６－１２１９）。国際公開第２０２０１８５６７２号パンフレット（Ｃｅｄａｒｓ－Ｓｉｎａｉ）は、２件の症例で抗ＨＬＡ抗体及び標準治療に抵抗性のＡＢＭＲがある患者を例証し、この患者はダラツムマブの治療を受け、抗ＨＬＡ抗体レベルが初期に減少した。
【0008】
しかしながら、この治療の欠点は、ダラツムマブ治療後にＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞が増加し、制御性Ｂ細胞（Ｂ－ｒｅｇｓ）が除去されたことだった。このことは、制御性Ｔ及びＢ細胞の減少に対するダラツムマブの補助的効果のためであってもよい。したがって、ダラツムマブでＣＤ３８を標的としても形質細胞集団が減少するだけでなく、有益な制御性細胞集団も枯渇する。末梢循環及び移植片微小環境内に制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇｓ）が存在することは、長期的移植免疫寛容を誘導し、維持するのに重要であってもよい。
【0009】
さらに、ＤＳＡ ＤＱ５を含む、抗ＨＬＡクラスＩＩ抗体のレベルには重要な影響がなく、いくつかのクラスＩＩ抗体が反跳し、新規のＨＬＡクラスＩＩ抗体が出現した。このことは、ダラツムマブにＣＤ３８＋ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を枯渇させる能力があり、したがってＡＤＣＣを制限するためであってもよい。図１は、インビトロでのＮＫ細胞の枯渇について、ＭＯＲ２０２及びイサツキシマブと比較したダラツムマブの影響を示す。
【0010】
要約すると、これらの研究では初期のＡＢＭＲエピソードを効果的に制御するが、初期のＡＢＭＲに施される治療選択肢は、遅発型／慢性エピソードには限られた影響しか及ぼさず、遅発型移植片機能損失には主因が残っていることが示される。
【0011】
したがって、ＡＢＭＲを治療するための同種抗体反応性を標的とし、長期的移植片生着を延ばす新規の戦略の必要性が高い。
【0012】
形質細胞のＭＯＲ２０２誘導溶解の主要な作用機序は、ＡＤＣＣ及びＡＤＣＰであり、ＣＤＣではない。ＣＤＣは、インフュージョンリアクションの主要な寄与体であると考えられている。したがって、他のＣＤ３８抗体と比較した主な利点は、インフュージョンリアクションのリスクが低いことである。さらに、ＭＯＲ２０２は、主に高ＣＤ３８細胞を枯渇させ、これによりインビトロでＣＤ３８レベルが低い特異的細胞集団を残す。特定の制御性細胞サブセットは、ＭＯＲ２０２での治療後に保存されてもよく、移植片生着が改善される。
【0013】
本開示は、ＡＢＭＲ、特に遅発型及び／又は慢性ＡＢＭＲを処置する効率的で、安全で、持続可能で、忍容性が良好な戦略に使用するための抗ＣＤ３８抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを提供する。ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを反復投与すると、進行中のＡＢＭＲの組織炎症（すなわちＣＤ４＋ＣＤ８＋Ｔ細胞数の増加）及び移植片損傷、特に微小循環の炎症、ＨＬＡ抗原に対するＢ細胞応答に対抗することができ、結果として、同種抗体／ＮＫ細胞トリガー慢性移植片損傷に対抗することができる。
【発明の概要】
【0014】
本発明は、臓器移植の抗体関連型拒絶反応の治療及び／又は予防に使用するための抗ＣＤ３８抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを提供する。さらに、腎移植を受けた対象においてドナー特異的抗体（例えば抗ＨＬＡ）を低減若しくは除去する、及び／又はＡＢＭＲの重症度を治療若しくは低減する方法を提供する。方法は、患者に有効量の抗ＣＤ３８抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを投与することを含む。いくつかの態様において、方法はさらに、臓器移植のＡＢＭＲを経験している又は経験したことがある患者を選択することを含む。他の態様において、方法はさらに、血清中にドナーＨＬＡに特異的な抗ＨＬＡ抗体を有する患者を選択することを含む。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【発明を実施するための形態】
【0016】
発明の詳細な説明
定義
用語「ＣＤ３８」とは、以下の同義語、ＡＤＰリボシルシクラーゼ１、ｃＡＤＰＲヒドロラーゼ１、サイクリックＡＤＰリボースヒドロラーゼ１、Ｔ１０を有する、ＣＤ３８として知られるタンパク質を指す。
ヒトＣＤ３８（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ２８９０７）は、以下のアミノ酸配列を有する。
ＭＡＮＣＥＦＳＰＶＳＧＤＫＰＣＣＲＬＳＲＲＡＱＬＣＬＧＶＳＩＬＶＬＩＬＶＶＶＬＡＶＶＶＰＲＷＲＱＱＷＳＧＰＧＴＴＫＲＦＰＥＴＶＬＡＲＣＶＫＹＴＥＩＨＰＥＭＲＨＶＤＣＱＳＶＷＤＡＦＫＧＡＦＩＳＫＨＰＣＮＩＴＥＥＤＹＱＰＬＭＫＬＧＴＱＴＶＰＣＮＫＩＬＬＷＳＲＩＫＤＬＡＨＱＦＴＱＶＱＲＤＭＦＴＬＥＤＴＬＬＧＹＬＡＤＤＬＴＷＣＧＥＦＮＴＳＫＩＮＹＱＳＣＰＤＷＲＫＤＣＳＮＮＰＶＳＶＦＷＫＴＶＳＲＲＦＡＥＡＡＣＤＶＶＨＶＭＬＮＧＳＲＳＫＩＦＤＫＮＳＴＦＧＳＶＥＶＨＮＬＱＰＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧＲＥＤＳＲＤＬＣＱＤＰＴＩＫＥＬＥＳＩＩＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲＰＤＫＦＬＱＣＶＫＮＰＥＤＳＳＣＴＳＥＩ（配列番号９）
定義
用語「ＣＤ３８」とは、以下の同義語、ＡＤＰリボシルシクラーゼ１、ｃＡＤＰＲヒドロラーゼ１、サイクリックＡＤＰリボースヒドロラーゼ１、Ｔ１０を有する、ＣＤ３８として知られるタンパク質を指す。
ヒトＣＤ３８（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ２８９０７）は、以下のアミノ酸配列を有する。
ＭＡＮＣＥＦＳＰＶＳＧＤＫＰＣＣＲＬＳＲＲＡＱＬＣＬＧＶＳＩＬＶＬＩＬＶＶＶＬＡＶＶＶＰＲＷＲＱＱＷＳＧＰＧＴＴＫＲＦＰＥＴＶＬＡＲＣＶＫＹＴＥＩＨＰＥＭＲＨＶＤＣＱＳＶＷＤＡＦＫＧＡＦＩＳＫＨＰＣＮＩＴＥＥＤＹＱＰＬＭＫＬＧＴＱＴＶＰＣＮＫＩＬＬＷＳＲＩＫＤＬＡＨＱＦＴＱＶＱＲＤＭＦＴＬＥＤＴＬＬＧＹＬＡＤＤＬＴＷＣＧＥＦＮＴＳＫＩＮＹＱＳＣＰＤＷＲＫＤＣＳＮＮＰＶＳＶＦＷＫＴＶＳＲＲＦＡＥＡＡＣＤＶＶＨＶＭＬＮＧＳＲＳＫＩＦＤＫＮＳＴＦＧＳＶＥＶＨＮＬＱＰＥＫＶＱＴＬＥＡＷＶＩＨＧＧＲＥＤＳＲＤＬＣＱＤＰＴＩＫＥＬＥＳＩＩＳＫＲＮＩＱＦＳＣＫＮＩＹＲＰＤＫＦＬＱＣＶＫＮＰＥＤＳＳＣＴＳＥＩ（配列番号９）
【0017】
ＣＤ３８は、ＩＩ型膜貫通糖タンパク質であり、抗体分泌細胞（例えば自己抗体分泌形質芽球及び形質細胞など）上に高度に発現する抗原の例である。ＣＤ３８によるとされる機能には、受容体介在接着及びシグナル伝達現象並びに（外部の）酵素活性の両方が含まれる。外酵素として、ＣＤ３８はＮＡＤ＋をサイクリックＡＤＰリボース（ｃＡＤＰＲ）及びＡＤＰＲを形成するための基質として用い、またニコチンアミド及びニコチン酸アデニンジヌクオチドリン酸（ＮＡＡＤＰ）を形成するための基質としても用いる。ｃＡＤＰＲ及びＮＡＡＤＰは、Ｃａ２＋動員用のセカンドメッセンジャーとして働くことが分かっている。ＮＡＤ＋をｃＡＤＰＲに変換することにより、ＣＤ３８は細胞外ＮＡＤ＋濃度を調節し、したがってＮＡＤ誘発性細胞死（ＮＣＩＤ）の調節により細胞生存を調節する。Ｃａ２＋によるシグナル伝達に加えて、ＣＤ３８シグナル伝達は、Ｔ及びＢ細胞上の抗原受容体複合体又は例えばＭＨＣ分子などの、他の種類の受容体複合体とのクロストークによっても起こり、このようにいくつかの細胞応答に関与するが、ＩｇＧ抗体の切り替え及び分泌にも関与する。
【0018】
用語「抗ＣＤ３８抗体」は、本明細書で用いる場合、最も広い意味での抗ＣＤ３８結合分子を含み、ＣＤ３８と特異的に結合する若しくはＣＤ３８の活性又は機能を阻害する、又は任意の他の方法によりＣＤ３８に対する治療効果を及ぼす任意の分子を含む。ＣＤ３８の機能性を妨害する又は抑制する任意の分子が含まれる。用語「抗ＣＤ３８抗体」としては、ＣＤ３８と特異的に結合する抗体、ＣＤ３８と結合する別のタンパク質足場、ＣＤ３８に特異的な核酸（アプタマーを含む）又はＣＤ３８に特異的な有機小分子が挙げられるが、これらに限定されない。
【0019】
ＣＤ３８に特異的な抗体は、例えば国際公開第１９９９６２５２６号パンフレット（Ｍａｙｏ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、国際公開第２００２０６３４７号パンフレット（Ｃｒｕｃｅｌｌ Ｈｏｌｌａｎｄ）、米国特許第２００２１６４７８８号（Ｊｏｎａｔｈａｎ Ｅｌｌｉｓ）、国際公開第２００５１０３０８３号パンフレット、国際公開第２００６１２５６４０号パンフレット、国際公開第２００７０４２３０９号パンフレット（ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ）、国際公開第２００６０９９８７５号パンフレット（Ｇｅｎｍａｂ）、及び国際公開第２００８０４７２４２号パンフレット（Ｓａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓ）．に記載される。ＣＤ３８に特異的な抗体及び他の作用薬の組み合わせは、例えば国際公開第２０００４０２６５号パンフレット（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、国際公開第２００６０９９８７５号パンフレット及び国際公開第２００８０３７２５７号パンフレット（Ｇｅｎｍａｂ）、並びに国際公開第２０１００６１３６０号パンフレット、国際公開第２０１００６１３５９号パンフレット、国際公開第２０１００６１３５８号パンフレット及び国際公開第２０１００６１３５７号パンフレット（Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）に記載される。ＣＤ３８標的抗体は、多発性骨髄腫で広く用いられる（Ｆｒｅｒｉｃｈｓ ＫＡら、２０１８， Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ；１４（３）：１９７－２０６で概説される）。抗ＣＤ３８抗体のさらなる使用は、例えば国際公開第２０１５１３０７３２号パンフレット、国際公開第２０１６０８９９６０号パンフレット、国際公開第２０１６２１０２２３号パンフレット（Ｊａｎｓｓｅｎ）、国際公開第２０１８００２１８１号パンフレット（ＵＭＣ Ｕｔｒｅｃｈｔ）、国際公開第２０１９０２０６４３号パンフレット（ＥＮＣＥＦＡ）、国際公開第２０２０１８５６７２号パンフレット（Ｃｅｄａｒｓ－Ｓｉｎａｉ）及び国際公開第２０２０１８７７１８号パンフレット（ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ）に記載され、その全体を参照により本明細書に援用される。
【0020】
好ましくは、本明細書で記載の使用するための抗ＣＤ３８抗体は、ＣＤ３８に特異的な抗体である。より好ましくは、抗ＣＤ３８抗体は、ＣＤ３８と特異的に結合し、特異的なＣＤ３８陽性Ｂ細胞、形質細胞、形質芽球及び他の任意のＣＤ３８陽性抗体分泌細胞を除去する、モノクローナル抗体などの、抗体又は抗体断片である。このような抗体は、マウス、ラット、キメラ、ヒト化又はヒト抗体など、いかなる種類であってよい。
【0021】
本明細書で用いる場合、「ヒト抗体」又は「ヒト抗体断片」は、フレームワーク及びＣＤＲ領域がヒト由来の配列である可変領域を有する抗体又は抗体断片である。抗体が定常領域を含む場合、定常領域もこのような配列に由来する。ヒト由来としては、例えばＫｎａｐｐｉｋら、（２０００）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２９６：５７－８６）に記載されるような、ヒト生殖系列配列若しくはヒト生殖系列配列の変異型、又はヒトフレームワーク配列解析に由来する共通フレームワーク配列を含む抗体が挙げられるが、これらに限定されない。ヒト抗体は、例えば合成ライブラリー又は遺伝子導入マウス（例えばゼノマウスなど）から分離することができる。抗体又は抗体断片の配列がヒトならば、抗体が物理的に由来する、分離された、又は作製された種に無関係に、抗体又は抗体断片はヒトである。
【0022】
例えばＣＤＲなどの免疫グロブリン可変領域の構造及び位置は、例えばＫａｂａｔのナンバリングスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａのナンバリングスキーム又はＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの組合せなどの周知のナンバリングスキームを用いて定義してよい（例えばＳｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（１９９１），ｅｄｓ）Ｋａｂａｔら、Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．２７３：９２７－９４８）；Ｋａｂａｔら、（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄｉｔ．，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ｎｏ．９１－３２４２Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；Ｃｈｏｔｈｉａら、（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７；Ｃｈｏｔｈｉａら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３、及びＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉら、（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７－９４８を参照する。）
【0023】
「ヒト化抗体」又は「ヒト化抗体断片」は、本明細書において抗体分子として定義され、この抗体分子はヒト由来の配列に由来する抗体定常領域を有し、抗体分子の抗体可変領域若しくは部分又はＣＤＲのみが別の種に由来する。例えばヒト化抗体は、ＣＤＲを移植した抗体であってよく、可変領域のＣＤＲは、非ヒト由来である一方、可変領域の１つ又は複数のフレームワークは、ヒト由来であり、定常領域（ある場合）はヒト由来である。
【0024】
用語「キメラ抗体」又は「キメラ抗体断片」は、本明細書において抗体分子として定義され、この抗体分子は、一方の種に見いだされる配列に由来する、又は対応する抗体定常領域及び別の種に由来する抗体可変領域を有する。好ましくは、抗体定常領域は、ヒトに見いだされる配列に由来する、又は対応し、抗体可変領域（例えばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ又はＦＲ領域）は、非ヒト動物、例えばマウス、ラット、ウサギ又はハムスターなどに見いだされる配列に由来する。
【0025】
用語「分離抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体又は抗体断片を実質的に含まない抗体又は抗体断片を指す。さらに、分離抗体又は抗体断片は、他の細胞物質及び／又は化学物質を実質的に含まなくてよい。したがって、いくつかの態様において、提供される抗体は、異なる特異性を有する抗体から分離されている分離抗体である。分離抗体は、モノクローナル抗体であってよい。分離抗体は、組換えモノクローナル抗体であってよい。標的のエピトープ、アイソフォーム又はバリアントと特異的に結合する分離抗体は、しかしながら、例えば他の種に由来するなどの（例えば種のホモログなど）他の関連抗原と交差反応性を有してよい。
【0026】
本明細書で用いられる用語「モノクローナル抗体」とは、単一の分子組成の抗体分子の製剤を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して固有の結合特異性及び親和性を有する固有の結合部位を示す。
【0027】
さらに、本明細書で用いる場合、「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書によりクラスＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、又はＩｇＤ（又はこれらの任意のサブクラス）に属するタンパク質として定義され、全ての従来既知の抗体又はこれらの機能的断片を含む。
【0028】
本明細書で用いる場合、フレーズ「抗体断片」とは、抗原と特異的に相互作用する（例えば結合、立体障害、空間分布の安定化などにより）能力を保持する抗体の１つ又は複数の部分を指す。結合断片の例としては、Ｆａｂフラグメント、すなわちＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１領域から成る一価のフラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、すなわちヒンジ領域でジスルフィド結合により連結された２個のＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメント、ＶＨ及びＣＨ１領域から成るＦｄフラグメント、抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨ領域から成るＦｖフラグメント、ＶＨ領域から成るｄＡｂフラグメント、及び分離した相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、Ｆｖフラグメントの２個の領域、すなわちＶＬ及びＶＨは、別々の遺伝子によりコードされているが、このＶＬ及びＶＨ領域のペアが一価の分子（単鎖フラグメント（ｓｃＦｖ）として知られる）を形成する単一のタンパク質鎖を作製できるようにする合成リンカーにより、組換え法を用いて結合することができる。このような単鎖抗体は、用語「抗体断片」に包含されるものとする。抗体断片を、シングルドメイン抗体、マキシボディ（ｍａｘｉｂｏｄｉｅｓ）、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｉｅｓ）、細胞内抗体、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）、トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｉｅｓ）、テトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｉｅｓ）、ｖ－ＮＡＲ及びｂｉｓ－ｓｃＦｖに組み込むこともできる。抗体断片は、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などのポリペプチドをベースとする骨格にグラフトすることができる。抗体断片は、相補的な軽鎖ポリペプチドと共に一対の抗原結合部位を形成する一対のタンデムＦｖセグメント（ＶＨ－ＣＨ１－ＶＨ－ＣＨ１）を含む１本鎖分子に組み込むことができる。
【0029】
本開示は、治療有効量の開示される抗ＣＤ３８抗体をこのような治療を必要とする対象に投与することを含む治療法を提供する。本明細書で用いる場合、「治療有効量」又は「有効量」とは、所望の生物学的応答を引き起こすのに必要とされる、ＣＤ３８に特異的な抗体の量を指す。本開示に従うと、治療有効量は、免疫複合体媒介疾患及びこの疾患に関連する症状を治療及び／又は予防するのに必要なＣＤ３８に特異的な抗体の量である。特定の個人に対する有効量は、治療する状態、患者の健康全般、投与方法、経路及び用量、並びに副作用の重症度などの要因に応じて変わってよい（Ｍａｙｎａｒｄら、（１９９６）Ａ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ＳＯＰｓ ｆｏｒ Ｇｏｏｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．；Ｄｅｎｔ（２００１）Ｇｏｏｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｇｏｏｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）。
【0030】
本明細書で用いる場合、用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」又は同種のものは、一時的又は永続的のいずれかで症状を軽減する、症状の原因を排除する、又は示された障害若しくは状態の症状の出現を防止若しくは遅らせることを意味する。これらの用語は、治療処置（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）及び予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）又は予防（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）策を指す。治療の目的は、望ましくない生理的変化又は傷害を防止若しくは遅らせる（和らげる）こと又は治療すべき疾患を治癒することである。有利な又は望ましい臨床結果としては、検出可能か検出不能化に関わらず、症状の軽減、疾患の範囲の減少、病状の安定化（すなわち悪化しないこと）、疾患進行の遅延又は緩徐化、病状の寛解又は緩和、及び寛解（部分又は全体に関わらず）．が挙げられる。「治療」はまた、対象が治療を受けなかった場合に予測される寿命と比較して、寿命を延長することを意味することもできる。治療を必要とする人には、状態若しくは傷害が既にある人並びに状態若しくは傷害にかかりやすい人又は状態若しくは傷害を予防する予定の人が含まれる。
【0031】
「予防すること（Ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」又は「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」とは、疾患又は障害にかかる又は発症するリスクを低減すること（すなわち疾患の臨床症状の少なくとも１つを、疾患発症性媒介物に曝露された又は疾患発症の前に疾患になりやすくてよい対象に発症させないこと）を指す。「予防」とは、疾患若しくは疾患の症状の発生を防ぐことを目標とする又は疾患若しくは疾患の症状の発生を遅らせる方法を指す。
【0032】
「投与した（Ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）」又は「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」としては、例えば静脈内、筋肉内、皮内又は皮下経路などの注射可能な形態により、又は例えば点鼻薬若しくは吸入用エアロゾルなど、又は経口摂取可能な溶液、カプセル若しくは錠剤などの粘膜経路により薬剤を投与することが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、投与は、注射可能な形態による。
【0033】
同時投与には、当業者にとって明らかなように、患者に２個以上の治療薬を同一の治療計画の一部として送達する任意の手段が含まれる。２個以上の作用薬を単一の製剤で、すなわち単一の医薬組成物として同時に投与してもよいが、このことは必須ではない。作用薬を異なる製剤で異なる時点で投与してもよい。併用療法の治療（例えば予防薬又は治療薬）を、同時に又は経時的に対象に投与することができる。併用療法の治療（例えば予防薬又は治療薬）を、周期的に投与することもできる。サイクリング療法は、第１の療法（例えば第１の予防薬又は治療薬）をある期間に投与し、その後第２の療法（例えば第２の予防薬又は治療薬）をある期間投与し、この連続投与、すなわちサイクルを繰り返すことを含む。これは、複数の療法の１つに対する抵抗性の発生を低下させて複数の療法の１つの副作用を避ける又は低減させる、及び／又は複数の療法の有効性を改善するためである。用語「同時に（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ）」又は「同時に（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｌｙ）」は、療法を正確に同時に投与することに限定されず、この用語はむしろ、本開示の抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を対象に、本開示の抗体を他の療法（複数含む）とある順序及びある時間間隔以外で投与した場合より利益が増えるよう本開示の抗体が他の療法（複数含む）とともに働くことができるようなある順序及びある時間間隔で投与することを意味する。
【0034】
「対象」又は「種」とは、本明細書で用いる場合、マウス又はラットなどのげっ歯類、及びカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）、アカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）又はヒト（Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ）などの霊長類を含む、全ての哺乳類を指す。好ましくは、対象は、霊長類であり、最も好ましくは、ヒトである。
【0035】
本明細書で用いる場合、用語「これを必要とする対象」又は同種のものは、臓器移植の抗体関連型拒絶の１つ又は複数の症状又は兆候を示すヒト又は非ヒト動物患者を意味する。好ましくは、対象は、霊長類であり、最も好ましくは、腎移植後に抗体関連型拒絶と診断されたヒト患者である。
【0036】
用語「抗体関連型拒絶反応「ＡＢＭＲ」）とは、臓器移植（Ｔｘ）後に起こることが多い、例えば微小環境の炎症及び形態学的損傷、（義務でない）移植内皮に沿った補体切断産物Ｃ４ｄの沈着、及びドナー抗原に対する抗体の検出（「ドナー特異的抗原、ＤＳＡ」））などの、Ｂａｎｆｆ分類に従った明確な診断基準を含む、確立した実体を指す。ＤＳＡは、（ｉ）ドナーのＨＬＡに対する抗体及び／又は（ｉｉ）非ＨＬＡ抗体であることができ、ＤＳＡは、レシピエント及びドナーの間で異なる多型抗原に対する同種抗体及び自己抗原又は自己抗体を認識する抗体の、少なくとも２種類の主要なカテゴリーに分類してよい。
【0037】
本明細書で用いる場合、特定の列挙された数値に関して用いられる用語「約」は、その値が列挙された値から１％以内分変わってよいことを意味する。例えば、本明細書で用いる場合、表現「約１００」には、９９及び１０１並びに間の全ての値（例えば９９．１、９９．２、９９．３、９９．４など）が含まれる。
【0038】
「薬学的に許容される」とは、連邦政府若しくは州政府の規制当局若しくは米国以外の国の対応する機関によって認可されたもの若しくは承認できるもの、又は動物に、より具体的にはヒトに使用するための米国薬局方又は他の一般的に認識されている薬局方に収載されているものを意味する。
【0039】
「薬学的に許容される溶媒」とは、抗体又は抗体断片を投与する希釈剤、アジュバント、賦形剤又は担体を指す。
【0040】
本明細書を通して、文脈上別段の解釈を必要としない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「有する（ｈａｖｅ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」並びに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などのこれらの単語それぞれの変形は、示された要素若しくは整数又は要素若しくは整数のグループを包含することを意味するが、他の任意の要素若しくは整数又は要素若しくは整数のグループを除外することを意味しない。
【0041】
「Ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ」は、「ＭＯＲ２０２」、「ＭＯＲ０３０８７」又は「ＭＯＲ３０８７」としても知られる、抗ＣＤ３８抗体である。この用語は、本開示において互換的に用いられる。ＭＯＲ２０２は、ＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する。
【0042】
ＫａｂａｔによるＭＯＲ２０２ ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列は、
ＳＹＹＭＮ（配列番号１）である。
ＳＹＹＭＮ（配列番号１）である。
【0043】
ＫａｂａｔによるＭＯＲ２０２ ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列は、
ＧＩＳＧＤＰＳＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）である。
ＧＩＳＧＤＰＳＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２）である。
【0044】
ＫａｂａｔによるＭＯＲ２０２ ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列は、
ＤＬＰＬＶＹＴＧＦＡＹ（配列番号３）である。
ＤＬＰＬＶＹＴＧＦＡＹ（配列番号３）である。
【0045】
ＫａｂａｔによるＭＯＲ２０２ ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列は、
ＳＧＤＮＬＲＨＹＹＶＹ（配列番号４）である。
ＳＧＤＮＬＲＨＹＹＶＹ（配列番号４）である。
【0046】
ＫａｂａｔによるＭＯＲ２０２ ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列は、
ＧＤＳＫＲＰＳ（配列番号５）である。
ＧＤＳＫＲＰＳ（配列番号５）である。
【0047】
ＭＯＲ２０２ ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列は、ＱＴＹＴＧＧＡＳＬ（配列番号６）である。
【0048】
ＭＯＲ２０２重鎖可変領域のアミノ酸配列は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＤＰＳＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＰＬＶＹＴＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７）である。
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＹＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＤＰＳＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＰＬＶＹＴＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７）である。
【0049】
ＭＯＲ２０２軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、
ＤＩＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＡＰＧＱＴＡＲＩＳＣＳＧＤＮＬＲＨＹＹＶＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＤＳＫＲＰＳＧＩＰＥＲＦＳＧＳＮＳＧＮＴＡＴＬＴＩＳＧＴＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＴＹＴＧＧＡＳＬＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱ（配列番号８）である。
ＤＩＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＡＰＧＱＴＡＲＩＳＣＳＧＤＮＬＲＨＹＹＶＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＤＳＫＲＰＳＧＩＰＥＲＦＳＧＳＮＳＧＮＴＡＴＬＴＩＳＧＴＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＴＹＴＧＧＡＳＬＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱ（配列番号８）である。
【0050】
ＭＯＲ２０２重鎖可変領域をコードするＤＮＡ配列は、
ＣＡＧＧＴＧＣＡＡＴＴＧＧＴＧＧＡＡＡＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＣＴＧＧＴＧＣＡＡＣＣＧＧＧＣＧＧＣＡＧＣＣＴＧＣＧＴＣＴＧＡＧＣＴＧＣＧＣＧＧＣＣＴＣＣＧＧＡＴＴＴＡＣＣＴＴＴＴＣＴＴＣＴＴＡＴＴＡＴＡＴＧＡＡＴＴＧＧＧＴＧＣＧＣＣＡＡＧＣＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＴＣＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＣＧＧＴＡＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＴＡＣＣＴＡＴＴＡＴＧＣＧＧＡＴＡＧＣＧＴＧＡＡＡＧＧＣＣＧＴＴＴＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＧＴＧＡＴＡＡＴＴＣＧＡＡＡＡＡＣＡＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＴＧＣＧＧＡＡＧＡＴＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＣＧＣＧＣＧＴＧＡＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＴＴＴＧＣＴＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＧＧＴＴＡＧＣＴＣＡ（配列番号１０）である。
ＣＡＧＧＴＧＣＡＡＴＴＧＧＴＧＧＡＡＡＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＣＴＧＧＴＧＣＡＡＣＣＧＧＧＣＧＧＣＡＧＣＣＴＧＣＧＴＣＴＧＡＧＣＴＧＣＧＣＧＧＣＣＴＣＣＧＧＡＴＴＴＡＣＣＴＴＴＴＣＴＴＣＴＴＡＴＴＡＴＡＴＧＡＡＴＴＧＧＧＴＧＣＧＣＣＡＡＧＣＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＴＣＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＣＧＧＴＡＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＴＡＣＣＴＡＴＴＡＴＧＣＧＧＡＴＡＧＣＧＴＧＡＡＡＧＧＣＣＧＴＴＴＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＧＴＧＡＴＡＡＴＴＣＧＡＡＡＡＡＣＡＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＴＧＣＧＧＡＡＧＡＴＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＣＧＣＧＣＧＴＧＡＴＣＴＴＣＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＴＴＴＧＣＴＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＧＧＴＴＡＧＣＴＣＡ（配列番号１０）である。
【0051】
ＭＯＲ２０２軽鎖可変領域をコードするＤＮＡ配列は、
ＧＡＴＡＴＣＧＡＡＣＴＧＡＣＣＣＡＧＣＣＧＣＣＴＴＣＡＧＴＧＡＧＣＧＴＴＧＣＡＣＣＡＧＧＴＣＡＧＡＣＣＧＣＧＣＧＴＡＴＣＴＣＧＴＧＴＡＧＣＧＧＣＧＡＴＡＡＴＣＴＴＣＧＴＣＡＴＴＡＴＴＡＴＧＴＴＴＡＴＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＣＧＧＧＣＡＧＧＣＧＣＣＡＧＴＴＣＴＴＧＴＧＡＴＴＴＡＴＧＧＴＧＡＴＴＣＴＡＡＧＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＧＣＡＴＣＣＣＧＧＡＡＣＧＣＴＴＴＡＧＣＧＧＡＴＣＣＡＡＣＡＧＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＧＡＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＴＡＧＣＧＧＣＡＣＴＣＡＧＧＣＧＧＡＡＧＡＣＧＡＡＧＣＧＧＡＴＴＡＴＴＡＴＴＧＣＣＡＧＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＴＣＴＣＴＴＧＴＧＴＴＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＧＡＡＧＴＴＡＡＣＣＧＴＴＣＴＴＧＧＣＣＡＧ（配列番号１１）である。
ＧＡＴＡＴＣＧＡＡＣＴＧＡＣＣＣＡＧＣＣＧＣＣＴＴＣＡＧＴＧＡＧＣＧＴＴＧＣＡＣＣＡＧＧＴＣＡＧＡＣＣＧＣＧＣＧＴＡＴＣＴＣＧＴＧＴＡＧＣＧＧＣＧＡＴＡＡＴＣＴＴＣＧＴＣＡＴＴＡＴＴＡＴＧＴＴＴＡＴＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＣＧＧＧＣＡＧＧＣＧＣＣＡＧＴＴＣＴＴＧＴＧＡＴＴＴＡＴＧＧＴＧＡＴＴＣＴＡＡＧＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＧＣＡＴＣＣＣＧＧＡＡＣＧＣＴＴＴＡＧＣＧＧＡＴＣＣＡＡＣＡＧＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＧＡＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＴＡＧＣＧＧＣＡＣＴＣＡＧＧＣＧＧＡＡＧＡＣＧＡＡＧＣＧＧＡＴＴＡＴＴＡＴＴＧＣＣＡＧＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＴＣＴＣＴＴＧＴＧＴＴＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＧＡＡＧＴＴＡＡＣＣＧＴＴＣＴＴＧＧＣＣＡＧ（配列番号１１）である。
【0052】
実施形態
抗体
本開示の特定の実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、国際公開第２００７０４２３０９号パンフレットに記載のＣＤ３８特異抗体のアミノ酸配列のいずれかを含む、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、重鎖、軽鎖及び／又はＣＤＲを含む。
抗体
本開示の特定の実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、国際公開第２００７０４２３０９号パンフレットに記載のＣＤ３８特異抗体のアミノ酸配列のいずれかを含む、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、重鎖、軽鎖及び／又はＣＤＲを含む。
【0053】
ある実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域を含む。
【0054】
１つの実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、配列番号１のＨＣＤＲ１領域、配列番号２のＨＣＤＲ２領域、配列番号３のＨＣＤＲ３領域、配列番号４のＬＣＤＲ１領域、配列番号５のＬＣＤＲ２領域及び配列番号６のＬＣＤＲ３領域を含む。
【0055】
ある実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、配列番号７の重鎖可変領域及び配列番号８の軽鎖可変領域を含む。
【0056】
別の実施形態において、本開示による使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片は、配列番号７の重鎖可変領域及び配列番号８の軽鎖可変領域又は配列番号７の重鎖可変領域に対して及び配列番号８の軽鎖可変領域に対して少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％又は少なくとも９５％の同一性を有する重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。
【0057】
配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む本開示による使用するための例示的な抗体又は抗体断片は、ＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）として知られているヒト抗ＣＤ３８抗体である。
【0058】
１つの実施形態において、本開示は、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片をコードする１つの核酸配列又は複数の核酸配列を含む核酸組成物であって、この抗体又は抗体断片は、配列番号１のＨＣＤＲ１領域、配列番号２のＨＣＤＲ２領域、配列番号３のＨＣＤＲ３領域、配列番号４のＬＣＤＲ１領域、配列番号５のＬＣＤＲ２領域、及び配列番号６のＬＣＤＲ３領域を含む、核酸組成物に関する。
【0059】
別の実施形態において、本開示は、本開示による使用するための分離したモノクローナル抗体又はその断片をコードする核酸であって、この核酸は、配列番号１０のＶＨ及び配列番号１１のＶＬを含む、核酸に関する。
【0060】
１つの実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な開示した抗体又は抗体断片は、モノクローナル抗体又は抗体断片である。
【0061】
１つの実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な開示した抗体又は抗体断片は、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体である。
【0062】
特定の実施形態において、本開示による使用するためのＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、分離抗体又は抗体断片である。
【0063】
別の実施形態において、本開示による使用するための抗体又は抗体断片は、組換え抗体又は抗体断片である。
【0064】
さらなる実施形態において、本開示による使用するための抗体又は抗体断片は、組換えヒト抗体又は抗体断片である。
【0065】
さらなる実施形態において、本開示による使用するための組換えヒト抗体又は抗体断片は、分離した組換えヒト抗体又は抗体断片である。
【0066】
さらなる実施形態において、本開示による使用するための組換えヒト抗体若しくは抗体断片又は分離した組換えヒト抗体又は抗体断片は、モノクローナルである。
【0067】
１つの実施形態において、本開示による使用するための開示した抗体又は抗体断片は、ＩｇＧアイソタイプである。特定の実施形態において、この抗体は、ＩｇＧ１である。
【0068】
本発明の特定の態様において、本開示による使用するための抗ＣＤ３８抗体は、ＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）である。
【0069】
ある実施形態において、本開示は、ＣＤ３８に特異的なｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（ＭＯＲ２０２）又はその断片及び本開示により使用するための薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【0070】
特定の実施形態において、ＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は、ヒトＣＤ３８に特異的に結合する分離したモノクローナル抗体又は抗体断片である。
【0071】
医薬組成物
医薬品として使用する場合、ＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片を典型的には医薬組成物で投与する。本開示の組成物は好ましくは、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（ＭＯＲ２０２）及び薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物である。
医薬品として使用する場合、ＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片を典型的には医薬組成物で投与する。本開示の組成物は好ましくは、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（ＭＯＲ２０２）及び薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物である。
【0072】
薬学的に許容される担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄又は上皮投与（例えば注射又は点滴による）に適するべきである。
【0073】
薬学的な担体は、組成物を強化する若しくは安定化する、又は組成物の調製を促進する。薬学的に許容される担体としては、生理学的に適合した溶媒、分散媒、コーティング、抗菌薬及び抗真菌薬、等張化剤及び吸収遅延剤、並びに同種のものが挙げられる。多くの場合において、組成物に例えば糖、マンニトール又はソルビトールなどの多価アルコール、及び塩化ナトリウムなどの等張化剤を含むことが好ましい。
【0074】
本開示の医薬組成物は、当該技術分野において公知の様々な経路により投与することができる。本開示の抗体又は抗体断片の選択された投与経路としては、例えば注射又は点滴による、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄又は他の非経口投与経路が挙げられる。
【0075】
ＣＤ３８に特異的な抗体又は抗体断片は好ましくは、注射用組成物として製剤化される。好ましい態様において、本開示の抗ＣＤ３８抗体は、静脈内に投与される。他の態様において、本開示の抗ＣＤ３８抗体は、皮下に、関節内に又は脊髄内に投与される。
【0076】
本開示の重要な態様は、ＣＤ３８発現抗体分泌細胞（例えば形質芽球、形質細胞など）をＡＤＣＣ及びＡＤＣＰにより死滅させることを媒介することができる医薬組成物である。
【0077】
治療方法
１つの実施形態において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片、又は抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片を含む医薬組成物を提供する。
１つの実施形態において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片、又は抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片を含む医薬組成物を提供する。
【0078】
特定の実施形態において、移植臓器は、腎臓、心臓、肝臓、肺、膵臓、胃、皮膚及び腸の１つ又は複数である。
【0079】
１つの実施形態において、腎移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の腎移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片、又は抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片を含む医薬組成物を提供する。
【0080】
特定の実施形態において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、配列番号１のＨＣＤＲ１領域、配列番号２のＨＣＤＲ２領域、配列番号３のＨＣＤＲ３領域、配列番号４のＬＣＤＲ１領域、配列番号５のＬＣＤＲ２領域、及び配列番号６のＬＣＤＲ３領域を含む抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を提供する。
【0081】
別の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するための、配列番号７の重鎖可変領域及び配列番号８の軽鎖可変領域を含む、抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を提供する。
【0082】
特定の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することを必要とする対象の臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の重症度を治療、抑制及び／又は低減することに使用するためのＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）を提供する。
【0083】
１つの実施形態において、本開示は、臓器移植を受けた後の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応がある対象におけるＣＤ３８発現抗体分泌細胞（好ましくは形質細胞）を枯渇させるのに使用するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を提供する。
【0084】
好ましい実施形態において、本開示は、臓器移植を受けた後の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応がある対象における循環抗ＨＬＡ抗体及び／又は抗非ＨＬＡ抗体を低減させるのに使用するための抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）を提供する。
【0085】
別の実施形態において、本開示は、臓器移植を受けた後の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応がある対象における移植臓器中の抗ＨＬＡ抗体及び／又は抗非ＨＬＡ抗体の沈着を低減させるのに使用するための抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）を提供する。
【0086】
さらなる態様において、本開示は、腎移植を受けた後の対象におけるＡＢＭＲの症状を低減するのに使用するための、抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２など）を活性成分として含む治療薬であって、この症状は、（ｉ）血清クレアチニン及び推算糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）によって測定される腎機能の悪化、（ｉｉ）ドナー特異的抗原の存在、及び／又は（ｉｉｉ）腎臓の毛細血管炎、炎症及び補体（Ｃ４ｄ）沈着から選択される、治療薬を提供する。
【0087】
別の態様において、本開示は、腎移植を受けた後の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応がある対象におけるＣＫＤ－ｅｐｉ式に基づく糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）によって示される腎機能を回復させる（ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ）、回復させる（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）又は正常化するのに使用するための、抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）を含む、予防及び／又は治療薬を提供する。
【0088】
さらなる態様において、本開示は、臓器移植のＡＢＭＲ反応を治療することを必要とする対象の臓器移植のＡＢＭＲ反応を治療することに使用するための抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）であって、この抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）は、少なくとも２回、少なくとも５回、少なくとも７回、又は少なくとも９回投与される、抗ＣＤ３８抗体を提供する。
【0089】
別の態様において、本開示は、臓器移植のＡＢＭＲ反応を治療することを必要とする対象の臓器移植のＡＢＭＲ反応を治療することに使用するための抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）であって、この抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）は、２回、５回、７回又は９回投与される、抗ＣＤ３８抗体を提供する。
【0090】
具体的な実施形態において、投与量は、８ｍｇ／ｋｇ以上である。特定の実施形態において、投与量は、１６ｍｇ／ｋｇである。
【0091】
別の実施形態において、本開示は、臓器移植のＡＢＭＲを治療することを必要とする対象の臓器移植のＡＢＭＲを治療することに使用するための抗ＣＤ３８抗体であって、この抗ＣＤ３８抗体は、サイクル１（Ｃ１）では２週間毎、サイクル２～６では４週間毎に投与される（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ／プラセボを０日目及び１４日目（サイクル１）、その後は４週目、８週目、１２週目、１６週目、及び２０週目に４週間間隔で（サイクル２～６）の投与）、抗ＣＤ３８抗体を提供する。
【0092】
別の実施形態において、本開示は、ＡＢＭＲの治療に使用するための抗ＣＤ３８抗体であって、この抗ＣＤ３８抗体は、静脈内に投与される、抗ＣＤ３８抗体を提供する。
【0093】
別の実施形態において、本開示は、ＡＢＭＲの治療に使用するための抗ＣＤ３８抗体であって、この抗体は、２時間にわたり静脈内に投与される、抗ＣＤ３８抗体を提供する。
【0094】
１つの実施形態において、抗ＣＤ３８抗体（例えばＭＯＲ２０２）は、臓器移植の前、同時に、及び／又は後に投与される。
【0095】
別の実施形態において、移植を必要とする個人に、移植の前、同時に、及び／又は後に有効量のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを投与することによるこの個人を治療する方法。
【0096】
別の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象における臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防のための薬物の調製における抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片の使用を提供する。
【0097】
他の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象における臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防のための薬物の調製における、配列番号１のＨＣＤＲ１領域、配列番号２のＨＣＤＲ２領域、配列番号３のＨＣＤＲ３領域、配列番号４のＬＣＤＲ１領域、配列番号５のＬＣＤＲ２領域及び配列番号６のＬＣＤＲ３領域を含む抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片の使用を提供する。
【0098】
他の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象における臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防のための薬物の調製における、配列番号７の重鎖可変領域及び配列番号８の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片の使用を提供する。
【0099】
さらなる態様において、本開示は、腎移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象における腎移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防のための薬物の調製におけるＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）の使用を提供する。
【0100】
別の態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象における臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防のための薬物の調製における、別の治療薬と併せた、ＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）又はＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）を含む医薬組成物の使用を提供する。
【0101】
いくつかの実施形態において、ＡＢＭＲの治療及び／又は予防を必要とする対象におけるＡＢＭＲの治療及び／又は予防のための、ステロイドと併せたＭＯＲ２０２の使用を提供する。他の態様において、ＭＯＲ２０２を、ＡＢＭＲの治療及び／又は予防に使用するためのプロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ又はカルフィルゾミブ）と併せて投与する。
【0102】
１つの態様において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防を必要とする対象に抗ＣＤ３８抗体を投与することを含む、この対象における臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の治療及び／又は予防方法を提供する。特定の実施形態において、この抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応は、移植腎に向けられる。
【0103】
いくつかの実施形態において、本開示は、臓器移植の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応を患う対象の予防及び／又は治療方法であって、この対象は、副腎皮質ステロイド若しくはカルシニューリン阻害薬又はＢ細胞枯渇療法（例えばリツキシマブ又は任意の他の抗ＣＤ２０抗体、若しくは抗ＢＡＦＦ抗体による）を含む、他の免疫抑制剤療法による治療に対して抵抗性であり、この方法は、有効量の抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片の投与を含む、方法を提供する。
【0104】
１つの態様において、本開示は、臓器移植を受けた後の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応になりやすい（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ）又はかかりやすい（ｖｕｌｎｅｒａｂｌｅ）患者において予防又は治療効果を達成するための抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片の使用方法を提供する。
【0105】
別の態様において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の症状の発生頻度を低減する、抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の症状を寛解させる、抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の症状を抑制する、抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の症状を緩和する、及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応及び／又は抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応の症状の発症、発病又は悪化を遅らせる方法であって、この方法は、この対象に有効量の抗ＣＤ３８抗体を投与することを含む、方法を提供する。具体的には、この抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応は、腎移植後である。
【0106】
好ましい実施形態において、本開示は、抗体関連型拒絶（ＡＢＭＲ）反応と関連するＤＳＡレベルが高い患者の治療方法を提供する。
【0107】
他の態様において、本開示は、ドナー特異的抗原に存在によって起こる疾患の治療及び／又は予防方法を提供する。さらに他の態様において、本開示は、抗ドナーＨＬＡ抗体の存在と関連する症状の治療及び／又は予防方法を提供する。さらなる態様において、本開示は、ＨＬＡに向けられていない抗ドナー抗体の存在と関連する症状の治療及び／又は予防方法を提供する。
【0108】
他の実施形態において、本開示は、抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）を患う対象における炎症及びＣ４ｄ補体沈着を低減する方法であって、この方法は、有効量の抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片又は本明細書に記載の１つ又は複数の医薬組成物の投与を含む、方法を提供する。例えば、本明細書で提供される方法は、抗ＨＬＡ抗体のレベルが高い患者に抗ＣＤ３８抗体を投与することを含む。他の態様において、本明細書で提供される方法は、移植した臓器中のＣ４ｄ補体沈着のレベルが高い患者に抗ＣＤ３８抗体を投与することを含む。
【0109】
１つの実施形態において、抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）を患う対象の血清中の抗ＨＬＡレベルの低減（変化）は、抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片、又は本明細書に記載の１つ又は複数の医薬組成物を投与した後、ベースラインと比較して少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、又は少なくとも５０％である。
【0110】
別の態様において、本開示は、抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の個人の腎機能の低下を予防する方法であって、この方法は、有効量の抗ＣＤ３８抗体若しくは抗体断片、又は本明細書に記載の１つ又は複数の医薬組成物の投与を含む、方法を提供する。
【0111】
さらなる実施形態において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の治療方法であって、この対象に、ＣＤ３８発現細胞と結合し、このようなＣＤ３８発現細胞を枯渇させる抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含む、方法に関する。
【0112】
好ましい実施形態において、本開示は、対象のＡＢＭＲの治療方法であって、この対象に、ＣＤ３８発現抗体分泌細胞と結合し、この抗体分泌細胞を枯渇させる一方、制御性Ｔ細胞及び／又はＢ細胞集団を残す抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含む、方法に関する。
【0113】
別の実施形態において、本開示は、対象のＡＢＭＲの治療方法であって、この対象に、ＣＤ３８発現抗体分泌細胞と結合し、この抗体分泌細胞を枯渇させるが、制御性Ｔ細胞はあまり枯渇させない抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含む、方法に関する。
【0114】
特定の好ましい実施形態において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の治療方法であって、この対象に、ＣＤ３８発現抗体分泌細胞と結合し、このようなＣＤ３８発現抗体分泌細胞を枯渇させる抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、この抗体は、ＮＫ細胞より抗体分泌細胞に対して、有意に高い特異的な細胞死滅を示す、方法に関する。
【0115】
１つの実施形態において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の治療方法であって、この対象に、ＣＤ３８発現抗体分泌細胞と結合し、このようなＣＤ３８発現抗体分泌細胞を枯渇させる抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体分泌細胞の特異的な細胞死滅は、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％であり、抗体非分泌ＮＫ細胞の特異的な細胞死滅は、標準的なＡＤＣＣアッセイで決定して、３０％未満、２５％未満、２０％未満、又は１５％未満である、方法に関する。
【0116】
１つの実施形態において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の治療方法であって、この対象に抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、この対象は、１つ又は複数の免疫グロブリン投与（ＩＶＩＧ）、リツキシマブ投与及び血漿交換（ＰＬＥＸ）を含む標準治療を受け、標準治療に対する対象の応答は無効である、方法に関する。
【0117】
別の実施形態において、治療予定の対象は、１つ又は複数のエクリズマブ、サイモグロブリン、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、バシリキシマブ、ミコフェノール酸モフェチル、タクロリムス及び副腎皮質ステロイドでの免疫抑制療法に対してさらに抵抗性である又は獲得抵抗性を有する。
【0118】
別の実施形態において、本開示は、対象の抗体関連型拒絶反応（ＡＢＭＲ）の治療方法であって、この対象に、抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、この対象は、事前にいかなる標準治療も受けたことがない、方法に関する。
【0119】
さらなる実施形態において、本開示は、対象のＡＢＭＲの治療方法であって、この対象に、抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、この抗ＣＤ３８抗体を投与しても制御性ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ１２７－Ｔ細胞の絶対数を有意に変化させない、方法に関する。
【0120】
別の実施形態において、本開示は、対象のＡＢＭＲの治療方法であって、この対象に、抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、抗体投与後にＣＤ８＋Ｔ細胞／Ｔｒｅｇの比は有意に増加しない、方法に関する。
【0121】
別の実施形態において、本開示は、対象のＡＢＭＲの治療方法であって、この対象に、抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含み、この抗ＣＤ３８抗体又は抗体断片を投与するとクラスＩ及び／又はクラスＩＩ抗ＨＬＡ抗体レベルが減少する、方法に関する。抗ＨＬＡクラスＩ抗体は、抗ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、及び－Ｃを含む。抗ＨＬＡクラスＩＩ抗体は、抗ＨＬＡ－ＤＲ、－ＤＱ（例えば抗－ＤＱ５）、及び－ＤＰを含む。
【0122】
好ましい実施形態において、ＡＢＭＲの治療方法は、ヒト対象におけるものであり、ＭＯＲ２０２（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ）を含む医薬組成物の投与を含み、この投与によりクラスＩＩ抗ＨＬＡ抗体レベル、好ましくは抗ＤＱ５抗体レベルが減少する。好ましい態様において、９回のＭＯＲ２０２を投与する。
【実施例】
【0123】
実施例１：遅発型抗体関連型移植腎拒絶反応におけるＦｅｌｚａｒｔａｍａｂ
１．１ 研究デザイン
本研究は、遅発型活動性又は慢性活動性ＡＢＭＲの腎移植レシピエントにおける完全ヒト抗ＣＤ３８モノクローナル抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの安全性、忍容性、薬物動態、薬力学及び有効性を評価するようデザインされた研究者主導パイロット治験である。
１．１ 研究デザイン
本研究は、遅発型活動性又は慢性活動性ＡＢＭＲの腎移植レシピエントにおける完全ヒト抗ＣＤ３８モノクローナル抗体ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの安全性、忍容性、薬物動態、薬力学及び有効性を評価するようデザインされた研究者主導パイロット治験である。
【0124】
本試験を、無作為化、対照、二重盲検第２相パイロット試験としてデザインする。プライマリーエンドポイントは、安全性及び忍容性である。本試験の単純化したフローチャートを図２に示す。
【0125】
１．２ 調査母集団
循環抗ＨＬＡ ＤＳＡがあり、生検適応（指標生検：移植後ＤＳＡ結果が陽性で移植片機能及び／又は蛋白尿がゆっくり悪化した患者に対して臨床ルーチンで実行される）において遅発型（移植後１８０日以降）活動性ＡＢＭＲ（Ｂａｎｆｆ ２０１９スキームに従って）の生検特徴がある約２０人の腎移植レシピエントを含める。他の主要な組み入れ基準は、年齢が１８歳超、移植後１８０日以降も機能する移植片及び推算ＧＦＲ（ＣＫＤ－ＥＰＩ式によるｅＧＦＲ）≧２０ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２組み入れ及び除外基準を表１に詳述する。
循環抗ＨＬＡ ＤＳＡがあり、生検適応（指標生検：移植後ＤＳＡ結果が陽性で移植片機能及び／又は蛋白尿がゆっくり悪化した患者に対して臨床ルーチンで実行される）において遅発型（移植後１８０日以降）活動性ＡＢＭＲ（Ｂａｎｆｆ ２０１９スキームに従って）の生検特徴がある約２０人の腎移植レシピエントを含める。他の主要な組み入れ基準は、年齢が１８歳超、移植後１８０日以降も機能する移植片及び推算ＧＦＲ（ＣＫＤ－ＥＰＩ式によるｅＧＦＲ）≧２０ｍｌ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２組み入れ及び除外基準を表１に詳述する。
【0126】
【0127】
１．３ 投薬
対象を、ウェブベースの無作為化プラットフォーム（ｗｗｗ．ｍｅｄｕｎｉｗｉｅｎ．ａｃ．ａｔ／ｒａｎｄｏｍｉｚｅｒ）を用いてｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（１６ｍｇ／ｋｇ、静脈内投与）又はプラセボのいずれかを受けるよう１：１で無作為化する。自己免疫疾患の進行中の第Ｉｂ／ＩＩａ相臨床試験（膜性腎症、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ， ＮＣＴ０４１４５４４０）でのＰＫモデル化の結果に基づいて、患者にｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを６か月間、点滴として投与する。移植患者は複数の化合物による免疫抑制ベースライン治療中なので（膜性腎症の患者とは対照的に）、したがって感染症のリスクが高く、第１サイクルの投薬間隔の拡大（毎週の代わりに２週間毎）を計画する。９回の代わりに、７回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを、各々２８日の６治療サイクルにわたり１６ｍｇ／ｋｇで静脈内投与する。投薬は、サイクル１（Ｃ１）では２週間毎でサイクル２～６では４週毎（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ／プラセボを０日目及び１４日目に（サイクル１）、その後４、８、１２、１６、及び２０週目に４週間隔で（サイクル２～６）投与）に発生する。
対象を、ウェブベースの無作為化プラットフォーム（ｗｗｗ．ｍｅｄｕｎｉｗｉｅｎ．ａｃ．ａｔ／ｒａｎｄｏｍｉｚｅｒ）を用いてｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（１６ｍｇ／ｋｇ、静脈内投与）又はプラセボのいずれかを受けるよう１：１で無作為化する。自己免疫疾患の進行中の第Ｉｂ／ＩＩａ相臨床試験（膜性腎症、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ， ＮＣＴ０４１４５４４０）でのＰＫモデル化の結果に基づいて、患者にｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを６か月間、点滴として投与する。移植患者は複数の化合物による免疫抑制ベースライン治療中なので（膜性腎症の患者とは対照的に）、したがって感染症のリスクが高く、第１サイクルの投薬間隔の拡大（毎週の代わりに２週間毎）を計画する。９回の代わりに、７回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを、各々２８日の６治療サイクルにわたり１６ｍｇ／ｋｇで静脈内投与する。投薬は、サイクル１（Ｃ１）では２週間毎でサイクル２～６では４週毎（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ／プラセボを０日目及び１４日目に（サイクル１）、その後４、８、１２、１６、及び２０週目に４週間隔で（サイクル２～６）投与）に発生する。
【0128】
好ましい状況においては、対象は、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ（１６ｍｇ／ｋｇ、静脈内投与）又はプラセボ（０．９％生理食塩水）（１：１ 無作為化）のいずれかを６か月間（ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ／プラセボを０、７、１４、２１日目（サイクル１）その後４、８、１２、１６、及び２０週目に４週間隔で（サイクル２～６）投与）受けるよう無作為化される。６か月（２４週）及び１２か月（５２週）後、研究参加者は経過観察移植生検を受ける。本治験の主要な目的は、１２か月間にわたり６か月の治療過程の安全性、薬物動態及び薬力学（末梢血ＰＣ及びＮＫ細胞の枯渇）を評価することである。
【0129】
したがって、点滴として９回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ又はプラセボを、各々２８日の６治療サイクルにわたり投与する。投薬は、サイクル１では毎週、サイクル２～６では４週毎に発生する。
【0130】
Ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂは、４．８ｍＬ水で再構成後、注入用に１０ｍＭヒスチジン、２６０ｍＭスクロース、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ６．０中６５ｍｇ／ｍＬで供給される（１個のバイアルには３２５ｍｇ ＭＯＲ２０２が含まれる）。Ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂを、２５０ｍＬの０．９％塩化ナトリウム溶液に希釈後投与する（最終濃度は１～２０ｍｇ／ｍＬにするべきである）。プラセボ（０．９％塩化ナトリウム）を、点滴用の２５０ｍＬの通常の生理食塩水で投与する。調製した注入液を２４時間までは２℃～８℃で、２４時間のうち４時間までは室温、１５℃～２５℃で保管してよい。投与前に、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ／プラセボ注入液は、使用前３０～６０分間非冷蔵で保管することにより室温に到達する必要がある。
【0131】
最初の２回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの点滴はゆっくりで（約９０分）、インフュージョンリアクションが起こらなかった場合、その後の点滴では点滴時間を１時間以下（最小３０分）に短縮してもよい。
【0132】
６か月（２４週）及び１２か月（５２週）後、研究参加者は経過観察移植生検を受ける。無作為化は、ＡＢＭＲカテゴリー（活動性ＡＢＭＲ対慢性／活動性ＡＢＭＲ）に従い、２個の群の間でこれらの２個の組織タイプの患者が確実に釣り合うようにする。本研究は、バイアスを最小にするために、二重盲検治験としてデザインされる。
【0133】
前投薬
インフュージョンリアクションを防ぐために、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ群に割り当てられた患者は、最初の２回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ点滴（０日目、１４日目）の前に静脈内前投薬を受ける。プラセボ群の患者は、プラセボ（０．９％ＮａＣｌ溶液）を受ける。前投薬を、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ点滴の３０分前に投与し、それぞれジフェンヒドラミン（３０ｍｇ）、パラセタモール（１０００ｍｇ）、及びプレドニゾロン（１００ｍｇ）から成る（各々１００ｍＬ体積中）。プラセボ群では、患者は、３×１００ｍＬ ＮａＣｌ０．９％を受ける。
インフュージョンリアクションを防ぐために、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ群に割り当てられた患者は、最初の２回のｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ点滴（０日目、１４日目）の前に静脈内前投薬を受ける。プラセボ群の患者は、プラセボ（０．９％ＮａＣｌ溶液）を受ける。前投薬を、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ点滴の３０分前に投与し、それぞれジフェンヒドラミン（３０ｍｇ）、パラセタモール（１０００ｍｇ）、及びプレドニゾロン（１００ｍｇ）から成る（各々１００ｍＬ体積中）。プラセボ群では、患者は、３×１００ｍＬ ＮａＣｌ０．９％を受ける。
【0134】
本研究中、以下の薬物を禁止する。
リツキシマブ、エクリズマブ、プロテアソーム阻害剤、ＩＶＩＧ、血漿交換又は免疫吸着、ダラツムマブ（Ｄａｒｃａｌｅｘ（登録商標））若しくはトシリズマブ（ＲｏＡｃｔｅｍｒａ（登録商標）／Ａｃｔｅｍｒａ（登録商標））などの市販のＣＤ３８又は抗ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒモノクローナル抗体薬を含む他の治験薬／治療。
リツキシマブ、エクリズマブ、プロテアソーム阻害剤、ＩＶＩＧ、血漿交換又は免疫吸着、ダラツムマブ（Ｄａｒｃａｌｅｘ（登録商標））若しくはトシリズマブ（ＲｏＡｃｔｅｍｒａ（登録商標）／Ａｃｔｅｍｒａ（登録商標））などの市販のＣＤ３８又は抗ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒモノクローナル抗体薬を含む他の治験薬／治療。
【0135】
本研究中、以下の併用薬物は容認される。
カルシニューリン阻害薬（ＣＮＩ、タクロリムス又はシクロスポリンＡ）、哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）阻害薬（エベロリムス又はラパマイシン）、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）／ミコフェノール酸ナトリウム、低用量副腎皮質ステロイドでの長期治療（プレドニゾロン５ｍｇ／日）。
カルシニューリン阻害薬（ＣＮＩ、タクロリムス又はシクロスポリンＡ）、哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）阻害薬（エベロリムス又はラパマイシン）、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）／ミコフェノール酸ナトリウム、低用量副腎皮質ステロイドでの長期治療（プレドニゾロン５ｍｇ／日）。
【0136】
ベースライン免疫抑制：遅発型ＡＢＭＲと診断されると、カルシニューリン阻害薬［タクロリムス若しくはシクロスポリンＡ（ＣｙＡ）］又はｍＴＯＲ阻害薬（エベロリムス若しくはラパマイシン）を用いるが、アザチオプリン若しくはミコフェノール酸（ＭＰＡ）を用いない治療の全てのレシピエントは、免疫抑制の低下を避けるために、ミコフェノール酸モフェチル（又は代わりに、腸溶性ミコフェノール酸（ＥＣ－ＭＰＡ）を、最初は１日当たり２×５００ｍｇ（又はそれぞれ２×３６０ｍｇ）の投与量で受け、耐容性を示した場合段階的に１日当たり２×１０００ｍｇ（又は２×７２０ｍｇ）に増やす。タクロリムスは、５～１０ｎｇ／ｍＬの、ＣｙＡは、８０－１２０ｎｇ／ｍＬの標的トラフレベルに達するよう調整される。ステロイド薬をやめさせたレシピエントは、低用量のプレドニゾロンを受ける（５ｍｇ／日）。
【0137】
１．４ 有効性評価
本治験の主要な目的は、１２か月間にわたり６か月の治療過程の安全性、薬物動態及び薬力学（末梢血ＰＣ及びＮＫ細胞の枯渇）を評価することである。さらに有効性についてのデータ（拒絶の悪化／活性、血液バイオマーカー）及び移植片機能不全の臨床的進行を反映するパラメーターと治療との潜在的な関連性（例えばＩｒｉｓｈ，Ｗら、２０２０， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎに記載される腎機能の経過又は Ｌｏｕｐｙ，Ａら、ＢＭＪ，３６６：ｌ４９２３，２０１９に記載されるｉＢＯＸスコアなど）を提供する。
本治験の主要な目的は、１２か月間にわたり６か月の治療過程の安全性、薬物動態及び薬力学（末梢血ＰＣ及びＮＫ細胞の枯渇）を評価することである。さらに有効性についてのデータ（拒絶の悪化／活性、血液バイオマーカー）及び移植片機能不全の臨床的進行を反映するパラメーターと治療との潜在的な関連性（例えばＩｒｉｓｈ，Ｗら、２０２０， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎに記載される腎機能の経過又は Ｌｏｕｐｙ，Ａら、ＢＭＪ，３６６：ｌ４９２３，２０１９に記載されるｉＢＯＸスコアなど）を提供する。
【0138】
【0139】
主要なエンドポイント（表２を参照する）には、安全性及び忍容性、ＤＳＡの経過（並びに平行して総Ｉｇ及びＩｇＧサブクラスレベル）、ＰＣ、ＮＫ細胞、並びにＴ及びＢ細胞亜集団の末梢血中の数の動態（ＦＡＣＳによって評価した）、並びに拒絶のバイオマーカー（血液及び尿中のＣＸＣＬ９及びＣＸＣＬ１０）並びに全体的免疫抑制（トルクテノウイルス負荷量）が含まれる。さらに、６か月及び１２か月の腎移植生検により、６か月及び１２か月での生検における病原性に基づく転写物（ＰＢＴ）スコア（細胞障害性Ｔ細胞浸潤、γ－インターフェロン効果、ナチュラルキラー細胞負荷、上皮細胞損傷）を含む、形態学的（拒絶及び慢性傷害、補体活性化／沈着を検出するための免疫組織化学及びＮＫ細胞を含む細胞性浸潤物の特徴づけのＢａｎｆｆ基準）及び分子的拒絶基準（分子状ＡＢＭＲスコア、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（登録商標）診断システムを用いたマイクロアレイ解析）を評価する。臨床エンドポイントは、蛋白尿並びにｅＧＦＲの勾配及びｉＢｏｘ臨床予測スコアであり、両方とも長期的な移植生着を正確に予測する確認されたサロゲートエンドポイントである。
【0140】
実施例２：実験方法
２．１ ＨＬＡ抗体検出
ＨＬＡ抗体レベルを評価するために、発表されたプロトコル（Ｄｏｂｅｒｅｒ，Ｋら、；Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ）に従った研究の完了後に血清サンプルを評価する。手短に言うと、ＬＡＢｓｃｒｅｅｎ ｓｉｎｇｌｅ－ａｎｔｉｇｅｎフロービーズアッセイ（Ｏｎｅ Ｌａｍｂｄａ）を抗体検出に適用する。補体干渉を防ぐために血清サンプルを１０ｍＭ ＥＤＴＡとインキュベーションする。データ取得は、ＬＡＢＳｃａｎＴＭ ２００ ｆｌｏｗ ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により実行する。ＤＳＡ／ＨＬＡ抗体レベルの長期的解析については、試験結果の日々の変化の影響を避けるためにビーズアッセイを後ろ向きに行う。ドナー特異性は、血清学的及び／又は低若しくは高解像度ドナー／レシピエントＨＬＡ－タイピング（ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃｗ、－ＤＲ、－ＤＱ、－ＤＰ）．に従って定義する。試験結果は、免疫優性ＤＳＡの平均蛍光強度（ＭＦＩ）として記述する。ＭＦＩ閾値＞１，０００を陽性とみなす。ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ治療のＤＳＡレベルに対する影響を、ＭＦＩのパーセント変化により推定する。ＤＳＡレベルの変化をより正確に定量化するために、本方法の後にＤｏｂｅｒｅｒ Ｋら、２０２０，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎに記載されるさらなる希釈実験を実行する。簡単に言えば、未加工ＤＳＡ ＭＦＩレベル（免疫優性ＤＳＡ）に基づく非線形検量線を、治療開始前及び２４週目に集めた個々の患者の血清の段階希釈により取得する。コンピュータ処理した検量線によれば、抗体レベルの倍率変化を、ついで無希釈の１２週、２４週、及び５２週のサンプルについて同一の実験で検出したＤＳＡ ＭＦＩレベルから算出する。
２．１ ＨＬＡ抗体検出
ＨＬＡ抗体レベルを評価するために、発表されたプロトコル（Ｄｏｂｅｒｅｒ，Ｋら、；Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ）に従った研究の完了後に血清サンプルを評価する。手短に言うと、ＬＡＢｓｃｒｅｅｎ ｓｉｎｇｌｅ－ａｎｔｉｇｅｎフロービーズアッセイ（Ｏｎｅ Ｌａｍｂｄａ）を抗体検出に適用する。補体干渉を防ぐために血清サンプルを１０ｍＭ ＥＤＴＡとインキュベーションする。データ取得は、ＬＡＢＳｃａｎＴＭ ２００ ｆｌｏｗ ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）により実行する。ＤＳＡ／ＨＬＡ抗体レベルの長期的解析については、試験結果の日々の変化の影響を避けるためにビーズアッセイを後ろ向きに行う。ドナー特異性は、血清学的及び／又は低若しくは高解像度ドナー／レシピエントＨＬＡ－タイピング（ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃｗ、－ＤＲ、－ＤＱ、－ＤＰ）．に従って定義する。試験結果は、免疫優性ＤＳＡの平均蛍光強度（ＭＦＩ）として記述する。ＭＦＩ閾値＞１，０００を陽性とみなす。ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ治療のＤＳＡレベルに対する影響を、ＭＦＩのパーセント変化により推定する。ＤＳＡレベルの変化をより正確に定量化するために、本方法の後にＤｏｂｅｒｅｒ Ｋら、２０２０，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎに記載されるさらなる希釈実験を実行する。簡単に言えば、未加工ＤＳＡ ＭＦＩレベル（免疫優性ＤＳＡ）に基づく非線形検量線を、治療開始前及び２４週目に集めた個々の患者の血清の段階希釈により取得する。コンピュータ処理した検量線によれば、抗体レベルの倍率変化を、ついで無希釈の１２週、２４週、及び５２週のサンプルについて同一の実験で検出したＤＳＡ ＭＦＩレベルから算出する。
【0141】
２．２ 免疫グロブリンレベル
血清中の総ＩｇＧ、ＩｇＭ及びＩｇＧサブクラスを、ＢＮ（商標）ＩＩ ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈｉｎｅｅｒｓ）で免疫比濁法を適用して評価する。
血清中の総ＩｇＧ、ＩｇＭ及びＩｇＧサブクラスを、ＢＮ（商標）ＩＩ ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈｉｎｅｅｒｓ）で免疫比濁法を適用して評価する。
【0142】
２．３ 移植生検
凝固異常又は８０％以下の血小板数を除外した後、２４及び５２週（研究終了時の来診）に経過観察生検を実行する。生検は、局所麻酔（リドカイン）下超音波ガイド下経皮的手法を用いて実行する。組織形態学は、パラフィン包埋切片上で標準的な方法論を適用して評価する。包埋した組織ブロックは、日常的な評価及び拒絶を段階分けするために、連続切片作製（５ｍｍ厚）、ヘマトキシリンエオシン染色及び過ヨウ素酸シッフ染色を受ける。免疫組織化学的Ｃ４ｄ染色のために、ポリクローナル抗Ｃ４ｄ抗体（ＢＩ－ＲＣ４Ｄ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ）を用い、Ｂａｎｆｆスキーム後（Ｌｏｕｐｙ，Ａら、２０２０，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ａｊｔ．１５８９８）、尿細管周囲毛細血管に沿った最小免疫組織化学的染色（Ｃ４ｄ Ｂａｎｆｆスコア≧１）を陽性とみなす。生検はまた、傍尿細管毛細血管基底膜の多層化病変（ＭＬＰＴＣ）を検出するために電子顕微鏡によっても評価する。さらに、全ての生検は、Ｂａｎｆｆスキームによっても提案されるマイクロアレイを用いて、国際的に確認されたＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（登録商標）診断システムＭＭＤｘプラットフォームを用いて分析する。拒絶反応［ＡＢＭＲ、Ｔ細胞関連型拒絶反応（ＴＣＭＲ）、全ての拒絶反応］、炎症（ｇｌｏｂａｌ ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ ｓｃｏｒｅ）又は慢性傷害（萎縮症／線維症スコア）と関連する機械学習由来の病変に基づく分類に基づく徹底的に確認された分子スコアを、１５２９件の生検の参照集合を用いて生成する。Ｂａｎｆｆ ２０１９スキームに従ったＡＢＭＲの分類のために、全ての生検結果を、分子結果の面に関して解析する。ＡＢＭＲを、形態学的（組織形態学、免疫組織化学、電子顕微鏡）及び徹底的に確認された分子基準：（ｉ）急性又は慢性組織傷害の証拠、（ｉｉ）現在／最近の血管内皮との抗体相互作用の証拠、及び（ｉｉｉ）ＤＳＡの血清学的証拠の両方に基づいて定義する。
凝固異常又は８０％以下の血小板数を除外した後、２４及び５２週（研究終了時の来診）に経過観察生検を実行する。生検は、局所麻酔（リドカイン）下超音波ガイド下経皮的手法を用いて実行する。組織形態学は、パラフィン包埋切片上で標準的な方法論を適用して評価する。包埋した組織ブロックは、日常的な評価及び拒絶を段階分けするために、連続切片作製（５ｍｍ厚）、ヘマトキシリンエオシン染色及び過ヨウ素酸シッフ染色を受ける。免疫組織化学的Ｃ４ｄ染色のために、ポリクローナル抗Ｃ４ｄ抗体（ＢＩ－ＲＣ４Ｄ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ）を用い、Ｂａｎｆｆスキーム後（Ｌｏｕｐｙ，Ａら、２０２０，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ａｊｔ．１５８９８）、尿細管周囲毛細血管に沿った最小免疫組織化学的染色（Ｃ４ｄ Ｂａｎｆｆスコア≧１）を陽性とみなす。生検はまた、傍尿細管毛細血管基底膜の多層化病変（ＭＬＰＴＣ）を検出するために電子顕微鏡によっても評価する。さらに、全ての生検は、Ｂａｎｆｆスキームによっても提案されるマイクロアレイを用いて、国際的に確認されたＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（登録商標）診断システムＭＭＤｘプラットフォームを用いて分析する。拒絶反応［ＡＢＭＲ、Ｔ細胞関連型拒絶反応（ＴＣＭＲ）、全ての拒絶反応］、炎症（ｇｌｏｂａｌ ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ ｓｃｏｒｅ）又は慢性傷害（萎縮症／線維症スコア）と関連する機械学習由来の病変に基づく分類に基づく徹底的に確認された分子スコアを、１５２９件の生検の参照集合を用いて生成する。Ｂａｎｆｆ ２０１９スキームに従ったＡＢＭＲの分類のために、全ての生検結果を、分子結果の面に関して解析する。ＡＢＭＲを、形態学的（組織形態学、免疫組織化学、電子顕微鏡）及び徹底的に確認された分子基準：（ｉ）急性又は慢性組織傷害の証拠、（ｉｉ）現在／最近の血管内皮との抗体相互作用の証拠、及び（ｉｉｉ）ＤＳＡの血清学的証拠の両方に基づいて定義する。
【0143】
２．４ 腎機能
ｅＧＦＲを、慢性腎臓病－疫学共同研究［ＣＫＤ－ＥＰＩ］式を用いて評価する（ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２）。タンパク排泄を、スポット尿中タンパク質／クレアチニン比（ｍｇ／ｇ）として記述する。
ｅＧＦＲを、慢性腎臓病－疫学共同研究［ＣＫＤ－ＥＰＩ］式を用いて評価する（ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２）。タンパク排泄を、スポット尿中タンパク質／クレアチニン比（ｍｇ／ｇ）として記述する。
【0144】
２．５． 拒絶反応の免疫性バイオマーカー
ケモカイン検出では、Ｍｕｈｌｂａｃｈｅｒ，Ｊら、（２０２０，Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ，７：１１４）によって記載されるルミネックスに基づくプロトコルを用いる。ケモカイン（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフ）リガンド（ＣＸＣＬ）９及びＣＸＣＬ１０の定量化では、補体干渉を防ぐよう血清サンプルを１０ｍＭ ＥＤＴＡに調整する。無希釈サンプルを、製造業者の説明書にしたがって多重Ｈｕｍａｎ ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘ Ｓｉｍｐｌｅｘイムノアッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて２回測定する。イムノアッセイは、Ｌｕｍｉｎｅｘ ２００機器（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐ．）で実行する。尿の結果をクレアチニン排泄に正規化し、ｐｇ（ケモカイン）／ｍｇ（クレアチニン）として表す。進行中の移植片損傷の程度を示すレシピエントの血漿サンプル中のｄｄ－ｃｆＤＮＡレベルを、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＭｉＳｅｑシーケンサー（Ｉｌｌｕｍｉｎａ Ｉｎｃ）での次世代シーケンシングによって検出される既定セットの一塩基多型の検出に基づく、標準技術を用いて検出する。
ケモカイン検出では、Ｍｕｈｌｂａｃｈｅｒ，Ｊら、（２０２０，Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ，７：１１４）によって記載されるルミネックスに基づくプロトコルを用いる。ケモカイン（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフ）リガンド（ＣＸＣＬ）９及びＣＸＣＬ１０の定量化では、補体干渉を防ぐよう血清サンプルを１０ｍＭ ＥＤＴＡに調整する。無希釈サンプルを、製造業者の説明書にしたがって多重Ｈｕｍａｎ ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘ Ｓｉｍｐｌｅｘイムノアッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて２回測定する。イムノアッセイは、Ｌｕｍｉｎｅｘ ２００機器（Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｃｏｒｐ．）で実行する。尿の結果をクレアチニン排泄に正規化し、ｐｇ（ケモカイン）／ｍｇ（クレアチニン）として表す。進行中の移植片損傷の程度を示すレシピエントの血漿サンプル中のｄｄ－ｃｆＤＮＡレベルを、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＭｉＳｅｑシーケンサー（Ｉｌｌｕｍｉｎａ Ｉｎｃ）での次世代シーケンシングによって検出される既定セットの一塩基多型の検出に基づく、標準技術を用いて検出する。
【0145】
２．６ 免疫細胞モニタリング及び白血球亜集団
慢性抗体関連型拒絶の根底にあるメカニズム、特に末梢性Ｔ及びＢ細胞サブセットの役割は、充分に明らかにされていない。したがって、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂでの治療のもと免疫表現型を前向きに監視することは、ＣＤ３８を標的とする場合の免疫調節経路の影響を解明するための有望な手法である。さらに、形質細胞及びＮＫ細胞数を評価すると、抗ＣＤ３８抗体の薬力学効果を監視することが可能となる。白血球（亜）集団の監視では、表現型決定用の再現性のある免疫モニタリングパネルを用いる（例えばフローサイトメトリー用のＤｕｒａＣｌｏｎｅ（登録商標））。ＤｕｒａＣｌｏｎｅキットの既定のアッセイチューブには、既製の乾燥抗体パネルを含む層が含まれる。１チューブ当たり最大１０種類の異なるモノクローナル抗体があるので、全血サンプル中に存在する白血球（例えばＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞サブセット）亜集団を同定できる。
慢性抗体関連型拒絶の根底にあるメカニズム、特に末梢性Ｔ及びＢ細胞サブセットの役割は、充分に明らかにされていない。したがって、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂでの治療のもと免疫表現型を前向きに監視することは、ＣＤ３８を標的とする場合の免疫調節経路の影響を解明するための有望な手法である。さらに、形質細胞及びＮＫ細胞数を評価すると、抗ＣＤ３８抗体の薬力学効果を監視することが可能となる。白血球（亜）集団の監視では、表現型決定用の再現性のある免疫モニタリングパネルを用いる（例えばフローサイトメトリー用のＤｕｒａＣｌｏｎｅ（登録商標））。ＤｕｒａＣｌｏｎｅキットの既定のアッセイチューブには、既製の乾燥抗体パネルを含む層が含まれる。１チューブ当たり最大１０種類の異なるモノクローナル抗体があるので、全血サンプル中に存在する白血球（例えばＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞サブセット）亜集団を同定できる。
【0146】
免疫細胞の監視では、血液、リンパ節、骨髄、脾臓、及び移植組織由来の細胞を、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ Ｆｉｘａｂｌｅ Ａｑｕａ Ｄｅａｄ Ｃｅｌｌ染色キット（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で染色する。ついで細胞を、以下のヒトに対するｍＡｂｓ：ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３８、ＣＤ５６、ＣＤ９５、ＣＤ１２７、ＣＤ１５９ａ、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＣＤ２７９（ＰＤ－１）、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＣＸＣＲ５、及び固定後はＫｉ６７及びＦｏｘＰ３の１つ又は複数で染色する。サンプルをフローサイトメーターで回収し、ＣＤ３８＋Ｂ細胞及び形質細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ１２７－Ｔ細胞の割合を標準的なソフトウェア（例えばＦｌｏｗＪｏ ｖ９．６．）を用いて解析する。
【0147】
２．７ 遺伝子発現解析
遺伝子発現解析では、５ｍＬの血液をＰＡＸｇｅｎｅ Ｂｌｏｏｄ ＲＮＡチューブに集め、レトロスペクティブ解析まで－８０℃で保管した。これらのチューブは、超低温での長期保管中血液中のＲＮＡを安定化するよう設計されている。遺伝子発現パターン解析（マイクロアレイ解析）を、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの抗体産生細胞に対する影響を評価するために末梢血で実行し、Ｂ細胞受容体シグナル伝達の一部としてアノテートされた遺伝子を解析する。
遺伝子発現解析では、５ｍＬの血液をＰＡＸｇｅｎｅ Ｂｌｏｏｄ ＲＮＡチューブに集め、レトロスペクティブ解析まで－８０℃で保管した。これらのチューブは、超低温での長期保管中血液中のＲＮＡを安定化するよう設計されている。遺伝子発現パターン解析（マイクロアレイ解析）を、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂの抗体産生細胞に対する影響を評価するために末梢血で実行し、Ｂ細胞受容体シグナル伝達の一部としてアノテートされた遺伝子を解析する。
【0148】
２．８ トルクテノウイルス（ＴＴＶ）の定量化
ＴＴＶ解析では、ＮｕｃｌｉＳＥＮＳ ｅａｓｙＭＡＧプラットフォーム（ｂｉｏＭｅｒｉｅｕｘ）を用いてＤＮＡを血漿サンプルから抽出し、５０μＬの溶出バッファーに溶出する。ＴＴＶ ＤＮＡを、例えばＳｃｈｉｅｍａｎｎ，Ｍら、（２０１７，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１０１：３６０－３６７）によって記載されるように、ＴａｑＭａｎリアルタイムＰＣＲによって定量化する。定量的ＰＣＲは、５μＬの抽出したＤＮＡ、４００ｎＭの各プライマー、及び８０ｎＭのプローブを含有する２×ＴａｑＭａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを用いて２５μＬの体積で実行する。熱サイクルは、５０℃で３分間から開始し、その後９５℃で１０分間、ついで９５℃で１５秒間、５５℃で３０秒間、及び７２℃で３０秒間を４５サイクル、ＣＦＸ９６リアルタイムシステム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて実行する。結果をコピー数／ｍＬとして記録する。
ＴＴＶ解析では、ＮｕｃｌｉＳＥＮＳ ｅａｓｙＭＡＧプラットフォーム（ｂｉｏＭｅｒｉｅｕｘ）を用いてＤＮＡを血漿サンプルから抽出し、５０μＬの溶出バッファーに溶出する。ＴＴＶ ＤＮＡを、例えばＳｃｈｉｅｍａｎｎ，Ｍら、（２０１７，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１０１：３６０－３６７）によって記載されるように、ＴａｑＭａｎリアルタイムＰＣＲによって定量化する。定量的ＰＣＲは、５μＬの抽出したＤＮＡ、４００ｎＭの各プライマー、及び８０ｎＭのプローブを含有する２×ＴａｑＭａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを用いて２５μＬの体積で実行する。熱サイクルは、５０℃で３分間から開始し、その後９５℃で１０分間、ついで９５℃で１５秒間、５５℃で３０秒間、及び７２℃で３０秒間を４５サイクル、ＣＦＸ９６リアルタイムシステム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて実行する。結果をコピー数／ｍＬとして記録する。
【0149】
２．９ ワクチン力価の経過
ムンプス、麻疹及び風疹（ＭＭＲ）に特異的な血清ＩｇＧ力価を、標準的なＥＬＩＳＡ技術によって解析する。
ムンプス、麻疹及び風疹（ＭＭＲ）に特異的な血清ＩｇＧ力価を、標準的なＥＬＩＳＡ技術によって解析する。
【0150】
２．１０ 生体物質の収集（日常的モニタリング以外）
血漿（１０ｍＬ；ケモカイン、ＴＴＶ負荷）、血清（１０ｍＬ；ＨＬＡ抗体試験）、全血（１０ｍＬ；フローサイトメトリー、遺伝子発現解析用のＲＮＡ）及び尿（１０ｍＬ）を研究開始前（０日目）、６か月後及び１２か月後（３×３０ｍＬ末梢血）に収集する。最後に、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ濃度及びＡＤＡの測定では、血清を来院毎に取得する（来院日当たり５ｍＬ末梢血、合計１８回の来院）。
血漿（１０ｍＬ；ケモカイン、ＴＴＶ負荷）、血清（１０ｍＬ；ＨＬＡ抗体試験）、全血（１０ｍＬ；フローサイトメトリー、遺伝子発現解析用のＲＮＡ）及び尿（１０ｍＬ）を研究開始前（０日目）、６か月後及び１２か月後（３×３０ｍＬ末梢血）に収集する。最後に、ｆｅｌｚａｒｔａｍａｂ濃度及びＡＤＡの測定では、血清を来院毎に取得する（来院日当たり５ｍＬ末梢血、合計１８回の来院）。
【0151】
実施例３：腎移植を受けた非ヒト霊長類のＡＢＭＲを予防及び治療するためのＭＯＲ２０２の安全性及び有効性
３．１ 実験ＮＨＰモデル
本研究は、高度に感作した非ヒト霊長類腎移植モデルのＡＢＭＲ及び急性移植後ＡＢＭＲを予防する、ＭＯＲ２０２に対する脱感作の安全性及び有効性を調べることである（Ｋｗｕｎ Ｊ．ら、Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ．２０１９ Ｊｕｌ；３０（７）：１２０６－１２１９を参照する）。さらに、ＭＯＲ２０２が反跳ドナー特異的抗体（ＤＳＡ）及び遅発型／慢性ＡＢＭＲを予防する長期的効果を評価する。
３．１ 実験ＮＨＰモデル
本研究は、高度に感作した非ヒト霊長類腎移植モデルのＡＢＭＲ及び急性移植後ＡＢＭＲを予防する、ＭＯＲ２０２に対する脱感作の安全性及び有効性を調べることである（Ｋｗｕｎ Ｊ．ら、Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ．２０１９ Ｊｕｌ；３０（７）：１２０６－１２１９を参照する）。さらに、ＭＯＲ２０２が反跳ドナー特異的抗体（ＤＳＡ）及び遅発型／慢性ＡＢＭＲを予防する長期的効果を評価する。
【0152】
３．１．１ ＣＤ３８発現
レシピエント動物のＢＭ、脾臓、リンパ節、及び血液由来の形質細胞のＣＤ３８発現レベル及びＭＯＲ２０２との交差反応性を分析する。貧血のリスクを推定するために赤血球のＣＤ３８発現レベルを確認する。
レシピエント動物のＢＭ、脾臓、リンパ節、及び血液由来の形質細胞のＣＤ３８発現レベル及びＭＯＲ２０２との交差反応性を分析する。貧血のリスクを推定するために赤血球のＣＤ３８発現レベルを確認する。
【0153】
３．１．２ ＭＯＲ２０２での脱感作
同種感作では、Ｂｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫ ら、Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １９：７２４－７３６に記載されるように、２回の連続的な皮膚移植を８週間間隔で設置することによりオスのアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）をＭＨＣ不適合のドナーに感作させる。２回目の皮膚移植のおよそ８～１２週後に、サルを４週間、１６ｍｇ／ｋｇのＭＯＲ２０２で処置する。同種抗体レベルを測定する。脱感作レベルを、単独又は共刺激遮断と併せたプロテアソーム阻害剤（ボルテゾミブ／カルフィルゾミブ）を用いる脱感作戦略（Ｋｗｕｎ Ｊ．ら、Ｂｌｏｏｄ Ａｄｖ．２０１７ Ｎｏｖ １４；１（２４）：２１１５－２１１９）の結果と比較する。薬物療法完了前後にＣＭＶ力価を測定する。免疫細胞の監視については、血液、リンパ節、骨髄、脾臓、及び移植組織由来の細胞をフローサイトメトリーにより評価する。
同種感作では、Ｂｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫ ら、Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １９：７２４－７３６に記載されるように、２回の連続的な皮膚移植を８週間間隔で設置することによりオスのアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）をＭＨＣ不適合のドナーに感作させる。２回目の皮膚移植のおよそ８～１２週後に、サルを４週間、１６ｍｇ／ｋｇのＭＯＲ２０２で処置する。同種抗体レベルを測定する。脱感作レベルを、単独又は共刺激遮断と併せたプロテアソーム阻害剤（ボルテゾミブ／カルフィルゾミブ）を用いる脱感作戦略（Ｋｗｕｎ Ｊ．ら、Ｂｌｏｏｄ Ａｄｖ．２０１７ Ｎｏｖ １４；１（２４）：２１１５－２１１９）の結果と比較する。薬物療法完了前後にＣＭＶ力価を測定する。免疫細胞の監視については、血液、リンパ節、骨髄、脾臓、及び移植組織由来の細胞をフローサイトメトリーにより評価する。
【0154】
３．１．３ 脱感作療法後ＡＢＭＲを予防及び治療するためのＭＯＲ２０２の有効性
動物は、同一の皮膚移植ドナーから腎移植を受け、ｒＡＴＧ，タクロリムス、ステロイドでの抗拒絶免疫抑制に加えて４週間毎週ＭＯＲ２０２も受ける。腎移植は、基本的にＢｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫら（Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２０１６；１６（６）：１７２６－１７３８）に記載される通りに実行する。形質細胞母集団の枯渇では、感作したアカゲザルを毎週ＭＯＲ２０２で処置する。コントロール動物は、腎移植前に処置を受けなかった。ＣＤ３８は、活性型Ｂ細胞及びＴ細胞集団を含む、造血細胞及び非造血細胞で発現されるので、循環Ｂ及びＴ細胞集団をＦＡＣＳにより評価する。これらには、循環Ｂ細胞、ＩｇＧ＋Ｂ細胞、及びメモリーＢ細胞（ＩｇＧ＋ＣＤ２７＋ＣＤ２０＋）、並びにＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞のナイーブ（ＣＤ２８＋ＣＤ９５－）、セントラルメモリー（ＣＤ２８＋ＣＤ９５＋）、及びエフェクターメモリー（ＣＤ２８－ＣＤ９５ｉｎｔ）サブセットが含まれる。
動物は、同一の皮膚移植ドナーから腎移植を受け、ｒＡＴＧ，タクロリムス、ステロイドでの抗拒絶免疫抑制に加えて４週間毎週ＭＯＲ２０２も受ける。腎移植は、基本的にＢｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫら（Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２０１６；１６（６）：１７２６－１７３８）に記載される通りに実行する。形質細胞母集団の枯渇では、感作したアカゲザルを毎週ＭＯＲ２０２で処置する。コントロール動物は、腎移植前に処置を受けなかった。ＣＤ３８は、活性型Ｂ細胞及びＴ細胞集団を含む、造血細胞及び非造血細胞で発現されるので、循環Ｂ及びＴ細胞集団をＦＡＣＳにより評価する。これらには、循環Ｂ細胞、ＩｇＧ＋Ｂ細胞、及びメモリーＢ細胞（ＩｇＧ＋ＣＤ２７＋ＣＤ２０＋）、並びにＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞のナイーブ（ＣＤ２８＋ＣＤ９５－）、セントラルメモリー（ＣＤ２８＋ＣＤ９５＋）、及びエフェクターメモリー（ＣＤ２８－ＣＤ９５ｉｎｔ）サブセットが含まれる。
【0155】
腎生検を、１か月目、３か月目、６か月目及び屠殺時に採取し、（免疫）組織学により分析し、Ｂａｎｆｆ基準に従ってスコア化する。その後移植後のドナー特異的抗体（ＤＳＡ）を毎週測定する。血清クレアチニンの上昇を示す反跳ＤＳＡの動物も、１か月間ＭＯＲ２０２で処置する。濾胞性ヘルパーＴ細胞、形質細胞（ＢＭ、ＬＮ、及び血液）、並びに形質芽球（血液及びＬＮ）を含む、細胞性及び液性免疫応答を分析する。必要に応じて追加の腎移植生検を採取する。潜在性拒絶及びＣ４ｄ沈着を監視するために、Ｈ＆Ｅ、ＰＡＳ及びＣ４ｄ染色を実行する。
【0156】
３．１．４ ＤＳＡモニタリング
Ｂｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫら、 （Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １９：７２４－７３６）によって記載されるように、ドナーリンパ球及びレシピエント血清を用いてフロークロスマッチによりＤＳＡレベルを毎週連続的に測定する。手短に言うと、ドナーＰＢＭＣ又は脾細胞をレシピエント血清とインキュベーションし、洗浄し、ＦＩＴＣ標識抗サルＩｇＧ、抗ＣＤ２０ｍＡｂ及び抗ＣＤ３ｍＡｂで染色する。Ｔ細胞又はＢ細胞の抗サルＩｇＧの平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定し、感作前の時点からのＭＦＩ変化として表す。交差反応性抗体を検出するために、ＮＨＰ血清同種抗体はまた、単一のＨＬＡ抗原ビーズ（ＬＡＢＳｃｒｅｅｎ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｎｔｉｇｅｎ；Ｏｎｅ Ｌａｍｂｄａ）を用いるヒト固相Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイを用いて測定してもよい。
Ｂｕｒｇｈｕｂｅｒ ＣＫら、 （Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １９：７２４－７３６）によって記載されるように、ドナーリンパ球及びレシピエント血清を用いてフロークロスマッチによりＤＳＡレベルを毎週連続的に測定する。手短に言うと、ドナーＰＢＭＣ又は脾細胞をレシピエント血清とインキュベーションし、洗浄し、ＦＩＴＣ標識抗サルＩｇＧ、抗ＣＤ２０ｍＡｂ及び抗ＣＤ３ｍＡｂで染色する。Ｔ細胞又はＢ細胞の抗サルＩｇＧの平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定し、感作前の時点からのＭＦＩ変化として表す。交差反応性抗体を検出するために、ＮＨＰ血清同種抗体はまた、単一のＨＬＡ抗原ビーズ（ＬＡＢＳｃｒｅｅｎ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｎｔｉｇｅｎ；Ｏｎｅ Ｌａｍｂｄａ）を用いるヒト固相Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイを用いて測定してもよい。
【図1】
【図2】
【配列表】
【国際調査報告】