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▶ イノベント バイオロジクス（スーチョウ）カンパニー，リミティドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-04-17
(54)【発明の名称】ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法
(51)【国際特許分類】
A61K 38/26 20060101AFI20240410BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20240410BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20240410BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20240410BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20240410BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20240410BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20240410BHJP
A61K 47/18 20170101ALI20240410BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20240410BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20240410BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20240410BHJP
C07K 14/605 20060101ALI20240410BHJP
【ＦＩ】
A61K38/26
A61P1/16
A61P3/04
A61P3/06
A61P3/10
A61P29/00
A61K9/08
A61K47/18
A61K47/10
A61K47/22
A61K47/26
C07K14/605 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023566834
(86)(22)【出願日】2022-04-28
(85)【翻訳文提出日】2023-10-30
(86)【国際出願番号】 CN2022089742
(87)【国際公開番号】W WO2022228498
(87)【国際公開日】2022-11-03
(31)【優先権主張番号】202110485578.0
(32)【優先日】2021-04-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202210420561.1
(32)【優先日】2022-04-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】519274183
【氏名又は名称】イノベント バイオロジクス（スーチョウ）カンパニー，リミティド
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(72)【発明者】
【氏名】チャオ チョンチョン
(72)【発明者】
【氏名】ワン インチュエ
(72)【発明者】
【氏名】ワン チンター
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB11
4C076CC04
4C076CC16
4C076CC21
4C076DD01
4C076DD07
4C076DD38
4C076DD49
4C076DD50
4C076DD51
4C076DD60
4C076EE23
4C076FF61
4C076FF63
4C076FF68
4C076GG45
4C084AA02
4C084BA01
4C084BA19
4C084BA23
4C084BA31
4C084BA42
4C084CA59
4C084DB35
4C084MA17
4C084MA66
4C084NA03
4C084ZA701
4C084ZA702
4C084ZA751
4C084ZA752
4C084ZB111
4C084ZB112
4C084ZC331
4C084ZC332
4C084ZC351
4C084ZC352
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA40
4H045BA10
4H045BA18
4H045BA41
4H045BA50
4H045DA30
4H045EA20
(57)【要約】
本発明は、ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法を開示する。上記ＯＸＭ３保存剤は、０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、０．１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０１ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含み、上記安定化剤は、マンニトール、プロピレングリコール、アルギニン、アルギニン塩酸塩、ヒスチジンおよびヒスチジン塩酸塩のうちの１つまたは複数を含み、上記キレート剤はエデト酸二ナトリウムを含み、上記溶媒は水を含む。上記ＯＸＭ３保存剤から構成されたＯＸＭ３製剤は、活性成分ＯＸＭ３を少なくとも６ヶ月間、好ましくは１２ヶ月間以上、より好ましくは１８ヶ月～２４ヶ月間以上安定に保存することが保証できる。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、０．１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０１ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含むＯＸＭ３保存剤であって、前記安定化剤は、マンニトール、プロピレングリコール、アルギニン、アルギニン塩酸塩、ヒスチジンおよびヒスチジン塩酸塩のうちの１つまたは複数を含み、好ましくは、前記安定化剤はマンニトールおよびプロピレングリコールを含み、前記キレート剤はエデト酸二ナトリウムを含み、前記溶媒は水を含む、ＯＸＭ３保存剤。
【請求項2】
前記保存剤は、１ｍｇ／ｍＬ～３ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬ～６６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０３ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含み、好ましくは、前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬ～４６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ～０．５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含む、請求項１に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項3】
前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、あるいは前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、あるいは
前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなる、請求項２に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項4】
前記保存剤は界面活性剤をさらに含み、前記界面活性剤はツイーン８０が好ましい、請求項２に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項5】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤および１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３を含むＯＸＭ３製剤であって、好ましくは、前記ＯＸＭ３は、３ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、より好ましくは、前記ＯＸＭ３は６ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、さらに好ましくは、前記ＯＸＭ３は１５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、最も好ましくは、前記ＯＸＭ３は１８ｍｇ／ｍＬの濃度である、ＯＸＭ３製剤。
【請求項6】
前記ＯＸＭ３製剤は、７～９のｐＨを有し、好ましくは、前記ＯＸＭ３製剤は７．５～８．５のｐＨを有し、より好ましくは、前記ＯＸＭ３製剤は７．７のｐＨを有する、請求項５に記載のＯＸＭ３製剤。
【請求項7】
請求項６に記載のＯＸＭ３製剤であって、前記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは前記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、３ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、４ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、６ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１２ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１５ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１８ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、２０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する、ＯＸＭ３製剤。
【請求項8】
請求項６または７に記載のＯＸＭ３製剤の調製方法であって、前記調製方法は、（１）トロメタミン、安定化剤およびキレート剤を混合して、ＯＸＭ３保存剤を得るステップ、
（２）ＯＸＭ３とステップ（１）で得られたＯＸＭ３保存剤を混合して、混合液を得るステップ、および
（３）前記混合液のｐＨを調整した後、濾過してＯＸＭ３製剤を得るステップを含む、調製方法。
【請求項9】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤のＯＸＭ３を保存することにおける、使用。
【請求項10】
請求項５～７のいずれか一項に記載の保存剤から調製される液体製剤であって、前記液体製剤は、好ましくは水性注射剤である、液体製剤。
【請求項11】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤、請求項５～７のいずれか一項に記載のＯＸＭ３製剤、または請求項１０に記載の液体製剤を含む送達装置であって、前記送達装置は、好ましくは、容器、シール部品および注射針先を含み、
ここで、
前記容器は、好ましくはバイアル、注射器、またはバイアル瓶であり、
前記シール部品は、好ましくは、密封プラグまたは密封リングであり、
前記注射針先は、好ましくは水針または単一針－マイクロ針のセットであり、
より好ましくは、前記送達装置はプレフィルドシリンジである、送達装置。
【請求項12】
請求項５～７のいずれか一項に記載のＯＸＭ３製剤、請求項１０に記載の液体製剤、または請求項１１に記載の送達装置を含む、試薬キット。
【請求項13】
請求項５～７のいずれか一項に記載のＯＸＭ３製剤、請求項１０に記載の液体製剤、請求項１１に記載の送達装置、または請求項１２に記載の試薬キットの、対象において疾患を治療または予防するための製品の調製における使用であって、前記疾患は、好ましくは肥満、糖尿病、および非アルコール性脂肪性肝炎である、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の参照
本発明は、２０２１年４月３０日に中国で提出された、発明名称が「ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法」で、出願番号が２０２１１０４８５５７８．０である特許出願の優先権、及び２０２２年４月２０日に中国で提出された、発明名称が「ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法」で、出願番号が２０２２１０４２０５６１．１である特許出願の優先権を主張し、その内容はすべて参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、２０２１年４月３０日に中国で提出された、発明名称が「ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法」で、出願番号が２０２１１０４８５５７８．０である特許出願の優先権、及び２０２２年４月２０日に中国で提出された、発明名称が「ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法」で、出願番号が２０２２１０４２０５６１．１である特許出願の優先権を主張し、その内容はすべて参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
本発明は薬剤学の分野に属し、具体的には、ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法に関する。
【背景技術】
【0003】
医薬品の安定性は、医薬品の有効性および安全性を確保する重要な指標である。薬品に良好な安定性を付与する製剤処方を取得することは、薬品を棚に置く期間内にその有効性および安全性を維持するための重要な条件である。強制、加速、振盪および光照射安定性試験を通じて、異なる賦形剤と内部包装材料が活性成分の品質に及ぼす影響を調査し、各製剤の処方について評価する。研究過程における検出項目は主に、外観、可視異物、純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法およびＲＰ－ＨＰＬＣ法）、電荷変異体（ＡＥＸ法）、および生物学的活性（細胞法）を含む。
【0004】
ＯＸＭ３は、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）とグルカゴン受容体のデュアルアゴニストであり、グルカゴン様ペプチド－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に結合して活性化することができる。これはＣＮ２０１６８００３６７７１．３で最初に開示され、その分子式はＨＸａａ２ＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＥＫＫＡＫＥＦＶＥＷＬＬＥＧＰＳＳＧであり、式中、Ｘａａ２はＡｉｂで、２０位のＫは、（［２－（２－アミノ－エトキシ）－エトキシ］－アセチル）２－（γＧｌｕ）１－ＣＯ－（ＣＨ２）１８－ＣＯ２ＨでＫ側鎖のε－アミノ基に結合することにより化学修飾され、かつＣ末端グリシンのカルボキシル基はＣ末端一級アミドにアミド化され、ＯＸＭ３の化学式は、下の図に示される通りである。
【0005】
【化1】
【0006】
従来技術ではＯＸＭ３を良好に保存できる液体保存剤が存在しないため、ＯＸＭ３を安定に保存できる保存剤および安定に保存できるＯＸＭ３製剤が強く望まれている。
【発明の概要】
【0007】
従来技術におけるＯＸＭ３を良好に保存できる液体保存剤および安定に保存できるＯＸＭ３製剤が存在しないことに鑑み、本発明は、ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法を提供する。上記ＯＸＭ３保存剤から構成されたＯＸＭ３製剤は、活性成分ＯＸＭ３を少なくとも６ヶ月間、好ましくは１２ヶ月間以上、より好ましくは１８ヶ月～２４ヶ月間以上安定に保存することが保証できる。
【0008】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案１は、０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、０．１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０１ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含むＯＸＭ３保存剤であり、上記安定化剤は、マンニトール、プロピレングリコール、アルギニン、アルギニン塩酸塩、ヒスチジンおよびヒスチジン塩酸塩のうちの１つまたは複数を含み、好ましくは、上記安定化剤はマンニトールおよびプロピレングリコールを含み、上記キレート剤はエデト酸二ナトリウムを含み、上記溶媒は水を含む。
【0009】
好ましくは、上記保存剤は、１ｍｇ／ｍＬ～３ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬ～６６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、および０．０３ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬのキレート剤を含む。好ましくは、上記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬ～４６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、および０．０５ｍｇ／ｍＬ～０．５ｍｇ／ｍＬのキレート剤を含む。
【0010】
技術案１の一好ましい例において、上記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなる。
【0011】
技術案１の一好ましい例において、上記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなる。
【0012】
技術案１の一好ましい例において、上記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなる。
【0013】
好ましくは、上記保存剤は界面活性剤をさらに含み、上記界面活性剤はツイーン８０が好ましい。
【0014】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案２は、上述したようなＯＸＭ３保存剤の調製方法である。
【0015】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案３は、上述したようなＯＸＭ３保存剤および１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３を含むＯＸＭ３製剤であり、上記ＯＸＭ３は、例えば、２ｍｇ／ｍＬ、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、７ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ、９ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、１８ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬもしくは１００ｍｇ／ｍＬの濃度である。好ましくは、上記ＯＸＭ３は、３ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬの濃度である。より好ましくは、上記ＯＸＭ３は６ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、さらに好ましくは、上記ＯＸＭ３は１５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、さらにより好ましくは、上記ＯＸＭ３は、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、８．３７ｍｇ／ｍＬ、１２ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、１８ｍｇ／ｍＬもしくは２０ｍｇ／ｍＬの濃度である。
【0016】
好ましくは、上記ＯＸＭ３製剤は、７～９のｐＨを有する。好ましくは、上記ＯＸＭ３製剤は、７．５～８．５のｐＨを有する。より好ましくは、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0017】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0018】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0019】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、３ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0020】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、４ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0021】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、６ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0022】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、１２ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0023】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、１５ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0024】
技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、１８ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。技術案３の一好ましい例において、上記ＯＸＭ３製剤は、２０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、上記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する。
【0025】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案４は、上述したようなＯＸＭ３製剤の調製方法であり、上記調製方法は、
（１）トロメタミン、安定化剤およびキレート剤を混合して、ＯＸＭ３保存剤を得るステップ、
（２）ＯＸＭ３とステップ（１）で得られたＯＸＭ３保存剤を混合して、混合液を得るステップ、および
（３）上記混合液のｐＨを調整した後、濾過してＯＸＭ３製剤を得るステップを含む。
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案５は、上述したようなＯＸＭ３保存剤のＯＸＭ３を保存することにおける使用である。
（１）トロメタミン、安定化剤およびキレート剤を混合して、ＯＸＭ３保存剤を得るステップ、
（２）ＯＸＭ３とステップ（１）で得られたＯＸＭ３保存剤を混合して、混合液を得るステップ、および
（３）上記混合液のｐＨを調整した後、濾過してＯＸＭ３製剤を得るステップを含む。
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案５は、上述したようなＯＸＭ３保存剤のＯＸＭ３を保存することにおける使用である。
【0026】
上記技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案６は、上述したような保存剤から調製される液体製剤であり、上記液体製剤は、好ましくは水性注射剤である。
【0027】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案７は、上述したようなＯＸＭ３保存剤、上述したようなＯＸＭ３製剤、または上述したような液体製剤を含む送達装置であり、
上記送達装置は、好ましくは、容器、シール部品および注射針先を含み、
ここで、
上記容器は、好ましくはバイアル、注射器、またはバイアル瓶であり、
上記シール部品は、好ましくは、密封プラグまたは密封リングであり、
上記注射針先は、好ましくは水針または単一針－マイクロ針のセットである。
上記送達装置は、好ましくは、容器、シール部品および注射針先を含み、
ここで、
上記容器は、好ましくはバイアル、注射器、またはバイアル瓶であり、
上記シール部品は、好ましくは、密封プラグまたは密封リングであり、
上記注射針先は、好ましくは水針または単一針－マイクロ針のセットである。
【0028】
技術案７の一好ましい例において、上記送達装置はプレフィルドシリンジである。
【0029】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案８は、上述したようなＯＸＭ３製剤、上述したような液体製剤、または上述したような送達装置を含む試薬キットである。
【0030】
上記の技術的課題を解決するために、本発明が提供する技術案９は、上述したようなＯＸＭ３製剤、上述したような液体製剤、上述したような送達装置、または上述したような試薬キットの、対象において疾患を治療または予防するための製品の調製における使用であり、上記疾患は、好ましくは肥満、糖尿病、および非アルコール性脂肪性肝炎である。
【0031】
当分野における常識に適合することに基づいて、上記の各好ましい条件を任意に組み合わせて、本発明の各好ましい実例を得ることができる。
【0032】
本発明で使用する試薬および原料はいずれも市販されている。
【0033】
本発明の積極的な進歩効果は、以下の通りである：
本発明は、ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法を提供し、上記ＯＸＭ３保存剤から構成されるＯＸＭ３製剤は、強制、加速および長期安定性の考察において、外観、可視異物、含有量、純度および電荷変異体ならびに生物学的活性などの側面での検出を経て、品質に変化がないという判断基準を満たしており、最低６ヵ月、最多１２ヵ月以上安定に保存することができる。これにより、ＯＸＭ３の保管、輸送、および使用が極めて容易になる。
本発明は、ＯＸＭ３保存剤、ＯＸＭ３製剤および調製方法を提供し、上記ＯＸＭ３保存剤から構成されるＯＸＭ３製剤は、強制、加速および長期安定性の考察において、外観、可視異物、含有量、純度および電荷変異体ならびに生物学的活性などの側面での検出を経て、品質に変化がないという判断基準を満たしており、最低６ヵ月、最多１２ヵ月以上安定に保存することができる。これにより、ＯＸＭ３の保管、輸送、および使用が極めて容易になる。
【図面の簡単な説明】
【0034】
【図1】モノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図2】モノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図3】メインピーク純度（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図4】メインピーク純度（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図5】電荷変異体－主成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図6】電荷変異体－酸性成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図7】電荷変異体－主成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図8】電荷変異体－酸性成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図9】メインピーク純度（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図10】メインピーク純度（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図11】総不純物（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向である（４０℃±２℃）。
【図12】総不純物（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向である（２５℃±２℃）。
【図13】電荷変異体－主成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図14】電荷変異体－酸性成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（４０℃±２℃）。
【図15】電荷変異体－主成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【図16】電荷変異体－酸性成分（ＡＥＸ法）の変化傾向図である（２５℃±２℃）。
【発明を実施するための形態】
【0035】
以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらの実施例の範囲に限定されるものではない。以下の実施例において具体的な条件を明記しない実験方法は、慣用の方法および条件、または製品の仕様書に従って選択される。
【0036】
１．実験材料および器具
１．１ 実験試料
ＯＸＭ３：含有量係数０．８３７、Ｅｌｉ Ｌｉｌｙから購入、ロット番号ＢＯ１７０６Ｐ００２、あるいは
ＯＸＭ３：Ａｓｙｍｃｈｅｍから購入、ロット番号ＣＰｏ１２５１０４－０１－０３－０２－４１－０１。
１．１ 実験試料
ＯＸＭ３：含有量係数０．８３７、Ｅｌｉ Ｌｉｌｙから購入、ロット番号ＢＯ１７０６Ｐ００２、あるいは
ＯＸＭ３：Ａｓｙｍｃｈｅｍから購入、ロット番号ＣＰｏ１２５１０４－０１－０３－０２－４１－０１。
【0037】
１．２ 実験材料は、表１に示す。
【0038】
【表1】
【0039】
１．３ 器具機器は、表２に示す。
【0040】
【表2】
【0041】
２．品質の変化がない判断基準
試料が変化したか否かを判断するために、製品に対する認識および器具と方法の精密度に基づき、試料検出指標数値を初期値と比べて品質の変化がない判断基準を設定し、詳細は表３に示されている。
試料が変化したか否かを判断するために、製品に対する認識および器具と方法の精密度に基づき、試料検出指標数値を初期値と比べて品質の変化がない判断基準を設定し、詳細は表３に示されている。
【0042】
【表3】
【0043】
表３の各検出の具体的な方法は、以下の通りである：
外観：本品の外観を目視で検査した。
含有量：ＲＰ－ＨＰＬＣ法：逆相クロマトグラフィーカラムを使用し、移動相Ａは０．１％（ｖ／ｖ）のＴＦＡ水溶液、移動相Ｂは０．０８５％（ｖ／ｖ）のＴＦＡアセトニトリル溶液；希釈剤は、９８０μＬの超純水を取り、１ｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ８．０緩衝液を２０μＬ加え、均一に混合し、使用時に調製し；対照品溶液は、ＩＢＩ３６２対照品を１本取り、軽く反転して十分に混合し；感度溶液は、５０μＬのＩＢＩ３６２対照品を１０ｍＬのメスフラスコに吸い取り、２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ緩衝液を加えて１０ｍＬに定容し；被検試料を取って超純水で１．０ｍｇ／ｍＬに希釈して供試品溶液とし；クロマトグラフィー条件：検出波長が２２０ｎｍで、カラム温度が６０℃で、カラム圧力が４００ｂａｒで、試料プレート温度が５℃で、流速が１．２ｍＬ／ｍｉｎで、注入体積が１０μＬで、採取時間が６０ｍｉｎで、溶離勾配は以下の通りである：
外観：本品の外観を目視で検査した。
含有量：ＲＰ－ＨＰＬＣ法：逆相クロマトグラフィーカラムを使用し、移動相Ａは０．１％（ｖ／ｖ）のＴＦＡ水溶液、移動相Ｂは０．０８５％（ｖ／ｖ）のＴＦＡアセトニトリル溶液；希釈剤は、９８０μＬの超純水を取り、１ｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ８．０緩衝液を２０μＬ加え、均一に混合し、使用時に調製し；対照品溶液は、ＩＢＩ３６２対照品を１本取り、軽く反転して十分に混合し；感度溶液は、５０μＬのＩＢＩ３６２対照品を１０ｍＬのメスフラスコに吸い取り、２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ緩衝液を加えて１０ｍＬに定容し；被検試料を取って超純水で１．０ｍｇ／ｍＬに希釈して供試品溶液とし；クロマトグラフィー条件：検出波長が２２０ｎｍで、カラム温度が６０℃で、カラム圧力が４００ｂａｒで、試料プレート温度が５℃で、流速が１．２ｍＬ／ｍｉｎで、注入体積が１０μＬで、採取時間が６０ｍｉｎで、溶離勾配は以下の通りである：
【0044】
【表4】
【0045】
希釈剤、対照品溶液、感度溶液および供試品溶液をそれぞれ１０μＬ精密に量り取り、試料を注入して検出を開始した。
【0046】
可視異物：国家薬典委員会、中華人民共和国薬典（２０１５年版、四部通則０９０４「可視異物検査法」、北京：中国医薬科技出版社、２０１５）に記載される方法に従い、透明度測定器（天津天大天発製、型番ＹＢ－２）および不溶性微粒子検出器（天津天大発製、型番ＧＷＪ－８により、試料における可視異物を検査した。
【0047】
モノマー純度：ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法：サイズ排除クロマトグラフィーカラムを使用して分離し、移動相は８０％の２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ緩衝液（ｐＨ８．０）＋２０％アセトニトリルで、希釈剤は、９８０μＬの超純水を取り、１ｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ８．０緩衝液を２０μＬ加え、均一に混合し、使用時に調製し；対照品溶液は、ＩＢＩ３６２対照品を１本取り、軽く反転して十分に混合し；感度溶液は、５０μＬのＩＢＩ３６２対照品を１０ｍＬのメスフラスコに吸い取り、２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ緩衝液を加えて１０ｍＬに定容し；被検試料を取って超純水で１．０ｍｇ／ｍＬに希釈して供試品溶液とし；クロマトグラフィー条件：注入量が１０μＬで、流速が０．５ｍＬ／ｍｉｎで、採取時間が３５ｍｉｎで、カラム温度が２５℃で、カラム圧力が《１０００ｐｓｉ／７０ｂａｒで、試料プレート温度が６℃で、検出波長が２１４ｎｍである。溶離方式は、定組成溶離である。希釈剤、対照品溶液、感度溶液および供試品溶液をそれぞれ１０μＬ精密に量り取り、試料を注入して検出を開始した。
【0048】
メインピーク純度：ＲＰ－ＨＰＬＣ法、含有量測定法と同じである。
【0049】
電荷変異体：アニオン交換クロマトグラフィー（ＡＥＸ－ＨＰＬＣ法と紫外線検出の併用）。ＹＭＣ－Ｂｉｏｐｒｏ ＱＡ－Ｆ１００×４．６ｍｍＳ－５μｍを使用して分離し、移動相Ａは１００ｍＭの酢酸ナトリウムで、ｐＨ４．６で、５０％のアセトニトリルで（１０００ｍＬのメスシリンダー内の４００ｍＬの水に８．２０ｇの酢酸ナトリウムを添加した。酢酸でｐＨを４．６に調整した。水を加えて全体積を５００ｍＬにし、アセトニトリルで１０００ｍＬに定容した）、移動相Ｂは５０％のアセトニトリル／水である（１０００ｍＬのメスシリンダーに５００ｍＬのアセトニトリルを加え、次に水で１０００ｍＬに定容した）。ｐＨ８．０の２０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（２．４２ｇのＴＲＩＳを１０００ｍＬの水に溶解し、１．０ＮのＨＣｌでｐＨを８．０±０．１に調整した）で１ｍｇ／ｍＬの溶液を調製した。２０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液をブランク溶液として取った。参照標準品を検出標準品として使用した（濃度：１．０ｍｇ／ｍＬ）。ブランク溶液、検出標準品溶液および供試品溶液をそれぞれ１０μＬ取って液体クロマトグラフに注入し、移動相流速が１．０ｍＬ／ｍｉｎで、採取時間が４５ｍｉｎで、カラム温度が２５℃で、検出波長が２８０ｎｍで、オートサンプラの温度が２℃～８℃である。試料を注入して分析し、主成分、酸性成分および塩基性成分の含有量を算出した。
【0050】
生物学的活性：（ＧＬＰ－１活性およびグルカゴン活性の検出を含む）
１）ＧＬＰ－１活性：培養したＨＥＫ２９３－ＧＬＰ１Ｒ細胞を取り、古い培地を吸引し、５ｍＬのＰＢＳで１回洗浄し、１ｍＬのＡｃｃｕｔａｓｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎを加えて細胞が剥がれ落ちるまで消化し、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒ（１０％のＦＢＳ（５６ｍＬ）、９０％のＤＭＥＭ（１×）＋ＧｌｕｔａＭＡＸＴＭ－１培地（５００ｍＬ））で消化を終了させた。細胞懸濁液を収集し、１０００ｒ／ｍｉｎで５ｍｉｎ遠心分離し、上清を捨て、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒで再懸濁して計数し、細胞懸濁液の密度を０．２×１０６細胞／ｍＬに調整した。対照品および供試品が５３４ｎｇ／ｍＬを開始濃度として、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒで３倍希釈した連続の１０個の勾配希釈を行い、合計１０個の勾配試料を得た。実験レイアウトに従って、処理した試料および細胞懸濁液を９６ウェル白色細胞培養プレートに５０μＬ／ウェルで添加し、陰性対照群に５０μＬ／ウェルのＡｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒを添加し、周辺ウェルに１００μＬ／ウェルでＡｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒを添加して密封した。その後、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターに６ｈインキュベートした。あらかじめ調製した発色液（Ｂｉｏ－ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ ｂｕｆｆｅｒを１００ｍＬ取り、Ｂｉｏ－ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅに溶解して得た）を室温に平衡化した。細胞培養プレートを取り出し、室温に平衡化するまで１０ｍｉｎ静置した。発色液を各ウェルに１００μＬ加え、室温で５ｍｉｎ静置した。マイクロプレートリーダーを使用して全波長における化学発光値を読み取り、タンパク質濃度を横座標とし、誘導効果倍数を縦座標として４パラメータカーブフィッティングを行い、ＥＣ５０、Ｒ２などのデータを得た。生物学的活性％＝対照品ＥＣ５０／供試品ＥＣ５０×１００％であり、
２）グルカゴン活性：培養したＣＨＯ－Ｋ１／ＧＣＧＲ／Ｇａ１５細胞を取り、古い培地を吸引し、１×ＰＢＳで１回洗浄し、１ｍＬのＡｃｃｕｔａｓｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎを加え、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターで４ｍｉｎ～５ｍｉｎインキュベートし、Ｆ－１２（１ｘ）で消化を終了させ、１０００回転／分で５ｍｉｎ遠心分離し、上清を捨て、適量の分析培地で再懸濁して計数し、細胞懸濁液の密度を１．８×１０６個／ｍＬに調整した。対照品および供試品が２６７ｎｇ／ｍＬを開始濃度とし、試料希釈液（２０％のＳｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ、８０％の滅菌水（用量に応じて使用時に調製する））を用いて３倍希釈した連続の１０個の勾配希釈を行い、合計１０個の勾配試料を得た。既定のレイアウトに従って、処理した試料および細胞懸濁液を９６ウェルプレートに５μＬ／ウェルで加え、瞬時に遠心分離し、プレートをプレート封止膜で封止し、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターで３０ｍｉｎインキュベートした。９６ウェルプレートを取り出し、プレート封止膜を剥がし、瞬時に遠心分離した。調製したｃＡＭＰ－ｄ２ストック溶液とＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－Ｃｒｙｐｔａｔｅストック溶液をあらかじめ解凍し、室温に平衡化して作動液を調製した。５μＬのｃＡＭＰ－ｄ２作動液（２０％のｃＡＭＰ－ｄ２ストック溶液を取り、８０％のＬｙｓｉｓ＆Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒを加えた（用量に従って使用時に調製する））および５μＬのＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－Ｃｒｙｐｔａｔｅ作動液（２０％のＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－ストック溶液を取り、８０％のＬｙｓｉｓ＆Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒを加えた（用量に従って使用時に調製する））を各ウェルに順次添加し、瞬時に遠心分離し、光を避けて室温で６０ｍｉｎ発色させた。マイクロプレートリーダーを使用して全波長における化学発光値を読み取り、タンパク質濃度を横座標とし、Ｒａｔｉｏ値を縦座標として４パラメータカーブフィッティングを行い、ＥＣ５０、Ｒ２などのデータを得、生物学的活性％＝対照品ＥＣ５０／供試品ＥＣ５０×１００％である。
１）ＧＬＰ－１活性：培養したＨＥＫ２９３－ＧＬＰ１Ｒ細胞を取り、古い培地を吸引し、５ｍＬのＰＢＳで１回洗浄し、１ｍＬのＡｃｃｕｔａｓｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎを加えて細胞が剥がれ落ちるまで消化し、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒ（１０％のＦＢＳ（５６ｍＬ）、９０％のＤＭＥＭ（１×）＋ＧｌｕｔａＭＡＸＴＭ－１培地（５００ｍＬ））で消化を終了させた。細胞懸濁液を収集し、１０００ｒ／ｍｉｎで５ｍｉｎ遠心分離し、上清を捨て、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒで再懸濁して計数し、細胞懸濁液の密度を０．２×１０６細胞／ｍＬに調整した。対照品および供試品が５３４ｎｇ／ｍＬを開始濃度として、Ａｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒで３倍希釈した連続の１０個の勾配希釈を行い、合計１０個の勾配試料を得た。実験レイアウトに従って、処理した試料および細胞懸濁液を９６ウェル白色細胞培養プレートに５０μＬ／ウェルで添加し、陰性対照群に５０μＬ／ウェルのＡｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒを添加し、周辺ウェルに１００μＬ／ウェルでＡｓｓａｙ Ｂｕｆｆｅｒを添加して密封した。その後、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターに６ｈインキュベートした。あらかじめ調製した発色液（Ｂｉｏ－ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ ｂｕｆｆｅｒを１００ｍＬ取り、Ｂｉｏ－ＧｌｏＴＭ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅに溶解して得た）を室温に平衡化した。細胞培養プレートを取り出し、室温に平衡化するまで１０ｍｉｎ静置した。発色液を各ウェルに１００μＬ加え、室温で５ｍｉｎ静置した。マイクロプレートリーダーを使用して全波長における化学発光値を読み取り、タンパク質濃度を横座標とし、誘導効果倍数を縦座標として４パラメータカーブフィッティングを行い、ＥＣ５０、Ｒ２などのデータを得た。生物学的活性％＝対照品ＥＣ５０／供試品ＥＣ５０×１００％であり、
２）グルカゴン活性：培養したＣＨＯ－Ｋ１／ＧＣＧＲ／Ｇａ１５細胞を取り、古い培地を吸引し、１×ＰＢＳで１回洗浄し、１ｍＬのＡｃｃｕｔａｓｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎを加え、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターで４ｍｉｎ～５ｍｉｎインキュベートし、Ｆ－１２（１ｘ）で消化を終了させ、１０００回転／分で５ｍｉｎ遠心分離し、上清を捨て、適量の分析培地で再懸濁して計数し、細胞懸濁液の密度を１．８×１０６個／ｍＬに調整した。対照品および供試品が２６７ｎｇ／ｍＬを開始濃度とし、試料希釈液（２０％のＳｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ、８０％の滅菌水（用量に応じて使用時に調製する））を用いて３倍希釈した連続の１０個の勾配希釈を行い、合計１０個の勾配試料を得た。既定のレイアウトに従って、処理した試料および細胞懸濁液を９６ウェルプレートに５μＬ／ウェルで加え、瞬時に遠心分離し、プレートをプレート封止膜で封止し、３７℃±２℃、５％±１％のＣＯ２インキュベーターで３０ｍｉｎインキュベートした。９６ウェルプレートを取り出し、プレート封止膜を剥がし、瞬時に遠心分離した。調製したｃＡＭＰ－ｄ２ストック溶液とＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－Ｃｒｙｐｔａｔｅストック溶液をあらかじめ解凍し、室温に平衡化して作動液を調製した。５μＬのｃＡＭＰ－ｄ２作動液（２０％のｃＡＭＰ－ｄ２ストック溶液を取り、８０％のＬｙｓｉｓ＆Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒを加えた（用量に従って使用時に調製する））および５μＬのＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－Ｃｒｙｐｔａｔｅ作動液（２０％のＡｎｔｉ－ｃＡＭＰ－ストック溶液を取り、８０％のＬｙｓｉｓ＆Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒを加えた（用量に従って使用時に調製する））を各ウェルに順次添加し、瞬時に遠心分離し、光を避けて室温で６０ｍｉｎ発色させた。マイクロプレートリーダーを使用して全波長における化学発光値を読み取り、タンパク質濃度を横座標とし、Ｒａｔｉｏ値を縦座標として４パラメータカーブフィッティングを行い、ＥＣ５０、Ｒ２などのデータを得、生物学的活性％＝対照品ＥＣ５０／供試品ＥＣ５０×１００％である。
【実施例1】
【0051】
実施例１ ＯＸＭ３製剤Ｆ１～Ｆ４処方の構成
表４に従って各処方の緩衝液を調製し、それぞれの処方溶液にＯＸＭ３を処方量で添加した。ｐＨを７．７に調整した。濾過して２Ｒバイアル瓶に１ｍＬを分注し、栓をしてキャップをした。
表４に従って各処方の緩衝液を調製し、それぞれの処方溶液にＯＸＭ３を処方量で添加した。ｐＨを７．７に調整した。濾過して２Ｒバイアル瓶に１ｍＬを分注し、栓をしてキャップをした。
【0052】
【表5】
【0053】
実施例２ Ｆ１～Ｆ４処方の安定性実験
上記の処方試料は、強制、加速および長期安定性について試験された。具体的な方案を表５に示す。
上記の処方試料は、強制、加速および長期安定性について試験された。具体的な方案を表５に示す。
【0054】
【表6】
【0055】
結果分析：
（１）外観および可視異物
Ｆ１～Ｆ４の試料は４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、その外観、可視異物はいずれも合格であった。
（１）外観および可視異物
Ｆ１～Ｆ４の試料は４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、その外観、可視異物はいずれも合格であった。
【0056】
（２）含有量
薬物含量の結果を表６に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量が顕著に減少し、０日と比較して、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量はそれぞれ１．１ｍｇ／ｍＬおよび１．０ｍｇ減少し、Ｆ３およびＦ４試料の薬物含有量は顕著な変化がなく、それぞれ０．２ｍｇ／ｍＬおよび０．４ｍｇ／ｍＬだけ減少したことが示された。同様に、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量が顕著に減少し、０日と比較して、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量はそれぞれ１．１ｍｇ／ｍＬおよび０．９ｍｇ減少し、Ｆ３およびＦ４試料の薬物含有量は顕著な変化がなく、それぞれ０．２ｍｇ／ｍＬおよび０．３ｍｇ／ｍＬだけ減少した。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、各試料の薬物含有量はすべて顕著な変化がなかった。以上により、ＯＸＭ３はＦ３およびＦ４において比較的安定している。
薬物含量の結果を表６に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量が顕著に減少し、０日と比較して、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量はそれぞれ１．１ｍｇ／ｍＬおよび１．０ｍｇ減少し、Ｆ３およびＦ４試料の薬物含有量は顕著な変化がなく、それぞれ０．２ｍｇ／ｍＬおよび０．４ｍｇ／ｍＬだけ減少したことが示された。同様に、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量が顕著に減少し、０日と比較して、Ｆ１およびＦ２試料の薬物含有量はそれぞれ１．１ｍｇ／ｍＬおよび０．９ｍｇ減少し、Ｆ３およびＦ４試料の薬物含有量は顕著な変化がなく、それぞれ０．２ｍｇ／ｍＬおよび０．３ｍｇ／ｍＬだけ減少した。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、各試料の薬物含有量はすべて顕著な変化がなかった。以上により、ＯＸＭ３はＦ３およびＦ４において比較的安定している。
【0057】
【表7】
【0058】
（３）純度
純度の結果を表７に示す。そのモノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向を図１および図２に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、Ｆ１～Ｆ４試料のモノマー純度が顕著に低下し、０日と比較して、モノマー純度はそれぞれ３．０％、１．７％、１．１％、および１．０％低下し、Ｆ３およびＦ４の低下幅は明らかにＦ１およびＦ２より小さいことが示された。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２のモノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）は４．２％および３．５％低下し、判断基準を超え、これに対して、Ｆ３およびＦ４のモノマー純度は顕著な変化がなく、いずれも０．３％減少した。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、Ｆ１～Ｆ４のモノマー純度はすべて顕著な変化がなかった。
純度の結果を表７に示す。そのモノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向を図１および図２に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、Ｆ１～Ｆ４試料のモノマー純度が顕著に低下し、０日と比較して、モノマー純度はそれぞれ３．０％、１．７％、１．１％、および１．０％低下し、Ｆ３およびＦ４の低下幅は明らかにＦ１およびＦ２より小さいことが示された。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２のモノマー純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）は４．２％および３．５％低下し、判断基準を超え、これに対して、Ｆ３およびＦ４のモノマー純度は顕著な変化がなく、いずれも０．３％減少した。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、Ｆ１～Ｆ４のモノマー純度はすべて顕著な変化がなかった。
【0059】
そのメインピーク純度（ＲＰ－ＨＰＬＣ法）の変化傾向を図３および図４に示す。４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、Ｆ１～Ｆ４試料のメインピーク純度が顕著に低下し、０日と比較して、Ｆ１～Ｆ４試料のメインピーク純度はそれぞれ５．９％、４．３％、２．２％および２．５％低下し、Ｆ３およびＦ４の低下幅は明らかにＦ１およびＦ２より小さかった。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、Ｆ１およびＦ２のメインピーク純度はそれぞれ６．９％および５．５％低下し、Ｆ３およびＦ４のメインピーク純度はそれぞれ２．６％および２．８％低下し、Ｆ３およびＦ４の低下幅は明らかにＦ１およびＦ２より小さかった。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、Ｆ１～Ｆ４のモノマー純度はすべて顕著な変化がなかった。
【0060】
以上により、Ｆ３およびＦ４はＦ１およびＦ２より優れている。
【0061】
【表8】
【0062】
【0063】
結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた後、各処方試料の荷電変異体の主成分と酸性成分がいずれも明らかに変化し、０日と比較して、Ｆ１～Ｆ４試料の主成分はそれぞれ１４．４％、１１．３％、９．０％および９．０％減少し、酸性成分はそれぞれ１３．９％、１１．１％、８．７％および８．５％増加し、Ｆ３およびＦ４の変化幅はＦ１およびＦ２より明らかに小さいことが示された。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた後、各処方試料の荷電変異体の主成分と酸性成分がいずれも明らかに変化し、０日と比較して、Ｆ１～Ｆ４試料の主成分はそれぞれ９．２％、８．３％、７．８％および７．５％減少し、酸性成分はそれぞれ８．４％、７．４％、６．７％および６．６％増加し、Ｆ３およびＦ４の変化幅はＦ１およびＦ２より小さかった。５℃±３℃の条件で３ヶ月間置き、各処方試料の電荷変異体の主成分と酸性成分はいずれも明らかな変化がなかった。以上により、Ｆ３およびＦ４はＦ１およびＦ２の処方より優れている。
【0064】
【表9】
【0065】
（５）生物学的活性（細胞法）
結果は表９を示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で３ヶ月間置いた場合、Ｆ１～Ｆ４試料の生物学的活性（細胞法）が６０％～１４０％の範囲内で許容されることが示された。
結果は表９を示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で３ヶ月間置いた場合、Ｆ１～Ｆ４試料の生物学的活性（細胞法）が６０％～１４０％の範囲内で許容されることが示された。
【0066】
【表10】
【0067】
上記をまとめると、Ｆ３およびＦ４はＦ１およびＦ２の処方より優れており、安定剤エデト酸二ナトリウムの添加が明らかな効果があることを示し、これに対して、Ｆ３およびＦ４は顕著な差がなく、マンニトールとプロピレングリコールは、試料の安定性に対して顕著な影響がないことを示した。
【0068】
実施例３ ＯＸＭ３製剤Ｆ５の最適化処方の構成
上記実施例の結果に基づいて、製剤処方の開発経験と組み合わせて、処方は以下のように最適化され：３．０ｍｇ／ｍＬ、４．０ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、１２．０ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、２０．０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン（すなわち、トリヒドロキシメチル、Ｔｒｉｓ）、２３．０ｍｇ／ｍＬのマンニトール、１０．０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウムをｐＨ７．７で、１ｍＬの細長いスリムプレフィルドシリンジまたは２Ｒバイアル瓶に０．５ｍＬ充填し、処方Ｆ５－１、Ｆ５－２、Ｆ５－３、Ｆ５－４、Ｆ５－５、Ｆ５－６およびＦ５－７を得た。処方情報を下記の表１０に示す。
上記実施例の結果に基づいて、製剤処方の開発経験と組み合わせて、処方は以下のように最適化され：３．０ｍｇ／ｍＬ、４．０ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、１２．０ｍｇ／ｍＬ、１５．０ｍｇ／ｍＬ、１８．０ｍｇ／ｍＬ、２０．０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン（すなわち、トリヒドロキシメチル、Ｔｒｉｓ）、２３．０ｍｇ／ｍＬのマンニトール、１０．０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウムをｐＨ７．７で、１ｍＬの細長いスリムプレフィルドシリンジまたは２Ｒバイアル瓶に０．５ｍＬ充填し、処方Ｆ５－１、Ｆ５－２、Ｆ５－３、Ｆ５－４、Ｆ５－５、Ｆ５－６およびＦ５－７を得た。処方情報を下記の表１０に示す。
【0069】
【表11】
【0070】
実施例４ Ｆ５処方の安定性実験
一、実施例３で得られたＦ５－１およびＦ５－２試料は、強制、加速および長期安定性について試験された。具体的な方案を表１１に示す。
一、実施例３で得られたＦ５－１およびＦ５－２試料は、強制、加速および長期安定性について試験された。具体的な方案を表１１に示す。
【0071】
【表12】
【0072】
結果分析
表１２～表１３のデータは、Ｆ５－１およびＦ５－２試料の外観、活性、可視異物などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で４週間置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
表１２～表１３のデータは、Ｆ５－１およびＦ５－２試料の外観、活性、可視異物などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で４週間置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
【0073】
【表13】
【0074】
【表14】
【0075】
表１４～表１５のデータは、Ｆ５－１およびＦ５－２試料の外観、活性、可視異物などの検査項目は、２５℃±２℃の条件で３ヶ月置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
【0076】
【表15】
【0077】
【表16】
【0078】
表１６～表１７のデータは、Ｆ５－１およびＦ５－２試料のすべての検査項目は、５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、いずれも品質基準を満たしていることが示された。
【0079】
【表17】
【0080】
【表18】
【0081】
二、実施例３で得られたＦ５－３試料は、強制、加速、振盪および光照射安定性について試験された。具体的な方案を表１８を示す。
【0082】
【表19】
【0083】
結果分析
１、外観および可視異物
Ｆ５－３試料は、４０℃±２℃の条件、２５℃±２℃の条件、および５℃±３℃の条件でそれぞれ１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月間置いた場合、その外観および可視異物はすべて合格であった。０日試料と強制の１ヶ月試料を通して、外観は、澄明から薄い乳白光まで、無色またはほぼ無色の液体として説明された。
１、外観および可視異物
Ｆ５－３試料は、４０℃±２℃の条件、２５℃±２℃の条件、および５℃±３℃の条件でそれぞれ１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月間置いた場合、その外観および可視異物はすべて合格であった。０日試料と強制の１ヶ月試料を通して、外観は、澄明から薄い乳白光まで、無色またはほぼ無色の液体として説明された。
【0084】
２、含有量
薬物含有量の結果を表１９に示す。結果は、各試料の薬物含有量は、４０℃±２℃の条件、２５℃±２℃の条件、および５℃±３℃の条件でそれぞれ１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月間置いた場合、いずれも顕著な変化がないことが示された。
薬物含有量の結果を表１９に示す。結果は、各試料の薬物含有量は、４０℃±２℃の条件、２５℃±２℃の条件、および５℃±３℃の条件でそれぞれ１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月間置いた場合、いずれも顕著な変化がないことが示された。
【0085】
【表20】
【0086】
【0087】
モノマー純度の結果は、Ｆ５－３試料の純度（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ法）は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、いずれも顕著な変化がないことが示された。
【0088】
【表21】
【0089】
メインピーク純度の結果は、４０℃±２℃の条件、２５℃±２℃の条件、および５℃±３℃の条件でそれぞれ１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料のメインピーク純度は、変動幅が異なることが示された。４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料のメインピーク純度はいずれも顕著に低下し、依然として品質基準内にあった。０日と比較して、Ｆ５－３試料のメインピーク純度は２．９％減少し、総不純物は２．９％増加し、最大単一不純物は明らかな変化がなく、０．４％だけ増加した。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料のメインピーク純度は１．９％減少し、総不純物は１．９％増加し、最大単一不純物は明らかな変化がなく、０．１％だけ増加した。５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料のメインピーク純度、総不純物および最大単一不純物はいずれも顕著な変化がなかった。
【0090】
上記の純度実験結果は、Ｆ５処方が安定していることが示された。
【0091】
【0092】
結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料の電荷変異体の主成分と酸性成分はいずれも顕著な変化がないことが示された。０日と比較して、Ｆ５－３試料の主成分は８．１％減少し、酸性成分は６．６％増加した。２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料の主成分と酸性成分はいずれも顕著な変化がないが、依然として品質基準内にあった。０日と比較して、Ｆ５－３試料の主成分は５．０％減少し、酸性成分は４．１％増加した。結果は、５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料の電荷変異体の主成分と酸塩基成分はいずれも顕著な変化がないことが示された。
【0093】
【表22】
【0094】
５、生物学的活性
生物学的活性の結果を表２２に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料の生物学的活性（細胞法）が６０％～１４０％の範囲内で許容されることが示された。
生物学的活性の結果を表２２に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置き、および５℃±３℃の条件で６ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３試料の生物学的活性（細胞法）が６０％～１４０％の範囲内で許容されることが示された。
【0095】
【表23】
【0096】
６、不溶性微粒子
不溶性微粒子の結果を表２３に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で２週間置き、および２５℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３不溶性微粒子は許容できることが示された。
不溶性微粒子の結果を表２３に示す。結果は、４０℃±２℃の条件で２週間置き、および２５℃±２℃の条件で１ヶ月間置いた場合、Ｆ５－３不溶性微粒子は許容できることが示された。
【0097】
【表24】
【0098】
（４）振盪実験の結果
振盪実験の結果を表２４に示す。結果は、室温、光を避けて、６５０ｒ／ｍｉｎの条件で５日間振盪した場合、Ｆ５－３の外観および可視異物はすべて合格であり、純度、電荷変異体、および生物学的活性はいずれも明らかな変化がないことが示された。
振盪実験の結果を表２４に示す。結果は、室温、光を避けて、６５０ｒ／ｍｉｎの条件で５日間振盪した場合、Ｆ５－３の外観および可視異物はすべて合格であり、純度、電荷変異体、および生物学的活性はいずれも明らかな変化がないことが示された。
【0099】
【表25】
【0100】
（５）光照射実験結果
光照射実験結果を表２５に示す。結果は、２５℃±２℃、６０％ＲＨ±５％ＲＨ、５００Ｌｕｘ±５０Ｌｕｘの条件で１０日間置いた場合、Ｆ５－３試料の外観、可視異物はすべて合格であり、純度、電荷変異体および生物学的活性はいずれも明らかな変化がなく、かつＦ５－３試料の間に明らかな差異がないことが示された。
光照射実験結果を表２５に示す。結果は、２５℃±２℃、６０％ＲＨ±５％ＲＨ、５００Ｌｕｘ±５０Ｌｕｘの条件で１０日間置いた場合、Ｆ５－３試料の外観、可視異物はすべて合格であり、純度、電荷変異体および生物学的活性はいずれも明らかな変化がなく、かつＦ５－３試料の間に明らかな差異がないことが示された。
【0101】
【表26】
【0102】
三、実施例３で得られたＦ５－４およびＦ５－５試料は、強制および加速安定性について試験された。具体的な方案を表２６に示す。
【0103】
【表27】
【0104】
結果分析
表２７～表２８のデータは、Ｆ５－４およびＦ５－５試料の活性および不溶性微粒子などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月置き、および２５℃±２℃の条件で３ヶ月置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
表２７～表２８のデータは、Ｆ５－４およびＦ５－５試料の活性および不溶性微粒子などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月置き、および２５℃±２℃の条件で３ヶ月置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
【0105】
【表28】
【0106】
【表29】
【0107】
四、実施例３で得られたＦ５－７試料は、強制、加速安定性について試験された。具体的な方案を表２９に示す。
【0108】
【表30】
【0109】
結果分析
表３０のデータは、Ｆ５－７試料の活性などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、および２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
表３０のデータは、Ｆ５－７試料の活性などの検査項目は、４０℃±２℃の条件で１ヶ月間置き、および２５℃±２℃の条件で３ヶ月間置いた場合、いずれも顕著な変化がなく、含有量、純度、関連物質などの検査項目は変化があるが、依然として品質基準の範囲内にあることが示された。
【0110】
【表31】
【0111】
上記の実験結果と製剤処方開発プラットフォームの経験に基づいて、最終的にＦ５がＯＸＭ３製剤処方として選択され、その組成は、３．０ｍｇ／ｍＬ、４．０ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、１２ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、１８ｍｇ／ｍＬもしくは２０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン（すなわち、トリヒドロキシメチル、Ｔｒｉｓ ）、２３．０ｍｇ／ｍＬのマンニトール、１０．０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウムをｐＨ７．７とするものであった。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【手続補正書】
【提出日】2023-11-01
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、０．１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０１ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含むＯＸＭ３保存剤であって、前記安定化剤は、マンニトール、プロピレングリコール、アルギニン、アルギニン塩酸塩、ヒスチジンおよびヒスチジン塩酸塩のうちの１つまたは複数を含み、好ましくは、前記安定化剤はマンニトールおよびプロピレングリコールを含み、前記キレート剤はエデト酸二ナトリウムを含み、前記溶媒は水を含む、ＯＸＭ３保存剤。
【請求項2】
前記保存剤は、１ｍｇ／ｍＬ～３ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬ～６６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０３ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含み、好ましくは、前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬ～４６ｍｇ／ｍＬの安定化剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ～０．５ｍｇ／ｍＬのキレート剤、および溶媒を含む、請求項１に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項3】
前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、あるいは前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、あるいは
前記保存剤は、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなる、請求項２に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項4】
前記保存剤は界面活性剤をさらに含み、前記界面活性剤はツイーン８０が好ましい、請求項２に記載のＯＸＭ３保存剤。
【請求項5】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤および１ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３を含むＯＸＭ３製剤であって、好ましくは、前記ＯＸＭ３は、３ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、より好ましくは、前記ＯＸＭ３は６ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、さらに好ましくは、前記ＯＸＭ３は１５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬの濃度であり、最も好ましくは、前記ＯＸＭ３は１８ｍｇ／ｍＬの濃度である、ＯＸＭ３製剤。
【請求項6】
前記ＯＸＭ３製剤は、７～９のｐＨを有し、好ましくは、前記ＯＸＭ３製剤は７．５～８．５のｐＨを有し、より好ましくは、前記ＯＸＭ３製剤は７．７のｐＨを有する、請求項５に記載のＯＸＭ３製剤。
【請求項7】
請求項６に記載のＯＸＭ３製剤であって、前記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、４６ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは前記ＯＸＭ３製剤は、８．３７ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、２０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、０．５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、３ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、４ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、６ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１２ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１５ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、１８ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有し、あるいは
前記ＯＸＭ３製剤は、２０ｍｇ／ｍＬのＯＸＭ３、１．２１ｍｇ／ｍＬのトロメタミン、１０ｍｇ／ｍＬのプロピレングリコール、２３ｍｇ／ｍＬのマンニトール、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム、および溶媒である水からなり、前記ＯＸＭ３製剤は、７．７のｐＨを有する、ＯＸＭ３製剤。
【請求項8】
請求項６に記載のＯＸＭ３製剤の調製方法であって、前記調製方法は、（１）トロメタミン、安定化剤およびキレート剤を混合して、ＯＸＭ３保存剤を得るステップ、
（２）ＯＸＭ３とステップ（１）で得られたＯＸＭ３保存剤を混合して、混合液を得るステップ、および
（３）前記混合液のｐＨを調整した後、濾過してＯＸＭ３製剤を得るステップを含む、調製方法。
【請求項9】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤のＯＸＭ３を保存することにおける、使用。
【請求項10】
請求項５に記載の製剤から調製される液体製剤であって、前記液体製剤は、好ましくは水性注射剤である、液体製剤。
【請求項11】
請求項１～４のいずれか一項に記載のＯＸＭ３保存剤、請求項５に記載のＯＸＭ３製剤、または請求項１０に記載の液体製剤を含む送達装置であって、前記送達装置は、好ましくは、容器、シール部品および注射針先を含み、
ここで、
前記容器は、好ましくはバイアル、注射器、またはバイアル瓶であり、
前記シール部品は、好ましくは、密封プラグまたは密封リングであり、
前記注射針先は、好ましくは水針または単一針－マイクロ針のセットであり、
より好ましくは、前記送達装置はプレフィルドシリンジである、送達装置。
【請求項12】
請求項５に記載のＯＸＭ３製剤、請求項１０に記載の液体製剤、または請求項１１に記載の送達装置を含む、試薬キット。
【請求項13】
請求項５に記載のＯＸＭ３製剤、請求項１０に記載の液体製剤、請求項１１に記載の送達装置、または請求項１２に記載の試薬キットの、対象において疾患を治療または予防するための製品の調製における使用であって、前記疾患は、好ましくは肥満、糖尿病、および非アルコール性脂肪性肝炎である、使用。
【国際調査報告】