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特表2024-512451エンテカビル（ＥＴＶ）の抗ウイルス性プロドラッグおよびその製剤
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-19
(54)【発明の名称】エンテカビル（ＥＴＶ）の抗ウイルス性プロドラッグおよびその製剤
(51)【国際特許分類】
C07D 473/18 20060101AFI20240312BHJP
A61K 31/522 20060101ALI20240312BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240312BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20240312BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20240312BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20240312BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240312BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20240312BHJP
A61K 9/10 20060101ALI20240312BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20240312BHJP
A61K 47/44 20170101ALI20240312BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20240312BHJP
A61K 47/34 20170101ALI20240312BHJP
【ＦＩ】
C07D473/18 CSP
A61K31/522
A61P43/00 111
A61P31/12
A61P1/16
A61P29/00
A61K45/00
A61K9/08
A61K9/10
A61K9/48
A61K47/44
A61K47/38
A61K47/34
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023556761
(86)(22)【出願日】2022-03-14
(85)【翻訳文提出日】2023-11-14
(86)【国際出願番号】 US2022071137
(87)【国際公開番号】W WO2022198195
(87)【国際公開日】2022-09-22
(31)【優先権主張番号】63/161,719
(32)【優先日】2021-03-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】501244222
【氏名又は名称】ザ スクリプス リサーチ インスティテュート
(74)【代理人】
【識別番号】100114188
【弁理士】
【氏名又は名称】小野 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100119253
【弁理士】
【氏名又は名称】金山 賢教
(74)【代理人】
【識別番号】100124855
【弁理士】
【氏名又は名称】坪倉 道明
(74)【代理人】
【識別番号】100129713
【弁理士】
【氏名又は名称】重森 一輝
(74)【代理人】
【識別番号】100137213
【弁理士】
【氏名又は名称】安藤 健司
(74)【代理人】
【識別番号】100143823
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 英彦
(74)【代理人】
【識別番号】100183519
【弁理士】
【氏名又は名称】櫻田 芳恵
(74)【代理人】
【識別番号】100196483
【弁理士】
【氏名又は名称】川嵜 洋祐
(74)【代理人】
【識別番号】100160749
【弁理士】
【氏名又は名称】飯野 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100160255
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 祐輔
(74)【代理人】
【識別番号】100146318
【弁理士】
【氏名又は名称】岩瀬 吉和
(74)【代理人】
【識別番号】100127812
【弁理士】
【氏名又は名称】城山 康文
(72)【発明者】
【氏名】チャタジー，アルナブ ・ケー
(72)【発明者】
【氏名】グプタ，アニル
(72)【発明者】
【氏名】エリアセン，アンダース・ミカル
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076AA22
4C076AA53
4C076BB01
4C076BB11
4C076BB21
4C076BB32
4C076CC04
4C076CC16
4C076CC29
4C076CC35
4C076DD09E
4C076DD17E
4C076EE23E
4C076EE32
4C076EE53
4C084AA19
4C084NA05
4C084ZA752
4C084ZB112
4C084ZB332
4C086AA01
4C086AA03
4C086CB07
4C086GA15
4C086MA02
4C086MA05
4C086MA17
4C086MA23
4C086MA37
4C086MA52
4C086MA55
4C086MA67
4C086NA14
4C086ZA75
4C086ZB11
4C086ZB33
4C086ZC20
(57)【要約】
化合物、組成物、ならびにＲ１およびＲ２が本明細書で定義される構造式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することによって、対象におけるＨＢＶの感染症を治療および／または予防するためのそれらの使用方法が本明細書で提供される。
【化１】
【選択図】図１８
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物であって：【化1】
Ｒ１がＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
ｍ＝１または２であり、
Ｘ－Ｌｍが、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｌ）２、－ＣＨ（Ｒ）ＯＣ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－Ｎ（Ｌ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）（ＮＬ２）、または－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＬ２）２であり、
各Ｌが、独立して、（Ｃ１－２２、直鎖および分岐）アルキル、（Ｃ３－２２、直鎖および分岐）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、ｎ＝０または１である（ＣＨＲ）ｎ－フェニル、および－ＣＨＲ－Ｎ（Ｒ）２から選択され、
またはＲ１が、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジモノアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含むリン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒが、Ｈ、（Ｃ１－２２）アルキル、（Ｃ３－２２）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、または（Ｃ６－Ｃ１２）アリールであり、
Ｒ２がＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
またはＲ２が、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含む、リン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒ１およびＲ２が、同時にＨではない、
化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項2】
Ｒ１およびＲ２の各々がＸ－Ｌｍである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項3】
Ｘ－Ｌｍが－Ｃ（＝Ｏ）Ｌである、請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項4】
以下の表から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩。【表1】
【請求項5】
結晶形態であり、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される９．００、１７．２８、２１．７２、および２３．８０ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする、請求項４に記載の化合物１１。【化2】
【請求項6】
前記ディフラクトグラムが、以下のピーク：１１．７４、１９．４８、２５．００、および２７．１６ °２θ±０．２０ °２θをさらに含む、請求項５に記載の化合物。
【請求項7】
結晶形態であり、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される１６．４４、１９．３６、２０．８８および２６．４６ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする、請求項４に記載の化合物３６。【化3】
【請求項8】
前記ディフラクトグラムが、以下のピーク：１５．１８、２２．１６、２４．５６、および２８．５８ °２θ±０．２０ °２θをさらに含む、請求項７に記載の化合物。
【請求項9】
結晶形態であり、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される１２．３０、１８．６２、２０．３４、および２５．５４ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする、請求項４に記載の化合物２９。【化4】
【請求項10】
前記ディフラクトグラムが、以下のピーク：１４．９６、１６．５４、２１．３８、および２７．７４ °２θ±０．２０ °２θをさらに含む、請求項９に記載の化合物。
【請求項11】
有効量の請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項12】
前記薬学的に許容される担体が、ゴマ油、ヒマシ油、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む製剤であって、前記化合物が、水溶性セルロース系ポリマーおよび非イオン性界面活性剤を含む水溶液に懸濁されている、製剤。
【請求項14】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、アルキルヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロースおよびその塩、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１３に記載の製剤。
【請求項15】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、メチルセルロース、エチルセルロース、プロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの塩、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項16】
前記水溶性セルロース系ポリマーがカルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）である、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項17】
前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル無水物、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェノールエーテル、ポリオキシエチレン脂肪アミン、ポリオキシエチレンアルキルアミド、ソルビトール無水物脂肪酸エステル、およびポリオキシエチレンエーテルからなる群から選択される、請求項１３～１６のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項18】
前記非イオン性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタンエステルから選択される、請求項１３～１７のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項19】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、約０．１～約２．０％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～１８のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項20】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、約０．３～約０．８％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～１９のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項21】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、約０．５％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～２０のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項22】
前記非イオン性界面活性剤が、約０．１～約２．０％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～２１のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項23】
前記非イオン性界面活性剤が、約０．３～約０．８％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～２２のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項24】
前記非イオン性界面活性剤が、約０．５％（ｗ／ｖ）の量で存在する、請求項１３～２３のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項25】
前記水溶性セルロース系ポリマーが、約０．５％（ｗ／ｖ）の量のＣＭＣであり、前記非イオン性界面活性剤が、約０．５％（ｗ／ｖ）の量のＴｗｅｅｎ－８０である、請求項１３～２４のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項26】
逆転写酵素生物活性で酵素を発現するウイルスを、有効量または有効濃度の請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む、ウイルス逆転写酵素生物活性を阻害する方法。
【請求項27】
逆転写酵素の阻害が医学的に指示される患者のウイルス感染症を治療する方法であって、有効量または有効濃度の請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項28】
患者のウイルス感染症を治療または予防する方法であって、治療または予防を必要とする前記患者に、有効量の請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。
【請求項29】
前記投与が、経口、非経口、およびインプラント投与経路から選択される、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項30】
前記化合物が、水性懸濁液もしくは溶液として製剤化されるか、または遅延放出のためにポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含む粒子でカプセル化される、請求項２７～２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項31】
前記ウイルス感染症がＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）によって引き起こされる、請求項２７～３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
少なくとも一つの抗ＨＢＶ剤を投与することをさらに含む、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
前記抗ＨＢＶ剤が、アデホビルジピボキシル、テルビブジン、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、テノホビルアラフェナミドフマル酸塩、ラミブジン、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
ＨＢＶのウイルス感染を治療または予防するための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は、２０２１年３月１６日に出願された米国仮特許出願第６３／１６１，７１９号に対する優先権の利益を主張し、この出願は、本明細書に完全に記載されているかのようにその全体が組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症は、世界中で毎年数百万人もの人々に影響を及ぼす、重大な公衆衛生上の問題である。特定のヌクレオシド類似体逆転写酵素（ＲＴ）阻害剤、例えばエンテカビル（ＥＴＶ）は、ＨＢＶ耐性に対する高いバリア性を有する（Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｏｐｉｎ ２００５、２１（１１）、１８４５～１８５６）。
【化1】
【0003】
逆転写酵素阻害剤は、ＨＢＶを含む、逆転写酵素機能がウイルス複製およびウイルスタンパク質の産生に不可欠であるウイルスによって引き起こされる、ウイルス感染症の治療に有効であり得る。ＤＮＡウイルスであるＨＢＶの場合、ＤＮＡウイルスポリメラーゼは逆転写酵素機能も有し、複製中にウイルスＲＮＡ中間体からウイルスＤＮＡを生成する。ＨＢＶを治療する抗ウイルス性化合物の例は、ラミブジンである。
［先行技術文献］
［非特許文献］
［非特許文献１］Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｏｐｉｎ ２００５、２１（１１）、１８４５～１８５６
［非特許文献２］Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２０１８，５４３（１），５２－５９
［先行技術文献］
［非特許文献］
［非特許文献１］Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｒｅｓ Ｏｐｉｎ ２００５、２１（１１）、１８４５～１８５６
［非特許文献２］Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２０１８，５４３（１），５２－５９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
ＥＴＶの毎日の投与には患者のコンプライアンスの課題があるので、ＥＴＶの持続放出を促進する努力がなされてきた。例えば、ＥＴＶのプロドラッグはＥＴＶ－パルミタートであり、これは最大１ヶ月間、治療的レベルより高い血漿レベルを実証する（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２０１８，５４３（１），５２－５９）。
【化2】
【課題を解決するための手段】
【0005】
この課題およびその他に対処するために、本開示は、様々な実施形態において、式（Ｉ）によるＥＴＶの生物活性プロドラッグまたはその薬学的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒ１はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
ｍ＝１または２であり、
Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｌ）２、－ＣＨ（Ｒ）ＯＣ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－Ｎ（Ｌ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）（ＮＬ２）、または－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＬ２）２であり、
各Ｌは、独立して、（Ｃ１－２２、直鎖および分岐）アルキル、（Ｃ３－２２、直鎖および分岐）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、ｎ＝０または１である（ＣＨＲ）ｎ－フェニル、および－ＣＨＲ－Ｎ（Ｒ）２から選択され、
またはＲ１は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートアミダート（モノおよびジ）、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含むリン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒは、Ｈ、（Ｃ１－２２）アルキル、（Ｃ３－２２）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、または（Ｃ６－Ｃ１２）アリールであり、
Ｒ２はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
またはＲ２は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートアミダート（モノおよびジ）、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含む、リン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒ１およびＲ２は、同時にＨではない。
【化3】
Ｒ１はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
ｍ＝１または２であり、
Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｌ）２、－ＣＨ（Ｒ）ＯＣ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－Ｎ（Ｌ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）（ＮＬ２）、または－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＬ２）２であり、
各Ｌは、独立して、（Ｃ１－２２、直鎖および分岐）アルキル、（Ｃ３－２２、直鎖および分岐）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、ｎ＝０または１である（ＣＨＲ）ｎ－フェニル、および－ＣＨＲ－Ｎ（Ｒ）２から選択され、
またはＲ１は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートアミダート（モノおよびジ）、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含むリン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒは、Ｈ、（Ｃ１－２２）アルキル、（Ｃ３－２２）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、または（Ｃ６－Ｃ１２）アリールであり、
Ｒ２はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
またはＲ２は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートアミダート（モノおよびジ）、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含む、リン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒ１およびＲ２は、同時にＨではない。
【0006】
本開示はまた、追加の実施形態では、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【0007】
さらなる実施形態では、本開示は、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む製剤を提供する。化合物は、水溶性セルロース系ポリマーと非イオン性界面活性剤とを含む水溶液に懸濁される。
【0008】
別の実施形態では、ウイルス逆転写酵素生物活性を阻害する方法も提供される。方法は、逆転写酵素生物活性で酵素を発現するウイルスを、有効量または有効濃度の本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む。
【0009】
さらなる態様では、本開示は、患者のウイルス感染症、例えば逆転写酵素の阻害が医学的に指示される感染症を治療または予防する方法を提供する。方法は、治療または予防を必要とする患者に、有効量の本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【図1】ＥＴＶの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0011】
【図2】ＥＴＶのＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0012】
【図3】微粒子化ＥＴＶおよびその製剤のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0013】
【図4】プロドラッグ９の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0014】
【図5】プロドラッグ９のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0015】
【図6】プロドラッグ１１の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0016】
【図7】プロドラッグ１１のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0017】
【図8】製剤化されたプロドラッグ１１のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0018】
【図9】プロドラッグ３６の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0019】
【図10】プロドラッグ３６のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0020】
【図11】微粒子化プロドラッグ３６およびその製剤のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0021】
【図12】プロドラッグ２９の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0022】
【図13】プロドラッグ２９のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0023】
【図14】微粒子化プロドラッグ２９およびその製剤のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0024】
【図15】ＥＴＶ－パルミタートの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す図である。
【0025】
【図16】ＥＴＶ－パルミタートのＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0026】
【図17】微粒子化ＥＴＶ－パルミタートおよびその製剤のＸ線粉末ディフラクトグラム（ＸＰＲＤ）である。
【0027】
【図18】ＩＭ投与後のＥＴＶおよびプロドラッグ９のラットＰＫデータである（実施例３９；表２）。
【0028】
【図19】ＩＭ投与後のプロドラッグ１１、２９およびＥＴＶのイヌＰＫデータである（実施例４０；表３）。
【0029】
【図20】ＩＭ／ＳＣ投与後のプロドラッグ１１、３６およびＥＴＶ－パルミタートのイヌＰＫデータである（実施例４１；表４）。
【発明を実施するための形態】
【0030】
本開示は、部分的には、ＥＴＶのプロドラッグである化合物に関する。さらに、これらのプロドラッグの製剤は、逆転写酵素（ＲＮＡ指令型ＤＮＡポリメラーゼ）の阻害がウイルス感染を遅延または遮断する、ＨＢＶなどのウイルスのウイルス感染症に対する患者の治療的および予防的治療を提供する。これらの治療のための投与経路には、経口、非経口およびインプラント（組成物およびデバイス）が含まれ得るが、これらに限定されない。本開示の製剤は、例えば水性懸濁液および／または油溶液製剤として注射された場合、これらのプロドラッグからのＥＴＶの遅延放出または制御放出または持続放出を提供し、したがって本発明のＥＴＶプロドラッグが長時間作用剤として機能することを可能にする。
【0031】
定義
【0032】
「アルキル」は、１～約２５個の炭素原子を含む直鎖（線状）または分岐鎖ヒドロカルビルを指す。例えば、アルキルは、１～１０個の炭素原子または１～６個の炭素原子を有することができる。例示的なアルキルには直鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル等が含まれ、直鎖アルキル基の分岐鎖異性体、例えば、これらに限定されないが、－ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、－Ｃ（ＣＨ３）３、－Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、－ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、－ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）３、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２、等も含まれる。したがって、アルキル基には、第１級アルキル基、第２級アルキル基、および第３級アルキル基が含まれる。
【0033】
「アルケニル」という用語は、１～１０、１～８、１～６、１～４、１～２、または少なくとも１つの不飽和、すなわち炭素－炭素二重結合を有する２～約２５個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖ヒドロカルビル基を指す。
【0034】
「シクロアルキル」という用語は、飽和単環式、二環式、三環式、または多環式の３～１４員環系、例えばＣ３－Ｃ８－シクロアルキルを指す。シクロアルキルは、任意の原子を介して結合していてもよい。シクロアルキルの代表的な例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。多環式シクロアルキルには、縮合、架橋および／またはスピロ縮合することができる環が含まれる。
【0035】
「アリール」は、単独でまたは別の用語の一部として使用される場合、縮合の有無にかかわらず、指定された数の炭素原子を有する、または指定されていない場合、１４個までの炭素原子を有する炭素環式芳香族基、例えばＣ６－Ｃ１０－アリールまたはＣ６－Ｃ１４－アリールを意味する。アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタセニルなどが挙げられる（例えば、Ｌａｎｇ’ｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｄｅａｎ，Ｊ．Ａ．，ｅｄ）１３ｔｈ ｅｄ．表７－２を参照されたい）。「アリール」はまた、縮合多環系の一部であるアリール環、例えば本明細書で定義されるシクロアルキルに縮合したアリールを意図する。例示的なアリールはフェニルである。
【0036】
本明細書中に記載される化合物は、立体配置異性体、幾何異性体および立体配座異性体（例えば、シスまたはトランス立体配座を含む）を含む様々な異性体形態で存在し得る。化合物はまた、単一の互変異性体および互変異性体の混合物の両方を含む、１つまたは複数の互変異性形態で存在し得る。「異性体」という用語は、化合物の互変異性体形態を含む、本開示の化合物のすべての異性体形態を包含することを意図している。本開示の化合物はまた、開鎖または環化形態で存在し得る。場合によっては、環化形態の１つ以上が水の損失から生じ得る。開鎖および環化形態の具体的な組成は、化合物をどのように単離、保存または投与するかに依存し得る。例えば、化合物は、酸性条件下では主に開鎖形態で存在し得るが、中性条件下では環化し得る。すべての形態が本開示に含まれる。
【0037】
本明細書に記載されるいくつかの化合物は、不斉中心を有することができ、したがって、異なるエナンチオマーおよびジアステレオマー形態で存在することができる。本明細書に記載の化合物は、光学異性体またはジアステレオマーの形態であり得る。したがって、本開示は、光学異性体、ジアステレオ異性体、およびラセミ混合物を含むそれらの混合物の形態の、本明細書に記載される化合物およびそれらの使用を包含する。本開示の化合物の光学異性体は、既知の技術、例えば不斉合成、キラルクロマトグラフィー、擬似移動床技術によって、または光学活性分割剤の使用による立体異性体の化学分離によって得ることができる。
【0038】
別段示されない限り、「立体異性体」という用語は、他の立体異性体を実質的に含まない化合物の１つの立体異性体を意味する。したがって、１つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まない。２つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性的に純粋な化合物は、化合物の約８０重量％超の１つの立体異性体および化合物の約２０重量％未満の他の立体異性体、例えば化合物の約９０重量％超の１つの立体異性体および化合物の約１０重量％未満の他の立体異性体、または化合物の約９５重量％超の１つの立体異性体および化合物の約５重量％未満の他の立体異性体、または化合物の約９７重量％超の１つの立体異性体および化合物の約３重量％未満の他の立体異性体、または化合物の約９９重量％超の１つの立体異性体および化合物の約１重量％未満の他の立体異性体を含む。上記の立体異性体は、本明細書に記載のそれぞれの重量パーセンテージで存在する２つの立体異性体を含む組成物と見なすことができる。
【0039】
示された構造とその構造に与えられた名称との間に不一致がある場合、示された構造が支配する。さらに、構造または構造の一部の立体化学が、例えば太線または破線で示されていない場合、構造または構造の一部は、そのすべての立体異性体を包含すると解釈されるべきである。しかし、場合によっては、２つ以上のキラル中心が存在する場合、構造および名称は、相対的な立体化学を説明するのを助けるために単一のエナンチオマーとして表されてもよい。有機合成の当業者は、化合物が単一のエナンチオマーとして、それらを調製するために使用される方法から調製されるかどうかを知るであろう。
【0040】
本明細書で使用される場合、別途そうではないと特定されない限り、「化合物」という用語は、化合物またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、および／または互変異性体を包含するという点で包括的である。したがって、例えば、本開示の化合物は、その化合物の互変異性体の薬学的に許容される塩を含む。
【0041】
本明細書では、「薬学的に許容される塩」は、本明細書に記載される化合物の薬学的に許容される有機もしくは無機酸の、または塩基の塩である。代表的な薬学的に許容される塩としては、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類塩、アンモニウム塩、水溶性および水不溶性塩、例えば、酢酸塩、アムソネート（４，４－ジアミノスチルベン－２，２－ジスルホネート）、ベンゼンスルホネート、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、エデト酸カルシウム、カンシラート、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラリエート（ｃｌａｖｕｌａｒｉａｔｅ）、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシネート（ｈｅｘｙｌｒｅｓｏｒｃｉｎａｔｅ）、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエート、ヨウ化物、イソチオネート、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、ムカート（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシレート、硝酸塩、Ｎ－メチルグルカミンアンモニウム塩、３－ヒドロキシ－２－ナフトエート、オレイン酸塩、オキサレート、パルミチン酸塩、パモエート（１，１－メチレン－ビス－２－ヒドロキシ－３－ナフトエート、アインボネート（ｅｉｎｂｏｎａｔｅ））、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロネート（ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｔｅ）、プロピオン酸塩、ｐ－トルエンスルホネート、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチレート（ｓｕｌｆｏｓａｌｉｃｕｌａｔｅ）、スラメート（ｓｕｒａｍａｔｅ）、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシレート、トリエチオジド、および吉草酸塩が挙げられる。薬学的に許容される塩は、その構造中に２つ以上の荷電原子を有することができる。この例では、薬学的に許容される塩は複数の対イオンを有することができる。したがって、薬学的に許容される塩は、１つ以上の荷電原子および／または１つ以上の対イオンを有することができる。
【0042】
「治療する」、「治療すること」および「治療」という用語は、疾患または疾患に関連する症状の改善または根絶を指す。特定の実施形態では、そのような用語は、そのような疾患を有する患者への１つ以上の予防または治療剤の投与から生じる、疾患の拡散または悪化の最小化を指す。
【0043】
用語「予防する」、「予防すること」、および「予防」は、予防または治療剤の投与から生じる、患者における疾患の発症、再発、または拡散の予防を指す。
【0044】
「有効量」という用語は、本明細書に記載の疾患の治療もしくは予防において治療上もしくは予防上の利益を提供するのに十分な、または疾患に関連する症状を遅延もしくは最小化するのに十分な、本明細書に記載の化合物または他の有効成分の量を指す。さらに、本明細書に記載の化合物に関する治療有効量は、疾患の治療または予防において治療上の利益を提供する治療剤の単独の量、または他の療法と組み合わせた量を意味する。本明細書に記載の化合物に関連して使用される場合、この用語は、全体的な治療を改善し、疾患の症状もしくは原因を軽減もしくは回避し、または別の治療剤の治療有効性を増強するか、もしくはそれと相乗的である量を包含し得る。
【0045】
「患者」または「対象」には、ヒト、ウシ、ウマ、ヒツジ、子ヒツジ、ブタ、ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギまたはモルモットなどの動物が含まれる。いくつかの実施形態によれば、動物は、非霊長類および霊長類（例えば、サルおよびヒト）などの哺乳動物である。一実施形態では、患者はヒト、例えばヒト乳児、小児、青年または成人である。本開示では、「患者」および「対象」という用語は互換的に使用される。
【0046】
本開示は、様々な実施形態において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒ１はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
ｍ＝１または２であり、
Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｌ）２、－ＣＨ（Ｒ）ＯＣ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－Ｎ（Ｌ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）（ＮＬ２）、または－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＬ２）２であり、
各Ｌは、独立して、（Ｃ１－２２、直鎖および分岐）アルキル、（Ｃ３－２２、直鎖および分岐）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、ｎ＝０または１である（ＣＨＲ）ｎ－フェニル、および－ＣＨＲ－Ｎ（Ｒ）２から選択され、
またはＲ１は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジモノアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含むリン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒは、Ｈ、（Ｃ１－２２）アルキル、（Ｃ３－２２）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、または（Ｃ６－Ｃ１２）アリールであり、
Ｒ２はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
またはＲ２は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含む、リン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒ１およびＲ２は、同時にＨではない。
【化4】
Ｒ１はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
ｍ＝１または２であり、
Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｌ）２、－ＣＨ（Ｒ）ＯＣ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－ＮＨ（Ｌ）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ（Ｒ）－Ｎ（Ｌ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＨＬ）（ＮＬ２）、または－Ｐ（＝Ｏ）（ＮＬ２）２であり、
各Ｌは、独立して、（Ｃ１－２２、直鎖および分岐）アルキル、（Ｃ３－２２、直鎖および分岐）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、ｎ＝０または１である（ＣＨＲ）ｎ－フェニル、および－ＣＨＲ－Ｎ（Ｒ）２から選択され、
またはＲ１は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジモノアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含むリン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒは、Ｈ、（Ｃ１－２２）アルキル、（Ｃ３－２２）アルケニル、（Ｃ３－７）シクロアルキル、または（Ｃ６－Ｃ１２）アリールであり、
Ｒ２はＨであるか、またはＸ－Ｌｍであり、
またはＲ２は、－ＯＣＨ（Ｒ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスホネート、リン酸ポリエステル、ホスフェートモノアミダート、ホスフェートジアミダート、ホスホロチオエート、ホスホロセレノエートもしくはホスホロボラノエートを含む、リン酸残基またはその誘導体残基であり、
Ｒ１およびＲ２は、同時にＨではない。
【0047】
様々な実施形態において、Ｒ１およびＲ２の各々はＸ－Ｌｍである。いくつかの実施形態において、Ｘ－Ｌｍの一方または両方の例は、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌである。例示的な実施形態において、Ｒ１およびＲ２の各々は、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌである。
【0048】
他の実施形態では、本明細書で定義される式（Ｉ）の規定にもかかわらず、式（Ｉ）は、以下の組み合わせの１つまたは複数を除外する。
ａ）Ｒ１＝ＨかつＲ２＝Ｘ－Ｌｍ、Ｒ１＝Ｘ－ＬｍかつＲ２＝Ｈ、またはＲ１＝Ｒ２＝Ｘ－Ｌｍこれらの組み合わせでは、Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、または－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）であり、各Ｌは、（Ｃ６－３０、直鎖および分岐鎖）アルキル、アルケニルが１～６の不飽和を含み得る（Ｃ７－３０、直鎖および分岐鎖）アルケニルから独立して選択され；
ｂ）Ｒ１＝－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ｎ－ＣＨ３、ｎ＝３、５、７、９、１１、１３、１５、Ｒ２＝Ｈであり；
ｃ）Ｒ１は、モノホスフェートであり、Ｒ２は、水素、置換または非置換Ｃ１－Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ３－Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換Ｃ２－Ｃ１２アルカノイル、置換または非置換－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｃ１－Ｃ１０アルキルからなる群から選択され、置換基は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ニトロ、ヒドロキシ、－ＮＲａＲｂ、およびシアノ基からなる群から選択され、ＲａおよびＲｂの各々は、独立してＨ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、またはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
ａ）Ｒ１＝ＨかつＲ２＝Ｘ－Ｌｍ、Ｒ１＝Ｘ－ＬｍかつＲ２＝Ｈ、またはＲ１＝Ｒ２＝Ｘ－Ｌｍこれらの組み合わせでは、Ｘ－Ｌｍは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｌ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＬ、または－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｌ）であり、各Ｌは、（Ｃ６－３０、直鎖および分岐鎖）アルキル、アルケニルが１～６の不飽和を含み得る（Ｃ７－３０、直鎖および分岐鎖）アルケニルから独立して選択され；
ｂ）Ｒ１＝－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ｎ－ＣＨ３、ｎ＝３、５、７、９、１１、１３、１５、Ｒ２＝Ｈであり；
ｃ）Ｒ１は、モノホスフェートであり、Ｒ２は、水素、置換または非置換Ｃ１－Ｃ１０アルキル、置換または非置換Ｃ３－Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換Ｃ２－Ｃ１２アルカノイル、置換または非置換－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｃ１－Ｃ１０アルキルからなる群から選択され、置換基は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ニトロ、ヒドロキシ、－ＮＲａＲｂ、およびシアノ基からなる群から選択され、ＲａおよびＲｂの各々は、独立してＨ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、またはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
【0049】
さらなる実施形態では、本開示は、以下の表１に示すとおり、化合物１～３８およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【0050】
様々な実施形態では、本明細書に記載される化合物またはその薬学的に許容される塩は、固体である。例えば、固体は、非晶質固体および１つ以上の結晶性固体（多形）から選択される。非晶質および結晶性固体は、例えば、粉末Ｘ線回折および示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を含む、当技術分野で公知の機器技術によって特徴付けられる。本発明の化合物の結晶性固体の例示的な特徴付けデータとしては、図４～図１４に示されるものが挙げられる。
【0051】
例示的な実施形態では、本開示は、結晶形態の化合物１１を提供する。
【化5】
【0052】
化合物１１の固体結晶形態は、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される９．００、１７．２８、２１．７２、および２３．８０ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする。さらなる実施形態では、ディフラクトグラムは、１１．７４、１９．４８、２５．００、および２７．１６ °２θ±０．２０ °２θのピークをさらに含む。
【0053】
別の例示的な実施形態では、本開示は、結晶形態の化合物３６を提供する。
【化6】
【0054】
化合物３６の固体結晶形態は、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される１６．４４、１９．３６、２０．８８、および２６．４６ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする。ある実施形態では、ディフラクトグラムは、１５．１８、２２．１６、２４．５６、および２８．５８ °２θ±０．２０ °２θのピークをさらに含む。
【0055】
本開示はまた、結晶形態の化合物２９を提供する。
【化7】
【0056】
化合物２９の固体結晶形態は、１．５４０５６Åの波長でＣｕ－Ｋα１放射線を使用する回折計で決定される１２．３０、１８．６２、２０．３４、および２５．５４ °２θ±０．２０ °２θのピークを含むＸ線粉末ディフラクトグラムを特徴とする。ある実施形態では、ディフラクトグラムは、１４．９６、１６．５４、２１．３８、および２７．７４ °２θ±０．２０ °２θのピークをさらに含む。
【0057】
さらなる例示的実施形態では、本開示は、表１に示される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。化合物は、特徴付けデータ（ＮＭＲおよびＬＣＭＳ）と共に開示される。
【0058】
【表1】
【0059】
医薬組成物
【0060】
本開示はまた、様々な実施形態において、治療有効量の本明細書に記載の１つ以上の化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、および／または互変異性体を薬学的に許容される担体と混合して含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的配合の許容される慣行に従って、１つ以上の追加の治療剤、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、アジュバント、安定剤、乳化剤、防腐剤、着色剤、緩衝剤、香味付与剤をさらに含有する。
【0061】
一実施形態では、医薬組成物は、表１に示すものから選択される化合物またはその薬学的に許容される塩、立体異性体および／もしくは互変異性体、ならびに薬学的に許容される担体を含む。
【0062】
本開示の医薬組成物は、優良な医療行為と一致する様式で製剤化され、服用され、投与される。この文脈で考慮すべき因子には、治療される特定の障害、治療される特定の対象、対象の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、および医療従事者に知られている他の因子が含まれる。
【0063】
投与される化合物またはその薬学的に許容される塩、立体異性体および／もしくは互変異性体の「治療有効量」は、そのような考慮事項によって調節され、逆転写酵素活性、ウイルス複製、ウイルスタンパク質の産生、またはそれらの組み合わせを阻害するのに必要な最小量である。そのような量は、正常細胞または対象全体に対して毒性である量未満であり得る。一般に、投与される本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）の初期治療有効量は、約０．０１～約２００ｍｇ／ｋｇの範囲である。典型的な投与量範囲は、約０．１～約４００ｍｇ／患者体重ｋｇ／日であり、典型的な初期範囲は、約５０～約２００ｍｇ／ｋｇ／日である。錠剤およびカプセル剤などの経口単位剤形は、約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）を含有し得る。別の実施形態では、そのような剤形は、約５０ｍｇ～約５００ｍｇの本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）を含有する。さらに別の実施形態では、そのような剤形は、約２５ｍｇ～約２００ｍｇの本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）を含有する。なおも別の実施形態では、そのような剤形は、約１０ｍｇ～約１００ｍｇの本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）を含有する。さらなる実施形態では、そのような剤形は、約５ｍｇ～約５０ｍｇの本開示の化合物（またはその薬学的に許容される塩、立体異性体もしくは互変異性体）を含有する。前述の実施形態のいずれにおいても、剤形は、１日に１、２、３または４回投与され得る。
【0064】
本開示の組成物は、用量単位製剤で経口的に、局所的に、非経口的に、例えば肺投与のために吸入もしくはスプレーによって、または直腸に投与することができる。本明細書で使用される非経口という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技術を含む。
【0065】
本明細書に記載の適切な経口組成物には、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、エマルジョン、硬質もしくは軟質カプセル、シロップまたはエリキシル剤が含まれるが、これらに限定されない。
【0066】
別の態様では、本開示の化合物またはその薬学的に許容される立体異性体、塩もしくは互変異性体および薬学的に許容される担体を含む、単一単位投与量に適した医薬組成物も包含される。
【0067】
経口使用に適した本開示の組成物は、医薬組成物の製造のための当技術分野で公知の任意の方法に従って調製することができる。例えば、本開示の化合物の液体製剤は、化合物の薬学的に口に合う調製物を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および防腐剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含有する。
【0068】
錠剤組成物については、非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合した本開示の化合物を錠剤の製造に使用する。そのような賦形剤の例としては、限定されないが不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；造粒剤および崩壊剤、例えばコーンスターチまたはアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチンまたはアカシア、および潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクが挙げられる。錠剤はコーティングしなくても、または公知のコーティング技術によってコーティングして、胃腸管での崩壊および吸収を遅延させ、それによって所望の期間にわたる持続的な治療作用を提供してもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を使用することができる。
【0069】
経口使用のための製剤はまた、有効成分が不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンと混合される硬質ゼラチンカプセルとして、または有効成分が水もしくは油媒体、例えば落花生油、流動パラフィンもしくはオリーブ油と混合される軟質ゼラチンカプセルとして提供され得る。
【0070】
水性懸濁液の場合、本開示の化合物は、安定な懸濁液を維持するのに適した賦形剤と混合される。そのような賦形剤の例としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムが挙げられるが、これらに限定されない。
【0071】
経口懸濁液はまた、分散剤または湿潤剤、例えば天然ホスファチド、例えばレシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエートを含有し得る。水性懸濁液はまた、１つ以上の防腐剤、例えば、ｐ－ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ－ヒドロキシ安息香酸ｎ－プロピル、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味剤、および１つ以上の甘味剤、例えばスクロースまたはサッカリンを含有し得る。
【0072】
油性懸濁液は、本開示の化合物を植物油、例えば落花生油、オリーブ油、ゴマ油もしくはヤシ油、または流動パラフィンなどの鉱油、またはヒマシ油、またはそれらの組み合わせに懸濁することによって製剤化することができる。油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜蝋、固形パラフィンまたはセチルアルコールを含有してもよい。
【0073】
上記のような甘味剤、および香味剤を添加して、口当たりのよい経口製剤を提供することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの酸化防止剤の添加によって保存され得る。
【0074】
水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末および顆粒を分散剤または湿潤剤、懸濁化剤および１つ以上の防腐剤と混合して、本開示の化合物を提供する。適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤は、既に上述したものによって例示される。追加の賦形剤、例えば甘味剤、香味剤および着色剤も存在し得る。
【0075】
本開示の医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油性相は、植物油、例えばオリーブ油もしくは落花生油、または鉱油、例えば流動パラフィン、またはこれらの混合物であり得る。適切な乳化剤は、天然ゴム、例えばアラビアゴムまたはトラガカントゴム、天然ホスファチド、例えばダイズ、レシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトールに由来するエステルまたは部分エステル、無水物、例えばソルビタンモノオレエート、ならびに前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合反応生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。エマルジョンはまた、甘味剤および香味剤を含有し得る。
【0076】
シロップおよびエリキシルは、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースと共に製剤化され得る。そのような製剤はまた、粘滑剤、防腐剤、ならびに香味剤および着色剤を含有し得る。医薬組成物は、滅菌注射剤、水性懸濁液または油性懸濁液の形態であり得る。この懸濁液は、上記の適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、公知の技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射剤溶液または懸濁液、例えば１，３－ブタンジオール中の溶液であってもよい。使用され得る、許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンガー液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来から使用されている。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性固定油を使用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に使用される。
【0077】
本開示の化合物はまた、直腸投与のための坐剤の形態で投与され得る。これらの組成物は、化合物を、常温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸内で融解して化合物を放出する、適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。そのような材料は、ココアバターおよびポリエチレングリコールである。
【0078】
非経口投与のための組成物は、滅菌媒体中で投与される。使用されるビヒクルおよび製剤中の化合物の濃度に応じて、非経口製剤は、溶解化合物を含有する懸濁液または溶液のいずれかであり得る。局所麻酔薬、防腐剤および緩衝剤などのアジュバントを非経口組成物に添加することもできる。
【0079】
様々な実施形態では、本開示は、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む製剤を提供する。化合物は、水溶性セルロース系ポリマーと非イオン性界面活性剤とを含む水溶液に懸濁される。
【0080】
水溶性セルロース系ポリマーは、様々な実施形態によれば、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、アルキルヒドロキシアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロースおよびその塩、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。具体的な例としては、メチルセルロース、エチルセルロース、プロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの塩、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、水溶性セルロース系ポリマーは、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）である。水溶性セルロース系ポリマーは、約０．１～約２．０％（ｗ／ｖ）または約０．３～約０．８％（ｗ／ｖ）の量で存在する。例示的な量は、約０．５％（ｗ／ｖ）である。
【0081】
さらなる実施形態では、非イオン性界面活性剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル無水物、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェノールエーテル、ポリオキシエチレン脂肪アミン、ポリオキシエチレンアルキルアミド、ソルビトール無水物脂肪酸エステル、およびポリオキシエチレンエーテルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、非イオン性界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、例えばポリオキシエチレン（８０）ソルビタンモノオレエート（Ｔｗｅｅｎ－８０）から選択される。様々な実施形態において、非イオン性界面活性剤は、約０．１～約２．０％（ｗ／ｖ）または約０．３～約０．８％（ｗ／ｖ）の量で存在する。例示的な量は、約０．５％（ｗ／ｖ）である。
【0082】
例示的な実施形態では、水溶性セルロース系ポリマーは、約０．５％（ｗ／ｖ）の量のＣＭＣであり、非イオン性界面活性剤は、約０．５％（ｗ／ｖ）の量のＴｗｅｅｎ－８０である。
【0083】
使用方法
【0084】
本開示はさらに、様々な態様において、ウイルス逆転写酵素生物活性を阻害する方法を提供する。方法は、逆転写酵素生物活性で酵素を発現するウイルスを、有効量または有効濃度の本明細書に記載の化合物と接触させることを含む。
【0085】
本開示はさらに、様々な実施形態において、逆転写酵素の阻害が医学的に指示される患者におけるウイルス血症の予防またはウイルス感染症の治療の方法を提供し、方法は、本明細書に記載の化合物の有効量または有効濃度を患者に投与することを含む。例えば、化合物は、化合物からＥＴＶを遅延放出または制御放出または持続放出させる製剤で投与される。より具体的には、化合物は、本明細書に記載の水性懸濁液または溶液として製剤化され、遅延放出のために、例えばポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）を含む粒子にカプセル封入することができる。いくつかの実施形態では、ウイルス感染症はＨＢＶによって引き起こされる。化合物の投与経路には、経口、非経口およびインプラント（薬物送達組成物およびデバイス）が含まれるが、これらに限定されない。
【0086】
ＨＢＶの治療または予防のための方法の一実施形態では、方法は、少なくとも１つの追加の抗ＨＢＶ剤をさらに含む。薬剤には、アデホビルジピボキシル、テルビブジン、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、テノホビルアラフェナミドフマル酸塩およびラミブジンが含まれるが、これらに限定されない。
【0087】
［実施例］
【0088】
略称
【0089】
以下の略称を使用する：テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）。
【0090】
本開示の化合物の調製のための一般的な実施例
【0091】
本明細書中に記載される化合物のための出発物質および中間体は、下記に記載される方法の適用または順応によって、それらの明らかな化学的等価物によって、または、例えば、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ １－８．Ｅｄｉｔｏｒｓ Ｅ．Ｍ．Ｃａｒｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｉｅｍｅ ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（２００１－２００８）などの文献に記載されるように調製される。試薬および反応オプションの詳細は、Ｓｃｉｆｉｎｄｅｒ（ｗｗｗ．ｃａｓ．ｏｒｇ）またはＲｅａｘｙｓ（ｗｗｗ．ｒｅａｘｙｓ．ｃｏｍ）などの市販のコンピュータ検索エンジンを使用した構造および反応検索によっても入手可能である。
【0092】
パートＩ：中間体－Ａの調製
【0093】
［実施例１］
２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（中間体－Ａ）の合成
２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（中間体－Ａ）の合成
【化8】
【0094】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１Ｌ）中のエンテカビル水和物（５０．０ｇ、１７０ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（３４．６ｇ、５１０ｍｍｏｌ）の混合物に、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（３３．２ｇ、２２０ｍｍｏｌ）を０～５℃で添加した。添加後、得られた混合物を３０℃で一晩撹拌した。混合物を水（４Ｌ）に注ぎ、濾過した。ケークを石油エーテル（４００ｍＬ）で、次いで石油エーテル／酢酸エチルの溶液（９／１、１０００ｍＬ）で洗浄した。
得られた固体を真空中で乾燥させて、所望の中間体－Ａ（５７．９ｇ、収率８７％）を白色固体として得た。
得られた固体を真空中で乾燥させて、所望の中間体－Ａ（５７．９ｇ、収率８７％）を白色固体として得た。
【0095】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．５０（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），６．３６（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．２８（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．０７（ｓ，１Ｈ），４．８６（ｓ，１Ｈ），４．５３（ｓ，１Ｈ），４．１１（ｓ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝６．４ Ｈｚ，２Ｈ），２．４８－２．４３（ｍ，１Ｈ），２．１３－２．０７（ｍ，１Ｈ），２．００－１．９４（ｍ，１Ｈ），０．８１（ｓ，９Ｈ），０．０８（ｓ，６Ｈ）．
【0096】
パートＩＩ：実施例化合物の調製
【0097】
［実施例２］
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－５－アセトキシ－３－（２－アミノ－６－オキソ－１，６－ジヒドロ－９Ｈ－プリン－９－イル）－２－メチレンシクロペンチル）酢酸メチル（１）：
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－５－アセトキシ－３－（２－アミノ－６－オキソ－１，６－ジヒドロ－９Ｈ－プリン－９－イル）－２－メチレンシクロペンチル）酢酸メチル（１）：
【化9】
【0098】
化合物２に従う手順を使用することによってプロドラッグ１を調製する。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ ３６２．４２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0099】
［実施例３］
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（イソブチリルオキシ）－３－メチレンシクロペンチル）イソ酪酸メチル（２）：
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（イソブチリルオキシ）－３－メチレンシクロペンチル）イソ酪酸メチル（２）：
【化10】
【0100】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中のイソ酪酸（４．８０ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（７．３０ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２００ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０．５ｇ、８１．４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１０．４ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（４．００ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。
合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５ｍＬ）中で研和すると、所望の２（４．１ｇ、収率７２％）が白色固体として得られた。
合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５ｍＬ）中で研和すると、所望の２（４．１ｇ、収率７２％）が白色固体として得られた。
【0101】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．０４２ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４１７．２０ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ２７Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４１８．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0102】
［実施例４］
（１Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（（ピバロイルオキシ）メチル）シクロペンチルピバラート（３）
（１Ｓ，３Ｓ，５Ｒ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（（ピバロイルオキシ）メチル）シクロペンチルピバラート（３）
【化11】
【0103】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中のピバル酸（５．５４ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（７．３２ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（０．２０ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０．５ｇ、８１．４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１０．４ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（４．００ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。
合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（２０ｍＬ）中で研和すると、所望の３（５．１６ｇ、収率８５％）が白色固体として得られた。
合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（２０ｍＬ）中で研和すると、所望の３（５．１６ｇ、収率８５％）が白色固体として得られた。
【0104】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝２．３５８ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４４５．２ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３１Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４４６．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【0105】
［実施例５］
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－エチルブタノイル）オキシ）－３－メチレンシクロペンチル）メチル２－エチルブタノエート（４）
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－エチルブタノイル）オキシ）－３－メチレンシクロペンチル）メチル２－エチルブタノエート（４）
【化12】
【0106】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中の２－エチルブタン酸（６．３０ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（７．３０ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２００ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０．５ｇ、８１．４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１０．４ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（４．００ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（１５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１５０ｍＬ）およびブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（３０ｍＬ）中で研和すると、所望の４（４．３０ｇ、収率６６％）が白色固体として得られた。
【0107】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．６０６ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４７３．３ ｆｏｒ Ｃ２４Ｈ３５Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４７４．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0108】
［実施例６］
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（ペンタノイルオキシ）シクロペンチル）吉草酸メチル（５）および（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－５－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）吉草酸メチル（２６）
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（ペンタノイルオキシ）シクロペンチル）吉草酸メチル（５）および（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－５－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）吉草酸メチル（２６）
【化13】
【0109】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中のエンテカビル水和物（５００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、吉草酸（５１９ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ）、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１．３０ｇ、６．７６ｍｍｏｌ）および４－ジメチルアミノピリジン（２１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（８７４ｍｇ、６．７６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を水（１５０ｍＬ）に注いだ。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）を添加して、所望の化合物を抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５０ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮して残渣を得た。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～６０％（％Ｂ））により精製して、所望の２６（４０ｍｇ、収率６．５％）を白色固体として、および５（１９０ｍｇ、収率２５％）を白色固体として得た。
【0110】
２６：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝２．９４１ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．３６１．４ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２３Ｎ５Ｏ４，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ３６２．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【0111】
５：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．８３６ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４４５．５ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３１Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４４６．２［Ｍ＋Ｈ
【0112】
［実施例７Ａ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルペンタノアート（中間体－Ｂ）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルペンタノアート（中間体－Ｂ）
【化14】
【0113】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中の２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（中間体－Ａ）（１．２０ｇ、３．０６ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２００ｍｇ、ｃａｔ．）およびｐ－トルエンスルホン酸（２００ｍｇ、ｃａｔ．）の混合物に、ウンデカン酸（１４ｇ、６．１２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。室温で４８時間撹拌した後、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１～１０：１）によって精製して、所望の化合物中間体－Ｂ（１８５ｍｇ、収率７６％）を白色固体として得た。
【0114】
［実施例７Ｂ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルウンデカノエート（３７）：テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルペンタノアート（中間体－Ｂ）（１．４０ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）中の１ＭのＴＡＢＦを０℃で添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１～１０：１）によって精製して、所望の化合物３７（１．１ｇ、収率９９％）を白色固体として得た。
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルウンデカノエート（３７）：テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｒ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルペンタノアート（中間体－Ｂ）（１．４０ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）中の１ＭのＴＡＢＦを０℃で添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１～１０：１）によって精製して、所望の化合物３７（１．１ｇ、収率９９％）を白色固体として得た。
【0115】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．５９（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），６．４３（ｓ，２Ｈ），５．５９－５．５７（ｍ，２Ｈ），５．３１－５．２６（ｍ，２Ｈ），５．１６（ｓ，１Ｈ），４．９９（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｍ，１Ｈ），３．６２－３．６１（ｍ，２Ｈ），３．１８－３．１４（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｓ，１Ｈ），２．３１－２．２８（ｍ，２Ｈ），２．２２－２．１７（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．６４（ｍ，２Ｈ），１．４９－１．０８（ｍ，１２Ｈ），０．８６－０．８３（ｍ，３Ｈ）．
【0116】
［実施例７Ｃ］
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（ウンデカノイルオキシ）シクロペンチル）メチルウンデカノエート（６）：ＤＭＦ（５ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルウンデカノエート（３７）（４００ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ／ｐ－トルエンスルホン酸（２０ｍｇ／２０ｍｇ）の溶液に、ＤＣＣ（５５６ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）に室温で４８時間添加した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を水（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、溶離液としてＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１～１０：１を使用するシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、表題化合物６（１８０ｍｇ、収率３３％）を白色固体として得た。
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（ウンデカノイルオキシ）シクロペンチル）メチルウンデカノエート（６）：ＤＭＦ（５ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルウンデカノエート（３７）（４００ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ／ｐ－トルエンスルホン酸（２０ｍｇ／２０ｍｇ）の溶液に、ＤＣＣ（５５６ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）に室温で４８時間添加した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を水（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を、溶離液としてＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１～１０：１を使用するシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、表題化合物６（１８０ｍｇ、収率３３％）を白色固体として得た。
【0117】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．７３９ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．６１３．４ ｆｏｒ Ｃ３４Ｈ５５Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ６１４．５［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0118】
［実施例８Ａ］
（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２－ジエノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｃ）
（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２－ジエノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｃ）
【化15】
【0119】
ジクロロメタン（３００ｍＬ）中の２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（ｉｎｔｅｒ－Ａ）（１．５０ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）、（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン酸（３．２３ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）、ピリジン（３．０３ｇ、３８．３ｍｍｏｌ）および４－ジメチルアミノピリジン（４６ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．３７ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。室温で１６時間撹拌した後、混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１～１０：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｃ（２．７０ｇ、純度８９％、収率９６％）を白色固体として得た。
【0120】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝４．０３０ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．６５３．４ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ５９Ｎ５Ｏ４Ｓｉ，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ６５４．３［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0121】
［実施例８Ｂ］
（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２－ジエノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｄ）
（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２－ジエノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｄ）
【0122】
テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中の（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２ジエノエート（２）（２．７０ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でテトラヒドロフラン（２５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）中１Ｍ ＴＡＢＦを添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮して残渣を得た。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝１５：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｄ（５８０ｍｇ、収率３０％）を灰色固体として得た。
【0123】
１Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．６６（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．４１－５．３０（ｍ，７Ｈ），５．１９（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｔ，Ｊ＝５．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．６５（ｓ，１Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２Ｈ），２．７７－２．７３（ｍ，３Ｈ），２．５９－２．４９（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，２Ｈ），２．２６－２．１９（ｍ，１Ｈ），２．０５－２．００（ｍ，４Ｈ），１．６３－１．５３（ｍ，２Ｈ），１．３５－１．２９（ｍ，１４Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９ Ｈｚ，３Ｈ）．
【0124】
［実施例８Ｃ］
（９Ｚ，１２Ｚ）－（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２ジエノイルオキシ）シクロペンチル）メチルオクタデカ－９，１２ジエノエート（８）
（９Ｚ，１２Ｚ）－（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２ジエノイルオキシ）シクロペンチル）メチルオクタデカ－９，１２ジエノエート（８）
【0125】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中の（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン酸（４４５ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（４０３ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）および４－ジメチルアミノピリジン（２６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４０７ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌した。（９Ｚ，１２Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルオクタデカ－９，１２－ジエノエート（５７０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）およびｐｒｅ－ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）によって精製して、所望の８（２５０ｍｇ、収率３０％）を灰色半固体として得た。
【0126】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝７．１７９ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．８０１．６ ｆｏｒ Ｃ４８Ｈ７５Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ８０２．６［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0127】
［実施例９］
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－ドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９－ヘキサエノイルオキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９ヘキサエノエート（９）：
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－ドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９－ヘキサエノイルオキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９ヘキサエノエート（９）：
【化16】
【0128】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中のＤＨＡ（４４．５ｇ、１３６ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（２７．５ｇ、２０３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（４１５ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４３．８ｇ、３３９ｍｍｏｌ）の混合物を０℃で４５分間撹拌した。Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（３９．０ｇ、２０３ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、エンテカビル水和物（１０．０ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で２日間撹拌した。次いで、混合物を水（１０００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５００ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～１００％（％Ｂ）、次いで１００％メタノール）によって精製して、所望の９（２３．６ｇ、収率７７％）を褐色半固体として得た。
【0129】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１１．７７５ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．８９７．６ ｆｏｒ Ｃ５６Ｈ７５Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ８９８．６［Ｍ＋Ｈ］＋
【0130】
［実施例１０］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセテート（１０）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセテート（１０）
【化17】
【0131】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）中のインドメタシン（３５．７ｇ、１００ｍｍｏｌ）、エンテカビル水和物（１０．０ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（３６６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５１．６ｇ、４００ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（３８ｇ、２００ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（２７．０ｇ、０．２００ｍｏｌ）を添加した。
混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、混合物を水（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ塩酸塩水溶液（２００ｍＬ）で３回、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～１００％（％Ｂ））によって精製して、所望の１０（１４．０ｇ、収率４４％）を黄色固体として得た。
混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、混合物を水（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ塩酸塩水溶液（２００ｍＬ）で３回、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～１００％（％Ｂ））によって精製して、所望の１０（１４．０ｇ、収率４４％）を黄色固体として得た。
【0132】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．６３２ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．９５５．３ ｆｏｒ Ｃ５０Ｈ４３Ｃｌ２Ｎ７Ｏ９，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ９５６．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0133】
［実施例１１］
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（２－フェニルアセトキシ）シクロペンチル）メチル２－フェニルアセテート（１１）
（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレン－５－（２－フェニルアセトキシ）シクロペンチル）メチル２－フェニルアセテート（１１）
【化18】
【0134】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中の２－フェニル酢酸（１４．８ｇ、１０８ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（２２．０ｇ、１６３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（３３０ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３５．１ｇ、２７１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（３１．１９ｇ、１６３ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（８．００ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（３００ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）およびブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（３０ｍＬ）中で研和すると、所望の１１（１１．３ｇ、収率８４％）が白色固体として得られた。
【0135】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．５５４ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．５１３．２ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２７Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ５１４．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0136】
［実施例１２Ａ］
（Ｒ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセテート（ｉｎｔｅｒ－Ｅ）
（Ｒ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセテート（ｉｎｔｅｒ－Ｅ）
【化19】
【0137】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）中のエンテカビル水和物（１０．０ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）、（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニル酢酸（３０．０ｇ、１１９ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（１．００ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４０ｇ、３１０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（４０．０ｇ、２０９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（２２．０ｇ、１６２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（８００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ塩酸塩水溶液（２００ｍＬ）で３回、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮して、所望の２（２８．０ｇ、収率１００％）を白色固体として得た。
【0138】
［実施例１２Ｂ］
（Ｒ）－（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－５－（（Ｒ）－２－アミノ－２－フェニルアセトキシ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレンシクロペンチル）メチル２－アミノ－２－フェニル酢酸二塩酸塩（１２）
（Ｒ）－（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－５－（（Ｒ）－２－アミノ－２－フェニルアセトキシ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－メチレンシクロペンチル）メチル２－アミノ－２－フェニル酢酸二塩酸塩（１２）
【0139】
酢酸エチル（２５０ｍＬ）中４Ｍの塩酸塩中の（Ｒ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニルアセテート（ｉｎｔｅｒ－Ｅ）（２８．０ｇ、３７．７ｍｍｏｌ）の溶液を、－２０℃で２時間撹拌した。混合物を濾過し、ケークを酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄して、所望の１２（２０．０ｇ、収率８６％）を白色固体として得た。
【0140】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．０２０ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．５４３．２ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２９Ｎ７Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ５４４．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0141】
［実施例１３Ａ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｆ）：
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｆ）：
【化20】
【0142】
ジクロロメタン（２５０ｍＬ）中の２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オンｉｎｔｅｒ－Ａ（２．０ｇ、５．１ｍｍｏｌ）、３－メチルブタン酸（１．０４ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）、ピリジン（１．６２ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）および４－ジメチルアミノピリジン（６２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．１１ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で１６時間撹拌した後、混合物を水（１００ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｆ（２．１８ｇ、収率９１％）を白色固体として得た。
【0143】
１Ｈ ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．６４（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．３６－５．２４（ｍ，３Ｈ），４．６８（ｓ，１Ｈ），３．８３－３．７７（ｍ，２Ｈ），２．８０－２．７５（ｍ，１Ｈ），２．５６－２．４６（ｍ，１Ｈ），２．２７－２．２１（ｍ，３Ｈ），２．１０－１．９７（ｍ，１Ｈ），０．９５（ｓ，３Ｈ），０．９３（ｓ，３Ｈ），０．９１（ｓ，９Ｈ），０．１１（ｓ，６Ｈ）．
【0144】
［実施例１３Ｂ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｇ）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｇ）
【0145】
テトラヒドロフラン（８０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｆ）（２．１０ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でテトラヒドロフラン（１５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）中１Ｍ ＴＡＢＦを添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）に注いだ。混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。
濾液を真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｇ（７８０ｍｇ、収率４８％）を白色固体として得た。
濾液を真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｇ（７８０ｍｇ、収率４８％）を白色固体として得た。
【0146】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．９５５ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．３６１．４ ｆｏｒ Ｃ１７Ｈ２３Ｎ５Ｏ４，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ３６２．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0147】
［実施例１３Ｃ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－３－メチレン－２－（（２－フェニルアセトキシ）メチル）シクロペンチル３－メチルブタノエート（１３）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－３－メチレン－２－（（２－フェニルアセトキシ）メチル）シクロペンチル３－メチルブタノエート（１３）
【0148】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチル３－メチルブタノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｇ）（３００ｍｇ、０．８３１ｌｍｍｏｌ）、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（５２７ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）および２－フェニル酢酸（２７８ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３５０ｍｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラム（ジクロルメタン：メタノール＝２０：１）によって精製して、所望の１３（２０５ｍｇ、収率５２％）を白色固体として得た。
【0149】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．６４０ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４７９．２ ｆｏｒ Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ５８０．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0150】
［実施例１４～１７］
化合物１３に従う手順を使用することによって、化合物１４～１７を調製した。
化合物１３に従う手順を使用することによって、化合物１４～１７を調製した。
【0151】
［実施例１８Ａ］
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－ヒドロキシ－３－メチレンシクロペンチル）メチル２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセテート（２８）
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－ヒドロキシ－３－メチレンシクロペンチル）メチル２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセテート（２８）
【化21】
【0152】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５００ｍＬ）中のインドメタシン（６０．５ｇ、１６９ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（４５．８ｇ、３４０ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２．０７ｇ、２０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０２．８ｇ、８００ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（６４．９８ｇ、３４０ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（５０．０ｇ、１６９ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（１Ｌ）に注ぎ、酢酸エチル（１Ｌ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５００ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５０ｍＬ）中で研和すると、所望の２８（３５ｇ、収率３３％）が白色固体として得られた。
【0153】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．９５７ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．６１６．２ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ２９ＣｌＮ６Ｏ６，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ６１７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0154】
［実施例１８Ｂ］
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９ヘキサエノエート（１８）
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）－（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセトキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルドコサ－４，７，１０，１３，１６，１９ヘキサエノエート（１８）
【0155】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中のＤＨＡ（２３．４ｇ、７１．３ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（１２．０ｇ、８９．０ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２１７ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１６．１ｇ、１２５ｍｍｏｌ）の混合物を５℃で３０分間撹拌した。Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１７．１ｇ、８９．０ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後、（（１Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）－３－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－５－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）メチル２－（１－（４－クロロベンゾイル）－５－メトキシ－２－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）アセテート（２８）（１１．０ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中のＤＨＡ（２３．４ｇ、７１．３ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（１２．０ｇ、８９．０ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２１７ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１６．０９ｇ、１２４．６ｍｍｏｌ）の別の混合物を５℃で３０分間撹拌した。
Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１７．１ｇ、８９．０ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、新しい混合物を先の混合物に添加した。撹拌を室温で２日間続けた。次いで、混合物を水（１０００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ塩酸塩水溶液（５００ｍＬ）で２回、およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１～１０：１）によって精製して、所望の１８（７．６０ｇ、収率４６％）を黄色固体として得た。
Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（１７．１ｇ、８９．０ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、新しい混合物を先の混合物に添加した。撹拌を室温で２日間続けた。次いで、混合物を水（１０００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を１Ｍ塩酸塩水溶液（５００ｍＬ）で２回、およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１～１０：１）によって精製して、所望の１８（７．６０ｇ、収率４６％）を黄色固体として得た。
【0156】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．３４４ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．９２６．４ ｆｏｒ Ｃ５３Ｈ５９ＣｌＮ６Ｏ７，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ９２７．４［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0157】
［実施例１９］
化合物１９を、（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニル酢酸を使用する化合物１８に従う手順を使用し、その後０℃でＨＣｌ－ＥｔＯＡｃを使用して脱保護することによって調製した。
化合物１９を、（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２－フェニル酢酸を使用する化合物１８に従う手順を使用し、その後０℃でＨＣｌ－ＥｔＯＡｃを使用して脱保護することによって調製した。
【0158】
［実施例２０Ａ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｈ）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｈ）
【化22】
【0159】
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（ｉｎｔｅｒ－Ａ）（１．５０ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）溶液に、ＤＭＡＰ（２０ｍｇ）およびＴｓＯＨ（１０ｍｇ）を添加した。ヘキサン酸（４４５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（７９０ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。ヘキサン酸（４４５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（７９０ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）の第２のバッチを添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。ヘキサン酸（４４５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（７９０ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）の第３のバッチを添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。ヘキサン酸（４４５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（７９０ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ）の第４のバッチを添加した。混合物を室温で７２時間撹拌した。次いで、混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を水（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１～２０：１～１０：１）によって精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｈ（１．６５ｇ、収率８８％）を白色固体として得た。
【0160】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．５９（ｓ，１Ｈ），７．６５（ｓ，１Ｈ），６．４４（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．３２－５．２１（ｍ，３Ｈ），５．０３－４．９４（ｍ，１Ｈ），４．６５－４．６４（ｍ，１Ｈ），３．８０－３．７８（ｍ，２Ｈ），２．７２－２．６９（ｍ，１Ｈ），２．５０－２．４３（ｍ，１Ｈ），２．３２－２．２８（ｍ，２Ｈ），２．２４－２．１９（ｍ，１Ｈ），１．５５－１．４９（ｍ，２Ｈ），１．２９－１．２４（ｍ，４Ｈ），０．９０－０．８４（ｍ，１２Ｈ），０．０９－０．０８（ｍ，６Ｈ）．
【0161】
［実施例２０Ｂ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｉ）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｉ）
【0162】
テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（２）（１．７０ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）中の１Ｍ ＴＡＢＦを０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮して残渣を得た。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～６０％（％Ｂ））により精製して、所望の化合物ｉｎｔｅｒ－Ｉ（４７０ｍｇ、収率３６％）を白色固体として得た。
【0163】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．５９（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），６．４３（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．３５－５．２６（ｍ，２Ｈ），５．１９－５．１２（ｍ，１Ｈ），５．０３－４．９４（ｍ，１Ｈ），４．６０（ｓ，１Ｈ），３．６６－３．５６（ｍ，２Ｈ），２．７１－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．５６－２．４２（ｍ，１Ｈ），２．３４－２．２９（ｍ，２Ｈ），２．２５－２．１４（ｍ，１Ｈ），１．６１－１．４７（ｍ，２Ｈ），１．３６－１．１９（ｍ，４Ｈ），０．９７－０．９２（ｍ，３Ｈ）．
【0164】
［実施例２０Ｃ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－３－メチレン－２－（（２－フェニルアセトキシ）メチル）シクロペンチルヘキサノエート（２０）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－３－メチレン－２－（（２－フェニルアセトキシ）メチル）シクロペンチルヘキサノエート（２０）
【0165】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルヘキサノエート（ｉｎｔｅｒ－Ｉ）（２００ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（２７５ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）および３－メチルブタン酸（１０２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４０８ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（２０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～６０％（％Ｂ））によって精製して、所望の２０（１２５ｍｇ、収率５１％）を白色固体として得た。
【0166】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．８０２ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４５９．２ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ３３Ｎ５Ｏ５，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４６０．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0167】
［実施例２１］
化合物２０に従う手順を使用することによって、化合物２１を調製した。
化合物２０に従う手順を使用することによって、化合物２１を調製した。
【0168】
［実施例２２］
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－ヒドロキシ－３－メチレンシクロペンチル）イソ酪酸メチル（２２）
（（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－ヒドロキシ－３－メチレンシクロペンチル）イソ酪酸メチル（２２）
【化23】
【0169】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中のイソ酪酸（１．１０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリゾール（３．１０ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（０．２ｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６．００ｇ、４６．４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（４．４０ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）およびエンテカビル水和物（４．６０ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を０．５Ｍ塩酸塩水溶液（５ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～８０％（％Ｂ））によって精製して、所望の２２（１．７ｇ、収率３２％）を白色固体として得た。
【0170】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝２．２５５ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．３４７．２ ｆｏｒ Ｃ１６Ｈ２１Ｎ５Ｏ４，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ３４８．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0171】
［実施例２３～３０］
実施例２２に上記される化合物２２に従う手順を使用することによって、化合物２３～３０を調製した。
実施例２２に上記される化合物２２に従う手順を使用することによって、化合物２３～３０を調製した。
【0172】
［実施例３１Ａ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（ｉｎｔｅｒ－Ｊ）
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（ｉｎｔｅｒ－Ｊ）
【化24】
【0173】
ジクロロメタン（３００ｍＬ）中の２－アミノ－９－（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－４－ヒドロキシ－２－メチレンシクロペンチル）－１Ｈ－プリン－６（９Ｈ）－オン（ｉｎｔｅｒ－Ａ）（６．００ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）、イソ酪酸（２．０３ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）、ピリジン（１４．６ｇ、１８４ｍｍｏｌ）および４－ジメチルアミノピリジン（１８７ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（４．７５ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で１６時間撹拌した後、混合物を濾過し、ケークをジクロロメタン（５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮した。残渣をエタノール（２５０ｍＬ）中で研和した。混合物を濾過し、ケークをさらなる５０ｍＬのジクロロメタンで洗浄して湿潤ケーク（１０．５ｇ）を得た。濾液を真空中で濃縮した。残渣をカラムＣ１８（移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル、勾配：５～６５％（％Ｂ））によって精製して、所望の生成物を得た。湿潤ケークおよびｐｒｅ－Ｃ１８から新たに得られた生成物を合わせ、真空中で乾燥させて、所望のｉｎｔｅｒ－Ｊ（７．４９ｇ、純度８５％、収率９０％）を白色固体として得た。
【0174】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．４７ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．４６１．３ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３５Ｎ５Ｏ４Ｓｉ，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ４６２．６［Ｍ＋Ｈ］＋．１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ １０．５１（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），６．３６（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．２３（ｔ，Ｊ＝８．４ Ｈｚ，１Ｈ），５．１６－５．１３（ｍ，２Ｈ），４．５７（ｓ，１Ｈ），３．７３－３．７１（ｍ，２Ｈ），２．６９－２．６０（ｍ，１Ｈ），２．４７－２．４１（ｍ，２Ｈ），２．１６－２．１１（ｍ，１Ｈ），１．０３－１．００（ｍ，６Ｈ），０．８１（ｓ，９Ｈ），０．０１（ｓ，６Ｈ）．
【0175】
［実施例３１Ｂ］
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（３１）：酢酸エチル（３０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（２）（７．４５ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）の混合物に、酢酸エチル（３０ｍＬ）中の４Ｍ塩酸塩を室温で添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮した。残渣をエタノール（２０ｍＬ）中で研和すると、所望の３１（３．８９ｇ、収率８２％）が白色固体として得られた。
（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（ヒドロキシメチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（３１）：酢酸エチル（３０ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ）－４－（２－アミノ－６－オキソ－１Ｈ－プリン－９（６Ｈ）－イル）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）－３－メチレンシクロペンチルイソブチレート（２）（７．４５ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）の混合物に、酢酸エチル（３０ｍＬ）中の４Ｍ塩酸塩を室温で添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮した。残渣をエタノール（２０ｍＬ）中で研和すると、所望の３１（３．８９ｇ、収率８２％）が白色固体として得られた。
【0176】
ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．５４０ ｍｉｎ，ｍａｓｓ ｃａｌｃｄ．３４７．２ ｆｏｒ Ｃ１６Ｈ２１Ｎ５Ｏ４，ｍ／ｚ ｆｏｕｎｄ ３４８．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0177】
［実施例３２～３７］
化合物３２～３７を、実施例３１で上記した化合物３２に従う手順を以下のとおり変更して使用して調製した：ａ）３３および３４に触媒作用量のｐ－トルエンスルホン酸（０．５１ｍｍｏｌ反応に５ｍｇ）を使用した；ｂ）ＴＢＳ群の脱保護を、ｉ）３３にはＴＢＡＦ、ｉｉ）３４にはＴＦＡ、ｉｉｉ）３５および３６にはＨＣｌ－ＴＨＦを使用して行った。
化合物３２～３７を、実施例３１で上記した化合物３２に従う手順を以下のとおり変更して使用して調製した：ａ）３３および３４に触媒作用量のｐ－トルエンスルホン酸（０．５１ｍｍｏｌ反応に５ｍｇ）を使用した；ｂ）ＴＢＳ群の脱保護を、ｉ）３３にはＴＢＡＦ、ｉｉ）３４にはＴＦＡ、ｉｉｉ）３５および３６にはＨＣｌ－ＴＨＦを使用して行った。
【0178】
［実施例３８］
選択した化合物の微粒子化
選択した化合物の微粒子化
【0179】
選択した化合物を、Ｔｅｃｎｏｌｏｇｉａ Ｍｅｃｃａｎｉｃａ Ｊ２０を用いて、粉砕圧力０．４８ＭＰａおよび入口圧力０．３８ＭＰａで微粒子化した。
ジェットミリングの前にすべての試料を粉砕した。微粒子化後、粒径は以下のとおりである：ＥＴＶ（Ｄ５０＝２．４μｍ；Ｄ９０＝５．０μｍ）；ＥＴＶ－パルミタート（Ｄ５０＝３．０μｍ；Ｄ９０＝１０．５μｍ）、プロドラッグ２９（Ｄ５０＝１．８μｍ；Ｄ９０＝４．０μｍ）、およびプロドラッグ３６（Ｄ５０＝７．０μｍ；Ｄ９０＝１６．６μｍ）。
ジェットミリングの前にすべての試料を粉砕した。微粒子化後、粒径は以下のとおりである：ＥＴＶ（Ｄ５０＝２．４μｍ；Ｄ９０＝５．０μｍ）；ＥＴＶ－パルミタート（Ｄ５０＝３．０μｍ；Ｄ９０＝１０．５μｍ）、プロドラッグ２９（Ｄ５０＝１．８μｍ；Ｄ９０＝４．０μｍ）、およびプロドラッグ３６（Ｄ５０＝７．０μｍ；Ｄ９０＝１６．６μｍ）。
【0180】
薬物動態（ＰＫ）研究
【0181】
動物 動物（約２００～２５０ｇの雄ＳＤラット、および約１２～１５ｋｇの雄ビーグル犬）は、承認された販売業者から入手した。
【0182】
順化／検疫到着後、動物は、獣医学スタッフまたは他の権限を有する職員のメンバーによって全般的な健康状態について評価された。動物を少なくとも３日間順化させた後、研究に供した。
【0183】
動物管理動物は、順化中に群れで収容され、研究中に個別に収容された。動物の室内環境を管理した（目標条件：温度１８～２６℃、相対湿度３０～７０％、人工光１２時間、暗１２時間）。温度および相対湿度を毎日監視した。
【0184】
動物のカニューレ挿入：なし
【0185】
投与前の少なくとも１２時間、動物を絶食させた。すべての動物に、投与の４時間後、Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ ＲｏｄｅｎｔおよびＲｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ以外を自由に摂取させた。
【0186】
水をオートクレーブ処理した後、動物に自由に与えた。水の定期的な分析を行い、結果を記録保管した。検出レベルで、研究の目的、実施または結果に干渉すると予想される、食事または水における既知の汚染物質はない。
【0187】
用量製剤 ＩＭ／ＳＣ製剤：製剤を表２～４に示す手順に従って調製した。製剤を投与日に調製した。製剤を調製した後、４時間以内に動物に投与した。各製剤の２つの２０μＬアリコートを各製剤溶液から取り出し、１．５ｍＬのポリプロピレン微量遠心管に移し、ＬＣ／ＵＶまたはＬＣ－ＭＳ／ＭＳによる用量検証を行った。
【0188】
用量投与 ＳＣ／ＩＭ投与のために、用量製剤を、それぞれ施設のＳＯＰに従って皮下／筋肉内注射によって投与した。
【0189】
試料収集 各時点で伏在静脈から血液を、ラットについては約２００μＬ、アカゲザルについては０．５ｍＬ採取した。すべての血液試料を、抗凝固剤として４μＬのＫ２ＥＤＴＡ（０．５Ｍ）を含有する微量遠心管に移し、血漿用に処理されるまで湿った氷上に置いた。
【0190】
血液／血漿処理 血液：血液試料を、採取の３０分以内に約４℃、３０００ ｇ、１５分での遠心分離によって血漿用に処理した。血漿試料をポリプロピレン管に保存し、ドライアイス上で急速凍結し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析まで－７０±１０℃に保った。
【0191】
試料分析
用量製剤の濃度検証
・各用量製剤の製剤アリコートを中間位置で二通り収集した。
・用量製剤試料中の試験化合物の濃度は、ＬＣ／ＵＶまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法によって決定した。
生物分析方法および試料分析
・対応する生体マトリックス中の試験化合物の定量測定のためのＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法は、非ＧＬＰコンプライアンス下で開発された。
・ゼロではない８つの較正標準を有する検量線を、ＬＬＯＱを含む方法に適用した。
・低濃度、中濃度、および高濃度からなるＱＣ試料のセットをこの方法に適用した。
・試験試料の分析は、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して、１組の較正標準および２組のＱＣ試料を用いて同時に行うことになる（試料数が４８を超える場合、２組のＱＣ試料を含む２つの検量線を適用した）。
・合否判定基準：
線形性：最低６つの較正標準を、血漿中のそれらの公称値の±２０％以内に逆算した。
精度：６つのＱＣ試料のうち最低４つを、血漿中のそれらの公称値の±２０％以内に逆算した。
特異性：単一ブランクマトリックス中の平均計算濃度は、ＬＬＯＱの０．５倍であるものとする。
感度：ＬＬＯＱを１～３ｎｇ／ｍＬを目標として試みる。
キャリーオーバー：最高標準注入直後の単一ブランクマトリックス中の平均計算キャリーオーバー濃度がＬＬＯＱであるものとする。キャリーオーバーが基準を満たすことができなかった場合、社内の生物分析ＳＯＰに従ってキャリーオーバーの割合が推定されるものとする。
用量製剤の濃度検証
・各用量製剤の製剤アリコートを中間位置で二通り収集した。
・用量製剤試料中の試験化合物の濃度は、ＬＣ／ＵＶまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法によって決定した。
生物分析方法および試料分析
・対応する生体マトリックス中の試験化合物の定量測定のためのＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法は、非ＧＬＰコンプライアンス下で開発された。
・ゼロではない８つの較正標準を有する検量線を、ＬＬＯＱを含む方法に適用した。
・低濃度、中濃度、および高濃度からなるＱＣ試料のセットをこの方法に適用した。
・試験試料の分析は、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して、１組の較正標準および２組のＱＣ試料を用いて同時に行うことになる（試料数が４８を超える場合、２組のＱＣ試料を含む２つの検量線を適用した）。
・合否判定基準：
線形性：最低６つの較正標準を、血漿中のそれらの公称値の±２０％以内に逆算した。
精度：６つのＱＣ試料のうち最低４つを、血漿中のそれらの公称値の±２０％以内に逆算した。
特異性：単一ブランクマトリックス中の平均計算濃度は、ＬＬＯＱの０．５倍であるものとする。
感度：ＬＬＯＱを１～３ｎｇ／ｍＬを目標として試みる。
キャリーオーバー：最高標準注入直後の単一ブランクマトリックス中の平均計算キャリーオーバー濃度がＬＬＯＱであるものとする。キャリーオーバーが基準を満たすことができなかった場合、社内の生物分析ＳＯＰに従ってキャリーオーバーの割合が推定されるものとする。
【0192】
データ分析 血漿濃度対時間のデータを、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ６．３ソフトウェアプログラムを使用してノンコンパートメントアプローチによって分析した。Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、Ｔ１／２、ＡＵＣ（０－ｔ）、ＡＵＣ（０－ｉｎｆ）、ＭＲＴ（０－ｔ）、ＭＲＴ（０－ｉｎｆ）、％Ｆおよび血漿濃度対時間プロファイルのグラフを報告した。
【0193】
［実施例３９］
【0194】
Ｂｉｓ－ＤＨＡプロドラッグ９（３１ｍｇ／ｋｇ、ＥＴＶの等価用量）およびＥＴＶ（２０ｍｇ／ｋｇ）を、筋肉内投与経路を介して単回用量のラットＰＫ試験に供した。非微粒子化プロドラッグおよびＥＴＶを使用した。プロドラッグ９は、ＥＴＶよりも遅い、２４８倍低いＣｍａｘをもたらした。プロドラッグ９についても、半減期および平均滞留時間の延長が観察され、長時間作用型薬剤として好適であった。
【0195】
表２は、ＩＭ投与後のＥＴＶおよびプロドラッグ９のラットＰＫデータを示す。データを図１８にグラフ形式で示す。
【0196】
【表2】
【0197】
［実施例４０］
【0198】
プロドラッグ１１および２９、ならびにＥＴＶを、ＥＴＶの２０ｍｇ／ｋｇ等価用量を筋肉内注射することによって単回用量のイヌＰＫ試験に供し、１１２日間モニタリングした（表３参照）。水性懸濁液製剤は、０．５％ ＣＭＣ－Ｎａおよび０．５％ Ｔｗｅｅｎ ８０から誘導した。プロドラッグ６は、ほぼ１１２日間を超えて、０．５ｎｇ／ｍＬを上回るＥＴＶの血漿レベルを示した。反対に、エンテカビルは、２３日目に０．５ｎｇ／ｍＬ未満であることが分かった。
モノエステル系プロドラッグ２９は、最大５５日間、治療レベルを提供した。微粒子化ＥＴＶ（Ｄ５０＝２．４μｍ；Ｄ９０＝５．０μｍ）およびプロドラッグ２９（Ｄ５０＝１．８μｍ；Ｄ９０＝４．０μｍ）および非微粒子化プロドラッグ１１（Ｄ５０＝４．４μｍ；Ｄ９０＝１３．０μｍ）をこの試験に使用した。
モノエステル系プロドラッグ２９は、最大５５日間、治療レベルを提供した。微粒子化ＥＴＶ（Ｄ５０＝２．４μｍ；Ｄ９０＝５．０μｍ）およびプロドラッグ２９（Ｄ５０＝１．８μｍ；Ｄ９０＝４．０μｍ）および非微粒子化プロドラッグ１１（Ｄ５０＝４．４μｍ；Ｄ９０＝１３．０μｍ）をこの試験に使用した。
【0199】
表３は、ＩＭ投与後のプロドラッグ１１、２９およびＥＴＶのイヌＰＫデータを示す。データを図１９にグラフ形式で示す。
【0200】
【表3】
【0201】
［実施例４１］
【0202】
プロドラッグ１１および３６、ならびにＥＴＶ－パルミタートを、ＥＴＶ（約１～２ｍｇ／ｋｇ）の様々な等価用量で筋肉内または皮下投与することによって単回用量のイヌＰＫ試験に供し、５６日間モニタリングした（表４参照）。水性懸濁液製剤は、０．５％ ＣＭＣ－Ｎａおよび０．５％ Ｔｗｅｅｎ ８０から誘導した。プロドラッグ６は、ＩＭ経路によって投与した場合、１ｍｇ／ｋｇ ＥＴＶ等価用量でほぼ４５日間、０．５ｎｇ／ｍＬを超えるＥＴＶの血漿レベルを示した。対照的に、既知のプロドラッグ、ＥＴＶ－パルミタート酸は、ＥＴＶの２倍等価用量で０．５ｎｇ／ｍＬを超える血漿レベルを約２７日間しか提供しなかった。プロドラッグ６のＳＣ経路投与は、初期のゆっくりした吸収と共に、５６日間を超えて０．５ｎｇ／ｍＬを超える濃度を提供する。微粒子化ＥＴＶ－パルミタート（Ｄ５０＝３．０μｍ；Ｄ９０＝１０．５μｍ）およびプロドラッグ３６（Ｄ５０＝７．０μｍ；Ｄ９０＝１６．６μｍ）および非微粒子化プロドラッグ１１（Ｄ５０＝４．４μｍ；Ｄ９０＝１３．０μｍ）をこの試験に使用した。
【0203】
表４は、ＩＭ／ＳＣ投与後のプロドラッグ１１、３６およびＥＴＶ－パルミタートのイヌＰＫデータを示す。データを図１２にグラフ形式で示す。
【0204】
【表4】
【0205】
［実施例４２］
粉末Ｘ線分析のために、適切な量の試料化合物粉末（一般に約２０～５０ｍｇ）を試料パン上に置き、ガラス板で穏やかに加圧して、Ｘ線走査のための平坦な表面を得た。試料は一般に粉砕されず、ふるいにかけられて、合成された外力が結晶転移を引き起こすのを回避した。いくつかのブロック試料については、小さなスクレーパを使用して粉末へと加圧した。データ収集は、ＣｕＫ－α線（λ＝１．５４０５６Å）；４０ｋＶの電圧および３０ｍＡの電流；および２～６０度の走査範囲（毎分５度）を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ ＸＲＤ－６０００回折計で行った。
粉末Ｘ線分析のために、適切な量の試料化合物粉末（一般に約２０～５０ｍｇ）を試料パン上に置き、ガラス板で穏やかに加圧して、Ｘ線走査のための平坦な表面を得た。試料は一般に粉砕されず、ふるいにかけられて、合成された外力が結晶転移を引き起こすのを回避した。いくつかのブロック試料については、小さなスクレーパを使用して粉末へと加圧した。データ収集は、ＣｕＫ－α線（λ＝１．５４０５６Å）；４０ｋＶの電圧および３０ｍＡの電流；および２～６０度の走査範囲（毎分５度）を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ ＸＲＤ－６０００回折計で行った。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【国際調査報告】