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特表2024-511614フッ素置換ピリドピラゾール系化合物の結晶形及びその製造方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-14
(54)【発明の名称】フッ素置換ピリドピラゾール系化合物の結晶形及びその製造方法
(51)【国際特許分類】
C07D 471/04 20060101AFI20240307BHJP
A61K 31/4545 20060101ALI20240307BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240307BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20240307BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240307BHJP
A61P 7/00 20060101ALI20240307BHJP
【ＦＩ】
C07D471/04 106Z
C07D471/04 CSP
A61K31/4545
A61P43/00 111
A61P37/02
A61P35/00
A61P7/00
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023558356
(86)(22)【出願日】2022-03-22
(85)【翻訳文提出日】2023-09-26
(86)【国際出願番号】 CN2022082353
(87)【国際公開番号】W WO2022199591
(87)【国際公開日】2022-09-29
(31)【優先権主張番号】202110309088.5
(32)【優先日】2021-03-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＢＲＩＪ
(71)【出願人】
【識別番号】522194474
【氏名又は名称】成都嘉葆薬銀医薬科技有限公司
(74)【代理人】
【識別番号】100158920
【弁理士】
【氏名又は名称】上野 英樹
(72)【発明者】
【氏名】朱 玉川
(72)【発明者】
【氏名】魏 霞蔚
(72)【発明者】
【氏名】王 ▲昊▼彬
(72)【発明者】
【氏名】沈 春莉
(72)【発明者】
【氏名】姜 ▲寧▼
(72)【発明者】
【氏名】▲呉▼ 成▲徳▼
【テーマコード（参考）】
4C065
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C065AA05
4C065BB05
4C065CC01
4C065DD03
4C065EE02
4C065HH01
4C065JJ02
4C065KK06
4C065KK09
4C065LL01
4C065PP03
4C065PP13
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB05
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA51
4C086ZB07
4C086ZB26
4C086ZC20
(57)【要約】
フッ素置換ピリドピラゾール系化合物の結晶形及びその製造方法であって、関連疾患を治療する薬物の製造における前記化合物及びその結晶形の使用をさらに含む。
【化１】
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）化合物の結晶形Ａであって、その粉末Ｘ線回折パターンにおいて、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、ことを特徴とする式（Ｉ）化合物の結晶形Ａ。
【化1】
【請求項2】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、１５．００１０±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、請求項１に記載の結晶形Ａ。
【請求項3】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７±０．２０００°、１５．００１０±０．２０００°、１６．１５９１±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、請求項２に記載の結晶形Ａ。
【請求項4】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７±０．２０００°、１３．６８０９±０．２０００°、１５．００１０±０．２０００°、１６．１５９１±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２４．０２１８±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、請求項３に記載の結晶形Ａ。
【請求項5】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７°、９．８１９４°、１３．６８０９°、１５．００１０°、１６．１５９１°、１７．０６０３°、１７．７８０５°、１８．４３８６°、１９．５４００°、２１．３１９３°、２２．０１９３°、２３．１５９７°、２３．５０１３°、２４．０２１８°、２６．１７９１°、２６．６００６°、２７．１１９９°、２７．４１９２°、２９．１５９５°、２９．７１９０°、３０．８４１７°、３１．２１９６°、３２．２９９２°、３２．９６１２°、３３．７７７３°、３４．３７７９°、３５．１７９６°、３７．１４０８°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、請求項４に記載の結晶形Ａ。
【請求項6】
ＸＲＰＤパターンが基本的に図１に示される、請求項５に記載の結晶形Ａ。
【請求項7】
その示差走査熱量曲線が、１０７．８９±３．００℃に一つの吸熱ピークの開始点があり、１４７．７６±３．００℃に一つの放熱ピークのピーク値がある、請求項１～６のいずれか１項に記載の結晶形Ａ。
【請求項8】
そのＤＳＣパターンが図２に示される、請求項７に記載の結晶形Ａ。
【請求項9】
その熱重量分析曲線において、２００．０±３℃における重量減少が０．０６％に達する、請求項１～６のいずれか１項に記載の結晶形Ａ。
【請求項10】
そのＴＧＡパターンが図３に示される、請求項９に記載の結晶形Ａ。
【請求項11】
その単結晶Ｘ線回折データは、単斜晶系で、空間群Ｃ２で、格子パラメータａ＝２２．０１２８（６）Å、ｂ＝１２．７５４２（３）Å、ｃ＝１６．０１５２（４）Å、α＝γ＝９０°、β＝９０．４９００（１０）°、体積Ｖ＝４４９６．２（２）Å３で、絶対配置パラメータＦｌａｃｋ値が０．０４（３）である、請求項１に記載の結晶形Ａ。
【請求項12】
式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法であって、式（Ｉ）化合物を溶媒に加えて、溶液を形成するステップ１）と、
溶液に逆溶媒を加えて、所定の温度で所定時間撹拌して、濾過して、濾過ケーキを減圧乾燥するステップ２）と、を含み、
前記溶媒は、エステル系溶媒、エーテル系溶媒又はアルコール系溶媒であり、
前記逆溶媒は、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン又は水であり、
前記撹拌の温度は、０～４０℃であり、
前記撹拌の時間は、１２～４８時間である、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法。
【請求項13】
ＢＴＫ関連疾患を治療する薬物の製造における、請求項１～１１のいずれか１項に記載の結晶形Ａの使用。
【請求項14】
前記ＢＴＫ関連疾患は、血腫瘍又は自己免疫疾患である、請求項１３に記載の使用。【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【0001】
本願は、出願日が２０２１年０３月２３日のＣＮ２０２１１０３０９０８８．５の優先権を主張している。
【技術分野】
【0002】
本発明は、フッ素置換ピリドピラゾール系化合物の結晶形及びその製造方法、並びに、関連疾患を治療する薬物の製造における、前記化合物及びその結晶形の使用に関する。
【背景技術】
【0003】
ＢＴＫは、Ｂ細胞抗原受容体（ＢＣＲ）シグナル経路の重要なキナーゼであり、ＢＴＫ不可逆的阻害剤はキナーゼの活性部位Ｃｙｓ－４８１と共有結合し、ＢＴＫ活性を阻害し、それによりＢ細胞の過剰増殖を有効に抑制し、抗腫瘍や抗炎症効果を達成する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
現在、すでに発売されている薬物の中で、イブルチニブ（ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ）は、Ｐｈａｒｍａｃｙｃｌｉｓとジョンソン・エンド・ジョンソン社が共同で開発した不可逆的ＢＴＫ阻害剤であり、ＦＤＡによりマントル細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病、ワルデンシュトロームのマクログロブリン血症、慢性移植片対宿主病などの治療への使用が承認されている。しかし、イブルチニブは、ＢＴＫ以外の他のキナーゼに対しても比較的強い阻害作用があり、特にＥＧＦＲ、ＩＴＫやＴＥＣなどのキナーゼに対する阻害は、深刻な皮疹、下痢や出血などの不良反応を引き起こすことがある。したがって、この分野では、関連疾患の治療のために、良好な選択性を有しながら、高活性である新規なＢＴＫ阻害剤を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【0005】
本発明は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する、ことを特徴とする式（Ｉ）化合物の結晶形Ａを提供する。
【化1】
【0006】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、１５．００１０±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する。
【0007】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７±０．２０００°、１５．００１０±０．２０００°、１６．１５９１±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する。
【0008】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７±０．２０００°、１３．６８０９±０．２０００°、１５．００１０±０．２０００°、１６．１５９１±０．２０００°、１７．０６０３±０．２０００°、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、２３．５０１３±０．２０００°、２４．０２１８±０．２０００°、２７．４１９２±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する。
【0009】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、１７．７８０５±０．２０００°、２２．０１９３±０．２０００°、及び／又は２７．４１９２±０．２０００°、及び／又は８．１３８７±０．２０００°、及び／又は９．８１９４±０．２０００°、及び／又は１３．６８０９±０．２０００°、及び／又は１５．００１０±０．２０００°、及び／又は１６．１５９１±０．２０００°、及び／又は１７．０６０３±０．２０００°、及び／又は１８．４３８６±０．２０００°、及び／又は１９．５４００±０．２０００°、及び／又は２１．３１９３±０．２０００°、及び／又は２３．１５９７±０．２０００°、及び／又は２３．５０１３±０．２０００°、及び／又は２４．０２１８±０．２０００°、及び／又は２６．１７９１±０．２０００°、及び／又は２６．６００６±０．２０００°、及び／又は２７．１１９９±０．２０００°、及び／又は２９．１５９５±０．２０００°、及び／又は２９．７１９０±０．２０００°、及び／又は３０．８４１７±０．２０００°、及び／又は３１．２１９６±０．２０００°、及び／又は３２．２９９２±０．２０００°、及び／又は３２．９６１２±０．２０００°、及び／又は３３．７７７３±０．２０００°、及び／又は３４．３７７９±０．２０００°、及び／又は３５．１７９６±０．２０００°、及び／又は３７．１４０８±０．２０００°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する。
【0010】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、８．１３８７°、９．８１９４°、１３．６８０９°、１５．００１０°、１６．１５９１°、１７．０６０３°、１７．７８０５°、１８．４３８６°、１９．５４００°、２１．３１９３°、２２．０１９３°、２３．１５９７°、２３．５０１３°、２４．０２１８°、２６．１７９１°、２６．６００６°、２７．１１９９°、２７．４１９２°、２９．１５９５°、２９．７１９０°、３０．８４１７°、３１．２１９６°、３２．２９９２°、３２．９６１２°、３３．７７７３°、３４．３７７９°、３５．１７９６°、３７．１４０８°という２θ角に特徴的な回折ピークを有する。
【0011】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、そのＸＲＰＤパターンが基本的に図１に示される通りである。
【0012】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、ＸＲＰＤパターン解析データが表１に示される。
【表1】
【0013】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、示差走査熱量曲線において、１０７．８９±３．００℃に一つの吸熱ピークの開始点があり、１４７．７６±３．００℃に一つの放熱ピークのピーク値がある。
【0014】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、ＤＳＣパターンが図２に示される。
【0015】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、熱重量分析曲線において、２００．０±３℃における重量減少が０．０６％に達する。
【0016】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、ＴＧＡパターンが図３に示される。
【0017】
本発明のいくつかの形態では、上記の結晶形Ａは、単結晶Ｘ線回折データが、単斜晶系で、空間群Ｃ２で、格子パラメータａ＝２２．０１２８（６）Å、ｂ＝１２．７５４２（３）Å、ｃ＝１６．０１５２（４）Å、α＝γ＝９０°、β＝９０．４９００（１０）°、体積Ｖ＝４４９６．２（２）Å３で、絶対配置パラメータＦｌａｃｋ値０．０４（３）である。
【0018】
本発明はまた、
式（Ｉ）化合物を溶媒に加えて、溶液を形成するステップ１）と、
溶液に逆溶媒を加えて、所定の温度で所定時間撹拌して、濾過して、濾過ケーキを減圧乾燥するステップ２）と、を含み、
前記溶媒は、エステル系溶媒、エーテル系溶媒又はアルコール系溶媒であり、
前記逆溶媒は、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン又は水であり、
前記撹拌の温度は、０～４０℃であり、
前記撹拌の時間は、１２～４８時間である、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法を提供する。
式（Ｉ）化合物を溶媒に加えて、溶液を形成するステップ１）と、
溶液に逆溶媒を加えて、所定の温度で所定時間撹拌して、濾過して、濾過ケーキを減圧乾燥するステップ２）と、を含み、
前記溶媒は、エステル系溶媒、エーテル系溶媒又はアルコール系溶媒であり、
前記逆溶媒は、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン又は水であり、
前記撹拌の温度は、０～４０℃であり、
前記撹拌の時間は、１２～４８時間である、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法を提供する。
【0019】
本発明はまた、
式（Ｉ）化合物を溶媒に加えて、溶液を形成するステップ１）と、
溶液に逆溶媒を加えて、３０℃で撹拌して、濾過して、濾過ケーキを減圧乾燥するステップ２）と、を含み、
前記溶媒は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン又はエタノールであり、
逆溶媒は、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン又は水であり、
前記撹拌の時間は、１２～２０時間である、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法を提供する。
式（Ｉ）化合物を溶媒に加えて、溶液を形成するステップ１）と、
溶液に逆溶媒を加えて、３０℃で撹拌して、濾過して、濾過ケーキを減圧乾燥するステップ２）と、を含み、
前記溶媒は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン又はエタノールであり、
逆溶媒は、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン又は水であり、
前記撹拌の時間は、１２～２０時間である、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造方法を提供する。
【0020】
本発明はまた、ＢＴＫ関連疾患を治療する薬物の製造における、上記の結晶形Ａの使用を提供する。
【0021】
本発明のいくつかの形態では、前記ＢＴＫ関連疾患は、血腫瘍又は自己免疫疾患である。
【0022】
定義及び説明
特に断らない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を含むことを意図している。特定の語句や用語は、特別な定義なしに不確かなものや不明瞭なものとみなされるべきではなく、一般的な意味で理解されるべきである。本明細書に商品名が使用される場合、それに対応する商品又はその有効成分を指すことを意図する。
特に断らない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を含むことを意図している。特定の語句や用語は、特別な定義なしに不確かなものや不明瞭なものとみなされるべきではなく、一般的な意味で理解されるべきである。本明細書に商品名が使用される場合、それに対応する商品又はその有効成分を指すことを意図する。
【0023】
本発明の中間体化合物は、以下に挙げる具体的な実施形態、それらの実施形態を他の化学の合成方法と組み合わせた実施形態、及び当業者によく知られている同等の代替形態を含む、当業者によく知られている様々な合成方法によって製造されてもよく、好ましい実施形態は、本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。
【0024】
本発明の具体的な実施形態の化学反応は、本発明の化学変化、並びにそれに必要な試薬及び材料に適した適切な溶媒中で行われる。本発明の化合物を得るためには、当業者が既存の実施形態に基づいて合成ステップ又は反応フローを修正又は選択する必要がある場合がある。
【0025】
本発明の化合物は、当業者によく知られた従来の方法によって構造を確認することができ、本発明が化合物の絶対配置に係わる場合、当該絶対配置は当業者の従来技術の手段によって確認することができる。例えば単結晶Ｘ線回折法（ＳＸＲＤ）では、培養した単結晶について、光源がＣｕＫα放射、走査方式がφ／ω走査のＢｒｕｋｅｒＤ８ｖｅｎｔｕｒｅ回折計で回折強度データを収集し、関連するデータを収集した後、さらに直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）で結晶構造を解析すれば、絶対配置を確認することができる。
【0026】
以下、実施例によって本発明について詳細に説明するが、それらの実施例は、本発明を限定するものではない。
【0027】
本発明で使用されるすべての溶媒は市販されており、さらに精製することなく使用することができる。
【0028】
本発明で使用される溶媒は、市販品として入手可能である。
【0029】
化合物は当該分野の通常の命名原則に基づき又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを使用して命名し、市販の化合物はサプライヤー目録の名称を採用する。
【発明の効果】
【0030】
本発明の化合物は、結晶形が安定的で、僅かな吸湿性を持ち、光や熱による影響を受けにくい。本発明の化合物は、活性が高く、優れた選択性を有するＢＴＫキナーゼ阻害剤であり、ＥＧＦＲ、ＩＴＫ及びＴＥＣキナーゼ選択性に優れていた。
【0031】
本発明の粉末Ｘ線回折（Ｘ－ｒａｙｐｏｗｄｅｒｄｉｆｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ、ＸＲＰＤ）方法
機器名：Ｘ線回折装置
機器モデル：ＤＸ－２７００ＢＨ
機器マーカー：丹東浩元儀器有限公司
方法のパラメータ：
光チューブ：Ｃｕ、ｋ－Ａｌｐｈａｌ（λ＝１．５４０５９Å）
光チューブの電圧：４０ｋＶ、光チューブの電流：４０ｍＡ
発散スリット：０．３ｍｍ
検出器スリット：１ｍｍ
散乱防止スリット：１ｍｍ
走査範囲：３～４０ｄｅｇ
ステップ径：０．０２ｄｅｇ
ステップ長さ：０．５秒
試験方法：サンプルをサンプル板に置き、サンプル板の表面を平坦にする。最後に、サンプル板Ｘ線回折装置に置いて試験を行う。
機器名：Ｘ線回折装置
機器モデル：ＤＸ－２７００ＢＨ
機器マーカー：丹東浩元儀器有限公司
方法のパラメータ：
光チューブ：Ｃｕ、ｋ－Ａｌｐｈａｌ（λ＝１．５４０５９Å）
光チューブの電圧：４０ｋＶ、光チューブの電流：４０ｍＡ
発散スリット：０．３ｍｍ
検出器スリット：１ｍｍ
散乱防止スリット：１ｍｍ
走査範囲：３～４０ｄｅｇ
ステップ径：０．０２ｄｅｇ
ステップ長さ：０．５秒
試験方法：サンプルをサンプル板に置き、サンプル板の表面を平坦にする。最後に、サンプル板Ｘ線回折装置に置いて試験を行う。
【0032】
本発明の示差熱分析（ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌＳｃａｎｎｉｎｇＣａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ、ＤＳＣ）方法
機器モデル：ＤＳＣ１示差走査熱量計
試験方法：サンプル（２．９７ｍｇ）をＤＳＣ高圧坩堝に入れて、プレスしてシールした後、試験を行い、１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、サンプルを４０℃から３５０℃に加熱する。
機器モデル：ＤＳＣ１示差走査熱量計
試験方法：サンプル（２．９７ｍｇ）をＤＳＣ高圧坩堝に入れて、プレスしてシールした後、試験を行い、１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、サンプルを４０℃から３５０℃に加熱する。
【0033】
本発明の熱重量分析（ＴｈｅｒｍａｌＧｒａｖｉｍｅｔｒｉｃＡｎａｌｙｚｅｒ、ＴＧＡ）方法
機器モデル：ＭｅｔｔｌｅｒＴＧＡ２ＳＦ／１１００
試験方法：サンプル（２～５ｍｇ）をＴＧＡアルミナ坩堝に入れて試験を行い、２０ｍＬ／ｍｉｎＮ２の条件下で、１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、サンプルを４０℃から５００℃に加熱し、４０℃から２００℃では、重量減少は０．０６％であある。
機器モデル：ＭｅｔｔｌｅｒＴＧＡ２ＳＦ／１１００
試験方法：サンプル（２～５ｍｇ）をＴＧＡアルミナ坩堝に入れて試験を行い、２０ｍＬ／ｍｉｎＮ２の条件下で、１０℃／ｍｉｎの昇温速度で、サンプルを４０℃から５００℃に加熱し、４０℃から２００℃では、重量減少は０．０６％であある。
【0034】
本発明の動的蒸気吸着解析（ＤｙｎａｍｉｃＶａｐｏｒＳｏｒｐｔｉｏｎ、ＤＶＳ）方法
機器モデル：ＳＭＳＤＶＳＩｎｔｒｉｎｓｉｃＰｌｕｓ動的蒸気吸着装置
試験条件：サンプル（１０～２０ｍｇ）をＤＶＳサンプルトレイに入れて試験を行う。
ＤＶＳパラメータは以下に詳細に説明する。
温度：２５℃
平衡：ｄｍ／ｄｔ＝０．００２％／ｍｉｎ（最短：１０ｍｉｎ、最長：１８０ｍｉｎ）
乾燥：０％ＲＨでｄｍ／ｄｔ≦０．００２％／ｍｉｎまで又は最長１８０ｍｉｎ乾燥する。
ＲＨ（％）試験勾配：１０％（０％～９０％）、５％（９０～９５％）
ＲＨ（％）試験勾配範囲：０％－９５％－０％
機器モデル：ＳＭＳＤＶＳＩｎｔｒｉｎｓｉｃＰｌｕｓ動的蒸気吸着装置
試験条件：サンプル（１０～２０ｍｇ）をＤＶＳサンプルトレイに入れて試験を行う。
ＤＶＳパラメータは以下に詳細に説明する。
温度：２５℃
平衡：ｄｍ／ｄｔ＝０．００２％／ｍｉｎ（最短：１０ｍｉｎ、最長：１８０ｍｉｎ）
乾燥：０％ＲＨでｄｍ／ｄｔ≦０．００２％／ｍｉｎまで又は最長１８０ｍｉｎ乾燥する。
ＲＨ（％）試験勾配：１０％（０％～９０％）、５％（９０～９５％）
ＲＨ（％）試験勾配範囲：０％－９５％－０％
【0035】
【表2】
【図面の簡単な説明】
【0036】
【図1】式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＣｕ－Ｋα放射線のＸＲＰＤスペクトルである。
【図2】式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＤＳＣスペクトルである。
【図3】式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＴＧＡスペクトルである。
【図4】式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＤＶＳスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【0037】
本発明の内容をより良く理解するために、以下では、具体的な実施例を参照してさらに説明するが、具体的な実施例は、本発明の内容を限定するものではない。
【0038】
（実施例１）式（Ｉ）化合物の製造
【化2】
【0039】
ステップ１：化合物ｂの合成
次亜塩素酸ナトリウム溶液の調製：ＮａＨＣＯ３（１１．００ｇ、１３０．９４ｍｍｏｌ、７．０５ｅ－２ｅｑ）をＮａＣｌＯ（２．４２ｋｇ、２．６０ｍｏｌ、２Ｌ、８％純度、１．４０ｅｑ）に溶解した。化合物ａ（４００ｇ、１．８６ｍｏｌ、１ｅｑ）及び２,２,６,６－テトラメチルピペリジンオキシド（２．９８ｇ、１８．９７ｍｍｏｌ、１．０２ｅ－２ｅｑ）のジクロロメタン（１．６Ｌ）溶液にＫＢｒ（２Ｍ、９６．００ｍＬ、１．０３ｅ－１ｅｑ）（水溶液）を加えて、氷浴により５～３５℃で保温し、上記の次亜塩素酸ナトリウム溶液を滴下し、滴下終了後、（２５～３５℃）で保温し、反応を３０ｍｉｎ持続した。反応液を静置した後、分液を行い、分離した水相をジクロロメタン（１．６Ｌ）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（ＫＩ（６１６．８５ｇ、３．７２ｍｏｌ、２ｅｑ）１．６Ｌ含有）及び１０％チオ硫酸ナトリウム溶液（１．６Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。化合物ｂを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 158.7。
次亜塩素酸ナトリウム溶液の調製：ＮａＨＣＯ３（１１．００ｇ、１３０．９４ｍｍｏｌ、７．０５ｅ－２ｅｑ）をＮａＣｌＯ（２．４２ｋｇ、２．６０ｍｏｌ、２Ｌ、８％純度、１．４０ｅｑ）に溶解した。化合物ａ（４００ｇ、１．８６ｍｏｌ、１ｅｑ）及び２,２,６,６－テトラメチルピペリジンオキシド（２．９８ｇ、１８．９７ｍｍｏｌ、１．０２ｅ－２ｅｑ）のジクロロメタン（１．６Ｌ）溶液にＫＢｒ（２Ｍ、９６．００ｍＬ、１．０３ｅ－１ｅｑ）（水溶液）を加えて、氷浴により５～３５℃で保温し、上記の次亜塩素酸ナトリウム溶液を滴下し、滴下終了後、（２５～３５℃）で保温し、反応を３０ｍｉｎ持続した。反応液を静置した後、分液を行い、分離した水相をジクロロメタン（１．６Ｌ）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（ＫＩ（６１６．８５ｇ、３．７２ｍｏｌ、２ｅｑ）１．６Ｌ含有）及び１０％チオ硫酸ナトリウム溶液（１．６Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。化合物ｂを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 158.7。
【0040】
ステップ２：化合物ｄの合成
ドライアイスエタノール浴及び窒素保護下で、化合物ｃ（３０９．６５ｇ、２．６９ｍｏｌ、１．０２ｅｑ）のテトラヒドロフラン２．１Ｌ溶液にｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ、１．１３Ｌ、１．０７ｅｑ）を－６８～－４０℃で保温しながら滴下し、滴下終了後、－６８～－４０℃で１ｈｒ反応させ、化合物ｂ（５６３ｇ、２．６４ｍｏｌ、１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（０．７Ｌ）溶液を－６８～－４０℃で保温しながら滴下し、滴下終了後、０℃にゆっくりと昇温し、２ｈｒ反応させた。撹拌しながら反応液に飽和塩化アンモニウム溶液（１．２Ｌ）を加えて、反応液を約３Ｌまで減圧濃縮し、酢酸エチル（１．２Ｌ＊３）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（１．２Ｌ）及び半飽和食塩水（１．２Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。濃縮すると、化合物ｄを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 272.9。
ドライアイスエタノール浴及び窒素保護下で、化合物ｃ（３０９．６５ｇ、２．６９ｍｏｌ、１．０２ｅｑ）のテトラヒドロフラン２．１Ｌ溶液にｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ、１．１３Ｌ、１．０７ｅｑ）を－６８～－４０℃で保温しながら滴下し、滴下終了後、－６８～－４０℃で１ｈｒ反応させ、化合物ｂ（５６３ｇ、２．６４ｍｏｌ、１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（０．７Ｌ）溶液を－６８～－４０℃で保温しながら滴下し、滴下終了後、０℃にゆっくりと昇温し、２ｈｒ反応させた。撹拌しながら反応液に飽和塩化アンモニウム溶液（１．２Ｌ）を加えて、反応液を約３Ｌまで減圧濃縮し、酢酸エチル（１．２Ｌ＊３）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（１．２Ｌ）及び半飽和食塩水（１．２Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。濃縮すると、化合物ｄを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 272.9。
【0041】
ステップ３：化合物ｅの合成
化合物ｄ（４６４ｇ、１．４１ｍｏｌ、１ｅｑ）及び２,２,６,６－テトラメチルピペリジンオキシド（２．２３ｇ、１４．１６ｍｍｏｌ、０．０１ｅｑ）のジクロロメタン（１．８Ｌ）溶液に、ＫＢｒ（２Ｍ、７４．００ｍＬ、１．０５ｅ－１ｅｑ）（水溶液）を加えて、氷浴により１０～１５℃で保温し、ＮａＣｌＯ（１．８４ｋｇ、１．９８ｍｏｌ、１．７２Ｌ、８％純度、１．４ｅｑ）を滴下し、１０～１５℃で保温して１０ｍｉｎ反応させた。ＮａＨＣＯ３（４０ｇ、４７６．１５ｍｍｏｌ、３．３７ｅ－１ｅｑ）を補充し、反応を３０ｍｉｎ持続した。反応液を静置し、分液を行い、分離した水相をジクロロメタン（９Ｌ）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（２．３５ｋｇＫＩ、２ｅｑ、９Ｌ含有）及び１０％チオ硫酸ナトリウム溶液（９Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５．５分間内で５％から４０％、５％で１．２ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：４０℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、単一配置の化合物であった。化合物ｅを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 271.1。
化合物ｄ（４６４ｇ、１．４１ｍｏｌ、１ｅｑ）及び２,２,６,６－テトラメチルピペリジンオキシド（２．２３ｇ、１４．１６ｍｍｏｌ、０．０１ｅｑ）のジクロロメタン（１．８Ｌ）溶液に、ＫＢｒ（２Ｍ、７４．００ｍＬ、１．０５ｅ－１ｅｑ）（水溶液）を加えて、氷浴により１０～１５℃で保温し、ＮａＣｌＯ（１．８４ｋｇ、１．９８ｍｏｌ、１．７２Ｌ、８％純度、１．４ｅｑ）を滴下し、１０～１５℃で保温して１０ｍｉｎ反応させた。ＮａＨＣＯ３（４０ｇ、４７６．１５ｍｍｏｌ、３．３７ｅ－１ｅｑ）を補充し、反応を３０ｍｉｎ持続した。反応液を静置し、分液を行い、分離した水相をジクロロメタン（９Ｌ）で抽出し、合わせた有機相を１Ｍ塩酸（２．３５ｋｇＫＩ、２ｅｑ、９Ｌ含有）及び１０％チオ硫酸ナトリウム溶液（９Ｌ）の順で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５．５分間内で５％から４０％、５％で１．２ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：４０℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、単一配置の化合物であった。化合物ｅを得た。LCMS(ESI): m/z(M-55)+: 271.1。
【0042】
【化3】
【0043】
ステップ４：化合物ｈの合成
撹拌しながら、化合物ｇ（１ｋｇ、７．０９ｍｏｌ、７５１．８８ｍＬ、１ｅｑ）及び化合物ｆ（１．１１ｋｇ、８．５０ｍｏｌ、１．２ｅｑ）のアセトニトリル（５Ｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（１．４７ｋｇ、１０．６３ｍｏｌ、１．５ｅｑ）を加えて、７５℃に昇温して、１３ｈｒ反応させた。反応液を室温に冷却し、静置後、上清を水５０Ｌに加えて、１０ｍｉｎ後、固体が大量生成されると、さらに１０ｍｉｎ撹拌した。残りの反応液を濾過して、濾過ケーキをアセトニトリル（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を撹拌しながら水１０Ｌに加えて、１０ｍｉｎ後に、固体が大量生成されると、さらに１０ｍｉｎ撹拌した。上記の２つのバッチの懸濁物を併せて濾過して、濾過ケーキを水（１Ｌ）で洗浄し、乾固まで吸引濾過して、濾過ケーキを収集した。化合物ｈを得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.20 - 8.23 (m, 2H),7.11 - 7.14 (m, 2H),7.02-7.04 (m, 2H),6.96-7.01 (m, 1H)。
撹拌しながら、化合物ｇ（１ｋｇ、７．０９ｍｏｌ、７５１．８８ｍＬ、１ｅｑ）及び化合物ｆ（１．１１ｋｇ、８．５０ｍｏｌ、１．２ｅｑ）のアセトニトリル（５Ｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（１．４７ｋｇ、１０．６３ｍｏｌ、１．５ｅｑ）を加えて、７５℃に昇温して、１３ｈｒ反応させた。反応液を室温に冷却し、静置後、上清を水５０Ｌに加えて、１０ｍｉｎ後、固体が大量生成されると、さらに１０ｍｉｎ撹拌した。残りの反応液を濾過して、濾過ケーキをアセトニトリル（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を撹拌しながら水１０Ｌに加えて、１０ｍｉｎ後に、固体が大量生成されると、さらに１０ｍｉｎ撹拌した。上記の２つのバッチの懸濁物を併せて濾過して、濾過ケーキを水（１Ｌ）で洗浄し、乾固まで吸引濾過して、濾過ケーキを収集した。化合物ｈを得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.20 - 8.23 (m, 2H),7.11 - 7.14 (m, 2H),7.02-7.04 (m, 2H),6.96-7.01 (m, 1H)。
【0044】
ステップ５：化合物ｉの合成
水素水生成ボトルにおいて、化合物ｈ（２００ｇ、７９６．２２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のメタノール（１Ｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（４ｇ、１０％純度）（ウェットパラジウムカーボン）を加えて、アルゴン置換を３回行い、水素ガス置換を３回行い、水素ガス圧力（３０ｐｓｉ）、室温（２５℃）で１６ｈｒ反応させた。反応液を（珪藻土を敷いて）濾過して、濾過ケーキをメタノール（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を乾固まで減圧濃縮し、化合物ｉを得た。LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 222.0。
水素水生成ボトルにおいて、化合物ｈ（２００ｇ、７９６．２２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のメタノール（１Ｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（４ｇ、１０％純度）（ウェットパラジウムカーボン）を加えて、アルゴン置換を３回行い、水素ガス置換を３回行い、水素ガス圧力（３０ｐｓｉ）、室温（２５℃）で１６ｈｒ反応させた。反応液を（珪藻土を敷いて）濾過して、濾過ケーキをメタノール（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を乾固まで減圧濃縮し、化合物ｉを得た。LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 222.0。
【0045】
ステップ６：化合物ｊの合成
氷水浴（５℃）下、濃塩酸（２Ｌ）及び水（１Ｌ）に化合物ｉ（３５０ｇ、１．５８ｍｏｌ、１ｅｑ）を加えて、得られた懸濁液に、ＮａＮＯ２（２１８．３５ｇ、３．１６ｍｏｌ、２ｅｑ）を溶解した水（０．５Ｌ）溶液を５～１５℃で保温しがら～０．５ｈｒ滴下し、滴下終了後、５～１０℃で保温して、１ｈｒ反応させ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１．４３ｋｇ、６．３３ｍｏｌ、４．００ｅｑ）を溶解した濃塩酸（１Ｌ）溶液を反応液に、内温を５～１５℃で保持しながら、合計約３ｈｒ滴下し、滴下終了後、水（０．７５Ｌ）を補充して、固体を反応系に均一に分布させ、室温（２５℃）にゆっくり昇温して、反応を４ｈｒ持続した。反応液を濾過して、濾過ケーキを水（３Ｌ）で洗浄し、濾過ケーキを収集して、濾過ケーキを４つの画分に分けて、画分ごとにメタノール（０．５Ｌ）とジクロロメタン（４Ｌ）の混合溶液に分散させ、６ＭＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを～１４に調整し、静置し分液した。得た水相をジクロロメタン（２Ｌ＊２）で抽出し、有機相を収集した。有機相を併せて濾過して、濾過ケーキをジクロロメタン５００ｍＬで洗浄し、合わせた濾液を分液し、水相をジクロロメタン（１Ｌ＊２）で抽出し、有機相を収集した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。化合物ｊを得た。LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 237.1。
氷水浴（５℃）下、濃塩酸（２Ｌ）及び水（１Ｌ）に化合物ｉ（３５０ｇ、１．５８ｍｏｌ、１ｅｑ）を加えて、得られた懸濁液に、ＮａＮＯ２（２１８．３５ｇ、３．１６ｍｏｌ、２ｅｑ）を溶解した水（０．５Ｌ）溶液を５～１５℃で保温しがら～０．５ｈｒ滴下し、滴下終了後、５～１０℃で保温して、１ｈｒ反応させ、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（１．４３ｋｇ、６．３３ｍｏｌ、４．００ｅｑ）を溶解した濃塩酸（１Ｌ）溶液を反応液に、内温を５～１５℃で保持しながら、合計約３ｈｒ滴下し、滴下終了後、水（０．７５Ｌ）を補充して、固体を反応系に均一に分布させ、室温（２５℃）にゆっくり昇温して、反応を４ｈｒ持続した。反応液を濾過して、濾過ケーキを水（３Ｌ）で洗浄し、濾過ケーキを収集して、濾過ケーキを４つの画分に分けて、画分ごとにメタノール（０．５Ｌ）とジクロロメタン（４Ｌ）の混合溶液に分散させ、６ＭＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを～１４に調整し、静置し分液した。得た水相をジクロロメタン（２Ｌ＊２）で抽出し、有機相を収集した。有機相を併せて濾過して、濾過ケーキをジクロロメタン５００ｍＬで洗浄し、合わせた濾液を分液し、水相をジクロロメタン（１Ｌ＊２）で抽出し、有機相を収集した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。化合物ｊを得た。LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 237.1。
【0046】
ステップ７：化合物ｋの合成
化合物ｅ（１ｋｇ、３．０６ｍｏｌ、１ｅｑ）及び化合物ｊ（１ｋｇ、４．２３ｍｏｌ、１．３８ｅｑ）のエタノール（５Ｌ）溶液に、ＡｃＯＨ（１５．２１ｍｏｌ、８７０．００ｍＬ、４．９６ｅｑ）を加えて、室温（２５℃）で１２ｈｒ反応させた。反応液を一括して乾固まで減圧濃縮した。化合物ｋを得た。
化合物ｅ（１ｋｇ、３．０６ｍｏｌ、１ｅｑ）及び化合物ｊ（１ｋｇ、４．２３ｍｏｌ、１．３８ｅｑ）のエタノール（５Ｌ）溶液に、ＡｃＯＨ（１５．２１ｍｏｌ、８７０．００ｍＬ、４．９６ｅｑ）を加えて、室温（２５℃）で１２ｈｒ反応させた。反応液を一括して乾固まで減圧濃縮した。化合物ｋを得た。
【0047】
ステップ８：化合物ｌの合成
化合物ｋ（１．９ｋｇ、３．４９ｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（６．５Ｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．８ｋｇ、８．５９ｍｏｌ、２．４６ｅｑ）を加えて、１００℃に昇温して１．５ｈｒ反応させた。反応液を濾過して、濾液をオイルポンプで乾固まで減圧濃縮した。濾過ケーキをジクロロメタン（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を水ポンプ及びオイルポンプにより乾固まで順次減圧濃縮した。濃縮物をエタノール（８Ｌ）に分散させて、１ｈｒ撹拌した後、濾過して、濾過ケーキをエタノール１Ｌで洗浄し、濾液を併せて乾固まで減圧濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～４：１、１０％ジクロロメタン添加）により精製し、得た濃縮物を酢酸エチル（１．１Ｌ）に分散させ、撹拌しながら石油エーテル３．３Ｌを加えて、室温（２５℃）で３ｈｒ撹拌した。濾過して、濾過ケーキを石油エーテル２００ｍＬで洗浄し、濾過ケーキを収集して、減圧濃縮し乾燥した。化合物ｌを得た。LCMS(ESI): m/z: 525.3[M+1]。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内でから５％まで、５％が１．５ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物である。
化合物ｋ（１．９ｋｇ、３．４９ｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（６．５Ｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．８ｋｇ、８．５９ｍｏｌ、２．４６ｅｑ）を加えて、１００℃に昇温して１．５ｈｒ反応させた。反応液を濾過して、濾液をオイルポンプで乾固まで減圧濃縮した。濾過ケーキをジクロロメタン（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を水ポンプ及びオイルポンプにより乾固まで順次減圧濃縮した。濃縮物をエタノール（８Ｌ）に分散させて、１ｈｒ撹拌した後、濾過して、濾過ケーキをエタノール１Ｌで洗浄し、濾液を併せて乾固まで減圧濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～４：１、１０％ジクロロメタン添加）により精製し、得た濃縮物を酢酸エチル（１．１Ｌ）に分散させ、撹拌しながら石油エーテル３．３Ｌを加えて、室温（２５℃）で３ｈｒ撹拌した。濾過して、濾過ケーキを石油エーテル２００ｍＬで洗浄し、濾過ケーキを収集して、減圧濃縮し乾燥した。化合物ｌを得た。LCMS(ESI): m/z: 525.3[M+1]。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内でから５％まで、５％が１．５ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物である。
【0048】
ステップ９：化合物ｍの合成
化合物ｌ（１．２６ｋｇ、２．４０ｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解したメタノール（２．６Ｌ）懸濁液にＨＣｌ（４Ｍ、３．８０Ｌ、６．３３ｅｑ）のメタノール溶液（３．８Ｌ）を滴下し、滴下終了後、室温（２５℃）で０．５ｈｒ反応させ、このとき、溶液が澄んでいる。反応液を乾固まで減圧濃縮した。ジクロロメタン４Ｌとメタノール４００ｍＬの混合溶液に濃縮物を溶解し、６Ｍ水酸化ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨを１４に調整し、さらに０．５ｈｒ撹拌し、静置し分液し、得た水相をジクロロメタン３Ｌで抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＧ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが２分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内でから５％まで、４０％で１．２ｍｉｎ保持し、５％で０．８ｍｉｎ保持する；流速：４ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であり、ＳＦＣ分離（カラム：ＤＡＩＣＥＬＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ（２５０ｍｍ＊５０ｍｍ,１０μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＭＥＯＨ］；Ｂ％：５０％～５０％,ｍｉｎ）により精製し、ｍ（保持時間２．５８４ｍｉｎ）を得た。LCMS(ESI): m/z: 425.2[M+1]。
化合物ｌ（１．２６ｋｇ、２．４０ｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解したメタノール（２．６Ｌ）懸濁液にＨＣｌ（４Ｍ、３．８０Ｌ、６．３３ｅｑ）のメタノール溶液（３．８Ｌ）を滴下し、滴下終了後、室温（２５℃）で０．５ｈｒ反応させ、このとき、溶液が澄んでいる。反応液を乾固まで減圧濃縮した。ジクロロメタン４Ｌとメタノール４００ｍＬの混合溶液に濃縮物を溶解し、６Ｍ水酸化ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨを１４に調整し、さらに０．５ｈｒ撹拌し、静置し分液し、得た水相をジクロロメタン３Ｌで抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＧ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが２分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内でから５％まで、４０％で１．２ｍｉｎ保持し、５％で０．８ｍｉｎ保持する；流速：４ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であり、ＳＦＣ分離（カラム：ＤＡＩＣＥＬＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ（２５０ｍｍ＊５０ｍｍ,１０μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＭＥＯＨ］；Ｂ％：５０％～５０％,ｍｉｎ）により精製し、ｍ（保持時間２．５８４ｍｉｎ）を得た。LCMS(ESI): m/z: 425.2[M+1]。
【0049】
ステップ１０：式（Ｉ）化合物の合成
化合物ｍ（２８０ｇ、６５９．７３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（２．８Ｌ）及び水（２．８Ｌ）溶液にＮａ２ＣＯ３（１０５ｇ、９９０．６６ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を加えて、塩化アクリロイル（６５．８８ｇ、７２７．９２ｍｍｏｌ、５９．３５ｍＬ、１．１ｅｑ）を溶解したテトラヒドロフラン（０．７Ｌ）溶液を反応液に滴下し、室温（２８℃）で０．５ｈｒ反応させた。塩化アクリロイル（１０．６ｇ、１１７．１２ｍｍｏｌ、９．５５ｍＬ、１．７８ｅ－１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液及びＮａ２ＣＯ３（７０ｇ、６６０．４５ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を補充した後、室温（２８℃）で反応を０．５ｈｒ持続し、反応液を１Ｎ塩酸でｐＨ６に調整し、ジクロロメタン（３．５Ｌ＊２）で抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～１：１、１０％ジクロロメタンを加えて溶解を促進させる。）により精製した。得た粗製品をジクロロメタン（１Ｌ）に溶解し、乾固まで減圧濃縮し、このような操作を３回繰り返し、オイルポンプに移して減圧濃縮し、式（Ｉ）化合物を得て、超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ２１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、４０％で２．５ｍｉｎ保持し、５％に戻って２．５分間平衡する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、単一配置の化合物（保持時間６．９１６ｍｉｎ）を得た。1HNMR(400MHz,DMSO-d6) δ 9.08(s,1H),8.32(s,1H),7.85(d,J=8.8Hz,2H),7.24-7.33(m,4H),7.09-7.11(m,1H),6.80-6.7582,1H),6.08(t,J=16.1Hz,1H),5.59-5.70(m,1H),4.70-4.72(m,0.5H),4.32(t,J=12.7Hz,1H),4.07-4.10(m,0.5H),3.57-3.44(m,0.5H),3.33-3.15(m,1.5H),3.12-3.03(m,0.5H),3.03-2.88(m,0.5H),2.27-2.16(m,1H),2.05-1.78(m,2H),1.68-1.49(m,1H)；LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 479.3。
化合物ｍ（２８０ｇ、６５９．７３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（２．８Ｌ）及び水（２．８Ｌ）溶液にＮａ２ＣＯ３（１０５ｇ、９９０．６６ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を加えて、塩化アクリロイル（６５．８８ｇ、７２７．９２ｍｍｏｌ、５９．３５ｍＬ、１．１ｅｑ）を溶解したテトラヒドロフラン（０．７Ｌ）溶液を反応液に滴下し、室温（２８℃）で０．５ｈｒ反応させた。塩化アクリロイル（１０．６ｇ、１１７．１２ｍｍｏｌ、９．５５ｍＬ、１．７８ｅ－１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液及びＮａ２ＣＯ３（７０ｇ、６６０．４５ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を補充した後、室温（２８℃）で反応を０．５ｈｒ持続し、反応液を１Ｎ塩酸でｐＨ６に調整し、ジクロロメタン（３．５Ｌ＊２）で抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～１：１、１０％ジクロロメタンを加えて溶解を促進させる。）により精製した。得た粗製品をジクロロメタン（１Ｌ）に溶解し、乾固まで減圧濃縮し、このような操作を３回繰り返し、オイルポンプに移して減圧濃縮し、式（Ｉ）化合物を得て、超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ２１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、４０％で２．５ｍｉｎ保持し、５％に戻って２．５分間平衡する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、単一配置の化合物（保持時間６．９１６ｍｉｎ）を得た。1HNMR(400MHz,DMSO-d6) δ 9.08(s,1H),8.32(s,1H),7.85(d,J=8.8Hz,2H),7.24-7.33(m,4H),7.09-7.11(m,1H),6.80-6.7582,1H),6.08(t,J=16.1Hz,1H),5.59-5.70(m,1H),4.70-4.72(m,0.5H),4.32(t,J=12.7Hz,1H),4.07-4.10(m,0.5H),3.57-3.44(m,0.5H),3.33-3.15(m,1.5H),3.12-3.03(m,0.5H),3.03-2.88(m,0.5H),2.27-2.16(m,1H),2.05-1.78(m,2H),1.68-1.49(m,1H)；LCMS (ESI): m/z(M+1)+: 479.3。
【0050】
式（Ｉ）化合物の配置の確認
室温で、式（Ｉ）化合物（１００ｍｇ、２０９．００μｍｏｌ、１ｅｑ）をＤＣＭ（０．３ｍＬ）に溶解し、撹拌しながらｎ－ヘプタン（１．５ｍＬ）を滴下すると、明らかな粘性物が見られ、これを（４０～５０℃）加熱しても清澄にならず、室温に冷却して夜通し静置すると、黄色油状物が認められた。室温、遮光下で７ヶ月静置すると、系には透明結晶が認められ、この結晶を採取して単結晶回折を測定した結果、上記の配置であることが確認された。
室温で、式（Ｉ）化合物（１００ｍｇ、２０９．００μｍｏｌ、１ｅｑ）をＤＣＭ（０．３ｍＬ）に溶解し、撹拌しながらｎ－ヘプタン（１．５ｍＬ）を滴下すると、明らかな粘性物が見られ、これを（４０～５０℃）加熱しても清澄にならず、室温に冷却して夜通し静置すると、黄色油状物が認められた。室温、遮光下で７ヶ月静置すると、系には透明結晶が認められ、この結晶を採取して単結晶回折を測定した結果、上記の配置であることが確認された。
【0051】
単結晶回折試験
機器モデル：単結晶Ｘ線回折装置（ＳＣ－ＸＲＤ）（Ｄ８ＶＥＮＴＵＲＥ）
結論：式（Ｉ）化合物は、分子式Ｃ２６Ｈ２１Ｆ３Ｎ４Ｏ２で、晶系Ｍｏｎｏｃｌｉｎｉｃで、空間群Ｃ２で、格子パラメータａ＝２２．０１２８（６）Å、ｂ＝１２．７５４２（３）Å、ｃ＝１６．０１５２（４）Å、α＝γ＝９０°、β＝９０．４９００（１０）°、体積Ｖ＝４４９６．２（２）Å３で、絶対配置パラメータＦｌａｃｋ値０．０４（３）である。
機器モデル：単結晶Ｘ線回折装置（ＳＣ－ＸＲＤ）（Ｄ８ＶＥＮＴＵＲＥ）
結論：式（Ｉ）化合物は、分子式Ｃ２６Ｈ２１Ｆ３Ｎ４Ｏ２で、晶系Ｍｏｎｏｃｌｉｎｉｃで、空間群Ｃ２で、格子パラメータａ＝２２．０１２８（６）Å、ｂ＝１２．７５４２（３）Å、ｃ＝１６．０１５２（４）Å、α＝γ＝９０°、β＝９０．４９００（１０）°、体積Ｖ＝４４９６．２（２）Å３で、絶対配置パラメータＦｌａｃｋ値０．０４（３）である。
【0052】
（実施例２）式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの製造
室温（３０℃）で、式（Ｉ）化合物（７９．３ｇ、１６５．７４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を酢酸エチル（８０ｍＬ）に溶解し、ｎ－ヘプタン（４００ｍＬ）をゆっくり滴下し、約１００ｍＬ滴下すると粘性固体が見られ、滴下速度を遅くして、撹拌速度を速め、約２時間かけて滴下終了後、大きな固体（瓶壁に附着する。）を撹拌して分散させ、さらに室温（３０℃）で１６時間撹拌した。濾過して、濾過ケーキを収集した。濾過ケーキを減圧乾燥し、得た濾過ケーキを６０℃で夜通し（１６ｈ）真空乾燥し、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａを得た。
室温（３０℃）で、式（Ｉ）化合物（７９．３ｇ、１６５．７４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を酢酸エチル（８０ｍＬ）に溶解し、ｎ－ヘプタン（４００ｍＬ）をゆっくり滴下し、約１００ｍＬ滴下すると粘性固体が見られ、滴下速度を遅くして、撹拌速度を速め、約２時間かけて滴下終了後、大きな固体（瓶壁に附着する。）を撹拌して分散させ、さらに室温（３０℃）で１６時間撹拌した。濾過して、濾過ケーキを収集した。濾過ケーキを減圧乾燥し、得た濾過ケーキを６０℃で夜通し（１６ｈ）真空乾燥し、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａを得た。
【0053】
式（Ｉ）化合物（３０．００ｇ、６２．７０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を容れた５００ｍＬ１つ口フラスコにエタノール（６０ｍＬ）を加えて、８０℃に加熱して、ほぼ清澄になるまで撹拌し、室温（３０℃）に降温し、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａ（約３００ｍｇ）を加えて、室温（３０℃）で２時間撹拌し、水（１２０ｍＬ）を滴下して、室温（３０℃）で１６時間撹拌した。大きな固体をばらばらにして、さらに２時間撹拌した。濾過して、濾過ケーキを収集して、９０℃で３２時間真空乾燥し、得式（Ｉ）化合物の結晶形Ａを得た。
【0054】
（実施例３）化合物１の製造
【化4】
【0055】
ステップ１：化合物１－２の製造
ＬＤＡ溶液の製造：窒素保護下、－７８℃のジイソプロピルアミン（１．７０ｇ、１６．８０ｍｍｏｌ、２．３７ｍＬ、１．０５ｅｑ）の無水テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）溶液にｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ、７．０４ｍＬ、１．１ｅｑ）を滴下し、得た混合物を０℃に昇温して、０．５時間反応させ、さらに－７８℃に冷却し、使用に備えた。
ＬＤＡ溶液の製造：窒素保護下、－７８℃のジイソプロピルアミン（１．７０ｇ、１６．８０ｍｍｏｌ、２．３７ｍＬ、１．０５ｅｑ）の無水テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）溶液にｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ、７．０４ｍＬ、１．１ｅｑ）を滴下し、得た混合物を０℃に昇温して、０．５時間反応させ、さらに－７８℃に冷却し、使用に備えた。
【0056】
－７８℃、窒素保護下、化合物ｃ（１．８４ｇ、１５．９９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解した無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に上記のＬＤＡ溶液を滴下し、得た混合物を－７８℃で１時間反応させ、化合物１－１（３．４１ｇ、１５．９９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解した無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液を反応液に滴下し、得た混合物を室温（２４℃）に徐々に昇温し、さらに反応を１６時間持続した。系に飽和塩化アンモニウム溶液を加えて、酢酸エチル（２０ｍＬ）を加えて、分液して抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィー分離により精製して、化合物１－２を得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M-55)+:272.9。
【0057】
ステップ２：化合物１－３の製造
０℃で、化合物１－２（５．０７ｇ、１５．４４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解した無水ジクロロメタン（３００ｍＬ）溶液にデス・マーチン酸化剤（７．８４ｇ、１８．４７ｍｍｏｌ、５．７２ｍＬ、１．２ｅｑ）を加えて、室温（２６℃）に徐々に昇温して、３時間反応させた。系に飽和重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍＬ）、ジクロロメタン（４００ｍＬ）を加えて、濾過して、濾液を分液し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を減圧濃縮し。化合物１－３を得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M-55)+:270.9。
０℃で、化合物１－２（５．０７ｇ、１５．４４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解した無水ジクロロメタン（３００ｍＬ）溶液にデス・マーチン酸化剤（７．８４ｇ、１８．４７ｍｍｏｌ、５．７２ｍＬ、１．２ｅｑ）を加えて、室温（２６℃）に徐々に昇温して、３時間反応させた。系に飽和重炭酸ナトリウム溶液（２００ｍＬ）、ジクロロメタン（４００ｍＬ）を加えて、濾過して、濾液を分液し、有機相を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を減圧濃縮し。化合物１－３を得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M-55)+:270.9。
【0058】
ステップ３：化合物１－４の製造
化合物１－３（５００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及び化合物ｊ（１．００ｇ、４．２３ｍｍｏｌ、２．７６ｅｑ）のエタノール（２５ｍＬ）溶液に酢酸（５．２５ｇ、８７．４３ｍｍｏｌ、５ｍＬ、５７．０６ｅｑ）を加えて、室温（２５℃）で１６時間反応させ、反応液を減圧濃縮し、化合物ｋを得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M-55)+:489.1。
化合物１－３（５００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及び化合物ｊ（１．００ｇ、４．２３ｍｍｏｌ、２．７６ｅｑ）のエタノール（２５ｍＬ）溶液に酢酸（５．２５ｇ、８７．４３ｍｍｏｌ、５ｍＬ、５７．０６ｅｑ）を加えて、室温（２５℃）で１６時間反応させ、反応液を減圧濃縮し、化合物ｋを得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M-55)+:489.1。
【0059】
ステップ４：化合物ｌの製造
化合物ｋ（１．９ｇ、３．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（３．４５ｇ、１０．５７ｍｍｏｌ、３．０３ｅｑ）を加えて、１３５℃に昇温して、１時間反応させた。反応液を（珪藻土を敷いて）濾過し、濾過ケーキをＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）で洗浄し、濾液を減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィー分離により精製し、化合物ｌを得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M+H)+:525.3。
化合物ｋ（１．９ｇ、３．４９ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（３．４５ｇ、１０．５７ｍｍｏｌ、３．０３ｅｑ）を加えて、１３５℃に昇温して、１時間反応させた。反応液を（珪藻土を敷いて）濾過し、濾過ケーキをＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）で洗浄し、濾液を減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィー分離により精製し、化合物ｌを得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M+H)+:525.3。
【0060】
ステップ５：化合物１－４の製造
化合物ｌ（５８５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のジクロロメタン（１６ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（６．１６ｇ、５４．０２ｍｍｏｌ、４ｍＬ、４８．４４ｅｑ）を滴下し、室温（３０℃）で０．５時間反応させた。反応液を減圧濃縮し、化合物１－４（粗製品、トリフルオロ酢酸塩）を得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M+1)+:425.2。
化合物ｌ（５８５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のジクロロメタン（１６ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（６．１６ｇ、５４．０２ｍｍｏｌ、４ｍＬ、４８．４４ｅｑ）を滴下し、室温（３０℃）で０．５時間反応させた。反応液を減圧濃縮し、化合物１－４（粗製品、トリフルオロ酢酸塩）を得た。LCMS:MS(ESI)m/z(M+1)+:425.2。
【0061】
ステップ６：化合物１Ａ及び１Ｂの製造
化合物１－４（１．３６ｇ、２．５３ｍｍｏｌ、１ｅｑ、トリフルオロ酢酸塩）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）溶液に炭酸ナトリウム（１．１５ｇ、１０．８５ｍｍｏｌ、４．３０ｅｑ）を加えて、塩化アクリロイル（１３０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１１７．１２μＬ、５．６９ｅ－１ｅｑ）を溶解したテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を反応液に滴下し、室温（２５℃）で１時間反応させた。１Ｎ塩酸を用いて反応液をｐＨ＝約５に調整し、ジクロロメタン（１０ｍＬ＊３）で抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィー分離により精製し、超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ２１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、４０％で２．５ｍｉｎ保持し、５％に戻って２．５分間平衡化する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であった。キラル分離（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－２（２５０ｍｍ＊３０ｍｍ、５μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＥＴＯＨ］；Ｂ％：４０％～４０％）をして、キラル異性体化合物１Ａ（保持時間６．６１６ｍｉｎ）及び化合物１Ｂ（保持時間６．９７１ｍｉｎ）を得た。
化合物１－４（１．３６ｇ、２．５３ｍｍｏｌ、１ｅｑ、トリフルオロ酢酸塩）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）溶液に炭酸ナトリウム（１．１５ｇ、１０．８５ｍｍｏｌ、４．３０ｅｑ）を加えて、塩化アクリロイル（１３０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１１７．１２μＬ、５．６９ｅ－１ｅｑ）を溶解したテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を反応液に滴下し、室温（２５℃）で１時間反応させた。１Ｎ塩酸を用いて反応液をｐＨ＝約５に調整し、ジクロロメタン（１０ｍＬ＊３）で抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を減圧濃縮し、カラムクロマトグラフィー分離により精製し、超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ２１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、４０％で２．５ｍｉｎ保持し、５％に戻って２．５分間平衡化する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であった。キラル分離（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－２（２５０ｍｍ＊３０ｍｍ、５μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＥＴＯＨ］；Ｂ％：４０％～４０％）をして、キラル異性体化合物１Ａ（保持時間６．６１６ｍｉｎ）及び化合物１Ｂ（保持時間６．９７１ｍｉｎ）を得た。
【0062】
化合物１Ａ：1HNMR(400MHz,DMSO-d6) δ 9.09(s,1H),8.33(s,1H),7.85(d,J=9.0Hz,2H),7.39-7.22(m,4H),7.16-7.05(m,1H),6.92-6.76(m,1H),6.09(t,J=16.1Hz,1H),5.72-5.57(m,1H),4.72(d,J=12.3Hz,0.5H),4.31(t,J=13.7Hz,1H),4.17-4.00(m,0.5H),3.53-3.44(m,0.5H),3.33-3.14(m,1.5H),3.12-3.02(m,0.5H),3.01-2.89(m,0.5H),2.27-2.16(m,1H),2.05-1.80(m,2H),1.66-1.46(m,1H)。LCMS：MS(ESI)m/z(M+1)+：479.2。
【0063】
化合物１Ｂ：1HNMR(400MHz,DMSO-d6) δ 9.09(s,1H),8.33(s,1H),7.85(d,J=8.8Hz,2H),7.40-7.23(m,4H),7.14-7.04(m,1H),6.94-6.75(m,1H),6.10(t,J=16.1Hz,1H),5.72-5.52(m,1H),4.73(d,J=12.5Hz,0.5H),4.32(t,J=12.7Hz,1H),4.09(d,J=13.1Hz,0.5H),3.57-3.44(m,0.5H),3.33-3.15(m,1.5H),3.12-3.03(m,0.5H),3.03-2.88(m,0.5H),2.27-2.16(m,1H),2.05-1.79(m,2H),1.68-1.49(m,1H)。LCMS：MS(ESI)m/z(M+1)+：479.2。
【0064】
（実施例４）式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの吸湿性の検討
実験材料
ＳＭＳＤＶＳＩｎｔｒｉｎｓｉｃＰｌｕｓ動的蒸気吸着装置
実験方法
サンプル（１０～２０ｍｇ）をＤＶＳサンプルトレイに入れて、試験を行った。
実験結果
式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＤＶＳスペクトルを図４に示し、△Ｗ＝０．２３％であった。
実験結論
８０％ＲＨ／２５℃では、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａは、吸湿による重量増加が０．２３％であり、サンプルには、わずかな吸湿性がある。
実験材料
ＳＭＳＤＶＳＩｎｔｒｉｎｓｉｃＰｌｕｓ動的蒸気吸着装置
実験方法
サンプル（１０～２０ｍｇ）をＤＶＳサンプルトレイに入れて、試験を行った。
実験結果
式（Ｉ）化合物の結晶形ＡのＤＶＳスペクトルを図４に示し、△Ｗ＝０．２３％であった。
実験結論
８０％ＲＨ／２５℃では、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａは、吸湿による重量増加が０．２３％であり、サンプルには、わずかな吸湿性がある。
【0065】
（実施例５）式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの固体安定性の試験
『原薬及び製剤の安定性試験指導原則』（中国薬局方２０１５版四部通則９００１）に基づき、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの影響因子（（高温（６０℃、開放）、高湿度（室温／相対湿度９２．５％、開放）及び強光照射（可視光強度５０００ｌｕｘと紫外強度９０ｗ／ｃｍ２、開放））と加速条件下（（４０℃／７５％ＲＨ、開放）と（６０℃／７５％ＲＨ、開放））の安定性を考察した。
『原薬及び製剤の安定性試験指導原則』（中国薬局方２０１５版四部通則９００１）に基づき、式（Ｉ）化合物の結晶形Ａの影響因子（（高温（６０℃、開放）、高湿度（室温／相対湿度９２．５％、開放）及び強光照射（可視光強度５０００ｌｕｘと紫外強度９０ｗ／ｃｍ２、開放））と加速条件下（（４０℃／７５％ＲＨ、開放）と（６０℃／７５％ＲＨ、開放））の安定性を考察した。
【0066】
式（Ｉ）化合物の結晶形Ａをそれぞれ約２０ｍｇずつ計量し、ガラスサンプル瓶の底部に置き、薄く広げ、そのサンプルを完全に露出させて放置した。異なる条件下に放置したサンプルを５日目、１０日目、１月、２月、３月にサンプリングして検出し（ＸＲＰＤ）、その検出結果を０日目の初期検出結果と比較し、試験結果を以下の表３に示す。
結論：式（Ｉ）化合物の結晶形Ａは、影響要素や加速条件のいずれにおいても、優れた安定性を有する。
【表3】
【0067】
生物試験データ：
実験例１：ＥＧＦＲ、ＩＴＫ、ＴＥＣ、及びＢＴＫキナーゼ試験
１．反応条件
緩衝条件：２０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭＭｇＣｌ２、１ｍＭＥＧＴＡ、０．０２％Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍＬＢＳＡ、０．１ｍｍＮａ３ＶＯ４、２ｍｍＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ。
実験例１：ＥＧＦＲ、ＩＴＫ、ＴＥＣ、及びＢＴＫキナーゼ試験
１．反応条件
緩衝条件：２０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭＭｇＣｌ２、１ｍＭＥＧＴＡ、０．０２％Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍＬＢＳＡ、０．１ｍｍＮａ３ＶＯ４、２ｍｍＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ。
【0068】
２．反応手順
２．１．製造したばかりの反応緩衝液中で指示基質を製造した。
２．２．所望の補因子を上記の基質溶液に移した。
２．３．指示されたキナーゼを基質溶液に入れて、軽く混合した。
２．４．音響学技術を利用して、ＤＭＳＯ中の化合物をキナーゼ反応混合物（Ｅｃｈｏ５５０）に送った。
２．５．３３Ｐ－ＡＴＰ（比活性０．０１μｃｉ／μＬ最終）を反応混合物に入れて、反応を開示させた。（ＡＴＰ最終濃度は、それぞれ２μＭ、５μＭ、５μＭであった。）。
２．６．キナーゼ反応を室温で１２０分間インキュベートした。
２．７．反応をＰ８１イオン交換紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８－９１５）に記録した。
２．８．０．７５％リン酸洗浄フィルタを広く使用した。
２．９．濾紙に残った放射性リン酸化基質を測定した。
２．１．製造したばかりの反応緩衝液中で指示基質を製造した。
２．２．所望の補因子を上記の基質溶液に移した。
２．３．指示されたキナーゼを基質溶液に入れて、軽く混合した。
２．４．音響学技術を利用して、ＤＭＳＯ中の化合物をキナーゼ反応混合物（Ｅｃｈｏ５５０）に送った。
２．５．３３Ｐ－ＡＴＰ（比活性０．０１μｃｉ／μＬ最終）を反応混合物に入れて、反応を開示させた。（ＡＴＰ最終濃度は、それぞれ２μＭ、５μＭ、５μＭであった。）。
２．６．キナーゼ反応を室温で１２０分間インキュベートした。
２．７．反応をＰ８１イオン交換紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８－９１５）に記録した。
２．８．０．７５％リン酸洗浄フィルタを広く使用した。
２．９．濾紙に残った放射性リン酸化基質を測定した。
【0069】
３．データ分析：キナーゼ活性データは、試験サンプル中の担体（ジメチルスルホキシド）との反応に対する残りのキナーゼ活性の百分率として表され、ＩＣ５０値及びカーブフィッティングはＰｒｉｓｍ４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）により得られた。
【0070】
４．実験結論：結果を表４に示す。
結論：本発明の化合物は、ＥＧＦＲ、ＩＴＫ、及びＴＥＣキナーゼ選択性に優れていた。
【表4】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【手続補正書】
【提出日】2023-10-02
【手続補正1】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0047】
ステップ８：化合物ｌの合成
化合物ｋ（１．９ｋｇ、３．４９ｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（６．５Ｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．８ｋｇ、８．５９ｍｏｌ、２．４６ｅｑ）を加えて、１００℃に昇温して１．５ｈｒ反応させた。反応液を濾過して、濾液をオイルポンプで乾固まで減圧濃縮した。濾過ケーキをジクロロメタン（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を水ポンプ及びオイルポンプにより乾固まで順次減圧濃縮した。濃縮物をエタノール（８Ｌ）に分散させて、１ｈｒ撹拌した後、濾過して、濾過ケーキをエタノール１Ｌで洗浄し、濾液を併せて乾固まで減圧濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～４：１、１０％ジクロロメタン添加）により精製し、得た濃縮物を酢酸エチル（１．１Ｌ）に分散させ、撹拌しながら石油エーテル３．３Ｌを加えて、室温（２５℃）で３ｈｒ撹拌した。濾過して、濾過ケーキを石油エーテル２００ｍＬで洗浄し、濾過ケーキを収集して、減圧濃縮し乾燥した。化合物ｌを得た。LCMS(ESI): m/z: 525.3[M+1]。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内で４０％から５％まで、５％が１．５ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物である。
化合物ｋ（１．９ｋｇ、３．４９ｍｏｌ、１ｅｑ）のＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミド（６．５Ｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．８ｋｇ、８．５９ｍｏｌ、２．４６ｅｑ）を加えて、１００℃に昇温して１．５ｈｒ反応させた。反応液を濾過して、濾液をオイルポンプで乾固まで減圧濃縮した。濾過ケーキをジクロロメタン（１Ｌ）で洗浄し、合わせた濾液を水ポンプ及びオイルポンプにより乾固まで順次減圧濃縮した。濃縮物をエタノール（８Ｌ）に分散させて、１ｈｒ撹拌した後、濾過して、濾過ケーキをエタノール１Ｌで洗浄し、濾液を併せて乾固まで減圧濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０～４：１、１０％ジクロロメタン添加）により精製し、得た濃縮物を酢酸エチル（１．１Ｌ）に分散させ、撹拌しながら石油エーテル３．３Ｌを加えて、室温（２５℃）で３ｈｒ撹拌した。濾過して、濾過ケーキを石油エーテル２００ｍＬで洗浄し、濾過ケーキを収集して、減圧濃縮し乾燥した。化合物ｌを得た。LCMS(ESI): m/z: 525.3[M+1]。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが５分間内で５％から４０％、０．５ｍｉｎ内で４０％から５％まで、５％が１．５ｍｉｎ保持する；流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物である。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0048】
ステップ９：化合物ｍの合成
化合物ｌ（１．２６ｋｇ、２．４０ｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解したメタノール（２．６Ｌ）懸濁液にＨＣｌ（４Ｍ、３．８０Ｌ、６．３３ｅｑ）のメタノール溶液（３．８Ｌ）を滴下し、滴下終了後、室温（２５℃）で０．５ｈｒ反応させ、このとき、溶液が澄んでいる。反応液を乾固まで減圧濃縮した。ジクロロメタン４Ｌとメタノール４００ｍＬの混合溶液に濃縮物を溶解し、６Ｍ水酸化ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨを１４に調整し、さらに０．５ｈｒ撹拌し、静置し分液し、得た水相をジクロロメタン３Ｌで抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＧ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが２分間内で５％から４０％、４０％で１．２ｍｉｎ保持し、５％で０．８ｍｉｎ保持する；流速：４ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であり、ＳＦＣ分離（カラム：ＤＡＩＣＥＬＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ（２５０ｍｍ＊５０ｍｍ,１０μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＭＥＯＨ］；Ｂ％：５０％～５０％,ｍｉｎ）により精製し、ｍ（保持時間２．５８４ｍｉｎ）を得た。LCMS(ESI): m/z: 425.2[M+1]。
化合物ｌ（１．２６ｋｇ、２．４０ｍｏｌ、１ｅｑ）を溶解したメタノール（２．６Ｌ）懸濁液にＨＣｌ（４Ｍ、３．８０Ｌ、６．３３ｅｑ）のメタノール溶液（３．８Ｌ）を滴下し、滴下終了後、室温（２５℃）で０．５ｈｒ反応させ、このとき、溶液が澄んでいる。反応液を乾固まで減圧濃縮した。ジクロロメタン４Ｌとメタノール４００ｍＬの混合溶液に濃縮物を溶解し、６Ｍ水酸化ナトリウム溶液を用いて溶液のｐＨを１４に調整し、さらに０．５ｈｒ撹拌し、静置し分液し、得た水相をジクロロメタン３Ｌで抽出し、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して、濾液を乾固まで減圧濃縮した。超臨界流体クロマトグラフィー検出（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＧ－３５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：０．０５％ジエチルアミンのエタノール溶液；勾配：Ｂが２分間内で５％から４０％、４０％で１．２ｍｉｎ保持し、５％で０．８ｍｉｎ保持する；流速：４ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃；波長：２２０ｎｍ）により分析したところ、ラセミ化合物であり、ＳＦＣ分離（カラム：ＤＡＩＣＥＬＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ（２５０ｍｍ＊５０ｍｍ,１０μｍ）；移動相：Ａ：超臨界二酸化炭素、Ｂ：［０．１％ＮＨ３Ｈ２ＯＭＥＯＨ］；Ｂ％：５０％～５０％,ｍｉｎ）により精製し、ｍ（保持時間２．５８４ｍｉｎ）を得た。LCMS(ESI): m/z: 425.2[M+1]。
【国際調査報告】