特表 2024-513401 タウオパチーのバイオマーカーとしてのＣＳＦリン酸化タウおよびアミロイドベータのプロファイル

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-25

(54)【発明の名称】タウオパチーのバイオマーカーとしてのＣＳＦリン酸化タウおよびアミロイドベータのプロファイル

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/68 20060101AFI20240315BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240315BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20240315BHJP

【ＦＩ】

G01N33/68

A61K45/00

A61P25/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023560561

(86)(22)【出願日】2022-03-31

(85)【翻訳文提出日】2023-11-28

(86)【国際出願番号】 US2022022906

(87)【国際公開番号】W WO2022212756

(87)【国際公開日】2022-10-06

(31)【優先権主張番号】63/169,193

(32)【優先日】2021-03-31

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】597025806

【氏名又は名称】ワシントン・ユニバーシティ

【氏名又は名称原語表記】Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

(74)【代理人】

【識別番号】100101454

【弁理士】

【氏名又は名称】山田 卓二

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100138911

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻井 陽子

(72)【発明者】

【氏名】サトウ，チヒロ

(72)【発明者】

【氏名】バルテルミー，ニコラ

(72)【発明者】

【氏名】ベイトマン，ランドール

【テーマコード（参考）】

2G045

4C084

【Ｆターム（参考）】

2G045AA25

2G045CA25

2G045DA36

4C084AA17

4C084NA14

4C084ZA151

4C084ZA161

(57)【要約】

本開示は、対象を診断し、処置決定を導き、臨床試験の対象を選択するために、特定のアミノ酸残基におけるタウリン酸化、および適宜Ａｂ種を定量する方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、
（ａ）前記対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびａβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値が検出される場合、前記対象を前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していると診断すること
を含む方法。

【請求項2】

複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を決定することをさらに含み、健康な対照と比較した複合値の増加は、前記対象がＦＴＤを有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していることを示す、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記対象が、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者であると診断される、請求項１または請求項２に記載の方法。

【請求項4】

アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、
（ａ）前記対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加が検出される場合、前記対象を前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していると診断すること
を含む方法。

【請求項5】

複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を決定することをさらに含み、アルツハイマー病集団と比較した複合値の増加は、前記対象がＦＴＤを有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していることを示す、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記対象が、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者であると診断される、請求項４または請求項５に記載の方法。

【請求項7】

アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、
（ａ）前記対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、前記対象を孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、または孤発性ＦＴＤのリスクが増加していると診断すること
を含む方法。

【請求項8】

アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、
（ａ）前記対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、前記対象を孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、または孤発性ＦＴＤのリスクが増加していると診断すること
を含む方法。

【請求項9】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと健康な状態とを区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項10】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーとアルツハイマー病とを区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項11】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーをアルツハイマー病、４Ｒ－タウオパチー、および健康な状態から区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項12】

健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと健康な状態とを区別する、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷタウオパチーとＡＤとを区別する、請求項１１に記載の方法。

【請求項14】

４Ｒ－タウオパチー集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと４Ｒ－タウオパチーとを区別する、請求項１１に記載の方法。

【請求項15】

孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値によって、孤発性ＦＴＤをアルツハイマー病、非孤発性ＦＴＤタウオパチー、および健康な状態から区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項16】

アルツハイマー病集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤとアルツハイマー病とを区別する、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

健康な対照集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤと健康な状態とを区別する、請求項１５に記載の方法。

【請求項18】

非孤発性ＦＴＤにおけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤと非孤発性ＦＴＤタウオパチーを区別する、請求項１５に記載の方法。

【請求項19】

対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに前記第１の処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；
（ｂ）前記第１の試料の後に前記対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第２のＣＳＦまたは血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに前記第２の処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記第２の試料および前記第１の試料の前記定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の間の差を計算することであって、前記第２の試料における前記定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の統計的有意差は、前記対象の疾患の進行を示す、計算すること
を含む方法。

【請求項20】

対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および前記第１の処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；
（ｂ）前記第１の試料の後に前記対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第２のＣＳＦまたは血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および前記第２の処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記第２の試料と前記第１の試料の前記定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値間の差を計算することであって、前記第２の試料における前記定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値における統計的有意差は、前記対象の疾患の進行を示す、計算すること
を含む方法。

【請求項21】

対象における孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）疾患の進行を測定するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および前記第１の処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；
（ｂ）前記第１の試料の後に前記対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記第２のＣＳＦまたは血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および前記第２の処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記第２の試料と前記第１の試料における前記定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値間の差を計算することであって、前記第２の試料における前記定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の統計的有意差は、前記対象の疾患の進行を示す、計算すること
を含む方法。

【請求項22】

それを必要とする対象を処置する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値が検出される場合、医薬組成物を前記対象に投与すること
を含む方法。

【請求項23】

前記医薬組成物がＦＴＤ療法を含む、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

それを必要とする対象を処置する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、前記ｐＴ２１７／Ｔ２１７値における減少およびＡβ４２／４０値の増加が検出される場合、医薬組成物を前記対象に投与すること
を含む方法。

【請求項25】

前記医薬組成物がＦＴＤ療法を含む、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

それを必要とする対象を処置する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および前記処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｂ）健康な対照集団、アルツハイマー病集団、または４Ｒ－タウオパチー集団における複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較して、前記複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加が検出される場合、医薬組成物を前記対象に投与すること
を含む方法。

【請求項27】

前記医薬組成物がＦＴＤ療法を含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

それを必要とする対象を処置する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｂ）健康な対照集団、アルツハイマー病集団、または非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、医薬組成物を対象に投与すること
を含む方法。

【請求項29】

前記医薬組成物が孤発性ＦＴＤ療法を含む、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

前記処置が、Ａβ沈着を低減または防止するための治療剤を含まない、請求項２２から２９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記処置が、前記定量されたｐタウ種の量を変化または安定化させる、請求項２２から３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じである場合に、前記対象をＦＴＤの臨床試験に選択すること
を含む方法。

【請求項33】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じである場合に、前記対象をＡＤまたはＡｂ療法の臨床試験から除外すること
を含む方法。

【請求項34】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値が健康な対照集団と比較して増加している場合に、ＦＴＤの臨床試験に前記対象を選択すること
を含む方法。

【請求項35】

臨床試験に対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値がＡＤ集団と比較して増加している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外すること
を含む方法。

【請求項36】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値が健康な対照集団と比較して減少している場合、孤発性ＦＴＤ療法のための臨床試験に前記対象を選択すること
を含む方法。

【請求項37】

臨床試験に対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１８１／Ｔ１８１値がＡＤ集団と比較して減少している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外すること
を含む方法。

【請求項38】

アルツハイマー病を区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１５３／Ｔ１５３値を定量することであって、前記ｐＴ１５３／Ｔ１５３値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項39】

健康な対照集団および非アルツハイマー病タウオパチー集団と比較して増加したｐＴ１５３／Ｔ１５３値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する、請求項３８に記載の方法。

【請求項40】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１５３／Ｔ１５３値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１５３／Ｔ１５３値が健康な対照集団または非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合に、ＡＤ療法のための臨床試験に対象を選択すること
を含む方法。

【請求項41】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１５１／Ｔ１５１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１５３／Ｔ１５３値が非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合、非ＡＤタウオパチー療法の臨床試験から前記対象を除外すること
を含む方法。

【請求項42】

アルツハイマー病を区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量することであって、前記ｐＴ１１１／Ｔ１１１値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別すること
を含む方法。

【請求項43】

健康な対照集団および非アルツハイマー病タウオパチー集団と比較して増加したｐＴ１１１／Ｔ１１１値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する、請求項３８に記載の方法。

【請求項44】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１１１／Ｔ１１１値が健康な対照集団または非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合に、ＡＤ療法のための臨床試験に前記対象を選択すること
を含む方法。

【請求項45】

臨床試験において対象を選択するための方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量すること；ならびに
（ｃ）前記ｐＴ１１１／Ｔ１１１値が非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合、非ＡＤタウオパチー療法の臨床試験から前記対象を除外すること
を含む方法。

【請求項46】

タウオパチーを区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２０５／Ｔ２０５値を定量することであって、前記ｐＴ２０５／Ｔ２０５値によって、タウオパチーと健康な状態とを区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項47】

ｐＴ２０５／Ｔ２０５値の増加により、タウオパチーと健康な状態とを区別する、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

タウオパチーを区別する方法であって、
（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、前記ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに
（ｂ）前記処理された試料中のｐＴ２０８／Ｔ２０８値を定量することであって、前記ｐＴ２０８／Ｔ２０８値によって、タウオパチーと健康な状態とを区別する、定量すること
を含む方法。

【請求項49】

ｐＴ２０８／Ｔ２０８値の増加により、タウオパチーと健康な状態とを区別する、請求項４８に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれている、２０２１年３月３１日に出願された米国特許仮出願第６３／１６９，１９３号の優先権を主張するものである。

【0002】

本開示は、所与の疾患を診断および／またはそれに適切な処置法を選択するために、３Ｒ－および４Ｒ－タウオパチーの病理学的特徴および／または臨床症状を測定するためのＣＳＦ中のタウ種およびアミロイド－ベータ種の使用を包含する。

【背景技術】

【0003】

微小管関連タンパク質タウ（ＭＡＰＴまたはタウ）は、ニューロンの形態学および生理学に必須の役割を果たす。タウは、６つの異なる全長タンパク質のアイソフォームを有し、アセチル化、グリコシル化およびリン酸化を含む多数の潜在的翻訳後修飾を受ける。リン酸化は、軸索の安定化におけるタウの正常な機能を調節するために重要であり、８０超の異なる残基で発生する場合がある。しかし、タウの過剰なリン酸化は、タウが主に過剰リン酸化タウで構成される細胞内不溶性対らせんフィラメント（ｐａｉｒｅｄ ｈｅｌｉｃａｌ ｆｉｌａｍｅｎｔｓ）（ＰＨＦ）および神経原線維変化（ＮＦＴ）に凝集する確率を高めるようである。

【0004】

大脳皮質における細胞内神経原線維変化は、アルツハイマー病（ＡＤ）の決定的な病理学的特徴であり、細胞外アミロイドβ（Ａβ）プラークの出現から長期間たった後に臨床症状が発症することと相関しており、細胞外アミロイドβ（Ａβ）プラークは、症状発症の最長２０年前から発現し始める。ＡＤにおいて、可溶性ｐ－タウおよび非リン酸化タウが、脳脊髄液（ＣＳＦ）中で２倍増加する。これらの変化は、タウおよびＮＦＴをＣＳＦに受動的に放出するニューロン死（神経変性）の影響を反映していると提唱されている。しかし、重大なＮＦＴ病変および神経変性を伴う他のタウオパチー（例えば、進行性核上性麻痺、前頭側頭葉変性タウ）では、ＣＳＦの可溶性ｐ－タウおよび総タウのレベルは増加しない。

【0005】

進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、皮質基底核症候群（ＣＢＳ）、および前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）等の他のタウオパチーまたは神経変性疾患には、現在、ＣＳＦまたは画像化バイオマーカーがなく、診断は主に、脳解剖後に最終的に確認される臨床評価に依存する。他のタウオパチーがアミロイド病変の非存在下でｐ－タウ修飾を誘導するかどうかは依然として不明である。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

したがって、当技術分野では、臨床試験の設計および実施に影響を与える、信頼性が高く精度が高いタウオパチーの臨床診断のための改善された方法が依然として必要とされている。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本開示の様々な態様の中で、対象を診断し、処置決定を導き、臨床試験の対象を選択するために、特定のアミノ酸残基におけるタウリン酸化、および適宜Ａβ種を定量する方法が提供される。

【0008】

本開示の一態様は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと健康な状態とを区別する、定量することを含む方法を包含する。

【0009】

本開示の別の態様は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーとアルツハイマー病とを区別する、定量することを含む方法を包含する。

【0010】

本開示の別の態様は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーをアルツハイマー病、４Ｒ－タウオパチー、および健康な状態から区別する、定量することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと健康な状態とを区別する。一部の実施形態では、アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａｂ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷタウオパチーとＡＤとを区別する。一部の実施形態では、４Ｒ－タウオパチー集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと４Ｒ－タウオパチーとを区別する。

【0011】

本開示の別の態様は、孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値によって、孤発性ＦＴＤをアルツハイマー病、非孤発性ＦＴＤタウオパチー、および健康な状態から区別する、定量することを含む方法を包含する。一部では、アルツハイマー病集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤとアルツハイマー病とを区別する。一部の実施形態では、健康な対照集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤと健康な状態とを区別する。一部の実施形態では、非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較した、工程（ｂ）で定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少により、孤発性ＦＴＤと非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団を区別する。

【0012】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値が検出される場合、対象を前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していると診断することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、方法は、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を決定することをさらに含み、健康な対照と比較した複合値の増加は、対象がＦＴＤを有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していることを示す。一部の実施形態では、対象は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者として診断される。

【0013】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加が検出される場合、対象を前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していると診断することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、方法は、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を決定することをさらに含み、アルツハイマー病集団と比較した複合値の増加は、対象がＦＴＤを有するか、またはＦＴＤのリスクが増加していることを示す。一部の実施形態では、対象は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者として診断される。

【0014】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、対象を孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、または孤発性ＦＴＤのリスクが増加していると診断することを含む方法を包含する。

【0015】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病の症状を有する対象を診断する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、対象を孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を有するか、または孤発性ＦＴＤのリスクが増加していると診断することを含む方法を包含する。

【0016】

本開示の別の態様は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに第１の処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；（ｂ）第１の試料の後に対象から得られた第２の処理されたＣＳＦ試料または血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに第２の処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）第２の試料および第１の試料の定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の間の差を計算することであって、第２の試料における定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を包含する。

【0017】

本開示の別の態様は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および第１の処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；（ｂ）第１の試料の後に対象から得られた第２の処理されたＣＳＦ試料または血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および第２の処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａｂ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）第２の試料と第１の試料の定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値間の差を計算することであって、第２の試料における定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値における統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を包含する。

【0018】

本開示の別の態様は、対象における孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）疾患の進行を測定するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および第１の処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；（ｂ）第１の試料の後に対象から得られた第２の処理されたＣＳＦ試料または血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦ試料または血液試料は、工程（ａ）と同じｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および第２の処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）第２の試料と第１の試料における定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値間の差を計算することであって、第２の試料における定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値の統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を包含する。

【0019】

本開示の別の態様は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、および処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｂ）健康な対照集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値が検出される場合、医薬組成物を対象に投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＦＴＤ療法を含む。

【0020】

本開示の別の態様は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｂ）アルツハイマー病集団におけるｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値と比較して、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加が検出される場合、医薬組成物を対象に投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＦＴＤ療法を含む。

【0021】

本開示の別の態様は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｂ）健康な対照集団、アルツハイマー病集団、または４Ｒ－タウオパチー集団における複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値と比較して、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加が検出される場合、医薬組成物を対象に投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、医薬組成物は、ＦＴＤ療法を含む。

【0022】

本開示の別の態様は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること、および処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｂ）健康な対照集団、アルツハイマー病集団、または非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団におけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値と比較して、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少が検出される場合、医薬組成物を対象に投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、医薬組成物は、孤発性ＦＴＤ療法を含む。

【0023】

上記の態様のそれぞれにおいて、ある特定の実施形態では、処置は、Ａβ沈着を低減または防止するための治療剤を含まず、および／または処置は、定量されたｐタウ種の量を変化または安定化させる。

【0024】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じである場合に、対象をＦＴＤの臨床試験に選択することを含む方法を包含する。

【0025】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じである場合に、対象をＡＤまたはＡｂ療法の臨床試験から除外することを含む方法を包含する。

【0026】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値が健康な対照集団と比較して増加している場合に、ＦＴＤの臨床試験に対象を選択することを含む方法を包含する。

【0027】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値がＡＤ集団と比較して増加している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外することを含む方法を包含する。

【0028】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１８１／Ｔ１８１値が健康な対照集団と比較して減少している場合、孤発性ＦＴＤ療法のための臨床試験に対象を選択することを含む方法を包含する。

【0029】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ１８１／Ｔ１８１値がＡＤ集団と比較して減少している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外することを含む方法を包含する。

【0030】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病を区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ１５３／Ｔ１５３値を定量することであって、ｐＴ１５３／Ｔ１５３値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する、定量することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、健康な対照集団および非アルツハイマー病タウオパチー集団と比較して増加したｐＴ１５３／Ｔ１５３値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する。

【0031】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１５３／Ｔ１５３値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１５３／Ｔ１５３値が健康な対照集団または非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合に、ＡＤ療法のための臨床試験に対象を選択することを含む方法を包含する。

【0032】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１５１／Ｔ１５１値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１５３／Ｔ１５３値が非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合、非ＡＤタウオパチー療法の臨床試験から対象を除外することを含む方法を包含する。

【0033】

本開示の別の態様は、アルツハイマー病を区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量することであって、ｐＴ１１１／Ｔ１１１値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する、定量することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、健康な対照集団および非アルツハイマー病タウオパチー集団と比較して増加したｐＴ１１１／Ｔ１１１値によって、アルツハイマー病を、非ＡＤタウオパチーおよび健康な状態から区別する。

【0034】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１１１／Ｔ１１１値が健康な対照集団または非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合に、ＡＤ療法のための臨床試験に対象を選択することを含む方法を包含する。

【0035】

本開示の別の態様は、臨床試験において対象を選択するための方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１１１／Ｔ１１１値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１１１／Ｔ１１１値が非ＡＤタウオパチー集団と比較して増加している場合、非ＡＤタウオパチー療法の臨床試験から対象を除外することを含む方法を包含する。

【0036】

本開示の別の態様は、タウオパチーを区別する方法であって、一般に、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ２０５／Ｔ２０５値を定量することであって、ｐＴ２０５／Ｔ２０５値によって、タウオパチーと健康な状態とを区別する、定量することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、ｐＴ２０５／Ｔ２０５値の増加により、タウオパチーと健康な状態とを区別する。

【0037】

本開示の別の態様は、タウオパチーを区別する方法であって、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに（ｂ）処理された試料中のｐＴ２０８／Ｔ２０８値を定量することであって、ｐＴ２０８／Ｔ２０８値によって、タウオパチーと健康な状態とを区別する、定量することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、ｐＴ２０８／Ｔ２０８値の増加により、タウオパチーと健康な状態とを区別する。

【0038】

本発明のこれらおよび他の態様ならびに反復を、以下により十分に説明する。

【0039】

出願ファイルは、少なくとも１つのカラーで作成された写真を含有する。カラー写真を有するこの特許出願公開のコピーは、要求および必要な料金の支払いに応じて事務局が提供することとなる。

【図面の簡単な説明】

【0040】

【図1】図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃ、図１Ｄ、図１Ｅおよび図１Ｆは、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者が、アミロイド病変を伴わずにＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７を増加させたことを示す。図１Ａは、すべての試料（ｎ＝２５２）が、ＷａｓｈＵ－Ａコホートで計算されたカットオフ（ＣＳＦ Ａβ４２／４０カットオフ＝０．０８６、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７カットオフ＝４．７６）を使用して象限分析にプロットされたことを示す。図１Ｂ～図１Ｅは、各象限に対し臨床的に分類された各群の参加者数を示す円グラフを示す：ＩＩ（図１Ｂ）、Ｉ（図１Ｃ）、ＩＩＩ（図１Ｄ）、およびＩＶ（図１Ｅ）。ＣＳＦ、脳脊髄液。図１Ｆは、この研究で分析されたコホートのフローチャートを示す。ＷａｓｈＵ－Ａコホートは、ＰｉＢ ＰＥＴ画像化データを有するサブセット（ｎ＝４８）を含むＡＤおよび年齢が一致した対照を含む。このサブセットおよびＰｉＢ ＰＥＴカットオフ０．１８を使用して、ＣＳＦ Ａｂ４２／４０（カットオフ０．０８６）の免疫沈降および質量分析（ＩＰ／ＭＳ）測定のアミロイド陽性を決定した。次に、ＷａｓｈＵ－ＡからのすべてのＣＳＦを使用して、ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７カットオフ４．７６を決定した。ｐＴ１８１、ｐＴ２１７、総タウのＣＳＦ濃度、およびｐＴ１８１／Ｔ１８１の比のカットオフは、それぞれ４４．７９、２２２．４、７５４．７、および１５．７５であった。ＷａｓｈＵ－Ａ（ｎ＝８５）、ＷａｓｈＵ－Ｂ（ｎ＝８８）、およびＭｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒコホート（ｎ＝７９）を、象限分析でＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａｂ４２／４０およびｐＴ２１７／Ｔ２１７について分析した（合計ｎ＝２５２）。試料を、決定されたアミロイドおよびｐタウ陽性のカットオフを使用して象限Ｉ～ＩＶに分類した。ＡＭＣ：年齢一致対照、ＹＮＣ：若年正常対照、ＣＢＳ：皮質基底核症候群、ＰＳＰ：進行性核上性麻痺、ｂｖＦＴＤ：行動障害型前頭側頭型認知症。

【図2】図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃおよび図２Ｄは、ＡＤ、およびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者診断用のＣＳＦ Ａβ４２／４０、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７、ならびに複合バイオマーカーを示す。図２Ａは、ＣＳＦ Ａβ４２／４０がＡＤにおいて有意に減少していることを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。図２Ｂは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７がＡＤにおいて有意に増加していることを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。図２Ｃは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０が、対照群および大部分が４Ｒタウオパチー（ＰＳＰ、ＣＢＳ、ＦＴＤ－ＭＡＰＴＰ３０１Ｌ）および孤発性ｂｖＦＴＤのサブセットからなる４Ｒタウオパチー群（ＦＴＤ－ＴＤＰ、ＦＴＤ－ＦＵＳ、および３Ｒタウオパチーを含む可能性がある、ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）と比較して、ＡＤにおいて有意に増加していることを示す。これは、対照（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）および４Ｒタウオパチー群（ＡＮＯＶＡ、ｐ＝０．０００１）と比較して、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者でも有意に増加している。図２Ｄは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７をＣＳＦ Ａβ４２／４０で割った値が、ＡＤにおいて有意に増加することを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。ＣＳＦ、脳脊髄液；ＡＤ、アルツハイマー病；ＰＳＰ、進行性核上性麻痺；ＣＢＳ、皮質基底核症候群；ｂｖＦＴＤ、行動障害型前頭側頭型認知症。

【図3】図３Ａ、図３Ｂ、図３Ｃ、図３Ｄ、図３Ｅ、図３Ｆ、図３Ｇ、図３Ｈ、図３Ｉ、図３Ｊ、図３Ｋ、および図３Ｌは、ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０、ＣＳＦタウおよびｐタウのＲＯＣ分析を示す。図３Ａは、ＣＳＦ Ａβ４２／４０比が、Ｗａｓｈ－Ａコホート（ｎ＝４８）のアミロイドＰＥＴ－ＰｉＢ＋参加者において有意に増加していることを示す。図３Ｂは、ＣＳＦ Ａβ４２／４０がアミロイドＰＥＴ－ＰｉＢ＋をＰｉＢ－個体から区別できることを示す（ＡＵＣ＝０．９２０７、ｐ＜０．０００１）。（図３Ｃ、図３Ｅ、図３Ｇ、図３Ｉ、図３Ｋ）ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７比、ＣＳＦ ｐＴ２１７、ＣＳＦ Ｔ１８１、ＣＳＦ総タウ濃度、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１比は、Ｗａｓｈ－Ａコホート（ｎ＝８５）におけるＣＳＦ Ａβ４２／４０比によって定義されたアミロイド＋参加者において有意に増加する。（図３Ｄ、図３Ｆ、図３Ｈ、図３Ｊ、図３Ｌ）ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７比、ＣＳＦ ｐＴ２１７、ＣＳＦ Ｔ１８１、ＣＳＦ総タウ濃度、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１比は、それぞれＡＵＣ＝０．９８３、０．９４９、０．８１６、０．６９３、０．９３４を伴い、ＣＳＦ Ａβ４２／４０陽性（アミロイド＋）個体をＣＳＦ Ａβ４２／４０陰性（アミロイド－）個体から区別することができる。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。

【図4】図４Ａは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。図４Ｂは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。図４Ｃは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。図４Ｄは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。図４Ｅは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。図４Ｆは、診断による象限分析を示す。各疾患群の参加者が位置する象限（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）を示す円グラフ。

【図5】図５Ａ、図５Ｂ、および図５Ｃは、象限ごとのアミロイドおよびタウのＰＥＴ画像化を示す。図５Ａは、ＰｉＢ ＳＵＶＲによって測定されたアミロイドＰＥＴ画像化が、象限ＩＩ＞ＩＩＩ＞ＩＶにおいて有意かつ徐々に増加することを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。図５Ｂは、ＡＶ４５ ＳＵＶＲによって測定されたアミロイドＰＥＴ画像化が、象限ＩＩ＞ＩＩＩ＞ＩＶにおいて有意かつ徐々に増加することを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。図５Ｃは、ＡＶ１４５１ ＳＵＶＲによって測定されたタウＰＥＴ画像化が、第ＩＩ象限でのみ増加していることを示す（ＡＮＯＶＡ、ｐ＜０．０００１）。象限Ｉに画像化データを有する参加者はいなかった。ＡＮＯＶＡ ＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。

【図6】図６は、象限ＩＩＩおよび象限ＩＶにおけるＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の相関をグラフで示す。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ｐタウ陽性のカットオフ未満の第ＩＩＩ象限および第ＩＶ象限におけるＣＳＦ Ａｂ４２／４０と負の相関がある（ピアソン相関 ｒ＝０．５５６、ｐ＜０．０００１）。

【図7】図７Ａ、図７Ｂ、図７Ｃ、および図７Ｄは、図２に示される診断のサブカテゴリをグラフで示す。図７Ａは、ＣＳＦ Ａβ４２／４０がＡＤおよび限局性ＡＤにおいて有意に減少していることを示す。図７Ｂは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７がＡＤおよび限局性ＡＤにおいて有意に増加していることを示す。図７Ｃは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０が、ＡＤおよびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者において有意に増加していることを示す。図７Ｄは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７をＣＳＦ Ａβ４２／４０で割った値が、ＡＤおよび限局性ＡＤにおいて有意に増加していることを示す。ＡＮＯＶＡ ＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。

【図8】図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ、および図８Ｄは、ＣＳＦ Ａｂ４２／４０およびＣＳＦの総タウおよびｐタウを使用した象限分析をグラフで示す。ｐＴ２１７（図８Ａ）、ｐＴ１８１（図８Ｂ）、総タウ（図８Ｃ）のＣＳＦ濃度によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者または他の群を分離しない。図８Ａは、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１比によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者が分離されないことを示す。しかし、孤発性ｂｖＦＴＤでは、象限ＩＶのＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１が低下する場合がある。

【図9】図９Ａ、図９Ｂ、図９Ｃ、および図９Ｄは、タウオパチーのサブ群におけるＩＰ／ＭＳ ＣＳＦの総タウおよびｐタウをグラフで示す。図９Ａおよび図９Ｂは、ＡＤではＣＳＦ ｐＴ２１７およびｐＴ１８１濃度が有意に増加したことを示す。図９Ｃは、総ＣＳＦタウが、ＹＮＣよりもＡＭＣ、ＡＤ、限局性ＡＤ、ＣＢＳ ＰＳＰ連続体において有意に増加していることを示す。図９Ｄは、ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ、ＦＴＬＤ－ＦＵＳを含む孤発性ｂｖＦＴＤが、Ｒ４０６Ｗ（＊ｐ＜０．０５）、ＡＭＣ（＊＊＊ｐ＜０．００１）、およびＡＤ／限局性ＡＤ（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１）よりも有意に低いＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１を有することを示している。

【図10】図１０Ａおよび図１０Ｂは、ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ、ＦＴＬＤ－ＦＵＳを含む孤発性ｂｖＦＴＤが、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１に関し、対照、ＡＤおよび他のタウオパチーから分離され得ることを示す。図１０Ａは、ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ、ＦＴＬＤ－ＦＵＳを含む孤発性ｂｖＦＴＤ（ｂｖＦＴＤ）が、対照、ＡＤ、ならびにＣＢＳ、ＰＳＰ、およびＭＡＰＴ－ＦＴＤ（Ｐ３０１ＬおよびＲ４０６Ｗ突然変異保持者）を含むタウオパチーよりも高いＣＳＦ Ａβ４２／４０比および低いＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１を有することを示す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。図１０Ｂは、ｂｖＦＴＤを他のコホートから分離する際のＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１の診断値を示す。孤発性ｂｖＦＴＤは、対照（ＡＵＣ＝０．７５２）ならびにＰＳＰ、ＣＢＳ、およびＭＡＰＴ－ＦＴＤ（ＡＵＣ＝０．７０７）から分離することができる。

【図11】図１１は、ＣＢＤまたはＰＳＰとして同定された参加者の大部分全員が、ＡＤ試料で観察されたよりも高いｐＴ２１７／Ｔ２１７を有することを示す。

【図12】図１２は、ＡＤおよび非ＡＤタウオパチーにおけるｐＴ１８１／Ｔ１８１値を示す。

【図13】図１３は、ＡＤおよび非ＡＤタウオパチーにおけるｐＴ２０５／Ｔ２０５値を示す。

【図14】図１４は、ＡＤおよび非ＡＤタウオパチーにおけるｐＳ２０８／Ｓ２０８値を示す。

【図15】図１５は、ＡＤおよび非ＡＤタウオパチーにおけるｐＴ１１１／Ｔ１１１値を示す。

【図16】図１６は、ＡＤおよび非ＡＤタウオパチーにおけるｐＴ１５３／Ｔ１５３値を示す。

【図17】図１７Ａは、ＦＴＤ－タウ、ＦＴＤ－ＡＬＳ、ＦＴＤ－ＦＵＳを含む孤発性ＦＴＤが、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１に関し、対照、ＡＤおよび他のタウオパチーから分離され得ることを示す。図１７Ｂでは、孤発性ＦＴＤ（ｓＦＴＤ）は、象限分析における他のコホートよりも高いＣＳＦ Ａｂ４２／４０比および低いＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１を示す。図１７Ｃでは、ｓＦＴＤは、Ｒ４０６Ｗ（＊ｐ＜０．０５）、ＡＭＣ（＊＊＊ｐ＜０．００１）、およびＡＤ／限局性ＡＤ（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１）よりも有意に低いＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１を有することを示している。図１７Ｄでは、ｓＦＴＤは、対照、ＡＤおよびＣＢＳ、ＰＳＰ、および家族性ＦＴＤ－ＭＡＰＴ（ｆＦＴＤ）に対し有意に低いＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１を有する。ｓＦＴＤは、対照（ＡＵＣ＝０．７５）ならびにＰＳＰ、ＣＢＳ、およびｆＦＴＤ（ＡＵＣ＝０．７２）から分離することができる。

【図18】図１８Ａは、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者ではアミロイド病変を伴わずにＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が増加し、孤発性ＦＴＤではｐＴ１８１／Ｔ１８１が減少したことを示す。図１８Ｂでは、すべての試料（ｎ＝２６５）を、ｘ軸にＣＳＦ Ａｂ４２／４０比、ｙ軸にＣＳＦタウ測定値を用いた象限分析に供した。図１８Ｃでは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者で増加している。図１８Ｄでは、（ＣＳＦ Ａβ４２／４０カットオフ＝０．０８６、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７カットオフ＝４．７５５。ＣＳＦ ｐＴ２１７絶対濃度によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は分離されない。図１８Ｅでは、孤発性ＦＴＤでは、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１が減少する。ＣＳＦ ｐＴ１８１の絶対濃度によって、孤発性ＦＴＤは分離されない。総タウによって、どの群も分離されない。

【図19】図１９Ａは、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者では、アミロイド病変を伴わずにｐＴ２１７／Ｔ２１７が増加し、図１９Ｂでは、孤発性ＦＴＤではｐＴ１８１／Ｔ１８１が減少したことを示す。図１９Ｃでは、ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者を分離するのに、ｐＴ２１７濃度単独よりも良好である。図１９Ｄでは、ｐＴ１８１／Ｔ１８１は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷおよびＰ３０１Ｌ保持者を含まない孤発性ＦＴＤを分離するのに、ｐＴ１８１濃度単独よりも良好である。図１９Ｅでは、様々な疾患コホートの年齢－図１９Ｆでは、ＣＳＦ総タウは、部分的に年齢に依存する。

【発明を実施するための形態】

【0041】

中枢神経系中の神経原線維変化中へのタウタンパク質凝集は、アルツハイマー病（ＡＤ）を含むある特定の神経変性障害の病因となる。タウ不安定化の機構はなお完全に理解されていないが、タウタンパク質はタウ凝集体中で高リン酸化されることが判明した。本開示は、タウオパチーを診断するために、特定のアミノ酸残基におけるタウリン酸化を定量するための、処置決定を導くための、臨床試験の対象を選択するための、およびある特定の治療介入の臨床効果を評価するための、方法の使用を包含する。本発明のこれらおよび他の態様ならびに反復を、以下により十分に説明する。

【0042】

Ｉ．定義
本発明がより容易に理解されるように、ある特定の用語を最初に定義する。別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明の実施形態が関係する当業者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書において記載されているものと類似するか、それを修正するか、またはそれと等価な多数の方法および材料を、本発明の実施形態の実践において不必要な実験を伴うことなく使用することができ、好ましい材料および方法は本明細書において記載されている。本発明の実施形態を説明し特許請求するにあたって、下記に記載する定義に従って以下の用語を使用する。

【0043】

「約」という用語は、本明細書において使用される場合、例えば典型的な測定技術および器具を通して発生することのある、限定されるものではないが質量、容量、時間、距離および量を含む任意の定量可能な変数に関する数量の変動を指す。さらに、実際に使用される固体および液体の操作手順を考慮すると、組成物を作製するかまたは方法を実行するため等に使用される成分の製造、供給源または純度の差異を通して起こる可能性のある、一定数の不慮の誤差および変動が存在する。「約」という用語は、最大±５％であり得るが、±４％、３％、２％、１％等でもあり得る、これらの変動も包含する。「約」という用語による修飾の有無を問わず、特許請求の範囲は量についての等価物を含む。

【0044】

本明細書において使用される場合、抗体は、当該技術分野において理解されるような完全な抗体、すなわち２つの重鎖および２つの軽鎖からなるものを指すか、または抗原結合領域を有し、限定されるものではないが、フラグメント、例えばＦａｂ’、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単一ドメイン抗体、Ｆｖおよび一本鎖抗体Ｆｖを含む、任意の抗体様の分子を指す。抗体という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体およびヒト化抗体も指す。様々な抗体ベースのコンストラクトおよびフラグメントを調製および使用するための技術は、当該技術分野において公知である。抗体を調製および特徴付けるための手段も、当該技術分野において公知である（例えばAntibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988を参照されたい、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。

【0045】

本明細書において使用される場合、「アプタマー」という用語は、生化学的活性、分子の認識または結合特性に関して有用な生物学的活性を有するポリヌクレオチド、一般的にはＲＮＡまたはＤＮＡを指す。通常、アプタマーは分子活性を有し、例えば特定のエピトープ（領域）における標的分子へ結合する。アプタマーはポリペプチドと結合する点で特異的であり、インビトロ進化法（ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ）により、合成および／または同定できることが一般的に認められている。アプタマーを調製および特徴付ける手段は、インビトロ進化法を含め、当該技術分野において公知である。例えば、その全体を参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ７，９３９，３１３を参照されたい。

【0046】

「Ａβ」という用語は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれるより大きなタンパク質のカルボキシ末端中の領域に由来するペプチドを指す。ＡＰＰをコードする遺伝子は、第２１染色体に位置する。毒性を有し得る異なる多数の形態のＡβが存在し、Ａβペプチドは典型的に３７～４３アミノ酸配列長であるが、これらは全体のサイズを変化させる短縮化および修飾を有し得る。これらは、可溶性および不溶性の区画中、モノマー、オリゴマーおよび凝集体形態で、細胞内または細胞外で見出すことができ、他のタンパク質または分子と複合体形成し得る。Ａβの有害効果または毒性効果は、上記の形態のいずれかまたはすべて、ならびに具体的に記載されていないその他の点に起因し得る。例えば、２つのそのようなＡβアイソフォームにはＡβ４０およびＡβ４２が挙げられ、Ａβ４２アイソフォームは特に原線維形成的または不溶性であり、疾患状態に関連する。「Ａβ」という用語は、典型的に、個別のＡβ種間の区別なしに、複数のＡβ種を指す。特定のＡβ種は、ペプチドのサイズにより、例えばＡβ４２、Ａβ４０、Ａβ３８等と同定される。

【0047】

本明細書において使用される場合、「Ａβ４２／Ａβ４０値」という用語は、対象から得られた試料中のＡβ４２の量の、同じ試料中のＡβ４０の量と比較した比を意味する。

【0048】

「Ａβアミロイドーシス」は、脳内の臨床的に異常なＡβ沈着として定義される。Ａβアミロイドーシスを有すると決定される対象は、本明細書において「アミロイド陽性」と称され、一方でＡβアミロイドーシスを有しないと決定される対象は、本明細書において「アミロイド陰性」と称される。Ａβアミロイドーシスの承認済みの指標が当該技術分野において存在する。本開示の時点では、Ａβアミロイドーシスは、典型的に、アミロイド画像化（例えばＰｉＢ ＰＥＴ、ｆｌｕｏｒｂｅｔａｐｉｒもしくは当該技術分野において公知の他の画像化方法）により直接測定されるか、または脳脊髄液（ＣＳＦ）Ａβ４２の低減もしくはＣＳＦ Ａβ４２／４０比の低減により、間接的に測定される。平均皮質結合能（ｍｅａｎ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）スコア＞０．１８を有する［１１Ｃ］ＰＩＢ－ＰＥＴ画像は、Ａβアミロイドーシスの指標であり、免疫沈降および質量分析（ＩＰ／ＭＳ）による約１ｎｇ／ｍｌの脳脊髄液（ＣＳＦ）Ａβ４２濃度も同様である。あるいは、ＰＩＢ－ＰＥＴによって決定されるアミロイド陽性の予測精度を最大化するＣＳＦ Ａβ４２／４０のカットオフ比を使用することもできる。これらのような、または当該技術分野において公知のおよび／または実施例で使用される他の値は、Ａβアミロイドーシスを臨床的に確認するために、単独でまたは組合せで使用することができる。例えば、各々がその全体を参照により本明細書に組み込まれる、Klunk W E et al. Ann Neurol 55(3) 2004, Fagan A M et al. Ann Neurol, 2006, 59(3), Patterson et. al, Annals of Neurology, 2015, 78(3): 439-453、またはJohnson et al., J. Nuc. Med., 2013, 54(7): 1011-1013を参照されたい。Ａβアミロイドーシスを有する対象は、症候性であることもあればそうでないこともあり、症候性の対象は、Ａβアミロイドーシスに関連する疾患についての臨床基準を満たすこともあれば満たさないこともある。Ａβアミロイドーシスに関連する症状の非限定的な例には、認知機能障害、挙動変化、言語機能異常、情動調節不全、発作、認知症および神経系構造または機能の障害を挙げることができる。Ａβアミロイドーシスに関連する疾患には、限定されるものではないが、アルツハイマー病（ＡＤ）、脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、レビー小体型認知症および封入体筋炎が挙げられる。Ａβアミロイドーシスを有する対象は、Ａβアミロイドーシスに関連する疾患を発症する増大したリスクを有する。

【0049】

「Ａβアミロイドーシスの臨床徴候」は、当該技術分野において公知のＡβ沈着の尺度を指す。Ａβアミロイドーシスの臨床徴候には、限定されるものではないが、アミロイド画像化（例えばＰｉＢ ＰＥＴ、ｆｌｕｏｒｂｅｔａｐｉｒまたは当該技術分野において公知の他の画像化方法）により、または脳脊髄液（ＣＳＦ）Ａβ４２もしくはＡβ４２／４０比の低減により同定される、Ａβ沈着を挙げることができる。例えば、各々がその全体を参照により本明細書に組み込まれる、Klunk WE et al. Ann Neurol 55(3) 2004、およびFagan AM et al. Ann Neurol 59(3) 2006を参照されたい。各々がその全体を参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第１４／３６６，８３１号、第１４／５２３，１４８号および第１４／７４７，４５３号に記載されているように、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候には、Ａβの代謝の測定、特に、単独での、または他のＡβ突然変異体（例えばＡβ３７、Ａβ３８、Ａβ３９、Ａβ４０および／または総Ａβ）の代謝の測定と比較した、Ａβ４２代謝の測定も挙げることができる。さらなる方法は、各々がその全体を参照により本明細書に組み込まれる、Albert et al. Alzheimer's & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 170-179; McKhann et al., Alzheimer's & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 263-269;およびSperling et al. Alzheimer's & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 280-292に記載されている。重要なことに、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候を有する対象は、Ａβ沈着に関連する症状を有することもあれば有しないこともある。また、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候を有する対象には、Ａβアミロイドーシスに関連する疾患を発症する増大したリスクがある。

【0050】

「アミロイド画像化の候補」は、臨床医によりアミロイド画像化が臨床的に保証される個体として特定された対象を指す。非限定的な例として、アミロイド画像化の候補は、１つもしくは複数のＡβアミロイドーシスの臨床徴候、１つもしくは複数のＡβプラークに関連する症状、１つもしくは複数のＣＡＡに関連する症状、またはそれらの組合せを有する対象であり得る。臨床医は、彼らの臨床的ケアを指示するために、そのような対象についてのアミロイド画像化を推奨してもよい。別の非限定的な例として、アミロイド画像化の候補は、Ａβアミロイドーシスに関連する疾患についての臨床試験における潜在的な参加者（対照対象または試験対象のいずれか）であり得る。

【0051】

「Ａβプラークに関連する症状」または「ＣＡＡに関連する症状」は、それぞれ、アミロイド線維と呼ばれる規則的に配列された線維の凝集体から構成されるアミロイドプラークまたはＣＡＡの形成により引き起こされるかまたはそれに関連する、任意の症状を指す。代表的なＡβプラークに関連する症状には、限定されるものではないが、ニューロン変性、認知機能障害、記憶障害、挙動変化、情動調節不全、発作、神経系構造または機能の障害、およびアルツハイマー病またはＣＡＡの発症または悪化の増大したリスクを挙げることができる。ニューロン変性には、ニューロンの構造の変化（分子の変化、例えば毒性タンパク質の細胞内蓄積、タンパク質凝集等、およびマクロレベルの変化、例えば軸索または樹状突起の形状または長さの変化、ミエリン鞘組成の変化、ミエリン鞘の喪失等を含む）、ニューロンの機能の変化、ニューロンの機能の喪失、ニューロン死、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。認知機能障害には、限定されるものではないが、記憶、注意、集中、言語、論理的思考、創造性、実行機能、計画および系統化の困難さを挙げることができる。挙動変化には、限定されるものではないが、身体的または言語的な攻撃、衝動性、抑制の低下、無感動、自発性の低下、人格の変化、アルコール、タバコまたは薬物の乱用、および他の依存症関連の行動を挙げることができる。情動調節不全には、限定されるものではないが、うつ病、不安、躁病、興奮性および情動失禁を挙げることができる。発作には、限定されるものではないが、全身性強直性間代性発作、複雑部分発作、および非てんかん性の心因性発作を挙げることができる。神経系構造または機能の障害には、限定されるものではないが、水頭症、パーキンソニズム、睡眠障害、精神病、姿勢および共調運動の障害を挙げることができる。これには、運動障害、例えば単不全麻痺、片側不全麻痺、四肢不全麻痺、運動失調、バリスムスおよび振戦を挙げることができる。これには、嗅覚、触覚、味覚、視覚、聴覚を含む感覚喪失または機能障害も挙げることができる。さらに、これには、自律神経系障害、例えば腸および膀胱の機能障害、性機能障害、血圧および体温の調節不全を挙げることができる。最後に、これには、視床下部および下垂体の機能障害に起因するホルモン障害、例えば成長ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、卵胞刺激ホルモン、ゴナドトロピン放出ホルモン、プロラクチンおよび無数の他のホルモンおよび調節因子の欠乏および調節不全を挙げることができる。

【0052】

本明細書において使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。哺乳動物には、限定されるものではないが、ヒト、霊長類、家畜、げっ歯類および愛玩動物が挙げられる。対象は、医学的ケアもしくは処置の待機中であってもよく、医学的ケアもしくは処置を受けていてもよく、または医学的ケアもしくは処置を受けたことがあってもよい。

【0053】

本明細書において使用される場合、「対照集団」、「正常集団」、もしくは「健康な」対象からの試料という用語は、タウオパチーもしくはＡβアミロイドーシスを有さないと臨床的に決定された対象もしくは対象の群、または定性的もしくは定量的試験結果に基づく、Ａβアミロイドーシス（アルツハイマー病を含むがこれに限定されない）に関連する臨床疾患を指す。

【0054】

本明細書において使用される場合、「血液試料」という用語は、血液、好ましくは末梢（または循環）血に由来する生物学的試料を指す。血液試料は全血、血漿または血清であることができるが、血漿が典型的に好ましい。

【0055】

「アイソフォーム」という用語は、本明細書において使用される場合、タンパク質をコードするｍＲＮＡの選択的スプライシング、タンパク質の翻訳後修飾、タンパク質のタンパク分解処理、遺伝的変異および体細胞組換えに起因して生じる、同じタンパク質変異体のいくつかの異なる形態のいずれかを指す。「アイソフォーム」および「変異体」という用語は、互換的に使用される。

【0056】

「タウ」という用語は、遺伝子ＭＡＰＴ（またはそのホモログ）によってコードされる複数のアイソフォーム、ならびにインビボでＣ末端が切断される種、インビボでＮ末端が切断される種、インビボで翻訳後修飾される種、またはそれらの任意の組合せを指す。本明細書において使用される場合、「タウ」、「タウタンパク質」、および「タウ種」という用語は、互換的に使用され得る。限定されるものではないが、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類、魚類、ウシ、カエル、ヤギおよびニワトリを含む多数の動物では、タウは遺伝子ＭＡＰＴによりコードされる。遺伝子がＭＡＰＴとして同定されていない動物では、ホモログが当該技術分野において周知の方法で同定され得る。

【0057】

ヒトでは、ＭＡＰＴのエクソン２、３および１０の選択的スプライシングにより生成される、タウの６つのアイソフォームが存在する。これらのアイソフォームは、３５２～４４１アミノ酸長の範囲にわたる。エクソン２および３は、Ｎ末端に各々２９個のアミノ酸インサートをコードし（Ｎと呼ばれる）、全長ヒトタウアイソフォームは、両方のインサート（２Ｎ）、１つのインサート（１Ｎ）を有するか、またはインサートを有しない（０Ｎ）ことがある。すべての全長ヒトタウアイソフォームは、微小管結合ドメイン（Ｒと呼ばれる）の３つの繰り返しも有する。Ｃ末端のエクソン１０を含むことで、エクソン１０によりコードされる第４の微小管結合ドメインを含むこととなる。したがって、全長ヒトタウアイソフォームは、微小管結合ドメインの４つの繰り返し（エクソン１０を含む：Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４）、または微小管結合ドメインの３つの繰り返し（エクソン１０を除く：Ｒ１、Ｒ３およびＲ４）から構成され得る。ヒトタウは、翻訳後修飾されることもあればされないこともある。例えば、タウがリン酸化、ユビキチン化、グリコシル化および糖化されることがあることは、当該技術分野において公知である。ヒトタウはまた、インビボでＣ末端、Ｎ末端、またはＣ末端およびＮ末端でタンパク質分解的に処理しても、しなくてもよい。したがって、「ヒトタウ」という用語は、２Ｎ３Ｒ、２Ｎ４Ｒ、１Ｎ３Ｒ、１Ｎ４Ｒ、０Ｎ３Ｒ、および０Ｎ４Ｒアイソフォーム、ならびにインビボでＣ末端が切断される種、インビボでＮ末端が切断される種、インビボで翻訳後修飾される種、またはそれらの任意の組合せを包含する。タウをコードする遺伝子の選択的スプライシングは他の動物において同様に発生する。

【0058】

本明細書において使用される場合、「ＭＴＢＲタウ」という用語は、タウの微小管結合領域（ＭＴＢＲ）の２つ以上のアミノ酸（例えば、タウ－４４１のアミノ酸２４４～３６８など）を含むタウタンパク質、または複数のタウタンパク質を指す。

【0059】

脳内のタウ沈着に関連する疾患は、本明細書では「タウオパチー」と称される。「タウ沈着」という用語は、限定されるものではないが、神経原線維変化、神経網糸状体、およびジストロフィー性神経突起におけるタウ凝集体を含む、あらゆる形態の病変タウ沈着を含む。当該技術分野において公知のタウオパチーには、限定されるものではないが、進行性核上性麻痺、拳闘家認知症、慢性外傷性脳症、第１７番染色体に関連する前頭側頭型認知症およびパーキンソニズム、リティコ－ボディグ病、グアムのパーキンソン病認知症、神経原線維変化型老年期認知症、神経節腫および神経細胞腫、髄膜血管腫症、亜急性硬化性全脳炎、鉛脳症、結節性硬化症、ハラフォルデン－シュパッツ病、リポフスチン症、ピック病、皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、嗜銀顆粒症（ａｒｇｙｒｏｐｈｉｌｉｃ ｇｒａｉｎ ｄｉｓｅａｓｅ）（ＡＧＤ）、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）、アルツハイマー病（ＡＤ）、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）が挙げられる。

【0060】

タウオパチーは、病理学的タウ沈着物中に見出されるタウアイソフォームの優勢によって分類される。３つのＭＴＢＲを有するタウで優勢に構成されるタウ沈着を伴うタウオパチーは、「３Ｒタウオパチー」と称される。ピック病は、３Ｒタウオパチーの非限定的な例である。明確にするために、一部の３Ｒタウオパチーの病理学的タウ沈着は、３Ｒおよび４Ｒタウアイソフォームの混合であり得、３Ｒアイソフォームが優勢である場合がある。アルツハイマー病患者の脳内の細胞内神経原線維変化（すなわち、タウ沈着）には、一般にほぼ同量の３Ｒおよび４Ｒアイソフォームが含まれていると考えられている。４つのＭＴＢＲを有するタウで優勢に構成されるタウ沈着を伴うタウオパチーは、「４Ｒタウオパチー」と称される。ＰＳＰ、ＣＢＤ、およびＡＧＤは、ＦＴＬＤの一部の形態と同様に、４Ｒタウオパチーの非限定的な例である。特に、一部のＶ３３４ＭおよびＲ４０６Ｗ突然変異保持者など、遺伝的に確認されたＦＴＬＤ症例を有する一部の対象の脳内の病理学的タウ沈着は、３Ｒおよび４Ｒアイソフォームの混合を示す。

【0061】

タウオパチーの臨床徴候は、限定されるものではないが神経原線維変化を含む、脳内のタウの凝集体であり得る。脳内のタウ凝集体を検出および定量するための方法は、当該技術分野において公知である（例えばタウ特異的リガンド、例えば［^１８Ｆ］ＴＨＫ５３１７、［^１８Ｆ］ＴＨＫ５３５１、［^１８Ｆ］ＡＶ１４５１、［^１１Ｃ］ＰＢＢ３、［^１８Ｆ］ＭＫ－６２４０、［^１８Ｆ］ＲＯ－９４８、［^１８Ｆ］ＰＩ－２６２０、［^１８Ｆ］ＧＴＰ１、［^１８Ｆ］ＰＭ－ＰＢＢ３および［^１８Ｆ］ＪＮＪ６４３４９３１１、［^１８Ｆ］ＪＮＪ－０６７）等を使用するタウＰＥＴ）。

【0062】

「処置する」、「処置すること」または「処置」という用語は、本明細書において使用される場合、訓練を受け免許を受けた専門家による、それを必要とする対象への医学的ケアの提供を指す。医学的ケアは、診断試験、治療処置、および／または予防もしくは防止手段であってもよい。治療および予防的処置の目的は、所望されない生理学的変化または疾患／障害を防止するかまたは緩慢化する（和らげる）ことである。治療または予防的処置の有益なまたは所望の臨床結果には、限定されるものではないが、検出可能かまたは検出不可能かにかかわらず、症状の緩和、疾患の程度の減弱、安定化した（すなわち、悪化しない）病態、疾患進行の遅延または緩慢化、病態の改善または軽減、および寛解（部分または完全のいずれか）が挙げられる。「処置」は、処置を受けない場合に予測される生存期間と比較して生存期間を延長することも意味することができる。処置を必要とする者には、疾患、状態もしくは障害を既に有する者、ならびに疾患、状態もしくは障害を有する傾向にある者、または疾患、状態もしくは障害を防止する予定の者が挙げられる。したがって、処置を必要とする対象は、疾患の症状または臨床徴候を有している場合もあれば、有していない場合もある。

【0063】

「タウ治療」という句は、集合的に、タウオパチーを発症するリスクのある対象、またはタウオパチーを有すると臨床的に診断された対象のために企図される、または彼らと共に使用する、任意の造影剤、治療処置、および／または予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）措置を指す。造影剤の非限定的な例には、機能的造影剤（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｍａｇｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、フルオロデオキシグルコース等）および分子造影剤（例えばＰｉｔｔｓｂｕｒｇｈ化合物Ｂ、フロルベタベン、フロルベタピル、フルテメタモル、放射性標識タウ特異的リガンド、放射性核種標識抗体等）が挙げられる。治療剤の非限定的な例には、コリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ－メチルＤ－アスパルテート（ＮＭＤＡ）アンタゴニスト、抗うつ剤（例えば選択的セロトニン再取り込み阻害剤、非定型抗うつ剤、アミノケトン、選択的セロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤、三環系抗うつ剤等）、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、抗Ａβ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗タウ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、幹細胞、栄養補助食品（例えばリチウム水、リポ酸を有するオメガ３脂肪酸、長鎖トリグリセリド、ゲニステイン、レスベラトロール、クルクミンおよびグレープシード抽出物等）、セロトニン受容体６のアンタゴニスト、ｐ３８アルファＭＡＰＫ阻害剤、組換え顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、受動免疫療法、活性ワクチン（例えばＣＡＤ１０６、ＡＦ２０５１３等）、タウタンパク質凝集阻害剤（例えばＴＲｘ０２３７、塩化メチルチオニミウム等）、血糖管理を改善するための治療（例えばインスリン、エキセナチド、リラグルチドピオグリタゾン等）、抗炎症剤、ホスホジエステラーゼ９Ａ阻害剤、シグマ１受容体アゴニスト、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ホスファターゼ阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、ＣＢ１および／またはＣＢ２エンドカンナビノイド受容体部分アゴニスト、β－２アドレナリン受容体アゴニスト、ニコチン性アセチルコリン受容体アゴニスト、５－ＨＴ２Ａ逆アゴニスト、アルファ－２ｃアドレナリン受容体アンタゴニスト、５－ＨＴ１Ａおよび１Ｄ受容体アゴニスト、グルタミニル－ペプチドシクロトランスフェラーゼ阻害剤、ＡＰＰ産生の選択的阻害剤、モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト、神経成長因子興奮剤、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、神経栄養剤（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ａｇｅｎｔ）、ムスカリン性Ｍ１受容体アゴニスト、ＧＡＢＡ受容体調節因子、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、微小管タンパク質調節因子、カルシウムチャネル遮断薬、抗高血圧薬、スタチン、ならびにそれらの任意の組合せが挙げられる。

【0064】

「Ａβ治療」という句は、集合的に、ＡβアミロイドーシスもしくはＡＤを発症するリスクのある対象、Ａβアミロイドーシスを有すると診断された対象、またはＡＤとを有する診断された対象に対して企図される、または彼らと共に使用する、任意の造影剤または治療剤を指す。

【0065】

「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、より好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値を指す。

【0066】

ＩＩ．生物学的試料中のタウリン酸化およびＡβの測定
本開示の方法は、対象から得られた生物学的試料を提供すること、タウおよび／またはＡβを単離すること、および１つまたは複数のアミノ酸残基、Ａβ４０、Ａβ４２、および適宜１つまたは複数のタンパク質におけるタウのリン酸化を測定することを含む。

【0067】

好適な生物学的試料には、対象から得られた血液試料または脳脊髄液（ＣＳＦ）試料が含まれる。一部の実施形態では、対象はヒトである。ヒト対象は、医療もしくは処置を待っている場合があるか、または医療もしくは処置を受けている場合があるか、または医療もしくは処置を受けたことがある場合がある。様々な実施形態では、ヒト対象は、健康な対象、神経変性疾患を発症するリスクのある対象、神経変性疾患の徴候および／または症状を有する対象、または神経変性疾患と診断された対象であり得る。さらなる実施形態では、神経変性疾患はタウオパチーであり得る。特定の例では、タウオパチーは、アルツハイマー病（ＡＤ）、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）であり得る。他の実施形態では、対象は実験動物である。さらなる実施形態では、対象は、ヒトタウおよび適宜１つまたは複数の追加のヒトタンパク質（例えば、ヒトＡβ、ヒトＡｐｏＥなど）を発現するように遺伝子操作された実験動物である。

【0068】

ＣＳＦは、留置ＣＳＦカテーテルの有無を問わない、腰椎穿刺によって得てもよい。対象から同時に収集された複数の血液またはＣＳＦ試料は、プールされてもよい。血液は、静脈内カテーテルの有無を問わない静脈穿刺によるか、またはフィンガースティック（またはその等価物）により収集してもよい。収集したら、血液試料またはＣＳＦ試料を、当該技術分野において公知の方法（例えば、全細胞および細胞残屑を除去するための遠心分離；分析試験の前に標本を安定化および保存するように設計された添加剤の使用等）に従って処理してもよい。血液試料またはＣＳＦ試料は、即時に使用されてもよく、または冷凍し無期限に保管されてもよい。本明細書に開示される方法で使用する前に、生物学的試料は、必要または所望であれば、プロテアーゼ阻害剤、同位体標識内部標準、界面活性剤およびカオトロピック剤を含むように、および／または他の分析物（例えば、タンパク質、ペプチド、代謝物など）を枯渇させるために修飾されていてもよい。

【0069】

使用される試料のサイズは、試料の種類、試料が得られた対象の健康状態、および分析されるべき分析物（タウに加えて）に応じて変動することができ、または変動することになる。ＣＳＦ試料の体積は、約０．０１ｍＬ～約５ｍＬ、または約０．０５ｍＬ～約５ｍＬであってもよい。特定の例において、試料のサイズは、約０．０５ｍＬ～約１ｍＬのＣＳＦであってもよい。血漿試料の量は、約０．０１ｍＬ～約２０ｍＬであってもよい。

【0070】

同位体標識は、試料処理全体の変動を考慮し、適宜絶対濃度を計算するための内部標準として使用することができる。一般に、同位体標識内部標準を、重要な試料処理の前に添加するが、必要であれば複数回添加することができる。

【0071】

複数の同位体標識内部標準が本明細書に記載されている。すべて、少なくとも１つのアミノ酸残基に重同位体標識が組み込まれている。１つまたは複数の完全長タウおよび／またはＡβアイソフォームを使用してもよい。あるいは、または加えて、当該技術分野で公知のように、翻訳後修飾を有するアイソフォームおよび／またはペプチドフラグメントも使用することができる。一般的に言えば、組み込まれる標識アミノ酸残基は、その化学的特性に影響を与えることなくペプチドの質量を増加させる必要があり、同位体標識の存在によって生じる質量シフトは、質量分析法で内部標準（ＩＳ）と内因性分析物のシグナルを区別できるようにする程度に十分でなければならない。本明細書に示すように、好適な重同位体標識としには、限定されるものではないが、^２Ｈ、^１３Ｃ、および^１５Ｎが挙げられる。典型的には、約１～１０ｎｇの内部標準で通常十分である。

【0072】

本明細書で使用される単離タウ試料とは、対象から得られた血液または脳脊髄液（ＣＳＦ）から精製されたタウを含む組成物を指す。本開示の単離タウ試料では、タウは血液またはＣＳＦから部分的または完全に、のいずれかで精製されている。血液またはＣＳＦからタウを精製する方法は当技術分野で公知であり、これらの方法としては、選択的沈殿、サイズ排除クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、およびアフィニティ精製が挙げられるが、これらに限定されない。好適な方法では、血液またはＣＳＦからリン酸化タウと非リン酸化タウの両方を濃縮する。

【0073】

本開示の方法は、１つまたは複数のタンパク質を試料から枯渇させる工程を含んでもよい。「枯渇する」という用語は、量または数が減少することを意味する。したがって、タンパク質の枯渇試料は、元の試料中の量よりも測定可能なほど少ない任意の量のタンパク質を有する場合があり、これにはタンパク質の量が存在しない場合も含まれる。

【0074】

タンパク質は、１つまたは複数のタンパク質を特異的に標的とする方法、例えば、親和性枯渇、固相抽出、または当該技術分野で公知の他の方法によって、試料から枯渇させることができる。タンパク質または複数のタンパク質の標的枯渇は、そのタンパク質の下流分析が所望される状況（例えば、同定、定量、翻訳後修飾の分析など）で使用してもよい。例えば、Ａβペプチドは、好適なエピトープ結合剤によるＡβの親和性枯渇後に、当該技術分野で公知の方法によって同定および定量することができる。別の非限定的な例として、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）の状態は、ＡｐｏＥの親和性枯渇およびＡｐｏＥアイソフォームの同定に続いて、当技術分野で公知の方法によって決定することができる。標的枯渇を使用して、その後の分析のために他のタンパク質、例えば、限定されるものではないが、アポリポプロテインＪ、シヌクレイン、可溶性アミロイド前駆体タンパク質、α－２マクログロブリン、Ｓ１００Ｂ、ミエリン塩基性タンパク質、インターロイキン、ＴＮＦ、ＴＲＥＭ－２、ＴＤＰ－４３、ＹＫＬ－４０、ＶＩＬＩＰ－１、ＮＦＬ、プリオンタンパク質、ｐＮＦＨ、およびＤＪ－１を単離することもできる。

【0075】

一部の実施形態では、標的枯渇は、親和性枯渇によって発生し得る。親和性枯渇とは、分子に対するその特異的結合特性を利用して、試料から目的のタンパク質を枯渇させる方法を指す。典型的には、分子は、固体支持体、例えばビーズ、樹脂、組織培養プレートなどに接着したリガンドである（固定化リガンドと称される）。リガンドの固体支持体への固定化は、リガンドとタンパク質の相互作用が発生した後に行ってもよい。好適なリガンドには、抗体、アプタマー、および他のエピトープ結合剤が挙げられる。この分子は、目的のタンパク質を選択的に吸収するポリマーまたは他の材料であってもよい。非限定的な例として、脂肪オキソエチル化アルコールで置換されたポリヒドロキシメチレン（例えば、ＰＨＭ－Ｌ ＬＩＰＯＳＯＲＢ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、血清からリポタンパク質（ＡｐｏＥを含む）を選択的に吸収することができる。２つ以上の親和性枯渇剤を組み合わせて、複数のタンパク質を順次にまたは同時に枯渇させることができる。

【0076】

あるいは、より一般的な方法、例えば限外濾過、または酸、有機溶媒もしくは塩を用いたタンパク質沈殿によって、試料からタンパク質を枯渇させることができる。一般に、これらの方法は、高存在量および高分子量のタンパク質を確実に減少させるために使用され、その結果、低分子量および／または低存在量のタンパク質およびペプチド（例えば、タウ、Ａβなど）が濃縮される。

【0077】

一部の実施形態では、タンパク質は、沈殿によって試料から枯渇させることができる。簡潔には、沈殿は、試料に沈殿剤を添加して完全に混合すること、試料を沈殿剤と共にインキュベートしてタンパク質を沈殿させること、および沈殿したタンパク質を遠心分離または濾過により分離することを含む。得られた上清はその後、下流用途で使用することができる。必要な試薬の量は、当該技術分野で公知の方法によって実験的に決定することができる。好適な沈殿剤には、過塩素酸、トリクロロ酢酸、アセトニトリル、メタノールなどが挙げられる。例示的な実施形態では、タンパク質は酸沈殿によって試料から枯渇させる。さらなる実施形態では、タンパク質は、過塩素酸を使用する酸沈殿によって試料から枯渇させる。

【0078】

上記アプローチの一方または両方からの２つ以上の方法を組み合わせて、複数のタンパク質を順次にまたは同時に枯渇させることができる。例えば、１つまたは複数のタンパク質を選択的に枯渇させ（標的枯渇）、続いて高存在量／分子量のタンパク質を枯渇させることができる。あるいは、高存在量／分子量のタンパク質を最初に枯渇させ、続いて１つまたは複数のタンパク質の標的枯渇を行うことができる。さらに別の代替法では、高存在量／分子量のタンパク質を最初に枯渇させ、続いて１つまたは複数のタンパク質の第１のラウンドの標的枯渇を行い、その後、第１のラウンド標的とは異なる１つまたは複数の異なるタンパク質の第２ラウンドの標的枯渇を行ってもよい。他の反復は、当業者には容易に明らかであろう。

【0079】

例示的な実施形態では、本開示の単離タウ試料は、アフィニティ精製によって血液またはＣＳＦから精製されたタウを含む。アフィニティ精製とは、固定化リガンドへの特異的結合特性を利用して、目的のタンパク質を精製する方法を指す。典型的には、固定化リガンドは、固体支持体、例えばビーズ、樹脂、組織培養プレート等に接着したリガンドである。好適なリガンドは、リン酸化タウと非リン酸化タウの両方に特異的に結合する。一例では、好適なリガンドは、タウの中間ドメイン内のエピトープに結合し得る。別の例では、好適なリガンドは、タウのＮ末端内、好ましくはタウのアミノ酸１～３５内のエピトープに結合し得る。別の例では、好適なリガンドは、タウのＭＴＢＲ内のエピトープに結合し得る。別の例では、好適なリガンドは、タウのＣ末端内のエピトープに結合し得る。なおさらなる実施形態では、タウは、２つ以上の固定化リガンドを使用して血液またはＣＳＦからアフィニティ精製し得る。一例では、固定化リガンドは、タウのＮ末端内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウの中間ドメイン内のエピトープに結合する。別の例では、固定化リガンドは、タウのＭＴＢＲ内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウの中間ドメイン内のエピトープに結合する。別の例では、固定化リガンドは、タウのＣ末端内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウの中間ドメイン内のエピトープに結合する。別の例では、固定化リガンドは、タウのＣ末端内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウのＮ末端内のエピトープに結合する。別の例では、固定化リガンドは、タウのＭＴＢＲ内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウのＮ末端内のエピトープに結合する。別の例では、固定化リガンドは、タウのＭＴＢＲ内のエピトープに結合し、別の固定化リガンドはタウのＣ末端内のエピトープに結合する。上記の実施形態のそれぞれにおいて、リガンドは抗体またはアプタマーであってもよい。

【0080】

上記の実施形態のそれぞれにおいて、エピトープ結合剤は、抗体またはアプタマーを含み得る。一部の実施形態では、アミロイドベータに特異的に結合するエピトープ結合剤は、ＨＪ５．１であるか、またはＨＪ５．１と同じエピトープに結合する、および／またはＨＪ５．１を競合的に阻害するエピトープ結合剤である。一部の実施形態では、両端を含む、タウ－４４１のアミノ酸１～１０３内のエピトープに特異的に結合するエピトープ結合剤は、ＨＪ８．５であるか、または、ＨＪ８．５と同じエピトープに結合する、および／またはＨＪ８．５を競合的に阻害するエピトープ結合剤である。一部の実施形態では、両端を含む、タウ－４４１のアミノ酸１０４～２２１内のエピトープに特異的に結合するエピトープ結合剤は、タウ１であるか、または、タウ１と同じエピトープに結合する、および／またはタウ１を競合的に阻害するエピトープ結合剤である。抗体が特異的に結合するエピトープを同定する方法、および２つの抗体間の競合阻害を評価するアッセイは、当技術分野で公知である。

【0081】

タウにおける特定のアミノ酸（すなわち、「部位」）のリン酸化により、リン酸化タウ（ｐ－タウ）アイソフォームが生じる。本開示の方法は、タウの１つまたは複数の特定のアミノ酸におけるリン酸化の化学量論を測定する手段を提供する。一部の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１１１、Ｓ１１３、Ｔ１８１、Ｓ１９９、Ｓ２０２、Ｓ２０８、Ｔ１５３、Ｔ１７５、Ｔ２０５、Ｓ２１４、Ｔ２１７、およびＴ２３１から選択される１つまたは複数の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。一部の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１１１、Ｔ１８１、Ｔ１５３、およびＴ２１７から選択される１つまたは複数の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。他の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１８１、およびＴ２１７から選択される１つまたは複数の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。他の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ２１７を含む１つまたは複数の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。他の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１８１を含む１つまたは複数の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。他の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１８１およびＴ２１７を含む２つ以上の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。他の実施形態では、本明細書の方法は、Ｔ１８１およびＴ２１７を含む３つ以上の残基におけるタウリン酸化を測定することを含む。

【0082】

出願人らは、タウリン酸化部位を発見し、単離されたタウタンパク質中のリン酸化部位の存在量を最初に定量するために、並列反応モニタリング（ＰＲＭ）を使用する高感度かつ高特異度の質量分析（ＭＳ）方法を開発した。しかし、本開示は、タウの部位特異的リン酸化を定量的に評価するための任意の１つの特定の方法に限定されない。好適な方法は、単一のアミノ酸のリン酸化状態のみが異なるタウアイソフォームを区別し、異なるアミノ酸でリン酸化されたｐ－タウアイソフォームを区別し、総タウの全体的変化から独立して特定の部位で起こるリン酸化の変化を定量するべきである。総タウの全体的な変化とは独立して、特定の部位で発生するリン酸化化学量論の変化を定量するための３つのアプローチを、実施例で詳しく説明する。１）同じ配列を共有する各リン酸化ペプチドの相対的存在量を推定するために使用することのできる、リン酸化ペプチド異性体間の相対的比較；２）参照としてのタウタンパク質からの任意のペプチドを用いた、リン酸化ペプチドの標準化、および３）標識した合成内部標準（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌａｂｅｌｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄｓ）を使用した、各リン酸化および非リン酸化ペプチドについての絶対量定量、ここで各リン酸化ペプチドについての絶対量定量値は、タウタンパク質からの任意のペプチドについて得られた任意の絶対量定量値を用いて標準化される。すべての３つの手法は、各部位についての相対的なリン酸化の変化の比較のために、内部標準化を使用する。当該技術分野において公知の他の方法も使用してもよい。

【0083】

例示的な実施形態では、タウの部位特異的リン酸化は、高分解能質量分析により測定される。好適な種類の質量分析が当該技術分野において公知である。これらには、限定されるものではないが、四重極型、飛行時間型、イオントラップおよびＯｒｂｉｔｒａｐ、ならびに異なる種類の質量分析計を１つの構成に組み合わせたハイブリッド型質量分析計（例えばＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃからのＯｒｂｉｔｒａｐ Ｆｕｓｉｏｎ（商標）Ｔｒｉｂｒｉｄ（商標）質量分析計）が挙げられる。単離タウ試料の追加の処理は、ＭＳ分析の前に行ってもよい。例えば、タウは、タンパク質分解により消化される場合がある。好適なプロテアーゼには、限定されるものではないが、トリプシン、Ｌｙｓ－Ｎ、Ｌｙｓ－ＣおよびＡｒｇ－Ｎが挙げられる。アフィニティ精製を使用して単離タウ試料を生成する場合、固定化リガンドからタウを溶出した後、またはタウが結合している間に消化が発生する場合がある。１つまたは複数の浄化ステップに続き、消化されたタウペプチドは、高分解能質量分析計と適合する液体クロマトグラフィーシステムによって分離されてもよい。クロマトグラフィーシステムは、所望のＬＣ－ＭＳパターンを生成するために、慣習的な実験により最適化されてもよい。多様なＬＣ－ＭＳ技術を、部位特異的タウリン酸化を定量的に分析するために使用してもよい。非限定的な例には、選択反応モニタリング、並列反応モニタリング、選択イオンモニタリングおよびデータ非依存型解析法（ｄａｔａ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）が挙げられる。上記で述べたように、部位特異的タウリン酸化のすべての定量分析は、総タウの全体的変化を考慮するべきである。例示的な実施形態では、実施例において概説される質量分析プロトコールが使用される。

【0084】

本明細書で使用される「総タウ」とは、所与の試料中のすべてのタウアイソフォームを指す。タウは、可溶性および不溶性の区画中、モノマーおよび凝集体形態で、規則的なまたは不規則な構造で、細胞内または細胞外で見出され、他のタンパク質または分子と複合体形成し得る。したがって、生物学的試料の供給源（例えば脳組織、ＣＳＦ、血液等）および生物学的試料の任意の下流処理は、所与の試料中のタウアイソフォームの全体量に影響を与えることとなる。

【0085】

総タウは、未修飾タウペプチドの存在量をモニタリングすることによって測定することができる。各リン酸化タウ部位について、対象のリン酸化ペプチドと共通のアミノ酸配列を共有するタウペプチドを優先的に使用して総タウレベルを測定することができるが、タウ配列からの任意のペプチドを使用することができる。タウペプチドの測定は質量分析により行うことができ、標識内部標準を参照として使用することで測定の精度を向上させることができる。あるいは、総タウは、イムノアッセイまたはタウ濃度を定量する他の方法により測定することができる。

【0086】

ＩＩＩ．ｐタウおよびＡβ測定値の使用
本開示はまた、診断する、ステージ分類する、所与の疾患ステージに適した処置法を選択する、および所与の処置レジメンを改変する（例えば、用量を変更する、別の薬物または処置モダリティに切り替える等）ために、タウオパチーの病理学的特徴および／または臨床症状のバイオマーカーとしての、血液またはＣＳＦ中のｐタウ種およびＡβ種（例えば、ｐＴ２１７／Ｔ２１７、ｐＴ１８１／Ｔ１８１、およびＡβ４２／４０）の測定値の使用を包含する。病理学的特徴は、タウ病変の態様（例えば、タウ沈着の量、翻訳後修飾の存在／不存在、翻訳後修飾の量等）であり得る。タウ沈着に代えてまたはそれに加えて、病理学的特徴は、タウ非依存性であり得る。例えば、タウオパチーがアルツハイマー病である場合、脳または脳の動脈にアミロイドベータ（Ａβ）が沈着する。臨床症状は、臨床的に検証された機器（例えば、ＭＭＳＥ、ＣＤＲ－ＳＢ等）によって測定される認知症、またはタウオパチーに関連する他の臨床症状であり得る。また、３Ｒ－タウオパチーおよび４Ｒ－タウオパチーについて当技術分野で公知の他の病理学的特徴および臨床症状のバイオマーカーとして、血液またはＣＳＦ中のｐタウおよびＡβ種の測定値を使用することも企図される。有利には、ｐＴ２１７／Ｔ２１７、ｐＴ１８１／Ｔ１８１、およびＡβ４２／４０を含むがこれらに限定されないｐタウ種およびＡβ種は、病態と健康状態を区別するだけでなく、様々なタウオパチーの間も区別する。

【0087】

したがって、一態様では、本開示は、対象におけるタウオパチー関連病変を測定するための方法であって、血液試料またはＣＳＦ試料等の、対象から得られた生物学的試料中の１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種を定量することであって、定量されたｐタウ種およびＡβ種の量は、対象の脳におけるタウオパチー関連の病変を表す、定量することを含む方法を提供する。タウオパチーは、３Ｒ－タウオパチー、混合型３Ｒ／４Ｒ－タウオパチー、または４Ｒ－タウオパチーであり得る。疾患関連病変は、タウ沈着、タウ翻訳後修飾、脳および／または脳動脈におけるアミロイドプラーク、または当技術分野で公知の他の病理学的特徴であり得る。対象は、タウオパチーの臨床症状を有してもよく、または有していなくてもよい。好ましい実施形態では、定量される少なくとも１つのｐタウ種は、ｐＴ２１７である。さらなる実施形態では、定量される２つ以上のｐタウ種は、ｐＴ２１７およびｐＴ１８１である。なおさらなる実施形態では、定量されるＡβ種はＡβ４０およびＡβ４２種である。なおまたさらなる実施形態では、ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびＡβ４２／４０、および適宜ｐＴ１８１／Ｔ１８１を定量する。またさらなる実施形態では、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量する。

【0088】

別の態様では、本開示は、タウオパチーの症状を有する対象を診断するための方法であって、血液試料またはＣＳＦ試料等の、対象から得られた生物学的試料中の１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種を定量すること、および定量されたｐタウ種およびＡβ種が、タウオパチーの臨床徴候または症状を有さず、ＰＥＴ画像化および／またはＣＳＦのＡβ４２／４０測定によって測定されたようにアミロイド陰性である対照集団から逸脱する場合、あるいは３Ｒタウオパチー、混合型３Ｒ／４Ｒタウオパチー、または４Ｒタウオパチーと診断された集団からの、同じ定量されたｐタウおよびＡｂ種から逸脱しているかまたは類似している場合、タウオパチーと診断することを含む方法を提供する。好ましい実施形態では、定量される少なくとも１つのｐタウ種は、ｐＴ２１７である。さらなる実施形態では、定量される２つ以上のｐタウ種は、ｐＴ２１７およびｐＴ１８１である。なおさらなる実施形態では、定量されるＡβ種はＡβ４０およびＡβ４２種である。なおまたさらなる実施形態では、ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびＡβ４２／４０、および適宜ｐＴ１８１／Ｔ１８１を定量する。またさらなる実施形態では、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量する。

【0089】

別の態様では、本開示は、対象におけるタウオパチー疾患の安定性を測定するための方法であって、対象から得られた第１の生物学的試料中の１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種を定量し、その後しばらく経ってから（例えば、数週間、数か月または数年後）、同じ対象から得られた第２の生物学的試料中の１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種を定量すること、ならびに試料間の定量されたｐタウ種とＡβ種の間の差異を計算することを含み、ここで、第２の試料における定量されたｐタウ種の統計的に有意な増加は、疾患の進行を示し、第２の試料における定量されたｐタウ種の統計的に有意な減少は、疾患の改善を示し、変化がないことは疾患の安定を示す、方法を提供する。タウオパチーは、３Ｒ－タウオパチー、混合型３Ｒ／４Ｒ－タウオパチー、または４Ｒ－タウオパチーであり得る。対象は疾患の臨床症状を有してもよく、または有していなくてもよく、タウ療法を受けていてもよく、または受けていなくてもよい。一部の例では、タウ療法は、第１の生物学的試料の収集と第２の生物学的試料の収集との間の期間に、対象に１または複数回施し、疾患の安定性の尺度は、タウ療法の有効性またはその欠如の指標である。好ましい実施形態では、定量される少なくとも１つのｐタウ種は、ｐＴ２１７である。さらなる実施形態では、定量される２つ以上のｐタウ種は、ｐＴ２１７およびｐＴ１８１である。なおさらなる実施形態では、定量されるＡβ種はＡβ４０およびＡβ４２種である。なおまたさらなる実施形態では、ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびＡβ４２／４０、および適宜ｐＴ１８１／Ｔ１８１を定量する。またさらなる実施形態では、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量する。

【0090】

別の態様では、本開示は、タウオパチーを有する対象を処置するための方法であって、血液試料またはＣＳＦ試料等の、対象から得られた生物学的試料中の１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種を定量すること；および疾患関連の病変または臨床症状の測定を改善するために対象にタウ療法を提供することを含み、ここで、対象は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、より好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るもしくは下回る定量されたｐタウ種を有し（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σ、または１．５σ異なっており、ここで、σは、タウオパチーの臨床徴候または症状を有さない対照集団で測定された正規分布によって定義される標準偏差であり、それは、ＰＥＴ画像化および／またはＣＳＦ中のＡβ４２／４０測定によって測定される場合、アミロイド陰性である）、方法を提供する。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を処置するための基準として使用することができる。タウオパチーは、３Ｒ－タウオパチー、混合型３Ｒ／４Ｒ－タウオパチー、または４Ｒ－タウオパチーであり得る。疾患関連病変の尺度は、ＰＥＴ画像化によって測定されるタウ沈着、質量分析法または他の好適な方法によって測定されるタウ翻訳後修飾、ＰＥＴ画像化によって測定される脳または脳の動脈におけるアミロイドプラーク、ＣＳＦ中のＡβ４２／４０よって測定されるアミロイドプラーク、または当技術分野で公知の他の病理学的特徴であり得る。臨床症状は、臨床的に検証された機器（例えば、ＭＭＳＥ、ＣＤＲ－ＳＢ等）によって測定される認知症、または３Ｒ－および４Ｒ－タウオパチーに関して当技術分野で公知の他の臨床症状であり得る。好ましい実施形態では、定量される少なくとも１つのｐタウ種は、ｐＴ２１７である。さらなる実施形態では、定量される２つ以上のｐタウ種は、ｐＴ２１７およびｐＴ１８１である。なおさらなる実施形態では、定量されるＡβ種はＡβ４０およびＡβ４２種である。なおまたさらなる実施形態では、ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびＡβ４２／４０、および適宜ｐＴ１８１／Ｔ１８１を定量する。またさらなる実施形態では、複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量する。タウ療法の多くは、特定の病態生理学的変化を標的としている。例えば、Ａβ標的療法は一般に、Ａβ産生を減少させ、Ａβ凝集に拮抗し、脳内Ａβクリアランスを増加させるように設計されており；タウ標的療法は一般に、タウのリン酸化パターンを変化させ、タウ凝集に拮抗する（タウの一般的な拮抗作用もしくは特定のタウアイソフォームの拮抗作用）、またはＮＦＴクリアランスを増加させるように設計されており；ＣＮＳの炎症または脳のインスリン抵抗性を軽減するため等に、様々な療法が設計されている。しかし、すべてのタウオパチーが同じ病態生理学的変化を共有するわけではない。したがって、これらの様々なタウ療法の有効性は、３Ｒ－タウオパチー、混合型３Ｒ／４Ｒ－タウオパチー、または４Ｒ－タウオパチーを有すると正しく同定された対象に、それらを投与することによって改善することができる。

【0091】

好適な生物学的試料およびタウリン酸化およびＡβ種の測定方法は第ＩＩ節に記載されており、その開示内容は参照によりこの節に組み込まれる。

【0092】

特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって；ｐＴ２１７／Ｔ２１７値、およびＡβ４２／４０値によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーをアルツハイマー病、および健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。

【0093】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーと健康な状態とを区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない対照集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない対照集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るかまたは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有していなくてもよい。

【0094】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加により、ＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷタウオパチーとＡＤとを区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない対照集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有するＡＤ集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用することができる。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有していなくてもよい。

【0095】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーをアルツハイマー病、４Ｒ－タウオパチー、および健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。

【0096】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない対照集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない対照集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るかまたは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。

【0097】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷタウオパチーをＡＤから区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有するＡＤ集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有するＡＤ集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。

【0098】

別の特定の実施形態では、本開示は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加によって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーを４Ｒ－タウオパチーから区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない４Ｒ－タウオパチー集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない４Ｒ－タウオパチー集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。

【0099】

別の特定の実施形態では、本開示は、孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値によって、孤発性ＦＴＤを、アルツハイマー病、他のタウオパチー、および健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。

【0100】

別の特定の実施形態では、本開示は、孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少によって、孤発性ＦＴＤをアルツハイマー病から区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない対照集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有するＡＤ集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有していなくてもよい。

【0101】

別の特定の実施形態では、本開示は、孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少によって、孤発性ＦＴＤを健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない対照集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない対照集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用してもよい。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有していなくてもよい。

【0102】

別の特定の実施形態では、本開示は、孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を区別するための方法であって、対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量することであって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少によって、孤発性ＦＴＤを健康な状態から区別する、定量することを含む方法を提供する。一態様では、計算された変化は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団における平均値から有意に逸脱している。「平均から有意に逸脱する」は、少なくとも１標準偏差、好ましくは少なくとも１．３標準偏差、またはより好ましくは少なくとも１．５標準偏差、またはさらにより好ましくは少なくとも２標準偏差、平均を上回るかまたは下回る値（すなわち、それぞれ１σ、１．３σ、１．５σまたは１．５σであり、σは、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない非孤発性ＦＴＤタウオパチー集団において測定された正規分布により定義される標準偏差である）を含む。閾値（例えば、少なくとも１標準偏差、平均を上回るもしくは下回る）を使用することに加えて、一部の実施形態では、平均を上回るもしくは下回る変化の程度を、対象を診断するために使用することができる。試料は、臨床診断を受けている場合も受けていない場合もある対象から得ることができる。さらなる実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有しても有していなくてもよい。

【0103】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに第２の試料および第１の試料の定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の間の差を計算することであって、第２の試料における定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0104】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに第２の試料および第１の試料の定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値の間の差を計算することであって、第２の試料における定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値に統計的有意差はなく、これは対象の疾患の安定性を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0105】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量することであって、第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに第２の試料と第１の試料の定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値間の差を計算することであって、第２の試料における定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値における統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0106】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象におけるＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチー疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに第２の試料と第１の試料の定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値間の差を計算することであって、第２の試料における定量された複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値における統計的有意差はなく、これは対象の疾患の安定性を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0107】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象における孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに第２の試料と第１の試料における定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値間の差を計算することであって、第２の試料における定量された複合ｐＴ１８１／Ｔ１８１値の統計的有意差は、対象の疾患の進行を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0108】

別の特定の実施形態では、本開示は、対象における孤発性前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）疾患の進行を測定するための方法であって、対象から得られた、第１の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第１のＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；ならびに処理された試料中の複合ｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；第１の試料の後に（例えば、数日、数週間、数か月）、対象から得られた第２の処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、第２のＣＳＦまたは血液試料は、同じｐタウ種が濃縮されている、提供すること、ならびに処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに第２の試料と第１の試料における定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値間の差を計算することであって、第２の試料における定量されたｐＴ１８１／Ｔ１８１値に統計的有意差はなく、これは対象の疾患の安定性を示す、計算することを含む方法を提供する。

【0109】

部位特異的タウリン酸化、およびＡβ種の測定、適宜総タウの測定を伴い使用する代わりに、またはそれに加えて、上記の実施形態のいずれかにおいて、測定されたリン酸化レベルから計算された比、あるいは測定されたリン酸化レベルおよび総タウから計算された比を使用することができる。両方の手法を、実施例において詳述する。比以外の数学演算も使用してもよい。例えば、実施例では、様々な統計学的モデル（例えば線形回帰、ＬＭＥ曲線、ＬＯＥＳＳ曲線等）における部位特異的タウリン酸化値を、他の公知のバイオマーカー（例えばＭＡＰＴ状態、ＡＰＯＥε４状態、年齢、性別、認知試験スコア、機能試験スコア等）と併せて使用する。測定の選択および数学演算の選択は、方法の特異性を最大化するために最適化されてもよい。例えば、診断の精度は、ＲＯＣ曲線下面積により評価されてもよく、一部の実施形態では、０．７以上のＲＯＣ ＡＵＣ値（例えば０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５等）が閾値として設定される。

【0110】

ヒトにおける脳のアミロイドプラークは、慣習的に、アミロイド陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）により測定される。例えば、皮質Ａβプラークの^１１Ｃ－Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ化合物Ｂ（ＰｉＢ）ＰＥＴ画像化は、Ａβプラーク病態を検出するために一般的に使用される。皮質ＰｉＢ－ＰＥＴの標準取込値比（ｓｔａｎｄａｒｄ ｕｐｔａｋｅ ｖａｌｕｅ ｒａｔｉｏ）（ＳＵＶＲ）は、有意な皮質Ａβプラークを確実に同定し、対象を ＰＩＢ陽性（ＳＵＶＲ≧１．２５）または陰性（ＳＵＶＲ＜１．２５）と分類するために使用される。したがって、上記の実施形態では、ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない対照集団は、皮質ＰｉＢ－ＰＥＴ ＳＵＶＲ＜１．２５を有する対象の集団を指すことがある。ＰｉＢ結合の他の値（例えば平均皮質結合能）または皮質領域以外の目的の領域の分析も、対象をＰＩＢ陽性または陰性と分類するために使用されてもよい。他のＰＥＴ造影剤も使用されてもよい。

【0111】

別の特定の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）タウの病変を変化させるために対象に処置を施すことを含み、対象の処理されたＣＳＦまたは血液試料は、約１．５σ以上異なる定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を有し、ここで、σは、タウオパチーの臨床徴候または症状を有さない対照集団で測定された正規分布によって定義される標準偏差であり、また、ＰＥＴ画像化によって測定される場合、アミロイド陰性であり、定量されたｐＴ２１７／Ｔ２１７値の量は、対象の脳におけるタウの病変を表す、方法を提供する。一部の実施形態では、タウの病変を変化させるために対象に処置を施すことにより、定量されたｐタウ種の量を、変化または安定化させる。一部の実施形態では、処置薬は、コリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ－メチルＤ－アスパルテート（ＮＭＤＡ）アンタゴニスト、抗うつ剤（例えば選択的セロトニン再取り込み阻害剤、非定型抗うつ剤、アミノケトン、選択的セロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤、三環系抗うつ剤等）、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、抗Ａβ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗タウ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗ＴＲＥＭ２抗体（その抗原結合フラグメント、変異体または誘導体を含む）、ＴＲＥＭ２アゴニスト、幹細胞、栄養補助食品（例えばリチウム水、リポ酸を有するオメガ３脂肪酸、長鎖トリグリセリド、ゲニステイン、レスベラトロール、クルクミンおよびグレープシード抽出物等）、セロトニン受容体６のアンタゴニスト、ｐ３８アルファＭＡＰＫ阻害剤、組換え顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、受動免疫療法、活性ワクチン（例えばＣＡＤ１０６、ＡＦ２０５１３等）、タウタンパク質凝集阻害剤（例えばＴＲｘ０２３７、塩化メチルチオニミウム等）、血糖管理を改善するための治療（例えばインスリン、エキセナチド、リラグルチドピオグリタゾン等）、抗炎症剤、ホスホジエステラーゼ９Ａ阻害剤、シグマ１受容体アゴニスト、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ホスファターゼ阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、ＣＢ１および／またはＣＢ２エンドカンナビノイド受容体部分アゴニスト、β－２アドレナリン受容体アゴニスト、ニコチン性アセチルコリン受容体アゴニスト、５－ＨＴ２Ａ逆アゴニスト、アルファ－２ｃアドレナリン受容体アンタゴニスト、５－ＨＴ１Ａおよび１Ｄ受容体アゴニスト、グルタミニル－ペプチドシクロトランスフェラーゼ阻害剤、ＡＰＰ産生の選択的阻害剤、モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト、神経成長因子興奮剤、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、神経栄養剤（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ａｇｅｎｔ）、ムスカリン性Ｍ１受容体アゴニスト、ＧＡＢＡ受容体調節因子、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、微小管タンパク質調節因子、カルシウムチャネル遮断薬、抗高血圧薬、スタチン、ならびにそれらの任意の組合せを含む医薬組成物である。例示的な実施形態では、医薬組成物はキナーゼ阻害剤を含んでもよい。好適なキナーゼ阻害剤は、１０００－１（ｔｈｏｕｓａｎｄ－ａｎｄ－ｏｎｅ）アミノ酸キナーゼ（ＴＡＯＫ）、ＣＤＫ、ＧＳＫ－３β、ＭＡＲＫ、ＣＤＫ５、またはＦｙｎを阻害する場合がある。別の例示的な実施形態では、医薬組成物はホスファターゼ活性化剤を含んでもよい。非限定的な例として、ホスファターゼ活性化剤は、プロテインホスファターゼ２Ａの活性を増加させることができる。一部の実施形態では、処置は、限定されるものではないが、タウリン酸化パターンを変化させるか、タウ凝集に拮抗するか、または病理学的タウアイソフォームおよび／または凝集体のクリアランスを増大させる活性医薬成分を含む、タウ標的療法を含む医薬組成物である。一部の実施形態では、処置は、抗Ａβ抗体、抗タウ抗体、抗ＴＲＥＭ２抗体、ＴＲＥＭ２アゴニスト、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ワクチン、またはタウタンパク質凝集阻害剤である。一実施形態では、健康な対照と比較したｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加および正常なＡβ４２／４０値は、対象がＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ療法で処置されていることを示す。別の実施形態では、ＡＤ集団と比較したｐＴ２１７／Ｔ２１７値の減少およびＡβ４２／４０値の増加は、対象がＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ療法またはタウ療法で処置されていることを示す。さらに別の実施形態では、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ集団と比較したｐＴ２１７／Ｔ２１７値の増加およびＡβ４２／４０値の減少は、対象がＡＤ療法で処置されていることを示す。さらに別の実施形態では、対照集団またはＡＤ集団と比較した複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値の増加は、対象がタウ療法で処置されていることを示す。

【0112】

別の特定の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象を処置するための方法であって、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）タウの病変を変化させるために対象に処置を施すことを含み、対象の処理されたＣＳＦまたは血液試料は、約１．５σ以上異なる定量されたＭＴＢＲタウ種、または定量されたＭＴＢＲタウ種の比を有し、ここで、σは、タウオパチーの臨床徴候または症状を有さない対照集団で測定された正規分布によって定義される標準偏差であり、また、ＰＥＴ画像化によって測定される場合、アミロイド陰性であり、定量されたｐタウ種の量は、対象の脳におけるタウの病変を表す、方法を提供する。一部の実施形態では、タウの病変を変化させるために対象に処置を施すことにより、ｐタウ種の量を、変化または安定化させる。一部の実施形態では、処置は、コリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ－メチルＤ－アスパルテート（ＮＭＤＡ）アンタゴニスト、抗うつ剤（例えば選択的セロトニン再取り込み阻害剤、非定型抗うつ剤、アミノケトン、選択的セロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤、三環系抗うつ剤等）、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、抗Ａβ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗タウ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗ＴＲＥＭ２抗体（その抗原結合フラグメント、変異体または誘導体を含む）、ＴＲＥＭ２アゴニスト、幹細胞、栄養補助食品（例えばリチウム水、リポ酸を有するオメガ３脂肪酸、長鎖トリグリセリド、ゲニステイン、レスベラトロール、クルクミンおよびグレープシード抽出物等）、セロトニン受容体６のアンタゴニスト、ｐ３８アルファＭＡＰＫ阻害剤、組換え顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、受動免疫療法、活性ワクチン（例えばＣＡＤ１０６、ＡＦ２０５１３等）、タウタンパク質凝集阻害剤（例えばＴＲｘ０２３７、塩化メチルチオニミウム等）、血糖管理を改善するための治療（例えばインスリン、エキセナチド、リラグルチドピオグリタゾン等）、抗炎症剤、ホスホジエステラーゼ９Ａ阻害剤、シグマ１受容体アゴニスト、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ホスファターゼ阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、ＣＢ１および／またはＣＢ２エンドカンナビノイド受容体部分アゴニスト、β－２アドレナリン受容体アゴニスト、ニコチン性アセチルコリン受容体アゴニスト、５－ＨＴ２Ａ逆アゴニスト、アルファ－２ｃアドレナリン受容体アンタゴニスト、５－ＨＴ１Ａおよび１Ｄ受容体アゴニスト、グルタミニル－ペプチドシクロトランスフェラーゼ阻害剤、ＡＰＰ産生の選択的阻害剤、モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト、神経成長因子興奮剤、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、神経栄養剤（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ａｇｅｎｔ）、ムスカリン性Ｍ１受容体アゴニスト、ＧＡＢＡ受容体調節因子、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、微小管タンパク質調節因子、カルシウムチャネル遮断薬、抗高血圧薬、スタチン、ならびにそれらの任意の組合せを含む医薬組成物である。例示的な実施形態では、医薬組成物は、キナーゼ阻害剤を含んでもよい。好適なキナーゼ阻害剤は、ｔｈｏｕｓａｎｄ－ａｎｄ－ｏｎｅアミノ酸キナーゼ（ＴＡＯＫ）、ＣＤＫ、ＧＳＫ－３β、ＭＡＲＫ、ＣＤＫ５またはＦｙｎを阻害し得る。別の例示的な実施形態では、医薬組成物は、ホスファターゼ活性化剤を含んでもよい。非限定的な例として、ホスファターゼ活性化剤は、プロテインホスファターゼ２Ａの活性を増大させ得る。一部の実施形態では、処置は、限定されるものではないが、タウリン酸化パターンを変化させるか、タウ凝集に拮抗するか、または病理学的タウアイソフォームおよび／または凝集体のクリアランスを増大させる活性医薬成分を含む、タウ標的療法を含む医薬組成物である。一部の実施形態では、処置は、抗Ａβ抗体、抗タウ抗体、抗ＴＲＥＭ２抗体、ＴＲＥＭ２アゴニスト、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ワクチン、またはタウタンパク質凝集阻害剤である。一実施形態では、健康な対照と比較したｐＴ１８１／Ｔ１８１値の減少は、対象が孤発性ＦＴＤ療法またはタウ療法で処置されていることを示す。

【0113】

上記の実施形態のそれぞれにおいて、医薬組成物は造影剤を含むことができる。造影剤の非限定的な例には、機能的造影剤（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｍａｇｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、フルオロデオキシグルコース等）および分子造影剤（例えばピッツバーグ化合物Ｂ（Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｂ）、フロルベタベン、フロルベタピル、フルテメタモル、放射性核種標識抗体等）が挙げられる。

【0114】

上記の実施形態のそれぞれにおいて、方法は、ｐＴ２０５／Ｔ２０５、ｐＴ２０８／Ｔ２０８、ｐＴ１１１／Ｔ１１１、ｐＴ１５３／Ｔ１５３、またはそれらの任意の組合せのうちの１つもしくは複数を定量することをさらに含み得る。

【0115】

ＩＶ．臨床試験
本開示の別の態様は、臨床試験の他のすべての基準が満たされている場合に、臨床試験、特にＡβまたはタウ療法の臨床試験に対象を選択するための方法である。一実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じであり、対象は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない場合に、対象をＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーの臨床試験に選択することを含んでもよい。別の実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ２１７／Ｔ２１７値およびＡβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ２１７／Ｔ２１７値が増加し、Ａβ４２／４０値が健康な対照集団とほぼ同じであり、対象は、ＰＥＴ画像化によって測定される脳のアミロイドプラークを有しない場合に、対象をＡＤ（またはＡβ療法）の臨床試験から除外することを含んでもよい。

【0116】

別の実施形態では、臨床試験の他のすべての基準が満たされている場合に、臨床試験、特にＡβまたはタウ療法の臨床試験に対象を選択するための方法である。一実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値が健康な対照集団と比較して増加している場合に、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗタウオパチーの臨床試験に対象を選択することを含んでもよい。別の実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種およびＡβ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中の複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ２１７／Ｔ２１７×Ａβ４２／４０値がＡＤ集団と比較して増加している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外することを含んでもよい。

【0117】

別の実施形態では、臨床試験の他のすべての基準が満たされている場合に、臨床試験、特にＡβまたはタウ療法の臨床試験に対象を選択するための方法である。一実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）ｐＴ１８１／Ｔ１８１値が健康な対照集団と比較して減少している場合、孤発性ＦＴＤ療法のための臨床試験に対象を選択することを含んでもよい。別の実施形態では、臨床試験において対象を選択するための方法は、（ａ）対象から得られた、処理されたＣＳＦまたは血液試料を提供することであって、ＣＳＦまたは血液試料は、１つまたは複数のｐタウ種が濃縮されている、提供すること；（ｂ）処理された試料中のｐＴ１８１／Ｔ１８１値を定量すること；ならびに（ｃ）複合ｐＴ１８１／Ｔ１８１値がＡＤ集団と比較して減少している場合に、ＡＤの臨床試験から対象を除外することを含んでもよい。「ＰＥＴ画像化により測定される場合に脳のアミロイドプラークを有しない対照集団」という語句は、第ＩＩＩ節で定義されている。

【0118】

部位特異的タウリン酸化、適宜総タウの測定を使用する代わりに、またはそれに加えて、上記の実施形態のいずれかにおいて、測定されたリン酸化レベルから計算された比、あるいは測定されたリン酸化レベルと総タウから計算された比を使用することができる。測定されたリン酸化レベルから計算される比は、ｐＴ１８１とｐＴ２０５、ｐＴ２１７とｐＴ２０５、またはｐＴ１８１とｐＴ２１７の間の比であり得る。測定されたリン酸化レベルと総タウから計算される比は、ｐＴ１８１と総タウ、ｐ－Ｔ２０５と総タウ、またはｐＴ２１７と総タウの間の比であり得る。比以外の数学演算も使用してもよい。例えば、実施例では、様々な統計学的モデル（例えば線形回帰、ＬＭＥ曲線、ＬＯＥＳＳ曲線等）における部位特異的タウリン酸化値を、他の公知のバイオマーカー（例えばＡＰＯＥε４状態、年齢、性別、認知試験スコア、機能試験スコア等）と併せて使用する。

【0119】

ＡＤおよびＦＴＤ療法のための臨床試験の設計を、本明細書に開示される方法によって大いに助けることができる。多くの臨床試験は、ＡＤ症状の発症前に発生する特定の病態生理学的変化を標的とする造影剤または治療剤の有効性を試験するように設計されている。第ＩＩＩ節で上述したように、これらの様々な薬剤の有効性は、本明細書に開示され例示される方法によって測定されるある特定の部位特異的タウリン酸化レベルを有する対象に薬剤を投与することによって改善することができる。同様に、Ａβ病変またはタウのみの病変の症状を有する対象を選択する臨床試験もまた、有効性が特定の病態に関連しているかどうかを決定するために、登録者の病変を正確に区別できることから利点が得られる。したがって、臨床試験において、特に臨床試験の処置群に対象を選択する前に、本明細書に記載されるタウリン酸化レベルを測定することにより、試験が縮小され、および／または転帰が改善される場合がある。場合によっては、本明細書に記載の方法を開発し、治療剤のコンパニオン診断として使用することができる。

【0120】

上記の実施形態のそれぞれにおいて、対象を、臨床試験の処置群に登録することができる。「処置」は、上記で定義されている。臨床試験の処置群に登録された対象には、医薬組成物を投与することができる。一部の実施形態では、医薬組成物は造影剤を含むことができる。造影剤の非限定的な例には、機能的造影剤（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｍａｇｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、フルオロデオキシグルコース等）および分子造影剤（例えばピッツバーグ化合物Ｂ、フロルベタベン、フロルベタピル、フルテメタモル、放射性核種標識抗体等）が挙げられる。あるいは、医薬組成物は活性医薬成分を含んでもよい。活性医薬成分の非限定的な例には、コリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ－メチルＤ－アスパルテート（ＮＭＤＡ）アンタゴニスト、抗うつ剤（例えば選択的セロトニン再取り込み阻害剤、非定型抗うつ剤、アミノケトン、選択的セロトニンおよびノルエピネフリン再取り込み阻害剤、三環系抗うつ剤等）、ガンマ－セクレターゼ阻害剤、ベータ－セクレターゼ阻害剤、抗Ａβ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、抗タウ抗体（抗原結合フラグメント、その変異体または誘導体を含む）、幹細胞、栄養補助食品（例えばリチウム水、リポ酸を有するオメガ３脂肪酸、長鎖トリグリセリド、ゲニステイン、レスベラトロール、クルクミンおよびグレープシード抽出物等）、セロトニン受容体６のアンタゴニスト、ｐ３８アルファＭＡＰＫ阻害剤、組換え顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、受動免疫療法、活性ワクチン（例えばＣＡＤ１０６、ＡＦ２０５１３等）、タウタンパク質凝集阻害剤（例えばＴＲｘ０２３７、塩化メチルチオニミウム等）、血糖管理を改善するための治療（例えばインスリン、エキセナチド、リラグルチドピオグリタゾン等）、抗炎症剤、ホスホジエステラーゼ９Ａ阻害剤、シグマ１受容体アゴニスト、キナーゼ阻害剤、ホスファターゼ活性化剤、ホスファターゼ阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、ＣＢ１および／またはＣＢ２エンドカンナビノイド受容体部分アゴニスト、β－２アドレナリン受容体アゴニスト、ニコチン性アセチルコリン受容体アゴニスト、５－ＨＴ２Ａ逆アゴニスト、アルファ－２ｃアドレナリン受容体アンタゴニスト、５－ＨＴ１Ａおよび１Ｄ受容体アゴニスト、グルタミニル－ペプチドシクロトランスフェラーゼ阻害剤、ＡＰＰ産生の選択的阻害剤、モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ＡＭＰＡ受容体アゴニスト、神経成長因子興奮剤、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、神経栄養剤（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ａｇｅｎｔ）、ムスカリン性Ｍ１受容体アゴニスト、ＧＡＢＡ受容体調節因子、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニスト、微小管タンパク質調節因子、カルシウムチャネル遮断薬、抗高血圧薬、スタチン、ならびにそれらの任意の組合せが挙げられる。例示的な実施形態では、医薬組成物はキナーゼ阻害剤を含んでもよい。好適なキナーゼ阻害剤は、１０００－１（ｔｈｏｕｓａｎｄ－ａｎｄ－ｏｎｅ）アミノ酸キナーゼ（ＴＡＯＫ）、ＣＤＫ、ＧＳＫ－３β、ＭＡＲＫ、ＣＤＫ５、またはＦｙｎを阻害する場合がある。別の例示的な実施形態では、医薬組成物はホスファターゼ活性化剤を含んでもよい。非限定的な例として、ホスファターゼ活性化剤は、プロテインホスファターゼ２Ａの活性を増加させることができる。

【0121】

上記の実施形態のそれぞれにおいて、対象は、無症状であってもまたは無症状でなくてもよい本明細書で使用される「無症候性の対象」は、タウオパチーのいかなる徴候も症状も示さない対象を指す。あるいは、対象は、徴候または症状（例えば記憶喪失、物を置き忘れること、気分または挙動の変化等）を呈し得るが、臨床診断についての十分な認知障害も機能障害も示さない場合がある。症候性または無症候性の対象はＡβアミロイドーシスを有し得るが、Ａβアミロイドーシスの事前知識は、処置のための必要条件ではない。なおさらなる実施形態では、対象はＡＤを有し得る。前述の実施形態のいずれかにおいて、対象は、遺伝性タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異の１つを保持していてもよい。代替実施形態では、対象は、遺伝性タウオパチーを引き起こすことが知られている遺伝子突然変異を有していなくてもよい。

【0122】

以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために含まれる。以下の実施例に開示される技術は、本発明の実施において良好に機能するように本発明者らによって発見された技術を表すことが、当業者には理解されるべきである。しかし、当業者は、本開示に照らして、開示されている特定の実施形態における変更を行うことができ、本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様のまたは類似した結果をなお得られることを理解するべきである。したがって、添付の図面に記載または示されているすべての事柄は、例示的なものとして解釈されることとなり、意味を限定するものではない。

【実施例】

【0123】

以下の実施例は、本発明の様々な反復を例証する。以下の実施例に開示される技術は、本発明の実施において良好に機能するように本発明者らによって発見された技術を表すことが、当業者には理解されるべきである。しかし、当業者は、本開示に照らして、開示されている特定の実施形態における変更を行うことができ、本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様のまたは類似した結果をなお得られることを理解するべきである。したがって、添付の図面において記載されるかまたは示されるすべての事柄は、例示的なものとして解釈されることとなり、意味を限定するものではない。
［実施例１］

【0124】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗは、アミロイド病変の非存在下でタウＴ２１７リン酸化を増加させる 脳脊髄液（ＣＳＦ）中のスレオニン２１７（ｐＴ２１７）におけるタウの過剰リン酸化は、最近、初期アミロイドーシスと関連付けられており、アルツハイマー病（ＡＤ）の高感度バイオマーカーとして機能する可能性がある。しかし、他のタウオパチーがｐＴ２１７修飾を誘導するかどうかは依然として不明である。ｐＴ２１７修飾がＡＤに特異的であるかどうかを決定するために、ＡＤおよび他のタウオパチーにおけるＣＳＦ ｐＴ２１７を測定した。

【0125】

免疫沈降法および質量分析法を使用して、ＣＳＦ Ｔ２１７リン酸化占有率（ｐＴ２１７／Ｔ２１７）およびアミロイドベータ（Ａβ）４２／４０比を、認知に関して正常な個体と、症候性ＡＤ、進行性核上性麻痺、皮質基底核症候群、および孤発性および家族性前頭側頭型認知症を有する個体とを比較した。

【0126】

ＡＤを有する個体は、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が高く、Ａβ４２／４０が低かった。対照的に、認知に関して正常な個体および４Ｒタウオパチーを有する大多数の個体は、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が低く、Ａβ４２／４０が正常であった。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が増加し、Ａβ４２／４０比が正常である個体のサブグループが同定されたが、そのほとんどがＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者であった。ＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の単独および組合せの診断精度を比較した。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０が、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者を、認知に関して正常な個体および他のタウオパチーを有する個体から分離することができる高感度複合バイオマーカーであることが示される。

【0127】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗは、ＡＤに類似するが、アミロイド神経病変を伴わない３Ｒ＋４Ｒタウオパチーを引き起こすタウ突然変異である。したがって、本実施例は、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７比の変化がＡＤに特異的ではなく、３Ｒ＋４Ｒタウオパチーに共通する共通の下流タウ病態生理を反映し得ることを示す。

【0128】

アルツハイマー病（ＡＤ）は、脳内の神経原線維変化、神経炎プラーク（Ｎｅｕｒｉｔｉｃ ｐｌａｑｕｅｓ）、および神経絨毛糸におけるアミロイドベータ４２ペプチド（Ａβ４２）のプラーク沈着および過剰リン酸化タウの凝集を特徴とする。脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＡβ４２／４０比の同時減少とリン酸化タウ（ｐタウ）種の増加は、それぞれＡＤアミロイドーシスのバイオマーカーとして、およびＡＤタウ神経病変の代理として使用されている。絶対濃度（ｐＴ２１７）またはリン酸化占有率（ｐＴ２１７／Ｔ２１７）として測定されるＣＳＦのスレオニン２１７でのタウリン酸化が、ＡＤの特異的でより感度の高いバイオマーカーであり、スレオニン１８１でのＣＳＦ ｐタウレベル（ｐＴ１８１）の十分に確立された測定値を上回ることを示唆する証拠が増加している。ＣＳＦ ｐＴ１８１レベルの増加は、ＣＳＦの総タウ濃度の増加と強く関連しており、タウ神経病変を反映すると想定されている。しかし、ＣＳＦ ｐＴ２１７およびｐＴ２１７／Ｔ２１７は、総ＣＳＦタウよりもアミロイドピッツバーグ化合物Ｂ（ＰｉＢ）陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）画像化によって測定されるアミロイド神経病変とより強く相関する。さらに、ｐＴ２１７は、ＡＤ突然変異を有する家系におけるＡＤ臨床症状の開始をｐＴ１８１よりも良好に予測することができる。したがって、Ｔ２１７の過剰リン酸化が、アミロイドーシスの初期かつ直接的な結果であるのか、それともタウ病変の下流マーカーであるのかは依然として不明である。これに関連して、アミロイド病変の不存在下における原発性タウオパチーにおいて、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が変化するかどうかも不明である。

【0129】

進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、皮質基底核症候群（ＣＢＳ）、および行動異常型前頭側頭型認知症（ｂｖＦＴＤ）等、タウ神経病変に関連する他の神経変性認知症疾患には、現在ＣＳＦまたは画像化バイオマーカーがない。診断は、主に臨床評価に依存し、脳解剖後に確認することができる。信頼性が高いインビボバイオマーカーの欠如は、臨床診断の精度に課題をもたらし、臨床試験の設計および実施に影響を及ぼす。これまでの研究では、主にイムノアッセイを用いてＣＳＦ ｐＴ１８１の絶対濃度を測定しており、ｐＴ１８１の増加はＡＤに特異的であることが示唆されていた。しかし、ＣＳＦタウアイソフォーム濃度の全体的な変化は、ｐＴ１８１リン酸化の相対的な変化を伴わないで、ｐＴ１８１絶対濃度に寄与する場合がある。ＣＳＦ ｐＴ１８１の変化を完全に解釈するには、ｐＴ１８１／Ｔ１８１比として測定されるｐＴ１８１リン酸化占有率が不可欠である。さらに、イムノアッセイおよび質量分析（ＭＳ）を使用したいくつかの最近の研究では、ＣＳＦ ｐＴ２１７濃度の増加はＡＤに特異的であり、他の神経変性疾患では観察されないことが示された。しかし、これまでの研究では、加齢および多くの神経変性疾患で頻繁に増加するアミロイド併発神経病変（ｃｏ－ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ）が、多くの場合考慮されていない。

【0130】

ＰＳＰ、ＣＢＳ、およびｂｖＦＴＤを含む非ＡＤタウオパチーにおけるタウリン酸化の効果を評価するために、連続免疫沈降（ＩＰ）およびＭＳを使用してＣＳＦ ｐタウおよびＣＳＦ Ａβを測定した。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびｐＴ１８１／Ｔ１８１比を計算して、タウリン酸化の変化をＣＳＦ総タウ変動から区別した。ＣＳＦ Ａβ４２／４０比は、同じ参加者内で計算し、アミロイド神経病変の代理として使用した。認知に関し正常な年齢を一致させた対照（ＡＭＣ）と、症候性ＡＤ、ＰＳＰ、ＣＢＳ、ならびに孤発性および家族性ＦＴＤを有する個体のコホートを分析した。ＣＳＦ ｐタウとＣＳＦ Ａβ４２／４０比との間の相関関係を各疾患群で評価し、症候性ＡＤを有する個体と他の神経変性認知症性疾患を有する個体とを区別する能力を評価するために、ＣＳＦ ｐタウ単独およびＣＳＦ Ａβ４２／４０との組合せの診断的関連性を評価した。

【0131】

結果
参加者および研究ワークフロー：参加者の個体群統計および臨床的特徴を、表１に要約する。分析の目的で、研究コホートを、いくつかの群に分割した。「ＡＤ」群（ｎ＝８０）には、健忘症が優勢な臨床的に「典型的な」ＡＤを有する患者（ｎ＝６６）、および限局的変異を有する患者（ｎ＝１４）が含まれていた。ｂｖＦＴＤ ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者（ｎ＝５）は、「Ｒ４０６Ｗ」としてとしてグループ化した。ＡＤ以外のすべての神経変性疾患およびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は、「４Ｒタウオパチー」としてグループ化した（ｎ＝７４）。この群には、ＰＳＰ（ｎ＝１６）、ＣＢＳ（ｎ＝１５）、ＣＢＳ－ＰＳＰ連続体（ｎ＝７）、孤発性ｂｖＦＴＤ（ｎ＝２８）を有する個体、およびｂｖＦＴＤ ＭＡＰＴ Ｐ３０１Ｌ突然変異保持者（ｎ＝３）が含まれており、これらは主に、脳凝集体の主要なアイソフォームとして４Ｒタウを伴う４Ｒタウオパチーであった。孤発性ｂｖＦＴＤは、「４Ｒタウオパチー」群に列挙されているが、それらは病理学的には確認されておらず、ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ４３、ＦＴＬＤ－ＦＵＳ、およびピック病等の少数の３Ｒタウオパチーを含んでいる可能性があることに注意すべきである。これらの参加者の１人は、後にＣ９ｏｒｆ７２突然変異を有することが見出された。認知に関し正常な対照は、「対照」（ｎ＝９８）と名付けられ、これには、認知に関し正常なＡＭＣ（ｎ＝６４）、ＹＮＣ（ｎ＝２６）、および脳腫瘍患者（ｎ＝８）が含まれていた。

【0132】

【表1】

【0133】

ＹＮＣ（４２．３±２．４）、脳腫瘍（５０．２±２．６）、およびＭＡＰＴ Ｐ３０１Ｌ（３７．２±３．６）群の個体は、ＡＭＣ（７３．０±０．８）、およびＡＤ（７３．３±０．９）、ＣＢＳ（６８．６±２．６）、ＣＢＳ ＰＳＰ連続体（７０．７±１．４）、ＰＳＰ（７１．０±２．６）、および孤発性ｂｖＦＴＤ（６２．１±１．３）を含む神経変性疾患を有する参加者より若かった（表１）。

【0134】

２５２個のＣＳＦベースライン試料および８個のＣＳＦフォローアップ試料すべてについて、ＣＳＦ Ａβ４２、Ａβ４０、ｐＴ２１７、Ｔ２１７、ｐＴ１８１、およびＴ１８１濃度を連続ＩＰ／ＭＳ法で測定した。ＣＳＦ Ａβ４２／４０、ｐＴ２１７／Ｔ２１７、ｐＴ１８１／Ｔ１８１比を計算した。異なる臨床群を分類するために使用されるワークフローを図１Ｆに示す。

【0135】

ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７のカットオフの決定：ＩＰ／ＭＳによって測定されるＣＳＦ Ａβ４２／４０のアミロイド陽性カットオフを定義するために、ＷａｓｈＵ－Ａコホートの参加者４８人からのアミロイドＰｉＢ－ＰＥＴの結果を使用した（カットオフ０．１８；図１Ｆ、表１）。ＣＳＦ Ａβ４２／４０は、アミロイド－ＰｉＢ＋コホートにおいて有意に減少した（図３Ａ）。ＲＯＣ曲線分析を実行し、コホート間の区別を最大化するためにＣＳＦ Ａβ４２／４０のカットオフとして０．０８６のヨーデンの指標（Ｙｏｕｄｅｎ’ｓ ｉｎｄｅｘ）値を選択した（曲線下面積［ＡＵＣ］＝０．９２１、ｐ＜０．０００１；図３Ｂ）。

【0136】

ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７のｐタウ異常カットオフを決定するために、アミロイド－ＰｉＢ＋患者におけるＣＳＦ Ａβ４２／４０値をＷａｓｈＵ－Ａコホートから使用した（図１Ｆ）。ＭＳのみを有する３７人の参加者の別のサブセットには、ＣＳＦ Ａβ４２／４０の測定値を追加した。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ＰｉＢ－ＰＥＴおよびＣＳＦ Ａβ４２／４０測定に基づいて、アミロイド＋個体において有意に増加した（図３Ｃ）。ＲＯＣ曲線分析を実行し、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７のカットオフとして４．７６のヨーデンの指標値を計算した（ＡＵＣ＝０．９８３、ｐ＜０．０００１；図３Ｄ）。

【0137】

同じＲＯＣ分析を、ＣＳＦ ｐＴ２１７、ｐＴ１８１、総タウの濃度、およびＴ１８１でのリン酸化占有率について実行した（ｐＴ１８１／Ｔ１８１、図３Ｅ～３Ｌ）。これらのバイオマーカーのそれぞれのＡＵＣは、それぞれ０．９４９（ｐＴ２１７）、０．８１６（ｐＴ１８１）、０．６９８（総タウ）、および０．９３４（ｐＴ１８１／Ｔ１８１）であり、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が優れた区別となるＡＤバイオマーカーであるという以前の知見を裏付けている。

【0138】

ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７との間の関連性：ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０とｐＴ２１７／Ｔ２１７との間の関係を評価するために、２５５人の参加者のそれぞれについて両方の比をプロットした。ＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７それぞれの計算された０．０８６および４．８カットオフに基づいて、象限を以下のように定義した：Ｉ（アミロイド－、ｐタウ＋）、ＩＩ（アミロイド＋、ｐタウ＋）、ＩＩＩ（アミロイド＋、ｐタウ－）、およびＩＶ（アミロイド－、ｐタウ－）（図１Ａ～１Ｅ、図３Ｂ）。

【0139】

第ＩＩ象限（アミロイド＋、ｐタウ＋）では、個体の８８％（７３／８３）を、ＡＤとして臨床的に同定した（図１Ｂ）。全体として、ＡＤ患者の９１％（７３／８０）を、ＩＩにプロットした（図４Ａ）。臨床的にＡＤと同定された７人の参加者を、象限Ｉ（ｎ＝３）、ＩＩＩ（ｎ＝１）、およびＩＶ（ｎ＝３、図１Ｂ～１Ｄ）に分割した。対照のサブセット（ＡＭＣ［ｎ＝５］、ＣＢＳ［ｎ＝２］、ＰＳＰ［ｎ＝２］、およびｂｖＦＴＤ［ｎ＝１］）も、象限ＩＩに割り当てた（図１Ａおよび１Ｂ）。

【0140】

対照の８４パーセント（８２／９８）をＩＶにおいてプロットし、ＩＶの個体の５５％（８２／１５０）が対照であった（図１Ｅ、図４Ｂ）。ＣＢＳの８０パーセント（１２／１５）およびＰＳＰの８１％（１３／１６）もＩＶにあり（図４Ｃおよび４Ｄ）、ＣＢＳ ＰＳＰ連続体の７１％（５／７）も同様であった。

【0141】

ＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は負に関連しており、Ｌ字型曲線を示した（図１）。ＡＤ連続体との関係においてＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７プロファイルの間の動的な関連をより良く理解するために、ＰｉＢ－ＰＥＴおよびＡＶ４５－ＰＥＴ画像化でアミロイド負荷を評価および測定し、参加者のサブセットにおけるＡＶ１４５１－ＰＥＴ画像化でタウ凝集を評価および測定した。（図５）。両方のＰＥＴトレーサーによって測定されたＡβ凝集は、象限ＩＶ、ＩＩＩからＩＩにかけて徐々にかつ有意に増加した（図５Ａおよび５Ｂ）。第ＩＩＩ象限のすべての対照はＡＭＣであり（図１Ａ）、ＹＮＣ（＜６４歳）に属するものはなかった。しかし、ＡＭＣ内では、第ＩＩＩ象限（７４．８±２．４）および第ＩＶ象限（７２．４±０．６）では年齢に有意差はなかった。これらは、アミロイド陽性を伴う象限ＩＩＩの個体が、異常なタウリン酸化を伴わない前症性ＡＤとして定義される場合があることを示唆している。対照的に、ＡＶ１４５１－ＰＥＴによって測定されたタウ凝集は第ＩＩ象限においてのみ増加し（図５Ｃ）、このことは、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびタウＰＥＴの前にＣＳＦ Ａβ４２／４０およびアミロイドＰＥＴが変化することを裏付けた。重要なことに、ＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７との間の有意な負の相関が、ほとんどの対照、ＰＳＰ、ＣＢＳ、およびｂｖＦＴＤを含む象限ＩＩＩおよびＩＶ（ｐタウ－）で観察された（図６）。

【0142】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者は、アミロイド病変を伴わずにｐＴ２１７／Ｔ２１７比を増加させた：象限Ｉ（アミロイド－、ｐタウ＋）には、ｂｖＦＴＤ、ＰＳＰ、ＡＤ、またはＣＢＳを有する個体が集合していた（図１Ｃ）。興味深いことに、４５％（５／１１）がｂｖＦＴＤであり、１人を除くすべて（８０％、４／５）がＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者であった（図４Ｆ、表２）。この研究で分析されたすべて（５／５）のＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は、アミロイド陰性（象限ＩおよびＩＶ）であり、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者にはアミロイド神経病変が存在しないことが裏付けられた（表２）。４０代で研究全体を通じて無症状であったＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者５人のうち１人だけが、ベースラインとフォローアップ訪問の両方でＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７陰性（象限ＩＶ）であった；他のすべてのＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は、発症前／発症状態にかかわらず、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７陽性（象限Ｉ）であった。ベースラインでは無症状で、４年後のフォローアップ訪問で認知症を発症した参加者１人（＃５）は、ベースライン（象限ＩＶ）でＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７が閾値をわずかに下回っていたが、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７はフォローアップ（象限Ｉ）で増加し、このバイオマーカーの長期的な変化が疾患の進行を反映している可能性があることを示唆している。比較すると、１年以内にフォローアップ訪問を行った他の５人の参加者（象限ＩでＰＳＰが１人、象限ＩＶでＣＢＳが２人、ＡＭＣが２人）は、ベースラインとフォローアップの間で同じ象限に留まった。これらの結果は、年齢の増加および症状の発現が、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者におけるＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の増加と関連していることを示唆している。

【0143】

【表2】

【0144】

ＡＤおよびＭＡＰＴＲ４０６Ｗ突然変異保持者におけるＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０、ｐＴ２１７／Ｔ２１７、および複合バイオマーカーの診断値：次に、ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の診断性能を、ｐＴ２１７／Ｔ２１７にＣＳＦ Ａβ４２／４０を掛けたもの、およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７をＡβ４２／４０で割ったものからなる複合バイオマーカーを使用して、比較した（図２、表３、図７）。この分析では、以前に定義された４つの臨床群（「ＡＤ」、「Ｒ４０６Ｗ」、「４Ｒタウオパチー」、および「対照」）を比較した。ＣＳＦ Ａβ４２／４０比およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７を単独で使用した場合、ＡＤを他の３つの群から分離するだけである（図２Ａおよび２Ｂ）。しかし、Ｒ４０６Ｗ群では、対照群および４Ｒタウオパチー群で観察されたものと比較して、ＣＳＦ Ａβ４２／４０×ｐＴ２１７／Ｔ２１７複合バイオマーカーが有意に増加していた（図２Ｃ）。この複合バイオマーカーは、Ｒ４０６Ｗ群を４Ｒタウオパチー（ＡＵＣ＝０．９４８）および対照群（ＡＵＣ＝０．９６１）から分離する優れた能力を示した。この複合バイオマーカーを使用した場合、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者の１００％が、Ｒ４０６Ｗ対対照のカットオフ０．５０を上回った（表３）。ＣＳＦ Ａβ４２／４０で割ったＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１１７／Ｔ２１７単独と同様に機能し、Ｒ４０６Ｗを他の群から識別することができなかった（図２Ｄ、表３）。

【0145】

【表3-1】

【表3-2】

【0146】

ＩＰ／ＭＳ ＣＳＦの総タウ濃度およびｐタウ濃度は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ保持者にとって有効なバイオマーカーではない：ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者を他の神経変性認知症疾患を有する個体から分離する際に、ＣＳＦ ｐＴ２１７、ｐＴ１８１、総タウ、またはＴ１８１でのリン酸化占有率（ｐＴ１８１／Ｔ１８１）のいずれも、複合バイオマーカーＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦＡβ４２／４０ほど効率的ではなかった（図８、図９）。ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１は、ＡＤ、ＡＭＣ、およびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者と比較して、孤発性ｂｖＦＴＤ（ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ４３、およびＦＴＬＤ－ＦＵＳを含む）において有意に減少した（図８Ｄ、図９Ｄ）。再グループ化すると、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１は、孤発性ｂｖＦＴＤ群を、ＡＤ（ＡＵＣ＝０．９５９）、対照（ＡＵＣ＝０．７５２）、およびその他のタウオパチー、例えば、ＣＢＳ、ＰＳＰ、ならびにＲ４０６ＷおよびＰ３０１Ｌを含むＦＴＤ－ＭＡＰＴ（ＡＵＣ＝０．７０７。図１０）から分離することができた。しかし、孤発性ｂｖＦＴＤを他のタウオパチーおよび対照から分離するＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１の特異度および感度は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者の同定においてＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の特異度および感度ほど高くはなかった。

【0147】

考察
ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は、アミロイド病変を伴わずにｐＴ２１７／Ｔ２１７比を増加させた：ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、ＡＤにおけるアミロイドＰＥＴによって測定されるアミロイド病変と強く相関するが、ｐＴ２１７／Ｔ２１７がＣＳＦアミロイド病変の読み取り値であるかそれともタウ病変の読み取り値であるかは証明されていなかった。本実施例は、症候性ＡＤを有する個体におけるＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７との間の特異的相関関係を示した。発症前のＡＤでも、リン酸化のわずかな変化が観察される場合、ＣＳＦ Ａβ４２／４０とＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は相関しており、ＰｉＢ－ＰＥＴとＣＳ ＦｐＴ２１７／Ｔ２１７との間の相関を示す以前の報告と一致している。ＣＳＦ Ａβ４２／４０もＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７も、ＰＳＰ、ＣＢＳ、およびほとんどの孤発性および家族性のＦＴＤを含む他のタウオパチーでは変化しなかった。しかし、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者はアミロイド病変とは無関係にＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７を増加させていることが見出され、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の増加が、実際にＡＤおよびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ関連認知症に共通する病理学的タウ修飾のバイオマーカーであり、アミロイド病変はこの修飾の前提条件ではないことが実証された。このことは、ＡＤおよびＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者に共通の下流タウ病変が存在し、その結果、脳内で特異なタウリン酸化変化が生じ、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の増加につながることを示唆している。あるいは、２つの異なる上流機構、すなわち１つはアミロイド沈着に関与し、２つ目はＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異に関与するもの、が同様の経路の活性化をもたらし、最終的にタウの過剰リン酸化および凝集を引き起こす可能性がある。

【0148】

ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異のＡＤとの類似性：ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異関連病変は、ＡＤと複数の臨床的および神経病理学的類似性を共有する。他のＭＡＰＴ突然変異保持者とは異なり、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者は、発症年齢が遅く、平均して５０代半ばで記憶喪失等の臨床症状が現れ、ゆっくりと進行する。Ｐ３０１Ｌ等のほとんどの病理学的ＭＡＰＴ突然変異は、エクソン１０内またはその周囲に位置しており、通常は４Ｒタウアイソフォームの凝集を引き起こし、４Ｒタウオパチーをもたらす。対照的に、Ｒ４０６ＷおよびＶ３３７Ｍ等のＭＡＰＴ突然変異は、３Ｒおよび４Ｒタウアイソフォームの両方に共通するドメイン内のタウタンパク質のＣ末端に位置し、３Ｒ＋４Ｒ混合型脳病変をもたらす。したがって、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異は、ＡＤと同様、３Ｒ＋４Ｒタウオパチーとして分類することができ、他の４Ｒ（エクソン１０に位置するＭＡＰＴ突然変異に関連するＣＢＳ、ＰＳＰ、ｂｖＦＴＤ）または３Ｒ（ピック病）タウオパチーとは区別される。

【0149】

タウ凝集体中のフィラメント構造は、ＡＤおよび慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）（３Ｒ＋４Ｒ）、ＣＢＳ（４Ｒ）、およびピック病（３Ｒ）等の様々なタウオパチーについて、極低温電子顕微鏡によって最近解明された。神経病理学的所見と一致して、３Ｒおよび４Ｒアイソフォームが共有するタウドメインは、ＡＤおよびＣＴＥタウ凝集に関与し、４Ｒおよび３Ｒ特異的ドメインはそれぞれ皮質基底核変性およびピック病凝集に関与する。ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ、ＡＤ、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ、およびＶ３３７Ｍについてはそのような構造データは入手できないが、ＡＤ、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ、およびＶ３３７Ｍは対らせんフィラメント構造を有し、ＡＶ１４５１等のＡＤタウＰＥＴトレーサーは、発症前のＭＡＰＴ Ｒ４０６ＷおよびＶ３３７Ｍ突然変異保持者ではある程度結合するが、他のタウオパチーでは結合せず、このことは、これらの３Ｒ＋４Ｒタウオパチーにおけるタウ凝集体が同様の特徴を有することを示唆している。しかし、Ｔ２１７での過剰リン酸化がどのように対らせんフィラメントの形成に寄与するか、またはどのように関連するかはまだ対処すべきことである。これまでの研究では、ＣＳＦ Ｔ２１７はＡＤの発症前の初期ステージで過剰リン酸化されており、臨床症状が出現する２０年よりも前に検出可能である一方、ＰＥＴ画像化で検出されるタウ凝集体は、症状の発症近くで増加することが示唆されている。本実施例は、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者を含む３Ｒ＋４Ｒタウオパチーにおいて、（１）ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７は、タウ対らせんフィラメントの形成が始まると症状の発症前に異常になるが、タウＰＥＴ画像化による検出限界を下回っており、その後タウＰＥＴ画像化に明らかな変化が見られ；または、（２）ＣＳＦ Ｔ２１７の過剰リン酸化は、神経原線維変化の形成とは直接関係しないが、タウに影響を及ぼし、最終的にタウ凝集につながる異常な細胞代謝を反映している。

【0150】

ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０の複合バイオマーカーは、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者に対する高感度バイオマーカーとして機能する：ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７およびＣＳＦ Ａβ４２／４０の単独および組合せの診断値を評価した。ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７レベルは、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者で増加していた。しかし、増加の程度はＡＤおよびＭＡＰＴと比較してはるかに小さく、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７単独ではＲ４０６Ｗ突然変異保持者を対照群またはＰＳＰ、ＣＢＳ、孤発性ｂｖＦＴＤ、およびＦＴＤ－ＭＡＰＴ Ｐ３０１Ｌを含む４Ｒタウオパチー群から分離することはできなかった（図２Ａ、２Ｂ、図６）。これまでの研究では、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者の一部の症例でＣＳＦおよび血漿ｐＴ１８１濃度が上昇することが示されているが、その上昇は穏やかであった。これらは、Ｒ４０６ＷバイオマーカーとしてｐＴ１８１、ｐＴ２１７のＣＳＦ濃度、またはＴ１８１およびＴ２１７のリン酸化占有率（ｐＴ１８１／Ｔ１８１およびｐＴ２１７／Ｔ２１７）のみを使用したこの研究から得られた感度が不十分であることと一致している。象限分析を通じて、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者を高精度で識別するには、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７とＣＳＦ Ａβ４２／４０の両方が必要であることが実証された。また、複合バイオマーカー、すなわちＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０が、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者を対照および４Ｒタウオパチーから識別するのに十分な感度および特異度を含むことも実証された（図２Ｃ、図７Ｃ、それぞれＡＵＣ＝０．９３４、０．９６０）。これは、ＡＤを対照から区別するためのＣＳＦ Ａβ４２／４０およびＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の高い特異度および感度に匹敵する（それぞれＡＵＣ＝０．９２６、０．９５２）。ＣＳＦ Ａβ４２／４０とｐＴ２１７／Ｔ２１７比の組合せは、今後の試験で、発症前のＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者と、おそらくＶ３３７Ｍ等の他の３Ｒ＋４Ｒタウオパチーを選択するために使用される可能性がある。さらに、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７の長期的な測定は疾患の進行を反映している可能性があり、このことは、ＣＳＦ Ａβ４２／４０、ＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７、および複合バイオマーカーが、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ突然変異保持者における標的関与を評価することができる、タウオパチーに対する薬物臨床試験における新たな高感度読み取り値として機能する場合があることを示唆している。

【0151】

孤発性ｂｖＦＴＤにおけるＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１の減少：イムノアッセイを用いた以前の研究では、ｂｖＦＴＤ、ＰＳＰ、およびＣＢＳ患者において、ＣＳＦ総タウまたはｐＴ１８１の変化がないか、または軽度の変化を示すまちまちの結果が示された。複数の報告と一致して、本実施例は、ｂｖＦＴＤ、ＰＳＰ、ＣＢＳ、および対照群の間でＣＳＦ総タウ濃度またはＣＳＦ ｐＴ１８１濃度単独の有意差を示さなかった。しかし、同じ参加者内のリン酸化占有率を計算すると、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１が孤発性ｂｖＦＴＤにおいて有意に減少することが示された。これは、総タウの増加に伴うｐＴ１８１の生理学的増加、ならびに年齢、性別、および遺伝子型等の個体差を考慮して、ｐＴ１８１の変化をＴ１８１ごとに正規化することによって達成することができる。対照または他のタウオパチーからの孤発性ｂｖＦＴＤの同定におけるＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１バイオマーカーの特異度と感度（ＡＵＣ＜０．８）は、ＭＡＰＴ突然変異保持者の同定における複合バイオマーカーであるＣＳＦ ｐＴ２１７／Ｔ２１７×ＣＳＦ Ａβ４２／４０（ＡＵＣ＞０．９）ほど高くなかった。これは、ＦＴＬＤ－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ、およびＦＴＬＤ－ＦＵＳを含む孤発性ｂｖＦＴＤコホートの不均一性によるものであり得る。

【0152】

方法
ヒト研究：すべての研究は、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡのＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙの治験審査委員会およびＭｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ大学病院の倫理委員会によって承認された（認定ＮＦＳ９６－９００ＣＨＵリソースセンターＢＢ－００３３－０００３１のＣＳＦ－ＮｅｕｒｏＢＡＮＫ＃ＤＣ－２００８－４１７［ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｂａｎｑｕｅｓ．ｅｕ］）。すべての参加者またはその代表者は、生体液試料の収集および共有に同意した。除外基準には、出血性疾患、活動性抗凝血、および活動性感染を含む、腰椎穿刺（ＬＰ）または腰椎カテーテルとの矛盾（ｃｏｎｔｒａｄｉｃｔｉｏｎ）が含まれていた。個人データを取り扱う許可は、番号１７０９７４３ｖ０でＦｒｅｎｃｈ Ｄａｔａ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ａｕｔｈｏｒｉｔｙ（ＣＮＩＬ）によって付与された。

【0153】

ＡＭＣおよび軽度のＡＤを有する個体は、安定同位体標識動態（ＳＩＬＫ）研究の一部として、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ＭｅｄｉｃｉｎｅのＫｎｉｇｈｔ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ（ＡＤＲＣ）に召集された。ＡＭＣは研究目的で登録されたボランティアであり、認知に関して正常である。これには、有症状参加者の２つの異なるコホート（ＷａｓｈＵ－ＡおよびＷａｓｈＵ－Ｂ）が含まれていた。ＷａｓｈＵ－Ａコホートからの個体は、３６時間の腰椎カテーテル研究に参加した。ＷａｓｈＵ－Ｂコホートからの個体は、４か月間にわたって５つのＬＰを伴うＳＩＬＫ研究に参加した。個体を、臨床評価によって診断し、臨床認知症評価尺度（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｅｍｅｎｔｉａ Ｒａｔｉｎｇ）（ＣＤＲ）に従って分類した。患者および付随情報源へのインタビューに加えて、可能であれば脳ＰＥＴ画像化データおよび診断用ＣＳＦ結果を検討した。このコホートには、ＡＤと一致するバイオマーカーを有さず、非ＡＤ認知症として分類された臨床ＡＤ患者が含まれる。ＷａｓｈＵ－Ａコホートを、ＰｉＢ画像化に基づいてアミロイドＰＥＴ陽性によりさらに分類した。現在神経疾患と診断されていない１８～６４歳の若年正常対照（ＹＮＣ）は、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙの保健ボランティアから紹介された。脳腫瘍患者は、Ｂａｒｎｅｓ Ｊｅｗｉｓｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌから紹介された。ＰＳＰ、ＣＢＳ、および孤発性ｂｖＦＴＤを有する患者は、提携する記憶診断センターおよび運動障害クリニックから紹介された。ＭＡＰＴ Ｐ３０１ＬおよびＲ４０６Ｗ突然変異保持者は、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙにて現地で臨床評価され、Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｍｉｌｉａｌ Ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｏｒａｌ Ｄｅｍｅｎｔｉａ Ｓｔｕｄｙ（家族性前頭側頭型認知症研究の評価）（ＬＥＦＦＴＤＳ； ａｌｌｆｔｄ．ｏｒｇ／ａｒｔｆｌ－ｌｅｆｆｔｄｓ； Ｓｉｔｅ ＰＩ ＮＧ）から紹介された。８人の参加者（ＰＳＰ １人、ＭＡＰＴ Ｒ４０６Ｗ ３人、ＣＢＳ ２人、ＡＭＣ ２人）は、ＬＰおよびＣＳＦの収集を繰り返した。

【0154】

Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒの参加者は、ＭｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒのＭｅｍｏｒｙ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ（記憶資源および研究センター）から紹介された。彼らを、臨床的、神経心理学的、脳画像化、およびフォローアップ評価に基づいて、ＡＤ、ＣＢＳ、ＰＳＰ、ｂｖＦＴＤ、およびＣＢＳ－ＰＳＰ連続体に分類した。Ａβ４２、タウ、ｐＴ１８１濃度のＣＳＦバイオマーカーも酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）で測定し、Ａβ４２／４０比を計算した。ＡＤは、許容される基準に従って、ＡＴＮ分類に基づいて診断した；すべてのＡＤ参加者は少なくとも２つの異常なＣＳＦバイオマーカーを有していた。これには、ＡＤのＣＳＦバイオマーカーを伴う主な言語、行動、視空間、失行表現型を指すＡＤ限局性表現型が含まれる。一部のＰＰＡエンドフェノタイプＡＤ症例は、ＡＤ限局性表現型に含まれていた（ｎ＝５）。ＣＢＳとＰＳＰは国際基準に従って診断された。ｂｖＦＴＤは、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）－タウ、ＦＴＬＤ－ＴＤＰ、およびＦＴＬＤ－ＦＵＳに起因する場合がある。いくつかの言語エンドフェノタイプＦＴＬＤがｂｖＦＴＤに含まれていた（ｎ＝３）。ＣＢＳ ＰＳＰ連続体には、フォローアップ中にＰＳＰに進化したＣＢＳ臨床表現型を有する患者が含まれていた。

【0155】

ＣＳＦ収集：ＷａｓｈＵ－ＡコホートにおけるＡＤおよびＡＭＣを有する個体からのＣＳＦを、前述のようにカテーテルを介して収集した。ＡＭＣおよびＷａｓｈＵ－Ｂコホートにおける症候性ＡＤ、ＰＳＰ、ＣＢＳ、およびｂｖＦＴＤを有する個体からのＣＳＦを、前述のように重力収集および遠心分離を使用したＬＰによって取得した。ＭＡＰＴ突然変異家族からのＣＳＦは、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅのバイオマーカーコアで標準化されたプロトコールに従って収集された。脳腫瘍を有する個体からのＣＳＦは、手術前または手術後にカテーテルを使用して腰椎ドレーンを介して取得された。

【0156】

ＭｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒコホートからのＣＳＦは、ＭｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒのＭｅｍｏｒｙ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒでの収集、遠心分離、および保存のための標準化プロトコールを使用して収集した。簡潔には、非外傷性針をＬＰに使用し、ＣＳＦを１０ｍＬポリプロピレン管およびタンパク質低結合エッペンドルフ管に収集した。ＣＳＦは、分注して－８０℃で保存する前に遠心分離しなかった。ＣＳＦタウおよびｐＴ１８１濃度は、Ｆｕｊｉｒｅｂｉｏの指示に従い、標準化された市販のＩＮＮＯＴＥＳＴサンドイッチＥＬＩＳＡＸ－ＭＡＰを使用して測定した。ＣＳＦ Ａβ４２およびＡβ４０は、ＦｕｊｉｒｅｂｉｏのＩＮＮＯＴＥＳＴサンドイッチＥＬＩＳＡを使用して測定した。

【0157】

ＣＳＦＡβおよびタウに関する連続ＩＰ法およびＭＳ法：ＣＳＦ Ａβを、以下の修飾を加えて先に記載したように分析した。界面活性剤およびカオトロピック試薬（最終１％ＮＰ－４０、５ｍｍｏｌ／Ｌグアニジン、プロテアーゼ阻害剤カクテル）およびタウ（^１５Ｎ標識２Ｎ４Ｒ組換えタウ）およびＡβ（^１５Ｎ標識合成Ａβ４０、および４２）の内部標準を含有するマスターミックスを、低結合Ａｘｙｇｅｎ管（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ、ＵＳＡ、ＭＣＴ－１７５）内で調製した。５００～１０００μＬのＣＳＦを加え、ＨＪ５．１ミッドドメインＡβ抗体で免疫沈降させた。洗浄後、試料をＬｙｓＮプロテアーゼで消化し、脱塩し、ＸｅｖｏＴＱ－Ｓ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）で分析した。

【0158】

ＣＳＦタウおよびｐタウを、以下の修飾を加えて先に記載したように分析した。タウ内部標準を含有するＨＪ５．１免疫沈降後のＣＳＦ試料を、タウ１中間ドメインおよびＨＪ８．５Ｎ末端タウ抗体で連続的に免疫沈降させた。洗浄後、試料をトリプシンで消化し、脱塩し、Ｏｒｂｉｔｒａｐ Ｆｕｓｉｏｎ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）で分析した。ｐＴ２１７およびｐＴ１８１を測定するＭＳ法については前述した。

【0159】

アミロイドおよびタウＰＥＴ画像化：アミロイドＰｉＢ－ＰＥＴ、ＡＶ４５－ＰＥＴ、およびタウＡＶ１４５１－ＰＥＴ画像化測定を、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ＭｅｄｉｃｉｎｅのＫｎｉｇｈｔ ＡＤＲＣからのＡＤおよびＡＭＣ参加者のサブセットにおいて実行した。データは前述のように収集および処理した。
［実施例２］

【0160】

非ＡＤタウオパチーにおけるｐタウの比較：ＬＯＡＤ対ＵＣＳＦ対ＮＣＲＡＤ対ＣＴＲＬ対タングル
以前に報告されているように、Ｔ２１７のリン酸化はアミロイドベータとともに増加する。異常なタウリン酸化は、群の参加者からの試料によって定義されたカットオフを超える値として定義された：アミロイドベータ陰性（ＡＢ－）、認知に関して正常（ＣＮ）、若年正常対照（ＹＮＣ）、脳転移（ＢＭ）または対照（ＣＴＲＬ））。

【0161】

この基準を考慮すると、異常なタウリン酸化は、皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、ピック病（ＰｉＤ）を有する参加者の大部分で観察された。この傾向は、３つの独立したコホート（ＵＣＳＦ、ＮＣＲＡＤ、タングル）のＣＢＤおよびＰＳＰに関して観察される。観察された値は、臨床症状のないアミロイド陽性参加者（ＡＢ＋ＣＤＲ０）と同じ範囲内にある。また、ＭＡＰＴ突然変異Ｎ２７９Ｋ、Ｓ３０５Ｓ、Ｖ３３７Ｍ、１０＋１６は、ＣＳＦ ｐタウ２１７の異常を誘発すると思われる。上に示したＲ４０６Ｗにも異常なｐタウ２１７がある。したがって、正常ＣＳＦ Ａベータ４２／４０とともにｐタウ２１７の増加は、非ＡＤタウオパチーのリスクのある参加者を同定するのに有用であると思われる（図１１）。

【0162】

図１２は、ｐタウ１８１が非ＡＤタウオパチーにおけるタウリン酸化の変化を検出するのに十分な感度がないことを示している。しかし、ＴＤＰ試料ではｐタウ１８１が低いことが観察された。また、図１７～１９に示すように、孤発性ＦＴＤ（ＦＴＤ－タウ、ＦＴＤ－ＦＵＳ、ＦＴＤ－ＴＤＰ４３を含む）は、ＣＳＦ ｐＴ１８１／Ｔ１８１比を低下させた。したがって、ｐＴ１８１／Ｔ１８１は、比率を測定すると、孤発性ＦＴＤを他のタウオパチーから分離することができる。

【0163】

図１３に示すように、ｐタウ２０５は、主にアミロイド陽性症候性（ＡＢ＋ＣＤＲ＞０）およびＡＤにおいて増加する。Ｎ２７９Ｋ、Ｓ３０５Ｓ、Ｖ３３７Ｍ、およびＲ４０６Ｗは、ｐタウ２１７について見られるように異常にリン酸化されるが、１０＋１６は異常にリン酸化されない。一部の非ＡＤタウオパチー（ＣＢＤ、ＰＳＰ、およびピック病）は対照群よりわずかに高い可能性があるが、この部位の感受性はｐタウ２１７より低い可能性がある。

【0164】

ｐタウ２０８は、ＬＯＡＤコホートにおいてｐタウ２１７と関連するが、ｐタウ２１７について観察されたものと比較して、ＡＤにおいては比較的低いようである。Ｎ２７９Ｋ、Ｓ３０５Ｓ、Ｖ３３７Ｍ、およびＲ４０６Ｗは、異常にリン酸化されるが、１０＋１６は異常にリン酸化されない。一部の非ＡＤタウオパチー（ＣＢＤ、ＰＳＰ、およびピック病）は対照群よりわずかに高い可能性があるが、この部位の感受性はｐタウ２１７より低い可能性がある（図１４）。

【0165】

図１５は、ｐタウ１１１が、ＬＯＡＤコホートにおいてｐタウ２１７と関連するが、ｐタウ２１７について観察されたものと比較して、ＡＤにおいては比較的低いようであることを示す。ＣＢＤ、ＰＳＰ、またはＭＡＰＴ突然変異ではｐタウ２１７の過剰リン酸化が見られるため、非ＡＤタウオパチーでは異常なリン酸化は観察されない。これは、ｐタウ１１１が真にＡＤ特異的であり、ｐタウ２１７について異常にリン酸化されている非ＡＤタウオパチーとＡＤを区別するために使用することができることを示唆している可能性がある。

【0166】

図１６に示されるように、ｐタウ１１１と同様に、ｐタウ１５３は、ＬＯＡＤコホートにおいてｐタウ２１７と関連するが、ｐタウ２１７について観察されたものと比較して、ＡＤにおいては比較的低いようである。ＣＢＤ、ＰＳＰ、またはＭＡＰＴ突然変異ではｐタウ２１７の過剰リン酸化が見られるため、非ＡＤタウオパチーでは異常なリン酸化は観察されない。これは、ｐタウ１５３が真にＡＤ特異的であり、ｐタウ２１７について異常にリン酸化されている非ＡＤタウオパチーとＡＤを区別するために使用することができることを示唆している。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図3G】

【図3H】

【図3I】

【図3J】

【図3K】

【図3L】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図4E】

【図4F】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図8D】

【図9A】

【図9B】

【図9C】

【図9D】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17A】

【図17B】

【図17C】

【図17D】

【図18A】

【図18B】

【図18C】

【図18D】

【図18E】

【図19A】

【図19B】

【図19C】

【図19D】

【図19E】

【図19F】

【国際調査報告】