特表 2024-510934 キラルホスホロチオエートの合成のためのキラルシントン

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-12

(54)【発明の名称】キラルホスホロチオエートの合成のためのキラルシントン

(51)【国際特許分類】

   C07F 9/58 20060101AFI20240305BHJP

   A61K 31/7125 20060101ALI20240305BHJP

【ＦＩ】

C07F9/58 Z CSP

A61K31/7125

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023553057

(86)(22)【出願日】2022-03-16

(85)【翻訳文提出日】2023-08-31

(86)【国際出願番号】 EP2022056805

(87)【国際公開番号】W WO2022194924

(87)【国際公開日】2022-09-22

(31)【優先権主張番号】21163531.3

(32)【優先日】2021-03-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】503385923

【氏名又は名称】ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング

(74)【代理人】

【識別番号】100094569

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 伸一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100103610

【弁理士】

【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦

(74)【代理人】

【識別番号】100109070

【弁理士】

【氏名又は名称】須田 洋之

(74)【代理人】

【識別番号】100119013

【弁理士】

【氏名又は名称】山崎 一夫

(74)【代理人】

【識別番号】100123777

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 さつき

(74)【代理人】

【識別番号】100111796

【弁理士】

【氏名又は名称】服部 博信

(74)【代理人】

【識別番号】100123766

【弁理士】

【氏名又は名称】松田 七重

(72)【発明者】

【氏名】ジャン ヨンダ

(72)【発明者】

【氏名】ウー リンリン

【テーマコード（参考）】

4C086

4H050

【Ｆターム（参考）】

4C086EA16

4C086NA03

4H050AA01

4H050AA03

4H050AB20

4H050AB81

(57)【要約】

本発明は、キラルホスホロチオエートを製造する一般合成方法のためのシントンとして有用な式（Ｉ）の化合物、それらの調製、及びＰ－キラルホスホロチオエートを製造するための堅牢な大規模プロセスにおけるそれらの使用に関する。
【化１】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物、

【化1】

（式中、
ｎは、０、１、２、３、４、５、又は６であり、
各Ｘは、
結合、
ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル又は－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルで置換されていてもよい－（ＣＨ₂）_m－、
Ｏ、
ＮＲ^N及び
Ｓ
からなる群より選択され、
ｍは１、２、３、又は４であり、
Ｒ^Nは、Ｈ又はＣ_1-3アルキルであり、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる群より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ²は、Ｃ_1-4アルキル、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁶、及びアリールからなる群より選択され、
Ｒ²の各アルキル基は、ハロゲン、シアノ、又はトリメチルシリルで置換されていてもよく、
Ｒ⁶は、Ｃ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ³は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる群より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる群より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよい）
又はそれらの互変異性体、立体異性体若しくは塩。

【請求項2】

ｎが、０又は１であり、
Ｘが、結合、Ｏ、ＮＨ、ＮＣＨ₃及びＳからなる群より選択され、
Ｒ¹が、Ｈ、Ｃ_1-4アルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-6シクロアルキル、及び－ＣＨ₂－フェニルからなる群より選択され、
フェニル基は、ハロゲン、－ＣＮ、ＣＨ₃及び－Ｏ－ＣＨ₃からなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ²が、１つ又は複数のＦ、又はＣｌ、Ｂｒ、シアノ、及びトリメチルシリルより選択される１つの置換基で置換されていてもよいＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ³が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択され、
Ｒ⁴が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択され、
Ｒ⁵が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択される、
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、
又はそれらの互変異性体、立体異性体若しくは塩。

【請求項3】

ｎが、０又は１であり、
Ｘが、結合、Ｏ、ＮＨ、及びＳからなる群より選択され、
Ｒ¹が、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²が、１つ又は複数のＦで置換されていてもよいＣ_1-3アルキルからなる群より選択され；
Ｒ³が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択され、
Ｒ⁴が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択され、
Ｒ⁵が、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる群より選択される、
請求項２に記載の式（Ｉ）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項4】

ｎが、０であり、
Ｘが、結合、及びＯからなる群より選択され、
Ｒ¹が、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²が、１～３個のＦで置換されていてもよいＣ_1-2アルキルからなる群より選択され、
Ｒ³が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁴が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁵が、Ｈからなる群より選択される、
請求項３に記載の式（Ｉ）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項5】

ｎが、０であり、
Ｘが、結合、及びＯからなる群より選択され、
Ｒ¹が、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²が、Ｃ_1-2アルキルからなる群より選択され、
Ｒ³が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁴が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁵が、Ｈからなる群より選択される、
請求項４に記載の式（Ｉ）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項6】

ｎが、０であり、
Ｘが、結合、及びＯからなる群より選択され、
Ｒ¹が、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²が、ＣＨ₃からなる群より選択され、
Ｒ³が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁴が、Ｈからなる群より選択され、
Ｒ⁵が、Ｈからなる群より選択される、
請求項５に記載の式（Ｉ）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項7】

下記式を有する、請求項１に記載の化合物、

【化2】

（式中、
Ｘは、Ｏであり、
Ｒ¹は、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²は、ＣＨ₃であり、
Ｒ³は、Ｈである）
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項8】

Ｘが、Ｏであり、
Ｒ¹が、Ｃ_1-3アルキルであり、Ｒ²が、ＣＨ₃であり、
Ｒ³が、Ｈである、
請求項７に記載の式（Ｉ．２）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩。

【請求項9】

式Ｉ．２ａ又はＩ．２ｂに示される構造及び立体化学を有する、請求項７又は８のいずれか１項に記載の化合物。

【化3】

【請求項10】

【化4】

より選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項11】

キラルホスホロチオエートの調製のための、請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物の使用。

【請求項12】

キラルホスホロチオエートが二量体である、請求項１１に記載の使用。

【請求項13】

キラルホスホロチオエートが四量体である、請求項１１に記載の使用。

【請求項14】

請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物をシントンとして使用することを特徴とする、キラルホスホロチオエートの調製のための方法。

【請求項15】

請求項１４に記載のキラルホスホロチオエートの調製のための方法であって、

【化5】

ａ）第１のヌクレオシドを、活性化剤の存在下で請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物とカップリングさせ、
ｂ）フルオレニルメチル基をステップａ）から得られた生成物から除去し、
ｃ）ステップｂ）から得られた生成物を第２のヌクレオシドとカップリングさせ、
ｄ）１（－２－ピリジニル）エチル基を、ステップｃ）から得られた生成物から除去し、キラルホスホロチオエートを得る
ことを特徴とする方法。

【請求項16】

請求項１０に記載の化合物が、活性化剤の存在下で使用される、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

ステップａ）において、ＤＭＯＣＰが活性化剤として使用される、請求項１５又は１６に記載の方法。

【請求項18】

ステップｂ）において、塩基を使用してフルオレニルメチル基を除去する、請求項１５～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

塩基が、ＤＢＵ、ＴＭＧ、ｔ－ＢｕＮＨ₂及びトリアルキルアミンからなる群より選択される、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

ステップｃ）において、ＤＭＯＣＰが活性化剤として使用される、請求項１５～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

１（－２－ピリジニル）エチル基が、水素化条件下で除去される、請求項１５～２０のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、キラルホスホロチオエートを製造する一般合成方法のためのシントンとして有用な新規の化合物、それらの調製、及びＰ－キラルホスホロチオエートを製造するための堅牢な大規模プロセスにおけるそれらの使用に関する。

【背景技術】

【0002】

Ｐ－キラルホスホロチオエート結合は、生物学的に活性なオリゴデオキシリボヌクレオチド及びオリゴリボヌクレオチドに広く挿入されている。従来、Ｐ－キラルホスホロチオエートは、以下を含むいくつかのステップで合成されていた。
（１）Ｐ（ＩＩＩ）ベースのホスホラミダイトと第１のヌクレオシドとのカップリング、
（２）第２のヌクレオシドとのカップリング、
（３）硫化、及び
（４）脱保護。
スキームＡ：Ｐ－キラルホスホロチオエートの合成のための方策

【0003】

【化1】

この方策は、T. Wada et al., J. Am.Chem.Soc., 2003, 125, 8307-8317; T. Wada et al., J. Am.Chem.Soc., 2008, 130, 16031-16037; T. Wada et al., J. Org.Chem., 2016, 81, 2753-2762;国際公開第２０１５／１０７４２５号パンフレットによって例示されているように、広く考察されている。ただし、この方法は、Ｐ（ＩＩＩ）及びキラル補助剤の多段階合成に関連する不安定な中間体を含む。より最近では、Ｐ（ＩＩＩ）中間体を介したキラルホスホロチオエート結合を持つオリゴヌクレオチドの触媒的不斉合成及び立体分岐合成が報告された（Aaron L. Featherston, Yongseok Kwon, Matthew M. Pompeo, Oliver D. Engl, David K. Leahy, Scott J. Miller Science, 2021, 371, 702-707）。
スキームＢ：Ｗａｄａらによるキラルジチミジンホスホロチオエートの合成
（Ｐｈ＝フェニル、ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン、ＯＴｆ＝トリフルオロメチルスルホニル、Ｔｈ＝チミジン、ＤＭＴｒ＝ジメトキシトリチル、Ａｃ＝アセチル、Ｐｙ＝ピリジン、ＴＥＡＢ＝重炭酸トリエチルアンモニウム）

【0004】

【化2】

【0005】

Ｐ（ＩＩＩ）－オキサチオホスホランを含むＰＳ－オリゴ（オリゴヌクレオチドのホスホロチオエート類似体）の、立体化学的に制御された化学合成のための最初の方法が、Ｓｔｅｃらによって開発された（Wojciech J. Stec, Andrzej Grajkowski, Anna Kobylafiska, Boledaw Karwowski, Maria KozioHciewicz, Konrad Misiura, Andnej Okruszek, Andrzej Wilk, Piotr Guga, and Mdgonata Boczkowska, J. Am.Chem.Soc.1995, 117, 12019-12029）。ただし、この手法は規模が制限されており、カップリング効率が低い。一方、この方策には、１つのヌクレオシドを犠牲にしてキラルＰ（Ｖ）－オキサチオホスホランスルフィドを分割することが含まれる。

【0006】

スキームＣ：ＳｔｅｃらによるＰＳ－オリゴの立体化学的に制御された合成
（ＤＭＴｒ＝ジメトキシトリチル、ⁱＰｒ＝イソプロピル、ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン、Ｒ＝Ａｃ又はＲ＝－ＣＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯ－ＬＣＡ－ＣＰＧ、Ｂ’＝Ｔｈｙ、Ａｄｅ^Bz、Ｃｙｔ^Bz又はＧｕａ^iBu,DPC、Ｂ＝Ｔｈｙ、Ａｄｅ、Ｃｙｔ又はＧｕａ、Ｒ＝Ａｃ又はＲ＝－ＣＯＣＨ ＣＨ ＣＯ－ＬＣＡ－ＣＰＧ、ＬＣＡ ＣＰＧ＝長鎖アルキルアミン制御細孔ガラス）

【0007】

【化3】

【0008】

上記の問題を克服するために、リン－硫黄をジアステレオ選択的に導入するための、新規のベンチ安定（ｂｅｎｃｈ－ｓｔａｂｌｅ）キラルＰ（Ｖ）ベース試薬、略称Ψ（ＰＳＩ＝ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ－ｓｕｌｆｕｒ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（リン硫黄組み込み））が最近発明され（Kyle W. Knouse, Justine N. deGruyter, Michael A. Schmidt, Bin Zheng, Julien C. Vantourout, Cian Kingston, Stephen E. Mercer, Ivar M. Mcdonald, Richard E. Olson, Ye Zhu, Chao Hang, Jason Zhu, Changxia Yuan, Qinggang Wang, Peter Park, Martin D. Eastgate, Phil S. Baran Science 2018, 361, 1234-1238）、これにより、プロセス効率が大幅に向上し、簡単な操作及び容易なスケールアップなどの大きな利点が得られる。この試薬系の適用は、保護されたヌクレオシドモノマーから単一のジアステレオ異性体として５０～８８％の収率で調製された、ジデオキシリボヌクレオシドの立体制御された合成で実証された。この化学反応では、オリゴヌクレオチド鎖の伸長に影響を与える唯一の塩基として、非常に強塩基のＤＢＵ（アセトニトリル中Ｐｋａ＝２４．３４の共役酸）が必要であったため、ヌクレオシド、特にリボヌクレオシドの保護基の選択の柔軟性が制限される。さらに、オリゴリボヌクレオチドの合成は完全には実証されなかった。

【0009】

スキームＤ：試薬Ψの合成及び使用
（ＤＣＭ＝ジクロロメタン、Ｅｔ＝エチル、Ｍｅ＝メチル、ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸、Ｂ＝Ｔｈｙ、Ａｄｅ^Bz、Ｃｙｔ^Bz又はＧｕａ^iBu、Ｂ’＝Ｔｈｙ、Ａｄｅ^Bz、Ｃｙｔ^Bz、又はＧｕａ^iBu、Ｒ＝ＴＢＤＰＳ＝ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）

【0010】

【化4】

【0011】

２００４年、Ｓｔａｗｉｎｓｋｉ及び同僚らは、ピリジンＮ－オキシドの分子内求核触媒作用に基づくＰ（Ｖ）ベースの中間体の操作によるＰ－キラルホスホロチオエートの立体特異的合成のための代替手法を開発した（J. Stawinski et al., Chem.Comm.2004, 290-291;国際公開第２００６／０６６２６０号パンフレット）。この方策により、カップリング反応速度が改善され、Ｐ中心でのエピマー化が防止された。しかし、この手法では、１つのヌクレオシドを犠牲にしてジアステレオ異性体中間体を分離するためにカラムクロマトグラフィーが必要であり、第２のＰ－キラルホスホロチオエートを導入するためのさらなる伸長を非現実的なものとする。さらに、４－メトキシ－２－ピリジンメタノール－１－オキシドの大規模な生産及び反応条件下でのその安定性は大きな課題を提示し、この手法の広範な適用を妨げている。

【0012】

Ｐ－キラルホスホロチオエートの形成に関連する前述の制限及び他の課題に対処して回避するために、堅牢で費用効果の高い方法の開発が、ヌクレオチドの分野で依然として非常に望ましい。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

本発明の目的は、Ｐ－キラルホスホロチオエートの合成に有用な新規の化合物、特に新規のシントンを提供することである。
本発明のさらなる目的は、Ｐ－キラルホスホロチオエートの大規模合成に有用な新規の化合物、特に新規のシントンを提供することである。
本発明のさらなる目的は、新規の化合物を使用して、オリゴデオキシリボヌクレオチド及びオリゴリボヌクレオチドなどの立体富化ヌクレオチドの合成のための方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、新規の化合物、特にＰ－キラルシントンの合成のための方法を提供することである。
本発明のさらなる目的は、１つ又は複数のＰ－立体中心を含む新規の化合物の合成のための方法に好適な出発化合物及び／又は中間化合物を提供することである。
本発明のさらなる目的は、以上の説明、及び以下の説明、及び実施例によって当業者に明らかになるであろう。

【課題を解決するための手段】

【0014】

本発明の範囲内で、驚くべきことに、以下に記載する一般式（Ｉ）の新規の化合物が、従来技術の問題を克服するキラルシントンとして有用であることが判明した。これらは安定であり、キラルアルコール上にフルオレニルメチル基及びピリジニル基を有するＰ（Ｖ）ベースの直交保護されたキラルホスホロチオエートであることを特徴とする。これらは、立体選択的及び予測可能な方法で立体富化ヌクレオチドを正確に構築することを可能にし、同時にカップリング順序を変更するか、又はシントンの他方のジアステレオ異性体に切り替えることによって、いずれか一方のジアステレオ異性体を調製する可能性を提供する。結果として、Ｐ－立体中心ヌクレオチド（Ｐ－ｓｔｅｒｅｏｇｅｎｉｃ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）のいずれのジアステレオ異性体も簡単な方法で、すなわちカラムクロマトグラフィーを用いずに調製できる。これにより、特許請求されているシントンが大規模な使用に適したものとなる。
第一の態様では、本発明は式（Ｉ）の化合物、

【0015】

【化5】

（式中、
ｎは、０、１、２、３、４、５、又は６であり、
各Ｘは、
結合、
ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル又は－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルで置換されていてもよい－（ＣＨ₂）_m－、
Ｏ、
ＮＲ^N及び
Ｓ
からなる基Ｘ－Ｇ１より選択され、
ｍは１、２、３、又は４であり、
Ｒ^Nは、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる基Ｒ^N－Ｇ１より選択され、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる基Ｒ¹－Ｇ１より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ²は、Ｃ_1-4アルキル、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁶、及びアリールからなる基Ｒ²－Ｇ１より選択され、
Ｒ²の各アルキル基は、ハロゲン、シアノ、及びトリメチルシリルから独立して選択される１つ又は複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ⁶は、Ｃ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ³は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる基Ｒ³－Ｇ１より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、アリール、－ＣＨ₂－アリール、及びヘテロアリールからなる基Ｒ⁴－Ｇ１より選択され、
各アリール基及びヘテロアリール基は、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ_1-3アルキル及び－Ｏ－Ｃ_1-3アルキルからなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよい）
又はそれらの互変異性体、立体異性体若しくは塩を提供する。

【0016】

さらなる態様では、本発明は、一般式（Ｉ）の化合物を調製する方法、及びこれらの方法における新規の中間体化合物に関する。
本発明のさらなる態様は、本発明による一般式（Ｉ）の化合物の塩に関する。
本発明の別の態様によれば、Ｐ－キラルホスホロチオエートの合成、特にＰ－キラルホスホロチオエートの大規模合成における一般式（Ｉ）の化合物の使用が提供される。
本発明の別の態様によれば、式（Ｉ）の新規の化合物を使用する、立体富化ヌクレオチド、例えば、オリゴデオキシリボヌクレオチド及びオリゴリボヌクレオチドの合成のための方法が提供される。
本発明の他の態様は、前述及び後述の明細書及び実験部から当業者に明らかになるであろう。

【0017】

式（Ｉ）の化合物は、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メタノール及びピコリン酸などの容易に入手可能で経済的な原料から容易に調製された。
式（Ｉ）の化合物は、キラルホスホロチオエートの入手を提供し、断定し得る立体化学を用いた簡単な操作を通じて、オリゴデオキシリボヌクレオチド又はより合成が複雑なオリゴリボヌクレオチドにおけるＰ－キラルホスホロチオエート結合の効果的な調製を可能にする、一般合成方法のためのシントンとして有用であり、温和な条件下でＰ－キラルホスホロチオエートを入手する新規の方法を提示し、大規模で効率的なＰ－キラルホスホロチオエートの立体特異的合成を可能にする。式（Ｉ）の化合物はまた、興味深い生物学的活性を持つ重要なクラスの化合物である環状ジヌクレオチド（ＣＤＮとも略称される）の合成におけるシントンとして有用である。

【発明を実施するための形態】

【0018】

特に明記しない限り、基、残基、及び置換基、特にｎ、Ｘ、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は、上記及び以下のように定義される。残基、置換基、又は基が化合物中に複数回出現する場合、それらは同じか又は異なる意味を有してもよい。本発明による化合物の個々の基及び置換基のいくつかの好ましい意味を、以下に示す。これらの定義のいずれか及びそれぞれは、相互に組み合わせることができる。
Ｘ：
Ｘ－Ｇ１：
基Ｘは、好ましくは、上記で定義した基Ｘ－Ｇ１より選択される。

【0019】

Ｘ－Ｇ２：
別の実施形態では、各基Ｘは、
結合、
－Ｈ、ハロゲン、－ＣＮ、－ＣＨ₃又は－Ｏ－ＣＨ₃で置換されていてもよい－（ＣＨ₂）－、
Ｏ、
ＮＲ^N及び
Ｓ
からなる基Ｘ－Ｇ２より選択され、
Ｒ^Nは、Ｈ及び－ＣＨ₃からなる基Ｒ^N－Ｇ２より選択される。

【0020】

Ｘ－Ｇ３：
別の実施形態では、各基Ｘは、結合、Ｏ、ＮＨ、ＮＣＨ₃及びＳからなる基Ｘ－Ｇ３より選択される。
Ｘ－Ｇ４：
別の実施形態では、各基Ｘは、結合、Ｏ、ＮＨ、及びＳからなる基Ｘ－Ｇ４より選択される。
Ｘ－Ｇ５ａ：
別の実施形態では、各基Ｘは、結合、及びＯからなる基Ｘ－Ｇ５ａより選択される。
Ｘ－Ｇ５ｂ：
別の実施形態では、各基Ｘは、Ｓ及びＯからなる基Ｘ－Ｇ５ｂより選択される。
Ｘ－Ｇ６：
別の実施形態では、各基Ｘは、Ｏからなる基Ｘ－Ｇ６より選択される。

【0021】

Ｒ¹：
Ｒ¹－Ｇ１：
基Ｒ¹は、好ましくは、上記で定義した基Ｒ¹－Ｇ１より選択される。
Ｒ¹－Ｇ２：
一実施形態では、基Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-6シクロアルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-10シクロアルキル、及び－ＣＨ₂－フェニルからなる基Ｒ¹－Ｇ２より選択され、
フェニル基は、ハロゲン、－ＣＮ、ＣＨ₃及び－Ｏ－ＣＨ₃からなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよい。
Ｒ¹－Ｇ３：
一実施形態では、基Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-4アルキル、－ＣＨ₂－Ｃ_3-6シクロアルキル、及び－ＣＨ₂－フェニルからなる基Ｒ¹－Ｇ３より選択され、
フェニル基は、ハロゲン、－ＣＮ、ＣＨ₃及び－Ｏ－ＣＨ₃からなる群より選択される１～３個の置換基で置換されていてもよい。
Ｒ¹－Ｇ４：
一実施形態では、基Ｒ¹は、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる基Ｒ¹－Ｇ４より選択される。
Ｒ¹－Ｇ５：
別の実施形態では、基Ｒ¹は、Ｃ_1-3アルキルからなる基Ｒ¹－Ｇ５より選択される。

【0022】

Ｒ²：
Ｒ²－Ｇ１：
基Ｒ²は、好ましくは、上記で定義した基Ｒ²－Ｇ１より選択される。
Ｒ²－Ｇ２：
一実施形態では、基Ｒ²は、１つ若しくは複数のＦ、又はＣｌ、Ｂｒ、シアノ、及びトリメチルシリルより選択される１つの置換基で置換されていてもよいＣ_1-4アルキルからなる基Ｒ²－Ｇ２より選択される。
Ｒ²－Ｇ３：
一実施形態では、基Ｒ²は、１つ又は複数のＦで置換されていてもよいＣ_1-3アルキルからなる基Ｒ²－Ｇ３より選択される。
Ｒ²－Ｇ４：
一実施形態では、基Ｒ²は、１つ～３つのＦで置換されていてもよいＣ_1-2アルキルからなる基Ｒ²－Ｇ４より選択される。

【0023】

Ｒ²－Ｇ５：
一実施形態では、基Ｒ²は、Ｃ_1-2アルキルからなる基Ｒ²－Ｇ５より選択される。
Ｒ²－Ｇ６：
別の実施形態では、基Ｒ²は、ＣＨ₃からなる基Ｒ²－Ｇ６より選択される。

【0024】

Ｒ³：
Ｒ³－Ｇ１：
基Ｒ³は、好ましくは、上記で定義した基Ｒ³－Ｇ１より選択される。
Ｒ³－Ｇ２：
一実施形態では、基Ｒ³は、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる基Ｒ³－Ｇ２より選択される。
Ｒ³－Ｇ３：
別の実施形態では、基Ｒ³は、Ｈからなる基Ｒ³－Ｇ３より選択される。

【0025】

Ｒ⁴：
Ｒ⁴－Ｇ１：
基Ｒ⁴は、好ましくは、上記で定義した基Ｒ⁴－Ｇ１より選択される。
Ｒ⁴－Ｇ２：
一実施形態では、基Ｒ⁴は、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる基Ｒ⁴－Ｇ２より選択される。
Ｒ⁴－Ｇ３：
別の実施形態では、基Ｒ⁴は、Ｈからなる基Ｒ⁴－Ｇ３より選択される。
Ｒ⁵：
Ｒ⁴－Ｇ１＝Ｒ⁵－Ｇ１：
基Ｒ⁵は、好ましくは、上記で定義した基Ｒ⁴－Ｇ１より選択される。
Ｒ⁵－Ｇ２：
一実施形態では、基Ｒ⁵は、Ｈ及びＣ_1-3アルキルからなる基Ｒ⁵－Ｇ２より選択される。
Ｒ⁵－Ｇ３
別の実施形態では、基Ｒ⁵は、Ｈからなる基Ｒ⁵－Ｇ３より選択される。

【0026】

ｎ：
ｎは、０、１、２、３、４、５、及び６より選択される整数である。
好ましくは、ｎは、０、１、２及び３より選択される。
より好ましくは、ｎは、０又は１である。
最も好ましくは、ｎは０である。
式（Ｉ）の化合物の以下の好ましい実施形態は、一般式（Ｉ．１）～（Ｉ．３ｂ）を使用して記載されており、そのあらゆる塩が包含される。

【0027】

【化6-1】

【化6-2】

【0028】

上記の式（Ｉ．１）～（Ｉ．３ｂ）において、ｎ及び基Ｘ、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は、上記で定義したとおりである。
本発明による好ましい下位実施形態（Ｅ）の例を以下の表に記載し、各実施形態の各置換基を、上記の定義に従って定義している。

【0029】

【表1-1】

【表1-2】

本発明の好ましい実施形態は、次式の化合物

【0030】

【化7】

（式中、
Ｘは、Ｏであり、
Ｒ¹は、Ｈ及びＣ_1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒ²は、ＣＨ₃であり、
Ｒ³は、Ｈである）
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩に関係する。

【0031】

本発明のより好ましい実施形態は、
Ｘが、Ｏであり、
Ｒ¹が、Ｃ_1-3アルキルであり、Ｒ²が、ＣＨ₃であり、
Ｒ³が、Ｈである、
式（Ｉ．２）の化合物、
又はその鏡像異性体、ジアステレオ異性体若しくは塩に関係する。
本発明の好ましい化合物には、以下が含まれる。

【0032】

【化8】

【0033】

特に好ましい化合物は、それらの立体異性体及びその塩を含めて、以下の実験項に記載されている。
本発明による化合物は、当業者に公知であり、有機合成の文献に記載されている合成の方法を使用して得ることができる。好ましくは、化合物は、以下により詳細に説明する、特に実験項に記載する調製の方法と同様にして得られる。

【0034】

用語及び定義
本明細書で特に定義されていない用語には、開示及び文脈を考慮して当業者によって与えられるであろう意味が与えられるべきである。ただし、本明細書で使用される場合、反対に規定されない限り、以下の用語は示された意味を有し、以下の慣例を遵守する。
「本発明による化合物」、「式（Ｉ）の化合物」、「本発明の化合物」などの用語は、本発明による式（Ｉ）の化合物を示し、これには、それらの互変異性体、立体異性体及びそれらの混合物、並びにそれらの塩、並びにそのような化合物の溶媒和物及び水和物が含まれ、この溶媒和物及び水和物には、そのような互変異性体、立体異性体及びそれらの塩の溶媒和物及び水和物が含まれる。

【0035】

以下に定義される基、ラジカル、又は部分では、炭素原子の数は、しばしば基に先行して指定されており、例えば、Ｃ_1-6－アルキルは、１～６個の炭素原子を有するアルキル基又はラジカルを意味する。一般に、２つ以上の下位基を含む基の場合、最後に名付けられている下位基がラジカル結合点であり、例えば、置換基「アリール－Ｃ_1-3－アルキル－」は、Ｃ_1-3－アルキル基に結合しているアリール基を意味し、Ｃ_1-3－アルキル基は、置換基が結合しているコア又は基に結合している。
本発明の化合物が、化学名の形式で、かつ式として示されている場合、矛盾がある場合には式が優先されるものとする。
置換基の原子の計数は、置換基が結合しているコア又は基に最も近い原子から開始する。
例えば、「３－カルボキシプロピル基」という用語は、下記の置換基を表す。

【0036】

【化9】

（式中、カルボキシ基は、プロピル基の３番目の炭素原子に結合している）
「１－メチルプロピル－」、「２，２－ジメチルプロピル－」又は「シクロプロピルメチル－」という用語は、下記の基を表す。

【化10】

アスタリスクを下位式に使用して、定義されたコア分子に接続している結合を示すことができる。

【0037】

基の定義において、「式中、各Ｘ、Ｙ及びＺ基は、～で置換されていてもよい」などの用語は、各基Ｘ、各基Ｙ及び各基Ｚが、それぞれ別個の基として、又はそれぞれが構成された基の一部として、定義されるように置換されていてもよいことを示す。例えば、「Ｒ^exは、Ｈ、Ｃ_1-3－アルキル、Ｃ_3-6－シクロアルキル、Ｃ_3-6－シクロアルキル－Ｃ_1-3－アルキル、又はＣ_1-3－アルキル－Ｏ－を示し、ここで各アルキル基は、１つ又は複数のＬ^exで置換されていてもよい。」等は、アルキルという用語を含む前述の基のそれぞれにおいて、すなわち、Ｃ_1-3－アルキル、Ｃ_3-6－シクロアルキル－Ｃ_1-3－アルキル及びＣ_1-3－アルキル－Ｏ－の基のそれぞれにおいて、アルキル部分が定義されるようにＬ^exで置換されていてもよいことを意味する。
特に示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲全体を通じて、所与の化学式又は化学名は、互変異性体、並びにすべての立体異性体、光学異性体、及び幾何異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、Ｅ／Ｚ異性体など）及びそのラセミ体、並びに別個の鏡像異性体の異なる割合の混合物、ジアステレオ異性体の混合物、又はそのような異性体及び鏡像異性体が存在する前述の形態のいずれかの混合物、並びにその塩、及びその溶媒和物、例えば遊離化合物の溶媒和物又は化合物の塩の溶媒和物を含む水和物を包含するものとする。

【0038】

本明細書では、「塩」は、親化合物がその酸性塩又は塩基性塩を作製することによって改変された、開示化合物の誘導体を指す。塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の無機塩又は有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩又は有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の塩は、従来の化学的方法により、塩基性又は酸性部分を含む親化合物から合成することができる。一般に、そのような塩は、水中、又はエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、若しくはアセトニトリル、若しくはそれらの混合物などの有機希釈剤中で、これらの化合物の遊離酸又は遊離塩基形態を、十分な量の適切な塩基又は酸と反応させることによって調製することができる。
例えば本発明の化合物を精製又は単離するのに有用な、上記のもの以外の他の酸の塩も、本発明の一部を構成する。
ハロゲンという用語は、一般にフッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を示す。

【0039】

ｎが１～ｎの整数である「Ｃ_1-n－アルキル」という用語は、単独で、又は別のラジカルと組み合わせて、１～ｎ個のＣ原子を有する非環式、飽和、分枝又は直鎖状炭化水素ラジカルを示す。例えば、Ｃ_1-5－アルキルという用語はＨ₃Ｃ－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ（ＣＨ₃）－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ₂－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ（ＣＨ₃）－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ（ＣＨ₃）－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－Ｃ（ＣＨ₃）₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ₂－ＣＨ₂－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ₂－ＣＨ（ＣＨ₃）－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ（ＣＨ₃）－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ（ＣＨ₃）－ＣＨ₂－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ₂－Ｃ（ＣＨ₃）₂－、Ｈ₃Ｃ－Ｃ（ＣＨ₃）₂－ＣＨ₂－、Ｈ₃Ｃ－ＣＨ（ＣＨ₃）－ＣＨ（ＣＨ₃）－及びＨ₃Ｃ－ＣＨ₂－ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）－ラジカルを包含する。

【0040】

ｎが４～ｎの整数である「Ｃ_3-n－シクロアルキル」という用語は、単独で、又は別のラジカルと組み合わせて、３～ｎ個のＣ原子を有する環式、飽和、非分枝炭化水素ラジカルを示す。環式基は、単環、二環、三環又はスピロ環であってもよく、最も好ましくは単環である。このようなシクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロドデシル、ビシクロ［３．２．１．］オクチル、スピロ［４．５］デシル、ノルピニル、ノルボニル、ノルカリル、アダマンチルなどが挙げられる。

【0041】

本明細書では「アリール」という用語は、単独で、又は別のラジカルと組み合わせて、芳香族であり、飽和又は不飽和であってもよい第２の５員又は６員の炭素環式基にさらに縮合されていてもよい６個の炭素原子を含む炭素環式芳香族単環式基を示す。アリールには、フェニル、インダニル、インデニル、ナフチル、アントラセニル、フェナントレニル、テトラヒドロナフチル及びジヒドロナフチルが含まれるが、これらに限定されない。好ましくは、アリールはフェニル又はナフチルを示す。より好ましくは、アリールはフェニルを示す。
上記の用語の多くは、式又は基の定義で繰り返し使用される可能性があり、それぞれの場合、互いに独立して上記の意味のうちの１つを有する。
上記及び以下に定義されるすべての残基（ｒｅｓｔ）及び置換基は、１つ又は複数のＦ原子で置換されていてもよい。

【0042】

キラルホスホチオエートの合成における本発明の化合物の使用
本発明の化合物を用いたキラルホスホロチオエートの一般的合成
スキーム１

【0043】

【化11】

【0044】

第１のヌクレオシド（リボヌクレオシド及びデオキシリボヌクレオシドを含む）を、最初にピリジン及びアセトニトリルなどの溶媒中、ＤＭＯＣＰなどの活性化剤の存在下で、キラルシントンとカップリングさせる。単離せずに、カップリング生成物をＤＢＵ、ＴＭＧ、ｔ－ＢｕＮＨ₂又はトリアルキルアミン、例えば、Ｅｔ₃Ｎ又はⁱＰｒ₂ＮＥｔなどの塩基で処理して、フルオレニルメチル基を除去する。単離した生成物を、第１のカップリングと同様の条件下で、第２のヌクレオシド（リボヌクレオシド及びデオキシリボヌクレオシドを含む）とカップリングさせる。１－（２－ピリジニル）エチル基を除去するための水素化条件により、キラルホスホロチオエートが得られる。ＤＭＴｒをヌクレオシドの保護に使用する場合、Ｐｄ触媒による水素化は、ＤＭＴｒの有無にかかわらず機能する。Ｐｄ／Ｃ、Ｐｄ（ＯＡｃ）₂、及びＰｄ（ＣＦ₃ＣＯ₂）₂などのさまざまなＰｄ触媒を、Ｚｎ（ＯＴｆ）₂、Ｚｎ（ＣＦ₃ＣＯ₂）₂、ＺｎＢｒ₂及びＺｎＣｌ₂などのルイス酸の存在下で使用できる。

【0045】

可能な活性化剤の構造：

【化12】

ＦＰＰＳ^Prの適用の例を、以下のスキーム２に示す。

【0046】

【化13】

【0047】

スキーム２
Ｎ－６－ベンゾイル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－デオキシアデノシンを、Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエートと、活性化剤として２－クロロ－５，５－ジメチル－１，３，２－ジオキサホスホリナン－２－オキシド（ＤＭＯＣＰ）を用いて、ピリジン中室温でカップリングさせた。反応が完了した後、水を添加して反応を停止させた。次いで、ＤＢＵを導入して、フルオレニルメチル基を除去した。生成物を、ＥｔＯＡｃなどの有機溶媒で抽出した。典型的には、キラルホスホロチオエート生成物を、定量的な収率で単離した。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー精製によって容易に得た。典型的には、シントンであるＯ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエートのＰ－キラリティーは完全に生成物に移行し、化学プロセス全体が立体選択的である。換言すれば、９９：１のｄｒのシントンがカップリングに使用される場合、生成物は、９９：１のｄｒで単離される。

【0048】

合成スキーム
本発明の化合物を調製する典型的な方法は、実験項に記載されている。
本発明の化合物はまた、以下に記載するものを含み、当分野の技術の範囲内の変形を含む当技術分野で公知の方法によって作製することができる。
スキーム１は、シントンの合成を示す。すべてのシントンは、ＤＭＯＣＰ又はＰｉｖＣｌなどの活性化剤の存在下、ピリジンなどの好適な溶媒中、室温でキラルアルコールとフルオレニルメチル基を有するＨ－ホスホネートとをカップリングすることによって調製される。生成物の硫化は、硫黄又はＳ₈の添加によって達成される。場合によっては、ＭｅＯＨ、ＣＨ₃ＣＮ、及び水などの反溶媒を添加した後、簡易濾過によってジアステレオ異性体的に純粋な異性体を単離した。キラルアルコールの鏡像異性体を使用することにより、シントンの鏡像異性体を同様の方法で調製する。
スキーム３

【0049】

【化14】

スキーム３で出発物質として使用されるキラルアルコールは、次のように調製できる。
スキーム４

【0050】

【化15】

ｎが０であり、Ｒ²がメチルである場合、ｔ－ＢｕＯＫ及びＬＤＡなどの塩基の存在下で、４－置換ピコリン酸メチルとＭｅＯＡｃ及びＥｔＯＡｃなどの酢酸エステルとをＣｌａｉｓｅｎ縮合すると、対応するβ－ケトンエステルが得られる。
スキーム５

【0051】

【化16】

ｎが０であり、Ｒ²がメチルである場合、ケトンエステルは、酸性条件下で連続的に加水分解及び脱炭酸を受け、メチルケトンが得られる。
以下に述べるキラルアルコールの合成に必要なさらなるケトンは、当業者に公知であり、有機合成の文献に記載されている合成の方法を使用して得ることができる。
ｎに応じて、対応するケトンがキラルアルコールに変換される。
ｎ＝０の場合のスキーム６ａ：

【0052】

【化17】

ｎが０である場合、野依の水素化条件下で、触媒のＳ異性体を用いて、ケトンを対応する（Ｒ）－キラルアルコールに変換することができる。
ｎ＝１の場合のスキーム６ｂ：

【0053】

【化18】

Ronald L. Reyes, Tomohiro Iwai,Satoshi Maeda and Masaya Sawamura, J. Am.Chem.Soc.2019, 141, 6817-6821
Andreas Weickgenannt, Marius Mewald, Thomas W. T.Muesmann, Martin Oestreich Prof. Dr., Angewandte Chemie, International Edition 2010, 49, 2223-2226
ｎ＝２の場合のスキーム６ｃ：

【0054】

【化19】

Sylvie Condon, Daniel Dupre, Isabelle Lachaise, Jean-Yves Nedelec, Synthesis 2002, 12, 1752-1758
ｎ＝３の場合のスキーム６ｄ：

【0055】

【化20】

Boekelheide, V.; Mason, J. H., Journal of the American Chemical Society 1951, 73, 2356-7
ｎ＝２～６の場合のスキーム６ｅ：

【化21】

Nils Aake Bergman, Torbjoern Halvarsson, J. Org.Chem.1989, 54, 2137-2142.

【0056】

上記のスキーム３に示すように、キラルアルコールと［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸を縮合し、続いてＳ₈で硫化すると、１：１のジアステレオ異性体が得られる。ＣＨ₃ＣＮ又はＭｅＯＨ及び水の添加後、（Ｒ，Ｒｐ）－ジアステレオ異性体が、高い／優れたジアステレオ選択性で単離される。トルエンなどの溶媒中のさらなるスラリーにより、残留Ｓ₈を除去した。固体生成物の典型的な収率は、３５～４０％である。

【0057】

実験部
以下の実施例は、本発明を制限することなく、本発明を説明することを意図するものである。「周囲温度」及び「室温」という用語は、交換可能に使用され、約２０℃の温度を指す。
以下に記載する化合物は、質量分析計でのイオン化後の特徴的な質量及び分析用ＨＰＬＣでの保持時間によって特徴付けられている。
略語の列挙：

【0058】

【表2】

【0059】

一般実験
すべての試薬は購入し、特に明記しない限りさらに精製せずに使用した。反応は、ＲＰ－ＨＰＬＣ分析によって監視したので、詳細についてはそれぞれの項を参照されたい。ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＤＲＸ－６００、ＤＲＸ－５００、及びＡＭＸ－４００機器で記録し、残留非重水素化溶媒（例えば、７．２６ｐｐｍのＣＨＣｌ₃ １Ｈ ＮＭＲ、７７．１６ １３Ｃ ＮＭＲ）を使用して校正した。多重度を説明するために次の略語を使用した。ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｍ＝マルチプレット、ｂｒ＝ブロード。カラムクロマトグラフィーは、Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル（６０、粒径０．０４３～０．０６３ｍｍ）を使用して実施した。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、エレクトロスプレーイオン化飛行時間リフレクトロン実験により、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ ＴＯＦ質量分析計で記録した。

【実施例】

【0060】

シントンの合成
（実施例１）
［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸の合成

【0061】

【化22】

【0062】

清潔で乾燥した反応器に、アセトニトリル（１１．５Ｌ）を添加した。溶媒を－３５℃に冷却した後、ＰＣｌ₃（３．７８ｋｇ、２７．５ｍｏｌ、１．２０当量）を一度に添加した。次いで、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メタノール（４．５ｋｇ、２２．９ｍｏｌ）のアセトニトリル（３６Ｌ）溶液を、－３０℃から－４０℃の間の温度で添加した。－３０℃から－４０℃の間で３０分後、混合物を０．５時間にわたって０℃に温めた。温度を２０℃未満に制御しながら、水（０．９９ｋｇ、５５ｍｏｌ、２．４当量）を添加した。次いで、混合物を２０℃に温めた。２０～２５℃で２時間後、固体を濾過により収集し、次いでアセトニトリル（８Ｌ）で洗浄した。真空下４０℃で乾燥した後、合計４．４７ｋｇ（７５％の収率）の生成物を固体として得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.58 (dd, J = 0.84, 7.52 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 7.48 Hz, 2H), 7.28 (dt, J = 1.12, 7.48 Hz, 2H), 6.75 (d, J (P, H) = 710.3 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.24 Hz, 2H), 4.21 (t, J = 7.12, 1H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 143.0, 141.3, 128.0, 127.2, 125.2, 120.1, 67.2 [d, J (P, C) = 5.94 Hz], 47.9 [d, J (P, C) = 7.09 Hz]. ³¹P NMR (162 MHz, CDCl₃): δ 8.7.

【0063】

（実施例２）
Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－メトキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（ＦＰＰＳ^Me）の合成

【0064】

【化23】

ａ）メチル３－（４－メトキシピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート

【0065】

【化24】

乾燥した清潔なフラスコに、ＫＯｔ－Ｂｕ（８４．８ｇ、８９７．３ｍｍｏｌ、３．０当量）及びＴＨＦ（４００ｍＬ）を投入した。混合物を２３℃で撹拌して、透明な溶液を得た。溶液を０℃に冷却した後、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の４－メトキシ－ピリジン－２－カルボン酸メチルエステル（５０ｇ、２９９．１ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、続いて温度を５℃未満に維持しながら、酢酸メチル（５１ｇ、６８８．０ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加した。０℃で１時間後、反応を停止させ、１２ＭのＨＣｌでｐＨ５に酸性化した。有機溶媒を、真空下で除去した。生成物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄した。溶媒の除去により粗ケトンエステル生成物が得られ、これを次のステップに直接使用した。
ｂ）１－（４－メトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン

【0066】

【化25】

【0067】

フラスコに、メチル３－（４－メトキシピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート（６２ｇ、２９６．４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｃ（２４８ｍＬ）及び水（４９．６ｍＬ）を投入し、続いてＨ₂ＳＯ₄（４５．６ｍＬ）を添加した。次いで、混合物を９８℃で２時間加熱した。残渣を０℃に冷却した後、６ＭのＮａＯＨを添加して、ｐＨ＝５．５にした。生成物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄した。次いで、有機溶液を活性炭で処理した。濃縮後、生成物は固化し、ヘキサン中でスラリー化した。固体を収集し、ヘキサンで洗浄した。乾燥後、４２ｇの生成物を、９４％の収率で単離した。
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.53 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 1.80 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 1.70, 5.25 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.62 (s, 3H).
ｃ）（１Ｒ）－１－（４－メトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール

【0068】

【化26】

【0069】

反応器に、１－（４－メトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン（１０ｇ、６６．２ｍｍｏｌ）、ＲｕＣｌ₂［（Ｓ）－ｘｙｌＢＩＮＡＰ］［（Ｓ）－ＤＡＩＰＥＮ］（４０．４ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）、ＫＤＭＯ（０．７７９ｇ、ヘプタン中５０％、０．０３当量）、２－ＰｒＯＨ（５０ｍＬ）を添加した。混合物を４５０ｐｓｉのＨ₂で、２０～２１℃で１４時間撹拌した。生成物を、ヘキサン中０～６０％のＥｔＯＡｃを用いるカラムクロマトグラフィーで精製した。合計８．２ｇの生成物を、８１％の収率及び８７：１３のｅｒで単離した。
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.28 (d, J = 5.68 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 2.52 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 2.60, 5.68 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 4.72 Hz, 1H), 4.68 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.56 Hz, 3H).
ｄ）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－メトキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（ＦＰＰＳ^Me）

【0070】

【化27】

【0071】

フラスコに、（１Ｒ）－１－（４－メトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール（５．０ｇ、３２．６ｍｍｏｌ）及び（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸（１０．０ｇ、３５．９ｍｍｏｌ））を投入し、続いてピリジン（１５．０００ｍｌ）を添加した。温度を２０から２５℃の間に維持しながら、２，２－ジメチルプロパノイルクロリド（ＰｉｖＣｌ）（５．５６６ｇ、５．６８５ｍｌ、４５．７ｍｍｏｌ）を添加した。２０～２５℃で０．５時間後、水（１．１８ｇ、６５．２８３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて温度を３５℃未満に維持しながら、硫黄（１．１ｇ、３４．２７４ｍｍｏｌ）を添加した。２～３時間後、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、２ＭのＫＨＳＯ₄及び水で順次洗浄した。有機層を濃縮した。残渣にＭｅＯＨ２５ｍＬを添加した。一晩後、固体を収集し、次いでＭｅＯＨ１０ｍＬで洗浄した。固体をトルエン中でさらにスラリー化して、残留硫黄を除去した。単離した固体を真空下で乾燥させて、３．３ｇの生成物ＦＰＰＳ^Meを２３．７％の収率で得た。
¹H NMR (600 MHz, ピリジン-d₅): 8.48 (d, J = 5.64 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 7.50 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.56 Hz, 2H), 7.77 (d, J = 7.50 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2.10 Hz, 1H), 7.35 (q, J = 7.08, 13.38 Hz, 2H), 7.25-7.21 (m, 2H), 6.72 (dd, J = 2.40, 5.58 Hz, 1H), 6.29 (m, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.48 (t, J = 7.26 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 1.93 (d, J = 6.54 Hz, 3H). ¹³C NMR (150 MHz, ピリジン-d₅): 166.7, 165.5 [d, J (P, C) = 6.21 Hz], 150.4, 145.1, 144.9, 141.7, 141.7, 128.0, 127.9, 127.4, 126.1, 125.9, 120.3, 120.3, 109.0, 106.7, 76.0 [d, J (P, C) = 5.18 Hz], 68.8 [d, J (P, C) = 5.48 Hz], 55.0, 48.9 [d, J (P, C) = 8.13 Hz], 23.5 [d, J (P, C) = 4.17 Hz]. HRMS (ES pos.): m/z C₂₂H₂₃NO₄PS (M + H⁺)の計算値: 428.10799, 実測値: 428.10777.

【0072】

（実施例３）
Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－エトキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（ＦＰＰＳ^Et）の合成
ａ）エチル３－（４－エトキシピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート

【0073】

【化28】

【0074】

乾燥した清潔なフラスコに、ＫＯｔ－Ｂｕ（６４．５ｇ、５６３．５ｍｍｏｌ、２．２当量）及びＴＨＦ（５００ｍＬ）を投入した。混合物を２３℃で撹拌して、透明な溶液を得た。溶液を－２０℃に冷却した後、温度を－１５℃未満に維持しながら、酢酸エチル（５５ｍｌ、５６３．５ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加した。１５分後、温度を０℃未満に維持しながら、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の４－エトキシ－ピリジン－２－カルボン酸エチルエステル（５０ｇ、２５６．１３ｍｍｏｌ、１．０当量）を０．５時間にわたって添加した。０℃で０．５時間後、反応を酢酸（４３．９９ｍｌ、７６８．４ｍｍｏｌ）で停止させ、続いて水（４００ｍＬ）を添加した。溶媒を真空下で除去した。生成物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄した。溶媒の除去により、粗ケトンエステル生成物が得られた。分析試料を、シリカゲルカラムのクロマトグラフィーによって得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.45 (d, J = 5.64 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 2.56, 5.64 Hz, 1 H), 4.22-4.12 (m, 6H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.24 (t, J = 7.16 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 200.0, 165.8, 155.4, 150.1, 114.2, 107.2, 63.9, 25.9, 14.4.
ｂ）１－（４－エトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン

【0075】

【化29】

【0076】

フラスコに、エチル３－（４－エトキシピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート（８５０ｇ；３５８．３ｍｍｏｌ；１．０当量）、及びＨＯＡｃ（２１２．５ｍＬ）及び水（８５ｍＬ）を投入し、続いてＨ₂ＳＯ₄（２１．２５ｍＬ）を添加した。次いで、混合物を９８℃で２時間加熱した。溶媒の大部分を、真空下で除去した。残渣を０℃に冷却した後、６ＭのＮａＯＨを添加して、ｐＨ＝１１にした。生成物を、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄した。次いで、有機溶液を活性炭で処理した。濃縮後、生成物を次のステップに使用した。全体の収率は、９３％である。分析試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.47 (dd, J = 0.52, 5.64 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 0.68, 2.52 Hz, 1H), 6.95 (ddd, J = 1.0, 2.64, 5.64 Hz, 1 H), 4.14 (q, J = 6.96, 14.0 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 200.0, 165.8, 155.4, 150.1, 114.2, 107.2, 63.9, 25.9, 14.4.
ｃ）（Ｒ）－１－（４－エトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール

【0077】

【化30】

【0078】

反応器に、１－（４－エトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン（１０ｇ、６０．５ｍｍｏｌ）、ＲｕＣｌ₂［（Ｓ）－ｘｙｌＢＩＮＡＰ］［（Ｓ）－ＤＡＩＰＥＮ］（１４７．９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、ｔ－ＢｕＯＫ（２７１．７ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）、２－ＰｒＯＨ（４０ｍＬ）を添加した。混合物を３１．０３ｂａｒ（４５０ｐｓｉ）のＨ₂で、２０～２１℃で１４時間撹拌した。生成物を、ヘキサン中０～６０％のＥｔＯＡｃを用いるカラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を、９０％の収率及び９７：３のｅｒで単離した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.17 (bs, 1H), 6.80 (d, J = 2.44 Hz, 1H), 6.57 (m, 1H), 4.76 (q, J = 6.52, 13.04 Hz, 1H), 3.98 (q, J = 7.08, 14.12 Hz, 2H), 1.39 (d, J = 6.44 Hz, 3H), 1.32 (t, J = 7.0 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 165.9, 165.7, 149.2, 109.0, 105.6, 69.3, 63.5, 24.1, 14.4.

【0079】

キラルＨＰＬＣ条件：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－３、４．６×２５０ｍｍ；９６：４ヘプタン／エタノール、１．３ｍＬ／分、２２０ｎｍ、（Ｒ）－異性体、ｔ＝１５．７２分、（Ｓ）－異性体、ｔ＝１６．６１分
ｄ１）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－エトキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Et）

【0080】

【化31】

【0081】

（１Ｒ）－１－（４－エトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール（５６ｇ、３３４．９２ｍｍｏｌ、１．０当量）及び［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸の混合物（１３１．３ｇ、３３４．９２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ピリジン（２×１０ｍＬ）との共蒸発により乾燥させた。ピリジン（１９６ｍＬ）を添加した後、２，２－ジメチルプロパノイルクロリド（６１．８７ｍＬ、５０２．３８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。３０分後、水（１２．０９ｍＬ、６６９．８４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いて硫黄（１１．８１ｇ、３６８．４１ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。２時間後、メタノール（８４０ｍＬ）を添加した。２３℃で１時間後、固体を収集し、メタノール（５０４ｍＬ）で洗浄した。固体をトルエン（５６０ｍＬ）に懸濁させた後、固体を収集し、トルエン（１１２ｍＬ）で洗浄し、次いで真空下で乾燥させた。生成物を、３１％の収率及び９８：２超のｄｒで単離した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.51 (d, J = 6.72 Hz, 1H), 7.84-7.80 (m, 2H), 7.58-7.53 (m, 2H), 7.40-7.34 (m, 3H), 7.32-7.24 (m, 3H), 5.52 (m, 1H), 4.33-4.18 (m, 2H), 4.11 (m, 1H), 4.07-3.96 (m, 2H), 1.44 (d, J = 6.52, 3H), 1.35 (t, J = 6.92 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, Py-d₅): δ 167.4, 166.6 [d, J (P, C) = 6.02 Hz], 146.3 [d, J (P, C) = 15.2 Hz], 142.9 [d, J (P, C) = 3.0 Hz], 129.2 [d, J (P, C) = 1.9 Hz], 128.7, 127.3, 127.2, 121.6 [d, J (P, C) = 2.4 Hz], 110.7, 108.3, 77.2 [d, J (P, C) = 5.0 Hz], 70.1 [d, J (P, C) = 5.6 Hz], 65.0, 50.2 [d, J (P, C) = 8.3 Hz], 24.8 [d, J (P, C) = 4.8 Hz], 15.7. ³¹P NMR (162 MHz, ピリジン-d₅): δ 62.2. HRMS (ES pos.): m/z C₂₃H₂₅NO₄PS (M + H⁺)の計算値: 442.12364, 実測値: 442.12357.

【0082】

ｄ２）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｓ）－１－（４－エトキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｓ）－ホスホロチオエート（（Ｓ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Et）

【0083】

【化32】

【0084】

（１Ｓ）－１－（４－エトキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール（３８．７ｇ、２３１．５ｍｍｏｌ、１．０当量）及び［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸の混合物（６０．２ｇ、２３１．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ピリジン（２×１００ｍＬ）との共蒸発により乾燥させた。ピリジン（１９４ｍＬ）を添加した後、２，２－ジメチルプロパノイルクロリド（６５．０５ｇ、３４７．２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。３０分後、水（８．３６ｍＬ、４６２．９ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、続いて硫黄（２２．２７ｇ、６９４．４ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。２時間後、メタノール（７７４ｍＬ）を添加した。２３℃で１時間後、固体を収集し、メタノール（８０ｍＬ）で洗浄した。固体をトルエン（４５０ｍＬ）に懸濁させた後、固体を収集し、トルエン（８０ｍＬ）で洗浄し、次いで真空下で乾燥させた。３４ｇの生成物を、３３％の収率、９８：２超のｄｒで単離した。
¹H NMR (400 MHz, Py-d₅): δ 13.54 (bs, 2H), 10.00 (d, J = 1.42 Hz, 1H), 9.37 (d, J = 7.44 Hz, 1H), 9.32-9.27 (m, 3H), 9.05 (d, J =2.52 Hz, 1H), 8.89-8.84 (m, 2H), 8.77-8.72 (m, 2H), 8.27 (dd, J = 2.52, 5.68 Hz, 1H), 7.79 (m, 1H), 6.27 (m, 1H), 6.16 (m, 1H), 5.99 (t, J = 7.16 Hz, 1H), 5.31 (q, J = 7.00, 14.00 Hz, 2H), 3.45 (d, J = 6.60 Hz, 3H), 2.67 (t, J = 6.96 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, Py-d₅): δ 167.4, 166.6 [d, J (P, C) = 6.02 Hz], 146.3 [d, J (P, C) = 15.2 Hz], 142.9 [d, J (P, C) = 3.0 Hz], 129.2 [d, J (P, C) = 1.9 Hz], 128.7, 127.3, 127.2, 121.6 [d, J (P, C) = 2.4 Hz], 110.7, 108.3, 77.2 [d, J (P, C) = 5.0 Hz], 70.1 [d, J (P, C) = 5.6 Hz], 65.0, 50.2 [d, J (P, C) = 8.3 Hz], 24.8 [d, J (P, C) = 4.8 Hz], 15.7. ³¹P NMR (162 MHz, ピリジン-d₅): δ 62.2. HRMS (ES pos.): m/z C₂₃H₂₅NO₄PS (M + H⁺)の計算値: 442.12364, 実測値: 442.12361.

【0085】

（実施例４）
Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr）の合成
ａ）４－プロポキシピコリン酸プロピル

【0086】

【化33】

４－クロロピコリン酸（２５０ｇ、１５８６．７６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１－ＰｒＯＨ（２２５０ｍＬ）及びＨ₂ＳＯ₄（１００．９８ｍＬ、１９０４．１０９１ｍｍｏｌ、１．２当量）を投入した。９０℃で１８時間後、１２５０ｍＬの１－ＰｒＯＨを１０ｍｂａｒ下、３５℃で蒸留した。水（２５０ｍＬ）を添加し、続いて固体のＮａＨＣＯ₃（３１９．８９ｇ、３８０８．２１８１ｍｍｏｌ、２．４当量）を注意深く添加して、ｐＨ７～８にした。生成物を、ＭＴＢＥ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を、水５００ｍＬで洗浄した。濃縮後、生成物を５７％の収率で単離した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.54 (d, J = 5.64 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.56 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 2.56, 5.64 Hz, 1 H), 4.37 (t, J = 6.96 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 6.56 Hz, 2H), 1.90-1.81 (m, 4H), 1.08-1.00 (m, 6H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 166.0, 165.4, 151.0, 149.9, 113.2, 111.7, 69.9, 67.5, 22.2, 22.0, 10.4. HRMS (ES pos.): m/z C₁₂H₁₈NO₃ (M + H⁺)の計算値: 224.12812, 実測値: 224.12805.
ｂ）メチル３－（４－クロロピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート

【0087】

【化34】

【0088】

乾燥した清潔な反応器に、ＫＯｔ－Ｂｕ（２６９．２ｇ、２３９８．８７ｍｍｏｌ、２．１当量）及びＴＨＦ（２Ｌ）を投入した。混合物を－１０℃に冷却した後、ＭｅＯＡｃ（１８６．２ｇ、２５１３．１ｍｍｏｌ、２．２当量）をＴ_r＝０℃未満で添加した。投入ラインを、ＴＨＦ（１Ｌ）ですすいで反応器に入れた。０～－５℃で０．５時間後、ＴＨＦ（８００ｍＬ）中の４－クロロピコリン酸メチル（２００ｇ、１１４２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の薄いスラリーを２℃未満で投入した。投入ラインを、ＴＨＦ（１００ｍＬ）ですすいで反応器に入れた。０～５℃で０．５時間後、ＨＯＡｃ（２０５．８ｇ、３４２６，９５ｍｍｏｌ、３．０当量）を２５℃未満で投入し、続いてＨ₂Ｏ（４００ｍＬ）を一度に添加して均一な溶液を得た。有機溶媒（約３０００ｍＬ）を、真空下３０～４０℃で除去した。ＭｅＯＨ（１２００ｍＬ）を添加した後、有機溶媒（約６００ｍＬ）を真空下３０～３５℃で除去した。混合物を少なくとも１時間にわたって２０～２３℃に冷却した後、水（１６００ｍＬ）を０．５時間にわたって添加した。２０～２３℃で１時間後、固体を濾過により収集し、次いでＨ₂Ｏ（４００ｍＬ）で洗浄した。湿潤ケーキに窒素を通すことにより、固体を真空下で乾燥させた。生成物を９３～９５％の収率で単離した。
ｃ）１－（４－クロロピリジン－２－イル）エタン－１－オン

【0089】

【化35】

【0090】

乾燥した清潔な反応器に、メチル３－（４－クロロピリジン－２－イル）－３－オキソプロパノエート（５５９ｇ、２．６２ｍｏｌ、互変異性体を含む）、Ｈ₂Ｏ（９９９ｍＬ）、ＨＯＡｃ（５５０ｇ）及びＨ₂ＳＯ₄（３３３ｇ）を投入した。８５℃で２時間後、混合物を５～２０℃に冷却した。１－メチルピロリジン（１１１４ｇ）を３０℃未満で添加し、投入ラインを２０～３０℃で、Ｈ₂Ｏ（８３８ｍＬ）ですすいで反応器内に３０℃未満で入れ、生成物をＥｔＯＡｃ（２２３６ｍＬ）で抽出した。相を切断した後、有機層をＨ₂Ｏ（５５９ｍＬ）で洗浄した。真空下４５℃未満で溶媒を除去した後、生成物をトルエン（５５９ｍＬ）との共蒸発により乾燥させた。典型的な収率は、８５～９０％である。
ｄ）１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン

【0091】

【化36】

手順Ａ：
ｉ）プロピル３－オキソ－３－（４－プロポキシピリジン－２－イル）プロパノエート

【0092】

【化37】

乾燥したフラスコに、ＫＯｔ－Ｂｕ（１１．０６ｇ、９８．５ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（１００ｍＬ）を投入した。溶液を－１０℃に冷却した後、ｎ－ＰｒＯＡｃ（１１．４０ｍＬ、９８．５ｍｍｏｌ、２．２当量）を、０℃未満で添加した。１０分後、４－プロポキシ－ピリジン－２－カルボン酸プロピルエステル（１０ｇ、４４．７９ｍｍｏｌ、１．０当量）を、０℃未満で添加した。０．５時間後、ＨＯＡｃ（８．９７ｍＬ、１５６．７６ｍｍｏｌ、３．５００当量）を２５℃未満で添加し、続いて水（２０ｍＬ）を添加して均一な溶液を得た。真空下でＴＨＦを除去した後、生成物を酢酸エチル（６０ｍＬ）で抽出し、水（２０ｍＬ）で洗浄した。濃縮後、生成物であるプロピル３－オキソ－３－（４－プロポキシピリジン－２－イル）プロパノエートを、次のステップに使用した。
ｉｉ）１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン

【0093】

【化38】

【0094】

フラスコに、プロピル３－オキソ－３－（４－プロポキシピリジン－２－イル）プロパノエート（２７０ｇ；１０１７．７ｍｍｏｌ；１．０当量）、ＨＯＡｃ（２７７．７８ｍＬ）、水（４０５ｍＬ）及びＨ₂ＳＯ₄（８１．３１ｍＬ）を添加した。９８℃に２時間加熱した後、混合物を０℃に冷却し、水（２７０ｍＬ）を添加し、続いて５０％ＮａＯＨを添加して、ｐＨ＝５．５にした（約３７６ｍＬ）。追加の水を添加して、塩の固体を溶解した。生成物を、ＥｔＯＡｃ（３３０ｍＬ）で２回抽出した。有機層を、ＮａＨＣＯ₃（２２０ｍＬ）及び水（２２０ｍＬ）の水溶液で洗浄した。粗生成物を、室温で、１０％活性炭で処理した。濾過及び濃縮後、生成物を８９％の収率で単離し、次のステップに使用した。
手順Ｂ：

【0095】

【化39】

【0096】

乾燥した清潔な反応器に、１－（４－クロロピリジン－２－イル）エタン－１－オン（１００ｇ、６４２ｍｍｏｌ）及び１－ＰｒＯＨ（１０００ｍＬ）を投入し、続いてＨ₂ＳＯ₄（７５．３ｇ、１．２当量）を添加した。投入ラインを、１－ＰｒＯＨ（３００ｍＬ）ですすいだ。得られた混合物を、９０℃で少なくとも２０時間加熱した。１１００ｍＬの１－ＰｒＯＨを真空下５５～６０℃で蒸留した後、水を添加した。５５～６０℃で０．５時間後、混合物を２３℃に冷却した。ピリジン（１５５．６ｍＬ、３．０当量）を２０～２５℃で添加し、続いてトルエン（６００ｍＬ）を添加した。相を切断した後、有機層をＮ（２５７ｍＬ、０．５Ｍ、０．２０当量）の水溶液で２０～２５℃で洗浄した。相を切断した後、有機層をＨ₂Ｏ（３００ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を、流速１０ｍＬ／分でＣｕｎｏ ｃａｒｂｏｎ ５５に通した。炭素を、トルエン２００ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を次のステップに使用した。典型的な収率は、７０～７５％である。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.47 (d, J = 5.64 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.96 (m, 1 H), 4.03 (t, J = 6.56 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 1.89-1.80 (m, 2H), 1.05 (t, J = 7.36 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 200.1, 166.0, 155.4, 150.1, 114.2, 107.3, 69.8, 25.9, 22.2, 10.3. HRMS (ES pos.): m/z C₁₀H₁₄NO₂ (M + H⁺)の計算値: 180.10191, 実測値: 180.10182.
ｅ）（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール

【0097】

【化40】

【0098】

反応器に、１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オン（６７８．２ｇ、３７８４．０ｍｍｏｌ）、ＲｕＣｌ₂［（Ｓ）－ｘｙｌＢＩＮＡＰ］［（Ｓ）－ＤＡＩＰＥＮ］（９．２４ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）、３，７－ジメチル－３－オクチル酸カリウム（５５．５８、ヘプタン中５０％、１１３．５ｍｍｏｌ）及び２－ＰｒＯＨ（３１７３ｍＬ）を添加した。混合物を３１．０３ｂａｒ（４５０ｐｓｉ）のＨ₂で、２０～２１℃で３０分間撹拌した。溶液を濃縮し、ヘプタン（９００ｍＬ）を添加した。混合物を一晩撹拌した。固体を収集し、ヘプタン（７００ｍＬ）で洗浄した。合計６０３ｇの生成物を、固体として９９：１のｅｒ及び８３％の収率で単離した。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8.31 (d, J = 5.76 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 2.44 Hz, 1H), 6.70 (dd, J = 2.44, 5.76 Hz, 1 H), 4.82 (q, J = 6.56, 13.08 Hz, 1H), 4.43 (bs, 1H), 3.97 (t, J = 6.56 Hz, 2H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.52 Hz, 3H), 1.04 (t, J = 7.40 Hz, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃): δ 165.9, 165.1, 149.3, 109.1, 105.7, 69.5, 69.0, 24.2, 22.3, 10.4. HRMS (ES pos.): m/z C₁₀H₁₆NO₂ (M + H⁺)の計算値: 182.11756, 実測値: 182.11752.
キラルＨＰＬＣ条件：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ－３、４．６×２５０ｍｍ；９４：６ヘプタン／エタノール、１．３ｍＬ／分、２２０ｎｍ、（Ｒ）－異性体、ｔ＝８．３９分、（Ｓ）－異性体、ｔ＝８．９８分
ｆ１）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr）

【0099】

【化41】

【0100】

乾燥した清潔な反応器に、（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール（３１２．９ｇ、１．７３ｍｏｌ、１．０当量）及び［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸（４９３．８９ｇ、１．９０ｍｏｌ、１．１当量）を投入した。ピリジン（９９０ｍＬ）を添加した後、温度を２０～２５℃に維持しながら、ＰｉｖＣｌ（２９４．２ｇ、２．４２ｍｏｌ、１．４当量）を添加した。２０～２５℃で０．５時間を超えた後、Ｈ₂Ｏ（６２．２ｇ、３．４５ｍｏｌ、２．０当量）を添加して反応を停止させた。温度を３５℃未満に維持しながら、硫黄（５９．０９ｇ、１．８１ｍｏｌ、１．０５当量）を添加した。２～３時間後、ＭｅＯＨ（９９０ｍＬ）を２０～２５℃で０．５時間にわたって添加し、続いてＨ₂Ｏ（１９８０ｍＬ）を２０～２５℃で０．５時間にわたって添加した。２０～２３℃で１時間後、固体を収集し、ＭｅＯＨ（１１５５ｍＬ）及びＨ₂Ｏ（２３１ｍＬ）の溶液で洗浄した。湿潤ケーキを清潔な反応器に投入し、続いてＭｅＯＨ（１９８０ｍＬ）を添加した。０．５時間後、Ｈ₂Ｏ（３９６ｍＬ）を添加した。０．５時間後、固体を再び収集し、ＭｅＯＨ（１６０ｍＬ）で洗浄した。湿潤ケーキを清潔な反応器に投入し、次いでトルエン（２５００ｍＬ）を添加した。２５±２℃で２時間後、固体を収集し、トルエン（３００ｍＬ）で洗浄した。真空下３０℃未満で乾燥後、生成物を３９％の収率及び９８：２超のｄｒで固体として単離した。
¹H NMR (600 MHz, ピリジン-d₅): δ 8.49 (d, J = 5.64 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 7.44 Hz, 1H), 7.79-7.76 (m, 3H), 7.56 (d, J = 2.46 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 7.14, 13.98 Hz, 2H), 7.24-7.21 (m, 2H), 6.74 (dd, J = 2.46, 5.58 Hz, 1H), 6.28 (m, 1H), 4.75-4.71 (m, 1H), 4.66-4.62 (m, 1H), 4.48 (t, J = 7.26 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 6.48 Hz, 2H), 1.93 (d, J = 6.60 Hz, 3H), 1.62-1.56 (m, 2H), 0.81 (t, J = 7.44 Hz, 3H). ¹³C NMR (150 MHz, ピリジン-d₅): δ 166.1, 165.1 [d, J (P,C) = 5.69 Hz], 150.1, 144.8, 144.7, 141.4, 141.4, 127.7, 127.7, 127.2, 127.1, 125.8, 125.7, 120.1, 120.1, 109.3, 107.0, 75.7 [d, J (P,C) = 5.1 Hz], 69.3, 68.6 [d, J (P,C) = 5.5 Hz], 48.6 [d, J (P,C) = 8.5 Hz], 23.3 [d, J (P,C) = 4.2 Hz], 22.2, 10.2. HRMS (ES pos.): m/z C₂₄H₂₇NO₄PS (M + H⁺)の計算値: 456.13929, 実測値: 456.13913.
ｆ２）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｓ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｓ）－ホスホロチオエート（（Ｓ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Pr）

【0101】

【化42】

【0102】

乾燥した清潔な反応器に、（Ｓ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エタン－１－オール（４．０ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）及び［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］ホスフィン酸（６．４８ｇ、２４．３ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。ピリジン（１２ｍＬ）を添加した後、温度を２０～２５℃に維持しながら、ＰｉｖＣｌ（４．０５ｇ、３３．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。２０～２５℃で０．５時間を超えた後、Ｈ₂Ｏ（０．８ｍＬ、４４．１ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加して反応を停止させた。温度を３５℃未満に維持しながら、硫黄（０．７８ｇ、２４．３ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。２～３時間後、ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）を２０～２５℃で０．５時間にわたって添加し、続いてＨ₂Ｏ（２４ｍＬ）を２０～２５℃で０．５時間にわたって添加した。２０～２３℃で１時間後、固体を収集し、ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）及びＨ₂Ｏ（３ｍＬ）の溶液で洗浄した。湿潤ケーキを清潔な反応器に投入し、次いでトルエン（１００ｍＬ）を添加した。２５±２℃で２時間後、固体を収集し、トルエン（２０ｍＬ）で洗浄した。真空下３０℃未満で乾燥させた後、生成物を３５％の収率及び９８：２超のｄｒで固体として単離した。
ＨＲＭＳ（ＥＳ ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₄ＰＳ（Ｍ＋Ｈ⁺）の計算値：４５６．１３９２９，実測値：４５６．１３９０６．
ｇ１）Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｓ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Pr）の精製

【0103】

【化43】

【0104】

Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエートを単離した後、母液を濃縮してＭｅＯＨの大部分を除去した。残渣を、ＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄で洗浄してピリジンを除去して、次いで水で洗浄した後、有機溶媒を真空下で除去した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムをヘキサンで平衡化した後、カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。この発泡固体をさらにＥｔＯＡｃと混合して、ＥｔＯＡｃ中のスラリーを調製した。固体を収集し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。真空下で乾燥後、生成物を９０：１０のｄｒで固体として単離した。
ＨＲＭＳ（ＥＳ ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ Ｃ₂₄Ｈ₂₇ＮＯ₄ＰＳ（Ｍ＋Ｈ⁺）の計算値：４５６．１３９２９，実測値：４５６．１３９０１．

【0105】

シントンの適用／使用
（実施例５）
モノマーの合成のための一般的な手順：

【化44】

【0106】

Ｂ＝ヌクレオシドの窒素塩基
乾燥した清潔なフラスコに、保護基としてのＤＭＴｒとともに１ｇのヌクレオシドｄＡ、ｄＣ、ｄＧ又はｄＴ、並びにＦＰＰＳ^Me、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Et、（Ｓ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Et、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr、（Ｓ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Pr、及び（Ｒ，Ｓ_p）－ＦＰＰＳ^Prより選択されるシントンを投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（２．６当量）を一度に添加した。１～２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＢＵ１ｍＬを添加した。３０分後、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍｌで洗浄した。濃縮後、粗生成物を単離し、次のステップに直接使用した。分析試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。次いで、画分を収集して濃縮し、生成物を発泡固体として得た。

【0107】

モノマーの合成のための具体例
（実施例５．１．）ヌクレオシドとしてｄＡを、シントンとして（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Prを使用して調製したｄＡ－Ｐ（Ｖ）

【0108】

【化45】

【0109】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドＮ－６－ベンゾイル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－デオキシアデノシン（ｄＡ；１ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）及びＯ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr、０．７３ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、２－クロロ－５，５－ジメチル－１，３，２－ジオキサホスホリナン－２－オキシド（ＤＭＯＣＰ；０．７３ｇ、３．９５ｍｍｏｌ、２．６当量）を一度に添加した。１～２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＢＵ１ｍＬを添加した。３０分後、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍＬで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍｌで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。画分を収集して濃縮した後、１．３１ｇの生成物を発泡固体として、９７．５：２．５超のｄｒ及び９４％の収率で得た。

【0110】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 8.61 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.06 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.37 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 7.26-7.16 (m, 8H), 6.81 (t, J = 9.35 Hz, 4H), 6.47 (t, J = 6.45 Hz, 1H), 5.62 (m, 1H), 5.18 (bs, 1H), 4.39 (bs, 1H), 4.17 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.32 (m, 1H), 3.25 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (126 MHz, DMSO-d₆): δ 169.7, 166.2, 161.0, 158.5, 158.5, 152.4, 151.9, 150.9, 145.3, 145.2, 136.1, 135.9, 133.9, 132.9, 130.2, 130.1, 129.4, 129.1, 129.0, 128.9, 128.3, 128.2, 127.9, 127.1, 126.4, 113.6, 111.1, 109.6, 86.1, 85.5 [d, J (P, C) = 5.6 Hz], 84.7, 76.4, [d, J (P, C) = 5.7 Hz], 71.5, 71.0, 64.5, 37.4, 22.5 [d, J (P, C) = 5.3 Hz], 22.0, 10.5. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.76. HRMS (ES pos.): m/z C₄₈H₅₀N₆O₉PS (M + H⁺)の計算値: 917.30921, 実測値: 917.30886.

【0111】

（実施例５．２．）ヌクレオシドとしてｄＣを、シントンとして（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Prを使用して調製したｄＣ－Ｐ（Ｖ）

【化46】

【0112】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシド５’－Ｏ－ジメトキシトリチル－Ｎ－ベンゾイル－デオキシシチジン（ｄＣ；１ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）及びＯ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr；０．７６ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、２－クロロ－５，５－ジメチル－１，３，２－ジオキサホスホリナン－２－オキシド（ＤＭＯＣＰ；０．７６ｇ、４．１０ｍｍｏｌ、２．６当量）を一度に添加した。１～２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＢＵ１ｍＬを添加した。３０分後、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。画分を収集して濃縮した後、１．３５ｇの生成物を発泡固体として、９９：１超のｄｒ及び９６％の収率で得た。

【0113】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 8.58 (d, J = 6.55 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.40 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.90 Hz, 2H), 7.42-7.38 (m, 3H), 7.33-7.15 (m, 9H), 6.89 (dd, J = 1.35, 8.75 Hz, 4H), 6.13 (t, J = 6.35 Hz, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.20 (t, J = 6.25 Hz, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.39 (dd, J = 4.65, 10.65 Hz, 1H), 3.25 (dd, J = 2.45, 10.91 Hz, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.81-1.72 (m, 2H), 1.50 (d, J = 6.60 Hz, 3H), 0.96 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (126 MHz, DMSO-d₆): δ 169.9, 167.9, 163.5, 160.7, 158.6, 158.6, 154.7, 144.9, 144.6, 135.8, 135.6, 133.6, 133.2, 130.3, 130.2, 129.4, 128.9, 128.9, 128.4, 128.2, 113.7, 113.2, 111.3, 109.7, 96.6, 86.9, 86.6, 85.5 [d, J (P, C) = 6.6 Hz], 75.3, 71.6, 70.7, 63.6, 55.5, 55.5, 22.3 [d, J (P. C) = 5.7 Hz], 21.9, 10.51.³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.80.

【0114】

（実施例５．３．）ヌクレオシドとしてｄＧを、シントンとして（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Prを使用して調製したｄＧ－Ｐ（Ｖ）

【化47】

【0115】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシド５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ－イソブチル－デオキシグアノシン（ｄＧ；１ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）及びＯ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr；０．７５ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、２－クロロ－５，５－ジメチル－１，３，２－ジオキサホスホリナン－２－オキシド（ＤＭＯＣＰ；０．７５ｇ、４．０６ｍｍｏｌ、２．６当量）を一度に添加した。１～２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＢＵ１ｍＬを添加した。３０分後、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。画分を収集して濃縮した後、１．３ｇの生成物を発泡固体として、９９：１超のｄｒ及び９３％の収率で得た。

【0116】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 12.04 (s, 1H), 11.74 (s, 1H), 8.56 (d, J = 6.55 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 7.25-7.18 (m, 8H), 6.82 (d, J = 9.15 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 9.15 Hz, 2H), 6.27 (m, 2H), 5.55 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.17 (t, J = 6.30 Hz, 2H), 3.72 (s, 6H), 3.29 (m, 1H), 3.12 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.73 (m, 1H), 2.56 (m, 1H), 1.78-1.72 (m, 2H), 1.47 (d, J = 6.65 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.80 Hz, 6H), 0.95 (t, J = 7.35 Hz, 3H).¹³C NMR (126 MHz, DMSO-d₆): δ 180.5, 169.7, 160.9, 158.5, 158.5, 155.3, 149.1, 148.6, 145.2, 137.5, 135.9, 135.9, 130.2, 130.1, 128.2, 128.2, 127.1, 120.8, 113.6, 111.1, 109.6, 86.1, 85.4 [d, J (P, C) = 6.01 Hz], 83.7, 76.3 [d, J (P, C) = 5.75 Hz], 71.5, 70.9, 64.7, 55.5, 55.4, 38.0, 35.3, 22.4 [d, J (P, C) = 4.81 Hz], 21.9, 19.2, 10.5. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.10. HRMS (ES pos.): m/z C₄₅H₅₂N₆O₁₀PS (M + H⁺)の計算値: 899.31978, 実測値: 899.31999.

【0117】

（実施例５．４．）ヌクレオシドとしてｄＴを、シントンとして（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Prを使用して調製したｄＴ－Ｐ（Ｖ）

【化48】

【0118】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシド５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）チミジン（ｄＴ；１ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）及びＯ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr；０．８８ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、２－クロロ－５，５－ジメチル－１，３，２－ジオキサホスホリナン－２－オキシド（ＤＭＯＣＰ；０．８８ｇ、４．７７ｍｍｏｌ、２．６当量）を一度に添加した。１～２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を１０分間撹拌した。ＤＢＵ１ｍＬを添加した。３０分後、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。その後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを使用して生成物を溶離した。画分を収集して濃縮した後、１．４ｇの生成物を発泡固体として、９９：１超のｄｒ及び９５％の収率で得た。

【0119】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.37 (s, 1H), 8.57 (d, J = 6.55 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.42-7.39 (m, 3H), 7.32-7.22 (m, 8H), 6.89 (d, J = 8.75 Hz, 4H), 6.19 (m, 1H), 5.61 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.18 (m, 2H), 3.73 (s, 6H), 3.35 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.39-2.29 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.65 Hz, 3H), 1.36 (s, 3H), 0.95 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (126 MHz, DMSO-d₆): δ 169.9, 164.1, 160.7, 158.7, 158.6, 150.8, 145.1, 135.9, 135.8, 135.6, 130.2, 130.2, 128.4, 128.1, 127.3, 113.8, 111.3, 110.2, 110.0, 86.6, 84.9 [d, J (P, C) = 5.63 Hz], 84.3, 76.3 [d, J (P, C) = 5.67 Hz], 71.6, 70.8, 64.3, 55.5, 55.5, 38.6 [d, J (P, C) = 4.35 Hz], 21.9, 12.0, 10.5. ³¹ P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.76. HRMS (ES pos.): m/z C₄₁H₄₇N₃O₁₀PS (M + H⁺)の計算値: 804.27143, 実測値: 804.27152.
以下を同様に調製した。
５．５． ＦＰＰＳ^MeからｄＴ－Ｐ（Ｖ）

【0120】

【化49】

【0121】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.37 (s, 1H), 8.54 (d, J = 6.35 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.32-7.22 (m, 8H), 6.89 (d, J = 7.75 Hz, 4H), 6.19 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.73 (s, 6H), 3.36 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.34-2.31 (m, 2H), 1.48 (d, J = 6.55 Hz, 3H), 1.36 (s, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 168.9, 164.1, 161.5, 158.7, 158.6, 150.8, 145.9, 145.1, 135.9, 135.8, 135.6, 130.2, 128.4, 128.1, 127.3, 113.8, 110.7, 110.6, 110.3, 109.0, 86.6, 84.9 [d, J (P, C) = 5.4 Hz], 84.3, 76.3 [d, J (P, C) = 5.2 Hz], 71.3, 64.4, 57.5, 55.5, 55.5, 38.6 [d, J (P, C) = 3.9 Hz], 24.1[d, J (P, C) = 4.9 Hz], 12.0. ³¹ P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.32.
５．６． ＦＰＰＳ^EtからｄＴ－Ｐ（Ｖ）

【0122】

【化50】

【0123】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.4 (s, 1H), 8.55 (d, J = 6.45 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.31 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.28-7.22 (m, 6H), 6.88 (d, J = 7.80 Hz, 4H), 6.19 (m, 1H), 5.58 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.30-4.24 (m, 3 H), 3.73 (s, 6H), 3.35 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.37-2.28 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.55 Hz, 3H), 1.36-1.32 (m, 6H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 169.5, 164.1, 161.0, 158.7, 158.6, 150.8, 145.2, 145.1, 135.9, 135.8, 135.6, 130.2, 130.2, 128.4, 128.1, 127.3, 113.8, 111.2, 110.2, 109.5, 85.6, 84.9 [d, J (P, C) = 5.4 Hz], 84.3, 76.2 [d, J (P, C) = 4.79 Hz], 70.9, 66.0, 64.4, 55.5, 55.5, 38.6 [d, J (P, C) = 4.25 Hz], 22.5 [d, J (P, C) = 4.93 Hz],, 14.5, 12.0. ³¹ P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 55.58.
５．７．Ｆ－Ｐ（Ｖ）

【0124】

【化51】

【0125】

乾燥した清潔な反応器に、Ｎ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（１００ｇ、９８．４質量％、１６０．８５ｍｍｏｌ）、Ｏ－（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル）Ｏ－（（Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－１－イウム－２－イル）エチル）（Ｒ）－ホスホロチオエート（（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr、７６．９７ｇ、９９．０質量％、１６０．３ｍｍｏｌ、１．０４当量）及びピリジン（６００ｍＬ）を投入した。ピリジン（４５０ｍＬ）を真空下４０℃未満で除去した後、アセトニトリル（１００ｍＬ）を２０～２３℃で添加した。ピリジン（１００ｍＬ）中のＤＭＯＣＰ（７７．１９ｇ、４１８．２ｍｍｏｌ、２．６当量）を、１０分未満で添加した。１時間後、Ｈ₂Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、続いて３５℃未満でＤＢＵ（１００ｍＬ）を添加した。３０分後、水（５００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（１Ｌ）を添加し、続いて２ＭのＫＨＳＯ₄（７００ｍＬ）を２０～２５℃で添加した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄で水相がｐＨ２～３になるまで洗浄し、続いて水（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を－５℃に冷却し、１時間撹拌し、固体をセライト床で濾過して除去した。濾液を濃縮して、９８％の収率で生成物を得た。分析試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃ、続いてＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを溶出液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって調製した。

【0126】

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆): δ 11.22 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.49 (d, J = 6.30, 2H), 8.04 (d, J = 7.44, 2H), 7.67-7.63 (m, 5H), 7.54 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.49-7.42 (m, 6H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (bs, 1H), 6.44 (dd, J = 4.2, 15.6 Hz, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.33 (dt, J = 4.2, 52.08 Hz, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.26 (bs, 1H), 4.11 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.01 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 1.74-1.68 (m, 2H), 1.36 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.38, 3H). ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆): δ 168.9, 165.6, 160.5, 151.8, 151.7, 150.4, 144.9, 142.7, 135.3, 135.3, 133.3, 132.4, 132.2, 130.1, 130.1, 128.5, 128.4, 128.0, 127.9, 125.4, 110.5, 108.8, 92.9, 91.6, 85.2 [d, J (P, C) = 32.61 Hz], 83.7 [d, J (P, C) = 7.44 Hz], 71.7 [d, J (P, C) = 14.45 Hz], 70.8, 70.4, 64.3 [d, J (P, C) = 4.92 Hz], 26.7, 21.7 [d, J (P, C) = 4.82 Hz], 21.4, 18.9, 10.0. ³¹P NMR (243 MHz, DMSO-d₆): δ 56.97. ¹⁹F NMR (565 MHz, DMSO-d₆): δ -208.05.

【0127】

（実施例６）
ホスホロチオエート二量体の合成のための実施例
基質の合成

【0128】

【化52】

【0129】

ＤＭＦ（３０ｍＬ）中のｄＧ（１５ｇ、２３．４５ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（３．９９ｇ、５８．６２ｍｍｏｌ）及びＴＢＤＰＳＣｌ（９．７ｇ、３５．１７ｍｍｏｌ）を投入した。２３℃で５時間後、反応混合物を水（１Ｌ）にゆっくりと添加した。固体を収集し、次いで水で洗浄した。ＣＨ₂Ｃｌ₂を添加して、固体を溶解した。相を切断していくらかの水を除去した後、溶液を濃縮し、次いでヘキサン中５０～８０％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製した。
生成物（１０ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３０ｍＬ）及びＣＨ₂Ｃｌ₂（３０ｍＬ）に溶解した。０．１ｇのＰｄ／Ｃを添加した後、反応混合物を６．８ｂａｒ（１００ｐｓｉ）のＨ₂で一晩加圧した。炭素を濾別した後、粗生成物を濃縮し、次いでヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。
ホスホロチオエート二量体の合成のための一般的な手順：

【0130】

【化53】

乾燥した清潔なフラスコに、保護基としてのＤＭＴｒとともに１ｇのヌクレオシドホスホロチオエート、及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにモノマーｄＡ、ｄＣ、ｄＧ又はｄＴを投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0131】

ホスホロチオエート二量体の合成のための具体例
６．１．ｄＡ－ｄＡ

【化54】

【0132】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＡ－Ｐ（Ｖ）（０．７３ｇ、０．７９６ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＡ（０．４７ｇ、０．７９６ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン２．２ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．４１ｇ、２．２２ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液３．５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍＬで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９９：１超のｄｒ及び８５％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0133】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.20 (bs, 2H), 8.64 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.22 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.07-8.03 (m, 4H), 7.65-7.62 (m, 6H), 7.59-7.52 (m, 4H), 7.35-7.31 (m, 2H), 7.22-7.19 (m, 6H), 7.16-7.14 (m, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.80-6.77 (m, 5H), 6.57 (t, J = 6.80 Hz, 1H), 6.43 (t, J = 6.90 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 5.35 (bs, 1H), 4.63 (bs, 1H), 4.23 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 3H), 3.68 (bs, 6H), 3.33-3.29 (m, 2H), 3.24-3.19 (m, 2H), 2.70 (m, 1H), 2.56 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 1.62-1.57 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.06 (s, 9H), 0.84 (t, J = 7.20 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ 166.1, 166.0, 165.7, 161.2 [d, J (P, C) = 5.69 Hz], 158.5, 158.5, 152.2, 152.2, 151.9, 151.8, 151.0, 150.9, 150.9, 145.1, 144.0, 143.5, 135.9, 135.8, 135.7, 133.8, 133.1, 133.0, 133.0, 132.9, 130.6, 130.1, 130.1, 129.0, 129.0, 128.9, 128.9, 128.5, 128.5, 128.2, 128.1, 127.1, 126.6, 126.4, 113.6, 109.8, 107.5, 86.2, 85.5 [d, J (P, C) = 8.73 Hz], 84.5, 84.3, 84.3, 79.2 [d, J (P, C) = 4.75 Hz], 78.6 [d, J (P, C) = 5.15 Hz], 74.0, 69.6, 67.6 [d, J (P, C) = 4.4 Hz], 63.5, 55.4, 55.4, 39.0, 36.4, 27.2, 22.2 [d, J (P, C) = 4.98 Hz], 22.1, 19.1, 10.6. ³¹P (202 MHz, DMSO-d₆) δ 65.64 Hz.
６．２．ｄＡ－ｄＣ

【0134】

【化55】

【0135】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＡ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＣ（０．９６ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．７９ｇ、４．３ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９７．５：２．５のｄｒ及び７８％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを最初に０～１００％のＥｔＯＡｃで洗浄した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0136】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.23 (bs, 2H), 8.58 (bs, 2H), 8.22 (d, J = 5.65 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 7.50 Hz, 2H), 7.98 (d, J = 7.50 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 7.25 Hz, 1H), 6.67-7.35 (m, 18H), 7.27-7.15 (m, 8H), 6.90 (d, J = 2.25 Hz, 1H), 6.81-6.79 (m, 3H), 6.48 (t, J = 6.95 Hz, 1H), 6.24 (t, J = 6.70 Hz, 1H), 5.49 (m, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.35 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.89-3.82 (m, 3H), 6.39 (s, 3H), 3.69 (s,3H), 3.28-3.25 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.81 (m, 1H), 1.63 (m, 2H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.03 (s, 9H), 0.86 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 165.7, 163.6, 161.1 [d, J (P, C) = 5.51 Hz], 158.5, 158.5, 154.7, 152.3, 151.8, 151.0, 150.9, 145.1, 144.5, 144.0, 135.8, 135.8, 133.8, 133.5, 133.2, 133.0, 133.0, 132.9, 130.6, 130.1, 130.1, 129.0, 128.9, 128.9, 128.5, 128.2, 128.1, 127.1, 126.5, 113.6, 109.7, 107.6, 96.7, 86.9, 85.7 [d, J (P, C) = 8.80 Hz], 84.5, 84.3 [d, J (P, C) = 6.41 Hz], 73.6, 69.6, 68.2, 67.5, 63.5, 55.4, 55.4, 41.0, 36.5, 27.1, 22.4 [d, J (P, C) = 5.08 Hz], 21.2, 19.1, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.86.
６．３．ｄＡ－ｄＧ

【0137】

【化56】

【0138】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＡ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＧ（０．９６７ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．７９ｇ、４．３ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９６．３：３．７のｄｒ及び７５％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0139】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.08 (s, 1H), 11.56 (s, 1H), 11.20 (s, 1H), 8.57 (s, 1 H), 8.56 (s, 1H), 8.21 (d, J = 5.45 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 7.50 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.66-7.53 (m, 7H), 7.48-7.41 (m, 6H), 7.33 (d, J = 7.55 Hz, 2H), 7.21-7.14 (m, 7H), 6.88 (s, 1H), 6.80-6.77 (m, 5H), 6.45 (t, J = 6.65 Hz, 1H), 6.33 (t, J = 6.60 Hz, 1H), 5.44 (m, 1H), 5.34 (m, 1H), 4.39 (bs, 1H), 4.24 (bs, 1H), 4.13 (bs, 1H), 3.87-3.80 (m, 4H), 3.69 (s, 6H), 3.29 (m, 1H), 3.23-3.16 (m, 2H0, 2.76 (m, 1H), 2.56 (m, 1H), 2.47 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 1.64-1.60 (m, 2H), 1.51 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 7.45 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 7.45 Hz, 3H), 1.03 (s, 9H), 0.86 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 180.0, 165.5, 165.2, 160.6 [d, J (P, C)= 5.6 Hz)], 158.0, 158.0, 154.7, 151.7, 151.3, 150.5, 150.4, 148.4, 148.1, 144.6, 143.6, 136.9, 135.3, 135.2, 135.2, 133.3, 132.4, 132.4, 132.3, 130.1, 129.6, 129.6, 128.4, 128.4, 128.0, 128.0, 127.7, 127.6, 126.6, 126.1, 120.3, 85.7, 85.2 [d, J (P, C)= 8.4 Hz)], 84.1, 83.8 [d, J (P, C)= 6.15 Hz)], 83.2, 73.7, 69.1, 67.2, 54.9, 54.9, 35.7, 34.7, 26.7, 21.8 [d, J (P, C)= 5.2 Hz)], 21.6, 18.8, 18.7, 18.5, 10.0 . ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.66.
６．４．ｄＡｄＴ

【0140】

【化57】

【0141】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＡ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＴ（０．８１ｇ、１．６８ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．７９ｇ、４．３ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９８．２：２．２超のｄｒ及び８４％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0142】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.33 (bs, 1H), 11.21 (bs, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.22 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 7.55 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 7.45 Hz, 1H), 7.59-7.54 (m, 6H), 7.47-7.39 (m, 6H), 7.35 (d, J = 7.50 Hz, 2H), 7.23-7.15 (m, 8H), 6.87 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.82-6.78 (m, 5H), 6.45 (t, J = 6.90 Hz, 1H), 6.27 (t, J = 5.90 Hz, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.89 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.33-3.30 (m, 1H), 3.27-3.21 (m, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 1.68-1.62 (m, 2H), 1.66 (s, 1H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H), 0.90 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR(125 MHz, DMSO-d₆) δ 166.1, 165.7, 164.0, 161.1 [d, J (P, C) = 5.55 Hz], 152.3, 151.9, 151.0, 150.9, 150.8, 145.1, 144.0, 135.8, 135.8, 135.7, 135.7, 135.5, 133.8, 133.0, 132.9, 130.6, 130.6, 130.1, 130.1, 129.0, 129.0, 128.5, 128.5, 128.2, 128.1, 127.1, 126.6, 113.6, 110.4, 109.6, 107.6, 86.2, 85.1 [d, J (P, C) = 8.63 Hz], 84.5, 84.4, 84.3 [d, J (P, C) = 6.25 Hz], 79.2 [d, J (P, C) = 4.54 Hz], 78.7 [d, J (P, C) = 4.56 Hz], 73.8, 69.6, 67.8 [d, J (P, C) = 5.99 Hz], 63.4, 36.5, 27.1, 22.3 [d, J (P, C) = 5.19 Hz], 22.1, 19.0, 12.6, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.88.
６．５．ｄＡ－ｄＴ ＴＢＤＰＳなし

【0143】

【化58】

【0144】

清潔なフラスコに、ｄＡ－ｄＴ（０．５ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（５ｍＬ）を投入した。ＴＨＦ中１ＭのＴＢＡＦ（０．７３ｍＬ、０．７２５ｍｍｏｌ）を、２０～２５℃で添加した。０．５時間後、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで水で洗浄した。濃縮後、粗生成物を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを用いるシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーで精製して、０．４１ｇの生成物を発泡固体として定量的な収率で得た。

【0145】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.33 (bs, 1H), 11.22 (bs, 1H), 8.60 (bs, 2H), 8.32 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.39-7.36 (m, 3H), 7.26-7.24 (m, 6H), 7.19 (m, 1H), 6.97 (d, J = 2.55 Hz, 1H), 6.88 (m, 1H), 6.85-6.81 (m, 4H), 6.52 (t, J = 13.85 Hz, 1H), 6.20 (m, 1H), 5.60 (m, 1H), 5.45-5.44 (m, 2H), 4.37 (m, 1H), 4.22-4.16 (m, 3H), 3.96-3.94 (m, 3H), 3.72 (s, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.39-3.28 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.71-1.65 (m, 5H), 1.60 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR(125 MHz, DMSO-d₆) δ 166.1, 165.8, 164.1, 161.2 [d, J (P, C) = 5.7 Hz], 158.6, 158.6, 152.2, 151.9, 151.0, 150.9, 150.8, 145.1, 144.0, 135.9, 135.8, 135.8, 133.8, 132.9, 130.2, 130.1, 128.9, 128.9, 128.2, 128.1, 127.2, 126.6, 113.6, 110.3, 109.8, 107.6, 86.3, 84.7 [d, J (P, C) = 8.7 Hz], 84.5, 84.4, 84.3 [d, J (P, C) = 6.4 Hz], 79.3 [d, J (P, C) = 4.9 Hz], 78.7 [d, J (P, C) = 4.75 Hz], 70.8, 69.6, 68.5 [d, J (P, C) = 5.5 Hz], 63.6, 55.5, 55.4, 39.4, 36.5, 22.4 [d, J (P, C) = 5.03 Hz], 22.1, 12.6, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.91.
６．６．ｄＣ－ｄＣ

【0146】

【化59】

【0147】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＣ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＣ（０．９０ｇ、１．５８ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．８２ｇ、４．６ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９８．５：１．５のｄｒ及び８２％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0148】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.28 (s, 1H), 11.24 (s, 1H), 8.22 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 7.05 Hz, 1H), 8.02-7.99 (m, 4H), 7.90 (d, J = 7.15 Hz, 1H), 7.64-7.57 (m, 6H), 7.54-7.36 (m, 13H), 7.30-7.19 (m, 9H), 6.89-6.85 (m, 5H), 6.80 (d, J = 5.50 Hz, 1H), 6.22 (t, J = 6.50 Hz, 1H), 6.14 (t, J = 6.35 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 5.11 (bs, 1H), 4.33 (s, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.93-3.85 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.71 (s, 6H), 2.65 (m, 1H), 2.38-2.33 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 1.67-1.59 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H), 0.87 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ 167.7, 167.6, 165.7, 163.7, 163.6, 161.1 [d, J (P, C) = 5.61 Hz], 158.7, 158.6, 154.7, 154.6, 150.9, 145.0, 144.8, 144.6, 135.7, 135.6, 135.5, 133.6, 133.5, 133.2, 133.0, 132.9, 130.6, 130.2, 130.1, 128.9, 128.9, 128.5, 128.3, 128.2, 127.3, 113.7, 109.8, 107.6, 96.7, 96.6, 87.1, 87.0, 86.7, 85.7 [d, J (P, C) = 7.53 Hz], 84.7 [d, J (P, C) = 7.03 Hz], 78.8 [d, J (P, C) = 4.86 Hz], 78.7, 73.6, 69.6, 67.5[d, J (P, C) 4.39 Hz], 63.1, 55.4, 41.0, 39.3, 27.1, 22.3 [d, J (P, C) = 5.30 Hz], 22.1, 19.0, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆) δ 65.76 Hz.
６．７．ｄＣ－ｄＧ

【0149】

【化60】

【0150】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＣ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＧ（０．９９３ｇ、１．７３ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．８１ｇ、４．４ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９９：１のｄｒ及び８３％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0151】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.07 (s, 1H), 11.55 (s, 1H), 11.29 (s, 1H), 8.22 (d, J = 5.50 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 6.70 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.63-7.57 (m, 5H), 7.52-7.50 (m, 2H), 7.48-7.41 (m, 6H), 7.35-7.33 (m, 2H), 7.29-7.26 (m, 2H), 7.22-7.18 (m, 6H), 6.86-6.85 (m, 5H), 6.80 (d, J = 5.50 Hz, 1H), 6.31 (t, J = 6.65 Hz, 1H), 6.10 (t, J = 6.15 Hz, 1H), 5.40 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.38 (bs, 1H), 4.20 (bs, 1H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.89-3.78 (m, 4H), 3.70 (s, 6H), 3.27 (bs, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.60 (m, 1H), 2.32-2.30 (m, 2H), 1.66-1.60 (m, 2H), 1.49 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.75 Hz, 3H), 1.11 (d, J = 6.75 Hz, 3H), 1.03 (s, 9H), 0.87 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 180.0, 167.2, 165.2, 163.2, 160.6 [d, J (P, C)= 5.78 Hz)], 158.1, 158.1, 154.7, 154.1, 150.4, 148.4, 148.1, 144.4, 144.2, 137.0, 135.2, 135.1, 134.9, 133.0, 132.7, 132.5, 132.3, 130.1, 129.7, 129.6, 128.4, 128.0, 127.8, 127.6, 126.7, 120.3, 113.2, 109.3, 107.0, 96.1, 86.5, 86.2, 85.1 [d, J (P, C)= 8.56 Hz)], 84.2 [d, J (P, C)= 4.86 Hz)], 83.1, 78.1 [d, J (P, C)= 4.58 Hz)], 78.0 [d, J (P, C)= 4.94 Hz)], 73.7, 69.1, 67.1 [d, J (P, C)= 4.65 Hz)], 62.4, 54.0, 39.0, 38.8, 34.7, 26.6, 21.7 [d, J (P, C)= 4.95 Hz)], 21.6, 18.8, 18.8, 18.5, 10.1. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.63.
６．８．ｄＣ－ｄＧ ＤＭＴｒなし

【0152】

【化61】

【0153】

清潔なフラスコに、ｄＣ－ｄＧ（１．０ｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）及びＣＨ₂Ｃｌ₂（１０ｍＬ）を投入した。ジクロロ酢酸（０．５７ｍＬ、６．８９３ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を２０～２３℃で０．５時間撹拌した後、反応は完了し、ＮａＨＣＯ₃水溶液で反応を停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、次いで水で洗浄した。粗生成物を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中０～１０％のＭｅＯＨを用いるシリカゲルカラムで精製して、０．７５ｇの純粋な生成物を９４％の収率で得た。

【0154】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.09 (bs, 1H), 11.57 (s, 1H), 11.27 (s, 1H), 8.33 (d, J = 8.50 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.03 (d, J = 7.25 Hz, 2H), 7.64-7.60 (m, 5H), 7.53-7.48 (m, 8H), 7.40 (m, 1H), 6.90 (d, J = 2.25 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4, 5.7 Hz, 1H), 6.33 (m, 1H), 6.15 (m, 1H), 5.44 (m, 1H), 5.26 (bs, 1H), 5.06 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.97-3.90 (m, 3H), 3.89-3.83 (m, 1H), 3.64-3.57 (m, 2H), 2.79 (m, 1H), 2.60-2.54 (m, 2H), 2.34 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 1.69-1.64 (m, 2H), 1.55 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 1.05 (s, 9H), 0.90 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 180.5, 167.8, 165.7, 163.7, 161.1 [d, J (P, C)= 6.06 Hz)], 155.2, 154.8, 150.8, 149.0, 148.6, 145.2, 137.6, 135.7, 133.2, 133.0, 132.8, 130.7, 130.6, 128.9, 128.9, 128.5, 128.5, 120.9, 109.9, 107.5, 96.7, 86.8, 86.5 [d, J (P, C)= 5.44 Hz)], 85.7 [d, J (P, C)= 8.66 Hz)], 83.7, 79.6 [d, J (P, C)= 4.96 Hz)], 78.5 [d, J (P, C)= 4.93 Hz)], 74.1, 69.6, 67.6 [d, J (P, C)= 4.85 Hz)], 61.2, 39.5, 39.2, 35.3, 27.2, 22.2 [d, J (P, C)= 4.8 Hz)], 22.1, 19.3, 19.3, 19.1, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.49.
６．９．ｄＣ－ｄＴ

【0155】

【化62】

【0156】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＣ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＴ（０．７６ｇ、１．５８ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．８２ｇ、４．６ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９８．５：１．５のｄｒ及び８５％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0157】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.32 (s, 1H), 11.30 (s, 1H), 8.22 (d, J = 5.55 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 7.05 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 7.60 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.30 Hz, 1H), 7.59-7.51 (m, 6H), 7.48-7.36 (m, 8H), 7.30 (t, J = 7.35 Hz, 2H), 7.25-7.21 (m, 7H), 6.88-6.85 (m, 5H), 6.81 (d, J = 5.45 Hz, 1H), 6.25 (t, J = 6.70 Hz, 1H), 6.12 (t, J = 6.20 Hz, 1H), 5.44 (m, 1H), 5.11 (bs, 1H), 4.24 (bs, 1H), 4.16 (bs, 1H), 3.98 (bs, 1H), 3.89 (t, J = 6.25 Hz, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.72 (s, 6H), 3.69 (m, 1H), 3.30 (bs, 2H), 2.63 (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 2.04-2.00 (m, 1H), 1.78-1.73 (m, 1H), 1.69-1.64 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.52 (d, J = 6.25 Hz, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.91 (t, J = 7.30 Hz, 3H).¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆) δ 167.8, 165.7, 164.0, 163.7, 161.0 [d, J (P, C) = 5.45 Hz], 158.7, 158.7, 154.7, 150.9, 150.8, 145.0, 144.8, 135.7, 135.7, 135.6, 135.5, 133.5, 133.2, 133.0, 132.9, 130.6, 130.6, 130.2, 130.2, 128.9, 128.4, 128.4, 128.2, 127.3, 113.7, 110.4, 110.0, 107.6, 96.6, 87.0, 86.7, 85.0 [d, J (P, C) = 8.67 Hz], 84.5, 78.7 [d, J (P, C) = 4.66 Hz], 78.5 [d, J (P, C) = 4.46 Hz], 73.8, 69.6, 67.8 [d, J (P, C) = 7.08 Hz], 62.9, 55.5, 39.3, 27.1, 22.3 [d, J (P, C) = 5.15 Hz], 19.0, 12.5, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆) δ 65.85 Hz.
６．１０．ｄＧ－ｄＧ

【0158】

【化63】

【0159】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＧ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＧ（０．９９ｇ、１．７１ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．８１ｇ、４．４ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９７．１：２．９のｄｒ及び７９％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0160】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.07 (bs, 2H), 11.57 (s, 1H), 11.56 (s, 1H), 8.18 (d, J = 5.55 Hz, 1H), 1 H), 8.08 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.63-7.57 (m, 4H), 7.48-7.39 (m, 6H), 7.31-7.30 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 7H), 6.84 (s, 1H), 6.80-6.76 (m, 5H), 6.31 (t, J = 6.65 Hz, 1H), 6.15 (t, J = 6.60 Hz, 1H), 5.39 (m, 1H), 5.15 (bs, 1H), 4.33 (bs, 1H), 4.10-4.09 (m, 2H), 3.89-3.85 (m, 3H), 3.75-3.74 (m, 1H), 3.69 (s, 6H), 3.22 (m, 1H), 3.14 (m, 1h), 2.98 (m, 1H), 2.76-2.73 (m, 2H), 2.41 (m, 1H), 2.32 (m, 1H), 1.64-1.59 (m, 2H), 1.48 (d, J = 6.25 Hz, 3H), 1.12-1.11 (m, 12H), 1.02 (s, 9H), 0.86 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 180.0, 180.0, 165.2, 160.4 [d, J (P, C)= 5.29 Hz)], 158.0, 158.0, 154.7, 154.7, 150.4, 148.6, 148.4, 148.1, 148.1, 144.5, 137.1, 136.8, 135.2, 135.2, 132.4, 132.3, 130.2, 129.6, 129.6, 127.9, 127.7, 127.6, 126.6, 120.5, 120.2, 113.0, 113.0, 109.2, 107.3, 85.8, 85.2 [d, J (P, C)= 8.83 Hz)], 83.9 [d, J (P, C)= 5.95 Hz)], 83.1, 82.8, 78.9 [d, J (P, C)= 4.66 Hz)], 78.0 [d, J (P, C)= 5.03 Hz)], 73.6, 69.1, 67.3, 63.3, 54.9, 54.9, 36.3, 34.7, 34.7, 26.6, 21.8 [d, J (P, C)= 5.30 Hz)], 21.6, 18.8, 18.5, 10.0. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.74.
６．１１．ｄＧ－ｄＴ

【0161】

【化64】

【0162】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＧ－Ｐ（Ｖ）（１．４ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＴ（０．８２ｇ、１．７１ｍｍｏｌ、１．１当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．８１ｇ、４．４ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９８．２：１．８のｄｒ及び８６％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0163】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.08 (s, 1H), 11.54 (s, 1H), 11.34 (s, 1H), 8.21 (d, J = 5.45 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.58-7.55 (m, 4H), 7.46-7.37 (m, 6H), 7.33-7.31 (m, 2H), 7.24-7.18 (m, 8H), 6.84 (s, 1H), 6.80-6.77 (m, 5H), 6.25 (t, J = 6.75 Hz, 1H), 6.19 (t, J = 6.65 Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 5.19 (bs, 1H), 4.24 (bs, 1H), 4.10 (bs, 1H), 3.98 (bs, 1H), 3.87 (t, J = 6.30 Hz, 2H), 3.80 (m, 1H), 3.70 (bs, 7H), 3.25-3.18 (m, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.54 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.66-1.62 (m, 5H), 1.51 (d, J = 6.20 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.60 Hz, 6H), 1.00 (s, 9H), 0.89 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 180.0, 165.2, 163.5, 160.4 [d, J (P, C)= 5.49 Hz)], 158.1, 158.0, 154.7, 150.4, 150.3, 148.6, 148.1, 144.5, 137.1, 135.2, 135.2, 135.1, 132.4, 130.1, 129.7, 129.6, 128.0, 127.7, 127.6, 126.7, 120.5, 113.0, 113.0, 109.9, 109.1, 107.3, 85.8, 84.5 [d, J (P, C)= 9.09 Hz)], 84.1, 84.0 [d, J (P, C)= 6.05 Hz)], 82.8, 78.8 [d, J (P, C)= 5.04 Hz)], 78.2 [d, J (P, C)= 4.69 Hz)], 73.2, 69.1, 67.4, 63.2, 54.9, 54.9, 36.5, 34.8, 26.6, 21.8 [d, J (P, C)= 5.15 Hz)], 21.6, 18.8, 18.8, 18.5, 12.0, 10.0. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 66.00.
６．１２．ｄＴ－ｄＴ

【0164】

【化65】

【0165】

乾燥した清潔なフラスコに、ヌクレオシドホスホロチオエートｄＴ－Ｐ（Ｖ）（１．５ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）及び保護基としてのＴＢＤＰＳとともにｄＴ（０．９０ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入した。混合物を、ピリジン３ｍＬの蒸発により乾燥させた。ピリジン３ｍＬを添加した後、ＤＭＯＣＰ（０．９６ｇ、５．２３ｍｍｏｌ、２．８当量）を一度に添加した。２時間後、水０．１ｍＬを添加し、混合物を水５ｍＬ、２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液７ｍＬ及びＥｔＯＡｃ１０ｍｌで希釈した。相を切断した後、有機層を２ＭのＫＨＳＯ₄水溶液８ｍＬ、次いで水２ｍＬで洗浄した。濃縮後、粗生成物を、９８．１：１．９のｄｒ及び８８％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、シリカゲルカラムで精製することによって得た。カラムにＣＨ₂Ｃｌ₂を予め充填し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂を利用して粗生成物をカラムに充填した。カラムを、０～１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。画分を収集して濃縮した後、生成物を発泡固体として得た。

【0166】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.4 (bs, 1H), 11.31 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 5.50 Hz, 1H), 7.57-7.54 (m, 4H), 7.48 (s, 1H), 7.45-7.36 (m, 8H), 7.29 (t, J = 7.40 Hz, 2H), 7.28-7.19 (m, 6H), 6.88-6.80 (m, 5H), 6.81 (d, J = 5.35 Hz, 1H), 6.23 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 6.18 (t, J = 6.85 Hz, 1H), 5.43 (m, 1H), 5.19 (bs, 1H), 4.22 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.96 (bs, 1H), 3.89 (t, J = 6.30 Hz, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.25-3.18 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.02-1.98 (m, 1H), 1.77-1.71 (m, 1H), 1.68-1.64 (m, 5H), 1.51 (d, J = 6.30 Hz, 3H), 1.46 (s, 3H), 1.00 (s, 9H), 0.90 (t, J = 7.30 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 165.2, 163.5, 163.4, 160.5 [d, J (P, C)= 5.25 Hz)], 158.2, 158.2, 150.4, 150.3, 150.2, 144.4, 135.4, 135.2, 135.2, 135.0, 135.0, 132.5 132.4, 130.1, 130.1, 129.7, 129.6, 128.0, 127.9, 127.6, 126.8, 113.2, 109.9, 109.9, 109.2, 107.1, 86.1, 84.5 [d, J (P, C)= 9.25 Hz)], 84.0, 83.8, 83.3 [d, J (P, C)= 6.06 Hz)], 78.8 [d, J (P, C)= 4.46 Hz)], 78.2 [d, J (P, C)= 4.74 Hz)], 73.3, 69.1, 67.2 [d, J (P, C)= 5.91 Hz)], 63.0, 55.0, 55.0, 37.3, 26.6, 21.8 [d, J (P, C)= 5.29 Hz)], 21.6, 18.5, 12.0, 11.6, 10.1. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 66.02.
６．１３．Ｆ－Ａ－３’－ＯＨ

【0167】

【化66】

【0168】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0169】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７０ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及びＡ－３’－ＯＨ（０．６３３ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９９：１のｄｒ及び９２％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0170】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.12 (s, 1H), 8.47 (s, 1 H), 8.45 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.19 (d, J = 5.65 Hz, 1H), 7.97-7.93 (m, 4H), 7.66-7.62 (m, 4H), 7.57-7.53 (m, 2H), 7.47-7.33 (m, 10H), 7.30-7.29 (m, 2H), 7.16-7.09 (m, 7H), 6.81 (m, 1H), 6.79-6.78 (m, 1H), 6.74-6.72 (m, 4H), 6.35 (d, J = 20.05 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.40-5.34 (m, 1.5 H), 5.27 (m, 0.5 H), 5.16 (m, 1H), 5.04-4.96 (m, 2H), 4.36-4.23 (m, 3H), 3.83 (t, J = 10.75 Hz, 2H), 3.63 (s, 1H), 3.63 (s, 1 H), 3.20 (m, 1H), 3.08 (m, 1H), 1.56-1.52 (m, 2H), 1.33 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.05 (s, 9H), 0.77 (t, J = 7.35 Hz, 3H), 0.42 (s, 9H), -0.35 (s, 3H), -0.51 (s, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 166.0, 166.0, 165.7, 161.3 [d, J (P, C) = 7.5 Hz], 158.6, 152.4, 151.9, 151.8, 151.7, 151.2, 151.1, 150.9, 145.1, 144.3, 144.0, 135.9, 135.9, 135.7, 135.5, 133.8, 132.9, 132.7, 132.6, 130.8, 130.7, 130.2, 130.1, 129.0, 128.9, 128.9, 128.5, 128.4, 128.2, 128.0, 127.1, 126.5, 126.3, 113.6, 113.6, 109.8, 107.1, 93.4, 91.9, 87.6, 87.4, 87.1, 86.3, 82.5, 81.6 [d, J (P, C) = 8.3 Hz], 78.4, 78.4, 72.3 [d, J (P, C) = 7.4 Hz], 71.4 [d, J (P, C) = 15.9 Hz], 69.6, 68.3, 63.2, 55.5, 27.2, 25.5, 22.3 [d, J (P, C) = 3.9 Hz], 19.4, 17.7, 10.6, -4.8, -5.3. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 67.43. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.7.
６．１４．Ｆ－Ｃ－３’－ＯＨ

【0171】

【化67】

【0172】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0173】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７０ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及びＣ－３’－ＯＨ（０．５３１ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９８．９：１．１のｄｒ及び９０％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0174】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.27 (bs, 2H), 8.57 (s, 1 H), 8.53 (s, 1H), 8.24 (d, J = 6.35 Hz, 1H), 8.18 (bs, 1H), 8.07-8.04 (m, 4H), 7.75-7.73 (m, 4H), 7.70-7.66 (m, 3H), 7.60-7.47 (m, 10H), 7.40-7.39 (m, 2H), 7.34-7.31 (m, 2H), 7.27-7.26 (m, 5H), 7.18 (bs, 1H), 6.90 (d, J = 7.7 Hz, 4H), 6.86 (bs, 2H), 6.45 (d, J = 19.95 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 4.35 Hz, 1H), 5.48 (m, 0.5 H), 5.41-5.35 (m, 1.5 H), 5.12-5.06 (m, 1H), 4.93-4.89 (m, 1H), 4.44 (t, J = 4.25 Hz, 1h), 4.37-4.34 (m, 2H), 4.22 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.94 (t, J = 6.45 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.32-3.27 (m, 2H), 1.71-1.67 (m, 2H), 1.41 (d, J = 6.45 Hz, 3H), 1.15 (s, 9H), 0.94 (t, J = 7.35 Hz, 3H), 0.74 (s, 9H), 0.00 (s, 3H), -0.08 (s, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 167.8, 166.0, 165.6, 163.8, 161.0, [d, J (P, C) = 6.66 Hz], 158.7, 158.7, 154.8, 151.8, 151.7, 151.1, 150.8, 144.6, 144.2, 135.9, 135.8, 135.5, 135.2, 133.8, 133.5, 133.3, 132.9, 132.7, 132.5, 130.8, 130.7, 130.2, 130.2, 129.0, 129.0, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 127.4, 126.3, 113.7, 109.7, 107.3, 97.0, 92.6 [d, J (F, C) = 187.9 Hz], 89.6, 87.3 [d, J (P, C) = 35.4 Hz], 86.8, 81.6, 81.5, 79.1, 78.3 [d, J (P, C) = 4.56 Hz], 76.2, 74.5, 71.3 [d, J (P, C) = 15.7 Hz], 69.6, 68.2, 62.4, 55.5, 55.4, 27.1, 25.8, 22.1, 22.0, 19.3, 18.0, 10.6, -4.7, -5.0. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 67.32. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -200.88.
６．１５．Ｆ－Ｇ－３’－ＯＨ

【0175】

【化68】

【0176】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0177】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及びＧ－３’－ＯＨ（０．６１９ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９８：２のｄｒ及び８５％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0178】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 12.30 (s, 1H), 11.85 (s, 1H), 11.43 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 8.25-8.24 (m, 3H), 7.95-7.93 (m, 4H), 7.87 (t, J = 7.40 Hz, 1H), 7.78-7.67 (m, 8H), 7.56-7.55 (m, 2H), 7.50-7.42 (m, 7H), 7.12 (m, 1H), 7.09-7.06 (m, 5H), 6.69 (d, J = 20.35 Hz, 1H), 6.03 (d, J =7.9 Hz, 1H), 5.68-5.58 (m, 2H), 5.36-5.31 (m, 1H), 5.13 (m, 1H), 4.99 (m, 1H), 4.58 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.15-4.12 (m, 3H), 3.97 (s, 6H), 3.40 (m, 2H), 2.92 (m, 1H), 1.87-1.83 (m, 2H), 1.74 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.33-1.30 (m, 6H), 1.09 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 0.71 (s, 9H), -0.03 (s, 3H), -0.14 (s, 3H). ¹³C NMR (126 MHz, DMSO-d₆): δ 180.5, 165.9, 165.7, 160.9 [d, J (P, C) = 7.0 Hz], 158.7, 158.7, 155.1, 151.7, 151.7, 151.1, 151.0, 149.6, 149.0, 145.0, 144.4, 136.7, 135.9, 135.8, 135.5, 135.4, 133.7, 132.9, 132.6, 132.5, 130.8, 130.8, 128.9, 128.9, 128.6, 128.4, 128.3, 128.0, 127.3, 126.3, 120.4, 113.6, 109.9, 107.6, 92.8 [d, J (F, C) = 187.2 Hz], 87.5 [d, J (P, C) = 35.2 Hz], 86.4, 85.2, 83.0, 81.7 [d, J (P, C) = 8.9 Hz], 78.8 [d, J (P, C) = 5.1 Hz], 78.5 [d, J (P, C) = 4.6 Hz], 74.6 [d, J (P, C) = 7.3 Hz], 71.5 [d, J (P, C) = 15.7 Hz], 69.6, 68.9, 63.6, 55.5, 55.5, 35.3, 27.1, 25.7, 25.4, 22.3 [d, J (P, C) = 4.3 Hz], 22.1, 21.2, 19.3, 17.7, 10.5, -4.9, -5.5. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 67.96. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.2.
６．１６．Ｆ－Ｕ－３’－ＯＨ

【0179】

【化69】

【0180】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0181】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及びＵ－３’－ＯＨ（０．５３１ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９６．４：１．４のｄｒ及び８７％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0182】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.58 (s, 1H), 11.29 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.31 (d, J = 5.15 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 7.45 Hz, 2H), 7.83-7.80 (m, 4H), 7.76 (t, J = 7.35 Hz, 1H), 7.67-7.64 (m, 3H), 7.63-7.55 (m, 6H), 7.42-7.37 (m, 4H), 7.33 (m, 1H), 7.28-7.27 (m, 4H), 6.97-6.92 (m, 6H), 6.52 (d, J = 20 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.58-5.45 (m, 3H), 5.17 (m, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.51-4.40 (m, 3H), 4.29-4.08 (m, 2H), 3.99 (t, J = 6.25 Hz, 2H), 3.84 (bs, 6H), 3.19 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.43 (d, J = 6.25 Hz, 1H), 1.23 (s, 9H), 1.00 (t, J = 7.30 Hz, 3H), 0.79 (s, 9H), 0.02 (s, 3H), 0.00 (s, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 166.0, 165.6, 163.1, 161.1 [d, J (P, C)= 6.94 Hz)], 158.7, 158.7, 151.8, 151.7, 151.0, 150.9, 150.8, 144.7, 144.2, 139.9, 135.9, 135.8, 135.3, 135.0, 133.8, 132.9, 132.7, 132.5, 130.8, 130.7, 130.1, 128.9, 128.9, 120.5, 120.4, 120.4, 127.9, 127.3, 126.3, 113.7, 113.7, 109.8, 107.3, 102.8, 92.5 [d, J (F, C)= 186.8 Hz)], 87.2, 86.8, 82.1, 81.4 [d, J (P, C)= 9.24 Hz)], 78.4 [d, J (P, C)= 4.59 Hz)], 77.5, 73.5 [d, J (P, C)= 6.19 Hz)], 71.3 [d, J (P, C)= 15.4 Hz)], 69.6, 68.0, 63.1, 55.5, 55.5, 27.2, 25.9, 25.7, 22.1, 19.3, 17.9, 10.6, -4.77, -5.06. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 67.66. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.5.
６．１７．Ｆ－Ａ－２’－ＯＨ

【0183】

【化70】

【0184】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0185】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及び（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－２－｛［ビス（４－メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝－４－ヒドロキシオキソラン－３－イルベンゾエート（０．６５６ｇ、０．８４４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９６．８：３．２のｄｒ及び８５％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0186】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.24 (s, 1H), 11.18 (s, 1 H), 8.61 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.17 (d, J = 5.75 Hz, 1H), 8.07-8.03 (m, 4H), 7.90 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 7.66-7.62 (m, 7H), 7.56-7.52 (m, 4H), 7.47-7.36 (m, 10H), 7.25-7.14 (m, 7H), 6.82-6.76 (m, 6H), 6.44 (m, 1H), 6.29 (d, J = 19.2 Hz, 1H), 6.09 (m, 1H), 5.98 (m, 1H), 5.31-5.20 (m, 2H), 4.88 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.20-4.14 (m, 3H), 3.94-3.84 (m, 3H), 3.68 (s, 6H), 3.43-3.35 (m, 2H), 1.69-1.65 (m, 2H), 1.06 (s, 9H), 0.91 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 164.0, 163.9, 163.5, 163.0, 158.9 [d, J (P, C) = 6.84 Hz], 156.4, 150.1, 150.0, 149.8, 149.6, 149.0, 148.8, 148.5, 142.9, 141.9, 141.7, 133.7, 133.6, 133.6, 133.5, 132.0, 131.7, 131.6, 130.8, 130.8, 130.5, 130.4, 128.6, 128.5, 128.1, 128.0, 127.7, 127.1, 126.9, 126.9, 126.8, 126.3, 126.2, 126.1, 126.0, 125.0, 124.1, 124.1, 111.5, 107.7, 104.7, 90.2 [d, J (F, C) = 188.4 Hz], 85.0 [d, J (P, C) = 11.5 Hz], 84.7, 84.2, 79.3 [d, J (P, C) = 5.0 Hz], 79.0, 76.4 [d, J (P, C) = 5.0 Hz], 74.1, 69.3 [d, J (P, C) = 4.8 Hz], 69.0 [d, J (P, C) = 15.7 Hz], 67.4, 65.7, 60.7, 53.3, 53.3, 25.0, 25.0, 20.0, 20.0, 17.2, 8.5. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 66.76. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.5.

【0187】

F-A-2-OH-DTBS
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.21 (bs, 2H), 8.62 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.21 (d, J = 5.70 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 7.45 Hz, 2H), 8.01 (d, J = 7.50 Hz, 2H), 7.68-7.67 (m, 4H), 7.64-7.61 (m, 2H), 7.56-7.51 (m, 4H), 7.49-7.41 (m, 6H), 6.86 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (m, 1H), 6.34 (d, J = 19.55 Hz, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.44-5.35 (m, 2.5H), 5.28 (m, 0.5H), 4.93 (m, 1H), 4.33-4.30 (m, 3H), 4.12 (m, 1H), 3.94-3.91 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 1.71-1.67 (m,2H), 1.36 (d, J = 6.45 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H), 0.99 (s, 9H), 0.92 (t, J = 7.35 Hz, 3H), 0.83 (s, 9H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 166.2, 166.1, 165.7, 161.1 [d, J (P, C) = 6.74 Hz], 152.2, 151.8, 151.8, 151.6, 151.1, 151.0, 150.8, 144.0, 143.9, 135.8, 135.8, 133.7, 132.0, 132.9, 130.8, 130.7, 129.0, 128.9, 128.9, 128.5, 128.4, 126.1, 126.0, 109.3, 107.4, 92.4 [d, J (F, C) = 188.4 Hz], 88.7, 87.0 [d, J (P, C) = 34.63 Hz], 81.7 [d, J (P, C) = 8.35 Hz], 78.5 [d, J (P, C) = 5.6 Hz], 78.4 [d, J (P, C) = 5.6 Hz], 74.6, 74.6, 71.3 [d, J (P, C) = 15.67 Hz], 69.6, 67.9, 67.0, 27.5, 27.1, 27.1, 22.6, 22.4, 22.3, 22.1, 20.2, 19.3, 10.7. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.76. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.5.
６．１８．Ｆ－Ｃ－２’－ＯＨ

【0188】

【化71】

【0189】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0190】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及び（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－２－｛［ビス（４－メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝－４－ヒドロキシオキソラン－３－イルベンゾエート（０．６０６ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９７．１：２．９のｄｒ及び８６％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0191】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 11.37 (s, 1H), 11.18 (s, 1 H), 8.52 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.03 (d, J = 7.70 Hz, 4H), 7.85 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 7.69-7.61 (m, 7H), 7.54-7.51 (m, 4H), 7.46-7.35 (m, 10H), 7.30-7.17 (m, 8H), 6.89 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.85-6.80 (m, 5H), 6.39 (dd, J =1.95, 18.75 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.70 (m, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.39 (m, 0.5H), 5.31-5.28 (m, 1.5 H), 4.95 (m, 1H), 4.39-4.30 (m, 3H), 4.12 (m, 1H), 3.97-3.90 (m, 2H), 3.68 (s, 6H), 3.40 (m, 2H), 1.68-1.64 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.15 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H), 0.89 (t, J = 7.35 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 167.9, 166.0, 165.7, 165.1, 164.3, 161.3 [d, J (P, C) = 6.83 Hz], 158.6, 158.6, 154.6, 151.9, 151.8, 151.0, 150.7, 146.6, 144.7, 143.8, 135.8, 135.8, 135.5, 135.5, 134.1, 133.8, 133.5, 133.3, 132.9, 132.7, 132.6, 130.7, 130.6, 130.1, 130.1, 129.9, 129.8, 129.2, 129.1, 129.0, 128.9, 128.9, 128.4, 128.4, 128.1, 127.3, 126.2, 113.7, 109.8, 106.8, 97.2, 93.0, 91.5, 86.9, 86.7, 81.5 [d, J (P, C) = 7.84 Hz], 80.4, 78.3 [d, J (P, C) = 4.74 Hz], 77.5, 71.2 [d, J (P, C) = 15.16 Hz], 70.5, 69.6, 67.6, 64.5, 55.4, 27.1, 22.2, 22,1 [d, J (P, C) = 4.11 Hz], 19.3, 10.6. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 66.76. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.5.
６．１９．Ｆ－Ｇ－２’－ＯＨ

【0192】

【化72】

【0193】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0194】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．２５ｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）及びＧ－２’－ＯＨ（０．２１８ｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を添加し、続いてＤＭＯＣＰ（０．１３２ｇ、０．７１８ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄、次いで水で洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９７．７：２．３のｄｒ及び８２％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 8.44 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.16 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 7.35 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.86 (d, J = 7.40 Hz, 2H), 7.66-7.63 (m, 6H), 7.54 (t, J = 7.70 Hz, 2H), 7.46-7.38 (m, 8H), 7.35 (d, J = 6.50 Hz, 2H), 7.29-7.15 (m, 7H), 6.86-6.78 (m, 2H), 6.76-6.74 (m, 2H), 6.27 (d, J = 18.7 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 5.60 Hz, 1H), 5.80 (m, 1H), 5.72 (m, 1H), 5.30-5.25 (m, 1.5H), 5.18 (m, 0.5H), 4.93-4.87 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H), 3.91-3.84 (m, 3H), 3.69 (s, 6H), 3.49 (m, 1H), 3.33 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 1.67-1.62 (m, 2H), 1.18 (d, J =6.45 Hz, 3H), 1.08-1.05 (m, 15H), 0.89 (t, J = 7.40 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 178.5, 164.0, 163.5, 162.9, 158.8 [d, J (P, C) = 7.25 Hz], 156.5, 156.5, 154.4, 150.0, 149.4, 149.1, 148.5, 147.6, 142.9, 141.7, 135.2, 133.7, 133.6, 132.0, 131.9, 130.6, 130.4, 128.6, 128.5, 128.1, 128.0, 127.6, 127.1, 127.0, 126.9, 126.8, 126.2, 126.1, 126.0, 125.1, 124.1, 118.6, 111.5, 107.6, 104.7, 90.3 [d, J (F, C) = 187.75 Hz], 84.9 [d, J (P, C) = 34.6 Hz], 84.3, 83.5, 79.9, 79.2 [d, J (P, C) = 7.94 Hz], 76.4 [d, J (P, C) = 4.8 Hz], 74.6, 70.0, 69.0 [d, J (P, C) = 15.5 Hz], 67.4, 65.8, 61.8, 53.3, 33.3, 25.0, 20.0, 17.4, 17.3, 17.2. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 66.76. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.04.
６．２０．Ｆ－Ｕ－２’－ＯＨ

【0195】

【化73】

【0196】

ｉ）フラスコに、（Ｒ，Ｒ_p）－ＦＰＰＳ^Pr（０．４２、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮ－｛９－［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－４－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－３－フルオロ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－イル］－９Ｈ－プリン－６－イル｝ベンズアミド（０．５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジン５ｍＬの蒸発により乾燥させた後、ピリジン（１．５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３９ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で１時間後、水（０．０５ｍＬ）を投入して反応を停止させた。ＤＢＵ（０．５ｍＬ）を添加した。３０分後、混合物を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬ及びＥｔＯＡｃ５ｍＬで希釈した。有機層を、２ＭのＫＨＳＯ₄４ｍＬ及び水５ｍＬで洗浄した。濃縮後、０．７ｇの粗生成物を定量的収率で単離し、次のステップに直接使用した。

【0197】

ｉｉ）（Ｓ）－｛［（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ］－４－フルオロオキソラン－２－イル］メトキシ｝［（１Ｒ）－１－（４－プロポキシピリジン－２－イル）エトキシ］スルファニリデン亜ホスフィン酸（０．７ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及び（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（６－ベンズアミド－９Ｈ－プリン－９－イル）－２－｛［ビス（４－メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝－４－ヒドロキシオキソラン－３－イルベンゾエート（０．６５６ｇ、０．８４４ｍｍｏｌ、１．０５当量）を乾燥したフラスコに投入した。混合物を、真空下４０℃未満でピリジン（２×１０ｍＬ）を蒸発させることにより乾燥させた後、ピリジン（１．７５ｍＬ）を投入し、続いてＤＭＯＣＰ（０．３７ｇ、２．０ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、反応を水で停止させた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、２ＭのＫＨＳＯ₄及び水で順次洗浄した。有機層を濃縮し、粗生成物を９７．１：２．９のｄｒ及び８７％の溶液収率で得た。分析的に純粋な試料を、ヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムで精製することによって得た。

【0198】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 11.49 (s, 1H), 11.17 (s, 1H), 8.47 (bs, 2H), 8.20 (d, J = 5.35 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 7.40 Hz, 2H), 7.83 (d, J = 7.55 Hz, 2H), 7.68-7.60 (m, 7H), 7.54 (t, J = 7.30 Hz, 2H), 7.47-7.39 (m, 8H), 7.34-7.33 (m, 2H), 7.25-7.17 (m, 7H), 6.84-6.82 (m, 5H), 6.79 (d, J = 5.30 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 19.4 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.60 (m, 1H), 5.45-5.39 (m, 2H), 5.34-5.24 (m, 2H), 4.96-4.92 (m, 1H), 4.30-4.23 (m, 3H), 4.08-4.01 (m, 1H), 3.93-3.89 (m, 2H), 3.69 (s, 6H), 3.38-3.29 (m, 2H), 1.69-1.65 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.30 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H), 0.91 (t, J = 7.25 Hz, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆): δ 166.0, 165.7, 165.0, 163.3, 161.1 [d, J (P, C)= 7.24 Hz)], 158.6, 158.6, 151.9, 151.7, 151.0, 150.7, 150.6, 144.9, 144.0, 141.7, 135.8, 135.8, 135.5, 135.4, 134.1, 133.8, 132.9, 132.7, 132.6, 130.7, 130.7, 130.2, 130.1, 129.8, 129.1, 129.0, 129.0, 128.9, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 127.3, 126.2, 113.7, 109.8, 106.7, 102.7, 92.3 [d, J (F, C)= 188.2 Hz)], 89.9, 87.0 [d, J (P, C)= 34.19 Hz)], 86.6, 81.3 [d, J (P, C)= 9.55 Hz)], 80.7, 78.4 [d, J (P, C)= 4.66 Hz)], 76.6, 71.2, 71.1, 69.6, 67.6, 63.1, 55.5, 55.5, 27.1, 22.1, 22.1, 22.1, 21.2, 19.3, 10.7. ³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 67.07. ¹⁹F NMR (470 MHz, DMSO-d₆): δ -201.4.

【0199】

（実施例７）
四量体の合成

【化74】

【0200】

ステップ１：ｄＣ－ｄＧ－Ｐ（Ｖ）の合成
乾燥したフラスコに、ＤＭＴｒを含まないｄＣ－ｄＧ（３５０ｍｇ、０．３０５ｍｍｏｌ）、ＦＰＰＳＰｒ（１４５．９ｍｇ、０．３１７ｍｍｏｌ）及びピリジン（１．０５ｍＬ）を投入した。次いで、クロロリン酸ジイソプロピル（１５７．６ｍｇ、０．７６２ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。２３℃で２時間後、水（０．０３５ｍＬ）を添加した。１０分後、ＤＢＵ（０．３５ｍＬ）を添加した。１０分後、生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、次いで２ＭのＫＨＳＯ₄で洗浄した。粗生成物を、９４：６のｄｒで単離し、次のステップに直接使用した。分析試料を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の０～１０％ＭｅＯＨを用いてシリカゲルで精製することによって得た。

【0201】

ステップ２：ｄＣ－ｄＧ－ｄＴ－ｄＡの合成
乾燥したフラスコに、ｄＣ－ｄＧ－Ｐ（Ｖ）（０．１ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）及びＴＢＤＰＳを含まないｄＡ－ｄＴ（０．０８１ｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）を投入した。混合物を、ピリジンの共蒸発により乾燥させた。ピリジン（０．２５ｍＬ）を投入した後、ＤＭＯＣＰ（０．０３３ｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を添加した。２３℃で２時間後、反応により、完全に変換された。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、次いで２ＭのＫＨＳＯ₄で洗浄した。粗生成物を、水中０～１００％のＭｅＯＨを用いるＣ１８逆相カラムで精製し、８７％の収率で単離した。

【0202】

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.06 (s, 1H), 11.54 (s, 1H), 11.33 (s, 1H), 11.27 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.29 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 4.75 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 4.70 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 6.25 Hz, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.98 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.65-7.53 (m, 8H), 7.50-7.42 (m, 8H), 7.37-7.32 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.21-7.18 (m, 6H), 7.15 (m, 1H), 6.94 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J =1.9 Hz, 1H), 6.82-6.76 (m, 7H), 6.46 (t, J =5.8 Hz, 1H), 6.31 (m, 1H), 6.12-6.08 (m, 2H), 5.54-5.51 (m, 2H), 5.43-5.40 (m, 2H), 5.06 (m, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.39 (bs, 1H), 4.32-4.28 (m, 2H), 4.27-4.24 (m, 2H), 4.17-4.12 (m, 2H), 4.09 (bs, 2H), 3.93-3.84 (m, 8H), 3.69 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.29-3.24 (m, 5H), 2.76 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.67-1.61 (m, 9H), 1.56-1.51 (m, 9H), 1.28-1.19 (m, 4H), 1.11 (d, J = 5.7 Hz, 6H), 1.03 (s, 9H), 0.91-0.84 (m, 9H).
¹³Ｃ ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ₆）：複雑なＮＭＲにより、データは収集しなかった。³¹P NMR (202 MHz, DMSO-d₆): δ 65.65, 65.62.

【国際調査報告】