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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-03-19
(54)【発明の名称】染毛剤として有用な化合物
(51)【国際特許分類】
C07C 217/84 20060101AFI20240312BHJP
A61K 8/41 20060101ALI20240312BHJP
A61Q 5/10 20060101ALI20240312BHJP
A61Q 1/02 20060101ALI20240312BHJP
C07C 255/16 20060101ALI20240312BHJP
C09B 67/20 20060101ALI20240312BHJP
【ＦＩ】
C07C217/84 CSP
A61K8/41
A61Q5/10
A61Q1/02
C07C255/16
C09B67/20 F
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023556912
(86)(22)【出願日】2022-03-23
(85)【翻訳文提出日】2023-11-10
(86)【国際出願番号】 SG2022050156
(87)【国際公開番号】W WO2022203601
(87)【国際公開日】2022-09-29
(31)【優先権主張番号】63/165,429
(32)【優先日】2021-03-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＮＯＮＩＤＥＴ
２．ＴＲＩＴＯＮ
３．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】507335687
【氏名又は名称】ナショナル ユニヴァーシティー オブ シンガポール
(71)【出願人】
【識別番号】305023366
【氏名又は名称】リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミネソタ
(74)【代理人】
【識別番号】100113376
【弁理士】
【氏名又は名称】南条 雅裕
(74)【代理人】
【識別番号】100179394
【弁理士】
【氏名又は名称】瀬田 あや子
(74)【代理人】
【識別番号】100185384
【弁理士】
【氏名又は名称】伊波 興一朗
(74)【代理人】
【識別番号】100137811
【弁理士】
【氏名又は名称】原 秀貢人
(72)【発明者】
【氏名】ヴェンカテサン ゴパラクリシュナン
(72)【発明者】
【氏名】パストリン ジョルジア
(72)【発明者】
【氏名】ビリアールディ ポール
【テーマコード（参考）】
4C083
4H006
【Ｆターム（参考）】
4C083AB082
4C083AB412
4C083AC472
4C083AC551
4C083AC552
4C083CC02
4C083CC36
4C083EE01
4C083EE03
4C083EE26
4H006AA01
4H006AA03
4H006AB99
4H006BJ20
4H006BN10
4H006BP10
4H006BP30
4H006BR10
4H006BU36
4H006BU46
4H006QN30
(57)【要約】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式Iの化合物であって：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキル、または、生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物を表す；
化合物。
【請求項2】
請求項１に記載された化合物であって、ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキルを表す；
化合物。
【請求項3】
請求項１または２に記載された化合物であって、ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、Ｃ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、Ｃ１－３アルキルを表す；
化合物。
【請求項4】
請求項１～３のいずれか一項に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【請求項5】
請求項４に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【請求項6】
請求項５に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【請求項7】
請求項１～６のいずれか一項に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
【請求項8】
請求項７に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－２アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
【請求項9】
請求項１～８のいずれか一項に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、メチルを表す
化合物。
【請求項10】
請求項１または２に記載された化合物であって、ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１の置換基により置換されたＣ１－４アルキルを表し：
ＯＲ２、＝Ｏ、＝ＣＨ２、およびＮＨＲ２；
Ｒ２は、非置換であるか、またはＯＲ４基により置換された、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；
Ｒ４は、Ｈまたはメチルを表す；
化合物。
【請求項11】
請求項１～１０のいずれか一項に記載された化合物であって、ここで：
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルにより置換されておらず、このＣ１－３アルキルは、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；および／または
（ｂ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｃ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｄ）存在する場合、Ｒ２は、ＨまたはＣ１－３（例えばＣ１－２）アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；および／または
（ｅ）存在する場合、Ｒ２は、Ｈを表し；および／または
（ｆ）存在する場合、Ｒ４は、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；および／または
（ｇ）存在する場合、Ｒ４は、Ｈを表し；および／または
（ｈ）存在する場合、Ｒ３は、Ｈではない；
化合物。
【請求項12】
請求項１に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項13】
請求項１に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項14】
請求項１３に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｂ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｃ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｄ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項15】
請求項１４に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｂ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項16】
請求項１２に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項17】
請求項１６に記載された化合物であって、ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
および
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【請求項18】
毛髪を染色する、または一時的なタトゥーを施す方法であって、前記方法は、請求項１～１７のいずれか一項に記載された式Ｉの化合物または生理的に許容される塩または溶媒和物、または、それらの酸化誘導体を含む組成物を、適用するステップを含む
方法。
【請求項19】
毛髪を染色する、または皮膚をタトゥーするための組成物であって：請求項１～１７のいずれか一項に規定された式Ｉの化合物；
および
水；
を含む組成物。
【請求項20】
請求項１９に記載された組成物であって、カップリング剤をさらに含む
組成物。
【請求項21】
部品キットであって： （ｉ）請求項１９または請求項２０に記載された組成物；
および
（ｉｉ）酸化剤を含む顕色組成物（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）；
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、対象の皮膚または毛髪に着色を施すように作用しうる、化合物および前記化合物を含む組成物に関連する。本明細書で開示される化合物は、水により溶けやすく、および／または対象にアレルギーまたは他の免疫反応を引き起こしにくく、および、黒色および／または強い暗色に酸化可能でもある。
【背景技術】
【0002】
本明細書における先行公開文献の記載または議論は、その文献が技術水準の一部であること、または技術常識であることを認めるものとして、必ずしも受け取られるべきではない。
【0003】
毛髪および一時的な皮膚の着色は、今日最も広く使用される化粧用処理のひとつである。これらの処理に使用される染料の多くは、所望の色素沈着を施すために酸化重合を受ける、不安定な２／３官能性芳香族アミンを含む。しかしながら、暗色染料の主成分であるパラフェニレンジアミン（ＰＰＤ）、またはこのジアミンの酸化的および酵素的変化は、刺激物質および非常に強力な接触アレルゲンとなりうる。これらの生命を脅かす可能性のあるアレルギーは、時に重度の水疱形成、かゆみ、および顔面腫脹を伴う限局性または全身性の接触アレルギーとして現れることがあり、リンパ節腫脹、喘息、またはメトヘモグロビン血症などの全身反応、および発熱を発症させることがある。
【0004】
パラフェニレンジアミンは、２００６年に「アレルゲン・オブ・ザ・イヤー」にノミネートされた。これは、具体的には染毛剤または非永久的なタトゥーに使用される、一般的なアミン含有化合物である。ＰＰＤは、皮膚を通して容易に浸透することができ、そこで生存可能な表皮の細胞を傷つけ、皮膚の免疫細胞と相互作用しうる。このことはまた、皮膚での代謝過程によって、または非電離放射線（紫外線／可視光線／赤外線）によって生成される、ＰＰＤ誘導体にも当てはまる。加えて、ＰＰＤおよびその誘導体の角質層におけるケラチンタンパク質との相互作用は、デポを形成することができ、ＰＰＤの皮膚深部への放出を長引かせ、具体的にはＰＰＤに対するアレルギー反応を、危険かつ長期間続く状態にしうる。
【0005】
標準化されたヘアドレッサーパッチテストシリーズ（Ｃｈｅｍｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）からの１％ＰＰＤ溶液を使用する実験は、ＰＰＤがパラフィン（提供されたもの）内に含まれる場合、酸化に対して保護されることを示した。パッチテスト２日後でも、テストフィールドは無色のままであるので、これは正しい。質量分析測定は、空気中で数日後でもパラフィン内のＰＰＤパッチテスト製剤がこの製剤中でいかなるバンドロフスキー塩基（Ｂａｎｄｒｏｗｓｋｉ ｂａｓｅ）または他の酸化／代謝誘導体を示さず、親化合物ＰＰＤのみが存在することを示した。しかしながら、感作された患者は、このＰＰＤ製剤に反応して明らかな限局性接触皮膚炎を発症する。このことは、ハプテン化によって、または単独で（おそらくＴｏｌｌ様受容体の活性化を通して）、ＰＰＤ自体が主なアレルゲンであることを示唆する。従って、皮膚バリアを通過できずＰＰＤを全く含まない着色ポリマーを適用することで、染毛剤および一時的なタトゥーが皮膚および免疫細胞に及ぼす深刻な毒性およびアレルギー効果を、回避できる可能性がある。
【0006】
商業的には、感作性のより低いＰＰＤ誘導体であるＭＥ－ＰＰＤが、ＰＰＤに代わりうるより安全な永久染毛剤として、２０１８年に発売された。しかしながら、ＰＰＤアレルギーである人の約３０％は、ＭＥ－ＰＰＤに対してもアレルギー反応を依然発症するため、ＭＥ－ＰＰＤ製剤を回避することが推奨される。従って、ＰＰＤアレルギーがある人にとって、ＰＰＤに代わる最適な非毒性代替物質は、現在は無いと思われる。従って、そのようなアレルギー反応を回避し、従来の着色物質に対し感受性を示す対象での使用に適するかもしれない、毛髪および一時的な皮膚の着色に対する必要性が残る。
【発明の概要】
【0007】
上記で同定された問題の一部または全部は、本発明により解決されうる。本発明の態様および実施形態は、以下の番号付けされた条項を参照して説明される。
【0008】
１． 式Iの化合物であって：
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキル、または、生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物を表す；
化合物。
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキル、または、生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物を表す；
化合物。
【0009】
２． 条項１に記載された化合物であって、
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキルを表す；
化合物。
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキルを表す；
化合物。
【0010】
３． 条項１または２に記載された化合物であって、
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、Ｃ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、Ｃ１－３アルキルを表す；
化合物。
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、Ｃ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、Ｃ１－３アルキルを表す；
化合物。
【0011】
４． 条項１～３のいずれか一項に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【0012】
５． 条項４に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【0013】
６． 条項５に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において、Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
化合物。
【0014】
７． 条項１～６のいずれか一項に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
【0015】
８． 条項７に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－２アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－２アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される；
化合物。
【0016】
９． 条項１～８のいずれか一項に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、メチルを表す
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、メチルを表す
化合物。
【0017】
１０． 条項１または２に記載された化合物であって、
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１の置換基により置換されたＣ１－４アルキルを表し：
ＯＲ２、＝Ｏ、＝ＣＨ２、およびＮＨＲ２；
Ｒ２は、非置換であるか、またはＯＲ４基により置換された、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；
Ｒ４は、Ｈまたはメチルを表す；
化合物。
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１の置換基により置換されたＣ１－４アルキルを表し：
ＯＲ２、＝Ｏ、＝ＣＨ２、およびＮＨＲ２；
Ｒ２は、非置換であるか、またはＯＲ４基により置換された、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；
Ｒ４は、Ｈまたはメチルを表す；
化合物。
【0018】
１１． 条項１～１０のいずれか一項に記載された化合物であって、
ここで：
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルにより置換されておらず、このＣ１－３アルキルは、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；および／または
（ｂ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｃ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｄ）存在する場合、Ｒ２は、ＨまたはＣ１－３（例えばＣ１－２）アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；および／または
（ｅ）存在する場合、Ｒ２は、Ｈを表し；および／または
（ｆ）存在する場合、Ｒ４は、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；および／または
（ｇ）存在する場合、Ｒ４は、Ｈを表し；および／または
（ｈ）存在する場合、Ｒ３は、Ｈではない；
化合物。
ここで：
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルにより置換されておらず、このＣ１－３アルキルは、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；および／または
（ｂ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｃ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｄ）存在する場合、Ｒ２は、ＨまたはＣ１－３（例えばＣ１－２）アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；および／または
（ｅ）存在する場合、Ｒ２は、Ｈを表し；および／または
（ｆ）存在する場合、Ｒ４は、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；および／または
（ｇ）存在する場合、Ｒ４は、Ｈを表し；および／または
（ｈ）存在する場合、Ｒ３は、Ｈではない；
化合物。
【0019】
１２． 条項１に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0020】
１３． 条項１に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0021】
１４． 条項１３に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｂ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｃ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｄ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｂ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン；
（ｃ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
および
（ｄ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0022】
１５． 条項１４に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｂ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｂ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル；
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0023】
１６． 条項１２に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0024】
１７． 条項１６に記載された化合物であって、
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
および
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
ここで式Ｉの前記化合物は、以下のリスト：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール；
および
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物；
から選択される
化合物。
【0025】
１８． 毛髪を染色する、または一時的なタトゥーを施す方法であって、
前記方法は、条項１～１７のいずれか一項に記載された式Ｉの化合物または生理的に許容される塩または溶媒和物、または、それらの酸化誘導体を含む組成物を、適用するステップを含む
方法。
前記方法は、条項１～１７のいずれか一項に記載された式Ｉの化合物または生理的に許容される塩または溶媒和物、または、それらの酸化誘導体を含む組成物を、適用するステップを含む
方法。
【0026】
１９． 毛髪を染色する、または皮膚をタトゥーするための組成物であって：
条項１～１７のいずれか一項に規定された式Ｉの化合物；
および
水；
を含む組成物。
条項１～１７のいずれか一項に規定された式Ｉの化合物；
および
水；
を含む組成物。
【0027】
２０． 条項１９に記載された組成物であって、
カップリング剤をさらに含む
組成物。
カップリング剤をさらに含む
組成物。
【0028】
２１． 部品キットであって：
（ｉ）条項１９または条項２０に記載された組成物；
および
（ｉｉ）酸化剤を含む顕色組成物（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）；
を含むキット。
（ｉ）条項１９または条項２０に記載された組成物；
および
（ｉｉ）酸化剤を含む顕色組成物（ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）；
を含むキット。
【0029】
［図面］
本開示のある実施形態は、以下で添付図面を参照してより詳細に説明される。
本開示のある実施形態は、以下で添付図面を参照してより詳細に説明される。
【図面の簡単な説明】
【0030】
【図1】ＨａＣａＴ皮膚細胞でのＮ１～Ｎ１３の細胞生存率プロファイル。グラフは、ｙ軸で細胞生存率％（リニアスケール）、ｘ軸で濃度（対数スケール）により表される。
【図2】２４時間のインキュベーション後の、Ｎ１～Ｎ１３の平均ペプチド減少率（システイン１：１０／リジン１：５０）。データは、３回反復の平均±標準偏差を表し、ｎｓ；有意ではない、＊＊；ｐ値＜０．０１、＊＊＊；ｐ値＜０．００１。＃は、J Hazard Mat., 2021, 402, 123712からのデータを示す。
【図3i-3ii】フランツ型拡散セルで行われたブタ皮膚浸透試験から得られた、Ｎ１～Ｎ１３誘導体の平均累積量プロファイル。合成された誘導体Ａ．Ｎ１、Ｂ．Ｎ２、Ｃ．Ｎ３、Ｄ．Ｎ４、Ｅ．Ｎ５、Ｆ．Ｎ６、Ｇ．Ｎ７、Ｈ．Ｎ８、Ｉ．Ｎ９、Ｊ．Ｎ１０、Ｋ．Ｎ１１、Ｌ．Ｎ１２、Ｍ．Ｎ１３の、累積量プロファイル。皮膚データは、６回反復の平均±標準偏差である。
【図4】ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよびＰＴＤと比較した、Ｎ１～Ｎ１３の皮膚浸透。適用された化合物用量に対する割合として表される。Ａ．ドナー区画における親化合物の回収、Ｂ）親化合物の浸透、Ｃ．皮膚における親化合物の回収。データは、６回反復の平均±標準偏差であり、＊＊ｐ＜０．０１。＃は、J Hazard Mat., 2021, 402, 123712からのデータを示す。
【図5i-5ii】皮膚浸透試験からの、Ｎ１～Ｎ１３の抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）。（Ａ）Ｎ１のＸＩＣ、（Ｂ）Ｎ２のＸＩＣ、（Ｃ）Ｎ３のＸＩＣ、（Ｄ）Ｎ４のＸＩＣ、（Ｅ）Ｎ５のＸＩＣ、（Ｆ）Ｎ６のＸＩＣ、（Ｇ）Ｎ７のＸＩＣ、（Ｈ）Ｎ８のＸＩＣ、（Ｉ）Ｎ９のＸＩＣ、（Ｊ）Ｎ１０のＸＩＣ、（Ｋ）Ｎ１１のＸＩＣ、（Ｌ）Ｎ１２のＸＩＣ、（Ｍ）Ｎ１３のＸＩＣ。
【図6】新規の染毛剤および標準物質による、ＩＬ－８およびＩＬ－１αの誘発。データは、６つの独立した実験の平均±標準偏差を表す。データは、６回反復の平均±標準偏差であり、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、陰性対照と比較した差である。ＰＰＤ、ＭＥＰＰＤ、およびＰＴＤのデータは、J Hazard Mat., 2021, 402, 123712から。
【図7i-7iii】ＴＨＰ－１細胞でのＮ１～Ｎ１３のＣＤ５４およびＣＤ８６発現レベルは、１×１０６細胞／ｍＬで播種され、各化学物質ＣＶ７５に基づく８用量で処理された。（Ａ）ＤＮＣＢ（陽性対照）、（Ｂ）ＳＬＳ（陰性対照）、（Ｃ）ＰＰＤ、（Ｄ）ＭＥ－ＰＰＤ、（Ｅ）ＰＴＤ、（Ｆ）Ｎ１、（Ｇ）Ｎ２、（Ｈ）Ｎ３、（Ｉ）Ｎ４、（Ｊ）Ｎ５、（Ｋ）Ｎ６、（Ｌ）Ｎ７、（Ｍ）Ｎ８、（Ｍ）Ｎ９、（Ｏ）Ｎ１０、（Ｐ）Ｎ１１、（Ｑ）Ｎ１２、および（Ｒ）Ｎ１３、２４時間、抗体で染色された。ＣＤ５４およびＣＤ８６発現は、フローサイトメトリーを使用して測定された。グラフは、１番目と２番目のＹ軸で％ＲＦＩと細胞生存率％の値を、Ｘ軸で化合物濃度を示す。破線および点線は、それぞれ％ＲＦＩ≧２００（ＣＤ５４）または％ＲＦＩ≧１５０（ＣＤ８６）のＯＥＣＤカットオフ範囲を表す。％ＲＦＩの値は、３回の実験の平均±標準誤差の値である。
【図8i-8iv】Ｎ１～Ｎ１３誘導体がブリーチされた毛髪試料上に適用された後の、染毛剤組成物および最終的な色。
【発明を実施するための形態】
【0031】
本発明は、（酸化の有無にかかわらず）染色効果を保持するが、ＰＰＤおよび／またはその酸化生成物に関連する感作の問題を回避する、ＰＰＤのアナログの使用を通じて、上記で同定された問題を克服する。すなわち、本明細書の以下に開示された化合物は、毛髪を染色または皮膚を着色する目的で使用されたとき、対象からのアレゴリーまたは他の免疫反応を引き起こさない。
【0032】
従って、本発明の第１の態様によれば、式Ｉの化合物が提供され：
ここで：
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキル、または、生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物を表す。
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表し：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表し；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキル、または、生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物を表す。
【0033】
本明細書の実施形態において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という単語は、言及された特徴を必要とするが、他の特徴の存在を限定するものではないと解釈されうる。あるいは、「含む」という単語はまた、列挙された構成要素／特徴のみが存在する（例えば、「含む」という単語は、「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｏｆ）」または「本質的に～から構成される（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という句により置き換えられうる）ことが意図される状況に、関連しうる。より広い解釈およびより狭い解釈の両方が、本発明のすべての態様および実施形態に適用されうることが、明示的に企図される。言い換えれば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という単語およびその同義語は、「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｏｆ）」という句または「本質的に～から構成される（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という句またはそれらの同義語により置き換えられることができ、その逆もまた同様である。
【0034】
本明細書における（本発明の任意の態様または実施形態における）式Ｉの化合物への言及は、そのような化合物自体への、そのような化合物の互変異性体への、および、そのような化合物の生理的に許容される塩または溶媒和物、または酸化誘導体への、言及を含む。
【0035】
言及されうる生理的に許容される塩には、酸付加塩および塩基付加塩を含む。そのような塩は、従来の手段によって、例えば式Ｉの化合物の遊離酸または遊離塩基の形態と、１または複数当量の適切な酸または塩基との反応によって、任意に溶媒中または塩が不溶性である培地中で、その後前記溶媒または前記培地を除去することによって、標準的な技術（例えば、真空中で、凍結乾燥により、または濾過により）を使用して、形成されうる。塩はまた、例えば適切なイオン交換樹脂を使用して、塩の形態の式Ｉの化合物の対イオンを、別の対イオンと交換することにより、調製されうる。
【0036】
生理的に許容される塩の例には、無機酸および有機酸に由来する酸付加塩、および、ナトリウム、マグネシウム、または好ましくはカリウムおよびカルシウムなどの金属に由来する塩を含む。
【0037】
酸付加塩の例には、以下で形成される酸付加塩を含む：酢酸、２，２－ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アリールスルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、およびｐ－トルエンスルホン酸）、アスコルビン酸（例えばＬ－アスコルビン酸）、Ｌ－アスパラギン酸、安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、ブタン酸、（＋）カンファー酸、カンファースルホン酸、（＋）－（１Ｓ）－カンファー－１０－スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸（例えばＤ－グルコン酸）、グルクロン酸（例えばＤ－グルクロン酸）、グルタミン酸（例えばＬ－グルタミン酸）、α－オキソグルタル酸、グリコール酸、ヒプリン酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、イセチオン酸、乳酸（例えば（＋）－Ｌ－乳酸および（±）－ＤＬ－乳酸）、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸（例えば（－）－Ｌ－リンゴ酸）、マロン酸、（±）－ＤＬ－マンデル酸、メタリン酸、メタンスルホン酸、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、Ｌ－ピログルタミン酸、サリチル酸、４－アミノ－サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸（例えば（＋）－Ｌ－酒石酸）、チオシアン酸、ウンデシレン酸、および吉草酸。
【0038】
塩の具体的な例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、および硫酸などの無機酸に由来する塩であり；酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、アリールスルホン酸などの有機酸に由来する塩であり；およびナトリウム、マグネシウム、または好ましくはカリウムおよびカルシウムなどの金属に由来する塩である。
【0039】
上述のように、式Ｉにより包含されるのはまた、化合物の任意の溶媒和物およびそれらの塩である。好ましい溶媒和物は、本発明の化合物の固体構造（例えば結晶構造）内に、非毒性の薬学的に許容される溶媒（以下、溶媒和性溶媒という）の分子を取り込むことにより形成される、溶媒和物である。そのような溶媒の例には、水、アルコール（エタノール、イソプロパノール、およびブタノールなど）、およびジメチルスルホキシドを含む。溶媒和物は、溶媒和性溶媒を含む溶媒または溶媒の混合物を用いて、本発明の化合物を再結晶することにより調製されうる。任意の例において溶媒和物が形成されたかどうかは、熱重量分析（ＴＧＥ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、およびＸ線結晶構造解析など、周知の標準的な技術を使用して、化合物の結晶を分析にかけることにより決定されうる。
【0040】
溶媒和物は、化学量論的または非化学量論的な溶媒和物でありうる。具体的には好ましい溶媒和物は水和物であり、水和物の例には、半水和物、一水和物、および二水和物を含む。
溶媒和物についてのより詳細な議論、およびそれらの作製と特性評価に使用される方法については、Bryn et al., Solid-State Chemistry of Drugs, Second Edition、ＳＳＣＩ，Ｉｎｃ発行、ウェストラファイエット（Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ）、インディアナ州、米国、１９９９年、ＩＳＢＮ０－９６７－０６７１０－３参照。
溶媒和物についてのより詳細な議論、およびそれらの作製と特性評価に使用される方法については、Bryn et al., Solid-State Chemistry of Drugs, Second Edition、ＳＳＣＩ，Ｉｎｃ発行、ウェストラファイエット（Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ）、インディアナ州、米国、１９９９年、ＩＳＢＮ０－９６７－０６７１０－３参照。
【0041】
本明細書で規定される式Ｉの化合物の「酸化誘導体（ｏｘｉｄｉｓｅｄ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）」とは、過酸化水素などの酸化剤に曝される、式Ｉの化合物から得られうる化合物である。結果得られる酸化化合物は、ＰＰＤの酸化生成物に類似しうることが理解されよう。
【0042】
式Ｉの化合物、および、そのような化合物の生理的に許容される塩、溶媒和物および酸化誘導体は、簡潔のために、以下「式Ｉの化合物（ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｆ ｆｏｒｍｕｌａ Ｉ）」と総称される。
【0043】
式Ｉの化合物は、二重結合を含んでもよく、従って個々の二重結合についてＥ（ｅｎｔｇｅｇｅｎ）およびＺ（ｚｕｓａｍｍｅｎ）幾何異性体として存在しうる。そのような異性体およびそれらの混合物はすべて、本発明の範囲に含まれる。
【0044】
式Ｉの化合物は、位置異性体として存在してもよく、また互変異性を示しうる。互変異性体およびそれらの混合物はすべて、本発明の範囲に含まれる。
【0045】
式Ｉの化合物は、１または複数の不斉炭素原子を含んでもよく、従って光学異性および／またはジアステレオ異性を示しうる。ジアステレオ異性体は、従来の技術、例えばクロマトグラフィーまたは分別晶析法を使用して、分離されうる。様々な立体異性体は、化合物のラセミ体または他の混合物を、従来の技術、例えば分別晶析法またはＨＰＬＣを使用して分離することによって、単離されうる。あるいは、ラセミ化またはエピメリ化を引き起こさない条件下で（すなわち「キラルプール」法）適切な光学活性出発物質を反応させることによって、適切な出発物質を適切な段階でその後除去されうる「不斉補助剤」と反応させることによって、例えばホモキラル酸で誘導体化し（すなわち、動的分割（ｄｙｎａｍｉｃ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）を含む分割）、次いでクロマトグラフィーなどの従来の方法によりジアステレオマー誘導体を分離することによって、またはいずれも当業者に知られた条件下で適切なキラル試薬またはキラル触媒と反応させることによって、所望の光学異性体が作製されうる。立体異性体およびそれらの混合物はすべて、本発明の範囲に含まれる。
【0046】
誤解を避けるために、本発明の文脈において、「染色する（ｄｙｅｉｎｇ）」および「タトゥーする（ｔａｔｔｏｏｉｎｇ）」という用語は、皮膚（タトゥーする場合）または毛髪（染色する場合）などの、対象の身体部分への化粧用処理の適用を指す。
【0047】
本明細書で使用される「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」という用語は、当該技術分野でよく認識されており、イヌ、ネコ、ラット、マウス、サル、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、ラクダ、および最も好ましくはヒトを含む哺乳動物を指すために、本明細書で使用される。その用語は、具体的な年齢または性別を示すものではない。従って、成人および（場合によっては）新生児の対象が、男女を問わずに含まれることが意図される。
【0048】
式Ｉの化合物の有効量が、対象の染色および／または一時的なタトゥーに効果を与えるために、使用されうることが理解されよう。「有効量（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ）」という用語は、処理対象に所望の着色効果（例えば、毛髪を染色し、または皮膚を一時的にタトゥーするために十分な）を与える化合物の量を指す。その効果は、客観的（すなわち、何らかの試験またはマーカーにより測定可能である）、または主観的（すなわち、対象が違いを認識できる）でありうる。
【0049】
「ハロ（ｈａｌｏ）」という用語は、本明細書で使用される場合、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードへの言及を含む。
【0050】
特に断りがない限り、「アルキル（ａｌｋｙｌ）」という用語は、非分岐または分岐、環式、飽和または不飽和（例えば、アルケニルまたはアルキニルを形成する）のヒドロカルビルラジカルを指し、（例えば、１または複数のハロ原子で）置換または非置換されうる。「アルキル」という用語が非環式基を指す場合、好ましくはＣ１－１０アルキルであり、より好ましくはＣ１－６アルキル（エチル、プロピル（例えばｎ－プロピルまたはイソプロピル）、ブチル（例えば分岐または非分岐ブチル）、ペンチル、またはより好ましくはメチルなど）である。「アルキル」という用語が環式基である場合（「シクロアルキル」基が特定される場合でもよい）、好ましくはＣ３－１２シクロアルキルであり、より好ましくはＣ５－１０（例えばＣ５－７）シクロアルキルである。より具体的には、アルキルという用語は、非分岐または分岐の飽和ヒドロカルビルラジカルを指し、（例えば、１または複数のハロ原子で）置換または非置換されうる。
【0051】
本発明のさらなる態様および実施形態は、以下の非限定的な実施例において提供される。
【0052】
本明細書で言及されうる本発明の実施形態において、
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表してもよく：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表してもよく；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキルを表してもよい。
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表してもよく：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１－５アルキルを表してもよく；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、ＨまたはＣ１－３アルキルを表してもよい。
【0053】
本明細書で言及されうる本発明のいくつかの実施形態において、
Ｒ３は、Ｃ１－３アルキルを表してもよい。
Ｒ３は、Ｃ１－３アルキルを表してもよい。
【0054】
本明細書で言及されうる本発明のさらなる実施形態において、
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表してもよく：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、Ｃ１－５アルキルを表してもよく；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、Ｃ１－３アルキルを表してもよい。
Ｒ１は、以下から選択される１または複数の置換基により置換されたＣ１－１０アルキルを表してもよく：
ハロ、ＯＲ２、ＣＮ、およびＣ１－３アルキル；
この後者の基は、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；
および
エポキシ；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－１０アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
Ｒ２は、Ｃ１－５アルキルを表してもよく；
これは非置換であるか、またはハロ、ＯＲ４、およびＣＮから選択される１または複数の置換基により置換され；
および
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、Ｃ１－３アルキルを表してもよい。
【0055】
本明細書で言及されうる式Ｉの実施形態において、以下のうちの１または複数が適用されうる：
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
任意選択でＲ１は、Ｃ１－３アルキルを表してもよく；
これはＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
（ｂ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－２アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；
（ｃ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、メチルを表す。
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
任意選択でＲ１は、Ｃ１－３アルキルを表してもよく；
これはＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；
（ｂ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－２アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；
（ｃ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、メチルを表す。
【0056】
式Ｉのさらなる実施形態において、以下のうちの１または複数が適用されうる：
（ｉ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
（ｉｉ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される。
（ｉ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはＯＲ２、ＣＮおよびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成される；
（ｉｉ）式Ｉの前記化合物において存在する場合、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換される。
【0057】
（ａ）～（ｃ）および（ｉ）～（ｉｉ）のうちの１または複数が選択されうることが理解されよう。例えば、Ｒ１は上記（ｉｉ）に定められる定義から選択されてもよく、Ｒ２は置換基の最も広範な一般的定義に合わせて規定されてもよく、一方Ｒ３およびＲ４は、上記（ｃ）により規定されてもよい。
【0058】
本明細書で言及されうる本発明のさらなる実施形態において：
Ｒ１は、以下から選択される１の置換基により置換されたＣ１－４アルキルを表してもよく：
ＯＲ２、＝Ｏ、＝ＣＨ２、およびＮＨＲ２；
Ｒ２は、非置換であるか、またはＯＲ４基により置換された、ＨまたはＣ１－２アルキルを表してもよく；
および
Ｒ４は、Ｈまたはメチルを表してもよい。
Ｒ１は、以下から選択される１の置換基により置換されたＣ１－４アルキルを表してもよく：
ＯＲ２、＝Ｏ、＝ＣＨ２、およびＮＨＲ２；
Ｒ２は、非置換であるか、またはＯＲ４基により置換された、ＨまたはＣ１－２アルキルを表してもよく；
および
Ｒ４は、Ｈまたはメチルを表してもよい。
【0059】
本明細書で言及されうる本発明のなおさらなる実施形態において、（ａ）～（ｈ）のうちの１または複数が適用されうる：
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルにより置換されておらず、このＣ１－３アルキルは、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；および／または
（ｂ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｃ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｄ）存在する場合、Ｒ２は、ＨまたはＣ１－３（例えばＣ１－２）アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；および／または
（ｅ）存在する場合、Ｒ２は、Ｈを表し；および／または
（ｆ）存在する場合、Ｒ４は、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；および／または
（ｇ）存在する場合、Ｒ４は、Ｈを表し；および／または
（ｈ）存在する場合、Ｒ３は、Ｈではない。
（ａ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルにより置換されておらず、このＣ１－３アルキルは、非置換であるか、またはハロ、ＣＮ、ＯＲ３により置換され；および／または
（ｂ）Ｒ１は、Ｃ１－６アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－６アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｃ）Ｒ１は、Ｃ１－３アルキルを表し；
これはハロ、ＯＲ２、ＣＮ、＝Ｏ、＝ＣＨ２、ＮＨＲ２、およびエポキシから選択される１または複数の置換基で置換され；
ただしエポキシ置換基は、Ｒ１がＣ２－３アルキルであり、およびＲ１の２つの隣接する炭素原子が、酸素原子と共に前記エポキシ置換基を形成する場合にのみ形成され；および／または
（ｄ）存在する場合、Ｒ２は、ＨまたはＣ１－３（例えばＣ１－２）アルキルを表し；
これは非置換であるか、または、１または複数のＯＲ４置換基により置換され；および／または
（ｅ）存在する場合、Ｒ２は、Ｈを表し；および／または
（ｆ）存在する場合、Ｒ４は、ＨまたはＣ１－２アルキルを表し；および／または
（ｇ）存在する場合、Ｒ４は、Ｈを表し；および／または
（ｈ）存在する場合、Ｒ３は、Ｈではない。
【0060】
それ自体言及されうる式Ｉの他の化合物には、本明細書の以下に記載される例の化合物を含む。従って、言及されうる本発明の実施形態は、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１］；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ２］；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ３］；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］；
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン［Ｎ１１］；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１２］；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１３］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１］；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ２］；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ３］；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］；
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン［Ｎ１１］；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１２］；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１３］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0061】
本明細書で言及されうる本発明のより具体的な実施形態には、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１］；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ２］；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ３］；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
および
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ｉ）２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１］；
（ｉｉ）２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ２］；
（ｉｉｉ）２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ３］；
（ｉｖ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｖ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｖｉ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
および
（ｖｉｉ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0062】
本明細書で言及されうる本発明のさらに具体的な実施形態には、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｂ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｃ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
および
（ｄ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
（ｂ）２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ５］；
（ｃ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
および
（ｄ）２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ７］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0063】
本明細書で言及されうる本発明のさらに具体的な実施形態には、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
および
（ｂ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ａ）２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ４］；
および
（ｂ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル［Ｎ６］；
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0064】
本明細書で言及されうる本発明のさらに具体的な実施形態には、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン［Ｎ１１］；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１２］；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１３］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］；
（ｘｉ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン［Ｎ１１］；
（ｘｉｉ）２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１２］；
および
（ｘｉｉｉ）２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン［Ｎ１３］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0065】
本明細書で言及されうる本発明のさらに具体的な実施形態には、式Ｉの化合物が以下のリストから選択される化合物であるものを含む：
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
および
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
（ｖｉｉｉ）２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール［Ｎ８］；
（ｉｘ）２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール［Ｎ９］；
および
（ｘ）１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール［Ｎ１０］、
または
生理的に許容されるそれらの塩または溶媒和物。
【0066】
式Ｉの化合物は、毛髪を染色し、または皮膚を（一時的に）タトゥーするための組成物に有用でありうることが理解されよう。従って、本発明のさらなる態様において、上記で規定された式Ｉの化合物および水を含む、毛髪を染色する、または皮膚をタトゥーするための組成物が、開示される。
【0067】
本発明でのタトゥーの文脈における「一時的に（ｔｅｍｐｏｒａｒｙ）」という用語は、皮膚を一時的に着色することを意味すると理解され、これは、洗浄（例えば、石鹸でタトゥーを洗浄）により、または一定期間にわたる表皮の自然な脱落により、完全にまたはほぼ完全に除去されうる。
【0068】
現在特許請求されている発明の文脈において、「毛髪を染色する（ｄｙｅｉｎｇ ｈａｉｒ）」とは、式Ｉの化合物を含む製剤を適用して、そのように染色される毛髪に永久的または半永久的な色の変化をもたらすことを指す。この効果は、毛髪をブロンドにする／ブリーチする、および／または式Ｉの化合物を酸化させる酸化性材料が存在しなくても達成されうるが、本明細書に記載されるいくつかの実施形態において、酸化材料が存在してもよい。
【0069】
本明細書で言及される化合物および組成物は、毛髪を永久的に染色するために使用されうることが理解されよう。この場合、髪が伸びるか、または別の色に染色されるまで、その効果は本質的に永久的である。
【0070】
組成物は、０．０００１～２０重量％の式Ｉの化合物を含んでもよく、残りは水である。後述するように、他の構成要素が組成物の一部を形成してもよく、そのような水は、典型的には、組成物の総重量に対して約１５～約９９重量％の範囲の量で提供されることが理解されよう。組成物のｐＨ範囲は約１．０～１４．０でありうるが、より典型的には、組成物のｐＨ範囲は約３．０～約１１．０であろう。式Ｉの化合物の組合せが、本明細書で具体的に企図されることが理解されよう。誤解を避けるために、「式Ｉの化合物」への言及はまた、それらの生理的に許容される塩または溶媒和物、または酸化誘導体にも関連する。
【0071】
本明細書で説明される組成物は、追加の構成要素を含んでもよく、この追加の構成要素には、カップリング剤、界面活性剤、追加の希釈剤／溶媒、増粘剤、およびアルカリ化剤を含みうるが、これらに限定されないことが理解されよう。
【0072】
ＰＰＤと共に使用されうる任意の適切なカップリング剤が、本明細書で使用されてもよく、カップリング剤は組成物全体の０．０００１～２０重量％を形成する。適切なカップリング剤は、フェノール、カテコール、メタアミノフェノール、メタフェニレンジアミンなどを含むが、これらに限定されない群から選択されてもよく、これらは、無置換であるか、またはアミノ基またはベンゼン環が、アルキル基、ヒドロキシアルキル基、アルキルアミノ基などで置換されてもよい。適切なカプラー（ｃｏｕｐｌｅｒ）には、３，４－メチレンジオキシフェノール、３，４－メチレンジオキシ－１－［（β－ヒドロキシエチル）アミノ］ベンゼン、１－メトキシ－２－アミノ－４－［（β－ヒドロキシエチル）アミノ］－ベンゼン、１－ヒドロキシ－３－（ジメチルアミノ）ベンゼン、６－メチル－１－ヒドロキシ－３［（β－ヒドロキシエチル）－アミノ］ベンゼン、２，４－ジクロロ－１－ヒドロキシ－３－アミノベンゼン、１－ヒドロキシ－３－（ジエチルアミノ）－ベンゼン、１－ヒドロキシ－２－メチル－３－アミノベンゼン、２－クロロ－６－メチル－１－ヒドロキシ－３－アミノベンゼン、１，３－ジアミノベンゼン、６－メトキシ－１，３－ジアミノベンゼン、６－ヒドロキシエトキシ－１，３－ジアミノベンゼン、６－メトキシ－５－エチル－１，３－ジアミノベンゼン、６－エトキシ－１，３－ジアミノベンゼン、１－ビス（β－ヒドロキシエチル）アミノ－３－アミノベンゼン、２－メチル－１，３－ジアミノベンゼン、６－メトキシ－１－アミノ－３－［（β－ヒドロキシエチル）アミノ］－ベンゼン、６－（β－アミノエトキシ）－１，３－ジアミノベンゼン、６－（β－ヒドロキシエトキシ）－１－アミノ－３－（メチルアミノ）ベンゼン、６－カルボキシメトキシ－１，３－ジアミノベンゼン、６－エトキシ－１－ビス（β－ヒドロキシエチル）アミノ－３－アミノベンゼン、６－ヒドロキシエチル－１，３－ジアミノベンゼン、１－ヒドロキシ－２－イソプロピル－５－メチルベンゼン、１，３－ジヒドロキシベンゼン、２－クロロ－１，３－ジヒドロキシベンゼン、２－メチル－１，３－ジヒドロキシベンゼン、４－クロロ－１，３－ジヒドロキシベンゼン、５，６－ジクロロ－２－メチル－１，３－ジヒドロキシベンゼン、１－ヒドロキシ－３－アミノ－ベンゼン、１－ヒドロキシ－３－（カルバモイルメチルアミノ）ベンゼン、６－ヒドロキシベンゾモルホリン、４－メチル－２，６－ジヒドロキシピリジン、２，６－ジヒドロキシピリジン、２，６－ジアミノピリジン、６－アミノベンゾモルホリン、１－フェニル－３－メチル－５－ピラゾロン、１－ヒドロキシナフタレン、１，７－ジヒドロキシナフタレン、１，５－ジヒドロキシナフタレン、５－アミノ－２－メチルフェノール、４－ヒドロキシインドール、４－ヒドロキシインドリン、６－ヒドロキシインドール、６－ヒドロキシインドリン、およびそれらの混合物を含む。本明細書で言及されうる具体的なカップリング剤には、レゾルシノール、１－ナフトール、５－アミノ－ｏ－クレゾール、２－メチルレゾルシノール、ｍ－アミノフェノール、ｍ－フェニレンジアミン、１－フェニル－３－メチル－ピラゾール－５－オン、それらの塩、または混合物を含む。
【0073】
組成物が界面活性剤を含む場合、界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、非イオン性、双性イオン性、または両性でありうる。１または複数の界面活性剤が、組成物の一部を形成しうることが理解されよう。存在する場合、界面活性剤（複数可）は、組成物の０．０１～２０重量％を形成しうる。
【0074】
本明細書で言及されうる適切な非イオン性界面活性剤には、以下を含むが、これらに限定されない：アルキルポリグリコシド、セトマクロゴール１０００、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コカミドＤＥＡ、コカミドＭＥＡ、デシルグルコシド、デシルポリグルコース、エトキシレート、モノステアリン酸グリセロール、ＩＧＥＰＡＬ ＣＡ－６３０、イソセテス－２０、ラウリルグルコシド、マルトシド、モノラウリン、マイコスブチリン、ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ－４０、ノノキシノール、オクタエチレングリコールモノデシルエーテル、Ｎ－オクチルβ－Ｄ－チオグルコピラノシド、オクチルグルコシド、オレイルアルコール、ＰＥＧ－１０ヒマワリグリセリズ、ペンタエチレングリコールモノドデシルエーテル、ポリドカノール、ポロキサマー、ポリエトキシ化牛脂アミン、ポリリシノール酸ポリグリセロール、ポリソルベート、ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、トリステアリン酸ソルビタン、ステアリルアルコール、サーファクチン、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、およびＴｗｅｅｎ ８０。
【0075】
本明細書で言及されうる適切なカチオン性界面活性剤には、以下を含むが、これらに限定されない：ベヘントリモニウムクロリド、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンゾドデシニウム臭化物、ブロニドックス（ｂｒｏｎｉｄｏｘ）、カルベトペンデシニウムブロミド、セタルコニウムクロリド、セトリモニウムブロミド、セトリモニウムクロリド、塩化セチルピリジニウム、塩化ジデシルジメチルアンモニウム、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド、 ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド、ドミフェン臭化物、ラウリルメチルグルセス－１０ヒドロキシプロピルジモニウムクロリド、オクテニジン二塩酸塩、オラフルル（ｏｌａｆｌｕｒ）、Ｎ－オレイル－１，３－プロパンジアミン、パフトキシン、ステアラルコニウムクロリド、水酸化テトラメチルアンモニウム、および臭化トンゾニウム。
【0076】
本明細書で言及されうる適切な双性イオン性界面活性剤には、以下を含むが、これらに限定されない：ベタイン、Ｎ－アルキル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムグリシネート、Ｎ－アシルアミノプロピル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムグリシネート、および２－アルキル－３－カルボキシメチル－３－ヒドロキシエチルイミダゾリン。
【0077】
本明細書で言及されうる適切な双性イオン性界面活性剤には、以下を含むが、これらに限定されない：Ｎ－アルキルグリシン、Ｎ－アルキルプロピオン酸、Ｎ－アルキルアミノ酪酸、Ｎ－アルキルイミノジプロピオン酸、Ｎ－ヒドロキシエチル－Ｎ－アルキルアミドプロピルグリシン、Ｎ－アルキルタウリン、Ｎ－アルキルサルコシン、２－アルキルアミノプロピオン酸、およびアルキルアミノ酢酸。特に好ましい両性界面活性剤は、Ｎ－ココアルキルアミノプロピオネート、ココアシルアミノエチルアミノプロピオネート、およびＣ１２－Ｃ１８アシルサルコシンである。
【0078】
本発明に記載された組成物は、水に加えて、追加の希釈剤として１または複数の溶媒を含みうる。一般に、本発明の着色組成物において使用するのに適切な溶媒は、水と混和性であり皮膚に無害なものが選択される。本明細書において追加の希釈剤として使用するのに適切な溶媒には、Ｃ１～Ｃ２０一価または多価アルコールおよびそれらのエーテル、グリセリンを含み、一価および二価アルコールおよびそれらのエーテルが好ましい。これらの化合物において、２～１０の炭素原子を含むアルコール残基が好ましい。従って、好ましい群には、エタノール、イソプロパノール、ｎ－プロパノール、ブタノール、プロピレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、およびそれらの混合物を含む。これらの追加の希釈剤／溶媒は、全組成物の約０．５～約２０重量％の量で存在しうる。
【0079】
選択された用途によっては、組成物の粘度が調整される必要がありうる。例えばこれは、消費者の期待に応えるため、または機能的な理由のため（例えば、具体的な用途のために組成物を扱いやすくするため）でありうる。これは一般的に、１または複数の増粘剤の使用を通じて起こる。任意の適切な増粘剤、例えば有機および無機増粘剤などが、使用されうる。
【0080】
適切な増粘剤には、以下を含む：アニオン性合成ポリマー；カチオン性合成ポリマー；天然由来の増粘剤、例えば非イオン性グアーガム、スクレログルカンガムまたはキサンタンガム、アラビアガム、ガティガム、カラヤガム、トラガントガム、カラギーナンガム、寒天、ローカストビーン粉、ペクチン、アルギン酸塩、デンプン画分、およびアミロース、アミロペクチン、およびデキストリンなどの誘導体、および、例えばメチルセルロース、カルボキシアルキルセルロース、およびヒドロキシアルキルセルロースなどのセルロース誘導体（本発明のセルロースとは異なる）など；非イオン性完全合成ポリマー、例えばポリビニルアルコールまたはポリビニルピロリジノンなど；および、無機増粘剤、具体的には、例えばベントナイトなどのフィロケイ酸塩、具体的にはモンモリロン石またはヘクトライトなどのスメクタイト。本明細書に記載された組成物において、１または複数の上記増粘剤が使用されうることが理解されよう。
【0081】
本明細書に記載された組成物において、増粘剤は、組成物の総重量に基づいて、０．１～４．５重量％、例えば０．１５～３．５重量％、例えば０．２～２．０重量％の総量で使用されうる。
【0082】
組成物は、７．０～１０．０（例えば９．５～１０．０）の範囲のｐＨを有しうる。組成物が問題の用途に所望のｐＨ範囲内のｐＨを有しない場合、ｐＨは１または複数のアルカリ化剤の添加により調整されうる。所望のｐＨ値を調整するために使用されうる適切なアルカリ化剤は、以下より形成される群から選択されうる：アンモニア、アルカノールアミン、塩基性アミノ酸、および無機アルカリ化剤、例えばアルカリ（アルカリ土類）金属水酸化物、アルカリ（アルカリ土類）金属メタケイ酸塩、アルカリ（アルカリ土類）金属リン酸塩、およびアルカリ（アルカリ土類）金属リン酸水素塩など。例えば、アルカリ化剤は、Ｎａ２ＣＯ３でありうる。
【0083】
ｐＨがアルカリ性すぎる場合、組成物は、ｐＨ値を調整するために１または複数の酸をさらに含みうることが理解されよう。適切な酸は、例えば、α－ヒドロキシカルボン酸などの有機酸、または無機酸である。
【0084】
さらに、上述の組成物はまた、例えば以下のような他の活性物質、補助物質、および添加物を含みうる：線状カチオン性ポリマー、例えば四級化セルロースエーテル、四級化基を有するポリシロキサン、ジメチルジアリルアンモニウムクロリドポリマー、アクリルアミド－ジメチルジアリルアンモニウムクロリドコポリマー、硫酸ジエチルで四級化されたジメチルアミノエチルメタクリレート－ビニルピロリジノンコポリマー、ビニルピロリドン－イミダゾリニウム－メトクロリドコポリマー、および四級化ポリビニルアルコールなど；双性イオン性および両性ポリマー；アニオン性ポリマー、例えばポリアクリル酸または架橋ポリアクリル酸など；構造化剤、例えばグルコース、マレイン酸、および乳酸など、ヘアコンディショニング化合物、例えばリン脂質、例えばレシチンおよびケファリンなど；香油、ジメチルイソソルビド、およびシクロデキストリン；繊維構造改善活性物質、具体的には単糖、二糖、およびオリゴ糖、例えばグルコース、ガラクトース、フルクトース、果糖、およびラクトースなど；薬剤を着色するための染料；抗フケ剤、例えばピロクトンオラミン、ジンクピリチオン（ｚｉｎｃ ｏｍａｄｉｎｅ）、およびクリンバゾールなど；アミノ酸およびオリゴペプチド；動物性および／または植物性の基剤を有するタンパク質加水分解物、およびそれらの脂肪酸縮合生成物、または任意にアニオン性またはカチオン性修飾された誘導体の形態；光安定剤およびＵＶカット剤；活性物質、例えばパンテノール、パントテン酸、パントラクトン、アラントイン、ピロリジノンカルボン酸、およびそれらの塩、および、ビサボロールなど；ポリフェノール、具体的にはヒドロキシ桂皮酸、６，７－ジヒドロキシクマリン、ヒドロキシ安息香酸、カテキン、タンニン、ロイコアントシアニジン、アントシアニジン、フラバノン、フラボン、およびフラボノール；セラミドまたは擬セラミド；ビタミン、プロビタミン、およびビタミン前駆体；植物抽出物；油脂およびワックス、例えば脂肪アルコール、蜜蝋、モンタンワックス、およびパラフィンなど；膨潤および浸透剤、例えばグリセロール、プロピレングリコールモノエチルエーテル、炭酸塩、炭酸水素塩、グアニジン、尿素、および第一、第二、第三リン酸塩など；乳白剤、例えばラテックス、スチレン／ＰＶＰおよびスチレン／アクリルアミドコポリマー、およびジステアリン酸ＰＥＧ－３など；噴射剤、例えばプロパン－ブタン混合物、Ｎ２Ｏ、ジメチルエーテル、ＣＯ２、および空気など。
【0085】
これらの追加物質の選択は、問題の組成物の所望の特性に従って、当業者によりなされる。他の随意構成要素および前記構成要素の使用量に関しては、当業者に公知の関連するハンドブックを明示的に参照する。追加の活性および補助物質は、本発明の薬剤において、好ましくは各場合において、問題の組成物の総重量に基づいて、０．０００１～２５重量％、具体的には０．０００５～１５重量％の量で使用される。
【0086】
本明細書で開示される組成物は、例えば、ローション、ゲル、スプレー、エアロゾル、またはポンプフォームの形態で産生されうる。従って適用形態に応じてそれらは、好ましくはチューブ、容器、瓶、箱、加圧容器、またはポンプスプレーアプリケータ付き容器に充填される。
【0087】
ある実施形態において、上記で開示された組成物は、式Ｉの化合物の酸化誘導体を含みうる。その場合、別の酸化剤を与える必要はないかもしれない。一方、式Ｉの化合物が酸化されていない形態である組成物は、そのまま使用されてもよく、少なくとも一時的な染毛効果を与える。毛髪をブロンドにし、より一貫した着色を提供するために、酸化剤もまた組成物に含まれうる（または別に適用される）ことも、また企図されており、それは永久的でありうる。従って、本発明のさらなる態様において、以下を含む部品キットが提供される：
（ｉ）上述の組成物；および
（ｉｉ）酸化剤を含む顕色組成物。
（ｉ）上述の組成物；および
（ｉｉ）酸化剤を含む顕色組成物。
【0088】
上述の組成物は、好ましくは式Ｉの化合物の酸化されていない形態を含むが、式Ｉの化合物の酸化された形態もまた、使用されうることが理解されよう。
【0089】
一般に、上述の式Ｉの化合物を含む組成物は、これらの部品キットに使用されうる。そのため、ここではこれらの組成物の上記説明を参照する。
【0090】
顕色組成物は、ブロンド／ブリーチ効果を毛髪に与えるために、場合によっては式Ｉの化合物（酸化されていない形態の場合）の酸化を引き起こすために、式Ｉの化合物を含む組成物に加えられる。顕色組成物は、皮膚および毛髪に使用しても安全な、任意の適切な酸化剤を使用しうる。本明細書で言及されうる適切な酸化剤は、過酸化水素である。酸化剤は、規制ガイドライン内に収まる適切な量で提供されうる。そのため、欧州連合の化粧品指令（１９７６年７月２７日理事会指令、付属書ＩＩＩ １２頁）に従い、即時使用可能な染毛剤における最大許容濃度は１２％（４０ボリューム）、およびスキンケア製剤において４重量％である。ここで言及された部品キットは、染毛剤組成物における使用を意図され、そのような酸化剤は、顕色剤（ｄｅｖｅｌｏｐｅｒ）組成物中に０．５～４５重量％の量で存在してもよく、残りは水であることが理解されよう。
【0091】
本発明のさらなる実施形態において、顕色剤組成物は、界面活性剤、増粘剤、および酸性化剤をさらに含みうる。
【0092】
顕色剤組成物において存在する場合、１または複数の界面活性剤は、本明細書で前述したものから選択されうる。界面活性剤（複数可）は、顕色剤組成物の０．０１～２０重量％の量で存在しうる。
【0093】
顕色剤組成物において存在する場合、１または複数の増粘剤は、本明細書で前述したものから選択されうる。増粘剤（複数可）は、顕色剤組成物の０．０１～２０重量％の量で存在しうる。
【0094】
顕色剤組成物は、２．５～６．９の範囲のｐＨを有しうる。顕色剤組成物が問題の用途に所望のｐＨ範囲内のｐＨを有しない場合、ｐＨは１または複数の酸性化剤の添加により調整されうる。適切な酸性化剤には、例えば、α－ヒドロキシカルボン酸などの有機酸、または無機酸を含む。
さらに、顕色剤組成物はまた、本明細書で前述したように、他の活性物質、補助物質、および添加物を含みうる。
さらに、顕色剤組成物はまた、本明細書で前述したように、他の活性物質、補助物質、および添加物を含みうる。
【0095】
本明細書で開示される化合物は、毛髪を染色し、または皮膚に一時的なタトゥーを施すために有用であることが理解されよう。従って、本発明のさらなる態様において、毛髪を染色する、または一時的なタトゥーを施す方法が提供され、前記方法は、本明細書に記載された式Ｉの化合物または生理的に許容される塩または溶媒和物、または、それらの酸化誘導体を含む組成物を、適用するステップを含む。
【0096】
染毛において使用される場合、染毛方法は３つのステップを有しうる：
・第１のステップは、対象の毛髪を「組成物」と接触させるステップを必要とする（顕色剤（例えば、酸化剤を含む組成物）と任意に混合するステップの後に）；
・混合物を毛髪に約３０秒～約６０分間残留させるステップ；
および
・その後、水および界面活性剤入りのシャンプーで広範囲に毛髪を洗浄し、毛髪色の変化を長持ちさせるステップ。
・第１のステップは、対象の毛髪を「組成物」と接触させるステップを必要とする（顕色剤（例えば、酸化剤を含む組成物）と任意に混合するステップの後に）；
・混合物を毛髪に約３０秒～約６０分間残留させるステップ；
および
・その後、水および界面活性剤入りのシャンプーで広範囲に毛髪を洗浄し、毛髪色の変化を長持ちさせるステップ。
【0097】
本明細書に記載された組成物を使用する一時的なタトゥーは、対象の皮膚にヘナタトゥーと同様に適用されうる。
【0098】
以下の実施例に関連して本発明はさらに説明されるが、これらは例示のみを目的する。
【実施例】
【0099】
［材料および方法］
特に断りのない限り、市販の材料はすべて、さらなる精製をせずに使用された。ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ ３００ＭＨｚシステム、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ Ｐｌｕｓ ４００ＭＨｚシステム、およびＢｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ ５００ＭＨｚシステム上で、溶媒としてＤＭＳＯ－ｄ６を、内部標準物質としてＴＭＳを用いて、室温で記録された。１Ｈおよび１３Ｃ化学シフトは、残留溶媒ピークを基準にテトラメチルシランの低磁場側ｐｐｍで報告される。結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）で報告され、シグナル結合は以下の略号を使用して報告される：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｍ，多重線；ｐ，五重線；ｑ，四重線；ｂｒ，幅広線（ｂｒｏａｄ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）および、または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）モードを備えた、Ｆｉｎｎｉｇａｎ／ＭＡＴ ９５ＸＬ－Ｔ分光計システム上で得られた。
特に断りのない限り、市販の材料はすべて、さらなる精製をせずに使用された。ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ ３００ＭＨｚシステム、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ Ｐｌｕｓ ４００ＭＨｚシステム、およびＢｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ ５００ＭＨｚシステム上で、溶媒としてＤＭＳＯ－ｄ６を、内部標準物質としてＴＭＳを用いて、室温で記録された。１Ｈおよび１３Ｃ化学シフトは、残留溶媒ピークを基準にテトラメチルシランの低磁場側ｐｐｍで報告される。結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）で報告され、シグナル結合は以下の略号を使用して報告される：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｍ，多重線；ｐ，五重線；ｑ，四重線；ｂｒ，幅広線（ｂｒｏａｄ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）および、または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）モードを備えた、Ｆｉｎｎｉｇａｎ／ＭＡＴ ９５ＸＬ－Ｔ分光計システム上で得られた。
【0100】
パラフェニレンジアミン（９８．０％）およびレゾルシノール（≧９９．０％）は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（シンガポール）から購入された。Ｓｃｈｗａｒｚｋｏｐｆ ＢｌｏｎｄＭｅ Ｐｒｅｍｉｕｍ Ｌｉｆｔ ９＋ブリーチパウダーおよびＳｃｈｗａｒｚｋｏｐｆ ＢｌｏｎｄＭｅ １２％／４０ボリューム顕色剤溶液、Ｓｉｌｋｐｒｏ ＶｉｔＡｉｒシリーズデイリーバランスシャンプー、およびＳｉｌｋｐｒｏ ＶｉｔＡｉｒシリーズデイリートリートメントマスク（ヘアコンディショナー）はＡｍａｚｏｎから購入され、さらなる精製をせずに使用された。３０％過酸化水素水は、Ｍｅｒｃｋ（シンガポール）から購入された。
【0101】
ＨＰＬＣグレードアセトニトリル（９９．０％）、メタノール（９９．０％）は、Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ベルギー）から、ロイシンエンケファリン酢酸塩水和物（９５．０％）、デフェロキサミンメシル酸塩（９２．５％）、リジン含有（Ａｃ－ＲＦＡＡＫＡＡ－ＣＯＯＨ、９５．５％）およびシステイン含有（Ａｃ－ＲＦＡＡＣＡＡ－ＣＯＯＨ、９６．０５％）ヘプタペプチドは、Ｐｅｐｔｉｄｅ ２．０ Ｉｎｃ（シャンティリー（Ｃｈａｎｔｉｌｌｙ）、バージニア州）から購入され、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（シンガポール）から購入された。
【0102】
【0103】
【0104】
［一般的手順１：ニトロ中間体１ａ～１ｍの合成］
これは、臭化アルキルのブロモ基の求核置換による、アルコキシ誘導体の合成に関連する。
これは、臭化アルキルのブロモ基の求核置換による、アルコキシ誘導体の合成に関連する。
【0105】
２－アミノ－５－ニトロフェノール（０．００６５Ｍ）が、不活性雰囲気下に保たれた５ｍＬのＤＭＦに溶解され、臭化アルキル（０．００７１５Ｍ、１．１当量）および無水Ｋ２ＣＯ３（０．００７１５Ｍ、１．１当量）が、溶液に加えられた。結果得られた赤色混合物は、１８～２４時間還流され、その後、結果得られた暗褐色混合物は、激しく攪拌しながら飽和ＮａＨＣＯ３溶液に滴下された。３０分後、混合物はＤＣＭで抽出され、有機層は、ＮａＨＣＯ３溶液で３回、飽和ＬｉＣｌ溶液で３回、最後に塩溶液で、洗浄された。無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた後、溶媒は減圧下で除去され、結果得られた混合油は真空中で乾燥された。油状混合物は次に、酢酸エチルおよびヘキサン混合物を溶離液とするグラジエントカラムクロマトグラフィーにより、精製された。この化合物は、酢酸エチルおよびヘキサンの混合物で溶離され、溶媒を蒸発させると中間生成物（１ａ～１ｍ）が明るい黄色の固体として得られた。
【0106】
［一般的手順２：Ｃ－置換誘導体２ａ～２ｍの合成］
これは、ニトロ基のアミノ基への還元に関連する。
これは、ニトロ基のアミノ基への還元に関連する。
【0107】
ニトロ誘導体（０．００１Ｍ；一般的手順１から調製）が、無水エタノール（５０ｍｌ）に溶解され、そこに１０％パラジウム炭素（０．０００１２Ｍ、０．１２当量）が加えられた。混合物は、Ｐａｒｒリアクターを使用して５０ｐｓｉの水素ガス下で、２時間振とうされた。反応混合物は、セライトパッドを使用して２回濾過され、エタノール性濾過液は蒸発させて、最終生成物（２ａ～２ｍ）を固体として得た。
【0108】
［実施例１：Ｎ１の合成］
［化合物１ａの合成］
化合物１ａは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモ－１，１－ジメトキシエタンを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２，２－ジメトキシエトキシ）－４－ニトロアニリン（１ａ）：収量：２．０ｇ（８６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．１０（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２５（ｓ，２Ｈ），４．６８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３２（ｓ，６Ｈ）。
［化合物１ａの合成］
化合物１ａは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモ－１，１－ジメトキシエタンを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２，２－ジメトキシエトキシ）－４－ニトロアニリン（１ａ）：収量：２．０ｇ（８６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．１０（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２５（ｓ，２Ｈ），４．６８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３２（ｓ，６Ｈ）。
【0109】
［化合物２ａ（Ｎ１）の合成］
化合物２ａは、化合物１ａから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ａ）：収量：０．９８ｇ（９８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．０５（ｓ，２Ｈ），７．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），４．５６（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３７（ｓ，６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．１，１４３．３，１３５．６，１１９．９，１１１．２，１０７．６，１０１．７，６８．４，５３．８。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１０Ｈ１６Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：２１３．１１５５，実測値：２１３．１１６５，質量誤差（ｐｐｍ）：４．６。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．２４９％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２１．６８８分。
化合物２ａは、化合物１ａから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－（２，２－ジメトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ａ）：収量：０．９８ｇ（９８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．０５（ｓ，２Ｈ），７．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），４．５６（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３７（ｓ，６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．１，１４３．３，１３５．６，１１９．９，１１１．２，１０７．６，１０１．７，６８．４，５３．８。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１０Ｈ１６Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：２１３．１１５５，実測値：２１３．１１６５，質量誤差（ｐｐｍ）：４．６。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．２４９％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２１．６８８分。
【0110】
［実施例２：Ｎ２の合成］
［化合物１ｂの合成］
化合物１ｂは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてブロモメチルメチルエーテルを使用して、黄色の固体として調製された。２－（メトキシメトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｂ）： 収量：２．３ｇ（６６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０８（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ）。
［化合物１ｂの合成］
化合物１ｂは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてブロモメチルメチルエーテルを使用して、黄色の固体として調製された。２－（メトキシメトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｂ）： 収量：２．３ｇ（６６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０８（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ）。
【0111】
［化合物２ｂ（Ｎ２）の合成］
化合物２ｂは、化合物１ｂから一般的手順２に従い、黒色の固体として調製された。２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｂ）：収量：０．９２ｇ（９２．０％）。
化合物２ｂは、化合物１ｂから一般的手順２に従い、黒色の固体として調製された。２－（メトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｂ）：収量：０．９２ｇ（９２．０％）。
【0112】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．２９（ｓ，２Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４７（ｓ，２Ｈ），４．６９（ｂｒ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４３．７，１４２．９，１３８．６，１１９．９，１１２．３，１１０．０，９３．８，５９．６。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ８Ｈ１２Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１６９．０８５９，実測値：１６９．０８５８，質量誤差（ｐｐｍ）：０．５。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．５００％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝１６．００２分。
【0113】
［実施例３：Ｎ３の合成］
［化合物１ｃの合成］
化合物１ｃは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてクロロメチルエチルエーテルを使用して、黄褐色の固体として調製された。２－（エトキシメトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｃ）：収量：２．４ｇ（７６．０％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｓ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），３．８５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．３２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。
［化合物１ｃの合成］
化合物１ｃは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてクロロメチルエチルエーテルを使用して、黄褐色の固体として調製された。２－（エトキシメトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｃ）：収量：２．４ｇ（７６．０％）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｓ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），３．８５（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．３２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。
【0114】
［化合物２ｃ（Ｎ３）の合成］
化合物２ｃは、化合物１ｃから一般的手順２に従い、黒色の固体として調製された。２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｃ）：収量：０．９４ｇ（９４．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ７．９２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３１（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ１４３．９，１４３．１，１３８．７，１２０．１，１１２．５，１１０．２，９３．９，６５．０，１５．２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８３．１４９２，実測値：１８３．１４９４，質量誤差（ｐｐｍ）：－１．２。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．１７２％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２７．６５９分。
化合物２ｃは、化合物１ｃから一般的手順２に従い、黒色の固体として調製された。２－（エトキシメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｃ）：収量：０．９４ｇ（９４．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ７．９２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３１（ｓ，２Ｈ），３．７４（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３） δ１４３．９，１４３．１，１３８．７，１２０．１，１１２．５，１１０．２，９３．９，６５．０，１５．２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８３．１４９２，実測値：１８３．１４９４，質量誤差（ｐｐｍ）：－１．２。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．１７２％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２７．６５９分。
【0115】
［実施例４：Ｎ４の合成］
［化合物１ｄの合成］
化合物１ｄは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２，３－エポキシプロパンを使用して、黄色の固体として調製された。４－ニトロ－２－（オキシラン－２－イルメトキシ）アニリン（１ｄ）：収量：３．２ｇ（６８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０５（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４７（ｓ，２Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０～４．１（ｍ，１Ｈ），３．８３～３．９２（ｍ，１Ｈ），３．４８～３．５０（ｍ，１Ｈ），４．１３～４．１８（ｍ，１Ｈ），３．９９～４．０５（ｍ，２Ｈ），３．４９～３．５５（ｍ，２Ｈ）。
［化合物１ｄの合成］
化合物１ｄは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２，３－エポキシプロパンを使用して、黄色の固体として調製された。４－ニトロ－２－（オキシラン－２－イルメトキシ）アニリン（１ｄ）：収量：３．２ｇ（６８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０５（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４７（ｓ，２Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０～４．１（ｍ，１Ｈ），３．８３～３．９２（ｍ，１Ｈ），３．４８～３．５０（ｍ，１Ｈ），４．１３～４．１８（ｍ，１Ｈ），３．９９～４．０５（ｍ，２Ｈ），３．４９～３．５５（ｍ，２Ｈ）。
【0116】
［化合物２ｄ（Ｎ４）の合成］
化合物２ｄは、化合物１ｄから一般的手順２に従い、ベージュ色の固体として調製された。２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｄ）：収量：０．９６ｇ（９６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．３５（ｓ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｓ，２Ｈ），４．０８～４．１２（ｍ，１Ｈ），３．８３～３．９２（ｍ，２Ｈ），３．４７～３．５１（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．３，１４０．０，１２７．９，１１５．８，１０７．６，１０１．９，６７．９，６２．０，５３．８。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１２Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８１．０８８６，実測値：１８１．０８８０，質量誤差（ｐｐｍ）：－３．３。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９７．２％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２２．４６７分。
化合物２ｄは、化合物１ｄから一般的手順２に従い、ベージュ色の固体として調製された。２－（オキシラン－２－イルメトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｄ）：収量：０．９６ｇ（９６．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．３５（ｓ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｓ，２Ｈ），４．０８～４．１２（ｍ，１Ｈ），３．８３～３．９２（ｍ，２Ｈ），３．４７～３．５１（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．３，１４０．０，１２７．９，１１５．８，１０７．６，１０１．９，６７．９，６２．０，５３．８。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１２Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８１．０８８６，実測値：１８１．０８８０，質量誤差（ｐｐｍ）：－３．３。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９７．２％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２２．４６７分。
【0117】
［実施例５：Ｎ５の合成］
［化合物１ｅの合成］
化合物１ｅは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－（２－メトキシエトキシ）エタンを使用して、黄褐色の固体として調製された。２－（２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｅ）：収量：０．７８ｇ（７８．２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．９４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７８（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．４６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ）。
［化合物１ｅの合成］
化合物１ｅは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－（２－メトキシエトキシ）エタンを使用して、黄褐色の固体として調製された。２－（２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｅ）：収量：０．７８ｇ（７８．２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．９４（ｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７８（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．４６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ）。
【0118】
［化合物２ｅ（Ｎ５）の合成］
化合物２ｅは、化合物１ｅから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｅ）：収量：０．９２ｇ（９２．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ） δ７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝４Ｈｚ，２Ｈ），３．９６（ｔ，Ｊ＝４Ｈｚ，２Ｈ），３．７５～３．７７（ｍ，２Ｈ），３．６３～３．６５（ｍ，２Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ） δ１５２．３，１３２．３，１２５．１，１１９．７，１１５．５，１０８．０，７０．９，６９．５，６８．６，６８．２，５８．０。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１１Ｈ１８Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：２２７．１３９０，実測値：２２７．１３９２，質量誤差（ｐｐｍ）：－０．８。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．０６３％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２４．７２５分。
化合物２ｅは、化合物１ｅから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｅ）：収量：０．９２ｇ（９２．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ） δ７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝４Ｈｚ，２Ｈ），３．９６（ｔ，Ｊ＝４Ｈｚ，２Ｈ），３．７５～３．７７（ｍ，２Ｈ），３．６３～３．６５（ｍ，２Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ） δ１５２．３，１３２．３，１２５．１，１１９．７，１１５．５，１０８．０，７０．９，６９．５，６８．６，６８．２，５８．０。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１１Ｈ１８Ｎ２Ｏ３［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：２２７．１３９０，実測値：２２７．１３９２，質量誤差（ｐｐｍ）：－０．８。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９９．０６３％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２４．７２５分。
【0119】
［実施例６：Ｎ６の合成］
［化合物１ｆの合成］
化合物１ｆは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてブロモアセトニトリルを使用して、橙色の固体として調製された。２－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）アセトニトリル（１ｆ）：収量：０．５２ｇ（５２．６％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．９０（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ）。
［化合物１ｆの合成］
化合物１ｆは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとしてブロモアセトニトリルを使用して、橙色の固体として調製された。２－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）アセトニトリル（１ｆ）：収量：０．５２ｇ（５２．６％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．９０（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），４．７１（ｓ，２Ｈ）。
【0120】
［化合物２ｆ（Ｎ６）の合成］
化合物２ｆは、化合物１ｆから一般的手順２に従い、紫色の結晶性固体として調製された。２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル（２ｆ）：収量：０．９４ｇ（９４．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．２７（ｓ，２Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１５～６．１９（ｍ，２Ｈ），４．８７（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１６４．９，１４３．９，１２７．４，１２７．０，１１７．５，１１６．８，１１１．８，６７．１。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ８Ｈ９Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１６４．０５８０，実測値：１６４．０５７９，質量誤差（ｐｐｍ）：０．９。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９８．９８８％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝１３．８４３分。
化合物２ｆは、化合物１ｆから一般的手順２に従い、紫色の結晶性固体として調製された。２－（２，５－ジアミノフェノキシ）アセトニトリル（２ｆ）：収量：０．９４ｇ（９４．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．２７（ｓ，２Ｈ），６．５７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１５～６．１９（ｍ，２Ｈ），４．８７（ｓ，２Ｈ），４．４１（ｓ，２Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１６４．９，１４３．９，１２７．４，１２７．０，１１７．５，１１６．８，１１１．８，６７．１。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ８Ｈ９Ｎ３Ｏ［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１６４．０５８０，実測値：１６４．０５７９，質量誤差（ｐｐｍ）：０．９。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９８．９８８％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝１３．８４３分。
【0121】
［実施例７：Ｎ７の合成］
［化合物１ｇの合成］
化合物１ｇは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－メトキシエタンを使用して、黄色の固体として調製された。２－（２－メトキシエトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｇ）：収量：０．８８ｇ（８８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３８（ｓ，２Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ）。
［化合物１ｇの合成］
化合物１ｇは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－メトキシエタンを使用して、黄色の固体として調製された。２－（２－メトキシエトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｇ）：収量：０．８８ｇ（８８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ８．０（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３８（ｓ，２Ｈ），４．３５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ）。
【0122】
［化合物２ｇ（Ｎ７）の合成］
化合物２ｇは、化合物１ｇから一般的手順２に従い、ベージュ色の固体として調製された。２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｇ）：収量：０．９８ｇ（９８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．１（ｓ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｓ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．２，１４３．６，１３５．６，１１９．８，１１１．１，１０７．１，７０．２，６８．１，５８．２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８３．１１２８，実測値：１８３．１１２７，質量誤差（ｐｐｍ）：０．８。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９８．３４８％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２７．１０２分。
化合物２ｇは、化合物１ｇから一般的手順２に従い、ベージュ色の固体として調製された。２－（２－メトキシエトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン（２ｇ）：収量：０．９８ｇ（９８．０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１０．１（ｓ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｓ，２Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．２，１４３．６，１３５．６，１１９．８，１１１．１，１０７．１，７０．２，６８．１，５８．２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１８３．１１２８，実測値：１８３．１１２７，質量誤差（ｐｐｍ）：０．８。ＨＰＬＣ純度（２５４ｎｍ）；９８．３４８％、溶離液：９０％ＡＣＮ／ＮＨ４ＯＡｃ、ｔＲ＝２７．１０２分。
【0123】
［化合物１ｈの合成］
化合物１ｈは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－（ブロモメトキシ）メタノールを使用して、黄橙色の固体として調製された。（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）メトキシ）メタノール（１ｈ）：収量：０．８ｇ（８４％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｓ，２Ｈ），５．６５（ｓ，２Ｈ）。
化合物１ｈは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－（ブロモメトキシ）メタノールを使用して、黄橙色の固体として調製された。（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）メトキシ）メタノール（１ｈ）：収量：０．８ｇ（８４％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ），５．９８（ｓ，２Ｈ），５．６５（ｓ，２Ｈ）。
【0124】
［化合物２ｈ（Ｎ８）の合成］
化合物２ｈは、化合物１ｈから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。（（２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール，（２ｈ）：収量：０．７５ｇ（７５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．９０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｓ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），４．７２（ｂｒ，４Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４８．０，１４１．０，１２７．０，１１７．５，１０９．０，９８．８，８８．２，８７．５。
化合物２ｈは、化合物１ｈから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。（（２，５－ジアミノフェノキシ）メトキシ）メタノール，（２ｈ）：収量：０．７５ｇ（７５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．９０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｓ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），４．７２（ｂｒ，４Ｈ），４．０８（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４８．０，１４１．０，１２７．０，１１７．５，１０９．０，９８．８，８８．２，８７．５。
【0125】
［化合物１ｉの合成］
化合物１ｉは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモエタノールを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）エタン－１－オール（１ｉ）：収量：１．２ｇ（７８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）。
化合物１ｉは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモエタノールを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）エタン－１－オール（１ｉ）：収量：１．２ｇ（７８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）。
【0126】
［化合物２ｉ（Ｎ９）の合成］
化合物２ｉは、化合物１ｉから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール，（２ｉ）：収量：０．８２ｇ（８２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．７０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，２Ｈ），４．７０（ｂｒ，４Ｈ），４．３３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．０，１４１．５，１２８．２，１１８．５，１０９．２，１００．８，９０．０，６１．２。
化合物２ｉは、化合物１ｉから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。２－（２，５－ジアミノフェノキシ）エタン－１－オール，（２ｉ）：収量：０．８２ｇ（８２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．７０（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，２Ｈ），４．７０（ｂｒ，４Ｈ），４．３３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．０，１４１．５，１２８．２，１１８．５，１０９．２，１００．８，９０．０，６１．２。
【0127】
［化合物１ｊの合成］
化合物１ｊは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモプロパン－２－オールを使用して、橙色の固体として調製された。１－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）プロパン－２－オール（１ｊ）：収量：１．４ｇ（８０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４２（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），４．１６～４．１９（ｍ，１Ｈ），３．９０～３．９４（ｍ，２Ｈ），１．０６～１．０９（ｍ，３Ｈ）。
化合物１ｊは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモプロパン－２－オールを使用して、橙色の固体として調製された。１－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）プロパン－２－オール（１ｊ）：収量：１．４ｇ（８０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４２（ｓ，２Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），４．１６～４．１９（ｍ，１Ｈ），３．９０～３．９４（ｍ，２Ｈ），１．０６～１．０９（ｍ，３Ｈ）。
【0128】
［化合物２ｊ（Ｎ１０）の合成］
化合物２ｊは、化合物１ｊから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール，（２ｊ）：収量：０．６５ｇ（６５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２５（ｓ，１Ｈ），４．８０（ｂｒ，４Ｈ），４．１７～４．２０（ｍ，１Ｈ），３．９０～３．９４（ｍ，２Ｈ），１．０６～１．０９（ｍ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．０，１４１．４，１２８．０，１１８．０，１０９．２，１００．７，７７．０，６６．５，１９．５。
化合物２ｊは、化合物１ｊから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。１－（２，５－ジアミノフェノキシ）プロパン－２－オール，（２ｊ）：収量：０．６５ｇ（６５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．７２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２５（ｓ，１Ｈ），４．８０（ｂｒ，４Ｈ），４．１７～４．２０（ｍ，１Ｈ），３．９０～３．９４（ｍ，２Ｈ），１．０６～１．０９（ｍ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１４６．０，１４１．４，１２８．０，１１８．０，１０９．２，１００．７，７７．０，６６．５，１９．５。
【0129】
［化合物１ｋの合成］
化合物１ｋは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－ブタノンを使用して、黄色の固体として調製された。１－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）ブタン－２－オン（１ｋ）：収量：０．９ｇ（９３％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），２．５８（ｑ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），１．１２（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
化合物１ｋは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして１－ブロモ－２－ブタノンを使用して、黄色の固体として調製された。１－（２－アミノ－５－ニトロフェノキシ）ブタン－２－オン（１ｋ）：収量：０．９ｇ（９３％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．３６（ｓ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），２．５８（ｑ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），１．１２（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【0130】
［化合物２ｋ（Ｎ１１）の合成］
化合物２ｋは、化合物１ｋから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン，（２ｋ）：収量：０．５８ｇ（５８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．９２（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），５．０２（ｓ，２Ｈ），２．３６（ｑ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） ２０７．０，１４８．０，１４１．０，１２８．０，１１８．５，１０９．７，１００．４，８０．０，３２．０，８．２。
化合物２ｋは、化合物１ｋから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。１－（２，５－ジアミノフェノキシ）ブタン－２－オン，（２ｋ）：収量：０．５８ｇ（５８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．４０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．９２（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），５．０２（ｓ，２Ｈ），２．３６（ｑ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） ２０７．０，１４８．０，１４１．０，１２８．０，１１８．５，１０９．７，１００．４，８０．０，３２．０，８．２。
【0131】
［化合物１ｌの合成］
化合物１ｌは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモプロペンを使用して、黄褐色の固体として調製された。４－ニトロ－２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）アニリン（１ｌ）：収量：１．５ｇ（８８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｓ，１Ｈ），４．４８（ｓ，１Ｈ），１．９２～１．９６（ｍ，３Ｈ）。
化合物１ｌは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモプロペンを使用して、黄褐色の固体として調製された。４－ニトロ－２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）アニリン（１ｌ）：収量：１．５ｇ（８８％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｓ，１Ｈ），４．４８（ｓ，１Ｈ），１．９２～１．９６（ｍ，３Ｈ）。
【0132】
［化合物２ｌ（Ｎ１２）の合成］
化合物２ｌは、化合物１ｌから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン，（２ｌ）：収量：０．５７ｇ（５７％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．２８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｂｒ，４Ｈ），４．５０（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，１Ｈ），１．９０～１．９３（ｍ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） １５８．５，１４３．０，１４１．２，１２９．５，１１７．５，１１１．０，１０３．０，９０．５，２１．５。
化合物２ｌは、化合物１ｌから一般的手順２に従い、茶色の固体として調製された。２－（プロパ－１－エン－２－イルオキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン，（２ｌ）：収量：０．５７ｇ（５７％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．２８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７６（ｂｒ，４Ｈ），４．５０（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，１Ｈ），１．９０～１．９３（ｍ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） １５８．５，１４３．０，１４１．２，１２９．５，１１７．５，１１１．０，１０３．０，９０．５，２１．５。
【0133】
［化合物１ｍの合成］
化合物１ｍは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモ－Ｎ－メチルエタンアミンを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｍ）：収量：１．１ｇ（８５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｓ，２Ｈ），５．５８（ｓ，１Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
化合物１ｍは、一般的手順１に従い、臭化アルキルとして２－ブロモ－Ｎ－メチルエタンアミンを使用して、黄橙色の固体として調製された。２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）－４－ニトロアニリン（１ｍ）：収量：１．１ｇ（８５％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ７．８４（ｄｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｓ，２Ｈ），５．５８（ｓ，１Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
【0134】
［化合物２ｍ（Ｎ１３）の合成］
化合物２ｍは、化合物１ｍから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン，（２ｍ）：収量：０．６１ｇ（６１％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．６５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｂｒ，４Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） １４５．５，１４０．３，１２７．２，１１７．４，１０８．５，１００．０，６８．５，５１．５，３６．０。
化合物２ｍは、化合物１ｍから一般的手順２に従い、暗褐色の固体として調製された。２－（２－（メチルアミノ）エトキシ）ベンゼン－１，４－ジアミン，（２ｍ）：収量：０．６１ｇ（６１％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ６．６５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｂｒ，４Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） １４５．５，１４０．３，１２７．２，１１７．４，１０８．５，１００．０，６８．５，５１．５，３６．０。
【0135】
［実施例８：染毛剤の溶解度決定およびＰＰＤ化合物との比較］
合成された化合物の溶解度プロファイルは、ＷＯ２０１９／０９８９４８に記載されているように、従前の化学物質ライブラリと比較された。
合成された化合物の溶解度プロファイルは、ＷＯ２０１９／０９８９４８に記載されているように、従前の化学物質ライブラリと比較された。
【0136】
［熱力学的溶解度アッセイ］
これらの化合物の水への溶解度（ｐＨ＝７）は、修正フラスコ振とう法およびＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、測定された。各染毛剤は、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水（１ｍＬ）を入れた２ｍＬガラスバイアルに加えられ、２５℃で沈殿物を形成した。続いて混合物は、溶解度平衡の段階にかけられた。バイアルは、３００ｒｐｍ、２５℃で２４時間振とうされた。沈殿物は、２３０００ｇ、２０分間の遠心分離により、分離された。その後、上澄み０．５ｍＬが１ｍＬエッペンドルフチューブ内に移され、上述のように再度遠心分離された。上澄みはその後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析に使用された。Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ超高圧液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）バイナリポンプ、オートサンプラ、真空デガッサ、およびカラムオーブン（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．、サンタクララ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ）、カリフォルニア州、米国）およびＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μＭ，２．１×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ、ミルフォード（Ｍｉｌｄｏｒｄ）、マサチューセッツ州、米国）が、クロマトグラフィー分離に使用された。
これらの化合物の水への溶解度（ｐＨ＝７）は、修正フラスコ振とう法およびＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、測定された。各染毛剤は、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水（１ｍＬ）を入れた２ｍＬガラスバイアルに加えられ、２５℃で沈殿物を形成した。続いて混合物は、溶解度平衡の段階にかけられた。バイアルは、３００ｒｐｍ、２５℃で２４時間振とうされた。沈殿物は、２３０００ｇ、２０分間の遠心分離により、分離された。その後、上澄み０．５ｍＬが１ｍＬエッペンドルフチューブ内に移され、上述のように再度遠心分離された。上澄みはその後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析に使用された。Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ超高圧液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）バイナリポンプ、オートサンプラ、真空デガッサ、およびカラムオーブン（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．、サンタクララ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ）、カリフォルニア州、米国）およびＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μＭ，２．１×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ、ミルフォード（Ｍｉｌｄｏｒｄ）、マサチューセッツ州、米国）が、クロマトグラフィー分離に使用された。
【0137】
質量分析は、ＡＢ Ｓｃｉｅｘ Ｔｕｒｂｏ Ｉｏｎ Ｓｐｒａｙインターフェースを装備したトリプル四重極ポジティブモード（ＥＳＩ＋）で動作する、ＡＢ ＳＣＩＥＸ ＱＴＲＡＰ ５５００タンデム質量分析（ＭＳ／ＭＳ）システム（ＡＢ ＳＣＩＥＸ、フレイミングハム（Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ）、マサチューセッツ州、米国）を使用して、行われた。データの取得および分析は、Ａｎａｌｙｓｔソフトウェアｖｅｒ．１．４．２（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて行われ、すべてのクロマトグラフィーのピーク積分を行った。各染毛剤について、４つの濃度からなる標準曲線が定められた。
【0138】
溶媒Ａは、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水中の０．１％［ｖ／ｖ］ギ酸からなるものであり、一方溶媒Ｂは、アセトニトリル中の０．１％［ｖ／ｖ］ギ酸からなるものであった。０．６ｍＬ／分でポンプされる移動相グラジエントが、カラムから染毛剤を溶離するために使用された。溶離に使用されたＨＰＬＣグラジエントプロファイルプログラムが、表２に示される。カラムは１分間平衡化され、その結果、総実行時間は５分間であった。注入体積は、すべての誘導体で５．０μＬであった。針への化合物の蓄積を防ぐために、ＡＣＮ中５０％メタノールが、針洗浄として１試料あたり３０秒間使用された。
【0139】
【0140】
［結果］
合成された化合物Ｎ１～Ｎ１３は、従前の一連の化学物質ＰＰＤ１～ＰＰＤ１６との比較として、模範的な溶解度プロファイルを示した。一連のＰＰＤのうち、水溶性を示す化学物質はなかった（表４）。対照的に、Ｎ１～Ｎ１３は、３２～１００ｍｇ／ｍｌの、ＰＰＤよりも高い溶解度プロファイルを示した（表３）。全体として、新規の化合物Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤと比較して１．５～２．５倍高い溶解度を示し、一連の親水性を確認した。化合物Ｎ１、Ｎ２、Ｎ５、Ｎ６、Ｎ８、Ｎ１０は、ＰＰＤの４％（４０ｍｇ／ｍＬ）と比較して、８．５～１０％（７８～１００ｍｇ／ｍＬ）の溶解度を示した。化合物Ｎ３、Ｎ４、Ｎ７およびＮ９は、約６．５％～７．２％（６５～７２ｍｇ／ｍＬ）の溶解度を示した。対照的に、化合物Ｎ１２およびＮ１３は、ＰＰＤよりも低い溶解度プロファイルを示したが、これは理論に縛られることなく、化学物質の疎水性によるものと考えられる。
合成された化合物Ｎ１～Ｎ１３は、従前の一連の化学物質ＰＰＤ１～ＰＰＤ１６との比較として、模範的な溶解度プロファイルを示した。一連のＰＰＤのうち、水溶性を示す化学物質はなかった（表４）。対照的に、Ｎ１～Ｎ１３は、３２～１００ｍｇ／ｍｌの、ＰＰＤよりも高い溶解度プロファイルを示した（表３）。全体として、新規の化合物Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤと比較して１．５～２．５倍高い溶解度を示し、一連の親水性を確認した。化合物Ｎ１、Ｎ２、Ｎ５、Ｎ６、Ｎ８、Ｎ１０は、ＰＰＤの４％（４０ｍｇ／ｍＬ）と比較して、８．５～１０％（７８～１００ｍｇ／ｍＬ）の溶解度を示した。化合物Ｎ３、Ｎ４、Ｎ７およびＮ９は、約６．５％～７．２％（６５～７２ｍｇ／ｍＬ）の溶解度を示した。対照的に、化合物Ｎ１２およびＮ１３は、ＰＰＤよりも低い溶解度プロファイルを示したが、これは理論に縛られることなく、化学物質の疎水性によるものと考えられる。
【0141】
【0142】
すべての値は、３回の別々の測定から得られた。
【0143】
【0144】
【0145】
【0146】
［実施例９：ＨａＣａＴ細胞でのＭＴＴアッセイ］
［方法］
ＨａＣａＴ（ヒト、成人、低カルシウム、高温、皮膚ケラチノサイト）細胞懸濁液が、１ウェルあたり５×１０３細胞に調整され、９６ウェルプレートに播種された後、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートされた。２４時間後、オートクレーブされたＭｉｌｌｉ－Ｑ水中にＮ１～Ｎ１３の１０ｍＭ原液が調製され、連続的に希釈された濃度がウェルに加えられた。各濃度は６回反復で行われ、培地のみで化合物を含まない播種ウェルは対照として使用され、一方培地のみのウェルはブランクとして使用された。プレートは７２時間インキュベートされ、その後１００μＬのＭＴＴ試薬が加えられ、１００μＬのＤＭＳＯが加えられる前に、プレートはさらに３時間インキュベートされた。続いて、プレートは２０分間振とうされ、その後Ｂｉｏ－Ｔｅｋプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍの吸光度が決定された。
［方法］
ＨａＣａＴ（ヒト、成人、低カルシウム、高温、皮膚ケラチノサイト）細胞懸濁液が、１ウェルあたり５×１０３細胞に調整され、９６ウェルプレートに播種された後、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートされた。２４時間後、オートクレーブされたＭｉｌｌｉ－Ｑ水中にＮ１～Ｎ１３の１０ｍＭ原液が調製され、連続的に希釈された濃度がウェルに加えられた。各濃度は６回反復で行われ、培地のみで化合物を含まない播種ウェルは対照として使用され、一方培地のみのウェルはブランクとして使用された。プレートは７２時間インキュベートされ、その後１００μＬのＭＴＴ試薬が加えられ、１００μＬのＤＭＳＯが加えられる前に、プレートはさらに３時間インキュベートされた。続いて、プレートは２０分間振とうされ、その後Ｂｉｏ－Ｔｅｋプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍの吸光度が決定された。
【0147】
［結果］
エラー！参照元が見つかりません。Ａおよび１Ｂは、様々な濃度のＮ１～Ｎ１３に暴露された後の、ＨａＣａＴ細胞の細胞生存率を示す。表５は、Ｎ１～Ｎ１３の細胞毒性プロファイルの、公表データＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよびＰＴＤとの比較である（J Hazard Mat., 2021, 402, 123712）。シンバスタチンは、ＨａＣａＴ細胞に対する細胞毒性効果がよく報告されているため、陽性対照として選択された。その結果、ＰＰＤのオルト位に置換して電子供与性の－Ｏ－Ｒ’基を導入することで、化合物の細胞毒性を改善しうることがわかった。すべての誘導体Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤ（ＩＣ５０＝２３．４５μＭ）より高いＩＣ５０値を示し、より良い細胞毒性プロファイルを示した。
エラー！参照元が見つかりません。Ａおよび１Ｂは、様々な濃度のＮ１～Ｎ１３に暴露された後の、ＨａＣａＴ細胞の細胞生存率を示す。表５は、Ｎ１～Ｎ１３の細胞毒性プロファイルの、公表データＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよびＰＴＤとの比較である（J Hazard Mat., 2021, 402, 123712）。シンバスタチンは、ＨａＣａＴ細胞に対する細胞毒性効果がよく報告されているため、陽性対照として選択された。その結果、ＰＰＤのオルト位に置換して電子供与性の－Ｏ－Ｒ’基を導入することで、化合物の細胞毒性を改善しうることがわかった。すべての誘導体Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤ（ＩＣ５０＝２３．４５μＭ）より高いＩＣ５０値を示し、より良い細胞毒性プロファイルを示した。
【0148】
【0149】
［実施例１０：ペプチド結合性試験（Ｄｉｒｅｃｔ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ Ａｓｓａｙ）］
［ＤＰＲＡインキュベーション］
アッセイは、化合物原液を調製するために使用されたそれぞれの溶媒を対照として、Ｎ１～Ｎ１３について３回反復で行われた。化合物の不足のため、ＯＥＣＤにより推奨される１００ｍＭの代わりに、２０ｍＭの原液濃度が調製された。インキュベーション混合物の様々な成分は、結果の変動を引き起こしうる安定性の問題を防ぐために、新鮮に調製された。システインヘプタペプチドでは１：１０の、リジンヘプタペプチドでは１：５０の試験化合物比の（OECD. Test No. 442C: In Chemico Skin Sensitisation 2020）、推奨ペプチドとのインキュベーション混合物が調製され、その後２５℃で２４時間、振とうインキュベータでインキュベートされた（Toxicol Sci. 2012;129(2):421-31）。
［ＤＰＲＡインキュベーション］
アッセイは、化合物原液を調製するために使用されたそれぞれの溶媒を対照として、Ｎ１～Ｎ１３について３回反復で行われた。化合物の不足のため、ＯＥＣＤにより推奨される１００ｍＭの代わりに、２０ｍＭの原液濃度が調製された。インキュベーション混合物の様々な成分は、結果の変動を引き起こしうる安定性の問題を防ぐために、新鮮に調製された。システインヘプタペプチドでは１：１０の、リジンヘプタペプチドでは１：５０の試験化合物比の（OECD. Test No. 442C: In Chemico Skin Sensitisation 2020）、推奨ペプチドとのインキュベーション混合物が調製され、その後２５℃で２４時間、振とうインキュベータでインキュベートされた（Toxicol Sci. 2012;129(2):421-31）。
【0150】
２４時間後、２００μＭのロイシンエンケファリン（内部標準物質）を含む７５μＬの９５％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏで、インキュベーション混合物がクエンチされた。システインＤＰＲＡでは、１００μＬのクエンチ混合物が、９０μＬの２％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏおよび新鮮に調製された１０μＬの０．０１６ｍＭ １，４－ジチオトレイトール（ＤＴＴ）溶液に、加えられた。ＤＴＴは、チオール基の二量体化および二付加物から一付加物への分解を防ぐことにより、チオール基の完全性を維持する。この第２の混合物は、その後４０℃で３０分間、振とうインキュベータでインキュベートされた。リジンＤＰＲＡでは、１０μＬのクエンチ混合物が、１９０μＬの２％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏに加えられた。２００μＬの混合物はすべて、９６ウェルプレートに移され、液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）での分析に送られた。
【0151】
［結果］
Ｎ１～Ｎ１３のＤＰＲＡの結果はすべて、ＰＰＤと比較して、より低い平均ペプチド減少率（すなわちより低い感作性）を示した。Ｎ１～Ｎ４、Ｎ６およびＮ８～Ｎ１０は、弱い感作性を示し、平均ペプチド減少値は最も低かった（それぞれ１７．２±２．３％～２２．５±１．９％）。Ｎ５、Ｎ７およびＮ１１～Ｎ１３は、市販のＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよびＰＴＤと比較して、中程度の感作性を示した。
Ｎ１～Ｎ１３のＤＰＲＡの結果はすべて、ＰＰＤと比較して、より低い平均ペプチド減少率（すなわちより低い感作性）を示した。Ｎ１～Ｎ４、Ｎ６およびＮ８～Ｎ１０は、弱い感作性を示し、平均ペプチド減少値は最も低かった（それぞれ１７．２±２．３％～２２．５±１．９％）。Ｎ５、Ｎ７およびＮ１１～Ｎ１３は、市販のＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよびＰＴＤと比較して、中程度の感作性を示した。
【0152】
より長鎖かつより多いジエーテル置換基を有する（例えばＮ５）および高い親電子性のアルケンハンドルを有する（例えばＮ１２）Ｒ基は、求核ペプチドに対してより高い反応性を示し、従ってオルト位のＲ’置換基としてはより好ましくない基であることが観察されうる。置換アルケニル側鎖を有するＮ１２が、最も高い反応性を示した（４３．７±４．０％）。対照的に、ＣＮで置換されたＮ６は、最も低い減少を示し、エポキシド基を有するＮ４は、Ｎ６よりもわずかに高いペプチド反応性を有した。構造的に類似し同じ分子量の２つの化合物Ｎ３およびＮ７は、互いに異なるプロファイルを示した。側鎖にヒドロキシル基を有するＮ８～Ｎ１０は、１９．５±３．６％～２２．５±３．８％と、一貫してより低い減少率を示した。対照的に、ケトン側鎖を有するＮ１１およびエチルアミン側鎖を有するＮ１３は、ペプチド減少を改善せず、中程度の感作物質のままであった。中程度の感作性（３０．４±２．９％）を示したＮ７と比較して、Ｎ３は約１７％の感作性で、最も優れた分子のひとつとなった。これらの活性の違いの理由のひとつは、Ｏ－エチル鎖の存在によるかもしれない。同様の観察が、同じくＯ－エチルで置換され、さらに別のエーテル性Ｏ－エチル鎖で伸長された、最も低い効果の化合物Ｎ５でも見られる。このことは、おそらくＯ－メチル鎖化合物（Ｎ１～Ｎ４およびＮ６）よりも高い疎水性のため、これらのＯ－エチル結合が有害でありうることを示唆する。結果はまた、側鎖でのヒドロキシル基の存在が、活性に有利であることを示唆する。にもかかわらず、当業者であれば、化合物Ｎ１～Ｎ１３のすべてが、既存の化合物よりも低下した感作性を示し、Ｎ１～Ｎ１３のすべてが、ＰＰＤ、ＭＥＰＰＤおよびＰＴＤに対して有利であることを理解するであろう。
【0153】
［実施例１１：皮膚浸透試験］
［フランツ型拡散セル（Ｆｒａｎｚ Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ Ｃｅｌｌ）法］
皮膚浸透試験は、従来報告された通りに行われた（New Journal of Chemistry. 2019;43(41):16188-99；Journal of Hazardous Materials. 2021;402）。各フランツセルに、厚さ～１ｍｍに調製されたブタ耳皮膚片が、しっかりとクランプされた。５ｍＬのＰＢＳ溶液が、レシーバー区画に加えられ、皮膚片と溶液との接触が最大になるように、気泡がパージされた。Ｎ１～Ｎ１３を脱イオン水に１％ｗ／ｖで溶解することにより、ドナー溶液が調製され、９００μＬがドナー区画に加えられた。試験は８時間行われ、最初の１時間は１５分間隔の各時点で、それ以降は１時間ごとに、２００μＬのアリコートがレシーバー溶液から取り出され、新しいＰＢＳがいっぱいまで補充された。
［フランツ型拡散セル（Ｆｒａｎｚ Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ Ｃｅｌｌ）法］
皮膚浸透試験は、従来報告された通りに行われた（New Journal of Chemistry. 2019;43(41):16188-99；Journal of Hazardous Materials. 2021;402）。各フランツセルに、厚さ～１ｍｍに調製されたブタ耳皮膚片が、しっかりとクランプされた。５ｍＬのＰＢＳ溶液が、レシーバー区画に加えられ、皮膚片と溶液との接触が最大になるように、気泡がパージされた。Ｎ１～Ｎ１３を脱イオン水に１％ｗ／ｖで溶解することにより、ドナー溶液が調製され、９００μＬがドナー区画に加えられた。試験は８時間行われ、最初の１時間は１５分間隔の各時点で、それ以降は１時間ごとに、２００μＬのアリコートがレシーバー溶液から取り出され、新しいＰＢＳがいっぱいまで補充された。
【0154】
マスバランスのため、８時間後に皮膚片および皮膚の上下面のスワブが採取され、Ｎ１～Ｎ１３抽出のためにＡＣＮ中に保存された。ドナー溶液およびレシーバー溶液もまた、採取された。
【0155】
［試料処理および分析］
採取されたアリコート試料は、７５０μＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を使用した２段階抽出を受けた。抽出効率を改善するために、４０μＬの２５％水酸化アンモニウムが加えられ、化合物をルイス塩基に変換した。溶媒はＴｕｒｂｏＶａｐを使用して乾燥され、その後１９８μＬの５０％メタノール水溶液中０．１％ギ酸で元に戻され、２μＬのＡＮＰ（内部標準物質）が加えられた。処理されたアリコート試料およびマスバランス試料は、その後ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用する分析に送られた。次に、各実験の累積量曲線の定常状態（直線部分）で、解をフィックの第２法則にフィッティングすることにより、化合物の定常状態のフラックスおよび浸透係数が計算された。
採取されたアリコート試料は、７５０μＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を使用した２段階抽出を受けた。抽出効率を改善するために、４０μＬの２５％水酸化アンモニウムが加えられ、化合物をルイス塩基に変換した。溶媒はＴｕｒｂｏＶａｐを使用して乾燥され、その後１９８μＬの５０％メタノール水溶液中０．１％ギ酸で元に戻され、２μＬのＡＮＰ（内部標準物質）が加えられた。処理されたアリコート試料およびマスバランス試料は、その後ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用する分析に送られた。次に、各実験の累積量曲線の定常状態（直線部分）で、解をフィックの第２法則にフィッティングすることにより、化合物の定常状態のフラックスおよび浸透係数が計算された。
【0156】
［結果］
Ｎ１～Ｎ１３の皮膚浸透は、フランツ型拡散セルに挿入されたブタ耳皮膚を使用して、評価された。フランツセルのレセプター区画は、化合物を皮膚に適用した後、異なる時点（０～８時間）でアッセイされ、経時的に浸透した累積量を得た。ブタ皮膚浸透試験から試料が採取され、－８０℃で保存された。図５ｉおよび５ｉｉは、ブタ皮膚浸透試験から得られた、Ｎ１～Ｎ１３の抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）の要約である。表６は、適用後８時間でのＮ１～Ｎ１３の平均累積量の要約である。平均累積量がより高いほど、化合物の皮膚への透過性がより高い（すなわち浸透性がより高い）ことを示唆する。Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤと比較して有意に低い皮膚透過性を有した。
Ｎ１～Ｎ１３の皮膚浸透は、フランツ型拡散セルに挿入されたブタ耳皮膚を使用して、評価された。フランツセルのレセプター区画は、化合物を皮膚に適用した後、異なる時点（０～８時間）でアッセイされ、経時的に浸透した累積量を得た。ブタ皮膚浸透試験から試料が採取され、－８０℃で保存された。図５ｉおよび５ｉｉは、ブタ皮膚浸透試験から得られた、Ｎ１～Ｎ１３の抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）の要約である。表６は、適用後８時間でのＮ１～Ｎ１３の平均累積量の要約である。平均累積量がより高いほど、化合物の皮膚への透過性がより高い（すなわち浸透性がより高い）ことを示唆する。Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤと比較して有意に低い皮膚透過性を有した。
【0157】
【0158】
データは、皮膚に適用された化合物の用量に対する割合で示される。Ｎ１～Ｎ１３の皮膚浸透性および皮膚に回収された量は、ＰＰＤのそれらよりもほぼ３桁少なかった。
【0159】
一般に、ＰＰＤのオルト位に－Ｏ－Ｒ基を導入すると、Ｎ１～Ｎ１３の浸透性が著しく減少する。ほぼすべての化合物が皮膚に対して不浸透性であったが、おそらくそれらの分子サイズがより大きいためである。予想通り、Ｎ１～Ｎ１３の誘導体の分子量が増加するにつれ、浸透プロファイルは減少した。最小の誘導体Ｎ６（１６３．１７Ｄａ）と最大の誘導体Ｎ５（２２６．３Ｄａ）は、それぞれＰＰＤの分子量よりも１．５倍と２．０倍大きい分子量を有する。モル体積（表３）などの他の物理化学的パラメータもまた、皮膚浸透性に極めて重要な役割を果たす。分子量で指摘したとおり、化合物の皮膚浸透は、モル体積の増加とともに減少する。最小の誘導体Ｎ６は１２７．８ｃｍ３のモル体積を有し、一方最大の誘導体Ｎ５は１９６．７ｃｍ３のより大きいモル体積を有する。
【0160】
【0161】
Ｎ１（分子量２１２．２５Ｄａ）は、０．００７３μｇ／ｃｍ２の累積量を生じ、ＰＰＤの累積量より約７４０倍少なかった。浸透したＮ２（分子量１６８．２０Ｄａ）およびＮ９（分子量１６８．２０Ｄａ）の累積量は、約０．０１２０μｇ／ｃｍ２であり、ＰＰＤより４４５～４５０倍少なかった。一連のＯ－アルキルエーテル官能基のうち、同程度の分子量（分子量１８２．２２Ｄａ）を有するＮ３、Ｎ７およびＮ１１は、それぞれ０．００８８μｇ／ｃｍ２および０．００８０μｇ／ｃｍ２の累積量を示した。これはＰＰＤより約６１７および６７５倍少ない浸透である。同様に、Ｎ３、Ｎ７およびＮ１１と近い分子量を有する他の化合物Ｎ４、Ｎ１３は、約５００倍少ない浸透を示した。さらにヒドロキシル側鎖化合物Ｎ８（０．００８４３μｇ／ｃｍ２）は、Ｎ３～Ｎ４、およびＮ７と同様のプロファイルを示し、６４０倍少ない浸透であった。最も長鎖の置換を有する別の多エーテル化合物であるＮ５は、８時間で最も少ない累積量０．００６５μｇ／ｃｍ２を示し、これはＰＰＤの累積量より約８２５倍少なかった。対照的に、より短鎖とより大きい分子サイズを有するＮ６およびＮ１２は、一連で最も少ない累積量を生じ、０．０１４５μｇ／ｃｍ２で標準物質ＰＰＤより約３７０倍少ない浸透であった。
【0162】
対応する累積量対時間のプロファイル（図３ｉおよび３ｉｉ）およびマスバランスの結果は、表７に示される。Ｎ１～Ｎ１３誘導体の皮膚への吸収は、皮膚におけるＰＰＤよりも有意に少なかった。実験終了時に回収された適用された化合物の量は、９３％～９９％の範囲であり（図４Ａ）、良好なマスバランスを示す。図４Ｂおよび４Ｃはそれぞれ、浸透実験終了時に、皮膚を通して浸透しおよび皮膚で回収された適用量の割合を示す。
【0163】
［実施例１２：Ｎ１～Ｎ１３の検出のためのＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法］
Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ超高圧液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）バイナリポンプ、オートサンプラ、真空デガッサ、およびカラムオーブン（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．、サンタクララ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ）、カリフォルニア州、米国）およびＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μＭ，２．１×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ、ミルフォード（Ｍｉｌｄｏｒｄ）、マサチューセッツ州、米国）が、クロマトグラフィー分離に使用された。
Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ超高圧液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）バイナリポンプ、オートサンプラ、真空デガッサ、およびカラムオーブン（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．、サンタクララ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ）、カリフォルニア州、米国）およびＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μＭ，２．１×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ、ミルフォード（Ｍｉｌｄｏｒｄ）、マサチューセッツ州、米国）が、クロマトグラフィー分離に使用された。
【0164】
質量分析は、ＡＢ Ｓｃｉｅｘ Ｔｕｒｂｏ Ｉｏｎ Ｓｐｒａｙインターフェースを装備したトリプル四重極ポジティブモード（ＥＳＩ＋）で動作する、ＡＢ ＳＣＩＥＸ ＱＴＲＡＰ ５５００タンデム質量分析（ＭＳ／ＭＳ）システム（ＡＢ ＳＣＩＥＸ、フレイミングハム（Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ）、マサチューセッツ州、米国）を使用して、行われた。データの取得および分析は、Ａｎａｌｙｓｔソフトウェアｖｅｒ．１．４．２（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて行われ、すべてのクロマトグラフィーのピーク積分を行った。分析カラムおよび試料の温度は、それぞれ４５℃および４℃に保たれた。溶媒Ａは、Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水中の０．１％［ｖ／ｖ］ギ酸からなるものであり、一方溶媒Ｂは、アセトニトリル中の０．１％［ｖ／ｖ］ギ酸からなるものであった。０．６ｍＬ／分でポンプされる移動相グラジエントが、カラムからＮ１～Ｎ１３を溶離するために使用された。溶離に使用されたＨＰＬＣグラジエントプログラムが、表２に示される。カラムは１分間平衡化され、その結果、総実行時間は５分間であった。注入体積は、すべての誘導体で５．０μＬであった。針への化合物の蓄積を防ぐために、ＡＣＮ中５０％メタノールが、針洗浄として１試料あたり３０秒間使用された。
【0165】
［較正標準物質および品質管理試料の調製］
１０ｍＭの濃度を有するＮ１～Ｎ１３の原液は、２ｍｇの化合物をメタノールに溶解することにより、調製された。作業用溶液は、各分析物の原液を最終濃度に希釈することにより、調製された。同じ濃度の品質管理（ＱＣ）試料を調製するために、異なる原液標準物質が使用された。Ｎ１～Ｎ１３のための２００μＬの作業用較正物質（１０μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．０１μＭ、０．００１μＭ、０．００５μＭ、０．０００５μＭ、０．０００１μＭ、０．００００１μＭ）が、バッファ（ｐＨ７．４）培地中に作成された。すべての低、中、および高品質管理（ＬＱＣ、ＭＱＣ、およびＨＱＣ）試料はまた、別々の原液を使用して、７．５、０．０５、および０．０００２５μＭの濃度で、バッファ（Ｐｈ７．４）培地中に調製された。５０μＭの２－アミノ－５－ニトロピリジン（ＡＮＰ）を含む作業用内部標準物質は、２－アミノ－５－ニトロピリジンの原液（１．０ｍｇ／ｍＬ）をメタノールで希釈することにより、調製された。原液および作業用溶液および標準溶液は、使用まで－２０℃で保存された。
１０ｍＭの濃度を有するＮ１～Ｎ１３の原液は、２ｍｇの化合物をメタノールに溶解することにより、調製された。作業用溶液は、各分析物の原液を最終濃度に希釈することにより、調製された。同じ濃度の品質管理（ＱＣ）試料を調製するために、異なる原液標準物質が使用された。Ｎ１～Ｎ１３のための２００μＬの作業用較正物質（１０μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．０１μＭ、０．００１μＭ、０．００５μＭ、０．０００５μＭ、０．０００１μＭ、０．００００１μＭ）が、バッファ（ｐＨ７．４）培地中に作成された。すべての低、中、および高品質管理（ＬＱＣ、ＭＱＣ、およびＨＱＣ）試料はまた、別々の原液を使用して、７．５、０．０５、および０．０００２５μＭの濃度で、バッファ（Ｐｈ７．４）培地中に調製された。５０μＭの２－アミノ－５－ニトロピリジン（ＡＮＰ）を含む作業用内部標準物質は、２－アミノ－５－ニトロピリジンの原液（１．０ｍｇ／ｍＬ）をメタノールで希釈することにより、調製された。原液および作業用溶液および標準溶液は、使用まで－２０℃で保存された。
【0166】
［タンデム質量分析］
［試料処理およびＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析］
［試料処理およびＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析］
【0167】
【0168】
【0169】
略語： ＤＰ：デクラスタリングポテンシャル、ＥＰ：入口ポテンシャル、ＣＥ：衝突エネルギー、ＣＸＰ：衝突出口ポテンシャル、ＣＵＲ：カーテンガス、ＣＡＤ：衝突ガス（窒素）、ＧＳ１：イオン源ガス１（シースガス）、ＧＳ２：イオン源ガス２（乾燥ガス）、ＩＳ：イオンスプレー電圧、インターフェースヒーター（Ｉｈｅ）はオンにされた；四重極１および四重極３は、単位分解能に維持され、設定された滞留時間は、すべての化合物で１００ｍｓであった。
【0170】
［ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析のための皮膚浸透試験試料の試料調製および精製］
標準物質の原液希釈は、メタノー中に１００倍濃度でなされた、すなわち、Ｎ１～Ｎ１３の１ｍＭ、１００μＭ、１０μＭ、７．５μＭ、５μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．５μＭ、０．０５μＭ、０．０１μＭ、０．００１μＭ、０．０２５μＭの標準物質濃度（較正標準物質およびＱＣ標準物質）が、調製された。上記濃度のそれぞれ２μＬが、２ｍＬエッペンドルフチューブに移され、バッファ（ｐＨ７．４）培地を使用して、体積が２００μＬにまでされた。試験試料として、２００μＬの細胞培養試料が直接使用された。２μＬの内部標準物質、濃度１００μＭの２－アミノ－５－ニトロピリジンが、混合物にピペット注入された。次に、化合物をバッファ（ｐＨ７．４）培地から効率的に抽出するために、４０μＬの２８％ＮＨ４ＯＨが加えられた。各チューブに１ｍＬのジクロロメタンが抽出のために加えられ、各チューブは３分間かき混ぜられた。水層は、別セットの２ｍＬエッペンドルフチューブ内に移され、化合物の２回目の抽出のために、１ｍＬのジクロロメタンがさらに加えられた。各チューブ３分間の２回目のかき混ぜ、および水層を捨てた後、ジクロロメタンの２つの有機層が合わせられ、ＴｕｒｂｏＶａｐシステムを使用して３～５ｐｓｉの圧力で、窒素流下で蒸発乾固された。各標準物質および試験溶液試料はその後、５０％メタノール水溶液中０．１％ギ酸である移動相２００μＬで元に戻され、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳまで４℃で保存された。
標準物質の原液希釈は、メタノー中に１００倍濃度でなされた、すなわち、Ｎ１～Ｎ１３の１ｍＭ、１００μＭ、１０μＭ、７．５μＭ、５μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．５μＭ、０．０５μＭ、０．０１μＭ、０．００１μＭ、０．０２５μＭの標準物質濃度（較正標準物質およびＱＣ標準物質）が、調製された。上記濃度のそれぞれ２μＬが、２ｍＬエッペンドルフチューブに移され、バッファ（ｐＨ７．４）培地を使用して、体積が２００μＬにまでされた。試験試料として、２００μＬの細胞培養試料が直接使用された。２μＬの内部標準物質、濃度１００μＭの２－アミノ－５－ニトロピリジンが、混合物にピペット注入された。次に、化合物をバッファ（ｐＨ７．４）培地から効率的に抽出するために、４０μＬの２８％ＮＨ４ＯＨが加えられた。各チューブに１ｍＬのジクロロメタンが抽出のために加えられ、各チューブは３分間かき混ぜられた。水層は、別セットの２ｍＬエッペンドルフチューブ内に移され、化合物の２回目の抽出のために、１ｍＬのジクロロメタンがさらに加えられた。各チューブ３分間の２回目のかき混ぜ、および水層を捨てた後、ジクロロメタンの２つの有機層が合わせられ、ＴｕｒｂｏＶａｐシステムを使用して３～５ｐｓｉの圧力で、窒素流下で蒸発乾固された。各標準物質および試験溶液試料はその後、５０％メタノール水溶液中０．１％ギ酸である移動相２００μＬで元に戻され、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳまで４℃で保存された。
【0171】
［実施例１３：ＴＨＰ－１白血病単球細胞モデルでのＭＴＴアッセイおよびサイトカインＩＬ－８およびＩＬ－１α分析］
次のステップは、サイトカインＩＬ－８、ＩＬ－１αについてのＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着測定法）分析などのさらなる試験を通じて、皮膚感作が起こったかどうかを証明することである。これらの試験を行う前に、ＴＨＰ－１樹状細胞モデルのＮ１～Ｎ１３におけるＣＶ７５（細胞生存率が７５％になると推定される濃度）値を決定する必要がある（Alternatives to Animal Testing and Experimentation. 2008;13(2):70-82）。これは、ＴＨＰ－１細胞のＣＶ７５値が、ＥＬＩＳＡ試験において試験用量として使用されるためである。ＩＬ－８およびＩＬ－１α炎症性サイトカインは、皮膚の炎症に応答して放出された。皮膚ケラチノサイトでのＩＬ－８およびＩＬ－１α受容体の発現は、炎症に応答して誘導される。ＩＬ－８およびＩＬ－１αはケモカインとして作用し、Ｔリンパ球などの免疫細胞を引きつけて免疫応答を促す。本発明者らはまず、ＴＨＰ－１細胞におけるＮ１～Ｎ１３のＣＶ７５（細胞生存率が７５％になると推定される濃度）値を決定した。
次のステップは、サイトカインＩＬ－８、ＩＬ－１αについてのＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着測定法）分析などのさらなる試験を通じて、皮膚感作が起こったかどうかを証明することである。これらの試験を行う前に、ＴＨＰ－１樹状細胞モデルのＮ１～Ｎ１３におけるＣＶ７５（細胞生存率が７５％になると推定される濃度）値を決定する必要がある（Alternatives to Animal Testing and Experimentation. 2008;13(2):70-82）。これは、ＴＨＰ－１細胞のＣＶ７５値が、ＥＬＩＳＡ試験において試験用量として使用されるためである。ＩＬ－８およびＩＬ－１α炎症性サイトカインは、皮膚の炎症に応答して放出された。皮膚ケラチノサイトでのＩＬ－８およびＩＬ－１α受容体の発現は、炎症に応答して誘導される。ＩＬ－８およびＩＬ－１αはケモカインとして作用し、Ｔリンパ球などの免疫細胞を引きつけて免疫応答を促す。本発明者らはまず、ＴＨＰ－１細胞におけるＮ１～Ｎ１３のＣＶ７５（細胞生存率が７５％になると推定される濃度）値を決定した。
【0172】
［方法］
［Ａ．ＭＴＴアッセイ］
ＴＨＰ－１（ヒト急性単球性白血病細胞株）細胞懸濁液は、１ウェルあたり１×１０５細胞に調整され、９６ウェルプレートに播種された。プレートは、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートされた。２４時間後、オートクレーブされたＭｉｌｌｉ－Ｑ水中にＮ１～Ｎ１３の１０ｍＭ原液が調製された。培地中に希釈された一連の濃度が、調製され、ウェルに加えられた。各濃度は６回反復で行われ、培地のみで化合物を含まない播種ウェルは対照として使用され、一方培地のみのウェルはブランクとして使用された。プレートは２４時間インキュベートされ、その後１００μＬのＭＴＴ試薬が加えられ、１００μＬのＤＭＳＯが加えられる前に、プレートはさらに３時間インキュベートされた。続いて、プレートは２０分間振とうされ、その後Ｂｉｏ－Ｔｅｋプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍの吸光度が決定された。細胞生存率が計算され、ＣＶ７５値が決定された。
［Ａ．ＭＴＴアッセイ］
ＴＨＰ－１（ヒト急性単球性白血病細胞株）細胞懸濁液は、１ウェルあたり１×１０５細胞に調整され、９６ウェルプレートに播種された。プレートは、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートされた。２４時間後、オートクレーブされたＭｉｌｌｉ－Ｑ水中にＮ１～Ｎ１３の１０ｍＭ原液が調製された。培地中に希釈された一連の濃度が、調製され、ウェルに加えられた。各濃度は６回反復で行われ、培地のみで化合物を含まない播種ウェルは対照として使用され、一方培地のみのウェルはブランクとして使用された。プレートは２４時間インキュベートされ、その後１００μＬのＭＴＴ試薬が加えられ、１００μＬのＤＭＳＯが加えられる前に、プレートはさらに３時間インキュベートされた。続いて、プレートは２０分間振とうされ、その後Ｂｉｏ－Ｔｅｋプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍの吸光度が決定された。細胞生存率が計算され、ＣＶ７５値が決定された。
【0173】
［Ｂ．ＩＬ－８およびＩＬ－１α放出アッセイ（ＩＬ－８およびＩＬ－１α濃度はＥＬＩＳＡにより測定された）］
ＣＶ７５値（ＴＨＰ－１細胞の７５％生存を示す濃度）は、本方法の節Ａで上述された手順に従って、決定された。ＩＬ－８およびＩＬ－１αの放出アッセイは、Toxicol In Vitro. 2003,17(3), 311-321に記載されたように行われた。ケモカイン免疫吸着アッセイＢｉｏ－ｌｅｇｅｎｄ ＥＬＩＳＡ Ｍａｘキットが使用され、得られたＩＬ－８およびＩＬ－１αタンパク質のレベルを定量した。未処理のＴＨＰ－１細胞の上澄み培地は、９６ウェルプレートにおいて標準物質、試験試料Ｎ１～Ｎ１３およびＤＭＳＯで処理された後、２４時間の培養後に回収された。ＩＬ－８およびＩＬ－１αは、メーカーのプロトコル（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、ＥＬＩＳＡ ＭＡＸ（商標）、シンガポール）に従い、９６ウェルマイクロタイタープレートで、ＥＬＩＳＡにより測定された。
ＣＶ７５値（ＴＨＰ－１細胞の７５％生存を示す濃度）は、本方法の節Ａで上述された手順に従って、決定された。ＩＬ－８およびＩＬ－１αの放出アッセイは、Toxicol In Vitro. 2003,17(3), 311-321に記載されたように行われた。ケモカイン免疫吸着アッセイＢｉｏ－ｌｅｇｅｎｄ ＥＬＩＳＡ Ｍａｘキットが使用され、得られたＩＬ－８およびＩＬ－１αタンパク質のレベルを定量した。未処理のＴＨＰ－１細胞の上澄み培地は、９６ウェルプレートにおいて標準物質、試験試料Ｎ１～Ｎ１３およびＤＭＳＯで処理された後、２４時間の培養後に回収された。ＩＬ－８およびＩＬ－１αは、メーカーのプロトコル（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、ＥＬＩＳＡ ＭＡＸ（商標）、シンガポール）に従い、９６ウェルマイクロタイタープレートで、ＥＬＩＳＡにより測定された。
【0174】
［結果］
表１０は、Ｎ１～Ｎ１３に暴露されたときの、ＴＨＰ－１細胞のＣＶ７５値を示す。見ての通り、Ｎ６、Ｎ１、Ｎ３、およびＮ８～Ｎ１０は、ＴＨＰ－１細胞に対してより優れた細胞毒性（すなわちより高いＣＶ７５値）を示し、ＨａＣａＴ細胞と同じ傾向を示した。
表１０は、Ｎ１～Ｎ１３に暴露されたときの、ＴＨＰ－１細胞のＣＶ７５値を示す。見ての通り、Ｎ６、Ｎ１、Ｎ３、およびＮ８～Ｎ１０は、ＴＨＰ－１細胞に対してより優れた細胞毒性（すなわちより高いＣＶ７５値）を示し、ＨａＣａＴ細胞と同じ傾向を示した。
【0175】
【0176】
図６は、新規の染毛剤（Ｎ１～Ｎ１３）のＩＬ－８およびＩＬ－１α誘発プロファイルを、ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤ、ＰＴＤのような染毛剤標準物質、陽性（ＤＮＣＢ）および陰性対照（未処理、ＤＭＳＯ ０．２％）と比較して示す。様々な化学物質の相対ＩＬ－８濃度（ｐｇ／ｍｌ）は、標準曲線を使用して定量された。新規の誘導体の皮膚感作性が、ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤ、ＰＴＤなどの染毛剤標準物質、および、陽性（ＤＮＣＢ）および陰性対照（未処理、ＤＭＳＯ ０．２％）と比較された。様々な化学物質の相対ＩＬ－８およびＩＬ－１α濃度（ｐｇ／ｍｌ）は、標準曲線を使用して定量された。新規の染毛剤Ｎ１～Ｎ４、Ｎ６、およびＮ８～Ｎ１１、未処理およびＤＭＳＯ ０．２％条件では、有意な量のＩＬ－８およびＩＬ－１αサイトカインは放出されなかった。予想通り、陽性対照ＤＮＣＢは、染毛剤標準物質と比較して、２～３倍高いＩＬ－８およびＩＬ－１αマーカーの放出を示した。Ｎ４は、ＩＬ－８よりもＩＬ－１αのわずかな放出を示したが、ＰＰＤよりも７～８倍少なかった。Ｎ５、Ｎ７、Ｎ１２、Ｎ１３は、ＩＬ－８とＩＬ－１αの両方のレベルのわずかな上昇を示した。しかしながら、これらＩＬ－８とＩＬ－１αの放出レベルは、ＰＰＤよりも２～３倍低いという利点がある。染毛剤標準物質ＰＰＤ、ＭＥＰＰＤ、ＰＴＤは、より高濃度のＩＬ－８およびＩＬ－１αを放出した。予想通り、陽性対照ＤＮＣＢは、染毛剤標準物質と比較して、２～３倍高いＩＬ－８およびＩＬ－１αマーカーの放出を示した。これらの結果は、新規の誘導体が標準的な染毛剤と比較して非感作性である利点を確認する。
【0177】
［実施例１４：フローサイトメトリーによるｈＣＬＡＴアッセイＣＤ８６およびＣＤ５４発現分析］
［方法］
アッセイは文献に従って行われた（Toxicol In Vitro, 2006, 20, 767-73）。ＴＨＰ－１細胞は、２４ウェルプレート（１×１０６細胞／１ｍＬ／ウェル）で、様々な濃度の各化学物質（Ｎ１～Ｎ１３）、＋ｖｅ対照（ＤＮＣＢ）、－ｖｅ対照とともに、２４時間培養された。
［方法］
アッセイは文献に従って行われた（Toxicol In Vitro, 2006, 20, 767-73）。ＴＨＰ－１細胞は、２４ウェルプレート（１×１０６細胞／１ｍＬ／ウェル）で、様々な濃度の各化学物質（Ｎ１～Ｎ１３）、＋ｖｅ対照（ＤＮＣＢ）、－ｖｅ対照とともに、２４時間培養された。
【0178】
ＴＨＰ－１細胞は、２４ウェルプレートで培養され（１×１０６細胞／ｍＬ／ウェル）、推奨濃度の各化学物質（Ｎ１～Ｎ１３）、陽性対照（ＤＮＣＢ）または陰性対照（ＳＬＳ）とともに、２４時間処理された。ＴＨＰ－１細胞が培養され、ＣＶ７５に基づいてＮ１～Ｎ１３の８用量で、すなわち、１．２×ＣＶ７５、１×ＣＶ７５、１／１．２×ＣＶ７５、１／１．２２×ＣＶ７５、１／１．２３×ＣＶ７５、１／１．２４×ＣＶ７５、１／１．２５×ＣＶ７５および１／１．２６×ＣＶ７５で、処理された。２４時間後、細胞は１．５ｍＬのマイクロチューブに移され、４５０ｇ、５分、４℃で遠心分離された。上澄みが捨てられ、細胞は１ｍＬのＦＡＣＳバッファ（ＰＢＳ＋ＦＢＳ＋ＨＥＰＥＳ）で洗浄された。細胞は、４５０ｇ、５分間、４℃で遠心分離された。５０μＬのＦｃブロック（０．０１％のグロブリンＣｏｈｎ画分ＩＩ，ＩＩＩ）が加えられ、４℃で１０分間インキュベートされた。細胞は、２０μＬのＡＰＣ ＣＤ５４（マウスＩｇＧ１、κ、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、サンディエゴ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ）、カリフォルニア州、米国）、２０μＬのＦＩＴＣ ＣＤ８６（マウスＩｇＧ１、κ、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、サンディエゴ、カリフォルニア州、米国）またはそれらそれぞれのアイソタイプ対照で染色され、暗所、室温で１５分間インキュベートされた。インキュベート後、抗体は、２００μｌのＦＡＣＳバッファで希釈された。細胞は、１ｍＬのＦＡＣＳバッファで２回洗浄された。さらに、ＦＡＣＳバッファ中に調製された２００μＬのヨウ化プロピジウム（ＰＩ、０．６２５μｇ／ｍＬ）が、フローサイトメトリー分析の前に加えられた。フローサイトメトリー分析は、ＢＤ ＬＳＲ Ｆｏｒｔｅｓｓａ（商標）（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、サンノゼ（Ｓａｎ Ｊｏｓｅ）、カリフォルニア州、米国）を用いて行われた。合計１００００個の生細胞が分析され、データはＦｌｏｗｊｏソフトウェア（ｖ１０．６、アシュランド（Ａｓｈｌａｎｄ）、オレゴン州、米国）を使用して処理された。７５％の細胞生存率（ＣＶ７５）を示す試験濃度は、用量反応曲線から導出され、対数線形補間により計算された。
【0179】
［データ分析および予測モデル］
幾何平均蛍光強度（ＭＦＩ）は、ＣＤ５４＋およびＣＤ８６＋細胞について別々に測定され、ＣＤ８６およびＣＤ５４の相対発現を反映する相対蛍光強度率（％ＲＦＩ）は、以下のように計算された。細胞生存率が５０％を下回った場合、ＲＦＩは計算されなかった。
幾何平均蛍光強度（ＭＦＩ）は、ＣＤ５４＋およびＣＤ８６＋細胞について別々に測定され、ＣＤ８６およびＣＤ５４の相対発現を反映する相対蛍光強度率（％ＲＦＩ）は、以下のように計算された。細胞生存率が５０％を下回った場合、ＲＦＩは計算されなかった。
【0180】
すべての化学物質は、３回の独立した実験で試験された。３回の独立した実験のうち２回においていずれかの用量で、ＣＤ８６のＲＦＩが１５０％を超えた、またはＣＤ５４のＲＦＩが２００％を超えた場合、その化学物質は感作物質として同定された。そうでない場合は、非感作物質として同定される。
【0181】
データは、平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）で表される。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０．１（サンディエゴ、カリフォルニア州、米国）を使用して、該当する場合はスチューデントのｔ検定、一元または二元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、次いでチューキーの事後検定が使用され、ｐ値≦０．０５を統計的に有意とした。
【0182】
［結果］
新規の誘導体Ｎ１～Ｎ１３は、ＨａＣａＴ細胞において非細胞毒性の可能性、ＤＰＲＡおよびインビトロＩＬ－８およびＩＬ－１αアッセイにおいて非反応性の可能性を示したため、本発明者らは、ＴＨＰ－１細胞でのｈ－ＣＬＡＴアッセイをさらに行い、ＣＤ８６およびＣＤ５４マーカー発現を調査し、これらの誘導体の皮膚感作性を確認した。陽性対照ＤＮＣＢおよび陰性対照ＳＬＳが、標準物質ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよび試験化学物質Ｎ１～Ｎ１３に対して試験された。さらに、％ＲＦＩおよび有効濃度（ＥＣ）値、例えばＣＤ８６ではＥＣ１５０、ＣＤ５４ではＥＣ２００、すなわち試験化学物質が％ＲＦＩ１５０または２００を誘導する最低濃度が、計算された。
新規の誘導体Ｎ１～Ｎ１３は、ＨａＣａＴ細胞において非細胞毒性の可能性、ＤＰＲＡおよびインビトロＩＬ－８およびＩＬ－１αアッセイにおいて非反応性の可能性を示したため、本発明者らは、ＴＨＰ－１細胞でのｈ－ＣＬＡＴアッセイをさらに行い、ＣＤ８６およびＣＤ５４マーカー発現を調査し、これらの誘導体の皮膚感作性を確認した。陽性対照ＤＮＣＢおよび陰性対照ＳＬＳが、標準物質ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤおよび試験化学物質Ｎ１～Ｎ１３に対して試験された。さらに、％ＲＦＩおよび有効濃度（ＥＣ）値、例えばＣＤ８６ではＥＣ１５０、ＣＤ５４ではＥＣ２００、すなわち試験化学物質が％ＲＦＩ１５０または２００を誘導する最低濃度が、計算された。
【0183】
ＴＨＰ－１細胞は、ＤＮＣＢ、ＳＬＳ、ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤ、ＰＴＤ、Ｎ１～Ｎ７の濃度の増加を伴って処理され、ＣＤ５４、ＣＤ８６発現は、フローサイトメトリーを使用して測定された。図７ｉ～７ｉｉｉに示されるように、すべての化合物（ＤＮＣＢ、ＳＬＳ、およびＮ１～Ｎ１３）は、ＣＤ５４およびＣＤ８６マーカーの発現レベルにおいて、用量依存的な増加を示した。すべての化合物は、すべての濃度にわたって６５％を超える細胞生存率を示し、ＯＥＣＤガイドラインに従って、さらなるデータ分析が考慮された。ＤＮＣＢは、１／１．２４×ＣＶ７５用量からＯＥＣＤカットオフを超えるマーカー発現を誘導し、ＣＶ７５でピークに達した後、減少した。ＣＶ７５では、ＤＮＣＢはＯＥＣＤ推奨範囲よりもほぼ２倍高く発現し（ＣＤ５４ではＲＦＩ＝４５０％、ＣＤ８６ではＲＦＩ＝３２６％）、ＥＣ２００、ＥＣ１５０値はそれぞれ、１．５μｇ／ｍＬおよび１．４μｇ／ｍＬを示した。予想通り、陰性対照ＳＬＳは、最高濃度でもマーカーを発現しなかった。他の標準物質ＰＰＤ、ＭＥＰＰＤ、およびＰＴＤは、推奨しきい値を超えるＣＤ５４、ＣＤ８６発現が生じた。例えばＰＰＤは、１／１．２３×ＣＶ７５からマーカーを過剰発現し、ＣＶ７５用量まで誘導が持続し、１．２×ＣＶ７５から減少した。ＰＰＤはＤＮＣＢと同様の傾向を示したが、ＣＶ７５での発現率は１．６倍低く（ＣＤ５４とＣＤ８６で、それぞれ２７０％と２１０％のＲＦＩ）、ＥＣ２００、ＥＣ１５０値はそれぞれ、３５．０μｇ／ｍＬおよび３９．４μｇ／ｍＬを示した。標準物質ＭＥ－ＰＰＤは、ＰＰＤよりもわずかに低い発現を示したが、ＥＣ２００、ＥＣ１５０値はそれぞれ１２０．５μｇ／ｍＬおよび１１７．９μｇ／ｍＬであり、依然として感作物質範囲で減少した。ＭＥ－ＰＰＤは、ＣＶ７５用量でマーカーを誘導し、用量レベルが増加するにつれてさらに上昇した。ＰＴＤについても同様の傾向が認められたが、より低い用量レベル１／１．２×ＣＶ７５でもマーカー誘導が認められ（ＥＣ２００、ＥＣ１５０値は、それぞれ３５．３５μｇ／ｍＬおよび３４．３μｇ／ｍＬ）、発現傾向はＰＰＤとＭＥ－ＰＰＤの間に位置した。
【0184】
新規の誘導体のうち、Ｎ１、Ｎ４、Ｎ１０およびＮ１１は、いずれの試験用量レベルでもマーカーを発現せず、感作物質のためのＯＥＣＤカットオフ範囲に当てはまらなかった。加えて、誘導はＤＮＣＢおよびＰＰＤよりも、それぞれ３～４倍および２～３倍低かった。発現レベルは、ＣＤ５４とＣＤ８６でそれぞれ１５０％～１５５％、１０３％、および８５％～１２５％であった。これらは、陰性対照ＳＬＳの発現レベルよりも大きいだけであった。Ｎ２、Ｎ３、およびＮ６は、Ｎ１およびＮ４と同様の傾向を示した（おおよそＣＤ５４で１５５％および１６０％、ＣＤ８６で１１８％および９２％のＲＦＩ）。これはＤＮＣＢよりも３倍低い誘導を示す。一連のＮ内であっても、Ｎ５、Ｎ７、Ｎ８、Ｎ９、およびＮ１２は、推奨％ＲＦＩカットオフを超えるマーカー発現を誘導しなかった（それぞれＣＤ５４で１７０％～１９０％、ＣＤ８６で１１５％～１４５％）。このことから、Ｎ５、Ｎ７およびＮ８～Ｎ９およびＮ１２～Ｎ１３は、非感作物質であるとみなされる。まとめると、全１３の試験化合物のうち、試験濃度でＴＨＰ－１細胞に皮膚感作性を示したものはなかった。
【0185】
［実施例１５：毛髪ニュアンス試験］
［ブリーチされた毛髪の準備］
３５ｇのブリーチパウダーが５０ｍＬの顕色剤と混合され、次に染色されていない黒色の毛髪（ブリーチ効果を高めるためアルミホイルに包まれる）上に適用され、４５分間放置された。毛髪はその後、脱イオン水およびシャンプーですすがれ、乾くまで放置された。この過程は、２回繰り返された。
［ブリーチされた毛髪の準備］
３５ｇのブリーチパウダーが５０ｍＬの顕色剤と混合され、次に染色されていない黒色の毛髪（ブリーチ効果を高めるためアルミホイルに包まれる）上に適用され、４５分間放置された。毛髪はその後、脱イオン水およびシャンプーですすがれ、乾くまで放置された。この過程は、２回繰り返された。
【0186】
［染毛剤製剤］
染毛剤製剤は、報告されている方法に従い（New Journal of Chemistry. 2019; 43(41): 16188-99）、表１１に記載された組成で、Ｎ１～Ｎ１３から調製された。ブリーチされた毛髪試料は、それぞれの製剤内に２０分間浸漬された後、２０分間風乾された。その後、それらは２回シャンプーされ、コンディショナーで５分間処理された。
染毛剤製剤は、報告されている方法に従い（New Journal of Chemistry. 2019; 43(41): 16188-99）、表１１に記載された組成で、Ｎ１～Ｎ１３から調製された。ブリーチされた毛髪試料は、それぞれの製剤内に２０分間浸漬された後、２０分間風乾された。その後、それらは２回シャンプーされ、コンディショナーで５分間処理された。
【0187】
【0188】
［毛髪色の測定］
ＳｋｉｎＣｏｌｏｒＣａｔｃｈ（Ｄｅｌｆｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｌｔｄ、クオピオ（Ｋｕｏｐｉｏ）、フィンランド）が、染色された毛髪試料のＣＩＥＬＡＢ三刺激値Ｌ＊、ａ＊、ｂ＊値、および未処理の毛髪からのベースラインＬ０、ａ０、ｂ０値の測定に、使用された。次に、色調の差（ΔＨ）および総合色差（ΔＥ）が、得られた値から以下の式を用いて導かれた：
ＳｋｉｎＣｏｌｏｒＣａｔｃｈ（Ｄｅｌｆｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｌｔｄ、クオピオ（Ｋｕｏｐｉｏ）、フィンランド）が、染色された毛髪試料のＣＩＥＬＡＢ三刺激値Ｌ＊、ａ＊、ｂ＊値、および未処理の毛髪からのベースラインＬ０、ａ０、ｂ０値の測定に、使用された。次に、色調の差（ΔＨ）および総合色差（ΔＥ）が、得られた値から以下の式を用いて導かれた：
【0189】
［結果および考察］
図８ｉ～８ｉｖは、Ｎ１～Ｎ１３誘導体がブリーチされた毛髪試料上に適用された後の、最終的な色の写真を示す。白黒写真では色は見えないが、各毛髪試料の色は、図８ｉ～８ｉｖに示される。表１２は、ブリーチされた毛髪試料の最終的な色を示し、表１３は、Ｎ１～Ｎ１３に毛髪ニュアンス試験を行った後の、それらのＣＩＥＬＡＢ三刺激値を示す。染毛剤標準物質からの測定値は、公表データから入手された（New Journal of Chemistry. 2019; 43(41): 16188-99）。３つの製剤が、この試験で調製された：酸化剤を含まないＡ型は、化合物が酸化剤を使用せずに毛髪を着色できるかどうかを調べるために使用された。酸化剤である過酸化水素を含むＢ型は、一般に市販される染毛剤製剤が酸化剤を含むため、使用された；Ｃ型は、カプラーであるレゾルシノールを含む酸化製剤で、カプラーを含む化合物の性能を調べるために使用された。
図８ｉ～８ｉｖは、Ｎ１～Ｎ１３誘導体がブリーチされた毛髪試料上に適用された後の、最終的な色の写真を示す。白黒写真では色は見えないが、各毛髪試料の色は、図８ｉ～８ｉｖに示される。表１２は、ブリーチされた毛髪試料の最終的な色を示し、表１３は、Ｎ１～Ｎ１３に毛髪ニュアンス試験を行った後の、それらのＣＩＥＬＡＢ三刺激値を示す。染毛剤標準物質からの測定値は、公表データから入手された（New Journal of Chemistry. 2019; 43(41): 16188-99）。３つの製剤が、この試験で調製された：酸化剤を含まないＡ型は、化合物が酸化剤を使用せずに毛髪を着色できるかどうかを調べるために使用された。酸化剤である過酸化水素を含むＢ型は、一般に市販される染毛剤製剤が酸化剤を含むため、使用された；Ｃ型は、カプラーであるレゾルシノールを含む酸化製剤で、カプラーを含む化合物の性能を調べるために使用された。
【0190】
Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤのオルト位に様々な親水性置換基を導入することを通じて、より水溶性になるように設計された。化合物の水溶性を向上させる目的は、染毛過程中に毛髪と接触する製剤中の染毛剤の量を最大化することにより、その染毛効果を増加することである。
【0191】
図８ｉ～８ｉｖは、Ｎ１～Ｎ１３誘導体がブリーチされた毛髪試料上に適用された後の、最終的な色の写真を示し、表１２は、ブリーチされた毛髪試料の最終的な色を示し、表１３は、Ｎ１～Ｎ１３に毛髪ニュアンス試験を行った後の、それらのＣＩＥＬＡＢ三刺激値を示す。Ｌ＊、ａ＊、ｂ＊は、処理された毛髪の値を指し、Ｌ０、ａ０、ｂ０は、天然の未処理の毛髪から測定されたベースライン値である。Ｎ１～Ｎ１３の測定値は、公表データからの染毛剤標準物質と比較される（J Hazard Mat., 2021, 402, 123712）。３つの製剤が調製された：Ａ型、酸化剤無し；Ｂ型、酸化剤有り；Ｃ型、酸化剤＋レゾルシノール有り。
【0192】
酸化剤を含まないＡ型製剤は、Ｎ１～Ｎ３、Ｎ５、およびＮ７に暗い色を、Ｎ４、Ｎ６、およびＮ１３に明るい色を与えた。さらに、ＢおよびＣ型製剤の顕色中、アンモニア溶液でｐＨを１０～１０．５の間に調整しても化合物の沈殿は観察されず、これらの化合物の完全な混和性および異なるｐＨ条件での水溶性を証明した。Ｎ１～Ｎ１３染料は、図８ｉ～８ｉｖに見られるように、酸化剤が存在しなくても毛幹上に色を与えることができた。Ｎ１～Ｎ１３のＢ型製剤は、様々な色合いの黒色から茶色の毛髪を、結果として生じさせた。一連のうち、Ｎ１～Ｎ３、Ｎ５およびＮ７～Ｎ１１は、毛髪に暗い色合いを与えた。Ｎ１、Ｎ８、Ｎ１０、Ｎ１１は、元々暗褐色の化学物質であり、過酸化水素で酸化すると黒色を与えた（ΔＥ＝２～３）。同様に、高い水溶性を有する天然の黒色として合成されたＮ２およびＮ３は、酸化（ΔＥ＝２．０および９．９）がなくても、それぞれΔＥ＝３．７および１１．６で黒色を与えた。Ｎ４、Ｎ６、Ｎ１１およびＮ１３のＡ型製剤は、それぞれ茶色がかった緑色およびローズピンク色から灰色がかった茶色などの、はっきりとより明るい色を結果として生じさせ、一方Ｎ１は、その物理的な形として茶色を反射した。同様に、Ｎ５、Ｎ７は、暗褐色の色合いを毛髪に与え、構造的特徴の類似性を示した。一方、Ｎ９およびＮ１２のＡ型およびＢ型製剤は、茶色を示した。
【0193】
ほとんどの化学物質は、レゾルシノールとのカップリングにより、茶色を示した（Ｃ型製剤）。興味深いことに、Ｎ４、Ｎ５、Ｎ７およびＮ９のＣ型製剤は、鮮やかな青色を結果として生じさせ、Ｎ１２のＣ型は、はっきりとした紫色を示した。Ｎ１～Ｎ１３は、比較対象ＰＰＤ、ＭＥ－ＰＰＤ、およびＰＴＤよりも深い色合いの毛髪ニュアンスを、結果として生じさせた。
【0194】
さらに、ニュアンスの安定性試験が行われた。Ｎ１～Ｎ１３で染色された毛髪試料は、この安定性試験中、３ヶ月まで毎週の洗浄、およびそのＣＩＥＬＡＢ三刺激値の測定を受け、すべての毛髪試料は、それらの元の毛髪色を保持しているように見えた。このことは、新しい染毛剤が、ひとたびコルテックス内に入ると繰り返しの洗浄でも毛幹から離れない、永久的な毛髪色を提供することを確認する。
【0195】
【0196】
【0197】
【0198】
［結論］
本研究において、改良された新規の染毛剤Ｎ１～Ｎ１３は、それらの水溶性、染毛効果、細胞毒性、皮膚浸透性および感作性について評価された。Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤのオルト位に戦略的親水性官能基を加えることにより、より水溶性になるように設計された。注意深い構造修飾により、それらの溶解度は６．５～１０％まで向上した。
本研究において、改良された新規の染毛剤Ｎ１～Ｎ１３は、それらの水溶性、染毛効果、細胞毒性、皮膚浸透性および感作性について評価された。Ｎ１～Ｎ１３は、ＰＰＤのオルト位に戦略的親水性官能基を加えることにより、より水溶性になるように設計された。注意深い構造修飾により、それらの溶解度は６．５～１０％まで向上した。
【0199】
染料の効果は、まず毛髪ニュアンス試験において評価された。Ｎ１～Ｎ３のＢ型製剤は、黒色を与え、自然な黒い毛髪色を示唆した（ΔＥ＝２～９．９）。同様に、Ｎ１～Ｎ３、Ｎ５、Ｎ７、Ｎ８、Ｎ１０～Ｎ１１のＡ型製剤は、暗い色を与え、化合物のより深い暗い濃淡の性質を示した。インビトロ皮膚浸透試験の結果は、分子サイズのために皮膚浸透性がないことを示す。ＨａＣａＴケラチノサイトにおける細胞毒性アッセイの結果は、Ｏ－メチル部位（Ｎ１～Ｎ４、Ｎ６およびＮ８～Ｎ１２）が、Ｏ－エチル部位（Ｎ５およびＮ７）よりも好ましいことを示唆する。加えて、ＤＰＲＡの結果は、Ｏ－エチル鎖化合物（Ｎ５およびＮ７）が、Ｏ－メチル鎖化合物（Ｎ１～Ｎ４、Ｎ６およびＮ８～Ｎ１２）と比較して、より助けにならないことをさらに確認する。
【0200】
最後に、単球性ＴＨＰ－１細胞における特異性マーカーサイトカイン（ＩＬ－８およびＩＬ－１α）および表面タンパク質（ＣＤ５４およびＣＤ８６）の評価により、皮膚感作アッセイがさらに評価された。Ｏ－メチル鎖化合物は、ＴＨＰ－１細胞においてＩＬ－８およびＩＬ－１α発現の誘導を示さなかったが、一方Ｎ５、Ｎ７およびＮ１２、Ｎ１３は、わずかな放出を示した。ｈ－ＣＬＡＴアッセイの結果は、ＤＰＲＡ、ＩＬ－８およびＩＬ－１αの結果を補完した。いずれの試験化合物も、ＯＥＣＤカットオフ（ＣＤ５４で、＞２００％ＲＦＩ、ＣＤ８６で、＞１５０％ＲＦＩ）を超えるマーカー発現を誘導せず、従って非感作物質であるとみなされた。
【0201】
本研究において本発明者らは、既知のアレルゲンであるＰＰＤおよびＰＴＤの毒性効果を、インビトロで確認した。ＭＥ－ＰＰＤは、ＰＰＤに代わる非毒性物質とされているが、ＰＰＤと比較して同等か、またはわずかに減弱する程度の毒性および感作性を示した。このことは、臨床現場におけるＭＥ－ＰＰＤ誘発性ＡＣＤの観察を確認する。対照的に、本発明者らは、Ｎ１～Ｎ１３がＰＰＤおよびＭＥ－ＰＰＤの優れた非毒性代替物質であることを見出した。これらは、高い水溶性、低い浸透性、ＨａＣａＴ細胞におけるより低い細胞毒性、および低い感作性を示した。さらにこれらは、酸化剤が存在しない場合でも効果的に毛髪を着色する。Ｎ２およびＮ３、Ｎ８～Ｎ１０が、着色に最も効果的であった。さらに、Ｎ１～Ｎ４およびＮ６、Ｎ８～Ｎ１０は、接触アレルゲンＰＰＤと比較して、最小限の反応性であると同定された。全体として、本発明の化合物は、非酸化性または酸化性の条件下で、毛幹への染色性が保持され、使用者にアレルギーまたは他の免疫反応を誘発しにくい。
【0202】
改善された性能に着目し、本発明者らは驚くべきことに、Ｎ１～Ｎ１３が安全で効能があり、消費者に優しい２イン１ボトル製品であることを実証した。
【図1】
【図2】
【図3iA-D】
【図3iE-G】
【図3ii】
【図4】
【図5iA-D】
【図5iE-H】
【図5ii】
【図6】
【図7i-1】
【図7i-2】
【図7ii】
【図7iii】
【図8i-1】
【図8i-2】
【図8ii】
【図8iii】
【図8iv】
【国際調査報告】