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特表2024-517233抗菌化合物の調製のための方法

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-04-19

(54)【発明の名称】抗菌化合物の調製のための方法

(51)【国際特許分類】

C07D 413/14 20060101AFI20240412BHJP

A61K 31/538 20060101ALI20240412BHJP

C07D 487/04 20060101ALI20240412BHJP

A61P 31/04 20060101ALI20240412BHJP

【ＦＩ】

C07D413/14 CSP

A61K31/538

C07D487/04 144

A61P31/04

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023567877

(86)(22)【出願日】2022-05-03

(85)【翻訳文提出日】2023-12-20

(86)【国際出願番号】 EP2022061879

(87)【国際公開番号】W WO2022233891

(87)【国際公開日】2022-11-10

(31)【優先権主張番号】202111020227

(32)【優先日】2021-05-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】IN

(31)【優先権主張番号】21181594.9

(32)【優先日】2021-06-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(31)【優先権主張番号】2204981.1

(32)【優先日】2022-04-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】519054725

【氏名又は名称】ディスキューバリミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林浩

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100131990

【弁理士】

【氏名又は名称】大野玲恵

(72)【発明者】

【氏名】ティミンズ，ピーター

(72)【発明者】

【氏名】カルニョー，ジャン－フランソワ

(72)【発明者】

【氏名】ボーミック，ディパル

(72)【発明者】

【氏名】スリヴァスタヴァ，アニル

(72)【発明者】

【氏名】デブ，パラシャント

(72)【発明者】

【氏名】マハジャン，アキル

(72)【発明者】

【氏名】レッディ，ヴィジャヤ

(72)【発明者】

【氏名】バンダナプ，プルショットハム

(72)【発明者】

【氏名】カーン，モハメドナワズ

(72)【発明者】

【氏名】クマール，グルシャム

(72)【発明者】

【氏名】クマール，サレシュ

【テーマコード（参考）】

4C050

4C063

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C050AA01

4C050BB05

4C050CC08

4C050EE03

4C050FF10

4C050GG01

4C050HH02

4C050HH04

4C063AA03

4C063BB01

4C063CC54

4C063DD25

4C063EE01

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086AA04

4C086BC74

4C086CB05

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZB35

(57)【要約】

本発明は、腸内細菌目のグラム陰性菌および／もしくはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染、またはそれらによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の処置における使用に好適な、抗菌化合物の製造のための方法に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

化合物（Ｉ）

【化1】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩

【化2】

の脱保護を含む方法。

【請求項2】

化合物（Ｉ）を製造するためのものである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

【請求項4】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）およびメチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の前記脱保護を含む、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

【請求項6】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）

【化3】

および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）

【化4】

の前記脱保護を含む、請求項１、２または５に記載の方法。

【請求項7】

前記脱保護が、酸触媒を使用して酸触媒される、請求項１から６のいずれかに記載の方法。

【請求項8】

前記脱保護が、塩基触媒を使用して塩基触媒される、請求項１から６のいずれかに記載の方法。

【請求項9】

脱保護剤が利用され、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）およびヒドラジンまたはその水和物から選択される、請求項１から６のいずれかに記載の方法。

【請求項10】

脱保護剤が利用され、前記脱保護剤が、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である、請求項１から６または９のいずれかに記載の方法。

【請求項11】

脱保護剤が利用され、前記脱保護剤が、１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）、好ましくは１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）、より好ましくはトリエチルアミン（ＴＥＡ）から選択される塩基を伴う、請求項１、２、５もしくは６、またはそれらに従属する請求項７から１０に記載の方法。

【請求項12】

前記脱保護が、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）、好ましくはメタノール、ジクロロメタン、およびイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、より好ましくはイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）から選択される溶媒を含む、請求項１から１１のいずれかに記載の方法。

【請求項13】

前記脱保護を、３０～８０℃、例として４０～７０℃、好ましくは４０～６０℃の温度で実行することができる、請求項１、２、５もしくは６、またはそれらに従属する請求項７から１２に記載の方法。

【請求項14】

【化5】

【請求項15】

前記先行ステップが、カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下での、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）と、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とをアミノ酸カップリングして、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩

【化6】

を形成することを含む、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記先行ステップが、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）をアミノ酸カップリングして、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）およびメチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）を形成することを含む、請求項１４または１５に記載の方法。

【請求項17】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）が形成され、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３、から選択され、好ましくは、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体は、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である、請求項１から４に従属する、請求項１４、１５もしくは１６、または請求項１から４に従属する、請求項７から１３のいずれかに記載の方法。

【請求項18】

前記アミノ酸カップリングが、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せから選択される溶媒を使用し、好ましくは、前記溶媒が、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択され、より好ましくは、前記溶媒が、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記先行するステップの前記アミノ酸カップリングが、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）を、塩化チオニルと組み合わせて使用する、請求項１から４に従属する、請求項１４、１５もしくは１６、または請求項１から４に従属する、請求項７から１３のいずれかに記載の方法。

【請求項20】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの前記二塩酸塩（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの前記二塩酸塩（１０Ｄ）が形成され、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３から選択され、好ましくは、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が、ヒドロキシベンゾトリアゾール、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、および塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）から選択され、より好ましくは、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が塩化チオニルである、請求項１、２、５、６に従属する、請求項１４、１５もしくは１６、または請求項１、２、５もしくは６に従属する請求項７から１３に記載の方法。

【請求項21】

前記アミノ酸カップリング反応が、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、またはそれらの組合せから選択される溶媒を使用し、好ましくは、前記溶媒が、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）およびアセトニトリル、またはそれらの組合せから選択され、より好ましくは、前記溶媒が、アセトニトリルまたはスルホランから選択され、最も好ましくはアセトニトリルである、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記アミノ酸カップリングにおいて、塩基、好ましくは第三級アミン、より好ましくはピリジンも試薬として使用される、請求項２０または２１に記載の方法。

【請求項23】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を脱アシル化して、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を形成することを含む追加の先行ステップをさらに含む、請求項１４から２２に記載の方法。

【請求項24】

前記追加の先行ステップが、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を脱アシル化して、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を形成することを含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記追加のステップが、酸または塩基触媒で酸または塩基触媒され、好ましくは塩基触媒で塩基触媒される、請求項２３または２４に記載の方法。

【請求項26】

前記追加のステップが、ＮａＯＨ、好ましくは３０％ＮａＯＨ水溶液を使用して塩基触媒される、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

化合物（Ｉ）

【化7】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、
以下のステップ：
１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）

【化8】

を形成するステップを含む方法。

【請求項28】

化合物（Ｉ）

【化9】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法における金属捕捉剤の使用であって、前記方法が、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を形成するステップであって、

【化10】

ここで、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を、前記金属捕捉剤で処理するステップを含む、使用。

【請求項29】

化合物（Ｉ）が形成される、請求項２７または２８に記載の方法または使用。

【請求項30】

【請求項31】

１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）が、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）とカップリングさせる、請求項２７から３０のいずれかに記載の方法または使用。

【請求項32】

１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）を、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）の塩、好ましくは４－ブロモ－３－メチルピリジン塩酸塩（６Ａ）

【化11】

とカップリングさせる、請求項２７から３０のいずれかに記載の方法または使用。

【請求項33】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）が、金属捕捉処理を受け、好ましくは、前記金属捕捉処理が金属捕捉剤による処理を含む、請求項２７、またはそれに従属する請求項２９から３２のいずれかに記載の方法。

【請求項34】

前記金属捕捉処理が金属捕捉剤による処理を含み、前記金属捕捉剤がトリチオシアヌル酸である、請求項２８または３３に記載の方法または使用。

【請求項35】

前記金属触媒が、遷移金属系触媒、例として白金系触媒、パラジウム系触媒、およびイリジウム系触媒であり、好ましくは、前記金属触媒がパラジウム系触媒であり、より好ましくは、前記金属触媒が酢酸パラジウム（ＩＩ）である、請求項２７から３４のいずれかに記載の方法。

【請求項36】

化合物（Ｉ）

【化12】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下で、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）と２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とをアミノ酸カップリングするステップ

【化13】

を含む方法。

【請求項37】

化合物（Ｉ）が形成される、請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３から選択され、好ましくは、前記カップリング剤またはカップリング剤前駆体が、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である、請求項３６または３７に記載の方法。

【請求項39】

前記アミノ酸カップリングが、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せから選択される溶媒、好ましくは、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される溶媒、より好ましくは、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される溶媒を使用する、請求項３６から３８のいずれかに記載の方法。

【請求項40】

前記アミノ酸カップリングが、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）を、塩化チオニルと組み合わせて使用する、請求項３６から３９のいずれかに記載の方法。

【請求項41】

１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を脱アシル化して４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を形成する、化合物（１２）を形成するための先行ステップ

【化14】

をさらに含む、請求項３６から４０のいずれかに記載の方法。

【請求項42】

化合物（Ｉ）の製造のための方法であって、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を脱アシル化して、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を形成するステップ

【化15】

を含む方法。

【請求項43】

前記脱アシル化を、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは酸触媒することができる、請求項４１または４２に記載の方法。

【請求項44】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を脱アシル化して１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を形成する、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を形成するための追加の先行ステップをさらに含む、請求項４１から４３に記載の方法。

【請求項45】

前記脱保護が、酸触媒を使用して酸触媒される、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記脱保護が、塩基触媒を使用して塩基触媒される、請求項４４に記載の方法。

【請求項47】

脱保護剤が利用され、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）およびヒドラジンまたはその水和物から選択される、請求項４４に記載の方法。

【請求項48】

脱保護剤が利用され、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である、請求項４４または４７に記載の方法。

【請求項49】

前記脱保護が、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択され、好ましくはメタノール、ジクロロメタン、およびイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）から選択される溶媒を含み、より好ましくは、前記溶媒がイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）である、請求項４４から４８のいずれかに記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、本明細書で定義される抗菌化合物の製造のための方法に関する。

【背景技術】

【0002】

既存の抗菌化合物に対する耐性を伴う細菌病原体の出現に対抗するための新しい抗菌化合物が必要とされている。既存の抗生物質に対する細菌耐性の発生の増加は、多くの細菌病原体の間で多剤耐性が一般的になり、一般的な感染が社会に及ぼす負担を大幅に増強させる脅威となっている。例えば、ＥＳＫＡＰＥ病原体（フェシウム菌（Enterococcus faecium）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、アシネトバクター・バウマンニ（Acinetobacter baumannii）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）およびエンテロバクター（Enterobacter）種）の抗生物質耐性菌株、例としてカルバペネム耐性腸内細菌（Enterobacteriaceae）（ＣＲＥ）、多剤耐性（ＭＤＲ）アシネトバクター（Acinetobacter）、ＭＤＲ緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）（ＭＲＳＡ）およびバンコマイシン耐性腸球菌（Enterococcus）（ＶＲＥ）などは、ヒトの健康に対する緊急のまたは深刻な脅威をもたらすと特定された抗生物質耐性微生物のリストに含まれている。他の顕著な抗生物質耐性病原体には、グラム陽性の嫌気性菌ディフィシル菌（Clostridium difficile）、薬剤耐性淋菌（Neisseria gonorrhoeae）および薬剤耐性結核菌（tuberculosis）が含まれる。

【0003】

具体的には、カルバペネム（β－ラクタム）抗生物質などの既存の抗生物質製剤に対する、グラム陰性菌、特に腸内細菌目のグラム陰性菌の耐性が増加している。例えば大腸菌（Escherichia coli）ＮＤＭ－１（ニューデリーメタロ－β－ラクタマーゼ）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）のようなカルバペネマーゼ産生腸内細菌目細菌（Enterobacterales）などの抗生物質耐性グラム陰性腸内細菌目細菌菌株は、処置が困難であり、ますます蔓延し、毒性が増加している。さらに、例えば、ＳＴ１１カルバペネム耐性の超毒性肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）菌株のような、致死的な大流行に関連するカルバペネム耐性肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）の、新しく出現している超毒性、多剤耐性および強度感染性の菌株が同定された。そのような菌株は、これまでおよび現在推奨されている抗生物質に対して耐性であり、現在、世界的規模の主要な公衆衛生の懸念事項である。

【0004】

現在、カルバペネム耐性腸内細菌目細菌（ＣＲＥ）が疑われる腸内細菌目細菌感染は、一般に広域スペクトル薬剤で処置される。そのような処置は通常、β－ラクタム系抗生物質とβ－ラカタマーゼ阻害剤（ＢＬ／ＢＬＩ）の組合せ、または最終手段の抗生物質であるコリスチンの使用からなる。ＢＬ／ＢＬＩの組合せは、短期的には有効であるが、最終的には細菌の既存の耐性メカニズムに屈すると予測されている。さらに、これらの広域スペクトル薬剤は、すべてのＡｍｂｌｅｒのβ－ラクタマーゼクラスに対して活性があるわけではなく、カルバペネム系抗生物質を含む広範囲のβ－ラクタム系抗生物質に対する耐性を与えるメタロ－β－ラクタマーゼに対しては活性を有さない。

【0005】

したがって、カルバペネムおよびその他のβ－ラクタムなどの既知の抗生物質に耐性があるか、または多剤耐性感染因子を伴う腸内細菌目のグラム陰性菌による感染、またはそれによって引き起こされるもしくは悪化する疾患に対して、信頼性の高い方法で効果的な処置を提供することができる、新しい抗菌化合物の製造のための効果的でスケーラブルな方法が必要とされている。さらに、既知の抗菌化合物に伴う副作用を回避または軽減することができる抗生物質製剤を提供する必要がある。

【0006】

本発明の態様の目的は、上述の問題または他の問題の解決策を提供する抗菌化合物の形成のための効果的でスケーラブルな方法を提供することである。

【発明の概要】

【0007】

本発明の第１の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0008】

【化1】

【0009】

【化2】

の脱保護を含む方法を提供する。

【0010】

本発明の第２の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0011】

【化3】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、以下のステップ：
１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を形成するステップであって、

【0012】

【化4】

好ましくは、ここで、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）が、金属捕捉処理を受け、金属捕捉処理は金属捕捉剤による処理を含む、ステップを含む方法を提供する。

【0013】

本発明の第３の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0014】

【化5】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法における金属捕捉剤の使用であって、方法が、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を形成するステップであって、

【0015】

【化6】

ここで、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を、金属捕捉剤で処理するステップを含む、使用を提供する。

【0016】

本発明の第４の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0017】

【化7】

【0018】

【化8】

を含む方法を提供する。

【0019】

定義
本明細書で使用される場合、「疾患」または「細菌性疾患」という用語は、生理学的機能を損ない、特定の症状に関連する異常な状態を定義するために使用される。この用語は、病因の性質（または実際には疾患の病因論的根拠が確立されているかどうか）に関係なく、生理学的機能が損なわれているあらゆる障害、疾病、異常、病変、不調、状態または症候群を包含するために広く使用される。したがって、この用語は、外傷、傷害、外科手術、放射線アブレーション、中毒、または栄養欠乏から生じる状態を包含する。この用語は、対象の身体および／または細胞内に存在および／または複製する細菌が関与する（例えば、その存在により生じ、悪化し、関連するかまたは特徴づけられる）任意の疾患を指す。したがって、この用語には、細菌性毒素により生じるかまたは悪化する疾患（本明細書では「細菌性中毒」と呼ばれる場合もある）が含まれる。

【0020】

本明細書で使用される場合、「感染」または「細菌感染」という用語は、対象が細菌に感染している状態を定義するために使用される。感染は、症候性または無症候性であり得る。症候性の場合には、対象は、確立された診断基準に基づいて、感染していると特定することができる。無症候性の場合には、対象は、例えば生化学的検査、血清学的検査、微生物培養法および／または顕微鏡観察を含む種々の検査に基づいて、感染していると特定することができる。したがって、本発明は、典型的には、細菌感染が診断されたかまたは検出された対象の処置における用途が見出される。

【0021】

本明細書で使用される場合、「処置」または「処置すること」という用語は、疾患の症状を治癒する、軽快させる、もしくは軽減する、またはその原因（例えば、原因となる細菌）を取り除く（もしくはその影響を軽減する）介入（例えば、対象への薬剤の投与）を指す。この場合、この用語は「治療」という用語と同義で使用される。したがって、本発明による感染の処置は、本発明の化合物の（直接的または間接的な）殺菌作用を特徴とすることができる。したがって、本発明の化合物は、細菌細胞を死滅させるか、またはその成長を防止する方法における用途が見出される。

【0022】

さらに、「処置」または「処置すること」という用語は、処置集団内での疾患の発症または進行を防止するかもしくは遅延させるか、またはその発生率を低下させる（もしくは根絶する）介入（例えば、対象への薬剤の投与）を指す。この場合、処置という用語は、「予防」という用語と同義で使用される。

【0023】

「対象」という用語（文脈が許す限り、「個体」、「動物」、「患者」または「哺乳動物」を含むものと解釈されるべきである）は、処置が示される任意の対象、特に哺乳動物の対象を定義する。哺乳動物の対象には、ヒト、飼育動物、家畜、動物園動物、競技用動物、ペット動物、例としてイヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、雌ウシ；霊長類、例として類人猿、サル、オランウータン、およびチンパンジー；イヌ類、例としてイヌおよびオオカミ；ネコ類、例としてネコ、ライオン、およびトラ；ウマ類、例としてウマ、ロバ、およびシマウマ；食用動物、例として雌ウシ、ブタ、およびヒツジ；有蹄類、例としてシカおよびキリン；げっ歯類、例としてマウス、ラット、ハムスターおよびモルモット；などが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、対象はヒトである。

【0024】

「グラム陰性菌」および「グラム陽性菌」という用語は、ある特定の細胞壁染色特徴に基づいて、２つの異なるクラスの細菌を定義する専門用語である。

【0025】

「有効な」という用語には、相加性、相乗作用、副作用の軽減、毒性の軽減、性能の向上、感染時の細菌負荷の軽減、または活性などの有利な効果が含まれる。

【0026】

本発明の化合物（Ｉ）に適用される「薬学的に許容される塩」という用語は、過度の毒性、刺激、アレルギー応答を伴うことなく、ヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比に相応する、遊離塩基の任意の有機または無機酸付加塩を定義する。好適な薬学的に許容される塩は、当技術分野において周知である。例として、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸）、有機カルボン酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、ジヒドロキシマレイン酸、安息香酸、フェニル酢酸、４－アミノ安息香酸、４－ヒドロキシ安息香酸、アントラニル酸、ケイ皮酸、サリチル酸、２－フェノキシ安息香酸、２－アセトキシ安息香酸およびマンデル酸）ならびに有機スルホン酸（例えば、メタンスルホン酸およびｐ－トルエンスルホン酸）から形成される塩がある。

【0027】

その最も広い態様において、本発明は、化合物（Ｉ）のすべての光学異性体、または薬学的に許容される塩の製造を企図する。

【0028】

化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の立体化学的形態が薬学的有用性にとって重要である場合、本発明は単離されたユートマーの製剤を企図する。

【0029】

本明細書で使用される「耐性菌株」という用語は、１つまたは複数の既知の抗菌剤、特に細菌の菌株による感染の処置における標準治療であると広く考えられている抗菌剤に対して耐性または非感受性を示したそのような菌株を指す。「非感受性菌株」は、所与の化合物または化合物クラスの、その菌株に対するＭＩＣ（最小発育阻止濃度）が、対応する感受性菌株に対するＭＩＣより高い数値に移行した菌株である。例えば、非感受性菌株は、β－ラクタム抗生物質に非感受性である菌株、１つもしくは複数のフルオロキノロンに非感受性である菌株および／または１つもしくは複数の他の抗生物質（すなわち、β－ラクタムおよびフルオロキノロン以外の抗生物質）に非感受性である菌株を指す場合がある。場合によっては、「耐性」という用語は、所与の化合物または化合物クラスの、その菌株に対するＭＩＣが、対応する感受性菌株に対するＭＩＣより有意に高い数値に移行した菌株を指す場合がある。細菌株は、ある濃度のこの薬剤によりインビトロにおいて阻害され、それが治療失敗の高い可能性に関連する場合、所与の抗生物質に対して耐性があると言われる可能性がある。

【0030】

本明細書で使用される「多剤耐性の」または「多剤耐性」という用語は、２つ以上の抗菌剤に対してインビトロおよび／またはインビボ耐性を示す、高耐性グラム陰性菌（例えば、カルバペネマーゼ産生肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae））などの生物を指す。そのような生物は、現在入手可能な抗菌剤のすべてに対して耐性があるか、またはより古い、より有毒である可能性がある抗菌剤に対してのみ感受性を維持している場合がある。

【0031】

本明細書で使用される「超毒性」という用語は、一般に高毒性プラスミドの獲得の結果として、例外的に高毒性の生物を指す。そのような生物は、重度の疾病を引き起こす可能性がある。完璧を期すると、「高毒性の」とは、極度に重度または有害な影響および疾病を引き起こす可能性がある生物を指す。

【0032】

本明細書で使用する「抗菌処置」という用語は、化合物（Ｉ）以外の抗菌剤またはその薬学的に許容される塩を用いた対象の感染または疾患の処置を意味する。典型的には、本発明との関係においては、これは、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩以外の、カルバペネムまたは他のβ－ラクタム系抗生物質を含む、既知の抗生物質または処置方法によるものである。

【図面の簡単な説明】

【0033】

【図1-1】図１ａから図１ｃは、化合物（Ｉ）、比較化合物（ＩＩ）および比較化合物（ＩＩＩ）についてインビトロ薬理学結合アッセイについて、試験した４４個のリガンドすべての結果を示す。

【図1-2】同上。

【図1-3】同上。

【図1-4】図１ｄは、化合物（Ｉ）、比較化合物（ＩＩ）および比較化合物（ＩＩＩ）についてインビトロ薬理学結合アッセイの結果のうち、５０％を超える阻害を示す結果のみを示す。

【図2】図２は、化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩＩ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による呼吸器感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究において評価した結果を示す。

【図3】図３は、化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩＩ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による菌血症または血流感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究において評価した結果を示す。

【図4-1】図４ａから図４ｃは、化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩＩ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による尿路感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究において評価した結果を示す。

【図4-2】同上。

【図4-3】同上。

【図5】図５は、化合物（Ｉ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による呼吸器感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究においてさらに評価した結果を示す。

【図6-1】図６ａから図６ｃは、化合物（Ｉ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による尿路感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究においてさらに評価した結果を示す。

【図6-2】同上。

【図6-3】同上。

【発明を実施するための形態】

【0034】

発明の詳細な説明
本発明は、腸内細菌目のグラム陰性菌、特にカルバペネム耐性腸内細菌目細菌（ＣＲＥ）および拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）腸内細菌目細菌による感染、またはそれらによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の処置、ならびにヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染、またはそれによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の処置に関して、これまでのアンメット臨床ニーズに対する解決策を提供する。

【0035】

驚くべきことに、かつ有利には、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩によって、腸内細菌目のグラム陰性菌および／またはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌、例えば、既知のβ－ラクタム系抗生物質に耐性があり、死亡の主な原因である腸内細菌目のグラム陰性菌および／もしくはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染、またはそれらによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の治療が可能になることが見出された。

【0036】

化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、多部位感染、すなわち腸内細菌目のグラム陰性菌および／またはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染であり、対象の異なる感染部位（組織および／または臓器の細胞内部位）において発生するものの処置において特に有利であり得る（本発明の実施例セクションに提供されるデータによって示される）。処置を必要とする対象の疾患または感染の抗菌処置が失敗した場合、または対象がアレルギーであるか、もしくはそうでなければ抗菌処置で使用されるまたは使用が検討される薬剤に対して禁忌である場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、腸内細菌目のグラム陰性菌および／もしくはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染、またはそれらによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の処置に、さらに有利に利用することができる。

【0037】

化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、迅速な殺菌作用があるようであり、すべてのＡｍｂｌｅｒのβ－ラクタマーゼクラス（メタロ－β－ラクタムを含む）を含む、現在試験されているすべての臨床耐性機構に対して非常に活性が高いと考えられる。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、全範囲のカルバペネム代謝酵素による失活を受けないようであり、カルバペネマーゼまたは他の耐性特性とは無関係に、現在試験されているすべてのＣＲＥに対する活性を実証している。既知のＢＬ／ＢＬＩ組合せ処置とは対照的に、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、インビトロで試験された耐性発現の傾向が低いことを示した。

【0038】

さらに、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、現在試験されているクラスの抗生物質との交差耐性を示さず、禁忌も観察されない。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、薬理学研究においてインビトロおよびインビボの両方の安全性も実証している。

【0039】

したがって、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、腸内細菌目のグラム陰性菌および／またはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌、特に、カルバペネム耐性腸内細菌目細菌（ＣＲＥ）および拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）腸内細菌目細菌などの、既知の抗生物質に耐性のある細菌によって引き起こされるもしくは悪化する細菌感染または疾患の処置に使用することができる。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、腸内細菌目のグラム陰性菌および／またはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌、特に、カルバペネム耐性腸内細菌目細菌（ＣＲＥ）および拡張スペクトルβ－ラクタマーゼ（ＥＳＢＬ）腸内細菌目細菌などの、既知の抗生物質に耐性のある細菌に対して殺菌活性を有する。

【0040】

本発明は、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法に関する。この方法は効果的かつスケーラブルである。それは、市販の出発材料を有利に使用することができ、カラムクロマトグラフィーによる精製を大幅に回避するように調整することができ、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を高収率および高純度で生成する合成経路である。方法中に利用される金属触媒の金属イオンなどのあらゆる有害な試薬は、最終生成物中に微量レベルでのみ存在するように、方法の後続のステップで有利に除去することができる。

【0041】

化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法は、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩

【0042】

【化9】

の脱保護を含む。

【0043】

この方法では、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を高収率および高純度で単離する。

【0044】

方法は、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の脱保護を含んでもよい。

【0045】

一般に、位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の混合物を、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）が優勢である。

【0046】

位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）のうちの１つを、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）が、一般に選択される。

【0047】

あるいは、方法は、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩の脱保護を含んでもよい。

【0048】

一般に、位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩の混合物を、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩が優勢である。

【0049】

位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩または位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩のうちの１つを、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩が、一般に選択される。

【0050】

好ましくは、２つの位置異性体（１０）および（１０Ａ）の塩は同じ塩である。

【0051】

方法が、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩の脱保護を含む場合、（１０）および（１０Ａ）の塩のそれぞれは、二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）などの塩酸塩であってもよい。２つの位置異性体（１０）および（１０Ａ）の塩は同じ塩酸塩であることが理解され、例えば、両方とも二塩酸塩であってもよい。したがって、方法は、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩の脱保護を含んでもよい。

【0052】

一般に、位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩の混合物を、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩が優勢である。

【0053】

位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩または位置異性体である２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩のうちの１つを、方法で使用する場合、位置異性体２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩が、一般に選択される。

【0054】

好ましくは、方法が、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩の脱保護を含む場合、脱保護は、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｄ）

【0055】

【化10】

の脱保護である。

【0056】

一般に、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｄ）の混合物を、方法で使用する場合、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）が優勢である。２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｄ）のうちの１つを、方法で使用する場合、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）が、一般に選択される。

【0057】

方法は、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護を含む。

【0058】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護により、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩が高収率で容易に得られる。

【0059】

脱保護は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。

【0060】

好適な脱保護試薬としては、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）、およびＮＨ_２ＮＨ_２（ヒドラジン）またはその水和物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、脱保護試薬はＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。驚くべきことに、かつ有利には、脱保護にＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を使用すると、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の収率が有利に向上することが見出された。

【0061】

好ましくは、脱保護が、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護である場合、脱保護試薬は塩基を伴っていてもよい。好適な塩基としては、１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）が挙げられる。好ましくは、塩基は、１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）から選択される。より好ましくは、塩基はトリエチルアミン（ＴＥＡ）であるように選択される。

【0062】

脱保護のための溶媒は、任意の好適な溶媒またはそれらの組合せ、例えば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、トルエン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＴＢＭＥ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、メタノール、ジクロロメタンおよびイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）から選択される。より好ましくは、溶媒はイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）であるように選択される。

【0063】

【0064】

【0065】

好ましくは、脱保護が、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護である場合、脱保護試薬は、溶媒としてイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中で、塩基としてトリエチルアミン（ＴＥＡ）を使用して、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）であるように選択される。

【0066】

【0067】

好ましくは、脱保護が、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護であり、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を利用する場合、脱保護により、化合物（Ｉ）の塩酸塩、例として二塩酸塩が得られる場合がある。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、塩基性条件下で化合物（Ｉ）の塩酸塩を処理することにより製造することができる。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、イオン交換樹脂、例としてＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＮ７８およびＭＰ－カーボネート；炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムなどの塩基の添加；メタノールまたはイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）などの溶媒中のアンモニアの添加；または水酸化アンモニウム（ＮＨ_４ＯＨ）の添加により、化合物（Ｉ）の塩酸塩を処理することにより製造することができる。好ましくは、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、化合物（Ｉ）の二塩酸塩を水酸化アンモニウム（ＮＨ_４ＯＨ）で処理することによって生成される。任意選択で、水酸化アンモニウムを加える前に、化合物（Ｉ）の二塩酸塩を水中で中和してもよい。任意選択で、化合物（Ｉ）の形成を助けるためにジクロロメタンを導入してもよい。化合物（Ｉ）の二塩酸塩のそのような処理により、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を高収率および高純度で提供することが容易になる。

【0068】

【0069】

したがって、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の製造方法は、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）

【0070】

【化11】

を利用して、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩を形成することができる、アミノ酸カップリングをさらに含むことができる。

【0071】

一般に、位置異性体である６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の混合物を、方法で使用する場合、位置異性体６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）が優勢である。

【0072】

位置異性体である６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を、方法で使用する場合、位置異性体６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）が、一般に選択される。

【0073】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩は、上記のとおりであり、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（ビスヒドロクロリド）（１０Ｄ）であり得る。

【0074】

６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を、カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下で、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）と反応させて、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩を形成することができる。

【0075】

好ましくは、アミノ酸カップリングステップでは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）を形成する。

【0076】

好ましくは、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を、カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下で、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）と反応させて、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）を形成する。

【0077】

好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の形成が所望される場合、好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、これらに限定されないが、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－（３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が挙げられる。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である。このアミノ酸カップリング反応に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。溶媒は、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒は、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。

【0078】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の形成が所望される場合、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）は、塩化チオニルと組み合わせて使用することができる。

【0079】

【0080】

好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩、好ましくは、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）、および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の塩酸塩、例として、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の形成が所望される場合、好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、これらに限定されないが、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が挙げられる。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は、ヒドロキシベンゾトリアゾール、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、および塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、から選択される。より好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニルである。このアミノ酸カップリング反応に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、溶媒は、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）およびアセトニトリル、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒はアセトニトリルまたはスルホランから選択され、最も好ましくはアセトニトリルである。好ましくは、このアミノ酸カップリング反応は、ピリジンまたは他の第三級アミン、好ましくはピリジンなどの塩基の存在下で行われる。

【0081】

【0082】

方法は、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を製造するための追加の先行ステップをさらに含んでもよい。

【0083】

この追加のステップは、化合物（Ｉ）を形成するために使用されるその後の反応ステップ、すなわち、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を反応させて２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および／もしくは２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）、またはその塩を形成するかどうかに関係なく利用することができる。

【0084】

したがって、方法は、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を脱アシル化して６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）を形成する、追加の先行ステップを含んでもよい。

【0085】

【0086】

一般に、位置異性体である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の混合物を、方法で使用する場合、位置異性体１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）が優勢である。

【0087】

位置異性体である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）のうちの１つを、方法で使用する場合、位置異性体１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）が、一般に選択される。

【0088】

脱アシル化は、酸または塩基触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨが挙げられる。ＮａＯＨは、２．０ＭＮａＯＨまたは３０％ＮａＯＨ溶液などの有機形態または水性形態のいずれかで使用することができる。好ましくは、脱アシル化は、ＮａＯＨ、より好ましくは３０％ＮａＯＨ溶液を使用して塩基触媒される。塩基触媒、特にＮａＯＨ、例として３０％ＮａＯＨ溶液を使用した脱アシル化により、所望の１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）生成物をより容易に単離することが有利に可能になる。

【0089】

好ましくは、脱アシル化はメタノールなどの溶媒中で実行する。

【0090】

好ましくは、脱アシル化は、塩基触媒、好ましくはメタノール中のＮａＯＨ、より好ましくは３０％ＮａＯＨ水溶液を使用して実行する。

【0091】

好ましくは、脱アシル化は、５０～８０℃、例として６０～８０℃、または６０～７５℃の温度で実行する。脱アシル化は、好ましくは４～８時間、例として５～６時間実行する。

【0092】

第１の態様による方法との関係においては、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）、好ましくは、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体（７）と（７Ａ）の混合物）は、任意の好適な合成経路によって生成することができる。１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は、本発明の第２の態様で定義されるカップリング反応に従って生成することができる。１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は、方法１、２、４もしくは５のステップ１～４、または方法３もしくは６のステップ１～３、またはそれらの組合せ、好ましくは方法３もしくは６のステップ１～３に従って生成することができる。

【0093】

本発明の第２の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0094】

【化12】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、以下のステップ：
１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を形成するステップであって、

【0095】

【化13】

好ましくは、ここで、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）が、金属捕捉処理を受け、金属捕捉処理が金属捕捉剤による処理を含む、ステップを含む方法を提供する。

【0096】

本発明の第２の態様による方法では、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は続いて、本発明の第１の態様に関連して、前述のように、脱アシル化および後続の反応ステップに利用して、化合物（Ｉ）もしくはその薬学的に許容される塩の形成を達成することができ、または本発明の第４の態様に関連して、後述のように、脱保護および後続の反応ステップに利用して、化合物（Ｉ）もしくはその薬学的に許容される塩の形成を達成することができる。

【0097】

本発明の第２の態様の方法で概説したカップリングステップを、そこで詳述されているように、本発明の第１または第４の態様による方法で利用して、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を形成することができることが理解されるであろう。したがって、本発明の第２の態様で定義されるカップリングステップは、本発明の第１または第４の態様による化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の製造について記載されたステップと組み合わせて、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を達成することができる。

【0098】

したがって、本明細書で記載された本発明の第２の態様のすべての特徴は、好ましいかまたは任意選択であるかにかかわらず、本発明の第１または第４の態様に適用可能であり、その逆も同様である。

【0099】

【0100】

【0101】

【0102】

驚くべきことに、かつ有利には、本発明の第２の態様の方法によって、それぞれ９８％対２％で、１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を上回る１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）の有利な位置異性体の形成が容易になることが見出された。

【0103】

カップリング反応では、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）は、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）またはその塩と反応し得る。その塩としては、４－ブロモ－３－メチルピリジン塩酸塩（６Ａ）が挙げられる。好ましくは、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）を、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）の塩と反応させる。好ましくは、４－ブロモ－３－メチルピリジン塩酸塩（６Ａ）を利用する。好ましくは、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）を、４－ブロモ－３－メチルピリジン塩酸塩（６Ａ）

【0104】

【化14】

と反応させる。

【0105】

カップリング反応に好適な金属触媒としては、遷移金属系触媒、例として白金系触媒、パラジウム系触媒、イリジウム系触媒が挙げられるが、これらに限定されない。典型的には、遷移金属系触媒は、塩基と組み合わせて利用される。好適な塩基としては、酢酸カリウムもしくは炭酸カリウムなどのカリウム塩、または炭酸セシウムなどのセシウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、より好ましくは酢酸パラジウム（ＩＩ）である。パラジウムは、このカップリング反応における触媒として特に効果的である。好ましくは、金属触媒は塩基と組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用される酢酸パラジウム（ＩＩ）である。

【0106】

カップリング反応は、ピバル酸およびトリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）（リガンド）を含む均質触媒系の存在下で行ってもよい。

【0107】

カップリング反応に好適な溶媒としては、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）スルホラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、炭酸ジメチル、ガンマ－バレロラクトンおよびアセトニトリル（ＡＣＮ）が挙げられる。好ましくは、溶媒は、スルホランおよびＮ－Ｎジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）から選択される。より好ましくは、溶媒は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）であるように選択される。

【0108】

そのようなカップリング反応では、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属触媒からの残留金属の制御が必要になる場合がある。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の残留金属のこのレベルは、好ましくは可能な限り、好ましくは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満まで、低減する。したがって、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から形成される場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩には、微量レベルの残留金属しか存在しないことがある。

【0109】

金属触媒使用後、カップリング反応の生成物である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中に存在する金属の残留レベルを制御するために、金属捕捉処理を、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造後に利用して、金属含有量を低減することができる。好適な金属捕捉処理としては、チャコール吸収；さまざまなグレードのシリカカラムまたはシリカプラグ濾過での吸収；酸性処理；およびトリチオシアヌル酸、シラメートチオール樹脂、中性アルミナ、フロリジル（florocil）、ｑｕａｄｒａｓｉｌ、および１０％システイン水溶液などの金属捕捉剤、またはそれらの組合せによる処理；ならびにそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属捕捉処理は、金属捕捉剤による処理を含む。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0110】

トリチオシアヌル酸は、ＣＡＳ番号６３８－１６－４を有し、当技術分野ではトリメルカプトトリアジン（ＴＭＴ）または１，３，５－トリアジン－２，４，６－トリチオールとしても知られている。

【0111】

金属捕捉剤が利用される場合、金属捕捉剤は、方法で使用される金属触媒の金属の量に対して過剰に使用することができることが理解されるであろう。したがって、残留金属のレベルは、上で考察したように可能な限り低減されることが好ましい。

【0112】

好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、より好ましくは酢酸パラジウム（ＩＩ）である。したがって、金属捕捉処理は、好ましくはパラジウムを捕捉することができる。好ましくは、金属捕捉処理は、パラジウム捕捉剤による処理を含む。好ましくは、パラジウム捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0113】

金属捕捉剤としてのトリチオシアヌル酸による処理は、１回または複数回、好ましくは２回実行することができる。好ましくは、金属捕捉処理は、シリカカラムまたはシリカプラグ濾過での吸収およびチャコール吸収に加えて、トリチオシアヌル酸による処理を含む。より好ましくは、金属捕捉処理は、シリカプラグ濾過およびチャコール吸収に加えて、トリチオシアヌル酸による処理を含む。典型的には、シリカプラグ濾過を最初に実行し、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用してもよい。典型的には、トリチオシアヌル酸による処理はチャコール吸収と同時に実行する。トリチオシアヌル酸による処理は、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、ＩＰＡおよび水、またはそれらの組合せから選択される溶媒中で実行することができる。この方法では、パラジウム触媒が好ましくは利用されるため、捕捉される金属は、好ましくはパラジウムである。

【0114】

金属捕捉処理中に、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、および水、またはそれらの組合せなどの溶媒を使用してもよい。

【0115】

金属捕捉後、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満であり得る。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を続いて、本発明の第１または第４の態様に関連して記載される反応などのさらなる反応に利用して、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を生成する場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１０ｐｐｍ未満、例えば５ｐｐｍ未満であり得る。そのような量は許容可能な微量と考えられる。

【0116】

化合物（Ｉ）または製造方法の他の中間体、例として、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の残留金属のレベルは、誘導結合プラズマ質量分析法（ＩＣＰ－ＭＳ）によって測定することができる。

【0117】

好ましくは、カップリング反応は、アルゴン雰囲気下で行う。

【0118】

好ましくは、カップリング反応に使用される試薬は、ピバル酸、トリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）、およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の存在下、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）および炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）となるように選択される。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0119】

第２の態様による方法との関係においては、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）（カップリング反応の開始点）は、任意の好適な合成経路によって生成することができる。好ましくは、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）は、方法１、２、４もしくは５のステップ１～３、または方法３もしくは６のステップ１～２、またはそれらの組合せ、好ましくは方法３もしくは６のステップ１および２に従って生成される。

【0120】

以下に詳述する方法１、２、４および５のステップ４、ならびに方法３および６のステップ３は、本発明の第２の態様の方法で以下に詳述するカップリング反応の好ましい反応条件を開示する。

【0121】

したがって、化合物（Ｉ）

【0122】

【化15】

【0123】

【化16】

ここで、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を、金属捕捉剤で処理するステップを含む、使用を提供する。

【0124】

本明細書で記載された本発明の第２の態様のすべての特徴は、好ましいかまたは任意選択であるかにかかわらず、本発明の第３の態様の使用に適用可能であり、その逆も同様である。

【0125】

本発明の第４の態様によれば、化合物（Ｉ）

【0126】

【化17】

またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法であって、
カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下で、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）と２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とをアミノ酸カップリングするステップ

【0127】

【化18】

を含む方法を提供する。

【0128】

カップリング剤またはカップリング剤前駆体は、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３から選択することができる。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である。アミノ酸カップリング反応に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。溶媒は、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒は、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。

【0129】

アミノ酸カップリングに関し、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）は、塩化チオニルと組み合わせて使用することができる。

【0130】

好ましくは、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）は、ＤＭＰＵとアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）、またはＨＭＰＵとアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）のいずれかにおいて、カップリング剤またはカップリング剤前駆体として利用される。

【0131】

本発明の第４の態様による方法は、化合物（１２）を形成するための先行ステップをさらに含んでもよい。

【0132】

方法は、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を脱アシル化して４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を形成すること

【0133】

【化19】

をさらに含んでもよい。

【0134】

脱アシル化は塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは酸触媒することができる。脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨ、例として２．０ＭＮａＯＨが挙げられる。好ましくは、脱アシル化は、ＨＣｌ、好ましくは６．０ＮＨＣｌを使用し、好ましくはメタノール（ＭｅＯＨ）の存在下で酸触媒する。

【0135】

本発明の第４の態様による方法は、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を形成するための追加の先行ステップをさらに含んでもよい。

【0136】

方法は、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を脱保護して、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を形成することをさらに含んでもよい。

【0137】

一般に、位置異性体である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の混合物（位置異性体７と７Ａの混合物）を使用する。

【0138】

【0139】

【0140】

脱保護は塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。

【0141】

好適な脱保護試薬としては、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）、およびＮＨ_２ＮＨ_２（ヒドラジン）またはその水和物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、脱保護試薬はＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0142】

脱保護のための溶媒は、任意の好適な溶媒またはそれらの組合せ、例えば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、メタノール、ジクロロメタンおよびイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）から選択される。より好ましくは、溶媒はイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）であるように選択される。

【0143】

好ましくは、脱保護試薬は、溶媒としてのイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中のＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0144】

第４の態様による方法との関係においては、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は、任意の好適な合成経路によって生成することができる。１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は、本発明の第２の態様で定義されるカップリング反応に従って生成することができる。１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）は、方法１、２、４もしくは５のステップ１～４、または方法３もしくは６のステップ１～３、またはそれらの組合せ、好ましくは方法３もしくは６のステップ１～３に従って生成することができる。

【0145】

したがって、第４の態様は、本発明の第１の態様で提供されるものに対し、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を製造するための、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）からの代替の形成経路を提示することが理解されるであろう。上記のように、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造は、代替合成が、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の形成をもたらす１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造後のステップのみが異なるように、第１および第４の態様両方について同じ方法で製造することができる。

【0146】

本発明のさらなる態様によれば、化合物（Ｉ）

【0147】

【化20】

またはその薬学的に許容される塩、の製造のための方法であって、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を脱アシル化して４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を形成するステップ

【0148】

【化21】

を含む方法を提供する。

【0149】

【0150】

化合物（Ｉ）を合成するための好適な方法には、以下の方法１、２および３が含まれるが、これらに限定されない。方法１、２および３は、化合物（Ｉ）を合成するための好ましい方法を表し、前記方法は、以下に詳述する好ましい連結ステップを含む。しかしながら、本発明との関係においては、これらの好ましいステップは分離可能であり、ステップのうちの１つまたは複数を、当業者によって特定される任意の他の好適なステップで置き換えることができることが理解されるであろう。方法１、２および３のうち、化合物（Ｉ）は方法３により形成することが好ましい。

【0151】

方法１
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：

【0152】

ステップ１

【0153】

【化22】

１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１）の臭素化による２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン臭化水素酸塩（２）および２，２－ジブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン）－６－イル）エタン－１－オン（２Ａ）（副生成物）の形成。

【0154】

好ましくは、ステップ１の臭素化に使用される試薬は、酢酸（ＡｃＯＨ）中の臭化水素（ＨＢｒ）、好ましくは３３％溶液、および氷酢酸中のＢｒ_２であるように選択される。

【0155】

ステップ２

【0156】

【化23】

アシル化剤による、２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン臭化水素酸塩（２）および２，２－ジブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン（２Ａ）のアシル化による１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）の形成。

【0157】

ステップ２に好適なアシル化剤としては、塩化アセチルなどのハロゲン化アシル；およびカルボン酸の無水物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、アシル化剤は塩化アセチル（ＣＨ_３ＣＯＣｌ）である。

【0158】

好ましくは、ステップ２のアシル化に使用される試薬は、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）中のアシル化剤としての塩化アセチル（ＣＨ_３ＣＯＣｌ）である。

【0159】

ステップ３

【0160】

【化24】

ピリミジン－２－アミン（４）による１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）の環化による１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）の形成。

【0161】

好ましくは、ステップ３の環化に使用される溶媒はエタノール（ＥｔＯＨ）である。

【0162】

好ましくは、環化は、６０～８５℃、例えば７５～８５℃の温度で、１２～３６時間の間、例えば１８～３０時間の間で行う。

【0163】

ステップ４

【0164】

【化25】

１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）とを、金属触媒の存在下でカップリングして、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）を形成する。

【0165】

ステップ４に好適な金属触媒としては、遷移金属系触媒、例として白金系触媒、パラジウム系触媒、およびイリジウム系触媒が挙げられるが、これらに限定されない。典型的には、遷移金属系触媒は、塩基と組み合わせて利用される。好適な塩基としては、酢酸カリウムもしくは炭酸カリウムなどのカリウム塩、または炭酸セシウムなどのセシウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、より好ましくは酢酸パラジウム（ＩＩ）である。好ましくは、金属触媒は塩基と組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用される酢酸パラジウム（ＩＩ）である。

【0166】

ステップ４のカップリング反応は、ピバル酸およびトリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）（リガンド）を含む均質触媒系の存在下で行ってもよい。

【0167】

カップリング反応に好適な溶媒としては、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）スルホラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、炭酸ジメチル、ガンマ－バレロラクトンおよびアセトニトリル（ＡＣＮ）が挙げられる。好ましくは、溶媒はジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）であるように選択される。

【0168】

好ましくは、ステップ４のカップリング反応に使用される試薬は、ピバル酸、トリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）、およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）の存在下、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）および炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）となるように選択される。

【0169】

そのようなカップリング反応では、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン）（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属触媒からの残留金属の制御が必要になる場合がある。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の残留金属のこのレベルを、好ましくは可能な限り、好ましくは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満まで、低減する。したがって、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン）（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から形成される場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩には、微量レベルの残留金属しか存在しないことがある。

【0170】

金属触媒使用後、カップリング反応の生成物である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中に存在する金属の残留レベルを制御するために、金属捕捉処理を、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造後に利用して、金属含有量を低減することができる。好適な金属捕捉処理としては、チャコール吸収；さまざまなグレードのシリカカラムまたはシリカプラグ濾過での吸収；酸性処理；およびトリチオシアヌル酸、シラメートチオール樹脂、中性アルミナ、フロリジル、ｑｕａｄｒａｓｉｌ、および１０％システイン水溶液などの金属捕捉剤、またはそれらの組合せによる処理；ならびにそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属捕捉処理は、金属捕捉剤による処理を含む。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0171】

金属捕捉剤が利用される場合、金属捕捉剤は、方法で使用される金属触媒の金属の量に対して過剰に使用することができることが理解されるであろう。次いで、残留金属のレベルは、上で考察したように可能な限り低減されることが好ましい。

【0172】

【0173】

【0174】

金属捕捉処理中に、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、および水、またはそれらの組合せなどの溶媒を使用してもよい。

【0175】

金属捕捉後、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満であり得る。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を続いて、本発明の第１または第４の態様に関連して記載される反応などのさらなる反応に利用する場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１０ｐｐｍ未満、例えば５ｐｐｍ未満であり得る。そのような量は許容可能な微量と考えられる。

【0176】

【0177】

好ましくは、カップリング反応は、アルゴン雰囲気下で行う。

【0178】

好ましくは、ステップ４のカップリング反応に使用される試薬は、ピバル酸、トリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）、およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の存在下、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）および炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）となるように選択される。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0179】

ステップ５

【0180】

【化26】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）の脱アシル化による６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）（位置異性体８と８Ａの混合物）の形成。

【0181】

ステップ５の脱アシル化は、酸または塩基触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。ステップ５の脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨ、例として２．０ＭＮａＯＨが挙げられる。好ましくは、脱アシル化は、ＮａＯＨ、より好ましくは２．０ＭＮａＯＨを使用して塩基触媒される。

【0182】

ステップ６

【0183】

【化27】

カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下での、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）（位置異性体８と８Ａの混合物）と、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とのアミノ酸カップリングによる、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）（位置異性体１０および１０Ａの混合物）の形成。

【0184】

ステップ６に好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、これらに限定されないが、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が、挙げられる。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である。

【0185】

ステップ６に好適な溶媒としては、これらに限定されないが、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せが挙げられる。溶媒は、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒は、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。

【0186】

ステップ６のアミノ酸カップリングには、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）を、塩化チオニルと組み合わせて使用することができる。

【0187】

好ましくは、ステップ６では、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）は、ＤＭＰＵとアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）、またはＨＭＰＵとアセトニトリルのいずれかにおいて、カップリング剤またはカップリング剤前駆体として利用される。

【0188】

ステップ７

【0189】

【化28】

【0190】

ステップ７の脱保護は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。

【0191】

【0192】

ステップ７の脱保護のための溶媒は、任意の好適な溶媒、例えば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）であるように選択される。

【0193】

好ましくは、ステップ７の脱保護試薬は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中のＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）であるように選択される。

【0194】

ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を利用する場合、脱保護により、化合物（Ｉ）の塩酸塩が得られる場合があることが理解されるであろう。化合物（Ｉ）は、塩基性条件下で化合物（Ｉ）の塩酸塩を処理することにより製造することができる。そのような処理には、塩基、例えば重炭酸ナトリウムの使用を含めることができる。化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩は、１０％メタノール／ＤＣＭを使用して得ることができる。

【0195】

方法２
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：

【0196】

ステップ１

【0197】

【化29】

【0198】

【0199】

ステップ２

【0200】

【化30】

アシル化剤による、２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン臭化水素酸塩（２）および２，２－ジブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン（２Ａ）副生成物のアシル化による１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）の形成。

【0201】

【0202】

【0203】

ステップ３

【0204】

【化31】

【0205】

好ましくは、ステップ３の環化に使用される溶媒はエタノール（ＥｔＯＨ）である。

【0206】

好ましくは、環化は、６０～８５℃、例えば７５～８５℃の温度で、１２～３６時間の間、例えば１８～３０時間の間で行う。

【0207】

ステップ４

【0208】

【化32】

１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）との、金属触媒の存在下でのカップリングによる、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）の形成。

【0209】

ステップ４に好適な金属触媒としては、遷移金属系触媒、例として白金系触媒、パラジウム系触媒、およびイリジウム系触媒が挙げられるが、これらに限定されない。典型的には、遷移金属系触媒は、塩基と組み合わせて利用される。好適な塩基としては、酢酸カリウムもしくは炭酸カリウムなどのカリウム塩、または炭酸セシウムなどのセシウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、より好ましくは酢酸パラジウム（ＩＩ）である。好ましくは、金属触媒は、塩基と組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用される酢酸パラジウム（ＩＩ）である。

【0210】

【0211】

【0212】

【0213】

【0214】

金属触媒使用後、カップリング反応の生成物である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中に存在する金属の残留レベルを制御するために、金属捕捉処理を、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造後に利用して、金属含有量を低減することができる。好適な金属捕捉処理としては、チャコール吸収；さまざまなグレードのシリカカラムまたはシリカプラグ濾過での吸収；酸性処理；およびトリチオシアヌル酸、シラメートチオール樹脂、中性アルミナ、フロリジル、ｑｕａｄｒａｓｉｌ、および１０％システイン水溶液などの金属捕捉剤、またはそれらの組合せによる処理；ならびにそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属捕捉処理は、金属捕捉剤による処理を含む。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0215】

【0216】

【0217】

【0218】

金属捕捉処理中に、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、および水、またはそれらの組合せなどの溶媒を使用してもよい。

【0219】

金属捕捉後、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満であり得る。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を、本発明の第１または第４の態様に関連して記載される反応などのさらなる反応に続いて利用する場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１０ｐｐｍ未満、例えば５ｐｐｍ未満であり得る。そのような量は許容可能な微量と考えられる。

【0220】

【0221】

好ましくは、カップリング反応は、アルゴン雰囲気下で行う。

【0222】

【0223】

ステップ５

【0224】

【化33】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）の脱保護による１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）の形成。

【0225】

ステップ５の脱保護は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。

【0226】

【0227】

ステップ５の脱保護のための溶媒は、任意の好適な溶媒、例えば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）である。

【0228】

好ましくは、ステップ５の脱保護用の脱保護試薬は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中のＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）であるように選択される。

【0229】

ステップ６

【0230】

【化34】

１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）の脱アシル化による４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）の形成。

【0231】

ステップ６の脱アシル化は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは酸触媒することができる。方法２のステップ６の脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨ、例として２．０ＭＮａＯＨが挙げられる。好ましくは、脱アシル化は、ＨＣｌ、好ましくは６．０ＮＨＣｌを使用し、好ましくはメタノール（ＭｅＯＨ）の存在下で酸触媒する。

【0232】

ステップ７

【0233】

【化35】

カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下での、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）と２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とのアミノ酸カップリングによる化合物（１）の形成。

【0234】

ステップ７に好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が、挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である。

【0235】

ステップ７に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。溶媒は、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒は、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。

【0236】

ステップ７のアミノ酸カップリングには、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）を、塩化チオニルと組み合わせて使用することができる。

【0237】

好ましくは、ステップ７のアミノ酸カップリング用の試薬は、ＤＭＰＵとアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）、またはＨＭＰＵとアセトニトリルのいずれかにおいて、カップリング剤またはカップリング剤前駆体として塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）となるように選択される。

【0238】

方法１および２の場合、驚くべきことに、かつ有利には、ステップ４によって、それぞれ９８％対２％で、１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を上回る１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）の有利な位置異性体の形成が容易になることが見出された。

【0239】

したがって、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）から、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）を合成する方法、すなわち方法１および２のステップ４であって、

【0240】

【化36】

【0241】

好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒である。より好ましくは、金属触媒は、塩基と組み合わせて利用され、前記塩基は、カリウム塩またはセシウム塩から選択され、好ましくはカリウム塩である。より好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、炭酸カリウムまたは酢酸カリウムと組み合わせて利用される。より好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、炭酸カリウムと組み合わせて利用される。より好ましくは、金属触媒は酢酸パラジウム（ＩＩ）であり、炭酸カリウムと組み合わせて利用される。

【0242】

好ましくは、方法１および２のステップ４の置換に使用される試薬は、ピバル酸、トリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）、およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）の存在下、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）および炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）となるように選択される。

【0243】

【0244】

加えて、方法１および２については、驚くべきことに、かつ有利には、方法１のステップ７および方法２のステップ５の脱保護にＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を使用すると、これにより収率が有利に向上することが見出された。

【0245】

したがって、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）から、化合物（Ｉ）を合成する方法、すなわち方法１のステップ７であって、

【0246】

【化37】

２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）（位置異性体１０および１０Ａの混合物）の脱保護により、化合物（１）を形成するステップを含む方法も、本発明に包含される。

【0247】

好ましくは、脱保護試薬はＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0248】

方法１のステップ７では、任意の好適な溶媒を利用することができ、例えば、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）である。

【0249】

好ましくは、方法１のステップ７の脱保護用の脱保護試薬は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中のＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0250】

したがって、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を合成する方法、すなわち方法２のステップ５であって、

【0251】

【化38】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）の脱保護により、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を形成するステップを含む方法も、本発明に包含される。

【0252】

好ましくは、脱保護試薬はＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0253】

方法２のステップ５では、任意の好適な溶媒を利用することができ、例えば、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）である。

【0254】

好ましくは、方法２のステップ５の脱保護用の脱保護試薬は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中のＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0255】

４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）から、化合物（Ｉ）を合成する方法、すなわち方法２のステップ７であって、

【0256】

【化39】

カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下での、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）と２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とのアミノ酸カップリングにより、化合物（１）を形成するステップを含む方法も、本発明に包含される。

【0257】

方法２のステップ７に好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）である。

【0258】

方法２のステップ７に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。溶媒は、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）およびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒は、アセトニトリルおよびヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、またはそれらの組合せから選択される。

【0259】

方法２のステップ７のアミノ酸カップリングには、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）またはヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）を、塩化チオニルと組み合わせて使用することができる。

【0260】

好ましくは、方法２のステップ７のアミノ酸カップリング用の試薬は、ＤＭＰＵとアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）、またはＨＭＰＵとアセトニトリルのいずれかにおいて、カップリング剤またはカップリング剤前駆体として塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）となるように選択される。

【0261】

したがって、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）から、化合物（Ｉ）を合成する方法、すなわち方法２のステップ６であって、

【0262】

【化40】

１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を脱アシル化して、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を形成すること、およびカップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下で、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）と２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とをアミノ酸カップリングして化合物（１）を形成することを含む方法も、本発明に包含される。

【0263】

方法２のステップ６の脱アシル化は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは酸触媒することができる。方法２のステップ６の脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨ、例として２．０ＭＮａＯＨが挙げられる。好ましくは、脱アシル化は、ＨＣｌ、好ましくは６．０ＮＨＣｌを使用し、好ましくはメタノール（ＭｅＯＨ）の存在下で酸触媒する。

【0264】

【0265】

【0266】

【0267】

【0268】

方法３
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：

【0269】

ステップ１

【0270】

【化41】

１－（２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１Ａ）のアシル化による１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）の形成。

【0271】

ステップ１のアシル化反応は、フリーデル・クラフツアシル化であってもよい。ステップ１に好適なアシル化剤としては、アシルハロゲン化物、例として、塩化アセチルのような塩化アシル、またはクロロアセチルクロリドのような塩素化アシルクロリド；およびカルボン酸の無水物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、アシル化剤は、ハロゲン化アシル、例として塩化アシル、より好ましくはクロロアセチルクロリドである。

【0272】

追加の試薬を、ステップ１のアシル化に利用することができる。追加の試薬は、塩化アルミニウム、塩化亜鉛、三塩化ホウ素、塩化チタンから選択することができる。好ましくは、追加の試薬として塩化アルミニウムが選択される。

【0273】

ステップ１のアシル化は、好適な溶媒中で行う。ステップ１のアシル化のための溶媒は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）であってもよい。

【0274】

好ましくは、ステップ１のアシル化に使用される試薬は、塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ_３）を用いたジクロロメタン（ＤＣＭ）中のアシル化剤としてのクロロアセチルクロリドである。

【0275】

ステップ２

【0276】

【化42】

ピリミジン－２－アミン（４）による１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）の環化による１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）の形成。

【0277】

ステップ２の環化に使用するのに好適な溶媒としては、エタノール、メタノール、２－イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、アセトンおよびジクロロメタンが挙げられる。好ましくは、溶媒は、エタノールであるように選択される。

【0278】

ステップ３

【0279】

【化43】

１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）と、４－ブロモ－３－メチルピリジンＨＣｌ（６Ａ）の、金属触媒の存在下でのカップリングによる、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の形成。

【0280】

ステップ３のカップリング反応に好適な金属触媒としては、遷移金属系触媒、例として白金系触媒、パラジウム系触媒、およびイリジウム系触媒が挙げられるが、これらに限定されない。典型的には、遷移金属系触媒は、塩基と組み合わせて利用される。好適な塩基としては、酢酸カリウムもしくは炭酸カリウムなどのカリウム塩、または炭酸セシウムなどのセシウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属触媒はパラジウム系触媒であり、より好ましくは酢酸パラジウム（ＩＩ）である。パラジウムは、このカップリング反応における触媒として特に効果的である。好ましくは、金属触媒は塩基と組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用されるパラジウム系触媒、より好ましくは炭酸カリウムと組み合わせて利用される酢酸パラジウム（ＩＩ）である。

【0281】

ステップ３のカップリング反応は、ピバル酸およびトリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）（リガンド）を含む均質触媒系の存在下で行ってもよい。

【0282】

ステップ３のカップリング反応に好適な溶媒としては、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）スルホラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、炭酸ジメチル、ガンマ－バレロラクトンおよびアセトニトリル（ＡＣＮ）が挙げられる。好ましくは、溶媒は、スルホランおよびＮ－Ｎジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）から選択される。より好ましくは、溶媒は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。

【0283】

そのようなカップリング反応では、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン）（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属触媒からの残留金属の制御が必要になる場合がある。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中のこのレベルの残留金属を、好ましくは可能な限り、好ましくは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満まで、低減する。したがって、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン）（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から形成される場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩には、微量レベルの残留金属しか存在しないことがある。

【0284】

金属触媒使用後、カップリング反応の生成物である１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中に存在する金属の残留レベルを制御するために、金属捕捉処理を、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の製造後に利用して、金属含有量を低減することができる。好適な金属捕捉処理としては、チャコール吸収；さまざまなグレードのシリカカラムまたはシリカプラグ濾過での吸収；酸性処理；およびトリチオシアヌル酸、シラメートチオール樹脂、中性アルミナ、フロリジル、ｑｕａｄｒａｓｉｌ、および１０％システイン水溶液などの金属捕捉剤、またはそれらの組合せによる処理；ならびにそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、金属捕捉処理は、金属捕捉剤による処理を含む。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0285】

【0286】

【0287】

【0288】

金属捕捉処理中に、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、ＩＰＡ、および水、またはそれらの組合せなどの溶媒を使用してもよい。

【0289】

金属捕捉後、生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１５０ｐｐｍ未満、または１２０ｐｐｍ未満、例として１００ｐｐｍ未満、または８０ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満であり得る。生成物１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を続いて、本発明の第１または第４の態様に関連して記載される反応などのさらなる反応に利用する場合、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩中の金属、好ましくはパラジウムのレベルは、１０ｐｐｍ未満、例えば５ｐｐｍ未満であり得る。そのような量は許容可能な微量と考えられる。

【0290】

【0291】

好ましくは、カップリング反応は、アルゴン雰囲気下で行う。

【0292】

好ましくは、ステップ３のカップリング反応に使用される試薬は、ピバル酸、トリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（（Ｃ_６Ｈ_１１）_３Ｐ．ＨＢＦ_４）、およびＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の存在下、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）および炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）となるように選択される。好ましくは、金属捕捉剤はトリチオシアヌル酸である。

【0293】

ステップ４

【0294】

【化44】

１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および／または１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の脱アシル化による６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の形成。

【0295】

ステップ４の脱アシル化は、酸または塩基触媒することができ、好ましくは塩基触媒により行うことができる。脱アシル化に好適な酸触媒としては、限定されないが、ＨＣｌ、例として６．０ＮＨＣｌが挙げられ、一方、好適な塩基触媒としては、限定されないが、ＮａＯＨが挙げられる。ＮａＯＨは、２．０ＭＮａＯＨまたは３０％ＮａＯＨ溶液などの有機形態または水性形態のいずれかで使用することができる。好ましくは、脱アシル化は、ＮａＯＨ、より好ましくは３０％ＮａＯＨ溶液を使用して塩基触媒される。

【0296】

好ましくは、ステップ４の脱アシル化はメタノールなどの溶媒中で実行する。

【0297】

好ましくは、ステップ４の脱アシル化は、塩基触媒、好ましくはメタノール中のＮａＯＨ、より好ましくは３０％ＮａＯＨ水溶液を使用して実行する。

【0298】

好ましくは、ステップ４の脱アシル化は、５０～８０℃、例として６０～８０℃、または６０～７５℃の温度で実行する。脱アシル化は、好ましくは４～８時間、例として５～６時間実行する。

【0299】

ステップ５

【0300】

【化45】

カップリング剤またはカップリング剤前駆体の存在下での、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および／または６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）と、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）とのアミノ酸カップリングによる、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の形成。

【0301】

ステップ５のための好適なカップリング剤またはカップリング剤前駆体としては、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｇｈｏｓｅｚ試薬（１－クロロ－Ｎ，Ｎ，２－トリメチル－１－プロペニルアミン）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール、フルオロ－ジピロリジノカルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＴＦＦＨ）、Ｔｉ（ｉＯＰｒ）_４およびＢ（ＯＣＨ_２ＣＦ_３）_３が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は、ヒドロキシベンゾトリアゾール、１－エチル－２－）３’－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド．ＨＣｌ、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、および塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）から選択される。より好ましくは、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニルである。

【0302】

ステップ５に好適な溶媒としては、Ｎ，Ｎ’ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、またはそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、溶媒は、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン（ＤＭＩ）、ガンマ－バレロラクトン（ＧＶＬ）、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、スルホラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）およびアセトニトリル、またはそれらの組合せから選択される。より好ましくは、溶媒はアセトニトリルまたはスルホランから選択され、最も好ましくはアセトニトリルである。

【0303】

好ましくは、ステップ５の反応は、ピリジンまたは他の第三級アミン、好ましくはピリジンなどの塩基の存在下で行われる。

【0304】

好ましくは、ステップ５において、カップリング剤またはカップリング剤前駆体は塩化チオニルであり、溶媒はアセトニトリルまたはスルホラン、好ましくはアセトニトリルであり、反応はピリジン中で行われる。

【0305】

ステップ６

【0306】

【化46】

１－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｃ）および／または２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オンの二塩酸塩（１０Ｄ）の脱保護による、化合物（Ｉ）の形成。

【0307】

ステップ６の脱保護は、塩基触媒または酸触媒することができ、好ましくは塩基触媒することができる。

【0308】

脱保護用の好適な脱保護試薬としては、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）、およびＮＨ_２ＮＨ_２（ヒドラジン）またはその水和物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、脱保護試薬はＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。脱保護試薬は塩基を伴っていてもよい。好適な塩基としては、１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）が挙げられる。好ましくは、塩基は、１，８－ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）から選択される。より好ましくは、塩基はトリエチルアミン（ＴＥＡ）であるように選択される。

【0309】

ステップ６の脱保護のための溶媒は、任意の好適な溶媒、例えば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびアセトニトリル（ＣＨ_３ＣＮ）から選択することができる。好ましくは、溶媒は、メタノール、ジクロロメタンおよびイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）から選択される。より好ましくは、溶媒は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）である。

【0310】

ステップ６の脱保護は、３０～８０℃、例として４０～７０℃、好ましくは４０～６０℃の温度で実行することができる。

【0311】

好ましくは、ステップ６の脱保護用の試薬は、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中の、塩基としてトリエチルアミン（ＴＥＡ）を含む、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）である。

【0312】

ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を利用する場合、脱保護により、化合物（Ｉ）の二塩酸塩が得られる場合があることが理解されるであろう。化合物（Ｉ）は、塩基性条件下で化合物（Ｉ）の二塩酸塩を処理することにより製造することができる。化合物（Ｉ）は、化合物（Ｉ）の二塩酸塩を、イオン交換樹脂、例としてＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＮ７８およびＭＰ－カーボネート；炭酸カリウムなどの塩基の添加；メタノールまたはイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）などの溶媒中のアンモニアの添加；または水酸化アンモニウム（ＮＨ_４ＯＨ）の添加により処理することにより製造することができる。好ましくは、化合物（Ｉ）は、化合物（Ｉ）の二塩酸塩を水酸化アンモニウム（ＮＨ_４ＯＨ）で処理することによって形成および単離する。任意選択で、水酸化アンモニウムを加える前に、化合物（Ｉ）の二塩酸塩を水中で中和してもよい。任意選択で、化合物（Ｉ）の形成を助けるためにジクロロメタンを導入してもよい。

【0313】

好ましくは、本発明の化合物（Ｉ）は、以下の方法４、５、および６のうちの１つに従って合成される。方法１、２および３と同様に、方法４、５および６は、化合物（Ｉ）を合成するための好ましい方法を表し、前記方法は、以下に詳述する好ましい連結ステップを含む。好ましくは、化合物（Ｉ）は、方法６に従って製造される。方法６は、本発明を実践するために現在企図されている最良の様式を構成する。しかしながら、本発明との関係においては、これらの好ましいステップは分離可能であり、ステップのうちの１つまたは複数を、当業者によって特定される任意の他の好適なステップで置き換えることができることが理解されるであろう。ステップＸにＡおよびＢの選択肢、例えば、ステップ６Ａまたはステップ６Ｂがある方法４および５の場合、ステップＸＡまたはＸＢのいずれかをステップＸとして利用することができる、すなわち、ステップ６Ａまたは６Ｂのいずれかをステップ６として利用することができる。

【0314】

上記の方法３および下記の方法６に示すように、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩を、１－（２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１Ａ）、すなわち市販の化合物から形成することができる。

【0315】

したがって、１－（２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１Ａ）

【0316】

【化47】

から出発する化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩の製造のための方法も、本明細書に組み込まれる。

【0317】

方法４
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：

【0318】

ステップ１

【0319】

【化48】

機械的撹拌器を装備した２０Ｌ四つ口丸底フラスコに、室温で１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１）（３００ｇ、１．６９ｍｏｌ）を充填した。氷酢酸中のＨＢｒの溶液（３３％ｗ／ｗ、２．１０Ｌ、７Ｖ）を、理想的には内部温度を約１２℃未満に維持しながら、１０℃で滴加した。得られた反応混合物に、氷酢酸（４５０ｍＬ、出発材料に対して１．５Ｖ）中の臭素（８６．７ｍＬ、１．６９ｍｏｌ）の溶液を１０℃（内部温度）で、内部温度が１０℃以下に維持されるようにゆっくりと（約９０分かけて）加えた。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。氷酢酸中の臭素の溶液を完全に加えた後、粗ＬＣＭＳにより、約１０％の未消費の出発材料（１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１））、および約３０％の所望の一臭素化生成物（２）への変換を、約２４％の二臭素化副生成物とともに確認した。冷却浴を取り外し、反応混合物をおよそ１時間かけて徐々に２５℃（内部温度）まで温めた。得られた反応混合物をさらに４０℃（内部温度）で１．５時間撹拌した［目に見える沈殿が観察され、粗ＬＣＭＳにより、未消費の出発材料（１）（約４％）を、所望の一臭素化生成物（２）（５５％）および二臭素化副生成物（約１８％）とともに確認した］。反応混合物を１０℃まで冷却し、ＭＴＢＥ（４．９Ｌ、１６Ｖ）で希釈し、１時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（６００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、３４０ｇ（一臭素化生成物と二臭素化生成物の混合物）をオフホワイトの固体として得た。得られた固体のＬＣＭＳによって、２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン．ＨＢｒ（２）（約８７％、一臭素化）、２，２－ジブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン（約５％、二臭素化副生成物）および未消費の１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１）（約１％）の混合物を確認した。この混合物をさらに精製することなく次のステップで使用した。ＬＣＭＳにより観察された一臭素化生成物（２）に基づいて計算された単離収率は、５２％であることが判明した。CHNOSのMS (ESI+) m/z 255.96 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.19-7.28 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.31 (t, J = 4.4 Hz, 2H)および3.32 (t, J = 4.4 Hz, 2H).

【0320】

ステップ２

【0321】

【化49】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ四つ口丸底フラスコに、２０℃で、ＴＨＦ（３．５０Ｌ、７Ｖ）および２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン．ＨＢｒ（２）（５００ｇ、１．４８ｍｏｌ）を充填した。得られた反応混合物に、温度を２０℃に維持しながら、塩化アセチル（４７６ｍＬ、６．６８ｍｏｌ）を滴加した。反応混合物への塩化アセチルの添加中に、反応温度の２℃の上昇が観察された。反応混合物を、３０℃で１６時間さらに撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。粗ＬＣＭＳにより、１：１の比で、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オンおよび１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オンの混合物の形成を確認した。反応混合物を約１０℃に冷却し、１０％Ｋ_２ＣＯ_３水溶液（５．０Ｌ）でｐＨ約８．０に塩基性化し、酢酸エチル（３×５Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５．０Ｌ）で洗浄し、減圧下で濃縮して、粗生成物を茶色の液体として得た。茶色の液体を１０℃に冷却し、ヘキサン（４．０Ｌ）で希釈し、１０℃で１時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ヘキサン（１．０Ｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（４）の混合物を薄茶色の固体（３８７ｇ、ＬＣＭＳにより純度９２％）として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。ＣＨＮＯＳのＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ２９７．９９［Ｍ＋Ｈ］^＋および２５４．０５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0322】

ステップ３

【0323】

【化50】

【0324】

機械的撹拌器を装備した５．０Ｌ四つ口丸底フラスコに、ＥｔＯＨ（２．０Ｌ、３Ｖ）、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）（６８５ｇ、２．３０ｍｏｌ、ＬＣＭＳにより純度９２％）の混合物を充填し、続いてピリミジン－２－アミン（４）（５４６ｇ、５．７４ｍｏｌ）を２０℃で加えた。反応混合物をさらに撹拌し、３時間還流した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。反応混合物を室温（約２０℃）まで冷却し、得られた沈殿固体を濾過し、ＥｔＯＨ（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）を、オフホワイトの固体として得た（４１８ｇ）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 295.06 [M+H]⁺. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + d-TFA): δ 9.27 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 8.97 -9.02 (m, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.44 (bs, 1H), 7.63-7.69 (m, 2H), 7.10 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.33-4.36 (m, 2H), 3.89-3.93 (m, 2H), 2.32 (s, 3H).位置異性体構造を、ｎＯｅにより確認した。

【0325】

ステップ４

【0326】

【化51】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ四つ口丸底フラスコに、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（２．０Ｌ）、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）（２５０ｇ、８４９ｍｍｏｌ）、２，２－ジメチルプロパン酸（３４．７ｇ、３４０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５８７ｇ、４．２５ｍｏｌ）および４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）（２６４ｇ、１．４４ｍｏｌ）を、２０℃で、Ｎ_２雰囲気下にて充填した。得られた反応混合物をＮ_２（気体）で３０分間パージし、続いてＰｄ（ＯＡｃ）_２（１９．１ｇ、８４．９ｍｍｏｌ）およびＰＣｙ_３・ＨＢＦ_４（３１．２ｇ、８４．９ｍｍｏｌ）をＮ_２雰囲気下で加えた。反応混合物を再びＮ_２（気体）でさらに１５分間パージした。得られた反応混合物を、１２５℃で７時間さらに撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。粗ＬＣＭＳにより、９８：２の位置異性体比で、所望の生成物の位置異性体混合物の形成を確認した。反応混合物をセライト床（高さ１．３ｃｍ、直径２５ｃｍ）に通して濾過した。セライト床を、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（１５Ｌ）で洗浄した。濾液を減圧下で蒸発させて、粗残留物を茶色の液体として得た。茶色の液体をヘプタン（３×６．０Ｌ）中で１０時間撹拌して、過剰のＤＭＡを除去した。ヘプタン／ＤＭＡ混合物をデカントして（デカントした画分中に微量の所望の生成物が観察された）、ワックス状固体を得た。ワックス状固体を、ＭＴＢＥ（３．０Ｌ）中でさらに１５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（２．０Ｌ）で洗浄して、所望の生成物を茶色の固体として得た。茶色の固体を小さなシリカプラグに通し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（約３５Ｌ）で溶出した。得られた溶媒画分を、元の体積の１／１０に濃縮した。濃縮した画分をＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で希釈し、３０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（１．０Ｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の位置異性体混合物を、薄茶色の固体として得た。収率：６６％（ＬＣＭＳにより９７％、位置異性体比９８：２）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 386.18 [M+1]⁺. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + d-TFA): δ 9.14 (s, 1H), 9.01-9.04 (m, 2H), 8.86 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.01 (bs, 1H), 7.55-7.58 (m, 1H), 7.41(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.09-4.33 (m, 2H), 3.71-3.92 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.11 (bs, 3H).

【0327】

ステップ５Ａ

【0328】

【化52】

メタノール中（１５０ｍＬ）１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の位置異性体混合物（９７：３）（２４．０ｇ、６２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、６．０ＮＨＣｌ水溶液（６２ｍＬ）を室温で加えた。反応混合物を、９０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、その元の体積の１／４まで濃縮した。濃縮した反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ８～９に塩基性化し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、（Ｎａ_２ＳＯ_４）上で乾燥させ、濾過し、減圧下でその元の体積の１／１０まで濃縮した。濃縮した混合物をヘプタン（１００ｍＬ）で希釈し、３０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ヘプタン（１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の混合物（２０．０ｇ）を、黄色の固体として得た。収率：７１％（位置異性体比２：１の２つの位置異性体の混合物、ＬＣＭＳにより８９％）。ＬＣＭＳは、それぞれ所望の質量５６％および３３％を有する２つのピークを示した。ＣＨＮＯＳの（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ３４４．２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0329】

あるいはステップ５Ｂ

【0330】

【化53】

２．０ＭＮａＯＨ水溶液（５２ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）中１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の位置異性体混合物（９８：２）（１０．０ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１００℃で２４時間加熱した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。反応終了後、反応混合物を室温まで冷却し、濾過した。濾過ケーキを水（約５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の混合物を薄茶色の固体として得た。収率：８．１ｇ、９０％（位置異性体比９８：２の２つの位置異性体の混合物、ＬＣＭＳにより９８．７％）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 344.20 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.69 (s, 1H), 8.54-8.62 (m, 2H), 8.25 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.96-7.03 (m, 2H), 6.46-6.55 (m, 2H), 5.87 (s, 1H), 4.11 (t, J = 4.0 Hz, 2H), 3.25 (bs, 2H), 1.94 (s, 3H).

【0331】

ステップ６Ａ（ＨＭＰＡ媒介アミノ酸カップリング）

【0332】

【化54】

ＨＭＰＡ（８４ｍＬ、７Ｖ）中の２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）（１２ｇ、１１６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＡＣＮ（８．４ｍＬ）中の塩化チオニル（９．２９ｇ、１２８ｍｍｏｌ）の溶液を、３℃でゆっくりと加えた（外部温度は０℃であった）。ＡＣＮ中の塩化チオニルの溶液を完全に加えてから１０分後に、懸濁液は透明になる。得られた反応混合物を、０℃で２０分間撹拌し、続いて、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の位置異性体混合物（８ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）を、０℃で少しずつ加えた。反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。反応の完了後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿物を濾過し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で洗浄した。固体を水（５０ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液でｐＨ８まで中和し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（４×１００ｍＬ）で抽出し、減圧下で元の反応混合物の体積の１／１０まで濃縮した。粗混合物をＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の位置異性体混合物を茶色の固体として得た。収率：６６％（ＬＣＭＳにより９７％、位置異性体比９８：２）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 429.16 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.69 (s, 1H), 8.54-8.62 (m, 2H), 8.29 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.98-7.05 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.45- 4.67 (m, 2H), 4.30 (bs, 2H), 2.12 (bs, 2H), 1.97 (s, 3H), 1.34 (s, 6H).

【0333】

あるいはステップ６Ｂ（ＤＭＰＵ媒介アミノ酸カップリング）

【0334】

【化55】

ＤＭＰＵ（１４ｍＬ）中の２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）（２．０ｇ、１９．４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡＣＮ（１．４ｍＬ）中の塩化チオニル（１．５５ｍＬ、２１．３ｍｍｏｌ）の溶液を４℃でゆっくり加えた。（外部温度０℃）。得られた反応混合物を、０℃で２０分間撹拌し、続いて、６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）の位置異性体混合物（９８：１）を、０℃で少しずつ加えた。反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。反応の完了後（ＬＣＭＳモニタリング）、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿物を濾過し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。固体を水（１００ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液でｐＨ約８．０に塩基性化し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（３×１００ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮して粗残留物を得た。粗残留物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）中でさらに撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の位置異性体混合物を茶色の固体として得、これをさらに精製することなく次の工程でさらに使用した。CHNOSのMS (ESI+) m/z 429.16 [M+1]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.69 (s, 1H), 8.54-8.62 (m, 2H), 8.29 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 6.98-7.05 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.45- 4.67 (m, 2H), 4.30 (bs, 2H), 2.12 (bs, 2H), 1.97 (s, 3H), 1.34 (s, 6H).

【0335】

ステップ７

【0336】

【化56】

イソプロピルアルコール（６０ｍＬ）中の２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）の位置異性体混合物（９８：２）の懸濁液（８．６ｇ、ＬＣＭＳにより９３％、２０．１ｍｍｏｌ）に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３．４９ｇ、５０．２ｍｍｏｌ）を室温で加えた。得られた懸濁液を、７０℃で２２時間撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。粗ＬＣＭＳは、微量の脱アミド化副生成物（粗ＬＣＭＳにより１～２％）および未反応出発材料（ＬＣＭＳにより２～３％）とともに、所望の生成物の形成を示した。得られた懸濁液を室温まで冷却し、アセトン（１００ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。反応混合物を元の体積の２０％まで濃縮し、沈殿を濾過し、アセトン（２００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、粗化合物（Ｉ）をＨＣｌ塩として得た。得られた固体を水（１０ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ_３の飽和溶液によってｐＨ約８まで塩基性化し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨ（５×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して粗残留物を得た。粗残留物を、ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中で撹拌した。粗生成物を、ＥｔＯＨに可溶化し、１～２時間撹拌した後、再び沈殿が観察された。得られた沈殿物を濾過し、ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）で洗浄した。このようにして得られた沈殿物を再度ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中で撹拌し、濾過し、続いてＤＣＭ中の２％ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、２－アミノ－１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）－２－メチルプロパン－１－オン（化合物（Ｉ））を淡黄色のふわふわした固体として得た。収率：３．５ｇ、４４％（ＬＣＭＳにより９８．３％）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 392.8 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ + d-TFA): δ 8.78-8.84 (m, 2H), 7.93 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.44 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.09 (dd, J = 2.1, 8.6 Hz, 1 H), 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 4.34 (bs, 2H), 3.97 (bs, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.60 (s, 6H).

【0337】

方法４では、好ましくは、ステップ５Ｂが選択される。

【0338】

方法５
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：

【0339】

ステップ１

【0340】

【化57】

機械的撹拌器を装備した２０Ｌ四つ口丸底フラスコに、室温で１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１）（３００ｇ、１．６９ｍｏｌ）を充填した。氷酢酸中のＨＢｒの溶液（３３％ｗ／ｗ、２．１０Ｌ、７Ｖ）を、理想的には内部温度を約１２℃未満に維持しながら、１０℃で滴加した。得られた反応混合物に、氷酢酸（４５０ｍＬ、出発材料に対して１．５Ｖ）中の臭素（８６．７ｍＬ、１．６９ｍｏｌ）の溶液を１０℃（内部温度）で、内部温度が１０℃未満に維持されるようにゆっくりと（約９０分かけて）加えた。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。氷酢酸中の臭素の溶液を完全に加えた後、粗ＬＣＭＳにより、約１０％の未消費の出発材料（１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１））、および約３０％の所望の一臭素化生成物（２）への変換を、約２４％の二臭素化副生成物とともに確認した。冷却浴を取り外し、反応混合物をおよそ１時間かけて徐々に２５℃（内部温度）まで温めた。得られた反応混合物をさらに４０℃（内部温度）で１．５時間撹拌した［目に見える沈殿が観察され、粗ＬＣＭＳにより、未消費の出発材料（１）（約４％）を、所望の一臭素化生成物（２）（５５％）および二臭素化副生成物（約１８％）とともに確認した］。反応混合物を１０℃まで冷却し、ＭＴＢＥ（４．９Ｌ、１６Ｖ）で希釈し、１時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（６００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、３４０ｇ（一臭素化生成物と二臭素化生成物の混合物）をオフホワイトの固体として得た。得られた固体のＬＣＭＳによって、２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン．ＨＢｒ（２）（約８７％、一臭素化）、２，２－ジブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）エタン－１－オン（約５％、二臭素化副生成物）および未消費の１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン（１）（約１％）の混合物を確認した。この混合物をさらに精製することなく次のステップで使用した。ＬＣＭＳにより観察された一臭素化生成物（２）に基づいて計算された単離収率は、５２％であることが判明した。CHNOSのMS (ESI+) m/z 255.96 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.19-7.28 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.31 (t, J = 4.4 Hz, 2H)および3.32 (t, J = 4.4 Hz, 2H).

【0341】

ステップ２

【0342】

【化58】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ四つ口丸底フラスコに、２０℃で、ＴＨＦ（３．５０Ｌ、７Ｖ）および２－ブロモ－１－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）エタン－１－オン．ＨＢｒ（２）（約５％）（５００ｇ、１．４８ｍｏｌ）を充填した。得られた反応混合物に、温度を２０℃に維持しながら、塩化アセチル（４７６ｍＬ、６．６８ｍｏｌ）を滴加した。反応混合物への塩化アセチルの添加中に、反応温度の２℃の上昇が観察された。反応混合物を、３０℃で１６時間さらに撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。粗ＬＣＭＳにより、１：１の比で、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オンおよび１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オンの混合物の形成を確認した。反応混合物を約１０℃に冷却し、１０％Ｋ_２ＣＯ_３水溶液（５．０Ｌ）でｐＨ約８．０に塩基性化し、酢酸エチル（３×５Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５．０Ｌ）で洗浄し、減圧下で濃縮して、粗生成物を茶色の液体として得た。茶色の液体を１０℃に冷却し、ヘキサン（４．０Ｌ）で希釈し、１０℃で１時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ヘキサン（１．０Ｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－ブロモエタン－１－オン（３）および１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（４）の混合物を薄茶色の固体（３８７ｇ、ＬＣＭＳにより純度９２％）として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。ＣＨＮＯＳのＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ２９７．９９［Ｍ＋Ｈ］^＋および２５４．０５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0343】

ステップ３

【0344】

【化59】

【0345】

ステップ４

【0346】

【化60】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ四つ口丸底フラスコに、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（２．０Ｌ）、１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）（２５０ｇ、８４９ｍｍｏｌ）、２，２－ジメチルプロパン酸（３４．７ｇ、３４０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５８７ｇ、４．２５ｍｏｌ）および４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）（２６４ｇ、１．４４ｍｏｌ）を、２０℃で、Ｎ_２雰囲気下で充填した。得られた反応混合物をＮ_２（気体）で３０分間パージし、続いてＰｄ（ＯＡｃ）_２（１９．１ｇ、８４．９ｍｍｏｌ）およびＰＣｙ_３・ＨＢＦ_４（３１．２ｇ、８４．９ｍｍｏｌ）をＮ_２雰囲気下で加えた。反応混合物を再びＮ_２（気体）でさらに１５分間パージした。得られた反応混合物を、１２５℃で７時間さらに撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。粗ＬＣＭＳにより、９８：２の位置異性体比で、所望の生成物の位置異性体混合物の形成を確認した。反応混合物をセライト床（高さ１．３ｃｍ、直径２５ｃｍ）に通して濾過した。セライト床を、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（１５Ｌ）で洗浄した。濾液を減圧下で蒸発させて、粗残留物を茶色の液体として得た。茶色の液体をヘプタン（３×６．０Ｌ）中で１０時間撹拌して、過剰のＤＭＡを除去した。ヘプタン／ＤＭＡ混合物をデカントして（デカントした画分中に微量の所望の生成物が観察された）、ワックス状固体を得た。ワックス状固体を、ＭＴＢＥ（３．０Ｌ）中でさらに１５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（２．０Ｌ）で洗浄して、所望の生成物を茶色の固体として得た。茶色の固体を小さなシリカプラグに通し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（約３５Ｌ）で溶出した。得られた溶媒画分を、その元の体積の１／１０に濃縮した。濃縮した画分をＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で希釈し、３０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＭＴＢＥ（１．０Ｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の位置異性体混合物を、薄茶色の固体として得た。収率：６６％（ＬＣＭＳにより９７％、位置異性体比９８：２）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 386.18 [M+1]⁺. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + d-TFA): δ 9.14 (s, 1H), 9.01-9.04 (m, 2H), 8.86 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.01 (bs, 1H), 7.55-7.58 (m, 1H), 7.41(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.09-4.33 (m, 2H), 3.71-3.92 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.11 (bs, 3H).

【0347】

ステップ５

【0348】

【化61】

イソプロピルアルコール（７０ｍＬ）中の１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）の懸濁液（１０ｇ、ＬＣＭＳにより９８％、２５．９ｍｍｏｌ）に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（４．５１ｇ、６４．９ｍｍｏｌ）を室温で加えた。得られた懸濁液を、８０℃で６時間撹拌した。懸濁液は８０℃、２時間で徐々に可溶化し、２～３時間で再沈殿が観察された。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。得られた懸濁液を室温まで冷却し、アセトン（１００ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。反応混合物を元の体積の２０％まで濃縮し、沈殿物を濾過し、アセトン（３００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、粗物質をＨＣｌ塩として得た。得られた固体を水（１０ｍＬ）に溶解し、１０℃でＮａＨＣＯ_３飽和水溶液によりｐＨ約８．０まで塩基性化した。得られた懸濁液を室温で２時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、水（２００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、粗残留物を得た。粗残留物をＭＴＢＥ（１００ｍＬ）中でさらに撹拌し、濾過し、真空下で乾燥させて、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を薄茶色の固体として得た。収率：７．５ｇ、８３％（ＬＣＭＳにより９３％）。CHNOS m/z 350.30 [M+H]⁺; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 10.86 (bs, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.31 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 7.16 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 6.71-7.09 (m, 2H), 5.37 (bs, 2H), 4.21(bs, 2H), 3.79 (bs, 2H), 1.99 (s, 3H), 1.75 (bs, 3H).

【0349】

ステップ６

【0350】

【化62】

メタノール中（３５ｍＬ）の１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾ－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）の溶液（７ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）に、６．０ＮＨＣｌ（２８ｍＬ）を室温で加えた。反応混合物を、９０℃で１６時間撹拌した。反応を、ＬＣＭＳによって監視した。反応終了後、反応混合物を室温まで冷却し、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物を水（２０ｍＬ）に溶解し、６．０ＭＮａＯＨ水溶液でｐＨ８．０～９．０に塩基性化し、ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、濾過し、減圧下で元の反応混合物の体積の１／１０まで濃縮した。濃縮した混合物をヘプタン（１００ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ヘプタン（１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を薄茶色の固体として得た。収率：５．１ｇ、８２％（ＬＣＭＳにより９８％）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 308.14 [M+H]⁺.¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ + d-TFA): δ 8.88 (s, 1H), 8.82 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.94 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 6.68 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 2.2 Hz, 1 H ), 6.42 (dd, J = 2.2, 8.2 Hz, 1 H), 4.14 (t, J = 4.2 Hz, 2 H), 3.27 (t, J = 4.2 Hz, 2 H), 2.16 (s, 3H).

【0351】

ステップ７Ａ（ＨＭＰＡ媒介アミノ酸カップリング）

【0352】

【化63】

ＨＭＰＡ（４２ｍＬ）中の２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）（１０）（６．０ｇ、５８．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＡＣＮ（３．００ｍＬ）中の塩化チオニル（４．６４ｍＬ、６４．０ｍｍｏｌ）の溶液を、３℃でゆっくり加えた。ＡＣＮ中の塩化チオニルの溶液を加えてから１０分後に、懸濁液は透明溶液になる。得られた反応混合物を、０℃で３０分間撹拌し、続いて、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）（３．５８ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を、３℃で少しずつ加えた。反応混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿物を濾過し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で洗浄した。固体を水（５ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ約８．０に塩基性化し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨ（５×１００ｍＬ）で抽出した。収集した有機層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、その元の体積の１／５まで濃縮し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、ＤＣＭ（２５ｍＬ）中２％ＭｅＯＨでトリチュレーションし、続いてＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、２－アミノ－１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）－２－メチルプロパン－１－オン（化合物（Ｉ））（（２．４ｇ、ＬＣＭＳおよび^１ＨＮＭＲにより約９６．６％）を、淡黄色の固体として得た。収率：（５３％）；CHNOSのMS (ESI+) m/z 392.8 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ + d-TFA): δ 8.78-8.84 (m, 2H), 7.93 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.44 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 7.09 (dd, J = 2.1, 8.6 Hz, 1 H), 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 4.34 (bs, 2H), 3.97 (bs, 2H), 2.16 (s, 3H)および1.60 (s, 6H).

【0353】

あるいはステップ７Ｂ（ＤＭＰＵ媒介アミノ酸カップリング）

【0354】

【化64】

ＤＭＰＵ（２３ｍＬ）中２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）（３．３ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡＣＮ（２．５ｍＬ）中の塩化チオニル（２．５５ｍＬ、３５．２ｍｍｏｌ）の溶液を４℃でゆっくり加えた。得られた反応混合物を、０℃で２０分間撹拌し、続いて、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）（１．９７ｇ、６．４０ｍｍｏｌ）を、０℃で少しずつ加えた。反応混合物を室温まで温め、１６時間さらに撹拌した。反応の完了後、反応混合物をＡＣＮ（５０ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿固体を濾過し、ＡＣＮ（１００ｍＬ）で洗浄した。固体を水（５．０ｍＬ）に溶解し、１０℃で飽和重炭酸ナトリウム水溶液を用いてｐＨ約８．０まで塩基性化し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨ（５×５０ｍＬ）で抽出し、減圧下で濃縮した。粗残留物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）中で撹拌し、濾過し、減圧下で乾燥させて、薄茶色の固体を得た。得られた固体をＥｔＯＨ（７ｍＬ）中でさらに撹拌し、濾過し、真空下で乾燥させて、２－アミノ－１－｛６－［２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル］－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－ベンゾオキサジン－４－イル｝－２－メチルプロパン－１－オン（化合物（Ｉ））を、オフホワイトの固体として得た（７７０ｍｇ、ＬＣＭＳにより９９．７％）。収率：（５３％）；ＣＨＮＯＳの（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ３９２．８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0355】

上記の方法１、２、４、および５すべてについて、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）は、ステップ８に従って以下のように配合した。

【0356】

【化65】

【0357】

機械的撹拌器を装備した２０Ｌ四つ口丸底フラスコに、－２０℃（内部温度）で３－メチルピリジン－４－アミン（２５．０ｇ、２３１ｍｍｏｌ）および臭化水素（４７％水溶液、３６０ｍＬ）を充填した。得られた反応混合物に、水（５２０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（７６．６ｇ、１．１１ｍｏｌ）の溶液を－２０℃でおよそ９０分間かけてゆっくり加えた。反応混合物を－２０℃で１時間撹拌し、それにＣｕＢｒ（７．９６ｇ、５５．５ｍｍｏｌ）を－２０℃で加えた。反応混合物を室温まで温め、さらに１６時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していることを示した。反応混合物を５０％水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、セライト床に通して濾過した。セライト床を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で洗浄し、抽出した。水層を、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濾過し、減圧下で濃縮した（水浴温度＞４０℃を維持して、茶色の液体を得た。収率６６％（２６ｇ）。CHNOSのMS (ESI+) m/z 172.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.50 (s, 1H), 8.25 (d, J = 5.20 Hz, 1 H), 7.66 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 2.33 (s, 3H).

【0358】

方法３では、４－ブロモ－３－メチルピリジン（６Ａ）の塩酸塩は市販されているが、上で詳述した４－ブロモ－３－メチルピリジン（６）を製造するためのステップ８の方法を改変することによって形成することもできる。

【0359】

方法４および５の場合、驚くべきことに、かつ有利には、ステップ４によって、それぞれ９８％対２％で、１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）を上回る１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）の有利な位置異性体の形成が容易になることが見出された。

【0360】

したがって、本明細書に記載の方法４および５のステップ４に従う、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）を合成する方法も本発明に包含される。

【0361】

加えて、方法４および５については、驚くべきことに、かつ有利には、方法４のステップ７および方法５のステップ５におけるＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を使用することにより、収率が有利に向上することが見出された。

【0362】

したがって、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を使用して、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）から、化合物（Ｉ）を合成する方法も本発明に包含される。

【0363】

好ましくは、本明細書に記載の方法４のステップ７に従って、２－アミノ－２－メチル－１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０）および２－アミノ－２－メチル－１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）プロパン－１－オン（１０Ａ）から、化合物（Ｉ）を合成する方法である。

【0364】

したがって、ＮＨ_２ＯＨ．ＨＣｌ（ヒドロキシルアミン塩酸塩）を使用して、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を合成する方法も本発明に包含される。

【0365】

好ましくは、方法５のステップ５に従って、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）から１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）を合成する方法である。

【0366】

好ましくは、方法５のステップ７に従って、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）を使用して、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）から、化合物（Ｉ）を合成する方法も本発明に包含される。

【0367】

好ましくは、方法５のステップ６および７に従って、４－（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２）を介して、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）を使用して、１－（６－（２－アミノ－５－（３－メチルピリジン－４－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１１）から化合物（Ｉ）を合成する方法も本発明に包含される。

【0368】

方法６
化合物（Ｉ）は、以下の方法に従って合成することができる：
ステップ１

【0369】

【化66】

【0370】

機械的撹拌器を装備した２０Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下で、２５℃±５℃にてジクロロメタン（２．６Ｌ、１３Ｖ）を充填した。塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ_３）（０．７５２ｋｇ、４ｍｏｌ当量）を、窒素雰囲気下で、撹拌しながら２５±５°Ｃにて丸底フラスコに加えた。この第１の反応混合物を、窒素雰囲気下で２０±５分間撹拌した。反応混合物を５±５℃に冷却した。別に、機械的撹拌器を装備した５Ｌ丸底フラスコに１－（２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（１Ａ）（０．２５ｋｇ、１ｍｏｌ当量）およびジクロロメタン（０．５Ｌ、２Ｖ）を充填した。第２の反応混合物を、５±５℃の温度で添加漏斗に通して２０Ｌ丸底フラスコ内の第１の反応混合物にゆっくりと加えた。合わせた反応混合物を、５±５℃で１０±５分間撹拌した。クロロアセチルクロリド（０．１４５Ｌ、１．３ｍｏｌ当量）を、窒素雰囲気下で、５±５℃の温度にて添加漏斗に通して、合わせた反応混合物にゆっくりと加えた。反応混合物を、４０±５℃に加熱した。反応混合物を、４０±５℃で３±１時間撹拌した。次いで、反応混合物を２５±５℃に冷却し、氷冷水（２．５Ｌ、１０Ｖ）を充填した別の２０Ｌ丸底フラスコに２～５℃で撹拌しながら加えた。混合物を２５±５℃で３０分～１時間撹拌し、次いで、相分離が起こるように３０分間静置した。水層（１０Ｖ）と有機層（３．５Ｌ、１４Ｖ）を別々の容器に収集し、水層を２０Ｌ丸底フラスコに戻し、これにジクロロメタン（１．５Ｌ、６Ｖ）をさらに充填し、混合物を３０分間撹拌した。次いで、混合物を分液漏斗に移し、３０分間静置した。水層と有機層（１．５Ｌ）を再度分離し、合わせた有機層を水（１．２５Ｌ、５Ｖ）とともに２０Ｌ丸底フラスコに充填し、３０分間撹拌し、１０～１５分間静置し、次いで分離した。有機層を水（４×５Ｖ）で洗浄し、水層（５Ｌ）と有機層（５Ｌ）を分離した。有機層をＢｕｃｈｉ丸底フラスコに充填し、４０℃で減圧蒸留して濃縮有機層を得た。チャコール（出発材料に対して１０％ｗ／ｗ）を有機層に導入し、２５±５℃で１２０±１０分間撹拌した。次いで、反応塊を、ブフナーフィルター中のセライト床に通して濾過し、ＤＣＭ中の５０％ＭｅＯＨで洗浄し、次いで濾液を収集した。ｒｏｔａｖａｐｏｒに有機層を充填し、濾液を真空下、４０℃で２Ｖが残るまで留去した。得られた混合物に、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（６Ｖ）を加え、２５±５℃で１時間撹拌した。得られた固体を、真空下、ブフナー漏斗で濾過した。次いで、固体材料をＭＴＢＥ（２Ｖ）で洗浄し、真空下で３０分間乾燥させ、次いで、真空オーブン内で５５℃にて７～８時間さらに乾燥させて、１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）を、収率７０％、純度９７．９７％（ＬＣＭＳにより測定）で得た。化合物を、さらに精製することなく次のステップで使用した。

【0371】

ステップ２

【0372】

【化67】

機械的撹拌器を装備した２Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下で、２５℃±５℃にてエタノール（１．０Ｌ、５Ｖ）を充填した。１－（４－アセチル－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－６－イル）－２－クロロエタン－１－オン（３Ａ）（０．２１ｋｇ、１．０ｍｏｌ当量）を、窒素雰囲気下で、撹拌しながら２５±５°Ｃにて丸底フラスコに加えた。この第１の反応混合物を、窒素雰囲気下で１０分間撹拌し、次いで２－アミノピリミジン（４）（０．１９７ｋｇ、２．５０ｍｏｌ当量）を窒素雰囲気下で２５℃±５℃にて第１の反応混合物に加えた。反応混合物を、７５～７８℃に加熱した。反応混合物を７８℃で１６～２４時間撹拌した。次いで、反応混合物を２５±５℃に冷却した。混合物を２５±５℃で１時間撹拌し、次いでブフナーフィルターで濾過し、湿ったケーキを２５±５℃でエタノール（０．２Ｌ）により洗浄し、真空中で３０分間乾燥させた。さらに真空オーブン内で６５±５℃で５～６時間乾燥させて、純度９９．５２％（ＬＣＭＳにより測定）を有する収率５７．６％の１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）を得、た。化合物を、さらに精製することなく次のステップで使用した。

【0373】

ステップ３

【0374】

【化68】

機械的撹拌器を装備した３Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下、２５℃±５℃でジメチルホルムアミド（８５０ｍＬ、１０Ｖ）を充填した。１－（６－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（５）（８５ｇ、１．０ｍｏｌ当量）を、窒素雰囲気下で、撹拌しながら２５±５°Ｃにて丸底フラスコに加えた。この第１の反応混合物を、窒素雰囲気下で１０分間撹拌した。４－ブロモ－３－メチル－ピリジンＨＣｌ（６Ａ）（７２．２ｇ、１．２０ｍｏｌ当量）、炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）（１９９．６ｇ、５．０ｍｏｌ当量）、ピバル酸（１３．０３ｍＬ、０．４０ｍｏｌ当量）、およびトリシクロヘキシルホスフィンテトラフルオロボレート（ＰＣｙ_３．ＨＢＦ_４）（１．６３ｇ、０．１０ｍｏｌ当量）を、窒素雰囲気下で、２５°Ｃ±５°Ｃにて加えた。反応混合物をアルゴンにより２５±５℃で２５～３０分間脱気した。反応混合物に、酢酸パラジウム（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）（６．４８ｇ、０．１０ｍｏｌ当量）を加えた。合わせた反応混合物を、１２５±５℃に加熱した。反応混合物を１２５±５℃で２～４時間撹拌した。次いで、反応混合物を３０±５℃に冷却した。次いで、反応混合物を、ブフナーフィルター上のセライト床に通して濾過し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨで洗浄し、次いで濾液を収集した。ｒｏｔａｖａｐｏｒに有機層を充填し、濾液を真空下で６５±５℃にて２Ｖが残るまで留去した。得られた混合物にジクロロメタン（ＤＣＭ）（２Ｖ）を加え、２５±５℃で１５～２０分間撹拌し、次いでメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（１０Ｖ）を加え、２５±５℃で１５～２０分間撹拌し、形成された得られた固体を真空下、ブフナー漏斗で濾別した。次いで、固体材料を真空下で乾燥させ、次いで真空オーブン内で５０±５℃で３～４時間乾燥させて、純度７７．１２％（ＬＣＭＳによって測定）を有する８８％の粗製材料（７および７Ａ）を得た。得られた化合物（７および７Ａ）に対して、シリカプラグ濾過に続いてトリチオシアヌル酸操作を含むパラジウム捕捉操作をさらに実行した。シリカプラグ濾過は、シリカ１００～２００メッシュ、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨを使用して実行し、次いで濾液を収集した。ｒｏｔａｖａｐｏｒに有機層を充填し、濾液を真空下で４５±５℃にて留去して固体を得た。固体材料を３Ｌ丸底フラスコに充填し、次いで撹拌しながらジクロロメタン（１０Ｖ）を充填した。混合物を１０分間撹拌し、トリチオシアヌル酸（６．８ｇ、２０ｍｏｌ％ｗ／ｗ）、チャコール（１４．８ｇ、２０ｍｏｌ％ｗ／ｗ）、重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）（２８．２２ｇ、１．７５当量）および水（２８２ｍＬ）を加えた。合わせた混合物を２５±５℃で３時間撹拌し、ブフナーフィルター上のセライト床に通して濾過し、ＤＣＭ中の１０％ＭｅＯＨで洗浄し、次いで濾液を収集した。濾液を分離器に入れ、１５～２０分間静置して相分離を生じさせた。水（０．２８２Ｌ）と有機物（５．１８Ｌ）を別々の容器に収集し、有機層を１０Ｌ丸底フラスコに戻し、これに１ＮＮａＯＨ（２０Ｖ）をさらに充填し、混合物をさらに２０±５分間撹拌した。得られた混合物を１０Ｌ分離器に充填し、１０～１５分間静置して相分離を生じさせた。水層（１．４８Ｌ）と有機層（５．１８Ｌ）を別々の容器に収集した。有機層（５．１８Ｌ）をブライン溶液（１０Ｌ）で洗浄し、分離した（５．１８Ｌ）。有機層を丸底フラスコに充填し、真空下で４０±５℃にて１．５Ｖが残るまで留去した。得られた混合物に、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（３Ｖ）を加え、次いで２５±５℃で３０分間撹拌した。得られた沈殿物を、真空下、ブフナー漏斗で濾過した。次いで、固体材料をＭＴＢＥ（１Ｖ）で洗浄し、真空下で３０分かけて乾燥させ、次いで、真空オーブン内で５０±５℃で２～４時間さらに乾燥させて、純度９５．２１％（ＬＣＭＳにより測定）を有する収率７０．０６％の（７および７Ａ）を得た。パラジウムの結果は４９～１１９ｐｐｍであった。１００ｐｐｍ未満のパラジウムを得るために、トリチオシアヌル酸操作をもう１回繰り返した。

【0375】

ステップ４

【0376】

【化69】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ丸底フラスコに、温度２５℃±５℃にて、１－（６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７）および１－（６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－２，３－ジヒドロ－４Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン－４－イル）エタン－１－オン（７Ａ）（位置異性体７と７Ａの混合物）（４４０ｇ、１．０ｍｏｌ当量）を充填した。メタノール（４．４Ｌ、１０Ｖ）を温度２５±５℃で丸底フラスコに加えた。反応塊を２５±５℃で１０分間撹拌し（ＲＭは不均質形態である）、続いて３０％ＮａＯＨ水溶液（８８０ｍＬ、２Ｖ）を、２５±５℃で撹拌しながら丸底フラスコに加えた。反応塊を７０±５℃で５～６時間加熱した。６５～７０℃で約４時間後、材料の沈殿が観察される。加熱を停止し、２５±５℃になるまで反応塊を放置する。反応混合物中、加熱時よりも２５±５℃でより多くの固体の形成が観察された。反応塊を、真空下でブフナー漏斗に通して濾過した。湿ったケーキをメタノール（０．８８Ｌ、２Ｖ）で洗浄し、真空下で３０分間乾燥させた。湿ったケーキをブフナーフィルターから取り出し、別の５．０Ｌ丸底フラスコに加えた。Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水（２．２Ｌ、５Ｖ）を５．０Ｌ丸底フラスコに加え、混合物をさらに３０分間撹拌した。混合物をブフナー漏斗で濾過し、水（２．２Ｌ、５Ｖ）で洗浄した。濾液のｐＨは約７～８になるはずである。材料をブフナー漏斗上で３０分間乾燥させ、さらに真空オーブン内で６５±５℃で１２～１４時間乾燥させて、純度９８．７８％（ＨＰＬＣにより測定）を有する収率６６．８％の（８および８Ａ）を得た。化合物を、さらに精製することなく次のステップで使用した。位置異性体（８）および（８Ａ）のうち、（８）が優勢であり、一部のバッチでは８Ａはごくわずかなものである。

【0377】

ステップ５

【0378】

【化70】

機械的撹拌器を装備した１０Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下で、２５℃±５℃で、２－アミノ－２－メチルプロパン酸（９）（２６０ｇ、３．３４ｍｏｌ当量）を充填した。アセトニトリル（３．９Ｌ、１５Ｖ）を丸底フラスコに加え、混合物を窒素雰囲気下で、２５±５℃にて１０分間撹拌した。塩化チオニル（４０３ｍＬ、７．３４ｍｏｌ当量）を丸底フラスコに１０分間にわたって加えた（約２℃の発熱が観察された）。得られた混合物を、４０±２℃で２時間加熱した（白色の懸濁液が観察された）。次いで、混合物を３０℃に冷却し、次いでそれにピリジン（７９２ｍＬ、１３．０ｍｏｌ当量）を４５分間にわたって加えた（５～７℃の発熱が観察され、混合物は透明になった）。混合物を３５～４０℃で１時間さらに撹拌し、次いで３０℃に冷却し、続いて６－（３－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８）および６－（２－（３－メチルピリジン－４－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（８Ａ）（位置異性体８と８Ａの混合物）（２６０ｇ、１．０ｍｏｌ当量）を加え、４～５℃の発熱が観察された。反応塊を３０±５℃で２～３時間さらに撹拌した（３０～４５分間維持した後に黄色の沈殿が観察された）。次いで、反応塊を窒素雰囲気下、ブフナー漏斗上で濾過して固体生成物を得、次いでこれをアセトニトリル（１．０４Ｌ、４Ｖ）で洗浄した。次いで、材料を真空オーブン内で６５±５℃で６～８時間乾燥させて、３２０ｇの粗製材料を得た。次いで、得られた粗製材料を２５±５℃でエタノール（９６０ｍＬ、粗物質に対して３Ｖ）に溶解し、５～１０分間撹拌した。次いで、混合物を７０±５℃で３０分間加熱し、次いで４０℃に冷却した。酢酸イソプロピル（４．１６Ｌ、１３Ｖ）を混合物に加え、次いで２５±５℃まで冷却させた。次いで、混合物を２５±５℃で３～４時間撹拌し、次いで減圧下、ブフナー漏斗上で濾過した。次いで、得られた固体を酢酸イソプロピル（６４０ｍＬ、２Ｖ）で洗浄した。材料をブフナー漏斗上で乾燥させ、最後にオーブン内で６５±５℃で５～６時間乾燥させて、純度９９．８１％（ＨＰＬＣで測定）を有する収率６５．８％の（１０Ｃおよび１０Ｄ）を得た。位置異性体（１０Ｃ）および（１０Ｄ）のうち、（１０Ｃ）が優勢であり、一部のバッチでは１０Ｄは観察されない。

【0379】

ステップ６

【0380】

【化71】

機械的撹拌器を装備した１０．０Ｌ丸底フラスコに、２５℃±５℃にて、（１０Ｃおよび１０Ｄ）ビスＨＣｌ塩（２５０ｇ、０．４９ｍｏｌ当量）を充填した。イソプロパノール（１．２５Ｌ、５Ｖ）を、２５±５℃で丸底フラスコに加えた。混合物を窒素雰囲気下で１０分間撹拌し、続いてトリエチルアミン（２０８ｍＬ、３．０ｍｏｌ当量）を加えた。得られた混合物を２５±５℃で１０分間、次いで５０℃で２時間撹拌した（不均質な反応塊）。ヒドロキシルアミン塩酸塩（１０４ｇ、１．４９ｍｏｌ当量）を、混合物に加えた（２～３℃の発熱が観察された）。反応塊を、５０℃で２～３時間さらに撹拌した。反応物は１５～２０分後に透明になり、２時間後に固体が沈殿し始める。反応塊を２５±５℃に冷却した。酢酸イソプロピル（１．２５Ｌ、５Ｖ）を丸底フラスコに２５±５℃で加え、混合物をさらに１時間撹拌した。酢酸イソプロピル（２．５Ｌ、１０Ｖ）を温度２５±５℃で丸底フラスコにさらに加え、さらに１時間撹拌した。次いで、このようにして得られた固体を減圧下、ブフナー漏斗上で濾過して、窒素雰囲気下で粗製材料を得た。このようにして得られた固体材料を、酢酸イソプロピル（５００ｍＬ、２Ｖ）で洗浄し、真空下で乾燥させた。固体を真空オーブン内で６０±５℃で４～６時間さらに乾燥させて、３５０ｇの粗製材料を得た。次いで、粗製材料（３５０ｇ）をエタノール（１．７５Ｌ、５Ｖ）中で３０分間還流し、次いで２５±５℃に冷却し、減圧下で濾過して、所望の材料を得た。材料をブフナー漏斗上で乾燥させ、最後に真空オーブン内で６０±５℃で６～８時間乾燥させて、純度９９．４６％（ＨＰＬＣで測定）を有するビスＨＣｌ塩として収率８４．９％の化合物（１）を得た。このようにして得られたＨＣｌ塩をさらに取り出して、遊離塩基を得た。機械的撹拌器を装備し、２５℃±５℃でＭｉｌｌｉ－Ｑ水（１．２６Ｌ、２．４Ｖ）を充填した１０．０Ｌ丸底フラスコに、化合物（１）（ビスＨＣｌ塩）（５２５ｇ）を、２５±５℃で丸底フラスコに加えた。混合物を１０分間撹拌し、次いで１５±５℃に冷却し、続いてＮＨ_４ＯＨ（１．２６Ｌ、２．４Ｖ）を３０～４５分間にわたって加えた。反応塊を、１５±５℃で３０～４５分間撹拌した。ジクロロメタン（２．６Ｌ、５Ｖ）を反応塊に加えた（ＤＣＭの添加は固体の形成を助ける）。混合物をさらに３０～４５分間撹拌し、次いで減圧下、ブフナー漏斗で濾過し、水（１．０５Ｌ、２Ｖ）で洗浄した。湿った固体を丸底フラスコに戻し、２５±５℃で３０～４５分間、水（５．２５Ｌ、１０Ｖ）でスラリー化した。次いで固体を再びブフナー漏斗上で濾過し、ＤＣＭ（１．０５Ｌ、２Ｖ）で洗浄した。材料をブフナー漏斗上で乾燥させ、最後に真空オーブン内で６５±５℃で１２～１４時間乾燥させて、純度９９．０１％（ＨＰＬＣで測定）を有する化合物（１）４２１ｇを得た。

【0381】

当業者であれば、典型的には本明細書に開示される合成法のいずれかを使用して、化合物（Ｉ）を形成し、続いてその薬学的に許容される塩を形成するために必要とされる既知の追加のステップにより、化合物（Ｉ）の薬学的に許容される塩を容易に合成できることが理解されるであろう。

【0382】

化合物（Ｉ）の有利な特性を、具体的な実施例を参照してここで説明する。これらは単なる例示であり、例証のみを目的としている；それらは、特許請求された独占権または記載された発明の範囲をいかなる形でも限定することを意図するものではない。

【実施例】

【0383】

比較化合物（ＩＩ）：

【0384】

【化72】

は、上記の化合物（Ｉ）について概説した方法を改変することによって合成した。そのような改変には、適切なピリジル出発材料の選択およびアミノ酸としてのグリシンの使用が含まれる。

【0385】

比較化合物（ＩＩＩ）：

【0386】

【化73】

は、適切なピリジル出発材料の選択およびアミノ酸としてのグリシンの使用が含まれる改変によって合成した。

【0387】

化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）について、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）および最小発育阻止濃度９０値（ＭＩＣ_９０）に関する以下の分析を行った。

【0388】

抗菌剤感受性
大腸菌（Escherichia coli）（ＮＣＴＣ１３４４１）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）(ＮＣＴＣ１３４３８）（浮遊細菌）に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は、臨床検査標準委員会（Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Eleventh Edition, CLSI document M07, 11 January 2018）のガイドラインに準拠したブロスの微量希釈手順によって決定した。ブロス希釈法には、９６ウェルマイクロタイタープレートでの化合物の２倍段階希釈が含まれ、最終濃度範囲は０．３９～２００μＭ、最大最終濃度は２％ＤＭＳＯとなった。試験した細菌株は、大腸菌（Escherichia coli）（ＮＣＴＣ１３４４１）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）（ＮＣＴＣ１３４３８）であった。菌株は、カチオン調整されたミュラーヒントンブロスまたはルリアベルターニ寒天上で、周囲雰囲気中、３７℃で増殖させた。ＭＩＣ（μＭ）は、２０～２４時間のインキュベーション期間後の増殖を阻害する化合物の最低濃度として決定した。結果を、表１に示す。

【0389】

【表1】

【0390】

上で概説した方法論を使用して、化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）について、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）対プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）（ＤＳＭ４４７９）を決定した。結果を、表２に示す。化合物（Ｉ）は、比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）に対して優れた効力を示す。

【0391】

【表2】

【0392】

大腸菌（Escherichia coli）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）の１００単離菌に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ_９０）を測定した。単離菌（菌株）の９０％が阻害される最小阻害濃度（ＭＩＣ_９０）は、ＥＵＣＡＳＴ感受性試験基準（ｗｗｗ．ｅｕｃａｓｔ．ｏｒｇ）に準拠したブロス微量希釈によって測定した。細菌接種材料は、０．５マクファーランド懸濁液を１００倍に希釈することにより、約１×１０＾６ＣＦＵ／ｍＬで調製した。最終濃度の２倍の抗菌溶液５０μｌを含有する抗菌パネルを、接種材料５０μｌで２倍に希釈して、最終接種材料約５×１０＾５ＣＦＵ／ｍｌ、および抗菌剤の所望の試験濃度（０．０３～６４μｇ／ｍＬ）を得た。プレートは、臨床検査標準委員会（Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard－Eleventh Edition, CLSI document M07, 11 January 2018）のガイドラインに従ってインキュベートした。ＭＩＣ_９０（μｇ／ｍｌ）は、試験集団内の単離菌（菌株）の９０％以上が阻害されるＭＩＣ値である。結果を、表３に示す。

【0393】

【表3】

【0394】

大腸菌（Escherichia coli）および肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）の１００単離菌について上で概説した方法論を使用して、化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩＩ）について、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）対プロテウス菌種（Proteus spp.）およびプロビデンシア菌種（Providencia spp.）を決定した。結果を、表４に示す。化合物（Ｉ）は、比較化合物（ＩＩＩ）に対して優れた効力を示す。

【0395】

【表4】

【0396】

化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）を、親油性および分布容積（Ｖｓｓ）に関する以下の分析に供した。

【0397】

親油性
化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩＩ）のＬｏｇＰ値は、ＳｉｒｉｕｓＡｎａｌｙｔｉｃａｌ製のＳｉｒｉｕｓＴ３装置を使用して、酸ベースの滴定を実行し、試料溶液が非混和性溶媒（オクタノール）と接触したときのｐＫａのシフトを測定することによって測定した。比較化合物（ＩＩ）のＬｏｇＰは、Ｍａｒｖｉｎ（理化学計算ソフトウェア）を使用して計算した。結果を、表５に示す。化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の親油性データは、異なる日に実行した別個の実験で収集し、表５において比較した。

【0398】

【表5】

【0399】

分布容積
化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の分布容積（Ｖｓｓ）は、それぞれ５ｍｇ／ｋｇのＩＶボーラス投与後にげっ歯類種（マウス）から得られた血漿濃度時間プロファイルの分析から決定した。分布容積は、ＰＫソルバー（Ｅｘｃｅｌ）の２コンパートメントＩＶボーラスモデルを使用して、化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）のげっ歯類血漿プロファイルを分析することによって得た。出力Ｖｓｓ値を、表６に示す。化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩ）の分布データの量は、異なる日に実行した別個の実験で収集し、表６において比較した。

【0400】

【表6】

【0401】

結果についての考察
理論に束縛されるものではないが、本発明者らは、親油性および分布量に関する上記の結果は、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩が、腸内細菌目のグラム陰性菌および／もしくはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による感染、またはそれらによって引き起こされるもしくは悪化する疾患の処置に、特に、腸内細菌目のグラム陰性菌および／またはヘモフィルス（Haemophilus）属のグラム陰性菌による多部位感染の処置に、有利に使用することができることを実証していると考える。本発明者らは、上記の結果は、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩が、あらゆる部位での効果的な処置を可能にするのに十分な濃度で、対象の体の周囲のすべての感染部位に効果的に分布する能力を有することを実証していると考える。薬理学的効果を発揮するのに十分な量の化合物が利用可能であることと同様に、血漿からの化合物の分布が十分に速く、薬物が感染に対して迅速に作用できるようにすることと、薬物が十分な濃度ですべての考えられる感染部位に到達することが妨げられる非常に急速な放出を回避することとの間のバランスが維持されるべきである。

【0402】

そのようなバランスは、以下でより詳細に考察する上記の結果によって実証されていると考えられる。

【0403】

化合物のＬｏｇＰ値は、極性の指標を示し、したがって、化合物が対象の標的組織に到達する能力、すなわち薬物が膜障壁を通過し、対象の体の周囲の考えられる細胞内感染部位に分布することができる容易さを示す。

【0404】

表５から、本発明の化合物（Ｉ）は、比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の両方と比較して、より高いＬｏｇＰ値、したがってより低い極性を有することが分かり、これは、より極性の高い比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）と比較して、化合物（Ｉ）の組織分布が改善されたことを示している。本発明者らは、化合物（Ｉ）のこの改善された組織分布により、処置が可能になるのに十分な薬物が感染部位のそれぞれに到達し、化合物が対象の体の周囲の考えられるすべての感染部位に分布することが可能になると考えている。表５のＬｏｇＰ値に基づく比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）に見られるように、薬物の分布が効果的でない場合、感染部位全体にわたる薬物濃度が不十分となり、感染の処置が妨げられることになる。上で考察したように、薬物が対象の体の周囲に分布する効率に関しては、達成すべきバランスが存在する。化合物（Ｉ）のＬｏｇＰ値は、比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）に対して、化合物（Ｉ）が複数の感染部位に分布し、これらの感染部位のすべてにおいて適切な薬物濃度を提供することを示している。

【0405】

分布容積（Ｖｓｓ）は、化合物が血漿ではなく対象の体組織に分布する程度、すなわち、化合物が血漿を離れ、対象の体組織に分布する傾向の指標を提供する。

【0406】

表６から、化合物（Ｉ）は、両方とも化合物（Ｉ）と構造的に非常に類似している比較化合物（ＩＩ）および比較化合物（ＩＩＩ）と比較して、驚くべきかつ予想外に優れた組織浸透特性を有することが分かる。

【0407】

本発明者らは、化合物（Ｉ）が良好な透過性を示すと結論付けた。化合物（Ｉ）の親油性および透過性により、化合物は対象の標的組織に到達し、浸透することができる。化合物（Ｉ）対比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の驚くべきかつ予想外に優れた組織分布および浸透特性は、化合物（Ｉ）の有利な親油性および透過性に起因する。

【0408】

インビトロ安全性薬理学研究
化合物（Ｉ）、比較化合物（ＩＩ）および比較化合物（ＩＩＩ）についてインビトロ薬理学結合アッセイを実行して、１０μＭの濃度の化合物（Ｉ）、比較化合物（ＩＩ）または比較化合物（ＩＩＩ）における４４個のリガンド（受容体、輸送体、イオンチャネル、酵素およびキナーゼを含む）に対する阻害のパーセンテージを評価する。化合物の結合は、各標的に特異的な放射性標識リガンドの結合の阻害のパーセンテージとして計算した。５０％を超える阻害を示す結果は、化合物（Ｉ）、比較化合物（ＩＩ）または比較化合物（ＩＩＩ）の認識可能な効果を表すと考えられる。試験した４４個のリガンドすべての結果を、図１ａ、１ｂ、および１ｃに示すが、図１ｄは５０％を超える阻害を示す結果のみを示す。化合物（Ｉ）ならびに比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）のインビトロ薬理学結合アッセイを、異なる日にわたって別々に実行し、図１ａ、１ｂ、１ｃ、および１ｄにおいて比較した。

【0409】

図１ａ、１ｂ、１ｃ、および１ｄから、化合物（Ｉ）は比較化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の両方とは異なるＣＥＲＥＰプロファイルを有することが分かる。化合物（Ｉ）は、単一のリガンドのみ、すなわち比較化合物（ＩＩ）および／または（ＩＩＩ）よりも少ない（および異なる）リガンドに対して５０％を超える阻害を示した。

【0410】

概念実証研究
化合物（Ｉ）および比較化合物（ＩＩＩ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による呼吸器感染、腸内細菌目のグラム陰性菌による菌血症または血流感染、および腸内細菌目のグラム陰性菌による尿路感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究において評価した。結果を、図２、３、および４ａ～ｃに示す。点、三角形、または四角形のインジケーターそれぞれは、１匹のマウスを表す。ＬＯＤは、細菌の検出限界を指す。静止（Stasis）は、処置前の対象における細菌のレベル（コロニー形成単位（ＣＦＵ））を示す。概念実証研究のそれぞれは、別々に実行した。ビヒクルは、薬学的に許容される担体または賦形剤を意味する。

【0411】

腸内細菌目のグラム陰性菌によって引き起こされる、または悪化する呼吸器感染の処置に関する概念実証研究のため、ＣＤ－１マウスに、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）ＡＴＣＣ４３８１６を感染させた。感染２時間後（図２における「前処置」）、化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有しないビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）、または化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有するビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）を、２０ｍｇ／ｋｇ、ＴＩＤ（８時間間隔）で、１日かけてＩＶボーラスにより投与した。

【0412】

図２から、研究の終了時（最初の感染から２６時間：図２の「化合物（Ｉ）」および「比較化合物（ＩＩＩ）」）、化合物（Ｉ）は比較化合物（ＩＩＩ）と比較して、コロニー形成単位（ＣＦＵ）が予想外に有意に減少しており、すなわち、細菌負荷が、前処置およびビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）対比較化合物（ＩＩＩ）での処置によって有意に減少したことが分かる。実際、図２の比較化合物（ＩＩＩ）のＣＦＵ値は、静止レベル、すなわち細菌の死滅が起こらなかった例に比較的近いままであった。図２から、研究の終了時（最初の感染から２６時間）、化合物（Ｉ）はビヒクルと比較して肺内の細菌負荷を６．２４ｌｏｇ減少させたのに対し、比較化合物（ＩＩＩ）は、ビヒクルと比較して４．１６ｌｏｇの減少しか示さなかったことが分かる。したがって、化合物（Ｉ）は、肺炎桿菌（Klebsiella pneumonia）、特に多剤耐性肺炎桿菌（Klebsiella pneumonia）による呼吸器感染の処置において、比較化合物（ＩＩＩ）よりも２ｌｏｇ有効である。

【0413】

腸内細菌目のグラム陰性菌による菌血症または血流感染の処置に関する概念実証研究のため、ＣＤ－１マウスに、ヒト尿単離大腸菌（E. coli）ＢＡＡ－２４６９（ＮＤＭ－１陽性）を感染させた。感染１時間後（図３における「前処置」）、化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有しないビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）、または、化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有するビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）を、２０ｍｇ／ｋｇで単回用量ＩＶボーラスとして投与した。

【0414】

図３から、研究の終了時（最初の感染から９時間：図３の「化合物（Ｉ）」および「比較化合物（ＩＩＩ）」）、化合物（Ｉ）は比較化合物（ＩＩＩ）と比較して、コロニー形成単位（ＣＦＵ）が予想外に有意に減少しており、すなわち、細菌負荷は、前処置およびビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）対比較化合物（ＩＩＩ）での処置によって有意に減少したことが分かる。実際、図３の比較化合物（ＩＩＩ）のＣＦＵ値は、静止レベル以上、すなわち、細菌の死滅が起こらなかった例に留まった。図３から、研究の終了時（最初の感染から９時間）、化合物（Ｉ）によって、血中の細菌負荷が検出限界（ＬＯＤ）未満に減少し、ビヒクルと比較して７．４３ｌｏｇ減少したことが分かる。対照的に、比較化合物（ＩＩＩ）は、ビヒクルと比較して４．８６ｌｏｇ減少のみを示した。したがって、化合物（Ｉ）は、大腸菌（Escherichia Coli）、特に多剤耐性大腸菌（Escherichia Coli）による菌血症または血流感染の処置において、比較化合物（ＩＩＩ）より２．５ｌｏｇ有効である。

【0415】

腸内細菌目細菌による尿路感染の処置に関する概念実証研究のため、雌型Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスに、大腸菌（E. coli）ＵＴＩ８９を感染させた。感染２４時間後（図４ａ～ｃにおける「前処置」）、化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有しないビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）、または、化合物（Ｉ）もしくは比較化合物（ＩＩＩ）を含有するビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）を、２０ｍｇ／ｋｇ、ＴＩＤ（８時間間隔）で、３日かけてＩＶボーラスにより投与した。

【0416】

尿路感染は、膀胱および腎臓に影響を与えることがあるため、尿、膀胱および腎臓のそれぞれにおける細菌負荷を評価した（それぞれ図４ａ～ｃ）。図４ａおよび４ｂから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後：図４ａおよび４ｂの「化合物（Ｉ）」および「比較化合物（ＩＩＩ）」）、化合物（Ｉ）は比較化合物（ＩＩＩ）と比較して、コロニー形成単位（ＣＦＵ）が予想外に有意に減少しており、すなわち、細菌負荷が、前処置およびビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）対比較化合物（ＩＩＩ）での処置によって有意に減少したことが分かる。図４ｃから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後：図４ｃの「化合物（Ｉ）」および「比較化合物（ＩＩＩ）」）、化合物（Ｉ）は比較化合物（ＩＩＩ）と比較して、コロニー形成単位（ＣＦＵ）がまた減少しており、すなわち、細菌負荷が、前処置およびビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）対比較化合物（ＩＩＩ）での処置によって減少したことが分かる。図４ａから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、化合物（Ｉ）によって、尿中の細菌負荷が検出限界（ＬＯＤ）未満に減少し、ビヒクルと比較して６．５９ｌｏｇ減少したことが分かる。対照的に、比較化合物（ＩＩＩ）は、ビヒクルと比較して３．３６ｌｏｇの減少のみを示した。したがって、化合物（Ｉ）は、尿中のＣＦＵの減少において比較化合物（ＩＩＩ）よりも３ｌｏｇ有効であり、したがって、大腸菌（Escherichia coli）による尿路感染（ＵＴＩ）の処置を促進する。図４ｂから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、ビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）によって、膀胱内の細菌負荷が５．６７ｌｏｇ減少したことが分かる。比較すると、比較化合物（ＩＩＩ）は、ビヒクルと比較して３．７１ｌｏｇの減少のみを示した。したがって、化合物（Ｉ）は、膀胱内のＣＦＵの減少において比較化合物（ＩＩＩ）よりも３ｌｏｇ有効であり、したがって、大腸菌（Escherichia coli）による尿路感染（ＵＴＩ）の処置を促進する。図４ｃから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、ビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）によって、腎臓における細菌負荷が４．７３ｌｏｇ減少したことが分かる。

【0417】

化合物（Ｉ）を、腸内細菌目のグラム陰性菌による呼吸器感染、および腸内細菌目のグラム陰性菌による尿路感染の処置のためのマウスモデルにおける概念実証研究においてさらに評価した。結果を、図５および６ａ～ｃに示す。点、三角形、または四角形のインジケーターそれぞれは、１匹のマウスを表す。ＬＯＤは、細菌の検出限界を指す。静止（Stasis）は、処置前の対象における細菌のレベル（コロニー形成単位（ＣＦＵ））を示す。概念実証研究のそれぞれは、別々に実行した。ビヒクルは、薬学的に許容される賦形剤または担体を意味する。

【0418】

腸内細菌目のグラム陰性菌によって引き起こされる、または悪化する呼吸器感染の処置に関するさらなる概念実証研究のため、雄型ＣＤ－１マウスに、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）ＡＴＣＣ４３８１６を感染させた。

【0419】

感染の２時間後（図５の「前処理」）、マウスを、化合物（Ｉ）を含有しないビヒクル対照（リン酸緩衝液）、または２０ｍｇ／ｋｇの用量の化合物（Ｉ）を１時間（ＱＤ）静脈内注入により投与して、化合物（Ｉ）を含有するビヒクル（リン酸緩衝液）のいずれかで処置した。化合物（Ｉ）を含有しないビヒクル対照を受けたマウス、および化合物（Ｉ）を含有するビヒクルを受けた一部のマウスについては、第１の投与開始時間の３時間後に、追加の１時間持続静脈内注入（ＢＩＤ、３時間間隔）を投与した。

【0420】

図５から、研究の終了時（最初の感染から２６時間：図５の「化合物（Ｉ）ＱＤ」および「化合物（Ｉ）ＢＩＤ」）、化合物（Ｉ）はコロニー形成単位（ＣＦＵ）が減少しており、すなわち、前処置およびビヒクル（図５の「ビヒクルＢＩＤ」）と比較して、化合物（Ｉ）での処置によって、細菌負荷が減少したことが分かる。これは、化合物（Ｉ）を２回（ＢＩＤ、３時間間隔）投与した場合に特に見られた（処置前およびビヒクルの両方と比較してＰ値＜０．０００１）。化合物（Ｉ）を１回投与した場合（ＱＤ）のＰ値は、処置前と比較して０．００４２、ビヒクルと比較して＜０．０００１であった。図５から、研究の終了時（最初の感染から２６時間）、化合物（Ｉ）は、肺内の細菌負荷を、ビヒクルと比較して４．３５および５．２０ｌｏｇ減少させ（それぞれ１回（ＱＤ）および２回（ＢＩＤ、３時間間隔）投与）、処置前（静止レベル）と比較して、（それぞれ１回（ＱＤ）および２回（ＢＩＤ、３時間間隔）投与の場合）０．９５および１．８０ｌｏｇ減少させたことが分かる。したがって、化合物（Ｉ）は、肺炎桿菌（Klebsiella pneumonia）、特に多剤耐性肺炎桿菌（Klebsiella pneumonia）による呼吸器感染の処置において有効である。

【0421】

腸内細菌目細菌による尿路感染の処置に関するさらなる概念実証研究のため、雌型Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスに、大腸菌（E. coli）ＵＴＩ８９を感染させた。

【0422】

感染の２４時間後（図６ａ～ｃの「前処理」）、マウスを、化合物（Ｉ）を含有しないビヒクル対照（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）、または２０ｍｇ／ｋｇの用量の化合物（Ｉ）を１時間（ＱＤ）静脈内注入により投与して、化合物（Ｉ）を含有するビヒクル（２０％ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン）のいずれかで処置した。化合物（Ｉ）を含有するビヒクルを受けた一部のマウスについては、第１の投与開始時間の５時間後に、追加の１時間持続静脈内注入（ＢＩＤ、５時間間隔）を投与した。１日１または２回の投与を３日間継続した。ＱＤの場合、投与は、感染後２４～２５時間、４８～４９時間、および７２～７３時間の間に行われ、ＢＩＤの場合、投与は、感染後２４～２５時間、２９～３０時間、４８～４９時間、５３～５４時間、７２～７３時間、および７７～７８時間の間に行われた。

【0423】

尿路感染は、膀胱および腎臓に影響を与えることがあるため、尿、膀胱および腎臓のそれぞれにおける細菌負荷を評価した（それぞれ図６ａ～ｃ）。図６ａ、６ｂ、および６ｃから、研究の終了時（最初の感染から９６時間：図６ａ、６ｂ、および６ｃの「化合物（Ｉ）ＱＤ」および「化合物（Ｉ）ＢＩＤ」）、化合物（Ｉ）はコロニー形成単位（ＣＦＵ）が有意に減少しており、すなわち、前処置およびビヒクルと比較して、化合物（Ｉ）での処置によって、細菌負荷が有意に減少したことが分かる。これは、化合物（Ｉ）を１日２回（ＢＩＤ、５時間間隔）投与した場合に特に見られた。図６ａから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、ＱＤおよびＢＩＤの両方の毎日の投与では、化合物（Ｉ）によって、尿中の細菌負荷が検出限界（ＬＯＤ）未満に減少し、ビヒクルと比較して、（それぞれ１日１回（ＱＤ）および２回（ＢＩＤ、５時間間隔）投与の場合）４．８６および５．８７ｌｏｇ減少したことが分かる。化合物（Ｉ）のＰ値は、１回投与（ＱＤ）または２回投与（ＢＩＤ、５時間間隔）にかかわらず、ビヒクルと比較して＜０．０００１であった。したがって、化合物（Ｉ）は、尿中のＣＦＵの減少において有効であり、したがって、大腸菌（Escherichia coli）による尿路感染（ＵＴＩ）の処置を促進する。図６ｂから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、ＱＤおよびＢＩＤの両方の毎日の投与では、化合物（Ｉ）によって、膀胱内の細菌負荷が検出限界（ＬＯＤ）未満に減少し、ビヒクルと比較して、（それぞれ１日１回（ＱＤ）および２回（ＢＩＤ、５時間間隔）投与の場合）５．０１および５．８４ｌｏｇ減少したことが分かる。ビヒクルと比較して、１日１回投与（ＱＤ）のＰ値は０．００１であり、１日２回投与（ＢＩＤ、５時間間隔）では０．０００２であった。したがって、化合物（Ｉ）は、膀胱内のＣＦＵの減少において有効であり、したがって、大腸菌（Escherichia coli）による尿路感染（ＵＴＩ）の処置を促進する。図６ｃから、研究の終了時（最初の感染から９６時間後）、ＢＩＤの投与では、化合物（Ｉ）によって、腎臓における細菌負荷が検出限界（ＬＯＤ）未満に減少し、ビヒクルと比較して、（それぞれ１日１回（ＱＤ）および２回（ＢＩＤ、５時間間隔）投与の場合）３．１７および４．３ｌｏｇ減少したことが分かる。ビヒクルと比較して、１日１回投与（ＱＤ）のＰ値は０．０００７であり、１日２回投与（ＢＩＤ、５時間間隔）では＜０．０００１であった。したがって、化合物（Ｉ）は、腎臓におけるＣＦＵの減少において有効であり、したがって、大腸菌（Escherichia coli）による尿路感染（ＵＴＩ）の処置を促進する。

【図1-1】