▶ シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-04-03
(54)【発明の名称】抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いるがんの治療方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20240327BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240327BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20240327BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240327BHJP
A61P 11/02 20060101ALI20240327BHJP
A61P 11/04 20060101ALI20240327BHJP
A61P 1/02 20060101ALI20240327BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240327BHJP
A61P 13/02 20060101ALI20240327BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20240327BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20240327BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20240327BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20240327BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240327BHJP
C07K 16/30 20060101ALN20240327BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 D
A61P35/00
A61P37/04
A61P11/00
A61P11/02
A61P11/04
A61P1/02
A61P43/00 105
A61P13/02
A61P1/04
A61P15/00
A61K39/395 N
A61P13/12
A61P1/16
A61P25/00
A61P43/00 111
A61P43/00 121
C07K16/30 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023561703
(86)(22)【出願日】2022-04-08
(85)【翻訳文提出日】2023-10-31
(86)【国際出願番号】 US2022023973
(87)【国際公開番号】W WO2022217026
(87)【国際公開日】2022-10-13
(31)【優先権主張番号】63/173,216
(32)【優先日】2021-04-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】503188759
【氏名又は名称】シージェン インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002572
【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ガルデイ，シラ
(72)【発明者】
【氏名】スミス，アリソン
【テーマコード（参考）】
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE03
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045DA76
4H045EA28
(57)【要約】
本明細書において、抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いて抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせてがんを治療する方法が提供される。
【選択図】図３
【選択図】図３
【特許請求の範囲】
【請求項1】
がんを治療する方法であって、前記方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記がんのサンプル中のＰＤ－Ｌ１のレベルは、ＣＰＳ（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに１０未満であるか、またはＴＰＳ（Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに５０％未満であるか、またはＴＣ（Ｔｕｍｏｒ Ｃｅｌｌスコア）によって測定したときに５０％未満であるか、または腫瘍浸潤免疫細胞染色（ＩＣ）によって測定したときに１０％未満であり、ここで、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む、前記方法。
【請求項2】
前記がんが、ＣＰＳによって測定された場合に、５未満、または３未満、または１未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記がんが、ＴＰＳによって測定された場合に、４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
前記がんが、ＴＣによって測定された場合に、４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記がんが、ＩＣによって測定された場合に、５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
請求項１～５のいずれか１項に記載の方法であって：ａ）前記がんが、非小肺癌であり、かつ前記ＴＰＳが１％未満である；
ｂ）前記がんが、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）であり、かつ前記ＣＰＳが１未満である；
ｃ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｄ）前記がんが、胃癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；
ｅ）前記がんが、食道癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｆ）前記がんが、子宮頸癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；または
ｇ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である、
前記方法。
【請求項7】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはニボルマブである、請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつ前記ＴＰＳが、５０％未満である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、セミプリマブである、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
請求項１～５のいずれか１項に記載の方法であって：ａ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつＩＣが、５％未満である；
ｂ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつＩＣが、１％未満である；または
ｃ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＩＣが、１０％未満である；または
ｄ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＴＣが、５０％未満である、
前記方法。
【請求項11】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、アテゾリズマブである、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、治療量以下の用量で投与する、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項13】
がんを治療する方法であって、前記方法が、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、治療量以下の用量で投与される、前記方法。
【請求項14】
前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の前記治療量以下の用量が、ａ）治療される前記がんについての前記抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療される前記がんの単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で前記抗体を投与することを含む、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項15】
前記抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記抗体の前記単剤療法の用量よりも少ない用量を含む、請求項１２～１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の用量の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％である前記抗体の用量である、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、前記単剤療法の用量が、２００ｍｇまたは４００ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、前記単剤療法の用量が、２４０ｍｇ、３６０ｍｇ、または４８０ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、セミプリマブであり、前記単剤療法の用量が、３５０ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブであり、前記単剤療法の用量が、８００ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブであり、前記単剤療法の用量が、１０ｍｇ／ｋｇまたは１５００ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項22】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブであり、前記単剤療法の用量が、８４０ｍｇ、１２００ｍｇ、または１６８０ｍｇである、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項23】
前記抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない前記抗体の投与頻度を含む、請求項１２～２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項24】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、３週間ごとまたは６週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブであり、前記単剤療法の用量が、３週間ごとに２００ｍｇまたは６週間ごとに４００ｍｇである、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとまたは３週間ごとまたは４週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項27】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブであり、前記単剤療法の用量が、２週間ごとに２４０ｍｇ、３週間ごとに３６０ｍｇ、または４週間ごとに４８０ｍｇである、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、セミプリマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、３週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項29】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項30】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとまたは４週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項31】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブであり、前記単剤療法の用量が、２週間ごとに１０ｍｇ／ｋｇ ｍｇ、または４週間ごとに１５００ｍｇである、請求項３０に記載の方法。
【請求項32】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブであり、前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとである、請求項２３に記載の方法。
【請求項33】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブであり、前記単剤療法の用量が、２週間ごとに８４０ｍｇ、３週間ごとに１２００ｍｇ、または４週間ごとに１６８０ｍｇである、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
前記がんが、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される、請求項１～３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項35】
がんを治療する方法であって、前記方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、前記がんが、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される、前記方法。
【請求項36】
前記方法が、尿路上皮癌の第１選択治療である、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項37】
前記がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項38】
がんを治療する方法であって、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、前記がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む、前記方法。
【請求項39】
前記がんが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異及び／またはＲＯＳ１遺伝子における変異を含む、請求項３７または３８に記載の方法。
【請求項40】
前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつ前記がんが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異を含む、請求項３７～３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項41】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブまたはニボルマブである；または前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブである、請求項４０に記載の方法。
【請求項42】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのうちの少なくとも１つに対する結合が増強されているＦｃを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項43】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項44】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項45】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項46】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項47】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記Ｆｃが、ＦｃγＲＩＩｂへの結合が減少している、請求項４２～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項48】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、重鎖定常領域内に置換Ｓ２９３Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項49】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、非フコシル化抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項50】
前記方法が、抗ＴＩＧＩＴ抗体の組成物を投与することを含み、前記組成物中の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の前記抗体が、非フコシル化抗体である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項51】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記Ｆｃが、同じアイソタイプの対応する野生型Ｆｃと比較して、増強されたＡＤＣＣ及び／またはＡＤＣＰ活性を有するＦｃを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項52】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、以下を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法：ａ）配列番号７～９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１；
ｂ）配列番号１０～１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２；
ｃ）配列番号１４～１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；
ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１；
ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２；及び
ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列。
【請求項53】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、以下の配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ、及びＣＤＲ３を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法：ａ）それぞれ、配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９；または
ｂ）それぞれ、配列番号８、１１、１４、１７、１８、及び１９；または
ｃ）それぞれ、配列番号９、１２、１５、１７、１８、及び１９；または
ｄ）それぞれ、配列番号８、１３、１６、１７、１８、及び１９；または
ｅ）それぞれ、配列番号８、１２、１６、１７、１８、及び１９。
【請求項54】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、配列番号１～５から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項55】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、配列番号２０～２４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖と、を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項56】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体を、治療量以下の用量で投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項57】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、ａ）治療される前記がんについての前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で前記抗ＴＩＧＩＴ抗体を投与することを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項58】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記単剤療法の用量よりも少ない用量を含む、請求項５６または５７に記載の方法。
【請求項59】
前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の用量の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％である前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の用量である、請求項５６～５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項60】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の投与頻度を含む、請求項５６～５９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項61】
前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項62】
前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ＣＴ－０１１、ＢＧＢ－Ａ３１７、セミプリマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、ＴＳＲ－０４２、ＰＤＲ００１、またはトリパリマブから選択される、請求項６１に記載の方法。
【請求項63】
前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含む、請求項１～６０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項64】
前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブまたはアベルマブから選択される、請求項６３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年４月９日に出願された米国仮出願第６３／１７３，２１６号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年４月９日に出願された米国仮出願第６３／１７３，２１６号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
本明細書において、抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いて抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせてがんを治療する方法が提供される。
【背景技術】
【0003】
ＴＩＧＩＴ（「Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ ｗｉｔｈ Ｉｇ ａｎｄ ＩＴＩＭ ｄｏｍａｉｎｓ（Ｉｇドメイン及びＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体）」）は、活性化、記憶、及び制御性Ｔ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞などのＴ細胞のサブセットに発現する免疫細胞エンゲージャーである。ＴＩＧＩＴは、Ｉｇスーパーファミリーのタンパク質中のＣＤ２８ファミリーのメンバーであり、Ｔ細胞の増殖及び活性化ならびにＮＫ細胞の機能を制限する共阻害性分子として作用する。ＴＩＧＩＴは、ＣＤ２２６（ＤＮＡＸアクセサリー分子－１、または「ＤＮＡＭ－１」としても知られている）と同じセットのリガンド：ＣＤ１５５（ポリオウイルス受容体または「ＰＶＲ」としても知られている）及びＣＤ１１２（ポリオウイルス受容体関連２または「ＰＶＲＬ２」としても知られている）と競合することにより、その免疫抑制効果を媒介する。Ｌｅｖｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１１，４１：９０２－９１５。ＴＩＧＩＴに対するＣＤ１５５の親和性は、ＣＤ２２６に対する親和性よりも高いため、ＴＩＧＩＴが存在する場合には、ＣＤ２２６シグナル伝達が阻害され、それによってＴ細胞の増殖及び活性化が制限される。
【0004】
黒色腫などの特定のがんを有する患者では、ＴＩＧＩＴの発現は、腫瘍抗原（ＴＡ）特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）上で上方制御される。ＴＩＧＩＴリガンド（ＣＤ１５５）発現細胞の存在下において、ＴＩＧＩＴを遮断することにより、ＴＡ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋ＴＩＬの増殖、サイトカイン産生、ならびに脱顆粒が増加する。Ｃｈａｕｖｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．，２０１５，１２５：２０４６－２０５８。したがって、ＴＩＧＩＴは、患者において抗腫瘍Ｔ細胞応答を刺激するための潜在的な治療標的であるが、ＴＩＧＩＴを遮断し、抗腫瘍応答を促進する改善された方法、及び単剤療法として、または他の剤（例えば、抗体）と組み合わせて、抗ＴＩＧＩＴ抗体によりがんを治療する改善された方法が依然として必要とされている。
【0005】
本明細書において、抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いて、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせてがんを治療する改善された方法が提供される。
【発明の概要】
【0006】
実施形態１ がんを治療する方法であって、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記がんのサンプル中の前記ＰＤ－Ｌ１のレベルは、ＣＰＳ（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに１０未満であるか、またはＴＰＳ（Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに５０％未満であるか、またはＴＣ（Ｔｕｍｏｒ Ｃｅｌｌスコア）によって測定したときに５０％未満であるか、または腫瘍浸潤免疫細胞染色（ＩＣ）によって測定したときに１０％未満であり、ここで、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む、前記方法。
【0007】
実施形態２ 前記がんが、ＣＰＳによって測定された場合に、５未満、または３未満、または１未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、実施形態１に記載の方法。
【0008】
実施形態３ 前記がんが、ＴＰＳによって測定された場合に、４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、実施形態１または２に記載の方法。
【0009】
実施形態４ 前記がんが、ＴＣによって測定された場合に、４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、実施形態１～３のいずれか１つに記載の方法。
【0010】
実施形態５ 前記がんが、ＩＣによって測定された場合に、５％未満、または３％未満、または１％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する、実施形態１～４のいずれか１つに記載の方法。
【0011】
実施形態６ 実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法であって：
ａ）前記がんが、非小肺癌であり、かつ前記ＴＰＳが１％未満である；
ｂ）前記がんが、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）であり、かつ前記ＣＰＳが１未満である；
ｃ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｄ）前記がんが、胃癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；
ｅ）前記がんが、食道癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｆ）前記がんが、子宮頸癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；または
ｇ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である、前記方法。
ａ）前記がんが、非小肺癌であり、かつ前記ＴＰＳが１％未満である；
ｂ）前記がんが、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）であり、かつ前記ＣＰＳが１未満である；
ｃ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｄ）前記がんが、胃癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；
ｅ）前記がんが、食道癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である；
ｆ）前記がんが、子宮頸癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１未満である；または
ｇ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつ前記ＣＰＳが、１０未満である、前記方法。
【0012】
実施形態７ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはニボルマブである、実施形態６に記載の方法。
【0013】
実施形態８ 前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつ前記ＴＰＳが、５０％未満である、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
【0014】
実施形態９ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、セミプリマブである、実施形態８に記載の方法。
【0015】
実施形態１０ 実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法であって：
ａ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつＩＣが、５％未満である；
ｂ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつＩＣが、１％未満である；または
ｃ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＩＣが、１０％未満である；または
ｄ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＴＣが、５０％未満である、
前記方法。
ａ）前記がんが、尿路上皮癌であり、かつＩＣが、５％未満である；
ｂ）前記がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつＩＣが、１％未満である；または
ｃ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＩＣが、１０％未満である；または
ｄ）前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつＴＣが、５０％未満である、
前記方法。
【0016】
実施形態１１ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、アテゾリズマブである、実施形態１０に記載の方法。
【0017】
実施形態１２ 前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、治療量以下の用量で投与する、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の方法。
【0018】
実施形態１３ がんを治療する方法であって、前記方法が、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、治療量以下の用量で投与される、前記方法。
【0019】
実施形態１４ 前記抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の前記治療量以下の用量が、ａ）治療される前記がんについての前記抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で前記抗体を投与することを含む、実施形態１２または１３記載の方法。
【0020】
実施形態１５ 前記抗体の前記治療量以下の用量は、治療される前記がんの前記抗体の前記単剤療法の用量よりも少ない用量を含む、実施形態１２～１４のいずれか１つに記載の方法。
【0021】
実施形態１６ 前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の用量の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％である前記抗体の用量である、実施形態１５に記載の方法。
【0022】
実施形態１７ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、前記単剤療法の用量が、２００ｍｇまたは４００ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0023】
実施形態１８ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、前記単剤療法の用量が、２４０ｍｇ、３６０ｍｇ、または４８０ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0024】
実施形態１９ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－１抗体が、セミプリマブであり、前記単剤療法の用量が、３５０ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0025】
実施形態２０ 前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブであり、前記単剤療法の用量が、８００ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0026】
実施形態２１ 前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブであり、前記単剤療法の用量が、１０ｍｇ／ｋｇまたは１５００ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0027】
実施形態２２ 前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブであり、前記単剤療法の用量が、８４０ｍｇ、１２００ｍｇ、または１６８０ｍｇである、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0028】
実施形態２３ 前記抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの単剤療法の投与頻度よりも少ない前記抗体の投与頻度を含む、実施形態１２～２２のいずれか１つに記載の方法。
【0029】
実施形態２４ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、３週間ごとまたは６週間ごとである、前記方法。
【0030】
実施形態２５ 実施形態２４に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、前記単剤療法の用量が、３週間ごとに２００ｍｇであるか、または６週間ごとに４００ｍｇである、前記方法。
【0031】
実施形態２６ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとまたは３週間ごとまたは４週間ごとである、前記方法。
【0032】
実施形態２７ 実施形態２６に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで前記抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、かつ前記単剤療法の用量が、２週間ごとに２４０ｍｇ、３週間ごとに３６０ｍｇ、または４週間ごとに４８０ｍｇである、前記方法。
【0033】
実施形態２８ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、セミプリマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、３週間ごとである、前記方法。
【0034】
実施形態２９ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとである、前記方法。
【0035】
実施形態３０ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごとまたは４週間ごとである、前記方法。
【0036】
実施形態３１ 実施形態３０に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブであり、かつ前記単剤療法の用量が、２週間ごとに１０ｍｇ／ｋｇ ｍｇ、または４週間ごとに１５００ｍｇである、前記方法。
【0037】
実施形態３２ 実施形態２３に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブであり、かつ前記単剤療法の投与頻度が、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとである、前記方法。
【0038】
実施形態３３ 実施形態３２に記載の方法であって、前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブであり、前記単剤療法の用量が、２週間ごとに８４０ｍｇ、３週間ごとに１２００ｍｇ、または４週間ごとに１６８０ｍｇである、前記方法。
【0039】
実施形態３４ 前記がんが、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。
【0040】
実施形態３５ がんを治療する方法であって、前記方法は、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、がんを有する対象に投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、ここで、前記がんが、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される、前記方法。
【0041】
実施形態３６ 前記方法が、尿路上皮癌の第１選択治療である、実施形態３４または３５に記載の方法。
【0042】
実施形態３７ 前記がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載の方法。
【0043】
実施形態３８ がんを治療する方法であって、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、前記がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む、前記方法。
【0044】
実施形態３９ 前記がんが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異及び／またはＲＯＳ１遺伝子における変異を含む、実施形態３７または３８に記載の方法。
【0045】
実施形態４０ 前記がんが、非小細胞肺癌であり、かつ前記がんが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異を含む、実施形態３７～３９のいずれか１つに記載の方法。
【0046】
実施形態４１ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはニボルマブである；または前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブである、実施形態４０に記載の方法。
【0047】
実施形態４２ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのうちの少なくとも１つに対する結合が増強されているＦｃを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0048】
実施形態４３ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む、実施形態４２に記載の方法。
【0049】
実施形態４４ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む、実施形態４２に記載の方法。
【0050】
実施形態４５ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む、実施形態４２に記載の方法。
【0051】
実施形態４６ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む、実施形態４２に記載の方法。
【0052】
実施形態４７ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記Ｆｃは、ＦｃγＲＩＩｂへの結合が減少している、実施形態４２～４６のいずれか１つに記載の方法。
【0053】
実施形態４８ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、重鎖定常領域内に置換Ｓ２９３Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0054】
実施形態４９ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、非フコシル化抗体である、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0055】
実施形態５０ 前記方法が、抗ＴＩＧＩＴ抗体の組成物を投与することを含み、前記組成物中の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の前記抗体が、非フコシル化抗体である、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0056】
実施形態５１ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記Ｆｃが、同じアイソタイプの対応する野生型Ｆｃと比較して、増強されたＡＤＣＣ及び／またはＡＤＣＰ活性を有するＦｃを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0057】
実施形態５２ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、以下を含む、先行実施形態のいずれか１項に記載の方法：
ａ）配列番号７～９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１；
ｂ）配列番号１０～１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２；
ｃ）配列番号１４～１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；
ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１；
ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２；及び
ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３。
ａ）配列番号７～９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１；
ｂ）配列番号１０～１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２；
ｃ）配列番号１４～１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；
ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１；
ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２；及び
ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３。
【0058】
実施形態５３ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、以下の配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ、及びＣＤＲ３を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法：
ａ）それぞれ、配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９；または
ｂ）それぞれ、配列番号８、１１、１４、１７、１８、及び１９；または
ｃ）それぞれ、配列番号９、１２、１５、１７、１８、及び１９；または
ｄ）それぞれ、配列番号８、１３、１６、１７、１８、及び１９；または
ｅ）それぞれ、配列番号８、１２、１６、１７、１８、及び１９。
ａ）それぞれ、配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９；または
ｂ）それぞれ、配列番号８、１１、１４、１７、１８、及び１９；または
ｃ）それぞれ、配列番号９、１２、１５、１７、１８、及び１９；または
ｄ）それぞれ、配列番号８、１３、１６、１７、１８、及び１９；または
ｅ）それぞれ、配列番号８、１２、１６、１７、１８、及び１９。
【0059】
実施形態５４ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、配列番号１～５から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0060】
実施形態５５ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、配列番号２０～２４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖と、を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0061】
実施形態５６ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体を、治療量以下の用量で投与する、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0062】
実施形態５７ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、ａ）治療される前記がんについての前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で前記抗ＴＩＧＩＴ抗体を投与することを含む、実施形態５６に記載の方法。
【0063】
実施形態５８ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記単剤療法の用量よりも少ない用量を含む、実施形態５６または５７に記載の方法。
【0064】
実施形態５９ 前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の用量の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％である前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の用量である、実施形態５６～５８のいずれか１つに記載の方法。
【0065】
実施形態６０ 前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の前記治療量以下の用量が、治療される前記がんの前記単剤療法の投与頻度よりも少ない前記抗ＴＩＧＩＴ抗体の投与頻度を含む、実施形態５６～５９のいずれか１つに記載の方法。
【0066】
実施形態６１ 前記方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の方法。
【0067】
実施形態６２ 前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ＣＴ－０１１、ＢＧＢ－Ａ３１７、セミプリマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、ＴＳＲ－０４２、ＰＤＲ－００１、またはトリパリマブから選択される、実施形態６１に記載の方法。
【0068】
実施形態６３ 前記方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含む、実施形態１～６０のいずれか１つに記載の方法。
【0069】
実施形態６４ 前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、デュルバルマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブまたはアベルマブから選択される、実施形態６３に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【0070】
【図1A】完全に免疫応答性のマウスにおいて成長させた１００ｍｍ３でのＲｅｎｃａ腫瘍における免疫細胞の組成を示す。
【図1B】完全に免疫応答性のマウスにおいて成長させた１００ｍｍ３でのＣＴ２６腫瘍における免疫細胞の組成を示す。
【図1C】完全に免疫応答性のマウスにおいて成長させた１００ｍｍ３でのＭＣ３８腫瘍における免疫細胞の組成を示す。
【図2】これらの腫瘍におけるＰＤ－１（Ａ）及びＰＤ－Ｌ１（Ｂ）のｍＲＮＡ発現レベルを示す。
【図3】皮下同系ＭＣ３８腫瘍に対する、治療量以下の用量の抗ＰＤ－１抗体と組み合わせた、異なるエフェクター機能を有するＦｃ骨格を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体の治療量以下の用量の治療のｉｎ ｖｉｖｏデータを示す。
【図4】皮下同系ＣＴ２６腫瘍（Ａ）またはＲｅｎｃａ腫瘍（Ｂ）に対する治療量以下の用量の非フコシル化エフェクター機能増強抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ抗体（すなわち、非フコシル化ヒトＩｇＧ１骨格に対応する非フコシル化マウスＩｇＧ２ａとして再構成されたＳＥＡ－ＴＧＴ抗体）による治療、治療量以下の用量の抗ＰＤ－１抗体による治療、またはその両方の組み合わせによる治療のｉｎ ｖｉｖｏデータを示す。
【図5A】皮下同系ＭＣ３８腫瘍に対する治療用量での異なる抗ＴＩＧＩＴ抗体による単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【図5B】皮下同系ＣＴ２６腫瘍に対する治療用量での異なる抗ＴＩＧＩＴ抗体による単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【図5C】皮下同系Ｒｅｎｃａ腫瘍に対する治療用量での異なる抗ＴＩＧＩＴ抗体による単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【図5D】同系皮下腫瘍ＭＣ３８における治療用量の抗ＰＤ－１抗体を用いた単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【図5E】同系皮下腫瘍ＣＴ２６における治療用量の抗ＰＤ－１抗体を用いた単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【図5F】同系皮下腫瘍Ｒｅｎｃａにおける治療用量の抗ＰＤ－１抗体を用いた単剤治療についてのｉｎ ｖｉｖｏ応答データを示す。
【発明を実施するための形態】
【0071】
Ｉ．序文
本発明は、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんは、抗ＴＩＧＩＴ抗体によって、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて治療することができるという驚くべき知見に部分的に基づく。このことは特に、Ｆｃ結合特性及びエフェクター機能が増強された抗ＴＩＧＩＴ抗体の場合であることが判明した。所望のＦｃ結合特性には、活性化ＦｃγＲへの結合の増強、阻害性ＦｃγＲへの結合の減少、ＡＤＣＣ活性の増強、及び／またはＡＤＣＰ活性の増強などの活性が含まれた。所望の活性を有する特定のそのような抗体は、非フコシル化抗体であった。
本発明は、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんは、抗ＴＩＧＩＴ抗体によって、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて治療することができるという驚くべき知見に部分的に基づく。このことは特に、Ｆｃ結合特性及びエフェクター機能が増強された抗ＴＩＧＩＴ抗体の場合であることが判明した。所望のＦｃ結合特性には、活性化ＦｃγＲへの結合の増強、阻害性ＦｃγＲへの結合の減少、ＡＤＣＣ活性の増強、及び／またはＡＤＣＰ活性の増強などの活性が含まれた。所望の活性を有する特定のそのような抗体は、非フコシル化抗体であった。
【0072】
本発明者らは、これらの知見に基づき、がんが低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現する対象に対して、抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体とを組み合わせて投与することにより、腫瘍のサイズ及び／または成長速度を低下させることを実証した。いくつかの実施形態では、抗体は、治療量以下の用量で投与され得る。様々な実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたＦｃ結合特性及び／またはエフェクター機能を有する。
【0073】
したがって、本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、がんを治療する方法であって、本方法は、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、がんを有する対象に投与することを含み；ここで、がんは、ＣＰＳ（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ）によって測定して１０未満、またはＴＰＳ（Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）によって測定して５０％未満のレベルのＰＤ－Ｌ１を発現し、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む。
【0074】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、治療量以下の用量で投与される。
【0075】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、治療量以下の用量で投与される。
【0076】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の両方は、治療量以下の用量で投与される。
【0077】
いくつかの実施形態では、本方法は、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、がんを有する対象に投与することを含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、ここで、がんは、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される。
【0078】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む。
【0079】
ＩＩ．定義
別段の定義のない限り、本明細書で用いられている技術用語と科学用語は、当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。例えば、Ｌａｃｋｉｅ，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（４ｔｈ ｅｄ．２００７）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ １９８９）を参照されたい。本発明の実施の際には、本明細書に記載されている方法、器具及び材料と類似または同等の方法、器具及び材料のいずれかを用いることができる。
別段の定義のない限り、本明細書で用いられている技術用語と科学用語は、当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。例えば、Ｌａｃｋｉｅ，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（４ｔｈ ｅｄ．２００７）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ １９８９）を参照されたい。本発明の実施の際には、本明細書に記載されている方法、器具及び材料と類似または同等の方法、器具及び材料のいずれかを用いることができる。
【0080】
本明細書で使用する場合、内容上明らかに別段に示されている場合を除き、「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」という単数形には、複数の言及物が含まれる。したがって、例えば「ａｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ」への言及は、任意選択的に２つ以上のかかる分子の組み合わせなどを含む。
【0081】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者であれば容易に理解するそれぞれの値の通常の誤差範囲を指す。
【0082】
「抗体」という用語は、インタクト抗体及びその抗原結合フラグメントを含み、抗原結合フラグメントは、抗原結合領域と、ＣＨ２に位置するアスパラギン（Ｎ）２９７を含む重鎖定常領域の少なくとも一部とを含む。典型的には、「可変領域」は、抗体の抗原結合領域を含み、結合の特異性及び親和性に関与する。Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐａｕｌ，ｅｄ．，Ｗｏｌｔｅｒｓ Ｋｌｕｗｅｒ Ｈｅａｌｔｈ／Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２０１３）を参照されたい。軽鎖は、典型的には、カッパまたはラムダのいずれかに分類される。重鎖は、典型的には、順番に免疫グロブリンクラス、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥそれぞれを定義する、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロンに分類される。
【0083】
「抗体」という用語には、二価または二重特異性分子、ダイアボディ、トリアボディ及びテトラボディも含まれる。二価及び二重特異性分子は、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７、Ｐａｃｋ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９２）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３１：１５７９、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９３），ＰＮＡＳ． ＵＳＡ９０：６４４４、Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８、Ｚｈｕ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．６：７８１、Ｈｕ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５６：３０５５、Ａｄａｍｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５３：４０２６及びＭｃＣａｒｔｎｅｙ，ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８：３０１に記載されている。
【0084】
「モノクローナル抗体」は、実質的に同種の抗体の集団から得られた抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る天然に存在する変異の可能性を除いて同一である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明による使用対象のモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５が初めて述べたハイブリドーマ法によって作製してもよく、または組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４８１６５６７号を参照されたい）によって作製してもよい。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１－５９７に記載の技術を用いてファージ抗体ライブラリーから単離され得るか、または他の方法で作製され得る。本明細書に記載の抗体は、モノクローナル抗体である。
【0085】
モノクローナル抗体のその標的抗原への特異的結合は、少なくとも１０６、１０７、１０８、１０９、または１０１０Ｍ－１の親和性を意味する。特異的結合は、その規模が検出可能なほど高く、少なくとも１つの無関係な標的に生じる非特異的結合と区別可能である。特異的結合は、特定の官能基間の結合形成または特定の空間適合（例えば、ロックアンドキー型）の結果であるのに対して、非特異的結合は通常、ファンデルワールス力の結果である。
【0086】
基本的な抗体構造単位は、サブユニットの四量体である。各四量体は、２つの同一のポリペプチド鎖対を含み、各対は、１本の「軽」鎖（約２５ｋＤａ）及び１本の「重」鎖（約５０～７０ｋＤａ）を有する。各鎖のアミノ末端部分は、主に抗原認識に関与する約１００～１１０以上のアミノ酸長の可変領域を含む。この可変領域は、最初に切断可能なシグナルペプチドに連結して発現する。シグナルペプチドを含まない可変領域は、成熟可変領域と呼ばれることがある。したがって、例えば、軽鎖成熟可変領域は、軽鎖シグナルペプチドを含まない軽鎖可変領域を意味する。各鎖のカルボキシ末端部分は、主にエフェクター機能に関与する定常領域を画定する。
【0087】
軽鎖は、カッパまたはラムダのいずれかに分類される。重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンとして分類され、これらによって、抗体のアイソタイプがそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥと定義される。軽鎖及び重鎖内で、可変領域及び定常領域は、約１２以上のアミノ酸の「Ｊ」領域によって連結され、重鎖は約１０以上のアミノ酸の「Ｄ」領域も含む。（一般に、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９８９，Ｃｈ．７（これは、すべての目的のためにその全体が参照により組み込まれる）を参照のこと）。
【0088】
各軽鎖／重鎖対の成熟可変領域は、抗体結合部位を形成する。したがって、インタクト抗体は、２つの結合部位を有する。二機能性または二重特異性抗体を除いて、２つの結合部位は同じである。鎖はすべて、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる３つの超可変領域によって連結された、比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）の同じ一般構造を示す。各対の２本の鎖からのＣＤＲはフレームワーク領域によって整列され、これにより、特定のエピトープへの結合が可能になる。Ｎ末端からＣ末端へ、軽鎖及び重鎖の両方がドメインＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４を含む。各ドメインへのアミノ酸の割り当ては、Ｋａｂａｔ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９８７及び１９９１）またはＣｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７８－８８３（１９８９）、またはＫａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａ、またはＩＭＧＴ（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ）、ＡｂＭ またはＣｏｎｔａｃｔまたは他の従来のＣＤＲの定義に従う。また、Ｋａｂａｔは、異なる重鎖間または異なる軽鎖間の対応する残基に同じ番号が割り当てられる、広く使用されているナンバリング規則（Ｋａｂａｔナンバリング）も提供する。文脈から特に明らかでない限り、Ｋａｂａｔナンバリングを使用して、可変領域内のアミノ酸の位置を指定する。文脈から特に明らかでない限り、ＥＵナンバリングは、定常領域の指定された位置に使用される。
【0089】
「ヒト化」抗体は、非ヒト抗体の反応性を保持しながら、ヒトにおける免疫原性が低い抗体である。これは、例えば、非ヒトＣＤＲ領域を保持し、抗体の残りの部分をそれらのヒト対応物と置換することによって達成され得る。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｏｉ，Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４４：６５－９２（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，２８：４８９－４９８（１９９１）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，３１（３）：１６９－２１７（１９９４）を参照されたい。
【0090】
本明細書で使用される「キメラ抗体」という用語は、（ａ）定常領域またはその一部が置換されて、これにより抗原結合部位（可変領域、ＣＤＲ、またはその一部）が異なる種の定常領域に連結している抗体分子を指す。
【0091】
「エピトープ」という用語は、抗体が結合する抗原上の任意の部位を指す。エピトープは、１つ以上のタンパク質の三次フォールディングが近接している連続アミノ酸または非連続アミノ酸から形成され得る。連続アミノ酸から形成されたエピトープは典型的には、変性溶媒にさらされたときに保持されるが、三次フォールディングによって形成されたエピトープは典型的には、変性溶媒で処理することにより喪失する。エピトープは、典型的には、少なくとも３つ、より通常は少なくとも５または８～１０のアミノ酸を固有の空間コンフォメーション内に含む。エピトープの空間コンフォメーションを決定する方法としては、例えば、Ｘ線結晶学及び２次元核磁気共鳴が挙げられる。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇｌｅｎｎ Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）を参照されたい。
【0092】
同じまたは重複するエピトープを認識する抗体は、ある抗体が別の抗体の標的抗原への結合と競合する能力を示す簡素なイムノアッセイにおいて同定され得る。抗体のエピトープは、その抗原に結合した抗体のＸ線結晶構造解析によって定義して、接触残基を同定することもできる。あるいは、一方の抗体の結合を減少させるかまたは排除する抗原中のすべてのアミノ酸変異が他方の結合を減少させるかまたは排除する場合には、２つの抗体は、同じエピトープを有する。一方の抗体の結合を減少させるかまたは排除するいくつかのアミノ酸変異が他方の結合を減少させるかまたは排除する場合には、２つの抗体は、重複するエピトープを有する。
【0093】
抗体間の競合は、試験中の抗体が参照抗体の共通抗原への特異的結合を阻害するアッセイによって決定される（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５０：１４９５，１９９０を参照されたい）。競合結合アッセイで測定したときに、過剰な試験抗体（例えば、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍または１００倍）が、参照抗体の結合を少なくとも５０％、しかし好ましくは７５％、９０％または９９％阻害する場合、試験抗体は、参照抗体と競合している。競合アッセイによって同定される抗体（競合抗体）としては、参照抗体と同じエピトープに結合する抗体、及び立体障害が発生するために参照抗体が結合するエピトープに十分近い隣接エピトープに結合する抗体が挙げられる。
【0094】
「特異的に結合する」という語句は、サンプル中のその標的に対して、非標的化合物に結合するよりも、より高い親和性、結合力、より容易に、及び／またはより長い持続時間で標的に結合する分子（例えば、抗体または抗体フラグメント）を指す。いくつかの実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、非標的化合物よりも少なくとも２倍高い親和性、例えば、少なくとも４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、２５倍、５０倍、または１００倍の親和性で標的に結合する抗体である。例えば、ＴＩＧＩＴに特異的に結合する抗体は、典型的には、非ＴＩＧＩＴ標的よりも少なくとも２倍高い親和性でＴＩＧＩＴに結合する。この定義を読んだ当業者は、例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部分またはエピトープ）が、第２の標的に特異的または優先的に結合してもしなくてもよいことを理解するであろう。そのため、「特異的に結合する」は、排他的結合を（含むことはできるが）必ずしも必要としない。
【0095】
「結合親和性」という用語は、本明細書では、２つの分子、例えば抗体またはそのフラグメントと抗原との間の非共有結合による相互作用の強度の尺度として使用される。「結合親和性」という用語は、一価の相互作用（内因性活性）を示すために使用される。
【0096】
一価相互作用による２つの分子、例えば抗体またはそのフラグメントと抗原との間の結合親和性は、解離定数（ＫＤ）の決定によって定量化され得る。次に、ＫＤは、非限定的な例として、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法（Ｂｉａｃｏｒｅ（商標））を使用して、複合体形成及び解離の動態を測定することによって決定することができる。一価複合体の会合及び解離に対応する速度定数は、それぞれ会合速度定数ｋａ（またはｋｏｎ）及び解離速度定数ｋｄ（またはｋｏｆｆ）と呼ばれる。ＫＤは、式ＫＤ＝ｋｄ／ｋａによってｋａ及びｋｄに関連付けられる。解離定数の値は、周知の方法によって直接決定することができ、または例えばＣａｃｅｃｉ ｅｔ ａｌ．（１９８４，Ｂｙｔｅ ９：３４０－３６２）に記載のものなどの方法によって、複合混合物についても算出され得る。例えば、ＫＤは、Ｗｏｎｇ＆Ｌｏｈｍａｎ（１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５４２８－５４３２）によって開示されたものなど、二重フィルターニトロセルロースフィルター結合アッセイを使用して確立され得る。標的抗原に対する抗体などのリガンドの結合能力を評価するための他の標準アッセイは、当技術分野で知られており、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、ＲＩＡ、及びフローサイトメトリー分析、ならびに本明細書の他の場所で例示されている他のアッセイが挙げられる。抗体の結合動態及び結合親和性はまた、当技術分野で知られている、または以下の実施例のセクションに記載の標準アッセイ、例えばＢｉａｃｏｒｅ（商標）システムを使用することによる、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）；ＫｉｎＥｘＡ（登録商標）などの結合平衡除外法；及びＢｉｏＬａｙｅｒ干渉法（例えば、ＦｏｒｔｅＢｉｏ（登録商標）Ｏｃｔｅｔプラットフォームを使用）によって判定することもできる。いくつかの実施形態では、結合親和性は、ＢｉｏＬａｙｅｒ干渉測定アッセイを使用して決定される。例えば、Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，３８：４００－４０７（２０１０）；Ｄｙｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，３７９：３０－４１（２０１２）；及びＥｓｔｅｐ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｂｓ，２０１３，５：２７０－２７８を参照されたい。
【0097】
本明細書で使用される「交差反応」という用語は、抗体が産生された抗原以外の抗原に抗体が結合する能力を指す。いくつかの実施形態では、交差反応性は、抗体が産生された抗原とは別の種由来の抗原に結合する抗体の能力を指す。非限定的例として、ヒトＴＩＧＩＴ抗原に対して産生される本明細書に記載の抗ＴＩＧＩＴ抗体は、異なる種（例えば、マウスまたはサル）由来のＴＩＧＩＴとの交差反応性を呈し得る。
【0098】
「単離された」抗体は、その自然環境の成分から同定され、分離及び／または回収された抗体、及び／または組換えにより産生された抗体を指す。「精製抗体」とは、典型的には、その産生または精製から生じる干渉タンパク質及び他の夾雑物に対して少なくとも５０％ｗ／ｗ純粋である抗体であるが、モノクローナル抗体が、過剰の薬学的に許容される担体（複数可）、またはその使用を容易にすることを意図した他のビヒクルと組み合わされる可能性を排除するものではない。干渉タンパク質及び他の夾雑物には、例えば、抗体が単離されるかまたは組換えにより産生される細胞の細胞成分が含まれ得る。場合によっては、モノクローナル抗体は、産生または精製による干渉タンパク質及び夾雑物に対して少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５または９９％ｗ／ｗ純粋である。ラット、キメラ、加工（ｖｅｎｅｅｒｅｄ）及びヒト化抗体を含む、本明細書に記載の抗体は、単離及び／または精製された形態で提供することができる。
【0099】
「Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ」または「ＣＰＳ」は、がん由来の腫瘍サンプルなど、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を測定する免疫組織化学的方法である。ＣＰＳは、ＰＤ－Ｌ１染色細胞（腫瘍細胞、リンパ球、マクロファージ）の数を生存腫瘍細胞の総数で割り、１００を掛けたものである。一部の治療的処置では、腫瘍サンプルは、ＣＰＳ≧１の場合にＰＤ－Ｌ１発現を有するとみなされる。例えば、胃癌、子宮頸癌、及び頭頸部扁平上皮癌を有する対象などの、特定のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤療法を受けるのに適した対象は、ＣＰＳ≧１である必要がある。場合によっては、ペムブロリズマブで治療されている尿路上皮癌（膀胱癌）、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、またはトリプルネガティブ乳癌を有する患者など、特定のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤療法を受けるのに適した対象は、ＣＰＳ≧１０である必要がある。
【0100】
「Ｔｕｍｏｒ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ」または「ＴＰＳ」は、がん由来の腫瘍サンプルなど、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を測定する免疫組織化学的方法である。ＴＰＳは、任意の強度で部分的または完全な膜染色を示す生存腫瘍細胞のパーセンテージである。いくつかの治療的処置では、ＴＰＳ≧１％の場合には、腫瘍サンプルがＰＤ－Ｌ１発現を有し、ＴＰＳ≧５０％の場合には、高いＰＤ－Ｌ１発現を有すると考えられる。例えば、非小細胞肺癌を有する対象など、特定のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤療法（例えば、ペムブロリズマブ）を受けるのに適した対象は、ＴＰＳ≧１％である必要がある。場合によっては、特定のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤療法（例えば、セミプリマブ）を受けるのに適した対象は、ＴＰＳ≧５０％である必要がある。
【0101】
腫瘍浸潤免疫細胞（ＩＣ）染色または「ＩＣ」は、がん由来の腫瘍サンプルなどのＰＤ－Ｌ１の発現を測定する免疫組織化学的方法である。発現は、任意の強度のＰＤ－Ｌ１染色ＩＣによって占有される腫瘍面積の割合として測定される。試験片が、腫瘍浸潤免疫細胞において任意の強度のＰＤ－Ｌ１染色が腫瘍面積の５％以上を占める場合、この試験片は、≧５％ＩＣのＰＤ－Ｌ１発現レベルとなる。試験片が、腫瘍浸潤免疫細胞において任意の強度のＰＤ－Ｌ１染色が腫瘍面積の５％未満である場合、この試験片は、＜５％ＩＣのＰＤ－Ｌ１発現レベルとなる。一部の治療的処置では、ＩＣを用いて、尿路上皮癌組織由来のＰＤ－Ｌ１発現をスコア化する。切除、経尿道的膀胱腫瘍切除術（ＴＵＲＢＴ）、ならびに原発部位及び転移部位の両方からのコア針生検から得られた尿路上皮癌組織サンプルが、ＩＣアッセイで使用され得る。市販のＩＣアッセイとしては、Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）Ａｓｓａｙ（商標）が挙げられる。
【0102】
腫瘍細胞または「ＴＣ」スコアは、任意の強度のＰＤ－Ｌ１発現腫瘍細胞のパーセンテージ（％ＴＣ）を指し、ＴＰＳに類似している。いくつかの実施形態では、ＴＣスコアは、Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）アッセイを用いて得られる。ＴＣスコアは、例えば、ＮＳＣＬＣ患者がアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ）で治療される場合に使用される。この適応症では、治療の閾値は、ＴＣスコア≧５０％である。ＴＣスコア化に関する更なる情報は、例えば、１）Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｌａｂｅｌｉｎｇ：Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）Ａｓｓａｙ（２０２０）Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．、２）Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）Ａｓｓａｙ：Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ Ｇｕｉｄｅ（２０１９）Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．で入手可能である。
【0103】
「対象」、「患者」、「個体」などの用語は、互換的に使用され、指示されている場合を除き、ヒト及びヒト以外の霊長類などの哺乳動物、ならびにウサギ、ラット、マウス、ヤギ、ブタ、及び他の哺乳動物の種などを指す。この用語は、対象が特定の疾患と診断されたことを必ずしも示すものではないが、典型的には、医学的管理下にある個体を指す。
【0104】
「治療法」、「治療」、及び「改善」という用語は、症状の重症度のあらゆる軽減を指す。がんを治療する場合、治療とは、例えば、腫瘍サイズ、がん細胞の数、成長速度、転移活性、非がん細胞の細胞死などを減少させることを指すことができる。本明細書で使用される「治療する」及び「防止する」は、絶対的用語であることを意図するものではない。治療及び予防とは、あらゆる発症の遅延、症状の改善、患者の生存率の改善、生存時間の延長または生存率の上昇などを指し得る。治療及び予防は、本明細書に記載の治療を受けていない患者よりも症状の頻度または重症度が低くなるように、完全（検出可能な症状が残っていない）または部分的であり得る。治療の効果は、治療を受けていない個体または個体のプール、または同じ患者の治療前または治療中の異なる時点と比較することができる。いくつかの態様では、疾患の重症度は、例えば、投与前の個体または治療を受けていない対照個体と比較して、少なくとも１０％低下する。いくつかの態様では、疾患の重症度は、少なくとも２５％、５０％、７５％、８０％、または９０％低下するか、場合によっては、標準診断技術を使用してもはや検出できない。
【0105】
本明細書で使用される場合、剤（例えば、本明細書に記載の抗体）の「治療量」または「治療有効量」は、対象における疾患（例えば、がん）の症状を予防する、緩和する、和らげる、改善する、または重症度を軽減する剤の量である。
【0106】
本明細書で使用される場合、剤（例えば、本明細書に記載される抗体）の「治療量以下の量」または「治療量以下の用量」は、同じ種類またはサブタイプのがんなど、同じ適応症を治療するために剤を単剤療法として使用する場合に投与される用量よりも少ない剤の用量である。治療量以下の用量は、単剤療法の用量の頻度を減少させて、これにより、対象が全体的により少ない用量の剤を受けるようにすることを含むことができる。
【0107】
「投与する」、「投与される」、または「投与すること」という用語は、所望の生物学的作用部位に剤、化合物、または組成物を送達する方法を指す。これらの方法には、局所送達、非経口送達、静脈内送達、皮内送達、筋肉内送達、結腸送達、直腸送達、または腹腔内送達が含まれるが、これらに限定されない。本明細書に記載の剤及び方法と共に任意に使用される投与技術としては、例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｄ．；Ｐｅｒｇａｍｏｎ；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｄｉｔｉｏｎ），Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡで論じられているものなどが挙げられる。
【0108】
ＩＩＩ．ＰＤ－Ｌ１の発現レベル
対象におけるがん中でのＰＤ－Ｌ１の発現レベルは、本明細書に開示される任意の組成物を投与する前に、または任意の方法を使用する前に測定することができる。発現レベルは、当技術分野で知られている任意の方法によって決定され得る。
対象におけるがん中でのＰＤ－Ｌ１の発現レベルは、本明細書に開示される任意の組成物を投与する前に、または任意の方法を使用する前に測定することができる。発現レベルは、当技術分野で知られている任意の方法によって決定され得る。
【0109】
ＰＤ－Ｌ１の発現レベルを評価するために、いくつかの実施形態では、この治療法を必要とする対象からがん組織サンプルを得ることができる。別の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の発現レベルの評価は、がん組織サンプルを得ることなく達成することができる。いくつかの実施形態では、好適な対象を選択することには、（ｉ）任意により、対象から得られたがん組織サンプルを提供することであって、ここで、がん組織サンプルは、がん細胞及び／またはがん浸潤性炎症細胞を含む、提供することと；（ｉｉ）がん組織サンプル中の細胞表面上にＰＤ－Ｌ１を発現する細胞の割合を評価することと、を含む。
【0110】
しかしながら、がん組織サンプルにおけるＰＤ－Ｌ１の発現を測定することを含む方法のいずれにおいても、対象から得られたがん組織サンプルを提供することを含むステップは、任意のステップであることが理解されるものとする。特定の実施形態において、細胞表面上にＰＤ－Ｌ１を発現するがん組織サンプル中の細胞を同定するまたは細胞の数もしくは割合を決定するための「測定する」または「評価する」ステップは、ＰＤ－Ｌ１の発現についてアッセイする形質転換法、例えば、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）アッセイまたは免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイを実施することにより実施されることも理解されるものとする。いくつかの実施形態では、形質転換ステップは伴わずに、例えば、試験室からの試験結果の報告を検討することによってＰＤ－Ｌ１の発現が評価される。特定の実施形態では、方法のＰＤ－Ｌ１の発現を評価するまでのステップ及びＰＤ－Ｌ１発現を評価することを含めたステップでは、治療に好適である対象を選択する際に使用するために、医師または他の医療提供者に提供され得る中間結果を提供する。特定の実施形態では、中間結果を提供するステップは、医療従事者、または医療従事者の指示の下で行動する者によって実行される。他の実施形態では、これらのステップは、独立した試験室によって、または試験室技術者などの独立した人員によって行われる。
【0111】
いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１を発現する細胞の割合は、ＰＤ－Ｌ１ ＲＮＡの存在を判断するためのアッセイを実施することによって評価される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１ ＲＮＡの存在は、ＲＴ－ＰＣＲ、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、またはＲＮａｓｅ保護によって決定される。他の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１を発現する細胞の割合は、ＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの存在を判断するためのアッセイを実施することによって評価される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの存在は、ＩＨＣアッセイ、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ｉｎ ｖｉｖｏイメージング、またはフローサイトメトリーによって決定される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の発現は、ＩＨＣアッセイによって決定される。Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９（１３）：３４６２－３４７３を参照されたい。
【0112】
イメージング技術は、がん研究及び治療において、重要な手段を提供している。ポジトロン放射断層撮影（ＰＥＴ）、単一光子放出型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、蛍光反射分光法（ＦＲＩ）、蛍光媒介断層撮影（ＦＭＴ）、生物発光分光法（ＢＬＩ）、レーザー走査型共焦点顕微鏡法（ＬＳＣＭ）及び多光子顕微鏡法（ＭＰＭ）を含む分子イメージングシステムの最近の開発は、がん研究におけるこれらの技術の更なる普及を示唆している可能性がある。これらの分子イメージングシステムの一部は、臨床医が身体内でのがんの位置を確認できるのみでなく、がんの挙動及び／または治療薬物に対する応答性に影響を与える特定の分子、細胞、及び生物学的プロセスの発現及び活性を可視化できる（Ｃｏｎｄｅｅｌｉｓ ａｎｄ Ｗｅｉｓｓｌｅｄｅｒ，Ｉｎ ｖｉｖｏ ｉｍａｇｉｎｇ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ．Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．Ｂｉｏｌ．２（１２）：ａ００３８４８（２０１０））。ＰＥＴの感度及び解像度と組み合わせた抗体特異性により、免疫ＰＥＴイメージングは、組織サンプル中の抗原の発現を監視及びアッセイするのに特に有力になる（ＭｃＣａｂｅ ａｎｄ Ｗｕ，Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏＰＥＴ－ｎｏｔ ｊｕｓｔ ａ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２５（３）：２５３－６１（２０１０）；Ｏｌａｆｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＩｍｍｕｎｏＰＥＴ ｉｍａｇｉｎｇ ｏｆ Ｂ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｕｓｉｎｇ １２４Ｉ－ａｎｔｉ－ＣＤ２０ ｓｃＦｖ ｄｉｍｅｒｓ（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ），Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．２３（４）：２４３－９（２０１０））。特定の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の発現は、イムノＰＥＴイメージングによってアッセイされる。特定の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１を発現するがん組織サンプル中の細胞の割合は、がん組織サンプル中の細胞の表面上のＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの存在を決定するアッセイを実施することによって評価される。特定の実施形態では、がん組織サンプルは、ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）サンプルである。他の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１ポリペプチドの存在は、ＩＨＣアッセイによって決定される。さらなる実施形態では、ＩＨＣアッセイは、自動化プロセスを使用して実施される。いくつかの実施形態では、ＩＨＣアッセイは、ＰＤ－Ｌ１ポリペプチドに結合する抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体を使用して行われる。
【0113】
いくつかの実施形態では、自動ＩＨＣ法を使用して、ＦＦＰＥ組織片中の細胞表面上のＰＤ－Ｌ１の発現をアッセイする。本開示は、がん組織サンプル中のヒトＰＤ－Ｌ１抗原の存在を検出するための方法、またはサンプル中のヒトＰＤ－Ｌ１抗原のレベルもしくは抗原を発現する細胞の割合を定量化するための方法を提供し、本方法は、抗体またはその一部とヒトＰＤ－Ｌ１との間の複合体の形成を可能にする条件下で、試験サンプル及び陰性対照サンプルを、ヒトＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するモノクローナル抗体と接触させることを含む。特定の実施形態では、試験及び対照の組織サンプルは、ＦＦＰＥサンプルである。次いで、複合体の形成が検出され、試験サンプルと陰性対照サンプルとの間の複合体形成の差異により、サンプル中におけるヒトＰＤ－Ｌ１抗原の存在が示される。ＰＤ－Ｌ１の発現を定量化するために、様々な方法が使用される。
【0114】
いくつかの実施形態では、自動ＩＨＣ法は、（ａ）自動染色装置でマウントされた組織切片を脱パラフィンし、再水和することと；（ｂ）１１０℃で１０分間加熱したデクローキングチャンバー及びｐＨ６緩衝液を使用して抗原を回収することと；（ｃ）自動染色装置上に試薬をセットすることと；（ｄ）自動染色装置を実行することと、を含み、組織片中の内因性ペルオキシダーゼを中和するステップと；スライド上の非特異的タンパク質結合部位をブロックするステップと；スライドを一次抗体とインキュベートするステップと；ポスト一次ブロッキング剤とインキュベートするステップと；ＮｏｖｏＬｉｎｋポリマーとインキュベートするステップと；色原体基質を加えて発色させるステップと；ヘマトキシリンによる対比染色を行うステップと；を含む。
【0115】
がん組織サンプルにおけるＰＤ－Ｌ１の発現を評価するために、病理医は、顕微鏡で各視野の膜ＰＤ－Ｌ１＋がん細胞の数を調べ、陽性である細胞の割合を暗算で推定し、次に、これらを平均して最終パーセンテージを得ることができる。異なる染色強度は、０／ネガティブ、１＋／弱、２＋／中程度、及び３＋／強として定義することができる。パーセンテージ値は、最初に、０及び３＋バケットに割り当てることができ、次に中間の１＋及び２＋の強度が検討され得る。高度に不均一な組織では、試験片をゾーンに分割し、各ゾーンを別々にスコア化した後に、１つのパーセンテージ値セットに合わせることができる。異なる染色強度に対する陰性及び陽性の細胞の割合は、各領域から決定され、各ゾーンに中央値が付与される。最終的なパーセンテージ値は、各染色強度カテゴリー：ネガティブ、１＋、２＋及び３＋について組織に付与し得る。全ての染色強度の合計は、１００％となり得る。
【0116】
染色は、マクロファージ及びリンパ球などのがん浸潤性炎症細胞においても評価される。ほとんどの場合、マクロファージは、マクロファージの多くの割合で染色が観察されるため、内部陽性対照として機能する。３＋強度で染色する必要はないが、いかなる技術的不具合も除外するために、マクロファージの染色がないことが考慮され得る。原形質膜染色について、マクロファージ及びリンパ球を評価し、各細胞カテゴリーについて、すべてのサンプルについてのみ陽性または陰性であるとして記録することができる。染色はまた、外側／内側がん免疫細胞の指定にしたがって、特徴付けられる。「内側」とは、免疫細胞が、がん細胞間に物理的にインターカレートされることなく、がん組織内及び／またはがん領域の境界上にあることを意味する。「外側」とは、がんとの物理的な会合がないことを意味し、免疫細胞は、結合組織またはあらゆる会合隣接組織と関連する周辺部で見られる。
【0117】
これらのスコア付け方法の特定の実施形態では、サンプルは、独立して作業する２名の病理学者によってスコア付けされ、その後スコアが統合される。特定の他の実施形態では、陽性細胞及び陰性細胞の同定は、適切なソフトウェアを用いてスコア付けされる。
【0118】
ＩＨＣデータのより定量的な尺度として、ヒストスコアが使用される。いくつかの実施形態では、ヒストスコアは、以下のように計算され得る：ヒストスコア＝［（％がん×１（低強度））＋（％がん×２（中強度））＋（％がん×３（高強度）］。
【0119】
いくつかの実施形態では、ヒストスコアを決定するために、病理医は、試験片内の各強度カテゴリーにおける染色された細胞のパーセンテージを推定することができる。ほとんどのバイオマーカーの発現は不均一であるため、ヒストスコアは、発現全体のより真の表示であり得る。最終ヒストスコア範囲は、０（発現なし）～３００（最大発現）である。
【0120】
いくつかの実施形態では、がん中でのＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、がん浸潤性炎症細胞によるＰＤ－Ｌ１発現パーセントを炎症密度に乗じたものとして定義される調整炎症スコア（ＡＩＳ）スコアを決定することである。Ｔａｕｂｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｗｉｔｈ Ｂ７－ｈｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｅｌａｎｏｃｙｔｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ ｓｕｐｐｏｒｔｓ ａｎ ａｄａｐｔｉｖｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｅｓｃａｐｅ，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ． Ｍｅｄ．４（１２７）：１２７ｒａ３７（２０１２））。
【0121】
いくつかの実施形態では、がん中のＰＤ－Ｌ１の発現を定量化する手段は、ＣＰＳ（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ）を決定することであり、これは上述したように、ＰＤ－Ｌ１染色細胞（腫瘍細胞、リンパ球、マクロファージ）の数を生存腫瘍細胞の総数で割り、１００を掛けたものである。一部の治療的処置では、腫瘍サンプルは、ＣＰＳ≧１の場合にＰＤ－Ｌ１発現を有するとみなされる。例えば、ペムブロリズマブで治療されている尿路上皮癌（膀胱癌）、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、またはトリプルネガティブ乳癌の対象などの、特定のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤療法を受けるのに適した対象には、ＣＰＳ≧１０が必要である。
【0122】
いくつかの実施形態では、がん中のＰＤ－Ｌ１の発現を定量化する手段は、ＴＰＳ（Ｔｕｍｏｒ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）を決定することであり、これは、上記のように、任意の強度で部分的または完全な膜染色を示す生存腫瘍細胞のパーセンテージである。いくつかの治療的処置では、ＴＰＳ≧１％の場合には、腫瘍サンプルがＰＤ－Ｌ１発現を有し、ＴＰＳ≧５０％の場合には、高いＰＤ－Ｌ１の発現を有するとみなされる。
【0123】
いくつかの実施形態において、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量化するための手段は、腫瘍細胞（ＴＣ）スコアを決定することである。いくつかの治療的処置では、ＴＣ≧５０％の場合、腫瘍サンプルは、ＰＤ－Ｌ１の発現を有するとみなされる。
【0124】
いくつかの実施形態において、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量するための手段は、腫瘍浸潤免疫細胞（ＩＣ）スコアを決定することである。いくつかの治療的処置の場合、試験片が、腫瘍浸潤免疫細胞における任意の強度のＰＤ－Ｌ１染色が腫瘍面積の５％以上を占める場合、腫瘍サンプルは、ＰＤ－Ｌ１発現を有するとみなされる。
【0125】
いくつかの実施形態では、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｄａｋｏ）ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ２２３ ｐｈａｒｍＤｘ Ａｓｓａｙ（商標）であり、その説明は、以下のうちの少なくとも１つに見られ得る：１）Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｌａｂｅｌｉｎｇ，Ｄａｋｏ ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２２Ｃ３ ｐｈａｒｍＤｘ，Ｄａｋｏ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ；２）Ｋｅｙｔｒｕｄａ添付文書（２０２１）Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ；３）ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２２Ｃ３ ｐｈａｒｍＤｘ Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｕｓｅ（２０２０）Ｄａｋｏ，Ａｇｉｌｅｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ；４）Ｇａｒｏｎ ＥＢ，Ｒｉｚｖｉ ＮＡ，Ｈｕｉ Ｒ，ｅｔ ａｌ．Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３７２（２１）：２０１８－２０２８（２０１５）；及び５）Ｒｏａｃｈ Ｃ，Ｚｈａｎｇ Ｎ，Ｃｏｒｉｇｌｉａｎｏ Ｅ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｃｏｍｐａｎｉｏｎ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ＰＤ－Ｌ１ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，Ａｐｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ．Ｍｏｒｐｈｏｌ．２４：３９２－３９７（２０１６）。
【0126】
いくつかの実施形態では、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｄａｋｏ）ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２８－８ ｐｈａｒｍＤｘ Ａｓｓａｙ（商標）であり、その説明は、以下のうちの少なくとも１つに見られ得る：１）Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｌａｂｅｌｉｎｇ，Ｄａｋｏ ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２８－８ ｐｈａｒｍＤｘ（２０２０）Ｄａｋｏ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ；２）ＯＰＤＩＶＯ添付文書（２０２１）Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；３）ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２８－８ ｐｈａｒｍ Ｄｘ：Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ Ｍａｎｕａｌ（２０２１），Ｄａｋｏ，Ａｇｉｌｅｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ；及び４）Ｐｈｉｌｌｉｐｓ Ｔ，Ｓｉｍｍｏｎｓ Ｐ，Ｉｎｚｕｎｚａ ＨＤ，Ｃｏｇｓｗｅｌｌ Ｊ，Ｎｏｖｏｔｎｙ Ｊ Ｊｒ，Ｔａｙｌｏｒ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ＰＤ－Ｌ１ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ＩＨＣ）ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，Ａｐｐｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｍｏｒｐｈｏｌ．２３：５４１－９（２０１５）。
【0127】
いくつかの実施形態において、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、Ａｇｉｌｅｎｔ（Ｄａｋｏ）ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ７３－１０ Ａｓｓａｙ（商標）であり、その説明は、以下のうちの少なくとも１つに見出され得る：１）Ｈａｎｓ，Ｊ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．ＰＤ－Ｌ１ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｓｓａｙ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｎｏｎ－Ｓｍａｌｌ Ｃｅｌｌ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ：Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ７３－１０ Ａｓｓａｙ，Ｊ．Ｔｈｏｒａｃｉｃ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ １５：１３０６－１３１６（２０２０）；及び２）Ｂａｖｅｎｃｉｏ添付文書（２０２１）ＥＭＤ Ｓｅｒｏｎｏ，Ｉｎｃ．Ｒｏｃｋｌａｎｄ，ＭＡ及びＰｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ。
【0128】
いくつかの実施形態では、がん中のＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）アッセイ（商標）であり、その説明は、以下のうちの少なくとも１つに見出され得る：１）Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｌａｂｅｌｉｎｇ：Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）Ａｓｓａｙ（２０２０）Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．；２）Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ添付文書（２０２１）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ；３）Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ１４２）Ａｓｓａｙ：Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ Ｇｕｉｄｅ（２０１９）Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．及びＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．；及び４）Ｖｅｎｎａｐｕｓａ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ＰＤ－Ｌ１ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａｓｓａｙ（ＳＰ１４２）ｆｏｒ Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ，Ａｐｐｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｍｏｒｐｈｏｌ．２７：９２－１００（２０１９）。
【0129】
いくつかの実施形態において、がん中でのＰＤ－Ｌ１発現を定量化する手段は、Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ２６３）アッセイ（商標）であり、その説明は、以下のうちの少なくとも１つに見出され得る：１）Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｌａｂｅｌｉｎｇ：Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ２６３）Ａｓｓａｙ（２０１７）Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ；２）Ｉｍｆｉｎｚｉ添付文書（２０２１），ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ；及び３）Ｖｅｎｔａｎａ ＰＤ－Ｌ１（ＳＰ２６３）Ａｓｓａｙ Ｓｔａｉｎｉｎｇ：Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ Ｇｕｉｄｅ（２０１９）Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，Ｍｕｎｉｃｈ，ＤＥ。
【0130】
以下の表１は、上記のアッセイの概要、及びそれらが使用され得る薬物と、米国において現在承認されている治療のための適応症とを提示する。本明細書で提供される併用療法の一部は、ＰＤ－Ｌ１発現レベルを決定するための対応するアッセイとともに、表１に列記する適応症における薬物を利用する。
【表1】
【0131】
さらに、Ｏ’Ｍａｌｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＰＤ－Ｌ１ ａｍｏｎｇ ｄｉｖｅｒｓｅ ｈｕｍａｎ ｎｅｏｐｌａｓｍｓ ｉｎ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ：ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ ｂａｓｅｄ ｕｐｏｎ ６２，８９６ ｃａｓｅｓ，Ｍｏｄｅｒｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ３２：９２９－９４２（２０１９）には、様々な種類のがんにおける抗体クローン２２Ｃ３、２８－８、ＳＰ１４２、またはＳＰ２６３を使用して、ＰＤ－Ｌ１発現を評価する説明が記載されている。
【0132】
ＩＶ．例示的抗体
例示的なＰＤ－１阻害剤及びＰＤ－Ｌ１阻害剤
特定の実施形態では、本明細書において提供される方法は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤を投与することを含む。ＰＤ－ｌ／ＰＤ－Ｌ１阻害剤の例として、米国特許第７，４８８，８０２号、同第７，９４３，７４３号、同第８，００８，４４９号、同第８，１６８，７５７号、同第８，２１７，１４９号、及びＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ２００３０４２４０２号、同第ＷＯ２００８１５６７１２号、同第ＷＯ２０１００８９４１１号、同第ＷＯ２０１００３６９５９号、同第ＷＯ２０１１０６６３４２号、同第ＷＯ２０１１１５９８７７号、同第ＷＯ２０１１０８２４００号、及び同第ＷＯ２０１１１６１６９９号に記載のものが挙げられるが、これらに限定されず、これらは全て、全体が本明細書中に援用される。
例示的なＰＤ－１阻害剤及びＰＤ－Ｌ１阻害剤
特定の実施形態では、本明細書において提供される方法は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤を投与することを含む。ＰＤ－ｌ／ＰＤ－Ｌ１阻害剤の例として、米国特許第７，４８８，８０２号、同第７，９４３，７４３号、同第８，００８，４４９号、同第８，１６８，７５７号、同第８，２１７，１４９号、及びＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ２００３０４２４０２号、同第ＷＯ２００８１５６７１２号、同第ＷＯ２０１００８９４１１号、同第ＷＯ２０１００３６９５９号、同第ＷＯ２０１１０６６３４２号、同第ＷＯ２０１１１５９８７７号、同第ＷＯ２０１１０８２４００号、及び同第ＷＯ２０１１１６１６９９号に記載のものが挙げられるが、これらに限定されず、これらは全て、全体が本明細書中に援用される。
【0133】
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される方法は、ＰＤ－１阻害剤を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ＡＭＰ－２２４、ＣＴ－０１１、セミプリマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、ＴＳＲ－０４２、ＰＤＲ００１、トリパリマブ、ＢＧＢ－Ａ３１７、ニボルマブ（ＯＮＯ－４５３８、ＢＭＳ－９３６５５８、またはＭＤＸ１１０６としても知られる）、ペムブロリズマブ（ＭＫ－３４７５、ＳＣＨ９００４７５、またはランブロリズマブとしても知られる）である。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブである。ニボルマブは、ヒトＩｇＧ４抗ＰＤ－１モノクローナル抗体であり、Ｏｐｄｉｖｏ（商標）という商品名で販売されている。別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブである。ペムブロリズマブは、ヒト化モノクローナルＩｇＧ４抗体であり、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（商標）という商品名で販売されている。さらに別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ヒト化抗体ＣＴ－０１１である。さらに別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、融合タンパク質ＡＭＰ－２２４である。別の実施形態において、ＰＤ－１抗体は、ＢＧＢ－Ａ３１７である。ＢＧＢ－Ａ３１７は、Ｆｃガンマ受容体Ｉに結合する能力が特別に操作されており、高い親和性及び優れた標的特異性でＰＤ－１との独自の結合シグネチャを有するモノクローナル抗体である。一実施形態では、ＰＤ－１抗体は、セミプリマブである。別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、カムレリズマブである。さらなる実施形態では、ＰＤ－１抗体は、シンチリマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１抗体は、チスレリズマブである。ある実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ＴＳＲ－０４２である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ＰＤＲ００１である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、トリパリマブである。
【0134】
特定の実施形態では、本明細書において提供される方法は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブまたはＩＭＦＩＮＺＩ（登録商標）としても知られる）、ＢＭＳ－９３６５５９（ＭＤＸ－１１０５－０１としても知られる）、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ及びＴｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標）としても知られる）またはアベルマブ（ＢＡＶＥＮＩＣＯ（登録商標）としても知られる）である。一実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＢＭＳ－９３６５５９である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アテゾリズマブである。さらなる実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アベルマブである。
【0135】
例示的な抗ＴＩＧＩＴ抗体
本明細書に記載される治療方法の特定の方法において利用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、種々の活性を有する。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴとリガンドＣＤ１５５及びＣＤ１１２の一方または両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、機能的バイオアッセイにおいてＴＩＧＩＴとＣＤ１５５との間の相互作用を阻害し、ＣＤ１５５－ＣＤ２２６シグナル伝達を生じさせ得る。
本明細書に記載される治療方法の特定の方法において利用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、種々の活性を有する。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴとリガンドＣＤ１５５及びＣＤ１１２の一方または両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、機能的バイオアッセイにおいてＴＩＧＩＴとＣＤ１５５との間の相互作用を阻害し、ＣＤ１５５－ＣＤ２２６シグナル伝達を生じさせ得る。
【0136】
本発明者らは、驚くべきことに、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、低ＰＤ－Ｌ１がん中でもＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１遮断と相乗効果を呈することを見出した。本明細書で実証されるように、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんを含むマウスモデルに、抗ＰＤ－１及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて抗ＴＩＧＩＴ抗体を投与することにより、腫瘍サイズ及び／または成長速度が減少する。
【0137】
ある実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＭＴＩＧ７１９２Ａまたはその非フコシル化型である。別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＢＭＳ－９８６２０７またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＯＭＰ－３１３Ｍ３２またはその非フコシル化型である。一実施形態では、ＴＩＧＩＴ阻害剤は、ＭＫ－７６８４またはその非フコシル化型である。別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＡＢ１５４またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＧＥＮ－１５１３７またはその非フコシル化型である。一実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＳＥＡ－ＴＧＴである。別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＡＳＰ８３７４またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＡＪＵＤ００８またはその非フコシル化型である。
【0138】
いくつかの実施形態では、非フコシル化抗ＴＩＧＩＴ抗体などの抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ヒトＴＩＧＩＴタンパク質またはその一部に高親和性で結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＴＩＧＩＴに対して、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満、５００ｐＭ未満、２５０ｐＭ未満、１５０ｐＭ未満、１００ｐＭ未満、５０ｐＭ未満、４０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、または約１０ｐＭ未満の結合親和性（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＴＩＧＩＴに対して５０ｐＭ未満の結合親和性（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＴＩＧＩＴに対して、約１ｐＭ～約５ｎＭ、例えば、約１ｐＭ～約１ｎＭ、約１ｐＭ～約５００ｐＭ、約５ｐＭ～約２５０ｐＭ、または約１０ｐＭ～約１００ｐＭの範囲のＫＤを有する。
【0139】
いくつかの実施形態では、高親和性でのヒトＴＩＧＩＴへの結合に加えて、非フコシル化抗ＴＩＧＩＴ抗体は、カニクイザル（「ｃｙｎｏ」）ＴＩＧＩＴ及び／またはマウスＴＩＧＩＴとの交差反応性を呈する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、１００ｎＭ以下の結合親和性（ＫＤ）でマウスＴＩＧＩＴに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、５ｎＭ以下のＫＤでヒトＴＩＧＩＴに結合し、１００ｎＭ以下のＫＤでマウスＴＩＧＩＴと交差反応する。いくつかの実施形態では、ヒトＴＩＧＩＴに結合する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、カニクイザルＴＩＧＩＴ及びマウスＴＩＧＩＴの両方との交差反応性も呈する。
【0140】
いくつかの実施形態では、抗体交差反応性は、細胞（例えば、ヒトＴＩＧＩＴ、カニクイザルＴＩＧＩＴ、またはマウスＴＩＧＩＴを発現する細胞株、またはＴＩＧＩＴを内因的に発現する初代細胞、例えば、ヒトＴＩＧＩＴ、ｃｙｎｏＴＩＧＩＴ、またはマウスＴＩＧＩＴを内因的に発現する初代Ｔ細胞）上に発現するＴＩＧＩＴに対する抗ＴＩＧＩＴ抗体の特異的結合を検出することによって決定される。いくつかの実施形態では、抗体結合及び抗体交差反応性は、抗ＴＩＧＩＴ抗体の精製または組換えＴＩＧＩＴ（例えば、精製または組換えヒトＴＩＧＩＴ、精製または組換えｃｙｎｏＴＩＧＩＴ、または精製または組換えマウスＴＩＧＩＴ）へのまたはＴＩＧＩＴを含むキメラタンパク質（例えば、ヒトＴＩＧＩＴ、カニクイザルＴＩＧＩＴ、またはマウスＴＩＧＩＴを含むＦｃ融合タンパク質、またはヒトＴＩＧＩＴ、ｃｙｎｏＴＩＧＩＴ、またはマウスＴＩＧＩＴを含むＨｉｓタグ付きタンパク質）への特異的結合を検出することによって決定される。
【0141】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴとリガンドＣＤ１５５との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴとリガンドＣＤ１１２との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴとリガンドＣＤ１５５及びＣＤ１１２の両方との間の相互作用を阻害する。
【0142】
いくつかの実施形態では、ヒトＴＩＧＩＴに結合する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、以下に記載の抗体：クローン１３、クローン１３Ａ、クローン１３Ｂ、クローン１３Ｃ、またはクローン１３Ｄのいずれかに由来する、軽鎖可変領域配列またはその一部、及び／または重鎖可変領域配列またはその一部を含む。抗ＴＩＧＩＴ抗体クローン１３、クローン１３Ａ、クローン１３Ｂ、クローン１３Ｃ、及びクローン１３ＤのＣＤＲ、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、及び重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のアミノ酸配列は、以下の配列表に記載する。
【0143】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、以下のうちの１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６）を含む：
配列番号７、配列番号８、及び配列番号９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列；
配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、及び配列番号１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列；
配列番号１４、配列番号１５及び１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列；
配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列；
配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列；及び／または
配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列。
配列番号７、配列番号８、及び配列番号９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列；
配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、及び配列番号１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列；
配列番号１４、配列番号１５及び１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列；
配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列；
配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列；及び／または
配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列。
【0144】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号７、配列番号８、または配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列；配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、または配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列；及び配列番号１４、配列番号１５、または１６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含む。
【0145】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列；配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列；及び配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含む。
【0146】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号７、配列番号８、または配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列；配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、または配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列；配列番号１４、配列番号１５、または配列番号１６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列；配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列；配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列；及び配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含む。
【0147】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、以下のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む：
（ａ）配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｂ）配列番号８、１１、１４、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｃ）配列番号９、１２、１５、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｄ）配列番号８、１３、１６、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｅ）配列番号８、１２、１６、１７、１８、及び１９のそれぞれのアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、を含む。
（ａ）配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｂ）配列番号８、１１、１４、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｃ）配列番号９、１２、１５、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｄ）配列番号８、１３、１６、１７、１８、及び１９のそれぞれ；または
（ｅ）配列番号８、１２、１６、１７、１８、及び１９のそれぞれのアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、を含む。
【0148】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５に対して、少なくとも９０％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、ＶＨ配列は、参照配列（例えば、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５）に対して、少なくとも９０％の配列同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上の置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含むが、ヒトＴＩＧＩＴに結合する能力を保持し、任意により、ＣＤ１５５及び／またはＣＤ１１２のＴＩＧＩＴへの結合を遮断する能力を保持している。
【0149】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号６に対して、少なくとも９０％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、参照配列（例えば、配列番号６）に対して、少なくとも９０％の配列同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上の置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含むが、ヒトＴＩＧＩＴに結合する能力を保持し、任意により、ＣＤ１５５及び／またはＣＤ１１２のＴＩＧＩＴへの結合を遮断する能力を保持している。
【0150】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５に対して、少なくとも９０％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、かつ配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、かつ配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0151】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は：
（ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
（ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｆ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
（ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；
（ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｆ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
【0152】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号２０、２１、２２、２３、及び２４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【0153】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＳＥＡ－ＴＧＴであり、これは、配列番号７、１０、１４、１７、１８、及び１９のアミノ酸配列をそれぞれ含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む非フコシル化ＩｇＧ１抗体である。対応するＶＨ及びＶＬは、配列番号１及び６のアミノ酸配列をそれぞれ含む。例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０２０／０４１５４１号を参照されたい。
【0154】
いくつかの実施形態では、本発明の方法で使用するための抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＵＳ２００９／０２５８０１３、ＵＳ２０１６／０１７６９６３、ＵＳ２０１６／０３７６３６５、またはＷＯ２０１６／０２８６５６に開示されている抗ＴＩＧＩＴ抗体の非フコシル化型である。
【0155】
増強したエフェクター機能を有する例示的なＦｃ領域
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法において使用される抗体は、以下の特徴のうちの１つ以上またはすべてを任意の組み合わせで有するＦｃを含む：１）１つ以上の活性化ＦｃγＲへの結合が増強されている、２）阻害性ＦｃγＲへの結合が減少している、３）非フコシル化されている、４）ＡＤＣＣ活性が増強されている、５）ＡＤＣＰ活性が増強されている、６）抗原提示細胞（ＡＰＣ）を活性化している、７）ＣＤ８Ｔ細胞応答が増強されている、８）共刺激受容体を上方制御している、９）自然細胞免疫応答を活性化している、及び／または１０）ＮＫ細胞を結合している。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、前述の特徴のうちの１つ以上を有するＦｃを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法において使用される抗体は、以下の特徴のうちの１つ以上またはすべてを任意の組み合わせで有するＦｃを含む：１）１つ以上の活性化ＦｃγＲへの結合が増強されている、２）阻害性ＦｃγＲへの結合が減少している、３）非フコシル化されている、４）ＡＤＣＣ活性が増強されている、５）ＡＤＣＰ活性が増強されている、６）抗原提示細胞（ＡＰＣ）を活性化している、７）ＣＤ８Ｔ細胞応答が増強されている、８）共刺激受容体を上方制御している、９）自然細胞免疫応答を活性化している、及び／または１０）ＮＫ細胞を結合している。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、前述の特徴のうちの１つ以上を有するＦｃを含む。
【0156】
したがって、いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、所望の増強されたＦｃγＲ結合プロファイルを得るために、１つ以上の活性化ＦｃγＲへの結合が増強され、及び／または１つ以上の阻害性ＦｃγＲへの結合が減少しているＦｃを含む。活性化ＦｃγＲには、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及び／またはＦｃγＲＩのうちの１つ以上が含まれる。阻害性ＦｃγＲには、例えば、ＦｃγＲＩＩｂが含まれる。
【0157】
ある実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。他の実施形態では、抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。ある実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。
【0158】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、活性化ＦｃγＲへの結合の増強に加えて、またはそれとは別に、１つ以上の阻害性ＦｃγＲへの結合の減少を有する。したがって、いくつかの実施形態では、抗体は、ＦｃγＲＩＩａ及び／またはＦｃγＲＩＩｂへの結合が減少している。
【0159】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、非フコシル化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、上記のＦｃγＲ結合プロファイルのうちの１つをさらに有する。
【0160】
ある実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＦｃは、野生型Ｆｃと比較して、アミノ酸変化を含み、これにより、上記のようなＦｃγＲ結合プロファイルを得るために、活性化ＦｃγＲへの結合を増強し、及び／または１つ以上の阻害性ＦｃγＲへの結合を減少させる。例えば、いくつかの実施形態では、抗体のＦｃは、重鎖定常領域内に置換Ｓ２９３Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及び／またはＩ３３２Ｅを含む。
【0161】
上記のとおり、本明細書に提供される方法で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、以下の活性のうちの１つ以上を有するＦｃを含む：１つ以上の活性化ＦｃγＲへの結合の増強；阻害性ＦｃγＲへの結合の減少；ＡＤＣＣ活性の増強；及び／またはＡＤＣＰ活性の増強。そのような活性及び所望の活性プロファイルを有するＦｃを有する抗体は、非フコシル化タンパク質の産生及び／または所望の活性をもたらす特定の変異を含むようにＦｃを操作することによるなど、様々な方法で生成することができる。本明細書では、非フコシル化抗体を生成するための方法、及び例示的操作アプローチについて、さらなる特定の詳細を示す。
【0162】
抗体は、定常領域中の保存された位置においてグリコシル化され得る（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｕｎｄ，（１９９７）Ｃｈｅｍ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６５：１１１－１２８；Ｗｒｉｇｈｔ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，（１９９７）ＴｉｂＴＥＣＨ １５：２６－３２）。免疫グロブリンのオリゴ糖側鎖は、タンパク質の機能（Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．，（１９９６）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：１３１１－１３１８；Ｗｉｔｔｗｅ ａｎｄ Ｈｏｗａｒｄ，（１９９０）Ｂｉｏｃｈｅｍ．２９：４１７５－４１８０）、及び糖タンパク質の立体構造に影響を与え得る糖タンパク質の部分と糖タンパク質の提示された三次元表面との間の分子内相互作用（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｕｎｄ、上記；Ｗｙｓｓ ａｎｄ Ｗａｇｎｅｒ，（１９９６）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ． Ｂｉｏｔｅｃｈ．７：４０９－４１６）に影響を与える。オリゴ糖はまた、特定の認識構造に基づいて、ある分子に特定の糖タンパク質を標的化する働きもし得る。例えば、アガラクトシル化ＩｇＧでは、オリゴ糖部分がＣＨ２間空間から「反転」し、末端のＮ－アセチルグルコサミン残基がマンノース結合タンパク質に結合できるようになることが報告されている（Ｍａｌｈｏｔｒａ ｅｔ ａｌ．，（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．１：２３７－２４３）。チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞中で産生されたＣＡＭＰＡＴＨ－１Ｈ（ヒトリンパ球のＣＤｗ５２抗原を認識する組換えヒト化マウスモノクローナルＩｇＧ１抗体）からのオリゴ糖のグリコペプチダーゼによる除去は、補体媒介性溶解（ＣＭＣＬ）の完全な減少をもたらした（Ｂｏｙｄ ｅｔ ａｌ．，（１９９６）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：１３１１－１３１８）が、ノイラミニダーゼを使用したシアル酸残基の選択的除去では、ＤＭＣＬは喪失しなかった。抗体のグリコシル化は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に影響を与えることも報告されている。特に、バイセクティングＧｌｃＮＡｃの形成を触媒するグリコシルトランスフェラーゼであるβ（１，４）－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ）のテトラサイクリン調節発現を有するＣＨＯ細胞は、ＡＤＣＣ活性の改善を有することが報告された（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６－１８０）。
【0163】
抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合またはＯ結合のいずれかである。Ｎ結合とは、アスパラギン残基の側鎖へ炭水化物部分が付着することを指す。トリペプチド配列であるアスパラギン－Ｘ－セリン及びアスパラギン－Ｘ－スレオニン（式中、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）は、炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素結合の認識配列である。したがって、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列のいずれかが存在することにより、潜在的なグリコシル化部位が作製される。Ｏ結合グリコシル化とは、糖類であるＮ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの結合を指すが、５－ヒドロキシプロリンまたは５－ヒドロキシリジンも使用され得る。
【0164】
抗体のグリコシル化バリアントは、抗体のグリコシル化パターンが改変されたバリアントである。改変とは、抗体中に見られる１つ以上の炭水化物部分を欠失させること、抗体に１つ以上の炭水化物部分を付加すること、グリコシル化の組成（グリコシル化パターン）、グリコシル化の程度などを変更することを意味する。
【0165】
抗体へのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列を上述のトリペプチド配列のうちの１つ以上を含むように改変することによって達成され得る（Ｎ結合型グリコシル化部位の場合）。改変は、元の抗体の配列への１つ以上のセリンまたはスレオニン残基の付加、またはそれらによる置換によっても行われ得る（Ｏ結合型グリコシル化部位の場合）。同様に、グリコシル化部位の除去は、抗体の天然のグリコシル化部位内のアミノ酸改変によって達成することができる。
【0166】
アミノ酸配列は、通常、基礎となる核酸配列を改変することによって改変される。これらの方法としては、天然源からの単離（天然に存在するアミノ酸配列バリアントの場合）または抗体の以前に調製されたバリアントまたは非バリアント型のオリゴヌクレオチド媒介（または部位特異的）変異誘発、ＰＣＲ変異誘発、及びカセット変異誘発による調製が挙げられる。
【0167】
抗体のグリコシル化（グリコシル化パターンを含む）は、アミノ酸配列または基礎となるヌクレオチド配列を改変することなく改変され得る。例えば、Ｐｅｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．，２０１８，ＭＡｂｓ，１０（５）：６９３－７１１を参照されたい。グリコシル化は、抗体の発現に使用される宿主細胞に大きく依存する。潜在的な治療薬として、抗体などの組換え糖タンパク質の発現に使用される細胞型が天然細胞であることはめったにないため、抗体のグリコシル化パターンの有意な変動が予想される。例えば、Ｈｓｅ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：９０６２－９０７０を参照されたい。宿主細胞の選択に加えて、抗体の組換え産生中にグリコシル化に影響を与える因子としては、成長様式、培地配合、培養密度、酸素添加、ｐＨ、精製スキームなどが挙げられる。オリゴ糖産生に関与する特定の酵素の導入または過剰発現など、特定の宿主生物中で達成されるグリコシル化パターンを改変するために、様々な方法が提唱されている（米国特許第５０４７３３５号；同第５５１０２６１号；同第５２７８２９９号）。グリコシル化、または特定の種類のグリコシル化は、例えばエンドグリコシダーゼＨ（Ｅｎｄｏ Ｈ）を使用して、糖タンパク質から酵素的に除去することができる。さらに、組換え宿主細胞は、遺伝子操作することができ、例えば、特定の種類の多糖類のプロセシングを欠損させ得る。これら及び類似の技法は、当該技術分野で既知である。
【0168】
抗体のグリコシル化構造は、レクチンクロマトグラフィー、ＮＭＲ、質量分析、ＨＰＬＣ、ＧＰＣ、単糖組成分析、逐次酵素消化、及び電荷に基づいてオリゴ糖を分離するために高ｐＨ陰イオン交換クロマトグラフィーを使用するＨＰＡＥＣ－ＰＡＤなど、炭水化物分析の従来の技術によって容易に分析できる。分析目的でオリゴ糖を放出するための方法も知られており、これらに限定されないが、酵素処理（通常、ペプチド－Ｎ－グリコシダーゼＦ／エンド－β－ガラクトシダーゼを使用して行われる）、過酷なアルカリ環境を使用して主にＯ結合構造を放出する脱離、及び無水ヒドラジンを使用してＮ及びＯ結合オリゴ糖の両方を放出する化学的方法が挙げられる。
【0169】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体のグリコシル化の修飾形態は、コアフコシル化の減少である。「コアフコシル化」とは、Ｎ結合型グリカンの還元末端でのＮ－アセチルグルコサミン（「ＧｌｃＮＡｃ」）へのフコースの付加（「フコシル化」）を指す。
【0170】
「複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖」は、典型的にはアスパラギン２９７（Ｋａｂａｔのナンバーによる）に結合している。本明細書では、複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖とは、バイアンテナリー複合糖鎖を有し、主に以下の構造を有する：
ここで、±は、糖分子が存在するかまたは存在していないことを示し、数字は糖分子間の連結の位置を示す。上記構造において、アスパラギンと結合する糖鎖末端（右）を還元末端、反対側を非還元末端と呼ぶ。フコースは、通常、還元末端のＮ－アセチルグルコサミン（「ＧｌｃＮＡｃ」）に、典型的にはα１，６結合（ＧｌｃＮＡｃの６位がフコースの１位に連結）によって結合している。「Ｇａｌ」はガラクトースを指し、「Ｍａｎ」はマンノースを指す。
【化1】
【0171】
「複合Ｎ－グリコシド結合糖鎖」には、以下を含む；１）複合型、ここでは、コア構造の非還元末端側が、ガラクトース－Ｎ－アセチルグルコサミン（「ｇａｌ－ＧｌｃＮＡｃ」ともいう）の０個または１個以上の分岐を有し、ｇａｌ－ＧｌｃＮＡｃの非還元末端側が、任意によりシアル酸、バイセクティングＮ－アセチルグルコサミンなどを有する；及び２）ハイブリッド型、ここでは、コア構造の非還元末端側が、高マンノースＮ－グリコシド結合型糖鎖及び複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖の両方の分岐を有する。
【0172】
本明細書で提供されるいくつかの方法では、少量のフコースのみが、抗ＴＩＧＩＴ抗体の複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖（複数可）に取り込まれる。例えば、様々な実施形態では、組成物中約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、または約３％未満の抗ＴＩＧＩＴ抗体がフコースによるコアフコシル化を有する。いくつかの実施形態では、組成物中約２％の抗ＴＩＧＩＴ抗体がフコースによるコアフコシル化を有する。様々な実施形態において、組成物中６０％未満の抗ＴＩＧＩＴ抗体がフコースによるコアフコシル化を有する場合には、組成物の抗体は「非フコシル化」または「アフコシル化」と称され得る。いくつかの実施形態では、組成物中少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の抗ＴＩＧＩＴ抗体が非フコシル化である。
【0173】
ある実施形態では、少量のフコース類似体（またはフコース類似体の代謝産物または産物）のみが複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖（複数可）に取り込まれる。例えば、様々な実施形態では、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、または約３％未満の抗ＴＩＧＩＴ抗体がフコース類似体またはフコース類似体の代謝産物または産物によるコアフコシル化を有する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体の約２％が、フコース類似体またはフコース類似体の代謝産物もしくは産物によるコアフコシル化を有する。
【0174】
いくつかの実施形態では、組成物中約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、または約３％未満の抗ＴＩＧＩＴ抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する（例えば、Ｒａｊｕ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ＭＡｂｓ ４：３８５－３９１，Ｆｉｇｕｒｅ ３を参照）。いくつかの実施形態では、組成物中約２％の抗ＴＩＧＩＴ抗体がＧ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する。様々な実施形態において、組成物中６０％未満の抗ＴＩＧＩＴ抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する場合、組成物の抗体は「非フコシル化」と称され得る。いくつかの実施形態では、組成物中、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の抗ＴＩＧＩＴ抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコースを有しない。Ｇ０グリカンには、Ｇ０－ＧＮグリカンを含むことを留意されたい。Ｇ０－ＧＮグリカンは、１つの末端ＧｌｃＮＡｃ残基を有するモノアンテナグリカンである。Ｇ１グリカンには、Ｇ１－ＧＮグリカンを含む。Ｇ１－ＧＮグリカンは、１つの末端ガラクトース残基を有するモノアンテナグリカンである。Ｇ０－ＧＮ及びＧ１－ＧＮグリカンは、フコシル化または非フコシル化であり得る。
【0175】
非フコシル化抗体を生成するためには、様々な方法を利用することができる。例示的な戦略は、フコシル化経路に関与する特定の生合成酵素を欠く細胞株の使用、またはフコシル化経路に関与する特定の遺伝子の阻害またはノックアウトが含まれる。このようなアプローチの概説は、Ｐｅｒｅｉｒａ，ｅｔ ａｌ．（２０１８）ｍＡｂｓ １０：６９３－７１１によって提供され、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0176】
例えば、抗体産生細胞をフコース類似体とインキュベートすることによって、本明細書に開示される非フコシル化抗ＴＩＧＩＴ抗体などの非フコシル化抗体を作製する方法は、例えば、ＷＯ２００９／１３５１８１及びＵＳ８，１６３，５５１に記載されている。簡潔に言えば、該抗体を発現するように操作された細胞を、フコース類似体またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物の存在下でインキュベートする。細胞内代謝産物は、例えば、ＧＤＰ修飾類似体または完全もしくは部分的に脱エステル化された類似体であり得る。産物は、例えば、完全にまたは部分的に脱エステル化された類似体であり得る。いくつかの実施形態では、フコース類似体は、フコースサルベージ経路における酵素（複数可）を阻害することができる。例えば、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコキナーゼまたはＧＤＰ－フコース－ピロホスホリラーゼの活性を阻害することができる。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコシルトランスフェラーゼ（好ましくは、１，６－フコシルトランスフェラーゼ、例えばＦＵＴ８タンパク質）を阻害する。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコースのｄｅ ｎｏｖｏ合成経路における酵素の活性を阻害することができる。例えば、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼまたはＧＤＰ－フコースシンテターゼの活性を阻害することができる。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコース輸送体（例えば、ＧＤＰ－フコース輸送体）を阻害することができる。
【0177】
一実施形態では、フコース類似体は、２－フルオロフコースである。成長培地中のフコース類似体及び他のフコース類似体を使用する方法は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００９／１３５１８１に開示されている。
【0178】
細胞株を操作してコアフコシル化を減少させるための他の方法としては、遺伝子ノックアウト、遺伝子ノックイン、及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）が挙げられる。例えば、Ｐｅｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．，２０１８，ｍＡｂｓ，１０（５）：６９３－７１１を参照されたい。遺伝子ノックアウトでは、ＦＵＴ８（アルファ１，６－フコシルトランスフェラーゼ酵素）をコードする遺伝子が不活性化される。ＦＵＴ８は、ＧＤＰ－フコースからＮ－グリカンのＡｓｎ結合（Ｎ結合）ＧｌｃＮａｃの６位へのフコシル残基の転移を触媒する。ＦＵＴ８は、Ａｓｎ２９７でのＮ結合型バイアンテナリー炭水化物へのフコースの付加に関与する唯一の酵素であることが報告されている。遺伝子ノックインは、ＧＮＴＩＩＩまたはゴルジアルファマンノシダーゼＩＩなどの酵素をコードする遺伝子を付加する。細胞内においてそのような酵素のレベルが増加することにより、モノクローナル抗体をフコシル化経路からそらして（コアフコシル化の減少がもたらされる）、バイセクティングＮ－アセチルグルコサミンの量が増加する。ＲＮＡｉも、典型的には、ＦＵＴ８遺伝子発現を標的とし、ｍＲＮＡの転写レベルの低下、または遺伝子発現の完全なノックアウトなどをもたらす。
【0179】
使用され得る他の戦略としては、ＧｌｙｃｏＭＡｂ（登録商標）（米国特許第６，６０２，６８４号）及びＰｏｔｅｌｌｉｇｅｎｔ（登録商標）（ＢｉｏＷａ）が挙げられる。
【0180】
これらの方法のいずれかを使用して、非フコシル化抗体の産生が可能となる細胞株を生成することができる。
【0181】
様々な工学的アプローチを利用して、所望のＦｃγＲ活性及びエフェクター機能を有するＦｃ領域を得ることもできる。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅの変異の組み合わせを有するように操作し、これにより、ＦｃγＲＩＩＩＡに対するＦｃドメインの親和性を増大させ、結果としてＡＤＣＣを増加させる。ＦｃγＲＩＩＩａに対する親和性を増大させる追加の置換としては、例えば、Ｔ２５６Ａ、Ｋ２９０Ａ、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａが挙げられる。活性化ＦｃγＲＩＩＩａへの結合を増強し、阻害性ＦｃγＲＩＩＩｂへの結合を減少させる置換としては、例えば、Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｖ３０５Ｉ／Ｐ３９６Ｌ及びＦ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｌ２３５Ｖ／Ｐ３９６Ｌが挙げられる。いくつかの実施形態では、置換は、ＩｇＧ１ Ｆｃ骨格中にある。
【0182】
保存されたＡｓｎ２９７に共有結合により付着しているオリゴ糖は、ＩｇＧのＦｃ領域がＦｃγＲに結合する能力に関与している（Ｌｕｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５７：４９６３－６９；Ｗｒｉｇｈｔ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９９７，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１５：２６－３１）。このグリコフォームをＩｇＧ上で操作することにより、ＩｇＧ媒介ＡＤＣＣを顕著に改善できる。このグリコフォームへのバイセクティングＮ－アセチルグルコサミン修飾の付加（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：１７６－１８０；Ｄａｖｉｅｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．７４：２８８－９４）、またはこのグリコフォームからのフコースの除去（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３－４０；Ｓｈｉｎｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：６５９１－６０４；Ｎｉｗａ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６４：２１２７－３３）は、ＩｇＧ ＦｃとＦｃγＲとの間の結合を改善し、それによってＩｇ媒介ＡＤＣＣ活性を増強するＩｇＧ Ｆｃ操作の２つの例である。
【0183】
ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域の溶媒露出アミノ酸の全身的置換により、ＦｃγＲ結合親和性が変化したＩｇＧバリアントが生成される（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１－６０４）。親ＩｇＧ１と比較した場合、Ｔｈｒ２５６／Ｓｅｒ２９８、Ｓｅｒ２９８／Ｇｌｕ３３３、Ｓｅｒ２９８／Ｌｙｓ３３４、またはＳｅｒ２９８／Ｇｌｕ３３３／Ｌｙｓ３３４でのＡｌａへの置換を含むこれらのバリアントのサブセットは、ＦｃγＲに対する結合親和性及びＡＤＣＣ活性の両方の増大を示す（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１－６０４；Ｏｋａｚａｋｉ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９－４９）。
【0184】
抗体でのフコシル化の量を決定するために、多くの方法が利用可能である。方法としては、例えば、ＰＬＲＰ－ＳクロマトグラフィーによるＬＣ－ＭＳ、エレクトロスプレーイオン化四重極ＴＯＦ ＭＳ、レーザー誘起蛍光によるキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＬＩＦ）、及び蛍光検出による親水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）が挙げられる。
【0185】
抗体の調製
抗体を調製するために、当技術分野で知られている多くの技術を使用することができる。例えば、Ｋｏｈｌｅｒ＆Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５－４９７（１９７５）；Ｋｏｚｂｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ４：７２（１９８３）；Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，ｐｐ．７７－９６ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８５）；Ｃｏｌｉｇａｎ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９９１）；Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（１９８８）；及びＧｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（２ｎｄ ｅｄ．１９８６））を参照されたい。
抗体を調製するために、当技術分野で知られている多くの技術を使用することができる。例えば、Ｋｏｈｌｅｒ＆Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５－４９７（１９７５）；Ｋｏｚｂｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ４：７２（１９８３）；Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，ｐｐ．７７－９６ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８５）；Ｃｏｌｉｇａｎ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９９１）；Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（１９８８）；及びＧｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（２ｎｄ ｅｄ．１９８６））を参照されたい。
【0186】
目的の抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子は、細胞からクローニングすることができ、例えば、モノクローナル抗体をコードする遺伝子は、該抗体を発現するハイブリドーマからクローニングし、組換えモノクローナル抗体を産生するために使用することができる。モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子ライブラリーは、ハイブリドーマまたはプラズマ細胞からも作製できる。さらに、ファージまたは酵母ディスプレイ技術を使用して、選択された抗原に特異的に結合する抗体及びヘテロマーＦａｂフラグメントを同定することができる（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４（１９９０）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｕ ｅｔ ａｌ．（２０１０）ＰＥＤＳ ２３：３１１；及びＣｈａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，１：７５５－７６８（２００６）を参照されたい）。あるいは、抗体及び抗体配列は、例えばＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ，２０１３，２６：６６３－６７０；ＷＯ２００９／０３６３７９；ＷＯ２０１０／１０５２５６；及び２０１２／００９５６８に開示のものなど、酵母ベースの抗体提示系を使用して単離及び／または同定され得る。重鎖及び軽鎖の遺伝子産物のランダムな組み合わせは、異なる抗原特異性を有する抗体の大きいプールを生成する（例えば、Ｋｕｂｙ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（３ｒｄ ｅｄ．１９９７））を参照されたい）。単鎖抗体または組換え抗体の産生技術（米国特許第４，９４６，７７８号、米国特許第４，８１６，５６７号）も、抗体を産生するために適合させることができる。抗体を二重特異性にすることもでき、すなわち、２つの異なる抗原を認識できるようにすることもできる（例えば、ＷＯ９３／０８８２９，Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５－３６５９（１９９１）；及びＳｕｒｅｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １２１：２１０（１９８６）を参照されたい）。抗体はまた、ヘテロコンジュゲート体、例えば、共有結合により連結した２つの抗体、または免疫毒素に共有結合により結合した抗体であり得る（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、ＷＯ９１／００３６０；及びＷＯ９２／２００３７３を参照されたい）。
【0187】
抗体は、原核生物及び真核生物の発現系など、任意の数の発現系を使用して産生することができる。いくつかの実施形態では、発現系は、ハイブリドーマまたはＣＨＯ細胞などの哺乳動物細胞である。このような系の多くは、商用供給業者から広く入手できる。抗体が重鎖及び軽鎖を両方とも含む実施形態では、重鎖及び重鎖及び軽鎖は、単一のベクターを使用して、例えば、二重シストロン発現ユニットで発現させてもよく、または異なるプロモーターの制御下にあり得る。他の実施形態では、重鎖及び軽鎖領域は、別個のベクターを使用して発現させ得る。本明細書に記載の重鎖及び軽鎖は、場合によりＮ末端にメチオニンを含んでもよい。
【0188】
いくつかの実施形態では、抗体フラグメント（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、またはダイアボディなど）が生成される。抗体フラグメントを産生するための様々な技法が開発されている。従来、これらのフラグメントは、インタクト抗体のタンパク質分解消化により得られていた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈ．，２４：１０７－１１７（１９９２）；及びＢｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５））。しかしながら、これらのフラグメントは、現在、組換え宿主細胞により直接産生され得る。例えば、抗体フラグメントは、抗体ファージライブラリから単離され得る。あるいは、Ｆａｂ’－ＳＨフラグメントは、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞から直接回収され、化学的にカップリングして、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを形成し得る（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：１６３－１６７（１９９２）を参照されたい）。別のアプローチに従って、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、組換え宿主細胞培養から直接単離することができる。抗体フラグメントを産生するための他の技術は、当業者には明らかであろう。他の実施形態では、最適な抗体は単鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）である。例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９３／１６１８５号、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。抗体フラグメントは、例えば米国特許第５，６４１，８７０号に記載の線形抗体であってもよい。
【0189】
いくつかの実施形態では、抗体または抗体フラグメントを別の分子、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ化）または血清アルブミンにコンジュゲートして、ｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を延長させ得る。抗体フラグメントのＰＥＧ化の例は、Ｋｎｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ． Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ １５：４０９，２００４（アブシキシマブに関して）；Ｐｅｄｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ７０：１１２６，１９９４（抗ＣＥＡ抗体に関して）；Ｃｈａｐｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：７８０，１９９９；及びＨｕｍｐｈｒｅｙｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．２０：２２７，２００７）に記載されている。
【0190】
いくつかの実施形態では、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体が提供される。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる抗原または同じ抗原の少なくとも２つの異なるエピトープに対して結合特異性を有する抗体である。多重特異性抗体を作製する方法としては、宿主細胞における重鎖及び軽鎖の２つの対の組換え共発現（例えば、Ｚｕｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ，２０００，１３：３６１－３６７参照）；「ｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ」技術（例えば、Ｒｉｄｇｗａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ，１９９６，９：６１７－７２１を参照）；「ダイアボディ」技法（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（ＵＳＡ），１９９３，９０：６４４４－６４４８参照）；及び分子内三量体化（例えば、Ａｌｖａｒｅｚ－Ｃｉｅｎｆｕｅｇｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１６，ｄｏｉ：／１０．１０３８／ｓｒｅｐ２８６４３を参照）が挙げられるが、これに限定されない；また、Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１５，６７（２），Ｐａｒｔ Ａ：９５－１０６を参照されたい。
【0191】
定常領域の選択
本明細書に記載の抗体の重鎖及び軽鎖可変領域は、ヒト定常領域の少なくとも一部に連結することができる。定常領域の選択は、抗体依存性細胞介在性細胞傷害、抗体依存性細胞食作用、及び／または補体依存性細胞傷害が望まれるか否かに部分的に依存する。例えば、ヒト同位体ＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、強い補体依存性細胞傷害性を有し、ヒトアイソタイプＩｇＧ２は、弱い補体依存性細胞傷害性を有し、ヒトＩｇＧ４は、補体依存性細胞傷害性を欠いている。ヒトＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ２及びＩｇＧ４よりも強力な細胞媒介性エフェクター機能も誘導する。軽鎖定常領域は、ラムダまたはカッパであり得る。抗体は、２つの軽鎖と２つの重鎖を含む四量体として、別々の重鎖、軽鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖとして、または重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインとがスペーサーを介して連結されている単鎖抗体として発現できる。
本明細書に記載の抗体の重鎖及び軽鎖可変領域は、ヒト定常領域の少なくとも一部に連結することができる。定常領域の選択は、抗体依存性細胞介在性細胞傷害、抗体依存性細胞食作用、及び／または補体依存性細胞傷害が望まれるか否かに部分的に依存する。例えば、ヒト同位体ＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、強い補体依存性細胞傷害性を有し、ヒトアイソタイプＩｇＧ２は、弱い補体依存性細胞傷害性を有し、ヒトＩｇＧ４は、補体依存性細胞傷害性を欠いている。ヒトＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、ヒトＩｇＧ２及びＩｇＧ４よりも強力な細胞媒介性エフェクター機能も誘導する。軽鎖定常領域は、ラムダまたはカッパであり得る。抗体は、２つの軽鎖と２つの重鎖を含む四量体として、別々の重鎖、軽鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖとして、または重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインとがスペーサーを介して連結されている単鎖抗体として発現できる。
【0192】
ヒト定常領域は、異なる個体間でアロタイプ多様体及びアイソアロタイプ多様体を示す。すなわち、定常領域は、異なる個体中の１つ以上の多型位置で異なり得る。アイソアロタイプは、アイソアロタイプを認識する血清が１つ以上の他のアイソタイプの非多型領域に結合するという点でアロタイプとは異なる。
【0193】
軽鎖及び／または重鎖のアミノ末端またはカルボキシ末端の１つまたはいくつかのアミノ酸（重鎖のＣ末端リジンなど）は、分子の一部またはすべてで欠落しているかまたは誘導体化され得る。置換は、補体介在性細胞傷害性またはＡＤＣＣなどのエフェクター機能を減少または増加させるために（例えば、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，米国特許第５，６２４，８２１号；Ｔｓｏ ｅｔ ａｌ．，米国特許第５，８３４，５９７号；及びＬａｚａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０３：４００５，２００６を参照）、またはヒトでの半減期を延長するために（例えば、Ｈｉｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９：６２１３，２００４を参照）、定常領域で行うことができる。
【0194】
いくつかの実施形態では、所望の抗体を構築するために、例示的な置換としては、アミノ酸位置２３４、２３５、２３７、２３９、２６７、２９８、２９９、３２６、３３０、または３３２に導入される、システイン残基への天然アミノ酸のアミノ酸置換、好ましくは、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ中のＳ２３９Ｃ変異（ナンバリングは、ＥＵインデックスに準拠（Ｋａｂａｔ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９８７及び１９９１）；ＵＳ２０１００１５８９０９を参照（参照により本明細書に組み込まれる））が挙げられる。追加のシステイン残基の存在により、鎖間ジスルフィド結合が形成され得る。このような鎖間ジスルフィド結合の形成は、立体障害を引き起こす可能性があり、それによってＦｃ領域とＦｃγＲの結合相互作用の親和性が低下する。２３４位、２３５位、２３６位、及び／または２３７位のいずれかにおける他の置換は、Ｆｃγ受容体、特にＦｃγＲＩ受容体に対する親和性を低下させる（例えば、ＵＳ６，６２４，８２１、ＵＳ５，６２４，８２１を参照）。
【0195】
抗体のｉｎ ｖｉｖｏ半減期も、そのエフェクター機能に影響を与え得る。抗体の半減期は、その治療活性を変化させるために延長または短縮することができる。ＦｃＲｎは、β２－ミクログロブリンと非共有結合により会合するＭＨＣクラスＩ抗原に構造的に類似した受容体である。ＦｃＲｎは、ＩｇＧの異化作用及び組織全体でのトランスサイトーシスを調節する（Ｇｈｅｔｉｅ ａｎｄ Ｗａｒｄ，２０００，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８：７３９－７６６；Ｇｈｅｔｉｅ ａｎｄ Ｗａｒｄ，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２５：９７－１１３）。ＩｇＧ－ＦｃＲｎ相互作用は、ｐＨ６．０（細胞内小胞のｐＨ）で発生するが、ｐＨ７．４（血液のｐＨ）では発生せず、この相互作用により、ＩｇＧを循環に戻すことができる（Ｇｈｅｔｉｅ ａｎｄ Ｗａｒｄ，２０００，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８：７３９－７６６；Ｇｈｅｔｉｅ ａｎｄ Ｗａｒｄ，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２５：９７－１１３）。ＦｃＲｎ結合に関与するヒトＩｇＧ１上の領域がマッピングされている（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１－６０４）。ヒトＩｇＧ１のＰｒｏ２３８位、Ｔｈｒ２５６位、Ｔｈｒ３０７位、Ｇｌｎ３１１位、Ａｓｐ３１２位、Ｇｌｕ３８０位、Ｇｌｕ３８２位、またはＡｓｎ４３４位でのアラニン置換は、ＦｃＲｎ結合を増強する（Ｓｈｉｅｌｄｓｅｔａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１－６０４）。これらの置換を保有するＩｇＧ１分子は、長い血清半減期を有する。その結果、これらの修飾されたＩｇＧ１分子は、非修飾のＩｇＧ１と比較して、より長い期間にわたってエフェクター機能を実施できるため、治療効果を発揮し得る。ＦｃＲｎへの結合を増加させるための他の例示的な置換としては、２５０位のＧｌｎ及び／または４２８位のＬｅｕが挙げられる。定常領域内のすべての位置に関しては、ＥＵナンバリングが使用される。
【0196】
抗体の補体固定活性（Ｃ１ｑ結合及びＣＤＣ活性の両方）は、Ｌｙｓ３２６及びＧｌｕ３３３における置換によって改善することができる（Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２５７１－２５７５）。ヒトＩｇＧ２主鎖上での同じ置換は、Ｃ１ｑへの結合が弱く補体活性化活性が著しく欠損している抗体アイソタイプを、Ｃ１ｑの結合及びＣＤＣの媒介が両方とも可能なアイソタイプに変換することができる（Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２５７１－７５）。抗体の補体固定活性を改善するために、いくつかの他の方法も適用されている。例えば、ＩｇＭの１８アミノ酸のカルボキシル末端尾部ピースをＩｇＧのカルボキシル末端に移植することにより、そのＣＤＣ活性が大幅に向上する。これは、通常、検出可能なＣＤＣ活性を持たないＩｇＧ４でも観察される（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：２２２６－３６）。また、ＩｇＧ１重鎖のカルボキシ末端近くに位置するＳｅｒ４４４をＣｙｓで置換することにより、ＩｇＧ１の尾部から尾部への二量体化が誘導され、単量体ＩｇＧ１よりもＣＤＣ活性が２００倍増加した（Ｓｈｏｐｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：２９１８－２２）。さらに、Ｃ１ｑに特異性を有する二重特異性ダイアボディ構築物は、ＣＤＣ活性も付与する（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１５：６２９－３１）。
【0197】
補体活性は、重鎖のアミノ酸残基３１８、３２０、及び３２２の少なくとも１つを、Ａｌａなどの異なる側鎖を有する残基に変異させることによって低下させることができる。Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、またはＶａｌなどの他のアルキル置換非イオン性残基、または３つの残基のうちのいずれか１つの代わりにあるＰｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、及びＰｒｏなどの芳香族非極性残基も、Ｃ１ｑ結合を減少させるかまたは無効にする。Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、及びＭｅｔは、Ｃ１ｑ結合活性を減少させるかまたは無効にするために、残基３２０及び３２２で使用できるが、３１８では使用できない。極性残基による３１８（Ｇｌｕ）残基の置換は、Ｃ１ｑ結合活性を変更し得るが、無効にする可能性はない。残基２９７（Ａｓｎ）をＡｌａに置き換えることにより、溶解活性が取り除かれるが、Ｃ１ｑに対する親和性はわずかに低下する（約３分の１になる）のみである。この変化は、グリコシル化部位と、補体活性化に必要な炭水化物の存在とを破壊する。この部位での任意の他の置換も、グリコシル化部位を破壊する。以下の変異及びそれらの任意の組み合わせもまた、Ｃ１ｑ結合を減少させる：Ｄ２７０Ａ、Ｋ３２２Ａ、Ｐ３２９Ａ、及びＰ３１１Ｓ（ＷＯ０６／０３６２９１を参照）。
【0198】
ヒト定常領域への言及は、任意の天然のアロタイプまたは天然のアロタイプの多型位置を占める残基の置換を有する定常領域を含む。また、Ｆｃγ受容体結合を減少させるか、またはＦｃＲＮへの結合を増加させるために、上に示したものなど、天然ヒト定常領域に対して最大１、２、５、または１０個の変異が存在し得る。
【0199】
核酸、ベクター及び宿主細胞
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、組換え法を使用して調製される。したがって、いくつかの態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体のいずれか（例えば、本明細書に記載のＣＤＲのいずれか１つ以上）をコードする核酸配列を含む単離された核酸；そのような核酸を含むベクター；抗体をコードする核酸を複製するため及び／または抗体を発現するために使用される核酸が導入される宿主細胞を提供する。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；またはヒト細胞である。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、組換え法を使用して調製される。したがって、いくつかの態様では、本発明は、本明細書に記載の抗体のいずれか（例えば、本明細書に記載のＣＤＲのいずれか１つ以上）をコードする核酸配列を含む単離された核酸；そのような核酸を含むベクター；抗体をコードする核酸を複製するため及び／または抗体を発現するために使用される核酸が導入される宿主細胞を提供する。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；またはヒト細胞である。
【0200】
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチド（例えば、単離されたポリヌクレオチド）は、本明細書に記載の抗体をコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に開示される１つ以上のアミノ酸配列（例えば、ＣＤＲ、重鎖、軽鎖、及び／またはフレームワーク領域）をコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に開示の配列（例えば、ＣＤＲ、重鎖、軽鎖、またはフレームワーク領域配列）に対して、少なくとも８５％の配列同一性（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む。
【0201】
さらなる態様では、本明細書に記載の抗体を作製する方法が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、抗体の発現に好適である条件下で、本明細書に記載の宿主細胞（例えば、本明細書に記載のポリヌクレオチドまたはベクターを発現する宿主細胞）を培養することを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、その後、宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収する。
【0202】
本開示の抗体またはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドを含む好適なベクターとしては、クローニングベクター及び発現ベクターが挙げられる。選択されるクローニングベクターは、使用することを意図する宿主細胞に応じて異なり得るが、有用なクローニングベクターは、一般に自己複製能力を有しており、特定の制限エンドヌクレアーゼに対して単一の標的を有してもよく、及び／またはベクターを含むクローンの選択に使用できるマーカーの遺伝子を有してもよい。例には、プラスミド及び細菌ウイルス、例えば、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（例えば、ｐＢＳ ＳＫ＋）及びその誘導体、ｍｐ１８、ｍｐ１９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡ、ならびにｐＳＡ３及びｐＡＴ２８などのシャトルベクターが挙げられる。クローニングベクターは、ＢｉｏＲａｄ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎなどの商用ベンダーから入手できる。
【0203】
発現ベクターは、一般に、本開示の核酸を含む複製可能なポリヌクレオチド構築物である。発現ベクターは、宿主細胞内でエピソームとして、または染色体ＤＮＡの不可欠な部分として複製することができる。好適な発現ベクターとしては、これらに限定されないが、プラスミド、ウイルスベクター、例えば、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス、及び任意の他のベクターが挙げられる。
【0204】
組換え抗体の発現
抗体は、典型的には、組換え発現によって産生される。組換えポリヌクレオチド構築物は、典型的には、抗体鎖のコード配列に動作可能に連結された発現制御配列を含み、天然関連または異種プロモーター領域を含む。好ましくは、発現制御配列は、真核宿主細胞を形質転換またはトランスフェクトできるベクター中の真核プロモーター系である。ベクターが適切な宿主に組み込まれると、宿主は、ヌクレオチド配列の高レベル発現、ならびに交差反応抗体の収集及び精製に好適な条件下で維持される。
抗体は、典型的には、組換え発現によって産生される。組換えポリヌクレオチド構築物は、典型的には、抗体鎖のコード配列に動作可能に連結された発現制御配列を含み、天然関連または異種プロモーター領域を含む。好ましくは、発現制御配列は、真核宿主細胞を形質転換またはトランスフェクトできるベクター中の真核プロモーター系である。ベクターが適切な宿主に組み込まれると、宿主は、ヌクレオチド配列の高レベル発現、ならびに交差反応抗体の収集及び精製に好適な条件下で維持される。
【0205】
哺乳動物細胞は、免疫グロブリンまたはそのフラグメントをコードするヌクレオチドセグメントを発現するための好ましい宿主である。Ｗｉｎｎａｃｋｅｒ，Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ，（ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ＮＹ，１９８７）を参照されたい。インタクト異種タンパク質を分泌できる複数の好適な宿主細胞株が当技術分野で開発されており、ＣＨＯ細胞株（例えば、ＤＧ４４）、様々なＣＯＳ細胞株、ＨｅＬａ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、Ｌ細胞、及び非抗体産生骨髄腫、例えばＳｐ２／０及びＮＳ０などが挙げられる。好ましくは、細胞は、非ヒトである。これらの細胞の発現ベクターは、複製起点、プロモーター、エンハンサーなどの発現制御配列（Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ、Ｒｅｖ．８９：４９（１９８６））、及びリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位、及び転写ターミネーター配列などの必要な処理情報部位を含むことができる。好ましい発現制御配列は、内因性遺伝子、サイトメガロウイルス、ＳＶ４０、アデノウイルス、ウシパピローマウイルスなどに由来するプロモーターである。Ｃｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１１４９（１９９２）を参照されたい。
【0206】
一旦発現すると、抗体は、ＨＰＬＣ精製、カラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動など、当技術分野の標準手順に従って精製することができる（概して、Ｓｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，ＮＹ，１９８２）を参照）。
【0207】
抗体の特徴付け
結合親和性、結合動態、及び交差反応性を分析するための方法は、当技術分野で知られている。例えば、Ｅｒｎｓｔ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｃｏｎｓｔａｎｔｓ，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ ｅｄ．２００９）を参照されたい。これらの方法としては、これらに限定されないが、固相結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイ）、免疫沈降、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）、結合平衡除外法（例えば、ＫｉｎＥｘＡ（登録商標））、フローサイトメトリー、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、ＢｉｏＬａｙｅｒ干渉法（例えば、Ｏｃｔｅｔ（商標）（ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｉｎｃ．，Ｍｅｎｌｏ Ｐａｒｋ，ＣＡ））、及びウエスタンブロット分析が挙げられる。ＳＰＲ技術は、例えば、Ｈａｈｎｆｅｌｄ ｅｔ ａｌ． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｄａｔａ Ｕｓｉｎｇ ＳＰＲ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ（２００４）に概説されている。典型的なＳＰＲ実験では、１つの相互作用物質（標的または標的化剤）がフローセル内のＳＰＲ活性な金コーティングガラススライド上に固定され、他の相互作用物質を含むサンプルが導入されて表面を流れる。特定の波長の光が表面に照射されると、金の光反射率の変化が結合及び結合の動態を示す。いくつかの実施形態では、結合平衡除外法を使用して親和性を決定する。この技術は、例えば、Ｄａｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｖｏｌ．２，ｎｕｍｂｅｒ ６ ６４７－６５７（２００４）に記載されている。いくつかの実施形態では、ＢｉｏＬａｙｅｒ干渉法アッセイが、親和性を決定するために使用される。この技術は、例えば、Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，３８：４００－４０７（２０１０）；Ｄｙｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，３７９：３０－４１（２０１２）に記載されている。
結合親和性、結合動態、及び交差反応性を分析するための方法は、当技術分野で知られている。例えば、Ｅｒｎｓｔ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｃｏｎｓｔａｎｔｓ，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ ｅｄ．２００９）を参照されたい。これらの方法としては、これらに限定されないが、固相結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイ）、免疫沈降、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）、結合平衡除外法（例えば、ＫｉｎＥｘＡ（登録商標））、フローサイトメトリー、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、ＢｉｏＬａｙｅｒ干渉法（例えば、Ｏｃｔｅｔ（商標）（ＦｏｒｔｅＢｉｏ，Ｉｎｃ．，Ｍｅｎｌｏ Ｐａｒｋ，ＣＡ））、及びウエスタンブロット分析が挙げられる。ＳＰＲ技術は、例えば、Ｈａｈｎｆｅｌｄ ｅｔ ａｌ． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｄａｔａ Ｕｓｉｎｇ ＳＰＲ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ（２００４）に概説されている。典型的なＳＰＲ実験では、１つの相互作用物質（標的または標的化剤）がフローセル内のＳＰＲ活性な金コーティングガラススライド上に固定され、他の相互作用物質を含むサンプルが導入されて表面を流れる。特定の波長の光が表面に照射されると、金の光反射率の変化が結合及び結合の動態を示す。いくつかの実施形態では、結合平衡除外法を使用して親和性を決定する。この技術は、例えば、Ｄａｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｖｏｌ．２，ｎｕｍｂｅｒ ６ ６４７－６５７（２００４）に記載されている。いくつかの実施形態では、ＢｉｏＬａｙｅｒ干渉法アッセイが、親和性を決定するために使用される。この技術は、例えば、Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，３８：４００－４０７（２０１０）；Ｄｙｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，３７９：３０－４１（２０１２）に記載されている。
【0208】
Ｖ．治療方法
いくつかの実施形態では、対象におけるがんを治療するための方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む。
いくつかの実施形態では、対象におけるがんを治療するための方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む。
【0209】
いくつかの実施形態では、本方法は、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんが、抗ＴＩＧＩＴ抗体によって、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて治療することができるという驚くべき知見に部分的に基づく。抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体との相乗効果により、抗ＰＤ１抗体またはＰＤ－Ｌ１抗体を用いて、現在承認された単剤療法が存在しないがんの治療が可能となる。
【0210】
例えば、表２には、特定の抗ＰＤ－１抗体を用いた特定のがんの治療に関する治療投与レベル、ＰＤ－Ｌ１発現レベル、及び変異状態を示す。表３には、特定の抗ＰＤ－Ｌ１抗体を用いた特定のがんの治療に関する治療投与レベル、ＰＤ－Ｌ１発現レベル、及び変異状態を示す。これらの表で確認できるように、このような抗体の多くは、特定の閾値を下回るＰＤ－Ｌ１レベルを発現するがんを有する対象には承認されず、また、特定の変異を含むがんを有する対象には承認されない。以下により詳細に記載のとおり、本明細書で提供される方法は、承認されたカットオフまたは閾値レベルを下回るレベルでＰＤ－Ｌ１を発現する腫瘍を有する患者、抗ＰＤ１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体による治療に対する応答性を低下させる、表に列記されているような変異を有する患者を治療するため、及び／または表に列記されている承認用量を下回る抗ＰＤ１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の用量で患者を治療するために、使用することができる。
【0211】
例えば、いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、表２及び／または表３に記載の用量などの治療用量で投与されるが、他の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、表２及び／または表３に記載される用量よりも少ない用量及び／または頻度が少ない用量などの治療量以下の用量で投与され得る。いくつかの実施形態では、本方法は、表２及び／または表３に記載の治療などの特定の治療から対象を排除する結果となる変異を含むがんを有する対象を治療する。
【0212】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、表２及び／または表３に記載された治療が利用できないがんを有する対象の治療を提供する。これらの方法は、ＰＤ－Ｌ１レベルの閾値及び投薬などに関して、以下でより詳細に論じる。
【表2-1】
【表2-2】
【表2-3】
【表2-4】
【表2-5】
【表2-6】
【表2-7】
【表2-8】
【表3-1】
【表3-2】
【表3-3】
【表3-4】
【0213】
いくつかの実施形態では、対象におけるがんを治療するための方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、がんのサンプル中のＰＤ－Ｌ１のレベルは、ＣＰＳ（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに１０未満であるか、またはＴＰＳ（Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに５０％未満であるか、またはＴＰＳ（Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ Ｓｃｏｒｅ）によって測定したときに５０％未満であるか、またはＴＣ（Ｔｕｍｏｒ Ｃｅｌｌスコア）によって測定したときに５０％未満であるか、または腫瘍浸潤免疫細胞染色（ＩＣ）によって測定したときに１０％未満であり、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む。
【0214】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、治療量以下の用量で投与される。
【0215】
いくつかの実施形態では、本方法は、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、がんを有する対象に投与することを含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、ここで、がんは、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される。いくつかの実施形態では、本方法は、尿路上皮癌の第１選択治療である。
【0216】
いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び（２）抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含み、がんが、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む。
【0217】
いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－１抗体及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体を、がんを有する対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に抗ＰＤ－１抗体を投与するが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は投与しないことを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、がんを有する対象に抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与するが、抗ＰＤ－１抗体は投与しないことを含む。
【0218】
ＰＤ－Ｌ１閾値レベル
いくつかの実施形態では、がんは、ＣＰＳによって測定された場合、１０未満、５未満、または３未満、または１未満のＰＤ－Ｌ１レベルを含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＣＰＳによって測定された場合、０～１０、または１～１０、または３～１０、または５～１０、または０～７、または１～７、または３～７、または０～５、または１～５、または３～５、または０～３、または１～３であるＰＤ－Ｌ１レベルを含む。
いくつかの実施形態では、がんは、ＣＰＳによって測定された場合、１０未満、５未満、または３未満、または１未満のＰＤ－Ｌ１レベルを含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＣＰＳによって測定された場合、０～１０、または１～１０、または３～１０、または５～１０、または０～７、または１～７、または３～７、または０～５、または１～５、または３～５、または０～３、または１～３であるＰＤ－Ｌ１レベルを含む。
【0219】
いくつかの実施形態では、がんは、ＴＰＳによって測定された場合、５０％未満、または４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満であるＰＤ－Ｌ１レベルを含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＴＰＳにより測定された場合、０％～５０％、または１％～５０％、または３％～５０％、または５％～５０％、または１０％～５０％、または２０％～５０％、または０％～３０％、または１％～３０％、または３％～３０％、または５％～３０％、または１０％～３０％、または０％～２０％、または３％～２０％、または５％～２０％であるＰＤ－Ｌ１のレベルを含む。
【0220】
いくつかの実施形態では、がんは、ＴＣによって測定された場合、５０％未満、または４０％未満、または３０％未満、または２０％未満、または１０％未満、または５％未満、または３％未満、または１％未満であるＰＤ－Ｌ１レベルを含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＴＣにより測定された場合、０％～５０％、または１％～５０％、または３％～５０％、または５％～５０％、または１０％～５０％、または２０％～５０％、または０％～３０％、または１％～３０％、または３％～３０％、または５％～３０％、または１０％～３０％、または０％～２０％、または３％～２０％、または５％～２０％であるＰＤ－Ｌ１のレベルを含む。
【0221】
いくつかの実施形態では、がんは、ＩＣによって測定された場合、１０％未満、５％未満、または３％未満、または１％未満のＰＤ－Ｌ１レベルを含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＩＣによって測定された場合、０％～１０％、または１％～１０％、または３％～１０％、または５％～１０％、または０％～７％、または１％～７％、または３％～７％、または０％～５％、または１％～５％、または３％～５％、または０％～３％、または１％～３％であるＰＤ－Ｌ１レベルを含む。
【0222】
抗ＴＩＧＩＴ抗体及び抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、治療量以下の用量で投与されるが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は投与されない。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、治療量以下の用量で投与されるが、抗ＰＤ－１抗体は投与されない。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体及び抗ＰＤ－１抗体のそれぞれは、治療量以下の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、治療量以下の用量で投与される。
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、治療量以下の用量で投与されるが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は投与されない。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、治療量以下の用量で投与されるが、抗ＰＤ－１抗体は投与されない。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体及び抗ＰＤ－１抗体のそれぞれは、治療量以下の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、治療量以下の用量で投与される。
【0223】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の治療量以下の用量は、ａ）治療されるがんについての抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療されるがんについての単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で抗体を投与することを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体の治療量以下の用量は、ａ）治療されるがんについての抗ＴＩＧＩＴ抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療されるがんの単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で抗ＴＩＧＩＴ抗体を投与することを含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の治療量以下の用量は、ａ）治療されるがんについての抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療されるがんについての単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で抗体を投与することを含み、抗ＴＩＧＩＴ抗体の治療量以下の用量は、ａ）治療されるがんについての抗ＴＩＧＩＴ抗体の単剤療法の用量よりも少なく、及び／またはｂ）治療されるがんの単剤療法の投与頻度よりも少ない投与頻度で抗ＴＩＧＩＴ抗体を投与することを含む。
【0224】
いくつかの実施形態では、抗体の治療量以下の用量は、治療されるがんの抗体の単剤療法の用量よりも少ない用量を含む。いくつかの実施形態では、治療量以下の用量は、治療されるがんについての単剤療法の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％、または１０％～９０％、または１０％～８０％、または１０％～７０％、または１０％～６０％、または１０％～５０％、または１０％～４０％、または１０％～３０％、または２０％～９０％、または２０％～８０％、または２０％～７０％、または２０％～６０％、または２０％～５０％、または２０％～４０％、または２０％～３０％、または３０％～９０％、または５０％～８０％、または３０％～７０％、または３０％～６０％、または３０％～５０％、または３０％～４０％、または４０％～９０％、または４０％～８０％、または４０％～７０％、または４０％～６０％、または４０％～５０％、または５０％～９０％、または５０％～８０％、または５０％～７０％、または５０％～６０％である抗体の用量である。
【0225】
いくつかの実施形態では、治療量以下の用量は、抗体の単剤療法の投与よりも少ない頻度である抗体の投与である。いくつかの実施形態では、単剤療法の投与が毎週である場合、治療量以下の投与のために、抗体は、１０日ごと、または２週間ごと、または３週間ごと、または４週間ごと、または１ヶ月ごと、またはさらに少ない頻度で投与される。いくつかの実施形態では、単剤療法の投与が２週間ごとである場合、治療量以下の投与のために、抗体は、３週間ごと、または４週間ごと、１ヶ月ごと、または５週間ごと、または６週間ごと、またはさらに少ない頻度で投与される。いくつかの実施形態では、単剤療法の投与が３週間ごとである場合、治療量以下の投与のために、抗体は、４週間ごと、または１ヶ月ごと、または５週間ごと、または６週間ごと、または８週間ごと、または２ヶ月ごと、または１０週間ごと、または１２週間ごと、または３ヶ月ごと、またはさらに少ない頻度で投与される。いくつかの実施形態では、単剤療法の投与が４週間ごとである場合、治療量以下の投与のために、抗体は、５週間ごと、または６週間ごと、または８週間ごと、または２ヶ月ごと、または１０週間ごと、または１２週間ごと、または３ヶ月ごと、または１４週間ごと、または１６週間ごと、または４ヶ月ごと、またはさらに少ない頻度で投与される。
【0226】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに２４０ｍｇ未満、３週間ごとに２００ｍｇ未満、３週間ごとに３５０ｍｇ未満、３週間ごとに３６０ｍｇ未満、４週間ごとに４８０ｍｇ未満、または６週間ごとに４００ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに２００ｍｇ未満、３週間ごとに１５０ｍｇ未満、３週間ごとに３００ｍｇ未満、３週間ごとに３２０ｍｇ未満、４週間ごとに４２０ｍｇ未満、または６週間ごとに３５０ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに１５０ｍｇ未満、３週間ごとに１２０ｍｇ未満、３週間ごとに２５０ｍｇ未満、３週間ごとに２８０ｍｇ未満、４週間ごとに３６０ｍｇ未満、または６週間ごとに３００ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに１００ｍｇ未満、３週間ごとに８０ｍｇ未満、３週間ごとに２００ｍｇ未満、３週間ごとに２４０ｍｇ未満、４週間ごとに３２０ｍｇ未満、または６週間ごとに２５０ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに５０ｍｇ未満、３週間ごとに６０ｍｇ未満、３週間ごとに１５０ｍｇ未満、３週間ごとに２００ｍｇ未満、４週間ごとに２４０ｍｇ未満、または６週間ごとに２００ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに２５ｍｇ未満、３週間ごとに２０ｍｇ未満、３週間ごとに１００ｍｇ未満、３週間ごとに１２０ｍｇ未満、４週間ごとに１８０ｍｇ未満、６週間ごとに１６０ｍｇ未満である。
【0227】
いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、ペムブロリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、２００ｍｇまたは４００ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、ニボルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、２４０ｍｇ、３６０ｍｇ、または４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、セミプリマブであり、セミプリマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、３５０ｍｇである。
【0228】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに２４０ｍｇ、３週間ごとに２００ｍｇ、３週間ごとに３５０ｍｇ、３週間ごとに３６０ｍｇ、４週間ごとに４８０ｍｇ、または６週間ごとに４００ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、４週間ごとに２４０ｍｇ、６週間ごとに２００ｍｇ、６週間ごとに３５０ｍｇ、６週間ごとに３６０ｍｇ、８週間ごとに４８０ｍｇ、または１２週間ごとに４００ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、６週間ごとに２４０ｍｇ、９週間ごとに２００ｍｇ、９週間ごとに３５０ｍｇ、９週間ごとに３６０ｍｇ、１２週間ごとに４８０ｍｇ、または１８週間ごとに４００ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、８週間ごとに２４０ｍｇ、１２週間ごとに２００ｍｇ、１２週間ごとに３５０ｍｇ、１２週間ごとに３６０ｍｇ、１６週間ごとに４８０ｍｇ、または２４週間ごとに４００ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体についての治療量以下の用量は、１０週間ごとに２４０ｍｇ、１５週間ごとに２００ｍｇ、１５週間ごとに３５０ｍｇ、１５週間ごとに３６０ｍｇ、２０週間ごとに４８０ｍｇ、または３０週間ごとに４００ｍｇより低い頻度である。
【0229】
いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、ペムブロリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、３週間ごとまたは６週間ごとである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブであり、ペムブロリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、３週間ごとに２００ｍｇ、または６週間ごとに４００ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、ニボルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブであり、ニボルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、２週間ごとに２４０ｍｇ、３週間ごとに３６０ｍｇ、または４週間ごとに４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、セミプリマブであり、セミプリマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、３週間ごとである。
【0230】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに８００ｍｇ未満、２週間ごとに８４０ｍｇ未満、３週間ごとに１，２００ｍｇ未満、３週間ごとに１，５００ｍｇ未満、または４週間ごとに１，６８０ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに６００ｍｇ未満、２週間ごとに６２０ｍｇ未満、３週間ごとに８００ｍｇ未満、３週間ごとに１，０００ｍｇ未満、または４週間ごとに１，２４０ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに４００ｍｇ未満、２週間ごとに４１０ｍｇ未満、３週間ごとに４００ｍｇ未満、３週間ごとに５００ｍｇ未満、または４週間ごとに８２０ｍｇ未満である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに２００ｍｇ未満、３週間ごとに２００ｍｇ未満、３週間ごとに２５０ｍｇ未満、または４週間ごとに４１０ｍｇ未満である。
【0231】
いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブであり、アベルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、８００ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブであり、デュルバルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、１０ｍｇ／ｋｇまたは１，５００ｍｇである。
【0232】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、２週間ごとに８００ｍｇ、２週間ごとに８４０ｍｇ、３週間ごとに１，２００ｍｇ、３週間ごとに１，５００ｍｇ、または４週間ごとに１，６８０ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、４週間ごとに８００ｍｇ、４週間ごとに８４０ｍｇ、６週間ごとに１，２００ｍｇ、６週間ごとに１，５００ｍｇ、または８週間ごとに１，６８０ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、６週間ごとに８００ｍｇ、６週間ごとに８４０ｍｇ、９週間ごとに１，２００ｍｇ、９週間ごとに１，５００ｍｇ、または１２週間ごとに１，６８０ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、８週間ごとに８００ｍｇ、８週間ごとに８４０ｍｇ、１２週間ごとに１，２００ｍｇ、１２週間ごとに１，５００ｍｇ、または１６週間ごとに１，６８０ｍｇより低い頻度である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体についての治療量以下の用量は、１０週間ごとに８００ｍｇ、１０週間ごとに８４０ｍｇ、１５週間ごとに１，２００ｍｇ、１５週間ごとに１，５００ｍｇ、または２０週間ごとに１，６８０ｍｇより低い頻度である。
【0233】
いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブであり、アテゾリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、８４０ｍｇ、１，２００ｍｇ、または１，６８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブであり、アベルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、２週間ごとである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブであり、デュルバルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、２週間ごとまたは４週間ごとである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブであり、デュルバルマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、２週間ごとに１０ｍｇ／ｋｇ ｍｇ、または４週間ごとに１，５００ｍｇである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブであり、アテゾリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の投与頻度は、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとである。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブであり、アテゾリズマブは、単剤療法の用量または単剤療法の用量よりも少ない治療量以下の用量（例えば、本明細書で提供されるパーセンテージ内または減少された用量または頻度）で投与され、単剤療法の用量は、２週間ごとに８４０ｍｇ、３週間ごとに１，２００ｍｇ、または４週間ごとに１，６８０ｍｇである。
【0234】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体の治療量以下の用量は、治療されるがんの抗ＴＩＧＩＴ抗体の単剤療法の用量よりも少ない用量を含む。いくつかの実施形態では、治療量以下の用量は、治療されるがんについての単剤療法の５％～９０％、または５％～８０％、または５％～７０％、または５％～６０％、または５％～５０％、または５％～４０％、または５％～３０％、または１０％～９０％、または１０％～８０％、または１０％～７０％、または１０％～６０％、または１０％～５０％、または１０％～４０％、または１０％～３０％、または２０％～９０％、または２０％～８０％、または２０％～７０％、または２０％～６０％、または２０％～５０％、または２０％～４０％、または２０％～３０％、または３０％～９０％、または５０％～８０％、または３０％～７０％、または３０％～６０％、または３０％～５０％、または３０％～４０％、または４０％～９０％、または４０％～８０％、または４０％～７０％、または４０％～６０％、または４０％～５０％、または５０％～９０％、または５０％～８０％、または５０％～７０％、または５０％～６０％である抗ＴＩＧＩＴ抗体の用量である。
【0235】
しかし、投与量は、いくつかの要因、例えば、選択された投与経路、組成物の製剤、患者の応答、状態の重症度、対象の体重、及び処方医の判断に応じて変動し得る。投与量は、個々の患者の必要に応じて、時間の経過とともに増加または減少させることができる。いくつかの実施形態では、患者は、最初に低用量が投与され、その後、患者が耐えられる高用量まで増加させる。いくつかの実施形態では、患者には最初により高い用量が投与され、その後、この用量をより少ない用量まで減少させる。
【0236】
例示的適応症
いくつかの実施形態では、がんは、膀胱癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、食道癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、消化器癌（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、膵臓癌、大腸癌、高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌、結腸癌、腎臓癌、腎細胞癌、腎明細胞癌、頭頸部癌、神経膠芽腫、肺癌、小細胞肺癌、初期段階小細胞肺癌、肺腺癌、胃癌、胚細胞癌、骨癌、肝臓癌、肝細胞癌、甲状腺癌、皮膚癌、黒色腫、中枢神経系の新生物、中皮腫、リンパ腫、白血病、慢性リンパ性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、骨髄腫、または肉腫である。いくつかの実施形態では、がんは、胃癌、精巣癌、膵臓癌、肺腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、頭頸部癌、頭頸部扁平上皮癌、前立腺癌、中皮腫、及び腎明細胞癌から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、これらに限定されないが、例えば、急性骨髄性、慢性骨髄性、急性リンパ性または慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、または結節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫などのリンパ腫または白血病である。いくつかの実施形態では、がんは、大腸癌、結腸癌、腎臓癌、または明細胞腎癌である。いくつかの実施形態では、がんは、転移性癌である。
いくつかの実施形態では、がんは、膀胱癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、食道癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、消化器癌（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、膵臓癌、大腸癌、高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌、結腸癌、腎臓癌、腎細胞癌、腎明細胞癌、頭頸部癌、神経膠芽腫、肺癌、小細胞肺癌、初期段階小細胞肺癌、肺腺癌、胃癌、胚細胞癌、骨癌、肝臓癌、肝細胞癌、甲状腺癌、皮膚癌、黒色腫、中枢神経系の新生物、中皮腫、リンパ腫、白血病、慢性リンパ性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、骨髄腫、または肉腫である。いくつかの実施形態では、がんは、胃癌、精巣癌、膵臓癌、肺腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、頭頸部癌、頭頸部扁平上皮癌、前立腺癌、中皮腫、及び腎明細胞癌から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、これらに限定されないが、例えば、急性骨髄性、慢性骨髄性、急性リンパ性または慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、または結節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫などのリンパ腫または白血病である。いくつかの実施形態では、がんは、大腸癌、結腸癌、腎臓癌、または明細胞腎癌である。いくつかの実施形態では、がんは、転移性癌である。
【0237】
いくつかの実施形態では、がんは、小細胞肺癌、早期小細胞肺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌、トリプルネガティブ乳癌、胃癌、肝細胞癌、神経膠芽腫、卵巣癌、頭頸部扁平上皮癌、食道扁平上皮癌（ＥＳＣＣ）、及び高頻度非マイクロサテライト不安定性（ｎｏｎ－ＭＳＩ ｈｉｇｈ）大腸癌から選択される。
【0238】
いくつかの実施形態において、がんは、非小細胞肺癌である。
【0239】
いくつかの実施形態では、がんは、多くの場合、Ｔ細胞応答を駆動するためのより多くの抗原を有するので、高い腫瘍変異負荷を有するがんである。したがって、いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、黒色腫、膀胱癌、または胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）などの変異負荷の高いがんである。いくつかの実施形態では、がんは、マイクロサテライト不安定性を有する。
【0240】
いくつかの実施形態では、
ａ）がんが非小細胞肺癌であり、かつＴＰＳ＜１％である；
ｂ）がんが頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）であり、ＣＰＳ＜１である；
ｃ）がんが尿路上皮癌であり、かつＣＰＳ＜１０である；
ｄ）がんが胃癌であり、かつＣＰＳ＜１である；
ｅ）がんが食道癌であり、かつＣＰＳ＜１０である；
ｆ）がんが子宮頸癌であり、かつＣＰＳ＜１である；または
ｇ）がんがトリプルネガティブ乳癌であり、かつＣＰＳが＜１０である。
ａ）がんが非小細胞肺癌であり、かつＴＰＳ＜１％である；
ｂ）がんが頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）であり、ＣＰＳ＜１である；
ｃ）がんが尿路上皮癌であり、かつＣＰＳ＜１０である；
ｄ）がんが胃癌であり、かつＣＰＳ＜１である；
ｅ）がんが食道癌であり、かつＣＰＳ＜１０である；
ｆ）がんが子宮頸癌であり、かつＣＰＳ＜１である；または
ｇ）がんがトリプルネガティブ乳癌であり、かつＣＰＳが＜１０である。
【0241】
いくつかの実施形態では、
ａ）がんが、尿路上皮癌であり、かつＩＣ＜５％である；
ｂ）がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつＩＣ＜１％である；または
ｃ）がんが、非小細胞肺癌であり、かつＩＣ＜１０％である。
ａ）がんが、尿路上皮癌であり、かつＩＣ＜５％である；
ｂ）がんが、トリプルネガティブ乳癌であり、かつＩＣ＜１％である；または
ｃ）がんが、非小細胞肺癌であり、かつＩＣ＜１０％である。
【0242】
いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺癌であり、ＴＰＳは、５０％未満である。
【0243】
いくつかの実施形態では、方法は、尿路上皮癌の第１選択治療である。
【0244】
いくつかの実施形態では、がんは、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させる変異を含む。いくつかの実施形態では、がんは、抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のそれぞれの有効性を低下させる変異を含む。いくつかの実施形態では、がんは、抗ＰＤ－１抗体の有効性を低下させるが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性は低下させない変異を含む。いくつかの実施形態では、がんは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性を低下させるが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の有効性は低下させない変異を含む。いくつかの実施形態では、がんは、抗ＴＩＧＩＴ抗体の有効性を低下させる変異を含む。
【0245】
いくつかの実施形態において、がんは、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異及び／またはＲＯＳ１遺伝子における変異を含む。いくつかの実施形態において、がんは、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及び／またはＡＬＫ遺伝子における変異を含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及びＡＬＫ遺伝子における変異を含むが、ＲＯＳ１遺伝子における変異は含まない。いくつかの実施形態では、がんは、ＥＧＦＲ遺伝子における変異及びＲＯＳ１遺伝子における変異を含むが、ＡＬＫ遺伝子における変異は含まない。いくつかの実施形態では、がんは、ＡＬＫ遺伝子における変異及びＲＯＳ１遺伝子における変異を含むが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異は含まない。いくつかの実施形態では、がんは、ＥＧＦＲ遺伝子における変異を含むが、ＡＬＫ遺伝子における変異またはＲＯＳ１遺伝子における変異は含まない。いくつかの実施形態では、がんは、ＡＬＫ遺伝子における変異を含むが、ＥＧＦＲ遺伝子における変異またはＲＯＳ１遺伝子における変異は含まない。いくつかの実施形態では、がんは、ＲＯＳ１遺伝子における変異を含むが、ＡＬＫ遺伝子における変異またはＥＧＦＲ遺伝子における変異は含まない。
【0246】
さらなる例示的な実施形態
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのうちの少なくとも１つに対する結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのそれぞれに対する結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのうちの少なくとも１つに対する結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、及びＦｃγＲＩのそれぞれに対する結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩＩａへの結合が増強されているＦｃを含む。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、少なくともＦｃγＲＩへの結合が増強されているＦｃを含む。
【0247】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＦｃは、１つ以上の阻害性ＦｃγＲへの結合が減少している。
【0248】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＦｃは、ＦｃγＲＩＩｂへの結合が減少している。
【0249】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、重鎖定常領域内に置換Ｓ２９３Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅを含む。
【0250】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、非フコシル化抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、抗ＴＩＧＩＴ抗体の組成物に含まれ、組成物中の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の抗ＴＩＧＩＴ抗体が、非フコシル化抗体である。
【0251】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＦｃは、同じアイソタイプの対応する野生型Ｆｃと比較して、増強されたＡＤＣＣ及び／またはＡＤＣＰ活性を有するＦｃを含む。
【0252】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、
（ａ）配列番号７～９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１０～１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号１４～１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２；及び
（ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む。
（ａ）配列番号７～９から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１；
（ｂ）配列番号１０～１３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２；
（ｃ）配列番号１４～１６から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；
（ｄ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１；
（ｅ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２；及び
（ｆ）配列番号１９のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む。
【0253】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、
（ａ）それぞれ、配列番号７、１０、１４、１７、１８及び１９；または
（ｂ）それぞれ、配列番号８、１１、１４、１７、１８及び１９；または
（ｃ）それぞれ、配列番号９、１２、１５、１７、１８及び１９；または
（ｄ）それぞれ、配列番号８、１３、１６、１７、１８及び１９；または
（ｅ）それぞれ、配列番号８、１２、１６、１７、１８及び１９
の配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ、及びＣＤＲ３とを含む。
（ａ）それぞれ、配列番号７、１０、１４、１７、１８及び１９；または
（ｂ）それぞれ、配列番号８、１１、１４、１７、１８及び１９；または
（ｃ）それぞれ、配列番号９、１２、１５、１７、１８及び１９；または
（ｄ）それぞれ、配列番号８、１３、１６、１７、１８及び１９；または
（ｅ）それぞれ、配列番号８、１２、１６、１７、１８及び１９
の配列を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ、及びＣＤＲ３とを含む。
【0254】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体が、配列番号１～５から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。
【0255】
いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、配列番号２０～２４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【0256】
いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－１抗体または複数の抗ＰＤ－１抗体を投与することを含む。
【0257】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ＣＴ－０１１、ＢＧＢ－Ａ３１７、セミプリマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、ＴＳＲ－０４２、ＰＤＲ００１、またはトリパリマブから選択され、または複数の抗ＰＤ－１抗体はそれぞれ独立してそれらから選択される。
【0258】
いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはニボルマブである。いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、セミプリマブである。いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。
【0259】
いくつかの実施形態では、本方法は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体または複数の抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含む。
【0260】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブまたはアベルマブから選択され、または複数の抗ＰＤ－Ｌ１抗体はそれぞれ独立してそれらから選択される。
【0261】
いくつかの実施形態では、方法が、抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはニボルマブである；または方法が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を投与することを含み、ここで、抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブである。
【0262】
様々な実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞を枯渇させ、抗原提示細胞（ＡＰＣ）を活性化し、ＣＤ８Ｔ細胞応答を増強し、共刺激受容体を上方制御し、及び／または免疫活性化サイトカイン（ＣＸＣＬ１０及び／またはＩＦＮγ）の放出を促進する。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、免疫抑制サイトカイン（ＩＬ１０及び／またはＭＤＣなど）よりも高い程度で免疫活性化サイトカインの放出を促進する。
【0263】
抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体、及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、同時投与または逐次投与することができる。逐次投与の場合、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体、及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの１つの少なくとも第１の投与は、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体、及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの別の１つの少なくとも第１の投与の前に行うことができる。同時投与の場合、いくつかの実施形態では、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの１つの少なくとも第１の投与、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの別の１つの少なくとも第１の投与は、別個の医薬組成物として、または同じ医薬組成物中において投与され得る。
【0264】
医薬組成物の投与経路は、経口、腹腔内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、吸入、局所、病変内、直腸、気管支内、経鼻、経粘膜、腸、眼または耳への送達、または当分野で知られている任意の他の方法であり得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の治療剤が、経口、静脈内、または腹腔内に投与される。
【0265】
抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体、及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のいずれかなどの共投与される治療剤は、一緒にまたは別々に、同時にまたは異なる時点で投与することができる。投与する場合、治療剤は独立して、必要に応じて、１日１回、２回、３回、４回、またはそれより多く、またはそれより少ない頻度で投与することができる。いくつかの実施形態では、投与される治療剤は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、投与される治療剤は、例えば混合物として同時に（複数可）投与される。いくつかの実施形態では、治療剤のうちの１つ以上が持続放出製剤中で投与される。
【0266】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される併用療法のいずれかは、長期間にわたって、例えば、少なくとも３０日、４０日、５０日、６０日、７０日、８０日、９０日、１００日、１５０日、２００日、２５０日、３００日、３５０日、またはそれ以上の間、対象に投与される。
【0267】
例示的な有効性の結果
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の併用療法の少なくとも一部で観察される活性の増強は、対応する単剤療法治療と比較して特定の利点を有する。例えば、いくつかの実施形態では、併用療法は、単剤療法として投与された場合の成分抗体のいずれかと同等の毒性プロファイルを有する。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、単剤療法として投与された場合の任意の成分抗体と比較してより長い応答期間をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、単剤療法として投与した場合の成分抗体のいずれかと比較して、より長い無増悪生存期間をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、併用療法の成分抗体のいずれかを用いた単剤療法治療後に再発する再発がんを治療するために使用できる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の併用療法の少なくとも一部で観察される活性の増強は、対応する単剤療法治療と比較して特定の利点を有する。例えば、いくつかの実施形態では、併用療法は、単剤療法として投与された場合の成分抗体のいずれかと同等の毒性プロファイルを有する。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、単剤療法として投与された場合の任意の成分抗体と比較してより長い応答期間をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、単剤療法として投与した場合の成分抗体のいずれかと比較して、より長い無増悪生存期間をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法の投与は、併用療法の成分抗体のいずれかを用いた単剤療法治療後に再発する再発がんを治療するために使用できる。
【0268】
ＶＩ．組成物及びキット
別の態様では、対象におけるがんの治療または予防に使用するための組成物及びキットが提供される。
別の態様では、対象におけるがんの治療または予防に使用するための組成物及びキットが提供される。
【0269】
医薬組成物
いくつかの実施形態では、本方法で使用するための医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、第１の医薬組成物中で投与され、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの少なくとも別の１つが、第２の医薬組成物中で投与される。いくつかの実施形態では、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、単一の医薬組成物中で投与される。
いくつかの実施形態では、本方法で使用するための医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの少なくとも１つが、第１の医薬組成物中で投与され、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のうちの少なくとも別の１つが、第２の医薬組成物中で投与される。いくつかの実施形態では、（１）抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに（２）抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、単一の医薬組成物中で投与される。
【0270】
本発明で使用するための製剤を調製するためのガイダンスは、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄ．，２００６、上記；Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ：Ｔｈｅ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｄｒｕｇ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，Ｓｗｅｅｔｍａｎ，２００５，Ｌｏｎｄｏｎ：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ；Ｎｉａｚｉ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，２００４，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ；及びＧｉｂｓｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ｄｒｕｇ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍ，２００１，Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓに記載され、これらは、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に記載の医薬組成物は、当業者に知られている方法、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、乳化、封入、捕捉または凍結乾燥プロセスによって製造することができる。以下の方法及び賦形剤は単なる例示であり、決して限定するものではない。
【0271】
いくつかの実施形態では、１つ以上の治療剤が、持続放出、制御放出、延長放出、時限放出、または遅延放出製剤で、例えば、治療剤を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックス中で送達するために調製される。様々なタイプの持続放出材料が確立されており、当業者に周知である。現在の延長放出製剤としては、フィルムコーティング錠、多粒子またはペレットシステム、親水性または親油性材料を使用したマトリックス技術、及び細孔形成賦形剤を含むワックスベース錠剤が挙げられる（例えば、Ｈｕａｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．２９：７９（２００３）；Ｐｅａｒｎｃｈｏｂ，ｅｔ ａｌ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．２９：９２５（２００３）；Ｍａｇｇｉ，ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．５５：９９（２００３）；Ｋｈａｎｖｉｌｋａｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．２２８：６０１（２００２）；及びＳｃｈｍｉｄｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２１６：９（２００１）を参照されたい）。持続放出送達システムは、その設計に応じて、数時間または数日にわたって、例えば、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１６時間、２０時間、２４時間、またはそれ以上にわたって化合物を放出することができる。通常、持続放出製剤は、天然または合成ポリマー、例えば、高分子ビニルピロリドン、例えば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）；カルボキシビニル親水性ポリマー；疎水性及び／または親水性親水コロイド、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロース；及びカルボキシポリメチレンを使用して調製できる。
【0272】
経口投与の場合、治療剤は、当技術分野で周知の薬学的に許容される担体と組み合わせることによって容易に製剤化され得る。そのような担体は、化合物を、治療される患者による経口摂取のために、錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、エマルジョン、親油性及び親水性の懸濁液、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして製剤化することができる。経口使用のための医薬組成物は、化合物を固形賦形剤と混合することによって得ることができ、任意に、所望される場合、好適な補助剤を添加した後、結果として得られる混合物を粉砕し、顆粒の混合物を処理して、錠剤または糖衣錠芯を得る。好適な賦形剤としては、例えば、フィラー、例えば、糖類、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトール；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）が挙げられる。所望の場合、架橋ポリビニルピロリドン、アガー、またはアルギン酸もしくはその塩、例えば、アルギン酸ナトリウムなどの崩壊剤が添加され得る。
【0273】
治療剤は、ボーラス注射または継続的注入によるなど、注射による非経口投与用に製剤化され得る。注射用に、化合物（複数可）は、水性または非水性溶媒、例えば、植物性または他の類似の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸のエステルまたはプロピレングリコール；及び必要ならば、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定剤及び保存剤などの通常使用されている添加剤と共に、溶解、懸濁または乳化させることによって調製物中に製剤化することができる。いくつかの実施形態では、化合物は、水溶液、好ましくはハンクス液、リンゲル液、または生理食塩水緩衝液などの生理学的に適合する緩衝液中で製剤化することができる。注射用製剤は、単位剤形で、例えばアンプル中で提供することができ、または多用量容器に、保存剤を加えて提供することができる。組成物は、油性ビヒクルまたは水性ビヒクル中の懸濁液、溶液または乳濁液のような形態を取ることができ、懸濁化剤、安定剤及び／または分散剤のような製剤化剤を含むことができる。
【0274】
治療剤は、経粘膜または経皮手段によって全身投与することができる。経粘膜または経皮投与のために、浸透させる障壁に適切な浸透剤が製剤中に使用される。局所投与のために、剤は、軟膏剤、クリーム、軟膏、粉末及びゲルに製剤化される。一実施形態では、経皮送達剤は、ＤＭＳＯであり得る。経皮送達システムには、例えばパッチが含まれ得る。経粘膜投与のために、浸透すべき障壁に適切な浸透剤が製剤に使用される。そのような浸透剤は、当技術分野で一般的に知られている。例示的な経皮送達製剤としては、米国特許第６，５８９，５４９号；同第６，５４４，５４８号；同第６，５１７，８６４号；同第６，５１２，０１０号；同第６，４６５，００６号；同第６，３７９，６９６号；同第６，３１２，７１７号及び同第６，３１０，１７７号に記載されているものが挙げられ、これらの各々は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0275】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、許容される担体及び／賦形剤を含む。薬学的に許容される担体としては、生理学的に適合性があり、好ましくは治療剤の活性と干渉しないかまたは他の方法で阻害しない任意の溶媒、分散媒、またはコーティングが含まれる。いくつかの実施形態では、担体は、静脈内、筋肉内、経口、腹腔内、経皮、局所、または皮下投与に好適である。薬学的に許容される担体は、例えば、組成物を安定化する、または活性剤（複数可）の吸収を増加または減少させる働きをする、１つ以上の生理学的に許容される化合物を含むことができる。生理学的に許容される化合物としては、例えば、グルコース、スクロース、またはデキストランなどの炭水化物、アスコルビン酸またはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質、活性剤のクリアランスまたは加水分解を減少させる組成物、または賦形剤または他の安定剤及び／または緩衝剤を挙げることができる。他の薬学的に許容される担体及びそれらの製剤は周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ． Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００５に一般的に記載されている。様々な薬学的に許容される賦形剤が当技術分野で周知であり、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（５ｔｈ ｅｄ．，Ｅｄ．Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．）に記載されている。
【0276】
本開示の医薬組成物の投与量及び所望の濃度は、想定される特定の使用に応じて異なり得る。適切な投与量または投与経路の決定は、十分に当業者の技術の範囲内である。好適な投与量は本明細書にも記載されている。
【0277】
キット
いくつかの実施形態では、がんを有する対象の治療に使用するためのキットが提供される。いくつかの実施形態では、キットは、以下を含む：
本明細書で提供される抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び
本明細書で提供される抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体。
いくつかの実施形態では、がんを有する対象の治療に使用するためのキットが提供される。いくつかの実施形態では、キットは、以下を含む：
本明細書で提供される抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び
本明細書で提供される抗ＰＤ－１抗体及び／または抗ＰＤ－Ｌ１抗体。
【0278】
いくつかの実施形態では、キットは、本発明の方法を実施するための指示（すなわち、プロトコル）（例えば、がんを治療するためにキットを使用するための指示）を含む説明資料をさらに含むことができる。説明資料は、一般的に、書面または印刷資料を含むが、これらに限定されない。そのような指示を格納し、それらをエンドユーザーに伝達することができる任意の媒体が、本発明によって企図される。そのような媒体としては、これらに限定されないが、電子記憶媒体（例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ、チップ）、光学媒体（例えば、ＣＤ ＲＯＭ）などが挙げられる。そのような媒体としては、そのような説明資料を提供するインターネットサイトへのアドレスが含まれてもよい。
【実施例】
【0279】
以下に論じられる実施例は、単に本発明の例示となるよう意図されており、決して本発明を限定するものと見なされるべきではない。実施例は、以下の実験が実施された全ての実験または唯一の実験であることを表すようには意図されていない。使用される数（例えば、量、温度等）に対する正確さを確保するよう努力されているが、いくつかの実験誤差及び偏差が計上されるべきである。別途示されない限り、部は、重量部であり、分子量は、平均分子量であり、温度は、摂氏温度であり、圧力は、大気圧であるか、またはそれに近い。
【0280】
実施例１：異なる同系モデルにおける腫瘍微小環境
１．１ 材料及び方法
Ｒｅｎｃａ、ＣＴ２６及びＭＣ３８腫瘍細胞を、Ｂａｌｂ／ｃまたはＣ５７ＢＬ／６マウスに皮下移植し、１００ｍｍ３まで成長させた。腫瘍を動物から切除し、製造業者（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の指示に従って、酵素解離キットを使用して１種の細胞懸濁液を作製した。これらの腫瘍を抗体で染色して、Ｂ細胞（ＣＤ１９＋）、ＣＤ４＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ８－ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３－）、ＮＫ細胞（ＣＤ３－ＮＫｐ４６＋）、ｍＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ－Ｌｙ６Ｃ＋）、ＤＣ（ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣＩＩ＋）、ｇＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ＋Ｌｙ６Ｃ－）、マクロファージ（ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋Ｌｙ６ｃ－Ｌｙ６Ｇ－）、制御性Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ８－ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７－）、ＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ４－ＣＤ８＋）、及び活性化ＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ４－ＣＤ８＋Ｅｏｍｅｓ＋ＰＤ－１＋Ｋｉ６７＋）を識別し、Ａｔｔｕｅｎフローサイトメーターを用いて分析した。
１．１ 材料及び方法
Ｒｅｎｃａ、ＣＴ２６及びＭＣ３８腫瘍細胞を、Ｂａｌｂ／ｃまたはＣ５７ＢＬ／６マウスに皮下移植し、１００ｍｍ３まで成長させた。腫瘍を動物から切除し、製造業者（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の指示に従って、酵素解離キットを使用して１種の細胞懸濁液を作製した。これらの腫瘍を抗体で染色して、Ｂ細胞（ＣＤ１９＋）、ＣＤ４＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ８－ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３－）、ＮＫ細胞（ＣＤ３－ＮＫｐ４６＋）、ｍＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ－Ｌｙ６Ｃ＋）、ＤＣ（ＣＤ１１ｃ＋ＭＨＣＩＩ＋）、ｇＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ＋Ｌｙ６Ｃ－）、マクロファージ（ＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋Ｌｙ６ｃ－Ｌｙ６Ｇ－）、制御性Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ８－ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７－）、ＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ４－ＣＤ８＋）、及び活性化ＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＤ３＋ＣＤ４－ＣＤ８＋Ｅｏｍｅｓ＋ＰＤ－１＋Ｋｉ６７＋）を識別し、Ａｔｔｕｅｎフローサイトメーターを用いて分析した。
【0281】
１．２ 結果
腫瘍内の各細胞型のパーセンテージを決定し、プロットした（図１Ａ～１Ｃ）。各腫瘍は、治療開始前の１００ｍｍ３ベースラインで、腫瘍微小環境における各免疫細胞サブセットの様々な明確なレベルを示した。例えば、ＭＣ３８は、Ｔ細胞に対する自然免疫細胞による集積の増加を示した（図１Ｃ）。これらの結果は、本発明者の施設で分析した場合のこれらの腫瘍型におけるベースライン免疫微小環境であるが、これらの腫瘍型を他の施設で評価した場合、結果が異なる可能性がある（Ｍｏｓｅｌｙ，２０１７，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓ．５（１）：２９－４１）。
腫瘍内の各細胞型のパーセンテージを決定し、プロットした（図１Ａ～１Ｃ）。各腫瘍は、治療開始前の１００ｍｍ３ベースラインで、腫瘍微小環境における各免疫細胞サブセットの様々な明確なレベルを示した。例えば、ＭＣ３８は、Ｔ細胞に対する自然免疫細胞による集積の増加を示した（図１Ｃ）。これらの結果は、本発明者の施設で分析した場合のこれらの腫瘍型におけるベースライン免疫微小環境であるが、これらの腫瘍型を他の施設で評価した場合、結果が異なる可能性がある（Ｍｏｓｅｌｙ，２０１７，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓ．５（１）：２９－４１）。
【0282】
実施例２：腫瘍ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１の発現レベル
１．１ 材料及び方法
バルク腫瘍ＲＮＡｓｅｑを、様々なサイズ（１００ｍｍ３、３００ｍｍ３、及び１，０００ｍｍ３）のＲｅｎｃａ、ＣＴ２６及びＭＣ３８腫瘍に対して実施した。異なる治療法に対する応答性の基礎と成り得る様々な同系腫瘍モデルのベースライン免疫チェックポイント特性を調べるために、様々な免疫チェックポイント分子の転写レベルを分析した。
１．１ 材料及び方法
バルク腫瘍ＲＮＡｓｅｑを、様々なサイズ（１００ｍｍ３、３００ｍｍ３、及び１，０００ｍｍ３）のＲｅｎｃａ、ＣＴ２６及びＭＣ３８腫瘍に対して実施した。異なる治療法に対する応答性の基礎と成り得る様々な同系腫瘍モデルのベースライン免疫チェックポイント特性を調べるために、様々な免疫チェックポイント分子の転写レベルを分析した。
【0283】
１．２ 結果
この分析により、異なる腫瘍モデル間で異なるレベルのＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１発現が明らかになり（図２Ａ～２Ｂ）、ＭＣ３８腫瘍は、両方の分子の最も低い平均レベルを示し、Ｒｅｎｃａ腫瘍が続いた。ＣＴ２６腫瘍は、両方の分子の最も高いレベルを示した。
この分析により、異なる腫瘍モデル間で異なるレベルのＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１発現が明らかになり（図２Ａ～２Ｂ）、ＭＣ３８腫瘍は、両方の分子の最も低い平均レベルを示し、Ｒｅｎｃａ腫瘍が続いた。ＣＴ２６腫瘍は、両方の分子の最も高いレベルを示した。
【0284】
実施例３：抗ＴＩＧＩＴ及び抗ＰＤ－１抗体に対するＭＣ３８腫瘍の応答性
１．１ 材料及び方法
異なるＦｃ骨格を有する様々な抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ－１抗体との組み合わせに対するＭＣ３８腫瘍の応答性を、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＭＣ３８同系腫瘍細胞株を移植することによって試験した。腫瘍を皮下移植し、１００ｍｍ３に達したときに、０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ抗体（すなわち、ＳＥＡ－ＴＧＴ抗体を、非フコシル化ヒトＩｇＧ１骨格に対応する非フコシル化マウスＩｇＧ２ａに再構成したもの）、野生型ｍＩｇＧ２ａ抗ＴＩＧＩＴ抗体、Ｆｃ－ｎｕｌｌ抗ＴＩＧＩＴ ＬＡＬＡ ｍＩｇＧ２ａ抗体、抗マウスＰＤ－１抗体、または両方の剤（例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴ及び抗マウスＰＤ－１）の組み合わせを、３日間隔で３回投与（ｑ３ｄｘ３）することにより動物を処置した。種々の抗ＴＩＧＩＴ抗体はそれぞれ、同じ可変ドメインを有し、Ｆｃ骨格及び関連する増強されたエフェクター機能のレベル（非フコシル化＞野生型＞ＬＡＬＡ Ｆｃ－ｎｕｌｌ）に関してのみ異なっていた。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。
１．１ 材料及び方法
異なるＦｃ骨格を有する様々な抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ－１抗体との組み合わせに対するＭＣ３８腫瘍の応答性を、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＭＣ３８同系腫瘍細胞株を移植することによって試験した。腫瘍を皮下移植し、１００ｍｍ３に達したときに、０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ抗体（すなわち、ＳＥＡ－ＴＧＴ抗体を、非フコシル化ヒトＩｇＧ１骨格に対応する非フコシル化マウスＩｇＧ２ａに再構成したもの）、野生型ｍＩｇＧ２ａ抗ＴＩＧＩＴ抗体、Ｆｃ－ｎｕｌｌ抗ＴＩＧＩＴ ＬＡＬＡ ｍＩｇＧ２ａ抗体、抗マウスＰＤ－１抗体、または両方の剤（例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴ及び抗マウスＰＤ－１）の組み合わせを、３日間隔で３回投与（ｑ３ｄｘ３）することにより動物を処置した。種々の抗ＴＩＧＩＴ抗体はそれぞれ、同じ可変ドメインを有し、Ｆｃ骨格及び関連する増強されたエフェクター機能のレベル（非フコシル化＞野生型＞ＬＡＬＡ Ｆｃ－ｎｕｌｌ）に関してのみ異なっていた。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。
【0285】
１．２ 結果
最適以下の用量（０．１ｍｇ／ｋｇ）またはより低い用量のいずれかの剤単独で処置した動物は、最小の応答性及び腫瘍成長の遅延のみ示した（図３）（ＴＩＧＩＴ単独では示さない）。Ｆｃ－ｎｕｌｌ抗ＴＩＧＩＴ ＬＡＬＡ抗体をＰＤ－１治療に加えても、抗腫瘍活性は増強しなかった。ＰＤ－１治療にｍＩｇＧ２ａ骨格の標準抗ＴＩＧＩＴ（ＩｇＧ１ヒト骨格のＦｃγＲ結合と同等）を加えることにより、腫瘍成長が遅延する程度まで実質的に増加し、治癒率を２倍増加させた（図３）。
最適以下の用量（０．１ｍｇ／ｋｇ）またはより低い用量のいずれかの剤単独で処置した動物は、最小の応答性及び腫瘍成長の遅延のみ示した（図３）（ＴＩＧＩＴ単独では示さない）。Ｆｃ－ｎｕｌｌ抗ＴＩＧＩＴ ＬＡＬＡ抗体をＰＤ－１治療に加えても、抗腫瘍活性は増強しなかった。ＰＤ－１治療にｍＩｇＧ２ａ骨格の標準抗ＴＩＧＩＴ（ＩｇＧ１ヒト骨格のＦｃγＲ結合と同等）を加えることにより、腫瘍成長が遅延する程度まで実質的に増加し、治癒率を２倍増加させた（図３）。
【0286】
しかしながら、このＦｃ相互作用が、非フコシル化抗ＴＩＧＩＴ抗体のＳＥＡ骨格（ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ）によってさらに増強された場合、抗腫瘍活性はさらに増強され、合わせて、完全奏効がさらに２倍増加した（図３）。これらのデータは、抗ＴＩＧＩＴ抗体によるＦｃ係合が、抗ＴＩＧＩＴ治療と抗ＰＤ－１遮断との相乗効果を促進するのに役立つことを実証している。また、特に、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａとのこの相乗活性は、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１の両方の発現が最も低いレベルのＭＣ３８モデルで見られた（図２）。
【0287】
実施例４：抗ＴＩＧＩＴ及び抗ＰＤ－１抗体に対するＣＴ２６及びＲｅｎｃａ腫瘍の応答性
１．１ 材料及び方法
ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ（さらなる詳細については実施例３を参照）及び抗ＰＤ－１抗体の組み合わせに対する応答性を、ＣＴ２６モデル及びＲｅｎｃａモデルでさらに試験した。Ｂａｌｂ／ｃマウスにＣＴ２６またはＲｅｎｃａ同系腫瘍細胞株を移植した。腫瘍を皮下移植し、それらが１００ｍｍ３に達すると、動物をＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ、抗マウスＰＤ－１、またはこれら両方の剤の組み合わせ、ｑ３ｄｘ３の最適以下の濃度（０．１ｍｇ／ｋｇ）で治療した。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。
１．１ 材料及び方法
ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ（さらなる詳細については実施例３を参照）及び抗ＰＤ－１抗体の組み合わせに対する応答性を、ＣＴ２６モデル及びＲｅｎｃａモデルでさらに試験した。Ｂａｌｂ／ｃマウスにＣＴ２６またはＲｅｎｃａ同系腫瘍細胞株を移植した。腫瘍を皮下移植し、それらが１００ｍｍ３に達すると、動物をＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ、抗マウスＰＤ－１、またはこれら両方の剤の組み合わせ、ｑ３ｄｘ３の最適以下の濃度（０．１ｍｇ／ｋｇ）で治療した。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。
【0288】
１．２ 結果
０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ単独の最適以下の用量で処置した動物は、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）及びＲｅｎｃａモデル（図４Ｂ）の双方において、最小の応答性及び腫瘍成長遅延を示し、同様に、低用量の抗ＰＤ－１治療でも、最小の抗腫瘍活性が見られた。しかしながら、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ及び抗ＰＤ－１抗体の２つの最適以下の用量を添加することにより、抗腫瘍活性が大きく増強された。腫瘍成長遅延及び併用治療に対する完全奏効の両方の増加は、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）及びＲｅｎｃａモデル（図４Ｂ）の両方で見られた。組み合わせ活性の程度は、Ｒｅｎｃａモデル（図４Ｂ）と比較して、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）においてより大きく、ＭＣ３８モデル（図３）では、組み合わせに対して依然として最大の感度を示している。
０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ単独の最適以下の用量で処置した動物は、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）及びＲｅｎｃａモデル（図４Ｂ）の双方において、最小の応答性及び腫瘍成長遅延を示し、同様に、低用量の抗ＰＤ－１治療でも、最小の抗腫瘍活性が見られた。しかしながら、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ及び抗ＰＤ－１抗体の２つの最適以下の用量を添加することにより、抗腫瘍活性が大きく増強された。腫瘍成長遅延及び併用治療に対する完全奏効の両方の増加は、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）及びＲｅｎｃａモデル（図４Ｂ）の両方で見られた。組み合わせ活性の程度は、Ｒｅｎｃａモデル（図４Ｂ）と比較して、ＣＴ２６モデル（図４Ａ）においてより大きく、ＭＣ３８モデル（図３）では、組み合わせに対して依然として最大の感度を示している。
【0289】
１．３ 実施例２～４のまとめ
これらのモデルにおける異なるレベルのＰＤ－Ｌ１発現（図２Ａ～２Ｂ）に照らして、実施例２～４のデータは、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａと抗マウスＰＤ－１抗体との相乗効果が驚くべきことに、基礎となるＰＤ－Ｌ１発現レベルと相関していないことを実証している。最も低いＰＤ－Ｌ１発現レベルを有するＭＣ３８モデルは、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａと抗ＰＤ－１抗体との組み合わせを用いて治療した場合に最大の効果を示した（図３）。
これらのモデルにおける異なるレベルのＰＤ－Ｌ１発現（図２Ａ～２Ｂ）に照らして、実施例２～４のデータは、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａと抗マウスＰＤ－１抗体との相乗効果が驚くべきことに、基礎となるＰＤ－Ｌ１発現レベルと相関していないことを実証している。最も低いＰＤ－Ｌ１発現レベルを有するＭＣ３８モデルは、ＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａと抗ＰＤ－１抗体との組み合わせを用いて治療した場合に最大の効果を示した（図３）。
【0290】
増強されたエフェクター機能を有するＦｃ領域を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体（例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴなどの非フコシル化抗体）が、より低いレベルのＰＤ－Ｌ１を発現する腫瘍モデルであっても、抗ＰＤ－１抗体との相乗効果を呈し得るという発見は、驚くべきことであった。これは、他のＦｃ骨格（例えば、野生型またはＩｇＧ１エフェクターｎｕｌｌなど）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いた試験により、この組み合わせが比較的高いレベルのＰＤ－Ｌ１発現に依存することが判明しているためである。したがって、従来、そのような抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いて実施された臨床試験は、多くの場合、特定の閾値限界を超えてＰＤ－Ｌ１を発現する患者でのみこの併用を試験するように設計された。
【0291】
実施例５：ＭＣ３８、ＣＴ２６及びＲｅｎｃａ腫瘍の単剤での治療
１．１ 材料及び方法
示された同系腫瘍細胞株をＣ５７ＢＬ／６またはＢａｌｂ／ｃマウスに移植することにより、異なるＦｃ骨格を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体に対するＭＣ３８、ＣＴ２６及びＲｅｎｃａ腫瘍の応答性を試験した（図５Ａ～図５Ｆ）。腫瘍を皮下移植し、１００ｍｍ３に達したときに、野生型フコシル化ｍＩｇＧ２ａ型ＳＥＡ－ＴＧＴ（ｍＡｂ１３）またはＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ（非フコシル化ヒトＩｇＧ１骨格に相当する非フコシル化マウスＩｇＧ２ａとして再構成されたＳＥＡ－ＴＧＴ抗体）を示された用量（図５Ａ～５Ｆ）で、ｑ３ｄｘ３で処置した。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。各群の動物において、完全に腫瘍が除去された場合を完全奏効（ＣＲ）として記録した。骨格エフェクター機能とは関係なく、より高用量のクローン１３またはＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａによって抗腫瘍応答が誘導されたが、抗ＰＤ－１と組み合わせた場合に見られるような、同じ治療応答を常に駆動することはできなかった。
１．１ 材料及び方法
示された同系腫瘍細胞株をＣ５７ＢＬ／６またはＢａｌｂ／ｃマウスに移植することにより、異なるＦｃ骨格を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体に対するＭＣ３８、ＣＴ２６及びＲｅｎｃａ腫瘍の応答性を試験した（図５Ａ～図５Ｆ）。腫瘍を皮下移植し、１００ｍｍ３に達したときに、野生型フコシル化ｍＩｇＧ２ａ型ＳＥＡ－ＴＧＴ（ｍＡｂ１３）またはＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａ（非フコシル化ヒトＩｇＧ１骨格に相当する非フコシル化マウスＩｇＧ２ａとして再構成されたＳＥＡ－ＴＧＴ抗体）を示された用量（図５Ａ～５Ｆ）で、ｑ３ｄｘ３で処置した。腫瘍サイズを測定し、成長を経時的にプロットした。各群の動物において、完全に腫瘍が除去された場合を完全奏効（ＣＲ）として記録した。骨格エフェクター機能とは関係なく、より高用量のクローン１３またはＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａによって抗腫瘍応答が誘導されたが、抗ＰＤ－１と組み合わせた場合に見られるような、同じ治療応答を常に駆動することはできなかった。
【0292】
１．２ 結果
ＭＣ３８モデルでは、用量５ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ治療の単独投与でも、完全奏効治癒率は１／６であり（図５Ａ）、これとは、対照的に、０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａのみを、０．１ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－１抗体の投与（図３）と組み合わせた場合は、４／５であった。したがって、ＭＣ３８モデルでは、単剤療法としてＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａの用量レベルを５０倍増加させた場合に得られたものよりも、併用療法の完全奏効率は、より良好であった。
ＭＣ３８モデルでは、用量５ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ治療の単独投与でも、完全奏効治癒率は１／６であり（図５Ａ）、これとは、対照的に、０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａのみを、０．１ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－１抗体の投与（図３）と組み合わせた場合は、４／５であった。したがって、ＭＣ３８モデルでは、単剤療法としてＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａの用量レベルを５０倍増加させた場合に得られたものよりも、併用療法の完全奏効率は、より良好であった。
【0293】
ＣＴ２６モデルでは、用量５ｍｇ／ｋｇのＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａは、ＭＣ３８モデル（図５Ｂ）で達成されたものと比較して、治癒的応答レベルの向上をもたらしたが、それでも同様のレベルの治癒的応答が、抗ＰＤ－１抗体を投与した場合、用量０．１ｍｇ／ｋｇで見られた（図４Ａ）（すなわち、５０倍低下させたＳＥＡ－ＴＧＴ抗体のレベルで同じ応答率をもたらす）。
【0294】
対照的に、Ｒｅｎｃａモデルでは、１ｍｇ／ｋｇ用量のＳＥＡ－ＴＧＴ ｍＩｇＧ２ａにより、治療的応答がもたらされたが（図５Ｃ）、抗ＰＤ－１抗体を投与した場合、０.１ｍｇ／ｋｇ用量で同様の応答が見られた（図４Ｂ）。
【0295】
抗ＰＤ－１抗体治療単独では、５ｍｇ／ｋｇの用量では、ＭＣ３８モデルにおいて、腫瘍成長を減少させ（図５Ｄ）、１０ｍｇ／ｋｇの用量では、ＣＴ２６モデルにおいて、腫瘍成長を中程度減少させ（図５Ｅ）、１ｍｇ／ｋｇの用量では、Ｒｅｎｃａモデルにおいて、腫瘍成長を減少させなかった（図５Ｆ）。非常に最小の単剤での活性にもかかわらず、抗ＰＤ－１治療に対するＳＥＡ－ＴＧＴの添加を、これらのモデルの全てにおいて実質的により少ない用量で行うことにより、抗腫瘍活性を大幅に向上させることができた。
【0296】
まとめると、前述の実施例に示された結果は、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんが、抗ＴＩＧＩＴ抗体、及びＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤と組み合わせた抗ＴＩＧＩＴ抗体によって治療され得るという驚くべき知見を裏付けるものである。前述の実施例によって実証されるように、これは、特に、増強されたＦｃ結合特性及びエフェクター機能を有する抗体（例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴ）を使用する場合であることが判明した。所望のＦｃ結合特性には、活性化ＦｃγＲへの結合の増強、阻害性ＦｃγＲへの結合の減少、ＡＤＣＣ活性の増強、及び／またはＡＤＣＰ活性の増強などの活性が含まれた。ＳＥＡ－ＴＧＴなど、所望の活性を有する特定のそのような抗体は、非フコシル化抗体であった。本明細書に提供されるデータは、例えば、抗ＰＤ１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体を使用する、現在承認されている治療法のカットオフレベル未満でＰＤ－Ｌ１を発現する腫瘍を有する患者を治療するために、増強されたＦｃ骨格を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体（例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴ）を、抗ＰＤ１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて使用することを裏付けるものである。データはさらに、本明細書に記載されるものなどの腫瘍中の変異が理由で、抗ＰＤ１または抗ＰＤＬ１抗体治療を用いた標準的な治療に比較的応答がない患者においても、かかる併用療法を支持する。
【0297】
本明細書に提供されるデータはまた、抗ＴＩＧＩＴ抗体、例えば、ＳＥＡ－ＴＧＴなどの増強されたエフェクター機能を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体、及び治療量以下の用量のＰＤ－Ｌ１阻害剤による治療が、有効性の相乗的改善を呈することを実証するものである。また、データは、そのような抗ＴＩＧＩＴ抗体の治療量以下の用量を、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤と組み合わせて、低レベルのＰＤ－Ｌ１を発現するがんの治療に使用できることも示す。抗ＰＤ１（または抗ＰＤ－Ｌ１）抗体及び／または抗ＴＩＧＩＴ抗体をより低いレベルで投与できる場合には、毒性を軽減し得る。
【0298】
理論に束縛されることを意図するものではないが、ＴＩＧＩＴの場合、非フコシル化抗ＴＩＧＩＴ抗体は、抗原（＋）Ｔ細胞と抗原提示細胞との間の免疫シナプスの強度を向上させると考えられている。自然細胞上でＦｃγＲＩＩＩａが係合することにより、それらの活性化、及び抗原特異的Ｔ細胞応答を増強できる因子の産生が増加する。非フコシル化骨格は、標的抗原とは関係なく、自然免疫細胞またはガンマデルタＴ細胞などの他のＦｃγＲＩＩＩａ発現細胞に結合して、二次抗原特異的Ｔ細胞応答の誘発を補助し得る活性化状態を誘導することができる。非フコシル化抗体が働くこれらすべてのメカニズムは、抗腫瘍活性及び長寿命の免疫防御を駆動するＴ細胞応答につながり得る。ＦｃγＲＩＩｂへの結合の減少または欠如は、非フコシル化抗体によって駆動される免疫活性化を減少させるカウンターシグナルまたは阻害性シグナルがないことを意味する。
【0299】
本明細書に引用された公開文献、特許、特許出願、または他の文献は全て、あたかも各個別の公開文献、特許、特許出願、または他の文献があらゆる目的のために参照により援用されるように個別に示されるのと同じ範囲まで、あらゆる目的のために、それらの全体において参照により本明細書に援用される。
【0300】
【表4-1】
【表4-2】
【0301】
【表4-3】
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図5D】
【図5E】
【図5F】
【配列表】
【国際調査報告】