特表 2024-514098 ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における化合物の使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-28

(54)【発明の名称】ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における化合物の使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/04 20060101AFI20240321BHJP

   C07D 487/04 20060101ALI20240321BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20240321BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240321BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240321BHJP

【ＦＩ】

C07D471/04 101

C07D471/04 CSP

C07D487/04 144

C07D471/04 107E

C07D487/04 142

C07D487/04 146

A61K31/506

A61K31/5377

A61K45/00

A61P35/04

A61P35/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023560644

(86)(22)【出願日】2022-03-31

(85)【翻訳文提出日】2023-11-29

(86)【国際出願番号】 CN2022084650

(87)【国際公開番号】W WO2022206929

(87)【国際公開日】2022-10-06

(31)【優先権主張番号】202110358192.3

(32)【優先日】2021-04-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＢＲＩＪ

(71)【出願人】

【識別番号】514023416

【氏名又は名称】シャンハイ ファーマシューティカルズ ホールディング カンパニー，リミティド

(74)【代理人】

【識別番号】110000578

【氏名又は名称】名古屋国際弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】リ ディ

(72)【発明者】

【氏名】ドゥアン リンジュン

(72)【発明者】

【氏名】ホン ユアン

(72)【発明者】

【氏名】ツァン ジーフー

(72)【発明者】

【氏名】シヤ グォンシン

(72)【発明者】

【氏名】クー イン

【テーマコード（参考）】

4C050

4C065

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C050AA01

4C050BB05

4C050CC08

4C050EE03

4C050EE04

4C050FF01

4C050GG03

4C050HH04

4C065AA03

4C065BB03

4C065BB05

4C065CC01

4C065DD02

4C065DD03

4C065EE02

4C065HH01

4C065JJ03

4C065KK01

4C065LL01

4C065PP09

4C065PP18

4C084AA19

4C084NA05

4C084ZB26

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB05

4C086GA07

4C086GA09

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZB26

(57)【要約】

化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶の使用、特にＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における使用である。提供される化合物はＥｒｂＢ２突然変異体に対して阻害活性を有し、ＥｒｂＢ２突然変異腫瘍細胞の増殖を効果的に阻害することができる。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における、化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶の使用。

【化1】

（ただし、Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化2】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化3】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。）

【請求項2】

前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化4】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化5】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮであることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化6】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化7】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮであることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項4】

ＥｒｂＢ２突然変異体関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における、化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶の使用。

【化8】

（ただし、Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化9】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化10】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。）

【請求項5】

前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
ただし、Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化11】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化12】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮであることを特徴とする、請求項４に記載の使用。

【請求項6】

前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【化13】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【化14】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮであることを特徴とする、請求項４に記載の使用。

【請求項7】

前記化学式１において、Ｒ_１がハロゲンである場合、前記ハロゲンはＣｌであり、Ｒ_１がＣ_１－Ｃ_６アルカンである場合、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルカンはメチルであり、
及び／又は、
ｎが１である場合、Ｒ_３は、

【化15】

であり、好ましくは

【化16】

であり、
ｎが２である場合、Ｒ_３は２つのオルト位基であり、そのうちの１つは、

【化17】

であり、もう１つの基は、

【化18】

であり、好ましくは

【化19】

であり、
及び／又は、Ｒ_２は、

【化20】

であり、
好ましくは、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミド、ラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ、ネラチニブ、

【化21】

から選択される一つ又は複数であることを特徴とする、請求項１又は４に記載の使用。

【請求項8】

前記ＥｒｂＢ２突然変異体の突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ、Ｇ７６６＞ＶＣ及びＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡのうちの一つ又は複数を含むことを特徴とする、請求項１～７の少なくとも一項に記載の使用。

【請求項9】

前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ、Ｇ７６６＞ＶＣ又はＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミドであり、
或いは、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ又はＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ラパチニブであり、
或いは、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ツカチニブであり、
或いは、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ピロチニブであり、
或いは、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ネラチニブであり、
或いは、前記ｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、下記の構造のいずれか一つであることを特徴とする、請求項８に記載の使用。

【化22】

【請求項10】

前記ＥｒｂＢ２突然変異関連疾患は、ＥｒｂＢ２突然変異がんであり、
前記ＥｒｂＢ２突然変異がんは、好ましくは、乳がん、結腸がん、頭頸部がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、肝臓がん又は肺がんを含み、
前記肺がんは、さらに好ましくは非小細胞肺がんであることを特徴とする、請求項４～６の少なくとも一項に記載の使用。

【請求項11】

前記治療は、腫瘍の転移及び／又は増殖を阻害することであることを特徴とする、請求項４～６の少なくとも一項に記載の使用。

【請求項12】

前記医薬は、薬学的に許容される担体をさらに含むことを特徴とする、請求項１～１１の少なくとも一項に記載の使用。

【請求項13】

前記化学式１で表される構造を含む化合物は、前記医薬の唯一の有効成分であるか、或いは、他のＥｒｂＢ２突然変異阻害剤又はがん治療薬と一緒に有効成分として作用することを特徴とする、請求項１～１１の少なくとも一項に記載の使用。

【請求項14】

前記医薬における前記化学式１で表される構造を含む化合物の含有量は、治療有効量を達成する含有量であることを特徴とする、請求項１～１１の少なくとも一項に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本出願は出願日が２０２１年０４月０１日である中国特許出願２０２１１０３５８１９２３の優先権を主張する。本出願は上記の中国特許出願の全文を引用する。

【技術分野】

【0002】

本発明は、生物医薬の分野に関し、具体的にはＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における化合物の使用に関する。

【背景技術】

【0003】

ＥｒｂＢ２遺伝子増幅／タンパク質の過剰発現（ＥｒｂＢ２陽性と呼ばれる）は、ＥｒｂＢ２活性化の一般的な機序であり、過去２０年間の研究により、ＥｒｂＢ２タンパク質の過剰発現は、遺伝子増幅又は転写不活化によるものであっても、多くの場合、様々な固形腫瘍の発がんと関連していることが確認された。臨床的には、ＥｒｂＢ２陽性の腫瘍としては、乳がん、胃がん、食道がん、卵巣がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、肺がんなどが挙げられ、その中で、乳がん、胃がん腫瘍ではＥｒｂＢ２の発現が比較的に高い。ＥｒｂＢ２は、発がん性促進因子として、乳がん及び胃がんの治療標的として認識されている。

【0004】

人類のがんゲノムのマッピングに関する知識の増加に伴い、ＥｒｂＢ２の周期的な体細胞の突然変異が認識され、通常は遺伝子増幅がない場合に発生する。ＢＲＡＦやＫＲＡＳなどの他の突然変異がん遺伝子とは異なり、単一の突然変異対立遺伝子が支配的ではなく、突然変異の正確な分布は腫瘍の種類によって異なる（Ｎａｔｕｒｅ， ２０１８， ５５４（７６９１）： １８９－１９４．）。ＥｒｂＢ２突然変異は、いくつかの腫瘍種類、特に乳がん（３％）、結腸がん（２～３％）及び肺がん（２～３％）で低頻度で発生する。頭頸部がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、肝臓がんなどを含む、他の種類のヒト腫瘍にもＥｒｂＢ２突然変異が含まれることが報告されている（Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ， ２０１８， ９ （１１）： ９７４１－９７５０）。さらに、一部のＥｒｂＢ２陽性患者は抗ＥｒｂＢ２療法に抵抗性を示すことが報告されている。

【0005】

複数の耐性機序は、ＥｒｂＢ２の突然変異が重要な機序であることを示している。ＥｒｂＢ２の突然変異の活性化は、キナーゼドメインの挿入とミスセンス突然変異、細胞外ドメインのミスセンス突然変異、又は細胞外ドメインの欠失突然変異という３つの体細胞分子変化によって引き起こされ得、それによってＥｒｂＢ２の切断型が生じる（Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ， ２０２０）。おそらく効果的な標的療法がないことも一部の原因であるが、ＥｒｂＢ２突然変異は他の発がん性促進因子に比べて予後がより悪い。

【0006】

肺がんは最も一般的に診断されるがんの１つであり、ＥｒｂＢ２突然変異が発がん性促進因子として、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）では発生率が２～３％であり、ＥＧＦＲ／ＡＬＫ／ＲＯＳ１トリプルネガティブＮＳＣＬＣでは６．７％に達する場合がある（ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ ２０１６； １６：８２８）。ＥｒｂＢ２突然変異は肺腺がんではまれな突然変異であるが、肺腺がんの数が多いことを考えると、依然として潜在的な臨床的意義がある。ＥｒｂＢ２突然変異のある肺がん患者の治療中の脳転移の発生率は、ＫＲＡＳ突然変異のある患者よりも高く（２８％対８％）、且つＥＧＦＲ突然変異のある患者よりも高い傾向にあることが文献で報告されている（２８％対１６％）（Ｃａｎｃｅｒ， ２０１９ Ａｕｇ ３０．）。

【0007】

ＣＮ１０９４２２７５５Ａは、非突然変異ＥｒｂＢ２を効果的に阻害できる一連の化合物を開示しているが、ＥｒｂＢ２突然変異によりその構造の変化をもたらすため、ＥｒｂＢ２突然変異体はＥｒｂＢ２阻害剤に対して耐性を持つようになり、従って、ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする有効な阻害剤が急務となっている。

【発明の概要】

【0008】

本発明が解決しようとする技術的課題は、従来技術におけるＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする有効な阻害剤がない欠点を克服するために、ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における化合物の使用を提供することである。

【0009】

本発明によって提供される技術的解決策の１つは、ＥｒｂＢ２突然変異体を標的とする阻害薬の調製における、化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶の使用であり、

【0010】

【化1】

【0011】

ただし、Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0012】

【化2】

【0013】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0014】

【化3】

【0015】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0016】

ある実施形態において、前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0017】

【化4】

【0018】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0019】

【化5】

【0020】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0021】

ある実施形態において、前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0022】

【化6】

【0023】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0024】

【化7】

【0025】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0026】

本発明によって提供される技術的解決策の１つは、ＥｒｂＢ２突然変異体関連疾患を治療又は予防するための医薬の調製における、化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶の使用であり、

【0027】

【化8】

【0028】

ただし、Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0029】

【化9】

【0030】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0031】

【化10】

【0032】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0033】

ある実施形態において、前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0034】

【化11】

【0035】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0036】

【化12】

【0037】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0038】

ある実施形態において、前記化学式１で表される構造を含む化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その薬学的に許容される塩の溶媒和物、又は、その結晶において、
Ｒ_１は、ハロゲン又はＣ_１－Ｃ_６アルカンであり、
Ｒ_２は、

【0039】

【化13】

【0040】

であり、
各Ｒ_３は独立して、

【0041】

【化14】

【0042】

であり、
ｎは、１又は２であり、
Ｇは、Ｎ又はＣ－ＣＮである。

【0043】

本発明の前記化学式１において、Ｒ_１がハロゲンである場合、前記ハロゲンは好ましくはＣｌであり、Ｒ_１がＣ_１－Ｃ_６アルカンである場合、前記Ｃ_１－Ｃ_６アルカンは好ましくはメチルである。

【0044】

本発明のある実施形態において、Ｒ_２は、

【0045】

【化15】

【0046】

である。

【0047】

さらに、本発明の一実施形態において、
ｎが１である場合、Ｒ_３は、好ましくは、

【0048】

【化16】

【0049】

であり、好ましくは、

【0050】

【化17】

【0051】

であり、
或いは、ｎが２である場合、Ｒ_３は好ましくは２つのオルト位基であり、そのうちの１つは、

【化18】

【0052】

であり、もう１つの基は、

【0053】

【化19】

【0054】

であり、好ましくは、

【0055】

【化20】

【0056】

である。

【0057】

前記化学式１で表される構造を含む化合物は、好ましくは、（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミド、ラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ、ネラチニブ、

【0058】

【化21】

【0059】

【0060】

から選択される一つ又は複数である。

【0061】

本発明の前記ＥｒｂＢ２突然変異体の突然変異型は、好ましくは、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ、Ｇ７６６＞ＶＣ及びＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡのうちの一つ又は複数を含む。

【0062】

本発明の好ましい実施形態において、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ、Ｇ７６６＞ＶＣ又はＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミドである。

【0063】

本発明の別の好ましい実施形態において、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ、Ｖ７７７Ｌ又はＡ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ラパチニブである。

【0064】

本発明の別の好ましい実施形態において、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ツカチニブである。

【0065】

本発明の別の好ましい実施形態において、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ピロチニブである。

【0066】

本発明の別の好ましい実施形態において、前記ＥｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、ネラチニブである。

【0067】

本発明のある実施形態において、前記ｒｂＢ２突然変異型は、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｒ８９６Ｃ又はＶ７７７Ｌであり、前記化学式１で表される構造を含む化合物は、下記の構造のいずれか一つである：

【0068】

【化22】

【0069】

【0070】

【0071】

、好ましくは、

【0072】

【化23】

【0073】

【0074】

である。

【0075】

本発明の前記ＥｒｂＢ２突然変異関連疾患は、好ましくはＥｒｂＢ２突然変異がんであり、
前記ＥｒｂＢ２突然変異がんは、好ましくは、乳がん、結腸がん、頭頸部がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、肝臓がん又は肺がんを含み、
前記肺がんは、さらに好ましくは非小細胞肺がんである。

【0076】

本発明の前記治療は、好ましくは、腫瘍の転移及び／又は増殖を阻害することであり、前記腫瘍の増殖を阻害することは、原発性腫瘍及び転移性腫瘍の増殖を阻害することを含み、前記転移性腫瘍は好ましくは脳転移腫瘍である。

【0077】

本発明の前記医薬は、好ましくは薬学的に許容される担体をさらに含む。

【0078】

本発明の前記化学式１で表される構造を含む化合物は、好ましくは前記医薬の唯一の有効成分であるか、或いは、他のＥｒｂＢ２突然変異阻害剤又はがん治療薬と一緒に有効成分として作用する。

【0079】

本発明の前記医薬における前記化学式１で表される構造を含む化合物の含有量は、好ましくは治療有効量を達成する含有量である。

【0080】

本発明において、化合物（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミドは、化合物Ｉとして表される。

【化24】

【0081】

本発明で使用される場合、「ハロゲン」という用語は、周期表のＶＩＩａ族の元素を指す。

【0082】

本発明で使用される場合、「アルカン」という用語は、分子内の炭素原子がすべて炭素－炭素単結合で連結され、残りの原子価結合がすべて水素と連結してなる化合物を指す。

【0083】

本発明で使用される場合、「治療」という用語は、治療的及び予防的治療を指すために使用することができる。ここで、予防とは、個人の病理学的状態又は疾患が緩和又は軽減されることを指すために使用することができる。「治療」という用語には、ヒトを含む哺乳動物における疾患を治療するための使用又は任意形態の投与が含まれる。さらに、当該用語には、疾患又は疾患の進行を阻害又は遅らせることも含まれる。疾患の部分的又は完全な緩和を達成するため、非効率なプロセスを刺激するため、或いは重篤な疾患を緩和するために、損なわれた又は失われた機能を回復又は修復するという意味が含まれる。

【0084】

本発明で使用される場合、「治療有効量」又は「薬学的有効量」という用語は、問題となっている疾患を予防又は治療するのに十分であり、妥当な利益／リスク比で疾患を治療するのに十分であり、且つ医療用途に適しており、悪影響を引き起こさない化合物又は組成物の量を指す。有効量のレベルは、患者の健康状態、疾患の重症度、薬物活性、薬物に対する患者の感受性、投与方法、投与時間、投与経路及び排泄速度、治療期間、製剤又は同時に投与される薬物、並びに当技術分野における公知の医療分野内の他の要因に基づいて決定することができる。本発明の一つの好ましい実施形態において、化合物Ｉの治療有効量は１０～４０ｍｇ／ｋｇであり、例えば、１０、１５、２０、２５、３０、３５、又は４０ｍｇ／ｋｇである。

【0085】

ここで、薬学的に許容される担体とは、患者への送達に適した非毒性物質であれば、いかなる担体であってもよい。蒸留水、アルコール、脂肪、ワックス及び不活性固体を担体として含むことができ、薬学的に許容されるアジュバント（緩衝剤、分散剤）も含むことができる。

【0086】

具体的には、有効成分以外の薬学的に許容される担体を含むことにより、当技術分野における公知の通常の方法を使用して、その投与経路に応じて医薬組成物を製剤に調製することができる。ここで、「薬学的に許容される」という用語は、担体の毒性が投与（処方）される対象が適応できる量を超えないとともに、有効成分の活性を阻害しないことを指す。

【0087】

当該分野の常識に基づいて、上記の各好ましい条件を任意に組み合わせて、本発明の各好ましい実例を得ることができる。

【0088】

本発明で使用される試薬及び原料はいずれも市販品として入手できる。

【0089】

本発明の積極的かつ進歩的な効果は、本発明によって提供される化合物がＥｒｂＢ２突然変異体に対して阻害活性を有し、ＥｒｂＢ２突然変異腫瘍細胞の増殖を効果的に阻害することができることである。好ましい実施形態において、本発明によって提供される化合物、特に化合物Ｉは、ＮＣＩ－Ｈ１７８１及びＢａ／Ｆ３細胞株におけるＥｒｂＢ２突然変異の増殖に対して良好な阻害活性を有し、且つＢ細胞リンパ腫細胞系Ｂａ／Ｆ３ ＥｒｂＢ２ Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ細胞マウス異種移植モデルにおいて、腫瘍の増殖を効果的に阻害することができる。このタイプの化合物の潜在的な臨床応用価値を示している。

【発明を実施するための形態】

【0090】

以下、実施例により本発明をさらに説明するが、それによって本発明は前記実施例の範囲に限定されるものではない。以下の実施例において、具体的な条件が示されていない実験方法は、通常の方法及び条件、或いは商品の説明書に従って選択される。

【0091】

実施例１ 化合物Ｉの調製

【化25】

【0092】

化合物Ｉ：［（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミド］の調製
ステップＡ：７－エトキシ－６－ニトロキナゾリン－４－オールの調製：７－フルオロ－６－ニトロキナゾリン－４－オール（４０００ｍｇ、１９．１３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶解させ、氷水浴で０℃まで冷却させ、ナトリウムエトキシド（４０００ｍｇ、５８．７８ｍｍｏｌ）の無水エタノール（２０ｍｌ）溶液を反応溶液にゆっくりと滴下し、徐々に室温まで昇温させ、１６時間撹拌した。氷水浴下で、酢酸で反応溶液のｐＨ値を５～６に調節し、ろ過し、真空乾燥させて、４０００ｍｇの淡黄色固体を得、次のステップの反応に直接に使用した。

【0093】

ステップＢ：４－クロロ－７－エトキシ－６－ニトロキナゾリンの調製：７－エトキシ－６－ニトロキナゾリン－４－オール（４０００ｍｇ、１７．０１ｍｍｏｌ）をオキシ塩化リン（５０ｍｌ）に溶解させ、撹拌しながら４時間加熱還流させた。次に反応溶液を減圧濃縮乾固し、残留物をジクロロメタン（５００ｍｌ）に溶解させ、水（５００ｍｌ）、飽和食塩水（５００ｍｌ）で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで２時間乾燥させ、減圧濃縮して、４０００ｍｇの淡黄色固体を得、収率は９２．７％であり、次のステップの反応に直接に使用した。

【0094】

ステップＣ：Ｎ－（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）－７－エトキシ－６－ニトロキナゾリン－４－アミンの調製：４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルアニリン（２５０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）、４－クロロ－７－エトキシ－６－ニトロキナゾリン（４００ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２９０ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中で混合し、室温で撹拌した。ろ過し、ろ液にジクロロメタン（１００ｍｌ）及び水（１００ｍｌ）を加え、有機層を分離し、水（１００ｍｌ）、飽和食塩水（１００ｍｌ）で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧濃縮して、５９０ｍｇの黄色固体を得、次のステップの反応に直接に使用した。

【0095】

ステップＤ：Ｎ４－（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）－７－エトキシキナゾリン－４，６－ジアミンの調製：Ｎ－（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）－７－エトキシ－６－ニトロキナゾリン－４－アミン（５９０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍｌ）に溶解させ、ラネーニッケルを加え、アルゴンガスで３回置換し、水素ガスを導入し、室温で２時間撹拌した。珪藻土でろ過し、減圧濃縮して、３３０ｍｇの固体を得、次のステップの反応に直接に使用した。

【0096】

ステップＥ：ジエチル（２－（（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）アミノ）－１－フルオロ－２－オキソエチル）ホスフィンの調製：７－エトキシＮ４－［３－メチル－４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）フェニル］キナゾリン－４，６－ジアミン（１．１５ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）及び２－ジエトキシホスホリル－２－フルオロ－酢酸（６９１ｍｇ、３．２２ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのピリジンに加え、０℃で１．５ｍＬのオキシ塩化リンを滴下し、１．５時間反応させた。反応を炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチングさせ、減圧濃縮して、残留物を得、ジクロロメタン及び水を加え、有機相を廃棄した。水相をジクロロメタン（６０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して、粗生成物を得、カラムクロマトグラフィーにより分離・精製して、９２０ｍｇの黄色固体を得、収率は５５％であった。

【0097】

ステップＦ：ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ，Ｚ／Ｅ）－２－（３－（（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）アミノ）－２－フルオロ－３－オキソプロプ－１－エン－１－イル）ピロリジン－１－カルボキシレートの調製：水酸化ナトリウム（３５９ｍｇ、８．９７ｍｍｏｌ）を混合溶媒エタノール１８ｍＬ及び水１．８ｍＬに溶解させ、ジエチル（２－（（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）アミノ）－１－フルオロ－２－オキソエチル）ホスフィン（７００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を清澄化させた後、０℃でｔｅｒｔ－ブチル（２Ｒ）－２－ホルミルピロリジン－１－カルボキシレート（４４７ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応溶液を室温まで昇温させ、３時間撹拌した。塩化アンモニウム水溶液を加え、有機溶媒を減圧濃縮除去し、残留物をジクロロメタン（６０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して、粗生成物を得、カラムクロマトグラフィーにより分離・精製して、５６５ｍｇの黄色固体混合物を得、収率は７５％であった。

【0098】

ステップＧ：（Ｒ，Ｚ）－Ｎ－（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）－２－フルオロ－３－（１－メチルピロール－２－イル）アクリルアミドの調製：ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ，Ｚ／Ｅ）－２－（３－（（４－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン）－７－イルオキシ）－３－メチルフェニル）アミノ）－７－エトキシキナゾリン－６－イル）アミノ）－２－フルオロ－３－オキソプロプ－１－エン－１－イル）ピロリジン－１－カルボキシレート混合物（５４０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を１６ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、４ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で３時間撹拌した。減圧濃縮し、得られた残留物を２０ｍＬのメタノールに溶解させ、１ｍＬの３７％のホルムアルデヒド水溶液を加え、室温で１．５時間撹拌し、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１ｇ、４．６９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応溶液を室温で１６時間撹拌した。減圧濃縮して、残留物を得、ジクロロメタン及び炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機相を廃棄し、水相をジクロロメタン（８０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧濃縮して、残留物を得、カラムクロマトグラフィーにより分離・精製して、粗生成物を得、次にＳＦＣにより分離・精製して、１３４ｍｇの目的化合物を得、収率は２８％であった。

【0099】

下記の実施例において、化合物２～化合物７、化合物１０～化合物１５、化合物１７はＷＯ２０１９０４２４０９Ａ１に開示され、当該特許出願に記載の調製方法に従って得られた；化合物８、化合物９及び化合物１６はＷＯ２０１７１４８３９１Ａ１に開示され、当該特許出願に記載の調製方法に従って得られた。ラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ、ネラチニブは市販品から購入した。

【0100】

実施例２ ＥｒｂＢ２突然変異体阻害試験
当該試験で使用された試薬材料及び試験プロセスは、Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって提供され、完了された。具体的なステップは下記の通りである。

【0101】

１．化合物の調製：試験化合物及び対照化合物（スタウロスポリン／Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）をすべてＤＭＳＯに溶解させた。

【0102】

２．酵素反応試験条件：試験化合物の培養時間は２０分であり、ＡＴＰ濃度は１０μＭであり、酵素反応時間は２時間であった。

【0103】

３．酵素反応実験のステップ
酵素反応緩衝液は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、２ｍＭのＭｎＣｌ_２、１ｍＭのＥＧＴＡ、０．０１％のＢｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、０．１ｍＭのＮａ_３ＶＯ_４、２ｍＭのＤＴＴ、１％のＤＭＳＯであった。

【0104】

酵素反応のステップは下記の通りである。

【0105】

（１）各酵素反応に必要な基質を新たに調製した酵素反応緩衝液にそれぞれ溶解させた。

【0106】

（２）各酵素をそれぞれ上記の基質溶液に加え、均一に混合した。

【0107】

（３）試験化合物を対応する濃度で酵素－基質混合溶液にそれぞれ加え、室温で２０分間培養した。

【0108】

（４）それぞれ^３３Ｐ－ＡＴＰ（最終濃度：０．０１μＣｉ／μｌ）を加えて酵素反応を開始し、室温で２時間培養した。

【0109】

（５）酵素反応溶液をＰ８１イオン交換紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８－９１５）に加えた。

【0110】

（６）０．７５％のリン酸で洗浄した。

【0111】

（７）紙上の放射性リン酸化基質を読み取った。

【0112】

４．データ分析：
キナーゼ活性％＝（試験化合物試料の残りのキナーゼ活性／溶媒対照試料（ＤＭＳＯ）のキナーゼ活性）×１００％。

【0113】

化合物のＩＣ_５０は、異なる化合物濃度におけるキナーゼ活性％に基づいてフィッティング計算された。

【0114】

【表1】

【0115】

【0116】

【0117】

【0118】

その中で、対照化合物はスタウロスポリン（Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）であり、強力な非選択的プロテインキナーゼ阻害剤であり、アポトーシス誘導剤であり、その役割は実験系が有効であることを証明することである。

【0119】

ラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ、ネラチニブ及び化合物Ｉはいずれも化学式１で表される構造を含み、それらの構造はそれぞれ下記の通りである。

【0120】

化学式１：

【0121】

【化26】

【0122】

ラパチニブ：

【0123】

【化27】

【0124】

ツカチニブ：

【0125】

【化28】

【0126】

ピロチニブ：

【0127】

【化29】

【0128】

ネラチニブ：

【0129】

【化30】

【0130】

化合物Ｉ：

【0131】

【化31】

【0132】

対照化合物（スタウロスポリン）：

【0133】

【化32】

【0134】

結果：ラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ、ネラチニブ及び化学式１はいずれもＥｒｂＢ２突然変異体に対して阻害特性を有し、その中で、化学式１のほとんどの化合物はラパチニブ、ツカチニブ、ピロチニブ及びネラチニブよりも高い阻害特性を有する。

【0135】

実施例３ ＥｒｂＢ２突然変異細胞阻害試験

【0136】

【表2】

【0137】

細胞を培養し、対数増殖期にある細胞を回収し、血小板カウンターを使用して細胞を計数した。トリパンブルー排除法を使用して細胞生存率を検出し、細胞生存率が９０％以上であることを確認した。ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養後、２×１０^６個の細胞を得た。細胞懸濁液を１×１０^３細胞／ウェルで９６ウェルプレート（９０μＬ／ウェル）にそれぞれ加え、３７℃、５％のＣＯ_２、湿度９５％の条件下で一晩培養した。１０倍薬物溶液を調製し、検出用最高濃度は１０μＭであり、３倍に希釈して９個濃度とし、細胞を接種した９６ウェルプレートの各ウェルに１０μＬの薬物溶液を加え、各薬物濃度に３つの複製ウェルを設定した。薬物を加えた９６ウェルプレートの細胞を３７℃、５％のＣＯ_２、湿度９５％の条件下で７２時間培養し続け、次にＣＴＧ分析を実行した。

【0138】

【表3】

【0139】

結果：ラパチニブ及び化合物Ｉは、上記の２つの突然変異細胞株（これら２つの突然変異は肺がんに現れた）において良好な細胞増殖阻害の活性を有する。

【0140】

実施例４ ＮＰＳＧマウス異種移植モデルにおける薬効試験
オスのＮＰＳＧマウス（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉｈｕｉ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．、証明書：Ｎｏ．２０１７００１２００６７８３）の右肩にＢａ／Ｆ３ ＥｒｂＢ２ Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ細胞（ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養、９×１０^７細胞を得た）を皮下接種し、平均腫瘍体積が１３０ｍｍ^３に達した時点で、腫瘍体積及び体重に基づいてランダムに各群１０匹で６群に分け、直ちに投与を開始した。投与後、マウスの体重及び腫瘍体積を週２回測定し、実験１３日目まで投与を連続した。実験の１４日目に、各群に対して薬物投与後の試料採取を実行した。

【0141】

【表4】

【0142】

注：データは平均値±標準誤差であり、対照群は化合物を投与しない群である。

【0143】

結論：データにより、Ｂ細胞リンパ腫細胞系Ｂａ／Ｆ３ ＥｒｂＢ２ Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ細胞マウス異種移植モデルで１３日間の連続投与実験において、ピロチニブ及びネラチニブは２０ｍｇ／ｋｇの用量で中程度の有効性を示し、化合物Iは１０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇの用量でいずれも強い有効性を示し、その中で、化合物Iは４０ｍｇ／ｋｇの用量で最も強い腫瘍阻害効果を示し、他の各試験薬物群と統計的差異を示した（ｐ値はいずれも０．０１未満である）。各試験薬物群の動物は、試験期間中に有意な体重減少や死亡を示さなかった。

【0144】

以上、本発明の具体的な実施形態について説明したが、当業者であれば、これらは単なる例であり、本発明の原理及び本質から逸脱することなく、これらの実施形態に対して様々な変更や修正を加えることができることを理解されたい。従って、本発明の保護範囲は添付の特許請求の範囲によって限定される。

【国際調査報告】