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▶ フォグホーン セラピューティクス インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-13
(54)【発明の名称】ＢＲＧ１及びＢＲＭの酵素活性の阻害剤の治療レジメン
(51)【国際特許分類】
A61K 31/5377 20060101AFI20240306BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20240306BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20240306BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240306BHJP
【ＦＩ】
A61K31/5377
A61K9/20
A61K9/48
A61P35/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023557115
(86)(22)【出願日】2022-03-18
(85)【翻訳文提出日】2023-10-25
(86)【国際出願番号】 US2022020943
(87)【国際公開番号】W WO2022198043
(87)【国際公開日】2022-09-22
(31)【優先権主張番号】63/163,338
(32)【優先日】2021-03-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】520281789
【氏名又は名称】フォグホーン セラピューティクス インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】ＦＯＧＨＯＲＮ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＩＮＣ．
(74)【代理人】
【識別番号】100105957
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100068755
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 博宣
(74)【代理人】
【識別番号】100142907
【弁理士】
【氏名又は名称】本田 淳
(74)【代理人】
【識別番号】100152489
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 美樹
(72)【発明者】
【氏名】ファン、リーユエ
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA36
4C076AA53
4C076BB01
4C076CC27
4C076DD05F
4C076DD29
4C076DD38
4C076DD41C
4C076DD55F
4C076EE31
4C076EE32
4C076EE32B
4C076EE45B
4C076FF04
4C076FF06
4C076FF07
4C076FF09
4C076FF21
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC73
4C086GA07
4C086GA08
4C086GA09
4C086GA10
4C086GA16
4C086MA01
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA05
4C086MA35
4C086MA37
4C086MA52
4C086NA05
4C086NA06
4C086ZB26
4C086ZB27
4C086ZC20
4C086ZC41
(57)【要約】
例えば、がんを治療するために、治療レジメンでの式（Ｉ）の化合物を投与することを必要とする対象に対し、それを行う方法を開示する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物を、それを必要とする対象に提供する方法であって、式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：【化1】
を有し、
前記対象に対して、前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む治療レジメンを前記対象に対して行うことを含み、
前記対象が、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、前記レジメンと同時に投与されない、前記方法。
【請求項2】
がん細胞を含むがん組織における細胞増殖を阻害することを必要とする対象においてそれを行う方法であって、前記がん組織を治療レジメンに従って式（Ｉ）：【化2】
の化合物と接触させることを含み、前記対象が、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、前記レジメンと同時に投与されない、前記方法。
【請求項3】
前記対象はがんを有する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
がんを治療することを必要とする対象においてそれを行う方法であって、有効量の式（Ｉ）：【化3】
の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む治療レジメンを前記対象に行うことを含み、
前記対象が、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、前記レジメンと同時に投与されない、前記方法。
【請求項5】
前記がんが、非小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、原発不明のがん、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、食道癌、胃食道癌、膵癌、肝胆道癌、軟部組織肉腫、卵巣癌、頭頸部癌、腎細胞癌、骨癌、非ホジキンリンパ腫、小細胞肺癌、前立腺癌、胎児性腫瘍、胚細胞性腫瘍、子宮頸癌、甲状腺癌、唾液腺癌、消化管神経内分泌腫瘍、子宮肉腫、消化管間質腫瘍、ＣＮＳ癌、胸腺腫瘍、副腎皮質癌、虫垂癌、小腸癌、陰茎癌、骨癌、または血液癌である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項6】
前記がんが、食道癌である、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
前記がんが、非小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、原発不明のがん、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、陰茎癌、骨癌、腎細胞癌、前立腺癌、または血液癌である、請求項５に記載の方法。
【請求項8】
前記がんが、非小細胞肺癌である、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記がんが、黒色腫、前立腺癌、乳癌、骨癌、腎細胞癌、または血液癌である、請求項７に記載の方法。
【請求項10】
前記がんが、黒色腫である、請求項９に記載の方法。
【請求項11】
前記黒色腫が、ぶどう膜黒色腫、粘膜黒色腫、または皮膚黒色腫である、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
前記黒色腫が、ぶどう膜黒色腫である、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記ぶどう膜黒色腫が、転移性ぶどう膜黒色腫である、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
前記ぶどう膜黒色腫が、進行期ぶどう膜黒色腫である、請求項１２に記載の方法。
【請求項15】
前記がんが、前立腺癌である、請求項９に記載の方法。
【請求項16】
前記がんが、血液癌である、請求項９に記載の方法。
【請求項17】
前記血液癌が、多発性骨髄腫、大細胞リンパ腫、急性Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、免疫グロブリンＡラムダ型骨髄腫、びまん性混合型組織球性及びリンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、びまん性大細胞リンパ腫、または非ホジキンリンパ腫である、請求項９に記載の方法。
【請求項18】
前記血液癌が、急性骨髄性白血病である、請求項９に記載の方法。
【請求項19】
前記がんが、乳癌である、請求項９に記載の方法。
【請求項20】
前記乳癌が、ＥＲ陽性乳癌、ＥＲ陰性乳癌、トリプルポジティブ乳癌、またはトリプルネガティブ乳癌である、請求項１９に記載の方法。
【請求項21】
前記がんが、骨癌である、請求項９に記載の方法。
【請求項22】
前記骨癌が、ユーイング肉腫である、請求項２１に記載の方法。
【請求項23】
前記がんが、腎細胞癌である、請求項２１に記載の方法。
【請求項24】
前記腎細胞癌が、小眼球症転写因子ファミリー転座型腎細胞癌である、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
前記がんが、転移性である、請求項３～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項26】
前記がんが、進行がんである、請求項３～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項27】
前記がんが、抗がん療法に対して抵抗性であるか、またはそれによる前治療に反応しなかった、請求項３～２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項28】
前記抗がん療法が、化学療法剤もしくは細胞毒性薬剤、免疫療法、手術、放射線療法、温熱療法、または光凝固術、あるいはそれらの組み合わせである、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記抗がん療法が、化学療法剤または細胞毒性薬剤である、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
前記化学療法剤または細胞毒性薬剤が、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤及び／またはプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）阻害剤である、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
前記がんが、ＰＫＣ阻害剤に対して抵抗性であるか、またはそれによる前治療に反応しなかった、請求項３～３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項32】
前記方法が、抗がん療法を前記対象に施すことをさらに含む、請求項３～３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項33】
前記抗がん療法が、化学療法剤もしくは細胞毒性薬剤、免疫療法、手術、放射線療法、温熱療法、または光凝固術、あるいはそれらの組み合わせである、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
前記抗がん療法が、手術、ＭＥＫ阻害剤、及び／またはＰＫＣ阻害剤、またはそれらの組み合わせである、請求項３２または３３に記載の方法。
【請求項35】
前記ＭＥＫ阻害剤が、セルメチニブ、ビニメチニブ、またはタメチニブである、請求項３４に記載の方法。
【請求項36】
前記ＰＫＣ阻害剤が、ソトラスタウリンまたはＩＤＥ１９６である、請求項３４に記載の方法。
【請求項37】
前記ＣＹＰ３Ａ阻害剤が、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤である、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項38】
前記強いＣＹＰ３Ａ阻害剤が、ボセプレビル、コビシスタット、ダノプレビル、エルビテグラビル、グレープフルーツジュース、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、パリタプレビル、オムビタスビル、ダサブビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、チプラナビル、テリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、イデラリシブ、ネファゾドン、ネルフィナビル、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである、請求項３７に記載の方法。
【請求項39】
前記ＣＹＰ３Ａ誘導剤が、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤である、請求項１～３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項40】
前記強いＣＹＰ３Ａ誘導剤が、アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピシン、セントジョーンズワート、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである、請求項３９に記載の方法。
【請求項41】
前記治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質が、アルフェンタニル、アバナフィル、ブスピロン、コニバプタン、ダリフェナシン、ダルナビル、エバスチン、エベロリムス、イブルチニブ、ロミタピド、ロバスタチン、ミダゾラム、ナロキセゴール、ニソルジピン、サキナビル、シンバスタチン、シロリムス、タクロリムス、チプラナビル、トリアゾラム、バルデナフィル、ブデソニド、ダサチニブ、ドロネダロン、エレトリプタン、エプレレノン、フェロジピン、インジナビル、ルラシドン、マラビロク、クエチアピン、シルデナフィル、チカグレロル、トルバプタン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである、請求項１～４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項42】
前記治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質が、経口投与される治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質である、請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項43】
前記治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質が、ダビガトランエテキシラート、ジゴキシン、フェキソフェナジン、ロペラミド、キニジン、タリノロール、ビンブラスチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである、請求項１～４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項44】
前記治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質が、経口投与される治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質である、請求項１～４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項45】
前記治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質が、クメストロール、ダイゼイン、ダントロレン、エストロン－３－硫酸、ゲニステイン、プラゾシン、スルファサラジン、ロスバスタチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである、請求項１～４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項46】
前記対象が、酸抑制剤を前記レジメンと同時に投与されないが、但し、制酸剤である酸抑制剤が、時間差投与する様式で治療レジメンと同時に投与され得ることを条件とする、請求項１～４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項47】
前記酸抑制剤が、制酸剤、Ｈ２ブロッカー、プロトンポンプ阻害剤、またはそれらの組み合わせである、請求項４６に記載の方法。
【請求項48】
前記Ｈ２ブロッカーが、ファモチジン、シメチジン、ラニチジン、ニザチジン、またはそれらの組み合わせである、請求項４７に記載の方法。
【請求項49】
前記プロトンポンプ阻害剤が、オメプラゾール、ランソプラゾール、パントプラゾール、ラベプラゾール、エソメプラゾール、デクスランソプラゾール、イラプラゾール、またはそれらの組み合わせである、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項50】
前記式（Ｉ）の化合物が、経口投与される、請求項１～４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項51】
前記式（Ｉ）の化合物が、カプセルまたは錠剤からなる群から選択される単位剤形で投与される、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項52】
前記式（Ｉ）の化合物が、以下の構造：【化4】
を有する、請求項１～５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項53】
前記式（Ｉ）の化合物が、前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物として投与される、請求項１～５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項54】
前記医薬組成物が、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、滑剤、滑沢剤、及びカプセルシェルのうちの１つ以上を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項55】
前記増量剤が、微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせである、請求項５４に記載の方法。
【請求項56】
前記医薬組成物が、７０～９０％（ｗ／ｗ）の前記増量剤を含む、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項57】
前記崩壊剤が、クロスカルメロースナトリウムである、請求項５４～５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項58】
前記医薬組成物が、４～６％（ｗ／ｗ）の前記崩壊剤を含む、請求項５４～５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項59】
前記湿潤剤が、ラウリル硫酸ナトリウムである、請求項５４～５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項60】
前記医薬組成物が、０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の前記湿潤剤を含む、請求項５４～５９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項61】
前記滑剤が、コロイド状二酸化ケイ素である、請求項５４～６０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項62】
前記医薬組成物が、１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の前記滑剤を含む、請求項５４～６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項63】
前記滑沢剤が、ステアリン酸マグネシウムである、請求項５４～６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項64】
前記医薬組成物が、０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の前記滑沢剤を含む、請求項５４～６３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項65】
前記医薬組成物が、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む、請求項５４～６４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項66】
前記ポリマーシェルが、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項67】
前記医薬組成物が単位剤形である、請求項５４～６６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項68】
前記単位剤形がカプセルである、請求項６７に記載の方法。
【請求項69】
前記医薬組成物が、２．５～２０％（ｗ／ｗ）の前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項５３～６８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項70】
前記医薬組成物が、２．５～２０％（ｗ／ｗ）の前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の前記増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の前記崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の前記湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の前記滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の前記滑沢剤、を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項71】
前記医薬組成物が、２．５～２０％（ｗ／ｗ）の前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項72】
前記医薬組成物が、２．５ｍｇ～２０ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項５３～７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項73】
前記医薬組成物が、２．６％（ｗ／ｗ）の前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項74】
前記医薬組成物が、２０％（ｗ／ｗ）の前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項75】
前記医薬組成物が、２．５ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項５３～７４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項76】
前記医薬組成物が、２０ｍｇの前記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項５３～７３及び７５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項77】
前記医薬組成物が、カプセルである単位剤形である、請求項７０～７７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項78】
前記カプセルが、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む、請求項７８に記載の方法。
【請求項79】
前記ポリマーシェルが、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む、請求項７９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【0001】
本発明は、ＢＲＧ１（Ｂｒａｈｍａ関連遺伝子－１）及びＢＲＭ（Ｂｒａｈｍａ）の酵素活性の阻害剤を、例えば、対象におけるがん治療に使用するための治療レジメンにおいて利用する方法に関する。
【0002】
クロマチン制御は、遺伝子発現に不可欠であり、ＡＴＰ依存性クロマチンリモデリングは、そのような遺伝子発現が生じるための機構である。ＢＡＦ複合体としても知られるヒトＳｗｉｔｃｈ／Ｓｕｃｒｏｓｅ Ｎｏｎ－Ｆｅｒｍｅｎｔａｂｌｅ（ＳＷＩ／ＳＮＦ）クロマチンリモデリング複合体には、ＢＲＧ１及びＢＲＭとして知られる２つのＳＷＩ２様ＡＴＰアーゼがある。ＡＴＰ依存性クロマチンリモデリング因子ＳＭＡＲＣＡ４としても知られる転写活性化因子ＢＲＧ１は、１９番染色体上のＳＭＡＲＣＡ４遺伝子によってコードされる。ＢＲＧ１は、いくつかのがん腫瘍で過剰発現しており、がん細胞の増殖に必要とされる。ＢＲＭは、可能性のあるグローバルな転写活性化因子（ｐｒｏｂａｂｌｅ ｇｌｏｂａｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ）ＳＮＦ２Ｌ２及び／またはＡＴＰ依存性クロマチンリモデリング因子ＳＭＡＲＣＡ２としても知られ、９番染色体上のＳＭＡＲＣＡ２遺伝子によってコードされ、ＢＲＧ１機能喪失変異を特徴とする細胞において腫瘍細胞増殖に不可欠であることが示されている。ＢＲＧ及び／またはＢＲＭの不活性化は、細胞周期停止及び腫瘍抑制を含め、細胞内の下流効果をもたらす。
【発明の概要】
【0003】
本発明は、例えば、がんを治療するために、治療レジメンでの式（Ｉ）の化合物を投与することを必要とする対象に対し、それを行う方法を特徴とする。
【0004】
一態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を、それを必要とする対象に提供する方法を特徴とし、式（Ｉ）の化合物は、構造：
を有し、方法には、対象に合わせて、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する治療レジメンを対象に対して行うステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【化1】
を有し、方法には、対象に合わせて、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する治療レジメンを対象に対して行うステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【0005】
別の態様では、本発明は、がん組織（例えば、がん細胞を含有する組織）における細胞増殖を阻害することを必要とする対象においてそれを行う方法を提供し、かかる方法には、がん組織を治療レジメンに従って式（Ｉ）：
の化合物と接触させるステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【化2】
の化合物と接触させるステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【0006】
上記のいずれかの態様のいくつかの実施形態では、対象はがんを有する。
【0007】
別の態様では、本発明は、がんを治療することを必要とする対象においてそれを行う方法を提供し、かかる方法には、有効量の式（Ｉ）：
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する治療レジメンを対象に対して行うステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【化3】
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する治療レジメンを対象に対して行うステップが含まれ、その場合、対象は、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、ＣＹＰ３Ａ誘導剤、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせを、かかるレジメンと同時に投与されない。
【0008】
上記の態様のいずれかのいくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、原発不明のがん、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、食道癌、胃食道癌、膵癌、肝胆道癌、軟部組織肉腫、卵巣癌、頭頸部癌、腎細胞癌、骨癌、非ホジキンリンパ腫、小細胞肺癌、前立腺癌、胎児性腫瘍、胚細胞性腫瘍、子宮頸癌、甲状腺癌、唾液腺癌、消化管神経内分泌腫瘍、子宮肉腫、消化管間質腫瘍、ＣＮＳ癌、胸腺腫瘍、副腎皮質癌、虫垂癌、小腸癌、陰茎癌、骨癌、または血液癌である。
【0009】
いくつかの実施形態では、がんは、食道癌である。
【0010】
いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、原発不明のがん、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、陰茎癌、骨癌、腎細胞癌、前立腺癌、または血液癌である。
【0011】
いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺癌である。
【0012】
いくつかの実施形態では、がんは、黒色腫、前立腺癌、乳癌、骨癌、腎細胞癌、または血液癌である。
【0013】
いくつかの実施形態では、がんは、黒色腫（例えば、ぶどう膜黒色腫、粘膜黒色腫、皮膚黒色腫）である。
【0014】
いくつかの実施形態では、黒色腫は、ぶどう膜黒色腫（例えば、転移性ぶどう膜黒色腫、進行期ぶどう膜黒色腫）である。
【0015】
いくつかの実施形態では、がんは、前立腺癌である。
【0016】
いくつかの実施形態では、がんは、血液癌（例えば、多発性骨髄腫、大細胞リンパ腫、急性Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、免疫グロブリンＡラムダ型骨髄腫、びまん性混合型組織球性及びリンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、びまん性大細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫）である。
【0017】
いくつかの実施形態では、血液癌は急性骨髄性白血病である。
【0018】
いくつかの実施形態では、がんは、乳癌（例えば、ＥＲ陽性乳癌、ＥＲ陰性乳癌、トリプルポジティブ乳癌、またはトリプルネガティブ乳癌）である。
【0019】
いくつかの実施形態では、がんは、骨癌（例えば、ユーイング肉腫）である。
【0020】
いくつかの実施形態では、がんは、腎細胞癌（例えば、小眼球症転写因子ファミリー転座型腎細胞癌）である。
【0021】
いくつかの実施形態では、がんは転移性である。
【0022】
いくつかの実施形態では、がんは進行がんである。
【0023】
いくつかの実施形態では、がんは、抗がん療法（例えば、化学療法剤もしくは細胞毒性薬剤、免疫療法、手術、放射線療法、温熱療法、または光凝固術、あるいはそれらの組み合わせ）に対して抵抗性であるか、またはそれによる前治療に反応しなかった。
【0024】
いくつかの実施形態では、抗がん療法は、化学療法剤または細胞毒性薬剤（例えば、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤及び／またはプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）阻害剤）である。
【0025】
いくつかの実施形態では、がんは、ＰＫＣ阻害剤に対して抵抗性であるか、またはそれによる前治療に反応しなかった。
【0026】
いくつかの実施形態では、方法はさらに、抗がん療法（例えば、化学療法剤もしくは細胞毒性薬剤、免疫療法、手術、放射線療法、温熱療法、光凝固術、またはそれらの組み合わせ）を対象に施すことを特徴とする。
【0027】
いくつかの実施形態では、抗がん療法は、手術、ＭＥＫ阻害剤（例えば、セルメチニブ、ビニメチニブ、もしくはタメチニブ）、またはＰＫＣ阻害剤（例えば、ソトラスタウリンもしくはＩＤＥ１９６）、またはそれらの組み合わせである。
【0028】
いくつかの実施形態では、ＣＹＰ３Ａ阻害剤は、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤（例えば、ボセプレビル、コビシスタット、ダノプレビル、エルビテグラビル、グレープフルーツジュース、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、パリタプレビル、オムビタスビル、ダサブビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、チプラナビル、テリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、イデラリシブ、ネファゾドン、ネルフィナビル、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせ）である。
【0029】
いくつかの実施形態では、ＣＹＰ３Ａ誘導剤は、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤（例えば、アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピシン、セントジョーンズワート、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせ）である。
【0030】
いくつかの実施形態では、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質は、アルフェンタニル、アバナフィル、ブスピロン、コニバプタン、ダリフェナシン、ダルナビル、エバスチン、エベロリムス、イブルチニブ、ロミタピド、ロバスタチン、ミダゾラム、ナロキセゴール、ニソルジピン、サキナビル、シンバスタチン、シロリムス、タクロリムス、チプラナビル、トリアゾラム、バルデナフィル、ブデソニド、ダサチニブ、ドロネダロン、エレトリプタン、エプレレノン、フェロジピン、インジナビル、ルラシドン、マラビロク、クエチアピン、シルデナフィル、チカグレロル、トルバプタン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである。
【0031】
いくつかの実施形態では、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質は、経口投与される治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質である。
【0032】
いくつかの実施形態では、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質は、ダビガトランエテキシラート、ジゴキシン、フェキソフェナジン、ロペラミド、キニジン、タリノロール、ビンブラスチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである。
【0033】
いくつかの実施形態では、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質は、経口投与される治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質である。
【0034】
いくつかの実施形態では、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質は、クメストロール、ダイゼイン、ダントロレン、エストロン－３－硫酸、ゲニステイン、プラゾシン、スルファサラジン、ロスバスタチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせである。
【0035】
いくつかの実施形態では、対象は、酸抑制剤（例えば、制酸剤、Ｈ２ブロッカー（例えば、ファモチジン、シメチジン、ラニチジン、ニザチジン、もしくはそれらの組み合わせ）、プロトンポンプ阻害剤（例えば、オメプラゾール、ランソプラゾール、パントプラゾール、ラベプラゾール、エソメプラゾール、デクスランソプラゾール、イラプラゾール、もしくはそれらの組み合わせ）、またはそれらの組み合わせ）をレジメンと同時に投与されないが、但し、制酸剤である酸抑制剤が、時間差投与する様式で治療レジメンと同時に投与され得ることを条件とする。
【0036】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、経口投与される。
【0037】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、カプセルまたは錠剤からなる群から選択される単位剤形で投与される。
【0038】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の構造：
を有する。
【化4】
を有する。
【0039】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物として投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、滑剤、滑沢剤、及びカプセルシェルのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、増量剤は、微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤を含む。いくつかの実施形態では、崩壊剤はクロスカルメロースナトリウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤を含む。いくつかの実施形態では、湿潤剤はラウリル硫酸ナトリウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤を含む。いくつかの実施形態では、滑剤はコロイド状二酸化ケイ素である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤を含む。いくつかの実施形態では、滑沢剤はステアリン酸マグネシウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は単位剤形である。いくつかの実施形態では、単位剤形はカプセルである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５ｍｇ～２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【0040】
ある態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、滑剤、滑沢剤、及びカプセルシェルのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、増量剤は、微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤を含む。いくつかの実施形態では、崩壊剤はクロスカルメロースナトリウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤を含む。いくつかの実施形態では、湿潤剤はラウリル硫酸ナトリウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤を含む。いくつかの実施形態では、滑剤はコロイド状二酸化ケイ素である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤を含む。いくつかの実施形態では、滑沢剤はステアリン酸マグネシウムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は単位剤形である。いくつかの実施形態では、単位剤形はカプセルである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５ｍｇ～２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【0041】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
【0042】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0043】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５ｍｇ～２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【0044】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0045】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0046】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２．５ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、カプセルである単位剤形である。いくつかの実施形態では、カプセルは、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む。いくつかの実施形態では、ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む。
【0047】
定義
本出願では、文脈から別様に明確でない限り、（ｉ）用語「ａ」は、「少なくとも１つ」を意味すると理解されてよく、（ｉｉ）用語「または」は、「及び／または」を意味すると理解されてよく、及び（ｉｉｉ）用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、項目別の構成要素またはステップを包含すると理解されてよく、それらが単独で提示されているのか、または１つ以上の追加の構成要素もしくはステップと一緒に提示されているのかは問わない。
本出願では、文脈から別様に明確でない限り、（ｉ）用語「ａ」は、「少なくとも１つ」を意味すると理解されてよく、（ｉｉ）用語「または」は、「及び／または」を意味すると理解されてよく、及び（ｉｉｉ）用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、項目別の構成要素またはステップを包含すると理解されてよく、それらが単独で提示されているのか、または１つ以上の追加の構成要素もしくはステップと一緒に提示されているのかは問わない。
【0048】
本明細書で使用される場合、用語「約」及び「おおよそ」とは、記載されている値を１０％以内で上回るかまたは下回る値を指す。例えば、用語「約５％」は、４．５～５．５％の範囲を示す。
【0049】
本明細書で使用される場合、用語「投与」とは、対象または系に対する組成物（例えば、本明細書に記載の化合物が含まれる化合物もしくは調製物）の投与を指す。動物対象への（例えば、ヒトへの）投与は、任意の適切な経路によるものであり得る。例えば、いくつかの実施形態では、投与は、気管支（気管支注入によるものを含む）、頬側、経腸、皮内（ｉｎｔｅｒｄｅｒｍａｌ）、動脈内、皮内、胃内、髄内、筋肉内、鼻腔内、腹腔内、髄腔内、腫瘍内、静脈内、脳室内、粘膜、経鼻、経口、直腸、皮下、舌下、局所、気管（気管内注入によるものを含む）、経皮、膣内、及び硝子体であり得る。
【0050】
本明細書で使用される場合、用語「ＢＡＦ複合体」とは、ヒト細胞におけるＢＲＧ１関連因子またはＨＢＲＭ関連因子の複合体を指す。
【0051】
本明細書で使用される場合、用語「ＢＡＦ複合体関連障害」とは、ＢＡＦ複合体の活性のレベルによって引き起こされるかまたは影響を受ける障害を指す。
【0052】
本明細書で使用される場合、用語「ＢＲＧ１活性」とは、ＢＲＧ１酵素ＡＴＰアーゼの活性を指す。
【0053】
本明細書で使用される場合、用語「ＢＲＧ１機能喪失型変異」とは、活性が低下している（例えば、ＢＲＧ１活性が少なくとも１％低下、例えば、ＢＲＧ１活性が２％、５％、１０％、２５％、５０％、または１００％低下）タンパク質をもたらすＢＲＧ１の変異を指す。例示的ＢＲＧ１機能喪失型変異としては、ホモ接合型ＢＲＧ１変異及びＢＲＧ１のＣ末端における欠失が挙げられるが、これらに限定されない。
【0054】
本明細書で使用される場合、用語「ＢＲＧ１機能喪失型障害」とは、ＢＲＧ１活性の低下（例えば、ＢＲＧ１活性が少なくとも１％低下、例えば、ＢＲＧ１活性が２％、５％、１０％、２５％、５０％、または１００％低下）を示す障害（例えば、がん）を指す。
【0055】
用語「がん」とは、腫瘍、新生物、癌腫、肉腫、白血病、及びリンパ腫等の悪性新生細胞の増殖によって引き起こされる状態を指す。
【0056】
本明細書で使用される場合、「併用療法」または「併用投与」とは、２つ（またはそれ以上）の異なる薬剤または治療が、特定の疾患または状態に対する定義された治療レジメンの一部として対象に投与されることを意味する。治療レジメンでは、対象に対する個々の薬剤の効果が重なるよう各薬剤の用量及び投与周期が定義される。いくつかの実施形態では、２つ以上の薬剤の送達は同時送達または併用送達であり、薬剤は合剤にされ得る。いくつかの実施形態では、２つ以上の薬剤は合剤にされず、処方されたレジメンの一部として連続的に投与される。いくつかの実施形態では、２つ以上の薬剤または治療の併用投与は、症状、または障害に関連した他のパラメータの軽減が、１つの薬剤または治療を単独かまたは他方を存在させずに送達した場合に観察されるものより大きくなるようなものである。２つの治療の効果は、部分的に相加的であり得るか、完全に相加的であり得るか、または相加的を超え得る（例えば、相乗的）。各治療剤の連続的または実質的に同時の投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、及び粘膜組織を介した直接吸収等の、これらに限定されない任意の適切な経路により実施され得る。治療剤は、同じ経路によっても、異なる経路によっても投与され得る。例えば、併用の第１の治療剤を静脈内注射により投与してよく、併用の第２の治療剤を経口投与してよい。
【0057】
用語「ＣＴＬＡ－４阻害剤」とは、本明細書で使用される場合、ヒトではＣＴＬＡ４遺伝子によってコードされるタンパク質の活性を阻害することができる抗体等の化合物を指す。既知のＣＴＬＡ－４阻害剤には、イピリムマブが含まれる。
【0058】
用語「ＣＹＰ３Ａ阻害剤」とは、本明細書で使用される場合、ヒトにおいて、シトクロムＰ４５０ファミリー３のサブファミリーＡのヒト遺伝子座によってコードされるタンパク質の活性を阻害することができる化合物を指す。代表的ＣＹＰ３Ａタンパク質の例としては、ＣＹＰ３Ａ４及びＣＹＰ３Ａ５が挙げられる。強いＣＹＰ３Ａ阻害剤は、高感度ＣＹＰ３Ａ基質のＡＵＣを５倍以上増加させるＣＹＰ３Ａ阻害剤である。
【0059】
用語「ＣＹＰ３Ａ誘導剤」とは、本明細書で使用される場合、ヒトにおいて、シトクロムＰ４５０ファミリー３のサブファミリーＡのヒト遺伝子座によってコードされるタンパク質の活性を誘導することができる化合物を指す。代表的ＣＹＰ３Ａタンパク質の例としては、ＣＹＰ３Ａ４及びＣＹＰ３Ａ５が挙げられる。強いＣＹＰ３Ａ誘導剤は、高感度ＣＹＰ３Ａ基質のＡＵＣを８０％以上減少させるＣＹＰ３Ａ誘導剤である。
【0060】
タンパク質またはＲＮＡの「低下したレベル」または「上昇したレベル」とは、それぞれ、参照と比較した場合のタンパク質レベルまたはＲＮＡレベルの減少または上昇（例えば、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約１００％、約１５０％、約２００％、約３００％、約４００％、約５００％、もしくはそれ以上の減少または上昇；参照と比較して約１０％、約１５％、約２０％、約５０％、約７５％、約１００％、もしくは約２００％を超える減少または上昇；約０．０１倍未満、約０．０２倍、約０．１倍、約０．３倍、約０．５倍、約０．８倍、もしくはそれより小さい減少または上昇；あるいは約１．２倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．８倍、約２．０倍、約３．０倍、約３．５倍、約４．５倍、約５．０倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約１０００倍を超えるか、またはそれ以上の上昇）を意味する。タンパク質のレベルは、質量／体積（例えば、ｇ／ｄＬ、ｍｇ／ｍＬ、μｇ／ｍＬ、ｎｇ／ｍＬ）または試料中の総タンパク質に対するパーセンテージで表され得る。
【0061】
「ＢＡＦ複合体の活性を低下させること」とは、ＢＡＦ複合体に関連する活性のレベル、または関連する下流効果を低下させることを意味する。ＢＡＦ複合体の活性を低下させることの非限定的な例は、Ｓｏｘ２の活性化である。ＢＡＦ複合体の活性レベルは、当該技術分野で公知の任意の方法、例えば、Ｋａｄｏｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ，２０１３，１５３，７１－８５に記載の方法を使用して測定され得、その方法は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0062】
本明細書で使用される場合、「薬物抵抗性であると決定される」がんとは、化学療法剤に対する不応性または反応性低下に基づく薬物抵抗性であるか、または予後アッセイ（例えば、遺伝子発現アッセイ）に基づいて薬物抵抗性であることが予測されるがんを指す。
【0063】
「薬物抵抗性」とは、１つ以上の化学療法剤（例えば、本明細書に記載される任意の薬剤）に対して反応しないか、または反応低下を示すがんを意味する。
【0064】
本明細書で使用される場合、用語「以前の治療法に応答しなかった」または「以前の治療法に不応性である」とは、その治療法による治療にもかかわらず進行したがんを指す。
【0065】
本明細書で使用される場合、「ＢＲＭを阻害すること」及び／または「ＢＲＧ１を阻害すること」という用語は、タンパク質のＡＴＰアーゼ触媒結合ドメインもしくはブロモドメインを遮断すること、またはそのレベルもしくは活性を低下させることを指す。ＢＲＭ及び／またはＢＲＧ１阻害は、当該技術分野で公知の方法、例えば、ＢＲＭ及び／またはＢＲＧ１ ＡＴＰアーゼアッセイ、Ｎａｎｏ ＤＳＦアッセイ、あるいはＢＲＭ及び／またはＢＲＧ１ルシフェラーゼ細胞アッセイを使用して決定され得る。
【0066】
本明細書で使用される場合、ＩＤＥ１９６としても知られる「ＬＸＳ１９６」という用語は、構造：
を有するＰＫＣ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を指す。
【化5】
を有するＰＫＣ阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を指す。
【0067】
用語「ＭＥＫ阻害剤」とは、本明細書で使用される場合、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ酵素ＭＥＫ１またはＭＥＫ２の活性を阻害することができる化合物を指す。ＭＥＫ阻害剤は、例えば、セルメチニブ、ビニメチニブ、またはタメチニブであり得る。
【0068】
本明細書で使用される場合、「転移性結節」とは、原発腫瘍部位以外の部位での体内における腫瘍細胞の集合を指す。
【0069】
本明細書で使用される場合、「転移性がん」とは、腫瘍またはがんのうち、腫瘍を形成するがん細胞が、対象内のある場所から別の場所（複数可）へ、リンパ系を介するかまたは血行性の広がりを介して転移するかまたは広がり、例えば、対象内に二次腫瘍を発生させる可能性が高いかまたはそれを開始しているものを指す。そのような転移挙動は、悪性腫瘍を示唆し得る。場合によっては、転移挙動は、腫瘍細胞の細胞遊走及び／または浸潤挙動の増加と関連し得る。
【0070】
転移性として定義することができるがんの例としては、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、乳癌、卵巣癌、大腸癌、胆道癌、膀胱癌、脳腫瘍（膠芽腫及び髄芽腫を含む）、子宮頸癌、絨毛癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、血液新生物、多発性骨髄腫、白血病、上皮内新生物、肝癌、リンパ腫、神経芽細胞腫、口腔癌、膵癌、前立腺癌、肉腫、皮膚癌（黒色腫を含む）、基底細胞癌、扁平上皮癌、精巣癌、間質性腫瘍、胚細胞性腫瘍、甲状腺癌、及び腎癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【0071】
用語「狭い治療域」とは、本明細書で使用される場合、用量または血中濃度のわずかな差が、生命を脅かす重篤な治療失敗または薬物有害反応を引き起こし得る、あるいは永続的または顕著な障害もしくは機能不全に陥り得る薬物化合物を指す。治療域は、治療的有効用量と毒性を引き起こす用量とを比較する数値である。例えば、治療域は、有効用量の中央値に対する毒性用量の中央値の比として表され得る。
【0072】
本明細書で使用される場合の「非転移性細胞遊走がん」とは、リンパ系を介するかまたは血行性の広がりを介して遊走することのないがんを指す。
【0073】
本明細書で使用される場合、用語「医薬組成物」は、薬学的に許容される賦形剤とともに製剤化される本明細書に記載される化合物を含有し、哺乳類、例えば、ヒトに対する投与に適切な組成物を表す。典型的には、医薬組成物は、哺乳類の疾患の治療のための治療レジメンの一部として政府の規制当局の承認を得て製造または販売される。医薬組成物は、例えば、単位剤形（例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ゲルキャップ、もしくはシロップ）での経口投与のため、局所投与（例えば、クリーム、ゲル、ローション、もしくは軟膏としての）のため、静脈内投与（例えば、微粒子塞栓物質を含まない、静脈内使用に好適な溶媒系に溶解させた滅菌溶液として）のため、または他の任意の薬学的に許容される製剤に、製剤化され得る。
【0074】
「薬学的に許容される賦形剤」とは、本明細書で使用される場合、本明細書に記載される化合物以外の任意の成分（例えば、活性化合物を懸濁または溶解させることができるビヒクル）であって、患者において実質的に無毒性かつ非炎症性であるという特性を有するものを指す。賦形剤としては、例えば、抗接着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素（着色料）、皮膚軟化剤、乳化剤、増量剤（希釈剤）、膜形成剤またはコーティング剤、香味料、着香剤、滑剤（流動促進剤）、滑沢剤、保存剤、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味料、及び水和用の水が挙げられ得る。
【0075】
用語「ＰＫＣ阻害剤」とは、本明細書で使用される場合、プロテインキナーゼＣの活性を阻害することができる化合物を指す。ＰＫＣ阻害剤は、例えば、ソトラスタウリンまたはＩＤＥ１９６であり得る。
【0076】
本出願で使用される「増殖」は、構成（細胞）要素による同様の形態（細胞）の生殖または増殖を伴う。
【0077】
「参照」とは、タンパク質またはＲＮＡのレベルを比較するために使用される任意の有用な参照を意味する。参照は、比較を目的として使用される任意の試料、標準、標準曲線、またはレベルであり得る。参照は、正常参照試料または参照標準もしくは参照レベルであり得る。「参照試料」は、例えば、対照、例えば、「正常対照」または同じ対象から採取された以前の試料等の、所定の陰性対照の値；正常細胞または正常組織等の、正常健常対象からの試料；疾患を有していない対象からの試料（例えば、細胞または組織）；疾患と診断されているが、まだ本発明の化合物により治療されていない対象からの試料；本発明の化合物によって治療されている対象からの試料；または既知の正常濃度の精製されたタンパク質またはＲＮＡ（例えば、本明細書に記載のいずれか）の試料であり得る。「参照標準または参照レベル」とは、参照試料から得られた値または数を意味する。「正常対照値」は、非疾患状態を示す事前に決定された値、例えば、健康な対照対象において予測される値である。典型的には、正常対照値は、範囲（「Ｘ～Ｙ」）、高閾値（「Ｘ以下」）、または低閾値（「Ｘ以上」）として表される。特定のバイオマーカーについて測定値が正常対照値内の対象は、典型的には、そのバイオマーカーについて「正常範囲内」と呼ばれる。正常参照標準または正常参照レベルは、疾患もしくは障害（例えば、がん）を有していない正常対象、本発明の化合物により治療されている対象から得られた値または数であり得る。好ましい実施形態では、参照試料、標準、またはレベルは、症例の対象試料と以下の基準のうちの少なくとも１つが一致する：年齢、体重、性別、病期、及び全般的な健康。正常基準範囲内である、精製されたタンパク質またはＲＮＡ（例えば、本明細書に記載のいずれか）のレベルの標準曲線も、参照として使用され得る。
【0078】
タンパク質の「高感度基質」という用語は、本明細書で使用される場合、そのタンパク質の既知の阻害剤と同時投与した場合に濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）値が５倍以上増加する化合物、またはそのタンパク質に対する低代謝群におけるＡＵＣ比が、高代謝群と比較して５倍以上である化合物を指す。
【0079】
用語「高感度ＣＹＰ３Ａ基質」とは、本明細書で使用される場合、既知のＣＹＰ３Ａ阻害剤と同時投与した場合に濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）値が５倍以上増加する化合物、またはＣＹＰ３Ａ酵素に対する低代謝群におけるＡＵＣ比が、高代謝群と比較して５倍以上である化合物を指す。
【0080】
本明細書で使用される場合、用語「対象」とは、例えば、実験、診断、予防、及び／または治療の目的で、本発明による組成物が投与され得る任意の生物を指す。典型的な対象としては、任意の動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒト等の哺乳類）が挙げられる。対象は、治療を求めているかもしくは必要としている、治療が必要である、治療を受けている、将来には治療を受けているか、または特定の疾患もしくは状態について訓練を受けた専門家による治療を受けているヒトもしくは動物であり得る。
【0081】
本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療される」、または「治療すること」という用語は、望ましくない生理学的状態、障害、もしくは疾患を減速させる（軽減する）こと、または有益なもしくは所望の臨床結果を得ることを目的とする治療的処置または任意の措置を意味する。有益なまたは所望の臨床結果としては、症状の緩和；状態、障害、もしくは疾患の程度の減少；状態、障害、もしくは疾患の状態の安定化（すなわち、悪化しない）；状態、障害、もしくは疾患の進行の発症遅延もしくは減速；状態、障害、もしくは疾患の状態の改善または寛解（部分的か完全かは問わない）；少なくとも１つの測定可能な身体的パラメータの改善（必ずしも患者により認識されるわけではない）；または状態、障害、もしくは疾患の向上もしくは改善が挙げられるが、これらに限定されない。治療には、過度のレベルの副作用を伴うことなく臨床的に重要な反応を誘発することが含まれる。治療には、治療を受けていなかった場合に予測される生存期間と比較して生存期間を延長させることも含まれる。本発明の化合物はまた、例えば、ある障害を発症するリスクが高い対象において、その障害を「予防的に治療する」かまたは「予防する」ために使用され得る。
【0082】
別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本発明の属する分野の当業者に共通して理解される意味と同一の意味を持つ。本開示に使用するための方法及び材料が本明細書に記載されているが、当該技術分野で公知の他の好適な方法及び材料も使用可能である。材料、方法、及び例は例示にすぎず、限定することを意図しない。本明細書で言及される刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリー、及び他の参考文献はいずれも、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾がある場合は、定義も含め、本明細書が優先する。
【0083】
本発明の１つ以上の実施形態の詳細は、以下の説明に記載される。本発明の他の特徴、目的、及び利点は、本記載及び特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【0084】
【図1】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ａ）によるいくつかのがん細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図2A】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ａ）、ＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ）、及びＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）による、ぶどう膜黒色腫細胞株９２－１の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図2B】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（式（Ｉ）の化合物）による、ぶどう膜黒色腫細胞株９２－１の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図3】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ａ）、ＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ）、及びＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）による、ぶどう膜黒色腫細胞株ＭＰ４１の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図4】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）によるいくつかのがん細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図5】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）で処理されたがん細胞株の用量反応曲線から計算された曲線下面積（ＡＵＣ）を示すグラフである。
【図6】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）による、ぶどう膜黒色腫及び非小細胞肺癌の細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図7】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）、ＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ）、及びＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）による、ぶどう膜黒色腫細胞株９２－１の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図8】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）、ＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ）、及びＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）による、ぶどう膜黒色腫細胞株ＭＰ４１の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図9】ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）による、ぶどう膜黒色腫親細胞株及びＰＫＣ阻害剤不応性ぶどう膜黒色腫細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図10】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｂ）による、ぶどう膜黒色腫親細胞株及びＰＫＣ阻害剤不応性ぶどう膜黒色腫細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図11】ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｃ）による、ぶどう膜黒色腫細胞株を移植されたマウスにおける腫瘍増殖の阻害を示すグラフである。
【図12】ぶどう膜黒色腫細胞株を移植され、ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｃ）を投与されたマウスからの腫瘍のサイズを示す図である。
【図13】ぶどう膜黒色腫細胞株を移植され、ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤（化合物Ｃ）を投与されたマウスの体重変化を示すグラフである。
【図14】Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドによる、いくつかのぶどう膜黒色腫細胞株の細胞増殖の阻害を示すグラフである。
【図15】Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドによる、ぶどう膜黒色腫細胞株を移植されたマウスにおける腫瘍増殖の阻害を示すグラフである。
【図16】ぶどう膜黒色腫細胞株を移植され、Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドを投与されたマウスの体重変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0085】
一般に、本発明は、例えば、がん（例えば、ぶどう膜黒色腫、転移性ぶどう膜黒色腫）を治療するために、治療レジメンでの式（Ｉ）
の化合物を投与することを必要とする対象に対し、それを行う方法を提供し、その場合、式（Ｉ）の化合物は、治療的有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれる治療レジメンで対象に投与され、ＣＹＰ３Ａ阻害剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤）、ＣＹＰ３Ａ誘導剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤）、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせの同時投与を含まない。
【化6】
の化合物を投与することを必要とする対象に対し、それを行う方法を提供し、その場合、式（Ｉ）の化合物は、治療的有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれる治療レジメンで対象に投与され、ＣＹＰ３Ａ阻害剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤）、ＣＹＰ３Ａ誘導剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤）、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質、またはそれらの組み合わせの同時投与を含まない。
【0086】
有利なことに、本発明の方法では、式（Ｉ）の化合物の薬物動態または薬力学に悪影響を及ぼすことができる薬物クラス（例えば、ＣＹＰ３Ａ阻害剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤）及びＣＹＰ３Ａ誘導剤（例えば、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤））の同時投与を排除することによって、治療的有効量の式（Ｉ）の化合物が、その有効性または安全性を損なうことなくそれを必要とする対象に提供される。さらに、本発明の方法により、薬物動態学的に式（Ｉ）の化合物に対して高感度であり得る化合物（例えば、治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質、治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質、及び治療域の狭い高感度ＢＣＲＰ基質）に対する、起こり得る式（Ｉ）の化合物の有害作用が排除され得る。
【0087】
強いＣＹＰ３Ａ阻害剤は、例えば、ボセプレビル、コビシスタット、ダノプレビル、エルビテグラビル、グレープフルーツジュース、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、パリタプレビル、オムビタスビル、ダサブビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、チプラナビル、テリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、イデラリシブ、ネファゾドン、ネルフィナビル、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせであり得る。強いＣＹＰ３Ａ誘導剤は、例えば、アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピシン、セントジョーンズワート、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせであり得る。治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質は、例えば、アルフェンタニル、アバナフィル、ブスピロン、コニバプタン、ダリフェナシン、ダルナビル、エバスチン、エベロリムス、イブルチニブ、ロミタピド、ロバスタチン、ミダゾラム、ナロキセゴール、ニソルジピン、サキナビル、シンバスタチン、シロリムス、タクロリムス、チプラナビル、トリアゾラム、バルデナフィル、ブデソニド、ダサチニブ、ドロネダロン、エレトリプタン、エプレレノン、フェロジピン、インジナビル、ルラシドン、マラビロク、クエチアピン、シルデナフィル、チカグレロル、トルバプタン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせであり得る。治療域の狭い高感度Ｐ－ｇｐ基質は、例えば、ダビガトランエテキシラート、ジゴキシン、フェキソフェナジン、ロペラミド、キニジン、タリノロール、ビンブラスチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせであり得る。治療域の狭いＢＣＲＰ基質は、例えば、クメストロール、ダイゼイン、ダントロレン、エストロン－３－硫酸、ゲニステイン、プラゾシン、スルファサラジン、ロスバスタチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの組み合わせであり得る。
【0088】
さらに、本発明の方法では、治療レジメンは、酸抑制剤（例えば、制酸剤、Ｈ２ブロッカー、プロトンポンプ阻害剤、またはそれらの組み合わせ）の同時投与を用いずに投与され得るが、但し、制酸剤である酸抑制剤が、時間差投与する様式で治療レジメンと同時に投与され得ることを条件とする。制酸剤の場合、時間差投与様式には、典型的には、式（Ｉ）の化合物の投与を、制酸剤の投与から少なくとも２時間あけることを伴う。
【0089】
方法
式（Ｉ）の化合物は本発明の方法に有用であり、理論に拘束されるものではないが、ＢＡＦ複合体のレベル、状態、及び／または活性を調節する、すなわち、哺乳類におけるＢＡＦ複合体内のＢＲＧ１及び／またはＢＲＭタンパク質の活性を阻害することによって、その能力を発揮すると考えられる。ＢＡＦ複合体関連障害としては、ＢＲＧ１機能喪失変異関連障害が挙げられるが、これらに限定されない。
式（Ｉ）の化合物は本発明の方法に有用であり、理論に拘束されるものではないが、ＢＡＦ複合体のレベル、状態、及び／または活性を調節する、すなわち、哺乳類におけるＢＡＦ複合体内のＢＲＧ１及び／またはＢＲＭタンパク質の活性を阻害することによって、その能力を発揮すると考えられる。ＢＡＦ複合体関連障害としては、ＢＲＧ１機能喪失変異関連障害が挙げられるが、これらに限定されない。
【0090】
本発明の一態様は、がん（例えば、非小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、原発不明のがん、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、または陰茎癌）等のＢＲＧ１機能喪失型変異に関連する障害を治療することを必要とする対象において、それを行う方法に関する。いくつかの実施形態では、本発明は、黒色腫（例えば、ぶどう膜黒色腫）、前立腺癌、乳癌、骨癌、腎細胞癌、または血液癌を治療する方法に関する。
【0091】
いくつかの実施形態では、化合物は、以下のうちの１つ以上（例えば、２つ以上、３つ以上、４つ以上）をもたらすのに有効な量及び時間で投与される：（ａ）腫瘍サイズの縮小、（ｂ）腫瘍増殖速度の低下、（ｃ）腫瘍細胞死の増加、（ｄ）腫瘍進行の減少、（ｅ）転移数の減少、（ｆ）転移速度の低下、（ｇ）腫瘍再発の減少、（ｈ）対象の生存期間の延長、（ｉ）対象の無増悪生存期間の延長。
【0092】
がんを治療することにより、腫瘍のサイズまたは体積の縮小がもたらされ得る。例えば、治療後、腫瘍サイズは、治療前のそのサイズと比べて５％以上（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上）縮小される。腫瘍のサイズは、再現性のある任意の測定手段により測定され得る。例えば、腫瘍のサイズは、腫瘍の直径として測定され得る。
【0093】
がんを治療することにより、腫瘍数の減少がさらにもたらされ得る。例えば、治療後、腫瘍数は、治療前の数と比べて５％以上（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上）減少する。腫瘍数は、再現性のある任意の測定手段により測定され得、例えば、腫瘍数は、肉眼かまたは特定の倍率（例えば、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、または５０倍）で見える腫瘍を数えることによって測定され得る。
【0094】
がんを治療することにより、原発腫瘍部位から離れた他の組織または臓器における転移性結節の数の減少がもたらされ得る。例えば、治療後、転移性結節の数は、治療前の数と比べて５％以上（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％以上）減少する。転移性結節の数は、再現性のある任意の測定手段により測定され得る。例えば、転移性結節の数は、肉眼かまたは特定の倍率で（例えば、２倍、１０倍、または５０倍）で見える転移性結節を数えることによって測定され得る。
【0095】
がんを治療することにより、未治療の対象の集団と比較して、本発明に従って治療された対象の集団の平均生存期間の延長がもたらされ得る。例えば、平均生存期間が、３０日超（６０日、９０日、または１２０日超）延長される。集団の平均生存期間の延長は、再現性のある任意の手段によって測定され得る。集団の平均生存期間の延長は、例えば、本発明の化合物による治療開始後の平均生存期間を、ある集団について計算することによって測定され得る。集団の平均生存期間の延長はまた、例えば、本発明の薬学的に許容される塩による１回目の治療完了後の平均生存期間を、ある集団について計算することによっても測定され得る。
【0096】
がんを治療することにより、未治療集団と比較して、治療された対象の集団の死亡率の低下ももたらされ得る。例えば、死亡率は、２％超（例えば、５％、１０％、または２５％超）低下する。治療された対象の集団の死亡率の低下は、再現性のある任意の手段によって、例えば、本発明の薬学的に許容される塩による治療開始後の単位時間あたりの疾患関連死の平均数を、ある集団について計算することによって測定され得る。集団の死亡率の低下はまた、例えば、本発明の薬学的に許容される塩による１回目の治療の完了後の単位時間あたりの疾患関連死の平均数を、ある集団について計算することによっても測定され得る。
【0097】
本発明により治療され得る例示的ながんとしては、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、大腸癌、膀胱癌、神経膠腫、乳癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、子宮内膜癌、胃食道癌、膵癌、肝胆道癌、軟部組織肉腫、卵巣癌、頭頸部癌、腎細胞癌、骨癌、非ホジキンリンパ腫、前立腺癌、胎児性腫瘍、胚細胞性腫瘍、子宮頸癌、甲状腺癌、唾液腺癌、消化管神経内分泌腫瘍、子宮肉腫、消化管間質腫瘍、ＣＮＳ癌、胸腺腫瘍、副腎皮質癌、虫垂癌、小腸癌、血液癌、及び陰茎癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【0098】
併用製剤及びその使用
本発明の化合物を、１つ以上の治療剤と組み合わせることができる。特に、治療剤は、本明細書に記載の任意のがんを治療するかまたは予防的に治療するものであり得る。
本発明の化合物を、１つ以上の治療剤と組み合わせることができる。特に、治療剤は、本明細書に記載の任意のがんを治療するかまたは予防的に治療するものであり得る。
【0099】
併用療法
本発明の化合物は、単独使用あるいは追加の治療剤、例えば、がんもしくはそれに関連する症状を治療する他の薬剤との併用、またはがんを治療するための他の種類の治療との併用が可能である。併用治療では、治療用化合物のうちの１つ以上の投与量は、単独投与される場合の標準投与量より減量され得る。例えば、用量は、薬物の組み合わせ及び順列から経験的に決定される場合もあれば、アイソボログラム解析により推測される場合もある（例えば、Ｂｌａｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６５：Ｓ３－Ｓ６，２００５）。この場合、併用時の化合物の投与量は、治療効果をもたらすものである。
本発明の化合物は、単独使用あるいは追加の治療剤、例えば、がんもしくはそれに関連する症状を治療する他の薬剤との併用、またはがんを治療するための他の種類の治療との併用が可能である。併用治療では、治療用化合物のうちの１つ以上の投与量は、単独投与される場合の標準投与量より減量され得る。例えば、用量は、薬物の組み合わせ及び順列から経験的に決定される場合もあれば、アイソボログラム解析により推測される場合もある（例えば、Ｂｌａｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６５：Ｓ３－Ｓ６，２００５）。この場合、併用時の化合物の投与量は、治療効果をもたらすものである。
【0100】
いくつかの実施形態では、第２の治療剤は、化学療法剤（例えば、がんの治療に有用な細胞毒性薬剤または他の化学物質）である。これらとしては、アルキル化剤、代謝拮抗剤、葉酸類似体、ピリミジン類似体、プリン類似体及び関連阻害剤、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、Ｌ－アスパラギナーゼ、トポイソメラーゼ阻害剤、インターフェロン、白金配位錯体、アントラセンジオン置換尿素、メチル・ヒドラジン誘導体、副腎皮質抑制剤、副腎皮質ステロイド、プロゲスチン、エストロゲン、抗エストロゲン薬、アンドロゲン、抗アンドロゲン薬、及びゴナドトロピン放出ホルモン類似体が挙げられる。また、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、ロイコボリン（ＬＶ）、イリノテカン、オキサリプラチン、カペシタビン、パクリタキセル及びドセタキセルも含まれる。化学療法剤の非限定的な例としては、チオテパ及びシクロホスファミド等のアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン等のアルキルスルホン酸；ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ等のアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチローロメラミンが含まれる、エチレンイミン及びメチラメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体のＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード等のナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチン等のニトロソウレア；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンガンマ１Ｉ及びカリケアマイシンオメガ１Ｉ等の抗生物質（例えば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ Ｅｎｇｌ．３３：１８３－１８６（１９９４）を参照のこと）；ジネミシンＡ等のジネミシン；クロドロナート等のビスホスホナート；エスペラマイシン；ならびにネオカルジノスタチンクロモホア及び関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２－ピロリノドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン等のドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣ等のマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メソトレキセート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）等の代謝拮抗薬；デノプテリン、メソトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキサート等の葉酸類似体；フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン等のプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン等のピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン等のアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン等の抗副腎剤；フロリン酸等の葉酸補充剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エルホミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウムアセタート；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；メイタンシン及びアンサミトシン等のマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２トキシン、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、Ｔａｘｏｌ（登録商標）（パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．））、ＡＢｒａｘａｎｅ（登録商標）（パクリタキセルのクレモフォール不含アルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．））、及びＴａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）（ドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ））；クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｎｂｕｃｉｌ）；Ｇｅｍｚａｒ（登録商標）（ゲムシタビン）；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メソトレキセート；シスプラチン、オキサリプラチン及びカルボプラチン等の白金配位錯体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロン酸；イリノテカン（例えば、ＣＰＴ－１１）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸等のレチノイド；カペシタビン；ならびに上記のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体が挙げられる。２つ以上の化学療法剤を、本明細書に記載の第１の治療剤と併用投与されるカクテルにして使用することができる。併用化学療法の好適な投与レジメンは当該技術分野で公知であり、例えば、Ｓａｌｔｚ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｐｒｏｃ ＡＳＣＯ １８：２３３ａ及びＤｏｕｉｌｌａｒｄ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｌａｎｃｅｔ ３５５：１０４１－７に記載されている。
【0101】
いくつかの実施形態では、第２の治療剤は、がん治療に使用されるサイトカイン（例えば、インターフェロンまたはインターロイキン（例えば、ＩＬ－２））等の生物学的製剤である治療剤である。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、抗ＶＥＧＦ剤、例えば、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））等の抗血管新生薬である。いくつかの実施形態では、生物学的製剤は、免疫グロブリンを用いる生物学的製剤、例えば、標的を刺激して抗がん応答を刺激するか、またはがんにとって重要な抗原に拮抗する、モノクローナル抗体（例えば、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、Ｆｃ融合タンパク質またはそれらの機能的断片）である。そのような薬剤としては、リツキサン（登録商標）（リツキシマブ）、ゼナパックス（登録商標）（ダクリズマブ）、シムレクト（登録商標）（バシリキシマブ）、シナジス（登録商標）（パリビズマブ）、レミケード（登録商標）（インフリキシマブ）、ハーセプチン（登録商標）（トラスツズマブ）、マイロターグ（登録商標）（ゲムツズマブオゾガマイシン）、キャンパス（アレムツズマブ）、ゼヴァリン（登録商標）（イブリツモマブチウキセタン）、ヒュミラ（登録商標）（アダリムマブ）、ゾレア（登録商標）（オマリズマブ）、ベキサール（登録商標）（トシツモマブ－Ｉ－１３１）、ラプティバ（登録商標）（エファリズマブ）、アービタックス（登録商標）（セツキシマブ）、アバスチン（登録商標）（ベバシズマブ）、タイサブリ（登録商標）（ナタリズマブ）、アクテムラ（登録商標）（トシリズマブ）、ベクティビックス（登録商標）（パニツムマブ）、ルセンティス（登録商標）（ラニビズマブ）、ソリリス（登録商標）（エクリズマブ）、シムジア（登録商標）（セルトリズマブペゴル）、シンポニー（登録商標）（ゴリムマブ）、イラリス（登録商標）（カナキヌマブ）、ステラーラ（登録商標）（ウステキヌマブ）、アーゼラ（登録商標）（オファツムマブ）、プロリア（登録商標）（デノスマブ）、Ｎｕｍａｘ（モタビズマブ）、ＡＢＴｈｒａｘ（ラキシバクマブ）、ベンリスタ（登録商標）（ベリムマブ）、ヤーボイ（登録商標）（イピリムマブ）、アドセトリス（登録商標）（ブレンツキシマブベドチン）、パージェタ（ペルツズマブ）、カドサイラ（登録商標）（トラスツズマブエムタンシン）、及びガザイバ（登録商標）（オビヌツズマブ）が挙げられる。また、抗体薬物複合体も含まれる。
【0102】
第２の薬剤は、薬物以外の治療である治療であり得る。例えば、第２の治療剤は、放射線療法、凍結療法、温熱療法及び／または腫瘍組織の外科的切除である。
【0103】
第２の薬剤は、チェックポイント阻害剤であり得る。一実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、阻害抗体（例えば、モノクローナル抗体等の単一特異性抗体）である。抗体は、例えば、ヒト化であるかまたは完全ヒト抗体であり得る。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、融合タンパク質、例えば、Ｆｃ－受容体融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、チェックポイントタンパク質と相互作用する、抗体等の薬剤である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、チェックポイントタンパク質のリガンドと相互作用する、抗体等の薬剤である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、ＣＴＬＡ－４（例えば、イピリムマブ／ヤーボイまたはトレメリムマブ等の抗ＣＴＬＡ４抗体）の阻害剤（例えば、阻害抗体または低分子阻害剤）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、ＰＤ－１（例えば、ニボルマブ／Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、ペムブロリズマブ／Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、ピジリズマブ／ＣＴ－０１１）の阻害剤（例えば、阻害抗体または低分子阻害剤）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、ＰＤＬ１（例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ／ＲＧ７４４６、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＢＭＳ ９３６５５９）の阻害剤（例えば、阻害抗体または低分子阻害剤）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、ＰＤＬ２（例えば、ＡＭＰ ２２４等のＰＤＬ２／Ｉｇ融合タンパク質）の阻害剤（例えば、阻害抗体またはＦｃ融合もしくは低分子阻害剤）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントの阻害剤は、Ｂ７－Ｈ３（例えば、ＭＧＡ２７１）、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ３、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、Ａ２ａＲ、Ｂ－７のファミリーのリガンド、またはそれらの組み合わせの阻害剤（例えば、阻害抗体または低分子阻害剤）である。
【0104】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、ぶどう膜黒色腫の治療に使用される別の抗がん療法、例えば、手術、ＭＥＫ阻害剤、及び／またはＰＫＣ阻害剤、あるいはそれらの組み合わせと併用される。例えば、いくつかの実施形態では、方法はさらに、本発明の化合物の投与の前、後、またはそれと同時に手術を実施することを含む。いくつかの実施形態では、方法はさらに、本発明の化合物の投与の前、後、またはそれと同時の、ＭＥＫ阻害剤（例えば、セルメチニブ、ビニメチニブ、またはタメチニブ）及び／またはＰＫＣ阻害剤（例えば、ソトラスタウリンもしくはＩＤＥ１９６）の投与を含む。
本明細書に記載の併用実施形態のいずれかでは、第１の治療剤及び第２の治療剤は、同時または順次に、いずれかの順序で投与される。第１の治療剤は、第２の治療剤の前後に、直前もしくは直後、最長１時間まで、最長２時間まで、最長３時間まで、最長４時間まで、最長５時間まで、最長６時間まで、最長７時間まで、最長８時間まで、最長９時間まで、最長１０時間まで、最長１１時間まで、最長１２時間まで、最長１３時間まで、１４時間、最長１６時間まで、最長１７時間まで、最長１８時間、最長１９時間まで、最長２０時間まで、最長２１時間まで、最長２２時間まで、最長２３時間まで、最長２４時間まで、または最長１～７日、１～１４日、１～２１日もしくは１～３０日までに投与され得る。
本明細書に記載の併用実施形態のいずれかでは、第１の治療剤及び第２の治療剤は、同時または順次に、いずれかの順序で投与される。第１の治療剤は、第２の治療剤の前後に、直前もしくは直後、最長１時間まで、最長２時間まで、最長３時間まで、最長４時間まで、最長５時間まで、最長６時間まで、最長７時間まで、最長８時間まで、最長９時間まで、最長１０時間まで、最長１１時間まで、最長１２時間まで、最長１３時間まで、１４時間、最長１６時間まで、最長１７時間まで、最長１８時間、最長１９時間まで、最長２０時間まで、最長２１時間まで、最長２２時間まで、最長２３時間まで、最長２４時間まで、または最長１～７日、１～１４日、１～２１日もしくは１～３０日までに投与され得る。
【0105】
医薬組成物
本明細書に記載される化合物は、インビボでの投与に好適な生物学的に適合性のある形態で、ヒト対象への投与のための医薬組成物に製剤化され得る。医薬組成物には、典型的には、本明細書に記載の活性薬剤及び生理学的に許容される賦形剤（例えば、薬学的に許容される賦形剤）が含まれる。式（Ｉ）の化合物の製剤原則はＷＯ２０２０／１６０１８０に記載されており、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本明細書に記載される化合物は、インビボでの投与に好適な生物学的に適合性のある形態で、ヒト対象への投与のための医薬組成物に製剤化され得る。医薬組成物には、典型的には、本明細書に記載の活性薬剤及び生理学的に許容される賦形剤（例えば、薬学的に許容される賦形剤）が含まれる。式（Ｉ）の化合物の製剤原則はＷＯ２０２０／１６０１８０に記載されており、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0106】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、例えば、経口、非経口、頬側、舌下、経鼻、直腸、パッチ、ポンプ、または経皮による投与によって投与され得、医薬組成物はそれに従って製剤化され得る。非経口投与には、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、経上皮、経鼻、肺内、髄腔内、直腸、及び局所による投与様式が含まれる。非経口投与は、選択された期間にわたる持続注入によるものであり得る。好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、経口投与される。
【0107】
好適な医薬担体、ならびに医薬製剤に使用するための製剤素材（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｎｅｃｅｓｓｉｔｉｅｓ）は、本分野で周知の参考テキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄ．，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）、及びＵＳＰ／ＮＦ（米国薬局方及び国民医薬品集（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ））に記載されている。
【0108】
医薬組成物は、本明細書に記載される好適な医薬担体及び賦形剤を含有し得る。賦形剤としては、例えば、抗接着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素（着色料）、皮膚軟化剤、乳化剤、増量剤（希釈剤）、膜形成剤またはコーティング剤、香味料、着香剤、滑剤（流動促進剤）、滑沢剤、保存剤、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味料、及び水和用の水が挙げられ得る。単位剤形は、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、滑剤、滑沢剤、及びカプセルシェルのうちの１つ以上を含有し得る。
【0109】
いくつかの例では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、医薬組成物の２．５～２０％（ｗ／ｗ）であり得る。
【0110】
いくつかの例では、増量剤は、医薬組成物の７０～９０％（ｗ／ｗ）であり得る。増量剤は、微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせであり得る。
【0111】
いくつかの例では、崩壊剤は、医薬組成物の４～６％（ｗ／ｗ）であり得る。崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウムであり得る。
【0112】
いくつかの例では、湿潤剤は、医薬組成物の０．５～１．５％（ｗ／ｗ）であり得る。湿潤剤は、ラウリル硫酸ナトリウムであり得る。
【0113】
いくつかの例では、滑剤は、医薬組成物の１．５～２．５％（ｗ／ｗ）であり得る。滑剤は、コロイド状二酸化ケイ素であり得る。
【0114】
いくつかの例では、滑沢剤は、医薬組成物の０．４～０．６％（ｗ／ｗ）であり得る。滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウムであり得る。
【0115】
いくつかの例では、カプセルシェルはポリマーシェルで作られている。ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンから作られ得る。
【0116】
いくつかの例では、医薬組成物は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
【0117】
いくつかの例では、医薬組成物は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0118】
いくつかの例では、医薬組成物は、２．５ｍｇ～２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【0119】
いくつかの例では、医薬組成物は、
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0120】
いくつかの例では、医薬組成物は、
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0121】
いくつかの例では、医薬組成物は、２．５ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの例では、医薬組成物は、２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの例では、医薬組成物は、カプセルである単位剤形である。いくつかの例では、カプセルは、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む。いくつかの例では、ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む。
【0122】
単位剤形
本明細書に記載される化合物は、経口投与のための単位剤形（例えば、カプセル）に製剤化され得る。式（Ｉ）の化合物は、経口投与用に異なるカプセル強度（例えば、１～２．５ｍｇ、２．５～５ｍｇ、５～１０ｍｇ、１０～１５ｍｇ、１５～２０ｍｇ、２０～２５ｍｇ、または５０～１００ｍｇ）で供給され得る。いくつかの例では、式（Ｉ）の化合物は、経口投与用に２．５ｍｇまたは２０ｍｇのカプセル強度で供給される。
本明細書に記載される化合物は、経口投与のための単位剤形（例えば、カプセル）に製剤化され得る。式（Ｉ）の化合物は、経口投与用に異なるカプセル強度（例えば、１～２．５ｍｇ、２．５～５ｍｇ、５～１０ｍｇ、１０～１５ｍｇ、１５～２０ｍｇ、２０～２５ｍｇ、または５０～１００ｍｇ）で供給され得る。いくつかの例では、式（Ｉ）の化合物は、経口投与用に２．５ｍｇまたは２０ｍｇのカプセル強度で供給される。
【0123】
単位剤形は、医薬組成物の項に記載のような好適な医薬担体及び賦形剤を含有し得る。賦形剤としては、例えば、抗接着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、色素（着色料）、皮膚軟化剤、乳化剤、増量剤（希釈剤）、膜形成剤またはコーティング剤、香味料、着香剤、滑剤（流動促進剤）、滑沢剤、保存剤、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味料、及び水和用の水が挙げられ得る。単位剤形は、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、滑剤、滑沢剤、及びカプセルシェルのうちの１つ以上を含有し得る。
【0124】
いくつかの例では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩は、単位剤形の２．５～２０％（ｗ／ｗ）であり得る。
【0125】
いくつかの例では、増量剤は、単位剤形の７０～９０％（ｗ／ｗ）であり得る。増量剤は、微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせであり得る。
【0126】
いくつかの例では、崩壊剤は、単位剤形の４～６％（ｗ／ｗ）であり得る。崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウムであり得る。
【0127】
いくつかの例では、湿潤剤は、単位剤形の０．５～１．５％（ｗ／ｗ）であり得る。湿潤剤は、ラウリル硫酸ナトリウムであり得る。
【0128】
いくつかの例では、滑剤は、単位剤形の１．５～２．５％（ｗ／ｗ）であり得る。滑剤は、コロイド状二酸化ケイ素であり得る。
【0129】
いくつかの例では、滑沢剤は、単位剤形の０．４～０．６％（ｗ／ｗ）であり得る。滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウムであり得る。
【0130】
いくつかの例では、カプセルシェルはポリマーシェルで作られている。ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンから作られ得る。
【0131】
いくつかの例では、単位剤形は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の増量剤、
４～６％（ｗ／ｗ）の崩壊剤、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）の湿潤剤、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）の滑剤、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）の滑沢剤、を含む。
【0132】
いくつかの例では、単位剤形は、
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．５～２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
７０～９０％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、マンニトール、またはそれらの組み合わせ、
４～６％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
０．５～１．５％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
１．５～２．５％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．４～０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0133】
いくつかの例では、単位剤形は、２．５ｍｇ～２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【0134】
いくつかの例では、単位剤形は、
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２．６％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
５０．８％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３８．１％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．０％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．０％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．５％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0135】
いくつかの例では、医薬組成物は、
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
２０％（ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩、
４８．２％（ｗ／ｗ）の微結晶性セルロース、
３７．０％（ｗ／ｗ）のマンニトール、
５．８％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、
１．２％（ｗ／ｗ）のラウリル硫酸ナトリウム、
２．３％（ｗ／ｗ）のコロイド状二酸化ケイ素、及び
０．６％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、を含む。
【0136】
いくつかの例では、単位剤形は、２．５ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの例では、単位剤形は、２０ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの例では、単位剤形はカプセルである。いくつかの例では、カプセルは、ポリマーシェルを含むカプセルシェルを含む。いくつかの例では、ポリマーシェルは、ヒプロメロース及び二酸化チタンを含む。
【0137】
本明細書に記載される化合物は、表１に記載のような経口投与のための単位剤形（例えば、カプセル）に製剤化され得る。
【表1】
【0138】
スウェディッシュオレンジのヒプロメロースカプセルシェルの組成を表２に記載する。
【表2】
【0139】
青緑色ヒプロメロースカプセルシェルの組成を表３に記載する。
【表3】
【実施例】
【0140】
実施例の項全体を通して以下の略語が使用される。
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）
ＤＣＭ：ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ（ジクロロメタン）
ＤＩＰＥＡまたはＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ－ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン）
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド）
ＤＭＳＯ：ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ジメチルスルホキシド）
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）－Ｎ’－ｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩）
ＥＥＤＱ：２－ｅｔｈｏｘｙ－１－ｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ－１，２－ｄｉｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ（２－エトキシ－１－エトキシカルボニル－１，２－ジヒドロキノリン）
ＥｔＯＨ：ｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ（エチルアルコール）
ｈまたはｈｒ：時間
ＨＯＢｔまたはＨＯＢＴ：１－ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ ｈｙｄｒａｔｅ（１－ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物）
ＭｅＯＨ：ｍｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ（メチルアルコール）
ＭｓＣｌ：ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ（メタンスルホニルクロリド）
ＮａＨＭＤＳ：ｓｏｄｉｕｍ ｂｉｓ（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ） ａｍｉｄｅ（ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド）
ＰｄＣｌ２（ｄｔｂｐｆ）：ｄｉｃｈｌｏｒｏ［１，１’－ｂｉｓ（ｄｉ－ｔ－ｂｕｔｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｏ）ｆｅｒｒｏｃｅｎｅ］ ｐａｌｌａｄｉｕｍ（ＩＩ）（ジクロロ［１，１’－ビス（ジ－ｔ－ブチルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ））
ＴＨＦ：ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ（テトラヒドロフラン）
ＴＭＳＣＨＮ２：（ｄｉａｚｏｍｅｔｈｙｌ）ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ（（ジアゾメチル）トリメチルシラン）
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）
ＤＣＭ：ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ（ジクロロメタン）
ＤＩＰＥＡまたはＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ－ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン）
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド）
ＤＭＳＯ：ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ジメチルスルホキシド）
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）－Ｎ’－ｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩）
ＥＥＤＱ：２－ｅｔｈｏｘｙ－１－ｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ－１，２－ｄｉｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ（２－エトキシ－１－エトキシカルボニル－１，２－ジヒドロキノリン）
ＥｔＯＨ：ｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ（エチルアルコール）
ｈまたはｈｒ：時間
ＨＯＢｔまたはＨＯＢＴ：１－ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ ｈｙｄｒａｔｅ（１－ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物）
ＭｅＯＨ：ｍｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ（メチルアルコール）
ＭｓＣｌ：ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ（メタンスルホニルクロリド）
ＮａＨＭＤＳ：ｓｏｄｉｕｍ ｂｉｓ（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ） ａｍｉｄｅ（ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド）
ＰｄＣｌ２（ｄｔｂｐｆ）：ｄｉｃｈｌｏｒｏ［１，１’－ｂｉｓ（ｄｉ－ｔ－ｂｕｔｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｏ）ｆｅｒｒｏｃｅｎｅ］ ｐａｌｌａｄｉｕｍ（ＩＩ）（ジクロロ［１，１’－ビス（ジ－ｔ－ブチルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ））
ＴＨＦ：ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ（テトラヒドロフラン）
ＴＭＳＣＨＮ２：（ｄｉａｚｏｍｅｔｈｙｌ）ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ（（ジアゾメチル）トリメチルシラン）
【0141】
実施例１．Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドの調製
Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドを以下のスキーム１に示すように合成した。
スキーム１．
Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドを以下のスキーム１に示すように合成した。
スキーム１．
【化7】
【0142】
ステップ１：６－フルオロピリジン－２－塩化カルボニル（中間体Ｂ）の調製
６－フルオロピリジン－２－カルボン酸（５０．０ｇ、３５４ｍｍｏｌ）を溶解させたジクロロメタン（５００ｍＬ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．２６ｍＬ、３．５４ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）溶液に、塩化オキサリル（１５５ｍＬ、１．７７ｍｏｌ）を加えた。塩化オキサリルを完全に添加した後、反応混合物を室温まで加温した。０．５時間後、混合物を真空濃縮して、中間体Ｂ（５６．５０ｇ）を白色固体として得、それをさらに精製することなく次のステップで使用した。
【化8】
６－フルオロピリジン－２－カルボン酸（５０．０ｇ、３５４ｍｍｏｌ）を溶解させたジクロロメタン（５００ｍＬ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．２６ｍＬ、３．５４ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）溶液に、塩化オキサリル（１５５ｍＬ、１．７７ｍｏｌ）を加えた。塩化オキサリルを完全に添加した後、反応混合物を室温まで加温した。０．５時間後、混合物を真空濃縮して、中間体Ｂ（５６．５０ｇ）を白色固体として得、それをさらに精製することなく次のステップで使用した。
【0143】
ステップ２：２－クロロ－１－（６－フルオロ－２－ピリジル）エテノン（中間体Ｃ）の調製
中間体Ｂ（５６．０ｇ、３５１ｍｍｏｌ）含有１，４－ジオキサン（８００ｍＬ）の冷却した（０℃）混合液に、２Ｍのトリメチルシリルジアゾメタン含有ヘキサン（３５１ｍＬ、７０２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。得られた反応混合物を２５℃で１０時間撹拌した。その後、反応混合物を、４Ｍ ＨＣｌ含有１，４－ジオキサン溶液（５００ｍＬ、２．０ｍｏｌ）でクエンチした。２時間撹拌した後、反応溶液を真空濃縮して、油状物を得た。残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮し、中間体Ｃ（３５．５ｇ）を白色固体として得、それを次のステップに直接使用した。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １７３．８．
【化9】
中間体Ｂ（５６．０ｇ、３５１ｍｍｏｌ）含有１，４－ジオキサン（８００ｍＬ）の冷却した（０℃）混合液に、２Ｍのトリメチルシリルジアゾメタン含有ヘキサン（３５１ｍＬ、７０２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。得られた反応混合物を２５℃で１０時間撹拌した。その後、反応混合物を、４Ｍ ＨＣｌ含有１，４－ジオキサン溶液（５００ｍＬ、２．０ｍｏｌ）でクエンチした。２時間撹拌した後、反応溶液を真空濃縮して、油状物を得た。残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮し、中間体Ｃ（３５．５ｇ）を白色固体として得、それを次のステップに直接使用した。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １７３．８．
【0144】
ステップ３：４－（６－フルオロ－２－ピリジル）チアゾール－２－アミン（中間体Ｅ）の調製
中間体Ｃ（３５．５ｇ、２０５ｍｍｏｌ）及びチオ尿素（１４．０ｇ、１８４ｍｍｏｌ）を溶解させたメタノール（２５０ｍＬ）と水（２５０ｍＬ）との混合溶液に、室温にて、ＮａＦ（３．５６ｇ、８４．８ｍｍｏｌ）を加えた。０．５時間撹拌した後、反応混合物を部分的に真空下で濃縮してＭｅＯＨを除去し、得られた溶液を２Ｍ ＨＣｌ水溶液でｐＨ約３に酸性化した。１５分後、溶液を酢酸エチルで３回抽出した。有機層を廃棄し、水相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でアルカリ化して３０分間撹拌し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテルでトリチュレートし、２５℃で１０分間撹拌し、濾過した。得られた固形物を真空下で乾燥させ、中間体Ｅ（２８．０ｇ、１４３ｍｍｏｌ、収率７０．１％、純度１００％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １９５．８．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ８．００ － ７．９６ （ｍ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２４ （ｓ， １Ｈ）， ７．１６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）．
【化10】
中間体Ｃ（３５．５ｇ、２０５ｍｍｏｌ）及びチオ尿素（１４．０ｇ、１８４ｍｍｏｌ）を溶解させたメタノール（２５０ｍＬ）と水（２５０ｍＬ）との混合溶液に、室温にて、ＮａＦ（３．５６ｇ、８４．８ｍｍｏｌ）を加えた。０．５時間撹拌した後、反応混合物を部分的に真空下で濃縮してＭｅＯＨを除去し、得られた溶液を２Ｍ ＨＣｌ水溶液でｐＨ約３に酸性化した。１５分後、溶液を酢酸エチルで３回抽出した。有機層を廃棄し、水相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でアルカリ化して３０分間撹拌し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテルでトリチュレートし、２５℃で１０分間撹拌し、濾過した。得られた固形物を真空下で乾燥させ、中間体Ｅ（２８．０ｇ、１４３ｍｍｏｌ、収率７０．１％、純度１００％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １９５．８．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ８．００ － ７．９６ （ｍ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２４ （ｓ， １Ｈ）， ７．１６ （ｓ， ２Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）．
【0145】
ステップ４：４－［６－［ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリン－４－イル］－２－ピリジル］チアゾール－２－アミン（中間体Ｇ）の調製
１０の別個の、中間体Ｅ（２．００ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）、ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリン（３．５４ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（５．３５ｍＬ、３０．７ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルスルホキシド溶液（１０ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下、１２０℃で並行して撹拌した。３６時間後、反応混合物を合わせ、水に滴加した。得られた懸濁液を濾過し、フィルターケーキを水で３回、石油エーテルで１回洗浄した後、減圧下で乾燥させ、中間体Ｇ（２５．５ｇ、８７．８ｍｍｏｌ、収率９５．２％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ２９１．２．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ７．５６ － ７．５４ （ｍ， １Ｈ）， ７．１７ （ｓ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０１ （ｓ， ２Ｈ）， ６．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２６ － ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６７ － ３．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３８ － ２．３４ （ｍ， ２Ｈ）， １．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【化11】
１０の別個の、中間体Ｅ（２．００ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）、ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリン（３．５４ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（５．３５ｍＬ、３０．７ｍｍｏｌ）の混合物のジメチルスルホキシド溶液（１０ｍＬ）を、Ｎ２雰囲気下、１２０℃で並行して撹拌した。３６時間後、反応混合物を合わせ、水に滴加した。得られた懸濁液を濾過し、フィルターケーキを水で３回、石油エーテルで１回洗浄した後、減圧下で乾燥させ、中間体Ｇ（２５．５ｇ、８７．８ｍｍｏｌ、収率９５．２％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ２９１．２．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ７．５６ － ７．５４ （ｍ， １Ｈ）， ７．１７ （ｓ， １Ｈ）， ７．１３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０１ （ｓ， ２Ｈ）， ６．７２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２６ － ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６７ － ３．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３８ － ２．３４ （ｍ， ２Ｈ）， １．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【0146】
ステップ５：Ｎ－［（１Ｓ）－２－［［４－［６－［ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリン－４－イル］－２－ピリジル］チアゾール－２－イル］アミノ］－１－（メトキシメチル）－２－オキソ－エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（中間体Ｉ）の調製
中間体Ｇ（１２．０ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）及び（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔブトキシカルボニルアミノ）－３－メトキシ－プロパン酸（１０．９ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（６０ｍＬ）に、ＥＥＤＱ（１２．３ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１～３：２）で精製し、中間体Ｉ（２０．０ｇ、４０．７ｍｍｏｌ、収率９８．５％）を黄色ガム状物として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ４９２．２．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．３７ （ｓ， １Ｈ）， ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６４ － ７．６０ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５０ － ４．４８ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７０ － ３．５１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４４ － ２．４０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【化12】
中間体Ｇ（１２．０ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）及び（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔブトキシカルボニルアミノ）－３－メトキシ－プロパン酸（１０．９ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（６０ｍＬ）に、ＥＥＤＱ（１２．３ｇ、４９．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１～３：２）で精製し、中間体Ｉ（２０．０ｇ、４０．７ｍｍｏｌ、収率９８．５％）を黄色ガム状物として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ４９２．２．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．３７ （ｓ， １Ｈ）， ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６４ － ７．６０ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５０ － ４．４８ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７０ － ３．５１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４４ － ２．４０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【0147】
ステップ６：（Ｓ）－４－（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）－１－メトキシ－３－オキソブタン－２－アミニウムクロリド（中間体Ｊ）の調製
４Ｍ ＨＣｌの１，４－ジオキサン溶液（２００ｍＬ、８００ｍｍｏｌ）に、中間体Ｉ（２０．０ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、混合物をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで希釈し、懸濁液を得た。固体を濾過により回収してメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで２回洗浄し、真空乾燥させ、中間体Ｊ（１９．０ｇ）を黄色固体として得、それをさらに精製することなく次のステップで使用した。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ３９２．３．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．４４ － １２．３０ （ｍ， １Ｈ）， ８．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．８７ （ｓ， １Ｈ）， ７．６６ － ７．６４ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９ － ４．３０ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９４ － ３．８６ （ｍ， １Ｈ）， ３．８５ － ３．７７ （ｍ， １Ｈ）， ３．６９ － ３．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【化13】
４Ｍ ＨＣｌの１，４－ジオキサン溶液（２００ｍＬ、８００ｍｍｏｌ）に、中間体Ｉ（２０．０ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、混合物をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで希釈し、懸濁液を得た。固体を濾過により回収してメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで２回洗浄し、真空乾燥させ、中間体Ｊ（１９．０ｇ）を黄色固体として得、それをさらに精製することなく次のステップで使用した。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋ ＝ ３９２．３．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．４４ － １２．３０ （ｍ， １Ｈ）， ８．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．８７ （ｓ， １Ｈ）， ７．６６ － ７．６４ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９ － ４．３０ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９４ － ３．８６ （ｍ， １Ｈ）， ３．８５ － ３．７７ （ｍ， １Ｈ）， ３．６９ － ３．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【0148】
１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボン酸（中間体Ｋ）の調製
１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボン酸を以下のスキーム２に示すように合成した。
スキーム２
１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボン酸を以下のスキーム２に示すように合成した。
スキーム２
【化14】
【0149】
ステップＡ：１Ｈ－ピロール－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（中間体Ｎ）の調製
ｔｅｒｔ－ブチル－プロパ－２－エノアート（７８．６ｍＬ、５４２ｍｍｏｌ）及び１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチルベンゼン（１０６ｇ、５４２ｍｍｏｌ）の混合物のＴＨＦ溶液（１３００ｍＬ）に、鉱油中６０％のＮａＨ（２５．９７ｇ、６４９ｍｍｏｌ）を３０℃にて１時間かけてゆっくりと加え、次いで、７０℃に加熱した。２時間後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相をブラインで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～３：１）で精製し、中間体Ｎ（４１．５ｇ、２３６ｍｍｏｌ、収率４３％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝ １８０．４．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ８．３６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．３５ － ７．２５ （ｍ， １Ｈ）， ６．７１ － ６．６２ （ｍ， １Ｈ）， ６．５９ － ６．４９ （ｍ， １Ｈ）， １．４８ （ｓ， ９Ｈ）．
【化15】
ｔｅｒｔ－ブチル－プロパ－２－エノアート（７８．６ｍＬ、５４２ｍｍｏｌ）及び１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチルベンゼン（１０６ｇ、５４２ｍｍｏｌ）の混合物のＴＨＦ溶液（１３００ｍＬ）に、鉱油中６０％のＮａＨ（２５．９７ｇ、６４９ｍｍｏｌ）を３０℃にて１時間かけてゆっくりと加え、次いで、７０℃に加熱した。２時間後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相をブラインで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～３：１）で精製し、中間体Ｎ（４１．５ｇ、２３６ｍｍｏｌ、収率４３％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝ １８０．４．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ８．３６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．３５ － ７．２５ （ｍ， １Ｈ）， ６．７１ － ６．６２ （ｍ， １Ｈ）， ６．５９ － ６．４９ （ｍ， １Ｈ）， １．４８ （ｓ， ９Ｈ）．
【0150】
ステップＢ：１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（中間体Ｏ）の調製
中間体Ｎ（４０．５ｇ、２４２ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）ＴＨＦ溶液（１５００ｍＬ）に１ＭのＮａＨＭＤＳ（４８４ｍＬ、４８４ｍｍｏｌ）溶液を加えた。０℃で３０分間撹拌した後、メタンスルホニルクロリド（２８．１ｍＬ、３６３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、混合物を３０℃に加温した。１６時間後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に反応混合物をゆっくりと注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルクロマトグラフフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、黄色固体を得た。黄色固体をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで室温にてトリチュレートし、２０分間撹拌し、濾過して真空乾燥させ、中間体Ｏ（２５．７ｇ、１０５ｍｍｏｌ、収率４３％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．６６－７．６４ （ｍ， １Ｈ）， ７．１０ － ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ６．７３－６．７１ （ｍ， １Ｈ）， ３．２１ （ｓ， ３Ｈ）， １．５６ （ｓ， ９Ｈ）．
【化16】
中間体Ｎ（４０．５ｇ、２４２ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）ＴＨＦ溶液（１５００ｍＬ）に１ＭのＮａＨＭＤＳ（４８４ｍＬ、４８４ｍｍｏｌ）溶液を加えた。０℃で３０分間撹拌した後、メタンスルホニルクロリド（２８．１ｍＬ、３６３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、混合物を３０℃に加温した。１６時間後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に反応混合物をゆっくりと注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルクロマトグラフフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、黄色固体を得た。黄色固体をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで室温にてトリチュレートし、２０分間撹拌し、濾過して真空乾燥させ、中間体Ｏ（２５．７ｇ、１０５ｍｍｏｌ、収率４３％）を白色固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．６６－７．６４ （ｍ， １Ｈ）， ７．１０ － ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ６．７３－６．７１ （ｍ， １Ｈ）， ３．２１ （ｓ， ３Ｈ）， １．５６ （ｓ， ９Ｈ）．
【0151】
ステップＣ：１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸（中間体Ｋ）の調製
中間体Ｏ（２５．７ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン混合溶液（１００ｍＬ）に、４ＭのＨＣｌの１，４－ジオキサン溶液（４００ｍＬ、１．６ｍｏｌ）を１５℃で加えた。１５℃で１４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで１５℃にて１６時間でトリチュレートした。混合物を濾過し、真空乾燥させ、中間体Ｋ（１８．７ｇ、９８．８ｍｍｏｌ、収率９４％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １８９．８．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール－ｄ４） δ ７．７８ － ７．７７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ － ７．２３ （ｍ， １Ｈ）， ６．７２ － ６．７０ （ｍ， １Ｈ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ）．
【化17】
中間体Ｏ（２５．７ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の１，４－ジオキサン混合溶液（１００ｍＬ）に、４ＭのＨＣｌの１，４－ジオキサン溶液（４００ｍＬ、１．６ｍｏｌ）を１５℃で加えた。１５℃で１４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで１５℃にて１６時間でトリチュレートした。混合物を濾過し、真空乾燥させ、中間体Ｋ（１８．７ｇ、９８．８ｍｍｏｌ、収率９４％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ １８９．８．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール－ｄ４） δ ７．７８ － ７．７７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ － ７．２３ （ｍ， １Ｈ）， ６．７２ － ６．７０ （ｍ， １Ｈ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ）．
【0152】
ステップ７：Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドの調製
１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸（中間体Ｋ）（２．４３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２．６９ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．８９ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（１０．２ｍＬ、５８．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）に中間体Ｊ（５．００ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で３回、ブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１～１：２）で精製した。残渣をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルでトリチュレートした。０．５時間後、懸濁液を濾過し、フィルターケーキをメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。固体をジメチルスルホキシド（１２ｍＬ）に溶解させ、水（８００ｍＬ）に滴加した。懸濁液を濾過し、ウェットフィルターケーキを得た。フィルターケーキを水に懸濁させ、室温で撹拌した。１時間後、固体を濾過により回収し、水で３回洗浄し、真空乾燥させ、Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミド（３．９ｇ、６．９３ｍｍｏｌ、収率５９．３％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ ５６３．１．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．４９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９８ － ７．９７ （ｍ， １Ｈ）， ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６７ － ７．５７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２９ － ７．２７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ － ６．７４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９４ － ４．９１ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７７ － ３．６７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６３ － ３．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４４ － ２．３８ （ｍ， ２Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【化18】
１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸（中間体Ｋ）（２．４３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２．６９ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．８９ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（１０．２ｍＬ、５８．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）に中間体Ｊ（５．００ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で４時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で３回、ブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１～１：２）で精製した。残渣をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルでトリチュレートした。０．５時間後、懸濁液を濾過し、フィルターケーキをメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。固体をジメチルスルホキシド（１２ｍＬ）に溶解させ、水（８００ｍＬ）に滴加した。懸濁液を濾過し、ウェットフィルターケーキを得た。フィルターケーキを水に懸濁させ、室温で撹拌した。１時間後、固体を濾過により回収し、水で３回洗浄し、真空乾燥させ、Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミド（３．９ｇ、６．９３ｍｍｏｌ、収率５９．３％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ［Ｍ＋Ｈ］＋＝ ５６３．１．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．４９ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９８ － ７．９７ （ｍ， １Ｈ）， ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６７ － ７．５７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２９ － ７．２７ （ｍ， １Ｈ）， ７．２６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ － ６．７４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９４ － ４．９１ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７７ － ３．６７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６３ － ３．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４４ － ２．３８ （ｍ， ２Ｈ）， １．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ６Ｈ）．
【0153】
実施例２．ＡＴＰアーゼ活性の効力及び選択性
式（Ｉ）の化合物の効力及び選択性を決定するため、一連のインビトロ実験も行われた。ＡＴＰアーゼ活性を、式（Ｉ）の化合物の様々な濃度及びバッチ選択を用いてＡＤＰ－Ｇｌｏアッセイで評価した。反応混合物を調製し、適切な基質とともにインキュベートした。反応が停止した後、発光を測定することによって結果を分析した。
式（Ｉ）の化合物の効力及び選択性を決定するため、一連のインビトロ実験も行われた。ＡＴＰアーゼ活性を、式（Ｉ）の化合物の様々な濃度及びバッチ選択を用いてＡＤＰ－Ｇｌｏアッセイで評価した。反応混合物を調製し、適切な基質とともにインキュベートした。反応が停止した後、発光を測定することによって結果を分析した。
【0154】
これらの結果は、式（Ｉ）の化合物が、ＢＲＧ１及びＢＲＭ酵素ＡＴＰアーゼ活性をそれぞれ、６．５ｎＭ（ｎ＝１１）及び４．５ｎＭ（ｎ＝１１）の幾何平均半数阻害濃度（ＩＣ５０）値で阻害したことを示した。クロモドメインヘリカーゼＤＮＡ結合タンパク質４（ＣＨＤ４）のＡＴＰアーゼドメインは、ＢＲＧ１及びＢＲＭのＡＴＰアーゼドメインと相同である。式（Ｉ）の化合物は、２００μＭ（ｎ＝３）までの濃度においてＣＨＤ４酵素のＡＴＰアーゼ活性を阻害しなかったことから、式（Ｉ）の化合物の選択性が示された。追加のプロファイリングでは、式（Ｉ）の化合物には、細胞内の他の２４９のＡＴＰアーゼへの結合がほとんどなかったことが示された。
【0155】
実施例３．ＢＲＭ及びＢＲＧ－１のＡＴＰアーゼ触媒活性についてのアッセイ
ＢＲＭまたはＢＲＧ－１のＡＴＰアーゼ触媒活性を、ＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ９１０２）を使用したインビトロ生化学的アッセイによって測定した。反応が完了したら、ＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）キナーゼアッセイを２段階で実施した。第１のステップは、反応物中の未消費ＡＴＰを枯渇させることである。第２のステップは、反応生成物ＡＤＰをＡＴＰに変換させることであったが、これがルシフェラーゼに利用されて発光を生じさせ、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ等の発光リーダーにより検出される。
ＢＲＭまたはＢＲＧ－１のＡＴＰアーゼ触媒活性を、ＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ９１０２）を使用したインビトロ生化学的アッセイによって測定した。反応が完了したら、ＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）キナーゼアッセイを２段階で実施した。第１のステップは、反応物中の未消費ＡＴＰを枯渇させることである。第２のステップは、反応生成物ＡＤＰをＡＴＰに変換させることであったが、これがルシフェラーゼに利用されて発光を生じさせ、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ等の発光リーダーにより検出される。
【0156】
アッセイ反応混合物（１０μＬ）には、３０ｎＭのＢＲＭまたはＢＲＧ－１、２０ｎＭのサケ精子ＤＮＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製、ＵｌｔｒａＰｕｒｅ（商標）Ｓａｌｍｏｎ Ｓｐｅｒｍ ＤＮＡ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ、カタログ番号１５６３２０１１）、ならびに４００μＭのＡＴＰ含有ＡＴＰアーゼアッセイバッファー（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ、ｐＨ８、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％Ｔｗｅｅｎ－２０、及び１ｍＭの新鮮ＤＴＴ（Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＤＴＴ（ジチオトレイトール）、カタログ番号２０２９０）で構成されている）が含有されていた。低容量白色Ｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ－３８４プラスプレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、カタログ番号６００８２８０）上で２．５μＬのＡＴＰ／ＤＮＡ溶液に２．５μＬのＡＴＰアーゼ溶液を添加することによって反応が開始され、室温で１時間インキュベートした。次に、キットで提供されている５μＬのＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）試薬の添加の後、反応物を室温で４０分間インキュベートした。次に、キットで提供されている１０μＬのキナーゼ検出試薬を加えてＡＤＰをＡＴＰに変換させ、反応物を室温で６０分間インキュベートした。最後に、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ等のプレートリーダールミノメーターを用いて発光測定値を収集する。
【0157】
ＢＲＭ及びＢＲＧ－１を、ｈｉｇｈ ｆｉｖｅ昆虫細胞株から９０％超の純度で合成した。
【0158】
Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては３．９ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては５．２ｎＭであることがアッセイにおいて見出された。Ｎ－（（Ｒ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－（メトキシ－ｄ３）－１－オキソプロパン－２－イル－３，３－ｄ２）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては４４３ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては７７７ｎＭであることがアッセイにおいて見出された。Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－（メトキシ－ｄ３）－１－オキソプロパン－２－イル－３，３－ｄ２）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては４．６ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては７．４ｎＭであることがアッセイにおいて見出された。
【0159】
実施例４．化合物Ａの合成
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ａは、以下の構造：
を有する。
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ａは、以下の構造：
【化19】
を有する。
【0160】
化合物Ａを以下のスキーム３に示すように合成した。
【0161】
スキーム３．化合物Ａの合成
化合物Ａの存在下でのＢＲＭまたはＢＲＧ－１のＡＴＰアーゼ触媒活性を、上記のＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ９１０２）を使用してインビトロ生化学的アッセイによって測定した。化合物Ａは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては１０．４ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては１９．３ｎＭであることがアッセイにおいて見出された。
【化20】
化合物Ａの存在下でのＢＲＭまたはＢＲＧ－１のＡＴＰアーゼ触媒活性を、上記のＡＤＰ－Ｇｌｏ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ９１０２）を使用してインビトロ生化学的アッセイによって測定した。化合物Ａは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては１０．４ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては１９．３ｎＭであることがアッセイにおいて見出された。
【0162】
実施例５．ぶどう膜黒色腫細胞株及び血液癌細胞株の増殖に対するＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害の効果
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）、前立腺癌細胞株（ＬＮＣＡＰ）、肺癌細胞株（ＮＣＩ－Ｈ１２９９）、及び不死化胚性腎臓株（ＨＥＫ２９３Ｔ）を増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表４を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＡをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、培地を細胞から除去し、３０マイクロリットルのＴｒｙｐＬＥ（Ｇｉｂｃｏ）を細胞に１０分間加えた。細胞をプレートから剥離させ、１７０マイクロリットルの増殖培地を添加して再懸濁させた。２つのＤＭＳＯ処理した対照ウェルからの細胞を計数し、実験開始時に播種した最初の数の細胞を、新鮮な化合物を含有するプレートに再度播種し、さらに４日間３７℃で置いた。７日目に、細胞を上記のように回収した。３日目及び７日目に、Ｃｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）の添加によって相対細胞増殖を測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で測定した。各細胞株の増殖が５０％阻害された（ＧＩ５０）化合物濃度をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを使用して計算したものを、以下にプロットする。多発性骨髄腫細胞株（ＯＰＭ２、ＭＭ１Ｓ、ＬＰ１）、ＡＬＬ細胞株（ＴＡＬＬ１、ＪＵＲＫＡＴ、ＲＳ４１１）、ＤＬＢＣＬ細胞株（ＳＵＤＨＬ６、ＳＵＤＨＬ４、ＤＢ、ＷＳＵＤＬＣＬ２、ＰＦＥＩＦＦＥＲ）、ＡＭＬ細胞株（ＯＣＩＡＭＬ５）、ＭＤＳ細胞株（ＳＫＭ１）、卵巣癌細胞株（ＯＶ７、ＴＹＫＮＵ）、食道癌細胞株（ＫＹＳＥ１５０）、ラブドイド腫瘍ライン（ＲＤ、Ｇ４０２、Ｇ４０１、ＨＳ７２９、Ａ２０４）、肝癌細胞株（ＨＬＦ、ＨＬＥ、ＰＬＣＲＰＦ５）、及び肺癌細胞株（ＳＷ１５７３、ＮＣＩＨ２４４４）では、上記の方法に以下の変更を加えて実施した：細胞を９６ウェルプレートに播種し、翌日、ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＡをＤＭＳＯに溶解させ、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。３日目及び７日目の細胞分割時、細胞を新しい９６ウェルプレートに分割し、再播種の４時間後に新鮮な化合物を加えた。表４に、試験した細胞株及び使用された増殖培地を示す。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）、前立腺癌細胞株（ＬＮＣＡＰ）、肺癌細胞株（ＮＣＩ－Ｈ１２９９）、及び不死化胚性腎臓株（ＨＥＫ２９３Ｔ）を増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表４を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＡをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、培地を細胞から除去し、３０マイクロリットルのＴｒｙｐＬＥ（Ｇｉｂｃｏ）を細胞に１０分間加えた。細胞をプレートから剥離させ、１７０マイクロリットルの増殖培地を添加して再懸濁させた。２つのＤＭＳＯ処理した対照ウェルからの細胞を計数し、実験開始時に播種した最初の数の細胞を、新鮮な化合物を含有するプレートに再度播種し、さらに４日間３７℃で置いた。７日目に、細胞を上記のように回収した。３日目及び７日目に、Ｃｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）の添加によって相対細胞増殖を測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で測定した。各細胞株の増殖が５０％阻害された（ＧＩ５０）化合物濃度をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを使用して計算したものを、以下にプロットする。多発性骨髄腫細胞株（ＯＰＭ２、ＭＭ１Ｓ、ＬＰ１）、ＡＬＬ細胞株（ＴＡＬＬ１、ＪＵＲＫＡＴ、ＲＳ４１１）、ＤＬＢＣＬ細胞株（ＳＵＤＨＬ６、ＳＵＤＨＬ４、ＤＢ、ＷＳＵＤＬＣＬ２、ＰＦＥＩＦＦＥＲ）、ＡＭＬ細胞株（ＯＣＩＡＭＬ５）、ＭＤＳ細胞株（ＳＫＭ１）、卵巣癌細胞株（ＯＶ７、ＴＹＫＮＵ）、食道癌細胞株（ＫＹＳＥ１５０）、ラブドイド腫瘍ライン（ＲＤ、Ｇ４０２、Ｇ４０１、ＨＳ７２９、Ａ２０４）、肝癌細胞株（ＨＬＦ、ＨＬＥ、ＰＬＣＲＰＦ５）、及び肺癌細胞株（ＳＷ１５７３、ＮＣＩＨ２４４４）では、上記の方法に以下の変更を加えて実施した：細胞を９６ウェルプレートに播種し、翌日、ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＡをＤＭＳＯに溶解させ、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。３日目及び７日目の細胞分割時、細胞を新しい９６ウェルプレートに分割し、再播種の４時間後に新鮮な化合物を加えた。表４に、試験した細胞株及び使用された増殖培地を示す。
【表4】
【0163】
結果：図１に示されるように、ぶどう膜黒色腫及び血液癌細胞株は、試験した他の細胞株よりもＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害に対して感受性が高かった。ぶどう膜黒色腫及び血液癌細胞株の阻害は、７日目まで維持された。
【0164】
実施例６．ぶどう膜黒色腫細胞株におけるＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤と臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤との比較
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株である９２－１またはＭＰ４１を増殖培地の存在下で９６ウェルプレートに播種した（表４を参照のこと）。ＢＡＦ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ａ）、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）、またはＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ；Ｓｅｌｌｅｃｋ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）をＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株である９２－１またはＭＰ４１を増殖培地の存在下で９６ウェルプレートに播種した（表４を参照のこと）。ＢＡＦ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ａ）、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）、またはＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ；Ｓｅｌｌｅｃｋ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）をＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
【0165】
結果：図２Ａ及び図３に示されるように、化合物Ａは、臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤と同等のぶどう膜黒色腫細胞の増殖阻害を示した。さらに、化合物Ａは、臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤よりも速く阻害の発現をもたらすことが見出された。
【0166】
ぶどう膜黒色腫細胞株における式（Ｉ）の化合物。式（Ｉ）の化合物によるヒトＵＭ９２－１細胞株における細胞増殖の阻害を調べるため、インビトロ研究を実施した。９２－１は、ヒト原発性腫瘍に由来する細胞株であり、ＵＭに共通する特徴である遺伝子ＧＮＡＱの変異を有する。式（Ｉ）の化合物をＤＭＳＯに溶解させ、様々な濃度で試験した。式（Ｉ）の化合物を、９２－１細胞における３日細胞増殖アッセイで二連で評価し、１１回繰り返した。陰性対照として、ＢＲＧ１の発現またはＢＲＭの発現いずれかを欠くＳＢＣ－５細胞において、式（Ｉ）の化合物を１０日増殖アッセイで三連でアッセイし、５回繰り返した。各アッセイのインキュベーション期間終了時、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ試薬及び発光検出用マイクロプレートリーダーを使用して細胞生存能を決定した。
【0167】
９２－１細胞を使用した３日細胞増殖アッセイでは、式（Ｉ）の化合物の平均ＩＣ５０は１．１３ｎＭ（ｎ＝１１）であった。化合物式（Ｉ）の化合物による９２－１細胞増殖に対する効果を示す代表的阻害曲線を図２Ｂに示す。ＳＢＣ－５細胞における式（Ｉ）の化合物の平均ＩＣ５０は２５，０００ｎＭ超であった。結果は、式（Ｉ）の化合物が、ＢＲＧ１及びＢＲＭを発現する細胞株の増殖を強力に阻害する一方、機能的ＢＲＧ１またはＢＲＭを有していない細胞株に対しては顕著な抗増殖効果がないことを示している。したがって、式（Ｉ）の化合物の抗増殖効果は、ＢＲＧ１及びＢＲＭタンパク質に対するこの化合物の阻害活性によるものと考えられる。
【0168】
実施例７．化合物Ｂの合成
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ｂは、以下の構造：
を有する。
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ｂは、以下の構造：
【化21】
を有する。
【0169】
化合物Ｂを以下のスキーム４に示すように合成した。
【0170】
スキーム４．化合物Ｂの合成
（２Ｓ）－２－アミノ－４－メチルスルファニル－Ｎ－［４－［３－（４－ピリジル）フェニル］チアゾール－２－イル］ブタンアミド（２ｇ、４．７５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）及び１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸（８９８．８１ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ）の混合物のＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（１．３７ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９６２．９２ｍｇ、７．１３ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（２．４６ｇ、１９．００ｍｍｏｌ、３．３１ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で３時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）に注ぎ、沈殿物を濾過により回収した。固体をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）でトリチュレートし、沈殿物を濾過により回収した。固体をＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に溶解させ、次いで、混合物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に注ぎ、形成された沈殿物を濾過により回収して凍結乾燥し、化合物Ｂ（２．０５ｇ、３．６６ｍｍｏｌ、収率７７．０１％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５５．９．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １２．４９ （ｓ， １Ｈ）， ８．６８ － ８．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ８．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．３１ － ８．３０ （ｍ， １Ｈ）， ８．０２ － ８．００ （ｍ， １Ｈ）， ７．９４ － ７．９６ （ｍ， １Ｈ）， ７．８３ （ｓ， １Ｈ）， ７．７３ － ７．７４ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６１ － ７．５７ （ｍ， １Ｈ）， ７．３１ － ７．２９ （ｍ， １Ｈ）， ６．７９ － ６．７７ （ｍ， １Ｈ）， ４．７４ － ４．６９ （ｍ， １Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６７－２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１３ － ２．０１ （ｍ， ５Ｈ）． ｅｅ％＝１００％．
【化22】
（２Ｓ）－２－アミノ－４－メチルスルファニル－Ｎ－［４－［３－（４－ピリジル）フェニル］チアゾール－２－イル］ブタンアミド（２ｇ、４．７５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）及び１－メチルスルホニルピロール－３－カルボン酸（８９８．８１ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ）の混合物のＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（１．３７ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９６２．９２ｍｇ、７．１３ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（２．４６ｇ、１９．００ｍｍｏｌ、３．３１ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で３時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）に注ぎ、沈殿物を濾過により回収した。固体をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）でトリチュレートし、沈殿物を濾過により回収した。固体をＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に溶解させ、次いで、混合物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に注ぎ、形成された沈殿物を濾過により回収して凍結乾燥し、化合物Ｂ（２．０５ｇ、３．６６ｍｍｏｌ、収率７７．０１％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５５．９．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １２．４９ （ｓ， １Ｈ）， ８．６８ － ８．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ８．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．３１ － ８．３０ （ｍ， １Ｈ）， ８．０２ － ８．００ （ｍ， １Ｈ）， ７．９４ － ７．９６ （ｍ， １Ｈ）， ７．８３ （ｓ， １Ｈ）， ７．７３ － ７．７４ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６１ － ７．５７ （ｍ， １Ｈ）， ７．３１ － ７．２９ （ｍ， １Ｈ）， ６．７９ － ６．７７ （ｍ， １Ｈ）， ４．７４ － ４．６９ （ｍ， １Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６７－２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１３ － ２．０１ （ｍ， ５Ｈ）． ｅｅ％＝１００％．
【0171】
化合物Ｂは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては３．６ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては５．７ｎＭであることが記載のＡＴＰアーゼアッセイで見出された。
【0172】
実施例８．ぶどう膜黒色腫、血液癌、前立腺癌、乳癌、及びユーイング肉腫細胞株の増殖に対するＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害の効果
手順：上記実施例５の全細胞株もまた、上記の化合物Ｂで記載のように試験した。さらに、以下の細胞株もまた、以下のとおり試験した。簡単に言えば、ユーイング肉腫細胞株（ＣＡＤＯＥＳ１、ＲＤＥＳ、ＳＫＥＳ１）、網膜芽細胞腫細胞株（ＷＥＲＩＲＢ１）、ＡＬＬ細胞株（ＲＥＨ）、ＡＭＬ細胞株（ＫＡＳＵＭＩ１）、前立腺癌細胞株（ＰＣ３、ＤＵ１４５、２２ＲＶ１）、黒色腫細胞株（ＳＨ４、ＳＫＭＥＬ２８、ＷＭ１１５、ＣＯＬＯ８２９、ＳＫＭＥＬ３、Ａ３７５）、乳癌細胞株（ＭＤＡＭＢ４１５、ＣＡＭＡ１、ＭＣＦ７、ＢＴ４７４、ＨＣＣ１４１９、ＤＵ４４７５、ＢＴ５４９）、Ｂ－ＡＬＬ細胞株（ＳＵＰＢ１５）、ＣＭＬ細胞株（Ｋ５６２、ＭＥＧ０１）、バーキットリンパ腫細胞株（ＲＡＭＯＳ２Ｇ６４Ｃ１０、ＤＡＵＤＩ）、マントル細胞リンパ腫細胞株（ＪＥＫＯ１、ＲＥＣ１）、膀胱癌細胞株（ＨＴ１１９７）、及び肺癌細胞株（ＳＢＣ５）について、上記の方法に以下の変更を加えて実施した：細胞を９６ウェルプレートに播種し、翌日、ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＢをＤＭＳＯに溶解させ、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。３日目及び７日目の細胞分割時、細胞を新しい９６ウェルプレートに分割し、再播種の４時間後に新鮮な化合物を加えた。表５に、試験した細胞株及び使用された増殖培地を示す。
手順：上記実施例５の全細胞株もまた、上記の化合物Ｂで記載のように試験した。さらに、以下の細胞株もまた、以下のとおり試験した。簡単に言えば、ユーイング肉腫細胞株（ＣＡＤＯＥＳ１、ＲＤＥＳ、ＳＫＥＳ１）、網膜芽細胞腫細胞株（ＷＥＲＩＲＢ１）、ＡＬＬ細胞株（ＲＥＨ）、ＡＭＬ細胞株（ＫＡＳＵＭＩ１）、前立腺癌細胞株（ＰＣ３、ＤＵ１４５、２２ＲＶ１）、黒色腫細胞株（ＳＨ４、ＳＫＭＥＬ２８、ＷＭ１１５、ＣＯＬＯ８２９、ＳＫＭＥＬ３、Ａ３７５）、乳癌細胞株（ＭＤＡＭＢ４１５、ＣＡＭＡ１、ＭＣＦ７、ＢＴ４７４、ＨＣＣ１４１９、ＤＵ４４７５、ＢＴ５４９）、Ｂ－ＡＬＬ細胞株（ＳＵＰＢ１５）、ＣＭＬ細胞株（Ｋ５６２、ＭＥＧ０１）、バーキットリンパ腫細胞株（ＲＡＭＯＳ２Ｇ６４Ｃ１０、ＤＡＵＤＩ）、マントル細胞リンパ腫細胞株（ＪＥＫＯ１、ＲＥＣ１）、膀胱癌細胞株（ＨＴ１１９７）、及び肺癌細胞株（ＳＢＣ５）について、上記の方法に以下の変更を加えて実施した：細胞を９６ウェルプレートに播種し、翌日、ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＢをＤＭＳＯに溶解させ、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。３日目及び７日目の細胞分割時、細胞を新しい９６ウェルプレートに分割し、再播種の４時間後に新鮮な化合物を加えた。表５に、試験した細胞株及び使用された増殖培地を示す。
【表5】
【0173】
結果：図４に示されるように、ぶどう膜黒色腫、血液癌、前立腺癌、乳癌、及びユーイング肉腫細胞株は、試験した他の細胞株よりもＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害に対して感受性が高かった。ぶどう膜黒色腫、血液癌、前立腺癌、乳癌、及びユーイング肉腫細胞株の阻害は、７日目まで維持された。
【0174】
実施例９．がん細胞株の増殖に対するＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害の効果。
手順：プールされた細胞の生存能アッセイを、ＰＲＩＳＭ（Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｉｎ Ｍｉｘｔｕｒｅｓ：混合物の相対阻害の同時プロファイリング）を用い、以前に報告されているように（“Ｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｏｔｙｐｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｏｆ ｂａｒｃｏｄｅｄ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ”，Ｙｕ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３４，４１９－４２３，２０１６）実施し、その際、以下の変更を加えた。今回のような大きな細胞株リストに対して特有の感染及びプーリングプロトコルを適用するために、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ（ＣＣＬＥ）コレクションから細胞株を入手し、１０％熱非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したフェノールレッド不含ＲＰＭＩ－１６４０培地に馴化させた。レンチウイルス遠心感染（ｓｐｉｎ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）プロトコルを実施し、全細胞株とも推定感染多重度（ＭＯＩ）を１とし、選択マーカーとしてブラストサイジンを使用して各細胞株に２４ヌクレオチドバーコードを導入した。次いで、安定的にバーコード化された７５０超のＰＲＩＳＭがん細胞株を、プールあたり２５で倍加時間に従って一緒にプールした。スクリーニングの実施では、以前の記載（Ｙｕ ｅｔ ａｌ．）のように各ウェルにプールの２５細胞株を播種する代わりに、すべての接着細胞株プールまたはすべての浮遊細胞株プールをそれぞれ、Ｔ２５フラスコ（１００，０００細胞／フラスコ）または６ウェルプレート（５０，０００細胞／ウェル）を使用して一緒に播種した。細胞を、ＤＭＳＯまたは化合物のいずれかを用いて、最高濃度の１０μＭから開始して、８点、３倍用量反応で三連で処理した。アッセイの頑健性の対照として、並行して、これまでに確認されている２つの化合物であるｐａｎ－Ｒａｆ阻害剤ＡＺ－６２８及びプロテアソーム阻害薬ボルテゾミブをそれぞれ、最高濃度に２．５μＭ及び０．０３９μＭを使用して細胞を処理した。
手順：プールされた細胞の生存能アッセイを、ＰＲＩＳＭ（Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｉｎ Ｍｉｘｔｕｒｅｓ：混合物の相対阻害の同時プロファイリング）を用い、以前に報告されているように（“Ｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｏｔｙｐｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｏｆ ｂａｒｃｏｄｅｄ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ”，Ｙｕ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３４，４１９－４２３，２０１６）実施し、その際、以下の変更を加えた。今回のような大きな細胞株リストに対して特有の感染及びプーリングプロトコルを適用するために、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ（ＣＣＬＥ）コレクションから細胞株を入手し、１０％熱非働化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したフェノールレッド不含ＲＰＭＩ－１６４０培地に馴化させた。レンチウイルス遠心感染（ｓｐｉｎ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）プロトコルを実施し、全細胞株とも推定感染多重度（ＭＯＩ）を１とし、選択マーカーとしてブラストサイジンを使用して各細胞株に２４ヌクレオチドバーコードを導入した。次いで、安定的にバーコード化された７５０超のＰＲＩＳＭがん細胞株を、プールあたり２５で倍加時間に従って一緒にプールした。スクリーニングの実施では、以前の記載（Ｙｕ ｅｔ ａｌ．）のように各ウェルにプールの２５細胞株を播種する代わりに、すべての接着細胞株プールまたはすべての浮遊細胞株プールをそれぞれ、Ｔ２５フラスコ（１００，０００細胞／フラスコ）または６ウェルプレート（５０，０００細胞／ウェル）を使用して一緒に播種した。細胞を、ＤＭＳＯまたは化合物のいずれかを用いて、最高濃度の１０μＭから開始して、８点、３倍用量反応で三連で処理した。アッセイの頑健性の対照として、並行して、これまでに確認されている２つの化合物であるｐａｎ－Ｒａｆ阻害剤ＡＺ－６２８及びプロテアソーム阻害薬ボルテゾミブをそれぞれ、最高濃度に２．５μＭ及び０．０３９μＭを使用して細胞を処理した。
【0175】
化合物による３日の処理の後、細胞を溶解させてゲノムＤＮＡを抽出し、バーコードをＰＣＲで増幅させ、次世代シークエンシングで検出した。処理試料中の細胞株特異的なバーコードの数を、ＤＭＳＯ対照及び０日目の対照におけるバーコードの数と比較することによって細胞生存能を決定した。各細胞株について用量反応曲線を適合させ、対応する曲線下面積（ＡＵＣ）を計算し、全細胞株のＡＵＣ中央値と比較した（図５）。
【0176】
結果：ＡＵＣが中央値未満の細胞株は、最も感受性が高いとみなされた。
【0177】
実施例１０．ぶどう膜黒色腫細胞株の増殖に対するＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤の効果。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）及び非小細胞肺癌細胞（ＮＣＩＨ１２９９）を増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＢをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）及び非小細胞肺癌細胞（ＮＣＩＨ１２９９）を増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤である化合物ＢをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～１０μＭの濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
【0178】
結果：図６に示されるように、化合物Ｂは細胞株において強力な増殖阻害をもたらした。
【0179】
実施例１１．ぶどう膜黒色腫細胞株におけるＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤と臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤との比較
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株である９２－１またはＭＰ４１を増殖培地の存在下で９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＡＦ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ｂ）、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）、及びＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ；Ｓｅｌｌｅｃｋ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）をＤＭＳＯに溶解し、播種時に０～１０μＭの濃度勾配で細胞に添加した。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株である９２－１またはＭＰ４１を増殖培地の存在下で９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＡＦ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ｂ）、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）、及びＭＥＫ阻害剤（セルメチニブ；Ｓｅｌｌｅｃｋ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）をＤＭＳＯに溶解し、播種時に０～１０μＭの濃度勾配で細胞に添加した。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
【0180】
結果：図７及び図８に示されるように、化合物Ｂは、臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤と比較して、ぶどう膜黒色腫細胞の増殖阻害に対する強力な効果を示した。さらに、化合物Ｂは、臨床のＰＫＣ阻害剤及びＭＥＫ阻害剤よりも速く増殖阻害の発現をもたらすことが見出された。
【0181】
実施例１２．ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤は、ＰＫＣ阻害剤耐性細胞の増殖阻害において有効である。
手順：ＭＰ４１ぶどう膜黒色腫細胞を、１μＭを最大とする漸増濃度の化合物を含有する増殖培地（表５を参照のこと）中での長期培養により、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）に対して耐性にした。３ヶ月後、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）またはＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ｂ）に対する親ＭＰ４１細胞及びＰＫＣ阻害剤（ＰＫＣｉ）耐性細胞の感受性について、上記の実施例４に記載のとおり７日増殖阻害アッセイで試験した。
手順：ＭＰ４１ぶどう膜黒色腫細胞を、１μＭを最大とする漸増濃度の化合物を含有する増殖培地（表５を参照のこと）中での長期培養により、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６；ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）に対して耐性にした。３ヶ月後、ＰＫＣ阻害剤（ＬＸＳ１９６）またはＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ｂ）に対する親ＭＰ４１細胞及びＰＫＣ阻害剤（ＰＫＣｉ）耐性細胞の感受性について、上記の実施例４に記載のとおり７日増殖阻害アッセイで試験した。
【0182】
結果：ＰＫＣｉ耐性細胞は、親ＭＰ４１細胞株で増殖が許容されたＬＸＳ１９６の濃度より高い濃度でも耐性を示して増殖することができたが（図９）、ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤（化合物Ｂ）は、ＰＫＣｉ耐性細胞株及び親細胞株の両方において強い増殖阻害をもたらした（図１０）。ＰＫＣｉ耐性細胞は、親ＭＰ４１細胞よりも化合物Ｂに対して感受性が高かった（図１０）。
【0183】
実施例１３．化合物Ｃの合成
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ｃは、以下の構造：
を有する。
ＢＲＧ１／ＢＲＭ阻害剤化合物Ｃは、以下の構造：
【化23】
を有する。
【0184】
化合物Ｃを以下のスキーム５に示すように合成した。
【0185】
スキーム５．化合物Ｃの合成
化合物Ｃは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては５．３ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては１．３ｎＭであることが上記のＡＴＰアーゼアッセイで見出された。
【化24】
化合物Ｃは、ＩＰ５０が、ＢＲＭに対しては５．３ｎＭ、及びＢＲＧ１に対しては１．３ｎＭであることが上記のＡＴＰアーゼアッセイで見出された。
【0186】
実施例１４．ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤はインビボでぶどう膜黒色腫の腫瘍増殖阻害を引き起こす。
手順：ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ）に対し、５×１０６の９２－１ぶどう膜黒色腫細胞を含む５０％マトリゲルを腋窩部に皮下移植した。腫瘍を平均約２００ｍｍ３まで成長させ、その時点でマウスをグループ分けし、投与を開始した。マウスにビヒクル（２０％２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン）または漸増用量の化合物Ｃを強制経口投与により１日１回投与した。腫瘍体積及び体重を３週間にわたって測定し、適切な用量（ｍｇ／ｋｇ）を達成するため体重によって用量が調整された。このとき、動物を屠殺して腫瘍を切除し、画像化した。
手順：ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ）に対し、５×１０６の９２－１ぶどう膜黒色腫細胞を含む５０％マトリゲルを腋窩部に皮下移植した。腫瘍を平均約２００ｍｍ３まで成長させ、その時点でマウスをグループ分けし、投与を開始した。マウスにビヒクル（２０％２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン）または漸増用量の化合物Ｃを強制経口投与により１日１回投与した。腫瘍体積及び体重を３週間にわたって測定し、適切な用量（ｍｇ／ｋｇ）を達成するため体重によって用量が調整された。このとき、動物を屠殺して腫瘍を切除し、画像化した。
【0187】
結果：図１１及び図１２に示されるように、化合物Ｃによる処置は、用量依存的に腫瘍増殖阻害を引き起こし、最大（５０ｍｇ／ｋｇ）用量で腫瘍退縮が観察された。図１３に示されるように、いずれの処置も、体重減少は観察されず、忍容性が高かった（図１３）。
【0188】
実施例１５．ぶどう膜黒色腫細胞株及び血液癌細胞株の増殖に対するＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害の効果。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＥＬ２０２、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）、前立腺癌細胞（２２ＲＶ１）、急性白血病細胞（ＥＯＬ１、ＴＨＰ１）、及び組織球性リンパ腫細胞（Ｕ９３７）を、増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤であるＮ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～２μＭ（ぶどう膜黒色腫細胞株の場合）、または０～１μＭ（他の細胞株の場合）の濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
手順：ぶどう膜黒色腫細胞株（９２－１、ＭＥＬ２０２、ＭＰ４１、ＭＰ３８、ＭＰ４６）、前立腺癌細胞（２２ＲＶ１）、急性白血病細胞（ＥＯＬ１、ＴＨＰ１）、及び組織球性リンパ腫細胞（Ｕ９３７）を、増殖培地の入った９６ウェルプレートに播種した（表５を参照のこと）。ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害剤であるＮ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドをＤＭＳＯに溶解させ、播種時、０～２μＭ（ぶどう膜黒色腫細胞株の場合）、または０～１μＭ（他の細胞株の場合）の濃度勾配で細胞に加えた。細胞を３７℃で３日間インキュベートした。３日間の処理の後、細胞増殖をＣｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定し、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。
【0189】
結果：図１４に示されるように、Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドは、すべての細胞株において強力な増殖阻害をもたらした。表６に示すように、測定された絶対ＩＣ５０値は、試験したすべての細胞株で３５０ナノモル未満であった。
【0190】
表６は、試験細胞株、使用した増殖培地、及び化合物処理３日後の絶対ＩＣ５０値（ｎＭ）の一覧である。
【表6】
【0191】
実施例１６．ＢＲＧ１／ＢＲＭ ＡＴＰアーゼ阻害はインビボでぶどう膜黒色腫の腫瘍増殖阻害を引き起こす。
手順：ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ）に対し、５×１０６の９２－１ぶどう膜黒色腫細胞を含む５０％マトリゲルを腋窩部に皮下移植した。腫瘍を平均約２００ｍｍ３まで成長させ、その時点でマウスをグループ分けし、投与を開始した。マウスにビヒクル（２０％２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン）または漸増用量のＮ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドを強制経口投与により１日１回投与した。腫瘍体積及び体重を３週間にわたって測定し、適切な用量（ｍｇ／ｋｇ）を達成するため体重によって用量が調整された。
手順：ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ）に対し、５×１０６の９２－１ぶどう膜黒色腫細胞を含む５０％マトリゲルを腋窩部に皮下移植した。腫瘍を平均約２００ｍｍ３まで成長させ、その時点でマウスをグループ分けし、投与を開始した。マウスにビヒクル（２０％２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン）または漸増用量のＮ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドを強制経口投与により１日１回投与した。腫瘍体積及び体重を３週間にわたって測定し、適切な用量（ｍｇ／ｋｇ）を達成するため体重によって用量が調整された。
【0192】
結果：図１５に示されるように、Ｎ－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（ｃｉｓ－２，６－ジメチルモルホリノ）ピリジン－２－イル）チアゾール－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－１－オキソプロパン－２－イル）－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミドによる処置は、用量依存的に腫瘍増殖阻害を引き起こし、最大（１．５ｍｇ／ｋｇ）用量で腫瘍退縮が観察された。図１６に示されるように、いずれの処置も、観察された体重変化（％）に基づき、忍容性が高かった。
【0193】
実施例１７．Ｐ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）及び乳癌耐性タンパク質（ＢＣＲＰ）及び他のトランスポーターのインビトロプロファイリング
インビトロ膜透過性。ヒトのＢＣＲＰまたはＰ－ｇｐを発現するＭＤＣＫサブクローンＩＩ（ＭＤＣＫ－ＩＩ）細胞を用いて、式（Ｉ）の化合物の受動的透過性、ならびにＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰによる排出状態を決定するため、インビトロ双方向輸送研究を行った。
インビトロ膜透過性。ヒトのＢＣＲＰまたはＰ－ｇｐを発現するＭＤＣＫサブクローンＩＩ（ＭＤＣＫ－ＩＩ）細胞を用いて、式（Ｉ）の化合物の受動的透過性、ならびにＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰによる排出状態を決定するため、インビトロ双方向輸送研究を行った。
【0194】
式（Ｉ）の化合物は、ＢＣＲＰまたはＰ－ｇｐを発現するＭＤＣＫ－ＩＩ細胞では濃度依存的排出を示したが、ＭＤＣＫ対照細胞では示されなかった（表７）。ＢＣＲＰ発現細胞における１μＭでの式（Ｉ）の化合物の排出比（ＥＲ）は、１μＭのＢＣＲＰ阻害剤Ｋｏ１４３の存在下では４から０．９に低下した。Ｐ－ｇｐ発現細胞における１μＭでの式（Ｉ）の化合物のＥＲは、３μＭのＰ－ｇｐ阻害剤エラクリダールの存在下では１６から０．８に低下した。ＭＤＣＫ対照細胞では、式（Ｉ）の化合物は、見かけの透過係数（Ｐａｐｐ）（Ｂ→Ａ）またはＰａｐｐ（Ａ→Ｂ）が１５（１０－６ｃｍ／ｓ）以上を示した。これらのデータは、式（Ｉ）の化合物がＢＣＲＰ及びＰ－ｇｐの両方の基質であり、受動的透過性が高いことを示している。
【表7】
【0195】
トランスポーターの阻害の可能性。有機カチオントランスポーター（ＯＡＴ）１、ＯＡＴ３、有機カチオントランスポーター（ＯＣＴ）２、ＯＡＴＰ１Ｂ１、ＯＡＴＰ１Ｂ３、多剤・毒素排出トランスポーター（ＭＡＴＥ）１、ＭＡＴＥ２、ＢＣＲＰ、及びＰ－ｇｐのための透過性支持体上で増殖させた極性を有する単層ＭＤＣＫ－ＩＩ細胞を用いて、式（Ｉ）の化合物が一連の細胞トランスポーターを阻害する可能性を調べた。式（Ｉ）の化合物を、ＢＣＲＰ及びＰ－ｇｐのアッセイでは１００μＭまでの様々な濃度で、または他の全トランスポーターでは５０μＭまでの様々な濃度で試験した。
【0196】
式（Ｉ）の化合物は、５０μＭまでの名目上の試験濃度においてＯＡＴ１及びＯＣＴ２に対し最小限の阻害を示した。式（Ｉ）の化合物は、他のトランスポーターのＯＡＴ３、ＯＡＴＰ１Ｂ１、ＯＡＴＰ１Ｂ３、ＭＡＴＥ１、ＭＡＴＥ２－Ｋ、ＢＣＲＰ、及びＰ－ｇｐを阻害した。名目上の試験濃度を用いた推定ＩＣ５０は、ＭＡＴＥ１の１．３５μＭからＯＡＴ３の２４．６μＭまでの範囲であった。非特異的結合についての補正後（測定濃度と名目上濃度間の平均差；表８）、ＩＣ５０は、ＭＡＴＥ１の０．３１８μＭからＯＡＴ３の５．７９μＭの範囲であった。
【表8】
【0197】
実施例１８．式（Ｉ）の化合物の代謝に関与するヒトシトクロムＰ４５０酵素の同定
インビトロ代謝における式（Ｉ）の化合物でのシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）酵素の役割を評価するため、反応表現型研究を行った。７つの組換えＣＹＰ酵素（ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、及びＣＹＰ２Ｃ８）によりもたらされる、ヒト肝ミクロソームにおける式（Ｉ）の化合物の消失である選択的化学的阻害、及び消失率に基づいて、ＣＹＰ３Ａが、ヒト肝ミクロソームにおける式（Ｉ）の化合物の代謝に関与する主要ＣＹＰ酵素として同定され、程度は低いがＣＹＰ２Ｃ１９の関与の可能性がある。この研究の結果を表９及び表１０に示す。
インビトロ代謝における式（Ｉ）の化合物でのシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）酵素の役割を評価するため、反応表現型研究を行った。７つの組換えＣＹＰ酵素（ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、及びＣＹＰ２Ｃ８）によりもたらされる、ヒト肝ミクロソームにおける式（Ｉ）の化合物の消失である選択的化学的阻害、及び消失率に基づいて、ＣＹＰ３Ａが、ヒト肝ミクロソームにおける式（Ｉ）の化合物の代謝に関与する主要ＣＹＰ酵素として同定され、程度は低いがＣＹＰ２Ｃ１９の関与の可能性がある。この研究の結果を表９及び表１０に示す。
【表9】
【表10】
【0198】
ＣＹＰ酵素阻害の可能性。式（Ｉ）の化合物が一連のＣＹＰ酵素を阻害する可能性を、プールされたヒト肝ミクロソーム（ＰＨＬＭ）を用いてインビトロで評価した。
【0199】
ＰＨＬＭでは、最高３０μＭまでの濃度の式（Ｉ）の化合物は、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、及びＣＹＰ３Ａに対して最小限から中程度の直接阻害活性（阻害＜５０％）を示した。ＣＹＰ２Ｃ８の直接阻害があり、ＩＣ５０値は２０μＭであった。ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）の存在下での式（Ｉ）の化合物とのプレインキュベーションでは、ＣＹＰ３Ａを除き、試験したＣＹＰの阻害は増強されなかった。ＮＡＤＰＨの非存在下でのプレインキュベーション後に観察された阻害と比較すると、ミダゾラム１’－水酸化及びテストステロン６β－水酸化によって測定されるＣＹＰ３Ａ４／５の阻害は、ＮＡＤＰＨの存在下での３０μＭの式（Ｉ）の化合物の３０分間のプレインキュベーション後に３０～４０％増加した。１０μＭ以下の濃度では、ＣＹＰ３Ａ４／５活性に対するプレインキュベーションの効果は明らかではなかった（阻害の増加が２０％未満）。これらのデータは、式（Ｉ）の化合物がＣＹＰ３Ａ４／５の弱い時間依存的阻害剤であることを示唆している（表１１）。溶解性が十分ではないこと、及び時間依存的阻害が３０μＭでしか明らかではなかったという考察により、ＣＹＰ３Ａ４／５の最大不活化率及びＫＩを決定することはできなかった。
【表11】
【0200】
ＣＹＰ酵素誘導の可能性。ＣＹＰ誘導剤としての式（Ｉ）の化合物を評価するため、各研究につき３名のドナーの凍結保存ヒト肝細胞を使用して２つのインビトロ研究を行った。陽性対照及び陰性対照では、両研究とも予想どおりに実施された。
【0201】
第１の研究では、０．０５～３０μＭの範囲の濃度の式（Ｉ）の化合物で７２時間処理した培養ヒト肝細胞において、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６及びＣＹＰ３Ａ４のｍＲＮＡレベルをｑＲＴ－ＰＣＲによって測定した。０．５μＭ以上の濃度の式（Ｉ）の化合物は、培養ヒト肝細胞に対して細胞毒性を示すようであった。０．５μＭ以上の式（Ｉ）の化合物濃度において肝細胞の形態変化が全ドナーで観察されたが、ＬＤＨ放出の増加は１名のドナーの培養物（ＨＣ１０－２３）で観察されただけであった。ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４の発現は、０．０５及び０．１５μＭの濃度の式（Ｉ）の化合物によって大きく減少し、肝細胞形態に対する明らかな影響は示されなかった。ＣＹＰ２Ｂ６ ｍＲＮＡレベルもまた０．１５μＭにて顕著に減少したが、０．０５μＭでは減少しなかった（表１２）。
【表12】
【0202】
低い試験濃度（０．３～５０ｎＭ）の式（Ｉ）の化合物で７２時間処理した培養凍結保存ヒト肝細胞において、ＣＹＰ ｍＲＮＡ発現または酵素活性に対する式（Ｉ）の化合物の効果をさらに評価するため、第２の研究を行った（表１３）。試験した濃度における細胞毒性の証拠はなかった。第１の研究と一致して、式（Ｉ）の化合物処理により、ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４のｍＲＮＡレベルが濃度依存的に減少した。ＣＹＰ２Ｃ８及びＣＹＰ２Ｃ９のｍＲＮＡの発現もまた下方制御されたが、ＣＹＰ２Ｂ６及びＣＹＰ２Ｃ１９では下方制御されなかった。ＣＹＰ３Ａ４では１ｎＭ以上、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８及びＣＹＰ２Ｃ９では１０ｎＭ以上の式（Ｉ）の化合物濃度で、ｍＲＮＡレベルの５０％超の減少が観察された。ｍＲＮＡ発現と一致して、ＣＹＰ１Ａ２酵素活性は１０ｎＭ以上の式（Ｉ）の化合物濃度で５０％超減少し、ＣＹＰ２Ｂ６活性は影響を受けなかった（表１４）。対照的に、ＣＹＰ３Ａ活性に対する式（Ｉ）の化合物の効果は、１～５０ｎＭの範囲の濃度でＣＹＰ３Ａ４ ｍＲＮＡレベルが顕著に減少したにもかかわらず、最小限であった。
【表13】
【表14】
【0203】
式（Ｉ）の化合物をラット肝細胞（０．３～１００ｎＭ）においても評価し、この種においてＣＹＰの下方制御が起こるかどうかを決定した。培養ラット肝細胞では、１０ｎＭ以上の濃度の式（Ｉ）の化合物によりＣＹＰ２ｂ１及びＣＹＰ３ａ２３のｍＲＮＡ発現が５０％以上減少したが、ＣＹＰ１ａ２では減少しなかった。
【0204】
薬物動態学的薬物相互作用。式（Ｉ）の化合物と同時投与され得る薬物との潜在的な相互作用を評価するための特別な研究は行われていない。ＰＨＬＭでは、直接阻害のＩＣ５０値は、ＣＹＰ２Ｃ８では２０μＭ、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、及びＣＹＰ３Ａ４／５では３０μＭ超であった。式（Ｉ）の化合物は、ＣＹＰ３Ａ４／５の弱い時間依存的阻害剤であった。培養ヒト肝細胞では、式（Ｉ）の化合物処理により、１ｎＭ以上の濃度でＣＹＰ３Ａ４の、また１０ｎＭ以上の濃度でＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８及びＣＹＰ２Ｃ９のｍＲＮＡ発現が下方制御されたが、ＣＹＰ２Ｂ６及びＣＹＰ２Ｃ１９のｍＲＮＡ発現に対しては、５０ｎＭまでの試験した濃度において影響が最小限であった。特定のトランスポーターを過剰発現している細胞において、式（Ｉ）の化合物は、ＯＡＴ３、ＯＡＴＰ１Ｂ１、ＯＡＴＰ１Ｂ３、ＭＡＴＥ１、ＭＡＴＥ２－Ｋ、ＢＣＲＰ及びＰ－ｇｐを阻害したが、ＯＡＴ１及びＯＣＴ２を阻害しなかった。推定ＩＣ５０濃度は、非特異的結合についての補正後、ＭＡＴＥ１の０．３１８μＭからＯＡＴ３の５．７９μＭまでの範囲であった。
【0205】
ヒト用量の３００ｍｇ及び０．１ｈ－１のＫａにおいて予測される最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）である０．８～１．４μＭに基づき、ヒト血漿中のｆｕを０．０１と仮定すると、Ｒ値（ＦＤＡ Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ（産業界のためのＦＤＡガイダンス）“Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｄｒｕｇ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ Ｓｔｕｄｉｅｓ－Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ Ｅｎｚｙｍｅ－ａｎｄ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｄｒｕｇ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ”，Ｊａｎｕａｒｙ ２０２０、に従って計算）は、試験したすべてのＣＹＰで１．０２未満であり、ＯＡＴＰ１Ｂ１及びＯＡＴＰ１Ｂ３では１．１未満、ならびにＯＡＴ１、ＯＡＴ３、ＯＣＴ２、ＭＡＴＥ１及びＭＡＴＥ２－Ｋでは０．１未満であった。腸内のＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰの阻害のＲ値は１０超であった。これらのデータから、式（Ｉ）の化合物は、Ｐ－ｇｐ及びＢＣＲＰを除くＣＹＰ酵素及びトランスポーターの阻害剤として薬物間相互作用（ＤＤＩ）の可能性が低いことが示唆される。腸内でのＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰの阻害は、経口投与される治療域が狭い高感度基質のＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰと臨床的に関連している可能性がある。
【0206】
式（Ｉ）の化合物で処理した培養ヒト肝細胞では、ｍＲＮＡレベルは、ＣＹＰ３Ａ４の場合は１ｎＭ以上、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、及びＣＹＰ２Ｃ９の場合は１０ｎＭ以上の式（Ｉ）の化合物濃度にて５０％超減少した。５０ｎＭまでの濃度において、ＣＹＰ２Ｂ６及びＣＹＰ２Ｃ１９のｍＲＮＡの発現は影響を受けなかった（ビヒクル対照と比べたｍＲＮＡ倍率変化は約１～１．７８の範囲であった）。ＣＹＰ３Ａ４のｍＲＮＡレベルは１～５０ｎＭの濃度で減少したが、ＣＹＰ３Ａ活性には大きな影響はなかった（３２％以下の減少）。ＣＹＰ１Ａ２酵素活性は、１０ｎＭ以上の式（Ｉ）の化合物濃度で５０％超減少した。ＣＹＰ下方制御のインビトロからインビボへの外挿は確立されていないため（２０２０ ＦＤＡ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＤＤＩガイダンス及び参照により本明細書に組み込まれるＨａｒｉｐａｒｓａｄ ｅｔ ａｌ．（Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ．４５（１０）：１０４９－１０５９（２０１７）を参照のこと）、これらの所見のインビボでの関連性はまた決定されていない。式（Ｉ）の化合物は、良好な受動的透過性を有するＰ－ｇｐ及びＢＣＲＰの基質である。カプセルで投与した場合にイヌにおいて受動的膜透過性が高く、経口吸収が良好であることを考慮すると、ヒトにおける式（Ｉ）の化合物の経口吸収は、Ｐ－ｇｐ及びＢＣＲＰによって大きく制限されない可能性がある。ＣＹＰ３Ａは、式（Ｉ）の化合物のインビトロ代謝に関与する主要ＣＹＰ酵素として同定されたことから、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤または誘導剤との同時投与が、式（Ｉ）の化合物のＰＫを変化させる可能性がある。
【0207】
ＣＹＰ３Ａは、ヒト肝ミクロソームにおいて式（Ｉ）の化合物の代謝に関与する主要ＣＹＰ酵素として同定されたこと、及びＣＹＰ下方制御の臨床的関連性が不明であることから、強いＣＹＰ３Ａ阻害剤または誘導剤、及び治療域の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質との同時投与は、関連する臨床データが利用可能になるまで避けるべきである。
【0208】
実施例１９．式（Ｉ）の化合物の投与によるヒト対象におけるＢＡＦ複合体関連障害の治療
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＦ複合体関連障害、例えば、がん（例えば、ぶどう膜黒色腫、進行性血液系悪性疾患等）、ウイルス感染症、コフィン・シリス症候群、神経線維腫症、または多発性髄膜腫等を治療するために（または対象のＢＡＦ複合体の活性を低下させるために）ヒト対象に投与することができる。例えば、ぶどう膜黒色腫を患うヒト対象は、式（Ｉ）の化合物を、適切な経路（例えば、経口）により特定の投与量（例えば、１日５ｍｇから開始）で数日、数週間、または数か月にわたる期間投与することによって治療され得る。
式（Ｉ）の化合物は、ＢＡＦ複合体関連障害、例えば、がん（例えば、ぶどう膜黒色腫、進行性血液系悪性疾患等）、ウイルス感染症、コフィン・シリス症候群、神経線維腫症、または多発性髄膜腫等を治療するために（または対象のＢＡＦ複合体の活性を低下させるために）ヒト対象に投与することができる。例えば、ぶどう膜黒色腫を患うヒト対象は、式（Ｉ）の化合物を、適切な経路（例えば、経口）により特定の投与量（例えば、１日５ｍｇから開始）で数日、数週間、または数か月にわたる期間投与することによって治療され得る。
【0209】
対象が、式（Ｉ）の化合物投与前に中止することができない、既知の強いＣＹＰ３Ａ（例えば、ＣＹＰ３Ａ４）阻害剤（複数可）（例えば、ボセプレビル、コビシスタット、ダノプレビル、エルビテグラビル、グレープフルーツジュース、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、パリタプレビル、オムビタスビル、ダサブビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、チプラナビル、テリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、イデラリシブ、ネファゾドン、ネルフィナビル、もしくはそれらの薬学的に許容される塩）、強いＣＹＰ３Ａ誘導剤（複数可）（例えば、アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピシン、セントジョーンズワート、もしくはその薬学的に許容される塩）、または治療域（ＴＩ）の狭い高感度ＣＹＰ３Ａ基質（複数可）（例えば、アルフェンタニル、アバナフィル、ブスピロン、コニバプタン、ダリフェナシン、ダルナビル、エバスチン、エベロリムス、イブルチニブ、ロミタピド、ロバスタチン、ミダゾラム、ナロキセゴール、ニソルジピン、サキナビル、シンバスタチン、シロリムス、タクロリムス、チプラナビル、トリアゾラム、バルデナフィル、ブデソニド、ダサチニブ、ドロネダロン、エレトリプタン、エプレレノン、フェロジピン、インジナビル、ルラシドン、マラビロク、クエチアピン、シルデナフィル、チカグレロル、トルバプタン、もしくはその薬学的に許容される塩）による治療を受けている場合、対象に式（Ｉ）の化合物を投与するべきではない。対象が、既知の中等度のＣＹＰ３Ａ阻害剤（複数可）（例えば、アプレピタント、シプロフロキサシン、コニバプタン、クリゾチニブ、シクロスポリン、ジルチアゼム、ドロネダロン、エリスロマイシン、フルコナゾール、フルボキサミン、イマチニブ、トフィソパム、ベラパミル、もしくはその薬学的に許容される塩）、中等度のＣＹＰ３Ａ誘導剤（複数可）（例えば、ボセンタン、エファビレンツ、エトラビリン、フェノバルビタール、プリミドン、もしくはその薬学的に許容される塩）、または主にＣＹＰ３Ａ、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、及びＣＹＰ２Ｃ９によって代謝される基質（複数可）による治療を受けている場合、対象に式（Ｉ）の化合物を慎重に（例えば、注意深くモニタリングしながら）投与するべきである。中等度のＣＹＰ３Ａ阻害剤（複数可）、中等度のＣＹＰ３Ａ誘導剤（複数可）、もしくは主にＣＹＰ３Ａ、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、及びＣＹＰ２Ｃ９によって代謝される基質（複数可）の投与を減らす（例えば、用量を下げる）／中断するか、または式（Ｉ）の化合物の投与を減らす（例えば、用量を下げる）／中断することが必要な場合がある。
【0210】
対象が、式（Ｉ）の化合物投与前に中止することができない、高感度のＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）基質（複数可）（例えば、ダビガトランエテキシラート、ジゴキシン、フェキソフェナジン、ロペラミド、キニジン、タリノロール、ビンブラスチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩等）または乳癌耐性タンパク質（ＢＣＲＰ）基質（複数可）（例えば、クメストロール、ダイゼイン、ダントロレン、エストロン－３－硫酸、ゲニステイン、プラゾシン、スルファサラジン、ロスバスタチン、もしくはそれらの薬学的に許容される塩等）である治療域の狭いことが既知の経口投与される薬剤（複数可）による治療を受けている場合、対象に式（Ｉ）の化合物を投与するべきではない。
【0211】
対象が、式（Ｉ）の化合物投与前に中止することができない、酸抑制剤（ＡＲＡ）であることが既知である薬剤（複数可）（例えば、ヒスタミンＨ２－受容体拮抗薬（Ｈ２ブロッカー）（例えば、ファモチジン、シメチジン、ラニチジン、ニザチジン、またはそれらの薬学的に許容される塩）、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）（例えば、オメプラゾール、ランソプラゾール、パントプラゾール、ラベプラゾール、エソメプラゾール、デクスランソプラゾール、イラプラゾール、またはそれらの薬学的に許容される塩等）による治療を受けている場合、対象に式（Ｉ）の化合物を投与するべきではない。制酸剤は、式（Ｉ）の化合物との時間差投与様式で投与される場合には許容される。時間差投与プロトコル下では、式（Ｉ）の化合物は、制酸剤投与の前後２時間以内には投与されない。
【0212】
対象が、血小板減少症（例えば、血小板数が５０×１０９／Ｌ未満）または別の主要な出血性障害／素因を患っている場合、式（Ｉ）の化合物により治療する際には、対象を注意深くモニターするべきである。
【0213】
対象にＱＴ延長があるか、またはそのリスクがある可能性がある場合、式（Ｉ）の化合物により治療する際に、対象を注意深くモニターする場合がある。
【0214】
他の実施形態
本発明をその具体的な実施形態と関連させて記載してきたが、本発明はさらなる変更が可能であること、ならびに本出願は、一般に、本発明の原理に従った本発明のいかなる変形、使用、または適応も包含することを意図し、それらには、本開示から発展させたもの、例えば、本発明が属する技術分野の範囲内で既知であるかもしくは慣習的な実施の範囲に入るもの、及び上文に記載の本質的な特徴に該当し得るものが含まれ、かつ、本出願は特許請求の範囲に準拠することが理解される。
本発明をその具体的な実施形態と関連させて記載してきたが、本発明はさらなる変更が可能であること、ならびに本出願は、一般に、本発明の原理に従った本発明のいかなる変形、使用、または適応も包含することを意図し、それらには、本開示から発展させたもの、例えば、本発明が属する技術分野の範囲内で既知であるかもしくは慣習的な実施の範囲に入るもの、及び上文に記載の本質的な特徴に該当し得るものが含まれ、かつ、本出願は特許請求の範囲に準拠することが理解される。
【0215】
他の実施形態は、特許請求の範囲に記載されている。
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【国際調査報告】