特表 2024-508526 心筋サルコメア阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-02-27

(54)【発明の名称】心筋サルコメア阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 487/10 20060101AFI20240219BHJP

   A61K 31/499 20060101ALI20240219BHJP

   A61K 31/501 20060101ALI20240219BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20240219BHJP

   A61P 9/04 20060101ALI20240219BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20240219BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20240219BHJP

【ＦＩ】

C07D487/10 CSP

A61K31/499

A61K31/501

A61P9/00

A61P9/04

A61P9/10

A61P21/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023553393

(86)(22)【出願日】2022-03-03

(85)【翻訳文提出日】2023-09-01

(86)【国際出願番号】 US2022018725

(87)【国際公開番号】W WO2022187501

(87)【国際公開日】2022-09-09

(31)【優先権主張番号】63/156,853

(32)【優先日】2021-03-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】504236628

【氏名又は名称】サイトキネティックス， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】モーガン， ブラッドリー ピー．

(72)【発明者】

【氏名】チュアン， チーユアン

(72)【発明者】

【氏名】アシュクラフト， ルーク ダブリュー．

(72)【発明者】

【氏名】ホー， ジャスティン

(72)【発明者】

【氏名】ガルシア， アルフレッド

【テーマコード（参考）】

4C050

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C050AA04

4C050BB02

4C050CC08

4C050EE03

4C050FF01

4C050GG03

4C050HH01

4C050HH04

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB02

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA36

4C086ZA94

(57)【要約】

式（Ｉ）の化合物：

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は、本明細書に定義されるとおりである）、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、薬学的に許容される組成物も提供される。式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用方法も提供される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物：

【化84】

（式中、
Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、
Ｒ^２は、Ｈ、ハロ、またはＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ^３は、
（ｉ）シクロヘキシルであって、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルもしくはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される、前記シクロヘキシル、または
（ｉｉ）Ｃ_１－６アルキル、であり、
Ｒ^４は、
（ｉ）－Ｃ（Ｏ）Ｈ、
（ｉｉ）－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、

【化85】

であり、
ただし、
（１）Ｒ^３が、Ｃ_１－６アルキルである場合、Ｒ^４は

【化86】

であり、
（２）Ｒ^３がイソプロピルである場合、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は少なくとも２であり、
（３）Ｒ^３が、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換されたシクロヘキシルである場合、Ｒ^４は、－Ｃ（Ｏ）Ｈ以外である）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項2】

Ｒ^４が、－Ｃ（Ｏ）Ｈである、請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項3】

Ｒ^４が、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である、請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項4】

Ｒ^４が、

【化87】

である、請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項5】

Ｒ^４が、

【化88】

である、請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項6】

Ｒ^３が、シクロヘキシルであり、前記シクロヘキシルが、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される、請求項１～５のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項7】

Ｒ^３が、

【化89】

である、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項8】

Ｒ^３が、

【化90】

である、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項9】

Ｒ^３が、Ｃ_１－６アルキルである、請求項１または請求項４に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項10】

Ｒ^３が、

【化91】

である、請求項１、４、及び９のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項11】

Ｒ^３が、

【化92】

である、請求項１、４、９、及び１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項12】

Ｒ^１が、ハロである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項13】

Ｒ^１が、クロロまたはフルオロである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項14】

Ｒ^１が、Ｃ_１－６ハロアルキルである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項15】

Ｒ^１が、－ＣＦ_３である、請求項１～１１及び１４のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項16】

Ｒ^２が、Ｈである、請求項１～１５のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項17】

Ｒ^２が、ハロである、請求項１～１５のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項18】

Ｒ^２が、クロロまたはフルオロである、請求項１～１５及び１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項19】

Ｒ^２が、Ｃ_１－６アルキルである、請求項１～１５のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項20】

Ｒ^２が、メチルである、請求項１～１５及び１９のいずれか１項に記載の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項21】

表１の化合物からなる群から選択される化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩。

【請求項22】

前記化合物が、化合物４：

【化93】

である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。

【請求項23】

前記化合物が、化合物１３：

【化94】

である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。

【請求項24】

前記化合物が、化合物１８：

【化95】

である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。

【請求項25】

（ｉ）請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、またはその互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩と、（ｉｉ）１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物。

【請求項26】

心疾患の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、前記対象に、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。

【請求項27】

前記心疾患が、肥大性心筋症である、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記肥大性心筋症が、閉塞性もしくは非閉塞性であるか、または（ｉ）サルコメア変異、（ｉｉ）非サルコメア変異、または（ｉｉｉ）サルコメア変異及び非サルコメア変異の両方によって引き起こされる、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記心疾患が、駆出率が保たれた心不全である、請求項２６に記載の方法。

【請求項30】

前記心疾患が、拡張機能不全、原発性または続発性拘束型心筋症、心筋梗塞及び狭心症、左心室流出路閉塞、高血圧性心疾患、先天性心疾患、心虚血、冠状動脈性心疾患、糖尿病性心疾患、うっ血性心不全、右心不全、心腎症候群、及び浸潤性心筋症からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。

【請求項31】

前記心疾患が、心臓老化、加齢による拡張機能不全、左心室肥大、及び求心性左心室リモデリングからなる群から選択される１つ以上の状態であるか、またはそれらに関連する、請求項２６に記載の方法。

【請求項32】

肥大性心筋症に関連する疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、前記対象に、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。

【請求項33】

前記疾患または状態が、ファブリー病、ダノン病、ミトコンドリア心筋症、及びヌーナン症候群からなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

続発性左心室壁肥厚に関連する疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、前記対象に、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。

【請求項35】

前記疾患または状態が、高血圧、弁膜性心疾患、大動脈狭窄、僧帽弁逆流、代謝症候群、糖尿病、肥満、末期腎疾患、強皮症、睡眠時無呼吸症、アミロイドーシス、ファブリー病、フリードライヒ運動失調症、ダノン病、ヌーナン症候群、及びポンペ病からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

小左心室内腔及び内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、前記対象に、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。

【請求項37】

筋ジストロフィー及び糖原病から選択される疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、前記対象に、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を投与することを含む、前記方法。

【請求項38】

心筋サルコメアを阻害する方法であって、前記心筋サルコメアに、請求項１～２４のいずれか１項に記載の化合物、もしくはその互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または請求項２５に記載の薬学的組成物を接触させることを含む、前記方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年３月４日に出願された米国仮特許出願第６３／１５６，８５３号の優先権を主張し、その開示は、参照によりその全体が本書に組み込まれる。

【0002】

複素環式化合物、かかる化合物を含む薬学的組成物、及びかかる化合物を用いて様々な心疾患及び状態を治療する方法が本書において提供される。

【背景技術】

【0003】

本開示は、心筋サルコメアを選択的に調節する特定の化学成分、具体的には、様々な心疾患及び状態を治療するための特定の化学成分、薬学的組成物、及び方法に関する。

【0004】

心筋サルコメアは、心筋機能を調節する収縮性タンパク質及び構造タンパク質のネットワークで構成されている。心筋サルコメアの構成要素は、例えば、収縮性を増加させることによる、または、収縮期及び拡張期機能をそれぞれ調節するために完全な弛緩を促進することによる、様々な心疾患及び状態の治療のためのターゲットを提示する。心筋収縮の力及び速度は、臓器機能の主要な決定要因であり、アクチン及びミオシンの周期的相互作用によって調節される。アクチン及びミオシンの結合の調節は、ミオフィラメント調節タンパク質のネットワーク及び細胞内Ｃａ^２＋のレベルによって決定される。トロポニン複合体及びトロポミオシンは、アクチン結合部位、ならびに本質的な軽鎖及び調節軽鎖の利用可能性を支配する細いフィラメントタンパク質であり、ミオシン結合タンパク質Ｃは、ミオシンの位置及び機械的特性を調節する。

【0005】

心筋サルコメアの異常は、肥大性心筋症（ＨＣＭ）及び駆出率が保たれた心不全（ＨＦｐＥＦ）などの様々な心疾患及び状態の駆動原因として同定されている。サルコメアのタンパク質の変異は、心筋を「高」または「低」収縮のいずれかにすることによって疾患を引き起こす。心筋サルコメアの調節因子は、収縮性を再調整し、疾患の経過を停止または逆転させるために使用することができる。

【0006】

変力物質（心臓の収縮能力を高める薬物）など、心筋サルコメアを標的とする現在の薬剤は、心臓組織に対する選択性が低く、その使用を制限する有害作用の認識がもたらされている。これらの有害作用には、エネルギー消費速度の増加によって引き起こされる細胞損傷、弛緩異常の悪化、及び変力的に刺激された心筋における細胞質Ｃａ^２＋及びサイクリックＡＭＰ濃度の増加に起因し得る潜在的な不整脈性副作用が含まれる。現在の薬剤の限界を考慮すると、ＨＣＭ及びＨＦｐＥＦにおける心機能を改善するための新しいアプローチが必要である。

【0007】

新しい作用機序を利用し、短期的及び長期的の双方での症状の緩和、安全性、及び患者の死亡率の観点からより良い転帰をもたらす可能性のある薬剤が依然として非常に必要とされている。現在の薬剤よりも改善された治療指数を有する新しい薬剤は、これらの臨床転帰を達成するための手段を提供する。心筋サルコメアに向けられた薬剤の選択性（例えば、心筋ミオシンを標的とすることによって）は、この改善された治療指数を達成するための重要な手段として特定されている。本開示は、かかる薬剤（特に心筋サルコメア阻害剤）及びそれらの使用方法を提供する。これらの薬剤は、心筋ミオシンのアロステリック阻害剤である。これらの化合物の利点は、より広い治療指数、より少ない心臓弛緩への影響、より良い薬物動態、及びより良い安全性を含む。本開示の薬剤は、本書に記載の使用方法のための１日１回の投薬を可能にし得るという点でも有用である。

【0008】

本開示は、ＨＣＭ及びＨＦｐＥＦを含む心不全の治療のための化学成分、薬学的組成物、及び方法を提供する。組成物は、心筋サルコメアの阻害剤、例えば、心筋ミオシンの阻害剤である。

【発明の概要】

【0009】

一態様では、式（Ｉ）の化合物：

【化1】

（式中、
Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、
Ｒ^２は、Ｈ、ハロ、またはＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ^３は、
（ｉ）シクロヘキシルであって、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルもしくはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される、上記シクロヘキシル、または
（ｉｉ）Ｃ_１－６アルキル、であり、
Ｒ^４は、
（ｉ）－Ｃ（Ｏ）Ｈ、
（ｉｉ）－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、

【化2】

であり、
ただし、
（１）Ｒ^３がＣ_１－６アルキルである場合、Ｒ^４は

【化3】

であり、
（２）Ｒ^３がイソプロピルである場合、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は少なくとも２であり、
（３）Ｒ^３が、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換されたシクロヘキシルである場合、Ｒ^４は、－Ｃ（Ｏ）Ｈ以外である）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。

【0010】

一態様では、式（Ｉ－Ａ）の化合物：

【化4】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、式（Ｉ）の化合物において本書に記載されるとおりである）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供される。

【0011】

一態様では、式（Ｉ－Ｂ）の化合物：

【化5】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、式（Ｉ）の化合物において本書に記載されるとおりである）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供される。

【0012】

一態様では、式（Ｉ－Ｃ）の化合物：

【化6】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、式（Ｉ）の化合物において本書に記載されるとおりである）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供される。

【0013】

一態様では、式（Ｉ－Ｄ）の化合物：

【化7】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、式（Ｉ）の化合物において本書に記載されるとおりである）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供される。

【0014】

いくつかの態様では、表１の化合物からなる群から選択される化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。

【0015】

いくつかの態様では、（ｉ）式（Ｉ）の化合物、またはそのバリエーションもしくは実施形態、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、及び（ｉｉ）１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、を含む薬学的組成物が提供される。

【0016】

いくつかの態様では、心疾患の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、対象に、式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物を投与することを含む、上記方法が提供される。いくつかの実施形態では、心疾患は、肥大性心筋症（ＨＣＭ）である。いくつかの実施形態では、ＨＣＭは、閉塞性もしくは非閉塞性であるか、またはサルコメア及び／または非サルコメア変異によって引き起こされる。いくつかの実施形態では、心疾患は、駆出率が保たれた心不全（ＨＦｐＥＦ）である。いくつかの実施形態では、心疾患は、拡張機能不全、原発性または続発性拘束型心筋症、心筋梗塞、狭心症、及び左心室流出路閉塞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、心疾患は、高血圧性心疾患、先天性心疾患、心虚血、冠状動脈性心疾患、糖尿病性心疾患、うっ血性心不全、右心不全、心腎症候群、または浸潤性心筋症である。いくつかの実施形態では、心疾患は、心臓老化及び／または加齢による拡張機能障害であるか、またはそれらに関連する状態である。いくつかの実施形態では、心疾患は、左心室肥大及び／または求心性左心室リモデリングであるか、またはそれらに関連する状態である。

【0017】

他の態様では、ＨＣＭに関連する疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法が提供され、方法は、対象に、式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物、を投与することを含む。いくつかの実施形態では、疾患または状態は、ファブリー病、ダノン病、ミトコンドリア心筋症、及びヌーナン症候群からなる群から選択される。

【0018】

いくつかの態様では、続発性左心室壁肥厚に関連する疾患または状態の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法が提供され、方法は、対象に、式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物、を投与することを含む。いくつかの実施形態では、疾患または状態は、高血圧、弁膜性心疾患（大動脈狭窄及び僧帽弁逆流など）、代謝症候群（糖尿病及び肥満など）、末期腎疾患、強皮症、睡眠時無呼吸症、アミロイドーシス、ファブリー病、フリードライヒ運動失調症、ダノン病、ヌーナン症候群、及びポンペ病からなる群から選択される。

【0019】

他の態様では、小左心室内腔及び内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態を治療する方法が提供される。筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）または糖原病の治療方法も提供される。

【0020】

心筋サルコメアを阻害する方法も提供され、方法は、心筋サルコメアを、式（Ｉ）の化合物、もしくはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩、または式（Ｉ）の化合物、またはその任意のバリエーション、もしくはその立体異性体もしくは互変異性体、もしくは前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物、と接触させることを伴う。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの非晶質形態の実験Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す。

【発明を実施するための形態】

【0022】

定義
本書で使用される場合、以下の単語及び語句は、概して、それらが使用される文脈において別段の記載がある場合を除き、下記の意味を有することが意図される。

【0023】

本出願を通して、文脈で別段の指示がない限り、式（Ｉ）の化合物への言及は、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）などの本書で定義される式（Ｉ）の全てのサブグループを含み、本書で定義及び／または説明される全ての下部構造、亜属、選好、実施形態、実施例、及び特定の化合物を含む。式（Ｉ）の化合物及びそのサブグループ、例えば式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）への言及は、それらのイオン形態、多形体、擬多形体、非晶形態、溶媒和物、共結晶、キレート、異性体、互変異性体、酸化物（例えば、Ｎ－酸化物、Ｓ－酸化物）、エステル、プロドラッグ、同位体及び／または保護形態が挙げられる。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物及びそのサブグループ、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）への言及は、それらの多形体、溶媒和物、共結晶、異性体、互変異性体、及び／または酸化物を含む。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物及びそのサブグループ、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）への言及は、それらの多形体、溶媒和物、及び／または共結晶を含む。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物及びそのサブグループ、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）への言及は、それらの異性体、互変異性体、及び／または酸化物を含む。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物及びそのサブグループ、例えば式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）への言及は、それらの溶媒和物を含む。

【0024】

「アルキル」は、示された数の炭素原子、例えば、１～２０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子を有する、直鎖及び分枝鎖の炭素鎖を包含する。例えば、Ｃ_１－６アルキルは、１～６個の炭素原子の直鎖アルキル及び分枝鎖アルキルの両方を包含する。特定の数の炭素を有するアルキル残基が名づけられるとき、その数の炭素を有する全ての分枝鎖バージョン及び直鎖バージョンが包含されることが意図される。よって、例えば、「プロピル」にはｎ－プロピル及びイソプロピルが含まれ、「ブチル」にはｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル及びｔ－ブチルが含まれる。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、２－ペンチル、３－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、及び３－メチルペンチルが挙げられるが、これらに限定されない。

【0025】

値の範囲が指定されている場合（例えば、Ｃ_１－６アルキル）、その範囲内の各値、ならびにその間にある全ての範囲が含まれる。例えば、「Ｃ_１－６アルキル」には、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_１－６、Ｃ_２－６、Ｃ_３－６、Ｃ_４－６、Ｃ_５－６、Ｃ_１－５、Ｃ_２－５、Ｃ_３－５、Ｃ_４－５、Ｃ_１－４、Ｃ_２－４、Ｃ_３－４、Ｃ_１－３、Ｃ_２－３、及びＣ_１－２アルキルが含まれる。

【0026】

「ハロゲン」または「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードを指す。

【0027】

「ハロアルキル」は、本書で定義されるアルキル部分を指し、アルキル部分中の水素原子のうちの１つ以上が、１つ以上の独立して選択されるハロ部分によって置き換えられる。ハロアルキル部分の例としては、限定されないが、－ＣＨ_２Ｆ、_－ＣＨＦ_２、－ＣＦ_３、－ＣＨ_２－ＣＨ_２Ｃｌ、－ＣＨ_２－ＣＨＣｌ_２、－ＣＨ_２－ＣＣｌ_３、及び－ＣＨＦ－ＣＨ_２Ｃｌが挙げられる。

【0028】

「シクロヘキシル」は、

【化8】

部分を指す。

【0029】

別段の記載がある場合を除き、本書で開示及び／または記載される化合物は、全ての可能な鏡像異性体、ジアステレオマー、メソ異性体及び他の立体異性体形態を含み、任意選択により、それらのラセミ混合物、光学的に純粋な形態、及び中間混合物を含む。鏡像異性体、ジアステレオマー、メソ異性体、及び他の立体異性体形態は、キラルシントンもしくはキラル試薬を使用して調製され得るか、または従来の技法を使用して分割され得る。別段の指定がない限り、本書で開示及び／または記載される化合物がオレフィン二重結合または他の幾何不斉中心を含有する場合、化合物は、Ｅ異性体及びＺ異性体の両方が含まれることが意図される。本書に記載される化合物が互変異性化可能な部分を含有する場合、別段の指定がない限り、その化合物には、全ての可能な互変異性体が含まれることが意図される。

【0030】

「保護基」は、有機合成においてそれと慣例的に関連付けられる意味を有し、すなわち、多官能性化合物中の１つ以上の反応部位を選択的にブロックして、別の保護されていない反応部位で化学反応を選択的に行うことができるようにし、また、選択的反応が完了した後にその基が容易に除去され得るようにする基である。様々な保護基が、例えば、Ｔ．Ｈ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９９）に開示されている。例えば、「ヒドロキシ保護形態」は、ヒドロキシル保護基で保護された少なくとも１つのヒドロキシル基を含有する。同様に、アミン及び他の反応基も同様に保護することができる。

【0031】

「薬学的に許容される塩」という用語は、無毒であることが知られており、薬学的文献で一般的に使用されている、本書における化合物のいずれかの塩を指す。いくつかの実施形態では、化合物の薬学的に許容される塩は、本書に記載される化合物の生物学的有効性を保持し、生物学的またはその他の点で望ましくないものではない。薬学的に許容される塩の例は、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊａｎｕａｒｙ １９７７，６６（１），１－１９に見出すことができる。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて形成可能である。塩の由来となり得る無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、及びリン酸が挙げられる。塩の由来となり得る有機酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエチルスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、ステアリン酸、及びサリチル酸が挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機塩基及び有機塩基を用いて形成可能である。塩の由来となり得る無機塩基としては、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、及びアルミニウムが挙げられる。塩の由来となり得る有機塩基としては、例えば、一級、二級、及び三級アミン、天然に存在する置換アミンなどの置換アミン、環状アミン、ならびに塩基性イオン交換樹脂が挙げられる。有機塩基の例としては、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、及びエタノールアミンが挙げられる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩基付加塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩から選択される。

【0032】

本書に記載される化合物が酸付加塩として得られる場合、酸塩の溶液を塩基性化することにより、遊離塩基を得ることができる。反対に、化合物が遊離塩基である場合、付加塩、特に薬学的に許容される付加塩は、塩基化合物から酸付加塩を調製するための従来の手順に従って、好適な有機溶媒に遊離塩基を溶解させ、溶液を酸で処理することにより生成することができる（例えば、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊａｎｕａｒｙ １９７７，６６（１），１－１９を参照されたい）。当業者であれば、薬学的に許容される付加塩を調製するために使用され得る様々な合成方法を認識するであろう。

【0033】

「溶媒和物」は、溶媒及び化合物の相互作用により形成される。好適な溶媒には、例えば、水及びアルコール（例えば、エタノール）が含まれる。溶媒和物には、一水和物、二水和物、及び半水和物のような、任意の比率の化合物と水と、を有する水和物が含まれる。

【0034】

「置換」という用語は、指定された基または部分が１つ以上の置換基、例えば、アルキル置換基またはハロアルキル置換基を有することを意味する。「非置換」という用語は、指定された基が置換基を有しないことを意味する。「置換」という用語が構造系を説明するために使用される場合、置換は、その系において原子価が許容する任意の位置で起こることが意図される。基または部分が複数の置換基を有する場合、置換基は互いに同じであっても異なっていてもよいことが理解される。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、１～５個の置換基を有する。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、１個の置換基を有する。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、２個の置換基を有する。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、３個の置換基を有する。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、４個の置換基を有する。いくつかの実施形態では、置換された基または部分は、５個の置換基を有する。

【0035】

「任意選択の」または「任意選択により」とは、その後に記載される事象または状況が起こる場合も起こらない場合もあることを意味し、また、その記載は当該事象または状況が起こる事例と起こらない事例を含むことを意味している。例えば、「任意選択により置換されたシクロヘキシル」は、本書で定義されるように、非置換シクロヘキシル及び置換シクロヘキシルの両方を包含する。当業者には理解されるように、１つ以上の置換基を含む任意の基に関して、そのような基が、立体的に非現実的な、合成的に実行不可能な、及び／または本質的に不安定な何らかの置換または置換パターンを導入することは意図されない。また、基または部分が任意選択により置換されている場合、本開示には、基または部分が置換されている実施形態と、基または部分が置換されていない実施形態との両方が含まれることも理解されよう。

【0036】

本書で開示及び／または記載される化合物は、濃縮された同位体形態、例えば、^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ及び／または^１４Ｃの含有量が濃縮されたものであり得る。一実施形態では、化合物は、少なくとも１つの重水素原子を含有する。そのような重水素化形態は、例えば、米国特許第５，８４６，５１４号及び同第６，３３４，９９７号に記載の手段によって作製することができる。そのような重水素化化合物は、本書で開示及び／または記載される化合物の効力を改善し、作用持続時間を増加させ得る。重水素置換化合物は、Ｄｅａｎ，Ｄ．，Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，２０００；６（１０）、Ｋａｂａｌｋａ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｖｉａ Ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃ Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９８９，４５（２１），６６０１－２１、及びＥｖａｎｓ，Ｅ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｊ．Ｒａｄｉｏａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８１，６４（１－２），９－３２に記載されているものなど、様々な方法を使用して合成することができる。

【0037】

「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」という用語には、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などが含まれる。薬学的活性物質のためのかかる媒体及び薬剤の使用は、当技術分野で周知である。いずれかの従来の媒体または薬剤が活性成分と適合しない場合を除いて、その薬学的組成物における使用が企図される。補助的な活性成分を薬学的組成物中に組み込むこともできる。

【0038】

「患者」、「個体」、及び「対象」という用語は、哺乳動物、鳥、または魚などの動物を指す。いくつかの実施形態では、患者または対象は哺乳動物である。哺乳動物としては、例えば、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ブタ、ヒツジ、ウマ、ウシ、及びヒトが挙げられる。いくつかの実施形態では、患者または対象はヒトであり、例えば、処置、観察、または実験の目的であったか、または目的となるヒトである。本書に記載される化合物、組成物、及び方法は、ヒトの療法及び獣医学的用途の両方で有用であり得る。

【0039】

本書で使用される場合、「治療」という用語は、心筋サルコメアを調節する能力を指す。本書で使用される場合、「調節」は、本書に記載される化学成分の存在に対する直接的または間接的な応答として、化学成分が存在しない場合の活性に対する活性の変化を指す。この変化は、活性の増加でも活性の減少でもよく、化学成分と標的の直接的な相互作用に起因する場合もあれば、化学成分と、次いで標的の活性に影響する１つ以上の他の因子の相互作用に起因する場合もある。例えば、化学成分の存在は、例えば、標的に直接結合することによって、（直接的または間接的に）別の因子に標的活性を増加または減少させることによって、または細胞もしくは生物に存在する標的の量を（直接的または間接的に）増加もしくは減少させることにより、標的活性を増加または減少させ得る。

【0040】

「治療上有効な量」または「有効量」という用語は、本書で定義される治療を必要とする患者に投与されたとき、かかる治療に影響するのに十分である、本書で開示及び／または記載される化合物の量を指す。化合物の治療有効量は、心筋サルコメアの調節に応答する疾患を治療するのに十分な量であり得る。治療上有効な量は、例えば、治療される対象及び病態、対象の体重及び年齢、病態の重症度、特定の化合物、従うべき投薬レジメン、投与のタイミング、投与の様式に応じて変わり、これらは全て、当業者によって容易に決定され得る。治療上有効な量は、例えば、化学成分の血中濃度を評価することによって実験的に、またはバイオアベイラビリティを算出することによって理論的に確認することができる。

【0041】

「治療」（及び「治療する」、「治療された」、「治療すること」などの関連用語）は、疾患もしくは障害を阻害すること、疾患もしくは障害の臨床症状の発症を遅延させるもしくは阻止すること、及び／または疾患もしくは障害を軽減すること（すなわち、臨床症状の軽減または回帰を引き起こすこと）のうちの１つ以上を含む。この用語は、状態または疾患の完全及び部分的な低減、ならびに疾患または障害の臨床症状の完全または部分的な低減の両方を包含する。よって、本書で記載及び／または開示される化合物は、既存の疾患もしくは障害の悪化を防止するか、疾患もしくは障害の管理を支援するか、または疾患もしくは障害を低減もしくは消失させ得る。

【0042】

「ＡＴＰａｓｅ」は、ＡＴＰを加水分解する酵素を指す。ＡＴＰａｓｅには、ミオシンなどの分子モーターを含むタンパク質が含まれる。

【0043】

本書で使用される場合、「選択的結合」または「選択的に結合する」は、他のタイプとは対照的に、１つのタイプの筋肉または筋線維中の標的タンパク質への優先的な結合を指す。例えば、化合物が、遅筋線維もしくはサルコメアのトロポニン複合体中のトロポニンＣ、または心筋サルコメアのトロポニン複合体中のトロポニンＣと比較して、速骨格筋線維またはサルコメアのトロポニン複合体中のトロポニンＣに優先的に結合する場合、化合物は速骨格筋トロポニンＣに選択的に結合する。

【0044】

「備える」として本書に記載される実施形態は、「からなる」及び「から本質的になる」実施形態を含むことが理解される。

【0045】

化合物
化合物及びその塩（薬学的に許容される塩など）が、概要及び添付の特許請求の範囲を含め、本書で詳述される。また、本書に記載される化合物の、幾何異性体（シス／トランス）、Ｅ／Ｚ異性体、鏡像異性体、ジアステレオマーを含む、ありとあらゆる立体異性体、ならびに本書に記載される化合物の、ラセミ混合物、塩、及び溶媒和物を含む、任意の比率におけるそれらの混合物を含む、本書に記載される化合物の全ての使用、ならびに、かかる化合物を作製する方法が提供される。本書に記載されるあらゆる化合物は、薬物とも呼ばれ得る。

【0046】

一態様では、式（Ｉ）の化合物：

【化9】

（式中、
Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、
Ｒ^２は、Ｈ、ハロ、またはＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ^３は、
（ｉ）シクロヘキシルであって、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルもしくはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される、上記シクロヘキシル、または
（ｉｉ）Ｃ_１－６アルキル、であり、
Ｒ^４は、
（ｉ）－Ｃ（Ｏ）Ｈ、
（ｉｉ）－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、

【化10】

であり、
ただし、
（１）Ｒ^３が、Ｃ_１－６アルキルである場合、Ｒ^４は

【化11】

であり、
（２）Ｒ^３が、イソプロピルである場合、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は少なくとも２であり、
（３）Ｒ^３が、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換されたシクロヘキシルである場合、Ｒ^４は、－Ｃ（Ｏ）Ｈ以外である）、
またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。

【0047】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^４は、－Ｃ（Ｏ）Ｈである。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、化合物は、式（Ｉ－Ａ）のもの：

【化12】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。

【0048】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^４は、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、化合物は、式（Ｉ－Ｂ）のもの：

【化13】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。

【0049】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^４は、

【化14】

である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、化合物は、式（Ｉ－Ｃ）のもの：

【化15】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。

【0050】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^４は、

【化16】

である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、化合物は、式（Ｉ－Ｄ）のもの：

【化17】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。

【0051】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｃ）、または（Ｉ－Ｄ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、非置換シクロヘキシルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される。

【0052】

いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６アルキル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－３アルキル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上の独立して選択されるメチルまたはエチル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上のメチル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つ以上のエチル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つのメチル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、任意選択により、１つのエチル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化18】

である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化19】

である。

【0053】

いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは１つ以上の独立して選択されるＣ_１－６ハロアルキル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、シクロヘキシルであり、シクロヘキシルは、１つ以上の独立して選択されるＣ_１－３ハロアルキル置換基によって置換される。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化20】

である。

【0054】

いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化21】

である。

【0055】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）または式（Ｉ－Ａ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、式中、Ｒ^３は、

【化22】

であり、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルであり、化合物は、式（Ｉ－Ａ１）のもの：

【化23】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、Ｒ^ｘはメチルである。

【0056】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）または式（Ｉ－Ｂ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、式中、Ｒ^３は、

【化24】

であり、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、化合物は、式（Ｉ－Ｂ１）のもの：

【化25】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ－Ｂ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^ｘは、メチルである。

【0057】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）または式（Ｉ－Ｃ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、式中、Ｒ^３は、

【化26】

であり、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、化合物は、式（Ｉ－Ｃ１）のもの：

【化27】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ－Ｃ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^ｘは、メチルである。

【0058】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）または式（Ｉ－Ｄ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、式中、Ｒ^３は、

【化28】

であり、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、化合物は、式（Ｉ－Ｄ１）のもの：

【化29】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^ｘは、メチルである。

【0059】

前述のいくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化30】

であり、

【化31】

部分は、（１ｒ，４ｒ）立体化学的構成で分子の残りの部分に結合している。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化32】

である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化33】

である。

【0060】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ｃ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_１－５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_１－４アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_１－３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_３－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_３－５アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ^３は、

【化34】

である。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化35】

である。

【0061】

前述のいくつかの実施形態では、Ｒ^３は、Ｃ_１－６アルキルであり、Ｒ^３のＣ_１－６アルキル部分は、Ｓ立体化学的構成で分子の残りに結合している。いくつかの実施形態では、Ｒ^３は、

【化36】

である。

【0062】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）または式（Ｉ－Ｃ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^３はイソプロピルであり、化合物は、式（Ｉ－Ｃ２）のもの：

【化37】

またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ－Ｃ２）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、そのとき、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は少なくとも２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は、２である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は、少なくとも３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は、３である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は、少なくとも４である。いくつかの実施形態では、Ｒ^１及びＲ^２のハロ原子の総数は、４である。

【0063】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^１は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロである。他の実施形態では、Ｒ^１は、クロロである。

【0064】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^１は、Ｃ_１－６ハロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１－６ハロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１－２ハロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、－ＣＦ_３である。

【0065】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^２は、Ｈである。

【0066】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^２は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、フルオロまたはクロロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、フルオロである。他の実施形態では、Ｒ^２は、クロロである。

【0067】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、Ｃ_１－３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、Ｃ_１－３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、Ｃ_１－２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、メチルである。

【0068】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、クロロまたはフルオロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、メチルである。

【0069】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、例えば、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、Ｒ^１は、ハロであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、クロロであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、Ｈである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、－ＣＦ_３であり、Ｒ^２は、Ｈである。

【0070】

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロであり、Ｒ^２は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロであり、Ｒ^２は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロであり、Ｒ^２は、フルオロまたはクロロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロであり、Ｒ^２は、フルオロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、クロロであり、Ｒ^２は、クロロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロであり、Ｒ^２は、クロロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、クロロであり、Ｒ^２は、フルオロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、ハロである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、－ＣＦ_３であり、Ｒ^２は、ハロである。

【0071】

いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、ハロであり、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロであり、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロまたはクロロであり、Ｒ^２は、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、フルオロであり、Ｒ^２は、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、クロロであり、Ｒ^２は、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^１は、－ＣＦ_３であり、Ｒ^２は、Ｃ_１－６アルキルである。

【0072】

いくつかの実施形態では、本書では、表１に記載の化合物及びそれらの塩が提供される。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【0073】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が本書において提供され、化合物は、
５－（４－クロロベンジル）－８－（４－エチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
８－（４－エチルシクロヘキシル）－５－（４－フルオロベンジル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒド、
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（４－フルオロ－３－メチルベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（３－クロロ－４－フルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（３－クロロ－４－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（４－クロロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（４－エチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
８－イソプロピル－２－（ピリダジン－３－イル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
８－（ｓｅｃ－ブチル）－５－（３，４－ジフルオロベンジル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（ペンタン－３－イル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
８－（ｓｅｃ－ブチル）－５－（４－フルオロ－３－メチルベンジル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（４－フルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
５－（４－クロロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド、
５－（４－フルオロベンジル）－８－（４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－４－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、及び
８－（４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－５－（４－フルオロベンジル）－２－（ピリダジン－４－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン、
からなる群、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、から選択される。

【0074】

いくつかのバリエーションでは、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、またはそれらの任意のバリエーション、または表１の化合物などの本書に記載される化合物のいずれかは、重水素化されてもよい（すなわち、１つ以上の水素原子が１つ以上の重水素原子によって置き換えられている）。これらのバリエーションのいくつかでは、化合物は、単一の部位で重水素化される。他のバリエーションでは、化合物は、複数の部位で重水素化される。重水素化化合物は、対応する重水素化されていない化合物の調製と同様の様式で、重水素化された出発物質から調製することができる。当技術分野で知られている他の方法を使用して、水素原子を重水素原子で置き換えてもよい。

【0075】

本書に示される任意の式、例えば、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）は、構造式によって示される構造、ならびにある特定のバリエーションまたは形態を有する化合物を表すことが意図される。特に、本書で示されるいずれかの式の化合物は、不斉中心を有する可能性があり、したがって、異なる鏡像異性体形態またはジアステレオマー形態で存在する可能性がある。一般式の化合物の全ての光学異性体及び立体異性体、ならびに任意の比率におけるそれらの混合物は、その式の範囲内にあるとみなされる。よって、本書で示されるいずれの式も、ラセミ体、１つ以上の鏡像異性体形態、１つ以上のジアステレオマー形態、１つ以上のアトロプ異性形態、及び任意の比率におけるそれらの混合物を表すことが意図される。表１の化合物が特定の立体化学的構成で示されている場合、本書では、化合物の任意の代替的な立体化学的構成、ならびに任意の比の化合物の立体異性体の混合物も提供される。例えば、表１の化合物が、「Ｓ」立体化学的配置にある立体中心を有する場合、その立体中心が「Ｒ」立体化学的配置にある当該化合物の鏡像異性体も本書において提供される。同様に、表１の化合物が、「Ｒ」配置にある立体中心を有する場合、「Ｓ」立体化学的配置にある当該化合物の鏡像異性体も本書において提供される。また、「Ｓ」と「Ｒ」の両方の立体化学的配置を有する化合物の混合物も提供される。更に、表１の化合物が２つ以上の立体中心を有する場合、化合物の任意の鏡像異性体またはジアステレオマーも提供される。例えば、表１の化合物が、それぞれ「Ｒ」及び「Ｒ」の立体化学的構成を有する第１の立体中心及び第２の立体中心を含有する場合、それぞれ「Ｓ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、それぞれ「Ｓ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、ならびにそれぞれ「Ｒ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、を有する第１及び第２の立体中心を有する化合物の立体異性体、も提供される。表１の化合物が、それぞれ「Ｓ」及び「Ｓ」の立体化学的構成を有する第１の立体中心及び第２の立体中心を含有する場合、それぞれ「Ｒ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、それぞれ「Ｓ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、ならびにそれぞれ「Ｒ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、を有する第１及び第２の立体中心を有する化合物の立体異性体、も提供される。表１の化合物が、それぞれ「Ｓ」及び「Ｒ」の立体化学的構成を有する第１の立体中心及び第２の立体中心を含有する場合、それぞれ「Ｒ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、それぞれ「Ｒ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、ならびにそれぞれ「Ｓ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、を有する第１及び第２の立体中心を有する化合物の立体異性体、も提供される。同様に、表１の化合物が、それぞれ「Ｒ」及び「Ｓ」の立体化学的構成を有する第１の立体中心及び第２の立体中心を含有する場合、それぞれ「Ｓ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、それぞれ「Ｒ」及び「Ｒ」の立体化学的構成、ならびにそれぞれ「Ｓ」及び「Ｓ」の立体化学的構成、を有する第１及び第２の立体中心を有する化合物の立体異性体、も提供される。更に、特定の構造は、幾何異性体（すなわち、シス及びトランス異性体）として、互変異性体として、またはアトロプ異性体として存在し得る。更に、本書に示される任意の式は、そのような形態が明示的に列挙されていなくても、そのような化合物の水和物、溶媒和物、及び非晶質及び多晶質の形態、ならびにそれらの混合物のうちのいずれか１つも指すことを意図している。いくつかの実施形態では、溶媒は水であり、溶媒和物は水和物である。

【0076】

中間体及び最終化合物を含む、本書で詳述される化合物の代表的な例は、表及び本書のいずれかの箇所で示されている。一態様では、適用可能な場合、単離して個体または対象に投与することができる中間体化合物を含め、任意の化合物が、本書で詳述される方法において使用され得ることが理解される。

【0077】

本書で示す化合物は、塩が示されていなくとも塩として存在してよく、当業者には十分理解されるように、本書において提供される組成物及び方法は、ここで示される化合物の全ての塩及び溶媒和物、ならびに化合物の非塩形態及び非溶媒和物形態を包含するものと理解される。いくつかの実施形態では、本書において提供される化合物の塩は、薬学的に許容される塩である。

【0078】

１つのバリエーションにおいて、本書の化合物は、個体または対象への投与のために調製された合成化合物である。別のバリエーションにおいて、実質的に純粋な形態の化合物を含む組成物が提供される。別のバリエーションにおいて、本書で詳述される化合物と薬学的に許容される担体と、を含む薬学的組成物が提供される。別のバリエーションにおいて、化合物を投与する方法が提供される。精製された形態、薬学的組成物、及び化合物を投与する方法は、本書において詳述される任意の化合物またはその形態に好適である。

【0079】

本書において提供されるＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４の任意のバリエーションまたは実施形態は、各組み合わせが同様に個別にかつ具体的に記載されているかのように、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４の他の全てのバリエーションまたは実施形態と組み合わせることができる。

【0080】

本書で使用される場合、いずれかの変数が化学式に複数回出現するとき、各出現におけるその定義は、あらゆる他の出現におけるその定義とは無関係である。

【0081】

式（Ｉ）は、その全ての部分式を含む。例えば、式（Ｉ）は、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物を含む。

【0082】

表１を含む、本書において提供される特定の化合物名は、ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ１５．０．０．１０６によって提供される。当業者であれば、化合物は、様々な一般的に認識されている命名体系及び記号を使用して名づけられるか、または識別され得ることを理解するであろう。例として、化合物は、一般名、系統名、または非系統名で名づけられまたは識別され得る。化学技術分野で一般的に認識されている命名体系及び記号には、例えば、Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）、ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗ Ｕｌｔｒａ、及び国際純正応用化学連合（ＩＵＰＡＣ）が含まれる。

【0083】

いくつかの実施形態では、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩は、ｈＥＲＧプロファイル、毒性プロファイル、安全ウィンドウ、選択性、オフターゲットプロファイル、良好な薬物／薬物相互作用プロファイル、バイオアベイラビリティ、クリアランス及び半減期を含むＰＫパラメータ、作用機序、ＣＹＰ阻害及び時間依存性阻害プロファイル、透過性及び／または流出、溶解性、代謝、非結合画分、適切なヒト用量、ならびに大規模な合成の容易さ、のうちの１つ以上に関連する利点を有してもよい。
組成物

【0084】

本書で開示及び／または記載される化合物、ならびに１つ以上の更なる薬剤、医薬品、アジュバント、担体、賦形剤などを含む薬学的組成物のような、組成物も提供される。好適な薬剤及び医薬品には、本書に記載されるものが含まれる。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、薬学的に許容される賦形剤またはアジュバントと、本書に記載される少なくとも１つの化学成分と、を含む。薬学的に許容される賦形剤の例は、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、クロスカルメロースナトリウム、グルコース、ゼラチン、スクロース、及び炭酸マグネシウムを含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、本書に記載の１つ以上の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含有する薬学的組成物、などの組成物が提供される。

【0085】

いくつかの実施形態では、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物を含む薬学的に許容される組成物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。いくつかの態様では、組成物は、本書に記載される化合物の調製に使用され得る合成中間体を含有し得る。本書に記載される組成物は、任意の他の好適な活性剤または不活性剤を含有し得る。

【0086】

本書に記載される組成物のいずれも、無菌であり得るか、または無菌である成分を含有し得る。滅菌は、当技術分野で知られている方法によって達成することができる。本書に記載される組成物のいずれも、実質的に純粋な１つ以上の化合物またはコンジュゲートを含有し得る。

【0087】

また、本書に記載される薬学的組成物と、本書に記載される疾患または状態を患っている患者を治療するために組成物を使用するための説明書とを備える、パッケージ化された薬学的組成物が提供される。

【0088】

使用方法
本書における化合物及び薬学的組成物は、個体または対象における疾患または状態を治療または予防するために使用され得る。

【0089】

予防的な方法で使用される場合、本書に開示及び／または記載される化合物は、疾患または障害が発症するのを防ぎ、または疾患もしくは障害が発症するリスクのある個体もしくは対象において、発症し得る疾患もしくは障害の程度を軽減し得る。

【0090】

理論に拘束されることなく、本書に開示される化合物及び薬学的組成物は、ミオシンを阻害することによって作用すると考えられる。この阻害は、収縮の量を低減させるアクチンフィラメントと相互作用する独立したミオシン頭部の数を潜在的に減少させる。心筋の収縮を低減させることは、過剰収縮が問題である心疾患の治療にとって重要であり得る。いくつかの実施形態では、個体または対象において心疾患を治療または予防する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、を投与することを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態では、心疾患の治療または予防を必要とする対象においてそれを治療または予防する方法であって、対象に、本書に記載の治療上有効な量の少なくとも１つの化学成分を投与することを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態では、心疾患の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、対象に、本書に記載の治療上有効な量の少なくとも１つの化学成分を投与することを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態では、確立されたまたは診断された心疾患の治療を必要とする対象においてそれを治療する方法であって、対象に、本書に記載の治療上有効な量の少なくとも１つの化学成分を投与することを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態では、心疾患の予防を必要とする対象においてそれを予防する方法であって、対象に、本書に記載の治療上有効な量の少なくとも１つの化学成分を投与することを含む、上記方法を提供する。

【0091】

対象における心疾患の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も、本書において提供される。いくつかの態様では、療法によりヒトまたは動物の身体を処置する方法において使用するための、本書に記載される化合物または組成物が提供される。いくつかの実施形態では、本書では、療法によりヒトまたは動物の身体を処置する方法において使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、心疾患の治療または予防に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、心疾患の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、確立された、または診断された心疾患の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、心疾患の予防に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、ＨＣＭに関連する疾患または状態の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、続発性左心室壁肥厚に関連する疾患または状態の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、心疾患に関連する症状の改善に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。他の実施形態では、本書では、心疾患に関連する症状のリスクの低減に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。他の実施形態では、本書では、小左心室内腔、内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、左心室からの血流の閉塞、心臓肥大、少ない心臓一回排出量、左心室の弛緩障害、高左心室充填圧、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。ある特定の実施形態では、本書では、小左心室内腔及び内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。いくつかの実施形態では、本書では、筋ジストロフィーの治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、本書では、糖原病の治療に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。他の実施形態では、本書では、心筋サルコメアの阻害などの心筋サルコメアの調節に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。更に他の実施形態では、本書では、心筋ミオシンの増強に使用するための、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。

【0092】

いくつかの実施形態では、対象は、哺乳動物である。いくつかの実施形態では、対象は、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ブタ、ヒツジ、ウマ、ウシ、またはヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、確立した、または診断された心疾患を有する。いくつかの実施形態では、対象は、確立した、または診断された肥大性心筋症（ＨＣＭ）を有する。いくつかの実施形態では、対象は、心疾患を発症するリスクがある。いくつかの実施形態では、対象は、心疾患のリスクを増加させる変異を有する。いくつかの実施形態では、対象は、肥大性心筋症（ＨＣＭ）のリスクを増加させる変異を有する。いくつかの実施形態では、変異は、サルコメア変異である。いくつかの実施形態では、変異は、ミオシン重鎖β（ＭＨＣ－β）、心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）、トロポミオシンアルファ－１鎖（ＴＰＭ１）、ミオシン結合タンパク質Ｃ心筋型（ＭＹＢＰＣ３）、心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）、ミオシン必須軽鎖（ＥＬＣ）、タイチン（ＴＴＮ）、ミオシン調節軽鎖２心室／心筋アイソフォーム（ＭＬＣ－２）、心筋アルファアクチン、筋肉ＬＩＭタンパク質（ＭＬＰ）、またはタンパク質キナーゼＡＭＰ活性化非触媒サブユニットガンマ２（ＰＲＫＡＧ２）の変異である。いくつかの実施形態では、変異は、ＭＨＣ－βの変異である。いくつかの実施形態では、対象は、確認された遺伝的病因なしに、確立された、または診断された肥大性心筋症を有する。

【0093】

いくつかの実施形態では、対象は、進行性の症状のリスクが高い。いくつかの実施形態では、対象は、心房細動、心室頻拍性不整脈、脳卒中、及び／または突然死のリスクが高い。いくつかの実施形態では、対象は、運動能力が低減している。いくつかの実施形態では、低減した運動能力は、年齢が適合した対照集団と比較した低減である。いくつかの実施形態では、対象は、心疾患を治療するための外科的介入または経皮的焼灼療法を受ける資格がある。

【0094】

いくつかの実施形態では、心疾患は、肥大性心筋症（ＨＣＭ）である。いくつかの実施形態では、心疾患は、閉塞性ＨＣＭである。いくつかの実施形態では、心疾患は、非閉塞性ＨＣＭである。いくつかの実施形態では、ＨＣＭは、サルコメア変異に関連している。いくつかの実施形態では、ＨＣＭは、非サルコメア変異に関連している。いくつかの実施形態では、心疾患は、サルコメア変異及び／または非サルコメア変異によって引き起こされる閉塞性または非閉塞性ＨＣＭである。いくつかの実施形態では、サルコメア変異は、ミオシン重鎖β（ＭＨＣ－β）、心筋トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）、トロポミオシンアルファ－１鎖（ＴＰＭ１）、ミオシン結合タンパク質Ｃ心筋型（ＭＹＢＰＣ３）、心筋トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）、ミオシン必須軽鎖（ＥＬＣ）、タイチン（ＴＴＮ）、ミオシン調節軽鎖２心室／心筋アイソフォーム（ＭＬＣ－２）、心筋アルファアクチン、または筋肉ＬＩＭタンパク質（ＭＬＰ）の変異である。いくつかの実施形態では、サルコメア変異は、ＭＨＣ－βの変異である。いくつかの実施形態では、非サルコメア変異は、タンパク質キナーゼＡＭＰ活性化非触媒サブユニットガンマ２（ＰＲＫＡＧ２）の変異である。

【0095】

いくつかの実施形態では、本書では、ＨＣＭに関連する疾患または状態を治療する方法が提供され、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を、投与することを含む。いくつかの実施形態では、疾患または状態は、ファブリー病、ダノン病、ミトコンドリア心筋症、またはヌーナン症候群である。

【0096】

ＨＣＭに関連する疾患または状態の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も、本書において提供される。

【0097】

いくつかの実施形態では、心疾患は、駆出率が保たれた心不全（ＨＦｐＥＦ）である。いくつかの実施形態では、心疾患は、拡張機能不全である。いくつかの実施形態では、心疾患は、心筋症である。いくつかの実施形態では、心疾患は、原発性または続発性拘束型心筋症である。いくつかの実施形態では、心疾患は、冠動脈疾患によって引き起こされる状態または症状である。いくつかの実施形態では、心疾患は、心筋梗塞または狭心症である。いくつかの実施形態では、心疾患は、左心室流出路閉塞である。いくつかの実施形態では、心疾患は、高血圧性心疾患である。いくつかの実施形態では、心疾患は、先天性心疾患である。いくつかの実施形態では、心疾患は、心虚血及び／または冠状動脈性心疾患である。いくつかの実施形態では、心疾患は、糖尿病性心疾患である。他の実施形態では、心疾患は、うっ血性心不全である。いくつかの実施形態では、心疾患は、右心不全である。他の実施形態では、心疾患は、心腎症候群である。いくつかの実施形態では、心疾患は、浸潤性心筋症である。いくつかの実施形態では、心疾患は、心臓老化もしくは加齢による拡張機能不全であるか、またはそれに関連する状態である。いくつかの実施形態では、心疾患は、左心室肥大及び／または求心性左心室リモデリングであるか、またはそれらに関連する状態である。

【0098】

いくつかの実施形態では、個体または対象において続発性左心室壁肥厚に関連する疾患または状態を治療する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態では、この疾患は、高血圧、弁膜性心疾患（大動脈狭窄、僧帽弁逆流）、代謝症候群（糖尿病、肥満）、末期腎疾患、強皮症、睡眠時無呼吸症、アミロイドーシス、ファブリー病、フリードライヒ運動失調症、ダノン病、ヌーナン症候群、またはポンペ病である。

【0099】

また、続発性左心室壁肥厚に関連する疾患または状態の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も本書において提供される。

【0100】

いくつかの実施形態では、対象において心疾患に関連する症状を緩和する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を、投与することを含む、上記方法を提供し、症状は、心臓弾性能の低下または低減、拡張期左心室の弛緩の不良または低減、異常な左心房圧（例えば、異常に高い左心房圧）、発作性または永久的な心房細動、左心房及び肺の毛細血管楔圧力の増加、左心室拡張期圧の増加、卒倒、拡張期中の心室の弛緩、心室線維腫、左心室肥大、左心室質量、左心室壁厚の増加、左心室の中間腔閉塞、僧帽弁の収縮期前方運動の増加、左心室流出路閉塞、胸痛、労作性呼吸困難、前卒倒、運動能力の異常、及び疲労から選択される１つ以上である。

【0101】

いくつかの実施形態では、対象において心疾患に関連する症状のリスクを低減する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、上記方法を提供し、症状は、心臓突然死、心臓弾性能の低下または低減、拡張期左心室の弛緩の不良または低減、異常な左心房圧（例えば、異常に高い左心房圧）、発作性または永久的な心房細動、左心房及び肺の毛細血管楔圧力の増加、左心室拡張期圧の増加、卒倒、拡張期中の心室弛緩、心室線維症、左心室肥大、左心室質量、左心室壁厚の増加、左心室の中間腔閉塞、僧帽弁の収縮期前方運動の増加、左心室流出路閉塞、胸痛、労作性呼吸困難、前卒倒、運動能力の異常、及び疲労から選択される１つ以上である。

【0102】

いくつかの実施形態では、個体または対象において、小左心室内腔、内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、左心室からの血流出の閉塞、心肥大、少ない心臓一回排出量、左心室の弛緩障害、高左心室充填圧、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態を治療する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を、投与することを含む、上記方法を提供する。

【0103】

いくつかの実施形態では、個体または対象において、小左心室内腔及び内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態を治療する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、上記方法を提供する。

【0104】

また、小左心室内腔及び内腔閉塞、高心拍出量性左心室収縮、心筋虚血、または心線維症に関連する疾患または状態の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も、本書において提供される。

【0105】

いくつかの実施形態では、個体または対象において筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）を治療する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、上記方法を提供する。また、筋ジストロフィー（例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー）の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も、本書において提供される。

【0106】

いくつかの実施形態では、個体または対象において糖原病を治療する方法であって、それを必要とする個体または対象に、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、上記方法を提供する。また、糖原病の治療のための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩の使用も、本書において提供される。

【0107】

また、個体または対象において心筋サルコメアを調節するための方法であって、それを必要とする個体または対象に、本書に記載の治療上有効な量の少なくとも１つの化学成分を投与することを含む、上記方法も提供する。いくつかの実施形態では、心筋サルコメアを阻害する方法であって、心筋サルコメアを、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩などの本書に記載の少なくとも１つの化学成分と接触させることを含む、上記方法を提供する。本書に追加的に提供されるのは、個体または対象の心筋サルコメアを阻害するための薬剤の製造における、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩などの本書に記載の少なくとも１つの化学成分の使用である。

【0108】

また、個体または対象において心筋ミオシンを増強するための方法であって、それを必要とする個体または対象に、治療有効量の本書に記載の少なくとも１つの化学成分、例えば、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を、投与することを含む、上記方法を提供する。本書に追加的に提供されるのは、個体または対象において心筋ミオシンを増強するための薬剤の製造における、例えば、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩などの、本書に記載の少なくとも１つの化学成分の使用である。

【0109】

いくつかの実施形態では、本書において提供される方法は、治療の有効性を監視することを更に含む。指標の例としては、以下のうちの１つ以上の改善が挙げられるが、これらに限定されない。ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）機能分類、運動能力、心臓弾性能、拡張期左心室の弛緩、左心房圧、発作性または永久的な心房細動、左心房及び肺の毛細血管楔圧力、左心室拡張期圧、卒倒、拡張期中の心室弛緩、心室線維症、左心室肥大、左心室質量、左心室壁厚、左心室の中間腔閉塞、僧帽弁の収縮期前方運動、左心室流出路閉塞、胸痛、労作性呼吸困難、前卒倒、運動能力異常、及び疲労。これらの指標は、自己報告、ホルター心電図を含むＥＣＧ、心エコー検査、心臓ＭＲＩ、ＣＴ、生検、心肺運動検査（ＣＰＥＴ）、及びアクティグラフィーを含む当該技術分野で既知の技法によって監視することができる。

【0110】

いくつかの実施形態では、本化合物は、心筋細胞の収縮性を低減させる。いくつかの実施形態では、化合物は、心筋細胞の収縮性を４０％を超えて、例えば、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％を超えて低減させる。いくつかの実施形態では、化合物は、心筋細胞の収縮性を４０％～９０％、例えば、４０％～８０％、４０％～７０％、５０％～９０％、５０％～８０％、または５０％～７０％低減させた。いくつかの実施形態では、本化合物は、心筋細胞におけるカルシウム移行を有意に変化させない。いくつかの実施形態では、本化合物は、心筋細胞におけるＡＴＰａｓｅ活性を低下させる。収縮性、ＡＴＰａｓｅ活性、及びカルシウム移行を測定する方法は、例えば、カルシウム標識、電気生理学的記録、及び顕微鏡イメージングによって、当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、化合物は、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）タンパク質を有意に阻害または誘導しない。

【0111】

いくつかの実施形態では、本書では、排出半減期（ｔ_１／２、ｌｎ（２）／ｋとして計算され、排出速度定数ｋは、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数の線形回帰の傾きの絶対値として計算される）が、ヒトにおいて３０時間以下である、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、もしくは（Ｉ－Ｄ１）の化合物、または表１の化合物、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、ヒトで１０時間≦ｔ_１／２≦３０時間である。いくつかの実施形態では、ｔ_１／２は、約１０時間～約３０時間、約１０時間～約２５時間、約１５時間～約３０時間、または約１５時間～約２５時間である。いくつかの実施形態では、ｔ_１／２は、約１２、１５、１８、２１、２４、２７、または３０時間である。いくつかの実施形態では、本書において提供される化合物の排出半減期は、その化合物が１日１回の投与に適しているようなものである。

【0112】

いくつかの実施形態では、対象は、治療前に通常よりも厚い左心室壁を有する。いくつかの実施形態では、対象は、治療前に１８ｍｍ、２０ｍｍ、２２ｍｍ、２５ｍｍ、または３０ｍｍを超えるなど、１５ｍｍを超える左心室壁厚を有する。いくつかの実施形態では、左心室壁厚は、治療後に５％を超えて、例えば、８％、１０％、１２％、１５％、２０％、または３０％を超えて低減される。左心室壁厚は、心エコー、ＣＴスキャン、または心臓ＭＲＩなどの当該技術分野で既知の方法によって測定することができる。

【0113】

いくつかの実施形態では、対象は、治療前に異常な心線維症を有する。いくつかの実施形態では、異常な心線維症は、治療後に５％を超えて、例えば、８％、１０％、１２％、１５％、２０％、または３０％を超えて低減される。心線維症は、生検または心臓ＭＲＩなどの当該技術分野で既知の方法によって測定することができる。

【0114】

いくつかの実施形態では、対象は、治療前に運動能力が低減している。いくつかの実施形態では、対象の運動能力は、治療後に５％を超えて、例えば、８％、１０％、１２％、１５％、２０％または３０％を超えて増加する。いくつかの実施形態では、運動能力は、心肺運動試験（ＣＰＥＴ）によって測定される。ＣＰＥＴは、酸素消費量の変化（ＶＯ_２ ｍａｘ）を測定する。ＣＰＥＴ及びＶＯ_２ ｍａｘを測定する方法は、当該技術分野で周知である（Ｍａｌｈｏｔｒａ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ：Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ，２０１６，４（８）：６０７－６１６；Ｇｕａｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｍｅｒ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｃａｒｄｉｏｌ，２０１７，７０ （１３）：１６１８－１６３６、Ｒｏｗｉｎ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ：Ｃａｒｉｏｖａｓｃ Ｉｍａｇｉｎｇ，２０１７，１０（１１）：１３７４－１３８６）。いくつかの実施形態では、ＶＯ_２ ｍａｘは、治療後に、１．２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．４ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．７ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、２．２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、２．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、３ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、３．２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、または３．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２を超えるなど、１ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２を超えて改善される。

【0115】

いくつかの実施形態では、対象は、治療前に、ＩＩ、ＩＩＩ、またはＩＶのニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）機能分類を有する。いくつかの実施形態では、対象は、治療前にＩＩＩまたはＩＶのニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）機能分類を有する。いくつかの実施形態では、対象は、治療前にＩＶのニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）機能分類を有する。いくつかの実施形態では、対象は、治療後に同じＮＹＨＡ機能クラスに留まるか、またはＮＹＨＡ機能クラスが低下している。

【0116】

いくつかの実施形態では、ＶＯ_２ ｍａｘは、１．２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．４ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、１．７ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、または２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２を超えるなど、１ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２を超えて改善され、対象は、治療後にＮＹＨＡ機能クラスが低下している。いくつかの実施形態では、ＶＯ_２ ｍａｘは、２．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、３ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、３．２ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２、または３．５ｍＬ／ｋｇ／ｍ^２を超えて改善され、対象は、治療後に同じＮＹＨＡ機能クラスに留まるか、またはＮＹＨＡ機能クラスが低下している。

【0117】

いくつかの実施形態では、対象の毎日の機能及び／または活動レベルは、治療後に改善される。改善された毎日の機能及び／または活動レベルは、例えば、ＦｉｔＢｉｔまたはＦｉｔＢｉｔのようなモニターなどのジャーナリングまたはアクティグラフィーによって測定され得る。

【0118】

いくつかの実施形態では、対象は、治療後に、息切れの減少、胸痛の減少、心房細動及び心室不整脈などの不整脈負荷の減少、心不全の発生率の減少、ならびに心室流出閉塞の減少のうちの１つ以上を有する。

【0119】

投薬量
本書で開示及び／または記載される化合物及び組成物は、治療上有効な投薬量、例えば、病状の治療を行うのに十分な投薬量で投与される。本書に記載される化学成分のヒトの投薬量レベルは、まだ最適化されていないが、概して、約０．０１～１００ｍｇ／ｋｇ体重の一日用量範囲であり、いくつかの実施形態では、約０．０５～１０．０ｍｇ／ｋｇ体重であり、いくつかの実施形態では、約０．１０～１．４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。よって、７０ｋｇのヒトに投与する場合、投薬量範囲は、いくつかの実施形態では、１日当たり約０．７～７０００ｍｇであり、いくつかの実施形態では、１日当たり約３．５～７００．０ｍｇであり、いくつかの実施形態では、１日当たり約７～１００．０ｍｇである。投与される化学成分の量は、例えば、治療される対象及び病状、病気の重篤度、投与の様式及びスケジュール、ならびに処方医師の判断に依存する。例えば、経口投与の例示的な投薬量範囲は、１日当たり約５ｍｇ～約５００ｍｇであり、例示的な静脈内投与の投薬量は、１日当たり約５ｍｇ～約５００ｍｇであり、それぞれ化合物の薬物動態に依存する。

【0120】

一日用量は、１日に投与される総量である。一日用量は、毎日、隔日、毎週、２週間ごと、毎月、または様々な間隔で投与され得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施形態では、一日用量は、１日から対象の生涯に及ぶ期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、一日用量は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、一日用量は、２回、３回、または４回の分割用量など、複数の分割用量で投与される。いくつかの実施形態では、一日用量は、２回の分割用量で投与される。

【0121】

本書に開示及び／または記載される化合物及び組成物の投与は、経口、舌下、皮下、非経口、静脈内、鼻腔内、局所、経皮、腹腔内、筋肉内、肺内、膣内、直腸内、または眼内投与を含むが、これらに限定されない、治療剤のための任意の受け入れられた投与様式を介して行うことができる。いくつかの実施形態では、化合物または組成物は、経口投与または静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本書で開示及び／または記載される化合物または組成物は、経口投与される。

【0122】

薬学的に許容される組成物には、錠剤、カプセル剤、散剤、液剤、懸濁剤、坐剤、及びエアロゾルの形態などの固体、半固体、液体及びエアロゾルの剤形が含まれる。本書で開示及び／または記載される化合物は、長期投与、及び／または所定の速度でのパルス投与のために、徐放または制御放出用の剤形（例えば、制御放出／徐放用の丸剤、デポー注射、浸透圧ポンプ、または経皮（電気輸送を含む）パッチ形態）で投与することもできる。いくつかの実施形態では、組成物は、正確な用量の単回投与に好適な単位剤形で提供される。

【0123】

本書で開示及び／または記載される化合物は、単独で投与してもよく、１つ以上の従来の薬学的担体または賦形剤（例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、クロスカルメロースナトリウム、グルコース、ゼラチン、スクロース、炭酸マグネシウム）と組み合わせて投与してもよい。所望であれば、薬学的組成物は、湿潤剤、乳化剤、可溶化剤、ｐＨ緩衝剤など（例えば、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、シクロデキストリン誘導体、モノラウリン酸ソルビタン、酢酸トリエタノールアミン、オレイン酸トリエタノールアミン）のような無毒の補助物質を少量含んでもよい。概して、薬学的組成物は、意図される投与様式に応じて、約０．００５重量％～９５重量％、または約０．５重量％～５０重量％の、本書で開示及び／または記載される化合物を含む。かかる剤形を調製する実際の方法は、当業者に既知であるか、または明らかであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａを参照されたい。

【0124】

いくつかの実施形態では、組成物は、丸剤または錠剤の形態を取り、したがって、組成物は、本書で開示及び／または記載される化合物とともに、希釈剤（例えば、ラクトース、スクロース、リン酸二カルシウム）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）、及び／または結合剤（例えば、デンプン、アラビアガム、ポリビニルピロリジン、ゼラチン、セルロース、セルロース誘導体）のうちの１つ以上を含有し得る。他の固体剤形には、ゼラチンカプセルに封入された散剤、ｍａｒｕｍｅ、溶液または懸濁液（例えば、炭酸プロピレン、植物油、またはトリグリセリド中）が含まれる。

【0125】

液体の薬学的に投与可能な組成物は、例えば、本書で開示及び／または記載される化合物と任意選択による薬学的添加剤とを担体（例えば、水、食塩水、水性デキストロース、グリセロール、グリコール、エタノールなど）に溶解、分散、または懸濁させることなどにより、溶液または懸濁液を形成することで調製され得る。注射可能剤は、従来の形態で、液体の溶液もしくは懸濁液として、エマルションとして、または注射前に液体に溶解もしくは懸濁させるのに好適な固体形態で調製することができる。かかる非経口組成物に含まれる化合物の割合は、例えば、化合物の物理的性質、化合物の活性、及び対象の必要性に依存する。しかし、溶液中で０．０１％～１０％の活性成分の割合が使用可能であり、組成物が固体であり後に別の濃度に希釈される場合には、より高くてもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、本書で開示及び／または記載される化合物を溶液中に約０．２～２％含む。

【0126】

本書で開示及び／または記載される化合物の薬学的組成物は、ネブライザー用のエアロゾルもしくは溶液として、または吹送用の超微粒粉末として、単独で、またはラクトースなどの不活性担体と組み合わせて、気道に投与してもよい。かかる場合、薬学的組成物の粒子は、５０ミクロン未満、またはいくつかの実施形態では、１０ミクロン未満の直径を有し得る。

【0127】

更に、薬学的組成物は、本書で開示及び／または記載される化合物、ならびに１以上の更なる薬剤、医薬品、アジュバントなどを含み得る。好適な薬剤及び医薬品には、本書に記載されるものが含まれる。

【0128】

キット
また、本書において提供される化合物または薬学的組成物のうちのいずれかを含有する製品及びキットも提供される。製品は、ラベルの付いた容器を備え得る。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、及び試験管が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、本書で提供される薬学的組成物を保持し得る。容器のラベルは、薬学的組成物が、本書に記載される状態を防止、処置、または抑制するために使用されることを示してもよく、インビボまたはインビトロのいずれかの使用に関する指示を示してもよい。
一態様では、本書では、本書に記載の化合物または組成物及び使用のための指示書を含有するキットが提供される。キットは、心疾患の治療を必要とする個体または対象に使用するための説明書を含み得る。キットは、バイアル、シリンジ、またはＩＶバッグなど、化合物または組成物の投与に使用され得る任意の材料または機器を更に含んでもよい。キットは、滅菌パッケージを含んでもよい。

【0129】

組み合わせ
本書で記載及び／または開示される化合物及び組成物は、単独で投与してもよく、前述の障害、疾患、または状態の治療に有用な他の療法及び／または治療剤と組み合わせて投与してもよい。

【0130】

本書に記載及び／または開示される化合物及び組成物は、ＨＣＭまたはＨＦｐＥＦなどの心疾患を治療するための１つ以上の他の治療剤と組み合わせてもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上の治療剤は、心臓の神経ホルモン刺激を下方調節することによって心不全の進行を遅らせ、心臓リモデリングを防止しようとする治療剤（例えば、ＡＣＥ阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬、アルドステロン受容体拮抗剤、または神経エンドペプチダーゼ阻害剤）を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の治療剤は、心収縮性を刺激することによって心機能を改善する治療剤（例えば、βアドレナリン作動剤ドブタミンまたはホスホジエステラーゼ阻害剤ミルリノンなどの陽性変力薬剤）を含む。他の実施形態では、１つ以上の治療剤は、心前負荷を低減する治療剤（例えば、フロセミドなどの利尿剤）、または後負荷を低減する治療剤（カルシウムチャネルブロッカー、ホスホジエステラーゼ阻害剤、エンドセリン受容体拮抗剤、レニン阻害剤、または平滑筋ミオシン調節剤を含むが、これらに限定されない任意のクラスの血管拡張剤）を含む。

【0131】

本書に記載及び／または開示される化合物及び組成物は、ＨＣＭまたはＨＦｐＥＦを治療するための１つ以上の他の治療剤と組み合わせてもよい。いくつかの実施形態では、化合物及び／組成物を、β遮断薬、ベラパミル、及び／またはジソピラミドと組み合わせてもよい。

【0132】

一般的な合成方法
式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）の化合物を、以下のそれらの一般的な調製のための例示的な合成スキーム及びそれに続く具体的な実施例を参照して説明する。当業者は、本書における様々な化合物を得るために、最終的に所望される置換基が必要に応じて保護の有無にかかわらず反応スキームを通じて保持されて所望の生成物をもたらすように、出発物質を好適に選択することができることを認識するであろう。あるいは、最終的に所望される置換基の代わりに、反応スキームを通して保持され、所望の置換基で適宜置き換えられ得る適切な基を採用することが必要であるか、または望ましい場合がある。更に、当業者には、保護基を使用して、ある特定の官能基（アミノ、カルボキシ、または側鎖基）を反応条件から保護できること、また、かかる基が適切な場合に標準条件下で除去されることが認識されよう。特に指定のない限り、変数は、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）に関して上記で定義されるとおりである。

【0133】

化合物の特定の鏡像異性体を得ることが所望される場合、これは、鏡像異性体を分離または分割するための任意の好適な従来の手順を使用して、対応する鏡像異性体の混合物から達成することができる。よって、例えば、ジアステレオマー誘導体は、鏡像異性体の混合物、例えばラセミ体と、適切なキラル化合物との反応によって生成され得る。次いで、ジアステレオマーを、任意の簡便な手段、例えば結晶化によって分離し、所望の鏡像異性体を回収することができる。別の分割プロセスでは、キラル高速液体クロマトグラフィーを使用して、ラセミ体を分離することができる。代替的には、所望の場合、特定のエナンチオマーは、記載される工程のうちの１つにおいて適切なキラル中間体を使用することによって得られ得る。

【0134】

クロマトグラフィー、再結晶化及び他の従来の分離手順はまた、化合物の特定の異性体を得ること、さもなければ反応の生成物を精製することが望ましい中間体または最終生成物で使用され得る。

【0135】

本書に記載される化合物を調製する一般的な方法は、以下の例示的な方法に示される。本書において提供されるスキームにおける可変基は、式（Ｉ）、（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ａ１）、（Ｉ－Ｂ）、（Ｉ－Ｂ１）、（Ｉ－Ｃ）、（Ｉ－Ｃ１）、（Ｉ－Ｃ２）、（Ｉ－Ｄ）、または（Ｉ－Ｄ１）、またはそれらの任意のバリエーションについて定義される。本書に記載される他の化合物は、同様の方法によって調製され得る。

【0136】

いくつかの実施形態では、本書において提供される化合物は、スキーム１に従って合成され得る。

【化38】

【0137】

スキーム１において、Ｒ^１及びＲ^２は、式（Ｉ）の化合物、またはそのバリエーションもしくは実施形態、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩に対して本書の他の場所で定義されたとおりであり、Ｒ^ｘは、Ｃ_１－６アルキルまたはＣ_１－６ハロアルキルであり、Ｒ^ｙは、Ｈまたは－ＮＨ_２である。

【0138】

いくつかの実施形態では、本書において提供される化合物は、スキーム２に従って合成され得る。

【化39】

【0139】

スキーム２において、Ｒ^１及びＲ^２は、式（Ｉ）の化合物、またはそのバリエーションもしくは実施形態、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩に対して本書の他の場所で定義されたとおりであり、Ｒ^ｙは、Ｈまたは－ＮＨ_２である。

【0140】

いくつかの実施形態では、本書において提供される化合物は、スキーム３に従って合成され得る。

【化40】

【0141】

スキーム３において、Ｒ^１及びＲ^２は、式（Ｉ）の化合物、またはそのバリエーションもしくは実施形態、またはその立体異性体もしくは互変異性体、または前述のいずれかの薬学的に許容される塩に対して本書の他の場所で定義されたとおりである。

【0142】

特定の非限定的な例を以下の実施例セクションで提供する。

【実施例】

【0143】

以下の実施例は、本書で提供される組成物、使用、及び方法を例示するために提供されるが、これらを限定するものではない。化合物は、上述の一般的な方法を使用して調製される。

【0144】

以下の略語は、実施例を通して使用され得る。ＴＥＡ（トリメチルアミン）、ＤＣＭ（ジクロロメタン）、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（ジ－ｔｅｒｔ－ブチルデカーボネート）、ＥＡ（酢酸エチル）、ＰＥ（石油エーテル）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド）、ＤＩＥＡ（Ｎ－エチル－Ｎ－イソプロピルプロパン－２－アミン）、ＨＡＴＵ（１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルホスフェート）、ＨＯＡｔ（１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール）、ＨＯＢｔ（ヒドロキシベンゾトリアゾール）、ＥＤＣＩ（１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド）、ＭｅＯＨ（メタノール）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＩＰＡ（ｉＰｒＯＨ、プロパン－２－オール）、ＮＭＰ（１－メチルピロリジン－２－オン）、ＳＴＡＢ（トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム）、ＡＣＮ（アセトニトリル）、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）、ＤＰＰＡ（ジフェニルホスホリルアジド）、ＤＢＵ（１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ＰＰｈ_３（トリフェニルホスファン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈａｎｅ））、ＳＭ（出発物質）、Ｈｅｘ（ヘキサン）、ＮＣＳ（Ｎ－クロロスクシンイミド）、ｒ．ｔ．（室温）、ＤＣＥ（ジクロロエタン）、ＦＡ（ギ酸）、ＣＨＣｌ_３（クロロホルム）、ＢｎＢｒ（臭化ベンジル）、ＨＣｌ（塩酸）、ｅｑｕｉｖ（当量）、ＲＴ（保持時間）、ＳＦＣ（超臨界流体クロマトグラフィー）、及びＤＳＣ（ビス（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）カーボネート）。

【0145】

以下のパラメータを使用してＸＲＰＤ回折図を収集した：

【0146】

ＸＲＰＤ装置：Ｒｉｇａｋｕ ＭｉｎｉＦｌｅｘ６００ ６ＧベンチトップＸ線回折システム、Ｘ線発生器：６００Ｗの電力（４０ｋＶ／１５ｍＡ）を供給、密閉型Ｘ線管：ノーマルフォーカス付きＴｏｓｈｉｂａ Ａ－２１－Ｃｕチューブ、Ｘ線放射：ＣｕＫα、ソフトウェア：Ｓｍａｒｔｌａｂ Ｓｔｕｄｉｏ ＩＩ ｘ６４ ｖｅｒ．４．５．３５２．０（データ収集及び分析）、入射ソーラスリット：２．５°、発散スリット：１．２５°、長さ制限スリット：１０、試料ステージ：ＡＳＣ－８ＰＭ＿ＭＦ、フィルター：Ｃｕ＿ｂｅｔａ＿Ｘ１．５、受光ソーラスリット：２．５°、散乱スリット：８．０ｍｍ、受入スリット：０．３ｍｍ、検出器：高速Ｄ／ｔｅｘ Ｕｔｒａ２ ＭＦ ＲＡＣ、電力：４０ｋＶ／１５ｍＡ、走査速度：２°θ／分、ステップ：０．０１°θ、スキャン範囲：３°～３０°θまたは３°～４０°θ、試料ホルダー：０．２ｍｍインデント付きゼロバックグラウンドＳｉ試料ホルダー。

【0147】

実施例１
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成
（化合物４）
ステップ１：１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（３，４－ジフルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成：

【化41】

０℃のＤＣＥ（４０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－アミノアゼチジン－１，３－ジカルボン酸（４．０ｇ、１６．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及び３，４－ジフルオロベンズアルデヒド（２．４ｇ、１９．６ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に、ＳＴＡＢ（７．０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＡｃＯＨ（２．０ｇ、３２．８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、水酸化アンモニウムでｐＨを８に調整し、水（５０．０ｍＬ）を添加し、ＤＣＭ（５０．０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、６．０ｇの１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－（３，４－ジフルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを黄色の油状物として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３１５（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0148】

ステップ２：１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成：

【化42】

０℃のＤＣＭ（６０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－［［（３，４－ジフルオロフェニル）メチル］アミノ］アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（６．０ｇ、１６．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、水（３０ｍＬ）中のＫ_２ＣＯ_３（３．４ｇ、２４．３ｍｍｏｌ、１．５０当量）の溶液を添加し、次いで１０分間にわたってブロモアセチルブロミド（３．９ｇ、１９．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、ＤＣＭ（５０．０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を、ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、８．０ｇの１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを黄色の油状物として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４３５（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0149】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成：

【化43】

ＡＣＮ（８０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（８．０ｇ、１６．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＥＡ（４．９ｇ、４８．４ｍｍｏｌ、３．０当量）及びトランス－（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキサン－１－アミン（２．８ｇ、２４．７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌し、徐々に８０℃に温め、８０℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、ＰＥ及びＥＡ（７／１、８０ｍＬ）の混合物でトリチュレートして、７ｇ（約８０％純度）のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートをオフホワイト固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２２（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0150】

ステップ４：５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンの合成：

【化44】

ＤＣＭ（７０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（７．０ｇ、１４．７ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（１８．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、水（１００．０ｍＬ）で希釈し、ＮａＯＨ水溶液（２Ｎ）でｐＨを１３～１４に調整し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を、ブライン（１００．０ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、４．５ｇ（約８０％の純度）の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンを黄色の半固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３７８（Ｍ＋Ｈ）．

【0151】

ステップ５：５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒド（化合物４）の合成：

【化45】

ギ酸エチル（１５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．５ｇ、４．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、８０℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、Ｃ１８カラムクロマトグラフィーにより精製し、水（０．０５％ＮＨ_４ＨＣＯ_３）／ＣＨ_３ＣＮ（３：２）の混合物で溶出し、１．３ｇ（８１％）の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドを非晶質白色固体として得た。この非晶質白色固体の実験Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを図１に示す。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４０６（Ｍ＋Ｈ）； ^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４７ － ７．２９ （ｍ，２Ｈ）， ７．１０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．４， ４．４， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ），４．１５－４．２８ （ｍ， Ｊ ＝ ３Ｈ）， ４．０１ （ｓ， ２Ｈ）， ３．９６ （ｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８０ － １．６９ （ｍ，２Ｈ）， １．６５ － １．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．３５ （ｄ， Ｊ ＝ １０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， １．１３ － ０．９３ （ｍ， ２Ｈ）， ０．８８ （ｄ，Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， ３Ｈ）．

【0152】

実施例２
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミドの合成
（化合物５）
ステップ１：５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド（化合物５）の合成：

【化46】

０℃のＴＨＦ（１５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．５ｇ、４．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＥＡ（１．２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ、３．０当量）及びイソシアナトトリメチルシラン（６８５ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ、１．５当量）を５分間かけて滴加した。得られた混合物を、室温で一晩撹拌し、減圧下で濃縮し、最初にＰＥ及びＥＡの混合物（５／１；２０ｍＬ）で、次いでヘキサン（２０ｍＬ）でトリチュレートして、１．４ｇ（８４％）の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミドをオフホワイト固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２１（Ｍ＋Ｈ）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ７．５５ － ７．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．０９ （ｄｄ，Ｊ ＝ ８．０， ４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．００ （ｓ， ２Ｈ）， ４．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２０ （ｔ， Ｊ ＝ ９．１ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｓ， ２Ｈ）， ３．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７４ （ｄ， Ｊ ＝ １２．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５８ （ｄｔｔ， Ｊ ＝ ２０．６，１２．１， ６．１ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．４２ － １．２９ （ｍ， １Ｈ）， １．０４ （ｑｄ， Ｊ ＝ １２．２， ４．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．８８ （ｄ，Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， ３Ｈ）．

【0153】

以下の表の化合物を、化合物５と同様の方法で調製した。

【表2-1】

【表2-2】

【0154】

実施例３
５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンの合成
（化合物８）
ステップ１：１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成：

【化47】

０℃のＤＣＥ（２０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－アミノアゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（２．０ｇ、８．２ｍｍｏｌ、１．０当量）及び４－クロロ－３－フルオロベンズアルデヒド（２．０ｇ、１２．３ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液に、ＡＣＯＨ（９８４ｍｇ、１６．４ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＳＴＡＢ（３．５ｇ、１６．５ｍｍｏｌ、２．０当量）を少しずつ添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、水酸化アンモニウムでｐＨを８に調整し、水（３０．０ｍＬ）を添加し、ＤＣＭ（３０．０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を、ブライン（３０．０ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、３．０ｇの１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを黄色の油状物として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３３１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0155】

ステップ２：１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成：

【化48】

０℃のＤＣＭ（３０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（３．０ｇ、７．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、水（１５ｍＬ）中のＫ_２ＣＯ_３（１．７ｇ、１２．３ｍｍｏｌ、１．５０当量）の溶液を添加し、次いでブロモアセチルブロミド（１．９ｇ、９．４ｍｍｏｌ、１．２当量）を５分間にわたって滴加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、ＤＣＭ（４０．０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を、ブライン（４０ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、Ｃ１８カラムクロマトグラフィーによって精製し、水（０．５％炭酸アンモニウム）及びＡＣＮ（１／４）で溶出し、３．９ｇ（８９％）の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを黄色の油状物として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４５１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0156】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成：

【化49】

ＡＣＮ（２０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（２－ブロモーＮ－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（１．５ｇ、３．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＥＡ（８９８ｍｇ、８．９ｍｍｏｌ、３．０当量）及びイソプロピルアミン（２６２ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌し、徐々に８０℃に温め、８０℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、撹拌しながら水を添加した。沈殿した固体を濾過によって回収し、水（５０．０ｍＬ）で洗浄して、１．１ｇ（８５％）のｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートをオフホワイト固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３８４（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0157】

ステップ４：５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンの合成：

【化50】

ＤＣＭ（１２．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．１ｇ、２．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（３．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を、室温で３時間撹拌し、水（２０．０ｍＬ）で希釈し、ＮａＯＨ水溶液（２Ｎ）でｐＨを１３～１４に調整し、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を、ブライン（２０．０ｍＬ）で２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、９５０ｍｇの５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンを黄色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３４０（Ｍ＋Ｈ）．

【0158】

ステップ５：５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン（化合物８）の合成：

【化51】

ジオキサン（１０ｍＬ）中の５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン（９５０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ、１．０当量）及び３－ブロモピリダジン（６６２．２ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ、１．５当量）の撹拌溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３（１．８ｇ、５．５ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＰｅｎｔＣｌ２－メチルピリジン（ｏ－ピコリン）（１１７．６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、０．０５当量）を添加した。得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で一晩撹拌した。混合物を室温に冷却し、濾過して固体を除去し、Ｃ１８カラムクロマトグラフィーによって精製し、水（０．０５％炭酸アンモニウム）／ＡＣＮ（２：１）で溶出し、６９５ｍｇ（５９％）の５－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－８－イソプロピル－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンを黄色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４１８（Ｍ＋Ｈ）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ８．５９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．６， １．３ Ｈｚ，１Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４３ － ７．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．３， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ），６．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０， １．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６０ （ｈ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４７ （ｄ，Ｊ ＝ ９．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０３ （ｓ， ２Ｈ）， １．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ６Ｈ）．

【0159】

以下の表の化合物を、化合物８と同様の方法で調製した。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【表3-4】

【表3-5】

【表3-6】

【0160】

実施例４
５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンの合成
（化合物１２）
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（３，４－ジフルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化52】

ＴＨＦ（１２．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－オキソアゼチジン－１－カルボキシレート（３．１ｇ、１８．２ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液に、水（６．０ｍＬ）中の酢酸（１．０ｇ、１６．８ｍｍｏｌ、１．２当量）及び（３，４－ジフルオロフェニル）メタンアミン（２．０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。室温で５分間撹拌した後、混合物に、水（２．８ｍＬ）中のシアン化ナトリウム（５．７ｇ、１１６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を添加した。混合物を、油浴中、６０℃で１５時間加熱し、室温に冷却し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を添加することによって中和し、酢酸エチル（３０．０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた黄色固体に、ジエチルエーテル（３０．０ｍＬ）を添加し、１分間超音波処理し、０℃に冷却し、濾過した。得られた白色沈殿物を、氷冷ジエチルエーテル（１５．０ｍＬ）で洗浄し、一晩乾燥させ、３．４ｇ（７６％）のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（３，４－ジフルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ２９７．１（Ｍ＋Ｈ－２７）．

【0161】

ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化53】

０℃に冷却したＤＣＭ（１２５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（３，４－ジフルオロベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレート（３．１ｇ、９．７ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５．０ｍＬ、２９．０ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液に、クロロアセチルクロリド（１．９ｍＬ、２４．２ｍｍｏｌ、２．５当量）を２０分かけて滴加した。混合物を０℃で１５分間撹拌し、室温に温め、２時間撹拌し、飽和重炭酸ナトリウムで希釈し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（０％～４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配）によって精製し、３．３ｇ（８６％）のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４００．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0162】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化54】

アセトニトリル（１５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレート（１．５ｇ、３．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、（１ｒ、４ｒ）－４－メチルシクロヘキサン－１－アミン（６４１．６ｍｇ、５．７ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＤＩＰＥＡ（２．０ｍＬ、１１．３ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。溶液を７５℃で２時間加熱し、濃縮し、溶出液としてヘキサン中の３０～１００％ＥｔＯＡｃの勾配を使用してシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、１．３ｇ（７０％）のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－２－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４７７．３（Ｍ＋Ｈ）．
ステップ４：ｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成：

【化55】

【0163】

エタノール（１５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレート（１．３ｇ、２．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、酢酸（２．３ｍＬ、４０．０ｍｍｏｌ、１５．０当量）を添加した。反応物を７５℃で１５時間加熱し、次いで９０℃で３時間加熱し、室温まで冷却し、１０分間超音波処理した。沈殿物を濾過により回収し、氷冷エタノールで洗浄し、乾燥させて、９５３．９ｍｇ（７６％）のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２２．２（Ｍ＋Ｈ－５６）．
ステップ５：５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートの合成：

【化56】

【0164】

ＤＣＭ（２．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（９５３．９ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＦＡ（２．０ｍＬ）を室温で添加した。混合物を３０分間撹拌し、濃縮し、高真空下で乾燥させて、９８１．０ｍｇ（９９％）の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３７８．２０（Ｍ＋Ｈ）．
ステップ６：５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン（化合物１２）の合成：

【化57】

【0165】

ＩＰＡ（４．０ｍＬ）中の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテート（３０２．８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、炭酸カリウム（１７１．５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ、２．０当量）及び６－クロロピリダジン－３－カルボン酸メチル（１５９．５ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応バイアルをキャップし、１２０℃で３０分間加熱し、室温まで冷却した。混合物に、ＬｉＯＨ溶液（１Ｍ、１．８ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加し、混合物を１０分間撹拌し、水で希釈し、ＨＣｌ（１．０Ｍ）でｐＨ３に酸性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。得られた固体にジフェニルエーテル（４．０ｍＬ）を添加し、混合物を１８０℃で５分間加熱し、室温に冷却し、ＤＣＭ中０～１０％ＭｅＯＨの勾配を使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、７５．１ｍｇ（２７％）の５－（３，４－ジフルオロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２－（ピリダジン－３－イル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオンを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４５６．２（Ｍ＋Ｈ）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ８．５８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．５，１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１２ － ７．０６ （ｍ， １Ｈ）， ６．８３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０， １．４ Ｈｚ，１Ｈ）， ４．９２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．２０ － ７．１１ （ｍ， １Ｈ）， ４．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ９．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０４ （ｓ， ２Ｈ）， １．７３ （ｄ， Ｊ ＝ １３．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６４ － １．４９ （ｍ， ４Ｈ）， １．４０ － １．２８（ｍ， １Ｈ）， １．０１ （ｑｄ， Ｊ ＝ １２．１， ４．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， ３Ｈ）．

【0166】

以下の表の化合物を、化合物１２と同様の方法で調製した。

【表4】

【0167】

実施例５
５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミドの合成
（化合物１８）
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化58】

ＴＨＦ（６０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－オキソアゼチジン－１－カルボキシレート（２０．０ｇ、１１６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、水（４５．０ｍＬ）中の酢酸（８．０ｍＬ、１４０．２ｍｍｏｌ、１．２当量）及び（４－クロロフェニル）メタンアミン（１７．１ｍＬ、１４０．２ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。室温で５分間撹拌した後、混合物に、水（１０．０ｍＬ）中のシアン化ナトリウム（５．７ｇ、１１６．９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を添加した。混合物を、油浴中、６５℃で１５時間加熱し、室温に冷却し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を添加することによって中和し、酢酸エチル（１５０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた黄色固体に、ジエチルエーテル／ヘキサン（１４０．０ｍＬ、２：１）を添加し、溶液を５分間超音波処理し、０℃に冷却し、濾過した。得られた白色沈殿物を、氷冷ジエチルエーテル（５０．０ｍＬ）で洗浄し、一晩乾燥させ、２９．７ｇ（９２％）のｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ２９５．２（Ｍ＋Ｈ－２７）．

【0168】

ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－クロロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化59】

０℃に冷却したＤＣＭ（１５０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレート（１４．０ｇ、４３．５ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２２．８ｍＬ、１３０．１ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液に、ＤＣＭ（５０．０ｍＬ）中の２－クロロアセチルクロリド（８．７ｍＬ、１０８．８ｍｍｏｌ、２．５当量）を２５分かけて滴加した。混合物を０℃で１５分間撹拌し、室温に温め、２０時間撹拌した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウムで希釈し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（０％～４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配）によって精製し、１４．１ｇ（８１％）のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－クロロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３９８．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0169】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル３－（Ｎ－（４－クロロベンジル）－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化60】

アセトニトリル（９０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－クロロベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレート（１１．０ｇ、２７．６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、（１ｒ、４ｒ）－４－メチルシクロヘキサン－１－アミン（３．６ｇ、３０．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＤＩＰＥＡ（９．６ｍＬ、６９．１ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。溶液を還流温度で３．５時間加熱し、更に（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキサン－１－アミン（３６２．１ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。混合物を１時間撹拌して加熱し、冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、１２．６ｇ（９６％）のｔｅｒｔ－ブチル３－（Ｎ－（４－クロロベンジル）－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４７５．２（Ｍ＋Ｈ）．

【0170】

ステップ４：ｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成：

【化61】

エタノール（８８．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（Ｎ－（４－クロロベンジル）－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）アミノ）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレート（１２．６ｇ、２６．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、０時間（１５．１ｍＬ、２６４．７ｍｍｏｌ、１０．０当量）、１４．５時間（７．６ｍＬ、１３２．４ｍｍｏｌ、５．０当量）、及び２０．５時間（７．６ｍＬ、１３２．４ｍｍｏｌ、５．０当量）で酢酸を添加した。反応物を還流温度で合計２１時間撹拌し、室温まで冷却し、１０分間超音波処理した。固体を濾過し、氷冷エタノールで洗浄し、乾燥させた。濾液を濃縮し、エタノールに溶解し、超音波処理／濾過を更に３回（合計４回）繰り返して、９．８ｇ（７８％）のｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２０．１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0171】

ステップ５：５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロ酢酸塩の合成：

【化62】

ＤＣＭ（５５．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１５．１ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、室温でＴＦＡ（５５．０ｍＬ）を添加した。混合物を３０分間撹拌し、濃縮し、高真空下で乾燥させて、１５．６ｇ（９９％）の５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３７６．２（Ｍ＋Ｈ）．

【0172】

ステップ６：５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミド（化合物１８）の合成：

【化63】

アセトニトリル（１０２．０ｍＬ）中の５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテート（１５．６ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、酢酸（１７５．０μＬ、３．１ｍｍｏｌ、０．１当量）及びシアン酸ナトリウム（４．０ｇ、６１．２ｍｍｏｌ、１．９当量）を添加した。混合物を５５℃で８０分間加熱し、室温に冷却し、水及び飽和重炭酸ナトリウムで希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、沈殿物を得、それをエーテル（１００．０ｍＬ）中で超音波処理した。得られた沈殿物を濾過により回収し、氷冷エーテルで洗浄し、乾燥させて白色固体を得、これをエタノール（１００．０ｍＬ）中で再び超音波処理した。沈殿物を再び濾過により回収し、氷冷エーテルで洗浄し、乾燥させて、８．７ｇ（６５％）の５－（４－クロロベンジル）－８－（（１ｒ，４ｒ）－４－メチルシクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキサミドを白色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４１９．２（Ｍ＋Ｈ）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．０１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２２ － ４．１２ （ｍ， １Ｈ），４．１９ （ｄ， Ｊ ＝ ９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９９ （ｓ， ２Ｈ）， ３．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７７ － １．６９ （ｍ，２Ｈ）， １．６３ － １．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．４１ － １．２７ （ｍ， １Ｈ）， １．０３ （ｑｄ， Ｊ ＝ １２．３， ４．１ Ｈｚ， ２Ｈ），０．８７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）．

【0173】

以下の表の化合物を、化合物１８と同様の方法で調製した。

【表5-1】

【表5-2】

【表5-3】

【表5-4】

【0174】

実施例６
５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成
（比較物Ａ）

【化64】

ステップ１：１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成

【化65】

ＤＣＥ（１２０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－アミノアゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（１０．６ｇ、４３．３ｍｍｏｌ、１．０当量）及び４－クロロベンズアルデヒド（６．１ｇ、４３．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の０℃での溶液に、ＡｃＯＨ（５．０ｍＬ）を添加した。室温に温め、室温で撹拌した後、混合物に、追加のＡｃＯＨ（５．０ｍＬ）を４時間、８．５時間、及び９時間で２回添加した（合計２０．０ｍＬ）。この混合物に、ＳＴＡＢ（１１．０ｇ、５２．０ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、重炭酸ナトリウム水溶液で希釈し、ＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。得られた油状物を、温めたヘキサン及びＥＡ（混合物が均質な溶液になるまで滴加）に６０℃で撹拌しながら溶解した。次いで混合物を０℃に冷却し、沈殿物を濾過によって回収し、冷ヘキサンで洗浄した。濾液を濃縮し、再度工程を繰り返した。混合した固体を真空下で乾燥させ、１３．８ｇ（８６％）の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを白色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３１３．１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0175】

ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成

【化66】

Ｎ_２下０℃でＴＨＦ（２００．０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（１０．０ｇ、２７．１ｍｍｏｌ、１．０当量）及び２，４－ジフルオロアニリン（３．０ｍＬ、２９．８ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌溶液に、ＬＨＭＤＳ溶液（５４．２ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ、５４．２ｍｍｏｌ、２．０当量）を２０分間にわたって滴加した。混合物を、０℃で２０分間撹拌し、水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＨＣｌ水溶液（０．５Ｎ）を使用してｐＨ５に酸性化し、ＥＡ（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、１１．３ｇのｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートを得、これを精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３９６．１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0176】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－クロロベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成

【化67】

０℃に冷却したＴＨＦ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－クロロベンジル）アミノ）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１１．３ｇ、２３．２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＥＡ（４．８ｍＬ、３４．７ｍｍｏｌ、１．５当量）及び２－クロロアセチルクロリド（１．５ｍＬ、２７．８ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。０℃で３０分間撹拌するときに、追加のＴＥＡ（４．８ｍＬ、３４．７ｍｍｏｌ、１．５当量）及び２－クロロアセチルクロリド（１．８ｍＬ、２３．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を混合物に添加し、混合物を０℃で３０分間撹拌した。この混合物に、追加の２－クロロアセチルクロリド（０．６ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ、０．３当量）を添加した。混合物を徐々に室温に温め、４５分間撹拌し、０℃に冷却し、重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチした。混合物をＥＡで３回抽出した。合わせた有機層を、Ｂｒｉｎｇで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、１３．２ｇのｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートを得、これを更に精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ５２８．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0177】

ステップ４：ｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成

【化68】

Ｎ_２下のＤＭＦ（４０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１３．２ｇ、２０．１ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（４．２ｇ、３０．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた混合物を室温で３．５時間撹拌し、水で希釈し、ＥＡで２回抽出した。合わせた有機層を、水で２回、ブラインで１回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、１１．７ｇのｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４３６．１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0178】

ステップ５：５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロ酢酸塩の合成

【化69】

ＤＣＭ（５０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１４．７ｇ、２９．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（２５．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮乾固し、１５．１ｇの５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートを得、これを更に精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３９２．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0179】

ステップ６：５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成

【化70】

ＡＣＮ（５０ｍＬ）中の５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテート（１５．１ｇ、２９．９ｍｍｏｌ、１当量）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１５．７ｍＬ、８９．７ｍｍｏｌ、３当量）の溶液に、ギ酸２，２，２－トリフルオロエチル（５．８ｍＬ、５９．８ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌し、水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、０～１００％ＥｔＯＡｃ勾配、次いで０～１０％ＭｅＯＨ、ＤＣＭ勾配を使用し、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。固体をＥｔＯＨ／ＭＴＢＥ１：１に懸濁し、８０℃に加熱し、氷上で冷却し、濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、乾燥して、８．３ｇ（６６％）の５－（４－クロロベンジル）－８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２０．１（Ｍ＋Ｈ）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．９８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６５（ｔｄ， Ｊ ＝ ８．８， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４８ － ７．４１ （ｍ， １Ｈ）， ７．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ，Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２２ （ｔｄ， Ｊ ＝ ８．４， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ９．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ９．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２８ （ｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ，１Ｈ）， ４．０８ （ｄ， Ｊ ＝ １０．８ Ｈｚ， １Ｈ）．

【0180】

実施例７
８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成
（比較物Ｂ）

【化71】

１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートの合成

【化72】

０℃のＤＣＥ（６０．０ｍＬ）中の１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル３－アミノアゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（１５．０ｇ、６１．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及び４－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（１１．８ｇ、６７．５ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、ＡｃＯＨ（７．４ｇ、１２２．８ｍｍｏｌ、２．０当量）及びＳＴＡＢ（１９．５ｇ、９２．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を少しずつ添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、水酸化アンモニウムでｐＨを８に調整し、水（１００．０ｍＬ）を添加し、ＤＣＭ（３００．０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブラインで２回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２９．６ｇの１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレートを得、これを精製せずに次のステップのために使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３４７．１（Ｍ＋Ｈ－５６）

【0181】

ｔｅｒｔ－ブチル３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成

【化73】

Ｎ_２下０℃のＴＨＦ（２００．０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）３－エチル３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１，３－ジカルボキシレート（２９．６ｇ、４４．１ｍｍｏｌ、１．０当量）及び２，４－ジフルオロアニリン（４．９ｍＬ、４８．５ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌溶液に、２０分間にわたりＬＨＭＤＳ（８８．３ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ、８８．３ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液を滴加した。混合物を０℃で２０分間撹拌し、水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＨＣｌ水溶液（３Ｎ）を使用してｐＨ５に酸性化し、ＥＡ（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、３６．２ｇのｔｅｒｔ－ブチル３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレートを得、これを精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４３０．１（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0182】

ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成

【化74】

０℃に冷却したＴＨＦ（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレート（３６．２ｇ、４０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＥＡ（８．５ｍＬ、６０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）及び２－クロロアセチルクロリド（３．９ｍＬ、４８．７ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。０℃で３０分間撹拌するときに、追加のＴＥＡ（８．５ｍＬ、６０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）及び２－クロロアセチルクロリド（３．３ｍＬ、４０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を混合物に添加し、混合物を０℃で３０分間撹拌した。この混合物に、追加の２－クロロアセチルクロリド（１．０ｍＬ、１２．２ｍｍｏｌ、０．３当量）を添加した。混合物を徐々に室温に温め、４５分間撹拌し、０℃に冷却し、重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチした。混合物をＥＡで３回抽出した。合わせた有機層を、Ｂｒｉｎｇで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して、４２．０ｇのｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレートを得、これを更に精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ５６２．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0183】

ｔｅｒｔ－ブチル８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成

【化75】

Ｎ_２下のＤＭＦ（８０．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－（（２，４－ジフルオロフェニル）カルバモイル）アゼチジン－１－カルボキシレート（４２．０ｇ、３３．４ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（７．０ｇ、５０．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。得られた混合物を室温で３．５時間撹拌し、水で希釈し、ＥＡで２回抽出した。合わせた有機層を、水で２回、ブラインで１回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、溶出液としてヘキサン中の０～６０％ＥＡの勾配を使用してシリカゲルによって精製し、１２．０ｇ（４ステップで３７％）のｔｅｒｔ－ブチル８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４６９．７（Ｍ＋Ｈ－５６）．

【0184】

８－（２，４－ジフルオロフェニル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートの合成

【化76】

ＤＣＭ（１２．０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１２．０ｇ、２２．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、ＴＦＡ（４０．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮乾固し、１２．３ｇの８－（２，４－ジフルオロフェニル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートを得、これを更に精製することなく次のステップに使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４２６．１（Ｍ＋Ｈ）．

【0185】

８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成

【化77】

ＴＨＦ（５０．０ｍＬ）中の８－（２，４－ジフルオロフェニル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｅ）（１２．３ｇ、２２．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の撹拌溶液に、シアン酸ナトリウム（４．４ｇ、６８．４ｍｍｏｌ、３．０当量）及び数滴の酢酸を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、濃縮し、溶出液としてＤＣＭ中の０～１０％のＭｅＯＨの勾配を使用してシリカカラムクロマトグラフィーによって精製して、８．８ｇ（２ステップで７３％）の８－（２，４－ジフルオロフェニル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４６９．１（Ｍ＋Ｈ）； ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール－ｄ４） δ ７．７０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．１ Ｈｚ， ２Ｈ），７．６１ － ７．５３ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２０ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １０．４， ８．８， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１２ （ｄｄｄｄ， Ｊ ＝ ９．１，８．０， ２．８， １．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５３ － ４．４９ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ９．５ Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0186】

実施例８
８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成
（比較物Ｅ）
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化78】

ＴＨＦ（９０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－オキソアゼチジン－１－カルボキシレート（２５ｇ、１４６．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、水（４０．０ｍＬ）中の酢酸（１０．５ｇ、１７５．２ｍｍｏｌ、１．２当量）及び（４－（トリフルオロメチル）フェニル）メタンアミン（３１．７ｇ、１８１．１ｍｍｏｌ、１．２当量）を添加した。室温で５分間撹拌した後、混合物に、添加した水（１０ｍＬ）中のシアン化ナトリウム（７．２ｇ、１４６．０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を添加した。混合物を、油浴中、６０℃で１８時間加熱し、室温に冷却し、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液を添加することによって中和し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた黄色固体に、ジエチルエーテル／ヘキサン（２００ｍＬ、１：２）を添加し、溶液を１分間超音波処理し、０℃に冷却し、濾過した。得られた白色沈殿物を、氷冷ジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄し、一晩乾燥させて、ｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレート（４３．９ｇ、収率８５％）を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ３２９．２（Ｍ＋Ｈ－２７）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．７１ （ｄ， Ｊ ＝８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８４ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）．

【0187】

ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化79】

０℃に冷却したＤＣＭ（０．２Ｍ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アミノ）アゼチジン－１－カルボキシレート（３．０ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びトリエチルアミン（１．３ｇ、１２．７ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液に、クロロアセチルクロリド（０．９５ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。混合物を０℃で１５分間撹拌し、室温に温め、２時間撹拌した。混合物に、追加の２－クロロアセチルクロリド（０．９５ｇ、８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びトリエチルアミン（１．３ｇ、１２．７ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。反応物を２時間撹拌し、塩化アンモニウムの飽和水溶液でクエンチし、層を分離した。水層をＤＣＭで１回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％～７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、Ｒ_ｆ＝０．２４（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン））により精製し、３．４ｇ（９２％）のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレートを得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４３２．１（Ｍ＋Ｈ）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．１Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．９５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．１５ （ｓ， ４Ｈ）， １．３５（ｓ， ９Ｈ）．

【0188】

ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（２－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）アミノ）－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレートの合成：

【化80】

アセトニトリル（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－クロロ－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）－３－シアノアゼチジン－１－カルボキシレート（０．８ｇ、１．９ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、（１ｒ、４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキサン－１－アミン塩酸塩（０．５１ｇ、２．８ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＤＩＰＥＡ（１．２ｇ、９．３ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。溶液を６５℃で４時間加熱し、その時点でＬＣＭＳは、反応の完了を示した。反応物を酢酸エチル及び水（１：１、８０ｍＬ）で希釈し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮し、ヘキサン中の酢酸エチル２５％～１００％の勾配を溶出液として使用したシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、０．６５ｇ（６４％）のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）アミノ）－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレートを淡黄色の油状物として得た。Ｒ_ｆ＝０．５５（酢酸エチル１００％、シリカ）。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ５４５．０（Ｍ＋Ｈ）．

【0189】

ステップ４：ｔｅｒｔ－ブチル８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートの合成：

【化81】

エタノール（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－シアノ－３－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）アミノ）－Ｎ－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）アセトアミド）アゼチジン－１－カルボキシレート（０．２７ｇ、０．５０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、酢酸（０．１８ｇ、３．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を添加した。反応物を７０℃で１５時間加熱し、室温に冷却し、ヘキサン（１．０ｍＬ）で希釈した。沈殿物を濾過により回収し、エタノール－ヘキサン（１：２，２ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、１８６ｍｇ（６９％）のｔｅｒｔ－ブチル８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレートを淡黄色固体として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４９０．２（Ｍ＋Ｈ－５６）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．７１ （ｄ， Ｊ ＝８．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ５６．７， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ （ｓ，２Ｈ）， ４．２９ － ４．１５ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０２ （ｓ， ２Ｈ）， ３．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９１ － １．５５ （ｍ，７Ｈ）， １．３５ （ｓ， ９Ｈ）， １．３８ － １．２０ （ｍ， ２Ｈ）．

【0190】

ステップ５：８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートの合成：

【化82】

ＤＣＭ（１．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、室温でＴＦＡ（１．５ｍＬ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥させて、１９０ｍｇ（９４％）の８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテートを得、更に精製することなく使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４４６．２（Ｍ＋Ｈ）．

【0191】

ステップ６：８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドの合成（比較物Ｅ）：

【化83】

アセトニトリル（０．６ｍＬ）中の８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－６，９－ジオン２，２，２－トリフルオロアセテート（５４．０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（３７．０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、３．０当量）及びギ酸２，２，２－トリフルオロエチル（１２４．０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ、１０．０当量）を添加した。混合物を、マイクロ波反応器中で１１０℃で２０分間加熱し、濃縮し、溶出液として、水中の１０％～１００％のＡＣＮの勾配（両方とも、０．１％のＨＣＯＯＨとともに）を使用して、ＨＰＬＣによって精製して、２１．０ｍｇ（４６％）の８－（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジフルオロメチル）シクロヘキシル）－６，９－ジオキソ－５－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－２，５，８－トリアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルバルデヒドを泡として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ ４７３．９（Ｍ＋Ｈ）．^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．７１（ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ５６．４， ４．５ Ｈｚ， １Ｈ），４．９４ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３０ － ４．１５ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０４ （ｓ， ２Ｈ）， ３．９６（ｄ， Ｊ ＝ １０．７ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９５ － １．４９ （ｍ， ７Ｈ）， １．４１ － １．０６ （ｍ， ２Ｈ）．

【0192】

生物学的実施例Ｂ－１：筋原線維アッセイ
天然サルコメアの文脈における完全長心筋ミオシンのＡＴＰａｓｅ活性に対する化合物の効果を評価するために、皮膚筋原線維アッセイを行った。ウシの心筋原線維は、ＴｒｉｔｏｎＸ－１００などの界面活性剤の存在下でウシの心左心室組織をホモジナイズすることによって得た。そのような処置は、膜及び可溶性細胞質タンパク質の大部分を除去するが、心筋サルコメアアクトミオシン装置をそのまま残す。筋原線維調製物は、Ｃａ^２＋調節された様式でＡＴＰを加水分解する能力を保持する。化合物の存在下及び非存在下でのそのような筋原線維調製物のＡＴＰａｓｅ活性を、最大割合の定義された割合（すなわち、２５％、７５％）まで活性化するＣａ^２＋濃度でアッセイした。低分子薬剤を、ピルビン酸キナーゼ及び乳酸デヒドロゲナーゼ（ＰＫ／ＬＤＨ）結合酵素系を使用して、ウシ心筋原線維の定常状態ＡＴＰａｓｅ活性を阻害する能力について評価した。このアッセイは、３４０ｎｍでの吸光度の変化が生じるＮＡＤＨの酸化によって、ミオシン生成ＡＤＰをＡＴＰに再生する。小分子薬剤を試験する前に、ウシ心筋原線維のカルシウム応答性を評価し、筋原線維系の５０％（ｐＣａ_５０）または７５％（ｐＣａ_７５）のいずれかの活性化を達成するカルシウム濃度を、小分子薬剤の阻害活性を評価するための最終条件として選択した。全ての酵素活性を、ｐＨ６．８（ＰＭ１２緩衝液）で、１２ｍＭのＰＩＰＥＳ（ピペラジン－Ｎ、Ｎ’－ビス（２－エタンスルホン酸）、２ｍＭの塩化マグネシウムを含有する緩衝液中で測定した。最終アッセイ条件は、１ｍｇ／ｍＬのウシ心筋原繊維、４Ｕ／ｍＬのピルビン酸キナーゼ、６Ｕ／ｍＬの乳酸デヒドロゲナーゼ、５０μＭのＡＴＰ、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）、１０ｐｐｍの消泡剤、１ｍＭのＤＴＴ、０．５ｍＭのＮＡＤＨ、１．５ｍＭのＰＥＰ、０．６ｍＭのＥＧＴＡ、及び筋原線維ＡＴＰａｓｅ活性の５０％または７５％の活性化を達成するのに十分な量のＣａＣｌ_２であった。試験した化合物の結果を表Ａに示す。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表6】

【0193】

比較物Ｃ及び比較物Ｄは、以下の構造を有する。

【表7】

【0194】

比較物Ｃ及び比較物Ｄの調製は、ＷＯ２０２０／０４７４４７Ａ１に記載されている。

【0195】

生物学的実施例Ｂ－２：薬物動態単回用量試験
マウス単回用量試験
雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（１８～２５ｇ、６～８週齢）をＺｈｅｊｉａｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄから得た。ＩＶ投与のための全ての動物は、食物及び水への自由なアクセスを有した。ＩＶ投薬を、尾静脈を通して行った。試験試料のためのＩＶ用量溶液を、０．１ｍｇ／ｍＬの濃度で、１０％ＤＭＡ／２０％ＰＧ／７０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製した。経口投与懸濁液は、試験試料を水中の０．５％ＨＰＭＣ／０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中に０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で懸濁させることによって調製した。ＩＶ及びＰＯ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、薬物動態（ＰＫ）パラメータは公称用量値を使用して計算した。１５匹のマウスの群は、体積が５ｍＬ／ｋｇであるＩＶ用量を受けた。別の１５匹のマウスの群は、１ｍｇ／ｋｇで試験試料の経口強制投与を受けた。経口用量体積は５ｍＬ／ｋｇであった。眼窩後採血を介して３匹のマウスの群からスパースな血液試料を収集し、Ｋ_２ＥＤＴＡマイクロテナーチューブに入れ、遠心分離まで氷上で維持して血漿を得た。指定されたマウスの各群を、２つの時点で採血した。時間点は、投与前（ＰＯのみ）、投与後５（ＩＶのみ）、１５、３０分、１、２、４、６、８、及び２４時間であった。血液試料を遠心分離し、収集した血漿を分析するまで－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を被験試料濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準（ＩＳ）を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度は、ＰＫ計算のためにゼロとして扱われた。複合ＰＫパラメータを、１マウスあたり最大２つのサンプリングポイント及びサンプリングポイントあたり最大３匹のマウスから推定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎのスパースデータオプションを、濃度－時間データの非コンパートメント分析に使用した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後の検出可能な濃度をｋで割った比の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。平均滞在時間（ＭＲＴ）は、モーメント分析によって推定した。定常状態（Ｖ_ｓｓ）での分布体積は、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。バイオアベイラビリティは、ｄＡＵＣ_∞、ｐｏ／ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％を計算し、ｄＡＵＣは、用量正規化ＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｂに提供する。試験した化合物は、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表8】

【0196】

ラット単回用量試験
雄のＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットをＺｈｅｊｉａｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から得た。ＩＶ群の動物は、水及び食物への自由なアクセスを有した。ＰＯ群の動物は、投薬前に一晩絶食させ、投薬後２時間に食物を与えた。ＩＶ用量溶液は、１ｍｇ／ｍＬの濃度で１０％ＤＭＡ／５０％ＰＧ／４０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製された。経口投与懸濁液は、試験試料を水中の０．５％ＨＰＭＣ／０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中に０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で懸濁させることによって調製した。ＩＶ及びＰＯ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、薬物動態パラメータは公称用量値を使用して計算した。３匹のラットに、尾静脈を介したボーラス注射を介してＩＶを投与した。用量群あたり３匹のラットを経口経管栄養によって投与した。血液試料を、投与前、投与後５（ＩＶのみ）、１５、３０分、及び１、２、４、６、及び２４時間で頸静脈カニューレから採取した。血液量を同量の滅菌済０．９％生理食塩水と交換した。血液試料を遠心分離し、収集した血漿を、その後の分析のために－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を試験試料濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度を、薬物動態計算のためにゼロとして扱った。濃度－時間データの非コンパートメント解析を使用して、個々の動物から薬物動態パラメータを推定した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数（ｌｏｇ）の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後に検出可能な濃度をｋで割った比（ＡＵＣ_ｔ－_∞）の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。平均滞在時間（ＭＲＴ）は、モーメント分析によって推定した。定常状態（Ｖ_ｓｓ）での分布体積は、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。バイオアベイラビリティは_、個々のラットの用量正規化されたＡＵＣ_∞，ｐｏ／平均ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％の比率から計算され、ｄＡＵＣは用量正規化されたＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｃに提供する。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表9】

【0197】

イヌ単回用量試験
非ナイーブ雄ビーグル犬（８ヶ月～３歳、体重８～１３ｋｇ）を本研究で使用した。ＩＶ投与のための全ての動物は、食物及び水への自由なアクセスを有し、ＰＯのための全ての動物は、投与前に一晩絶食され、投与の約６時間後に給餌された。ＰＯ群の動物について、ペンタガストリン（６．０μｇ／ｋｇ、ｉ．ｍ．）を、ＰＯ製剤を投与する２０分前、及び最初のペンタガストリン投与１．５時間後に投与した。投与量は０．０２４ｍＬ／ｋｇであり、ＤＭＳＯ／１Ｎ ＮａＯＨ／ＰＢＳ中の濃度は２５０μｇ／ｍＬであった。各動物の経管栄養カテーテルを洗浄するために１０ｍＬの０．００１Ｎ ＨＣｌを使用した。ＩＶ用量溶液を、１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で１０％ＤＭＡ／５０％ＰＧ／４０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製した。経口用量懸濁液は、化合物を蒸留水中の０．５％ＨＰＭＣ／０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中に０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で懸濁させることによって調製した。ＩＶ及びＰＯ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、ＰＫパラメータは公称用量値を使用して計算した。血液試料は、投与前、投与後５、１５、３０分、１、２、４、６、８、２４及び４８時間での投与静脈を除く末梢静脈の静脈穿刺によって採取した。血液試料を遠心分離し、得られた血漿を生体分析のために凍結した。分析前に、血漿試料を－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を化合物濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度は、ＰＫ計算のためにゼロとして扱われた。濃度－時間データの非コンパートメント分析を使用して、個々の動物からＰＫパラメータを推定した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数（ｌｏｇ）の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後の検出可能な濃度をｋで割った比の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。無限大に外挿された平均滞留時間（ＭＲＴ_∞）をモーメント分析によって推定した。Ｖ_ｓｓは、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。これはクロスオーバー試験であったため、バイオアベイラビリティは、ｄＡＵＣ_∞、ｐｏ／ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％を計算した。ここで、ｄＡＵＣは、ＩＶ及びＰＯ用量を与えられた同じ動物からの用量正規化ＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｄに提供する。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表10】

【0198】

サル単回用量試験
本研究で使用された非ナイーブ雄カニクイザル（２～５歳、体重２～５ｋｇ）を、Ｔｏｐｇｅｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから得た。ＩＶ投与のための全ての動物は、食物及び水への自由なアクセスを有し、ＰＯのための全ての動物は、投与前に一晩絶食され、投与の約６時間後に給餌された。ＩＶ用量溶液を、１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で１０％ＤＭＡ／５０％ＰＧ／４０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製した。経口用量懸濁液は、化合物を蒸留水中の０．５％ＨＰＭＣ／０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中に０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で懸濁させることによって調製した。ＩＶ及びＰＯ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、ＰＫパラメータは公称用量値を使用して計算した。血液試料は、投与前、投与後５、１５、３０分、１、２、４、６、８、２４及び４８時間での投与静脈を除く末梢静脈の静脈穿刺によって採取した。血液試料を遠心分離し、得られた血漿を生体分析のために凍結した。分析前に、血漿試料を－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を化合物濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度は、ＰＫ計算のためにゼロとして扱われた。濃度－時間データの非コンパートメント分析を使用して、個々の動物からＰＫパラメータを推定した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数（ｌｏｇ）の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後の検出可能な濃度をｋで割った比の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。無限大に外挿された平均滞留時間（ＭＲＴ_∞）をモーメント分析によって推定した。Ｖ_ｓｓは、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。これはクロスオーバー試験であったため、バイオアベイラビリティは、ｄＡＵＣ_∞、ｐｏ／ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％を計算した。ここで、ｄＡＵＣは、ＩＶ及びＰＯ用量を与えられた同じ動物からの用量正規化ＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｅに提供する。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表11】

【0199】

ヒトにおける単回投与ＣＬ及びＶ_ｓｓ値の予測値
ヒトクリアランス及び分布体積の予測のための非比例的スケーリングは、マウス、ラット、イヌ、及びカニクイザルの静脈内薬物動態パラメータの種間の単純な相対成長スケーリングに基づいた（Ｂｏｘｅｎｂａｕｍ，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ Ｂｉｏｐｈａｒｍ１０：２０１－２７，１９８２）。ヒトＣＬの予測は、前臨床種の血漿静脈内クリアランスを外挿することによって行った。「指数の規則」（Ｍａｈｍｏｏｄ＆Ｂａｌｉａｎ、Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ５９：５７９－８５、１９９６）は、この予測で検討され、単純な相対成長指数が０．７１と０．９９の間にある場合、この種の最大寿命（ＭＬＰ）に基づく補正係数を適用することができ、単純な相対成長の指数が１．０より大きい場合、脳重量（ＢｒＷ）に基づく補正係数を適用することができ、または利用可能な場合にはタンパク質結合補正を適用することができることが提案されている。同様の方法で、単純な相対成長スケーリングを用いてヒト分布体積を予測した。この方法は、様々な薬物に対して成功裏に使用されている（Ｗａｒｄ＆Ｓｍｉｔｈ，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ３２：６１２－１９，２００４；ＭｃＧｉｎｎｉｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ８：４６３－７９，２００７）。選択された化合物の予測データを表Ｆに提供する。

【表12】

【0200】

表Ｆのキー：ＳＡ＝単純相対成長、ＲＯＥ＝指数規則、ｆｕ補正＝血清に結合していない官能基の補正、ＭＬＰ補正＝最大寿命補正、ＢｒＷ補正＝脳重量補正

【0201】

犬用カセットの投与
本研究では、Ｊｉａｎｇｓｕ Ｊｏｈｎｓｅｎ Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ ＣＯ．及び／またはＢｅｉｊｉｎｇ Ｒｉｘｉｎｋｅｊｉ ＣＯ．，ＬＴＤ 及び／またはＢｅｉｊｉｎｇ Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＣＯ．，ＬＴＤから調達された非ナイーブ雄ビーグル犬（８ヶ月～３歳、体重８～１４ｋｇ）を使用した。ＩＶ投与のための全ての動物は、食物及び水への自由なアクセスを有した。ＩＶ用量溶液を、０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で１０％ＤＭＡ／５０％ＰＧ／４０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製した。ＩＶ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、ＰＫパラメータは公称用量値を使用して計算した。血液試料は、投与前、投与後５ １５、３０分、１、２、４、６、８、及び２４時間での投与した静脈を除く末梢静脈の静脈穿刺によって採取した。血液試料を遠心分離し、得られた血漿を生体分析のために凍結した。分析前に、血漿試料を－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を化合物濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度は、ＰＫ計算のためにゼロとして扱われた。濃度－時間データの非コンパートメント分析を使用して、個々の動物からＰＫパラメータを推定した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数（ｌｏｇ）の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後の検出可能な濃度をｋで割った比の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。無限大に外挿された平均滞留時間（ＭＲＴ_∞）をモーメント分析によって推定した。Ｖ_ｓｓは、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。これはクロスオーバー試験であったため、バイオアベイラビリティは、ｄＡＵＣ_∞、ｐｏ／ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％を計算した。ここで、ｄＡＵＣは、ＩＶ及びＰＯ用量を与えられた同じ動物からの用量正規化ＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｇに提供する。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表13】

【0202】

サルカセット投与
Ｔｏｐｇｅｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから調達した非ナイーブ雄ビーグル犬（２～５歳、体重２～５ｋｇ）を本研究で使用した。ＩＶ投与のための全ての動物は、食物及び水への自由なアクセスを有した。ＩＶ用量溶液を、０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で１０％ＤＭＡ／５０％ＰＧ／４０％ＨＰβＣＤ溶液（４０％ｗ／ｖ ＨＰβＣＤ水溶液）中で調製した。ＩＶ用量の濃度は、研究の最後に測定した。測定値が公称値の２０％以内である場合、ＰＫパラメータは公称用量値を使用して計算した。血液試料は、投与前、投与後５ １５、３０分、１、２、４、６、８、及び２４時間での投与した静脈を除く末梢静脈の静脈穿刺によって採取した。血液試料を遠心分離し、得られた血漿を生体分析のために凍結した。分析前に、血漿試料を－８０℃で保管した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿試料を化合物濃度について分析した。簡潔に述べると、各血漿試料の５０μＬのアリコートを、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、遠心分離した。得られた溶液の１０μＬを逆相Ｃ１８カラムに注入し、得られたピークを、ターボイオンスプレーイオン化源を装備したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ上で検出した。定量限界（ＢＬＱ）を下回る試料濃度は、ＰＫ計算のためにゼロとして扱われた。濃度－時間データの非コンパートメント分析を使用して、個々の動物からＰＫパラメータを推定した（Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，ｖｅｒｓｉｏｎ ６４；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）。排出速度定数（ｋ）は、濃度－時間プロファイルの最後の３つのデータポイントの時間に対する濃度の対数（ｌｏｇ）の線形回帰の傾きの絶対値として計算した。見かけの排出半減期（ｔ_１／２）の値はｌｎ（２）／ｋとして計算した。濃度－時間曲線（ＡＵＣ）値の下の面積は、線形台形法を使用して推定した。ＡＵＣ_ｔ値は、投与時間から最後の測定可能な濃度まで計算した。ＡＵＣ_∞値を、対応するＡＵＣ_ｔと、最後の検出可能な濃度をｋで割った比の合計として計算した。血漿クリアランス（ＣＬ）は、用量／ＡＵＣ_∞から計算した。無限大に外挿された平均滞留時間（ＭＲＴ_∞）をモーメント分析によって推定した。Ｖ_ｓｓは、ＭＲＴ_∞×ＣＬから計算した。観察されたとおり、最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに達するまでの時間（ｔ_ｍａｘ）を記録した。これはクロスオーバー試験であったため、バイオアベイラビリティは、ｄＡＵＣ_∞、ｐｏ／ｄＡＵＣ_∞、ｉｖ×１００％を計算した。ここで、ｄＡＵＣは、ＩＶ及びＰＯ用量を与えられた同じ動物からの用量正規化ＡＵＣ値であった。試験した化合物のデータを表Ｈに提供する。試験した化合物を、本書に記載の合成手順に従って調製した。

【表14】

【0203】

ヒトにおけるカセット投与ＣＬ及びＶ_ｓｓ値の予測値
カセットＩＶ投与に由来するＰＫデータについて、ヒトクリアランス及び分布体積の予測は、単一種アロメトリーを使用して行った。この場合、値は、タンパク質結合補正を適用することによって、イヌ及びサルのＰＫの血漿静脈内クリアランスから予測された（Ｔａｎｇ，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ ３３：１２９４－９６，２００５；Ｐａｔｅｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２２（３）： １－７，２０１８）。選択された化合物の予測データを表Ｊ及び表Ｋに提供する。

【表15】

【表16】

【0204】

生物学的実施例Ｂ－３：ラットの心臓収縮性における急性薬力学的作用の心エコー検査評価
イソフルラン（１－３％）麻酔下で、心エコー検査によるインビボ心機能の評価を雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットにおいて行った。左心室の２－ＤＭモード画像は、化合物の投与前、投与中、及び投与後に、傍胸骨長軸視で取得した。インビボ短縮率は、以下の計算でＭモード画像解析によって決定された：（（拡張末期直径－収縮末期直径）／拡張末期直径×１００）。３つの投与前ベースラインＭモード画像を、化合物投与の前に１分間隔で撮影した。化合物は、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース２９１０（ＨＰＭＣ２９１０）：０．１％のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０懸濁液に配合され、経口経管栄養による単回投与（５ｍＬ／ｋｇ）として送達される。用量後１及び４時間に、Ｍモード心エコー測定のために、ラットを軽く麻酔した。心エコー検査測定と同時に、血液試料を採取して、対応する化合物血漿濃度を決定した。得られた血漿中濃度を使用して、ＩＣ_５０及びＩＣ_１０値を推定した。ＩＣ_５０及びＩＣ_１０値は、それぞれ、分画短縮が投与前ベースライン収縮性の５０％及び１０％である濃度である。

【表17】

【0205】

生物学的実施例Ｂ－４：インビトロでのＣＹＰ４５０酵素の時間依存性阻害の決定
ヒト肝ミクロソームを使用した主要ヒトシトクロムＰ４５０アイソザイムに対する試験化合物の時間依存性阻害ポテンシャルの評価も、標準方法を使用して実施した（Ｇｒｉｍｍ ｅｔ ａｌ，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．，Ｊｕｌ；３７（７）：１３５５－７０．ｄｏｉ：１０．１１２４／ｄｍｄ．１０９．０２６７１６，２００９）。プールされたヒトミクロソーム及び選択的ＣＹＰプローブ基質を、７つのヒト肝シトクロムＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｂ６、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、及び３Ａ４）の時間依存性阻害剤として、２５及び５０μＭでの試験化合物のインビトロ評価に使用した。代謝産物の形成を定量化するためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用した。ヒト肝ミクロソーム中の各Ｐ４５０酵素の阻害は、時間０及び３０分インキュベーション後の非阻害対照（＝１００％活性）と比較して、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって測定されるマーカー代謝産物形成の活性の減少の割合として測定した。次いで、任意の時間依存性阻害の発生を、３０分間のインキュベーション後の活性と比較して、時間０での酵素活性の倍率変化として表した。

【表18-1】

【表18-2】

【表18-3】

【表18-4】

【0206】

ＮＡ：利用不可、ＣＹＰ３Ａ４－Ｔ：テストステロンプローブ基質によって測定したＣＹＰ３Ａ４活性、ＣＹＰ３Ａ４－Ｍ：ミダゾラムプローブ基質によって測定したＣＹＰ３Ａ４活性

【0207】

３Ａ４について、ミダルゾラム及びテストステロンの両方をプローブとして使用した％活性の測定では、化合物１３、化合物８、化合物７、及び化合物４は、酵素の活性が１．２倍を超えて変化しなかったため、時間依存性阻害の兆候を示さない。しかし、比較物Ｃは、２５μＭ及び５０μＭの濃度で、両方のプローブについて１．５倍を超える倍率活性の変化を示した。化合物１８、化合物５、及び化合物６はまた、試験した濃度のうちの１つまたはプローブ基質試験のうちの１つにおいて、１．２倍を超える倍率活性のいくらかの変化を示し、これらの化合物について時間依存性フォーマットで試験した場合、３Ａ４活性にいくらかの変化がある可能性があることを示唆している。この形式で試験した場合、試験した全ての化合物は、１Ａ２及び２Ｂ６の活性に変化を示さなかった。２Ｃ９について、化合物７は、２５μＭ濃度での活性の１．３倍の変化、及び５０μＭ濃度での活性の１．３倍の変化のみを示した。２Ｃ１９について、化合物５は、５０μＭの濃度で活性の１．３倍の変化を示し、化合物４は、２５μＭの濃度で活性の１．４倍の変化を示したが、５０μＭの濃度では、化合物４の活性の変化は観察されなかった。２Ｄ６について、化合物１３は、５０μＭの濃度で活性の１．４倍の変化を示し、化合物６及び化合物４は、２５μＭの濃度で活性の１．３倍の変化を示したが、５０μＭの濃度ではこれらの化合物の活性の変化は観察されなかった。２Ｃ８について、化合物１８は、５０μＭの濃度で活性の１．３倍の変化を示し、化合物５は、５０μＭの濃度で活性の２．０倍の変化を示した。

【0208】

本書に記載される化合物、使用、及び方法の前述の書かれた説明は、当業者が本書に記載される化合物、使用、及び方法を製造及び使用することを可能にするが、当業者は、本書の特定の実施形態、方法、及び実施例の変形、組み合わせ、及び等価物の存在を理解し、正当に評価するであろう。したがって、本書において提供される化合物、使用、及び方法は、上記の実施形態、方法、または実施例によって限定されるべきではなく、本書において提供される化合物、使用、及び方法の範囲及び趣旨内の全ての実施形態及び方法を包含する。

【0209】

本書に開示される全ての参考文献は、参照により、それらの全体が組み込まれる。

【図1】

【国際調査報告】