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特表2024-516151ＰＤＥ５阻害剤及びグルココルチコイド受容体拮抗剤の併用による認知症の予防及び治療のための組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-04-12
(54)【発明の名称】ＰＤＥ５阻害剤及びグルココルチコイド受容体拮抗剤の併用による認知症の予防及び治療のための組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/437 20060101AFI20240405BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20240405BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240405BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20240405BHJP
【ＦＩ】
A61K31/437
A61P25/28
A61P43/00 121
A61K31/519
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023564423
(86)(22)【出願日】2022-04-22
(85)【翻訳文提出日】2023-12-15
(86)【国際出願番号】 KR2022005818
(87)【国際公開番号】W WO2022225378
(87)【国際公開日】2022-10-27
(31)【優先権主張番号】10-2021-0052930
(32)【優先日】2021-04-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】521438191
【氏名又は名称】アリビオ カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100107766
【弁理士】
【氏名又は名称】伊東 忠重
(74)【代理人】
【識別番号】100070150
【弁理士】
【氏名又は名称】伊東 忠彦
(72)【発明者】
【氏名】チョン，ジェジュン
(72)【発明者】
【氏名】カン，ビョンウ
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB05
4C086GA16
4C086MA02
4C086NA14
4C086ZA15
4C086ZC75
(57)【要約】
本発明は、アルツハイマー病又は認知症の治療のための、ホスホジエステラーゼ５阻害剤（ＰＤＥ５阻害剤）であるミロデナフィル及びグルココルチコイド受容体（ＧＲ）拮抗剤であるＣＯＲＴ－１０８２９７の併用によるアミロイドβの除去に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
認知症の予防又は治療のための組成物であって、前記組成物は、ホスホジエステラーゼ５阻害剤と；
グルココルチコイド受容体拮抗剤とを有効成分として含み、
前記ホスホジエステラーゼ５阻害剤は、ミロデナフィル、その薬学的に許容される塩、溶媒和物又は水和物からなる群から選択される少なくとも１つであり；
前記グルココルチコイド受容体拮抗剤は、ＣＯＲＴ－１０８２９７、その薬学的に許容される塩、溶媒和物又は水和物からなる群から選択され；
少なくとも１つの前記ホスホジエステラーゼ５阻害剤及び前記グルココルチコイド受容体拮抗剤は、１：３～１：２４のモル濃度比で同時投与され、アミロイドβ（Ａβ）の除去に相乗効果を有することを特徴とする組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ホスホジエステラーゼ５阻害剤（ＰＤＥ５阻害剤）の１つであるミロデナフィル及びグルココルチコイド受容体（ＧＲ）拮抗剤の１つであるＣＯＲＴ－１０８２９７の同時投与によるアミロイドβの除去を介したアルツハイマー病及び認知症の治療に関する。
【背景技術】
【0002】
認知症は、様々な遺伝的及び環境的リスク因子によって引き起こされる多面的な病因を有する後天性脳疾患であり、複数の認知障害に苦しむ臨床疾患を指す。認知症の最も一般的な原因は、主に高齢者に発生し、全認知症症例の約６０～７０％を占めると報告されているアルツハイマー病である（非特許文献１）。
【0003】
アミロイドβタンパク質（Ａβ）は、遺伝性及び散発性アルツハイマー病の一般的な原因であることが知られており、活発に研究されている。Ａβは、正常な人でさえ、人体全体で少量生成される。正常な人では、Ａβは生成されてもすぐに分解され、人体に蓄積しないが、アルツハイマー病患者では、Ａβが異常に大量に生成され、分解されずに組織内に蓄積するため、記憶や学習に重要な役割を果たす海馬や大脳皮質等に老人斑が形成されたり、過剰に蓄積したりする。蓄積したＡβは、周囲の細胞に炎症反応を引き起こす。その結果、神経細胞が損傷を受け、脳の正常な機能を維持する神経回路が徐々に損なわれる。更に、蓄積したＡβは、神経細胞を殺すシグナル伝達系を活性化するフリーラジカルを大量に生成する。
【0004】
Ａβは、βセクレターゼによって切断されるアミロイド前駆体タンパク質の一部である。Ａβには、それを構成するアミノ酸の数に応じて幾つかの形態がある。アルツハイマー病患者では、４０又は４２のアミノ酸からなるＡβの比率が劇的に増加する。Ａβをｉｎ ｖｉｔｒｏで培養した神経細胞で処理すると、神経細胞死が誘導され、細胞死のメカニズムは、アルツハイマー病患者に見られるアポトーシスの型と類似しているという報告が多い。Ａβ１－４２又はＡβ１－４３タンパク質による神経細胞の損傷は、アルツハイマー病の重要な原因の一つとして同定され（非特許文献２）（非特許文献３）、Ａβ２５‐３５は、神経細胞に損傷を引き起こすＡβ１－４２又は４３の重要な毒性フラグメントであることが知られている（非特許文献４）（非特許文献５）。
【0005】
認知症の治療に現在使用されている最も一般的なＦＤＡ承認薬には、ＡＣｈＥＩ及びＮ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸受容体拮抗剤、抗酸化薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、抗炎症剤、スタチン、ホルモン等がある。製剤等様々な薬剤がこれらと互換性をもって使用されている。しかしながら、これらの薬剤は、症状の緩和、認知機能の遅延及び改善にのみ使用されており、認知症の根本的な治療は開発されていない。
【0006】
典型的なＡＣｈＥＩには、ドネペジル、リバスチグミン、及びガランタミンがあり、これらは神経伝達物質アセチルコリンの濃度を一時的に上昇させることにより対症療法的効果を有する。これらの薬剤は、軽度から中等度のアルツハイマー病、血管性認知症、パーキンソン病認知症、脳卒中又は皮質下虚血性血管疾患にも処方される（非特許文献６）。
【0007】
現在、世界の製薬会社は、β－セクレターゼの作用を阻害して、発生源でのＡβの生成を遮断する薬剤の開発を試みている。近年、米国の製薬会社、大学、研究機関では、認知症治療の開発のために、薬用植物から抗酸化作用を示す成分を単離する研究が盛んに行われており、その中で認知症治療として使用され始めている成分としては、Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ（イチョウ）（非特許文献７）（非特許文献８）及びＨｕｐｅｒｚｉａ ｓｅｒｒａｔａ Ｔｒａｖｉｓ（トウゲシバ）（非特許文献９）（非特許文献１０）がある。これらは、典型的な例である。更に、Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ Ｌ．（ウコン）から単離されたクルクミノイドも、認知症における治療効果を有することが報告されている（非特許文献１１）（非特許文献１２）（非特許文献１３）。アミロイド代謝物の毒性を阻害することが知られているオタネニンジン、テトランドリン、イチョウエキス（ＥＧＢ７６１）は、アルツハイマー病患者の神経細胞の生存を増加させたり、認知症症状の悪化速度を遅らせることが報告されている（非特許文献１４）。
【0008】
一方、アルツハイマー認知症に対する満足な治療法はなく、有効な抗認知症薬剤も開発されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0009】
【非特許文献1】Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ．１９９３ Ｍａｙ；３３（５）：４９４－５０１
【非特許文献2】Ｙａｎ，Ｓ，Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ １９９７ Ｏｃｔ １６；３８９（６６５２）：６８９－９５．
【非特許文献3】Ｈａａｓｓ Ｃ，Ｓｅｌｋｏｅ ＤＪ．Ｃｅｌｌ １９９３ Ｄｅｃ １７；７５（６）：１０３９－４２．
【非特許文献4】Ｐｉｋｅ ＣＪ，Ｒａｍｅｚａｎ－Ａｒａｂ Ｎ，Ｃｏｔｍａｎ ＣＷ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ １９９７ Ｏｃｔ；６９（４）：１６０１－１１．
【非特許文献5】Ｌｏｒｅｎｚｏ Ａ， Ｙａｎｋｎｅｒ ＢＡ．Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ７７７，８９－９５，１９９６．
【非特許文献6】Ｊ Ｋｏｒｅａｎ Ｍｅｄ Ａｓｓｏｃ ２００９；５２（４）：４１７－４２５．
【非特許文献7】Ｌｅ Ｂａｒｓ，Ｐ Ｌ ｅｔ ａｌ．ＪＡＭＡ．１９９７ Ｏｃｔ ２２－２９；２７８（１６）：１３２７－３２．
【非特許文献8】Ｏｋｅｎ，Ｂ Ｓ ｅｔ ａｌ．Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ．１９９８ Ｎｏｖ；５５（１１）：１４０９－１５．
【非特許文献9】Ｂａｄｉａ，Ａ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１９９８Ａｐｒ；６（４）：４２７－４０．
【非特許文献10】Ｓｋｏｌｎｉｃｋ，Ａ Ａ．ＪＡＭＡ．１９９７ Ｍａｒ １２；２７７（１０）：７７６．
【非特許文献11】Ｂａｓｔｉａｎｅｔｔｏ，Ｓ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０００ Ｊｕｎ；１２（６）：１８８２－９０
【非特許文献12】Ｚａｎｇａｒａ，Ａｎｄｒｅａ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｅｈａｖ．２００３ Ｊｕｎ；７５（３）：６７５－８６．
【非特許文献13】Ｐａｒｋ ＳＹ，Ｋｉｍ ＤＳ．Ｊ Ｎａｔ Ｐｒｏｄ．２００２ Ｓｅｐ；６５（９）：１２２７－３１
【非特許文献14】Ｂａｓｔｉａｎｅｔｔｏ，Ｓ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０００ Ｊｕｎ；１２（６）：１８８２－９０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
認知症を含む変性神経疾患は、神経細胞の機能が低下又は消失することにより、引き起こされ、運動制御機能、認知機能、知覚機能、感覚機能等、私たちが感じることのできる身体の全ての機能に加えて、知覚することなく自己調節を行う自律神経機能等、様々な機能に異常を引き起こす。
【0011】
現在まで、認知症の原因は特定されていないので、根本的な治療はできておらず、市販されている５種類の薬剤は、一部の疾患の症状を緩和するのみであり、これらの薬剤は、認知症の進行を根本的に変えることのできない症状終了の効果のみを有する。
【0012】
本発明は、神経細胞死の直接の原因であるアミロイドβに対して、ミロデナフィル単独で、又は外傷後ストレス障害（ＰＴＤＳ）の治療薬として開発されているＣＯＲＴ－１０８２９７と併用することにより、アミロイドβを減少させ、神経細胞を保護することにより認知症を治療する方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【0013】
本発明は、ホスホジエステラーゼ５阻害剤及びグルココルチコイド受容体（ＧＲ）拮抗剤である。有効成分として含有する認知症の予防及び治療用組成物に関する。
【0014】
本発明では、認知症は、アルツハイマー型認知症、エイズ誘発性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、多発性梗塞性認知症、意味性認知症及び血管性認知症、ハンチントン病、パーキンソン病、及び筋萎縮性側索硬化症が含まれる。
【0015】
本発明のホスホジエステラーゼ５阻害剤は、ミロデナフィル、シルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル、ウデナフィル、ダサンタフィル、アバナフィル、並びにその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び水和物からなる群から選択される少なくとも１種を含む。
【0016】
薬学的に許容される塩とは、化合物が投与される生物に深刻な刺激を与えず、その化合物の生物活性及び物理的性質を損なわない化合物の製剤を意味する。薬学的に許容される塩は、実質的に無毒である薬学的に許容される有機酸及び無機酸を用いて、当該技術分野において周知の従来の方法によって調製される。酸は、塩酸、臭素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、スルホン酸（ｐ－トルエンスルホン酸等）、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、カプリン酸、イソブタン酸等の無機酸であり、マロン酸、コハク酸、フタル酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸、サリチル酸等の有機酸を含む。更に、アンモニウム塩等の塩基、ナトリウム又はカリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム又はマグネシウム塩等の塩、アルカリ土類金属塩等、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン等の有機塩基の塩と、本発明の化合物を反応させることにより、アルギニンやリジン等のアミノ酸塩が生成されることができる。
【0017】
本発明の一実施形態によれば、薬学的に許容される塩は、ミロデナフィル塩酸塩、シルデナフィルクエン酸塩、バルデナフィル塩酸塩等を例示することができる。
【0018】
水和物は、非共有結合性分子間力によって結合された化学量論的又は非化学量論的量の水を含む、本発明の化合物又はその塩を指す。
【0019】
溶媒和物は、非共有結合性分子間力によって結合された化学量論的又は非化学量論的量の溶媒を含む、本発明の化合物又はその塩を意味する。好ましい溶媒は、揮発性、無毒性である、及び／又はヒトへの投与に適した溶媒である。
【0020】
グルココルチコイド受容体（ＧＲ）拮抗剤）、ＣＯＲＴ－１０８２９７、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ミフェプリストン、シクレソニド、ブデソニド、コルチゾン、フルニソリド；及びそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び水和物からなる群から選択される少なくとも１種。
【0021】
より好ましくは、本発明のホスホジエステラーゼ５阻害剤は、ミロデナフィル並びにその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び水和物からなる群から選択される少なくとも１つであり、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）拮抗剤は、ＣＯＲＴ－１０８２９７並びにその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び水和物からなる群から選択される少なくとも１つである。
【0022】
本発明のＣＯＲＴ－１０８２９７は、以下の構造を有する、（Ｒ）－（４ａ－エトキシメチル－１－（４－フルオロフェニル）－６－（４－トリフルオロメチル－ベンゼンスルホニル）－４，４ａ，５，６，７，８－ヘキサヒドロ－１Ｈ，１，２，６－トリアザ－シクロペンタ［ｂ］ナフタレンである。
【0023】
【化1】
【0024】
本発明の医薬組成物は、経口又は非経口で投与することができる。
【0025】
本発明の一実施形態によれば、本発明の医薬組成物は、被験者に経口投与されるか、又は頭部以外の部位に非経口投与される。即ち、本発明の組成物は、脳組織、脳組織を取り巻く身体組織（例えば、頭皮）、及び隣接領域に直接投与されなくても、本発明において意図された効果を示すことができる。１つの特定の例では、非経口投与は、皮下投与、静脈内投与、腹部注入、経皮投与、又は筋肉内投与であり、別の特定の例では、皮下投与、静脈内投与、又は筋肉内投与である。
【0026】
本発明の医薬組成物に含まれる薬学的に許容される担体は、ラクトース、ブドウ糖、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアゴム（ａｃａｃｉａ ｒｕｂｂｅｒ）、リン酸カルシウム、アルギン酸、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、及び鉱油の製剤に一般的に使用されるが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物は、上記成分に加えて、潤滑油、湿潤剤、甘味料、香味料、乳化剤、懸濁液、保存剤等を更に含むことができる。好適な薬理学的に許容される担体及び製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９ｔｈ ｅｄ．，１９９５）に詳細に記載される。
【0027】
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤を用いて、本発明が属する当業者が容易に実施できる方法に従って、単位用量形態又は多容量容器で調製されることができる。この場合、製剤は、溶液、懸濁液、又はエマルジョンの形態、油媒体又は水系媒体で、又はＸ剤、粉、顆粒、錠剤、フィルム、又はカプセルの形態であることができ、分散剤又は安定剤を更に含むことができる。
【発明の効果】
【0028】
本発明は、ホスホジエステラーゼ５阻害剤とグルココルチコイド受容体拮抗剤との併用によるアミロイドβ減少による認知症を抑制する効果に関する。
【図面の簡単な説明】
【0029】
【発明を実施するための形態】
【0030】
以下、本発明を以下の実施形態に従って更に詳細に説明する。しかしながら、これらの実施形態は本発明の説明のためのものであり、本発明の範囲はこれらの実施形態によって制限されるものではない。
【0031】
［実験実施例１］細胞培養
【0032】
実験で用いられたＳＨ－ＳＹ５Ｙヒト神経芽細胞腫細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，ＵＳＡ）から入手し、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ；オーストラリア原産、ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｌｏｇａｎ，ＵＴ，ＵＳＡ）及び１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ；ＨｙＣｌｏｎｅ）をＣＯ２インキュベーター（３１１－ＴＩＦ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ，ＭＡ，ＵＳＡ）の中で、３７℃、ＤＭＥＭ／Ｆ１２完全培地（ＨｙＣｌｏｎｅ）を用いて５％ＣＯ２条件で、インキュベートした。
【0033】
［実験実施例２］ａｌｌ－ｔｒａｎｓ－レチノイン酸（ＲＡ）を用いたＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞のニューロン様分化
【0034】
アミロイドβの量の変化を決定するために、２＊？＊５細胞をＴ－２５フラスコに分注した。
【0035】
細胞接着と安定化のために、ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ）の中で、３７℃、５％ＣＯ２条件下で、１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ）及び１％Ｐ／Ｓ（ＨｙＣｌｏｎｅ）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２完全培地（ＨｙＣｌｏｎｅ）で２４時間インキュベートした。
【0036】
細胞分注の２４時間後、細胞培養培地はニューロン様分化のために除去され、１％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ）、１％Ｐ／Ｓ（ＨｙＣｌｏｎｅ）、１０μＭのａｌｌ－ｔｒａｎｓ－レチノイン酸（ＲＡ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２分化培地と取り換えた。
【0037】
分化の３日目に、培地は、新しいＤＭＥＭ／Ｆ１２分化培地に取り換えられた。分化の６日目に、未処理対照群の培地は、新しいＤＭＥＭ／Ｆ１２分化培地に取り替えられ、サンプル処理群の培地は、様々な条件下で新しいＤＭＥＭ／Ｆ１２分化培地を追加することによって様々な条件で取り換えられた。
【0038】
［実験実施例３］アミロイドβ（Ａβ）１－４２形成及び処理
【0039】
１％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ）及び１％Ｐ／Ｓ（ＨｙＣｌｏｎｅ）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２完全培地（ＨｙＣｌｏｎｅ）に、１０μＭまでのヒトＡβ１－４２（Ａｂｃａｍ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ，ＵＳＡ）を添加し、Ａβ１－４２オリゴマーを形成し、ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ）の中で、３７℃で、５％ＣＯ２条件で３時間放置し、Ａβ１－４２オリゴマーを形成した。
【0040】
Ａβ１－４２変化を確認するために、既存の細胞培養培地をＲＡ分化ＳＨ－ＳＹ５Ｙニューロン様細胞から除去し、Ａβ１－４２オリゴマー（１０μＭ）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２完全培地（ＨｙＣｌｏｎｅ）で取り換え、ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ）の中で、３７℃で、５％ＣＯ２条件で、７２時間インキュベートし、Ａβ１－４２オリゴマーで誘導した細胞損傷を誘導した。
【0041】
７２時間後、培地を除去し、１０μＭのＡβ１－４２オリゴマーのみ、又はミロデナフィル及びＣＯＲＴ－１０８２９７の併用を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２完全培地（ＨｙＣｌｏｎｅ）で細胞を処理し、ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ）の中で、３７℃で、５％ＣＯ２条件で、２４時間インキュベートし、その後次の実験に移った。
【0042】
［実施例４］アミロイドβ４２ヒトＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着測定法）測定結果
【0043】
細胞中のＡβ４２（ｐｇ／ｍＬ）量を測定するために、細胞を回収し、細胞溶解緩衝液で処理した。
【0044】
その後、１４，０００ｒｐｍ４℃で１０分間遠心分離した後、上清を移し、タンパク質を回収した。タンパク質の量は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて定量した。その後、細胞内のＡβ４２の量は、ヒトＡβ４２ ＥＬＩＳＡキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて測定した。
【0045】
【表1】
【0046】
まとめると、ミロデナフィル０．１μＭ及びＣＯＲＴ－１０８２９７ ０．３μＭ併用処理群におけるＡβ減少率は、７．０６％であり；ミロデナフィル０．１μＭ及びＣＯＲＴ－１０８２９７ ０．６μＭ併用処理群におけるＡβ減少率は、９．５２％であり；ミロデナフィル０．１μＭ及びＣＯＲＴ－１０８２９７ １．２μＭ併用処理群におけるＡβ減少率は、１２．３２％であり；ミロデナフィル０．１μＭ及びＣＯＲＴ－１０８２９７ １．８μＭ併用処理群におけるＡβ減少率は、１４．９５％であり；ミロデナフィル０．１μＭ及びＣＯＲＴ－１０８２９７２．４μＭ併用処理群におけるＡβ減少率は、２０．００％であり、これらの全ては、ミロデナフィル又はＣＯＲＴ－１０８２９７それぞれによる処理からのＡ及びＢの合計の減少率よりも高かったので、相加的以上であり、相乗的効果があることが確認された。
【0047】
上述した本発明は一例に過ぎず、本発明が属する当業者であれば、本発明から種々の変形及び他の均一な実施形態が可能であることを十分に認識しているであろう。したがって、本発明が上述の詳細な説明で言及された形態に限定されないことがよく理解されるであろう。したがって、本発明の技術的保護の真の範囲は、添付の特許請求の範囲の技術的思想によって決定されるべきである。更に、本発明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の精神、及びその範囲内の全ての変更、等価、及び代替を含むと理解されるべきである。
【図1】
【国際調査報告】