特表 2024-513054 リンパ腫の治療のためのＣＡＲ Ｔ細胞療法および免疫調節化合物の組合せ

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-21

(54)【発明の名称】リンパ腫の治療のためのＣＡＲ Ｔ細胞療法および免疫調節化合物の組合せ

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/17 20150101AFI20240313BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240313BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240313BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240313BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20240313BHJP

   A61K 47/65 20170101ALI20240313BHJP

   A61K 47/64 20170101ALI20240313BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20240313BHJP

   C07K 14/705 20060101ALN20240313BHJP

   C07K 19/00 20060101ALN20240313BHJP

【ＦＩ】

A61K35/17

A61K31/5377

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K47/68

A61K47/65

A61K47/64

C07K16/28 ZNA

C07K14/705

C07K19/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023560638

(86)(22)【出願日】2022-03-29

(85)【翻訳文提出日】2023-11-22

(86)【国際出願番号】 US2022022358

(87)【国際公開番号】W WO2022212384

(87)【国際公開日】2022-10-06

(31)【優先権主張番号】63/167,599

(32)【優先日】2021-03-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/277,134

(32)【優先日】2021-11-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516316897

【氏名又は名称】ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(74)【代理人】

【識別番号】100221523

【弁理士】

【氏名又は名称】佐藤 渉

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(72)【発明者】

【氏名】トリード，ニコラウス セバスティアン

(72)【発明者】

【氏名】プルハム，ティム

(72)【発明者】

【氏名】ウー，ファン

(72)【発明者】

【氏名】プーダーナッド，マイケル

(72)【発明者】

【氏名】デステファノ，ジョセフ アンドリュー

(72)【発明者】

【氏名】カランシオ アントン，マリア ソラジャ

(72)【発明者】

【氏名】バックホルツ，トニア ジェーン

(72)【発明者】

【氏名】ポーツ，マイケル

(72)【発明者】

【氏名】チン，ジム

(72)【発明者】

【氏名】デュボーイ，ロナルド

(72)【発明者】

【氏名】ブランド，ニコラス

【テーマコード（参考）】

4C076

4C086

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076CC27

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF68

4C086AA01

4C086AA02

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZB26

4C086ZC75

4C087AA01

4C087AA02

4C087BB37

4C087BB65

4C087CA04

4C087MA02

4C087NA05

4C087NA13

4C087ZB26

4C087ZC75

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045DA50

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA28

(57)【要約】

ある特定のＢ細胞悪性病変等の疾患および状態に罹っている対象を治療するための、養子細胞療法、例えば、Ｔ細胞療法等の免疫療法、および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンまたはそのエナンチオマーもしくはエナンチオマーの混合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体の使用を伴う併用療法の方法、組成物、使用および製造品、ならびに関連する方法、組成物、使用および製造品が提供される。細胞は、一般に、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する。一部の実施形態では、疾患または状態は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、再発したもしくは不応性のＮＨＬまたは特定のＮＨＬサブタイプである。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法であって、ＣＤ１９を発現するがんに罹っている対象に、
（ｉ）前記がんに対するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法であって、併用療法の１日目に投与されるＴ細胞療法；および
（ｉｉ）（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩
を含む併用療法を投与する工程を含む、方法。

【請求項2】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、
（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法であって、併用療法の１日目に投与されるＴ細胞療法；および
（ｉｉ）（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩
を含む併用療法を投与する工程を含む、方法。

【請求項3】

化合物の投与が、Ｔ細胞療法の投与後に開始される、請求項１または請求項２に記載の方法。

【請求項4】

ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法であって、ＣＤ１９を発現するがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、前記がんに対するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され、前記化合物の投与が、前記Ｔ細胞療法の投与後に開始される、方法。

【請求項5】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され、前記化合物の投与が、前記Ｔ細胞療法の投与後に開始される、方法。

【請求項6】

化合物の投与が、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

化合物が、複数の用量として投与され、各用量が、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）である、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

化合物が、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、
（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法であって、併用療法の１日目に投与されるＴ細胞療法；および
（ｉｉ）（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩
を含む併用療法を投与する工程を含み、前記化合物が、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量が、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、前記化合物の投与が、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、方法。

【請求項10】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、前記化合物の投与が、前記併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、方法。

【請求項11】

化合物の投与が、１日目～２２日目の間（上限下限値を含む）に開始される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

化合物の投与が、１日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

化合物の投与が、８日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

化合物の投与が、１日目または約１日目に開始される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

化合物の投与が、８日目または約８日目に開始される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

化合物の投与が、１５日目または約１５日目に開始される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

複数の間欠的用量の各用量が同一である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

化合物が、週１回投与される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

化合物が、２週間毎に１回投与される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

化合物が、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される、請求項１～１７および２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

化合物が、Ｔ細胞療法の投与の後に少なくとも１２週間にわたり投与される、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

化合物が、Ｔ細胞療法の投与の後に最大１２週間にわたり投与される、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

化合物が、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、請求項１～１２、１４、１７～１９、２２および２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

化合物が、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、請求項１～１３、１５、１７～１９、２２および２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

化合物が、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、請求項１～１３、１６～１９、２２および２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

化合物が、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与される、請求項１～１３、１５、１７および２０～２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

化合物の用量が、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）である、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

化合物の用量が、０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇである、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

化合物の用量が、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇ～０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇ（上限下限値を含む）である、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

化合物の用量が、０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇである、請求項１～２８および３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

化合物の用量が、０．４ｍｇ未満である、請求項１～２８および３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

化合物の用量が、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇである、請求項１～２８、３０および３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

化合物の用量が、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇである、請求項１～２８、３０および３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量が、０．３ｍｇである、方法。

【請求項36】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法。

【請求項37】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量が、０．３ｍｇである、方法。

【請求項38】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量が、０．４ｍｇである、方法。

【請求項39】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与され、各用量が、０．３ｍｇである、方法。

【請求項40】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量が、０．２ｍｇである、方法。

【請求項41】

リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物またはその薬学的に許容される塩を投与する工程を含み、
前記化合物が、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、前記Ｔ細胞療法が、前記併用療法の１日目に投与され；
前記化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量が、０．６ｍｇである、方法。

【請求項42】

化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩であるかまたはそれを含む、請求項１～４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンであるかまたはそれを含む、請求項１～４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

化合物の投与の開始時に、対象が、Ｔ細胞療法の投与後に重度の毒性を示さない、請求項１～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

重度の毒性が、重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、適宜、グレード３以上のＣＲＳ、長期のグレード３以上のＣＲＳ、グレード４のＣＲＳもしくはグレード５のＣＲＳであり；および／または
重度の毒性が、重度の神経毒性、適宜、グレード３以上の神経毒性、長期のグレード３以上の神経毒性、グレード４の神経毒性もしくはグレード５の神経毒性である、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

対象が、化合物の投与後に毒性、適宜、血液学的毒性を示す場合、化合物の投与が保留される、および／または化合物の用量が改変、適宜低下される、請求項１～４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

毒性が、重度の血小板減少症、適宜、グレード４の血小板減少症または長期のグレード４の血小板減少症である、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

毒性が、重度の好中球減少症、適宜、グレード４の好中球減少症、長期のグレード４の好中球減少症または発熱性好中球減少症、適宜、グレード３以上の発熱性好中球減少症もしくは長期のグレード３以上の発熱性好中球減少症である、請求項４６に記載の方法。

【請求項49】

対象がもはや毒性を示さなくなった後に、化合物の投与が再開される、請求項４６～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

がんが、Ｂ細胞悪性病変である、請求項１～４９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項51】

がんが、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）であり、適宜、ＮＨＬが、侵襲性ＮＨＬ；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）；ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ、適宜、形質転換した低悪性度；ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ；Ｔ細胞／組織球リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）；濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、適宜、濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）；ならびに／またはＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／もしくはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（二重／三重ヒット）を含む、請求項１～５０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項52】

ＣＤ１９が、ヒトＣＤ１９である、請求項１～５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項53】

キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）が、ＣＤ１９に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ＩＴＡＭを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、請求項１～５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖、適宜ヒトＣＤ３－ゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）が、共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、請求項５３または請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

共刺激シグナル伝達領域が、ＣＤ２８または４－１ＢＢ、適宜ヒトＣＤ２８またはヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む、請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

共刺激シグナル伝達領域が、ヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む、請求項５５または請求項５６に記載の方法。

【請求項58】

ＣＡＲが、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢ、適宜ヒト４－１ＢＢであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含み；適宜、ＣＡＲが、膜貫通ドメインおよびｓｃＦｖの間のスペーサーをさらに含む、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項59】

ＣＡＲが、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン、適宜ヒト４－１ＢＢシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインである、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含み；適宜、ＣＡＲが、膜貫通ドメインおよびｓｃＦｖの間のスペーサーをさらに含む、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項60】

ＣＡＲが、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；スペーサーと；膜貫通ドメインと、適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメインである、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと、適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含む、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

スペーサーが、免疫グロブリンヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなるか、または約１５アミノ酸以下を含むポリペプチドスペーサーである、請求項５８～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

スペーサーが、免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４ヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなり、および／または約１５アミノ酸以下を含む、請求項５８～６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

スペーサーが、１２アミノ酸もしくは約１２アミノ酸の長さであり、および／または免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４もしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなる、請求項５８～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

スペーサーが、配列番号１の配列；配列番号２、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４によってコードされる配列；またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを有するかまたはそれからなる、請求項５８～６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインが、配列番号１２に記載される配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む、請求項５８～６４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項66】

一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインが、配列番号１３～１５のいずれかの配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む、請求項５８～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項67】

ｓｃＦｖが、
ＲＡＳＱＤＩＳＫＹＬＮ（配列番号３５）のＣＤＲＬ１配列、ＳＲＬＨＳＧＶ（配列番号３６）のＣＤＲＬ２配列および／もしくはＧＮＴＬＰＹＴＦＧ（配列番号３７）のＣＤＲＬ３配列；ならびに／または
ＤＹＧＶＳ（配列番号３８）のＣＤＲＨ１配列、ＶＩＷＧＳＥＴＴＹＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号３９）のＣＤＲＨ２配列および／もしくはＹＡＭＤＹＷＧ（配列番号４０）のＣＤＲＨ３配列
を含む、請求項５８～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

ｓｃＦｖが、
ＦＭＣ６３の可変重鎖領域およびＦＭＣ６３の可変軽鎖領域；ならびに／または
ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ２配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ３配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ２配列およびＦＭＣ６３のＣＤＲＨ３配列
を含み；
適宜、ｓｃＦｖが、配列番号４１に記載されるアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４２に記載されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項５８～６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

ｓｃＦｖが、配列番号４３に記載されるアミノ酸の配列を有する、請求項５８～６８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

操作された細胞の用量が、１×１０^５個もしくは約１×１０^５個～５×１０^８個もしくは約５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^６個もしくは約１×１０^６個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０^６個もしくは約５×１０^６個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^７個もしくは約１×１０^７個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞または５×１０^７個もしくは約５×１０^７個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）を含む、請求項１～６９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

操作された細胞の用量が、少なくとも１×１０^５個もしくは少なくとも約１×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^５個もしくは少なくとも約２．５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^５個もしくは少なくとも約５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^６個もしくは少なくとも約１×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^６個もしくは少なくとも約２．５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^６個もしくは少なくとも約５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^７個もしくは少なくとも約１×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^７個もしくは少なくとも約２．５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^７個もしくは少なくとも約５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^８個もしくは少なくとも約１×１０^８個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^８個もしくは少なくとも約２．５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞または少なくとも５×１０^８個もしくは少なくとも約５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む、請求項１～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項72】

操作された細胞の用量が、１×１０^８個または約１×１０^８個のＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む、請求項１～７１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項73】

操作された細胞の用量が、非経口、適宜、静脈内投与される、請求項１～７２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項74】

Ｔ細胞が、対象から得られる初代Ｔ細胞である、請求項１～７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項75】

Ｔ細胞が、対象にとって自家である、請求項１～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

Ｔ細胞が、対象にとって同種異系である、請求項１～７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項77】

操作された細胞の用量が、ＣＡＲを発現するＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＡＲを発現するＣＤ８＋Ｔ細胞を含み、用量の投与が、複数の別々の組成物を投与する工程を含み、前記複数の別々の組成物が、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の一方を含む第１の組成物およびＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の他方を含む第２の組成物を含む、請求項１～７６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

第１の組成物および第２の組成物が、０～１２時間間隔、０～６時間間隔もしくは０～２時間間隔で投与されるか、または第１の組成物の投与および第２の組成物の投与が、同一の日に行われ、約０～約１２時間間隔、約０～約６時間間隔もしくは約０～２時間間隔で行われ；ならびに／あるいは
第１の組成物の投与の開始および第２の組成物の投与の開始が、約１分～約１時間間隔または約５分～約３０分間隔で行われる、請求項７７に記載の方法。

【請求項79】

第１の組成物および第２の組成物が、２時間以下、１時間以下、３０分以下、１５分以下、１０分以下または５分以下の間隔で投与される、請求項７７または請求項７８に記載の方法。

【請求項80】

第１の組成物が、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む、請求項７７～７９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項81】

第１の組成物が、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む、請求項７７～７９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項82】

第１の組成物が、第２の組成物の前に投与される、請求項７７～８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項83】

Ｔ細胞療法の投与の前に、対象が、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含むリンパ球枯渇療法でプレコンディショニングされている、請求項１～８２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項84】

Ｔ細胞療法の投与の直前に、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含む、リンパ球枯渇療法を対象に投与する工程をさらに含む、請求項１～８２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項85】

リンパ球枯渇療法が、２～４日間、適宜、３日間にわたり毎日の、約２００～４００ｍｇ／ｍ^２（上限下限値を含む）、適宜、３００ｍｇ／ｍ^２もしくは約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび／または約２０～４０ｍｇ／ｍ^２、適宜、３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含むか、またはリンパ球枯渇療法が、約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドの投与を含む、請求項８３または請求項８４に記載の方法。

【請求項86】

リンパ球枯渇療法が、３日間にわたり毎日の、３００ｍｇ／ｍ^２もしくは約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含み；ならびに／または
リンパ球枯渇療法が、３日間にわたり毎日の、５００ｍｇ／ｍ^２もしくは約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む、請求項８３～８５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項87】

対象がヒトである、請求項１～８６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項88】

方法に従って治療された対象の少なくとも３５％、少なくとも４０％または少なくとも５０％が、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、持続的である完全奏効（ＣＲ）、またはＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的であるＣＲを達成する；ならびに／あるいは
６ヶ月目までにＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％が、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保ち、ＣＲを保ち、および／または生存するまたは進行せずに生存し；ならびに／あるいは
方法に従って治療された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％または少なくとも７０％が、客観的奏効（ＯＲ）を達成し、適宜、ＯＲが、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、持続的であるか、またはＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的であり；ならびに／あるいは
６ヶ月目までにＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％が、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保ち、または生存する、請求項１～８７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項89】

操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象が、リンパ腫のための１つまたはそれ以上の以前の療法、適宜、ＣＡＲを発現する操作された細胞の別の用量以外の１、２または３つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる、請求項１～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項90】

操作された細胞の用量の投与時にまたはその前に、
対象が、二重／三重ヒットリンパ腫であるか、もしくはそれに罹っていることが同定され；
対象が、化学療法抵抗性リンパ腫、適宜、化学療法抵抗性ＤＬＢＣＬであるか、もしくはそれに罹っていることが同定され；および／または
対象が、以前の療法に応答した完全寛解（ＣＲ）を達成していない、請求項１～８９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項91】

化合物の投与が、
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型を反転し；
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させ；
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型のレベルもしくは程度を低減させ；または
疲弊表現型を有する対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞のパーセンテージもしくは総数を低減させる、請求項１～９０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項92】

化合物の投与の開始が、Ｔ細胞療法の投与後に行われ、化合物の投与またはその開始に続いて、対象が、前記対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞の抗原または腫瘍特異的活性または機能の回復またはレスキューを示し、適宜、前記回復、レスキュー、および／または前記化合物の投与の開始が、対象または対象の血液におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞が、疲弊した表現型を示した後の時点においてなされる、請求項１～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項93】

化合物の投与が、
（ａ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露後に、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞の抗原特異的もしくは抗原受容体駆動活性の増加をもたらし；または
（ｂ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露後に、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させ；または
（ｃ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、対象における前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい疲弊したＴ細胞における疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む、請求項１～９２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項94】

化合物の投与が、（ｉ）活性の前記増加をもたらし、（ｉｉ）前記疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させ、および／または前記疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む、請求項９３に記載の方法。

【請求項95】

対象におけるＴ細胞が、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含み、および／または曝露が、ＣＤ１９抗原への曝露である、請求項９３または請求項９４に記載の方法。

【請求項96】

疲弊表現型が、Ｔ細胞またはＴ細胞の集団に関連して、
同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、１つまたはそれ以上の疲弊マーカー、適宜、２、３、４、５または６つの疲弊マーカーの、Ｔ細胞における表面発現のレベルもしくは程度または表面発現を示す前記Ｔ細胞の集団のパーセンテージの増加；あるいは
同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤への曝露後の、前記Ｔ細胞もしくはＴ細胞の集団によって示される活性のレベルもしくは程度の減少
を含む、請求項９１～９５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項97】

レベル、程度またはパーセンテージの増加が、１．２倍または約１．２倍、１．５倍または約１．５倍、２．０倍または約２．０倍、３倍または約３倍、４倍または約４倍、５倍または約５倍、６倍または約６倍、７倍または約７倍、８倍または約８倍、９倍または約９倍、１０倍または約１０倍以上を超える、請求項９６に記載の方法。

【請求項98】

レベル、程度またはパーセンテージの減少が、１．２分の１または約１．２分の１、１．５分の１または約１．５分の１、２．０分の１または約２．０分の１、３分の１または約３分の１、４分の１または約４分の１、５分の１または約５分の１、６分の１または約６分の１、７分の１または約７分の１、８分の１または約８分の１、９分の１または約９分の１、１０分の１または約１０分の１以下を下回る、請求項９６に記載の方法。

【請求項99】

参照Ｔ細胞集団が、適宜、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象と同一対象に由来するか、またはそれと同一種の、疲弊していない表現型を有することが知られているＴ細胞の集団であるか、ナイーブＴ細胞の集団であるか、セントラルメモリーＴ細胞の集団であるか、またはステムセントラルメモリーＴ細胞の集団である、請求項９６～９８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項100】

参照Ｔ細胞集団が、（ａ）疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象の血液から単離されたバルクＴ細胞を含む対象適合集団であり、適宜、バルクＴ細胞が、ＣＡＲを発現せず、および／または（ｂ）ＣＡＲを発現するＴ細胞の用量の投与を受ける前に、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象から得られる、請求項９６～９９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項101】

参照Ｔ細胞集団が、対象へのその投与の前に、ＣＡＲを発現するＴ細胞の試料を含む組成物またはＣＡＲを発現するＴ細胞を含む医薬組成物であり、適宜、組成物が、凍結保存された試料である、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の方法。

【請求項102】

１つまたはそれ以上の疲弊マーカーが、阻害受容体である、請求項９６～１０１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項103】

１つまたはそれ以上の疲弊マーカーが、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＢＴＬＡ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＤ３９、ＶＩＳＴＡおよびＴＩＧＩＴの中から選択される、請求項９６～１０２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項104】

活性が、増殖、細胞傷害性、または炎症性サイトカインのうち１つもしくは組合せの産生のうち１つまたはそれ以上であり、適宜、サイトカインのうち１つまたは組合せが、ＩＬ－２、ＩＦＮ－ガンマおよびＴＮＦ－アルファからなる群から選択される、請求項９６～１０３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項105】

前記ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露が、ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤、適宜、ＣＡＲの抗原結合性ドメインに結合する薬剤とのインキュベーションを含む、請求項９６～１０４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項106】

ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露が、Ｔ細胞を、ＣＤ１９抗原発現標的細胞、適宜、Ｂ細胞悪性病変の細胞に曝露する工程を含む、請求項１０５に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年３月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／１６７，５９９号および２０２１年１１月８日に出願された米国仮特許出願第６３／２７７，１３４号に基づく優先権を主張し、これらそれぞれの内容全体は、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

配列表の参照による組込み
本出願は、電子書式の配列表とともに出願中である。配列表は、３６キロバイトのサイズである、２０２２年３月２７日に作成された７３５０４２０２４５４０ＳｅｑＬｉｓｔ．ｔｘｔという表題のファイルとして提供される。電子書式の配列表内の情報は、その全体が参照により組み込まれる。

【0003】

分野
本開示は、一部の態様では、ある特定のＢ細胞悪性病変等の疾患および状態に罹っている対象を治療するための、養子細胞療法、例えば、Ｔ細胞療法等の免疫療法、および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンまたはそのエナンチオマーもしくはエナンチオマーの混合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体の使用を伴う併用療法の方法、組成物、使用および製造品、ならびに関連する方法、組成物、使用および製造品に関する。Ｔ細胞療法は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する細胞を含む。一部の実施形態では、疾患または状態は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、再発したもしくは不応性のＮＨＬまたは特定のＮＨＬサブタイプである。

【背景技術】

【0004】

例えば、養子療法のために操作されたＴ細胞を投与する免疫療法のために、様々な戦略が利用できる。例えば、ＣＡＲ等の遺伝子操作された抗原受容体を発現させ、そのような細胞を含有する組成物を対象に投与する、Ｔ細胞を操作するための戦略が利用できる。細胞の有効性を向上させるための、例えば、対象への投与の際に細胞の持続、活性および／または増殖を向上させる、改善された戦略が必要とされる。そのような必要を満たす方法、組成物、キットおよびシステムが提供される。

【発明の概要】

【0005】

一部の実施形態では、ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法であって、ＣＤ１９を発現するがんに罹っている対象に、（ｉ）がんに対するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法；および（ｉｉ）（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法を投与する工程を含む方法が本明細書に提供される。

【0006】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＤ１９を発現するがんは、リンパ腫である。

【0007】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法；および（ｉｉ）（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法を投与する工程を含む方法も本明細書に提供される。

【0008】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与の前に開始される。

【0009】

一部の実施形態では、ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法であって、ＣＤ１９を発現するがんに罹っている対象に、がんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法を投与する工程を含み、Ｔ細胞療法は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体との併用療法において投与され、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与の前に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0010】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＤ１９を発現するがんは、リンパ腫である。

【0011】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法を投与する工程を含み、Ｔ細胞療法は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体との併用療法において投与され、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与の前に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0012】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与後に開始される。

【0013】

一部の実施形態では、ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法であって、ＣＤ１９を発現するがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、がんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与後に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0014】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＤ１９を発現するがんは、リンパ腫である。

【0015】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫であるがんに罹っている対象に、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、化合物の投与は、Ｔ細胞療法の投与後に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0016】

提供される方法のいずれかの一部では、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与される。

【0017】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される。

【0018】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、複数の用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）である。

【0019】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与される。

【0020】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法であって、併用療法の１日目に投与されるＴ細胞療法；および（ｉｉ）下記構造：

【化1】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物であって、間欠的（すなわち、毎日ではない）投薬レジメンにおいて投与される化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法を投与する工程を含む方法も本明細書に提供される。

【0021】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化2】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され、化合物は、間欠的（すなわち、毎日ではない）投薬レジメンにおいて投与される、方法も本明細書に提供される。

【0022】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、複数の間欠的用量として投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、週１回以下で投与される。

【0023】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）である。

【0024】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される。

【0025】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法であって、併用療法の１日目に投与されるＴ細胞療法；および（ｉｉ）下記構造：

【化3】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法を投与する工程を含み、化合物は、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0026】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化4】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、方法も本明細書に提供される。

【0027】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、１日目～２２日目の間（上限下限値を含む）に開始される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、１日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、８日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。

【0028】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、１日目または約１日目に開始される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、８日目または約８日目に開始される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、１５日目または約１５日目に開始される。

【0029】

提供される方法のいずれかの一部では、複数の間欠的用量の各用量は、同一である。

【0030】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、週１回投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、２週間毎に１回投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される。

【0031】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、Ｔ細胞療法の投与の後に少なくとも１２週間にわたり投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、Ｔ細胞療法の投与の後に最大１２週間にわたり投与される。

【0032】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与される。

【0033】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）である。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇである。

【0034】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇ～０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇ（上限下限値を含む）である。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇである。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．４ｍｇ未満である。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇである。提供される方法のいずれかの一部では、化合物の用量は、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇである。

【0035】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化5】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0036】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化6】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0037】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化7】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0038】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化8】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．４ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0039】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化9】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0040】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化10】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．２ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0041】

一部の実施形態では、リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化11】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．６ｍｇである、方法も本明細書に提供される。

【0042】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオン、またはその薬学的に許容される塩である。

【0043】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩であるかまたはそれを含む。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの水和物であるかまたはそれを含む。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの溶媒和物であるかまたはそれを含む。提供される方法のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンであるかまたはそれを含む。

【0044】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与の開始時に、対象は、Ｔ細胞療法の投与後に重度の毒性を示さない。提供される方法のいずれかの一部では、重度の毒性は、重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、適宜、グレード３以上のＣＲＳ、長期のグレード３以上のＣＲＳ、グレード４のＣＲＳもしくはグレード５のＣＲＳである；および／または重度の毒性は、重度の神経毒性、適宜、グレード３以上の神経毒性、長期のグレード３以上の神経毒性、グレード４の神経毒性もしくはグレード５の神経毒性である。一部の実施形態では、重度の毒性は、重度のＣＲＳである。一部の実施形態では、重度の毒性は、重度の神経毒性である。

【0045】

提供される方法のいずれかの一部では、対象が、化合物の投与後に毒性、適宜、血液学的毒性を示す場合、化合物の投与は、保留される、および／または化合物の用量は、改変、適宜低下される。提供される方法のいずれかの一部では、対象が、化合物の投与後に毒性を示す場合、化合物の投与は、保留される。提供される方法のいずれかの一部では、対象が、化合物の投与後に毒性を示す場合、化合物の用量は、低下される。提供される方法のいずれかの一部では、毒性は、血液学的な毒性である。提供される方法のいずれかの一部では、毒性は、重度の血小板減少症、適宜、グレード４の血小板減少症または長期のグレード４の血小板減少症である。提供される方法のいずれかの一部では、毒性は、重度の好中球減少症、適宜、グレード４の好中球減少症、長期のグレード４の好中球減少症、または発熱性好中球減少症、適宜、グレード３以上の発熱性好中球減少症もしくは長期のグレード３以上の発熱性好中球減少症である。

【0046】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、対象がもはや毒性を示さなくなった後に再開される。

【0047】

提供される方法のいずれかの一部では、リンパ腫は、ＣＤ１９を発現する。

【0048】

提供される方法のいずれかの一部では、リンパ腫は、Ｂ細胞悪性病変である。提供される方法のいずれかの一部では、リンパ腫は、再発した／不応性のリンパ腫である。提供される方法のいずれかの一部では、リンパ腫は、侵襲性リンパ腫である。提供される方法のいずれかの一部では、リンパ腫は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）であり、適宜、ＮＨＬは、侵襲性ＮＨＬ；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）；ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ、適宜、形質転換した低悪性度；ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ；Ｔ細胞／組織球リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）；濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、適宜、濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）；ならびに／またはＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／もしくはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（二重／三重ヒット）を含む。

【0049】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＤ１９は、ヒトＣＤ１９である。

【0050】

提供される方法のいずれかの一部では、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、ＣＤ１９に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ＩＴＡＭを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。提供される方法のいずれかの一部では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖、適宜ヒトＣＤ３－ゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。提供される方法のいずれかの一部では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖のシグナル伝達ドメインを含む。提供される方法のいずれかの一部では、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、共刺激シグナル伝達領域をさらに含む。提供される方法のいずれかの一部では、共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８または４－１ＢＢ、適宜ヒトＣＤ２８またはヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む。提供される方法のいずれかの一部では、共刺激シグナル伝達領域は、ヒトＣＤ２８のシグナル伝達ドメインを含む。提供される方法のいずれかの一部では、共刺激シグナル伝達領域は、ヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む。

【0051】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢ、適宜ヒト４－１ＢＢであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含み；適宜、ＣＡＲは、膜貫通ドメインおよびｓｃＦｖの間のスペーサーをさらに含む。提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；ヒト４－１ＢＢに由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、細胞質シグナル伝達ドメインと；膜貫通ドメインおよびｓｃＦｖの間のスペーサーとを含む。

【0052】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン、適宜ヒト４－１ＢＢシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインである、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含む。提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；ヒト４－１ＢＢシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、細胞質シグナル伝達ドメインと；ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインである、細胞質シグナル伝達ドメインとを含む。

【0053】

提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；スペーサーと；膜貫通ドメインと、適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメインである、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと、適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含む。提供される方法のいずれかの一部では、ＣＡＲは、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；スペーサーと；膜貫通ドメインと、４－１ＢＢシグナル伝達ドメインである、細胞質シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、細胞質シグナル伝達ドメインとを含む。

【0054】

提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、免疫グロブリンヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなるか、または約１５アミノ酸以下を含むポリペプチドスペーサーである。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４ヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなる、および／または約１５アミノ酸以下を含む。一部の実施形態では、スペーサーは、ＩｇＧ４等の免疫グロブリンヒンジまたはその改変バージョンの全てまたは部分を含むかまたはそれからなる。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジまたはその改変バージョンの全てまたは部分を含むかまたはそれからなる。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、約１５アミノ酸以下を含む。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、１２アミノ酸または約１２アミノ酸の長さである。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、１２アミノ酸または約１２アミノ酸の長さである。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、配列番号１の配列；配列番号２、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４によってコードされる配列；またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを有するかまたはそれからなる。提供される方法のいずれかの一部では、スペーサーは、配列番号１の配列を有するかまたはそれからなる。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号２によってコードされる配列を有する。

【0055】

提供される方法のいずれかの一部では、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインは、配列番号１２に記載される配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む。提供される方法のいずれかの一部では、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインは、配列番号１３～１５のいずれかの配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む。

【0056】

提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＲＡＳＱＤＩＳＫＹＬＮ（配列番号３５）のＣＤＲＬ１配列、ＳＲＬＨＳＧＶ（配列番号３６）のＣＤＲＬ２配列および／もしくはＧＮＴＬＰＹＴＦＧ（配列番号３７）のＣＤＲＬ３配列；ならびに／またはＤＹＧＶＳ（配列番号３８）のＣＤＲＨ１配列、ＶＩＷＧＳＥＴＴＹＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号３９）のＣＤＲＨ２配列および／もしくはＹＡＭＤＹＷＧ（配列番号４０）のＣＤＲＨ３配列を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＲＡＳＱＤＩＳＫＹＬＮ（配列番号３５）のＣＤＲＬ１配列、ＳＲＬＨＳＧＶ（配列番号３６）のＣＤＲＬ２配列およびＧＮＴＬＰＹＴＦＧ（配列番号３７）のＣＤＲＬ３配列；ならびに／またはＤＹＧＶＳ（配列番号３８）のＣＤＲＨ１配列、ＶＩＷＧＳＥＴＴＹＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号３９）のＣＤＲＨ２配列およびＹＡＭＤＹＷＧ（配列番号４０）のＣＤＲＨ３配列を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＲＡＳＱＤＩＳＫＹＬＮ（配列番号３５）のＣＤＲＬ１配列、ＳＲＬＨＳＧＶ（配列番号３６）のＣＤＲＬ２配列およびＧＮＴＬＰＹＴＦＧ（配列番号３７）のＣＤＲＬ３配列；ならびにＤＹＧＶＳ（配列番号３８）のＣＤＲＨ１配列、ＶＩＷＧＳＥＴＴＹＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号３９）のＣＤＲＨ２配列およびＹＡＭＤＹＷＧ（配列番号４０）のＣＤＲＨ３配列を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ２配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ３配列を含む可変軽鎖領域、ならびにＦＭＣ６３のＣＤＲＨ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ２配列およびＦＭＣ６３のＣＤＲＨ３配列を含む可変重鎖領域を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＦＭＣ６３の可変重鎖領域およびＦＭＣ６３の可変軽鎖領域を含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号４１に記載されるアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号４２に記載されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ２配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ３配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ２配列およびＦＭＣ６３のＣＤＲＨ３配列を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、ＦＭＣ６３の可変重鎖領域およびＦＭＣ６３の可変軽鎖領域を含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、配列番号４１を含むＶＨ、および配列番号４２として記載されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む。提供される方法のいずれかの一部では、ｓｃＦｖは、配列番号４３に記載されるアミノ酸の配列を有する。

【0057】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、１×１０^５個もしくは約１×１０^５個～５×１０^８個もしくは約５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^６個もしくは約１×１０^６個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０^６個もしくは約５×１０^６個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^７もしくは約１×１０^７～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞または５×１０^７個もしくは約５×１０^７個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、１×１０^５～５×１０^８個またはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む（上限下限値を含む）。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、１×１０^６個もしくは約１×１０^６個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（上限下限値を含む）を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、５×１０^６個もしくは約５×１０^６個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（上限下限値を含む）を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、１×１０^７個もしくは約１×１０^７個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（上限下限値を含む）を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、５×１０^７個もしくは約５×１０^７個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（上限下限値を含む）を含む。

【0058】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも１×１０^５個もしくは少なくとも約１×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^５個もしくは少なくとも約２．５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^５個もしくは少なくとも約５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^６個もしくは少なくとも約１×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^６個もしくは少なくとも約２．５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^６個もしくは少なくとも約５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^７個もしくは少なくとも約１×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^７個もしくは少なくとも約２．５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^７個もしくは少なくとも約５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^８個もしくは少なくとも約１×１０^８個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^８個もしくは少なくとも約２．５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞、または少なくとも５×１０^８個もしくは少なくとも約５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む。

【0059】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも１×１０^５個または少なくとも約１×１０^５個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも２．５×１０^５個または少なくとも約２．５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも５×１０^５個または少なくとも約５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも１×１０^６個または少なくとも約１×１０^６個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも２．５×１０^６個または少なくとも約２．５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも５×１０^６個または少なくとも約５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも１×１０^７個または少なくとも約１×１０^７個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも２．５×１０^７個または少なくとも約２．５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも５×１０^７個または少なくとも約５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも１×１０^８個または少なくとも約１×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも２．５×１０^８個または少なくとも約２．５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、少なくとも５×１０^８個または少なくとも約５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む。

【0060】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、１×１０^８個または約１×１０^８個のＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む。

【0061】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、非経口、適宜、静脈内投与される。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、静脈内投与される。

【0062】

提供される方法のいずれかの一部では、Ｔ細胞は、対象から得られる初代Ｔ細胞である。提供される方法のいずれかの一部では、Ｔ細胞は、対象にとって自家である。提供される方法のいずれかの一部では、Ｔ細胞は、対象にとって同種異系である。

【0063】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量は、ＣＡＲを発現するＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＡＲを発現するＣＤ８＋Ｔ細胞を含み、用量の投与は、複数の別々の組成物を投与する工程を含み、前記複数の別々の組成物は、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の一方を含む第１の組成物、ならびにＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の他方を含む第２の組成物を含む。

【0064】

提供される方法のいずれかの一部では、第１の組成物および第２の組成物は、０～１２時間間隔、０～６時間間隔もしくは０～２時間間隔で投与されるか、または第１の組成物の投与および第２の組成物の投与は、同一の日に行われ、約０～約１２時間間隔、約０～約６時間間隔もしくは約０～２時間間隔で行われ；および／または第１の組成物の投与の開始および第２の組成物の投与の開始は、約１分～約１時間間隔もしくは約５分～約３０分間隔で行われる。提供される方法のいずれかの一部では、第１の組成物および第２の組成物は、２時間以下、１時間以下、３０分以下、１５分以下、１０分以下または５分以下の間隔で投与される。

【0065】

提供される方法のいずれかの一部では、第１の組成物は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む。提供される方法のいずれかの一部では、第１の組成物は、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。

【0066】

提供される方法のいずれかの一部では、第１の組成物は、第２の組成物の前に投与される。

【0067】

提供される方法のいずれかの一部では、Ｔ細胞療法の投与の前に、対象は、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含むリンパ球枯渇療法でプレコンディショニングされている。提供される方法のいずれかの一部では、方法は、Ｔ細胞療法の投与の直前に、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含む、リンパ球枯渇療法を対象に投与する工程をさらに含む。

【0068】

提供される方法のいずれかの一部では、リンパ球枯渇療法は、２～４日間、適宜、３日間にわたり毎日の、約２００～４００ｍｇ／ｍ^２（上限下限値を含む）、適宜、３００ｍｇ／ｍ^２もしくは約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび／または約２０～４０ｍｇ／ｍ^２、適宜、３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む、またはリンパ球枯渇療法は、約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドの投与を含む。提供される方法のいずれかの一部では、リンパ球枯渇療法は、３日間にわたり毎日の、３００ｍｇ／ｍ^２もしくは約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む；ならびに／またはリンパ球枯渇療法は、３日間にわたり毎日の、５００ｍｇ／ｍ^２もしくは約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む。

【0069】

提供される方法のいずれかの一部では、対象は、ヒトである。

【0070】

提供される方法のいずれかの一部では、方法に従って治療された対象の少なくとも３５％、少なくとも４０％または少なくとも５０％は、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、持続的である完全奏効（ＣＲ）、またはＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的であるＣＲを達成する；ならびに／あるいは６ヶ月目までにＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％は、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保つ、ＣＲを保つ、および／または生存するまたは進行せずに生存する；ならびに／あるいは方法に従って治療された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％または少なくとも７０％は、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、客観的奏効（ＯＲ）を達成し、適宜、ＯＲは、持続的であるか、またはＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的であり；ならびに／あるいは６ヶ月目までにＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％は、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保つまたは生存する。

【0071】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象は、ＮＨＬのための１つまたはそれ以上の以前の療法、適宜、ＣＡＲを発現する操作された細胞の別の用量以外の１、２または３つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象は、ＮＨＬのための１つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象は、ＮＨＬのための２つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる。提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象は、ＮＨＬのための３つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる。提供される方法のいずれかの一部では、１つまたはそれ以上の以前の療法は、ＣＡＲを発現する操作された細胞の別の用量を含まない。

【0072】

提供される方法のいずれかの一部では、操作された細胞の用量の投与時にまたはその前に、対象は、二重／三重ヒットリンパ腫であるか、もしくはそれに罹っていることが同定されている；対象は、化学療法抵抗性リンパ腫、適宜、化学療法抵抗性ＤＬＢＣＬであるか、もしくはそれに罹っていることが同定されている；および／または対象は、以前の療法に応答した完全寛解（ＣＲ）を達成していない。提供される実施形態のいずれかの一部では、対象は、以前の療法に応答した完全寛解（ＣＲ）を達成していない。

【0073】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型を反転する；対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させる；対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型のレベルもしくは程度を低減させる；または疲弊表現型を有する対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞のパーセンテージもしくは総数を低減させる。

【0074】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与の開始は、Ｔ細胞療法の投与後に行われ、化合物の投与またはその開始後に、対象は、前記対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞の抗原または腫瘍特異的活性または機能の回復またはレスキューを示し、適宜、前記回復、レスキュー、および／または前記化合物の投与の開始は、対象または対象の血液におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞が、疲弊した表現型を示した後の時点においてなされる。

【0075】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、（ａ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露に続く、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞の抗原特異的もしくは抗原受容体駆動活性の増加をもたらす；または（ｂ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露後、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させる；または（ｃ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、対象における前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい疲弊したＴ細胞における疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む。

【0076】

提供される方法のいずれかの一部では、化合物の投与は、（ｉ）活性の前記増加をもたらし、（ｉｉ）前記疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させる、および／または前記疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む。

【0077】

提供される方法のいずれかの一部では、対象におけるＴ細胞は、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含む、および／または前記抗原は、ＣＤ１９である、例えば、曝露は、ＣＤ１９抗原への曝露である。

【0078】

提供される方法のいずれかの一部では、疲弊表現型は、Ｔ細胞またはＴ細胞の集団に関連して、同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、１つまたはそれ以上の疲弊マーカー、適宜、２、３、４、５または６つの疲弊マーカーの、Ｔ細胞における表面発現のレベルもしくは程度または表面発現を示す前記Ｔ細胞の集団のパーセンテージの増加；あるいは同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤への曝露後の、前記Ｔ細胞もしくはＴ細胞の集団によって示される活性のレベルもしくは程度の減少を含む。

【0079】

提供される方法のいずれかの一部では、レベル、程度またはパーセンテージの増加は、１．２倍または約１．２倍、１．５倍または約１．５倍、２．０倍または約２．０倍、３倍または約３倍、４倍または約４倍、５倍または約５倍、６倍または約６倍、７倍または約７倍、８倍または約８倍、９倍または約９倍、１０倍または約１０倍以上を超える。提供される方法のいずれかの一部では、レベル、程度またはパーセンテージの減少は、１．２分の１または約１．２分の１、１．５分の１または約１．５分の１、２．０分の１または約２．０分の１、３分の１または約３分の１、４分の１または約４分の１、５分の１または約５分の１、６分の１または約６分の１、７分の１または約７分の１、８分の１または約８分の１、９分の１または約９分の１、１０分の１または約１０分の１以下を下回る。

【0080】

提供される方法のいずれかの一部では、参照Ｔ細胞集団は、適宜、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象と同一対象に由来するまたはそれと同一種の、疲弊していない表現型を有することが知られているＴ細胞の集団であるか、ナイーブＴ細胞の集団であるか、セントラルメモリーＴ細胞の集団であるか、またはステムセントラルメモリーＴ細胞の集団である。提供される方法のいずれかの一部では、参照Ｔ細胞集団は、（ａ）疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象の血液から単離されたバルクＴ細胞を含む対象適合集団であり、適宜、バルクＴ細胞は、ＣＡＲを発現しない、および／または（ｂ）ＣＡＲを発現するＴ細胞の用量の投与を受ける前に、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象から得られる。提供される方法のいずれかの一部では、参照Ｔ細胞集団は、対象へのその投与の前に、Ｔ細胞療法の試料、例えば、ＣＡＲを発現するＴ細胞の試料を含む組成物、またはＣＡＲを発現するＴ細胞を含む医薬組成物であり、適宜、組成物は、凍結保存された試料である。

【0081】

提供される方法のいずれかの一部では、１つまたはそれ以上の疲弊マーカーは、阻害受容体である。提供される方法のいずれかの一部では、１つまたはそれ以上の疲弊マーカーは、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＢＴＬＡ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＤ３９、ＶＩＳＴＡおよびＴＩＧＩＴの中から選択される。

【0082】

提供される方法のいずれかの一部では、活性は、増殖、細胞傷害性、または炎症性サイトカインのうち１つもしくは組合せの産生のうち１つまたはそれ以上であり、適宜、サイトカインのうち１つまたは組合せは、ＩＬ－２、ＩＦＮ－ガンマおよびＴＮＦ－アルファからなる群から選択される。

【0083】

提供される方法のいずれかの一部では、前記ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露は、ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤、適宜、ＣＡＲの抗原結合性ドメインに結合する薬剤とのインキュベーションを含む。提供される方法のいずれかの一部では、ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露は、Ｔ細胞を、ＣＤ１９抗原発現標的細胞、適宜、Ｂ細胞悪性病変の細胞に曝露する工程を含む。

【0084】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療する方法における使用のための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法、および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法も提供される。

【0085】

提供される方法のいずれかに従って、ＣＤ１９を発現するがんを治療する方法における使用のための、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体も提供される。

【0086】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療する方法における使用のための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法も提供される。

【0087】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療するための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法、および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法の使用も提供される。

【0088】

提供される方法のいずれかに従って、ＣＤ１９を発現するがんを治療するための、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体の使用も提供される。

【0089】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療するための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法の使用も提供される。

【0090】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療するための医薬の製造のための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法、および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を含む併用療法の使用も提供される。

【0091】

提供される方法のいずれかに従って、ＣＤ１９を発現するがんを治療するための医薬の製造のための、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体の使用も提供される。

【0092】

提供される方法のいずれかに従って、がんを治療するための医薬の製造のための、ＣＤ１９を発現するがんを標的化するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法の使用も提供される。

【0093】

提供される実施形態のいずれかの一部では、ＣＡＲは、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合する。一部の実施形態では、ＣＤ１９を発現するがんは、リンパ腫である。

【0094】

提供される実施形態のいずれかの一部では、化合物は、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオン、またはその薬学的に許容される塩である。

【図面の簡単な説明】

【0095】

【図1】図１は、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ転写因子の発現レベルを示す。

【図2A】図２Ａは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、生きている抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のパーセンテージを示す。

【図2B】図２Ｂは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞倍加の数を示す。

【図2C】図２Ｃは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞倍加の数を示す。

【図2D】図２Ｄは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、細胞周期のＧ１期である抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のパーセンテージを示す。

【図2E】図２Ｅは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、細胞周期のＧ１期である抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のパーセンテージを示す。

【図2F】図２Ｆは、様々な免疫調節化合物の存在下におけるＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体による刺激後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のサイトカインレベルを示す。ゼロを超えるＬｏｇ_２倍の変化値は、「＋」で指し示される。

【図2G】図２Ｇは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞および化合物Ｃで治療されたＲＬ腫瘍細胞の細胞数を示す。

【図2H】図２Ｈは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞および化合物２で処理されたＲＬ腫瘍細胞の細胞数を示す。

【図3A】図３Ａは、慢性刺激後の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のサイトカイン産生を示す。

【図3B】図３Ｂは、慢性刺激後の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解機能を示す。

【図3C】図３Ｃは、化合物Ｃの存在下で刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞との共培養の９日目のＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの代表的な画像を示す（同時的治療）。

【図3D】図３Ｄは、慢性刺激後に化合物Ｃの存在下で刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞と共培養されたＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの体積を示す（同時的治療）。

【図3E】図３Ｅは、慢性刺激後に化合物Ｃの存在下で刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞と共培養されたＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの体積を示す（同時的治療）。

【図3F】図３Ｆは、共培養された細胞の上清におけるＩＦＮγ濃度を示す。

【図3G】図３Ｇは、化合物Ｃまたは化合物２の存在下における６日間の慢性刺激後の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓ発現を示す。

【図3H】図３Ｈは、化合物Ｃで同時的に治療された慢性的に刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における差次的に発現された遺伝子を示すボルケーノプロットを描写する。

【図3I】図３Ｉは、慢性的に刺激されてきた抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における、化合物Ｃ同時的治療によって誘導される遺伝子発現プロファイル（ｌｏｇ_２倍の変化）における効果の比較を示す。

【図3J】図３Ｊは、化合物Ｃによる同時的治療後の慢性的に刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における差次的に発現された遺伝子のＫＥＧＧ経路富化解析を示す。

【図4A】図４Ａは、化合物Ｃの存在下における抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞との共培養の９日目のＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの代表的な画像を示す（レスキュー治療）。

【図4B】図４Ｂは、化合物Ｃの存在下で抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞と共培養されたＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの体積を示す（レスキュー治療）。

【図4C】図４Ｃは、化合物Ｃの存在下で抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞と共培養されたＣＤ１９発現腫瘍スフェロイドの体積を示す（レスキュー治療）。

【図4D】図４Ｄは、共培養された細胞の上清におけるＩＦＮγ濃度を示す。

【図4E】図４Ｅは、化合物Ｃによるレスキュー治療後の、慢性的に刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における差次的に発現された遺伝子を示すボルケーノプロットを示す。

【図4F】図４Ｆは、慢性的に刺激されてきた抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における、化合物Ｃレスキュー治療によって誘導された遺伝子発現プロファイル（ｌｏｇ_２倍の変化）における効果の比較を示す。

【図4G】図４Ｇは、化合物Ｃによるレスキュー治療後の、慢性的に刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における差次的に発現された遺伝子のＫＥＧＧ経路富化解析を示す。

【図5A】図５Ａは、化合物Ｃの存在下における慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す（同時的治療）。

【図5B】図５Ｂは、化合物Ｃの存在下におけるＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す（レスキュー治療）。

【図6A】図６Ａは、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投薬レジメンに基づく化合物Ｃの予想される血漿濃度レベルを示す。

【図6B】図６Ｂおよび図６Ｃは、化合物Ｃへの２４時間（図６Ｂ）または６日間曝露（図６Ｃ）後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓレベルを示す。

【図6C】図６Ｂおよび図６Ｃは、化合物Ｃへの２４時間（図６Ｂ）または６日間曝露（図６Ｃ）後の、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓレベルを示す。

【図6D】図６Ｄは、４つの異なる薬力学モデルを使用して生成された、化合物ＣのＱ７Ｄ投薬レジメンに基づく予測される好中球絶対数（ＡＮＣ）プロファイルを示す。

【図7A】図７Ａは、高濃度の化合物Ｃで１日間、次いで低濃度の化合物Ｃで５日間、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞に関するものを含む、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す。

【図7B】図７Ｂは、高濃度の化合物Ｃで１日間、次いで低濃度の化合物Ｃで６日間、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞に関するものを含む、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞のそれぞれ細胞溶解活性およびＣＤ２７／ＣＣＲ７発現を示す。

【図7C】図７Ｃは、高濃度の化合物Ｃで１日間、次いで低濃度の化合物Ｃで６日間、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞に関するものを含む、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞のそれぞれ細胞溶解活性およびＣＤ２７／ＣＣＲ７発現を示す。

【発明を実施するための形態】

【0096】

がんまたは増殖性疾患に罹っている対象の治療のための、操作されたＴ細胞（例えば、ＣＡＲ－Ｔ細胞）を含有する細胞療法等の細胞療法、および下記構造：

【化12】

(式I)
を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体もしくはラセミ混合物（化合物Ｃ）、ならびにそれらの組成物の方法および使用が本明細書に提供される。一部の態様では、細胞療法は、Ｔ細胞療法である。一部の態様では、細胞療法は、Ｂ細胞悪性病変、例えば、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）またはそのサブタイプに関連する抗原等、がんまたは増殖性疾患に関連する抗原を特異的に認識および／または標的化するＴ細胞を含む養子Ｔ細胞療法である。一部の態様では、細胞療法は、抗原に結合する、例えば、特異的に結合する抗原結合性ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）により操作されたＴ細胞を含む。一部の事例では、細胞療法によって標的化された抗原は、ＣＤ１９である。一部の態様では、がん、例えば、リンパ腫は、ＣＤ１９を発現する。細胞療法を含む組成物および／または化合物Ｃを含む組成物を含有する組合せおよび製造品、例えば、キット、ならびにリンパ腫等のがんを含む疾患、状態および障害を治療または予防するためのそのような組成物および組合せの使用も本明細書に提供される。

【0097】

（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオン（化合物Ｃ）は、経口セレブロンモジュレート剤（ＣＥＬＭｏＤ）である。セレブロンは、ＣＲＬ４ユビキチンＥ３リガーゼの基質受容体として機能し、セレブロンモジュレート化合物の結合は、Ｉｋａｒｏｓファミリージンクフィンガータンパク質１および３（ＩＫＺＦ１およびＩＫＺＦ３、これらはそれぞれＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓとしても知られている）等の重要な標的基質のリクルートメント、ユビキチン化および破壊を誘導して、細胞効果を媒介する。本明細書で示されるように、化合物Ｃの投与は、そのクラスにおける他のＣＥＬＭｏＤ（例えば、レナリドミド、アバドミド（avadomide）およびイベルドミド（iberdomide））を用いた場合よりもさらに、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの顕著な分解をもたらす。しかし、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓ分解の潜在的な副作用は、好中球成熟停止に続発する好中球減少症の発症である。好中球減少症は、造血発生を制御する重大な意味を持つ転写因子であるＩｋａｒｏｓの枯渇の結果として発症する場合があり、好中球前駆体の後期成熟停止が原因である。

【0098】

細胞療法、例えば、Ｔ細胞に基づく療法、例えば、養子Ｔ細胞療法（キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および／または他の組換え抗原受容体等、目的の疾患または障害に特異的なキメラ受容体を発現する細胞の投与を伴う療法、ならびに他の養子免疫細胞および養子Ｔ細胞療法を含む）は、Ｂ細胞悪性病変等の疾患および障害の治療において有効となり得る。Ｔ細胞の表面におけるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体の操作された発現は、Ｔ細胞特異性の方向性を変えること（redirection）を可能にする。臨床研究において、ＣＡＲ－Ｔ細胞、例えば、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞は、白血病およびリンパ腫患者の両方において耐久性のある完全奏効を生じた（Porter et al. (2015) Sci Transl Med., 7:303ra139；Kochenderfer (2015) J. Clin. Oncol., 33: 540-9；Lee et al. (2015) Lancet, 385:517-28；Maude et al. (2014) N Engl J Med, 371:1507-17）。

【0099】

ある特定の状況では、養子細胞療法に利用できるアプローチは、必ずしも完全に満足のいくものとは限らない場合がある。例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞持続は、リンパ腫に罹っている多くの対象において検出され得るが、より少ない完全奏効（ＣＲ）が、ＡＬＬに罹っている対象と比較して、ＮＨＬに罹っている対象において観察された。より具体的には、最大８０％のより高い全奏効率（ＣＲ率４７％～６０％）がＣＡＲ Ｔ細胞注入後に報告されたが、一部における応答は一過性であり、対象は、持続性ＣＡＲ Ｔ細胞の存在下で再発することが示された（Neelapu, 58th Annual Meeting of the American Society of Hematology (ASH): 2016; San Diego, CA, USA. Abstract No. LBA-6.2016; Abramson, Blood. 2016 Dec 01;128(22):4192）。別の研究は、４０％の長期ＣＲ率を報告した（Schuster, Ann Hematol. 2016 Oct;95(11):1805-10）。

【0100】

一部の態様では、これに関する説明は、循環ＣＡＲ発現Ｔ細胞の免疫学的疲弊、および／またはＴリンパ球集団の変化である。その理由として、一部の状況では、最適な有効性が、活性化されるようになる、増大化する、細胞傷害性死滅およびサイトカイン等の様々な因子の分泌を含む様々なエフェクター機能を発揮する、長期を含む持続する、ある特定の表現型状態（長期記憶、低分化およびエフェクター状態等）に分化する、それに移行するまたはそれへのリプログラミングに関連する、疾患の局所的微小環境における免疫抑制状態を回避または低減する、クリアランスおよび標的リガンドまたは抗原への再曝露後に有効かつ頑強なリコール応答を提供する、ならびに疲弊、アネルギー、末梢性寛容、終末分化および／または抑制状態への分化を回避または低減する性能を有する投与された細胞の能力に依存し得ることが挙げられる。

【0101】

一部の態様では、操作された細胞の曝露、持続性および機能は、対象への投与後に低減されるまたは減退する。一部の態様では、長期刺激または抗原への曝露および／または腫瘍微小環境における条件下での曝露後に、Ｔ細胞は、経時的に、機能低下になることができるおよび／または疲弊した状態に関連する特色を示すことができる。一部の態様では、これは、抗原に対するＴ細胞の持続性および有効性を低減させ、有効となるその能力を限定する。これにもかかわらず、観察において、一部の事例では、組換え受容体を発現する投与された細胞が、インビボで再増大化しておよび／または再活性化されて（例えば、経時的に増加した数の細胞または持続時間を示す）、養子細胞療法における有効性および治療転帰を改善することができることが指し示されている。ＣＡＲ Ｔ細胞の有効性および機能を改善する、特に、機能低下または疲弊した状態を最小化、低減、予防または反転する方法の必要がある。

【0102】

提供される方法は、化合物Ｃによる治療が、Ｔ細胞の１つまたはそれ以上のサイトカインを産生する能力、細胞傷害性、増大化、増殖および持続性に関する機能を含むＴ細胞機能を改善することができるという観察に基づく。一部の態様では、提供される方法は、細胞療法の投与に関連するＴ細胞（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）の増殖および／または活性を増強またはモジュレートする。そのような方法および使用が、改善されたまたはより優れたＴ細胞機能性およびこれにより改善された抗腫瘍有効性を提供し、または達成することが見出される。

【0103】

本明細書において、Ｔ細胞機能の強化に加えて、化合物Ｃによる治療は、Ｔ細胞シグナル伝達を増加させ、および／または慢性刺激後に差次的に調節される１つまたはそれ以上の遺伝子を変更することによるものを含む、Ｔ細胞疲弊を反転、遅延または予防することができることも見出される。一部の事例では、Ｔ細胞活性を増加または強化する薬剤は、細胞を疲弊した状態に駆動することができるが、本明細書において、Ｔ細胞活性において強化の効果を発揮する化合物Ｃの活性が、Ｔ細胞疲弊から切り離されることが見出される。さらに、本明細書における観察は、化合物Ｃが、細胞が疲弊の特色を示した後に１つまたはそれ以上のＴ細胞活性を回復または部分的に回復すること等により、Ｔ細胞疲弊からＴ細胞をレスキューする活性を示すことを示す。注目すべきことに、本明細書における結果は、慢性的に刺激されており、疲弊したＴ細胞の特徴を示すＴ細胞が、化合物Ｃへの曝露後に、活性を回復することができる、またはその活性を回復もしくは部分的に回復させることを示す。本明細書における観察は、提供される方法が、治療される対象の特定の群における等、ある特定の代替方法と比較して、改善されたまたはより耐久性のある応答を達成することもできることを支持する。

【0104】

本明細書において、低用量化合物Ｃ治療（例えば、１ｎＭ）が、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓ発現の両方を顕著に分解することができることも示される。しかし、本明細書において、より高用量の化合物Ｃ（例えば、１０および１００ｎＭ）が、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの持続した標的分解を生じ、低減した細胞溶解機能をもたらすことができることも示される。そのような結果は、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの過剰な持続した標的分解が、逆効果となる効果を有し、ＣＡＲ Ｔ細胞機能障害をもたらし得ることを示唆する。これらの結果に基づき、また、化合物Ｃは、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓを、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓを標的化する他のＣＥＬＭｏＤ化合物よりも顕著に分解することができるため、本明細書において、単一の毎週用量が、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの深いが一過性の分解をもたらすのに十分であり、よって、用量の間でＩｋａｒｏｓおよび／またはＡｉｏｌｏｓ発現の復旧を潜在的に可能にすることが仮定された。本明細書で示される通り、０．３ｍｇの毎週用量（Ｑ７Ｄ）における化合物Ｃの薬物動態モデル化は、およそ１ｎＭの７日目のＣ_ｍｉｎで、化合物Ｃの急速Ｃ_ｍａｘ（およそ２０ｎＭ）および二相性排出を実証した。モデル化は、０．３ｍｇの毎週用量が、好中球数に実質的に影響しないであろうことも示した。また、本明細書で示される通り、前臨床モデルにおいて、ＣＤ１９＋標的細胞に対する抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞溶解活性は、一過性（１日間）高濃度の化合物Ｃ（２０～１００ｎＭ）への曝露と、それに続く洗い流しおよび慢性低濃度の化合物Ｃ（１ｎＭで５日間）の後に最も顕著であり、この高濃度から低濃度の曝露は、０．３ｍｇを７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）における化合物Ｃの薬物動態プロファイルをモデル化するために選択された。逆に、より高い慢性濃度の化合物Ｃは、細胞溶解機能に有害な効果を有した。

【0105】

よって、本明細書に示される結果に基づき、化合物Ｃの間欠的な（例えば、７日毎に１回）投薬と組み合わせた細胞療法、例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞療法は、好中球成熟停止に続発する好中球減少症の患者発症のリスクも低減しながら、ＣＡＲ Ｔ細胞の早期の疲弊を予防し、Ｔ細胞機能性を増強および延長し、リンパ腫等のがんにおけるより顕著なかつ持続的な応答を生じるための有用な治療アプローチを提供することができる。

【0106】

一部の実施形態では、提供される方法に従って投与される操作されたＴ細胞療法のＴ細胞機能（Ｔ細胞の増大化、増殖および持続性に関する機能を含む）は、化合物Ｃによって改善される。一部の実施形態では、方法は、化合物Ｃと組み合わせた、例えば、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の養子細胞療法のための細胞を含む組成物等のＴ細胞療法の投与に基づいて有益である。一部の態様では、提供される方法および使用は、ある特定の代替方法と比較して、改善され、またはより持続的な応答または有効性を提供し、または達成する。一部の態様では、提供される方法は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）の投与に関連するＴ細胞の増殖および／または活性を増強し、またはモジュレートする。特定の実施形態では、化合物Ｃとの併用療法は、ＣＡＲ Ｔ細胞の持続性抗腫瘍機能を改善することにより、腫瘍微小環境をモジュレートすることによりＢ細胞悪性病変にわたってＣＡＲ Ｔ細胞の活性を増強および延長するための有用な治療アプローチを提供することができる。

【0107】

一部の実施形態では、化合物Ｃおよびリンパ球枯渇療法の骨髄抑制性効果が最小化されるように、化合物Ｃは、リンパ球枯渇療法を受けてから十分な時間の後に対象に投与される。

【0108】

一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞）が、疲弊の特色を示すことができるか、またはそれを示す可能性がある時点で使用される。一部の実施形態では、疲弊表現型は、ピーク増大化に達したＴ細胞が、対象の血液中の数を減退し始めた後に明らかである。一部の実施形態では、化合物ＣにＴ細胞療法のＴ細胞（ＣＡＲ Ｔ細胞）を曝露または接触させる方法は、抗原へのＴ細胞の曝露の直前の時点（ベースライン）と比較して、または細胞が抗原に曝露されたが増殖し続けておりピーク増大化に未だ達していない時点と比較して、Ｔ細胞が、機能低下または疲弊した状態の増加を示す時点で行われる。一部の実施形態では、機能低下または疲弊した状態の増加は、以前のより初期の時点と比較した、疲弊マーカーの発現増加によって決定することができる。一部の実施形態では、疲弊マーカーの発現の増加等、機能低下または疲弊した状態の増加は、Ｔ細胞療法によって標的化される抗原に関連する疾患または状態に罹っている対象へのＴ細胞療法（例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞）の投与後の時点で起こる。対象への投与後の末梢血中のＴ細胞等のＴ細胞は、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３およびＬＡＧ－３等のＴ細胞活性化または疲弊のマーカーについてモニターすることができる。

【0109】

一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法、例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞の投与、およびＣＡＲ Ｔ細胞が、疲弊表現型を示すか、またはそれを示す可能性があるよりも前の時点における化合物Ｃの投与の開始が必要である。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、ＣＡＲ Ｔ細胞が依然として増大化しているか、または依然として増大化することができる時点で開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、対象の血液中のピークＣＡＲ Ｔ細胞数の存在の前またはその前の疑われる時点で開始される。一部の態様では、この時点における化合物Ｃ投与の開始は、ＣＡＲ Ｔ細胞機能を強化する。一部の態様では、この時点における化合物Ｃ投与の開始はまた、ＣＡＲ Ｔ細胞疲弊を遅延させ、または予防する。

【0110】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、ピークＣＡＲ－Ｔ細胞が対象の血液中に存在する前またはほぼその時点、例えば、Ｔ細胞の投与の開始後２１日以内であるかまたはそうであることが疑われるか、またはそうである可能性がある時点で開始される。一部の事例では、ピークＣＡＲ－Ｔ細胞は、ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後１１～１５日以内に存在する。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の開始から１～１５日、例えば、１日もしくは８日もしくは１５日またはそれらの概数後の時点で開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、対象が、細胞療法の投与後に重度の毒性を示さない時点で投与される。

【0111】

一部の実施形態では、提供される方法は、毒性もしくは毒性転帰の高い割合もしくは可能性をもたらさないか、またはある特定の他の細胞療法もしくは免疫調節薬レジメン等と比較して、毒性もしくは毒性転帰、例えば、神経毒性（ＮＴ）、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）もしくは血液学的な毒性、例えば、好中球減少症の割合もしくは可能性を低減させる。

【0112】

一部の実施形態では、方法は、ある特定の血液学的な毒性、例えば、好中球減少症または血小板減少症をもたらさないか、またはそのリスクを増加させない。一部の実施形態では、対象の５０％以下は、グレード３よりも高い好中球減少症、例えば、長期のグレード３の好中球減少症もしくはグレード４の好中球減少症、および／またはグレード３よりも高い血小板減少症、例えば、グレード３もしくはグレード４の血小板減少症を示す。一部の実施形態では、方法に従って治療された対象の少なくとも５０％（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）は、グレード３またはグレード３よりも高い重度の好中球減少症または重度の血小板減少症を示さない。

【0113】

一部の実施形態では、方法は、重度のＮＴ（ｓＮＴ）、重度のＣＲＳ（ｓＣＲＳ）、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、３日間以上にわたる少なくともまたはセ氏約３８度の発熱、および少なくともまたは約２０ｍｇ／ｄＬのＣＲＰの血漿レベルをもたらさないか、またはそのリスクを増加させない。一部の実施形態では、提供される方法に従って治療された対象の３０％、３５％、４０％、５０％、５５％、６０％以上を超えるか、またはその概数を超えるものは、いかなるグレードのＣＲＳもいかなるグレードの神経毒性も示さない。一部の実施形態では、治療された対象の５０％以下（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）は、グレード２よりも高いサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはグレード２よりも高い神経毒性を示す。一部の実施形態では、方法に従って治療された対象の少なくとも５０％（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）は、重度の毒性の転帰（例えば、重度のＣＲＳまたは重度の神経毒性）を示さず、例えば、グレード３以上の神経毒性を示さず、および／または重度のＣＲＳを示さず、または細胞の投与の１週間、２週間もしくは１ヶ月間以内等、治療後のある特定の期間内にそれを行わない。

【0114】

一部の態様では、用量、用量のタイミングまたは用量の数は、グレード４の好中球減少症またはグレード４の血小板減少症等の重度の毒性を引き起こすと予想されない。一部の態様では、提供される方法は、例えば、化合物Ｃの間欠的投薬全体を通して、対象へのＴ細胞療法および／または化合物Ｃの投与後の毒性を最小化または回避する。一部の態様では、本明細書に提供される方法は、単独療法アプローチにおける化合物Ｃのために使用され得る用量よりも実質的に低く、低減された頻度で与えられる用量を投与する工程を伴う。一部の態様では、本明細書に提供される方法は、単独療法アプローチにおける化合物Ｃのために使用され得るものよりも少ない用量を投与する工程を伴う。一部の態様では、本明細書に提供される方法は、単独療法アプローチにおける化合物Ｃのために使用され得るものよりも長く、化合物Ｃの用量間の期間で、化合物Ｃの間欠的用量を投与する工程を伴う。

【0115】

一部の事例では、化合物Ｃは、それが細胞を効率的に／有効に増強し、または準備することができる時点で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の細胞のピークまたは最大レベルが対象の血液中で検出可能となる時点でまたはその前に開始される。一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法、例えば、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法を強化することができ、これは、一部の態様では、治療のための転帰を改善することができる。一部の実施形態では、方法は、Ｔ細胞療法の細胞が対象において弱い増大化を示す、疲弊状態になった、低減もしくは減少した持続性を示す対象において、ならびに／あるいは他の療法に対して抵抗性もしくは不応性であるおよび／または侵襲性もしくは高リスクがんであるがんに罹っている対象において、特に有利である。

【0116】

一部の実施形態では、Ｔ細胞療法、例えば、ＣＡＲ－Ｔ細胞の投与を受けた対象は、対象の生体試料中、例えば、対象の血液中等、対象における療法のＴ細胞の存在、非存在またはレベルについてモニターされる。一部の実施形態では、提供される方法は、それが投与された対象において、増加した持続性および／またはより優れた効力を有する遺伝子操作された細胞をもたらす。一部の実施形態では、対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞等の遺伝子操作された細胞の持続性は、Ｔ細胞療法の投与を伴うが化合物Ｃの投与の非存在下である方法等の代替方法によって達成されるであろう持続性と比較してより優れている。一部の実施形態では、持続性は、少なくともまたは約少なくとも１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍以上増加される。

【0117】

一部の実施形態では、投与された細胞の持続性の程度または程度は、対象への投与後に検出または定量化することができる。例えば、一部の態様では、定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）を使用して、対象の血液または血清または臓器または組織（例えば、疾患部位）における組換え受容体を発現する細胞（例えば、ＣＡＲ発現細胞）の含量を評価する。一部の態様では、持続性は、１マイクログラムのＤＮＡ当たりの受容体、例えば、ＣＡＲをコードするＤＮＡまたはプラスミドのコピーとして、あるいは１マイクロリットルの試料、例えば、血液もしくは血清当たりの、または１マイクロリットルの試料当たりの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）もしくは白血球細胞もしくはＴ細胞の総数当たりの受容体発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞の数として定量化される。一部の実施形態では、受容体に特異的な抗体を一般に使用した、受容体を発現する細胞を検出するフローサイトメトリーアッセイを行うこともできる。細胞に基づくアッセイを使用して、疾患もしくは状態の細胞または受容体によって認識される抗原を発現する細胞に結合するおよび／またはそれを中和するおよび／またはそれに対する応答、例えば、細胞傷害性応答を誘導することができる細胞等の機能的な細胞の数またはパーセンテージを検出することもできる。そのような実施形態のいずれかでは、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ発現細胞）に関連する別のマーカーの発現の程度またはレベルを使用して、対象における内因性細胞から、投与された細胞を区別することができる。

【0118】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、ある期間にわたって投与されて、応答の持続性を増強、増加または最適化する。一部の態様では、提供される方法は、３ヶ月目に完全寛解（ＣＲ）を達成するまたはそれにある対象が、治療を終えた後または併用療法の投与後に完全奏効（ＣＲ）を最初に達成した後の３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間または１２ヶ月間を超えてまたはその概数を超えて、生存するまたは進行せずに生存する等、より長い期間応答を持続する可能性がより高いという観察に基づく。一部の態様では、方法が行われて、Ｔ細胞療法の投与の開始後の少なくとも３ヶ月間または約３ヶ月間である期間にわたり、記載されている特定の間欠的投薬レジメン等において化合物Ｃを投与する。

【0119】

一部の態様では、提供される方法および使用は、治療された対象の特定の群等における、ある特定の代替方法、例えば、単独療法としてのＴ細胞療法もしくは化合物Ｃの投与を含む方法、または本明細書に記載されている通り一緒にした併用療法としての投与を含まない方法と比較して、改善されたまたはより持続的な応答または有効性を提供するまたは達成する。一部の実施形態では、方法は、例えば、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の養子細胞療法のための細胞および化合物Ｃを含む組成物等、Ｔ細胞療法の投与に基づいて有利である。一部の実施形態では、そのような応答は、高リスク疾患、例えば、高リスクＮＨＬに罹っている患者等、予後不良を有する高リスク患者において観察される。一部の態様では、方法は、標準療法に対して再発したもしくは不応性である（Ｒ／Ｒ）または予後不良を有するＮＨＬ等、侵襲性および／または予後不良Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の形態を有する対象を治療する。一部の実施形態では、提供される方法に従って治療された対象は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）または濾胞性リンパ腫に罹っている。

【0120】

一部の実施形態では、提供される方法に従っておよび／または提供される製造品、キットもしくは組成物を用いて治療された対象の少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％または少なくとも７５％以上は、完全奏効（ＣＲ）を達成する。一部の実施形態では、対象は、ＣＲにあり、最小残存疾患（ＭＲＤ）を示す。一部の実施形態では、対象は、ＣＲにあり、ＭＲＤ－である。一部の実施形態では、提供される方法に従っておよび／または提供される製造品、キットもしくは組成物を用いて治療された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％または少なくとも９０％は、部分奏効（ＰＲ）の客観的奏効を達成する。一部の実施形態では、提供される方法に従っておよび／または提供される製造品、キットもしくは組成物を用いて治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％以上は、細胞療法の投与の開始後６ヶ月目、７ヶ月目、８ヶ月目、９ヶ月目、１０ヶ月目、１１ヶ月目または１年目に、ＣＲまたはＰＲを達成する。

【0121】

一部の実施形態では、細胞療法の投与の開始後３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月または１２ヶ月目以上までに、提供される方法に従っておよび／または提供される製造品、キットもしくは組成物を用いて治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％以上は、ＣＲまたは客観的奏効（ＯＲ）を保つ等、奏効を保つ。一部の実施形態では、ＣＲまたはＯＲ等のそのような応答は、提供される方法に従って治療された対象の少なくとももしくは約少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％以上において、または３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月もしくは６ヶ月目までにＣＲを達成するそのような対象において等、少なくとも３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間以上にわたり持続性がある。一部の実施形態では、提供される方法に従っておよび／または提供される製造品、キットもしくは組成物を用いて治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％以上、または３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月もしくは６ヶ月目までにＣＲを達成するそのような対象は、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間以上を超えてまたはその概数を超えて、生存するまたは進行せずに生存する。

【0122】

本出願で参照されている特許文書、科学論文およびデータベースを含むあらゆる刊行物は、あたかも個々の刊行物のそれぞれが個々に参照により本明細書に組み込まれるのと同一程度まで、あらゆる目的のためにそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に示される定義が、参照により本明細書に組み込まれる特許、出願、公開された出願および他の刊行物に示される定義に反するかさもなければ不一致である場合、本明細書に示される定義が、参照により本明細書に組み込まれる定義よりも優先する。

【0123】

本明細書で使用されるセクションの見出しは、単に体系化を目的とするものであり、記載されている主題を限定するものとして解釈されるべきではない。

【0124】

Ｉ．併用療法
がんに罹っている対象の治療のための、操作された細胞、例えば、Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲ－Ｔ細胞）および（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオン、または式Ｉ

【化13】

(式I)
の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体もしくはラセミ混合物（化合物Ｃ）（これらの組成物を含む）の方法および使用が本明細書に提供される。一部の実施形態では、方法は、リンパ腫に罹っている対象を治療するためのものである。一部の実施形態では、リンパ腫は、Ｂ細胞悪性病変である。一部の態様では、リンパ腫は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。一部の実施形態では、がん、例えば、リンパ腫は、ＣＤ１９を発現する。一部の態様では、方法および使用は、ある特定の代替方法と比較して、例えば、治療された対象の特定の群において、改善された応答および／またはより持続的な応答もしくは有効性を提供するまたは達成する。

【0125】

化合物Ｃを調製する方法は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＵＳ２０１９／０３２２６４７に記載されている。

【0126】

一部の実施形態では、方法および使用は、１）リンパ腫（例えば、ＮＨＬ等のＢ細胞悪性病変）および／またはリンパ腫が由来する細胞型によって発現される、それに関連するおよび／またはそれに特異的な抗原を認識する、遺伝子操作された細胞表面受容体（例えば、組換え抗原受容体）、例えば、キメラ受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む細胞療法を対象に投与する工程と、２）化合物Ｃを対象に投与する工程とを含む。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の後に（それに後続して）、または細胞療法の投与の開始の後に（それに後続して）開始される。一部の事例では、化合物Ｃは、細胞療法の投与を受けた対象に投与される。方法は、操作された細胞の１またはそれ以上の用量および化合物Ｃの２以上の用量を対象に投与する工程を伴うことができる。

【0127】

例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する操作された細胞および化合物Ｃ、または本明細書に記載されている操作された細胞および／もしくは化合物Ｃを含む組成物を含む、併用療法は、種々の治療、診断および予防的適応症において有用である。例えば、組合せは、対象における種々の疾患および障害の治療において有用である。そのような方法および使用は、例えば、腫瘍またはがん等の疾患、状態または障害に罹っている対象への操作された細胞、化合物Ｃ、および／または一方もしくは両方を含有する組成物の投与を伴う、治療方法および使用を含む。一部の実施形態では、操作された細胞、化合物Ｃ、および／または一方もしくは両方を含有する組成物は、疾患または障害の治療をもたらすための有効量で投与される。使用は、そのような方法および治療における、ならびにそのような治療方法を行うための医薬の調製における、操作された細胞、化合物Ｃ、および／または一方もしくは両方を含有する組成物の使用を含む。一部の実施形態では、方法は、疾患または状態に罹っているまたは有することが疑われる対象に、操作された細胞、化合物Ｃ、および／または一方もしくは両方を含有する組成物を投与することにより行われる。一部の実施形態では、方法はこれにより、対象における疾患または状態または障害を治療する。一部の実施形態では、操作された細胞は、セクションＩＩに記載されているもののうちいずれかである。

【0128】

一部の実施形態では、併用療法は、リンパ腫に罹っている対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、特定のＢ細胞悪性病変に罹っている対象に投与される。治療されるＢ細胞悪性病変は、抗原の発現が、Ｂ細胞悪性病変の病因学に関連するおよび／またはそれに関与する、例えば、Ｂ細胞悪性病変を引き起こす、それを増悪するまたは他の仕方でそれに関与する、いずれかとなることができる。例示的なＢ細胞悪性病変は、細胞の悪性病変または形質転換に関連する疾患または状態（例えば、がん）を含むことができる。治療され得る様々なＢ細胞悪性病変に関連する抗原を含む例示的な抗原は、本明細書に記載されている。特定の実施形態では、キメラ抗原受容体は、疾患または状態に関連する抗原に特異的に結合する。一部の実施形態では、受容体によって標的化される抗原は、多数の知られているＢ細胞マーカーのいずれか等、Ｂ細胞悪性病変に関連する抗原を含む。一部の実施形態では、抗原は、ヒトＢ細胞を含むＢ細胞によって発現されるかまたはその表面に存在する。一部の実施形態では、受容体によって標的化される抗原は、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＲＯＲ１、ＣＤ４５、ＣＤ２１、ＣＤ５、ＣＤ３３、Ｉｇカッパー、Ｉｇラムダ、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂまたはＣＤ３０である。一部の実施形態では、抗原は、ＣＤ１９であり、キメラ抗原受容体は、ＣＤ１９に特異的に結合する。一部の実施形態では、ＣＤ１９抗原は、ヒトＣＤ１９である。一部の実施形態では、リンパ腫は、ＣＤ１９を発現するＢ細胞を含む。ＣＡＲ発現Ｔ細胞がＣＤ１９に特異的である本明細書に提供される方法のいずれかの記載が、上に記載されているいずれか等、別のＢ細胞抗原またはＴ細胞悪性病変に関連するもしくはその細胞表面に発現される抗原の標的化により行うこともできることが理解される。

【0129】

一部の実施形態では、治療されるべきＢ細胞悪性病変は、白血病およびリンパ腫、例えば、急性骨髄球性（または骨髄性）白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄球性（または骨髄性）白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性（またはリンパ芽球性）白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、辺縁帯リンパ腫、バーキットリンパ腫、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、未分化大細胞型リンパ腫（ＡＬＣＬ）、濾胞性リンパ腫、不応性濾胞性リンパ腫およびびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を含む。一部の実施形態では、疾患または状態は、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、成人ＡＬＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）およびびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の中から選択されるＢ細胞悪性病変である。一部の実施形態では、疾患または状態は、ＮＨＬであり、ＮＨＬは、侵襲性ＮＨＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、ＮＯＳ（ｄｅ ｎｏｖｏかつ低悪性度から形質転換）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、Ｔ細胞／組織球（ｈｉｓｔｏｃｙｔｅ）リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＴＣＨＲＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）および／または濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、適宜、濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）からなる群から選択される。

【0130】

一部の実施形態では、方法は、抗原受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現細胞）および化合物Ｃを投与することにより、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）等のリンパ腫に罹っている対象を治療する工程を伴う。一部の実施形態では、化合物Ｃは、組換え受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現細胞）の投与の開始の後にまたはその後続で等、組換え受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現細胞）の投与の後にまたはその後続で投与される。

【0131】

一部の実施形態では、ＮＨＬは、Ｌｕｇａｎｏ分類に基づきステージ分類することができる（例えば、Cheson et al., (2014) JCO 32(27):3059-3067；Cheson, B.D. (2015) Chin Clin Oncol 4(1):5を参照）。一部の事例では、ステージは、ローマ数字Ｉ～ＩＶ（１～４）によって記載され、リンパ系以外の臓器（節外性臓器）に罹患する限定されたステージ（ＩまたはＩＩ）のリンパ腫は、Ｅによって指し示される。ステージＩは、１個の結節もしくは隣接する結節の群への関与、または結節性関与を伴わない単一の節外性病変を表す（ＩＥ）。ステージ２は、横隔膜の同側における２個以上の結節性の群への関与、または限定された近接節外性関与を伴う結節性度合によるステージＩもしくはＩＩを表す（ＩＩＥ）。ステージＩＩＩは、横隔膜の両方の側における結節への関与、または脾臓関与を伴う横隔膜の上の結節を表す。ステージＩＶは、追加の非近接リンパ節外関与への関与を表す。加えて、「巨大腫瘤病変（bulky disease）」を使用して、特に、ステージＩＩのために、胸部における大型の腫瘍を表すことができる。疾患の程度は、集積のあるリンパ腫については陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）・コンピュータ断層撮影（ＣＴ）によって、また、集積のない組織像についてはＣＴによって決定される。

【0132】

一部の実施形態では、米国東海岸がん臨床試験グループ（Eastern Cooperative Oncology Group）（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス指標を使用して、治療のための対象、例えば、以前の療法から不十分なパフォーマンスを有していた対象を評価または選択することができる（例えば、Oken et al. (1982) Am J Clin Oncol. 5:649-655を参照）。一部の実施形態では、対象は、１以下のＥＣＯＧ状態を有する。パフォーマンスステータスのＥＣＯＧ尺度は、自分自身をケアするその能力、日常の活動および身体能力（例えば、歩行、作業、等）の観点から患者の機能レベルを表す。一部の実施形態では、０のＥＣＯＧパフォーマンスステータスは、対象が、通常の活動を行うことができることを指し示す。一部の態様では、１のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、身体活動にある程度の制限を示すが、対象は、完全に歩行可能である。一部の態様では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する患者は、５０％を超えて歩行可能である。一部の事例では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、セルフケアが可能となることもできる；例えば、Sorensen et al., (1993) Br J Cancer 67(4) 773-775を参照されたい。ＥＣＯＧパフォーマンスステータスを反映した基準は、下の表１に記載されている：

【表1】

【0133】

一部の実施形態では、対象は、二重／三重ヒットリンパ腫または二重／三重ヒット分子サブタイプのリンパ腫に罹っているかまたはそれに罹っていると同定された。一部の実施形態では、リンパ腫は、ＭＹＣ（骨髄細胞腫症癌遺伝子）、ＢＣＬ２（Ｂ細胞リンパ腫２）および／またはＢＣＬ６（Ｂ細胞リンパ腫６）遺伝子再編成（例えば、転座）の存在によって特徴付けされる二重ヒットリンパ腫である。一部の実施形態では、リンパ腫は、ＭＹＣ、ＢＣＬ２およびＢＣＬ６遺伝子再編成の存在によって特徴付けされる三重ヒットリンパ腫である；例えば、Aukema et al., (2011) Blood 117:2319-2331を参照されたい。そのような実施形態の一部の態様では、対象は、ＥＣＯＧ ０～１である。態様では、そのような対象のために療法が指し示される、および／または使用説明書は、そのような集団内の対象への投与を指し示す。一部の実施形態では、２０１６ ＷＨＯ基準（Swerdlow et al., (2016) Blood 127(20):2375-2390）に基づき、二重／三重ヒットリンパ腫は、ＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／またはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（二重／三重ヒット）と考慮することができる。

【0134】

一部の実施形態では、併用療法は、細胞療法（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）による治療に対して不十分な応答者であるかもしくはそうである可能性があるかもしくはそうであることが予測される、ならびに／または応答しない、そうしない可能性があるおよび／もしくはそうしないことが予測される、もしくはある特定の時間内におよび／もしくはある特定の程度まで応答しない対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、細胞療法の投与の開始後１ヶ月以内、２ヶ月以内または３ヶ月以内等に、完全奏効または全奏効を示さないかまたはそうする可能性が低いかまたはそうすることが予測されない対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、細胞療法の投与後の１ヶ月、２ヶ月または３ヶ月間以内等に、進行性疾患（ＰＤ）を示すかまたはそれを示す可能性があるかまたはそれを示すことが予測される対象に投与される。一部の実施形態では、対象は、細胞療法でそのように治療されたまたは以前に治療された複数の同様の状態にある対象に基づき、応答またはある特定の応答を示さない可能性があるかまたはそう予測される。

【0135】

一部の実施形態では、提供される方法は、特定の群またはサブセットの対象、例えば、高リスク疾患、例えば、高リスクＮＨＬを有すると同定された対象を治療する工程を伴う。一部の態様では、方法は、標準療法に対して再発したもしくは不応性である（Ｒ／Ｒ）または予後不良であるＮＨＬ等、侵襲性および／または予後不良Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の形態を有する対象を治療する。一部の事例では、療法が指し示される疾患および／または患者集団に関する、利用できる療法、標準治療または参照療法に対する全奏効率（ＯＲＲ）は、４０％未満である、および／または完全奏効（ＣＲ）は、２０％未満である。一部の実施形態では、化学療法抵抗性ＤＬＢＣＬにおいて、参照もしくは利用できる治療または標準治療の療法によるＯＲＲは、約２６％であり、ＣＲは、約８％である（Crump et al. Outomes in refractory aggressive diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL): Results from the international SCHOLAR study. ASCO 2016 [Abstract 7516]）。一部の態様では、提供される方法、組成物、使用および製造品は、利用できる療法に対する改善されたかつ優れた応答を達成する。

【0136】

一部の実施形態では、本明細書に記載されている対象の治療のための方法および使用は、例えば、疾患の特定の型、診断基準、前の治療および／または前の治療に対する応答に基づき、特定の群またはサブセットの対象を選択または同定する工程を伴う。一部の実施形態では、方法は、１つまたはそれ以上の以前の療法による治療後の寛解後に再発したもしくはそれに対して不応性になった対象；または本明細書に記載されている療法を含む、１つもしくはそれ以上の以前の療法、例えば、一次もしくはより高次選択の標準療法に対して再発したもしくは不応性である（Ｒ／Ｒ）対象を治療する工程を伴う。

【0137】

一部の実施形態では、対象は、１、２、３、４、５または６つを超える以前の療法に付されている。一部の実施形態では、対象は、１つの以前の療法に付されている。一部の実施形態では、対象は、約２～４つの以前の療法に付されている。一部の実施形態では、対象は、約５～６つの以前の療法に付されている。一部の実施形態では、対象は、６つを超える以前の療法に付されている。

【0138】

一部の実施形態では、対象は、組換え受容体を発現する細胞の投与の前に、リンパ腫、例えば、ＮＨＬを標的化する療法または治療剤で以前に治療されている。一部の実施形態では、対象は、細胞療法（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）で以前に治療されている。一部の実施形態では、対象は、造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）、例えば、同種異系ＨＳＣＴまたは自源性ＨＳＣＴで以前に治療されている。一部の実施形態では、対象は、標準療法による治療後に予後不良になった、および／または一次もしくはより高次選択の以前の療法に失敗した。一部の実施形態では、対象は、リンパ球枯渇療法以外の、ＮＨＬを治療するための少なくともまたは約少なくともまたは約１、２、３、４、５、６または７つの他の療法で治療されたかまたはそれを以前に受けたことがある。一部の実施形態では、対象は、化学療法または放射線療法で以前に治療されている。一部の態様では、対象は、他の療法または治療剤に対して不応性または非応答性である。一部の実施形態では、対象は、例えば、化学療法または放射線照射を含む別の療法または治療介入による治療の後に、持続性のまたは再発した疾患に罹っている。

【0139】

一部の実施形態では、併用療法は、前の治療で進行した対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、以前の療法に対する応答を中止した対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、前の治療後の寛解に続いて再発した対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、前の治療に対して不応性である対象に投与される。一部の実施形態では、併用療法は、以前の療法に対して最適な応答（例えば、完全奏効、部分奏効または安定疾患）に満たない対象に投与される。

【0140】

一部の実施形態では、対象は、最後に行われた以前の療法に対して不応性である。一部の実施形態では、対象は、最後に行われた以前の療法に対して再発した。対象が、最後に行われた以前の療法に対して部分奏効未満を達成した場合、状態は不応性である。一部の実施形態では、対象は、前の化学療法を有する。一部の実施形態では、対象は、前の化学療法に対して化学療法抵抗性である。一部の実施形態では、対象は、以前の療法に対して化学感受性である。状態は、化学療法抵抗性であり、対象は、最後の化学療法含有レジメンに対して安定疾患（ＳＤ）もしくは進行性疾患（ＰＤ）を達成した、または自家幹細胞移植後１２ヶ月間未満に再発した。さもなければ、状態は、化学感受性である。

【0141】

一部の実施形態では、前の治療または療法は、ＣＤ２０標的化剤を含む。一部の実施形態では、前の治療または療法は、アントラサイクリンを含む。一部の実施形態では、前の治療または療法は、細胞療法（例えば、Ｔ細胞療法、例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞療法）を含む。

【0142】

一部の実施形態では、方法、使用および製造品は、例えば、記載されているいずれかの群の対象等、疾患の特定の型、診断基準、前の治療および／または前の治療に対する応答に基づき、特定の群またはサブセットの対象を選択または同定する工程を伴う対象の治療を伴うかまたはそのために使用される。一部の実施形態では、方法は、１つもしくはそれ以上の以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したかもしくはそれに対して不応性になった対象；または１つもしくはそれ以上の以前の療法、例えば、一次もしくはより高次選択の標準療法、例えば、細胞療法（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）に対して再発したもしくは不応性である（Ｒ／Ｒ）対象を治療する工程を伴う。一部の実施形態では、方法は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、特定不能（ＮＯＳ；ｄｅ ｎｏｖｏかつ低悪性度から形質転換）、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）または濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）、ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬまたはＥＢＶ陽性ＮＯＳに罹っている対象を治療する工程を伴う。一部の実施形態では、方法は、０～１等、１未満の米国東海岸がん臨床試験グループパフォーマンスステータス（ＥＣＯＧ）に罹っている対象を治療する工程を伴う。一部の実施形態では、方法は、１つまたはそれ以上の、例えば、２または３個の染色体転座を有する者（ＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／またはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫である、いわゆる「二重ヒット」または「三重ヒット」リンパ腫等；これは、ｔ（１４；１８）（ｑ３２；ｑ２１）ｂｃｌ－２遺伝子または／およびＢＣＬ６／３ｑ２７染色体転座と通常組み合わせた、転座ＭＹＣ／８ｑ２４遺伝子座を有する；例えば、Xu et al. (2013) Int J Clin Exp Pathol. 6(4): 788-794を参照されたい）、および／または１２ヶ月以内に再発した、適宜、再発した者、および／または化学療法抵抗性と疑われた者等、一般に、療法または特定の参照療法に対して不十分に応答する、ＤＬＢＣＬ患者の予後不良集団またはその対象を治療する。

【0143】

一部の実施形態では、対象は、胚中心様（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬであるＤＬＢＣＬを有する。一部の実施形態では、対象は、非胚中心様（非ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬを有する。一部の実施形態では、対象は、二重ヒットリンパ腫（ＤＨＬ）に罹っている。一部の実施形態では、対象は、三重ヒットリンパ腫（ＴＨＬ）に罹っている。一部の実施形態では、対象は、化合物Ｃによる治療の応答性を指し示す遺伝子の発現が陽性である。一部の実施形態では、対象は、遺伝子の発現が陰性である。Blood 2017 130:4118を参照されたい。

【0144】

一部の実施形態では、抗原受容体（例えば、ＣＡＲ）は、ＮＨＬに関連する等、疾患または状態に関連する標的抗原に特異的に結合する。一部の実施形態では、疾患または障害に関連する抗原は、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＲＯＲ１、ＣＤ４５、ＣＤ２１、ＣＤ５、ＣＤ３３、Ｉｇカッパー、Ｉｇラムダ、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂまたはＣＤ３０から選択される。一部の実施形態では、抗原は、ＣＤ１９である。一部の実施形態では、ＣＤ１９抗原は、ヒトＣＤ１９である。

【0145】

一部の実施形態では、方法は、Ｂ細胞悪性病変のリスクがあるかまたはそれに罹っていると疑われる対象への細胞療法および化合物Ｃの投与を含む。

【0146】

一部の実施形態では、方法は、ＮＨＬのある特定の予後またはリスクを有すると選択または同定された対象への細胞の投与を含む。非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、可変的な疾患となることができる。ＮＨＬに罹っている一部の対象は、治療なしで生存することができるが、他の対象は、即時介入を必要とし得る。一部の事例では、ＮＨＬに罹っている対象は、疾患予後および／または推奨される治療戦略を知らせることができる群に分類することができる。一部の事例では、そのような群は、「低リスク」、「中等リスク」、「高リスク」および／または「超高リスク」となることができ、患者は、遺伝的異常性および／または形態的もしくは身体的特徴を含むがこれらに限定されない多数の因子に応じて、そのようなものとして分類することができる。一部の実施形態では、方法に合わせておよび／または製造品もしくは組成物を用いて治療される対象は、ＮＨＬのリスクに基づき分類または同定される。一部の実施形態では、対象は、高リスクＮＨＬに罹っている対象である。

【0147】

一部の実施形態では、治療されるべき対象は、侵襲性ＮＨＬ、特に、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、特定不能（ＮＯＳ；ｄｅ ｎｏｖｏかつ低悪性度から形質転換）、Ｔ細胞／組織球リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）、ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ、ＥＢＶ陽性ＮＯＳ、またはＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／もしくはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（「二重ヒット」または「三重ヒット」リンパ腫）に罹っている対象の群を含む。一部の実施形態では、対象の疾患は、少なくとも２つの前の選択の療法に対して再発したかまたは不応性である。一部の実施形態では、以前の療法は、ＣＤ２０標的化剤および／またはアントラサイクリンを含む。一部の実施形態では、対象は、スクリーニング時に０～１のＥＣＯＧスコアを有する。一部の実施形態では、対象は、Ｌｕｇａｎｏ分類（Cheson, 2014）に従った陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）陽性疾患に罹っている。一部の実施形態では、対象は、同種異系幹細胞移植（ＳＣＴ）で以前に治療されていてよい。

【0148】

一部の実施形態では、対象は、成体である。一部の実施形態では、対象は、雄である。一部の実施形態では、対象は、雌である。一部の実施形態では、対象は、併用療法を投与される時点で（例えば、細胞療法を投与される時点で）少なくとも４０歳である。一部の実施形態では、対象は、併用療法を投与される時点で（例えば、細胞療法を投与される時点で）４０歳未満である。一部の実施形態では、対象は、併用療法を投与される時点で（例えば、細胞療法を投与される時点で）約４０～６５歳である。一部の実施形態では、対象は、併用療法を投与される時点で（例えば、細胞療法を投与される時点で）少なくとも６５歳である。

【0149】

Ａ．細胞療法の投与
養子細胞療法のための細胞の投与のための方法は、知られており、提供される方法、組成物および製造品およびキットに関連して使用することができる。例えば、養子Ｔ細胞療法の方法は、例えば、Gruenberg et alの米国特許出願公開第２００３／０１７０２３８号；Rosenbergの米国特許第４，６９０，９１５号；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)に記載されている。例えば、Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933；Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9；Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338を参照されたい。

【0150】

一部の実施形態では、提供される方法における使用のためのまたはそれと関連して投与される細胞は、操作された受容体、例えば、操作された抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を含有するかまたはそれを含有するように操作される。組成物の中でも、養子細胞療法のため等、投与のための医薬組成物および製剤が特に挙げられる。提供される方法に合わせておよび／または提供される製造品もしくは組成物を用いて、対象、例えば、患者に細胞および組成物を投与するための治療の方法も提供される。

【0151】

細胞は一般に、機能的な非ＴＣＲ抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、およびトランスジェニックＴ細胞受容体（ＴＣＲ）等の他の抗原結合性受容体を含む抗原受容体等の組換え受容体を発現する。また、受容体の中でも、他のキメラ受容体が特に挙げられる。提供される方法において細胞療法として投与するための例示的な操作された細胞は、セクションＩＩに記載されている。

【0152】

一部の実施形態では、細胞療法、例えば、養子Ｔ細胞療法は、自家移入によって行われ、それによると、細胞は、細胞療法を受けることになっている対象からまたはそのような対象に由来する試料から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。よって、一部の態様では、細胞は、治療を必要とする対象、例えば、患者に由来し、細胞は、単離および加工処理の後に、同一対象に投与される。

【0153】

一部の実施形態では、細胞療法、例えば、養子Ｔ細胞療法は、同種異系移入によって行われ、それによると、細胞は、細胞療法を受けることになっているまたは最終的に受ける対象以外の対象、例えば、第１の対象から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。そのような実施形態では、細胞は次いで、同一種の異なる対象、例えば、第２の対象に投与される。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同一である。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同様である。一部の実施形態では、第２の対象は、第１の対象と同一のＨＬＡクラスまたはスーパータイプ（supertype）を発現する。

【0154】

Ｔ細胞療法の細胞は、投与のために製剤化された組成物において、またはその代わりに、別々の投与のために製剤化された２つ以上の組成物（例えば、２つの組成物）において投与することができる。細胞の用量は、特定の数もしくは相対数の細胞もしくは操作された細胞、および／またはＣＤ４ ｖｓ ＣＤ８ Ｔ細胞等の組成物内の定義された比もしくは組成の２つ以上のサブタイプを含むことができる。

【0155】

細胞は、いずれか適した手段によって、例えば、ボーラス注入によって、注射、例えば、静脈内もしくは皮下注射、眼内注射、眼周囲注射、網膜下注射、硝子体内注射、経中隔注射、強膜下注射、脈絡膜内注射、前房内注射、結膜下（subconjectval）注射、結膜下（subconjuntival）注射、テノン嚢下（sub-Tenon）注射、眼球後注射、眼球周囲注射、または強膜近傍後側（posterior juxtascleral）デリバリーによって投与することができる。一部の実施形態では、細胞は、非経口、肺内および鼻腔内、また、局所的治療に望まれる場合は、病巣内投与によって投与される。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内または皮下投与を含む。一部の実施形態では、所与の用量は、細胞の単一ボーラス投与によって投与される。一部の実施形態では、所与の用量は、例えば３日間以下の期間にわたる細胞の複数ボーラス投与によって、または細胞の継続注入投与によって投与される。一部の実施形態では、細胞用量またはいずれか追加の療法、例えば、リンパ球枯渇療法、介入療法および／または併用療法の投与は、外来デリバリーにより行われる。

【0156】

疾患の治療のため、適切な投薬量は、治療されるべき疾患の型、細胞または組換え受容体の型、疾患の重症度および経過、以前の療法、対象の臨床歴および細胞に対する応答、ならびに担当医の裁量に依存し得る。組成物および細胞は、一部の実施形態では、一度にまたは一連の治療にわたり、対象に適切に投与される。

【0157】

免疫枯渇（例えば、リンパ球枯渇）療法による対象のプレコンディショニングは、一部の態様では、養子細胞療法（ＡＣＴ）の効果を改善することができる。

【0158】

よって、一部の実施形態では、方法は、シクロホスファミド、フルダラビンまたはこれらの組合せ等のリンパ球枯渇または化学療法剤等のプレコンディショニング剤を、細胞療法の開始の前に対象に投与する工程を含む。例えば、対象は、細胞療法の開始の少なくとも３、４、５、６または７日前等、少なくとも２日前にプレコンディショニング剤を投与することができる。一部の実施形態では、対象は、細胞療法の開始の６、５、４、３または２日前以下等、７日前以下にプレコンディショニング剤を投与される。

【0159】

一部の実施形態では、対象は、４０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇの間またはその概数の間等、２０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間またはその概数の間の用量のシクロホスファミドでプレコンディショニングされる。一部の態様では、対象は、６０ｍｇ／ｋｇまたは約６０ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミドでプレコンディショニングされる。一部の実施形態では、シクロホスファミドは、単一の用量において投与することができる、または毎日、１日置きにもしくは３日毎に与える等、複数の用量において投与することができる。一部の実施形態では、シクロホスファミドは、１または２日間にわたり１日１回投与される。一部の実施形態では、リンパ球枯渇剤が、シクロホスファミドを含む場合、対象は、２００ｍｇ／ｍ^２～４００ｍｇ／ｍ^２もしくは２５０ｍｇ／ｍ^２～３５０ｍｇ／ｍ^２の間またはその概数の間等、１００ｍｇ／ｍ^２～５００ｍｇ／ｍ^２の間またはその概数の間（上限下限値を含む）の用量のシクロホスファミドを投与される。一部の実例では、対象は、約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドを投与される。一部の実例では、対象は、約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドを投与される。一部の実施形態では、シクロホスファミドは、単一の用量において投与することができる、または毎日、１日置きにもしくは３日毎に与える等、複数の用量において投与することができる。一部の実施形態では、シクロホスファミドは、１～５日間、例えば、３～５日間等にわたり、毎日投与される。一部の実例では、対象は、細胞療法の開始の前に、３日間にわたり毎日、約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドを投与される。一部の実例では、対象は、細胞療法の開始の前に、３日間にわたり毎日、約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドを投与される。

【0160】

一部の実施形態では、リンパ球枯渇剤が、フルダラビンを含む場合、対象は、１０ｍｇ／ｍ^２～７５ｍｇ／ｍ^２、１５ｍｇ／ｍ^２～５０ｍｇ／ｍ^２、２０ｍｇ／ｍ^２～４０ｍｇ／ｍ^２または２４ｍｇ／ｍ^２～３５ｍｇ／ｍ^２の間またはその概数の間等、１ｍｇ／ｍ^２～１００ｍｇ／ｍ^２の間またはその概数の間（上限下限値を含む）の用量のフルダラビンを投与される。一部の実例では、対象は、約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンを投与される。一部の実施形態では、フルダラビンは、単一の用量において投与することができる、または毎日、１日置きにもしくは３日毎に与える等、複数の用量において投与することができる。一部の実施形態では、フルダラビンは、１～５日間、例えば、３～５日間等にわたり、毎日投与される。一部の実例では、対象は、細胞療法の開始の前に、３日間にわたり毎日、約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンを投与される。

【0161】

一部の実施形態では、リンパ球枯渇剤は、シクロホスファミドおよびフルダラビンの組合せ等、薬剤の組合せを含む。よって、薬剤の組合せは、上に記載されているもの等、いずれかの用量または投与スケジュールのシクロホスファミドと、上に記載されているもの等、いずれかの用量または投与スケジュールのフルダラビンとを含むことができる。例えば、一部の態様では、対象は、第１のまたは後続の用量の前に、６０ｍｇ／ｋｇ（ほぼ２ｇ／ｍ^２）のシクロホスファミドおよび３～５用量の２５ｍｇ／ｍ^２フルダラビンを投与される。一部の実施形態では、対象は、細胞療法の開始の前に、いずれも３日間にわたり毎日の、３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンを投与される。一部の実施形態では、対象は、細胞療法の開始の前に、いずれも３日間にわたり毎日の、５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンを投与される。

【0162】

細胞の投与後に、操作された細胞集団の生物活性は、一部の実施形態では、例えば、多数の公知方法のいずれかによって測定される。評価するためのパラメーターは、インビボにおける、例えば、イメージングによる、またはエクスビボにおける、例えば、ＥＬＩＳＡもしくはフローサイトメトリーによる、抗原への操作されたまたは天然のＴ細胞または他の免疫細胞の特異的結合を含む。ある特定の実施形態では、標的細胞を破壊する操作された細胞の能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009)およびHerman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)に記載されている細胞傷害性アッセイ等、いずれか適した公知方法を使用して測定することができる。ある特定の実施形態では、細胞の生物活性は、ＣＤ１０７ａ、ＩＦＮγ、ＩＬ－２およびＴＮＦ等の１つまたはそれ以上のサイトカインの発現および／または分泌をアッセイすることにより測定される。一部の態様では、生物活性は、腫瘍負荷または負荷量の低減等の臨床の転帰を評価することにより測定される。

【0163】

１．組成物および製剤
一部の実施形態では、組換え抗原受容体、例えば、ＣＡＲまたはＴＣＲにより操作された細胞を含むＴ細胞療法等の細胞療法の細胞の用量は、医薬組成物または製剤等の組成物または製剤として提供される。そのような組成物は、Ｂ細胞悪性病変の治療において等、提供される方法に合わせておよび／または提供される製造品もしくは組成物を用いて使用することができる。

【0164】

用語「医薬製剤」は、その中に含有される活性成分の生物活性が有効となることを可能にするような形態であり、また、製剤が投与される対象にとって許容できないほど毒性がある追加の構成成分を含有しない、調製物を指す。

【0165】

「薬学的に許容される担体」は、対象にとって無毒性である、活性成分以外の医薬製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体は、バッファー、賦形剤、安定剤または保存料を含むがこれらに限定されない。

【0166】

一部の実施形態では、操作されたＴ細胞（例えば、ＣＡＲ Ｔ細胞）等の細胞療法は、薬学的に許容される担体とともに製剤化される。一部の態様では、担体の選択は、一部には、特定の細胞もしくは薬剤によっておよび／または投与の方法によって決定される。したがって、種々の適した製剤が存在する。例えば、医薬組成物は、保存料を含有することができる。適した保存料は、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウムおよび塩化ベンザルコニウムを含むことができる。一部の態様では、２つ以上の保存料の混合物が使用される。保存料またはその混合物は典型的に、総組成物の重量で約０．０００１％～約２％の量で存在する。担体は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)によって記載されている。薬学的に許容される担体は一般に、用いられる投薬量および濃度ではレシピエントにとって無毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸等のバッファー；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存料（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール等）；低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリシン等のアミノ酸；グルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む単糖、二糖および他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール等の糖；ナトリウム等の塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性物質を含むがこれらに限定されない。

【0167】

緩衝剤が、一部の態様では、組成物中に含まれる。適した緩衝剤は、例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸カリウム、ならびに様々な他の酸および塩を含む。一部の態様では、２つ以上の緩衝剤の混合物が使用される。緩衝剤またはその混合物は典型的に、総組成物の重量で約０．００１％～約４％の量で存在する。投与可能な（administrable）医薬組成物を調製するための方法が知られている。例示的な方法は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 21st ed. (May 1, 2005)により詳細に記載されている。

【0168】

製剤は、水溶液を含むことができる。製剤または組成物は、細胞または薬剤により治療されている特定の適応症、疾患または状態に有用な２つ以上の活性成分を含有することもでき、この場合、それぞれの活性は、互いに有害に影響しない。そのような活性成分は、組合せにおいて、意図される目的に有効な量で適切に存在する。よって、一部の実施形態では、医薬組成物は、化学療法剤、例えば、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メトトレキセート、パクリタキセル、リツキシマブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン等、他の薬学的に活性な薬剤または薬物をさらに含む。

【0169】

医薬組成物は、一部の実施形態では、治療有効または予防有効量等、疾患または状態を治療するのに有効な量で細胞を含有する。治療有効性は、一部の実施形態では、治療された対象の定期的評価によってモニターされる。数日間またはそれよりも長い期間にわたる反復投与のために、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が起こるまで、治療は反復される。しかし、他の投薬量レジメンが有用となる場合があり、これを決定することができる。所望の投薬量は、組成物の単一ボーラス投与によって、組成物の複数ボーラス投与によってまたは組成物の継続注入投与によって送達することができる。

【0170】

細胞は、標準投与技法、製剤および／またはデバイスを使用して投与することができる。組成物の貯蔵および投与のために、シリンジおよびバイアル等の製剤およびデバイスが提供される。細胞に関して、投与は、自家または異種であり得る。例えば、免疫応答性細胞または前駆体は、ある対象から得ることができ、同一対象または異なる適合性対象に投与される。末梢血由来免疫応答性細胞またはその後代（例えば、インビボ、エクスビボまたはインビトロ由来）は、カテーテル投与を含む局在化注射、全身性注射、局在化注射、静脈内注射または非経口投与により投与することができる。治療用組成物（例えば、遺伝子改変された免疫応答性細胞を含有する医薬組成物）を投与する場合、これは一般に、単位投薬量注射可能形態（溶液、懸濁液、エマルション）で製剤化されるであろう。

【0171】

製剤は、経口、静脈内、腹腔内、皮下、肺、経皮、筋肉内、鼻腔内、頬側、舌下または坐薬投与のための製剤を含む。一部の実施形態では、薬剤または細胞集団は、非経口投与される。用語「非経口」は、本明細書で使用される場合、静脈内、筋肉内、皮下、直腸、腟および腹腔内投与を含む。一部の実施形態では、薬剤または細胞集団は、静脈内、腹腔内または皮下注射による末梢全身性デリバリーを使用して対象に投与される。

【0172】

組成物は、一部の実施形態では、一部の態様では、選択されたｐＨに緩衝され得る、滅菌液体調製物、例えば、等張性水溶液、懸濁液、エマルション、分散または粘稠性組成物として提供される。液体調製物は、通常、ゲル、他の粘稠性組成物および固体組成物よりも調製が容易である。その上、液体組成物は若干、特に注射による投与がより簡便である。粘稠性組成物は、他方では、適切な粘性範囲内で製剤化して、特異的な組織とのより長い接触期間を提供することができる。液体または粘稠性組成物は、例えば、水、食塩水、リン酸緩衝食塩水、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール）およびこれらの適した混合物を含有する溶媒または分散媒となり得る担体を含むことができる。

【0173】

滅菌注射可能溶液は、滅菌水、生理食塩水、グルコース、デキストロースその他等の適した担体、希釈剤または賦形剤との混合物等の溶媒中に細胞を取り込むことにより調製することができる。

【0174】

インビボ投与のために使用されるべき製剤は一般に、滅菌されている。滅菌性は、例えば、滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成することができる。
２．投薬

【0175】

一部の実施形態では、細胞の用量は、提供される方法に合わせておよび／または提供される製造品もしくは組成物を用いて対象に投与される。一部の実施形態では、用量のサイズまたはタイミングは、対象における特定の疾患または状態（例えば、がん、例えば、Ｂ細胞悪性病変）の関数として決定される。一部の事例では、提供される記載を考慮した特定の疾患のための用量のサイズまたはタイミングは、経験的に決定することができる。

【0176】

一部の実施形態では、細胞の用量は、４×１０^５個もしくは約４×１０^５個の細胞／ｋｇ～１×１０^６個もしくは約１×１０^６個の細胞／ｋｇの間または６×１０^５個もしくは約６×１０^５個の細胞／ｋｇ～８×１０^５個もしくは約８×１０^５個の細胞／ｋｇの間等、２×１０^５個または約２×１０^５個の細胞／ｋｇ～２×１０^６個または約２×１０^６個の細胞／ｋｇの間を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、３×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約３×１０^５細胞／ｋｇ以下、４×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約４×１０^５細胞／ｋｇ以下、５×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約５×１０^５細胞／ｋｇ以下、６×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約６×１０^５細胞／ｋｇ以下、７×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約７×１０^５細胞／ｋｇ以下、８×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約８×１０^５細胞／ｋｇ以下、９×１０^５細胞／ｋｇ以下もしくは約９×１０^５細胞／ｋｇ以下、１×１０^６細胞／ｋｇ以下もしくは約１×１０^６細胞／ｋｇ以下または２×１０^６細胞／ｋｇ以下もしくは約２×１０^６細胞／ｋｇ以下等、対象の体重１キログラム当たり２×１０^５個以下の細胞（例えば、抗原発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞）（細胞／ｋｇ）を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、少なくとも３×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約３×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも４×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約４×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも５×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約５×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも６×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約６×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも７×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約７×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも８×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約８×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも９×１０^５細胞／ｋｇもしくは少なくとも約９×１０^５細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、少なくとも１×１０^６細胞／ｋｇもしくは少なくとも約１×１０^６細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数、または少なくとも２×１０^６細胞／ｋｇもしくは少なくとも約２×１０^６細胞／ｋｇもしくはその値もしくはその概数等、対象の体重１キログラム当たり少なくとも２×１０^５個もしくは少なくとも約２×１０^５個もしくはその値もしくはその概数の細胞（例えば、抗原発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞）（細胞／ｋｇ）を含む。

【0177】

ある特定の実施形態では、細胞、または細胞の個々の集団もしくは（ｏｆ）サブタイプは、約１００万～約１０００億個の細胞の範囲で、および／または体重１キログラム当たりの当該量の細胞で、例えば、１００万～約５００億個の細胞（例えば、約５００万個の細胞、約２５００万個の細胞、約５億個の細胞、約１０億個の細胞、約５０億個の細胞、約２００億個の細胞、約３００億個の細胞、約４００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、例えば、約１０００万～約１０００億個の細胞（例えば、約２０００万個の細胞、約３０００万個の細胞、約４０００万個の細胞、約６０００万個の細胞、約７０００万個の細胞、約８０００万個の細胞、約９０００万個の細胞、約１００億個の細胞、約２５０億個の細胞、約５００億個の細胞、約７５０億個の細胞、約９００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、また、一部の事例では、約１億個の細胞～約５００億個の細胞（例えば、約１億２０００万個の細胞、約２億５０００万個の細胞、約３億５０００万個の細胞、約４億５０００万個の細胞、約６億５０００万個の細胞、約８億個の細胞、約９億個の細胞、約３０億個の細胞、約３００億個の細胞、約４５０億個の細胞）、またはこれらの範囲の間にあるいずれかの値、および／または体重１キログラム当たりで、対象に投与される。投薬量は、疾患または障害および／または患者および／または他の治療に特定の特質に応じて変動し得る。

【0178】

一部の実施形態では、細胞の用量が、対象の体表面積または体重に関連付けられないかまたはそれに基づかないように、細胞の用量は、細胞の平坦用量または細胞の固定用量である。

【0179】

一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、約５×１０^８個よりも少ない総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、例えば、約１×１０^６～５×１０^８個の範囲内のそのような細胞、例えば、２×１０^６、５×１０^６、１×１０^７、５×１０^７、１×１０^８、２×１０^８、３×１０^８もしくは４×１０^８個のそのような細胞の全て、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、対象がヒトである場合、用量は、約１×１０^６～３×１０^８個の間の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、例えば、約１×１０^７～２×１０^８個のそのような細胞の範囲内、例えば、１×１０^７、５×１０^７、１×１０^８もしくは１．５×１０^８個のそのような細胞の総計、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、患者は、複数用量を投与され、用量のそれぞれまたは総用量は、前述の値のいずれかの内となることができる。一部の実施形態では、細胞の用量は、１×１０^５個もしくは約１×１０^５個～５×１０^８個もしくは約５×１０^８個の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現Ｔ細胞もしくは総Ｔ細胞、１×１０^５～１×１０^８個の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現Ｔ細胞もしくは総Ｔ細胞、５×１０^５個もしくは約５×１０^５個～１×１０^７個もしくは約１×１０^７個の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現Ｔ細胞もしくは総Ｔ細胞、または１×１０^６個もしくは約１×１０^６個～１×１０^７個もしくは約１×１０^７個の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現Ｔ細胞もしくは総Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）の投与を含む。

【0180】

一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、またはＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。

【0181】

一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む用量中を含む、用量のＣＤ８＋Ｔ細胞は、約１×１０^６～１×１０^８個の間の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現ＣＤ８＋細胞、例えば、約５×１０^６～１×１０^８個の範囲内のそのような細胞、１×１０^７、２．５×１０^７、５×１０^７、７．５×１０^７もしくは１×１０^８個のそのような細胞の全て、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、患者は、複数の用量を投与され、用量のそれぞれまたは総用量は、前述の値のいずれかの内に収まることができる。一部の実施形態では、細胞の用量は、１×１０^７～０．７５×１０^８個またはその概数の総組換え受容体発現ＣＤ８＋Ｔ細胞、１×１０^７～２．５×１０^７個の総組換え受容体発現ＣＤ８＋Ｔ細胞、１×１０^７～０．７５×１０^８個またはその概数の総組換え受容体発現ＣＤ８＋Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）の投与を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、１×１０^７、２．５×１０^７、５×１０^７、７．５×１０^７もしくは１×１０^８個またはその概数の総組換え受容体発現ＣＤ８＋Ｔ細胞の投与を含む。

【0182】

一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む用量中を含む用量のＣＤ４＋Ｔ細胞は、約１×１０^６～１×１０^８個の間の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現ＣＤ４＋細胞、例えば、約５×１０^６～１×１０^８個のそのような細胞、そのような細胞の範囲内、１×１０^７、２．５×１０^７、５×１０^７、７．５×１０^７もしくは１×１０^８個のそのような細胞の総計、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、患者は、複数用量を投与され、用量のそれぞれまたは総用量は、前述の値のいずれかの内となることができる。一部の実施形態では、細胞の用量は、１×１０^７個または約１×１０^７個～０．７５×１０^８個または約０．７５×１０^８個の総組換え受容体発現ＣＤ４＋Ｔ細胞、１×１０^７～２．５×１０^７個の総組換え受容体発現ＣＤ４＋Ｔ細胞、１×１０^７個または約１×１０^７個～０．７５×１０^８個または約０．７５×１０^８個の総組換え受容体発現ＣＤ４＋Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）の投与を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、１×１０^７、２．５×１０^７、５×１０^７、７．５×１０^７もしくは１×１０^８個またはその概数の総組換え受容体発現ＣＤ４＋Ｔ細胞の投与を含む。

【0183】

一部の実施形態では、細胞、例えば、組換え受容体発現Ｔ細胞の用量は、単一の用量として対象に投与される、または２週間、１ヶ月間、３ヶ月間、６ヶ月間、１年間以上の期間内に１回のみ投与される。

【0184】

養子細胞療法の文脈において、所与の「用量」の投与は、単一の組成物および／または単一の中断されない投与としての、例えば、単一の注射または継続注入としての、所与の量または数の細胞の投与を包含し、また、３日間以下等の指定の期間にわたる、分割用量としてのまたは複数の個々の組成物もしくは注入に提供される複数の組成物としての、所与の量または数の細胞の投与も包含する。よって、一部の状況では、用量は、単一の時点で与えられるまたは開始される指定の数の細胞の単一のまたは継続的な投与である。しかし、一部の状況では、用量は、１日１回を３日間もしくは２日間、または１日間の期間にわたる複数の注入による等、３日間以下の期間にわたる複数の注射もしくは注入において投与される。

【0185】

よって、一部の態様では、用量の細胞は、単一の医薬組成物において投与される。一部の実施形態では、用量の細胞は、用量の細胞を合計して含有する複数の組成物において投与される。

【0186】

一部の実施形態では、用語「分割用量」は、１日間を超えて投与されるように分割された用量を指す。この型の投薬は、本方法によって包含され、単一の用量であると考慮される。

【0187】

よって、細胞の用量は、分割用量、例えば、経時的に投与される分割用量として投与することができる。例えば、一部の実施形態では、用量は、２日間または３日間にわたり対象に投与することができる。分割投薬のための例示的な方法は、１日目に用量の２５％を投与し、２日目に用量の残っている７５％を投与する工程を含む。他の実施形態では、用量の３３％を１日目に投与し、残っている６７％を２日目に投与することができる。一部の態様では、用量の１０％は１日目に投与され、用量の３０％は２日目に投与され、用量の６０％は３日目に投与される。一部の実施形態では、分割用量は、３日間を超えて広がらない。

【0188】

一部の実施形態では、用量の細胞は、用量の一部の細胞をそれぞれ含有する、第１および第２の、適宜、さらに多くの等、複数の組成物または溶液の投与によって投与することができる。一部の態様では、細胞の異なる集団および／またはサブタイプをそれぞれ含有する複数の組成物は、適宜、ある特定の期間内に、別々にまたは独立して投与される。例えば、細胞の集団またはサブタイプは、それぞれＣＤ８^＋およびＣＤ４^＋Ｔ細胞、および／またはそれぞれＣＤ８＋およびＣＤ４＋富化集団、例えば、ＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞を含むことができ、これらはそれぞれ、組換え受容体を発現するように遺伝子操作された細胞を個々に含む。一部の実施形態では、用量の投与は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の用量またはＣＤ４＋Ｔ細胞の用量を含む第１の組成物の投与、ならびにＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の用量の他方を含む第２の組成物の投与を含む。

【0189】

一部の実施形態では、組成物または用量の投与、例えば、複数の細胞組成物の投与は、別々の細胞組成物の投与を伴う。一部の態様では、別々の投与は、同時にまたは逐次に、いずれかの順序で行われる。一部の実施形態では、用量は、第１の組成物および第２の組成物を含み、第１の組成物および第２の組成物は、０～１２時間間隔、０～６時間間隔または０～２時間間隔で投与される。一部の実施形態では、第１の組成物の投与の開始および第２の組成物の投与の開始は、２時間以下、１時間以下または３０分以下の間隔で、１５分以下、１０分以下または５分以下の間隔で行われる。一部の実施形態では、第１の組成物の投与の開始および／または完了ならびに第２の組成物の投与の完了および／または開始は、２時間以下、１時間以下または３０分以下の間隔で、１５分以下、１０分以下または５分以下の間隔で行われる。

【0190】

一部の実施形態では、第１の組成物および第２の組成物は、対象への投与の前に混合される。一部の実施形態では、第１の組成物および第２の組成物は、投与の少し（例えば、６時間、５時間、４時間、３時間、２時間、１．５時間、１時間または０．５時間以内）前に混合される。一部の実施形態では、第１の組成物および第２の組成物は、投与の直前に混合される。

【0191】

一部の組成物では、第１の組成物、例えば、用量の第１の組成物は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む。一部の組成物では、第１の組成物、例えば、用量の第１の組成物は、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、第１の組成物は、第２の組成物の前に投与される。

【0192】

一部の実施形態では、細胞の用量または組成物は、組換え受容体を発現するＣＤ４＋細胞、対、組換え受容体を発現するＣＤ８＋細胞の、および／またはＣＤ４＋細胞、対、ＣＤ８＋細胞の定義されるまたは標的比を含み、この比は適宜、およそ１：１であるかまたはおよそ１：３～およそ３：１の間、例えば、およそ１：１である。一部の態様では、異なる細胞集団の標的または所望の比（ＣＤ４＋：ＣＤ８＋比またはＣＡＲ＋ＣＤ４＋：ＣＡＲ＋ＣＤ８＋比、例えば、１：１等）での組成物または用量の投与は、集団の一方を含有する細胞組成物の投与と、次いで、集団の他方を含む別々の細胞組成物の投与を伴い、投与は、ちょうどまたはおよそ標的または所望の比である。一部の態様では、定義された比での細胞の用量または組成物の投与は、Ｔ細胞療法の改善された増大化、持続性および／または抗腫瘍活性を生じる。

【0193】

一部の実施形態では、対象は、細胞の複数の用量、例えば、２以上の用量または複数の連続用量を受ける。一部の実施形態では、２用量が対象に投与される。一部の実施形態では、対象は、連続用量、例えば、第２の用量を、第１の用量のおよそ４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１日後に受ける。一部の実施形態では、追加の用量が連続用量の投与の後に投与されるように、複数の連続用量が第１の用量の後に投与される。一部の態様では、追加の用量において対象に投与される細胞の数は、第１の用量および／または連続用量と同一または同様である。一部の実施形態では、追加の用量は、前の用量よりも大きい。

【0194】

一部の態様では、第１のおよび／または連続用量のサイズは、前の治療、例えば、化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍量、バルク、サイズもしくは程度、転移の程度もしくは型、ステージ、ならびに／または毒性転帰、例えば、ＣＲＳ、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発症する対象の可能性もしくは発生率、ならびに／または投与されている細胞および／もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答等、１つまたはそれ以上の判断基準に基づき決定される。

【0195】

一部の態様では、第１の用量の投与および連続用量の投与の間の時間は、約９～約３５日間、約１４～約２８日間または１５～２７日間である。一部の実施形態では、連続用量の投与は、第１の用量の投与から約１４日後超かつ約２８日後未満の時点においてなされる。一部の態様では、第１のおよび連続用量の間の時間は、約２１日間である。一部の実施形態では、追加の用量、例えば、連続用量は、連続用量の投与の後に投与される。一部の態様では、追加の連続用量は、前の用量の投与から少なくとも約１４日後にかつ約２８日後未満に投与される。一部の実施形態では、追加の用量は、前の用量から約１４日後未満に、例えば、前の用量から４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２または１３日後に投与される。一部の実施形態では、用量は、前の用量から約１４日後未満に投与されない、および／または用量は、前の用量から約２８日後超に投与されない。

【0196】

一部の実施形態では、細胞、例えば、組換え受容体発現細胞の用量は、Ｔ細胞の第１の用量およびＴ細胞の連続用量を含む２用量（例えば、ダブル用量）を含み、第１の用量および第２の用量の一方または両方は、Ｔ細胞の分割用量の投与を含む。

【0197】

一部の実施形態では、細胞の用量は一般に、疾患負荷の低減において有効となるために十分なほど大きい。

【0198】

一部の実施形態では、細胞は、一部の態様では、細胞もしくは細胞型の所望の用量もしくは数および／または細胞型の所望の比を含む、所望の投薬量で投与される。よって、細胞の投薬量は、一部の実施形態では、細胞の総数（または体重１ｋｇ当たりの数）および個々の集団またはサブタイプの所望の比、例えば、ＣＤ４＋対ＣＤ８＋の比に基づく。一部の実施形態では、細胞の投薬量は、個々の集団における細胞のまたは個々の細胞型の所望の総数（または体重１ｋｇ当たりの数）に基づく。一部の実施形態では、投薬量は、総細胞の所望の数、所望の比、および個々の集団における細胞の所望の総数等、そのような特色の組合せに基づく。

【0199】

一部の実施形態では、ＣＤ８^＋およびＣＤ４^＋Ｔ細胞等、細胞の集団またはサブタイプは、Ｔ細胞の所望の用量等の総細胞の所望の用量でまたはその許容される差の内で投与される。一部の態様では、所望の用量は、細胞の所望の数、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりの細胞の所望の数、例えば、細胞／ｋｇである。一部の態様では、所望の用量は、細胞の最小数または体重の単位当たりの細胞の最小数であるかまたはそれを上回る。一部の態様では、所望の用量で投与される総細胞の中で、個々の集団またはサブタイプは、所望の出力比（ＣＤ４^＋対ＣＤ８^＋の比等）でまたはその付近で、例えば、そのような比のある特定の許容される差または誤差の内で存在する。

【0200】

一部の実施形態では、細胞は、ＣＤ４＋細胞の所望の用量および／またはＣＤ８＋細胞の所望の用量等、細胞の個々の集団またはサブタイプのうち１つまたはそれ以上の所望の用量でまたはその許容される差の内で投与される。一部の態様では、所望の用量は、サブタイプもしくは集団の細胞の所望の数、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりのそのような細胞の所望の数、例えば、細胞／ｋｇである。一部の態様では、所望の用量は、集団もしくはサブタイプの細胞の最小数、または体重の単位当たりの集団もしくはサブタイプの細胞の最小数であるかまたはそれを上回る。

【0201】

よって、一部の実施形態では、投薬量は、総細胞の所望の固定用量および所望の比に基づく、ならびに／または個々のサブタイプもしくは亜集団の１つまたはそれ以上の、例えば、それぞれの所望の固定用量に基づく。よって、一部の実施形態では、投薬量は、Ｔ細胞の所望の固定もしくは最小用量およびＣＤ４^＋対ＣＤ８^＋細胞の所望の比に基づく、ならびに／またはＣＤ４^＋および／もしくはＣＤ８^＋細胞の所望の固定もしくは最小用量に基づく。

【0202】

一部の実施形態では、細胞は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞またはサブタイプ等、複数の細胞集団またはサブタイプの所望の出力比でまたはその許容される範囲内で投与される。一部の態様では、所望の比は、具体的な比であり得るか、または比の範囲であり得る。例えば、一部の実施形態では、所望の比（例えば、ＣＤ４^＋対ＣＤ８^＋細胞の比）は、５：１もしくはその概数～５：１もしくはその概数（または約１：５超～約５：１未満）の間、または１：３もしくはその概数～３：１もしくはその概数（または約１：３超～約３：１未満）の間、例えば、２：１もしくはその概数～１：５もしくはその概数（または約１：５超～約２：１未満）の間、例えば、５：１、４．５：１、４：１、３．５：１、３：１、２．５：１、２：１、１．９：１、１．８：１、１．７：１、１．６：１、１．５：１、１．４：１、１．３：１、１．２：１、１．１：１、１：１、１：１．１、１：１．２、１：１．３、１：１．４、１：１．５、１：１．６、１：１．７、１：１．８、１：１．９、１：２、１：２．５、１：３、１：３．５、１：４、１：４．５もしくは１：５またはその概数である。一部の態様では、許容される差は、所望の比の約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以内であり、これらの範囲の間にあるいずれかの値を含む。

【0203】

特定の実施形態では、細胞の数および／または濃度は、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞の数を指す。他の実施形態では、細胞の数および／または濃度は、投与された全細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の数または濃度を指す。

【0204】

一部の態様では、用量のサイズは、前の治療、例えば、化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍負荷量、容積、サイズもしくは程度、転移の程度もしくは型、ステージ、ならびに／または対象が、投与されている細胞および／もしくは組換え受容体に対して毒性の転帰、例えば、ＣＲＳ、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性および／もしくは宿主免疫応答を発症する可能性もしくは発生率等の１つまたはそれ以上の判断基準に基づき決定される。

【0205】

一部の実施形態では、方法は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞の１もしくは複数の追加の用量、および／もしくはリンパ球枯渇療法を投与する工程も含む、ならびに／または方法の１つもしくはそれ以上の工程が反復される。一部の実施形態では、１または複数の追加の用量は、初期用量と同一である。一部の実施形態では、１またはそれ以上の追加の用量は、初期用量とは異なる、例えば、初期用量よりも高い、例えば、それよりも２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍もしくは１０倍以上高い、または初期用量よりも低い、例えば、その２分の１、３分の１、４分の１、５分の１、６分の１、７分の１、８分の１、９分の１もしくは１０分の１以下である。一部の実施形態では、１またそれ以上の数の追加の用量の投与は、初期治療もしくはいずれかの前の治療に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍量、バルク、サイズもしくは程度、転移の程度もしくは型、ステージ、ならびに／または毒性転帰、例えば、ＣＲＳ、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発症する対象の可能性もしくは発生率、ならびに／または投与されている細胞および／もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答に基づき決定される。

【0206】

Ｂ．化合物Ｃの投与
本明細書に提供される方法、組成物、組合せ、キットまたは製造品の一部の実施形態では、併用療法は、化学名（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンを有するおよび／または式Ｉ：

【化14】

(式I)
の構造を有する化合物Ｃ、またはそのエナンチオマーもしくはエナンチオマーの混合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含む。

【0207】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンのエナンチオマーもしくはエナンチオマーの混合物、または（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体である。一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの溶媒和物である。一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの水和物である。一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩である。一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである。一部の実施形態では、化合物Ｃは、式Ｉの構造を有する。

【0208】

ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、固体である。ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、水和されている。ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、溶媒和されている。ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、無水物である。ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、非吸湿性である。

【0209】

ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、アモルファスである。ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、結晶性である。

【0210】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩である。本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される塩」は、無機酸および塩基ならびに有機酸および塩基を含む薬学的に許容される無毒性の酸または塩基から調製された塩を指す。化合物Ｃの適した薬学的に許容される塩基付加塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から作製された金属塩、またはリシン、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ－メチル－グルカミン）およびプロカインから作製された有機塩を含む。適した無毒性の酸は、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸（ethenesulfonic）、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモン酸（pamoic）、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸およびｐ－トルエンスルホン酸等の無機および有機酸を含む。その他は、当技術分野でよく知られており、例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1990)またはRemington: The Science and Practice of Pharmacy, 19^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1995)を参照されたい。

【0211】

ある特定の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの塩酸塩、またはそのエナンチオマーもしくはエナンチオマーの混合物；またはその薬学的に許容される溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体である。ある特定の実施形態では、塩酸塩は、固体である。ある特定の実施形態では、塩酸塩は、無水物である。ある特定の実施形態では、塩酸塩は、非吸湿性である。ある特定の実施形態では、塩酸塩は、アモルファスである。ある特定の実施形態では、塩酸塩は、結晶性である。

【0212】

本明細書で使用される場合、また、他に指示がなければ、用語「立体異性体」または「立体化学的に（stereomerically）純粋な」は、当該化合物の他の立体異性体を実質的に含まない、化合物の１つの立体異性体を意味する。例えば、１個のキラル中心を有する立体化学的に純粋な化合物は、化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まないであろう。２個のキラル中心を有する立体化学的に純粋な化合物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まないであろう。典型的な立体化学的に純粋な化合物は、約８０重量％超の化合物の１つの立体異性体と約２０重量％未満の化合物の他の立体異性体、約９０重量％超の化合物の１つの立体異性体と約１０重量％未満の化合物の他の立体異性体、約９５重量％超の化合物の１つの立体異性体と約５重量％未満の化合物の他の立体異性体、または約９７重量％超の化合物の１つの立体異性体と約３重量％未満の化合物の他の立体異性体を含む。化合物は、キラル中心を有することができ、ラセミ体、個々のエナンチオマーまたはジアステレオマー、およびこれらの混合物として生じることができる。化合物Ｃのいずれかのそのような異性体形態の投与を伴う方法は、その混合物の投与を含む、本明細書に提供される実施形態内に含まれる。

【0213】

一部の実施形態では、本明細書に提供される化合物Ｃは、１個のキラル中心を含有し、エナンチオマーの混合物、例えば、ラセミ混合物として存在することができる。本開示は、そのような化合物の立体化学的に純粋な形態の使用とともに、それらの形態の混合物の使用を包含する。例えば、等しいまたは等しくない量の本明細書に提供される化合物Ｃのエナンチオマーを含む混合物は、本明細書に開示されている方法および組成物において使用することができる。これらの異性体は、キラルカラムまたはキラル分割剤等の標準的な方法を用いて非対称的に合成または分割することができる。例えば、Jacques, J., et al, Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981)；Wilen, S. H., et al, Tetrahedron 33 :2725 (1977)；Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962)；およびWilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972)を参照されたい。

【0214】

化合物Ｃのキラル中心が、インビボでエピマー化を受けることができることを理解されたい。そのようなものとして、当業者は、インビボでのエピマー化の場合、その（Ｒ）形態での化合物Ｃの投与が、その（Ｓ）形態での化合物Ｃの投与と等価となり得ることを認識するであろう。

【0215】

光学的に活性な（＋）および（－）、（Ｒ）－および（Ｓ）－、または（Ｄ）－および（Ｌ）－異性体は、キラルシントンもしくはキラル試薬を使用して調製することができる、またはキラル固定相におけるクロマトグラフィー等の従来技術を用いて分割することができる。

【0216】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの溶媒和物である。用語「溶媒和物」は、有機であれ無機であれ、１つまたはそれ以上の溶媒分子と化合物との物理的結合を意味する。この物理的結合は、水素結合を含む。ある特定の実例では、例えば、１つまたはそれ以上の溶媒分子が、結晶性固体の結晶格子に取り込まれる場合、溶媒和物は、単離が可能となるであろう。「溶媒和物」は、溶液相溶媒和物および不溶性溶媒和物の両方を包含する。例示的な溶媒和物として、水和物、エタノール付加物、メタノール付加物、イソプロパノール付加物、アセトニトリル溶媒和物、および酢酸エチル溶媒和物が挙げられる。一部の実施形態では、化合物Ｃは、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの水和物である。溶媒和の方法は、当技術分野で知られている。

【0217】

「互変異性体」は、互いに平衡状態にある化合物の異性体形態を指す。異性体形態の濃度は、化合物が見出される環境に依存し、例えば、化合物が固体であるか、または有機溶液もしくは水溶液中にあるかに応じて異なる場合がある。例えば、水溶液中で、ピラゾールは、互いの互変異性体と称される次の異性体形態を示すことができる：

【化15】

【0218】

当業者によって容易に理解される通り、多種多様な官能基および他の構造は、互変異性を示すことができ、化合物Ｃのいずれかの互変異性体の投与は、本明細書に提供される方法の範囲内にある。

【0219】

提供される方法において使用される化合物Ｃが、原子のうち１つまたはそれ以上に非天然の割合の原子同位体を含有することができることにも留意されたい。例えば、化合物Ｃは、例えば、トリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）、硫黄－３５（^３５Ｓ）もしくは炭素－１４（^１４Ｃ）等の放射性同位体で放射標識することができる、または重水素（^２Ｈ）、炭素－１３（^１３Ｃ）もしくは窒素－１５（^１５Ｎ）等により同位体的に富化することができる。本明細書で使用される場合、「同位体分子種」は、同位体的に富化された化合物である。用語「同位体的に富化された」は、当該原子の天然の同位体組成以外の同位体組成を有する原子を指す。「同位体的に富化された」は、当該原子の天然の同位体組成以外の同位体組成を有する少なくとも１個の原子を含有する化合物を指すこともできる。用語「同位体組成」は、所与の原子に見られる各同位体の量を指す。放射標識および同位体的に富化された化合物は、治療剤、例えば、がん治療剤、研究試薬、例えば、結合アッセイ試薬および診断剤、例えば、インビボ造影剤として有用である。放射性であるか否かにかかわらず、化合物Ｃのいずれかの同位体変種の投与を伴う方法は、本明細書に提供される方法の範囲内に包含されることが意図される。一部の実施形態では、化合物Ｃの同位体分子種、例えば、重水素、炭素－１３（^１３Ｃ）および／または窒素－１５（^１５Ｎ）富化化合物の投与を伴う方法が本明細書に提供される。本明細書で使用される場合、「重水素化された」は、少なくとも１個の水素（Ｈ）が重水素（Ｄまたは^２Ｈによって指し示される）によって置き換えられた化合物を意味し、すなわち、化合物は、少なくとも１個の位置において重水素が富化されている。

【0220】

立体化学または同位体組成とは無関係に、化合物Ｃは、本明細書に記載されている薬学的に許容される塩のいずれかの形態で投与することができることが理解される。それと同時に、同位体組成は、化合物Ｃの立体化学組成から独立して変動し得ることが理解される。さらに、同位体組成は、化合物Ｃまたはその塩に存在する元素に制限されているが、化合物Ｃの薬学的に許容される塩の選択から独立して、他の面では変動し得る。

【0221】

描写されている構造と当該構造を与えられた名称との間に矛盾がある場合、描写されている構造に、より多くの重みを与えられるべきであることに留意されたい。加えて、構造または構造の部分の立体化学が、例えば、太字または破線で指し示されていない場合、構造または構造の部分は、構造のあらゆる立体異性体を包含するものとして解釈されるべきである。

【0222】

１．組成物および製剤
本明細書に提供される併用療法の方法、組成物、組合せ、キットおよび使用の一部の実施形態では、併用療法は、化合物Ｃを含有する１つまたはそれ以上の組成物、例えば、医薬組成物において投与することができる。

【0223】

一部の実施形態では、化合物Ｃを含有する組成物、例えば、医薬組成物は、希釈剤、アジュバント、賦形剤またはビヒクル等の担体を含むことができ、それとともに、化合物Ｃおよび／または細胞が投与される。適した医薬品担体の例は、“Remington’s Pharmaceutical Sciences” by E. W. Martinに記載されている。そのような組成物は、患者への適切な投与のための形態を提供できるように、適した量の担体と一緒に、一般に精製された形態で、治療有効量の化合物Ｃを含有するであろう。そのような医薬品担体は、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱物油およびゴマ油等、石油、動物、植物または合成起源のものを含む、水および油等、滅菌された液体となることができる。食塩水溶液およびデキストロース水およびグリセロール溶液も、特に、注射可能な溶液のための、液体担体として用いることができる。医薬組成物は、希釈剤、アジュバント、接着阻害薬（antiadherent）、結合剤、コーティング、フィラー、香料、着色料、潤滑剤、流動促進剤、保存料、洗剤、吸着剤、乳化剤、医薬品賦形剤、ｐＨ緩衝剤）または甘味料およびこれらの組合せのうちいずれか１つまたはそれ以上を含有することができる。一部の実施形態では、医薬組成物は、液体、固体、凍結乾燥された粉末、ゲル形態および／またはこれらの組合せとなることができる。一部の態様では、担体の選択は、特定の阻害剤および／または投与の方法によって部分的に決定される。

【0224】

薬学的に許容される担体は一般に、用いられる投薬量および濃度においてレシピエントにとって無毒性であり、リン酸、クエン酸および他の有機酸等のバッファー；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存料（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；ヘキサメトニウム塩化物；ベンザルコニウム塩化物；ベンゼトニウム塩化物；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール等）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリシン等のアミノ酸；グルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む単糖、二糖および他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール等の糖；ナトリウム等の塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性物質、安定剤、ならびに／または保存料を含むがこれらに限定されない。化合物Ｃを含有する組成物は、凍結乾燥されていてもよい。

【0225】

一部の実施形態では、医薬組成物は、筋肉内、静脈内、皮内、病巣内、腹腔内注射、皮下、腫瘍内、硬膜外、経鼻、経口、腟、直腸、外用、局所的、耳、吸入、頬側（例えば、舌下）および経皮投与またはいずれかの経路を含む、当業者に知られているいずれかの経路による投与のために製剤化することができる。一部の実施形態では、他の投与機序も考慮される。一部の実施形態では、投与は、ボーラス注入によって、注射によって、例えば、静脈内もしくは皮下注射、眼内注射、眼周囲注射、網膜下注射、硝子体内注射、経中隔注射、強膜下（subscleral）注射、脈絡膜内注射、前房内注射、結膜下（subconjectval）注射、結膜下（subconjuntival）注射、テノン嚢下（sub-Tenon）注射、眼球後注射、眼球周囲注射または強膜近傍後側（posterior juxtascleral）デリバリーによってなされる。一部の実施形態では、投与は、非経口、肺内および鼻腔内によって、局所的治療に所望される場合は、病巣内投与によってなされる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内または皮下投与を含む。一部の実施形態では、所与の用量は、単一のボーラス投与によって投与される。一部の実施形態では、それは、例えば、３日間以下の期間にわたり、複数のボーラス投与によって、または継続注入投与によって投与される。

【0226】

一部の実施形態では、投与は、治療の位置に応じて局所的、外用または全身的となることができる。一部の実施形態では、治療を必要とする領域への局所的投与は、例えばであって限定するものではないが、外科手術の際の局所的注入、例えば、外科手術後の創傷被覆と併せた外用適用、カテーテルを用いた、坐薬を用いたまたはインプラントを用いた注射によって達成することができる。一部の実施形態では、組成物は、逐次に、間欠的に、または同一組成物中のいずれかで、他の生物活性剤とともに投与することもできる。一部の実施形態では、投与は、ポンプ等を用いた、制御された放出製剤およびデバイス制御された放出を含む、制御された放出系を含むこともできる。一部の実施形態では、投与は、経口である。

【0227】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、典型的に、単位剤形または複数剤形において製剤化および投与される。各単位用量は、要求される医薬品担体、ビヒクルまたは希釈剤に関連して、所望の治療効果を生じるのに十分な所定の含量の治療活性がある化合物Ｃを含有する。一部の実施形態では、単位剤形は、適した含量の化合物Ｃを含有する、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、顆粒、滅菌非経口溶液または懸濁液、および経口溶液または懸濁液、および油・水エマルションを含むがこれらに限定されない。単位用量形態は、アンプルおよびシリンジまたは個々に包装された錠剤もしくはカプセル中に含有され得る。単位用量形態は、その分数または倍数で投与され得る。一部の実施形態では、複数用量形態は、隔離された単位用量形態で投与されるべき単一容器内に包装された複数の同一単位剤形である。複数用量形態の例は、バイアル、錠剤もしくはカプセルのボトル、またはパイントもしくはガロンのボトルを含む。

【0228】

２．投薬
一部の実施形態では、提供される併用療法の方法は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の細胞療法の開始の前に、その後に、その間に、その経過中に、それと同時に、それとほとんど同時に、それと逐次に、それと同時的におよび／またはそれと間欠的に、化合物Ｃの投与を開始する工程を伴う。一部の実施形態では、提供される併用療法の方法における化合物Ｃの投与の開始は、Ｔ細胞療法の投与の開始の後にまたはその後続でなされる。

【0229】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の細胞療法の開始の後に（その後続で）開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、Ｔ細胞療法の細胞のピークまたは最大レベルが、対象の血液中で検出可能となった時点でまたはその前に開始される。

【0230】

一部の事例では、化合物Ｃの投与の開始は、（ｉ）Ｔ細胞療法の細胞のピークもしくは最大レベルが、対象の血液中で検出可能となる時点の；（ｉｉ）血液中で検出可能となった後で、血液中で検出可能なＴ細胞療法の細胞の数が、検出不能となるかもしくは低減される、適宜、Ｔ細胞療法の投与後の先行する時点と比較して低減される；（ｉｉｉ）血液中で検出可能なＴ細胞療法の細胞の数が、Ｔ細胞療法の投与の開始後に対象の血液中で検出可能なＴ細胞療法のピークもしくは最大数細胞の１．５分の１、２．０分の１、３．０分の１、４．０分の１、５．０分の１、１０分の１以下にもしくはそれを下回って減少される；（ｉｖ）Ｔ細胞療法の細胞のピークもしくは最大レベルが、対象の血液中で検出可能となった後の時点において、対象由来の血液中で検出可能な細胞のもしくはそれに由来する細胞の数が、対象の血液中の総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の１０％未満、５％未満、１％未満もしくは０．１％未満となる；（ｖ）対象が、Ｔ細胞療法による治療後の寛解に続いて疾患進行を示す、および／もしくは再発した；ならびに／または（ｉｖ）対象が、細胞の投与前もしくはその後のかつ化合物Ｃの投与の開始前の時点の腫瘍負荷と比較して増加した腫瘍負荷を示す、１、２または３日前以内等、その時点でまたはその１週間前以内に行われる。ある特定の態様では、提供される方法は、Ｔ細胞療法に対する応答、例えば、Ｔ細胞の存在および／または腫瘍負荷の低減を改善するために、対象におけるＴ細胞療法を増強、増加または強化するために行われる。

【0231】

一部の実施形態では、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の細胞療法は、併用療法の１日目に投与される。

【0232】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の開始の後に（その後続で）開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、Ｔ細胞療法の開始の後に（その後続で）、かつ、Ｔ細胞療法の開始と同一の日に（すなわち、併用療法の１日目に）開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１日目～２２日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の２日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の３日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の４日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の５日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の６日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の７日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の８日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される。

【0233】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８もしくは２９日目またはその概数に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１日目または約１日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の２日目または約２日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の３日目または約３日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の４日目または約４日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の５日目または約５日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の５日目または約５日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の７日目または約７日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の８日目または約８日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の９日目または約９日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１０日目または約１０日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１１日目または約１１日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１２日目または約１２日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１３日目または約１３日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１４日目または約１４日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１５日目または約１５日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１６日目または約１６日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１７日目または約１７日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１８日目または約１８日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の１９日目または約１９日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の２０日目または約２０日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の２１日目または約２１日目に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、併用療法の２２日目または約２２日目に開始される。

【0234】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法、例えば、Ｔ細胞療法の投与前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１ヶ月前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の４週間前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の３週間前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の２週間前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１週間前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の６日前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の５日前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の４日前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の３日前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の２日前以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１日前以内に開始される。

【0235】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１ヶ月前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の４週間前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の３週間前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の２週間前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１週間前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の６日前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の５日前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の４日前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の３日前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の２日前に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、細胞療法の投与の１日前に開始される。

【0236】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与後かつ細胞療法の投与前に開始される。一部の実施形態では、細胞療法は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから２～７日後に投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の最終日に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから７日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから６日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから５日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから４日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから３日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから２日後以内に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから１日後以内に開始される。

【0237】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから７日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから６日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから５日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから４日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから３日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから２日後に開始される。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、リンパ球枯渇療法の投与の終わりから１日後に開始される。

【0238】

一部の実施形態では、対象が化合物Ｃを最初に投与された時点で、および／または投与の開始後のいずれかの後続時点で、対象は、重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または重度の毒性等の重度の毒性の徴候または症状を示さない。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、対象が、重度のＣＲＳの徴候または症状を示さない、および／あるいは長期のグレード３のＣＲＳまたはグレード４もしくは５のＣＲＳ等のグレード３以上のＣＲＳを示さない時点でなされる。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、対象が、重度の神経毒性の徴候または症状を示さない、および／あるいは長期のグレード３の神経毒性またはグレード４もしくはグレード５の神経毒性等のグレード３以上の神経毒性を示さない時点でなされる。一部の態様では、Ｔ細胞療法の投与の開始時点および化合物Ｃの投与時点の間に、対象は、重度のＣＲＳを示していない、および／あるいは長期のグレード３のＣＲＳまたはグレード４もしくは５のＣＲＳ等のグレード３以上のＣＲＳを示していない。一部の実例では、Ｔ細胞療法の投与の開始時点および化合物Ｃの投与時点の間に、対象は、重度の神経毒性を示していない、および／あるいは長期のグレード３の神経毒性またはグレード４もしくは５の神経毒性等のグレード３以上の神経毒性を示さない。

【0239】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、間欠的（すなわち、毎日ではない）投薬レジメンにおいて投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、複数の間欠的用量として投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、同一である。他の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量は、異なる量のものとなることができる。

【0240】

一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、例えば、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇの間、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇの間、０．２ｍｇもしくは約０．２ｍｇ～０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇの間、０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇ～０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間、０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇ～０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇの間、０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間、０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇ～０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇの間、０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間、０．７ｍｇもしくは約０．７ｍｇ～０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇの間、０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間、０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇ～０．９ｍｇもしくは約０．９ｍｇの間または０．８ｍｇもしくは約０．８ｍｇ～１．０ｍｇもしくは約１．０ｍｇの間（それぞれ上限下限値を含む）である。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇもしくは約０．６ｍｇの間である。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．５ｍｇもしくは約０．５ｍｇの間である。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．４ｍｇもしくは約０．４ｍｇの間である。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇもしくは約０．１ｍｇ～０．３ｍｇもしくは約０．３ｍｇの間である。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇである。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇである。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇである。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇである。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．５ｍｇまたは約０．５ｍｇである。一部の実施形態では、化合物Ｃの用量は、０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇである。先行する実施形態のいずれかでは、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、同一である。

【0241】

一部の実施形態では、間欠的投薬レジメンの一部としての化合物Ｃは、５日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、６日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、７日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、８日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、９日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１０日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１１日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１２日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１３日毎に１回以下で投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１４日毎に１回以下で投与される。

【0242】

一部の実施形態では、間欠的投薬レジメンの一部としての化合物Ｃは、５日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、６日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、週１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、８日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、９日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１０日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１１日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１２日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１３日毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、２週間毎に１回投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される。

【0243】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始の後続の期間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも１週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも２週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも３週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも４週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも５週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも６週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも７週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも８週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも９週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも１０週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも１１週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後少なくとも１２週間にわたり投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後最大１２週間にわたり投与される。先行する実施形態のいずれかでは、化合物Ｃは、細胞療法の投与の開始後最大１２週間にわたり投与される。よって、併用療法の１日目に細胞療法が投与される併用療法を参照すると、一部の実施形態では、化合物Ｃは、併用療法の８５日目よりも遅くに投与されない。

【0244】

一部の実施形態では、化合物Ｃは、併用療法の１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、併用療法の８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、併用療法の１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。一部の実施形態では、化合物Ｃは、併用療法の８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与される。

【0245】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．３ｍｇであり、化合物Ｃは、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0246】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．３ｍｇであり、化合物Ｃは、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0247】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．３ｍｇであり、化合物Ｃは、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0248】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．４ｍｇであり、化合物Ｃは、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0249】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．３ｍｇであり、化合物Ｃは、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与される。

【0250】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．２ｍｇであり、化合物Ｃは、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0251】

一部の実施形態では、化合物Ｃの複数の間欠的用量の各用量は、０．６ｍｇであり、化合物Ｃは、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される。

【0252】

一部の事例では、サイクリングレジメンは、いずれかの時点でおよび／または１つもしくはそれ以上の時間にわたり、中断され得る。一部の事例では、対象が、セクションＩＶに記載されているもの等、１つまたはそれ以上の有害事象、用量規制毒性（ＤＬＴ）、好中球減少症もしくは発熱性好中球減少症、血小板減少症、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）を発症する場合、サイクリングレジメンは、中断または修飾される。一部の実施形態では、対象が、セクションＩＶに記載されているもの等、１つまたはそれ以上の有害事象、用量規制毒性（ＤＬＴ）、好中球減少症もしくは発熱性好中球減少症、血小板減少症、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／または神経毒性（ＮＴ）を発症した後に、投与毎のまたは１週間のある特定の日における１日当たりの化合物Ｃの量は、変更される。

【0253】

ＩＩ．細胞療法および細胞の操作
一部の実施形態では、提供される併用療法の方法に合わせた使用のための細胞療法（例えば、Ｔ細胞療法）は、がん、例えば、Ｂ細胞悪性病変等の疾患または状態に関連する抗原を認識するおよび／またはそれに特異的に結合するように設計された組換え受容体を発現する操作された細胞を投与する工程を含む。一部の実施形態では、抗原への結合は、そのような抗原に対する免疫応答等の応答をもたらす。一部の実施形態では、細胞は、操作された受容体または組換え受容体、例えば、操作された抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含有するかまたはそれを含有するように操作されている。ＣＡＲ等の組換え受容体は一般に、一部の態様では、リンカーおよび／または膜貫通ドメインを介して、１つまたはそれ以上の細胞内シグナル伝達構成成分に連結された細胞外抗原（またはリガンド）結合性ドメインを含む。一部の態様では、操作された細胞は、養子細胞療法のため等、対象への投与に適した医薬組成物および製剤として提供される。対象、例えば、患者に細胞および組成物を投与するための治療方法も提供される。一部の実施形態では、方法は、セクションＩに記載されているいずれかである。

【0254】

よって、一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作により導入された１つまたはそれ以上の核酸を含み、これにより、そのような核酸の組換えまたは遺伝子操作された産物を発現する。一部の実施形態では、遺伝子移入は、先ず、細胞を刺激することにより、例えば、これを、例えば、サイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定される、増殖、生存および／または活性化等の応答を誘導する刺激と組み合わせ、続いて、活性化された細胞を形質導入し、培養において、臨床適用に十分な数まで増大させることにより達成される。

【0255】

１．キメラ抗原受容体
提供される方法および使用、例えば、セクションＩに記載されているいずれかの一部の実施形態では、Ｔ細胞等の操作された細胞は、所望の抗原（例えば、腫瘍抗原）に対する特異性を提供するリガンド結合性ドメイン（例えば、抗体または抗体断片）を細胞内シグナル伝達ドメインと組み合わせる１つまたはそれ以上のドメインを含有する、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等のキメラ受容体を発現する。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次活性化シグナルを提供するＴ細胞活性化ドメイン等の活性化細胞内ドメイン部分である。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、エフェクター機能を容易にするための共刺激シグナル伝達ドメインを含有するかまたはさらに含有する。分子、例えば、抗原への特異的結合時に、受容体は一般に、ＩＴＡＭ伝達シグナル等の免疫刺激シグナルを細胞内に送達し、これにより、疾患または状態に標的化された免疫応答を促進する。一部の実施形態では、キメラ受容体は、免疫細胞において遺伝子操作された場合、Ｔ細胞活性をモジュレートすることができ、一部の事例では、Ｔ細胞分化または恒常性をモジュレートし、これにより、養子細胞療法の方法における使用のため等、インビボで改善された長寿、生存および／または持続性を有する遺伝子操作された細胞をもたらすことができる。

【0256】

ＣＡＲを含む例示的な抗原受容体、ならびにそのような受容体を細胞内に操作および導入するための方法は、例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ２０００１４２５７、ＷＯ２０１３１２６７２６、ＷＯ２０１２／１２９５１４、ＷＯ２０１４０３１６８７、ＷＯ２０１３／１６６３２１、ＷＯ２０１３／０７１１５４、ＷＯ２０１３／１２３０６１、米国特許出願公開番号ＵＳ２００２１３１９６０、ＵＳ２０１３２８７７４８、ＵＳ２０１３０１４９３３７、米国特許第６，４５１，９９５号、同第７，４４６，１９０号、同第８，２５２，５９２号、同第８，３３９，６４５号、同第８，３９８，２８２号、同第７，４４６，１７９号、同第６，４１０，３１９号、同第７，０７０，９９５号、同第７，２６５，２０９号、同第７，３５４，７６２号、同第７，４４６，１９１号、同第８，３２４，３５３号および同第８，４７９，１１８号ならびに欧州特許出願番号ＥＰ２５３７４１６に記載されているもの、ならびに／またはSadelain et al., Cancer Discov. 2013 April; 3(4): 388-398；Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338；Turtle et al., Curr. Opin. Immunol., 2012 October; 24(5): 633-39；Wu et al., Cancer, 2012 March 18(2): 160-75によって記載されているものを含む。一部の態様では、抗原受容体は、米国特許第７，４４６，１９０号に記載されているＣＡＲ、および国際特許出願公開番号ＷＯ／２０１４０５５６６８Ａ１に記載されているものを含む。ＣＡＲの例は、これらそれぞれの内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＷＯ２０１４０３１６８７、ＵＳ８，３３９，６４５、ＵＳ７，４４６，１７９、ＵＳ２０１３／０１４９３３７、米国特許第７，４４６，１９０号、米国特許第８，３８９，２８２号、Kochenderfer et al., 2013, Nature Reviews Clinical Oncology, 10, 267-276 (2013)；Wang et al. (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；およびBrentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177)等、上述の刊行物のいずれかに開示されているＣＡＲを含む。ＷＯ２０１４０３１６８７、ＵＳ８，３３９，６４５、ＵＳ７，４４６，１７９、ＵＳ２０１３／０１４９３３７、米国特許第７，４４６，１９０号および米国特許第８，３８９，２８２号も参照されたい。

【0257】

ＣＤ１９を標的化する例示的なＣＡＲ Ｔ細胞療法は、ＦＤＡ承認された製品ＢＲＥＹＡＮＺＩ（登録商標）（リソカブタゲン（lisocabtagene）・マラルユーセル）、ＴＥＣＡＲＴＵＳ（商標）（ブレクスカブタゲン・オートルユーセル（brexucabtagene autoleucel））、ＫＹＭＲＩＡＨ（商標）（チサゲンレクルユーセル）およびＹＥＳＣＡＲＴＡ（商標）（アキシカブタゲン・シロルユーセル）を含む、臨床試験ＮＣＴ０２６４４６５５、ＮＣＴ０３７４４６７６、ＮＣＴ０１０８７２９４、ＮＣＴ０３３６６３５０、ＮＣＴ０３７９０８９１、ＮＣＴ０３４９７５３３、ＮＣＴ０４００７０２９、ＮＣＴ０３９６０８４０、ＮＣＴ０４０４９３８３、ＮＣＴ０４０９４７６６、ＮＣＴ０３３６６３２４、ＮＣＴ０２５４６７３９、ＮＣＴ０３４４８３９３、ＮＣＴ０３４６７２５６、ＮＣＴ０３４８８１６０、ＮＣＴ０４０１２８７９、ＮＣＴ０３０１６３７７、ＮＣＴ０３４６８１５３、ＮＣＴ０３４８３６８８、ＮＣＴ０３３９８９６７、ＮＣＴ０３２２９８７６、ＮＣＴ０３４５５９７２、ＮＣＴ０３４２３７０６、ＮＣＴ０３４９７５３３およびＮＣＴ０４００２４０１において調査されたまたは調査中の療法を含む。例示的な操作された細胞は、ＢＲＥＹＡＮＺＩ（登録商標）、ＴＥＣＡＲＴＵＳ（商標）、ＫＹＭＲＩＡＨ（商標）、ＹＥＳＣＡＲＴＡ（商標）、ＵＣＡＲＴ１９およびＡＬＬＯ－５０１を含む。一部の態様では、操作された細胞は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるMarofi et al., Front. Immunol. (2021) 12:681984に記載されている細胞のいずれかを含む。

【0258】

一部の実施形態では、Ｔ細胞等の操作された細胞は、特定の細胞型の表面に発現される抗原等の特定の抗原（またはマーカーもしくはリガンド）に対する特異性を有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する。一部の実施形態では、受容体によって標的化される抗原は、ポリペプチドである。一部の実施形態では、これは、炭水化物または他の分子である。一部の実施形態では、抗原は、正常なまたは標的化されない細胞または組織と比較して、疾患または状態の細胞、例えば、腫瘍または病原性細胞において選択的に発現または過剰発現される。他の実施形態では、抗原は、正常な細胞において発現される、および／または操作された細胞において発現される。

【0259】

受容体によって標的化される抗原は、一部の実施形態では、多数の知られているＢ細胞マーカーのいずれか等、Ｂ細胞悪性病変に関連する抗原を含む。一部の実施形態では、受容体によって標的化される抗原は、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＲＯＲ１、ＣＤ４５、ＣＤ２１、ＣＤ５、ＣＤ３３、Ｉｇカッパー、Ｉｇラムダ、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂまたはＣＤ３０である。特定の態様では、抗原は、ＣＤ１９である。一部の実施形態では、そのような抗原のいずれかは、ヒトＢ細胞において発現される抗原である。

【0260】

ＣＡＲ等のキメラ受容体は一般に、抗体分子の抗原結合性部分である細胞外抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、抗体分子の部分、一般に、抗体の可変重（ＶＨ）鎖領域および／または可変軽（ＶＬ）鎖領域、例えば、ｓｃＦｖ抗体断片である。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、例えば、ｓｄＦｖ、ナノボディ、Ｖ_ＨＨおよびＶ_ＮＡＲである。一部の実施形態では、抗原結合性断片は、可動性リンカーによって連接された抗体可変領域を含む。

【0261】

一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片（例えば、ｓｃＦｖまたはＶ_Ｈドメイン）は、ＣＤ１９等の抗原を特異的に認識する。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＣＤ１９に特異的に結合する抗体または抗原結合性断片に由来するか、またはそのバリアントである。

【0262】

一部の実施形態では、抗原は、ＣＤ１９である。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、ＣＤ１９に特異的な抗体または抗体断片に由来するＶ_ＨおよびＶ_Ｌを含有する。一部の実施形態では、ＣＤ１９に結合する抗体または抗体断片は、ＦＭＣ６３およびＳＪ２５Ｃ１等のマウス由来抗体である。一部の実施形態では、抗体または抗体断片は、例えば、米国特許公開番号ＵＳ２０１６／０１５２７２３に記載されているヒト抗体である。

【0263】

一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、一部の態様ではｓｃＦｖとなり得る、ＦＭＣ６３に由来するＶ_Ｈおよび／またはＶ_Ｌを含む。ＦＭＣ６３は一般に、ヒト起源のＣＤ１９を発現するＮａｌｍ－１および－１６細胞に対して産生されたマウスモノクローナルＩｇＧ１抗体を指す（Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302）。一部の実施形態では、ＦＭＣ６３抗体は、それぞれ配列番号３８および３９に記載されるＣＤＲ－Ｈ１およびＣＤＲ－Ｈ２、ならびに配列番号４０または５４に記載されるＣＤＲ－Ｈ３、ならびに配列番号３５に記載されるＣＤＲ－Ｌ１、ならびに配列番号３６または５５に記載されるＣＤＲ－Ｌ２、ならびに配列番号３７または５６に記載されるＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態では、ＦＭＣ６３抗体は、配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）、および配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。

【0264】

一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号３５のＣＤＲ－Ｌ１配列、配列番号３６のＣＤＲ－Ｌ２配列および配列番号３７のＣＤＲ－Ｌ３配列を含有する可変軽鎖ならびに／もしくは配列番号３８のＣＤＲ－Ｈ１配列、配列番号３９のＣＤＲ－Ｈ２配列および配列番号４０のＣＤＲ－Ｈ３配列を含有する可変重鎖、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号４１に記載されるＦＭＣ６３の可変重鎖領域および配列番号４２に記載されるＦＭＣ６３の可変軽鎖領域、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを含む。一部の実施形態では、可変重鎖および可変軽鎖は、リンカーによって接続される。一部の実施形態では、リンカーは、配列番号５９に記載される。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、順番に、Ｖ_Ｈ、リンカーおよびＶ_Ｌを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、順番に、Ｖ_Ｌ、リンカーおよびＶ_Ｈを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号５７に記載されるヌクレオチドの配列、または配列番号５７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％配列同一性を示す配列によってコードされる。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号４３に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号４３に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％配列同一性を示す配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＢＲＥＹＡＮＺＩ（登録商標）（リソカブタゲン・マラルユーセル）のＣＡＲである。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＢＲＥＹＡＮＺＩ（登録商標）（リソカブタゲン・マラルユーセル）である。

【0265】

一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、一部の態様ではｓｃＦｖとなり得る、ＳＪ２５Ｃ１に由来するＶ_Ｈおよび／またはＶ_Ｌを含む。ＳＪ２５Ｃ１は、ヒト起源のＣＤ１９を発現するＮａｌｍ－１および－１６細胞に対して産生されたマウスモノクローナルＩｇＧ１抗体である（Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302）。一部の実施形態では、ＳＪ２５Ｃ１抗体は、それぞれ配列番号４７～４９に記載されるＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３、ならびにそれぞれ配列番号４４～４６に記載されるＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態では、ＳＪ２５Ｃ１抗体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）、および配列番号５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号４４のＣＤＲ－Ｌ１配列、配列番号４５のＣＤＲ－Ｌ２配列および配列番号４６のＣＤＲ－Ｌ３配列を含有する可変軽鎖ならびに／もしくは配列番号４７のＣＤＲ－Ｈ１配列、配列番号４８のＣＤＲ－Ｈ２配列および配列番号４９のＣＤＲ－Ｈ３配列を含有する可変重鎖、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号５０に記載されるＳＪ２５Ｃ１の可変重鎖領域および配列番号５１に記載されるＳＪ２５Ｃ１の可変軽鎖領域、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを含む。一部の実施形態では、可変重鎖および可変軽鎖は、リンカーによって接続される。一部の実施形態では、リンカーは、配列番号５２に示される。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、順番に、Ｖ_Ｈ、リンカーおよびＶ_Ｌを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、順番に、Ｖ_Ｌ、リンカーおよびＶ_Ｈを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号５３に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号５３に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％配列同一性を示す配列を含む。

【0266】

一部の実施形態では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＴＥＣＡＲＴＵＳ（商標）（ブレクスカブタゲン・オートルユーセル）のＣＡＲである。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＴＥＣＡＲＴＵＳ（商標）（ブレクスカブタゲン・オートルユーセル）である。

【0267】

一部の実施形態では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＫＹＭＲＩＡＨ（商標）（チサゲンレクルユーセル）のＣＡＲである。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＫＹＭＲＩＡＨ（商標）（チサゲンレクルユーセル）である。

【0268】

一部の実施形態では、抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＹＥＳＣＡＲＴＡ（商標）（アキシカブタゲン・シロルユーセル）のＣＡＲである。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＹＥＳＣＡＲＴＡ（商標）（アキシカブタゲン・シロルユーセル）である。

【0269】

本明細書における用語「抗体」は、最も広義で使用されており、無傷抗体および機能的な（抗原結合性）抗体断片を含むポリクローナルおよびモノクローナル抗体を含み、該断片は、抗原結合性フラグメント（Ｆａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、抗原に特異的に結合することができる可変重鎖（Ｖ_Ｈ）領域、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む単鎖抗体断片、および単一ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ、Ｖ_ＨＨまたはＶ_ＮＡＲ）または断片を含む。この用語は、遺伝子操作されたおよび／または他の仕方で修飾された形態の免疫グロブリン、例えば、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全にヒト抗体、ヒト化抗体およびヘテロコンジュゲート抗体、多特異性、例えば、二特異性の抗体、ダイアボディ（diabody）、トリアボディ（triabody）およびテトラボディ（tetrabody）、タンデム型ジｓｃＦｖ、タンデム型トリｓｃＦｖを包含する。他に記述がなければ、用語「抗体」は、その機能的な抗体断片を包含するものと理解されるべきである。この用語は、ＩｇＧおよびそのサブクラス、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡならびにＩｇＤを含む、いずれかのクラスまたはサブクラスの抗体を含む無傷または全長抗体も包含する。一部の態様では、ＣＡＲは、例えば、異なる特異性を有する２個の抗原結合性ドメインを含有する、二特異性ＣＡＲである。

【0270】

一部の実施形態では、抗原結合性タンパク質、抗体およびそれらの抗原結合性断片は、全長抗体の抗原を特異的に認識する。一部の実施形態では、抗体の重鎖および軽鎖は、全長となることができるか、または抗原結合性部分（Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖまたは単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ））となることができる。他の実施形態では、抗体重鎖定常領域は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤおよびＩｇＥから選択され、特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４、より具体的には、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１）から選択される。別の実施形態では、抗体軽鎖定常領域は、例えば、カッパーまたはラムダ、特に、カッパーから選択される。

【0271】

「高頻度可変領域」または「ＨＶＲ」と同義である用語「相補性決定領域」および「ＣＤＲ」は、一部の事例では、抗原特異性および／または結合親和性を付与する抗体可変領域内のアミノ酸の非近接配列を指すことが知られている。一般に、各重鎖可変領域における３個のＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）および各軽鎖可変領域における３個のＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３）が存在する。「フレームワーク領域」および「ＦＲ」は、一部の事例では、重鎖および軽鎖の可変領域の非ＣＤＲ部分を指すことが知られている。一般に、各全長重鎖可変領域における４個のＦＲ（ＦＲ－Ｈ１、ＦＲ－Ｈ２、ＦＲ－Ｈ３およびＦＲ－Ｈ４）および各全長軽鎖可変領域における４個のＦＲ（ＦＲ－Ｌ１、ＦＲ－Ｌ２、ＦＲ－Ｌ３およびＦＲ－Ｌ４）が存在する。

【0272】

所与のＣＤＲまたはＦＲの正確なアミノ酸配列境界は、Kabat et al. (1991), “Sequences of Proteins of Immunological Interest,” 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD（「Ｋａｂａｔ」ナンバリングスキーム）；Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948（「Ｃｈｏｔｈｉａ」ナンバリングスキーム）；MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), “Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography,” J. Mol. Biol. 262, 732-745.”（「接触（Contact）」ナンバリングスキーム）；Lefranc MP et al., “IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains,” Dev Comp Immunol, 2003 Jan;27(1):55-77（「ＩＭＧＴ」ナンバリングスキーム）；Honegger A and Pluckthun A, “Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool,” J Mol Biol, 2001 Jun 8;309(3):657-70（「Ａｈｏ」ナンバリングスキーム）；およびMartin et al., “Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm,” PNAS, 1989, 86(23):9268-9272（「ＡｂＭ」ナンバリングスキーム）によって記載されたスキームを含む多数のよく知られているスキームのいずれかを使用して容易に決定することができる。

【0273】

所与のＣＤＲまたはＦＲの境界は、同定のために使用されるスキームに応じて変動し得る。例えば、Ｋａｂａｔスキームは、構造配列に基づき、一方、Ｃｈｏｔｈｉａスキームは、構造情報に基づく。ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａスキームの両方のためのナンバリングは、最も一般的な抗体領域配列の長さに基づき、挿入は、挿入文字、例えば、「３０ａ」によって対応され、欠失は、一部の抗体において出現する。この２つのスキームは、ある特定の挿入および欠失（「インデル」）を異なる位置に配置し、差次的ナンバリングをもたらす。接触スキームは、複雑な結晶構造の解析に基づき、多くの点でＣｈｏｔｈｉａナンバリングスキームと同様である。ＡｂＭスキームは、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアによって使用されるものに基づく、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ定義の間の妥協である。

【0274】

下の表２は、それぞれＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭおよび接触スキームによって同定される、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３およびＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３の例示的な位置境界を収載する。ＣＤＲ－Ｈ１について、残基ナンバリングは、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａナンバリングスキームの両方を使用して収載されている。ＦＲは、ＣＤＲの間に位置付けられ、例えば、ＦＲ－Ｌ１は、ＣＤＲ－Ｌ１の前に位置付けられ、ＦＲ－Ｌ２は、ＣＤＲ－Ｌ１およびＣＤＲ－Ｌ２の間に位置付けられ、ＦＲ－Ｌ３は、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３の間に位置付けられる、等々。示されているＫａｂａｔナンバリングスキームは、挿入をＨ３５ＡおよびＨ３５Ｂに配置するため、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲ－Ｈ１ループの終わりは、示されているＫａｂａｔナンバリング慣例を使用してナンバリングされた場合、ループの長さに応じて、Ｈ３２およびＨ３４の間で変動することが留意される。

【表2】

【0275】

よって、他に指定がなければ、所与の抗体またはその領域、例えば、その可変領域の「ＣＤＲ」または「相補性（complementary）決定領域」または個々の指定されたＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）は、上述のスキームまたは他の知られているスキームのいずれかによって定義されるある（または特異的な）相補性（complementary）決定領域を包含するものと理解されたい。例えば、特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）が、所与のＶ_ＨまたはＶ_Ｌ領域アミノ酸配列における対応するＣＤＲのアミノ酸配列を含有することが記述される場合、そのようなＣＤＲが、上述のスキームまたは他の知られているスキームのいずれかによって定義される可変領域内の対応するＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）の配列を有することが理解される。一部の実施形態では、特異的ＣＤＲ配列は、指定されている。提供される抗体の例示的なＣＤＲ配列は、様々なナンバリングスキームを使用して記載されるが、提供される抗体が、当業者に知られている他の上述のナンバリングスキームまたは他のナンバリングスキームのいずれかに従って記載されるＣＤＲを含むことができることが理解される。

【0276】

同様に、他に指定がなければ、所与の抗体またはその領域、例えば、その可変領域のＦＲまたは個々の指定されたＦＲ（例えば、ＦＲ－Ｈ１、ＦＲ－Ｈ２、ＦＲ－Ｈ３、ＦＲ－Ｈ４）は、知られているスキームのいずれかによって定義されるある（または特異的な）フレームワーク領域を包含するものと理解されたい。一部の実例では、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭもしくは接触方法または他の知られているスキームによって定義されるＣＤＲ等、特定のＣＤＲ、ＦＲまたはＣＤＲの同定のためのスキームは、指定されている。他の事例では、ＣＤＲまたはＦＲの特定のアミノ酸配列は、与えられている。

【0277】

用語「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗原への抗体の結合に関与する抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。ネイティブ抗体の重鎖および軽鎖の可変領域（それぞれＶ_ＨおよびＶ_Ｌ）は一般に、同様の構造を有し、各ドメインは、４個の保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）および３個のＣＤＲを含む（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007）を参照）。単一のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインは、抗原結合特異性の付与に十分となり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体は、それぞれ相補的Ｖ_ＬまたはＶ_Ｈドメインのライブラリーをスクリーニングするために、抗原に結合する抗体由来のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインを使用して単離することができる。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照されたい。

【0278】

提供される抗体の中でも、抗体断片が特に挙げられる。「抗体断片」は、無傷抗体が結合する抗原に結合する、無傷抗体の部分を含む、無傷抗体以外の分子を指す。抗体断片の例は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）_２；ダイアボディ；線形抗体；可変重鎖（Ｖ_Ｈ）領域、単鎖抗体分子、例えば、ｓｃＦｖおよび単一ドメインＶ_Ｈ単一抗体；ならびに抗体断片から形成された多特異性抗体を含むがこれらに限定されない。特定の実施形態では、抗体は、ｓｃＦｖ等、可変重鎖領域および／または可変軽鎖領域を含む単鎖抗体断片である。

【0279】

用語「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗原への抗体の結合に関与する抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。ネイティブ抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメイン（それぞれＶ_ＨおよびＶ_Ｌ）は一般に、同様の構造を有し、各ドメインは、４個の保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）および３個のＣＤＲを含む（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007）を参照）。単一のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインは、抗原結合特異性の付与に十分となり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体は、それぞれ相補的Ｖ_ＬまたはＶ_Ｈドメインのライブラリーをスクリーニングするために、抗原に結合する抗体由来のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインを使用して単離することができる。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993)；Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照されたい。

【0280】

単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは部分または軽鎖可変ドメインの全てもしくは部分を含む抗体断片である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である。一部の実施形態では、ＣＡＲは、本明細書に記載されているまたは知られている標的抗原のいずれか等、腫瘍細胞またはがん細胞等の標的化されるべき細胞または疾患のがんマーカーまたは細胞表面抗原等の抗原に特異的に結合する抗体重鎖ドメインを含む。例示的な単一ドメイン抗体は、ｓｄＦｖ、ナノボディ、Ｖ_ＨＨまたはＶ_ＮＡＲを含む。

【0281】

抗体断片は、無傷抗体のタンパク質分解による消化や、組換え宿主細胞による産生を含むがこれらに限定されない、様々な技法によって作製することができる。一部の実施形態では、抗体は、合成リンカー、例えば、ペプチドリンカーによって連接された２個以上の抗体領域もしくは鎖を有する断片および／または天然に存在する無傷抗体の酵素消化によって産生され得ない断片等、天然では起こらない配置を含む断片等、組換えにより産生された断片である。一部の実施形態では、抗体断片は、ｓｃＦｖである。

【0282】

「ヒト化」抗体は、全てのまたは実質的に全てのＣＤＲアミノ酸残基が非ヒトＣＤＲに由来し、全てのまたは実質的に全てのＦＲアミノ酸残基がヒトＦＲに由来する、抗体である。ヒト化抗体は、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでいてもよい。非ヒト抗体の「ヒト化形態」は、親非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しつつ、典型的にヒトに対する免疫原性を低減させるために、ヒト化を受けた非ヒト抗体のバリアントを指す。一部の実施形態では、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、例えば抗体特異性または親和性を回復または改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が得られた抗体）由来の対応する残基で置換されている。

【0283】

一部の態様では、組換え受容体、例えば、キメラ抗原受容体は、抗体またはその断片等の１つまたはそれ以上のリガンド（例えば、抗原）結合性ドメインを含有する細胞外部分と、１つまたはそれ以上の細胞内シグナル伝達領域またはドメイン（互換的に、細胞質シグナル伝達ドメインまたは領域とも呼ばれる）とを含む。一部の態様では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲは、スペーサーおよび／または膜貫通ドメインまたは部分をさらに含む。一部の態様では、スペーサーおよび／または膜貫通ドメインは、リガンド（例えば、抗原）結合性ドメインを含有する細胞外部分と、細胞内シグナル伝達領域またはドメインとを連結することができる。

【0284】

一部の実施形態では、ＣＡＲ等の組換え受容体は、免疫グロブリン定常領域またはそのバリアントもしくは改変バージョン、例えば、ヒンジ領域、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ領域ならびに／またはＣ_Ｈ１／Ｃ_Ｌおよび／もしくはＦｃ領域の少なくとも一部分となり得るかまたはそれを含み得るスペーサーをさらに含む。一部の実施形態では、組換え受容体は、スペーサーおよび／またはヒンジ領域をさらに含む。一部の実施形態では、定常領域または部分は、ヒトＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１の定常領域または部分である。一部の態様では、定常領域の部分は、抗原認識構成成分、例えば、ｓｃＦｖおよび膜貫通ドメインの間のスペーサー領域として機能する。スペーサーは、スペーサーの非存在下と比較して、抗原結合後の細胞の応答性増加をもたらす長さのものであり得る。一部の例では、スペーサーは、１２アミノ酸の長さであるまたは約１２アミノ酸の長さであるまたは１２以下のアミノ酸の長さである。例示的なスペーサーは、少なくとも約１０～２２９アミノ酸、約１０～２００アミノ酸、約１０～１７５アミノ酸、約１０～１５０アミノ酸、約１０～１２５アミノ酸、約１０～１００アミノ酸、約１０～７５アミノ酸、約１０～５０アミノ酸、約１０～４０アミノ酸、約１０～３０アミノ酸、約１０～２０アミノ酸または約１０～１５アミノ酸を有し、収載されている範囲のいずれかの終点の間のいずれかの整数を含むスペーサーを含む。一部の実施形態では、スペーサー領域は、約１２アミノ酸以下、約１１９アミノ酸以下または約２２９アミノ酸以下を有する。例示的なスペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジ単独、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジ、またはＣ_Ｈ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジを含む。例示的なスペーサーは、Hudecek et al. (2013) Clin. Cancer Res., 19:3153、Hudecek et al. (2015) Cancer Immunol Res. 3(2): 125-135、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１４０３１６８７に記載されているものを含むがこれらに限定されない。

【0285】

一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号１に記載され、配列番号２に記載される配列によってコードされるヒンジのみスペーサー等、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１のヒンジのみ等、ＩｇＧのヒンジ領域のみを含有する。一部の実施形態では、スペーサーは、Ｃ_Ｈ２および／またはＣ_Ｈ３ドメインに連結されたＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号３に記載される等、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメインに連結されたＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号４に記載される等、Ｃ_Ｈ３ドメインのみに連結されたＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。一部の実施形態では、スペーサーは、グリシン－セリンリッチ配列または他の可動性リンカー、例えば、知られている可動性リンカーであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、定常領域または部分は、ＩｇＤのそれである。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号５に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号１、３、４および５のいずれかに対して少なくともまたは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を有する。

【0286】

一部の態様では、スペーサーは、（ａ）免疫グロブリンヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなるか、または約１５アミノ酸以下を含み、かつＣＤ２８細胞外領域またはＣＤ８細胞外領域を含まない、（ｂ）免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４ヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなる、および／または約１５アミノ酸以下を含み、かつＣＤ２８細胞外領域またはＣＤ８細胞外領域を含まない、あるいは（ｃ）１２アミノ酸もしくは約１２アミノ酸の長さである、および／または免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４もしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかまたはそれからなる；あるいは（ｄ）配列番号１、３～５、２７～３４もしくは５８に記載されるアミノ酸の配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントからなるかまたはそれを含む、あるいは（ｅ）式Ｘ_１ＰＰＸ_２Ｐ（式中、Ｘ_１は、グリシン、システインまたはアルギニンであり、Ｘ_２は、システインまたはスレオニンである）を含むかまたはそれからなる、ポリペプチドスペーサーである。

【0287】

一部の実施形態では、抗原受容体は、細胞外ドメインに直接的にまたは間接的に連結された細胞内ドメインを含む。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、細胞外ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインを連結する膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＩＴＡＭを含む。例えば、一部の態様では、抗原認識ドメイン（例えば、細胞外ドメイン）は一般に、ＣＡＲの場合はＴＣＲ複合体等の抗原受容体複合体を介した活性化をおよび／または別の細胞表面受容体を経由したシグナルを模倣するシグナル伝達構成成分等の１つまたはそれ以上の細胞内シグナル伝達構成成分に連結される。一部の実施形態では、キメラ受容体は、細胞外ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）および細胞内シグナル伝達ドメインの間に連結または融合された膜貫通ドメインを含む。よって、一部の実施形態では、抗原結合性構成成分（例えば、抗体）は、１つまたはそれ以上の膜貫通および細胞内シグナル伝達ドメインに連結される。

【0288】

一実施形態では、受容体、例えば、ＣＡＲにおけるドメインの１つと天然で会合する膜貫通ドメインが使用される。一部の実例では、膜貫通ドメインは、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するために、同一または異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへのそのようなドメインの結合を回避するように選択されるか、またはそうなるようにアミノ酸置換によって修飾される。

【0289】

膜貫通ドメインは、一部の実施形態では、天然または合成供給源のいずれかに由来する。供給源が天然である場合、ドメインは、一部の態様では、いずれかの膜結合または膜貫通タンパク質に由来する。膜貫通領域は、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）またはＣＤ１５４のアルファ、ベータまたはゼータ鎖に由来する膜貫通領域を含む（即ち、その少なくとも膜貫通領域を含む）。その代わりに、膜貫通ドメインは、一部の実施形態では、合成である。一部の態様では、合成膜貫通ドメインは、ロイシンおよびバリン等の疎水性残基を優勢に含む。一部の態様では、フェニルアラニン、トリプトファンおよびバリンのトリプレットは、合成膜貫通ドメインの各末端に見出されるであろう。一部の実施形態では、連結は、リンカー、スペーサーおよび／または膜貫通ドメインによる。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８またはそのバリアントの膜貫通部分を含有する。細胞外ドメインおよび膜貫通は、直接的にまたは間接的に連結することができる。一部の実施形態では、細胞外ドメインおよび膜貫通は、本明細書に記載されているいずれか等のスペーサーによって連結される。

【0290】

一部の実施形態では、受容体、例えば、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ヒトＣＤ２８またはそのバリアントの膜貫通ドメイン、例えば、ヒトＣＤ２８の２７アミノ酸膜貫通ドメイン（受託番号Ｐ１０７４７．１）であるか、あるいは配列番号８に記載されるアミノ酸の配列または配列番号８に対して少なくとももしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む膜貫通ドメインである。一部の実施形態では、組換え受容体の部分を含有する膜貫通ドメインは、配列番号９に記載されるアミノ酸の配列、またはそれに対して少なくとももしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するアミノ酸の配列を含む。

【0291】

一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲは、少なくとも１個の細胞内シグナル伝達構成成分、例えば、細胞内シグナル伝達領域またはドメインを含む。Ｔ細胞活性化は、一部の態様では、２つのクラスの細胞質シグナル伝達配列によって媒介されるものとして記載される：ＴＣＲを介して抗原依存性一次活性化を開始するクラス（一次細胞質シグナル伝達配列）および抗原非依存性様式で作用して、二次または共刺激シグナルを提供するクラス（二次細胞質シグナル伝達配列）。一部の態様では、ＣＡＲは、そのようなシグナル伝達構成成分の一方または両方を含む。細胞内シグナル伝達領域の中でも、天然の抗原受容体を介したシグナル、共刺激受容体と組み合わせたそのような受容体を介したシグナルおよび／または共刺激受容体単独を介したシグナルを模倣するまたはそれに近似する細胞内シグナル伝達領域が特に挙げられる。一部の実施形態では、短いオリゴまたはポリペプチドリンカー、例えば、２～１０の間のアミノ酸の長さのリンカー、例えば、グリシンおよびセリン、例えば、グリシン－セリンダブレットを含有するリンカーが存在し、ＣＡＲの膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインの間に連結を形成する。

【0292】

一部の実施形態では、ＣＡＲのライゲーションにより、ＣＡＲの細胞質ドメインまたは細胞内シグナル伝達領域は、ＣＡＲを発現するように操作された免疫細胞、例えば、Ｔ細胞の正常なエフェクター機能または応答のうち少なくとも１つを活性化する。例えば、一部の状況では、ＣＡＲは、サイトカインまたは他の因子の分泌等、細胞溶解活性またはＴ－ヘルパー活性等、Ｔ細胞の機能を誘導する。一部の実施形態では、抗原受容体構成成分または共刺激分子の細胞内シグナル伝達領域の切断された部分は、例えば、エフェクター機能シグナルを伝達する場合、無傷免疫刺激鎖の代わりに使用される。一部の実施形態では、例えば細胞内ドメインを含む、細胞内シグナル伝達領域は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列を含み、また、一部の態様では、天然の状況において、そのような受容体と協調して作用して、抗原受容体係合後にシグナル伝達を開始する共受容体の細胞質配列、および／またはそのような分子のいずれかの誘導体もしくはバリアント、および／または同一の機能的性能を有するいずれかの合成配列も含む。一部の実施形態では、例えば細胞内ドメインを含む、細胞内シグナル伝達領域は、共刺激シグナルの提供に関与する領域またはドメインの細胞質配列を含む。

【0293】

一部の態様では、ＣＡＲは、ＴＣＲ複合体の一次活性化を調節する一次細胞質シグナル伝達配列を含む。刺激様式で作用する一次細胞質シグナル伝達配列は、免疫受容活性化チロシンモチーフまたはＩＴＡＭとして知られているシグナル伝達モチーフを含有することができる。一次細胞質シグナル伝達配列を含有するＩＴＡＭの例は、ＣＤ３ゼータ鎖、ＦｃＲガンマ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタおよびＣＤ３イプシロンに由来するＩＴＡＭを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲにおける細胞質シグナル伝達分子は、ＣＤ３ゼータに由来する細胞質シグナル伝達ドメイン、その部分または配列を含有する。

【0294】

一部の実施形態では、受容体は、Ｔ細胞活性化ならびに細胞傷害性を媒介するＴＣＲ ＣＤ３鎖、例えば、ＣＤ３ゼータ鎖等、ＴＣＲ複合体の細胞内構成成分を含む。よって、一部の態様では、抗原結合性部分は、１つまたはそれ以上の細胞シグナル伝達モジュールに連結される。一部の実施形態では、細胞シグナル伝達モジュールは、ＣＤ３膜貫通ドメイン、ＣＤ３細胞内シグナル伝達ドメインおよび／または他のＣＤ膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、受容体、例えば、ＣＡＲは、Ｆｃ受容体γ、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＣＤ４、ＣＤ２５またはＣＤ１６等の１つまたはそれ以上の追加の分子の部分をさらに含む。例えば、一部の態様では、ＣＡＲまたは他のキメラ受容体は、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３－ζ）またはＦｃ受容体γと、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＣＤ４、ＣＤ２５またはＣＤ１６との間のキメラ分子を含む。

【0295】

一部の実施形態では、細胞内（または細胞質）シグナル伝達領域は、ヒトＣＤ３鎖、適宜、ＣＤ３ゼータ刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能性バリアント、例えば、ヒトＣＤ３ζのアイソフォーム３の１１２ＡＡ細胞質ドメイン（受託番号Ｐ２０９６３．２）または米国特許第７，４４６，１９０号もしくは米国特許第８，９１１，９９３号に記載されているＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、配列番号１３、１４もしくは１５に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１３、１４もしくは１５に対して少なくとももしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。

【0296】

天然のＴＣＲの状況において、完全活性化は一般に、ＴＣＲを介したシグナル伝達のみならず、共刺激シグナルも要求する。よって、一部の実施形態では、完全活性化を促進するために、二次または共刺激シグナルを生成するための構成成分もまた、ＣＡＲに含まれる。他の実施形態では、ＣＡＲは、共刺激シグナルを生成するための構成成分を含まない。一部の態様では、追加のＣＡＲが同一細胞において発現され、二次または共刺激シグナルを生成するための構成成分を提供する。

【0297】

一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、Ｔ細胞共刺激分子の細胞内ドメインを含有する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＣＤ２７、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＩＣＯＳおよび／または他の共刺激受容体等の共刺激受容体のシグナル伝達ドメインおよび／または膜貫通部分を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ヒトＣＤ２８またはヒト４－１ＢＢ等のＣＤ２８または４－１ＢＢの共刺激領域またはドメインを含む。

【0298】

一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域またはドメインは、ヒトＣＤ２８の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能性バリアントもしくは部分、例えば、その４１アミノ酸ドメインおよび／またはネイティブＣＤ２８タンパク質の１８６～１８７位にＬＬからＧＧへの置換を有するそのようなドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１０もしくは１１に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１０もしくは１１に対して少なくとももしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含むことができる。一部の実施形態では、細胞内領域は、４－１ＢＢの細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能性バリアントもしくは部分、例えば、ヒト４－１ＢＢの４２アミノ酸細胞質ドメイン（受託番号Ｑ０７０１１．１）またはその機能性バリアントもしくは部分、例えば、配列番号１２に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１２に対して少なくとももしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。

【0299】

一部の態様では、同一ＣＡＲが、一次（または活性化）細胞質シグナル伝達領域および共刺激シグナル伝達構成成分の両方を含む。

【0300】

一部の実施形態では、ある１つのＣＡＲ内に活性化ドメインが含まれ、一方、別の抗原を認識する別のＣＡＲによって共刺激構成成分が提供される。一部の実施形態では、ＣＡＲは、活性化または刺激ＣＡＲと、共刺激ＣＡＲとを含み、両者は同一細胞の表面に発現される（ＷＯ２０１４／０５５６６８を参照）。一部の態様では、細胞は、１つまたはそれ以上の刺激もしくは活性化ＣＡＲおよび／または共刺激ＣＡＲを含む。一部の実施形態では、細胞は、阻害ＣＡＲ（ｉＣＡＲ、Fedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215) (December, 2013)を参照）、例えば、疾患または状態に関連するおよび／またはそれに特異的である抗原以外の抗原を認識するＣＡＲをさらに含み、それによって、疾患標的化ＣＡＲを介して送達される活性化シグナルは、そのリガンドへの阻害ＣＡＲの結合によって減少または阻害され、例えば、オフターゲット効果を低減させる。

【0301】

一部の事例では、ＣＡＲは、第一、第二および／または第三世代ＣＡＲと称される。一部の態様では、第一世代ＣＡＲは、抗原結合時にＣＤ３鎖誘導性シグナルを単に提供するＣＡＲである；一部の態様では、第二世代ＣＡＲは、そのようなシグナルおよび共刺激シグナルを提供するＣＡＲ、例えば、ＣＤ２８またはＣＤ１３７等の共刺激受容体由来の細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲである；一部の態様では、第三世代ＣＡＲは、一部の態様では、異なる共刺激受容体の複数の共刺激ドメインを含むＣＡＲである。

【0302】

一部の実施形態では、ＣＡＲは、１つまたはそれ以上の、例えば、２個以上の共刺激ドメインおよび活性化ドメイン、例えば、一次活性化ドメインを細胞質部分に包含する。例示的なＣＡＲは、ＣＤ３－ゼータ、ＣＤ２８および４－１ＢＢの細胞内構成成分を含む。

【0303】

一部の実施形態では、抗原受容体は、マーカーをさらに含む、および／またはＣＡＲもしくは他の抗原受容体を発現する細胞は、受容体を発現させるための細胞の形質導入もしくは操作の確認に使用され得る細胞表面マーカー等のサロゲートマーカーをさらに含む。一部の態様では、マーカーは、ＣＤ３４、ＮＧＦＲまたは上皮増殖因子受容体の全てまたは一部（例えば、切断形態）、例えば、そのような細胞表面受容体の切断バージョン（例えば、ｔＥＧＦＲ）を含む。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸は、切断可能リンカー配列、例えば、Ｔ２Ａ等のリンカー配列をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結される。例えば、マーカーおよび適宜、リンカー配列は、公開特許出願番号ＷＯ２０１４０３１６８７に開示されているいずれかとなることができる。例えば、マーカーは、Ｔ２Ａ切断可能リンカー配列等のリンカー配列に連結されていてよい、切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）となることができる。

【0304】

切断型ＥＧＦＲ（例えば、ｔＥＧＦＲ）のための例示的なポリペプチドは、配列番号７もしくは１６に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号７もしくは１６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。例示的なＴ２Ａリンカー配列は、配列番号６もしくは１７に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号６もしくは１７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。

【0305】

一部の実施形態では、マーカーは、Ｔ細胞において天然に見出されないかもしくはＴ細胞の表面において天然に見出されない分子、例えば、細胞表面タンパク質、またはその部分である。一部の実施形態では、分子は、非自己分子、非自己タンパク質、即ち、細胞が養子移入されるであろう宿主の免疫系によって「自己」と認識されないものである。

【0306】

一部の実施形態では、マーカーは、治療機能を果たさない、および／または遺伝子操作のための、例えば、操作に成功した細胞を選択するためのマーカーとして使用されるもの以外の効果を生じない。他の実施形態では、マーカーは、治療的分子または他の場合ではいくつかの所望の効果を発揮する分子、例えば、インビボで細胞が遭遇されるリガンド、例えば養子移入およびリガンドとの遭遇時に細胞の応答を増強し、および／または弱める共刺激性または免疫チェックポイント分子であってもよい。

【0307】

一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、本明細書に記載されている抗体または断片を含有する細胞外部分を含む。一部の態様では、キメラ抗原受容体は、本明細書に記載されている抗体または断片を含有する細胞外部分と、細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。一部の実施形態では、抗体または断片は、ｓｃＦｖまたは単一ドメインＶ_Ｈ抗体を含み、細胞内ドメインは、ＩＴＡＭを含有する。一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖のゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＤ３－ゼータ鎖は、ヒトＣＤ３－ゼータ鎖である。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、ＣＤ３ゼータ細胞内ドメインに連結されたＣＤ２８およびＣＤ１３７（４－１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９）共刺激ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＤ２８は、ヒトＣＤ２８である。一部の実施形態では、４－１ＢＢは、ヒト４－１ＢＢである。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、細胞外ドメインと細胞内シグナル伝達領域との間に設置された膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通部分を含有する。細胞外ドメインおよび膜貫通は、直接的にまたは間接的に連結され得る。一部の実施形態では、細胞外ドメインおよび膜貫通は、本明細書に記載されているいずれか等のスペーサーによって連結される。

【0308】

一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体、例えば、抗体断片と、ＣＤ２８の膜貫通部分またはその機能性バリアントであるかまたはそれを含有する膜貫通ドメインと、ＣＤ２８のシグナル伝達部分またはその機能性バリアントおよびＣＤ３ゼータのシグナル伝達部分またはその機能性バリアントを含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有する。例えば、一部の実施形態では、ＣＡＲは、上に記載されているいずれか等、例えば、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖを含む抗体断片等の抗体と、Ｉｇヒンジ含有スペーサー等、重鎖分子のヒンジ領域および／または１つもしくはそれ以上の定常領域等の免疫グロブリン分子の部分を含有するスペーサー等のスペーサーと、ＣＤ２８由来膜貫通ドメインの全てまたは部分を含有する膜貫通ドメインと、ＣＤ２８由来細胞内シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインとを含む。

【0309】

一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体、例えば、抗体断片と、ＣＤ２８の膜貫通部分またはその機能性バリアントであるかまたはそれを含有する膜貫通ドメインと、４－１ＢＢのシグナル伝達部分またはその機能性バリアントおよびＣＤ３ゼータのシグナル伝達部分またはその機能性バリアントを含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有する。一部のそのような実施形態では、受容体は、ヒンジのみのスペーサー等、Ｉｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ等、ヒトＩｇ分子等のＩｇ分子の部分を含有するスペーサーをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、上に記載されているいずれか等、例えば、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖ等の抗体または断片と、Ｉｇヒンジ含有スペーサーのいずれか等のスペーサーと、ＣＤ２８由来膜貫通ドメインと、４－１ＢＢ由来細胞内シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータ由来シグナル伝達ドメインとを含む。

【0310】

Ｂ．核酸、ベクターおよび遺伝子操作に関する方法
ある実施形態では、細胞、例えば、Ｔ細胞は、組換え受容体を発現するように遺伝子操作されている。一部の実施形態では、操作は、組換え受容体をコードするポリヌクレオチドを導入することにより行われる。組換え受容体をコードするポリヌクレオチド、ならびにそのような核酸および／またはポリヌクレオチドを含有するベクターまたは構築物も提供される。

【0311】

一部の事例では、組換え受容体をコードする核酸配列は、シグナルペプチドをコードするシグナル配列を含有する。一部の態様では、シグナル配列は、天然ポリペプチドに由来するシグナルペプチドをコードすることができる。他の態様では、シグナル配列は、配列番号２５に記載され、配列番号２４に記載されるヌクレオチド配列によってコードされる、ＧＭＣＳＦＲアルファ鎖の例示的なシグナルペプチド等の異種または非天然シグナルペプチドをコードすることができる。一部の事例では、組換え受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列は、シグナルペプチドをコードするシグナル配列を含有する。シグナルペプチドの非限定的で例示的な例は、例えば、配列番号２５に記載され、配列番号２４に記載されるヌクレオチド配列によってコードされるＧＭＣＳＦＲアルファ鎖シグナルペプチド、または配列番号２６に記載されるＣＤ８アルファシグナルペプチドを含む。

【0312】

一部の実施形態では、組換え受容体をコードするポリヌクレオチドは、組換え受容体の発現を制御するために、操作可能に連結された少なくとも１つのプロモーターを含有する。一部の例では、ポリヌクレオチドは、組換え受容体の発現を制御するために、操作可能に連結された２、３つ以上のプロモーターを含有する。

【0313】

核酸分子が２つ以上の異なるポリペプチド鎖、例えば、組換え受容体およびマーカーをコードする、ある特定の事例では、ポリペプチド鎖のそれぞれは、別々の核酸分子によってコードされ得る。例えば、２つの別々の核酸が提供され、それぞれは、細胞における発現のために、細胞に個々に移入または導入され得る。一部の実施形態では、組換え受容体をコードする核酸およびマーカーをコードする核酸は、同一プロモーターに作動可能に連結されており、これは、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、または適宜、Ｔ２Ａ、Ｐ２Ａ、Ｅ２ＡもしくはＦ２Ａである、自己切断性ペプチドもしくはリボソームスキッピングを引き起こすペプチドをコードする核酸によって分離されていてよい。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸および組換え受容体をコードする核酸は、２つの異なるプロモーターに作動可能に連結される。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸および組換え受容体をコードする核酸は、細胞のゲノム内の異なる位置に存在するまたは挿入される。一部の実施形態では、組換え受容体をコードするポリヌクレオチドは、レトロウイルス形質導入、トランスフェクションまたは形質転換等により、培養細胞を含有する組成物に導入される。

【0314】

ポリヌクレオチドが第１および第２の核酸配列を含有する実施形態等、一部の実施形態では、異なるポリペプチド鎖のそれぞれをコードするコード配列は、同一であっても異なっていてもよいプロモーターに操作可能に連結され得る。一部の実施形態では、核酸分子は、２つ以上の異なるポリペプチド鎖の発現を駆動するプロモーターを含有することができる。一部の実施形態では、そのような核酸分子は、マルチシストロニック（バイシストロニックまたはトリシストロニック、例えば、米国特許第６，０６０，２７３号を参照されたい）となることができる。一部の実施形態では、転写単位は、単一プロモーターからのメッセージによる遺伝子産物（（例えば、マーカーをコードするおよび組換え受容体をコードする）の同時発現を可能にするＩＲＥＳ（配列内リボソーム進入部位）を含有するバイシストロニック単位として操作され得る。代わりに、一部の事例では、単一プロモーターは、単一オープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）において、自己切断ペプチド（例えば、２Ａ配列）またはプロテアーゼ認識部位（例えば、フューリン）をコードする配列によって互いに分離される２つまたは３つの遺伝子（例えば、マーカーをコードするおよび組換え受容体をコードする）を含有するＲＮＡの発現を誘導し得る。したがって、ＯＲＦは、翻訳中（２Ａの場合）または翻訳後のいずれかで、個々のタンパク質にプロセシングされる単一ポリペプチドをコードする。一部の事例では、Ｔ２Ａ等のペプチドは、リボソームに、２ＡエレメントのＣ末端でのペプチド結合の合成をスキップさせることができ（リボソームスキッピング）、２Ａ配列の末端と、下流にある次のペプチドとの間に分離を引き起こす（例えば、de Felipe, Genetic Vaccines and Ther. 2:13 (2004)およびde Felipe et al. Traffic 5:616-626 (2004)を参照）。様々な２Ａエレメントが知られている。本明細書に開示される方法およびシステムにおいて使用することができる２Ａ配列の例は、米国特許出願公開第２００７０１１６６９０号に記載されている、口蹄疫ウイルス（Ｆ２Ａ、例えば、配列番号２１）、ウマ鼻炎Ａウイルス（Ｅ２Ａ、例えば、配列番号２０）、ゾセア・アシグナ（Thosea asigna）ウイルス（Ｔ２Ａ、例えば、配列番号６または１７）およびブタテッショウウイルス－１（Ｐ２Ａ、例えば、配列番号１８または１９）由来の２Ａ配列を限定することなく含む。

【0315】

本明細書に記載されている組換え受容体のいずれかが、いずれかの組合せまたは配置で、組換え受容体をコードする１つまたはそれ以上の核酸配列を含有するポリヌクレオチドによってコードされてもよい。例えば、１、２、３つ以上のポリヌクレオチドが、１、２、３つ以上の異なるポリペプチド、例えば、組換え受容体をコードすることができる。一部の実施形態では、ある１つのベクターまたは構築物は、マーカーをコードする核酸配列を含有し、別々のベクターまたは構築物は、組換え受容体、例えば、ＣＡＲをコードする核酸配列を含有する。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸および組換え受容体をコードする核酸は、２つの異なるプロモーターに作動可能に連結される。一部の実施形態では、組換え受容体をコードする核酸は、マーカーをコードする核酸の下流に存在する。

【0316】

一部の実施形態では、ベクター骨格は、１つまたはそれ以上のマーカーをコードする核酸配列を含有する。一部の実施形態では、１つまたはそれ以上のマーカーは、形質導入マーカー、サロゲートマーカーおよび／または選択マーカーである。

【0317】

一部の実施形態では、マーカーは、形質導入マーカーまたはサロゲートマーカーである。形質導入マーカーまたはサロゲートマーカーを使用して、ポリヌクレオチド、例えば、組換え受容体をコードするポリヌクレオチドにより導入された細胞を検出することができる。一部の実施形態では、形質導入マーカーは、細胞の改変を示し得るか、またはそれを確認し得る。一部の実施形態では、サロゲートマーカーは、組換え受容体、例えばＣＡＲとともに細胞表面上で共発現されるよう作製されたタンパク質である。特定の実施形態では、そのようなサロゲートマーカーは、活性をほとんどまたは全く持たなくなるように修飾された表面タンパク質である。ある特定の実施形態では、サロゲートマーカーは、組換え受容体をコードする同一ポリヌクレオチドにコードされる。一部の実施形態では、組換え受容体をコードする核酸配列は、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、またはＴ２Ａ、Ｐ２Ａ、Ｅ２ＡもしくはＦ２Ａ等の２Ａ配列等の自己切断性ペプチドもしくはリボソームスキッピングを引き起こすペプチドをコードする核酸によって分離されていてよい、マーカーをコードする核酸配列に作動可能に連結される。外因性マーカー遺伝子は、一部の事例では、細胞の検出または選択を可能にするよう、また一部の事例では細胞自殺を促進するよう操作された細胞と関連して利用され得る。

【0318】

例示的なサロゲートマーカーは、非機能的であり、シグナルもしくは細胞表面ポリペプチドの全長形態によって通常伝達されるシグナルを伝達しないかもしくは伝達することができない、および／または内部移行しないかもしくは内部移行することができない切断形態等、細胞表面ポリペプチドの切断形態を含むことができる。例示的な切断型細胞表面ポリペプチドは、切断型ヒト上皮増殖因子受容体２（ｔＨＥＲ２）、切断型上皮増殖因子受容体（ｔＥＧＦＲ、例示的なｔＥＧＦＲ配列を配列番号７または１６に記載される）もしくは前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）またはこれらの改変形態等、増殖因子または他の受容体の切断形態を含む。ｔＥＧＦＲは、ｔＥＧＦＲ構築物およびコードされた外因性タンパク質により操作された細胞の同定もしくは選択にならびに／またはコードされた外因性タンパク質を発現する細胞の排出もしくは分離に使用することができる、抗体セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））または他の治療用抗ＥＧＦＲ抗体もしくは結合分子によって認識されるエピトープを含有することができる。米国特許第８，８０２，３７４号およびLiu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434）を参照されたい。一部の態様では、マーカー、例えば、サロゲートマーカーは、ＣＤ３４、ＮＧＦＲ、ＣＤ１９もしくは切断型ＣＤ１９、例えば、切断型非ヒトＣＤ１９、または上皮増殖因子受容体（例えば、ｔＥＧＦＲ）の全てまたは一部（例えば、切断形態）を含む。

【0319】

一部の実施形態では、マーカーは、蛍光タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、高感度緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、例えば、スーパーフォールド（super-fold）ＧＦＰ（ｓｆＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）、例えば、ｔｄＴｏｍａｔｏ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ＡｓＲｅｄ２、ＤｓＲｅｄまたはＤｓＲｅｄ２、シアン蛍光タンパク質（ＣＦＰ）、青緑色（blue green）蛍光タンパク質（ＢＦＰ）、高感度青色蛍光タンパク質（ＥＢＦＰ）および黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）、ならびに蛍光タンパク質の種バリアント、単量体バリアントならびにコドン最適化および／または増強されたバリアントを含むそれらのバリアントであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、マーカーは、酵素、例えば、ルシフェラーゼ、イー・コリ（E. coli）由来のｌａｃＺ遺伝子、アルカリホスファターゼ、分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）であるかまたはそれを含む。例示的な発光レポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ（ｌｕｃ）、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳ）またはそれらのバリアントを含む。

【0320】

一部の実施形態では、マーカーは、選択マーカーである。一部の実施形態では、選択マーカーは、外因性薬剤もしくは薬物に対して耐性を付与するポリペプチドであるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、選択マーカーは、抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、哺乳動物細胞に抗生物質耐性を付与する抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、ピューロマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ブラストサイジン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジェネテシン耐性遺伝子もしくはゼオシン耐性遺伝子、またはそれらの改変形態であるか、またはそれらを含む。

【0321】

一部の実施形態では、分子は、非自己分子、例えば、非自己タンパク質、すなわち、細胞が養子移入されることになる宿主の免疫系によって「自己」として認識されないそれである。

【0322】

一部の態様では、マーカーは、治療的機能を果たさず、および／または例えば首尾よく操作された細胞を選択するために、遺伝子操作用のマーカーとして使用される以外の効果を生じない。他の実施形態では、マーカーは、治療用分子、またはある所望の効果を他の仕方で発揮する分子、例えば、インビボで遭遇することになる細胞のリガンド、例えば、養子移入およびリガンドとの遭遇後に細胞の応答を増強および／または減衰するための共刺激または免疫チェックポイント分子となることができる。

【0323】

一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸は、切断可能リンカー配列、例えば、Ｔ２Ａ等のリンカー配列をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結される。例えば、マーカー、および適宜リンカー配列は、ＰＣＴ国際公開ＷＯ２０１４０３１６８７号において開示されるいずれかであり得る。例えば、マーカーは、リンカー配列、例えばＴ２Ａ切断可能リンカー配列に連結されてもよい切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）であり得る。切断型ＥＧＦＲ（例えば、ｔＥＧＦＲ）の例示的なポリペプチドは、配列番号７もしくは１６に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号７もしくは１６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。

【0324】

一部の実施形態では、マーカーは、蛍光タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、高感度緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、例えば、スーパーフォールドＧＦＰ（ｓｆＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）、例えば、ｔｄＴｏｍａｔｏ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ＡｓＲｅｄ２、ＤｓＲｅｄまたはＤｓＲｅｄ２、シアン蛍光タンパク質（ＣＦＰ）、青緑色蛍光タンパク質（ＢＦＰ）、高感度青色蛍光タンパク質（ＥＢＦＰ）および黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）、ならびに蛍光タンパク質の種バリアント、単量体バリアントならびにコドン最適化および／または増強されたバリアントを含むそれらのバリアントであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、マーカーは、酵素、例えば、ルシフェラーゼ、イー・コリ由来のｌａｃＺ遺伝子、アルカリホスファターゼ、分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）であるかまたはそれを含む。例示的な発光レポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ（ｌｕｃ）、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳ）またはそれらのバリアントを含む。

【0325】

一部の実施形態では、マーカーは、選択マーカーである。一部の実施形態では、選択マーカーは、外因性薬剤もしくは薬物に対して耐性を付与するポリペプチドであるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、選択マーカーは、抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、哺乳動物細胞に抗生物質耐性を付与する抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、ピューロマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ブラストサイジン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジェネテシン耐性遺伝子もしくはゼオシン耐性遺伝子、またはそれらの改変形態であるか、またはそれらを含む。

【0326】

一部の実施形態では、組換え核酸は、例えばサルウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来するベクター等の組換え感染性ウイルス粒子を使用して、細胞へ移入される。一部の実施形態では、組換え核酸は、組換えレンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクター、例えば、ガンマ－レトロウイルスベクターを使用してＴ細胞に移入される（例えば、Koste et al. (2014) Gene Therapy, 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25；Carlens et al. (2000) Exp. Hematol., 28(10): 1137-46；Alonso-Camino et al. (2013) Mol. Ther. Nucl. Acids., 2, e93；Park et al., Trends Biotechnol., 2011 November 29(11): 550-557を参照）。

【0327】

一部の実施形態では、ベクターは、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）である。

【0328】

一部の実施形態では、レトロウイルスベクターは、末端反復配列の配列（ＬＴＲ）、例えば、モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭＬＶ）、骨髄増殖性肉腫ウイルス（ＭＰＳＶ）、マウス胚性幹細胞ウイルス（ＭＥＳＶ）、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）、脾フォーカス形成ウイルス（ＳＦＦＶ）に由来するレトロウイルスベクターを有する。大部分のレトロウイルスベクターは、マウスレトロウイルスに由来する。一部の実施形態では、レトロウイルスは、任意の鳥類または哺乳動物細胞供給源に由来するものを含む。レトロウイルスは通常、アンホトロピックであり、それらがヒトを含む数種の宿主細胞を感染することが可能であることを意味する。一実施形態では、発現されるべき遺伝子は、レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌおよび／またはｅｎｖ配列を置き換える。多数の説明的なレトロウイルス系が記載されている（例えば、米国特許第５，２１９，７４０号；同第６，２０７，４５３号；同第５，２１９，７４０号；Miller and Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990；Miller, A.D.(1990) Human Gene Therapy 1:5-14；Scarpa et al.(1991) Virology 180:849-852；Burns et al.(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037；およびBoris-Lawrie and Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109）。

【0329】

レンチウイルス形質導入の方法は、知られている。例示的な方法は、例えば、Wang et al.(2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；Cooper et al.(2003) Blood. 101:1637-1644；Verhoeyen et al.(2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114；およびCavalieri et al. (2003) Blood. 102(2): 497-505に記載されている。

【0330】

一部の実施形態では、組換え核酸は、電気穿孔を介してＴ細胞に移入される（例えば、Chicaybam et al,(2013) PLoS ONE 8(3): e60298およびVan Tedeloo et al.(2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437を参照）。一部の実施形態では、組換え核酸は、転位を介してＴ細胞に移入される（例えば、Manuri et al.(2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437；Sharma et al.(2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74；およびHuang et al.(2009) Methods Mol Biol 506: 115-126を参照）。免疫細胞において遺伝子材料を導入および発現する他の方法として、リン酸カルシウムトランスフェクション（例えば、Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.に記載されるような）、プロトプラスト融合、カチオン性リポソーム媒介性トランスフェクション；タングステン粒子促進微粒子衝撃（Johnston, Nature, 346: 776-777(1990)）；およびリン酸ストロンチウムＤＮＡ共沈殿（Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034(1987)）が挙げられる。

【0331】

組換え産物をコードする核酸の移入のための他のアプローチおよびベクターは、例えば、国際特許出願公開ＷＯ２０１４０５５６６８号、および米国特許第７，４４６，１９０号に記載されるものである。

【0332】

一部の実施形態では、細胞、例えばＴ細胞は、増大中または後のいずれかに、例えばＴ細胞受容体（ＴＣＲ）またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）でトランスフェクトされ得る。所望の受容体の遺伝子の導入のためのこのトランスフェクションは、例えば、任意の適切なレトロウイルスベクターを用いて行われ得る。次に、遺伝子改変された細胞集団は、初期刺激（例えば、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激）から解放することができ、それに後続して、例えば、ｄｅ ｎｏｖｏ導入された受容体を介して、第２の型の刺激で刺激することができる。この第２の型の刺激は、ペプチド／ＭＨＣ分子、遺伝子導入された受容体の同族（架橋）リガンド（例えば、ＣＡＲの天然リガンド）または新たな受容体のフレームワーク内で直接結合する（例えば、受容体内の定常領域を認識することによって）任意のリガンド（例えば、抗体）の形態の抗原刺激を含み得る。例えば、Cheadle et al, "Chimeric antigen receptors for T-cell based therapy" Methods Mol Biol. 2012; 907:645-66またはBarrett et al., Chimeric Antigen Receptor Therapy for Cancer Annual Review of Medicine Vol. 65: 333-347 (2014)を参照されたい。

【0333】

一部の事例では、細胞、例えば、Ｔ細胞が活性化されることを要求しないベクターを使用することができる。一部のそのような場合では、細胞は、活性化の前に選択および／または形質導入され得る。したがって、細胞は、細胞の培養の前に、またはその後に、一部の事例では、培養と同時に、または培養の少なくとも一部中に操作され得る。

【0334】

さらなる核酸、例えば、導入用の遺伝子の中には、例えば移入された細胞の生存度および／または機能を促進することによって、療法の有効性を改善するもの；例えばインビボでの生存または局在化を評価するための細胞の選択および／または評価用の遺伝子マーカーを提供する遺伝子；例えば、Lupton S. D. et al., Mol. and Cell Biol., 11:6(1991)；およびRiddell et al., Human Gene Therapy 3:319-338(1992)によって記載されるように細胞をネガティブ選択を受けやすくさせることによって安全性を改善する遺伝子がある；同様に、ドミナントポジティブ選択可能マーカーとネガティブ選択可能マーカーとの融合に由来する二官能性選択可能融合遺伝子の使用について記載するＬｕｐｔｏｎらによるＰＣＴ／ＵＳ９１／０８４４２号およびＰＣＴ／ＵＳ９４／０５６０１号の刊行物も参照されたい。例えば、Ｒｉｄｄｅｌｌら、米国特許第６，０４０，１７７号の欄１４～１７を参照されたい。

【0335】

Ｃ．遺伝子操作のための細胞および細胞の調製
一部の実施形態では、核酸は、異種であり、即ち、例えば、操作されている細胞では通常見出されない別の生物または細胞、および／またはそのような細胞が由来されない生物から得られたもの等の細胞または細胞から得られた試料中には通常存在しない。一部の実施形態では、核酸は、天然に存在せず、例えば、多種多様な細胞型由来の各種ドメインをコードする核酸のキメラ組合せを含むものを含む、天然に存在しない核酸である。

【0336】

細胞は概して、哺乳動物細胞等の真核細胞であり、通常、ヒト細胞である。一部の実施形態では、細胞は、血液、骨髄、リンパ、またはリンパ器官に由来し、リンパ球、通常はＴ細胞および／またはＮＫ細胞を含む、自然免疫もしくは適応免疫の細胞、例えば骨髄系またはリンパ系細胞等の免疫系の細胞である。他の例示的な細胞として、人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む多分化能性および多能性幹細胞等の幹細胞が挙げられる。細胞は通常、対象から直接単離され、および／対象から単離されて凍結されたもの等の初代細胞である。一部の実施形態では、細胞は、Ｔ細胞または他の細胞型の１つまたはそれ以上のサブセット、例えば全Ｔ細胞集団、ＣＤ４^＋細胞、ＣＤ８^＋細胞、およびそれらの亜集団、例えば、機能、活性化状態、成熟度、分化能、増大、再循環、局在化、および／または持続能、抗原特異性、抗原受容体の型、特定の臓器もしくはコンパートメントにおける存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、および／または分化度によって規定されるものを含む。治療されるべき対象に関して、細胞は、同種異系および／または自家であり得る。方法の中には、市販の方法が含まれる。一部の態様では、例えば市販の技術に関して、細胞は、多能性および／または多分化能性の、例えば幹細胞、例えば人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）である。一部の実施形態では、方法は、細胞を対象から単離すること、それらを調製すること、加工処理すること、培養すること、および／または操作すること、ならびに凍結保存前もしくは後にそれらを同一対象に再度導入することを含む。

【0337】

Ｔ細胞および／またはＣＤ４^＋および／またはＣＤ８^＋Ｔ細胞のサブタイプおよび亜集団の中には、ナイーブＴ（Ｔ_Ｎ）細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔ_ＥＦＦ）、メモリーＴ細胞およびそれらのサブタイプ、例えば幹細胞メモリーＴ（Ｔ_ＳＣＭ）、セントラルメモリーＴ（Ｔ_ＣＭ）、エフェクターメモリーＴ（Ｔ_ＥＭ）、または高分化型エフェクターメモリーＴ細胞、細胞浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、未熟Ｔ細胞、成熟Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、粘膜関連インバリアントＴ（ＭＡＩＴ）細胞、天然に存在する適応制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞、ヘルパーＴ細胞、例えばＴＨ１細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ３細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２２細胞、濾胞性ヘルパーＴ細胞、アルファ／ベータＴ細胞、およびデルタ／ガンマＴ細胞が存在する。

【0338】

一部の実施形態では、細胞は、ナチュナルキラー（ＮＫ）細胞である。一部の実施形態では、細胞は、単球または顆粒細胞、例えば骨髄性細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、マスト細胞、好酸球、および／または好塩基球である。

【0339】

一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作を介して導入された１つまたはそれ以上の核酸を含み、それにより、そのような核酸の組換えまたは遺伝子操作された産物を発現する。一部の実施形態では、核酸は、異種であり、即ち、例えば、操作されている細胞では通常見出されない別の生物または細胞、および／またはそのような細胞が由来されない生物から得られたもの等の細胞または細胞から得られた試料中には通常存在しない。一部の実施形態では、核酸は、天然に存在せず、例えば、多種多様な細胞型由来の各種ドメインをコードする核酸のキメラ組合せを含むものを含む、天然に存在しない核酸である。

【0340】

一部の実施形態では、操作された細胞の調製は、１つまたはそれ以上の培養および／または調製工程を含む。ＣＡＲ等のトランスジェニック受容体をコードする核酸の導入のための細胞は、試料、例えば、生体試料、例えば、対象から得られるかまたはそれに由来する試料から単離することができる。一部の実施形態では、細胞が単離される対象は、疾患もしくは状態に罹っているもの、または細胞療法を必要とするもの、または細胞療法が投与されるであろうものである。対象は、一部の実施形態では、細胞が単離、加工処理、および／または操作される養子細胞療法等の特定の治療介入を必要とするヒトである。

【0341】

したがって、細胞は、一部の実施形態では、初代細胞、例えば初代ヒト細胞である。試料として、組織、液体、および対象から直接採取した他の試料、ならびに分離、遠心分離、遺伝子操作（例えば、ウイルスベクターを用いた形質導入）、洗浄、および／またはインキュベーション等の１つまたはそれ以上の加工処理工程から生じる試料が挙げられる。生体試料は、生物学的供給源から直接得られた試料または加工処理された試料であり得る。生体試料として、体液、例えば血液、血漿、血清、脳脊髄液、滑液、尿および汗、組織および臓器試料（それらに由来する加工処理された試料を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0342】

一部の態様では、細胞が由来するか、または単離される試料は、血液または血液由来試料であるか、あるいはアフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス産物であるか、またはそれに由来する。例示的な試料として、全血、末梢血単球（ＰＢＭＣ）、白血球、骨髄、胸腺、組織バイオプシー、腫瘍、白血病、リンパ腫、リンパ節、腸管関連リンパ系組織、粘膜関連リンパ系組織、脾臓、他のリンパ系組織、肝臓、肺、胃、腸、結腸、腎臓、膵臓、胸部、骨、前立腺、子宮頸部、精巣、卵巣、扁桃腺、もしくは他の臓器、および／またはそれらに由来する細胞が挙げられる。試料は、細胞療法、例えば養子細胞療法の状況では、自家および同種供給源由来の試料を含む。

【0343】

一部の実施形態では、細胞は、細胞株、例えばＴ細胞株に由来される。細胞は、一部の実施形態では、異種供給源から、例えば、マウス、ラット、非ヒト霊長類、およびブタから得られる。

【0344】

一部の実施形態では、細胞の単離は、１つまたはそれ以上の調製および／または非親和性ベースの細胞分離工程を含む。一部の例では、細胞は、洗浄され、遠心分離され、および／または１つまたはそれ以上の試薬の存在下でインキュベートされ、例えば、望ましくない構成成分を除去し、所望の構成成分を富化して、特定の試薬に対して感度が高い細胞を溶解または除去する。一部の例では、細胞は、１つまたはそれ以上の特性、例えば、密度、接着特性、サイズ、特定の構成成分に対する感度および／または耐性に基づいて単離される。

【0345】

一部の例では、対象の循環血液由来の細胞は、例えば、アフェレーシスまたは白血球アフェレーシスによって得られる。試料は、一部の態様では、Ｔ細胞を含むリンパ球、単球、顆粒細胞、Ｂ細胞、他の有核白血球細胞、赤血球細胞、および／または血小板を含有し、一部の態様では、赤血球細胞および血小板以外の細胞を含有する。

【0346】

一部の実施形態では、対象から収集された血液細胞は洗浄されて、例えば血漿分画を除去し、続く加工処理工程用に適切なバッファーまたは培地中に細胞を配置する。一部の実施形態では、細胞は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。一部の実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムおよび／またはマグネシウムおよび／または多くのもしくは全ての二価カチオンを欠如している。一部の態様では、洗浄工程は、製造業者の使用説明書に従って半自動「フロースルー」遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１細胞プロセッサー、Ｂａｘｔｅｒ）で遂行される。一部の態様では、洗浄工程は、製造業者の使用説明書に従ってタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって遂行される。一部の態様では、細胞は、例えばＣａ^＋＋／Ｍｇ^＋＋を含まないＰＢＳ等の洗浄後の様々な生物適合性バッファー中に再懸濁される。ある特定の実施形態では、血液細胞試料の構成成分が除去され、細胞は、培養培地中に直接的に再懸濁される。

【0347】

一部の実施形態では、方法は、赤血球細胞を溶解することと、ＰｅｒｃｏｌｌまたはＦｉｃｏｌｌ勾配による遠心分離とによる、末梢血からの白血球細胞の調製等の密度ベースの細胞分離方法を含む。

【0348】

一部の実施形態では、単離方法は、１つまたはそれ以上の特異的分子、例えば表面マーカー、例えば表面タンパク質、細胞内マーカー、もしくは核酸の細胞における発現または存在に基づく異なる細胞型の分離を含む。一部の実施形態では、そのようなマーカーに基づく分離に関する任意の公知の方法が使用され得る。一部の実施形態では、分離は、親和性または免疫親和性ベースの分離である。例えば、単離は、一部の態様では、例えばそのようなマーカーに特異的に結合する抗体または結合パートナーとのインキュベーション、続く一般的に洗浄工程および抗体または結合パートナーが結合された細胞の分離による、１つまたはそれ以上のマーカー、通常は細胞表面マーカーの細胞の発現または発現レベルに基づく細胞および細胞集団の、抗体または結合パートナーに結合されていない細胞との分離を含む。

【0349】

そのような分離工程は、試薬が結合された細胞がさらなる使用のために保持されるポジティブ選択、および／または抗体もしくは結合パートナーに結合されていない細胞が保持されるネガティブ選択に基づき得る。一部の例では、両方の分画がさらなる使用のために保持される。一部の態様では、ネガティブ選択は、分離が所望の集団以外の細胞によって発現されるマーカーに基づいて最良に行われるように、異種集団において細胞型を特異的に同定する抗体が利用可能でない場合に特に有用である。

【0350】

分離は、特定の細胞集団もしくは特定のマーカーを発現する細胞の１００％富化または除去をもたらす必要はない。例えば、特定の型の細胞、例えばマーカーを発現するものに関するもののポジティブ選択またはそれらに関する富化は、そのような細胞の数またはパーセンテージを増加することを指すが、マーカーを発現しない細胞の完全な非存在をもたらす必要はない。同様に、特定の型の細胞、例えばマーカーを発現するもののネガティブ選択、除去または欠失は、そのような細胞の数またはパーセンテージを減少することを指すが、全てのそのような細胞の完全な除去をもたらす必要はない。

【0351】

一部の例では、多重の一連の分離工程が行われ、ここで、１つの工程由来のポジティブまたはネガティブ選択された分画は、続くポジティブまたはネガティブ選択等の別の分離工程に付される。一部の例では、単一の分離工程が、例えば、細胞を、それぞれがネガティブ選択に関して標的化されるマーカーに特異的である複数の抗体または結合パートナーとともにインキュベートすることによって、多重マーカーを発現する細胞を同時に枯渇させることができる。同様に、多重細胞型は、細胞を、各種細胞型上で発現される複数の抗体または結合パートナーとともにインキュベートすることによって同時にポジティブ選択され得る。

【0352】

例えば、一部の態様では、Ｔ細胞、１つまたはそれ以上の表面マーカーにポジティブであるか、または高レベルのそれらを発現する細胞等のＴ細胞の特異的亜集団、例えば、ＣＤ２８^＋、ＣＤ６２Ｌ^＋、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ２７^＋、ＣＤ１２７^＋、ＣＤ４^＋、ＣＤ８^＋、ＣＤ４５ＲＡ^＋、および／またはＣＤ４５ＲＯ^＋Ｔ細胞は、ポジティブまたはネガティブ選択技法によって単離される。

【0353】

例えば、ＣＤ３^＋、ＣＤ２８^＋Ｔは、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８コンジュゲート磁気ビーズ（例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｘｐａｎｄｅｒ）を使用してポジティブ選択され得る。

【0354】

一部の実施形態では、単離は、ポジティブ選択による特定の細胞集団に関する富化、またはネガティブ選択による特定の細胞集団の枯渇によって行われる。一部の実施形態では、ポジティブまたはネガティブ選択は、細胞を、それぞれ、ポジティブもしくはネガティブ選択された細胞上で発現される（マーカー^＋）か、または比較的高レベルで発現される（マーカー^高）１つまたはそれ以上の表面マーカーに特異的に結合する１つまたはそれ以上の抗体または他の結合剤とともにインキュベートすることによって行われる。

【0355】

一部の実施形態では、Ｔ細胞は、非Ｔ細胞、例えばＢ細胞、単球、または他の白血球細胞上で発現されるマーカー、例えばＣＤ１４のネガティブ選択によってＰＢＭＣ試料から分離される。一部の態様では、ＣＤ４^＋またはＣＤ８^＋選択工程は、ＣＤ４^＋ヘルパーおよびＣＤ８^＋細胞傷害性Ｔ細胞を分離するのに使用される。そのようなＣＤ４^＋およびＣＤ８^＋集団は、１つまたはそれ以上のナイーブ、メモリー、および／またはエフェクターＴ細胞亜集団上で発現されるか、もしくは比較的高度に発現されるマーカーに関するポジティブまたはネガティブ選択によって、亜集団にさらに選別され得る。

【0356】

一部の実施形態では、ＣＤ８^＋細胞は、例えば各々の亜集団と関連付けられる表面抗原に基づくポジティブまたはネガティブ選択によって、ナイーブ、セントラルメモリー、エフェクターメモリー、および／またはセントラルメモリー幹細胞に関してさらに富化または枯渇される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ（Ｔ_ＣＭ）細胞に関する富化は、有効性を高めるために、例えば、投与後に長期生存、増大、および／または生着を改善するために行われ、それは、一部の態様では、そのような亜集団において特に頑強である。Terakura et al. (2012) Blood,1:72-82；Wang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701を参照されたい。一部の実施形態では、ＴＣＭが富化されたＣＤ８^＋Ｔ細胞およびＣＤ４^＋Ｔ細胞を組み合わせることで、有効性をさらに増強させる。

【0357】

ある実施形態では、メモリーＴ細胞は、ＣＤ８^＋末梢血リンパ球のＣＤ６２Ｌ^＋およびＣＤ６２^－サブセットの両方に存在する。ＰＢＭＣは、例えば抗ＣＤ８および抗ＣＤ６２Ｌ抗体を使用して、ＣＤ６２Ｌ－ＣＤ８^＋および／またはＣＤ６２Ｌ^＋ＣＤ８^＋分画に関して富化され得るか、または枯渇され得る。

【0358】

一部の実施形態では、セントラルメモリー（Ｔ_ＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＣＲ７、ＣＤ２８、ＣＤ３、および／またはＣＤ１２７のポジティブまたは高表面発現に基づき、一部の態様では、セントラルメモリー（Ｔ_ＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４５ＲＡおよび／またはグランザイムＢを発現するか、または高度に発現する細胞に関するネガティブ選択に基づく。一部の態様では、Ｔ_ＣＭ細胞に関して富化されたＣＤ８^＋集団の単離は、ＣＤ４、ＣＤ１４、ＣＤ４５ＲＡを発現する細胞の枯渇、およびＣＤ６２Ｌを発現する細胞に関するポジティブ選択または富化によって行われる。一態様では、セントラルメモリー（Ｔ_ＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４発現に基づいて選択される細胞のネガティブ分画に始まって行われ、これは、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡの発現に基づくネガティブ選択、およびＣＤ６２Ｌに基づくポジティブ選択に付される。そのような選択は、一部の態様では、同時に行われ、他の態様では、いずれかの順序で順次行われる。一部の態様では、ＣＤ４ベースの分離からのポジティブおよびネガティブ分画の両方が保持され、当該方法の続く工程、適宜続く１つまたはそれ以上のさらなるポジティブまたはネガティブ選択工程で使用されるように、ＣＤ８^＋細胞集団または亜集団を調製する際に使用される同一ＣＤ４発現ベースの選択工程が、同様にＣＤ４^＋細胞集団または亜集団を生成するのにも使用される。

【0359】

特定の例では、ＰＢＭＣの試料または他の白血球細胞試料は、ＣＤ４^＋細胞の選択に付され、そこで、ネガティブおよびポジティブ分画が保持される。次に、ネガティブ分画は、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡまたはＣＤ１９の発現に基づくネガティブ選択、およびセントラルメモリーＴ細胞の特徴的なマーカー、例えばＣＤ６２ＬまたはＣＣＲ７に基づくポジティブ選択に付され、ここで、ポジティブおよびネガティブ選択は、いずれかの順序で行われる。

【0360】

ＣＤ４^＋Ｔヘルパー細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を同定することによって、ナイーブ、セントラルメモリー、およびエフェクター細胞に分類される。ＣＤ４^＋リンパ球は、標準的な方法によって得ることができる。一部の実施形態では、ナイーブＣＤ４^＋Ｔリンパ球は、ＣＤ４５ＲＯ^－、ＣＤ４５ＲＡ^＋、ＣＤ６２Ｌ^＋、ＣＤ４^＋Ｔ細胞である。一部の実施形態では、セントラルメモリーＣＤ４^＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ^＋およびＣＤ４５ＲＯ^＋である。一部の実施形態では、エフェクターＣＤ４^＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ^－およびＣＤ４５ＲＯ^－である。

【0361】

一例では、ネガティブ選択によってＣＤ４^＋細胞を富化するために、モノクローナル抗体カクテルは通常、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ、およびＣＤ８に対する抗体を含む。一部の実施形態では、抗体または結合パートナーは、固体支持体またはマトリックス、例えば磁気ビーズまたは常磁性ビーズに結合されて、ポジティブおよび／またはネガティブ選択に関する細胞の分離を可能にする。例えば、一部の実施形態では、細胞および細胞集団は、免疫磁気（または親和性磁気）分離技法を使用して分離または単離される（Methods in Molecular Medicine, vol. 58: Metastasis Research Protocols, Vol. 2: Cell Behavior In Vitro and In vivo, p 17-25 Edited by: S. A. Brooks and U. Schumacher（著作権）Humana Press Inc.、トトワ、ニュージャージー州に概説されている）。

【0362】

一部の態様では、分離されるべき細胞の試料または組成物は、小さな磁化可能な、または磁気的応答性の材料、例えば磁気的応答性の粒子または微粒子、例えば常磁性ビーズ（例えば、ＤｙｎａｌｂｅａｄｓまたはＭＡＣＳビーズ等）とともにインキュベートされる。磁気的応答性の材料、例えば、粒子は概して、分離するのが所望の、例えばネガティブもしくはポジティブ選択するのが所望の細胞または細胞の集団上に存在する分子、例えば表面マーカーに特異的に結合する結合パートナー、例えば抗体に直接的にまたは間接的に結合される。

【0363】

一部の態様では、磁気粒子またはビーズは、特異的な結合パートナー、例えば抗体または他の結合パートナーに結合された磁気的応答性の材料を含む。磁気的分離方法で使用される周知の磁気的応答性の材料が多く存在している。適切な磁気粒子として、Ｍｏｌｄａｙの米国特許第４，４５２，７７３号、および欧州特許明細書ＥＰ４５２３４２Ｂ号に記載されているものが挙げられ、それらは、これにより参照により本明細書に組み込まれる。例えばＯｗｅｎの米国特許第４，７９５，６９８号およびＬｉｂｅｒｔｉらの米国特許第５，２００，０８４号に記載されるもの等のコロイドサイズの粒子は他の例である。

【0364】

インキュベーションは概して、磁気粒子もしくはビーズに結合されている、抗体もしくは結合パートナー、またはそのような抗体もしくは結合パートナーに特異的に結合する分子、例えば二次抗体または他の試薬が、試料内の細胞上に存在する場合に、細胞表面分子特異的に結合する条件下で行われる。

【0365】

一部の態様では、試料は、磁場に置かれ、結合された磁気的応答性の、または磁化可能な粒子を有する細胞は、磁石に結合され、非標識細胞と分離される。ポジティブ選択に関して、磁石に結合されている細胞が保持され、ネガティブ選択に関して、結合されていない細胞（非標識細胞）が保持される。一部の態様では、ポジティブおよびネガティブ選択の組合せは、同一選択工程中に実施され、ここで、ポジティブおよびネガティブ分画は、保持されて、さらに加工処理されて、さらなる分離工程に付される。

【0366】

ある特定の実施形態では、磁気的応答性の粒子は、一次抗体または他の結合パートナー、二次抗体、レクチン、酵素、またはストレプトアビジンでコーティングされる。ある特定の実施形態では、磁気粒子は、１つまたはそれ以上のマーカーに特異的な一次抗体のコーティングを介して細胞に結合される。ある特定の実施形態では、ビーズではなく細胞が、一次抗体または結合パートナーで標識され、次に、細胞型特異的な二次抗体または他の結合パートナー（例えば、ストレプトアビジン）でコーティングされた磁気粒子が付加される。ある特定の実施形態では、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気粒子は、ビオチン化された一次または二次抗体と併せて使用される。

【0367】

一部の実施形態では、磁気的応答性の粒子は、続いてインキュベートされ、培養され、および／または操作されるべき細胞に結合されたまままであり、一部の態様では、粒子は、患者への投与用の細胞に結合されまままである。一部の実施形態では、磁化可能な、または磁気的応答性粒子は、細胞から除去される。磁化可能な粒子を細胞から除去する方法は公知であり、例えば、非標識抗体、および切断可能なリンカーにコンジュケートされた磁化可能な粒子または抗体の競合の使用を含む。一部の実施形態では、磁化可能な粒子は、生分解性である。

【0368】

一部の実施形態では、親和性ベースの選択は、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ、オーバーン、カリフォルニア州）を介する。磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）システムは、磁化可能な粒子が結合された細胞の高純度選択が可能である。ある特定の実施形態では、ＭＡＣＳは、非標的および標的種が順次、外部磁場の印加後に溶出される様式で作動する。即ち、磁化された粒子に結合された細胞は、所定の位置に維持される一方で、結合されていない種は溶出される。次に、この第１の溶出工程が完了した後、磁場に捕捉され、溶出するのを妨害された種は、それらが溶出されて、回収され得るように一部の様式で遊離される。ある特定の実施形態では、非標的細胞は、標識されて、細胞の異種集団から枯渇される。

【0369】

一部の実施形態では、単離または分離は、当該方法の単離、細胞調製、分離、加工処理、インキュベーション、培養、および／または製剤化工程の１つまたはそれ以上を実行するシステム、デバイス、または装置を使用して行われる。一部の態様では、システムは、閉鎖または滅菌環境でこれらの工程それぞれを行うのに、例えば、誤差、使用者の取扱いおよび／または混入を最小限に抑えるのに使用される。一例では、システムは、国際特許出願公開番号ＷＯ２００９／０７２００３またはＵＳ２０１１０００３３８０Ａ１に記載されているシステムである。

【0370】

一部の実施形態では、システムまたは装置は、統合型もしくは自己完結型のシステムにおいて、および／または自動もしくはブログラム可能様式で、１つまたはそれ以上、例えば全ての単離、加工処理、操作、および製剤化工程を行う。一部の態様では、システムまたは装置は、システムまたは装置と通信したコンピュータおよび／またはコンピュータプログラムを含み、これにより使用者は、加工処理、単離、操作、および製剤化工程の転帰をプログラミングし、制御し、評価し、および／またはそれらの各種態様を調整することが可能になる。

【0371】

一部の実施形態では、分離および／または他の工程は、例えば閉鎖および滅菌系における臨床スケールレベルでの細胞の自動分離のためにＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して行われる。構成成分は、統合マイクロコンピューター、磁気分離ユニット、蠕動ポンプ、および各種ピンチ弁を含み得る。統合コンピュータは、一部の態様では、機器の全ての構成成分を制御し、システムが、標準化された順序において反復手順を実施するよう誘導する。磁気分離ユニットは、一部の態様では、選択カラム用の可動永続マグネットおよびホルダーを含む。蠕動ポンプは、チューブセット全体にわたって流速を制御し、ピンチ弁とともに、システムから流れるバッファーの制御された流れおよび細胞の断続的な懸濁を保証する。

【0372】

ＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムは、一部の態様では、滅菌性の非発熱性溶液中に供給される抗体とカップリングされた磁化可能な粒子を使用する。一部の実施形態では、磁気粒子による細胞の標識後に、細胞は洗浄されて、過剰な粒子を除去する。次に、細胞調製バッグは、チューブセットに接続され、それは続いて、バッファーを含有するバッグおよび細胞収集バッグに接続される。チューブセットは、プレカラムおよび分離カラムを含むアセンブル済みの滅菌チューブからなり、単回の使用のみ用である。分離プログラムの開始後に、システムは自動で細胞試料を分離カラム上に適用する。標識された細胞は、カラム内に保持される一方で、非標識細胞は、一連の洗浄工程によって除去される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、非標識であり、カラム中に保持されない。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、標識されており、カラム中に保持される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、磁場の除去後にカラムから溶出され、細胞収集バッグ内に収集される。

【0373】

ある特定の実施形態では、分離および／または他の工程は、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して行われる。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムは、一部の態様では、遠心分離による細胞の自動洗浄および分画を可能にする細胞加工処理ユニティが装備されている。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムはまた、供給源細胞産物の巨視的な層を識別することによって最適な細胞分画エンドポイントを決定する内蔵カメラおよび画像認識ソフトウェアを含み得る。例えば、末梢血は、赤血球、白血球細胞および血漿層に自動的に分離される。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムはまた、例えば細胞分化および増大、抗原負荷、および長期細胞培養等の細胞培養プロトコールを遂行する統合細胞培養チャンバーを含み得る。入力ポートは、培地の滅菌除去および補充を可能にすることができ、細胞は、統合顕微鏡を使用してモニタリングすることができる。例えば、Klebanoff et al. (2012) J Immunother. 35(9): 651-660、Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82、およびWang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701を参照されたい。

【0374】

一部の実施形態では、本明細書に記載されている細胞集団は、フローサイトメトリーを介して収集および富化（または枯渇）され、そこで、多重細胞表面マーカーに関して染色された細胞が流動ストリームで運搬される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている細胞集団は、分取スケール（ＦＡＣＳ）選別を介して収集および富化（または枯渇）される。ある特定の実施形態では、本明細書中記載される細胞集団は、ＦＡＣＳベースの検出システムと組み合わせて微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップを用いて収集および富化（または枯渇）される（例えば、ＷＯ２０１０／０３３１４０号、Cho et al. (2010) Lab Chip 10, 1567-1573；およびGodin et al. (2008) J Biophoton. 1(5):355-376を参照）。両方の場合で、細胞は、多重マーカーで標識することができ、高純度での明確に定められたＴ細胞サブセットの単離を可能にする。

【0375】

一部の実施形態では、抗体または結合パートナーは、ポジティブおよび／またはネガティブ選択に関して分離を促進するために、１つまたはそれ以上の検出可能なマーカーで標識される。例えば、分離は、蛍光標識された抗体への結合に基づき得る。一部の例では、１つまたはそれ以上の細胞表面マーカーに特異的な抗体または他の結合パートナーの結合に基づく細胞の分離は、例えば、フローサイトメトリー検出システムと組み合わせて、例えば、分取スケール（ＦＡＣＳ）および／または微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップを含む蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって流動ストリーム中で運搬される。そのような方法は、同時に多重マーカーに基づくポジティブおよびネガティブ選択を可能にする。

【0376】

一部の実施形態では、調製方法は、単離、インキュベーション、および／または操作前または後のいずれかに、細胞を凍結すること、例えば凍結保存することに関する工程を含む。一部の実施形態では、凍結、続く解凍工程は、細胞集団における顆粒細胞、およびある程度は単球を除去する。一部の実施形態では、細胞は、例えば、血漿および血小板を除去するための洗浄工程後に、凍結溶液中に懸濁される。様々な公知の凍結溶液およびパラメーターのいずれかは、一部の態様では使用され得る。一例は、２０％ＤＭＳＯおよび８％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含有するＰＢＳ、または他の適切な細胞凍結培地を伴う。次に、これは培地で１：１に希釈され、その結果、ＤＭＳＯおよびＨＳＡの最終濃度は、それぞれ１０％および４％である。次に、細胞は一般的に、１分当たり１℃の速度で－８０℃に凍結され、液体窒素保管タンクの気相中に保管される。

【0377】

一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作の前に、もしくは遺伝子操作と関連してインキュベートされ、および／または培養される。インキュベーション工程は、培養、栽培、刺激、活性化、および／または伝播を含み得る。インキュベーションおよび／または操作は、ユニット、チャンバー、ウェル、カラム、管、チューブセット、バルブ、バイアル、培養皿、バッグ、または細胞を培養もしくは栽培するための他の容器等の培養容器中で行われ得る。一部の実施形態では、組成物または細胞は、刺激条件または刺激剤の存在下でインキュベートされる。そのような条件は、集団において細胞の増殖、増大、活性化、および／または生存を誘導するように、抗原曝露を模倣するように、および／または遺伝子操作のために、例えば組換え抗原受容体の導入のために細胞をプライミングするように設計されたものを含む。

【0378】

条件は、特定の培地、温度、酸素含有量、二酸化炭素含有量、時間、薬剤、例えば栄養分、アミノ酸、抗生物質、イオン、および／または刺激因子、例えばサイトカイン、ケモカイン、抗原、結合パートナー、融合タンパク質、組換え可溶性受容体、および細胞を活性化するよう設計された任意の他の薬剤の１つまたはそれ以上を含み得る。

【0379】

一部の実施形態では、刺激条件または薬剤は、ＴＣＲ複合体の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化または刺激することができる１つまたはそれ以上の薬剤、例えば、リガンドを含む。一部の態様では、薬剤は、Ｔ細胞においてＴＣＲ／ＣＤ３細胞内シグナル伝達カスケードを作動させるか、またはそれを開始させる。そのような薬剤は、抗体、例えばＴＣＲに特異的なもの、例えば抗ＣＤ３を含み得る。一部の実施形態では、刺激条件は、共刺激受容体を刺激することが可能な１つまたはそれ以上の薬剤、例えばリガンド、例えば抗ＣＤ２８を含む。一部の実施形態では、そのような薬剤および／またはリガンドは、ビーズ等の固体支持体、および／または１つまたはそれ以上のサイトカインに結合されてもよい。適宜、増大方法は、抗ＣＤ３および／または抗ＣＤ２８抗体を培養培地に添加する（例えば、少なくとも約０．５ｎｇ／ｍｌの濃度で）工程をさらに含み得る。一部の実施形態では、刺激剤として、ＩＬ－２、ＩＬ－１５および／またはＩＬ－７が挙げられる。一部の態様では、ＩＬ－２濃度は、少なくとも約１０ユニット／ｍＬである。

【0380】

一部の態様では、インキュベーションは、Ｒｉｄｄｅｌｌらの米国特許第６，０４０，１７７号、Klebanoff et al. (2012) J Immunother. 35(9): 651-660、Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82、および／またはWang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701に記載されるもの等の技法に従って行われる。

【0381】

一部の実施形態では、Ｔ細胞は、培養開始組成物にフィーダー細胞、例えば非分裂性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を添加すること（例えば、得られた細胞集団が、増大されるべき初期集団における各Ｔリンパ球に関して少なくとも約５、１０、２０、もしくは４０個以上のＰＢＭＣフィーダー細胞を含有するように）と；培養物をインキュベートすること（例えば、Ｔ細胞の数を増大するのに十分な時間）とによって増大される。一部の態様では、非分裂性フィーダー細胞は、ガンマ線を照射したＰＢＭＣフィーダー細胞を含み得る。一部の実施形態では、ＰＢＭＣは、細胞分裂を予防するように約３０００～３６００ｒａｄの範囲のガンマ線で照射される。一部の態様では、フィーダー細胞は、Ｔ細胞の集団の添加の前に培養培地に添加される。

【0382】

一部の実施形態では、刺激条件は、ヒトＴリンパ球の成長に適した温度、例えば少なくともセ氏約２５度、一般的には少なくともセ氏約３０度、および一般的にはセ氏３７度またはセ氏約３７度を含む。適宜、インキュベーションは、フィーダー細胞として非分裂性ＥＢＶで形質転換したリンパ芽球様細胞（ＬＣＬ）を添加することをさらに含み得る。ＬＣＬは、約６０００～１０，０００ｒａｄの範囲のガンマ線で照射され得る。ＬＣＬフィーダー細胞は、一部の態様では、任意の適切な量で、例えば、ＬＣＬフィーダー細胞対初期Ｔリンパ球の比が少なくとも約１０：１で提供される。

【0383】

ある実施形態では、抗原特異的なＴ細胞、例えば抗原特異的なＣＤ４^＋および／またはＣＤ８^＋Ｔ細胞は、ナイーブまたは抗原特異的なＴリンパ球を抗原で刺激することによって得られる。例えば、抗原特異的なＴ細胞株またはクローンは、Ｔ細胞を感染対象から単離することと、細胞をインビトロで同一抗原で刺激することとによってサイトメガロウイルス抗原に対して生成され得る。

【0384】

ＩＩＩ．例示的な治療の転帰およびそれらを評価する方法
本明細書に提供される方法、組成物、組合せ、使用、キットおよび製造品の一部の実施形態では、提供される併用療法は、１つまたはそれ以上の治療の転帰、例えば、以下で記載するような、療法または治療と関連付けられるパラメーターのいずれか１つまたはそれ以上と関連付けられる特徴をもたらす。一部の実施形態では、当該方法は、セクションＩに記載されるようないずれかである。一部の実施形態では、当該方法は、Ｔ細胞、例えばＴ細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の曝露、持続および増殖の評価をさらに含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法における細胞、例えば免疫療法、例えばＴ細胞療法のために投与される細胞の、細胞の曝露、もしくは長期の増大および／または持続、および／または細胞表現型の変化もしくは細胞の機能的活性は、インビボまたはエクスビボでＴ細胞の特性を評価することによって測定することができる。一部の実施形態では、そのようなアッセイを使用して、本明細書に提供される併用療法を投与する前、投与している間、または投与した後にＴ細胞、例えばＴ細胞療法の機能を決定または確認することができる。

【0385】

一部の実施形態では、併用療法は、併用療法を用いた治療に関して対象を同定するための、および／または併用療法を継続する１つまたはそれ以上のスクリーニング工程、および／または治療の転帰の評価のための、および／または治療の転帰をモニタリングする工程をさらに含み得る。一部の実施形態では、治療の評価のための工程は、治療を評価するための、および／またはモニタリングするための、および／または療法のさらなるもしくは残りの工程の投与に関しておよび／または反復療法に関して対象を同定するための工程を含み得る。一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価を使用して、本明細書に提供される併用療法の用量、頻度、持続時間、タイミングおよび／または順序を決定することができる。

【0386】

一部の実施形態では、本明細書に記載されている治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価のいずれかは、提供される併用療法の１つまたはそれ以上の工程の投与、例えば、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）の投与、および／または化合物Ｃの前に、その間に、その過程中に、またはその後に使用することができる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法のいずれかの実施の前に、その間に、その過程中に、またはその後に行われる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法の実施の前に行われる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法の１つまたはそれ以上の工程の実施後に行われる。一部の実施形態では、評価は、例えば併用療法を受けるのに適しており、および／または併用療法を受けやすい患者をスクリーニングおよび同定するために、提供される併用療法の１つまたはそれ以上の工程の投与の前に実施される。一部の実施形態では、評価は、例えば、中間のもしくは最終的な治療の転帰を評価するため、例えば治療の有効性を決定するために、および／または治療を継続もしくは反復するかどうかを決定するため、および／または併用療法の残りの工程を投与するかどうかを決定するために、提供される併用療法の１つまたはそれ以上の工程の投与の間に、その過程中に、またはその後に実施される。

【0387】

一部の実施形態では、治療の転帰は、免疫機能、例えば細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の、および／または身体における内因性Ｔ細胞の免疫機能の改善を含む。一部の実施形態では、例示的な治療の転帰として、Ｔ細胞増殖の増強、Ｔ細胞機能的活性の増強、免疫細胞表現型マーカー発現の変化が挙げられるが、これらに限定されず、例えば、そのような特徴は、対象に投与された操作されたＴ細胞、例えばＣＡＲ－Ｔ細胞と関連付けられる。一部の実施形態では、例示的な治療の転帰として、疾患負荷、例えば腫瘍負荷の減少、臨床転帰の改善および／または療法の有効性の増強が挙げられる。

【0388】

一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価は、細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の生存および／または機能を評価することを含む。一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価は、サイトカインまたは増殖因子のレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価は、疾患負荷および／または改善を評価すること、例えば腫瘍負荷および／または臨床転帰を評価することを含む。一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価のいずれかは、本明細書に記載され、および／または公知の評価方法および／またはアッセイのいずれかを含んでもよく、１回またはそれ以上、例えば、併用療法の１つまたはそれ以上の工程の投与の前に、その間に、その過程中に、またはその後に続いて実施され得る。本明細書に提供される方法の一部の実施形態で評価することができる治療の転帰と関連付けられる例示的なパラメーターセットとして、末梢血免疫細胞集団プロファイルおよび／または腫瘍負荷が挙げられる。

【0389】

一部の実施形態では、当該方法は、対象における細胞療法の有効性に影響を及ぼす。一部の実施形態では、化合物Ｃを用いた当該方法における細胞の用量の投与後の対象における組換え受容体発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞の持続、増大、および／または存在は、化合物Ｃの投与を用いない方法を介して達成されるものと比較した場合により大きい。一部の実施形態では、投与されたＴ細胞療法、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の対象における増大および／または持続は、Ｔ細胞療法が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較した場合に評価される。一部の実施形態では、当該方法は、Ｔ細胞療法が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較した場合に、対象において増大および／または持続の増加あるいは延長を示す、投与されたＴ細胞をもたらす。

【0390】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、組換え受容体を発現する細胞の用量が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較した場合に、対象において疾患負荷、例えば腫瘍負荷を減少する。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、組換え受容体を発現する細胞の用量が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較した場合に、対象において骨髄芽球を減少する。一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、組換え受容体を発現する細胞の用量が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較して、臨床転帰、例えば客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）の改善をもたらす。

【0391】

一部の実施形態では、対象は、併用療法の１つまたはそれ以上の工程の投与の前にスクリーニングされ得る。例えば、対象は、併用療法の投与に対する適合性、応答性および／または感受性を決定するために、併用療法の投与の前に、疾患および／または疾患負荷、例えば腫瘍負荷の特性に関してスクリーニングすることができる。一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価を使用して、本明細書に提供される併用療法の用量、頻度、持続時間、タイミングおよび／または順序を決定することができる。

【0392】

一部の実施形態では、対象は、併用療法の残りの工程を受けるために対象を決定および同定するため、および／または療法の有効性をモニタリングするために、併用療法の工程の１つの投与後にスクリーニングすることができる。一部の実施形態では、投与されたＴ細胞の数、レベルもしくは量および／または投与されたＴ細胞の増殖および／または活性は、化合物Ｃの投与の前、および／または投与後に評価される。

【0393】

一部の実施形態では、評価の異なる時点、異なる条件、参照時点および／または異なる対象における同一パラメーターもしくは転帰のレベル、値または測定値と比較した、パラメーターもしくは転帰のレベル、値または測定値における変化および／または変更、例えば増加、上昇、減少または低減が、決定または評価される。例えば、一部の実施形態では、例えば化合物Ｃの投与前の、異なる条件における同一パラメーターと比較して、特定のパラメーター、例えば試料中の操作されたＴ細胞の数における倍の変化、例えば増加または減少が決定され得る。一部の実施形態では、２つ以上のパラメーターのレベル、値または測定値が決定され、相対レベルが比較される。一部の実施形態では、パラメーターの決定されたレベル、値または測定値は、対照試料または未治療の試料由来のレベル、値または測定値と比較される。一部の実施形態では、パラメーターの決定されたレベル、値または測定値は、同一対象由来であるが、異なる時点の試料のレベルと比較される。個々のパラメーターの定量化で得られた値は、例えばマルチパラメトリック解析を使用することによってパラメーターのレベル、値または測定値に関して算術または論理演算を成すことによって、疾患評価の目的で組み合わせることができる。一部の実施形態では、２つ以上の特定パラメーターの比が算出され得る。

【0394】

Ａ．細胞曝露、持続および増殖
一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価および／または治療の転帰をモニタリングすることに関して評価され得るパラメーターを含む、療法または治療の転帰と関連付けられるパラメーターは、Ｔ細胞、例えばＴ細胞に基づく療法に関して投与されたＴ細胞の曝露、持続および増殖の評価であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法における、細胞の曝露の増加、増大および／または持続の延長、および／または細胞、例えば、免疫療法、例えばＴ細胞療法のために投与された細胞の細胞表現型もしくは機能的活性の変化は、インビボまたはエクスビボでＴ細胞の特性を評価することによって測定され得る。一部の実施形態では、そのようなアッセイを使用して、本明細書に提供される併用療法の１つまたはそれ以上の工程を投与する前に、または投与した後に、免疫療法、例えばＴ細胞療法に使用されるＴ細胞の機能を決定または確認することができる。

【0395】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、例えば経時的に細胞の増大および／または持続を促進することによって、細胞、例えばＴ細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞への、対象の曝露を促進するよう設計されている。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、Ｔ細胞療法が化合物Ｃの非存在下で対象に投与される方法と比較した場合に、対象において増大および／または持続の増加あるいは延長を示す。

【0396】

一部の実施形態では、提供される方法は、投与された細胞への、対象の曝露を増加し（例えば、経時的な細胞数または持続時間の増加）、および／または免疫療法、例えばＴ細胞療法の有効性および／または治療転帰を改善する。一部の態様では、当該方法は、組換え受容体を発現する細胞、例えばＣＡＲ発現細胞へのより高い、および／またはより長い程度の曝露が、他の方法と比較した場合に治療の転帰を改善するという点で好適である。そのような転帰は、重篤な腫瘍負荷を伴う個体でさえも、患者の生存および寛解を含み得る。

【0397】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、化合物Ｃの非存在下でＴ細胞単独の投与と比較した場合に、対象における細胞、例えばＴ細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞への、曝露の最大値、総計および／または持続時間を増加し得る。一部の態様では、化合物Ｃの投与は、高い疾患負荷（よって、より多い量の抗原）および／またはより侵襲性もしくは耐性のＢ細胞悪性病変の状況において、細胞の増大化および／または持続性を予防し得る、免疫抑制、アネルギーおよび／または疲弊をもたらし得る、同一の文脈における化合物Ｃの非存在下でのＴ細胞単独の投与と比較して、有効性を増強する。

【0398】

一部の実施形態では、Ｔ細胞の投与に続く、および化合物Ｃの投与前、投与中および／または投与後の対象における組換え受容体を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞に基づく療法のために投与されたＣＡＲ発現細胞）の存在および／または量が検出される。一部の態様では、定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）を使用して、対象の血液または血清または臓器または組織試料（例えば、疾患部位、例えば腫瘍試料）中の組換え受容体を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞に基づく療法のために投与されたＣＡＲ発現細胞）の量を評価する。一部の態様では、持続は、ＤＮＡ１マイクログラム当たりの受容体、例えばＣＡＲをコードするＤＮＡまたはプラスミドのコピー、例えば試料から得られた総ＤＮＡとして、あるいは試料、例えば血液もしくは血清１マイクロリットル当たりの、または試料１マイクロリットルについての末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）もしくは白血球細胞もしくはＴ細胞の総数当たりの、受容体発現、例えばＣＡＲ発現細胞の数として定量化される。

【0399】

一部の実施形態では、細胞は、対象において、Ｔ細胞、例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与後の４、７、１０、１４、１８、２１、２４、２７、もしくは２８日目に、または少なくとも４、７、１０、１４、１８、２１、２４、２７、もしくは２８日目に検出される。一部の態様では、細胞は、Ｔ細胞の投与後の２、４、もしくは６週目に、またはその後の３、６、もしくは１２、１８、もしくは２４、もしくは３０もしくは３６ヶ月、または１、２、３、４、５以上の年数で、あるいはその概数で検出される。

【0400】

一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えば、ＣＡＲ発現細胞および／または化合物Ｃの投与後に、当該方法による対象における受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現細胞）の持続は、免疫療法単独の投与、例えば化合物Ｃの非存在下でのＴ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与を伴う方法等の代替的方法によって達成されるであろう持続と比較した場合より長い。

【0401】

増大および／または持続を示す細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞の曝露、例えば数は、対象が曝露される細胞の最大数、検出可能な細胞またはある特定数もしくはパーセンテージを超える細胞の持続時間、経時的な細胞数に関する曲線下面積、および／またはそれらの組合せおよびそれらの指標に関して提示され得る。そのような転帰は、特定の試料、例えば血液、血清、血漿または組織、例えば腫瘍試料中の核酸またはＤＮＡの総量と比較して、組換え受容体をコードする核酸のコピー数を検出するためのｑＰＣＲ、および／または一般的に受容体に特異的な抗体を使用して受容体を発現する細胞を検出するフローサイトメトリーアッセイ等の公知の方法を使用して評価され得る。細胞に基づくアッセイもまた、疾患もしくは状態の細胞または受容体によって認識される抗原を発現する細胞に結合すること、および／またはそれらの細胞に対する応答、例えば細胞傷害性応答を中和することおよび／または誘導することが可能な細胞等の機能性細胞の数あるいはパーセンテージを検出するのに使用され得る。

【0402】

一部の実施形態では、対象の、細胞への曝露の増加は、細胞の増大の増加を含む。一部の実施形態では、受容体発現細胞、例えばＣＡＲ発現細胞は、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与後に、および／または化合物Ｃの投与後に対象において増大する。一部の実施形態では、当該方法は、化合物Ｃの投与の非存在下で、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与を伴う方法等の他の方法と比較して、細胞のより高い増大をもたらす。

【0403】

一部の態様では、当該方法は、例えば、フローサイトメトリーによって測定される場合に、投与された細胞の高いインビボ増殖をもたらす。一部の態様では、高いピーク比率の細胞が検出される。例えば、一部の実施形態では、対象の血液もしくは疾患部位またはその白血液細胞分画、例えばＰＢＭＣ分画またはＴ細胞分画におけるＴ細胞、例えばＣＡＲ発現細胞および／または化合物Ｃの投与後にピークまたは最大レベルで、細胞の少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、組換え受容体、例えばＣＡＲを発現する。

【0404】

一部の実施形態では、当該方法は、対象の血液または血清または他の体液または臓器または組織において、ＤＮＡ１マイクログラム当たり、受容体、例えばＣＡＲをコードする核酸の少なくとも１００、５００、１０００、１５００、２０００、５０００、１０，０００または１５，０００個のコピー、あるいは末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の総数、単核細胞の総数、Ｔ細胞の総数、またはマイクロリットルの総数当たり少なくとも０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、または０．９個の受容体発現、例えばＣＡＲ発現細胞の最大濃度をもたらす。一部の実施形態では、受容体を発現する細胞は、対象の血液中で総ＰＢＭＣの少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、または６０％として、および／またはＴ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞および／または化合物Ｃに続いて少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、２４、３６、４８、または５２週間にわたり、あるいはそのような投与に続いて１、２、３、４、もしくは５年以上の年数にわたりそのようなレベルで検出される。

【0405】

一部の態様では、当該方法は、例えば対象の血清、血漿、血液または組織、例えば腫瘍試料において、ＤＮＡ１マイクログラム当たりの組換え受容体、例えばＣＡＲをコードする核酸のコピーの少なくとも４倍、少なくとも１０倍、または少なくとも２０倍の増加をもたらす。

【0406】

一部の実施形態では、受容体を発現する細胞は、指定した方法、例えばｑＰＣＲまたはフローサイトメトリーベースの検出方法によって、対象の血清、血漿、血液または組織、例えば腫瘍試料において、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与後に、または化合物Ｃの投与後に少なくとも２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、もしくは６０日以上の日数にわたり、Ｔ細胞、例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞、および／または化合物Ｃの投与後に少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、もしくは２４週以上の週数にわたり、あるいは少なくともその概数にわたり検出可能である。

【0407】

一部の態様では、１マイクロリットル当たり少なくとも約１×１０^２、少なくとも約１×１０^３、少なくとも約１×１０^４、少なくとも約１×１０^５、または少なくとも約１×１０^６もしくは少なくとも約５×１０^６または少なくとも約１×１０^７もしくは少なくとも約５×１０^７または少なくとも約１×１０^８個の組換え受容体発現、例えばＣＡＲ発現細胞、および／または少なくとも１０、２５、５０、１００、２００、３００、４００、または５００個、または１０００個の受容体発現細胞、例えば１マイクロリットル当たり少なくとも１０個が、対象または体液、血漿、血清、組織、もしくはそれらのコンパートメントにおいて、例えば、対象の血液、例えば末梢血、または疾患部位、例えば腫瘍において、検出可能であるか、または存在する。一部の実施形態では、そのような細胞数または濃度は、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞の投与後に、および／または化合物Ｃの投与後に、少なくとも約２０日、少なくとも約４０日、もしくは少なくとも約６０日、または少なくとも約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２ヶ月、または少なくとも２年もしくは３年間、対象において検出可能である。そのような細胞数は、フローサイトメトリーベースのまたは定量的ＰＣＲベースの方法および公知の方法を使用した総細胞数の外挿によって検出され得る。例えば、Brentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177)、Park et al, Molecular Therapy 15(4):825-833(2007)、Savoldo et al., JCI 121(5):1822-1826(2011)、Davila et al.,(2013) PLoS ONE 8(4):e61338、Davila et al., Oncoimmunology 1(9):1577-1583(2012)、Lamers, Blood 2011 117:72-82、Jensen et al., Biol Blood Marrow Transplant 2010 September; 16(9): 1245-1256、Brentjens et al., Blood 2011 118(18):4817-4828を参照されたい。

【0408】

一部の態様では、例えば、末梢血または骨髄または他のコンパートメントにおける細胞１００個当たりの組換え受容体をコードする核酸のコピー数、例えばベクターコピー数は、免疫組織化学、ＰＣＲ、および／またはフローサイトメトリーによって測定される場合、細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞、および／または化合物Ｃの投与後約１週、約２週、約３週、約４週、約５週、もしくは約６週、または少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２ヶ月または少なくとも２もしくは３年で、少なくとも０．０１、少なくとも０．１、少なくとも１、もしくは少なくとも１０個である。一部の実施形態では、ゲノムＤＮＡ１マイクログラム当たりの受容体、例えばＣＡＲを発現するベクターのコピー数は、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞、または化合物Ｃの投与に続いて約１週、約２週、約３週、もしくは約４週、またはそのような投与後少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２ヶ月、または少なくとも２もしくは３年の時点で、少なくとも１００、少なくとも１０００、少なくとも５０００、または少なくとも１０，０００、または少なくとも１５，０００または少なくとも２０，０００個である。

【0409】

一部の態様では、細胞によって発現される受容体、ＣＡＲは、定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）によって、またはフローサイトメトリーによって、対象、血漿、血清、血液、組織および／または対象の疾患部位、例えば腫瘍部位において、細胞の投与後に、例えばＴ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞、および化合物Ｃの投与の開始後に、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１年、少なくとも約２年、少なくとも約３年、または３年より長い時点で検出可能である。

【0410】

一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴＣＲまたはＣＡＲ発現Ｔ細胞および／または化合物Ｃの投与後に経時的な対象の体液、血漿、血清、血液、組織、臓器および／または疾患部位、例えば腫瘍部位における受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞の濃度に関する曲線下面積（ＡＵＣ）は、化合物Ｃの投与の非存在下で対象にＴ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞が投与される場合の代替投薬レジメンを介して達成されるものと比較した場合により大きい。

【0411】

一部の態様では、当該方法は、例えばフローサイトメトリーによって測定される場合に、投与された細胞の高いインビボ増殖をもたらす。一部の態様では、高いピーク比率の細胞が検出される。例えば、一部の実施形態では、対象の血液、血漿、血清、組織もしくは疾患部位または対象の白血球細胞分画、例えばＰＢＭＣ分画またはＴ細胞分画において、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞および／または化合物Ｃに続くピークあるいは最大レベルで、細胞の少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％が、組換え受容体、例えばＣＡＲを発現する。

【0412】

一部の態様では、化合物Ｃが投与された対象における細胞の投薬の増大および／または持続の増加あるいは延長は、対象における腫瘍関連の転帰における有益性と関連付けられる。一部の実施形態では、腫瘍関連の転帰として、対象における腫瘍負荷の減少または骨髄芽球の減少が挙げられる。一部の実施形態では、腫瘍負荷は、当該方法の投与後に、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、またはその概数分、あるいは少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、またはその概数分減少する。一部の実施形態では、疾患負荷、腫瘍サイズ、腫瘍体積、腫瘍質量、および／または腫瘍量またはバルクは、化合物Ｃの投与を伴わない方法で治療した対象と比較して、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％分以上、または少なくともその概数分、細胞の投薬後に低減する。

【0413】

Ｂ．Ｔ細胞機能的活性
一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価および／または治療の転帰のモニタリングに関して評価され得るパラメーターを含む、療法または治療の転帰と関連付けられるパラメーターは、Ｔ細胞の活性、表現型、増殖または機能の１つまたはそれ以上を含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞の活性、表現型、増殖および／または機能を評価するための当技術分野における公知のアッセイのいずれかを使用することができる。細胞および／または化合物Ｃの投与の前に、および／またはその後に、操作された細胞集団の生物活性は、一部の実施形態では、例えば多数の公知の方法のいずれかによって測定される。評価するためのパラメーターとして、インビボで、例えばイメージングによる、またはエクスビボで、例えばＥＬＩＳＡもしくはフローサイトメトリーによる、操作されたか、もしくは天然のＴ細胞または他の免疫細胞の、抗原への特異的結合が挙げられる。ある特定の実施形態では、操作された細胞の、標的細胞を破壊する能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702(2009)、およびHerman et al., J. Immunological Methods, 285(1): 25-40(2004)に記載される細胞傷害性アッセイ等の任意の適切な方法を使用して測定することができる。

【0414】

一部の実施形態では、組換え発現（例えば、ＣＡＲ）Ｔ細胞等のＴ細胞は、Ｔ細胞が疲弊の特徴を示すかどうかを評価または決定するために、細胞および／または化合物Ｃの投与の前に、および／またはその後に評価され得る。一部の事例では、疲弊は、Ｔ細胞機能の損失、例えば、抗原特異的もしくは抗原受容体駆動活性の低減または減少、例えば標的抗原に対してサイトカインを産生するか、もしくは細胞溶解性活性を駆動する能力の低減または減少をモニタリングすることによって評価され得る。一部の事例では、疲弊はまた、疲弊の表現型と関連付けられるＴ細胞（例えば、ＣＤ４細胞および／またはＣＤ４ Ｔ細胞）上の表面マーカーの発現をモニタリングすることによって評価され得る。疲弊マーカーの中には、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３およびＴＩＭ－３等の阻害性受容体が存在する。

【0415】

一部の実施形態では、活性のそのような低減または減少は、対象への投与後に、および／または抗原への長期曝露後に経時的に観察される。

【0416】

特定の実施形態では、（ｉ）抗原特異的または抗原受容体駆動活性の前記増加を達成するため、および（ｉｉ）疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、または遅延させるため、および／または前記疲弊表現型を反転するための提供される方法である。一部の実施形態では、量、持続時間および／または頻度は、（ｉ）抗原特異的または抗原受容体駆動活性の前記増加を達成し、（ｉｉ）疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、または遅延させるのに有効である。他の実施形態では、量、持続時間および／または頻度は、（ｉ）抗原特異的または抗原受容体駆動活性の前記増加を達成し、（ｉｉ）疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、または遅延させ、前記疲弊表現型を反転するのに有効である。

【0417】

一部の実施形態では、疲弊表現型は、Ｔ細胞またはＴ細胞の集団に関連して、同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、１つまたはそれ以上の疲弊マーカー、適宜、２、３、４、５または６つの疲弊マーカーの、Ｔ細胞における表面発現のレベルもしくは程度の増加または表面発現を示す前記Ｔ細胞の集団のパーセンテージの増加；または同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露後の、前記Ｔ細胞もしくはＴ細胞の集団によって示される活性のレベルもしくは程度の減少、同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、１つまたはそれ以上の疲弊マーカー、適宜、２、３、４、５または６つの疲弊マーカーの、Ｔ細胞における表面発現のレベルもしくは程度の増加または表面発現を示す前記Ｔ細胞の集団のパーセンテージの増加；または同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露後の、前記Ｔ細胞もしくはＴ細胞の集団によって示される活性のレベルもしくは程度の減少を含む。

【0418】

ある特定の実施形態では、細胞の生物活性は、ＣＤ１０７ａ、ＩＦＮγ、ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦおよびＴＮＦα等の１つまたはそれ以上のサイトカインの発現および／または分泌をアッセイすることによって、および／または細胞溶解性活性を評価することによって測定される。

【0419】

一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞の活性、表現型、増殖および／または機能に関するアッセイとして、ＥＬＩＳＰＯＴ、ＥＬＩＳＡ、細胞増殖、細胞傷害性リンパ球（ＣＴＬ）アッセイ、Ｔ細胞エピトープ、抗原もしくはリガンドへの結合、または細胞内サイトカイン染色、増殖アッセイ、リンホカイン分泌アッセイ、直接的な細胞傷害性アッセイ、および限界希釈アッセイが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、Ｔ細胞の増殖性応答は、例えば、^３Ｈ－チミジン、ＢｒｄＵ（５－ブロモ－２’－デオキシウリジン）もしくは２’－デオキシ－５－エチニルウリジン（ＥｄＵ）の、それらのＤＮＡへの取込み、またはカルボキシフルオレセイン二酢酸スクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ、もしくは膜色素ＰＫＨ２６等の色素を使用した色素希釈アッセイによって測定することができる。

【0420】

一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞の活性、表現型、増殖および／または機能を評価することは、Ｔ細胞からのサイトカイン産生を測定すること、および／または対象由来の生体試料、例えば血漿、血清、血液、および／または組織試料、例えば腫瘍試料におけるサイトカイン産生を測定することを含む。一部の事例では、そのような測定されるサイトカインとして、限定されないが、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インターフェロン－ガンマ（ＩＦＮγ）、インターロイキン－４（ＩＬ－４）、ＴＮＦ－アルファ（ＴＮＦα）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、インターロイキン－１０（ＩＬ－１０）、インターロイキン－１２（ＩＬ－１２）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、ＣＤ１０７ａ、および／またはＴＧＦ－ベータ（ＴＧＦβ）が挙げられ得る。サイトカインを測定するためのアッセイは周知されており、ＥＬＩＳＡ、細胞内サイトカイン染色、サイトメトリービーズアレイ、ＲＴ－ＰＣＲ、ＥＬＩＳＰＯＴ、フローサイトメトリーおよび関連するサイトカインに応答性の細胞が試験試料の存在下で応答性（例えば、増殖）に関して試験されるバイオアッセイが挙げられるが、これらに限定されない。

【0421】

一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞の活性、表現型、増殖および／または機能を評価することは、細胞表現型、特定の細胞表面マーカーの発現を評価することを含む。一部の実施形態では、Ｔ細胞、例えばＴ細胞療法のために投与されたＴ細胞は、Ｔ細胞活性化マーカー、Ｔ細胞疲弊マーカー、および／またはＴ細胞分化マーカーの発現に関して評価される。一部の実施形態では、細胞表現型は、投与前に評価される。一部の実施形態では、細胞表現型は、細胞療法および／または化合物Ｃの投与中、または投与後に評価される。評価のためのＴ細胞活性化マーカー、Ｔ細胞疲弊マーカー、および／またはＴ細胞分化マーカーとして、Ｔ細胞の特定のサブセットに関して公知の任意のマーカー、例えば、ＣＤ２５、ＣＤ３８、ヒト白血球抗原－ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）、ＣＤ６９、ＣＤ４４、ＣＤ１３７、ＫＬＲＧ１、ＣＤ６２^低、ＣＣＲ７^低、ＣＤ７１、ＣＤ２、ＣＤ５４、ＣＤ５８、ＣＤ２４４、ＣＤ１６０、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）、リンパ球活性化遺伝子３タンパク質（ＬＡＧ－３）、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメインタンパク質３（ＴＩＭ－３）、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原－４（ＣＴＬＡ－４）、ＢおよびＴリンパ球減衰因子（ＢＴＬＡ）および／またはＴ細胞免疫グロブリンおよび免疫受容体チロシンベースの阻害性モチーフドメイン（ＴＩＧＩＴ）が挙げられる（例えば、Liu et al., Cell Death and Disease(2015) 6, e1792を参照）。一部の実施形態では、疲弊マーカーは、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＢＴＬＡ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＤ３９、ＶＩＳＴＡ、およびＴＩＧＩＴのいずれか１つまたはそれ以上である。一部の実施形態では、評価される細胞表面マーカーは、ＣＤ２５、ＰＤ－１および／またはＴＩＭ－３である。一部の実施形態では、評価される細胞表面マーカーは、ＣＤ２５である。

【0422】

一部の態様では、発現レベルを検出することは、インビトロアッセイを実施することを含む。一部の実施形態では、インビトロアッセイは、イムノアッセイ、アプタマーベースのアッセイ、組織学的もしくは細胞学的アッセイ、またはｍＲＮＡ発現レベルアッセイである。一部の実施形態では、１つまたはそれ以上の因子、エフェクター、酵素および／または表面マーカーのそれぞれの１つまたはそれ以上に関するパラメーターは、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、免疫ブロッティング、免疫沈降、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、免疫染色、フローサイトメトリーアッセイ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、ケミルミネッセンスアッセイ、ラテラルフローイムノアッセイ、阻害アッセイまたはアビディティーアッセイによって検出される。一部の実施形態では、サイトカインおよび／または表面マーカーの検出は、少なくとも１つのバイオマーカーに特異的に結合する結合試薬を使用して決定される。一部の事例では、結合試薬は、抗体またはその抗原結合性断片、アプタマーまたは核酸プローブである。

【0423】

一部の実施形態では、化合物Ｃの投与は、循環性ＣＡＲ Ｔ細胞のレベルを増加させる。

【0424】

Ｃ．応答、有効性および生存
一部の実施形態では、治療の転帰のスクリーニング工程および／または評価のため、および／または治療の転帰をモニタリングするために評価され得るパラメーターを含む、療法または治療の転帰と関連付けられるパラメーターとして、腫瘍または疾患負荷が挙げられる。Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）および化合物Ｃ等の免疫療法の投与は、対象における疾患もしくは状態の増大または負荷を低減あるいは予防することができる。例えば、疾患または状態が腫瘍である場合、当該方法は概して、腫瘍サイズ、バルク、転移、骨髄における芽球のパーセンテージまたは分子的に検出可能なＢ細胞悪性病変を低減し、および／または腫瘍負荷と関連付けられる予後もしくは生存もしくは他の症状を改善する。

【0425】

一部の態様では、提供される方法による、および／または提供される製造品もしくは組成物による投与は概して、対象における疾患もしくは状態の増大または負荷を低減あるいは予防する。例えば、疾患または状態が腫瘍である場合、当該方法は概して、腫瘍サイズ、バルク、転移、骨髄における芽球のパーセンテージまたは分子的に検出可能なＢ細胞悪性病変を低減し、および／または腫瘍負荷と関連付けられる予後もしくは生存もしくは他の症状を改善する。

【0426】

一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の免疫療法が化合物Ｃの投与なしで付与される代替起点方法と比較して、治療された対象において腫瘍負荷の減少をもたらす。腫瘍負荷は実際には、併用療法を受ける対象全てを低減させる必要はなく、例えば臨床データに基づいて、治療された対象において平均して低減される必要はなく、ここで、腫瘍負荷は、そのような併用療法で治療された対象の大部分が腫瘍負荷の低減を示し、例えば併用療法で治療された対象の少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上の対象が腫瘍負荷の低減を示す。

【0427】

一部の実施形態では、疾患負荷は、対象における、または対象の臓器、組織もしくは体液、例えば、腫瘍もしくは例えば転移を示す別の位置の臓器または組織における疾患の総細胞数を包含し得る。例えば、腫瘍細胞は、ある特定の血液学的悪性病変の状況で、血液、リンパもしくは骨髄において検出および／または定量化され得る。疾患負荷は、一部の実施形態では、腫瘍量、転移の数もしくは程度および／または骨髄中に存在する芽球のパーセンテージを含み得る。

【0428】

一部の実施形態では、対象は、リンパ腫または白血病に罹っている。疾患負荷の程度は、血液または骨髄における残留白血病の評価によって決定することができる。一部の実施形態では、対象は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、またはびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）に罹っている。一部の実施形態では、対象は、ＭＭまたはＤＢＣＢＬに罹っている。

【0429】

一部の態様では、対象、例えばＮＨＬを患う対象における奏効率は、Ｌｕｇａｎｏの判断基準に基づいている（Cheson et al.,(2014) JCO., 32(27):3059-3067；Johnson et al.,(2015) Radiology 2:323-338；Cheson, B.D.(2015) Chin. Clin. Oncol. 4(1):5）。一部の態様では、奏効評価は、臨床的、血液学的、および／または分子的方法のいずれかを利用する。一部の態様では、必要に応じてＬｕｇａｎｏ判断基準を使用して評価される奏効は、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）－コンピュータ断層撮影（ＣＴ）および／またはＣＴの使用を伴う。ＰＥＴ－ＣＴ評価は、ＦＤＧ高集積（ＦＤＧ－ａｖｉｄ）リンパ腫に関してフルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）の使用をさらに含み得る。一部の態様では、ＰＥＴ－ＣＴがＦＤＧ高集積組織学における奏効を評価するのに使用される場合、５段階評価が使用され得る。一部の観点では、５段階評価は、下記の判断基準を含む：１、バックグラウンドを上回る取込みなし；２、縦隔以下の取込み：３、縦隔を超えるが、肝臓以下の取込み；４、肝臓を上回る中程度の取込み；５、肝臓より顕著に高い取込みおよび／または新たな病変；Ｘ、リンパ腫に関連される可能性が低い取込みの新たな領域。

【0430】

一部の態様では、Ｌｕｇａｎｏ判断基準を使用して記載される完全奏効は、様々な測定可能な部位での完全代謝奏効および完全放射線奏効を伴う。一部の態様では、これらの部位は、リンパ節およびリンパ節外部位を含み、ここで、ＣＲは、ＰＥＴ－ＣＴが使用される場合、５段階評価で残留腫瘤を伴って、または伴わずに、１、２、または３のスコアとして記載されている。一部の態様では、生理学的取込みを伴うか、または脾臓もしくは骨髄内での活性化を伴う（例えば、化学療法または骨髄性コロニー刺激因子を用いて）ワルダイエル咽頭輪または節外において、取込みは、正常な縦隔および／または肝臓より高い可能性がある。この状況において、初期関与の部位での取込みが、組織が高い生理学的取込みを有する場合でさえ周囲の正常組織以下である場合には、完全代謝奏効は推測され得る。一部の態様では、奏効は、ＣＴを使用してリンパ節中で評価され、ここで、ＣＲは、疾患の非リンパ節外部位として記載され、標的節／結節性腫瘤が、病変の最長の横径（ＬＤｉ）において１．５ｃｍ以下にまで退行しなくてはならない。評価のさらなる部位として、骨髄が挙げられ、ここで、ＰＥＴ－ＣＴベースの評価は、骨髄におけるＦＤＧ高集積疾患のエビデンスの欠如を示すべきであり、ＣＴベースの評価は、正常な形態を示すべきであり、これは、未定である場合にはＩＨＣ陰性であるべきである。さらなる部位は、臓器の拡張の評価を含んでもよく、これは、正常にまで退行すべきである。一部の態様では、非測定病変および新たな病変が評価され、これは、ＣＲの場合には非存在であるべきである（Cheson et al.,(2014) JCO., 32(27):3059-3067；Johnson et al.,(2015) Radiology 2:323-338；Cheson, B.D. (2015) Chin. Clin. Oncol. 4(1):5）。

【0431】

一部の態様では、Ｌｕｇａｎｏ判断基準を使用して記載される場合の部分的奏効（ＰＲ）は、様々な測定可能な部位での部分的代謝および／または放射線奏効を伴う。一部の態様では、これらの部位は、リンパ節およびリンパ節外部位を含み、ここで、ＰＲは、ＰＥＴが使用される場合、ベースラインと比較して低減された取込みおよび任意のサイズの残留腫瘤を伴って、４または５のスコアとして記載される。一時的に、そのような見解は、応答性疾患を示し得る。治療の最後には、そのような見解は、残留疾患を示し得る。一部の態様では、奏効は、ＣＴを使用してリンパ節で評価され、ここで、ＰＲは、最大６つの測定可能な標的節および節外部位のＳＰＤの５０％以上の減少として記載される。病変が小さすぎてＣＴでは測定することができない場合、５ｍｍ×５ｍｍがデフォルト値として割り当てされ；病変がもはや目に見えない場合、値は、０ｍｍ×０ｍｍであり；５ｍｍ×５ｍｍを超えるが、正常より小さい節に関しては、実際の測定値が算出に使用される。評価のさらなる部位として、骨髄が挙げられ、ここで、ＰＥＴ－ＣＴベースの評価は、正常な骨髄における取込みより高い残留取込みを示すが、ベースラインと比較して低減されるべきである（認められている化学療法からの反応性変化に適合する散在性の取込み）。一部の態様では、結節奏効の状況で骨髄中で持続的な病巣変化がみられる場合、ＭＲＩもしくは生検査、またはインターバルスキャンを用いたさらなる評価が検討されるべきである。一部の態様では、さらなる部位は、臓器拡張の評価を含んでもよく、ここで、脾臓は、正常を超える長さの５０％を上回って退行されていなくてはならない。一部の態様では、非測定病変および新たな病変が評価され、これは、ＰＲの場合、非存在／正常であり、退行され、増加すべきではない。非応答／安定疾患（ＳＤ）または進行性疾患（ＰＤ）もまた、ＰＥＴ－ＣＴおよび／またはＣＴベースの評価を使用して評価され得る（Cheson et al.,(2014) JCO., 32(27):3059-3067；Johnson et al.,(2015) Radiology 2:323-338；Cheson, B.D. (2015) Chin. Clin. Oncol., 4(1):5）。

【0432】

一部の態様では、無進行生存（ＰＦＳ）は、対象が疾患を伴って生存するが、悪化しないＢ細胞悪性病変等の疾患の治療中および治療後の期間として記載される。一部の態様では、客観的奏効（ＯＲ）は、測定可能な奏効として記載される。一部の奏効では、客観的奏効率（ＯＲＲ）は、ＣＲまたはＰＲを達成した患者の比率として記載されている。一部の態様では、全生存（ＯＳ）は、疾患と診断された患者が依然として生きている、Ｂ細胞悪性病変等の疾患に関する診断日または治療の開始のいずれかからの期間として記載されている。一部の態様では、無イベント生存（ＥＦＳ）は、対象が、治療が予防または遅延させると意図されたある特定の合併症またはイベントないままである、Ｂ細胞悪性病変に対する治療が終了した後の期間として記載されている。これらのイベントは、Ｂ細胞悪性病変の再発またはある特定の症状の開始、例えば、骨に伝播したＢ細胞悪性病変由来の骨痛、あるいは死亡を含み得る。

【0433】

一部の実施形態では、奏効の持続時間（ＤＯＲ）の測定は、疾患進行に対する腫瘍奏効の文書化からの時間を含む。一部の実施形態では、奏効を評価するためのパラメーターは、持続的な奏効、例えば、療法の開始からのある期間後に持続する奏効を含み得る。一部の実施形態では、持続的な奏効は、療法の開始のおよそ１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８または２４ヶ月後の奏効率によって示される。一部の実施形態では、奏効は、３ヶ月より長く、または６ヶ月より長く永続的である。

【0434】

一部の態様では、ＲＥＣＩＳＴ判断基準が、客観的腫瘍奏効を決定するのに使用される（Eisenhauer et al., European Journal of Cancer 45(2009) 228-247）。一部の態様では、ＲＥＣＩＳＴ判断基準は、標的病変の客観的腫瘍奏効を決定するのに使用される。一部の観点では、ＲＥＣＩＳＴ判断基準を使用して決定される場合の完全奏効は、全ての標的病変の消失として記載され、いかなる病理学的リンパ節（標的であろうと、非標的であろうと）も、短軸において１０ｍｍ未満の低減を有さなくてはならない。他の態様では、ＲＥＣＩＳＴ判断基準を使用して決定される場合の部分奏効は、ベースラインの合計直径を参照として取って、標的病変の直径の合計の少なくとも３０％減少として記載されている。他の態様では、進行性疾患（ＰＤ）は、研究の最小合計（これは、それが研究の最小である場合のベースライン合計を含む）を参照として取って、標的病変の直径の合計の少なくとも２０％減少として記載されている。２０％の相対的増加に加えて、合計はまた、少なくとも５ｍｍの絶対的増加を示さなくてはならない（一部の態様では、１つまたはそれ以上の新たな病変の出現もまた、進行とみなされる）。他の態様では、安定疾患（ＳＤ）は、研究中の最小合計直径を参照として取って、ＰＲに関して認定するのに十分な収縮も、ＰＤに関して認定するのに十分な増加もないと記載されている。

【0435】

ＭＭの場合、疾患負荷の程度を評価するための例示的なパラメーターとして、クローン形質細胞の数（例えば、骨髄生検査で１０％を超える、または他の組織由来の生検で任意の量で；形質細胞腫）、血清または尿のいずれかにおけるモノクローナルタンパク質（パラプロテイン）の存在、形質細胞障害に関連すると感じられる末端臓器損傷のエビデンス（例えば、高カルシウム血症（２．７５ｍｍｏｌ／ｌを超える補正カルシウム）；骨髄腫に起因する腎不全；貧血（１０ｇ／ｄｌ未満のヘモグロビン）；および／または骨病変（圧迫骨折を伴う溶解性病変または骨粗鬆症））等のパラメーターを含む。

【0436】

ＤＬＢＣＬの場合、疾患負荷の程度を評価するための例示的なパラメーターとして、細胞形態（例えば、中心芽球、免疫芽球、および未分化芽球細胞）、遺伝子発現、ｍｉＲＮＡ発現およびタンパク質発現（例えば、ＢＣＬ２、ＢＣＬ６、ＭＵＭ１、ＬＭＯ２、ＭＹＣ、およびｐ２１の発現）等のパラメーターが挙げられる。

【0437】

一部の態様では、対象、例えばＣＬＬを患う対象における奏効率は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ ｏｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ Ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＩＷＣＬＬ）奏効判断基準に基づいている（Hallek, et al., Blood 2008, Jun 15；111(12): 5446-5456）。一部の態様では、これらの判断基準は下記のように記載されている：一部の態様では、免疫表現型検査による末梢血クローンリンパ球の非存在、リンパ節腫大の非存在、肝腫大または脾腫大の非存在、全身症状の非存在および十分な血球数を要する完全寛解（ＣＲ）；一部の態様では、上記ＣＲとして記載されるが、正常な血球数のない不完全な骨髄回復を伴う完全寛解（ＣＲｉ）；一部の態様では、末梢血球数の改善とともにリンパ球数の５０％以上の低下、リンパ節腫大の５０％以上の低減、または肝臓もしくは脾臓の５０％以上の低減として記載される部分寛解（ＰＲ）；一部の態様では、５×１０^９個／Ｌを超えるリンパ球数の５０％以上の上昇、リンパ節腫大の５０％以上の増加、肝臓もしくは脾臓サイズの５０％以上の増加、リヒタートランスフォーメーション、またはＣＬＬに起因した新たな血球減少として記載される進行性疾患（ＰＤ）；および一部の態様では、ＣＲ、ＣＲｉ、ＰＲまたはＰＤに関する判断基準を満たさないと記載される安定疾患。

【0438】

一部の実施形態では、対象は、細胞の用量の投薬の１ヶ月以内に、対象におけるリンパ節のサイズが２０ｍｍもしくは約２０ｍｍ未満、またはサイズが１０ｍｍもしくは約１０ｍｍ未満である場合にＣＲまたはＯＲを示す。

【0439】

一部の実施形態では、ＣＬＬの指標クローンは、対象の骨髄中で（または、当該方法に従って治療された対象の５０％、６０％、７０％、８０％、９０％以上の対象の骨髄中で）検出されない。一部の実施形態では、ＣＬＬの指標クローンは、ＩｇＨディープシーケーシングによって評価される。一部の実施形態では、指標クローンは、細胞の投与後の１、２、３、４、５、６、１２、１８もしくは２４ヶ月目、またはその概数の時点で、あるいは少なくとも１、２、３、４、５、６、１２、１８もしくは２４ヶ月目、またはその概数の時点で検出されない。

【0440】

一部の実施形態では、対象は、例えば光学顕微鏡によって検出される場合、骨髄中の５％より多いか、またはそれに等しい芽球、例えば骨髄中の１０％より多いか、またはそれに等しい芽球、骨髄中の２０％より多いか、またはそれに等しい芽球、骨髄中の３０％より多いか、またはそれに等しい芽球、骨髄中の４０％より多いか、またはそれに等しい芽球あるいは骨髄中の５０％より多いか、またはそれに等しい芽球が存在する場合に形態学的疾患を示す。一部の態様では、対象は、骨髄中の５％未満の芽球が存在する場合に、完全または臨床的寛解を示す。

【0441】

一部の実施形態では、対象は、完全寛解を示し得るが、少比率の形態学的に検出不可能な（光学顕微鏡技法による）残留白血病細胞が存在する。対象が骨髄中の５％未満の芽球を示し、かつ分子的に検出可能なＢ細胞悪性病変を示す場合に、対象は、微小残存病変（ＭＲＤ）を示すとされる。一部の実施形態では、分子的に検出可能なＢ細胞悪性病変は、少数の細胞の高感度検出を可能にする様々な分子技法のいずれかを使用して評価され得る。一部の態様では、そのような技法として、特有のＩｇ／Ｔ細胞受容体遺伝子再編成および染色体転座によって生じる融合転写物を決定することができるＰＣＲアッセイが挙げられる。一部の実施形態では、フローサイトメトリーは、白血病特異的免疫表現型に基づいてＢ細胞悪性病変を同定するのに使用され得る。一部の実施形態では、Ｂ細胞悪性病変の分子検出は、１００，０００個の正常細胞中わずか１個の白血病細胞を検出し得る。一部の実施形態では、例えばＰＣＲまたはフローサイトメトリーによって、１００，０００個の細胞中少なくとも１個または１個より多い白血病細胞が検出される場合、対象は、分子的に検出可能であるＭＲＤを示す。一部の実施形態では、対象の疾患負荷は、一部の事例では、白血病細胞がＰＣＲまたはフローサイトメトリー技法を使用して対象において検出されることが不可能であるように、分子的に検出不可能またはＭＲＤ^－である。

【0442】

白血病の場合、疾患負荷の程度は、血液または骨髄における残留白血病の評価によって決定することができる。一部の実施形態では、対象は、例えば光学顕微鏡によって検出される場合、骨髄中の５％より多いか、またはそれに等しい芽球が存在する場合に形態学的疾患を示す。一部の実施形態では、対象は、骨髄中の５％未満の芽球が存在する場合に完全または臨床的寛解を示す。

【0443】

一部の実施形態では、白血病に関して、対象は、完全寛解を示し得るが、小比率の形態学的に検出不可能な（光学顕微鏡技法によって）残留白血病細胞が存在する。対象が骨髄中の５％未満の芽球を示し、分子学的に検出可能なＢ細胞悪性病変を示す場合に、対象は、微小残存病変（ＭＲＤ）を示すとされる。一部の実施形態では、分子学的に検出可能なＢ細胞悪性病変は、少数の細胞の高感度検出を可能にする様々な分子学的技法のいずれかを使用して評価され得る。一部の態様では、そのような技法として、特有のＩｇ／Ｔ細胞受容体遺伝子再編成および染色体転座によって生じる融合転写物を決定することができるＰＣＲアッセイが挙げられる。一部の実施形態では、フローサイトメトリーは、白血病特異的免疫表現型に基づいてＢ細胞悪性病変を同定するのに使用され得る。一部の実施形態では、Ｂ細胞悪性病変の分子検出は、１００，０００個の正常細胞中わずか１個の白血病細胞を検出し得る。一部の実施形態では、例えばＰＣＲまたはフローサイトメトリーによって、１００，０００個の細胞中少なくとも１個または１個より多い白血病細胞が検出される場合、対象は、分子的に検出可能であるＭＲＤを示す。一部の実施形態では、対象の疾患負荷は、一部の事例では、白血病細胞がＰＣＲまたはフローサイトメトリー技法を使用して対象において検出されることが不可能であるように、分子的に検出不可能またはＭＲＤ^－である。

【0444】

一部の実施形態では、細胞療法、例えばＴ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）および／または化合物Ｃの方法および／または投与は、免疫療法、例えばＴ細胞療法および／または化合物Ｃの投与の直前の時点での疾患負荷と比較した場合に、疾患負荷を減少させる。

【0445】

一部の態様では、免疫療法、例えばＴ細胞療法および／または化合物Ｃの投与は、疾患負荷の増加を予防する可能性があり、これは、疾患負荷の変化がないことによって明らかである。

【0446】

一部の実施形態では、当該方法は、代替的療法、例えば、対象が、化合物Ｃの投与の非存在下で、免疫療法、例えばＴ細胞療法単独を受けるもの使用した匹敵する方法で観察されるであろう低減と比較した場合に、より大きな程度でおよび／またはより長い期間、疾患または症状の負荷、例えば、腫瘍細胞の数、腫瘍のサイズ、患者の生存または無イベント生存の持続時間を低減する。一部の実施形態では、疾患負荷は、薬剤単独それぞれを投与すること、例えば免疫療法、例えばＴ細胞療法を受けていなかった対象に化合物Ｃを投与すること、または化合物Ｃを受けていなかった対象に、免疫療法、例えばＴ細胞療法を投与することによって達成されるであろう低減と比較して、免疫療法、例えばＴ細胞療法、および化合物Ｃの投与の併用療法後に、より大きな程度で、またはより長い持続時間、低減する。

【0447】

一部の実施形態では、対象における疾患または状態の負荷は、検出、評価または測定される。疾患負荷は、一部の態様では、対象における、または対象の臓器、組織、もしくは体液、例えば血液または血清における疾患または疾患関連細胞、例えば腫瘍細胞の総数を検出することによって検出され得る。一部の実施形態では、疾患負荷、例えば、腫瘍負荷は、転移の数または程度を測定することによって評価される。一部の態様では、対象の生存、ある特定の期間内の生存、生存の程度、無イベントもしくは無症状生存、もしくは無再発生存の存在または持続時間が評価される。一部の実施形態では、疾患または状態の任意の症状が評価される。一部の実施形態では、疾患または状態負荷の尺度が明示される。一部の実施形態では、決定のための例示的なパラメーターとして、疾患もしくは状態、例えば腫瘍の回復または改善を示す特定の臨床転帰が挙げられる。そのようなパラメーターとして、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）または安定疾患（ＳＤ）（例えば、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｃｒｉｔｅｒｉａ Ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴ）ガイドラインを参照）、客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）を含む疾患制御の持続時間が挙げられる。パラメーターに関する具体的な閾値は、本明細書に提供される併用療法の方法の有効性を決定するよう設定され得る。

【0448】

一部の態様では、疾患負荷は、免疫療法、例えばＴ細胞療法の投与の前に、免疫療法、例えば、Ｔ細胞療法の投与後に、但し化合物Ｃの投与の前に、および／または免疫療法、例えば、Ｔ細胞療法および化合物Ｃの両方の投与後に測定または検出される。併用療法の１つまたはそれ以上の工程の多重投与の状況で、疾患負荷は、一部の実施形態では、投与の工程、用量および／またはサイクルのいずれかの投与の前に、または投与後に、あるいは投与の工程、用量および／またはサイクルのいずれかの投与間の時点で測定され得る。

【0449】

一部の実施形態では、負荷は、化合物Ｃおよび免疫療法、例えばＴ細胞療法を施すことの直前と比較して、提供される方法によって、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、またはその概数分、あるいは少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、または少なくともその概数分減少される。一部の実施形態では、疾患負荷、腫瘍サイズ、腫瘍体積、腫瘍質量、腫瘍量またはバルクは、免疫療法、例えばＴ細胞療法および／または化合物Ｃの投与の直後のものと比較して、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０％分以上、または少なくともその概数分、免疫療法、例えばＴ細胞療法および化合物Ｃの投与後に低減される。

【0450】

一部の実施形態では、当該方法による疾患負荷の低減は、例えば、併用療法の投与、例えば開始後１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または６ヶ月以上で評価した場合に形態学的完全寛解の誘導を含む。

【0451】

一部の態様では、微小残存病変に関するアッセイは、例えばマルチパラメトリックフローサイトメトリーによって測定される場合に陰性であるか、または微小残存病変のレベルは、約０．３％未満、約０．２％未満、約０．１％未満、または０．０５％未満である。

【0452】

一部の実施形態では、対象の無イベント生存率または全生存率は、他の方法と比較した場合に、当該方法によって改善される。例えば、一部の実施形態では、本明細書に提供される併用療法の当該方法後６ヶ月で当該方法によって治療された対象に関する無イベント生存率または確率は、約４０％より高いか、約５０％より高いか、約６０％より高いか、約７０％より高いか、約８０％より高いか、約９０％より高いか、または約９５％より高い。一部の態様では、全生存率は、約４０％より高いか、約５０％より高いか、約６０％より高いか、約７０％より高いか、約８０％より高いか、約９０％より高いか、または約９５％より高い。一部の実施形態では、当該方法で治療された対象は、少なくとも６ヶ月、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０年に至る無イベント生存、無再発生存、または生存を示す。一部の実施形態では、進行までの時間、例えば６ヶ月もしくは、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０年より長い、あるいはその概数より長い進行までの時間が改善される。

【0453】

一部の実施形態では、当該方法による治療後に、再発率は、他の方法と比較した場合に低減される。例えば、一部の実施形態では、併用療法の当該方法の６ヶ月後の再発率は、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、または約１０％未満である。

【0454】

一部の事例では、投与された細胞、例えば養子移入された細胞の薬物動態は、投与された細胞の利用可能性、例えばバイオアベイラビリティを評価するために決定される。養子移入された細胞の薬物動態を決定する方法は、操作された細胞が投与された対象由来の末梢血を採取することと、末梢血中の操作された細胞の数または比を決定することをと含み得る。細胞を選択および／または単離するためのアプローチは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）特異的抗体（例えば、Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 2013 Mar; 5(177): 177ra38）、プロテインＬ（Zheng et al., J. Transl. Med. 2012 Feb; 10:29）、エピトープタグ、例えばＣＡＲにおける特異的部位へ直接導入され、それによりＳｔｒｅｐ－Ｔａｇに対する結合試薬を使用して、ＣＡＲを直接評価するＳｔｒｅｐ－Ｔａｇ配列（Liu et al.(2016) Nature Biotechnology, 34:430；国際特許出願公開ＷＯ２０１５０９５８９５号）およびＣＡＲポリペプチドに特異的に結合するモノクローナル抗体（国際特許出願公開ＷＯ２０１４１９０２７３号を参照）の使用を包含し得る。外因性マーカー遺伝子は一部の事例では、細胞の検出または選択を可能にするために、また一部の事例では細胞自殺を促進するために、操作細胞療法と関連して利用され得る。切断型増殖因子受容体（ＥＧＦＲｔ）は、一部の事例では、形質導入された細胞において目的の導入遺伝子と共発現させることができる（例えば、米国特許第８，８０２，３７４号を参照）。ＥＧＦＲｔは、抗体セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））または他の治療用抗ＥＧＦＲ抗体もしくは結合性分子によって認識されるエピトープを含有してもよく、それは、ＥＧＦＲｔ構築物および別の組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）で操作された細胞を同定もしくは選択するのに、および／または受容体を発現する細胞を排除もしくは分離するのに使用することができる。例えば、米国特許第８，８０２，３７４号およびLiu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434を参照されたい。

【0455】

一部の実施形態では、患者から得られる生体試料、例えば、血液におけるＣＡＲ＋Ｔ細胞の数は、例えば細胞の薬物動態を決定するために、細胞療法の投与後のある期間で決定することができる。一部の実施形態では、対象の血液中で、または当該方法によってそのように治療された対象の大部分において検出可能なＣＡＲ＋Ｔ細胞、適宜ＣＡＲ＋ＣＤ８＋Ｔ細胞および／またはＣＡＲ＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の数は、１μＬ当たり１個より多い細胞、１μＬ当たり５個より多い細胞または１μＬ当たり１０個より多い細胞である。

【0456】

ＩＶ．毒性および有害な転帰
提供される方法の実施形態では、対象は、細胞療法（例えば、Ｔ細胞療法）および化合物Ｃを含む提供される併用療法を投与された対象における、治療関連転帰、例えば、好中球減少症、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または神経毒性（ＮＴ）の発症を含む、毒性または他の有害転帰についてモニターされる。一部の実施形態では、提供される方法は、重度の好中球減少症、重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または重度の神経毒性に関連するかまたはそれを指し示す症状または転帰等、毒性転帰または症状、毒性促進プロファイル、因子または特性のリスクを低減させるために行われる。

【0457】

一部の実施形態では、提供される方法は、毒性もしくは毒性の転帰の高い割合または可能性をもたらさず、あるいは例えばある特定の他の細胞療法と比較して、毒性もしくは毒性の転帰、例えば重篤な神経毒性（ＮＴ）または重篤なサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の割合または可能性を低減する。一部の実施形態では、当該方法は、重篤なＮＴ（ｓＮＴ）、重篤なＣＲＳ（ｓＣＲＳ）、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、３日以上の日数の間の少なくともセ氏３８度または少なくともセ氏約３８度の発熱および少なくとも２０ｍｇ／ｍＬまたは少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬのＣＲＰの血漿レベルをもたらさないか、あるいはそれらのリスクを増加させない。一部の実施形態では、提供される方法に従って治療された対象の約３０％、３５％、４０％、５０％、５５％、６０％以上対象より多く、あるいはその概数以上対象より多く、ＣＲＳの任意のグレードまたは神経毒性の任意のグレードを示されない。一部の実施形態では、治療された対象の５０％以下（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上の）が、グレード２より高いサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはグレード２より高い神経毒性を示さない。一部の実施形態では、当該方法に従って治療された対象の少なくとも５０％（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）が、重篤な毒性の転帰（例えば、重篤なＣＲＳまたは重篤な神経毒性）を示さず、例えば、グレード３もしくはそれより高い神経毒性を示さず、および／または重篤なＣＲＳを示さず、あるいは治療後のある特定の期間内で、例えば、細胞の投与の１週、２週、または１ヶ月以内でそのように示さない。

【0458】

一部の実施形態では、提供される方法は、ある特定の他の細胞療法等と比較して、重度の神経毒性（ＮＴ）もしくは重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）等の毒性もしくは毒性転帰の高い割合もしくは可能性をもたらさないか、または毒性もしくは毒性転帰の割合もしくは可能性を低減させる。一部の実施形態では、方法は、重度のＮＴ（ｓＮＴ）、重度のＣＲＳ（ｓＣＲＳ）、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、３日間以上にわたる少なくともまたはセ氏約３８度の発熱、および少なくとも２０ｍｇ／ｄＬまたは約２０ｍｇ／ｄＬのＣＲＰの血漿レベルをもたらさないか、またはそのリスクを増加させない。一部の実施形態では、提供される方法に従って治療された対象の３０％、３５％、４０％、５０％、５５％、６０％以上を超えるまたはその概数を超えるものは、いかなるグレードのＣＲＳもいかなるグレードの神経毒性も示さない。一部の実施形態では、治療された対象の５０％以下（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）は、グレード２よりも高いサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはグレード２よりも高い神経毒性を示さない。一部の実施形態では、方法に従って治療された対象の少なくとも５０％（例えば、治療された対象の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％以上）は、重度の毒性転帰（例えば、重度のＣＲＳまたは重度の神経毒性）を示さない、例えば、グレード３以上の神経毒性を示さない、および／または重度のＣＲＳを示さない、または細胞の投与の１週間、２週間もしくは１ヶ月間以内等、治療に続くある特定の期間内にそれを行わない。

【0459】

Ａ．サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および神経毒性
一部の態様では、毒性転帰は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または重度のＣＲＳ（ｓＣＲＳ）であるかまたはそれに関連するかまたはそれを指し示す。ＣＲＳ、例えば、ｓＣＲＳは、一部の事例では、養子Ｔ細胞療法および他の生物学的産物の対象への投与に続いて起き得る。Davila et al., Sci Transl Med 6, 224ra25(2014)；Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 5, 177ra38(2013)；Grupp et al., N. Engl. J. Med. 368, 1509-1518(2013)；およびKochenderfer et al., Blood 119, 2709-2720(2012)；Xu et al., Cancer Letters 343(2014) 172-78を参照されたい。

【0460】

通常、ＣＲＳは、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、単球、および／またはマクロファージによって媒介される全身免疫応答の悪化によって引き起こされる。そのような細胞は、大量のサイトカインおよびケモカイン等の炎症性メディエーターを放出し得る。サイトカインは、急性炎症性応答を誘発する可能性があり、および／または内皮臓器損傷を誘導する可能性があり、それらは、微小血管漏出、心不全、または死亡をもたらし得る。重篤な生命を脅かすＣＲＳは、肺浸潤および肺損傷、腎不全、または播種性血管内凝固を招き得る。他の重篤な生命を脅かす毒性は、心毒性、呼吸困難、神経毒性および／または肝不全を含み得る。ＣＲＳは、抗炎症性療法、例えば抗ＩＬ－６療法、例えば、抗ＩＬ－６抗体、例えば、トシリズマブ、もしくは抗生物質、または記載されるような他の薬剤を使用して治療され得る。

【0461】

ＣＲＳの転帰、徴候および症状は公知であり、本明細書に記載されているものを含む。一部の実施形態では、特定の投薬レジメンまたは投与が、所与のＣＲＳ関連の転帰、徴候、もしくは症状をもたらすか、またはもたらさない場合、特定の転帰、徴候、および症状および／またはそれらの量もしくは程度が特定され得る。

【0462】

ＣＡＲ発現細胞を投与する状況で、ＣＲＳは通常、ＣＡＲを発現する細胞の注入の６日～２０日後に起きる。Xu et al., Cancer Letters 343(2014) 172-78を参照されたい。一部の事例では、ＣＲＳは、ＣＡＲ Ｔ細胞注入後の６日未満または２０日より長い日数で起きる。ＣＲＳの発生率およびタイミングは、注入時のベースラインのサイトカインレベルまたは腫瘍負荷に関連し得る。通常、ＣＲＳは、インターフェロン（ＩＦＮ）－γ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）－α、および／またはインターロイキン（ＩＬ）－２の血清レベルの上昇を伴う。ＣＲＳにおいて迅速に誘導され得る他のサイトカインは、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８、およびＩＬ－１０である。

【0463】

ＣＲＳと関連付けられる例示的な転帰として、発熱、苦しさ、悪寒、低血圧、呼吸困難、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、脳障害、ＡＬＴ／ＡＳＴ上昇、腎不全、心障害、低酸素、神経障害、および死亡が挙げられる。神経学的合併症として、せん妄、発作様活動、錯乱、喚語困難、失語症、および／または昏迷状態になることが挙げられる。他のＣＲＳ関連の転帰として、疲労、吐気、頭痛、発作、頻脈、筋肉痛、発疹、急性血管漏出症候群、肝機能障害、および腎不全が挙げられる。一部の態様では、ＣＲＳは、血清－フェリチン、ｄ－二量体、アミノトランスフェラーゼ、乳酸脱水素酵素およびトリグリセリド等の１つまたはそれ以上の因子の増加と、あるいは低フィブリノゲン血症または肝脾腫大と関連付けられる。

【0464】

一部の実施形態では、ＣＲＳと関連付けられる転帰は、例えば、２日以上の日数、例えば３日以上の日数、例えば４日以上の日数、または少なくとも３日連続した日数の間の、持続性発熱、例えば、特定の温度の、例えばセ氏３８度またはセ氏約３８度を超える発熱；サイトカインの上昇、例えば少なくとも２つのサイトカイン（例えば、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、およびＩＬ－５、および／または腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）からなる群の少なくとも２つ）の治療前のレベルと比較して、少なくとも７５または約７５の最大の倍の変化、あるいは例えばそのようなサイトカインの少なくとも１つの少なくとも２５０または約２５０の最大の倍の変化；および／または毒性の少なくとも１つの臨床的徴候、例えば、低血圧（少なくとも１つの静脈内血管作用性昇圧薬によって測定される場合）；低酸素（例えば、９０％または約９０％未満の血漿酸素（ＰＯ_２）レベル）；および／または１つまたはそれ以上の神経障害（精神状態変化、鈍麻、および発作を含む）が挙げられる。

【0465】

例示的なＣＲＳ関連の転帰として、サイトカインおよびケモカインならびにＣＲＳと関係付けられる他の因子を含む、１つまたはそれ以上の因子の増加または高い血清レベルが挙げられる。例示的な転帰はさらに、そのような因子の１つまたはそれ以上の合成または分泌の増加を含む。そのような合成または分泌は、Ｔ細胞またはＴ細胞と相互作用する細胞、例えば、自然免疫細胞またはＢ細胞によるものであり得る。

【0466】

一部の実施形態では、ＣＲＳ関連血清因子またはＣＲＳ関連の転帰として、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ｓＩＬ－２Ｒａ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、マクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ）－１、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）、ＩＬ－６、およびＩＬ－１０、ＩＬ－１β、ＩＬ－８、ＩＬ－２、ＭＩＰ－１、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、および／またはＩＬ－５を含む、炎症性サイトカインおよび／またはケモカインが挙げられる。一部の実施形態では、因子または転帰は、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を含む。ＣＲＳに関する初期の、かつ容易に測定可能なリスク因子であるほかに、ＣＲＰはまた、細胞増大に関するマーカーである。一部の実施形態では、高レベルのＣＲＰ、例えば１５ｍｇ／ｄＬ以上を有すると測定される対象は、ＣＲＳを有する。一部の実施形態では、高レベルのＣＲＰを有すると測定される対象は、ＣＲＳを有さない。一部の実施形態では、ＣＲＳの尺度は、ＣＲＰおよびＣＲＳを示す別の因子の尺度を含む。

【0467】

１つまたはそれ以上の炎症性サイトカインまたはケモカインは、ＣＡＲ治療および／または化合物Ｃ治療前、治療中、または治療後にモニタリングされる。一部の態様では、１つまたはそれ以上のサイトカインまたはケモカインとして、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ｓＩＬ－２Ｒα、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、またはマクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ）が挙げられる。一部の態様では、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩＬ－６がモニタリングされる。

【0468】

どの患者がｓＣＲＳを発症するリスクのある可能性がより高いかを予測するためのＣＲＳの発生と相関するようであるＣＲＳ判断基準が開発されている（Davilla et al. Science translational medicine. 2014;6(224):224ra25）。因子として、発熱、低酸素、低血圧、神経性変化、炎症性サイトカイン、例えば治療誘導性上昇が治療前の腫瘍負荷およびｓＣＲＳ症状の両方と十分に相関し得る７つのサイトカイン（ＩＦＮγ、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、およびＧＭ－ＣＳＦ）のセットの血清レベルの上昇が挙げられる。ＣＲＳの診断および管理に関する他のガイドラインが公知である（例えば、Lee et al, Blood. 2014;124(2):188-95を参照）、一部の実施形態では、ＣＲＳグレードを反映する判断基準は、以下の表３で詳述されるものである。

【表3】

【0469】

一部の実施形態では、投与後に、対象が、少なくとも３日間の少なくともセ氏３８度の発熱；（２）（ａ）投与直後のレベルと比較して、下記の７つのサイトカインの群：インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、およびＩＬ－５のうちの少なくとも２つに関して少なくとも７５の最大の倍の変化および／または（ｂ）投与直後のレベルと比較して下記の７つのサイトカインの群：インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、およびＩＬ－５のうちの少なくとも１つに関して少なくとも２５０の最大の倍の変化；および（ｃ）低血圧（少なくとも１つの静脈内血管作用性昇圧薬を要する）または低酸素（ＰＯ_２＜９０％）あるいは１つまたはそれ以上の神経障害（精神状態変化、鈍麻、および／または発作を含む）等の毒性の少なくとも１つの臨床的徴候を示す場合に、対象は、細胞療法もしくはそれらの細胞の用量の投与に応答して、またはそれに続発して、「重篤なＣＲＳ」（「ｓＣＲＳ」）を発症するとみなされる。一部の実施形態では、重篤なＣＲＳは、表４に記載されるように３またそれを超えるグレードを有するＣＲＳを含む。

【0470】

一部の実施形態では、重篤なＣＲＳあるいはグレード３以上の、例えばクレード４以上のＣＲＳと関連付けられる転帰は、持続性発熱、例えば、２日以上の、例えば３日以上の、例えば４日以上の日数、あるいは少なくとも３日連続した日数の間の、例えば、特定の温度の、例えばセ氏３８度またはセ氏約３８度を超える発熱；サイトカインの上昇、例えば少なくとも２つのサイトカイン（例えば、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、Ｆｌｔ－３Ｌ、フラクタルカイン、およびＩＬ－５、および／または腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）からなる群の少なくとも２つ）の治療前のレベルと比較して、少なくとも７５または少なくとも約７５の最大の倍の変化、あるいは例えばそのようなサイトカインの少なくとも１つの少なくとも２５０または少なくとも約２５０の最大の倍の変化；および／または少なくとも１つの臨床的徴候、例えば、低血圧（少なくとも１つの静脈内血管作用性昇圧薬によって測定される場合）；低酸素（例えば、９０％または約９０％未満の血漿酸素（ＰＯ_２）レベル）；および／または１つまたはそれ以上の神経障害（精神状態変化、鈍麻、および発作を含む）の１つまたはそれ以上を含む。一部の実施形態では、重篤なＣＲＳは、集中治療室（ＩＣＵ）での管理または治療を要するＣＲＳを含む。

【0471】

一部の実施形態では、ＣＲＳ、例えば重篤なＣＲＳは、（１）持続性発熱（少なくとも３日間の少なくともセ氏３８度の発熱）および（２）少なくとも２０ｍｇ／ｄＬまたは少なくとも約２０ｍｇ／ｄＬのＣＲＰの血清レベルの組合せを包含する。一部の実施形態では、ＣＲＳは、２つ以上の昇圧薬の使用を要する低血圧あるいは人工呼吸器を要する呼吸不全を包含する。一部の実施形態では、昇圧薬の投薬は、第２のまたは続発する投与において増加される。

【0472】

一部の実施形態では、重篤なＣＲＳまたはグレード３のＣＲＳは、アラニンアミノトランスフェラーゼの増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの増加、寒気、発熱性好中球減少症、頭痛、左心室機能障害、脳障害、水頭症、および／または振戦を包含する。

【0473】

各種転帰を測定または検出する方法は特定され得る。

【0474】

一部の態様では、療法、例えば細胞療法の毒性の転帰は、神経毒性もしくは重篤な神経毒性であるか、またはそれらと関連付けられるか、またはそれらを示す。一部の実施形態では、神経毒性の臨床的リスクと関連付けられる症状として、錯乱、せん妄、表出性失語症、鈍麻、ミオクローヌス、嗜眠、精神状態の変化、痙攣、発作様活動、発作（脳波［ＥＥＧ］によって確認されてもよい）、ベータアミロイド（Ａβ）のレベルの上昇、グルタミン酸のレベルの上昇、および酸素ラジカルのレベルの上昇が挙げられる。一部の実施形態では、神経毒性は、重症度に基づいて（例えば、グレード１～５スケールを使用して）等級分けされる（例えば、Guido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666(December 2010)；National Cancer Institute-Common Toxicity Criteria version 4.03(NCI-CTCAE v4.03)を参照）。

【0475】

一部の事例では、神経症状は、ｓＣＲＳの最初期の症状であってもよい。一部の実施形態では、神経症状は、細胞療法注入の５日～７日後に開始するようである。一部の実施形態では、神経性変化の持続時間は、３日～１９日の範囲であり得る。一部の事例では、神経性変化の回復は、ｓＣＲＳの他の症状が消散した後に起きる。一部の実施形態では、神経性変化の消散の時間または程度は、抗ＩＬ－６および／またはステロイドによる治療によって促進されない。

【0476】

一部の実施形態では、対象が、１）末梢運動神経の炎症または変性を含む末梢性運動ニューロパチーの症状；２）末梢感覚神経の炎症または変性、知覚異常および不快感をもたらす知覚の歪み等の異常感覚、神経もしくは神経群に沿った激しい痛みの感覚等の神経痛、および／または刺激に非存在下での刺痛、圧感、冷感および温感の異常な皮膚感覚をもたらす感覚ニューロンの機能不全等の感覚異常を含む末梢性感覚ニューロパチーの症状の中からセルフケア（例えば、入浴、着衣および脱衣、摂食、トイレの使用、服薬）を制限する症状を示す場合に、対象は、細胞療法もしくはそれらの細胞の用量の投与に応答して、またはそれに続発して、「重篤な神経毒性」を発症するとみなされる。一部の実施形態では、重篤な神経毒性は、例えば、表４に記載されるように３以上のグレードを有する神経毒性を含む。一部の実施形態では、症状またはグレード３の神経毒性が１０日以上続く場合に、重篤な神経毒性は、長期のグレード３であるとみなされる。

【表4】

【0477】

一部の実施形態では、当該方法は、他の方法と比較して、ＣＲＳまたは神経毒性と関連付けられる症状を低減させる。一部の態様では、提供される方法は、他の方法と比較して、重篤なＣＲＳあるいはグレード３以上のＣＲＳと関連付けられる症状、転帰または因子を含む、ＣＲＳと関連付けられる症状、転帰または因子を低減させる。例えば、本方法に従って治療された対象は、検出可能な、ＣＲＳ、例えば重篤なＣＲＳあるいはグレード３以上のＣＲＳの症状、転帰または因子、例えば記載される、例えば表３で明記されるいずれかを欠如する可能性があり、および／またはＣＲＳ、例えば重篤なＣＲＳあるいはグレード３以上のＣＲＳの症状、転帰または因子、例えば記載される、例えば表２で明記されるいずれかを低減させた可能性がある。一部の実施形態では、本方法に従って治療された対象は、他の方法によって治療された対象と比較して、神経毒性の症状、例えば脚弱またはしびれ、記憶、視力、および／または知力の喪失、制御不能な強迫および／または強制行動、妄想、頭痛、運動制御の喪失、認知衰退および自律神経系機能障害を含む認知的ならびに行動的問題、および性機能障害を低減させた可能性がある。一部の実施形態では、本方法に従って治療された対象は、末梢性運動ニューロパチー、末梢性感覚ニューロパチー、異常感覚、神経痛または感覚異常と関連付けられる症状を減少させた可能性がある。

【0478】

一部の実施形態では、当該方法は、神経系および／または脳の損傷、例えばニューロン死を含む神経毒性と関連付けられる転帰を低減させる。一部の態様では、当該方法は、ベータアミロイド（Ａβ）、グルタミン酸、および酸素ラジカル等の神経毒性と関連付けられる因子のレベルを低減させる。

【0479】

一部の実施形態では、毒性の転帰は、用量制限毒性（ＤＬＴ）である。一部の実施形態では、毒性転帰は、用量制限毒性の非存在である。一部の実施形態では、用量制限毒性（ＤＬＴ）は、特定の毒性を評価するための任意の公知のもしくは公開されているガイドライン、例えば上記で記載され、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）のＣｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ（ＣＴＣＡＥ）バージョン４．０を含むいずれかによって記載または評価されるように、任意のグレード３以上の毒性として定義される。一部の実施形態では、用量規制毒性（ＤＬＴ）は、細胞療法（例えば、Ｔ細胞療法）および／または化合物Ｃの投与後に、下記に記載される事象のいずれかが生じるときと定義され、事象は、ａ）発熱性好中球減少症；ｂ）約７日間または約７日間超続くグレード４の好中球減少症；ｃ）臨床的に重大な出血を伴うグレード３または４の血小板減少症；およびｄ）２４時間超続くグレード４の血小板減少症を含む。

【0480】

一部の実施形態では、提供される実施形態は、例えば提供される併用療法を踏まえて、および／または提供される製造品もしくは組成物を用いてＴ細胞の用量を投与した場合に観察される、毒性、例えばＣＲＳもしくは神経毒性または重篤なＣＲＳまたは神経毒性、例えばグレード３以上のＣＲＳあるいは神経毒性の低い割合またはそれを発症する低いリスクをもたらす。一部の事例では、このことは、外来患者としての細胞療法の投与を可能にする。一部の実施形態では、提供される方法を踏まえて、および／または提供される製造品もしくは組成物を用いた細胞療法、例えばＴ細胞（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）の用量の投与は、外来患者として実施されるか、または対象に入院を、例えば一泊の滞在を要する入院を求めない。

【0481】

一部の態様では、外来患者として治療された対象を含む、提供される方法を踏まえて、および／または提供される製造品もしくは組成物を用いて、細胞療法、例えばＴ細胞（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）の用量を投与した対象は、対象が例えば神経毒性もしくはＣＲＳの毒性の徴候または症状を示さない限りはあるいは示すまで、細胞用量の投与の前に、または投与とともに任意の特性を治療するための介入は投与されない。

【0482】

一部の実施形態では、外来患者として治療された対象を含む、細胞療法、例えばＴ細胞（例えば、ＣＡＲ＋Ｔ細胞）の用量を投与した対象が発熱を示す場合、対象は、発熱を下げるように治療を受けるようもしくは投与するように付与されるか、または指示される。一部の実施形態では、対象における熱は、ある特定の閾値温度もしくはレベルで、あるいはある特定の閾値温度またはレベルを上回る（あるいはある特定の閾値温度またはレベルで測定される）対象の体温として特徴付けられる。一部の態様では、閾値温度は、少なくとも低度の発熱と、少なくとも中程度の発熱と、および／または少なくとも高度の発熱と関連付けられる温度である。一部の実施形態では、閾値温度は、特定の温度または範囲である。例えば、閾値温度は、セ氏３８度、３９度、４０度、４１度、もしくは４２度で、またはその概数で、あるいは少なくともセ氏約３８度、３９度、４０度、４１度、もしくは４２度で、またはその概数であってもよく、および／またはセ氏３８度もしくはセ氏約３８度～セ氏３９度もしくはセ氏約３９度の範囲、セ氏３９度もしくはセ氏約３９度～セ氏４０度もしくはセ氏約４０度の範囲、セ氏４０度もしくはセ氏約４０度～セ氏４１度もしくはセ氏約４１度の範囲、またはセ氏４１度もしくはセ氏約４１度～セ氏４２度もしくはセ氏約４２度の範囲であり得る。

【0483】

一部の実施形態では、発熱を下げるよう設計された治療として、解熱剤を用いた治療が挙げられる。解熱剤として、発熱を下げる任意の薬剤、組成物、または成分、例えば解熱作用を有することが知られている多数の薬剤のうちの１つ、例えばＮＳＡＩＤ（例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、およびニメスリド）、アスピリン、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム、およびサリチル酸ナトリウム等のサリチル酸塩、パラセタモール、アセトアミノフェン、メタミゾール、ナブメトン、フェナキソン（Phenaxone）、アンチピリン、熱さまし（febrifuge）が挙げられ得る。一部の実施形態では、解熱剤は、アセトアミノフェンである。一部の実施形態では、アセトアミノフェンは、１２．５ｍｇ／ｋｇの用量で、経口でまたは静脈内に、最大４時間毎に投与することができる。一部の実施形態では、解熱剤は、イブプロフェンもしくはアスピリンであるか、またはイブプロフェンもしくはアスピリンを含む。

【0484】

一部の実施形態では、発熱が稽留熱である場合、対象は、毒性を治療するための代替治療が投与される。外来患者として治療された対処に関して、対象が稽留熱を有し、および／または稽留熱を有すると決定される場合、対象は病院へ戻るよう指示される。一部の実施形態では、対象（男性または女性）が、特定治療、例えば解熱剤、例えばＮＳＡＩＤまたはサリチル酸塩、例えばイブプロフェン、アセトアミノフェンまたはアスピリンによる治療等の発熱を下げるよう設計された治療後に、関連する閾値温度でまたは関連する閾値温度を上回って発熱を示す場合、かつ対象の発熱もしくは体温が下がらないか、または特定量分または特定量を上回って下がらない（例えば、１℃を上回って、一般に、約０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃分、または約０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃を上回って変動しない）場合に、対象は、稽留熱を有し、および／または稽留熱を有すると決定されるか、または稽留熱を有するとみなされる。例えば、対象（男性または女性）が、少なくともセ氏３８度もしくは少なくともセ氏約３８度または少なくとも３９度もしくは少なくともセ氏約３９度の発熱を示すか、あるいはそれを示すと決定され、発熱が、アセトアミノフェン等の解熱剤による治療後でさえ、６時間にわたって、８時間にわたって、または１２時間にわたって、または２４時間にわたって、０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃分、またはその概数分下がらないか、あるいは０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃を上回って、またはその概数を上回って下がらないか、あるいは１％、２％、３％、４％、もしくは５％分またはその概数分下がらない場合に、対象は、稽留熱を有するとみなされる。一部の実施形態では、解熱剤の投薬量は、例えば発熱または特定のタイプの発熱、例えば細菌またはウイルス感染、例えば対象において限局性または全身性感染と関連付けられる発熱を下げるのに通常有効な投薬量である。

【0485】

一部の実施形態では、対象（男性または女性）が、関連する閾値温度でまたは関連する閾値温度を上回って発熱を示す場合、かつ対象の発熱または体温が、約１℃分または約１℃を上回って変動せず、一般に、約０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃分、または約０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃を上回って変動しない場合に、対象は、稽留熱を有し、および／または稽留熱を有すると決定されるか、または稽留熱を有するとみなされる。ある特定量を上回るか、またはある特定量での変動のそのような非存在は概して、所与の期間にわたって測定される（例えば、２４時間、１２時間、８時間、６時間、３時間、または１時間の期間にわたって、これらは、発熱の第１の徴候または表示される閾値を上回る第１の温度から測定され得る）。例えば、一部の実施形態では、対象（男性または女性）が、少なくともセ氏３８度もしくはセ氏約３８度または少なくとも３９度もしくはセ氏約３９度の発熱を示し、発熱が、６時間にわたって、８時間にわたって、または１２時間にわたって、または２４時間にわたって、０．５℃、０．４℃、０．３℃、もしくは０．２℃分、またはその概数分より多く温度が変動しない場合に、対象は、稽留熱を示すとみなされるか、または決定される。

【0486】

一部の実施形態では、発熱は稽留熱であり、一部の態様では、対象は、対象が稽留熱を有すると決定された時点で、例えば、毒性を誘導する可能性を有する初期療法、例えば細胞療法、例えば、Ｔ細胞、例えばＣＡＲ＋Ｔ細胞の用量に続くそのような決定または第１のそのような決定の１、２、３、４、５時間または数時間以内に治療される。

【0487】

一部の実施形態では、毒性を治療するための１つまたはそれ以上の介入または薬剤、例えば毒性を標的化する療法は、例えば上述の実施形態のいずれかに従って測定される場合、対象が稽留熱を示すと決定もしくは確認された（例えば、示すと最初に決定または確認される）時点でまたは直後に投与される。一部の実施形態では、１つまたはそれ以上の毒性を標的化する療法は、そのような確認または決定のある一定期間内に、例えば、その３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、または８時間以内に投与される。

【0488】

Ｂ．血液学的毒性
一部の態様では、毒性転帰は、血小板減少症および／または好中球減少症等の血液学的毒性であるかまたはそれに関連するかまたはそれを指し示す。一部の事例では、血小板減少症および好中球減少症を含む血液学的な毒性は、有害事象共通用語規準（Common Terminology Criteria for Adverse Events）（バージョン４．０３；米国国立がん研究所（US National Cancer Institute）、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ、ＵＳＡ）に従って等級分けされる。一部の事例では、血小板減少症および／または好中球減少症等の血液学的な毒性は、化合物Ｃの投与の前に、その間におよびその後にモニターされる。一部の事例では、血小板減少症および／または好中球減少症等の血液学的な毒性は、化合物Ｃの各投与の前にモニターされる。一部の事例では、血小板減少症および／または好中球減少症等の血液学的な毒性は、化合物Ｃの投与後に少なくとも１、２、３、４、５、６または７日毎にモニターされる。

【0489】

一部の実施形態では、全血球の計数が行われて、好中球および血小板を含む、対象における白血球（白血球細胞）のレベルをモニターする。種々の方法を使用して、全血液細胞（ＣＢＣ）計数および／または白血球百分率計数を行うことができる。一部の実施形態では、血液学分析計が使用される。

【0490】

好中球減少症は、細菌および真菌感染症に対する罹患率増加を生じることが多い、血中好中球数の低減によって特徴付けされる。患者における好中球減少症の共通症状は、例えば、発熱、口内の痛み（mouth sore）および耳感染症を含む。顕著な好中球減少症に罹っている患者は、化膿性感染症、例えば、敗血症、皮膚蜂巣炎、肝臓膿瘍、フルンケル症、肺炎、口内炎、歯肉炎、直腸周囲炎症、結腸炎、副鼻腔炎および中耳炎を患うことが多い。

【0491】

一部の実施形態では、好中球絶対数（ＡＮＣ）が使用されて、好中球減少症のレベルを定義する。ＡＮＣは、全血球数の構成成分から計算することができる。一部の実施形態では、好中球減少症の重症度は、血液１マイクロリットル当たりの細胞で測定された好中球絶対数（ＡＮＣ）に基づき分類される：ａ）軽度の好中球減少症（１０００～１５００細胞／ｍＬ）；ｂ）中等度の好中球減少症（グレード３；５００～１０００細胞／ｍＬ）；ｃ）重度の好中球減少症（グレード４；＜５００細胞／ｍＬ）。一部の実施形態では、好中球減少症は、表５に示す基準に従って等級分けすることができる。重度の好中球減少症に罹っている対象は、感染症の重度のリスクを有することが多い。

【表5】

【0492】

一部の事例では、好中球減少症は、発熱性好中球減少症（好中球減少性発熱または好中球減少性敗血症とも呼ばれる）である。発熱性好中球減少症は、患者が３８℃を超える体温および低レベルの好中球または好中球減少症を有するときに生じる。一部の実施形態では、発熱性好中球減少症は、表６に示す基準に従って等級分けすることができる。

【表6】

【0493】

一部の実施形態では、対象は、血小板減少症についてモニターされる。血小板減少症は、１マイクロリットル（μＬ）当たり１５０，０００個未満の細胞の血小板数によって特徴付けされる。特に、より重度のグレードを有する患者の間での、血小板減少症の提示は、出血、出血斑、点状出血、紫斑および脾機能亢進を含むことができる。血小板減少症は、グレード１の血小板減少症（すなわち、７５，０００～１５０，０００／μＬの血小板数）、グレード２（すなわち、５０，０００～＜７５，０００／μＬの血小板数）、グレード３（２５，０００～＜５０，０００／μＬの血小板数）またはグレード４（すなわち、２５，０００／μＬ未満の血小板数）として特徴付けることができる。

【0494】

提供される方法の一部の実施形態では、対象が、血液学的な毒性、例えば、血小板減少症および／もしくは好中球減少症またはそれらの特定のグレードを示すと決定される場合、化合物Ｃとの併用療法を変更することができる。一部の態様では、化合物Ｃの投与後に、対象が、グレード３以上の血小板減少症；グレード３の好中球減少症；持続する（少なくとも３、５または７日間を超える等）グレード３の好中球減少症；グレード４の好中球減少症；グレード３以上の発熱性好中球減少症に罹っている場合、併用療法は変更される。一部の実施形態では、毒性の徴候または症状が消散、低下または低減されるまで、化合物Ｃの投与は、永久に停止されるかまたは保留される。ＣＢＣまたは白血球百分率解析等により、対象の継続的なモニタリングを行って、毒性の１つまたはそれ以上の徴候または症状を評価することができる。一部の事例では、毒性が消散するかまたは低減される場合、化合物Ｃの投与は、併用療法を保留する前と同一用量もしくは投薬レジメンで、より低いもしくは低減された用量で、および／またはより低頻度の投薬を伴う投薬レジメンにおいて再開することができる。一部の実施形態では、併用療法を再開する実例において、用量は、少なくともまたは少なくとも約または約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％または６０％低下または低減される。一部の実施形態では、細胞療法を保留する前の用量が０．３ｍｇである場合、用量は、０．２ｍｇに低減される。一部の態様では、血液学的な毒性が、併用療法の保留が４週間を超えるほどの重症度のものである場合、併用療法は、永久に中断することができる。

【0495】

一部の実施形態では、１つまたはそれ以上の薬剤を対象に投与して、血液学的な毒性に関連する１つまたはそれ以上の症状を治療、緩解または低下することができる。一部の事例では、血液学的な毒性が改善するまで、骨髄球性増殖因子、例えば、Ｇ－ＣＳＦまたはＧＭ－ＣＳＦが対象に投与される。そのような療法の例は、フィルグラスチムまたはペグフィルグラスチムを含む。一部の態様では、そのような薬剤は、いずれかの持続時間のいずれかのグレード３以上の好中球減少症を含む重度の好中球減少症または発熱性好中球減少症を経験している対象に投与される。

【0496】

Ｃ．非血液学的毒性
一部の態様では、毒性転帰は、化合物Ｃの投与後の１つまたはそれ以上の非血液学的毒性であるかまたはそれに関連するかまたはそれを指し示す。非血液学的毒性の例は、腫瘍フレア反応、感染症、腫瘍溶解症候群、心臓検査室異常、血栓塞栓性事象（深部静脈血栓症および肺塞栓症等）および／または肺臓炎を含むがこれらに限定されない。

【0497】

一部の態様では、非血液学的毒性は、腫瘍フレア反応（ＴＦＲ）（偽性進行（pseudoprogression）と称される場合もある）である。ＴＦＲは、低グレード発熱、圧痛および腫脹、びまん性発疹、ならびに一部の事例では、末梢血リンパ球数の増加を伴うことが多い、リンパ節、脾臓および／または肝臓を含む、疾患に罹っている部位のサイズの突発性増加である。一部の実施形態では、ＴＦＲは、有害事象共通用語規準（バージョン３．０；米国国立がん研究所、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ、ＵＳＡ）に従って等級分けされる。一部の実施形態では、ＴＦＲは、次の通りに等級分けされる：グレード１、機能に干渉しない軽度の疼痛；グレード２、中等度の疼痛、機能に干渉するが日常生活動作（ＡＤＬ）に干渉しない疼痛または鎮痛薬；グレード３、重度の疼痛、機能に干渉しＡＤＬに干渉する疼痛または鎮痛薬；グレード４、身体障害性；グレード５、死亡。一部の実施形態では、コルチコステロイド、ＮＳＡＩＤおよび／または麻薬性鎮痛薬等、１つまたはそれ以上の薬剤を対象に投与して、ＴＦＲに関連する１つまたはそれ以上の症状を治療、緩解または低下することができる。

【0498】

一部の態様では、非血液学的毒性は、腫瘍溶解症候群（ＴＬＳ）である。一部の実施形態では、ＴＬＳは、Ｃａｉｒｏ－Ｂｉｓｈｏｐ等級分け方式（Cairo and Bishop (2004) Br J Haematol, 127:3-11）によって指定される基準に従って等級分けすることができる。一部の実施形態では、対象に静脈内水分補給を与えて、高尿酸血症を低減させることができる。

【0499】

一部の実施形態では、対象は、ＥＣＧ、ＬＶＥＦのモニタリングならびにトロポニン－ＴおよびＢＮＰのレベルのモニタリング等により、心臓毒性についてモニターすることができる。一部の実施形態では、１つまたはそれ以上の心臓症状を伴うトロポニン－Ｔおよび／またはＢＮＰのレベル上昇が観察される場合、化合物Ｃの保持または保留を必要とし得る可能性がある心臓毒性が生じ得る。

【0500】

提供される方法の一部の実施形態では、対象が、ＴＦＲもしくは他の非血液学的な毒性またはそれらの特定のグレード等の非血液学的な毒性を示すと決定される場合、化合物Ｃとの併用療法を変更することができる。一部の態様では、化合物Ｃの投与後に、対象が、グレード３以上の非血液学的な毒性、例えば、グレード３以上のＴＦＲに罹っている場合、併用療法は変更される。一部の実施形態では、毒性の徴候または症状が消散、低下または低減されるまで、化合物Ｃの投与は、永久に停止されるかまたは保留される。対象の継続的なモニタリングを行って、毒性の１つまたはそれ以上の徴候または症状を評価することができる。一部の事例では、毒性が消散するかまたは低減される場合、化合物Ｃの投与は、併用療法を保留する前と同一用量もしくは投薬レジメンで、より低いもしくは低減された用量で、および／またはより低頻度の投薬を伴う投薬レジメンにおいて再開することができる。一部の実施形態では、併用療法を再開する実例において、用量は、少なくともまたは少なくとも約または約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％または６０％低下または低減される。一部の実施形態では、細胞療法を保留する前の用量が０．３ｍｇである場合、用量は、０．２ｍｇに低減される。一部の実施形態では、用量低減後であってもグレード３の毒性が再発する場合、用量をさらに低減させることができる。一部の実施形態では、用量低減後であってもグレード４の毒性が再発する場合、併用療法を永久に中断することができる。一部の態様では、血液学的な毒性が、併用療法の保留が４週間を超えるほどの重症度のものである場合、併用療法は、永久に中断することができる。

【0501】

Ｖ．製造品およびキット
化合物Ｃ、および免疫療法の構成成分、例えば、抗体もしくはその抗原結合性断片またはＴ細胞療法、例えば、操作された細胞を含有する製造品、ならびに／またはその組成物も提供される。製造品は、容器および容器上もしくは容器と関連付けられるラベルまたは添付文書を含み得る。適切な容器として、例えば、瓶、バイアル、シリンジ、ＩＶ溶液バッグ等が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。容器は、一部の実施形態では、それ単独で存在するか、あるいは状態を治療、予防および／または診断するのに有効な別の組成物と組み合わせられる組成物を保持する。一部の実施形態では、容器は、滅菌アクセスポートを有する。例示的な容器として、静脈内溶液バッグ、バイアル、注射用の針によって突き刺すことが可能な栓を含むバイアル、または経口投与される薬剤用の瓶もしくはバイアルが挙げられる。ラベルまたは添付文書は、組成物が疾患または状態を治療するのに使用されることを示し得る。

【0502】

製造品は、（ａ）その中に含有される組成物を有する第１の容器であって、組成物が、免疫療法、例えば、Ｔ細胞療法に使用される操作された細胞を含む、第１の容器；および（ｂ）その中に含有される組成物を有する第２の容器であって、組成物が、化合物Ｃを含む、第２の容器を含むことができる。

【0503】

一部の実施形態では、第１の容器は、第１の組成物および第２の組成物を含み、第１の組成物は、免疫療法、例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞療法に使用される操作された細胞の第１の集団を含み、第２の組成物は、操作された細胞の第２の集団を含み、第２の集団は、第１の集団とは別々に操作され得る、例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞療法に使用される。一部の実施形態では、第１および第２の細胞組成物は、定義された比の操作された細胞、例えば、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞（例えば、１：１比のＣＤ４＋：ＣＤ８＋ＣＡＲ＋Ｔ細胞）を含有する。

【0504】

製造品は、組成物が特定の状態を治療するのに使用され得ることを示す添付文書をさらに含み得る。あるいは、またはさらには、製造品は、薬学的に許容されるバッファーを含む別のまたは同一容器をさらに含み得る。製造品は、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、および／またはシリンジ等の他の材料をさらに含み得る。

【0505】

ＶＩ．定義
別記されない限り、本明細書で使用される技術分野の用語、表記法ならびに他の技術および化学用語または用語法は全て、特許請求される主題が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有すると意図される。一部の事例では、一般に理解される意味を有する用語は、明瞭のために、および／またはすぐに参照するために本明細書で定義されており、本明細書中にそのような定義を包含することは、当技術分野で一般に理解されるものと実質的な差を表すと必ずしも解釈されるべきではない。

【0506】

本明細書で使用される場合、「対象」は、哺乳動物、例えば、ヒトまたは他の動物であり、典型的には、ヒトである。一部の実施形態では、化合物Ｃ、操作された細胞または組成物が投与される対象、例えば、患者は、哺乳動物、典型的には霊長類、例えば、ヒトである。一部の実施形態では、霊長類は、サルまたは類人猿である。対象は、雄または雌となることができ、乳児、若年期、青年期、成体および老齢期対象を含むいずれか適した年齢となることができる。一部の実施形態では、対象は、非霊長類哺乳動物、例えば、齧歯類である。

【0507】

本明細書で使用される場合、「治療」（および、「治療する」または「治療すること」等のそれらの文法的変形）は、疾患もしくは状態もしくは障害、またはそれらに関係づけられる症状、有害効果もしくは転帰、もしくは表現型の完全または部分的な緩解または低減を指す。治療の望ましい効果として、疾患の発生もしくは再発の予防、症状の軽減、任意の直接的もしくは間接的な病理学的帰結の減少、転移の予防、疾患進行の割合の減少、疾患状態の寛解または緩和、および軽減または予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。この用語は、疾患の完全な治癒、または任意の症状の完全な排除、または全ての症状もしくは転帰に対する効果を意味しない。

【0508】

本明細書で使用される場合、「疾患の発症の遅延」は、疾患（例えば、Ｂ細胞悪性病変）の発症を先送り、妨害し、遅らせ、減速し、安定化し、抑制し、および／または先延ばしすることを意味する。この遅延は、治療される疾患および／または個体の病歴に応じて、様々な長さの時間であり得る。明らかな通り、十分なまたは著しい遅延は、実際には、個体が疾患を発症しないという点において、予防を包含することができる。例えば、後期のＢ細胞リンパ腫、例えば、転移の発症は、遅延され得る。

【0509】

「予防すること」は、本明細書で使用される場合、疾患にかかりやすい素因があり得るが、いまだ疾患とは診断されていない対象における疾患の発生または再発に関して予防を提供することを含む。一部の実施形態では、提供される細胞および組成物は、疾患の発症を遅延させるか、または疾患の進行を遅らせるのに使用される。

【0510】

本明細書で使用される場合、機能または活性を「抑制する」ことは、目的の条件もしくはパラメーターを除いて他の状況では同一条件比較した場合に、あるいは別の条件と比較した場合に、機能または活性を低減することである。例えば、腫瘍成長を抑制する細胞は、細胞の非存在下での腫瘍の成長速度と比較して、腫瘍の成長速度を低減させる。

【0511】

薬剤、例えば、操作された細胞または抗ＰＤ－Ｌ１もしくは抗原結合性断片、またはその医薬製剤もしくは組成物の「有効量」は、投与の状況では、所望の結果、例えば、治療的または予防的結果を達成するのに必要な投薬量／量で、また必要な期間で有効な量を指す。

【0512】

薬剤、例えば、操作された細胞または抗ＰＤ－Ｌ１もしくは抗原結合性断片、またはその医薬製剤もしくは組成物の「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するのに、疾患、状態もしくは障害の治療および／または治療の薬物動態もしくは薬力学的効果のために、必要な投薬量でかつ必要な期間で有効な量を指す。治療有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに投与される免疫調節ポリペプチドまたは操作された細胞等の因子に応じて多様であり得る。一部の実施形態では、提供される方法は、有効量、例えば、治療有効量で、化合物Ｃ、操作された細胞（例えば、細胞療法）または組成物を投与することを伴う。

【0513】

「予防有効量」は、所望の予防的結果を達成するのに必要な投薬量でかつ必要な期間で有効な量を指す。予防的用量は、疾患のより初期段階の前に、またはより初期段階で対象において使用されるため、通常、予防有効量は、治療有効量未満であるが、必ずしもそうとは限らない。

【0514】

「医薬製剤」という用語は、中に含有される有効成分の生物活性が有効になることを可能にするような形態で存在し、また、製剤が投与される対象にとって許容されないほど毒性であるさらなる構成成分を含有しない調製物を指す。

【0515】

「薬学的に許容される担体」は、対象にとって無毒性である有効成分以外の医薬製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体として、バッファー、賦形剤、安定剤、または防腐剤が挙げられるが、これらに限定されない。

【0516】

本明細書に記載されている場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他の状況を指示しない限り、複数形を含む。例えば、「ａ」または「ａｎ」は、「少なくとも１つ」または「１つまたはそれ以上」を意味する。本明細書中に記載される態様および変形は、態様および変形「からなる」および／または「から本質的になる」ことを含むと理解されよう。

【0517】

本開示全体にわたって、特許請求される主題の各種態様は、範囲形式で提示される。範囲形式での説明は、単に利便性および簡潔さのためであると理解されるべきであり、特許請求される主題の範囲に対する融通の利かない限定と解釈されるべきではない。したがって、範囲の説明は、考え得る部分範囲ならびにその範囲内の個々の数値全てを具体的に開示したとみなされるべきである。例えば、値の範囲が提供される場合、その範囲の上限と下限の間に介在する値それぞれ、およびその記載範囲における任意の他の記載値または介在値が特許請求される主題内に包含されることが理解されよう。これらのより小さな範囲の上限および下限は独立して、より小さな範囲に含まれてもよく、また記載範囲において任意の具体的に排除される限界を受けて、特許請求される主題内に包含される。記載範囲が限界の一方または両方を含む場合、それらの含まれる限界の一方または両方を排除する範囲もまた、特許請求される主題に含まれる。このことは、範囲の幅に関わらず適用される。

【0518】

「約」という用語は、本明細書で使用される場合、この技術分野の当業者であれば容易に分かる各々値の通常の誤差範囲を指す。本明細書中の「約」の値またはパラメーターについての言及は、それ自体がその値またはパラメーターを対象とする実施形態を含む（および記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、「Ｘ」の説明を含む。

【0519】

本明細書で使用される場合、ヌクレオチドまたはアミノ酸が、配列表において記述されるような開示される配列におけるヌクレオチドまたはアミノ酸位置「に相当する」という記述は、ＧＡＰアルゴリズム等の標準的なアラインメントアルゴリズムを使用して同一性を最大にするための、開示される配列とのアラインメント時に同定されるヌクレオチドまたはアミノ酸位置を指す。配列をアラインすることにより、当業者は、例えば、ガイドの通りに、保存されたおよび同一のアミノ酸残基を使用して、対応する残基を同定することができる。概して、相当する位置を同定するためには、アミノ酸の配列は、最高次数のマッチが得られるようにアラインされる（例えば、Computational Molecular Biology, Lesk, A.M., ed., Oxford University Press, New York, 1988；Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., ed., Academic Press, New York, 1993；Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M., and Griffin, H.G., eds., Humana Press, New.Jersey, 1994；Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987；およびSequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991；Carrillo et al.(1988) SIAM J Applied Math 48: 1073を参照）。

【0520】

「ベクター」という用語は、本明細書で使用される場合、ベクターが連結される別の核酸を伝播することが可能な核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクターならびにベクターが導入された宿主細胞のゲノムに取り込まれるベクターを含む。ある特定のベクターは、それらが作動可能に連結した核酸の発現を誘導することが可能である。そのようなベクターは、「発現ベクター」として本明細書で言及される。ベクターの中には、ウイルスベクター、例えばレトロウイルス、例えばガンマレトロウイルスおよびレンチウイルスベクターが存在する。

【0521】

「宿主細胞」、「宿主細胞株」、および「宿主細胞培養物」という用語は、言い換え可能に使用され、そのような細胞の子孫を含む外因性核酸が導入された細胞を指す。宿主細胞は、「形質転換体」および「形質転換細胞」を含み、それらは、継代数に関係なく、初代形質転換細胞およびそれに由来する子孫を含む。子孫は、親細胞に対して、核酸内容が完全に一致していなくてもよく、突然変異を含有してもよい。元の形質転換細胞に関してスクリーニングもしくは選択される場合に同一機能または生物活性を有する突然変異子孫は、本発明に含まれる。

【0522】

本明細書で使用される場合、細胞または細胞の集団が、特定のマーカーに関して「陽性である」という記載は、特定のマーカー、通常は表面マーカーの細胞上または細胞中での検出可能な存在を指す。表面マーカーに言及する場合、当該用語は、フローサイトメトリーによって、例えばマーカーに特異的に結合する抗体を染色することと、前記抗体を検出することとによって検出される場合の表面発現マーカーの存在を指し、ここで、染色は、他の状況では同一条件下でアイソタイプ適合制御を用いて同一手順を行う、検出される染色を実質的に上回るレベルで、および／またはマーカーに関して陽性であることが公知の細胞に関するレベルと実質的に同様のレベルで、および／またはマーカーに関して陰性であることが公知の細胞に関するレベルより実質的に高いレベルで、フローサイトメトリーによって検出可能である。

【0523】

本明細書で使用される場合、細胞または細胞の集団が特定のマーカーに関して「陰性である」という記載は、特定のマーカー、通常表面マーカーの細胞上または細胞中での実質的に検出可能な存在の非存在を指す。表面マーカーに言及する場合、当該用語は、フローサイトメトリーによって、例えば、マーカーに特異的に結合する抗体で染色することと、前記抗体を検出することとによって、検出される場合の表面発現の非存在を指し、ここで、染色は、他の状況では同一条件下でアイソタイプ適合性制御を用いて同一手順を行う、検出される染色を実質的に上回るレベルで、および／またはマーカーに関して陽性であることが公知の細胞に関するレベルより実質的に低いレベルで、および／またはマーカーに関して陰性であることが公知の細胞に関するレベルと比較した場合に実質的に同様のレベルで、フローサイトメトリーによって、検出されない。

【0524】

本明細書で使用される場合、「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」および「パーセント同一性」は、アミノ酸配列（参照ポリペプチド配列）に関して使用される場合、配列をアラインして、必要であればギャップを導入して、最大パーセント配列同一性を達成した後の、また配列同一性の一部としていかなる保存的置換も考慮しない、参照ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である候補配列（例えば、対象抗体または断片）におけるアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的でのアラインメントは、当技術分野の技能範囲内の様々な方法で、例えば、公開されているコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長にわたって最大アラインメントを達成するのに必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列をアラインするための適切なパラメーターを決定することができる。

【0525】

本アミノ酸置換は、ポリペプチド中の１つのアミノ酸を、別のアミノ酸で置き換えることを含み得る。置換は、保存的アミノ酸置換または非保存的アミノ酸置換であり得る。アミノ酸置換は、目的の結合性分子、例えば抗体に導入されてもよく、産物は、所望の活性、例えば抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善に関してスクリーニングされ得る。

【0526】

アミノ酸は一般に、次の共通側鎖特性に従ってグループ化することができる：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向性に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

【0527】

一部の実施形態では、保存的置換は、これらのクラスの１つのあるメンバーの、同一クラスの別のメンバーに代えた交換を伴うことができる。一部の実施形態では、非保存的アミノ酸置換は、これらのクラスの１つのあるメンバーの、別のクラスに代えた交換を伴うことができる。

【0528】

本明細書で使用される場合、組成物は、細胞を含む、セレブロンを標的化する２つ以上の製品、物質または化合物のいずれかの混合物を指す。組成物は、溶液、懸濁液、液体、粉末、ペースト、水性、非水性またはそれらの任意の組合せであり得る。

【0529】

本明細書で使用される場合、「対象」は、哺乳動物、例えば、ヒトまたは他の動物であり、典型的には、ヒトである。

【0530】

ＶＩＩ．例示的な実施形態
提供される実施形態の中でも、次のものを特に挙げる：
１．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、
（ｉ）分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含む細胞療法であって、併用療法の１日目に投与される細胞療法；および
（ｉｉ）下記構造：

【化16】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体であって、化合物は、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）に開始される、方法。
２．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化17】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、週１回以下で投与される複数の間欠的用量として投与され、各用量は、０．１ｍｇまたは約０．１ｍｇ～０．６ｍｇまたは約０．６ｍｇ（上限下限値を含む）であり、化合物の投与は、併用療法の１日目～２９日目の間（上限下限値を含む）開始される、方法。
３．化合物の投与が、１日目～２２日目の間（上限下限値を含む）に開始される、実施形態１または実施形態２に記載の方法。
４．化合物の投与が、１日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される、実施形態１または実施形態２に記載の方法。
５．化合物の投与が、８日目～１５日目の間（上限下限値を含む）に開始される、実施形態１～４のいずれかに記載の方法。
６．化合物の投与が、１日目または約１日目に開始される、実施形態１～４のいずれかに記載の方法。
７．化合物の投与が、８日目または約８日目に開始される、実施形態１～５のいずれかに記載の方法。
８．化合物の投与が、１５日目または約１５日目に開始される、実施形態１～５のいずれかに記載の方法。
９．複数の間欠的用量の各用量が同一である、実施形態１～８のいずれかに記載の方法。
１０．化合物が、週１回投与される、実施形態１～９のいずれかに記載の方法。
１１．化合物が、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される、実施形態１～１０のいずれかに記載の方法。
１２．化合物が、２週間毎に１回投与される、実施形態１～９のいずれかに記載の方法。
１３．化合物が、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される、実施形態１～９および１２のいずれかに記載の方法。
１４．化合物が、細胞療法の投与の後に少なくとも１２週間にわたり投与される、実施形態１～１３のいずれかに記載の方法。
１５．化合物が、細胞療法の投与の後に最大１２週間にわたり投与される、実施形態１～１３のいずれかに記載の方法。
１６．化合物が、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、実施形態１～４、６、９～１１、１４および１５のいずれかに記載の方法。
１７．化合物が、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、実施形態１～５、７、９～１１、１４および１５のいずれかに記載の方法。
１８．化合物が、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与される、実施形態１～５、８～１１、１４および１５のいずれかに記載の方法。
１９．化合物が、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与される、実施形態１～５、７、９および１２～１５のいずれかに記載の方法。
２０．化合物の用量が、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇ～０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇ（上限下限値を含む）である、実施形態１～１９のいずれかに記載の方法。
２１．化合物の用量が、０．４ｍｇまたは約０．４ｍｇである、実施形態１～２０のいずれかに記載の方法。
２２．化合物の用量が、０．４ｍｇ未満である、実施形態１～２０のいずれかに記載の方法。
２３．化合物の用量が、０．３ｍｇまたは約０．３ｍｇである、実施形態１～２０および２２のいずれかに記載の方法。
２４．化合物の用量が、０．２ｍｇまたは約０．２ｍｇである、実施形態１～２０および２２のいずれかに記載の方法。
２５．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化18】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法。
２６．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化19】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法。
２７．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化20】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法。
２８．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化21】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．４ｍｇである、方法。
２９．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化22】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、１４日毎に１回（Ｑ１４Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、２２、３６、５０、６４および７８日目に投与され、各用量は、０．３ｍｇである、方法。
３０．リンパ腫を治療する方法であって、リンパ腫に罹っている対象に、下記構造：

【化23】

を有する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンである化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、共結晶、クラスレートもしくは多形体を投与する工程を含み、
化合物は、分化抗原群１９（ＣＤ１９）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞を含む操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法との併用療法において投与され、Ｔ細胞療法は、併用療法の１日目に投与され；
化合物は、７日毎に１回（Ｑ７Ｄ）投与される複数の間欠的用量として投与され、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８および８５日目に投与され、各用量は、０．２ｍｇである、方法。
３１．化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの薬学的に許容される塩であるかまたはそれを含む、実施形態１～３０のいずれかに記載の方法。
３２．化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの水和物であるかまたはそれを含む、実施形態１～３０のいずれかに記載の方法。
３３．化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンの溶媒和物であるかまたはそれを含む、実施形態１～３０のいずれかに記載の方法。
３４．化合物が、（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオンであるかまたはそれを含む、実施形態１～３０のいずれかに記載の方法。
３５．化合物の投与の開始時に、対象が、細胞療法の投与後に重度の毒性を示さない、実施形態１～３４のいずれかに記載の方法。
３６．重度の毒性が、重度のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、適宜、グレード３以上のＣＲＳ、長期のグレード３以上のＣＲＳ、グレード４のＣＲＳもしくはグレード５のＣＲＳである；および／または
重度の毒性が、重度の神経毒性、適宜、グレード３以上の神経毒性、長期のグレード３の以上の神経毒性、グレード４の神経毒性もしくはグレード５の神経毒性である、
実施形態３５に記載の方法。
３７．対象が、化合物の投与後に毒性、適宜、血液学的毒性を示す場合、化合物の投与が保留される、および／または化合物の用量が改変、適宜低下される、実施形態１～３６のいずれか１つに記載の方法。
３８．毒性が、重度の血小板減少症、適宜、グレード４の血小板減少症または長期のグレード４の血小板減少症である、実施形態３７に記載の方法。
３９．毒性が、重度の好中球減少症、適宜、グレード４の好中球減少症、長期のグレード４の好中球減少症、または発熱性好中球減少症、適宜、グレード３以上の発熱性好中球減少症もしくは長期のグレード３以上の発熱性好中球減少症である、実施形態３７に記載の方法。
４０．対象がもはや毒性を示さなくなった後に、化合物の投与が再開される、実施形態３７～３９のいずれかに記載の方法。
４１．リンパ腫が、Ｂ細胞悪性病変である、実施形態１～４０のいずれか１つに記載の方法。
４２．リンパ腫が、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）であり、適宜、ＮＨＬが、侵襲性ＮＨＬ；びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）；ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ、適宜、形質転換した低悪性度；ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ－ＮＯＳ；Ｔ細胞／組織球リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）；濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、適宜、濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ（ＦＬ３Ｂ）；ならびに／またはＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／もしくはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（二重／三重ヒット）を含む、実施形態１～４１のいずれかに記載の方法。
４３．ＣＤ１９が、ヒトＣＤ１９である、実施形態１～４２のいずれかに記載の方法。
４４．キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）が、ＣＤ１９に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ＩＴＡＭを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態１～４３のいずれかに記載の方法。
４５．細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖、適宜ヒトＣＤ３－ゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む、実施形態４４に記載の方法。
４６．キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）が、共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、実施形態４４または実施形態４５に記載の方法。
４７．共刺激シグナル伝達領域が、ＣＤ２８または４－１ＢＢ、適宜ヒトＣＤ２８またはヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む、実施形態４６に記載の方法。
４８．共刺激シグナル伝達領域が、ヒト４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む、実施形態４６または実施形態４７に記載の方法。
４９．ＣＡＲが、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢ、適宜ヒト４－１ＢＢであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含み；適宜、ＣＡＲが、膜貫通ドメインおよびｓｃＦｖの間のスペーサーをさらに含む、実施形態１～４８のいずれかに記載の方法。
５０．ＣＡＲが、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；膜貫通ドメインと；適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン、適宜ヒト４－１ＢＢシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと；適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、適宜ヒトＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインである、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態１～４８のいずれかに記載の方法。
５１．ＣＡＲが、順番に、ＣＤ１９に特異的なｓｃＦｖと；スペーサーと；膜貫通ドメインと、適宜、４－１ＢＢシグナル伝達ドメインである、共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインと、適宜、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む、一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態１～４８のいずれかに記載の方法。
５２．スペーサーが、免疫グロブリンヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなるか、または約１５アミノ酸以下を含むポリペプチドスペーサーである、実施形態４９～５１のいずれかに記載の方法。
５３．スペーサーが、免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４ヒンジもしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなる、および／または約１５アミノ酸以下を含む、実施形態４９～５２のいずれかに記載の方法。
５４．スペーサーが、１２アミノ酸もしくは約１２アミノ酸の長さである、および／または免疫グロブリンヒンジ、適宜ＩｇＧ４もしくはその改変バージョンの全てもしくは部分を含むかもしくはそれからなる、実施形態５２または実施形態５３に記載の方法。
５５．スペーサーが、配列番号１の配列、配列番号２、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４によってコードされる配列、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有する前述のいずれかのバリアントを有するかまたはそれからなる、実施形態４９～５４のいずれかに記載の方法。
５６．共刺激分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインが、配列番号１２、またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む、実施形態４９～５５のいずれかに記載の方法。
５７．一次シグナル伝達ＩＴＡＭ含有分子に由来する細胞質シグナル伝達ドメインが、配列番号１３もしくは１４もしくは１５またはそれに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するそのバリアントを含む、実施形態４９～５６のいずれかに記載の方法。
５８．ｓｃＦｖが、ＲＡＳＱＤＩＳＫＹＬＮ（配列番号３５）のＣＤＲＬ１配列、ＳＲＬＨＳＧＶ（配列番号３６）のＣＤＲＬ２配列および／もしくはＧＮＴＬＰＹＴＦＧ（配列番号３７）のＣＤＲＬ３配列ならびに／またはＤＹＧＶＳ（配列番号３８）のＣＤＲＨ１配列、ＶＩＷＧＳＥＴＴＹＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号３９）のＣＤＲＨ２配列および／もしくはＹＡＭＤＹＷＧ（配列番号４０）のＣＤＲＨ３配列を含む、実施形態４９～５７のいずれかに記載の方法。
５９．ｓｃＦｖが、ＦＭＣ６３の可変重鎖領域およびＦＭＣ６３の可変軽鎖領域、ならびに／またはＦＭＣ６３のＣＤＲＬ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ２配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＬ３配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ１配列、ＦＭＣ６３のＣＤＲＨ２配列およびＦＭＣ６３のＣＤＲＨ３配列を含み、適宜、ｓｃＦｖが、配列番号４１を含むＶＨおよび配列番号４２として記載されるアミノ酸配列を含むＶＬを含む、実施形態４９～５８のいずれかに記載の方法。
６０．ｓｃＦｖが、配列番号４３に記載されるアミノ酸の配列を有する、実施形態４９～５８のいずれかに記載の方法。
６１．操作された細胞の用量が、１×１０^５個もしくは約１×１０^５個～５×１０^８個もしくは約５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^６個もしくは約１×１０^６個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０^６個もしくは約５×１０^６個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０^７個もしくは約１×１０^７個～２．５×１０^８個もしくは約２．５×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞または５×１０^７個もしくは約５×１０^７個～１×１０^８個もしくは約１×１０^８個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞（それぞれ上限下限値を含む）を含む、実施形態１～６０のいずれかに記載の方法。
６２．操作された細胞の用量が、少なくとも１×１０^５個もしくは少なくとも約１×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^５個もしくは少なくとも約２．５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^５個もしくは少なくとも約５×１０^５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^６個もしくは少なくとも約１×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^６個もしくは少なくとも約２．５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^６個もしくは少なくとも約５×１０^６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^７個もしくは少なくとも約１×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^７個もしくは少なくとも約２．５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも５×１０^７個もしくは少なくとも約５×１０^７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも１×１０^８個もしくは少なくとも約１×１０^８個のＣＡＲ発現細胞、少なくとも２．５×１０^８個もしくは少なくとも約２．５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞または少なくとも５×１０^８個もしくは少なくとも約５×１０^８個のＣＡＲ発現細胞を含む、実施形態１～６１のいずれかに記載の方法。
６３．操作された細胞の用量が、１×１０^８個または約１×１０^８個のＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む、実施形態１～６２のいずれかに記載の方法。
６４．操作された細胞の用量が、非経口、適宜、静脈内投与される、実施形態１～６３のいずれかに記載の方法。
６５．Ｔ細胞が、対象から得られる初代Ｔ細胞である、実施形態１～６４のいずれかに記載の方法。
６６．Ｔ細胞が、対象にとって自家である、実施形態１～６５のいずれかに記載の方法。
６７．Ｔ細胞が、対象にとって同種異系である、実施形態１～６４のいずれかに記載の方法。
６８．操作された細胞の用量が、ＣＡＲを発現するＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＡＲを発現するＣＤ８＋Ｔ細胞を含み、用量の投与が、複数の別々の組成物を投与する工程を含み、前記複数の別々の組成物が、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の一方を含む第１の組成物およびＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞の他方を含む第２の組成物を含む、実施形態１～６７のいずれかに記載の方法。
６９．第１の組成物および第２の組成物が、０～１２時間間隔、０～６時間間隔もしくは０～２時間間隔で投与されるか、または第１の組成物の投与および第２の組成物の投与が、同一の日に行われ、約０～約１２時間間隔、約０～約６時間間隔もしくは約０～２時間間隔で行われる；ならびに／あるいは
第１の組成物の投与の開始および第２の組成物の投与の開始が、約１分～約１時間間隔または約５分～約３０分間隔で行われる、
実施形態６８に記載の方法。
７０．第１の組成物および第２の組成物が、２時間以下、１時間以下、３０分以下、１５分以下、１０分以下または５分以下の間隔で投与される、実施形態６８または実施形態６９に記載の方法。
７１．第１の組成物が、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む、実施形態６８～７０のいずれかに記載の方法。
７２．第１の組成物が、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む、実施形態６８～７０のいずれかに記載の方法。
７３．第１の組成物が、第２の組成物の前に投与される、実施形態６８～７２のいずれかに記載の方法。
７４．細胞療法の投与の前に、対象が、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含むリンパ球枯渇療法でプレコンディショニングされている、実施形態１～７３のいずれか１つに記載の方法。
７５．細胞療法の投与の直前に、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミドの投与を含む、リンパ球枯渇療法を対象に投与する工程をさらに含む、実施形態１～７３のいずれか１つに記載の方法。
７６．リンパ球枯渇療法が、２～４日間、適宜、３日間にわたり毎日の、約２００～４００ｍｇ／ｍ^２、適宜、３００ｍｇ／ｍ^２または約３００ｍｇ／ｍ^２（上限下限値を含む）のシクロホスファミド、および／または約２０～４０ｍｇ／ｍ^２、適宜、３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む、またはリンパ球枯渇療法が、約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドの投与を含む、実施形態７４または実施形態７５に記載の方法。
７７．リンパ球枯渇療法が、３日間にわたり毎日の、３００ｍｇ／ｍ^２もしくは約３００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む；ならびに／または
リンパ球枯渇療法が、３日間にわたり毎日の、５００ｍｇ／ｍ^２もしくは約５００ｍｇ／ｍ^２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ^２のフルダラビンの投与を含む、
実施形態７４～７６のいずれか１つに記載の方法。
７８．対象がヒトである、実施形態１～７７のいずれか１つに記載の方法。
７９．方法に従って治療された対象の少なくとも３５％、少なくとも４０％または少なくとも５０％が、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、持続的である完全奏効（ＣＲ）、またはＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的であるＣＲを達成する；ならびに／あるいは
６ヶ月目までにＣＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％が、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保つ、ＣＲを保つ、および／または生存するまたは進行せずに生存する；ならびに／あるいは
方法に従って治療された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％または少なくとも７０％が、６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えてまたは９ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、客観的奏効（ＯＲ）を達成し、適宜、ＯＲが、持続的か、またはＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０もしくは９５％において持続的である；ならびに／あるいは
６ヶ月目までにＯＲを達成する対象の少なくとも６０、７０、８０、９０または９５％が、３ヶ月間にわたりもしくはそれを超えておよび／または６ヶ月間にわたりもしくはそれを超えて、奏効を保つまたは生存する、実施形態１～７８のいずれかに記載の方法。
８０．操作された細胞の用量の投与時にまたはその直前に、対象が、ＮＨＬのための１つまたはそれ以上の以前の療法、適宜、ＣＡＲを発現する操作された細胞の別の用量以外の１、２または３つの以前の療法による治療後の寛解に続いて再発したか、またはそれに対して不応性になる、実施形態４２～７９のいずれかに記載の方法。
８１．操作された細胞の用量の投与時にまたはその前に、
対象が、二重／三重ヒットリンパ腫であるか、もしくはそれに罹っていることが同定されている；
対象が、化学療法抵抗性リンパ腫、適宜、化学療法抵抗性ＤＬＢＣＬであるか、もしくはそれに罹っていることが同定されている；および／または
対象が、以前の療法に応答した完全寛解（ＣＲ）を達成していない、実施形態４２～８０のいずれかに記載の方法。
８２．化合物の投与が、
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型を反転し；
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させ；
対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞における疲弊表現型のレベルもしくは程度を低減させ；または
疲弊表現型を有する対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞のパーセンテージもしくは総数を低減させる、実施形態１～８１のいずれかに記載の方法。
８３．化合物の投与の開始が、細胞療法の投与後に行われ、化合物の投与またはその開始に続いて、対象が、前記対象におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞の抗原または腫瘍特異的活性または機能の回復またはレスキューを示し、適宜、前記回復、レスキュー、および／または前記化合物の投与の開始が、対象または対象の血液におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞が、疲弊した表現型を示した後の時点においてなされる、実施形態１～８２のいずれかに記載の方法。
８４．化合物の投与が、
（ａ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露後に、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞の抗原特異的もしくは抗原受容体駆動活性の増加をもたらすか；または
（ｂ）前記化合物の前記投与の非存在と比較して、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤へのＴ細胞の曝露後に、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい、対象におけるナイーブもしくは疲弊していないＴ細胞における疲弊表現型の発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させるか；または
（ｃ）前記対象の前記投与の非存在と比較して、対象における前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含んでいてもよい疲弊したＴ細胞における疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む、実施形態１～８３のいずれかに記載の方法。
８５．化合物の投与が、（ｉ）活性の前記増加をもたらし、（ｉｉ）前記疲弊表現型の前記発生を予防し、阻害し、もしくは遅延させ、および／または前記疲弊表現型を反転するのに有効な量、頻度および／または持続時間での投与を含む、実施形態８４に記載の方法。
８６．対象におけるＴ細胞が、前記ＣＡＲを発現するＴ細胞を含むか、および／または前記抗原が、ＣＤ１９である、実施形態８４または実施形態８５に記載の方法。
８７．疲弊表現型が、Ｔ細胞またはＴ細胞の集団に関連して、
同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、１つまたはそれ以上の疲弊マーカー、適宜、２、３、４、５または６つの疲弊マーカーの、Ｔ細胞における表面発現のレベルもしくは程度または表面発現を示す前記Ｔ細胞の集団のパーセンテージの増加；あるいは
同一条件下の参照Ｔ細胞集団と比較した、ＣＤ１９抗原もしくは抗原受容体特異的薬剤への曝露後の、前記Ｔ細胞もしくはＴ細胞の集団によって示される活性のレベルもしくは程度の減少
を含む、実施形態８２～８６のいずれかに記載の方法。
８８．レベル、程度またはパーセンテージの増加が、１．２倍または約１．２倍、１．５倍または約１．５倍、２．０倍または約２．０倍、３倍または約３倍、４倍または約４倍、５倍または約５倍、６倍または約６倍、７倍または約７倍、８倍または約８倍、９倍または約９倍、１０倍または約１０倍以上を超える、実施形態８７に記載の方法。
８９．レベル、程度またはパーセンテージの減少が、６分の５または約６分の５、３分の２または約３分の２、２．０分の１または約２．０分の１、３分の１または約３分の１、４分の１または約４分の１、５分の１または約５分の１、６分の１または約６分の１、７分の１または約７分の１、８分の１または約８分の１、９分の１または約９分の１、１０分の１または約１０分の１以下を下回る、実施形態８７に記載の方法。
９０．参照Ｔ細胞集団が、適宜、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象と同一対象に由来するまたはそれと同一種の、疲弊していない表現型を有することが知られているＴ細胞の集団であるか、ナイーブＴ細胞の集団であるか、セントラルメモリーＴ細胞の集団であるか、またはステムセントラルメモリーＴ細胞の集団である、実施形態８７～８９のいずれかに記載の方法。
９１．参照Ｔ細胞集団が、（ａ）疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象の血液から単離されたバルクＴ細胞を含む対象適合集団であり、適宜、バルクＴ細胞がＣＡＲを発現しない、および／または（ｂ）ＣＡＲを発現するＴ細胞の用量の投与を受ける前に、疲弊表現型を有するＴ細胞が由来する対象から得られる、実施形態８７～９０のいずれかに記載の方法。
９２．参照Ｔ細胞集団が、対象へのその投与の前に、Ｔ細胞療法の試料を含む組成物またはＣＡＲを発現するＴ細胞を含む医薬組成物であり、適宜、組成物が、凍結保存された試料である、実施形態８７～９１のいずれかに記載の方法。
９３．１つまたはそれ以上の疲弊マーカーが、阻害受容体である、実施形態８７～９２のいずれかに記載の方法。
９４．１つまたはそれ以上の疲弊マーカーが、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＢＴＬＡ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＤ３９、ＶＩＳＴＡおよびＴＩＧＩＴの中から選択される、実施形態８７～９３のいずれかに記載の方法。
９５．活性が、増殖、細胞傷害性、または炎症性サイトカインのうち１つもしくは組合せの産生のうち１つまたはそれ以上であり、適宜、サイトカインのうち１つまたは組合せが、ＩＬ－２、ＩＦＮ－ガンマおよびＴＮＦ－アルファからなる群から選択される、実施形態８７～９４のいずれかに記載の方法。
９６．前記ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露が、ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤、適宜、ＣＡＲの抗原結合性ドメインに結合する薬剤とのインキュベーションを含む、実施形態８７～９５のいずれかに記載の方法。
９７．ＣＤ１９抗原または抗原受容体特異的薬剤への曝露が、Ｔ細胞を、ＣＤ１９抗原発現標的細胞、適宜、Ｂ細胞悪性病変の細胞に曝露する工程を含む、実施形態９６に記載の方法。

【実施例】

【0531】

ＶＩＩＩ．実施例
下記実施例は、単に例示的な目的で含まれており、本発明の範囲を限定するものと意図されない。

【0532】

実施例１：化合物Ｃによる抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞におけるＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ転写因子の分解
刺激された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞においてＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ転写因子を分解する（Ｓ）－２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（（２－フルオロ－４－（（３－モルホリノアゼチジン－１－イル）メチル）ベンジル）アミノ）イソインドリン－１，３－ジオン（化合物Ｃ）の能力を評価した。

【0533】

試料からＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞を別々に選択することによるＴ細胞の免疫親和性に基づく選択を含むプロセスによって、５名の健康なヒト成体ドナー由来の白血球アフェレーシス試料から抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含有するＴ細胞組成物を生成し、ドナー毎にそれぞれＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞が富化された２つの組成物をもたらした。富化されたＣＤ４＋およびＣＤ８＋組成物の細胞を、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズを用いて別個に活性化し、抗ＣＤ１９ ＣＡＲをコードするベクターによるレンチウイルス形質導入に付した。抗ＣＤ１９ ＣＡＲは、マウス抗体に由来する抗ＣＤ１９単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）（ＦＭＣ６３に由来する可変領域）、免疫グロブリン由来のスペーサー、ＣＤ２８に由来する膜貫通ドメイン、４－１ＢＢに由来する共刺激領域、およびＣＤ３－ゼータ細胞内シグナル伝達ドメインを含有していた。ウイルスベクターにおける発現構築物は、Ｔ２Ａリボソームスキップ配列によってＣＡＲコード配列から分離されたＣＡＲ発現用のサロゲート表面マーカーをコードする配列をさらに含有していた。続いて、形質導入された集団を、細胞増大用の刺激試薬の存在下で別個にインキュベートした。増大されたＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞を配合して、別個に凍結保存し、保管した。

【0534】

使用の前に、凍結保存したＣＤ４＋およびＣＤ８＋操作細胞組成物を解凍し、各ドナーに関しておよそ１：１のＣＤ４：ＣＤ８の比で合わせた。次に、組み合わせた組成物の細胞を、３７℃にて５％ＣＯ_２で２４時間、３０μｇ／ｍＬのＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体により刺激した（例えば、ＷＯ２０１８／０２３１００を参照）。この刺激は、ビヒクル対照の存在下で、またはおよそ１０^－１～１０^４ｎＭの範囲に及ぶ濃度の化合物Ｃ；（Ｓ）－３－［４－（４－モルホリン－４－イルメチル－ベンジルオキシ）－１－オキソ－１，３－ジヒドロ－イソインドール－２－イル］－ピペリジン－２，６－ジオン（化合物２）；もしくは３－（５－アミノ－２－メチル－４－オキソ－４Ｈ－キナゾリン－３－イル）－ピペリジン－２，６－ジオン（化合物１）の存在下で行われた。

【0535】

インキュベーション後に、刺激された細胞を抗体で染色し、フローサイトメトリーによって解析して、蛍光強度中央値（ＭＦＩ）によって測定されるＣＡＲ＋Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの細胞内レベルを評価した。ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓのＭＦＩ値を、ビヒクル対照と比べたパーセンテージとして標準化および計算した。

【0536】

化合物Ｃ、化合物２および化合物１とのインキュベーション後に、ＣＡＲを発現する刺激されたＴ細胞において細胞内ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓ発現の濃度依存性減少が観察された（図１）。検査した全ての化合物濃度レベルにおいて、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓ発現は、化合物Ｃで治療された細胞において、化合物２または化合物１よりも低かった。加えて、化合物Ｃ、化合物２および化合物１に関するＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ発現の低減のＥＣ５０値は、化合物の非存在下でのそれらのＭＦＩの５０％までＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ ＭＦＩを低減させた化合物濃度として計算した。これらのＥＣ５０値を、平均として表Ｅ１に示す（５名のドナーにわたる９５％信頼区間を括弧内に示す）。結果は、化合物Ｃが、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞における、化合物２または化合物１よりも強力なＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓ分解因子であることを示す。

【表7】

【0537】

実施例２：ＣＡＲ－Ｔ細胞機能における化合物Ｃの効果
化合物Ｃで治療された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞のＴ細胞機能を評価した。

【0538】

実施例１に記載されている通りに、３名の異なる健康なドナーから抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞組成物を生成した。使用前に、凍結保存されたＣＤ４＋およびＣＤ８＋操作された細胞組成物を解凍し、およそ１：１のＣＤ４：ＣＤ８比で組み合わせた。

【0539】

Ａ．抗イディオタイプ抗体および化合物Ｃとのインキュベーション
生存率、増殖、細胞周期の期およびサイトカイン産生を評価するために、組み合わせたＣＤ４＋およびＣＤ８＋ＣＡＲ発現Ｔ細胞組成物を、プレートに結合されたＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体（例えば、ＷＯ２０１８／０２３１００を参照）とともにインキュベートし、化合物Ｃ、化合物２または化合物１の存在下で３７℃にてインキュベートした。インキュベーション後に、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を収集し、培地中で２回洗浄し、評価した。

【0540】

生／死細胞色素を使用したフローサイトメトリーによって、培養３日目に生存率を評価した。３名のドナー（平均±ＳＥＭ）について図２Ａに示す通り、３μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体（左パネル）または３０μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体（右パネル）のいずれかにより刺激が実行された場合、化合物は、細胞生存率に効果がなかった。

【0541】

プレートに結合された抗イディオタイプ抗体との培養中のＴ細胞の増殖を、ＩｎｃｕＣｙｔｅ（登録商標）生細胞解析システム（Ｅｓｓｅｎ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｃ．）を使用して７日間モニターし、３０μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体で刺激された細胞の細胞倍加の数を、３名のドナー（平均±ＳＥＭ）について図２Ｂおよび図２Ｃに示す。図２Ｂに示す通り、抗イディオタイプ抗体によるＣＡＲ特異的刺激の際の化合物の存在は、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖の量を減少させた。化合物Ｃで治療された細胞は、検査した全ての用量で、倍加の最も大幅な減少を得た。図２Ｃに示す通り、増殖は、１ｎＭの化合物Ｃの存在下で減少し（＊＊＊Ｐ＜０．００１）、１０ｎＭの化合物Ｃの存在下でさらに減少した（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。

【0542】

プレートに結合された抗イディオタイプ抗体によるＣＡＲ特異的刺激の際に化合物で治療されたＣＡＲ Ｔ細胞の細胞周期の期を、３日間の刺激後の２時間にわたるＥＤＵ取込みを使用して決定した。ＥＤＵ取込みのため、Ｃｌｉｃｋ－ｉＴ（商標）ＥｄＵ細胞増殖キット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用してＣＡＲ Ｔ細胞を標識し、その後、調製された細胞をフローサイトメトリーによって解析した。図２Ｄ（左パネル：３μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体による刺激；右パネル：３０μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体による刺激）における結果は、より高用量の化合物による治療が、細胞周期Ｇ１期のＣＡＲ Ｔ細胞のパーセンテージを増加させたことを示す。化合物Ｃは、検査した全ての用量でＧ１期の細胞のパーセンテージに最も大きい効果を有し、検査した他の化合物と比較して１０分の１または１００分の１の用量で、細胞周期Ｇ１期の細胞のパーセンテージに同様の効果を有した。図２Ｅに示す通り、Ｇ１期の細胞のパーセンテージは、１ｎＭおよび１０ｎＭの両方の化合物Ｃの存在下で増加した（＊＊＊Ｐ＜０．００１）。理論に制約されることを望むものではないが、Ｇ１期のＣＡＲ Ｔ細胞の蓄積は、下の実施例３に示す通り、化合物が慢性刺激の際の疲弊の発生を限定することができる機構の１つを説明することができる。

【0543】

３０μｇ／ｍＬの抗イディオタイプ抗体で７２時間刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞における細胞内サイトカインレベルを決定した。これを行うために、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞から上清を採取し、マルチプレックスエレクトロケミルミネッセンスアッセイを使用して、インターフェロン－γ（ＩＦＮ－γ）およびインターロイキン－２（ＩＬ－２）含有量について解析した。パーフォリンおよびグランザイムＢを含む細胞内サイトカインを染色するために、Ｆｏｘｐ３／転写因子染色バッファーセット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、細胞を固定および透過処理した。次に、ＩＦＮγ、パーフォリン、グランザイムＢおよびＩＬ－２の細胞内サイトカインレベルをフローサイトメトリーによって決定した。図２Ｆに示す通り、化合物による細胞の治療は、ビヒクル対照の存在下における抗イディオタイプ抗体による刺激と比較したＭＦＩの倍の変化によって決定される通り、エフェクターサイトカイン（ＩＦＮγ、パーフォリン、グランザイムＢ）の細胞内発現を増加させたが、ＩＬ－２産生に有意な効果はなかった。ゼロよりも大きいＬｏｇ_２倍の変化値は、図２Ｆにおいて「＋」により指し示される。サイトカインが陽性の細胞のパーセンテージを測定した場合に、同様の結果が観察された。

【0544】

Ｂ．ＣＤ１９＋腫瘍細胞および化合物Ｃとのインキュベーション
ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解機能における化合物Ｃの効果を評価するために、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を、１：１のエフェクター対標的（Ｅ：Ｔ）比で、かつ変動する濃度の化合物Ｃまたは化合物２の存在下で、ＣＡＲ Ｔ細胞耐性、ＣＥＬＭｏＤ感受性ＲＬ ＣＤ１９＋腫瘍細胞と共培養した。これを行うために、ＣＡＲ Ｔ細胞をポリＤ－リシンプレート上にプレーティングした。次に、化合物Ｃまたはビヒクル対照に加えて、ＩｎｃｕＣｙｔｅ（登録商標）ＮｕｃＬｉｇｈｔ Ｒｅｄ（Ｅｓｓｅｎ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｃ．）を形質導入されたＣＤ１９＋腫瘍細胞をＣＡＲ Ｔ細胞に添加した。複数日にわたり腫瘍細胞数を測定した。

【0545】

図２Ｇおよび図２Ｈは、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞およびそれぞれ化合物Ｃまたは化合物２（左パネル：０．００１μＭの化合物；中央パネル：０．０１μＭの化合物；右パネル：０．１μＭの化合物）で治療されたＲＬ腫瘍細胞の細胞数を示す。いずれかの免疫調節化合物と組み合わせたＣＡＲ Ｔ細胞による治療は、ＣＡＲ Ｔ細胞単独または化合物単独よりも少ない腫瘍細胞数を生じた。図２Ｇに示す通り、０．００１μＭ（Ｐ＜０．０００１）および０．０１μＭ（Ｐ＜０．０００１）を含む化合物Ｃが提供された全ての濃度レベルについて、腫瘍細胞数はより少なかった。図２Ｈに示す通り、０．０１μＭおよび０．１μＭの濃度レベルの化合物２で、腫瘍細胞数はより少なかったが、０．００１μＭではそうではなかった。

【0546】

Ｃ．概要
まとめると、これらの結果は、ＣＡＲ Ｔ細胞生存率に影響を与えることなく、化合物Ｃによる治療が、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖を低減させ、Ｇ１期の細胞の数を増加させ、ある特定のサイトカインの産生を増加させたことを示す。さらに、ＣＡＲ Ｔ細胞増殖および細胞周期における効果は、化合物Ｃについて、化合物２または化合物１と比べてより顕著であり、細胞溶解は、化合物２と比べて、より低い用量の化合物Ｃによって改善された。

【0547】

実施例３：化合物Ｃで同時的に治療された慢性的に刺激されたＣＡＲ－Ｔ細胞の評価
慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞における疲弊を遮断または低減させる化合物Ｃの能力を評価した。

【0548】

慢性刺激の条件をシミュレートするために、実施例１に記載されている通りに産生された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、プレートに結合されたＣＡＲ特異的抗イディオタイプ抗体（例えば、ＷＯ２０１８／０２３１００を参照）とともにインキュベートし、６日間の期間にわたり３７℃でインキュベートした。この６日間の刺激は、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞において機能低下状態を誘導することが示された。例えば、６日間の刺激後にＣＤ１９＋腫瘍細胞で再負荷されたＣＡＲ Ｔ細胞は、６日間の刺激に付されていない新鮮解凍ＣＡＲ Ｔ細胞と比較して、低減されたＩＦＮγおよびＩＬ－２サイトカイン産生（図３Ａ）ならびに低減された細胞溶解機能（図３Ｂ）を有した。

【0549】

慢性刺激後のこのようなＣＡＲ Ｔ細胞機能低下を遮断または低減させる化合物Ｃの能力を評価した。これを行うために、操作されたＣＡＲ Ｔ細胞を、６日間の刺激の際に、化合物Ｃ、化合物２またはビヒクル対照で同時的に治療した。次に、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を収集し、培地中で２回洗浄し、化合物Ｃの非存在下でＧｒａｎｔａ－５１９リンパ腫腫瘍スフェロイド（ＩｎｃｕＣｙｔｅ ＮｕｃＬｉｇｈｔ Ｒｅｄで形質導入されている）で再負荷し、その後、経時的な赤色蛍光の喪失およびＣＡＲ－Ｔ細胞との共培養後の様々な時点における腫瘍スフェロイドサイズの平均した測定値により細胞溶解活性を評価した。ＣＡＲ Ｔ細胞のサイトカイン産生、Ｉｋａｒｏｓ発現および遺伝子発現も評価した。

【0550】

図３Ｃは、化合物Ｃの存在下で刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞との共培養９日目のＧｒａｎｔａ－５１９腫瘍スフェロイドの代表的な画像を示す。図３Ｄおよび図３Ｅは、慢性刺激後に化合物Ｃの存在下で刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と共培養された腫瘍スフェロイドの体積を示す。図３Ｄおよび図３Ｅに示す通り、再負荷の際の細胞溶解活性は、刺激の際の１ｎＭ濃度の化合物Ｃによる治療によって改善された（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。図３Ｅに示す通り、刺激の際の１０ｎＭの化合物Ｃによる治療も、１ｎＭの化合物Ｃ（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）よりも少ない程度であるが、共培養９日目に低減された腫瘍サイズを生じた（＊Ｐ＜０．０５）。共培養された細胞の上清におけるＩＦＮγのサイトカイン産生も、腫瘍細胞による再負荷の５日後に評価し、慢性刺激の際に同時的に存在する１ｎＭ濃度の化合物Ｃも、再負荷後に、治療されたＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩＦＮγ産生を改善した（図３Ｆ、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。刺激の際の１０ｎＭの化合物Ｃによる治療も、１ｎＭの化合物Ｃよりも少ない程度であるが、ＩＦＮγ産生を増加させた（＊＊＊Ｐ＜０．００１）。

【0551】

図３Ｇは、ＭＦＩによって決定された、化合物Ｃまたは化合物２の存在下における６日間の慢性刺激の後のＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓ発現を示す。図示される通り、Ｉｋａｒｏｓ発現は、より高い濃度（例えば、０．０１μＭおよび０．１μＭ）の化合物Ｃで治療されたＣＡＲ Ｔ細胞について、最低であった。

【0552】

再負荷５日後に、腫瘍スフェロイドからＣＡＲ Ｔ細胞を選別し、ＲＮＡ配列決定（ＲＮＡ－ｓｅｑ）によって遺伝子発現を解析した。ＲＮＡ－ｓｅｑのためのライブラリーを配列決定し、リードをＧｅｎｏｍｅ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ Ｈｕｍａｎ Ｂｕｉｌｄ ３８（ＧＲＣｈ３８）ヒト参照ゲノムにマッピングした。遺伝子発現レベルを定量化し、ＤＥＳｅｑ２を使用して差次的発現を行った。刺激の際に化合物Ｃで治療された慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞との間とともに、治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と刺激されていないＣＡＲ Ｔ細胞との間で、遺伝子発現を比較した。１ｎＭおよび１０ｎＭの化合物による治療効果に基づき差次的発現を計算した。差次的遺伝子座選択カットオフは、ｑ≦０．０５および絶対的ｌｏｇ_２倍の変化≧０．５であった。

【0553】

図３Ｈに示す通り、慢性刺激の際の化合物Ｃによる治療は、治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と比較して、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞において変更された遺伝子発現を生じた。同一セットの遺伝子について、図３Ｉは、治療されたおよび治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の間（ｙ軸）ならびに治療されていない慢性的に刺激されたおよび刺激されていないＣＡＲ Ｔ細胞の間（ｘ軸）で、どのように発現レベルが異なっていたかについて示す。図示される通り、刺激の際の化合物Ｃによる治療によって上方調節された遺伝子は、慢性刺激によって下方調節された遺伝子であり（左上四分円）、刺激の際の化合物Ｃによる治療によって下方調節された遺伝子は、慢性刺激によって上方調節された遺伝子であった（右下四分円）。

【0554】

Ｋｙｏｔｏ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅｓ（ＫＥＧＧ）を使用したＣＡＲ Ｔ ＲＮＡ－ｓｅｑデータの経路解析も、ｃｌｕｓｔｅｒＰｒｏｆｉｌｅｒを使用して行った。慢性刺激によるその上方調節が化合物Ｃによる治療によって予防または低減された経路は、図３Ｊに示され、特異的細胞増殖経路を含む。図３Ｊに示す遺伝子比は、所与の経路における総遺伝子にわたる重大な遺伝子のパーセンテージとして計算された。

【0555】

まとめると、これらの結果は、慢性刺激の条件における、相対的に低濃度であっても、化合物Ｃの存在が、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞における疲弊を限定または低減させることができることを指し示す。これらの結果は、ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓ発現が、より高い濃度の化合物Ｃによる治療によって低減され、Ｔ細胞機能に関与する経路が、慢性刺激後に富化され、慢性刺激の際の同時的治療による化合物Ｃによって反転され得ることも示した。

【0556】

これらの結果は、慢性刺激の際のより高い濃度（１０ｎＭ）の化合物Ｃによる治療が、１ｎＭの化合物Ｃによる治療と比較して、ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性およびサイトカイン産生において少ない改善を生じたことも示した。理論に制約されることを望むものではないが、より高い濃度の化合物Ｃによる治療は、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの持続したまたは過剰な分解を生じ、慢性刺激の際の化合物Ｃ治療の利益を限定するＣＡＲ Ｔ細胞機能障害をもたらす可能性がある。対照的に、より低い濃度の化合物Ｃは、持続したまたは過剰なＡｉｏｌｏｓおよびＩｋａｒｏｓ分解の有害な効果を伴わずに、ＣＡＲ Ｔ細胞機能を改善する可能性がある。

【0557】

実施例４：化合物Ｃによるレスキュー治療に続く慢性的に刺激されたＣＡＲ－Ｔ細胞の評価
化合物Ｃの、疲弊から慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞をレスキューする能力を評価した。

【0558】

実施例１に記載されるように産生された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、実施例３に記載される通りであるが、刺激中の化合物Ｃの非存在下で刺激した。その代わりに、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を、Ｇｒａｎｔａ－５１９リンパ腫（lyphoma）腫瘍スフェロイドまたはＡ５４９腫瘍スフェロイドによる再負荷の際に化合物Ｃで治療し、その後、ＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性、サイトカイン産生および遺伝子発現を評価した。

【0559】

図４Ａは、化合物Ｃの存在下におけるＣＡＲ Ｔ細胞との共培養９日目のＧｒａｎｔａ－５１９およびＡ５４９腫瘍スフェロイドの代表的な画像を示す。図４Ｂおよび図４Ｃは、化合物Ｃの存在下で抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞と共培養された腫瘍スフェロイドの体積を示す。図４Ｂに示す通り、腫瘍体積は、ＣＡＲ Ｔ細胞および化合物Ｃ（１ｎＭまたは１０ｎｍ）による同時治療によって、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞単独または化合物Ｃ単独による治療よりも低減された（両方の濃度についてＰ＜０．０００１）。図４Ｃは、共培養９日目の腫瘍サイズに基づく同様の結果を示す（１ｎＭについて＊＊＊Ｐ＜０．００１；１０ｎＭについて＊＊Ｐ＜０．０１）。腫瘍細胞による再負荷の５日後にサイトカイン産生も評価し、再負荷の際の化合物Ｃの存在はまた、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞単独と比較して、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩＦＮγ産生を改善した（対照；図４Ｄ）。サイトカイン産生は、１ｎＭの化合物Ｃの存在下で再負荷されたＣＡＲ Ｔ細胞について最高であり（Ｐ＜０．０００１）、また、１０ｎＭの化合物の存在下で再負荷されたＣＡＲ Ｔ細胞について増加された（Ｐ＜０．０５）。

【0560】

慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の遺伝子発現も、実施例３の通りにＲＮＡ配列決定によって解析した。再負荷の際に化合物Ｃで治療された慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞との間とともに、治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞と刺激されていないＣＡＲ Ｔ細胞との間で、遺伝子発現を比較した。図４Ｅに示す通り、再負荷の際の化合物Ｃによる治療は、治療されていない慢性的に刺激されたＣＡＲ細胞と比較して、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞において変更された遺伝子発現を生じた。図４Ｆに示す通り、再負荷の際に化合物Ｃによる治療によって上方調節された遺伝子は、慢性刺激によって下方調節された遺伝子であり（左上四分円）、再負荷の際に化合物Ｃによる治療によって下方調節された遺伝子は、慢性刺激によって上方調節された遺伝子であった（右下四分円）。慢性刺激によるその上方調節が再負荷の際の化合物Ｃによる治療によって反転される経路を図４Ｇに示す。

【0561】

まとめると、これらの結果は、相対的に低濃度であっても、化合物Ｃの存在が、既に慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を、疲弊した表現型からレスキューまたは回復することができることを指し示す。実施例３に記載されている同時的刺激による結果と同様に、この結果は、Ｔ細胞機能に関与する経路が、慢性刺激後に富化され、レスキュー治療による化合物Ｃによって反転され得ることを明らかにする。

【0562】

実施例５：異なる濃度レベルの化合物Ｃで治療された慢性的に刺激されたＣＡＲ－Ｔ細胞の評価
異なる濃度の化合物Ｃを、慢性刺激後のＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解機能におけるそれらの効果について検査した。ＣＡＲ Ｔ細胞を、慢性刺激の際またはその後のいずれかで、様々な濃度の化合物Ｃで治療した。

【0563】

実施例１に記載されている通りに産生された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、実施例３に記載されている通りに慢性的に刺激し（化合物Ｃは、慢性刺激の際に存在する）、次いで、化合物Ｃの非存在下でＧｒａｎｔａ－５１９リンパ腫腫瘍スフェロイドにより再負荷した（同時的治療群）。加えて、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、実施例４に記載されている通りに慢性的に刺激し（化合物Ｃは、慢性刺激の際に存在しない）、次いで、化合物Ｃの存在下でＧｒａｎｔａ－５１９リンパ腫腫瘍スフェロイドにより再負荷した（レスキュー治療群）。再負荷の際に、ＣＡＲ－Ｔ細胞との共培養中の様々な時点で、腫瘍細胞数によって細胞溶解活性を評価した。

【0564】

図５Ａは、化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す（同時的治療）。図５Ｂは、化合物Ｃの存在下におけるＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す（レスキュー治療）。両方の治療条件において、腫瘍細胞数は、０．００１μＭ濃度の化合物Ｃで治療されたＣＡＲ Ｔ細胞のための対照条件と比較して低減された。また、両方の治療群において、腫瘍細胞数は、０．０１μＭおよび０．１μＭ濃度の化合物Ｃで治療されたＣＡＲ Ｔ細胞のための対照条件と比較してより高かった。

【0565】

これらの結果は、より高い濃度の化合物Ｃによる治療が、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性を損なう可能性があることを示唆する。理論に制約されることを望むものではないが、このような障害は、例えば、実施例３に示す通り、より高い濃度の化合物ＣによるＩｋａｒｏｓの持続したまたは過剰な分解が原因である可能性がある。
実施例６：化合物Ｃの間欠的投薬スケジュールの評価

【0566】

過剰なまたは持続した治療が、マイナスにＣＡＲ Ｔ細胞機能に影響し得る、および／または好中球成熟停止に続発する好中球減少症を引き起こし得る、ＩｋａｒｏｓおよびＡｉｏｌｏｓの分解における化合物Ｃの頑強な影響が原因で、化合物Ｃによる治療のための間欠的投薬スケジュールを、Ｉｋａｒｏｓの深いが一過性の分解をもたらすその能力について評価した。これを行うために、毎週（Ｑ７Ｄ）０．３ｍｇ用量の化合物Ｃの薬物動態をモデル化した。これらの結果に基づき、化合物Ｃへの短い（２４時間）および慢性（６日間）曝露後のＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓ分解を決定した。好中球発生における毎週０．３ｍｇ用量の化合物Ｃの効果もモデル化した。

【0567】

図６Ａは、Ｑ７Ｄ投薬レジメンに基づく化合物Ｃの予想される血漿濃度レベルを示す。図示される通り、薬物動態モデル化は、化合物Ｃの二相性排出を明らかにし、２０ｎＭのＣ_ｍａｘまでの高い一過性初期ピークに続いて、拡張された末端排出およびおよそ１ｎＭの７日目におけるＣ_ｍｉｎが見られた。

【0568】

図６Ｂおよび図６Ｃは、化合物Ｃへの２４時間（図６Ｂ）または６日間の曝露（図６Ｃ）後の、実施例１に記載されている通りに生成された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞におけるＩｋａｒｏｓレベルを示す。図６Ｂに示す通り、化合物Ｃの０．０１μＭもの低さの用量レベルは、Ｉｋａｒｏｓ分解を生じ、０．３ｍｇ用量の化合物Ｃ（２０ｎＭのＣ_ｍａｘを有する）が、２４時間後に実質的なＩｋａｒｏｓ分解を生じるであろうことを示唆する。図６Ｃに示す通り、０．００１μＭの化合物Ｃへの６日間の曝露は、Ｉｋａｒｏｓレベルに影響せず、化合物Ｃの血漿濃度が用量間で経時的に減少するにつれて、Ｉｋａｒｏｓレベルが、初期分解後にベースラインレベルに戻る機会を有し得ることを示唆する。

【0569】

図６Ｄは、４つの異なる薬力学モデルを使用して生成された予測好中球絶対数（ＡＮＣ）プロファイルを示す。毎週０．３ｍｇ用量が、少ない好中球数（例えば、好中球減少症）をもたらすか否か評価することを含む、好中球発生における毎週０．３ｍｇ用量の化合物Ｃの効果を評価するために、これらのプロファイルが生成された。全てのモデルについて、平均ナディアＡＮＣレベルは、毎週０．３ｍｇ用量を与えた場合、およそ２．２×１０^９細胞／Ｌを上回ることが予測された。

【0570】

まとめると、これらの結果は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法と組み合わせた化合物Ｃの間欠的投薬スケジュールが、好中球発生に実質的に影響することも、ＣＡＲ Ｔ細胞機能にマイナスに影響することもなく、ＣＡＲ Ｔ細胞における深いが一過性のＩｋａｒｏｓ分解を可能にするであろうことを示唆する。理論に制約されることを望むものではないが、毎週用量による化合物Ｃの薬物動態排出は、Ｉｋａｒｏｓレベルが、用量間でベースライン値に戻ることを可能にし、これにより、持続したＩｋａｒｏｓ分解が原因のＣＡＲ Ｔ細胞機能障害または好中球成熟停止を予防することができる。

【0571】

実施例７：慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞における化合物Ｃの間欠的投薬スケジュールの評価
ＣＡＲ Ｔ細胞における間欠的化合物Ｃ投薬スケジュールの効果を評価した。実施例６に示す毎週用量による化合物Ｃの二相性排出をシミュレートするために、化合物Ｃの存在下でＣＡＲ Ｔ細胞を慢性的に刺激し、１日間は高濃度の化合物Ｃで、次いで、５日間は低濃度の化合物Ｃで行った。

【0572】

実施例１に記載されている通りに産生された抗ＣＤ１９ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を、化合物Ｃの存在下で実施例３に記載されている通りに慢性的に刺激した。慢性刺激の際に、化合物Ｃは、（ｉ）５０ｎＭで１日間および１ｎＭで残っている５日間、（ｉｉ）２５ｎＭで１日間および０．５ｎＭで残っている５日間、（ｉｉｉ）１０ｎＭで１日間および非存在で残っている５日間、または（ｉｖ）１ｎＭで全６日間存在した。次に、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を、化合物Ｃの非存在下、Ｒａｊｉリンパ腫腫瘍スフェロイドで再負荷し、その後、細胞溶解活性を評価した。

【0573】

図７Ａは、記載される通りに化合物Ｃの存在下で慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞とともに、新鮮な（慢性的に刺激されていない）ＣＡＲ Ｔ細胞の再負荷の際の腫瘍細胞数を示す。図示される通り、慢性刺激の際の１日間の高濃度と、それに続く５日間の低濃度の化合物Ｃの存在（１日間の５０ｎＭおよび残っている５日間の１ｎＭ、または１日間の２５ｎＭおよび残っている５日間の０．５ｎＭ）は、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性の最大の増加を生じた。

【0574】

ＣＡＲ Ｔ細胞が化合物Ｃの存在または非存在下で７日間にわたり慢性的に刺激された別々の実験について、図７Ｂに同様の結果を示す。本実験において、化合物Ｃは、（ｉ）５０ｎＭで１日間および１ｎＭで残っている刺激の６日間、（ｉｉ）２５ｎＭで１日間および０．５ｎＭで残っている刺激の６日間、（ｉｉｉ）１０ｎＭで刺激の全７日間、または（ｉｖ）１ｎＭで刺激の全７日間存在した。次に、刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞を、化合物Ｃの非存在下、Ｒａｊｉリンパ腫腫瘍スフェロイドで再負荷し、その後、４日間の期間にわたり細胞溶解活性を評価した。図７Ｂに示す通り、１日間の５０ｎＭおよび残っている刺激の６日間の１ｎＭの化合物Ｃの存在は、慢性的に刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性を改善した（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。１日間の２５ｎＭおよび残っている刺激の６日間の０．５ｎＭの化合物Ｃの存在も、細胞溶解活性を改善した（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。化合物Ｃの存在または非存在下で７日間刺激されたＣＡＲ Ｔ細胞も、慢性刺激後にフローサイトメトリーを使用して、表現型Ｔ細胞メモリーマーカーについて解析した。図７Ｃに示す通り、化合物Ｃの存在下で刺激されたＣＡＲ発現ＣＤ８ Ｔ細胞は、化合物Ｃの非存在下で刺激された細胞よりも高いパーセンテージのＣＤ２７＋／ＣＣＲ７＋細胞を有した。低分化ナイーブ様Ｔ細胞のマーカーであるＣＤ２７／ＣＣＲ７発現は、１日間の５０ｎＭおよび残っている刺激の６日間の１ｎＭの化合物Ｃの存在下で刺激されたＣＡＲ発現ＣＤ８ Ｔ細胞において最高であった（＊Ｐ＜０．０５）。

【0575】

これらの結果は、例えば、化合物Ｃの間欠的投薬レジメンの一部としての、化合物Ｃの毎週用量が、化合物Ｃと組み合わせて投与されたＣＡＲ Ｔ細胞の細胞溶解活性を改善するであろうことを示唆する。これらの結果は、化合物Ｃの間欠的投薬レジメンが、ＣＡＲ Ｔ細胞における低分化メモリー表現型の保存を生じるであろうことも指し示す。

【0576】

実施例８：抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞および化合物Ｃによる再発した／不応性のＢ細胞悪性病変の治療
化合物Ｃと、ＣＤ１９に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有する治療用ＣＡＲ Ｔ細胞組成物とを含む併用療法を、再発した／不応性の侵襲性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）に罹っている対象に投与した。

【0577】

具体的には、形質転換した低悪性度ＮＨＬを含むＤＬＢＣＬ ＮＯＳ；濾胞性リンパ腫グレード３Ｂ；Ｔ細胞／組織球リッチ大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；ＥＢＶ陽性ＤＬＢＣＬ、ＮＯＳ；原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；またはＤＬＢＣＬ組織像を有するＭＹＣならびにＢＣＬ２および／もしくはＢＣＬ６の再編成を有する高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（二重／三重ヒットリンパ腫）として定義される侵襲性Ｂ細胞ＮＨＬに罹っている成体ヒト対象由来の白血球アフェレーシス試料から、自家抗ＣＤ１９指向性治療用Ｔ細胞組成物を実施例１に記載されている通りに生成した。侵襲性Ｂ細胞ＮＨＬは、最後の再発時に組織学的に確認されたか、さもなければ、新たな腫瘍生検が要求された。

【0578】

適格な対象は、ＣＤ２０標的化剤およびアントラサイクリンを含む少なくとも２つの前の選択の全身療法に対して再発したかまたは不応性である。形質転換した疾患に罹っている対象のため、対象は、適格となるために、形質転換した疾患（すなわち、ＤＬＢＣＬ）のための少なくとも２つの選択の全身療法を受けているべきである。前の選択の療法は、以前に低悪性度の状態（例えば、濾胞性リンパ腫またはＣＬＬ）のために与えられた療法を含まなかった。対象は、低悪性度の疾患のためにアントラサイクリンを受けた場合、自身のＤＬＢＣＬのためにアントラサイクリンを受けている必要はなかった。対象は、化合物Ｃによる前の治療を有さなかった。

【0579】

適格な対象は、Ｌｕｇａｎｏ分類による陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）陽性（すなわち、Ｄｅａｕｖｉｌｌｅスコア４または５）およびコンピュータ断層撮影（ＣＴ）測定可能な疾患を有した。適格な対象は、ＣＴスキャンによる２５ｃｍ^２以上の最大６個の指標病変の垂直直径の積の和（ＳＰＤ）を有した。

【0580】

自家抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞組成物の産生のため、予定されるＣＡＲ Ｔ細胞投与のおよそ４週間前に、対象から白血球アフェレーシス試料を得た。次いで、対象は、３日間にわたりフルダラビン（Ｆｌｕ、３０ｍｇ／ｍ^２）およびシクロホスファミド（Ｃｙ、３００ｍｇ／ｍ^２）によるリンパ球枯渇化学療法を受けた。リンパ球枯渇化学療法の完了から２～７日後に、対象は、併用療法の１日目にＣＡＲ発現Ｔ細胞の用量（例えば、１×１０^６個の総Ｔ細胞）を受けた。

【0581】

対象を、化合物Ｃ投与のための７つの投薬サブコホートの１つに割り当てた。サブコホートＡに割り当てられた患者は、８日目に始める週１回の０．３ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受けた。化合物Ｃ投与の予定された開始時にグレード３以上のＣＲＳまたはＮＴを有する対象のため、化合物Ｃ投与の開始を最大３日間遅延させることができる。サブコホートＡのための投薬レジメンの安全性および忍容性に応じて、他の投薬レジメンを評価することができる。サブコホートＢは、１日目に始める週１回の０．３ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。サブコホートＣは、１５日目に始める週１回の０．３ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。サブコホートＤは、８日目に始める週１回の０．４ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。サブコホートＥは、８日目に始める２週間毎に１回の０．３ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。サブコホートＦは、８日目に始める週１回の０．２ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。サブコホートＧは、８日目に始める週１回の０．６ｍｇの化合物Ｃの投薬レジメンを受ける。全てのサブコホートについて、化合物Ｃ投与は、併用療法の８５日目まで続けられる。

【0582】

安全性、薬物動態および薬力学および臨床応答について対象をモニターした。治療に対する臨床応答の決定は、対象が、進行性疾患（ＰＤ）、部分奏効（ＰＲ）、完全奏効（ＣＲ）および／または安定疾患を示したか否かについての評価を含んだ。

【0583】

本発明は、例えば本発明の各種態様を説明するために提供される特定の開示される実施形態に範囲が限定されると意図されない。記載される組成物および方法に対する各種変更は、本明細書中の説明および教示から明らかとなる。そのような変形は、本開示の真の範囲および主旨を逸脱することなく実施されてよく、本開示の範囲内に収まると意図される。

【表8】

【表8】

【表8】

【表8】

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図2G】

【図2H】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図3G】

【図3H】

【図3I】

【図3J】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図4E】

【図4F】

【図4G】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【配列表】

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【国際調査報告】