特表 2024-515459 アフリベルセプトをコードするＡＡＶ２バリアントを使用する眼疾患の治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-04-10

(54)【発明の名称】アフリベルセプトをコードするＡＡＶ２バリアントを使用する眼疾患の治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/76 20150101AFI20240403BHJP

   A61P 27/06 20060101ALI20240403BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20240403BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240403BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20240403BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240403BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20240403BHJP

   C12N 7/01 20060101ALI20240403BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20240403BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240403BHJP

   C12N 15/12 20060101ALI20240403BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240403BHJP

   C07K 16/00 20060101ALI20240403BHJP

   C07K 14/71 20060101ALI20240403BHJP

   C12N 15/864 20060101ALI20240403BHJP

【ＦＩ】

A61K35/76

A61P27/06

A61K48/00

A61P43/00 121

A61K31/573

A61K45/00

A61K38/17

C12N7/01 ZNA

C12N15/62 Z

C12N15/13

C12N15/12

C07K19/00

C07K16/00

C07K14/71

C12N15/864 100Z

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023558203

(86)(22)【出願日】2022-04-26

(85)【翻訳文提出日】2023-09-21

(86)【国際出願番号】 US2022071937

(87)【国際公開番号】W WO2022232790

(87)【国際公開日】2022-11-03

(31)【優先権主張番号】63/180,646

(32)【優先日】2021-04-27

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516279086

【氏名又は名称】アドヴェラム バイオテクノロジーズ， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】クラーク， ジュリー

(72)【発明者】

【氏名】ウィットカップ， スコット

(72)【発明者】

【氏名】トゥルプク， アダム

【テーマコード（参考）】

4B065

4C084

4C086

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA95X

4B065AB01

4B065AC14

4B065AC20

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA25

4B065CA44

4B065CA46

4C084AA13

4C084AA19

4C084BA44

4C084MA02

4C084MA58

4C084NA05

4C084ZA331

4C084ZA332

4C084ZC751

4C086AA01

4C086AA02

4C086DA10

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA58

4C086NA05

4C086ZA33

4C086ZC75

4C087AA01

4C087AA02

4C087BC83

4C087MA02

4C087MA58

4C087NA05

4C087NA14

4C087ZA33

4C087ZC75

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA50

4H045DA76

4H045EA21

4H045FA74

(57)【要約】

個体における眼疾患の治療方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の眼に投与することを含み、上記ｒＡＡＶ粒子が、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む、上記方法が提供される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

個体における緑内障の治療方法であって、
単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を前記個体の一方の眼に投与することを含み、
前記個体がヒトであり、
前記ｒＡＡＶ粒子が、
ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、
ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）と
を含む、前記方法。

【請求項2】

前記緑内障が血管新生緑内障である、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

個体における眼圧の低減方法であって、
単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を前記個体の一方の眼に投与することを含み、
前記個体がヒトであり、
前記ｒＡＡＶ粒子が、
ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、
ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）と
を含む、前記方法。
［請求項３．ａ］
個体における眼圧の低減方法であって、
単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記個体の一方の眼に投与することを含み、
前記個体がヒトであり、
前記ｒＡＡＶ粒子が、
ａ）毛様体において活性である強力なプロモーターの制御下にあるポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、
ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）と
を含む、前記方法。

【請求項4】

前記個体が緑内障を有する、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記緑内障が血管新生緑内障である、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）以下である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約６×１０^１０～約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約６×１０^１０～約２×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約２×１０^１１～約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約２×１０^１１または約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約２×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記ｒＡＡＶ粒子の単位用量が、眼当り約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記個体の対側の眼に投与することをさらに含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記対側の眼に前記投与することが、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記一方の眼に投与することの最大で約２週間後である、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

（ａ）前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記対側の眼に前記投与することが、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記一方の眼に前記投与することと同日であるか、または
（ｂ）前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記対側の眼に前記投与することが、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記一方の眼に前記投与することの約１日後～約１４日後である、
請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記個体の前記対側の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が、前記個体の前記一方の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子と同一であるか、またはそれよりも少ない眼当りのベクターゲノム（ｖｇ／眼）を含む、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記対側の眼に前記投与することが、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を前記一方の眼に投与することの少なくとも約２週間後である、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

前記個体の対側の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が、前記個体の前記一方の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子よりも多くの眼当りのベクターゲノム（ｖｇ／眼）を含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項19】

前記核酸が、配列番号４０の核酸配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記ポリペプチドが配列番号３５のアミノ酸配列を含む、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記ポリペプチドが配列番号４１のアミノ酸配列を含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記ポリペプチドがアフリベルセプトである、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記核酸が、第１のエンハンサー領域、プロモーター領域、５’ＵＴＲ領域、第２のエンハンサー領域、及びポリアデニル化部位をさらに含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記核酸が、５’から３’の順に、
（ａ）第１のエンハンサー領域と、
（ｂ）プロモーター領域と、
（ｃ）５’ＵＴＲ領域と、
（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸と、
（ｅ）第２のエンハンサー領域と、
（ｆ）ポリアデニル化部位と
を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれている、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記第１のエンハンサー領域が、配列番号２２の配列もしくは前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む、請求項２３または請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

前記プロモーター領域が、配列番号２３の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む、請求項２３～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

ポリペプチドをコードする前記核酸が、配列番号４０の核酸配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む、請求項２４～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

前記ポリペプチドが、配列番号３５のアミノ酸配列または前記配列と少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む、請求項２４～２７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項29】

前記ポリペプチドが、配列番号４１のアミノ酸配列または前記配列と少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む、請求項２４～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記ポリペプチドがアフリベルセプトである、請求項２４～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記５’ＵＴＲ領域が、５’から３’の順に、配列番号２４の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＴＰＬ配列と、配列番号２５の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むｅＭＬＰ配列とを含む、請求項２３～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記第２のエンハンサー領域が、配列番号２６の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む全長のＥＥＳ配列を含む、請求項２３～３１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記ポリアデニル化部位が、配列番号２７の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＨＧＨポリアデニル化部位を含む、請求項２３～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

前記核酸が、
（ａ）配列番号２２の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む第１のエンハンサー領域と、
（ｂ）配列番号２３の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含むプロモーター領域と、
（ｃ）５’から３’の順に、配列番号２４の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＴＰＬ配列、及び配列番号２５の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むｅＭＬＰ配列を含む５’ＵＴＲ領域と、
（ｄ）配列番号２６の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む全長のＥＥＳ配列を含む第２のエンハンサー領域と、
（ｅ）配列番号２７の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＨＧＨポリアデニル化部位と
をさらに含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項35】

前記核酸が、配列番号３９の配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む、請求項１～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質が、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質が、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質が、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む、請求項１～３７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

前記ｒＡＡＶ粒子が、配列番号３８のアミノ酸配列または配列番号３８と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＧＨループを含むＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質を含む、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子の前記一方の眼及び／または前記対側の眼への前記投与が硝子体内投与による、請求項１～３９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が医薬製剤中に存在する、請求項１～４０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項42】

前記医薬製剤が、前記ｒＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、及び界面活性剤を含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記医薬製剤が、約１５０～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８、及びｍＬ当り約６×１０^１３～約６×１０^１０ベクターゲノム（ｖｇ）（ｖｇ／ｍＬ）の前記ｒＡＡＶ粒子を含み、前記医薬製剤のｐＨが約７．０～約７．５である、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

前記医薬製剤が、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬの前記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、前記医薬製剤のｐＨが約７．３である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記医薬製剤が、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約２×１０^１２ｖｇ／ｍＬの前記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、前記医薬製剤のｐＨが約７．３である、請求項４３に記載の方法。

【請求項46】

前記医薬製剤が、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬの前記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、前記医薬製剤のｐＨが約７．３である、請求項４３に記載の方法。

【請求項47】

前記一方の眼及び／または前記対側の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が、約２５μＬ～約２５０μＬの体積中に存在する、請求項１～４６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項48】

前記一方の眼及び／または前記対側の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が、約１００μＬの体積を含む、請求項４７に記載の方法。

【請求項49】

前記一方の眼及び／または前記対側の眼に投与される前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が、約３０μＬの体積を含む、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

前記個体が以前に抗ＶＥＧＦ剤による眼内血管新生疾患の治療を受けていた、請求項１～４９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項51】

前記個体が、前記ｒＡＡＶ粒子の前記一方の眼及び／もしくは前記対側の眼への投与の前に、前記一方の眼及び／もしくは前記対側の眼への抗ＶＥＧＦ剤の注射を１回または２回受けたことがある、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

前記抗ＶＥＧＦ剤がアフリベルセプトである、請求項５０または５１に記載の方法。

【請求項53】

前記個体が以前に抗ＶＥＧＦ剤による眼内血管新生疾患の治療を受けていない、請求項１～４９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項54】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子が抗ＶＥＧＦ剤の投与との併用で投与される、請求項１～５３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項55】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を、前記抗ＶＥＧＦ剤の投与の約１週間後または約７日後に、前記個体の前記一方の眼に投与することを含む、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

前記抗ＶＥＧＦ剤を１日目に前記個体の前記一方の眼に投与することと、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子を８日目に前記個体の前記一方の眼に投与することとを含む、請求項５４または請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

前記抗ＶＥＧＦ剤がアフリベルセプトを含む、請求項５４～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項58】

前記アフリベルセプトが硝子体内注射により約２ｍｇの用量で投与される、請求項５７に記載の方法。

【請求項59】

前記単位用量のｒＡＡＶ粒子がステロイド治療との併用で投与される、請求項１～５８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記ステロイド治療がコルチコステロイド治療である、請求項５９に記載の方法。

【請求項61】

前記ステロイド治療が全身性ステロイド治療である、請求項５９または請求項６０に記載の方法。

【請求項62】

前記ステロイド治療が経口ステロイド治療である、請求項５９～６１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項63】

前記ステロイド治療がプレドニゾン治療である、請求項５９～６２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項64】

前記ステロイド治療が局所ステロイド治療である、請求項５９または請求項６０に記載の方法。

【請求項65】

前記ステロイド治療がジフルプレドナート治療である、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記ステロイドが、前記単位用量のｒＡＡＶ粒子の前記一方の眼及び／または前記対側の眼への投与の前、投与の間、及び／または投与の後に投与される、請求項５９～６５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項67】

前記局所ステロイドが約１μｇ～約３μｇの用量のジフルプレドナート０．０５％を含む、請求項６４～６６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項68】

前記局所ステロイドが約２．５μｇの用量のジフルプレドナート０．０５％を含む、請求項６４～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項69】

個体における緑内障の治療方法における使用のための、約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ）以下の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子の単位用量であって、
前記方法が前記単位用量を前記個体の一方の眼に投与することを含み、
前記個体がヒトであり、
前記ｒＡＡＶ粒子が、
ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、
ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）と
を含む、
前記単位用量。

【請求項70】

眼圧の低減方法を必要とする個体での眼圧の低減方法における使用のためのｒＡＡＶ粒子の単位用量であって、
前記方法が前記単位用量を前記個体の一方の眼に投与することを含み、
前記個体がヒトであり、
前記ｒＡＡＶ粒子が、
ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、
ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、前記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む前記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、前記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）と
を含む、
前記単位用量。

【請求項71】

前記個体が緑内障を有する、請求項７０に記載の単位用量。

【請求項72】

前記緑内障が血管新生緑内障である、請求項６９または７１の単位用量。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年４月２７日出願の米国仮特許出願第６３／１８０，６４６号の利益及び優先権を主張し、上記出願の開示は、その全体が本明細書に援用される。

【0002】

ＡＳＣＩＩテキストファイルによる配列表の提出物
以下のＡＳＣＩＩテキストファイルによる提出物、すなわち、コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：６２７００２００１３４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２２年４月２６日、サイズ：４１，４９３バイト）は、その全体が本明細書に援用される。

【0003】

技術分野
本開示は、個体における眼疾患及び眼障害の治療方法であって、単回の単位用量の、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を個体の眼に投与することを含む上記方法に関する。

【背景技術】

【0004】

アフリベルセプトは、血管内皮増殖因子サブタイプＡ及びＢ（ＶＥＧＦ－Ａ及びＶＥＧＦ－Ｂ）ならびに胎盤増殖因子（ＰＧＦ）のデコイ受容体として作用する組換え融合タンパク質である。アフリベルセプトは、これらのリガンドに結合することによって、該リガンドが血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）、ＶＥＧＦＲ－１、及びＶＥＧＦＲ－２に結合するのを防止して、とりわけ血管新生を抑制し、血管透過性を低下させることができる。アフリベルセプトは、ＩｇＧ１のＦｃフラグメントに融合したＶＥＧＦＲ－１のドメイン２及びＶＥＧＦＲ－２のドメイン３からなる。

【0005】

現在の標準治療のアフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤は、最適な治療転帰を達成するため及び視力を維持するためには、硝子体内（ＩＶＴ）注射を介して４～８週間毎に再投与する必要がある。かかる投薬計画の遵守は、患者、患者の介護者、及び保健システムにとって煩わしく、ほとんどの患者が時間の経過と共に最適な投薬計画の遵守から外れ、これは視覚喪失と相関する（Ｋｈａｎａｎｉ ＡＭ， ｅｔ ａｌ．）。加えて、眼内炎、網膜剥離、外傷性白内障、及び眼圧（ＩＯＰ）上昇を含む合併症が存在し、これらの合併症のリスクはＩＶＴ注射を繰り返すことによって高まる可能性がある（Ｆａｌａｖａｒｊａｎｉ ｅｔ ａｌ．， （２０１３） Ｅｙｅ （Ｌｏｎｄ）， ２７（７）：７８７－７９４）。
したがって、本技術分野では、有効であり、有害作用のリスクが低く、且つ患者が長期間にわたって高い服薬遵守を受け入れやすい眼疾患の治療法が必要とされている。
眼障害を治療するための、アフリベルセプトをコードするＡＡＶの使用は、米国特許出願第１７／０１７，４６９号、ＷＯ２０２１／０５００９４、及びＷＯ２０２１／０５０６４９（それらの全体が援用される）に記載される。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】国際公開第２０２１／０５００９４号

【特許文献2】国際公開第２０２１／０５０６４９号

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Ｆａｌａｖａｒｊａｎｉ ｅｔ ａｌ．， （２０１３） Ｅｙｅ （Ｌｏｎｄ）， ２７（７）：７８７－７９４）

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

いくつかの態様において、本発明は、個体における緑内障の治療方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態において、上記緑内障は血管新生緑内障である。いくつかの態様において、本発明は、個体における眼圧の低減方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態において、上記個体は緑内障を有する。いくつかの実施形態において、上記緑内障は血管新生緑内障である。

【0009】

本発明のいくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）以下である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約６×１０^１０～約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約６×１０^１０～約２×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約２×１０^１１～約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約２×１０^１１または約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約２×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、眼当り約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ／眼）である。

【0010】

いくつかの実施形態において、方法は、単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の対側の眼に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に上記投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大で約２週間後である。いくつかの実施形態において、方法は以下を含む。（ａ）上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に上記投与することであって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に上記投与することと同日であるか、または（ｂ）上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に上記投与することであって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に上記投与することの約１日後～約１４日後である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の上記一方の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子と同一であるか、またはそれよりも少ない眼当りのベクターゲノム（ｖｇ／眼）を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に上記投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの少なくとも約２週間後である。いくつかの実施形態において、上記個体の対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の上記一方の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子よりも多くの眼当りのベクターゲノム（ｖｇ／眼）を含む。

【0011】

本発明のいくつかの実施形態において、上記核酸は、配列番号４０の核酸配列または前記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは配列番号３５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは配列番号４１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドはアフリベルセプトである。

【0012】

本発明のいくつかの実施形態において、上記核酸は、第１のエンハンサー領域、プロモーター領域、５’ＵＴＲ領域、第２のエンハンサー領域、及びポリアデニル化部位をさらに含む。いくつかの実施形態において、上記核酸は、５’から３’の順に、（ａ）第１のエンハンサー領域と、（ｂ）プロモーター領域と、（ｃ）５’ＵＴＲ領域と、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸と、（ｅ）第２のエンハンサー領域と、（ｆ）ポリアデニル化部位とを含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれている。いくつかの実施形態において、上記第１のエンハンサー領域は、配列番号２２の配列もしくは上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む。いくつかの実施形態において、上記プロモーター領域は、配列番号２３の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む。いくつかの実施形態において、ポリペプチドをコードする上記核酸は、配列番号４０の核酸配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは、配列番号３５のアミノ酸配列または上記配列と少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列または上記配列と少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドはアフリベルセプトである。いくつかの実施形態において、上記５’ＵＴＲ領域は、５’から３’の順に、配列番号２４の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＴＰＬ配列と、配列番号２５の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むｅＭＬＰ配列とを含む。いくつかの実施形態において、上記第２のエンハンサー領域は、配列番号２６の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む全長のＥＥＳ配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリアデニル化部位は、配列番号２７の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＨＧＨポリアデニル化部位を含む。いくつかの実施形態において、上記核酸は、（ａ）配列番号２２の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含む第１のエンハンサー領域と、（ｂ）配列番号２３の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＣＭＶ配列を含むプロモーター領域と、（ｃ）５’から３’の順に、配列番号２４の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＴＰＬ配列、及び配列番号２５の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むｅＭＬＰ配列を含む５’ＵＴＲ領域と、（ｄ）配列番号２６の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む全長のＥＥＳ配列を含む第２のエンハンサー領域と、（ｅ）配列番号２７の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むＨＧＨポリアデニル化部位とをさらに含む。いくつかの実施形態において、上記核酸は、配列番号３９の配列または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む。

【0013】

本発明のいくつかの実施形態において、上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質は、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）。いくつかの実施形態において、上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む。いくつかの実施形態において、上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３８のアミノ酸配列または配列番号３８と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＧＨループを含むＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質を含む。

【0014】

本発明のいくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の前記一方の眼及び／または前記対側の眼への前記投与は硝子体内投与による。

【0015】

本発明のいくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は医薬製剤中に存在する。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、前記ｒＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、及び界面活性剤を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１５０～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８、及びｍＬ当り約６×１０^１３～約６×１０^１０ベクターゲノム（ｖｇ）（ｖｇ／ｍＬ）の前記ｒＡＡＶ粒子を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬの前記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約２×１０^１２ｖｇ／ｍＬの上記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬの上記ｒＡＡＶ粒子、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。

【0016】

本発明のいくつかの実施形態において、上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約２５μＬ～約２５０μＬの体積中に存在する。いくつかの実施形態において、上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約１００μＬの体積を含む。いくつかの実施形態において、上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約３０μＬの体積を含む。

【0017】

本発明のいくつかの実施形態において、上記個体は以前に抗ＶＥＧＦ剤による眼内血管新生疾患の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記ｒＡＡＶ粒子の上記一方の眼及び／もしくは上記対側の眼への投与の前に、上記一方の眼及び／もしくは上記対側の眼への抗ＶＥＧＦ剤の注射を１回または２回受けたことがある。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤はアフリベルセプトである。

【0018】

本発明のいくつかの実施形態において、上記個体は以前に抗ＶＥＧＦ剤による眼内血管新生疾患の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は抗ＶＥＧＦ剤の投与との併用で投与される。いくつかの実施形態において、上記方法は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を、上記抗ＶＥＧＦ剤の投与の約１週間後または約７日後に、上記個体の上記一方の眼に投与することを含む。いくつかの実施形態において、上記方法は、上記抗ＶＥＧＦ剤を１日目に上記個体の上記一方の眼に投与することと、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を８日目に上記個体の上記一方の眼に投与することとを含む。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤はアフリベルセプトを含む。いくつかの実施形態において、上記アフリベルセプトは硝子体内注射により約２ｍｇの用量で投与される。

【0019】

本発明のいくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子はステロイド治療との併用で投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はコルチコステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は全身性ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は経口ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は局所ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はジフルプレドナート治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記一方の眼及び／または上記対側の眼への投与の前、投与の間、及び／または投与の後に投与される。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは約１μｇ～約３μｇの用量のジフルプレドナート０．０５％を含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは約２．５μｇの用量のジフルプレドナート０．０５％を含む。

【0020】

いくつかの態様において、本発明は、個体における緑内障の治療方法における使用のための、約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ）以下の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子の単位用量であって、上記方法が上記単位用量を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む、上記単位用量を提供する。いくつかの態様において、本発明は、眼圧の低減方法を必要とする個体での眼圧の低減方法における使用のためのｒＡＡＶ粒子の単位用量であって、上記方法が上記単位用量を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であり、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む、上記単位用量を提供する。いくつかの実施形態において、上記個体は緑内障を有する。いくつかの実施形態において、上記緑内障は血管新生緑内障である。

【0021】

援用
本明細書に引用される、特許出願及び刊行物を含む全ての参考文献は、それらの全体が援用される。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】アフリベルセプトの核酸配列（配列番号３６）を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0023】

例証のための例としての応用を参照して、いくつかの態様を以下に記載する。多数の具体的な詳細、関係、及び方法が、本明細書に記載される特徴を十分に理解するために記載されることを理解する必要がある。但し、関連技術分野の当業者であれば、１つ以上の具体的な詳細が記載されなくとも、または他の方法により、本明細書に記載の特徴を実施することが可能であることを容易に認識しよう。本明細書に記載の特徴は、例証される行為または事象の順序に限定されない。というのも、一部の行為は異なる順序で、及び／または他の行為もしくは事象と同時に行われてもよいことによる。さらに、本明細書に記載の特徴に従って方法論を実施するためには、必ずしも全ての例証される行為または事象が必要とされるわけではない。

【0024】

定義
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語は、当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。

【0025】

本明細書で使用される用語は、単に特定の例を説明する目的のためであり、限定することを意図しない。本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈による明確な別段の指示がない限り、複数形も同様に含むことが意図される。さらに、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「有する（ｗｉｔｈ）」という用語もしくはその変化形を、詳細な説明及び／または特許請求の範囲のいずれかで使用する場合、そのような用語は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語と類似の意味合いで包括的であることが意図される。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、本明細書で使用される場合、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」または「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」と同義であり、包括的すなわちオープンエンドである。

【0026】

本明細書において「または」という言及は、別段の明示がない限り、「及び／または」を包含することが意図される。本明細書で使用される場合、用語「「約」＋数字」は、その数字の±１０％の数字を指す。「「約」＋数値またはパラメータ」への言及は、本明細書では、その値またはパラメータそれ自体を指す実施形態を含む（及び記載する）。

【0027】

「対象」、「患者」、または「個体」という用語は、霊長動物、例えばヒト及び非ヒト霊長動物、例えばアフリカミドリザル及びアカゲザルを指す。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。

【0028】

「治療する」、「治療すること」、「治療」、「改善する」、または「改善すること」という用語及び他の文法上の等価物は、本明細書で使用される場合、眼疾患もしくは障害、または眼疾患もしくは障害の症状を軽減する、弱める、または改善すること、眼疾患もしくは障害の追加の症状を防止すること、症状の根源となる代謝上の原因を改善または防止すること、眼疾患もしくは障害を阻害すること、例えば眼疾患もしくは障害の発生を停止させること、眼疾患もしくは障害を緩和すること、眼疾患もしくは障害を退縮させること、あるいは眼疾患もしくは障害の症状を停止させることを指し、予防を含むことが意図される。上記用語は、治療上の利益及び／または予防上の利益を達成することをさらに含む。「治療上の利益」という用語は、治療を受ける眼疾患もしくは障害の根絶または改善を指す。治療上の利益は、いくつかの実施形態において、当該対象が当該眼疾患または障害になおも罹患しているにもかかわらず、該対象において改善が観察されるような、当該眼疾患もしくは障害に関連する１つ以上の生理学的症状の根絶または改善によっても達成される。予防上の利益については、当該眼疾患もしくは障害を発症するリスクがある対象、または当該眼疾患もしくは障害の１つ以上の生理学的症状を訴える対象に、当該疾患もしくは障害との診断が行われていない場合であっても、医薬組成物が投与される。

【0029】

「投与する」、「投与すること」、「投与」等という用語は、本明細書で使用される場合、生物学的作用が所望される部位への治療薬または医薬組成物の送達を可能にするために使用される方法を指す場合がある。これらの方法は眼への硝子体内または網膜下注射を含む。

【0030】

「有効量」、「治療有効量」、または「薬学的有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、治療を受ける眼疾患もしくは障害の１つ以上の症状をある程度軽減することになるのに十分な、投与される少なくとも１種の医薬組成物または化合物の量を指す場合がある。「有効量」、「治療有効量」、または「薬学的有効量」の医薬組成物が、それを必要とする対象に単位用量（本明細書の他所においてさらに詳細に説明する）として投与されてもよい。

【0031】

「薬学的に許容される」という用語は、本明細書で使用される場合、担体または希釈剤などの物質であって、本明細書に開示される化合物の生物学的活性または特性を抑制せず、且つ比較的に非毒性である（すなわち、当該物質が個体に投与される際に、該物質は、望ましくない生物学的作用を生じさせないのみならず、該物質を含有する組成物の構成成分のいずれとも有害な形態で相互作用することがない）上記物質を指す場合がある。

【0032】

「医薬組成物」または単に「組成物」という用語は、本明細書で使用される場合、任意選択で、担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、賦形剤等などの、但しこれらに限定されない少なくとも１種の薬学的に許容される化学成分と混合された、生物学的に活性な化合物を指す場合がある。

【0033】

「ＡＡＶベクター」または「ｒＡＡＶベクター」は、本明細書で使用される場合、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターまたは組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）ベクターであって、標的細胞中へのまたは標的組織への形質導入のための、ＡＡＶ起源ではないポリヌクレオチド配列（例えば、治療用導入遺伝子、例えばアフリベルセプトをコードする核酸配列などの、ＡＡＶに対して異種のポリヌクレオチド）を含む上記ベクターを指す。一般的に、異種ポリヌクレオチドは、少なくとも１つの、一般には２つのＡＡＶ逆位末端反復配列（ＩＴＲ）が隣接する。上記ｒＡＡＶベクターという用語は、ｒＡＡＶベクター粒子及びｒＡＡＶベクタープラスミドの両方を包含する。ｒＡＡＶベクターは、一本鎖（ｓｓＡＡＶ）または自己相補的（ｓｃＡＡＶ）のいずれであってもよい。

【0034】

「ＡＡＶウイルス」または「ＡＡＶウイルス粒子」または「ｒＡＡＶベクター粒子」または「ｒＡＡＶ粒子」は、少なくとも１種のＡＡＶカプシドタンパク質及びポリヌクレオチドｒＡＡＶベクターを含むウイルス粒子を指す。いくつかの場合、上記少なくとも１種のＡＡＶカプシドタンパク質は、野生型ＡＡＶに由来するか、またはバリアントＡＡＶカプシドタンパク質（例えば、挿入、例えば以下に記載される７ｍ８アミノ配列の挿入を伴うＡＡＶカプシドタンパク質）である。上記粒子が異種ポリヌクレオチド（例えば、標的細胞または標的組織に送達される導入遺伝子などの野生型ＡＡＶゲノム以外のポリヌクレオチド）を含む場合には、「ｒＡＡＶ粒子」、「ｒＡＡＶベクター粒子」、または「ｒＡＡＶベクター」と呼ばれる。このように、かかるベクターはｒＡＡＶ粒子内に含まれることから、ｒＡＡＶ粒子の産生はｒＡＡＶベクターの産生を必然的に含む。

【0035】

「パッケージング」という用語は、本明細書で使用される場合、ｒＡＡＶ粒子のアセンブリ及びカプシド形成を生じさせることができる、一連の細胞内事象を指す場合がある。

【0036】

ＡＡＶ「ｒｅｐ」及び「ｃａｐ」遺伝子は、アデノ随伴ウイルスの複製及びカプシド形成タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を指す。ＡＡＶ ｒｅｐ及びｃａｐは、本明細書においてＡＡＶ「パッケージング遺伝子」と呼ばれる。

【0037】

「ポリペプチド」という用語は、天然に存在するもの及び天然に存在しないものの両方の、タンパク質、ペプチド、フラグメント、突然変異体、それらの誘導体及び類似体を包含する場合がある（天然に存在しないタンパク質の例は融合タンパク質である）。ポリペプチドは、単量体、二量体、三量体、またはポリマーであってもよい。さらに、ポリペプチドは、いくつかの異なるドメインであって、それぞれが１つ以上の異なる活性を有する上記ドメインを含んでいてもよい。疑義を回避するために、「ポリペプチド」は２つアミノ酸よりも長い任意の長さであってよい。

【0038】

本明細書で使用される場合、「ポリペプチドバリアント」または単純に「バリアント」は、その配列がアミノ酸修飾を含むポリペプチドを指す。いくつかの実施形態において、上記修飾は、天然のすなわち野生型のタンパク質などの比較タンパク質またはポリペプチドのアミノ酸配列と比較しての、１つ以上のアミノ酸の挿入、重複、欠失、再配列、あるいは置換である。バリアントは、１つ以上のアミノ酸点置換（ある位置で単一のアミノ酸が別のアミノ酸に変化している）、１つ以上の挿入及び／もしくは欠失（比較タンパク質の配列において、１つ以上のアミノ酸がそれぞれ、挿入されているもしくは欠失している）、ならびに／またはアミノ末端もしくはカルボキシ末端のいずれかもしくは両方におけるアミノ酸配列のトランケーションを有していてもよい。バリアントは、比較タンパク質または非修飾タンパク質と比較して、同様のまたは異なる生物学的活性を有していてもよい。

【0039】

いくつかの実施形態において、バリアントは、例えば、その対応する比較タンパク質と少なくとも約８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の全体的な配列相同性を有していてもよい。いくつかの実施形態において、バリアントは、野生型タンパク質と少なくとも約９０％の全体的な配列相同性を有していてもよい。いくつかの実施形態において、バリアントは、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．５％、または少なくとも約９９．９％の全体的な配列同一性を示す。

【0040】

本明細書で使用される場合、「組換え」は、遺伝子あるいはタンパク質などの生体分子であって、（１）上記生体分子が天然に存在する環境から取り出されている、（２）天然において上記遺伝子が存在するポリヌクレオチドの全てもしくは一部に連結していない、（３）天然において上記生体分子が連結していないポリヌクレオチドに作動可能に連結している、または（４）天然に存在しない、上記遺伝子あるいはタンパク質などの生体分子を指す場合がある。「組換え」という用語は、クローニングされたＤＮＡ単離物、化学合成されたポリヌクレオチド類似体、もしくは異種系によって生物学的に合成されたポリヌクレオチド類似体、ならびにかかる核酸によってコードされるタンパク質及び／またはｍＲＮＡに関連して使用することができる。したがって、例えば、微生物によって合成されるタンパク質は、例えばそれが細胞中に存在する組換え遺伝子から合成されるｍＲＮＡから合成される場合、組換えである。

【0041】

「抗ＶＥＧＦ剤」という用語は、ｉｎ ｖｉｖｏで内因性ＶＥＧＦ及び／もしくは内因性ＶＥＧＦ受容体（ＶＥＧＦＲ）の活性または機能、またはＶＥＧＦ－ＶＥＧＦＲ相互作用もしくは経路を低減する、妨害する、破壊する、遮断する、及び／または阻害することができるタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、融合タンパク質、多量体タンパク質、遺伝子産物、抗体、ヒトモノクローナル抗体、抗体フラグメント、アプタマー、小分子、キナーゼ阻害剤、受容体もしくは受容体フラグメント、あるいは核酸分子を含む任意の治療薬を含む。抗ＶＥＧＦ剤は、ｉｎ ｖｉｖｏで細胞、組織、または対象に送達された場合に、新たな血管の増殖もしくは形成及び／または浮腫もしくは腫脹を低減させることができる公知の治療薬、例えばラニビズマブ、ブロルシズマブ、またはベバシズマブの任意の１種であってよい。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤は、天然に存在するもの、天然に存在しないもの、または合成されたものであってよい。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤は、天然に存在する分子に由来するものであってもよく、その後抗ＶＥＧＦ活性を付与するように修飾または変異させたものであってもよい。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤は融合タンパク質またはキメラタンパク質である。かかるタンパク質においては、機能性ドメインまたはポリペプチドを部分またはポリペプチドに人為的に融合させて、ｉｎ ｖｉｖｏでＶＥＧＦを隔離する、もしくはＶＥＧＦＲデコイとして機能することができる融合タンパク質またはキメラタンパク質を作製する。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤は、内因性ＶＥＧＦＲをそのリガンドと相互作用しないように遮断する融合タンパク質またはキメラタンパク質である。

【0042】

本明細書で使用される場合、「ＶＥＧＦ」は、別段の必要性がない限り、ＶＥＧＦ－Ａ、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ、ＶＥＧＦ－Ｅ、ＶＥＧＦ－Ｆ、またはそれら任意の組合せ、または任意の機能性フラグメントもしくはバリアントを含む、但しこれらに限定されない、ＶＥＧＦの任意のアイソフォームを指す場合がある。「ＶＥＧＦ」は、別段の必要性がない限り、ＶＥＧＦ－Ａ、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ、ＶＥＧＦ－Ｅ、ＶＥＧＦ－Ｆ、メンバー、すなわち、ＶＥＧＦ－Ａ、胎盤増殖因子（ＰＧＦ）、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、及びＶＥＧＦ－Ｄ、またはそれら任意の組合せ、機能性フラグメント、もしくはバリアントを含むＶＥＧＦファミリーの任意のメンバーを指す場合がある。本明細書で使用される場合、「ＶＥＧＦ受容体」または「ＶＥＧＦＲ」もしくは「ＶＥＧＦ－Ｒ」は、ＶＥＧＦＲ－１（またはＦｌｔ－１）、ＶＥＧＦＲ－２（またはＦｌｋ－１／ＫＤＲ）、及びＶＥＧＦＲ－３（またはＦｌｔ－４）を含む、但しこれらに限定されないＶＥＧＦの受容体のいずれか１種指すために使用される場合がある。ＶＥＧＦＲは、膜結合型もしくは可溶性型、または受容体の機能性フラグメントもしくはトランケーション型であってよい。抗ＶＥＧＦ剤の例としては、ラニビズマブ、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、またはそれらの任意の組合せ、バリアント、もしくは機能性フラグメントが挙げられるが、これらに限定はされない。

【0043】

「作動可能に連結された（ｏｐｅｒａｔｉｖｅｌｙ ｌｉｎｋｅｄ）」または「作動可能に連結された（ｏｐｅｒａｂｌｙ ｌｉｎｋｅｄ）」または「カップリングされた」とは、遺伝子の構成要素の並置であって、上記構成要素が、該構成要素を予想される様式で作動させることが可能な関係にある上記並置を指す場合がある。例えば、プロモーターは、該プロモーターがコード配列の転写の開始を支援する場合、上記コード領域に作動可能に連結されてもよい。この機能性関係が維持される限り、上記プロモーターとコード領域の間に介在残基が存在していてもよい。

【0044】

「発現ベクター」または「発現構築物」または「カセット」または「プラスミド」または単に「ベクター」という用語は、遺伝子産物であり、該遺伝子産物中の配列をコードする核酸の一部もしくは全てが転写可能であり、且つ遺伝子治療に適合する上記遺伝子産物をコードする核酸またはポリヌクレオチドを含むＡＡＶあるいはｒＡＡＶベクターを含む、任意のタイプの遺伝子構築物を含んでいてもよい。上記転写物をタンパク質に翻訳することができる。いくつかの実施形態において、上記転写物は部分的に翻訳されるかまたは翻訳されない。特定の態様において、発現は、遺伝子の転写及びｍＲＮＡの遺伝子産物への翻訳の両方を含む。他の態様において、発現は、対象の遺伝子をコードする核酸の転写のみを含む。発現ベクターはまた、標的細胞におけるタンパク質の発現を容易にするために、コード領域に作動可能に連結された制御成分を含んでいてもよい。制御成分と、該制御成分が発現のために作動可能に連結される遺伝子または複数の遺伝子との組合せは、場合により「発現カセット」と呼ばれる場合があり、その多くは当技術分野で公知であり且つ利用可能であるか、または当技術分野で利用可能な構成成分から容易に構築することができる。

【0045】

「異種」という用語は、エンティティーであって、該エンティティーの比較対照である該エンティティーの残部と遺伝子型が異なる上記エンティティーを指す場合がある。例えば、遺伝子操作技法によってプラスミドまたはベクターに導入された、異なる種に由来するポリヌクレオチドは、異種ポリヌクレオチドである場合がある。その天然のコード配列から除去されたプロモーターであって、天然においては上記プロモーターが連結することはないコード配列と、作動可能に連結された上記プロモーターは、異種プロモーターであってよい。

【0046】

本明細書で使用される場合、「７ｍ８」はアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を指す。

【0047】

「７ｍ８バリアント」とは、当該カプシドタンパク質の溶媒曝露ＧＨループ中に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を有する、任意の血清型であってよいｒＡＡＶを指す。

【0048】

７ｍ８がｒＡＡＶ２に挿入されている場合（ＡＡＶ２．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸５７０～６１１内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ２カプシドタンパク質ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入される。いくつかの場合には、７ｍ８がｒＡＡＶ２に挿入されている場合（ＡＡＶ２．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＧＨループ中に、例えば配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ１に挿入されている場合（ＡＡＶ１．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ１カプシドタンパク質のアミノ酸５７１～６１２内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ１カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ５に挿入されている場合（ＡＡＶ５．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ５カプシドタンパク質のアミノ酸５６０～６０１内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ５カプシドタンパク質のアミノ酸５７５と５７６の間に挿入される。７ｍ８が、ｒＡＡＶ６に挿入されている場合（ＡＡＶ６．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ６カプシドタンパク質のアミノ酸５７１～６１２内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ６カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ７に挿入されている場合（ＡＡＶ７．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ７カプシドタンパク質のアミノ酸５７２～６１３内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ７カプシドタンパク質のアミノ酸５８９と５９０の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ８に挿入されている場合（ＡＡＶ８．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ８カプシドタンパク質のアミノ酸５７３～６１４内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ８カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ９に挿入されている場合（ＡＡＶ９．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ９カプシドタンパク質の内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ９カプシドタンパク質のアミノ酸５８８と５８９の間に挿入される。７ｍ８がｒＡＡＶ１０に挿入されている場合（ＡＡＶ１０．７ｍ８とも呼ばれる）、アミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）は、ＡＡＶ１０カプシドタンパク質のアミノ酸５７３～６１４内のＧＨループ中に、例えばＡＡＶ１０カプシドタンパク質のアミノ酸５８９と５９０の間に挿入される。

【0049】

概観
眼疾患に対する現在の治療薬（例えば、アフリベルセプト組換えタンパク質、ラニビズマブ組換えタンパク質）は、およそ４～８週間毎のＩＶＴの投与などの涯続く治療を必要とする。この治療薬により、一部の患者において、炎症、感染症、及び他の有害作用のリスクが増加する可能性がある。さらに、現在の治療薬により、上記治療薬を投与するために繰り返し且つ／または頻繁に通院することに起因して、服薬遵守の問題が生じる。投与の頻度を低減すると視覚喪失及び当該眼疾患または疾病の悪化を伴う。ＡＡＶベクターの、ＩＶＴ注射後に標的網膜細胞に効率的に形質導入することができる能力を利用し、治療用遺伝子を光受容体、網膜色素上皮、及び内部網膜へとうまく移入して、多様な網膜疾患を治療している。このように、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードするｒＡＡＶ粒子の投与によって、抗ＶＥＧＦ剤をｉｎ ｖｉｖｏで長期間且つ／または持続的に放出することができる。

【0050】

したがって、本開示は、６×１０^１１ｖｇ／眼以下の、単回の単位用量の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードするｒＡＡＶ粒子を投与することによる、個体における眼疾患（例えば、緑内障）の治療方法を提供する。加えて、本開示は、単回の単位用量の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードするｒＡＡＶ粒子を投与することによる、眼疾患（例えば、緑内障）を有する個体における眼圧（ＩＯＰ）の低減方法を提供する。本明細書に開示の方法によって、繰り返しＩＶＴ注射を行う必要性が低減するまたはなくなると同時に、長期的な有効性が提供され、それによって非服薬遵守及び能動的な治療への参加の欠如（ｎｏｎ－ａｄｈｅｒｅｎｃｅ）の問題に対処する。加えて、本明細書で提供される方法により、複数のＩＶＴ注射に伴う有害作用が低減される。

【0051】

治療方法
本明細書においては、個体における眼疾患（例えば、緑内障）の治療方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の眼に投与することを含む上記方法が提供される。

【0052】

また、本明細書においては、個体における（例えば、眼疾患（例えば、緑内障）を有する個体の眼における）眼圧の低減方法であって、単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の眼に投与することを含む上記方法も提供される。

【0053】

また、本明細書においては、個体における眼疾患（例えば、緑内障）の治療方法であって、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）を上記個体の眼に投与することと、上記抗ＶＥＧＦ剤の投与後に、治療を施すこと（例えば、少なくとも１、少なくとも２の単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を、上記個体の上記の眼に投与すること）とを含む方法も提供される。

【0054】

いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障である。いくつかの実施形態において、上記緑内障は血管新生緑内障である。

【0055】

いくつかの実施形態において、上記個体はヒトである。いくつかの実施形態において、上記個体は、以前に少なくとも１回の眼疾患の治療（例えば、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、またはそれを超える回数の治療）を受けていた。いくつかの実施形態において、上記以前の少なくとも１回の治療（例えば、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、またはそれを超える回数の治療）は、ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブリンゴ酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）から構成される。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量の抗ｒＡＡＶ粒子の投与前の直近の約８週間以内、直近の約９週間以内、直近の約１０週間以内、直近の約１１週間以内、直近の約１２週間以内、直近の約１３週間以内、直近の約１４週間以内、直近の約１５週間以内、または直近の約１６週間以内に、治療（例えば、上記の１種以上の何れかの薬剤による）を受けた。いくつかの実施形態において、上記個体は、以前の治療に対して意味のある応答を示した。いくつかの実施形態において、上記個体は、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブリンゴ酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療に対して意味のある応答を示した。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は、アフリベルセプト、その機能性バリアント、またはその機能性フラグメントである。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。

【0056】

いくつかの実施形態において、上記個体は視覚機能障害を有する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の、上記個体の上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼の視力（ＢＣＶＡ）は、約７８～５０ ＥＴＤＲＳ文字（例えば、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、または７８ ＥＴＤＲＳ文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の、上記個体の上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼の視力（ＢＣＶＡ）は、約２０／３２～約２０／１００（スネレンの換算視力）である。

【0057】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の、上記個体の上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼の、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ（登録商標）を使用した中心領域網膜厚（ＣＳＴ）は、中心窩を含むＩＲＦ（中心窩１ｍｍ）が認められる場合、≧３２５μｍである。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記個体の上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、主として緑内障（例えば、血管新生緑内障）に起因する視力の低下が生じる。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の約６ヶ月以下、例えば、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の約６ヶ月以下、約５ヶ月以下、約４ヶ月以下、約３ヶ月以下、約２ヶ月以下、約１ヶ月以下のいずれかの間に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、緑内障（例えば、血管新生緑内障）との診断を受けている。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の少なくとも約６０日（すなわち、約２ヶ月）前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において抗ＶＥＧＦ剤による以前の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、上記抗ＶＥＧＦ剤による以前の治療に対して、中心領域網膜厚に関して意味のある応答、例えば、中心領域網膜厚の少なくとも１０％の減少を示していた。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、抗ＶＥＧＦ剤による以前の治療に対する有害反応を経験していなかった。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、ＡＡＶ２．７ｍ８に対する中和抗体を有していない。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前、例えば、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の約６ヶ月以内の、上記個体の抗ＡＡＶ２．７ｍ８中和抗体力価は、１：１２５を超えていない。

【0058】

いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、アフリベルセプト、コルチコステロイド、またはフルオレセイン色素もしくはフルオレセインナトリウム（例えば、血管造影に使用される）に対するアレルギーの履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、アフリベルセプト、コルチコステロイド、またはフルオレセイン色素もしくはフルオレセインナトリウム（例えば、血管造影に使用される）に対する軽症のアレルギーの履歴を有し、上記アレルギーは治療が可能である。

【0059】

いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、管理されていない糖尿病、例えば１０％を超えるＨｂＡ１ｃを有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の約３ヶ月以内に糖尿病性ケトアシドーシスの履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、例えばインスリンポンプまたは１日に複数回のインスリン注射による集中的なインスリンによる治療を開始していなかった。

【0060】

いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後の約３ヶ月以内に、例えばインスリンポンプまたは１日に複数回のインスリン注射による集中的なインスリンによる治療を開始する予定がない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、全身性ステロイド剤または免疫抑制治療薬、例えば、メトトレキサートまたはアダリムマブによる治療を必要とする全身性自己免疫疾患の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、黄斑浮腫を生じさせることが知られている全身性薬物、例えば、フィンゴリモド、タモキシフェン、クロロキン、またはヒドロキシクロロキンなどの投与を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、全身性抗ＶＥＧＦ治療薬の投与を受けていない。一部の実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、増殖性糖尿病性網膜症（ＰＤＲ）の高リスクを有していない。いくつかの実施形態において、ＰＤＲは、あらゆる硝子体または網膜前出血、臨床検査で標準のＥＴＤＲＳ ７視野と等価の面積内で＞１／２乳頭面積の他の箇所の血管新生、または臨床検査で＞１／３乳頭面積の乳頭の血管新生と定義される。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、焦点または格子状レーザー光凝固術を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、いかなる以前の汎網膜光凝固術（ＰＲＰ）も受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、抗ＶＥＧＦ治療（例えば、アフリベルセプトのＩＶＴ注射）を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の少なくとも６０日前に、抗ＶＥＧＦ治療（例えば、アフリベルセプトのＩＶＴ注射）を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、２回を超える抗ＶＥＧＦ治療（例えば、アフリベルセプトのＩＶＴ注射）を受けていない。

【0061】

いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、前眼部血管新生（例えば、虹彩の血管新生［ＮＶＩ］または血管新生緑内障［ＮＶＧ］）、著しい硝子体出血、血管結合組織増殖、または牽引性網膜剥離のうちのいずれの履歴も有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、黄斑浮腫または視力障害に寄与する中心窩の構造的異常（例えば、濃くて硬い滲出液、色素異常、中心窩萎縮、硝子体黄斑牽引または網膜上膜のいずれも）有していない。いくつかの実施形態において、中心窩の構造的異常は臨床検査またはＯＣＴで評価される。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、糖尿病性網膜症（例えば、加齢黄斑変性症（いずれかの眼におけるもの）、網膜静脈閉塞症、網膜動脈閉塞、または病理的近視）以外の網膜疾患の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、糖尿病黄斑浮腫以外の眼疾患、例えば、著しい白内障もしくは黄斑牽引の履歴、または後嚢下白内障のエビデンスを有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の少なくとも約３ヶ月以内に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、白内障摘出術またはイットリウム・アルミニウム・ガーネット（ＹＡＧ）嚢切開術の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、網膜剥離（修復を伴うまたは伴わない）の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、線維柱帯切除術、緑内障シャント術、または低侵襲性緑内障手術（ＭＩＧＳ）のうちのいずれの履歴も有していない。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、上記個体は、硝子体切除術または他のろ過手術の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、無水晶体症または前房眼内レンズの存在を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、管理されていない高眼圧症または緑内障、例えば、抗緑内障薬による治療または現時点での２種を超えるＩＯＰ降下薬の使用にもかかわらず２２ｍｍＨｇを超えるＩＯＰを有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、任意の眼の疾病に対する眼内または眼周囲のステロイド治療（例えば、ＩＶＴ Ｔｒｉｅｓｅｎｃｅ、Ｉｌｕｖｉｅｎ、またはＯｚｕｒｄｅｘ）の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の少なくとも約９０日以内に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、屈折矯正手術を受けていなかった。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、以前の全層角膜移植術、内皮角膜移植術、または眼への放射線照射を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、上記ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける眼において、いかなる以前の硝子体網膜外科手術も受けていなかった。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、ぶどう膜炎または眼内炎症、例えば、解消した軽度の予想された術後炎症以外の痕跡またはそれを超える程度の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、局所ステロイド投与に関連するＩＯＰ上昇の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、ウイルス性ぶどう膜炎、網膜炎または角膜炎を含めた眼の単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、またはサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の履歴を有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、結膜炎、霰粒腫、または著しい眼瞼炎を含めた外眼部感染症のいずれのエビデンスも有していない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に、眼トキソプラズマ症の履歴を有していない。

【0062】

いくつかの実施形態において、上記単位用量は、ベクターゲノムの数（ｖｇ）として表される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ）以下の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、ベクターゲノム数（ｖｇ）／眼（ｖｇ／眼）としてとして表される。いくつかの実施形態において上記単位用量は、約６×１０^１１ｖｇ／眼以下の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約６×１０^１０～約２×１０^１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約２×１０^１１または約６×１０^１０ｖｇ／眼である。

【0063】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は上記個体の一方の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は右眼または左眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は右眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は左眼である。いくつかの実施形態において、本明細書に提供される方法は、単位用量のｒＡＡＶ粒子を個体の対側の眼に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は右眼であり、上記対側の眼は左眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は左眼であり、対側の眼は右眼である。

【0064】

いくつかの実施形態において、上記個体の対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約２週間（例えば、約０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、または１４日）後である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の上記単位用量は、上記個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量とほぼ同一（例えば、高いもしくは低い幅は１％未満、高いもしくは低い幅は５％未満、高いもしくは低い幅は１０％未満、または高いもしくは低い幅は２０％未満）であるか、またはそれより低い（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または約９０％低い）。

【0065】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの少なくとも約２週間（例えば、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１年、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、少なくとも約５年、またはそれより長い期間）後である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の上記一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量よりも高い（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％のいずれか、またはそれよりも大きい幅で高い）。

【0066】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む。配列番号３５の配列を以下に示す。

【表1】

【0067】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸と、ｂ）ＡＡＶ２カプシドタンパク質であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）とを含む。

【0068】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは配列番号３５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドはアフリベルセプトまたはその機能性バリアントもしくはその機能性フラグメントである。

【0069】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列をコードするコドン最適化された配列を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列をコードするコドン最適化された配列を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と１００％の同一性を有するアミノ酸配列をコードするコドン最適化された配列を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。

【0070】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、アフリベルセプトまたはその機能性バリアントもしくはその機能性フラグメントのｃＤＮＡ配列を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、アフリベルセプトまたはその機能性バリアントもしくはその機能性フラグメントのコドン最適化されたｃＤＮＡ配列を含み、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は配列番号３６の核酸配列を含む核酸を含む。

【0071】

いくつかの実施形態において、上記核酸は、（ａ）ＣＭＶ配列を含む第１のエンハンサー領域と、（ｂ）ＣＭＶ配列を含むプロモーター領域と、（ｃ）５’から３’の順に、ＴＰＬ配列及びｅＭＬＰ配列を含む５’ＵＴＲ領域と、（ｄ）全長のＥＥＳ配列を含む第２のエンハンサー領域と、（ｅ）ＨＧＨポリアデニル化部位をさらに含む。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ配列を含む上記エンハンサー領域は、配列番号２２の配列を含む。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ配列を含む上記プロモーター領域は、配列番号２３の配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ＴＰＬ配列は配列番号２４の配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ｅＭＬＰ配列は配列番号２５の配列を含む。いくつかの実施形態において、全長のＥＥＳ配列を含む上記第２のエンハンサー領域は配列番号２６の配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ＨＧＨポリアデニル化部位は配列番号２７の配列を含む。

【0072】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含むＡＡＶ２カプシドタンパク質を含む。配列番号１３の配列を以下に示す。

【表2】

【0073】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含むＡＡＶ２カプシドタンパク質を含む。

【0074】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入された以下のアミノ酸配列、すなわち、ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）、ＬＡＮＥＴＩＴＲＰＡ（配列番号２）、ＬＡＫＡＧＱＡＮＮＡ（配列番号３）、ＬＡＫＤＰＫＴＴＮＡ（配列番号４）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号５）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号６）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号７）、ＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号８）、ＬＡＫＤＴＤＴＴＲＡ（配列番号９）、ＬＡＲＡＧＧＳＶＧＡ（配列番号１０）、ＬＡＡＶＤＴＴＫＦＡ（配列番号１１）、ＬＡＳＴＧＫＶＰＮＡ（配列番号１２）、ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）、ＮＥＴＩＴＲＰ（配列番号１５）、ＫＡＧＱＡＮＮ（配列番号１６）、ＫＤＰＫＴＴＮ（配列番号１７）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号１８）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号１９）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号２０）、及びＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号２１）のいずれかを含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入された以下のアミノ酸配列、すなわち、ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）；ＬＡＮＥＴＩＴＲＰＡ（配列番号２）、ＬＡＫＡＧＱＡＮＮＡ（配列番号３）、ＬＡＫＤＰＫＴＴＮＡ（配列番号４）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号５）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号６）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号７）、ＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号８）、ＬＡＫＤＴＤＴＴＲＡ（配列番号９）、ＬＡＲＡＧＧＳＶＧＡ（配列番号１０）、ＬＡＡＶＤＴＴＫＦＡ（配列番号１１）、ＬＡＳＴＧＫＶＰＮＡ（配列番号１２）、ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）、ＮＥＴＩＴＲＰ（配列番号１５）、ＫＡＧＱＡＮＮ（配列番号１６）、ＫＤＰＫＴＴＮ（配列番号１７）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号１８）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号１９）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号２０）、及びＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号２１）のいずれかを含むＡＡＶ２カプシドタンパク質を含む。

【0075】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与は、硝子体内（ＩＶＴ）注射、眼内投与、または網膜内注射による。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与は、硝子体内（ＩＶＴ）注射による。

【0076】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は医薬製剤中に存在する。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、上記ｒＡＡＶ粒子、１種以上の浸透圧またはイオン強度調整剤、１種以上の緩衝剤、１種以上の界面活性剤、及び１種以上の溶媒を含む。いくつかの実施形態において、上記浸透圧またはイオン強度調整剤は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態において、上記１種以上の緩衝剤はリン酸二水素ナトリウム及び／またはリン酸水素ナトリウムである。いくつかの実施形態において、上記界面活性剤はポロキサマー１８８である。いくつかの実施形態において、上記溶媒は水である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、上記ｒＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、及び界面活性剤を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１×１０^１０ｖｇ／ｍＬ～約１×１０^１３ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬ～約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの塩化ナトリウム（例えば、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭ、または約２００ｍＭのいずれか）を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム（例えば、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、または約１０ｍＭ）を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム（例えば、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、または約１０ｍＭ）を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）ポロキサマー１８８（例えば、約０．０００５％（ｗ／ｖ）、０．０００６％（ｗ／ｖ）、０．０００７％（ｗ／ｖ）、０．０００８％（ｗ／ｖ）、０．０００９％（ｗ／ｖ）、０．００１％（ｗ／ｖ）、０．００２％（ｗ／ｖ）、０．００３％（ｗ／ｖ）、０．００４％（ｗ／ｖ）、または約０．００５％（ｗ／ｖ）のいずれか）を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤のｐＨは、約７．０～約７．５（例えば、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、または約７．５のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。

【0077】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約２５μＬ～約２５０μＬ（例えば、約２５μＬ、約３０μＬ、約４０μＬ、約５０μＬ、約６０μＬ、約７０μＬ、約８０μＬ、約９０μＬ、約１００μＬ、約１１０μＬ、約１２０μＬ、約１３０μＬ、約１４０μＬ、約１５０μＬ、約１６０μＬ、約１７０μＬ、約１８０μＬ、約１９０μＬ、約２００μＬ、約２１０μＬ、約２２０μＬ、約２３０μＬ、約２４０μＬ、または約２５０μＬのいずれか）の体積を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤中のｒＡＡＶ粒子の濃度は、上記個体の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の体積が約２５μＬ～約２５０μＬの間となるように調整される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は約１００μＬの体積を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は約３０μＬの体積を含む。

【0078】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、ステロイド治療との併用で投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はコルチコステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は全身性のステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は経口ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は眼科用ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療は、局所ステロイド治療（例えば、点眼薬）、眼周囲のステロイド治療（例えば、テノン嚢下、結膜下）、硝子体内ステロイド治療、または脈絡膜上ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイド治療は、ジフルプレドナート治療、メドリゾン治療、ロテプレドノール治療、プレドニゾロン治療、フルオシノロン治療、トリアムシノロン治療、リメキソロン治療、デキサメタゾン治療、フルオロメトロン治療、フルオシノロン治療、リメキソロン治療、またはプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイド治療はジフルプレドナート治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前、投与の間、及び／または投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前及び投与の間に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前及び投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間及び投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前、投与の間、及び投与の後に施される。

【0079】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療眼科用ステロイド治療薬（例えば、ジフルプレドナート）である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療（例えば、ジフルプレドナート）は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与から最大で約４週間、約６週間、または約８週間の間、毎日のステロイド治療である。いくつかの実施形態において、眼科用ステロイド治療は、概ね１週目に約４回の眼科用ステロイドの投与、概ね２週目に概ね３は回の眼科用ステロイドの投与、概ね３週目に概ね２回の眼科用ステロイドの投与、及び概ね４週目に概ね１回の眼科用ステロイドの投与を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与時に開始され、その後継続される。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドは約０．００５％～約０．５％のジフルプレドナートである。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドは、約０．００５％、約０．００６％、約０．００７％、約０．００８％、約０．００９％、約０．０１％、約０．０２％、約０．０３％、約０．４％、約０．０５％、約０．０６％、約０．０７％、約０．０８％、約０．０９％、または約０．１％のジフルプレドナートのいずれかである。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドはジフルプレドナート０．０５％である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナート０．０５％の用量は眼科用溶液１滴である。いくつかの実施形態において、１滴は約５０μｌ（例えば、約２５μｌ～約５０μｌ、約５０μｌ～約１００μｌ）である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は、約１μｇ～約５μｇ、または約２μｇ～約３μｇ、または約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は、約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。

【0080】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は眼科用ステロイド治療（例えば、ジフルプレドナート）である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療（例えば、ジフルプレドナート）は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与から最大で約４週間、約６週間、または約８週間の間毎日の局所ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、局所ステロイド治療は、概ね１週目に約４回の局所ステロイドの投与、概ね２週目に約３回の局所ステロイドの投与、概ね３週目に約２回の局所ステロイドの投与、及び概ね４週目に約１回の局所ステロイドの投与を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与時に開始され、その後継続される。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後の約３週間の間の、１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１週間の間の、１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１週間の間の、１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１週間の間の、１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは、約１μｇ～約３μｇ用量のジフルプレドナート０．０５％を含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは、約２．５μｇ用量のジフルプレドナート０．０５％を含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは約０．００５％～約０．５％のジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは、約０．００５％、約０．００６％、約０．００７％、約０．００８％、約０．００９％、約０．０１％、約０．０２％、約０．０３％、約０．０４％、約０．０５％、約０．０６％、約０．０７％、約０．０８％、約０．０９％、または約０．１％のジフルプレドナートのいずれかである。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドは、ジフルプレドナート０．０５％である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナート０．０５％の用量は眼科用溶液１滴である。いくつかの実施形態において、１滴は約５０μｌ（例えば、約２５μｌ～約５０μｌ、約５０μｌ～約１００μｌ）である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は、約１μｇ～約５μｇ、または約２μｇ～約３μｇ、または約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。

【0081】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積が維持されるかまたは減少する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積が減少する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積が、約５％を超えて、約１０％を超えて、約１５％を超えて、約２０％を超えて、約２５％を超えて、約３０％を超えて、約３５％を超えて、約４０％を超えて、約４５％を超えて、または約５０％を超えてのいずれかで減少する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積が少なくとも約１０％減少する。いくつかの実施形態において、上記黄斑体積はＯＣＴまたはＳＤ－ＯＣＴによって測定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積は少なくとも約１０％減少する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の黄斑体積と比較して、黄斑体積は約１５％以上減少する。いくつかの実施形態において、上記黄斑体積はＯＣＴまたはＳＤ－ＯＣＴによって測定される。

【0082】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前の黄斑体積と比較した黄斑体積は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の約３０週間以上後の時点で、維持されているかまたは減少している。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前の黄斑体積と比較した黄斑体積は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の、約３０週間、約３４週間、約４４週間、約６ヶ月、約１年、約１．５年、約２年、約３年、約５年、約１０年、またはそれを超える期間の後のいずれかの時点で、維持されているかまたは減少している。

【0083】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較して、視力が維持されるかまたは改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較して、視力が改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較して、視力が、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％、またはそれを超える幅のいずれかで改善される。いくつかの実施形態において、視力は最高矯正視力（ＢＣＶＡ）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが改善される。いくつかの実施形態におい、ＢＣＶＡはＥＴＤＲＳスコアとして表され、ＥＴＤＲＳスコアは正確に読まれた文字数に対応する（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）。

【0084】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが少なくとも１５ ＥＴＤＲＳ文字（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４ （９）： １０４１： １０４７）（例えば、少なくとも約１５文字、少なくとも約２０文字、少なくとも約３０文字、少なくとも約４０文字、少なくとも約５０文字、少なくとも約６０文字、または約７０文字）改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約１～約１５ ＥＴＤＲＳ文字（例えば、約１文字、約２文字、約３文字、約４文字、約５文字、約６文字、約７文字、約８文字、約９文字、約１０文字、約１１文字、約１２文字、約１３文字、約１４文字、または約１５文字のいずれか）改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約５ ＥＴＤＲＳ文字改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約１、約２、約３、約４、約５、約６、または約７ ＥＴＤＲＳ文字のいずれかで改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約３ ＥＴＤＲＳ文字以上改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約４ ＥＴＤＲＳ文字以上改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約５．１ ＥＴＤＲＳ文字以上改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約６．４ ＥＴＤＲＳ文字以上改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約６．８ ＥＴＤＲＳ文字改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約８．８ ＥＴＤＲＳ文字改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約２．３ ＥＴＤＲＳ文字改善される。

【0085】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は１５文字未満（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４ （９）： １０４１： １０４７）（例えば、１５文字以下、１４文字以下、１３文字以下、１２文字以下、１１文字以下、１０文字以下、９文字以下、８文字以下、７文字以下、６文字以下、５文字以下、４文字以下、３文字以下、２文字以下、１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約２文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約１文字、約２文字、約３文字、約４文字、約５文字、約６文字、約７文字、約８文字、または約９文字のいずれかである。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は０文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約１文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約２．７文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約２．８文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約２文字以下である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約３．２文字以下である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約１５～約０文字（例えば、約１５文字、約１４文字、約１３文字、約１２文字、約１１文字、約１０文字、約９文字、約８文字、約７文字、約６文字、約５文字、約４文字、約３文字、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約１０～約０文字（例えば、約１０文字、約９文字、約８文字、約７文字、約６文字、約５文字、約４文字、約３文字、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約５～約０文字（例えば、約５文字、約４文字、約３文字、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約４～約０文字（例えば、約４文字、約３文字、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約３～約０文字（例えば、約３文字、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約２～約０文字（例えば、約２文字、約１文字、または０文字のいずれか）である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが維持され、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下は約１～約０文字である。

【0086】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－２０～＋７以上（例えば、－２０、－１９、－１８、－１７、－１６、－１５、－１４、－１３、－１２、－１１、－１０、－９、－８、－７、－６、－５、－４、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡが約１６、７、または５ ＥＴＤＲＳ文字のいずれかで増加する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡの低下は約１９、１４、７、６、５、４、３、２、または１ ＥＴＤＲＳ文字のいずれかである。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡの低下は約４．８または約０．８ ＥＴＤＲＳ文字である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡの低下は約２ ＥＴＤＲＳ文字以下である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡの低下は約３．２ ＥＴＤＲＳ文字以下である。

【0087】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－１５～＋７以上（例えば、－１５、－１４、－１３、－１２、－１１、－１０、－９、－８、－７、－６、－５、－４、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－１０～＋７以上（例えば、－１０、－９、－８、－７、－６、－５、－４、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－５～＋７以上（例えば、－５、－４、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－４～＋７以上（例えば、－４、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－３～＋７以上（例えば、－３、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－２～＋７以上（例えば、－２、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約－１～＋７以上（例えば、－１、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約０～＋７以上（例えば、０、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋１～＋７以上（例えば、＋１、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋２～＋７以上（例えば、＋２、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋３～＋７以上（例えば、＋３、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋４～＋７以上（例えば、＋４、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋５～＋７以上（例えば、＋５、＋６、＋７、＋８、＋９、＋１０、＋１１、＋１２、＋１３、＋１４、＋１５、＋１６、＋１７、＋１８、＋１９、＋２０、またはそれを超える幅のいずれか）のＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡに約＋６または約＋７ ＥＴＤＲＳ文字の変化が生じる。

【0088】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、一過性の炎症（例えば、房水細胞及び／または硝子体細胞によって駆動される炎症、房水フレア、虹彩後癒着、低瞳孔散大）が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、炎症（例えば、房水細胞及び／または硝子体細胞によって駆動される炎症、房水フレア、虹彩後癒着、低瞳孔散大）が生じ、該炎症は経口及び／もしくは局所ステロイド治療薬ならびに／または散瞳薬の投与後に改善される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、炎症（例えば、房水細胞及び／または硝子体細胞によって駆動される炎症）が生じ、該炎症は経口及び／または局所ステロイド治療薬の投与後に消散する。炎症（例えば、房水細胞及び／または硝子体細胞によって駆動される炎症、房水フレア、虹彩後癒着、低瞳孔散大）は、細隙灯検査などの当技術分野で公知の任意の方法を使用して測定することができる。

【0089】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較した視力（例えば、ＢＣＶＡ）は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の、約１日、約１週間、約２週間、約４週間、約８週間、約１２週間、約１６週間、約２０週間、約２４週間、約２８週間、約３２週間、約３６週間、約４０週間、約４４週間、約４８週間、約５２週間、約５６週間、約６０週間、約６４週間、約６８週間、約７２週間、約７６週間、約８０週間、約８４週間、約８８週間、約９２週間、約９６週間、約１００週間、約１０４週間、約１０８週間、またはそれを超える期間の後のいずれかの時点で、維持されているかまたは改善されている。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較した視力（例えば、ＢＣＶＡ）は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の約３０週間以上後の時点で、維持されているかまたは改善されている。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の視力と比較した視力（例えば、ＢＣＶＡ）は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の約３０週間、約３４週間、約４４週間、約６ヶ月、約１年、約１．５年、約２年、約３年、約５年、約１０年、またはそれを超える期間の後のいずれかの時点で、維持されているかまたは改善されている。

【0090】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼における最高矯正視力（ＢＣＶＡ）に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、ＢＣＶＡはＥＴＤＲＳスコアとして表され、ＥＴＤＲＳスコアは正確に読んだ文字数に対応する（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）。いくつかの実施形態において、個体の、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前と比較したＥＴＤＲＳスコアの低下が１５文字未満（例えば、１５文字以下、１４文字以下、１３文字以下、１２文字以下、１１文字以下、１０文字以下、９文字以下、８文字以下、７文字以下、６文字以下、５文字以下、４文字以下、３文字以下、２文字以下、１文字、または０文字のいずれか）の場合、上記個体は視覚及び／または視力が維持されていると判定される。いくつかの実施形態において、個体のＥＴＤＲＳスコアが、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、少なくとも１５文字（例えば、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約３０、少なくとも約４０、少なくとも約５０、少なくとも約６０、または約７０文字のいずれか）増加する場合、上記個体は視覚及び／または視力が改善されていると判定される。

【0091】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼における黄斑体積に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、黄斑体積はＳＤ－ＯＣＴによって測定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、ＳＤ－ＯＣＴによって評価された黄斑体積が減少する場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、ＳＤ－ＯＣＴによって評価された黄斑体積が維持される場合には上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0092】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼における虹彩ルベオーシスに基づいて評価される。いくつかの実施形態において、虹彩ルベオーシスの減少は蛍光眼底造影検査（ＦＡ）によって測定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、虹彩ルベオーシス（例えば、ＦＡによって評価された）が減少する場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、虹彩ルベオーシス（例えば、ＦＡによって評価された）が維持される場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0093】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼における眼圧（ＩＯＰ）の低下に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、ＩＯＰの低下はゴルドマン眼圧測定検査によって測定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、ＩＯＰ（例えば、ゴルドマン眼圧測定検査によって測定された）が低下する場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の上一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、ＩＯＰ（例えば、ゴルドマン眼圧測定検査によって測定された）が維持される場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0094】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼における前房隅角または前房深度の増加に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、上記前房隅角または前房深度の増加は、隅角鏡検査、超音波生体顕微鏡検査（ＵＢＭ）、または前眼部光干渉断層撮影法（ＯＣＴ）によって測定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、上記前房隅角または前房深度（例えば、隅角鏡検査、ＵＢＭ、またはＯＣＴによって測定された）が増加する場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、上記前房隅角または前房深度（例えば、隅角鏡検査、ＵＢＭ、またはＯＣＴによって測定された）が維持される場合には、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0095】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の上記個体が必要とする救助治療薬による治療（ｒｅｓｃｕｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ）（例えば、アフリベルセプト注射）の回数に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、個体が必要とする救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）が、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、またはそれを超える期間のいずれか毎に１回未満である場合に、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0096】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、個体が、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも１５週間、少なくとも２０週間、少なくとも３０週間、少なくとも４０週間、少なくとも５０週間、少なくとも６０週間、少なくとも７０週間、少なくとも８０週間、少なくとも９０週間、少なくとも１００週間、少なくとも１１０週間、またはそれをこえる期間のいずれかの間、如何なる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない場合に、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療（治療の進捗など）がなされたと判定される。

【0097】

いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約２４ヶ月、少なくとも約２３ヶ月、少なくとも約２２ヶ月、少なくとも約２１ヶ月、少なくとも約２０ヶ月、少なくとも約１９ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約１７ヶ月、少なくとも約１６ヶ月、少なくとも約１５ヶ月、少なくとも約１４ヶ月、少なくとも約１３ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約３週間、少なくとも約２週間、または少なくとも約１週間のいずれかの間、如何なる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約１２ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約１０ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約７ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約６ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約２ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。いくつかの実施形態において、上記個体は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の少なくとも約１ヶ月の間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない。

【0098】

いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれか）が、抗ＶＥＧＦ救助治療（ｒｅｓｃｕｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約６７％（例えば、少なくとも約６７％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれか）が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約５０％が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約７８％が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約８０％が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約８２％が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の１００％が、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。

【0099】

いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれか）が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、少なくとも約８週間、少なくとも約１２週間、少なくとも約１６週間、少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６８週間、少なくとも約７２週間、少なくとも約７６週間、少なくとも約８０週間、少なくとも約８４週間、少なくとも約８８週間、少なくとも約９２週間、少なくとも約９６週間、少なくとも約１００週間、少なくとも約１０４週間、少なくとも約１０８週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約５０％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の約５２週間以上、または約５６週間以上の間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約６７％（例えば、少なくとも約６７％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれか）が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約７８％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、少なくとも約８週間、少なくとも約１２週間、少なくとも約１６週間、少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６８週間、少なくとも約７２週間、少なくとも約７６週間、少なくとも約８０週間、少なくとも約８４週間、少なくとも約８８週間、少なくとも約９２週間、少なくとも約９６週間、少なくとも約１００週間、少なくとも約１０４週間、少なくとも約１０８週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約７８％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の約２０週間以上、または約３６週間以上の間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の上記一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約８０％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の少なくとも約８２％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の１００％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の１００％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、少なくとも約８週間、少なくとも約１２週間、少なくとも約１６週間、少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６８週間、少なくとも約７２週間、少なくとも約７６週間、少なくとも約８０週間、少なくとも約８４週間、少なくとも約８８週間、少なくとも約９２週間、少なくとも約９６週間、少なくとも約１００週間、少なくとも約１０４週間、少なくとも約１０８週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記複数の個体の１００％が、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約６４週間以上、７２週間以上、または８４週間以上のいずれかの間、抗ＶＥＧＦ救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要としない。

【0100】

いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は、約７８％以下（例えば、約７８％以下、約７５％以下、約７０％以下、約６５％以下、約６０％以下、約５５％以下、約５０％以下、約４５％以下、約４０％以下、約３５％以下、約３０％以下、約２５％以下、約２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約２．５％以下、約１％以下、または約０．５％以下のいずれか）である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は、約５０％以下（例えば、約５０％以下、約４５％以下、約４０％以下、約３５％以下、約３０％以下、約２５％以下、約２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約２．５％以下、約１％以下、または約０．５％以下のいずれか）である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の上一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は、約３０％未満（例えば、約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約２．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のいずれか）である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は約３０％未満である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記一方の眼及び／または上記対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は約２０％未満である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は０％である。

【0101】

いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、少なくとも約８週間、少なくとも約１２週間、少なくとも約１６週間、少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６８週間、少なくとも約７２週間、少なくとも約７６週間、少なくとも約８０週間、少なくとも約８４週間、少なくとも約８８週間、少なくとも約９２週間、少なくとも約９６週間、少なくとも約１００週間、少なくとも約１０４週間、少なくとも約１０８週間、またはそれを超える期間のいずれかの間に、何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は、約７８％以下（例えば、約７８％以下、約７５％以下、約７０％以下、約６５％以下、約６０％以下、約５５％以下、約５０％以下、約４５％以下、約４０％以下、約３５％以下、約３０％以下、約２５％以下、約２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約２．５％以下、約１％以下、または約０．５％以下のいずれか）である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間に、何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は、約３０％未満（例えば、約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約２．５％未満、約１％未満、または約０．５％未満のいずれか）である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の上一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は約３０％未満である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の上一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は約２０％未満である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の上一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６６週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は０％である。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、例えば、上記ｒＡＡＶ粒子の投与の後の少なくとも約４週間、少なくとも約８週間、少なくとも約１２週間、少なくとも約１６週間、少なくとも約２０週間、少なくとも約２４週間、少なくとも約２８週間、少なくとも約３２週間、少なくとも約３６週間、少なくとも約４０週間、少なくとも約４４週間、少なくとも約４８週間、少なくとも約５２週間、少なくとも約５６週間、少なくとも約６０週間、少なくとも約６４週間、少なくとも約６８週間、少なくとも約７２週間、少なくとも約７６週間、少なくとも約８０週間、少なくとも約８４週間、少なくとも約８８週間、少なくとも約９２週間、少なくとも約９６週間、少なくとも約１００週間、少なくとも約１０４週間、少なくとも約１０８週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、一方の眼及び／または対側の眼において何らかの救助治療（例えば、アフリベルセプト注射）を必要とする上記複数の個体のうちの割合は０％である。

【0102】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、平均年間抗ＶＥＧＦ注射率に、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の平均年間抗ＶＥＧＦ注射率と比較して、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８７％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれかの低下が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、平均年間抗ＶＥＧＦ注射率に、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の平均年間抗ＶＥＧＦ注射率と比較して、約８７％以上の低下が生じる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を、複数の個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することによって、平均年間抗ＶＥＧＦ注射率に、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の平均年間抗ＶＥＧＦ注射率と比較して、１００％の低下が生じる。

【0103】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前の平均年間抗ＶＥＧＦ注射率は以下の式：
上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前の年間の率＝（上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前１２ヶ月における抗ＶＥＧＦ注射の回数）／（上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前１２ヶ月の間の最初の抗ＶＥＧＦ注射から上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与までの日数／３６５．２５）
に従って算出する。

【0104】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後の平均年間抗ＶＥＧＦ注射率を以下の式：
上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後の年間の率＝（上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与してからの抗ＶＥＧＦ注射の回数）／（上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与してからの日数／３６５．２５）
に従って算出する。

【0105】

いくつかの実施形態において、個体が、ｒＡＡＶ粒子の投与を受ける一方の眼及び／または対側の眼に関して、ｒＡＡＶ粒子の投与前のｒＡＡＶ粒子の投与を受ける一方の眼及び／または対側の眼に関するＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡの１０文字またはそれよりも多くの減少（例えば、ＥＴＤＲＳプロトコールを使用）を示す場合、その個体はｒＡＡＶ粒子の投与後の救助治療（例えば、アフリベルセプト注射などの抗ＶＥＧＦガラス体内注射）が必要であると判定される。いくつかの実施形態において、個体がｒＡＡＶ粒子の投与を受ける一方の眼及び／または対側の眼においてＡＭＤに起因する視覚を脅かす出血を示す場合、その個体は救助治療（例えば、アフリベルセプト注射などの抗ＶＥＧＦ硝子体内注射）が必要であると判定される。

【0106】

いくつかの実施形態において、救助治療は、標準治療である抗ＶＥＧＦ治療を施すことを含む。かかる標準治療である抗ＶＥＧＦ治療は、１回以上の抗ＶＥＧＦ治療（例えば、抗ＶＥＧＦ硝子体内注射）を含む。いくつかの実施形態において、救助治療は、１回以上のアフリベルセプトのＩＶＴ注射を含む。いくつかの実施形態において、救助治療は、１回以上の、アフリベルセプト約２ｍｇを含むアフリベルセプトのＩＶＴ注射を含む。

【0107】

いくつかの実施形態において、眼疾患の治療（治療の進捗など）が、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与前の色素上皮剥離（ＰＥＤ）と比較したＰＥＤの消散に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前のＰＥＤと比較して、単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与の後にＰＥＤの消散が観察される場合、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与の後の個体において、眼疾患の治療がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障（例えば、血管新生緑内障）である。

【0108】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体における眼疾患の治療(治療の進捗など)が、フルオレセイン血管造影によって判定される脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）病変の成長に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与の前に存在するＣＮＶ病変と比較して、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与の後に、ＣＮＶ病変が収縮する（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または１００％のいずれかよりも大きく）場合には、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体において、眼疾患の治療がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与前に存在するＣＮＶ病変と比較して、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与後にＣＮＶ病変が成長しない（例えば、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、または約２０％のいずれかよりも成長が小さい）場合、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体において、眼疾患の治療がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障（例えば、血管新生緑内障）である。

【0109】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、当技術分野で公知のいずれかの方法（例えば、ＳＤ－ＯＣＴ、ＯＣＴ、フルオレセイン血管造影、デジタルカラー眼底撮影等）に基づく、一方の眼及び／または対側の眼の解剖学的特徴に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与後に、一方の眼及び／または対側の眼の解剖学的特徴に改善が観測される場合には、単位用量のｒＡＡＶの一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体における眼疾患の治療がなされたと判定される。いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障（例えば、血管新生緑内障）である。

【0110】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与後の個体における眼疾患の治療（治療の進捗など）が、眼科検査、眼圧（例えば、ゴルドマン眼圧計、またはＴｏｎｏ－ｐｅｎを使用）、倒像眼底検査、一方の眼及び／または対側の眼ならびに眼付属器の検査、眼瞼及び／または瞳孔の応答性、眼瞼下垂、異常な瞳孔形状、瞳孔不同、光に対する反応の異常、求心性瞳孔障害、細隙灯検査（眼瞼、結膜、角膜、水晶体、光彩、及び前房の検査を含む）、硝子体、視神経、周辺網膜、及び網膜の脈管構造の後側セグメントの異常、ＳＤ－ＯＣＴ、フルオレセイン血管造影、デジタルカラー眼底撮影（網膜、視神経乳頭、及び／または黄斑の画像を含む）、房水採取、硝子体液採取、ＯＣＴ－血管造影（ＯＣＴ－Ａ）、屈折及び／または視力（ＢＣＶＡ）に基づいて評価される。いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障（例えば、血管新生緑内障）である。

【0111】

単位用量のｒＡＡＶは、当技術分野で公知の任意の方法によって個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与することができる。例えば単位用量のｒＡＡＶは、個体の一方の眼及び／または対側の眼に、眼内とうよされるか、または硝子体内注射によって投与されてもよい。いくつかの実施形態において、単位用量のｒＡＡＶの個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与は、眼内投与である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与は、硝子体内注射（ＩＶＴ）または網膜下注射による。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与はＩＶＴ注射による。いくつかの実施形態において、無菌技法を使用して、単位用量のｒＡＡＶを硝子体内注射によって投与する。いくつかの実施形態において、ポビドン－ヨウ素を用いた無菌技法を使用して、単位用量のｒＡＡＶを硝子体内注射によって投与する。

【0112】

いくつかの実施形態において、上記個体は眼疾患に対する以前の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼への、眼疾患に対する以前の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼への、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、以前のアフリベルセプト治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼への以前のアフリベルセプト治療を受けていない。

【0113】

ステロイド治療
いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、ステロイド治療との併用で投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、コルチコステロイド治療である。例示的なコルチコステロイドとしては、アクロメタゾン、アムシノニド、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、シクレソニド、クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、クロプレドノール、コルチバゾール、デフラザコルト、デオキシコルチコステロン、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルプレドナート、フルクロロロン、フルドロコルチゾン、フルドロキシコルチド、フルメタゾン、フルニソリド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルオコルチン、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルペロロン、フルチカゾン、ｆｕｐｒｅｄｎｉｄｅｎｅ、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾンアセポン酸エステル、ヒドロコルチゾンブテプレート、ヒドロコルチゾン酪酸エステル、ロテプレドノール、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾロンアセポン酸エステル、モメタゾンフランカルボン酸エステル、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾン、プレドニゾロン、プレドニリデン、レメキソロン、チキソコルトール、トリアムシノロン、及びウロベタゾールが挙げられるが、限定はされない。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は全身性のステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は経口ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は眼科用ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療は、局所ステロイド治療（例えば、点眼液）、眼周囲のステロイド治療（例えば、テノン嚢下、結膜下）、硝子体内ステロイド治療、または脈絡膜上ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、ジフルプレドナート治療、メドリゾン治療、ロテプレドノール治療、プレドニゾロン治療、フルオシノロン治療、トリアムシノロン治療、リメキソロン治療、デキサメタゾン治療、フルオロメトロン治療、フルオシノロン治療、リメキソロン治療、またはプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドによる治療はジフルプレドナート治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療はジフルプレドナート治療である。

【0114】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は全身性ステロイド治療及び局所ステロイド治療を含む。いくつかの実施形態において、上記全身性ステロイド治療は、経口ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記全身性ステロイド治療はプレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイド治療はジフルプレドナート治療である。いくつかの実施形態において、上記全身性ステロイド治療及び局所ステロイド治療は同時に（例えば、同一の日に）施される。いくつかの実施形態において、上記全身性ステロイド治療及び局所ステロイド治療は別個に（例えば、異なる日に）施される。

【0115】

いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前、投与の間、及び／または投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前、投与の間、及び投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間、及び投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前及び投与の間に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間及び投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前及び／または投与後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイドは、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前及び投与後に投与される。

【0116】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は全身性ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記全身性ステロイド治療は経口ステロイド治療である。

【0117】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は経口プレドニゾン治療である。いくつかの実施形態において、上記経口プレドニゾン治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前に開始される。いくつかの実施形態において、初回の経口プレドニゾン治療は、１日当たり約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、または約７０ｍｇのプレドニゾンのいずれかの用量で、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約７日前、約６日前、約５日前、約４日前、約３日前、約２日前、約１日前、または０日前のいずれかに投与され、約３日間、約４日間、約５日間、約６日間、約７日間、約８日間、約９日間、または約１０日間、またはそれを超える期間のいずれかの間継続される。いくつかの実施形態において、初回の経口プレドニゾン治療は、１日当たり約６０ｍｇのプレドニゾンの用量で、ｒＡＡＶの単位用量の投与の約３日前に投与され、約３日間継続される。

【0118】

いくつかの実施形態において、上記初回の経口プレドニゾン治療薬に続いて、経口プレドニゾン治療薬の用量を漸減させる。いくつかの実施形態において、上記経口プレドニゾン治療薬の用量の漸減は、１日当たり約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、または約５０ｍｇのプレドニゾンのいずれかの用量で、全体で約１日間、約２日間、約３日間、約４日間、約５日間、約６日間、または約７日間のいずれか、その後１日当たり約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、または約２５ｍｇのプレドニゾンの用量で、約１日間、約２日間、約３日間、または約４日間のいずれか、その後１日当たり約５ｍｇ、約１０ｍｇ、または約１５ｍｇのプレドニゾンの用量で、約１日間、約２日間、約３日間、または約４日間施される。いくつかの実施形態において、上記プレドニゾンの用量の漸減は、１日当たり約４０ｍｇのプレドニゾンの用量で３日間、その後１日当たり約２０ｍｇのプレドニゾンの用量で２日間、その後１日当たり約１０ｍｇのプレドニゾンの用量で２日間施される。

【0119】

いくつかの実施形態において、初回の経口プレドニゾン治療薬は、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の３日前に、１日当たり６０ｍｇのプレドニゾンの用量で、全体で６日間から開始され、その後１日当たり４０ｍｇのプレドニゾンの用量で、全体で３日間、その後１日当たり２０ｍｇのプレドニゾンの用量で２日間、その後１日当たり１０ｍｇのプレドニゾンの用量で２日間投与される。

【0120】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、眼科用ステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療はジフルプレドナート治療である。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前、投与の間、及び／または投与の後に投与される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前に施される。いくつかの実施形態において、ス上記テロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前及び投与の間に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前及び投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の間及び投与の後に施される。いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の前、投与の間、及び投与の後に施される。

【0121】

いくつかの実施形態において、上記ステロイド治療は、眼科用ステロイド治療、例えば局所ステロイド治療ある。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイド治療薬、例えば局所ステロイド治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後の最大４週間、最大６週間、最大８週間、最大３ヶ月、最大４ヶ月、最大５ヶ月、または最大６ヶ月の間の毎日のステロイド治療である。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、概ね１週目に約４回の局所ステロイドの投与、概ね２週目に約３回の局所ステロイドの投与、概ね３週目に約２回の局所ステロイドの投与、及び概ね４週目に約１回の局所ステロイドの投与を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与時に開始し、その後継続する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後の約３週間における局所ステロイドの１日当たり約４回の投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１週間における局所ステロイドの１日当たり約３回の投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１週間における局所ステロイドの１日当たり約２回の投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１週間約１週間における局所ステロイドの１日当たり約１回の投与（すなわち、ＱＤ）を含む。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドによる治療は治療にあたる医師の自由裁量で延長される。

【0122】

いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドは、約０．００５％～約０．５％のジフルプレドナートである。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドは、約０．００５％、約０．００６％、約０．００７％、約０．００８％、約０．００９％、約０．０１％、約０．０２％、約０．０３％、約０．４％、約０．０５％、約０．０６％、約０．０７％、約０．０８％、約０．０９％、または約０．１％のジフルプレドナートのいずれかである。いくつかの実施形態において、上記眼科用ステロイドは、ジフルプレドナート０．０５％である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナート０．０５％の用量は眼科用溶液１滴である。いくつかの実施形態において、１滴は約５０μｌ（例えば、約２５μｌ～約５０μｌ、または約５０μｌ～約１００μｌ）である。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は、約１μｇ～約５μｇ、または約２μｇ～約３μｇ、または約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、ジフルプレドナートの用量は約２．５μｇのジフルプレドナートを含む。

【0123】

いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、７週間の局所ステロイドによる治療、例えば、０．０５％のジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約４週間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１週間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１週間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１週間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約１週間前から開始する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約２８日間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約７日間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約７日間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約７日間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約７日前に開始する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、１日目～概ね２８日目の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の概ね２９日目～概ね３５日目の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の概ね３６日目～概ね４２日目の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の概ね４３日目～概ね４９日目の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは１日目に開始する。いくつかの実施形態において、炎症が存在している場合には局所ステロイドによる治療が継続される。

【0124】

いくつかの実施形態において、本明細書で提供される治療方法は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼に投与する前に、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプトのＩＶＴ注射）を個体の上記一方の眼に投与することを含む。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約７日または約１週間前に投与される。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は概ね１日目に投与され、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は概ね８日目に投与される。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、７週間の局所ステロイドによる治療、例えば、０．０５％のジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約４週間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１週間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１週間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１週間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは抗ＶＥＧＦ剤の投与時に開始し、その継続する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約２８日間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約７日間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約７日間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約７日間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、、タイミングは抗ＶＥＧＦ剤の投与時に開始し、その継続する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、１日目～約２８日目の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の概ね２９日目～概ね３５日目の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の概ね３６日目～概ね４２日目の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の概ね４３日目～概ね４９日目の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは１日目に開始する。いくつかの実施形態において、炎症が存在している場合には局所ステロイド治療が継続される。

【0125】

いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、４ヶ月間の局所ステロイドによる治療、例えば、０．０５％のジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約１ヶ月間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１ヶ月間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１ヶ月間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１ヶ月間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約１週間前に開始する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約３０日間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約３０日間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約３０日間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約３０日間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約７日前に開始する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、１日目～約３０日目の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の概ね３１日目～概ね６０日目の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の概ね６１日目～概ね９０日目の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の概ね９１日目～概ね１２０日目の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは１日目に開始する。いくつかの実施形態において、炎症が存在している場合には局所ステロイドによる治療が継続される。

【0126】

いくつかの実施形態において、本明細書で提供される治療方法は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の一方の眼に投与する前に、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプトのＩＶＴ注射）を上記個体の上記一方の眼に投与することを含む。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の約７日前または約１週間前に投与される。いくつかの実施形態において、上記抗ＶＥＧＦ剤は概ね１日目に投与され、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子が約８日目に投与される。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、４ヶ月間の局所ステロイドによる治療、例えば、０．０５％のジフルプレドナートを含む。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約１ヶ月間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約１ヶ月間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約１ヶ月間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約１ヶ月間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記抗ＶＥＧＦ剤の投与時に開始し、その後継続する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、約３０日間の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の約３０日間の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の約３０日間の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の約３０日間の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは上記抗ＶＥＧＦ剤の投与時に開始し、その後継続する。いくつかの実施形態において、上記局所ステロイドによる治療は、１日目～概ね３０日目の１日当たり約４回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＩＤ）、その後の概ね３１日目～概ね６０日目の１日当たり約３回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＴＩＤ）、その後の概ね６１日目～概ね９０日目の１日当たり約２回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＢＩＤ）、及びその後の概ね９１日目～概ね１２０日目の１日当たり約１回の局所ステロイドの投与（すなわち、ＱＤ）を含み、タイミングは１日目に開始する。いくつかの実施形態において、炎症が存在している場合には、局所ステロイドによる治療が継続される。

【0127】

標的細胞に導入遺伝子を送達するためのベクター
いくつかの実施形態において、上記組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子は、対象（例えば、ヒトまたは非ヒト霊長動物）において複製欠損となるように改変されているアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来する組換えウイルスベクターを含む。いくつかの実施形態において、上記アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である。

【0128】

ＡＡＶまたはｒＡＡＶは、小さい無エンベロープの一本鎖ＤＮＡウイルスである。ｒＡＡＶは、非病原性ヒトパルボウイルスであり、複製に関して、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、及びＣＭＶを含むヘルパーウイルスに依存するように作製されていてもよい。

【0129】

野生型（ｗｔ）ＡＡＶへの曝露は、いかなるヒト病態の原因となることにも関連せず、または原因となることが知られておらず、一般集団において一般的であることから、ＡＡＶまたはｒＡＡＶは、遺伝子治療のための好適な送達系となる。抗ＶＥＧＦ剤、例えばアフリベルセプトを送達するための、遺伝子治療のために使用されるＡＡＶ及びｒＡＡＶは、任意の血清型であってよい。いくつかの実施形態において、本開示の方法では、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２．５、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、及びそれらの任意のハイブリッドまたはキメラＡＡＶを含む、任意且つ好適なＡＡＶ血清型を使用することができる。いくつかの実施形態において、使用される血清型は、ウイルスの指向性または目的の標的細胞の感染力に基づく。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤導入遺伝子（例えば、アフリベルセプト導入遺伝子）と共に使用するのに最適な血清型の選択を可能にするために、いくつかのＡＡＶベクターを生成させてもよい。

【0130】

いくつかの実施形態において、本開示の方法は、シュードタイプＡＡＶの使用を提供する。シュードタイプＡＡＶ粒子は、別のＡＡＶ血清型のＡＡＶカプシドによってカプシド化された１種のＡＡＶ血清型のＡＡＶゲノム逆位末端反復配列（ＩＴＲ）を含む。一般的には、シュードタイプＡＡＶは、「ＡＡＶ＃／＃」と命名され、最初の「＃」はＡＡＶ ＩＴＲ血清型を示し、２番目の「＃」はカプシドの血清型を示す。例えば、ＡＡＶ２ ＩＴＲ及びＡＡＶ１カプシドを含むＡＡＶ粒子は、「ＡＡＶ２／１」と命名される。

【0131】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、核酸、例えば異種核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記核酸は、導入遺伝子、例えば抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする。いくつかの実施形態において、上記コードされる導入遺伝子、例えば抗ＶＥＧＦ剤は、核酸の転写を開始するプロモーターの転写制御下にある。いくつかの実施形態において、上記プロモーターは「遍在する」プロモーターである。いくつかの実施形態において、上記プロモーターは、「強力な」または構成的に活性なプロモーター、例えばサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、伸長因子１アルファ（ＥＦｌａ）プロモーター、グリセルアルデヒド３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）プロモーター、またはコネキシン３６（もしくは「Ｃｘ３６」）プロモーターである。いくつかの実施形態において、上記プロモーターは、非標的化細胞への潜在的毒性または望ましくない作用を低減するために、特定の組織または細胞、例えば網膜細胞において活性化される組織特異的プロモーターである。一部の態様において、上記抗ＶＥＧＦ剤導入遺伝子（例えば、アフリベルセプト導入遺伝子）と共に使用するために最適な血清型及びプロモーターの選択を可能にするために、いくつかのＡＡＶベクターが生成されてもよい。いくつかの実施形態において、上記核酸はＡＡＶ逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれている。いくつかの実施形態において、上記核酸はＡＡＶ２ ＩＴＲに挟まれている。

【0132】

いくつかの実施形態において、上記ＡＡＶベクターは、標的細胞（例えば、網膜細胞）における導入遺伝子（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の発現を増強するためにポリヌクレオチドカセットを含む。いくつかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドカセットは、５’から３’の順に、（ａ）ＣＭＶ配列を含む第１のエンハンサー領域（配列番号２２）と、（ｂ）ＣＭＶ配列を含むプロモーター領域（配列番号２３）と、（ｃ）５’から３’の順にＴＰＬ及びｅＭＬＰ配列（それぞれ、配列番号２４及び配列番号２５）を含む５’ＵＴＲ領域と、（ｄ）ペプチドまたはポリペプチド（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）をコードするコード配列と、（ｅ）全長のＥＥＳ配列（配列番号２６）を含む第２のエンハンサー領域と、（ｆ）ＨＧＨポリアデニル化部位（配列番号２７）とを含む。ある特定のこれらの実施形態において、上記ポリヌクレオチドカセットは、配列番号２８～３２から選択される１つ以上の配列、またはそれらと少なくとも８５％の同一性を有する配列を含む。ある特定のこれらの実施形態において、上記ポリヌクレオチドカセットの５’アームは、配列番号３３またはそれと少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。ある特定のこれらの実施形態において、上記ポリヌクレオチドカセットの３’アームは、配列番号３４またはそれと少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。配列番号２２～３４の核酸配列を以下に示す。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【0133】

いくつかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドカセットは、配列番号３９または上記配列と少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むか、または該配列からなる。

【表4】

【0134】

配列番号３９は、５’から３’の方向に、配列番号３９のヌクレオチド１～１４５を含むＡＡＶ血清型２の逆位末端反復配列（ＩＴＲ）と；配列番号３９のヌクレオチド１８０～６９３を含むＣＭＶプロモーター；アデノウイルスの三部分からなるリーダー配列および合成イントロンを含み、配列番号３９のヌクレオチド６９４～１３１４を含む５’非翻訳領域（ＵＴＲ）と；配列番号３９のヌクレオチド１３２９～１３４０を含むコザック配列と；配列番号３９のヌクレオチド１３３８～２７１４を含むコドン最適化されたアフリベルセプトｃＤＮＡ配列；ヒト足場付着領域を含み、配列番号３９のヌクレオチド２７１７～３５２７を含む３’ＵＴＲと；配列番号３９のヌクレオチド３５４６～３７４８を含むヒト成長ホルモンポリアデニル化／転写終結シグナルと；配列番号３９のヌクレオチド３７７２～３９１６を含むＡＡＶ血清型２の逆位末端反復配列（ＩＴＲ）とを含む。

【0135】

標的細胞（例えば、網膜細胞）における導入遺伝子（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤をコードする導入遺伝子）の発現を増強するための追加のポリヌクレオチドカセットがＷＯ２０１８／１７０４７３に開示されており、標的細胞における導入遺伝子の発現を増強させるためのポリヌクレオチドカセットに関連する上記特許文献の内容は、本明細書に援用される。

【0136】

いくつかの態様において、本発明は、個体における緑内障の治療方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む、上記方法を提供する。いくつかの態様において、本発明は、個体における眼圧の低減方法であって、単位用量の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）粒子を上記個体の一方の眼に投与することを含み、上記個体がヒトであり、上記ｒＡＡＶ粒子が、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む、上記方法を提供する。いくつかの実施形態において、本開示の方法は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２．５、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、及びそれらの任意のハイブリッドまたはキメラＡＡＶを含む、任意且つ適宜のＡＡＶ血清型の使用を提供する。

【0137】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、標的細胞、例えば網膜細胞の感染力の増加を有するバリアントカプシドタンパク質を含み、網膜細胞への形質導入を増加させるために、または個体における網膜細胞への遺伝子送達の標的化を増加させるために使用される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶカプシドタンパク質のカプシドタンパク質ＧＨループ／ループＩＶにアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施形態において、改変部位は、ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨループ／ループＩＶの溶媒アクセス可能部分である。ＡＡＶカプシドのＧＨループ／ループＩＶの説明に関しては、例えばｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ｅｔ ａｌ． （２００６） Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ． １４：８０９；Ｐａｄｒｏｎ ｅｔ ａｌ． （２００５） Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ７９：５０４７；及びＳｈｅｎ ｅｔ ａｌ． （２００７） Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ． １５：１９５５を参照されたい。７ｍ８バリアントを含むいくつかのＡＡＶカプシドバリアントが公知である。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ粒子は、対応する親のＡＡＶカプシドタンパク質と比較してカプシドタンパク質のＧＨループに５アミノ酸～１１アミノ酸、例えば７アミノ酸の配列の挿入を含むバリアントＡＡＶカプシドタンパク質を含み、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子による網膜細胞の感染力と比較すると、上記バリアントカプシドタンパク質は、網膜細胞の感染力の増加を付与する。いくつかの実施形態において、以下のアミノ酸配列、すなわち、ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）；ＬＡＮＥＴＩＴＲＰＡ（配列番号２）、ＬＡＫＡＧＱＡＮＮＡ（配列番号３）、ＬＡＫＤＰＫＴＴＮＡ（配列番号４）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号５）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号６）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号７）、ＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号８）、ＬＡＫＤＴＤＴＴＲＡ（配列番号９）、ＬＡＲＡＧＧＳＶＧＡ（配列番号１０）、ＬＡＡＶＤＴＴＫＦＡ（配列番号１１）、及びＬＡＳＴＧＫＶＰＮＡ（配列番号１２）、ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）、ＮＥＴＩＴＲＰ（配列番号１５）、ＫＡＧＱＡＮＮ（配列番号１６）、ＫＤＰＫＴＴＮ（配列番号１７）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号１８）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号１９）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号２０）、及びＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号２１）のいずれか１つがカプシドタンパク質のＧＨループに挿入されてもよい。いくつかの実施形態において、配列番号１～１２及び１４～２１で示すアミノ酸配列のいずれか１つが、ｒＡＡＶ中のＶＰ１カプシドタンパク質の溶媒に露出したＧＨループに挿入される。例えばＩＶＴ注射後の網膜細胞への目的の核酸の形質導入を容易にするために、カプシドタンパク質のＧＨループに挿入することができるアミノ酸配列に関するさらなる詳細は、ＷＯ２０１２１４５６０１、ＵＳ９５８７２８２、ＵＳ１０２０２６５７、及びＵＳ１０２１４７８５に記載されており、カプシドタンパク質のＧＨループに挿入することができるアミノ酸配列に関連する上記特許文献の内容は、本明細書に援用される。

【0138】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、以下の位置、すなわち、ＡＡＶ２カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間；ＡＡＶ１カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間；ＡＡＶ５カプシドタンパク質のアミノ酸５７５と５７６の間；ＡＡＶ６カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間；ＡＡＶ７カプシドタンパク質のアミノ酸５８９と５９０の間；ＡＡＶ８カプシドタンパク質のアミノ酸５９０と５９１の間；ＡＡＶ９カプシドタンパク質のアミノ酸５８８と５８９の間；またはＡＡＶ１０カプシドタンパク質のアミノ酸５８９と５９０の間に挿入された以下のアミノ酸配列、すなわち、ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）；ＬＡＮＥＴＩＴＲＰＡ（配列番号２）、ＬＡＫＡＧＱＡＮＮＡ（配列番号３）、ＬＡＫＤＰＫＴＴＮＡ（配列番号４）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号５）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号６）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号７）、ＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号８）、ＬＡＫＤＴＤＴＴＲＡ（配列番号９）、ＬＡＲＡＧＧＳＶＧＡ（配列番号１０）、ＬＡＡＶＤＴＴＫＦＡ（配列番号１１）、及びＬＡＳＴＧＫＶＰＮＡ（配列番号１２）、ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）、ＮＥＴＩＴＲＰ（配列番号１５）、ＫＡＧＱＡＮＮ（配列番号１６）、ＫＤＰＫＴＴＮ（配列番号１７）、ＫＤＴＤＴＴＲ（配列番号１８）、ＲＡＧＧＳＶＧ（配列番号１９）、ＡＶＤＴＴＫＦ（配列番号２０）、及びＳＴＧＫＶＰＮ（配列番号２１）のうちのいずれか１つを含むＡＡＶカプシドタンパク質、例えばＡＡＶ２カプシドタンパク質を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号１３の配列を含むＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含むＡＡＶ２カプシドタンパク質を含む。

【0139】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ２ ＶＰ１タンパク質のＧＨループ中、ＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＡ（配列番号１）を含むＡＡＶ２由来の７ｍ８バリアントカプシドタンパク質を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３８のアミノ酸配列または配列番号３８と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＧＨループを含むＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３８と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のいずれかの配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＧＨループを含むＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質を含む。

【表5】

【0140】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含むＡＡＶ２由来の７ｍ８バリアントカプシドタンパク質を含む。ＡＡＶ２ ＶＰ１の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含むＡＡＶ２由来の７ｍ８バリアントカプシドタンパク質の配列を以下に示す。

【表6】

【0141】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ１であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ１（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ２であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ２（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ３であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ３（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３であって、ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３のそれぞれが、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１４）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。

【0142】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ１であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ１（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ２であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ２（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ３であって、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ３（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３であって、ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３のそれぞれが、上記カプシドタンパク質の５８７位と５８８位の間に挿入されたアミノ酸配列ＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡ（配列番号１）を含む上記カプシドタンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、及びＶＰ３（但し、上記アミノ酸残基のナンバリングはＡＡＶ２ ＶＰ１カプシドタンパク質に対応する）を含む。

【0143】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶウイルスを生成させるために使用される組換えウイルス及び／またはプラスミドは、ポリＡ（ポリアデニル化）配列、非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’ＵＴＲ、または終止配列などの、他の転写または調節エレメントを含む。いくつかの実施形態において、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、または２種以上のタンパク質の同時発現を可能にするか、または多重遺伝子もしくは多シストロン性ｍＲＮＡを生み出す類似のエレメントを使用して、２種以上の遺伝子が上記ベクターあるいはプラスミドから発現される。

【0144】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ及び／またはｒＡＡＶを生成するために使用されるプラスミドは、以下の核酸エレメント：第１のＩＴＲ配列；プロモーター配列；イントロン配列；第１のＵＴＲ配列；抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする異種核酸；第２のＵＴＲ配列；ポリＡ配列；及び第２のＩＴＲ配列のうちの１つまたは複数を含む。いくつかの実施形態において、リンカー配列（複数可）が核酸エレメントの２つまたはそれより多くの間に挿入される。いくつかの実施形態において、治療ポリペプチドをコードする異種核酸は、例えば、アフリベルセプト（またはその機能性フラグメントもしくは機能性バリアント）をコードする。

【0145】

いくつかの実施形態において、上記ベクターは、標的化ベクター、特に、特定の細胞、例えば網膜細胞（例えば、視細胞、網膜神経節細胞、ミュラー細胞、双極細胞、アマクリン細胞、水平細胞、または網膜色素上皮細胞）のより高い感染力を示す標的化ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）である。本開示において使用するためのウイルスベクターは、個体において低い毒性及び／または低い免疫原性を示し、且つ、個体、例えばヒトにおいて治療有効量の上記抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）を発現するベクターを含んでいてもよい。当技術分野で公知の任意且つ好適な方法を、例えば本明細書の他所で記載される医薬組成物を調製するための組換えウイルス（例えば、ｒＡＡＶ）の生化学的精製に使用することができる。組換えＡＡＶウイルスは、細胞から直接または細胞を含む培養培地から採取することができる。ウイルスは、様々な生化学的手段、例えばゲルろ過、ろ過、クロマトグラフィー、アフィニティ精製、密度勾配超遠心、またはサイズ排除法を使用して精製することができる。いくつかの実施形態において、ウイルスは凍結乾燥される。

【0146】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、７ｍ８バリアントカプシドタンパク質、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８、及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト、またはその機能性フラグメントもしく機能性バリアント）をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子（例えば、７ｍ８バリアント）は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％のいずれかの網膜細胞の感染力が増加する。いくつかの実施形態において、上記網膜細胞の感染力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、５％～１００％、５％～９５％、５％～９０％、５％～８５％、５％～８０％、５％～７５％、５％～７０％、５％～６５％、５％～６０％、５％～５５％、５％～５０％、５％～４５％、５％～４０％、５％～３５％、５％～３０％、５％～２５％、５％～２０％、５％～１５％、または５％～１０％のいずれかの増加である。

【0147】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８の網膜細胞に対する感染力の上記増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも１倍、少なくとも１．１倍、少なくとも１．２倍、少なくとも１．３倍、少なくとも１．４倍、少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、または少なくとも２倍のいずれかである。いくつかの実施形態において、上記感染力の増加は、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍のいずれかである。いくつかの実施形態において、上記感染力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍、少なくとも３０倍、少なくとも３５倍、少なくとも４０倍、少なくとも４５倍、少なくとも５０倍、少なくとも５５倍、少なくとも６０倍、少なくとも６５倍、少なくとも７０倍、少なくとも７５倍、少なくとも８０倍、少なくとも８５倍、少なくとも９０倍、または少なくとも１００倍のいずれかである。

【0148】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８の網膜細胞に対する感染力の上記増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、１０倍～１００倍、１０倍～９５倍、１０倍～９０倍、１０倍～８５倍、１０倍～８０倍、１０倍～７５倍、１０倍～７０倍、１０倍～６５倍、１０倍～６０倍、１０倍～５５倍、１０倍～５０倍、１０倍～４５倍、１０倍～４０倍、１０倍～３５倍、１０倍～３０倍、１０倍～２５倍、１０倍～２０倍、または１０倍～１５倍である。

【0149】

いくつかの実施形態において、網膜細胞の感染力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、２倍～２０倍、２倍～１９倍、２倍～１８倍、２倍～１７倍、２倍～１６倍、２倍～１５倍、２倍～１４倍、２倍～１３倍、２倍～１２倍、２倍～１１倍、２倍～１０倍、２倍～９倍、２倍～８倍、２倍～７倍、２倍～６倍、２倍～５倍、２倍～４倍、または２倍～３倍である。

【0150】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるカプシドタンパク質のアミノ酸修飾を行うことによって、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子が対象の眼の内境界膜（ＩＬＭ）を通過する能力と比較して、ｒＡＡＶ粒子の、個体、例えばヒトの眼のＩＬＭを通過する能力を増加させることができる。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８がＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％のいずれかの増加である。いくつかの実施形態において、ＩＬＭを通過する上記能力の増加は、親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して、５％～１００％、５％～９５％、５％～９０％、５％～８５％、５％～８０％、５％～７５％、５％～７０％、５％～６５％、５％～６０％、５％～５５％、５％～５０％、５％～４５％、５％～４０％、５％～３５％、５％～３０％、５％～２５％、５％～２０％、５％～１５％、または５％～１０％の増加である。

【0151】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８がＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親のＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも１倍、少なくとも１．１倍、少なくとも１．２倍、少なくとも１．３倍、少なくとも１．４倍、少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、または少なくとも２倍のいずれかである。いくつかの実施形態において、ＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親のＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍のいずれかである。いくつかの実施形態において、ＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍、少なくとも３０倍、少なくとも３５倍、少なくとも４０倍、少なくとも４５倍、少なくとも５０倍、少なくとも５５倍、少なくとも６０倍、少なくとも６５倍、少なくとも７０倍、少なくとも７５倍、少なくとも８０倍、少なくとも８５倍、少なくとも９０倍、または少なくとも１００倍のいずれかである。

【0152】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８がＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、１０倍～１００倍、１０倍～９５倍、１０倍～９０倍、１０倍～８５倍、１０倍～８０倍、１０倍～７５倍、１０倍～７０倍、１０倍～６５倍、１０倍～６０倍、１０倍～５５倍、１０倍～５０倍、１０倍～４５倍、１０倍～４０倍、１０倍～３５倍、１０倍～３０倍、１０倍～２５倍、１０倍～２０倍、または１０倍～１５倍である。

【0153】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶバリアント、例えばｒＡＡＶ２．７ｍ８がＩＬＭを通過する上記能力の増加は、対応する親または未修飾ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶ粒子と比較して、２倍～２０倍、２倍～１９倍、２倍～１８倍、２倍～１７倍、２倍～１６倍、２倍～１５倍、２倍～１４倍、２倍～１３倍、２倍～１２倍、２倍～１１倍、２倍～１０倍、２倍～９倍、２倍～８倍、２倍～７倍、２倍～６倍、２倍～５倍、２倍～４倍、または２倍～３倍である。

【0154】

いくつかの実施形態において、アフリベルセプトをコードする核酸を含むｒＡＡＶ．７ｍ８を、遺伝子治療のために使用する。いくつかの実施形態において、ＡＡＶ２またはｒＡＡＶ２を使用して、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を、対象の眼もしくは網膜細胞に硝子体内注射または網膜下注射を介して送達する。いくつかの実施形態において、ＡＡＶ２またはｒＡＡＶ２を使用して、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を、対象の眼または網膜細胞に硝子体内注射を介して送達する。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ２．７ｍ８を使用して、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）の核酸配列を、対象の網膜細胞に送達する。いくつかの実施形態において、異種核酸（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤をコードする核酸）は、標的細胞ゲノム（例えば、網膜細胞ゲノム）に組み込まれ、標的細胞において例えば、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）の長期間の発現が生じる。いくつかの実施形態において、上記ウイルスベクターは、異種核酸（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤をコードする核酸）を含むプラスミドまたは他の染色体外遺伝子エレメントを、標的細胞（例えば、網膜細胞）に送達する。

【0155】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％のいずれかの同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３５のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、アフリベルセプトをコードし、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。配列番号３５の配列を以下に示す。

【表7】

【0156】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号３６の核酸配列と少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９％、または少なくとも約１００％のいずれかの配列相同性を有し、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。配列番号３６の配列を図１に示す。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、アフリベルセプトの核酸配列（例えば、配列番号３６）と少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９％、または少なくとも約１００％のいずれかの配列相同性を有し、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記アフリベルセプトの核酸配列は、そのアミノ酸配列に由来する。いくつかの実施形態において、上記アフリベルセプトの核酸配列は、対象におけるその発現を改善するためにコドン最適化されている。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４０の核酸配列と少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．９％、または１００％の配列相同性のいずれかを有し、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４０の核酸配列を含む核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４０の核酸配列を含み、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。

【表8】

【0157】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のいずれかの同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）を両端に有する核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４１のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、且つＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）を両端に有する核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、配列番号４１のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸を含む。

【表9】

【0158】

いくつかの実施形態において、上記アフリベルセプトの核酸配列は、霊長動物対象またはヒト対象における発現に関してコドン最適化されている。アフリベルセプトアミノ酸配列に対応する合成遺伝子の構築は、文献、例えばＫａｎｄａ Ａ， Ｎｏｄａ Ｋ， Ｓａｉｔｏ Ｗ， Ｉｓｈｉｄａ Ｓ． Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ Ｔｒａｐｓ Ｇａｌｅｃｔｉｎ－１， ａｎ Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ Ｆａｃｔｏｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ． Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ５：１７９４６ （２０１５）（「ＶＥＧＦ－Ｔｒａｐ_Ｒ１Ｒ２（アフリベルセプトに対応）ｃＤＮＡが、ＩＤＴ（Ｃｏｒａｌｖｉｌｌｅ， ＩＡ）によって合成遺伝子として生成した」ことを記載）に記載されている。アフリベルセプトの利用可能なアミノ酸配列を考慮すると、当技術分野で公知の任意の方法を使用して、本明細書に記載される遺伝子治療またはｒＡＡＶにおいて使用するための、アフリベルセプトのｃＤＮＡを生成することができる。

【0159】

コドン最適化は、当技術分野で公知の任意の方法によって達成することができる。コドン最適化は、目的の標的または宿主細胞、例えばヒト網膜細胞における遺伝子の発現を増強するために、天然のアミノ酸配列を維持しながら、天然配列の少なくとも１つのコドン（例えば、約１個以上、約２個以上、約３個以上、約４個以上、約５個以上、約１０個以上、約１５個以上、約２０個以上、約２５個以上、約５０個以上、約１００個以上、またはそれより多い数以上のコドン）を宿主細胞において、より頻繁に使用されるまたは最も頻繁に使用されるコドンと交換することによって、核酸配列を修飾するプロセスを指す。例えば、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ Ｃｏｄｏｎ Ｕｓａｇｅ Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ Ｔａｂｌｅ Ｔｏｏｌ ａｔ ｗｗｗ（ｄｏｔ）ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ（ｄｏｔ）ｃｏｍ／ｔｏｏｌｓ／ｃｏｄｏｎ－ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ－ｔａｂｌｅ；Ｃｏｄｏｎ Ｕｓａｇｅ Ｄａｔａｂａｓｅ ａｔ ｗｗｗ（ｄｏｔ）ｋａｚｕｓａ（ｄｏｔ）ｏｒ（ｄｏｔ）ｊｐ／ｃｏｄｏｎ／；及びＮａｋａｍｕｒａ， Ｙ．， ｅｔ ａｌ． “Ｃｏｄｏｎ ｕｓａｇｅ ｔａｂｕｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄａｔａｂａｓｅｓ： ｓｔａｔｕｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｙｅａｒ ２０００” Ｎｕｃｌ． Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ２８：２９２ （２０００）を含むコドン使用表が容易に入手可能である。

【0160】

相同性は、機能性フラグメント、挿入、欠失、置換を含む配列、偽フラグメント、偽遺伝子、スプライスバリアント、または人為的に最適化した配列を含む、但しこれらに限定されない２つの配列間のアライメントの残基のパーセント保存率を指す。

【0161】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、アフリベルセプトをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドはアフリベルセプトである。

【0162】

本明細書で使用される場合、「アフリベルセプト」は、上記で特定されるアフリベルセプトアミノ酸配列（配列番号３５）と少なくとも７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより高く、または１００％のいずれかの相同性を有するポリペプチドもしくはタンパク質配列またはその機能性フラグメントもしくはバリアントもしくは突然変異体を指す。相同性は、機能性フラグメント、挿入、欠失、置換を含む配列、偽フラグメント、偽遺伝子、スプライスバリアント、または人為的に最適化した配列を含む、但しこれらに限定されない２つの配列間のアライメントの残基の保存率を指す。

【0163】

いくつかの実施形態において、上記アフリベルセプトのアミノ酸配列は、配列番号３５のアフリベルセプトアミノ酸配列と、少なくとも７５％相同、８０％相同、８１％相同、８２％相同、８３％相同、８４％相同、８５％相同、８６％相同、８７％相同、８８％相同、８９％相同、９０％相同、９１％相同、９２％相同、９３％相同、９４％相同、９５％相同、９６％相同、９７％相同、９８％相同、９９％相同、９９．９％相同、または１００％相同のいずれかである。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるアフリベルセプトをコードする核酸配列は、上記で特定されるアフリベルセプトアミノ酸配列の対応するｃＤＮＡ配列と比較した場合、アフリベルセプトの核酸配列（例えば、配列番号３６）との間で少なくとも７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、または１００％のいずれかの配列相同性を示す。いくつかの実施形態において、アフリベルセプトは、アフリベルセプトと、空間的に（例えば、その二次構造、三次構造、及び四次構造または立体配座に関して）少なくとも８０％相同、８５％相同、９０％相同、９１％相同、９２％相同、９３％相同、９４％相同、９５％相同、９６％相同、９７％相同、９８％相同、９９％相同、９９．９％相同、または１００％相同のいずれかである。いくつかの実施形態において、アフリベルセプトは、標準治療で使用されるアフリベルセプトと、空間的に（例えば、その二次構造、三次構造、及び四次構造または立体配座に関して）、多くて８０％相同、８５％相同、９０％相同、９１％相同、９２％相同、９３％相同、９４％相同、９５％相同、９６％相同、９７％相同、９８％相同、９９％相同、９９．９％相同、または１００％相同のいずれかである。

【0164】

いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶに基づく遺伝子治療に含まれるアフリベルセプト遺伝子産物、またはアフリベルセプト導入遺伝子は、本明細書に開示されるカプシドバリアント（例えば、７ｍ８バリアント）を含み、配列番号３５の上記のアミノ酸配列と、またはアフリベルセプトの対応するｃＤＮＡ配列（例えば、配列番号３６と比較される、遺伝子治療に使用されるアフリベルセプト配列のｃＤＮＡ）との間で、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも１００％のいずれかの相同性を有するタンパク質、融合タンパク質、またはポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法、組成物は、アフリベルセプトの機能性フラグメント、またはそのバリアントもしくは突然変異体を含む。いくつかの実施形態において、アフリベルセプトの核酸配列は、ｉｎ ｖｉｖｏでのその活性、発現、安定性、及び／または溶解性を増強するように修飾されるかまたはコドン最適化される。

【0165】

アフリベルセプトは、グリコシル化されていてもよい１１５ｋＤａの融合タンパク質である。アフリベルセプトは、ヒトＶＥＧＦＲ－１及びＶＥＧＦＲ－２の細胞外ＶＥＧＦ受容体配列に融合されたＩｇＧ骨格を含み、その天然のまたは内因性の受容体より高い親和性でＶＥＧＦ－Ａに結合することによって可溶性のデコイ受容体として機能する。例えば、Ｓｔｅｗａｒｔ ＭＷ． Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ （ＶＥＧＦ Ｔｒａｐ－ｅｙｅ）： ｔｈｅ ｎｅｗｅｓｔ ａｎｔｉ－ＶＥＧＦ ｄｒｕｇ． Ｂｒ． Ｊ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． ２０１２ Ｓｅｐ；９６（９）：１１５７－８を参照されたい。アフリベルセプトのＶＥＧＦに対する高い親和性は、天然のまたは内因性のＶＥＧＦ受容体のその後の結合及び活性化を妨害または破壊する。ＶＥＧＦ活性が低下すると、血管形成及び血管透過性の減少が生じる場合がある。アフリベルセプトによる胎盤増殖因子ＰＩＧＦ及びＶＥＧＦ－Ｂの阻害はまた、異常な（例えば、過剰な）血管形成及び／または血管新生によって特徴付けられる眼の疾患または障害の治療にも寄与し得る。ＰＩＧＦは、ＰＩＧＦの上昇レベルに関連し得る、血管形成及び滲出性ＡＭＤなどのある特定の眼疾患または障害に関連している。ＶＥＧＦ－Ｂの過剰発現は、血液－網膜関門の破壊及び網膜血管形成に関連する場合がある。このように、ＶＥＧＦ－Ａ、ＶＥＧＦ－Ｂ、及びＰＩＧＦの阻害は全て、アフリベルセプトの有効性に寄与する可能性がある。

【0166】

標的細胞に導入遺伝子を送達するためのベクターの調製方法
いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、当技術分野で公知の任意の方法を使用して製造される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、Ｓｆ９細胞におけるバキュロウイルス発現ベクター系を使用して製造される。Ｓｆ９細胞は、バキュロウイルスを使用する組換えタンパク質産生のために一般的に使用される昆虫細胞培養細胞系である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、Ｓｆ９細胞において２種のバキュロウイルスを使用して製造される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、Ｓｆ９細胞において２種のバキュロウイルスを使用して製造され、第１のバキュロウイルスは、ＡＡＶ２ Ｒｅｐ及びＡＡＶ２．７ｍ８ Ｃａｐタンパク質の遺伝子をコードし、第２のバキュロウイルスは抗ＶＥＧＦ剤をコードする。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、Ｓｆ９細胞において２種のバキュロウイルスを使用して製造され、第１のバキュロウイルスは、ＡＡＶ２ Ｒｅｐ及びＡＡＶ２．７ｍ８ Ｃａｐタンパク質の遺伝子をコードし、第２のバキュロウイルスはアフリベルセプト（例えば、ヒトアフリベルセプト）ｃＤＮＡ発現カセットをコードする。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子は、Ｓｆ９細胞において２種のバキュロウイルスを使用して製造され、第１のバキュロウイルスは、ＡＡＶ２ Ｒｅｐ及びＡＡＶ２．７ｍ８ Ｃａｐタンパク質の遺伝子をコードし、第２のバキュロウイルスは、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードし、ＡＡＶ２逆位末端反復配列（ＩＴＲ）に挟まれた核酸を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドは、配列番号３５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、上記ポリペプチドはアフリベルセプトである。

【0167】

用量
いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、個体の一方の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記個体の一方の眼は右眼または左眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の一方の眼は右眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の一方の眼は左眼である。いくつかの実施形態において、本明細書に提供される方法は、ｒ単位用量のＡＡＶ粒子を個体の対側の眼に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は右眼であり、上記対側の眼は左眼である。いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼は左眼であり、上記対側の眼は右眼である。

【0168】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの少なくとも約２週間（例えば、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１年、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、少なくとも約５年、またはそれを超える期間）の後である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの少なくとも約２週間後であり、上記個体の上記対側の眼に投与される上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の上記一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量より高い（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％、またはそれを超える幅のいずれか）。

【0169】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約１週間、最大約２週間、最大約３週間、または最大約４週間後である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約２週間（例えば、約０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、または１４日）後である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約２週間（例えば、約０日、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、または１４日）後であり、上記個体の上記対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の上記一方の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量とほぼ同一であるか（例えば、１％未満高いもしくは低い、５％未満高いもしくは低い、１０％未満高いもしくは低い、または２０％未満高いもしくは低い）、または低い（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または約９０％低い）。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約２週間後であり、上記個体の上記対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の上記一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量とほぼ同一である（例えば、１％未満高いもしくは低い、５％未満高いもしくは低い、１０％未満高いもしくは低い、または２０％未満高いもしくは低い）。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記個体の上記対側の眼に投与することは、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子を上記一方の眼に投与することの最大約２週間後であり、上記個体の上記対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量より低い（例えば、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または約９０％低い）。

【0170】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は上記個体の上記一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、ベクターゲノム数（ｖｇ）として表される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１１ベクターゲノム（ｖｇ）以下のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１×１０^１０～約２×１０^１０ｖｇ、約２×１０^１０～約３×１０^１０ｖｇ、約３×１０^１０～約４×１０^１０ｖｇ、約４×１０^１０～約５×１０^１０ｖｇ、約５×１０^１０～約６×１０^１０ｖｇ、約６×１０^１０～約７×１０^１０ｖｇ、約７×１０^１０～約８×１０^１０ｖｇ、約８×１０^１０～約９×１０^１０ｖｇ、約９×１０^１０～約１０×１０^１０ｖｇ、約１×１０^１１～約２×１０^１１ｖｇ、約２×１０^１１～約３×１０^１１ｖｇ、約３×１０^１１～約４×１０^１１ｖｇ、約４×１０^１１～約５×１０^１１ｖｇ、または約５×１０^１１～約６×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値のｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１×１０^１１～約５×１０^１１ｖｇ、約５×１０^１１～約１×１０^１２ｖｇ、約１×１０^１２～約５×１０^１２ｖｇ、約５×１０^１２～約１×１０^１３ｖｇ、約１×１０^１３～約５×１０^１３ｖｇ、約５×１０^１３～約１×１０^１４ｖｇ、のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ベクターゲノム（ｖｇ）～約２×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇ、約７×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇ、約８×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇ、約９×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇ、約１０×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇ、または約１×１０^１１ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１０ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ～約７×１０^１０ｖｇ、約７×１０^１０ｖｇ～約８×１０^１０ｖｇ、約８×１０^１０ｖｇ～約９×１０^１０ｖｇ、約９×１０^１０ｖｇ～約１０×１０^１０ｖｇ、約１０×１０^１０ｖｇ～約１×１０^１１ｖｇ、または約１×１０^１１ｖｇ～約２×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ、約７×１０^１０ｖｇ、約８×１０^１０ｖｇ、約９×１０^１０ｖｇ、約１０×１０^１０ｖｇ、約１×１０^１１ｖｇ、または約２×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、ｒＡＡＶ粒子の約６×１０^１０ｖｇまたは約２×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量はｒＡＡＶ粒子の約６×１０^１０ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ、約２×１０^１１ｖｇ、または約６×１０^１１ｖｇのｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１０ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約２×１０^１１ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１１ｖｇである。

【0171】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、眼当りのベクターゲノム数（ｖｇ）（ｖｇ／眼）として表される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１１ｖｇ／眼以下の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１×１０^１０～約２×１０^１０、約２×１０^１０～約３×１０^１０、約３×１０^１０～約４×１０^１０、約４×１０^１０～約５×１０^１０、約５×１０^１０～約６×１０^１０、約６×１０^１０～約７×１０^１０、約７×１０^１０～約８×１０^１０、約８×１０^１０～約９×１０^１０、約９×１０^１０～約１０×１０^１０、約１×１０^１１～約２×１０^１１、約２×１０^１１～約３×１０^１１、約３×１０^１１～約４×１０^１１、約４×１０^１１～約５×１０^１１、または約５×１０^１１～約６×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値の上記ｒＡＡＶ粒子含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１×１０^１１～約５×１０^１１、約５×１０^１１～約１×１０^１２、約１×１０^１２～約５×１０^１２、約５×１０^１２～約１×１０^１３、約１×１０^１３～約５×１０^１３、約５×１０^１３～約１×１０^１４ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値の上記ｒＡＡＶ粒子含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、または約１×１０^１１ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、ｒＡＡＶ粒子の約６×１０^１０ｖｇ／眼～約７×１０^１０ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼～約８×１０^１０ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼～約９×１０^１０ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼～約１０×１０^１０ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼～約１×１０^１１ｖｇ／眼、または約１×１０^１１ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼、約１×１０^１１ｖｇ／眼、または約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼または約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼、約２×１０^１１ｖｇ／眼、または約６×１０^１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１０ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約２×１０^１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６×１０^１１ｖｇ／眼である。

【0172】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、Ｅは、底１０の指数の略記であり、ｘＥｙは、ｘに、底１０の累乗／羃指数ｙ乗を乗じたものを指す。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、ベクターゲノム数（ｖｇ）として表される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１１ベクターゲノム（ｖｇ）以下の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１Ｅ１０～約２Ｅ１０ｖｇ、約２Ｅ１０～約３Ｅ１０ｖｇ、約３Ｅ１０～約４Ｅ１０ｖｇ、約４Ｅ１０～約５Ｅ１０ｖｇ、約５Ｅ１０～約６Ｅ１０ｖｇ、約６Ｅ１０～約７Ｅ１０ｖｇ、約７Ｅ１０～約８Ｅ１０ｖｇ、約８Ｅ１０～約９Ｅ１０ｖｇ、約９Ｅ１０～約１０Ｅ１０ｖｇ、約１Ｅ１１～約２Ｅ１１ｖｇ、約２Ｅ１１～約３Ｅ１１ｖｇ、約３Ｅ１１～約４Ｅ１１ｖｇ、約４Ｅ１１～約５Ｅ１１ｖｇ、または約５Ｅ１１～約６Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値のｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ベクターゲノム（ｖｇ）～約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇ、約７Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇ、約８Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇ、約９Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇ、約１０Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇ、または約１Ｅ１１ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ～約７Ｅ１０ｖｇ、約７Ｅ１０ｖｇ～約８Ｅ１０ｖｇ、約８Ｅ１０ｖｇ～約９Ｅ１０ｖｇ、約９Ｅ１０ｖｇ～約１０Ｅ１０ｖｇ、約１０Ｅ１０ｖｇ～約１Ｅ１１ｖｇ、または約１Ｅ１１ｖｇ～約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ、約７Ｅ１０ｖｇ、約８Ｅ１０ｖｇ、約９Ｅ１０ｖｇ、約１０Ｅ１０ｖｇ、約１Ｅ１１ｖｇ、または約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇまたは約２Ｅ１１ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇの上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ、約２Ｅ１１ｖｇ、または約６Ｅ１１ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約２Ｅ１１ｖｇである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１１ｖｇである。

【0173】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、眼当りのベクターゲノム数（ｖｇ）（ｖｇ／眼）として表される。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１１ｖｇ／眼以下の上記ｒＡＡＶ粒子のである。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約１Ｅ１０～約２Ｅ１０ｖｇ／眼、約２Ｅ１０～約３Ｅ１０ｖｇ／眼、約３Ｅ１０～約４Ｅ１０ｖｇ／眼、約４Ｅ１０～約５Ｅ１０ｖｇ／眼、約５Ｅ１０～約６Ｅ１０ｖｇ／眼、約６Ｅ１０～約７Ｅ１０ｖｇ／眼、約７Ｅ１０～約８Ｅ１０ｖｇ／眼、約８Ｅ１０～約９Ｅ１０ｖｇ／眼、約９Ｅ１０～約１０Ｅ１０ｖｇ／眼、約１Ｅ１１～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、約２Ｅ１１～約３Ｅ１１ｖｇ／眼、約３Ｅ１１～約４Ｅ１１ｖｇ／眼、約４Ｅ１１～約５Ｅ１１ｖｇ／眼、または約５Ｅ１１～約６Ｅ１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値のｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、約７Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、約８Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、約９Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、約１０Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼、または約１Ｅ１１ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼～約７Ｅ１０ｖｇ／眼、約７Ｅ１０ｖｇ／眼～約８Ｅ１０ｖｇ／眼、約８Ｅ１０ｖｇ／眼～約９Ｅ１０ｖｇ／眼、約９Ｅ１０ｖｇ／眼～約１０Ｅ１０ｖｇ／眼、約１０Ｅ１０ｖｇ／眼～約１Ｅ１１ｖｇ／眼、または約１Ｅ１１ｖｇ／眼～約２Ｅ１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼、約７Ｅ１０ｖｇ／眼、約８Ｅ１０ｖｇ／眼、約９Ｅ１０ｖｇ／眼、約１０Ｅ１０ｖｇ／眼、約１Ｅ１１ｖｇ／眼、または約２Ｅ１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼または約２Ｅ１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量はｒＡＡＶ粒子の約６Ｅ１０ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は、約６Ｅ１０ｖｇ／眼、約２Ｅ１１ｖｇ／眼、または約６Ｅ１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１０ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約２Ｅ１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、上記単位用量は約６Ｅ１１ｖｇ／眼である。

【0174】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、硝子体液中で治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、硝子体液中で、約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｍｌ、またはそれを超える濃度のいずれか１つで、これらの値の間の任意の範囲を含む、治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の濃度を達成するのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、硝子体液中でアフリベルセプトの発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、硝子体液中で約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｍｌ、またはそれを超える濃度のいずれか１つで、これらの値の間の任意の範囲を含む、アフリベルセプトの濃度を達成するのに十分な単位用量である。

【0175】

いくつかの実施形態において、上記個体の上記一方の眼及び／または上記対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、房水中で治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、房水中で、少なくとも約０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１．０μｇ／ｍｌ、またはそれを超える濃度で、これらの値の間の任意の範囲を含む、治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の濃度を達成するのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、房水中でアフリベルセプトの発現を生じさせるの十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、房水中で少なくとも約０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１．０μｇ／ｍｌ、またはそれを超える濃度で、これらの値の間の任意の範囲を含む、アフリベルセプトの濃度を達成するのに十分な単位用量である。

【0176】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、網膜中で治療タンパク用質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、網膜中で少なくとも約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｇ、またはそれを超える濃度で、これらの値の間の任意の範囲を含む治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の濃度を達成するのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、網膜中でアフリベルセプトの発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、網膜中で少なくとも約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｇ、またはそれを超える濃度で、これらの値の間の任意の範囲を含むアフリベルセプトの濃度を達成するのに十分な単位用量である。

【0177】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、脈絡膜中で治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の発現を生じさせるのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、脈絡膜中で約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｇ、またはそれを超える濃度のいずれか１つで、これらの値の間の任意の範囲を含む、治療用タンパク質（例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤）の濃度を達成するのに十分な単位用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、脈絡膜中でアフリベルセプトの発現を生じさせるのに十分な単位用量である。一部の実施形態では、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、脈絡膜中で約３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０μｇ／ｇまたはそれを超える濃度のいずれか１つで、これらの値の間の任意の範囲を含むアフリベルセプトの濃度を達成するために十分な単位用量である。

【0178】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は治療有効用量である。

【0179】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前の視力と比較して、視力を維持するまたは改善するのに十分である場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前の視力と比較して、視力を改善するのに十分である場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前の視力と比較して、約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％、またはそれを超える幅のいずれかよりも大きい視力の改善を生じさせるのに十分である場合、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、視力は最高矯正視力（ＢＣＶＡ）である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前のＢＣＶＡと比較して、ＢＣＶＡを改善するのに十分である場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、ＢＣＶＡはＥＴＤＲＳスコアとして表され、ＥＴＤＲＳスコアは正確に読んだ文字数に対応する（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前のＢＣＶＡと比較して、少なくとも１５ ＥＴＤＲＳ文字（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）（例えば、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約３０、少なくとも約４０、少なくとも約５０、少なくとも約６０、または約７０文字）のＢＣＶＡの改善を生じさせるのに十分である場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量が、該単位用量のｒＡＡＶ粒子を投与する前のＢＣＶＡと比較して、上記個体のＥＴＤＲＳ文字数の低下が１５文字未満（Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）（例えば、１５文字以下、１４文字以下、１３文字以下、１２文字以下、１１文字以下、１０文字以下、９文字以下、８文字以下、７文字以下、６文字以下、５文字以下、４文字以下、３文字以下、２文字以下、１文字、または０文字）であるＢＣＶＡの維持を生じさせるのに十分である場合には、治療有効用量である。

【0180】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に、当該個体の視覚が維持されていると判定される場には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に、当該個体の視覚が改善されていると判定される場合には、治療有効用量である。

【0181】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に、当該個体が必要とする救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）が、約４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、またはそれを超える期間のいずれか毎に１回未満である場合に、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、該単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の後に、当該個体が少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１５週間、２０週間、３０週間、４０週間、５０週間、６０週間、７０週間、８０週間、９０週間、１００週間、１１０週間、またはそれを超える期間のいずれかの間、いかなる救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）も必要としない場合には、治療有効用量である。

【0182】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与前の色素上皮剥離（ＰＥＤ）と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、当該個体におけるＰＥＤが消散していると判定される場合には、治療有効用量である。

【0183】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与前に存在するＣＮＶ病変と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、ＣＮＶ病変が収縮する場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与前に存在するＣＮＶ病変と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、ＣＮＶ病変が収縮する場合には、治療有効用量である。約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかより大きな幅で収縮する場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与前に存在するＣＮＶ病変と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、ＣＮＶ病変が成長しない場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与前に存在するＣＮＶ病変と比較して、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、ＣＮＶ病変が、約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、または２０％のいずれかより大きな幅で成長しない場合には、治療有効用量である。

【0184】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、当該個体における一方の眼及び／または対側の眼の解剖学的特徴が、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前の解剖学的特徴と比較して改善されていると判定される場合には、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与後に、当該個体における一方の眼及び／または対側の眼の解剖学的特徴が、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与前の解剖学的特徴と比較して安定化されている及び／または維持されていると判定される場合には、治療有効用量である。

【0185】

いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記用量の当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与が、眼疾患または障害の少なくとも１つの症状を低減する、停止させる、または防止する場合には、治療上有効である。いくつかの実施形態において、かかる症状としては、例えば視覚障害（色覚障害、かすみ目、中心視力の悪化など）、視覚喪失、虹彩ルベオーシスの進行度の変化、眼圧（ＩＯＰ）の変化、追加の抗緑内障介入（抗緑内障薬物療法、手術等）の回数の変化、及び／または前房隅角の隅角鏡検査における変化が挙げられるが、これらに限定はされない。

【0186】

いくつかの実施形態において、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記単位用量の当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与によって、当該眼疾患（例えば、血管新生緑内障などの緑内障）の１つ以上の臨床上の特徴が維持される、部分消散する、または完全消散する場合には、治療有効用量である。例えば、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記用量の当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与により、当技術分野で公知の任意の方法によって測定して、当該眼疾患（例えば、血管新生緑内障などの緑内障）が完全消散する、部分消散する、または維持される場合には、治療的に有効である。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記用量の当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与により、最高矯正視力（ＢＣＶＡ）（例えば、ＥＴＤＲＳスコアに基づく；Ｖｉｔａｌｅ ｅｔ ａｌ．， （２０１６） ＪＡＭＡ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ １３４（９）：１０４１：１０４７）、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の一方の眼及び／または対側の眼への投与後に個体が必要とする救助治療薬による治療（例えば、アフリベルセプト注射）の回数、色素上皮剥離（ＰＥＤ）の消散、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）病変の成長、虹彩ルベオーシス、当技術分野で公知の任意の方法（例えば、ＳＤ－ＯＣＴ、ＯＣＴ、フルオレセイン血管造影、デジタルカラー眼底撮影等）に基づく解剖学的特徴によって評価して、当該眼疾患が完全消散する、部分消散する、または維持される場合には、治療的に有効である。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記用量の上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与によって、眼科検査、眼圧（例えば、ゴルドマン眼圧計、またはＴｏｎｏ－ｐｅｎを使用）、倒像眼底検査、上記一方の眼及び／または対側の眼ならびに眼付属器の検査、眼瞼及び／または瞳孔の応答性、眼瞼下垂、異常な瞳孔形状、瞳孔不同、光に対する反応の異常、求心性瞳孔障害、細隙灯検査（眼瞼、結膜、角膜、水晶体、光彩、及び前房の検査を含む）、硝子体、視神経、周辺網膜、及び網膜の脈管構造の後側セグメントの異常、ＳＤ－ＯＣＴ、フルオレセイン血管造影、デジタルカラー眼底撮影（網膜、視神経乳頭、及び／または黄斑の画像を含む）、房水採取、硝子体液採取、ＯＣＴ－血管造影（ＯＣＴ－Ａ）、屈折及び視力（ＢＣＶＡ）により評価して、眼疾患が完全消散している、部分消散している、または維持されている場合には、治療上有効である。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の一方の眼及び／または対側の眼への上記用量の投与により、前房隅角の隅角鏡検査によって分析されたとき、眼疾患（緑内障や血管新生緑内障など）が完全消散している、部分消散している、または維持されている場合には、治療上有効である。隅角鏡検査は通常、前房角とも呼ばれる眼の内部排液システムを評価するために眼科検査中に実施される。「角」とは、角膜と虹彩が交わる場所のことである。角は、眼の中の液体（房水）が眼から静脈系に排出される場所である。

【0187】

いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量と同一である。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量とは異なる。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量より高く、例えば約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％、またはそれより高い割合のいずれかよりも高い。いくつかの実施形態において、当該個体の対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、上記個体の一方の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量より高く、例えば約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、約２２５％、約２５０％、約２７５％、約３００％、またはそれより高い割合のいずれかよりも高い。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、ベクターゲノム数（ｖｇ）／眼（ｖｇ／眼）として表わされる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約６×１０^１１ｖｇ／眼以下のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約１×１０^１０～約２×１０^１０ｖｇ／眼、約２×１０^１０～約３×１０^１０ｖｇ／眼、約３×１０^１０～約４×１０^１０ｖｇ／眼、約４×１０^１０～約５×１０^１０ｖｇ／眼、約５×１０^１０～約６×１０^１０ｖｇ／眼、約６×１０^１０～約７×１０^１０ｖｇ／眼、約７×１０^１０～約８×１０^１０ｖｇ／眼、約８×１０^１０～約９×１０^１０ｖｇ／眼、約９×１０^１０～約１０×１０^１０ｖｇ／眼、約１×１０^１１～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約２×１０^１１～約３×１０^１１ｖｇ／眼、約３×１０^１１～約４×１０^１１ｖｇ／眼、約４×１０^１１～約５×１０^１１ｖｇ／眼、または約５×１０^１１～約６×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子であり、これらの範囲内の任意の値のｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼、または約１×１０^１１ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、ｒＡＡＶ粒子の約６×１０^１０ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼～約７×１０^１０ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼～約８×１０^１０ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼～約９×１０^１０ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼～約１０×１０^１０ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼～約１×１０^１１ｖｇ／眼、または約１×１０^１１ｖｇ／眼～約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約６×１０^１０ｖｇ／眼、約７×１０^１０ｖｇ／眼、約８×１０^１０ｖｇ／眼、約９×１０^１０ｖｇ／眼、約１０×１０^１０ｖｇ／眼、約１×１０^１１ｖｇ／眼、または約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約６×１０^１０ｖｇ／眼または約２×１０^１１ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子の単位用量は、約６×１０^１０ｖｇ／眼の上記ｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は、約６×１０^１０ｖｇ／眼、約２×１０^１１ｖｇ／眼、または約６×１０^１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ粒子の単位用量は約６×１０^１０ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ粒子の単位用量は約２×１０^１１ｖｇ／眼である。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ粒子の単位用量は約６×１０^１１ｖｇ／眼である。

【0188】

いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼に投与される単位用量のｒＡＡＶ粒子と、上記個体の対側の眼に投与される単位用量のｒＡＡＶ粒子は、同じ時間に投与される。いくつかの実施形態において、当該個体の一方の眼に投与される単位用量のｒＡＡＶ粒子と、上記個体の対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の単位用量は、異なる時間に投与される。いくつかの実施形態において、対側の眼に投与される単位用量は、単位用量を一方の眼に投与した少なくとも約１時間、少なくとも約２時間、少なくとも約４時間、少なくとも約８時間、少なくとも約１２時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約１日、少なくとも約２日、少なくとも約３日、少なくとも約４日、少なくとも約５日、少なくとも約６日、少なくとも約７日、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、またはそれより長い期間のいずれかの後に投与される。いくつかの実施形態において、対側の眼に投与される単位用量は、単位用量を一方の眼に投与した少なくとも約２週間後に投与される。

【0189】

いくつかの実施形態において、単回の単位用量のｒＡＡＶ粒子は、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、一方の眼及び／または対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の１回単位用量は、治療有効用量である。いくつかの実施形態において、ｒＡＡＶ粒子の１回分を超える用量（例えば、約２、３、４、５回、またはそれより多く回数分の単位用量のいずれかより多い）が、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与される。いくつかの実施形態において、一方の眼及び／または対側の眼に投与されるｒＡＡＶ粒子の１回分を超える用量は、治療有効用量である。

【0190】

いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ治療、例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤によるＩＶＴ注射をｒＡＡＶ粒子の投与を受ける一方の眼及び／または対側の眼に、単位用量（例えば、約２×１０^１１ｖｇ／眼～約６×１０^１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子の単位用量）のｒＡＡＶ粒子を投与する少なくとも約１週間前、例えば少なくとも約７日前に施す。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ治療、例えば、アフリベルセプトなどの抗ＶＥＧＦ剤によるＩＶＴ注射を眼に約１日目に施し、単位用量のｒＡＡＶ粒子、例えば約２×１０^１１ｖｇ／眼～約６×１０^１１ｖｇ／眼の単位用量のｒＡＡＶ粒子を眼に約８日目に投与する。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は約２×１０^１１ｖｇ／眼または約６×１０^１１ｖｇ／眼のｒＡＡＶ粒子である。いくつかの実施形態において、上記眼疾患は糖尿病性黄斑浮腫である。

【0191】

医薬製剤
いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は医薬製剤中に存在する。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、上記ｒＡＡＶ粒子、１種以上の浸透圧またはイオン強度調整剤、１種以上の緩衝剤、１種以上の界面活性剤、及び１種以上の溶媒を含む。いくつかの実施形態において、上記浸透圧またはイオン強度調整剤は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態において、上記１種以上の緩衝剤はリン酸二水素ナトリウム及び／またはリン酸水素ナトリウムである。いくつかの実施形態において、上記界面活性剤はポロキサマー１８８である。いくつかの実施形態において、上記溶媒は水である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、上記ｒＡＡＶ粒子、塩化ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、及び界面活性剤を含む。

【0192】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約１×１０^１０ｖｇ／ｍＬ～約１×１０^１３ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬ～約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの塩化ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約１ｍＭ～約１０ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。

【0193】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤中のｒＡＡＶ粒子は、約１×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約１×１０^１３ｖｇ／ｍｌの濃度で存在する。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤中のｒＡＡＶ粒子は、約１×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１４ｖｇ／ｍｌの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記医薬製剤中のｒＡＡＶ粒子は、約１×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^０９ｖｇ／ｍｌ、約２×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約３×１０^０９、約３×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^０９、約４×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約５×１０^０９、約５×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^０９、約６×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約７×１０^０９、約７×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約８×１０^０９、約８×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約９×１０^０９、約９×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約１０×１０^０９、約１０×１０^０９ｖｇ／ｍｌ～約１×１０^１０、約１×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^１０、約２×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約３×１０^１０、約３×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^１０、約４×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約５×１０^１０、約５×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１０、約６×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約７×１０^１０、約７×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約８×１０^１０、約８×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約９×１０^１０、約９×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約１０×１０^１０、約１０×１０^１０ｖｇ／ｍｌ～約１×１０^１１、約１×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^１１、約２×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約３×１０^１１、約３×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^１１、約４×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約５×１０^１１、約５×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１１、約６××１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約７×１０^１１、約７×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約８×１０^１１、約８×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約９×１０^１１、約９×１０^１１ｖｇ／ｍｌ～約１０×１０１１、約１×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^１２、約２×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約３×１０１２、約３×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^１２、約４×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約５×１０^１２、約５×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１２、約６×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約７×１０^１２、約７×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約８×１０^１２、約８×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約９×１０^１２、約９×１０^１２ｖｇ／ｍｌ～約１０×１０^１２、約１×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^１３、約２×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約３×１０^１３、約３×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^１３、約４×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約５×１０１３、約５×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１３、約６×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約７×１０^１３、約７×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約８×１０^１３、約８×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約９×１０^１３、約９×１０^１３ｖｇ／ｍｌ～約１０×１０^１３、約１×１０^１４ｖｇ／ｍｌ～約２×１０^１４、約２×１０^１４ｖｇ／ｍｌ～約３×１０^１４、約３×１０^１４ｖｇ／ｍｌ～約４×１０^１４、約４×１０^１４ｖｇ／ｍｌ～約５×１０^１４、または約５×１０^１４ｖｇ／ｍｌ～約６×１０^１４ｖｇ／ｍＬの濃度で存在する。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬ～約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子を含む。

【0194】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤中の塩化ナトリウムは約１５０ｍＭ～約２００ｍＭの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記医薬製剤中の塩化ナトリウムは、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭ、または約２００ｍＭの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記医薬製剤中の塩化ナトリウムは約１８０ｍＭの濃度で存在する。

【0195】

いくつかの実施形態において、上記リン酸二水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約１ｍＭ～約１０ｍＭの濃度で存在する。いくつかの実施形態において、上記リン酸二水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、または約１０ｍＭのいずれかの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記リン酸二水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約５ｍＭの濃度で存在する。

【0196】

いくつかの実施形態において、上記リン酸水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約１ｍＭ～約１０ｍＭの濃度で存在する。いくつかの実施形態において、上記リン酸水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、または約１０ｍＭのいずれかの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記リン酸水素ナトリウムは上記医薬製剤中に約５ｍＭの濃度で存在する。

【0197】

いくつかの実施形態において、上記ポロキサマー１８８は上記医薬製剤中に約０．０００５％（ｗ／ｖ）～約０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、上記ポロキサマー１８８は上記医薬製剤中に約０．０００５％（ｗ／ｖ）、約０．０００６％（ｗ／ｖ）、約０．０００７％（ｗ／ｖ）、約０．０００８％（ｗ／ｖ）、約０．０００９％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）、約０．００２％（ｗ／ｖ）、約０．００３％（ｗ／ｖ）、約０．００４％（ｗ／ｖ）、または約０．００５％（ｗ／ｖ）のいずれかの濃度で存在する。ある特定の実施形態では、上記ポロキサマー１８８は上記医薬製剤中に約０．００１％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する。

【0198】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤のｐＨは約７．０～約７．５である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤のｐＨは約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、または約７．５である。ある特定の実施形態では、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。いくつかの実施形態において、塩酸及び水酸化ナトリウムを使用して上記医薬製剤のｐＨを調整する。

【0199】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１２ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、約６×１０^１１ｖｇ／ｍＬのｒＡＡＶ粒子、約１８０ｍＭの塩化ナトリウム、約５ｍＭのリン酸二水素ナトリウム、約５ｍＭのリン酸水素ナトリウム、及び約０．００１％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８を含み、上記医薬製剤のｐＨは約７．３である。

【0200】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、当該個体、例えばヒト患者の一方の眼及び／または対側の眼に硝子体内（ＩＶＴ）注射により投与して、所望の治療効果または予防効果を実現するのに好適である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は再構築された均一な溶液として供給される。いくつかの実施形態において、上記溶液は懸濁液である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は凍結させた懸濁液として供給され、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与する前に解凍される。いくつかの実施形態において、上記溶液は等張性である。

【0201】

他の実施形態において、例えば抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプトまたはその機能性フラグメントもしくはバリアント）をコードする核酸配列を含むＡＡＶ２．７ｍ８ベクターを含む医薬組成物が凍結乾燥形態で供給され、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与の前に再構成される。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法は、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプトまたはその機能性フラグメントもしくはバリアント）をコードする核酸配列を含む、凍結乾燥した医薬組成物を、対象への投与の前に緩衝剤中で再構築する、溶解する、または可溶化することをさらに含む。いくつかの実施形態において、かかる凍結乾燥した医薬組成物は、以下、すなわち、凍結保護剤、界面活性剤、塩、安定剤、またはそれらのいずれかの組合せの１種以上を含む。

【0202】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は均一な溶液剤である。いくつかの実施形態において、均一な溶液剤がプレフィルドシリンジの形態で供給される。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は剤剤として供給される。いくつかの実施形態において、上記懸濁液は溶液である。いくつかの実施形態において、上記懸濁液剤は冷蔵されている。いくつかの実施形態において、上記懸濁液剤は凍結されている。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法は、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与（例えば、ＩＶＴ注射による）の前に、冷蔵されている懸濁液剤を室温まで加温し、且つ／または懸濁液剤を撹拌して、活性成分（複数可）が確実に溶液中に溶解し、且つ／または一様に分布するようにするステップをさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法は、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与（例えば、ＩＶＴ注射による）の前に、凍結懸濁液剤を解凍し、室温まで加温し、且つ／または懸濁液剤を撹拌して、活性成分（複数可）が確実に溶液中に溶解し、且つ／または一様に分布するようにするステップをさらに含む。いくつかの実施形態において、懸濁液剤は、対象への投与（例えば、ＩＶＴ注射による）の前に希釈される。いくつかの実施形態において、懸濁液剤はプレフィルドシリンジとして供給される。

【0203】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は凍結した懸濁液剤として提供される。いくつかの実施形態において、上記懸濁液剤は、薬学的に許容される賦形剤、例えば、界面活性剤、グリセロール、非イオン界面活性剤、緩衝剤、グリコール、塩、及びそれらのいずれかの組合せを含む。

【0204】

いくつかの実施形態において、上記懸濁液剤は溶液である。いくつかの実施形態において、上記懸濁液剤はミセルを含む。

【0205】

いくつかの実施形態において、貯蔵安定性及び取扱いの利便性のために、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプトまたはその機能性フラグメントもしくはバリアント）をコードする核酸配列を含む医薬製剤が、凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）粉末、凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ）粉末、または真空乾燥粉末として製剤化され、それが、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼に投与する前に、生理食塩水、緩衝液、または水によって再構成される。あるいは、上記医薬製剤は、懸濁液剤または均一な溶液剤などの水溶液剤として製剤化される。上記医薬製剤は、アフリベルセプトをコードする核酸配列を含むｒＡＡＶ粒子を含有していてもよい。リン酸、ＰＢＳ、もしくはトリス緩衝液、グリコール、グリセロール、生理食塩水、界面活性剤（例えば、プルロニック（登録商標）もしくはポリソルベート）、またはそれらのいずれかの組合せなどの種々の賦形剤を使用して医薬製剤を安定化させてもよい。さらに、アルコールなどの凍結保護物質を凍結または乾燥条件下での安定剤として使用してもよい。いくつかの実施形態において、遺伝子治療薬が、懸濁液剤、冷蔵懸濁液剤、または凍結懸濁液として提供される。

【0206】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液の体積は、約２０μＬ、３０μＬ、４０μＬ、５０μＬ、６０μＬ、７０μＬ、８０μＬ、９０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、３００μＬ、４００μＬ、５００μＬ、６００μＬ、７００μＬ、８００μＬ、９００μＬ、または１０００μＬのいずれかである。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液の体積は約２５０μＬである。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液の体積は、０．１～０．５ｍＬ、０．１～０．２ｍＬ、０．３～０．５ｍＬ、０．５～１．０ｍＬ、０．５～０．７ｍＬ、０．６～０．８ｍＬ、０．８～１ｍＬ、０．９～１．１ｍＬ、１．０～１．２ｍＬ、または１．０～１．５ｍＬである。他の実施形態において、上記体積は、０．１ｍＬ以下、０．２ｍＬ以下、０．３ｍＬ以下、０．４ｍＬ以下、０．５ｍＬ以下、０．６ｍＬ以下、０．７ｍＬ以下、０．８ｍＬ以下、０．９ｍＬ以下、１．０ｍＬ以下、１．１ｍＬ以下、１．２ｍＬ以下、１．３ｍＬ以下、１．４ｍＬ以下、または１．５ｍＬ以下である。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液の体積は約０．２５ｍＬである。

【0207】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液は、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製止め栓）を備える滅菌されたそのまま使用可能なバイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉された（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過された凍結懸濁液として提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液は、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製止め栓）を備える滅菌されたそのまま使用可能なバイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉された（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過された凍結懸濁液として提供され、上記バイアルは、０．１～０．５ｍＬ、０．１～０．２ｍＬ、０．２～０．３ｍＬ、０．３～０．４ｍＬ、または０．４ｍＬ～０．５ｍＬの体積の医薬製剤の懸濁液を収納している。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤の懸濁液は、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製止め栓）を備える滅菌されたそのまま使用可能なバイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉された（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過された凍結懸濁液として提供され、上記バイアルは約０．２５ｍＬの体積の医薬製剤の懸濁液を収納している。

【0208】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される医薬製剤が、霊長動物（例えば、非ヒト霊長動物及びヒト対象）に硝子体内注射または網膜下注射によって投与するために設計される、操作される、または適合化が行われる。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を含むｒＡＡＶ粒子を含む医薬製剤が、個体の眼に硝子体内注射用に調製される。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物が、約２５μＬ以下、約３０μＬ以下、約３５μＬ以下、約４０μＬ以下、約４５μＬ以下、約５０μＬ以下、約５５μＬ以下、約６０μＬ以下、約６５μＬ以下、約７０μＬ以下、約７５μＬ以下、約８０μＬ以下、約８５μＬ以下、約９０μＬ以下、約９５μＬ以下、約１００μＬ以下、約１１０μＬ以下、約１２０μＬ以下、約１３０μＬ以下、約１４０μＬ以下、約１５０μＬ以下、約１６０μＬ以下、約１７０μＬ以下、約１８０μＬ以下、約１９０μＬ以下、約２００μＬ以下、約２１０μＬ以下、約２２０μＬ以下、約２３０μＬ以下、約２４０μＬ以下、もしくは約２５０μＬ以下の、または２５μＬ、３０μＬ、３５μＬ、４０μＬ、４５μＬ、５０μＬ、５５μＬ、６０μＬ、６５μＬ、７０μＬ、７５μＬ、８０μＬ、８５μＬ、９０μＬ、９５μＬ、１００μＬ、１１０μＬ、１２０μＬ、１３０μＬ、１４０μＬ、１５０μＬ、１６０μＬ、１７０μＬ、１８０μＬ、１９０μＬ、２００μＬ、２１０μＬ、２２０μＬ、２３０μＬ、２４０μＬ、もしくは２５０μＬのいずれか以下の体積の硝子体内注射を可能にする濃度に製剤化される、あるいは再構成される。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤の単位用量は、約２５μＬ以下、約３０μＬ以下、約３５μＬ以下、約４０μＬ以下、約４５μＬ以下、約５０μＬ以下、約５５μＬ以下、約６０μＬ以下、約６５μＬ以下、約７０μＬ以下、約７５μＬ以下、約８０μＬ以下、約８５μＬ以下、約９０μＬ以下、約９５μＬ以下、約１００μＬ以下、約１１０μＬ以下、約１２０μＬ以下、約１３０μＬ以下、約１４０μＬ以下、約１５０μＬ以下、約１６０μＬ以下、約１７０μＬ以下、約１８０μＬ以下、約１９０μＬ以下、約２００μＬ以下、約２１０μＬ以下、約２２０μＬ以下、約２３０μＬ以下、約２４０μＬ以下、もしくは約２５０μＬ以下、または２５μＬ、３０μＬ、３５μＬ、４０μＬ、４５μＬ、５０μＬ、５５μＬ、６０μＬ、６５μＬ、７０μＬ、７５μＬ、８０μＬ、８５μＬ、９０μＬ、９５μＬ、１００μＬ、１１０μＬ、１２０μＬ、１３０μＬ、１４０μＬ、１５０μＬ、１６０μＬ、１７０μＬ、１８０μＬ、１９０μＬ、２００μＬ、２１０μＬ、２２０μＬ、２３０μＬ、２４０μＬ、もしくは２５０μＬのいずれか以下の体積を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、約２５μＬ、３０μＬ、３５μＬ、４０μＬ、４５μＬ、５０μＬ、５５μＬ、６０μＬ、６５μＬ、７０μＬ、７５μＬ、８０μＬ、８５μＬ、９０μＬ、９５μＬ、１００μＬ、１１０μＬ、１２０μＬ、１３０μＬ、１４０μＬ、１５０μＬ、１６０μＬ、１７０μＬ、１８０μＬ、１９０μＬ、２００μＬ、２１０μＬ、２２０μＬ、２３０μＬ、２４０μＬ、または２５０μＬのいずれかの体積の、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を含む医薬製剤の溶液または懸濁液の硝子体内注射を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、約３０μＬまたは約１００μＬの体積の、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を含む医薬製剤の溶液または懸濁液の硝子体内注射を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、約３０μＬの体積の、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を含む医薬製剤の溶液または懸濁液の硝子体内注射を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、約１００μＬの体積の、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードする核酸配列を含む医薬製剤の溶液または懸濁液の硝子体内注射を含む。

【0209】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）導入遺伝子の核酸配列を含むＡＡＶ２．７ｍ８粒子は、遺伝子治療医薬製剤の構成成分である。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の７ｍ８バリアントカプシドタンパク質を含む任意の血清型のｒＡＡＶ粒子を使用して、凍結懸濁液または凍結乾燥した（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ）もしくは凍結乾燥した（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）製剤組成物を作製する。いくつかの実施形態において、冷蔵または凍結懸濁液として上記遺伝子治療薬を製剤化される。いくつかの実施形態において、上記ｒＡＡＶ粒子はｒＡＡＶ２である。いくつかの実施形態において、凍結乾燥したまたは懸濁液の上記医薬製剤は、７ｍ８バリアントカプシドタンパク質、及び抗ＶＥＧＦ剤（例えば、アフリベルセプト）をコードするＤＮＡ配列を含むｒＡＡＶ２を含む。いくつかの実施形態において、上記懸濁液は冷蔵または凍結されている。

【0210】

いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子の、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼への投与は硝子体内（ＩＶＴ）注射による。ＩＶＴ注射では、上記ｒＡＡＶ粒子を医薬製剤の懸濁液剤の形態で送達することができる（例えば、本明細書に記載のようにして）。最初に、局所麻酔薬が当該の眼の表面に適用され、その後、点眼用消毒溶液が適用される。器具を使用してまたは使用せずに眼を開いた状態に保ち、直接観察下で、短く細い針、例えば３０ゲージの針を用い、上記ｒＡＡＶ粒子が、当該個体の一方の眼及び／または対側の眼の硝子体腔に、強膜を通して注射される。一般には、約２５μＬ～約２５０μＬ（例えば、約２５μＬ、約３０μＬ、約４０μＬ 約５０μＬ、約６０μＬ、約７０μＬ、約８０μＬ、約９０μＬ、約１００μＬ、約１１０μＬ、約１２０μＬ、約１３０μＬ、約１４０μＬ、約１５０μＬ、約１６０μＬ、約１７０μＬ、約１８０μＬ、約１９０μＬ、約２００μＬ、約２１０μＬ、約２２０μＬ、約２３０μＬ、約２４０μＬ、または約２５０μＬのいずれか）の体積のｒＡＡＶ粒子懸濁液をＩＶＴ注射によって上記の眼に送達することができる。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は約１００μＬの体積を含む。いくつかの実施形態において、上記単位用量のｒＡＡＶ粒子は約３０μＬの体積を含む。いくつかの実施形態において、上記ＩＶＴ注射は硝子体液の除去と組み合わせて実施される。いくつかの実施形態において、硝子体切除術が実施されてもよく、硝子体ゲルの全体積がｒＡＡＶ粒子懸濁液（例えば、約４ｍＬのｒＡＡＶ粒子懸濁液）を注入することによって置き換えられる。硝子体切除術は適当な口径サイズ（例えば、２０ゲージ～２７ゲージ）のカニューレを使用して実施され、除去された硝子体ゲルの体積を注入用カニューレからの液、例えば、生理食塩水、等張溶液、ｒＡＡＶ粒子懸濁液の注入によって置き換えられる。ＩＶＴ投与は一般に忍容性が良好である。手順の終了時に注射部位が軽度に赤くなる場合がある。圧痛が生じることもあるが、大多数の患者からはいかなる痛みも報告されない。この手順後、眼帯も眼球保護帯も必要なく、活動も制限されない。感染防止を補助するために数日間の抗生物質点眼剤が処方される場合もある。

【0211】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、異常な（例えば、過剰な）血管形成または血管新生を特徴とする眼疾患または障害を治療するために、個体（例えば、ヒトまたは非ヒト霊長動物）の一方の眼及び／または対側の眼にＩＶＴ注射によって投与される単位用量（例えば、治療有効用量）である。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、本明細書の他の箇所でさらに詳細に記載される単位用量（例えば、治療有効用量）を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される単位用量（例えば、治療有効用量）のウイルスベクター（例えば、本明細書に開示されるｒＡＡＶベクター）の体積は、約２５μＬ、３０μＬ、３５μＬ、４０μＬ、４５μＬ、５０μＬ、５５μＬ、６０μＬ、６５μＬ、７０μＬ、７５μＬ、８０μＬ、８５μＬ、９０μＬ、９５μＬ、１００μＬ、１１０μＬ、１２０μＬ、１３０μＬ、１４０μＬ、１５０μＬ、１６０μＬ、１７０μＬ、１８０μＬ、１９０μＬ、２００μＬ、２１０μＬ、２２０μＬ、２３０μＬ、２４０μＬ、または２５０μＬ（これらの値の間の任意の範囲を含む）のいずれか１つ以下である。対象に投与される単位用量の体積を最小化することにより、ＩＶＴ注射に付随する眼圧の変化及び他の有害作用（例えば、眼圧の上昇、炎症、刺激、もしくは疼痛）が回避または軽減される場合がある。

【0212】

眼への使用に好適な医薬製剤としては、滅菌水溶液剤もしくは分散液剤、及び滅菌注射用溶液剤、懸濁液剤、または分散液剤を現場で調製するための滅菌粉末剤が挙げられる。硝子体内投与に関して、好適な担体としては、生理的食塩水、静菌水、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、及び／または等張化剤、例えばグリセロールが挙げられる。ある特定の実施形態において、上記医薬製剤は、シリンジへの吸い上げまたは注射が容易である程度に滅菌され且つ流動性である。ある特定の実施形態において、上記医薬製剤は、製造及び貯蔵の条件下で安定であり、細菌及び真菌などの微生物の汚染作用から保護されている。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、塩またはグリセロールなどの等張化剤を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、凝集を防止するために界面活性剤または安定剤が上記医薬組成物に添加される。

【0213】

いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は賦形剤または担体を含有する。担体は、例えば、水、生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、及びそれらのいずれかの組合せを含有する溶媒または分散媒である。適当な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングを使用することによって、分散液剤の場合には必要な粒子サイズを維持することによって、ならびに、ポリソルベート（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）ポリソルベート２０、ポリソルベート８０）、ドデシル硫酸ナトリウム（ラウリル硫酸ナトリウム）、ラウリルジメチルアミン酸化物、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、ポリエトキシル化アルコール、ポリオキシエチレンソルビタン、オクトキシノール（Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標） Ｘ１００（商標））、Ｎ，Ｎ－ジメチルドデシルアミン－Ｎ－オキシド、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム（ＨＴＡＢ）、ポリオキシル１０ラウリルエーテル、Ｂｒｉｊ（登録商標） ７２１（商標）、胆汁酸塩（デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム）、プルロニック（登録商標）酸（Ｆ－６８、Ｆ－１２７）、ポリオキシルヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（商標））ノニルフェノールエトキシレート（Ｔｅｒｇｉｔｏｌ（商標））、シクロデキストリン、及び、塩化エチルベンゼトニウム（Ｈｙａｍｉｎｅ（商標））などの界面活性剤を使用することによって、維持することができる。微生物の作用の防止は、種々の抗細菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、クレゾール、チメロサールなどによって実現することができる。多くの実施形態において、上記医薬製剤中には、等張化剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、及び／または塩化ナトリウムが含まれている。吸収を遅延させる作用剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを上記組成物中に含めることによって、内部組成物を持続的に吸収させることができる。いくつかの実施形態において、上記医薬担体としては、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ポリソルベート、及びスクロースが挙げられる。いくつかの実施形態において、上記医薬製剤は、界面活性剤、例えば、ポリソルベート、ポロキサマー、またはプルロニック（登録商標）などの非イオン界面活性剤を含む。いくつかの実施形態において、非イオン界面活性剤の添加により、上記医薬組成物中の凝集が低減する。

【0214】

本明細書では、本明細書に記載の少なくとも１種の医薬製剤を含むキットも提供される。いくつかの実施形態において、上記キットは、医薬製剤の凍結懸濁液（例えば、バイアル中の１つの単位用量）を備える。いくつかの実施形態において、上記キットは、本明細書に開示される凍結乾燥（ｌｙｐｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）または凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ）医薬製剤（例えば、バイアル中に１つの単位用量）、ならびに凍結乾燥医薬組成物を溶解させる、希釈する、及び／または再構成するための溶液を備える。いくつかの実施形態において、再構成または希釈のための溶液が、充填済みのシリンジとして供給される。いくつかの実施形態において、上記キットは、ｒＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ２．７ｍ８）を含む凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅｄ－ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｐｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）医薬組成物、及び医薬組成物を所望の濃度または体積に再構成するための溶液を備える。いくつかの実施形態において、上記キットは、本明細書に開示される医薬組成物を再構成する際の凝集を防止するのに役立つ緩衝剤を備える。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物はプレフィルドシリンジ中で提供される。いくつかの実施形態において、上記キットは２室型シリンジまたは容器を備えており、２室型シリンジの１室には医薬組成物を溶解させるまたは希釈するための緩衝液が入っている。いくつかの実施形態において、上記キットは注射用シリンジを備える。いくつかの実施形態において、再構成された溶液は投与の前にろ過される。いくつかの実施形態において、上記キットは、再構成された医薬組成物を患者への投与の前にろ過するためのフィルターまたはフィルターシリンジを備える。いくつかの実施形態において、上記キットは、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製止め栓）を備える、滅菌されそのまま使用可能なバイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉された（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過凍結懸濁液として提供される、本明細書に開示されるｒＡＡＶ粒子を含む医薬製剤の懸濁液を備える。いくつかの実施形態において、上記キットは、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製の止め栓）を備える滅菌されそのまま使用可能なバイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉され（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過された凍結懸濁液として提供される、本明細書に開示のｒＡＡＶ粒子を含む医薬製剤の懸濁液を備え、上記バイアルには、０．１～０．５ｍＬ、０．１～０．２ｍＬ、０．２～０．３ｍＬ、０．３～０．４ｍＬ、または０．４ｍＬ～０．５ｍＬの体積の医薬製剤の懸濁液が収納されている。いくつかの実施形態において、上記キットは、そのまま使用可能な止め栓（例えば、クロロブチル製の止め栓）を備える滅菌され、そのまま使用可能な止め栓バイアル（例えば、０．５ｍＬバイアル；例えばＣｒｙｓｔａｌ Ｚｅｎｉｔｈ（登録商標）バイアル）中の、密閉され（例えば、滅菌アルミニウム剥ぎ取り式シールを用いて）滅菌ろ過された凍結懸濁液として提供される、本開示のｒＡＡＶ粒子を含む医薬製剤の懸濁液を備え、上記バイアルには、約０．２５ｍＬの体積の医薬製剤の懸濁液が収納されている。いくつかの実施形態において、上記キットは、使用説明書；例えば、本明細書に開示されるｒＡＡＶ粒子を用いて眼疾患を治療するための説明書をさらに備える。

【0215】

眼疾患
一態様において、本開示は、個体における眼疾患の治療方法を提供する。別の態様において、本開示は、眼疾患を有する個体の眼における眼圧（ＩＯＰ）の低減方法を提供する。

【0216】

いくつかの実施形態において、上記眼疾患は緑内障である。本明細書では、「緑内障」とは、視神経を損傷し、視力喪失を引き起こす眼の疾病を指す。一般に、この損傷は眼内の異常に高い圧力によって生じる。緑内障は６０歳を超える人の失明の主要な原因の１つである。緑内障はあらゆる年齢層で発生する可能性があるが、高齢者でより一般的である。いくつかの実施形態において、上記緑内障は、慢性緑内障としても知られる原発性緑内障である。原発性緑内障は、眼圧（ＩＯＰ）として知られる眼内の過剰な圧力によって起こる。この圧力の上昇は、通常、眼内の体液の不適正な排出が原因である。いくつかの実施形態において、上記緑内障は続発性緑内障である。続発性緑内障とは、眼圧の上昇という特定可能な原因があり、それにより視神経損傷及び視覚喪失が生じる、いずれかの形態の緑内障を指す。いくつかの実施形態において、上記緑内障は血管新生緑内障であり、血管新生緑内障は、一般的には、虹彩上及び眼の排水路上の新たな血管の異常な形成に起因する。上記新たな血管は、眼の液体が線維柱帯網を通って出て行くのを妨げ、眼圧の上昇を起こす。血管新生緑内障は常に他の異常、最も多くの場合は糖尿病を伴う。いくつかの実施形態において、上記緑内障は、眼内の液体の排出角が開いたままである開放隅角（広角、慢性単純）緑内障であり、あまり一般的ではないタイプとしては、閉塞隅角（狭隅角、急性うっ血性）緑内障及び正常眼圧緑内障が挙げられる。開放隅角緑内障は時間をかけてゆっくりと進行し、疼痛はない。周辺視力が低下し始め、続いて中心視力が低下し、治療を受けなければ失明に至る場合がある。いくつかの実施形態において、上記緑内障は閉塞隅角緑内障である。閉塞隅角緑内障は、徐々にまたは突然に現れる場合がある。閉塞隅角緑内障が突然現れると、重度の目の痛み、かすみ目、瞳孔の中等度の拡大、目の充血、吐き気を伴う場合がある。緑内障による視力喪失は、一度発症すると永続する。早期に治療すれば、薬物療法、レーザー治療、または手術によって疾患の進行を遅らせるまたは停止させることが可能である。治療の目標は眼圧を低下させることである。

【0217】

いくつかの実施形態において、上記個体は、単位用量のｒＡＡＶ粒子の投与の直前約１２週間（例えば、約３ヶ月または約４ヶ月）の間に、抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による少なくとも１回の以前の治療（例えば、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回の、またはそれを超える治療）を受けている。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与の直前約１２週間（例えば、約３ヶ月または約４ヶ月）の間に、一方の眼及び／または対側の眼に抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による２回または３回の以前の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼に抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による少なくとも約１回、少なくとも約５回、少なくとも約１０回、少なくとも約２０回、少なくとも約３０回、少なくとも約４０回、少なくとも約５０回、少なくとも約６０回、少なくとも約７０回、少なくとも約８０回、少なくとも約９０回、少なくとも約１００回、少なくとも約１１０回、少なくとも約１２０回、またはそれよりも多くの以前の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、上記個体は、約２週間、約３週間、４週間、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、またはそれを超える、一方の眼及び／または対側の眼に対する計算された抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、及び／またはアフリベルセプト）注射間隔を有していた。いくつかの実施形態において、上記個体は、約５～７週間、約４～１０週間、約４～７週間、または約４～６週間の、一方の眼及び／または対側の眼に対する算出された抗ＶＥＧＦ（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、及び／またはアフリベルセプト）注射間隔を有していた。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与前の少なくとも約５日間、少なくとも約６日間、少なくとも約７日間、少なくとも約８日間、少なくとも約９日間、少なくとも約１０日間、少なくとも約１１日間、少なくとも約１２日間、少なくとも約１３日間、少なくとも約１４日間、少なくとも約１５日間、少なくとも約１６日間、少なくとも約１７日間、少なくとも約１８日間、少なくとも約１９日間、または少なくとも約２０日間のいずれかの間、一方の眼及び／または対側の眼に抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与前の約７日間、約１０日間、または約１４日間にわたって、一方の眼及び／または対側の眼に抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を受けていた。いくつかの実施形態において、以前の治療は、抗ＶＥＧＦ剤の眼内注射、網膜下注射または硝子体内注射を含む。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤は、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプトである。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ剤はアフリベルセプトである。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与前約１２ヶ月の間に、一方の眼及び／または対側の眼に対して抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を１回から２０回の間（例えば、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、１５回、１６回、１７回、１８回、１９回、または２０回のいずれか）受けていた。一部の実施形態では、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与前約１２ヶ月の間に、一方の眼及び／または対側の眼に対して抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプト）による以前の治療を約９回または約１０回受けていた。

【0218】

いくつかの実施形態において、上記個体は眼疾患に対する以前の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼眼において、以前の眼疾患の治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は以前の抗ＶＥＧＦ治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼において以前の抗ＶＥＧＦ治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は以前のアフリベルセプト治療を受けていない。いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼において以前のアフリベルセプト治療を受けていない。

【0219】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法を使用して、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、ファリシマブ、アビシパルペゴル、コンベルセプト、ＯＰＴ－３０２、ＫＳＩ－３０１、注射用スニチニブマレイン酸塩（ＧＢ－１０２）、ＰＡＮ－９０８０６（ＰａｎＯｐｔｉｃａ）、及び／またはアフリベルセプトによる以前の治療を受けた対象における、眼の疾患または障害を防止または治療する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法を使用して、ベバシズマブ、ブロルシズマブ、ラニビズマブ、及び／またはアフリベルセプトによる治療に対して応答性の眼の疾患または障害を防止または治療する。

【0220】

いくつかの実施形態において、上記個体は、一方の眼及び／または対側の眼へのｒＡＡＶ粒子の単位用量の投与の少なくとも１日前、少なくとも１週間前、少なくとも１ヶ月前、少なくとも２ヶ月前、少なくとも４ヶ月前、少なくとも６ヶ月前、少なくとも１２ヶ月前、少なくとも１８ヶ月前、少なくとも２４ヶ月前、少なくとも３０ヶ月前、少なくとも３６ヶ月前、少なくとも４２ヶ月前、少なくとも４８ヶ月前、少なくとも５４ヶ月前、少なくとも６０ヶ月前、少なくとも６６ヶ月前、少なくとも７２ヶ月前、少なくとも７８ヶ月前、少なくとも８４ヶ月前、少なくとも９０ヶ月前、９６ヶ月前、少なくとも１０２ヶ月前、少なくとも１０８ヶ月前、少なくとも１１４ヶ月前、少なくとも１２０ヶ月前、少なくとも１２６ヶ月前、少なくとも１３２ヶ月前、またはそれよりも前に、眼疾患の診断を受けている。

【0221】

以下の説明は、当業者が種々の実施形態を作出し、使用することを可能にするために示すものである。特定のデバイス、技法、及び適用の説明は単に例として提示される。本明細書に記載の実施例に対する種々の修飾が当業者には容易に明らかになり、また、本明細書において定義されている一般原則を、種々の実施形態の主旨及び範囲から逸脱することなく、他の実施例及び用途に適用することができる。したがって、種々の実施形態は、本明細書に記載され示されている実施例に限定されるものではなく、請求項に矛盾しない範囲と一致するものである。

【実施例】

【0222】

実施例１：糖尿病黄斑浮腫を有する対象におけるＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプト第２相、多施設、ランダム化、二重盲検、実薬対照試験
本実施例では、糖尿病黄斑浮腫を有する対象におけるＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの単回硝子体内（ＩＶＴ）注射の持続性を評価するために設計された第２相、多施設、ランダム化、二重盲検、実薬対照試験について記載する。

【0223】

Ｉ．試験の目的及びエンドポイント
Ａ．主要目的
本試験の主要目的は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの単回ＩＶＴ注射の持続性を評価することであった。

【0224】

Ｂ．副次目的
本試験の副次目的は以下を含んでいた：
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの安全性及び忍容性の評価。
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの黄斑浮腫に対する効果の評価。
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの最高矯正視力（ＢＣＶＡ）に対する効果の評
価。
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの糖尿病網膜症重症度尺度（ＤＲＳＳ）スコアに対する効果の評価。
・レスキューアフリベルセプト（２ｍｇ ＩＶＴ）の必要性の評価。
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプト投与前の先行するアフリベルセプトの用量（２ｍｇ ＩＶＴ）の評価。
・ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの視覚を脅かす合併症（前眼部血管新生、硝子体出血、または牽引性網膜剥離）の発生に対する効果の評価。

【0225】

Ｃ．主要エンドポイント
本試験の主要エンドポイントは、試験を行う眼に関する、以下のいずれかの出現率によって定義される糖尿病黄斑浮腫（ＤＭＥ）疾患活動性の悪化までの時間であった：
・ＳＤ－ＯＣＴによって評価して、１日目または第４週に記録された２つのＣＳＴ測定値のうちの小さい方と比較して中心領域網膜厚（ＣＳＴ）の＞５０μｍの増加。
・ＤＭＥ疾患活動性の悪化に起因する、１日目または第４週に記録された２つのＢＣＶＡ測定値のうちの大きい方と比較してＢＣＶＡの＞５文字の減少。

【0226】

Ｄ．副次的エンドポイント
本試験の副次的エンドポイントは、試験を行う眼（別段の指定がない限り）についての転帰の評価基準に基づき、以下を含んでいた：
・眼の及び眼以外の有害事象（ＡＥ）の発生率及び重症度。
・第４８週を通した経時的な、ＣＳＴ及び黄斑体積のベースラインからの変化。
・第４８週を通した経時的な、ＢＣＶＡのベースラインからの変化。
・試験中の経時的な試験を行う眼へのレスキューアフリベルセプト（２ｍｇ ＩＶＴ）の頻度。
・第４８週を通した経時的な、ＤＲＳＳスコアの２段階の改善及び３段階の改善の発生率。
・第４８週を通した経時的な、ＤＲＳＳスコアの２段階の悪化及び３段階の悪化の発生率。
・第４８週を通した経時的な、視覚を脅かす合併症（前眼部血管新生、硝子体出血、または任意の他の高リスク増殖性糖尿病網膜症（ＤＲ）、または牽引性網膜剥離）の発生。
・第４８週を通した経時的な、ＣＳＴ＜３００μｍの発生率。
・第４８週を通した経時的な、身体検査、眼の検査、イメージング、及び臨床評価による臨床的に意味がある所見の発生率。

【0227】

ＩＩ．試験集団
Ａ．組み入れ基準
試験を行う眼への以前の抗ＶＥＧＦ治療の注射を最大２回受けていた、新たに診断されたＤＭＥ（すなわち、スクリーニングの６ヶ月以内のＤＭＥ診断）を有する対象が以下の組み入れ基準を満たした場合、その対象を本試験に含めた：
・年齢≧１８歳。
・１型または２型糖尿病。
・中心窩を含む糖尿病黄斑浮腫に起因する視覚機能障害。
・スクリーニング時の視覚：
＊試験を行う眼：ＢＣＶＡがＥＴＤＲＳで７８～５０文字、包括的（概算のスネレン等価視力２０／３２～２０／１００）。
＊試験を行わない眼：ＢＣＶＡがＥＴＤＲＳで３５文字またはそれよりも多く（概算のスネレン等価視力２０／２００またはそれよりも良好）。
・Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ（登録商標）を使用してスクリーニング来訪時の試験を行う眼のＣＳＴ≧３２５μｍ、中心窩に及ぶＩＲＦ（中心窩１ｍｍ）。
・主にＤＭＥに起因するものと判定された、試験を行う眼の視覚の減少。
・スクリーニングから６ヶ月以内の最初のＤＭＥ診断。
・試験を行う眼への抗ＶＥＧＦの最大２回の以前の注射（０回、１回、または２回）。
＊以前の抗ＶＥＧＦが試験を行う眼に投与されている場合、意味のあるＣＳＴ応答（例えば、≧１０％の減少）がなければならず、抗ＶＥＧＦに対する有害反応（例えば、炎症）があってはならない。
・試験を行う眼への最後の抗ＶＥＧＦ注射と１日目のランダム化の間に最低６０日の間隔。

【0228】

Ｂ．除外基準
以下の基準のいずれかを満たす対象は本試験から除外された：
・ランダム化６ヶ月以内に実証された抗ＡＡＶ２．７ｍ８中和抗体力価＞１：１２５。
・以前の眼の遺伝子治療。
・アフリベルセプト、コルチコステロイド、または血管造影に使用されるフルオレセイン色素もしくはナトリウムフルオレセインに対するアレルギーの履歴（治療を適用できる軽症アレルギーは許容された）。
・投薬の６ヶ月以内の以下の心血管疾患のいずれかの履歴またはエビデンス：
＊重症心疾患（例えば、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ｈｅａｒｔ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ［ＮＹＨＡ］Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｃｌａｓｓ ＩＩＩまたはＩＶ）または不安定狭心症の臨床的なエビデンス。
＊急性冠状動脈症候群、心筋梗塞または冠状動脈血管再生、脳血管発作（ＣＶＡ）、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）。
＊継続治療が必要な心室頻脈性不整脈、または管理されていない不整脈。
＊スクリーニング期間内のＢＰ降下薬の使用にもかかわらず、収縮期血圧（ＳＢＰ）＞１６０ｍｍＨｇまたは拡張期血圧（ＤＢＰ）＞１００ｍｍＨｇと定義される管理されていない高血圧。ＢＰ降下薬が必要であった場合、対象は、ランダム化前の連続した３０日間、安定した用量の同一の薬の投与を受けているべきであった。
・進行中の出血障害のあらゆる履歴。アスピリンまたは他の抗凝固薬（例えば、第Ｘａ因子阻害剤）の使用は除外基準としなかった。
・ＨｂＡ１ｃ＞１０％と定義される管理されていない糖尿病；またはランダム化前３ヶ月以内の糖尿病性ケトアシドーシスの履歴；または、直近３ヶ月以内に、集中的なインスリンによる治療（ポンプまたは多数回の毎日の注射）が開始されたかもしくは今後３ヶ月以内にその予定があった対象。
・全身性ステロイド薬または免疫抑制治療（例えば、メトトレキサート、アダリムマブ）による治療を必要とする全身性自己免疫疾患の履歴。
・黄斑浮腫を引き起こすことが分かっている全身性薬物（例えば、フィンゴリモド（ｆｉ
ｎｇｏｌｏｍｏｄ）、タモキシフェン、クロロキン／ヒドロキシクロロキン）またはあらゆる以前の全身性の抗ＶＥＧＦ治療。
・ＨＩＶ陽性が分かっていることまたは活動性ウイルス性肝炎（Ｃ型肝炎に対する治療後に治癒が実証されている場合を除く）；梅毒の分かっている履歴
・推定ＣｒＣｌ＜３０ｍＬ／分（コッククロフト・ゴールト算出による）によって示される重症腎機能障害が分かっていること；試験期間中に血液透析の必要性または必要性が予測されること。
・ランダム化前１週間以内のあらゆる熱性の疾病。

【0229】

さらに、試験を行う眼に関して以下の眼に関する除外基準のいずれかを満たす対象は本試験から除外された：
・スクリーニング時に、以下と定義される高リスク増殖性糖尿病網膜症（ＰＤＲ）：あらゆる硝子体または網膜前出血、臨床検査で標準のＥＴＤＲＳ ７－視野と等価の面積内で＞１／２乳頭面積の他の箇所の血管新生、または臨床検査で＞１／３乳頭面積の乳頭の血管新生。
・試験を行う眼に対するあらゆる以前の焦点もしくは格子状レーザー光凝固術またはあらゆる以前の汎網膜光凝固術（ＰＲＰ）。
・ランダム化前の６０日間のあらゆる抗ＶＥＧＦ治療（最大２回の以前の抗ＶＥＧＦ注射は許容されたが、前の６０日間に行われたものであってはならない）。
・前眼部血管新生（例えば、虹彩の血管新生［ＮＶＩ］もしくは血管新生緑内障［ＮＶＧ］）、著しい硝子体出血、血管結合組織増殖または牽引性網膜剥離の履歴。
・黄斑浮腫または視力障害に寄与すると考えられる中心窩の構造的異常（例えば、濃くて硬い滲出液、色素異常、中心窩萎縮、硝子体黄斑牽引または網膜上膜）の臨床検査またはＯＣＴでの検査によるエビデンス。
・試験を行う眼に関して、加齢黄斑変性症（いずれかの眼におけるもの）、網膜静脈閉塞症、網膜動脈閉塞症、病理的近視などを含めた糖尿病網膜症以外の網膜疾患の履歴。
・視覚の改善の潜在性を低下させる可能性があるあらゆる現在のＤＭＥ以外の眼の疾患もしくはその履歴、交絡を生じさせる黄斑の評価または試験中の医学的もしくは外科的介入の必要（例えば、著しい白内障、黄斑牽引）またはあらゆる後嚢下白内障のエビデンス。
・１日目の前３ヶ月以内の白内障摘出術またはイットリウム・アルミニウム・ガーネット（ＹＡＧ）嚢切開術の履歴。
・試験を行う眼における網膜剥離（修復を伴うまたは伴わない）の履歴。
・線維柱帯切除術または緑内障シャント術または低侵襲性緑内障手術（ＭＩＧＳ）の履歴。
・硝子体切除術または他のろ過手術の履歴。
・無水晶体または前房眼内レンズの存在。
・ランダム化の時点での試験を行う眼における管理されていない高眼圧症または緑内障（抗緑内障薬による治療にもかかわらずＩＯＰ＞２２ｍｍＨｇと定義される）または現時
点で＞２のＩＯＰ降下薬の使用。
・あらゆる任意の眼の状態に対する眼内または眼周囲のステロイド治療（例えば、ＩＶＴ Ｔｒｉｅｓｅｎｃｅ、ＩｌｕｖｉｅｎまたはＯｚｕｒｄｅｘ）の履歴。
・スクリーニングの前９０日の期間内の屈折矯正手術。
・以前の全層角膜移植術、内皮角膜移植術、または眼への放射線照射。
・あらゆる以前の硝子体網膜外科手術。

【0230】

さらに、試験を行う眼または試験を行わない眼（すなわち「もう片方の眼」）に関して以下の眼に関する除外基準のいずれかを満たす対象は本試験から除外された：
・消散した軽症の予測された手術後の炎症以外のぶどう膜炎または眼内炎症（ごくわずかなまたはそれを超えるグレード）のあらゆる履歴。
・局所ステロイド投与に関連するＩＯＰ上昇の履歴。
・ウイルス性ぶどう膜炎、網膜炎または角膜炎を含めた眼の単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、またはサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の分かっている履歴。
・結膜炎、霰粒腫または著しい眼瞼炎を含めた外眼部感染症のエビデンス。
・眼トキソプラズマ症の履歴。

【0231】

ＩＩＩ．試験設計
Ａ．試験治療
本試験は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの０．１０ｍＬでの単回ＩＶＴ注射の有効性、安全性、及び忍容性を評価するために設計された、多施設、ランダム化、二重盲検、対照、並行群間試験であった。２用量のＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトが調査された。

【0232】

スクリーニングの６ヶ月以内にＤＭＥの最初の診断を受けており、以前の抗ＶＥＧＦ治療の注射を最大２回受けている対象が登録に適格であった。

【0233】

適格の対象およそ３３名を、２用量のＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプト（６×１０^１ｖｇ／眼もしくは２×１０^１１ｖｇ／眼）のうちの１種の投与を受けるように、または、先行するアフリベルセプト注射を伴って眼へのニセ（ｓｈａｍ）注射を受ける対照アームにランダム化した。ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの投与を受けるように割り当てられた対象を、先行するアフリベルセプトまたは眼へのニセ注射を受けるようにさらにランダム化した。試験アームを以下に要約する：
・アーム１（ｎ＝６）：対象は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの投与を６×１０^１１ｖｇ／眼の用量で受け、先行するアフリベルセプト投薬を伴う。
・アーム２（ｎ＝６）：対象は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの投与を６×１０^１１ｖｇ／眼の用量で受け、先行するアフリベルセプト投薬を伴わない。
・アーム３（ｎ＝６）：対象は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの投与を２×１０^１１ｖｇ／眼の用量で受け、先行するアフリベルセプト投薬を伴う。
・アーム４（ｎ＝６）：対象は、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの投与を２×１０^１１ｖｇ／眼の用量で受け、先行するアフリベルセプト投薬を伴わない。
・アーム５（ｎ＝９）：対象は、アフリベルセプトのみを受ける（実対照）。

【0234】

治療の割り当ての盲検化を維持するために、１日目の先行するアフリベルセプトなしのアームまたは８日目のＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトなしのアームに割り当てられた対象は、対応する来訪時に眼へのニセ注射の投与を受けた。対象当たり一方の眼のみを、試験を行う眼として選択した。両方の眼が適格である場合、ＢＣＶＡが悪い方の眼を、試験を行う眼として選択した。

【0235】

ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプト及びアフリベルセプトのどちらもＩＶＴ注射によって投与した。活動性炎症が存在する場合にはＩＶＴ注射を実施しなかった。ポビドンヨードを用いた無菌技法を局所または結膜下麻酔と共に使用した。眼へのニセ注射手順は同じ条件下で行ったが、針を備えていない空のシリンジ（鈍端を使用する）を眼に押し付けて注射を模倣した。

【0236】

本試験におけるアームの要約を表１７に示す。

【表10】

【0237】

１日目及び８日目の割り当てられたＩＶＴ注射の後、対象全員を第２週、第４週、及び、その後、４週間毎に、１日目の後最大で第４８週まで（例えば、第８週、第１２週、第１６週など）フォローアップした。盲検を維持するために、対象と評価を行う人員のどちらに対しても試験全体を通して治療の割り当てを盲検化した。

【0238】

対象全員をランダム化後４８週間にわたって経過観察した。

【0239】

Ｂ．予防的な局所ステロイドレジメン
対象全員に予防的な７週間のジフルプレドナート（０．０５％；例えば、Ｄｕｒｅｚｏｌ）の局所コルチコステロイドレジメンを、１日目に開始して実施した。対象に、ジフルプレドネートを４週間（すなわち、１日目から２８日目まで）１日当たり４回（ＱＩＤ）自己投与し、その後、１週間（すなわち、７日間）１日当たり３回（ＴＩＤ）自己投与し、その後、１週間（すなわち、７日間）１日当たり２回（ＢＩＤ）自己投与し、最終的に、１週間（すなわち、７日間）１日当たり１回（ＱＤ）自己投与するよう指示した。活動性炎症の存在下では漸減を開始しなかった。炎症の徴候が生じた場合はこのレジメンを延長した。ジフルプレドナートレジメンの要約を表２に示す。

【表11】

【0240】

Ｃ．救助治療
第８週に開始して、対象は、以下のいずれかを満たした場合、救助用アフリベルセプトの投与（２ｍｇ ＩＶＴ）を受けた：
・ＳＤ－ＯＣＴによって評価して、１日目または第４週に記録された２つのＣＳＴ測定値のうちの小さい方と比較して、ＣＳＴの＞５０μｍの増加。
・ＢＣＶＡの、ＤＭＥ疾患活動性の悪化に起因する、１日目または第４週に記録された２つのＢＣＶＡ測定値のうちの大きい方と比較して＞５文字の低下。

【0241】

活動性炎症を有する眼にはアフリベルセプトを注射しなかった。救助用アフリベルセプト注射の間には最低２１日間が必要であった。

【0242】

Ｄ．薬物及び治療
試験の間、以下の薬物を禁止した：
・ベバシズマブを含むあらゆる全身性抗ＶＥＧＦ剤。
・黄斑浮腫を引き起こすことが分かっている全身性薬物（例えば、フィンゴリモド、タモキシフェン、クロロキン／ヒドロキシクロロキン）。
・試験薬またはアフリベルセプトＩＶＴ ２ｍｇ以外の、試験を行う眼へのあらゆる抗ＶＥＧＦ剤。
・試験を行う眼へのＩＶＴステロイド（例えば、ＯｚｕｒｄｅｘまたはＩｌｌｕｖｉｅｎ Ｔｒｉｅｓｅｎｃｅ）。
・全身性免疫抑制剤（例えば、静脈内ステロイド、メトトレキサート、アザチオプリン、シクロスポリン、アダリムマブ、インフリキシマブ、エタネルセプト）。吸入または局所ステロイド及びＮＳＡＩＤは許容された。

【0243】

試験を行う眼に高リスクＰＤＲが発生した対象は、救助用アフリベルセプトの投与を受けた後に汎網膜光凝固（ＰＲＰ）を受けた。

【0244】

視覚的に著しい白内障を有していた対象は本試験に登録されなかったが、白内障が試験中に発生した場合、試験を行う眼の白内障外科手術を、臨床的に必要が示され、ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプト投与の＞９０日後及び／またはアフリベルセプトの最後の注射＞７日後に予定される場合には実施することが許可された。

【0245】

他眼（試験を行わない）にＤＭＥが発生した対象は、標準治療を受けることが許可された。

【0246】

ＩＶ．試験評価
Ａ．全般的な身体検査及びバイタルサイン
全般的な身体検査（ＰＥ）をスクリーニング時及び試験終了（ＥＯＳ）または早期中止来訪時に実施した。ＰＥは、全身外観、神経、ＨＥＥＮＴ（頭部、眼、耳、鼻、及びのど）、頸部、心血管、呼吸器、腹部、四肢、皮膚、体重、及び身長についての身体系検査から構成されていた。ＥＯＳまたは早期中止来訪時に、身体検査により、スクリーニング検査時以来で対象の健康状態に何らかの変化が生じているかどうかを評価した。標的化身体検査を、ＡＥの評価のために必要に応じて実施した。

【0247】

バイタルサインは、血圧、脈拍数、体温、及び呼吸数から構成されていた。１２誘導心電図（ＥＣＧ）を各対象について、スクリーニング時及びＥＯＳまたは早期中止来訪時に取得した。

【0248】

Ｂ．臨床検査、ベクター発現、及び免疫応答
試験のために、以下の臨床検査を実施した：化学的検査、全血球計数、ＨｂＡ１ｃ、尿検査、及びＨＬＡ－Ｂ２７遺伝子型決定。

【0249】

対象の試料（血液及び／または房水の両方）を採取して、以下を測定した：
・ＡＡＶ２．７ｍ８に対する全抗体：血清を全抗ＡＡＶ２．７ｍ８抗体に関してＥＬＩＳＡアッセイで測定した。
・ＡＡＶ２．７ｍ８に対する中和抗体：血清を中和性抗ＡＡＶ２．７ｍ８抗体に関して細胞に基づくアッセイで測定した。
・抗アフリベルセプト抗体：血清をアフリベルセプトに対する液性免疫応答に関してＥＬＩＳＡアッセイで測定した。
・アフリベルセプトタンパク質発現：血清及び房水試料を採取し、アフリベルセプトタンパク質の存在を確認するためにＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙアッセイで測定した。
・細胞媒介性免疫応答：ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドタンパク質及びアフリベルセプトタンパク質に対する細胞性免疫をＥＬＩＳＰＯＴアッセイで測定した。
Ｃ．全眼科検査

【0250】

試験評価には眼科学的検査、眼圧（ＩＯＰ）、及び間接検眼が含まれていた。

【0251】

上記眼科検査は、眼及び付属器の外診、眼瞼／瞳孔応答性に関する常套的なスクリーニング（眼瞼下垂、異常な瞳孔形状、瞳孔不同、光に対する反応の異常、及び求心性瞳孔障害を含む、但しこれらに限定はされない）、ならびに細隙灯検査（眼瞼、結膜、角膜、水晶体、虹彩、前房）から構成されていた。細隙灯検査により眼の前側の構造を検査し、あらゆる所見のグレード分類のために使用した。いずれかの来訪時の細隙灯検査の間に何らかの所見が認められた場合には、重症度をグレード分類し、所見を臨床的に意味があるものまたは臨床的に意味がないものとして記載した。

【0252】

ＩＯＰ測定をゴルドマン眼圧計またはＴｏｎｏ－ｐｅｎ（商標）を使用して実施した。同じＩＯＰ測定の方法を個々の対象それぞれに対して試験全体を通して使用した。いずれのＩＶＴ注射の前及び眼を散大させる前にも、試験全体を通して同一の方法を使用してＩＯＰ測定を実施した。１日目及び８日目の来訪では、注射前及び注射後（注射の３０分後）のＩＯＰ測定が必要であった。

【0253】

散大間接検眼試験には、硝子体、視神経、周辺網膜、及び網膜の脈管構造の後眼部の異常の評価が含まれていた。いずれかの来訪時の検眼鏡検査の間に何らかの所見が認められた場合にも、重症度をグレード分類し、所見を臨床的に意味があるものまたは臨床的に意味がないものとして記載した。１日目及び８日目の来訪では、注射前及び注射後の間接検眼評価が必要であった。

【0254】

Ｄ．屈折及び視力
屈折及びＢＣＶＡを測定した。視力測定値は、眼を散大させる前に、開始距離４メートルで測定した。
Ｅ．画像診断

【0255】

スペクトラルドメイン光干渉断層法（ＳＤ－ＯＣＴ）は、干渉縞パターンのスペクトル分析によって後方散乱光の大きさ及び遅延にコード化された深さ分解された組織構造情報を提供する、インターフェロメトリー技法である。対象が試験のランダム化前の来訪時に抗ＶＥＧＦ注射を受ける場合、これらの来訪でのＯＣＴを収集し、中央読み取り施設に送付した。

【0256】

光干渉断層血管造影法（ＯＣＴ－Ａ）は、網膜及び脈絡膜の容積３次元マップならびに血流に関する情報を提供する画像診断技術である。ＯＣＴ－Ａには、掃引供給源とスペクトラルドメインの２つの型が存在する。利用可能な場合には掃引供給源画像診断を使用した。掃引供給源機器が利用不能であり、且つスペクトラルドメイン機器が利用可能である場合には、スペクトラルドメイン機器を使用した。

【0257】

網膜、視神経乳頭、及び黄斑の超広視野眼底デジタル写真画像を収集するための標準化された手順に従った。さらに、虹彩の写真を散大前に取得した。

【0258】

色素追跡法を使用して網膜循環及び血管透過性を検査するための標準化された手順に従った。これは、ナトリウムフルオレセインを体循環中に注入し、その後、網膜に波長４９０ｎｍの青色光を照射した後に放出された蛍光をデジタル撮影することによって血管造影図を得ることを含んでいた。
Ｆ．臨床検査、バイオマーカー、及び他の生物学的検体

【0259】

房水試料を採取し、アフリベルセプト、ＶＥＧＦ－Ａ、中和抗体（ＮＡｂ）、及び追加的なバイオマーカーのレベルに関して分析を行った。硝子体液試料を取得し、アフリベルセプト濃度及び他のバイオマーカー関して分析を行った。
Ｇ．安全性

【0260】

試験治療の実施後に、全ての臨床的に意味がある有害事象（ＡＥ）が報告された。ａ）最後の試験来訪の３０日後のＡＥ報告期間終了まで、またはｂ）いずれの継続している、試験治療に関連するＡＥ及び／または重篤なＡＥ（ＳＡＥ）が消散するかまたは安定するまで、各対象を経過観察した。いずれのＤＭＥに関連した臨床的に意味がある安全性評価も、対象の疾病に関して予測されたものよりも重症であると判断されない限り、ＡＥまたはＳＡＥとして報告されなかった。試験下での疾患の進行は有効性に関する転帰として捕捉された。

【0261】

本試験に関する特に関心が高い有害事象としては以下が挙げられた：
・視覚を脅かす有害事象：有害事象は、以下の基準の１つ以上が満たされた場合に、視覚を脅かすものとみなされた：
＊以前の来訪と比較してＢＣＶＡの≧３０文字の低下が生じた。
＊恒久的な視覚喪失を防止するために、外科的または医学的介入（すなわち、従来の外科手術、硝子体切除術）が必要であった。
＊重症眼内炎症（すなわち、眼内炎、４＋前房内細胞／フレア、または４＋硝子体細胞）が生じた。

【0262】

上記に挙げた視覚を脅かす有害事象の全てが、重篤な有害事象として報告され、事象の根本原因（分かっている場合）を主要な事象用語として列挙した。
Ｈ．有効性

【0263】

ＤＭＥの治療におけるＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトの有効性を以下の尺度によって評価した。ＢＣＶＡ及びＳＤ－ＯＣＴエンドポイントのベースライン値とは、アフリベルセプトＩＶＴまたはニセの眼への注射が投与された１日目の来訪時に取得された、治療前の測定値を指していた。
・ＢＣＶＡ：視覚を、ＥＴＤＲＳスコア（正確に読み取られた文字の数）として表されるＢＣＶＡによって主として評価した。対象のＥＴＤＲＳスコアのベースラインと比較した低下が１５文字未満の場合には、視覚の維持に分類した。算出されたエンドポイントには、ベースラインからの平均の変化、ベースラインと比較して少なくとも１５文字増加した割合、及びベースラインと比較して１５文字以上低下した増加が含まれていた。
・中心領域網膜厚：認可された設備及び標準の技法を使用し、ＳＤ－ＯＣＴを実施して、厚さ及び液をベースライン値と比較して評価した。エンドポイントにはＣＳＴ及び黄斑体積が含まれていた。
・アフリベルセプトによる再治療：ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトによる治療後に行われたアフリベルセプト注射の経時的な頻度及びタイミング。
・各時点について、超広視野カラー眼底撮影を使用して糖尿病網膜症重症度尺度（ＤＲＳＳ）を測定し、１日目と比較した。
・超広視野画像診断及び臨床検査によって測定された視覚を脅かす合併症（前眼部血管新生、糖尿病黄斑浮腫、高リスクＰＤＲ発生、硝子体出血、または牽引性網膜剥離）。

【0264】

Ｉ．統計解析
主要解析集団には、８日目に試験治療（ＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトＩＶＴまたはニセの眼への注射）を受けたランダム化された対象の全てが含まれていた。全ての安全性及び有効性に関する変数を治療アーム毎に記述的に要約した。平均値、標準偏差（ＳＤ）、中央値、及び範囲を連続変数として示し、頻度計数及びパーセンテージをカテゴリカル変数として示した。平均値及びパーセンテージの信頼区間を９０％レベルと９５％レベルの両方でした。カプラン・マイヤー生存解析を利用して、ＤＭＥ疾患悪化の最初の出現までの時間中央値を引き出した。試験中に各対象が投与を受けた全ての救助アフリベルセプト（２ｍｇ ＩＶＴ）を、再発性事象についての統計学的モデルを使用してまとめた。経時的な平均累積関数（ＭＣＦ）曲線を注射の平均累積数についてプロットした。反復測定のための混合効果モデル（ＭＭＲＭ）を使用して、経時的なＢＣＶＡ及びＣＳＴの変化に対する治療の効果を調査した。経時的なＤＲＳＳの変化に対する治療の効果を、カテゴリカル転帰に関する全般混合モデルを使用して調査した。全ての対象を２４週間経過観察した後に、暫定解析（ＩＡ）を行った。

【0265】

Ｖ．結果
アーム１の糖尿病性黄斑浮腫（ＯＵ）を有する５６歳のアメリカインディアンまたはアラスカ先住民女性の１人の対象（例えば、６Ｅ１１ベクターゲノムの用量のＡＡＶ２．７ｍ８－アフリベルセプトによる治療を受けた）は、この研究における試験薬対シャムに対してランダム化されてから約３０週間後に、重症の低血圧の有害事象を経験した。現在の治験薬概要書（第４．０版）によれば、この治験薬に関し低血圧は予想外である。この患者は引き続き試験に残留し、治療と綿密な経過観察を続けた。臨床的炎症の兆候がない場合でも、ＩＯＰ≦１０ｍｍＨｇが観測された場合には、ステロイド療法の開始が推奨された。

【0266】

本開示を明確な理解のために、実証及び例示として一部の詳細に説明しているが、詳細な説明及び実施例は本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきものではない。本明細書に引用される全ての特許文献及び科学文献の開示は、明示的にそれらの全体が援用される。

【図1】

【配列表】

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【国際調査報告】