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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-19
(54)【発明の名称】細胞外ベシクルベースのナノ担体
(51)【国際特許分類】
   A61K 39/39 20060101AFI20240312BHJP
   A61P 37/04 20060101ALI20240312BHJP
   A61P 31/12 20060101ALI20240312BHJP
   A61P 31/04 20060101ALI20240312BHJP
   A61P 35/00 20060101ALI20240312BHJP
   A61K 47/46 20060101ALI20240312BHJP
   A61K 48/00 20060101ALI20240312BHJP
   C12N 15/33 20060101ALN20240312BHJP
   C12N 15/31 20060101ALN20240312BHJP
   C12N 15/12 20060101ALN20240312BHJP
   A61K 47/62 20170101ALN20240312BHJP
   A61K 47/65 20170101ALN20240312BHJP
   A61K 39/385 20060101ALN20240312BHJP
   A61P 31/14 20060101ALN20240312BHJP
   A61K 39/215 20060101ALN20240312BHJP
   A61K 39/12 20060101ALN20240312BHJP
   A61K 39/02 20060101ALN20240312BHJP
   A61K 39/00 20060101ALN20240312BHJP
【FI】
A61K39/39
A61P37/04
A61P31/12
A61P31/04
A61P35/00
A61K47/46
A61K48/00
C12N15/33 ZNA
C12N15/31
C12N15/12
A61K47/62
A61K47/65
A61K39/385
A61P31/14
A61K39/215
A61K39/12
A61K39/02
A61K39/00 H
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023555786
(86)(22)【出願日】2022-03-14
(85)【翻訳文提出日】2023-10-27
(86)【国際出願番号】 US2022071126
(87)【国際公開番号】W WO2022198187
(87)【国際公開日】2022-09-22
(31)【優先権主張番号】63/161,093
(32)【優先日】2021-03-15
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514137997
【氏名又は名称】オハイオ・ステイト・イノベーション・ファウンデーション
(74)【代理人】
【識別番号】110000659
【氏名又は名称】弁理士法人広江アソシエイツ特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】イギータ-カストロ,ナタリア
(72)【発明者】
【氏名】ギャレゴ-ペレス,ダニエル
(72)【発明者】
【氏名】ドゥアルテ-サンミゲル,シルビア
(72)【発明者】
【氏名】サラザール-プエルタ,アナ
【テーマコード(参考)】
4C076
4C084
4C085
【Fターム(参考)】
4C076AA95
4C076CC06
4C076CC07
4C076CC27
4C076CC31
4C076CC35
4C076CC41
4C076EE57
4C076EE59
4C084AA13
4C084NA05
4C084NA13
4C084ZB021
4C084ZB091
4C084ZB261
4C084ZB331
4C084ZB351
4C085AA03
4C085AA06
4C085AA38
4C085BA07
4C085BA51
4C085BA71
4C085BB01
4C085CC31
4C085DD62
4C085EE01
4C085EE06
4C085FF13
4C085GG01
4C085GG03
4C085GG04
(57)【要約】
ワクチン組成物を直接送達することによって皮膚常在APCに関与するシステム、及び皮膚細胞をワクチンディスパッチセンターに変えて、標的化リガンドで官能化され、皮膚外APCに標的化することができるワクチン組成物で装填された、操作された細胞外ベシクル(EV)の産生を介して免疫を増幅するシステムが本明細書に開示される。特に、ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、第1のポリヌクレオチドと、APC標的化リガンド及びエクソソーム又はリソソーム膜貫通タンパク質を含む融合タンパク質をコードする、第2のポリヌクレオチドと、を含む、ワクチン組成物が本明細書に開示される。対象の皮膚細胞を開示されるワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、対象にワクチン接種する方法も開示される。本明細書には、対象に開示されるEVワクチンを投与することを含む、対象にワクチン接種する方法も開示される。
【選択図】図1
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ワクチン組成物であって、
(a)ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、第1のポリヌクレオチドと、
(b)APC標的化リガンド及びエクソソーム又はリソソーム膜貫通タンパク質を含む融合タンパク質をコードする、第2のポリヌクレオチドと、を含む、ワクチン組成物。
【請求項2】
前記APC標的化リガンドが、ICAM1又はICAM4を含む、請求項1に記載のワクチン組成物。
【請求項3】
前記APC標的化リガンドが、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される、請求項1に記載のワクチン組成物。
【請求項4】
前記ウイルス抗原が、レトロウイルス、レオウイルス、ラブドウイルス、ポリオウイルス、ポチウイルス、ゲミニウイルス、フレキシウイルス、ピコルナウイルス、トガウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、カリシウイルス、アレナウイルス、フラビウイルス、フィロウイルス、ブニャウイルス、コロナウイルス、アストロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、パルボウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、ポックスウイルス、又はポリオーマウイルス由来である、請求項1~3のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項5】
前記ウイルス抗原が、SARS-CoV-2抗原である、請求項4に記載のワクチン組成物。
【請求項6】
前記ウイルス抗原が、SARS-COV2スパイクタンパク質である、請求項5に記載のワクチン組成物。
【請求項7】
前記第1のポリヌクレオチド及び前記第2のポリヌクレオチドが、単一プラスミドに存在する、請求項1に記載のワクチン組成物。
【請求項8】
対象にワクチン接種する方法であって、前記対象の皮膚細胞を請求項1に記載のワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、方法。
【請求項9】
ワクチン組成物であって、ウイルス、細菌、又は腫瘍抗原と、ウイルス抗原をコードするプラスミド又はオリゴヌクレオチドと、を含む、細胞外ベシクル(EV)を含み、前記EVが、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されている、ワクチン組成物。
【請求項10】
前記APC標的化リガンドが、ICAM1又はICAM4を含む、請求項9に記載のワクチン組成物。
【請求項11】
前記APC標的化リガンドが、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される、請求項9に記載のワクチン組成物。
【請求項12】
前記ウイルス抗原が、レトロウイルス、レオウイルス、ラブドウイルス、ポリオウイルス、ポチウイルス、ゲミニウイルス、フレキシウイルス、ピコルナウイルス、トガウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、カリシウイルス、アレナウイルス、フラビウイルス、フィロウイルス、ブニャウイルス、コロナウイルス、アストロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、パルボウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、ポックスウイルス、又はポリオーマウイルス由来である、請求項9に記載のワクチン組成物。
【請求項13】
前記ウイルス抗原が、SARS-CoV-2抗原である、請求項12に記載のワクチン組成物。
【請求項14】
前記ウイルス抗原が、SARS-COV2スパイクタンパク質である、請求項13に記載のワクチン組成物。
【請求項15】
対象にワクチン接種する方法であって、前記対象に請求項14に記載のワクチン組成物を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、2021年3月15日に出願された、米国仮出願第63/161,093号の利益を主張し、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表
本出願は、366,068バイトを有する、2022年2月16日に作成された「321501-2540 Sequence Listing_ST25」と題されたASCII.txtファイルとして電子形式で出願された配列表を含有する。配列表の内容は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0003】
DNA/mRNAワクチンは、後天性及び先天性免疫を標的とするそれらの能力によって、従来のワクチンに対する有望な代替物として出現している。DNA/mRNAワクチンは、COVID-19のために積極的に開発されているが(例えば、mRNA-1273)、現在、そのようなワクチンをAPCに標的化された方法で送達する方法が不足している。
【発明の概要】
【0004】
ワクチン組成物を直接送達することによって皮膚常在APCに関与するシステム、及び皮膚細胞をワクチンディスパッチセンターに変えて、標的化リガンドで官能化され、皮膚外APCに標的化することができるワクチン組成物で装填された、操作された細胞外ベシクル(EV)の産生を介して免疫を増幅するシステムが本明細書に開示される。特に、ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、第1のポリヌクレオチドと、APC標的化リガンド及びエクソソーム又はリソソーム膜貫通タンパク質を含む融合タンパク質をコードする、第2のポリヌクレオチドと、を含む、ワクチン組成物が本明細書に開示される。
【0005】
いくつかの実施形態では、ウイルス抗原は、レトロウイルス、レオウイルス、ラブドウイルス、ポリオウイルス、ポチウイルス、ゲミニウイルス、フレキシウイルス、ピコルナウイルス、トガウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、カリシウイルス、アレナウイルス、フラビウイルス、フィロウイルス、ブニャウイルス、コロナウイルス、アストロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、パルボウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、ポックスウイルス、又はポリオーマウイルス由来である。
【0006】
いくつかの実施形態では、ウイルス抗原は、SARS-CoV-2抗原である。例えば、いくつかの実施形態では、ウイルス抗原は、mRNA-1273(Moderna,Inc.)、AZD-1222(AstraZeneca and University of Oxford)、BNT162(Pfizer and BioNTech)、CoronaVac(Sinovac)、NVX-CoV 2372(NovoVax)、SCB-2019(Sanofi and GSK)、ZyCoV-D(Zydus Cadila)、又はCoVaxin(Bharat Biotech)、LV-SMENP-DC(Shenzhen Geno-Immune Medical Institute)、CVnCoV(CureVac biopharmaceuticals)、Gam-COVID-Vac Lyo/Sputnik V(Gamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology)、Ad5-nCoV(Cansino Biologics)、DelNS1-SARS-CoV-2-RBD(University of Hong Kong)、Coroflu(University of Wisconsin-Madison/ Bharath Biotech Inc)、PittCoVacc(University of Pittsburgh School of Medicine)、Covid-19 aAPC(Shenzhen Geno-Immune Medical Institute)、Triple Antigen Vaccine(Premas Biotech)、又はBBIBP-CorV(Beijing Institute of Biological Products and Sinopharm)である。
【0007】
いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ICAM1又はICAM4を含む。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される。
【0008】
エクソソームを産生するための設計戦略は、Liu C,et al.Theranostics.2019 9(4):1015-1028に記載され、これは融合タンパク質をエクソソームに誘導するために使用することができる膜貫通タンパク質の教示のために参照によって組み込まれる。したがって、いくつかの実施形態では、膜貫通タンパク質は、CD63、CD9、CD81、CD53、CD82、CD37(テトラスパニン)、Alix(エンドソーム関連タンパク質)、フロチリン-1(脂質ラフト関連タンパク質)、TSG101(ESCRT-I複合体の成分)、ARRDC(タンパク質のアレスチンファミリー)、パルミトイル化tdTomato(EV膜標識のためのパルミトイル化シグナルとNH2末端で融合したタンデム二量体Tomato)、ラクタデリンC1C2ドメイン(膜糖タンパク質)、EGF VIII(膜貫通糖タンパク質)、PDGFR TMドメイン(細胞表面チロシンキナーゼ受容体)、HIV-1 Nef(mut)(細胞外ベシクルで放出)、VSVG(水疱性口内炎ウイルス糖タンパク質)、LAMP2B(リソソーム関連膜糖タンパク質2)、LAMP1(リソソーム関連膜糖タンパク質1)、ALIX-1(ESCRT-IIIサブユニットSNF7と相互作用することによってMVBと関連するサイトゾルタンパク質)、HSP70(ヒートショックタンパク質)、HSP90(ヒートショックタンパク質)、MHC(膜に固定)、SCAMP(分泌担体関連膜タンパク質18)、ApoE(アポリポタンパク質E)、及びWWタグ(Lドメイン含有タンパク質Ndfip1によって認識され、ユビキチン化及びエクソソームへの装填をもたらす)からなる群から選択される。
【0009】
いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチド及び第2のポリヌクレオチドは、単一プラスミドに存在する。他の実施形態では、それらは、同時に又は連続して送達することができる別個のポリヌクレオチド中にある。
【0010】
対象の皮膚細胞を開示されるワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、対象にワクチン接種する方法も開示される。本明細書に開示されるように、この方法は、皮膚常在皮膚細胞に、ウイルス、細菌、又は腫瘍抗原を含有し、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されたEVを産生させる。
【0011】
ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原を含有する、かつ/又はウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするプラスミド若しくはオリゴヌクレオチドを含有するEVを含むEVワクチン組成物であって、EVが、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されている、EVワクチン組成物も開示される。本明細書には、対象に開示されるEVワクチンを投与することを含む、対象にワクチン接種する方法も開示される。
【0012】
本発明の1つ以上の実施形態の詳細は、添付の図面及び以下の説明に明示されている。本発明の他の特徴、目的、及び利点は、説明及び図面、並びに特許請求の範囲から明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【0013】
図1】COVID-19に対するTNT及びエクソソーム駆動型ワクチン接種方法を示す。パネル(a)は、COVID19特異的抗原をコードするDNAを皮膚常在APCに直接送達するために、TNTがリンパ節付近の皮膚表面に適用されることを示す。パネル(b)は、TNT処理された皮膚が、APCを標的とすることができるリガンド(すなわち、ICAM1/4)で装飾され、COVID19特異的抗原をコードするプラスミドDNA及びmRNAで装填された、操作されたエクソソームを作製することもできることを示す。これらのエクソソームは、COVID19特異的抗原に対する免疫応答を増幅するために、皮膚から標的結節常在APCまで、全身に送り出されるであろう。TNT手順は、1回のみ適用され、適用当たり約100ms続く。
図2A-2J】CD11b+骨髄細胞を優先的に標的化し、抗腫瘍免疫を駆動するICAM1装飾エクソソームを示す。図2A及び2Bは、定義された装飾及びカーゴを有するエクソソームの放出をもたらすマウス胚線維芽細胞(MEF)の非トランスフェクションを示す。図2D及び2Eは、ICAM1装飾されたエクソソームが、CD11b+骨髄細胞による優先的な取り込みをどのように駆動するかを示し、図2Fは、カーゴに応じた炎症促進応答を示す。図2G~2Jは、腫瘍への直接的な尾部注射によって配置された操作されたエクソソームを示し(図2G)、(i-j)抗腫瘍免疫を駆動する(図2I~2J)ことによって進行を妨げる(図2H)。
図3A-3J】TNTが皮膚からの抗腫瘍活性を有する操作されたエクソソームのインサイチュ産生を駆動することを示す。図3A及び3Bは、ICAM1装飾された操作されたエクソソームのインサイチュ放出を駆動する皮膚に適用されたTNTを示す。図3C及び3Dは、抗腫瘍活性を示す。図3E~3Jは、ICAM1装飾エクソソームによる腫瘍内の骨髄細胞の標的化を示し(図3E)、miR-146a及びGlut1カーゴは、腫瘍負荷を阻害する免疫応答を誘導することができることを示す(図3F~3J)。
【発明を実施するための形態】
【0014】
本開示をより詳細に記載する前に、本開示が、記載される特定の実施形態に限定されず、そのため、当然ながら、変動し得ることが理解されるべきである。本明細書で使用される用語は、単に特定の実施形態を記載する目的のためであり、本開示の範囲が添付の特許請求の範囲によって限定されるために限定することが意図されないことも理解されるべきである。
【0015】
値の範囲が提供される場合、文脈が別途明確に指示しない限り、その範囲の上限と下限との間の下限の単位の10分の1までの各介在値、及び記載された範囲内の任意の他の記載された値又は介在値は、本開示内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、より小さい範囲に独立して含まれてもよく、記載された範囲内の任意の具体的に除外された限界に従って、同様に本開示内に包含される。記載された範囲が限界の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界のいずれか又は両方を除外する範囲も本開示に含まれる。
【0016】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載される方法及び材料と同様又は同等の任意の方法及び材料は、本開示の実施又は試験においても使用され得るが、好ましい方法及び材料が、これより記載される。
【0017】
本明細書で引用される全ての刊行物及び特許は、各々個々の刊行物又は特許が、参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されるかのように、参照により本明細書に組み込まれ、刊行物が引用される方法及び/又は材料を開示し、説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。いかなる刊行物の引用も、出願日前のその開示のためにあり、本開示が事前の開示に基づいてそのような刊行物の前に日付を付ける権利がないことを認めるものと解釈されるべきではない。更に、提供される公開日は、独立して確認する必要があり得る実際の公開日とは異なる場合がある。
【0018】
本開示を読むと当業者に明らかになるように、本明細書に記載及び例示される個々の実施形態のうちのそれぞれは、別個の構成要素及び特徴を有し、これらは、本開示の範囲又は趣旨から逸脱することなく、他のいくつかの実施形態のうちのいずれかから容易に分離され得るか、又はそれらと組み合わされ得る。任意の列挙された方法は、列挙されたイベントの順序、又は論理的に可能な任意の他の順序で実行され得る。
【0019】
本開示の実施形態は、別段の指示がない限り、当該技術分野の範囲内にある、化学、生物学などの技法を用いるであろう。
【0020】
以下の例は、本明細書に開示され、特許請求される方法をどのように実施し、プローブをどのように使用するかの完全な開示及び説明を当業者に提供するために示される。数値(例えば、量、温度など)に関して精度を保証するように努力がなされてはいるが、いくらかの誤差及び偏差が考慮されるべきである。別段の指示がない限り、部は、重量部であり、温度は、℃であり、圧力は、大気圧又はその付近である。標準温度及び圧力は、20℃及び1気圧と定義される。
【0021】
本開示の実施形態を詳細に説明する前に、別段の指示がない限り、本開示は、そのようなものは異なり得るため、特定の材料、試薬、反応材料、製造プロセスなどに限定されないことを理解されたい。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的とし、限定することが意図されないことも理解されるべきである。本開示では、これが論理的に可能である異なる順序でステップを実行することができることも可能である。
【0022】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「a」、「an」、及び「the」は、文脈が明示的に別様に示さない限り、複数の参照物を含むことに留意する必要がある。
【0023】
定義
「対象」という用語は、投与又は治療の標的である任意の個体を指す。対象は、脊椎動物、例えば、哺乳動物であり得る。したがって、対象は、ヒト又は獣医患者であり得る。「患者」という用語は、臨床医、例えば、医師の治療下にある対象を指す。
【0024】
「治療的に有効な」という用語は、使用される組成物の量が、疾患又は障害の1つ以上の原因又は症状を軽減するのに十分なものであることを指す。このような軽減は、低減又は改変を必要とするだけであり、排除である必要はない。
【0025】
「薬学的に許容される」という用語は、合理的な利益/リスク比に見合った、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症なしでヒト及び動物の組織に接触して使用するのに好適な、健全な医学的判断の範囲内である、化合物、材料、組成物、及び/又は投薬形態を指す。
【0026】
「担体」という用語は、化合物又は組成物と組み合わされるとき、その意図された用途又は目的のために、化合物又は組成物の調製、貯蔵、投与、送達、有効性、選択性、又は任意の他の特徴を補助又は促進する、化合物、組成物、物質、又は構造を意味する。例えば、担体は、活性成分の任意の分解を最小限に抑え、対象における任意の有害な副作用を最小限に抑えるように選択することができる。
【0027】
「治療」という用語は、疾患、病的な状態、又は障害を治癒し、軽減し、安定化し、又は予防する意図を有する患者の医学的管理を指す。この用語は、積極的治療、すなわち、具体的に疾患、病態、又は障害の改善に向けた治療を含み、また、原因治療、すなわち、関連する疾患、病態、又は障害の原因の除去に向けた治療も含む。加えて、この用語は、緩和治療、すなわち、疾患、病態、又は障害の治癒ではなく、症状の軽減のために設計された治療;予防的治療、すなわち、関連する疾患、病態、又は障害の発症を最小限に抑える、又は部分的に若しくは完全に阻害することに向けた治療;並びに支持治療、すなわち、関連する疾患、病態、又は障害の改善に向けた別の特定の治療法を補完するために用いられる治療を含む。
【0028】
「ポリペプチド」という用語は、ペプチド結合又は修飾ペプチド結合、例えば、ペプチドイソスターなどによって互いに結合したアミノ酸を指し、20個の遺伝子コードされたアミノ酸以外の修飾アミノ酸を含有し得る。ポリペプチドは、翻訳後処理などの、自然プロセス、又は当該技術分野で周知の化学修飾技法のいずれかによって修飾することができる。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、及びアミノ又はカルボキシル末端を含む、ポリペプチドの任意の場所で生じ得る。同じ種類の修飾は、所与のポリペプチドにおけるいくつかの部位に同じ又は変動する程度で存在し得る。また、所与のポリペプチドは、多くの種類の修飾を有し得る。修飾としては、限定なしに、アセチル化、アシル化、ADP-リボシル化、アミド化、共有結合架橋又は環化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチド又はヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質又は脂質誘導体の共有結合、ホスフィチジルイノシトールの共有結合、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、システイン又はピログルタメートの形成、ホルミル化、ガンマ-カルボキシル化、グリコシル化、GPIアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ化、メチル化、ミリストイル化、酸化、PEG化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、及びアルギニル化などのアミノ酸のタンパク質への転移-RNA媒介付加が挙げられる。(Proteins - Structure and Molecular Properties 2nd Ed.,T.E.Creighton,W.H.Freeman and Company,New York(1993)、Posttranslational Covalent Modification of Proteins,B.C.Johnson, Ed.,Academic Press,New York,pp.1-12(1983)を参照されたい)。
【0029】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸配列」という用語は、アミノ酸残基を表す略語、文字、記号、又は単語のリストを指す。本明細書で使用されるアミノ酸の略語は、アミノ酸の従来の1文字コードであり、以下のように表される:A、アラニン、B、アスパラギン又はアスパラギン酸、C、システイン、Dアスパラギン酸、E、グルタミン酸塩、グルタミン酸、F、フェニルアラニン、G、グリシン、Hヒスチジン、Iイソロイシン、K、リジン、L、ロイシン、M、メチオニン、N、アスパラギン、P、プロリン、Q、グルタミン、R、アルギニン、S、セリン、T、トレオニン、V、バリン、W、トリプトファン、Y、チロシン、Z、グルタミン又はグルタミン酸。
【0030】
本明細書で使用される場合、「核酸」という語句は、DNA若しくはRNA、又はDNA-RNAハイブリッド、一本鎖又は二本鎖、センス又はアンチセンスにかかわらず、ワトソン-クリック塩基対形成による相補的な核酸へのハイブリダイゼーションを可能にする、天然に存在する又は合成オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドを指す。核酸はまた、ヌクレオチド類似体(例えば、BrdU)、及び非ホスホジエステルヌクレオシド間結合(例えば、ペプチド核酸(PNA)又はチオジエステル結合)を含み得る。特に、核酸は、限定されないが、DNA、RNA、cDNA、gDNA、ssDNA、dsDNA、又はそれらの任意の組み合わせを含み得る。
【0031】
本明細書で使用される場合、「ヌクレオチド」は、塩基部分、糖部分、及びリン酸部分を含有する分子である。ヌクレオチドは、それらのリン酸部分及び糖部分を通して、一緒に結合し、ヌクレオシド間結合を生成することができる。「オリゴヌクレオチド」という用語は、一緒に結合した2つ以上のヌクレオチドを含有する分子を指して使用されることがある。ヌクレオチドの塩基部分は、アデニン-9-イル(A)、シトシン-1-イル(C)、グアニン-9-イル(G)、ウラシル-1-イル(U)、及びチミン-1-イル(T)であり得る。ヌクレオチドの糖部分は、リボース又はデオキシリボースである。ヌクレオチドのリン酸部分は、五価リン酸である。ヌクレオチドの非限定的な例は、3■-A
MP(3■-アデノシン一リン酸)又は5■-GMP(5■-グアノシン一リン酸)であ
ろう。
【0032】
ヌクレオチド類似体は、塩基、糖、及び/又はリン酸部分に何らかの種類の修飾を含有するヌクレオチドである。ヌクレオチドに対する修飾は、当該技術分野において周知であり、例えば、5-メチルシトシン(5-me-C)、5-ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、及び2-アミノアデニン、並びに糖又はリン酸部分における修飾を含むであろう。
【0033】
ヌクレオチド代替物は、ヌクレオチドと同様の機能特性を有するが、ペプチド核酸(PNA)などのリン酸部分を含有しない分子である。ヌクレオチド代替物は、ワトソン-クリック又はフーグスティーン様式で核酸を認識するが、リン酸部分以外の部分を通して一緒に結合した分子である。ヌクレオチド代替物は、適切な標的核酸と相互作用するときに、二重らせん型構造に適合することができる。
【0034】
「ベクター」又は「構築物」という用語は、ベクター配列が結合している別の核酸を細胞に輸送することが可能な核酸配列を指す。「発現ベクター」という用語は、細胞による発現に好適な形態で(例えば、転写制御エレメントに結合した)遺伝子構築物を含有する任意のベクター(例えば、プラスミド、コスミド、又はファージ染色体)を含む。「プラスミド」及び「ベクター」は、プラスミドがベクターの一般的に使用される形態であるため、交換可能に使用される。更に、本発明は、同等の機能を果たす他のベクターを含むことが意図される。
【0035】
「作動可能に結合した」という用語は、核酸と別の核酸配列との機能的関係を指す。プロモーター、エンハンサー、転写及び翻訳停止部位、並びに他のシグナル配列は、他の配列に作動可能に結合した核酸配列の例である。例えば、転写制御エレメントへのDNAの作動可能な結合は、そのようなDNAの転写が、DNAを特異的に認識し、結合し、転写するRNAポリメラーゼによってプロモーターから開始されるような、DNAとプロモーターとの間の物理的及び機能的関係を指す。
【0036】
本明細書の目的のために、所与のヌクレオチド又はアミノ酸配列Cの、所与の核酸配列Dに対する(to、with、又はagainst)配列同一性%(代替的に、所与の配列Dに対する(to、with、又はagainst)特定の配列同一性%を有するか、又は含む所与の配列Cとして表現することができる)は、以下のように計算され:
100×分数W/Z、
式中、Wは、そのプログラムのC及びDのアラインメントにおける配列アラインメントプログラムによって同一マッチとしてスコアリングされたヌクレオチド又はアミノ酸の数であり、Zは、Dにおけるヌクレオチド又はアミノ酸の総数である。配列Cの長さが配列Dの長さに等しくない場合、C対Dの配列同一性%は、D対Cの配列同一性%に等しくないことが理解されるであろう。配列同一性パーセントを決定する目的でのアラインメントは、例えば、BLAST、BLAST-2、ALIGN、ALIGN-2、又はMegalign(DNASTAR)ソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して、当該技術分野の技術の範囲内にある様々な方法で達成することができる。
【0037】
「特異的にハイブリダイズする」とは、プローブ、プライマー、又はオリゴヌクレオチドが、高いストリンジェンシー条件下で実質的に相補的な核酸(例えば、c-met核酸)を認識し、これと物理的に相互作用(すなわち、塩基対形成)し、他の核酸と実質的に塩基対形成しないことを意味する。
【0038】
本明細書で使用される場合、「ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件」という用語は、プローブと標的配列との間に少なくとも95%、好ましくは少なくとも97%の配列同一性がある場合、ハイブリダイゼーションが一般的に起こることを意味する。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件の例は、50%ホルムアミド、5×SSC(150mMのNaCl、15mMのクエン酸三ナトリウム)、50mMのリン酸ナトリウム(pH7.6)、5×Denhardtの溶液、10%硫酸デキストラン、及び20μg/mlの変性され、せん断されたキャリアDNA、例えば、サケ精子DNAを含む溶液中での一晩のインキュベーション、続いて約65℃の0.1×SSC中でハイブリダイゼーション支持体を洗浄することである。他のハイブリダイゼーション及び洗浄条件は、周知であり、Sambrook et al,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Second Edition,Cold Spring Harbor,N.Y.(1989)、特にchapter 11において例示される。
【0039】
組成物
ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、第1のポリヌクレオチドと、APC標的化リガンド及びエクソソーム又はリソソーム膜貫通タンパク質を含む融合タンパク質をコードする、第2のポリヌクレオチドと、を含む、ワクチン組成物が本明細書に開示される。対象の皮膚細胞を開示されるワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、対象にワクチン接種する方法も開示される。本明細書に開示されるように、この方法は、皮膚常在皮膚細胞に、ウイルス、細菌、又は腫瘍抗原を含有し、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されたEVを産生させる。
【0040】
開示されるEVは、いくつかの実施形態では、皮膚細胞などの、細胞によって分泌され得る任意のベシクルであり得る。細胞は、アポトーシス小体(1~5μm)、マイクロベシクル(100~1000nmのサイズ)、及びエクソソーム(50~150nm)として知られている、エンドソーム由来のベシクルを含む、広範囲の直径及び機能を有する細胞外ベシクル(EV)を分泌する。
【0041】
ウイルス抗原
RNA又はDNAワクチンについて当該技術分野で既知のものなどの、ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、核酸配列を含むポリヌクレオチドも本明細書に開示される。
【0042】
いくつかの実施形態では、ウイルス抗原は、mRNA-1273である。
【0043】
いくつかの実施形態では、ウイルス抗原は、SARS-COV2スパイクタンパク質である。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下のアミノ酸配列:MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT(配列番号1、YP_009724390)、又は配列番号1と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するウイルス抗原をコードする。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATGTTTGTTTTTCTTGTTTTATTGCCACTAGTCTCTAGTCAGTGTGTTAATCTTACAACCAGAACTCAATTACCCCCTGCATACACTAATTCTTTCACACGTGGTGTTTATTACCCTGACAAAGTTTTCAGATCCTCAGTTTTACATTCAACTCAGGACTTGTTCTTACCTTTCTTTTCCAATGTTACTTGGTTCCATGCTATACATGTCTCTGGGACCAATGGTACTAAGAGGTTTGATAACCCTGTCCTACCATTTAATGATGGTGTTTATTTTGCTTCCACTGAGAAGTCTAACATAATAAGAGGCTGGATTTTTGGTACTACTTTAGATTCGAAGACCCAGTCCCTACTTATTGTTAATAACGCTACTAATGTTGTTATTAAAGTCTGTGAATTTCAATTTTGTAATGATCCATTTTTGGGTGTTTATTACCACAAAAACAACAAAAGTTGGATGGAAAGTGAGTTCAGAGTTTATTCTAGTGCGAATAATTGCACTTTTGAATATGTCTCTCAGCCTTTTCTTATGGACCTTGAAGGAAAACAGGGTAATTTCAAAAATCTTAGGGAATTTGTGTTTAAGAATATTGATGGTTATTTTAAAATATATTCTAAGCACACGCCTATTAATTTAGTGCGTGATCTCCCTCAGGGTTTTTCGGCTTTAGAACCATTGGTAGATTTGCCAATAGGTATTAACATCACTAGGTTTCAAACTTTACTTGCTTTACATAGAAGTTATTTGACTCCTGGTGATTCTTCTTCAGGTTGGACAGCTGGTGCTGCAGCTTATTATGTGGGTTATCTTCAACCTAGGACTTTTCTATTAAAATATAATGAAAATGGAACCATTACAGATGCTGTAGACTGTGCACTTGACCCTCTCTCAGAAACAAAGTGTACGTTGAAATCCTTCACTGTAGAAAAAGGAATCTATCAAACTTCTAACTTTAGAGTCCAACCAACAGAATCTATTGTTAGATTTCCTAATATTACAAACTTGTGCCCTTTTGGTGAAGTTTTTAACGCCACCAGATTTGCATCTGTTTATGCTTGGAACAGGAAGAGAATCAGCAACTGTGTTGCTGATTATTCTGTCCTATATAATTCCGCATCATTTTCCACTTTTAAGTGTTATGGAGTGTCTCCTACTAAATTAAATGATCTCTGCTTTACTAATGTCTATGCAGATTCATTTGTAATTAGAGGTGATGAAGTCAGACAAATCGCTCCAGGGCAAACTGGAAAGATTGCTGATTATAATTATAAATTACCAGATGATTTTACAGGCTGCGTTATAGCTTGGAATTCTAACAATCTTGATTCTAAGGTTGGTGGTAATTATAATTACCTGTATAGATTGTTTAGGAAGTCTAATCTCAAACCTTTTGAGAGAGATATTTCAACTGAAATCTATCAGGCCGGTAGCACACCTTGTAATGGTGTTGAAGGTTTTAATTGTTACTTTCCTTTACAATCATATGGTTTCCAACCCACTAATGGTGTTGGTTACCAACCATACAGAGTAGTAGTACTTTCTTTTGAACTTCTACATGCACCAGCAACTGTTTGTGGACCTAAAAAGTCTACTAATTTGGTTAAAAACAAATGTGTCAATTTCAACTTCAATGGTTTAACAGGCACAGGTGTTCTTACTGAGTCTAACAAAAAGTTTCTGCCTTTCCAACAATTTGGCAGAGACATTGCTGACACTACTGATGCTGTCCGTGATCCACAGACACTTGAGATTCTTGACATTACACCATGTTCTTTTGGTGGTGTCAGTGTTATAACACCAGGAACAAATACTTCTAACCAGGTTGCTGTTCTTTATCAGGATGTTAACTGCACAGAAGTCCCTGTTGCTATTCATGCAGATCAACTTACTCCTACTTGGCGTGTTTATTCTACAGGTTCTAATGTTTTTCAAACACGTGCAGGCTGTTTAATAGGGGCTGAACATGTCAACAACTCATATGAGTGTGACATACCCATTGGTGCAGGTATATGCGCTAGTTATCAGACTCAGACTAATTCTCCTCGGCGGGCACGTAGTGTAGCTAGTCAATCCATCATTGCCTACACTATGTCACTTGGTGCAGAAAATTCAGTTGCTTACTCTAATAACTCTATTGCCATACCCACAAATTTTACTATTAGTGTTACCACAGAAATTCTACCAGTGTCTATGACCAAGACATCAGTAGATTGTACAATGTACATTTGTGGTGATTCAACTGAATGCAGCAATCTTTTGTTGCAATATGGCAGTTTTTGTACACAATTAAACCGTGCTTTAACTGGAATAGCTGTTGAACAAGACAAAAACACCCAAGAAGTTTTTGCACAAGTCAAACAAATTTACAAAACACCACCAATTAAAGATTTTGGTGGTTTTAATTTTTCACAAATATTACCAGATCCATCAAAACCAAGCAAGAGGTCATTTATTGAAGATCTACTTTTCAACAAAGTGACACTTGCAGATGCTGGCTTCATCAAACAATATGGTGATTGCCTTGGTGATATTGCTGCTAGAGACCTCATTTGTGCACAAAAGTTTAACGGCCTTACTGTTTTGCCACCTTTGCTCACAGATGAAATGATTGCTCAATACACTTCTGCACTGTTAGCGGGTACAATCACTTCTGGTTGGACCTTTGGTGCAGGTGCTGCATTACAAATACCATTTGCTATGCAAATGGCTTATAGGTTTAATGGTATTGGAGTTACACAGAATGTTCTCTATGAGAACCAAAAATTGATTGCCAACCAATTTAATAGTGCTATTGGCAAAATTCAAGACTCACTTTCTTCCACAGCAAGTGCACTTGGAAAACTTCAAGATGTGGTCAACCAAAATGCACAAGCTTTAAACACGCTTGTTAAACAACTTAGCTCCAATTTTGGTGCAATTTCAAGTGTTTTAAATGATATCCTTTCACGTCTTGACAAAGTTGAGGCTGAAGTGCAAATTGATAGGTTGATCACAGGCAGACTTCAAAGTTTGCAGACATATGTGACTCAACAATTAATTAGAGCTGCAGAAATCAGAGCTTCTGCTAATCTTGCTGCTACTAAAATGTCAGAGTGTGTACTTGGACAATCAAAAAGAGTTGATTTTTGTGGAAAGGGCTATCATCTTATGTCCTTCCCTCAGTCAGCACCTCATGGTGTAGTCTTCTTGCATGTGACTTATGTCCCTGCACAAGAAAAGAACTTCACAACTGCTCCTGCCATTTGTCATGATGGAAAAGCACACTTTCCTCGTGAAGGTGTCTTTGTTTCAAATGGCACACACTGGTTTGTAACACAAAGGAATTTTTATGAACCACAAATCATTACTACAGACAACACATTTGTGTCTGGTAACTGTGATGTTGTAATAGGAATTGTCAACAACACAGTTTATGATCCTTTGCAACCTGAATTAGACTCATTCAAGGAGGAGTTAGATAAATATTTTAAGAATCATACATCACCAGATGTTGATTTAGGTGACATCTCTGGCATTAATGCTTCAGTTGTA
AACATTCAAAAAGAAATTGACCGCCTCAATGAGGTTGCCAAGAATTTAAATGAATCTCTCATCGATCTCCAAGAACTTGGAAAGTATGAGCAGTATATAAAATGGCCATGGTACATTTGGCTAGGTTTTATAGCTGGCTTGATTGCCATAGTAATGGTGACAATTATGCTTTGCTGTATGACCAGTTGCTGTAGTTGTCTCAAGGGCTGTTGTTCTTGTGGATCCTGCTGCAAATTTGATGAAGACGACTCTGAGCCAGTGCTCAAAGGAGTCAAATTACATTACACC(配列番号2、NC_045512.2)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号2からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0044】
いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、Her-2/neuタンパク質である。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下のアミノ酸配列:KGRPWPLWSGPRAAARPFPRGPLLRRAPGPHPSQHPAPRALPAGSSRSHGAGAAVSTMELAALCRWGLLLALLPPGAASTQVCTGTDMKLRLPASPETHLDMLRHLYQGCQVVQGNLELTYLPTNASLSFLQDIQEVQGYVLIAHNQVRQVPLQRLRIVRGTQLFEDNYALAVLDNGDPLNNTTPVTGASPGGLRELQLRSLTEILKGGVLIQRNPQLCYQDTILWKDIFHKNNQLALTLIDTNRSRACHPCSPMCKGSRCWGESSEDCQSLTRTVCAGGCARCKGPLPTDCCHEQCAAGCTGPKHSDCLACLHFNHSGICELHCPALVTYNTDTFESMPNPEGRYTFGASCVTACPYNYLSTDVGSCTLVCPLHNQEVTAEDGTQRCEKCSKPCARVCYGLGMEHLREVRAVTSANIQEFAGCKKIFGSLAFLPESFDGDPASNTAPLQPEQLQVFETLEEITGYLYISAWPDSLPDLSVFQNLQVIRGRILHNGAYSLTLQGLGISWLGLRSLRELGSGLALIHHNTHLCFVHTVPWDQLFRNPHQALLHTANRPEDECVGEGLACHQLCARGHCWGPGPTQCVNCSQFLRGQECVEECRVLQGLPREYVNARHCLPCHPECQPQNGSVTCFGPEADQCVACAHYKDPPFCVARCPSGVKPDLSYMPIWKFPDEEGACQPCPINCTHSCVDLDDKGCPAEQRASPLTSIISAVVGILLVVVLGVVFGILIKRRQQKIRKYTMRRLLQETELVEPLTPSGAMPNQAQMRILKETELRKVKVLGSGAFGTVYKGIWIPDGENVKIPVAIKVLRENTSPKANKEILDEAYVMAGVGSPYVSRLLGICLTSTVQLVTQLMPYGCLLDHVRENRGRLGSQDLLNWCMQIAKGMSYLEDVRLVHRDLAARNVLVKSPNHVKITDFGLARLLDIDETEYHADGGKVPIKWMALESILRRRFTHQSDVWSYGVTVWELMTFGAKPYDGIPAREIPDLLEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDSECRPRFRELVSEFSRMARDPQRFVVIQNEDLGPASPLDSTFYRSLLEDDDMGDLVDAEEYLVPQQGFFCPDPAPGAGGMVHHRHRSSSTRSGGGDLTLGLEPSEEEAPRSPLAPSEGAGSDVFDGDLGMGAAKGLQSLPTHDPSPLQRYSEDPTVPLPSETDGYVAPLTCSPQPEYVNQPDVRPQPPSPREGPLPAARPAGATLERPKTLSPGKNGVVKDVFAFGGAVENPEYLTPQGGAAPQPHPPPAFSPAFDNLYYWDQDPPERGAPPSTFKGTPTAENPEYLGLDVPVTRRPSPQKPCVLREQGRPDFCWHQEVGGPSDHFQGNLPCQEPVLRNLPSCLSSQMAGRGPASLEEEQHWGVFVDSEALPNETLGSSGCHSPAWPFPSRSWVLKALGKLAEGKRPGSVEQKRPIQRLSLKPSTAPHEEGTAMVSVSRLCTECFSVFLLFLFCFFKDEIKTQGE(配列番号37)、又は配列番号37と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するウイルス抗原をコードする。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:AAGGGGAGGTAACCCTGGCCCCTTTGGTCGGGGCCCCGGGCAGCCGCGCGCCCCTTCCCACGGGGCCCTTTACTGCGCCGCGCGCCCGGCCCCCACCCCTCGCAGCACCCCGCGCCCCGCGCCCTCCCAGCCGGGTCCAGCCGGAGCCATGGGGCCGGAGCCGCAGTGAGCACCATGGAGCTGGCGGCCTTGTGCCGCTGGGGGCTCCTCCTCGCCCTCTTGCCCCCCGGAGCCGCGAGCACCCAAGTGTGCACCGGCACAGACATGAAGCTGCGGCTCCCTGCCAGTCCCGAGACCCACCTGGACATGCTCCGCCACCTCTACCAGGGCTGCCAGGTGGTGCAGGGAAACCTGGAACTCACCTACCTGCCCACCAATGCCAGCCTGTCCTTCCTGCAGGATATCCAGGAGGTGCAGGGCTACGTGCTCATCGCTCACAACCAAGTGAGGCAGGTCCCACTGCAGAGGCTGCGGATTGTGCGAGGCACCCAGCTCTTTGAGGACAACTATGCCCTGGCCGTGCTAGACAATGGAGACCCGCTGAACAATACCACCCCTGTCACAGGGGCCTCCCCAGGAGGCCTGCGGGAGCTGCAGCTTCGAAGCCTCACAGAGATCTTGAAAGGAGGGGTCTTGATCCAGCGGAACCCCCAGCTCTGCTACCAGGACACGATTTTGTGGAAGGACATCTTCCACAAGAACAACCAGCTGGCTCTCACACTGATAGACACCAACCGCTCTCGGGCCTGCCACCCCTGTTCTCCGATGTGTAAGGGCTCCCGCTGCTGGGGAGAGAGTTCTGAGGATTGTCAGAGCCTGACGCGCACTGTCTGTGCCGGTGGCTGTGCCCGCTGCAAGGGGCCACTGCCCACTGACTGCTGCCATGAGCAGTGTGCTGCCGGCTGCACGGGCCCCAAGCACTCTGACTGCCTGGCCTGCCTCCACTTCAACCACAGTGGCATCTGTGAGCTGCACTGCCCAGCCCTGGTCACCTACAACACAGACACGTTTGAGTCCATGCCCAATCCCGAGGGCCGGTATACATTCGGCGCCAGCTGTGTGACTGCCTGTCCCTACAACTACCTTTCTACGGACGTGGGATCCTGCACCCTCGTCTGCCCCCTGCACAACCAAGAGGTGACAGCAGAGGATGGAACACAGCGGTGTGAGAAGTGCAGCAAGCCCTGTGCCCGAGTGTGCTATGGTCTGGGCATGGAGCACTTGCGAGAGGTGAGGGCAGTTACCAGTGCCAATATCCAGGAGTTTGCTGGCTGCAAGAAGATCTTTGGGAGCCTGGCATTTCTGCCGGAGAGCTTTGATGGGGACCCAGCCTCCAACACTGCCCCGCTCCAGCCAGAGCAGCTCCAAGTGTTTGAGACTCTGGAAGAGATCACAGGTTACCTATACATCTCAGCATGGCCGGACAGCCTGCCTGACCTCAGCGTCTTCCAGAACCTGCAAGTAATCCGGGGACGAATTCTGCACAATGGCGCCTACTCGCTGACCCTGCAAGGGCTGGGCATCAGCTGGCTGGGGCTGCGCTCACTGAGGGAACTGGGCAGTGGACTGGCCCTCATCCACCATAACACCCACCTCTGCTTCGTGCACACGGTGCCCTGGGACCAGCTCTTTCGGAACCCGCACCAAGCTCTGCTCCACACTGCCAACCGGCCAGAGGACGAGTGTGTGGGCGAGGGCCTGGCCTGCCACCAGCTGTGCGCCCGAGGGCACTGCTGGGGTCCAGGGCCCACCCAGTGTGTCAACTGCAGCCAGTTCCTTCGGGGCCAGGAGTGCGTGGAGGAATGCCGAGTACTGCAGGGGCTCCCCAGGGAGTATGTGAATGCCAGGCACTGTTTGCCGTGCCACCCTGAGTGTCAGCCCCAGAATGGCTCAGTGACCTGTTTTGGACCGGAGGCTGACCAGTGTGTGGCCTGTGCCCACTATAAGGACCCTCCCTTCTGCGTGGCCCGCTGCCCCAGCGGTGTGAAACCTGACCTCTCCTACATGCCCATCTGGAAGTTTCCAGATGAGGAGGGCGCATGCCAGCCTTGCCCCATCAACTGCACCCACTCCTGTGTGGACCTGGATGACAAGGGCTGCCCCGCCGAGCAGAGAGCCAGCCCTCTGACGTCCATCATCTCTGCGGTGGTTGGCATTCTGCTGGTCGTGGTCTTGGGGGTGGTCTTTGGGATCCTCATCAAGCGACGGCAGCAGAAGATCCGGAAGTACACGATGCGGAGACTGCTGCAGGAAACGGAGCTGGTGGAGCCGCTGACACCTAGCGGAGCGATGCCCAACCAGGCGCAGATGCGGATCCTGAAAGAGACGGAGCTGAGGAAGGTGAAGGTGCTTGGATCTGGCGCTTTTGGCACAGTCTACAAGGGCATCTGGATCCCTGATGGGGAGAATGTGAAAATTCCAGTGGCCATCAAAGTGTTGAGGGAAAACACATCCCCCAAAGCCAACAAAGAAATCTTAGACGAAGCATACGTGATGGCTGGTGTGGGCTCCCCATATGTCTCCCGCCTTCTGGGCATCTGCCTGACATCCACGGTGCAGCTGGTGACACAGCTTATGCCCTATGGCTGCCTCTTAGACCATGTCCGGGAAAACCGCGGACGCCTGGGCTCCCAGGACCTGCTGAACTGGTGTATGCAGATTGCCAAGGGGATGAGCTACCTGGAGGATGTGCGGCTCGTACACAGGGACTTGGCCGCTCGGAACGTGCTGGTCAAGAGTCCCAACCATGTCAAAATTACAGACTTCGGGCTGGCTCGGCTGCTGGACATTGACGAGACAGAGTACCATGCAGATGGGGGCAAGGTGCCCATCAAGTGGATGGCGCTGGAGTCCATTCTCCGCCGGCGGTTCACCCACCAGAGTGATGTGTGGAGTTATGGTGTGACTGTGTGGGAGCTGATGACTTTTGGGGCCAAACCTTACGATGGGATCCCAGCCCGGGAGATCCCTGACCTGCTGGAAAAGGGGGAGCGGCTGCCCCAGCCCCCCATCTGCACCATTGATGTCTACATGATCATGGTCAAATGTTGGATGATTGACTCTGAATGTCGGCCAAGATTCCGGGAGTTGGTGTCTGAATTCTCCCGCATGGCCAGGGACCCCCAGCGCTTTGTGGTCATCCAGAATGAGGACTTGGGCCCAGCCAGTCCCTTGGACAGCACCTTCTACCGCTCACTGCTGGAGGACGATGACATGGGGGACCTGGTGGATGCTGAGGAGTATCTGGTACCCCAGCAGGGCTTCTTCTGTCCAGACCCTGCCCCGGGCGCTGGGGGCATGGTCCACCACAGGCACCGCAGCTCATCTACCAGGAGTG
GCGGTGGGGACCTGACACTAGGGCTGGAGCCCTCTGAAGAGGAGGCCCCCAGGTCTCCACTGGCACCCTCCGAAGGGGCTGGCTCCGATGTATTTGATGGTGACCTGGGAATGGGGGCAGCCAAGGGGCTGCAAAGCCTCCCCACACATGACCCCAGCCCTCTACAGCGGTACAGTGAGGACCCCACAGTACCCCTGCCCTCTGAGACTGATGGCTACGTTGCCCCCCTGACCTGCAGCCCCCAGCCTGAATATGTGAACCAGCCAGATGTTCGGCCCCAGCCCCCTTCGCCCCGAGAGGGCCCTCTGCCTGCTGCCCGACCTGCTGGTGCCACTCTGGAAAGGCCCAAGACTCTCTCCCCAGGGAAGAATGGGGTCGTCAAAGACGTTTTTGCCTTTGGGGGTGCCGTGGAGAACCCCGAGTACTTGACACCCCAGGGAGGAGCTGCCCCTCAGCCCCACCCTCCTCCTGCCTTCAGCCCAGCCTTCGACAACCTCTATTACTGGGACCAGGACCCACCAGAGCGGGGGGCTCCACCCAGCACCTTCAAAGGGACACCTACGGCAGAGAACCCAGAGTACCTGGGTCTGGACGTGCCAGTGTGAACCAGAAGGCCAAGTCCGCAGAAGCCCTGATGTGTCCTCAGGGAGCAGGGAAGGCCTGACTTCTGCTGGCATCAAGAGGTGGGAGGGCCCTCCGACCACTTCCAGGGGAACCTGCCATGCCAGGAACCTGTCCTAAGGAACCTTCCTTCCTGCTTGAGTTCCCAGATGGCTGGAAGGGGTCCAGCCTCGTTGGAAGAGGAACAGCACTGGGGAGTCTTTGTGGATTCTGAGGCCCTGCCCAATGAGACTCTAGGGTCCAGTGGATGCCACAGCCCAGCTTGGCCCTTTCCTTCCAGATCCTGGGTACTGAAAGCCTTAGGGAAGCTGGCCTGAGAGGGGAAGCGGCCCTAAGGGAGTGTCTAAGAACAAAAGCGACCCATTCAGAGACTGTCCCTGAAACCTAGTACTGCCCCCCATGAGGAAGGAACAGCAATGGTGTCAGTATCCAGGCTTTGTACAGAGTGCTTTTCTGTTTAGTTTTTACTTTTTTTGTTTTGTTTTTTTAAAGATGAAATAAAGACCCAGGGGGAG(配列番号38)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号38からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0045】
いくつかの実施形態では、細菌抗原は、Staphylococcus aureusタンパク質である。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下のアミノ酸配列:MKLFAFIFICVKSCSLLFMLNGNPRPEQLNKASEFTGLMDNMRYLYDDKHVSETNIKAQEKFLQHDLLFKINGSKIDGSKILKTEFNNKSLSDKYKNKNVDLFGTNYYNQCYFSADNMELNDGRLIEKTCMYGGVTEHDGNQIDKNNLTDNSHNILIKVYENERNTLSFDISTNKKNITAQEIDYKVRNYLLKHKNLYKFNSSPYETGYIKFIEGNGHSFWYDMMPESGEKFYPTKYLLIYNDNKTVESKSINVEVHLTKK(配列番号39)、又は配列番号39と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を有するウイルス抗原をコードする。したがって、いくつかの実施形態では、第1のポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATGAAGTTATTTGCTTTTATCTTCATATGTGTTAAGTCTTGCAGCTTACTATTTATGTTAAATGGCAATCCTAGACCAGAACAATTGAATAAAGCGAGTGAATTCACTGGTCTAATGGATAATATGAGGTATTTGTATGACGATAAACACGTATCAGAAACAAACATTAAAGCCCAAGAGAAGTTTTTACAACATGATTTATTATTTAAAATAAATGGCTCTAAAATTGATGGTTCTAAAATTTTAAAAACAGAATTTAATAATAAAAGCCTTTCGGATAAATACAAAAATAAAAACGTAGATTTGTTTGGGACAAACTATTATAATCAATGCTATTTTTCAGCGGATAATATGGAATTAAATGATGGTAGACTAATTGAAAAAACGTGTATGTATGGCGGTGTGACCGAGCATGATGGAAATCAAATAGATAAAAATAATCTAACTGATAACTCTCATAATATCTTAATTAAAGTATACGAAAACGAAAGAAACACATTATCTTTTGATATATCTACCAATAAGAAAAACATAACAGCACAAGAAATAGATTATAAAGTTAGAAACTATTTACTTAAGCATAAAAATTTATATAAATTTAATAGTTCGCCTTATGAGACTGGCTATATAAAGTTTATCGAAGGAAATGGTCATTCTTTTTGGTATGATATGATGCCTGAATCTGGTGAAAAATTTTATCCGACTAAATATTTACTAATTTATAATGATAATAAGACAGTTGAGAGTAAATCTATTAATGTAGAAGTTCATTTAACCAAAAAATAA(配列番号40)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号40からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0046】
APC標的化リガンド
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ICAM1又はICAM4を含む。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される。
【0047】
いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ICAM1又はICAM4を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ICAM1であり、以下のアミノ酸配列:ELLCYSELQPQPRYGSQQPPARAARTPGPARGSVPRTWQCPDICVPLKSHPAPGRLRAGDMQHLLPAQVVGHRDPVAKGVAPAWEQPEGVTEQCARRPTNVLFKLPWAVNSNLPHRVLDSRTGGTGTPPLLAASGQEPYPTLPGGGWGTPGQPHRGAAPWGEGAETGASCGGARGHDHGAGEERSPWSQFLVPHTGPAAPRAGAVEHLGPLPAPDLCPASDSPTTCQPPGPRGGHAGDRGLFPGRAVPSLGGPGPPGTGGPEVEPHSHLWQRLLLGQGLSQCDRRGRGHPAADVCSNTGEPEPGDTADSDHLQLSGAQRDSDEARGLRRDRGDSEVGPPSQGDAEWGSSPATGPEGPAPAEGHPRGQRAQLLLLCNPGGGRPAYTQEPDPGASCPVWPPTGREGLSGKLDVARKFPADSNVPGLGEPIARAQVSKGWHFPTAHRGISDCHSRSGHLPLSGQEHSRGGHPQGDRECALPPVDCHHHCGSSRSHNGHCRPQHVPLPPAEDQEIQTTTGPKRDPHETEHTSHASLNLSRDRASSSAFPYWWQWCHTEQSGRHMPCSYTYRPWDAGGQGIVLSQIQQHLGPWYLHTNTRPRISVVTLSQEEGARLKTLMDVKVPDERGSGGGDIAPPGHTTGKYNLLPIGYAEAPQTYRRSGPPTCVASKHKGPHFLTDASLGTAVYPQPLMICIYSFVILPAIYVSFMAKTVSGLTELPVLITFKVTRYSCTGCTLQESAWQKDQMGLGLLIGQPAFPQKEFFYRHKSTIWTGNGYRFRDYPVRPYSSLPPKTDTFVSHLPTHIHFCQCSQHSAVMSGHECPGNMPKLCLVLLSCLHFTGSLHYAAPVSCSDQGPASSGEGGQGIGGLPPSFGSLIRVCVCVYVTSSRSVTQAGVQWCNHGSLQSPFGLKSSHLSLLSSWDHRLTTPHLANLIFFFFPETGSRNIAQTSFVLVNKAFSTA(配列番号3、NM_000201.3)、又は配列番号3と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GAGCTCCTCTGCTACTCAGAGTTGCAACCTCAGCCTCGCTATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACATGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTCCTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGAACCTATCCCGGGACAGGGCCTCTTCCTCGGCCTTCCCATATTGGTGGCAGTGGTGCCACACTGAACAGAGTGGAAGACATATGCCATGCAGCTACACCTACCGGCCCTGGGACGCCGGAGGACAGGGCATTGTCCTCAGTCAGATACAACAGCATTTGGGGCCATGGTACCTGCACACCTAAAACACTAGGCCACGCATCTGATCTGTAGTCACATGACTAAGCCAAGAGGAAGGAGCAAGACTCAAGACATGATTGATGGATGTTAAAGTCTAGCCTGATGAGAGGGGAAGTGGTGGGGGAGACATAGCCCCACCATGAGGACATACAACTGGGAAATACTGAAACTTGCTGCCTATTGGGTATGCTGAGGCCCCACAGACTTACAGAAGAAGTGGCCCTCCATAGACATGTGTAGCATCAAAACACAAAGGCCCACACTTCCTGACGGATGCCAGCTTGGGCACTGCTGTCTACTGACCCCAACCCTTGATGATATGTATTTATTCATTTGTTATTTTACCAGCTATTTATTGAGTGTCTTTTATGTAGGCTAAATGAACATAGGTCTCTGGCCTCACGGAGCTCCCAGTCCTAATCACATTCAAGGTCACCAGGTACAGTTGTACAGGTTGTACACTGCAGGAGAGTGCCTGGCAAAAAGATCAAATGGGGCTGGGACTTCTCATTGGCCAACCTGCCTTTCCCCAGAAGGAGTGATTTTTCTATCGGCACAAAAGCACTATATGGACTGGTAATGGTTACAGGTTCAGAGATTACCCAGTGAGGCCTTATTCCTCCCTTCCCCCCAAAACTGACACCTTTGTTAGCCACCTCCCCACCCACATACATTTCTGCCAGTGTTCACAATGACACTCAGCGGTCATGTCTGGACATGAGTGCCCAGGGAATATGCCCAAGCTATGCCTTGTCCTCTTGTCCTGTTTGCATTTCACTGGGAGCTTGCACTATGCAGCTCCAGTTTCCTGCAGTGATCAGGGTCCTGCAAGCAGTGGGGAAGGGGGCCAAGGTATTGGAGGACTCCCTCCCAGCTTTGGAAGCCTCATCCGCGTGTGTGTGTGTGTGTATGTGTAGACAAGCTCTCGCTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAGTGGTGCAATCATGGTTCACTGCAGTCTTGACCTTTTGGGCTCAAGTGATCCTCCCACCTCAGCCTCCTGAGTAGCTGGGACCATAGGCTCACAACACCACACCTGGCAAATTTGATTTTTTTTTTTTTTCCAGAGACGGGGTCTCGCAACATTGCCCAGACTTCCTTTGTGTTAGTTAATAAAGCTTTCTCAACTGCC(配列番号4)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号4からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0048】
いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ICAM-4であり、以下のアミノ酸配列:ISRAGPGSLARGPLVRAFCHGVSVPSVAAVFFGGRLPGSWERAGTPDAGAKPQGPSRALRDLSALLGAHEPGVRGCAAGEVSAAQLQQQLSPAAEFQPPHPAAARQDAQRAGLGVLPAARREGLELPRALPRDLRRKNTLGHLQDHRLQCSRWATWWPGMEAGSSIPKAWSASPAWIWPTPPTSLLLDPATSGSPSATRASISTAWWSATARHPLHCSLGAPRPQLWPPVPSLPLGSSSLWALRTYASALSPRRKGGCSMPAEREKEEYETIWGNGHTWWLTPVIPALWEAEAGESLEPRSSRPAWTTDPVYAKNTQISLVWWPAPVVPATREAELGGSFEPKSRLQALIVPLHSSLGDRARPCLQKNKNKNKYWRGNPLESIKASLT(配列番号5)、又は配列番号5と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATCTCTAGAGCCGGCCCTGGCTCTCTGGCGCGGGGCCCCTTAGTCCGGGCTTTTTGCCATGGGGTCTCTGTTCCCTCTGTCGCTGCTGTTTTTTTTGGCGGCCGCCTACCCGGGAGTTGGGAGCGCGCTGGGACGCCGGACTAAGCGGGCGCAAAGCCCCAAGGGTAGCCCTCTCGCGCCCTCCGGGACCTCAGTGCCCTTCTGGGTGCGCATGAGCCCGGAGTTCGTGGCTGTGCAGCCGGGGAAGTCAGTGCAGCTCAATTGCAGCAACAGCTGTCCCCAGCCGCAGAATTCCAGCCTCCGCACCCCGCTGCGGCAAGGCAAGACGCTCAGAGGGCCGGGTTGGGTGTCTTACCAGCTGCTCGACGTGAGGGCCTGGAGCTCCCTCGCGCACTGCCTCGTGACCTGCGCAGGAAAAACACGCTGGGCCACCTCCAGGATCACCGCCTACAGTGTTCCCGGTGGGCTACTTGGTGGTGACCCTGAGGCATGGAAGCCGGGTCATCTATTCCGAAAGCCTGGAGCGCTTCACCGGCCTGGATCTGGCCAACGTGACCTTGACCTACGAGTTTGCTGCTGGACCCCGCGACTTCTGGCAGCCCGTGATCTGCCACGCGCGCCTCAATCTCGACGGCCTGGTGGTCCGCAACAGCTCGGCACCCATTACACTGATGCTCGCTTGGAGCCCCGCGCCCACAGCTTTGGCCTCCGGTTCCATCGCTGCCCTTGTAGGGATCCTCCTCACTGTGGGCGCTGCGTACCTATGCAAGTGCCTAGCTATGAAGTCCCAGGCGTAAAGGGGGATGTTCTATGCCGGCTGAGCGAGAAAAAGAGGAATATGAAACAATCTGGGGAAATGGCCATACATGGTGGCTGACGCCTGTAATCCCAGCACTTTGGGAGGCCGAGGCAGGAGAATCGCTTGAGCCCAGGAGTTCGAGACCAGCCTGGACAACATAGTGAGACCCCGTCTATGCAAAAAATACACAAATTAGCCTGGTGTGGTGGCCCGCACCTGTGGTCCCAGCTACCCGGGAGGCTGAGTTGGGAGGATCCTTTGAGCCCTGAAAGTCGAGGTTGCAGTGAGCCTTGATCGTGCCACTGCACTCCAGCCTGGGGGACAGAGCACGACCCTGTCTCCAAAAATAAAATAAAAATAAAAATAAATATTGGCGGGGGAACCCTCTGGAATCAATAAAGGCTTCCTTAACCA(配列番号6)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号6からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0049】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、FGF10であり、以下のアミノ酸配列:GFPRDLEVERRAQQNASRQPPPKQEVAFGRLHINRHHQKEKGRRRQQRLGSCLQFQLQRDTFVASRLGLCREGPEGANRRGAQMSSCTPTPPTLGFVHRPVICFSDLFCIHGEERSEEENKVTPGGSEELWPTPPVPTAAATHVHCSPDWRDAGSGSEDGARTGSRSFLEVMDVGALASGQIRTQRELSRSHHLQLSLCLAAGLTLPVCSFDNFQCREFQYNVEMDTDTLCLSLSPPAGLLLLLLVALFGVFVPCHLPSSWSGHGVTGGHQLLFFLLVLLLSFQCGKACAELQSPPRRCPLEKAVLLHQVLSHDEERQGQRDQERLSVQCPGDNISGNRSCCRQSHQQQLLLSHEQEGETLWLKRVQRLAERENRGKWIQHLCIFLAAQWQANVCGIEWKRSSQERTKNKKEKHLCSLPPHDDPNIEENTVGGCSTTNDSLDRKRWYPHRLLKRQRHSPEFSLFKGRKALDVFVLTADIQSSFHLCVIVSCLIIKIEASQVWMEVILKTMLWWGLGFFCLFVCFIFKFLFLNFDRTRTWNTLLNDLWESYLWNMNTYQRLSLLIQAFNEQDTQAFTGKHLGHIICTTKGALGVAPWKNWIRFTNINIVVNCPNTNSMVCLCILSPSFSISFVIYLIGCISFGVRVSSMLPSGLPFLSLSLSLSLSLSLSLSLSLSLSLSPSLSLPPPSGTIRTFMTKCFKTLANTSEIGDEIKEAVMPHALSVDLICTSAIKNTSNDYGRILLIMQISVIICQHISVQRDPYLKMKAKFSFIVLFHLQEYTKRRKNELLDHCWVFFFLLMMACHRSQWQMMQRLSAHTALCKAHRILLPQKNQKRKFGMKCNSPWGLTANISYMSNHILTPVQAEWSSLYRTTTLFSVNLKCSRRFHNITTLKFIFLEKVKAVCKCAMHPRSVDHINTALFAVSVVILRMETLLKKFRITLRYCCSLLSCLEMSVYFHCLDSVFEQKDSPNVSVYNLTSREASDLSSSNLFVLMLDQYKSAFNIIIKGSVILKLAFFFRMFLQVIIYDFFEKLAFQEKSTEAQCFGLWVVAFCGVLSTCFLTNGIFKMYTSCGWILYVRVLVTESKGSNVMNLKNVSFFTFILKLYLTHDHGPPTTKIKCLGRQTIVFSDKGNSKCRRWILISLCHLDYRDYVTVIIIVLKTLNSFQNVSKLAESKNRKHLSPSPTLHFPLYASQRIQNEFGKERGDSSSLHICLILIENSGPFYNYKKRSSVLNFVCKKKRFCEFCLRGKCGHCSTMLKCVSHGYRAYDCHQTPRYRIASLLLILKRLNSVYYVTFKRQKCWEKRIKVLFLFYFLSFFSSLFFSFLFFFFSFFFLFFFYPKTIPGNEISSRAVCMAGCGMPHSPKQQQQKKKLLKHLGFFNVLHVAGYPYPNNNQMLSGSPNYSGPPSLHSGRRMNKQGWLVQQEALGGKPGAANVDFQGMEKTNEFDLKS(配列番号7)、又は配列番号7と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GGCTTTCCAAGGGACTTGGAGGTGGAGAGAAGGGCCCAACAAAACGCCAGCCGCCAGCCGCCCCCCAAACAAGAAGTGGCTTTCGGAAGACTTCACATCAACAGGCACCACCAAAAAGAGAAAGGAAGGAGAAGACAACAGCGCCTGGGCAGCTGCCTCCAGTTCTGACAACTCCAAAGAGACACTTTTTAAGTGGCCAGCAGGCTGGGACTCTGCAGAGAAGGACCAGAAGGTGCCAACCGCAGAGGGGCGCAGATGTCTTCCTGCACCCCCACCCCACCCACTTTGGGTTTTGTTCACCGTCCTGTCATCTGTTTTTCAGACCTCTTTTGCATCTAACATGGTGAAGAAAGGAGTGAAGAAGAGAACAAAGTAACCCCCGGGGGGAGCGAAGAGCTCTGGTGACCGACACCACCAGTTCCTACTGCCGCGGCCACCCACGTCCACTGTTCACCCTGAGACTGGAGAGACGCAGGCAGCGGATCCGAGGACGGAGCGAGGACAGGCAGCCGGTCCTTCCTAGAAGTTATGGATGTTGGTGCACTCGCTTCTGGCCAGATCCGTACCCAGAGGGAGCTATCCAGAAGCCACCACCTCCAGCTGTCTCTCTGCCTCGCAGCAGGTCTTACCCTTCCAGTATGTTCCTTCTGATGAGACAATTTCCAGTGCCGAGAGTTTCAGTACAATGTGGAAATGGATACTGACACATTGTGCCTCAGCCTTTCCCCACCTGCCGGGCTGCTGTTGCTGCTTCTTGTTGCTCTTTTTGGTGTCTTCGTTCCCTGTCACCTGCCAAGCTCTTGGTCAGGACATGGTGTCACAGGAGGCCACCAACTGCTCTTCTTCCTCCTCGTCCTTCTCCTCTCCTTCCAGTGCGGGAAGGCATGTGCGGAGCTACAATCACCTCCAAGGAGATGTCCGCTGGAGAAGGCTGTTCTCCTTCACCAAGTACTTTCTCACGATTGAGAAGAACGGCAAGGTCAGCGGGACCAAGAATGAAGACTGTCCGTACAGTGTCCTGGAGATAACATCAGTGGAAATCGGAGTTGTTGCCGTCAAAGCCATCAACAGCAACTATTACTTAGCCATGAACAAGAAGGGGAAACTCTATGGCTCAAAAGAGTTTAACAACGACTGTAAGCTGAAAGAGAGAATAGAGGAAAATGGATACAACACCTATGCATCTTTTAACTGGCAGCACAATGGCAGGCAAATGTATGTGGCATTGAATGGAAAAGGAGCTCCCAGGAGAGGACAAAAAACAAGAAGGAAAAACACCTCTGCTCACTTCCTCCCCATGACGATCCAAACATAGAAGAAAACACTGTTGGTGGATGCAGTACAACCAATGACTCTTTGGACAGAAAGAGATGGTATCCTCACTGAAGACTGTAGCTCAAAAGGCAAAGACATAGCCCTGAATTCAGCTTGTTTAAAGGAAGGAAGGCTTTGGATGTTTTTGTACTCACTGCTGACATACAAAGTTCTTTTCACTAGCTCTGTGTCATTGTGTCATGCCTTATAATCAAGATAGAGGCAAGTCAAGTTTGGATGGAAGTTATCCTCAAGTGAACAATGTTGTGGTGGGGGCTGGGCTTTTTTTGTTTGTTTGTTTGTTTCATTTTTAAGTTTTTGTTTTTGAACTTCTGAGATAGAACTTAAAGAACATGGAACACTCTGTTGAATGATCTTTGGGAAAGTTATTTATGGAATATGAACACATATCAAAGACTTTCATTGCTCATTCAAGCCTGATGATTCAATGAGCAGTAAGACACGCAAGCATTTACTGGAAAGCACTTGGGTCATATCATATGCACAACCAAAGGAGCTTTGGGTGTGGCACCATGGAAGAATTGGATCAGATTTACAAATATAAACATAGTAGTATGAAACTGTCCTAATACAAATAGTATGGTATGCTTGTGCATTCTGTCTCCATCCTTTTCTATTTCCTTCTAAGTTATTTATTTAATAGGATGTTAAATATCTTTTGGGGTTTAAAGAGTATCTTCAATGCTGCCCTCTGGTTTACCTTTTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCCCTCTCTCTCCCTCCCTCCCCCCTCTGGCACCATACGCACATTCATGACAAAGTGTTTTAAAACCTTGGCAAACACTTCAGAAATAGGAGATGAGATCAAGGAAGCAGTATGAATGCCCCATGCGCTCTCAGTTGACTTAATTTGCACTTCTGCAATAAAAAACACCAGCAATGACTATGGCAGAATTCTGCTATAGATTATGTAACAGATATCTGTCATCATTTGTCAACATATATCAGTCCAGAGGGACCCTTACCTTAAAATGTAGAAGGCCAAATTCTCTTTCATTGTCTTATTTCATCTTCAAGAATATACTAAAAGAAGAAAAAATGAATTGTTAGACTAACATTGTTGGGTTTTTTTTTTCCTACTGATGATGGCTTGCCACAGGTCACAATGGCAAATGATGCAAAGGTTATCTGCACATACATGAGCCCTTTGTAAGGCCCACAGAATCCTTCTCCCTCAAAAGAACCAAAAAAGGAAATTTGGTATGAAGTGCAACTCTCCCTGGGGCTTAACCTGAGCAAATATATCCTAGTATATGAGTAACCATATACTGACACCTGTTCAAGCTGAATGGTCTAGTCTTTACAGAACCACATAAACCTTGTTTTCTGTAAATTTAAAATGTTCTAGAAGGTTCCATAATATAACCACATTGAAATTCATTTTCTTAGAAAAGGTATAGAAAGCAGTATGTAAGTGTGCCATGCACCCTCGCTCTGTAGATCACTAAATAAACACGTAAGCCTTATTTGCAGTGTCTGTAGTGATTTTAAGAATGTAGGAAACACTTCTAAAAAAATTTTAAAGGATAACTCTGAGATGATATTGATGCTGCAGTCTTCTTTCTTGTTTGGAAATGTCTGTTTATTTTCATTGTTTGGATTCAGTATTTTGATAGGAACAAAAAGACTCACCAAATGTGTCTGTTTACTAAAATTTAACCTCTAGAGAGGCTAGTGATTTGTGATCCTCTTCTAACTTATTTGTGCTGATGCTTGACCAGTACAAATCAGCTTTTTAAAATATTATTATTAAAGGTTGATCAGTCATTTTAAAATTGGCCTTTTTTTTCAGAATGTTCCTACAGGTCATAATTTATGATTTCTTTGAAAAGCTTGCATTTCAAGAGAAAAGCACAGAGGCACAATGCTTTGGTTTATGGGTATAGGTTGCATTTTGTGGTGTTCTTTCAACTTGTTTTCTGACAAATGGGATTTTTAAAATGTATACTTCTTGTGGTTGGA
TTCTGTATGTTAGAGTTTAATTGGTAACTGAGTCTAAAGGCTCTAATGTAATGAATCTCTAGAAGAACTAGGTATCTTTTTTTACTTTTATTTTAAAATAATAATTATACCTGACACATGACCATGGACCACCCACAACCAAAATTAAATGTTTGGGGAGACAAACTATAGTATTCAGTGACAAGGGTAACAGCAAATAGTGCAGACGTTGGATTCTTATTTCACTTTGCCATTTAGATTACTAAAGAGACTATGTGTAAACAGTCATCATTATAGTACTCAAGACATTAAACAGCTTCTAGCAAAATGTATCAAAGCTTGCAGAGTCCAAAAATAGAAAACATCTTTCCCCCTCTCCCACCCTACATTTCCCCCTGTATGCATCCTAACAGAGATAAATACAAAATGAATTCGGTAAGGAGAGAGGAGATTCTTCTTCACTTCATATTTGTTTGATATTAATAGAGAATTCTGGTCCTTTTTACAACTACTGAAAGAAAAGAAGTTCAGTCCTAAATTTTGTGTGTTAAAAAAAGAAAAGATTTTGTGAGTTCTGCCTCCGTGGGAAGTGTGGGCACTGCTCCACCATGCTGAAGTGTGTTAGCCACGGGTACAGAGCATATGACTGTTGACATCAGACTCCTTAAAGATACAGAATCGCTTCCCTCCTCCTAATCCTCAAAAGGCTGAACAGTGTATATTATGTTACATTTAAATAAAGGCAATAAAAATGCTGGGAAAAGAGAATAAAAGTACTGTTCTTATTTTATTTCCTTTCTTTCTTCTCTTCTCTTTTCTTTTCTTTCCTTTTCTTTTTTTTTTCCTTTTTTTTTCTTTTTTTTTTTTATTAGCCTAAAACTATACCTGGTAATGAGATCAGCTCCAGGGCTGTGTGCATGGCAGGATGTGGTTAAATGCCCCACAGCCCCAAACAACAACAACAGAAAAAAAAATTACTCAAACATTTGTAAGGTTTCTTTAATGTTTTACATGTGTGAGCCGGCTATCCTTACCCTAATAACAACCAAATGCTTTCGGGTTCTCCTAACTACTCAGGTCCACCTAGTTTACACAGTGGATAAAGAAGAATGAATTGAAAACAAGGATGGCTTGTGCAACAATGAGAGGCTCTTGGAGGAAAGCCAGGAGCTGCAAACGTTGACTTCCAGGGCATGGAAAAGACCAACGAATTTGATTTGAAAAGT(配列番号8)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号8からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0050】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、FGF7であり、以下のアミノ酸配列:THTHKHTRAHTQRENPSACFMETIMILLENFSAEKFVATVERLKLHQADNRHGILIYPAVSNKTKVKQTASQQLNLLRTVFMRIYQQSYLRRNPVLLSGTKRIRLTIWKEQLLFLKSIYNSQIGRGQPRSNNQLKIHFHYVIHEHPEHYTIMHKWILTWILPTLLYRSCFHIICLVGTISLACNDMTPEQMATNVNCSSPERHTRSYDYMEGGDIRVRRLFCRTQWYLRIDKRGKVKGTQEMKNNYNIMEIRTVAVGIVAIKGVESEFYLAMNKEGKLYAKKECNEDCNFKELILENHYNTYASAKWTHNGGEMFVALNQKGIPVRGKKTKKEQKTAHFLPMAITLHMVYKEPVPAGRFLVDCFLSSQNFLSFYFLVIKKGWKTTEKLIKLDLCIYVCFKTLHRKIKVYTKIRFSNRLKIVKLVVQSCQFFSINLPLRVCILSDNDYLNIPICLNGCYNNNNTDVVIGISDLQASGRICQIIKPHLWKMSSILNAFKIIIYLNSNQKKNSQKNYYESQNRFNKSTGLEHAYTYKEQNFCCSSGKGIAKRMFPKILYIRQQLMIILYFILLATKHFINPQSKIEKSLSFFQVTSIFVFIFGNMAFNNVLPTNNHAFFLWLQHTLFVVFELYCFVIVYVIYKKKTLISCICFICFFRNNKTVWLNGKFPSLFLTLSLAHSTWASKSWKADKNKSLKQCLQMSHTEQYKYVKNLSPHILANLDHISKIITNISIYRILKLEYIMHGKISYFKTMYIIFSNLKSLLFKRWQHKLFSCMARAQCPKKMQLRIRGPECHEGLRSAYRQDYYKDEFPLQKSFIGRSWHFICSPMGGQYLSNLKGMLTTVVLISKYLSFKSLYINSIWYIYRELYEKARSTKTIDSFNFPVVDLYDQDVENKELPFLRYTLGREHEWYSELSPDSRTLLARFGQASVTVVLAYGQRRTFFICVSLVPSRLSVHNQFSVIHMFIDKRKYTLKLIFILKGNMTIQKFKKCIYINTSYVRTKCSLSMELYFHQITQCIRQNQHLVVNPFLVVVTKRLLEICTLIICFSPIFKFIMQILENKICSSYTPLEFNIKTVRGLHPSYSFVVEIEILIHLRSRSWVDIQLSQESRSVSTCFLLFDYYYLMVFGMFLFFISVEIPLHLYTNVTMSWQCTSYTMTNLYCDDLTQKEKRNYVVFNSDSYSPFVYEWKALCKIYIAEAFKCSLKDKIKYMSFQLEKKKLKHEMITKVNKRYFQSSEQNILTAIIIIIKIKTIVIVSLVGYKFNLMTEEKGCWRILRVSISSLLFWFSRLPKNIKMCEGTLKQSYNKKNSKTVPLTIFYNFSNSRGVKEVRECKGGPPQTEHFFSLKTHVIFASYSIIYLWLRYDNVCNTPVSKIDTSELAGLIMQFGLHPYSTAIYLSVNETQKIICLPSNFTHKHKAKENQNSNSPRIGVITKIFNSQYGLLANQNTSLIHRNGCRPLLTCGYHFYDHPKTELGKYLLTGLSGLNSQYVSYEIAHNFMCNYFSIVVSYSLFHFCTVFIQPSCCFQRSLVPSGTHILPPILFMVCQENLLSLELKNLTGSKKYSPSLFPITSDFSILKLHFSRNQIFTLIWEDASYVFLLLPGYHVVAFSKFLSLNLEPIKIYFLSFIFLKCEMKITFHLKTLLLMNPSMCLSIAVQIKTWLET(配列番号9)、又は配列番号9と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ACACACACACACAAGCACACACGCGCTCACACACAGAGAGAAAATCCTTCTGCCTGTTGATTTATGGAAACAATTATGATTCTGCTGGAGAACTTTTCAGCTGAGAAATAGTTTGTAGCTACAGTAGAAAGGCTCAAGTTGCACCAGGCAGACAACAGACATGGAATTCTTATATATCCAGCTGTTAGCAACAAAACAAAAGTCAAATAGCAAACAGCGTCACAGCAACTGAACTTACTACGAACTGTTTTTATGAGGATTTATCAACAGAGTTATTTAAGAGGAATCCTGTGTTGTTATCAGGAACTAAAAGGATAAGGCTAACAATTTGGAAAGAGCAACTACTCTTTCTTAAATCAATCTACAATTCACAGATAGGAAGAGGTCAATGACCTAGGAGTAACAATCAACTCAAGATTCATTTTCATTATGTTATTCATGAACACCCGGAGCACTACACTATAATGCACAAATGGATACTGACATGGATCCTGCCAACTTTGCTCTACAGATCATGCTTTCACATTATCTGTCTAGTGGGTACTATATCTTTAGCTTGCAATGACATGACTCCAGAGCAAATGGCTACAAATGTGAACTGTTCCAGCCCTGAGCGACACACAAGAAGTTATGATTACATGGAAGGAGGGGATATAAGAGTGAGAAGACTCTTCTGTCGAACACAGTGGTACCTGAGGATCGATAAAAGAGGCAAAGTAAAAGGGACCCAAGAGATGAAGAATAATTACAATATCATGGAAATCAGGACAGTGGCAGTTGGAATTGTGGCAATCAAAGGGGTGGAAAGTGAATTCTATCTTGCAATGAACAAGGAAGGAAAACTCTATGCAAAGAAAGAATGCAATGAAGATTGTAACTTCAAAGAACTAATTCTGGAAAACCATTACAACACATATGCATCAGCTAAATGGACACACAACGGAGGGGAAATGTTTGTTGCCTTAAATCAAAAGGGGATTCCTGTAAGAGGAAAAAAAACGAAGAAAGAACAAAAAACAGCCCACTTTCTTCCTATGGCAATAACTTAATTGCATATGGTATATAAAGAACCAGTTCCAGCAGGGAGATTTCTTTAAGTGGACTGTTTTCTTTCTTCTCAAAATTTTCTTTCCTTTTATTTTTTAGTAATCAAGAAAGGCTGGAAAACTACTGAAAAACTGATCAAGCTGGACTTGTGCATTTATGTTTGTTTTAAGACACTGCATTAAAGAAAGATTTGAAAAGTATACACAAAAATCAGATTTAGTAACTAAAGGTTGTAAAAAATTGTAAAACTGGTTGTACAATCATGATGTTAGTAACAGTAATTTTTTTCTTAAATTAATTTACCCTTAAGAGTATGTTAGATTTGATTATCTGATAATGATTATTTAAATATTCCTATCTGCTTATAAAATGGCTGCTATAATAATAATAATACAGATGTTGTTATATAAGGTATATCAGACCTACAGGCTTCTGGCAGGATTTGTCAGATAATCAAGCCACACTAACTATGGAAAATGAGCAGCATTTTAAATGCTTTCTAGTGAAAAATTATAATCTACTTAAACTCTAATCAGAAAAAAAATTCTCAAAAAAACTATTATGAAAGTCAATAAAATAGATAATTTAACAAAAGTACAGGATTAGAACATGCTTATACCTATAAATAAGAACAAAATTTCTAATGCTGCTCAAGTGGAAAGGGTATTGCTAAAAGGATGTTTCCAAAAATCTTGTATATAAGATAGCAACAGTGATTGATGATAATACTGTACTTCATCTTACTTGCCACAAAATAACATTTTATAAATCCTCAAAGTAAAATTGAGAAATCTTTAAGTTTTTTTCAAGTAACATAATCTATCTTTGTATAATTCATATTTGGGAATATGGCTTTTAATAATGTTCTTCCCACAAATAATCATGCTTTTTTCCTATGGTTACAGCATTAAACTCTATTTTAAGTTGTTTTTGAACTTTATTGTTTTGTTATTTAAGTTTATGTTATTTATAAAAAAAAAACCTTAATAAGCTGTATCTGTTTCATATGCTTTTAATTTTAAAGGAATAACAAAACTGTCTGGCTCAACGGCAAGTTTCCCTCCCTTTTCTGACTGACACTAAGTCTAGCACACAGCACTTGGGCCAGCAAATCCTGGAAGGCAGACAAAAATAAGAGCCTGAAGCAATGCTTACAATAGATGTCTCACACAGAACAATACAAATATGTAAAAAATCTTTCACCACATATTCTTGCCAATTAATTGGATCATATAAGTAAAATCATTACAAATATAAGTATTTACAGGATTTTAAAGTTAGAATATATTTGAATGCATGGGTAGAAAATATCATATTTTAAAACTATGTATATTTAAATTTAGTAATTTTCTAATCTCTAGAAATCTCTGCTGTTCAAAAGGTGGCAGCACTGAAAGTTGTTTTCCTGTTAGATGGCAAGAGCACAATGCCCAAAATAGAAGATGCAGTTAAGAATAAGGGGCCCTGAATGTCATGAAGGCTTGAGGTCAGCCTACAGATAACAGGATTATTACAAGGATGAATTTCCACTTCAAAAGTCTTTCATTGGCAGATCTTGGTAGCACTTTATATGTTCACCAATGGGAGGTCAATATTTATCTAATTTAAAAGGTATGCTAACCACTGTGGTTTTAATTTCAAAATATTTGTCATTCAAGTCCCTTTACATAAATAGTATTTGGTAATACATTTATAGATGAGAGTTATATGAAAAGGCTAGGTCAACAAAAACAATAGATTCATTTAATTTTCCTGTGGTTGACCTATACGACCAGGATGTAGAAAACTAGAAAGAACTGCCCTTCCTCAGATATACTCTTGGGAGAGAGCATGAATGGTATTCTGAACTATCACCTGATTCAAGGACTTTGCTAGCTAGGTTTTGAGGTCAGGCTTCAGTAACTGTAGTCTTGTGAGCATATTGAGGGCAGAGGAGGACTTAGTTTTTCATATGTGTTTCCTTAGTGCCTAGCAGACTATCTGTTCATAATCAGTTTTCAGTGTGAATTCACTGAATGTTTATAGACAAAAGAAAATACACACTAAAACTAATCTTCATTTTAAAAGGGTAAAACATGACTATACAGAAATTTAAATAGAAATAGTGTA
TATACATATAAAATACAAGCTATGTTAGGACCAAATGCTCTTTGTCTATGGAGTTATACTTCCATCAAATTACATAGCAATGCTGAATTAGGCAAAACCAACATTTAGTGGTAAATCCATTCCTGGTAGTATAAGTCACCTAAAAAAGACTTCTAGAAATATGTACTTTAATTATTTGTTTTTCTCCTATTTTTAAATTTATTATGCAAATTTTAGAAAATAAAATTTGCTCTAGTTACACACCTTTAGAATTCTAGAATATTAAAACTGTAAGGGGCCTCCATCCCTCTTACTCATTTGTAGTCTAGGAAATTGAGATTTTGATACACCTAAGGTCACGCAGCTGGGTAGATATACAGCTGTCACAAGAGTCTAGATCAGTTAGCACATGCTTTCTACTCTTCGATTATTAGTATTATTAGCTAATGGTCTTTGGCATGTTTTTGTTTTTTATTTCTGTTGAGATATAGCCTTTACATTTGTACACAAATGTGACTATGTCTTGGCAATGCACTTCATACACAATGACTAATCTATACTGTGATGATTTGACTCAAAAGGAGAAAAGAAATTATGTAGTTTTCAATTCTGATTCCTATTCACCTTTTGTTTATGAATGGAAAGCTTTGTGCAAAATATACATATAAGCAGAGTAAGCCTTTTAAAAATGTTCTTTGAAAGATAAAATTAAATACATGAGTTTCTAACAATTAGAAAAGAAAAAATTAAAACATGAAATGATAACAAAAGTAAACAAAAGATACTTTCAAAGCAGTGAACAAAACATTTTGACATAAGCCATAATATAAATTATAATATAAAAAATAAAAACCATAGTATAAATTGTCAGCCTTTGAGTTGGCTACAAATTCAATTTAATGACAGAAGAGAAGGGATGCTGGAGGTAAATTCTTAGGGTTTCTATCTCATAGAGTTTGCTCTTCTGGTTCTCTAGACTGCCAAAGAACATAAAGATGTGCGAGGGGACCTAGCTGTAGTAAAAGCAATCCTATAACAAGAAAAACTCTAAAACAGTGCCCCTTACGATTTTCTACTGAAATTTCTCTAATAGTAGAGGTGTAAAATAAGAAGTTAGAGAATAATGCAAAGGGGGCCCACCACAGACGGAACATTTCTTTTCTCTTAAGACTCATGTGATTTTTGCATCTTACTCCATAATATATTTGTGGTTGCGTTAATATGACAATGTCTGCAATTAAACACCAGTAAGCAAAATTGATACATCAGAATGACTTGCAGGGCTTATCATGCAGTTTGGTTTACATCCCTACTCCACTGCCATTTACTTGAGCGTGAATGAGACACAAAAGATTATTTGCCTCCCATAATCCAACTTTACACATAAATAACACAAGGCTAAAGAAAACCAGAACTCAAATTCACCACGCATAGGAGTGATAACAAAAATATTTAACAGTCAGTATGGGTGATTACTGGCCAATCAGAATACATCACTGATACATCGAAATGGATGCAGGCCACTATGACTAACTTGTGGGTATCATTTCTATGATCACCCTAAAACAGAGTTGGGAAAATATCTATTAACTGGTCTCTCTGGTTTGAATTCTCAATATGTATCTTAATATGAAATAGCTCATTAAAACTTCATGTGTAACTATTTCAGCATTGTTGTCAGCTACTCTTTATTCCACTTCTGTACAGTATTTATTCAACCAAGCTGCTGCTTTCAATGAAGGTCACTTGTTCCTTCAGGGACACATATACTCCCACCTATCCTTTAATTTTGAATGGTTTGTCAGGAAAATTTACTTTCTCTTGAGTTGAAAAACTTGACAGGAAGCAAGAAATAATACAGTCCTAGCCTCTTTCCAATAACATCTGATTTCTCCATTCTCAAACTACACTTCTCAAGGAACCAGATATTTACTCTCATCTGGGAAGATGCCTCTTATGTTTTCCTTTTACTTCCTGGTTATCATGTGGTTGCATTTTCCAAGTTCTTATCATTGAATTTATGAGAGCCTATCAAAATTTATTTTCTTTCATTTATATTCTAATAATTGAAATGTGAGATGAAAATAACATTTCACTTATGAAAAACCCTTCTCTTGATGAATCCTTCCATGTGTTAGTTATCTATTGCTGTGTAACAAATTAAAACTTAATGGCTTGAAACAAA(配列番号10)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号10からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0051】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、KRT14であり、以下のアミノ酸配列:TRAPSLHSANCSLAHLPPLHHDHLQPPVHLLQLHEGLLRHRGRHRGRLQPHLLRPGRRVLPRPQHLRGRPVCLILPLLLWGSLRAGGRLWRWLQQQQQQLWWLWGRIWWWPWCWLGWWLWWWLCWWWASGGQEGDHAEPQPPGLLPGQGACSGGGQRRPGSEDPLVPEAAACDQRLQSLLQDHGPEEQDSHSHSGQCQCPSADQCPSGRGLPHQVDRVEPAHECGSRHQWPAQGAGRTDPGQSPGDADEPEGGAGLPEEEPRGGDECPERPGGWRCQCGDGRCTWRGPEPHSERDAPVEDGREEPQGCRGMVLHQDRGAEPRGGHQQRAGAERQERDLGAPAHHAEPGDAAVPAQHESIPGEQPGGDQRSLLHAAGPDPGDDWQRGGAAGPAPLRDGAAEPGVQDPAGREDAAGAGDRHLPPPAGGRGRPPLLLPVLLWIAVIQRCDLLQPPNPHQGHGCARWQGGVHPRAGPSHQELRLPSPAQAEAPRVDTDPTGRSPLLPKHFTAGPCFTLTPSWQSIQLHYLSCI(配列番号11)、又は配列番号11と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ACCCGAGCACCTTCTCTTCACTCAGCCAACTGCTCGCTCGCTCACCTCCCTCCTCTGCACCATGACCACCTGCAGCCGCCAGTTCACCTCCTCCAGCTCCATGAAGGGCTCCTGCGGCATCGGGGGCGGCATCGGGGGCGGCTCCAGCCGCATCTCCTCCGTCCTGGCCGGAGGGTCCTGCCGCGCCCCCAGCACCTACGGGGGCGGCCTGTCTGTCTCATCCTCCCGCTTCTCCTCTGGGGGAGCCTGCGGGCTGGGGGGCGGCTATGGCGGTGGCTTCAGCAGCAGCAGCAGCAGCTTTGGTAGTGGCTTTGGGGGAGGATATGGTGGTGGCCTTGGTGCTGGCTTGGGTGGTGGCTTTGGTGGTGGCTTTGCTGGTGGTGATGGGCTTCTGGTGGGCAGTGAGAAGGTGACCATGCAGAACCTCAATGACCGCCTGGCCTCCTACCTGGACAAGGTGCGTGCTCTGGAGGAGGCCAACGCCGACCTGGAAGTGAAGATCCGTGACTGGTACCAGAGGCAGCGGCCTGCTGAGATCAAAGACTACAGTCCCTACTTCAAGACCATTGAGGACCTGAGGAACAAGATTCTCACAGCCACAGTGGACAATGCCAATGTCCTTCTGCAGATTGACAATGCCCGTCTGGCCGCGGATGACTTCCGCACCAAGTATGAGACAGAGTTGAACCTGCGCATGAGTGTGGAAGCCGACATCAATGGCCTGCGCAGGGTGCTGGACGAACTGACCCTGGCCAGAGCTGACCTGGAGATGCAGATTGAGAGCCTGAAGGAGGAGCTGGCCTACCTGAAGAAGAACCACGAGGAGGAGATGAATGCCCTGAGAGGCCAGGTGGGTGGAGATGTCAATGTGGAGATGGACGCTGCACCTGGCGTGGACCTGAGCCGCATTCTGAACGAGATGCGTGACCAGTATGAGAAGATGGCAGAGAAGAACCGCAAGGATGCCGAGGAATGGTTCTTCACCAAGACAGAGGAGCTGAACCGCGAGGTGGCCACCAACAGCGAGCTGGTGCAGAGCGGCAAGAGCGAGATCTCGGAGCTCCGGCGCACCATGCAGAACCTGGAGATTGAGCTGCAGTCCCAGCTCAGCATGAAAGCATCCCTGGAGAACAGCCTGGAGGAGACCAAAGGTCGCTACTGCATGCAGCTGGCCCAGATCCAGGAGATGATTGGCAGCGTGGAGGAGCAGCTGGCCCAGCTCCGCTGCGAGATGGAGCAGCAGAACCAGGAGTACAAGATCCTGCTGGACGTGAAGACGCGGCTGGAGCAGGAGATCGCCACCTACCGCCGCCTGCTGGAGGGCGAGGACGCCCACCTCTCCTCCTCCCAGTTCTCCTCTGGATCGCAGTCATCCAGAGATGTGACCTCCTCCAGCCGCCAAATCCGCACCAAGGTCATGGATGTGCACGATGGCAAGGTGGTGTCCACCCACGAGCAGGTCCTTCGCACCAAGAACTGAGGCTGCCCAGCCCCGCTCAGGCCTAGGAGGCCCCCCGTGTGGACACAGATCCCACTGGAAGATCCCCTCTCCTGCCCAAGCACTTCACAGCTGGACCCTGCTTCACCCTCACCCCCTCCTGGCAATCAATACAGCTTCATTATCTGAGTTGCATAA(配列番号12)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号12からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0052】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CD2であり、以下のアミノ酸配列:SLTSVPFARAQNQKRKPTPKMSFPCKFVASFLLIFNVSSKGAVSKEITNALETWGALGQDINLDIPSFQMSDDIDDIKWEKTSDKKKIAQFRKEKETFKEKDTYKLFKNGTLKIKHLKTDDQDIYKVSIYDTKGKNVLEKIFDLKIQERVSKPKISWTCINTTLTCEVMNGTDPELNLYQDGKHLKLSQRVITHKWTTSLSAKFKCTAGNKVSKESSVEPVSCPEKGLDIYLIIGICGGGSLLMVFVALLVFYITKRKKQRSRRNDEELETRAHRVATEERGRKPHQIPASTPQNPATSQHPPPPPGHRSQAPSHRPPPPGHRVQHQPQKRPPAPSGTQVHQQKGPPLPRPRVQPKPPHGAAENSLSPSSNKRKLSFSIKSTVDFCPPDVHIRTSMRCFLCAEHCHLLRLWATATSASSNSAMWSTSGVFGLLRELHHTSKEKQYKCDCKNGRGPSTEILEISCPLSGHVMRIKLVCLGLTTSSLSAETLEFLMCPGGHLPTILVKVKKLL(配列番号13)、又は配列番号13と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:AGTCTCACTTCAGTTCCTTTTGCATGAAGAGCTCAGAATCAAAAGAGGAAACCAACCCCTAAGATGAGCTTTCCATGTAAATTTGTAGCCAGCTTCCTTCTGATTTTCAATGTTTCTTCCAAAGGTGCAGTCTCCAAAGAGATTACGAATGCCTTGGAAACCTGGGGTGCCTTGGGTCAGGACATCAACTTGGACATTCCTAGTTTTCAAATGAGTGATGATATTGACGATATAAAATGGGAAAAAACTTCAGACAAGAAAAAGATTGCACAATTCAGAAAAGAGAAAGAGACTTTCAAGGAAAAAGATACATATAAGCTATTTAAAAATGGAACTCTGAAAATTAAGCATCTGAAGACCGATGATCAGGATATCTACAAGGTATCAATATATGATACAAAAGGAAAAAATGTGTTGGAAAAAATATTTGATTTGAAGATTCAAGAGAGGGTCTCAAAACCAAAGATCTCCTGGACTTGTATCAACACAACCCTGACCTGTGAGGTAATGAATGGAACTGACCCCGAATTAAACCTGTATCAAGATGGGAAACATCTAAAACTTTCTCAGAGGGTCATCACACACAAGTGGACCACCAGCCTGAGTGCAAAATTCAAGTGCACAGCAGGGAACAAAGTCAGCAAGGAATCCAGTGTCGAGCCTGTCAGCTGTCCAGAGAAAGGTCTGGACATCTATCTCATCATTGGCATATGTGGAGGAGGCAGCCTCTTGATGGTCTTTGTGGCACTGCTCGTTTTCTATATCACCAAAAGGAAAAAACAGAGGAGTCGGAGAAATGATGAGGAGCTGGAGACAAGAGCCCACAGAGTAGCTACTGAAGAAAGGGGCCGGAAGCCCCACCAAATTCCAGCTTCAACCCCTCAGAATCCAGCAACTTCCCAACATCCTCCTCCACCACCTGGTCATCGTTCCCAGGCACCTAGTCATCGTCCCCCGCCTCCTGGACACCGTGTTCAGCACCAGCCTCAGAAGAGGCCTCCTGCTCCGTCGGGCACACAAGTTCACCAGCAGAAAGGCCCGCCCCTCCCCAGACCTCGAGTTCAGCCAAAACCTCCCCATGGGGCAGCAGAAAACTCATTGTCCCCTTCCTCTAATTAAAAAAGATAGAAACTGTCTTTTTCAATAAAAAGCACTGTGGATTTCTGCCCTCCTGATGTGCATATCCGTACTTCCATGAGGTGTTTTCTGTGTGCAGAACATTGTCACCTCCTGAGGCTGTGGGCCACAGCCACCTCTGCATCTTCGAACTCAGCCATGTGGTCAACATCTGGAGTTTTTGGTCTCCTCAGAGAGCTCCATCACACCAGTAAGGAGAAGCAATATAAGTGTGATTGCAAGAATGGTAGAGGACCGAGCACAGAAATCTTAGAGATTTCTTGTCCCCTCTCAGGTCATGTGTAGATGCGATAAATCAAGTGATTGGTGTGCCTGGGTCTCACTACAAGCAGCCTATCTGCTTAAGAGACTCTGGAGTTTCTTATGTGCCCTGGTGGACACTTGCCCACCATCCTGTGAGTAAAAGTGAAATAAAAGCTTTGACTAGA(配列番号14)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号14からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0053】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、VLA-4であり、以下のアミノ酸配列:VFEAPKNISCCWEYEDIDVECVLVCWRCINDSTCQTTRGSLFHDFRAVVSFFPLGREANKLSHRLWRGTTLQYWLYICRSSLKDRYLSPGCELTQQSGRGPQYHSACYLKRGNGQSKAQQSDCSNTFKIGADCSWVCKPNFICVWIKKANVHGGENELNFPCYQHWQYGSQCCGNNGTKFFPPNAVQHFGCPDYYWRMPLKLSKSVCIRAAKECNADLERHSPVLVQDEAIVLHKSSTLFKFLVFWENGKWKRSQCSYPTGRPAIHFRNGDFSTQVNKSNRFSRAKSKSNTKQGECCACSTGRTTSSKTQTLFHHSDYFKLATWTYCTSVDLICYVEGWLLKTIQIYPTRRKQKRQLELYQQKQLRTSFKLREWKTDSGCSKEIKTLFTRKNEFCLDFFYSSCDILCLHARGKSQQLLFEIEELQRYSQRSLSFMGRETLKHSIYSRKVSPRYLEMKVLSIILEKSTNTTYHMCLPQNEPHWVGRGSFQIHLYLFKICSLKIFFRELFPNFLTSGPLSLSPLFIIHFLRAVFQQPFFFSRLILYYRPNWQTSDTCTLVANDFWIIIFLLWISPSFFLYIYMCFYVGIYLPFFLSILPITHLYQAYPGVIFKSFVIFNKRLVLHFTYMLIKIQKPYLTNNFKIKAVQRLGGLYFICIMYYVKYLSHNYFLGCNSLLPFTSISVTLHGNEETKFINLNSILKDTDSICIQIMRRQQNFHEMNIFIVCSYYMRFYFKLSGFKISLNTIIFVIFILCLSRLQNIILSDSVFIRELWPNFEHLLGVIKLEGNVEKQFWERFLYMKSLPLASHPNKLSVHRPAVMVRNVLRFAKAFENVSTKPPEPRVCIHRNKLYDIYVFLKNFVSLKGSFFQENIDHRKIKPRFRTVFSRIVSKEIYIWFFPTQNYSETTIYFRLFEHSESRVLWLSNTGLSDTRGTQLHIGLDFAQFKIVFVINLLCYLYHEFNPTTLRRQGWVILFWQVGYITMFNLTALDGAVNQGRLMKSVLYLQNIGNLTLMSSNPEKKNPNYFRIIVKYCIMMVAKFFVCPINTLKKEFELIFKKKKK(配列番号15)、又は配列番号15と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GTTTTTGAAGCCCCATGAAAATAAAACATATCTTGCTGTTGGGAGTATGAAGACATTGATGTTGAATGTGTCCTTGTTTAATGCTGGAGATGATGCATATGAAACGACTCTACATGTCAAACTACCCGTGGGTCTTTATTTCATTAAGATTTTAGAGCTGTTGTTTCATTTTTCCCATTAGGAAGAGAAGCAAATAAACTGTGAAGTCACAGATAACTCTGGCGTGGTACAACTTGACTGCAGTATTGGCTATATATATGTAGATCATCTCTCAAGGATAGATATTAGCTTTCTCCTGGATGTGAGCTCACTCAGCAGAGCGGAAGAGGACCTCAGTATCACAGTGCATGCTACCTGTGAAAATGAAGAGGAAATGGACAATCTAAAGCACAGCAGAGTGACTGTAGCAATACCTTTAAAATATGAGGTTAAGCTGACTGTTCATGGGTTTGTAAACCCAACTTCATTTGTGTATGGATCAAATGATGAAAATGAGCCTGAAACGTGCATGGTGGAGAAAATGAACTTAACTTTCCATGTTATCAACACTGGCAATAGTATGGCTCCCAATGTTAGTGTGGAAATAATGGTACCAAATTCTTTTAGCCCCCAAACTGATAAGCTGTTCAACATTTTGGATGTCCAGACTACTACTGGAGAATGCCACTTTGAAAATTATCAAAGAGTGTGTGCATTAGAGCAGCAAAAGAGTGCAATGCAGACCTTGAAAGGCATAGTCCAGTTCTTGTCCAAGACTGATAAGAGGCTATTGTACTGCATAAAAGCTGATCCACATTGTTTAAATTTCTTGTGTAATTTTGGGAAAATGGAAAGTGGAAAAGAAGCCAGTGTTCATATCCAACTGGAAGGCCGGCCATCCATTTTAGAAATGGATGAGACTTCAGCACTCAAGTTTGAAATAAGAGCAACAGGTTTTCCAGAGCCAAATCCAAGAGTAATTGAACTAAACAAGGATGAGAATGTTGCGCATGTTCTACTGGAAGGACTACATCATCAAAGACCCAAACGTTATTTCACCATAGTGATTATTTCAAGTAGCTTGCTACTTGGACTTATTGTACTTCTGTTGATCTCATATGTTATGTGGAAGGCTGGCTTCTTTAAAAGACAATACAAATCTATCCTACAAGAAGAAAACAGAAGAGACAGTTGGAGTTATATCAACAGTAAAAGCAATGATGATTAAGGACTTCTTTCAAATTGAGAGAATGGAAAACAGACTCAGGTTGTAGTAAAGAAATTTAAAAGACACTGTTTACAAGAAAAAATGAATTTTGTTTGGACTTCTTTTACTCATGATCTTGTGACATATTATGTCTTCATGCAAGGGGAAAATCTCAGCAATGATTACTCTTTGAGATAGAAGAACTGCAAAGGTAATAATACAGCCAAAGATAATCTCTCAGCTTTTAAATGGGTAGAGAAACACTAAAGCATTCAATTTATTCAAGAAAAGTAAGCCCTTGAAGATATCTTGAAATGAAAGTATAACTGAGTTAAATTATACTGGAGAAGTCTTAGACTTGAAATACTACTTACCATATGTGCTTGCCTCAGTAAAATGAACCCCACTGGGTGGGCAGAGGTTCATTTCAAATACATCTTTGATACTTGTTCAAAATATGTTCTTTAAAAATATAATTTTTTAGAGAGCTGTTCCCAAATTTTCTAACGAGTGGACCATTATCACTTTAAAGCCCTTTATTTATAATACATTTCCTACGGGCTGTGTTCCAACAACCATTTTTTTTCAGCAGACTATGAATATTATAGTATTATAGGCCAAACTGGCAAACTTCAGACTGAACATGTACACTGGTTTGAGCTTAGTGAAATGACTTCTGGATAATTATTTTTTTATAATTATGGATTTCACCATCTTTCTTTCTGTATATATACATGTGTTTTTATGTAGGTATATATTTACCATTCTTCCTATCTATTCTTCCTATAACACACCTTTATCAAGCATACCCAGGAGTAATCTTCAAATCTTTTGTTATATTCTGAAACAAAAGATTGTGAGTGTTGCACTTTACCTGATACATGCTGATTTAGAAAATACAGAAACCATACCTCACTAATAACTTTAAAATCAAAGCTGTGCAAAGACTAGGGGGCCTATACTTCATATGTATTATGTACTATGTAAAATATTGACTATCACACAACTATTTCCTTGGATGTAATTCTTTGTTACCCTTTACAAGTATAAGTGTTACCTTACATGGAAACGAAGAAACAAAATTCATAAATTTAAATTCATAAATTTAGCTGAAAGATACTGATTCAATTTGTATACAGTGAATATAAATGAGACGACAGCAAAATTTTCATGAAATGTAAAATATTTTTATAGTTTGTTCATACTATATGAGGTTCTATTTTAAATGACTTTCTGGATTTTAAAAAATTTCTTTAAATACAATCATTTTTGTAATATTTATTTTATGCTTATGATCTAGATAATTGCAGAATATCATTTTATCTGACTCTGTCTTCATAAGAGAGCTGTGGCCGAATTTTGAACATCTGTTATAGGGAGTGATCAAATTAGAAGGCAATGTGGAAAAACAATTCTGGGAAAGATTTCTTTATATGAAGTCCCTGCCACTAGCCAGCCATCCTAATTGATGAAAGTTATCTGTTCACAGGCCTGCAGTGATGGTGAGGAATGTTCTGAGATTTGCGAAGGCATTTGAGTAGTGAAATGTAAGCACAAAACCTCCTGAACCCAGAGTGTGTATACACAGGAATAAACTTTATGACATTTATGTATTTTTAAAAAACTTTGTATCGTTATAAAAAGGCTAGTCATTCTTTCAGGAGAACATCTAGGATCATAGATGAAAAATCAAGCCCCGATTTAGAACTGTCTTCTCCAGGATTGTCTCTAAGGAAATTTACATTTGGTTCTTTCCTACTCAGAACTACTCAGAAACAACTATATATTTCAGGTTATTTGAGCACAGTGAAAGCAGAGTACTATGGTTGTCCAACACAGGCCTCTCAGATACAAGGGGAACACAATTACATATTGGGCTAGATTTTGCCCAGTTCAAAATAGTATTTGTTATCAACTTACTTTGTTACTTGTATCATGAATTTTAAAACCCTACCACTTTAAGAAGACAGGGATGGGTTATTCTTTTTTGGCAGGTAGGCTATATAACTATGTGATTTTGAAATTTAACTGCTCTGGATTAGGGAGCAGTGAATCAAGGCAGACTTATGAAATCTGTATTATATTTGTAACAGAATATAGGAAATTTAACATAATTGATGAGCTCAAATCCTGAAAAATGAAAGAATCCAAATTATTTCAGAATTATCTAGGTTAAATATTGATGTATTATGATGGTTGCAAAGTTTTTTGTGTGTCCAATAAACACATTGTAAAAAAAAGAATTTGAATTGATATTTAAAAAAAAAAAAAAA(配列番号16)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号16からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0054】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、FLA-1であり、以下のアミノ酸配列:IIFLFHPVVASKSHGPPDAAPGATGPSSAGRMKDSCITVMAMALLSGFFFFAPASSYNLDVRGARSFSPPRAGRHFGYRVLQVGNGVIVGAPGEGNSTGSLYQCQSGTGHCLPVTLRGSNYTSKYLGMTLATDPTDGSILACDPGLSRTCDQNTYLSGLCYLFRQNLQGPMLQGRPGFQECIKGNVDLVFLFDGSMSLQPDEFQKILDFMKDVMKKLSNTSYQFAAVQFSTSYKTEFDFSDYVKRKDPDALLKHVKHMLLLTNTFGAINYVATEVFREELGARPDATKVLIIITDGEATDSGNIDAAKDIIRYIIGIGKHFQTKESQETLHKFASKPASEFVKILDTFEKLKDLFTELQKKIYVIEGTSKQDLTSFNMELSSSGISADLSRGHAVVGAVGAKDWAGGFLDLKADLQDDTFIGNEPLTPEVRAGYLGYTVTWLPSRQKTSLLASGAPRYQHMGRVLLFQEPQGGGHWSQVQTIHGTQIGSYFGGELCGVDVDQDGETELLLIGAPLFYGEQRGGRVFIYQRRQLGFEEVSELQGDPGYPLGRFGEAITALTDINGDGLVDVAVGAPLEEQGAVYIFNGRHGGLSPQPSQRIEGTQVLSGIQWFGRSIHGVKDLEGDGLADVAVGAESQMIVLSSRPVVDMVTLMSFSPAEIPVHEVECSYSTSNKMKEGVNITICFQIKSLIPQFQGRLVANLTYTLQLDGHRTRRRGLFPGGRHELRRNIAVTTSMSCTDFSFHFPVCVQDLISPINVSLNFSLWEEEGTPRDQRAQGKDIPPILRPSLHSETWEIPFEKNCGEDKKCEANLRVSFSPARSRALRLTAFASLSVELSLSNLEEDAYWVQLDLHFPPGLSFRKVEMLKPHSQIPVSCEELPEESRLLSRALSCNVSSPIFKAGHSVALQMMFNTLVNSSWGDSVELHANVTCNNEDSDLLEDNSATTIIPILYPINILIQDQEDSTLYVSFTPKGPKIHQVKHMYQVRIQPSIHDHNIPTLEAVVGVPQPPSEGPITHQWSVQMEPPVPCHYEDLERLPDAAEPCLPGALFRCPVVFRQEILVQVIGTLELVGEIEASSMFSLCSSLSISFNSSKHFHLYGSNASLAQVVMKVDVVYEKQMLYLYVLSGIGGLLLLLLIFIVLYKVGFFKRNLKEKMEAGRGVPNGIPAEDSEQLASGQEAGDPGCLKPLHEKDSESGGGKDVQACEVQSAQNWTQDAQGHSASACILPCALGRVTASPWPSVSLSRTWNSFLPVSFAGSGRPAEGPAKRAAKVRACHYQTVHQPLLVSFLGRECLIMWRNCSLRTGCSGPHPCPGMSTDASTPQNLSLHTPLHWSPVSSAGRKQMPVSLRDCGTRLVLGQRPNSLACLPAPCKMRPSWPSPASSRAVMPPCSSGDTSLSPRPGSFLSSCIHPDSSLCLNLPSRHPSFLDQQIPAHVTLGWVLTSFTLPPACTTPSKHTSCFFIRQPGCFFPVLTYLAAISQTVRVKAILVLFTLGCLMICQGVGHLVGAHNFTELMTEPVGRYRKRGAGLGAVVHACNPSTLGGQGGWITGQELEASLAKPHLYKYKIQAWWHTPVVPATQEVEVGELLEPGRWRLQAKIAPLHSSLGNTARLRLKEKIKIKSGHGPVTSPPLEAVFSGSALPLHTLSQDPSRLCSGPHRKTELKVGTTSANLEPQCQAQCLHVFIQMNSV(配列番号17)、又は配列番号17と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATCATTTTCCTCTTTCACCCTGTCTAGGTTGCCAGCAAATCCCACGGGCCTCCTGACGCTGCCCCTGGGGCCACAGGTCCCTCGAGTGCTGGAAGGATGAAGGATTCCTGCATCACTGTGATGGCCATGGCGCTGCTGTCTGGGTTCTTTTTCTTCGCGCCGGCCTCGAGCTACAACCTGGACGTGCGGGGCGCGCGGAGCTTCTCCCCACCGCGCGCCGGGAGGCACTTTGGATACCGCGTCCTGCAGGTCGGAAACGGGGTCATCGTGGGAGCTCCAGGGGAGGGGAACAGCACAGGAAGCCTCTATCAGTGCCAGTCGGGCACAGGACACTGCCTGCCAGTCACCCTGAGAGGTTCCAACTATACCTCCAAGTACTTGGGAATGACCTTGGCAACAGACCCCACAGATGGAAGCATTTTGGCCTGTGACCCTGGGCTGTCTCGAACGTGTGACCAGAACACCTATCTGAGTGGCCTGTGTTACCTCTTCCGCCAGAATCTGCAGGGTCCCATGCTGCAGGGGCGCCCTGGTTTTCAGGAATGTATCAAGGGCAACGTAGACCTGGTATTTCTGTTTGATGGTTCGATGAGCTTGCAGCCAGATGAATTTCAGAAAATTCTGGACTTCATGAAGGATGTGATGAAGAAACTCAGCAACACTTCGTACCAGTTTGCTGCTGTTCAGTTTTCCACAAGCTACAAAACAGAATTTGATTTCTCAGATTATGTTAAACGGAAGGACCCTGATGCTCTGCTGAAGCATGTAAAGCACATGTTGCTGTTGACCAATACCTTTGGTGCCATCAATTATGTCGCGACAGAGGTGTTCCGGGAGGAGCTGGGGGCCCGGCCAGATGCCACCAAAGTGCTTATCATCATCACGGATGGGGAGGCCACTGACAGTGGCAACATCGATGCGGCCAAAGACATCATCCGCTACATCATCGGGATTGGAAAGCATTTTCAGACCAAGGAGAGTCAGGAGACCCTCCACAAATTTGCATCAAAACCCGCGAGCGAGTTTGTGAAAATTCTGGACACATTTGAGAAGCTGAAAGATCTATTCACTGAGCTGCAGAAGAAGATCTATGTCATTGAGGGCACAAGCAAACAGGACCTGACTTCCTTCAACATGGAGCTGTCCTCCAGCGGCATCAGTGCTGACCTCAGCAGGGGCCATGCAGTCGTGGGGGCAGTAGGAGCCAAGGACTGGGCTGGGGGCTTTCTTGACCTGAAGGCAGACCTGCAGGATGACACATTTATTGGGAATGAACCATTGACACCAGAAGTGAGAGCAGGCTATTTGGGTTACACCGTGACCTGGCTGCCCTCCCGGCAAAAGACTTCGTTGCTGGCCTCGGGAGCCCCTCGATACCAGCACATGGGCCGAGTGCTGCTGTTCCAAGAGCCACAGGGCGGAGGACACTGGAGCCAGGTCCAGACAATCCATGGGACCCAGATTGGCTCTTATTTCGGTGGGGAGCTGTGTGGCGTCGACGTGGACCAAGATGGGGAGACAGAGCTGCTGCTGATTGGTGCCCCACTGTTCTATGGGGAGCAGAGAGGAGGCCGGGTGTTTATCTACCAGAGAAGACAGTTGGGGTTTGAAGAAGTCTCAGAGCTGCAGGGGGACCCCGGCTACCCACTCGGGCGGTTTGGAGAAGCCATCACTGCTCTGACAGACATCAACGGCGATGGGCTGGTAGACGTGGCTGTGGGGGCCCCTCTGGAGGAGCAGGGGGCTGTGTACATCTTCAATGGGAGGCACGGGGGGCTTAGTCCCCAGCCAAGTCAGCGGATAGAAGGGACCCAAGTGCTCTCAGGAATTCAGTGGTTTGGACGCTCCATCCATGGGGTGAAGGACCTTGAAGGGGATGGCTTGGCAGATGTGGCTGTGGGGGCTGAGAGCCAGATGATCGTGCTGAGCTCCCGGCCCGTGGTGGATATGGTCACCCTGATGTCCTTCTCTCCAGCTGAGATCCCAGTGCATGAAGTGGAGTGCTCCTATTCAACCAGTAACAAGATGAAAGAAGGAGTTAATATCACAATCTGTTTCCAGATCAAGTCTCTCATCCCCCAGTTCCAAGGCCGCCTGGTTGCCAATCTCACTTACACTCTGCAGCTGGATGGCCACCGGACCAGAAGACGGGGGTTGTTCCCAGGAGGGAGACATGAACTCAGAAGGAATATAGCTGTCACCACCAGCATGTCATGCACTGACTTCTCATTTCATTTCCCGGTATGTGTTCAAGACCTCATCTCCCCCATCAATGTTTCCCTGAATTTCTCTCTTTGGGAGGAGGAAGGGACACCGAGGGACCAAAGGGCGCAGGGCAAGGACATACCGCCCATCCTGAGACCCTCCCTGCACTCGGAAACCTGGGAGATCCCTTTTGAGAAGAACTGTGGGGAGGACAAGAAGTGTGAGGCAAACTTGAGAGTGTCCTTCTCTCCTGCAAGATCCAGAGCCCTGCGTCTAACTGCTTTTGCCAGCCTCTCTGTGGAGCTGAGCCTGAGTAACTTGGAAGAAGATGCTTACTGGGTCCAGCTGGACCTGCACTTCCCCCCGGGACTCTCCTTCCGCAAGGTGGAGATGCTGAAGCCCCATAGCCAGATACCTGTGAGCTGCGAGGAGCTTCCTGAAGAGTCCAGGCTTCTGTCCAGGGCATTATCTTGCAATGTGAGCTCTCCCATCTTCAAAGCAGGCCACTCGGTTGCTCTGCAGATGATGTTTAATACACTGGTAAACAGCTCCTGGGGGGACTCGGTTGAATTGCACGCCAATGTGACCTGTAACAATGAGGACTCAGACCTCCTGGAGGACAACTCAGCCACTACCATCATCCCCATCCTGTACCCCATCAACATCCTCATCCAGGACCAAGAAGACTCCACACTCTATGTCAGTTTCACCCCCAAAGGCCCCAAGATCCACCAAGTCAAGCACATGTACCAGGTGAGGATCCAGCCTTCCATCCACGACCACAACATACCCACCCTGGAGGCTGTGGTTGGGGTGCCACAGCCTCCCAGCGAGGGGCCCATCACACACCAGTGGAGCGTGCAGATGGAGCCTCCCGTGCCCTGCCACTATGAGGATCTGGAGAGGCTCCCGGATGCAGCT
GAGCCTTGTCTCCCCGGAGCCCTGTTCCGCTGCCCTGTTGTCTTCAGGCAGGAGATCCTCGTCCAAGTGATCGGGACTCTGGAGCTGGTGGGAGAGATCGAGGCCTCTTCCATGTTCAGCCTCTGCAGCTCCCTCTCCATCTCCTTCAACAGCAGCAAGCATTTCCACCTCTATGGCAGCAACGCCTCCCTGGCCCAGGTTGTCATGAAGGTTGACGTGGTGTATGAGAAGCAGATGCTCTACCTCTACGTGCTGAGCGGCATCGGGGGGCTGCTGCTGCTGCTGCTCATTTTCATAGTGCTGTACAAGGTTGGTTTCTTCAAACGGAACCTGAAGGAGAAGATGGAGGCTGGCAGAGGTGTCCCGAATGGAATCCCTGCAGAAGACTCTGAGCAGCTGGCATCTGGGCAAGAGGCTGGGGATCCCGGCTGCCTGAAGCCCCTCCATGAGAAGGACTCTGAGAGTGGTGGTGGCAAGGACTGAGTCCAGGCCTGTGAGGTGCAGAGTGCCCAGAACTGGACTCAGGATGCCCAGGGCCACTCTGCCTCTGCCTGCATTCTGCCGTGTGCCCTCGGGCGAGTCACTGCCTCTCCCTGGCCCTCAGTTTCCCTATCTCGAACATGGAACTCATTCCTGCCTGTCTCCTTTGCAGGCTCATAGGGAAGACCTGCTGAGGGACCAGCCAAGAGGGCTGCAAAAGTGAGGGCTTGTCATTACCAGACGGTTCACCAGCCTCTCTTGGTTTCCTTCCTTGGAAGAGAATGTCTGATCTAAATGTGGAGAAACTGTAGTCTCAGGACCTAGGGATGTTCTGGCCCTCACCCCTGCCCTGGGATGTCCACAGATGCCTCCACCCCCCAGAACCTGTCCTTGCACACTCCCCTGCACTGGAGTCCAGTCTCTTCTGCTGGCAGAAAGCAAATGTGACCTGTGTCACTACGTGACTGTGGCACACGCCTTGTTCTTGGCCAAAGACCAAATTCCTTGGCATGCCTTCCAGCACCCTGCAAAATGAGACCCTCGTGGCCTTCCCCAGCCTCTTCTAGAGCCGTGATGCCTCCCTGTTGAAGCTCTGGTGACACCAGCCTTTCTCCCAGGCCAGGCTCCTTCCTGTCTTCCTGCATTCACCCAGACAGCTCCCTCTGCCTGAACCTTCCATCTCGCCACCCCTCCTTCCTTGACCAGCAGATCCCAGCTCACGTCACACTTGGTTGGGTCCTCACATCTTTCACACTTCCACCAGCCTGCACTACTCCCTCAAAGCACACGTCATGTTTCTTCATCCGGCAGCCTGGATGTTTTTTCCCTGTTTAATGATTGACGTACTTAGCAGCTATCTCTCAGTGAACTGTGAGGGTAAAGGCTATACTTGTCTTGTTCACCTTGGGATGATGCCTCATGATATGTCAGGGCGTGGGACATCTAGTAGGTGCTTGACATAATTTCACTGAATTAATGACAGAGCCAGTGGGAAGATACAGAAAAAGAGGGGCTGGGCTGGGCGCGGTGGTTCACGCCTGTAATCCCAGCACTTTGGGAGGCCAAGGAGGGTGGATCACCTGAGGTCAGGAGTTAGAGGCCAGCCTGGCGAAACCCCATCTCTACTAAAAATACAAAATCCAGGCGTGGTGGCACACACCTGTAGTCCCAGCTACTCAGGAGGTTGAGGTAGGAGAATTGCTTGAACCTGGGAGGTGGAGGTTGCAGTGAGCCAAGATTGCGCCATTGCACTCCAGCCTGGGCAACACAGCGAGACTCCGTCTCAAGGAAAAAATAAAAATAAAAAGCGGGCACGGGCCCGTGACATCCCCACCCTTGGAGGCTGTCTTCTCAGGCTCTGCCCTGCCCTAGCTCCACACCCTCTCCCAGGACCCATCACGCCTGTGCAGTGGCCCCCACAGAAAGACTGAGCTCAAGGTGGGAACCACGTCTGCTAACTTGGAGCCCCAGTGCCAAGCACAGTGCCTGCATGTATTTATCCAATAAATGTGAAATTCTGTCCA(配列番号18)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号18からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0055】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CD154であり、以下のアミノ酸配列:NPEGGHFDSLLMLPLPPSLPEDTISTLTQHDRNIQPNFSPICGHWTAHQHENFYVFTYCFSYHPDDWVSTFCCVSSKVGQDRRKESSRFCIHENDTEMQHRRKILILTELGDKPVRLCEGYNVKQRGDEERKQLNAKRSESSNCGTCHKGQQNNICVTVGKRILHHEQQLGNPGKWETADRKTRTLLYLCPSHLLFQSGSFESSSIYSQPLPKVPRIRENLTQSCKYPQFRQTLRATIHSLGRSIIATRCFGVCQCDSKPSEPWHWLHVLWLTQTLNSVTLQAVVELTLGVFIIQHSGAHPLLTAYLPDPPYGELFIIHSKACRTVISELQVTNQNGPCSIRAYISEAATPLMQTSRESYEKTRPLCTGILSKQQITCQVQFCFFACSVFPWIMHLIYQRCRREMGSLSSHSVMVDSGFLWPCWRGPGSRTSNTVENRNPPPPPATLSDSYSFSFNLSLSISLFQSLSLNLFLPISLSQSLCFPLSVSSLPQSLFSIPLSNTHTHTHTHTHTHTHTHTESGRCSVLFFPPCPYLYHYRGGVGSAALSLPTPHYEMTVFKGNLLYLPAVSIVSRVNLLSCYLFFERPLNI(配列番号19)、又は配列番号19と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:AATCCTGAGTAAGGTGGCCACTTTGACAGTCTTCTCATGCTGCCTCTGCCACCTTCTCTGCCAGAAGATACCATTTCAACTTTAACACAGCATGATCGAAACATACAACCAAACTTCTCCCCGATCTGCGGCCACTGGACTGCCCATCAGCATGAAAATTTTTATGTATTTACTTACTGTTTTTCTTATCACCCAGATGATTGGGTCAGCACTTTTTGCTGTGTATCTTCATAGAAGGTTGGACAAGATAGAAGATGAAAGGAATCTTCATGAAGATTTTGTATTCATGAAAACGATACAGAGATGCAACACAGGAGAAAGATCCTTATCCTTACTGAACTGTGAGGAGATTAAAAGCCAGTTTGAAGGCTTTGTGAAGGATATAATGTTAAACAAAGAGGAGACGAAGAAAGAAAACAGCTTTGAAATGCAAAAAGGTGATCAGAATCCTCAAATTGCGGCACATGTCATAAGTGAGGCCAGCAGTAAAACAACATCTGTGTTACAGTGGGCTGAAAAAGGATACTACACCATGAGCAACAACTTGGTAACCCTGGAAAATGGGAAACAGCTGACCGTTAAAAGACAAGGACTCTATTATATCTATGCCCAAGTCACCTTCTGTTCCAATCGGGAAGCTTCGAGTCAAGCTCCATTTATAGCCAGCCTCTGCCTAAAGTCCCCCGGTAGATTCGAGAGAATCTTACTCAGAGCTGCAAATACCCACAGTTCCGCCAAACCTTGCGGGCAACAATCCATTCACTTGGGAGGAGTATTTGAATTGCAACCAGGTGCTTCGGTGTTTGTCAATGTGACTGATCCAAGCCAAGTGAGCCATGGCACTGGCTTCACGTCCTTTGGCTTACTCAAACTCTGAACAGTGTCACCTTGCAGGCTGTGGTGGAGCTGACGCTGGGAGTCTTCATAATACAGCACAGCGGTTAAGCCCACCCCCTGTTAACTGCCTATTTATAACCCTAGGATCCTCCTTATGGAGAACTATTTATTATACACTCCAAGGCATGTAGAACTGTAATAAGTGAATTACAGGTCACATGAAACCAAAACGGGCCCTGCTCCATAAGAGCTTATATATCTGAAGCAGCAACCCCACTGATGCAGACATCCAGAGAGTCCTATGAAAAGACAAGGCCATTATGCACAGGTTGAATTCTGAGTAAACAGCAGATAACTTGCCAAGTTCAGTTTTGTTTCTTTGCGTGCAGTGTCTTTCCATGGATAATGCATTTGATTTATCAGTGAAGATGCAGAAGGGAAATGGGGAGCCTCAGCTCACATTCAGTTATGGTTGACTCTGGGTTCCTATGGCCTTGTTGGAGGGGGCCAGGCTCTAGAACGTCTAACACAGTGGAGAACCGAAACCCCCCCCCCCCCCCCGCCACCCTCTCGGACAGTTATTCATTCTCTTTCAATCTCTCTCTCTCCATCTCTCTCTTTCAGTCTCTCTCTCTCAACCTCTTTCTTCCAATCTCTCTTTCTCAATCTCTCTGTTTCCCTTTGTCAGTCTCTTCCCTCCCCCAGTCTCTCTTCTCAATCCCCCTTTCTAACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACACAGAGTCAGGCCGTTGCTAGTCAGTTCTCTTCTTTCCACCCTGTCCCTATCTCTACCACTATAGATGAGGGTGAGGAGTAGGGAGTGCAGCCCTGAGCCTGCCCACTCCTCATTACGAAATGACTGTATTTAAAGGAAATCTATTGTATCTACCTGCAGTCTCCATTGTTTCCAGAGTGAACTTGTAATTATCTTGTTATTTATTTTTTGAATAATAAAGACCTCTTAACATTA(配列番号20)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号20からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0056】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CXC5であり、以下のアミノ酸配列:TVLRILQSSLLQSPLLHPVQEPATARSALLTTMSLLSSRAARVPGPSSSLCALLVLLLLLTQPGPIASAGPAAAVLRELRCVCLQTTQGVHPKMISNLQVFAIGPQCSKVEVVASLKNGKEICLDPEAPFLKKVIQKILDGGNKENLREMSTHGKVSQSSAEKFSGGLTQGRQEGKILLLFVYLFFQLAFFLDSSLRVGKPMFAAAFSSANEVFSIVPLLFAVILSAMLLKFWQLTIVARNHWLLIFQSVLNCRLLYFQEIFLKILTEKAVDLMWKCFIRILLMEIHCYLHFYKKEIFCFLGNMLENFLTLDCGILFNYFTLESVFHTLSMNIFPYSEFLKVVLGLISYLPIILDILYLFSMANCHHLLLNFDFICYLLSILLGVPFWLNIYFRMKKLENRQIPDCFIKCILLVFKVKANLTMTCTLKVLETYSNNLNINLSFSYKNIRHPRGPSISPWIGDQRELGMLKTKQNKKKQGEVVQGMSIFYPSVWVRFSKIIIRRPAFMVEYIIIYKVATLGQVPSPLTALAPFTENLGRIAEDERERGGQGRCLSGFHSSFHWDFEAFLSECKACSSPGGTHWGWGWGKMRNRLVSVVLISLIMLSLFLQIFLFKLFHLCLEILPFRENVTLVKRLVGKLLPFFLTFKQTVINGCEFLFLLCFTFVFQNRILYLNGKNKTFCAINKATARKIKHFLVKTYVFIYYIFIYNIYYIFSIAELFRCLLCIFRFPFCYELHIYYIHYIKIVLFYYVSHWFIVFILSFETLKDFTS(配列番号21)、又は配列番号21と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ACAGTGCTCCGGATCCTCCAATCTTCGCTCCTCCAATCTCCGCTCCTCCACCCAGTTCAGGAACCCGCGACCGCTCGCAGCGCTCTCTTGACCACTATGAGCCTCCTGTCCAGCCGCGCGGCCCGTGTCCCCGGTCCTTCGAGCTCCTTGTGCGCGCTGTTGGTGCTGCTGCTGCTGCTGACGCAGCCAGGGCCCATCGCCAGCGCTGGTCCTGCCGCTGCTGTGTTGAGAGAGCTGCGTTGCGTTTGTTTACAGACCACGCAAGGAGTTCATCCCAAAATGATCAGTAATCTGCAAGTGTTCGCCATAGGCCCACAGTGCTCCAAGGTGGAAGTGGTAGCCTCCCTGAAGAACGGGAAGGAAATTTGTCTTGATCCAGAAGCCCCTTTTCTAAAGAAAGTCATCCAGAAAATTTTGGACGGTGGAAACAAGGAAAACTGATTAAGAGAAATGAGCACGCATGGAAAAGTTTCCCAGTCTTCAGCAGAGAAGTTTTCTGGAGGTCTCTGAACCCAGGGAAGACAAGAAGGAAAGATTTTGTTGTTGTTTGTTTATTTGTTTTTCCAGTAGTTAGCTTTCTTCCTGGATTCCTCACTTTGAAGAGTGTGAGGAAAACCTATGTTTGCCGCTTAAGCTTTCAGCTCAGCTAATGAAGTGTTTAGCATAGTACCTCTGCTATTTGCTGTTATTTTATCTGCTATGCTATTGAAGTTTTGGCAATTGACTATAGTGTGAGCCAGGAATCACTGGCTGTTAATCTTTCAAAGTGTCTTGAATTGTAGGTGACTATTATATTTCCAAGAAATATTCCTTAAGATATTAACTGAGAAGGCTGTGGATTTAATGTGGAAATGATGTTTCATAAGAATTCTGTTGATGGAAATACACTGTTATCTTCACTTTTATAAGAAATAGGAAATATTTTAATGTTTCTTGGGGAATATGTTAGAGAATTTCCTTACTCTTGATTGTGGGATACTATTTAATTATTTCACTTTAGAAAGCTGAGTGTTTCACACCTTATCTATGTAGAATATATTTCCTTATTCAGAATTTCTAAAAGTTTAAGTTCTATGAGGGCTAATATCTTATCTTCCTATAATTTTAGACATTCTTTATCTTTTTAGTATGGCAAACTGCCATCATTTACTTTTAAACTTTGATTTTATATGCTATTTATTAAGTATTTTATTAGGAGTACCATAATTCTGGTAGCTAAATATATATTTTAGATAGATGAAGAAGCTAGAAAACAGGCAAATTCCTGACTGCTAGTTTATATAGAAATGTATTCTTTTAGTTTTTAAAGTAAAGGCAAACTTAACAATGACTTGTACTCTGAAAGTTTTGGAAACGTATTCAAACAATTTGAATATAAATTTATCATTTAGTTATAAAAATATATAGCGACATCCTCGAGGCCCTAGCATTTCTCCTTGGATAGGGGACCAGAGAGAGCTTGGAATGTTAAAAACAAAACAAAACAAAAAAAAACAAGGAGAAGTTGTCCAAGGGATGTCAATTTTTTATCCCTCTGTATGGGTTAGATTTTCCAAAATCATAATTTGAAGAAGGCCAGCATTTATGGTAGAATATATAATTATATATAAGGTGGCCACGCTGGGGCAAGTTCCCTCCCCACTCACAGCTTTGGCCCCTTTCACAGAGTAGAACCTGGGTTAGAGGATTGCAGAAGACGAGCGGGAGCGGGGAGGGCAGGGAAGATGCCTGTCGGGTTTTTAGCACAGTTCATTTCACTGGGATTTTGAAGCATTTCTGTCTGAATGTAAAGCCTGTTCTAGTCCTGGTGGGACACACTGGGGTTGGGGGTGGGGGAAGATGCGGTAATGAAACCGGTTAGTCAGTGTTGTCTTAATATCCTTGATAATGCTGTAAAGTTTATTTTTACAAATATTTCTGTTTAAGCTATTTCACCTTTGTTTGGAAATCCTTCCCTTTTAAAGAGAAAATGTGACACTTGTGAAAAGGCTTGTAGGAAAGCTCCTCCCTTTTTTTCTTTAAACCTTTAAATGACAAACCTAGGTAATTAATGGTTGTGAATTTCTATTTTTGCTTTGTTTTTAATGAACATTTGTCTTTCAGAATAGGATTCTGTGATAATATTTAAATGGCAAAAACAAAACATAATTTTGTGCAATTAACAAAGCTACTGCAAGAAAAATAAAACATTTCTTGGTAAAAACGTATGTATTTATATATTATATATTTATATATAATATATATTATATATTTAGCATTGCTGAGCTTTTTAGATGCCTATTGTGTATCTTTTAAAGGTTTTGACCATTTTGTTATGAGTAATTACATATATATTACATTCACTATATTAAAATTGTACTTTTTTACTATGTGTCTCATTGGTTCATAGTCTTTATTTTGTCCTTTGAATAAACATTAAAAGATTTCTAAACTTCA(配列番号22)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号22からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0057】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、CD22であり、以下のアミノ酸配列:TRKQACTQTRHHASPRPLAPAPGSRILGFLLKMGFAPNPLRLGGGLRLDPLHLQSPRWPGKLHPVPQSVQEHLEVWDKTLKHKGWEGSFAEKGAIPGRQEELHTEYPPGAPQQWSAGAEDGVQDEMDGTNTPQCLKAFSTSYPAPSRNSRVPGSHSDLLAEFLLLWVSDPIAVAPRGGSNEAGCCHLDLLDHQVCLHPERAQVLPTVESPWEDCDLPASGCRWEVPLQHGAAEREASSQEGDHSDSKPHADSRRRHSDPFLLQFQPQCYPVMETPWRLGGAIAWGAEDPKRWLGQHNHRLRSLLVLVGLPCRPECPVCPPRREGPENQAPFRDSLWKLGQPPMLLKQPPQRSPVLLGEKWQASGERKPAEFLHLPRRCWELQLLGEQLHRTDSVQGLDTSAVCTQEAACVHEPGGPSDGGEECNPDLERRQPSRLPLHLVLEPKPPLPQPEAEIGAGEGPALGCLLVPGDQQCGQGPFASQHPHRLLPGDHRQASGCGTRVLPRHPHPGNLWAQAPATLEEDTEPAGASGEFQRPELLCEEKGKGPPLRPPLPGMLQSNDGRWHLHHPALSRDEHTTNWRCRVLRDAETSPGLRHGHLFSIAQAPSGHYENVIPDFPEDEGIHYSELIQFGVGERPQAQENVDYVILKHHWMGCSRGTGGSGGQGSPRVFPR(配列番号23)、又は配列番号23と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ACGCGGAAACAGGCTTGCACCCAGACACGACACCATGCATCTCCTCGGCCCCTGGCTCCTGCTCCTGGTTCTAGAATACTTGGCTTTCTCTGACTCAAGTAAATGGGTTTTTGAGCACCCTGAAACCCTCTACGCCTGGGAGGGGGCCTGCGTCTGGATCCCCTGCACCTACAGAGCCCTAGATGGTGACCTGGAAAGCTTCATCCTGTTCCACAATCCTGAGTATAACAAGAACACCTCGAAGTTTGATGGGACAAGACTCTATGAAAGCACAAAGGATGGGAAGGTTCCTTCTGAGCAGAAAAGGGTGCAATTCCTGGGAGACAAGAATAAGAACTGCACACTGAGTATCCACCCGGTGCACCTCAATGACAGTGGTCAGCTGGGGCTGAGGATGGAGTCCAAGACTGAGAAATGGATGGAACGAATACACCTCAATGTCTCTGAAAGGCCTTTTCCACCTCATATCCAGCTCCCTCCAGAAATTCAAGAGTCCCAGGAAGTCACTCTGACCTGCTTGCTGAATTTCTCCTGCTATGGGTATCCGATCCAATTGCAGTGGCTCCTAGAGGGGGTTCCAATGAGGCAGGCTGCTGTCACCTCGACCTCCTTGACCATCAAGTCTGTCTTCACCCGGAGCGAGCTCAAGTTCTCCCCACAGTGGAGTCACCATGGGAAGATTGTGACCTGCCAGCTTCAGGATGCAGATGGGAAGTTCCTCTCCAATGACACGGTGCAGCTGAACGTGAAGCATCCTCCCAAGAAGGTGACCACAGTGATTCAAAACCCCATGCCGATTCGAGAAGGAGACACAGTGACCCTTTCCTGTAACTACAATTCCAGTAACCCCAGTGTTACCCGGTATGAATGGAAACCCCATGGCGCCTGGGAGGAGCCATCGCTTGGGGTGCTGAAGATCCAAAACGTTGGCTGGGACAACACAACCATCGCCTGCGCAGCTTGTAATAGTTGGTGCTCGTGGGCCTCCCCTGTCGCCCTGAATGTCCAGTATGCCCCCCGAGACGTGAGGGTCCGGAAAATCAAGCCCCTTTCCGAGATTCACTCTGGAAACTCGGTCAGCCTCCAATGTGACTTCTCAAGCAGCCACCCCAAAGAAGTCCAGTTCTTCTGGGAGAAAAATGGCAGGCTTCTGGGGAAAGAAAGCCAGCTGAATTTTGACTCCATCTCCCCAGAAGATGCTGGGAGTTACAGCTGCTGGGTGAACAACTCCATAGGACAGACAGCGTCCAAGGCCTGGACACTTGAAGTGCTGTATGCACCCAGGAGGCTGCGTGTGTCCATGAGCCCGGGGGACCAAGTGATGGAGGGGAAGAGTGCAACCCTGACCTGTGAGAGCGACGCCAACCCTCCCGTCTCCCACTACACCTGGTTTGACTGGAATAACCAAAGCCTCCCCTACCACAGCCAGAAGCTGAGATTGGAGCCGGTGAAGGTCCAGCACTCGGGTGCCTACTGGTGCCAGGGGACCAACAGTGTGGGCAAGGGCCGTTCGCCTCTCAGCACCCTCACCGTCTACTATAGCCCGGAGACCATCGGCAGGCGAGTGGCTGTGGGACTCGGGTCCTGCCTCGCCATCCTCATCCTGGCAATCTGTGGGCTCAAGCTCCAGCGACGTTGGAAGAGGACACAGAGCCAGCAGGGGCTTCAGGAGAATTCCAGCGGCCAGAGCTTCTTTGTGAGGAATAAAAAGGTTAGAAGGGCCCCCCTCTCTGAAGGCCCCCACTCCCTGGGATGCTACAATCCAATGATGGAAGATGGCATTAGCTACACCACCCTGCGCTTTCCCGAGATGAACATACCACGAACTGGAGATGCAGAGTCCTCAGAGATGCAGAGACCTCCCCCGGACTGCGATGACACGGTCACTTATTCAGCATTGCACAAGCGCCAAGTGGGCACTATGAGAACGTCATTCCAGATTTTCCAGAAGATGAGGGGATTCATTACTCAGAGCTGATCCAGTTTGGGGTCGGGGAGCGGCCTCAGGCACAAGAAAATGTGGACTATGTGATCCTCAAACATTGACACTGGATGGGCTGCAGCAGAGGCACTGGGGGCAGCGGGGGCCAGGGAAGTCCCCGAGTTTTCCCCAGAC(配列番号24)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号24からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0058】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ガレクチン-3であり、以下のアミノ酸配列:ARSTSSPAAVRSQPTSGKWQTIFRSMMRYLGLETQTLKDGLAHGGTSLLGQGATQGLPILGPTPGRHPQGLILDRHLQAPTLEHLELIPEHLHLESTQGHPAALGPTHLLDSQVPPEPTLPLAPMAPLLGHLCLITCLCLGEWCLACQFWARSPMQTELLISKEGMMLPSTLTHASMRTTGESLFAIQSWIITGEGKKDSRFSHLKVGNHSKYKYWLNLTTSRLQMMLTCCSTIIGLKNSMKSANWEFLVTTSPVLHIPYNLKGADKKKKNLNLTCVKVSCSLVKIFTFINIPLVSHLLNKYYS(配列番号25)、又は配列番号25と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GCCCGCAGCACCTCCTCGCCAGCAGCCGTCCGGAGCCAGCCAACGAGCGGAAAATGGCAGACAATTTTTCGCTCCATGATGCGTTATCTGGGTCTGGAAACCCAAACCCTCAAGGATGGCCTGGCGCATGGGGGAACCAGCCTGCTGGGGCAGGGGGCTACCCAGGGGCTTCCTATCCTGGGGCCTACCCCGGGCAGGCACCCCCAGGGGCTTATCCTGGACAGGCACCTCCAGGCGCCTACCCTGGAGCACCTGGAGCTTATCCCGGAGCACCTGCACCTGGAGTCTACCCAGGGCCACCCAGCGGCCCTGGGGCCTACCCATCTTCTGGACAGCCAAGTGCCACCGGAGCCTACCCTGCCACTGGCCCCTATGGCGCCCCTGCTGGGCCACTGATTGTGCCTTATAACCTGCCTTTGCCTGGGGGAGTGGTGCCTCGCATGCTGATAACAATTCTGGGCACGGTGAAGCCCAATGCAAACAGAATTGCTTTAGATTTCCAAAGAGGGAATGATGTTGCCTTCCACTTTAACCCACGCTTCAATGAGAACAACAGGAGAGTCATTGTTTGCAATACAAAGCTGGATAATAACTGGGGAAGGGAAGAAAGACAGTCGGTTTTCCCATTTGAAAGTGGGAAACCATTCAAAATACAAGTACTGGTTGAACCTGACCACTTCAAGGTTGCAGTGAATGATGCTCACTTGTTGCAGTACAATCATCGGGTTAAAAAACTCAATGAAATCAGCAAACTGGGAATTTCTGGTGACATAGACCTCACCAGTGCTTCATATACCATGATATAATCTGAAAGGGGCAGATTAAAAAAAAAAAAAGAATCTAAACCTTACATGTGTAAAGGTTTCATGTTCACTGTGAGTGAAAATTTTTACATTCATCAATATCCCTCTTGTAAGTCATCTACTTAATAAATATTACAGTG(配列番号26)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号26からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0059】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、ガレクチン-1であり、以下のアミノ酸配列:ISLGWSLLTAGAPAREHPPGLNHGLWSGRQQPESQTWRVPSSARRGGSRELRAEPGQRQQQPVPALQPSLQRPRRRQHHRVQQQGRRGLGDRAAGGCLSLPAWKCCRGVHHLRPGQPDRQAARWIRIQVPQPPQPGGHQLHGSRLQDQMCGLLKSASPWPPIKAAASAPSE(配列番号27)、又は配列番号27と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATCTCTCTCGGGTGGAGTCTTCTGACAGCTGGTGCGCCTGCCCGGGAACATCCTCCTGGACTCAATCATGGCTTGTGGTCTGGTCGCCAGCAACCTGAATCTCAAACCTGGAGAGTGCCTTCGAGTGCGAGGCGAGGTGGCTCCTGACGCTAAGAGCTTCGTGCTGAACCTGGGCAAAGACAGCAACAACCTGTGCCTGCACTTCAACCCTCGCTTCAACGCCCACGGCGACGCCAACACCATCGTGTGCAACAGCAAGGACGGCGGGGCCTGGGGGACCGAGCAGCGGGAGGCTGTCTTTCCCTTCCAGCCTGGAAGTGTTGCAGAGGTGTGCATCACCTTCGACCAGGCCAACCTGACCGTCAAGCTGCCAGATGGATACGAATTCAAGTTCCCCAACCGCCTCAACCTGGAGGCCATCAACTACATGGCAGCTGACGGTGACTTCAAGATCAAATGTGTGGCCTTTGACTGAAATCAGCCAGCCCATGGCCCCCAATAAAGGCAGCTGCCTCTGCTCCCTCTGAA(配列番号28)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号28からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0060】
APC標的化リガンドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドは、HSP70であり、以下のアミノ酸配列:VQLLGFLWLPSLLEPGLHPSNHVQGTCSWYSWHHLLLCGCFPARKSRDNCQSGKPNHSKLCRLYGHTVDRCRKESSCNEPHQHSFCQTSDWTQICCCPVYETLALYGGECWQAQGPSRIQGRDQKLLSRGGVFYGSDKDEGNCRSLPWEDCYQCCGHSASLLLSASGYQRCWNYCWSQCTNYANCCCYCLRLRQKGWSRKKRAHLPGRWHFCVNPHYGWNLGQVYSWRHPLGWRRFQPNGQPFYCVAQAEGHQEQESCKTPPYCLTCAYPLFQHPGQYDRFSLRNRLLYLHYPCPIRTECPVPWHPGPSRESPSRCQTRQVTDSYCPGWWFYSYPQDSEASPRLLQWKRTEEHQPSCCLWCSCPGSHLVWRQVECSRFAALGCHSSFPWYNCWWSHDCPHQAYHHSYQADTDLHYLFQPAWCAYSGLRRACHDKGQPAWQVTHRHTSCTPRCSSDSHFHCQWYTQCLCCGQEYGKREQDYYHQGPFEQGRHTYGPGSEVQSREAEGQGVIQEFTVLCLQHESNCRETSRQDRGQTEDSGQVNYQLAESDCEGRITSTERAGESLQPHHHQAVPECRRHARRNAWGISWWWSSSLWWCFLRAHHRGLSQPSVDVALFHTFKTFEGPKFVANSVA(配列番号29)、又は配列番号29と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GTGCAGCTCTTGGGTTTTTTGTGGCTTCCTTCGTTATTGGAGCCAGGCCTACACCCCAGCAACCATGTCCAAGGGACCTGCAGTTGGTATTGATCTTGGCACCACCTACTCTTGTGTGGGTGTTTTCCAGCACGGAAAAGTCGAGATAATTGCCAATGATCAGGGAAACCGAACCACTCCAAGCTATGTCGCCTTTACGGACACTGAACGGTTGATCGGTGATGCCGCAAAGAATCAAGTTGCAATGAACCCCACCAACACAGTTTTTGATGCCAAACGTCTGATTGGACGCAGATTTGATGATGCTGTTGTCCAGTCTGATATGAAACATTGGCCCTTTATGGTGGTGAATGATGCTGGCAGGCCCAAGGTCCAAGTAGAATACAAGGGAGAGACCAAAAGCTTCTATCCAGAGGAGGTGTCTTCTATGGTTCTGACAAAGATGAAGGAAATTGCAGAAGCCTACCTTGGGAAGACTGTTACCAATGCTGTGGTCACAGTGCCAGCTTACTTTAATGACTCTCAGCGTCAGGCTACCAAAGATGCTGGAACTATTGCTGGTCTCAATGTACTTAGAATTATTAATGAGCCAACTGCTGCTGCTATTGCTTACGGCTTAGACAAAAAGGTTGGAGCAGAAAGAAACGTGCTCATCTTTGACCTGGGAGGTGGCACTTTTGATGTGTCAATCCTCACTATTGAGGATGGAATCTTTGAGGTCAAGTCTACAGCTGGAGACACCCACTTGGGTGGAGAAGATTTTGACAACCGAATGGTCAACCATTTTATTGCTGAGTTTAAGCGCAAGCATAAGAAGGACATCAGTGAGAACAAGAGAGCTGTAAGACGCCTCCGTACTGCTTGTGAACGTGCTAAGCGTACCCTCTCTTCCAGCACCCAGGCCAGTATTGAGATCGATTCTCTCTATGAAGGAATCGACTTCTATACCTCCATTACCCGTGCCCGATTTGAAGAACTGAATGCTGACCTGTTCCGTGGCACCCTGGACCCAGTAGAGAAAGCCCTTCGAGATGCCAAACTAGACAAGTCACAGATTCATGATATTGTCCTGGTTGGTGGTTCTACTCGTATCCCCAAGATTCAGAAGCTTCTCCAAGACTTCTTCAATGGAAAAGAACTGAATAAGAGCATCAACCCTGATGAAGCTGTTGCTTATGGTGCAGCTGTCCAGGCAGCCATCTTGTCTGGAGACAAGTCTGAGAATGTTCAAGATTTGCTGCTCTTGGATGTCACTCCTCTTTCCCTTGGTATTGAAACTGCTGGTGGAGTCATGACTGTCCTCATCAAGCGTAATACCACCATTCCTACCAAGCAGACACAGACCTTCACTACCTATTCTGACAACCAGCCTGGTGTGCTTATTCAGGTTTATGAAGGCGAGCGTGCCATGACAAAGGATAACAACCTGCTTGGCAAGTTTGAACTCACAGGCATACCTCCTGCACCCCGAGGTGTTCCTCAGATTGAAGTCACTTTTGACATTGATGCCAATGGTATACTCAATGTCTCTGCTGTGGACAAGAGTACGGGAAAAGAGAACAAGATTACTATCACTAATGACAAGGGCCGTTTGAGCAAGGAAGACATTGAACGTATGGTCCAGGAAGCTGAGAAGTACAAAGCTGAAGATGAGAAGCAGAGGGACAAGGTGTCATCCAAGAATTCACTTGAGTCCTATGCCTTCAACATGAAAGCAACTGTTGAAGATGAGAAACTTCAAGGCAAGATTAACGATGAGGACAAACAGAAGATTCTGGACAAGTGTAATGAAATTATCAACTGGCTTGATAAGAATCAGACTGCTGAGAAGGAAGAATTTGAACATCAACAGAAAGAGCTGGAGAAAGTTTGCAACCCCATCATCACCAAGCTGTACCAGAGTGCAGGAGGCATGCCAGGAGGAATGCCTGGGGGATTTCCTGGTGGTGGAGCTCCTCCCTCTGGTGGTGCTTCCTCAGGGCCCACCATTGAAGAGGTTGATTAAGCCAACCAAGTGTAGATGTAGCATTGTTCCACACATTTAAAACATTTGAAGGACCTAAATTCGTAGCAAATTCTGTGGCA(配列番号30)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号30からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0061】
膜貫通ドメイン
APC標的化リガンドをエクソソームに誘導するのに適した膜貫通タンパク質をコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドも開示される。この種類のタンパク質の例としては、テトラスパニンCD9、CD63、及びCD81が挙げられる。
【0062】
したがって、いくつかの実施形態では、膜貫通タンパク質は、CD9であり、以下のアミノ酸配列:DQPTAACICIQRQVPPVPAARAPQSRTRSAQAKLALTMPVKGGTKCIKYLLFGFNFIFWLAGIAVLAIGLWLRFDSQTKSIFEQETNNNNSSFYTGVYILIGAGALMMLVGFLGCCGAVQESQCMLGLFFGFLLVIFAIEIAAAIWGYSHKDEVIKEVQEFYKDTYNKLKTKDEPQRETLKAIHYALNCCGLAGGVEQFISDICPKKDVLETFTVKSCPDAIKEVFDNKFHIIGAVGIGIAVVMIFGMIFSMILCCAIRRNREMVSQLTSLSRKVYPRLVGFFVCLFCFVCCLLFVFLPLILVFILHCIKAEVTLCLSFNASFNIDICSAGGLVCFGLYFFSCLFLLVILSRNPAMKGTIFARLTRYCTKNFFVFKIQMSINFNQVVTYIEDNLIHNKKLQCQKKKK(配列番号31)、又は配列番号31と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0063】
したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GACCAGCCTACAGCCGCCTGCATCTGTATCCAGCGCCAGGTCCCGCCAGTCCCAGCTGCGCGCGCCCCCCAGTCCCGCACCCGTTCGGCCCAGGCTAAGTTAGCCCTCACCATGCCGGTCAAAGGAGGCACCAAGTGCATCAAATACCTGCTGTTCGGATTTAACTTCATCTTCTGGCTTGCCGGGATTGCTGTCCTTGCCATTGGACTATGGCTCCGATTCGACTCTCAGACCAAGAGCATCTTCGAGCAAGAAACTAATAATAATAATTCCAGCTTCTACACAGGAGTCTATATTCTGATCGGAGCCGGCGCCCTCATGATGCTGGTGGGCTTCCTGGGCTGCTGCGGGGCTGTGCAGGAGTCCCAGTGCATGCTGGGACTGTTCTTCGGCTTCCTCTTGGTGATATTCGCCATTGAAATAGCTGCGGCCATCTGGGGATATTCCCACAAGGATGAGGTGATTAAGGAAGTCCAGGAGTTTTACAAGGACACCTACAACAAGCTGAAAACCAAGGATGAGCCCCAGCGGGAAACGCTGAAAGCCATCCACTATGCGTTGAACTGCTGTGGTTTGGCTGGGGGCGTGGAACAGTTTATCTCAGACATCTGCCCCAAGAAGGACGTACTCGAAACCTTCACCGTGAAGTCCTGTCCTGATGCCATCAAAGAGGTCTTCGACAATAAATTCCACATCATCGGCGCAGTGGGCATCGGCATTGCCGTGGTCATGATATTTGGCATGATCTTCAGTATGATCTTGTGCTGTGCTATCCGCAGGAACCGCGAGATGGTCTAGAGTCAGCTTACATCCCTGAGCAGGAAAGTTTACCCATGAAGATTGGTGGGATTTTTTGTTTGTTTGTTTTGTTTTGTTTGTTGTTTGTTGTTTGTTTTTTTGCCACTAATTTTAGTATTCATTCTGCATTGCTAGATAAAAGCTGAAGTTACTTTATGTTTGTCTTTTAATGCTTCATTCAATATTGACATTTGTAGTTGAGCGGGGGGTTTGGTTTGCTTTGGTTTATATTTTTTCAGTTGTTTGTTTTTGCTTGTTATATTAAGCAGAAATCCTGCAATGAAAGGTACTATATTTGCTAGACTCTAGACAAGATATTGTACATAAAAGAATTTTTTTGTCTTTAAATAGATACAAATGTCTATCAACTTTAATCAAGTTGTAACTTATATTGAAGACAATTTGATACATAATAAAAAATTATGACAATGTCAAAAAAAAAAAAAAA(配列番号32)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号32からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0064】
いくつかの実施形態では、膜貫通タンパク質は、CD63であり、以下のアミノ酸配列:MAVEGGMKCVKFLLYVLLLAFCACAVGLIAVGVGAQLVLSQTIIQGATPGSLLPVVIIAVGVFLFLVAFVGCCGACKENYCLMITFAIFLSLIMLVEVAAAIAGYVFRDKVMSEFNNNFRQQMENYPKNNHTASILDRMQADFKCCGAANYTDWEKIPSMSKNRVPDSCCINVTVGCGINFNEKAIHKEGCVEKIGGWLRKNVLVVAAAALGIAFVEVLGIVFACCLVKSIRSGYEVM(配列番号33)、又は配列番号33と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:ATGGCGGTGGAAGGAGGAATGAAATGTGTGAAGTTCTTGCTCTACGTCCTCCTGCTGGCCTTTTGCGCCTGTGCAGTGGGACTGATTGCCGTGGGTGTCGGGGCACAGCTTGTCCTGAGTCAGACCATAATCCAGGGGGCTACCCCTGGCTCTCTGTTGCCAGTGGTCATCATCGCAGTGGGTGTCTTCCTCTTCCTGGTGGCTTTTGTGGGCTGCTGCGGGGCCTGCAAGGAGAACTATTGTCTTATGATCACGTTTGCCATCTTTCTGTCTCTTATCATGTTGGTGGAGGTGGCCGCAGCCATTGCTGGCTATGTGTTTAGAGATAAGGTGATGTCAGAGTTTAATAACAACTTCCGGCAGCAGATGGAGAATTACCCGAAAAACAACCACACTGCTTCGATCCTGGACAGGATGCAGGCAGATTTTAAGTGCTGTGGGGCTGCTAACTACACAGATTGGGAGAAAATCCCTTCCATGTCGAAGAACCGAGTCCCCGACTCCTGCTGCATTAATGTTACTGTGGGCTGTGGGATTAATTTCAACGAGAAGGCGATCCATAAGGAGGGCTGTGTGGAGAAGATTGGGGGCTGGCTGAGGAAAAATGTGCTGGTGGTAGCTGCAGCAGCCCTTGGAATTGCTTTTGTCGAGGTTTTGGGAATTGTCTTTGCCTGCTGCCTCGTGAAGAGTATCAGAAGTGGCTACGAGGTGATG(配列番号34)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号34からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0065】
したがって、いくつかの実施形態では、膜貫通タンパク質は、CD81であり、以下のアミノ酸配列:GQRASAQRRRRRRPHRASCQASGAQRPTRPRAPAPPRPFLRAPAPRPARPPCRPPARPRAGPPAAQDRPAPRRPPAARAAMGVEGCTKCIKYLLFVFNFVFWLAGGVILGVALWLRHDPQTTNLLYLELGDKPAPNTFYVGIYILIAVGAVMMFVGFLGCYGAIQESQCLLGTFFTCLVILFACEVAAGIWGFVNKDQIAKDVKQFYDQALQQAVVDDDANNAKAVVKTFHETLDCCGSSTLTALTTSVLKNNLCPSGSNIISNLFKEDCHQKIDDLFSGKLYLIGIAAIVVAVIMIFEMILSMVLCCGIRNSSVYGPAALATGTSAVPPKPGHFRGGHHRLCIRFRYYSATRSLFTFGVLFLFTFLLPFQGRHMVACMSGDGPGSWGLEGRGPSALGSQGALPAQPGLSWEPLAQRLSLANLGGCVHPARPSCGLHSSPCSLLPRFESRVCGHSLPSCTCPFHVAFNCNHNILTPSFNKEGTSGML(配列番号35)、又は配列番号35と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、APC標的化リガンドをコードするポリヌクレオチドは、以下の核酸配列:GGCCAGAGAGCGAGCGCGCAACGGCGGCGACGGCGGCGACCCCACCGCGCATCCTGCCAGGCCTCCGGCGCCCAGCGCCCCACGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCTTTCTTCGCGCCCCCGCCCCTCGGCCCGCCAGGCCCCCTTGCCGGCCACCCGCCAGGCCCCGCGCCGGCCCGCCCGCCGCCCAGGACCGGCCCGCGCCCCGCAGGCCGCCCGCCGCCCGCGCCGCCATGGGAGTGGAGGGCTGCACCAAGTGCATCAAGTACCTGCTCTTCGTCTTCAATTTCGTCTTCTGGCTGGCTGGAGGCGTGATCCTGGGTGTGGCCCTGTGGCTCCGCCATGACCCGCAGACCACCAACCTCCTGTATCTGGAGCTGGGAGACAAGCCCGCGCCCAACACCTTCTATGTAGGCATCTACATCCTCATCGCTGTGGGCGCTGTCATGATGTTCGTTGGCTTCCTGGGCTGCTACGGGGCCATCCAGGAATCCCAGTGCCTGCTGGGGACGTTCTTCACCTGCCTGGTCATCCTGTTTGCCTGTGAGGTGGCCGCCGGCATCTGGGGCTTTGTCAACAAGGACCAGATCGCCAAGGATGTGAAGCAGTTCTATGACCAGGCCCTACAGCAGGCCGTGGTGGATGATGACGCCAACAACGCCAAGGCTGTGGTGAAGACCTTCCACGAGACGCTTGACTGCTGTGGCTCCAGCACACTGACTGCTTTGACCACCTCAGTGCTCAAGAACAATTTGTGTCCCTCGGGCAGCAACATCATCAGCAACCTCTTCAAGGAGGACTGCCACCAGAAGATCGATGACCTCTTCTCCGGGAAGCTGTACCTCATCGGCATTGCTGCCATCGTGGTCGCTGTGATCATGATCTTCGAGATGATCCTGAGCATGGTGCTGTGCTGTGGCATCCGGAACAGCTCCGTGTACTGAGGCCCCGCAGCTCTGGCCACAGGGACCTCTGCAGTGCCCCCTAAGTGACCCGGACACTTCCGAGGGGGCCATCACCGCCTGTGTATATAACGTTTCCGGTATTACTCTGCTACACGTAGCCTTTTTACTTTTGGGGTTTTGTTTTTGTTCTGAACTTTCCTGTTACCTTTTCAGGGCTGACGTCACATGTAGGTGGCGTGTATGAGTGGAGACGGGCCTGGGTCTTGGGGACTGGAGGGCAGGGGTCCTTCTGCCCTGGGGTCCCAGGGTGCTCTGCCTGCTCAGCCAGGCCTCTCCTGGGAGCCACTCGCCCAGAGACTCAGCTTGGCCAACTTGGGGGGCTGTGTCCACCCAGCCCGCCCGTCCTGTGGGCTGCACAGCTCACCTTGTTCCCTCCTGCCCCGGTTCGAGAGCCGAGTCTGTGGGCACTCTCTGCCTTCATGCACCTGTCCTTTCTAACACGTCGCCTTCAACTGTAATCACAACATCCTGACTCCGTCATTTAATAAAGAAGGAACATCAGGCATGCTA(配列番号36)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号36からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列を有する。
【0066】
実施例融合タンパク質
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、SARS-COV2スパイクタンパク質+ポリHisタグ+CD63を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYTHHHHHHMAVEGGMKCVKFLLYVLLLAFCACAVGLIAVGVGAQLVLSQTIIQGATPGSLLPVVIIAVGVFLFLVAFVGCCGACKENYCLMITFAIFLSLIMLVEVAAAIAGYVFRDKVMSEFNNNFRQQMENYPKNNHTASILDRMQADFKCCGAANYTDWEKIPSMSKNRVPDSCCINVTVGCGINFNEKAIHKEGCVEKIGGWLRKNVLVVAAAALGIAFVEVLGIVFACCLVKSIRSGYEVM(配列番号41)、又は配列番号41と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:ATGTTTGTTTTTCTTGTTTTATTGCCACTAGTCTCTAGTCAGTGTGTTAATCTTACAACCAGAACTCAATTACCCCCTGCATACACTAATTCTTTCACACGTGGTGTTTATTACCCTGACAAAGTTTTCAGATCCTCAGTTTTACATTCAACTCAGGACTTGTTCTTACCTTTCTTTTCCAATGTTACTTGGTTCCATGCTATACATGTCTCTGGGACCAATGGTACTAAGAGGTTTGATAACCCTGTCCTACCATTTAATGATGGTGTTTATTTTGCTTCCACTGAGAAGTCTAACATAATAAGAGGCTGGATTTTTGGTACTACTTTAGATTCGAAGACCCAGTCCCTACTTATTGTTAATAACGCTACTAATGTTGTTATTAAAGTCTGTGAATTTCAATTTTGTAATGATCCATTTTTGGGTGTTTATTACCACAAAAACAACAAAAGTTGGATGGAAAGTGAGTTCAGAGTTTATTCTAGTGCGAATAATTGCACTTTTGAATATGTCTCTCAGCCTTTTCTTATGGACCTTGAAGGAAAACAGGGTAATTTCAAAAATCTTAGGGAATTTGTGTTTAAGAATATTGATGGTTATTTTAAAATATATTCTAAGCACACGCCTATTAATTTAGTGCGTGATCTCCCTCAGGGTTTTTCGGCTTTAGAACCATTGGTAGATTTGCCAATAGGTATTAACATCACTAGGTTTCAAACTTTACTTGCTTTACATAGAAGTTATTTGACTCCTGGTGATTCTTCTTCAGGTTGGACAGCTGGTGCTGCAGCTTATTATGTGGGTTATCTTCAACCTAGGACTTTTCTATTAAAATATAATGAAAATGGAACCATTACAGATGCTGTAGACTGTGCACTTGACCCTCTCTCAGAAACAAAGTGTACGTTGAAATCCTTCACTGTAGAAAAAGGAATCTATCAAACTTCTAACTTTAGAGTCCAACCAACAGAATCTATTGTTAGATTTCCTAATATTACAAACTTGTGCCCTTTTGGTGAAGTTTTTAACGCCACCAGATTTGCATCTGTTTATGCTTGGAACAGGAAGAGAATCAGCAACTGTGTTGCTGATTATTCTGTCCTATATAATTCCGCATCATTTTCCACTTTTAAGTGTTATGGAGTGTCTCCTACTAAATTAAATGATCTCTGCTTTACTAATGTCTATGCAGATTCATTTGTAATTAGAGGTGATGAAGTCAGACAAATCGCTCCAGGGCAAACTGGAAAGATTGCTGATTATAATTATAAATTACCAGATGATTTTACAGGCTGCGTTATAGCTTGGAATTCTAACAATCTTGATTCTAAGGTTGGTGGTAATTATAATTACCTGTATAGATTGTTTAGGAAGTCTAATCTCAAACCTTTTGAGAGAGATATTTCAACTGAAATCTATCAGGCCGGTAGCACACCTTGTAATGGTGTTGAAGGTTTTAATTGTTACTTTCCTTTACAATCATATGGTTTCCAACCCACTAATGGTGTTGGTTACCAACCATACAGAGTAGTAGTACTTTCTTTTGAACTTCTACATGCACCAGCAACTGTTTGTGGACCTAAAAAGTCTACTAATTTGGTTAAAAACAAATGTGTCAATTTCAACTTCAATGGTTTAACAGGCACAGGTGTTCTTACTGAGTCTAACAAAAAGTTTCTGCCTTTCCAACAATTTGGCAGAGACATTGCTGACACTACTGATGCTGTCCGTGATCCACAGACACTTGAGATTCTTGACATTACACCATGTTCTTTTGGTGGTGTCAGTGTTATAACACCAGGAACAAATACTTCTAACCAGGTTGCTGTTCTTTATCAGGATGTTAACTGCACAGAAGTCCCTGTTGCTATTCATGCAGATCAACTTACTCCTACTTGGCGTGTTTATTCTACAGGTTCTAATGTTTTTCAAACACGTGCAGGCTGTTTAATAGGGGCTGAACATGTCAACAACTCATATGAGTGTGACATACCCATTGGTGCAGGTATATGCGCTAGTTATCAGACTCAGACTAATTCTCCTCGGCGGGCACGTAGTGTAGCTAGTCAATCCATCATTGCCTACACTATGTCACTTGGTGCAGAAAATTCAGTTGCTTACTCTAATAACTCTATTGCCATACCCACAAATTTTACTATTAGTGTTACCACAGAAATTCTACCAGTGTCTATGACCAAGACATCAGTAGATTGTACAATGTACATTTGTGGTGATTCAACTGAATGCAGCAATCTTTTGTTGCAATATGGCAGTTTTTGTACACAATTAAACCGTGCTTTAACTGGAATAGCTGTTGAACAAGACAAAAACACCCAAGAAGTTTTTGCACAAGTCAAACAAATTTACAAAACACCACCAATTAAAGATTTTGGTGGTTTTAATTTTTCACAAATATTACCAGATCCATCAAAACCAAGCAAGAGGTCATTTATTGAAGATCTACTTTTCAACAAAGTGACACTTGCAGATGCTGGCTTCATCAAACAATATGGTGATTGCCTTGGTGATATTGCTGCTAGAGACCTCATTTGTGCACAAAAGTTTAACGGCCTTACTGTTTTGCCACCTTTGCTCACAGATGAAATGATTGCTCAATACACTTCTGCACTGTTAGCGGGTACAATCACTTCTGGTTGGACCTTTGGTGCAGGTGCTGCATTACAAATACCATTTGCTATGCAAATGGCTTATAGGTTTAATGGTATTGGAGTTACACAGAATGTTCTCTATGAGAACCAAAAATTGATTGCCAACCAATTTAATAGTGCTATTGGCAAAATTCAAGACTCACTTTCTTCCACAGCAAGTGCACTTGGAAAACTTCAAGATGTGGTCAACCAAAATGCACAAGCTTTAAACACGCTTGTTAAACAACTTAGCTCCAATTTTGGTGCAATTTCAAGTGTTTTAAATGATATCCTTTCACGTCTTGACAAAGTTGAGGCTGAAGTGCAAATTGATAGGTTGATCACAGGCAGACTTCAAAGTTTGCAGACATATGTGACTCAACAATTAATTAGAGCTGCAGAAATCAGAGCTTCTGCTAATCTTGCTGCTACTAAAATGTCAGAGTGTGTACTTGGACAATCAAAAAGAGTTGATTTTTGTGGAAAGGGCTATCATCTTATGTCCTTCCCTCAGTCAGCACCTCATGGTGTAGTCTTCTTGCATGTGACTTATGTCCCTGCACAAGAAAAGAACTTCACAACTGCTCCTGCCATTTGTCATGATGGAAAAGCACACTTTCCTCGTGAAGGTGTCTTTGTTTCAAATGGCACACACTGGTTTGTAACACAAA
GGAATTTTTATGAACCACAAATCATTACTACAGACAACACATTTGTGTCTGGTAACTGTGATGTTGTAATAGGAATTGTCAACAACACAGTTTATGATCCTTTGCAACCTGAATTAGACTCATTCAAGGAGGAGTTAGATAAATATTTTAAGAATCATACATCACCAGATGTTGATTTAGGTGACATCTCTGGCATTAATGCTTCAGTTGTAAACATTCAAAAAGAAATTGACCGCCTCAATGAGGTTGCCAAGAATTTAAATGAATCTCTCATCGATCTCCAAGAACTTGGAAAGTATGAGCAGTATATAAAATGGCCATGGTACATTTGGCTAGGTTTTATAGCTGGCTTGATTGCCATAGTAATGGTGACAATTATGCTTTGCTGTATGACCAGTTGCTGTAGTTGTCTCAAGGGCTGTTGTTCTTGTGGATCCTGCTGCAAATTTGATGAAGACGACTCTGAGCCAGTGCTCAAAGGAGTCAAATTACATTACACCCACCACCACCACCACCACATGGCGGTGGAAGGAGGAATGAAATGTGTGAAGTTCTTGCTCTACGTCCTCCTGCTGGCCTTTTGCGCCTGTGCAGTGGGACTGATTGCCGTGGGTGTCGGGGCACAGCTTGTCCTGAGTCAGACCATAATCCAGGGGGCTACCCCTGGCTCTCTGTTGCCAGTGGTCATCATCGCAGTGGGTGTCTTCCTCTTCCTGGTGGCTTTTGTGGGCTGCTGCGGGGCCTGCAAGGAGAACTATTGTCTTATGATCACGTTTGCCATCTTTCTGTCTCTTATCATGTTGGTGGAGGTGGCCGCAGCCATTGCTGGCTATGTGTTTAGAGATAAGGTGATGTCAGAGTTTAATAACAACTTCCGGCAGCAGATGGAGAATTACCCGAAAAACAACCACACTGCTTCGATCCTGGACAGGATGCAGGCAGATTTTAAGTGCTGTGGGGCTGCTAACTACACAGATTGGGAGAAAATCCCTTCCATGTCGAAGAACCGAGTCCCCGACTCCTGCTGCATTAATGTTACTGTGGGCTGTGGGATTAATTTCAACGAGAAGGCGATCCATAAGGAGGGCTGTGTGGAGAAGATTGGGGGCTGGCTGAGGAAAAATGTGCTGGTGGTAGCTGCAGCAGCCCTTGGAATTGCTTTTGTCGAGGTTTTGGGAATTGTCTTTGCCTGCTGCCTCGTGAAGAGTATCAGAAGTGGCTACGAGGTGATG(配列番号42)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号42からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0067】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、Her-2/neu+FLAG+CD81を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:KGRPWPLWSGPRAAARPFPRGPLLRRAPGPHPSQHPAPRALPAGSSRSHGAGAAVSTMELAALCRWGLLLALLPPGAASTQVCTGTDMKLRLPASPETHLDMLRHLYQGCQVVQGNLELTYLPTNASLSFLQDIQEVQGYVLIAHNQVRQVPLQRLRIVRGTQLFEDNYALAVLDNGDPLNNTTPVTGASPGGLRELQLRSLTEILKGGVLIQRNPQLCYQDTILWKDIFHKNNQLALTLIDTNRSRACHPCSPMCKGSRCWGESSEDCQSLTRTVCAGGCARCKGPLPTDCCHEQCAAGCTGPKHSDCLACLHFNHSGICELHCPALVTYNTDTFESMPNPEGRYTFGASCVTACPYNYLSTDVGSCTLVCPLHNQEVTAEDGTQRCEKCSKPCARVCYGLGMEHLREVRAVTSANIQEFAGCKKIFGSLAFLPESFDGDPASNTAPLQPEQLQVFETLEEITGYLYISAWPDSLPDLSVFQNLQVIRGRILHNGAYSLTLQGLGISWLGLRSLRELGSGLALIHHNTHLCFVHTVPWDQLFRNPHQALLHTANRPEDECVGEGLACHQLCARGHCWGPGPTQCVNCSQFLRGQECVEECRVLQGLPREYVNARHCLPCHPECQPQNGSVTCFGPEADQCVACAHYKDPPFCVARCPSGVKPDLSYMPIWKFPDEEGACQPCPINCTHSCVDLDDKGCPAEQRASPLTSIISAVVGILLVVVLGVVFGILIKRRQQKIRKYTMRRLLQETELVEPLTPSGAMPNQAQMRILKETELRKVKVLGSGAFGTVYKGIWIPDGENVKIPVAIKVLRENTSPKANKEILDEAYVMAGVGSPYVSRLLGICLTSTVQLVTQLMPYGCLLDHVRENRGRLGSQDLLNWCMQIAKGMSYLEDVRLVHRDLAARNVLVKSPNHVKITDFGLARLLDIDETEYHADGGKVPIKWMALESILRRRFTHQSDVWSYGVTVWELMTFGAKPYDGIPAREIPDLLEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDSECRPRFRELVSEFSRMARDPQRFVVIQNEDLGPASPLDSTFYRSLLEDDDMGDLVDAEEYLVPQQGFFCPDPAPGAGGMVHHRHRSSSTRSGGGDLTLGLEPSEEEAPRSPLAPSEGAGSDVFDGDLGMGAAKGLQSLPTHDPSPLQRYSEDPTVPLPSETDGYVAPLTCSPQPEYVNQPDVRPQPPSPREGPLPAARPAGATLERPKTLSPGKNGVVKDVFAFGGAVENPEYLTPQGGAAPQPHPPPAFSPAFDNLYYWDQDPPERGAPPSTFKGTPTAENPEYLGLDVPVTRRPSPQKPCVLREQGRPDFCWHQEVGGPSDHFQGNLPCQEPVLRNLPSCLSSQMAGRGPASLEEEQHWGVFVDSEALPNETLGSSGCHSPAWPFPSRSWVLKALGKLAEGKRPGSVEQKRPIQRLSLKPSTAPHEEGTAMVSVSRLCTECFSVFLLFLFCFFKDEIKTQGEDYKDDDDKGQRASAQRRRRRRPHRASCQASGAQRPTRPRAPAPPRPFLRAPAPRPARPPCRPPARPRAGPPAAQDRPAPRRPPAARAAMGVEGCTKCIKYLLFVFNFVFWLAGGVILGVALWLRHDPQTTNLLYLELGDKPAPNTFYVGIYILIAVGAVMMFVGFLGCYGAIQESQCLLGTFFTCLVILFACEVAAGIWGFVNKDQIAKDVKQFYDQALQQAVVDDDANNAKAVVKTFHETLDCCGSSTLTALTTSVLKNNLCPSGSNIISNLFKEDCHQKIDDLFSGKLYLIGIAAIVVAVIMIFEMILSMVLCCGIRNSSVYGPAALATGTSAVPPKPGHFRGGHHRLCIRFRYYSATRSLFTFGVLFLFTFLLPFQGRHMVACMSGDGPGSWGLEGRGPSALGSQGALPAQPGLSWEPLAQRLSLANLGGCVHPARPSCGLHSSPCSLLPRFESRVCGHSLPSCTCPF-HVAFNCNHNILTPSFNKEGTSGML(配列番号43)、又は配列番号43と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:AAGGGGAGGTAACCCTGGCCCCTTTGGTCGGGGCCCCGGGCAGCCGCGCGCCCCTTCCCACGGGGCCCTTTACTGCGCCGCGCGCCCGGCCCCCACCCCTCGCAGCACCCCGCGCCCCGCGCCCTCCCAGCCGGGTCCAGCCGGAGCCATGGGGCCGGAGCCGCAGTGAGCACCATGGAGCTGGCGGCCTTGTGCCGCTGGGGGCTCCTCCTCGCCCTCTTGCCCCCCGGAGCCGCGAGCACCCAAGTGTGCACCGGCACAGACATGAAGCTGCGGCTCCCTGCCAGTCCCGAGACCCACCTGGACATGCTCCGCCACCTCTACCAGGGCTGCCAGGTGGTGCAGGGAAACCTGGAACTCACCTACCTGCCCACCAATGCCAGCCTGTCCTTCCTGCAGGATATCCAGGAGGTGCAGGGCTACGTGCTCATCGCTCACAACCAAGTGAGGCAGGTCCCACTGCAGAGGCTGCGGATTGTGCGAGGCACCCAGCTCTTTGAGGACAACTATGCCCTGGCCGTGCTAGACAATGGAGACCCGCTGAACAATACCACCCCTGTCACAGGGGCCTCCCCAGGAGGCCTGCGGGAGCTGCAGCTTCGAAGCCTCACAGAGATCTTGAAAGGAGGGGTCTTGATCCAGCGGAACCCCCAGCTCTGCTACCAGGACACGATTTTGTGGAAGGACATCTTCCACAAGAACAACCAGCTGGCTCTCACACTGATAGACACCAACCGCTCTCGGGCCTGCCACCCCTGTTCTCCGATGTGTAAGGGCTCCCGCTGCTGGGGAGAGAGTTCTGAGGATTGTCAGAGCCTGACGCGCACTGTCTGTGCCGGTGGCTGTGCCCGCTGCAAGGGGCCACTGCCCACTGACTGCTGCCATGAGCAGTGTGCTGCCGGCTGCACGGGCCCCAAGCACTCTGACTGCCTGGCCTGCCTCCACTTCAACCACAGTGGCATCTGTGAGCTGCACTGCCCAGCCCTGGTCACCTACAACACAGACACGTTTGAGTCCATGCCCAATCCCGAGGGCCGGTATACATTCGGCGCCAGCTGTGTGACTGCCTGTCCCTACAACTACCTTTCTACGGACGTGGGATCCTGCACCCTCGTCTGCCCCCTGCACAACCAAGAGGTGACAGCAGAGGATGGAACACAGCGGTGTGAGAAGTGCAGCAAGCCCTGTGCCCGAGTGTGCTATGGTCTGGGCATGGAGCACTTGCGAGAGGTGAGGGCAGTTACCAGTGCCAATATCCAGGAGTTTGCTGGCTGCAAGAAGATCTTTGGGAGCCTGGCATTTCTGCCGGAGAGCTTTGATGGGGACCCAGCCTCCAACACTGCCCCGCTCCAGCCAGAGCAGCTCCAAGTGTTTGAGACTCTGGAAGAGATCACAGGTTACCTATACATCTCAGCATGGCCGGACAGCCTGCCTGACCTCAGCGTCTTCCAGAACCTGCAAGTAATCCGGGGACGAATTCTGCACAATGGCGCCTACTCGCTGACCCTGCAAGGGCTGGGCATCAGCTGGCTGGGGCTGCGCTCACTGAGGGAACTGGGCAGTGGACTGGCCCTCATCCACCATAACACCCACCTCTGCTTCGTGCACACGGTGCCCTGGGACCAGCTCTTTCGGAACCCGCACCAAGCTCTGCTCCACACTGCCAACCGGCCAGAGGACGAGTGTGTGGGCGAGGGCCTGGCCTGCCACCAGCTGTGCGCCCGAGGGCACTGCTGGGGTCCAGGGCCCACCCAGTGTGTCAACTGCAGCCAGTTCCTTCGGGGCCAGGAGTGCGTGGAGGAATGCCGAGTACTGCAGGGGCTCCCCAGGGAGTATGTGAATGCCAGGCACTGTTTGCCGTGCCACCCTGAGTGTCAGCCCCAGAATGGCTCAGTGACCTGTTTTGGACCGGAGGCTGACCAGTGTGTGGCCTGTGCCCACTATAAGGACCCTCCCTTCTGCGTGGCCCGCTGCCCCAGCGGTGTGAAACCTGACCTCTCCTACATGCCCATCTGGAAGTTTCCAGATGAGGAGGGCGCATGCCAGCCTTGCCCCATCAACTGCACCCACTCCTGTGTGGACCTGGATGACAAGGGCTGCCCCGCCGAGCAGAGAGCCAGCCCTCTGACGTCCATCATCTCTGCGGTGGTTGGCATTCTGCTGGTCGTGGTCTTGGGGGTGGTCTTTGGGATCCTCATCAAGCGACGGCAGCAGAAGATCCGGAAGTACACGATGCGGAGACTGCTGCAGGAAACGGAGCTGGTGGAGCCGCTGACACCTAGCGGAGCGATGCCCAACCAGGCGCAGATGCGGATCCTGAAAGAGACGGAGCTGAGGAAGGTGAAGGTGCTTGGATCTGGCGCTTTTGGCACAGTCTACAAGGGCATCTGGATCCCTGATGGGGAGAATGTGAAAATTCCAGTGGCCATCAAAGTGTTGAGGGAAAACACATCCCCCAAAGCCAACAAAGAAATCTTAGACGAAGCATACGTGATGGCTGGTGTGGGCTCCCCATATGTCTCCCGCCTTCTGGGCATCTGCCTGACATCCACGGTGCAGCTGGTGACACAGCTTATGCCCTATGGCTGCCTCTTAGACCATGTCCGGGAAAACCGCGGACGCCTGGGCTCCCAGGACCTGCTGAACTGGTGTATGCAGATTGCCAAGGGGATGAGCTACCTGGAGGATGTGCGGCTCGTACACAGGGACTTGGCCGCTCGGAACGTGCTGGTCAAGAGTCCCAACCATGTCAAAATTACAGACTTCGGGCTGGCTCGGCTGCTGGACATTGACGAGACAGAGTACCATGCAGATGGGGGCAAGGTGCCCATCAAGTGGATGGCGCTGGAGTCCATTCTCCGCCGGCGG
TTCACCCACCAGAGTGATGTGTGGAGTTATGGTGTGACTGTGTGGGAGCTGATGACTTTTGGGGCCAAACCTTACGATGGGATCCCAGCCCGGGAGATCCCTGACCTGCTGGAAAAGGGGGAGCGGCTGCCCCAGCCCCCCATCTGCACCATTGATGTCTACATGATCATGGTCAAATGTTGGATGATTGACTCTGAATGTCGGCCAAGATTCCGGGAGTTGGTGTCTGAATTCTCCCGCATGGCCAGGGACCCCCAGCGCTTTGTGGTCATCCAGAATGAGGACTTGGGCCCAGCCAGTCCCTTGGACAGCACCTTCTACCGCTCACTGCTGGAGGACGATGACATGGGGGACCTGGTGGATGCTGAGGAGTATCTGGTACCCCAGCAGGGCTTCTTCTGTCCAGACCCTGCCCCGGGCGCTGGGGGCATGGTCCACCACAGGCACCGCAGCTCATCTACCAGGAGTGGCGGTGGGGACCTGACACTAGGGCTGGAGCCCTCTGAAGAGGAGGCCCCCAGGTCTCCACTGGCACCCTCCGAAGGGGCTGGCTCCGATGTATTTGATGGTGACCTGGGAATGGGGGCAGCCAAGGGGCTGCAAAGCCTCCCCACACATGACCCCAGCCCTCTACAGCGGTACAGTGAGGACCCCACAGTACCCCTGCCCTCTGAGACTGATGGCTACGTTGCCCCCCTGACCTGCAGCCCCCAGCCTGAATATGTGAACCAGCCAGATGTTCGGCCCCAGCCCCCTTCGCCCCGAGAGGGCCCTCTGCCTGCTGCCCGACCTGCTGGTGCCACTCTGGAAAGGCCCAAGACTCTCTCCCCAGGGAAGAATGGGGTCGTCAAAGACGTTTTTGCCTTTGGGGGTGCCGTGGAGAACCCCGAGTACTTGACACCCCAGGGAGGAGCTGCCCCTCAGCCCCACCCTCCTCCTGCCTTCAGCCCAGCCTTCGACAACCTCTATTACTGGGACCAGGACCCACCAGAGCGGGGGGCTCCACCCAGCACCTTCAAAGGGACACCTACGGCAGAGAACCCAGAGTACCTGGGTCTGGACGTGCCAGTGTGAACCAGAAGGCCAAGTCCGCAGAAGCCCTGATGTGTCCTCAGGGAGCAGGGAAGGCCTGACTTCTGCTGGCATCAAGAGGTGGGAGGGCCCTCCGACCACTTCCAGGGGAACCTGCCATGCCAGGAACCTGTCCTAAGGAACCTTCCTTCCTGCTTGAGTTCCCAGATGGCTGGAAGGGGTCCAGCCTCGTTGGAAGAGGAACAGCACTGGGGAGTCTTTGTGGATTCTGAGGCCCTGCCCAATGAGACTCTAGGGTCCAGTGGATGCCACAGCCCAGCTTGGCCCTTTCCTTCCAGATCCTGGGTACTGAAAGCCTTAGGGAAGCTGGCCTGAGAGGGGAAGCGGCCCTAAGGGAGTGTCTAAGAACAAAAGCGACCCATTCAGAGACTGTCCCTGAAACCTAGTACTGCCCCCCATGAGGAAGGAACAGCAATGGTGTCAGTATCCAGGCTTTGTACAGAGTGCTTTTCTGTTTAGTTTTTACTTTTTTTGTTTTGTTTTTTTAAAGATGAAATAAAGACCCAGGGGGAGGACTACAAGGACGACGACGACAAGGGCCAGAGAGCGAGCGCGCAACGGCGGCGACGGCGGCGACCCCACCGCGCATCCTGCCAGGCCTCCGGCGCCCAGCGCCCCACGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCTTTCTTCGCGCCCCCGCCCCTCGGCCCGCCAGGCCCCCTTGCCGGCCACCCGCCAGGCCCCGCGCCGGCCCGCCCGCCGCCCAGGACCGGCCCGCGCCCCGCAGGCCGCCCGCCGCCCGCGCCGCCATGGGAGTGGAGGGCTGCACCAAGTGCATCAAGTACCTGCTCTTCGTCTTCAATTTCGTCTTCTGGCTGGCTGGAGGCGTGATCCTGGGTGTGGCCCTGTGGCTCCGCCATGACCCGCAGACCACCAACCTCCTGTATCTGGAGCTGGGAGACAAGCCCGCGCCCAACACCTTCTATGTAGGCATCTACATCCTCATCGCTGTGGGCGCTGTCATGATGTTCGTTGGCTTCCTGGGCTGCTACGGGGCCATCCAGGAATCCCAGTGCCTGCTGGGGACGTTCTTCACCTGCCTGGTCATCCTGTTTGCCTGTGAGGTGGCCGCCGGCATCTGGGGCTTTGTCAACAAGGACCAGATCGCCAAGGATGTGAAGCAGTTCTATGACCAGGCCCTACAGCAGGCCGTGGTGGATGATGACGCCAACAACGCCAAGGCTGTGGTGAAGACCTTCCACGAGACGCTTGACTGCTGTGGCTCCAGCACACTGACTGCTTTGACCACCTCAGTGCTCAAGAACAATTTGTGTCCCTCGGGCAGCAACATCATCAGCAACCTCTTCAAGGAGGACTGCCACCAGAAGATCGATGACCTCTTCTCCGGGAAGCTGTACCTCATCGGCATTGCTGCCATCGTGGTCGCTGTGATCATGATCTTCGAGATGATCCTGAGCATGGTGCTGTGCTGTGGCATCCGGAACAGCTCCGTGTACTGAGGCCCCGCAGCTCTGGCCACAGGGACCTCTGCAGTGCCCCCTAAGTGACCCGGACACTTCCGAGGGGGCCATCACCGCCTGTGTATATAACGTTTCCGGTATTACTCTGCTACACGTAGCCTTTTTACTTTTGGGGTTTTGTTTTTGTTCTGAACTTTCCTGTTACCTTTTCAGGGCTGACGTCACATGTAGGTGGCGTGTATGAGTGGAGACGGGCCTGGGTCTTGGGGACTGGAGGGCAGGGGTCCTTCTGCCCTGGGGTCCCAGGGTGCTCTGCCTGCTCAGCCAGGCCTCTCCTGGGAGCCACTCGCCCAGAGACTCAGCTTGGCCAACTTGGGGGGCTGTGTCCACCCAGCCCGCCCGTCCTGTGGGCTGCACAGCTCACCTTGTTCCCTCCTGCCCCGGTTCGAGAGCCGAGTCTGTGGGCACTCTCTGCCTTCATGCACCTGTCCTTTCTAACACGTCGCCTTCAACTGTAATCACAACATCCTGACTCCGTCATTTAATAAAGAAGGAACATCAGGCATGCTA(配列番号44)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号44からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0068】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、Staphylococcus aureus抗原+MBP+CD9を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:MKLFAFIFICVKSCSLLFMLNGNPRPEQLNKASEFTGLMDNMRYLYDDKHVSETNIKAQEKFLQHDLLFKINGSKIDGSKILKTEFNNKSLSDKYKNKNVDLFGTNYYNQCYFSADNMELNDGRLIEKTCMYGGVTEHDGNQIDKNNLTDNSHNILIKVYENERNTLSFDISTNKKNITAQEIDYKVRNYLLKHKNLYKFNSSPYETGYIKFIEGNGHSFWYDMMPESGEKFYPTKYLLIYNDNKTVESKSINVEVHLTKKRSRRASWSGSTATRATTAWPRWARSSRRTPASRPWSTPTSWRRSSPRWPPPATAPTSSSGPTTGSAATPRAACWPRSPPTRPSRTSCTPSPGTPGTTASSPTPSPWRPASTTRTCCPTPPRPGRRSPPWTRSRPRARAPCSTCRSPTSPGPSPPTAATPSSTRTASTTSRTWAWTTPAPRPAPSWWTSEQAHERRHRLQHRRGRLQQGRDRHDHQRPLGLEQHRHQQGELRRDRAAHLQGPAQQALRGRAERRHQRRQPQQGAGQGVPGELPADRRGPGGREQGQAPGRRGPEELRGGAGQGPQDRRHHGERPEGRDHAQHPPDERLLVRREDRRDQRRQRQADRGRGPEGRPDQQQQQQQQQQQQQQPGHRGQGPAYSRLHLYPAPGPASPSCARPPVPHPFGPGVSPHHAGQRRHQVHQIPAVRILHLLACRDCCPCHWTMAPIRLSDQEHLRARNFQLLHRSLYSDRSRRPHDAGGLPGLLRGCAGVPVHAGTVLRLPLGDIRHNSCGHLGIFPQGGDGSPGVLQGHLQQAENQGAPAGNAESHPLCVELLWFGWGRGTVYLRHLPQEGRTRNLHREVLSCHQRGLRQIPHHRRSGHRHCRGHDIWHDLQYDLVLCYPQEPRDGLESAYIPEQESLPMKIGGIFCLFVLFCLLFVVCFFATNFSIHSALLDKSSYFMFVFCFIQYHLLSGGFGLLWFIFFQLFVFACYIKQKSCNERYYICTLDKILYIKEFFCLIDTNVYQLSSCNLYRQFDTKIMTMSKKKK(配列番号45)、又は配列番号45と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:ATGAAGTTATTTGCTTTTATCTTCATATGTGTTAAGTCTTGCAGCTTACTATTTATGTTAAATGGCAATCCTAGACCAGAACAATTGAATAAAGCGAGTGAATTCACTGGTCTAATGGATAATATGAGGTATTTGTATGACGATAAACACGTATCAGAAACAAACATTAAAGCCCAAGAGAAGTTTTTACAACATGATTTATTATTTAAAATAAATGGCTCTAAAATTGATGGTTCTAAAATTTTAAAAACAGAATTTAATAATAAAAGCCTTTCGGATAAATACAAAAATAAAAACGTAGATTTGTTTGGGACAAACTATTATAATCAATGCTATTTTTCAGCGGATAATATGGAATTAAATGATGGTAGACTAATTGAAAAAACGTGTATGTATGGCGGTGTGACCGAGCATGATGGAAATCAAATAGATAAAAATAATCTAACTGATAACTCTCATAATATCTTAATTAAAGTATACGAAAACGAAAGAAACACATTATCTTTTGATATATCTACCAATAAGAAAAACATAACAGCACAAGAAATAGATTATAAAGTTAGAAACTATTTACTTAAGCATAAAAATTTATATAAATTTAATAGTTCGCCTTATGAGACTGGCTATATAAAGTTTATCGAAGGAAATGGTCATTCTTTTTGGTATGATATGATGCCTGAATCTGGTGAAAAATTTTATCCGACTAAATATTTACTAATTTATAATGATAATAAGACAGTTGAGAGTAAATCTATTAATGTAGAAGTTCATTTAACCAAAAAATAATGAAGATCGAGGAGGGCAAGCTGGTGATCTGGATCAACGGCGACAAGGGCTACAACGGCCTGGCCGAGGTGGGCAAGAAGTTCGAGAAGGACACCGGCATCAAGGTGACCGTGGAGCACCCCGACAAGCTGGAGGAGAAGTTCCCCCAGGTGGCCGCCACCGGCGACGGCCCCGACATCATCTTCTGGGCCCACGACAGGTTCGGCGGCTACGCCCAGAGCGGCCTGCTGGCCGAGATCACCCCCGACAAGGCCTTCCAGGACAAGCTGTACCCCTTCACCTGGGACGCCGTGAGGTACAACGGCAAGCTGATCGCCTACCCCATCGCCGTGGAGGCCCTGAGCCTGATCTACAACAAGGACCTGCTGCCCAACCCCCCCAAGACCTGGGAGGAGATCCCCGCCCTGGACAAGGAGCTGAAGGCCAAGGGCAAGAGCGCCCTGATGTTCAACCTGCAGGAGCCCTACTTCACCTGGCCCCTGATCGCCGCCGACGGCGGCTACGCCTTCAAGTACGAGAACGGCAAGTACGACATCAAGGACGTGGGCGTGGACAACGCCGGCGCCAAGGCCGGCCTGACCTTCCTGGTGGACCTGATCAGAACAAGCACATGAACGCCGACACCGACTACAGCATCGCCGAGGCCGCCTTCAACAAGGGCGAGACCGCCATGACCATCAACGGCCCCTGGGCCTGGAGCAACATCGACACCAGCAAGGTGAACTACGGCGTGACCGTGCTGCCCACCTTCAAGGGCCAGCCCAGCAAGCCCTTCGTGGGCGTGCTGAGCGCCGGCATCAACGCCGCCAGCCCCAACAAGGAGCTGGCCAAGGAGTTCCTGGAGAACTACCTGCTGACCGACGAGGGCCTGGAGGCCGTGAACAAGGACAAGCCCCTGGGCGCCGTGGCCCTGAAGAGCTACGAGGAGGAGCTGGCCAAGGACCCCAGGATCGCCGCCACCATGGAGAACGCCCAGAAGGGCGAGATCATGCCCAACATCCCCCAGATGAGCGCCTTCTGGTACGCCGTGAGGACCGCCGTGATCAACGCCGCCAGCGGCAGGCAGACCGTGGACGAGGCCCTGAAGGACGCCCAGACCAACAGCAGCAGCAACAACAACAACAACAACAACAACAACAACCTGGGCATCGAGGGCAGGGACCAGCCTACAGCCGCCTGCATCTGTATCCAGCGCCAGGTCCCGCCAGTCCCAGCTGCGCGCGCCCCCCAGTCCCGCACCCGTTCGGCCCAGGCTAAGTTAGCCCTCACCATGCCGGTCAAAGGAGGCACCAAGTGCATCAAATACCTGCTGTTCGGATTTAACTTCATCTTCTGGCTTGCCGGGATTGCTGTCCTTGCCATTGGACTATGGCTCCGATTCGACTCTCAGACCAAGAGCATCTTCGAGCAAGAAACTAATAATAATAATTCCAGCTTCTACACAGGAGTCTATATTCTGATCGGAGCCGGCGCCCTCATGATGCTGGTGGGCTTCCTGGGCTGCTGCGGGGCTGTGCAGGAGTCCCAGTGCATGCTGGGACTGTTCTTCGGCTTCCTCTTGGTGATATTCGCCATTGAAATAGCTGCGGCCATCTGGGGATATTCCCACAAGGATGAGGTGATTAAGGAAGTCCAGGAGTTTTACAAGGACACCTACAACAAGCTGAAAACCAAGGATGAGCCCCAGCGGGAAACGCTGAAAGCCATCCACTATGCGTTGAACTGCTGTGGTTTGGCTGGGGGCGTGGAACAGTTTATCTCAGACATCTGCCCCAAGAAGGACGTACTCGAAACCTTCACCGTGAAGTCCTGTCCTGATGCCATCAAAGAGGTCTTCGACAATAAATTCCACATCATCGGCGCAGTGGGCATCGGCATTGCCGTGGTCATGATATTTGGCATGATCTTCAGTATGATCTTGTGCTGTGCTATCCGCAGGAACCGCGAGATGGTCTAGAGTCAGCTTACATCCCTGAGCAGGAAAGTTTACCCATGAAGATTGGTGGGATTTTTTGTTTGTTTGTTTTGTTTTGTTTGTTGTTTGTTGTTTGTTTTTTTGCCACTAATTTTAGTATTCATTCTGCATTGCTAGATAAAAGCTGAAGTTACTTTATGTTTGTCTTTTAATGCTTCATTCAATATTGACATTTGTAGTTGAGCGGGGGGTTTGGTTTGCTTTGGTTTATATTTTTTCAGTTGTTTGTTTTTGCTTGTTATATTAAGCAGAAATCCTGCAATGAAAGGTACTATATTTGCTAGACTCTAGACAAGATATTGTACATAAAAGAATTTTTTTGTCTTTAAATAGATACAAATGTCTATCAACTTTAATCAAGTTGTAACTTATATTGAAGACAATTTGATACATAATAAAAAATTATGACAATGTCAAAAAAAAAAAAAAA(配列番号46)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号46からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0069】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、SARS-COV2スパイクタンパク質+ポリHisタグ+CD63+Mycタグ+ICAM1を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLGVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYTHHHHHHMAVEGGMKCVKFLLYVLLLAFCACAVGLIAVGVGAQLVLSQTIIQGATPGSLLPVVIIAVGVFLFLVAFVGCCGACKENYCLMITFAIFLSLIMLVEVAAAIAGYVFRDKVMSEFNNNFRQQMENYPKNNHTASILDRMQADFKCCGAANYTDWEKIPSMSKNRVPDSCCINVTVGCGINFNEKAIHKEGCVEKIGGWLRKNVLVVAAAALGIAFVEVLGIVFACCLVKSIRSGYEVMEQKLISEEDLELLCYSELQPQPRYGSQQPPARAARTPGPARGSVPRTWQCPDICVPLKSHPAPGRLRAGDMQHLLPAQVVGHRDPVAKGVAPAWEQPEGVTEQCARRPTNVLFKLPWAVNSNLPHRVLDSRTGGTGTPPLLAASGQEPYPTLPGGGWGTPGQPHRGAAPWGEGAETGASCGGARGHDHGAGEERSPWSQFLVPHTGPAAPRAGAVEHLGPLPAPDLCPASDSPTTCQPPGPRGGHAGDRGLFPGRAVPSLGGPGPPGTGGPEVEPHSHLWQRLLLGQGLSQCDRRGRGHPAADVCSNTGEPEPGDTADSDHLQLSGAQRDSDEARGLRRDRGDSEVGPPSQGDAEWGSSPATGPEGPAPAEGHPRGQRAQLLLLCNPGGGRPAYTQEPDPGASCPVWPPTGREGLSGKLDVARKFPADSNVPGLGEPIARAQVSKGWHFPTAHRGISDCHSRSGHLPLSGQEHSRGGHPQGDRECALPPVDCHHHCGSSRSHNGHCRPQHVPLPPAEDQEIQTTTGPKRDPHETEHTSHASLNLSRDRASSSAFPYWWQWCHTEQSGRHMPCSYTYRPWDAGGQGIVLSQIQQHLGPWYLHTNTRPRISVVTLSQEEGARLKTLMDVKVPDERGSGGGDIAPPGHTTGKYNLLPIGYAEAPQTYRRSGPPTCVASKHKGPHFLTDASLGTAVYPQPLMICIYSFVILPAIYVSFMAKTVSGLTELPVLITFKVTRYSCTGCTLQESAWQKDQMGLGLLIGQPAFPQKEFFYRHKSTIWTGNGYRFRDYPVRPYSSLPPKTDTFVSHLPTHIHFCQCSQHSAVMSGHECPGNMPKLCLVLLSCLHFTGSLHYAAPVSCSDQGPASSGEGGQGIGGLPPSFGSLIRVCVCVYVTSSRSVTQAGVQWCNHGSLQSPFGLKSSHLSLLSSWDHRLTTPHLANLIFFFFPETGSRNIAQTSFVLVNKAFSTA(配列番号47)、又は配列番号47と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:ATGTTTGTTTTTCTTGTTTTATTGCCACTAGTCTCTAGTCAGTGTGTTAATCTTACAACCAGAACTCAATTACCCCCTGCATACACTAATTCTTTCACACGTGGTGTTTATTACCCTGACAAAGTTTTCAGATCCTCAGTTTTACATTCAACTCAGGACTTGTTCTTACCTTTCTTTTCCAATGTTACTTGGTTCCATGCTATACATGTCTCTGGGACCAATGGTACTAAGAGGTTTGATAACCCTGTCCTACCATTTAATGATGGTGTTTATTTTGCTTCCACTGAGAAGTCTAACATAATAAGAGGCTGGATTTTTGGTACTACTTTAGATTCGAAGACCCAGTCCCTACTTATTGTTAATAACGCTACTAATGTTGTTATTAAAGTCTGTGAATTTCAATTTTGTAATGATCCATTTTTGGGTGTTTATTACCACAAAAACAACAAAAGTTGGATGGAAAGTGAGTTCAGAGTTTATTCTAGTGCGAATAATTGCACTTTTGAATATGTCTCTCAGCCTTTTCTTATGGACCTTGAAGGAAAACAGGGTAATTTCAAAAATCTTAGGGAATTTGTGTTTAAGAATATTGATGGTTATTTTAAAATATATTCTAAGCACACGCCTATTAATTTAGTGCGTGATCTCCCTCAGGGTTTTTCGGCTTTAGAACCATTGGTAGATTTGCCAATAGGTATTAACATCACTAGGTTTCAAACTTTACTTGCTTTACATAGAAGTTATTTGACTCCTGGTGATTCTTCTTCAGGTTGGACAGCTGGTGCTGCAGCTTATTATGTGGGTTATCTTCAACCTAGGACTTTTCTATTAAAATATAATGAAAATGGAACCATTACAGATGCTGTAGACTGTGCACTTGACCCTCTCTCAGAAACAAAGTGTACGTTGAAATCCTTCACTGTAGAAAAAGGAATCTATCAAACTTCTAACTTTAGAGTCCAACCAACAGAATCTATTGTTAGATTTCCTAATATTACAAACTTGTGCCCTTTTGGTGAAGTTTTTAACGCCACCAGATTTGCATCTGTTTATGCTTGGAACAGGAAGAGAATCAGCAACTGTGTTGCTGATTATTCTGTCCTATATAATTCCGCATCATTTTCCACTTTTAAGTGTTATGGAGTGTCTCCTACTAAATTAAATGATCTCTGCTTTACTAATGTCTATGCAGATTCATTTGTAATTAGAGGTGATGAAGTCAGACAAATCGCTCCAGGGCAAACTGGAAAGATTGCTGATTATAATTATAAATTACCAGATGATTTTACAGGCTGCGTTATAGCTTGGAATTCTAACAATCTTGATTCTAAGGTTGGTGGTAATTATAATTACCTGTATAGATTGTTTAGGAAGTCTAATCTCAAACCTTTTGAGAGAGATATTTCAACTGAAATCTATCAGGCCGGTAGCACACCTTGTAATGGTGTTGAAGGTTTTAATTGTTACTTTCCTTTACAATCATATGGTTTCCAACCCACTAATGGTGTTGGTTACCAACCATACAGAGTAGTAGTACTTTCTTTTGAACTTCTACATGCACCAGCAACTGTTTGTGGACCTAAAAAGTCTACTAATTTGGTTAAAAACAAATGTGTCAATTTCAACTTCAATGGTTTAACAGGCACAGGTGTTCTTACTGAGTCTAACAAAAAGTTTCTGCCTTTCCAACAATTTGGCAGAGACATTGCTGACACTACTGATGCTGTCCGTGATCCACAGACACTTGAGATTCTTGACATTACACCATGTTCTTTTGGTGGTGTCAGTGTTATAACACCAGGAACAAATACTTCTAACCAGGTTGCTGTTCTTTATCAGGATGTTAACTGCACAGAAGTCCCTGTTGCTATTCATGCAGATCAACTTACTCCTACTTGGCGTGTTTATTCTACAGGTTCTAATGTTTTTCAAACACGTGCAGGCTGTTTAATAGGGGCTGAACATGTCAACAACTCATATGAGTGTGACATACCCATTGGTGCAGGTATATGCGCTAGTTATCAGACTCAGACTAATTCTCCTCGGCGGGCACGTAGTGTAGCTAGTCAATCCATCATTGCCTACACTATGTCACTTGGTGCAGAAAATTCAGTTGCTTACTCTAATAACTCTATTGCCATACCCACAAATTTTACTATTAGTGTTACCACAGAAATTCTACCAGTGTCTATGACCAAGACATCAGTAGATTGTACAATGTACATTTGTGGTGATTCAACTGAATGCAGCAATCTTTTGTTGCAATATGGCAGTTTTTGTACACAATTAAACCGTGCTTTAACTGGAATAGCTGTTGAACAAGACAAAAACACCCAAGAA
GTTTTTGCACAAGTCAAACAAATTTACAAAACACCACCAATTAAAGATTTTGGTGGTTTTAATTTTTCACAAATATTACCAGATCCATCAAAACCAAGCAAGAGGTCATTTATTGAAGATCTACTTTTCAACAAAGTGACACTTGCAGATGCTGGCTTCATCAAACAATATGGTGATTGCCTTGGTGATATTGCTGCTAGAGACCTCATTTGTGCACAAAAGTTTAACGGCCTTACTGTTTTGCCACCTTTGCTCACAGATGAAATGATTGCTCAATACACTTCTGCACTGTTAGCGGGTACAATCACTTCTGGTTGGACCTTTGGTGCAGGTGCTGCATTACAAATACCATTTGCTATGCAAATGGCTTATAGGTTTAATGGTATTGGAGTTACACAGAATGTTCTCTATGAGAACCAAAAATTGATTGCCAACCAATTTAATAGTGCTATTGGCAAAATTCAAGACTCACTTTCTTCCACAGCAAGTGCACTTGGAAAACTTCAAGATGTGGTCAACCAAAATGCACAAGCTTTAAACACGCTTGTTAAACAACTTAGCTCCAATTTTGGTGCAATTTCAAGTGTTTTAAATGATATCCTTTCACGTCTTGACAAAGTTGAGGCTGAAGTGCAAATTGATAGGTTGATCACAGGCAGACTTCAAAGTTTGCAGACATATGTGACTCAACAATTAATTAGAGCTGCAGAAATCAGAGCTTCTGCTAATCTTGCTGCTACTAAAATGTCAGAGTGTGTACTTGGACAATCAAAAAGAGTTGATTTTTGTGGAAAGGGCTATCATCTTATGTCCTTCCCTCAGTCAGCACCTCATGGTGTAGTCTTCTTGCATGTGACTTATGTCCCTGCACAAGAAAAGAACTTCACAACTGCTCCTGCCATTTGTCATGATGGAAAAGCACACTTTCCTCGTGAAGGTGTCTTTGTTTCAAATGGCACACACTGGTTTGTAACACAAAGGAATTTTTATGAACCACAAATCATTACTACAGACAACACATTTGTGTCTGGTAACTGTGATGTTGTAATAGGAATTGTCAACAACACAGTTTATGATCCTTTGCAACCTGAATTAGACTCATTCAAGGAGGAGTTAGATAAATATTTTAAGAATCATACATCACCAGATGTTGATTTAGGTGACATCTCTGGCATTAATGCTTCAGTTGTAAACATTCAAAAAGAAATTGACCGCCTCAATGAGGTTGCCAAGAATTTAAATGAATCTCTCATCGATCTCCAAGAACTTGGAAAGTATGAGCAGTATATAAAATGGCCATGGTACATTTGGCTAGGTTTTATAGCTGGCTTGATTGCCATAGTAATGGTGACAATTATGCTTTGCTGTATGACCAGTTGCTGTAGTTGTCTCAAGGGCTGTTGTTCTTGTGGATCCTGCTGCAAATTTGATGAAGACGACTCTGAGCCAGTGCTCAAAGGAGTCAAATTACATTACACCCACCACCACCACCACCACATGGCGGTGGAAGGAGGAATGAAATGTGTGAAGTTCTTGCTCTACGTCCTCCTGCTGGCCTTTTGCGCCTGTGCAGTGGGACTGATTGCCGTGGGTGTCGGGGCACAGCTTGTCCTGAGTCAGACCATAATCCAGGGGGCTACCCCTGGCTCTCTGTTGCCAGTGGTCATCATCGCAGTGGGTGTCTTCCTCTTCCTGGTGGCTTTTGTGGGCTGCTGCGGGGCCTGCAAGGAGAACTATTGTCTTATGATCACGTTTGCCATCTTTCTGTCTCTTATCATGTTGGTGGAGGTGGCCGCAGCCATTGCTGGCTATGTGTTTAGAGATAAGGTGATGTCAGAGTTTAATAACAACTTCCGGCAGCAGATGGAGAATTACCCGAAAAACAACCACACTGCTTCGATCCTGGACAGGATGCAGGCAGATTTTAAGTGCTGTGGGGCTGCTAACTACACAGATTGGGAGAAAATCCCTTCCATGTCGAAGAACCGAGTCCCCGACTCCTGCTGCATTAATGTTACTGTGGGCTGTGGGATTAATTTCAACGAGAAGGCGATCCATAAGGAGGGCTGTGTGGAGAAGATTGGGGGCTGGCTGAGGAAAAATGTGCTGGTGGTAGCTGCAGCAGCCCTTGGAATTGCTTTTGTCGAGGTTTTGGGAATTGTCTTTGCCTGCTGCCTCGTGAAGAGTATCAGAAGTGGCTACGAGGTGATGGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGGAGCTCCTCTGCTACTCAGAGTTGCAACCTCAGCCTCGCTATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACATGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTCCTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGAACCTATCCCGGGACAGGGCCTCTTCCTCGGCCTTCCCATATTGGTGGCAGTGGTGCCACACTGAACAGAGTGGAAGACATATGCCATGCAGCTACACCTACCGGCCCTGGGACGCCGGAGGACAGGGCATTGTCCTCAGTCAGATACAACAGCATTTGGGGCCATGGTACCTGCACACCTAAAACACTAGGCCACGCATCTGATCTGTAGTCACATGACTAAGCCAAGAGGAAGGAGCAAGACTCAAGACATGATTGATGGATGTTAAAGTCTAGCCTGATGAGAGGGGAAGTGGTGGGGGAGACATAGCCCCACCATGAGGACATACAACTGGGAAATACTGAAACTTGCTGCCTATTGGGTATGCTGAGGCCCCACAGACTTACAGAAGAAGTGGCCCTCCATAGACATGTGTAGCATCAAAACACAAAGGCCCACACTTCCTGACGGATGCCAGCTTGGGCACTGCTGTCTACTGACCCCAACCCTTGATGATATGTATTTATTCATTTGTTATTTTACCAGCTATTTATTGAGTGTCTTTTATGTAGGCTAAATGAACATAGGTCTCTGGCCTCACGGAGCTCCCAGTCCTAATCACATTCAAGGTCACCAGGTACAGTTGTACAGGTTGTACACTGCAGGAGAGTGCCTGGCAAAAAGATCAAATGGGGCTGGGACTTCTCATTGGCCAACCTGCCTTTCCCCAGAAGGAGTGATTTTTCTATCGGCACAAAAGCACTATATGGACTGGTAATGGTTACAGGTTCAGAGATTACCCAGTGAGGCCTTATTCCTCCCTTCCCCCCAAAACTGACACCTTTGTTAGCCACCTCCCCACCCACATACATTTCTGCCAGTGTTCACAATGACACTCAGCGGTCATGTCTGGACATGAGTGCCCAGGGAATATGCCCAAGCTATGCCTTGTCCTCTTGTCCTGTTTGCATTTCACTGGGAGCTTGCACTATGCAGCTCCAGTTTCCTGCAGTGATCAGGGTCCTGCAAGCAGTGGGGAAGGGGGCCAAGGTATTGGAGGACTCCCTCCCAGCTTTGGAAGCCTCATCCGCGTGTGTGTGTGTGTGTATGTGTAGACAAGCTCTCGCTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAGTGGTGCAATCATGGTTCACTGCAGTCTTGACCTTTTGGGCTCAAGTGATCCTCCCACCTCAGCCTCCTGAGTAGCTGGGACCATAGGCTCACAACACCACACCTGGCAAAT
TTGATTTTTTTTTTTTTTCCAGAGACGGGGTCTCGCAACATTGCCCAGACTTCCTTTGTGTTAGTTAATAAAGCTTTCTCAACTGCC(配列番号48)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号48からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0070】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、Her-2/neu+HA+CD81+FLAG+ICAM4を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:ISRAGPGSLARGPLVRAFCHGVSVPSVAAVFFGGRLPGSWERAGTPDAGAKPQGPSRALRDLSALLGAHEPGVRGCAAGEVSAAQLQQQLSPAAEFQPPHPAAARQDAQRAGLGVLPAARREGLELPRALPRDLRRKNTLGHLQDHRLQCSRWATWWPGMEAGSSIPKAWSASPAWIWPTPPTSLLLDPATSGSPSATRASISTAWWSATARHPLHCSLGAPRPQLWPPVPSLPLGSSSLWALRTYASALSPRRKGGCSMPAEREKEEYETIWGNGHTWWLTPVIPALWEAEAGESLEPRSSRPAWTTDPVYAKNTQISLVWWPAPVVPATREAELGGSFEPKSRLQALIVPLHSSLGDRARPCLQKNKNKNKYWRGNPLESIKASLT(配列番号49)、又は配列番号49と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:AAGGGGAGGTAACCCTGGCCCCTTTGGTCGGGGCCCCGGGCAGCCGCGCGCCCCTTCCCACGGGGCCCTTTACTGCGCCGCGCGCCCGGCCCCCACCCCTCGCAGCACCCCGCGCCCCGCGCCCTCCCAGCCGGGTCCAGCCGGAGCCATGGGGCCGGAGCCGCAGTGAGCACCATGGAGCTGGCGGCCTTGTGCCGCTGGGGGCTCCTCCTCGCCCTCTTGCCCCCCGGAGCCGCGAGCACCCAAGTGTGCACCGGCACAGACATGAAGCTGCGGCTCCCTGCCAGTCCCGAGACCCACCTGGACATGCTCCGCCACCTCTACCAGGGCTGCCAGGTGGTGCAGGGAAACCTGGAACTCACCTACCTGCCCACCAATGCCAGCCTGTCCTTCCTGCAGGATATCCAGGAGGTGCAGGGCTACGTGCTCATCGCTCACAACCAAGTGAGGCAGGTCCCACTGCAGAGGCTGCGGATTGTGCGAGGCACCCAGCTCTTTGAGGACAACTATGCCCTGGCCGTGCTAGACAATGGAGACCCGCTGAACAATACCACCCCTGTCACAGGGGCCTCCCCAGGAGGCCTGCGGGAGCTGCAGCTTCGAAGCCTCACAGAGATCTTGAAAGGAGGGGTCTTGATCCAGCGGAACCCCCAGCTCTGCTACCAGGACACGATTTTGTGGAAGGACATCTTCCACAAGAACAACCAGCTGGCTCTCACACTGATAGACACCAACCGCTCTCGGGCCTGCCACCCCTGTTCTCCGATGTGTAAGGGCTCCCGCTGCTGGGGAGAGAGTTCTGAGGATTGTCAGAGCCTGACGCGCACTGTCTGTGCCGGTGGCTGTGCCCGCTGCAAGGGGCCACTGCCCACTGACTGCTGCCATGAGCAGTGTGCTGCCGGCTGCACGGGCCCCAAGCACTCTGACTGCCTGGCCTGCCTCCACTTCAACCACAGTGGCATCTGTGAGCTGCACTGCCCAGCCCTGGTCACCTACAACACAGACACGTTTGAGTCCATGCCCAATCCCGAGGGCCGGTATACATTCGGCGCCAGCTGTGTGACTGCCTGTCCCTACAACTACCTTTCTACGGACGTGGGATCCTGCACCCTCGTCTGCCCCCTGCACAACCAAGAGGTGACAGCAGAGGATGGAACACAGCGGTGTGAGAAGTGCAGCAAGCCCTGTGCCCGAGTGTGCTATGGTCTGGGCATGGAGCACTTGCGAGAGGTGAGGGCAGTTACCAGTGCCAATATCCAGGAGTTTGCTGGCTGCAAGAAGATCTTTGGGAGCCTGGCATTTCTGCCGGAGAGCTTTGATGGGGACCCAGCCTCCAACACTGCCCCGCTCCAGCCAGAGCAGCTCCAAGTGTTTGAGACTCTGGAAGAGATCACAGGTTACCTATACATCTCAGCATGGCCGGACAGCCTGCCTGACCTCAGCGTCTTCCAGAACCTGCAAGTAATCCGGGGACGAATTCTGCACAATGGCGCCTACTCGCTGACCCTGCAAGGGCTGGGCATCAGCTGGCTGGGGCTGCGCTCACTGAGGGAACTGGGCAGTGGACTGGCCCTCATCCACCATAACACCCACCTCTGCTTCGTGCACACGGTGCCCTGGGACCAGCTCTTTCGGAACCCGCACCAAGCTCTGCTCCACACTGCCAACCGGCCAGAGGACGAGTGTGTGGGCGAGGGCCTGGCCTGCCACCAGCTGTGCGCCCGAGGGCACTGCTGGGGTCCAGGGCCCACCCAGTGTGTCAACTGCAGCCAGTTCCTTCGGGGCCAGGAGTGCGTGGAGGAATGCCGAGTACTGCAGGGGCTCCCCAGGGAGTATGTGAATGCCAGGCACTGTTTGCCGTGCCACCCTGAGTGTCAGCCCCAGAATGGCTCAGTGACCTGTTTTGGACCGGAGGCTGACCAGTGTGTGGCCTGTGCCCACTATAAGGACCCTCCCTTCTGCGTGGCCCGCTGCCCCAGCGGTGTGAAACCTGACCTCTCCTACATGCCCATCTGGAAGTTTCCAGATGAGGAGGGCGCATGCCAGCCTTGCCCCATCAACTGCACCCACTCCTGTGTGGACCTGGATGACAAGGGCTGCCCCGCCGAGCAGAGAGCCAGCCCTCTGACGTCCATCATCTCTGCGGTGGTTGGCATTCTGCTGGTCGTGGTCTTGGGGGTGGTCTTTGGGATCCTCATCAAGCGACGGCAGCAGAAGATCCGGAAGTACACGATGCGGAGACTGCTGCAGGAAACGGAGCTGGTGGAGCCGCTGACACCTAGCGGAGCGATGCCCAACCAGGCGCAGATGCGGATCCTGAAAGAGACGGAGCTGAGGAAGGTGAAGGTGCTTGGATCTGGCGCTTTTGGCACAGTCTACAAGGGCATCTGGATCCCTGATGGGGAGAATGTGAAAATTCCAGTGGCCATCAAAGTGTTGAGGGAAAACACATCCCCCAAAGCCAACAAAGAAATCTTAGACGAAGCATACGTGATGGCTGGTGTGGGCTCCCCATATGTCTCCCGCCTTCTGGGCATCTGCCTGACATCCACGGTGCAGCTGGTGACACAGCTTATGCCCTATGGCTGCCTCTTAGACCATGTCCGGGAAAACCGCGGACGCCTGGGCTCCCAGGACCTGCTGAACTGGTGTATGCAGATTGCCAAGGGGATGAGCTACCTGGAGGATGTGCGGCTCGTACACAGGGACTTGGCCGCTCGGAACGTGCTGGTCAAGAGTCCCAACCATGTCAAAATTACAGACTTCGGGCTGGCTCGGCTGCTGGACATTGACGAGACAGAGTACCATGCAGATGGGGGCAAGGTGCCCATCAAGTGGATGGCGCTGGAGTCCATTCTCCGCCGGCGGTTCACCCACCAGAGTGATGTGTGGAGTTATGGTGTGACTGTGTGGGAGCTGATGACTTTTGGGGCCAAACCTTACGATGGGATCCCAGCCCGGGAGATCCCTGACCTGCTGGAAAAGGGGGAGCGGCTGCCCCAGCCCCCCATCTGCACCATTGATGTCTACATGATCATGGTCAAATGTTGGATGATTGACTCTGAATGTCGGCCAAGATTCCGGGAGTTGGTGTCTGAATTCTCCCGCATGGCCAGGGACCCCCAGCGCTTTGTGGTCATCCAGAATGAGGACTTGGGCCCAGCCAGTCCCTTGGACAGCACCTTCTACCGCTCACTGCTGGAGGACGATGACATGGGGGACCTGGTGGATGCTGAGGAGTATCTGGTACCCCAGCAGGGCTTCTTCTGTCCAGACCCTGCCCCGGGCGCTGGGGGCATGGTCCACCACAGGCACCGCAGCTCATCTACCAGGAGTGGCGGTGGGGACCTGACACTAGGGCTGGAGCCCTCTGAAGAGGAGGCCCCCAGGTCTCCACTGGCACCCTCCGAAGGGGCTGGCTCCGATGTATTTGATGGTGACCTGGGAATGGGGGCAGCCAAGGGGCTGCAAAGCCTCCCCACACATGACCCCAGCCCTCTACAGCGGTACAGTGAGGACCCCACAGTACCCCTGCCCTCTGAGACTGATGGCTACGTTGCCCCCCTGACCTGCAGCCCCCAGCCTGAATATGTGAACCAGCCAGATGTTCGGCCCCAGCCCCCTTCGCCCCGAGAGGGCCCTCTGCCTGCTGCCCGACCTGCTGGTGCCACTCTGGAAAGGCCCAAGACTCTCTCCCCAGGGAAGAATGGGGTCGTCAAAGACGTTTTTGCCTTTGGGGGTGCCGTGGAGAACCCCGAGTACTTGACACCCCAGGGAGGAGCTGCCCCTCAGCCCCACCCTCCTCCTGCCTTCAGCCCAGCCTTCGACAACCTCTATTACTGGGACCAGGACCCACCAGAGCGGGGGGCTCCACCCAGCACCTTCAAAGGGACACCTACGGCAGAGAACCCAGAGTACCTGGGTCTGGACGTGCCAGTGTGAACCAGAAGGCCAAGTCCGCAGAAGCCCTGATGTGTCCTCAGGGAGCAGGGAAGGCCTGACTTCTGCTGGCATCAAGAGGTGGGAGGGCCCTCCGACCACTTCCAGGGGAACCTGCCATGCCAGGAACCTGTCCTAAGGAACCTTCCTTCCTGCTTGAGTTCCCAGATGGCTGGAAGGGGTCCAGCCTCGTTGGAAGAGGAACAGCACTGGGGAGTCTTTGTGGATTCTGAGGCCCTGCCCAATGAGACTCTAGGGTCCAGTGGATGCCACAGCCCAGCTTGGCCCTTTCCTTCCAGATCCTGGGTACTGAAAGCCTTAGGGAAGCTGGCCTGAGAGGGGAAGCGGCCCTAAGGGAGTGTCTAAGAACAAAAGCGACCCATTCAGAGACTGTCCCTGAAACCTAGTACTGCCCCCCATGAGGAAGGAACAGCAATGGTGTCAGTATCCAGGCTTTGTACAGAGTGCTTTTCTGTTTAGTTTTTACTTTTTTTGTTTTGTTTTTTTAAAGA
TGAAATAAAGACCCAGGGGGAG(配列番号50)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号50からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0071】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、Staphylococcus aureus抗原+MBP+CD9+ポリHis+CD22を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:MKLFAFIFICVKSCSLLFMLNGNPRPEQLNKASEFTGLMDNMRYLYDDKHVSETNIKAQEKFLQHDLLFKINGSKIDGSKILKTEFNNKSLSDKYKNKNVDLFGTNYYNQCYFSADNMELNDGRLIEKTCMYGGVTEHDGNQIDKNNLTDNSHNILIKVYENERNTLSFDISTNKKNITAQEIDYKVRNYLLKHKNLYKFNSSPYETGYIKFIEGNGHSFWYDMMPESGEKFYPTKYLLIYNDNKTVESKSINVEVHLTKKRSRRASWSGSTATRATTAWPRWARSSRRTPASRPWSTPTSWRRSSPRWPPPATAPTSSSGPTTGSAATPRAACWPRSPPTRPSRTSCTPSPGTPGTTASSPTPSPWRPASTTRTCCPTPPRPGRRSPPWTRSRPRARAPCSTCRSPTSPGPSPPTAATPSSTRTASTTSRTWAWTTPAPRPAPSWWTSEQAHERRHRLQHRRGRLQQGRDRHDHQRPLGLEQHRHQQGELRRDRAAHLQGPAQQALRGRAERRHQRRQPQQGAGQGVPGELPADRRGPGGREQGQAPGRRGPEELRGGAGQGPQDRRHHGERPEGRDHAQHPPDERLLVRREDRRDQRRQRQADRGRGPEGRPDQQQQQQQQQQQQQQPGHRGQDQPTAACICIQRQVPPVPAARAPQSRTRSAQAKLALTMPVKGGTKCIKYLLFGFNFIFWLAGIAVLAIGLWLRFDSQTKSIFEQETNNNNSSFYTGVYILIGAGALMMLVGFLGCCGAVQESQCMLGLFFGFLLVIFAIEIAAAIWGYSHKDEVIKEVQEFYKDTYNKLKTKDEPQRETLKAIHYALNCCGLAGGVEQFISDICPKKDVLETFTVKSCPDAIKEVFDNKFHIIGAVGIGIAVVMIFGMIFSMILCCAIRRNREMVSQLTSLSRKVYPRLVGFFVCLFCFVCCLLFVFLPLILVFILHCIKAEVTLCLSFNASFNIDICSAGGLVCFGLYFFSCLFLLVILSRNPAMKGTIFARLTRYCTKNFFVFKIQMSINFNQVVTYIEDNLIHNKKLQCQKKKKHHHHHHTRKQACTQTRHHASPRPLAPAPGSRILGFLLKMGFAPNPLRLGGGLRLDPLHLQSPRWPGKLHPVPQSVQEHLEVWDKTLKHKGWEGSFAEKGAIPGRQEELHTEYPPGAPQQWSAGAEDGVQDEMDGTNTPQCLKAFSTSYPAPSRNSRVPGSHSDLLAEFLLLWVSDPIAVAPRGGSNEAGCCHLDLLDHQVCLHPERAQVLPTVESPWEDCDLPASGCRWEVPLQHGAAEREASSQEGDHSDSKPHADSRRRHSDPFLLQFQPQCYPVMETPWRLGGAIAWGAEDPKRWLGQHNHRLRSLLVLVGLPCRPECPVCPPRREGPENQAPFRDSLWKLGQPPMLLKQPPQRSPVLLGEKWQASGERKPAEFLHLPRRCWELQLLGEQLHRTDSVQGLDTSAVCTQEAACVHEPGGPSDGGEECNPDLERRQPSRLPLHLVLEPKPPLPQPEAEIGAGEGPALGCLLVPGDQQCGQGPFASQHPHRLLPGDHRQASGCGTRVLPRHPHPGNLWAQAPATLEEDTEPAGASGEFQRPELLCEEKGKGPPLRPPLPGMLQSNDGRWHLHHPALSRDEHTTNWRCRVLRDAETSPGLRHGHLFSIAQAPSGHYENVIPDFPEDEGIHYSELIQFGVGERPQAQENVDYVILKHHWMGCSRGTGGSGGQGSPRVFPR(配列番号51)、又は配列番号51と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:ATGAAGTTATTTGCTTTTATCTTCATATGTGTTAAGTCTTGCAGCTTACTATTTATGTTAAATGGCAATCCTAGACCAGAACAATTGAATAAAGCGAGTGAATTCACTGGTCTAATGGATAATATGAGGTATTTGTATGACGATAAACACGTATCAGAAACAAACATTAAAGCCCAAGAGAAGTTTTTACAACATGATTTATTATTTAAAATAAATGGCTCTAAAATTGATGGTTCTAAAATTTTAAAAACAGAATTTAATAATAAAAGCCTTTCGGATAAATACAAAAATAAAAACGTAGATTTGTTTGGGACAAACTATTATAATCAATGCTATTTTTCAGCGGATAATATGGAATTAAATGATGGTAGACTAATTGAAAAAACGTGTATGTATGGCGGTGTGACCGAGCATGATGGAAATCAAATAGATAAAAATAATCTAACTGATAACTCTCATAATATCTTAATTAAAGTATACGAAAACGAAAGAAACACATTATCTTTTGATATATCTACCAATAAGAAAAACATAACAGCACAAGAAATAGATTATAAAGTTAGAAACTATTTACTTAAGCATAAAAATTTATATAAATTTAATAGTTCGCCTTATGAGACTGGCTATATAAAGTTTATCGAAGGAAATGGTCATTCTTTTTGGTATGATATGATGCCTGAATCTGGTGAAAAATTTTATCCGACTAAATATTTACTAATTTATAATGATAATAAGACAGTTGAGAGTAAATCTATTAATGTAGAAGTTCATTTAACCAAAAAATAATGAAGATCGAGGAGGGCAAGCTGGTGATCTGGATCAACGGCGACAAGGGCTACAACGGCCTGGCCGAGGTGGGCAAGAAGTTCGAGAAGGACACCGGCATCAAGGTGACCGTGGAGCACCCCGACAAGCTGGAGGAGAAGTTCCCCCAGGTGGCCGCCACCGGCGACGGCCCCGACATCATCTTCTGGGCCCACGACAGGTTCGGCGGCTACGCCCAGAGCGGCCTGCTGGCCGAGATCACCCCCGACAAGGCCTTCCAGGACAAGCTGTACCCCTTCACCTGGGACGCCGTGAGGTACAACGGCAAGCTGATCGCCTACCCCATCGCCGTGGAGGCCCTGAGCCTGATCTACAACAAGGACCTGCTGCCCAACCCCCCCAAGACCTGGGAGGAGATCCCCGCCCTGGACAAGGAGCTGAAGGCCAAGGGCAAGAGCGCCCTGATGTTCAACCTGCAGGAGCCCTACTTCACCTGGCCCCTGATCGCCGCCGACGGCGGCTACGCCTTCAAGTACGAGAACGGCAAGTACGACATCAAGGACGTGGGCGTGGACAACGCCGGCGCCAAGGCCGGCCTGACCTTCCTGGTGGACCTGATCAGAACAAGCACATGAACGCCGACACCGACTACAGCATCGCCGAGGCCGCCTTCAACAAGGGCGAGACCGCCATGACCATCAACGGCCCCTGGGCCTGGAGCAACATCGACACCAGCAAGGTGAACTACGGCGTGACCGTGCTGCCCACCTTCAAGGGCCAGCCCAGCAAGCCCTTCGTGGGCGTGCTGAGCGCCGGCATCAACGCCGCCAGCCCCAACAAGGAGCTGGCCAAGGAGTTCCTGGAGAACTACCTGCTGACCGACGAGGGCCTGGAGGCCGTGAACAAGGACAAGCCCCTGGGCGCCGTGGCCCTGAAGAGCTACGAGGAGGAGCTGGCCAAGGACCCCAGGATCGCCGCCACCATGGAGAACGCCCAGAAGGGCGAGATCATGCCCAACATCCCCCAGATGAGCGCCTTCTGGTACGCCGTGAGGACCGCCGTGATCAACGCCGCCAGCGGCAGGCAGACCGTGGACGAGGCCCTGAAGGACGCCCAGACCAACAGCAGCAGCAACAACAACAACAACAACAACAACAACAACCTGGGCATCGAGGGCAGGACCAGCCTACAGCCGCCTGCATCTGTATCCAGCGCCAGGTCCCGCCAGTCCCAGCTGCGCGCGCCCCCCAGTCCCGCACCCGTTCGGCCCAGGCTAAGTTAGCCCTCACCATGCCGGTCAAAGGAGGCACCAAGTGCATCAAATACCTGCTGTTCGGATTTAACTTCATCTTCTGGCTTGCCGGGATTGCTGTCCTTGCCATTGGACTATGGCTCCGATTCGACTCTCAGACCAAGAGCATCTTCGAGCAAGAAACTAATAATAATAATTCCAGCTTCTACACAGGAGTCTATATTCTGATCGGAGCCGGCGCCCTCATGATGCTGGTGGGCTTCCTGGGCTGCTGCGGGGCTGTGCAGGAGTCCCAGTGCATGCTGGGACTGTTCTTCGGCTTCCTCTTGGTGATATTCGCCATTGAAATAGCTGCGGCCATCTGGGGATATTCCCACAAGGATGAGGTGATTAAGGAAGTCCAGGAGTTTTACAAGGACACCTACAACAAGCTGAAAACCAAGGATGAGCCCCAGCGGGAAACGCTGAAAGCCATCCACTATGCGTTGAACTGCTGTGGTTTGGCTGGGGGCGTGGAACAGTTTATCTCAGACATCTGCCCCAAGAAGGACGTACTCGAAACCTTCACCGTGAAGTCCTGTCCTGATGCCATCAAAGAGGTCTTCGACAATAAATTCCACATCATCGGCGCAGTGGGCATCGGCATTGCCGTGGTCATGATATTTGGCATGATCTTCAGTATGATCTTGTGCTGTGCTATCCGCAGGAACCGCGAGATGGTCTAGAGTCAGCTTACATCCCTGAGCAGGAAAGTTTACCCATGAAGATTGGTGGGATTTTTTGTTTGTTTGTTTTGTTTTGTTTGTTGTTTGTTGTTTGTTTTTTTGCCACTAATTTTAGTATTCATTCTGCATTGCTAGATAAAAGCTGAAGTTACTTTATGTTTGTCTTTTAATGCTTCATTCAATATTGACATTTGTAGTTGAGCGGGGGGTTTGGTTTGCTTTGGTTTATATTTTTTCAGTTGTTTGTTTTTGCTTGTTATATTAAGCAGAAATCCTGCAATGAAAGGTACTATATTTGCTAGACTCTAGACAAGATATTGTACATAAAAGAATTTTTTTGTCTTTAAATAGATACAAATGTCT
ATCAACTTTAATCAAGTTGTAACTTATATTGAAGACAATTTGATACATAATAAAAAATTATGACAATGTCAAAAAAAAAAAAAACACCACCACCACCACCACACGCGGAAACAGGCTTGCACCCAGACACGACACCATGCATCTCCTCGGCCCCTGGCTCCTGCTCCTGGTTCTAGAATACTTGGCTTTCTCTGACTCAAGTAAATGGGTTTTTGAGCACCCTGAAACCCTCTACGCCTGGGAGGGGGCCTGCGTCTGGATCCCCTGCACCTACAGAGCCCTAGATGGTGACCTGGAAAGCTTCATCCTGTTCCACAATCCTGAGTATAACAAGAACACCTCGAAGTTTGATGGGACAAGACTCTATGAAAGCACAAAGGATGGGAAGGTTCCTTCTGAGCAGAAAAGGGTGCAATTCCTGGGAGACAAGAATAAGAACTGCACACTGAGTATCCACCCGGTGCACCTCAATGACAGTGGTCAGCTGGGGCTGAGGATGGAGTCCAAGACTGAGAAATGGATGGAACGAATACACCTCAATGTCTCTGAAAGGCCTTTTCCACCTCATATCCAGCTCCCTCCAGAAATTCAAGAGTCCCAGGAAGTCACTCTGACCTGCTTGCTGAATTTCTCCTGCTATGGGTATCCGATCCAATTGCAGTGGCTCCTAGAGGGGGTTCCAATGAGGCAGGCTGCTGTCACCTCGACCTCCTTGACCATCAAGTCTGTCTTCACCCGGAGCGAGCTCAAGTTCTCCCCACAGTGGAGTCACCATGGGAAGATTGTGACCTGCCAGCTTCAGGATGCAGATGGGAAGTTCCTCTCCAATGACACGGTGCAGCTGAACGTGAAGCATCCTCCCAAGAAGGTGACCACAGTGATTCAAAACCCCATGCCGATTCGAGAAGGAGACACAGTGACCCTTTCCTGTAACTACAATTCCAGTAACCCCAGTGTTACCCGGTATGAATGGAAACCCCATGGCGCCTGGGAGGAGCCATCGCTTGGGGTGCTGAAGATCCAAAACGTTGGCTGGGACAACACAACCATCGCCTGCGCAGCTTGTAATAGTTGGTGCTCGTGGGCCTCCCCTGTCGCCCTGAATGTCCAGTATGCCCCCCGAGACGTGAGGGTCCGGAAAATCAAGCCCCTTTCCGAGATTCACTCTGGAAACTCGGTCAGCCTCCAATGTGACTTCTCAAGCAGCCACCCCAAAGAAGTCCAGTTCTTCTGGGAGAAAAATGGCAGGCTTCTGGGGAAAGAAAGCCAGCTGAATTTTGACTCCATCTCCCCAGAAGATGCTGGGAGTTACAGCTGCTGGGTGAACAACTCCATAGGACAGACAGCGTCCAAGGCCTGGACACTTGAAGTGCTGTATGCACCCAGGAGGCTGCGTGTGTCCATGAGCCCGGGGGACCAAGTGATGGAGGGGAAGAGTGCAACCCTGACCTGTGAGAGCGACGCCAACCCTCCCGTCTCCCACTACACCTGGTTTGACTGGAATAACCAAAGCCTCCCCTACCACAGCCAGAAGCTGAGATTGGAGCCGGTGAAGGTCCAGCACTCGGGTGCCTACTGGTGCCAGGGGACCAACAGTGTGGGCAAGGGCCGTTCGCCTCTCAGCACCCTCACCGTCTACTATAGCCCGGAGACCATCGGCAGGCGAGTGGCTGTGGGACTCGGGTCCTGCCTCGCCATCCTCATCCTGGCAATCTGTGGGCTCAAGCTCCAGCGACGTTGGAAGAGGACACAGAGCCAGCAGGGGCTTCAGGAGAATTCCAGCGGCCAGAGCTTCTTTGTGAGGAATAAAAAGGTTAGAAGGGCCCCCCTCTCTGAAGGCCCCCACTCCCTGGGATGCTACAATCCAATGATGGAAGATGGCATTAGCTACACCACCCTGCGCTTTCCCGAGATGAACATACCACGAACTGGAGATGCAGAGTCCTCAGAGATGCAGAGACCTCCCCCGGACTGCGATGACACGGTCACTTATTCAGCATTGCACAAGCGCCAAGTGGGCACTATGAGAACGTCATTCCAGATTTTCCAGAAGATGAGGGGATTCATTACTCAGAGCTGATCCAGTTTGGGGTCGGGGAGCGGCCTCAGGCACAAGAAAATGTGGACTATGTGATCCTCAAACATTGACACTGGATGGGCTGCAGCAGAGGCACTGGGGGCAGCGGGGGCCAGGGAAGTCCCCGAGTTTTCCCCAGAC(配列番号52)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号52からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0072】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、CD63+ポリHisタグ+ICAM1を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:MAVEGGMKCVKFLLYVLLLAFCACAVGLIAVGVGAQLVLSQTIIQGATPGSLLPVVIIAVGVFLFLVAFVGCCGACKENYCLMITFAIFLSLIMLVEVAAAIAGYVFRDKVMSEFNNNFRQQMENYPKNNHTASILDRMQADFKCCGAANYTDWEKIPSMSKNRVPDSCCINVTVGCGINFNEKAIHKEGCVEKIGGWLRKNVLVVAAAALGIAFVEVLGIVFACCLVKSIRSGYEVMHHHHHHELLCYSELQPQPRYGSQQPPARAARTPGPARGSVPRTWQCPDICVPLKSHPAPGRLRAGDMQHLLPAQVVGHRDPVAKGVAPAWEQPEGVTEQCARRPTNVLFKLPWAVNSNLPHRVLDSRTGGTGTPPLLAASGQEPYPTLPGGGWGTPGQPHRGAAPWGEGAETGASCGGARGHDHGAGEERSPWSQFLVPHTGPAAPRAGAVEHLGPLPAPDLCPASDSPTTCQPPGPRGGHAGDRGLFPGRAVPSLGGPGPPGTGGPEVEPHSHLWQRLLLGQGLSQCDRRGRGHPAADVCSNTGEPEPGDTADSDHLQLSGAQRDSDEARGLRRDRGDSEVGPPSQGDAEWGSSPATGPEGPAPAEGHPRGQRAQLLLLCNPGGGRPAYTQEPDPGASCPVWPPTGREGLSGKLDVARKFPADSNVPGLGEPIARAQVSKGWHFPTAHRGISDCHSRSGHLPLSGQEHSRGGHPQGDRECALPPVDCHHHCGSSRSHNGHCRPQHVPLPPAEDQEIQTTTGPKRDPHETEHTSHASLNLSRDRASSSAFPYWWQWCHTEQSGRHMPCSYTYRPWDAGGQGIVLSQIQQHLGPWYLHTNTRPRISVVTLSQEEGARLKTLMDVKVPDERGSGGGDIAPPGHTTGKYNLLPIGYAEAPQTYRRSGPPTCVASKHKGPHFLTDASLGTAVYPQPLMICIYSFVILPAIYVSFMAKTVSGLTELPVLITFKVTRYSCTGCTLQESAWQKDQMGLGLLIGQPAFPQKEFFYRHKSTIWTGNGYRFRDYPVRPYSSLPPKTDTFVSHLPTHIHFCQCSQHSAVMSGHECPGNMPKLCLVLLSCLHFTGSLHYAAPVSCSDQGPASSGEGGQGIGGLPPSFGSLIRVCVCVYVTSSRSVTQAGVQWCNHGSLQSPFGLKSSHLSLLSSWDHRLTTPHLANLIFFFFPETGSRNIAQTSFVLVNKAFSTA(配列番号53)、又は配列番号53と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:GAGCTCCTCTGCTACTCAGAGTTGCAACCTCAGCCTCGCTATGGCTCCCAGCAGCCCCCGGCCCGCGCTGCCCGCACTCCTGGTCCTGCTCGGGGCTCTGTTCCCAGGACCTGGCAATGCCCAGACATCTGTGTCCCCCTCAAAAGTCATCCTGCCCCGGGGAGGCTCCGTGCTGGTGACATGCAGCACCTCCTGTGACCAGCCCAAGTTGTTGGGCATAGAGACCCCGTTGCCTAAAAAGGAGTTGCTCCTGCCTGGGAACAACCGGAAGGTGTATGAACTGAGCAATGTGCAAGAAGATAGCCAACCAATGTGCTATTCAAACTGCCCTGATGGGCAGTCAACAGCTAAAACCTTCCTCACCGTGTACTGGACTCCAGAACGGGTGGAACTGGCACCCCTCCCCTCTTGGCAGCCAGTGGGCAAGAACCTTACCCTACGCTGCCAGGTGGAGGGTGGGGCACCCCGGGCCAACCTCACCGTGGTGCTGCTCCGTGGGGAGAAGGAGCTGAAACGGGAGCCAGCTGTGGGGGAGCCCGCTGAGGTCACGACCACGGTGCTGGTGAGGAGAGATCACCATGGAGCCAATTTCTCGTGCCGCACTGAACTGGACCTGCGGCCCCAAGGGCTGGAGCTGTTTGAGAACACCTCGGCCCCCTACCAGCTCCAGACCTTTGTCCTGCCAGCGACTCCCCCACAACTTGTCAGCCCCCGGGTCCTAGAGGTGGACACGCAGGGGACCGTGGTCTGTTCCCTGGACGGGCTGTTCCCAGTCTCGGAGGCCCAGGTCCACCTGGCACTGGGGGACCAGAGGTTGAACCCCACAGTCACCTATGGCAACGACTCCTTCTCGGCCAAGGCCTCAGTCAGTGTGACCGCAGAGGACGAGGGCACCCAGCGGCTGACGTGTGCAGTAATACTGGGGAACCAGAGCCAGGAGACACTGCAGACAGTGACCATCTACAGCTTTCCGGCGCCCAACGTGATTCTGACGAAGCCAGAGGTCTCAGAAGGGACCGAGGTGACAGTGAAGTGTGAGGCCCACCCTAGAGCCAAGGTGACGCTGAATGGGGTTCCAGCCCAGCCACTGGGCCCGAGGGCCCAGCTCCTGCTGAAGGCCACCCCAGAGGACAACGGGCGCAGCTTCTCCTGCTCTGCAACCCTGGAGGTGGCCGGCCAGCTTATACACAAGAACCAGACCCGGGAGCTTCGTGTCCTGTATGGCCCCCGACTGGACGAGAGGGATTGTCCGGGAAACTGGACGTGGCCAGAAAATTCCCAGCAGACTCCAATGTGCCAGGCTTGGGGGAACCCATTGCCCGAGCTCAAGTGTCTAAAGGATGGCACTTTCCCACTGCCCATCGGGGAATCAGTGACTGTCACTCGAGATCTTGAGGGCACCTACCTCTGTCGGGCCAGGAGCACTCAAGGGGAGGTCACCCGCAAGGTGACCGTGAATGTGCTCTCCCCCCGGTATGAGATTGTCATCATCACTGTGGTAGCAGCCGCAGTCATAATGGGCACTGCAGGCCTCAGCACGTACCTCTATAACCGCCAGCGGAAGATCAAGAAATACAGACTACAACAGGCCCAAAAAGGGACCCCCATGAAACCGAACACACAAGCCACGCCTCCCTGAACCTATCCCGGGACAGGGCCTCTTCCTCGGCCTTCCCATATTGGTGGCAGTGGTGCCACACTGAACAGAGTGGAAGACATATGCCATGCAGCTACACCTACCGGCCCTGGGACGCCGGAGGACAGGGCATTGTCCTCAGTCAGATACAACAGCATTTGGGGCCATGGTACCTGCACACCTAAAACACTAGGCCACGCATCTGATCTGTAGTCACATGACTAAGCCAAGAGGAAGGAGCAAGACTCAAGACATGATTGATGGATGTTAAAGTCTAGCCTGATGAGAGGGGAAGTGGTGGGGGAGACATAGCCCCACCATGAGGACATACAACTGGGAAATACTGAAACTTGCTGCCTATTGGGTATGCTGAGGCCCCACAGACTTACAGAAGAAGTGGCCCTCCATAGACATGTGTAGCATCAAAACACAAAGGCCCACACTTCCTGACGGATGCCAGCTTGGGCACTGCTGTCTACTGACCCCAACCCTTGATGATATGTATTTATTCATTTGTTATTTTACCAGCTATTTATTGAGTGTCTTTTATGTAGGCTAAATGAACATAGGTCTCTGGCCTCACGGAGCTCCCAGTCCTAATCACATTCAAGGTCACCAGGTACAGTTGTACAGGTTGTACACTGCAGGAGAGTGCCTGGCAAAAAGATCAAATGGGGCTGGGACTTCTCATTGGCCAACCTGCCTTTCCCCAGAAGGAGTGATTTTTCTATCGGCACAAAAGCACTATATGGACTGGTAATGGTTACAGGTTCAGAGATTACCCAGTGAGGCCTTATTCCTCCCTTCCCCCCAAAACTGACACCTTTGTTAGCCACCTCCCCACCCACATACATTTCTGCCAGTGTTCACAATGACACTCAGCGGTCATGTCTGGACATGAGTGCCCAGGGAATATGCCCAAGCTATGCCTTGTCCTCTTGTCCTGTTTGCATTTCACTGGGAGCTTGCACTATGCAGCTCCAGTTTCCTGCAGTGATCAGGGTCCTGCAAGCAGTGGGGAAGGGGGCCAAGGTATTGGAGGACTCCCTCCCAGCTTTGGAAGCCTCATCCGCGTGTGTGTGTGTGTGTATGTGTAGACAAGCTCTCGCTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAGTGGTGCAATCATGGTTCACTGCAGTCTTGACCTTTTGGGCTCAAGTGATCCTCCCACCTCAGCCTCCTGAGTAGCTGGGACCATAGGCTCACAACACCACACCTGGCAAATTTGATTTTTTTTTTTTTTCCAGAGACGGGGTCTCGCAACATTGCCCAGACTTCCTTTGTGTTAGTTAATAAAGCTTTCTCAACTGCC(配列番号54)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号54からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0073】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列:DQPTAACICIQRQVPPVPAARAPQSRTRSAQAKLALTMPVKGGTKCIKYLLFGFNFIFWLAGIAVLAIGLWLRFDSQTKSIFEQETNNNNSSFYTGVYILIGAGALMMLVGFLGCCGAVQESQCMLGLFFGFLLVIFAIEIAAAIWGYSHKDEVIKEVQEFYKDTYNKLKTKDEPQRETLKAIHYALNCCGLAGGVEQFISDICPKKDVLETFTVKSCPDAIKEVFDNKFHIIGAVGIGIAVVMIFGMIFSMILCCAIRRNREMVSQLTSLSRKVYPRLVGFFVCLFCFVCCLLFVFLPLILVFILHCIKAEVTLCLSFNASFNIDICSAGGLVCFGLYFFSCLFLLVILSRNPAMKGTIFARLTRYCTKNFFVFKIQMSINFNQVVTYIEDNLIHNKKLQCQKKKKRLQGRRRQGFSPMKIKHILLLGVRHCMCPCLMLEMMHMKRLYMSNYPWVFISLRFSCCFIFPIRKRSKTVKSQITLAWYNLTAVLAIYMIISQGILAFSWMAHSAERKRTSVSQCMLPVKMKRKWTISTAELQYLNMRLSLFMGLTQLHLCMDQMMKMSLKRAWWRKTLSMLSTLAIVWLPMLVWKWYQILLAPKLISCSTFWMSRLLLENATLKIIKECVHSSKRVQCRPKASSSCPRLIRGYCTAKLIHIVISCVILGKWKVEKKPVFISNWKAGHPFKWMRLQHSSLKEQQVFQSQIQELNTRMRMLRMFYWKDYIIKDPNVISPLFQVACYLDLLYFCSHMLCGRLASLKDNTNLSYKKKTEETVGVISTVKAMMIKDFFQIERMENRLRLRNLKDTVYKKKILFGLLLLMILHIMSSCKGKISAMITLDRRTAKVIIQPKIISQLLNGRNTKAFNLFKKSKPLKISNESITELNYTGEVLDLKYYLPYVLASVKTPLGGQRFISNTSLILVQNMFFKNIIFRAVPKFSNEWTIITLKPFIYNTFPTGCVPTTIFFQQTMNIIVLAKLANFRLNMYTGLSLVKLLDNYFFIIMDFTIFLSVYIHVFLCRYIFTILPIYSSYNTPLSSIPRSNLQIFCYILKQKIVSVALYLIHADLENTETIPHLNQSCAKTRGPILHMYYVLCKILTITQLFPWMFFVTLYKYKCYLTWKRRNKIHKFKFINLAERYFNLYTVNINETTAKFSNVKYFYSLFILYEVLFMTFWILKNFFKYNHFCNIYFMLMIIIAEYHFILCLHKRAVAEFTSVIGSDQIRRQCGKTILGKISLYEVPATSQPSLMKVICSQACSDGEECSEICEGIVVKCKHKTSTQSVYTQETLHLCIFKKLCIVIKRLVILSGEHLGSMKNQAPINCLLQDCLGNLHLVLSYSELLRNNYIFQVIAQKQSTMVVQHRPLRYKGNTITYWARFCPVQNSICYQLTLLLVSILKPYHFKKTGMGYSFLAGRLYNYVILKFNCSGLGSSESRQTYEICIIFVTEYRKFNIIDELKSKMKESKLFQNYLGILMYYDGCKVFCVSNKHIVKKRIIDIKKKK(配列番号55)、又は配列番号55と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:GTTTTTGAAGCCCCATGAAAATAAAACATATCTTGCTGTTGGGAGTATGAAGACATTGATGTTGAATGTGTCCTTGTTTAATGCTGGAGATGATGCATATGAAACGACTCTACATGTCAAACTACCCGTGGGTCTTTATTTCATTAAGATTTTAGAGCTGTTGTTTCATTTTTCCCATTAGGAAGAGAAGCAAATAAACTGTGAAGTCACAGATAACTCTGGCGTGGTACAACTTGACTGCAGTATTGGCTATATATATGTAGATCATCTCTCAAGGATAGATATTAGCTTTCTCCTGGATGTGAGCTCACTCAGCAGAGCGGAAGAGGACCTCAGTATCACAGTGCATGCTACCTGTGAAAATGAAGAGGAAATGGACAATCTAAAGCACAGCAGAGTGACTGTAGCAATACCTTTAAAATATGAGGTTAAGCTGACTGTTCATGGGTTTGTAAACCCAACTTCATTTGTGTATGGATCAAATGATGAAAATGAGCCTGAAACGTGCATGGTGGAGAAAATGAACTTAACTTTCCATGTTATCAACACTGGCAATAGTATGGCTCCCAATGTTAGTGTGGAAATAATGGTACCAAATTCTTTTAGCCCCCAAACTGATAAGCTGTTCAACATTTTGGATGTCCAGACTACTACTGGAGAATGCCACTTTGAAAATTATCAAAGAGTGTGTGCATTAGAGCAGCAAAAGAGTGCAATGCAGACCTTGAAAGGCATAGTCCAGTTCTTGTCCAAGACTGATAAGAGGCTATTGTACTGCATAAAAGCTGATCCACATTGTTTAAATTTCTTGTGTAATTTTGGGAAAATGGAAAGTGGAAAAGAAGCCAGTGTTCATATCCAACTGGAAGGCCGGCCATCCATTTTAGAAATGGATGAGACTTCAGCACTCAAGTTTGAAATAAGAGCAACAGGTTTTCCAGAGCCAAATCCAAGAGTAATTGAACTAAACAAGGATGAGAATGTTGCGCATGTTCTACTGGAAGGACTACATCATCAAAGACCCAAACGTTATTTCACCATAGTGATTATTTCAAGTAGCTTGCTACTTGGACTTATTGTACTTCTGTTGATCTCATATGTTATGTGGAAGGCTGGCTTCTTTAAAAGACAATACAAATCTATCCTACAAGAAGAAAACAGAAGAGACAGTTGGAGTTATATCAACAGTAAAAGCAATGATGATTAAGGACTTCTTTCAAATTGAGAGAATGGAAAACAGACTCAGGTTGTAGTAAAGAAATTTAAAAGACACTGTTTACAAGAAAAAATGAATTTTGTTTGGACTTCTTTTACTCATGATCTTGTGACATATTATGTCTTCATGCAAGGGGAAAATCTCAGCAATGATTACTCTTTGAGATAGAAGAACTGCAAAGGTAATAATACAGCCAAAGATAATCTCTCAGCTTTTAAATGGGTAGAGAAACACTAAAGCATTCAATTTATTCAAGAAAAGTAAGCCCTTGAAGATATCTTGAAATGAAAGTATAACTGAGTTAAATTATACTGGAGAAGTCTTAGACTTGAAATACTACTTACCATATGTGCTTGCCTCAGTAAAATGAACCCCACTGGGTGGGCAGAGGTTCATTTCAAATACATCTTTGATACTTGTTCAAAATATGTTCTTTAAAAATATAATTTTTTAGAGAGCTGTTCCCAAATTTTCTAACGAGTGGACCATTATCACTTTAAAGCCCTTTATTTATAATACATTTCCTACGGGCTGTGTTCCAACAACCATTTTTTTTCAGCAGACTATGAATATTATAGTATTATAGGCCAAACTGGCAAACTTCAGACTGAACATGTACACTGGTTTGAGCTTAGTGAAATGACTTCTGGATAATTATTTTTTTATAATTATGGATTTCACCATCTTTCTTTCTGTATATATACATGTGTTTTTATGTAGGTATATATTTACCATTCTTCCTATCTATTCTTCCTATAACACACCTTTATCAAGCATACCCAGGAGTAATCTTCAAATCTTTTGTTATATTCTGAAACAAAAGATTGTGAGTGTTGCACTTTACCTGATACATGCTGATTTAGAAAATACAGAAACCATACCTCACTAATAACTTTAAAATCAAAGCTGTGCAAAGACTAGGGGGCCTATACTTCATATGTATTATGTACTATGTAAAATATTGACTATCACACAACTATTTCCTTGGATGTAATTCTTTGTTACCCTTTACAAGTATAAGTGTTACCTTACATGGAAACGAAGAAACAAAATTCATAAATTTAAATTCATAAATTTAGCTGAAAGATACTGATTCAATTTGTATACAGTGAATATAAATGAGACGACAGCAAAATTTTCATGAAATGTAAAATATTTTTATAGTTTGTTCATACTATATGAGGTTCTATTTTAAATGACTTTCTGGATTTTAAAAAATTTCTTTAAATACAATCATTTTTGTAATATTTATTTTATGCTTATGATCTAGATAATTGCAGAATATCATTTTATCTGACTCTGTCTTCATAAGAGAGCTGTGGCCGAATTTTGAACATCTGTTATAGGGAGTGATCAAATTAGAAGGCAATGTGGAAAAACAATTCTGGGAAAGATTTCTTTATATGAAGTCCCTGCCACTAGCCAGCCATCCTAATTGATGAAAGTTATCTGTTCACAGGCCTGCAGTGATGGTGAGGAATGTTCTGAGATTTGCGAAGGCATTTGAGTAGTGAAATGTAAGCACAAAACCTCCTGAACCCAGAGTGTGTATACACAGGAATAAACTTTATGACATTTATGTATTTTTAAAAAACTTTGTATCGTTATAAAAAGGCTAGTCATTCTTTCAGGAGAACATCTAGGATCATAGATGAAAAATCAAGCCCCGATTTAGAACTGTCTTCTCCAGGATTGTCTCTAAGGAAATTTACATTTGGTTCTTTCCTACTCAGAACTACTCAGAAACAACTATATATTTCAGGTTATTTGAGCACAGTGAAAGCAGAGTACTATGGTTGTCCAACACAGGCCTCTCAGATACAAGGGGAACACAATTACATATTGGGCTAGATTTTGCCCAGTTCAAAATAGTATTTGTTATCAACTTACTTTGTTACTTGTATCATGAATTTTAAAACCCTACCACTTTAAGAAGACAGGGATGGGTTATTCTTTTTTGGCAGGTAGGCTATATAACTATGTGATTTTGAAATTTAACTGCTCTGGATTAGGGAGCAGTGAATCAAGGCAGACTTATGAAATCTGTATTATATTTGTAACAGAATATAGGAAATTTAACATAATTGATGAGCTCAAATCCTGAAAAATGAAAGAATCCAAATTATTTCAGAATTATCTAGGTTAAATATTGATGTATTA
TGATGGTTGCAAAGTTTTTTGTGTGTCCAATAAACACATTGTAAAAAAAAGAATTTGAATTGATATTTAAAAAAAAAAAAAAA(配列番号56)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号56からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0074】
いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、CD81+Mycタグ+KRT14を含有し、したがって、以下のアミノ酸配列:GQRASAQRRRRRRPHRASCQASGAQRPTRPRAPAPPRPFLRAPAPRPARPPCRPPARPRAGPPAAQDRPAPRRPPAARAAMGVEGCTKCIKYLLFVFNFVFWLAGGVILGVALWLRHDPQTTNLLYLELGDKPAPNTFYVGIYILIAVGAVMMFVGFLGCYGAIQESQCLLGTFFTCLVILFACEVAAGIWGFVNKDQIAKDVKQFYDQALQQAVVDDDANNAKAVVKTFHETLDCCGSSTLTALTTSVLKNNLCPSGSNIISNLFKEDCHQKIDDLFSGKLYLIGIAAIVVAVIMIFEMILSMVLCCGIRNSSVYGPAALATGTSAVPPKPGHFRGGHHRLCIRFRYYSATRSLFTFGVLFLFTFLLPFQGRHMVACMSGDGPGSWGLEGRGPSALGSQGALPAQPGLSWEPLAQRLSLANLGGCVHPARPSCGLHSSPCSLLPRFESRVCGHSLPSCTCPFHVAFNCNHNILTPSFNKEGTSGMLEQKLISEEDLTRAPSLHSANCSLAHLPPLHHDHLQPPVHLLQLHEGLLRHRGRHRGRLQPHLLRPGRRVLPRPQHLRGRPVCLILPLLLWGSLRAGGRLWRWLQQQQQQLWWLWGRIWWWPWCWLGWWLWWWLCWWWASGGQEGDHAEPQPPGLLPGQGACSGGGQRRPGSEDPLVPEAAACDQRLQSLLQDHGPEEQDSHSHSGQCQCPSADQCPSGRGLPHQVDRVEPAHECGSRHQWPAQGAGRTDPGQSPGDADEPEGGAGLPEEEPRGGDECPERPGGWRCQCGDGRCTWRGPEPHSERDAPVEDGREEPQGCRGMVLHQDRGAEPRGGHQQRAGAERQERDLGAPAHHAEPGDAAVPAQHESIPGEQPGGDQRSLLHAAGPDPGDDWQRGGAAGPAPLRDGAAEPGVQDPAGREDAAGAGDRHLPPPAGGRGRPPLLLPVLLWIAVIQRCDLLQPPNPHQGHGCARWQGGVHPRAGPSHQELRLPSPAQAEAPRVDTDPTGRSPLLPKHFTAGPCFTLTPSWQSIQLHYLSCI(配列番号57)、又は配列番号57と少なくとも65%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、若しくは99%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。したがって、いくつかの実施形態では、融合タンパク質は、以下の核酸配列:GGCCAGAGAGCGAGCGCGCAACGGCGGCGACGGCGGCGACCCCACCGCGCATCCTGCCAGGCCTCCGGCGCCCAGCGCCCCACGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCCGCGCCCCTTTCTTCGCGCCCCCGCCCCTCGGCCCGCCAGGCCCCCTTGCCGGCCACCCGCCAGGCCCCGCGCCGGCCCGCCCGCCGCCCAGGACCGGCCCGCGCCCCGCAGGCCGCCCGCCGCCCGCGCCGCCATGGGAGTGGAGGGCTGCACCAAGTGCATCAAGTACCTGCTCTTCGTCTTCAATTTCGTCTTCTGGCTGGCTGGAGGCGTGATCCTGGGTGTGGCCCTGTGGCTCCGCCATGACCCGCAGACCACCAACCTCCTGTATCTGGAGCTGGGAGACAAGCCCGCGCCCAACACCTTCTATGTAGGCATCTACATCCTCATCGCTGTGGGCGCTGTCATGATGTTCGTTGGCTTCCTGGGCTGCTACGGGGCCATCCAGGAATCCCAGTGCCTGCTGGGGACGTTCTTCACCTGCCTGGTCATCCTGTTTGCCTGTGAGGTGGCCGCCGGCATCTGGGGCTTTGTCAACAAGGACCAGATCGCCAAGGATGTGAAGCAGTTCTATGACCAGGCCCTACAGCAGGCCGTGGTGGATGATGACGCCAACAACGCCAAGGCTGTGGTGAAGACCTTCCACGAGACGCTTGACTGCTGTGGCTCCAGCACACTGACTGCTTTGACCACCTCAGTGCTCAAGAACAATTTGTGTCCCTCGGGCAGCAACATCATCAGCAACCTCTTCAAGGAGGACTGCCACCAGAAGATCGATGACCTCTTCTCCGGGAAGCTGTACCTCATCGGCATTGCTGCCATCGTGGTCGCTGTGATCATGATCTTCGAGATGATCCTGAGCATGGTGCTGTGCTGTGGCATCCGGAACAGCTCCGTGTACTGAGGCCCCGCAGCTCTGGCCACAGGGACCTCTGCAGTGCCCCCTAAGTGACCCGGACACTTCCGAGGGGGCCATCACCGCCTGTGTATATAACGTTTCCGGTATTACTCTGCTACACGTAGCCTTTTTACTTTTGGGGTTTTGTTTTTGTTCTGAACTTTCCTGTTACCTTTTCAGGGCTGACGTCACATGTAGGTGGCGTGTATGAGTGGAGACGGGCCTGGGTCTTGGGGACTGGAGGGCAGGGGTCCTTCTGCCCTGGGGTCCCAGGGTGCTCTGCCTGCTCAGCCAGGCCTCTCCTGGGAGCCACTCGCCCAGAGACTCAGCTTGGCCAACTTGGGGGGCTGTGTCCACCCAGCCCGCCCGTCCTGTGGGCTGCACAGCTCACCTTGTTCCCTCCTGCCCCGGTTCGAGAGCCGAGTCTGTGGGCACTCTCTGCCTTCATGCACCTGTCCTTTCTAACACGTCGCCTTCAACTGTAATCACAACATCCTGACTCCGTCATTTAATAAAGAAGGAACATCAGGCATGCTAGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGACCCGAGCACCTTCTCTTCACTCAGCCAACTGCTCGCTCGCTCACCTCCCTCCTCTGCACCATGACCACCTGCAGCCGCCAGTTCACCTCCTCCAGCTCCATGAAGGGCTCCTGCGGCATCGGGGGCGGCATCGGGGGCGGCTCCAGCCGCATCTCCTCCGTCCTGGCCGGAGGGTCCTGCCGCGCCCCCAGCACCTACGGGGGCGGCCTGTCTGTCTCATCCTCCCGCTTCTCCTCTGGGGGAGCCTGCGGGCTGGGGGGCGGCTATGGCGGTGGCTTCAGCAGCAGCAGCAGCAGCTTTGGTAGTGGCTTTGGGGGAGGATATGGTGGTGGCCTTGGTGCTGGCTTGGGTGGTGGCTTTGGTGGTGGCTTTGCTGGTGGTGATGGGCTTCTGGTGGGCAGTGAGAAGGTGACCATGCAGAACCTCAATGACCGCCTGGCCTCCTACCTGGACAAGGTGCGTGCTCTGGAGGAGGCCAACGCCGACCTGGAAGTGAAGATCCGTGACTGGTACCAGAGGCAGCGGCCTGCTGAGATCAAAGACTACAGTCCCTACTTCAAGACCATTGAGGACCTGAGGAACAAGATTCTCACAGCCACAGTGGACAATGCCAATGTCCTTCTGCAGATTGACAATGCCCGTCTGGCCGCGGATGACTTCCGCACCAAGTATGAGACAGAGTTGAACCTGCGCATGAGTGTGGAAGCCGACATCAATGGCCTGCGCAGGGTGCTGGACGAACTGACCCTGGCCAGAGCTGACCTGGAGATGCAGATTGAGAGCCTGAAGGAGGAGCTGGCCTACCTGAAGAAGAACCACGAGGAGGAGATGAATGCCCTGAGAGGCCAGGTGGGTGGAGATGTCAATGTGGAGATGGACGCTGCACCTGGCGTGGACCTGAGCCGCATTCTGAACGAGATGCGTGACCAGTATGAGAAGATGGCAGAGAAGAACCGCAAGGATGCCGAGGAATGGTTCTTCACCAAGACAGAGGAGCTGAACCGCGAGGTGGCCACCAACAGCGAGCTGGTGCAGAGCGGCAAGAGCGAGATCTCGGAGCTCCGGCGCACCATGCAGAACCTGGAGATTGAGCTGCAGTCCCAGCTCAGCATGAAAGCATCCCTGGAGAACAGCCTGGAGGAGACCAAAGGTCGCTACTGCATGCAGCTGGCCCAGATCCAGGAGATGATTGGCAGCGTGGAGGAGCAGCTGGCCCAGCTCCGCTGCGAGATGGAGCAGCAGAACCAGGAGTACAAGATCCTGCTGGACGTGAAGACGCGGCTGGAGCAGGAGATCGCCACCTACCGCCGCCTGCTGGAGGGCGAGGACGCCCACCTCTCCTCCTCCCAGTTCTCCTCTGGATCGCAGTCATCCAGAGATGTGACCTCCTCCAGCCGCCAAATCCGCACCAAGGTCATGGATGTGCACGATGGCAAGGTGGTGTCCACCCACGAGCAGGTCCTTCGCACCAAGAACTGAGGCTGCCCAGCCCCGCTCAGGCCTAGGAGGCCCCCCGTGTGGACACAGATCCCACTGGAAGATCCCCTCTCCTGCCCAAGCACTTCACAGCTGGACCCTGCTTCACCCTCACCCCCTCCTGGCAATCAATACAGCTTCATTATCTGAGTTGCATAA(配列番号58)、又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で配列番号58からなる核酸配列にハイブリダイズする核酸配列によってコードされる。
【0075】
ポリペプチド又は機能的核酸を発現するために、開示されるポリヌクレオチドは、適切な発現ベクターに挿入され得る。したがって、本明細書に開示されるポリヌクレオチドを含む非ウイルスベクターも開示されており、核酸配列は、発現制御配列に作動可能に結合している。いくつかの実施形態では、核酸配列は、単一の発現制御配列に作動可能に結合している。他の実施形態では、核酸配列は、2つ以上の別個の発現制御配列に作動可能に結合している。
【0076】
遺伝子配列並びに適切な転写及び翻訳制御エレメントを含有する発現ベクターを構築する方法は、当該技術分野において周知である。これらの方法には、インビトロで組み換えDNA技術、合成技術、及びインビボでの遺伝子組み換えが含まれる。そのような技法は、Sambrook et al.,Molecular Cloning,A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Press,Plainview,N.Y.,1989)、及びAusubel et al.,Current Protocols in Molecular Biology(John Wiley & Sons,New York,N.Y.,1989)に記載される。
【0077】
発現ベクターは、概して、挿入されたコード配列の翻訳及び/又は転写のための調節配列必要なエレメントを含有する。例えば、コード配列は、好ましくは、所望の遺伝子産物の発現を制御するのに役立つように、プロモーター及び/又はエンハンサーに作動可能に結合している。
【0078】
「制御エレメント」又は「調節配列」は、宿主細胞タンパク質と相互作用して転写及び翻訳を行う、ベクターエンハンサー、プロモーター、5′及び3′非翻訳領域の非翻訳領域である。そのようなエレメントは、それらの強度及び特異性において変動し得る。
【0079】
「プロモーター」は、一般に、転写開始部位に関して相対的に固定された位置にあるときに機能するDNAの配列である。「プロモーター」は、RNAポリメラーゼ及び転写因子の基本的な相互作用に必要なコアエレメントを含有し、上流エレメント及び応答エレメントを含有することができる。
【0080】
「エンハンサー」は、一般に、転写開始部位から固定距離なしで機能し、転写単位に対して5■又は3■のいずれかであり得るDNAの配列を指す。更に、エンハンサーは、イ
ントロン内及びコード配列自体内にあり得る。これらは、通常、10~300bpの長さで、シスで機能する。エンハンサーは、近くのプロモーターからの転写を増加させるように機能する。エンハンサーは、プロモーターのように、同様に多くの場合、転写の調節を媒介する応答エレメントを含有する。エンハンサーは、多くの場合、発現の調節を決定する。
【0081】
「内因性」エンハンサー/プロモーターは、ゲノムにおける所与の遺伝子と自然に結合しているものである。「外因性」又は「異種」エンハンサー/プロモーターは、その遺伝子の転写が結合したエンハンサー/プロモーターによって指示されるように、遺伝子操作(すなわち、分子生物学的技法)によって遺伝子と並置されるものである。
【0082】
バイオテクノロジーで使用されるプロモーターは、遺伝子発現の制御の意図された種類に従った異なる種類のものである。それらは、一般に、構成的プロモーター、組織特異的又は発達段階特異的プロモーター、誘導性プロモーター、及び合成プロモーターに分けることができる。
【0083】
構成的プロモーターは、実質的に全ての組織における発現を指示し、環境及び発達因子とは、完全ではないにしても、ほとんど無関係である。それらの発現は通常、内因性因子によって条件付けられないため、構成的プロモーターは通常、種にわたって、更には界にわたって活性である。構成的プロモーターの例としては、CMV、EF1a、SV40、PGK1、Ubc、ヒトベータアクチン、及びCAGが挙げられる。
【0084】
誘導性プロモーターの性能は、内因性因子ではなく、人工的に制御することができる環境条件及び外部刺激に条件付けられる。この群内には、光、酸素レベル、高温、低温、及び創傷などの非生物学的因子によって調節されるプロモーターがある。これらの因子のいくつかは、実験環境の外で制御することが困難であるため、目的の生物において天然に見出されない、化学化合物に応答するプロモーターが特に興味深い。同じように、抗生物質、銅、アルコール、ステロイド、及び除草剤に応答するプロモーターは、他の化合物の中でも、自由自在に、かつ他の生物学的又は非生物学的因子とは独立して、遺伝子活性の誘導を可能にするように適合及び精製されている。
【0085】
発現制御配列に作動可能に結合した本明細書に開示される1つ以上のポリヌクレオチドを含有する非ウイルスベクターが開示される。そのような非ウイルスベクターの例としては、オリゴヌクレオチドを単独で、又は好適なタンパク質、多糖、若しくは脂質製剤と組み合わせて含む。非ウイルス方法は、ウイルス法に対して特定の利点を提示し、単純な大規模産生及び低い宿主免疫原性がそのわずか2つである。以前は、低レベルのトランスフェクション及び遺伝子の発現は、非ウイルス方法を不利な状況に保持したが、ベクター技術の最近の進歩は、ウイルスのものと同様のトランスフェクション効率を有する分子及び技法をもたらした。
【0086】
好適な非ウイルスベクターの例としては、pIRES-hrGFP-2a、pCMV6、pMAX、pCAG、pAd-IRES-GFP、及びpCDNA3.0が挙げられるが、これらに限定されない。
【0087】
開示される組成物は、薬学的に許容される担体と組み合わせて治療に使用することができる。「薬学的に許容される」とは、いかなる望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、又はそれと接触する薬学的組成物の他の成分のいずれとも有害な様式で相互作用することなく、生物学的に又は別途望ましくないものではない材料、すなわち、核酸又はベクターとともに、対象に投与され得る材料を意味する。担体は、当業者には周知の通り、活性成分のあらゆる分解を最小限に抑え、対象におけるあらゆる有害な副作用を最小限に抑えるように、必然的に選択され得る。
【0088】
材料は、溶液、懸濁液(例えば、微小粒子、リポソーム、又は細胞に組み込まれる)中であってもよい。これらは、抗体、受容体、又は受容体リガンドを介して、特定の細胞型を標的にし得る。以下の参考文献は、特定のタンパク質を腫瘍組織に標的化するための本技術の使用例である(Senter,et al.,Bioconjugate Chem.,2:447-451,(1991)、Bagshawe,K.D.,Br.J.Cancer,60:275-281,(1989)、Bagshawe,et al.,Br.J.Cancer,58:700-703,(1988)、Senter,et al.,Bioconjugate Chem.,4:3-9,(1993)、Battelli,et al.,Cancer Immunol.Immunother.,35:421-425,(1992)、Pietersz and McKenzie,Immunolog.Reviews,129:57-80,(1992)、及びRoffler,et al.,Biochem.Pharmacol,42:2062-2065,(1991))。「ステルス」及び他の抗体共役リポソーム(結腸がんを標的とする脂質媒介性薬物を含む)などのビヒクル、細胞特異的リガンドを介したDNAの受容体媒介性標的化、リンパ球指向性腫瘍標的化、及びインビボでのマウス神経膠腫細胞の高度に特異的な治療的レトロウイルス標的化。以下の参考文献は、特定のタンパク質を腫瘍組織に標的化するための本技術の使用例である(Hughes et al.,Cancer Research,49:6214-6220,(1989)、及びLitzinger and Huang,Biochimica et Biophysica Acta,1104:179-187,(1992))。概して、受容体は、構成的又はリガンド誘導のいずれかのエンドサイトーシスの経路に関与する。これらの受容体は、クラスリン被覆ピット内でクラスター化し、クラスリン被覆ベシクルを介して細胞内に入り、受容体が選別される酸性化エンドソームを通過し、次いで細胞表面にリサイクルされるか、細胞内に貯蔵されるか、又はリソソーム中で分解されるかのいずれかである。内部移行経路は、栄養素の取り込み、活性化タンパク質の除去、巨大分子のクリアランス、ウイルス及び毒素の日和見進入、リガンドの解離及び分解、並びに受容体レベルの調節などの様々な機能を果たす。多くの受容体は、細胞型、受容体濃度、リガンドの種類、リガンド価、及びリガンド濃度に応じて、2つ以上の細胞内経路に従う。受容体媒介性エンドサイトーシスの分子的及び細胞的機序は報告されている(Brown and Greene,DNA and Cell Biology 10:6,399-409(1991))。
【0089】
好適な担体及びそれらの配合物は、Remington:The Science and Practice of Pharmacy(19th ed.)ed.A.R.Gennaro,Mack Publishing Company,Easton,PA 1995に記載されている。典型的には、製剤を等張性にするために、製剤に適切な量の薬学的に許容される塩が使用される。薬学的に許容される担体の例としては、生理食塩水、リンゲル液、及びデキストロース溶液が挙げられるが、これらに限定されない。溶液のpHは、好ましくは、約5~約8であり、より好ましくは、約7~約7.5である。更なる担体としては、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放性調製物が挙げられ、このマトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、リポソーム、又は微粒子の形態である。ある特定の担体が、例えば、投与経路及び投与される組成物の濃度に応じて、より好ましくてもよいことは、当業者には明らかであろう。
【0090】
薬学的担体は当業者に既知である。これらは、最も典型的には、生理的pHの滅菌水、生理食塩水、及び緩衝液などの溶液を含む、ヒトへの薬物投与のための標準的な担体である。これらの組成物は、筋肉内又は皮下に投与することができる。他の化合物は、当業者が使用する標準的な手順に従って投与されることになる。
【0091】
薬学的組成物は、選択される分子に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、保存剤、表面活性剤などを含んでもよい。薬学的組成物はまた、抗微生物剤、抗炎症剤、麻酔剤などのような1つ以上の活性成分を含んでもよい。
【0092】
非経口投与のための調製物には、滅菌水溶液又は非水溶液、懸濁液、及びエマルジョンが含まれる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体には、生理食塩水及び緩衝媒体を含む、水、アルコール性/水性溶液、エマルジョン、又は懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液、又は固定油が含まれる。静脈内ビヒクルには、流体及び栄養補充剤、電解質補充剤(リンゲルデキストロースに基づくものなど)などが含まれる。保存剤及び他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、及び不活性ガスなども存在し得る。
【0093】
方法
対象の皮膚細胞を、第1及び第2のポリヌクレオチドを含有する本明細書に開示されるワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、対象にワクチン接種する方法も本明細書に開示される。本明細書に開示されるように、この方法は、皮膚常在皮膚細胞に、ウイルス抗原を含有し、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されたEVを産生させるであろう。
【0094】
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、遺伝子銃、そのような送達に適したミクロ粒子若しくはナノ粒子、エレクトロポレーション、三次元ナノチャネルエレクトロポレーションによるトランスフェクション、組織ナノトランスフェクションデバイス、そのような送達に適したリポソーム、又は深部局所組織ナノエレクトロインジェクションデバイスを介して皮膚細胞に細胞内送達される。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターを使用することができる。しかしながら、他の実施形態では、ポリヌクレオチドは、ウイルスによって送達されない。
【0095】
エレクトロポレーションは、細胞膜の透過性を増加させるために電界を細胞に印加し、カーゴ(例えば、リプログラミング因子)が細胞に導入されることを可能にする技法である。エレクトロポレーションは、外来DNAを細胞に導入するための一般的な技法である。
【0096】
組織ナノトランスフェクションは、並置する組織細胞メンバーを良性にナノポレートし、カーゴを細胞へと電気泳動的に駆動する、アレイされたナノチャネルを介して非常に強力かつ焦点の合った電界を印加することによって、カーゴ(例えば、リプログラミング因子)の細胞への直接的なサイトゾル送達を可能にする。
【0097】
いくつかの実施形態では、開示される組成物は、体重1kg当たり約0.1ng~約100g、体重1kg当たり約10ng~約50g、体重1kg当たり約100ng~約1g、体重1kg当たり約1μg~約100mg、体重1kg当たり約1μg~約50mg、体重1kg当たり約1mg~約500mg、及び体重1kg当たり約1mg~約50mgの非経口投与に相当する用量で投与される。代替的には、治療有効用量を達成するために投与される開示される組成物の量は、体重1kg当たり約0.1ng、1ng、10ng、100ng、1μg、10μg、100μg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、80mg、90mg、100mg、500mg以上である。
【0098】
例示的実施形態
実施形態1.ワクチン組成物であって、
(a)ウイルス、細菌、若しくは腫瘍抗原をコードするか、又はそれを含む、第1のポリヌクレオチドと、
(b)APC標的化リガンド及びエクソソーム又はリソソーム膜貫通タンパク質を含む融合タンパク質をコードする、第2のポリヌクレオチドと、を含む、ワクチン組成物。
【0099】
実施形態2.APC標的化リガンドが、ICAM1又はICAM4を含む、実施形態1のワクチン組成物。
【0100】
実施形態3.APC標的化リガンドが、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される、実施形態1のワクチン組成物。
【0101】
実施形態4.ウイルス抗原が、レトロウイルス、レオウイルス、ラブドウイルス、ポリオウイルス、ポチウイルス、ゲミニウイルス、フレキシウイルス、ピコルナウイルス、トガウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、カリシウイルス、アレナウイルス、フラビウイルス、フィロウイルス、ブニャウイルス、コロナウイルス、アストロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、パルボウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、ポックスウイルス、又はポリオーマウイルス由来である、実施形態1~3のいずれか1つのワクチン組成物。
【0102】
実施形態5.ウイルス抗原が、SARS-CoV-2抗原である、実施形態4のワクチン組成物。
【0103】
実施形態6.ウイルス抗原が、SARS-COV2スパイクタンパク質である、実施形態5のワクチン組成物。
【0104】
実施形態7.第1のポリヌクレオチド及び第2のポリヌクレオチドが、単一プラスミドに存在する、実施形態1~6のいずれか1つのワクチン組成物。
【0105】
実施形態8.対象にワクチン接種する方法であって、対象の皮膚細胞を実施形態1~7のいずれか1つのワクチン組成物でトランスフェクトすることを含む、方法。
【0106】
実施形態9.ワクチン組成物であって、ウイルス、細菌、又は腫瘍抗原と、ウイルス抗原をコードするプラスミド又はオリゴヌクレオチドと、を含む、細胞外ベシクル(EV)を含み、EVが、表面上にAPC標的化リガンドで装飾されている、ワクチン組成物。
【0107】
実施形態10.APC標的化リガンドが、ICAM1又はICAM4を含む、実施形態9のワクチン組成物。
【0108】
実施形態11.APC標的化リガンドが、CD2、CD11a、CD18、CD22、CD29、CD40L、LDL、oxLDL、レクチン、ガレクチン1、ガレクチン3、フラゲリン、Cxcl5、KRT14、FGF7、FGF10、及びAMP-IBP5からなる群から選択される、実施形態9のワクチン組成物。
【0109】
実施形態12.ウイルス抗原が、レトロウイルス、レオウイルス、ラブドウイルス、ポリオウイルス、ポチウイルス、ゲミニウイルス、フレキシウイルス、ピコルナウイルス、トガウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、カリシウイルス、アレナウイルス、フラビウイルス、フィロウイルス、ブニャウイルス、コロナウイルス、アストロウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、パルボウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、ポックスウイルス、又はポリオーマウイルス由来である、実施形態9~11のいずれか1つのワクチン組成物。
【0110】
実施形態13.ウイルス抗原が、SARS-CoV-2抗原である、実施形態12のワクチン組成物。
【0111】
実施形態14.ウイルス抗原が、SARS-COV2スパイクタンパク質である、実施形態13のワクチン組成物。
【0112】
実施形態15.対象にワクチン接種する方法であって、対象に実施形態9~15のいずれか1つのワクチン組成物を投与することを含む、方法。
【0113】
本発明のいくつかの実施形態が記載されている。それにもかかわらず、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々変更が行われ得ることが理解されるであろう。したがって、他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内である。
【0114】
別段定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、開示される発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で引用される刊行物及びそれらが引用されている資料は、参照により具体的に組み込まれている。
【0115】
当業者であれば、通常範囲を超えない実験を使用して、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、又は確定することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲によって包含されることが意図される。
図1
図2A-B】
図2C
図2D
図2E
図2F
図2G
図2H
図2I
図2J
図2K
図2L
図3A-B】
図3C
図3D
図3E
図3F
図3G
図3H-J】
【配列表】
2024512436000001.app
【国際調査報告】