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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-04-01
(54)【発明の名称】高濃度二重特異性抗体製剤
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20240325BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240325BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240325BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20240325BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20240325BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20240325BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20240325BHJP
A61K 47/20 20060101ALI20240325BHJP
A61K 47/18 20170101ALI20240325BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20240325BHJP
C07K 16/46 20060101ALI20240325BHJP
C12N 9/24 20060101ALI20240325BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61P35/00
A61P11/00
A61K47/42
A61K9/08
A61K47/26
A61K47/12
A61K47/20
A61K47/18
C07K16/28 ZNA
C07K16/46
C12N9/24
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023564087
(86)(22)【出願日】2022-04-21
(85)【翻訳文提出日】2023-11-22
(86)【国際出願番号】 IB2022053733
(87)【国際公開番号】W WO2022224187
(87)【国際公開日】2022-10-27
(31)【優先権主張番号】63/177,518
(32)【優先日】2021-04-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/180,690
(32)【優先日】2021-04-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/309,230
(32)【優先日】2022-02-11
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】509087759
【氏名又は名称】ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100095360
【弁理士】
【氏名又は名称】片山 英二
(74)【代理人】
【識別番号】100093676
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 純子
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100149010
【弁理士】
【氏名又は名称】星川 亮
(72)【発明者】
【氏名】クノーブラウフ，ローランド
(72)【発明者】
【氏名】トルネ，サチェン
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB16
4C076CC27
4C076DD41
4C076DD49
4C076DD55
4C076DD67
4C076EE23F
4C076EE41Q
4C076FF14
4C076FF16
4C076FF36
4C076FF63
4C085AA14
4C085AA16
4C085BB11
4C085GG04
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA40
4H045CA40
4H045DA76
4H045DA89
4H045EA20
(57)【要約】
本明細書では、二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体の高濃度製剤を含む安定な水性医薬組成物、及びその調製方法が提供される。本明細書ではまた、本明細書に開示される安定な水性医薬組成物を対象に皮下投与することによって、処置を必要とする対象においてがんを処置する方法も提供される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体及びヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物であって、前記抗体は、ａ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む、第１の重鎖（ＨＣ１）；
ｂ．配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む、第１の軽鎖（ＬＣ１）；
ｃ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む、第２の重鎖（ＨＣ２）；
ｄ．配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む、第２の軽鎖（ＬＣ２）；
を含み、前記組成物は、約１，０５０ｍｇ～約２，２４０ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体、及び約１３，０００Ｕ～約２８，０００Ｕの前記ヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物。
【請求項2】
前記組成物が、約１，０５０ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項3】
前記組成物が、約１，４００ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項4】
前記組成物が、約１，５７５ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項5】
前記組成物が、約１，６００ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項6】
前記組成物が、約２，１００ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項7】
前記組成物が、約２，２４０ｍｇの前記二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、請求項１に記載の安定な組成物。
【請求項8】
安定な水性医薬組成物であって、ａ）約１４４ｍｇ／ｍＬ～約１７６ｍｇ／ｍＬの二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体であって、前記二重特異性抗体は、
ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、
軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、
ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、及び
軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、
を含み、
前記ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、前記ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、前記ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、前記ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体と、
ｂ）約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、
ｃ）約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロースと、
ｄ）約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
ｅ）約０．８ｍｇ／ｍＬ～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、
ｆ）約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、
ｇ）任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、
ｈ）約５．２～約６．２のｐＨと、
を含む、安定な水性医薬組成物。
【請求項9】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、請求項８に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項10】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、請求項８又は請求項９に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項11】
前記ＨＣ１が配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記ＬＣ１が配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項８～１０のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項12】
前記ＨＣ２が配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記ＬＣ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項８～１１のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項13】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、請求項８～１２のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項14】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、約１６０ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、請求項８～１３のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項15】
前記酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、約３０ｍＭの濃度を有する、請求項８～１４のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項16】
前記酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、氷酢酸及び／又は酢酸ナトリウム三水和物を含む、請求項８～１５のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項17】
約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを含む、請求項８～１６のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項18】
約０．０６％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む、請求項８～１７のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項19】
前記メチオニンが、Ｌ－メチオニンを含み、かつ約１ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、請求項８～１８のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項20】
前記ＥＤＴＡが、約２０μｇ／ｍＬの濃度を有する、請求項８～１９のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項21】
前記ｐＨが、約５．７である、請求項８～２０のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項22】
前記ヒアルロニダーゼが、ヒトヒアルロニダーゼ、任意選択では配列番号２５のアミノ酸配列を含む可溶性ヒトＰＨ２０である、請求項８～２１のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項23】
前記濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬである、請求項８～２２のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項24】
前記濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約２，０００Ｕ／ｍＬである、請求項８～２３のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項25】
安定性が、溶液の色、ｐＨ、濁度、肉眼では見えない粒子の数、アグリコシル化重鎖（ＡＧＨＣ）のパーセンテージ、新たなピークのパーセンテージ、高分子量種（ＨＭＷＳ）のパーセンテージ、低分子量種（ＬＭＷＳ）のパーセンテージ、酸性ピークの合計のパーセンテージ、塩基性ピークの合計のパーセンテージ、タンパク質濃度、ＥＧＦＲ結合活性のパーセンテージ、ｃＭｅｔ結合活性のパーセンテージ、ＰＳ８０のパーセンテージ、任意選択でｒＨｕＰＨ２０活性のパーセンテージ、又はこれらの任意の組み合わせに基づいて定義される、請求項８～２４のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項26】
前記組成物の総体積が約６ｍＬ～約９ｍＬの範囲である、請求項８～２５のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項27】
前記組成物の総体積が、約７．１ｍＬである、請求項２４に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項28】
前記組成物の総体積が、約６．６ｍＬである、請求項２４に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項29】
前記組成物の総体積が、約８．７５ｍＬである、請求項２４に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項30】
約１６０ｍｇ／ｍＬの前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡとともに含み、前記安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
請求項１～２９のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項31】
約１６０ｍｇ／ｍＬの前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、並びに約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０とともに含み、前記安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
請求項１～２９のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物。
【請求項32】
処置を必要とする対象においてがんを処置する方法であって、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項33】
前記投与が、皮下である、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
前記がんが、肺がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、又は卵巣がん（ＯＣ）を含む、請求項３０～３１に記載の方法。
【請求項35】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、請求項３２～３３に記載の方法。
【請求項36】
ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体の安定な水性医薬組成物を調製するための方法であって、ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする前記二重特異性抗体は、ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、を含み、前記ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２及び３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、前記ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１、及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、前記方法は、約１６０ｍｇ／ｍＬの前記二重特異性抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを含む組成物を、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、任意選択で約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０と組み合わせることを含み、前記安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有する、方法。
【請求項37】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
前記二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、請求項３６～３７に記載の方法。
【請求項39】
前記抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）と、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）とを含む、請求項３６～３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項40】
前記抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２とを含む、請求項３６～３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項41】
前記抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、請求項３６～４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項42】
請求項１～３１のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物及びその使用説明書を含む、キット。
【請求項43】
請求項１～３１のいずれか一項に記載の安定な水性医薬組成物を保持する容器を含む、製造品。
【請求項44】
前記容器が、シリンジによって穿刺可能な栓を有するバイアルである、請求項４３に記載の製造品。
【請求項45】
前記バイアルが、単回使用バイアルである、請求項４４に記載の製造品。
【請求項46】
前記がんの処置に使用するための、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項47】
前記がんが、肺がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、又は卵巣がん（ＯＣ）を含む、を含む、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項48】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項49】
がんを処置するための医薬品の調製に使用するための、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項50】
請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物を投与することによって、処置を必要とする対象においてがんを処置するための、医薬組成物の使用。
【請求項51】
前記投与が、皮下である、請求項５０に記載の医薬組成物の使用。
【請求項52】
請求項１に記載の安定な水性医薬製剤を患者へ皮下投与することを含む、アミバンタマブで処置された対象における注入関連反応を低減する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２１年４月２１日に出願された米国仮出願第６３／１７７，５１８号、２０２１年４月２８日に出願された米国仮出願第６３／１８０，６９０号、及び２０２２年２月１１日に出願された米国仮出願第６３／３０９，２３０号の優先権を主張する。上記出願の全容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年４月２１日に出願された米国仮出願第６３／１７７，５１８号、２０２１年４月２８日に出願された米国仮出願第６３／１８０，６９０号、及び２０２２年２月１１日に出願された米国仮出願第６３／３０９，２３０号の優先権を主張する。上記出願の全容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
（電子的に提出された配列表の参照）
本出願は、２０２２年４月７日付けで作成された、「ＪＢＩ６５２９ＷＯＰＣＴ１ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ」というファイル名のＡＳＣＩＩ形式の配列表としてＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に提出された、４２ＫＢのサイズを有する配列表を含む。ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出された配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２２年４月７日付けで作成された、「ＪＢＩ６５２９ＷＯＰＣＴ１ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ」というファイル名のＡＳＣＩＩ形式の配列表としてＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に提出された、４２ＫＢのサイズを有する配列表を含む。ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出された配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0003】
（発明の分野）
皮下投与を含む投与のための二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、安定な組成物の組成、並びに安定な組成物を用いる方法及び製剤化する方法が開示される。
皮下投与を含む投与のための二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、安定な組成物の組成、並びに安定な組成物を用いる方法及び製剤化する方法が開示される。
【0004】
（発明の背景）
がんにおける上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ１又はＨＥＲ１）及び肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）の両方の役割は十分に確立されており、これらの標的を併用療法にとって魅力的なものにしている。いずれの受容体も、同じ生存経路及び抗アポトーシス経路（ＥＲＫ及びＡＫＴ）を通してシグナルを伝達する。ＥＧＦＲ及びｃ－Ｍｅｔ又は二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ分子を標的とする併用療法は、様々な臨床試験において試験されている。
がんにおける上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ１又はＨＥＲ１）及び肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）の両方の役割は十分に確立されており、これらの標的を併用療法にとって魅力的なものにしている。いずれの受容体も、同じ生存経路及び抗アポトーシス経路（ＥＲＫ及びＡＫＴ）を通してシグナルを伝達する。ＥＧＦＲ及びｃ－Ｍｅｔ又は二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ分子を標的とする併用療法は、様々な臨床試験において試験されている。
【0005】
二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は有望な結果を示しているが、冷蔵温度（２～８℃）及び周囲温度で長期間安定である一方、それらの投与様式に最適に製剤化されている、そのような抗体を含む医薬組成物が当該技術分野において依然として必要とされている。
【0006】
（発明の概要）
本明細書では、二重特異性抗体の特定の製剤を含む安定な水性医薬組成物が開示される。
本明細書では、二重特異性抗体の特定の製剤を含む安定な水性医薬組成物が開示される。
【0007】
一態様では、二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体及びヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物が本明細書で提供されるが、抗体は、
配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む、第１の重鎖（ＨＣ１）、
配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む、第１の軽鎖（ＬＣ１）、
配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む、第２の重鎖（ＨＣ２）、
配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む、第２の軽鎖（ＬＣ２）、
を含み、組成物は、約１，０５０ｍｇ～約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体、及び約１３，０００Ｕ～約２８，０００Ｕのヒアルロニダーゼを含む。
配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む、第１の重鎖（ＨＣ１）、
配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む、第１の軽鎖（ＬＣ１）、
配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む、第２の重鎖（ＨＣ２）、
配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む、第２の軽鎖（ＬＣ２）、
を含み、組成物は、約１，０５０ｍｇ～約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体、及び約１３，０００Ｕ～約２８，０００Ｕのヒアルロニダーゼを含む。
【0008】
いくつかの実施形態では、組成物は、約１，０５０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0009】
いくつかの実施形態では、組成物は、約１，４００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0010】
いくつかの実施形態では、組成物は、約１，５７５ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0011】
いくつかの実施形態では、組成物は、約１，６００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0012】
いくつかの実施形態では、組成物は、約２，１００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0013】
いくつかの実施形態では、組成物は、約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む。
【0014】
一態様では、本明細書では、安定な水性医薬組成物であって、
ａ）約１４４ｍｇ／ｍＬ～約１７６ｍｇ／ｍＬの二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体であって、二重特異性抗体は、
ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、
軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、
ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、及び
軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、
を含み、
ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体と、
ｂ）約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、
ｃ）約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロースと、
ｄ）約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
ｅ）約０．８ｍｇ／ｍＬ～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、
ｆ）約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、
ｇ）任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、
ｈ）約５．２～約６．２のｐＨと、
を含む、安定な水性医薬組成物である。
ａ）約１４４ｍｇ／ｍＬ～約１７６ｍｇ／ｍＬの二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体であって、二重特異性抗体は、
ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、
軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、
ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、及び
軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、
を含み、
ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体と、
ｂ）約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、
ｃ）約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロースと、
ｄ）約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
ｅ）約０．８ｍｇ／ｍＬ～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、
ｆ）約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、
ｇ）任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、
ｈ）約５．２～約６．２のｐＨと、
を含む、安定な水性医薬組成物である。
【0015】
いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、ポリソルベート８０が最終濃度約０．０６％（ｗ／ｖ）、及びＥＤＴＡが最終濃度約２０μｇ／ｍＬになるように含み、安定な水性医薬組成物はｐＨ約５．７を有し、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）と、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２と、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２と、を含む。
【0016】
いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、ポリソルベート８０が最終濃度約０．０６％（ｗ／ｖ）、ＥＤＴＡが最終濃度約２０μｇ／ｍＬ、及びｒＨｕＰＨ２０が最終濃度約２，０００Ｕ／ｍＬになるように含み、安定な水性医薬組成物はｐＨ約５．７を有し、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）と、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２と、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２と、を含む。
【0017】
本明細書では、処置を必要とする対象においてがんを処置する方法もまた提供される。本方法は、本明細書に開示の安定な水性医薬組成物を対象に投与することを含む。
【0018】
本明細書ではまた、本明細書で開示された安定な水性医薬製剤を対象へ皮下投与することを含む、アミバンタマブで処置された対象における注入関連反応を低減する方法もまた提供される。
【0019】
本明細書ではまた、ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体の安定な水性医薬組成物を調製するための方法であって、当該ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体は、ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、を含み、ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、方法が提供される。本方法は、約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを含む組成物を、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、任意選択で約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０と組み合わせることを含み、安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有する、方法を含む。
【0020】
また、本明細書では、本明細書に開示の安定な水性医薬製剤及びその使用説明書を含むキットも提供される。
【0021】
本明細書では、本明細書に開示の安定な水性医薬製剤を保持する容器を含む製造品も更に提供される。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】アミバンタマブ用量の血清濃度－時間プロファイルを示す。
【図2】最初のＳＣアミバンタマブ投与後の、可溶性遊離ＥＧＦＲ及びＭＥＴの飽和を示す。ＬＬＯＱ－定量下限値、Ｐｒｅ－投与前、「Ｃ」－処置サイクルを示す（各サイクルは２８日間であった）、「Ｄ」－処置サイクル内の日数を示す。
【0023】
（発明の詳細な記述）
本開示の方法は、本開示の一部を形成する、添付の図面に関連してなされる以下の詳細な説明を参照することにより、より容易に理解することができる。本開示の方法は、本明細書に記載及び／又は示される特定の方法に限定されないこと、更に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を例によって説明することのみを目的とし、特許請求された方法に限定することを意図しないことを理解されたい。
本開示の方法は、本開示の一部を形成する、添付の図面に関連してなされる以下の詳細な説明を参照することにより、より容易に理解することができる。本開示の方法は、本明細書に記載及び／又は示される特定の方法に限定されないこと、更に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を例によって説明することのみを目的とし、特許請求された方法に限定することを意図しないことを理解されたい。
【0024】
特別な記述がない限り、動作に関する可能なメカニズム又は形態、あるいは改善の理由についてのあらゆる記載は、説明のみを意図したものであり、本開示の組成物及び方法は、そのようないかなる提案されている動作に関するメカニズム又は形態、あるいは改善の理由の是非によっても制限されない。
【0025】
数値の範囲が本明細書で列挙又は確立される場合、この範囲は、その端点、並びにその範囲内の全ての個々の整数及び有理数を含み、更に、これらの端点及び内部整数及び有理数の全ての種々の可能な組み合わせによって形成される、その中のより狭い範囲のそれぞれを含み、それらのより狭い範囲のそれぞれが明示的に列挙されたかのように、記載の範囲内の値のより大きい群の小群を形成する。数値の範囲が、記載される値よりも大きいと本明細書に記載される場合、その範囲はそれにもかかわらず有限であり、本明細書に記載される本発明の文脈内で動作可能である値によって、その上限が画定される。数値の範囲が、記載される値よりも小さいと本明細書に記載される場合、その範囲は、それにもかかわらず、ゼロでない値によって、その下限が画定される。本発明の範囲が、範囲を定義する際に列挙される特定の値に限定されることを意図しない。範囲はいずれも境界値を含み、組み合わせが可能である。
【0026】
値が、先行詞「約」を用いて近似値として表現される場合、その特定の値は、別の実施形態を形成することが理解される。特定の数値に関する言及は、文脈上その他に明記されない限り、少なくともその特定の値を含むものとする。
【0027】
また、明確さのために本明細書では別々の実施形態の文脈で説明される、本開示の組成物及び方法の特定の特徴は、単一の実施形態において組み合わせて提供され得ることも理解される。逆に、簡潔さのために単一の実施形態の文脈で説明される、本開示の組成物及び方法の種々の特徴が、別々に又は任意の部分的組み合わせで提供される場合もある。
【0028】
本明細書で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は複数を含むものとする。
【0029】
本明細書の態様に関する様々な用語が、本明細書及び特許請求の範囲を通して使用される。別段の指示がない限り、このような用語には、当該技術分野におけるそれらの通常の意味が与えられるものとする。他の具体的に定義される用語は、本明細書で提供される定義と一致する様式で解釈されるものとする。
【0030】
本明細書で使用される「約」とは、数値範囲、カットオフ、又は特定の値に関連して使用される場合、列記された値が、列挙された値から最大１０％変動し得ることを示すために使用される。本明細書で使用される数値の多くが実験的に決定されるため、当業者であれば、かかる決定が、異なる実験間で異なる場合があり、多くの場合、異なるであろうことを理解するはずである。本明細書で使用される値は、この固有の変動によって過度に制限されるとみなされるべきではない。したがって、用語「約」とは、規定値からの±１０％以下の変動、±５％以下の変動、±１％以下の変動、±０．５％以下の変動、又は±０．１％以下の変動を包含するために使用される。
【0031】
同様に、用語「を含む（comprising）」とは、用語「から本質的になる（consisting essentially of）」及び用語「からなる（consisting of）」によって包含される例を含むことを意図する。同様に、用語「から本質的になる」は、用語「からなる」によって包含される例を含むことを意図する。
【0032】
「抗体」という用語及び同様の用語は、広義に意図されており、モノクローナル抗体（マウス、ヒト、ヒト適合化、ヒト化、及びキメラモノクローナル抗体など）、抗体フラグメント、二重特異性又は多重特異性抗体、二量体、四量体、又は多量体抗体、及び一本鎖抗体を含む、免疫グロブリン分子又はそのフラグメントを含む。
【0033】
免疫グロブリンは、重鎖定常ドメインのアミノ酸配列に応じて５つの主要なクラス、すなわち、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭに割り当てられ得る。ＩｇＡ及びＩｇＧは、アイソタイプＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４として更に細かく分類される。いずれの脊椎動物種の抗体軽鎖も、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて２つの明確に異なるタイプ、すなわちカッパ（κ）及びラムダ（λ）のうちの一方に割り当てられ得る。
【0034】
「抗体フラグメント」とは、親完全長抗体の抗原結合特性を保持する免疫グロブリン分子の一部分を指す。例示的な抗体フラグメントは、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、２、及び３、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、２、及び３、重鎖可変領域（ＶＨ）、又は軽鎖可変領域（ＶＬ）である。抗体フラグメントには、ＶＬ、ＶＨ、定常軽鎖（ＣＬ）、及び（定常重鎖１）ＣＨ１ドメインからなる一価フラグメントであるＦａｂフラグメントと、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメントであるＦ（ａｂ’）２フラグメントと、ＶＨ及びＣＨＩドメインからなるＦｄフラグメントと、抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖフラグメントと、ＶＨドメインからなるドメイン抗体（ｄＡｂ）フラグメント（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４１：５４４～５４６，１９８９）と、が含まれる。ＶＨドメイン及びＶＬドメインは、操作され、合成リンカーを介して一緒に連結して様々な種類の一本鎖抗体設計を形成することができるが、ＶＨ／ＶＬドメインは、分子内で対合するか、又はＶＨドメイン及びＶＬドメインが別々の一本鎖抗体構築物によって発現される場合には分子間で対合して、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又はダイアボディなどの一価の抗原結合部位を形成する。例えば、国際公開第１９９８／４４００１号、同第１９８８／０１６４９号、同第１９９４／１３８０４号、及び同第１９９２／０１０４７号に記載されている。これらの抗体フラグメントは、当業者に既知の技法を使用して得られ、これらのフラグメントは、完全長抗体の場合と同じ方法で、有用性についてスクリーニングされる。
【0035】
抗体可変領域は、３つの「抗原結合部位」によって中断された「フレームワーク」領域からなる。抗原結合部位は、様々な用語を用いて定義される：（ｉ）ＶＨ内に３つ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）及びＶＬ内に３つ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）の相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列多様性に基づいている（Ｗｕ ａｎｄ Ｋａｂａｔ Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １３２：２１１－５０，１９７０；Ｋａｂａｔ他、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．，１９９１）、及び（ｉｉ）ＶＨ内に３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬ内に３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）の「超可変性領域」（「ＨＶＲ」又は「ＨＶ」）は、Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６：９０１－１７，１９８７）により定義される通り、構造において超可変性である、抗体可変ドメインの領域を指す。他の用語には、「ＩＭＧＴ－ＣＤＲ」（Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ Ｃｏｍｐａｒａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：５５－７７，２００３）及び「Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｓｉｄｕｅ Ｕｓａｇｅ」（ＳＤＲＵ）（Ａｌｍａｇｒｏ Ｍｏｌ Ｒｅｃｏｇｎｉｔ １７：１３２－４３，２００４）が含まれる。Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）データベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｉｍｇｔ＿ｏｒｇ）は、抗原結合部位についての標準的番号及び定義を提供する。ＣＤＲ、ＨＶ及びＩＭＧＴの概要説明の対応関係は、Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ Ｃｏｍｐａｒａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：５５－７７，２００３に記載されている。
【0036】
「モノクローナル抗体」とは、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示し、又は二重特異性モノクローナル抗体の場合には、２つの別個のエピトープに対する二重結合特異性を示す。したがって、モノクローナル抗体とは、抗体重鎖からのＣ末端リシンの除去などの可能な周知の改変を除いて、各重鎖及び各軽鎖のアミノ酸組成が単一である抗体集団のことを指す。モノクローナル抗体は、抗体集団内で不均一なグリコシル化を有し得る。モノクローナル抗体は、単一特異性若しくは多重特異性、又は一価、二価、若しくは多価であり得る。二重特異性抗体は、モノクローナル抗体という用語に含まれる。
【0037】
（認可済み標準製剤／生物学的薬剤、すなわち、列挙した医薬の）「バイオ後続品」という用語は、臨床的に不活性な成分にわずかな相違があるものの、次の（ａ）～（ｃ）から得たデータに基づいて、安全性、純度、及び作用強度の点でバイオ後続品と標準製剤との間に臨床的に重要な違いがない、標準製剤に極めて類似した生物学的製剤を指す：（ａ）生物学的製剤は、臨床的に不活性な成分にわずかな相違があるものの、標準製剤に極めて類似していることを実証する分析的研究、（ｂ）動物実験（毒性の評価を含む）、並びに／あるいは（ｃ）標準製剤が認可される使用条件及び標準製剤の使用が意図される条件、並びにバイオ後続品に対する認可付与のための条件などの１つ以上の適切な使用条件の下での安全性、純度、及び作用強度を証明するのに十分である臨床試験（複数可）（免疫原性及び薬物動態学又は薬力学の評価を含む）。バイオ後続品は、処方する医療従事者の介入なしに薬局で標準製剤の代替品となり得る、互換可能な製品であり得る。「互換性」の更なる基準を遵守すべく、バイオ後続品は、いずれの所与の患者においても標準製剤と同じ臨床結果を生じさせることが求められ、バイオ後続品が個体に複数回投与される場合には、バイオ後続品の使用と標準製剤の使用を交互にすること又は切り替えることによる安全性又は効果の低下に関するリスクは、そのように使用を交互にすること又は切り替えることなく標準製剤を使用した場合のリスクを上回らない。標準製剤の機序が既知である範囲で、バイオ後続品は、提案された使用条件に関して同じ作用機序を利用する。バイオ後続品に関して提案されるラベル表示において定められた、推奨された、又は提示された使用条件（複数可）は、標準製剤に関して既に認可されている。バイオ後続品の投与経路、剤形、及び／又は強度は、標準製剤のものと同じであり、バイオ後続品は、バイオ後続品が安全性、純度及び強度を確実に維持し続けるように設計された基準を満たす設備で製造、加工、包装又は保持される。バイオ後続品は、標準製剤と比較した場合に、バイオ後続品の性能を変化させないと予想されるアミノ酸配列の若干の改変（例えば、Ｎ末端又はＣ末端短縮）を含んでもよい。
【0038】
「エピトープ」とは、抗体が特異的に結合する抗原の一部分を指す。エピトープは、通常、アミノ酸又は多糖類側鎖などの部位の化学的に活性な（極性、非極性、又は疎水性など）表面基からなり、特定の三次元構造特性だけでなく、特定の電荷特性も有し得る。エピトープは、立体配座的な空間単位を形成する連続的な、かつ／又は不連続的なアミノ酸で構成され得る。不連続なエピトープでは、抗原の直鎖配列の異なる部分にあるアミノ酸が、タンパク質分子の折り畳みにより三次元空間でごく近接するようになる。
【0039】
「ヒアルロニダーゼ」とは、ヒアルロン酸を分解する酵素を指す。この酵素は、他の同時投与された医薬の組織への分散及び吸収を増加させるために使用されることが多い（例えば、皮下注入（subcutaneous injections）、皮下注入（subcutaneous infusion）、例えば皮下注入（hypodermoclysis）など）。より具体的には、ヒト組換えＤＮＡ由来ヒアルロニダーゼ酵素ＰＨ２０（ｒＨｕＰＨ２０）は、特に大量に注射する場合、皮下への医薬注入を増加させるためにしばしば使用される。
【0040】
「変異体」とは、例えば、置換、挿入、又は欠失などの１つ以上の改変により参照ポリペプチド又は参照ポリヌクレオチドとは異なるポリペプチド又はポリヌクレオチドを指す。
【0041】
「～と組み合わせて」とは、２つ以上の治療薬が、対象に、混合物で一緒に、単独の薬剤として同時に、又は単独の薬剤として任意の順序で順次に投与され得ることを意味する。
【0042】
「処置する」、「処置」、及び同様の用語は、治療処置、及び予防又は防止処置の両方を指し、症状の重症度及び／又は頻度を低減させること、症状及び／又は症状の根本原因を排除すること、症状の頻度若しくは可能性及び／又は症状の根本原因を低減させること、悪性腫瘍によって直接的に又は間接的に引き起こされた損傷を改善すること又は修復することを含む。処置は、処置を受けていない対象の予想生存期間と比較して、生存期間を延長させることも含む。処置される対象には、容態若しくは疾患に罹患している対象、並びに容態又は疾患に易罹患性の対象、又は容態若しくは疾患が防止される対象が含まれる。
【0043】
「治療有効量」とは、必要な投与量で必要な期間にわたって所望の治療を達成するのに有効な開示される併用療法の量を指す。治療有効量は、対象の病状、年齢、性別、及び体重などの要因、並びに対象に所望の応答を誘発する併用療法の能力によって異なり得る。治療有効量の例示的な指標としては、例えば、患者の健康状態の改善、腫瘍量の減少、腫瘍の成長の停止若しくは遅延、及び／又は体内の他の場所へのがん細胞の転移の不在が挙げられる。
【0044】
用語「がん」は、本明細書で使用される場合、異常細胞の急速かつ制御されない増殖を特徴とする疾患として定義される。がん細胞は、局所的に、又は血流及びリンパ系を介して身体の他の部分に拡散し得る。種々のがんの例としては、固形悪性腫瘍、例えば、乳がん（ＢＣ）、前立腺がん、卵巣がん（ＯＣ）、子宮頸がん、皮膚がん、膵臓がん、胃食道がん（ＧＥＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、肝臓がん、肝細胞がん（ＨＣＣ）、脳がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ））、リンパ腫、白血病、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬ）又は小細胞肺がん（ＳＣＬＣ））、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、及び中皮腫などが挙げられるが、これらに限定されない。固形悪性腫瘍は転移性又は切除不能であり得る。固形悪性腫瘍は組織学的又は細胞学的に確認され得る。
【0045】
本明細書で使用される参照材料（ＲＭ）とは、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品の約０．２ｍＬアリコートを含有し、かつ臨床原体のための適正製造規範（ＧＭＰ）で使用される、バイアルを指す。ＲＭを少なくとも－６０℃で保存し、融解し、アミバンタマブ分析アッセイにおいて対照として使用する。
【0046】
「対象」は、任意のヒト又は非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」としては、あらゆる脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類などの哺乳類及び非哺乳類が挙げられる。「対象」及び「患者」という用語は、本明細書において互換的に使用され得る。
【0047】
「注入関連反応」又は「ＩＲＲ」は、アミバンタマブなどの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体が投与される一部の患者で起こり得る。ＩＲＲの徴候及び症状としては、呼吸困難、潮紅、発熱、悪寒、悪心、胸部不快感、低血圧、及び／又は嘔吐が挙げられ得る。新たなタンパク質治療薬注入の導入の際、重篤な反応を含む全身性ＩＲＲもまた起こり得る。
【0048】
説明
本明細書では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物が開示される。二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む、好適な医薬組成物で提供され得る。安定な水性医薬組成物は、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体が皮下投与される、１つ以上の希釈剤、アジュバント、賦形剤、又はビヒクルを含み得る。例示的な賦形剤には、緩衝剤、安定剤、キレート剤、界面活性剤、及び酵素のうち１つ以上が含まれる。いくつかの実施形態によれば、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物は、緩衝剤、安定剤、キレート剤、界面活性剤、及び任意選択的にヒアルロニダーゼを更に含む。本明細書で提供される二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物はまた、医薬品又はＤＰとも称される。
本明細書では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物が開示される。二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む、好適な医薬組成物で提供され得る。安定な水性医薬組成物は、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体が皮下投与される、１つ以上の希釈剤、アジュバント、賦形剤、又はビヒクルを含み得る。例示的な賦形剤には、緩衝剤、安定剤、キレート剤、界面活性剤、及び酵素のうち１つ以上が含まれる。いくつかの実施形態によれば、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物は、緩衝剤、安定剤、キレート剤、界面活性剤、及び任意選択的にヒアルロニダーゼを更に含む。本明細書で提供される二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物はまた、医薬品又はＤＰとも称される。
【0049】
いくつかの態様では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、を含み、ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む（表２９参照）。
【0050】
いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第１重鎖（ＨＣ１）は、ＨＣ１定常ドメイン３（ＨＣ１ ＣＨ３）及びＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第２重鎖（ＨＣ２）は、ＨＣ２定常ドメイン３（ＨＣ２ ＣＨ３）及びＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第１の重鎖（ＨＣ１）は、ＨＣ１定常ドメイン３（ＨＣ１ ＣＨ３）及びＨＣ１可変領域１（ＶＨ１を含み、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第２の重鎖（ＨＣ２）は、ＨＣ２定常ドメイン３（ＨＣ２ ＣＨ３）及びＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第１の重鎖（ＨＣ１）は、ＨＣ１定常ドメイン２及び定常ドメイン３（ＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３）並びにＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第２の重鎖（ＨＣ２）は、ＨＣ２定常ドメイン２及び定常ドメイン３（ＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３）並びにＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第１の重鎖（ＨＣ１）は、ＨＣ１定常ドメイン２及び定常ドメイン３（ＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３）並びにＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含み、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の第２の重鎖（ＨＣ２）は、ＨＣ２定常ドメイン２及び定常ドメイン３（ＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３）並びにＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む。
【0051】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３領域、ＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３領域、又はその両方に非対称安定化突然変異を含む。「非対称安定化突然変異」は、第１及び第２のＣＨ２－ＣＨ３領域内の異なる位置にあり、第１のＣＨ２－ＣＨ３領域又は第２のＣＨ２－ＣＨ３領域間のホモ二量体形成よりも第１のＣＨ２－ＣＨ３領域と第２のＣＨ２－ＣＨ３領域との間のヘテロ二量体形成に有利に働く（例えば、安定化させる）、第１のＣＨ２－ＣＨ３領域及び第２のＣＨ２－ＣＨ３領域内の突然変異を指す。ＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３領域及びＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３領域内の、又はＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３領域及びＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３領域内の例示的な非対称安定化突然変異は、以下の通りである（残基の番号付けはＥＵインデックスに従う）：
それぞれＦ４０５Ｌ及びＫ４０９Ｒ、
それぞれ野生型及びＦ４０５Ｌ／Ｒ４０９Ｋ、
それぞれＴ３６６Ｗ及びＴ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＴ３６６Ｙ／Ｆ４０５Ａ及びＴ３９４Ｗ／Ｙ４０７Ｔ、
それぞれＴ３６６Ｗ／Ｆ４０５Ｗ及びＴ３９４Ｓ／Ｙ４０７Ａ、
それぞれＦ４０５Ｗ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ｗ／Ｔ３９４Ｓ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ及びＴ３９４Ｗ、
それぞれＴ３６６Ｉ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ及びＦ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＴ３６６Ｌ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ及びＦ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ｖ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＹ４０７Ａ及びＴ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＤ３９９Ｋ／Ｅ３５６Ｋ及びＫ４０９Ｄ／Ｋ３９２Ｄ、又は
それぞれＤ３９９Ｋ／Ｅ３５６Ｋ／Ｅ３５７Ｋ及びＫ４０９Ｄ／Ｋ３９２Ｄ／Ｋ３７０。
それぞれＦ４０５Ｌ及びＫ４０９Ｒ、
それぞれ野生型及びＦ４０５Ｌ／Ｒ４０９Ｋ、
それぞれＴ３６６Ｗ及びＴ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＴ３６６Ｙ／Ｆ４０５Ａ及びＴ３９４Ｗ／Ｙ４０７Ｔ、
それぞれＴ３６６Ｗ／Ｆ４０５Ｗ及びＴ３９４Ｓ／Ｙ４０７Ａ、
それぞれＦ４０５Ｗ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ｗ／Ｔ３９４Ｓ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ及びＴ３９４Ｗ、
それぞれＴ３６６Ｉ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ及びＦ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＴ３６６Ｌ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ及びＦ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＬ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ及びＴ３６６Ｖ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＹ４０７Ａ及びＴ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、
それぞれＤ３９９Ｋ／Ｅ３５６Ｋ及びＫ４０９Ｄ／Ｋ３９２Ｄ、又は
それぞれＤ３９９Ｋ／Ｅ３５６Ｋ／Ｅ３５７Ｋ及びＫ４０９Ｄ／Ｋ３９２Ｄ／Ｋ３７０。
【0052】
いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域と、を含む（表２９参照）。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、ＨＣ１ ＣＨ２－ＣＨ３領域、ＨＣ２ ＣＨ２－ＣＨ３領域、又はその両方に非対称安定化突然変異を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体はｃ－Ｍｅｔ結合アームにＫ４０９Ｒを含み、ＥＧＦＲ結合アームにＦ４０５Ｌを含む。
【0053】
いくつかの態様では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域と、を含む（表２９参照）。
【0054】
いくつかの実施形態では、重鎖１（ＨＣ１）は、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、ＨＣ２は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む（表２９参照）。
【0055】
いくつかの実施形態では、軽鎖１（ＬＣ１）は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、ＬＣ２は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む（表２９参照）。
【0056】
いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である。
【0057】
アミバンタマブ
アミバンタマブ（ＪＮＪ－６１１８６３７２）とは、化学療法による処置後にＥＧＦＲエクソン２０ｉｎｓ突然変異を有する患者についてＦＤＡによって承認されている、ＥＧＦＲ及びｃＭＥＴチロシンキナーゼ受容体に対する低フコース完全ヒトＩｇＧ１ベースの二重特異性抗体である。
アミバンタマブ（ＪＮＪ－６１１８６３７２）とは、化学療法による処置後にＥＧＦＲエクソン２０ｉｎｓ突然変異を有する患者についてＦＤＡによって承認されている、ＥＧＦＲ及びｃＭＥＴチロシンキナーゼ受容体に対する低フコース完全ヒトＩｇＧ１ベースの二重特異性抗体である。
【0058】
アミバンタマブは、原発性活性化ＥＧＦＲ突然変異（エクソン１９欠失［エクソン１９ｄｅｌ］、アルギニン置換に対するエクソン２１ロイシン８５８（［Ｌ８５８Ｒ］、及びエクソン２０ｉｎｓ変異）、ＥＧＦＲ耐性突然変異（メチオニンに対するチロシン７９０［Ｔ７９０Ｍ］、又はセリンに対するシステイン７９７［Ｃ７９７Ｓ］突然変異）、過剰発現野生型ＥＧＦＲ、及びｃＭｅｔ経路の活性化を有する腫瘍に対して活性を示す。
【0059】
ラゼルチニブは、エクソン１９ｄｅｌ及びエクソン２１ Ｌ８５８Ｒ ＥＧＦＲ活性化変異と、Ｔ７９０Ｍ耐性突然変異との両方を標的とする、経口の非常に強力な変異選択的かつ不可逆的な第三世代ＥＧＦＲ ＴＫＩである。ラゼルチニブは、ＥＧＦＲ突然変異ＮＳＣＬＣの参加者において有効性を実証しており、全身性及び中枢神経系病変の両方で活性が観察され、血液脳関門を通過するその能力を実証している。細胞内ＥＧＦＲチロシンキナーゼ部位を標的とするラゼルチニブと、細胞外ＥＧＦＲリガンド結合ドメインを標的とするアミバンタマブとを組み合わせることは、ＥＧＦＲシグナル伝達経路をより強力に阻害し、ＥＧＦＲ ＴＫＩに対する頻繁なＥＧＦＲ依存性及び独立性の耐性機構を弱め、いずれかの薬剤単独よりも深い応答を誘導する可能性を有する。
【0060】
いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を、約１００ｍｇ／ｍＬ、１１０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ、１２１ｍｇ／ｍＬ、１２２ｍｇ／ｍＬ、１２３ｍｇ／ｍＬ、１２４ｍｇ／ｍＬ、１２５ｍｇ／ｍＬ、１２６ｍｇ／ｍＬ、１２７ｍｇ／ｍＬ、１２８ｍｇ／ｍＬ、１２９ｍｇ／ｍＬ、１３０ｍｇ／ｍＬ、１３１ｍｇ／ｍＬ、１３２ｍｇ／ｍＬ、１３３ｍｇ／ｍＬ、１３４ｍｇ／ｍＬ、１３５ｍｇ／ｍＬ、１３６ｍｇ／ｍＬ、１３７ｍｇ／ｍＬ、１３８ｍｇ／ｍＬ、１３９ｍｇ／ｍＬ、１４０ｍｇ／ｍＬ、１４１ｍｇ／ｍＬ、１４２ｍｇ／ｍＬ、１４３ｍｇ／ｍＬ、１４４ｍｇ／ｍＬ、１４５ｍｇ／ｍＬ、１４６ｍｇ／ｍＬ、１４７ｍｇ／ｍＬ、１４８ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ、１５１ｍｇ／ｍＬ、１５２ｍｇ／ｍＬ、１５３ｍｇ／ｍＬ、１５４ｍｇ／ｍＬ、１５５ｍｇ／ｍＬ、１５６ｍｇ／ｍＬ、１５７ｍｇ／ｍＬ、１５８ｍｇ／ｍＬ、１５９ｍｇ／ｍＬ、１６０ｍｇ／ｍＬ、１６１ｍｇ／ｍＬ、１６２ｍｇ／ｍＬ、１６３ｍｇ／ｍＬ、１６４ｍｇ／ｍＬ、１６５ｍｇ／ｍＬ、１６６ｍｇ／ｍＬ、１６７ｍｇ／ｍＬ、１６８ｍｇ／ｍＬ、１６９ｍｇ／ｍＬ、１７０ｍｇ／ｍＬ、１７１ｍｇ／ｍＬ、１７２ｍｇ／ｍＬ、１７３ｍｇ／ｍＬ、１７４ｍｇ／ｍＬ、１７５ｍｇ／ｍＬ、１７６ｍｇ／ｍＬ、１７７ｍｇ／ｍＬ、１７８ｍｇ／ｍＬ、１７９ｍｇ／ｍＬ、１８０ｍｇ／ｍＬ、１８１ｍｇ／ｍＬ、１８２ｍｇ／ｍＬ、１８３ｍｇ／ｍＬ、１８４ｍｇ／ｍＬ、１８５ｍｇ／ｍＬ、１８６ｍｇ／ｍＬ、１８７ｍｇ／ｍＬ、１８８ｍｇ／ｍＬ、１９０ｍｇ／ｍＬ、１９１ｍｇ／ｍＬ、１９２ｍｇ／ｍＬ、１９３ｍｇ／ｍＬ、１９４ｍｇ／ｍＬ、１９５ｍｇ／ｍＬ、１９６ｍｇ／ｍＬ、１９７ｍｇ／ｍＬ、１９８ｍｇ／ｍＬ、１９９ｍｇ／ｍＬ、又は２００ｍｇ／ｍＬの濃度で含む。いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体は、約１６０ｍｇ／ｍＬの濃度を有する。
【0061】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１４０ｍｇ～約１７５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１４０ｍｇ～約２１００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１０５０ｍｇ～約２２４０ｍｇの用量で投与される。
【0062】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５１０ｍｇ、約５２０ｍｇ、約５３０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５６０ｍｇ、約５７０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約５９０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６１０ｍｇ、約６２０ｍｇ、約６３０ｍｇ、約６４０ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６６０ｍｇ、約６７０ｍｇ、約６８０ｍｇ、約６９０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７１０ｍｇ、約７２０ｍｇ、約７３０ｍｇ、約７４０ｍｇ、約７５０ｍｇ、約７６０ｍｇ、約７７０ｍｇ、約７８０ｍｇ、約７９０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８１０ｍｇ、約８２０ｍｇ、約８３０ｍｇ、約８４０ｍｇ、約８５０ｍｇ、約８６０ｍｇ、約８７０ｍｇ、約８８０ｍｇ、約８９０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９１０ｍｇ、約９２０ｍｇ、約９３０ｍｇ、約９４０ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９６０ｍｇ、約９７０ｍｇ、約９８０ｍｇ、約９９０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０１０ｍｇ、約１０２０ｍｇ、約１０３０ｍｇ、約１０４０ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１０６０ｍｇ、約１０７０ｍｇ、約１０８０ｍｇ、約１０９０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１１１０ｍｇ、約１１２０ｍｇ、約１１３０ｍｇ、約１１４０ｍｇ、約１１５０ｍｇ、約１１６０ｍｇ、約１１７０ｍｇ、約１１８０ｍｇ、約１１９０ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１２１０ｍｇ、約１２２０ｍｇ、約１２３０ｍｇ、約１２４０ｍｇ、約１２５０ｍｇ、約１２６０ｍｇ、約１２７０ｍｇ、約１２８０ｍｇ、約１２９０ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１３１０ｍｇ、約１３２０ｍｇ、約１３３０ｍｇ、約１３４０ｍｇ、約１３５０ｍｇ、約１３６０ｍｇ、約１３７０ｍｇ、約１３８０ｍｇ、約１３９０ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１４１０ｍｇ、約１４２０ｍｇ、約１４３０ｍｇ、約１４４０ｍｇ、約１４５０ｍｇ、約１４６０ｍｇ、約１４７０ｍｇ、約１４８０ｍｇ、約１４９０ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１５１０ｍｇ、約１５２０ｍｇ、約１５３０ｍｇ、約１５４０ｍｇ、約１５５０ｍｇ、約１５６０ｍｇ、約１５７０ｍｇ、約１５７５ｍｇ、約１５８０ｍｇ、約１５９０ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１６１０ｍｇ、１６２０ｍｇ、約１６３０ｍｇ、約１６４０ｍｇ、約１６５０ｍｇ、約１６６０ｍｇ、約１６７０ｍｇ、約１６８０ｍｇ、約１６９０ｍｇ、約１７００ｍｇ、約１７１０ｍｇ、約１７２０ｍｇ、約１７３０ｍｇ、約１７４０ｍｇ、約１７５０ｍｇ、約１７６０ｍｇ、約１７７０ｍｇ、約１７８０ｍｇ、約１７９０ｍｇ、約１８００ｍｇ、約１８１０ｍｇ、約１８２０ｍｇ、約１８３０ｍｇ、約１８４０ｍｇ、約１８５０ｍｇ、約１８６０ｍｇ、約１８７０ｍｇ、約１８８０ｍｇ、１８９０ｍｇ、約１９００ｍｇ、約１９１０ｍｇ、約１９２０ｍｇ、約１９３０ｍｇ、約１９４０ｍｇ、約１９５０ｍｇ、約１９６０ｍｇ、約１９７０ｍｇ、約１９８０ｍｇ、約１９９０ｍｇ、約２０００ｍｇ、約２０１０ｍｇ、約２０２０ｍｇ、約２０３０ｍｇ、約２０４０ｍｇ、約２０５０ｍｇ、約２０６０ｍｇ、約２０７０ｍｇ、約２０８０ｍｇ、約２０９０ｍｇ、約２１００ｍｇ、約２１１０ｍｇ、約２１２０ｍｇ、約２１５０ｍｇ、約２２００ｍｇ、約２２１０ｍｇ、約２２２０ｍｇ、約２２３０ｍｇ、約２２４０ｍｇ、約２２５０ｍｇ、約２２６０ｍｇ、約２２７０ｍｇ、約２２８０ｍｇ、約２２９０ｍｇ、又は約２３００ｍｇの用量で投与される。
【0063】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約３５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１５７５ｍｇ、又は約２１００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約３５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約７００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約７５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約８００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約８５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約９００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約９５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１０００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１０５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１１００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１１５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１２５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１３００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１３５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１４００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１５７５ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約１６００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約２１００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、約２２４０ｍｇの用量で投与される。
【0064】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、約１０５０ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、約１４００ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、約１５７５ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、約１６００ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、いくつかの実施形態では、約２１００ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、約２２４０ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。
【0065】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約１０５０ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約１４００ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約１５７５ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約１６００ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約２１００ｍｇの二重特異性抗は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、約２２４０ｍｇの二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。
【0066】
いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週２回投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、週１回投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、２週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、３週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、二重特異性抗ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体は、４週間に１回投与される。
【0067】
併用療法の場合、１つ以上の抗がん剤は、推奨された抗がん剤の投与量を用いて投与され得る。
【0068】
緩衝剤は、ｐＨを約５．０～６．２、例えばｐＨ５．１～５．７などに調整するのに適している。例示的な緩衝液は、ヒスチジン緩衝液又は酢酸緩衝液である。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、約８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５１ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、又は６０ｍＭの濃度のヒスチジン及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩を含む。いくつかの実施形態では、ヒスチジン及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩は、約１０ｍＭの濃度を有する。いくつかの実施形態では、ヒスチジン及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩は、約５０ｍＭの濃度を有する。更なる実施形態では、ヒスチジン及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩は、Ｌ－ヒスチジン及びＬ－ヒスチジン塩酸塩一水和物を含む。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、約８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、又は５０ｍＭの濃度の酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩を含む。いくつかの実施形態では、酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩は、約３０ｍＭの濃度を有する。更なる実施形態では、酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩は、氷酢酸及び／又は酢酸ナトリウム三水和物を含む。
【0069】
安定剤は、スクロース及び任意選択でメチオニンを含んでもよい。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、約６．０％、６．１％、６．２％、６．３％、６．４％、６．５％、６．６％、６．７％、６．８％、６．９％、７．０％、７．１％、７．２％、７．３％、７．４％、７．５％、７．６％、７．７％、７．８％、７．９％、８．０％、８．１％、８．２％、８．３％、８．４％、８．５％、８．６％、８．７％、８．８％、９．９％、１０．０％、１０．１％、１０．２％、１０．３％、１０．４％、１０．５％、１０．６％、１０．７％、１０．８％、１０．９％、又は１１．０％の濃度（重量対体積パーセント（％ｗ／ｖ））のスクロースを含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを含む。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、約０．１ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬ、０．４ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、０．６ｍｇ／ｍＬ、０．７ｍｇ／ｍＬ、０．８ｍｇ／ｍＬ、０．９ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ、１．１ｍｇ／ｍＬ、１．２ｍｇ／ｍＬ、１．３ｍｇ／ｍＬ、１．４ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、又は２．０ｍｇ／ｍＬの濃度でメチオニン（例えば、Ｌ－メチオニン）を含む。一実施形態では、メチオニンは、Ｌ－メチオニンを含み、かつ約１．０ｍｇ／ｍＬの濃度を有する。
【0070】
好ましい界面活性剤はポリソルベート８０（ＰＳ８０）である。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）を、約０．００５％、０．０１％、０．０１５％、０．０２０％、０．０２５％、０．０３０％、０．０３５％、０．０３６％、０．０３７％、０．０３８％、０．０３９％、０．０４０％、０．０４１％、０．０４２％、０．０４３％、０．０４４％、０．０４５％、０．０４６％、０．０４７％、０．０４８％、０．０４９％、０．０５０％、０．０５１％、０．０５２％、０．０５３％、０．０５４％、０．０５５％、０．０５６％、０．０５７％、０．０５８％、０．０５９％、０．０６０％、０．０６１％、０．０６２％、０．０６３％、０．０６４％、０．０６５％、０．０６６％、０．０６７％、０．０６８％、０．０６９％、０．０７０％、０．０７１％、０．０７２％、０．０７３％、０．０７４％、０．０７５％、０．０８０％、０．０８１％、０．０８２％、０．０８３％、０．０８４％、０．０８５％、０．０８６％、０．０８７％、０．０８８％、０．０８９％、０．０９０％、０．０９１％、０．０９２％、０．０９３％、０．０９４％、又は０．０９５％の濃度（％ｗ／ｖ）で含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約０．０６％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む。
【0071】
好ましいキレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である。いくつかの態様によれば、安定な水性医薬組成物は、ＥＤＴＡを、約１０μｇ／ｍＬ、１１μｇ／ｍＬ、１２μｇ／ｍＬ、１３μｇ／ｍＬ、１４μｇ／ｍＬ、１５μｇ／ｍＬ、１６μｇ／ｍＬ、１７μｇ／ｍＬ、１８μｇ／ｍＬ、１９μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、２１μｇ／ｍＬ、２２μｇ／ｍＬ、２３μｇ／ｍＬ、２４μｇ／ｍＬ、２５μｇ／ｍＬ、２６μｇ／ｍＬ、２７μｇ／ｍＬ、２８μｇ／ｍＬ、２９μｇ／ｍＬ、又は３０μｇ／ｍＬの濃度で含む。一実施形態では、ＥＤＴＡは約２０μｇ／ｍＬの濃度を有する。
【0072】
いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む安定な水性医薬組成物は、皮下投与中に抗体の分散を増加させるのに十分な量のヒアルロニダーゼ酵素を含む。本発明の製剤によるヒアルロニダーゼ酵素賦形剤は、本明細書に記載の安定な医薬組成物において二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の分子的完全性に悪影響を及ぼさないことを特徴とする。更に、ヒアルロニダーゼ酵素は、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の全身循環への送達を単に修飾するだけであるが、全身的に吸収された二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の治療効果を提供するか又はそれに寄与し得るいかなる特性をも有しない。ヒアルロニダーゼ酵素は、全身的に生物学的に利用可能ではなく、本発明による安定な医薬組成物の推奨される保存条件で二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の分子的完全性に悪影響を及ぼさない。本発明によるいくつかの好適なヒアルロニダーゼ酵素が知られている。好ましい酵素は、ヒトヒアルロニダーゼ酵素、例えば可溶性ヒトＰＨ２０ヒアルロニダーゼなど、好ましくはｒＨｕＰＨ２０として公知の組換えヒトヒアルロニダーゼ酵素生成物である。可溶性ヒトＰＨ２０ヒアルロニダーゼのアミノ酸配列には、ｒＨｕＰＨ２０として公知であり、かつＣＡＳ登録番号７５７９７１－５８－７で入手可能な可溶性ヒトＰＨ２０が含まれる。可溶性ヒトＰＨ２０ヒアルロニジアーゼ（hyaluronidiase）は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、国際公開第２００４／０７８１４０号及び米国特許第７，７６７，４２９号に記載されている。いくつかの実施形態では、可溶性ヒアルロニダーゼには、その配列が配列番号２１～２５のいずれかに示されるものが含まれる。可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼは、細胞で発現される場合、細胞における輸送のためのシグナル配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼのアミノ酸配列は、配列番号２６を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼの配列のアミノ酸配列、配列番号２２、すなわち野生型ヒトヒアルロニダーゼの残基３６～４８２。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼのアミノ酸配列は、配列番号２３を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼのアミノ酸配列は、配列番号２４を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼｒＨｕＰＨ２０のアミノ酸配列は、配列番号２５を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼのアミノ酸配列は、配列番号２１を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ＰＨ２０ヒアルロニダーゼは、細胞で発現される場合、配列番号２１～配列番号２５の任意の１つ以上を様々な存在量で含み得る種の混合物を含む。平均分子量は６１ｋＤａである。
【0073】
ｒＨｕＰＨ２０は、一般に天然又は異種シグナル配列（配列番号２６の残基１～３５）に連結された配列番号２６の残基３６～４８２をコードする核酸の、ＣＨＯ細胞などの細胞での発現時に産生される組成物を指す。ｒＨｕＰＨ２０は、哺乳類細胞におけるアミノ酸１～４８２（配列番号２６に示す）をコードする核酸分子の発現によって産生される。翻訳処理は３５アミノ酸シグナル配列を除去する。培地中で産生される際、ｒＨｕＰＨ２０と指定される産物が、配列番号２６のポリペプチド３６～４８０、ポリペプチド３６～４８１、及びポリペプチド３６～４８２のいずれか１つ以上と、いくつかのより短いポリペプチドとを様々な存在量で含み得る種の混合物を含むように、Ｃ末端に不均一性が存在する。典型的には、ｒＨｕＰＨ２０は、正しいＮ－グリコシル化を促進して活性を保持するＣＨＯ細胞など、例えばＤＧ４４ ＣＨＯ細胞などの細胞で産生される。
【0074】
いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約５００Ｕ／ｍＬ、約７５０Ｕ／ｍＬ、約１，０００Ｕ／ｍＬ、約１，２５０Ｕ／ｍＬ、約１，５００Ｕ／ｍＬ、約１，７５０Ｕ／ｍＬ、約２，０００Ｕ／ｍＬ、約２，２５０Ｕ／ｍＬ、約２，５００Ｕ／ｍＬ、約２，７５０Ｕ／ｍＬ、約３，０００Ｕ／ｍＬ、約３，２５０Ｕ／ｍＬ、約３，５００Ｕ／ｍＬ、約３，７５０Ｕ／ｍＬ、又は約４，０００Ｕ／ｍＬの濃度でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２，０００Ｕ／ｍＬの濃度のｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１，５００Ｕ／ｍＬの濃度のｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態によれば、安定な水性医薬組成物は、約０．００５ｍｇ／ｍＬ、約０．００７５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．０１２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１７５ｍｇ／ｍＬ、約０．０２ｍｇ／ｍＬ、約０．０２２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０２７５ｍｇ／ｍＬ、約０．０３ｍｇ／ｍＬ、約０．０３２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０３５ｍｇ／ｍＬ、約０．０３７５ｍｇ／ｍＬ、又は約０．０４ｍｇ／ｍＬの濃度でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約０．０２ｍｇ／ｍＬの濃度のｒＨｕＰＨ２０を含む。
【0075】
いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１０，０００Ｕ、約１１，０００Ｕ、約１２，０００Ｕ、約１３，０００Ｕ、約１３，２００Ｕ、約１４，０００Ｕ、約１５，０００Ｕ、約１６，０００Ｕ、約１７，０００Ｕ、約１７，５００Ｕ、約１８，０００Ｕ、約１９，０００Ｕ、約１９，５００Ｕ、約１９，６００Ｕ、約１９，６８０Ｕ、約１９，７００Ｕ、約２０，０００Ｕ、約２１，０００Ｕ、約２２，０００Ｕ、約２３，０００Ｕ、約２４，０００Ｕ、約２５，０００Ｕ、約２６，０００Ｕ、約２６，２６０Ｕ、約２６，５００Ｕ、約２６，６００Ｕ、約２６，６８０Ｕ、約２６，７００Ｕ、約２７，０００Ｕ、２８，０００Ｕ、約２９，０００Ｕ、約３０，０００Ｕ、又はこれらの間の任意の値の用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１３，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１３，２００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１４，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１７，５００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１８，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約１９，６８０Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２０，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，２６０Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，３００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，４００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，５００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２６，６００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２７，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２７，５００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２８，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２８，５００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約２９，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は、約３０，０００Ｕの用量でｒＨｕＰＨ２０を含む。
【0076】
いくつかの実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の安定な水性医薬組成物は、ヒスチジン、及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩、スクロース、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、メチオニン、ＥＤＴＡ、約５．２～約６．２のｐＨ、及び任意選択的にはヒアルロニダーゼを含む。安定な水性医薬組成物は、約１２８ｍｇ／ｍＬ～約１９２ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約１０ｍＭ～約５０ｍＭのヒスチジン、及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩、約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロース、約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約０．８ｍｇ／ｍＬまで～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニン、約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、及び約５．２～約６．２のｐＨを更に含み得る。安定な水性医薬組成物は、任意選択的には、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼを含み得る。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と、約１０ｍＭのヒスチジン及び／又は医薬的に許容されるヒスチジン塩と、約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースと、約０．０６％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、約１ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、約２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、約５．７のｐＨと、任意選択的には約２，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、を含む。
【0077】
他の実施形態では、二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の安定な水性医薬組成物は、酢酸、及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、スクロース、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、メチオニン、ＥＤＴＡ、約５．２～約６．２のｐＨ、及び任意選択的にはヒアルロニダーゼを含む。安定な水性医薬組成物は、約１２８ｍｇ／ｍＬ～約１９２ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロース、約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約０．８ｍｇ／ｍＬまで～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニン、約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、及び約５．２～約６．２のｐＨを含み得る。安定な水性医薬組成物は、任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼを含み得る。いくつかの実施形態では、安定な水性医薬組成物は約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースと、約０．０６％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、約１ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、約２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、約５．７のｐＨと、任意選択的には約２，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、を含む。
【0078】
本明細書では、治療有効量である本明細書に開示される二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体の安定な水性医薬組成物を対象へと投与することによって、それを必要とする対象においてがんを処置する方法が更に提供される。がんは、固形悪性腫瘍、例えば、乳がん（ＢＣ）、前立腺がん、卵巣がん（ＯＣ）、子宮頸がん、皮膚がん、膵臓がん、胃食道がん（ＧＥＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、肝臓がん、肝細胞がん（ＨＣＣ）、脳がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ））、リンパ腫、白血病、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）又は小細胞肺がん（ＳＣＬＣ））、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、及び中皮腫などである可能性がある。いくつかの態様によれば、固形悪性腫瘍は、転移性又は切除不能であり得る。いくつかの実施形態では、固形悪性腫瘍は、組織学的又は細胞学的に確認され得る。開示される安定な水性医薬組成物は、例えば、皮下注入によって皮下投与され得る。皮下注入は、上腕、大腿、腹部、又は腰背部などであるがこれらに限定されない、対象の身体の様々な位置で行うことができる。
【0079】
一実施形態では、がんは、肺がんである。一実施形態では、がんは、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）である。一実施形態では、がんは、処置未経験の局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣである。一実施形態では、がんは、ＩＶアミバンタマブによって以前に処置されている。一実施形態では、がんは、ＥＧＦＲエクソン１９ｄｅｌ突然変異を内包している。一実施形態では、がんは、エクソン２１ Ｌ８５８Ｒ突然変異を内包している。一実施形態では、がんは、ＥＧＦＲエクソン２０ｉｎｓ突然変異を内包している。一実施形態では、がんは、第３世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）による処置のとき又は処置の後で疾患の進行を経験している。
【0080】
本明細書では、本明細書で開示された安定な水性医薬製剤を対象へ皮下投与することを含む、アミバンタマブで処置された対象における注入関連反応を低減する方法が更に提供される。対象は、本明細書に開示されるがんの処置を必要とする。
【0081】
本明細書で更に提供されるのは、本発明の安定な水性医薬組成物を含有する製造品である。一実施形態では、製造品は、投与される安定な水性医薬組成物を含有する栓を備えた、単回使用ガラスバイアルである。いくつかの実施形態では、栓は、シリンジによって穿刺可能である。いくつかの実施形態では、バイアルは、密封される。いくつかの実施形態では、単回使用バイアルは、２０ｍｍのアルミニウムシールで覆われた２０ｍｍの栓を有する１０ｍＬの単回使用ガラスバイアルである。いくつかの実施形態では、バイアルサイズは、それぞれ約４ｍＬ、６ｍＬ、１０ｍＬ、１２ｍＬ、１４ｍＬ、２０ｍｌ、２６ｍＬ、３３ｍＬ、３８ｍＬ、又は６２ｍＬの容量を有する２Ｒ、４Ｒ、６Ｒ、８Ｒ、１０Ｒ、１５Ｒ、２０Ｒ、２５Ｒ、３０Ｒ、又は５０ＲのＩＳＯフォーマットである。一実施形態では、安定な水性医薬組成物（また、医薬品又はＤＰと本明細書では称される）の総体積は、約５ｍＬ～約１０ｍＬの範囲である。一実施形態では、安定な水性医薬組成物（医薬品又はＤＰ）の総体積は、約０．５ｍＬ～約２０ｍＬ、約１ｍＬ～約１５ｍＬ、約５ｍＬ～約１０ｍＬ、又は約６ｍＬ～約８ｍＬの範囲である。一実施形態では、安定な水性医薬組成物の総体積は、約０．５ｍＬ、０．６ｍＬ、０．７ｍＬ、０．８ｍＬ、０．９ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、６ｍＬ、６．５ｍＬ、６．６ｍＬ、６．７ｍＬ、７ｍＬ、７．１ｍＬ、８ｍＬ、８．５ｍＬ、８．６ｍＬ、８．７ｍＬ、８．７５ｍＬ、８．８ｍＬ、９ｍＬ、１０ｍＬ、１１ｍＬ、１２ｍＬ、１３ｍＬ、１４ｍＬ、１５ｍＬ、１６ｍＬ、１８ｍＬ、１９ｍＬ、２０ｍＬ、２５ｍＬ、又は３０ｍＬ、又はその間の任意の範囲である。
【0082】
医薬品の安定性
いくつかの実施形態では、ＤＰ安定性は、特定の期間保存した後に決定される。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約３ヶ月以上、約６ヶ月以上、約１２ヶ月以上、約１．５年以上、約２年以上、約２．５年以上、約３年以上、約３．５年以上、約４年以上、約４．５年以上、約５年以上、約６年以上、約７年以上、約８年以上、約９年以上、又は約１０年以上保存される。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約１２ヶ月以上、約１．５年以上、約２年以上、約２．５年以上、又は約３年以上保存される。いくつかの実施形態では、ＤＰは約２年以上保存される。
いくつかの実施形態では、ＤＰ安定性は、特定の期間保存した後に決定される。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約３ヶ月以上、約６ヶ月以上、約１２ヶ月以上、約１．５年以上、約２年以上、約２．５年以上、約３年以上、約３．５年以上、約４年以上、約４．５年以上、約５年以上、約６年以上、約７年以上、約８年以上、約９年以上、又は約１０年以上保存される。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約１２ヶ月以上、約１．５年以上、約２年以上、約２．５年以上、又は約３年以上保存される。いくつかの実施形態では、ＤＰは約２年以上保存される。
【0083】
温度
いくつかの実施形態では、ＤＰは、特定の温度で特定の期間保存した後に安定である。いくつかの実施形態では、温度は、約－１０～５０℃、０～２５℃、１～２０℃、１～１５℃、２～１０℃、又は２～５℃の範囲である。いくつかの実施形態では、温度は約２～８℃の範囲である。いくつかの実施形態では、温度は、約－１０℃、－９℃、－８℃、－７℃、－６℃、－５℃、－４℃、－３℃、－２℃、－１℃、０℃、１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、１０℃、１１℃、１２℃、１３℃、１４℃、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３１℃、３２℃、３３℃、３４℃、３５℃、３６℃、３７℃、３８℃、３９℃、４０℃、４１℃、４２℃、４３℃、４４℃、４５℃、４６℃、４７℃、４８℃、４９℃又は５０℃である。
いくつかの実施形態では、ＤＰは、特定の温度で特定の期間保存した後に安定である。いくつかの実施形態では、温度は、約－１０～５０℃、０～２５℃、１～２０℃、１～１５℃、２～１０℃、又は２～５℃の範囲である。いくつかの実施形態では、温度は約２～８℃の範囲である。いくつかの実施形態では、温度は、約－１０℃、－９℃、－８℃、－７℃、－６℃、－５℃、－４℃、－３℃、－２℃、－１℃、０℃、１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、１０℃、１１℃、１２℃、１３℃、１４℃、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３１℃、３２℃、３３℃、３４℃、３５℃、３６℃、３７℃、３８℃、３９℃、４０℃、４１℃、４２℃、４３℃、４４℃、４５℃、４６℃、４７℃、４８℃、４９℃又は５０℃である。
【0084】
いくつかの実施形態では、ＤＰは、約２℃～約８℃の範囲の温度で、約１２ヶ月以上、又は約２年以上保存した後に安定である。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約５℃の温度で約１２ヶ月以上又は約２年以上の保存した後に安定である。いくつかの実施形態では、ＤＰは、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後に安定である。
【0085】
医薬品（ＤＰ）ともまた称される本開示の水性医薬組成物の安定性は、二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、及び本明細書で提供されるＤＰの他の構成成分（緩衝剤、安定剤、キレート剤、界面活性剤、及び酵素などであるが、これらに限定されない）の特定の量又は割合、並びに様々な因子の評価に基づいて決定される。これらの因子としては、溶液の色、ｐＨ、濁度、肉眼では見えない粒子の数、アグリコシル化重鎖（ＡＧＨＣ）のパーセンテージ、新たなピークのパーセンテージ、高分子量種（ＨＭＷＳ）のパーセンテージ、低分子量種（ＬＭＷＳ）のパーセンテージ、酸性ピークの合計のパーセンテージ、塩基性ピークの合計のパーセンテージ、タンパク質濃度、ＥＧＦＲ結合活性のパーセンテージ、ｃＭｅｔ結合活性のパーセンテージ、及び／又はＰＳ８０のパーセンテージが挙げられるが、これらに限定されない。
【0086】
本明細書に開示される安定なＤＰは、本明細書に列挙される全ての因子を必要とすると解釈されるべきではなく、むしろそれらの因子のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、又は少なくとも３つ以上を必要とすると解釈されるべきである。いくつかの実施形態では、安定な開示されたＤＰは、本明細書において以下に詳細に列挙される因子のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、又はそれ以上について以下の結果を示す。いくつかの実施形態では、安定なＤＰは、本明細書において以下に詳細に列挙される全ての因子について以下の結果を示す。
【0087】
溶液の色
ＤＰ溶液の色を監視し、溶液の外観が放出時及び保存寿命にわたって以前のバッチと一致していることを検証するための評価を行うことができる。ＤＰ溶液の色は、安定性を反映し得る。一実施形態では、ＤＰの安定性は、欧州薬局方（European Pharmacopoeia）２．２．２、Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）第１０版モノグラフ番号２０２０２、２０１９年７月に記載されているように、無色から約ＢＹ２以下、約ＢＹ４以下、約Ｂ２以下、約Ｂ４以下、約Ｙ２以下、又は約Ｙ４以下に及ぶ溶液の色を有する場合として定義される。
ＤＰ溶液の色を監視し、溶液の外観が放出時及び保存寿命にわたって以前のバッチと一致していることを検証するための評価を行うことができる。ＤＰ溶液の色は、安定性を反映し得る。一実施形態では、ＤＰの安定性は、欧州薬局方（European Pharmacopoeia）２．２．２、Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）第１０版モノグラフ番号２０２０２、２０１９年７月に記載されているように、無色から約ＢＹ２以下、約ＢＹ４以下、約Ｂ２以下、約Ｂ４以下、約Ｙ２以下、又は約Ｙ４以下に及ぶ溶液の色を有する場合として定義される。
【0088】
一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ２以下、約Ｂ２以下、約Ｙ２以下の溶液の色を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ４以下、約Ｂ４以下、約Ｙ４以下の溶液の色を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ５以下、約Ｂ５以下、約Ｙ５以下の溶液の色を有することとして定義される。
【0089】
ｐＨ
ＤＰ溶液のｐＨを測定することにより、ｐＨが放出時及び保存寿命にわたって以前のＤＰバッチと一致していることを確認することができる。一実施形態では、ＤＰの安定性は、そのｐＨが約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、又は６．４である場合として定義される。一実施形態では、ＤＰのｐＨは、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．７である。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０～約６．４のｐＨ範囲を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、そのｐＨが約５．２～約６．２の範囲である場合として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、そのｐＨが約５．４～約６．０の範囲である場合として定義される。
ＤＰ溶液のｐＨを測定することにより、ｐＨが放出時及び保存寿命にわたって以前のＤＰバッチと一致していることを確認することができる。一実施形態では、ＤＰの安定性は、そのｐＨが約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、又は６．４である場合として定義される。一実施形態では、ＤＰのｐＨは、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．７である。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０～約６．４のｐＨ範囲を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、そのｐＨが約５．２～約６．２の範囲である場合として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、そのｐＨが約５．４～約６．０の範囲である場合として定義される。
【0090】
濁度
濁度は、以前のＤＰバッチとの一貫性を保証するためにＤＰ溶液中の粒子の存在を測定することを可能にし、放出時及び保存寿命にわたって適用可能な公定書準拠ガイダンスを可能にする。試験結果は、比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）で報告される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、その濁度値が約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）である場合として定義される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の約１３ＮＴＵ以下の濁度値である場合として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。
濁度は、以前のＤＰバッチとの一貫性を保証するためにＤＰ溶液中の粒子の存在を測定することを可能にし、放出時及び保存寿命にわたって適用可能な公定書準拠ガイダンスを可能にする。試験結果は、比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）で報告される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、その濁度値が約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）である場合として定義される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の約１３ＮＴＵ以下の濁度値である場合として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。
【0091】
粒子分析
ＤＰの安定性は、肉眼では見えない粒子の平均数に基づく粒子汚染の特定の閾値に設定される。試験結果は、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒ、欧州薬局方２．９．１９、及び日本薬局方ＸＶＩＩ／６．０７粒子汚染：肉眼では見えない粒子に準拠する。したがって、試験したＤＰ単位中に存在する粒子の平均数は、１０μｍ以上の粒径については容器当たり６０００粒子を超えるべきではなく、２５μｍ以上の粒径については容器当たり６００粒子を超えるべきではない。
ＤＰの安定性は、肉眼では見えない粒子の平均数に基づく粒子汚染の特定の閾値に設定される。試験結果は、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒ、欧州薬局方２．９．１９、及び日本薬局方ＸＶＩＩ／６．０７粒子汚染：肉眼では見えない粒子に準拠する。したがって、試験したＤＰ単位中に存在する粒子の平均数は、１０μｍ以上の粒径については容器当たり６０００粒子を超えるべきではなく、２５μｍ以上の粒径については容器当たり６００粒子を超えるべきではない。
【0092】
ｃＳＤＳ条件
キャピラリＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ｃＳＤＳ）は、ゲルベースのＳＤＳ－ＰＡＧＥと同様に、分子量に基づいて変性タンパク質を分離する方法である。このプロセスは、ＤＰ純度を定量化し、放出時及び保存寿命にわたってその安定性を監視することを可能にする。
キャピラリＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ｃＳＤＳ）は、ゲルベースのＳＤＳ－ＰＡＧＥと同様に、分子量に基づいて変性タンパク質を分離する方法である。このプロセスは、ＤＰ純度を定量化し、放出時及び保存寿命にわたってその安定性を監視することを可能にする。
【0093】
一実施形態では、ＤＰ安定性は、ｃＳＤＳ変数（例えば、純度パーセント、アグリコシル化重鎖（ＡＧＨＣ）、又は新たなピークの存在）の様々な結果に基づいて定義され、ｃＳＤＳは、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、還元又は非還元条件下で行われた。
【0094】
還元型ｃＳＤＳの結果は安定性と一致する。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、アミバンタマブ参照材料の検証済みストックと比較して８８．０％以上の純度パーセントを有し、１１．０％以下のＡＧＨＣを有し、１．５％を超える新たなピークがないこととして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９１．０％以上の純度パーセントを有し、約８．０％以下のＡＧＨＣを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９４．０％以上の純度パーセントを有し、約５．０％以下のＡＧ ＨＣを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。
【0095】
非還元型ｃＳＤＳの結果は安定性と一致する。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約８８．０％以上の純度パーセントを有し、１．５％を超える新たなピークがないこととして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９０．０％以上の純度パーセントを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９４．０％以上の純度パーセントを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。
【0096】
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は約１００％若しくは１００％に等しい、あるいはこれらの間の任意の範囲の純度パーセントを有することとして定義される。
【0097】
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、又はこれらの間の任意の範囲のＡＧＨＣを有することとして定義される。
【0098】
一実施形態では、ＤＰ安定性は、未処理の参照材料と比較した場合、０．５％、０．８％、０．９％、１．０％、１．２％、１．３％、１．４％、１．５％、１．６％、１．７％、１．８％、１．９％を超える、又は２％を超える新たなピークをｃＳＤＳ結果で示さないこととして定義される。
【0099】
安定性と一致するサイズ排除ＨＰＬＣ（ＳＥ－ＨＰＬＣ）結果
ＳＥ－ＨＰＬＣ手順は、ＤＰの純度を評価し、放出時及び保存寿命にわたって非変性条件下でその安定性を監視することを可能にする。
ＳＥ－ＨＰＬＣ手順は、ＤＰの純度を評価し、放出時及び保存寿命にわたって非変性条件下でその安定性を監視することを可能にする。
【0100】
ＳＥ－ＨＰＬＣの結果は安定性と一致する
主成分－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に主成分が約９０．０％以上であることとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後に、約９５．０％以上の主成分を有するとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後、約９７．０％の主成分を有するとして定義される。高分子量種（ＨＭＷＳ）－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１０．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。低分子量種（ＬＭＷＳ）－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約２．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。
主成分－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に主成分が約９０．０％以上であることとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後に、約９５．０％以上の主成分を有するとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後、約９７．０％の主成分を有するとして定義される。高分子量種（ＨＭＷＳ）－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１０．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。低分子量種（ＬＭＷＳ）－一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約２．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。
【0101】
キャピラリ等電点電気泳動（ｃＩＥＦ）
ｃＩＥＦは、等電ゲル電気泳動（ＩＥＦ）法と同様に、全体の電荷又は等電点（ｐＩ）に基づいてタンパク質を分離する。この手順は、放出時及び保存寿命にわたって医薬品の電荷ベースのアイソフォームの分布を監視することを可能にする。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、主ピーク（ＭＰ）、酸性ピークの合計又は塩基性ピークの合計などのｃＩＥＦ変数の様々な結果に基づいて定義される。
ｃＩＥＦは、等電ゲル電気泳動（ＩＥＦ）法と同様に、全体の電荷又は等電点（ｐＩ）に基づいてタンパク質を分離する。この手順は、放出時及び保存寿命にわたって医薬品の電荷ベースのアイソフォームの分布を監視することを可能にする。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、主ピーク（ＭＰ）、酸性ピークの合計又は塩基性ピークの合計などのｃＩＥＦ変数の様々な結果に基づいて定義される。
【0102】
ｃＩＥＦの結果は安定性と一致する
主ピーク－
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、若しくは９５％、又はこれらの間の任意の範囲のＭＰを有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３０％～約９０％の範囲のＭＰを有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に３７～８７％の主ピークを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に４７～８７％の主ピークを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５７～８７％の主ピークを有することとして定義される。
主ピーク－
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、若しくは９５％、又はこれらの間の任意の範囲のＭＰを有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３０％～約９０％の範囲のＭＰを有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に３７～８７％の主ピークを有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に４７～８７％の主ピークを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５７～８７％の主ピークを有することとして定義される。
【0103】
酸性ピークの合計－
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、若しくは７０％又はこれらの間の任意の範囲になる酸性ピークの合計を有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～６０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～５０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～４０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、若しくは７０％又はこれらの間の任意の範囲になる酸性ピークの合計を有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～６０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～５０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～４０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。
【0104】
塩基性ピークの合計－
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、若しくは１５％又はこれらの間の任意の範囲になる塩基性ピークの合計を有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１２．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１０．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約８．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、若しくは１５％又はこれらの間の任意の範囲になる塩基性ピークの合計を有するｃＩＥＦを有することとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１２．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１０．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約８．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。
【0105】
Ａ２８０によるタンパク質濃度
ＤＰのタンパク質濃度は、それが出荷時及び保存寿命にわたって以前のＤＰバッチと一致することを検証可能にする。タンパク質濃度は、２８０ｎｍ（Ａ２８０）での医薬品溶液のＵＶ光吸光度を測定することによって定量化することができる。
ＤＰのタンパク質濃度は、それが出荷時及び保存寿命にわたって以前のＤＰバッチと一致することを検証可能にする。タンパク質濃度は、２８０ｎｍ（Ａ２８０）での医薬品溶液のＵＶ光吸光度を測定することによって定量化することができる。
【0106】
タンパク質濃度の結果はＤＰの安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１２８～１９２ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１４４～１７６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５０ｍｇ／ｍＬ～１７０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。
【0107】
医薬品の効力
ＥＧＦＲ及び／又はｃ－ＭｅｔへのＤＰのインビトロ結合は、ＤＰ安定性のレベルの評価を可能にする。この結合は、限定するものではないが、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイを使用することによって評価することができる。
ＥＧＦＲ及び／又はｃ－ＭｅｔへのＤＰのインビトロ結合は、ＤＰ安定性のレベルの評価を可能にする。この結合は、限定するものではないが、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイを使用することによって評価することができる。
【0108】
ＥＧＦＲ結合活性の結果は安定性と一致する。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して、約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１１０％、１２０％、１３０％、１４０％、１５０％、１６０％若しくは１７０％、又はこれらの間の任意の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約５０％～約１５０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約６０％～約１４０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約８０％～約１２０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して、約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１１０％、１２０％、１３０％、１４０％、１５０％、１６０％若しくは１７０％、又はこれらの間の任意の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約５０％～約１５０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約６０％～約１４０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約８０％～約１２０％の範囲のＥＧＦＲ結合活性を有することとして定義される。
【0109】
ｃＭｅｔ結合活性の結果は安定性と一致する。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１１０％、１２０％、１３０％、若しくは１４０％、又はその間の任意の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約５０％～約１５０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約６０％～約１４０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約８０％～約１２０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１１０％、１２０％、１３０％、若しくは１４０％、又はその間の任意の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約５０％～約１５０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約６０％～約１４０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照と比較して約８０％～約１２０％の範囲のｃＭｅｔ結合活性を有することとして定義される。
【0110】
効力ｒＨｕＰＨ２０活性
インビトロでのｒＨｕＰＨ２０ヒアルロニダーゼ酵素活性は、ｒＨｕＰＨ２０の基質であるヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合した場合の濁度を測定することによって決定される。ヒアルロニダーゼ活性の決定は、ヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合したときの沈殿物の形成に基づく。ヒアルロニダーゼをＨＡで３０分、９６ウェルプレート形式で３７℃にて培養した後、酸性化した血清を添加して未消化ＨＡを沈殿させることにより活性を測定する。得られた濁度は、６４０ｎｍで測定し、ＨＡ基質の酵素的開裂に起因する濁度の低下は、ヒアルロニダーゼ活性の尺度である。
インビトロでのｒＨｕＰＨ２０ヒアルロニダーゼ酵素活性は、ｒＨｕＰＨ２０の基質であるヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合した場合の濁度を測定することによって決定される。ヒアルロニダーゼ活性の決定は、ヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合したときの沈殿物の形成に基づく。ヒアルロニダーゼをＨＡで３０分、９６ウェルプレート形式で３７℃にて培養した後、酸性化した血清を添加して未消化ＨＡを沈殿させることにより活性を測定する。得られた濁度は、６４０ｎｍで測定し、ＨＡ基質の酵素的開裂に起因する濁度の低下は、ヒアルロニダーゼ活性の尺度である。
【0111】
ｒＨｕＰＨ２０活性の結果は安定性と一致する。
一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、約８００Ｕ／ｍＬ、９００Ｕ／ｍＬ、１０００Ｕ／ｍＬ、１１００Ｕ／ｍＬ、１２００Ｕ／ｍＬ、１３００Ｕ／ｍＬ、１４００Ｕ／ｍＬ、１５００Ｕ／ｍＬ、１６００Ｕ／ｍＬ、１７００Ｕ／ｍＬ、１８００Ｕ／ｍＬ、１９００Ｕ／ｍＬ、２０００Ｕ／ｍＬ、２１００Ｕ／ｍＬ、２２００Ｕ／ｍＬ、２３００Ｕ／ｍＬ、２４００Ｕ／ｍＬ、２５００Ｕ／ｍＬ、２６００Ｕ／ｍＬ、２７００Ｕ／ｍＬ、２８００Ｕ／ｍＬ、２９００Ｕ／ｍＬ、３０００Ｕ／ｍＬ、３１００Ｕ／ｍＬ、３２００Ｕ／ｍＬ、３３００Ｕ／ｍＬ、３４００Ｕ／ｍＬ若しくは３５００Ｕ／ｍＬ、又はこれらの間の任意の範囲でｒＨｕＰＨ２０活性を有するとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１０００Ｕ／ｍＬ～３０００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５００Ｕ／ｍＬ～２５００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１８００Ｕ／ｍＬ～２２００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。
一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、約８００Ｕ／ｍＬ、９００Ｕ／ｍＬ、１０００Ｕ／ｍＬ、１１００Ｕ／ｍＬ、１２００Ｕ／ｍＬ、１３００Ｕ／ｍＬ、１４００Ｕ／ｍＬ、１５００Ｕ／ｍＬ、１６００Ｕ／ｍＬ、１７００Ｕ／ｍＬ、１８００Ｕ／ｍＬ、１９００Ｕ／ｍＬ、２０００Ｕ／ｍＬ、２１００Ｕ／ｍＬ、２２００Ｕ／ｍＬ、２３００Ｕ／ｍＬ、２４００Ｕ／ｍＬ、２５００Ｕ／ｍＬ、２６００Ｕ／ｍＬ、２７００Ｕ／ｍＬ、２８００Ｕ／ｍＬ、２９００Ｕ／ｍＬ、３０００Ｕ／ｍＬ、３１００Ｕ／ｍＬ、３２００Ｕ／ｍＬ、３３００Ｕ／ｍＬ、３４００Ｕ／ｍＬ若しくは３５００Ｕ／ｍＬ、又はこれらの間の任意の範囲でｒＨｕＰＨ２０活性を有するとして定義される。一実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１０００Ｕ／ｍＬ～３０００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５００Ｕ／ｍＬ～２５００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１８００Ｕ／ｍＬ～２２００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。
【0112】
分析試験－界面活性剤
ポリソルベート８０の定量
ポリソルベート８０を、混合モードイオン交換／疎水性ＨＰＬＣによって定量的に測定する。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の約０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０８％、０．０９％若しくは０．１％又はこれらの間の任意の範囲の重量対体積パーセンテージでのＰＳ８０濃度によって定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０３～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０４～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０５～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。
ポリソルベート８０の定量
ポリソルベート８０を、混合モードイオン交換／疎水性ＨＰＬＣによって定量的に測定する。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上ＤＰを保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の約０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０８％、０．０９％若しくは０．１％又はこれらの間の任意の範囲の重量対体積パーセンテージでのＰＳ８０濃度によって定義される。一実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０３～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０４～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰ安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０５～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。
【0113】
粘度。
当業者によって認識される高濃度タンパク質製剤の使用に伴う潜在的な問題は、溶液の粘度が、通常、タンパク質濃度の増加とともに増加することである。粘性抗体溶液は、プロセス（例えば、充填バイアル及び／又はシリンジ）及び患者への投与が困難である。高粘性製剤は、製造、シリンジへの引き込み、及び注入が困難である。粘性製剤を操作する際の力の使用は、過剰な起泡をもたらし、活性生物製剤の変性及び不活性化をもたらし得る。粘度を低下させることができない限り、高濃度の抗体製剤は、より大きなボアニードル、高圧注入、より長い注入時間、及び抗体接着を打ち消すための特別な機器又は材料を必要とし得る。これらの変化は、患者の不快感及び治療用抗体生成物の製造コストを増加させる。
当業者によって認識される高濃度タンパク質製剤の使用に伴う潜在的な問題は、溶液の粘度が、通常、タンパク質濃度の増加とともに増加することである。粘性抗体溶液は、プロセス（例えば、充填バイアル及び／又はシリンジ）及び患者への投与が困難である。高粘性製剤は、製造、シリンジへの引き込み、及び注入が困難である。粘性製剤を操作する際の力の使用は、過剰な起泡をもたらし、活性生物製剤の変性及び不活性化をもたらし得る。粘度を低下させることができない限り、高濃度の抗体製剤は、より大きなボアニードル、高圧注入、より長い注入時間、及び抗体接着を打ち消すための特別な機器又は材料を必要とし得る。これらの変化は、患者の不快感及び治療用抗体生成物の製造コストを増加させる。
【0114】
本明細書で使用する場合、「粘度」は、流れに対する流体の抵抗であり、所与の剪断速度で、センチポアズ（ｃＰ）又はミリパスカル秒（ｍＰａ－ｓ）の単位で測定してもよく、１ｃＰ＝１ｍＰａ－ｓである。粘度は、粘度計、例えば、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｄｉａｌ Ｒｅａｄｉｎｇ Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ、モデルＬＶＴ、及びＡＲ－Ｇ２、ＴＡ装置を用いて測定してもよい。粘度は、本発明によって記載される賦形剤の使用によって得られる粘度の低下率が重要であることを理解して、任意の他の方法を用いて、当該技術分野で公知の任意の他の単位（例えば、絶対粘度、動粘度（kinematic viscosity）、又は動粘度（dynamic viscosity））で測定してもよい。粘度を決定するために使用される方法にかかわらず、賦形剤製剤に対する対照製剤における粘度の低下率は、所与の剪断速度でほぼ同じままである。
【0115】
本発明は、室温で約９ｃＰ～約１１ｃＰの粘度を有する高濃度アミバンタマブ組成物を提供する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、約２２ｃＰ以下、１６ｃＰ以下、１３ｃＰ以下、１１ｃＰ以下、９ｃＰ以下、８ｃＰ以下、７ｃＰ以下又は６ｃＰの絶対粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、４℃で測定した場合に約２１．９ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、１０℃で測定した場合に約１６ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、１５℃で測定した場合に約１３．３ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、２０℃で測定した場合に約１１ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、２５℃で測定した場合に約９．３ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、３０℃で測定した場合に約７．９ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、３５℃で測定した場合に約６．７ｃＰの粘度を有する。いくつかの実施形態では、高濃度アミバンタマブ組成物は、４０℃で測定した場合に約５．８ｃＰの粘度を有する。
【0116】
例示的な実施形態
本開示の技術の例示的な実施形態が本明細書で提供される。これらの実施形態は、例示のみを目的としており、本開示又は本開示に添付の特許請求の範囲を限定するものではない。
１．二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体及びヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物であって、抗体は、
ａ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む、第１の重鎖（ＨＣ１）；
ｂ．配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む、第１の軽鎖（ＬＣ１）；
ｃ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む、第２の重鎖（ＨＣ２）；
ｄ．配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む、第２の軽鎖（ＬＣ２）；
を含み、組成物は、約１，０５０ｍｇ～約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体、及び約１３，０００Ｕ～約２８，０００Ｕのヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物。
２．組成物が、約１，０５０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
３．組成物が、約１，４００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
４．組成物が、約１，５７５ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
４ａ．組成物が、約１，６００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
５．組成物が、約２，１００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
５ａ．組成物が、約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
６．安定な水性医薬組成物であって、
ａ）約１４４ｍｇ／ｍＬ～約１７６ｍｇ／ｍＬの二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体であって、二重特異性抗体は、
ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、
軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、
ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、及び
軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、
を含み、
ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体と、
ｂ）約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、
ｃ）約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロースと、
ｄ）約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
ｅ）約０．８ｍｇ／ｍＬ～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、
ｆ）約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、
ｇ）任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、
ｈ）約５．２～約６．２のｐＨと、
を含む、安定な水性医薬組成物。
６ａ．組成物の粘度が、２０℃で測定した際に約１１ｃＰ未満である、実施形態６に記載の安定な水性医薬組成物。
７．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、実施形態６に記載の安定な水性医薬組成物。
８．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、実施形態６又は実施形態７に記載の安定な水性医薬組成物。
９．ＨＣ１が配列番号１７のアミノ酸配列を含み、ＬＣ１が配列番号１８のアミノ酸配列を含む、実施形態６～８のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１０．ＨＣ２が配列番号１９のアミノ酸配列を含み、ＬＣ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含む、実施形態６～９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１１．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、実施形態６～１０のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１２．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、約１６０ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１１のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１３．酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、約３０ｍＭの濃度を有する、実施形態６～１２のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１４．酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、氷酢酸及び／又は酢酸ナトリウム三水和物を含む、実施形態６～１３のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１５．約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを含む、実施形態６～１４のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１６．約０．０６％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む、実施形態６～１５のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１７．メチオニンが、Ｌ－メチオニンを含み、かつ約１ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１６のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１８．ＥＤＴＡが、約２０μｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１９．ｐＨが、約５．７である、実施形態６～１８のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２０．ヒアルロニダーゼが、ヒトヒアルロニダーゼ、任意選択で配列番号２１のアミノ酸配列を含むｒＨｕＰＨ２０である、実施形態６～１９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２１．濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬである、実施形態６～２０のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２２．濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約２，０００Ｕ／ｍＬである、実施形態６～２１のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２３．安定性が、溶液の色、ｐＨ、濁度、肉眼では見えない粒子の数、アグリコシル化重鎖（ＡＧＨＣ）のパーセンテージ、新たなピークのパーセンテージ、高分子量種（ＨＭＷＳ）のパーセンテージ、低分子量種（ＬＭＷＳ）のパーセンテージ、酸性ピークの合計のパーセンテージ、塩基性ピークの合計のパーセンテージ、タンパク質濃度、ＥＧＦＲ結合活性のパーセンテージ、ｃＭｅｔ結合活性のパーセンテージ、ＰＳ８０のパーセンテージ、任意選択でｒＨｕＰＨ２０活性のパーセンテージ、又はこれらの任意の組み合わせに基づいて定義される、実施形態６～２２のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２４．組成物の総体積が約６ｍＬ～約９ｍＬの範囲である、実施形態６～２３のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２５．組成物の総体積が、約７．１ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２６．組成物の総体積が、約６．６ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２７．組成物の総体積が、約８．７５ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２８．約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡとともに含み、当該安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、
二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
実施形態１～２７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２９．約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、並びに約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０とともに含み、安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、
二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
実施形態１～２７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
３０．処置を必要とする対象においてがんを処置する方法であって、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法。
３１．投与が、皮下である、実施形態３０に記載の方法。
３２．がんが、肺がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、又は卵巣がん（ＯＣ）を含む、実施形態３０～３１に記載の方法。
３３．がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、実施形態３０～３１に記載の方法。
３４．ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体の安定な水性医薬組成物を調製するための方法であって、ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体は、ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、を含み、ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、方法は、
約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを含む組成物を、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、任意選択で約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０と組み合わせることを含み、安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有する、方法。
３５．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、実施形態３４に記載の方法。
３６．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、実施形態３４～３５に記載の方法。
３７．抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）と、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）と、を含む、実施形態３４～３６のいずれか１つに記載の方法。
３８．抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２と、を含む、実施形態３４～３７のいずれか１つに記載の方法。
３９．抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、実施形態３４～３８のいずれか１つに記載の方法。
４０．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物及びその使用説明書を含む、キット。
４１．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物を保持する容器を含む、製造品。
４２．容器が、シリンジによって穿刺可能な栓を有するバイアルである、実施形態４１に記載の製造品。
４３．バイアルが、単回使用バイアルである、実施形態４２に記載の製造品。
４４．がんの処置に使用するための、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物。
４５．がんが、肺がんを含む、実施形態４４に記載の医薬組成物。
４６．がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、実施形態４４に記載の医薬組成物。
４７．がんを処置するための医薬品の調製に使用するための、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物。
４８．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物を投与することによって、処置を必要とする対象においてがんを処置するための、医薬組成物の使用。
４９．投与が、皮下である、実施形態４８に記載の医薬組成物の使用。
５０．アミバンタマブで処置された対象における注入関連反応を低減するための、実施形態４９に記載の医薬組成物の使用。
本開示の技術の例示的な実施形態が本明細書で提供される。これらの実施形態は、例示のみを目的としており、本開示又は本開示に添付の特許請求の範囲を限定するものではない。
１．二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体及びヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物であって、抗体は、
ａ．配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む、第１の重鎖（ＨＣ１）；
ｂ．配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む、第１の軽鎖（ＬＣ１）；
ｃ．配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む、第２の重鎖（ＨＣ２）；
ｄ．配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む、第２の軽鎖（ＬＣ２）；
を含み、組成物は、約１，０５０ｍｇ～約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体、及び約１３，０００Ｕ～約２８，０００Ｕのヒアルロニダーゼを含む、安定な水性医薬組成物。
２．組成物が、約１，０５０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
３．組成物が、約１，４００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
４．組成物が、約１，５７５ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
４ａ．組成物が、約１，６００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
５．組成物が、約２，１００ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
５ａ．組成物が、約２，２４０ｍｇの二重特異性ＥＧＦＲ／ｃ－Ｍｅｔ抗体を含む、実施形態１に記載の安定な組成物。
６．安定な水性医薬組成物であって、
ａ）約１４４ｍｇ／ｍＬ～約１７６ｍｇ／ｍＬの二重特異性上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）／肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）抗体であって、二重特異性抗体は、
ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、
軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、
ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、及び
軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、
を含み、
ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６の軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体と、
ｂ）約１０ｍＭ～約５０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩と、
ｃ）約６．８％（ｗ／ｖ）～約１０．２％（ｗ／ｖ）のスクロースと、
ｄ）約０．０３６％（ｗ／ｖ）～約０．０８４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、
ｅ）約０．８ｍｇ／ｍＬ～約１．２ｍｇ／ｍＬのメチオニンと、
ｆ）約１６μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、
ｇ）任意選択で、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬのヒアルロニダーゼと、
ｈ）約５．２～約６．２のｐＨと、
を含む、安定な水性医薬組成物。
６ａ．組成物の粘度が、２０℃で測定した際に約１１ｃＰ未満である、実施形態６に記載の安定な水性医薬組成物。
７．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、実施形態６に記載の安定な水性医薬組成物。
８．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、実施形態６又は実施形態７に記載の安定な水性医薬組成物。
９．ＨＣ１が配列番号１７のアミノ酸配列を含み、ＬＣ１が配列番号１８のアミノ酸配列を含む、実施形態６～８のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１０．ＨＣ２が配列番号１９のアミノ酸配列を含み、ＬＣ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含む、実施形態６～９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１１．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、実施形態６～１０のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１２．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、約１６０ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１１のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１３．酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、約３０ｍＭの濃度を有する、実施形態６～１２のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１４．酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩が、氷酢酸及び／又は酢酸ナトリウム三水和物を含む、実施形態６～１３のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１５．約８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースを含む、実施形態６～１４のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１６．約０．０６％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む、実施形態６～１５のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１７．メチオニンが、Ｌ－メチオニンを含み、かつ約１ｍｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１６のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１８．ＥＤＴＡが、約２０μｇ／ｍＬの濃度を有する、実施形態６～１７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
１９．ｐＨが、約５．７である、実施形態６～１８のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２０．ヒアルロニダーゼが、ヒトヒアルロニダーゼ、任意選択で配列番号２１のアミノ酸配列を含むｒＨｕＰＨ２０である、実施形態６～１９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２１．濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約１，０００Ｕ／ｍＬ～約３，０００Ｕ／ｍＬである、実施形態６～２０のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２２．濃度ｒＨｕＰＨ２０が、約２，０００Ｕ／ｍＬである、実施形態６～２１のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２３．安定性が、溶液の色、ｐＨ、濁度、肉眼では見えない粒子の数、アグリコシル化重鎖（ＡＧＨＣ）のパーセンテージ、新たなピークのパーセンテージ、高分子量種（ＨＭＷＳ）のパーセンテージ、低分子量種（ＬＭＷＳ）のパーセンテージ、酸性ピークの合計のパーセンテージ、塩基性ピークの合計のパーセンテージ、タンパク質濃度、ＥＧＦＲ結合活性のパーセンテージ、ｃＭｅｔ結合活性のパーセンテージ、ＰＳ８０のパーセンテージ、任意選択でｒＨｕＰＨ２０活性のパーセンテージ、又はこれらの任意の組み合わせに基づいて定義される、実施形態６～２２のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２４．組成物の総体積が約６ｍＬ～約９ｍＬの範囲である、実施形態６～２３のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２５．組成物の総体積が、約７．１ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２６．組成物の総体積が、約６．６ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２７．組成物の総体積が、約８．７５ｍＬである、実施形態２４に記載の安定な水性医薬組成物。
２８．約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡとともに含み、当該安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、
二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
実施形態１～２７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
２９．約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、並びに約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０とともに含み、安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有し、
二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）、及び配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２を含む、
実施形態１～２７のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物。
３０．処置を必要とする対象においてがんを処置する方法であって、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法。
３１．投与が、皮下である、実施形態３０に記載の方法。
３２．がんが、肺がん、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、又は卵巣がん（ＯＣ）を含む、実施形態３０～３１に記載の方法。
３３．がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、実施形態３０～３１に記載の方法。
３４．ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体の安定な水性医薬組成物を調製するための方法であって、ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔを標的とする二重特異性抗体は、ＨＣ１可変領域１（ＶＨ１）を含む第１の重鎖（ＨＣ１）と、軽鎖可変領域１（ＶＬ１）を含む第１の軽鎖（ＬＣ１）と、ＨＣ２可変領域２（ＶＨ２）を含む第２の重鎖（ＨＣ２）と、軽鎖可変領域２（ＶＬ２）を含む第２の軽鎖（ＬＣ２）と、を含み、ＶＨ１は、それぞれ配列番号１、２、及び３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬ１は、それぞれ配列番号４、５及び６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、ＶＨ２は、それぞれ配列番号７、８及び９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、ＶＬ２は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含み、方法は、
約１６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性抗体、約３０ｍＭの酢酸及び／又は医薬的に許容される酢酸塩、約８．５％のスクロース、並びに約１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニンを含む組成物を、約０．０６％（ｗ／ｖ）の最終濃度までのポリソルベート８０及び約２０μｇ／ｍＬの最終濃度までのＥＤＴＡ、任意選択で約２，０００Ｕ／ｍＬの最終濃度までのｒＨｕＰＨ２０と組み合わせることを含み、安定な水性医薬組成物が、約５．７のｐＨを有する、方法。
３５．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＨＣ１可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣ１可変領域とを含む、実施形態３４に記載の方法。
３６．二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体が、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＨＣ２可変領域と、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＬＣ２可変領域とを含む、実施形態３４～３５に記載の方法。
３７．抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖１（ＨＣ１）と、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖１（ＬＣ１）と、を含む、実施形態３４～３６のいずれか１つに記載の方法。
３８．抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＣ２と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣ２と、を含む、実施形態３４～３７のいずれか１つに記載の方法。
３９．抗体が、アミバンタマブ又はそのバイオ後続品である、実施形態３４～３８のいずれか１つに記載の方法。
４０．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物及びその使用説明書を含む、キット。
４１．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の安定な水性医薬組成物を保持する容器を含む、製造品。
４２．容器が、シリンジによって穿刺可能な栓を有するバイアルである、実施形態４１に記載の製造品。
４３．バイアルが、単回使用バイアルである、実施形態４２に記載の製造品。
４４．がんの処置に使用するための、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物。
４５．がんが、肺がんを含む、実施形態４４に記載の医薬組成物。
４６．がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を含む、実施形態４４に記載の医薬組成物。
４７．がんを処置するための医薬品の調製に使用するための、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物。
４８．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の医薬組成物を投与することによって、処置を必要とする対象においてがんを処置するための、医薬組成物の使用。
４９．投与が、皮下である、実施形態４８に記載の医薬組成物の使用。
５０．アミバンタマブで処置された対象における注入関連反応を低減するための、実施形態４９に記載の医薬組成物の使用。
【実施例】
【0117】
本明細書において開示した実施形態のいくつかを更に説明するために、以下の実施例を提供する。これらの実施例は、例示を目的とするものであって、本開示の実施形態を制限するものではない。
【0118】
本明細書で使用される分析試験の説明
分析試験－一般特性評価
溶液の色
溶液の色を医薬品（ＤＰ）について監視して外観を評価し、放出時及び貯蔵寿命にわたって以前のバッチと確実に一致するようにする。溶液の色は、製品安定性の指標ともなり得る。溶液の色を判定するために、試験サンプルを規定の参照溶液のセットと視覚的に比較する。
分析試験－一般特性評価
溶液の色
溶液の色を医薬品（ＤＰ）について監視して外観を評価し、放出時及び貯蔵寿命にわたって以前のバッチと確実に一致するようにする。溶液の色は、製品安定性の指標ともなり得る。溶液の色を判定するために、試験サンプルを規定の参照溶液のセットと視覚的に比較する。
【0119】
規定量の液体内容物を、参照溶液と同じ寸法の予め刻み目を入れたアンプルに移す。次に、アンプルの内容物を欧州薬局方の色度参照溶液と視覚的に比較する。色の度合いは、白色背景に対して観察される拡散昼光で判定される。
【0120】
溶液材料の色及び方法
材料及び方法は、欧州薬局方２．２．２、Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）第１０版モノグラフ番号２０２０２、２０１９年７月に記載されている。簡単に説明すると、試験品を、Ｂ（茶色）、ＢＹ（茶色がかった黄色）、及びＹ（黄色）色度参照溶液セットと比較する。
材料及び方法は、欧州薬局方２．２．２、Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）第１０版モノグラフ番号２０２０２、２０１９年７月に記載されている。簡単に説明すると、試験品を、Ｂ（茶色）、ＢＹ（茶色がかった黄色）、及びＹ（黄色）色度参照溶液セットと比較する。
【0121】
溶液の色の結果は安定性と一致する
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ２以下、約Ｂ２以下、約Ｙ２以下の溶液の色を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ４以下、約Ｂ４以下、約Ｙ４以下の溶液の色を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ５以下、約Ｂ５以下、約Ｙ５以下の溶液の色を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ２以下、約Ｂ２以下、約Ｙ２以下の溶液の色を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ４以下、約Ｂ４以下、約Ｙ４以下の溶液の色を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、無色から約ＢＹ５以下、約Ｂ５以下、約Ｙ５以下の溶液の色を有することとして定義される。
【0122】
ｐＨ
ｐＨ材料及び方法
標準化されたｐＨ電極を有する毎日較正された電子ｐＨ計を使用して、試験品のｐＨを測定する。全ての較正溶液、参照緩衝液、及び試験品を、試験前に２５℃に平衡化し、試験中２５℃に維持する。
ｐＨ材料及び方法
標準化されたｐＨ電極を有する毎日較正された電子ｐＨ計を使用して、試験品のｐＨを測定する。全ての較正溶液、参照緩衝液、及び試験品を、試験前に２５℃に平衡化し、試験中２５℃に維持する。
【0123】
ｐＨの結果は安定性と一致する
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５．０～６．４のｐＨ範囲を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の５．２～６．２のｐＨ範囲であるものとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５．４～６．０のｐＨ範囲を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５．０～６．４のｐＨ範囲を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の５．２～６．２のｐＨ範囲であるものとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５．４～６．０のｐＨ範囲を有することとして定義される。
【0124】
濁度
濁度材料及び方法
材料及び方法は、欧州薬局方２．２．１、Ｃｌａｒｉｔｙ ａｎｄ Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｏｐａｌｅｓｃｅｎｃｅ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓに基づく。
濁度材料及び方法
材料及び方法は、欧州薬局方２．２．１、Ｃｌａｒｉｔｙ ａｎｄ Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ｏｐａｌｅｓｃｅｎｃｅ ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄｓに基づく。
【0125】
濁度の結果は安定性と一致する。
試験結果は、比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）で報告される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１３ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。
試験結果は、比濁分析濁度単位（ＮＴＵ）で報告される。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１３ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約８ＮＴＵ以下の濁度値を有することとして定義される。
【0126】
分析試験－粒子状物質
粒子状物質（肉眼では見えない）材料及び方法－全ての材料及び方法は、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒに準拠している。公定書収載の容量サンプラー装置を備えた公定書準拠の液体粒子計数器を使用する。試験品は、試験前に少なくとも６０分間であるが１０時間以下の間、室温に平衡化される。試験品バイアルを、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒに準拠した様式でプールする。米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒによって指示されるように、プールされた試験品の各々適切な体積の４つの部分を取り出し、１０μｍ及び２５μｍ以上の粒子の数を部分ごとに計数する。第１の部分について得られた結果を無視し、残りの３つの結果を用いて、試験した調製物の平均粒子数を計算する。
粒子状物質（肉眼では見えない）材料及び方法－全ての材料及び方法は、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒに準拠している。公定書収載の容量サンプラー装置を備えた公定書準拠の液体粒子計数器を使用する。試験品は、試験前に少なくとも６０分間であるが１０時間以下の間、室温に平衡化される。試験品バイアルを、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒに準拠した様式でプールする。米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒによって指示されるように、プールされた試験品の各々適切な体積の４つの部分を取り出し、１０μｍ及び２５μｍ以上の粒子の数を部分ごとに計数する。第１の部分について得られた結果を無視し、残りの３つの結果を用いて、試験した調製物の平均粒子数を計算する。
【0127】
粒子分析（肉眼では見えない）公定書準拠結果－試験結果は、米国薬局方＜７８８＞Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ Ｍａｔｔｅｒ、欧州薬局方２．９．１９、及び日本薬局方ＸＶＩＩ／６．０７粒子汚染：肉眼では見えない粒子に準拠する。したがって、試験した単位中に存在する粒子の平均数は、１０μｍ以上の粒径については容器当たり６０００粒子を超えるべきではなく、２５μｍ以上の粒径については容器当たり６００粒子を超えるべきではない。
【0128】
分析試験－純度
キャピラリ電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ｃＳＤＳ）－還元型
還元型ｃＳＤＳ材料及び方法－分析は、温度制御されたカートリッジ内の裸の溶融シリカキャピラリ、内径５０μｍ×長さ３０．２ｃｍを有する市販のキャピラリ電気泳動システムを用いる。キャピラリには、紫外光に対して透明な検出窓が設けられている。キャピラリを、各注入前に動電学的にすすぐ。各試料分析の前に、絡み合ったポリマー溶液からなるふるい分けマトリックスをキャピラリに充填する。この方法は、ＳＤＳ－ＭＷゲル泳動緩衝液及び約１０～１４８ｋＤａの範囲にわたるタンパク質分子量認証標準を利用する。装置の紫外吸収分光光度計検出器を波長２２０ｎｍに設定し、キャピラリ温度を２５℃に設定する。試料処理条件を低下させるために、試験品（２連）をＳＤＳ及び２－メルカプトエタノールと混合し、次いで規定の時間及び温度で加熱して、タンパク質を完全に変性及び還元させる。還元試料を、キャピラリに５ｋＶの電圧を約２０秒間印加することによって動電的に注入し、次いで、より大きな電場を約３５分間印加することによって分析する。検出は、２２０ｎｍのスペクトルの遠紫外領域における吸光度によって達成される。全シグナルデータのパーセントを、軽鎖、重鎖、及びアグリコシル化重鎖（ＡＧ ＨＣ）について収集する。
キャピラリ電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ｃＳＤＳ）－還元型
還元型ｃＳＤＳ材料及び方法－分析は、温度制御されたカートリッジ内の裸の溶融シリカキャピラリ、内径５０μｍ×長さ３０．２ｃｍを有する市販のキャピラリ電気泳動システムを用いる。キャピラリには、紫外光に対して透明な検出窓が設けられている。キャピラリを、各注入前に動電学的にすすぐ。各試料分析の前に、絡み合ったポリマー溶液からなるふるい分けマトリックスをキャピラリに充填する。この方法は、ＳＤＳ－ＭＷゲル泳動緩衝液及び約１０～１４８ｋＤａの範囲にわたるタンパク質分子量認証標準を利用する。装置の紫外吸収分光光度計検出器を波長２２０ｎｍに設定し、キャピラリ温度を２５℃に設定する。試料処理条件を低下させるために、試験品（２連）をＳＤＳ及び２－メルカプトエタノールと混合し、次いで規定の時間及び温度で加熱して、タンパク質を完全に変性及び還元させる。還元試料を、キャピラリに５ｋＶの電圧を約２０秒間印加することによって動電的に注入し、次いで、より大きな電場を約３５分間印加することによって分析する。検出は、２２０ｎｍのスペクトルの遠紫外領域における吸光度によって達成される。全シグナルデータのパーセントを、軽鎖、重鎖、及びアグリコシル化重鎖（ＡＧ ＨＣ）について収集する。
【0129】
還元型ｃＳＤＳの結果は安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、アミバンタマブ参照材料の検証済みストックと比較して８８．０％以上の純度パーセントを有し、１１．０％以下のＡＧ ＨＣを有し、１．５％を超える新たなピークがないこととして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９１．０％以上の純度パーセントを有し、約８．０％以下のＡＧ ＨＣを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９４．０％以上の純度パーセントを有し、約５．０％以下のＡＧ ＨＣを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。
【0130】
キャピラリ電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ｃＳＤＳ）－非還元型
非還元型ｃＳＤＳ材料及び方法－分析は、温度制御されたカートリッジ内の裸の溶融シリカキャピラリ、内径５０μｍ×長さ３０．２ｃｍを有する市販のキャピラリ電気泳動システムを用いる。キャピラリには、紫外光に対して透明な検出窓が設けられている。キャピラリを、各注入前に動電学的にすすぐ。各試料分析の前に、絡み合ったポリマー溶液からなるふるい分けマトリックスをキャピラリに充填する。この方法は、ＳＤＳ－ＭＷゲル泳動緩衝液、約１０～１４８ｋＤａの範囲にわたるタンパク質分子量認証標準、及び検証済みのアミバンタマブ参照材料試料を利用する。装置の紫外吸収分光光度計検出器を波長２２０ｎｍに設定し、キャピラリ温度を２５℃に設定する。非還元試料処理条件については、試験品（２連）をＳＤＳ及びアルキル化試薬（Ｎ－エチルマレイミド、ジスルフィド結合のシャッフリング又は再形成を防止するため）と混合する。次いで、これを規定の時間及び温度で加熱して、タンパク質を完全に変性させ、フラグメント及びアーチファクトバンドの形成を最小限に抑える。非還元試料を、キャピラリに５ｋＶの電圧を約２０秒間印加することによって動電学的に注入し、次いで、より大きな電場を約３５分間印加することによって分析する。検出は、２２０ｎｍのスペクトルの遠紫外領域における吸光度によって達成される。全シグナルデータのパーセントを収集する。データを、アミバンタマブ参照材料と比較した新たなピークの存在についてもまた分析する。純度パーセントは、パーセント重鎖＋パーセント軽鎖として定義される。
非還元型ｃＳＤＳ材料及び方法－分析は、温度制御されたカートリッジ内の裸の溶融シリカキャピラリ、内径５０μｍ×長さ３０．２ｃｍを有する市販のキャピラリ電気泳動システムを用いる。キャピラリには、紫外光に対して透明な検出窓が設けられている。キャピラリを、各注入前に動電学的にすすぐ。各試料分析の前に、絡み合ったポリマー溶液からなるふるい分けマトリックスをキャピラリに充填する。この方法は、ＳＤＳ－ＭＷゲル泳動緩衝液、約１０～１４８ｋＤａの範囲にわたるタンパク質分子量認証標準、及び検証済みのアミバンタマブ参照材料試料を利用する。装置の紫外吸収分光光度計検出器を波長２２０ｎｍに設定し、キャピラリ温度を２５℃に設定する。非還元試料処理条件については、試験品（２連）をＳＤＳ及びアルキル化試薬（Ｎ－エチルマレイミド、ジスルフィド結合のシャッフリング又は再形成を防止するため）と混合する。次いで、これを規定の時間及び温度で加熱して、タンパク質を完全に変性させ、フラグメント及びアーチファクトバンドの形成を最小限に抑える。非還元試料を、キャピラリに５ｋＶの電圧を約２０秒間印加することによって動電学的に注入し、次いで、より大きな電場を約３５分間印加することによって分析する。検出は、２２０ｎｍのスペクトルの遠紫外領域における吸光度によって達成される。全シグナルデータのパーセントを収集する。データを、アミバンタマブ参照材料と比較した新たなピークの存在についてもまた分析する。純度パーセントは、パーセント重鎖＋パーセント軽鎖として定義される。
【0131】
非還元型ｃＳＤＳの結果は安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約８８．０％以上の純度パーセントを有し、１．５％を超える新たなピークがないこととして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９０．０％以上の純度パーセントを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に、参照材料と比較して約９４．０％以上の純度パーセントを有し、１．０％を超える新たなピークがないこととして定義される。
【0132】
サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ－ＨＰＬＣ）
ＳＥ－ＨＰＬＣ材料及び方法－参照材料及び試験品を目標タンパク質濃度に希釈する。２０μＬの体積の分析物を、１０～５００ｋＤａの分画範囲を有する、５μｍの粒径のシリカベースを有する７．８ｍｍ×３０ｃｍサイズの排除カラムに注入する。水性リン酸緩衝液を流速０．７ｍＬ／分で移動相として使用し、溶出液の吸光度を２８０ｎｍで連続的に監視する。モノマー（主成分又は主ピーク）、凝集体（高分子量種、又はＨＭＷＳ）、及びフラグメント（低分子量種、又はＬＭＷＳ）は、カラム上で分離され、異なる保持時間で溶出する。これらの種の量は、２８０ｎｍでのピーク吸光度を監視することによって測定される。
ＳＥ－ＨＰＬＣ材料及び方法－参照材料及び試験品を目標タンパク質濃度に希釈する。２０μＬの体積の分析物を、１０～５００ｋＤａの分画範囲を有する、５μｍの粒径のシリカベースを有する７．８ｍｍ×３０ｃｍサイズの排除カラムに注入する。水性リン酸緩衝液を流速０．７ｍＬ／分で移動相として使用し、溶出液の吸光度を２８０ｎｍで連続的に監視する。モノマー（主成分又は主ピーク）、凝集体（高分子量種、又はＨＭＷＳ）、及びフラグメント（低分子量種、又はＬＭＷＳ）は、カラム上で分離され、異なる保持時間で溶出する。これらの種の量は、２８０ｎｍでのピーク吸光度を監視することによって測定される。
【0133】
ＳＥ－ＨＰＬＣの結果は安定性と一致する
主成分－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に主成分が約９０．０％以上であることとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後に、約９５．０％以上の主成分を有するとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後、約９７．０％の主成分を有するとして定義される。高分子量種（ＨＭＷＳ）－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１０．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。低分子量種（ＬＭＷＳ）－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約２．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。
主成分－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に主成分が約９０．０％以上であることとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後に、約９５．０％以上の主成分を有するとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約１２ヶ月以上及び約５℃の温度で保存した後、約１２ヶ月以上及び約２５℃の温度で保存した後、並びに／又は約２年以上及び約５℃の温度で保存した後、約９７．０％の主成分を有するとして定義される。高分子量種（ＨＭＷＳ）－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１０．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約３．０％以下のＨＭＷＳを有することとして定義される。低分子量種（ＬＭＷＳ）－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約５．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約２．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に約１．０％以下のＬＭＷＳを有することとして定義される。
【0134】
キャピラリ等電点電気泳動（ｃＩＥＦ）
ｃＩＥＦ材料及び方法－分析手順を、オートサンプラーを備えた市販のイメージングｃＩＥＦ分析装置で行う。分析は、外壁ポリイミドコーティングを有する１００μｍの内壁コーティングシリカキャピラリを使用する。更に、希リン酸及びメチルセルロースの分析物溶液、水酸化ナトリウム及びメチルセルロースのカソード液溶液、並びに所定の種類及び量の両性電解質が使用される。試験品をカルボキシペプチダーゼＢ（ＣＰＢ）で処理して、Ｃ末端リシンを除去し、各荷電種について複数のＣ末端変異体の存在によって導入される曖昧さを排除する。機器のオートサンプラーを、予備泳動及び泳動の両方について４℃に設定する。予備泳動の電圧及び時間は、それぞれ１５００Ｖ及び１分である。泳動の電圧及び時間は、それぞれ３０００Ｖ及び７分である。
ｃＩＥＦ材料及び方法－分析手順を、オートサンプラーを備えた市販のイメージングｃＩＥＦ分析装置で行う。分析は、外壁ポリイミドコーティングを有する１００μｍの内壁コーティングシリカキャピラリを使用する。更に、希リン酸及びメチルセルロースの分析物溶液、水酸化ナトリウム及びメチルセルロースのカソード液溶液、並びに所定の種類及び量の両性電解質が使用される。試験品をカルボキシペプチダーゼＢ（ＣＰＢ）で処理して、Ｃ末端リシンを除去し、各荷電種について複数のＣ末端変異体の存在によって導入される曖昧さを排除する。機器のオートサンプラーを、予備泳動及び泳動の両方について４℃に設定する。予備泳動の電圧及び時間は、それぞれ１５００Ｖ及び１分である。泳動の電圧及び時間は、それぞれ３０００Ｖ及び７分である。
【0135】
ｃＩＥＦの結果は安定性と一致する
主ピーク－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に３７～８７％の主ピークを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に４７～８７％の主ピークを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５７～８７％の主ピークを有することとして定義される。
主ピーク－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に３７～８７％の主ピークを有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に４７～８７％の主ピークを有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に５７～８７％の主ピークを有することとして定義される。
【0136】
酸性ピークの合計－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～６０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～５０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計１０～４０％の酸性ピークの合計を有することとして定義される。
【0137】
塩基性ピークの合計－一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１２．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約１０．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に合計約８．０％以下の塩基性ピークの合計を有することとして定義される。
【0138】
分析試験－量
Ａ２８０によるタンパク質濃度
医薬品のタンパク質濃度を、２８０ｎｍでの吸光度の定量（Ａ２８０）によって決定する。
Ａ２８０によるタンパク質濃度
医薬品のタンパク質濃度を、２８０ｎｍでの吸光度の定量（Ａ２８０）によって決定する。
【0139】
Ａ２８０によるタンパク質濃度材料及び方法
タンパク質濃度の測定を、適格で較正されたダブルビームＵＶ－Ｖｉｓ分光光度計を用いて行う。０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌを用いて試験品を１：１２５に希釈する。試料を、１ｃｍの経路長及び黒色面又は艶消し面を有する石英セミマイクロキュベット（１．４ｍＬ）を用いて測定する。分光光度計は、波長２８０ｎｍ、スリット幅１ｎｍ、１秒の応答に設定されている。０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌをブランク対照として使用する。タンパク質濃度（ｍｇ／ｍＬ）は、試験品の吸光度と希釈係数との積を、抗体の吸光係数と機器の経路長（例えば、限定されるものではないが、アミバンタマブの吸光係数１．４０（ｍｇ／ｍＬ）－１ｃｍ－１と機器の経路長１ｃｍ）との積で除算することによって計算される。
タンパク質濃度の測定を、適格で較正されたダブルビームＵＶ－Ｖｉｓ分光光度計を用いて行う。０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌを用いて試験品を１：１２５に希釈する。試料を、１ｃｍの経路長及び黒色面又は艶消し面を有する石英セミマイクロキュベット（１．４ｍＬ）を用いて測定する。分光光度計は、波長２８０ｎｍ、スリット幅１ｎｍ、１秒の応答に設定されている。０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌをブランク対照として使用する。タンパク質濃度（ｍｇ／ｍＬ）は、試験品の吸光度と希釈係数との積を、抗体の吸光係数と機器の経路長（例えば、限定されるものではないが、アミバンタマブの吸光係数１．４０（ｍｇ／ｍＬ）－１ｃｍ－１と機器の経路長１ｃｍ）との積で除算することによって計算される。
【0140】
タンパク質濃度の結果はＤＰの安定性と一致する
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１２８～１９２ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１４４～１７６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５０ｍｇ／ｍＬ～１７０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。
一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１２８～１９２ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１４４～１７６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５０ｍｇ／ｍＬ～１７０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を有することとして定義される。
【0141】
分析試験－効力
効力（上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）結合）
医薬品のＥＧＦＲへのインビトロ結合を、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイフォーマットを使用して実証する。この手順では、様々な濃度の非標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体試料が、アクセプターフルオロフォア（Ｃｙ５）標識ＥＧＦＲ抗原への結合について、ドナーフルオロフォア（ユーロピウム（Ｅｕ）キレート）標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と競合する。ドナーフルオロフォアの励起は、結合したアクセプターフルオロフォアへのエネルギーの移動をもたらす（ＦＲＥＴプロセス）。得られたＦＲＥＴを、時間分解蛍光を測定することができるマイクロプレートリーダーを使用して、６６５ｎｍでの光の放出によって検出する。試料用量反応曲線をＲＭと比較する。
効力（上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）結合）
医薬品のＥＧＦＲへのインビトロ結合を、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイフォーマットを使用して実証する。この手順では、様々な濃度の非標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体試料が、アクセプターフルオロフォア（Ｃｙ５）標識ＥＧＦＲ抗原への結合について、ドナーフルオロフォア（ユーロピウム（Ｅｕ）キレート）標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と競合する。ドナーフルオロフォアの励起は、結合したアクセプターフルオロフォアへのエネルギーの移動をもたらす（ＦＲＥＴプロセス）。得られたＦＲＥＴを、時間分解蛍光を測定することができるマイクロプレートリーダーを使用して、６６５ｎｍでの光の放出によって検出する。試料用量反応曲線をＲＭと比較する。
【0142】
ＥＧＦＲ結合材料及び方法。Ｃ末端Ｈｉｓタグを有する組換えヒトＥＧＦＲ／ＥｒｂＢ１／ＨＥＲ１である認証された市販のＥＧＦＲを、認証された市販のＣｙ５ Ｍｏｎｏ ＮＨＳ Ｅｓｔｅｒと反応させて、Ｃｙ５標識ＥＧＦＲを生成する。検証済みの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を、認証された市販のユーロピウム（Ｅｕ）キレートと反応させて、Ｅｕ標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を生成する。二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体参照材料（ＲＭ）、アッセイ対照及び試験品の連続希釈物を、同じアッセイプレート上で並行して試験する。Ｅｕ標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を各ＲＭ、アッセイ対照、及び試験品に添加した後、アッセイプレートを穏やかに振盪する。次いで、Ｃｙ５－ＥＧＦＲを同様に添加し、アッセイプレートを再び穏やかに振盪し、暗所で４±１時間インキュベートする。次いで、蛍光を６６５ｎｍで分光測光法によって測定し、抗体濃度に対してプロットし、４パラメータロジスティックモデルによって分析する。最大蛍光応答の半分を得るのに必要な抗体濃度（ＥＣ５０）を、ＲＭ、アッセイ対照及び試料について決定する。アッセイ対照及び試料の効力を、試料（又は対照）とＲＭ ＥＣ５０値との比に基づいて計算し、ＲＭに対する活性パーセンテージとして報告する。
【0143】
ＥＧＦＲ結合活性の結果は安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して５０％～１５０％の結合活性として定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して６０％～１４０％の結合活性として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して約８０％～１２０％の範囲の結合活性として定義される。
【0144】
効力（ｃＭｅｔ結合）
ｃ－ＭＥＴへの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体のインビトロ結合を、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイフォーマットを用いて実証する。この手順では、様々な濃度の非標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体試料が、アクセプターフルオロフォア（Ｃｙ５）標識ｃ－ＭＥＴ抗原への結合について、ドナーフルオロフォア（ユーロピウム（Ｅｕ）キレート）標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と競合する。ドナーフルオロフォアの励起は、結合したアクセプターフルオロフォアへのエネルギーの移動をもたらす（ＦＲＥＴプロセス）。得られたＦＲＥＴを、時間分解蛍光を測定することができるマイクロプレートリーダーを使用して、６６５ｎｍでの光の放出によって検出する。試料用量反応曲線を参照材料（ＲＭ）と比較する。
ｃ－ＭＥＴへの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体のインビトロ結合を、均一競合時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイフォーマットを用いて実証する。この手順では、様々な濃度の非標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体試料が、アクセプターフルオロフォア（Ｃｙ５）標識ｃ－ＭＥＴ抗原への結合について、ドナーフルオロフォア（ユーロピウム（Ｅｕ）キレート）標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体と競合する。ドナーフルオロフォアの励起は、結合したアクセプターフルオロフォアへのエネルギーの移動をもたらす（ＦＲＥＴプロセス）。得られたＦＲＥＴを、時間分解蛍光を測定することができるマイクロプレートリーダーを使用して、６６５ｎｍでの光の放出によって検出する。試料用量反応曲線を参照材料（ＲＭ）と比較する。
【0145】
ｃ－ＭＥＴ結合材料及び方法。ｃ末端Ｈｉｓタグを有する組換えｃＭｅｔ／ＨＧＦＲである認証された市販のｃＭｅｔを、認証された市販のＣｙ５ Ｍｏｎｏ ＮＨＳ Ｅｓｔｅｒと反応させて、Ｃｙ５標識ｃ－ＭＥＴを生成する。検証済みの二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を、認証された市販のユーロピウム（Ｅｕ）キレートと反応させて、Ｅｕ標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を生成する。二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体ＲＭ、アッセイ対照及び試験品の連続希釈物を、同じアッセイプレート上で並行して試験する。Ｅｕ標識二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体を各ＲＭ、アッセイ対照、及び試験品に添加した後、アッセイプレートを穏やかに振盪する。次いで、Ｃｙ５－ｃ－ＭＥＴを同様に添加し、アッセイプレートを再び穏やかに振盪し、暗所で４±１時間インキュベートする。次いで、蛍光を６６５ｎｍで分光測光法によって測定し、抗体濃度に対してプロットし、４パラメータロジスティックモデルによって分析する。最大蛍光応答の半分を得るのに必要な抗体濃度（ＥＣ５０）を、ＲＭ、アッセイ対照及び試料について決定する。アッセイ対照及び試料の効力を、試料（又は対照）とＲＭ ＥＣ５０値との比に基づいて計算し、ＲＭに対する活性パーセンテージとして報告する。
【0146】
ｃＭｅｔ結合活性の結果は安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して約５０％～約１５０％の範囲の結合活性として定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して約６０％～１４０％の範囲の結合活性として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の、参照材料と比較して約８０％～約１２０％の範囲の結合活性として定義される。
【0147】
効力ｒＨｕＰＨ２０活性
インビトロでのｒＨｕＰＨ２０ヒアルロニダーゼ酵素活性は、ｒＨｕＰＨ２０の基質であるヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合した場合の濁度を測定することによって決定される。ヒアルロニダーゼ活性の決定は、ヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合したときの沈殿物の形成に基づく。ヒアルロニダーゼをＨＡで３０分、９６ウェルプレート形式で３７℃にて培養した後、酸性化した血清を添加して未消化ＨＡを沈殿させることにより活性を測定する。得られた濁度は、６４０ｎｍで測定し、ＨＡ基質の酵素的開裂に起因する濁度の低下は、ヒアルロニダーゼ活性の尺度である。
インビトロでのｒＨｕＰＨ２０ヒアルロニダーゼ酵素活性は、ｒＨｕＰＨ２０の基質であるヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合した場合の濁度を測定することによって決定される。ヒアルロニダーゼ活性の決定は、ヒアルロン酸（ＨＡ）が酸性化血清と結合したときの沈殿物の形成に基づく。ヒアルロニダーゼをＨＡで３０分、９６ウェルプレート形式で３７℃にて培養した後、酸性化した血清を添加して未消化ＨＡを沈殿させることにより活性を測定する。得られた濁度は、６４０ｎｍで測定し、ＨＡ基質の酵素的開裂に起因する濁度の低下は、ヒアルロニダーゼ活性の尺度である。
【0148】
ｒＨｕＰＨ２０活性材料及び方法
アッセイ方法は、注射用の米国薬局方モノグラフＵＳＰ２９－ＮＦ２４ヒアルロニダーゼに基づく。標準的な試薬としては、５００ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ３．１）、１００ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ３．１）、灌水用滅菌水（ＳＷＦＩ）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）２５％（ＮＤＣ＃６８２０９－６４３－０２）、ウマ血清、５０ｍｇ／ｍＬのヒアルロン酸ナトリウム、及びｒＨｕＰＨ２０が挙げられる。アッセイ特異的試薬を以下の表１に列挙する。酵素希釈剤、ウマ血清使用液（２．８％）、及び０．７ｍｇ／ｍＬのＨＡ基質をアッセイの当日に調製する。ＨＡ基質チューブは、使用準備ができるまで２～８℃で保存する。
アッセイ方法は、注射用の米国薬局方モノグラフＵＳＰ２９－ＮＦ２４ヒアルロニダーゼに基づく。標準的な試薬としては、５００ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ３．１）、１００ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ３．１）、灌水用滅菌水（ＳＷＦＩ）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）２５％（ＮＤＣ＃６８２０９－６４３－０２）、ウマ血清、５０ｍｇ／ｍＬのヒアルロン酸ナトリウム、及びｒＨｕＰＨ２０が挙げられる。アッセイ特異的試薬を以下の表１に列挙する。酵素希釈剤、ウマ血清使用液（２．８％）、及び０．７ｍｇ／ｍＬのＨＡ基質をアッセイの当日に調製する。ＨＡ基質チューブは、使用準備ができるまで２～８℃で保存する。
【0149】
【表1】
【0150】
アッセイ及び試料の調製
アッセイ開始前に、空の９６ウェル反応プレートを、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒに入れ、１５℃に設定し、最低３０分間平衡化させる。また、ヒートブロックを３７℃のインキュベータに入れ、酵素反応を開始する前に少なくとも２時間にわたり適切な温度で平衡化させる。
アッセイ開始前に、空の９６ウェル反応プレートを、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒに入れ、１５℃に設定し、最低３０分間平衡化させる。また、ヒートブロックを３７℃のインキュベータに入れ、酵素反応を開始する前に少なくとも２時間にわたり適切な温度で平衡化させる。
【0151】
２，０００Ｕ／ｍＬの予想したｒＨｕＰＨ２０活性を有する試験試料を、酵素希釈剤で９．３Ｕ／ｍＬに希釈する。ｒＨｕＰＨ２０対照及び希釈した試験試料のアリコートを９６ウェル転写プレートに充填する。別個の希釈プレートにおいて、指定された体積の酵素希釈剤を指定されたウェルに等分する。ＷＲＳを指定されたウェルに三連で等分し、次いで、酵素希釈剤を含有する指定されたウェルで段階希釈する。これらのウェルからのデータを使用して、６点較正曲線を生成する。固定体積のｒＨｕＰＨ２０対照及び希釈された試料を、トランスファープレートから希釈プレート中の指定されたウェルに二連で移す。
【0152】
酵素反応
ＨＡ基質溶液を２～８℃の保存から取り出し、３～４回の反転によって穏やかに混合する。Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒ中で平衡化した９６ウェル反応プレートを１５℃に維持しながら、固定体積のＨＡ基質溶液を、希釈プレートの対応するウェル位置へと等分する。次いで、希釈プレートからの標準、対照及び試料を、希釈プレートの対応するウェル位置へと移す。次いで、１５℃のＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒを使用して、反応プレートを９００ｒｐｍで１０秒間混合する。反応プレートをＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒから取り出し、プレートの蓋を反応プレート上に置き、直ちに３７℃インキュベータ内のプレインキュベートしたヒートブロックへと移す。反応プレートを３７℃で３０±５分間インキュベートする。
ＨＡ基質溶液を２～８℃の保存から取り出し、３～４回の反転によって穏やかに混合する。Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒ中で平衡化した９６ウェル反応プレートを１５℃に維持しながら、固定体積のＨＡ基質溶液を、希釈プレートの対応するウェル位置へと等分する。次いで、希釈プレートからの標準、対照及び試料を、希釈プレートの対応するウェル位置へと移す。次いで、１５℃のＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒを使用して、反応プレートを９００ｒｐｍで１０秒間混合する。反応プレートをＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒから取り出し、プレートの蓋を反応プレート上に置き、直ちに３７℃インキュベータ内のプレインキュベートしたヒートブロックへと移す。反応プレートを３７℃で３０±５分間インキュベートする。
【0153】
反応及び発生の停止
３７℃でのインキュベーションが完了したら、覆われた反応プレートをインキュベータから取り出し、直ちに、覆われたプレートをアイスバケット内の新たに分注された氷へと押し込み、タイマーを２分間で開始する。２分間のインキュベーションの間、プレートを触れないままにする。２分後、プレートの底部を拭き取りして（例えば、キムワイプ）、あらゆる結露又は水を除去し、反応プレートを１５℃のＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒに移す。Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒの蓋を上に置き、１５℃で１０分間インキュベートする。
３７℃でのインキュベーションが完了したら、覆われた反応プレートをインキュベータから取り出し、直ちに、覆われたプレートをアイスバケット内の新たに分注された氷へと押し込み、タイマーを２分間で開始する。２分間のインキュベーションの間、プレートを触れないままにする。２分後、プレートの底部を拭き取りして（例えば、キムワイプ）、あらゆる結露又は水を除去し、反応プレートを１５℃のＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒに移す。Ｔｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒの蓋を上に置き、１５℃で１０分間インキュベートする。
【0154】
１０分後、直ちにＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒの蓋を取り外し、固定体積のウマ血清使用液を各ウェルへと等分する。次いで、プレートをＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒの蓋で覆い、１５℃で２０±５分間でタイマーを開始する。２０±５分間のインキュベーション後、反応プレートを１５℃のＴｈｅｒｍｏ－ｍｉｘｅｒから９６ウェルプレートリーダーに移す。次いで、試料の光学密度を６４０ｎｍで測定する。
【0155】
データ解析
段階希釈したＷＲＳ試料の既知のｒＨｕＰＨ２０活性（Ｕ／ｍＬ）値を、それらの対応する測定光学密度（ＯＤ）値に対してプロットし、曲線適合式を得る。９６ウェルプレートのウェル中の各試料希釈物のｒＨｕＰＨ２０活性を、個々のＯＤ値、及び参照材料曲線から得られた曲線適合式を用いることによって計算する。
段階希釈したＷＲＳ試料の既知のｒＨｕＰＨ２０活性（Ｕ／ｍＬ）値を、それらの対応する測定光学密度（ＯＤ）値に対してプロットし、曲線適合式を得る。９６ウェルプレートのウェル中の各試料希釈物のｒＨｕＰＨ２０活性を、個々のＯＤ値、及び参照材料曲線から得られた曲線適合式を用いることによって計算する。
【0156】
ｒＨｕＰＨ２０活性の結果はＤＰの安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１０００Ｕ／ｍＬ～３０００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１５００Ｕ／ｍＬ～２５００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に１８００Ｕ／ｍＬ～２２００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０活性を有することとして定義される。
【0157】
分析試験－界面活性剤
ポリソルベート８０の定量
ポリソルベート８０を、混合モードイオン交換／疎水性ＨＰＬＣによって定量的に測定する。
ポリソルベート８０の定量
ポリソルベート８０を、混合モードイオン交換／疎水性ＨＰＬＣによって定量的に測定する。
【0158】
ＰＳ８０材料及び方法。分析を、３０μｍの水湿潤性混合モードポリマー球状吸着剤粒子、ＥＬＳＤ、及び３０℃の温度制御されたカラム区画を含有する２．１×２０ｍｍオンラインカラムを備えた勾配ＨＰＬＣで行う。流速を１ｍＬ／分に設定し、ＥＬＳＤ蒸発器温度を５０℃に設定する。移動相Ａは、水中２％ｖ／ｖギ酸であり、移動相Ｂは、イソプロピルアルコール中２％ｖ／ｖギ酸である。未希釈のポリソルベート８０を使用して、較正標準及びチェック標準を作成する。試験品試料を未希釈で注射する。
【0159】
ポリソルベート８０の結果はＤＰの安定性と一致する。一実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０３～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０４～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。最も好ましい実施形態では、ＤＰの安定性は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後の０．０５～０．０８％のＰＳ８０濃度として定義される。
【0160】
分析試験－ルーチン特性評価
ペプチドマップ
この試験の目的は、抗体構造中に存在し得る酸化、脱アミド化、及び異性化などの翻訳後修飾のレベルを測定することである。試験品を酵素消化してペプチドセグメントを得る。次いで、これらのペプチドを、超高速液体クロマトグラフィー質量分析（ＵＰＬＣ－ＭＳ）によって評価する。分析した各ペプチド配列を、抗体構造全体の中のその既知の位置に対して同定する。同定したペプチド配列の測定質量をその予想質量と比較することによって、翻訳後修飾を測定する。
ペプチドマップ
この試験の目的は、抗体構造中に存在し得る酸化、脱アミド化、及び異性化などの翻訳後修飾のレベルを測定することである。試験品を酵素消化してペプチドセグメントを得る。次いで、これらのペプチドを、超高速液体クロマトグラフィー質量分析（ＵＰＬＣ－ＭＳ）によって評価する。分析した各ペプチド配列を、抗体構造全体の中のその既知の位置に対して同定する。同定したペプチド配列の測定質量をその予想質量と比較することによって、翻訳後修飾を測定する。
【0161】
ペプチドマッピング材料及び方法。試料を６Ｍグアニジン、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ８．０、５ｍＭ ＥＤＴＡで変性させ、３０ｋＤａ遠心フィルタ装置を使用して濾過する（フロースルー廃棄）。変性した試料を１Ｍジチオスレイトール（ＤＴＴ）で還元し、続いて１Ｍヨード酢酸ナトリウムでアルキル化し、更にＤＴＴで処理して反応をクエンチする。反応混合物を、ブランク、参照材料、及び試験品に使用される別個のカラムを有するＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５カラムを介して消化緩衝液（１ｍＭ ＣａＣｌ２を含む５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．０）に交換する。１ｍｇ／ｍＬトリプシンストック溶液のアリコートを消化緩衝液中の試料に添加して、２０μＬ／ｍＬトリプシン濃度を得る。溶液を３７℃で２時間±３０分間インキュベートする。トリプシン処理した溶液を室温に冷却し、酵素をトリフルオロ酢酸で不活性化する。処理した試料を、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ（エチレン架橋ハイブリッド）Ｃ１８、２．１×１００ｍｍ、１．７μｍ、１３０Åカラム及び付属のオートサンプラーを備えた超高速液体クロマトグラフィー質量分析（ＵＰＬＣ－ＭＳ）によって評価する。移動相Ａは水中０．１％ギ酸であり、移動相Ｂはアセトニトリル中０．１％ＦＡ（移動相Ｂ）である。オートサンプラーを２～８℃に設定し、カラムを４０℃に設定し、流速を５００μＬ／分に設定する。溶出したペプチドをエレクトロスプレーイオン化に供し、較正オンライン質量分析を使用して検出した。
【0162】
実施例１：製剤スクリーニング研究
様々なｐＨ値、製剤化緩衝液種、及び緩衝液濃度で製剤化された高濃度（１７５ｍｇ／ｍＬ）アミバンタマブの安定性傾向を評価するために、２つの製剤スクリーニング研究を行った。
様々なｐＨ値、製剤化緩衝液種、及び緩衝液濃度で製剤化された高濃度（１７５ｍｇ／ｍＬ）アミバンタマブの安定性傾向を評価するために、２つの製剤スクリーニング研究を行った。
【0163】
研究１
第１の研究では、固定値に保持された他の全ての製剤成分を有する一定範囲のｐＨ値及び対応する緩衝液種からなる試験製剤を評価した。（表２）。
第１の研究では、固定値に保持された他の全ての製剤成分を有する一定範囲のｐＨ値及び対応する緩衝液種からなる試験製剤を評価した。（表２）。
【0164】
【表2】
【0165】
試験製剤を通常（５℃）安定性条件及びストレス（４０℃）安定性条件下において３週間保持した。次いで、試験製剤をＳＥＣによってアッセイして、試験製剤ごとに観察された凝集体、モノマー、及びフラグメントのパーセントを評価した。
【0166】
以下の表３に示すように、ｐＨ値の増加は、通常（５℃）安定性条件及びストレス（４０℃）安定性条件の両方で凝集体％の増加と一般に相関していた。予想通り、凝集値はストレス条件下において大きかった。全体として、製剤３及び製剤４は、製剤１及び製剤２に対して性能が劣っていた。したがって、高ｐＨ製剤及びリン酸緩衝液は、更なる開発のために考慮されなかった。
【0167】
通常の条件下において、製剤１及び製剤２は両方とも、製剤２よりわずかに低い凝集を示す製剤１を有する安定な製剤と一致する同様の結果を呈した。しかしながら、ストレスを受けた条件下では、製剤２は、フラグメントの増加にもかかわらず、最も少ない凝集を呈した。凝集体とフラグメントとの間の一見同等なトレードオフに基づいて、低ｐＨ値での酢酸及びヒスチジン緩衝液の両方を更なる評価のために検討した。
【0168】
【表3】
【0169】
研究２
第２の研究では緩衝液濃度を評価した。ｐＨ５．６のヒスチジン緩衝液を代表的な低ｐＨ製剤として選択した。他の全ての製剤化成分は固定値に保持された（表４）。
第２の研究では緩衝液濃度を評価した。ｐＨ５．６のヒスチジン緩衝液を代表的な低ｐＨ製剤として選択した。他の全ての製剤化成分は固定値に保持された（表４）。
【0170】
【表4】
【0171】
試験製剤をストレス（４０℃）安定性条件下において３週間保持した。次いで、試験製剤をＳＥＣによってアッセイして、試験製剤ごとに観察された凝集体、モノマー、及びフラグメントのパーセントを評価した。
【0172】
以下の表５に示すように、緩衝液濃度の増加は凝集体％の減少と相関していた。したがって、ある範囲の緩衝液濃度を有する製剤が、更なる評価のために考慮される。
【0173】
【表5】
【0174】
実施例２：高濃度安定性試験
様々な緩衝液濃度及び種を有する３つの高タンパク質濃度製剤を評価するために安定性試験を実施した（以下の表６を参照されたい）。試験製剤は、推奨条件（５℃）、加速条件（２５℃）、及びストレス条件（４０℃）で最大６ヶ月まで保持した。
様々な緩衝液濃度及び種を有する３つの高タンパク質濃度製剤を評価するために安定性試験を実施した（以下の表６を参照されたい）。試験製剤は、推奨条件（５℃）、加速条件（２５℃）、及びストレス条件（４０℃）で最大６ヶ月まで保持した。
【0175】
【表6】
【0176】
３つの試験製剤を、アミバンタマブの５０ｍｇ／ｍＬストック製剤から調製した。ストック製剤をタンジェント流濾過（ＴＦＦ）によって濃縮し、緩衝液を限外濾過／透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）によって交換した。試験製剤を１５．６ｍＬの充填体積で３０Ｒバイアルに等分した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。バイアルを、推奨条件（５℃）、加速条件（２５℃）、及びストレス（４０℃）条件下において安定した場所に置いた。指定された時点で、試料を採取し、アッセイする。
【0177】
試験結果
推奨条件下、加速条件下、及びストレス条件下で保持された試験製剤の安定性結果を、以下の表７、表８、及び表９に列挙する。開始時（Ｔ＝０）及び研究を通して、製剤３の測定されたｐＨ値はその目標値と一致しないことが認められた。製剤３の試料を酢酸濃度についてアッセイし、３０ｍＭであると報告した。ｐＨ及び酢酸濃度のシフトはギブス・ドナン効果の結果であり、その大きさは、高いタンパク質濃度、タンパク質のｐＩ、及び使用される透析濾過緩衝液のｐＨによって影響された。したがって、製剤３の実際の組成は、３０ｍＭ酢酸中１６０ｍｇ／ｍＬアミバンタマブ、８．５％スクロース、１ｍｇ／ｍＬメチオニン、２０μｇ／ｍＬ ＥＤＴＡ、０．０６％ＰＳ－８０、ｐＨ５．７であった。
推奨条件下、加速条件下、及びストレス条件下で保持された試験製剤の安定性結果を、以下の表７、表８、及び表９に列挙する。開始時（Ｔ＝０）及び研究を通して、製剤３の測定されたｐＨ値はその目標値と一致しないことが認められた。製剤３の試料を酢酸濃度についてアッセイし、３０ｍＭであると報告した。ｐＨ及び酢酸濃度のシフトはギブス・ドナン効果の結果であり、その大きさは、高いタンパク質濃度、タンパク質のｐＩ、及び使用される透析濾過緩衝液のｐＨによって影響された。したがって、製剤３の実際の組成は、３０ｍＭ酢酸中１６０ｍｇ／ｍＬアミバンタマブ、８．５％スクロース、１ｍｇ／ｍＬメチオニン、２０μｇ／ｍＬ ＥＤＴＡ、０．０６％ＰＳ－８０、ｐＨ５．７であった。
【0178】
５℃での安定性
３つの製剤は全て、経時的に属性値の変化をほとんど示さなかった。観察された変化はいずれもわずかであり、５℃で経時的なタンパク質分解と一致し、全ての製剤にわたって同様の大きさであった。
３つの製剤は全て、経時的に属性値の変化をほとんど示さなかった。観察された変化はいずれもわずかであり、５℃で経時的なタンパク質分解と一致し、全ての製剤にわたって同様の大きさであった。
【0179】
２５℃での安定性
３つの製剤は全て、２５℃での経時的なタンパク質分解と一致する経時的な属性値のわずかから最小の変化を示し、ｃＩＥＦ属性値を除く全ての製剤にわたって同様の大きさの変化が観察された。全ての製剤は、酸性ピークの合計％で経時的に安定した増加を示し、主ピーク％で対応する減少を示した。経時変化の大きさは製剤２及び製剤３について同様であったが、一方でその大きさは製剤１について著しく大きかった。
３つの製剤は全て、２５℃での経時的なタンパク質分解と一致する経時的な属性値のわずかから最小の変化を示し、ｃＩＥＦ属性値を除く全ての製剤にわたって同様の大きさの変化が観察された。全ての製剤は、酸性ピークの合計％で経時的に安定した増加を示し、主ピーク％で対応する減少を示した。経時変化の大きさは製剤２及び製剤３について同様であったが、一方でその大きさは製剤１について著しく大きかった。
【0180】
４０℃での安定性
３つの製剤は全て、４０℃で最大６ヶ月間の経時的なタンパク質分解と一致して、経時的な属性値の顕著な変化を示した。しかしながら、いくつかの属性について、変化の大きさは製剤２又は製剤３よりも製剤１の方が大きかった。
３つの製剤は全て、４０℃で最大６ヶ月間の経時的なタンパク質分解と一致して、経時的な属性値の顕著な変化を示した。しかしながら、いくつかの属性について、変化の大きさは製剤２又は製剤３よりも製剤１の方が大きかった。
【0181】
全ての製剤のｃＩＥＦデータは、酸性ピークの合計％の着実な増加及び対応する主ピーク％の減少を示した。しかしながら、経時的な変化の大きさは、製剤２又は製剤３よりも製剤１の方が著しく大きく、特にＴ＝０～３ヶ月間及び３～６ヶ月間が大きかった。
【0182】
この傾向はまたＳＥＣでも見られ、全ての製剤がＨＭＷＳ％ピークの着実な増加、及びそれに対応する主成分％の減少を示した。しかし、ｃＩＥＦデータと同様に、増加の大きさは製剤２及び製剤３について同様であり、製剤１について著しく大きかった。
【0183】
製剤２及び製剤３のカラースコアリングは、経時的なＢ、ＢＹ、及びＹカラースコアリングのわずかながらも顕著な増加を示した。対照的に、製剤１は、６ヶ月の試料が最大のＢ、ＢＹ、及びＹカラースコアを受け取ると、経時的にカラースコアリングの急速な増加を示した。
【0184】
製剤２及び製剤３について、６ヶ月間にわたってｐＨの変化は観察されなかった。しかしながら、製剤１は、３～６ヶ月間でｐＨの著しい低下を示した。
【0185】
５℃、２５℃、４０℃で３ヶ月保持した後の翻訳後修飾
５℃、２５℃、及び４０℃におけるＴ＝０及び３Ｍでの翻訳後修飾を、表１０～表１１に示す。５℃及び２５℃では、３つの製剤全てが、それぞれ、Ｔ＝０に対する属性値の変化をほとんど又はわずかから最小まで示した。所与の温度内で、変化の大きさは全ての製剤にわたって同様であり、それらの温度での経時的なタンパク質分解と一致した。
５℃、２５℃、及び４０℃におけるＴ＝０及び３Ｍでの翻訳後修飾を、表１０～表１１に示す。５℃及び２５℃では、３つの製剤全てが、それぞれ、Ｔ＝０に対する属性値の変化をほとんど又はわずかから最小まで示した。所与の温度内で、変化の大きさは全ての製剤にわたって同様であり、それらの温度での経時的なタンパク質分解と一致した。
【0186】
４０℃で、Ｔ＝０に対して抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ａｓｎ ３３３／抗ｃ－Ｍｅｔ ＨＣ Ａｓｎ ３２７及び抗ｃ－Ｍｅｔ ＨＣ Ａｓｎ ５５、５９での脱アミド化の著しい増加が観察された。抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ａｓｐ ９９の異性化における同様の傾向が観察された。脱アミド化及び異性化の増加の大きさは、３つの製剤全てで同様であった。
【0187】
また、４０℃では、製剤２及び製剤３は、４０℃での経時的なタンパク質分解と一致して、Ｔ＝０に対する酸化値の顕著な変化を示した。しかしながら、製剤１は、抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ｍｅｔ １０３、抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ｍｅｔ １０８、抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ｍｅｔ ２６０／抗ｃ－Ｍｅｔ ＨＣ Ｍｅｔ ２５４、抗ＥＧＦＲ ＨＣ Ｍｅｔ ４３６／抗ｃ－Ｍｅｔ ＨＣ Ｍｅｔ ４３０、及び抗ｃ－Ｍｅｔ ＬＣ Ｔｒｐ ３２、Ｔｒｐ ３５について、酸化対製剤２及び製剤３の大きさ、並びにその対応するＴ＝０値の顕著な増加を示した。
【0188】
考察及び結論
試験を通して、製剤１は、製剤２及び製剤３に対して安定性属性の減少を示した。加速温度でのｐＨの変化は、製剤１（１０ｍＭヒスチジン）が、高濃度（１６０ｍｇ／ｍＬ）ではアミバンタマブの緩衝能が低いことを示唆した。
試験を通して、製剤１は、製剤２及び製剤３に対して安定性属性の減少を示した。加速温度でのｐＨの変化は、製剤１（１０ｍＭヒスチジン）が、高濃度（１６０ｍｇ／ｍＬ）ではアミバンタマブの緩衝能が低いことを示唆した。
【0189】
製剤２及び製剤３は、試験の経過にわたって同様の安定性プロファイルを示した。しかしながら、全ての試験時点及び温度で、製剤２はわずかに乳白色の液体として見えたが、製剤３は透明な液体として見えた。同様に、製剤３は、試験全体を通して製剤２よりも低い濁度値を示した。
【0190】
【表7】
【0191】
【表8】
【0192】
【表9】
【0193】
【表10】
【0194】
【表11】
【0195】
【表12】
【0196】
【表13】
【0197】
【表14】
【0198】
実施例３：ポリソルベート濃度範囲の振盪及び凍結融解試験
この試験は、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスからアミバンタマブを安定化させるポリソルベート８０（ＰＳ８０）濃度の範囲を決定するために行う。この試験はまた、５℃で１２ヶ月間保存した後のポリソルベート８０の保護特性を評価する。
この試験は、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスからアミバンタマブを安定化させるポリソルベート８０（ＰＳ８０）濃度の範囲を決定するために行う。この試験はまた、５℃で１２ヶ月間保存した後のポリソルベート８０の保護特性を評価する。
【0199】
試験製剤バイアルの複数の同一のセットを作製する。各セットは、目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値より低い、目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値である、及び目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値より高い濃度のポリソルベート８０を含有する、試験製剤の各々のバイアルを２つ含む。セットはまた、ＰＳ８０を含有しない試験製剤対照バイアルを含む。他の全ての製剤成分は一定に保たれる（１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸、８．５％のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのメチオニン、２０μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ｐＨ５．７）。製剤を８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積まで分注し、栓をし、キャップをし、クリンプシールする。
【0200】
一般的な試験ベースラインデータを確立するために、１セットのバイアルを試験開始時に試験し、未処理の時間０対照（Ｔ＝０）として供する。
【0201】
機械的ストレス及び界面ストレスに対するポリソルベート８０の安定化効果を評価するために、１セットのバイアルをオービタルシェーカ上に水平に置き、周囲室温及び明条件下において約２５０ｒｐｍで最大７２時間にわたり振盪する（Ｔ７２ｈ振盪）。同じ時間の間、バイアルの第２の対応する振盪していない対照セットを、周囲室及び明条件で垂直に保持する（Ｔ７２ｈ対照）。
【0202】
エイジングしたポリソルベート８０の機械的ストレス及び界面ストレスに対する安定化効果を評価するために、２セットのバイアルを５℃で１２ヶ月間保持する。上述の方法を用いて、一方のセットを最大７２時間にわたり振盪し（Ｔ１２ｍ Ｔ７２ｈ振盪）、他方のセットを対照として保持する（Ｔ１２ｍ Ｔ７２ｈ対照）。
【0203】
凍結／融解ストレスに対するポリソルベート８０の安定化効果を評価するために、１セットのバイアルを、１サイクルが－７０℃への凍結、それに続く周囲室温での受動的融解と定義された５回の凍結／融解サイクル（５×ＦＴ）に供する。
【0204】
全ての試験試料を、色、ｐＨ、濁度、粒子状物質（肉眼では見えない）、タンパク質濃度（Ａ２８０）、ＳＥ－ＨＰＬＣ、ｃＳＤＳ（還元型）、ｃＳＤＳ（非還元型）、ｃＩＥＦ、ＰＳ８０、効力（ＥＧＦＲ）、効力（ｃＭＥＴ）によって安定性について評価する。
【0205】
振盪されたＰＳ８０なしの対照試料は、凝集体の検出の増加を含む撹拌誘発性分解の存在と一致する、属性値プロファイルを示すことが予想される。また、非常に低レベルのＰＳ８０を含有する試料は、撹拌誘発性分解が、Ｔ＝０及び対応する振盪していない対照試料で見られる属性値プロファイルのすぐ上又はそれに等しい値の急激な減少を示すことが予想される。低レベル、標的レベル、及び高レベルのＰＳ８０を含有する試料は、Ｔ＝０及び対応する振盪していない対照試料と非常に類似した属性値プロファイルを呈することが更に予想される。このデータは、ＰＳ８０がアミバンタマブを機械的及び界面ストレスから安定化させる能力を実証している。
【0206】
振盪ストレス前に５℃で１２ヶ月間保持した試料についても同様の結果が予想される。また、凍結／融解ストレス後にも、Ｔ＝０対照と比較して属性値の実質的な差は予想されない。
【0207】
振盪ストレス下及び凍結／融解ストレス下の両方で、低ポリソルベート８０試料、目標ポリソルベート８０試料、及び高ポリソルベート８０試料の間で属性値に実質的な差はないものと予想される。これは、低濃度、標的濃度及び高濃度レベルのポリソルベート８０を用いて製剤化された安定なアミバンタマブが、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスに対して保護することを示している。
【0208】
振盪及び凍結／融解ストレスに対する加速条件下でエイジングした製剤を含有するポリソルベート８０の評価
本研究は、加速条件下において６ヶ月間エイジングさせた場合の、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスに対してポリソルベート８０とともに製剤化された、１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブの試験製剤を評価するために行われた。
本研究は、加速条件下において６ヶ月間エイジングさせた場合の、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスに対してポリソルベート８０とともに製剤化された、１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブの試験製剤を評価するために行われた。
【0209】
１０ｍＭ酢酸中の１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、８．５％スクロース、１ｍｇ／ｍＬのメチオニン、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、０．０６％ＰＳ－８０、ｐＨ５．１を、バイアル当たり１５．６ｍＬの充填体積で複数の複製３０Ｒバイアルへと等分した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。一般的な試験ベースラインデータを確立するために、１つの複製バイアルを試験開始時に試験し、時間０対照（Ｔ＝０）として供した。残りの複製バイアルを、加速（２５℃）条件で６ヶ月間安定した場所に置いた。
【0210】
機械的ストレス及び界面ストレスに対するエイジング製剤の安定性を評価するために、エイジングした複製バイアルをオービタルシェーカ上に水平に置き、周囲室温（＋振盪）下において、約２５０ｒｐｍで最大７２時間にわたり振盪した。
【0211】
凍結／融解ストレスに対するエイジング製剤の安定性を評価するために、エイジングした複製バイアルを、２４時間にわたる－７０℃への凍結として定義される１サイクルで、五（５）回の凍結／融解サイクル（５ｘＦＴ）に供し、続いて２４時間にわたる周囲室温で受動的に融解させた。
【0212】
残りのエイジングした複製バイアルを、振盪及び凍結／融解研究のための未処理対照として使用した。
【0213】
全ての試験試料を、色、ｐＨ、濁度、粒子状物質（肉眼では見えない）、タンパク質濃度（Ａ２８０）、ＳＥ－ＨＰＬＣ、ｃＳＤＳ（還元型）、ｃＳＤＳ（非還元型）、ｃＩＥＦ、ＰＳ８０、効力（ＥＧＦＲ）、効力（ｃＭＥＴ）によって安定性について評価した。
【0214】
試験結果を以下の表１１Ａに掲載する。加速条件下において６ヶ月間エイジングしたＴ＝０及び未処理対照試料の比較は、２５℃で６ヶ月間にわたるタンパク質分解と一致する属性値のわずかから最小までの変化を示した。特に注目すべきことに、全てのエイジング試料は、ＰＳ８０濃度の同等の減少（０．０４３～０．０４４％）対Ｔ＝０（０．０５８％）を示した。
【0215】
加速条件下において６ヶ月間エイジングした試料の比較は、振盪ストレス、反復凍結融解ストレス、又は未処理対照への曝露間に顕著な差を示さなかった。これは、０．０４％～０．０６％のポリソルベート８０濃度レベルで製剤化された１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブが、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスに対して保護することを実証している。
【0216】
【表15】
【0217】
【表16】
【0218】
実施例４：ｒＨｕＰＨ２０含有製剤中のポリソルベート濃度範囲の振盪及び凍結融解
この試験は、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスからｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブを安定化させる、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）濃度の範囲を決定するために行う。この試験はまた、５℃で１２ヶ月間保存した後のポリソルベート８０の保護特性を評価する。
この試験は、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスからｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブを安定化させる、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）濃度の範囲を決定するために行う。この試験はまた、５℃で１２ヶ月間保存した後のポリソルベート８０の保護特性を評価する。
【0219】
試験製剤バイアルの複数の同一のセットを作製する。各セットは、目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値より低い、目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値である、及び目標（０．０６％ｗ／ｖ）ＰＳ８０値より高い濃度のポリソルベート８０を含有する、試験製剤の各々のバイアルを２つ含む。セットはまた、ＰＳ８０を含有しない試験製剤対照バイアルを含む。他の全ての製剤成分を一定に保つ（１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸、８．５％のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのメチオニン、２０μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、２０００Ｕ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０、ｐＨ５．７）。製剤を８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積まで分注し、栓をし、キャップをし、クリンプシールする。
【0220】
一般的な試験ベースラインデータを確立するために、１セットのバイアルを試験開始時に試験し、未処理の時間０対照（Ｔ＝０）として供する。
【0221】
機械的ストレス及び界面ストレスに対するポリソルベート８０の安定化効果を評価するために、１セットのバイアルをオービタルシェーカ上に水平に置き、周囲室温及び明条件下において約２５０ｒｐｍで最大７２時間にわたり振盪する（Ｔ７２ｈ振盪）。同じ時間の間、バイアルの第２の対応する振盪していない対照セットを、周囲室及び明条件で垂直に保持する（Ｔ７２ｈ対照）。
【0222】
エイジングしたポリソルベート８０の機械的ストレス及び界面ストレスに対する安定化効果を評価するために、２セットのバイアルを５℃で１２ヶ月間保持する。上述の方法を用いて、一方のセットを最大７２時間にわたり振盪し（Ｔ１２ｍ Ｔ７２ｈ振盪）、他方のセットを対照として保持する（Ｔ１２ｍ Ｔ７２ｈ対照）。
【0223】
凍結／融解ストレスに対するポリソルベート８０の安定化効果を評価するために、１セットのバイアルを、１サイクルが－７０℃への凍結、それに続く周囲室温での受動的融解と定義された５回の凍結／融解サイクル（５×ＦＴ）に供する。
【0224】
全ての試験試料を、色、ｒＨｕＰＨ２０活性、ｐＨ、濁度、粒子状物質（肉眼では見えない）、タンパク質濃度（Ａ２８０）、ＳＥ－ＨＰＬＣ、ｃＳＤＳ（還元型）、ｃＳＤＳ（非還元型）、ｃＩＥＦ、ＰＳ８０、効力（ＥＧＦＲ）、効力（ｃＭＥＴ）によって安定性について評価する。振盪されたＰＳ８０なしの対照試料は、凝集体の検出の増加を含む撹拌誘発性分解の存在と一致する、属性値プロファイルを示すことが予想される。また、非常に低レベルのＰＳ８０を含有する試料は、撹拌誘発性分解が、Ｔ＝０及び対応する振盪していない対照試料で見られる属性値プロファイルのすぐ上又はそれに等しい値の急激な減少を示すことが予想される。低レベル、標的レベル、及び高レベルのＰＳ８０を含有する試料は、Ｔ＝０及び対応する振盪していない対照試料と非常に類似した属性値プロファイルを呈することが更に予想される。このデータは、ＰＳ８０がアミバンタマブを機械的及び界面ストレスから安定化させる能力を実証している。
【0225】
振盪ストレス前に５℃で１２ヶ月間保持した試料についても同様の結果が予想される。また、凍結／融解ストレス後にも、Ｔ＝０対照と比較して属性値の実質的な差は予想されない。
【0226】
振盪ストレス下及び凍結／融解ストレス下の両方で、低ポリソルベート８０試料、目標ポリソルベート８０試料、及び高ポリソルベート８０試料の間で属性値に実質的な差はないものと予想される。これは、低濃度、標的濃度及び高濃度レベルのポリソルベート８０を用いて製剤化された安定なアミバンタマブが、機械的ストレス、界面ストレス、及び凍結／融解ストレスに対して保護することを示している。
【0227】
実施例５：製剤の堅牢性の発現
研究デザイン
研究は、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で保持された二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体医薬品の製剤成分濃度レベルの多因子変動の効果を調べるために実施する。評価した製剤成分は、タンパク質濃度、酢酸濃度、スクロース濃度、ポリソルベート８０濃度、ＥＤＴＡ／メチオニン濃度、及びｐＨレベルである。試験された最低及び最高試験因子濃度値は、それぞれ、目標試験因子濃度値よりも約１０～４０％低い又は高い（表１２参照）。
研究デザイン
研究は、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で保持された二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体医薬品の製剤成分濃度レベルの多因子変動の効果を調べるために実施する。評価した製剤成分は、タンパク質濃度、酢酸濃度、スクロース濃度、ポリソルベート８０濃度、ＥＤＴＡ／メチオニン濃度、及びｐＨレベルである。試験された最低及び最高試験因子濃度値は、それぞれ、目標試験因子濃度値よりも約１０～４０％低い又は高い（表１２参照）。
【0228】
【表17】
【0229】
この基準に基づいて、統計ソフトウェアを使用して、試験に必要な試験製剤の数及び組成を指定する実験の多因子設計統計モデルを作成した。
【0230】
試験製剤を調製し、７．１ｍＬの充填体積で８Ｒバイアルに等分した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプシールする。バイアルを、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で安定した場所に置く。指定された時点で、試料を採取し、アッセイする。
【0231】
試験結果
試験開始時（時間０）、推奨保存条件（５℃）にて１２ヶ月後、及び加速温度（２５℃）にて６ヶ月後の試験製剤の各属性の試験結果を、表形式で提示し、以下の属性の各々について試験製剤の範囲、平均、及び標準偏差を報告する：ｃＩＥＦ（主ピーク面積％、酸性ピークの合計％、塩基性ピークの合計％）、ｃＳＤＳ（純度％（非還元）、純度％（還元））、ＳＥ－ＨＰＬＣ（凝集体％、モノマー％、フラグメント％）、粒子状物質（肉眼では見えない）（粒子／容器≧１０μｍ、粒子／容器≧２５μｍ）、及び濁度（ＮＴＵ）。
試験開始時（時間０）、推奨保存条件（５℃）にて１２ヶ月後、及び加速温度（２５℃）にて６ヶ月後の試験製剤の各属性の試験結果を、表形式で提示し、以下の属性の各々について試験製剤の範囲、平均、及び標準偏差を報告する：ｃＩＥＦ（主ピーク面積％、酸性ピークの合計％、塩基性ピークの合計％）、ｃＳＤＳ（純度％（非還元）、純度％（還元））、ＳＥ－ＨＰＬＣ（凝集体％、モノマー％、フラグメント％）、粒子状物質（肉眼では見えない）（粒子／容器≧１０μｍ、粒子／容器≧２５μｍ）、及び濁度（ＮＴＵ）。
【0232】
５℃で１２ヶ月間保持した全ての製剤についての分析結果は、安定性を示すアッセイ試験値にほとんど変化がないことを実証するものと予想される。賦形剤濃度が多変量範囲である全ての製剤が狭い範囲のアッセイ試験結果値をもたらす能力は、試験した境界及び保存条件内での製剤の堅牢性を実証している。その上、この試験におけるアッセイごとに観察された値の全範囲は、２～８℃で保持した場合の安定性の最も好ましい実施形態と一致するものと予想される。
【0233】
加速保存条件（２５℃）で６ヶ月間保持した全ての製剤の分析結果は、長期加速保存条件に曝露した二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の安定性プロファイルと一致する分解効果を示すものとまた予想される。しかしながら、ほとんどの結果について、効果の大きさは、５℃で１２ヶ月にて見られた結果と比較して相対的に小さいであろう。同様に、結果値の範囲の増加の大きさもまた比較的小さく、範囲のいくつかは、５℃で１２ヶ月目に見られるものと同等又はそれ未満であるはずである。これは、加速保存条件下であっても、賦形剤濃度が多変量範囲であることが比較的一貫した結果をもたらすことを実証している。
【0234】
実施例６：ｒＨｕＰＨ２０を伴う製剤の堅牢性の発現
研究デザイン
研究は、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で保持されたｒＨｕＰＨ２０を伴う二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体医薬品の製剤成分濃度レベルの多因子変動の効果を調べるために実施する。評価した製剤成分は、タンパク質濃度、酢酸濃度、スクロース濃度、ポリソルベート８０濃度、ＥＤＴＡ／メチオニン濃度、ｒＨｕＰＨ２０濃度、及びｐＨである。試験された最低及び最高試験因子濃度値は、それぞれ、目標試験因子濃度値よりも約１０～５０％低い又は高い（表１３参照）。
研究デザイン
研究は、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で保持されたｒＨｕＰＨ２０を伴う二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体医薬品の製剤成分濃度レベルの多因子変動の効果を調べるために実施する。評価した製剤成分は、タンパク質濃度、酢酸濃度、スクロース濃度、ポリソルベート８０濃度、ＥＤＴＡ／メチオニン濃度、ｒＨｕＰＨ２０濃度、及びｐＨである。試験された最低及び最高試験因子濃度値は、それぞれ、目標試験因子濃度値よりも約１０～５０％低い又は高い（表１３参照）。
【0235】
【表18】
【0236】
この基準に基づいて、統計ソフトウェアを使用して、試験に必要な試験製剤の数及び組成を指定する実験の多因子設計統計モデルを作成した。
【0237】
試験製剤を調製し、７．５ｍＬの充填体積で８Ｒバイアルに等分した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプシールする。バイアルを、推奨条件（５℃）及び加速条件（２５℃）で安定した場所に置く。指定された時点で、試料を採取し、アッセイする。
【0238】
試験結果
試験開始時（時間０）、推奨保存条件（５℃）にて１２ヶ月後、及び加速温度（２５℃）にて６ヶ月後の試験製剤の各属性の試験結果を、表形式で提示し、以下の属性の各々について試験製剤の範囲、平均、及び標準偏差を報告する：ｃＩＥＦ（主ピーク面積％、酸性ピークの合計％、塩基性ピークの合計％）、ｃＳＤＳ（純度％（非還元）、純度％（還元））、ＳＥ－ＨＰＬＣ（凝集体％、モノマー％、フラグメント％）、粒子状物質（肉眼では見えない）（粒子／容器≧１０μｍ、粒子／容器≧２５μｍ）、濁度（ＮＴＵ）ｒＨｕＰＨ２０活性（Ｕ／ｍＬ）。
試験開始時（時間０）、推奨保存条件（５℃）にて１２ヶ月後、及び加速温度（２５℃）にて６ヶ月後の試験製剤の各属性の試験結果を、表形式で提示し、以下の属性の各々について試験製剤の範囲、平均、及び標準偏差を報告する：ｃＩＥＦ（主ピーク面積％、酸性ピークの合計％、塩基性ピークの合計％）、ｃＳＤＳ（純度％（非還元）、純度％（還元））、ＳＥ－ＨＰＬＣ（凝集体％、モノマー％、フラグメント％）、粒子状物質（肉眼では見えない）（粒子／容器≧１０μｍ、粒子／容器≧２５μｍ）、濁度（ＮＴＵ）ｒＨｕＰＨ２０活性（Ｕ／ｍＬ）。
【0239】
５℃で１２ヶ月間保持した全ての製剤についての分析結果は、安定性を示すアッセイ試験値にほとんど変化がないことを実証するものと予想される。賦形剤濃度が多変量範囲である全ての製剤が狭い範囲のアッセイ試験結果値をもたらす能力は、試験した境界及び保存条件内での製剤の堅牢性を実証している。その上、この試験におけるアッセイごとに観察された値の全範囲は、２～８℃で保持した場合の安定性の最も好ましい実施形態と一致するものと予想される。
【0240】
加速保存条件（２５℃）で６ヶ月間保持した全ての製剤の分析結果は、長期加速保存条件に曝露した二重特異性ＥＧＦＲ－ｃＭｅｔ抗体の安定性プロファイルと一致する分解効果を示すものとまた予想される。しかしながら、ほとんどの結果について、効果の大きさは、５℃で１２ヶ月にて見られた結果と比較して相対的に小さいであろう。同様に、結果値の範囲の増加の大きさもまた比較的小さく、範囲のいくつかは、５℃で１２ヶ月目に見られるものと同等又はそれ未満であるはずである。これは、加速保存条件下であっても、賦形剤濃度が多変量範囲であることが比較的一貫した結果をもたらすことを実証している。
【0241】
実施例７：製剤化された医薬のバルク生成
プロセスの説明
処理溶液
プロセスの説明
処理溶液
【0242】
【表19】
【0243】
限外濾過／透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）
限外濾過／透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）を行って、アミバンタマブウイルス保持濾液中間体製造溶液を、１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸、８．５％のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、ｐＨ５．７からなる予め製剤化されたバルク（ｐＦＢ）溶液に再製剤化する。ＵＦ／ＤＦ操作中、透析濾過緩衝液の酢酸塩濃度は、ギブス・ドナン効果により１０ｍＭ～３０ｍＭに増加することに留意されたい。ｐＨもまた５．２～５．７にシフトする。
限外濾過／透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）を行って、アミバンタマブウイルス保持濾液中間体製造溶液を、１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸、８．５％のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、ｐＨ５．７からなる予め製剤化されたバルク（ｐＦＢ）溶液に再製剤化する。ＵＦ／ＤＦ操作中、透析濾過緩衝液の酢酸塩濃度は、ギブス・ドナン効果により１０ｍＭ～３０ｍＭに増加することに留意されたい。ｐＨもまた５．２～５．７にシフトする。
【0244】
アミバンタマブ製剤化バルク（ＦＢ）の調製
ポリソルベート８０（６．０％ｗ／ｖ）及びＥＤＴＡ（２ｍｇ／ｍＬ）ストック溶液を１：１００希釈でｐＦＢに添加して、０．０６％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０及び２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡの最終濃度を得て、３０ｍＭの酢酸、８．５％（ｗ／ｖ）のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、０．０６％のポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブからなる製剤化バルク（ＦＢ）を得る。次いで、ＦＢ溶液を均一に混合する。製剤化されたバルクの最終濾過は、滅菌０．４５／０．２２μｍフィルタ及びその直後にインライン０．２２μｍフィルタを使用して達成される。
ポリソルベート８０（６．０％ｗ／ｖ）及びＥＤＴＡ（２ｍｇ／ｍＬ）ストック溶液を１：１００希釈でｐＦＢに添加して、０．０６％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０及び２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡの最終濃度を得て、３０ｍＭの酢酸、８．５％（ｗ／ｖ）のスクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、０．０６％のポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブからなる製剤化バルク（ＦＢ）を得る。次いで、ＦＢ溶液を均一に混合する。製剤化されたバルクの最終濾過は、滅菌０．４５／０．２２μｍフィルタ及びその直後にインライン０．２２μｍフィルタを使用して達成される。
【0245】
最終バルク充填
最終濾過後、ＦＢをポリカーボネート製Ｂｉｏｔａｉｎｅｒ（複数可）に充填する。充填体積は、Ｂｉｏｔａｉｎｅｒの記載容積の２０％～９０％である。
最終濾過後、ＦＢをポリカーボネート製Ｂｉｏｔａｉｎｅｒ（複数可）に充填する。充填体積は、Ｂｉｏｔａｉｎｅｒの記載容積の２０％～９０％である。
【0246】
最終バルクの保存及び輸送
医薬品製造前の製剤化されたバルクの保存及び輸送条件は、ＦＢが約１週間以下の間保存される場合、遮光した状態で５℃±３℃、又はＦＢが１週間を超えて保存される場合、遮光した状態で－４０℃±１０℃である。
医薬品製造前の製剤化されたバルクの保存及び輸送条件は、ＦＢが約１週間以下の間保存される場合、遮光した状態で５℃±３℃、又はＦＢが１週間を超えて保存される場合、遮光した状態で－４０℃±１０℃である。
【0247】
実施例８：ｒＨｕＰｈ２０生成物による医薬製剤
プロセスの説明
処理溶液
プロセスの説明
処理溶液
【0248】
【表20】
【0249】
ｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブ医薬製剤の調製
ｒＨｕＰＨ２０製剤化バルクをアミバンタマブ製剤化バルク溶液に添加して、２，０００ＩＵ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０の最終濃縮物を得て、３０ｍＭ酢酸、８．５％（ｗ／ｖ）スクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、０．０６％ポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、ｒＨｕＰＨ２０ ２０００ＩＵ、ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブからなるｒＨｕＰＨ２０を有する医薬製剤を得る。ｒＨｕＰＨ２０製剤化バルクからのヒスチジン及び塩化ナトリウムの寄与は最小であると考えられ、したがって、ｒＨｕＰＨ２０医薬製剤化組成物を含むアミバンタマブには列挙されていない。次いで、医薬製剤溶液を均一に混合する。医薬製剤の最初の濾過は、滅菌０．２２μｍフィルタを用いて達成される。医薬製剤の最終濾過は、滅菌０．２２μｍフィルタ、及びその直後にインライン０．２２μｍフィルタを用いて達成される。
ｒＨｕＰＨ２０製剤化バルクをアミバンタマブ製剤化バルク溶液に添加して、２，０００ＩＵ／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０の最終濃縮物を得て、３０ｍＭ酢酸、８．５％（ｗ／ｖ）スクロース、１ｍｇ／ｍＬのＬ－メチオニン、０．０６％ポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、ｒＨｕＰＨ２０ ２０００ＩＵ、ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブからなるｒＨｕＰＨ２０を有する医薬製剤を得る。ｒＨｕＰＨ２０製剤化バルクからのヒスチジン及び塩化ナトリウムの寄与は最小であると考えられ、したがって、ｒＨｕＰＨ２０医薬製剤化組成物を含むアミバンタマブには列挙されていない。次いで、医薬製剤溶液を均一に混合する。医薬製剤の最初の濾過は、滅菌０．２２μｍフィルタを用いて達成される。医薬製剤の最終濾過は、滅菌０．２２μｍフィルタ、及びその直後にインライン０．２２μｍフィルタを用いて達成される。
【0250】
実施例９：医薬品：一次包装の組成及び成分
アミバンタマブ医薬品の組成の概要を、本明細書に表形式で提供する（表１６）。
アミバンタマブ医薬品の組成の概要を、本明細書に表形式で提供する（表１６）。
【0251】
【表21】
【0252】
アミバンタマブ医薬品（ＤＰ）一次包装は、ガラスバイアル、ポリマーバイアル栓、及びアルミニウムシールからなる。表１７は、一次包装材料の具体的な構成要素を列挙している。
【0253】
【表22】
【0254】
実施例１０：ｒＨｕＰＨ２０を伴う医薬品：一次包装の組成及び成分
ｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブ医薬品の組成概要を、本明細書に表形式で提供する（表１８）。
ｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブ医薬品の組成概要を、本明細書に表形式で提供する（表１８）。
【0255】
【表23】
【0256】
ｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブ医薬品（ＤＰ）一次包装は、ガラスバイアル、ポリマーバイアル栓、及びアルミニウムシールからなる。表１９は、一次包装材料の具体的な構成要素を列挙している。
【0257】
【表24】
【0258】
実施例１１：医薬品安定性試験の説明
この試験は、様々な環境条件及び時間長下での安定した場所に置かれたアミバンタマブＤＰ属性を監視するために行われた。製剤化されたバルクを８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積で等分することによって、研究試験品を調製した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。
この試験は、様々な環境条件及び時間長下での安定した場所に置かれたアミバンタマブＤＰ属性を監視するために行われた。製剤化されたバルクを８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積で等分することによって、研究試験品を調製した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。
【0259】
全ての試験は、バイアルを逆向きにして実施した。
【0260】
【表25】
【0261】
安定性試験結果
推奨、加速、及びストレス条件下で保持されたアミバンタマブＤＰの現在までの安定性結果を、表２１～表２３に列挙する。推奨保存条件で保持されたＤＰについての全時点で、アッセイ研究ごとに観察された全ての試験パラメータ結果値は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に保持された場合、安定性の最も好ましい実施形態と一致する基準を超えることが予想される。同様に、ペプチドマップの結果は、翻訳後修飾の測定された割合の経時的な必然の変化をほとんど又は全く示さないものと予想される。
推奨、加速、及びストレス条件下で保持されたアミバンタマブＤＰの現在までの安定性結果を、表２１～表２３に列挙する。推奨保存条件で保持されたＤＰについての全時点で、アッセイ研究ごとに観察された全ての試験パラメータ結果値は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に保持された場合、安定性の最も好ましい実施形態と一致する基準を超えることが予想される。同様に、ペプチドマップの結果は、翻訳後修飾の測定された割合の経時的な必然の変化をほとんど又は全く示さないものと予想される。
【0262】
加速条件及びストレス条件で保持されたアミバンタマブＤＰの結果は、長期加速条件及びストレス保存条件に曝露された医薬品の予想される分解速度を示すものと予想される。加速条件（２５℃）で１２ヶ月間保持されたＤＰは、２～８℃で約２年以上保持された場合、安定性の好ましい実施形態と一致する結果を示すこともまた予想される。
【0263】
５℃データ
【0264】
【表26】
【0265】
【表27】
【0266】
【表28】
【0267】
【表29】
【0268】
【表30】
【0269】
【表31】
【0270】
２５℃データ
【0271】
【表32】
【0272】
【表33】
【0273】
【表34】
【0274】
【表35】
【0275】
【表36】
【0276】
【表37】
【0277】
【表38】
【0278】
【表39】
【0279】
【表40】
【0280】
【表41】
【0281】
【表42】
【0282】
【表43】
【0283】
実施例１２：ｒＨｕＰＨ２０を伴う医薬品安定性試験の説明
この試験は、様々な環境条件及び時間長下での安定した場所に置かれたｒＨｕＰＨ２０ ＤＰ属性によるアミバンタマブを監視するために行われた。製剤化されたバルクを８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積で等分することによって、研究試験品を調製した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。
この試験は、様々な環境条件及び時間長下での安定した場所に置かれたｒＨｕＰＨ２０ ＤＰ属性によるアミバンタマブを監視するために行われた。製剤化されたバルクを８Ｒバイアルに７．１ｍＬの充填体積で等分することによって、研究試験品を調製した。バイアルに栓をし、キャップをし、クリンプで密封した。
【0284】
全ての試験は、バイアルを逆向きにして実施した。
【0285】
【表44】
【0286】
安定性試験結果
推奨、加速、及びストレス条件下において保持されたｒＨｕＰＨ２０ ＤＰによるアミバンタマブの現在までの安定性結果を、表２５～表２７に列挙する。推奨保存条件で保持されたＤＰについての全時点で、アッセイ研究ごとに観察された全ての試験パラメータ結果値は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に保持された場合、安定性の最も好ましい実施形態と一致する基準を超えることが予想される。同様に、ペプチドマップの結果は、翻訳後修飾の測定された割合の経時的な必然の変化をほとんど又は全く示さないものと予想される。
推奨、加速、及びストレス条件下において保持されたｒＨｕＰＨ２０ ＤＰによるアミバンタマブの現在までの安定性結果を、表２５～表２７に列挙する。推奨保存条件で保持されたＤＰについての全時点で、アッセイ研究ごとに観察された全ての試験パラメータ結果値は、約５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、約２５℃の温度で約１２ヶ月以上保存した後、及び／又は約５℃の温度で約２年以上保存した後に保持された場合、安定性の最も好ましい実施形態と一致する基準を超えることが予想される。同様に、ペプチドマップの結果は、翻訳後修飾の測定された割合の経時的な必然の変化をほとんど又は全く示さないものと予想される。
【0287】
加速条件及びストレス条件で保持されたｒＨｕＰＨ２０ ＤＰによるアミバンタマブの結果は、長期加速条件及びストレス保存条件に曝露された医薬品の予想される分解速度を示したものと予想される。加速条件（２５℃）で１２ヶ月間保持されたＤＰは、２～８℃で約２年以上保持された場合、安定性の好ましい実施形態と一致する結果を示すこともまた予想される。
【0288】
５℃データ
【0289】
【表45】
【0290】
【表46】
【0291】
【表47】
【0292】
【表48】
【0293】
【表49】
【0294】
【表50】
【0295】
２５℃データ
【0296】
【表51】
【0297】
【表52】
【0298】
【表53】
【0299】
【表54】
【0300】
【表55】
【0301】
【表56】
【0302】
４０℃データ
【0303】
【表57】
【0304】
【表58】
【0305】
【表59】
【0306】
【表60】
【0307】
【表61】
【0308】
【表62】
【0309】
実施例１２Ａ：粘度
ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸塩、８．５％のスクロース、０．０６％のポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、１ｍｇ／ｍＬのメチオニンの粘度を、自動粘度計で分析した。温度掃引を４℃～４０℃の間で５℃間隔で行い、温度設定ごとに４回測定した。全ての温度での最初の測定値を破棄し、残りの３つを使用して、以下の表２８に報告される平均粘度値を計算する。
ｐＨ５．７での１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ、３０ｍＭの酢酸塩、８．５％のスクロース、０．０６％のポリソルベート８０、２０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡ、１ｍｇ／ｍＬのメチオニンの粘度を、自動粘度計で分析した。温度掃引を４℃～４０℃の間で５℃間隔で行い、温度設定ごとに４回測定した。全ての温度での最初の測定値を破棄し、残りの３つを使用して、以下の表２８に報告される平均粘度値を計算する。
【0310】
【表63】
【0311】
これらの結果は、アミバンタマブの高濃度製剤が注入に適した粘度を有することを実証している。
【0312】
実施例１３．進行性固形悪性腫瘍を有する患者におけるアミバンタマブの皮下送達。
アミバンタマブの皮下（ＳＣ）送達を、ＥＧＦＲ又はＭＥＴ指向性治療（ＰＡＬＯＭＡ；ＮＣＴ０４６０６３８１）から利益を得ることができる進行性固形腫瘍を有する患者における、第１相用量段階的拡大試験で評価した。適格の腫瘍タイプには、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、及び卵巣がん（ＯＣ）が含まれた。適格患者は、転移性疾患のための標準治療後に進行し、現在の標準治療に対して不適格であったか、又は現在の標準治療を拒否した。
アミバンタマブの皮下（ＳＣ）送達を、ＥＧＦＲ又はＭＥＴ指向性治療（ＰＡＬＯＭＡ；ＮＣＴ０４６０６３８１）から利益を得ることができる進行性固形腫瘍を有する患者における、第１相用量段階的拡大試験で評価した。適格の腫瘍タイプには、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮がん（ＳＣＣＨＮ）、肝細胞がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、腎細胞がん（ＲＣＣ）、甲状腺髄様がん（ＭＴＣ）、胃食道がん（ＧＥＣ）、中皮腫、乳がん（ＢＣ）、及び卵巣がん（ＯＣ）が含まれた。適格患者は、転移性疾患のための標準治療後に進行し、現在の標準治療に対して不適格であったか、又は現在の標準治療を拒否した。
【0313】
研究目的は、低濃度製剤、５０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ±ｒＨｕＰＨ２０（パート１）及び高濃度製剤、１６０ｍｇ／ｍＬのアミバンタマブ±ｒＨｕＰＨ２０（パート２）の投与、安全性、及び薬物動態（ＰＫ）の実現可能性を評価することであった。低濃度製剤（５０ｍｇ／ｍＬ）アミバンタマブを、（Ａｍｉ－ＬＣ－ＭＤ［混合及び送達］）、又は（Ａｍｉ－ＬＣ）ｒＨｕＰＨ２０なし（パート１、それぞれコホート１ａ及びコホート１ｂ）のいずれかで投与した。高濃度製剤（１６０ｍｇ／ｍＬ）アミバンタマブを、（Ａｍｉ－ＨＣ－ＣＦ［共製剤化］）、又は（Ａｍｉ－ＨＣ）ｒＨｕＰＨ２０なし（パート２、それぞれコホート２ａ及びコホート２ｂ）のいずれかで投与した。パート１及びパート２の患者に、１０５０ｍｇ及び２，０００単位／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０（体重≧８０ｋｇでは１４００ｍｇ及び２０００単位／ｍＬのｒＨｕＰＨ２０）ＳＣ（最初の４週間は毎週、その後は隔週）でアミバンタマブの投与量を投与した。この試験はまた、１日目でのアミバンタマブの全用量の投与を評価した。
【0314】
結果：パート１（ｎ＝１６）及びパート２（ｎ＝１７）に登録された患者の完全な安全性、ＰＫ、バイオアベイラビリティ、及び受容体占有率のデータを評価した。ＩＶ投与と比較して、初期ＳＣ経験は、高濃度アミバンタマブとｒＨｕＰＨ２０との共製剤が、必要な注入時間を２～４時間から５分未満に短縮し、初期バイオアベイラビリティがＩＶ投与の約６５％であることを実証した。可溶性の遊離ＥＧＦＲ及びＭＥＴの飽和が最初のＳＣ用量の後に達成された。ＩＲＲの発生率は１８．２％であり、これは、ＣＨＲＹＳＡＬＩＳ研究（Ｐａｒｋ Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ ３２［ｓｕｐｐｌ＿５］：Ｓ９８１）全体では、推奨される第２相用量（ＲＰ２Ｄ）のＩＶアミバンタマブ静注を受けた患者の６７．３％と比較して、全ての事象がグレード１～グレード２の重症度であった。完全なアミバンタマブＳＣ用量を最初の投与時に１４人の患者へと安全に投与することで、分割投与の必要性をなくした。
【0315】
完全な初期アミバンタマブ投与ではＩＲＲのリスク増加は観察されなかった；ＩＲＲは、全用量（Ｃ１Ｄ１）を受けた３／１４（２１％）の患者、及び分割用量を受けた３／１９（１６％）の患者において報告された。
【0316】
ＳＣアミバンタマブのＩＲＲ外のＡＥプロファイルは、ＩＶアミバンタマブに匹敵した。グレード３以上のＡＥが患者の２７．３％で発生し、ほとんどが単一事象として報告された。単一グレード３事象（低カリウム血症）が処置関連として報告された。用量の減少又は中止をもたらす処置関連ＡＥは報告されなかった。２人の患者（６．１％）はグレード１の注入部位反応を示した。これは一過性であり、その後の投与に影響を及ぼさなかった。
【0317】
薬物動態、薬力学、及び免疫原性。アミバンタマブの最大血清濃度は、ＳＣ投与の２～３日後に達成された（図１）。ｒＨｕＰＨ２０でより高い曝露が得られた；ｒＨｕＰＨ２０を含む製剤を用いたＳＣ投与による推定バイオアベイラビリティは、約６５％であった。可溶性の遊離ＥＧＦＲ及びＭＥＴの飽和が最初の全用量後に全てのコホートにおいて達成された（図２）。試験した患者では抗医薬抗体は検出されなかった（パート１群とパート２群の両方で、合計Ｎ＝３３）。
【0318】
結論：初回ＳＣアミバンタマブ±ｒＨｕＰＨ２０は、投与時間及び容易さの改善とともに良好に耐容され、静脈内（ＩＶ）投与と比較してＩＲＲの有意な低減を伴い、分割投与の必要性が排除された。
【0319】
実施例１４．オシメルチニブ及び白金ベースの化学療法での進行後の、ＥＧＦＲ突然変異非小細胞肺（ＮＳＣＬＣ）患者におけるアミバンタマブ及びラゼルチニブ。
方法：臨床試験コホートにより、第１／第２のラインのオシメルチニブに続いて治療の最終ラインとして白金－化学療法が進行した疾患を持つＥＧＦＲエクソン１９欠失又はＬ８５８Ｒ ＮＳＣＬＣを有する患者（標的集団、ｎ＝１０６）、及びオシメルチニブ及び白金－化学療法±これらの治療の数及び順序に関係ない他の治療の後に進行した疾患を持つより重度に前処置された集団（ｎ＝５６）において、アミバンタマブ及びラゼルチニブを評価した。患者は、１０５０ｍｇのＩＶアミバンタマブ（１４００ｍｇ、８０ｋｇ以上）＋２４０ｍｇの経口ラゼルチニブを受けた。奏効を、ＲＥＣＩＳＴｖ１．１（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ、第４５巻第２２８～２４７頁（２００９年））に従って評価し、奏効評価可能な患者について報告し、奏効永続性について６ヶ月以上の追跡調査を受けた患者と定義する。
方法：臨床試験コホートにより、第１／第２のラインのオシメルチニブに続いて治療の最終ラインとして白金－化学療法が進行した疾患を持つＥＧＦＲエクソン１９欠失又はＬ８５８Ｒ ＮＳＣＬＣを有する患者（標的集団、ｎ＝１０６）、及びオシメルチニブ及び白金－化学療法±これらの治療の数及び順序に関係ない他の治療の後に進行した疾患を持つより重度に前処置された集団（ｎ＝５６）において、アミバンタマブ及びラゼルチニブを評価した。患者は、１０５０ｍｇのＩＶアミバンタマブ（１４００ｍｇ、８０ｋｇ以上）＋２４０ｍｇの経口ラゼルチニブを受けた。奏効を、ＲＥＣＩＳＴｖ１．１（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ、第４５巻第２２８～２４７頁（２００９年））に従って評価し、奏効評価可能な患者について報告し、奏効永続性について６ヶ月以上の追跡調査を受けた患者と定義する。
【0320】
結果：１６２人の患者がコホートに登録された（治療の前ラインの中央値６２歳、女性６５％、アジア人６１％、中央値３人［範囲、２～１４］）。最後のオシメルチニブ処置から最初の用量のアミバンタマブ＋ラゼルチニブまでの時間の中央値は、標的集団及び重度に前処置された集団で、それぞれ、６．３ヶ月及び２．０ヶ月であった。標的集団の５０人の有効性評価可能な患者のうち、ＯＲＲは３６％（９５％ＣＩ、２３～５１）であり、１人が完全奏効（ＣＲ）、１７人が部分奏効（ＰＲ）であり、臨床的利益率（ＣＢＲ）は５８％（９５％ＣＩ、４３～７２）であった。奏効期間の中央値（ｍＤＯＲ）は達成されなかった。８．３ヶ月の追跡調査中央値で、７名の応答者（３９％）が６ヶ月以上続くＤＯＲを達成した。重度に前処置された集団の５６人の有効性評価可能な患者（８．７ヶ月の追跡中央値）のうち、ＯＲＲは２９％（９５％ＣＩ、１７～４２）であり、１例のＣＲ及び１５例のＰＲを有していた。ＣＢＲは５５％（９５％ＣＩ、４２～６９）であり、ｍＤＯＲは８．６ヶ月（９５％ＣＩ、４．２～ＮＲ）であった。ＣＮＳ抗腫瘍活性の予備的証拠は、試験登録前１年以内に放射線を受けていなかったベースライン脳病変（７非標的、１標的）を有する８人の患者で報告された。
【0321】
注入関連反応（ＩＲＲ）（６５％）が、報告された最も頻度の高い有害事象（ＡＥ）であり、爪囲炎（４９％）、発疹（４１％）、及び口内炎（３９％）がこれに続いた。最も一般的なグレード３以上の処置関連ＡＥ（ＴＲＡＥ）は、注入関連反応（７％）、ざ瘡様皮膚炎（５％）、及び低アルブミン血症（４％）であった。アミバンタマブ（ami）及びラゼルチニブ（laz）のいずれか又は両方の中断につながるＴＲＡＥは、それぞれ、１２％及び７％で発生した。
【0322】
実施例１５．ｒＨｕＰＨ２０と共製剤化されたアミバンタマブの皮下送達。
２週間に１回（Ｑ２Ｗ）のアミバンタマブ投与レジメンに対して提案されている予備推奨第２相用量（ＲＰ２Ｄ）は、ＢＷ＜８０ｋｇの患者では１６００ｍｇであり、ＢＷ≧８０ｋｇの参加者では２２４０ｍｇである。この予備皮下用量は、ｒＨｕＰＨ２０（アミバンタマブＳＣ－ＣＦ）と共製剤化された１６０ｍｇ／ｍＬの濃度のアミバンタマブを含む。
２週間に１回（Ｑ２Ｗ）のアミバンタマブ投与レジメンに対して提案されている予備推奨第２相用量（ＲＰ２Ｄ）は、ＢＷ＜８０ｋｇの患者では１６００ｍｇであり、ＢＷ≧８０ｋｇの参加者では２２４０ｍｇである。この予備皮下用量は、ｒＨｕＰＨ２０（アミバンタマブＳＣ－ＣＦ）と共製剤化された１６０ｍｇ／ｍＬの濃度のアミバンタマブを含む。
【0323】
アミバンタマブＳＣ－ＣＦについて提案されている推奨投与レジメンは、得られた曝露がＩＶ ＲＰ２Ｄレジメンで観察されたものと同様であることを確実にするように選択される。ＳＣ投与後の観察されたＡＵＣ（ｒＨｕＰＨ２０製剤を含む及び含まないコホート）を、ＩＶ投与後の対応する観察されたＡＵＣと比較することによって、バイオアベイラビリティを推定した。ＳＣコホートには、ＩＶ ＲＰ２Ｄ（ＢＷ＜８０ｋｇの参加者には１０５０ｍｇ、ＢＷ≧８０ｋｇの参加者には１４００ｍｇ）を投与した。この用量では、最初のＳＣ用量後に、可溶性遊離ＥＧＦＲ及びｃＭｅｔの飽和が達成された。更に、３３名の参加者全員が抗アミバンタマブ抗体について陰性であった。サイクル２の最初の投与後（サイクル１の毎週の誘導投与後）、濃度時間曲線下の平均（ＣＶ％、ｎ）面積（ＡＵＣ）Ｃ２Ｄ１～Ｃ２Ｄ１５は、ｒＨｕＰＨ２０あり及びなしの１６０ｍｇ／ｍｌからのコホートについて、それぞれ、９５，４１６μｇ×ｈ／ｍＬ（４５．４％、７）及び７５，３７８μｇ×ｈ／ｍＬ（２７．０％、５）であった。
【0324】
ｒＨｕＰＨ２０を伴うアミバンタマブの共製剤（すなわち、アミバンタマブＳＣ－ＣＦ）は、ｒＨｕＰＨ２０を含まない製剤と比較して、注入に必要な時間を約８倍短縮することに加えて、改善されたバイオアベイラビリティ（６５％対５１％）を提供した。推定バイオアベイラビリティに基づいて、ＢＷ＜８０ｋｇの参加者については１，６００ｍｇ、ＢＷ≧８０ｋｇの参加者については２，２４０ｍｇの予備ＲＰ２Ｄが提案された。
【0325】
新たに得られたデータは、アミバンタマブＩＶで以前に報告されたよりも低いＩＲＲ発生率（全体で１８．７％及び０グレード≧３）を示している（全体で６５．９％及び２．３％グレード≧３）。ＩＲＲの発生率及び重症度が低下した結果、この研究は、初回用量のアミバンタマブＳＣの１日注入の実現可能性を実証した。
【0326】
予備的モデリングによって支持される現在の臨床データ及び分析に基づいて、アミバンタマブＳＣ－ＣＦを、体重８０ｋｇ未満の参加者については１，６００ｍｇ、体重８０ｋｇ超の参加者については２，２４０ｍｇの予備ＲＰ２Ｄで投与することになる。
【0327】
コホート１は、ＥＧＦＲエクソン１９ｄｅｌ又はエクソン２１ Ｌ８５８Ｒ突然変異を内包する処置未経験の局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する対象における、アミバンタマブＳＣ－ＣＦ（Ｑ２Ｗ）と、ラゼルチニブとの組み合わせを評価する。参加者は、第２サイクルから開始して、第１サイクルの第１日目、第８日目、第１５日目、及び第２２日目、並びにその後の各２８日間サイクルの第１日目及び第１５日目にアミバンタマブを投与される。アミバンタマブＳＣ－ＣＦは、１，６００ｍｇ（体重≧８０ｋｇの場合、２，２４０ｍｇ）での手動注入によってＳＣに投与される。ラゼルチニブは２４０ｍｇを１日１回経口投与される。
【0328】
コホート４は、標準治療に従って３ヶ月以上のアミバンタマブＩＶを受けた対象における切り替え療法としての、アミバンタマブＳＣ－ＣＦ（Ｑ２Ｗ）の実現可能性を評価する。参加者は、第２サイクルから開始して、第１サイクルの第１日目、第８日目、第１５日目、及び第２２日目、並びにその後の各２８日間サイクルの第１日目及び第１５日目にアミバンタマブを投与される。アミバンタマブＳＣ－ＣＦは、１，６００ｍｇ（体重≧８０ｋｇの場合、２，２４０ｍｇ）での手動注入によって投与される。
【0329】
当業者であれば、本発明の好ましい実施形態に対して、多数の変更及び修正を加えることができ、このような変更及び修正を、本発明の趣旨を逸脱しない範囲内で行うことができることを理解するであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の趣旨及び範囲に収まる、このような同等の変化を全て網羅することが意図されている。
【0330】
本明細書に引用又は記載されている各特許、特許出願、及び刊行物の開示は、その全体が本明細書に参照として組み込まれる。
【0331】
【表64】
【0332】
【表65-1】
【0333】
【表65-2】
【図1】
【図2】
【配列表】
【国際調査報告】