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特表2024-511273心房細動及び／又は粗動を発症するリスクを判定するための糖タンパク質アセチルの使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-13
(54)【発明の名称】心房細動及び／又は粗動を発症するリスクを判定するための糖タンパク質アセチルの使用
(51)【国際特許分類】
G01N 33/68 20060101AFI20240306BHJP
【ＦＩ】
G01N33/68
【審査請求】未請求
【予備審査請求】有
(21)【出願番号】P 2023549810
(86)(22)【出願日】2022-02-16
(85)【翻訳文提出日】2023-09-29
(86)【国際出願番号】 FI2022050099
(87)【国際公開番号】W WO2022175596
(87)【国際公開日】2022-08-25
(31)【優先権主張番号】20215176
(32)【優先日】2021-02-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】FI
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522490985
【氏名又は名称】ナイチンゲール ヘルス オーワイジェイ
(74)【代理人】
【識別番号】100120891
【弁理士】
【氏名又は名称】林 一好
(74)【代理人】
【識別番号】100165157
【弁理士】
【氏名又は名称】芝 哲央
(74)【代理人】
【識別番号】100205659
【弁理士】
【氏名又は名称】齋藤 拓也
(74)【代理人】
【識別番号】100126000
【弁理士】
【氏名又は名称】岩池 満
(74)【代理人】
【識別番号】100185269
【弁理士】
【氏名又は名称】小菅 一弘
(72)【発明者】
【氏名】ユルクネン ヘリ
(72)【発明者】
【氏名】ウルツ ピーター
【テーマコード（参考）】
2G045
【Ｆターム（参考）】
2G045AA25
2G045DA44
2G045DA77
2G045FA36
2G045JA06
(57)【要約】
対象が特定の循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法が開示される。
【選択図】図１ａ
【選択図】図１ａ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法であって、前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、前記生体試料中の以下の少なくとも１つのバイオマーカー
糖タンパク質アセチル、
アルブミン、
総脂肪酸に対するリノール酸の比、
総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
脂肪酸不飽和度、
リノール酸、
オメガ－６脂肪酸、
中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
酢酸、
乳酸、
ピルビン酸、
アセト酢酸、
アラニン、
グルタミン、
グリシン、
ヒスチジン、
フェニルアラニン、
チロシン
の定量値を決定する工程と、
前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示し、
前記循環器疾患は、心房細動及び／若しくは粗動を含むか又は心房細動及び／若しくは粗動であり、
前記少なくとも１つのバイオマーカーは、糖タンパク質アセチルを含むか又は糖タンパク質アセチルである、方法。
【請求項2】
前記方法は、前記生体試料において、複数のバイオマーカー、例えば２つ、３つ、４つ、５つ又はこれよりも多い前記バイオマーカーの定量値を決定することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
アルブミン
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１又は請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
以下のうちの少なくとも１つの脂肪酸指標：総脂肪酸に対するリノール酸の比、リノール酸、総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、オメガ－６脂肪酸、総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記対象は概ね健康であるか、又は前記対象は循環器疾患の既存の形態を有し、別の若しくは再発性の循環器疾患を発症するリスクが判定される請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値は核磁気共鳴分光法を使用して測定される請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記方法は、前記少なくとも１つのバイオマーカー又は複数の前記バイオマーカーの前記定量値に基づいて計算されたリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクを使用して、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定することをさらに含む請求項１から請求項６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記リスクスコア、ハザード比、オッズ比、並びに／又は予測される相対リスク及び／若しくは絶対リスクは、前記対象の特徴等の少なくとも１つのさらなる指標に基づいて計算されてもよい請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記対象の前記特徴は、年齢、身長、体重、肥満度指数、人種若しくは民族、喫煙、及び／又は循環器疾患の家族歴のうちの１つ以上を含む請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
アルブミン、
総脂肪酸に対するリノール酸の比、
総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
脂肪酸不飽和度、
リノール酸、
オメガ－６脂肪酸、
中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
酢酸、
乳酸、
ピルビン酸、
アセト酢酸、
アラニン、
グルタミン、
グリシン、
ヒスチジン、
フェニルアラニン、
チロシン
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１から請求項９のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、概して、対象が特定の循環器疾患のうちの１つ以上を発症するリスクがあるか否かを判定する方法に関する。
【背景技術】
【0002】
循環器疾患は、世界中で入院及び死亡の最も一般的な原因の１つである。循環器疾患を発症するリスクが高い個体の正確な特定は、早期の治療及び予防の努力を支援するために重要である。現在の臨床ツールは、主として冠動脈疾患及び脳卒中のリスクの予測に焦点を当てている。しかしながら、多くの他の種類の循環器疾患のリスク予測も有益である可能性がある。このような疾患には、例えば、慢性リウマチ性心疾患、肺性心、静脈及びリンパ管の疾患、並びに非リウマチ性大動脈弁障害、心停止、及び心房細動等の他の形態の心臓疾患が含まれる。
【0003】
種々のバイオマーカーが、個体が以降の生活でこれらの循環器疾患を発症するリスクが高いか否かを予測するために有用である可能性がある。このようなバイオマーカーは、様々な生体試料（生物学的試料）から、例えば、血液試料又は関連する生体液（生物学的流体）から測定されてもよい。入院又は死亡さえも引き起こすこれらの循環器疾患の最も重篤な症状の提示を予測するバイオマーカーは、より良好な標的スクリーニング、より早期の診断及び予防的処置への支援を提供できると思われる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0004】
対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法であって、この循環器疾患は、以下の循環器疾患：連合弁膜症（ＩＣＤ－１０診断コードＩ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／又は左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び／若しくは解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／又はリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）のうちの１つ以上を含む方法が開示される。この方法は、対象から得られた生体試料において、以下の
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
のうちの少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
のうちの少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
【0005】
上記対象は概ね健康であってもよく、すなわち循環器疾患に罹患していないことが既知であってもよく、又は対象は循環器疾患の既存の形態を有してもよく、別の若しくは再発性の循環器疾患を発症するリスクが判定されてもよい。
【図面の簡単な説明】
【0006】
実施形態のさらなる理解を提供するために含まれ、本明細書の一部を構成する添付の図面は、種々の実施形態を例証する。
【0007】
【図1a】図１ａは、２０種の血液バイオマーカーの濃度が絶対濃度及びバイオマーカー濃度の五分位点で分析されたときの、その血液バイオマーカーのベースライン濃度と、特定の循環器疾患（本明細書では、以下の循環器疾患ＩＣＤ－１０診断の複合エンドポイントとして定義される：Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０及びＩ８９；本明細書では「特定の循環器疾患」と呼ばれる）の将来の発症との関係を示す。結果は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ（ＵＫバイオバンク）からの約１１５，０００人の概ね健康な個体からの血漿試料に基づく。
【図2a】図２ａは、ベースラインバイオマーカーレベルと１６種の具体的な循環器疾患（ＩＣＤ－１０ ３文字診断により定義される）の将来の発症との関係をヒートマップの形態で示す。結果は、３文字ＩＣＤ－１０コードによって定義される具体的な循環器疾患はすべて、概ね健康なヒト由来の血漿試料のＮＭＲ分光法によって測定される広範なバイオマーカーパネルと非常に類似した関連性を有することを実証する。
【図3a】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3b】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3c】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3d】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3e】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3f】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3g】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図3h】図３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、３ｆ、３ｇ、及び３ｈは、ベースラインバイオマーカーレベルと、１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症との関係を、新規の疾患開始のハザード比のフォレストプロットの形態で示す。
【図4】図４は、２０種の血液バイオマーカーのベースライン濃度と、「特定の循環器疾患」が原因の死亡のリスクとの関係を、「特定の循環器疾患」が原因の将来の入院及び／又は死亡のリスクと比較して示す。結果は、これらのバイオマーカーが、入院よりも致死的な事象のより強力な予測因子であることが多いということを実証する。
【図5】図５は、複数バイオマーカースコアと「特定の循環器疾患」のリスクとの関係の例を示す。複数バイオマーカースコアの選択された例は、個々のバイオマーカーと比較して複数バイオマーカースコアによって達成される改善された予測を例証するために示される。
【図6b】図６ｂは、連合弁膜症を発症するリスクの予測が、異なる人口統計を有する人々に対して有効に機能し、共通のリスク因子について調整する場合に、短期リスク予測について実質的により強い結果を有することを示す。
【図7b】図７ｂは、肺塞栓症を発症するリスクの予測が、異なる人口統計を有する人々に対して有効に機能し、共通のリスク因子について調整する場合に、短期リスク予測について実質的により強い結果を有することを示す。
【発明を実施するための形態】
【0008】
対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法が開示される。
【0009】
循環器疾患は、以下の循環器疾患のうちの１つ以上であってもよい：連合弁膜症（ＩＣＤ－１０診断コードＩ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／若しくは左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び／若しくは解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／又はリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）。この方法は、対象から得られた生体試料において、以下の
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
のうちの少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含んでもよく、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
のうちの少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含んでもよく、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
【0010】
対象は、概ね健康であってもよく、すなわち、循環器疾患に罹患していないことが既知であってもよく、又は対象は、循環器疾患（同じ又は異なる循環器疾患）の既存の形態を有してもよく、又は有したことがあってもよい。後者の場合、別の又は再発性の循環器疾患を発症するリスクが判定されてもよい。言い換えれば、対象が既に有しているかもしれない（若しくは既に有したことがあるかもしれない）ものとは異なる循環器疾患を発症するリスクが判定されてもよく、かつ／又は対象が既に有しているかもしれない（若しくは既に有したことがあるかもしれない）同じ循環器疾患の再発性の形態を発症するリスクが判定されてもよい。
【0011】
様々な血液バイオマーカーが、個体が循環器疾患を発症するリスクが高いか否かを予測するために有用である可能性がある。このようなバイオマーカーは、生体試料から、例えば血液試料又は関連する生体液から測定されてもよい。
【0012】
循環器疾患が原因の入院を予測するバイオマーカーは、より有効なスクリーニング及びより良好な標的化予防的処置を可能にするのに役立つことができよう。
【0013】
一実施形態では、当該方法は、アルブミンの定量値を決定することを含む。
【0014】
一実施形態では、当該方法は、糖タンパク質アセチルの定量値を決定することを含む。
【0015】
一実施形態では、当該方法は、総脂肪酸に対するリノール酸の比の定量値を決定することを含む。
【0016】
一実施形態では、当該方法は、総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比の定量値を決定することを含む。
【0017】
一実施形態では、当該方法は、総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比の定量値を決定することを含む。
【0018】
一実施形態では、当該方法は、脂肪酸不飽和度の定量値を決定することを含む。
【0019】
一実施形態では、当該方法は、リノール酸の定量値を決定することを含む。
【0020】
一実施形態では、当該方法は、オメガ－６脂肪酸の定量値を決定することを含む。
【0021】
一実施形態では、当該方法は、中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリドの定量値を決定することを含む。
【0022】
一実施形態では、当該方法は、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリドの定量値を決定することを含む。
【0023】
一実施形態では、当該方法は、酢酸の定量値を決定することを含む。
【0024】
一実施形態では、当該方法は、乳酸の定量値を決定することを含む。
【0025】
一実施形態では、当該方法は、ピルビン酸の定量値を決定することを含む。
【0026】
一実施形態では、当該方法は、アセト酢酸の定量値を決定することを含む。
【0027】
一実施形態では、当該方法は、アラニンの定量値を決定することを含む。
【0028】
一実施形態では、当該方法は、グルタミンの定量値を決定することを含む。
【0029】
一実施形態では、当該方法は、グリシンの定量値を決定することを含む。
【0030】
一実施形態では、当該方法は、ヒスチジンの定量値を決定することを含む。
【0031】
一実施形態では、当該方法は、フェニルアラニンの定量値を決定することを含む。
【0032】
一実施形態では、当該方法は、チロシンの定量値を決定することを含む。
【0033】
本明細書に記載される代謝バイオマーカーは、有意に異なることが見出されており、すなわち、それらの定量値（量及び／又は濃度等）は、後に特定の循環器疾患を発症した対象に関して、有意に高いか又は低いことが見出されている。このバイオマーカーは、血液、血清、若しくは血漿、乾燥血液スポット、又は他の適切な生体試料から検出及び定量されてもよく、単独で、又は他のバイオマーカーと組み合わせて、特定の循環器疾患を発症するリスクを決定するために使用されてもよい。
【0034】
さらには、このバイオマーカーは、年齢、性別、喫煙状態、アルコール使用、肥満度指数（ＢＭＩ）、ウエスト周囲長、身体活動、食事、血圧、血中コレステロール、家族歴、遺伝的リスク、並びに／若しくは循環器疾患及び／若しくは他の併存疾患の以前の病歴等の、スクリーニング並びにリスク予測に現在使用されてもよい確立されたリスク因子と組み合わされ、かつ／又はそれらを考慮する場合でさえ、循環器疾患を発症するリスクがある対象を特定する可能性を大きく改善する可能性がある。本明細書に記載されるバイオマーカーは、単独で、又はリスクスコア（複数バイオマーカーリスクスコア等）、ハザード比、オッズ比、及び／若しくは予測される絶対リスク若しくは相対リスクとして、又は他のリスク因子及び検査と組み合わせて、予測を改善するか、又はさらには他の検査若しくは測定の必要性に取って代わる可能性がある。これは、他のリスク因子及び検査からの予測情報を補完することによって、又はＥＣＧ（心電図）、冠動脈カルシウムスキャン、並びに／若しくは、例えばＬＤＬ、ＨＤＬ及び／若しくは総コレステロール、トリグリセリド、ＣＲＰ（Ｃ－反応性タンパク質）等の炎症性タンパク質バイオマーカー、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ（Ｎ末端（ＮＴ）－プロホルモンＢＮＰ）並びに／若しくはｈｓ－ｃＴｎＴ（高感度心臓トロポニンＴ）並びに／若しくは循環器疾患のリスクに関する遺伝子スコアについての血液検査等の他の分析の必要性を置き換えることによって、予測精度を改善することを含んでもよい。従って、本明細書に記載される１つ以上の実施形態に係るバイオマーカー若しくはリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクは、他のリスク因子指標がそれほど実現可能でない条件においても、循環器疾患の将来の発症のリスクを効率的に評価することを可能にする可能性がある。
【0035】
当該方法は、上記生体試料において、２つ、３つ、４つ、５つ又はそれ以上等の複数のバイオマーカーの定量値を決定することを含んでもよい。例えば、複数のバイオマーカーは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０（すなわち、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９）、又はすべてのバイオマーカーを含んでもよい。従って、用語「複数のバイオマーカー」は、本明細書内では、（１を超える）任意の数のバイオマーカーを指すものとして理解されてもよい。従って、用語「複数のバイオマーカー」は、（１を超える）任意の数の本明細書に記載されるバイオマーカー及び／又は本明細書に記載されるバイオマーカーの組み合わせ若しくはサブセットを指すものとして理解されてもよい。複数のバイオマーカーを決定することにより、対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かの予測の精度を高められる場合がある。概して、バイオマーカーの数が多いほど、当該方法はより正確又は予測的になりうる。しかしながら、本明細書に記載される単独のバイオマーカーでさえ、対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定することを可能にするか、又はそれを支援する可能性がある。この複数のバイオマーカーは、同じ生体試料から又は別々の生体試料から、同じ分析方法又は異なる分析方法を使用して測定されてもよい。一実施形態では、複数のバイオマーカーは、複数のバイオマーカーのパネルであってもよい。
【0036】
本明細書の文脈では、語句「バイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する」は、当業者なら理解するように、例えば、単一の（個々の）バイオマーカーの定量値が決定されるか、又は複数のバイオマーカーの定量値が決定されるかに応じて、バイオマーカーの定量値を、個々に、又は複数のバイオマーカーとして（例えば、リスクスコアが複数のバイオマーカーの定量値から計算される場合）、対照試料又は対照値と比較することを指すものとして理解されてもよい。
【0037】
一実施形態では、当該方法は、対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値（複数可）を対照試料又は対照値（複数可）と比較することと
を含んでもよく、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値（複数可）を対照試料又は対照値（複数可）と比較することと
を含んでもよく、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。
【0038】
一実施形態では、少なくとも１つのバイオマーカーは、糖タンパク質アセチルを含むか、又は糖タンパク質アセチルである。当該方法は、本明細書に記載される他のバイオマーカーのうちの少なくとも１つの定量値を決定することをさらに含んでもよい。
【0039】
対象はヒトであってもよい。このヒトは健康であるか、又は既存の循環器疾患等の既存の疾患を有してもよい。具体的には、ヒトは、既に存在する形態の循環器疾患を有してもよく、上記疾患及び／若しくは他の循環器疾患の再発性形態並びに／若しくはより重篤な形態を発症するリスクが判定並びに／又は計算されてもよい。対象は、追加的又は代替的に、動物、例えば哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウマ又はげっ歯類であってもよい。
【0040】
本明細書の文脈では、用語「バイオマーカー」は、疾患若しくは状態又はその疾患若しくは状態を有するか若しくは発症するリスクと関連すると見出されてもよいバイオマーカー、例えば、化学マーカー又は分子マーカーを指してもよい。それは、臨床の現場において具体的な有効性を有するものとして統計的に十分に検証されるバイオマーカーを必ずしも指さない。バイオマーカーは、代謝産物、化合物、脂質、タンパク質、部分、官能基、組成物、２つ以上の代謝産物及び／若しくは化合物の組み合わせ、それらの（測定可能な又は測定された）量、それらから誘導される比率若しくは他の値、又は原則として、疾患若しくは状態若しくはそれを有する若しくは発症するリスクと関連すると見出されてもよい化学的及び／若しくは生物学的成分を反映する任意の測定値であってもよい。バイオマーカー及びその任意の組み合わせは、任意選択でさらなる分析及び／又は指標と組み合わせて、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、又は心房細動及び／若しくは粗動等の循環器疾患を発症するリスクを示す生物学的プロセスを測定するために使用されてもよい。
【0041】
上記疾患は、循環器疾患のカテゴリー又はこのカテゴリーにおける具体的な疾患を指してもよい。本明細書の文脈では、用語「循環器疾患」又は「特定の循環器疾患」は、以下の循環器系の疾患のうちの１つ以上を指すものとして理解されてもよい：連合弁膜症（ＩＣＤ－１０診断コードＩ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／若しくは左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び／若しくは解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／又はリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）。上記の循環器系の疾患は急性状態又は慢性状態であってもよい。慢性状態は、本明細書の文脈では、その効果及び／若しくは経時的に生じる疾患において持続性又は別の態様で長期継続性であると理解されてもよい。循環器疾患の徴候及び症状は、対象の年齢及び／又は全体的な健康状態等の因子に応じて、軽度から重度又は障害性又は生命を脅かす可能性があるものまでの範囲にわたってもよい。
【0042】
一実施形態では、当該方法は、対象が（以降の）３年のうちに上記循環器疾患を発症するか又は循環器疾患が原因で死亡するリスクがあるか否かを判定する方法である。
【0043】
バイオマーカーの関連性は、異なる循環器疾患について同様であってもよい。それゆえ、同じ個々のバイオマーカー及びバイオマーカーの組み合わせを拡張して、具体的な循環器疾患のリスクも予測されてもよい。このような具体的な循環器疾患の例としては、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動が挙げられる。
【0044】
本明細書に記載される循環器疾患は、以下のように分類されてもよい。「ＩＣＤ－１０」は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｐｒｏｂｌｅｍｓ １０ｔｈ Ｒｅｖｉｓｉｏｎ（ＩＣＤ－１０） － ＷＨＯ Ｖｅｒｓｉｏｎ ｆｏｒ ２０１９（疾病及び関連保健問題の国際統計分類第１０回改訂（ＩＣＤ－１０） － ２０１９年のＷＨＯバージョン）を指すものとして理解されてもよい。ＩＣＤ－９又はＩＣＤ－１１等のＩＣＤ－１０以外の他の疾患分類システムによって分類又は診断された類似の状態も適用されてもよい。
【0045】
用語「特定の循環器疾患」は、ＩＣＤ－１０診断Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０又はＩ８９の任意の新規（偶発的な）発生を指すものとして理解されてもよい。
【0046】
具体的な循環器疾患は、循環器疾患についての３文字ＩＣＤ－１０診断（Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０、Ｉ８９）内に分類される疾患を指すと理解されてもよい。
【0047】
一実施形態では、上記循環器疾患は、本明細書に記載される１つ以上のＩＣＤ－１０ ３文字コード診断によって定義される疾患等の具体的な疾患である。
【0048】
一実施形態では、上記循環器疾患は、以下のＩＣＤ１０ ３文字診断のうちの少なくとも１つの範囲内の疾患である。
・Ｉ０８：連合弁膜症
・Ｉ１０：本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）
・Ｉ２６：肺塞栓症
・Ｉ２７：その他の肺性心疾患
・Ｉ３１：心膜のその他の疾患
・Ｉ３５：非リウマチ性大動脈弁障害
・Ｉ４２：心筋症
・Ｉ４４：房室ブロック及び左脚ブロック
・Ｉ４５：その他の伝導障害
・Ｉ４６：心停止
・Ｉ４８：心房細動及び粗動
・Ｉ７１：大動脈瘤及び解離
・Ｉ７４：動脈の塞栓症及び血栓症
・Ｉ７７：動脈及び細動脈のその他の障害
・Ｉ８０：静脈炎及び血栓（性）静脈炎
・Ｉ８９：リンパ管及びリンパ節のその他の非感染性障害。
・Ｉ０８：連合弁膜症
・Ｉ１０：本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）
・Ｉ２６：肺塞栓症
・Ｉ２７：その他の肺性心疾患
・Ｉ３１：心膜のその他の疾患
・Ｉ３５：非リウマチ性大動脈弁障害
・Ｉ４２：心筋症
・Ｉ４４：房室ブロック及び左脚ブロック
・Ｉ４５：その他の伝導障害
・Ｉ４６：心停止
・Ｉ４８：心房細動及び粗動
・Ｉ７１：大動脈瘤及び解離
・Ｉ７４：動脈の塞栓症及び血栓症
・Ｉ７７：動脈及び細動脈のその他の障害
・Ｉ８０：静脈炎及び血栓（性）静脈炎
・Ｉ８９：リンパ管及びリンパ節のその他の非感染性障害。
【0049】
一実施形態では、循環器疾患は、本明細書に記載されるいずれかの循環器疾患又は上に列挙されたＩＣＤ－１０コードの１つ以上によって表される疾患等の循環器疾患が原因の死亡を含むか、又はそのような死亡であってもよい。
【0050】
一実施形態では、上記循環器疾患は、連合弁膜症（Ｉ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／若しくは左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／若しくはリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）を含んでもよく、又はそれらであってもよい。
【0051】
一実施形態では、上記循環器疾患は、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、並びに／又は心房細動及び／若しくは粗動を含んでもよく、又はそれらであってもよい。
【0052】
当該方法は、上記少なくとも１つのバイオマーカー又は複数の上記バイオマーカーの定量値に基づいて計算されたリスクスコア、ハザード比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクを使用して、対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定することをさらに含んでもよい。
【0053】
リスクスコア、ハザード比、並びに／若しくは予測される絶対リスク及び／若しくは相対リスクの増加又は減少は、対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0054】
リスクスコア及び／又はハザード比及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクは、本明細書に記載されるバイオマーカーの任意の複数、組み合わせ又はサブセットに基づいて計算されてもよい。
【0055】
リスクスコア及び／又はハザード比及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクは、例えば、以下の実施例に示されるように計算されてもよい。例えば、適切な方法を用いて、例えばＮＭＲ分光法を用いて測定された複数のバイオマーカーが、回帰アルゴリズム及び多変量分析を用いて、並びに／又は機械学習分析を用いて組み合わされてもよい。回帰分析又は機械学習の前に、バイオマーカー中の欠落値があればその欠落値が、データセットに対する各バイオマーカーの平均値で補完されてもよい。上記疾患又は状態の発症と最も関連があると考えられ得るバイオマーカーの数、例えば５が、予測モデルで使用するために選択されてもよい。他のモデリングアプローチを使用して、個々のバイオマーカーの組み合わせ又はサブセット、すなわち複数のバイオマーカーに基づいて、リスクスコア及び／又はハザード比及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクが計算されてもよい。
【0056】
リスクスコアは、例えば、個々のバイオマーカー、すなわち複数のバイオマーカーの加重和として計算されてもよい。加重和は、例えば、Σｉ［βｉ
＊ｃｉ］＋β０として定義される複数バイオマーカースコアの形態であってもよく、式中、ｉは個々のバイオマーカーにわたる和（合計）の添え字（インデックス）であり、βｉはバイオマーカーｉに帰属される加重係数であり、ｃｉはバイオマーカーｉの血中濃度であり、β０は切片項である。
【0057】
例えば、リスクスコアは、β１
＊濃度（糖タンパク質アセチル）＋β２
＊濃度（総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比）＋β３
＊濃度（アルブミン）＋β０として定義することができ、式中、β１、β２、β３は、循環器疾患のリスクとの関連性の大きさに応じた各バイオマーカーについての乗数であり、β０は切片項である。当業者が理解するように、この例において言及されるバイオマーカーは、本明細書に記載される任意の他のバイオマーカー（複数可）によって置き換えられてもよい。概して、より多くのバイオマーカーがリスクスコアに含まれるほど、予測性能はより強くなる可能性がある。追加のバイオマーカーがリスクスコアに含まれる場合、βｉ重みは、循環器疾患の予測のための最適な組み合わせに従って、すべてのバイオマーカーについて変化してもよい。
【0058】
リスクスコア、ハザード比、オッズ比、並びに／又は予測される相対リスク及び／若しく絶対リスクは、少なくとも１つのさらなる指標、例えば対象の特徴に基づいて計算されてもよい。そのような特徴は、生体試料が対象から得られる前、得られるのと同時に、又は得られた後に決定されてもよい。当業者が理解するように、その特徴のいくつかは、例えばアンケートを使用して収集された情報、又は以前に収集された臨床データであってもよい。特徴のいくつかは、生化学的測定若しくは臨床的診断測定及び／又は医学的診断によって決定されてもよい（又はすでに決定されていてもよい）。このような特徴は、例えば、年齢、身長、体重、肥満度指数、人種若しくは民族、喫煙、並びに／又は循環器疾患の家族歴のうちの１つ以上を含むことができる。
【0059】
当該方法は、対象における上記循環器疾患を予防又は治療するために、上記循環器疾患を発症するリスクがある対象に治療を施すことによってその対象を治療することをさらに含んでもよい。上記バイオマーカーの１つ以上に基づく循環器疾患のリスク予測は、予防的努力、例えば非喫煙意識、健康な食事、定期的な運動、身体活動、並びに／又は臨床スクリーニング頻度、及び／若しくは薬理学的治療の決定、特に脂質低下及び抗高血圧性の薬物を導くために使用することができる。例えば、循環器疾患の将来のリスクの情報は、例えば、抗凝固剤、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ）、β遮断薬、抗血小板薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、ジギタリス薬、硝酸及び／又はコレステロール低下薬、例えばスタチン、エゼチミブ及びフィブラートによる治療を誘導するために使用することができる。
【0060】
本明細書の文脈では、用語「アルブミン」は、血清アルブミン（血液アルブミンと称されることが多い）を指すものとして理解されてもよい。これは、脊椎動物の血液中に見出されるアルブミンである。アルブミンは、６５，０００ダルトンのおよその分子量の球状水溶性非グリコシル化血清タンパク質である。ＮＭＲを用いたアルブミンの測定は、例えば、Ｋｅｔｔｕｎｅｎら、２０１２，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ４４、２６９－２７６；Ｓｏｉｎｉｎｅｎら、２０１５、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ：Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ８、２１２－２０６（ＤＯＩ：１０．１１６１／ＣＩＲＣＧＥＮＥＴＩＣＳ．１１４．０００２１６）による刊行物に記載されている。アルブミンは、種々の他の方法によって、例えば、臨床化学分析器によっても測定されてもよい。このような方法の例としては、例えば、ブロモクレゾールグリーン及びブロモクレゾールパープル等の色素結合法が挙げられてもよい。
【0061】
本明細書の文脈では、用語「糖タンパク質アセチル」、「糖タンパク質アセチル化」、又は「ＧｌｙｃＡ」は、循環糖化タンパク質の存在量、及び／又は循環糖化タンパク質、すなわちＮ－アセチル化糖タンパク質の存在量を表す核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）シグナルを指してもよい。糖タンパク質アセチルは、例えば、α－１－酸糖タンパク質、α－１アンチトリプシン、ハプトグロビン、トランスフェリン、及び／又はα－１アンチキモトリプシンを含む、複数の異なる糖タンパク質からのシグナルを含んでもよい。心臓代謝バイオマーカーに関する科学文献において、用語「糖タンパク質アセチル」又は「ＧｌｙｃＡ」は、通常、循環糖化タンパク質のＮＭＲシグナルを指してもよい（例えば、Ｒｉｔｃｈｉｅら、Ｃｅｌｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ ２０１５ １（４）：２９３－３０１；Ｃｏｎｎｅｌｌｙら、Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ． ２０１７；１５（１）：２１９）。糖タンパク質アセチル及びそれらを測定する方法は、例えば、Ｋｅｔｔｕｎｅｎら、２０１８、Ｃｉｒｃ Ｇｅｎｏｍ Ｐｒｅｃｉｓ Ｍｅｄ． １１：ｅ００２２３４及びＳｏｉｎｉｎｅｎら、２００９、Ａｎａｌｙｓｔ １３４、１７８１－１７８５に記載されている。ＮＭＲシグナルに寄与する個々のタンパク質の測定を上回るリスク予測のために糖タンパク質アセチルのＮＭＲシグナルを使用することの利益、例えば、より良好な分析精度及び経時的な安定性、並びに測定のより低いコスト、並びに多くの他のバイオマーカーと同時にＮＭＲシグナルを測定する可能性、がある場合がある。
【0062】
本明細書の文脈では、用語「オメガ－６脂肪酸」は、全オメガ－６脂肪酸、すなわち全オメガ－６脂肪酸の量及び／又は濃度、すなわち異なるオメガ－６脂肪酸の量及び／又は濃度の合計を指してもよい。オメガ－６脂肪酸は、多価不飽和脂肪酸である。オメガ－６脂肪酸において、脂肪酸鎖中の最後の二重結合は、メチル末端から数えて６番目の結合である。
【0063】
１つの実施形態では、オメガ－６脂肪酸はリノール酸であってもよい。リノール酸（１８：２ω－６）は、最も豊富なタイプのオメガ－６脂肪酸であり、それゆえ、循環器疾患のリスク予測のための全オメガ－６脂肪酸の良好な近似と考えられてもよい。
【0064】
本明細書の文脈では、用語「飽和脂肪酸」（ＳＦＡ）は、全飽和脂肪酸を指してもよい。飽和脂肪酸は、その構造中に二重結合を有さない脂肪酸であってもよく、又はそれを含んでもよい。パルミチン酸（１６：０）及びステアリン酸（１８：０）は、ヒト血清中の豊富なＳＦＡの例である。
【0065】
オメガ－６、リノール酸及び／又は飽和脂肪酸を含むすべての脂肪酸指標について、脂肪酸指標は、血液（又は血清／血漿）遊離脂肪酸、結合脂肪酸及びエステル化脂肪酸を含んでもよい。エステル化脂肪酸は、例えば、トリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、若しくはホスホグリセリドにおけるようにグリセロールに、又はコレステロールエステルにおけるようにコレステロールにエステル化されていてもよい。
【0066】
本明細書の文脈では、用語「脂肪酸不飽和度」又は「不飽和」は、全脂肪酸中の二重結合の数、例えば全脂肪酸中の二重結合の平均数を指すものとして理解されてもよい。
【0067】
本明細書の文脈では、用語「ＩＤＬ」は、中密度リポタンパク質を指す。
【0068】
本明細書の文脈では、用語「ＬＤＬ」は、低密度リポタンパク質を指す。
【0069】
本明細書の文脈では、語句「低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）トリグリセリド」、「中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）トリグリセリド」、「ＬＤＬ（低密度リポタンパク質）中のトリグリセリド」、又は「ＩＤＬ（中密度リポタンパク質）中のトリグリセリド」は、そのリポタンパク質クラス又はサブフラクション中の総トリグリセリド濃度を指すものとして理解されてもよい。
【0070】
本明細書の文脈では、用語「酢酸」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中の酢酸塩分子若しくは酢酸エステル分子及び／又は酢酸そのものを指してもよい。
【0071】
本明細書の文脈では、用語「クエン酸」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のクエン酸塩分子若しくはクエン酸エステル分子及び／又はクエン酸そのものを指してもよい。
【0072】
本明細書の文脈では、用語「乳酸」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中の乳酸塩分子若しくは乳酸エステル分子及び／又は乳酸そのものを指してもよい。
【0073】
本明細書の文脈では、用語「ピルビン酸」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のピルビン酸塩分子若しくはピルビン酸エステル分子及び／又はピルビン酸そのものを指してもよい。
【0074】
本明細書の文脈では、用語「アセト酢酸」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のアセト酢酸塩分子若しくはアセト酢酸エステル分子及び／又はアセト酢酸そのものを指してもよい。
【0075】
本明細書の文脈では、用語「アラニン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のアラニンアミノ酸を指してもよい。
【0076】
本明細書の文脈では、用語「グルタミン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のグルタミンアミノ酸を指してもよい。
【0077】
本明細書の文脈では、用語「グリシン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のグリシンアミノ酸を指してもよい。
【0078】
本明細書の文脈では、用語「ヒスチジン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のヒスチジンアミノ酸を指してもよい。
【0079】
本明細書の文脈では、用語「フェニルアラニン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のフェニルアラニンアミノ酸を指してもよい。
【0080】
本明細書の文脈では、用語「チロシン」は、例えば、血液、血漿若しくは血清又は関連する生体液中のチロシンアミノ酸を指してもよい。
【0081】
本明細書の文脈では、用語「定量値」は、バイオマーカーの量及び／又は濃度を特徴付ける任意の定量値を指してもよい。例えば、それは、生体試料中のバイオマーカーの量若しくは濃度であるか、若しくはそれを反映してもよく、又は核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）若しくはバイオマーカーを定量的に検出するのに適した他の方法から導出されるシグナルであるか、若しくはそれを反映してもよい。このようなシグナルは、バイオマーカーの量若しくは濃度を示してもよいし、又はそれと相関してもよい。定量値は、ＮＭＲ測定又は他の測定から導出される１つ以上のシグナルから計算される定量値であってもよい。定量値は、追加的又は代替的に、様々な技術を用いて測定されてもよい。このような方法としては、質量分析（ＭＳ）、ＭＳと組み合わせたガスクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー単独又はＭＳと組み合わせた高速液体クロマトグラフィー、免疫比濁測定、超遠心分離、イオン移動度、酵素による分析、比色分析又は蛍光分析、免疫ブロット分析、免疫組織化学的方法（例えば、代謝産物の抗体検出に基づくインサイツ（ｉｎ ｓｉｔｕ）法）、及びイムノアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ）を挙げてもよい。様々な方法の例が以下に示される。対象における定量値を決定するために使用される方法は、対照対象（複数可）又は対照試料（複数可）における定量値を決定するために使用される方法と同じであってもよい。
【0082】
少なくとも１つのバイオマーカー又は複数のバイオマーカーの定量値又は初期定量値は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、例えば１Ｈ－ＮＭＲを用いて測定されてもよい。少なくとも１つの追加のバイオマーカー又は複数の追加のバイオマーカーも、ＮＭＲを使用して測定されてもよい。ＮＭＲは、多数のバイオマーカーを含むバイオマーカーを同時に測定するための特に効率的で迅速な方法を提供してもよく、それらについての定量値を提供することができる。しかもＮＭＲは、典型的には、試料の前処理又は調製をほとんど必要としない。ＮＭＲで測定されるバイオマーカーは、Ｓｏｉｎｉｎｅｎら、２０１５、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ：Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ８、２１２－２０６（ＤＯＩ：１０．１１６１／ＣＩＲＣＧＥＮＥＴＩＣＳ．１１４．０００２１６）、Ｓｏｉｎｉｎｅｎら、２００９、Ａｎａｌｙｓｔ １３４、１７８１－１７８５、及びＷｕｅｒｔｚら、２０１７、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ １８６（９）、１０８４－１０９６（ＤＯＩ：１０．１０９３／ａｊｅ／ｋｗｘ０１６）によって以前に公開された血液（血清又は血漿）ＮＭＲメタボロミクスについてのアッセイを使用して、大量の試料について効果的に測定することができる。これは、上記の科学論文に詳細に記載されているように、試料あたり２５０個のバイオマーカーに関するデータを提供する。
【0083】
一実施形態では、少なくとも１つのバイオマーカーの（初期）定量値は、核磁気共鳴分光法を使用して測定される。
【0084】
しかしながら、本明細書に記載される様々なバイオマーカーの定量値は、ＮＭＲ以外の技術によっても実施されてもよい。例えば、バイオマーカーに応じて、質量分析（ＭＳ）、酵素的方法、抗体ベースの検出方法、又は他の生化学的若しくは化学的方法が企図されてもよい。
【0085】
例えば、糖タンパク質アセチルは、（例えば、Ｒｉｔｃｈｉｅら、２０１５、Ｃｅｌｌ Ｓｙｓｔ． ２８；１（４）：２９３－３０１に記載されているように）α－１－酸糖タンパク質、ハプトグロビン、α－１－アンチトリプシン、及びトランスフェリンの免疫比濁測定によって測定又は近似することができる。
【0086】
例えば、一価不飽和脂肪酸、飽和脂肪酸及びオメガ－６脂肪酸は、（例えば、Ｊｕｌａら、２００５、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ ２５、２１５２－２１５９に記載されているように）ガスクロマトグラフィーを用いて血清総脂肪酸組成によって定量することができる（すなわち、それらの定量値が決定されてもよい）。
【0087】
本明細書の文脈では、用語「試料」又は「生体試料」は、対象又は対象の群若しくは集団から得られる任意の生体試料を指してもよい。試料は、新鮮なもの、凍結したもの、又は乾燥したものであってもよい。
【0088】
生体試料は、例えば、血液試料、血漿試料、血清試料、又はそれに由来する試料を含んでもよく、又はそれらであってもよい。この生体試料は、例えば、空腹時血液試料、空腹時血漿試料、空腹時血清試料、又はそれから得ることができる画分であってもよい。しかしながら、生体試料は、必ずしも空腹時試料である必要はない。血液試料は静脈血試料であってもよい。
【0089】
血液試料は、乾燥血液試料であってもよい。この乾燥血液試料は、乾燥全血試料、乾燥血漿試料、乾燥血清試料、又はそれらに由来する乾燥試料であってもよい。
【0090】
当該方法は、少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を決定する前に、対象から生体試料を得ることを含んでもよい。対象又は患者の血液試料又は組織試料を採取することは、通常の臨床診療の一部である。集められた血液又は組織試料を調製することができ、血清又は血漿を当業者に周知の技術を用いて分離することができる。血液試料又は組織試料等の生体試料から１つ以上の画分を分離する方法も、当業者に利用可能である。用語「画分」は、本明細書の文脈では、１つ以上の物理的特性、例えば、溶解度、親水性若しくは疎水性、密度、又は分子サイズに従って分離された生体試料の一部分又は成分をも指してもよい。
【0091】
本明細書の文脈では、用語「対照試料」は、対象から得られ、上記疾患若しくは状態に罹患していないか、又は上記疾患若しくは状態を有するか若しくは発症するリスクがないことが既知である試料を指してもよい。この対照試料はマッチしたものであってもよい。一実施形態では、対照試料は、健常個体又は健常個体の一般化集団に由来する生体試料であってもよい。用語「対照値」は、対照試料から得ることができる値及び／又はそれから導出可能な定量値として理解されてもよい。例えば、上回るか又は下回ると疾患又は状態を発症するリスクが上昇するという閾値を、対照試料及び／又は対照値から計算することが可能であってもよい。言い換えれば、（バイオマーカー、リスクスコア、ハザード比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクに応じて）上記閾値より高い又は低い値は、対象がその疾患又は状態を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0092】
対照試料又は対照値と比較した場合の上記少なくとも１つのバイオマーカー若しくは複数のバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、対象が疾患若しくは状態を有するか又は発症するリスクが高いことを示してもよい。対象が疾患又は状態を発症するリスクが高いことを増加が示すか又は減少が示すかは、バイオマーカーに依存してもよい。
【0093】
対照試料又は対照値と比較した場合の少なくとも１つのバイオマーカーの（又は複数のバイオマーカーの個々のバイオマーカーにおける）定量値の１．２倍、１．５倍、若しくは例えば２倍、若しくは３倍の増加又は減少が、対象が疾患又は状態を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0094】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のアルブミンの定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0095】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加は、前記対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0096】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の総脂肪酸に対するリノール酸の比の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0097】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸及び／又はリノール酸の比の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0098】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比の定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0099】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の脂肪酸不飽和度の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0100】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のリノール酸の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0101】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のオメガ－６脂肪酸の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0102】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリドの定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0103】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリドの定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0104】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の酢酸の定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0105】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合の乳酸の定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0106】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のピルビン酸の定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0107】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のアセト酢酸の定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0108】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のアラニンの定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0109】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のグルタミンの定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0110】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のグリシンの定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0111】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のヒスチジンの定量値の減少は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0112】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のフェニルアラニンの定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0113】
一実施形態では、対照試料又は対照値と比較した場合のチロシンの定量値の増加は、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0114】
一実施形態では、β０＋β１
＊濃度（糖タンパク質アセチル）＋β２
＊濃度（アルブミン）として定義され、β０は切片項であり、β１は糖タンパク質アセチルの濃度に帰属される加重係数であり、β２はアルブミンの濃度に帰属される加重係数であるリスクスコアが、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0115】
一実施形態では、β０＋β１
＊濃度（糖タンパク質アセチル）＋β２
＊濃度（脂肪酸指標）として定義され、β０は切片項であり、β１は糖タンパク質アセチルの濃度に帰属される加重係数であり、β２は脂肪酸指標に帰属される加重係数であるリスクスコアが、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。上記脂肪酸指標は、以下の脂肪酸のうちの１つであるか、又は総脂肪酸に対するそれらの比であってもよい：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸、及び／又は脂肪酸不飽和度。
【0116】
一実施形態では、β０＋β１
＊濃度（糖タンパク質アセチル）＋β２
＊濃度（アルブミン）＋β３
＊濃度（脂肪酸指標）として定義され、β０は切片項であり、β１は糖タンパク質アセチルの濃度に帰属される加重係数であり、β２はアルブミンの濃度に帰属される加重係数であり、β３は脂肪酸指標の濃度に帰属される加重係数であるリスクスコアが、対象が連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。上記脂肪酸指標は、以下の脂肪酸のうちの１つであるか、又は総脂肪酸に対するそれらの比であってもよい：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸、及び／又は脂肪酸不飽和度。
【0117】
用語「組み合わせ」は、少なくともいくつかの実施形態では、当該方法が、バイオマーカーの定量値に基づいて計算されたリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクを使用することを含むように理解されてもよい。例えば、糖タンパク質アセチル及びアルブミンの両方の定量値が決定される場合、両方のバイオマーカーの定量値は、対照試料若しくは対照値と別々に比較されてもよいし、又は両方のバイオマーカーの定量値に基づいてリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／若しくは予測される絶対リスク若しくは相対リスクが計算され、このリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／若しくは予測される絶対リスク若しくは相対リスクが対照試料又は対照値と比較されてもよい。
【0118】
一実施形態では、当該方法は、対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加及びアルブミンの定量値の減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加及びアルブミンの定量値の減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0119】
一実施形態では、当該方法は、対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・糖タンパク質アセチル、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比、リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度という少なくとも１つの脂肪酸指標
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
・糖タンパク質アセチル、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比、リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度という少なくとも１つの脂肪酸指標
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0120】
一実施形態では、当該方法は、対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・アルブミン、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比という少なくとも１つの脂肪酸指標：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合のアルブミンの定量値の減少、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
・アルブミン、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比という少なくとも１つの脂肪酸指標：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合のアルブミンの定量値の減少、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0121】
一実施形態では、当該方法は、対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比という少なくとも１つの脂肪酸指標：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加、アルブミンの定量値の減少、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン、
・以下の脂肪酸又は総脂肪酸に対するそれらの比という少なくとも１つの脂肪酸指標：リノール酸、オメガ－６脂肪酸、飽和脂肪酸及び／又は脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含んでもよく、
対照試料又は対照値と比較した場合の上記バイオマーカー及び／又はそれらの組み合わせの定量値の増加又は減少は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す。対照試料又は対照値と比較した場合の糖タンパク質アセチルの定量値の増加、アルブミンの定量値の減少、並びにリノール酸及び／若しくはオメガ－６脂肪酸及び／若しくは脂肪酸不飽和度並びに／若しくは総脂肪酸に対するそれらの比の定量値の減少、並びに／又は飽和脂肪酸及び／若しくは総脂肪酸に対するその比の定量値の増加は、対象が循環器疾患を発症するリスクが高いことを示してもよい。
【0122】
以下の実施形態が開示される。
【0123】
１． 対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法であって、上記循環器疾患は、以下の循環器疾患：連合弁膜症（Ｉ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／若しくは左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び／若しくは解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／又はリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）の１つ以上を含み、
この方法は、上記対象から得られた生体試料において、その生体試料中の以下の少なくとも１つのバイオマーカー
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比、
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
の定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す、方法。
この方法は、上記対象から得られた生体試料において、その生体試料中の以下の少なくとも１つのバイオマーカー
・アルブミン、
・糖タンパク質アセチル、
・総脂肪酸に対するリノール酸の比、
・総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
・総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
・脂肪酸不飽和度、
・リノール酸、
・オメガ－６脂肪酸、
・中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
・低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
・酢酸、
・乳酸、
・ピルビン酸、
・アセト酢酸、
・アラニン、
・グルタミン、
・グリシン、
・ヒスチジン、
・フェニルアラニン、
・チロシン
の定量値を決定する工程と、
上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す、方法。
【0124】
２． 上記方法は、上記生体試料において、複数の上記バイオマーカー、例えば２つ、３つ、４つ、５つ又はこれよりも多い上記バイオマーカーの定量値を決定することを含む実施形態１に記載の方法。
【0125】
３． 上記少なくとも１つのバイオマーカーは、糖タンパク質アセチルを含むか、又は糖タンパク質アセチルである実施形態１又は実施形態２に記載の方法。
【0126】
４． 上記方法は、上記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
実施形態１から実施形態３のいずれか１つに記載の方法。
・糖タンパク質アセチル、
・アルブミン
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
実施形態１から実施形態３のいずれか１つに記載の方法。
【0127】
５． 上記方法は、上記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー
・糖タンパク質アセチル、
・以下のうちの少なくとも１つの脂肪酸指標：総脂肪酸に対するリノール酸の比、リノール酸、総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、オメガ－６脂肪酸、総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
実施形態１から実施形態４のいずれか１つに記載の方法。
・糖タンパク質アセチル、
・以下のうちの少なくとも１つの脂肪酸指標：総脂肪酸に対するリノール酸の比、リノール酸、総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、オメガ－６脂肪酸、総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
上記バイオマーカーの定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
上記対照試料又は上記対照値と比較した場合の上記バイオマーカーの定量値の増加又は減少は、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
実施形態１から実施形態４のいずれか１つに記載の方法。
【0128】
６． 上記循環器疾患は、連合弁膜症（Ｉ０８）；本態性（原発性＜一次性＞）高血圧（症）（Ｉ１０）；肺塞栓症（Ｉ２６）；その他の肺性心疾患（Ｉ２７）；心膜のその他の疾患（Ｉ３１）；非リウマチ性大動脈弁障害（Ｉ３５）；心筋症（Ｉ４２）；房室ブロック及び／若しくは左脚ブロック（Ｉ４４）；その他の伝導障害（Ｉ４５）；心停止（Ｉ４６）；心房細動及び／若しくは粗動（Ｉ４８）；大動脈瘤及び／若しくは解離（Ｉ７１）；動脈の塞栓症及び／若しくは血栓症（Ｉ７４）；動脈及び／若しくは細動脈のその他の障害（Ｉ７７）；静脈炎及び／若しくは血栓（性）静脈炎（Ｉ８０）；並びに／若しくはリンパ管及び／若しくはリンパ節のその他の非感染性障害（Ｉ８９）を含むか又はそれらである実施形態１から実施形態５のいずれか１つに記載の方法。
【0129】
７． 上記循環器疾患は、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／若しくは粗動を含むか、又はこれらである実施形態１から実施形態６のいずれか１つに記載の方法。
【0130】
８． 上記対象は概ね健康であるか、又は上記対象は循環器疾患の既存の形態を有し、別の若しくは再発性の循環器疾患を発症するリスクが判定される実施形態１から実施形態７のいずれか１つに記載の方法。
【0131】
９． 上記少なくとも１つのバイオマーカーの定量値は、核磁気共鳴分光法を使用して測定される実施形態１から実施形態８のいずれか１つに記載の方法。
【0132】
１０． 上記方法は、上記少なくとも１つのバイオマーカー又は複数の上記バイオマーカーの定量値に基づいて計算されたリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクを使用して、上記対象が上記循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定することをさらに含む実施形態１から実施形態９のいずれか１つに記載の方法。
【実施例】
【0133】
これより様々な実施形態を詳細に参照する。それらの実施形態の例は添付の図面に示されている。以下の説明は、当業者が本開示に基づいて実施形態を利用することができる程度に詳細にいくつかの実施形態を開示する。工程又は特徴の多くは本明細書に基づいて当業者に明白となるので、実施形態のすべての工程又は特徴が詳細に論じられるわけではない。
【0134】
図において使用される略語
ＬＡ％：総脂肪酸に対するリノール酸の比
オメガ－６％：総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比
ＳＦＡ％：総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比
不飽和：脂肪酸不飽和度
ＬＡ：リノール酸
オメガ－６：オメガ－６脂肪酸
ＩＤＬ：中密度リポタンパク質
ＬＤＬ：低密度リポタンパク質
ＩＤＬ－ＴＧ：中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド
ＬＤＬ－ＴＧ：低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド
ＣＩ：信頼区間
ＳＤ：標準偏差
ＢＭＩ：肥満度指数
ＬＡ％：総脂肪酸に対するリノール酸の比
オメガ－６％：総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比
ＳＦＡ％：総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比
不飽和：脂肪酸不飽和度
ＬＡ：リノール酸
オメガ－６：オメガ－６脂肪酸
ＩＤＬ：中密度リポタンパク質
ＬＤＬ：低密度リポタンパク質
ＩＤＬ－ＴＧ：中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド
ＬＤＬ－ＴＧ：低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド
ＣＩ：信頼区間
ＳＤ：標準偏差
ＢＭＩ：肥満度指数
【0135】
実施例１
核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって定量したバイオマーカー指標を、それらが連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の特定の循環器疾患を予測することができるか否かに関して調べた。すべての分析は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ（ＵＫバイオバンク）に基づいて、ＮＭＲ分光法からの血液バイオマーカーデータを利用可能である約１１５，０００人の研究参加者を用いて行った。
核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって定量したバイオマーカー指標を、それらが連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動等の特定の循環器疾患を予測することができるか否かに関して調べた。すべての分析は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ（ＵＫバイオバンク）に基づいて、ＮＭＲ分光法からの血液バイオマーカーデータを利用可能である約１１５，０００人の研究参加者を用いて行った。
【0136】
研究集団
ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋの設計の詳細は、Ｓｕｄｌｏｗら、２０１５、ＰＬｏＳ Ｍｅｄ． ２０１５；１２（３）：ｅ１００１７７９によって報告されている。簡単に述べると、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋは、英国全体にわたる２２ヶ所の評価センターで３７～７３歳の５０２，６３９人の参加者を募集した。すべての参加者は、書面によるインフォームドコンセントを提供し、倫理的承認は、Ｎｏｒｔｈ Ｗｅｓｔ Ｍｕｌｔｉ－Ｃｅｎｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ノースウェストマルチセンター研究倫理委員会）から得られた。血液試料は、２００７年から２０１０年の間にベースラインで採取した。選択基準はこのサンプリングに適用しなかった。
ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋの設計の詳細は、Ｓｕｄｌｏｗら、２０１５、ＰＬｏＳ Ｍｅｄ． ２０１５；１２（３）：ｅ１００１７７９によって報告されている。簡単に述べると、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋは、英国全体にわたる２２ヶ所の評価センターで３７～７３歳の５０２，６３９人の参加者を募集した。すべての参加者は、書面によるインフォームドコンセントを提供し、倫理的承認は、Ｎｏｒｔｈ Ｗｅｓｔ Ｍｕｌｔｉ－Ｃｅｎｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ノースウェストマルチセンター研究倫理委員会）から得られた。血液試料は、２００７年から２０１０年の間にベースラインで採取した。選択基準はこのサンプリングに適用しなかった。
【0137】
バイオマーカープロファイリング
ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ集団全体から、１１８，４６６人の個体からのベースライン血漿試料のランダムなサブセットを、Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ（ナイチンゲール）ＮＭＲバイオマーカープラットフォーム（Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ Ｈｅａｌｔｈ Ｌｔｄ（ナイチンゲール・ヘルス）、フィンランド）を使用して測定した。この血液分析方法は、リポタンパク質脂質、循環脂肪酸、並びにアミノ酸、ケトン体及び糖新生関連代謝産物を含む種々の低分子量代謝産物を含む多くの血液バイオマーカーのモル濃度単位での同時定量を提供する。技術的詳細及び疫学的応用が概説されている（Ｓｏｉｎｉｎｅｎら、２０１５、Ｃｉｒｃ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｇｅｎｅｔ；２０１５；８：１９２－２０６；Ｗｕｅｒｔｚら、２０１７、Ａｍ Ｊ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ ２０１７；１８６：１０８４－１０９６）。中央値から４四分位間の範囲外の値を外れ値とみなし、除外した。
ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ集団全体から、１１８，４６６人の個体からのベースライン血漿試料のランダムなサブセットを、Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ（ナイチンゲール）ＮＭＲバイオマーカープラットフォーム（Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ Ｈｅａｌｔｈ Ｌｔｄ（ナイチンゲール・ヘルス）、フィンランド）を使用して測定した。この血液分析方法は、リポタンパク質脂質、循環脂肪酸、並びにアミノ酸、ケトン体及び糖新生関連代謝産物を含む種々の低分子量代謝産物を含む多くの血液バイオマーカーのモル濃度単位での同時定量を提供する。技術的詳細及び疫学的応用が概説されている（Ｓｏｉｎｉｎｅｎら、２０１５、Ｃｉｒｃ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｇｅｎｅｔ；２０１５；８：１９２－２０６；Ｗｕｅｒｔｚら、２０１７、Ａｍ Ｊ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ ２０１７；１８６：１０８４－１０９６）。中央値から４四分位間の範囲外の値を外れ値とみなし、除外した。
【0138】
特定の循環器疾患のリスクとのバイオマーカーの関連の疫学的分析
特定の循環器疾患についてのリスクとの血液バイオマーカーの関連付けを、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋデータに基づいて行った。個々のバイオマーカーが、特定の循環器疾患の将来の発症のリスクに関連するか否かを判定するために、分析は、血液試料を収集した後の特定の循環器疾患の発生に対するバイオマーカーの関係に焦点を当てた。バイオマーカーの加重和の形態の複数バイオマーカースコアを使用する例も、それらが各個々のバイオマーカーよりもさらに強く予測できるか否かを調べるために、検討した。
特定の循環器疾患についてのリスクとの血液バイオマーカーの関連付けを、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋデータに基づいて行った。個々のバイオマーカーが、特定の循環器疾患の将来の発症のリスクに関連するか否かを判定するために、分析は、血液試料を収集した後の特定の循環器疾患の発生に対するバイオマーカーの関係に焦点を当てた。バイオマーカーの加重和の形態の複数バイオマーカースコアを使用する例も、それらが各個々のバイオマーカーよりもさらに強く予測できるか否かを調べるために、検討した。
【0139】
すべての研究参加者の血液サンプリング後に起こった疾患事象に関する情報は、ＵＫ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｅｐｉｓｏｄｅ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ（英国病院エピソード統計）データ及び死亡登録から記録した。すべての分析は、診断の最初の発生に基づいており、従って、血液サンプリング前に所与の疾患の診断が記録された個体は、統計分析から除外した。ＩＣＤ－１０診断Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０又はＩ８９の任意の新規発生に基づいて、特定の循環器疾患の複合エンドポイントを定義した。特定の循環器疾患のより精緻化（細分化）されたサブタイプは、表１に列挙するＩＣＤ－１０診断に従って定義した。
【0140】
登録に基づく追跡調査は、２００７～２０１０年の血液サンプリングから２０２０年までであった（およそ１１０００００人・年）。追跡調査中に１５０未満の疾患事象しか記録されなかった具体的な疾患は、範囲外にした。
【0141】
バイオマーカー関連性検定のために、年齢、性別、及びＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ評価センターについて調整したコックス（Ｃｏｘ）比例ハザード回帰モデルを使用した。結果を各バイオマーカー指標の標準偏差当たりの大きさでプロットして、関連性の大きさの直接比較を可能にした。
【0142】
結果の概要
バイオマーカー分析のための研究集団のベースライン特徴に対する特定の循環器疾患の将来のリスクを表１に示す。血液サンプリング後に起こった疾患事象の新規発生数を、分析したすべての状態について列挙する。
バイオマーカー分析のための研究集団のベースライン特徴に対する特定の循環器疾患の将来のリスクを表１に示す。血液サンプリング後に起こった疾患事象の新規発生数を、分析したすべての状態について列挙する。
【0143】
【表1】
【0144】
図１ａは、特定の循環器疾患（以下の循環器疾患ＩＣＤ－１０診断の複合エンドポイントとして定義される：Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０及びＩ８９；本明細書では「特定の循環器疾患」と呼ぶ）の将来のリスクに関する２０種の血液バイオマーカーのハザード比を示す。図の左側は、バイオマーカーを絶対濃度で分析した場合のハザード比を、研究集団の標準偏差にスケーリングして示す。右側は、バイオマーカー濃度の最も高い五分位点にある個体を最も低い五分位点にある個体と比較したときの対応するハザード比を示す。これらの結果は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋからの１１５，０００人を超える個体の統計分析に基づき、そのうち２７，０９０人が、約１０年間の追跡調査の間に、循環器疾患（病院登録における、又は死亡記録における以下の循環器疾患ＩＣＤ－１０診断のうちの１つ：Ｉ０８、Ｉ１０、Ｉ２６、Ｉ２７、Ｉ３１、Ｉ３５、Ｉ４２、Ｉ４４、Ｉ４５、Ｉ４６、Ｉ４８、Ｉ７１、Ｉ７４、Ｉ７７、Ｉ８０及びＩ８９）を発症した。分析は、コックス比例ハザード回帰モデルにおいて年齢、性別、及びＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ評価センターについて調整した。Ｐ値は、すべての関連性についてＰ＜０．０００１（多重試験補正に対応する）であった。これらの結果は、上記２０種の個々のバイオマーカーが、一般集団設定における特定の循環器疾患のリスクを予測することを実証する。
【0145】
図１ｂは、バイオマーカー濃度の最低、中間、及び最高の五分位点による、上記２０種の血液バイオマーカーの各々についての「特定の循環器疾患」の累積リスクのカプラン・マイヤー（Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ）プロットを示す。これらの結果は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋからの１１５，０００人を超える個体の統計分析に基づき、そのうち２７，０９０人が、特定の循環器疾患を発症した。これらの結果はさらに、上記２０種の個々のバイオマーカーが、一般集団設定における特定の循環器疾患のリスクを予測することを実証する。
【0146】
図２ａは、３文字ＩＣＤ－１０診断コードによって定義される１６種の具体的な循環器疾患の将来の発症についての２０種の血液バイオマーカーのハザード比を示す。これらの結果は、バイオマーカーの関連性のパターンが、１７種の具体的な障害すべてについて高度に一貫性があることを明らかにする。
【0147】
図２ｂは、「特定の循環器疾患」定義と比較した、上記１６種の具体的な循環器疾患（３文字ＩＣＤ－１０診断コードによって定義される）とのバイオマーカーの関連性の一貫性を示す。概して、バイオマーカーの関連性はすべて、「特定の循環器疾患」の場合と同じ関連性方向であるか、又は不一致の方向では統計的に有意ではない。それゆえ、「特定の循環器疾患」を強く予測するいずれのバイオマーカーの組み合わせも、列挙されたすべての具体的な循環器疾患を予測するであろう。
【0148】
図３ａ～ｈは、本研究で検討した１６種の具体的な循環器疾患（ＩＣＤ ３文字診断コードによって定義される）の各々の将来の発症に関する２０種の血液バイオマーカーのハザード比を示す。このハザード比は、各バイオマーカーの標準偏差にスケーリングして、絶対濃度で示してある。これらの結果は、ＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋからの１１５，０００人を超える個体の統計分析に基づいており、およそ１０年間の追跡調査中に上記具体的な疾患を発症した個体の数を各プロットの上部に示す。黒丸は関連性のＰ値がＰ＜０．０００１（多重検定補正に対応する）であり、白丸は関連性のＰ値がＰ＞０．０００１であったことを表す。分析は、コックス比例ハザード回帰モデルを用いて年齢、性別、及びＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ評価センターについて調整した。
【0149】
図４は、「特定の循環器疾患」が原因の死亡に関連する２０種の血液バイオマーカーについてのハザード比（黒色）を示す。比較のために、特定の循環器疾患の発生率のハザード比（すなわち、組み合わされた非致死的事象及び致死的事象。灰色）も示す。ハザード比は、絶対濃度で分析し、研究集団の標準偏差にスケーリングしたバイオマーカーについて示す。これらの結果は、これらのバイオマーカーが致死的な循環器疾患事象のより強力な予測因子であることが多いといいうことを実証する。結果は、バイオマーカーと、３文字ＩＣＤ－１０診断コードによって定義される具体的な循環器疾患に起因する致死的事象との関連性について同様であった。
【0150】
図５は、２つ以上のバイオマーカーを組み合わせた場合の「特定の循環器疾患」とのより強い関連性結果の例を示す。「特定の循環器疾患」の将来のリスクに関する伴うハザード比を、バイオマーカーの対の選択した組み合わせ、及びバイオマーカースコアの例について示す。これらの結果は、多くの他の組み合わせ、特に、アルブミン及び糖タンパク質アセチルに加えて異なる脂肪酸指標を含むものに関して同様であった。複数バイオマーカースコアは、Σｉ［βｉ
＊ｃｉ］＋β０の形態で組み合わされ、式中、ｉは個々のバイオマーカーにわたる和の添え字であり、βｉはバイオマーカーｉに帰属される加重係数であり、ｃｉはバイオマーカーｉの血中濃度であり、β０は切片項である。βｉ乗数は、バイオマーカーのそれぞれの組み合わせについてのＵＫ Ｂｉｏｂａｎｋ研究の統計分析において調べられた、「特定の循環器疾患」のリスクとの多変量関連性の大きさに従って定義される。関連性の大きさの増強は、表１に列挙する１７種の特定の種類の「特定の循環器疾患」についてここに示されるものと同様であった。
【0151】
意図される使用の説明：特定の循環器疾患のリスク予測についての複数バイオマーカースコア
特定の循環器疾患の予測に関連する意図される応用を例示するために、さらなる疫学的分析を以下に説明する。これらの応用は、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動のリスクの予測について例示される。同様の結果が、表１に列挙される他の循環器疾患にも当てはまる。結果は、図１～５において取り上げた２０種のバイオマーカーを組み合わせた複数バイオマーカースコアについて示す。わずかに弱いが類似の結果は、２つ又は３つの個々のバイオマーカーのみの組み合わせで得られる。
特定の循環器疾患の予測に関連する意図される応用を例示するために、さらなる疫学的分析を以下に説明する。これらの応用は、連合弁膜症、肺塞栓症、非リウマチ性大動脈弁障害、心房細動及び／又は粗動のリスクの予測について例示される。同様の結果が、表１に列挙される他の循環器疾患にも当てはまる。結果は、図１～５において取り上げた２０種のバイオマーカーを組み合わせた複数バイオマーカースコアについて示す。わずかに弱いが類似の結果は、２つ又は３つの個々のバイオマーカーのみの組み合わせで得られる。
【0152】
図６ａは、２０種のバイオマーカーの加重和からなる複数バイオマーカースコアのレベルの上昇に伴う連合弁膜症（ＩＣＤ－１０コードＩ０８）のリスクの増加を示す。左側に、リスク増加を勾配パーセンタイルプロットの形態でプロットし、個体をバイオマーカーレベルのパーセンタイルにビニングしたときに追跡調査中に連合弁膜症を発症した個体の割合を示す。各ドットは、約５００人の個体に対応する。右側のカプラン・マイヤープロットでは、複数バイオマーカースコアの選択した分位点についての追跡調査中の連合弁膜症の累積リスクを示す。両方のプロットは、リスクが複数バイオマーカースコアの分布の上端において非線形的に増加していることを実証するのに役立つ。プロットは、研究集団の検証セット部分、すなわち、複数バイオマーカースコアの導出には含まれなかった５０％（ｎ＝６３５９７）について示す。
【0153】
図６ｂは、研究参加者の関連するリスク因子特徴を考慮するときの、連合弁膜症（ＩＣＤ－１０コードＩ０８）の将来の発症に関する同じ複数バイオマーカースコアのハザード比を示す。最初の２つのパネルは、リスク予測が、男性及び女性の両方について、並びに血液サンプリング時の異なる年齢の人々について有効に機能することを実証する。第３のパネルは、ハザード比の大きさが、統計モデリングにおいて肥満度指数及び喫煙状態を考慮するときにわずかにしか減衰されないことを示す。最後のパネルは、結果が、短期リスク予測に対して実質的により強いことを示す。
【0154】
図７ａは、２０種のバイオマーカーの加重和からなる複数バイオマーカースコアのレベルの上昇に伴う肺塞栓症（ＩＣＤ－１０コードＩ２６）のリスクの増加を示す。左側に、リスク増加を勾配パーセンタイルプロットの形態でプロットし、個体をバイオマーカーレベルのパーセンタイルにビニングしたときに追跡調査中に肺塞栓症を発症した個体の割合を示す。各ドットは、約５００人の個体に対応する。右側のカプラン・マイヤープロットでは、複数バイオマーカースコアの選択した分位点についての追跡調査中の肺塞栓症の累積リスクを示す。両方のプロットは、リスクが複数バイオマーカースコアの分布の上端において非線形的に増加していることを実証するのに役立つ。プロットは、研究集団の検証セット部分、すなわち、複数バイオマーカースコアの導出には含まれなかった５０％（ｎ＝６３３９２）について示す。
【0155】
図７ｂは、研究参加者の関連するリスク因子特徴を考慮するときの、肺塞栓症（ＩＣＤ－１０コードＩ２６）の将来の発症に関する同じ複数バイオマーカースコアのハザード比を示す。最初の２つのパネルは、リスク予測が、男性及び女性の両方について、並びに血液サンプリング時の異なる年齢の人々について有効に機能することを実証する。第３のパネルは、ハザード比の大きさが、統計モデリングにおいて肥満度指数及び喫煙状態を考慮するときにわずかにしか減衰されないことを示す。最後のパネルは、結果が、短期リスク予測に対して実質的により強いことを示す。
【0156】
図８ａは、２０種のバイオマーカーの加重和からなる複数バイオマーカースコアのレベルの上昇に伴う非リウマチ性大動脈弁障害（ＩＣＤ－１０コードＩ３５）のリスクの増加を示す。左側に、リスク増加を勾配パーセンタイルプロットの形態でプロットし、個体をバイオマーカーレベルのパーセンタイルにビニングしたときに追跡調査中に非リウマチ性大動脈弁障害を発症した個体の割合を示す。各ドットは、約５００人の個体に対応する。右側のカプラン・マイヤープロットでは、複数バイオマーカースコアの選択した分位点についての追跡調査中の非リウマチ性大動脈弁障害の累積リスクを示す。両方のプロットは、リスクが複数バイオマーカースコアの分布の上端において非線形的に増加していることを実証するのに役立つ。プロットは、研究集団の検証セット部分、すなわち、複数バイオマーカースコアの導出には含まれなかった５０％（ｎ＝６３５１２）について示す。
【0157】
図８ｂは、研究参加者の関連するリスク因子特徴を考慮するときの、非リウマチ性大動脈弁障害（ＩＣＤ－１０コードＩ３５）の将来の発症に関する同じ複数バイオマーカースコアのハザード比を示す。最初の２つのパネルは、リスク予測が、男性及び女性の両方について、並びに血液サンプリング時の異なる年齢の人々について有効に機能することを実証する。第３のパネルは、ハザード比の大きさが、統計モデリングにおいて肥満度指数及び喫煙状態を考慮するときにわずかにしか減衰されないことを示す。最後のパネルは、結果が、短期リスク予測に対して実質的により強いことを示す。
【0158】
図９ａは、２０種のバイオマーカーの加重和からなる複数バイオマーカースコアのレベルの上昇に伴う心房細動及び粗動（ＩＣＤ－１０コードＩ４８）のリスクの増加を示す。左側に、リスク増加を勾配パーセンタイルプロットの形態でプロットし、個体をバイオマーカーレベルのパーセンタイルにビニングしたときに追跡調査中に心房細動及び粗動を発症した個体の割合を示す。各ドットは、約５００人の個体に対応する。右側のカプラン・マイヤープロットでは、複数バイオマーカースコアの選択した分位点についての追跡調査中の心房細動及び粗動の累積リスクを示す。両方のプロットは、リスクが複数バイオマーカースコアの分布の上端において非線形的に増加していることを実証するのに役立つ。プロットは、研究集団の検証セット部分、すなわち、複数バイオマーカースコアの導出には含まれなかった５０％（ｎ＝６２７５６）について示す。
【0159】
図９ｂは、研究参加者の関連するリスク因子特徴を考慮するときの、心房細動及び粗動（ＩＣＤ－１０コードＩ４８）の将来の発症に関する同じ複数バイオマーカースコアのハザード比を示す。最初の２つのパネルは、リスク予測が、男性及び女性の両方について、並びに血液サンプリング時の異なる年齢の人々について有効に機能することを実証する。第３のパネルは、ハザード比の大きさが、統計モデリングにおいて肥満度指数及び喫煙状態を考慮するときにわずかにしか減衰されないことを示す。最後のパネルは、結果が、短期リスク予測に対して実質的により強いことを示す。
【0160】
当業者には、技術の進歩とともに、基本的なアイデアが様々な方法で実行されてもよいことが明らかである。従って、実施形態は上記の例に限定されない。代わりに、実施形態は請求項の範囲内で様々であってよい。
【0161】
上述の実施形態は、互いに任意の組み合わせで使用されてもよい。実施形態のうちのいくつかは、さらなる実施形態を形成するようにともに組み合わされてもよい。本明細書に開示される方法は、本明細書の上記の実施形態のうちの少なくとも１つを含んでもよい。上記の利益及び利点は、１つの実施形態に関連してもよいし、又はいくつかの実施形態に関連してもよいことが理解されよう。実施形態は、記載された課題のいずれか若しくはすべてを解決するもの、又は記載された利益及び利点のいずれか若しくはすべてを有するものに限定されない。「ある」項目への言及は、１つ以上のこれらの項目を指すことがさらに理解されるであろう。用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」は、本明細書において、１つ以上の追加の特徴又は行為の存在を排除することなく、その語句に続く特徴又は行為を含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）を意味するために使用される。
【図1a】
【図1b】
【図2a】
【図2b】
【図3a】
【図3b】
【図3c】
【図3d】
【図3e】
【図3f】
【図3g】
【図3h】
【図4】
【図5】
【図6a】
【図6b】
【図7a】
【図7b】
【図8a】
【図8b】
【図9a】
【図9b】
【手続補正書】
【提出日】2022-12-16
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
対象が循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定する方法であって、前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、前記生体試料中の以下の少なくとも１つのバイオマーカー
糖タンパク質アセチル、
アルブミン、
総脂肪酸に対するリノール酸の比、
総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
脂肪酸不飽和度、
リノール酸、
オメガ－６脂肪酸、
中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
酢酸、
乳酸、
ピルビン酸、
アセト酢酸、
アラニン、
グルタミン、
グリシン、
ヒスチジン、
フェニルアラニン、
チロシン
の定量値を決定する工程と、
前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較する工程と
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示し、
前記循環器疾患は、心房細動及び／若しくは粗動を含むか又は心房細動及び／若しくは粗動であり、
前記少なくとも１つのバイオマーカーは、糖タンパク質アセチルを含むか又は糖タンパク質アセチルであり、糖タンパク質アセチルは、循環糖化タンパク質の存在量を表す核磁気共鳴分光法シグナルを指す、方法。
【請求項2】
前記方法は、前記生体試料において、複数のバイオマーカー、例えば２つ、３つ、４つ、５つ又はこれよりも多い前記バイオマーカーの定量値を決定することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
アルブミン
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１又は請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
以下のうちの少なくとも１つの脂肪酸指標：総脂肪酸に対するリノール酸の比、リノール酸、総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、オメガ－６脂肪酸、総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、脂肪酸不飽和度
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記対象は概ね健康であるか、又は前記対象は循環器疾患の既存の形態を有し、別の若しくは再発性の循環器疾患を発症するリスクが判定される請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
前記対象は、循環器疾患に罹患していないことが既知である請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記少なくとも１つのバイオマーカーの前記定量値は核磁気共鳴分光法を使用して測定される請求項１から請求項６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記方法は、前記少なくとも１つのバイオマーカー又は複数の前記バイオマーカーの前記定量値に基づいて計算されたリスクスコア、ハザード比、オッズ比、及び／又は予測される絶対リスク若しくは相対リスクを使用して、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクがあるか否かを判定することをさらに含む請求項１から請求項７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
前記リスクスコア、ハザード比、オッズ比、並びに／又は予測される相対リスク及び／若しくは絶対リスクは、前記対象の特徴等の少なくとも１つのさらなる指標に基づいて計算されてもよい請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記対象の前記特徴は、年齢、身長、体重、肥満度指数、人種若しくは民族、喫煙、及び／又は循環器疾患の家族歴のうちの１つ以上を含む請求項９に記載の方法。
【請求項11】
前記方法は、前記対象から得られた生体試料において、以下のバイオマーカー糖タンパク質アセチル、
アルブミン、
総脂肪酸に対するリノール酸の比、
総脂肪酸に対するオメガ－６脂肪酸の比、
総脂肪酸に対する飽和脂肪酸の比、
脂肪酸不飽和度、
リノール酸、
オメガ－６脂肪酸、
中密度リポタンパク質（ＩＤＬ）中のトリグリセリド、
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）中のトリグリセリド、
酢酸、
乳酸、
ピルビン酸、
アセト酢酸、
アラニン、
グルタミン、
グリシン、
ヒスチジン、
フェニルアラニン、
チロシン
の定量値を決定することと、
前記バイオマーカーの前記定量値を対照試料又は対照値と比較することと
を含み、
前記対照試料又は前記対照値と比較した場合の前記バイオマーカーの前記定量値の増加又は減少は、前記対象が前記循環器疾患を発症するリスクが高いことを示す
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の方法。
【国際調査報告】