特表 2024-514824 治療用オリゴペプチドおよびペプチド模倣物のシリカベース製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-04-03

(54)【発明の名称】治療用オリゴペプチドおよびペプチド模倣物のシリカベース製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/07 20060101AFI20240327BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20240327BHJP

   A61K 9/06 20060101ALI20240327BHJP

   A61K 47/04 20060101ALI20240327BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20240327BHJP

   C07K 5/10 20060101ALI20240327BHJP

   C01B 33/152 20060101ALI20240327BHJP

   C01B 33/141 20060101ALI20240327BHJP

【ＦＩ】

A61K38/07

A61K9/14

A61K9/06

A61K47/04

A61P27/02

C07K5/10

C01B33/152 A

C01B33/141

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023561739

(86)(22)【出願日】2022-04-07

(85)【翻訳文提出日】2023-11-27

(86)【国際出願番号】 US2022023828

(87)【国際公開番号】W WO2022216928

(87)【国際公開日】2022-10-13

(31)【優先権主張番号】63/171,723

(32)【優先日】2021-04-07

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】20215537

(32)【優先日】2021-05-06

(33)【優先権主張国・地域又は機関】FI

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522012798

【氏名又は名称】ステルス バイオセラピューティクス インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＴＥＡＬＴＨ ＢＩＯＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＩＮＣ．

(74)【代理人】

【識別番号】100139723

【弁理士】

【氏名又は名称】樋口 洋

(74)【代理人】

【識別番号】100116540

【弁理士】

【氏名又は名称】河野 香

(72)【発明者】

【氏名】レッドモン，マーティン ピー

(72)【発明者】

【氏名】フォースバック，アリ－ペッカ

(72)【発明者】

【氏名】ミッコラ，ヤーリ

(72)【発明者】

【氏名】スンドクヴィスト，ヨーナ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4G072

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA09

4C076AA30

4C076BB11

4C076BB15

4C076BB16

4C076BB21

4C076BB24

4C076CC10

4C076DD29

4C076FF31

4C076GG09

4C076GG32

4C084AA02

4C084AA03

4C084BA01

4C084BA09

4C084BA16

4C084BA23

4C084CA59

4C084MA05

4C084MA28

4C084MA43

4C084MA58

4C084MA66

4C084NA12

4C084ZA331

4C084ZA332

4G072AA28

4G072CC01

4G072CC04

4G072EE01

4G072GG02

4G072GG03

4G072HH30

4G072JJ14

4G072JJ22

4G072JJ47

4G072KK01

4G072KK03

4G072LL06

4G072MM32

4G072PP01

4G072PP03

4G072RR05

4G072RR15

4G072TT01

4G072UU17

4H045BA13

4H045EA20

(57)【要約】

本発明は、生分解性シリカハイドロゲルコンポジットを含むデポ製剤であって、ハイドロゲルコンポジットは、（ｉ）シリカハイドロゲル；および（ｉｉ）シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子；を含む、デポ製剤を開示する。本明細書に記載のデポ製剤は、活性医薬化合物の持続的な長期放出を提供する。デポ製剤は眼に移植することができ、眼疾患の処置に有用である。シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子は、連続フロープロセスを用いて調製することができる。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

生分解性シリカハイドロゲルコンポジットを含むデポ製剤であって、前記ハイドロゲルコンポジットは、
（ｉ）シリカハイドロゲル；および
（ｉｉ）シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子；
を含み、
前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物は、１，２００ａｍｕ未満の分子量を有し、
前記ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、せん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性である、デポ製剤。

【請求項2】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物は、中性ｐＨの水性緩衝溶液中で正に荷電している（例えば、正味電荷が＋２以上である）、請求項１に記載のデポ製剤。

【請求項3】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物は水溶性である（例えば、２５℃で５０ｍｇ／ｍＬ超または１００ｍｇ／ｍＬ超の水溶性を有する）、請求項１または２に記載のデポ製剤。

【請求項4】

前記微粒子は、デポ製剤中に約３０～約９５重量％の量で存在する、請求項１～３のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項5】

前記微粒子は、デポ製剤中に約４５～約９０重量％、５０～約８５重量％、または７５～９０重量％の量で存在する、請求項１～４のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項6】

前記微粒子は、デポ製剤中に約８０重量％の量で存在する、請求項１～５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項7】

前記微粒子は、デポ製剤中に約３０～約７０重量％の量で存在する、請求項１～４のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項8】

前記微粒子は、デポ製剤中に約４０～６０重量％の量で存在する、請求項１～４および７のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項9】

前記微粒子は、デポ製剤中に約５０重量％の量で存在する、請求項１～４、７および８のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項10】

前記微粒子は、デポ製剤中に約２０～約５０重量％、または２０～約４０重量％の量で存在する、請求項１～３のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項11】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約０．１重量％～約１０重量％の量で存在する、請求項１～１０のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項12】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約１重量％～約６重量％の量で存在する、請求項１～１１のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項13】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約１重量％～約３重量％の量で存在する、請求項１～１２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項14】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約２重量％～約５重量％の量で存在する、請求項１～１２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項15】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約０．２５重量％～約２．５重量％の量で存在する、請求項１～１１のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項16】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物の遊離塩基等価物は、デポ製剤中に約０．４５重量％～約２重量％の量で存在する、請求項１～１１のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項17】

せん断応力が加えられる場合、前記シリカハイドロゲルコンポジットは自由流動性であり、針が取り付けられたシリンジから注射することができる、請求項１～１６のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項18】

前記針の太さは２５～３０ゲージである、請求項１７に記載のデポ製剤。

【請求項19】

せん断応力の印加が終了すると、シリカハイドロゲルコンポジットは、３７℃において非流動性でかつ構造的に安定である、請求項１～１８のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項20】

製剤のｐＨは約４．０～約７．５である、請求項１～１９のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項21】

製剤のｐＨは約５．０～約６．０である、請求項１～２０のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項22】

製剤のｐＨは約５．５～約６．５である、請求項１～２０のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項23】

デポ製剤の微粒子は、複数のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物を含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項24】

前記微粒子は、オリゴペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項25】

前記オリゴペプチドは、エラミプレチド、化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩ、および化合物ＩＶ、ならびにそれらの薬学的に許容される塩からなる群より選択され、
エラミプレチドは、以下の構造：

【化1】

を有し、
化合物Ｉは、以下の構造：

【化2】

を有し、
化合物ＩＩは、以下の構造：

【化3】

を有し、
化合物ＩＩＩは、以下の構造：

【化4】

を有する、請求項２４に記載のデポ製剤。

【請求項26】

前記オリゴペプチドは、エラミプレチドまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２５に記載のデポ製剤。

【請求項27】

前記オリゴペプチドは、化合物ＩＩまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２５に記載のデポ製剤。

【請求項28】

前記オリゴペプチドは、化合物ＩＩＩまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２５に記載のデポ製剤。

【請求項29】

前記オリゴペプチドは、化合物ＩＶまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２５に記載のデポ製剤。

【請求項30】

前記微粒子は、ペプチド模倣化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項31】

前記ペプチド模倣化合物が、

【化5】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項３０に記載のデポ製剤。

【請求項32】

前記オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物がミトコンドリアを標的とする、請求項１～３１のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項33】

注射可能または移植可能である、請求項１～３２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項34】

非経口投与用である、請求項１～３２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項35】

皮下投与、筋肉内投与、腹膜投与、または眼投与用である、請求項３４に記載のデポ製剤。

【請求項36】

硝子体内注射用である、請求項３３に記載のデポ製剤。

【請求項37】

局所点眼（topical ocular instillation）用である、請求項３３に記載のデポ製剤。

【請求項38】

１週間に１回～１年に１回、１ヶ月に１回～１年に１回、１ヶ月に１回～６ヶ月に１回、１ヶ月に１回～３ヶ月に１回、３ヶ月に１回～６ヶ月に１回、６ヶ月に１回～９ヶ月に１回、または９ヶ月に１回～１年に１回の投与のためのものである、請求項１～３７のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項39】

１ヶ月に１回～６ヶ月に１回、または１ヶ月に１回～５ヶ月に１回、２ヶ月に１回～５ヶ月に１回、２ヶ月に１回～４ヶ月に１回、または２ヶ月に１回～３ヶ月に１回、３ヶ月に１回～４ヶ月に１回、または約３ヶ月に１回の投与のためのものである、請求項１～３７のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項40】

デポ製剤中のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の量は、１０μｇ／５０μＬ～１００ｍｇ／５０μＬ、１０μｇ／５０μＬ～１０００μｇ／５０μＬ、１０μｇ／５０μＬ～５００μｇ／５０μＬ、５０μｇ／５０μＬ～３００μｇ／５０μＬ、または７５μｇ／５０μＬ～２７５μｇ／５０μＬである、請求項１～３９のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項41】

デポ製剤中のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の量は、２５０μｇ／５０μＬ～１０００μｇ／５０μＬ、１５０μｇ／５０μＬ～４５０μｇ／５０μＬ、２００μｇ／５０μＬ～４００μｇ／５０μＬ、２５０μｇ／５０μＬ～３５０μｇ／５０μＬ、５０μｇ／５０μＬ～２５０μｇ／５０μＬ、または約２７０μｇ／５０μＬである、請求項１～３９のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項42】

前記製剤が、０．０１μｇ～１０μｇ、０．５μｇ～５μｇ、１μｇ～５μｇ、または約３μｇのオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物である１日用量を送達する、請求項１～４１のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項43】

約３ヶ月毎に１回の硝子体内注射用である、請求項１～４２のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項44】

滅菌製剤である、請求項１～４３のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項45】

前記滅菌製剤はガンマ線滅菌製剤である、請求項４４に記載のデポ製剤。

【請求項46】

前記シリカハイドロゲルは、３重量％以下、２重量％以下、または１重量％以下の固形分を有する、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項47】

前記シリカ粒子は、０．１～７０重量％、０．３～５０重量％、または１～１５重量％のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物を含む、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項48】

前記シリカ粒子は、０．５μｍ～３００μｍ、０．５μｍ～１００μｍ、０．５μｍ～３０μｍ、または０．５μｍ～２０μｍの直径を有する微粒子である、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項49】

１μｍ未満の直径を有するシリカ粒子の体積分率が、３％未満、２％未満、または１％未満である、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項50】

コンポジット固形分が、１０重量％～７５重量％、１５重量％～６０重量％、または２５重量％～５５重量％である、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項51】

線形粘弾性領域における小角振動せん断下で測定される複素弾性率が、２４００ｋＰａ未満、１２００ｋＰａ未満、または６００ｋＰａ未満である、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項52】

損失係数（すなわち、粘性率／弾性率）が、１未満、０．８未満、または０．６未満である、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項53】

粘度が、１０～５０秒^－１のせん断速度で測定して１０～５０Ｐａｓであり、２００～２１０秒^－１のせん断速度で測定して０．４～１．５Ｐａｓであり、６００～６１０秒^－１のせん断速度で測定して０．１～０．４Ｐａｓである、請求項１～４５のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項54】

単回使用硝子体内注射用のシリンジおよび針の構成でプレパッケージされる、請求項１～５３のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項55】

シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子が、連続フロープロセスを使用して形成される、請求項１～５４のいずれか一項に記載のデポ製剤。

【請求項56】

連続フロープロセスは、シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子を作製するために噴霧乾燥機の使用をさらに含む、請求項５５に記載のデポ製剤。

【請求項57】

連続フロープロセスは、インラインミキサーの使用をさらに含む、請求項５５または５６に記載のデポ製剤。

【請求項58】

疾患、障害もしくは状態を処置、阻害、改善する、またはそれらの発症を遅延させる方法であって、それを必要とする対象に、有効量の請求項１～５７のいずれか一項に記載のデポ製剤を投与することを含む、方法。

【請求項59】

前記疾患、障害もしくは状態が、レーベル遺伝性視神経症である、請求項５８に記載の方法。

【請求項60】

前記疾患、障害もしくは状態が、フックス角膜内皮ジストロフィー（ＦＥＣＤ）、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、視神経症、網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、網膜毛細血管拡張症、または網膜色素変性症である、請求項５８に記載の方法。

【請求項61】

前記疾患、障害もしくは状態が、新生血管を伴うＡＭＤ（滲出型ＡＭＤ）および網膜地図状萎縮を伴うＡＭＤ（萎縮型ＡＭＤ）を含むＡＭＤである、請求項５８に記載の方法。

【請求項62】

請求項１～５７のいずれか一項に記載のデポ製剤を含むプレフィルドシリンジであって、任意選択でガンマ線への曝露によって滅菌されている、プレフィルドシリンジ。

【請求項63】

請求項１～５７のいずれか一項に記載のデポ製剤を作製する方法であって、
ａ）オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含むシリカ粒子であって、任意選択で懸濁液として、１０００μｍ以下の最大直径を有し、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物が１，２００ａｍｕ未満の分子量を有する、シリカ粒子；および
ｂ）シリカハイドロゲル
を組み合わせることを含み、
ｉ）前記シリカハイドロゲルは、５０重量％以下の固形分を有し；
ｉｉ）前記シリカ粒子は、重合アルコキシシランを含み；
ｉｉｉ）前記デポ製剤は、８５重量％までの前記シリカ粒子を含み；
ｉｖ）前記ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、注射によりせん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性である、方法。

【請求項64】

シリカゾルを、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液と組み合わせ、それによって、シリカゾルとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む混合物を作製することをさらに含む、請求項６３に記載の方法。

【請求項65】

オルトケイ酸テトラエチル（ＴＥＯＳ）、水および塩酸、ならびに任意選択で有機共溶媒（例えば、エタノール）を組み合わせ、それによってシリカゾルを作製することをさらに含む、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を水および任意選択で有機共溶媒（例えば、エタノール）と組み合わせ、それによって、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液を作製することをさらに含む、請求項６４または６５に記載の方法。

【請求項67】

シリカゾルと、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液とを組み合わせることが、連続フロープロセスで行われる、請求項６４～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

シリカゾルと、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液とを組み合わせるステップが、インラインミキサーの使用をさらに含む、請求項６７に記載の方法。

【請求項69】

シリカゾルと、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液とを組み合わせるステップが、ポンプの使用をさらに含む、請求項６４～６８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

シリカゾルとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む溶液との混合物を噴霧乾燥し、それによってシリカ粒子を形成することをさらに含む、請求項６９～６９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

前記製剤は、任意選択で針が取り付けられた、シリンジにパッケージされる、請求項６３～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項72】

デポ製剤を滅菌することをさらに含む、請求項６３～７１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項73】

デポ製剤を滅菌するステップが、放射線滅菌によって行われる、請求項７２に記載の方法。

【請求項74】

放射線滅菌がガンマ線放射線滅菌を含む、請求項７３に記載の方法。

【請求項75】

前記オリゴペプチドが、エラミプレチド：

【化6】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

前記オリゴペプチドが、化合物ＩＩ：

【化7】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項77】

前記オリゴペプチドが、化合物ＩＩＩ：

【化8】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

前記オリゴペプチドが、化合物ＩＶ：

【化9】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項79】

前記ペプチド模倣物が、化合物Ｉ：

【化10】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本出願は、２０２１年４月７日に出願された米国特許仮出願第６３／１７１，７２３号、および２０２１年５月６日に出願されたフィンランド特許出願第２０２１５５３７号に対する優先権の利益を主張する；これらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

オリゴペプチドおよびペプチド模倣化合物は、様々な疾患の処置に有用である。例えば、オリゴペプチドおよびペプチド模倣化合物は、糖尿病、皮膚疾患、心疾患、および肥満を処置するために使用されている。また、オリゴペプチドおよびペプチド模倣化合物は、レーベル遺伝性視神経症（Leber’s Hereditary Optic Neuropathy）およびフックス角膜内皮ジストロフィー（Fuchs’ Corneal Endothelial Dystrophy）などの様々な眼の適応症の処置における有用性も実証されている。しかしながら、これらの化合物を眼に投与する方法は、依然として未解決の課題である。したがって、眼の適応症のためにオリゴペプチドおよびペプチド模倣化合物を投与するための製剤および方法を開発する必要性が存在する。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0003】

本出願は、生分解性シリカハイドロゲルコンポジットを含むデポ製剤であって、ハイドロゲルコンポジットは、シリカハイドロゲル；およびシリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子；を含み、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物（freebase equivalent）（以下に定義される）は１，２００ａｍｕ未満であり、ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、せん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性（shear-thinning）である、デポ製剤を提供する。デポ製剤は、例えば、ゼロ次放出デポ、一次放出デポ、二次放出デポ、遅延放出デポ、持続放出デポ、即時放出デポ、またはそれらの任意の組み合わせなどの、制御放出デポである。

【0004】

ある特定の実施形態において、シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子は、連続フロープロセスを使用して形成される。

【0005】

特定の実施形態では、製剤は、単回使用の硝子体内注射用のシリンジおよび針の構成でプレパッケージされる。

【0006】

特定の実施形態において、製剤は、例えばガンマ線照射によって滅菌される。

【0007】

別の態様では、本出願は、疾患、障害もしくは状態を処置、阻害、改善するまたはそれらの発症を遅延させる方法であって、それを必要とする対象に有効量の本明細書に開示されるデポ製剤を投与することを含む方法を提供する。

【0008】

ある特定の実施形態では、状態はレーベル遺伝性視神経症である。別の態様では、本出願は、フックス角膜内皮ジストロフィー（ＦＥＣＤ）、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、視神経障害、網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、網膜毛細血管拡張症（retinal telangiectasia）、または網膜色素変性症（retinitis pigmentosa）を処置する方法であって、それを必要とする対象に有効量の本明細書に開示されるデポ製剤を投与することを含む方法を提供する。加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）は、滲出型ＡＭＤ（ｗｅｔ ＡＭＤ）もしくは萎縮型ＡＭＤ（ｄｒｙ ＡＭＤ）、またはそれらの組み合わせであり得る。

【0009】

別の態様では、本出願は、本明細書に開示されるデポ製剤を含むプレフィルドシリンジ（prefilled syringe）を提供する。任意選択で、プレフィルドシリンジは、ガンマ線への曝露によって滅菌される。

【0010】

本出願はまた、本明細書に開示されるデポ製剤を作製する方法であって、
ａ）オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含むシリカ粒子であって、任意選択で懸濁液として、１０００μｍ以下の最大直径を有し、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物が１，２００ａｍｕ未満の分子量を有する、シリカ粒子；および
ｂ）シリカハイドロゲル
を組み合わせることを含み、
ｉ）シリカハイドロゲルは、５０重量％以下の固形分を有し；
ｉｉ）シリカ粒子は、重合アルコキシシランを含み；
ｉｉｉ）デポ製剤は、８５重量％までの前記シリカ粒子を含み；
ｉｖ）前記ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、注射によりせん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性である、方法を提供する。

【0011】

デポ製剤を作製する方法は、連続フロープロセスで実施される１つまたは複数のステップを含んでもよい。

【0012】

特定の実施形態では、方法は、デポ製剤を滅菌することをさらに含む。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】エラミプレチド（elamipretide）のデポ製剤＃０５Ｄのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出を示すグラフである。

【図2】エラミプレチドのデポ製剤＃０８Ｄのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出を示すグラフである。

【図3】化合物Ｉ（以下に定義する）のデポ製剤＃０５Ｄのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出を示すグラフである。

【図4】化合物Ｉ（以下に定義する）のデポ製剤＃０８Ｄのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出を示すグラフである。

【図5】本明細書に開示されるプレフィルドシリンジにパッケージされたデポ製剤の製造のためのフローダイアグラムであり、連続フロープロセスを使用してシリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子を製造する。

【図6】加水分解されたシリカの化学重合の図である。

【図7】連続フローリアクターシステムの概略図を示す。

【図8】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）のＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を補足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なる第１のＲ値を有する微粒子製剤＃０１～＃０３（２％ＡＰＩ搭載（load）、ｐＨ５．９）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出（左）および化合物Ｉの放出（右）の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図9】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を捕足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なるｐＨを有する微粒子製剤＃０３～＃０６（Ｒ３－１００、２％ＡＰＩ搭載）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出（左）および化合物Ｉの放出（右）の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図10】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を捕足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なるＡＰＩ搭載およびｐＨを有する微粒子製剤＃０３、＃０５、＃０７および＃０８（Ｒ３－１００ベースの製剤）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出（左）および化合物Ｉの放出（右）の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図11】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を捕足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中におけるデポ製剤＃０５Ｄからのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出および化合物Ｉの放出を示す。対応する微粒子製剤＃０５（Ｒ３－１００、２％ＡＰＩ搭載）の溶出プロファイルを比較として示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図12】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を捕足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中のデポ製剤＃０８Ｄからのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出および化合物Ｉの放出を示す。対応する微粒子製剤＃０８（Ｒ３－１００、５％ＡＰＩ搭載）の溶出プロファイルを比較として示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図13】デポ製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄの貯蔵弾性率（Ｇ’）およびｔａｎδ（損失係数）値を示す。測定は、材料の線形粘弾性範囲内の制御された変形（γ＜０．００２）の下で行った。報告された値は単一の測定を表す。

【図14】デポ製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄについてのせん断速度の関数としての動的粘度（dynamic viscosity）を示す。報告された値は単一の測定を表す。

【図15】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を含む５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なる第１のＲ値を有する微粒子製剤＃０１～＃０３（２％ＡＰＩ搭載、ｐＨ５．９）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出およびエラミプレチドの放出の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図16】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を捕足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なるｐＨを有する微粒子製剤＃０３～＃０６（Ｒ３－１００、２％ＡＰＩ搭載）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出およびエラミプレチドの放出の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図17】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）のＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を補足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中における異なるＡＰＩ搭載およびｐＨを有する微粒子製剤＃０３、＃０５、＃０７および＃０８（Ｒ３－１００ベースの製剤）からのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出（左）およびエラミプレチドの放出（右）の比較を示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図18】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）のＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を補足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中におけるデポ製剤＃０５Ｄからのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出およびエラミプレチドの放出を示す。対応する微粒子製剤＃０５（Ｒ３－１００、２％ＡＰＩ搭載）の溶出プロファイルを比較として示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図19】シンク条件での０．０１％（ｖ／ｖ）のＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を補足した５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中におけるデポ製剤＃０８Ｄからのシリカマトリックスの累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出およびエラミプレチドの放出を示す。対応する微粒子製剤＃０８（Ｒ３－１００、５％ＡＰＩ搭載）の溶出プロファイルを比較として示す。各時点でのトリプリケート分析の平均値。

【図20】デポ製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄの貯蔵弾性率（Ｇ’）およびｔａｎδ（損失係数）値を示す。測定は、材料の線形粘弾性範囲内の制御された変形（γ＜０．００２）の下で行った。報告された値は単一の測定を表す。

【図21】デポ製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄについてのせん断速度の関数としての動的粘度（dynamic viscosity）を示す。報告された値は単一の測定を表す。

【図22】製剤＃０９および＃１０－５のコンシステンシーバッチの粒径分布のグラフを示す。

【図23】エラミプレチド微粒子製剤＃０９および＃１０－５のコンシステンシーバッチのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出のグラフを示す。

【図24】製剤＃０９および＃１０－５の連続フロー１０ｘバッチの粒径分布のグラフを示す。

【図25-1】エラミプレチド微粒子製剤＃０９および＃１０－５の連続フロー１０ｘバッチのシンク条件での累積ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出のグラフを示す。

【図25-2】図２５－１の続き。

【発明を実施するための形態】

【0014】

本出願は、生分解性シリカハイドロゲルコンポジットを含むデポ製剤に関する。ハイドロゲルコンポジットは、シリカハイドロゲル、およびシリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子を含み、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物は１，２００ａｍｕ未満の分子量を有する。ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、せん断応力が加えられる（例えば、シリンジを介した注射によって力が加えられる）とせん断減粘性である。

【0015】

いくつかの実施形態では、デポ製剤のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物は、中性ｐＨの水性緩衝溶液中で正に荷電している（例えば、正味電荷が＋２以上である）。

【0016】

いくつかの実施形態では、デポ製剤のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物は、良好な水溶性を示す（例えば、＞５０ｍｇ／ｍＬ、＞７５ｍｇ／ｍＬ、＞１００ｍｇ／ｍＬ、または＞１５０ｍｇ／ｍＬの水溶性を有する）。

【0017】

いくつかの実施形態において、ハイドロゲルコンポジットの複数の微粒子は、様々な量で存在する。いくつかの実施形態では、微粒子は、約３０～約９５重量％、または約４５～約９０重量％、または約５０～約８５重量％、または７５～９０重量％の量でデポ製剤中に存在する。いくつかの実施形態において、微粒子は、約８０重量％の量でデポ製剤中に存在する。いくつかの実施形態では、微粒子は、デポ製剤中に約３０～約７０重量％、または約４０～約６０重量％、または約２０～約４０重量％の量で存在する。いくつかの実施形態において、微粒子は、デポ製剤中に約５０重量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、微粒子は、デポ製剤中に約２０～約５０重量％、または２０～約４０重量％の量で存在する。

【0018】

デポ製剤はオリゴペプチドを含んでいてよく、それはある範囲の量で存在し得る。いくつかの実施形態では、デポ製剤中のオリゴペプチドの遊離塩基等価物は、約０．１重量％～約１０重量％、または約０．３重量％～約５重量％、または約１重量％～約３重量％、または約２重量％～約４重量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、デポ製剤中のオリゴペプチドの遊離塩基等価物は、約２重量％～約５重量％、または約０．２５重量％～約２．５重量％、または０．４５重量％～２重量％の量で存在する。

【0019】

デポ製剤はペプチド模倣化合物を含んでいてよく、それはある範囲の量で存在し得る。いくつかの実施形態では、デポ製剤中のペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物は、約０．１重量％～約１０重量％、または約０．３重量％～約５重量％、または約１重量％～約３重量％、または約２重量％～約４重量％の量で存在する。いくつかの実施形態では、デポ製剤中のペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物は、約２重量％～約５重量％、または約０．２５重量％～約２．５重量％、または０．４５重量％～２重量％の量で存在する。

【0020】

特定の実施形態では、デポ製剤は、せん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性であり、細い針（例えば、１８～３０ゲージ針、２０～３０ゲージ針、２５～３０ゲージ針、または２７～３０ゲージ針）を通して注射可能であり得る。特定の実施形態において、せん断応力が加えられる場合には、シリカハイドロゲルコンポジットは自由流動性（free flowing）であり、針が取り付けられたシリンジから注射することができる。特定の実施形態において、針の太さは２５～３０ゲージである。いくつかの実施形態では、針の太さは最大２５ゲージである。いくつかの実施形態では、針の太さは最大３０ゲージである。いくつかの実施形態では、針の太さは最大３５ゲージである。いくつかの実施形態では、針の太さは最大４０ゲージである。いくつかの実施形態において、針の太さは最大５０ゲージである。

【0021】

注射後（すなわち、せん断応力の印加の終了時）に、シリカハイドロゲルコンポジットは３７℃で非流動性かつ構造的に安定である。

【0022】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるデポ製剤は、ある範囲のｐＨ値を含むことができる。いくつかの実施形態では、デポ製剤は、約５．５～約７．５、または約５．５～約７．０、または約５．５～約６．５のｐＨを有する。

【0023】

いくつかの実施形態では、デポ製剤の微粒子は、複数のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物を含むことができる。いくつかの実施形態では、微粒子のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物は、ミトコンドリアを標的とする。

【0024】

いくつかの態様において、微粒子は、オリゴペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの態様において、オリゴペプチドは、エラミプレチド、化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩ、および化合物ＩＶ、ならびにそれらの薬学的に許容される塩からなる群より選択される。エラミプレチド、化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩ、および化合物ＩＶ（遊離塩基等価物の形態）の構造を以下に示す：

【化1】

【0025】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、エラミプレチドまたはその薬学的に許容される塩である。

【0026】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、化合物ＩＩまたはその薬学的に許容される塩である。

【0027】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、化合物ＩＩＩまたはその薬学的に許容される塩である。

【0028】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、化合物ＩＶまたはその薬学的に許容される塩である。

【0029】

いくつかの実施形態では、デポ製剤の微粒子は、ペプチド模倣化合物またはその薬学的に許容される塩を含むことができる。化合物Ｉは、本明細書に開示されるデポ製剤に使用することができる１つのそのようなペプチド模倣化合物（またはその薬学的に許容される塩）の例である：

【化2】

【0030】

本明細書に開示されるデポ製剤は、注射（または注入）、移植、吸入、または他の非経口投与の手段に適するように製剤化され得る。いくつかの態様では、デポ製剤は、皮下、筋肉内、腹膜、または眼への投与に適するように製剤化され得る。いくつかの実施形態では、デポ製剤は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の硝子体内注射または局所眼送達用に製剤化される。特定の実施形態において、製剤は硝子体内注射用である。いくつかの実施形態では、デポ製剤は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の全身送達のための静脈内または皮下投与用に製剤化される。

【0031】

いくつかの実施形態では、デポ製剤は、１週間に１回～１年に１回、または１ヶ月に１回～１年に１回、または１ヶ月に１回～６ヶ月に１回、または１週間に１回～１ヶ月に１回、または１ヶ月に１回～３ヶ月に１回、３ヶ月に１回～６ヶ月に１回、６ヶ月に１回～９ヶ月に１回、または９ヶ月に１回～１年に１回の投与のためのものである。あるいは、デポ製剤は、１ヶ月に１回～６ヶ月に１回、または１ヶ月に１回～５ヶ月に１回、２ヶ月に１回～５ヶ月に１回、２ヶ月に１回～４ヶ月に１回、または２ヶ月に１回～３ヶ月に１回、３ヶ月に１回～４ヶ月に１回、または約３ヶ月に１回の投与のためのものであってもよい。

【0032】

経時的に薬物を放出するデポ製剤は、「制御放出」デポ製剤と呼ばれる。制御放出用に製剤化されたこのようなデポ製剤は、患者によっては、薬物を毎日摂取するよりも長期間に１回注射するほうが容易であるため、患者のコンプライアンスを助けることができる。さらなる実施形態では、デポ製剤は注射部位反応を伴う頻度がより少ないため、制御放出デポ製剤は、例えば、毎日の注射（例えば、毎日の皮下注射）と比較して、患者によってより良好に耐容され得る。

【0033】

幾つかの実施形態において、製剤は、０．０１μｇ～１０μｇ、０．１μｇ～５μｇ、１μｇ～５μｇ、または約３μｇのオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の１日用量を送達し、ここで、記載される量は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の質量（オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基または塩形態のいずれが製剤の調製に使用されるかにかかわらず）に基づいて計算される。

【0034】

いくつかの実施形態では、デポ製剤中のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の量は、１０μｇ／５０μＬ～１００ｍｇ／５０μＬ、１０μｇ／５０μＬ～１０００μｇ／５０μＬ、１０μｇ／５０μＬ～５００μｇ／５０μＬ、５０μｇ／５０μＬ～３００μｇ／５０μＬ、または７５μｇ／５０μＬ～２７５μｇ／５０μＬであり、ここで、記載される量は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の質量に基づいて計算される。あるいは、デポ製剤中のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物の量は、１００μｇ／５０μＬ～５００μｇ／５０μＬ、１５０μｇ／５０μＬ～４５０μｇ／５０μＬ、２００μｇ／５０μＬ～４００μｇ／５０μＬ、２５０μｇ／５０μＬ～３５０μｇ／５０μＬ、または約２７０μｇ／５０μＬである。

【0035】

特定の実施形態では、デポ製剤は、約３ヶ月毎の硝子体内注射用である。

【0036】

特定の実施形態において、デポ製剤は、例えばガンマ線滅菌によって、滅菌される。

【0037】

本出願のデポ製剤は、ある範囲の固形分を有するシリカハイドロゲルを含むことができる。いくつかの実施形態において、シリカハイドロゲルは、３重量％以下、２重量％または１重量％以下の固形分を有する。いくつかの実施形態では、シリカ粒子は、０．１～７０重量％、０．３～５０重量％、または１～１５重量％のオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物を含む。

【0038】

デポ製剤のいくつかの実施形態では、複数の微粒子は、ある範囲の直径を有するシリカ粒子を含む。いくつかの実施形態では、シリカ粒子は、０．５μｍ～３００μｍの直径を有する。いくつかの実施形態では、シリカ粒子は、０．５μｍ～１００μｍ、０．５μｍ～３０μｍ、または０．５μｍ～２０μｍの直径を有する。

【0039】

本出願のデポ製剤は、ある体積分率のある範囲の直径のシリカ粒子を有し得る。いくつかの実施形態では、１μｍ未満の直径を有するシリカ粒子の体積分率は、３％未満、２％未満、または１％未満である。

【0040】

いくつかの実施形態では、デポ製剤は、１０重量％～７５重量％、１５重量％～６０重量％、または２５重量％～５５重量％のコンポジット固形分を含むことができる。

【0041】

いくつかの実施形態では、デポ製剤は、線形粘弾性領域において小角振動せん断（small angle oscillatory shear）下で測定されるある範囲の複素弾性率（complex modulus）を含む。いくつかの実施形態では、複素弾性率は、２４００ｋＰａ未満、１２００ｋＰａ未満または６００ｋＰａ未満である。

【0042】

いくつかの実施形態では、デポ製剤は、１未満、０．８未満、または０．６未満の損失係数（すなわち、粘性率（viscous modulus）／弾性率（elastic modulus））値を含む。

【0043】

いくつかの実施形態では、デポ製剤は、１０～５０秒^－１のせん断速度で測定した約１０～５０Ｐａｓの粘度、２００～２１０秒^－１のせん断速度で測定した約０．４～１．５Ｐａｓの粘度、または６００～６１０秒^－１のせん断速度で測定した約０．１～０．４Ｐａｓの粘度を有する。

【0044】

特定の実施形態では、製剤は、単回使用硝子体内注射用のシリンジおよび針の構成でプレパッケージされる。

【0045】

本出願はまた、本明細書に記載のデポ製剤を含むプレフィルドシリンジを提供する。いくつかの実施形態では、プレフィルドシリンジは、ガンマ線への曝露によって滅菌される。

【0046】

微粒子は、多くの異なる方法によって調製することができる。微粒子（しばしば、必ずではないが、球状粒子、ミクロスフェア）は、典型的には、マイクロメートル範囲（典型的には、１μｍ～１０００μｍ）の直径を有する小さい粒子である。制御された粒径分布を有する微粒子を調製または製造するために通常使用されるいくつかの直接的な技術、例えば、噴霧乾燥（しばしば、サイクロン中での微粒子の遠心分離が続く）、シングルエマルジョン、ダブルエマルジョン、重合、コアセルベーション相分離および溶媒抽出法がある。これらの技術を使用することによって、小さな体積分率のサブミクロン粒子（通常０．５～１．０μｍ）が得られる生成物に含まれ得るが、それらの割合は、通常非常に低く、１体積％未満であることが多い。したがって、例えば、制御放出微粒子製剤におけるそれらの影響は小さい。キャスティングによって、または大きな構造を微粒子に破砕することによって、微粒子を調製することも可能であるが、その場合、得られる粒子のサイズおよび形態が多様化する可能性があり、タンブリング（tumbling）および粒子サイジングなどの追加の調製ステップが必要となり得る。

【0047】

ある特定の実施形態において、シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子は、連続フロープロセスを使用して形成される。

【0048】

特定の実施形態では、連続フロープロセスは、シリカとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む複数の微粒子を作製するために噴霧乾燥機の使用をさらに含む。さらなる実施形態では、連続フロープロセスは、インラインミキサーの使用をさらに含む。

【0049】

シリカ－シリカコンポジットのシリカ微粒子は、薬物の制御放出において役割を果たし、ハイドロゲル構造は、得られるコンポジットの安定性および注射可能性（injectability）の両方を確実にする。例えば、プレフィルドシリンジ中に保存される場合など、静止状態で安定であるが、ハイドロゲルコンポジット構造は非常に緩いため、ハイドロゲルコンポジットがすぐに使えるシリンジから細い針（例えば、２０ゲージ、２４ゲージ、２５ゲージ、２８ゲージまたは３０ゲージなどの、２０～３０ゲージ）を通して注射される場合にはせん断減粘性である。この特性の組み合わせは、例えば眼疾患の最小侵襲性の長期的な処置を提供する。

【0050】

本出願はさらに、フックス角膜内皮ジストロフィー（ＦＥＣＤ）、（滲出型または萎縮型）加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、視神経症、網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、網膜毛細血管拡張症、または網膜色素変性症などの他の疾患、障害もしくは状態を処置、阻害、改善するまたはそれらの発症を遅延させる方法を提供する。本方法は、有効量の本明細書に記載のデポ製剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＡＭＤは、新生血管を伴うＡＭＤ（滲出型ＡＭＤ）または網膜地図状萎縮を伴うＡＭＤ（萎縮型ＡＭＤ）である。

【0051】

本出願は、疾患を治療、阻害、改善するまたはその発症を遅延させる方法であって、それを必要とする対象に有効量の本明細書に記載のデポ製剤を投与することを含む方法をさらに提供する。治療される疾患はレーベル遺伝性視神経症であり得る。

【0052】

いくつかの実施形態では、疾患はミトコンドリア機能不全に関連し得る。

【0053】

本出願は、本明細書に記載のデポ製剤を作製する方法をさらに提供し、その方法は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含むシリカ粒子であって、任意選択で懸濁液として、１０００μｍ以下の最大直径を有し、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物の遊離塩基等価物が１，２００ａｍｕ未満の分子量を有するシリカ粒子を、シリカハイドロゲルと組み合わせることを含む。いくつかの実施形態において、シリカハイドロゲルは、５０重量％以下の固形分を有し；シリカ粒子は、重合アルコキシシラン（polymerized alkoxysilane）を含み；デポ製剤は、８５重量％までの前記シリカ粒子を含み；前記ハイドロゲルコンポジットは、静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であり、注射によってせん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性である。

【0054】

いくつかの実施形態では、方法は、シリカゾルを、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはその医薬用塩を含む溶液と組み合わせ、それによって、シリカゾルとオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはそれらの薬学的に許容される塩とを含む混合物を作製することをさらに含む。得られた混合物を噴霧乾燥してシリカ粒子を形成することができ、最終的にそれをシリカハイドロゲルと組み合わせる（例えば、図５を参照されたい）。

【0055】

特定のこのような実施形態では、本方法は、オルトケイ酸テトラエチル（ＴＥＯＳ）、水および塩酸、ならびに任意選択で有機共溶媒（例えば、エタノール）を組み合わせ、それによってシリカゾルを作製することをさらに含む（例えば、図５および６を参照されたい）。

【0056】

さらなるそのような実施形態では、本方法は、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはその医薬用塩を水および任意選択で有機共溶媒（例えばエタノール）と組み合わせ、それによってオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはその医薬用塩を含む溶液（例えば、ＡＰＩ溶液、例えば、図７を参照されたい）を作製することを含む。

【0057】

ある特定の実施形態では、シリカゾルと、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物またはその医薬用塩を含む溶液とを合わせるステップは、例えば連続フローリアクターにおいて、連続フロープロセスで行われる。そのようなプロセスは、インラインミキサーおよび／またはポンプの使用を含んでもよい（例えば、図５～７を参照されたい）。

【0058】

連続フロープロセスは、繰り返し可能であり、スケールアップを可能にする。したがって、デポ製剤を作製する方法のいくつかの実施形態では、製剤は、１０ｘスケール、５０ｘスケール、１５０ｘスケール、２５０ｘスケール、５００ｘスケール、７５０ｘスケール、１０００ｘスケール、１５００ｘスケール、２０００ｘスケール、またはそれ以上で作製される。連続フロープロセスは、単一バッチリアクターを使用する製造方法と比較して、より一貫した粒径（およびサイズ分布）ならびにＡＰＩ含有量を提供することができる。

【0059】

ある特定の実施形態では、製剤は、任意選択で針が取り付けられた、シリンジにパッケージされる。

【0060】

デポ製剤を作製する方法は、例えば、放射線滅菌によってデポ製剤を滅菌することをさらに含み得る。放射線滅菌は、ガンマ線放射線滅菌を含み得る。

【0061】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、エラミプレチドまたはその薬学的に許容される塩である。

【0062】

ある特定の実施形態では、オリゴペプチドは、化合物ＩＩまたはその薬学的に許容される塩である。

【0063】

ある特定の実施形態において、オリゴペプチドは、化合物ＩＩＩまたはその薬学的に許容される塩である。

【0064】

ある特定の実施形態において、オリゴペプチドは、化合物ＩＶまたはその薬学的に許容される塩である。

【0065】

ある特定の実施形態では、ペプチド模倣物は、化合物Ｉまたはその薬学的に許容される塩である。

【0066】

定義
本明細書で使用される場合、疾患、障害もしくは状態（例えば、タウオパチー）を「改善する」または「改善すること」とは、統計学的サンプルまたは特定の対象において、対照サンプルまたは対象と比較して、治療剤を投与されたサンプルまたは対象において、疾患、障害もしくは状態（あるいはその徴候、症状もしくは状態）の発生をより良好にするまたはより耐容性にする結果を指す。

【0067】

生分解という用語は、浸食、すなわち、体内でのマトリックス材料（例えばシリカ）の段階的な分解（gradual degradation）を指す。分解は、好ましくは体液中での溶出によって起こる。

【0068】

本明細書で使用する場合、「遅延させる」または「発症を遅延させる」という語句は、統計学的サンプルにおいて、対照サンプルまたは対象と比較して、治療剤を投与されたサンプルまたは対象において、疾患、障害もしくは状態の発生を延期するか、妨害するか、または疾患、障害もしくは状態の１つもしくは複数の徴候、症状もしくは状態を正常よりもゆっくりと生じさせることを意味する。

【0069】

本出願において言及されるデポ製剤は、活性薬剤が、長期間（すなわち、数日～数ヶ月）にわたって、対象の体内で作用しかつ放出され得るように、徐放および対象による緩やかな吸収を可能にする制御放出薬物（活性薬剤）製剤の投与であると定義される。デポ製剤は、皮下、筋肉内、腹膜または眼への移植または注射のいずれかによって非経口的に投与される。

【0070】

遊離塩基等価物は、その最も単純な最低分子量形態の化合物（例えば、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物）を指すと理解されるべきである。例えば、塩、または典型的にはその化合物と会合または複合体形成し得る他の原子、分子もしくは薬剤を含まない形態。例えば、エラミプレチドおよび化合物Ｉ～ＩＶは、典型的には窒素がプロトン化された場合（したがって、電荷が正になった場合）に負イオンと複合体を形成する３つの塩基性窒素原子を含む。エラミプレチドおよび化合物Ｉ～ＩＶの遊離塩基等価物は上に例示されている。

【0071】

ゲルは、本出願の文脈において、少なくとも１つの固相と１つの液相との均質な混合物、すなわちコロイド分散体であり、固相（例えば、シリカそれ自体および／または部分的もしくは完全に加水分解されたもの）は連続相であり、液体（例えば水、エタノールおよびシリカ前駆物質の残留物）が構造中に均質に分散されたものであると理解されるべきである。ゲルは粘弾性であり、弾性特性が支配的であり、これは小角振動せん断下でのレオロジー測定によって示される。損失係数（または損失正接）ｔａｎδ＝（Ｇ”／Ｇ’）が１未満である場合、弾性特性が支配的であり、構造は非流動性である。弾性率（elastic modulus）Ｇ’と粘性率（viscous modulus）Ｇ”との組み合わせ効果は、複素弾性率（または複素せん断弾性率）の形態、Ｇ^＊＝Ｇ’＋Ｇ”で表すこともできる。

【0072】

ゲル化点（gel point）は、流動性のゾルが粘弾性であるゲルに変わり、弾性特性が支配的になる時点を意味すると理解されるべきであり、これは、弾性率Ｇ’が粘性率よりも大きく、損失係数が１未満であるという小角振動せん断下でのレオロジー測定によって示される。粘弾性特性は、通常、レオメーター（変形とせん断応力と時間との間の相関を決定するための測定装置）を用いて、せん断応力が小さい（変形角が小さい）振動せん断によって測定される。小さな振動せん断における全抵抗は、複素弾性率（Ｇ^＊）によって記述される。複素弾性率（または複素せん断弾性率）は、２つの成分を含む（Ｇ^＊＝Ｇ’＋ｉＧ”）：１）貯蔵弾性率Ｇ’とも呼ばれる弾性率は、材料が固体材料に特徴的ないくつかの弾性特性を有することを記述し、すなわち、ゲル系は、運動がゲル構造を破壊しない限り、振動運動からエネルギーを得る。このエネルギーは試料に蓄積され、弾性率によって記述される；２）損失弾性率とも呼ばれる粘性率Ｇ”は、流動特性を記述し、すなわち、系、例えば、振動せん断において、粘性散逸として失われるエネルギーの一部を説明するゾルの成分間の運動を生じさせるシリカゾルを記述する。Ｇ^＊＝Ｇ’である場合、材料は弾性と呼ばれ、Ｇ^＊＝Ｇ”である場合、材料は粘性と呼ばれる。ゲル化点において、弾性率Ｇ’は粘性率Ｇ”よりも大きくなる。Ｇ’＞Ｇ”である場合、粘弾性材料は半固体と呼ばれ、それに対応してＧ”＞Ｇ’である場合、粘弾性材料は半液体と呼ばれる。弾性率および粘性率の大きさはせん断応力に依存し、せん断応力は、加えられるひずみ（小角変形）および（振動せん断の）周波数に依存する。測定は、特定の測定システムに対して適切な信号を確実にすることによって行われ、すなわち、ひずみ掃引は、レオメータシステムのための適切な信号および線形粘弾性領域を見つけるために、通常、一定の周波数で行われ、次いで、実際の測定は、変動する周波数で一定のひずみで行われる。変動する周波数は、変動する弾性率および粘性率を与え、測定は、固相と液相のいずれが支配的であるかを示す。周囲条件が有意に変化しない場合、弾性率がゲル化点後に急速に増加することも典型的であり、例えば、室温付近の酸性ゾルから形成されるゲル、例えば、ゲルになるｐＨ＝２のＲ１５ゾル（Ｒ＝水対アルコキシドのモル比）の場合、ゲル化点から数分以内にＧ’が１００～７００倍増加することは典型的なことである。Ｒ１５０およびＲ４００などのより大きいＲ値については、弾性率Ｇ’は、ゲル化点後でさえ低いレベルに留まり、Ｇ’の増加は速くなく、これは、細い針で注射可能なままであるゲル構造を有することを可能にする。規定のゲル化点後のゲルの形態では、固体状態が支配的であるが、系は依然として様々な量の液体を含有し、材料は典型的には乾燥前には柔らかく粘弾性であり、十分に乾燥されると硬く脆性になる。ゾルの形態では、液体状態が支配的であるが、系は様々な量の固相を含有し、系は依然として流動性である。ゲル化点前は、動的粘度および弾性率の急激な上昇が観察されることが典型的であり、これは、ゲル化点後も構造が発達するにつれて上昇し続ける。本出願の文脈において、注射可能なゲルを得る前にコンポジットのゲル化点に達している。

【0073】

ハイドロゲルは、液相が水または５０重量％（ｗｔ％）超の水を含む水系であるゲルであると理解されるべきである。典型的には、ハイドロゲルの液相は、６５重量％超、より典型的には９０重量％超、最も典型的には９５重量％超の水を含む。液相は、他の液体、典型的には有機溶媒（例えばエタノール）をさらに含むことができる。典型的には、このような溶媒、例えばエタノールの濃度は、１０重量％未満、より典型的には３重量％未満、最も典型的には１重量％未満である。本出願の文脈において、本明細書に開示されるコンポジットは、ハイドロゲルの基本的基準を満たすので、ハイドロゲルと見なされる。したがって、本明細書に開示されるハイドロゲルコンポジットに言及する場合、この言及は、コンポジットへの言及と等価である。

【0074】

本明細書中で使用される場合、「阻害する」または「阻害すること」は、対照と比較して客観的に測定可能な量または程度の、タウオパチーに関連する疾患、障害もしくは状態に関連する徴候、症状もしくは状態（例えば、リスク因子）の低減を指す。一実施形態では、阻害または阻害とは、対照（または対照対象）と比較して少なくとも統計学的に有意な量の低減を指す。一実施形態では、阻害または阻害することとは、対照（または対照対象）と比較して少なくとも５パーセントの低減を指す。様々な個々の実施形態では、阻害または阻害することとは、対照（または対照対象）と比較して少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３３、４０、５０、６０、６７、７０、７５、８０、９０、９５、または９９パーセントの低減を指す。

【0075】

注射可能とは、本出願の文脈において、外科的投与装置、例えば、針、カテーテルまたはこれらの組み合わせを介して投与可能であることを意味する。本出願の文脈におけるせん断減粘性は、組成物のレオロジー特性である。そのような組成物のせん断応力またはせん断速度が変化するたびに、組成物はその新しい平衡状態に向かって徐々に移動し、より低いせん断速度では、せん断減粘性組成物は粘性が高くなり、より高いせん断速度では、粘性が低くなる。したがって、せん断減粘性は、流体の粘度、すなわち、流体の流動抵抗の尺度が、せん断速度の増加とともに減少する効果を指す。

【0076】

本出願の文脈における注射可能なゲルまたはハイドロゲルは、組成物のレオロジー特性である。注射前、例えば３７℃未満の温度、例えば室温（２０～２５℃）で、または冷蔵庫温度（３～６℃）で、シリンジ中および／またはアルミニウム箔中に保存した場合、組成物はゲルであり、すなわち、弾性率（小角振動せん断下で測定）Ｇ’が粘性率Ｇ”よりも大きく、損失係数ｔａｎδ＝（Ｇ”／Ｇ’）は１未満である。ハイドロゲルコンポジット構造はゲル様構造であり、コンポジット構造は、静止保管時は安定かつ非流動性のままであるが、ゲル構造は非常に緩く、例えば２５Ｇ針（０．５０ｍｍ×２５ｍｍ）を用いて、例えばシリンジから針を通して注射の形態で、せん断応力が加えられる場合にはせん断減粘性である。

【0077】

静止保管時は非流動性でかつ構造的に安定であるとは、シリカハイドロゲル中のシリカ粒子から構成される安定なコンポジットハイドロゲル構造を指す。安定性は、粘性率より大きい弾性率Ｇ’および１未満の損失係数によって、小角振動せん断下でのレオロジー測定によって示される。弾性率が粘性率よりも大きく、損失係数が１未満である場合、構造は非流動性である。非流動性構造は、シリカ粒子の相分離を防ぐことによってコンポジットハイドロゲル構造の安定性を確実にする。言い換えれば、シリカ粒子はシリカハイドロゲル中に埋め込まれ、それらは、例えば、ハイドロゲルコンポジットが典型的には２５℃以下の温度で保存された際に、容器、例えばシリンジの底部に沈殿または分離しない。コンポジットハイドロゲル構造は、静止状態で、例えば、プレフィルドのすぐに使えるシリンジに保存された状態では非流動性であるが、その構造は非常に緩く、注射によってハイドロゲルコンポジットにせん断応力が加えられた場合、せん断減粘性であり、したがって細い針を通して注射可能である。

【0078】

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、化合物／医薬品／組成物（医薬を含む）がそれと共に投与されるかまたは投与用に製剤化される、希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを指す。このような薬学的に許容される担体の非限定的な例としては、水、生理食塩水、油などの液体、およびアラビアガム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、シリカ粒子（ナノ粒子または微粒子）尿素などの固体が挙げられる。加えて、補助剤、安定化剤、増粘剤、滑沢剤、香味剤、および着色剤を使用してもよい。適切な医薬担体の他の例は、Ｅ．Ｗ．ＭａｒｔｉｎによるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されており、それは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0079】

本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な塩」は、本明細書中に記載される化合物上に見出される特定の置換基に依存して、比較的非毒性の酸または塩基を用いて調製され得る治療的に活性な化合物の塩を指す。化合物が比較的酸性の官能基を含む場合、塩基付加塩は、そのような化合物の中性形態を、溶媒なしで（neat）または適切な不活性溶媒中において、十分な量の所望の塩基と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩の例としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノもしくはマグネシウム塩、または類似の塩が挙げられる。化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、酸付加塩は、そのような化合物の中性形態を、溶媒なしでまたは適切な不活性溶媒中において、十分な量の所望の酸と接触させることによって得ることができる。薬学的に許容される無機塩基に由来する塩としては、アンモニウム、カルシウム、銅、三価鉄、二価鉄、リチウム、マグネシウム、三価マンガン、二価マンガン、カリウム、ナトリウム、および亜鉛の塩などが挙げられる。薬学的に許容される有機塩基に由来する塩には、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２－ジエチルアミノエタノール、２－ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルモルホリン、Ｎ－エチルモルホリン、Ｎ－エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン（ＮＥｔ_３）、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの、置換アミン、環状アミン、天然アミンなどを含む第一級、第二級および第三級アミンの塩が含まれ、例えば、塩が有機塩基のプロトン化形態（例えば、［ＨＮＥｔ_３］^＋）を含む場合などである。薬学的に許容される無機酸に由来する塩としては、ホウ酸、炭酸、ハロゲン化水素酸（臭化水素酸、塩酸、フッ化水素酸またはヨウ化水素酸）、硝酸、リン酸、スルファミン酸および硫酸の塩が挙げられる。薬学的に許容される有機酸に由来する塩としては、脂肪族ヒドロキシル酸（例えば、クエン酸、グルコン酸、グリコール酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸および酒石酸）、脂肪族モノカルボン酸（例えば、酢酸、酪酸、ギ酸、プロピオン酸およびトリフルオロ酢酸）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸）、芳香族カルボン酸（例えば、安息香酸、ｐ－クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチジン酸、馬尿酸、およびトリフェニル酢酸）、芳香族ヒドロキシル酸（例えば、ｏ－ヒドロキシ安息香酸、ｐ－ヒドロキシ安息香酸、ｌ－ヒドロキシナフタレン－２－カルボン酸、および３－ヒドロキシナフタレン－２－カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸（例えば、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸およびコハク酸）、グルクロン酸、マンデル酸、ムチン酸、ニコチン酸、オロト酸、パモ酸、パントテン酸、スルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、カンファースルホン酸、エジシル酸（edisylic acid）、エタンスルホン酸、イソチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、ナフタレン－２，６－ジスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸（ＰＴＳＡ））、キシナホ酸等の塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される対イオンは、酢酸、安息香酸、ベシル酸、臭化物、カンファースルホン酸、塩化物、クロロテオフィリネート（chlorotheophyllinate）、クエン酸、エタンジスルホン酸、フマル酸、グルセプト酸、グルコン酸、グルクロン酸、馬尿酸、ヨウ化物、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリル硫酸、リンゴ酸、マレイン酸、メシル酸、メチル硫酸、ナフトエ酸、ナプシル酸（sapsylate）、硝酸、オクタデカン酸、オレイン酸、シュウ酸、パモ酸、リン酸、ポリガラクツロン酸、コハク酸、硫酸、スルホサリチル酸、酒石酸、トシル酸、およびトリフルオロ酢酸からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、塩は、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、塩酸塩、またはトシル酸塩である。アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸などの有機酸の塩も含まれる（例えば、Berge et al, Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)を参照されたい）。本出願のある特定の化合物は塩基性官能性および酸性官能性の両方を含むことができ、それにより、化合物が塩基付加塩または酸付加塩のいずれかに変換されるかまたは双性イオン形態で存在することが可能となる。これらの塩は、当業者に公知の方法によって調製することができる。当業者に公知の他の薬学的に許容される担体も本技術に適している。

【0080】

シリカという用語は、ゾル－ゲル法によって調製することができる非晶質ＳｉＯ_２を指す。ゾル－ゲル由来シリカは、ゾル－ゲル法によって調製されたシリカを指し、シリカは、アルコキシド、アルキルアルコキシド、アミノアルコキシドまたは無機ケイ酸塩溶液などの液相前駆物質から調製され、加水分解および縮合反応によってゾルを形成し、それがゲルに変わるかまたは安定なゾルを形成する。安定なシリカゾル中の液体を蒸発させることができ、その結果、典型的にはコロイド状シリカ粒子からなる粉末が形成される。得られたゲル／粒子は、任意選択でエージング、乾燥、および熱処理することができ、熱処理する場合は、好ましくは７００℃未満の温度とする。７００℃未満で調製されたゾル－ゲル由来シリカは、通常、非晶質である。ゲルが生物学的に活性な薬剤、例えば薬物および医薬品有効成分（例えば、本明細書に記載されるオリゴペプチドもしくはペプチド模倣物）を含む場合、熱処理は典型的にはスキップされる。次いで、形成されたゲルは、典型的には、エージング（典型的には４０℃以下で）および乾燥（典型的には４０℃以下で）されるだけである。ゾルは、形状付与のために型内でゲル化させることができる。ゾル－ゲル由来シリカはまた、同時のゲル化、エージング、乾燥および形状付与によって、異なるモルフォロジーに加工して調製することもでき、例えば、噴霧乾燥によって微粒子に、ディップ／ドレイン／スピンコーティングによってフィルムに、押出しによってモノリス構造に、または紡糸によって繊維にすることができる。

【0081】

シリカゾルという用語は、懸濁液、すなわち、液体（連続相）と固相（分散相）との混合物を指し、固相は、シリカ粒子および／または凝集シリカ粒子からなり、シリカ粒子および／または凝集体の粒径は典型的には１μｍ未満であり、すなわち、シリカ粒子および／または粒子凝集体はコロイド状である。シリカゾルは、通常、加水分解を介して、部分的に加水分解されたシリカ種または完全に加水分解されたケイ酸のいずれかを形成するアルコキシドまたは無機ケイ酸塩から調製される。液相は、典型的には、水、ならびにエタノールなどの加水分解物および縮合生成物から構成される。ＳｉＯＨ含有種のその後の縮合反応は、増加する量のシロキサン結合を有するより大きなシリカ種の形成をもたらす。これらの種は、ナノサイズのコロイド粒子および／または粒子凝集体を形成する。条件に応じて、シリカゾルは安定なコロイド懸濁液として残るかまたはゲルになる。

【0082】

ゾルは、少なくとも１つの液相と１つの固相との均質な混合物、すなわちコロイド分散体であると理解されるべきであり、液相（例えば水、エタノール、およびシリカ前駆物質の残留物）は連続相であり、固相（例えば、シリカのコロイド粒子および／または部分的もしくは完全に加水分解されたシリカおよび／または前記粒子の凝集体）が、前記液相中に均質に分散され、ゾルは、明らかな流動特性を有し、液相が支配的であることを特徴とする。また、懸濁液も、固体粒子がコロイド状であり、直径が１μｍより小さい場合に、特別にゾルと呼ぶことができる。しかしながら、本出願の文脈において、ゾルという用語は、固体粒子が＜５０ｎｍであるコロイド分散体を指し、懸濁液という用語は、固体粒子が＞５０ｎｍである分散体を指す。

【0083】

本明細書中で使用される場合、用語「対象」、「個体」または「患者」は、個々の生物、脊椎動物、哺乳動物またはヒトであり得る。対象には、ヒト対象における試験の前に、ラット、マウス、ニワトリ、ウシ、サル、ウサギ、霊長類などが含まれるが、これらに限定されない。対象はヒトであり得る。

【0084】

本明細書中で使用される場合、用語「処置する」または「処置」は、治療処置を指し、ここで、その目的は、既存の疾患、障害もしくは状態またはその関連する徴候、症状もしくは状態を軽減させる、緩和させる、もしくは減速させる（減らす）ことである。限定ではなく例として、有効量の化合物／組成物／医薬品またはその薬学的に許容される塩を投与した後に、対象が疾患、障害もしくは状態に関連する１つまたは複数の徴候、症状もしくは状態の観察可能なおよび／または測定可能な軽減または不在を示す場合、対象は疾患について首尾よく「処置」される。

【0085】

医薬組成物
特定の実施形態では、本出願は、医薬組成物を対象とする。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に開示されるデポ製剤を含む。いくつかの実施形態では、デポ製剤は、追加の治療化合物（すなわち、薬剤）および薬学的に許容される担体をさらに含む。少なくとも１つの追加の治療剤は、レーベル遺伝性視神経症などの疾患の処置に有用な薬剤を指すことができる。医薬組成物は医薬品であり得る。

【0086】

医薬組成物は、化合物、例えばオリゴペプチドもしくはペプチド模倣化合物を、薬学的に許容される担体および任意選択で１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わせることによって調製することができる。

【0087】

「有効量」は、所望の生物学的効果を達成するのに十分な任意の量（例えば、疾患、障害もしくは状態、または疾患もしくは障害の生理学的徴候、症状もしくは状態を処置する、阻害する、改善する、またはそれらの発症を遅延させる量）を指す。本明細書に提供される教示と組み合わせて、種々の活性化合物の中から選択し、効力、相対的バイオアベイラビリティ、対象の体重、有害な副作用の重症度、および投与様式等の因子に重み付けすることによって、実質的な望ましくない毒性を引き起こさないで、特定の対象の状態、障害または疾患を治療するのに有効である有効な予防的（すなわち、防御的）または治療的処置レジメンを計画することができる。任意の特定の適応症に対する有効量は、処置される疾患、障害もしくは状態、投与される本出願の特定の化合物、対象のサイズ、または疾患、障害もしくは状態の重症度などの因子に応じて変動し得る。有効量は、前臨床試験および臨床試験中に、医師および臨床医によく知られている方法によって決定され得る。当業者は、過度の実験を必要とすることなく、本出願の特定の化合物および／または他の治療剤の有効量を経験的に決定することができる。最大用量、すなわち、いくつかの医学的判断に従って最大安全用量が使用され得る。適切な全身レベルは、例えば、薬物の対象におけるピークまたは持続血漿レベルの測定によって決定することができる。局所的に送達される用量は、例えば、眼の硝子体液などの身体の特定のコンパートメントにおけるレベルによって決定され得る。「用量（dose）」および「投与量（dosage）」は、本明細書において互換的に使用される。用量は、自分自身によって、他者によって、またはデバイス（例えば、ポンプもしくはシリンジ）によって投与され得る。化合物／組成物／医薬品は、１つまたは複数の追加の治療化合物／薬剤と組み合わせて投与してもよい（例えば、追加の治療剤が、同時に、逐次的に、または別々の投与によって投与され得るいわゆる「共投与（co-administration）」）。

【0088】

治療または予防において使用するための化合物は、適切な動物モデル系において試験され得る。同様に、ｉｎ ｖｉｖｏ試験のために、当技術分野で公知の動物モデル系のいずれかが、ヒト対象への投与前に使用され得る。適切な動物モデル系には、ヒト対象における試験の前に、ラット、マウス、ニワトリ、ウシ、サル、ウサギなどが含まれるが、これらに限定されない。

【0089】

治療化合物および任意選択で他の治療剤は、遊離塩基等価形態または薬学的に許容される塩の形態で投与され得る。医薬において使用される場合、塩は薬学的に許容されるものであるべきであるが、薬学的に許容される塩を調製するために薬学的に許容されない塩が好都合に使用され得る。薬学的に許容される塩形態は、塩を含む分子の比が１：１ではない形態を含むことができる。例えば、塩は、化合物の分子あたり２つの塩酸分子などの、塩基の分子あたり１つより多い無機または有機酸分子を含んでもよい。別の例として、塩は、酒石酸の分子あたり２つの化合物分子など、塩基の分子あたり１つ未満の無機または有機酸分子を含んでいてもよい。

【0090】

本出願の医薬組成物は、有効量の本明細書に記載の治療化合物（例えば、エラミプレチド、化合物Ｉ、化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩまたは化合物ＩＶ）を含有し、任意選択で、薬学的に許容される担体中に分配され得る。医薬組成物の成分はまた、所望の薬学的効率を実質的に損なう相互作用がないような様式で、本出願の化合物と、および互いと混ぜ合わせることができる。

【0091】

任意の治療化合物、組成物（例えば、製剤もしくは医薬品）、他の治療剤、またはそれらの混合物の投与量、毒性、および治療有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手順によって決定することができる。毒性効果と治療効果との間の用量比が治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。高い治療指数を示す化合物が有利である。

【0092】

細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量の範囲を処方する際に使用することができる。そのような化合物の投与量は、毒性をほとんどまたは全く伴わないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内であり得る。投与量は、使用される剤形および利用される投与経路に応じて、この範囲内で変動し得る。用量は、ＩＣ５０（すなわち、症状の半数（５０％）阻害を達成する試験化合物の濃度である）を含む循環血漿濃度範囲を達成するように動物モデルにおいて処方することができる。このような情報を使用して、ヒトにおける有用な用量を正確に決定することができる。動物またはヒトの血漿中の活性医薬成分／治療化合物（例えば、オリゴペプチドもしくはペプチド模倣物）のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定することができる。

【0093】

例示的な処置レジメンは、週１回～１ヶ月に１回、または１ヶ月に１回～１年に１回、または１ヶ月に１回～６ヶ月に１回、または１ヶ月に１回～３ヶ月に１回、３ヶ月に１回～６ヶ月に１回、６ヶ月に１回～９ヶ月に１回、または９ヶ月に１回～１年に１回の投与を伴い得る。いくつかの実施形態では、処置レジメンは、約３ヶ月に１回、６ヶ月に１回、９ヶ月に１回、または約１年に１回のデポ製剤の硝子体内注射である。治療的適用では、疾患、障害もしくは状態の進行が軽減もしくは終了するまで、または対象が疾患、障害もしくは状態の症状の部分的もしくは完全な改善を示すまで、比較的短い間隔での比較的高い投与量が時々必要とされる。その後、対象に予防的レジメンが投与され得る。

【0094】

治療における使用のために、有効量の本明細書に開示される製剤（例えば、デポ製剤）は、化合物を所望の表面に送達する任意の様式によって対象に投与され得る。医薬組成物の投与は、当業者に公知の任意の手段によって達成することができる。投与経路には、経口、局所、鼻腔内、全身、皮下、腹腔内、皮内、眼内、眼、経粘膜、硝子体内、または筋肉内投与が含まれるが、これらに限定されない。投与には、自己投与、他者による投与およびデバイスによる投与が含まれる。

【0095】

眼または眼内適応症のために、眼または眼の近くの領域に治療化合物または医薬組成物を送達する任意の適切な様式を使用することができる。眼科用製剤については、概して、Mitra (ed.),Ophthalmic Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y. (1993)、およびHavener, W. H.,Ocular Pharmacology, C.V. Mosby Co., St. Louis (1983)を参照されたい。眼内またはその付近への投与に適した医薬組成物の非限定的な例としては、眼科用インサート（Ocular insert）、ミニタブレット、デポ製剤、ならびに点眼剤、軟膏、およびｉｎ ｓｉｔｕゲルなどの局所製剤が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、本明細書に開示される治療化合物を含む医薬組成物でコンタクトレンズをコーティングする。

【0096】

局所眼投与の場合、治療化合物または医薬組成物は、当技術分野で周知のように、溶液、ゲル、軟膏、クリーム、懸濁液などとして製剤化され得る。眼用ゲルは、シリカを含んでいてよく、ゾルゲルまたはハイドロゲルであり得る。軟膏剤は、眼または皮膚への局所使用などの外用用の半固体剤形である。いくつかの実施形態では、軟膏は、ヒトの中心温度に近い融点または軟化点の固体または半固体炭化水素基剤を含む。いくつかの実施形態では、眼に適用された軟膏は小滴に分解し、それは結膜嚢内に長期間留まるため、バイオアベイラビリティを高める。

【0097】

眼科用インサートは、従来の眼科用薬物形態の欠点を伴わない固体または半固体剤形である。それらは、鼻涙管を介した流出のような防御機構の影響を受けにくく、結膜嚢内に長期間留まる能力を示し、従来の剤形よりも安定である。それらはまた、１つまたは複数の治療化合物の正確な投薬、一定の速度での１つまたは複数の治療化合物の徐放、および１つまたは複数の治療化合物の全身吸収の制限などの利点を提供する。いくつかの実施形態では、眼科用インサートは、本明細書に開示される１つまたは複数の治療化合物および１つまたは複数のポリマー材料を含む。ポリマー材料としては、メチルセルロースおよびその誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ））、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰＫ－９０）、ポリビニルアルコール、キトサン、カルボキシメチルキトサン、ゼラチン、および前述のポリマーの様々な混合物を挙げることができるが、これらに限定されない。眼科用インサートはシリカを含むことができ、ゾルゲルまたはハイドロゲルの形態を含む。

【0098】

眼科用または眼内用製剤および医薬は、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、メチルおよびプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコール、またはフェニルエタノールなどの使用に際して無害である抗菌成分；塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、またはグルコン酸緩衝液などの緩衝成分；および例えば、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテート、エチレンジアミン四酢酸などの他の従来の成分；などの非毒性補助物質を含有してもよい。

【0099】

いくつかの実施形態では、角膜との接触および眼におけるバイオアベイラビリティを改善するために、１つまたは複数の治療化合物を含む眼用製剤の粘度を高める。粘度は、生体膜を通して拡散せず水中で三次元ネットワークを形成する高分子量の親水性ポリマーの添加によって高めることができる。このようなポリマーの非限定的な例としては、ポリビニルアルコール、ポロキサマー、ヒアルロン酸、カルボマー、および多糖類、セルロース誘導体、ゲランガム、およびキサンタンガムが挙げられる。

【0100】

いくつかの実施形態では、眼用製剤は、例えばゾルゲルとして、眼に注射することができる。いくつかの実施形態では、眼用製剤は、制御放出製剤などのデポ製剤である。このような制御放出製剤は、微粒子またはナノ粒子などの粒子を含み得る。

【0101】

治療化合物もしくは他の治療剤またはそれらの混合物は、担体系中に製剤化することができる。担体はコロイド系であり得る。コロイド系は、ゾルゲルまたはハイドロゲルであり得る。一実施形態では、治療化合物もしくは他の治療剤またはそれらの混合物は、治療化合物もしくは他の治療剤またはそれらの混合物の完全性を維持しながら、ゾルゲルまたはハイドロゲルに封入することができる。

【0102】

担体またはコロイド系は、治療剤を含むかまたは封入するシリカナノ粒子または微粒子を含むゾルゲルであり得る。

【0103】

いくつかの実施形態では、治療化合物もしくは他の治療剤またはそれらの混合物は、インプラントおよびマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤などのように、身体からの急速な排出に対して治療化合物、他の治療剤またはそれらの混合物を保護する担体を用いて調製される。

【0104】

治療化合物は、制御放出システムに含まれ得る。用語「制御放出」は、製剤からの薬物放出の様式およびプロファイルが制御される任意の薬物含有製剤を指すことが意図される。これは、即放性製剤および非即放性製剤を指し、非即放性製剤には、持続放出製剤および遅延放出製剤が含まれるが、これらに限定されない。「持続放出」（「徐放」とも呼ばれる）という用語は、その従来の意味で、長期間にわたって薬物の段階的な放出をもたらし、好ましくは、必ずではないが、長期間にわたって薬物の実質的に一定の血中レベルをもたらす薬物製剤を指すために使用される。用語「遅延放出」は、製剤の投与と薬物の放出との間に時間遅延がある薬物製剤を指すために従来の意味で使用される。「遅延放出」は、長期間にわたって薬物を徐々に放出することを含んでも含まなくてもよく、したがって「持続放出」であってもなくてもよい。

【0105】

長期持続放出インプラントまたはデポ製剤の使用は、慢性状態の処置に特に適している可能性がある。用語「インプラント」および「デポ製剤」は、単一の組成物（メッシュなど）、または複数の成分を含む組成物（例えば、メッシュ材料のいくつかの個々のピースから構築された繊維メッシュ）、または複数の個々の組成物（例えば、微粒子またはナノ粒子）（ここで、複数の組成物は局在化したままであり、複数の組成物の凝集体から生じる長期持続放出を提供する）を含むことが意図される。本明細書で使用される「長期」放出とは、インプラントまたはデポ製剤が、少なくとも２日間、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を送達するように構築および配置されることを意味する。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも７日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも１４日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも３０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも６０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも９０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも１８０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を少なくとも１年間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を１５～３０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を３０～６０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を６０～９０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を９０～１２０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、インプラントまたはデポ製剤は、治療レベルまたは予防レベルの活性成分を１２０～１８０日間送達するように構築および配置される。いくつかの実施形態では、長期持続放出インプラントまたはデポ製剤は当業者に周知であり、上記の放出システムのいくつかを含む。いくつかの実施形態において、このようなインプラントまたはデポ製剤は、外科的に投与され得る。いくつかの実施形態において、このようなインプラントまたはデポ製剤は、局所的にまたは注射によって投与され得る。

【0106】

滅菌手順
特定の実施形態において、デポ製剤は滅菌製剤である。

【0107】

特定の実施形態では、デポ製剤を作製する方法は、デポ製剤を滅菌するステップをさらに含む。滅菌ステップは本明細書に記載される手順のいずれかに従って行うことができ、放射線滅菌（例えば、アルファ（α）線、ベータ（β）線、ガンマ（γ）線、中性子線、電子ビーム、またはＸ線による滅菌）、化学的滅菌（例えば、エチレンオキシドまたは過酸化水素を用いる）、または物理的滅菌（例えば、加熱、濾過、またはレトルト缶詰などを用いる）などが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、デポ製剤を作製する方法は、γ線照射で製剤を滅菌するステップをさらに含む。

【0108】

特定の実施形態では、デポ製剤を作製する方法は最終滅菌ステップを含み、デポ製剤は、任意選択で容器（シリンジなど）に密封され、次いで滅菌ステップを受ける。好ましくは、滅菌は照射、例えばガンマ線照射による。

【0109】

本発明のデポ製剤などの化学組成物を滅菌するための様々な手順が当技術分野において公知である。滅菌は、化学的、物理的、または照射技術によって達成され得る。化学的方法の例としては、エチレンオキシドまたは過酸化水素蒸気への曝露が挙げられる。

【0110】

物理的方法の例としては、加熱（乾式または湿式）による滅菌、レトルト缶詰、および濾過が挙げられる。英国薬局方は、効果的な滅菌のために、最低１６０℃で２時間以上、最低１７０℃で１時間以上、最低１８０℃で３０分以上の加熱を推奨している。加熱滅菌の例については、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，１３６，３２６を参照されたい。化学組成物を膜に通すことを使用して、組成物を滅菌することができる。例えば、組成物は、濾過される組成物に対して不活性な材料を含む０．２２ミクロンフィルターなどの小孔フィルターを通して濾過される。特定の例において、濾過は、クラス１００，０００以上のクリーンルームで行われる。

【0111】

照射方法としては、アルファ線、ベータ線、ガンマ線照射、中性子線照射、電子ビーム（または電子線）照射、マイクロ波照射、可視光を使用する照射が挙げられる。１つの好ましい方法は、ガンマ線（γ線）照射である。

【0112】

電子ビーム照射のためのいくつかの供給源がある。電子ビーム加速器の２つの主な群は以下の通りである：（１）絶縁コア変圧器を使用するダイナミトロン、および（２）無線周波数（ＲＦ）線形加速器（リニアック）。ダイナミトロンは、電子にエネルギーを与えるように設計された粒子加速器（４．５ＭｅＶ）である。ガラス絶縁ビーム管（加速管）の長さ内に配置された加速器電極の静電場によって高エネルギー電子が生成および加速される。排気ビーム管およびビーム輸送（ドリフトパイプ）の延長部を通って移動するこれらの電子は、ビーム窓を通って真空容器を出る前に、「スキャンされた」ビームを生成するために、磁石偏向システムに供される。線量は、パーセントスキャン、ビーム電流、およびコンベヤ速度の制御によって調節することができる。特定の例において、用いられる電子ビーム放射線は、少なくとも約２マイクロキュリー（μＣｉ）／ｃｍ^２、少なくとも約５μＣｉ／ｃｍ^２、少なくとも約８μＣｉ／ｃｍ^２、または少なくとも約１０μＣｉ／ｃｍ^２の初期フルエンスで維持され得る。特定の例において、用いられる電子ビーム放射線は、約２～約２５μＣｉ／ｃｍ^２の初期フルエンスを有する。特定の例において、電子ビーム線量は、約５～５０キログレイ（ｋＧｒａｙ）、または約１５～約２０ｋＧｒａｙであり、特定の線量は、電子ビーム放射線に曝される材料の密度ならびにその中にあると推定されるバイオバーデンの量に対して選択される。このような因子は当業者の技術範囲内である。

【0113】

可視光を使用する滅菌手順は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，５７９，９１６に記載されている。滅菌のための可視光は、滅菌をもたらすのに十分な出力および波長幅の任意の従来の発生器を使用して発生させることができる。発生器は、商品名ＰｕｒｅＢｒｉｇｈｔ（登録商標）インライン滅菌システム（ＰｕｒｅＰｕｌｓｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．４２４１ Ｐｏｎｄｅｒｏｓａ Ａｖｅ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．９２１２３，ＵＳＡ）で市販されている。ＰｕｒｅＢｒｉｇｈｔ（登録商標）インライン滅菌システムは、可視光を使用して、表面太陽光より約９００００倍大きい強度で透明な液体を滅菌する。ＵＶ光の透過量が懸念される場合、従来のＵＶ吸収材を使用してＵＶ光をフィルタリングすることができる。

【0114】

本明細書に提供される製剤を滅菌する１つの方法は、放射線滅菌によるものである。このような放射線としては、α線、β線、γ線、中性子線、電子ビーム、およびＸ線が挙げられる。特定の好ましい実施形態では、放射線はガンマ線（γ線）滅菌である。例示的な放射線量としては、以下のものが挙げられる：約０．５～１０ＭＲａｄ（５～１００ｋＧｙ）、約１．５～５．０ＭＲａｄ（１０～５０ｋＧｙ）または約２～４ＭＲａｄ（２０～４０ｋＧｙ）の放射線。例えば、γ線滅菌は、以下の線量（ｋＧＹ）のうちの１つのあたりで実施され得る：１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０。一般に、電子ビームまたはガンマ線の線量は、約１０～５０ｋＧｙまたは２０～４０ｋＧｙの範囲である。

【0115】

放射線の線量は、滅菌前の組成物のバイオバーデンレベル（初期汚染）に基づいて決定され得る。暴露時間は、他の変数の中でも特に、組成物の性質、ビームの強度、およびコンベヤ速度に依存し、典型的には１分未満である；一般に、１／１０秒～数秒の範囲である。線量計を使用して、照射されている特定の試料または組成物の最適な曝露時間を決定してもよい。

【0116】

滅菌手順の温度は、約２℃～５０℃、または約１５℃～４０℃、または約２０℃～３０℃の範囲であり得る。典型的には、照射は周囲条件下で行われる。

【0117】

特定の実施形態では、デポ製剤を滅菌して、少なくとも１０^－３、または少なくとも１０^－４、またはさらには少なくとも１０^－５の無菌性保証レベル（ＳＡＬ）を提供する。無菌性保証レベルの測定規格は、例えば、ＩＳＯ／ＣＤ １４９３７に記載されており、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの例において、本明細書に提供される滅菌組成物は、少なくとも１０^－６（１００万分の１より大きい非滅菌単位（nonsterile unit）の確率）である無菌性保証レベルを有し得る。

【0118】

デポ製剤は、ガラス、プラスチック、箔およびフィルム形成パッケージを含むがこれらに限定されない任意のタイプの少なくとも部分的に電子ビームまたはガンマ線透過性の容器に含まれ得る。容器は密封されてよく、あるいは開口部を有していてもよい。ガラスおよび場合によってはプラスチック容器の例として、アンプル、バイアル、シリンジ（シングル、デュアルまたはマルチプルレット）、ピペット、アプリケーター、チューブなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0119】

例えば、容器は、シリンジ、または任意選択で通気性のあるシリンジキャップを含むシリンジであってもよい。通気性のあるシリンジキャップの例としては、Ｖｅｎｔｅｄ ＦＬＬキャップ３ミクロンフィルター（Ｑｏｓｉｎａ、Ｐ／Ｎ １２０８９）、Ｆｅｍａｌｅ Ｌｕｅｒキャップ通気式ヘックスルアーフィット（Ｑｏｓｉｎａ、Ｐ／Ｎ ６５７０）、およびＬｕｅｒチップシリンジキャップ（Ｖａｌｕｅ Ｐｌａｓｔｉｃｓ（Ｆｏｒｔ Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｃｏｌｏ．）、Ｐ／Ｎ ＶＰＭ０４８０２０１Ｎ）が挙げられる。

【0120】

上記のものなどであるがこれらに限定されない容器は、例えば、密封ホイルパウチなどのパウチ内にさらにパッケージおよび密封されてもよい。製薬業界および医療業界で使用するためのパッケージング材料は周知である。本明細書に提供されるタイプの組成物に適用可能として、“Pharmaceutical Packaging Technology”, Dean, D. A., et al., Ed., Taylor & Francis, Inc., 2000に記載されている容器が、本方法における使用のために、ならびに本明細書に提供される組成物およびキットのために企図される。

【0121】

電子ビームまたはガンマ線照射の浸透は、一般に、選択されるパッケージング材料の関数である。特定の実施形態では、静止した電子ビームまたはガンマ線の側面からの浸透が不十分であると判断される場合、適切な浸透を達成するために容器を反転または回転させることができる。あるいは、電子ビームまたはガンマ線源を、静止したパッケージまたは容器の周りを移動させてもよい。プロダクトロードにおいて線量分布および線量浸透を決定するために、線量マップを実施することができる。線量マップは、特定の製品、パッケージまたは容器の最小および最大線量ゾーンを特定するために使用することができる。特定の実施形態では、デポ製剤を含む容器を、例えば電子ビームまたはガンマ線照射で滅菌した後、容器をさらに滅菌してもよい。例えば、滅菌を必要とし得る他の構成要素と共に容器をキットに入れる。このプロセスでは、キット全体が滅菌され得る。例えば、キット全体を、化学的（例えば、エチレンオキシドまたは過酸化水素蒸気を用いる）、物理的（例えば、乾式加熱）、またはマイクロ波照射、電子ビーム照射もしくはガンマ線照射などの他の技術によってさらに滅菌してもよい。

【0122】

ここで本発明を一般的に説明してきたが、以下の実施例を参照することにより、より容易に理解されるであろうが、これらの実施例は、単に本発明の特定の態様および実施形態の例示を目的として含まれており、本発明を限定することを意図するものではない。

【実施例】

【0123】

以下の実施例１および２における製剤を調製するための方法は、本質的にＷＯ２０１４／２０７３０４およびＷＯ２０１７／０６８２４５（それぞれ、全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるように実施したが、以下の各実施例に具体的に記載されるように修正した。

【0124】

実施例１：製造されたエラミプレチドを含むシリカ－ＡＰＩ－シリカハイドロゲルコンポジット（デポ）の製剤
製剤仕様：
・総薬物用量：５０μＬの注射中２７０μｇのＡＰＩの用量
・１日の薬物用量：３μｇ
・ｉｎ ｖｉｖｏ放出プロファイル：３ヶ月間の持続放出
・投与経路：硝子体内注射
・注射体積：５０μＬ以下
・針のサイズ：３０ゲージ
・注射頻度：３ヶ月に１回反復

【0125】

表１中の情報は、調製した製剤の詳細およびその分析を提供する。
１）注射可能なハイドロゲルコンポジットを製造するために使用される微粒子製剤
２）ハイドロゲル前駆物質（Ｒ４００）１ｍＬ当たりの微粒子の質量（ｇ）
３）デポ中の微粒子の重量％（デポ１グラム当たり５００ｍｇの微粒子）
４）最終デポ製剤中のＡＰＩの測定量、デポの密度は１．２ｇ／ｍＬであると推定された
５）最終デポ製剤のｐＨ
６）（プライミング後）１００μＬの注射で手動注射可能性試験（Manual injectability testing）を行った。

【0126】

表１に記載のコンポジットのシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出データを図１および図２に示す。

【0127】

ディスカッション：
図１は、製剤＃０５Ｄが約８～９日間にわたってＡＰＩ（すなわち、エラミプレチド）を放出することを示し、それはｉｎ ｖｉｖｏで約９ヶ月に相当するはずである。

【0128】

図２は、製剤＃０８Ｄが約４～５日間にわたってＡＰＩ（すなわち、エラミプレチド）を放出することを示し、それはｉｎ ｖｉｖｏで約５ヶ月に相当するはずである。

【0129】

この実施例１ならびに図１および２におけるデータは、粒子が形成される条件（例えば、形成ｐＨ）を調節することにより、ＡＰＩの放出速度を所望の放出基準に調整できることを実証する。

【0130】

実施例２：製造された化合物Ｉを含むシリカ－ＡＰＩ－シリカハイドロゲルコンポジット（デポ）の製剤
１）注射可能なハイドロゲルコンポジットを製造するために使用される微粒子製剤
２）ハイドロゲル前駆物質（Ｒ４００）１ｍＬ当たりの微粒子の質量（ｇ）
３）デポ中の微粒子の重量％（デポ１グラム当たり５００ｍｇの微粒子）
４）最終デポ製剤中のＡＰＩの測定量、デポの密度は１．２ｇ／ｍＬであると推定された
５）最終デポ製剤のｐＨ
６）（プライミング後）１００μＬの注射で手動注射可能性試験を行った。

【0131】

表２に記載のコンポジットのシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出データを図３および図４に示す。

【0132】

結果の要約
・ハイドロゲル成分は、製剤＃０５ＤのシリカおよびＡＰＩの両方の放出速度を低下させる。
・ハイドロゲル成分は、＃０５Ｄと比較して、製剤＃０８Ｄの放出速度に有意な効果を有さなかった。
・デポ製剤はすべて、２５ゲージまたは２７ゲージサイズの針のいずれかを通して注射された。
・ハイドロゲルコンポジットの製造は容易であった。
・微粒子の湿潤は速く、懸濁液の作業性は良好であった。
・化合物Ｉの製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄについてのデータは、特に、エラミプレチドについて観察されたものと同様であった：
－ 図３は、製剤＃０５Ｄが約９～１０日間にわたってＡＰＩ（すなわち、化合物Ｉ）を放出することを示し、それはｉｎ ｖｉｖｏで約１０ヶ月に相当するはずである。
－ 図４は、製剤＃０８Ｄが約４～５日間にわたってＡＰＩ（すなわち、化合物Ｉ）を放出することを示し、それはｉｎ ｖｉｖｏで約５ヶ月に相当するはずである。
・この実施例２のデータは、粒子が形成される条件（例えば、形成ｐＨ）を調節することによって、ＡＰＩの放出速度を所望の放出基準に調整できることを実証する。

【0133】

【表1】

【0134】

【表2】

【0135】

実施例３：重フッ化アンモニウム中における化合物Ｉおよびエラミプレチドの放出：
・０．１ＭのＮＨ_４ＨＦ_２をシリカ微粒子に１ｍｇ／ｍＬの粒子濃度まで添加する（すなわち、１０ｍＬの溶液に対して１０ｍｇの粒子）。
・シリカ－プラセボ微粒子を用いＡＰＩを１６μｇ／ｍＬまたは４０μｇ／ｍＬの濃度に添加（spiked）する。
・シリカ微粒子を室温で溶解させる。
・過剰のシリカ－プラセボ微粒子を不活性な非反応ＮＨ_４ＨＦ_２に加える（１６ｍｇ）。
・ブランク試料→ＡＰＩを含まない同じ製剤。
・１．５ｍＬの試料溶液を１４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離する。
・上清を安定性指示ＲＰ－ＨＰＬＣ法（stability-indicating RP-HPLC method）で分析する。
・対照／標準→水中の１５μｇ／ｍＬまたは４０μｇ／ｍＬのＡＰＩ。

【0136】

【表3】

【0137】

【表4】

【0138】

結論：
・新鮮なＡＰＩ試料中および微粒子製剤から放出されたＡＰＩを有する試料中の不純物の相対量は同じレベルであった。
・エラミプレチドおよび化合物Ｉの両方とも、製剤化プロセスによって有意に修飾されることはなく、試験したＡＰＩの制御放出のためのこれら製剤の開発に不適切であるとして、製剤がプロセスに悪影響を及ぼすことはなかった。

【0139】

実施例５：微粒子用ゾルの調製および微粒子の調製
シリカ－ＡＰＩ微粒子－シリカハイドロゲルデポの製造プロセスの概要を図５に示す。

【0140】

噴霧乾燥微粒子を製造するためのシリカゾルは、ｐＨ２で塩酸（ＨＣｌ）を触媒として使用して水中でオルトケイ酸テトラエチル（tetraethyl orthosilicate）（ＴＥＯＳ）を加水分解することによって作製することができる。水：ＴＥＯＳのモル比は、微粒子製剤の第１のＲ値（第１のＲ）を決定する。医薬有効成分（または活性医薬成分）（ＡＰＩ）を希釈剤（エタノールもしくは水、またはそれらの混合物）に溶解し、次いでこの溶液をゾルと組み合わせる。その結果、形成された溶液中のＴＥＯＳはさらに希釈され、これは第２のＲ値（第２のＲ）として示され、その場合に希釈剤はあたかも水であるかのように計算される。噴霧乾燥の前に、ゾルのｐＨを調整し、その後ゾルを噴霧乾燥して微粒子を形成することができる。これら微粒子は主に製剤の特性を決定する。具体的な実験手順を以下に記載する。

【0141】

微粒子を作製するためのシリカゾルは、以下のように、水中でのオルトケイ酸テトラエチル（ＴＥＯＳ）の加水分解によって生成された：まず、ＴＥＯＳを水と混合した；ＴＥＯＳに対する水の初期モル比（＝製剤レシピを記載するために使用される標準命名法における第１のＲ、例えば、Ｒ１０－１００）は、３～１０で変化した。ＴＥＯＳは水に非混和性であるため、加水分解前は二相系であった。次いで、水－ＴＥＯＳ混合物を０．１ＭのＨＣｌでｐＨ２に調整すると、均質な水溶液になった。ＨＣｌ中の水の量は、Ｒ値を計算する際に考慮される。発熱加水分解反応後、シリカゾルを氷浴中で冷却した。分子重合を示すスキームを図６に示す。

【0142】

その後、冷シリカゾルをＡＰＩ－水溶液に添加し、希釈係数Ｒ、すなわち希釈後のＴＥＯＳに対する水のモル比（＝製剤レシピを記載するために使用される標準命名法における第２のＲ、例えば、Ｒ１０－１００）として示した。第２のＲ値は、製造された全ての微粒子で１００であった。

【0143】

ＡＰＩ搭載％（API load-%）の影響も調査し、ＡＰＩ搭載％は、ゾル中のシリカ含有量に対して２％～５％で変化させた。最後に、０．１ＭのＮａＯＨ溶液でゾルを最終ｐＨに調整し、噴霧乾燥前にｐＨを４．０～５．９で変化させた。一般に、噴霧乾燥前のゾルのｐＨは、シリカの縮合度（condensation degree）、ひいては微粒子の溶出速度に影響を及ぼす。

【0144】

最後に、ＡＰＩを含有するゾルを、濾過された周囲空気で噴霧乾燥することによって、シリカ－ＡＰＩ微粒子を調製した。噴霧乾燥パラメータを以下に示す。

【表5】

【0145】

実施例６：シリカ－ＡＰＩ微粒子シリカハイドロゲルデポ製剤の調製
注射可能なデポ剤を調製するために、高含水率を有するシリカゾル（Ｒ４００ゾル、含水率９８～９９％）も、ｐＨ２でＨＣｌを触媒として使用して水中でＴＥＯＳを加水分解することによって作製する。第１および第２のＲ値を有する噴霧乾燥シリカ－ＡＰＩ微粒子をＲ４００ゾルと混合する。このシリカ微粒子－シリカハイドロゲル懸濁液を使用してシリンジに充填する。シリンジは、ゲルが形成されるまで回転ミキサーで回転させることによって均質に保たれ得る。具体的な実験手順を以下に記載する。

【0146】

高含水率を有するシリカゾル（Ｒ４００、含水率９８～９９％）を、触媒として０．１ＭのＨＣｌを使用して、ＴＥＯＳおよび脱イオン水の加水分解によって作製した。加水分解後、ゾル（すなわち、ハイドロゲルのためのゾル）のｐＨを０．１ＭのＮａＯＨ溶液で約ｐＨ６に調整した。

【0147】

実施例５からの噴霧乾燥シリカ－ＡＰＩ微粒子を、手動でＲ４００ゾルと１：１の比（ｗ：ｖ）で混合した。シリカゾルの懸濁液および微粒子を、懸濁液を上下にピペッティングすることによって混合し、バッチサイズは約１～３ｍｌであった。シリンジ（針なし）で懸濁液を直接引き込むことによって懸濁液をプラスチックシリンジ（１ｍｌの使い捨てＢＤシリンジ）に移し、シリンジを軽くたたくことによって潜在的な気泡を除去した。次いで、粒子の沈降が生じるのを防ぐために、キャップしたシリンジをチューブローター内で穏やかに混合することによって、シリカ－ＡＰＩ微粒子－シリカハイドロゲル懸濁液を均質に保ちながら、懸濁液を周囲温度で１～２日間ゲル化させた。

【0148】

実施例７：ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験
製剤の特性は、主に微粒子によって決定される。第１のＲ値はシリカの溶出速度（dissolution rate）を決定する。一般に、第１のＲが小さいほど、シリカマトリックスは水に速く溶解する。他方、第２のＲ値は、封入（encapsulation）効率に影響を与える。報告されたｐＨは、噴霧乾燥前のゾルのｐＨである。ｐＨは、シリカの縮合度、ひいては溶出速度に影響を及ぼすが、その影響は製剤およびＡＰＩに依存する。ＡＰＩ搭載％は、シリカ含有量に対する製剤中のＡＰＩの量を示す。ＡＰＩ搭載率はシリカの構造と溶出速度に影響を及ぼす。希釈剤は、ゾル中にＡＰＩを添加する前にＡＰＩを溶解させるために使用される溶媒／希釈剤である。希釈剤はＡＰＩの溶解性を改善し、例えば噴霧乾燥におけるＡＰＩの沈殿を防止し得る。噴霧乾燥における入口温度（ＩＴ）は、溶媒の蒸発速度を制御することにより粒子形成において役割を果たす。

【0149】

シリカのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出およびＡＰＩの放出は、３７℃で、ｐＨ７．４の０．０１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を含む５０ｍＭ ＴＲＩＳ中において測定した（社内でＴＷと称する）。分析した微粒子またはハイドロゲル試料のサイズは約１０～３０ｍｇであり、振盪水浴中（６０ストローク／分）で１６８時間（７日間）まで溶出試験を行った。シリカおよびＡＰＩの濃度は、溶出媒体（dissolution medium）中においてシンク条件（ＳｉＯ_２マトリックスの自由溶解、すなわちシリカは飽和濃度の２０％未満に保たれる）に維持された。シリカ濃度を３０ｐｐｍ未満に保つため、すなわちシンク条件を確実に維持するため、溶出媒体を各時点で新鮮な媒体に交換した。１時間目のサンプリング時点およびその後２４時間毎に、溶出媒体を交換する前に試料を遠心分離した。各時点で３つの反復試験試料を採取し、平均値を結果に示す

【0150】

試料（１０～２５ｍｇ）を０．５Ｍ ＮａＯＨ溶液に溶解させることによって試料の総シリカ含有量を別個に測定し、溶出したシリカの累積量が総シリカ含有量と等しくなるまで溶出を続けた。試料（１０ｍｇの微粒子または２０ｍｇのデポ製剤）を０．１Ｍの重フッ化アンモニウム（ammonium bifluoride）に溶解させることにより、化合物Ｉの総含有量を測定し、一方でエラミプレチド（１０ｍｇの微粒子または２０ｍｇのデポ製剤）は０．０１％（ｖ／ｖ）のＴＷＥＥＮ（登録商標）８０を補足した１５０ｍｌの５０ｍＭグリシン緩衝液（ｐＨ９．４）（社内でＧＷと称される）に溶解させた。さらに、１６８時間の時点後に試料のどれだけが残ったかを評価するために、それらの最終サンプリング時点後にシンク条件溶出試料について０．５Ｍ ＮａＯＨ溶液中で完全溶解（total dissolution）を行った。

【0151】

微粒子製剤の封入効率は、非封入ＡＰＩを考慮した後に算出されたシリカに対するＡＰＩの質量比として定義され、エタノール中で測定された。分析した試料の質量は約２０～３０ｍｇであり、エタノール中の微粒子の最終質量濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるようにエタノール溶液を添加した。エタノール溶出試験は室温で２４時間まで行った。本明細書における理論的根拠は、シリカ－ＡＰＩ微粒子のシリカマトリックスがエタノールに不溶性であるということである。したがって、非封入ＡＰＩのみがこの条件で溶解する。

【0152】

シンク条件での溶出試験は加速溶出試験法であり、ＡＰＩおよびシリカの溶出プロファイルは、適切なｉｎ ｖｉｔｒｏ－ｉｎ ｖｉｖｏ相関（ＩＶＩＶＣ）因子（factor）がなければ、ｉｎ ｖｉｖｏでの溶出特性と対応しないことに留意されたい。硝子体内注射の場合、３０のＩＶＩＶＣ因子を使用して、シンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出データからシリカマトリックスのｉｎ ｖｉｖｏ溶出速度を推定することができることが過去に示されている。シリカマトリックスの溶出速度が、シンク試験条件と比較してｉｎ ｖｉｖｏで３０倍遅いことを意味する。

【0153】

実施例８：化合物Ｉを含む製剤
Ｉ．化合物Ｉを含むシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤
本研究において製造されたシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤の組成を以下の表に示し、微粒子製剤についてシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏでの累積的な化合物Ｉの放出およびシリカマトリックスの溶出を図８～１０に示す。図面は、製剤の放出プロファイルに対する研究されたプロセスパラメータの影響を示す。

【0154】

【表6】

【0155】

ＩＩ．化合物Ｉを含むシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤のシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出
ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験は、シンク条件で１６８時間（７日間）まで実施した。試験した全ての製剤（＃０１～＃０８）は、低いバースト放出（総含有量の５％未満）を有し、これはＡＰＩの良好な封入を示す。これは、ＡＰＩ含有量が２４時間の溶出後に定量限界を下回ることを示したエタノール溶出試験によっても確認された。

【0156】

シリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０１～＃０３からのｉｎ ｖｉｔｒｏでのシリカの累積溶出およびＡＰＩの累積放出の要約を図８に示す。これらの微粒子製剤中のＡＰＩ搭載は２％であり、ｐＨは５．９で一定に保たれた。微粒子製剤の第１のＲ値は、シリカ溶出およびＡＰＩ放出のプロファイルに有意な影響を及ぼした。第１のＲ値の低下は、より多くのヒドロキシル基がシリカマトリックス中に残るので、シリカマトリックスのより速い溶出速度をもたらした。７日以内に、最遅製剤（＃０１）からシリカマトリックスの約５％が溶出し、最速製剤（＃０３）から約８４％が溶出した。ＡＰＩ放出プロファイルはシリカ溶出プロファイルと相関し、総ＡＰＩ含有量の１２～８７％が７日以内に放出された。

【0157】

様々なｐＨでのシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０３～＃０６からのｉｎ ｖｉｔｒｏでのシリカの累積溶出およびＡＰＩの累積放出の要約を図９に示す。これらの微粒子製剤中のＡＰＩ搭載は２％であり、第１のＲ値は３で一定に保たれ、第２のＲ値は１００で一定に保たれた。

【0158】

この研究では、製剤＃０３と＃０４との間で、ＡＰＩの放出速度およびシリカマトリックスの溶出に有意差が見られるが、＃０５と＃０６との間では見られない（図９）。７日以内に、最遅製剤（＃０４）から約４７％のシリカマトリックスが溶出し、最速製剤（＃０５および＃０６）から１００％が溶出した。ＡＰＩ放出プロファイルはシリカ溶出プロファイルと相関し、総ＡＰＩ含有量の４８～１００％が７日以内に放出された。製剤＃０３のシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出プロファイルは、最も高いｐＨ（より縮合されたシリカマトリックス）により最遅製剤であるはずのため、特殊である。ＡＰＩ放出は、全ての研究された微粒子製剤でシリカの溶出と相関する。

【0159】

ＡＰＩ搭載％を２％から５％に増加させることについてＲ３－１００ベースの製剤で調べた（図１０）。製剤＃０５および＃０８はより速い製剤であって互いに同一であり、一方製剤＃０３および＃０７はより遅い製剤である。溶出結果は、ＡＰＩ搭載を２％から５％に増加させることが溶出速度に有意な影響を与えないことを示す。対照的に、ｐＨは溶出プロファイルに対してより有意な効果を有する。

【0160】

ＩＩＩ．粒径分布
開発されたシリカ－化合物Ｉ微粒子製剤の粒径分布を以下に要約する。

【表7】

【0161】

Ｄ値は、分析した試料の累積質量の１０％、５０％、９０％の切片（intercept）である。例えば、Ｄ１０値は、試料の質量の１０％がこの値以下の直径を有する粒子で構成される直径である。ここで、Ｄ５０値は１０μｍ未満であるため（＃０６を除く）、全ての微粒子製剤の粒径は明らかに小さい。シリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０５および＃０８は、シリカ溶出、ＡＰＩ放出および粒径分布に関して最も望ましい特徴を示したので、それらをデポ製剤開発において使用されるリード製剤として選択した。

【0162】

ＩＶ．シリカ－ＡＰＩ微粒子－シリカハイドロゲルデポ製剤
シリカ－化合物Ｉ微粒子－シリカハイドロゲル（ＨＧ）製剤（すなわち、シリカ－化合物Ｉデポ製剤）の組成を以下に示す。

【表8】

【0163】

デポ製剤からのシリカマトリックスのシンク条件での累積溶出およびＡＰＩの放出速度を図１１および１２に示す。対応する微粒子製剤の放出速度も前記図に示し、微粒子製剤の溶出速度に対するＨＧ成分の影響を示す。微粒子がシリカ－ＨＧ成分に組み込まれている場合、最初の２４時間以内に（微粒子）製剤＃０５から放出されるＡＰＩの累積量は約４４％から５％に減少し、（微粒子）製剤＃０８では３４％から１０％に減少する。デポ製剤中のＡＰＩの７８％（＃０５Ｄ）および９６％（＃０８Ｄ）が１６８時間で放出されるのに対して、それら両方の微粒子製剤は１２０時間でＡＰＩの９６％超を放出したことから、総放出時間は増加する。この現象は、シリカ微粒子を取り囲むシリカハイドロゲルがバリアとして機能し、微粒子を固定化（locks-in-place）することから予想される。したがって、デポ製剤は、微粒子を溶出緩衝液中に分散させるのではなく、単一の固体として溶解する。これにより、製剤の反応性表面積が減少し、溶出速度も低下する。

【0164】

図１１および１２から、ＨＧ成分が微粒子製剤の溶出速度を少なくともある程度低下させることが明らかである。両方のデポ製剤でのシリカの溶出およびＡＰＩの放出において２４時間の時点までの短いラグタイムが観察される。

【0165】

Ｖ．レオロジー測定および注射可能性
プレフィルドシリンジに充填されたデポ製剤内の三次元ゲル構造の存在を示すために、振動測定（oscillatory measurement）を行った。粘弾性材料に関して、損失係数（ｔａｎδ＝Ｇ”／Ｇ’）が１より大きい場合、材料はより液体のように挙動する。他方、損失係数が１未満である場合、材料は半固体、例えばゲルのように挙動する。

【0166】

デポ製剤＃０５Ｄおよび＃０８Ｄについて、損失係数は、図１３に示される全周波数範囲において１未満である。したがって、三次元ゲル構造が形成され、静止時、すなわち貯蔵中のシリンジ内での粒子沈降を防止する。さらに、デポ製剤試料は、デポ製剤の良好な機械的強度を示す、周波数に依存しない適切な貯蔵弾性率（Ｇ’）値を誘発する。

【0167】

デポ製剤は、せん断速度の増加の関数として粘度が減少するので、せん断減粘特性を誘発する（図１４）。材料は静止時に固体であるため、粘度は低いせん断速度で高い。せん断速度が増加するにつれて、材料は流動し始める。このせん断減粘特性は、材料が、細い針を通してプレフィルドシリンジから注射され得ることを示す。注射処置の間、材料は、１０ ０００ １／ｓ～１００ ０００ １／ｓの範囲のせん断速度を受ける。本質的に、デポ製剤は、静止時に安定な固体様材料であり、応力を受けると液体として流動し始める。

【0168】

さらに、図１４に示されるせん断減粘現象がデポ製剤の良好な注射可能性と類似していることを示すために、細い皮下注射針を通した手動注射可能性試験（manual injectability test）を行った。注射可能性試験の結果を以下に示す。

【表9】

【0169】

実施例９：エラミプレチドを含む製剤
Ｉ．エラミプレチドを含むシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤
この研究で製造されたシリカ－エラミプレチド微粒子の組成を以下に示し、微粒子製剤のＡＰＩのシンク条件での累積放出を図１５～１７に示す。これらの図は、研究されたプロセスパラメータが製剤の放出プロファイルに及ぼす影響を示す。

【0170】

【表10】

【0171】

ＩＩ．エラミプレチドを含むシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤のシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出
ｉｎ ｖｉｔｒｏ溶出試験は、シンク条件で１６８時間（７日間）まで実施した。試験した全ての製剤（＃０１～＃０８）は、低いバースト放出（総ＡＰＩ含有量の５％未満）を有し、これはＡＰＩの良好な封入を示す。これは、ＡＰＩ含有量が２４時間の溶出後に検出限界を下回ることを示したエタノール溶出試験によっても確認された。

【0172】

シリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０１～＃０３からのｉｎ ｖｉｔｒｏでのシリカの累積溶出およびＡＰＩの累積放出の要約を図１５に示す。これらの微粒子製剤中のＡＰＩ搭載は２％であり、ｐＨは５．９で一定に保たれた。微粒子製剤の第１のＲ値は、シリカ溶出およびＡＰＩ放出のプロファイルに影響を及ぼした。第１のＲ値の低下は、より多くのヒドロキシル基がシリカマトリックス中に残るので、シリカマトリックスのより速い溶出速度をもたらした。７日以内に、最遅製剤（＃０１および＃０２）から約１０％のシリカマトリックスが溶出し、最速製剤（＃０３）から約６１％が溶出した。ＡＰＩ放出プロファイルはシリカ溶出プロファイルと相関し、総ＡＰＩ含有量の１５～７５％が７日以内に放出された。

【0173】

様々なｐＨでのシリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０３～＃０６からのｉｎ ｖｉｔｒｏでのシリカの累積溶出およびＡＰＩの累積放出の要約を図１６に示す。この研究では、製剤＃０３と＃０６との間でＡＰＩの放出速度およびシリカマトリックス溶出に有意差が見られる。７日以内に、製剤＃０３から約６１％のシリカマトリックスが溶出したのに対し、製剤＃０６から約１００％が溶出した。ＡＰＩ放出は、全ての研究された製剤でシリカの溶出と相関する。

【0174】

ＡＰＩ搭載％を２％から５％に増加させることについてＲ３－１００ベースの製剤で調べた（図１７）。製剤＃０５および＃０８はより速い製剤であり、それらの溶出プロファイルは類似しているようであるが、製剤＃０３と＃０７の間の差は有意である。溶出結果は、ＡＰＩ搭載を２％から５％に増加させることが、噴霧乾燥前のゾルのｐＨがより高い（ｐＨ＝５．９）場合、溶出速度に有意な影響を及ぼすことを示す。対照的に、より低いｐＨのゾルでは、ＡＰＩ搭載率は溶出プロファイルに有意な影響を及ぼさない。

【0175】

ＩＩＩ．粒径分布
開発されたシリカ－エラミプレチド微粒子製剤の粒径分布を以下に要約する。

【表11】

【0176】

Ｄ５０値は１０μｍ未満であるため（＃０６を除く）、全ての微粒子製剤の粒径は小さい。シリカ－ＡＰＩ微粒子製剤＃０５および＃０８は、シリカ溶出、ＡＰＩ放出および粒径分布に関して最も望ましい特徴を示したので、それらをデポ製剤開発において使用されるリード製剤として選択した。

【0177】

ＩＶ．シリカ－ＡＰＩ微粒子－シリカハイドロゲルデポ製剤
シリカ－エラミプレチド微粒子－シリカハイドロゲル（ＨＧ）製剤（すなわち、シリカ－エラミプレチドデポ製剤）の組成を以下に示す。

【表12】

【0178】

デポ製剤からのシリカマトリックスのシンク条件での累積溶出およびＡＰＩ放出速度を図１８および１９に示す。対応する微粒子製剤の放出速度も前記図に示し、微粒子製剤の溶出速度に対するＨＧ成分の影響を示す。微粒子がシリカＨＧ成分に組み込まれている場合、最初の２４時間以内に微粒子製剤＃０５から放出されるＡＰＩの累積量は約４７％から１４％に減少し、微粒子製剤＃０８では３４％から１４％に減少する。デポ製剤中のＡＰＩの８９％が１６８時間で放出されるのに対し、微粒子製剤は１２０時間でＡＰＩの９６％超を放出することから、製剤＃０５Ｄの総放出時間は増加する。この現象は、シリカ微粒子を取り囲むシリカハイドロゲルがバリアとして機能し、微粒子を固定化（locks-in-place）することから予想される。したがって、デポ製剤は、微粒子を溶出緩衝液中に分散させるのではなく、単一の固体として溶解する。これにより、製剤の反応性表面積が減少し、溶出速度も低下する。

【0179】

図１８および１９から、ＨＧ成分が微粒子製剤の溶出速度を少なくともある程度低下させることが明らかである。両方のデポ製剤でのシリカ溶出およびＡＰＩ放出において２４時間の時点までの短いラグタイムが観察される。

【0180】

Ｖ．レオロジー測定および注射可能性
プレフィルドシリンジに充填されたデポ製剤内の三次元ゲル構造の存在を示すために、振動測定を行った。粘弾性材料に関して、損失係数（ｔａｎδ＝Ｇ”／Ｇ’）が１より大きい場合、材料はより液体のように挙動する。他方、損失係数が１未満である場合、材料は半固体、例えばゲルのように挙動する。

【0181】

デポ製剤＃５Ｄおよび＃８Ｄについて、損失係数は、図２０に示される全周波数範囲において１未満である。したがって、三次元ゲル構造が形成され、静止時、すなわち貯蔵中のシリンジ内での粒子沈降を防止する。さらに、デポ製剤試料は、デポ製剤の良好な機械的強度を示す、周波数に依存しない適切な貯蔵弾性率（Ｇ’）値を誘発する。

【0182】

デポ製剤は、せん断速度の増加の関数として粘度が減少するので、せん断減粘特性を誘発する（図２１）。材料は静止時に固体であるため、粘度は低いせん断速度で高い。せん断速度が増加するにつれて、材料は流動し始める。このせん断減粘特性は、材料が、細い針を通してプレフィルドシリンジから注射され得ることを示す。注射処置の間、材料は、１００００ １／ｓ～１０００００ １／ｓの範囲のせん断速度を受ける。本質的に、デポ製剤は、静止時に安定な固体様材料であり、応力を受けると液体として流動し始める。

【0183】

さらに、図２１に示されるせん断減粘現象がデポ製剤の良好な注射可能性と類似していることを示すために、細い皮下注射針を通した手動注射可能性試験を行った。注射可能性試験の結果を以下に示す。

【表13】

【0184】

実施例１０：連続フローリアクターシステムを用いた製造
連続フローリアクターシステムを利用して、２％および５％のＡＰＩ搭載を用いて、エラミプレチドを含むシリカ－ＡＰＩ－シリカハイドロゲルコンポジット（デポ）の製造をスケールアップした。図７に概略図を示す。

【0185】

連続フロープロセスにおいて、シリカおよびＡＰＩのｐＨおよび濃度は、製造プロセスを通して一貫したままであった。

【0186】

【表14】

・製造された製剤＃０９のコンシステンシーバッチの粒径分布は類似しており、製剤＃１０－５のコンシステンシーバッチは同じ粒径分布を有する。
・連続フロープロセスは、より狭い粒径分布につながる反応時間のより良好な制御を可能にする。
・粒子のサイズ分布をＳｙｍｐａｔｅｃ ＨＥＬＯＳレーザー回折装置で測定した。
・一般に、本発明者らのシステムで製造されたシリカ微粒子の平均サイズは５±２μｍである（Ｄ５０、例えば粒子の５０％が示されたサイズ以下である）。
・図２２は、コンシステンシーバッチからの粒径分布のグラフを示す。
・図２３は、エラミプレチド微粒子製剤＃０９（２％ＡＰＩ搭載）および＃１０－５（５％ＡＰＩ搭載）のシンク条件でのｉｎ ｖｉｔｒｏ累積溶出を示す。
・連続フローリアクターシステムの製造プロセスはスケーラブルであり、図２４および２５に示すように、１０倍（１０ｘ）までスケールアップして実証された。
・プロセスは、２％および５％ＡＰＩペイロード材料を用いてバッチから連続フロープロセスへと首尾よく変更された。
・ｐＨならびにシリカおよびＡＰＩの濃度は、２％および５％のＡＰＩペイロード材料について、製造プロセスを通して一貫したままであった。
・製造された全ての微粒子製剤＃０９および＃１０－５のバッチは、ほぼ同一のＰＳＤプロファイル（第１の製造バッチの右側の肩のサイズのわずかな変動を除く）を有する。
・バッチサイズは、（実施可能性試験（feasibility study）のバッチサイズと比較して）１０倍（１０ｘ）まで首尾よく増加され、製造された製剤の溶出プロファイルは、２％ＡＰＩ製剤のコンシステンシーバッチと同じままであった。５％ＡＰＩ製剤については、１０ｘバッチはわずかに低い溶出プロファイルを有した。
・収集容器の温度制御は、５％ペイロード材料で見られた溶出の変化を防止した
・連続フロープロセスは、２％および５％のＡＰＩペイロードを含むシリカ－ＡＰＩ微粒子を製造する反復可能なプロセスである

【0187】

実施例１１：中等度加齢黄斑変性および高リスクドルーゼンにおけるエラミプレチドの第１相臨床試験データ
中等度加齢黄斑変性（ＡＭＤ）および高リスクドルーゼン（ＨＲＤ）を有する患者におけるエラミプレチドの皮下投与の安全性、忍容性（tolerability）および実施可能性（feasibility）を評価するために、第１相試験を実施した。ＲｅＣＬＡＩＭと題された本試験の結果は、Ophthalmology Science (M. J. Allingham, P.S. Mettu, and S. W. Cousins; Ophthalmology Science, Vol. 2, Issue 1, March 2022, 100095; https://doi.org/10.1016/j.xops.2021.100095; その全体が参照により本明細書に組み込まれる）において公開された。

【0188】

ＲｅＣＬＡＩＭ試験は、エラミプレチドが、ＡＭＤおよびＨＲＤの処置において安全でかつ忍容性が良好であることを実証した。

【0189】

実施例１２：エラミプレチド処置は、加齢に伴う視覚低下を遅らせるかまたは逆転させることができる。
エラミプレチドは、N.M. Alam, R. M. Douglas, and G. T. Prusky, Disease Models & Mechanisms (2021) 14, dmm048256. doi:10.1242/dmm.048256（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）において詳述されているように、加齢性視覚障害を処置するその能力について研究されている。

【0190】

著者らは、エラミプレチドが、明所視の加齢に伴う空間視力喪失（photopic age-related loss of spatial vision）を処置し、すなわち予防ならびに回復させ、明所視時間情報を処理する視覚系の能力を改善するの有効であることを決定した。実際、本研究は、エラミプレチド処置が、むしろ選択的に明所視機能の加齢に伴う喪失を改善するという行動証拠を明らかにした。

【0191】

参照による組み入れ
本明細書で引用される米国特許ならびに米国およびＰＣＴ公開特許出願の全てが、参照により本明細書に組み込まれる。

【0192】

均等物
前記の明細書は、当業者が本発明を実施するのに十分であると考えられる。実施例は、本発明の一態様の単なる例示として意図されており、他の機能的に等価な実施形態は本発明の範囲内にあるので、本発明は、提供される実施例によって範囲を限定されるものではない。本明細書に示されおよび記載されるものに加えて、本発明の様々な改変は、前述の説明から当業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲内に含まれる。本発明の利点および目的は、必ずしも本発明の各実施形態によって包含されるわけではない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25-1】

【図25-2】

【国際調査報告】