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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-13
(54)【発明の名称】フラン縮合環置換グルタルイミド系化合物
(51)【国際特許分類】
C07D 405/14 20060101AFI20240306BHJP
A61P 13/08 20060101ALI20240306BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240306BHJP
A61K 31/496 20060101ALI20240306BHJP
C07D 493/04 20060101ALI20240306BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20240306BHJP
【ＦＩ】
C07D405/14 CSP
A61P13/08
A61P35/00
A61K31/496
C07D493/04 101A
A61K31/4439
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023556819
(86)(22)【出願日】2022-03-16
(85)【翻訳文提出日】2023-09-14
(86)【国際出願番号】 CN2022081261
(87)【国際公開番号】W WO2022194221
(87)【国際公開日】2022-09-22
(31)【優先権主張番号】202110286500.6
(32)【優先日】2021-03-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202110712765.8
(32)【優先日】2021-06-25
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202111314330.4
(32)【優先日】2021-11-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202210187905.9
(32)【優先日】2022-02-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
２．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】516304780
【氏名又は名称】メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110001519
【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】レイ、マオイー
(72)【発明者】
【氏名】リー、チュンミャオ
(72)【発明者】
【氏名】チェン、シューホイ
【テーマコード（参考）】
4C063
4C071
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA03
4C063AA05
4C063BB01
4C063CC76
4C063DD11
4C063EE01
4C071AA01
4C071AA08
4C071BB01
4C071EE05
4C071FF15
4C071GG10
4C071HH17
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC38
4C086BC50
4C086GA02
4C086GA07
4C086GA12
4C086GA16
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA81
4C086ZB26
(57)【要約】
本発明は、一連のフラン縮合環置換グルタルイミド系化合物、及び関連疾患を治療するための医薬の製造におけるその使用を開示し、具体的には、式（ＩＩ）で表される化合物及びその薬学的に許容される塩を開示する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学に許容される塩。【化1】
（ただし、
ＰＴＭは、ＡＲタンパク質に標的結合する薬物又はその誘導体から選択され、
Ｌ１は、－（ＣＨ２）ｎ－から選択され、前記各ＣＨ２は、任意選択でＲ１により置換され、
Ｒ１は、Ｃ３－７シクロアルキル、６員ヘテロシクロアルキル、－ＮＲａ－、－ＣＲｂＲｃ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－から選択され、
Ｒａは、Ｈ及びＣ１－３アルキルから選択され、
Ｒｂ、Ｒｃは、それぞれ独立してＨ、Ｄ及びＦから選択され、
Ｅ１は、単結合及びＯから選択され、
環Ａは存在せず、
又は環Ａは、フェニル及び５員ヘテロアリールから選択され、
ｎは、１、２、３、４、５及び６から選択され、
前記６員ヘテロシクロアルキル及び５員ヘテロアリールは、それぞれ１、２又は３つの独立して－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｓ－及びＮから選択されるヘテロ原子又はヘテロ原子団を含み、
条件は、前記化合物は、下記の式から選択されないことである。）
【化2】
【化3】
【請求項2】
ＰＴＭは、【化4】
から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項3】
Ｒａは、Ｈ及びＣＨ３から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項4】
Ｒ１は、【化5】
－ＮＨ－、－Ｎ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項5】
Ｌ１は、【化6】
から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項6】
構造単位－Ｅ１－Ｌ１－は、【化7】
から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項7】
構造単位【化8】
から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項8】
化合物は、式（Ｉ－１）、（Ｉ－２）、（ＩＩ－１）、（ＩＩ－２）、（ＩＩＩ－１）及び（ＩＶ－１）で表される構造から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。【化9】
（ただし、Ｌ１は、請求項１～６のいずれか一項で定義される通りである。）
【請求項9】
下記の式で表される、化合物又はその薬学的に許容される塩。【化10】
【化11】
【請求項10】
下記の式から選択される、請求項８に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。【化12】
【化13】
【化14】
【請求項11】
前立腺癌を治療するための医薬を製造における、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は下記の優先権を主張する：
ＣＮ２０２１１０２８６５００．６、出願日は：２０２１年０３月１７日であり、
ＣＮ２０２１１０７１２７６５．８、出願日は：２０２１年０６月２５日であり、
ＣＮ２０２１１１３１４３３０．４、出願日は：２０２１年１１月０８日であり、
ＣＮ２０２２１０１８７９０５．９、出願日は：２０２２年０２月２８日である。
ＣＮ２０２１１０２８６５００．６、出願日は：２０２１年０３月１７日であり、
ＣＮ２０２１１０７１２７６５．８、出願日は：２０２１年０６月２５日であり、
ＣＮ２０２１１１３１４３３０．４、出願日は：２０２１年１１月０８日であり、
ＣＮ２０２２１０１８７９０５．９、出願日は：２０２２年０２月２８日である。
【0002】
本発明は、一連のフラン縮合環置換グルタルイミド系化合物、及び関連疾患を治療するための医薬の製造におけるその使用に関し、具体的には、式（ＩＩ）で表される化合物及びその薬学的に許容される塩に関する。
【背景技術】
【0003】
アンドロゲン受容体シグナル伝達は、前立腺癌の病因において重要な役割を果たし、他のアンドロゲン受容体陽性癌の発症に関与していることが知られているため、アンドロゲン受容体に拮抗する抗アンドロゲン剤によるアンドロゲン受容体シグナル伝達の阻害は、前立腺癌の治療に使用されているか、又は使用が提案されている。
【0004】
ＡＲ遺伝子はアンドロゲン受容体タンパク質をコードしており、そのリガンドは主にテストステロンとジヒドロテストステロンであり、当該受容体は人体のほとんどの臓器及び組織に広く分布しており、アンドロゲンの生物学的効果を媒介する。アンドロゲン受容体は、細胞質内の熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）に結合することができ、アンドロゲンがアンドロゲン受容体に結合すると、その受容体は活性化され、熱ショックタンパク質が解離され、アンドロゲン受容体は二量体を形成して核に入り、ＤＮＡ上のアンドロゲン応答エレメント（ＡＲＥ）に結合し、エレメントの下流にある一連の遺伝子の転写と発現を開始させ、これには、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）及びサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰＩなどの遺伝子が含まれ、最終的に細胞分化をもたらし、組織・器官の発達を促進する。アンドロゲンは前立腺の成長と発達を維持する機能があ、アンドロゲンのない環境において、前立腺細胞は自発的にアポトーシスを起こすが、アンドロゲンレベルが正常な環境では、前立腺細胞は成長・分化を続けることができる。従って、一部の研究では、アンドロゲンの過剰分泌とアンドロゲン受容体の過剰応答は、いずれも前立腺細胞の抑制されない増殖を引き起こし、前立腺癌発症の危険因子であると考えている。
【0005】
前立腺癌（ＰＣａ）は、米国の男性で最も一般的に診断される非皮膚癌の１つであり、癌による死亡原因としては２番目に多く、米国では毎年２００，０００以上が新たに発症し、３０，０００以上が死亡している。アンドロゲン除去療法（ＡＤＴ）は、進行性ＰＣａに対する標準治療である。進行性ＰＣａ患者は、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト、ＬＨＲＨアンタゴニスト又は両側精巣摘出術によるＡＤＴを受ける。ＡＤＴに対する初期反応にもかかわらず、疾患の進行は避けられず、癌は去勢抵抗性前立腺癌（ＣＲＰＣ）として出現する。放射線又は手術による一次治療を受けた前立腺癌患者の最大３０％が、一次治療から１０年以内に転移性疾患を発症する。毎年、約５０，０００人の患者が転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）と呼ばれる、転移性疾患を発症する。
【0006】
タンパク質分解誘導キメラ分子（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｃｈｉｍｅｒａ、ＰＲＯＴＡＣ）は、ユビキチン－プロテアソームシステムを適用して特定のタンパク質を標的にし、それらの細胞内分解を誘導する技術である。ユビキチン－プロテアソームシステムは細胞内タンパク質分解の主要な経路であり、通常の生理学的機能として細胞から変性、突然変異又は有害なタンパク質を除去する役割を主に担っており、細胞内タンパク質分解の８０％以上はユビキチン－プロテアソームシステムに依存している。ＰＲＯＴＡＣは、細胞独自のタンパク質破壊機序を利用して、細胞における特定の標的タンパク質を除去する。
【0007】
本開示では、ユビキチン化及びその後の分解のためにｃｅｒｅｂｌｏｎ（ＣＲＢＮ）Ｅ３ユビキチンリガーゼなどのＥ３ユビキチンリガーゼに内因性タンパク質をリクルートする機能を有する、同一組成の組成物を含む化合物、ならびにその使用方法を記載する。特に、本開示は、標的ユビキチン化及びアンドロゲン受容体（ＡＲ）分解のモジュレーターとして作用することが判明された二機能性又はタンパク質分解誘導キメラ分子（ＰＲＯＴＡＣ）化合物を提供する。
【発明の概要】
【0008】
本発明は、式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
ただし、
ＰＴＭは、ＡＲタンパク質に標的結合する薬物又はその誘導体から選択され、
Ｌ１は、－（ＣＨ２）ｎ－から選択され、前記各ＣＨ２は、任意選択でＲ１により置換され、
Ｒ１は、Ｃ３－７シクロアルキル、６員ヘテロシクロアルキル、－ＮＲａ－、－ＣＲｂＲｃ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－から選択され、
Ｒａは、Ｈ及びＣ１－３アルキルから選択され、
Ｒｂ、Ｒｃは、Ｈ、Ｄ及びＦから選択され、
Ｅ１は、単結合及びＯから選択され、
環Ａは存在せず、
又は環Ａは、フェニル及び５員ヘテロアリールから選択され、
ｎは、１、２、３、４、５及び６から選択され、
前記６員ヘテロシクロアルキル及び５員ヘテロアリールは、それぞれ１、２又は３つの独立して－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｓ－及びＮから選択されるヘテロ原子又はヘテロ原子団を含み、
条件は、前記化合物は、下記の式から選択されないことである。
【化1】
ただし、
ＰＴＭは、ＡＲタンパク質に標的結合する薬物又はその誘導体から選択され、
Ｌ１は、－（ＣＨ２）ｎ－から選択され、前記各ＣＨ２は、任意選択でＲ１により置換され、
Ｒ１は、Ｃ３－７シクロアルキル、６員ヘテロシクロアルキル、－ＮＲａ－、－ＣＲｂＲｃ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－から選択され、
Ｒａは、Ｈ及びＣ１－３アルキルから選択され、
Ｒｂ、Ｒｃは、Ｈ、Ｄ及びＦから選択され、
Ｅ１は、単結合及びＯから選択され、
環Ａは存在せず、
又は環Ａは、フェニル及び５員ヘテロアリールから選択され、
ｎは、１、２、３、４、５及び６から選択され、
前記６員ヘテロシクロアルキル及び５員ヘテロアリールは、それぞれ１、２又は３つの独立して－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｓ－及びＮから選択されるヘテロ原子又はヘテロ原子団を含み、
条件は、前記化合物は、下記の式から選択されないことである。
【化2】
【0009】
本発明の一部の実施形態において、上記ＰＴＭは、
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化3】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0010】
本発明の一部の実施形態において、上記Ｒａは、Ｈ及びＣＨ３から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0011】
本発明の一部の実施形態において、上記Ｒ１は、シクロプロピル、シクロヘキシル、ピペラジニル、ピペリジニル、－ＮＲａ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0012】
本発明の一部の実施形態において、上記Ｒ１は、
－ＮＨ－、－Ｎ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化4】
－ＮＨ－、－Ｎ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0013】
本発明の一部の実施形態において、上記Ｒ１は、
－Ｎ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化5】
－Ｎ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－及び－ＮＨＣ（＝Ｏ）－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0014】
本発明の一部の実施形態において、上記Ｌ１は、
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化6】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0015】
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位－Ｅ１－Ｌ１－は、
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化7】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0016】
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化8】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0017】
本発明の一部の実施形態において、上記化合物は、式（Ｉ－１）、（Ｉ－２）、（ＩＩ－１）、（ＩＩ－２）、（ＩＩＩ－１）及び（ＩＶ－１）で表される構造から選択される。
ただし、
Ｌ１は、本発明で定義される通りである。
【化9】
ただし、
Ｌ１は、本発明で定義される通りである。
【0018】
本発明は、式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
ただし、
Ｅ１は、単結合、Ｏ及びＮＨから選択され、
Ｅ２は、単結合及びＣ１－３アルキルから選択され、
Ｅ３は、Ｃ１－３アルキル及びシクロプロピルから選択され、
Ｅ４は、単結合及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択され、
環Ａは存在せず、
又は環Ａは、フェニルから選択され、
ＡＢＭは、ＡＲ標的タンパク質に結合する医薬又はその誘導体から選択される。
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位－Ｅ１－Ｅ２－は、単結合及び－ＯＣＨ２ＣＨ２－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化10】
ただし、
Ｅ１は、単結合、Ｏ及びＮＨから選択され、
Ｅ２は、単結合及びＣ１－３アルキルから選択され、
Ｅ３は、Ｃ１－３アルキル及びシクロプロピルから選択され、
Ｅ４は、単結合及び－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択され、
環Ａは存在せず、
又は環Ａは、フェニルから選択され、
ＡＢＭは、ＡＲ標的タンパク質に結合する医薬又はその誘導体から選択される。
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位－Ｅ１－Ｅ２－は、単結合及び－ＯＣＨ２ＣＨ２－から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0019】
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位－Ｅ３－Ｅ４－は、Ｃ１－３アルキル、
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化11】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0020】
本発明の一部の実施形態において、上記構造単位
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【化12】
から選択され、他の変量は本発明に定義された通りである。
【0021】
本発明の一部の実施形態において、上記ＡＢＭは、式（ＡＢＭ－１）の構造から選択される。
ただし、
Ｒ１及びＲ２は、メチルから選択され、
又は、Ｒ１及びＲ２はそれらと共に連結された炭素原子とＣ４－６シクロアルキルを形成し、
Ｙ１及びＹ２は、それぞれ独立してＯ及びＳから選択され、
環Ｂは、フェニル及びピリジルから選択され、前記フェニル及びピリジルは、任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
環Ｃは、単結合又はフェニルから選択され、前記フェニルは、任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒｂは、Ｆ及びＣｌから選択される。
【化13】
ただし、
Ｒ１及びＲ２は、メチルから選択され、
又は、Ｒ１及びＲ２はそれらと共に連結された炭素原子とＣ４－６シクロアルキルを形成し、
Ｙ１及びＹ２は、それぞれ独立してＯ及びＳから選択され、
環Ｂは、フェニル及びピリジルから選択され、前記フェニル及びピリジルは、任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
環Ｃは、単結合又はフェニルから選択され、前記フェニルは、任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＣＨ３、ＣＦ３及びＮＯ２から選択され、
Ｒｂは、Ｆ及びＣｌから選択される。
【0022】
本発明の一部の実施形態において、上記ＡＢＭは、式（ＡＢＭ－１ａ）及び（ＡＢＭ－１ｂ）の構造から選択される。
ただし、
Ｔ１は、ＣＨ及びＮから選択され、
Ｒｂ１は、Ｈ及びＦから選択され、
ｎは、１、２及び３から選択され、
Ｙ１、Ｙ２、Ｒａ、Ｒ１及びＲ２は、本発明に定義された通りである。
【化14】
ただし、
Ｔ１は、ＣＨ及びＮから選択され、
Ｒｂ１は、Ｈ及びＦから選択され、
ｎは、１、２及び３から選択され、
Ｙ１、Ｙ２、Ｒａ、Ｒ１及びＲ２は、本発明に定義された通りである。
【0023】
本発明の一部の実施形態において、上記ＡＢＭは、
から選択される。
【化15】
から選択される。
【0024】
本発明の一部の実施形態において、上記化合物は、式（Ｉ－１ａ）及び（Ｉ－２ａ）で表される構造から選択される。
ただし、
Ｔ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｒａ、Ｒｂ１、ｎ、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３及びＥ４は、本発明に定義された通りである。
【化16】
ただし、
Ｔ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｒａ、Ｒｂ１、ｎ、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３及びＥ４は、本発明に定義された通りである。
【0025】
本発明一部の形態は、更に上記の各変量の任意の組み合わせにより形成される。
本発明はまた、下記化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
本発明はまた、下記化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【化17】
【化18】
【0026】
本発明はまた、下記の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【化19】
【化20】
【化21】
【0027】
本発明はまた、前立腺癌を治療するための医薬を製造における、上記の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【0028】
［定義及び説明］
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。１つの特定の用語又は連語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。１つの特定の用語又は連語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
【0029】
本明細書で用いられる「薬学的許容される」は、それらの化合物、材料、組成物及び／又は剤形に対するもので、これらは信頼できる医学判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織との接触に適し、毒性、刺激性、アレルギー反応又はほかの問題又は合併症があまりなく、合理的な利益／リスク比に合う。
【0030】
用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩で、本発明で発見された特定の置換基を有する化合物と比較的に無毒の酸又は塩基とで製造される。本発明の化合物に比較的に酸性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は適切な不活性溶媒において十分な量の塩基でこれらの化合物の中性の形態と接触することで塩基付加塩を得ることができる。薬学的許容される塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミン又はマグネシウム塩あるいは類似の塩を含む。本発明で化合物に比較的塩基性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は、適切な不活性溶媒において十分な量の酸でこれらの化合物の中性の形態と接触することで酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の実例は、無機酸塩及び有機酸塩、さらにアミノ酸（例えばアルギニンなど）の塩、及びグルクロン酸のような有機酸の塩を含み、上記無機酸は、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素イオン、リン酸、リン酸一水素イオン、リン酸二水素イオン、硫酸、硫酸水素イオン、ヨウ化水素酸、亜リン酸などを含み、上記有機酸は、例えば酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸やメタンスルホン酸などの類似の酸を含む。本発明の一部の特定的の化合物は、塩基性及び酸性の官能基を含有するため、任意の塩基付加塩又は酸付加塩に転換することができる。
【0031】
用語「薬物又はその誘導体」には、標的タンパク質に結合するように開発された薬物又はその誘導体が含まれる。
本発明の薬学的許容される塩は、酸基又は塩基性基を含む母体化合物から通常の方法で合成することができる。通常の場合、このような塩の製造方法は、水又は有機溶媒あるいは両者の混合物において、遊離酸又は塩基の形態のこれらの化合物を化学量論量の適切な塩基又は酸と反応させて製造する。
本発明の薬学的許容される塩は、酸基又は塩基性基を含む母体化合物から通常の方法で合成することができる。通常の場合、このような塩の製造方法は、水又は有機溶媒あるいは両者の混合物において、遊離酸又は塩基の形態のこれらの化合物を化学量論量の適切な塩基又は酸と反応させて製造する。
【0032】
本発明の化合物は、特定の幾何又は立体異性体の形態が存在してもよい。本発明は、全てのこのような化合物を想定し、シス及びトランス異性体、（－）－及び（＋）－エナンチオマー、（Ｒ）－及び（Ｓ）－エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、及びそのラセミ混合物並びに他の混合物、例えばエナンチオマー又は非エナンチオマーを多く含有する混合物を含み、全てのこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。アルキル等の置換基に他の不斉炭素原子が存在してもよい。全てのこれらの異性体及びこれらの混合物はいずれも本発明の範囲内に含まれる。
【0033】
別途に説明しない限り、用語「エナンチオマー」又は「光学異性体」とは互いに鏡像の関係にある立体異性体である。
別途に説明しない限り、用語「ジアステレオマー」とは分子が二つ又は複数のキラル中心を有し、かつ分子同士は非鏡像の関係にある立体異性体である。
別途に説明しない限り、「（＋）」は右旋性を意味し、「（－）」は左旋性を意味し、「（±）」はラセミ体を意味する。
別途に説明しない限り、用語「ジアステレオマー」とは分子が二つ又は複数のキラル中心を有し、かつ分子同士は非鏡像の関係にある立体異性体である。
別途に説明しない限り、「（＋）」は右旋性を意味し、「（－）」は左旋性を意味し、「（±）」はラセミ体を意味する。
【0034】
【化22】
【0035】
特に明記しない限り、ある基が一つ以上の結合可能な部位を有する場合、該基の任意の一つ以上の部位は、化学結合によって他の基に結合することができる。前記部位が他の基と結合する化学結合は、
例えば、－ＯＣＨ３の直線の実線の結合は、基内の酸素原子を介して他の基に接続されていることを示し；
の直線の破線の結合は、基内の窒素原子の両端を介した他の基への接続を示し；
の波線は、フェニルの１つ及び２つの炭素原子を介した他の基への結合を示す。
【化23】
例えば、－ＯＣＨ３の直線の実線の結合は、基内の酸素原子を介して他の基に接続されていることを示し；
【化24】
の直線の破線の結合は、基内の窒素原子の両端を介した他の基への接続を示し；
【化25】
の波線は、フェニルの１つ及び２つの炭素原子を介した他の基への結合を示す。
【0036】
本発明の化合物は、特定に存在することができる。別途に説明しない限り、用語「互変異性体」又は「互変異性体の形態」とは室温において、異なる官能基の異性体が動的平衡にあり、かつ快速に互いに変換できることを指す。互変異性体は可能であれば（例えば、溶液において）、互変異性体の化学的平衡に達することが可能である。例えば、プロトン互変異性体（ｐｒｏｔｏｎ ｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトトロピー互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃ ｔａｕｔｏｍｅｒ）とも呼ばれる）は、プロトンの移動を介する相互変換、例えばケト－エノール異性化やイミン－エナミン異性化を含む。原子価互変異性体（ｖａｌｅｎｃｅ ｔａｕｔｏｍｅｒ）は、一部の結合電子の再構成による相互変換を含む。中では、ケト－エノール互変異性化の具体的な実例は、ペンタン－２，４－ジオンと４－ヒドロキシペント－３－エン－２－オンの二つの互変異性体の間の相互変換である。
【0037】
別途に説明しない限り、用語「１つの異性体に富む」、「異性体豊富な」、「１つのエナンチオマーに富む」又は「エナンチオマー豊富な」とは、１つの異性体又はエナンチオマーの含有量が１００％未満で、且つこの異性体又はエナンチオマーの含有量が６０％以上、又は７０％以上、又は８０％以上、又は９０％以上、又は９５％以上、又は９６％以上、又は９７％以上、又は９８％以上、又は９９％以上、又は９９．５％以上、又は９９．６％以上、又は９９．７％以上、又は９９．８％以上、又は９９．９％以上であることを意味する。
【0038】
別途に説明しない限り、用語「異性体過剰率」又は「エナンチオマー過剰率」とは、２つの異性体又は２つのエナンチオマーの相対百分率の間の差を意味する。例えば、１つの異性体又はエナンチオマーの含有量が９０％であり、もう１つの異性体又はエナンチオマーの含有量が１０％である場合、異性体又はエナンチオマー過剰率（ｅｅ値）は８０％である。
【0039】
光学活性な（Ｒ）－及び（Ｓ）－異性体ならびにＤ及びＬ異性体は、不斉合成又はキラル試薬又はほかの通常の技術を用いて調製することができる。本発明のある化合物の一つの鏡像異性体を得るには、不斉合成又はキラル補助剤を有する誘導作用によって調製することができるが、ここで、得られたジアステレオマー混合物を分離し、かつ補助基を分解させて単離された所要の鏡像異体性を提供する。あるいは、分子に塩基性官能基（例えばアミノ）又は酸性官能基（例えばカルボキシル）が含まれる場合、適切な光学活性な酸又は塩基とジアステレオマーの塩を形成させ、更に本分野で公知の通常の方法によってジアステレオマーの分割を行った後、回収して単離された鏡像異体を得る。また、エナンチオマーとジアステレオマーの分離は、通常、クロマトグラフィー法によって行われ、前記クロマトグラフィーはキラル固定相を使用し、且つ任意の化学誘導法（例えば、アミンからカルバミン酸塩を生成させる）と併用する。
【0040】
本発明の化合物は、化合物を構成する一つまた複数の原子には、非天然の原子同位元素が含まれてもよい。例えば、三重水素（３Ｈ）、ヨウ素－１２５（１２５Ｉ）又はＣ－１４（１４Ｃ）のような放射性同位元素で化合物を標識することができる。又、例えば重水素を水素に置換して重水素化薬物を形成することができ、重水素と炭素で形成された結合は、通常の水素と炭素で形成された結合よりも強く、重水素化されていない薬物と比較して、重水素化された薬物には、毒性の副作用が軽減され、薬物の安定性が増し、治療効果が向上され、薬物の生物学的半減期が延ばされるという利点がある。本発明の化合物の同位体組成の変換は、放射性であるか否かに関わらず、本発明の範囲に含まれる。
【0041】
用語「任意」また「任意に」は後記の事項又は状況によって可能であるが必ずしも現れるわけではなく、かつ当該記述はそれに記載される事項又は状況が生じる場合によってその事項又は状況が乗じない場合を含むことを意味する。
【0042】
用語「置換された」は特定の原子における任意の１つ又は複数の水素原子が置換基で置換されたことで、特定の原子価状態が正常でかつ置換後の化合物が安定していれば、重水素及び水素の変形体を含んでもよい。置換基がケト基（即ち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されたことを意味する。ケト基置換は、芳香族基で生じない。用語「任意に置換される」は、置換されてもよく、置換されなくてもよく、別途に定義しない限り、置換基の種類と数は化学的に安定して実現できれば任意である。
【0043】
用語「置換された」とは、特定の原子又は基が、特定の他の原子又は基で置換されてもよいことを指す。例えば、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ３のＣＨ２は、Ｏ、Ｓ、ＮＨにより置換されてＣＨ３ＯＣＨ３、ＣＨ３ＳＣＨ３及びＣＨ３ＮＨＣＨ３を得ることができる。
【0044】
変量（例えばＲ）のいずれかが化合物の組成又は構造に１回以上現れた場合、その定義はいずれの場合においても独立である。そのため、例えば、１つの基が０～２個のＲで置換された場合、上記基は任意に２個以下のＲで置換され、かついずれの場合においてもＲは独立して選択肢を有する。また、置換基及び／又はその変形体の組み合わせは、このような組み合わせであれば安定した化合物になる場合のみ許容される。
【0045】
連結基の数が０の場合、例えば、－（ＣＲＲ）０－は、当該連結基が単結合であることを意味する。
置換基がない場合、当該置換基が存在しないことを表し、例えば、Ａ－ＸのＸがない場合、当該構造が実際にＡとなることを表す。挙げられた置換基に対してどの原子を通して置換された置換基が明示しない場合、このような置換基はその任意の原子を通して結合することができ、例えば、置換基としてのピリジニルは、ピリジン環の任意の炭素原子を通して置換基に結合してもよい。
置換基がない場合、当該置換基が存在しないことを表し、例えば、Ａ－ＸのＸがない場合、当該構造が実際にＡとなることを表す。挙げられた置換基に対してどの原子を通して置換された置換基が明示しない場合、このような置換基はその任意の原子を通して結合することができ、例えば、置換基としてのピリジニルは、ピリジン環の任意の炭素原子を通して置換基に結合してもよい。
【0046】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－３アルキル」は直鎖又は分枝鎖の１～３個の炭素原子で構成された飽和炭化水素基を表す。前記Ｃ１－３アルキルにはＣ１－２とＣ２－３アルキルなどが含まれ、それは１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）及び多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１－３アルキルの実例は、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）を含むが、これらに限定されない。
【0047】
別途に説明しない限り、環内の原子数は一般に環員の数として定義され、例えば、「５～７員環」とは、その周囲に配置された５～７個の原子の「環」を指す。
別途に定義しない限り、「Ｃ３－７シクロアルキル」は、３～７個の炭素原子で構成された飽和環状炭化水素基であり、それは、単環式及び二環式環系を含み、ここで、二環式環系にはスピロ環、縮合環及び架橋環が含まれる。前記Ｃ３－７シクロアルキルには、Ｃ３－６、Ｃ３－５、Ｃ３－４、Ｃ４－７、Ｃ４－６、Ｃ４－５、Ｃ５－７又はＣ５－６シクロアルキルなどが含まれ、それは１価、２価及び多価であってもよい。Ｃ３－７シクロアルキルの実例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプタンなどを含むが、これらに限定されない。
別途に定義しない限り、「Ｃ３－７シクロアルキル」は、３～７個の炭素原子で構成された飽和環状炭化水素基であり、それは、単環式及び二環式環系を含み、ここで、二環式環系にはスピロ環、縮合環及び架橋環が含まれる。前記Ｃ３－７シクロアルキルには、Ｃ３－６、Ｃ３－５、Ｃ３－４、Ｃ４－７、Ｃ４－６、Ｃ４－５、Ｃ５－７又はＣ５－６シクロアルキルなどが含まれ、それは１価、２価及び多価であってもよい。Ｃ３－７シクロアルキルの実例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプタンなどを含むが、これらに限定されない。
【0048】
別途に定義しない限り、用語「６員ヘテロシクロアルキル」自体又は他の用語と組み合わせは、それぞれ６個の環原子で構成された飽和環状基を表し、その１、２、３及び４個の環原子は独立してＯ、Ｓ及びＮのヘテロ原子から選ばれ、残りは炭素原子である。窒素原子が任意に四級化されており、窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化される（即ち、ＮＯ及びＳ（Ｏ）ｐ、ｐは１又は２である。）。それは、単環式及び二環式環系を含み、ここで、二環式環系にはスピロ環、縮合環及び架橋環が含まれる。６員のヘテロアリールの実例は、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル（１－ピペリジニル、２－ピペリジニル及び３－ピペリジニルなどを含む）、ピペラジニル（１－ピペラジニル及び２－ピペラジニルなどを含む）又はモルホリニル（３－モルホリニル及び４－モルホリニルなどを含む）を含むが、これらに限定されない。
【0049】
別途に定義しない限り、本発明の用語「５員ヘテロ芳香環」と「５員ヘテロアリール」は交換的に使用することができ、用語「５員ヘテロアリール」は個の環原子で構成された共役π電子系を持つ単環式基であり、その１、２又は３個の環原子は独立してＯ、Ｓ及びＮのヘテロ原子から選ばれ、残りは炭素原子である。ここで、窒素原子は任意に四級化されており、窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化される（即ち、ＮＯ及びＳ（Ｏ）ｐ、ｐは１又は２である）。５員ヘテロアリールは、ヘテロ原子又は炭素原子を通して分子の他の部分に連結される。５員ヘテロアリールの実例は、ピロリル（Ｎ－ピロリル、２－ピロリル、及び３－ピロリルなどを含む）、ピラゾリル（２－ピラゾリル及び３－ピラゾリルなどを含む）、イミダゾリル（Ｎ－イミダゾリル、２－イミダゾリル、４－イミダゾリルな及び５－イミダゾリルなどを含む）、オキザゾリル（２－オキサゾリル、４－オキサゾリル及び５－オキザゾリルなどを含む）、トリアゾリル（１Ｈ－１、２、３－トリアゾリル、２Ｈ－１、２、３－トリアゾリル、１Ｈ－１、２、４－トリアゾリル及び４Ｈ－１、２、４－トリアゾリルなど）、テトラゾリル、イソキサゾリル（３－イソキサゾリル、４－イソキサゾリル及び５－イソキサゾリルなど）、チアゾリル（２－チアゾリル、４－チアゾリル及び５－チアゾリルなどを含む）、フラニル（２－フラニル及び３―フラニルなどを含む）、チエニル（２－チエニル及び３－チエニルなどを含む）を含むが、これらに限定されない。
【0050】
別途に定義しない限り、Ｃｎ－ｎ＋ｍ又はＣｎ－Ｃｎ＋ｍはｎからｎ＋ｍ個の炭素の任意の一つの具体的な様態を含み、例えば、Ｃ１－１２はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、及びＣ１２を含み、ｎ～ｎ＋ｍのうちの任意の一つの範囲も含み、例えば、Ｃ１－１２はＣ１－３、Ｃ１－６、Ｃ１－９、Ｃ３－６、Ｃ３－９、Ｃ３－１２、Ｃ６－９、Ｃ６－１２、及びＣ９－１２等を含む。同様に、ｎ員からｎ＋ｍ員は環における原子数がｎ～ｎ＋ｍ個であることを表し、例えば、３～１２員環は３員環、４員環、５員環、６員環、７員環、８員環、９員環、１０員環、１１員環、及び１２員環を含み、ｎ～ｎ＋ｍのうちの任意の一つの範囲も含み、例えば、３～１２員環は３～６員環、３～９員環、５～６員環、５～７員環、６～７員環、６～８員環、及び６～１０員環等を含む。
【0051】
特に明記しない限り、ある基が一つ以上の結合可能な部位を有する場合、該基の任意の一つ以上の部位は、化学結合によって他の基に結合することができる。該化学結合の結合方式が非局在であり、且つ結合可能な部位にＨ原子が存在する場合、化学結合を結合すると、該部位のＨ原子の個数は、結合された化学結合の個数に応じて相応の価数の基に減少する。前記部位が他の基と結合する化学結合は、
【化26】
【0052】
例えば、－ＯＣＨ３の直線実線結合は、該基の酸素原子を介して他の基に結合されていることを意味する。
中の直線の破線結合は、該基内の窒素原子の両端が他の基に結合されていることを意味する。
【化27】
中の直線の破線結合は、該基内の窒素原子の両端が他の基に結合されていることを意味する。
【0053】
【化28】
中の波線は、当該フェニル基の部位１と２の炭素原子を介して他の基に結合されていることを意味する。
【0054】
【化29】
は、ナフタレン環の任意の結合可能な部位が１つの化学結合によって他の基に結合できることを意味し、少なくとも
【化30】
の６種類の結合形態を含む。
【0055】
本発明の化合物は当業者に熟知の様々な合成方法によって製造することができ、以下に挙げられた具体的な実施形態、他の化学合成方法と合わせた実施形態及び当業者に熟知の同等の代替方法を含み、好適な実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。
【0056】
本発明の化合物の構造は、当業者に周知の従来の方法によって確認することができ、本発明が化合物の絶対配置に関する場合、絶対配置は、当業者の従来の技術的手段によって確認することができる。例えば、単結晶Ｘ線回折（ＳＸＲＤ）、培養された単結晶はＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計によって収集され、光源はＣｕＫα放射線、走査方法：φ／ω走査、関連データを収集した後、更に直接法は（Ｓｈｅｌｘｓ９７）結晶構造解析により、絶対配置を確認できる。
【0057】
本発明に使用されたすべての溶媒は市販品から得ることができる。本発明は以下の略語を使用する。ａｑは水を表し；ｅｑは当量、等量を表し；ＣＤＩはカルボニルジイミダゾールを表し；ＤＣＭはジクロロメタンを表し；ＰＥは石油エーテルを表し；ＤＭＦはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを表し；ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し；ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表し；ＥｔＯＨはエタノールを表し；ＭｅＯＨはメタノールを表し；ＢＯＣはアミン保護基であるｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルを表し；ｒ．ｔ．は室温を表し；Ｏ／Ｎは一晩実行することを表し；ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し；Ｂｏｃ２Ｏは二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチルを表し；Ｍはｍｏｌ／Ｌを表し；ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーを表す。
【0058】
化合物は本分野の通常の名称又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトによって名付けられ、市販化合物はメーカーのカタログの名称が使用された。
【発明の効果】
【0059】
本発明の化合物は、優れたＡＲタンパク質分解効果、細胞増殖阻害効果、及び腫瘍抑制効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【0060】
【発明を実施するための形態】
【0061】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明の不利な制限を意味するものではない。本発明は本明細書で詳細に説明されており、その特定の実施形態も開示されており、当業者にとって、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本発明の特定の実施形態において様々な変更及び修正を行うことができることは明らかである。
【0062】
参照例１
合成スキーム：
【化31】
合成スキーム：
【化32】
【0063】
ステップ１：中間体ＢＢ－１－２の合成
化合物ＢＢ－１－１（１ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）及びカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．０７ｇ、１７．６６ｍｍｏｌ）をトルエン（１５ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２２６．４１ｍｇ、２４７．２５μｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（２０９．９８ｍｇ、４９４．４９μｍｏｌ）、リン酸カリウム（３．００ｇ、１４．１３ｍｍｏｌ）を順次に反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、減圧して大部分の有機溶媒をスピンオフした。酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／２、体積比）により分離して中間体ＢＢ－１－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：７．８３ － ７．７３（ｍ， １Ｈ）， ７．５７（ｓ， １Ｈ）， ７．４７ － ７．４０（ｍ， １Ｈ）， ７．１４ － ７．０５（ｍ， １Ｈ）， ６．８１（ｂｒ ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１９（ｑ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４９ － １．４２（ｍ， ９Ｈ）， １．３２ － １．２３（ｍ， ３Ｈ）。
化合物ＢＢ－１－１（１ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）及びカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．０７ｇ、１７．６６ｍｍｏｌ）をトルエン（１５ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２２６．４１ｍｇ、２４７．２５μｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（２０９．９８ｍｇ、４９４．４９μｍｏｌ）、リン酸カリウム（３．００ｇ、１４．１３ｍｍｏｌ）を順次に反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、減圧して大部分の有機溶媒をスピンオフした。酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／２、体積比）により分離して中間体ＢＢ－１－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：７．８３ － ７．７３（ｍ， １Ｈ）， ７．５７（ｓ， １Ｈ）， ７．４７ － ７．４０（ｍ， １Ｈ）， ７．１４ － ７．０５（ｍ， １Ｈ）， ６．８１（ｂｒ ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１９（ｑ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４９ － １．４２（ｍ， ９Ｈ）， １．３２ － １．２３（ｍ， ３Ｈ）。
【0064】
ステップ２：中間体ＢＢ－１－３の合成
０℃で、化合物ＢＢ－１－２（３００ｍｇ、９３９．４０μｍｏｌ）及びアクリルアミド（７３．４５ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、７１．３１μＬ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１５８．１２ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を反応にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応溶液をゆっくりと飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）に加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－１－３を得た。
０℃で、化合物ＢＢ－１－２（３００ｍｇ、９３９．４０μｍｏｌ）及びアクリルアミド（７３．４５ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、７１．３１μＬ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１５８．１２ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を反応にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応溶液をゆっくりと飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）に加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－１－３を得た。
【0065】
ステップ３：中間体ＢＢ－１の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－１－３（４０ｍｇ、１１６．１６μｍｏｌ）を酢酸エチル（２ｍＬ）に加え、塩酸／ジオキサン（４Ｍ、１ｍＬ）をゆっくりと反応系に滴下した。混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を直接にスピン乾燥させて中間体ＢＢ－１の塩酸塩を得た。
化合物ＢＢ－１－３（４０ｍｇ、１１６．１６μｍｏｌ）を酢酸エチル（２ｍＬ）に加え、塩酸／ジオキサン（４Ｍ、１ｍＬ）をゆっくりと反応系に滴下した。混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を直接にスピン乾燥させて中間体ＢＢ－１の塩酸塩を得た。
【0066】
参照例２
合成スキーム：
【化33】
合成スキーム：
【化34】
【0067】
ステップ１：中間体ＢＢ－２－２の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－２－１（４ｇ、１４．１３ｍｍｏｌ）及びカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．９７ｇ、４２．３９ｍｍｏｌ）をトルエン（７０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）の混合液に加え、次に、順次にリン酸カリウム（１２．００ｇ、５６．５１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（９０５．６３ｍｇ、９８８．９９μｍｏｌ）及び２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（８３９．９３ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１１０℃及び窒素ガスの保護下で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、珪藻土で濾過し、濾液に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５００ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝０／１～１０／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－２－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ： ７．７１（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．６３（ｓ， １Ｈ）， ７．３７（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４（ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５９（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ４．２０（ｑ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５３（ｓ， ９Ｈ）， １．２９ （ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－２－１（４ｇ、１４．１３ｍｍｏｌ）及びカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．９７ｇ、４２．３９ｍｍｏｌ）をトルエン（７０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）の混合液に加え、次に、順次にリン酸カリウム（１２．００ｇ、５６．５１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（９０５．６３ｍｇ、９８８．９９μｍｏｌ）及び２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（８３９．９３ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１１０℃及び窒素ガスの保護下で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、珪藻土で濾過し、濾液に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５００ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝０／１～１０／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－２－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ： ７．７１（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．６３（ｓ， １Ｈ）， ７．３７（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４（ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５９（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ４．２０（ｑ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５３（ｓ， ９Ｈ）， １．２９ （ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0068】
ステップ２：中間体ＢＢ－２－３の合成
化合物ＢＢ－２－２（０．７５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）及びカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２８４．４２ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８ｍＬ）に加え、アクリルアミド（３１２．６０ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応溶液に加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０～５℃で２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液をゆっくりと飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）に加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－２－３を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ２４５．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．６５ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．３２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０４ （ｄｄ， Ｊ＝２．１， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５７ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ３．９１ （ｔ， Ｊ＝７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８０ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３５ － ２．２０ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）。
化合物ＢＢ－２－２（０．７５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）及びカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２８４．４２ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８ｍＬ）に加え、アクリルアミド（３１２．６０ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応溶液に加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０～５℃で２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液をゆっくりと飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）に加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－２－３を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ２４５．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．６５ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．３２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０４ （ｄｄ， Ｊ＝２．１， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５７ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ３．９１ （ｔ， Ｊ＝７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８０ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３５ － ２．２０ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）。
【0069】
ステップ３：中間体ＢＢ－２の塩酸塩の合成
室温で、中間体ＢＢ－２－３（３００ｍｇ、８７１．１８μｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル溶液（４Ｍ、５ｍＬ）に溶解させ、反応混合物を室温で２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液を減圧濃縮し、溶媒を除去して中間体ＢＢ－２の塩酸塩を得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， １０．３４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ８．０５ （ｓ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５８ （ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５ （ｄｄ， Ｊ＝２．１， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｄｄ， Ｊ＝４．８， １２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８８ － ２．７３ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０ （ｄｑ， Ｊ＝４．４， １２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２０ － ２．１０ （ｍ， １Ｈ）。
室温で、中間体ＢＢ－２－３（３００ｍｇ、８７１．１８μｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル溶液（４Ｍ、５ｍＬ）に溶解させ、反応混合物を室温で２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液を減圧濃縮し、溶媒を除去して中間体ＢＢ－２の塩酸塩を得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， １０．３４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ８．０５ （ｓ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５８ （ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５ （ｄｄ， Ｊ＝２．１， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｄｄ， Ｊ＝４．８， １２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８８ － ２．７３ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０ （ｄｑ， Ｊ＝４．４， １２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２０ － ２．１０ （ｍ， １Ｈ）。
【0070】
参照例３
【化35】
【0071】
合成スキーム：
【化36】
【0072】
ステップ１：中間体ＢＢ－３－２の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、濃硫酸（２２０．８０ｇ、２．２１ｍｏｌ、１２０ｍＬ、純度：９８％）を氷水（４０ｍＬ）に滴下し、次に、化合物ＢＢ－３－１（１０ｇ、４４．８３ｍｍｏｌ）を加え、５～１０℃に冷却させ、４－クロロアセト酢酸エチル（７．３８ｇ、４４．８３ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を室温に昇温させ、１６時間撹拌して反応させ、更に５０℃に昇温させ、１６時間撹拌を続けて反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、氷水（１Ｌ）に注ぎ、大量の固体を析出させ、濾過し、ケーキを収集した。得られた固体にトルエン（４００ｍＬ）を加え、減圧して溶媒を除去し、更にトルエン（４００ｍＬ）を加え、再び減圧して溶媒を除去して中間体ＢＢ－３－２を得た。
室温及び窒素ガスの保護下で、濃硫酸（２２０．８０ｇ、２．２１ｍｏｌ、１２０ｍＬ、純度：９８％）を氷水（４０ｍＬ）に滴下し、次に、化合物ＢＢ－３－１（１０ｇ、４４．８３ｍｍｏｌ）を加え、５～１０℃に冷却させ、４－クロロアセト酢酸エチル（７．３８ｇ、４４．８３ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を室温に昇温させ、１６時間撹拌して反応させ、更に５０℃に昇温させ、１６時間撹拌を続けて反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、氷水（１Ｌ）に注ぎ、大量の固体を析出させ、濾過し、ケーキを収集した。得られた固体にトルエン（４００ｍＬ）を加え、減圧して溶媒を除去し、更にトルエン（４００ｍＬ）を加え、再び減圧して溶媒を除去して中間体ＢＢ－３－２を得た。
【0073】
ステップ２：中間体ＢＢ－３－３の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－３－２（１４．５ｇ、４４．８１ｍｍｏｌ）を水酸化ナトリウム（８．７０ｇ、２１７．５２ｍｍｏｌ）の水（１５０ｍＬ）溶液に溶解させ、反応混合物を８０℃に加熱させ、５時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を加えて希釈し、分離した後有機相を収集し、水相をジクロロメタン（１５０ｍＬ×３）で抽出した。水相を２Ｍの希塩酸でｐＨを４に調節し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧し、溶媒を除去して中間体ＢＢ－３－３を得た。
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－３－２（１４．５ｇ、４４．８１ｍｍｏｌ）を水酸化ナトリウム（８．７０ｇ、２１７．５２ｍｍｏｌ）の水（１５０ｍＬ）溶液に溶解させ、反応混合物を８０℃に加熱させ、５時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を加えて希釈し、分離した後有機相を収集し、水相をジクロロメタン（１５０ｍＬ×３）で抽出した。水相を２Ｍの希塩酸でｐＨを４に調節し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧し、溶媒を除去して中間体ＢＢ－３－３を得た。
【0074】
ステップ３：中間体ＢＢ－３－４の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－３－３（１１．３ｇ、３７．０３ｍｍｏｌ）をエタノール（３００ｍＬ）に溶解させ、次に、濃硫酸（２．０８ｇ、２０．７８ｍｍｏｌ、１．１３ｍＬ、純度：９８％）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、減圧濃縮して溶媒を除去し、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（１５０ｍＬ×１、１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～９７／３、体積比）により分離して中間体ＢＢ－３－４を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３５（ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０９（ｔ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８６（ｓ， ２Ｈ）， ７．７３（ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１８－４．０９（ｍ， ４Ｈ）， １．１８（ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、中間体ＢＢ－３－３（１１．３ｇ、３７．０３ｍｍｏｌ）をエタノール（３００ｍＬ）に溶解させ、次に、濃硫酸（２．０８ｇ、２０．７８ｍｍｏｌ、１．１３ｍＬ、純度：９８％）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、減圧濃縮して溶媒を除去し、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（１５０ｍＬ×１、１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～９７／３、体積比）により分離して中間体ＢＢ－３－４を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３５（ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０９（ｔ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８６（ｓ， ２Ｈ）， ７．７３（ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１８－４．０９（ｍ， ４Ｈ）， １．１８（ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0075】
ステップ４：中間体ＢＢ－３－５の合成
室温で、撹拌条件で、中間体ＢＢ－３－４（２．００ｇ、６．００ｍｍｏｌ）をトルエン（６０ｍＬ）及び水（６ｍＬ）に溶解させ、次に、順次にカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．５２ｇ、３０．０１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（３８４．７８ｍｇ、４２０．２０μｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（３５６．８７ｍｇ、８４０．４０μｍｏｌ）、リン酸カリウム（５．１０ｇ、２０．０１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物の反応系を窒素ガスで３回置換し、ゆっくりと１０５℃に昇温させ、窒素ガスの保護条件下で、１２時間反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、得られた反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～５／１、体積比）により分離・精製して中間体ＢＢ－３－５を得た。
室温で、撹拌条件で、中間体ＢＢ－３－４（２．００ｇ、６．００ｍｍｏｌ）をトルエン（６０ｍＬ）及び水（６ｍＬ）に溶解させ、次に、順次にカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．５２ｇ、３０．０１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（３８４．７８ｍｇ、４２０．２０μｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（３５６．８７ｍｇ、８４０．４０μｍｏｌ）、リン酸カリウム（５．１０ｇ、２０．０１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物の反応系を窒素ガスで３回置換し、ゆっくりと１０５℃に昇温させ、窒素ガスの保護条件下で、１２時間反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、得られた反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～５／１、体積比）により分離・精製して中間体ＢＢ－３－５を得た。
【0076】
ステップ５：中間体ＢＢ－３－６の合成
０℃及び窒素ガスの保護下で、ＢＢ－３－５（４．００ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６０ｍＬ）溶媒に溶解させ、その中にそれぞれカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１．２２ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１．６７ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で３時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離・精製して中間体ＢＢ－３－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ３３８．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９５（ｓ， １Ｈ）， ９．５５（ｓ， １Ｈ）， ８．２５（ｓ， １Ｈ）， ７．９６（ｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７２（ｓ， ２Ｈ）， ２．８９（ｓ， ３Ｈ）， ２．７４（ｓ， ２Ｈ）， １．５２（ｓ， ９Ｈ）。
０℃及び窒素ガスの保護下で、ＢＢ－３－５（４．００ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６０ｍＬ）溶媒に溶解させ、その中にそれぞれカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１．２２ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１．６７ｇ、１０．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で３時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離・精製して中間体ＢＢ－３－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ３３８．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９５（ｓ， １Ｈ）， ９．５５（ｓ， １Ｈ）， ８．２５（ｓ， １Ｈ）， ７．９６（ｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７２（ｓ， ２Ｈ）， ２．８９（ｓ， ３Ｈ）， ２．７４（ｓ， ２Ｈ）， １．５２（ｓ， ９Ｈ）。
【0077】
ステップ６：中間体ＢＢ－３の塩酸塩の合成
０℃で、ＢＢ－３－６（１．０ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、その中に塩化水素・酢酸エチル（２．５４ｍＬ）をゆっくりと加え、窒素ガスの雰囲気で、反応混合液を４時間撹拌した。反応完了後、減圧濃縮してＢＢ－３の塩酸塩を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：２９４．３１［Ｍ＋Ｈ］＋．
０℃で、ＢＢ－３－６（１．０ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、その中に塩化水素・酢酸エチル（２．５４ｍＬ）をゆっくりと加え、窒素ガスの雰囲気で、反応混合液を４時間撹拌した。反応完了後、減圧濃縮してＢＢ－３の塩酸塩を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：２９４．３１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0078】
参照例４
【化37】
【0079】
合成スキーム：
【化38】
【0080】
ステップ１：中間体ＢＢ－４－２の合成
０～５℃及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－１（１０ｇ、７８．６７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２０ｍＬ）及びアセトン（６０ｍＬ）に溶解させ、順次にシアノトリメチルシラン（１２．４５ｇ、１２５．５０ｍｍｏｌ、１５．７０ｍＬ）、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（８２０．００ｍｇ、３．６９ｍｍｏｌ、６６６．６７μＬ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、反応完了後、０～５℃に冷却させ、水（２００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～５／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－２を得た。Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：６．８３（ｔ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７４（ｄｄ， Ｊ＝２．７， １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６６ － ６．５９（ｍ， １Ｈ）， １．６５（ｓ， ６Ｈ）。
０～５℃及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－１（１０ｇ、７８．６７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２０ｍＬ）及びアセトン（６０ｍＬ）に溶解させ、順次にシアノトリメチルシラン（１２．４５ｇ、１２５．５０ｍｍｏｌ、１５．７０ｍＬ）、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（８２０．００ｍｇ、３．６９ｍｍｏｌ、６６６．６７μＬ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、反応完了後、０～５℃に冷却させ、水（２００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～５／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－２を得た。Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：６．８３（ｔ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７４（ｄｄ， Ｊ＝２．７， １２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６６ － ６．５９（ｍ， １Ｈ）， １．６５（ｓ， ６Ｈ）。
【0081】
ステップ２：化学物ＢＢ－４－３の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－２（８ｇ、４５．４０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（１５０ｍＬ）に溶解させ、４－イソチオシアナト－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトロル（１０．３６ｇ、４５．４０ｍｍｏｌ）を反応溶液にバッチで加え、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌し、メタノール（６０ｍＬ）、希塩酸（２Ｍ、６０ｍＬ）を加え、反応混合物を７０℃で３時間撹拌し、反応完了後、室温に冷却させ、水（５００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：８．０３ － ７．９４（ｍ， １Ｈ）， ８．０２ － ７．９４（ｍ， １Ｈ）， ８．０５ － ７．９２（ｍ， １Ｈ）， ８．０４ － ７．９２（ｍ， １Ｈ）， ８．１５ － ７．８９（ｍ， １Ｈ）， ７．８６（ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ － ７．７９（ｍ， １Ｈ）， ７．１９ － ７．１０（ｍ， ２Ｈ）， ６．９９ － ６．９０（ｍ， ２Ｈ）， ６．０６（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １．５８（ｓ， ６Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－２（８ｇ、４５．４０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（１５０ｍＬ）に溶解させ、４－イソチオシアナト－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトロル（１０．３６ｇ、４５．４０ｍｍｏｌ）を反応溶液にバッチで加え、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌し、メタノール（６０ｍＬ）、希塩酸（２Ｍ、６０ｍＬ）を加え、反応混合物を７０℃で３時間撹拌し、反応完了後、室温に冷却させ、水（５００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ：８．０３ － ７．９４（ｍ， １Ｈ）， ８．０２ － ７．９４（ｍ， １Ｈ）， ８．０５ － ７．９２（ｍ， １Ｈ）， ８．０４ － ７．９２（ｍ， １Ｈ）， ８．１５ － ７．８９（ｍ， １Ｈ）， ７．８６（ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ － ７．７９（ｍ， １Ｈ）， ７．１９ － ７．１０（ｍ， ２Ｈ）， ６．９９ － ６．９０（ｍ， ２Ｈ）， ６．０６（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １．５８（ｓ， ６Ｈ）。
【0082】
ステップ３：化学物ＢＢ－４－４の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－３（２ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解させ、順次に４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．６６ｇ、５．６７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．３１ｇ、９．４５ｍｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（７８４．１７ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ６３６．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－３（２ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解させ、順次に４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．６６ｇ、５．６７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．３１ｇ、９．４５ｍｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（７８４．１７ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ６３６．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0083】
ステップ４：化合物ＢＢ－４－５の塩酸塩の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－４（２．０ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、３．９３ｍＬ）を反応混合物にゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌し、反応完了後、反応混合物を減圧濃縮して化合物ＢＢ－４－５の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ： ８．２３ － ８．１３（ｍ， ２Ｈ）， ８．００（ｄｄ， Ｊ＝１．８， ８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４０（ｔ， Ｊ＝８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３２（ｄｄ， Ｊ＝２．４， １１．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２４（ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６９ － ４．６０（ｍ， ２Ｈ）， ３．８８ － ３．７９（ｍ， ６Ｈ）， ３．７５ － ３．６５（ｍ， ４Ｈ）， １．５８（ｓ， ６Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－４（２．０ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、３．９３ｍＬ）を反応混合物にゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌し、反応完了後、反応混合物を減圧濃縮して化合物ＢＢ－４－５の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）δ： ８．２３ － ８．１３（ｍ， ２Ｈ）， ８．００（ｄｄ， Ｊ＝１．８， ８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４０（ｔ， Ｊ＝８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３２（ｄｄ， Ｊ＝２．４， １１．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２４（ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６９ － ４．６０（ｍ， ２Ｈ）， ３．８８ － ３．７９（ｍ， ６Ｈ）， ３．７５ － ３．６５（ｍ， ４Ｈ）， １．５８（ｓ， ６Ｈ）。
【0084】
ステップ５：化学物ＢＢ－４－６の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－５（１．５ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、塩酸塩）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解させ、順次にブロモ酢酸エチル（８７５．８５ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ、５８０．０４μＬ）、炭酸カリウム（７２４．８６ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、５時間撹拌して反応させ、反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ６２２．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－５（１．５ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、塩酸塩）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解させ、順次にブロモ酢酸エチル（８７５．８５ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ、５８０．０４μＬ）、炭酸カリウム（７２４．８６ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃に加熱させ、５時間撹拌して反応させ、反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－４－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ６２２．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0085】
ステップ６：化学物ＢＢ－４の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－６（１．５ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）をエタノール（５０ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１Ｍ、７．２５ｍＬ）を反応混合物にゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応混合物を２Ｍの塩酸でｐＨ＝２～３に調節し、反応混合物を減圧濃縮して化合物ＢＢ－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５９４．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４－６（１．５ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）をエタノール（５０ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１Ｍ、７．２５ｍＬ）を反応混合物にゆっくりと滴下し、反応混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応混合物を２Ｍの塩酸でｐＨ＝２～３に調節し、反応混合物を減圧濃縮して化合物ＢＢ－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５９４．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0086】
参照例５
【化39】
【0087】
合成スキーム：
【化40】
【0088】
化合物ＢＢ－１－１（３ｇ、１０．６０ｍｍｏｌ）及びアリルアルコール（１．３４ｇ、２３．０７ｍｍｏｌ、１．５７ｍＬ）をジオキサン（３０ｍＬ）に加え、Ｎ－シクロヘキシル－Ｎ－メチル－シクロヘキシルアミン（２．４８ｇ、１２．７２ｍｍｏｌ、２．７０ｍＬ）、トリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン（４．２９ｇ、２．１２ｍｍｏｌ、４．９７ｍＬ、含有量：１０％）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（９７０．３２ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加えた。混合物を窒素ガスで３回置換した後、３０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を水（５０ｍＬ）ゆっくりと加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で３回抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝０／１～３／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－５を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）δ： ９．８４（ｓ， １Ｈ）， ７．６０（ｓ， １Ｈ）， ７．５０（ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３３（ｓ， １Ｈ）， ７．１２（ｄｄ， Ｊ＝１．０， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２４ － ４．１６（ｍ， ２Ｈ）， ３．６９（ｄ， Ｊ＝０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１４ － ３．０３（ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ － ２．７８（ｍ， ２Ｈ）， １．２９（ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0089】
参照例６
合成スキーム：
【化41】
合成スキーム：
【化42】
【0090】
ステップ１：中間体ＢＢ－６－２の合成
２５℃で化合物１－アミノシクロプロパン－１－カルボン酸エチル塩酸塩（１．０ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物Ｎ－ベンジル－２－クロロ－Ｎ－（２－クロロエチル）エチルアミン塩酸塩（１．７８ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７．８８ｇ、６０．９８ｍｍｏｌ、１０．６２ｍＬ）を加えた。窒素ガスの保護下で、８０℃に加熱させ、窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、その後直接にスピン乾燥させ、粗生成物に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、半飽和食塩水（１０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相に無水硫酸ナトリウムを加え、乾燥させた後濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－６－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．４０－７．２７ （ｍ， ５ Ｈ）， ４．１８ （ｑ， Ｊ＝７．２０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．０２ （ ｓ， ４Ｈ）， ２．４０ （ ｓ， ４Ｈ）， １．２８－１．３４ （ｍ， ５Ｈ）， ０．９４ （ｑ， Ｊ＝３．６ Ｈｚ， ２Ｈ）。
２５℃で化合物１－アミノシクロプロパン－１－カルボン酸エチル塩酸塩（１．０ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物Ｎ－ベンジル－２－クロロ－Ｎ－（２－クロロエチル）エチルアミン塩酸塩（１．７８ｇ、６．６４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７．８８ｇ、６０．９８ｍｍｏｌ、１０．６２ｍＬ）を加えた。窒素ガスの保護下で、８０℃に加熱させ、窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、その後直接にスピン乾燥させ、粗生成物に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、半飽和食塩水（１０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相に無水硫酸ナトリウムを加え、乾燥させた後濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１～１／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－６－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．４０－７．２７ （ｍ， ５ Ｈ）， ４．１８ （ｑ， Ｊ＝７．２０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．０２ （ ｓ， ４Ｈ）， ２．４０ （ ｓ， ４Ｈ）， １．２８－１．３４ （ｍ， ５Ｈ）， ０．９４ （ｑ， Ｊ＝３．６ Ｈｚ， ２Ｈ）。
【0091】
ステップ２：中間体ＢＢ－６－３の合成
２５℃で中間体ＢＢ－６－２（０．３ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物水酸化カリウム（５８３．６６ｍｇ、１０．４０ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃に加熱させ、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、スピン乾燥させた。次に、水（４０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。水相に４Ｍの希塩酸を加えてｐＨを３に調節し、次に、酢酸エチル（４０ｍＬ）を加えて抽出し、生成物は水相にあり、水相を収集して凍結乾燥させた。化合物ＢＢ－６－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．７０ （ ｓ， １Ｈ）， ７．５９ （ ｓ， ２Ｈ）， ７．４５ （ｓ， ３Ｈ）， ４．２６ （ ｓ， ２Ｈ），３．４６ （ｔ， Ｊ＝１２．４ Ｈｚ， ２Ｈ），３．２１ （ ｄ， Ｊ＝１１．６ Ｈｚ， ２Ｈ），２．９４ （ ｄ， Ｊ＝１２．８ Ｈｚ， ２Ｈ），２．８３ （ ｓ， ２Ｈ），１．１６ （ ｓ， ２Ｈ），０．９４ （ ｓ， ２Ｈ）。
２５℃で中間体ＢＢ－６－２（０．３ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物水酸化カリウム（５８３．６６ｍｇ、１０．４０ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃に加熱させ、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、スピン乾燥させた。次に、水（４０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。水相に４Ｍの希塩酸を加えてｐＨを３に調節し、次に、酢酸エチル（４０ｍＬ）を加えて抽出し、生成物は水相にあり、水相を収集して凍結乾燥させた。化合物ＢＢ－６－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．７０ （ ｓ， １Ｈ）， ７．５９ （ ｓ， ２Ｈ）， ７．４５ （ｓ， ３Ｈ）， ４．２６ （ ｓ， ２Ｈ），３．４６ （ｔ， Ｊ＝１２．４ Ｈｚ， ２Ｈ），３．２１ （ ｄ， Ｊ＝１１．６ Ｈｚ， ２Ｈ），２．９４ （ ｄ， Ｊ＝１２．８ Ｈｚ， ２Ｈ），２．８３ （ ｓ， ２Ｈ），１．１６ （ ｓ， ２Ｈ），０．９４ （ ｓ， ２Ｈ）。
【0092】
ステップ３：化学物ＢＢ－６－４の合成
２５℃で、中間体ＢＢ－６－３をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物ＢＢ－２（９３８．２１ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２．１９ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５５ｇ、１５．３７ｍｍｏｌ、２．１４ｍＬ）を加えた。窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、半飽和食塩水（５０ｍＬ）を加えて洗浄し、有機相に無水硫酸ナトリウムを加え、乾燥させた後濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１～０／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－６－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：： ４８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９１ （ｓ， １Ｈ）， ９．９２ （ｓ， １Ｈ）， ７．９５ （ｓ， １Ｈ）， ７．８８ （ｓ， １Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝８．８Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ （ｄｄ， Ｊ＝８．８， １．６Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５－７．２８ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２７－７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｄｄ， Ｊ＝１２．０， ４．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５０ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４０－３．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８９ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８３－２．７４（ｍ， １Ｈ）， ２．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ２．６１－２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．５６－２．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３４－２．２０ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４－２．１０ （ｍ， １Ｈ），１．０８ － １．０６（ ｍ， ４ Ｈ）。
２５℃で、中間体ＢＢ－６－３をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、順次に化合物ＢＢ－２（９３８．２１ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２．１９ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５５ｇ、１５．３７ｍｍｏｌ、２．１４ｍＬ）を加えた。窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、半飽和食塩水（５０ｍＬ）を加えて洗浄し、有機相に無水硫酸ナトリウムを加え、乾燥させた後濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去し、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１～０／１、体積比）により分離して中間体ＢＢ－６－４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：： ４８７．２［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９１ （ｓ， １Ｈ）， ９．９２ （ｓ， １Ｈ）， ７．９５ （ｓ， １Ｈ）， ７．８８ （ｓ， １Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝８．８Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ （ｄｄ， Ｊ＝８．８， １．６Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５－７．２８ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２７－７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｄｄ， Ｊ＝１２．０， ４．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５０ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４０－３．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８９ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８３－２．７４（ｍ， １Ｈ）， ２．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ２．６１－２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．５６－２．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３４－２．２０ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４－２．１０ （ｍ， １Ｈ），１．０８ － １．０６（ ｍ， ４ Ｈ）。
【0093】
ステップ４：化学物ＢＢ－６の合成
２５℃で化合物ＢＢ－６－４（５０ｍｇ、９７．９１μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解させ、アルゴンガスの保護下で、湿式パラジウム炭素（５ｍｇ、１０．２８μＬ）を加え、水素ガスで３回置換し、圧力を４０Ｐｓｉに維持させ、反応溶液を３０℃に加熱させ、水素ガスの雰囲気で、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、濾液を減圧濃縮し、溶媒を除去して化合物ＢＢ－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：３９７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
２５℃で化合物ＢＢ－６－４（５０ｍｇ、９７．９１μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解させ、アルゴンガスの保護下で、湿式パラジウム炭素（５ｍｇ、１０．２８μＬ）を加え、水素ガスで３回置換し、圧力を４０Ｐｓｉに維持させ、反応溶液を３０℃に加熱させ、水素ガスの雰囲気で、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、濾液を減圧濃縮し、溶媒を除去して化合物ＢＢ－６を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：３９７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0094】
参照例７
合成スキーム：
【化43】
合成スキーム：
【化44】
【0095】
ステップ１：化学物ＢＢ－７－２の合成
２５℃で化合物トリフェニルホスファイト（４８．４２ｇ、１５６．０６ｍｍｏｌ、４１．０４ｍＬ）をジクロロメタン（２５０ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの雰囲気で、－７０℃に冷却させ、液体臭素（２７．２１ｇ、１７０．２５ｍｍｏｌ、８．７８ｍＬ）を滴下し、滴下完了後順次にトリエチルアミン（１８．６６ｇ、１８４．４４ｍｍｏｌ、２５．６７ｍＬ）及び化合物ＢＢ－７－１（２５．００ｇ、１４１．８８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液を滴下し、滴下完了後ゆっくりと２５℃に昇温させ、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液をゆっくりと飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（４００ｍＬ）に注ぎ、１０分間撹拌し、ジクロロメタン（２００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：純粋な石油エーテル）で精製した。化合物ＢＢ－７－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．４８ （ｄ， Ｊ＝８．７８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７５ （ｄｄ， Ｊ＝８．５３， ２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ＝２．７６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３０ （ｔ， Ｊ＝４．７７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．８２ （ｔ， Ｊ＝ ８．０３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３５ （ｔｄ， Ｊ＝８．０３， ５．０２ Ｈｚ， ２Ｈ）。
２５℃で化合物トリフェニルホスファイト（４８．４２ｇ、１５６．０６ｍｍｏｌ、４１．０４ｍＬ）をジクロロメタン（２５０ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの雰囲気で、－７０℃に冷却させ、液体臭素（２７．２１ｇ、１７０．２５ｍｍｏｌ、８．７８ｍＬ）を滴下し、滴下完了後順次にトリエチルアミン（１８．６６ｇ、１８４．４４ｍｍｏｌ、２５．６７ｍＬ）及び化合物ＢＢ－７－１（２５．００ｇ、１４１．８８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）溶液を滴下し、滴下完了後ゆっくりと２５℃に昇温させ、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液をゆっくりと飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（４００ｍＬ）に注ぎ、１０分間撹拌し、ジクロロメタン（２００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：純粋な石油エーテル）で精製した。化合物ＢＢ－７－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．４８ （ｄ， Ｊ＝８．７８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７５ （ｄｄ， Ｊ＝８．５３， ２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６８ （ｄ， Ｊ＝２．７６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３０ （ｔ， Ｊ＝４．７７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．８２ （ｔ， Ｊ＝ ８．０３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３５ （ｔｄ， Ｊ＝８．０３， ５．０２ Ｈｚ， ２Ｈ）。
【0096】
ステップ２：化学物ＢＢ－７－３の合成
２５℃で化合物ＢＢ－７－２（１０．００ｇ、４１．８２ｍｍｏｌ）をトルエン（１００ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、０℃に冷却させ、ジクロロジシアノベンゾキノン（１０．４４ｇ、４６．００ｍｍｏｌ）をバッチで加え，添加完了後２５℃で１５時間反応させた。反応溶液に飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を滴下して反応系をクエンチングさせ、１０分間撹拌した後、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。得られた粗生成物を石油エーテル（５０ｍＬ）で１０分間スラリー化させ、濾過し、ケーキを石油エーテル（２５ｍＬ×２）で濯ぎ、濾液をスピン乾燥させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：純粋な石油エーテル）で精製した。化合物ＢＢ－７－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１３ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６７ （ｄ， Ｊ＝８．２８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６１ （ｄ， Ｊ＝７．２８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２１-７．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１１ （ｄ， Ｊ＝２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－７－２（１０．００ｇ、４１．８２ｍｍｏｌ）をトルエン（１００ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、０℃に冷却させ、ジクロロジシアノベンゾキノン（１０．４４ｇ、４６．００ｍｍｏｌ）をバッチで加え，添加完了後２５℃で１５時間反応させた。反応溶液に飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を滴下して反応系をクエンチングさせ、１０分間撹拌した後、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチルで（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。得られた粗生成物を石油エーテル（５０ｍＬ）で１０分間スラリー化させ、濾過し、ケーキを石油エーテル（２５ｍＬ×２）で濯ぎ、濾液をスピン乾燥させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：純粋な石油エーテル）で精製した。化合物ＢＢ－７－３を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１３ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６７ （ｄ， Ｊ＝８．２８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６１ （ｄ， Ｊ＝７．２８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２１-７．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１１ （ｄ， Ｊ＝２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ３Ｈ）。
【0097】
ステップ３：化学物ＢＢ－７－４の合成
２５℃で化合物ＢＢ－７－３（４．９０ｇ、２０．６７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（６．２１ｇ、２４．８０ｍｍｏｌ、２．３９ｍＬ）をゆっくりと滴下し、滴下完了後２５℃で３時間撹拌した。反応溶液を氷水（２５０ｍＬ）に注いで反応系をクエンチングさせ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－４を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１９ （ｄ， Ｊ＝９．０３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６３-７．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２６-７．３２ （ｍ， １Ｈ）， ７．２３ （ｄｄ， Ｊ＝９．０３， ２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ＝２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－７－３（４．９０ｇ、２０．６７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解させ、０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（６．２１ｇ、２４．８０ｍｍｏｌ、２．３９ｍＬ）をゆっくりと滴下し、滴下完了後２５℃で３時間撹拌した。反応溶液を氷水（２５０ｍＬ）に注いで反応系をクエンチングさせ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－４を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１９ （ｄ， Ｊ＝９．０３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６３-７．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２６-７．３２ （ｍ， １Ｈ）， ７．２３ （ｄｄ， Ｊ＝９．０３， ２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ＝２．５１ Ｈｚ， １Ｈ）。
【0098】
ステップ４：化学物ＢＢ－７－５の合成
２０℃で化合物ＢＢ－７－４（２．５０ｇ、１１．２１ｍｍｏｌ）をメタンスルホン酸（２５ｍＬ）に溶解させ、４－クロロアセト酢酸エチル（２．７７ｇ、１６．８１ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）を滴下し、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を氷水（２００ｍＬ）に注いでクエンチングさせ、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキを水（３０ｍＬ×３）で濯ぎ、次にスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－５を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．５６ （ｄ， Ｊ＝８．７８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．４６ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．７１ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６３ （ｄｄ， Ｊ＝８．６６， ７．６５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９２ （ｓ， １Ｈ）， ５．３９ （ｓ， ２Ｈ）。
２０℃で化合物ＢＢ－７－４（２．５０ｇ、１１．２１ｍｍｏｌ）をメタンスルホン酸（２５ｍＬ）に溶解させ、４－クロロアセト酢酸エチル（２．７７ｇ、１６．８１ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）を滴下し、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を氷水（２００ｍＬ）に注いでクエンチングさせ、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキを水（３０ｍＬ×３）で濯ぎ、次にスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－５を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．５６ （ｄ， Ｊ＝８．７８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．４６ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．７１ （ｄ， Ｊ＝９．２９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６３ （ｄｄ， Ｊ＝８．６６， ７．６５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９２ （ｓ， １Ｈ）， ５．３９ （ｓ， ２Ｈ）。
【0099】
ステップ５：化学物ＢＢ－７－６の合成
２５℃で化合物ＢＢ－７－５（０．１０ｇ、３０９．０５μｍｏｌ）を水酸化ナトリウム（２Ｍ、１．０３ｍＬ）の水溶液に加え、８０℃で３時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、水（１０ｍＬ）で希釈し、希塩酸（２Ｍ、水溶液）でｐＨ＝３に調節し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液をスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １２．５９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．２４ （ｄ， Ｊ＝８．３８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｄ， Ｊ＝９．２６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９０ （ｄ， Ｊ＝７．５０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５４ （ｄｄ， Ｊ＝２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｓ， １Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １Ｈ）， ４．０８ （ｓ， ２Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－７－５（０．１０ｇ、３０９．０５μｍｏｌ）を水酸化ナトリウム（２Ｍ、１．０３ｍＬ）の水溶液に加え、８０℃で３時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、水（１０ｍＬ）で希釈し、希塩酸（２Ｍ、水溶液）でｐＨ＝３に調節し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液をスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １２．５９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．２４ （ｄ， Ｊ＝８．３８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｄ， Ｊ＝９．２６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９０ （ｄ， Ｊ＝７．５０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５４ （ｄｄ， Ｊ＝２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｓ， １Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １Ｈ）， ４．０８ （ｓ， ２Ｈ）。
【0100】
ステップ６：化学物ＢＢ－７の合成
２５℃で化合物ＢＢ－７－６（１．４０ｇ、４．５９ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１４ｍＬ）に溶解させ、硫酸（４１３．２８ｍｇ、４．１３ｍｍｏｌ、２２４．６１μＬ、９８％の濃度）をゆっくりと滴下した後、８０℃に昇温させ、１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して溶媒を除去し、酢酸エチル（６０ｍＬ）を加えて希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（６０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。石油エーテル（５ｍＬ）を加え、室温でスラリー化させ、１０分間撹拌した後濾過し、ケーキを石油エーテル（５ｍＬ×２）で濯ぎ、ケーキを収集し、スピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．２２ （ｔ， Ｊ＝８．４１Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７８-７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７５ （ｄ， Ｊ＝９．２９Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ （ｔ， Ｊ＝７．９１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．０３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０６ （ｓ， ２Ｈ）， １．２６ （ｔ， Ｊ＝７．１５Ｈｚ， ３Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－７－６（１．４０ｇ、４．５９ｍｍｏｌ）を無水エタノール（１４ｍＬ）に溶解させ、硫酸（４１３．２８ｍｇ、４．１３ｍｍｏｌ、２２４．６１μＬ、９８％の濃度）をゆっくりと滴下した後、８０℃に昇温させ、１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して溶媒を除去し、酢酸エチル（６０ｍＬ）を加えて希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（６０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。石油エーテル（５ｍＬ）を加え、室温でスラリー化させ、１０分間撹拌した後濾過し、ケーキを石油エーテル（５ｍＬ×２）で濯ぎ、ケーキを収集し、スピン乾燥させた。化合物ＢＢ－７を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．２２ （ｔ， Ｊ＝８．４１Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７８-７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７５ （ｄ， Ｊ＝９．２９Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ （ｔ， Ｊ＝７．９１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．０３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０６ （ｓ， ２Ｈ）， １．２６ （ｔ， Ｊ＝７．１５Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0101】
参照例８
合成スキーム：
【化45】
合成スキーム：
【化46】
【0102】
ステップ１：化合物８－１の合成
化合物ＢＢ－７（５ｇ、１５．０１ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．６４ｇ、２２．５１ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１２．７４ｇ、６０．０３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（９６１．９６ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）及び２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２，４，６－トリイソプロピルビフェニル（８９２．１６ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスで３回置換し、１００℃に昇温させて１５時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で濯ぎ、濾液を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（５０ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキをメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１０ｍＬ×２）で濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＢＢ－８－１を得た。
化合物ＢＢ－７（５ｇ、１５．０１ｍｍｏｌ）をトルエン（５０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．６４ｇ、２２．５１ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１２．７４ｇ、６０．０３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（９６１．９６ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）及び２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２，４，６－トリイソプロピルビフェニル（８９２．１６ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスで３回置換し、１００℃に昇温させて１５時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で濯ぎ、濾液を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（５０ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキをメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１０ｍＬ×２）で濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＢＢ－８－１を得た。
【0103】
ステップ２：化学物ＢＢ－８－２の合成
化合物ＢＢ－８－１（４．２ｇ、１１．３７ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（８８８．９３ｍｇ、１２．５１ｍｍｏｌ、８６３．０４μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、０℃に冷却させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２．５５ｇ、２２．７４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）溶液を滴下し、２０℃に昇温させ２時間撹拌した。反応溶液を０．２Ｎの希塩酸（２００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキをジクロロメタン（１０ｍＬ）で濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＢＢ－８－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９４ （ｓ， １Ｈ）， ９．２８ （ｓ， １Ｈ）， ８．０４－７．９６ （ｍ， ３Ｈ）， ７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５５－７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６７ （ｄｄ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９３－２．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６６－２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．４５－２．３６ （ｍ， １Ｈ）， ２．３３－２．２６ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｓ， ９Ｈ）。
化合物ＢＢ－８－１（４．２ｇ、１１．３７ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（８８８．９３ｍｇ、１２．５１ｍｍｏｌ、８６３．０４μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、０℃に冷却させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２．５５ｇ、２２．７４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）溶液を滴下し、２０℃に昇温させ２時間撹拌した。反応溶液を０．２Ｎの希塩酸（２００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、濾過し、ケーキをジクロロメタン（１０ｍＬ）で濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＢＢ－８－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９４ （ｓ， １Ｈ）， ９．２８ （ｓ， １Ｈ）， ８．０４－７．９６ （ｍ， ３Ｈ）， ７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５５－７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６７ （ｄｄ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９３－２．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６６－２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．４５－２．３６ （ｍ， １Ｈ）， ２．３３－２．２６ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｓ， ９Ｈ）。
【0104】
ステップ３：化合物ＢＢ－８の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－８－２（１ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、５０．００ｍＬ）を滴下し、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して化合物ＢＢ－８の塩酸塩を得た。
化合物ＢＢ－８－２（１ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、５０．００ｍＬ）を滴下し、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して化合物ＢＢ－８の塩酸塩を得た。
【0105】
参照例９
合成スキーム：
【化47】
合成スキーム：
【化48】
【0106】
ステップ１：化学物ＢＢ－９－１の合成
化合物ＢＢ－４－３（１３ｇ、３０．７１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．４９ｇ、６１．４１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）に溶解させ、１，２－ジブロモエタン（２８．８４ｇ、１５３．５３ｍｍｏｌ、１１．５８ｍＬ）を加え、８０℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（１Ｌ）を加え、酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝４／１）により分離して化合物ＢＢ－９－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００－７．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８５－７．８３ （ｍ， １Ｈ）， ７．１４－７．０４ （ｍ， ３Ｈ）， ４．４４ （ｔ， Ｊ＝６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７１ （ｔ， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６０ （ｓ， ６Ｈ）。
化合物ＢＢ－４－３（１３ｇ、３０．７１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．４９ｇ、６１．４１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）に溶解させ、１，２－ジブロモエタン（２８．８４ｇ、１５３．５３ｍｍｏｌ、１１．５８ｍＬ）を加え、８０℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（１Ｌ）を加え、酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝４／１）により分離して化合物ＢＢ－９－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００－７．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８５－７．８３ （ｍ， １Ｈ）， ７．１４－７．０４ （ｍ， ３Ｈ）， ４．４４ （ｔ， Ｊ＝６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７１ （ｔ， Ｊ＝６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６０ （ｓ， ６Ｈ）。
【0107】
ステップ２：化学物ＢＢ－９の合成
化合物ＢＢ－９－１（３ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）及びメチルアミン塩酸塩（１．９１ｇ、２８．２８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に入れ、炭酸カリウム（１１．７３ｇ、８４．８５ｍｍｏｌ）を加え、５０℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（７０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（７０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離して化合物ＢＢ－９を得た。
化合物ＢＢ－９－１（３ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）及びメチルアミン塩酸塩（１．９１ｇ、２８．２８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に入れ、炭酸カリウム（１１．７３ｇ、８４．８５ｍｍｏｌ）を加え、５０℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（７０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（７０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離して化合物ＢＢ－９を得た。
【0108】
参照例１０：フラグメントＢＢ－１０：
合成スキーム：
【化49】
合成スキーム：
【化50】
【0109】
ステップ１：化学物ＢＢ－１０－２の合成
０℃で及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１０－１（５ｇ、１８．０３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）及びアセトン（２５ｍＬ）に溶解させ、順次にシアノトリメチルシラン（２．６８ｇ、２７．０４ｍｍｏｌ、３．３８ｍＬ）、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（４００．６７ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、３２５．７４μＬ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～４／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１０－２を得た。
０℃で及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１０－１（５ｇ、１８．０３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）及びアセトン（２５ｍＬ）に溶解させ、順次にシアノトリメチルシラン（２．６８ｇ、２７．０４ｍｍｏｌ、３．３８ｍＬ）、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（４００．６７ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、３２５．７４μＬ）をゆっくりと滴下し、反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～４／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１０－２を得た。
【0110】
ステップ２：化学物ＢＢ－１０の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１０－２（１０ｇ、２９．０３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（１００ｍＬ）、４－イソチオシアナト－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトロル（６．６２ｇ、２９．０３ｍｍｏｌ）に溶解させ、反応溶液にバッチで加え、反応混合物を２０℃で３時間撹拌し、メタノール（１００ｍＬ）、希塩酸（２Ｍ、５６．３２ｍＬ）を加え、反応混合物を７０℃で２時間撹拌し、反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝２０／１～１０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１０を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．９９ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２２ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０４ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６４-３．５７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４５-３．３８ （ｍ， ４ Ｈ）， １．５８ （ｓ， ６Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１０－２（１０ｇ、２９．０３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（１００ｍＬ）、４－イソチオシアナト－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトロル（６．６２ｇ、２９．０３ｍｍｏｌ）に溶解させ、反応溶液にバッチで加え、反応混合物を２０℃で３時間撹拌し、メタノール（１００ｍＬ）、希塩酸（２Ｍ、５６．３２ｍＬ）を加え、反応混合物を７０℃で２時間撹拌し、反応完了後、室温に冷却させ、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝２０／１～１０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１０を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．９９ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２２ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０４ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６４-３．５７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４５-３．３８ （ｍ， ４ Ｈ）， １．５８ （ｓ， ６Ｈ）。
【0111】
参照例１１：フラグメントＢＢ－１１：
合成スキーム：
【化51】
合成スキーム：
【化52】
【0112】
ステップ１：化学物ＢＢ－１１－２の合成
０℃及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１１－１（０．８７ｇ、５．５７ｍｍｏｌ）及び化合物ｔｅｒｔ－ブチル［（１Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（１．００ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させ、次に、水素ナトリウム（２７８．６８ｍｇ、６．９７ｍｍｏｌ、６０％）を加え、０℃で２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（５０ｍＬ×３）及び飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～６／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６－７．４７ （ｍ， １Ｈ）， ６．９７－６．９２ （ｍ， １Ｈ）， ６．８４－６．７２ （ｍ， １Ｈ）， ４．２９－４．１７ （ｍ， １Ｈ）， ４．１３－４．０８ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４－２．０３ （ｍ， ４Ｈ）， １．４７－１．３８ （ｍ， ９Ｈ）， １．２６－１．２０ （ｍ， ４Ｈ）。
０℃及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１１－１（０．８７ｇ、５．５７ｍｍｏｌ）及び化合物ｔｅｒｔ－ブチル［（１Ｒ，４Ｒ）－４－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバメート（１．００ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させ、次に、水素ナトリウム（２７８．６８ｍｇ、６．９７ｍｍｏｌ、６０％）を加え、０℃で２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（５０ｍＬ×３）及び飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～６／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６－７．４７ （ｍ， １Ｈ）， ６．９７－６．９２ （ｍ， １Ｈ）， ６．８４－６．７２ （ｍ， １Ｈ）， ４．２９－４．１７ （ｍ， １Ｈ）， ４．１３－４．０８ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４－２．０３ （ｍ， ４Ｈ）， １．４７－１．３８ （ｍ， ９Ｈ）， １．２６－１．２０ （ｍ， ４Ｈ）。
【0113】
ステップ２：化合物ＢＢ－１１－３の塩酸塩の合成
室温で、化合物ＢＢ－１１－２（２．７０ｇ、７．７０ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解させ、次に、４Ｍの塩化水素メタノール溶液（２５ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、減圧濃縮して溶媒を除去して化合物ＢＢ－１１－３の塩酸塩を得、直接に後の反応に使用した。
室温で、化合物ＢＢ－１１－２（２．７０ｇ、７．７０ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解させ、次に、４Ｍの塩化水素メタノール溶液（２５ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、減圧濃縮して溶媒を除去して化合物ＢＢ－１１－３の塩酸塩を得、直接に後の反応に使用した。
【0114】
ステップ３：化学物ＢＢ－１１－６の合成
室温で、化合物ＢＢ－１１－５（１０．００ｇ、５７．９５ｍｍｏｌ）及び４－ピペリジンメタノール（６．６７ｇ、５７．９５ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）に溶解させ、次に、トリエチルアミン（１１．７３ｇ、１１５．９０ｍｍｏｌ、１６．１３ｍＬ）を加え、反応混合物を９０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後室温に冷却させ、反応溶液に水（２００ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（１００ｍＬ×４）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（１００ｍＬ×２）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～２０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２７ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７－４．５３ （ｍ， １Ｈ）， ４．５３－４．４８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８６ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３０－３．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９９ （ｔｄ， Ｊ＝１．９， １２．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８１－１．６６ （ｍ， ３Ｈ）， １．２１－１．０６ （ｍ， ２Ｈ）。
室温で、化合物ＢＢ－１１－５（１０．００ｇ、５７．９５ｍｍｏｌ）及び４－ピペリジンメタノール（６．６７ｇ、５７．９５ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）に溶解させ、次に、トリエチルアミン（１１．７３ｇ、１１５．９０ｍｍｏｌ、１６．１３ｍＬ）を加え、反応混合物を９０℃に加熱させ、１２時間撹拌して反応させた。反応完了後室温に冷却させ、反応溶液に水（２００ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（１００ｍＬ×４）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（１００ｍＬ×２）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～２０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２７ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７－４．５３ （ｍ， １Ｈ）， ４．５３－４．４８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８６ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３０－３．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９９ （ｔｄ， Ｊ＝１．９， １２．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８１－１．６６ （ｍ， ３Ｈ）， １．２１－１．０６ （ｍ， ２Ｈ）。
【0115】
ステップ４：化学物ＢＢ－１１－７の合成
室温で、ＢＢ－１１－６（２．００ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解させ、次に、２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、４Ｍの塩酸でｐＨを４～５に調節し、減圧濃縮して溶媒を除去し、化合物ＢＢ－１１－７の粗生成物を得、直接に後の反応に使用した。
室温で、ＢＢ－１１－６（２．００ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解させ、次に、２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、４Ｍの塩酸でｐＨを４～５に調節し、減圧濃縮して溶媒を除去し、化合物ＢＢ－１１－７の粗生成物を得、直接に後の反応に使用した。
【0116】
ステップ５：化学物ＢＢ－１１－４の合成
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１１－３の塩酸塩（７．６５ｍｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１１－７（７．６５ｍｍｏｌ、粗生成物）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４６ｍＬ）に溶解させ、次に、ジイソプロピルエチルアミン（１．０３ｇ、７．９６ｍｍｏｌ、１．３９ｍＬ）及び２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（３．０３ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（１００ｍＬ×２）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～２０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－４を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４７０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．５８ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３３ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄｄ， Ｊ＝２．４， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０－４．４４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．９２－３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．３２－３．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０７－２．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１８－２．０５ （ｍ， ２Ｈ）， １．９５－１．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．８１－１．６８ （ｍ， ３Ｈ）， １．６８－１．５１ （ｍ， ２Ｈ）， １．５１－１．４８ （ｍ， ２Ｈ）， １．２０－１．０６ （ｍ， ２Ｈ）。
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－１１－３の塩酸塩（７．６５ｍｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１１－７（７．６５ｍｍｏｌ、粗生成物）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４６ｍＬ）に溶解させ、次に、ジイソプロピルエチルアミン（１．０３ｇ、７．９６ｍｍｏｌ、１．３９ｍＬ）及び２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（３．０３ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に水（１００ｍＬ×２）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～２０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１－４を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４７０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．５８ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７９ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３３ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄｄ， Ｊ＝２．４， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０－４．４４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．９２－３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．３２－３．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０７－２．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１８－２．０５ （ｍ， ２Ｈ）， １．９５－１．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．８１－１．６８ （ｍ， ３Ｈ）， １．６８－１．５１ （ｍ， ２Ｈ）， １．５１－１．４８ （ｍ， ２Ｈ）， １．２０－１．０６ （ｍ， ２Ｈ）。
【0117】
ステップ６：化学物ＢＢ－１１の合成
室温で、化合物ＢＢ－１１－４（１００．０２ｍｇ、２０５．０６μｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解させ、次に、デス・マーチン酸化剤（１３０．４６ｍｇ、３０７．５９μｍｏｌ）を加え、室温で、１時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：４６８．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］ ＋。
室温で、化合物ＢＢ－１１－４（１００．０２ｍｇ、２０５．０６μｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解させ、次に、デス・マーチン酸化剤（１３０．４６ｍｇ、３０７．５９μｍｏｌ）を加え、室温で、１時間撹拌して反応させた。反応完了後、反応溶液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１、体積比）により分離して化合物ＢＢ－１１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：４６８．２ ［Ｍ ＋ Ｈ］ ＋。
【0118】
参照例１２：フラグメントＢＢ－１２：
合成スキーム：
【化53】
合成スキーム：
【化54】
【0119】
ステップ１：化学物ＢＢ－１２－１の合成
２５℃で化合物ＢＢ－３－４（１０．００ｇ、３０．０１ｍｍｏｌ）及び１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン（８．３９ｇ、４５．０２ｍｍｏｌ）をトルエン（１５０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１．９２ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１９．１１ｇ、９０．０４ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（１．７８ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキを２０ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。濾液を３００ｍＬの酢酸エチル及び３００ｍＬの水に加え、水相を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル：酢酸エチル＝５０／１～５／１）により分離して化合物ＢＢ－１２－１を得た。
ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４３９．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１５ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３６ （ｄｄ， Ｊ＝２．５， ９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３１ （ｄ， Ｊ＝２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０４ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７１ － ３．６２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２９ － ３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３ （ｓ， ９Ｈ）， １．２８ （ｄｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－３－４（１０．００ｇ、３０．０１ｍｍｏｌ）及び１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン（８．３９ｇ、４５．０２ｍｍｏｌ）をトルエン（１５０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１．９２ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１９．１１ｇ、９０．０４ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（１．７８ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキを２０ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。濾液を３００ｍＬの酢酸エチル及び３００ｍＬの水に加え、水相を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル：酢酸エチル＝５０／１～５／１）により分離して化合物ＢＢ－１２－１を得た。
ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４３９．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１５ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６０ （ｓ， ２Ｈ）， ７．３６ （ｄｄ， Ｊ＝２．５， ９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３１ （ｄ， Ｊ＝２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０４ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７１ － ３．６２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２９ － ３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３ （ｓ， ９Ｈ）， １．２８ （ｄｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0120】
ステップ２：化学物ＢＢ－１２－２の合成
０℃で化合物ＢＢ－１２－１（８．６ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１．１３ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ、１．０９ｍＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２．６７ｇ、２３．８０ｍｍｏｌ）を反応系にバッチで加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液（４８０ｍＬ）にゆっくりと滴下し、大量の固体を析出させ、濾過し、ケーキを水で２回洗浄し（２０ｍＬ×２）、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させた。得られた粗生成物をメタノール（１０ｍＬ）に加えて３０分間撹拌し、濾過し、ケーキをメタノール（５ｍＬ）で洗浄し、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＢＢ－１２－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝２．９， ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ － ７．９１ （ｍ， １Ｈ）， ７．７２ － ７．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４４ － ７．３７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６２ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．３， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５３ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ３．２２－ ３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９３ － ２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ （ｄｑ， Ｊ＝４．３， １２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）。
０℃で化合物ＢＢ－１２－１（８．６ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１．１３ｇ、１５．８６ｍｍｏｌ、１．０９ｍＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（２．６７ｇ、２３．８０ｍｍｏｌ）を反応系にバッチで加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液（４８０ｍＬ）にゆっくりと滴下し、大量の固体を析出させ、濾過し、ケーキを水で２回洗浄し（２０ｍＬ×２）、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させた。得られた粗生成物をメタノール（１０ｍＬ）に加えて３０分間撹拌し、濾過し、ケーキをメタノール（５ｍＬ）で洗浄し、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＢＢ－１２－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝２．９， ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ － ７．９１ （ｍ， １Ｈ）， ７．７２ － ７．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４４ － ７．３７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６２ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．３， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５３ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ３．２２－ ３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９３ － ２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ （ｄｑ， Ｊ＝４．３， １２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）。
【0121】
ステップ３：化合物ＢＢ－１２の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－１２－２（３．４ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、塩化水素・酢酸エチル溶液（４Ｍ、３０ｍＬ）をゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、濾過し、ケーキを酢酸エチル（５ｍＬ×２）で洗浄し、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＢＢ－１２の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｓ， １Ｈ）， ９．６５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ８．０７ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．７５ － ７．６９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４５ （ｄｄ， Ｊ＝２．４， ９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６４ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．４， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝５．０ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．２８ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ２．９４ － ２．８２ （ｍ， １Ｈ）， ２．６７ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．０， １２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３０ － ２．１７ （ｍ， １Ｈ）。
化合物ＢＢ－１２－２（３．４ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、塩化水素・酢酸エチル溶液（４Ｍ、３０ｍＬ）をゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、濾過し、ケーキを酢酸エチル（５ｍＬ×２）で洗浄し、ケーキを収集し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＢＢ－１２の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｓ， １Ｈ）， ９．６５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ８．０７ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．７５ － ７．６９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４５ （ｄｄ， Ｊ＝２．４， ９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６４ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．４， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝５．０ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．２８ （ｂｒ ｓ， ４Ｈ）， ２．９４ － ２．８２ （ｍ， １Ｈ）， ２．６７ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．０， １２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３０ － ２．１７ （ｍ， １Ｈ）。
【0122】
参照例１３：フラグメントＢＢ-１３
合成スキーム：
【化55】
合成スキーム：
【化56】
【0123】
ステップ１：化学物ＢＢ－１３－１の合成
２５℃で化合物ＢＢ－７（１．４ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）及び１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン（１．１７ｇ、６．３０ｍｍｏｌ）をジオキサン（２０ｍＬ）及び水（４ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２６９．３５ｍｇ、２９４．１４μｍｏｌ）、リン酸カリウム（２．６８ｇ、１２．６１ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（２４９．８１ｍｇ、５８８．２８μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキを２０ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。濾液を酢酸エチル（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）に加え、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）により分離して化合物ＢＢ－１３－１を得た。ＭＳ： ＥＳＩ ｍ／ｚ：４３９．０［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．１７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０４ （ｓ， １Ｈ）， ７．８６ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ － ４．０９ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３６ － ２．５９ （ｍ， ８Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．２０ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）。
２５℃で化合物ＢＢ－７（１．４ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）及び１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン（１．１７ｇ、６．３０ｍｍｏｌ）をジオキサン（２０ｍＬ）及び水（４ｍＬ）に加え、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２６９．３５ｍｇ、２９４．１４μｍｏｌ）、リン酸カリウム（２．６８ｇ、１２．６１ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（２４９．８１ｍｇ、５８８．２８μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、珪藻土で濾過し、ケーキを２０ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。濾液を酢酸エチル（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）に加え、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）により分離して化合物ＢＢ－１３－１を得た。ＭＳ： ＥＳＩ ｍ／ｚ：４３９．０［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： ８．１７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０４ （ｓ， １Ｈ）， ７．８６ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｔ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ － ４．０９ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３６ － ２．５９ （ｍ， ８Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．２０ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0124】
ステップ２：化学物ＢＢ－１３－２の合成
０℃で化合物ＢＢ－１３－１（１．５ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（２３１．６８ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ、２２４．９３μＬ）をＮ，Ｎジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（４３８．９１ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応系にバッチで加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（７５ｍＬ）にゆっくりと滴下し、固体を析出させ、濾過した。ケーキを水（５ｍＬ×２）で洗浄し、固体を収集し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を５ｍＬのメタノールに加え、１５分間撹拌し、濾過し、ケーキをメタノール（３ｍＬ×２）で洗浄し、固体を収集し、減圧してスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－１３－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：８．１９ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｄ， Ｊ＝１６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５１ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８９ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５５ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ （ｄｑ， Ｊ＝３．８， １２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）。
０℃で化合物ＢＢ－１３－１（１．５ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（２３１．６８ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ、２２４．９３μＬ）をＮ，Ｎジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（４３８．９１ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応系にバッチで加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（７５ｍＬ）にゆっくりと滴下し、固体を析出させ、濾過した。ケーキを水（５ｍＬ×２）で洗浄し、固体を収集し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を５ｍＬのメタノールに加え、１５分間撹拌し、濾過し、ケーキをメタノール（３ｍＬ×２）で洗浄し、固体を収集し、減圧してスピン乾燥させた。化合物ＢＢ－１３－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：８．１９ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７ （ｄ， Ｊ＝１６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５１ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８９ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８ － ２．５５ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ （ｄｑ， Ｊ＝３．８， １２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）。
【0125】
ステップ３：化合物ＢＢ－１３の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－１３－２（０．６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（６ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、１０ｍＬ）を反応系にゆっくりと加え、反応系を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。混合物を減圧し、スピン乾燥させて化合物ＢＢ－１３の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：３６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
化合物ＢＢ－１３－２（０．６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（６ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、１０ｍＬ）を反応系にゆっくりと加え、反応系を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。混合物を減圧し、スピン乾燥させて化合物ＢＢ－１３の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：３６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0126】
実施例１
合成スキーム：
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４（０．３ｇ、５０５．４０μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、ＢＢ－２（１２３．４４ｍｇ、５０５．４０μｍｏｌ、塩酸塩），トリエチルアミン（２５５．７０ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ、３５１．７２μＬ）、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（２８８．２５ｍｇ、７５８．１０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を２０℃で２時間撹拌し、反応完了後、水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して凍結乾燥させ、標的化合物ＷＸ００１を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８２０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９４（ｓ， １Ｈ）， １０．６１（ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２９（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０８（ｍ， １Ｈ）， ７．９３－７．９２（ｍ， ２Ｈ）， ７．５７（ｄ， Ｊ＝８．８Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９－７．４３（ｍ， ３Ｈ）， ７．４０（ｄ， Ｊ＝２．４Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９（ｓ， ２Ｈ）， ４．１５－４．１１（ｍ， １Ｈ）， ３．６２－３．５４（ｍ， ６Ｈ）， ２．９０－２．５１（ｍ， ８Ｈ）， ２．２５－２．１５（ｍ， ２Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）．
【化57】
合成スキーム：
【化58】
室温及び窒素ガスの保護下で、化合物ＢＢ－４（０．３ｇ、５０５．４０μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、ＢＢ－２（１２３．４４ｍｇ、５０５．４０μｍｏｌ、塩酸塩），トリエチルアミン（２５５．７０ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ、３５１．７２μＬ）、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（２８８．２５ｍｇ、７５８．１０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を２０℃で２時間撹拌し、反応完了後、水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧して溶媒を除去した。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して凍結乾燥させ、標的化合物ＷＸ００１を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８２０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９４（ｓ， １Ｈ）， １０．６１（ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２９（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０８（ｍ， １Ｈ）， ７．９３－７．９２（ｍ， ２Ｈ）， ７．５７（ｄ， Ｊ＝８．８Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９－７．４３（ｍ， ３Ｈ）， ７．４０（ｄ， Ｊ＝２．４Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９（ｓ， ２Ｈ）， ４．１５－４．１１（ｍ， １Ｈ）， ３．６２－３．５４（ｍ， ６Ｈ）， ２．９０－２．５１（ｍ， ８Ｈ）， ２．２５－２．１５（ｍ， ２Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）．
【0127】
実施例２
合成スキーム：
化合物ＢＢ－４（１００ｍｇ、１６８．４７μｍｏｌ）及び中間体ＢＢ－１（４７．２９ｍｇ、１６８．４７μｍｏｌ）の塩酸塩をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（９６．０８ｍｇ、２５２．７０μｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３４．０９ｍｇ、３３６．９３μｍｏｌ、４６．９０μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を２０ｍＬの水及び３０ｍＬの酢酸エチルに注ぎ、有機相を分離し、水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して化合物ＷＸ００２を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８２０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９０（ｓ， １Ｈ）， １０．４７（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２８（ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１３ － ７．９７（ｍ， ２Ｈ）， ７．８７（ｓ， １Ｈ）， ７．５４（ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４７ － ７．２９（ｍ， ３Ｈ）， ７．２６ － ７．１３（ｍ， １Ｈ）， ４．５４（ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ４．１２（ｄｄ， Ｊ＝４．８， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６７ － ３．４５（ｍ， ２Ｈ）， ２．８３ － ２．６７（ｍ， ２Ｈ）， ２．６３ － ２．４３（ｍ， １０Ｈ）， ２．３９ － ２．２５（ｍ， １Ｈ）， ２．１９ － ２．０３（ｍ， １Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
【化59】
合成スキーム：
【化60】
化合物ＢＢ－４（１００ｍｇ、１６８．４７μｍｏｌ）及び中間体ＢＢ－１（４７．２９ｍｇ、１６８．４７μｍｏｌ）の塩酸塩をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（９６．０８ｍｇ、２５２．７０μｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３４．０９ｍｇ、３３６．９３μｍｏｌ、４６．９０μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を２０ｍＬの水及び３０ｍＬの酢酸エチルに注ぎ、有機相を分離し、水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して化合物ＷＸ００２を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８２０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９０（ｓ， １Ｈ）， １０．４７（ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２８（ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１３ － ７．９７（ｍ， ２Ｈ）， ７．８７（ｓ， １Ｈ）， ７．５４（ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４７ － ７．２９（ｍ， ３Ｈ）， ７．２６ － ７．１３（ｍ， １Ｈ）， ４．５４（ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ４．１２（ｄｄ， Ｊ＝４．８， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６７ － ３．４５（ｍ， ２Ｈ）， ２．８３ － ２．６７（ｍ， ２Ｈ）， ２．６３ － ２．４３（ｍ， １０Ｈ）， ２．３９ － ２．２５（ｍ， １Ｈ）， ２．１９ － ２．０３（ｍ， １Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
【0128】
実施例３
合成スキーム：
室温及び窒素ガスの保護条件下で、ＢＢ－３の塩酸塩（３７８ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及びＢＢ－４（７６７．８６ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）溶媒に溶解させ、その中に２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（６１４．８２ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２７２．７０ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して標的化合物ＷＸ００３を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８７０．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９６（ｓ， １Ｈ）， １０．７３（ｓ， １Ｈ）， ８．４１－８．４０（ｍ， ２Ｈ）， ８．３９（ｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０８（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０７（ｄｄ， Ｊ＝１．６， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１（ｓ， １Ｈ）， ７．７８（ｓ， ３Ｈ）， ７．７５（ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６－７．３７（ｍ， ２Ｈ）， ７．２３（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６８（ｄｄ， Ｊ＝４．０， １１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８（ｓ， ２Ｈ）， ３．９８（ｍ， １Ｈ）， ３．４７（ｓ， ９Ｈ）， ２．９５ － ２．５８（ｍ， ３Ｈ ）， ２．４９ － ２．２１（ｍ， ３Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
【化61】
合成スキーム：
【化62】
室温及び窒素ガスの保護条件下で、ＢＢ－３の塩酸塩（３７８ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及びＢＢ－４（７６７．８６ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）溶媒に溶解させ、その中に２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（６１４．８２ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２７２．７０ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％の塩酸）により分離して標的化合物ＷＸ００３を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８７０．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １０．９６（ｓ， １Ｈ）， １０．７３（ｓ， １Ｈ）， ８．４１－８．４０（ｍ， ２Ｈ）， ８．３９（ｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０８（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０７（ｄｄ， Ｊ＝１．６， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１（ｓ， １Ｈ）， ７．７８（ｓ， ３Ｈ）， ７．７５（ｄ， Ｊ＝２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６－７．３７（ｍ， ２Ｈ）， ７．２３（ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６８（ｄｄ， Ｊ＝４．０， １１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８（ｓ， ２Ｈ）， ３．９８（ｍ， １Ｈ）， ３．４７（ｓ， ９Ｈ）， ２．９５ － ２．５８（ｍ， ３Ｈ ）， ２．４９ － ２．２１（ｍ， ３Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
【0129】
実施例４
合成スキーム：
【化63】
合成スキーム：
【化64】
【0130】
ステップ１：ＷＸ００４－１の合成
化合物ＢＢ－５（１０２．３８ｍｇ、３９３．３５μｍｏｌ）及びＢＢ－４－５（１５０ｍｇ、２６２．２３μｍｏｌ、１４５．８２μＬ、塩酸塩）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加え、トリエチルアミン（５３．０７ｍｇ、５２４．４６μｍｏｌ、７３．００μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を２５℃で０．５時間撹拌し、酢酸水素化ホウ素ナトリウム（１３８．９４ｍｇ、６５５．５８μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１１．５時間撹拌した。反応系を５０ｍＬの水にゆっくりと加え、ジクロロメタンで（５０ｍＬ×３）３回抽出し、有機相を合わせ減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～５．７／１、体積比）により精製して化合物ＷＸ００４－１を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ７８０．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＢＢ－５（１０２．３８ｍｇ、３９３．３５μｍｏｌ）及びＢＢ－４－５（１５０ｍｇ、２６２．２３μｍｏｌ、１４５．８２μＬ、塩酸塩）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加え、トリエチルアミン（５３．０７ｍｇ、５２４．４６μｍｏｌ、７３．００μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を２５℃で０．５時間撹拌し、酢酸水素化ホウ素ナトリウム（１３８．９４ｍｇ、６５５．５８μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１１．５時間撹拌した。反応系を５０ｍＬの水にゆっくりと加え、ジクロロメタンで（５０ｍＬ×３）３回抽出し、有機相を合わせ減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝１／０～５．７／１、体積比）により精製して化合物ＷＸ００４－１を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ７８０．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0131】
ステップ２：ＷＸ００４の合成
０℃の化合物ＷＸ００４－１（２８０ｍｇ、３０９．１４μｍｏｌ）及びアクリルアミド（２６．３７ｍｇ、３７０．９７μｍｏｌ、２５．６０μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１７３．４５ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応系にハッチで加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応系を飽和塩化アンモニウムの溶液にゆっくりと加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して標的化合物ＷＸ００４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８０５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１０．８９（ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２８（ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０７（ｄｄ， Ｊ＝１．４， ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３（ｄｄ， Ｊ＝４．０， ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９ － ７．３２（ｍ， ３Ｈ）， ７．２１（ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１５（ｄｄ， Ｊ＝５．５， ７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５３（ｂｒ ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１２（ｄｄ， Ｊ＝４．９， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ － ３．６２（ｍ， ５Ｈ）， ３．２７ － ３．０６（ｍ， ２Ｈ）， ２．８４ － ２．６５（ｍ， ３Ｈ）， ２．５７（ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １７．２ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．４９ － ２．４２（ｍ， ２Ｈ）， ２．４０ － ２．２６（ｍ， １Ｈ）， ２．１９ － ２．０１（ｍ， ３Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
０℃の化合物ＷＸ００４－１（２８０ｍｇ、３０９．１４μｍｏｌ）及びアクリルアミド（２６．３７ｍｇ、３７０．９７μｍｏｌ、２５．６０μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１７３．４５ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応系にハッチで加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応系を飽和塩化アンモニウムの溶液にゆっくりと加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して標的化合物ＷＸ００４を得た。ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８０５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ：１０．８９（ｓ， １Ｈ）， ８．４０（ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２８（ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０７（ｄｄ， Ｊ＝１．４， ８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３（ｄｄ， Ｊ＝４．０， ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９ － ７．３２（ｍ， ３Ｈ）， ７．２１（ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１５（ｄｄ， Ｊ＝５．５， ７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５３（ｂｒ ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１２（ｄｄ， Ｊ＝４．９， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ － ３．６２（ｍ， ５Ｈ）， ３．２７ － ３．０６（ｍ， ２Ｈ）， ２．８４ － ２．６５（ｍ， ３Ｈ）， ２．５７（ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １７．２ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．４９ － ２．４２（ｍ， ２Ｈ）， ２．４０ － ２．２６（ｍ， １Ｈ）， ２．１９ － ２．０１（ｍ， ３Ｈ）， １．５２（ｓ， ６Ｈ）。
【0132】
実施例５
合成スキーム：
【化65】
合成スキーム：
【化66】
【0133】
ステップ１：中間体ＷＸ００５－１の合成
室温で、ＢＢ－４－３（１．００ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）及びブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（５１２．０１ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、その中に炭酸カリウム（３９１．７３ｍｇ、２．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で、反応系を１２時間撹拌した。反応完了後、室温に冷却させ、混合物に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／１、体積比）により分離して中間体ＷＸ００５－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．０１－７．９４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１６－７．１０ （ｍ， １Ｈ）， ７．０９－７．００ （ｍ， ２Ｈ）， ４．８８ （ｔ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ （ｄ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８６－３．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７２－３．６２ （ｍ， ２Ｈ）， １．５９ （ｓ， ６Ｈ）， １．２７ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ６Ｈ）．
室温で、ＢＢ－４－３（１．００ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）及びブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール（５１２．０１ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、その中に炭酸カリウム（３９１．７３ｍｇ、２．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で、反応系を１２時間撹拌した。反応完了後、室温に冷却させ、混合物に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／１、体積比）により分離して中間体ＷＸ００５－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．０１－７．９４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１６－７．１０ （ｍ， １Ｈ）， ７．０９－７．００ （ｍ， ２Ｈ）， ４．８８ （ｔ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ （ｄ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８６－３．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７２－３．６２ （ｍ， ２Ｈ）， １．５９ （ｓ， ６Ｈ）， １．２７ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【0134】
ステップ２：中間体ＷＸ００５－２の合成
室温で、ＷＸ００５－１（５００．００ｍｇ、９２６．７１μｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、その中に酢酸（５．２５ｇ、８７．４２ｍｍｏｌ）及び塩酸（１Ｍ、２．５ｍＬ）を加え、反応混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で、反応系を１２時間撹拌した。反応完了後、室温に冷却させ、減圧濃縮して溶媒を除去し（エタノール）、混合物に水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１／１、体積比）により分離して中間体ＷＸ００５－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ９．９２ （ｓ， １Ｈ）， ８．０２－７．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９－７．１０ （ｍ， １Ｈ）， ７．１０－７．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７４ （ｓ， ２Ｈ）， １．６０ （ｓ， ６Ｈ）．
室温で、ＷＸ００５－１（５００．００ｍｇ、９２６．７１μｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、その中に酢酸（５．２５ｇ、８７．４２ｍｍｏｌ）及び塩酸（１Ｍ、２．５ｍＬ）を加え、反応混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で、反応系を１２時間撹拌した。反応完了後、室温に冷却させ、減圧濃縮して溶媒を除去し（エタノール）、混合物に水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、順次に飽和食塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１／１、体積比）により分離して中間体ＷＸ００５－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ９．９２ （ｓ， １Ｈ）， ８．０２－７．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｄｄ， Ｊ＝２．０， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９－７．１０ （ｍ， １Ｈ）， ７．１０－７．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７４ （ｓ， ２Ｈ）， １．６０ （ｓ， ６Ｈ）．
【0135】
ステップ３：化学物ＷＸ００５の合成
２５℃で化合物ＷＸ００５－２（４０ｍｇ、８５．９４μｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、次に、化合物ＢＢ－６（３６．８０ｍｇ、７７．３５μｍｏｌ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５４．６５ｍｇ、２５７．８３μｍｏｌ）を加えた。窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、半飽和食塩水（５０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相を加え無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後濾過し、スピン乾燥させた。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して標的化合物ＷＸ００５を得た。ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８４６．２［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．８９ （ｓ， ２Ｈ），９．７７ （ｓ， １Ｈ），８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ），８．２７ （ｄ， Ｊ＝１．２５ Ｈｚ， １Ｈ），８．０７ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １ Ｈ），７．９６ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ），７．８８ （ｓ， １Ｈ），７．５１ － ７．５６ （ｍ， １Ｈ），７．４４ － ７．５０ （ｍ， １Ｈ），７．３５ － ７．４４ （ｍ， ２Ｈ），７．２１ －７．２３ （ ｍ， １Ｈ），４．６１ （ｓ， ２Ｈ），４．１１ （ｄｄ， Ｊ＝１２．０， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ），３．５ －３．６０ （ｍ， ４Ｈ），３．５０ －３．５１ （ｍ， ２Ｈ），２．９３ － ３．０２ （ｍ， ２Ｈ），２．８０ － ２．９０ （ｍ， ２Ｈ），２．７０ － ２．７９ （ｍ， １Ｈ），２．５５ － ２．６８ （ｍ， １Ｈ），２．２２ － ２．３５ （ｍ， １Ｈ），２．０６ － ２．１９ （ｍ， １Ｈ），１．５１ （ｓ， ６Ｈ），１．１４ － １．２１ （ｍ， ２Ｈ），１．０８－１．１０ （ｍ， ２Ｈ）。
２５℃で化合物ＷＸ００５－２（４０ｍｇ、８５．９４μｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、次に、化合物ＢＢ－６（３６．８０ｍｇ、７７．３５μｍｏｌ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５４．６５ｍｇ、２５７．８３μｍｏｌ）を加えた。窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌を続けた。反応完了後、反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、半飽和食塩水（５０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相を加え無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後濾過し、スピン乾燥させた。得られた残留物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して標的化合物ＷＸ００５を得た。ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８４６．２［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．８９ （ｓ， ２Ｈ），９．７７ （ｓ， １Ｈ），８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ），８．２７ （ｄ， Ｊ＝１．２５ Ｈｚ， １Ｈ），８．０７ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １ Ｈ），７．９６ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ），７．８８ （ｓ， １Ｈ），７．５１ － ７．５６ （ｍ， １Ｈ），７．４４ － ７．５０ （ｍ， １Ｈ），７．３５ － ７．４４ （ｍ， ２Ｈ），７．２１ －７．２３ （ ｍ， １Ｈ），４．６１ （ｓ， ２Ｈ），４．１１ （ｄｄ， Ｊ＝１２．０， ４．８ Ｈｚ， １Ｈ），３．５ －３．６０ （ｍ， ４Ｈ），３．５０ －３．５１ （ｍ， ２Ｈ），２．９３ － ３．０２ （ｍ， ２Ｈ），２．８０ － ２．９０ （ｍ， ２Ｈ），２．７０ － ２．７９ （ｍ， １Ｈ），２．５５ － ２．６８ （ｍ， １Ｈ），２．２２ － ２．３５ （ｍ， １Ｈ），２．０６ － ２．１９ （ｍ， １Ｈ），１．５１ （ｓ， ６Ｈ），１．１４ － １．２１ （ｍ， ２Ｈ），１．０８－１．１０ （ｍ， ２Ｈ）。
【0136】
実施例６
合成スキーム：
【化67】
合成スキーム：
【化68】
【0137】
ステップ１：化学物ＷＸ００６－１の合成
化合物ＢＢ－９（７１．００ｍｇ、４９９．５０μｍｏｌ、６６．３６μＬ）及び化合物２－ホルミル－１－シクロプロパンカルボン酸エチル（０．２ｇ、４１６．２５μｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）及び氷酢酸（０．１ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、２０℃でトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１３２．３３ｍｇ、６２４．３８μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液に水（２ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（５ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。分取薄層クロマトグラフィー（展開剤：ジクロロメタン／メタノール＝１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ００６－１を得た。
化合物ＢＢ－９（７１．００ｍｇ、４９９．５０μｍｏｌ、６６．３６μＬ）及び化合物２－ホルミル－１－シクロプロパンカルボン酸エチル（０．２ｇ、４１６．２５μｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）及び氷酢酸（０．１ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、２０℃でトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１３２．３３ｍｇ、６２４．３８μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液に水（２ｍＬ）を加え、１０分間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（５ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。分取薄層クロマトグラフィー（展開剤：ジクロロメタン／メタノール＝１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ００６－１を得た。
【0138】
ステップ２：化学物ＷＸ００６－２の合成
化合物ＷＸ００６－１（０．１１ｇ、１８１．３３μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及び水（０．４ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、水酸化リチウム一水和物（３８．０５ｍｇ、９０６．６５μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、１Ｎの水酸化リチウム水溶液（２ｍＬ×５）で洗浄し、水相を１Ｎの希塩酸でｐＨ＝４～５に調節し、ジクロロメタン（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を直接に無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて化合物ＷＸ００６－２を得た。
化合物ＷＸ００６－１（０．１１ｇ、１８１．３３μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及び水（０．４ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、水酸化リチウム一水和物（３８．０５ｍｇ、９０６．６５μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、１Ｎの水酸化リチウム水溶液（２ｍＬ×５）で洗浄し、水相を１Ｎの希塩酸でｐＨ＝４～５に調節し、ジクロロメタン（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を直接に無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて化合物ＷＸ００６－２を得た。
【0139】
ステップ３：化学物ＷＸ００６の合成
化合物ＷＸ００６－２（９０ｍｇ、１５５．５５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８８．７２ｍｇ、２３３．３３μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１００．５２ｍｇ、７７７．７７μｍｏｌ、１３５．４７μＬ）を加え、１０分間撹拌した後化合物ＢＢ－８の塩酸塩（５４．９４ｍｇ、１８６．６６μｍｏｌ）を加え、２０℃で６０時間撹拌した。反応溶液を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；中性系）により分離・精製して化合物ＷＸ００６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１５－８．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０６－８．０５ （ｍ， １Ｈ）， ７．９８ （ｔ， Ｊ＝１０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６９ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５８ － ７．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２９ － ７．１９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１０－ ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ４．６５－４．６１ （ｍ， １Ｈ）， ４．３３ （ｔ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０７ （ｔ， Ｊ＝４．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９２ － ２．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．７７ － ２．７０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６１ － ２．５８ （ｔ， １Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ） ２．４６－２．４２ （ｍ， ２Ｈ）， １．９４－１．９１ （ｍ， １Ｈ）， １．６７－１．６５ （ｍ， １Ｈ）， １．５２ （ｓ， ６Ｈ）， １．３５－１．３１ （ｍ， １Ｈ）， ０．９５－０．９０ （ｍ， １Ｈ）。
化合物ＷＸ００６－２（９０ｍｇ、１５５．５５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８８．７２ｍｇ、２３３．３３μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１００．５２ｍｇ、７７７．７７μｍｏｌ、１３５．４７μＬ）を加え、１０分間撹拌した後化合物ＢＢ－８の塩酸塩（５４．９４ｍｇ、１８６．６６μｍｏｌ）を加え、２０℃で６０時間撹拌した。反応溶液を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；中性系）により分離・精製して化合物ＷＸ００６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１５－８．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０６－８．０５ （ｍ， １Ｈ）， ７．９８ （ｔ， Ｊ＝１０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６９ （ｄ， Ｊ＝９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５８ － ７．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２９ － ７．１９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１０－ ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ４．６５－４．６１ （ｍ， １Ｈ）， ４．３３ （ｔ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０７ （ｔ， Ｊ＝４．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９２ － ２．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．７７ － ２．７０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６１ － ２．５８ （ｔ， １Ｈ）， ２．５５ （ｓ， ３Ｈ） ２．４６－２．４２ （ｍ， ２Ｈ）， １．９４－１．９１ （ｍ， １Ｈ）， １．６７－１．６５ （ｍ， １Ｈ）， １．５２ （ｓ， ６Ｈ）， １．３５－１．３１ （ｍ， １Ｈ）， ０．９５－０．９０ （ｍ， １Ｈ）。
【0140】
実施例７
合成スキーム：
【化69】
合成スキーム：
【化70】
【0141】
ステップ１：化学物ＷＸ００７－１の合成
化合物ＷＸ００７－２（０．５ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、反応溶液を０℃に冷却させ、反応溶液をデス・マーチン酸化剤（２．９４ｇ、６．９４ｍｍｏｌ、２．１５ｍＬ）にバッチで加え、２０℃にゆっくりと昇温させて２時間撹拌した。反応溶液を０～１０℃の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）及び１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して化合物ＷＸ００７－３の溶液を得た。化合物ＷＸ００７－３の溶液及び化合物ＢＢ－９（１．４ｇ、２．９１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）及び氷酢酸（０．１ｍＬ）に溶解させ、２０℃でトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．２４ｇ、５．８３ｍｍｏｌ）を加えて１２時間撹拌した。反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１～０／１）により精製して化合物ＷＸ００７－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００－７．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４－７．０２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．２１－４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９８－２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７８ （ｓ， ２Ｈ）， ２．４１ （ｓ， ３Ｈ）， １．５９ （ｓ， ６Ｈ）， １．２９－１．２３ （ｍ， ５Ｈ）， ０．８８－０．８５ （ｍ， ２Ｈ）。
化合物ＷＸ００７－２（０．５ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、反応溶液を０℃に冷却させ、反応溶液をデス・マーチン酸化剤（２．９４ｇ、６．９４ｍｍｏｌ、２．１５ｍＬ）にバッチで加え、２０℃にゆっくりと昇温させて２時間撹拌した。反応溶液を０～１０℃の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）及び１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して化合物ＷＸ００７－３の溶液を得た。化合物ＷＸ００７－３の溶液及び化合物ＢＢ－９（１．４ｇ、２．９１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）及び氷酢酸（０．１ｍＬ）に溶解させ、２０℃でトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．２４ｇ、５．８３ｍｍｏｌ）を加えて１２時間撹拌した。反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１～０／１）により精製して化合物ＷＸ００７－１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．００－７．９６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４－７．０２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．２１－４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９８－２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７８ （ｓ， ２Ｈ）， ２．４１ （ｓ， ３Ｈ）， １．５９ （ｓ， ６Ｈ）， １．２９－１．２３ （ｍ， ５Ｈ）， ０．８８－０．８５ （ｍ， ２Ｈ）。
【0142】
ステップ２：化学物ＷＸ００７－４の合成
化合物ＷＸ００７－１（０．５３ｇ、８７３．６８μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム一水和物（１８３．３０ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で２４時間撹拌した。４０℃に昇温させて２４時間撹拌した。反応溶液を１Ｎの塩酸でｐＨ＝６～７に調節し、大部分のテトラヒドロフランをスピンオフし、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（３０ｍＬ）及び１０％の炭酸カリウム水溶液（２０ｍＬ×３）を加え、分離し、水相を１Ｎの塩酸でｐＨ＝５～６に調節し、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＷＸ００７－４を得た。
化合物ＷＸ００７－１（０．５３ｇ、８７３．６８μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム一水和物（１８３．３０ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で２４時間撹拌した。４０℃に昇温させて２４時間撹拌した。反応溶液を１Ｎの塩酸でｐＨ＝６～７に調節し、大部分のテトラヒドロフランをスピンオフし、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（３０ｍＬ）及び１０％の炭酸カリウム水溶液（２０ｍＬ×３）を加え、分離し、水相を１Ｎの塩酸でｐＨ＝５～６に調節し、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させて化合物ＷＸ００７－４を得た。
【0143】
ステップ３：化学物ＷＸ００７の合成
化合物ＷＸ００７－４（５０ｍｇ、８６．４２μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４４．６８ｍｇ、３４５．６８μｍｏｌ、６０．２１μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２０℃で２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（３９．４３ｍｇ、１０３．７０μｍｏｌ）を加えて５分間撹拌し、化合物ＢＢ－８の塩酸塩（３４．３０ｍｇ、１０３．７０μｍｏｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮し、溶媒を除去して粗生成物を得、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ００７を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１７－８．１５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．９８ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８７－７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７４ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６２ （ｔ， Ｊ＝７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４５ （ｄ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２８－７．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ＝５．６ Ｈｚ， １１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５２ （ｔ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９０ （ｄｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， １３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３－３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．６５－３．６１ （ｍ， １Ｈ）， ３．３２－３．２９ （ｍ， １Ｈ）， ３．０８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９４－２．８５ （ｍ， １Ｈ）， ２．７７－２．７２ （ｍ， １Ｈ）， ２．５３－２．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２－１．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．５３ （ｓ， ６Ｈ）， １．４８－１．４５ （ｍ， １Ｈ）， １．３９－１．３５ （ｍ， １Ｈ）。
化合物ＷＸ００７－４（５０ｍｇ、８６．４２μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４４．６８ｍｇ、３４５．６８μｍｏｌ、６０．２１μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２０℃で２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（３９．４３ｍｇ、１０３．７０μｍｏｌ）を加えて５分間撹拌し、化合物ＢＢ－８の塩酸塩（３４．３０ｍｇ、１０３．７０μｍｏｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮し、溶媒を除去して粗生成物を得、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ００７を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１７－８．１５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．９８ （ｄ， Ｊ＝８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８７－７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７４ （ｄ， Ｊ＝９．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６２ （ｔ， Ｊ＝７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４５ （ｄ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２８－７．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１２ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ＝５．６ Ｈｚ， １１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５２ （ｔ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９０ （ｄｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， １３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３－３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．６５－３．６１ （ｍ， １Ｈ）， ３．３２－３．２９ （ｍ， １Ｈ）， ３．０８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９４－２．８５ （ｍ， １Ｈ）， ２．７７－２．７２ （ｍ， １Ｈ）， ２．５３－２．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２－１．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．５３ （ｓ， ６Ｈ）， １．４８－１．４５ （ｍ， １Ｈ）， １．３９－１．３５ （ｍ， １Ｈ）。
【0144】
実施例８
合成スキーム：
【化71】
合成スキーム：
【化72】
【0145】
ステップ１：化学物ＷＸ００８－２の合成
化合物ＷＸ００８－１（１００ｇ、４６０．７０ｍｍｏｌ）及び塩化アセチル（５４．２５ｇ、６９１．０５ｍｍｏｌ、４９．３１ｍＬ）をジクロロメタン（１０００ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスで置換・保護し、２０℃で三塩化アルミニウム（９２．１５ｇ、６９１．０５ｍｍｏｌ、３７．７６ｍＬ）をバッチで加え、反応溶液を２時間撹拌した。反応溶液を６Ｎの氷塩酸（４００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（７００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（７００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて得られた粗生成物をメタノール（５００ｍＬ）でスラリー化させ、１５分間撹拌し、濾過し、メタノール（１００ｍＬ×２）でケーキを濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＷＸ００８－２を得た。
化合物ＷＸ００８－１（１００ｇ、４６０．７０ｍｍｏｌ）及び塩化アセチル（５４．２５ｇ、６９１．０５ｍｍｏｌ、４９．３１ｍＬ）をジクロロメタン（１０００ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスで置換・保護し、２０℃で三塩化アルミニウム（９２．１５ｇ、６９１．０５ｍｍｏｌ、３７．７６ｍＬ）をバッチで加え、反応溶液を２時間撹拌した。反応溶液を６Ｎの氷塩酸（４００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（７００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（７００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて得られた粗生成物をメタノール（５００ｍＬ）でスラリー化させ、１５分間撹拌し、濾過し、メタノール（１００ｍＬ×２）でケーキを濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＷＸ００８－２を得た。
【0146】
ステップ２：化学物ＷＸ００８－３の合成
ＷＸ００８－２（２０ｇ、７７．１９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解させ、－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（１７．４０ｇ、６９．４７ｍｍｏｌ、６．６９ｍＬ）を滴下し、２０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。反応溶液を４Ｎの塩酸（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させ、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝７／１）により分離して化合物ＷＸ００８－３を得た。
ＷＸ００８－２（２０ｇ、７７．１９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解させ、－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（１７．４０ｇ、６９．４７ｍｍｏｌ、６．６９ｍＬ）を滴下し、２０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。反応溶液を４Ｎの塩酸（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させ、得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝７／１）により分離して化合物ＷＸ００８－３を得た。
【0147】
ステップ３：化学物ＷＸ００８－４の合成
化合物ＷＸ００８－３（１３．８４ｇ、５６．４７ｍｍｏｌ）をクロロホルム（７０ｍＬ）及び酢酸エチル（７０ｍＬ）に溶解させ、臭化銅（２５．２３ｇ、１１２．９５ｍｍｏｌ、５．２９ｍＬ）を加え、９０℃に昇温させて１６時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ジクロロメタン（１１０ｍＬ）でケーキを濯ぎ、化合物ＷＸ００８－４のジクロロメタン溶液を得た。
化合物ＷＸ００８－３（１３．８４ｇ、５６．４７ｍｍｏｌ）をクロロホルム（７０ｍＬ）及び酢酸エチル（７０ｍＬ）に溶解させ、臭化銅（２５．２３ｇ、１１２．９５ｍｍｏｌ、５．２９ｍＬ）を加え、９０℃に昇温させて１６時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、濾過し、ジクロロメタン（１１０ｍＬ）でケーキを濯ぎ、化合物ＷＸ００８－４のジクロロメタン溶液を得た。
【0148】
ステップ４：化学物ＷＸ００８－５の合成
０℃で、トリエチルアミン（１１．４３ｇ、１１２．９７ｍｍｏｌ、１５．７２ｍＬ）を化合物ＷＸ００８－４のジクロロメタン溶液にゆっくりと滴下し、滴下完了後、２０℃に昇温させ、２時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ×３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、化合物ＷＸ００８－５のジクロロメタン溶液を得た。
０℃で、トリエチルアミン（１１．４３ｇ、１１２．９７ｍｍｏｌ、１５．７２ｍＬ）を化合物ＷＸ００８－４のジクロロメタン溶液にゆっくりと滴下し、滴下完了後、２０℃に昇温させ、２時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ×３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、化合物ＷＸ００８－５のジクロロメタン溶液を得た。
【0149】
ステップ５：化学物ＷＸ００８－６の合成
ＷＸ００８－５のジクロロメタン溶液にトルエン（１５０ｍＬ）及びエトキシカルボニルメチレントリフェニルホスホラン（２３．６２ｇ、６７．７９ｍｍｏｌ）を加え、１３０℃に昇温させ、低沸点溶媒を水分離器で分離し、１２時間撹拌した。室温に冷却させ、直接に減圧濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．７０ （ｓ， １Ｈ）， ７．６０ （ｓ， １Ｈ）， ７．０５ （ｓ， １Ｈ）， ４．２０ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９５ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ２Ｈ）， １．２８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
ＷＸ００８－５のジクロロメタン溶液にトルエン（１５０ｍＬ）及びエトキシカルボニルメチレントリフェニルホスホラン（２３．６２ｇ、６７．７９ｍｍｏｌ）を加え、１３０℃に昇温させ、低沸点溶媒を水分離器で分離し、１２時間撹拌した。室温に冷却させ、直接に減圧濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－６を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．７０ （ｓ， １Ｈ）， ７．６０ （ｓ， １Ｈ）， ７．０５ （ｓ， １Ｈ）， ４．２０ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９５ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ２Ｈ）， １．２８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0150】
ステップ６：化学物ＷＸ００８－７の合成
化合物ＷＸ００８－６（４ｇ、１２．７７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解させ、－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（３．３６ｇ、１３．４１ｍｍｏｌ、１．２９ｍＬ）を滴下し、０．５時間保温して撹拌し、０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（３．３６ｇ）を加え、０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。反応溶液を１Ｎの塩酸（５０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５／１）により分離して化合物ＷＸ００８－７を得た。
化合物ＷＸ００８－６（４ｇ、１２．７７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解させ、－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（３．３６ｇ、１３．４１ｍｍｏｌ、１．２９ｍＬ）を滴下し、０．５時間保温して撹拌し、０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。－７０℃に冷却させ、三臭化ホウ素（３．３６ｇ）を加え、０℃にゆっくりと昇温させて１時間撹拌した。反応溶液を１Ｎの塩酸（５０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５／１）により分離して化合物ＷＸ００８－７を得た。
【0151】
ステップ７：化学物ＷＸ００８－８の合成
化合物ＷＸ００８－７（１．８ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．８３ｇ、１３．２４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に入れ、２－ブロモ－１，１－ジメトキシエタン（１．２２ｇ、７．２２ｍｍｏｌ、８４７．５８μＬ）を加え、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－８を得た。
化合物ＷＸ００８－７（１．８ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．８３ｇ、１３．２４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に入れ、２－ブロモ－１，１－ジメトキシエタン（１．２２ｇ、７．２２ｍｍｏｌ、８４７．５８μＬ）を加え、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－８を得た。
【0152】
ステップ８：化学物ＷＸ００８－９の合成
化合物ＷＸ００８－８（１．８４ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に入れ、ポリリン酸（１．８４ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）を加え、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－９を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７１ （ｍ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
化合物ＷＸ００８－８（１．８４ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に入れ、ポリリン酸（１．８４ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）を加え、１００℃に昇温させて１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ００８－９を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ７．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７１ （ｍ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８５ （ｄ， Ｊ ＝ ０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0153】
ステップ９：化学物ＷＸ００８－１０の合成
化合物ＷＸ００８－９（７００ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（１２８．７８ｍｇ、３０３．２８μｍｏｌ）、カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３０４．５３ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１．８４ｇ、８．６７ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１３８．８６ｍｇ、１５１．６４μｍｏｌ）をトルエン（１０ｍＬ）及び水（２ｍＬ）に入れ、窒素ガスで置換・保護し、１００℃に昇温させて６時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にｎ－ヘプタン（１０ｍＬ）を加えて１５分間撹拌し、濾過し、ｎ－ヘプタン（３ｍＬ×３）でケーキを濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＷＸ００８－１０を得た。
化合物ＷＸ００８－９（７００ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、２－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（１２８．７８ｍｇ、３０３．２８μｍｏｌ）、カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３０４．５３ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（１．８４ｇ、８．６７ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１３８．８６ｍｇ、１５１．６４μｍｏｌ）をトルエン（１０ｍＬ）及び水（２ｍＬ）に入れ、窒素ガスで置換・保護し、１００℃に昇温させて６時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物にｎ－ヘプタン（１０ｍＬ）を加えて１５分間撹拌し、濾過し、ｎ－ヘプタン（３ｍＬ×３）でケーキを濯ぎ、ケーキを収集して化合物ＷＸ００８－１０を得た。
【0154】
ステップ１０：化学物ＷＸ００８－１１の合成
化合物ＷＸ００８－１０（７６０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１６５．３５ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ、１６０．５３μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させ、２０℃でカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（４９８．３４ｍｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で１時間撹拌した。反応溶液を０～１０℃の１Ｎ塩酸（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により分離して化合物ＷＸ００８－１１を得た。
化合物ＷＸ００８－１０（７６０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）及びアクリルアミド（１６５．３５ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ、１６０．５３μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解させ、２０℃でカリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（４９８．３４ｍｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で１時間撹拌した。反応溶液を０～１０℃の１Ｎ塩酸（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により分離して化合物ＷＸ００８－１１を得た。
【0155】
ステップ１１：化合物ＷＸ００８－１２の塩酸塩の合成
化合物ＷＸ００８－１１（２４０ｍｇ、６２４．３８μｍｏｌ）を酢酸エチル（１ｍＬ）に入れ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、２０℃で３時間撹拌した。反応溶液を直接に減圧濃縮して化合物ＷＸ００８－１２の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８７ （ｓ， １Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ７．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８６－２．７７ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８－２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４－２．２２ （ｍ， １Ｈ）， ２．１９－２．１４ （ｍ， １Ｈ）。
化合物ＷＸ００８－１１（２４０ｍｇ、６２４．３８μｍｏｌ）を酢酸エチル（１ｍＬ）に入れ、塩化水素・酢酸エチル（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、２０℃で３時間撹拌した。反応溶液を直接に減圧濃縮して化合物ＷＸ００８－１２の塩酸塩を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８７ （ｓ， １Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ７．０９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８６－２．７７ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８－２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４－２．２２ （ｍ， １Ｈ）， ２．１９－２．１４ （ｍ， １Ｈ）。
【0156】
ステップ１２：化学物ＷＸ００８の合成
化合物ＢＢ－４（１２５．２９ｍｇ、２１１．０７μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９０．９３ｍｇ、７０３．５７μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２０℃で２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８６．９４ｍｇ、２２８．６６μｍｏｌ）を加えて５分間撹拌した。２０℃で化合物ＷＸ００８－１２の塩酸塩（５０ｍｇ、１７５．８９μｍｏｌ）を加えて１２時間撹拌した。反応溶液を直接に減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ００８を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１９ （ｓ， １Ｈ）， ８．１７－８．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８１ （ｓ， １Ｈ）， ７．４０－７．３５ （ｍ， １Ｈ）， ７．３２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２５－７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０－４．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７７－３．６９ （ｍ， ６Ｈ）， ３．４２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９２－２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．７９－２．７３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４４－２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７ （ｓ， ６Ｈ）。
化合物ＢＢ－４（１２５．２９ｍｇ、２１１．０７μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９０．９３ｍｇ、７０３．５７μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、２０℃で２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８６．９４ｍｇ、２２８．６６μｍｏｌ）を加えて５分間撹拌した。２０℃で化合物ＷＸ００８－１２の塩酸塩（５０ｍｇ、１７５．８９μｍｏｌ）を加えて１２時間撹拌した。反応溶液を直接に減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ００８を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１９ （ｓ， １Ｈ）， ８．１７－８．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８１ （ｓ， １Ｈ）， ７．４０－７．３５ （ｍ， １Ｈ）， ７．３２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．４ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２５－７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０－４．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｓ， ２Ｈ）， ３．７７－３．６９ （ｍ， ６Ｈ）， ３．４２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９２－２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．７９－２．７３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４４－２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７ （ｓ， ６Ｈ）。
【0157】
実施例９
合成スキーム：
化合物ＷＸ００９の合成
化合物ＢＢ－４（２００ｍｇ、３３６．９３μｍｏｌ）及びＢＢ－８の塩酸塩（１３３．７３ｍｇ、４０４．３２μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（２５６．２２ｍｇ、６７３．８６μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３０．６４ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を１０ｍＬの水及び１０ｍＬの酢酸エチルに注ぎ、有機相を分離し、水（１０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ００９を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．６９ － １０．３７ （ｍ， １Ｈ）， ８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２７ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１７ － ７．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．８６ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６８ － ７．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４９ － ７．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．３， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６６ － ４．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２８ － ３．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８１ － ３．６１ （ｍ， １０Ｈ）， ３．００ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７２ － ２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．４７ － ２．３７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ － ２．２１ （ｍ， １Ｈ）， １．５１ （ｓ， ６Ｈ）。
【化73】
合成スキーム：
【化74】
化合物ＷＸ００９の合成
化合物ＢＢ－４（２００ｍｇ、３３６．９３μｍｏｌ）及びＢＢ－８の塩酸塩（１３３．７３ｍｇ、４０４．３２μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（２５６．２２ｍｇ、６７３．８６μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３０．６４ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を１０ｍＬの水及び１０ｍＬの酢酸エチルに注ぎ、有機相を分離し、水（１０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ００９を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．６９ － １０．３７ （ｍ， １Ｈ）， ８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２７ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１７ － ７．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．８６ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６８ － ７．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４９ － ７．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７０ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．３， １１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６６ － ４．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２８ － ３．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８１ － ３．６１ （ｍ， １０Ｈ）， ３．００ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７２ － ２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．４７ － ２．３７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ － ２．２１ （ｍ， １Ｈ）， １．５１ （ｓ， ６Ｈ）。
【0158】
実施例１０
合成スキーム：
【化75】
合成スキーム：
【化76】
【0159】
ステップ１：化学物ＷＸ０１０－１の合成
室温で化合物ＢＢ－３－４（２ｇ、６．００ｍｍｏｌ）をジオキサン（２０ｍＬ）の溶媒に加え、撹拌を開始させ、化合物ビス（ピナコラート）ジボロン（２．２９ｇ、９．００ｍｍｏｌ）、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４３９．２３ｍｇ、６００．２８μｍｏｌ）及び酢酸カリウム（１．１８ｇ、１２．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を１００℃に昇温させ、窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、半飽和食塩水（３０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相を加え、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後濾過し、スピン乾燥させ、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液，石油エーテル：酢酸エチル＝１／０～４／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ３８０．９［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．１９ （ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９４ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８３ － ７．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６５ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０９ － ４．０９ （ｍ， １Ｈ）， ４．０８ （ｓ， １Ｈ）， １．４１ （ｓ， １２Ｈ）， １．３０ － １．２５ （ｍ， ３Ｈ）。
室温で化合物ＢＢ－３－４（２ｇ、６．００ｍｍｏｌ）をジオキサン（２０ｍＬ）の溶媒に加え、撹拌を開始させ、化合物ビス（ピナコラート）ジボロン（２．２９ｇ、９．００ｍｍｏｌ）、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４３９．２３ｍｇ、６００．２８μｍｏｌ）及び酢酸カリウム（１．１８ｇ、１２．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を１００℃に昇温させ、窒素ガスの保護下で、１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を室温に冷却させ、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせ、半飽和食塩水（３０ｍＬ×２）を加えて洗浄し、有機相を加え、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後濾過し、スピン乾燥させ、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液，石油エーテル：酢酸エチル＝１／０～４／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ３８０．９［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．１９ （ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９４ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８３ － ７．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６５ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０９ － ４．０９ （ｍ， １Ｈ）， ４．０８ （ｓ， １Ｈ）， １．４１ （ｓ， １２Ｈ）， １．３０ － １．２５ （ｍ， ３Ｈ）。
【0160】
ステップ２：化学物ＷＸ０１０－２の合成
室温で化合物ＷＸ０１０－１（２．３ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）の混合溶媒に加え、撹拌を開始させ、化合物炭酸水素ナトリウム（１．０２ｇ、１２．１０ｍｍｏｌ、４７０．５２μＬ）を加え、反応溶液を０℃に冷却させ、過酸化水素（５．４９ｇ、４８．３９ｍｍｏｌ、４．６５ｍＬ、３０％の濃度）を反応溶液にゆっくりと滴下し、窒素ガスの保護下で、２時間撹拌を続けた。反応溶液氷浴下で飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）をゆっくりと滴下し、滴下完了後、１０分間撹拌を続けた。酢酸エチル（１００ｍＬ×２）を加えて抽出した。有機相に無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた後、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル：酢酸エチル＝８／１～４／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：８．１３ （ｄ， Ｊ＝８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６４ － ７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２９ （ｄ， Ｊ＝２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１８ （ｄｄ， Ｊ＝２．６， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０５ （ｄ， Ｊ＝０．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３１ － １．２２ （ｍ， ３Ｈ）。
室温で化合物ＷＸ０１０－１（２．３ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）の混合溶媒に加え、撹拌を開始させ、化合物炭酸水素ナトリウム（１．０２ｇ、１２．１０ｍｍｏｌ、４７０．５２μＬ）を加え、反応溶液を０℃に冷却させ、過酸化水素（５．４９ｇ、４８．３９ｍｍｏｌ、４．６５ｍＬ、３０％の濃度）を反応溶液にゆっくりと滴下し、窒素ガスの保護下で、２時間撹拌を続けた。反応溶液氷浴下で飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）をゆっくりと滴下し、滴下完了後、１０分間撹拌を続けた。酢酸エチル（１００ｍＬ×２）を加えて抽出した。有機相に無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた後、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル：酢酸エチル＝８／１～４／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－２を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：８．１３ （ｄ， Ｊ＝８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ７．６４ － ７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２９ （ｄ， Ｊ＝２．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１８ （ｄｄ， Ｊ＝２．６， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０５ （ｄ， Ｊ＝０．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３１ － １．２２ （ｍ， ３Ｈ）。
【0161】
ステップ３：化学物ＷＸ０１０－３の合成
化合物ＷＸ０１０－２（４００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）及びと１，５－ジブロモペンタン（１．５３ｇ、６．６４ｍｍｏｌ、８９７．７９μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（５５０．４１ｍｇ、３．９８ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（１９８．９９ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１０時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、それに酢酸エチル（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加え、有機相を分離し、飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄した。有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－３を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４１８．９［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ： ８．０６ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．５３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２５ － ７．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１７ － ４．０８ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０３ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６ （ｓ， ２Ｈ）， ３．３９ （ｔ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９７ － １．８６ （ｍ， ２Ｈ）， １．８５ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６９ － １．５７ （ｍ， ３Ｈ）， １．１８ （ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
化合物ＷＸ０１０－２（４００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）及びと１，５－ジブロモペンタン（１．５３ｇ、６．６４ｍｍｏｌ、８９７．７９μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（５５０．４１ｍｇ、３．９８ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（１９８．９９ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１０時間撹拌した。反応溶液を２５℃に冷却させ、それに酢酸エチル（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加え、有機相を分離し、飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄した。有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－３を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ４１８．９［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ： ８．０６ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６６ （ｓ， １Ｈ）， ７．５３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２５ － ７．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１７ － ４．０８ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０３ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６ （ｓ， ２Ｈ）， ３．３９ （ｔ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９７ － １．８６ （ｍ， ２Ｈ）， １．８５ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６９ － １．５７ （ｍ， ３Ｈ）， １．１８ （ｔ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0162】
ステップ４：化学物ＷＸ０１０－４の合成
化合物ＢＢ－１０（２００ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ）及びＷＸ０１０－３（１７７．１１ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ、７２．６１μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（１７５．１２ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）及びヨウ化カリウム（７０．１２ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－４を得た。
ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１２．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＢＢ－１０（２００ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ）及びＷＸ０１０－３（１７７．１１ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ、７２．６１μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（１７５．１２ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）及びヨウ化カリウム（７０．１２ｍｇ、４２２．３７μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１０－４を得た。
ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１２．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0163】
ステップ５：化学物ＷＸ０１０の合成
０℃で化合物ＷＸ０１０－４（３００ｍｇ、３６９．５０μｍｏｌ）及びアクリルアミド（２６．２６ｍｇ、３６９．５０μｍｏｌ、２５．５０μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（８２．９２ｍｇ、７３９．００μｍｏｌ）をゆっくりと反応系にバッチで加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応系を飽和塩化アンモニウム（５０ｍＬ）にゆっくりと加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して化合物ＷＸ０１０を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８３７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１１．２３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， ８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．３０ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１５ － ８．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ － ７．６８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３４ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６５ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１８ － ４．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０３ （ｓ， １Ｈ）， ３．９３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ３．６０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３８ － ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２ － ３．０４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９８ － ２．７９ （ｍ， １Ｈ）， ２．７１ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４１ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， １２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３１ － ２．１７ （ｍ， １Ｈ）， １．９５ － １．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．６４ － １．４３ （ｍ， ８Ｈ）。
０℃で化合物ＷＸ０１０－４（３００ｍｇ、３６９．５０μｍｏｌ）及びアクリルアミド（２６．２６ｍｇ、３６９．５０μｍｏｌ、２５．５０μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に加え、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（８２．９２ｍｇ、７３９．００μｍｏｌ）をゆっくりと反応系にバッチで加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、０℃で１時間撹拌した。反応系を飽和塩化アンモニウム（５０ｍＬ）にゆっくりと加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で２回抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して化合物ＷＸ０１０を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８３７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１１．２３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， ８．３９ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．３０ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１５ － ８．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ － ７．６８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３４ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６５ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１８ － ４．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０３ （ｓ， １Ｈ）， ３．９３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ３．６０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３８ － ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２ － ３．０４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９８ － ２．７９ （ｍ， １Ｈ）， ２．７１ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４１ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， １２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３１ － ２．１７ （ｍ， １Ｈ）， １．９５ － １．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．６４ － １．４３ （ｍ， ８Ｈ）。
【0164】
実施例１１
合成スキーム：
【化77】
合成スキーム：
【化78】
【0165】
ステップ１：化学物ＷＸ０１１－１の合成
化合物ＢＢ－４－３（１ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解させ、炭酸カリウム（６５２．８６ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）及び２，２’－ジブロモジエチルエーテル（２．７４ｇ、１１．８１ｍｍｏｌ、１．４８ｍＬ）を加え、８０℃に昇温させ３０時間撹拌した。反応溶液に水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１）により精製して化合物ＷＸ０１１－１を得た。
化合物ＢＢ－４－３（１ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解させ、炭酸カリウム（６５２．８６ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）及び２，２’－ジブロモジエチルエーテル（２．７４ｇ、１１．８１ｍｍｏｌ、１．４８ｍＬ）を加え、８０℃に昇温させ３０時間撹拌した。反応溶液に水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１）により精製して化合物ＷＸ０１１－１を得た。
【0166】
ステップ２：化学物ＷＸ０１１－２の合成
１－アミノシクロプロパンカルボン酸エチル塩酸塩（３４６．０１ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（５７７．４８ｍｇ、４．１８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、化合物ＷＸ０１１－１（０．６ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、７５℃に昇温させて１５時間撹拌した。反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１）により精製して化合物ＷＸ０１１－２を得た。
１－アミノシクロプロパンカルボン酸エチル塩酸塩（３４６．０１ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（５７７．４８ｍｇ、４．１８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、化合物ＷＸ０１１－１（０．６ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、７５℃に昇温させて１５時間撹拌した。反応溶液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１５ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１）により精製して化合物ＷＸ０１１－２を得た。
【0167】
ステップ３：化学物ＷＸ０１１－３の合成
化合物ＷＸ０１１－２（０．２ｇ、３２１．２２μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、２０℃で水酸化リチウム一水和物（６７．４０ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を加え、３０時間撹拌した。反応溶液に水（５ｍＬ）を加え、１Ｎの希塩酸でｐＨ＝５に調節し、酢酸エチル（１０ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて化合物ＷＸ０１１－３を得た。
化合物ＷＸ０１１－２（０．２ｇ、３２１．２２μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、２０℃で水酸化リチウム一水和物（６７．４０ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を加え、３０時間撹拌した。反応溶液に水（５ｍＬ）を加え、１Ｎの希塩酸でｐＨ＝５に調節し、酢酸エチル（１０ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、スピン乾燥させて化合物ＷＸ０１１－３を得た。
【0168】
ステップ４：化学物ＷＸ０１１の合成
化合物ＷＸ０１１－３（８０ｍｇ、１３４．５５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解させ、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（７６．７４ｍｇ、２０１．８２μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６９．５６ｍｇ、５３８．２０μｍｏｌ、９３．７４μＬ）を加え、１０分間撹拌し、化合物ＢＢ－１の塩酸塩（４９．１０ｍｇ、１７４．９１μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ０１１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１６－８．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｄｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９１ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７１ （ｓ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３０－７．２２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１６－７．１４（ｍ， １Ｈ）， ４．３５ （ｔ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１０ （ｄｄ， Ｊ＝４．２ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９９－３．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｔ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８３－２．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４２－２．３２ （ｍ， １Ｈ）， ２．２９－２．２２ （ｍ， １Ｈ）， １．８１－１．７８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５－１．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５４ （ｓ， ９Ｈ）．
化合物ＷＸ０１１－３（８０ｍｇ、１３４．５５μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解させ、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（７６．７４ｍｇ、２０１．８２μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６９．５６ｍｇ、５３８．２０μｍｏｌ、９３．７４μＬ）を加え、１０分間撹拌し、化合物ＢＢ－１の塩酸塩（４９．１０ｍｇ、１７４．９１μｍｏｌ）を加え、２０℃で１５時間撹拌した。反応溶液を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離・精製して化合物ＷＸ０１１を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ： ８．１６－８．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｄｄ， Ｊ＝１．６ Ｈｚ， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９１ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７１ （ｓ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３０－７．２２ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１６－７．１４（ｍ， １Ｈ）， ４．３５ （ｔ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１０ （ｄｄ， Ｊ＝４．２ Ｈｚ， １１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９９－３．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｔ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８３－２．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４２－２．３２ （ｍ， １Ｈ）， ２．２９－２．２２ （ｍ， １Ｈ）， １．８１－１．７８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５－１．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５４ （ｓ， ９Ｈ）．
【0169】
実施例１２
合成スキーム：
【化79】
合成スキーム：
【化80】
【0170】
ステップ１：化学物ＷＸ０１２－１の合成
化合物ＢＢ－１０及び５－ブロモ吉草酸エチル（６６２．３３ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ、５０５．５９μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（２６２．６９ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（９４．９７ｍｇ、６３３．５６μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１２時間撹拌した。反応完了後、２５℃に冷却させ、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、飽和食塩水（２０ｍＬ）で１回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１２－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：６０２．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＢＢ－１０及び５－ブロモ吉草酸エチル（６６２．３３ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ、５０５．５９μＬ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（２６２．６９ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）及びヨウ化ナトリウム（９４．９７ｍｇ、６３３．５６μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃で１２時間撹拌した。反応完了後、２５℃に冷却させ、酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、飽和食塩水（２０ｍＬ）で１回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１）により分離・精製して化合物ＷＸ０１２－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：６０２．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0171】
ステップ２：化学物ＷＸ０１２－２の合成
化合物ＷＸ０１２－１（１７０ｍｇ、２８２．５４μｍｏｌ）を無水エタノール（２．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、水酸化リチウム一水和物（２９．６４ｍｇ、７０６．３５μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液に水（１０ｍＬ）を加え、減圧して大部分の有機溶媒をスピンオフし、水相を２Ｎの塩酸でｐＨ＝３に調節し、水相を直接に凍結乾燥させた。化合物ＷＸ０１２－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：５７４．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＷＸ０１２－１（１７０ｍｇ、２８２．５４μｍｏｌ）を無水エタノール（２．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、水酸化リチウム一水和物（２９．６４ｍｇ、７０６．３５μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液に水（１０ｍＬ）を加え、減圧して大部分の有機溶媒をスピンオフし、水相を２Ｎの塩酸でｐＨ＝３に調節し、水相を直接に凍結乾燥させた。化合物ＷＸ０１２－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：５７４．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0172】
ステップ３：化合物ＷＸ０１２の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－３の塩酸塩（５４．３０ｍｇ、１３９．４６μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（１６５．７１ｍｇ、４３５．８２μｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５２．９２ｍｇ、５２２．９９μｍｏｌ、７２．７９μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で３時間撹拌した。反応系を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集し無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して化合物ＷＸ０１２の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８５０．４［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．５４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １０．２９ （ｓ， １Ｈ）， ８．４８ － ８．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１８ － ８．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９９ （ｓ， １Ｈ）， ７．７９ － ７．６９ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２８ － ７．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１４ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６５ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．４， １２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２８ － ３．０７ （ｍ， ６Ｈ）， ２．９５ － ２．８０ （ｍ， １Ｈ）， ２．６９ － ２．５９ （ｍ， １Ｈ）， ２．４９ － ２．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３３ － ２．２２ （ｍ， １Ｈ）， １．９２ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．７６ － １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４９ （ｓ， ６Ｈ）。
化合物ＢＢ－３の塩酸塩（５４．３０ｍｇ、１３９．４６μｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（１６５．７１ｍｇ、４３５．８２μｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５２．９２ｍｇ、５２２．９９μｍｏｌ、７２．７９μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で３時間撹拌した。反応系を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、有機相を水（２０ｍＬ×２）で２回洗浄し、有機相を収集し無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により分離して化合物ＷＸ０１２の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８５０．４［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．５４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １０．２９ （ｓ， １Ｈ）， ８．４８ － ８．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１８ － ８．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．９９ （ｓ， １Ｈ）， ７．７９ － ７．６９ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２８ － ７．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１４ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６５ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．４， １２．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２８ － ３．０７ （ｍ， ６Ｈ）， ２．９５ － ２．８０ （ｍ， １Ｈ）， ２．６９ － ２．５９ （ｍ， １Ｈ）， ２．４９ － ２．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３３ － ２．２２ （ｍ， １Ｈ）， １．９２ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．７６ － １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４９ （ｓ， ６Ｈ）。
【0173】
実施例１３
合成スキーム：
【化81】
合成スキーム：
【化82】
【0174】
ステップ１：化学物ＷＸ０１３－１の合成
化合物ＢＢ－１０（０．１５ｇ、２８４．７９μｍｏｌ）及びブロモプロピオン酸エチル（１０３．１１ｍｇ、５６９．５７μｍｏｌ、７２．６１μＬ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（７８．７２ｍｇ、５６９．５７μｍｏｌ）及びヨウ化カリウム（４７．２８ｍｇ、２８４．７９μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃の２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）を加え、有機相を分離して飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄した。有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１、体積比）により精製して化合物ＷＸ０１３－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５７４．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＢＢ－１０（０．１５ｇ、２８４．７９μｍｏｌ）及びブロモプロピオン酸エチル（１０３．１１ｍｇ、５６９．５７μｍｏｌ、７２．６１μＬ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、炭酸カリウム（７８．７２ｍｇ、５６９．５７μｍｏｌ）及びヨウ化カリウム（４７．２８ｍｇ、２８４．７９μｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、８０℃の２時間撹拌した。反応溶液を室温に冷却させ、酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）を加え、有機相を分離して飽和食塩水（３０ｍＬ×２）で２回洗浄した。有機相を収集し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝５０／１～１０／１、体積比）により精製して化合物ＷＸ０１３－１を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５７４．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0175】
ステップ２：化学物ＷＸ０１３－２の合成
化合物ＷＸ０１３－１（０．２ｇ、３４８．６６μｍｏｌ）を無水エタノール（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、水酸化リチウム一水和物（４３．８９ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応系を減圧して大部分のエタノールをスピンオフし、２０ｍＬの水を加えた。水相を２Ｎの塩酸でｐＨ＝３～４に調節し、水相を直接に凍結乾燥させた。化合物ＷＸ０１３－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５４６．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
化合物ＷＸ０１３－１（０．２ｇ、３４８．６６μｍｏｌ）を無水エタノール（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に加え、撹拌を開始させ、水酸化リチウム一水和物（４３．８９ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を反応系にゆっくりと加え、反応溶液を窒素ガスで３回置換した後、２５℃で１２時間撹拌した。反応系を減圧して大部分のエタノールをスピンオフし、２０ｍＬの水を加えた。水相を２Ｎの塩酸でｐＨ＝３～４に調節し、水相を直接に凍結乾燥させた。化合物ＷＸ０１３－２を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ５４６．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0176】
ステップ３：化合物ＷＸ０１３の塩酸塩の合成
化合物ＷＸ０１３－２（６０ｍｇ、１０９．９８μｍｏｌ）及びＢＢ－３の塩酸塩をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８３．６３ｍｇ、２１９．９５μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４２．６４ｍｇ、３２９．９３μｍｏｌ、５７．４７μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２０℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を水及び酢酸エチル（１０ｍＬ：１０ｍＬ）の混合溶媒に注ぎ、有機相を分離し、水（１０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１３の塩酸塩を得た。 ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：８２２．３［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．５４ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １０．４６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．４７ － ８．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．１６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．０８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．００ （ｓ， １Ｈ）， ７．８０ － ７．６７ （ｍ， ３Ｈ）， ７．３４ － ７．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６８ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ３．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ２．８６ （ｍ， １Ｈ）， ２．６７ （ｍ， １Ｈ）， ２．６３ － ２．６２ （ｍ， １Ｈ）， ２．４１ － ２．３３ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｂｒ ｓ， ６Ｈ）。
化合物ＷＸ０１３－２（６０ｍｇ、１０９．９８μｍｏｌ）及びＢＢ－３の塩酸塩をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に加え、２－（７－アザベンゾトリアゾリル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（８３．６３ｍｇ、２１９．９５μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４２．６４ｍｇ、３２９．９３μｍｏｌ、５７．４７μＬ）を反応系にゆっくりと加え、混合物を窒素ガスで３回置換した後、２０℃で１２時間撹拌した。反応完了後、反応溶液を水及び酢酸エチル（１０ｍＬ：１０ｍＬ）の混合溶媒に注ぎ、有機相を分離し、水（１０ｍＬ×３）で３回洗浄し、有機相を収集して無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧してスピン乾燥させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１３の塩酸塩を得た。 ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ：８２２．３［Ｍ＋Ｈ］＋．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９５ （ｓ， １Ｈ）， １０．５４ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， １０．４６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．４７ － ８．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．１６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．０８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．００ （ｓ， １Ｈ）， ７．８０ － ７．６７ （ｍ， ３Ｈ）， ７．３４ － ７．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６８ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ３．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ２．８６ （ｍ， １Ｈ）， ２．６７ （ｍ， １Ｈ）， ２．６３ － ２．６２ （ｍ， １Ｈ）， ２．４１ － ２．３３ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ （ｂｒ ｓ， ６Ｈ）。
【0177】
実施例１４
合成スキーム：
【化83】
合成スキーム：
【化84】
【0178】
化合物ＷＸ０１４の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－１１（４００ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１２の塩酸塩（４０３．８３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解させ、酢酸ホウ素ナトリウム（５４３．５０ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、ジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離して、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相を減圧濃縮し、得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１４の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， １０．８３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６３ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０５ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．９１ － ７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５４ － ７．４３ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４１ － ７．３８ （ｍ， １Ｈ）， ７．１６ － ７．１１ （ｍ， １Ｈ）， ４．６３ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．０， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９８ － ３．８１ （ｍ， ３Ｈ）， ３．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４３ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝１２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２８ － ３．０５ （ｍ， ６Ｈ）， ２．９６ － ２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．７６ － ２．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５６ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４６ － ２．３７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３１ － ２．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７２ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８ － １．４５ （ｍ， ２Ｈ）。
化合物ＢＢ－１１（４００ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１２の塩酸塩（４０３．８３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解させ、酢酸ホウ素ナトリウム（５４３．５０ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、ジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離して、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相を減圧濃縮し、得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１４の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， １０．８３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６３ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０５ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９６ （ｓ， １Ｈ）， ７．９１ － ７．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７３ （ｓ， ２Ｈ）， ７．５４ － ７．４３ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４１ － ７．３８ （ｍ， １Ｈ）， ７．１６ － ７．１１ （ｍ， １Ｈ）， ４．６３ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．０， １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９８ － ３．８１ （ｍ， ３Ｈ）， ３．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４３ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝１２．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２８ － ３．０５ （ｍ， ６Ｈ）， ２．９６ － ２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．７６ － ２．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５６ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４６ － ２．３７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３１ － ２．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０２ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１２．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７２ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８ － １．４５ （ｍ， ２Ｈ）。
【0179】
実施例１５
合成スキーム：
【化85】
合成スキーム：
【化86】
【0180】
化合物ＷＸ０１５の塩酸塩の合成
化合物ＢＢ－１１（４００ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１３の塩酸塩（４０３．８３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解させ、酢酸ホウ素ナトリウム（１８１．１７ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、ジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相減圧濃縮し、得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１５の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｓ， １Ｈ）， １０．８２ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６３ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０３ （ｓ， １Ｈ）， ７．９６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８６ （ｄｔ， Ｊ＝９．４， １５．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．６０ － ７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ＝２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２７ － ７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ７．１４ （ｄｄ， Ｊ＝２．３， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６８ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９２ － ３．８１ （ｍ， １Ｈ）， ３．６９ （ｂｒ ｓ， ３Ｈ）， ３．５０ － ３．３８ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２３ － ３．０６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９８ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．４５ － ２．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１６ － １．９９ （ｍ， ５Ｈ）， １．９１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７１ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７ － １．４２ （ｍ， ２Ｈ）， １．４０ － １．２７ （ｍ， ２Ｈ）。
化合物ＢＢ－１１（４００ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１３の塩酸塩（４０３．８３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解させ、酢酸ホウ素ナトリウム（１８１．１７ｍｇ、８５４．８０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、ジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相減圧濃縮し、得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣ（移動相：アセトニトリル／水；酸性系：０．０５％のＨＣｌ）により精製して化合物ＷＸ０１５の塩酸塩を得た。ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９６ （ｓ， １Ｈ）， １０．８２ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６３ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１７ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０３ （ｓ， １Ｈ）， ７．９６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８６ （ｄｔ， Ｊ＝９．４， １５．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．６０ － ７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ＝２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２７ － ７．２２ （ｍ， １Ｈ）， ７．１４ （ｄｄ， Ｊ＝２．３， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６８ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝３．９， １１．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９２ － ３．８１ （ｍ， １Ｈ）， ３．６９ （ｂｒ ｓ， ３Ｈ）， ３．５０ － ３．３８ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２３ － ３．０６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９８ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０ － ２．５８ （ｍ， １Ｈ）， ２．４５ － ２．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１６ － １．９９ （ｍ， ５Ｈ）， １．９１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７１ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７ － １．４２ （ｍ， ２Ｈ）， １．４０ － １．２７ （ｍ， ２Ｈ）。
【0181】
実施例１６及び実施例１７
合成スキーム：
【化87】
合成スキーム：
【化88】
【0182】
化合物１６及び化合物１７の合成
化合物ＢＢ－１１（７ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１３の塩酸塩（７．１８ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解させ、室温で１２時間撹拌し、酢酸ホウ素ナトリウム（４．７６ｇ、２２．４４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、水（２００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離し、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相を減圧濃縮し、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン：メタノール＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ０１５を得、化合物ＷＸ０１５をキラルＨＰＬＣ（カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＩＥ（２５０ｍｍ×３０ｍｍ、１０μｍ）；移動相：Ａ（ＩＰＡ）、Ｂ（ＡＣＮ）、Ｂ％：５０％～１００％；流速：８０ｍＬ／ｍｉｎ）により分離して化合物ＷＸ０１６及びＷＸ０１７を得た。
化合物ＢＢ－１１（７ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－１３の塩酸塩（７．１８ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解させ、室温で１２時間撹拌し、酢酸ホウ素ナトリウム（４．７６ｇ、２２．４４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素ガスの保護下で、室温で１２時間撹拌した。反応完了後、水（２００ｍＬ）を加えて反応溶液を希釈し、有機相を分離し、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、有機相を減圧濃縮し、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメタン：メタノール＝１０／１）により分離して化合物ＷＸ０１５を得、化合物ＷＸ０１５をキラルＨＰＬＣ（カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＩＥ（２５０ｍｍ×３０ｍｍ、１０μｍ）；移動相：Ａ（ＩＰＡ）、Ｂ（ＡＣＮ）、Ｂ％：５０％～１００％；流速：８０ｍＬ／ｍｉｎ）により分離して化合物ＷＸ０１６及びＷＸ０１７を得た。
【0183】
分析方法：カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡ １００×４．６ｍｍ、３μｍ；移動相：Ａ：ｎ－ヘキサン（０．１％のジエチルアミン）；Ｂ：イソプロパノール：アセトニトリル＝２：１、Ａ：Ｂ＝４０：６０；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ。
ＷＸ０１６：保持時間：４．６７９ｍｉｎ、ｅｅ％：９８．７７％；ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， ８．６０ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１６ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９９ （ｓ， １Ｈ）， ７．９１ － ７．７４ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５１ （ｔ， Ｊ＝７．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２１ － ７．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １１．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９４ － ３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．２２３．００ （ｍ， ７Ｈ）， ２．８９ （ｄｄｄ， Ｊ＝５．３， １２．２， １７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６９ － ２．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４７ － ２．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２９ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．００ － １．８１ （ｍ， ５Ｈ）， １．７２ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８ － １．４４ （ｍ， ２Ｈ）， １．２６ － １．０９ （ｍ， ２Ｈ）．
ＷＸ０１７：保持時間：５．７９７ｍｉｎ、ｅｅ％：９９．８６％；ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．００ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２２ － ８．１３ （ｍ， １Ｈ）， ８．０４ － ７．９５ （ｍ， １Ｈ）， ７．９４ － ７．７１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５７ － ７．４７ （ｍ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝８．０， １９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．８７ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２８ － ２．９７ （ｍ， ７Ｈ）， ２．８８ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝１２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６９ － ２．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４９ － ２．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝６．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１７ － ２．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．００ － １．７９ （ｍ， ５Ｈ）， １．７１ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５１ （ｑ， Ｊ＝１０．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２６ － １．０１ （ｍ， ２Ｈ）．
ＷＸ０１６：保持時間：４．６７９ｍｉｎ、ｅｅ％：９８．７７％；ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ： １０．９７ （ｓ， １Ｈ）， ８．６０ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１６ （ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９９ （ｓ， １Ｈ）， ７．９１ － ７．７４ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５１ （ｔ， Ｊ＝７．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２１ － ７．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝４．１， １１．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９４ － ３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．２２３．００ （ｍ， ７Ｈ）， ２．８９ （ｄｄｄ， Ｊ＝５．３， １２．２， １７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６９ － ２．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４７ － ２．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２９ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１１ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝９．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．００ － １．８１ （ｍ， ５Ｈ）， １．７２ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８ － １．４４ （ｍ， ２Ｈ）， １．２６ － １．０９ （ｍ， ２Ｈ）．
ＷＸ０１７：保持時間：５．７９７ｍｉｎ、ｅｅ％：９９．８６％；ＭＳ-ＥＳＩ ｍ／ｚ： ８１５．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋． １Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．００ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６０ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２２ － ８．１３ （ｍ， １Ｈ）， ８．０４ － ７．９５ （ｍ， １Ｈ）， ７．９４ － ７．７１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５７ － ７．４７ （ｍ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ＝８．０， １９．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６６ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ － ４．４０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．８７ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２８ － ２．９７ （ｍ， ７Ｈ）， ２．８８ （ｂｒ ｔ， Ｊ＝１２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６９ － ２．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４９ － ２．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２８ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝６．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１７ － ２．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．００ － １．７９ （ｍ， ５Ｈ）， １．７１ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５１ （ｑ， Ｊ＝１０．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２６ － １．０１ （ｍ， ２Ｈ）．
【0184】
生物学的データ
試験例１：ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲタンパク質レベル及び下流エフェクター前立腺特異抗原（ＰＳＡ）タンパク質調節のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験
実験目的：ＷＢ（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ、ウエスタンブロット）法を使用して、異なる濃度の化合物のヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲタンパク質レベル及び下流エフェクター前立腺特異抗原（ＰＳＡ）タンパク質の調節を研究することである。
試験例１：ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲタンパク質レベル及び下流エフェクター前立腺特異抗原（ＰＳＡ）タンパク質調節のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験
実験目的：ＷＢ（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ、ウエスタンブロット）法を使用して、異なる濃度の化合物のヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲタンパク質レベル及び下流エフェクター前立腺特異抗原（ＰＳＡ）タンパク質の調節を研究することである。
【0185】
実験スキーム：
１）ＬＮＣａＰ細胞を解凍し、少なくとも２回継代し；
２）ＬＮＣａＰ細胞を６ウェルプレートに各ウェルに３×１０５細胞で接種し、一晩付着させた後所定の濃度の試験化合物で処理し；
３）２４時間処理した後、培養細胞試料の上清を廃棄し、ＤＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水）で２回洗浄し、次に細胞を１００℃で予熱した所定量の２％のＳＤＳライセートで溶解、収集した後１００℃で１５分間変性させ；
４）上記のライセートを変性・冷却させた後タンパク質定量試験（Ｐｉｅｒｃｅ ＢＣＡ タンパク質試験キット、Ｔｈｅｒｍｏ）を実行し、次に５倍のローディング緩衝液（ジチオスレイトール（ＤＤＴ）を含む、Ｂｅｙｏｔｉｍｅ）で同じタンパク質濃度に従って定容させ、更に１００℃で１０分間還元変性させ；
５）ＳＤＳ-ＰＡＧＥで上記試料（１０～２０μｇのタンパク質）を分離し、ＰＶＤＦメンブレン（Ｂｉｏｒａｄ）に転写し；
６）標的タンパク質の分子量に応じてバンドを切断し、ブロッキング溶液（３％のウシ血清アルブミンＴＢＳ－Ｔ溶液、その中で、ＴＢＳ－Ｔ溶液は０．２％のＴｗｅｅｎ－２０を含むトリス－ＨＣｌ緩衝液）で１時間ブロッキングし、更に一次抗体（ａｎｔｉ-ＡＲ（＃５１５３、ＣＳＴ）、ａｎｔｉ-ＰＳＡ／ＫＬＫ３（＃５３６５、ＣＳＴ）及びａｎｔｉ-β－ａｃｔｉｎ（＃４９７０、ＣＳＴ）、ブロッキング溶液をそれぞれ１：１０００、１：１０００及び１：２０００で希釈して調製した）で４℃で一晩培養し；
７）最後に、ＨＲＰ結合二次抗体（ｎｔｉ-ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ（＃７０７４、ＣＳＴ）、ブロッキング溶液で１：２０００に希釈して製造した）と室温で１時間培養し、次に化学発光基質（Ｃｌａｒｉｔｙ ＥＣＬ、Ｂｉｏｒａｄ）でメンブレン上のバンドを検出した。
１）ＬＮＣａＰ細胞を解凍し、少なくとも２回継代し；
２）ＬＮＣａＰ細胞を６ウェルプレートに各ウェルに３×１０５細胞で接種し、一晩付着させた後所定の濃度の試験化合物で処理し；
３）２４時間処理した後、培養細胞試料の上清を廃棄し、ＤＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水）で２回洗浄し、次に細胞を１００℃で予熱した所定量の２％のＳＤＳライセートで溶解、収集した後１００℃で１５分間変性させ；
４）上記のライセートを変性・冷却させた後タンパク質定量試験（Ｐｉｅｒｃｅ ＢＣＡ タンパク質試験キット、Ｔｈｅｒｍｏ）を実行し、次に５倍のローディング緩衝液（ジチオスレイトール（ＤＤＴ）を含む、Ｂｅｙｏｔｉｍｅ）で同じタンパク質濃度に従って定容させ、更に１００℃で１０分間還元変性させ；
５）ＳＤＳ-ＰＡＧＥで上記試料（１０～２０μｇのタンパク質）を分離し、ＰＶＤＦメンブレン（Ｂｉｏｒａｄ）に転写し；
６）標的タンパク質の分子量に応じてバンドを切断し、ブロッキング溶液（３％のウシ血清アルブミンＴＢＳ－Ｔ溶液、その中で、ＴＢＳ－Ｔ溶液は０．２％のＴｗｅｅｎ－２０を含むトリス－ＨＣｌ緩衝液）で１時間ブロッキングし、更に一次抗体（ａｎｔｉ-ＡＲ（＃５１５３、ＣＳＴ）、ａｎｔｉ-ＰＳＡ／ＫＬＫ３（＃５３６５、ＣＳＴ）及びａｎｔｉ-β－ａｃｔｉｎ（＃４９７０、ＣＳＴ）、ブロッキング溶液をそれぞれ１：１０００、１：１０００及び１：２０００で希釈して調製した）で４℃で一晩培養し；
７）最後に、ＨＲＰ結合二次抗体（ｎｔｉ-ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ（＃７０７４、ＣＳＴ）、ブロッキング溶液で１：２０００に希釈して製造した）と室温で１時間培養し、次に化学発光基質（Ｃｌａｒｉｔｙ ＥＣＬ、Ｂｉｏｒａｄ）でメンブレン上のバンドを検出した。
【0186】
実験結果：
試験結果は図１、図２に示された通りである。
結論：本発明の化合物は、ＡＲタンパク質に対して良好な分解活性を示し、その分解能力は良好な濃度依存性を示し、本発明の化合物は、対応する下流のＰＳＡ効果変化に有意な影響を与えることができ、その効果の程度は良好な濃度依存性を示している。
試験結果は図１、図２に示された通りである。
結論：本発明の化合物は、ＡＲタンパク質に対して良好な分解活性を示し、その分解能力は良好な濃度依存性を示し、本発明の化合物は、対応する下流のＰＳＡ効果変化に有意な影響を与えることができ、その効果の程度は良好な濃度依存性を示している。
【0187】
試験例２：ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞における抗増殖効果の評価
実験目的：
本実験では、ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞における細胞増殖に対する試験化合物の阻害効果を検出する。
実験材料：
１．細胞株及び培養方法
実験目的：
本実験では、ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞における細胞増殖に対する試験化合物の阻害効果を検出する。
実験材料：
１．細胞株及び培養方法
【表1】
【0188】
２．培地及び試薬
【表2】
【0189】
３．マルチウェルプレート
Ｇｒｅｉｎｅｒ ＣＥＬＬＳＴＡＲ（登録商標）９６ウェルプレート、平底黒プレート（蓋付き及び透明な底）、＃６５５０９０。
Ｇｒｅｉｎｅｒ ＣＥＬＬＳＴＡＲ（登録商標）９６ウェルプレート、平底黒プレート（蓋付き及び透明な底）、＃６５５０９０。
【0190】
４．細胞活性実験用試薬と機器
（１）Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ発光法細胞活性検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ－Ｇ７５７３）。
（２）２１０４ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダー、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ。
（１）Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ発光法細胞活性検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ－Ｇ７５７３）。
（２）２１０４ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダー、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ。
【0191】
実験スキーム
１．細胞の培養
腫瘍細胞株を上記の培養条件に従って３７℃で、５％ＣＯ２のインキュベーターで培養した。定期的に継代し、対数増殖期にある細胞をプレイティング用に採取した。
２．細胞プレイティング
（１）細胞をトリパンブルーで染色し、生存細胞をカウントし；
（２）細胞濃度を適切な濃度に調整し；
（３）上表に示されるように、培養プレートに９０μＬ／ウェルで細胞懸濁液を加え、ブランク対照ウェルに無細胞培地を加え；
（４）培養プレートを３７℃、５％のＣＯ２、及び１００％の相対湿度のインキュベーターで一晩培養した。
１．細胞の培養
腫瘍細胞株を上記の培養条件に従って３７℃で、５％ＣＯ２のインキュベーターで培養した。定期的に継代し、対数増殖期にある細胞をプレイティング用に採取した。
２．細胞プレイティング
（１）細胞をトリパンブルーで染色し、生存細胞をカウントし；
（２）細胞濃度を適切な濃度に調整し；
【表3】
（３）上表に示されるように、培養プレートに９０μＬ／ウェルで細胞懸濁液を加え、ブランク対照ウェルに無細胞培地を加え；
（４）培養プレートを３７℃、５％のＣＯ２、及び１００％の相対湿度のインキュベーターで一晩培養した。
【0192】
３．化合物の保存プレートの製造
化合物の開始濃度の４００倍の母液保存プレートを製造：化合物をＤＭＳＯで最高濃度勾配から最低濃度まで希釈した。毎回使用するたびに調製した。
化合物の開始濃度１０倍濃度の作業溶液の調製及び化合物による細胞処理：
（１）Ｖ底の９６ウェルプレートに７８μＬの細胞培地を加え、化合物の開始濃度４００倍濃度の母液保存プレートから２μＬの化合物をピペットで取り、９６ウェルプレートの細胞培地に加えた。溶媒対照とブランク対照に２μＬのＤＭＳＯを加えた。化合物又はＤＭＳＯを加えた後、ピペットで均一にピペッティングした。
（２）投与：１０μＬの化合物の初期濃度の１０倍の作業溶液を取り、細胞培養プレートに加えた。溶媒対照とブランク対照に１０μＬのＤＭＳＯ-細胞培地混合溶液を加えた。
（３）９６ウェル細胞プレートをインキュベーターに戻し、６日間培養した。
化合物の開始濃度の４００倍の母液保存プレートを製造：化合物をＤＭＳＯで最高濃度勾配から最低濃度まで希釈した。毎回使用するたびに調製した。
化合物の開始濃度１０倍濃度の作業溶液の調製及び化合物による細胞処理：
（１）Ｖ底の９６ウェルプレートに７８μＬの細胞培地を加え、化合物の開始濃度４００倍濃度の母液保存プレートから２μＬの化合物をピペットで取り、９６ウェルプレートの細胞培地に加えた。溶媒対照とブランク対照に２μＬのＤＭＳＯを加えた。化合物又はＤＭＳＯを加えた後、ピペットで均一にピペッティングした。
（２）投与：１０μＬの化合物の初期濃度の１０倍の作業溶液を取り、細胞培養プレートに加えた。溶媒対照とブランク対照に１０μＬのＤＭＳＯ-細胞培地混合溶液を加えた。
（３）９６ウェル細胞プレートをインキュベーターに戻し、６日間培養した。
【0193】
５．ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ発光法による細胞活性の検出
以下の手順は、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ発光法細胞活性検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ－Ｇ７５７３）の説明書に従って実行した。
（１）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ緩衝液を溶かして室温に放置し；
（２）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ基質を室温に放置し；
（３）１本のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ基質に１００ｍＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ緩衝液を加えて基質を溶解させ、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ作業溶液を調製し；
（４）ゆっくりとボルテックスして完全に溶解させ；
（５）細胞培養プレートを取り、３０分間室温放置して平衡化させ；
（６）各ウェルに５０μＬ（各ウェルの細胞培養液の半分の体積に相当する）のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ作業溶液を加えた。光照射を避けるために細胞プレートをアルミ箔でラップし；
（７）培養プレートをオービタルシェーカーで２分間振って、細胞溶解を誘導し；
（８）発光信号を安定させるために、培養プレートを室温で１０分間放置し；
（９）２１０４ ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーで発光信号を検出した。
以下の手順は、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ発光法細胞活性検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ－Ｇ７５７３）の説明書に従って実行した。
（１）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ緩衝液を溶かして室温に放置し；
（２）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ基質を室温に放置し；
（３）１本のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ基質に１００ｍＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ緩衝液を加えて基質を溶解させ、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ作業溶液を調製し；
（４）ゆっくりとボルテックスして完全に溶解させ；
（５）細胞培養プレートを取り、３０分間室温放置して平衡化させ；
（６）各ウェルに５０μＬ（各ウェルの細胞培養液の半分の体積に相当する）のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ-Ｇｌｏ作業溶液を加えた。光照射を避けるために細胞プレートをアルミ箔でラップし；
（７）培養プレートをオービタルシェーカーで２分間振って、細胞溶解を誘導し；
（８）発光信号を安定させるために、培養プレートを室温で１０分間放置し；
（９）２１０４ ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーで発光信号を検出した。
【0194】
６．データ分析
下記の式で試験化合物の阻害率（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ、ＩＲ）を計算した。ＩＲ（％）＝（１-（ＲＬＵ溶媒対照-ＲＬＵ化合物）／（ＲＬＵ溶媒対照-ＲＬＵブランク対照）×１００％。Ｅｘｃｅｌで異なる濃度の化合物の阻害率を計算し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して阻害曲線図を作成し、最小阻害率、最大阻害率及びＩＣ５０を含む関連パラメータを計算した。
下記の式で試験化合物の阻害率（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ、ＩＲ）を計算した。ＩＲ（％）＝（１-（ＲＬＵ溶媒対照-ＲＬＵ化合物）／（ＲＬＵ溶媒対照-ＲＬＵブランク対照）×１００％。Ｅｘｃｅｌで異なる濃度の化合物の阻害率を計算し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して阻害曲線図を作成し、最小阻害率、最大阻害率及びＩＣ５０を含む関連パラメータを計算した。
【0195】
実験結果：
実験結果は表４に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、ヒト前立腺癌細胞ＬＮＣａＰにおいて優れた細胞増殖の阻害効果を示している。
実験結果は表４に示される通りである。
【表4】
結論：本発明の化合物は、ヒト前立腺癌細胞ＬＮＣａＰにおいて優れた細胞増殖の阻害効果を示している。
【0196】
試験例３：ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞皮下異種移植腫瘍ＣＢ－１７ ＳＣＩＤモデルのｉｎ ｖｉｖｏ薬効研究
細胞の培養
ヒト前立腺癌ＬＮｃａｐ細胞（ＥＣＡＣＣ－８９１１０２１１）を体外単層培養し、培養条件はＲＰＭＩ－１６４０培地に、１０％のウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを加え、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで培養した。週に２回、トリプシン－ＥＤＴＡを使用して通常のな消化処理をし、継代培養した。細胞の飽和度が８０％～９０％であり、細胞の数が要件に達した場合、細胞を収集し、カウントし、接種した。
細胞の培養
ヒト前立腺癌ＬＮｃａｐ細胞（ＥＣＡＣＣ－８９１１０２１１）を体外単層培養し、培養条件はＲＰＭＩ－１６４０培地に、１０％のウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを加え、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで培養した。週に２回、トリプシン－ＥＤＴＡを使用して通常のな消化処理をし、継代培養した。細胞の飽和度が８０％～９０％であり、細胞の数が要件に達した場合、細胞を収集し、カウントし、接種した。
【0197】
実験動物
ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス、６～８週齢、オス、体重１８～２２ｇ。
実験スキーム
各マウスの右背部に０．２ｍＬ（１×１０７細胞）のＬＮｃａｐ細胞（マトリゲルを添加、体積比１：１）を皮下接種し、平均腫瘍体積が８０ｍｍ３に達した時点でマウスに外科的去勢を実行し、１６６ｍｍ３に達した時点で群を分けて投与し始めた。実験動物の群分け及び投与方法は表５にされる通りである。
注：
１．Ｎ：各群のマウス数
２．投与体積：マウスの体重に基づいて１０μＬ／ｇ。体重減少が１５％を超える場合は、それに応じて投与計画を調節する必要がある。
３．ＢＩＤの時間間隔は８時間である。
腫瘍の測定と実験指標
週に２回ノギスで腫瘍の直径を測定した。腫瘍体積の計算式は：Ｖ＝０．５ａ×ｂ２であり、ａとｂは、それぞれ腫瘍の長径と短径を表す。
化合物の抗腫瘍効果は、ＴＧＩ（％）によって評価される。ＴＧＩ（％）は、腫瘍増殖阻害率を反映する。ＴＧＩ（％）＝［（１－（特定の治療群の投与終了時の平均腫瘍体積－当該治療群の投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群の治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群の治療開始時の平均腫瘍体積）］×１００％。
ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス、６～８週齢、オス、体重１８～２２ｇ。
実験スキーム
各マウスの右背部に０．２ｍＬ（１×１０７細胞）のＬＮｃａｐ細胞（マトリゲルを添加、体積比１：１）を皮下接種し、平均腫瘍体積が８０ｍｍ３に達した時点でマウスに外科的去勢を実行し、１６６ｍｍ３に達した時点で群を分けて投与し始めた。実験動物の群分け及び投与方法は表５にされる通りである。
【表5】
注：
１．Ｎ：各群のマウス数
２．投与体積：マウスの体重に基づいて１０μＬ／ｇ。体重減少が１５％を超える場合は、それに応じて投与計画を調節する必要がある。
３．ＢＩＤの時間間隔は８時間である。
腫瘍の測定と実験指標
週に２回ノギスで腫瘍の直径を測定した。腫瘍体積の計算式は：Ｖ＝０．５ａ×ｂ２であり、ａとｂは、それぞれ腫瘍の長径と短径を表す。
化合物の抗腫瘍効果は、ＴＧＩ（％）によって評価される。ＴＧＩ（％）は、腫瘍増殖阻害率を反映する。ＴＧＩ（％）＝［（１－（特定の治療群の投与終了時の平均腫瘍体積－当該治療群の投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群の治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群の治療開始時の平均腫瘍体積）］×１００％。
【0198】
実験結果
実験結果は表６に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ異種移植腫瘍モデルにおいて有意な腫瘍抑制効果を示している。
実験結果は表６に示される通りである。
【表6】
結論：本発明の化合物は、ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ異種移植腫瘍モデルにおいて有意な腫瘍抑制効果を示している。
【0199】
試験例４：ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲタンパク質レベルの調節のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験
実験目的：ＩＣＷ法により、ＬＮＣａＰ細胞におけるアンドロゲン受容体ＡＲに対する化合物の分解効果を試験することである。
実験目的：ＩＣＷ法により、ＬＮＣａＰ細胞におけるアンドロゲン受容体ＡＲに対する化合物の分解効果を試験することである。
【0200】
実験方法：
１日目
１．細胞培地、０．０２５％のトリプシン及びリン酸塩緩衝液を３７℃の水浴で予熱した。
２．トリプシンで消化された細胞を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を廃棄し、その後細胞を新鮮な培地で再懸濁した。
３．細胞を４ｋ／３６μＬ／ウェルの密度でＣＯＬ－Ｃｏａｔｅｄ ＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ－３８４プレートに接種した。
４．細胞を接種した３８４細胞プレートを超クリーンワークベンチに１０分間静置した。
５．細胞プレートをＣＯ２細胞インキュベーター内で一晩培養した。
１日目
１．細胞培地、０．０２５％のトリプシン及びリン酸塩緩衝液を３７℃の水浴で予熱した。
２．トリプシンで消化された細胞を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を廃棄し、その後細胞を新鮮な培地で再懸濁した。
３．細胞を４ｋ／３６μＬ／ウェルの密度でＣＯＬ－Ｃｏａｔｅｄ ＣｅｌｌＣａｒｒｉｅｒ－３８４プレートに接種した。
４．細胞を接種した３８４細胞プレートを超クリーンワークベンチに１０分間静置した。
５．細胞プレートをＣＯ２細胞インキュベーター内で一晩培養した。
【0201】
２日目
１．１０ｍＭの濃度の化合物を、段階希釈の前に３ｍＭ（３μＬ＋７μＬのジメチルスルホキシド）に希釈した。
２．Ｂｒａｖｏ機器を使用して、化合物をＥｃｈｏプレートで３倍（４μＬ＋８μＬ）に連続希釈した。
３．ＺＰＥ及びＨＰＥ対照ウェルを設定し、ＺＰＥ対照ウェルはジメチルスルホキシドであった。
４．Ｅｃｈｏプレートを１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した後、Ｅｃｈｏを使用して２００ｎＬ／ウェルで、希釈した化合物をＥｃｈｏプレートから中間プレートに移した。
５．Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ｃｏｍｂｉを使用して細胞培地を２０μＬ／ウェルで中間プレートに加えた。
６．中間プレートを水平振とう機に置いて１分間振とうし、化合物と培地をよく混合した。
７．Ｂｒａｖｏを使用して化合物を中間希釈プレートから細胞プレートに４μＬ／ウェルで移した。
８．細胞プレートを水平振とう機に置いて１分間振とうし、８００ｒｐｍで３０秒間遠心分離した。
９．細胞プレートをＣＯ２インキュベーターに戻し、２４時間培養を続けた。
１．１０ｍＭの濃度の化合物を、段階希釈の前に３ｍＭ（３μＬ＋７μＬのジメチルスルホキシド）に希釈した。
２．Ｂｒａｖｏ機器を使用して、化合物をＥｃｈｏプレートで３倍（４μＬ＋８μＬ）に連続希釈した。
３．ＺＰＥ及びＨＰＥ対照ウェルを設定し、ＺＰＥ対照ウェルはジメチルスルホキシドであった。
４．Ｅｃｈｏプレートを１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した後、Ｅｃｈｏを使用して２００ｎＬ／ウェルで、希釈した化合物をＥｃｈｏプレートから中間プレートに移した。
５．Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ｃｏｍｂｉを使用して細胞培地を２０μＬ／ウェルで中間プレートに加えた。
６．中間プレートを水平振とう機に置いて１分間振とうし、化合物と培地をよく混合した。
７．Ｂｒａｖｏを使用して化合物を中間希釈プレートから細胞プレートに４μＬ／ウェルで移した。
８．細胞プレートを水平振とう機に置いて１分間振とうし、８００ｒｐｍで３０秒間遠心分離した。
９．細胞プレートをＣＯ２インキュベーターに戻し、２４時間培養を続けた。
【0202】
３日目
１．４％のパラホルムアルデヒドを冷蔵庫から取り出し、室温に戻せた。
２．細胞プレートをインキュベーターから取り出した。
３．細胞プレートに４％のパラホルムアルデヒドを４０μＬ／ウェルで直接に加えた。
４．室温で２０分間培養した。
５．細胞プレートの培地を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離し、残留培地を完全に除去した。
６．細胞プレートに４％のパラホルムアルデヒドを２５μＬ／ウェルで加えた。
７．室温で３０分間培養した。
８．細胞プレートのパラホルムアルデヒド溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
９．０．１％のＴｒｉｔｉｏｎを２５μＬ／ウェルで加えた。
１０．室温で１０分間培養した。
１１．細胞プレートの０．１％のＴｒｉｔｉｏｎ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１２．Ｉｎｔｅｒｃｅｐｔ（登録商標）（ＰＢＳ）Ｂｌｏｃｋｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒを２５μＬ／ウェルで加えた。
１３．室温で１時間培養した。
１４．細胞プレートのＩｎｔｅｒｃｅｐｔ（登録商標）（ＰＢＳ）Ｂｌｏｃｋｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１５．一次抗体溶液を２０μＬ／ウェルで加えた。細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１６．細胞プレートを密閉した後、４℃で一晩培養した。
１．４％のパラホルムアルデヒドを冷蔵庫から取り出し、室温に戻せた。
２．細胞プレートをインキュベーターから取り出した。
３．細胞プレートに４％のパラホルムアルデヒドを４０μＬ／ウェルで直接に加えた。
４．室温で２０分間培養した。
５．細胞プレートの培地を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離し、残留培地を完全に除去した。
６．細胞プレートに４％のパラホルムアルデヒドを２５μＬ／ウェルで加えた。
７．室温で３０分間培養した。
８．細胞プレートのパラホルムアルデヒド溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
９．０．１％のＴｒｉｔｉｏｎを２５μＬ／ウェルで加えた。
１０．室温で１０分間培養した。
１１．細胞プレートの０．１％のＴｒｉｔｉｏｎ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１２．Ｉｎｔｅｒｃｅｐｔ（登録商標）（ＰＢＳ）Ｂｌｏｃｋｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒを２５μＬ／ウェルで加えた。
１３．室温で１時間培養した。
１４．細胞プレートのＩｎｔｅｒｃｅｐｔ（登録商標）（ＰＢＳ）Ｂｌｏｃｋｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１５．一次抗体溶液を２０μＬ／ウェルで加えた。細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
１６．細胞プレートを密閉した後、４℃で一晩培養した。
【0203】
４日目
１．細胞プレートの一次抗体溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
２．１１０μＬのＰＢＳで３回洗浄した。
３．細胞プレートを遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
４．二次抗体とＤＡＰＩ溶液を２０μＬ／ウェルで加えた。細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
５．室温で１時間培養した。
６．細胞プレートの二次抗体とＤＡＰＩ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
７．１１０μＬのＰＢＳで３回洗浄し、細胞プレートに３０μＬのＰＢＳが残った。
８．細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
９．Ｏｐｅｒｅｔｔａ機器で細胞プレートをスキャンした。
１．細胞プレートの一次抗体溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
２．１１０μＬのＰＢＳで３回洗浄した。
３．細胞プレートを遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
４．二次抗体とＤＡＰＩ溶液を２０μＬ／ウェルで加えた。細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
５．室温で１時間培養した。
６．細胞プレートの二次抗体とＤＡＰＩ溶液を手動で振り落とし、遠心分離機に転倒させ、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
７．１１０μＬのＰＢＳで３回洗浄し、細胞プレートに３０μＬのＰＢＳが残った。
８．細胞プレートを遠心分離機に置き、８００ｒｐｍで７秒間遠心分離した。
９．Ｏｐｅｒｅｔｔａ機器で細胞プレートをスキャンした。
【0204】
実験結果
実験結果は表４に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、ＡＲに対して良好な分解活性を示している。
実験結果は表４に示される通りである。
【表7】
結論：本発明の化合物は、ＡＲに対して良好な分解活性を示している。
【0205】
試験例５：２９３Ｔ ＡＲ Ｆ８７６Ｌ細胞におけるＡＲタンパク質の発現レベルのＩｎ ｃｅｌｌ ｗｅｓｔｅｒｎ分析
実験目的：本実験では、Ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｗｅｓｔｅｒｎ実験により細胞株２９３Ｔ ＡＲ Ｆ８７６Ｌにおける点突然変異のＡＲタンパク質発現レベルに対する、化合物ＷＸ０１５、ＷＸ０１６及びＷＸ０１７の影響を検出し、ＡＲ Ｆ８７６Ｌ点突然変異タンパク質に対する化合物の分解効果を評価することである。
実験目的：本実験では、Ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｗｅｓｔｅｒｎ実験により細胞株２９３Ｔ ＡＲ Ｆ８７６Ｌにおける点突然変異のＡＲタンパク質発現レベルに対する、化合物ＷＸ０１５、ＷＸ０１６及びＷＸ０１７の影響を検出し、ＡＲ Ｆ８７６Ｌ点突然変異タンパク質に対する化合物の分解効果を評価することである。
【0206】
実験材料：
１．細胞株及び培養方法
２．培地及び試薬
１．細胞株及び培養方法
【表8】
２．培地及び試薬
【表9】
【0207】
３．機器
【表10】
【0208】
４．抗体
【表11】
【0209】
実験方法：
１．細胞の培養：
細胞株を３７℃、５％ＣＯ２の培養条件のインキュベーターで培養した。定期的に継代し、対数増殖期にある細胞をプレイティング用に採取した。
１．細胞の培養：
細胞株を３７℃、５％ＣＯ２の培養条件のインキュベーターで培養した。定期的に継代し、対数増殖期にある細胞をプレイティング用に採取した。
【0210】
２．細胞プレイティング：
１）細胞をトリパンブルーで染色し、生存細胞をカウントした。
２）細胞濃度を適切な濃度に調節し、密度は２００００／ウェルにした。
３）９６ウェル培養プレートに９０μＬ／ウェルで細胞懸濁液を加え、ブランク対照ウェルに無細胞培地を加えた。
４）培養プレートを３７℃、５％ＣＯ２、及び１００％の相対湿度のインキュベーターで一晩培養した。
１）細胞をトリパンブルーで染色し、生存細胞をカウントした。
２）細胞濃度を適切な濃度に調節し、密度は２００００／ウェルにした。
３）９６ウェル培養プレートに９０μＬ／ウェルで細胞懸濁液を加え、ブランク対照ウェルに無細胞培地を加えた。
４）培養プレートを３７℃、５％ＣＯ２、及び１００％の相対湿度のインキュベーターで一晩培養した。
【0211】
３．化合物の保存プレートの製造及びＩｎ ｃｅｌｌ ｗｅｓｔｅｒｎ検出：
１）４００倍の化合物保存プレートの製造：化合物をＤＭＳＯで最高濃度から最低濃度まで勾配希釈した。
２）１０倍化合物作業溶液の製造：Ｖ底の９６ウェルプレートに７８μＬの細胞培地を加え、４００Ｘ化合物保存プレートからの２μＬの化合物をピペットで取り、９６ウェルプレートの細胞培地に加えた。溶媒対照とブランク対照に２μＬのＤＭＳＯを加えた。化合物又はＤＭＳＯを加えた後、ピペットで均一にピペッティングした。
３）投与：１０μＬの１０倍化合物作業溶液を取り、細胞培養プレートに加えた。溶媒対照とブランク対照に１０μＬのＤＭＳＯ－細胞培地混合溶液を加えた。ＤＭＳＯの最終濃度は０．２５％であった。
４）９６ウェル細胞プレートをインキュベーターに戻せ、４８時間培養した。
５）培地を除去し、ＰＢＳを加えて１回洗浄した。
６）８％のホルマリン溶液（ＰＢＳで希釈）を加え、４℃で一晩培養した。
７）８％のホルマリン溶液を除去し、各ウェルに１５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒを加え、室温でシェーカーに入れて１．５時間ブロッキングした。
８）ブロッキング溶液を廃棄し、各ウェルに５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒで希釈した一次抗体（ＤＭＳＯウェルには一次抗体を加えなかった）を加え、４℃で一晩培養した後、ＰＢＳＴ（０．１％のＴｒｉｔｏｎ－Ｘを含む）で毎回５ｍｉｎで５回洗浄した。
９）各ウェルに５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒで希釈した二次抗体を加え、室温で１時間培養した後ＰＢＳＴ（０．１％のＴｒｉｔｏｎ－Ｘを含む）で３回洗浄し、ｄｄＨ２Ｏで２回洗浄し、各ウェルに更に１００μＬのＰＢＳを加えて検出を準備した。
１０）検出：ウェルプレートのＰＢＳを廃棄し、Ｌｉ－ＣＯＲ ｏｄｙｓｓｅｙ２色近赤外イメージャーで７００ｎｍ／ウェルの蛍光シグナルを検出した。
１）４００倍の化合物保存プレートの製造：化合物をＤＭＳＯで最高濃度から最低濃度まで勾配希釈した。
２）１０倍化合物作業溶液の製造：Ｖ底の９６ウェルプレートに７８μＬの細胞培地を加え、４００Ｘ化合物保存プレートからの２μＬの化合物をピペットで取り、９６ウェルプレートの細胞培地に加えた。溶媒対照とブランク対照に２μＬのＤＭＳＯを加えた。化合物又はＤＭＳＯを加えた後、ピペットで均一にピペッティングした。
３）投与：１０μＬの１０倍化合物作業溶液を取り、細胞培養プレートに加えた。溶媒対照とブランク対照に１０μＬのＤＭＳＯ－細胞培地混合溶液を加えた。ＤＭＳＯの最終濃度は０．２５％であった。
４）９６ウェル細胞プレートをインキュベーターに戻せ、４８時間培養した。
５）培地を除去し、ＰＢＳを加えて１回洗浄した。
６）８％のホルマリン溶液（ＰＢＳで希釈）を加え、４℃で一晩培養した。
７）８％のホルマリン溶液を除去し、各ウェルに１５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒを加え、室温でシェーカーに入れて１．５時間ブロッキングした。
８）ブロッキング溶液を廃棄し、各ウェルに５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒで希釈した一次抗体（ＤＭＳＯウェルには一次抗体を加えなかった）を加え、４℃で一晩培養した後、ＰＢＳＴ（０．１％のＴｒｉｔｏｎ－Ｘを含む）で毎回５ｍｉｎで５回洗浄した。
９）各ウェルに５０μＬのＬｉｃｏｒ Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒで希釈した二次抗体を加え、室温で１時間培養した後ＰＢＳＴ（０．１％のＴｒｉｔｏｎ－Ｘを含む）で３回洗浄し、ｄｄＨ２Ｏで２回洗浄し、各ウェルに更に１００μＬのＰＢＳを加えて検出を準備した。
１０）検出：ウェルプレートのＰＢＳを廃棄し、Ｌｉ－ＣＯＲ ｏｄｙｓｓｅｙ２色近赤外イメージャーで７００ｎｍ／ウェルの蛍光シグナルを検出した。
【0212】
４．データ分析
ウェスタンブロッティング免疫化学発光バンドの密度強度の相対定量化は、Ｉｍａｇｅ Ｓｔｕｄｉｏ Ｖｅｒ ５．２ソフトウェアを使用して実行した。
ウェスタンブロッティング免疫化学発光バンドの密度強度の相対定量化は、Ｉｍａｇｅ Ｓｔｕｄｉｏ Ｖｅｒ ５．２ソフトウェアを使用して実行した。
【0213】
実験結果
実験結果は表１２に示される通りである。
結論：本発明の化合物は強いＦ８７６Ｌ点突然変異ＡＲタンパク質を分解する能力を有している。
実験結果は表１２に示される通りである。
【表12】
結論：本発明の化合物は強いＦ８７６Ｌ点突然変異ＡＲタンパク質を分解する能力を有している。
【0214】
試験例６：マウスにおける化合物の薬物動態評価
試験目的：
本研究の試験化合物はＣＢ－１７ ＳＣＩＤオスマウスを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でマウスに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、マウスにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
試験目的：
本研究の試験化合物はＣＢ－１７ ＳＣＩＤオスマウスを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でマウスに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、マウスにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
【0215】
実験材料：
ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス（オス、２０～３０ｇ、７～１０週齢、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ又はＳｈａｎｇｈａｉ ＳＬＡＣ）。
実験操作：
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からマウスに注射するか（絶食させず）、又はマウスに胃内投与した（絶食させず）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、８、２４ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を加えた抗凝固剤チューブに入れ、４℃で、混合物を十分にボルテックスして混合し、１３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．５、１、２、４、６、８、２４ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を加えた抗凝固剤チューブに入れ、混合物を十分にボルテックスして混合し、１３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭ Ｖｅｒｓｉｏｎ ６．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
ＣＢ－１７ ＳＣＩＤマウス（オス、２０～３０ｇ、７～１０週齢、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ又はＳｈａｎｇｈａｉ ＳＬＡＣ）。
実験操作：
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からマウスに注射するか（絶食させず）、又はマウスに胃内投与した（絶食させず）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、８、２４ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を加えた抗凝固剤チューブに入れ、４℃で、混合物を十分にボルテックスして混合し、１３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．５、１、２、４、６、８、２４ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を加えた抗凝固剤チューブに入れ、混合物を十分にボルテックスして混合し、１３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭ Ｖｅｒｓｉｏｎ ６．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
【0216】
実験結果：試験の結果は表１３に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、マウスの体内において良好な創薬可能性を示している。
【表13】
結論：本発明の化合物は、マウスの体内において良好な創薬可能性を示している。
【0217】
試験例７：ラットにおける化合物の薬物動態評価
試験目的：
本研究の試験化合物はＳＤオスラットを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でラットに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、ラットにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
実験材料：
ＳＤラット（オス、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ）。
試験目的：
本研究の試験化合物はＳＤオスラットを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でラットに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、ラットにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
実験材料：
ＳＤラット（オス、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ）。
【0218】
実験操作：
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からラットに注射するか（絶食させず）、又はラットに胃内投与した（絶食させず）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ヘパリンナトリウムを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ヘパリンナトリウムを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭＶｅｒｓｉｏｎ ８．２．０（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
実験結果：試験の結果は表１４に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、ラットの体内において良好な創薬可能性を示している。
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からラットに注射するか（絶食させず）、又はラットに胃内投与した（絶食させず）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ヘパリンナトリウムを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに頚静脈穿刺により血液を採取し、ヘパリンナトリウムを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭＶｅｒｓｉｏｎ ８．２．０（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
実験結果：試験の結果は表１４に示される通りである。
【表14】
結論：本発明の化合物は、ラットの体内において良好な創薬可能性を示している。
【0219】
試験例８：ビーグルにおける化合物の薬物動態評価
試験目的：
本研究の試験化合物はビーグルを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でビーグルに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、ビーグルにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
実験材料：
ビーグル（オス、Ｊｉａｎｇｓｕ Ｙａｄｏｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｎｉｍａｌｓ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．）。
試験目的：
本研究の試験化合物はビーグルを選択し、ＬＣＭＳ／ＭＳ法を使用して、異なる時間における試験化合物及び参照化合物を定量でビーグルに静脈内注射又は経口投与した血漿中の薬物濃度を測定し、ビーグルにおける試験薬物の薬物動態特性を評価することである。
実験材料：
ビーグル（オス、Ｊｉａｎｇｓｕ Ｙａｄｏｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｎｉｍａｌｓ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．）。
【0220】
実験操作：
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からビーグルに注射するか（通常の給餌）、又はビーグルに胃内投与した（通常の給餌）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに前肢静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－２Ｋを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに前肢静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－２Ｋを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭＶｅｒｓｉｏｎ ８．２．０ （Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
試験化合物の透明な溶液又は懸濁液を、尾静脈からビーグルに注射するか（通常の給餌）、又はビーグルに胃内投与した（通常の給餌）。静脈内注射の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに前肢静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－２Ｋを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）；胃内投与の場合、０ｈ（投与前）及び投与後の０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、２４ｈ、４８ｈに前肢静脈穿刺により血液を採取し、ＥＤＴＡ－２Ｋを加えた抗凝固剤チューブに入れ、血液試料を採取して氷上に置き、１時間以内に血漿を遠心分離した（遠心分離条件：６０００ｇ、３分間、２～８℃）。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して血漿濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎＴＭＶｅｒｓｉｏｎ ８．２．０ （Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）薬物動態ソフトウェアを使用して、非コンパートメントモデル線形対数ラダー法を使用し、薬物動態パラメーターを計算した。
【0221】
実験結果：試験の結果は表１５に示される通りである。
結論：本発明の化合物は、ビーグルの体内において良好な創薬可能性を示している。
【表15】
結論：本発明の化合物は、ビーグルの体内において良好な創薬可能性を示している。
【図1】
【図2】
【国際調査報告】