特表 2024-517381 がんを治療するための併用療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-04-22

(54)【発明の名称】がんを治療するための併用療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240415BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240415BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 31/517 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 31/4709 20060101ALI20240415BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 31/337 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 31/352 20060101ALI20240415BHJP

   A61K 31/502 20060101ALI20240415BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20240415BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240415BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20240415BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240415BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20240415BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240415BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 U

A61K39/395 D

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K45/00

A61K31/517

A61K31/4709

A61P13/12

A61K31/337

A61K31/352

A61K31/502

A61P15/00

A61P17/00

C07K16/28 ZNA

C12N15/13

C12N15/62 Z

C07K19/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023562257

(86)(22)【出願日】2022-04-11

(85)【翻訳文提出日】2023-12-06

(86)【国際出願番号】 CN2022086143

(87)【国際公開番号】W WO2022218264

(87)【国際公開日】2022-10-20

(31)【優先権主張番号】63/173,479

(32)【優先日】2021-04-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/300,567

(32)【優先日】2022-01-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520053809

【氏名又は名称】アダジーン インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】ルオ， ピーター ペイチー

(72)【発明者】

【氏名】リュウ， ギジョン

【テーマコード（参考）】

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA19

4C084MA02

4C084NA05

4C084ZA811

4C084ZA812

4C084ZA891

4C084ZA892

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC412

4C084ZC75

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB11

4C085EE03

4C086AA01

4C086BA02

4C086BA08

4C086BC28

4C086BC46

4C086BC50

4C086GA02

4C086GA07

4C086GA12

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086ZA81

4C086ZA89

4C086ZB26

4C086ZC41

4C086ZC75

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA28

4H045FA74

(57)【要約】

提供するのは、活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体のような抗細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ４）抗体を用いて、がんを治療する組成物及び方法である。いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体と、免疫チェックポイント阻害剤、抗ＣＤ１３７抗体、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）阻害剤、化学療法剤またはポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤とを含む併用療法を提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、（ａ）有効量の活性化可能な抗体及び（ｂ）有効量の抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、前記活性化可能な抗体が、
Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、
前記ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）、及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、式中、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、前記ＣＭが切断されていないときには、前記ＭＭが、前記活性化可能な抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、
前記ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、
ａ）前記ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｂ）前記ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｃ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、または
ｄ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含み、
前記ＣＭが切断されると、前記活性化可能な抗体が、前記ＶＨ及びＶＬを介して、ヒトＣＴＬＡ４に結合する前記方法。

【請求項2】

前記抗ＰＤ１抗体が、２Ｅ５またはトリパリマブである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記がんが、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、乳癌、メラノーマ、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、（ａ）有効量の活性化可能な抗体及び（ｂ）有効量の抗ＣＤ１３７抗体を投与することを含み、前記活性化可能な抗体が、
Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、
前記ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）、及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、式中、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、前記ＣＭが切断されていないときには、前記ＭＭが、前記活性化可能な抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、
前記ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、
ａ）前記ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｂ）前記ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｃ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、または
ｄ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含み、
前記ＣＭが切断されると、前記活性化可能な抗体が、前記ＶＨ及びＶＬを介して、ヒトＣＴＬＡ４に結合し、
前記抗ＣＤ１３７抗体が、ヒトＣＤ１３７の細胞外ドメインに特異的に結合し、前記抗体が、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６２～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９５～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に結合する前記方法。

【請求項5】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、配列番号２３１の５１番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１４番目のアミノ酸残基に結合する、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨが、配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬが、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項４または５に記載の方法。

【請求項7】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号２４０のアミノ酸配列を含み、及び／または前記軽鎖が、配列番号２４１のアミノ酸配列を含む、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨが、配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬが、配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項４または５に記載の方法。

【請求項10】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、配列番号２４８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号２５０のアミノ酸配列を含み、及び／または前記軽鎖が、配列番号２５１のアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨが、配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬが、配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項４または５に記載の方法。

【請求項13】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、配列番号２５８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖が、配列番号２６０のアミノ酸配列を含み、及び／または前記軽鎖が、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記抗ＣＤ１３７抗体が、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域を含み、任意に、前記ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域が、Ｓ２４１Ｐという変異を含み、ナンバリングが、Ｋａｂａｔに従うものである、請求項４～１４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記がんが、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、乳癌、メラノーマ、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である、請求項４～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記ＭＭがさらに、そのＮ末端に追加のアミノ酸配列を含む、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記追加のアミノ酸配列が、配列番号１４８のアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記第１の切断部位が、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択したプロテアーゼのプロテアーゼ切断部位である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記ＣＭがさらに、前記第１の切断部位のＣ末端側に、第１のリンカー（Ｌ_１）を含む、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記Ｌ_１が、配列番号１５６～１６３からなる群から選択したアミノ酸配列を含む、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記ＣＭがさらに、第２の切断部位を含む、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記第２の切断部位が、前記Ｌ_１のＣ末端側にある、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

前記第２の切断部位が、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択したプロテアーゼのプロテアーゼ切断部位である、請求項２２または２３に記載の方法。

【請求項25】

前記第１の切断部位と前記第２の切断部位が異なる、請求項２２～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記ＣＭがさらに、前記第２の切断部位のＣ末端側に、第２のリンカー（Ｌ_２）を含む、請求項２２～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

前記Ｌ_２が、配列番号１５６～１６３からなる群から選択したアミノ酸配列を含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記ＣＭがさらに、前記第１の切断部位のＮ末端側に、第３のリンカー（Ｌ_３）を含む、請求項１～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項29】

前記ＣＭが、少なくとも第１のプロテアーゼ切断部位を含み、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択した１つ以上のプロテアーゼによって切断される、請求項１～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記活性化可能な抗体が、配列番号１６５～１７９からなる群から選択したアミノ酸配列を含む、請求項１～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記ＭＭが切断されると、前記活性化可能な抗体が、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、前記アミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、前記アミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＶＥＧＦ阻害剤を有効量、投与することを含む前記方法。

【請求項33】

前記ＶＥＧＦ阻害剤が、フルキンチニブである、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記がんが、大腸癌である、請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記ＶＥＧＦ阻害剤が、アンロチニブである、請求項３２に記載の方法。

【請求項36】

前記がんが、腎臓癌、任意に腎臓腺癌である、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記活性化可能な抗体を前記対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

前記活性化可能な抗体を前記対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、前記アミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）化学療法剤を有効量、投与することを含む前記方法。

【請求項40】

前記化学療法剤が、ドセタキセルである、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

前記がんが、乳癌である、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記化学療法剤が、イカリチンである、請求項３９に記載の方法。

【請求項43】

前記がんが、メラノーマである、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、前記アミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＰＡＲＰ阻害剤を有効量、投与することを含む前記方法。

【請求項45】

前記ＰＡＲＰ阻害剤が、オラパリブである、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記がんが、乳癌である、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

ａ）前記抗体が、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４に、約３５０ｎＭ以下の解離定数（Ｋ_Ｄ）で結合し、
ｂ）前記抗ＣＴＬＡ４抗体の結合により、ＣＴＬＡ４を発現しているヒト細胞またはヒトＴｒｅｇ細胞に対して、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）が誘導され、前記抗ＣＴＬ４抗体のＡＤＣＣ活性が、イピリムマブのＡＤＣＣ活性よりも高く、及び／または
ｃ）ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６をプレートに結合したとき、あるいはヒトＣＴＬＡ４が細胞表面上に存在するときのいずれかのアッセイにおいて、前記抗ＣＴＬＡ４抗体が、ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６のヒトＣＴＬＡ４への結合を遮断するＩＣ５０が、イピリムマブのＩＣ５０よりも高い、
請求項３２～４６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項48】

前記抗体が、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、
ａ）前記重鎖可変領域が、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３を含み、
前記ＨＶＲ－Ｈ１が、
式（Ｉ）：Ｘ１ＴＦＳＸ２ＹＸ３ＩＨＷＶ（配列番号１）（式中、Ｘ１は、ＦまたはＹであり、Ｘ２は、ＤまたはＧであり、Ｘ３は、Ａ、ＧまたはＷである）、
式（ＩＩ）：ＹＳＩＸ１ＳＧＸ２Ｘ３ＷＸ４ＷＩ（配列番号２）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＴであり、Ｘ２は、ＨまたはＹであり、Ｘ３は、ＨまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＤまたはＳである）、及び
式（ＩＩＩ）：ＦＳＬＳＴＧＧＶＡＶＸ１ＷＩ（配列番号３）（式中、Ｘ１は、ＧまたはＳである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
前記ＨＶＲ－Ｈ２が、
式（ＩＶ）：ＩＧＸ１ＩＸ２ＨＳＧＳＴＹＹＳＸ３ＳＬＫＳＲＶ（配列番号４）（式中、Ｘ１は、ＤまたはＥであり、Ｘ２は、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、ＰまたはＱである）、
式（Ｖ）：ＩＧＸ１ＩＳＰＳＸ２ＧＸ３ＴＸ４ＹＡＱＫＦＱＧＲＶ（配列番号５）（式中、Ｘ１は、ＩまたはＷであり、Ｘ２は、ＧまたはＳであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＫまたはＮである）、及び
式（ＶＩ）：ＶＳＸ１ＩＳＧＸ２ＧＸ３Ｘ４ＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ（配列番号６）（式中、Ｘ１は、Ａ、ＧまたはＳであり、Ｘ２は、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＳまたはＴである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
前記ＨＶＲ－Ｈ３が、
式（ＶＩＩ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＦＤＸ５（配列番号７）（式中、Ｘ１は、Ｇ、ＲまたはＳであり、Ｘ２は、Ａ、ＩまたはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、ＶまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＥまたはＹであり、Ｘ５は、ＩまたはＹである）、
式（ＶＩＩＩ）：ＡＲＸ１ＧＸ２ＧＹＦＤＸ３（配列番号８）（式中、Ｘ１は、ＤまたはＬであり、Ｘ２は、ＦまたはＹであり、Ｘ３は、ＶまたはＹである）、
式（ＩＸ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＡＸ５Ｘ６ＦＤＹ（配列番号９）（式中、Ｘ１は、ＬまたはＲであり、Ｘ２は、ＩまたはＰであり、Ｘ３は、ＡまたはＹであり、Ｘ４は、ＳまたはＴであり、Ｘ５は、ＴまたはＹであり、Ｘ６は、ＡまたはＹである）、
式（Ｘ）：ＡＲＤＸ１Ｘ２Ｘ３ＧＳＳＧＹＹＸ４ＧＦＤＸ５（配列番号１０）（式中、Ｘ１は、ＩまたはＶであり、Ｘ２は、ＡまたはＨであり、Ｘ３は、ＰまたはＳであり、Ｘ４は、ＤまたはＹであり、Ｘ５は、ＦまたはＶである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
ｂ）前記軽鎖可変領域が、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、
前記ＨＶＲ－Ｌ１が、
式（ＸＩ）：ＲＡＳＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＳＸ４ＬＸ５（配列番号１１）（式中、Ｘ１は、ＧまたはＳであり、Ｘ２は、ＩまたはＶであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＳまたはＹであり、Ｘ５は、ＡまたはＮである）
式（ＸＩＩ）：ＲＡＳＱＸ１ＶＸ２Ｘ３ＲＸ４ＬＡ（配列番号１２）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＴであり、Ｘ２は、Ｆ、ＲまたはＳであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＦまたはＹである）、及び
式（ＸＩＩＩ）：ＲＡＳＸ１ＳＶＤＦＸ２ＧＸ３ＳＦＬＸ４（配列番号１３）（式中、Ｘ１は、ＥまたはＱであり、Ｘ２は、Ｄ、Ｆ、ＨまたはＹであり、Ｘ３は、Ｆ、ＩまたはＫであり、Ｘ４は、Ａ、ＤまたはＨである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
前記ＨＶＲ－Ｌ２が、式（ＸＩＶ）：Ｘ１ＡＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＧＸ６（配列番号１４）（式中、Ｘ１は、ＡまたはＤであり、Ｘ２は、Ｎ、ＳまたはＴであり、Ｘ３は、ＬまたはＲであり、Ｘ４は、Ａ、ＥまたはＱであり、Ｘ５は、ＳまたはＴであり、Ｘ６は、ＩまたはＶである）によるアミノ酸配列を含み、
前記ＨＶＲ－Ｌ３が、
式（ＸＶ）：ＹＣＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＰＸ７Ｔ（配列番号１５）（式中、Ｘ１は、Ｅ、ＱまたはＶであり、Ｘ２は、ＨまたはＱであり、Ｘ３は、Ａ、Ｇ、Ｈ、ＲまたはＳであり、Ｘ４は、Ｄ、Ｌ、ＳまたはＹであり、Ｘ５は、Ｅ、Ｇ、Ｐ、ＱまたはＳであり、Ｘ６は、Ｌ、Ｔ、ＶまたはＷであり、Ｘ７は、Ｆ、Ｌ、Ｐ、ＷまたはＹである）、
式（ＸＶＩ）：ＹＣＱＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＷＰＰＷＴ（配列番号１６）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＹであり、Ｘ２は、ＤまたはＹであり、Ｘ３は、ＱまたはＹである）、及び
式（ＸＶＩＩ）：ＹＣＱＸ１ＹＸ２ＳＳＰＰＸ３ＹＴ（配列番号１７）（式中、Ｘ１は、ＨまたはＱであり、Ｘ２は、ＴまたはＶであり、Ｘ３は、ＥまたはＶである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含む、
請求項３２～４７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項49】

前記抗体が、
ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｄ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｅ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｆ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｇ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｈ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｉ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｊ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｋ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
ｌ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、または
ｍ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、
を含む、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

前記抗体が、
ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｇ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｈ）配列番号８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｊ）配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｋ）配列番号９２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
ｌ）配列番号９３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
ｍ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む、請求項４８または４９に記載の方法。

【請求項51】

前記抗体が、（ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域、あるいは（ｂ）配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項52】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２０または３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２３または３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項54】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２６または３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項55】

対象においてメラノーマを治療する方法であって、前記対象に、活性化可能な抗体を有効量投与することを含み、前記活性化可能な抗体が、
Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、
前記ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）、及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、式中、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、前記ＣＭが切断されていないときには、前記ＭＭが、前記活性化可能な抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、
前記ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、
ａ）前記ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｂ）前記ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、前記活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、
ｃ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、または
ｄ）前記ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
前記ＣＭが切断されると、前記活性化可能な抗体が、前記ＶＨ及びＶＬを介して、ヒトＣＴＬＡ４に結合する前記方法。

【請求項56】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２０または３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２３または３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項５５に記載の方法。

【請求項58】

前記活性化可能な抗体が、配列番号３２６または３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項５５に記載の方法。

【請求項59】

前記対象が、ヒトである、請求項１～５８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記対象に、少なくとも１つの追加の治療剤を治療有効量投与することをさらに含む、請求項１～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項61】

前記活性化可能な抗体を前記対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項３９～６０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項62】

前記活性化可能な抗体を前記対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項６１に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本願は、２０２１年４月１１日に出願した米国仮特許出願第６３／１７３，４７９号、及び２０２２年１月１８日に出願した同第６３／３００，５６７号の優先権の利益を主張するものであり、これらのそれぞれの内容は、参照により、その全体が本明細書に援用される。

【0002】

本願は、がんの治療分野におけるものであり、ヒト細胞傷害性Ｔリンパ球タンパク質４（ＣＴＬＡ４）に結合する抗体を含む併用療法に関するものである。

【背景技術】

【0003】

細胞傷害性Ｔリンパ球タンパク質４（ＣＴＬＡ４）は、タンパク質の免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーのメンバーのうち、Ｔ細胞の活性化をダウンレギュレートするとともに、免疫原性のホメオスタシスを維持するように作用するメンバーである。同系マウス前立腺癌モデルにおいて、ｉｎ ｖｉｖｏで、抗体の媒介によりＣＴＬＡ４を遮断すると、抗がん免疫応答が増強されることが示されている（Ｋｗｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，９４（１５）：８０９９－１０３）。加えて、腫瘍担持マウスにおいて、ＣＴＬＡ４機能の遮断により、腫瘍成長の様々な段階で、抗腫瘍Ｔ細胞応答が増強されることが示された（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５７（１８）：４０３６－４１、Ｈｕｒｗｉｔｚ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５（１７）：１００６７－７）。しかしながら、ヒトでの使用に適する抗体ベースの治療剤の開発は、依然として困難である。前臨床の動物モデルから、ヒトでの安全性への移行が不良な場合が多いからである。したがって、動物モデル研究を可能にすると同時に、適切なヒト用治療薬候補を提供するために、ヒト及び実験動物（例えば、マウス、サル、ラットなど）のような異なる種の間で交差反応性を有する抗ＣＴＬＡ４抗体に対するニーズが存在する。加えて、プロテアーゼに富む腫瘍微小環境内などの特定の状況でのみ活性を持つ、より安全な抗ＣＴＬＡ４抗体の開発に対するニーズが存在する。

【発明の概要】

【0004】

本開示は、抗ＣＴＬＡ４抗体及び活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体でがんを治療する方法を提供する。本願はさらに、抗ＣＴＬＡ４抗体及び第２の治療剤でがんを治療する方法を提供する。本願はさらに、活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体及び第２の治療剤でがんを治療する方法を提供する。

【0005】

一態様では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）活性化可能な抗体を有効量投与することを含み、その活性化可能な抗体が、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、式中、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、ＣＭが切断されていないときには、ＭＭが、その活性化可能な抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、ａ）ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｂ）ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｃ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、またはｄ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＣＭが切断されると、その活性化可能な抗体が、そのＶＨ及びＶＬを介して、ヒトＣＴＬＡ４に結合する方法である。いくつかの実施形態では、その対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、その対象は、非ヒト動物または非ヒト哺乳動物である。

【0006】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、単剤療法として、それを必要とする患者に投与できる。別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、本明細書に示されているような１つ以上の追加の薬剤と組み合わせて投与できる。いくつかの実施形態では、そのがんは、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、乳癌、メラノーマ、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である。いくつかの実施形態では、その肺癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態では、その結腸直腸癌は、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）結腸直腸癌またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ＋）結腸直腸癌である。いくつかの実施形態では、そのメラノーマは、ぶどう膜（ＵＶ）メラノーマである。

【0007】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体のＭＭはさらに、そのＮ末端に追加のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、その追加のアミノ酸配列は、配列番号１４８のアミノ酸配列を含む。

【0008】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体の第１の切断部位は、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択したプロテアーゼのプロテアーゼ切断部位である。

【0009】

いくつかの実施形態では、そのＣＭはさらに、第１の切断部位のＣ末端側に、第１のリンカー（Ｌ_１）を含む。いくつかの実施形態では、そのＬ_１は、配列番号１５６～１６３からなる群から選択したアミノ酸配列を含む。

【0010】

いくつかの実施形態では、そのＣＭはさらに、第２の切断部位を含む。いくつかの実施形態では、その第２の切断部位は、Ｌ_１のＣ末端側である。いくつかの実施形態では、その第２の切断部位は、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択したプロテアーゼのプロテアーゼ切断部位である。いくつかの実施形態では、第１の切断部位と第２の切断部位は、異なっている。

【0011】

いくつかの実施形態では、そのＣＭはさらに、第２の切断部位のＣ末端側に、第２のリンカー（Ｌ_２）を含む。いくつかの実施形態では、そのＬ_２は、配列番号１５６～１６３からなる群から選択したアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、そのＣＭはさらに、第１の切断部位のＮ末端側に、第３のリンカー（Ｌ_３）を含む。

【0012】

いくつかの実施形態では、そのＣＭは、少なくとも第１のプロテアーゼ切断部位を含み、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ－１（ＭＭＰ－１）、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥからなる群から選択した１つ以上のプロテアーゼによって切断される。

【0013】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１６５～１７９からなる群から選択したアミノ酸配列を含む。

【0014】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１８９～１９６からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを有する。別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号２１３～２１６からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを含む。別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１４１～１４７からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを含む。特定の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号２００のアミノ酸配列のＭＭを含む。

【0015】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１９７～２０９からなる群から選択したアミノ酸配列の、ＭＭ／ＣＭの組み合わせを含む。特定の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１９２のアミノ酸配列の、ＭＭ／ＣＭの組み合わせを有する。

【0016】

いくつかの実施形態では、ＭＭが切断されると、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングは、配列番号２０７に従うものである。

【0017】

いくつかの実施形態では、ＭＭが切断されると、ａ）その切断済みの抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４に、約３５０ｎＭ以下の解離定数（Ｋ_Ｄ）で結合し、ｂ）その抗ＣＴＬＡ４抗体の結合により、ＣＴＬＡ４を発現しているヒト細胞またはヒトＴｒｅｇ細胞に対して、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）が誘導され、その抗ＣＴＬ４抗体のＡＤＣＣ活性は、イピリムマブのＡＤＣＣ活性よりも高く、及び／またはｃ）ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６をプレートに結合したとき、あるいはヒトＣＴＬＡ４が細胞表面上に存在するときのアッセイにおいて、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６のヒトＣＴＬＡ４への結合を遮断する際のＩＣ５０が、イピリムマブのＩＣ５０よりも高い。

【0018】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ａ）その重鎖可変領域は、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＨＶＲ－Ｈ１は、
式（Ｉ）：Ｘ１ＴＦＳＸ２ＹＸ３ＩＨＷＶ（配列番号１）（式中、Ｘ１は、ＦまたはＹであり、Ｘ２は、ＤまたはＧであり、Ｘ３は、Ａ、ＧまたはＷである）、
式（ＩＩ）：ＹＳＩＸ１ＳＧＸ２Ｘ３ＷＸ４ＷＩ（配列番号２）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＴであり、Ｘ２は、ＨまたはＹであり、Ｘ３は、ＨまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＤまたはＳである）、及び
式（ＩＩＩ）：ＦＳＬＳＴＧＧＶＡＶＸ１ＷＩ（配列番号３）（式中、Ｘ１は、ＧまたはＳである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
そのＨＶＲ－Ｈ２は、
式（ＩＶ）：ＩＧＸ１ＩＸ２ＨＳＧＳＴＹＹＳＸ３ＳＬＫＳＲＶ（配列番号４）（式中、Ｘ１は、ＤまたはＥであり、Ｘ２は、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、ＰまたはＱである）、
式（Ｖ）：ＩＧＸ１ＩＳＰＳＸ２ＧＸ３ＴＸ４ＹＡＱＫＦＱＧＲＶ（配列番号５）（Ｘ１は、ＩまたはＷであり、Ｘ２は、ＧまたはＳであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＫまたはＮである）、及び
式（ＶＩ）：ＶＳＸ１ＩＳＧＸ２ＧＸ３Ｘ４ＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ（配列番号６）（式中、Ｘ１は、Ａ、ＧまたはＳであり、Ｘ２は、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＳまたはＴである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
そのＨＶＲ－Ｈ３は、
式（ＶＩＩ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＦＤＸ５（配列番号７）（式中、Ｘ１は、Ｇ、ＲまたはＳであり、Ｘ２は、Ａ、ＩまたはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、ＶまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＥまたはＹであり、Ｘ５は、ＩまたはＹである）、
式（ＶＩＩＩ）：ＡＲＸ１ＧＸ２ＧＹＦＤＸ３（配列番号８）（式中、Ｘ１は、ＤまたはＬであり、Ｘ２は、ＦまたはＹであり、Ｘ３は、ＶまたはＹである）、
式（ＩＸ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＡＸ５Ｘ６ＦＤＹ（配列番号９）（式中、Ｘ１は、ＬまたはＲであり、Ｘ２は、ＩまたはＰであり、Ｘ３は、ＡまたはＹであり、Ｘ４は、ＳまたはＴであり、Ｘ５は、ＴまたはＹであり、Ｘ６は、ＡまたはＹである）、
式（Ｘ）：ＡＲＤＸ１Ｘ２Ｘ３ＧＳＳＧＹＹＸ４ＧＦＤＸ５（配列番号１０）（式中、Ｘ１は、ＩまたはＶであり、Ｘ２は、ＡまたはＨであり、Ｘ３は、ＰまたはＳであり、Ｘ４は、ＤまたはＹであり、Ｘ５は、ＦまたはＶである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
ｂ）その軽鎖可変領域は、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、
そのＨＶＲ－Ｌ１は、
式（ＸＩ）：ＲＡＳＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＳＸ４ＬＸ５（配列番号１１）（式中、Ｘ１は、ＧまたはＳであり、Ｘ２は、ＩまたはＶであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＳまたはＹであり、Ｘ５は、ＡまたはＮである）
式（ＸＩＩ）：ＲＡＳＱＸ１ＶＸ２Ｘ３ＲＸ４ＬＡ（配列番号１２）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＴであり、Ｘ２は、Ｆ、ＲまたはＳであり、Ｘ３は、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＦまたはＹである）、及び
式（ＸＩＩＩ）：ＲＡＳＸ１ＳＶＤＦＸ２ＧＸ３ＳＦＬＸ４（配列番号１３）（式中、Ｘ１は、ＥまたはＱであり、Ｘ２は、Ｄ、Ｆ、ＨまたはＹであり、Ｘ３は、Ｆ、ＩまたはＫであり、Ｘ４は、Ａ、ＤまたはＨである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、
そのＨＶＲ－Ｌ２は、式（ＸＩＶ）：Ｘ１ＡＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＧＸ６（配列番号１４）（式中、Ｘ１は、ＡまたはＤであり、Ｘ２は、Ｎ、ＳまたはＴであり、Ｘ３は、ＬまたはＲであり、Ｘ４は、Ａ、ＥまたはＱであり、Ｘ５は、ＳまたはＴであり、Ｘ６は、ＩまたはＶである）によるアミノ酸配列を含み、
そのＨＶＲ－Ｌ３は、
式（ＸＶ）：ＹＣＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＰＸ７Ｔ（配列番号１５）（式中、Ｘ１は、Ｅ、ＱまたはＶであり、Ｘ２は、ＨまたはＱであり、Ｘ３は、Ａ、Ｇ、Ｈ、ＲまたはＳであり、Ｘ４は、Ｄ、Ｌ、ＳまたはＹであり、Ｘ５は、Ｅ、Ｇ、Ｐ、ＱまたはＳであり、Ｘ６は、Ｌ、Ｔ、ＶまたはＷであり、Ｘ７は、Ｆ、Ｌ、Ｐ、ＷまたはＹである）、
式（ＸＶＩ）：ＹＣＱＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＷＰＰＷＴ（配列番号１６）（式中、Ｘ１は、ＳまたはＹであり、Ｘ２は、ＤまたはＹであり、Ｘ３は、ＱまたはＹである）、及び
式（ＸＶＩＩ）：ＹＣＱＸ１ＹＸ２ＳＳＰＰＸ３ＹＴ（配列番号１７）（式中、Ｘ１は、ＨまたはＱであり、Ｘ２は、ＴまたはＶであり、Ｘ３は、ＥまたはＶである）、
からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含む。

【0019】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ａ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｂ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｄ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｅ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｆ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｇ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｈ）配列番号２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｉ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｊ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｋ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、ｌ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３、またはｍ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0020】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、切断されると、ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｇ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｈ）配列番号８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｊ）配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｋ）配列番号９２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、ｌ）配列番号９３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、またはｍ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0021】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、切断されると、（ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域、あるいは（ｂ）配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0022】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号３２０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２０または３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２３または３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２６または３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0023】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、その対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかのこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、３週間に１回投与する。

【0024】

別の態様では、本発明で提供するのは、対象においてメラノーマを治療する方法であって、その対象に、活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体を有効量投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、単剤療法として投与する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、その対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、その対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、その対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、その対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、３週間に１回投与する。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗体は、配列番号３２０または３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２３または３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗体は、配列番号３２６または３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、その対象は、非ヒト動物または非ヒト哺乳動物である。

【0025】

いくつかの実施形態では、本開示の抗ＣＴＬＡ４抗体及び活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、対象に、ＰＤ－１阻害剤（例えば抗ＰＤ－１抗体）と組み合わせて投与する。いくつかのこのような実施形態では、その抗ＰＤ１抗体は、２Ｅ５である。別のこのような実施形態では、その抗ＰＤ１抗体は、トリパリマブである。別のこのような実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブである。いくつかの実施形態では、その対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、その対象は、非ヒト動物または非ヒト哺乳動物である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体とＰＤ－１阻害剤（例えば抗ＰＤ－１抗体）との組み合わせは、組み合わせて投与すると、相乗効果が見られる。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、切断されると、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体である。

【0026】

いくつかの実施形態では、本開示の抗ＣＴＬＡ４抗体及び活性化可能なＣＴＬＡ４抗体は、対象に、抗ＣＤ１３７抗体と組み合わせて投与し、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７の細胞外ドメインに特異的に結合し、その抗体は、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６２～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９５～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に結合する。いくつかの実施形態では、その対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、その対象は、非ヒト動物または非ヒト哺乳動物である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体と抗ＣＤ１３７抗体との組み合わせは、組み合わせて投与すると、相乗効果が見られる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１４番目のアミノ酸残基に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、そのＶＨは、配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＶＬは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、その重鎖は、配列番号２４０のアミノ酸配列を含み、及び／またはその軽鎖は、配列番号２４１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＶＬは、配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0027】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２４８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２４９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、その重鎖は、配列番号２５０のアミノ酸配列を含み、及び／またはその軽鎖は、配列番号２５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＶＬは、配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２５８のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、重鎖及び軽鎖を含み、その重鎖は、配列番号２６０のアミノ酸配列を含み、及び／またはその軽鎖は、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域を含み、任意に、そのヒトＩｇＧ４のＦｃ領域は、Ｓ２４１Ｐという変異を含み、ナンバリングは、Ｋａｂａｔに従うものである。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、切断されると、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体である。

【0028】

別の態様では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体）のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＶＥＧＦ阻害剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、そのＶＥＧＦ阻害剤は、フルキンチニブである。いくつかの実施形態では、そのがんは、大腸癌である。いくつかの実施形態では、そのＶＥＧＦ阻害剤は、アンロチニブである。いくつかの実施形態では、そのがんは、腎臓癌、任意に腎臓腺癌である。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、切断されると、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体である。

【0029】

ある態様では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体）のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）化学療法剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、その化学療法剤は、ドセタキセルである。いくつかの実施形態では、そのがんは、乳癌である。いくつかの実施形態では、その化学療法剤は、イカリチンである。いくつかの実施形態では、そのがんは、メラノーマである。

【0030】

別の態様では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体）のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＰＡＲＰ阻害剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、そのＰＡＲＰ阻害剤は、オラパリブである。いくつかの実施形態では、そのがんは、乳癌である。

【0031】

上記方法のうちのいずれか１つによるいくつかの実施形態では、そのがんは、従来の療法に耐性または不応性があり、その従来の療法は、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＰＤ－１リガンドの阻害剤である。いくつかの実施形態では、その対象は、従来の療法に耐性があるか、または従来の療法を受けてから再発した者であり、その従来の療法は、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＰＤ－１リガンドの阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えばイピリムマブのようなＣＴＬＡ４阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、抗ＰＤ－１抗体、例えば、ペムブロリズマブまたはトリパリマブのようなＰＤ－１阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、ＰＤ－１リガンド（例えばＰＤ－Ｌ１）阻害剤、例えば抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、その従来の療法には、ＣＴＬＡ４阻害剤及びＰＤ－１阻害剤の両方が含まれる。いくつかの実施形態では、その従来の療法には、ＣＴＬＡ４阻害剤及びＰＤ－Ｌ１阻害剤の両方が含まれる。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＭＭが切断されると、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域、例えば、野生型ＩｇＧ１のＦｃ領域、またはＡＤＣＣ活性が増強されているバリアントを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域、例えば、野生型ＩｇＧ１のＦｃ領域、またはＡＤＣＣ活性が増強されているバリアントを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗体は、配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列、または配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列、または配列番号３２２のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0032】

上記及び本明細書に記載の様々な実施形態の特性のうちの１つ、一部またはすべてを組み合わせて、本願の別の実施形態を形成してもよいことを理解されたい。本願これらの態様及び別の態様は、当業者には明らかであろう。本願のこれらの実施形態及びその他の実施形態は、下記の詳細な説明によって、さらに説明されている。
本特許または本出願ファイルは、カラーで作成された図面を少なくとも１つ含む。カラー図面（複数可）を含む、本特許または本特許出願公開のコピーは、要請かつ必要な料金の支払いがあれば、特許庁が提供するであろう。

【図面の簡単な説明】

【0033】

【図1】共有結合したＮ末端ペプチドによってマスキングされたＳＡＦＥｂｏｄｙの概略図を示しており、そのペプチドの後には、プロテアーゼ切断部位が続いている。正常組織では、ＳＡＦＥｂｏｄｙは、マスキングされたままであり、その標的に結合できない。しかしながら、活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体ＴＹ２２４０４に関して後述されているように、腫瘍微小環境では、そのマスクが、様々な腫瘍組織で過剰発現するプロテアーゼによって切断され、その結果、そのＳＡＦＥｂｏｄｙが活性化され、その標的に結合可能となる。ＴＹ２２４０４の完全重鎖については配列番号３２０を、完全軽鎖（マスク／リンカーを含む）については配列番号３２２を参照されたい。

【図2】ＣＴＬＡ４／Ｂ７リガンドの相互作用を遮断して、Ｔ細胞の活性化を高める（例えば、Ｒｏｗｓｈａｎｒａｖａｎ ｅｔ ａｌ．ＣＴＬＡ４：ａ ｍｏｖｉｎｇ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｂｌｏｏｄ ２０１８，１３１：５８を参照されたい）とともに、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）で、ＡＤＣＣ／ＡＤＣＰを通じて免疫抑制性のＴｒｅｇ細胞を枯渇させ、その結果、全体的な抗腫瘍免疫応答を増強させる活性化ＴＹ２２４０４の作用機序を示す概略図を示す。

【図3】ＴＹ２２４０４ ＳＡＦＥｂｏｄｙの標的結合部位が、高度にマスキングされており、低濃度（ｎＭ単位前後）では、ＣＴＬＡ４タンパク質に微弱にしか結合しないが、かなり高い濃度（ｎＭ単位よりも高いｕＭ単位またはサブミクロンＭ単位）では、標的と結合できることを示す。しかしながら、プロテアーゼが、そのマスキングペプチドを切断すると、ＴＹ２２４０４は活性化されて、ヒト、サル及び齧歯動物由来の異種間のＣＴＬＡ４タンパク質に高い親和性で結合できる。

【図4】抗ＣＴＬＡ４の媒介による、ＣＤ２８シグナル伝達の活性化を評価するために用いた、細胞ベースのＣＴＬＡ４遮断バイオアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）の結果を示す。プロテアーゼにより活性化されるＴＹ２２４０４は、イピリムマブよりも穏やかなＣＴＬＡ４チェックポイント阻害剤であった。

【図5】ＣＴＬＡ４を発現している標的細胞と、Ｊｕｒｋａｔ ＮＦＡＴ－Ｌｕｃ／ＣＤ１６レポーター細胞を用いて、ＴＹ２２４０４の媒介による、ＡＤＣＣシグナル伝達の活性化を評価したｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＤＣＣレポーターアッセイの結果を示す。プロテアーゼにより活性化されたＴＹ２２４０４では、イピリムマブよりも強いＡＤＣＣシグナル伝達活性が見られるが、マスキングペプチド－インタクトＴＹ２２４０４では見られない。

【図6】Ｔ細胞活性化の関数として測定したＩＬ－２レベルを示す。プロテアーゼにより活性化されたＴＹ２２４０４は、ＳＥＡ（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ Ａ）により誘導される、ヒトＴ細胞の活性化を増強できるが、マスキングペプチド－インタクトＴＹ２２４０４は増強できない。

【図7】マウス肝臓モデル及びマウス大腸癌モデルで試験したＴＹ２２４０４（５ｍｇ／ｋｇ）を示し、単剤として、同系マウス腫瘍モデルにおいて、ｉｎ ｖｉｖｏで有効な抗腫瘍活性が示された。

【図8】マウスＬｅｗｉｓ肺癌モデルにおいて、抗ＰＤ－１と組み合わせたところ、ｉｎ ｖｉｖｏで有効な抗腫瘍活性を示したＴＹ２２４０４（２ｍｇ／ｋｇ）を示す。

【図9】ＣＴ２６大腸腫瘍モデルにおいて、腫瘍組織内のＴｒｅｇ細胞は、ＣＴＬＡ４の発現が末梢組織よりも高く、ＴＹ２２４０４（５ｍｇ／ｋｇ）によって治療すると、効率的に枯渇されることを示す。

【図10】Ｌｅｗｉｓがんモデルにおいて、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の作用を示す。

【図11】４Ｔ１がんモデルにおいて、抗ＣＤ１３７抗体ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の作用を示す。

【図12A】ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図12B】ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図13A】ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図13B】ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図14A】ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図14B】ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図15】４Ｔ１マウス乳癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図16】４Ｔ１マウス乳癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図17】Ｂ１６Ｆ１０同系マウスメラノーマモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図18A】Ａ２０がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図18B】Ａ２０がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図19A】ＥＭＴ６がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図19B】ＥＭＴ６がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の作用を示す。

【図20A】ＣＴ２６大腸癌モデルにおいて、ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図20B】ＣＴ２６大腸癌モデルにおいて、ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図21A】ＣＴ２６がんモデルにおいて、フルキンチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図21B】ＣＴ２６がんモデルにおいて、フルキンチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図22A】Ｒｅｎｃａがんモデルにおいて、アンロチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図22B】Ｒｅｎｃａがんモデルにおいて、アンロチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図23A】４Ｔ１がんモデルにおいて、ドセタキセルと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図23B】４Ｔ１がんモデルにおいて、ドセタキセルと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図24A】ＥＭＴ６がんモデルにおいて、オラパリブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図24B】ＥＭＴ６がんモデルにおいて、オラパリブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図25】ＭＣ３８がんモデルにおいて、抗体ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の作用を示す。

【図26】Ｂ１６Ｆ１０同系マウスメラノーマモデルにおいて、イカリチン（「ＳＮＧ１６２」）及び／またはＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の作用を示す。

【図27】ＣＴＬＡ４陰性Ｈ２２腫瘍及びＣＴＬＡ４陽性Ｈ２２腫瘍の両方を担持しているマウスにおけるＴＹ２２４０４及びＴＹ２１５８０のｉｎ ｖｉｖｏイメージング結果を示す。

【図28】マウス（左）及びカニクイザル（右）において、ＴＹ２１５８０とＴＹ２２４０４の薬物動態を比較したものを示す。

【図29】ヒト患者において、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙの投与結果を調べた第１相用量漸増試験のデザインを示す。疾患の進行または許容できない毒性が生じるまで、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙを３週間に１回、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇで投与し、所定の適応症において、コホート拡大を、ＳＲＣ推奨の１０ｍｐｋで行い、６ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、抗ＰＤ１と併用し、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、ＡＤＧ１０６と併用した。

【図30】ヒト患者において、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙの投与結果を調べた第１相用量漸増試験のデザインを示す。疾患の進行または許容できない毒性が生じるまで、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙを３週間に１回、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇで投与し、所定の適応症において、コホート拡大を、ＳＲＣ推奨の１０ｍｐｋで行い、６ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、抗ＰＤ１と併用し、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、ＡＤＧ１０６と併用した。

【図31】抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙにおける治療関連の安全性プロファイルを示す。２０２１年１１月３０日時点で、１６人の患者を５つの用量漸増コホート（０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇ）で治療した。抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙは、十分な忍容性が示され、グレード３以上の有害事象（グレード３の疲労感）は１人のみで、１０人は、グレード１の有害事象に留まった。

【図32A】５ラインの前治療を受けた卵巣癌患者であって、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙによる治療２サイクル後ごとの腫瘍評価のそれぞれに、腫瘍の持続的な収縮が見られた患者の症例研究結果である。

【図32B】前治療において、イピリムマブ＋ニボルマブに効力がなかったぶどう膜（ＵＶ）メラノーマ患者であって、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙによる治療の後に、Ｔ細胞の活性化と、－２４％の腫瘍収縮が見られた患者の症例研究結果である。

【図33】治療過程におけるがん患者の血清中の炎症性サイトカインＩＦＮ－γの動的な変化を示す。

【図34】治療過程におけるがん患者の血清中の炎症性サイトカインＴＮＦ－αの変化を示す。

【図35A】抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙで治療した患者の末梢血液試料の免疫細胞亜集団（ＣＤ４＋ ヘルパーＴ細胞）の絶対数の、ベースレベル（サイクル１の１日目の投与前）に対する変化を示す。

【図35B】抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙで治療した患者の末梢血液試料の免疫細胞亜集団（ＣＤ８＋ 細胞傷害性Ｔ細胞）の絶対数の、ベースレベル（サイクル１の１日目の投与前）に対する変化を示す。

【図35C】抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙで治療した患者の末梢血液試料の免疫細胞亜集団（ＮＫ細胞）の絶対数の、ベースレベル（サイクル１の１日目の投与前）に対する変化を示す。

【図36】ＴＹ２２４０４のボーラス注射後、投与から２４時間の時点には、３匹中２匹のマウスの腫瘍において、活性化可能な全抗ＣＴＬＡ４抗体ＴＹ２２４０４の約半分である切断形態が検出されたが、肝臓及び血漿では検出されなかったことを示す。しかしながら、投与から９６時間の時点には、３匹すべてのマウス（４～６とラベル付けした）から採取した腫瘍、肝臓及び血漿を含むすべての試料において、ＴＹ２２４０４の切断形態が観察された。

【図37】活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体ＴＹ２２４０４が、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）において、アイソタイプコントロールと比べて、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージを用量依存的に、有意に低下させたことを示す。しかしながら、ＴＹ２２４０４は、脾臓では、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージを低下させなかった。

【図38】ＴＹ２２４０４による治療後に、ＴＩＬにおけるＴｒｅｇ細胞上のＣＴＬＡ－４発現レベルが、用量依存的に有意に低下したことを示す。しかしながら、ＴＹ２２４０４による治療後、脾臓のＴｒｅｇ細胞上では、ＣＴＬＡ－４発現レベルは変化しなかった。

【発明を実施するための形態】

【0034】

Ｉ．定義
本明細書で別段に定義されていない限り、本願に関連して用いられている科学用語及び技術用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈によって別段に必要とされない限り、単数形の用語には、複数形の用語が含まれるものとし、複数形の用語には、単数形の用語が含まれるものとする。概して、本明細書に記載の抗体操作、免疫療法、細胞及び組織の培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学、ならびにタンパク質及び核酸の化学に関連して用いられている命名法、ならびにそれらの技法は、当該技術分野において周知かつ一般的に用いられているものである。

【0035】

「抗体」という用語は、本明細書では最も広い意味で用いられており、具体的には、所望の生物学的活性を示す限りは、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体、三重特異性抗体）、ならびに抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ及び／または一本鎖可変断片、すなわちｓｃＦｖ）が網羅される。

【0036】

いくつかの実施形態では、「抗体」という用語は、２本の同じ重（Ｈ）鎖と２本の同じ軽（Ｌ）鎖からなる基本的な４本のポリペプチド鎖構造を有する抗原結合タンパク質（すなわち免疫グロブリン）を指す。各Ｌ鎖は、１つのジスルフィド共有結合によって、Ｈ鎖に連結されている一方で、２本のＨ鎖は、Ｈ鎖のアイソタイプに応じて、１つ以上のジスルフィド結合によって、互いに連結している。各重鎖は、Ｎ末端に可変領域（本明細書では、Ｖ_Ｈと略称する）を有し、その後に定常領域が続く。重鎖定常領域は、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２及びＣ_Ｈ３という３つのドメインからなる。各軽鎖は、Ｎ末端に可変領域（本明細書では、Ｖ_Ｉと略称する）を有し、もう一方の末端に、定常領域が続く。軽鎖定常領域は、Ｃ_Ｌという１つのドメインからなる。Ｖ_Ｌは、Ｖ_Ｈと並列しており、Ｃ_Ｌは、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）と並列している。Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌの対合により、１つの抗原結合部位が形成される。ＩｇＭ抗体は、Ｊ鎖と呼ばれる追加のポリペプチドとともに、５個の基本的なヘテロ四量体ユニットからなり、すなわち、１０個の抗原結合部位を含む一方で、分泌型ＩｇＡ抗体は、重合して、Ｊ鎖とともに、基本的な４本鎖ユニットを２～５個含む多価の集合体を形成できる。

【0037】

Ｖ_Ｈ領域及びＶ_Ｌ領域は、構造解析及び配列解析に基づいて、超可変領域（ＨＶＲ）という超可変性の領域にさらに細分化できる。ＨＶＲは、フレームワーク領域（ＦＷ）という、より保存性の高い領域に挟まれている（例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９９）２９３，８６５－８８１を参照されたい）。それぞれのＶ_Ｈ及びＶ_Ｌは、３つのＨＶＲ及び４つのＦＷからなり、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＷ－１＿ＨＶＲ－１＿ＦＷ－２＿ＨＶＲ－２＿ＦＷ－３＿ＨＶＲ－３＿ＦＷ４という順序で並んでいる。本願全体を通じて、重鎖の３つのＨＶＲは、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３という。同様に、軽鎖の３つのＨＶＲは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３という。

【0038】

本明細書で使用する場合、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見られる不連続の抗原結合部位を意味するように意図されている。これらの具体的な領域は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８（１９９７）、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）、Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２７：５５－７７（２００３）及びＨｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３０９：６５７－６７０（２００１）によって説明されており、その定義には、互いに比較したときに、重複しているアミノ酸残基またはアミノ酸残基のサブセットが含まれる。しかしその一方で、抗体もしくは移植抗体、またはそのバリアントのＣＤＲを指すいずれかの定義を適用することも、本明細書で定義及び使用されているその用語の範囲内であるように意図されている。上で引用した各参照文献によって定義されているようなＣＤＲを網羅するアミノ酸残基は、比較として、下記の表Ｉに示されている。ＣＤＲ予測のアルゴリズム及びインターフェースは、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）、Ｅｈｒｅｎｍａｎｎ Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，３８：Ｄ３０１－Ｄ３０７（２０１０）、及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含め、当該技術分野で知られている。この段落で引用した参照文献の内容は、本発明での使用のため、及び本発明における１つ以上の請求項に含まれる可能性のために、参照により、その全体が本明細書に援用される。

【表1】

【0039】

重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えばエフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃｌｑ）を含む宿主組織または宿主因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。軽鎖及び重鎖においては、可変領域及び定常領域が、約１２個以上のアミノ酸からなる「Ｊ」領域によって連結されており、重鎖は、約１０個以上のアミノ酸からなる「Ｄ」領域も含む（例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２^ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ）．（１９８９）を参照されたい）。

【0040】

いずれかの脊椎動物種に由来するＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、明らかに異なる２つの種類（κ及びλという）のうちの１つに割り当てることができる。抗体は、それらの重鎖（ＣＨ）の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てることができる。ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭという５つのクラスの抗体があり、ＩｇＡはα（アルファ）、ＩｇＤはδ（デルタ）、ＩｇＥはε（イプシロン）、ＩｇＧはγ（ガンマ）、ＩｇＭはμ（ミュー）と呼ばれる重鎖を有する。ＩｇＧクラスの抗体はさらに、Ｙ１～Ｙ４のγ重鎖によって、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４という４つのサブクラスに分類することができる。

【0041】

「抗体誘導体」または抗体の「誘導体」という用語は、その抗体が結合する抗原と同じ抗原（例えばＣＴＬＡ４）に結合できるとともに、追加の分子体に連結された抗体のアミノ酸配列を含む分子を指す。抗体のアミノ酸配列のうち、抗体誘導体に含まれるアミノ酸配列は、抗体の完全長重鎖、完全長軽鎖、完全長重鎖のいずれかの部分（複数可）、完全長軽鎖のいずれかの部分（複数可）、抗体のいずれかの他の断片（複数可）、または完全抗体であってよい。その追加の分子体は、化学分子または生体分子であってよい。追加の分子体の例としては、化学基、アミノ酸、ペプチド、タンパク質（酵素、抗体など）及び化学化合物が挙げられる。その追加の分子体は、検出剤、標識、マーカー、医薬または治療剤としての用途のようないずれかの有用性を有してよい。抗体のアミノ酸配列は、化学的カップリング、遺伝子融合、非共有的会合などによって、その追加の分子体に結合または連結されていてよい。「抗体誘導体」という用語には、キメラ抗体、ヒト化抗体、ならびにＣＴＬＡ４抗体のアミノ酸配列の改変、例えば、アミノ酸の保存的な置換、付加及び挿入に由来する分子も含まれる。

【0042】

抗体の「抗原結合断片」または「抗原結合部分」という用語は、その抗体が結合する抗原（例えばＣＴＬＡ４）に結合する能力を保持する１つ以上の抗体部分を指す。抗体の「抗原結合断片」の例としては、（ｉ）Ｖ_Ｌドメイン、Ｖ_Ｈドメイン、Ｃ_Ｌドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ’）_２断片、（ｉｉｉ）Ｖ_Ｈドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一アームのＶ_Ｌドメイン及びＶ_ＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）Ｖ_ＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４－５４６（１９８９））、ならびに（ｖｉ）単離相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。

【0043】

「ＣＴＬＡ４」という用語が本願で使用されており、ＣＴＬＡ４には、ヒトＣＴＬＡ４（例えばＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ１６４１０）、ならびにそのバリアント、アイソフォーム及び種ホモログ（例えば、マウスＣＴＬＡ４（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０９７９３）、ラットＣＴＬＡ４（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｑ９Ｚ１Ａ７）、イヌＣＴＬＡ４（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｑ９ＸＳＩ１）、カニクイザルＣＴＬＡ４（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｇ７ＰＬ８８）など）が含まれる。したがって、本明細書において定義及び開示されているような抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、ヒト以外の種のＣＴＬＡ４にも結合し得る。別の場合では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＴＬＡ４に完全に特異的であってもよく、種間交差反応性またはその他の種類の交差反応性を示さない場合がある。

【0044】

「ＣＴＬＡ４抗体」という用語は、本明細書で定義されているように、ヒトＣＴＬＡ４に結合できる抗体（例えば、活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体）を指す。

【0045】

「キメラ抗体」という用語は、ヒト抗体に由来する可変領域、及びマウス免疫グロブリンの定常領域を有する抗体のように、異なる動物種に由来するアミノ酸配列を含む抗体を指す。

【0046】

「結合に関して競合する」という用語は、２つの抗体が、結合標的への結合の際に示す相互作用を指す。第１の抗体とそのコグネイトエピトープとの結合が、第２の抗体の存在下において、第２の抗体の非存在下での第１の抗体の結合と比べて、検出可能に低下する場合には、第１の抗体は第２の抗体と、結合に関して競合する。第１の抗体の存在下において、第２の抗体とそのエピトープとの結合が、検出可能に低下する代替的なケースも見られるが、必ずしもそうである必要はない。すなわち、第１の抗体は、第１の抗体とそのそれぞれのエピトープとの結合を第２の抗体が阻害することなく、第２の抗体とそのエピトープとの結合を阻害することができる。しかしながら、それぞれの抗体が、他の抗体とそのコグネイトエピトープとの結合を検出可能に阻害する場合、程度が同じか、大きいか、小さいかに関わらず、それらの抗体は、それらのそれぞれのエピトープ（複数可）の結合に関して、互いに「交差競合する」と言う。

【0047】

「エピトープ」という用語は、抗体（またはその抗原結合断片）が結合する抗原部分を指す。エピトープは、連続するアミノ酸、またはタンパク質が三次構造に折り畳まれることにより並置された不連続なアミノ酸の両方から形成されることができる。連続するアミノ酸から形成されたエピトープは典型的には、変性溶媒に暴露されても維持されるが、三次構造に折り畳まれることにより形成されたエピトープは典型的には、変性溶媒で処理すると失われる。エピトープは、特有の空間的コンホメーションで、様々な数のアミノ酸を含むことができる。エピトープの空間的コンホメーションを求める方法としては、例えば、Ｘ線結晶解析、二次元核磁気共鳴、質量分析と組み合わせた重水素水素交換、もしくは部位特異的変異誘発、または抗原ならびにその結合抗体及びそのバリアントとの複合体構造の計算モデリングと組み合わせて用いるあらゆる方法が挙げられる（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇ．Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．（１９９６）を参照されたい）。抗原の所望のエピトープが決定したら、例えば、本明細書に記載の技法を用いて、そのエピトープに対する抗体を生成することができる。抗体の生成と特性解析により、所望のエピトープに関する情報を解明できる。この情報から、同じエピトープへの結合について、抗体を競合的にスクリーニングすることができる。これを行うためのアプローチは、交差競合試験を実施して、互いに競合的に結合する抗体、すなわち、抗原への結合に関して競合する抗体を見出すことである。抗体の交差競合に基づいて、抗体を「ビニング」するハイスループットなプロセスは、国際公開番号第ＷＯ０３／４８７３１号に記載されている。

【0048】

「糖鎖付加部位」という用語は、糖残基の結合位置として、真核細胞に認識されるアミノ酸残基を指す。オリゴ糖のような糖鎖が結合するアミノ酸は典型的には、アスパラギン残基（Ｎ－結合型）、セリン残基（Ｏ－結合型）及びトレオニン残基（Ｏ－結合型）である。具体的な結合部位は典型的には、本明細書で「糖鎖付加部位配列」と呼ばれるアミノ酸配列によってシグナル伝達される。Ｎ－結合型糖鎖付加の糖鎖付加部位配列は、－Ａｓｎ－Ｘ－Ｓｅｒ－または－Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ－であり、式中、Ｘは、プロリン以外の従来のアミノ酸のいずれかであってよい。「Ｎ－結合型」及び「Ｏ－結合型」という用語は、糖分子とアミノ酸残基との結合部位として機能する化学基を指す。Ｎ－結合型の糖は、アミノ基を介して結合し、Ｏ－結合型の糖は、ヒドロキシル基を介して結合する。「グリカン占有数」という用語は、糖鎖付加部位に連結された糖鎖部分が存在すること（すなわち、グリカン部位が占有されていること）を指す。ポリペプチドに、潜在的な糖鎖付加部位が少なくとも２つある場合には、糖鎖部分によって占有されている部位がない（グリカン部位占有数が０である）か、１つである（グリカン部位占有数が１である）か、または両方である（グリカン部位占有数が２である）ことができる。

【0049】

「宿主細胞」という用語は、目的のタンパク質、タンパク質断片またはペプチドを産生するように操作できる細胞系を指す。宿主細胞としては、培養細胞、例えば、ＣＨＯ、ＢＨＫ、ＮＳＯ、ＳＰ２／０、ＹＢ２／０のように、齧歯動物（ラット、マウス、モルモットもしくはハムスター）に由来する哺乳動物培養細胞、ヒト細胞（例えば、ＨＥＫ２９３Ｆ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞）もしくはヒト組織、またはハイブリドーマ細胞、酵母細胞、昆虫細胞（例えばＳ２細胞）、細菌細胞（例えばＥ．ｃｏｌｉ細胞）、及びトランスジェニック動物もしくは培養組織に含まれる細胞が挙げられるが、これらに限定されない。この用語には、特定の対象細胞のみではなく、そのような細胞の子孫も含まれる。後続の世代においては、変異または環境的影響のいずれかに起因して、ある特定の変化が生じ得るため、そのような子孫は、親細胞と同一でない場合があるが、「宿主細胞」という用語の範囲内に依然として含まれる。

【0050】

「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞によって産生される抗体、またはヒト抗体レパートリーもしくはその他のヒト抗体をコードする配列を利用する非ヒト供給源に由来する抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義では、非ヒトの抗原結合残基を含むヒト化抗体が明確に除外される。

【0051】

「ヒト化抗体」という用語は、ヒト抗体の配列に由来するアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。ヒト化抗体は、非ヒト動物または合成抗体のＣＤＲまたはＨＶＲの一部または全部を含んでよい一方で、その抗体のフレームワーク及び定常領域は、ヒト抗体配列に由来するアミノ酸残基を含む。

【0052】

「例示的な抗体」という用語は、本開示で説明されているとともに、表Ａ及びＢに列挙されている抗体として定められた抗体、ならびに表Ａ及びＢに列挙されている抗体の、６個のＨＶＲ及び／またはＶＨ及びＶＬを含むいずれかの抗体のうちのいずれか１つを指す。これらの抗体は、いずれのクラス（例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭ）のものでもよい。したがって、上で定めた各抗体には、５つのすべてのクラスの抗体であって、Ｖ_Ｌ領域及びＶ_Ｈ領域について同じアミノ酸配列を有する抗体が含まれる。さらに、ＩｇＧクラスの抗体は、いずれのサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）のものでもよい。したがって、ＩｇＧサブクラスにおいて、上で定めた各抗体には、４つのすべてのサブクラスの抗体であって、Ｖ_Ｌ領域及びＶ_Ｈ領域について同じアミノ酸配列を有する抗体が含まれる。この５つのクラス、及び４つのＩｇＧサブクラスにおけるヒト抗体の重鎖定常領域のアミノ酸配列は、当該技術分野で知られている。

【0053】

「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」とは、ある特定の細胞傷害性細胞（例えば、ＮＫ細胞、好中球及びマクロファージ）上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）上に結合した分泌型免疫グロブリンにより、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が、抗原を有する標的細胞に特異的に結合した後、その標的細胞を細胞毒素によって殺傷可能になる形態の細胞傷害を指す。ＡＤＣＣを媒介する最初の細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲの発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ ９：４５７－９２（１９９１）の４６４ページの表３にまとめられている。対象とする分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号、同第５，８２１，３３７号、または米国特許第６，７３７，０５６号（Ｐｒｅｓｔａ）に記載されているようなｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＤＣＣアッセイを行ってよい。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、ＰＢＭＣ及びＮＫ細胞が挙げられる。上記の代わりに、または上記に加えて、対象とする分子のＡＤＣＣ活性は、ｉｎ ｖｉｖｏで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９５：６５２－６５６（１９９８）に開示されているような動物モデルで評価してもよい。ＡＤＣＣ活性を評価するための例示的なアッセイは、本明細書の実施例に示されている。

【0054】

「補体依存性細胞傷害性」または「ＣＤＣ」とは、補体の存在下での、標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）が、（適切なサブクラスの）抗体に結合することによって開始され、その抗体は、それらのコグネイト抗原に結合している。補体の活性化を評価するために、例えばＧａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）に記載されているようなＣＤＣアッセイを実施してもよい。Ｆｃ領域のアミノ酸配列が改変されている（バリアントＦｃ領域を有するポリペプチド）とともに、Ｃ１ｑ結合能が増減されているポリペプチドバリアントが、例えば、米国特許第６，１９４，５５１Ｂ１号及びＷＯ１９９９／５１６４２に記載されている。例えば、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８－４１８４（２０００）も参照されたい。

【0055】

「単離」抗体（例えば活性化可能な抗体）は、その天然の環境の構成成分から単離されているものである。いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）またはクロマトグラフィー（例えば、イオン交換ＨＰＬＣもしくは逆相ＨＰＬＣ）によって求めた場合に、９５％超または９９％超の純度まで精製する。抗体純度の評価方法の概説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ ８４８：７９－８７（２００７）を参照されたい。

【0056】

「Ｋ_ａ」という用語は、特定の抗体－抗原相互作用の会合速度定数を指し、「ｋ_ｄ」という用語は、特定の抗体－抗原相互作用の解離速度定数を指す。

【0057】

「Ｋ_Ｄ」という用語は、特定の抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指す。この定数は、ｋ_ａに対するｋ_ｄの比（すなわちｋ_ｄ／ｋ_ａ）から得られ、モル濃度（Ｍ）として表される。Ｋ_Ｄは、抗体がその結合パートナーに結合する親和性の尺度として使用する。Ｋ_Ｄが小さいほど、その抗体は強固に結合するか、または抗体と抗原との親和性が高くなる。例えば、解離定数がナノモル（ｎＭ）単位である抗体は、解離定数がマイクロモル（μＭ）単位である抗体よりも、特定の抗原に強固に結合する。抗体のＫ_Ｄ値は、当該技術分野で十分に確立されている方法を使用して求めることができる。抗体のＫ_Ｄを求める方法の１つは、表面プラズモン共鳴を使用すること、典型的には、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）システムのようなバイオセンサーシステムを使用することによるものである。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）システムを用いるアッセイ手順（ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ）は、本願の少なくとも実施例３に説明されている。

【0058】

「哺乳動物」という用語は、哺乳綱のいずれかの動物種を指す。哺乳動物の例としては、ヒト、実験動物、例えば、ラット、マウス、ハムスター、ウサギ、非ヒト霊長類動物及びモルモット、飼育動物、例えば、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ及びブタ、ならびに捕獲された野生動物、例えば、ライオン、トラ、ゾウなどが挙げられる。

【0059】

本明細書で使用する場合、２つのポリペプチド配列間の「配列同一性」は、その配列間で同一であるアミノ酸のパーセンテージを示す。ポリペプチドのアミノ酸配列同一性は、Ｂｅｓｔｆｉｔ、ＦＡＳＴＡまたはＢＬＡＳＴのような既知のコンピュータープログラムを使用して、慣習的に求めることができる（例えば、Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８３：６３－９８（１９９０）、Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３２：１８５－２１９（２０００）、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０（１９９０）、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｅｌｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２（１９９７）を参照されたい）。Ｂｅｓｔｆｉｔまたはいずれかの他の配列アラインメントプログラムを使用して、特定の配列が、例えば、参照アミノ酸配列と９５％同一であるか求めるときには、同一性のパーセンテージが、その参照アミノ酸配列の全長にわたって計算されるとともに、その参照配列内のアミノ酸残基総数の５％までの相同性におけるギャップが許容されるように、パラメーターを設定する。ポリペプチド間の同一性のパーセンテージを求めるこの上記方法は、本明細書に開示されているすべてのタンパク質、その断片またはバリアントに適用可能である。

【0060】

本明細書で使用する場合、「結合する」、「～に結合する」、「特異的に結合する」「～に特異的に結合する」または「～に特異的な」という用語は、標的と抗体との結合のような測定可能かつ再現可能な相互作用であって、生体分子を含む不均一な分子集団の存在下で、その標的が存在することを決定する相互作用を指す。例えば、標的（エピトープであることができる）に結合するかまたは特異的に結合する抗体は、その抗体が他の標的に結合する場合よりも、高い親和性及びアビディティで、その場合よりも容易に、及び／またはその場合よりも長い持続期間で、この標的に結合する抗体である。一実施形態では、抗体と無関係な標的との結合の程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定した場合、抗体と標的との結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、解離定数（Ｋｄ）が１μＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下または０．１ｎＭ以下である。ある特定の実施形態では、抗体は、様々な種のタンパク質間で保存されている、タンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合には、排他的な結合を含めることができるが、必須ではない。

【0061】

「治療する」、「治療すること」または「治療」という用語は、哺乳動物におけるある特定の病状に関して、その病状を有する哺乳動物において、望ましい効果または有益な効果を生むことを指す。その望ましい効果または有益な効果としては、疾患の症状の１つ以上の頻度または重症度（すなわち、腫瘍の成長及び／または転移、または免疫細胞の数及び／または活性によって媒介される他の作用など）の低減、あるいは疾患、状態または障害のさらなる発現の抑止または阻害を挙げてよい。哺乳動物においてがんを治療することに関しては、その望ましい効果または有益な効果としては、がん細胞のさらなる成長もしくは拡散の阻害、がん細胞の死滅、がん再発の阻害、がんと関連する疼痛の低減、またはその哺乳動物の生存率の改善を挙げてよい。その効果は、主観的または客観的のいずれかであることができる。例えば、その哺乳動物がヒトである場合、そのヒトは、改善または治療応答の自覚症状として、活力もしくは生存能の向上、または疼痛の低減を認識し得る。あるいは、臨床医が、身体診察、臨床検査値、腫瘍マーカーまたはＸ線所見に基づき、腫瘍サイズまたは腫瘍量の減少を認識し得る。臨床医が、治療に対する応答について観察し得るいくつかの臨床検査の兆候としては、白血球数、赤血球数、血小板数、赤血球沈降速度及び様々な酵素のレベルなどの検査結果の正常化が挙げられる。加えて、臨床医は、検出可能な腫瘍マーカーの減少を観察してもよい。あるいは、ソノグラム、核磁気共鳴検査及びポジトロン放出検査のような他の検査を使用して、客観的な改善を評価できる。

【0062】

「予防する」または「予防すること」という用語は、哺乳動物におけるある特定の病状に関して、疾患の発症を予防もしくは遅延させること、またはその臨床症状もしくは不顕性症状の発現を予防することを指す。

【0063】

「単離核酸」という用語は、ゲノム由来、ｃＤＮＡ由来もしくは合成由来の核酸分子、またはそれらの組み合わせであって、その核酸の天然源に存在する他の核酸分子から分離したものを指す。例えば、ゲノムＤＮＡに関しては、「単離」という用語には、そのゲノムＤＮＡが天然において収納されている染色体から分離されている核酸分子が含まれる。好ましくは、「単離」核酸は、天然においてその核酸を挟み込んでいる配列（すなわち、対象となる核酸の５’末端及び３’末端に位置する配列）を含まない。

【0064】

「ベクター」という用語は、外来核酸分子を輸送することができる核酸分子を指す。その外来核酸分子は、ライゲーションまたは組み換えなどの組み換え技術によって、ベクターの核酸分子に連結されている。これにより、宿主細胞または生物中で、外来核酸分子を増殖させたり、選択したり、さらに操作したり、または発現させたりできる。ベクターは、プラスミド、ファージ、トランスポゾン、コスミド、染色体、ウイルス、またはビリオンであることができる。ベクターの一種は、宿主細胞に導入すると、その宿主細胞のゲノムに組み込まれることができ、それにより、その宿主ゲノムとともに複製される（例えば、非エピソーム型の哺乳動物ベクター）。別の種類のベクターは、そのベクターが導入される宿主細胞中で自律複製できる（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター、及びエピソーム型の哺乳動物ベクター）。そのベクターに機能可能に連結されている発現可能な外来核酸の発現を誘導できる別の特定の種類のベクターは、一般に「発現ベクター」という。発現ベクターは概して、発現可能な外来核酸の発現を駆動する制御配列を有する。「転写ベクター」として知られるもっと単純なベクターは、転写しかできず、翻訳されず、標的細胞内で複製できるが、発現しない。「ベクター」という用語には、ベクターの機能にかかわらず、あらゆる種類のベクターが含まれる。そのベクターに機能可能に連結されている発現可能な核酸の発現を誘導できるベクターは、一般に「発現ベクター」という。「ベクター」の他の例としては、ディスプレイベクター（例えば、ウイルスまたは細胞（細菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞及び／または哺乳動物細胞など）の表面上で、コードされるポリペプチドの発現及び提示を行うように誘導するベクター）を挙げてよい。

【0065】

本明細書で使用する場合、「対象」、「患者」または「個体」は、ヒトまたは非ヒト動物を指してよい。「非ヒト動物」とは、ヒトとして分類されないいずれかの動物、例えば、飼育動物、家畜または動物園の動物、競技用動物、ペットの動物（イヌ、ウマ、ネコ、ウシなど）、ならびに研究で使用する動物を指してよい。研究用の動物とは、線虫、節足動物、脊椎動物、哺乳動物、カエル、齧歯動物（例えば、マウスまたはラット）、魚類（例えば、ゼブラフィッシュまたはフグ）、鳥類（例えばニワトリ）、イヌ、ネコ、及び非ヒト霊長類動物（例えば、アカゲザル、カニクイザル、チンパンジーなど）を指してよいが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、その対象、患者または個体は、ヒトである。

【0066】

「有効量」とは、治療結果または予防結果を含む所望の効果または示されている効果の１つ以上を達成するために必要な用量及び期間で、少なくとも有効な量を指す。有効量は、１回以上の投与で供給できる。本願の目的では、抗体、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、予防的処置または治療的処置を直接または間接的のいずれかで行うのに十分な量である。臨床状況において理解されるように、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、別の薬物、化合物または医薬組成物と併せて達成しても、しなくてもよい（例えば、単剤療法または併用療法として投与する有効量）。すなわち、「有効量」は、１つ以上の治療剤を投与する状況において考えてもよいし、１つ以上の他の薬剤と併せて、所望の結果が得られる可能性があるか、または得られている場合に、単一の薬剤が、有効量で投与されているとみなしてよい。

【0067】

「再発（ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ）」、「再発（ｒｅｌａｐｓｅ）」または「再発した（ｒｅｌａｐｓｅｄ）」という用語は、疾患の消失を臨床的に評価した後に、がんまたは疾患が再発したことを指す。遠隔転移または局所再発という診断は、再発とみなすことができる。

【0068】

「難治性」または「耐性」という用語は、治療に応答しなかったがんまたは疾患を指す。

【0069】

本明細書で使用する場合、「完全奏効」または「ＣＲ」は、すべての標的病変の消失を指し、「部分奏功」または「ＰＲ」は、ベースラインの最長直径（ＳＬＤ）を基準として、標的病変のＳＬＤの合計が少なくとも３０％短縮することを指し、「安定」または「ＳＤ」は、治療を開始して以来最小のＳＬＤを基準として、標的病変の収縮が、ＰＲとするほどではないこと、または増大が、ＰＤとするほどではないことを指す。

【0070】

本明細書で使用する場合、「進行」または「ＰＤ」は、治療を開始して以来最小のＳＬＤ記録値を基準として、標的病変のＳＬＤが少なくとも２０％拡大すること、または１つ以上の新たな病変が存在することを指す。

【0071】

本明細書で使用する場合、「無増悪生存期間」（ＰＦＳ）は、治療中または治療後の時間の長さであって、治療している疾患（例えば、がん）が悪化しない長さを指す。無増悪生存期間は、患者が完全奏効または部分奏効を経験した時間の量、及び患者が安定を経験した時間の量を含んでよい。

【0072】

本明細書で使用する場合、「全奏効率」（ＯＲＲ）は、完全奏効（ＣＲ）率及び部分奏功（ＰＲ）率の合計を指す。

【0073】

本明細書で使用する場合、「全生存率」は、特定の期間後に生存している可能性が高い群の個体のパーセンテージを指す。

【0074】

本明細書で使用する場合、「バイオマーカー」または「マーカー」という用語は概して、分子（例えば、ｐｒｅ－ｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、タンパク質など）または細胞集団（例えば、エフェクターメモリーＴ細胞、すなわちＴ_ｅｍ細胞、もしくは制御性Ｔ細胞、すなわちＴ_ｒｅｇ細胞）であって、対象の組織（例えば腫瘍）内もしくはその組織上、または対象の組織もしくは細胞によって分泌された分子の場合に、そのレベルを既知の方法（または本明細書に開示されている方法）によって検出できるとともに、治療レジメン（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体による治療）に対する対象の感受性を予測するためのものであるか、またはその感受性を予測する（もしくはその予測を助ける）ために、いくつかの実施形態では、そのレジメンに対する対象の応答性を予測する（もしくはその予測を助ける）ために使用できる分子または細胞集団を指す。

【0075】

本明細書で使用する場合、「試料」という用語は、該当する対象から得られるか、またはその対象に由来する組成物であって、例えば、物理的特徴、生化学的特徴、化学的特徴及び／または生理学的特徴に基づき特徴付けたり及び／または特定したりすることになる細胞分子及び／またはその他の分子体を含む組成物を指す。

【0076】

本明細書で使用する場合、「組織試料または細胞試料」という用語は、対象または患者の組織から得た類似の細胞の集合体を指す。組織試料または細胞試料の供給源は、新鮮であるか、凍結されているか及び／または保存されている臓器試料、組織試料、生検標本または吸引物、血液またはいずれかの血液成分、脳脊髄液、羊水、腹水または間質液のような体液、いずれかの妊娠期間または発育期間の対象の細胞に由来するような固形組織であってよい。組織試料は、初代細胞であっても、培養細胞であってもよい。任意に、組織試料または細胞試料は、疾患の組織または臓器から得る。組織試料は、保存剤、抗凝固剤、緩衝剤、固定剤、栄養分、抗生物質などのように、天然の組織とは天然では混ざり合わない化合物を含んでよい。本明細書で使用する場合、「参照値」または「参照レベル」は、絶対値、相対値、上限及び／または下限を有する値、値の範囲、平均値（ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ）、中央値、平均値（ｍｅａｎ ｖａｌｕｅ）、あるいは特定のレベルまたはベースラインレベルと比較した値であってよい。

【0077】

本明細書で使用する場合、「ベースラインレベル」または「ベースライン値」は、対象が、抗ＣＴＬＡ４抗体による治療のような治療を開始する前の対象のレベルまたは値を指す。

【0078】

「参照試料」、「参照細胞」、「参照組織」、「コントロール試料」、「コントロール細胞」または「コントロール組織」は、本明細書で使用する場合、比較目的で使用する試料、細胞、組織、標準物またはレベルを指す。一実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、コントロール試料、コントロール細胞またはコントロール組織は、同じ対象または個体の身体（例えば、組織または細胞）の健常な部分及び／または非罹患部分から得る。例えば、罹患細胞または罹患組織に隣接する健常な細胞もしくは組織、及び／または非罹患細胞もしくは非罹患組織（例えば、腫瘍に隣接する細胞または組織）。別の実施形態では、参照試料は、同じ対象または個体の身体の未治療の組織及び／または細胞から得る。さらに別の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、コントロール試料、コントロール細胞またはコントロール組織は、その対象または個体ではない個体の身体の健常な部分及び／または非罹患部分（例えば、組織または細胞）から得る。さらに別の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、コントロール試料、コントロール細胞またはコントロール組織は、その対象または個体ではない個体の身体の未治療の組織及び／または細胞から得る。

【0079】

「相関する」または「相関すること」とは、いずれかの方法で、第１の解析またはプロトコールの成果及び／または結果と、第２の解析またはプロトコールの成果及び／または結果とを比較することを意味する。例えば、第２のプロトコールを行う際に、第１の解析またはプロトコールの結果を使用してもよく、及び／または第１の解析またはプロトコールの結果を使用して、第２の解析またはプロトコールを行うべきか判断してもよい。バイオマーカーの解析またはプロトコールの実施形態に関しては、バイオマーカーレベルの解析またはプロトコールの結果を使用して、特定の治療レジメンを行うべきか判断してもよい。バイオマーカーレベルの解析またはプロトコールの実施形態に関しては、バイオマーカーレベルの解析またはプロトコールの結果を使用して、特定の治療レジメンを行うべきか判断してもよい。

【0080】

医薬による治療に対する、患者の「有効な応答」または患者の「応答性」及び同様の表現は、がんのような疾患もしくは障害のリスクがあるか、またはそれに罹患している患者が受ける臨床上または治療上の利益を指す。一実施形態では、このような利益としては、生存期間（全生存期間及び無増悪生存期間を含む）が延びること、客観的奏効（完全奏効もしくは部分奏功を含む）を得られること、またはがんの徴候もしくは症状が改善することのいずれか１つ以上が挙げられる。

【0081】

治療に対して「有効な応答を示さない」患者とは、生存期間（全生存期間及び無増悪生存期間を含む）が延びること、客観的奏効（完全奏効もしくは部分奏功を含む）を得られること、またはがんの徴候もしくは症状が改善することのいずれか１つも示さない患者を指す。

【0082】

本願の方法及び技法は概して、別段に示されていない限り、当該技術分野で周知な方法に従って、かつ、本明細書の全体を通じて引用及び考察されている様々な一般的かつより具体的な参照文献に記載されているようにして行う。このような参照文献としては例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（２００１）、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，ＮＹ（２００２）及びＨａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）が挙げられる。酵素反応及び精製技法は、当該技術分野で一般的に行われているように、または本明細書に記載されているように、メーカーの仕様書に従って行う。本明細書に記載の分析化学、合成有機化学、医化学及び製薬化学に関連して用いられている専門用語、ならびにそれらの実験の手順及び技法は、周知のものであり、当該技術分野で一般的に用いられている。化学合成、化学分析、医薬の調製、調合及び送達、ならびに患者の治療には、標準的な技法を使用する。

【0083】

本明細書で使用する場合、２０個の従来のアミノ酸及びそれらの略称は、従来の使用法に従う。Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ－Ａ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅ．Ｓ．Ｇｏｌｕｂ ａｎｄ Ｄ．Ｒ．Ｇｒｅｎ，Ｅｄｓ．，Ｓｉｎａｕｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，Ｍａｓｓ．（１９９１））を参照されたい。

【0084】

本明細書で使用する場合、「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」が付された単数形には、文脈上明らかに別段に示されていない限り、複数の言及物が含まれる。したがって、例えば、「分子」に言及する場合には、任意に、そのような分子を２つ以上組み合わせたものなどが含まれる。

【0085】

本明細書で使用する場合、「約」という用語は、当業者であれば容易に理解する、それぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書で、「約」が付された値またはパラメーターに言及する場合には、その値またはパラメーター自体を対象とする実施形態が含まれる（かつ記載される）。

【0086】

本明細書に記載されている、本願の態様及び実施形態には、態様及び実施形態「を含むこと」、態様及び実施形態「からなること」、ならびに態様及び実施形態「から本質的になること」が含まれることを理解されたい。

【0087】

本明細書で使用する場合、ある値またはパラメーター「ではない」ことに言及している場合には、概して、ある値またはパラメーター「以外」であることを意味及び説明する。例えば、Ｘという種類のがんを治療するためには、その方法を使用しないとは、その方法を使用して、Ｘ以外の種類のがんを治療することを意味する。

【0088】

本明細書で用いられている「約Ｘ～Ｙ」という用語は、「約Ｘ～約Ｙ」と同じ意味を有する。

【0089】

本明細書で使用する場合、「及び／または」という用語は、「Ａ及び／またはＢ」のような表現に、Ａ及びＢの両方、ＡまたはＢ、Ａ（単独）、ならびにＢ（単独）が含まれるように意図されている。同様に、「及び／または」という用語は、本明細書で使用する場合、「Ａ、Ｂ及び／またはＣ」のような表現に、Ａ、Ｂ及びＣ、Ａ、ＢまたはＣ、ＡまたはＣ、ＡまたはＢ、ＢまたはＣ、Ａ及びＣ、Ａ及びＢ、Ｂ及びＣ、Ａ（単独）、Ｂ（単独）、ならびにＣ（単独）という実施形態のそれぞれが含まれるように意図されている。

【0090】

ＩＩ．治療の方法
本願は、ヒトＣＴＬＡ４に特異的に結合する抗ＣＴＬＡ４抗体を用いて、対象においてがんを治療する方法を提供する。本明細書に記載の方法では、第ＩＩＩ節「抗ＣＴＬＡ４抗体」における抗ＣＴＬＡ４抗体（完全長抗体及びその抗原結合断片、ならびに活性化可能な抗体を含む）のいずれか１つを用いてよい。その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、単独で単剤療法として投与してもよいし、または１つ以上の追加の治療剤もしくは療法と組み合わせて投与してもよい。

【0091】

本明細書に記載の方法は、様々ながんを治療するのに有用である。いくつかの実施形態では、そのがんは、固形がんである。いくつかの実施形態では、そのがんは、液性がんである。悪性がんまたは良性がんにかかわらず、かつ原発がんまたは二次がんにかかわらず、本開示が提供する方法によって、ＣＴＬＡ４が関与している様々ながんを治療または予防し得る。例示的ながんとしては、肝臓癌、消化器系のがん（例えば、大腸癌、結腸直腸癌）、肺癌、骨癌、心臓癌、脳腫瘍、腎臓癌、膀胱癌、血液癌（例えば白血病）、皮膚癌、乳癌、甲状腺癌、膵臓癌、頭頸部癌、眼に関連するがん、男性生殖器系のがん（例えば、前立腺癌、精巣癌）、または女性生殖器系のがん（例えば、子宮癌、子宮頸癌）が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、そのがんは、腎細胞癌または尿路上皮癌のような腎臓癌である。いくつかの実施形態では、そのがんは、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌（例えばＮＳＣＬＣ）、乳癌、メラノーマ、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、または結腸直腸癌（例えば、ＭＳＩ－ＨもしくはｄＭＭＲ＋の結腸直腸癌）である。いくつかの実施形態では、そのがんは、メラノーマ、ＮＳＣＬＣ、肝細胞癌、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌（例えば、ＭＳＩ－ＨもしくはｄＭＭＲ＋の結腸直腸癌）である。

【0092】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４（例えば活性化可能な抗体）は、がん患者に単剤療法として投与する。いくつかの実施形態では、そのがんは、メラノーマである。別の実施形態では、そのがんは、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肺癌、乳癌、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、結腸直腸癌である。いくつかの実施形態では、その肺癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。

【0093】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、がん患者に、個別投与、順次投与または同時投与用の１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて投与する。「追加の治療剤」という用語は、本開示が提供する抗ＣＴＬＡ４抗体以外のいずれかの治療剤を指す。いくつかの実施形態では、対象においてがんを治療するための併用療法であって、その対象に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）を治療有効量、１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて投与することを含む療法を提供する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、化学療法剤、免疫療法剤及び／またはホルモン治療剤を含む１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その１つ以上の追加の治療剤は、ウイルス遺伝子療法、免疫チェックポイント阻害剤、標的療法、放射線療法及び化学療法からなる群から選択する。

【0094】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、抗ＣＤ１３７抗体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、ＶＥＧＦ阻害剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、化学療法剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、ＰＡＲＰ阻害剤と組み合わせて投与する。

【0095】

いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）有効量の活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体と、（ｂ）有効量の抗ＰＤ－１抗体を投与することを含み、その活性化可能な抗体が、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、ＣＭが切断されていないときには、ＭＭが、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、ａ）ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｂ）ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｃ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、またはｄ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＣＭが切断されると、その活性化可能な抗体が、ヒトＣＴＬＡ４に、そのＶＨ及びＶＬを介して結合する方法である。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ１抗体は、２Ｅ５である。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、そのＶＨは、配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＶＬが、配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３００のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、そのがんは、肺癌である。いくつかの実施形態では、その肺癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。上記実施形態のうちの別の実施形態では、そのがんは、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、乳癌、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である。

【0096】

いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）有効量の活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体と、（ｂ）有効量の抗ＣＤ１３７抗体を投与することを含み、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体が、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドを含み、ＭＭが、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択したアミノ酸配列を含み、ｍが２～１０であり、各Ｘが独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、ＣＭが切断されていないときには、ＭＭが、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体のヒトＣＴＬＡ４への結合を阻害し、ＣＭが、少なくとも第１の切断部位を含み、ａ）ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｂ）ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、その活性化可能な抗体がさらに、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む第２のポリペプチドを含むか、ｃ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、またはｄ）ＴＢＭが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＣＭが切断されると、その活性化可能な抗体が、ヒトＣＴＬＡ４に、そのＶＨ及びＶＬを介して結合し、その抗ＣＤ１３７抗体が、ヒトＣＤ１３７の細胞外ドメインに特異的に結合し、その抗体が、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６２～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９５～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に結合する方法である。いくつかの実施形態では、そのがんは、乳癌である。上記実施形態のうちの別の実施形態では、そのがんは、肺癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である。

【0097】

いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＶＥＧＦ阻害剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、そのＶＥＧＦ阻害剤は、フルキンチニブである。いくつかの実施形態では、そのがんは、大腸癌である。いくつかの実施形態では、そのＶＥＧＦ阻害剤は、アンロチニブである。いくつかの実施形態では、そのがんは、腎臓癌である。いくつかの実施形態では、そのがんは、腎臓腺癌である。いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）化学療法剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、その化学療法剤は、ドセタキセルである。いくつかの実施形態では、そのがんは、乳癌である。いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、（ａ）抗ＣＴＬＡ４抗体のうち、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８という残基を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングが、配列番号２０７に従うものである抗体を有効量と、（ｂ）ＰＡＲＰ阻害剤を有効量、投与することを含む方法である。いくつかの実施形態では、そのＰＡＲＰ阻害剤は、オラパリブである。上記実施形態のうちのいくつかでは、そのがんは、乳癌である。上記実施形態のうちの別の実施形態では、そのがんは、肺癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、卵巣癌、膵臓癌、胆管癌、肝細胞癌、グリオブラストーマ、腎細胞癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または結腸直腸癌である。

【0098】

がんの治療は、例えば、腫瘍の退縮、腫瘍の重量もしくはサイズの収縮、無増悪期間、生存期間、無増悪生存期間、全奏効率、奏効持続期間、クオリティオブライフ、タンパク質の発現及び／または活性によって評価できる。例えば、放射線画像診断によって、応答を測定することを含め、療法の有効性を求めるアプローチを用いることができる。

【0099】

本開示が提供する抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）、１つ以上の追加の治療剤及び組成物は、いずれかの適切な経腸投与経路または非経口投与経路を介して投与できる。「経腸投与経路」という用語は、胃腸管の部分のいずれかを介した投与を指す。経腸経路の例としては、経口経路、粘膜経路、口腔内経路及び直腸経路、または胃内経路が挙げられる。「非経口投与経路」は、経腸経路以外の投与経路を指す。非経口投与経路の例としては、静脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、腹腔内投与、腫瘍内投与、膀胱内投与、動脈内投与、髄腔内投与、嚢内投与、眼窩内投与、心臓内投与、経臓器投与、関節内投与、嚢下投与、くも膜下投与、脊髄内投与、硬膜外投与、胸骨内投与、皮下投与または局所投与が挙げられる。本開示の抗体及び組成物は、経口摂取、経鼻胃管、胃瘻管、注射、注入、埋め込み型注入ポンプ及び浸透圧ポンプによるなど、いずれかの適切な方法を用いて投与できる。適切な投与経路及び投与方法は、使用する具体的な抗体、所望の吸収速度、使用する具体的な製剤または剤形、治療する障害の種類または重症度、具体的な作用部位、及び患者の状態のような多くの要因に応じて変動することがあり、当業者が容易に選択できる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、静脈内投与する。

【0100】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、２０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．００３ｍｇ／ｋｇまたは０．００１ｍｇ／ｋｇのいずれか１つを超えない用量で投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体の用量は、下記のいずれか１つの範囲内であり、その範囲は、上限が、２０ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇまたは０．００３ｍｇ／ｋｇのいずれか１つであり、独立して、所定の下限が、１９ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．００３ｍｇ／ｋｇまたは０．００１ｍｇ／ｋｇのいずれか１つであり、その下限は、上限よりも小さい。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇのいずれか１つの用量で投与する。本明細書に記載の用量は、ヒトに適する用量、または所定の種の対象に対する同等の用量を指してよい。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒト対象に対して、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇに相当する用量、例えば、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約３．０ｍｇ／ｋｇ、約６．０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇなどで投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、０．１ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。

【0101】

その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）及び／または１つ以上の追加の治療剤の有効量は、１回用量または複数回用量で投与してよい。その抗ＣＴＬＡ４抗体の投与を複数回用量で含む方法では、例示的な投与頻度としては、週に１回、中断なしに週に１回、３週間のうち２週間、週に１回、４週間のうち３週間、週に１回、３週間に１回、２週間に１回、１カ月に１回、６カ月に１回、１年に１回などが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、約１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、６週間に１回、または１２週間に１回投与する。いくつかの実施形態では、それぞれの投与間の間隔は、約３年、約２年、約１２カ月、約１１カ月、約１０カ月、約９カ月、約８カ月、約７カ月、約６カ月、約５カ月、約４カ月、約３カ月、約２カ月、約１カ月、約４週間、約３週間、約２週間または約１週間のいずれかの期間よりも短い。いくつかの実施形態では、それぞれの投与間の間隔は、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約１カ月、約２カ月、約３カ月、約４カ月、約５カ月、約６カ月、約７カ月、約８カ月、約９カ月、約１０カ月、約１１カ月、約１２カ月、約２年または約３年のいずれかの期間よりも長い。いくつかの実施形態では、投与スケジュールに中断期間がない。

【0102】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）及び／または１つ以上の追加の治療剤は、低頻度で、例えば、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、１カ月に１回、２カ月に１回、３カ月に１回、４カ月に１回、５カ月に１回、６カ月に１回、７カ月に１回、８カ月に１回、９カ月に１回、１０カ月に１回、１１カ月に１回、１年に１回以下よりも少ない頻度のいずれか１つで投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤は、１回用量で投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤は、約３週間に１回投与する。

【0103】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）及び／または１つ以上の追加の治療剤は、２サイクル以上、例えば、約２サイクル、約３サイクル、約４サイクル、約５サイクル、約６サイクル、約７サイクル、約８サイクル、約９サイクル、約１０サイクル、約１１サイクルまたは約１２サイクル以上のいずれか１つで投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、少なくとも４サイクルで投与する。

【0104】

いくつかの実施形態では、その治療は、初期フェーズと、その後の維持フェーズを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）及び／または１つ以上の追加の治療剤は、維持フェーズでは、初期フェーズよりも低い頻度で投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤は、維持フェーズでは、初期フェーズと同じ頻度で投与する。いくつかの実施形態では、その治療は、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤を約３週間に１回、少なくとも４サイクル投与する初期フェーズと、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤を約４週間に１回～１２週間に１回、例えば、４週間に１回、６週間に１回、８週間に１回、１０週間に１回または１２週間に１回投与する維持フェーズを含む。いくつかの実施形態では、維持フェーズでの投与頻度は、１つ以上のバイオマーカー、例えば、Ｔ_ｒｅｇ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ_ｅｍ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ_ｅｍ細胞、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対するＣＤ８＋ Ｔ_ｅｍ細胞の比率、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対するＣＤ４＋ Ｔ_ｅｍ細胞の比率、ＣＤ２５＋ Ｔ細胞、及び／またはＮＫ細胞に応じて調整する。例えば、その対象で、抗ＣＴＬＡ４抗体の投与後に、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対するＣＤ８＋ Ｔ_ｅｍ細胞の比率の上昇が見られる場合には、その対象に、抗ＣＴＬＡ４抗体を約４週間に１回、さらに投与してよい。

【0105】

その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）及び／または１つ以上の追加の治療剤の投与は、長期間にわたって、例えば、約１週間～約１カ月、約１カ月～約１年、約１年～約数年、延長できる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤は、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約１カ月、約２カ月、約３カ月、約４カ月、約５カ月、約６カ月、約７カ月、約８カ月、約９カ月、約１０カ月、約１１カ月、約１２カ月、約１年、約２年、約３年または約４年以上の少なくともいずれかの期間にわたって投与する。

【0106】

ＭＭが切断されると、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体が、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むいくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約３ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇの用量で３週間に１回、約３ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇで３週間に１回、約６ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇで３週間に１回、または約６ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇで３週間に１回投与する。いくつかのこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約３ｍｇ／ｋｇの用量で３週間に１回投与する。別のこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約６ｍｇ／ｋｇの用量で３週間に１回投与する。別のこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で３週間に１回投与する。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域、例えば、野生型ＩｇＧ１のＦｃ領域、またはＡＤＣＣ活性が増強されているバリアントを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１８９～１９６からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号２１３～２１６からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号１４１～１４７からなる群から選択したアミノ酸配列のＭＭを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号２００のアミノ酸配列のＭＭを含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列、または配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列、または配列番号３２２のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、メラノーマ、非小細胞肺癌、腎細胞癌または肝細胞癌である患者に投与する。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲのがんである患者に投与する。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、転移したがんである患者に投与する。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、他の抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはこれらの組み合わせを含む従来のがん療法に耐性または不応性がある患者に投与する。

【0107】

ＭＭが切断されると、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体が、配列番号８７のアミノ酸配列、もしくは配列番号８７のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号１００のアミノ酸配列、もしくは配列番号１００のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むいくつかの実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、第１の高めの用量（例えば、約１０ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ）で、少なくとも１治療サイクル（本明細書に定義されているようなサイクル）投与してから、その後のサイクルでは、低めの用量（例えば、約３ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ）で投与する。いくつかのこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、少なくとも１治療サイクル（例えば、１～３治療サイクル）投与し、その後の治療サイクルでは、約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。別のこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、少なくとも１治療サイクル（例えば、１～３治療サイクル）投与し、その後の治療サイクルでは、約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。別のこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約１５ｍｇ／ｋｇの用量で、少なくとも１治療サイクル（例えば、１～３治療サイクル）投与し、その後の治療サイクルでは、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。別のこのような実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、約２０ｍｇ／ｋｇの用量で、少なくとも１治療サイクル（例えば、１～３治療サイクル）投与し、その後の治療サイクルでは、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列、または配列番号３２０もしくは３２１のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列、または配列番号３２２のアミノ酸配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、メラノーマ、非小細胞肺癌、腎細胞癌または肝細胞癌である患者に投与する。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲのがんである患者に投与する。上記実施形態のうちの別の実施形態では、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、転移したがんである患者に投与する。上記実施形態のうちのいくつかでは、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、他の抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはこれらの組み合わせを含む従来のがん療法に耐性または不応性がある患者に投与する。

【0108】

先の２つの段落の実施形態のうちのいずれでも、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、単剤療法としても、または本明細書に開示されているような１つ以上の抗がん剤と組み合わせても投与できる。例えば、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、抗ＰＤ－１抗体または抗ＣＤ１３７抗体と組み合わせて投与できる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体と、抗ＰＤ－１抗体または抗ＣＤ１３７抗体との組み合わせは、相乗効果を発揮する。

【0109】

いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤による治療により、腫瘍において、Ｔｒｅｇ細胞が枯渇する。いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体及び／または１つ以上の追加の治療剤による治療によっても、末梢組織では、Ｔｒｅｇ細胞が枯渇しない。

【0110】

いくつかの実施形態では、その対象は以前に、従来の療法によって治療したことがある。いくつかの実施形態では、その対象は以前に、１つ、２つ、３つまたは４つ以上の前治療のいずれか１つを受けたことがある。いくつかの実施形態では、その対象は、利用可能な他のすべての療法を使い果たした。いくつかの実施形態では、その対象は、従来の療法に応答しないか、または耐性がある。いくつかの実施形態では、その対象は、従来の療法の後に、疾患が再発している。いくつかの実施形態では、その対象は、従来の療法に不応性がある。いくつかの実施形態では、その対象は、約１年、約６カ月または約３カ月以内のうちに、従来の療法が失敗している。いくつかの実施形態では、その対象は以前に、従来の療法を受けたことがない。

【0111】

いくつかの実施形態では、その対象は以前に、そのがんに対する標準療法によって治療したことがある。いくつかの実施形態では、その対象は、標準療法に応答しないか、または耐性がある。いくつかの実施形態では、その対象は、標準療法の後に、疾患が再発している。いくつかの実施形態では、その対象は、標準療法に不応性がある。いくつかの実施形態では、その対象は、約１年、約６カ月または約３カ月以内のうちに、標準療法が失敗している。いくつかの実施形態では、その対象は以前に、標準療法を受けたことがない。いくつかの実施形態では、その対象は、標準療法を拒絶したことがあるか、標準療法に不適格である。

【0112】

いくつかの実施形態では、その従来の療法（例えば標準療法）は、ウイルス遺伝子療法、免疫療法、標的療法、放射線療法及び化学療法からなる群から選択する。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、免疫チェックポイント阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＰＤ－１リガンド（例えば、ＰＤ－Ｌ１もしくはＰＤ－Ｌ２）の阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体とは異なる抗ＣＴＬＡ４抗体のようなＣＴＬＡ４阻害剤である。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、イピリムマブである。いくつかの実施形態では、その従来の療法は、イピリムマブ及び／またはニボルマブである。

【0113】

いくつかの実施形態では、その従来の療法は、ＰＤ－１結合アンタゴニスト、ＰＤＬ１結合アンタゴニスト及びＰＤＬ２結合アンタゴニストを含め、ＰＤ－１またはＰＤ－１リガンドの阻害剤である。「ＰＤ－１」の代替名としては、ＣＤ２７９及びＳＬＥＢ２が挙げられる。「ＰＤＬ１」の代替名としては、Ｂ７－Ｈ１、Ｂ７－４、ＣＤ２７４及びＢ７－Ｈが挙げられる。「ＰＤＬ２」の代替名としては、Ｂ７－ＤＣ、Ｂｔｄｃ及びＣＤ２７３が挙げられる。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１、ＰＤＬ１及びＰＤＬ２は、ヒトＰＤ－１、ヒトＰＤＬ１及びヒトＰＤＬ２である。

【0114】

いくつかの実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、ＰＤ－１が、そのリガンド結合パートナーに結合するのを阻害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１リガンドの阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１及び／またはＰＤ－Ｌ２の阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、ＰＤＬ１が、その結合パートナーに結合するのを阻害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ２の結合パートナーは、ＰＤ－１及び／またはＢ７－１である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１リガンドの阻害剤は、ＰＤ－Ｌ２が、その結合パートナーに結合するのを阻害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ２の結合パートナーは、ＰＤ－１である。その阻害剤は、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質またはオリゴペプチドであってよい。

【0115】

いくつかの実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体）である。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ及びＣＴ－０１１からなる群から選択する。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、イムノアドヘシン（例えば、ＰＤＬ１またはＰＤＬ２の細胞外部分またはＰＤ－１結合部分が、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたものを含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、ＡＭＰ－２２４である。ニボルマブは、ＭＤＸ－１１０６－０４、ＭＤＸ－１１０６、ＯＮＯ－４５３８、ＢＭＳ－９３６５５８及びＯＰＤＩＶＯ（登録商標）としても知られており、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載されている抗ＰＤ－１抗体である。ペムブロリズマブは、ＭＫ－３４７５、Ｍｅｒｃｋ３４７５、ランブロリズマブ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）及びＳＣＨ－９００４７５としても知られており、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載されている抗ＰＤ－１抗体である。ＣＴ－０１１は、ｈＢＡＴまたはｈＢＡＴ－１としても知られており、ＷＯ２００９／１０１６１１に記載されている抗ＰＤ－１抗体である。ＡＭＰ－２２４は、Ｂ７－ＤＣＩｇとしても知られており、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されている、ＰＤＬ２－Ｆｃ融合体である可溶性受容体である。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４－９４－４）である。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブ（ＣＡＳ登録番号：１３７４８５３－９１－４）である。

【0116】

いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ－１１０５及びＭＥＤＩ４７３６からなる群から選択する。ＭＤＸ－１１０５は、ＢＭＳ－９３６５５９としても知られており、ＷＯ２００７／００５８７４に記載されている抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１に記載されている抗ＰＤ－Ｌ１である。ＭＥＤＩ４７３６は、ＷＯ２０１１／０６６３８９及びＵＳ２０１３／０３４５５９に記載されている抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。本願の方法に有用な抗ＰＤ－Ｌ１抗体、及びその作製方法の例は、国際公開第ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１号及び米国特許第８，２１７，１４９号に記載されており、これらの特許は、参照により、本明細書に援用される。

【0117】

前治療（例えば標準療法）には、腫瘍を除去するための手術、及び放射線療法も含まれる。例示的な放射線療法としては、電離性（電磁）放射線療法（例えば、Ｘ線またはガンマ線）、及び粒子線放射線療法（例えば、高線エネルギー放射線治療）が挙げられるが、これらに限定されない。放射線源は、その対象の体外または体内にあることができる。

【0118】

本明細書に記載の方法は、がん治療の様々な態様に有用である。いくつかの実施形態では、個体において、細胞の増殖（腫瘍の成長など）を阻害する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、細胞の増殖を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、約３０％、約４０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％または約９５％以上のいずれかを含む）阻害する。

【0119】

いくつかの実施形態では、個体において、腫瘍転移を阻害する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、約３０％、約４０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％または約９５％以上のいずれかを含む）阻害する。

【0120】

いくつかの実施形態では、個体において、既存の腫瘍の転移（リンパ節への転移など）を低減する方法（根絶する方法など）であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、約３０％、約４０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％または約９５％以上のいずれかを含む）低減する。

【0121】

いくつかの実施形態では、個体において、既存の腫瘍の転移（リンパ節への転移など）の発生または量を低減する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。

【0122】

いくつかの実施形態では、個体において、腫瘍サイズを低減する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、その方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、約３０％、約４０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％または約９５％以上のいずれかを含む）低減する。

【0123】

いくつかの実施形態では、個体において、がんの疾患進行までの時間を延ばす方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、その方法は、その疾患進行までの時間を少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１６週間、２０週間、２４週間、２８週間、３２週間または３６週間以上のいずれかだけ延ばす。

【0124】

いくつかの実施形態では、がんである個体の生存期間（例えば、全生存期間または無増悪生存期間）を延ばす方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、その方法は、その個体の生存期間を少なくとも１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、６カ月、７カ月、８カ月、９カ月、１０カ月、１１カ月、１２カ月、１８カ月または２４カ月のいずれかだけ延ばす。

【0125】

いくつかの実施形態では、がんである個体において、１つ以上の症状を緩和する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて投与する。

【0126】

いくつかの実施形態では、がんである個体において、クオリティオブライフを改善する方法であって、その個体に、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つを有効量投与することを含む方法を提供する。

【0127】

併用療法
対象においてがんを治療する方法であって、その対象に、抗ＣＴＬＡ４抗体を１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。

【0128】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、免疫療法剤と組み合わせて投与する。「免疫療法剤」という用語は、哺乳動物の免疫応答を増強できる化学物質または生体物質を指す。免疫療法剤の例としては、ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ（ＢＣＧ）、インターフェロンなどのサイトカイン、個別化免疫療法ＭｙＶａｘ、Ｏｎｙｖａｘ－Ｐ、Ｏｎｃｏｐｈａｇｅ、ＧＲＮＶＡＣ１、Ｆａｖｌｄ、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、ＧＶＡＸ、Ｌｏｖａｘｉｎ Ｃ、ＢｉｏｖａｘＩＤ、ＧＭＸＸ及びＮｅｕＶａｘなどのワクチン、ならびにアレムツズマブ（ＣＡＭＰＡＴＨ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標））、イブリツモマブチウキセタン（ＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標））、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、ＭＡＢＴＨＥＲＡ（登録商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、トシツモマブ（ＢＥＸＸＡＲ（登録商標））、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（登録商標））、トレメリムマブ、ＣＡＴ－３８８８、ＯＸ４０受容体に対するアゴニスト抗体（ＷＯ２００９／０７９３３５に開示されているものなど）、ＣＤ４０受容体に対するアゴニスト抗体（ＷＯ２００３／０４０１７０に開示されているものなど）及びＴＬＲ－９アゴニスト（ＷＯ２００３／０１５７１１、ＷＯ２００４／０１６８０５及びＷＯ２００９／０２２２１５に開示されているものなど）などの抗体が挙げられる。

【0129】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ホルモン治療剤と組み合わせて投与する。「ホルモン治療剤」という用語は、ホルモンの産生を阻害または排除するか、あるいはホルモンが、がん細胞の成長及び／または生存に及ぼす作用を阻害または相殺する化学物質または生体物質を指す。本発明の方法に適するこのような薬剤の例としては、ＵＳ２００７０１１７８０９に開示されているものが挙げられる。特定のホルモン治療剤の例としては、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標））、トレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標））、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標））、アナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標））、エキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標））、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標））、酢酸メゲストロール（ＭＥＧＡＣＥ（登録商標））、ゴセレリン（ＺＯＬＡＤＥＸ（登録商標））及びロイプロリド（ＬＵＰＲＯＮ（登録商標））が挙げられる。本開示の抗ＣＴＬＡ４抗体は、（１）卵巣、精巣、副腎及び下垂体など、ホルモンの産生に関与する臓器または腺の全部または一部を除去する外科的方法、ならびに（２）患者の臓器または腺に対して、標的ホルモンの産生を阻害または排除するのに十分な量で放射線を照射する放射線治療のような非薬物ホルモン療法と組み合わせて使用してもよい。

【0130】

いくつかの実施形態では、その追加の治療剤は、ポマリスト、レブラミド、レナリドミド、ポマリドミド、サリドマイド、ＤＮＡをアルキル化する白金含有誘導体、シスプラチン、５－フルオロウラシル、シクロホスファミド、抗ＣＤ１３７抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ４０抗体、抗ＤＲ５抗体、抗ＣＤ１ｄ抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＳＬＡＭＦ７抗体、抗ＫＩＲ受容体抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＥｒｂＢ－２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、セツキシマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、ペムブロリズマブ、放射線療法、単回放射線照射、分割放射線照射、焦点放射線照射、全臓器放射線照射、ＩＬ－１２、ＩＦＮα、ＧＭ－ＣＳＦ、キメラ抗原受容体、養子移入Ｔ細胞、抗がんワクチン及び腫瘍溶解性ウイルスの１つ以上である。いくつかの実施形態では、その追加の治療剤は、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態では、その追加の治療剤は、抗ＰＤ－１抗体である。

【0131】

がんを治療するための併用療法には、抗ＣＴＬＡ４抗体と、腫瘍を除去する手術との組み合わせも含まれる。その抗ＣＴＬＡ４抗体は、哺乳動物に、手術前、手術中または手術後に投与してよい。

【0132】

がんを治療するための併用療法には、抗ＣＴＬＡ４抗体と放射線療法、例えば、電離性（電磁）放射線療法（例えば、Ｘ線またはガンマ線）及び粒子線放射線療法（例えば高線エネルギー放射線治療）との組み合わせも含まれる。その放射線源は、その哺乳動物の体外または体内にあることができる。その抗ＣＴＬＡ４抗体は、その哺乳動物に、放射線療法前、放射線療法の最中、放射線療法の後に投与してよい。

【0133】

本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つの組成物であって、本節に記載されている方法で使用するための組成物、及びがん（固形がん、例えば尿路上皮癌など）を治療する医薬の製造に、その抗ＣＴＬＡ４抗体を使用することも提供する。

【0134】

免疫チェックポイント阻害剤
いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせて投与する。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫系の制御機構の活性を阻害する化合物である。免疫系チェックポイントまたは免疫チェックポイントは、免疫系における阻害経路であり、この経路は概して、自己寛容を維持するか、または生理的な免疫応答の継続時間及び規模を調節して、付随する組織損傷を最小限に抑えるように作用する。チェックポイント阻害剤は、その経路において、刺激性チェックポイント分子の活性を刺激したり、または阻害性チェックポイント分子の活性を阻害したりすることによって、免疫系チェックポイントを阻害できる。免疫系チェックポイント分子としては、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ４）、プログラム細胞死１タンパク質（ＰＤ－１）、プログラム細胞死１リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）、プログラム細胞死１リガンド２（ＰＤ－Ｌ２）、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ３）、Ｂ７－１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｔ細胞膜タンパク質３（ＴＩＭ３）、Ｂ－リンパ球及びＴ－リンパ球アテニュエーター（ＢＴＬＡ）、Ｔ細胞活性化のＶ－ドメイン免疫グロブリン（Ｉｇ）含有抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）及びＡ２Ａアデノシン受容体（Ａ２ａＲ）が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、チェックポイント阻害剤としては、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＬＡＧ３、Ｂ７－１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、Ａ２ａＲまたはＴＩＭ３のアンタゴニストが挙げられる。例えば、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＬＡＧ３、Ｂ７－１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、Ａ２ａＲまたはＴＩＭ３に結合して、それらの機能をアンタゴナイズする抗体は、チェックポイント阻害剤である。さらに、免疫系チェックポイントの阻害機能を阻害するいずれの分子（例えば、ペプチド、核酸、小分子など）も、チェックポイント阻害剤である。

【0135】

いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイント分子に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体及び抗ＣＴＬＡ４抗体からなる群から選択する。

【0136】

いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。例示的な抗ＰＤ－１抗体としては、２Ｅ５（Ｃｓｔｏｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）、ＢＧＢ－１０８、ＳＴＩ－Ａ１１１０、ＡＭ０００１、ＢＩ７５４０９１、シンチリマブ（ＩＢＩ３０８）、セトレリマブ（ＪＮＪ－６３７２３２８３）、トリパリマブ（ＪＳ－００１）、カムレリズマブ（ＳＨＲ－１２１０、ＩＮＣＳＨＲ－１２１０、ＨＲ－３０１２１０）、ＭＥＤＩ－０６８０（ＡＭＰ－５１４）、ＭＧＡ－０１２（ＩＮＣＭＧＡ ００１２）、ニボルマブ（ＢＭＳ－９３６５５８、ＭＤＸ１１０６、ＯＮＯ－４５３８）、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００ｌ）、ペムブロリズマブ（ＭＫ－３４７５、ＳＣＨ９００４７５）、ＰＦ－０６８０１５９１、セミプリマブ（ＲＥＧＮ－２８１０、ＲＥＧＥＮ２８１０）、ドスタルリマブ（ＴＳＲ－０４２、ＡＮＢ０１１）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１）、ＦＩＴＣ－ＹＴ－１６（ＰＤ－１結合ペプチド）、ＡＰＬ－５０１、ＣＢＴ－５０１またはゲプタノリマブ（ＧＢ－２２６）、ＡＢ－１２２、ＡＫ１０５、ＡＭＧ４０４、ＢＣＤ－１００、Ｆ５２０、ＨＬＸ１０、ＨＸ００８、ＪＴＸ－４０１４、ＬＺＭ００９、Ｓｙｍ０２１、ＰＳＢ２０５、ＡＭＰ－２２４（ＰＤ－１を標的とする融合タンパク質）、ＣＸ－１８８（ＰＤ－１プロボディ）、ＡＧＥＮ－２０３４、ＧＬＳ－０１０、ブジガリマブ（ＡＢＢＶ－１８１）、ＡＫ－１０３、ＢＡＴ－１３０６、ＣＳ－１００３、ＡＭ－０００１、ＴＩＬＴ－１２３、ＢＨ－２９２２、ＢＨ－２９４１、ＢＨ－２９５０、ＥＮＵＭ－２４４Ｃ８、ＥＮＵＭ－３８８Ｄ４、ＨＡＢ－２１、Ｈ ＥＩＳＣＯＩ １１－００３、ＩＫＴ－２０２、ＭＣＬＡ－１３４、ＭＴ－１７０００、ＰＥＧＭＰ－７、ＰＲＳ－３３２、ＲＸＩ－７６２、ＳＴＩ－１１１０、ＶＸＭ－１０、ＸｍＡｂ－２３１０４、ＡＫ－１１２、ＨＬＸ－２０、ＳＳＩ－３６１、ＡＴ－１６２０１、ＳＮＡ－０１、ＡＢ１２２、ＰＤ１－ＰＩＫ、ＰＦ－０６９３６３０８、ＲＧ－７７６９、ＣＡＢ ＰＤ－１ Ａｂｓ、ＡＫ－１２３、ＭＥＤＩ－３３８７、ＭＥＤＩ－５７７１、４Ｈ１１２８Ｚ－Ｅ２７、ＲＥＭＤ－２８８、ＳＧ－００１、ＢＹ－２４．３、ＣＢ－２０１、ＩＢＩ－３１９、ＯＮＣＲ－１７７、Ｍａｘ－１、ＣＳ－４１００、ＪＢＩ－４２６、ＣＣＣ－０７０１、ＣＣＸ－４５０３、これらのバイオシミラー、及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、当該技術分野で認識されているこれらの抗体のいずれかと、ＰＤ－１への結合に関して競合する抗体も使用できる。いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、２Ｅ５である。２Ｅ５及び関連する抗ＰＤ－１抗体は、例えばＣＮ１０７８４０８８７Ａに記載されており、その特許は、参照により、その全体が本明細書に援用される。いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、トリパリマブである。トリパリマブ及び関連する抗ＰＤ－１抗体は、例えばＵＳ１００６６０１３Ｂ２に記載されており、その特許は、参照により、その全体が本明細書に援用される。

【0137】

いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、そのＶＨは、配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＶＬは、配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３００のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、その抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

【0138】

いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。例示的な抗ＰＤ－Ｌ１抗体としては、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ（イミフィンジ）、ＢＧＢ－Ａ３３３、ＳＨＲ－１３１６（ＨＴＩ－１０８８）、ＣＫ－３０１、ＢＭＳ－９３６５５９、エンバフォリマブ（ＫＮ０３５、ＡＳＣ２２）、ＣＳ１００１、ＭＤＸ－１１０５（ＢＭＳ－９３６５５９）、ＬＹ３３０００５４、ＳＴＩ－Ａ１０１４、ＦＡＺ０５３、ＣＸ－０７２、ＩＮＣＢ０８６５５０、ＧＮＳ－１４８０、ＣＡ－１７０、ＣＫ－３０１、Ｍ－７８２４、ＨＴＩ－１０８８（ＨＴＩ－１３１、ＳＨＲ－１３１６）、ＭＳＢ－２３１１、ＡＫ－１０６、ＡＶＡ－００４、ＢＢＩ－８０１、ＣＡ－３２７、ＣＢＡ－０７１０、ＣＢＴ－５０２、ＦＰＴ－１５５、ＩＫＴ－２０１、ＩＫＴ－７０３、１０－１０３、ＪＳ－００３、ＫＤ－０３３、ＫＹ－１００３、ＭＣＬＡ－１４５、ＭＴ－５０５０、ＳＮＡ－０２、ＢＣＤ－１３５、ＡＰＬ－５０２（ＣＢＴ－４０２またはＴＱＢ２４５０）、ＩＭＣ－００１、ＫＤ－０４５、ＩＮＢＲＸ－１０５、ＫＮ－０４６、ＩＭＣ－２１０２、ＩＭＣ－２１０１、ＫＤ－００５、ＩＭＭ－２５０２、８９Ｚｒ－ＣＸ－０７２、８９Ｚｒ－ＤＦＯ－６Ｅ１１、ＫＹ－１０５５、ＭＥＤＩ－１１０９、ＭＴ－５５９４、ＳＬ－２７９２５２、ＤＳＰ－１０６、Ｇｅｎｓｃｉ－０４７、ＲＥＭＤ－２９０、Ｎ－８０９、ＰＲＳ－３４４、ＦＳ－２２２、ＧＥＮ－１０４６、ＢＨ－２９ｘｘ、ＦＳ－１１８、これらのバイオシミラー、及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、当該技術分野で認識されているこれらの抗体のいずれかと、ＰＤ－Ｌ１への結合に関して競合する抗体も使用できる。いくつかの実施形態では、その免疫チェックポイント阻害剤は、アテゾリズマブである。

【0139】

抗ＣＤ１３７抗体
いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、抗ＣＤ１３７抗体と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、本明細書に記載の抗ＣＤ１３７抗体（完全長抗体及びその抗原結合断片を含む）（第ＩＶ節、抗ＣＤ１３７抗体を参照されたい）のいずれか１つである。

【0140】

ＣＤ１３７（ＣＤ１３７受容体、４－１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９などともいう）は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳ）の膜貫通タンパク質である。ＣＤ１３７に関する現在の理解では、その発現が概して、活性化依存性であり、活性化ＮＫ細胞、活性化ＮＫＴ細胞、制御性Ｔ細胞、樹状細胞（ＤＣ）、刺激されたマスト細胞、分化中の骨髄系細胞、単球、好中球及び好酸球を含む広範な免疫細胞サブセットに存在することが示されている（Ｗａｎｇ，２００９，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２２９：１９２－２１５）。ＣＤ１３７の発現は、腫瘍の脈管系（Ｂｒｏｌｌ，２００１，Ａｍｅｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．１１５（４）：５４３－５４９、Ｓｅａｍａｎ，２００７，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ １１：５３９－５５４）、及び炎症部位またはアテローム性内皮部位（Ｄｒｅｎｋａｒｄ，２００７ ＦＡＳＥＢ Ｊ．２１：４５６－４６３、Ｏｌｏｆｓｓｏｎ，２００８，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １１７：１２９２－１３０１）でも示されている。ＣＤ１３７を刺激するリガンド、すなわちＣＤ１３７リガンド（ＣＤ１３７Ｌ）は、活性化抗原提示細胞（ＡＰＣ）、骨髄系前駆細胞及び造血幹細胞の上に発現する。

【0141】

ＶＥＧＦ阻害剤
いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）は、ＶＥＧＦ阻害剤と組み合わせて投与する。血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）阻害剤は、血管新生阻害剤の一種である。血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の媒介による血管新生は、腫瘍の成長及び転移において重要な役割を果たすと考えられている。いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＶＥＧＦ阻害剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、そのＶＥＧＦ阻害剤は、フルキンチニブ、アンロチニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、パゾパニブ、ブリバニブアラニナート、セジラニブ、バンデタニブ、リニファニブ、アフリベルセプト及び抗ＶＥＧＦ二重特異性抗体からなる群から選択する。

【0142】

化学療法剤
いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、化学療法剤と組み合わせて投与する。「化学療法剤」という用語は、がん細胞を死滅させたり、あるいはがん細胞の成長、分裂、修復及び／または機能を妨害したりすることができる化学物質または生体物質を指す。化学療法剤の例としては、ＷＯ２００６／１２９１６３及びＵＳ２００６０１５３８０８に開示されているものが挙げられ、これらの開示内容は、参照により、本明細書に援用される。特定の化学療法剤の例としては、（１）アルキル化剤、例えば、クロラムブシル（ＬＥＵＫＥＲＡＮ（登録商標））、シクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標））、イホスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、メクロレタミン塩酸塩（ＭＵＳＴＡＲＧＥＮ（登録商標））、チオテパ（ＴＨＩＯＰＬＥＸ（登録商標））、ストレプトゾトシン（ＺＡＮＯＳＡＲ（登録商標））、カルムスチン（ＢＩＣＮＵ（登録商標）、ＧＬＩＡＤＥＬ ＷＡＦＥＲ（登録商標））、ロムスチン（ＣＥＥＮＵ（登録商標））及びダカルバジン（ＤＴＩＣ－ＤＯＭＥ（登録商標））、（２）細胞傷害性抗生物質を含むアルカロイドまたは植物ビンカアルカロイド、例えば、ドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、エピルビシン（ＥＬＬＥＮＣＥ（登録商標）、ＰＨＡＲＭＯＲＵＢＩＣＩＮ（登録商標））、ダウノルビシン（ＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標）、ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標））、ネモルビシン、イダルビシン（ＩＤＡＭＹＣＩＮ ＰＦＳ（登録商標）、ＺＡＶＥＤＯＳ（登録商標））、ミトキサントロン（ＤＨＡＤ（登録商標）、ＮＯＶＡＮＴＲＯＮＥ（登録商標））、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ、ＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標））、プリカマイシン（ＭＩＴＨＲＡＣＩＮ（登録商標））、マイトマイシン（ＭＵＴＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、ブレオマイシン（ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標））、酒石酸ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））、ビンブラスチン（ＶＥＬＢＡＮ（登録商標））、ビンクリスチン（ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標））及びビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標））、（３）代謝拮抗剤、例えば、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ（登録商標））、フルダラビン（ＦＬＵＤＡＲＡ（登録商標））、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、ヒドロキシウレア（ＨＹＤＲＡ（登録商標））、メトトレキサート（ＦＯＬＥＸ（登録商標）、ＭＥＸＡＴＥ、ＴＲＥＸＡＬＬ（登録商標））、ネララビン（ＡＲＲＡＮＯＮ（登録商標））、トリメトレキサート（ＮＥＵＴＲＥＸＩＮ（登録商標））及びペメトレキセド（ＡＬＩＭＴＡ（登録商標））、（４）ピリミジンアンタゴニスト、例えば、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））、ラルチトレキセド（ＴＯＭＵＤＥＸ（登録商標））、テガフール－ウラシル（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））及びゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））、（５）タキサン、例えば、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標））、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、（６）白金系薬物、例えば、シスプラチン（ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標））、カルボプラチン（ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標））及びオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標））、（７）トポイソメラーゼ阻害剤、例えば、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））、トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標））、エトポシド（ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標）、ＶＥＰＥＳＳＩＤ（登録商標）、ＴＯＰＯＳＡＲ（登録商標））及びテニポシド（ＶＵＭＯＮ（登録商標））、（８）エピポドフィロトキシン（ポドフィロトキシン誘導体）、例えば、エトポシド（ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ（登録商標）、ＶＥＰＥＳＳＩＤ（登録商標）、ＴＯＰＯＳＡＲ（登録商標））、（９）葉酸誘導体、例えばロイコボリン（ＷＥＬＬＣＯＶＯＲＩＮ（登録商標））、（１０）ニトロソウレア、例えば、カルムスチン（ＢＩＣＮＵ（登録商標））、ロムスチン（ＣＥＥＮＵ（登録商標））、（１１）上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、インスリン受容体、インスリン様成長因子受容体（ＩＧＦＲ）、肝細胞成長因子受容体（ＨＧＦＲ）及び血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）を含む受容体型チロシンキナーゼの阻害剤、例えば、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標））、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））、ゲフィチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ、サリドマイド、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））、アクシチニブ、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ、ＭＡＢＴＨＥＲＡ（登録商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））及びラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標））、ｌｙｍ－１（ＯＮＣＯＬＹＭ（登録商標））、インスリン様成長因子－１受容体（ＩＧＦ－１Ｒ）に対する抗体であって、ＷＯ２００２／０５３５９６に開示されている抗体）、（１２）血管新生阻害剤、例えば、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、スラミン（ＧＥＲＭＡＮＩＮ（登録商標））、アンギオスタチン、ＳＵ５４１６、サリドマイド及びマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤（バチマスタット及びマリマスタットなど）、ならびに、ＷＯ２００２０５５１０６に開示されているもの、ならびに（１３）プロテアソーム阻害剤、例えばボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））が挙げられる。

【0143】

いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、イカリチン（３，５，７－トリヒドロキシ－２－（４－メトキシフェニル）－８－（３－メチルブタ－２－エニル）クロメン－４－オン、ＰｕｂＣｈｅｍ ＣＩＤ Ｎｏ．５３１８９８０）と組み合わせて投与する。イカリチンは、白血病、リンパ腫及び多発性骨髄腫のような血液悪性腫瘍を含む様々な新生物において抗腫瘍効果を示した伝統的な漢方薬草Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ属から抽出した化合物である。イカリチンは、「ＳＮＧ１６２」とも称することがある。イカリチンの構造は、下に示されている。

【化1】

【0144】

ＰＡＲＰ阻害剤
いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＰＡＲＰ阻害剤と組み合わせて投与する。ＰＡＲＰ阻害剤は、酵素ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の薬理的な阻害剤群である。いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＰＡＲＰ阻害剤と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、そのＰＡＲＰ阻害剤は、オラパリブである。

【0145】

ＩＩＩ．抗ＣＴＬＡ４抗体
本明細書に記載の方法は、ＣＴＬＡ４抗体、ＣＴＬＡ４抗体の抗原結合断片及びＣＴＬＡ４抗体の誘導体を含め、ヒトＣＴＬＡ４に特異的に結合する抗ＣＴＬＡ４抗体の投与を含む。例示的な抗ＣＴＬＡ４抗体は、例えば国際公開第ＷＯ２０１９１４９２８１Ａ１に記載されており、この特許は、参照により、その全体が本明細書に援用される。

【0146】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＨＶＲ、可変領域（ＶＬ、ＶＨ）、ならびに軽鎖及び重鎖の具体的なアミノ酸配列について記載されている抗体（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ４）を含め、本明細書に記載の抗体のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒト化抗体及び／またはキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＴＬＡ４に結合するとともに、（ａ）ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、５００ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する特性、（ｂ）ヒトＣＴＬＡ４に対してアンタゴニスト活性を有する特性、（ｃ）ヒトのＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ９５、ＣＤ１２０ａ、ＯＸ４０、ＣＤ４０、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＩＣＯＳ、及び／またはＢ７－Ｈ４に、１００ｎＭの濃度まで結合しない特性、（ｄ）サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する特性、（ｅ）（例えばＴｒｅｇｓに対して）ＡＤＣＣ作用を誘導する特性、（ｆ）ヒトＰＢＭＣを活性化する（例えば、ＩＬ－２及び／またはＩＦＮγの分泌を刺激する）特性、（ｇ）腫瘍細胞の成長を阻害できる特性、（ｈ）がんに対する治療効果を有する特性、ならびに（ｉ）ヒトＣＴＬＡ４がヒトＣＤ８０及び／またはヒトＣＤ８６に結合するのを遮断する特性という機能的特性の少なくとも１個（例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個または９個すべて）を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＤ８０及び／またはＣＤ８６を固定化したとき（すなわち、プレートに結合したとき）、あるいは、ヒトＣＴＬＡ４タンパク質が細胞表面に存在するときのいずれかのアッセイにおいて、ＣＤ８０及び／またはＣＤ８６のヒトＣＴＬＡ４への結合を遮断する活性が、イピリムマブよりも低い。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体は、ＰＢＭＣまたは脾臓でＴｒｅｇ細胞を枯渇させる場合よりも、腫瘍微小環境において、Ｔｒｅｇ細胞を選択的に枯渇させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体は、腫瘍微小環境において、Ｔｒｅｇ枯渇活性がイピリムマブよりも高い。本明細書では、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、本明細書に記載の抗体または抗原結合断片の１つ以上と交差競合する１つ以上の抗ＣＴＬＡ４抗体または抗原結合断片も１つ以上提供する。

【0147】

いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、約５００ｎＭ以下のＫ_Ｄ（例えば、約５００ｎＭ以下、約４５０ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３５０ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２５０ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１５０ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約９０ｎＭ以下、約８０ｎＭ以下、約７０ｎＭ以下、約６０ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約４０ｎＭ以下、約３０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約２０ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下、約０．１ｎＭ以下など）で結合する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、約３５０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４に、約１００ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４に、約５０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４に、約１０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。抗体または抗原結合断片のＫ_Ｄを測定する方法は、例えば、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡによるなどを含め、当該技術分野で知られているいずれかの方法を用いて行ってよい。いくつかの実施形態では、Ｋ_Ｄは、表面プラズモン共鳴またはＥＬＩＳＡによって測定する（例えば、下記の実施例３を参照されたい）。

【0148】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４に対してアンタゴニスト活性を有する。いくつかの実施形態では、ヒトＣＴＬＡ４を発現する細胞（例えばヒト細胞）が、その抗体または抗原結合断片と接触すると、その抗体または抗原結合断片は、ヒトＣＴＬＡ４の活性の１つ以上を抑制する（例えば、ＣＬＡ４遮断レポーター遺伝子アッセイを用いて、レポーター遺伝子シグナルの増大によって測定した場合、ＣＴＬＡ４が遮断される）。

【0149】

いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、サル（例えばカニクイザル）ＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、サルＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、マウスＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ラットＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、イヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、サルＣＴＬＡ４及びマウスＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、またはサルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片が、非ヒトＣＴＬＡ４分子に、約５００ｎＭ未満（例えば、約１ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約２５ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約７５ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、約１５０ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約２５０ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約３５０ｎＭ未満など）のＫ_Ｄで結合する場合には、その抗体または抗原結合断片は、交差反応性を有する。抗体の交差反応性を測定する方法は、当該技術分野で知られており、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、交差反応性は、ＥＬＩＳＡによって測定する。

【0150】

いくつかの実施形態では、その抗体は、細胞が発現したＣＴＬＡ４に結合した後に、そのＣＴＬＡ４発現細胞（例えば、ＴｒｅｇなどのＣＴＬＡ４発現ヒト細胞）に対して、ＡＤＣＣ作用を誘導する。ＡＤＣＣ作用を測定する方法（例えばｉｎ ｖｉｔｒｏ法）は、当該技術分野で知られている。いくつかの実施形態では、その抗体は、コントロール（例えば、アイソタイプコントロールまたはイピリムマブ）に対して、ＡＤＣＣ作用を約１０％超、誘導する（例えば、ＡＤＣＣを約１０％超、約１５％超、約２０％超、約２５％超、約３０％超、約３５％超、約４０％など、誘導する）。

【0151】

いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、腫瘍細胞の成長及び／または増殖を阻害できる。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞の成長及び／または増殖は、その抗体または抗原結合断片と接触させると、その抗体または抗原結合断片接触させていない対応する腫瘍細胞に対して（またはアイソタイプコントロール抗体と接触させた対応する腫瘍細胞に対して）、少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）阻害される。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片を対象に投与すると、その抗体または抗原結合断片は、その対象において、腫瘍体積を縮小できる。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、その対象の初期の腫瘍体積に対して（例えば、その抗体または抗原結合断片の投与前、アイソタイプコントロール抗体を投与した対象の対応する腫瘍と比べて）、対象において、腫瘍体積を少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）縮小できる。腫瘍細胞の成長／増殖、腫瘍体積及び／または腫瘍の阻害をモニタリングする方法は、当該技術分野で知られている。

【0152】

いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、がんに対して治療効果を有する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、がんの徴候または症状の１つ以上を軽減する。いくつかの実施形態では、がんに罹患している対象は、その抗体または抗原結合断片を投与されると、部分寛解または完全寛解する。

【0153】

別の態様では、本開示は、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、本開示の例示的な抗体のいずれか、例えば、ＴＹ２１５８５、ＴＹ２１５８６、ＴＹ２１５８７、ＴＹ２１５８８、ＴＹ２１５８９、ＴＹ２１５８０、ＴＹ２１５９１、ＴＹ２１６８６、ＴＹ２１６８７、ＴＹ２１６８９、ＴＹ２１６８０、ＴＹ２１６９１及び／またはＴＹ２１６９２と競合または交差競合する単離抗体を提供する。特定の実施形態では、本願は、ヒトＣＴＬＡ４上の同じエピトープへの結合に関して、本開示の例示的な抗体のいずれかと競合または交差競合する単離抗体を提供する。抗体が、結合に関して、別の抗体と競合または交差競合する能力は、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイまたはフローサイトメトリーなど、当該技術分野で知られている標準的な結合アッセイを用いて求めることができる。例えば、本開示の例示的な抗体をヒトＣＴＬＡ４に、飽和条件下で結合させてから、その試験抗体がそのＣＴＬＡ４に結合する能力を測定することができる。その試験抗体が、そのＣＴＬＡ４に、その例示的な抗体と同時に結合できる場合には、その試験抗体は、その例示的な抗体とは異なるエピトープに結合する。しかしながら、その試験抗体が、そのＣＴＬＡ４に、同時には結合できない場合には、その試験抗体は、その例示的な抗体が結合したエピトープと同じエピトープ、そのエピトープと重複するエピトープ、またはそのエピトープに近接しているエピトープに結合する。この実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＦＡＣＳまたは表面プラズモン共鳴などの様々な方法を使用して実施することができる。

【0154】

いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ＣＴＬＡ４とその結合パートナーの１つ以上（例えば、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８０、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８６）との結合を遮断する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ＣＴＬＡ４とそのリガンドとの結合をｉｎ ｖｉｔｒｏで遮断する。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を遮断する半最大阻害濃度（ＩＣ_５０）が約５００ｎＭ以下（例えば、約５００ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下など）である。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、ＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を遮断する半最大阻害濃度（ＩＣ_５０）が約１００ｎＭ以下である。いくつかの実施形態では、その抗体または抗原結合断片は、約１００ｎＭ以上（例えば、約１００ｎＭ以上、約５００ｎＭ以上、約１μＭ以上、約１０μＭ以上など）の濃度で供給すると、ヒトＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を完全に遮断する。本明細書で使用する場合、「完全に遮断すること」または「完全に遮断する」という用語は、その抗体または抗原結合断片が、第１のタンパク質と第２のタンパク質との結合を少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％など）低減する能力を指す。抗体または抗原結合断片が、第１のタンパク質（例えばヒトＣＴＬＡ４）と第２のタンパク質（例えば、ヒトＣＤ８０またはヒトＣＤ８６）との結合を遮断する能力を測定する方法は、当該技術分野で知られており、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイ及びフローサイトメトリーによるものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体は、リガンドの結合を遮断する活性が、イピリムマブよりも低い。

【0155】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、表面プラズモン共鳴によって測定した場合に、ヒトＣＴＬＡ４に、１０００ｎＭ以下（例えば、５０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下）のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その抗体は、カニクイザル、マウス、ラット及びイヌから選択した少なくとも１つの非ヒト種との交差反応性を有する。

【0156】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のリガンド結合部位と同様のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のＣＤ８０結合部位と同様のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のＣＤ８６結合部位と同様のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のリガンド結合部位（例えば、ＣＤ８０結合部位及び／またはＣＤ８６結合部位）内のアミノ酸残基を１つ以上含むエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒトＣＴＬＡ４上のエピトープのうち、イピリムマブのエピトープとは異なるエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、そのエピトープは、ヒトＣＴＬＡ４のＣＣ’ループモチーフ内のアミノ酸残基を含まない。いくつかの実施形態では、そのエピトープは、ヒトＣＴＬＡ４のＬ１０６またはＩ１０８というアミノ酸残基を含まない。いくつかの実施形態では、その抗体は、ヒトＣＴＬＡ４のＹ１０５及びＬ１０６というアミノ酸残基を含むが、Ｉ１０８を含まないエピトープに特異的に結合し、そのアミノ酸残基のナンバリングは、ＫＡＭＨＶＡＱＰＡＶＶＬＡＳＳＲＧＩＡＳＦＶＣＥＹＡＳＰＧＫＡＴＥＶＲＶＴＶＬＲＱＡＤＳＱＶＴＥＶＣＡＡＴＹＭＭＧＮＥＬＴＦＬＤＤＳＩＣＴＧＴＳＳＧＮＱＶＮＬＴＩＱＧＬＲＡＭＤＴＧＬＹＩＣＫＶＥＬＭＹＰＰＰＹＹＬＧＩＧＮＧＴＱＩＹＶＩＤＰＥ（配列番号２０７）によるものである。

【0157】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、ａ）その重鎖可変領域は、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＨＶＲ－Ｈ１は、式（Ｉ）：Ｘ１ＴＦＳＸ２ＹＸ３ＩＨＷＶ（配列番号１）（式中、Ｘ１は、ＦもしくはＹであり、Ｘ２は、ＤもしくはＧであり、Ｘ３は、Ａ、ＧもしくはＷである）、式（ＩＩ）：ＹＳＩＸ１ＳＧＸ２Ｘ３ＷＸ４ＷＩ（配列番号２）（式中、Ｘ１は、ＳもしくはＴであり、Ｘ２は、ＨもしくはＹであり、Ｘ３は、ＨもしくはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＤもしくはＳである）、及び式（ＩＩＩ）：ＦＳＬＳＴＧＧＶＡＶＸ１ＷＩ（配列番号３）（式中、Ｘ１は、ＧもしくはＳである）から選択した式によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｈ２は、式（ＩＶ）：ＩＧＸ１ＩＸ２ＨＳＧＳＴＹＹＳＸ３ＳＬＫＳＲＶ（配列番号４）（式中、Ｘ１は、ＤもしくはＥであり、Ｘ２は、ＳもしくはＹであり、Ｘ３は、ＰもしくはＱである）、式（Ｖ）：ＩＧＸ１ＩＳＰＳＸ２ＧＸ３ＴＸ４ＹＡＱＫＦＱＧＲＶ（配列番号５）（式中、Ｘ１は、ＩもしくはＷであり、Ｘ２は、ＧもしくはＳであり、Ｘ３は、ＧもしくはＳであり、Ｘ４は、ＫもしくはＮである）、及び式（ＶＩ）：ＶＳＸ１ＩＳＧＸ２ＧＸ３Ｘ４ＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ（配列番号６）（式中、Ｘ１は、Ａ、ＧもしくはＳであり、Ｘ２は、ＳもしくはＹであり、Ｘ３は、ＧもしくはＳであり、Ｘ４は、ＳもしくはＴである）から選択した式によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｈ３は、式（ＶＩＩ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＦＤＸ５（配列番号７）（式中、Ｘ１は、Ｇ、ＲもしくはＳであり、Ｘ２は、Ａ、ＩもしくはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、ＶもしくはＹであり、Ｘ４は、Ａ、ＥもしくはＹであり、Ｘ５は、ＩもしくはＹである）、式（ＶＩＩＩ）：ＡＲＸ１ＧＸ２ＧＹＦＤＸ３（配列番号８）（式中、Ｘ１は、ＤもしくはＬであり、Ｘ２は、ＦもしくはＹであり、Ｘ３は、ＶもしくはＹである）、式（ＩＸ）：ＡＲＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ＡＸ５Ｘ６ＦＤＹ（配列番号９）（式中、Ｘ１は、ＬもしくはＲであり、Ｘ２は、ＩもしくはＰであり、Ｘ３は、ＡもしくはＹであり、Ｘ４は、ＳもしくはＴであり、Ｘ５は、ＴもしくはＹであり、Ｘ６は、ＡもしくはＹである）、及び式（Ｘ）：ＡＲＤＸ１Ｘ２Ｘ３ＧＳＳＧＹＹＸ４ＧＦＤＸ５（配列番号１０）（式中、Ｘ１は、ＩもしくはＶであり、Ｘ２は、ＡもしくはＨであり、Ｘ３は、ＰもしくはＳであり、Ｘ４は、ＤもしくはＹであり、Ｘ５は、ＦもしくはＶである）から選択した式によるアミノ酸配列を含み、及び／またはｂ）その軽鎖可変領域は、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、そのＨＶＲ－Ｌ１は、式（ＸＩ）：ＲＡＳＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＳＸ４ＬＸ５（配列番号１１）（式中、Ｘ１は、ＧもしくはＳであり、Ｘ２は、ＩもしくＶであり、Ｘ３は、ＧもしくはＳであり、Ｘ４は、ＳもしくはＹであり、Ｘ５は、ＡもしくはＮである）、式（ＸＩＩ）：ＲＡＳＱＸ１ＶＸ２Ｘ３ＲＸ４ＬＡ（配列番号１２）（式中、Ｘ１は、ＳもしくはＴであり、Ｘ２は、Ｆ、ＲもしくはＳであり、Ｘ３は、ＧもしくはＳであり、Ｘ４は、ＦもしくはＹである）、及び式（ＸＩＩＩ）：ＲＡＳＸ１ＳＶＤＦＸ２ＧＸ３ＳＦＬＸ４（配列番号１３）（式中、Ｘ１は、ＥもしくはＱであり、Ｘ２は、Ｄ、Ｆ、ＨもしくはＹであり、Ｘ３は、Ｆ、ＩもしくはＫであり、Ｘ４は、Ａ、ＤもしくはＨである）から選択した式によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｌ２は、式（ＸＩＶ）：Ｘ１ＡＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＧＸ６（配列番号１４）（式中、Ｘ１は、ＡもしくはＤであり、Ｘ２は、Ｎ、ＳもしくはＴであり、Ｘ３は、ＬもしくはＲであり、Ｘ４は、Ａ、ＥもしくはＱであり、Ｘ５は、ＳもしくはＴであり、Ｘ６は、ＩもしくはＶである）によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｌ３は、式（ＸＶ）：ＹＣＸ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６ＰＸ７Ｔ（配列番号１５）（式中、Ｘ１は、Ｅ、ＱもしくはＶであり、Ｘ２は、ＨもしくはＱであり、Ｘ３は、Ａ、Ｇ、Ｈ、ＲもしくはＳであり、Ｘ４は、Ｄ、Ｌ、ＳもしくはＹであり、Ｘ５は、Ｅ、Ｇ、Ｐ、ＱもしくはＳであり、Ｘ６は、Ｌ、Ｔ、ＶもしくはＷであり、Ｘ７は、Ｆ、Ｌ、Ｐ、ＷもしくはＹである）、式（ＸＶＩ）：ＹＣＱＱＸ１Ｘ２Ｘ３ＷＰＰＷＴ（配列番号１６）（式中、Ｘ１は、ＳもしくはＹであり、Ｘ２は、ＤもしくはＹであり、Ｘ３は、ＱもしくはＹである）、及び式（ＸＶＩＩ）：ＹＣＱＸ１ＹＸ２ＳＳＰＰＸ３ＹＴ（配列番号１７）（式中、Ｘ１は、ＨもしくはＱであり、Ｘ２は、ＴもしくはＶであり、Ｘ３は、ＥもしくはＶである）から選択した式によるアミノ酸配列を含む。

【0158】

いくつかの実施形態では、その抗体は、ａ）配列番号１８～２９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３０～３９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号４０～５２から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、及び／またはｂ）配列番号５３～６５から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６～６９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７０～８１から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、下記の表Ａに記載されている例示的な抗体のいずれかについて示されているＨＶＲのうちの１個、２個、３個、４個、５個または６個すべてを含む。

【表2-1】

【表2-2】

【0159】

いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0160】

いくつかの実施形態では、その抗体は、ａ）配列番号８２～９４から選択したアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／またはｂ）配列番号９５～１０７から選択したアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８２～９４から選択した配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％）であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号９５～１０７から選択した配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％）であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、下記の表Ｂに記載されている例示的な抗体のいずれかの重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、下記の表Ｂに記載されている例示的な抗体のいずれかについて示されている重鎖可変領域のＨＶＲの１個、２個もしくは３個すべて、及び／または軽鎖可変領域のＨＶＲの１個、２個もしくは３個すべてを含む。

【表3-1】

【表3-2】

【0161】

いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号９９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１００のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号９２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号９３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号９４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２１のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、抗体種のミックスであって、それぞれの抗体種が、配列番号３２２のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び配列番号３２０または３２１のアミノ酸配列のいずれかを含む重鎖を有するミックスを指す。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、抗体種のミックスであって、それぞれの抗体種が、配列番号３２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び配列番号３２３または３２４のアミノ酸配列のいずれかを含む重鎖を有するミックスを指す。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、配列番号３２７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、その抗体は、抗体種のミックスであって、それぞれの抗体種が、配列番号３２８のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び配列番号３２６または３２１のアミノ酸配列のいずれかを含む重鎖を有するミックスを指す。

【0162】

いくつかの実施形態では、本願の抗体は、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、ａ）配列番号１８～２９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３０～３９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号４０～５２から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、及び／またはｂ）配列番号５３～６５から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６～６９から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７０～８１から選択したアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗体と交差競合する。いくつかの実施形態では、本願の抗体は、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、表Ａに記載されている例示的な抗体のいずれかについて示されているＨＶＲの１個、２個、３個、４個、５個または６個すべてを含む抗体と交差競合する。いくつかの実施形態では、本願の抗体は、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、ａ）配列番号８２～９４から選択したアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／またはｂ）配列番号９５～１０７から選択したアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗体と交差競合する。いくつかの実施形態では、本願の抗体は、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、表Ｂに記載されている例示的な抗体のいずれかについて示されているＶＨ及び／またはＶＬを含む抗体と交差競合する。

【0163】

本明細書に記載のＣＴＬＡ４抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡまたはＩｇＤなどのいずれかのクラスのものであってよい。いくつかの実施形態では、そのＣＴＬＡ４抗体は、ＩｇＧ１サブクラス、ＩｇＧ２サブクラスＩｇＧ３またはＩｇＧ４サブクラスなどのＩｇＧクラスのものである。ＣＴＬＡ４抗体は、当該技術分野で知られている方法を用いて、ある１つのクラスまたはサブクラスから、別のクラスまたはサブクラスに変換できる。所望のクラスまたはサブクラスの抗体を作製する例示的な方法は、ＣＴＬＡ４抗体の重鎖をコードする核酸と、ＣＴＬＡ４抗体の軽鎖をコードする核酸を単離する工程と、Ｖ_Ｈ領域をコードする配列を単離する工程と、所望のクラスまたはサブクラスの重鎖定常領域をコードする配列に、そのＶ_Ｈ配列をライゲーションする工程と、その軽鎖遺伝子と、その重鎖コンストラクトを細胞内で発現させる工程と、そのＣＴＬＡ４抗体を回収する工程を含む。本願の抗体は、モノクローナル抗体であっても、またはポリクローナル抗体であってもよい。本願の抗体は、単特異性の抗体であっても、または多特異性（例えば、二重特異性、三重特異性など）の抗体であってもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＴＬＡ４抗体は、Ｆｃ変異（例えば、ＡＤＣＣ活性またはＣＤＣ活性を調節する（増減させる）変異）を１つ以上含んでよい。当該技術分野で知られているいずれかの適切なＦｃ変異を本願のＣＴＬＡ４抗体で用いてよい。

【0164】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、抗ＣＴＬＡ４抗体の抗原結合断片である。ＣＴＬＡ４抗体の抗原結合断片としては、（ｉ）Ｖ_Ｌドメイン、Ｖ_Ｈドメイン、Ｃ_Ｌドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２個のＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ’）_２断片、（ｉｉｉ）Ｖ_Ｈドメイン及びＣ_Ｈ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一アームのＶ_Ｌドメイン及びＶ_ＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）Ｖ_ＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４－５４６）、（ｖｉ）単離ＣＤＲ、ならびに（ｖｉｉ）抗体のＶ_Ｈ領域に連結された、抗体のＶ_Ｌ領域を含むポリペプチドである一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）（例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６、Ｈｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照されたい）が挙げられる。

【0165】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＴＬＡ４抗体は、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のうちのいずれか１つの誘導体である。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、本願の例示的な抗体（例えば「親抗体」）のアミノ酸配列の修飾体から得られる一方で、その親抗体のアミノ酸配列の全体的な分子構造は保存されている。フレームワーク領域、ＨＶＲ領域または定常領域など、親抗体鎖のうちのいずれかの領域のアミノ酸配列が改変されていてよい。改変の種類としては、親抗体のアミノ酸の１つ以上の置換、挿入、欠失またはこれらの組み合わせが挙げられる。

【0166】

いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号８２～１０７のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるＶ_Ｌ領域またはＶ_Ｈ領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号１８～２９のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｈ１領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号３０～３９のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｈ２領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号４０～５２のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｈ３領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号５３～６５のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｌ１領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号６６～６９のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｌ２領域を含む。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、配列番号７０～８１のいずれかに示されているようなアミノ酸配列と少なくとも６５％、少なくとも７５％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列のＨＶＲ－Ｌ３領域を含む。

【0167】

いくつかの特定の実施形態では、その誘導体は、配列番号１８～１０７のいずれかに示されているようなアミノ酸配列に対して、保存的もしくは非保存的置換を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個もしくは１５個、及び／または付加及び／または欠失を１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個もしくは１５個含む。

【0168】

アミノ酸置換には、保存的置換及び非保存的置換の両方が含まれる。「保存的アミノ酸置換」という用語は、ある１つのアミノ酸を別のアミノ酸に置き換えることであって、その２つのアミノ酸において、関係する残基の極性、電荷、溶解度、疎水性、親水性及び／または両親媒性などの特定の物理化学的特性が類似していることを意味する。例えば、置換は典型的には、（ａ）アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン及びメチオニンなどの非極性（疎水性）アミノ酸、（ｂ）グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン及びグルタミンなどの極性中性アミノ酸、（ｃ）アルギニン、リジン及びヒスチジンなど、正電荷を持つ（塩基性）アミノ酸、ならびに（ｄ）アスパラギン酸及びグルタミン酸など、負電荷を持つ（酸性）アミノ酸というそれぞれの群の中で行ってよい。

【0169】

その修飾は、ＨＶＲ、フレームワーク領域または定常領域を含め、抗体のアミノ酸配列の位置のいずれかで行ってよい。一実施形態では、本願は、本開示の例示的な抗体のＶ_Ｈ及びＶ_ＬのＨＶＲ配列を含むが、その例示的な抗体のフレームワーク配列とは異なるフレームワーク配列を含む抗体誘導体を提供する。このようなフレームワーク配列は、生殖細胞系抗体の遺伝子配列を含む公共のＤＮＡデータベースまたは公開されている参考文献から得ることができる。例えば、ヒトの重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の遺伝子の生殖細胞系ＤＮＡ配列は、Ｇｅｎｂａｎｋデータベースまたはヒト生殖細胞系配列データベース「ＶＢａｓｅ」に見ることができる（Ｋａｂａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２（１９９１）、Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７７６－７９８（１９９２）及びＣｏｘ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：８２７－８３６（１９９４））。抗体誘導体を構築する際に用いてよいフレームワーク配列としては、本開示の例示的な抗体によって用いられているフレームワーク配列と構造的に似ている配列が挙げられる。例えば、フレームワーク配列の由来元である生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子に見られる配列と同一の配列を有するフレームワーク領域に、例示的な抗体のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３の配列、ならびにＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３の配列を移植することもできるし、またはその生殖細胞系配列と比べて変異を１つ以上含むフレームワーク領域に、それらのＨＶＲ配列を移植することもできる。

【0170】

いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、本開示の例示的な抗体のアミノ酸配列を含むキメラ抗体である。一例では、１つ以上の例示的な抗体の１つ以上のＨＶＲと、マウスまたはラットなどの非ヒト動物に由来する抗体のＨＶＲを組み合わせる。別の例では、そのキメラ抗体のＨＶＲのすべてが、１つ以上の例示的な抗体に由来する。いくつかの特定の実施形態では、そのキメラ抗体は、例示的な抗体重鎖可変領域のＨＶＲを１個、２個もしくは３個、及び／または例示的な抗体軽鎖可変領域のＨＶＲを１個、２個もしくは３個含む。キメラ抗体は、当該技術分野で知られている従来の方法を用いて作製できる。

【0171】

別の種類の修飾は、Ｖ_Ｈ鎖及び／またはＶ_Ｌ鎖のＨＶＲ領域内のアミノ酸残基を変異させることである。部位特異的変異誘発またはＰＣＲ媒介変異誘発を行って、変異（複数可）を導入でき、当該技術分野で知られているｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏでのアッセイで、抗体結合に対する作用、または該当するその他の機能的特性を評価できる。典型的には、保存的置換を導入する。その変異は、アミノ酸の付加及び／または欠失であってよい。さらに、典型的には、ＨＶＲ領域内の１個以下、２個以下、３個以下、４個以下または５個以下の残基を変更する。いくつかの実施形態では、その抗体誘導体は、重鎖ＨＶＲ及び／または軽鎖ＨＶＲに、アミノ酸置換を１個、２個、３個または４個含む。別の実施形態では、そのアミノ酸置換は、抗体中の１つ以上のシステインを別の残基、例えば、アラニンまたはセリン（これらに限らない）に変更することである。そのシステインは、カノニカルまたは非カノニカルなシステインであってよい。一実施形態では、その抗体誘導体は、その重鎖ＨＶＲ領域に、例示的な抗体のアミノ酸配列に対して、保存的アミノ酸置換を１個、２個、３個または４個有する。

【0172】

修飾は、Ｖ_Ｈ領域及び／またはＶ_Ｌ領域内のフレームワーク残基にも加えてもよい。典型的には、このようなフレームワークバリアントを作製して、その抗体の免疫原性を低下させる。アプローチの１つは、１つ以上のフレームワーク残基を、対応する生殖細胞系配列に「復帰変異させる」ことである。体細胞変異を加えた抗体は、その抗体の由来元である生殖細胞系配列とは異なるフレームワーク残基を含むことがある。このような残基は、その抗体のフレームワーク配列と、その抗体の由来元である生殖細胞系配列を比較することによって特定できる。そのフレームワーク領域配列を生殖細胞系の構造に復帰させるためには、例えば部位特異的変異誘発またはＰＣＲ媒介変異誘発によって、その体細胞変異を生殖細胞系配列に「復帰変異」させることができる。

【0173】

加えて、例示的な抗体のＦｃ領域内にも修飾を行って、典型的には、その抗体の機能的特性の１つ以上、例えば、血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合及び／または抗体依存性細胞傷害を変化させてもよい。一例では、ＣＨ１のヒンジ領域を修飾して、ヒンジ領域内のシステイン残基の数を変更、例えば増減させるようにする。このアプローチは、米国特許第５，６７７，４２５号にさらに記載されている。ＣＨ１のヒンジ領域内のシステイン残基の数を変化させて、例えば、軽鎖及び重鎖のアセンブルを促したり、またはその抗体の安定性を増減させたりする。別の場合には、抗体のＦｃヒンジ領域を変異させて、その抗体の生物学的半減期を短縮する。

【0174】

さらに、本願の抗体を修飾して、当該技術分野で知られている慣用的な実験に従って、その潜在的な糖鎖付加部位または糖鎖付加パターンを変更してよい。別の態様では、本願は、軽鎖または重鎖の可変領域内の変異であって、その可変領域での糖鎖付加のパターンを変化させる変異を少なくとも１つ含むＣＴＬＡ４抗体誘導体を提供する。このような抗体誘導体は、抗原との結合に関して、親和性が向上し、及び／または特異性が改変されていてもよい。その変異により、新規な糖鎖付加部位がＶ領域に加わるか、１つ以上のＶ領域糖鎖付加部位（複数可）の位置が変化するか、または既存のＶ領域糖鎖付加部位が除去されてよい。一実施形態では、本願は、重鎖可変領域のアスパラギンに、潜在的なＮ－結合型糖鎖付加部位を有するＣＴＬＡ４抗体誘導体であって、１つの重鎖可変領域において、潜在的なＮ－結合型糖鎖付加部位が除去されている誘導体を提供する。別の実施形態では、本願は、重鎖可変領域のアスパラギンに、潜在的なＮ－結合型糖鎖付加部位を有するＣＴＬＡ４抗体誘導体であって、両方の重鎖可変領域の潜在的なＮ－結合型糖鎖付加部位が除去されている誘導体を提供する。抗体の糖鎖付加パターンを変更する方法は、米国特許第６，９３３，３６８号（その開示内容は、参照により、本明細書に援用される）に記載されている方法など、当該技術分野で知られている。

【0175】

ＣＴＬＡ４を標的とする活性化可能な結合ポリペプチド
本開示は部分的には、精度／状況依存性の活性化可能な結合ポリペプチド（すなわち活性化可能な抗体）であって、ヒトＣＴＬＡ４に結合する抗体に関するものでもあり、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体の結合断片及び／または抗ＣＴＬＡ４抗体誘導体）を含む活性化可能な抗体、その活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体の抗原結合断片、及び／またはその活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体の誘導体のいずれかが挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、安全性プロファイルが改善していてよい。例えば、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体は、脾臓の重量変化によって評価した場合に、安全マージンが増大していてよい。薬物の投与量の増加に伴い、脾臓サイズが変化したことをベンチマークとして利用して、使用する候補薬の安全マージンを評価する。本明細書に記載の活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体は、親抗体（マスキング部分を有さない抗体）に対して、安全マージンが増大している。いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、「ＳＡＦＥｂｏｄｙ」という。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、ＴＹ２２４０４である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、二重特異性抗体（例えば、抗ＣＴＬＡ４かつ抗ＰＤ１の抗体、抗ＣＴＬＡ４かつ抗ＰＤ－Ｌ１の抗体、または抗ＣＴＬＡ４かつ抗ＣＤ１３７の抗体）である。

【0176】

いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、（ａ）マスキング部分（ＭＭ）、（ｂ）切断可能な部分（ＣＭ）、及び（ｃ）標的結合部分（ＴＢＭ）を含む。いくつかの実施形態では、そのＭＭは、本明細書に記載のマスキング部分のいずれかである。いくつかの実施形態では、そのＣＭは、本明細書に記載の切断可能な部分のいずれかである。いくつかの実施形態では、そのＴＢＭは、本明細書に記載の標的結合部分（例えば、抗体軽鎖可変領域及び／または抗体重鎖可変領域、例えば、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のうちのいずれかのＶＨ及び／またはＶＬを含む標的結合部分（ＴＢＭ））のいずれかである。いくつかの実施形態では、そのＭＭは、ＣＭが切断されていないときには、活性化可能な抗体のその標的（例えば、ヒトＣＴＬＡ４またはヒトＣＤ１３７）への結合を妨害及び／または阻害する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、ＣＭが切断されると、その標的（例えば、ヒトＣＴＬＡ４またはヒトＣＤ１３７）に結合できる。

【0177】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、（ａ）Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドであって、そのＭＭが、本明細書に記載のマスキング部分のいずれかであり、ＣＭが、本明細書に記載の切断可能な部分のいずれかであり、ＴＢＭが、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含むポリペプチドと、（ｂ）抗体重鎖可変領域（ＶＨ）とを含む。

【0178】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、（ａ）Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）を含むポリペプチドであって、そのＭＭが、本明細書に記載のマスキング部分のいずれかであり、ＣＭが、本明細書に記載の切断可能な部分のいずれかであり、ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含むポリペプチドと、（ｂ）抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。

【0179】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及び標的結合部分（ＴＢＭ）ポリペプチドであって、そのＭＭが、本明細書に記載のマスキング部分のいずれかであり、ＣＭが、本明細書に記載の切断可能な部分のいずれかであり、ＴＢＭが、抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）を含むポリペプチドを含む。

【0180】

「活性化可能な結合ポリペプチド」、「ＡＢＰ」または「活性化可能な抗体」という用語には、標的結合部分（ＴＢＭ）、切断可能な部分（ＣＭ）及びマスキング部分（ＭＭ）を含むポリペプチドが含まれる。いくつかの実施形態では、そのＴＢＭは、標的に結合するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、そのＴＢＭは、抗体またはその抗体断片（例えば、本明細書に記載の抗体または抗原結合断片のいずれか）の抗原結合ドメイン（ＡＢＤ）を含む。いくつかの実施形態では、その抗原結合ドメインは、本明細書に記載の重鎖可変領域のＨＶＲの１つ、２つまたは３つを含む重鎖可変領域、ならびに本明細書に記載の軽鎖可変領域のＨＶＲの１つ、２つまたは３つを含む軽鎖可変領域（例えば、表Ａに示されているような例示的な抗体のうちのいずれかの６つすべてのＨＶＲを含め、表Ａに示されているような重鎖可変領域のＨＶＲ配列の１つ、２つもしくは３つ、及び／または軽鎖可変領域のＨＶＲ配列の１つ、２つもしくは３つ）を含む。いくつかの実施形態では、その抗原結合ドメインは、本明細書に記載の重鎖可変領域配列のいずれかを含む重鎖可変領域、及び本明細書に記載の軽鎖可変領域配列のいずれかを含む軽鎖可変領域（例えば、表Ｂに示されているような重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列）を含む。いくつかの実施形態では、そのＴＢＭ（例えば、ＡＢＤを含むＴＢＭ）は、抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）及び抗体重鎖可変領域（ＶＨ）を含み、そのＶＨ及びＶＬは、ＭＭの非存在下で、標的に結合する結合ドメインを形成する。いくつかの実施形態では、そのＶＨ及びＶＬは、例えばｓｃＦｖにおいて共有結合している。いくつかの実施形態では、そのＶＨ及びＶＬは、共有結合していない。いくつかの実施形態では、そのＶＨ及びＶＬは、Ｆａｂ断片を形成する。いくつかの実施形態では、そのＶＨは、抗体の重鎖定常領域に連結しており、そのＶＬは、抗体の軽鎖定常領域に連結している。

【0181】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）－切断可能な部分（ＣＭ）－ＶＬという構造を含むポリペプチドを含み、その活性化可能な抗体はさらに、ＶＨを含む第２のポリペプチドを含む（例えばＦａｂ断片）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）－切断可能な部分（ＣＭ）－ＶＬ－ＶＨという構造を含むポリペプチドを含む（例えばｓｃＦｖ）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）－切断可能な部分（ＣＭ）－ＶＨという構造を含むポリペプチドを含み、その活性化可能な抗体はさらに、ＶＬを含む第２のポリペプチドを含む（例えばＦａｂ断片）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、マスキング部分（ＭＭ）－切断可能な部分（ＣＭ）－ＶＨ－ＶＬという構造を含むポリペプチドを含む（例えば、ｓｃＦｖ）。

【0182】

そのＣＭは概して、切断可能であるアミノ酸配列、例えば、酵素の基質として機能するアミノ酸配列、及び／または還元可能なジスルフィド結合を形成できる、システイン－システインの対を含む。したがって、「切断」、「切断可能な」、「切断された」などという用語が、ＣＭと関連して用いられているときには、それらの用語には、酵素的切断、例えばプロテアーゼによる切断、及び還元剤への暴露に起因し得る、ジスルフィド結合の還元を介して、システイン－システインの対の間のジスルフィド結合を破壊することが含まれる。

【0183】

そのＭＭは、その活性化可能な抗体のＣＭがインタクトな状態（例えば、対応する酵素によって切断されていないか、及び／または未還元のシステイン－システインによるジスルフィド結合を含む状態）であるアミノ酸配列を指し、そのＭＭは、ＴＢＭのその標的への結合を妨害または阻害する。いくつかの実施形態では、そのＭＭは、ＴＢＭのその標的への結合を非常に効率的に妨害または阻害して、ＴＢＭのその標的への結合が、極めて低いか、及び／または検出限界未満である（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイまたはフローサイトメトリーアッセイで結合を検出できない）ようになる。そのＣＭのアミノ酸配列は、ＭＭと重複してもよいし、またはＭＭ内に含まれてもよい。便宜上、「ＡＢＰ」または「活性化可能な抗体」は、本明細書では、その未切断（または「天然型」）の状態及び切断状態の両方のＡＢＰまたは活性化可能な抗体を指す目的で使用されていることに留意されたい。いくつかの実施形態では、例えばプロテアーゼによって、ＣＭが切断されたことにより、切断されたＡＢＰは、ＭＭを欠落でき、その結果、少なくともＭＭが放出される（例えば、ＭＭが、共有結合（例えば、システイン残基間のジスルフィド結合）によってＡＢＰに連結されていない場合）ことは当業者には明らかであろう。例示的なＡＢＰは、以下にさらに詳細に記載されている。

【0184】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、その標的への結合に関して、その標的結合部分を妨害、遮断するか、その標的結合部分の能力を低減するか、その標的結合部分を阻止、阻害するか、またはその標的結合部分と競合する（例えば「不活性な活性化可能な抗体）。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、そのポリペプチドが、活性化（例えば、ｐＨの変化（増減）による活性化、温度シフト（増減）による活性化、第２の分子（小分子またはタンパク質リガンドなど）と接触した後に活性化など）されていないときのみに、その標的への結合に関して、その標的結合部分を妨害、遮断、低減、阻止、阻害するか、またはその標的結合部分と競合する。いくつかの実施形態では、活性化により、切断部分内で、そのポリペプチドの切断が誘導される。いくつかの実施形態では、活性化により、そのポリペプチドにおいて、構造変化（例えば、マスキング部分（ＭＭ）の置き換え）が誘導されて、マスキング部分が、活性化可能な抗体のその標的への結合を阻止しなくなる。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによって、その切断可能な部分（ＣＭ）が切断されていないときのみに、そのマスキング部分（ＭＭ）は、その標的への結合に関して、その標的結合部分を妨害、遮断するか、その標的結合部分の能力を低減するか、その標的結合部分を阻止、阻害するか、またはその標的結合部分と競合する。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、活性化前には、マスキング効率が少なくとも約２．０（例えば、少なくとも約２．０、少なくとも約３．０、少なくとも約４．０、少なくとも約５．０、少なくとも約６．０、少なくとも約７．０、少なくとも約８．０、少なくとも約９．０、少なくとも約１０、少なくとも約２５、少なくとも約５０、少なくとも約７５、少なくとも約１００、少なくとも約１５０、少なくとも約２００、少なくとも約３００、少なくとも約４００、少なくとも約５００など）である。いくつかの実施形態では、マスキング効率は、そのマスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体（活性化前）が、その標的に結合する親和性と、そのマスキング部分を欠損したポリペプチドが、その標的に結合する親和性との差（例えば、マスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体（活性化前）の標的抗原（ＣＴＬＡ４など）に対する親和性と、マスキング部分（ＭＭ）を欠損した親抗体との差、またはマスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体（活性化前）の標的抗原（ＣＴＬＡ４など）に対する親和性と、活性化後のその活性化可能な抗体の標的抗原に対する親和性との差）として測定する。いくつかの実施形態では、そのマスキング効率は、マスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体（活性化前）の結合のＥＣ_５０を親抗体のＥＣ_５０で除することによって（例えば、ＥＬＩＳＡによって、ＥＣ_５０を測定することによる。例えば、実施例８の方法を参照されたい）測定する。いくつかの実施形態では、マスキング効率は、マスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体が、活性化前にその標的に結合する親和性と、マスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体が、活性化後にその標的に結合する親和性との差（例えば、活性化前の活性化可能な抗体の標的抗原（ＣＴＬＡ４）に対する親和性と、活性化後の活性化可能な抗体との差）として測定する。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、標的結合部分（ＴＢＭ）に結合し、その活性化可能な抗体が、その標的に結合するのを阻止する（例えば、「不活性な」活性化可能な抗体）。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、標的結合部分（ＴＢＭ）への結合の解離定数が、標的結合部分（ＴＢＭ）のその標的に対する解離定数よりも大きい。

【0185】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体が、活性化した（例えば、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによる処理によって活性化したか、ｐＨの変化（増減）によって活性化したか、温度シフト（増減）によって活性化したか、第２の分子（酵素またはタンパク質リガンドなど）と接触した後に活性化したなど）後には、そのマスキング部分（ＭＭ）は、その標的への結合に関して、その標的結合部分（ＴＢＭ）を妨害、遮断したり、その標的結合部分（ＴＢＭ）の能力を低減したり、その標的結合部分（ＴＢＭ）を阻止、阻害したり、またはその標的結合部分（ＴＢＭ）と競合したりしない。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによって、その切断可能な部分（ＣＭ）が切断された後には、そのマスキング部分（ＭＭ）は、その標的への結合に関して、その標的結合部分（ＴＢＭ）を妨害、遮断したり、その標的結合部分（ＴＢＭ）の能力を低減したり、その標的結合部分（ＴＢＭ）を阻止、阻害したり、またはその標的結合部分（ＴＢＭ）と競合したりしない。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、活性化後には、マスキング効率が最大で約１．７５（例えば、最大で約１．７５、最大で約１．５、最大で約１．４、最大で約１．３、最大で約１．２、最大で約１．１、最大で約１．０、最大で約０．９、最大で約０．８、最大で約０．７、最大で約０．６または最大で約０．５など）である（例えば、親抗体の親和性と比べた、活性化後の活性化可能な抗体の相対的親和性）。

【0186】

いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、一定の位置に１対のシステイン残基を含むマスキング部分（ＭＭ）を含み、その活性化可能な抗体において、コンホメーションが固定されるか、及び／または化学的に不安定な残基（メチオニンもしくはトリプトファンなど）がほとんどないか、もしくはないようになっている。有益なことに、一定の位置に１対のシステイン残基が含まれることで、その活性化可能な抗体のコンホメーションが固定されるようになり、結合親和性及び／または特異性が向上している傾向が見られた。さらに、本開示の活性化可能な抗体には、メチオニンまたはトリプトファンなど、製造プロセスにおいて望ましくない残基をほぼ有さないか、または有さないマスキング部分を含めた。

【0187】

いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、状況依存性である（例えば、ある特定の状況（プロテアーゼが豊富な腫瘍微小環境中など）で活性化する（その状況でのみ、その標的と結合できる））。いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、より従来的な活性化できない抗体よりも、安全性を向上させる（例えば、毒性の低下が見られる、多くの臓器の重量の有意な変化を誘導しない、肝臓の病理組織診断結果、血液分析結果及び／または血液の生化学診断結果を変化させないなど）。いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、薬物動態特性が、より従来的な活性化できない抗体と比べて改善している（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期が長くなっている）。

【0188】

活性化可能な抗ＣＴＬＡ４抗体の活性
いくつかの実施形態では、本開示は、活性型になると、ヒトＣＴＬＡ４に結合する活性化可能な抗体に関するものである（例えば、その活性化可能な抗体は、切断可能な部分において（例えば、１つ以上のプロテアーゼで）切断された後に活性となるが、切断可能な部分にいおて（例えば、１つ以上のプロテアーゼで）切断される前には不活性である）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型になると、（ａ）ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、５００ｎＭ以下、例えば約１０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する特性、（ｂ）ヒトＣＴＬＡ４に対するアンタゴニスト活性を有す恵る特性、（ｃ）ヒトＰＤ－１、ヒトＰＤ－Ｌ１、ヒトＰＤ－Ｌ２、ヒトＬＡＧ３、ヒトＴＩＭ３、ヒトＢ７－Ｈ３、ヒトＣＤ９５、ヒトＣＤ１２０ａ、ヒトＯＸ４０、ヒトＣＤ４０、ヒトＢＴＬＡ、ヒトＶＩＳＴＡ、ヒトＩＣＯＳ及び／またはヒトＢ７－Ｈ４に、１００ｎＭの濃度までは結合しない特性、（ｄ）サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する特性、（ｅ）（例えばＴｒｅｇ）に対してＡＤＣＣ作用を誘導する特性、（ｆ）ヒトＰＢＭＣを活性化する（例えば、ＩＬ－２及び／またはＩＦＮγの分泌を刺激する）特性、（ｇ）腫瘍細胞の成長を阻害できる特性、（ｈ）がんに対して治療効果を有する特性、ならびに（ｉ）ヒトＣＴＬＡ４のヒトＣＤ８０及び／またはヒトＣＤ８６への結合を阻害する特性という機能的特性の少なくとも１個（例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個または９個すべて）を有する。本発明では、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して、本明細書に記載の活性化可能なＣＴＬＡ４標的抗体及び／または抗ＣＴＬＡ４抗体の１つ以上と競合または交差競合する１つ以上の活性化可能な抗体も提供する。

【0189】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときに、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、約５００ｎＭ以上のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、約５００ｎＭ以下（例えば、約５００ｎＭ以下、約４５０ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３５０ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２５０ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１５０ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約９０ｎＭ以下、約８０ｎＭ以下、約７０ｎＭ以下、約６０ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約４０ｎＭ以下、約３０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約２０ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下、約０．１ｎＭ以下など）のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４、カニクイザルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４に、約３５０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４に、約１００ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４に、約５０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４に、約１０ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。活性化可能な抗体のＫ_Ｄを測定する方法は、例えば、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡによるなどを含め、当該技術分野で知られているいずれかの方法を用いて行ってよい。いくつかの実施形態では、Ｋ_Ｄは、ＥＬＩＳＡによって測定する（例えば、下記の実施例を参照されたい）。

【0190】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４に対するアンタゴニスト活性を有さない。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４に対するアンタゴニスト活性を有する（例えば、（Ｔｒｅｇなどに対して）ＡＤＣＣ作用を誘導したり、（ＩＬ－２及び／またはＩＦＮγの分泌を活性化、誘導及び／または刺激するなどによって）ＰＢＭＣを活性化したり、ヒトＣＴＬＡ４のヒトＣＤ８０及び／またはヒトＣＤ８６への結合を遮断したりするなど）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ヒトＣＴＬＡ４の活性の１つ以上を抑制する（例えば、ヒトＣＴＬＡ４を発現する細胞（ヒト細胞など）に、活性化可能な抗体が接触すると、ヒトＣＴＬＡ４の活性の１つ以上を抑制する）。

【0191】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときには、サル（例えばカニクイザル）ＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有さない。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、サル（例えばカニクイザル）ＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及び／またはイヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、サルＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、マウスＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ラットＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、イヌＣＴＬＡ４との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、サルＣＴＬＡ４及びマウスＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４、またはサルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４、ラットＣＴＬＡ４及びイヌＣＴＬＡ４と交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な結合ポリペプチドは、活性型であるときには、約３５０ｎＭ（例えば、約１ｎＭ、約１０ｎＭ、約２５ｎＭ、約５０ｎＭ、約７５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ）において交差反応性を有する。交差反応性を測定する方法は、当該技術分野で知られており、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0192】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときには、（例えば、Ｔｒｅｇのように、ＣＴＬＡ４を発現しているヒト細胞に対して）ＡＤＣＣ作用を誘導しない。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときには、コントロール結合ポリペプチド（例えば親抗体）と比べて、（例えば、Ｔｒｅｇのように、ＣＴＬＡ４を発現しているヒト細胞に対する）ＡＤＣＣ作用が低減されている。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、（例えば、Ｔｒｅｇのように、ＣＴＬＡ４を発現しているヒト細胞に対して）ＡＤＣＣ作用を誘導する。ＡＤＣＣ作用を測定する方法（例えばｉｎ ｖｉｔｒｏ法）は、当該技術分野で知られており、下記の実施例に記載の方法が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、不活性型であるときには、ＡＤＣＣ作用を誘導するのが、コントロール（例えば親抗体）に対して約１０％未満である（例えば、ＡＤＣＣを誘導するのが、約１０％未満、約５％未満、約１％未満などである）。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、活性型であるときには、ＡＤＣＣ作用を誘導するのが、コントロール（例えばアイソタイプコントロール）に対して約１０％超である（例えば、ＡＤＣＣを誘導するのが、約１０％超、約１５％超、約２０％超、約２５％超、約３０％超、約３５％超、約４０％超などである）。

【0193】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、腫瘍細胞の成長及び／または増殖を阻害できる。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体と接触させると、その活性化可能な抗体と接触させていない対応する腫瘍細胞に対して（またはアイソタイプコントロール抗体と接触させた対応する腫瘍細胞に対して）、腫瘍細胞の成長及び／または増殖が少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）阻害される。いくつかの実施形態では、対象に、その活性化可能な抗体を投与すると、その活性化可能な抗体は、その対象において腫瘍体積を縮小できる。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、その対象における初期の腫瘍体積に対して（例えば、その活性化可能な抗体投与前、アイソタイプコントロール抗体を投与された対象における対応する腫瘍と比べて）、対象において腫瘍体積を少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）縮小できる。腫瘍細胞の成長／増殖、腫瘍体積、及び／または腫瘍の阻害をモニタリングする方法は、当該技術分野で知られており、例えば、下記の実施例に記載の方法が挙げられる。

【0194】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、がんに対して治療効果を有する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、がんの徴候または症状の１つ以上を軽減する。いくつかの実施形態では、がんに罹患している対象は、その活性化可能な抗体を投与されると、部分寛解または完全寛解する。

【0195】

いくつかの実施形態では、本開示は、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、及び／またはｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗体と、活性型であるときに、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して競合または交差競合する活性化可能な単離抗体を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ａ）配列番号８７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／またはｂ）配列番号１００のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗体と、活性型であるときに、ヒトＣＴＬＡ４への結合に関して競合または交差競合する活性化可能な単離抗体を提供する。活性化可能な抗体が、結合に関して、ある抗体と競合または交差競合する能力は、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイまたはフローサイトメトリーのように、当該技術分野で知られている標準的な結合アッセイを用いて求めることができる。例えば、飽和条件下で、抗体（例えば、上記のような抗体）をヒトＣＴＬＡ４に結合させ、その活性化可能な試験抗体が、（活性型であるときに）そのＣＴＬＡ４に結合する能力を測定することができる。その活性化可能な試験抗体が、そのＣＴＬＡ４に、その抗体と同時に結合できる場合には、その活性化可能な試験抗体は、その抗体とは異なるエピトープに結合する。しかしながら、その活性化可能な試験抗体が、そのＣＴＬＡ４に、同時に結合できない場合には、その活性化可能な試験抗体は、その抗体が結合したエピトープと同じエピトープ、そのエピトープと重複するエピトープ、またはそのエピトープに近接しているエピトープに結合する。この実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＦＡＣＳまたは表面プラズモン共鳴などの様々な方法を使用して実施することができる。

【0196】

いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、（不活性型であるときには、）ＣＴＬＡ４とその結合パートナーの１つ以上（例えば、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８０、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８６）との結合を阻害しない。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、（活性型であるときには、）ＣＴＬＡ４とその結合パートナーの１つ以上（例えば、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８０、ヒトＣＴＬＡ４とヒトＣＤ８６）との結合を阻害する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、ＣＴＬＡ４とそのリガンドとの結合をｉｎ ｖｉｔｒｏで阻害する。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、ＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を阻害する半最大阻害濃度（ＩＣ_５０）が約５００ｎＭ以下（例えば、約５００ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下など）である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、ＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を阻害する半最大阻害濃度（ＩＣ_５０）が約１００ｎＭ以下である。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、約１００ｎＭ以上（例えば、約１００ｎＭ以上、約５００ｎＭ以上、約１μＭ以上、約１０μＭ以上など）の濃度で供給すると、ヒトＣＴＬＡ４のＣＤ８０及び／またはＣＤ８６への結合を完全に阻害する。本明細書で使用する場合、「完全に阻害すること」または「完全に阻害する」という用語は、その活性化可能な抗体が、第１のタンパク質と第２のタンパク質との結合を少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％など）低減する能力を指す。ポリペプチドが、第１のタンパク質（例えばヒトＣＴＬＡ４）と第２のタンパク質（例えば、ヒトＣＤ８０またはヒトＣＤ８６）との結合を阻害する能力を測定する方法は、当該技術分野で知られており、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイ及びフローサイトメトリーによるものが挙げられるが、これらに限定されない。

【0197】

マスキング部分（ＭＭ）
いくつかの実施形態では、本開示は、マスキング部分（ＭＭ）を含む活性化可能な抗体に関するものである。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、式（ＸＶＩＩＩ）：Ｘ_ｍＣＸ_ｎＣＺ_ｏ（配列番号１３４）によるアミノ酸配列を含み、式中、ｍは、２～１０であり、ｎは、３～１０であり、ｏは、１～１０であり、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｗ、Ｍ及び／またはＣではない。いくつかの実施形態では、式（ＸＶＩＩＩ）のＸ_ｍにおける各Ｘは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸であり、及び／または式（ＸＶＩＩＩ）のＸ_ｎにおける各Ｘは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。いくつかの実施形態では、そのＭＭは、式（ＸＸ）：（ＮＮＫ）_ｍＴＧＹ（ＮＮＫ）_ｎＴＧＹ（ＮＨＣ）_ｏ（配列番号１３６）によるポリヌクレオチド配列によってコードされたポリペプチドを含み、式中、各Ｎは独立して、Ａ、Ｇ、ＴまたはＣであり、各Ｋは独立して、ＴまたはＧであり、各Ｙは独立して、ＴまたはＣであり、各Ｈは独立して、Ａ、ＴまたはＣである。

【0198】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、式（ＸＩＸ）：Ｚ_ｍＣＺ_ｎＣＺ_ｏ（配列番号１３５）によるアミノ酸配列を含み、式中、ｍは、２～１０であり、ｎは、３～１０であり、ｏは、１～１０であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0199】

いくつかの実施形態では、ｍは、２～１０、２～９、２～８、２～７、２～６、２～５、２～４、２～３、３～１０、３～９、３～８、３～７、３～６、３～５、３～４、４～１０、４～９、４～８、４～７、４～６、４～５、５～１０、５～９、５～８、５～７、５～６、６～１０、６～９、６～８、６～７、７～１０、７～９、７～８、８～１０、８～９または９～１０である。いくつかの実施形態では、ｍは、６～８である。いくつかの実施形態では、ｍは、３、４、５、６、７、８、９または１０である。いくつかの実施形態では、ｍは、６である。

【0200】

いくつかの実施形態では、ｎは、３～１０、３～９、３～８、３～７、３～６、３～５、３～４、４～１０、４～９、４～８、４～７、４～６、４～５、５～１０、５～９、５～８、５～７、５～６、６～１０、６～９、６～８、６～７、７～１０、７～９、７～８、８～１０、８～９または９～１０である。いくつかの実施形態では、ｎは、６～８である。いくつかの実施形態では、ｎは、３、４、５、６、７、８、９または１０である。いくつかの実施形態では、ｎは、６である。いくつかの実施形態では、ｎは、８である。

【0201】

いくつかの実施形態では、ｏは、１～１０、１～９、１～８、１～７、１～６、１～５、１～４、１～３、１～２、２～１０、２～９、２～８、２～７、２～６、２～５、２～４、２～３、３～１０、３～９、３～８、３～７、３～６、３～５、３～４、４～１０、４～９、４～８、４～７、４～６、４～５、５～１０、５～９、５～８、５～７、５～６、６～１０、６～９、６～８、６～７、７～１０、７～９、７～８、８～１０、８～９または９～１０である。いくつかの実施形態では、ｏは、１～２である。いくつかの実施形態では、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。いくつかの実施形態では、ｏは、２である。

【0202】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、式（ＸＸＩ）：Ｚ_６ＣＸ_６ＣＺ_２（配列番号１３７）によるアミノ酸配列を含み、式中、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0203】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、式（ＸＸＩＩ）：Ｚ_６ＣＸ_８ＣＺ_２（配列番号１３８）によるアミノ酸配列を含み、式中、Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0204】

いくつかの実施形態では、その第１のペプチド（ＦＰ）は、式（ＸＸＩＩＩ）：（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_２）（配列番号１３９）によるアミノ酸配列を含み、式中、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0205】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、式（ＸＸＩＶ）：（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_８）Ｃ（Ｚ_２）（配列番号１４０）によるアミノ酸配列を含み、式中、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、Ｘ_ｍＣＰＤＨＰＹＰＣＸＸ（配列番号１８１）、Ｘ_ｍＣＤＡＦＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８２）、Ｘ_ｍＣＤＳＨＹＰＹＣＸＸ（配列番号１８３）及びＸ_ｍＣＶＰＹＹＹＡＣＸＸ（配列番号１８４）からなる群から選択した配列を含むマスキング部分（ＭＭ）を含み、式中、ｍは、２～１０であり、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸である。いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、ＥＶＧＳＹＮＦＶＡＤＳＣＰＤＨＰＹＰＣＳＡ（配列番号１８９）、ＥＶＧＳＹＩＶＨＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳ（配列番号１９０）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＮＳ（配列番号１９１）、ＥＶＧＳＹＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１９２）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＱＳ（配列番号１９３）、ＥＶＧＳＹＰＱＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１９５）またはＥＶＧＳＹＰＮＰＡＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１９６）の配列を含むマスキング部分（ＭＭ）を含む。いくつかの実施形態では、そのＭＭは、ＥＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号２１３）、ＥＶＧＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号２１４）、ＥＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳ（配列番号２１５）またはＥＶＧＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳ（配列番号２１６）の配列を含む。

【0206】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、ＮＦＶＡＤＳＣＰＤＨＰＹＰＣＳＡ（配列番号１４１）、ＩＶＨＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳ（配列番号１４２）、ＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＮＳ（配列番号１４３）、ＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１４４）、ＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＱＳ（配列番号１４５）、ＰＱＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１４６）及びＰＮＰＡＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹ（配列番号１４７）から選択したアミノ酸配列を含む。

【0207】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のマスキング部分（ＭＭ）のいずれも、１つ以上の追加のアミノ酸配列（例えば、１つ以上のポリペプチドタグ）をさらに含んでよい。適切な追加のアミノ酸配列の例としては、精製タグ（Ｈｉｓタグ、ＦＬＡＧタグ、マルトース結合タンパク質及びグルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼタグなど）、検出タグ（測光によって検出し得るタグなど（例えば、赤色または緑色蛍光タンパク質など））、検出可能な酵素活性を有するタグ（例えばアルカリホスファターゼなど）、分泌配列、リーダー配列及び／または安定化配列を含むタグ、プロテアーゼ切断部位（例えば、フューリン切断部位、ＴＥＶ切断部位、トロンビン切断部位）などを挙げてよいが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、その１つ以上の追加のアミノ酸配列は、マスキング部分（ＭＭ）のＮ末端にある。いくつかの実施形態では、その追加のアミノ酸配列は、ＥＶＧＳＹ（配列番号１４８）の配列を含むか、またはその配列からなる。

【0208】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分は、活性化前（例えば、切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによる処理前、ｐＨが（局所的に）変化（増減）する前、温度のシフト（増減）前、第２の分子（小分子またはタンパク質リガンドなど）と接触する前など）には、標的結合部分（ＴＢＭ）に結合して、その活性化可能な抗体の標的への結合を阻害するが、活性化後（例えば、切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによる処理後、ｐＨが（局所的に）変化（増減）した後、温度のシフト（増減）後、第２の分子（小分子またはタンパク質リガンドなど）と接触した後など）には、ＴＢＭに結合したり、及び／またはその活性化可能な抗体の標的への結合を阻害したりしない。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、そのＣＭが切断されていないときには、活性化可能な抗体のその標的への結合を阻害するが、そのＣＭが切断されると、その活性化可能な抗体のその標的への結合を阻害しない。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、そのＴＢＭへの結合に関する解離定数が、（活性型であるときの）その活性化可能な抗体のその標的に対する解離定数よりも大きい（例えば、少なくとも約１．５倍超、少なくとも約２倍超、少なくとも約２．５倍超、少なくとも約３倍超、少なくとも約３．５倍超、少なくとも約４倍超、少なくとも約４．５倍超、少なくとも約５倍超、少なくとも約１０倍超、少なくとも約１００倍超、少なくとも約５００倍超など）。

【0209】

切断可能な部分（ＣＭ）
いくつかの実施形態では、本開示は、切断可能な部分（ＣＭ）を含む活性化可能な抗体に関するものである。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）は、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼでの処理、ｐＨの変化（増減）、温度のシフト（増減）、及び／または第２の分子（小分子もしくはタンパク質リガンド）との接触などによって、切断及び／または破壊される。

【0210】

いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）は、少なくとも第１の切断部位（ＣＳ_１）（例えば第１のプロテアーゼ切断部位）を含む。いくつかの実施形態では、その第１の切断部位は、第１のプロテアーゼ切断部位である。いずれかのプロテアーゼ（例えば、そのＣＭを含む活性化可能な抗体の標的と共局在することが知られているプロテアーゼ）によって認識及び／または切断されるいずれかの適切なプロテアーゼ切断部位のうち、当該技術分野で知られている部位を使用してよく、例えば、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ（例えば、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－７、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１０、ＭＭＰ－１１、ＭＭＰ－１２、ＭＭＰ－１３、ＭＭＰ－１４、ＭＭＰ－１５、ＭＭＰ－１６、ＭＭＰ－１７、ＭＭＰ－１９、ＭＭＰ－２０、ＭＭＰ－２３、ＭＭＰ－２４、ＭＭＰ－２６及び／またはＭＭＰ－２７）、タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＡＤＡＭＳ／ＡＤＡＭＴＳ（例えば、ＡＤＡＭ８、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７／ＴＡＣＥ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ４及び／またはＡＤＡＭＴＳ５）、カスパーゼ（例えば、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３及び／またはカスパーゼ－１４）、アスパラギン酸プロテアーゼ（例えば、ＲＡＣＥ及び／またはレニン）、アスパラギン酸カテプシン（例えば、カテプシンＤ及び／またはカテプシンＥ）、システインカテプシン（例えば、カテプシンＢ、カテプシンＣ、カテプシンＫ、カテプシンＬ、カテプシンＳ、カテプシンＶ／Ｌ２及び／またはカテプシンＸ／Ｚ／Ｐ）、システインプロテイナーゼ（例えば、クルジパイン、レグマイン及び／またはオツバイン－２）、ＫＬＫ（例えば、ＫＬＫ４、ＫＬＫ５、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫ８、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３及び／またはＫＬＫ１４）、メタロプロテイナーゼ（例えば、メプリン、ネプリライシン、ＰＳＭＡ及び／またはＢＭＰ－１）、セリンプロテアーゼ（例えば、活性化プロテインＣ、カテプシンＡ、カテプシンＧ、キマーゼ及び／または凝固因子プロテアーゼ（ＦＶＩＩａ、ＦＩＸａ、ＦＸａ、ＦＸＩａ、ＦＸＩＩａなど））、エラスターゼ、グランザイムＢ、グアニジノベンゾアターゼ、ＨｔｒＡ１、ヒト好中球エラスターゼ、ラクトフェリン、マラプシン、ＮＳ３／４Ａ、ＰＡＣＥ４、ｔＰＡ、トリプターゼ、ＩＩ型膜貫通型セリンプロテアーゼ（ＴＴＳＰ）（例えば、ＤＥＳＣ１、ＤＰＰ－４、ＦＡＰ、ヘプシン、マトリプターゼ－２、ＭＴ－ＳＰ１／マトリプターゼ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３及び／またはＴＭＰＲＳＳ４）などによって認識及び／または切断されるプロテアーゼ切断部位が挙げられる。いくつかの実施形態では、第１のプロテアーゼ切断部位は、ｕＰＡ、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１４、ＴＥＶプロテアーゼ、プラスミン、トロンビン、第Ｘ因子、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、カテプシンＤ、カテプシンＫ、カテプシンＳ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭＴＳ、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１、カスパーゼ－１２、カスパーゼ－１３、カスパーゼ－１４及びＴＡＣＥから選択したプロテアーゼの切断部位である。いくつかの実施形態では、第１のプロテアーゼ切断部位は、ｕＰＡ、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９及び／またはＴＥＶプロテアーゼ選択したプロテアーゼの切断部位である。いくつかの実施形態では、プロテアーゼによる切断部は、ＳＧＲＳＡ（配列番号１４９）、ＰＬＧＬＡＧ（配列番号１５０）及びＥＮＬＹＦＱＧ（配列番号１５１）から選択したアミノ酸配列を含む。

【0211】

いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、式（ＸＸＶ）：ＥＶＧＳＹ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号１５２）によるアミノ酸配列を含むマスキング部分（ＭＭ）及び切断可能な部分（ＣＭ）を含み、式中、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰから選択したアミノ酸である。

【0212】

いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、式（ＸＸＶＩ）：ＥＶＧＳＹ（Ｚ_６）Ｃ（Ｘ_６）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号１５３）によるアミノ酸配列を含むマスキング部分（ＭＭ）及び切断可能な部分（ＣＭ）を含み、式中、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹから選択したアミノ酸であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0213】

いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、式（ＸＸＶＩＩ）：ＥＶＧＳＹ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_８）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号１５４）によるアミノ酸配列を含むマスキング部分（ＭＭ）及び切断可能な部分（ＣＭ）を含み、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰから選択したアミノ酸である。

【0214】

いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、式（ＸＸＶＩＩＩ）：ＥＶＧＳＹ（Ｚ_６）Ｃ（Ｘ_８）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号１５５）によるアミノ酸配列を含むマスキング部分（ＭＭ）及び切断可能な部分（ＣＭ）を含み、式中、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0215】

いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）はさらに、第１のリンカー（Ｌ_１）を含む。いくつかの実施形態では、その第１のリンカー（Ｌ_１）は、第１の切断部位（ＣＳ_１）（例えば第１のプロテアーゼ切断部位）のＣ末端側にある。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、（ＣＳ_１）－Ｌ_１という構造を含む。

【0216】

当該技術分野で知られているいずれかの適切なリンカー（例えばフレキシブルリンカー）を用いてよく、例えば、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ（式中、ｎは、少なくとも１（例えば、少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０など）の整数である）、グリシン－セリンポリマー（ＧＳ）ｎ（式中、ｎは、少なくとも１（例えば、少なくとも１つ、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０など）の整数である）、例えば、ＧＧＧＧＳ（配列番号１５６）、ＳＧＧＳ（配列番号１５７）、ＧＧＳＧ（配列番号１５８）、ＧＧＳＧＧ（配列番号１５９）、ＧＳＧＳＧ（配列番号１６０）、ＧＳＧＧＧ（配列番号１６１）、ＧＧＧＳＧ（配列番号１６２）及び／またはＧＳＳＳＧ（配列番号１６３））、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマーなどが挙げられる。リンカー配列は、約１アミノ酸（例えば、グリシンまたはセリン）～約２０アミノ酸（例えば、２０アミノ酸のグリシンポリマーまたはグリシン－セリンポリマー）、約１アミノ酸～約１５アミノ酸、約３アミノ酸～約１２アミノ酸、約４アミノ酸～約１０アミノ酸、約５アミノ酸～約９アミノ酸、約６アミノ酸～約８アミノ酸などのように、いずれかの長さの配列であってよい。いくつかの実施形態では、そのリンカーは、約１アミノ酸長、約２アミノ酸長、約３アミノ酸長、約４アミノ酸長、約５アミノ酸長、約６アミノ酸長、約７アミノ酸長、約８アミノ酸長、約９アミノ酸長、約１０アミノ酸長、約１１アミノ酸長、約１２アミノ酸長、約１３アミノ酸長、約１４アミノ酸長、約１５アミノ酸長、約１６アミノ酸長、約１７アミノ酸長、約１８アミノ酸長、約１９アミノ酸長または約２０アミノ酸長のいずれかである。いくつかの実施形態では、そのリンカーは、配列番号１５９～１６３から選択したアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、そのリンカーは、配列番号１５６または１５７のアミノ酸配列を含む。

【0217】

いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）はさらに、少なくとも第２の切断部位（例えば、少なくとも第２の切断部位、少なくとも第３の切断部位、少なくとも第４の切断部位、少なくとも第５の切断部位など）を含む。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）はさらに、第２の切断部位（ＣＳ_２）を含む。いくつかの実施形態では、その第２の切断部位は、第２のプロテアーゼ切断部位である。その第２のプロテアーゼ切断部位は、上記のプロテアーゼのいずれかによって認識及び／または切断されるいずれかの適切なプロテアーゼ切断部位であってよい。いくつかの実施形態では、第１の切断部位（ＣＳ_１）及び第２の切断部位（ＣＳ_２）は、同じプロテアーゼによって認識及び／または切断されるプロテアーゼ切断部位である。いくつかの実施形態では、第１の切断部位（ＣＳ_１）及び第２の切断部位（ＣＳ_２）は、異なるプロテアーゼによって認識及び／または切断されるプロテアーゼ切断部位である（例えば、第１のプロテアーゼ切断部位は、ｕＰＡによって認識及び／または切断され、第２のプロテアーゼ切断部位は、ＭＭＰ－２によって認識及び／または切断されるか、第１のプロテアーゼ切断部位は、ｕＰＡによって認識及び／または切断され、第２のプロテアーゼ切断部位は、ＭＭＰ－９によって認識及び／または切断されるか、第１のプロテアーゼ切断部位は、ｕＰＡによって認識及び／または切断され、第２のプロテアーゼ切断部位は、ＴＥＶプロテアーゼによって認識及び／または切断されるなど）。いくつかの実施形態では、その少なくとも第２の切断部位（ＣＳ_２）は、第１のリンカー（Ｌ_１）のＣ末端側にある。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、（ＣＳ_１）－Ｌ_１－（ＣＳ_２）という構造を含む。

【0218】

いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）はさらに、少なくとも第２のリンカー（例えば、少なくとも第２のリンカー、少なくとも第３のリンカー、少なくとも第４のリンカー、少なくとも第５のリンカーなど）を含む。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）はさらに、第２のリンカー（Ｌ_２）を含む。その第２のリンカー（Ｌ２）は、上記のいずれかの適切なリンカーであってよい。いくつかの実施形態では、その第２のリンカーは、配列番号１５６～１６３から選択したアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、その第１のリンカー（Ｌ_１）及び第２のリンカー（Ｌ_２）は、同じである（例えば、両方のリンカーとも、配列番号１５６または１５７の配列を含む）。いくつかの実施形態では、その第１のリンカー（Ｌ_１）及び第２のリンカー（Ｌ_２）は、異なる（例えば、その第１のリンカー（Ｌ_１）は、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、その第２のリンカー（Ｌ_２）は、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むなど）。いくつかの実施形態では、その少なくとも第２のリンカー（Ｌ_２）は、第２の切断部位（ＣＳ_２）のＣ末端側にある。いくつかの実施形態では、その切断可能な部分（ＣＭ）は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、（ＣＳ_１）－Ｌ_１－（ＣＳ_２）－Ｌ_２という構造を含む。

【0219】

例示的なＭＭ－ＣＭ配列
いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、（ＦＰ）－（ＰＣＳ_１）－Ｌ_１－（ＰＣＳ_２）－Ｌ_２という構造を含む。いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、式（ＸＸＩＸ）：ＥＶＧＳＹＸ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６ＣＸ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２ＣＸ_１３Ｘ_１４ＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１６４）によるアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１は、Ａ、Ｄ、Ｉ、Ｎ、ＰまたはＹであり、Ｘ２は、Ａ、Ｆ、Ｎ、ＳまたはＶであり、Ｘ３は、Ａ、Ｈ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、ＶまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、Ｈ、ＳまたはＹであり、Ｘ５は、Ａ、Ｄ、Ｐ、Ｓ、ＶまたはＹであり、Ｘ６は、Ａ、Ｄ、Ｌ、ＳまたはＹであり、Ｘ７は、Ｄ、ＰまたはＶであり、Ｘ８は、Ａ、Ｄ、Ｈ、Ｐ、ＳまたはＴであり、Ｘ９は、Ａ、Ｄ、Ｆ、Ｈ、ＰまたはＹであり、Ｘ１０は、Ｌ、ＰまたはＹであり、Ｘ１１は、Ｆ、ＰまたはＹであり、Ｘ１２は、Ａ、Ｐ、ＳまたはＹであり、Ｘ１３は、Ａ、Ｄ、Ｎ、Ｓ、ＴまたはＹであり、Ｘ１４は、Ａ、ＳまたはＹである。いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、ＥＶＧＳＹＤＡＬＨＹＡＣＰＰＤＹＹＡＣＹＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１６５）、ＥＶＧＳＹＮＳＹＨＡＹＣＰＨＰＬＹＰＣＴＡＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１６６）、ＥＶＧＳＹＡＳＳＡＶＬＣＶＴＡＹＦＳＣＮＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１６７）、ＥＶＧＳＹＮＦＶＡＤＳＣＰＤＨＰＹＰＣＳＡＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１６８）、ＥＶＧＳＹＮＦＶＡＤＳＣＰＤＨＰＹＰＣＳＡＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１６９）、ＥＶＧＳＹＩＶＨＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７０）、ＥＶＧＳＹＩＶＨＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１７１）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＮＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７２）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＮＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１７３）、ＥＶＧＳＹＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７４）、ＥＶＧＳＹＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号１７５）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＱＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７６）、ＥＶＧＳＹＹＳＡＹＰＡＣＤＳＨＹＰＹＣＮＳＡＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７７）、ＥＶＧＳＹＰＱＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７８）及び／またはＥＶＧＳＹＰＮＰＡＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号１７９）のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、本開示のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、（ＦＰ）－（ＰＣＳ_１）－Ｌ_１－（ＰＣＳ_２）－Ｌ_２－（ＴＢＭ）という構造を含む。

【0220】

いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、ＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＥＮＬＹＦＱＧＳＧＧＳ（配列番号２２０）、ＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号２２１）またはＳＧＲＳＡＰＬＧＬＡ（配列番号２２２）のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、活性化可能な抗体は、ＥＶ（Ｚｎ）Ｃ（Ｘ_８）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号２１７）、ＥＤＣ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_２）ＳＧＲＳＡ（配列番号２１８）またはＥＤＣ（Ｚ_６）Ｃ（Ｚ_２）ＰＬＧＬＡ（配列番号２１９）の配列を含み、式中、各Ｘは独立して、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択したアミノ酸であり、ｎは、１～１１であり、各Ｚは独立して、Ｄ、Ａ、Ｙ、Ｓ、Ｔ、Ｎ、Ｉ、Ｌ、Ｆ、Ｖ、Ｈ及びＰからなる群から選択したアミノ酸である。

【0221】

標的結合部分（ＴＢＭ）
いくつかの実施形態では、本開示は、標的結合部分（ＴＢＭ）を含む活性化可能な抗体に関するものである。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、抗体軽鎖可変領域及び／または抗体重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、抗体軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、抗体重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、抗体軽鎖可変領域及び抗体重鎖可変領域を含む。

【0222】

いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、完全長抗体軽鎖及び／または完全長抗体重鎖を含む。その抗体軽鎖は、κ軽鎖であってもよいし、またはλ軽鎖であってもよい。その抗体重鎖は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡまたはＩｇＤのようないずれかのクラスのものであってよい。いくつかの実施形態では、その抗体重鎖は、ＩｇＧクラス、例えばＩｇＧ１サブクラス、ＩｇＧ２サブクラス、ＩｇＧ３サブクラスまたはＩｇＧ４サブクラスのものである。本明細書に記載の抗体重鎖は、当該技術分野で知られている方法を用いて、一方のクラスまたはサブクラスから別のクラスまたはサブクラスに変換されていてもよい。

【0223】

本明細書に記載の標的結合部分（ＴＢＭ）のいずれか１つ以上には、本明細書に記載のＨＶＲ配列のいずれか（例えば、上記の表Ａに示されているような、重鎖可変領域のＨＶＲ配列の１つ、２つもしくは３つ、及び／または軽鎖可変領域のＨＶＲ配列の１つ、２つもしくは３つ）、本明細書に記載の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列のいずれか（例えば、上記の表Ｂに示されているような重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列）、及び／または本明細書に記載の抗体のいずれかが組み入れられていてよい。

【0224】

いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、ＨＶＲ、可変領域（ＶＬ、ＶＨ）及び／または軽鎖及び重鎖の具体的アミノ酸配列に関して記載されている抗体（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ４）を含め、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のうちの１つ以上の配列を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、ＲＡＳＱＳＶＲＧＲＦＬＡ（配列番号５８）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、ＤＡＳＮＲＡＴＧＩ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び／またはＹＣＱＱＳＳＳＷＰＰＴ（配列番号７５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗体軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、標的結合部分（ＴＢＭ）は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００の配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％）である配列を含む抗体軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、ＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩ（配列番号２３）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、ＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び／またはＡＲＳＹＶＹＦＤＹ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む抗体重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７の配列との配列同一性が少なくとも９０％（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％）である配列を含む抗体重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、ａ）ＲＡＳＱＳＶＲＧＲＦＬＡ（配列番号５８）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、ＤＡＳＮＲＡＴＧＩ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び／またはＹＣＱＱＳＳＳＷＰＰＴ（配列番号７５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗体軽鎖可変領域、ならびにｂ）ＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩ（配列番号２３）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、ＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び／またはＡＲＳＹＶＹＦＤＹ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む抗体重鎖可変領域含む。いくつかの実施形態では、その標的結合部分（ＴＢＭ）は、配列番号１００のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変領域、及び配列番号８７のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変領域を含む。

【0225】

活性化可能な結合ポリペプチドの特性
いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な結合ポリペプチド（すなわち活性化可能な抗体）は、（ａ）マスキング部分（ＭＭ）、（ｂ）切断可能な部分及び（ｃ）標的結合部分を含む。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）は、その活性化可能な抗体の標的結合部分（ＴＢＭ）に結合し、マスキング部分を欠損している対応する結合ポリペプチドのＣＴＬＡ４（例えばヒトＣＴＬＡ４）への結合と比べて、及び／または親抗体のＣＴＬＡ４（例えばヒトＣＴＬＡ４）への結合と比べて、その活性化可能な結合部分のＣＴＬＡ４（例えばヒトＣＴＬＡ４）への結合を低減または阻害する。

【0226】

いくつかの実施形態では、「活性化可能な」結合ポリペプチドは、阻害されている状態、マスキングされている状態及び／または切断されていない状態であるときに、ＣＴＬＡ４への第１のレベルの結合を示すとともに、阻害されていない状態、マスキングされていない状態及び／または切断された状態で、ＣＴＬＡ４への第２のレベルの結合を示す結合ポリペプチドであって、ＣＴＬＡ４への結合の第２のレベルが、ＣＴＬＡ４への結合の第１のレベルよりも大きい結合ポリペプチドを指す。いくつかの実施形態では、その活性化可能な結合ポリペプチドによるＣＴＬＡ４への接触度は、その切断可能な部分内で（例えば、１つ以上のプロテアーゼによって）切断された後、大きくなる。

【0227】

いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は概して、その活性化可能な抗体の活性化後（例えば、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断する１つ以上のプロテアーゼによる処理によって活性化後、ｐＨの変化（増減）によって活性化後、温度のシフト（増減）によって活性化後、第２の分子（小分子など）と接触したことによって活性化後など）に、そのポリペプチドのＣＴＬＡ４（例えばヒトＣＴＬＡ４）に対する結合親和性が、その活性化可能な抗体の活性化前と比べて、少なくとも約２倍（例えば、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約３倍、少なくとも約３．５倍、少なくとも約４倍、少なくとも約４．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約５．５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約６．５倍、少なくとも約７倍、少なくとも約７．５倍、少なくとも約８倍、少なくとも約８．５倍、少なくとも約９倍、少なくとも約９．５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約７５倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２５０倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約７５０倍または少なくとも約１０００倍以上）上昇するときに、「活性化可能な」結合ポリペプチドであるとみなす。いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は概して、「活性化」後に、その活性化可能な抗体のＥＣ_５０が少なくとも約２分の１（例えば、少なくとも約２分の１、少なくとも約２．５分の１、少なくとも約３分の１、少なくとも約３．５分の１、少なくとも約４分の１、少なくとも約４．５分の１、少なくとも約５分の１、少なくとも約５．５分の１、少なくとも約６分の１、少なくとも約６．５分の１、少なくとも約７分の１、少なくとも約７．５分の１、少なくとも約８分の１、少なくとも約８．５分の１、少なくとも約９分の１、少なくとも約９．５分の１、少なくとも約１０分の１、少なくとも約２５分の１、少なくとも約５０分の１、少なくとも約７５分の１、少なくとも約１００分の１、少なくとも約２５０分の１、少なくとも約５００分の１、少なくとも約７５０分の１または少なくとも約１０００分の１以下）に低下した場合に、「活性化可能」であるとみなす（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイまたはＦＡＣＳアッセイによって測定した場合。下記の実施例を参照されたい）。いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は概して、その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断するプロテアーゼで処理後、そのポリペプチドのＥＣ_５０が、少なくとも約２分の１に低下した場合に、「活性化可能」であるとみなす（例えば、ＥＬＩＳＡアッセイまたはＦＡＣＳアッセイによって測定した場合。下記の実施例を参照されたい）。

【0228】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分（ＭＭ）が、その活性化可能な抗体の標的結合部分（ＴＢＭ）に結合しているときには、その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４に対するＫ_Ｄは、そのマスキング部分（ＭＭ）が、その標的結合部分（ＴＢＭ）に結合していないとき（例えば、その活性化可能な抗体の「活性化」後（その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断するためにプロテアーゼで処理後など））、及び／またはその親抗体のＣＴＬＡ４に対するＫ_Ｄよりも、約２倍（例えば、約２倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約２５倍、約５０倍、約７５倍、約１００倍、約２５０倍、約５００倍、約７５０倍または約１０００倍以上）大きい。親和性を測定する方法は、当該技術分野で知られており、例えば、下記の実施例に記載の方法が挙げられる。

【0229】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分が、その活性化可能な抗体の標的結合部分に結合しているときには、その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４に対するＫ_Ｄは、そのマスキング部分が、その標的結合部分に結合していないとき（例えば、その活性化可能な抗体の「活性化」後（その切断可能な部分（ＣＭ）内で切断するためのプロテアーゼによる処理後など））に対して、及び／またはその親抗体のＣＴＬＡ４に対するＫ_Ｄに対して、少なくとも約２５％（例えば、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％）低下している。親和性を測定する方法は、当該技術分野で知られており、例えば、下記の実施例に記載の方法が挙げられる。

【0230】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分は、その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４への結合を立体的に妨害するか、及び／またはその活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４への結合をアロステリック的に妨害する。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分は、その活性化可能な抗体及び／または親抗体の天然の結合パートナーのアミノ酸配列を含まない。

【0231】

いくつかの実施形態では、そのマスキング部分の標的結合部分に対する解離定数は、（活性化したときの）その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４に対する解離定数よりも大きい。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分の標的結合部分に対する解離定数は、（活性化したときの）その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４に対する解離定数よりも約２倍（例えば、約２倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約２５倍、約５０倍、約７５倍、約１００倍、約２５０倍、約５００倍、約７５０倍または約１０００倍以上）大きい。いくつかの実施形態では、そのマスキング部分の標的結合部分に対する解離定数は、（活性化したときの）その活性化可能な抗体のＣＴＬＡ４に対する解離定数とほぼ等しい。

【0232】

本明細書に記載の活性化可能な抗体は、さらに修飾されていてもよい。いくつかの実施形態では、その活性化可能な抗体は、追加の分子体に連結している。追加の分子体の例としては、医薬剤、ペプチドまたはタンパク質、検出剤または検出標識、及び抗体が挙げられる。

【0233】

いくつかの実施形態では、本開示の活性化可能な抗体は、医薬剤に連結している。医薬剤の例としては、細胞傷害剤またはその他のがん治療剤、及び放射性同位体が挙げられる。細胞傷害剤の具体例としては、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、エチジウムブロマイド、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール及びピューロマイシン、ならびにこれらのアナログまたはホモログが挙げられる。治療剤としては、例えば、代謝拮抗剤（例えば、メトトレキサート、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、シタラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオテパ、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）及びロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ及びシス－ジクロロジアンミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）であるシスプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（以前のダウノマイシン）及びドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前のアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン及びアントラマイシン（ＡＭＣ））、ならびに抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン及びビンブラスチン）も挙げられる。診断または治療での使用のために、抗体にコンジュゲートできる放射性同位体の例としては、ヨウ素^１３１、インジウム^１１１、イットリウム^９０及びルテチウム^１７７が挙げられるが、これらに限定されない。ポリペプチドを医薬剤に連結する方法は、様々なリンカー技術を使用するなど、当該技術分野で知られている。リンカーの種類の例としては、ヒドラゾン、チオエーテル、エステル、ジスルフィド及びペプチドを含むリンカーが挙げられる。リンカー、及び治療剤を抗体に連結する方法のさらなる考察については、例えば、Ｓａｉｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５５：１９９－２１５（２００３）、Ｔｒａｉｌ，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８－３３７（２００３）、Ｐａｙｎｅ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３：２０７－２１２（２００３）、Ａｌｌｅｎ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ ２：７５０－７６３（２００２）、Ｐａｓｔａｎ ａｎｄ Ｋｒｅｉｔｍａｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ３：１０８９－１０９１（２００２）、Ｓｅｎｔｅｒ ａｎｄ Ｓｐｒｉｎｇｅｒ（２００１）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５３：２４７－２６４を参照されたい。

【0234】

ＩＶ．抗ＣＤ１３７抗体
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、ヒトＣＤ１３７の細胞外ドメインに特異的に結合する抗ＣＤ１３７抗体の投与を含む。本明細書に記載の抗ＣＤ１３７抗体には、完全長抗ＣＤ１３７抗体、ＣＤ１３７抗体の抗原結合断片、及びＣＤ１３７抗体の誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、本明細書に記載の抗体のいずれか１つであり、エピトープへの結合に関連して記載されている抗体、ならびにＣＤＲ、可変領域（ＶＬ、ＶＨ）、ＩｇＧ（例えばＩｇＧ４）軽鎖及びＩｇＧ重鎖の具体的なアミノ酸配列に関連して記載されている抗体が挙げられる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、（ａ）ヒトＣＤ１３７に、５００ｎＭ以下のＫＤで結合する特性、（ｂ）ヒトＣＤ１３７に対するアゴニスト活性を有する特性、（ｃ）１０００ｎＭの濃度までは、ヒトＯＸ４０、ヒトＣＤ４０、ヒトＧＩＴＲ及び／またはヒトＣＤ２７の受容体に結合しない特性、（ｄ）サルＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７またはイヌＣＤ１３７との交差反応性を有する特性、（ｅ）ＡＤＣＣ作用を誘導しない特性、（ｆ）腫瘍細胞の成長を阻害できる特性、（ｇ）がんに対する治療効果を有する特性、（ｈ）ＣＤ１３７とＣＤ１３７Ｌとの結合を遮断する特性、ならびに（ｉ）ＣＤ１３７を発現する細胞において、ＣＤ１３７Ｌによって刺激される、ＣＤ１３７のシグナル伝達（例えば、ＣＤ１３７Ｌに刺激されるＮＦ－κＢ依存性の転写）を遮断する特性という機能的特性の少なくとも１個（例えば、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、８個または９個全部）を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されている抗体は、ＣＤ１３７とそのリガンドＣＤ１３７Ｌとの結合を遮断、例えば完全に遮断することもできる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７への結合に関して、本明細書に記載されているような抗体または抗原結合断片の１つ以上と交差競合する抗体（またはその抗原結合断片）である。本明細書に記載の方法に適する例示的な抗ＣＤ１３７抗体は、例えば、ＵＳ２０１９００５５３１４Ａ１、ＷＯ２０１９０３６８５５Ａ１及びＷＯ２０１９０３７７１１Ａ１に記載されており、これらの特許は、参照により、その全体が本明細書に援用される。

【0235】

ヒトＣＤ１３７は、２５５アミノ酸のタンパク質である（例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１５６１、ＮＰ＿００１５５２、配列番号２３１）。そのタンパク質は、シグナル配列（１～１７番目のアミノ酸残基）の後に、細胞外ドメイン（１６９アミノ酸）、膜貫通領域（２７アミノ酸）及び細胞内ドメイン（４２アミノ酸）を含む（Ｃｈｅｕｋ ＡＴＣ ｅｔ ａｌ．２００４ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ １１：２１５－２２６）。その受容体は、細胞表面上に単量体及び二量体の形態で発現し、ＣＤ１３７リガンドと三量体を形成して、シグナルを伝達する可能性が高い。

【0236】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の３４～１０８番目のアミノ酸残基内の１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の３４～９３番目のアミノ酸残基内の１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の３４～３６番目、５３～５５番目及び９２～９３番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の３４～３６番目のアミノ酸残基の１つ以上、５３～５５番目のアミノ酸残基の１つ以上、及び９２～９３番目のアミノ酸残基の１つ以上に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の１０９～１１２番目、１２５番目、１２６番目、１３５～１３８番目、１５０番目及び１５１番目のアミノ酸残基からなる群から選択したアミノ酸残基の１つ以上に結合しない。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の１０９～１１２番目、１２５番目、１２６番目、１３５～１３８番目、１５０番目及び１５１番目のアミノ酸残基に特異的に結合しない。抗体または抗原結合断片が、標的抗原に結合する能力を測定する方法は、当該技術分野で知られているいずれかの方法を用いて行ってよく、例えば、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡなどによるか、またはその抗ＣＤ１３７抗体とＣＤ１３７との結晶構造に基づくものが挙げられる。

【0237】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１４番目のアミノ酸残基からなる群から選択した１つ以上のアミノ酸残基に特異的に結合する。

【0238】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６２～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９５～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、５３番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１６番目のアミノ酸残基に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３１の５１番目、６３～６７番目、６９～７３番目、８３番目、８９番目、９２番目、９８～１０４番目及び１１２～１１４番目のアミノ酸残基に特異的に結合する。

【0239】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７に、約５００ｎＭ以下（例えば、約５００ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１５０ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約９０ｎＭ以下、約８０ｎＭ以下、約７５ｎＭ以下、約７０ｎＭ以下、約６０ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約４０ｎＭ以下、約３０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約２０ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下、約０．１ｎＭ以下など）のＫＤで特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７に、約１００ｎＭ以下のＫＤで特異的に結合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７に、約５０ｎＭ以下のＫＤで特異的に結合する。抗体または抗原結合断片のＫＤを測定する方法は、当該技術分野で知られているいずれかの方法を用いて行ってよく、例えば、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡによるものなどが挙げられる。

【0240】

抗ＣＤ１３７抗体は、アゴニストになるためには、架橋する必要がある。例えば、架橋は、ｉｎ ｖｉｖｏでは、Ｆｃγ受容体を通じて行われ、典型的には、ｉｎ ｖｉｔｒｏでは、細胞ベースの実験で、ポリクローナル抗Ｆｃ抗体が使用される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７に対してアゴニスト活性を有する。いくつかの実施形態では、ヒトＣＤ１３７を発現している細胞（例えばヒト細胞）に、その抗ＣＤ１３７抗体が接触すると、その抗ＣＤ１３７抗体が、ヒトＣＤ１３７の活性の１つ以上（例えば、１つ以上、２つ以上、３つ以上など）を誘導する。様々なＣＤ１３７活性が、当該技術分野で知られており、ＮＦ－κＢ依存性の転写の誘導、Ｔ細胞増殖の誘導、Ｔ細胞生存期間の延長、活性化Ｔ細胞の共刺激、サイトカイン分泌（ＩＬ－２など）の誘導、及び単球活性化の誘導を挙げてよいが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、その１つ以上のＣＤ１３７活性は、ＣＤ１３７のそのリガンドへの結合ではない。ＣＤ１３７活性（例えば、ＮＦ－κＢ依存性の転写及び／またはＴ細胞増殖の誘導など）を測定する方法は、当該技術分野で知られている。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７を発現している細胞（例えばヒト細胞）において、ＮＦ－κＢ依存性の転写を増大させる。いくつかの実施形態では、ＮＦ－κＢ依存性の転写は、ＣＤ１３７を発現している細胞（例えばヒト細胞）であって、その抗ＣＤ１３７抗体と接触させた細胞において、その抗ＣＤ１３７抗体と接触していない対応する細胞（例えば、抗体と接触していない対応する細胞、またはアイソタイプコントロール抗体と接触させた対応する細胞）に対して約１０％以上、約２０％以上、約３０％以上、約４０％以上、約５０％以上、約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約９０％以上または約９９％以上増大する。いくつかの実施形態では、ＮＦ－κＢ依存性の転写は、ＣＤ１３７を発現している細胞（例えばヒト細胞）であって、その抗ＣＤ１３７抗体と接触させた細胞において、その抗ＣＤ１３７抗体と接触していない対応する細胞（例えば、抗体と接触していない対応する細胞、またはアイソタイプコントロール抗体と接触させた対応する細胞）に対して約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１００倍、約１０００倍以上増大する。

【0241】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、サル（例えばカニクイザル）ＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７及び／またはイヌＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、サルＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、マウスＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ラットＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、イヌＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、サルＣＤ１３７及びマウスＣＤ１３７、サルＣＤ１３７及びラットＣＤ１３７、サルＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７及びラットＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、サルＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７及びラットＣＤ１３７、サルＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、サルＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７、またはサルＣＤ１３７、マウスＣＤ１３７、ラットＣＤ１３７及びイヌＣＤ１３７との交差反応性を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、約１００ｎＭ（例えば、約１ｎＭ、約１０ｎＭ、約２５ｎＭ、約５０ｎＭ、約７５ｎＭ、約１００ｎＭ）において交差反応性を有する。抗体の交差反応性を測定する方法は、当該技術分野で知られており、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱測定、フィルター結合アッセイ、ＥＭＳＡなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0242】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＡＤＣＣ作用を誘導しない。ＡＤＣＣ作用を測定する方法（例えばｉｎ ｖｉｖｏ法）は、当該技術分野で知られている。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、コントロールに対して、ＡＤＣＣ作用を誘導するのが約１０％以下である（ＡＤＣＣを誘導するのが約１０％以下、約５％以下、約１％以下、約０．１％以下、約０．０１％以下である）。

【0243】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、腫瘍細胞の成長／増殖を阻害できる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体と接触させると、腫瘍細胞の成長／増殖は、その抗ＣＤ１３７抗体と接触していない対応する腫瘍細胞に対して少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）阻害される。いくつかの実施形態では、対象にその抗ＣＤ１３７抗体を投与すると、その抗ＣＤ１３７抗体は、その対象において腫瘍体積を縮小できる。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、対象において腫瘍体積を、その対象における初期の腫瘍体積（例えば、その抗ＣＤ１３７抗体の投与前）に対して少なくとも約５％（例えば、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または少なくとも約９９％）縮小できる。腫瘍細胞の成長／増殖、腫瘍体積及び／または腫瘍の阻害をモニタリングする方法は、当該技術分野で知られている。

【0244】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、がんに対して治療効果を有する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、がんの徴候または症状の１つ以上を軽減する。いくつかの実施形態では、がんに罹患している対象は、その抗ＣＤ１３７抗体を投与されると、部分寛解または完全寛解する。

【0245】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＡＧ１００５８、ＡＧ１００５９及びＡＤＧ１０６からなる群から選択されている。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７への結合に関して、本願の例示的な抗体のいずれか、例えば、ＡＧ１００５８、ＡＧ１００５９及びＡＤＧ１０６と競合または交差競合する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＣＤ１３７上の同じエピトープへの結合に関して、ＡＧ１００５８、ＡＧ１００５９またはＡＤＧ１０６として、競合または交差競合する抗体である。抗体が、結合に関して、別の抗体と競合または交差競合する能力は、当該技術分野で知られている標準的な結合アッセイ、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイまたはフローサイトメトリーを用いて求めることができる。例えば、本開示の例示的な抗体をヒトＣＤ１３７に、飽和条件下で結合させてから、その試験抗体がＣＤ１３７に結合する能力を測定することができる。その試験抗体が、そのＣＤ１３７に、その例示的な抗体と同時に結合できる場合には、その試験抗体は、その例示的な抗体とは異なるエピトープに結合する。しかしながら、その試験抗体が、そのＣＤ１３７に、同時には結合できない場合には、その試験抗体は、その例示的な抗体が結合したエピトープと同じエピトープ、そのエピトープと重複するエピトープ、またはそのエピトープに近接しているエピトープに結合する。この実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＦＡＣＳまたは表面プラズモン共鳴などの様々な方法を使用して実施することができる。

【0246】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＣＤ１３７とそのリガンド（例えば、ヒトＣＤ１３７とヒトＣＤ１３７Ｌ）との結合を遮断する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＣＤ１３７とそのリガンドとの結合をｉｎ ｖｉｔｒｏで遮断する。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＣＤ１３７のそのリガンドへの結合を遮断する半最大阻害濃度（ＩＣ５０）が、約５００ｎＭ以下（例えば、約５００ｎＭ以下、約４００ｎＭ以下、約３００ｎＭ以下、約２００ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約２５ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下など）である。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＣＤ１３７のそのリガンドへの結合を遮断する半最大阻害濃度（ＩＣ５０）が約１００ｎＭ以下である。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、約１００ｎＭ以上（例えば、約１００ｎＭ以上、約５００ｎＭ以上、約１μＭ以上、約１０μＭ以上など）の濃度で供給すると、ヒトＣＤ１３７のそのリガンドへの結合を完全に遮断する。本明細書で使用する場合、「完全に遮断すること」または「完全に遮断する」という用語は、その抗体または抗原結合断片が、第１のタンパク質と第２のタンパク質との結合を少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％など）低減する能力を指す。抗体または抗原結合断片が、第１のタンパク質（例えばＣＤ１３７）と第２のタンパク質（例えばＣＤ１３７Ｌ）との結合を遮断する能力を測定する方法は、当該技術分野で知られており、ＢＩＡｃｏｒｅ解析、ＥＬＩＳＡアッセイ及びフローサイトメトリーによるものが挙げられるが、これらに限定されない。

【0247】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ａ）そのＶＨは、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２及びＨＶＲ－Ｈ３を含み、そのＨＶＲ－Ｈ１は、式（Ｉ）：Ｘ１ＴＦＸ２Ｘ３ＹＸ４ＩＨＷＶ（配列番号２６２）（式中、Ｘ１は、ＦもしくはＹであり、Ｘ２は、ＳもしくはＴであり、Ｘ３は、Ｇ、ＮもしくはＳであり、Ｘ４は、Ａ、ＧもしくはＷである）、式（ＩＩ）：ＹＳＩＸ１ＳＧＸ２Ｘ３ＷＸ４ＷＩ（配列番号２６３）（式中、Ｘ１は、ＳもしくはＴであり、Ｘ２は、ＨもしくはＹであり、Ｘ３は、ＨもしくはＹであり、Ｘ４は、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｎ、ＳもしくはＴである）、及び式（ＩＩＩ）：ＦＳＬＳＴＸ１ＧＶＸ２ＶＸ３ＷＩ（配列番号２６４）（式中、Ｘ１は、ＧもしくはＳであり、Ｘ２は、ＡもしくはＧであり、Ｘ３は、Ａ、Ｇ、ＳもしくはＴである）からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｈ２は、式（ＩＶ）：ＬＡＬＩＤＷＸ１Ｘ２ＤＫＸ３ＹＳＸ４ＳＬＫＳＲＬ（配列番号２６５）（式中、Ｘ１は、Ａ、ＤもしくはＹであり、Ｘ２は、ＤもしくはＧであり、Ｘ３は、Ｒ、ＳもしくはＹであり、Ｘ４は、ＰもしくはＴである）、式（Ｖ）：ＩＧＸ１ＩＹＨＳＧＸ２ＴＹＹＸ３ＰＳＬＫＳＲＶ（配列番号２６６）（式中、Ｘ１は、ＤもしくはＥであり、Ｘ２は、ＮもしくはＳであり、Ｘ３は、ＮもしくはＳである）、及び式（ＶＩ）：ＶＳＸ１ＩＳＧＸ２ＧＸ３Ｘ４ＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ（配列番号２６７）（式中、Ｘ１は、Ａ、Ｇ、Ｓ、ＶもしくはＹであり、Ｘ２は、Ａ、Ｄ、ＳもしくはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、ＧもしくはＳであり、Ｘ４は、ＳもしくはＴである）からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｈ３は、式（ＶＩＩ）：ＡＲＸ１ＧＸ２Ｘ３Ｘ４ＶＸ５ＧＤＷＦＸ６Ｙ（配列番号２６８）（式中、Ｘ１は、ＥもしくはＧであり、Ｘ２は、ＥもしくはＳであり、Ｘ３は、ＤもしくはＴであり、Ｘ４は、Ａ、ＴもしくはＶであり、Ｘ５は、Ａ、Ｉ、Ｌ、ＴもしくはＶであり、Ｘ６は、Ａ、ＤもしくはＧである）によるアミノ酸配列を含み、及び／またはｂ）そのＶＬは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、そのＨＶＲ－Ｌ１は、式（ＶＩＩＩ）：Ｘ１ＡＳＱＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（配列番号２６９）（式中、Ｘ１は、ＱもしくはＲであり、Ｘ２は、Ｄ、ＧもしくはＳであり、Ｘ３は、ＩもしくはＶであり、Ｘ４は、Ｇ、Ｒ、ＳもしくはＴであり、Ｘ５は、Ｐ、Ｒ、ＳもしくはＴであり、Ｘ６は、Ａ、Ｄ、Ｆ、Ｓ、ＶもしくはＹであり、Ｘ７は、ＬもしくはＶであり、Ｘ８は、Ａ、ＧもしくはＮである）によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｌ２は、式（ＩＸ）：Ｘ１ＡＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＧＸ６（配列番号２７０）（式中、Ｘ１は、ＡもしくはＤであり、Ｘ２は、Ｎ、ＳもしくはＴであり、Ｘ３は、ＬもしくはＲであり、Ｘ４は、Ａ、ＥもしくはＱであり、Ｘ５は、ＳもしくはＴであり、Ｘ６は、ＩもしくはＶである）によるアミノ酸配列を含み、そのＨＶＲ－Ｌ３は、式（Ｘ）：ＹＣＱＱＸ１ＹＸ２Ｘ３Ｘ４Ｔ（配列番号２７１）（式中、Ｘ１は、Ａ、Ｇ、ＳもしくはＹであり、Ｘ２は、Ｑ、ＳもしくはＹであり、Ｘ３は、Ｉ、Ｌ、ＴもしくはＹであり、Ｘ４は、Ｉ、Ｓ、ＶもしくはＷである）、及び式（ＸＩ）：ＹＣＸ１ＱＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｔ（配列番号２７２）（式中、Ｘ１は、ＥもしくはＱであり、Ｘ２は、Ｐ、ＳもしくはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、Ｌ、Ｓ、ＴもしくはＹであり、Ｘ４は、Ｄ、Ｅ、Ｈ、ＳもしくはＴであり、Ｘ５は、Ｄ、Ｌ、ＴもしくはＷであり、Ｘ６は、Ｌ、Ｐ、ＲもしくはＶである）からなる群から選択した式によるアミノ酸配列を含む。

【0248】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／またはそのＶＬは、配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0249】

例示的な抗ＣＤ１３７抗体の配列が、下記の表Ｃに示されている。

【表4】

【0250】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／またはそのＶＬは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0251】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３８のアミノ酸配列の重鎖相補性決定領域（ＨＣ－ＣＤＲ）１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨ、及び／または配列番号２３９のアミノ酸配列の軽鎖相補性決定領域（ＬＣ－ＣＤＲ）１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号２３９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２４０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号２４１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0252】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／またはそのＶＬは、配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0253】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２４８のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨ、及び／または配列番号２４９のアミノ酸配列のＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２４８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号２４９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２５０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号２５１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0254】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、そのＶＨは、配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／またはそのＶＬは、配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0255】

いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２５８のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨ、及び／または配列番号２５９のアミノ酸配列のＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／または配列番号２５９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２６０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／または配列番号２６１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0256】

本明細書に記載のＣＤ１３７抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡまたはＩｇＤなどのいずれかのクラスのものであることができる。そのＣＤ１３７抗体は、ＩｇＧ１サブクラス、ＩｇＧ２サブクラス、ＩｇＧ３サブクラスまたはＩｇＧ４サブクラスなどのＩｇＧクラスのものであることが好ましい。ＣＤ１３７抗体は、当該技術分野で知られている方法を用いて、ある１つのクラスまたはサブクラスから別のクラスまたはサブクラスに変換できる。所望のクラスまたはサブクラスの抗体を作製する例示的な方法は、ＣＤ１３７抗体の重鎖をコードする核酸、及びＣＤ１３７抗体の軽鎖をコードする核酸を単離する工程、ＶＨ領域をコードする配列を単離する工程、所望のクラスまたはサブクラスの重鎖定常領域をコードする配列に、そのＶＨ配列をライゲーションする工程、その軽鎖遺伝子及びその重鎖コンストラクトを細胞内で発現させる工程、ならびにそのＣＤ１３７抗体を回収する工程を含む。いくつかの実施形態では、その抗ＣＤ１３７抗体は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、そのヒトＩｇＧ４のＦｃ領域は、Ｓ２４１Ｐという変異を含み、そのナンバリングは、Ｋａｂａｔに従うものである。

【0257】

Ｖ．医薬組成物、キット及び製品
別の態様では、本願は、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）のいずれか１つを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、その組成物は、その抗ＣＴＬＡ４抗体（例えば活性化可能な抗体）と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物である。いくつかの実施形態では、本発明で提供するのは、１つ以上の追加の治療剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＣＤ１３７抗体及びＶＥＧＦ阻害剤、化学療法剤、またはＰＡＲＰ阻害剤）を含む組成物である。その組成物は、当該技術分野で知られている従来の方法によって調製できる。

【0258】

「薬学的に許容される担体」という用語は、活性剤（例えば抗ＣＴＬＡ４抗体）を送達するために、製剤で使用するために適するいずれかの不活物質を指す。担体は、付着防止剤、結合剤、コーティング剤、崩壊剤、充填剤または希釈剤、保存剤（例えば、抗酸化剤、抗菌剤または抗真菌剤）、甘味剤、吸収遅延剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤などであってよい。適切な薬学的に許容される担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、デキストロース、植物油（例えばオリーブ油）、生理食塩水、緩衝剤、緩衝生理食塩水、ならびに等張化剤、例えば、糖、ポリアルコール、ソルビトール及び塩化ナトリウムが挙げられる。その組成物は、いずれかの適切な形態、例えば、液体、半固体及び固体の剤形であってよい。液体剤形の例としては、溶液（例えば、注射可能及び注入可能な溶液）、マイクロエマルジョン、リポソーム、分散液または懸濁液が挙げられる。固体剤形の例としては、錠剤、丸剤、カプセル剤、マイクロカプセル剤及び散剤が挙げられる。抗ＣＴＬＡ４抗体を送達するのに適する組成物の具体的な形態は、注射または注入用の溶液、懸濁液または分散液のような滅菌液である。滅菌液は、その抗体を必要な量で、適切な担体に組み込んでから、滅菌精密濾過することによって調製できる。概して、分散液は、基本的な分散媒及びその他の担体を含む滅菌ビヒクルに、その抗体を組み込むことによって調製する。滅菌液を調製するための滅菌粉末の場合には、調製方法としては、活性成分の粉末と、いずれかの追加の所望の成分の溶液を事前に滅菌濾過したものから、それらの粉末を得るために、真空乾燥及び凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｙｉｎｇ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ））することが挙げられる。様々な剤形の組成物は、当該技術分野で知られている従来の技法によって調製できる。

【0259】

その組成物に含まれる抗ＣＴＬＡ４抗体の相対量は、使用する具体的な抗ＣＴＬＡ４抗体及び担体、剤形、ならびに所望の放出特性及び薬物動態特性のような多くの要因に応じて変動することになる。単一剤形中の抗ＣＴＬＡ４抗体の量は概して、治療効果を発揮する量となるが、それよりも少ない量であってもよい。概して、この量は、その剤形の総量に対して約０．０１％～約９９％、約０．１％～約７０％または約１％～約３０％の範囲となる。

【0260】

その抗ＣＴＬＡ４抗体に加えて、１つ以上の追加の治療剤をその組成物に含めてもよい。追加の治療剤の例は、本明細書において、「治療方法」の節に記載されている。その組成物に含める追加の治療剤の適切な量は、当業者が容易に選択でき、使用する具体的な薬剤及び担体、剤形、ならびに所望の放出特性及び薬物動態特性のような多くの要因に応じて変動することになる。単一剤形に含まれる追加の治療剤の量は概して、治療効果を発揮する薬剤の量となるが、それよりも少ない量であってもよい。

【0261】

いくつかの実施形態では、がんの治療に有用な材料を含む製品を提供する。その製品は、容器と、その容器上またはその容器に付随のラベルまたは添付文書を含むことができる。適切な容器としては例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどが挙げられる。その容器は、ガラスまたはプラスチックのような様々な材料から形成されていてよい。概して、その容器は、本明細書に記載の組成物であって、がんの治療に有効である組成物を保持するとともに、滅菌アクセスポートを有してよい（例えば、その容器は、皮下注射針で貫通可能なストッパーを備えた静脈内輸液用のバッグまたはバイアルであってよい）。添付文書とは、医薬品の商業用パッケージに通常含まれる説明書であって、そのような医薬品の適応症、使用、投薬量、投与、禁忌についての情報、及び／またはそのような医薬品の使用に関する警告を含む説明書を指す。いくつかの実施形態では、その添付文書は、その組成物が、がんの治療に使用するものであることを示す。そのラベルまたは添付文書は、その組成物を患者に投与する際の説明をさらに含んでもよい。

【0262】

加えて、その製品は、薬学的に許容される緩衝剤、例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液及びデキストロース溶液を含む第２の容器をさらに含んでもよい。さらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針及びシリンジを含め、商用及びユーザーの観点から望ましい他の物質を含んでもよい。

【0263】

任意にその製品と組み合わせて、様々な目的に、例えば、本明細書に記載のがんの治療に有用であるキットも提供する。本願のキットには、本明細書に記載の組成物（あるいは単位剤形及び／または製品）のいずれか１つを含む１つ以上の容器が含まれる。いくつかの実施形態では、そのキットは、他の薬剤（例えば、１つ以上の追加の治療剤）、及び／または本明細書に記載の方法のいずれかに従って使用するための説明書をさらに含む。そのキットは、治療に適する個体の選択の説明をさらに含んでよい。本願のキットに供給される説明書は典型的には、ラベルまたは添付文書上の説明文書（例えば、そのキットに含まれる紙のシート）であるが、機械で読み取り可能な説明書（例えば、磁気記憶ディスクまたは光学記憶ディスクに書き込まれた説明書）も許容される。

【0264】

例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＴＬＡ４抗体のいずれか１つと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物、及びその医薬組成物を、がんである対象に投与するための説明書を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、そのキットは、化学療法剤のような追加の治療剤を含む医薬組成物をさらに含む。いくつかの実施形態では、そのキットは、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＣＤ１３７抗体及びＶＥＧＦ阻害剤、化学療法剤またはＰＡＲＰ阻害剤を含む医薬組成物をさらに含む。いくつかの実施形態では、そのキットは、本明細書に記載の１つ以上のバイオマーカー（例えば、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ_ｅｍ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ_ｅｍ細胞、Ｔ_ｒｅｇ細胞、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対するＣＤ８＋ Ｔ_ｅｍ細胞の比率、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対するＣＤ４＋ Ｔ_ｅｍ細胞の比率、ＮＫ細胞、Ｂ細胞）のレベルを求めるための１つ以上のアッセイまたはその試薬を含む。

【0265】

本願のキットは、適切なパッケージに入っている。適切なパッケージとしては、バイアル、ボトル、ジャー、フレキシブルパッケージ（例えば、密封マイラーまたはプラスチックバッグ）などが挙げられるが、これらに限定されない。キットは任意に、追加の構成要素、例えば、緩衝剤及び解釈的な情報を提供してもよい。すなわち、本願は、バイアル（密封バイアルなど）、ボトル、ジャー、フレキシブルパッケージなどを含む製品も提供する。

【0266】

その容器は、単位用量、バルクパッケージ（例えば複数用量パッケージ）または分割単位用量であってよい。キットは、薬局、例えば院内薬局及び配合薬局での保管及び使用に十分な量で使用及び包装するために、複数単位用量の医薬組成物及び説明書も含んでよい。

【0267】

上記の説明文は、当業者が本開示を実施可能となるのに十分とみなされる。下記の実施例は、例示目的で示されているに過ぎず、いかなる場合も、本開示の範囲を限定するようには意図されていない。実際、当業者には、上記の説明から、本明細書に示されているとともに説明されている形態に加えて、本開示の様々な修正形態が明らかとなり、それらの形態は、添付の特許請求の範囲内に含まれるであろう。

【実施例】

【0268】

本発明は、下記の実施例を参照することによって、さらに理解できるが、それらの実施例は、例示として示されており、限定するようには意図されていない。

【0269】

実施例１．がん免疫療法において、オンターゲット・オフ腫瘍毒性に対処するための新規な抗ＣＴＬＡ４チェックポイント阻害プロドラッグ
イピリムマブは、ＣＴＬＡ４を標的とする初めてのＦＤＡ認可済み免疫チェックポイント阻害剤として、がん免疫療法において、特に抗ＰＤ－１療法と組み合わせて、チェックポイント遮断の臨床効果が実証されている。しかしながら、イピリムマブは、多くの臓器系に関与し得る正常組織での自己免疫応答により、重篤かつ命にかかわることもある免疫介在性有害反応を誘導することがあり、そのため、その臨床応用は限られる。その結果、抗腫瘍効力が増強されているとともに、安全性プロファイルが改善した次世代の抗ＣＴＬＡ４抗体の開発が急務である。

【0270】

ＴＹ２２４０４は、ＳＡＦＥｂｏｄｙ技術を用いて操作された新規な抗ＣＴＬＡ４完全ヒトＩｇＧ１抗体プロドラッグである。ＴＹ２２４０４は、腫瘍微小環境で優先的に活性化され、正常組織では、そのオンターゲット・オフ腫瘍毒性が限られる抗体に設計されている。図１に示されているように、ＳＡＦＥｂｏｄｙは、共有結合したＮ末端ペプチドによってマスキングされており、そのペプチドの後には、プロテアーゼ切断部位が続いている。正常組織では、ＳＡＦＥｂｏｄｙのマスキング部分は、ＴＹ２２４０４のＣＴＬＡ４への結合を遮断するように機能するが、腫瘍組織で高度に発現し、活性を有することが知られるプロテアーゼによって切断された後には、そのマスキング部分が放出されて、活性化ＴＹ２２４０４抗体がｉｎ ｓｉｔｕで、ＣＴＬＡ４に結合して、ＣＴＬＡ４の機能を阻害することができるようになる。

【0271】

非臨床での薬理試験により、マスキングされていないＴＹ２２４０４または活性化ＴＹ２２４０４が、種間交差反応性を持つ状態で、ＣＴＬＡ４特有の保存されているエピトープに結合して、ＣＴＬＡ４／Ｂ７リガンドの相互作用を部分的に遮断することが示された。活性化ＴＹ２２４０４は、腫瘍微小環境において特異的に、一次刺激シグナルの存在下でサイトカインＩＬ－２の産生を誘導することによって、Ｔ細胞の活性化を増強し、ＡＤＣＣの増強を通じて、免疫抑制性のＴｒｅｇを枯渇させ、免疫抑制性のＴｒｅｇ活性を低減して、抗腫瘍応答を媒介した。ＴＹ２２４０４は、複数の同系マウス腫瘍モデルにおいて、単剤としても、他の免疫調節剤と組み合わせても、有効な抗腫瘍活性を示した。非臨床の毒性試験により、ＴＹ２２４０４が、カニクイザルにおいて十分な忍容性を示すことが示された。これらの結果から、マスキングされたＴＹ２２４０４プロドラッグを、局所的な腫瘍微小環境において優先的に活性化させると、他の従来型抗ＣＴＬＡ４抗体よりも高い有効用量レベルが腫瘍に送達されるとともに、全身での安全性プロファイルも優れている治療が可能となり得ることが示唆された。すなわち、ＴＹ２２４０４は、広範なヒトがんに対する免疫療法において、有効性及び安全性プロファイルを大きく改善させる見込みが高い。

【0272】

前臨床の毒性試験結果
非肥満糖尿病（ＮＯＤ）マウスモデルにおいて、５０ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４で６回治療後、すべてのマウスが生き残った。ＴＹ２２４０４に起因する異常所見は観察されなかった。

【0273】

４週間のＧＬＰ反復投与毒性試験において、ＴＹ２２４０４をカニクイザルに、１ｋｇ当たり１用量当たりで５ｍｇ、３０ｍｇ及び２００ｍｇで、１週間に１回、５用量で静脈内注入してから、２８日、回復期間を置いたところ、十分な忍容性が見られた。２００ｍｇ／ｋｇにおいて、雄雌両方で、複数の臓器及び組織において、軽度から中等度の混合血管周囲浸潤物の顕微鏡的有害所見（ただし可逆性であった）が観察された。

【0274】

ラット及びカニクイザルの両方において、無毒性量（ＮＯＡＥＬ）を求めたところ、１ｋｇ当たり１用量当たりで３０ｍｇであったとともに、カニクイザルにおいて、重篤な毒性を発現しない最大用量（ＨＮＳＴＤ）を求めたところ、１ｋｇ当たり１用量当たりで２００ｍｇであった。

【0275】

ＴＹ２２４０４のヒトＣＴＬＡ４、サルＣＴＬＡ４、マウスＣＴＬＡ４及びラットＣＴＬＡ４に対する結合親和性
マスキングされたＴＹ２２４０４の、ヒト、カニクイザル、マウスまたはラット由来の組み換えＣＴＬＡ４タンパク質に対する結合親和性と、その活性化形態（条件１及び２による活性化ＴＹ２２４０４）の結合親和性の比較結果を評価した。簡潔に述べると、ヒト、カニクイザル、マウスまたはラット由来の組み換えＣＴＬＡ４タンパク質（細胞外ドメイン）をＥＬＩＳＡ用マイクロプレート上にコーティングして、段階的希釈率のＴＹ２２４０４、ＴＹ２２４０４の活性化形態（条件１及び２による活性化ＴＹ２２４０４）、またはヒトＩｇＧ１アイソタイプコントロール抗体をキャプチャーさせてから、キャプチャーさせた抗体を、ＨＲＰ標識抗ヒトＩｇＧ（Ｆａｂ特異的）二次抗体で検出する。フィッティングした結合曲線に基づき、半最大効果濃度（ＥＣ５０）を計算する。

【0276】

図３に示されているように、マスキングされたＴＹ２２４０４は、ヒト、カニクイザル、マウス及びラットの組み換えＣＴＬＡ４タンパク質に結合できるが、親和性は、かなり低い。その活性化形態は、４つのすべての種の組み換えＣＴＬＡ４タンパク質に結合すると同時に、親和性が比較的高い（いずれも０．３ｎＭ前後）。マスキングされたＴＹ２２４０４抗体に比べて、切断されたＴＹ２２４０４は、その標的であるＣＴＬＡ４タンパク質に、大幅に上昇した親和性で、ヒトＣＴＬＡ４では２５０倍超上昇した親和性で、サルＣＴＬＡ４では約４０倍上昇した親和性で、マウスＣＴＬＡ４では３００倍超上昇した親和性で、ラットＣＴＬＡ４では１００倍超上昇した親和性で結合する。

【0277】

ＣＴＬＡ４遮断に関するｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞バイオアッセイによる、ＣＤ２８シグナル伝達活性に対するＴＹ２２４０４の作用
マスキングされたＴＹ２２４０４及びその活性化形態と、イピリムマブが、ＣＴＬＡ４とＣＤ８０リガンド及びＣＤ８６リガンドとの結合を遮断することによって、ＣＤ２８の媒介による、下流細胞のシグナル伝達を刺激する機能的活性を評価した。

【0278】

この試験では、生物発光細胞ベースのアッセイである、ＰｒｏｍｅｇａのＣＴＬＡ４遮断バイオアッセイシステムを用いて、抗ＣＴＬＡ４ ｍＡｂのＣＴＬＡ４遮断機能を評価する。このアッセイシステムでは、遺伝子操作された２つの細胞株、すなわち、ＣＴＬＡ４エフェクター細胞、すなわち、ヒトＣＴＬＡ４と、ＩＬ－２ネイティブプロモーターによって駆動されるルシフェラーゼレポーターであって、ＴＣＲ／ＣＤ２８の活性化に応答するレポーターとを発現するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞（１．０×１０^５／ウェル）と、ＡＰＣ／Ｒａｊｉ細胞（２．０×１０^５）、すなわち、ＴＣＲを抗原依存的に活性化するように設計された細胞表面タンパク質を発現するとともに、ＣＴＬＡ４リガンドＣＤ８０及びＣＤ８６を内在的に発現するＲａｊｉ細胞が関与する。この２種類の細胞を共培養すると、ＣＴＬＡ４は、ＣＤ２８と、それらの共通のリガンドＣＤ８０及びＣＤ８６に関して競合するので、ＣＤ２８経路の活性化と、プロモーターの媒介による発光を阻害する。そして、段階希釈したＴＹ２２４０４、その活性化形態、イピリムマブまたはアイソタイプ抗体を加えて、ＣＴＬＡ４とそのリガンドＣＤ８０及びＣＤ８６との相互作用を遮断し、その結果、プロモーターの媒介により発光する。続いて、Ｂｉｏ－Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイシステムを用いて、生物発光シグナルを検出できる。

【0279】

図４に示されているように、マスキングされたＴＹ２２４０４は、下流の発光細胞シグナル伝達を誘導できない。条件１または２のいずれかによるｉｎ ｖｉｔｒｏでの切断により活性化した後には、条件１及び２により活性化された抗体のいずれも、ＣＴＬＡ４遮断により媒介されるレポーターシグナル伝達を用量依存的に刺激できる。しかしながら、活性化形態のＴＹ２２４０４の活性は、イピリムマブよりもかなり低い。

【0280】

ヒトＣＴＬＡ４を過剰発現している２９３Ｆにおける、ＴＹ２２４０４のＡＤＣＣレポーター遺伝子活性の評価
ＴＹ２２４０４及びその活性化形態と、イピリムマブとの抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）のレポーター遺伝子活性をその標的細胞（２９３Ｆ－ＣＴＬＡ４）において評価した。簡潔に述べると、ヒトＴリンパ球Ｊｕｒｋａｔ細胞株から、エフェクター細胞Ｊｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－ＣＤ１６を操作作製する。Ｊｕｒｋａｔ細胞は天然では、機能的なＮＦＡＴ転写因子を発現し、この因子は、ＡＤＣＣにおいて、初期シグナルイベントに関与する。この試験で使用する標的細胞（２．０×１０^４）は、ＣＴＬＡ４標的分子を過剰発現している２９３Ｆである。抗ＣＴＬＡ４ ｍＡｂのＡＤＣＣレポーター活性は、ＣＴＬＡ４標的細胞である２９３Ｆとエフェクター細胞（１．２×１０５）とを、抗ＣＴＬＡ４ ｍＡｂの存在下及び非存在下で、様々な濃度でコインキュベートしてから、ルシフェラーゼを解析することによってアッセイする。ＩｇＧ１アイソタイプコントロールｍＡｂをＡＤＣＣレポーター活性のネガティブコントロールとして使用する。

【0281】

図５に示されているように、これらの結果から、マスキングペプチドを有するＴＹ２２４０４では、ＡＤＣＣレポーター遺伝子活性が見られないが、プロテアーゼによる切断によってマスキングペプチドが除去されたその活性化形態（条件１及び条件２による活性化ＴＹ２２４０４）は、ＣＴＬＡ４分子を過剰発現している２９３Ｆ細胞に対して、有意な用量依存性ＡＤＣＣレポーター活性を有することが示唆されている。注目すべきことに、条件１及び条件２によるいずれの活性化ＴＹ２２４０４も、イピリムマブよりも、ＥＣ５０がかなり低いことにより明らかなように、２９３Ｆ－ＣＴＬＡ４細胞に対して強力なＡＤＣＣレポーター活性を有する。

【0282】

ＰＢＭＣ中のＳＥＡの存在下における、ＴＹ２２４０４によるヒトＴ細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏでの活性化
ＴＹ２２４０４及びその活性化形態（条件１及び２による活性化ＴＹ２２４０４）のｉｎ ｖｉｔｒｏでの生物学的活性であって、ＰＢＭＣの状況下で、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ Ａ（ＳＥＡ）ペプチドに刺激されるヒトＴ細胞の活性化を増強する生物学的活性を評価した。スーパー抗原としてのＳＥＡは、ＡＰＣ由来のＭＨＣＩＩとＴ細胞由来のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）に結合することによって、大半のヒトＴ細胞を活性化することが知られているので、この試験において、Ｔ細胞の活性化をプライミングするために選択されている。ヒトＰＢＭＣ（末梢血単核細胞、２．０×１０^５／ウェル）を１人の健常なドナー（Ｄ＃６９）から単離し、準至適濃度のＳＥＡペプチド（５０ｎｇ／ｍＬ）及び段階希釈濃度のＴＹ２２４０４、その活性化形態またはアイソタイプコントロール抗体で刺激した。ＥＬＩＳＡによって、ＩＬ－２をＴ細胞活性化増強のエンドポイントとして測定するために、４日後に、複製細胞の上清を回収した。

【0283】

図６に示されているように、このｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｔ細胞活性化アッセイから得られたこれらの結果により、ＴＹ２２４０４の活性化形態（条件１及び２による活性化ＴＹ２２４０４の両方）が、１人の健常なドナーから得たＰＢＭＣにおいて、ＳＥＡペプチドにより刺激されたサイトカインＩＬ－２の放出を増強できる一方で、マスキングされたＴＹ２２４０４は、このような活性を有さないことが示唆されている。加えて、条件２による活性化ＴＹ２２４０４では、条件１による活性化ＴＹ２２４０４よりも、ヒトＰＢＭＣの状況において、抗原により刺激されるＴ細胞活性化の増強において、強力な活性が見られる。

【0284】

Ｈ２２マウス肝臓癌モデルにおけるＴＹ２２４０４の抗腫瘍効力
ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝８、雌、６～７週齢）に、Ｈ２２マウス肝臓癌細胞（ＣＣＴＣＣ）を皮下接種した。平均腫瘍体積が約９７ｍｍ^３に達したら、治療を開始した。それらのマウスに、アイソタイプコントロール及びＴＹ２２４０４を５ｍｇ／ｋｇで、腹腔内注射によって投与した。それらのマウスには、これらの抗体を１週間に２回、合計で６用量投与した。腫瘍の成長を１週間に２回モニタリングし、平均腫瘍体積±標準誤差として経時的に記録した。図７（左パネル）に示されているように、ＴＹ２２４０４では、Ｈ２２モデルにおいて、単剤療法として非常に強力な抗腫瘍効力が見られた。

【0285】

ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおけるＴＹ２２４０４の抗腫瘍効力
ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝８、雌、７～８週齢）に、ＣＴ２６マウス大腸癌細胞（ＳＩＢＳ）を皮下接種した。平均腫瘍体積が約９８ｍｍ^３に達したら、治療を開始した。それらのマウスに、アイソタイプコントロール及びＴＹ２２４０４を５ｍｇ／ｋｇで、腹腔内注射によって投与した。それらのマウスには、これらの抗体を１週間に２回、合計で６用量投与した。腫瘍の成長を１週間に２回モニタリングし、平均腫瘍体積±標準誤差として経時的に記録した。図７（右パネル）に示されているように、ＴＹ２２４０４では、ＣＴ２６モデルにおいて、単剤療法として非常に強力な抗腫瘍効力が見られた。

【0286】

図８は、図１０の個別の曲線である。（Ｌｅｗｉｓがんモデルにおいて、ＴＹ２２４０４を抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与した）。

【0287】

ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおけるＴＹ２２４０４のＴｒｅｇ枯渇性
ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝１０、雌、７～８週齢）に、ＣＴ２６マウス大腸癌細胞（ＳＩＢＳ）を皮下接種した。腫瘍を接種してから９日目、平均腫瘍体積が約１２１ｍｍ^３に達したら、治療を開始した。それらのマウスに、アイソタイプコントロール及びＴＹ２２４０４を５ｍｇ／ｋｇで、腹腔内注射によって投与した。それらのマウスには、これらの抗体を９日目及び１２日目に投与し、末梢及び腫瘍浸潤リンパ球の解析のために、１４日目に終了した。

【0288】

図９に示されているように、ＴＹ２２４０４では、ＴＩＬにおいて、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージが、アイソタイプコントロールと比べて有意に低下した。しかしながら、血中及び脾臓中の末梢リンパ球では、ＴＹ２２４０４は、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージに影響を及ぼさなかった（右パネル）。図９（左パネル）に示されているように、ＴＩＬにおけるＴｒｅｇ細胞上のＣＴＬＡ４発現レベルは、ＴＹ２２４０４による治療後に有意に低下した。しかしながら、末梢Ｔｒｅｇ細胞上では、ＣＴＬＡ４発現レベルは、ＴＹ２２４０４による治療後に、わずかに上昇した（ＰＢＭＣ）か、変化しなかった（脾臓）。

【0289】

概要
ＴＹ２２４０４は、複数の種にわたって、プロテアーゼによって切断されて、マスキングペプチドが除去されると、ＣＴＬＡ４に特異的に結合する活性化可能なプロドラッグである（図３）。

【0290】

活性化ＴＹ２２４０４は、イピリムマブよりも穏やかなリガンドブロッカーであったが、高密度にＣＴＬＡ４を発現している細胞を標的とするＡＤＣＣ活性が、イピリムマブよりも強力である（図４～５）。

【0291】

活性化ＴＹ２２４０４は、Ｔ細胞の活性化を強力に増強できるが、マスキングペプチドがインタクトであるＴＹ２２４０４ ＳＡＦＥｂｏｄｙは、増強できない（図６）。

【0292】

ＴＹ２２４０４では、様々なマウス腫瘍モデルにおいて、単剤として強力な抗腫瘍活性が見られた（図７）。

【0293】

ＴＹ２２４０４は、抗ＰＤ－１抗体のような他のＩＯ剤と相乗的に組み合わせたところ、腫瘍の成長をｉｎ ｖｉｖｏで阻害した（図８）。併用療法では、腫瘍の成長が有意に遅くなり、８個の腫瘍のうち４個を完全に退縮（ＣＲ）させた。

【0294】

ＴＹ２２４０４は、高めのレベルのＣＴＬＡ４を発現する腫瘍において、Ｔｒｅｇ細胞を効率的に枯渇させることができるが、末梢組織においては、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇させない（図９）。

【0295】

ＴＹ２２４０４は、ＮＯＤマウス及びカニクイザルを含む動物において、十分な忍容性が見られ、治療指数が高い可能性が示唆された。

【0296】

実施例２．抗ＣＴＬＡ４抗体との併用療法
様々ながんモデルにおいて、抗ＣＴＬＡ４抗体の併用療法の有効性を試験した。

【0297】

図１０には、Ｌｅｗｉｓがんモデルにおいて、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の結果が示されている。ＴＹ２２４０４と抗ＰＤ－１との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価した。マウスに、Ｌｅｗｉｓマウス肺腫瘍細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が１１８ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。試験抗体の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。投与開始から１４日後に、アイソタイプコントロール群に対する腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を評価した。図１０に示されているように、２ｍｇ／ｋｇでのＴＹ２１５８０及びＴＹ２２４０４の単剤療法では、抗腫瘍活性が見られ、ＴＧＩは、ＴＹ２１５８０では５１％、ＴＹ２２４０４では１８％であった。１０ｍｇ／ｋｇでの抗ＰＤ－１ ＦＣ１２２５による単剤療法では、抗腫瘍作用が見られた（ＴＧＩ＝６９％）。ＴＹ２１５８０またはＴＹ２２４０４と抗ＰＤ－１ ＦＣ１２２５を組み合わせたところ、抗腫瘍作用が有意に増強され、ＴＧＩは、ＴＹ２１５８０の場合には９２％、ＴＹ２２４０４の場合には９１％であった。併用療法に対する応答は、試験したすべての単剤療法レジメンよりも優れていたことから、ＴＹ２１５８０及びＴＹ２２４０４のいずれも、腫瘍の阻害において、抗ＰＤ１と相乗作用を示すことができることが示唆されている。

【0298】

図１１には、ＴＹ２２４０４と抗ＣＤ１３７抗体ＡＤＧ１０６との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、４Ｔ１がんモデルにおいて、ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の結果が示されている。マウスに、４Ｔ１マウス乳癌細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が９０ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。ビヒクル、５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４もしくはＡＤＧ１０６、またはこれらの２つの薬剤の組み合わせの腹腔内投与を、１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。図１１に示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、ＴＹ２２４０４では、３３日目に、部分的な抗腫瘍作用が見られ、ＴＧＩは４９％であったのに対して、ＡＤＧ１０６には、有意な抗腫瘍活性がなかった（ＴＧＩ１０％）。このモデルでは、ＴＹ２２４０４とＡＤＧ１０６の組み合わせにおいて、抗腫瘍作用がわずかに増強された（ＴＧＩ６３％）。

【0299】

図１２Ａ～１２Ｂには、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。マウスに、ＣＴ２６マウス大腸腫瘍細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が６７ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。これらの群に、１ｍｇ／ｋｇのアイソタイプコントロール、０．２ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６、０．２ｍｇ／ｋｇもしくは１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０、またはＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせのいずれかを同じ用量で、腹腔内注射によって投与した。いずれの抗体も、１週間に２回投与した。図１２Ａ～１２Ｂに示されているように、１９日目に、アイソタイプコントロール群と比べて、ＡＤＧ１０６のみの治療では、腫瘍成長の部分的な阻害が見られ（ＴＧＩは４７％）、ＴＹ２１５８０のみでは、腫瘍の成長が用量依存的にさらに強力に阻害され、ＴＧＩは、０．２ｍｇ／ｋｇの用量では７９％、１ｍｇ／ｋｇの用量では９２％であった。ＡＤＧ１０６と、０．２ｍｇ／ｋｇもしくは１ｍｇ／ｋｇのいずれかのＴＹ２１５８０とを組み合わせたところ、抗腫瘍活性の増強は見られず、ＴＧＩは、０．２ｍｇ／ｋｇでは８３％、１ｍｇ／ｋｇでは９１％であった。これらの結果では、このモデルにおいて、ＡＤＧ１０６及びＴＹ２１５８０の単剤での強力な抗腫瘍活性が示されたが、相乗効果は見られなかった。

【0300】

図１３Ａ～１３Ｂには、ＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍効力を評価するために、ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。マウスに、ＭＣ３８マウス大腸腫瘍細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が６９ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。これらの群に、１０ｍｇ／ｋｇのアイソタイプコントロール、１０ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６、０．２ｍｇ／ｋｇもしくは２ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０、または同じ用量のＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせのいずれかを腹腔内注射によって投与した。いずれの抗体も、１週間に２回、４週間にわたって投与した。図１３Ａ～１３Ｂに示されているように、３３日目のアイソタイプコントロール群と比べて、ＡＤＧ１０６のみでの治療では、腫瘍の成長が阻害されなかったが、ＴＹ２１５８０では、腫瘍の成長が用量依存的に阻害され、３３日目のＴＧＩは、０．２ｍｇ／ｋｇの用量では３０％、２ｍｇ／ｋｇの用量では６７％であった。ＡＤＧ１０６と、０．２ｍｇ／ｋｇもしくは２ｍｇ／ｋｇのいずれかのＴＹ２１５８０とを組み合わせたところ、抗腫瘍活性の増強が見られ、ＴＧＩは、０．２ｍｇ／ｋｇでは６５％、２ｍｇ／ｋｇでは８４％であった。これらの治療では、体重に対しては有害作用は観察されなかった。これらの結果から、ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせたＡＤＧ１０６により、抗腫瘍応答の増強が誘導されたことが示されている。

【0301】

図１４Ａ～１４Ｂには、ＭＣ３８マウス大腸癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。平均ＴＶが約５３ｍｍ^３に達したら、投与を開始した（ｎ＝８）。ＴＹ２１５８０単剤療法群では、完全奏効（ＣＲ）は１０匹中１匹、ＡＤＧ１０６＋ＴＹ２１５８０の併用群では、完全奏効（ＣＲ）は１０匹中１匹、安定（ＳＤ）は１０匹中２匹であった。この試験において、ＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６には相乗効果が見られた。

【0302】

図１５～１６には、４Ｔ１マウス乳癌モデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝８、雌、６～８週齢）に、マウストリプルネガティブ乳癌細胞株である４Ｔ１乳癌細胞を３×１０５個、皮下移植した。腫瘍を確立した後（すなわち、体積が９６ｍｍ３に達した後）、マウスをアイソタイプコントロール抗体、抗ＣＤ１３７抗体ＡＤＧ１０６（５ｍｇ／ｋｇ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体ＴＹ２１５８０（２ｍｇ／ｋｇ）、またはＡＤＧ１０６（５ｍｇ／ｋｇ）とＴＹ２１５８０（２ｍｇ／ｋｇ）との組み合わせで、腹腔内注射によって、１週間に２回、２週間にわたって治療した。腫瘍の成長を１週間に２回モニタリングし、平均腫瘍体積±標準誤差として経時的に記録した。ＴＹ２１５８０群では、８匹中４匹が死亡し、ＡＤＧ１０６＋ＴＹ２１５８０群では、８匹中１匹が死亡した。図１５～１６に示されているように、４Ｔ１乳癌モデルにおいて、アイソタイプコントロール抗体と比べて、ＴＹ２１５８０及びＡＤＧ１０６の単剤療法の両方で、抗腫瘍活性が見られ、ＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との組み合わせでは、相乗的な抗腫瘍効力が見られた。

【0303】

図１７には、ＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、Ｂ１６Ｆ１０同系マウスメラノーマモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。マウスに、Ｂ１６Ｆ１０マウスメラノーマ腫瘍細胞を皮下接種した。腫瘍接種後、マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化し、それらのマウスに、アイソタイプコントロール、５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６もしくはＴＹ２１５８０、または同じ用量のＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせのいずれかを腹腔内注射によって投与した。いずれの抗体も、１週間に２回投与した。図１７に示されているように、アイソタイプコントロール群と比べて、ＡＤＧ１０６のみでの治療では、腫瘍の成長が阻害されなかった一方で、ＴＹ２１５８０単剤では、抗腫瘍活性が見られた。ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせでは、腫瘍の成長阻害がさらに増強されたことから、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０が、抗腫瘍作用において相乗作用を示し得ることが示唆された。

【0304】

図１８Ａ～１８Ｂには、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、Ａ２０がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。マウスに、Ａ２０マウスＢリンパ腫細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が１０１ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６もしくは０．５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０、またはこれらの２つの薬剤の組み合わせの腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。図１８Ａ～１８Ｂに示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６のみ、または０．５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみのいずれでも、部分的な抗腫瘍活性が見られた。ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせでは、抗腫瘍作用がさらに増強され、４匹で完全奏効が見られたことから、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０が、腫瘍の阻害において相乗作用を示し得ることが示唆された。

【0305】

図１９Ａ～１９Ｂには、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、ＥＭＴ６がんモデルにおいて、ＴＹ２１５８０と組み合わせて投与したＡＤＧ１０６の結果が示されている。マウスに、ＥＭＴ６マウス乳癌細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が９５ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。０．５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６もしくは０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０、またはこれらの２つの薬剤の組み合わせの腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで開始した。図１９Ａ～１９Ｂに示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、０．５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６のみ、または０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみのいずれでも、有意な抗腫瘍活性が見られた。ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０との組み合わせでは、抗腫瘍作用がさらに増強され、７匹で完全奏効が見られたことから、ＡＤＧ１０６とＴＹ２１５８０が、腫瘍の阻害において相乗作用を示し得ることが示唆された。

【0306】

図２０Ａ～２０Ｂには、ＣＴ２６大腸癌モデルにおいて、ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝８、雌、７～８週齢）に、ＣＴ２６マウス大腸癌細胞（ＳＩＢＳ）を皮下接種した。平均腫瘍体積が約６２ｍｍ^３に達したら、治療を開始した。それらのマウスに、アイソタイプコントロール（５ｍｇ／ｋｇ）、ＴＹ２１５８０（５ｍｇ／ｋｇ）、ＡＤＧ１０６（０．１ｍｇ／ｋｇを２用量、０．２ｍｇ／ｋｇを別に４用量）、及びＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との組み合わせを腹腔内注射によって投与した。それらのマウスには、これらの抗体を１週間に２回、合計で６用量投与した。腫瘍の成長を１週間に２回モニタリングし、平均腫瘍体積±標準誤差として経時的に記録した。図２０に示されているように、ＣＴ２６モデルにおいて、いずれのＴＹ２１５８０単剤療法でも、抗腫瘍活性が見られ、ＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との組み合わせでは、抗腫瘍効力の増強が見られた。

【0307】

図２１Ａ～２１Ｂには、ＴＹ２１５８０とＶＥＧＦＲ阻害剤フルキンチニブとの併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、ＣＴ２６がんモデルにおいて、フルキンチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。平均腫瘍体積が約１２０ｍｍ^３に達したら、投与を開始した（１群あたりｎ＝８）。腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。５ｍｇ／ｋｇのフルキンチニブを１日１回、３週間にわたって経口投与した。図２１Ａ～２１Ｂに示されているように、アイソタイプコントロール群と比べて、０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみ、または５ｍｇ／ｋｇフルキンチニブのみのいずれでも、部分的な抗腫瘍活性が見られた。ＴＹ２１５８０とフルキンチニブとの組み合わせでは、抗腫瘍作用がさらに増強され、ＴＹ２１５８０がフルキンチニブと、腫瘍の阻害において相乗作用を示し得ることが示唆された。併用群では、完全奏効（ＣＲ）は８匹中１匹であり、ＴＹ２１５８０またはフルキンチニブの単剤療法群では、完全奏効（ＣＲ）は見られなかった。

【0308】

図２２Ａ～２２Ｂには、ＴＹ２１５８０とＶＥＧＦＲ阻害剤アンロチニブとの併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、Ｒｅｎｃａがんモデルにおいて、アンロチニブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。マウスに、Ｒｅｎｃａマウス腎臓癌細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が８６ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。３ｍｇ／ｋｇのアンロチニブを１日１回、１７用量で経口投与した。図２２Ａ～２２Ｂに示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみでは、抗腫瘍作用が見られなかったが、アンロチニブのみでは、強力な抗腫瘍活性が見られ、ＴＧＩは、２９日目に９３％であった。ＴＹ２１５８０とアンロチニブとの組み合わせでは、アンロチニブ単剤の場合と同じ抗腫瘍作用が見られ、この腫瘍モデルでは、これらの２つの薬剤の間に相乗作用がないことが示唆された。

【0309】

図２３Ａ～２３Ｂには、ＴＹ２１５８０とドセタキセルとの併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、４Ｔ１がんモデルにおいて、ドセタキセルと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。平均腫瘍体積が約９０ｍｍ^３に達したら、投与を開始した（１群あたりｎ＝８）。平均腫瘍体積が９０ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。２ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。１０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルを１週間に１回、３用量で静脈内投与した。ＴＹ２１５８０の単剤療法群では、投与開始から２週間後に、８匹中４匹のマウスが死亡した一方で、併用療法群では、投与開始から６週間後に、８匹中１匹のマウスのみが死亡した。図２３Ａ～２３Ｂに示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、２ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみ、または１０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルのみのいずれでも、部分的な抗腫瘍活性が見られた（ＴＧＩは３５日目に、ＴＹ２１５８０では４４．９％、ドセタキセルでは３８．３％であった）。ＴＹ２１５８０とドセタキセルとの組み合わせでは、抗腫瘍作用がさらに増強され、ＴＧＩは７４％であったことから、ＴＹ２１５８０がドセタキセルと、腫瘍の阻害において相乗作用を示し得ることが示唆された。

【0310】

図２４Ａ～２４Ｂには、ＴＹ２１５８０とＰＡＲＰ阻害剤オラパリブとの併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、ＥＭＴ６がんモデルにおいて、オラパリブと組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。マウスに、ＥＭＴ６マウス乳癌細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が９５ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで開始した。５０ｍｇ／ｋｇのオラパリブを１日１回、２１用量で経口投与した。図２４Ａ～２４Ｂに示されているように、ビヒクルコントロール群と比べて、オラパリブのみでは、有意な抗腫瘍作用は見られなかった一方で、０．１ｍｇ／ｋｇのＴＹ２１５８０のみでは、有意な抗腫瘍活性が見られ、２７日目のＴＧＩは５６％であった。ＴＹ２１５８０とオラパリブとの組み合わせでは、抗腫瘍作用の増強が見られ、ＴＧＩは１５．４％であったことから、オラパリブが、腫瘍の阻害において、ＴＹ２１５８０の活性をアンタゴナイズし得ることが示唆された。

【0311】

図２５には、ＴＹ２２４０４と抗体ＡＤＧ１０６との併用治療のｉｎ ｖｉｖｏでの抗腫瘍効力を評価するために、ＭＣ３８がんモデルにおいて、ＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２２４０４の結果が示されている。マウスに、ＭＣ３８マウス大腸腫瘍細胞を皮下接種した。平均腫瘍体積が９７ｍｍ^３に達したら、腫瘍担持マウスを、それぞれ８匹のマウスからなる様々な治療群にランダム化した。試験抗体の腹腔内投与を１週間に２回のスケジュールで、４用量で開始した。腫瘍細胞の接種から２７日目に、アイソタイプコントロール群に対する腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を評価した。図２５に示されているように、５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４の単剤療法では、有意な抗腫瘍活性が見られ、ＴＧＩは７７％であった一方で、５ｍｇ／ｋｇのＡＤＧ１０６のみでは、有意な抗腫瘍活性は見られなかった（ＴＧＩ＝２１％）。これらの２つの薬剤の組み合わせでは、抗腫瘍作用が有意に増強され、平均ＴＧＩは９４％であったとともに、８匹中４匹のマウスで、完全な腫瘍退縮が見られた。併用療法に対する応答は、いずれの薬剤単剤よりも優れていたことから、ＴＹ２２４０４がＡＤＧ１０６と、腫瘍の阻害において相乗作用を示し得ることが示唆された。

【0312】

図２６には、Ｂ１６Ｆ１０同系マウスメラノーマモデルにおいて、イカリチン（「ＳＮＧ１６２」）及び／またはＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０の結果が示されている。ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝８）に、Ｂ１６Ｆ１０マウスメラノーマ細胞を皮下接種した。腫瘍の接種から６日目に、治療を開始した。それらのマウスに、コントロール（コーン油＋ｍＩｇＧ＋ｈＩｇＧ４）、ＴＹ２１５８０（５ｍｇ／ｋｇ）、ＡＤＧ１０６（５ｍｇ／ｋｇ）、及びＴＹ２１５８０とＡＤＧ１０６との組み合わせを腹腔内注射によって投与した。マウスには、３日に１回（Ｑ３Ｄ）、合わせて６用量投与した。イカリチン（「ＳＮＧ１６２」）及び／またはＡＤＧ１０６と組み合わせて投与したＴＹ２１５８０は、Ｂ１６Ｆ１０同系マウスメラノーマモデルでも試験した。図２６に示されているように、ＡＤＧ１０６では、このモデルにおいて、ＴＹ２１５８０との相乗的な抗腫瘍作用が見られた。実験の最後に、ＳＮＧ１６２＋ＴＹ２１５８０、ＡＤＧ１０６＋ＴＹ２１５８０及びＳＮＧ１６２＋ＡＤＧ１０６＋ＴＹ２１５８０という３つの群のそれぞれにおいて、完全な腫瘍退縮を示したマウスが見られた。

【0313】

実施例３．ＴＹ２２４０４の活性化、及びＴＹ２１５８０とＴＹ２２４０４の薬物動態の比較
図２７に示されているように、雌のＢＡＬＢ／ｃマウスに、ヒトＣＴＬＡ４が発現しているかまたは発現していないＨ２２マウス肝臓癌腫瘍細胞を皮下接種した。図２７の図に示されているように、ＣＴＬＡ４を外因性に過剰発現させたＨ２２腫瘍細胞をマウスの左側腹部に接種し、ＣＴＬＡ４を発現していない親Ｈ２２腫瘍細胞をそのマウスの右側腹部に接種した。親ＴＹ２１５８０ ｍＡｂ及びＴＹ２２４０４ ｍＡｂのいずれも、放射性物質８９Ｚｒで標識し、腫瘍担持マウスに、尾静脈を介して静脈内注射した。ＰＥＴ／ＣＴスキャンを様々な時点に行って、シグナル分布をイメージングした。画像の結果から、ｍＡｂの投与から１２０時間後、ＴＹ２２４０４が、親ＴＹ２１５８０の状況と同様、主に、標的のＣＴＬＡ４を発現している腫瘍に蓄積したことが示された。これらの結果から、腫瘍微小環境において、ＴＹ２２４０４が活性化し、標的への結合が可能となることが示唆された。

【0314】

図２８に示されているように、マウス及びカニクイザルに、それぞれ１０ｍｇ／ｋｇで、１回用量のＴＹ２１５８０またはＴＹ２２４０４を投与した。抗体の投与後、血液試料を様々な時点に回収し、試験抗体の濃度を測定した。様々な時点のＴＹ２１５８０またはＴＹ２２４０４の平均濃度を時間に対してプロットした。その結果により、ＴＹ２２４０４では、マウス及びカニクイザルの両方において、半減期の延長が見られ、全身暴露がＴＹ２１５８０よりも高いことが示され、これは、正常な生理的条件では、抗体がその標的に結合しないようにＳＡＦＥｂｏｄｙが保護し、その結果、標的を介した薬物消失（ＴＭＤＤ）が低減されるというコンセプトと整合している。

【0315】

実施例４．第１相用量漸増試験における抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙの臨床解析
オーストラリア及び米国において、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙに対する第１相用量漸増試験及びコホート拡大試験を複数の施設で行った。この試験は、複数の前治療ラインがうまくいかなかった進行固体腫瘍患者における複数施設でのオープンラベル第１相試験であった。抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙは、疾患の進行または許容できない毒性が生じるまで、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇで３週間に１回投与した。

【0316】

そのＳＡＦＥｂｏｄｙは、ＴＹ２１５８０のＶＨ配列及びＶＬ配列で構成されていたとともに、軽鎖のＮ末端に、配列番号１９２の配列を含むマスキング部分、及び配列番号２２１の配列を含むリンカー部分を有していた（ＭＭ／ＬＭ複合配列は、ＥＶＧＳＹＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳ（配列番号２００）であった）。完全重鎖については配列番号３２０を、完全軽鎖（マスク／リンカーを含む）については配列番号３２２を参照されたい。

【0317】

０．１ｍｇから１０ｍｇへの用量漸増において、約１８人の患者を登録した。ＤＬＴは、Ｑ３Ｗで、１０ｍｇ／ｋｇまでは観察されなかったとともに、所定の適応症において、ＳＲＣ推奨の１０ｍｐｋでコホート拡大を連続的に行い、６ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、抗ＰＤ１と併用し、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙでは、ＡＤＧ１０６と併用した（図２９及び３０）。

【0318】

表Ｇに、患者の人口統計的なプロファイルとともに、治療歴及び適応症が示されている。

【表5-1】

【表5-2】

【0319】

治療に関する安全性プロファイルは、図３１に示されている。これらのデータから、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙが１０ｍｐｋまでは、非常にしっかりした安全性プロファイルを有することが示されており、これは、前臨床の観察結果と整合している。

【0320】

２つのコールド腫瘍について、２つの症例研究を選択した。第１に、卵巣癌患者は、５つの前治療ラインを受けたことがあった（図３２Ａ）。１ｍｐｋでこの試験に登録したところ、その患者では、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙによる治療を２サイクル行った後の毎回の腫瘍評価ごとに、持続的な腫瘍収縮が見られた。標的とした腫瘍病変は、－１３％、－１９％から－２２％まで縮小した一方で、ＣＡ１２５は、－１８％、－６７％から－７７％まで着実に低下し、患者に対する臨床効果と整合していた。第２に、前治療においてイピリムマブ＋ニボルマブが無効であったＵＶメラノーマ患者では、－２４％の腫瘍収縮が見られ（図３２Ｂ）、これは、２サイクルの抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ療法後に、Ｔ細胞が活性化したことによって裏付けられている。これらの観察結果は、有効な療法がないこのコールド腫瘍サブタイプでは驚くべきことであった。

【0321】

実施例５．第１相用量漸増試験における、抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙの予備的なバイオマーカー解析
予備的なバイオマーカー評価のために、実施例４に記載されている第Ｉ相臨床試験に登録した患者から、末梢血試料及び血清試料を採取し、探索的なバイオマーカー試験で評価した。この試験には、フローサイトメトリーによる、末梢リンパ球のプロファイリング、サイトカイン、可溶性受容体／リガンド及びＭＭＰの血清レベルの解析が含まれていた。

【0322】

サイトカインの解析のために、標準的なプロトコールに従って、各患者から様々な時点（サイクル１の１日目の投与前、サイクル１の８日目、サイクル１の１５日目、サイクル２の１日目の投与前、サイクル３の１日目の投与前、及びサイクル４の１日目の投与前）に採取した新鮮な血液から血清を調製した。血清中で、免疫活性化の初期応答因子である一連の炎症性サイトカイン（ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－６及びＩＬ－１０）の濃度を高感度かつ定量的なＭＳＤ Ｖ－Ｐｌｅｘアッセイ（カタログ番号Ｋ１５１Ａ９Ｈ）によって、メーカーの指示に従って測定した。

【0323】

ＩＦＮ－γについては図３３、ＴＮＦ－αについては図３４に示されているように、治療クールにわたる、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αのベースレベル（サイクル１の１日目の投与前）に対する変化をプロットした。３ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４を投与した患者６１０５－００５におけるＩＦＮ－γの存在量は、サイクル１の８日目からサイクル２の１日目までに有意に増加した。１ｍｇ／ｋｇの用量を投与した患者６１０５－００４では、治療中に、ＴＮＦ－αの存在量が急激な増加を示した。全体的には、一部の患者において、ＴＹ２２４０４による治療後、ＩＦＮ－γ及び／またはＴＮＦ－αのレベルの一過性の上昇が観察され、これは、免疫の活性化を示している。

【0324】

免疫細胞のプロファイリングのために、様々な時点（サイクル１の１日目の投与前、サイクル１の８日目、サイクル１の１５日目、サイクル２の１日目の投与前、サイクル３の１日目の投与前、及びサイクル４の１日目の投与前）に、標準的なプロトコールに従って、新鮮な末梢血試料を各患者から採取した。ＣＤ４＋ ヘルパーＴ細胞、ＣＤ８＋ 細胞傷害性Ｔ細胞、Ｂ細胞及びＮＫ細胞を含む免疫細胞亜集団のプロファイルをＴＢＮＫ ＦＡＣＳパネルによって求めた。図３５Ａ～３５Ｃに示されているように、治療クールにわたる、各亜集団での絶対数のベースレベル（サイクル１の１日目の投与前）に対する変化をプロットした。全体的には、一部の患者では、ＴＹ２２４０４による治療後に、ＣＤ４^＋、ＣＤ８^＋のＴ細胞及びＮＫ細胞の一過性の上昇が観察された。治療後のＮＫ細胞の絶対数及びパーセンテージの上昇は、用量依存的であったようである。

【0325】

実施例６．Ｈ２２マウス腫瘍、マウス肝臓及びマウス血漿におけるＴＹ２２４０４のｉｎ ｖｉｖｏ切断
Ｈ２２マウス腫瘍、マウス肝臓及びマウス血漿において、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）またはマトリックスメタロプロテイナーゼ－９（ＭＭＰ９）によるＴＹ２２４０４のｖｉｖｏ切断効率を従来のウェスタンブロット（ＷＢ）によって評価した。簡潔に述べると、Ｈ２２腫瘍細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏで、１０％ウシ胎児血清が添加されたＲＰＭＩ－１６４０培地中の単層培養液として、３７℃で、空気中５％ＣＯ_２の雰囲気で維持した。指数成長期に成長している細胞を回収し、腫瘍接種に備えて計数した。それぞれのマウス（ＢＡＬＢ／ｃ）に、腫瘍発生のために、０．１ｍｌのＰＢＳ中のＨ２２腫瘍細胞（２×１０^６）を右側腹部領域に皮下接種した。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、初期の腫瘍体積（約３００ｍｍ^３）に基づき、２つの群（Ｎ＝３）にランダムに分けた。続いて、その試験におけるマウスを５ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４で、静脈内ボーラスによって治療した。その後のＷＢ解析のために、投与から２４時間後及び９６時間後に、腫瘍、肝臓及び血漿の試料を、その２つの群（１群当たり３匹のマウス）からそれぞれ採取した。プロテアーゼ阻害剤カクテルを含む氷冷ＲＩＰＡ Ｌｙｓｉｓ Ｂｕｆｆｅｒに、それらの組織試料を溶解し、全組織タンパク質をビシンコニン酸（ＢＣＡ）キットによって定量した。その後、標的抗体をプルダウンし、事前に処理したプロテインＡビーズによって濃縮した。調製した試料を、ＳＤＳ－ＰＡＧＥに備えて、１２％グラジエントゲルに流した。一次抗体は、抗ヒトκ軽鎖抗体（Ａｂｃａｍ、ａｂ１３４９３０、１：５０００希釈液）を使用し、第２の抗体は、ＨＲＰ標識マウス抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）を使用し、最終的なシグナル検出には、高感度化学発光（ＥＣＬ）法を使用した。インタクトなＴＹ２２４０４と、切断されたＴＹ２２４０４との１：１の比率の混合物を、このアッセイにおける標準コントロール（ＳＴＤとラベル付けした）として使用した。

【0326】

図３６に示されているように、投与から２４時間後には、全ＴＹ２２４０４の約半数である切断形態は、３匹中２匹のマウス（１～３とラベル付けした）の腫瘍で検出されたが、肝臓及び血漿では検出されなかった。しかしながら、投与から９６時間後には、切断形態のＴＹ２２４０４は、３匹すべてのマウス（４～６とラベル付けした）の腫瘍、肝臓及び血漿を含むすべての試料で観察された。

【0327】

実施例７．ＣＴ２６マウス大腸癌モデルにおける、ＴＹ２２４０４の用量依存的なＴｒｅｇ枯渇
ＢＡＬＢ／ｃマウス（１群あたりｎ＝１０、雌、８～９週齢）に、ＣＴ２６マウス大腸癌細胞（ＳＩＢＳ）を皮下接種した。腫瘍の接種から９日目に、平均腫瘍体積が約１５０ｍｍ^３に達したら、治療を開始した。それらのマウスに、５ｍｇ／ｋｇのアイソタイプコントロール、ならびに５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ及び０．２ｍｇ／ｋｇのＴＹ２２４０４を腹腔内注射によって投与した。それらのマウスには、これらの抗体を９日目及び１２日目に投与し、脾臓及び腫瘍浸潤リンパ球の解析のために、１４日目に終了した。

【0328】

図３７に示されているように、ＴＹ２２４０４では、ＴＩＬにおいて、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージが、アイソタイプコントロールと比べて有意に、用量依存的に低下した。しかしながら、脾臓では、ＴＹ２２４０４によって、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇのパーセンテージが低下しなかった。図３８に示されているように、ＴＩＬにおけるＴｒｅｇ細胞上でのＣＴＬＡ－４発現レベルは、ＴＹ２２４０４による治療後に、有意に用量依存的に低下した。しかしながら、ＣＴＬＡ－４発現レベルは、末梢Ｔｒｅｇ細胞上では、ＴＹ２２４０４による治療後に変化しなかった。

【0329】

例示的な配列

【表6-1】

【表6-2】

【表6-3】

【表6-4】

【表6-5】

【表6-6】

【表6-7】

【表7-1】

【表7-2】

【表7-3】

【表7-4】

【表8-1】

【表8-2】

【表8-3】

【0330】

配列番号２３１ ヒトＣＤ１３７のアミノ酸配列
ＭＧＮＳＣＹＮＩＶＡＴＬＬＬＶＬＮＦＥＲＴＲＳＬＱＤＰＣＳＮＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥＰＧＨＳＰＱＩＩＳＦＦＬＡＬＴＳＴＡＬＬＦＬＬＦＦＬＴＬＲＦＳＶＶＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ

【0331】

配列番号２３２ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｈ１
ＦＳＬＳＴＧＧＶＧＶＧＷＩ

【0332】

配列番号２３３ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｈ２
ＬＡＬＩＤＷＡＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬ

【0333】

配列番号２３４ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｈ３
ＡＲＧＧＳＤＴＶＩＧＤＷＦＡＹ

【0334】

配列番号２３５ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＳＩＧＳＹＬＡ

【0335】

配列番号２３６ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｌ２
ＤＡＳＮＬＥＴＧＶ

【0336】

配列番号２３７ ＡＤＧ１０６のＨＶＲ－Ｌ３
ＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴ

【0337】

配列番号２３８ ＡＤＧ１０６のＶＨ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＬＳＴＧＧＶＧＶＧＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＬＩＤＷＡＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＴＶＩＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0338】

配列番号２３９ ＡＤＧ１０６のＶＬ
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＧＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ

【0339】

配列番号２４０ ＡＤＧ１０６の重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＬＳＴＧＧＶＧＶＧＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＬＩＤＷＡＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＴＶＩＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ

【0340】

配列番号２４１ ＡＤＧ１０６の軽鎖
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＧＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【0341】

配列番号２４２ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｈ１
ＹＳＩＴＳＧＨＹＷＡＷＩ

【0342】

配列番号２４３ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｈ２
ＶＳＳＩＳＧＹＧＳＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ

【0343】

配列番号２４４ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｈ３
ＡＲＧＧＳＤＡＶＬＧＤＷＦＡＹ

【0344】

配列番号２４５ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＧＩＧＳＦＬＡ

【0345】

配列番号２４６ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｌ２
ＤＡＳＮＬＥＴＧＶ

【0346】

配列番号２４７ ＡＧ１００５９のＨＶＲ－Ｌ３
ＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴ

【0347】

配列番号２４８ ＡＧ１００５９のＶＨ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＴＳＧＨＹＷＡＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＧＹＧＳＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＡＶＬＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0348】

配列番号２４９ ＡＧ１００５９のＶＬ
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＧＳＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ

【0349】

配列番号２５０ ＡＧ１００５９の重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＴＳＧＨＹＷＡＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＧＹＧＳＴＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＡＶＬＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ

【0350】

配列番号２５１ ＡＧ１００５９の軽鎖
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＧＳＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＹＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【0351】

配列番号２５２ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｈ１
ＦＳＬＳＴＳＧＶＧＶＧＷＩ

【0352】

配列番号２５３ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｈ２
ＬＡＬＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬ

【0353】

配列番号２５４ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｈ３
ＡＲＧＧＳＤＴＶＬＧＤＷＦＡＹ

【0354】

配列番号２５５ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＳＶＳＰＹＬＡ

【0355】

配列番号２５６ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｌ２
ＤＡＳＳＬＥＳＧＶ

【0356】

配列番号２５７ ＡＧ１００５８のＨＶＲ－Ｌ３
ＹＣＱＱＧＹＳＬＷＴ

【0357】

配列番号２５８ ＡＧ１００５８のＶＨ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＬＳＴＳＧＶＧＶＧＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＬＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＴＶＬＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0358】

配列番号２５９ ＡＧ１００５８のＶＬ
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＳＰＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＳＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＳＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ

【0359】

配列番号２６０ ＡＧ１００５８の重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＬＳＴＳＧＶＧＶＧＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＬＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＧＳＤＴＶＬＧＤＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ

【0360】

配列番号２６１ ＡＧ１００５８の軽鎖
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＳＰＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＳＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＹＳＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【0361】

配列番号２６２ ＨＶＲ－Ｈ１の式（Ｉ）
Ｘ１ＴＦＸ２Ｘ３ＹＸ４ＩＨＷＶ（式中、Ｘ１は、ＦまたはＹであり、Ｘ２は、ＳまたはＴであり、Ｘ３は、Ｇ、ＮまたはＳであり、Ｘ４は、Ａ、ＧまたはＷである）

【0362】

配列番号２６３ ＨＶＲ－Ｈ１の式（ＩＩ）
ＹＳＩＸ１ＳＧＸ２Ｘ３ＷＸ４ＷＩ（式中、Ｘ１は、ＳまたはＴであり、Ｘ２は、ＨまたはＹであり、Ｘ３は、ＨまたはＹであり、Ｘ４は、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｎ、ＳまたはＴである）

【0363】

配列番号２６４ ＨＶＲ－Ｈ１の式（ＩＩＩ）
ＦＳＬＳＴＸ１ＧＶＸ２ＶＸ３ＷＩ（式中、Ｘ１は、ＧまたはＳであり、Ｘ２は、ＡまたはＧであり、Ｘ３は、Ａ、Ｇ、ＳまたはＴである）

【0364】

配列番号２６５ ＨＶＲ－Ｈ２の式（ＩＶ）
ＬＡＬＩＤＷＸ１Ｘ２ＤＫＸ３ＹＳＸ４ＳＬＫＳＲＬ（式中、Ｘ１は、Ａ、ＤまたはＹであり、Ｘ２は、ＤまたはＧであり、Ｘ３は、Ｒ、ＳまたはＹであり、Ｘ４は、ＰまたはＴである）

【0365】

配列番号２６６ ＨＶＲ－Ｈ２の式（Ｖ）
ＩＧＸ１ＩＹＨＳＧＸ２ＴＹＹＸ３ＰＳＬＫＳＲＶ（式中、Ｘ１は、ＤまたはＥであり、Ｘ２は、ＮまたはＳであり、Ｘ３は、ＮまたはＳである）

【0366】

配列番号２６７ ＨＶＲ－Ｈ２の式（ＶＩ）
ＶＳＸ１ＩＳＧＸ２ＧＸ３Ｘ４ＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦ（式中、Ｘ１は、Ａ、Ｇ、Ｓ、ＶまたはＹであり、Ｘ２は、Ａ、Ｄ、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、ＧまたはＳであり、Ｘ４は、ＳまたはＴである）

【0367】

配列番号２６８ ＨＶＲ－Ｈ３の式（ＶＩＩ）
ＡＲＸ１ＧＸ２Ｘ３Ｘ４ＶＸ５ＧＤＷＦＸ６Ｙ（式中、Ｘ１は、ＥまたはＧであり、Ｘ２は、ＥまたはＳであり、Ｘ３は、ＤまたはＴであり、Ｘ４は、Ａ、ＴまたはＶであり、Ｘ５は、Ａ、Ｉ、Ｌ、ＴまたはＶであり、Ｘ６は、Ａ、ＤまたはＧである）

【0368】

配列番号２６９ ＨＶＲ－Ｌ１の式（ＶＩＩＩ）
Ｘ１ＡＳＱＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｘ８（式中、Ｘ１は、ＱまたはＲであり、Ｘ２は、Ｄ、ＧまたはＳであり、Ｘ３は、ＩまたはＶであり、Ｘ４は、Ｇ、Ｒ、ＳまたはＴであり、Ｘ５は、Ｐ、Ｒ、ＳまたはＴであり、Ｘ６は、Ａ、Ｄ、Ｆ、Ｓ、ＶまたはＹであり、Ｘ７は、ＬまたはＶであり、Ｘ８は、Ａ、ＧまたはＮである）

【0369】

配列番号２７０ ＨＶＲ－Ｌ２の式（ＩＸ）
Ｘ１ＡＳＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＧＸ６（式中、Ｘ１は、ＡまたはＤであり、Ｘ２は、Ｎ、ＳまたはＴであり、Ｘ３は、ＬまたはＲであり、Ｘ４は、Ａ、ＥまたはＱであり、Ｘ５は、ＳまたはＴであり、Ｘ６は、ＩまたはＶである）

【0370】

配列番号２７１ ＨＶＲ－Ｌ３の式（Ｘ）
ＹＣＱＱＸ１ＹＸ２Ｘ３Ｘ４Ｔ（式中、Ｘ１は、Ａ、Ｇ、ＳまたはＹであり、Ｘ２は、Ｑ、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、Ｉ、Ｌ、ＴまたはＹであり、Ｘ４は、Ｉ、Ｓ、ＶまたはＷである）

【0371】

配列番号２７２ ＨＶＲ－Ｌ３の式（ＸＩ）
ＹＣＸ１ＱＸ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５ＰＸ６Ｔ（式中、Ｘ１は、ＥまたはＱであり、Ｘ２は、Ｐ、ＳまたはＹであり、Ｘ３は、Ｄ、Ｌ、Ｓ、ＴまたはＹであり、Ｘ４は、Ｄ、Ｅ、Ｈ、ＳまたはＴであり、Ｘ５は、Ｄ、Ｌ、ＴまたはＷであり、Ｘ６は、Ｌ、Ｐ、ＲまたはＶである）

【0372】

配列番号２７３ ｓＣＤ１３７のアミノ酸配列
ＬＱＤＰＣＳＮＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥＰＧＨＳＰＱ

【0373】

配列番号２７４ ＣＤ１３７Ｌの核酸配列
Ａｔｇｇａａｔａｃｇｃｃｔｃｔｇａｃｇｃｔｔｃａｃｔｇｇａｃｃｃｃｇａａｇｃｃｃｃｇｔｇｇｃｃｔｃｃｃｇｃｇｃｃｃｃｇｃｇｃｔｃｇｃｇｃｃｔｇｃｃｇｃｇｔａｃｔｇｃｃｔｔｇｇｇｃｃｃｔｇｇｔｃｇｃｇｇｇｇｃｔｇｃｔｇｃｔｇｃｔｇｃｔｇｃｔｇｃｔｃｇｃｔｇｃｃｇｃｃｔｇｃｇｃｃｇｔｃｔｔｃｃｔｃｇｃｃｔｇｃｃｃｃｔｇｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃｇｇｇｇｃｔｃｇｃｇｃｃｔｃｇｃｃｃｇｇｃｔｃｃｇｃｇｇｃｃａｇｃｃｃｇａｇａｃｔｃｃｇｃｇａｇｇｇｔｃｃｃｇａｇｃｔｔｔｃｇｃｃｃｇａｃｇａｔｃｃｃｇｃｃｇｇｃｃｔｃｔｔｇｇａｃｃｔｇｃｇｇｃａｇｇｇｃａｔｇｔｔｔｇｃｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｇｃｃｃａａａａｔｇｔｔｃｔｇｃｔｇａｔｃｇａｔｇｇｇｃｃｃｃｔｇａｇｃｔｇｇｔａｃａｇｔｇａｃｃｃａｇｇｃｃｔｇｇｃａｇｇｃｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｃｇｇｇｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔａｃａａａｇａｇｇａｃａｃｇａａｇｇａｇｃｔｇｇｔｇｇｔｇｇｃｃａａｇｇｃｔｇｇａｇｔｃｔａｃｔａｔｇｔｃｔｔｃｔｔｔｃａａｃｔａｇａｇｃｔｇｃｇｇｃｇｃｇｔｇｇｔｇｇｃｃｇｇｃｇａｇｇｇｃｔｃａｇｇｃｔｃｃｇｔｔｔｃａｃｔｔｇｃｇｃｔｇｃａｃｃｔｇｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｔｃｔｇｃｔｇｃｔｇｇｇｇｃｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇｇｃｔｔｔｇａｃｃｇｔｇｇａｃｃｔｇｃｃａｃｃｃｇｃｃｔｃｃｔｃｃｇａｇｇｃｔｃｇｇａａｃｔｃｇｇｃｃｔｔｃｇｇｔｔｔｃｃａｇｇｇｃｃｇｃｔｔｇｃｔｇｃａｃｃｔｇａｇｔｇｃｃｇｇｃｃａｇｃｇｃｃｔｇｇｇｃｇｔｃｃａｔｃｔｔｃａｃａｃｔｇａｇｇｃｃａｇｇｇｃａｃｇｃｃａｔｇｃｃｔｇｇｃａｇｃｔｔａｃｃｃａｇｇｇｃｇｃｃａｃａｇｔｃｔｔｇｇｇａｃｔｃｔｔｃｃｇｇｇｔｇａｃｃｃｃｃｇａａａｔｃｃｃａｇｃｃｇｇａｃｔｃｃｃｔｔｃａｃｃｇａｇｇｔｃｇｇａａ

【0374】

配列番号２７５ ＣＤ１３７Ｌのアミノ酸配列
ＭＥＹＡＳＤＡＳＬＤ ＰＥＡＰＷＰＰＡＰＲ ＡＲＡＣＲＶＬＰＷＡ ＬＶＡＧＬＬＬＬＬＬ ＬＡＡＡＣＡＶＦＬＡ ＣＰＷＡＶＳＧＡＲＡ ＳＰＧＳＡＡＳＰＲＬ ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤ ＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧ ＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶ ＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹ ＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬ ＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴ ＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶ ＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲ ＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳ ＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬ ＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡ ＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳ ＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱ ＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱ ＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡ ＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱ ＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶ ＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳ ＰＲＳＥ

【0375】

配列番号２７６ ＰＤ－Ｌ１のアミノ酸配列
ＭＲＩＦＡＶＦＩＦＭＴＹＷＨＬＬＮＡＦＴＶＴＶＰＫＤＬＹＶＶＥＹＧＳＮＭＴＩＥＣＫＦＰＶＥＫＱＬＤＬＡＡＬＩＶＹＷＥＭＥＤＫＮＩＩＱＦＶＨＧＥＤＬＫＶＱＨＳＳＹＲＱＲＡＲＬＬＫＤＱＬＳＬＧＮＡＡＬＱＩＴＤＶＫＬＱＤＡＧＶＹＲＣＭＩＳＹＧＧＡＤＹＫＲＩＴＶＫＶＮＡＰＹＮＫＩＮＱＲＩＬＶＶＤＰＶＴＳＥＨＥＬＴＣＱＡＥＧＹＰＫＡＥＶＩＷＴＳＳＤＨＱＶＬＳＧＫＴＴＴＴＮＳＫＲＥＥＫＬＦＮＶＴＳＴＬＲＩＮＴＴＴＮＥＩＦＹＣＴＦＲＲＬＤＰＥＥＮＨＴＡＥＬＶＩＰＥＬＰＬＡＨＰＰＮＥＲＴＨＬＶＩＬＧＡＩＬＬＣＬＧＶＡＬＴＦＩＦＲＬＲＫＧＲＭＭＤＶＫＫＣＧＩＱＤＴＮＳＫＫＱＳＤＴＨＬＥＥＴ

【0376】

配列番号２７７ Ｋｉ６７のアミノ酸配列
ＭＷＰＴＲＲＬＶＴＩＫＲＳＧＶＤＧＰＨＦＰＬＳＬＳＴＣＬＦＧＲＧＩＥＣＤＩＲＩＱＬＰＶＶＳＫＱＨＣＫＩＥＩＨＥＱＥＡＩＬＨＮＦＳＳＴＮＰＴＱＶＮＧＳＶＩＤＥＰＶＲＬＫＨＧＤＶＩＴＩＩＤＲＳＦＲＹＥＮＥＳＬＱＮＧＲＫＳＴＥＦＰＲＫＩＲＥＱＥＰＡＲＲＶＳＲＳＳＦＳＳＤＰＤＥＫＡＱＤＳＫＡＹＳＫＩＴＥＧＫＶＳＧＮＰＱＶＨＩＫＮＶＫＥＤＳＴＡＤＤＳＫＤＳＶＡＱＧＴＴＮＶＨＳＳＥＨＡＧＲＮＧＲＮＡＡＤＰＩＳＧＤＦＫＥＩＳＳＶＫＬＶＳＲＹＧＥＬＫＳＶＰＴＴＱＣＬＤＮＳＫＫＮＥＳＰＦＷＫＬＹＥＳＶＫＫＥＬＤＶＫＳＱＫＥＮＶＬＱＹＣＲＫＳＧＬＱＴＤＹＡＴＥＫＥＳＡＤＧＬＱＧＥＴＱＬＬＶＳＲＫＳＲＰＫＳＧＧＳＧＨＡＶＡＥＰＡＳＰＥＱＥＬＤＱＮＫＧＫＧＲＤＶＥＳＶＱＴＰＳＫＡＶＧＡＳＦＰＬＹＥＰＡＫＭＫＴＰＶＱＹＳＱＱＱＮＳＰＱＫＨＫＮＫＤＬＹＴＴＧＲＲＥＳＶＮＬＧＫＳＥＧＦＫＡＧＤＫＴＬＴＰＲＫＬＳＴＲＮＲＴＰＡＫＶＥＤＡＡＤＳＡＴＫＰＥＮＬＳＳＫＴＲＧＳＩＰＴＤＶＥＶＬＰＴＥＴＥＩＨＮＥＰＦＬＴＬＷＬＴＱＶＥＲＫＩＱＫＤＳＬＳＫＰＥＫＬＧＴＴＡＧＱＭＣＳＧＬＰＧＬＳＳＶＤＩＮＮＦＧＤＳＩＮＥＳＥＧＩＰＬＫＲＲＲＶＳＦＧＧＨＬＲＰＥＬＦＤＥＮＬＰＰＮＴＰＬＫＲＧＥＡＰＴＫＲＫＳＬＶＭＨＴＰＰＶＬＫＫＩＩＫＥＱＰＱＰＳＧＫＱＥＳＧＳＥＩＨＶＥＶＫＡＱＳＬＶＩＳＰＰＡＰＳＰＲＫＴＰＶＡＳＤＱＲＲＲＳＣＫＴＡＰＡＳＳＳＫＳＱＴＥＶＰＫＲＧＧＲＫＳＧＮＬＰＳＫＲＶＳＩＳＲＳＱＨＤＩＬＱＭＩＣＳＫＲＲＳＧＡＳＥＡＮＬＩＶＡＫＳＷＡＤＶＶＫＬＧＡＫＱＴＱＴＫＶＩＫＨＧＰＱＲＳＭＮＫＲＱＲＲＰＡＴＰＫＫＰＶＧＥＶＨＳＱＦＳＴＧＨＡＮＳＰＣＴＩＩＩＧＫＡＨＴＥＫＶＨＶＰＡＲＰＹＲＶＬＮＮＦＩＳＮＱＫＭＤＦＫＥＤＬＳＧＩＡＥＭＦＫＴＰＶＫＥＱＰＱＬＴＳＴＣＨＩＡＩＳＮＳＥＮＬＬＧＫＱＦＱＧＴＤＳＧＥＥＰＬＬＰＴＳＥＳＦＧＧＮＶＦＦＳＡＱＮＡＡＫＱＰＳＤＫＣＳＡＳＰＰＬＲＲＱＣＩＲＥＮＧＮＶＡＫＴＰＲＮＴＹＫＭＴＳＬＥＴＫＴＳＤＴＥＴＥＰＳＫＴＶＳＴＡＮＲＳＧＲＳＴＥＦＲＮＩＱＫＬＰＶＥＳＫＳＥＥＴＮＴＥＩＶＥＣＩＬＫＲＧＱＫＡＴＬＬＱＱＲＲＥＧＥＭＫＥＩＥＲＰＦＥＴＹＫＥＮＩＥＬＫＥＮＤＥＫＭＫＡＭＫＲＳＲＴＷＧＱＫＣＡＰＭＳＤＬＴＤＬＫＳＬＰＤＴＥＬＭＫＤＴＡＲＧＱＮＬＬＱＴＱＤＨＡＫＡＰＫＳＥＫＧＫＩＴＫＭＰＣＱＳＬＱＰＥＰＩＮＴＰＴＨＴＫＱＱＬＫＡＳＬＧＫＶＧＶＫＥＥＬＬＡＶＧＫＦＴＲＴＳＧＥＴＴＨＴＨＲＥＰＡＧＤＧＫＳＩＲＴＦＫＥＳＰＫＱＩＬＤＰＡＡＲＶＴＧＭＫＫＷＰＲＴＰＫＥＥＡＱＳＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＰＳＥＥＳＭＴＤＥＫＴＴＫＩＡＣＫＳＰＰＰＥＳＶＤＴＰＴＳＴＫＱＷＰＫＲＳＬＲＫＡＤＶＥＥＥＦＬＡＬＲＫＬＴＰＳＡＧＫＡＭＬＴＰＫＰＡＧＧＤＥＫＤＩＫＡＦＭＧＴＰＶＱＫＬＤＬＡＧＴＬＰＧＳＫＲＱＬＱＴＰＫＥＫＡＱＡＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＨＴＥＥＬＶＡＡＧＫＴＴＫＩＰＣＤＳＰＱＳＤＰＶＤＴＰＴＳＴＫＱＲＰＫＲＳＩＲＫＡＤＶＥＧＥＬＬＡＣＲＮＬＭＰＳＡＧＫＡＭＨＴＰＫＰＳＶＧＥＥＫＤＩＩＩＦＶＧＴＰＶＱＫＬＤＬＴＥＮＬＴＧＳＫＲＲＰＱＴＰＫＥＥＡＱＡＬＥＤＬＴＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＨＴＥＥＡＶＡＡＧＫＴＴＫＭＰＣＥＳＳＰＰＥＳＡＤＴＰＴＳＴＲＲＱＰＫＴＰＬＥＫＲＤＶＱＫＥＬＳＡＬＫＫＬＴＱＴＳＧＥＴＴＨＴＤＫＶＰＧＧＥＤＫＳＩＮＡＦＲＥＴＡＫＱＫＬＤＰＡＡＳＶＴＧＳＫＲＨＰＫＴＫＥＫＡＱＰＬＥＤＬＡＧＬＫＥＬＦＱＴＰＶＣＴＤＫＰＴＴＨＥＫＴＴＫＩＡＣＲＳＱＰＤＰＶＤＴＰＴＳＳＫＰＱＳＫＲＳＬＲＫＶＤＶＥＥＥＦＦＡＬＲＫＲＴＰＳＡＧＫＡＭＨＴＰＫＰＡＶＳＧＥＫＮＩＹＡＦＭＧＴＰＶＱＫＬＤＬＴＥＮＬＴＧＳＫＲＲＬＱＴＰＫＥＫＡＱＡＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＲＧＨＴＥＥＳＭＴＮＤＫＴＡＫＶＡＣＫＳＳＱＰＤＰＤＫＮＰＡＳＳＫＲＲＬＫＴＳＬＧＫＶＧＶＫＥＥＬＬＡＶＧＫＬＴＱＴＳＧＥＴＴＨＴＨＴＥＰＴＧＤＧＫＳＭＫＡＦＭＥＳＰＫＱＩＬＤＳＡＡＳＬＴＧＳＫＲＱＬＲＴＰＫＧＫＳＥＶＰＥＤＬＡＧＦＩＥＬＦＱＴＰＳＨＴＫＥＳＭＴＮＥＫＴＴＫＶＳＹＲＡＳＱＰＤＬＶＤＴＰＴＳＳＫＰＱＰＫＲＳＬＲＫＡＤＴＥＥＥＦＬＡＦＲＫＱＴＰＳＡＧＫＡＭＨＴＰＫＰＡＶＧＥＥＫＤＩＮＴＦＬＧＴＰＶＱＫＬＤＱＰＧＮＬＰＧＳＮＲＲＬＱＴＲＫＥＫＡＱＡＬＥＥＬＴＧＦＲＥＬＦＱＴＰＣＴＤＮＰＴＴＤＥＫＴＴＫＫＩＬＣＫＳＰＱＳＤＰＡＤＴＰＴＮＴＫＱＲＰＫＲＳＬＫＫＡＤＶＥＥＥＦＬＡＦＲＫＬＴＰＳＡＧＫＡＭＨＴＰＫＡＡＶＧＥＥＫＤＩＮＴＦＶＧＴＰＶＥＫＬＤＬＬＧＮＬＰＧＳＫＲＲＰＱＴＰＫＥＫＡＫＡＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＨＴＥＥＳＭＴＤＤＫＩＴＥＶＳＣＫＳＰＱＰＤＰＶＫＴＰＴＳＳＫＱＲＬＫＩＳＬＧＫＶＧＶＫＥＥＶＬＰＶＧＫＬＴＱＴＳＧＫＴＴＱＴＨＲＥＴＡＧＤＧＫＳＩＫＡＦＫＥＳＡＫＱＭＬＤＰＡＮＹＧＴＧＭＥＲＷＰＲＴＰＫＥＥＡＱＳＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＰＤＨＴＥＥＳＴＴＤＤＫＴＴＫＩＡＣＫＳＰＰＰＥＳＭＤＴＰＴＳＴＲＲＲＰＫＴＰＬＧＫＲＤＩＶＥＥＬＳＡＬＫＱＬＴＱＴＴＨＴＤＫＶＰＧＤＥＤＫＧＩＮＶＦＲＥＴＡＫＱＫＬＤＰＡＡＳＶＴＧＳＫＲＱＰＲＴＰＫＧＫＡＱＰＬＥＤＬＡＧＬＫＥＬＦＱＴＰＩＣＴＤＫＰＴＴＨＥＫＴＴＫＩＡＣＲＳＰＱＰＤＰＶＧＴＰＴＩＦＫＰＱＳＫＲＳＬＲＫＡＤＶＥＥＥＳＬＡＬＲＫＲＴＰＳＶＧＫＡＭＤＴＰＫＰＡＧＧＤＥＫＤＭＫＡＦＭＧＴＰＶＱＫＬＤＬＰＧＮＬＰＧＳＫＲＷＰＱＴＰＫＥＫＡＱＡＬＥＤＬＡＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＴＤＫＰＴＴＤＥＫＴＴＫＩＡＣＫＳＰＱＰＤＰＶＤＴＰＡＳＴＫＱＲＰＫＲＮＬＲＫＡＤＶＥＥＥＦＬＡＬＲＫＲＴＰＳＡＧＫＡＭＤＴＰＫＰＡＶＳＤＥＫＮＩＮＴＦＶＥＴＰＶＱＫＬＤＬＬＧＮＬＰＧＳＫＲＱＰＱＴＰＫＥＫＡＥＡＬＥＤＬＶＧＦＫＥＬＦＱＴＰＧＨＴＥＥＳＭＴＤＤＫＩＴＥＶＳＣＫＳＰＱＰＥＳＦＫＴＳＲＳＳＫＱＲＬＫＩＰＬＶＫＶＤＭＫＥＥＰＬＡＶＳＫＬＴＲＴＳＧＥＴＴＱＴＨＴＥＰＴＧＤＳＫＳＩＫＡＦＫＥＳＰＫＱＩＬＤＰＡＡＳＶＴＧＳＲＲＱＬＲＴＲＫＥＫＡＲＡＬＥＤＬＶＤＦＫＥＬＦＳＡＰＧＨＴＥＥＳＭＴＩＤＫＮＴＫＩＰＣＫＳＰＰＰＥＬＴＤＴＡＴＳＴＫＲＣＰＫＴＲＰＲＫＥＶＫＥＥＬＳＡＶＥＲＬＴＱＴＳＧＱＳＴＨＴＨＫＥＰＡＳＧＤＥＧＩＫＶＬＫＱＲＡＫＫＫＰＮＰＶＥＥＥＰＳＲＲＲＰＲＡＰＫＥＫＡＱＰＬＥＤＬＡＧＦＴＥＬＳＥＴＳＧＨＴＱＥＳＬＴＡＧＫＡＴＫＩＰＣＥＳＰＰＬＥＶＶＤＴＴＡＳＴＫＲＨＬＲＴＲＶＱＫＶＱＶＫＥＥＰＳＡＶＫＦＴＱＴＳＧＥＴＴＤＡＤＫＥＰＡＧＥＤＫＧＩＫＡＬＫＥＳＡＫＱＴＰＡＰＡＡＳＶＴＧＳＲＲＲＰＲＡＰＲＥＳＡＱＡＩＥＤＬＡＧＦＫＤＰＡＡＧＨＴＥＥＳＭＴＤＤＫＴＴＫＩＰＣＫＳＳＰＥＬＥＤＴＡＴＳＳＫＲＲＰＲＴＲＡＱＫＶＥＶＫＥＥＬＬＡＶＧＫＬＴＱＴＳＧＥＴＴＨＴＤＫＥＰＶＧＥＧＫＧＴＫＡＦＫＱＰＡＫＲＫＬＤＡＥＤＶＩＧＳＲＲＱＰＲＡＰＫＥＫＡＱＰＬＥＤＬＡＳＦＱＥＬＳＱＴＰＧＨＴＥＥＬＡＮＧＡＡＤＳＦＴＳＡＰＫＱＴＰＤＳＧＫＰＬＫＩＳＲＲＶＬＲＡＰＫＶＥＰＶＧＤＶＶＳＴＲＤＰＶＫＳＱＳＫＳＮＴＳＬＰＰＬＰＦＫＲＧＧＧＫＤＧＳＶＴＧＴＫＲＬＲＣＭＰＡＰＥＥＩＶＥＥＬＰＡＳＫＫＱＲＶＡＰＲＡＲＧＫＳＳＥＰＶＶＩＭＫＲＳＬＲＴＳＡＫＲＩＥＰＡＥＥＬＮＳＮＤＭＫＴＮＫＥＥＨＫＬＱＤＳＶＰＥＮＫＧＩＳＬＲＳＲＲＱＮＫＴＥＡＥＱＱＩＴＥＶＦＶＬＡＥＲＩＥＩＮＲＮＥＫＫＰＭＫＴＳＰＥＭＤＩＱＮＰＤＤＧＡＲＫＰＩＰＲＤＫＶＴＥＮＫＲＣＬＲＳＡＲＱＮＥＳＳＱＰＫＶＡＥＥＳＧＧＱＫＳＡＫＶＬＭＱＮＱＫＧＫＧＥＡＧＮＳＤＳＭＣＬＲＳＲＫＴＫＳＱＰＡＡＳＴＬＥＳＫＳＶＱＲＶＴＲＳＶＫＲＣＡＥＮＰＫＫＡＥＤＮＶＣＶＫＫＩＲＴＲＳＨＲＤＳＥＤＩ

【0377】

配列番号２８６ アテゾリズマブ（抗ＰＤ－Ｌ１）のＨＶＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ

【0378】

配列番号２８７ アテゾリズマブのＨＶＲ－Ｈ２
ＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ

【0379】

配列番号２８８ アテゾリズマブのＨＶＲ－Ｈ３
ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ

【0380】

配列番号２８９ アテゾリズマブのＨＶＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ

【0381】

配列番号２９０ アテゾリズマブのＨＶＲ－Ｌ２
ＳＡＳＦＬＹＳ

【0382】

配列番号２９１ アテゾリズマブのＨＶＲ－Ｌ３
ＱＱＹＬＹＨＰＡＴ

【0383】

配列番号２９２ アテゾリズマブのＶＨ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0384】

配列番号２９３ アテゾリズマブのＶＬ
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶ

【0385】

配列番号２９４ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｈ１
ＴＹＹＩＳ

【0386】

配列番号２９５ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｈ２
ＹＩＮＭＧＳＧＧＴＮＹＮＥＫＦＫ

【0387】

配列番号２９６ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｈ３
ＩＧＹＦＤＹ

【0388】

配列番号２９７ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｌ１
ＲＳＳＱＳＬＬＤＳＤＧＧＴＹＬＹ

【0389】

配列番号２９８ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｌ２
ＬＶＳＴＬＧＳ

【0390】

配列番号２９９ ２Ｅ５のＨＶＲ－Ｌ３
ＭＱＬＴＨＷＰＹＴ

【0391】

配列番号３００ ２Ｅ５のＶＨ
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＦＴＦＴＴＹＹＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＹＬＧＹＩＮＭＧＳＧＧＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＩＩＧＹＦＤＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ

【0392】

配列番号３０１ ２Ｅ５のＶＬ
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＬＤＳＤＧＧＴＹＬＹＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＬＶＳＴＬＧＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＭＱＬＴＨＷＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ

【0393】

配列番号３０２ 抗ＣＤ１３７Ｌの第１のエピトープ
ＭＥＹＡＳＤＡＳＬＤＰＥＡＰＷＰＰＡＰＲＡＲＡＣＲＶＬＰ

【0394】

配列番号３０３ 抗ＣＤ１３７Ｌの第２のエピトープ
ＭＥＹＡＳＤＡＳＬＤＰＥＡＰＷＰＰＡＰＲＡＲＡ

【0395】

配列番号３０４ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｈ１
ＦＳＬＳＴＳＧＶＧＶＳＷＩ

【0396】

配列番号３０５ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｈ２
ＬＡＬＩＤＷＡＧＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬ

【0397】

配列番号３０６ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｈ３
ＡＲＹＧＹＳＳＹＡＬＤＹ

【0398】

配列番号３０７ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＳＶＲＧＳＹＬＡ

【0399】

配列番号３０８ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｌ２
ＡＡＳＴＬＱＳＧＶ

【0400】

配列番号３０９ ＴＹ２３５６１のＨＶＲ－Ｌ３
ＹＣＱＱＹＳＳＬＷＴ

【0401】

配列番号３１０ ＴＹ２３５６１のＶＨ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＬＳＴＳＧＶＧＶＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＬＩＤＷＡＧＤＫＹＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＧＹＳＳＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0402】

配列番号３１１ ＴＹ２３５６１のＶＬ
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＲＧＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＳＳＬＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ

【0403】

配列番号３１２ トリパリマブ（抗ＰＤ１）のＨＶＲ－Ｈ１
ＤＹＥＭＨ

【0404】

配列番号３１３ トリパリマブのＨＶＲ－Ｈ２
ＶＩＥＳＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ

【0405】

配列番号３１４ トリパリマブのＨＶＲ－Ｈ３
ＥＧＩＴＴＶＡＴＴＹＹＷＹＦＤＶ

【0406】

配列番号３１５ トリパリマブのＨＶＲ－Ｌ１
ＲＳＳＱＳＩＶＨＳＮＧＮＴＹＬＥ

【0407】

配列番号３１６ トリパリマブのＨＶＲ－Ｌ２
ＫＶＳＮＲＦＳ

【0408】

配列番号３１７ トリパリマブのＨＶＲ－Ｌ３
ＦＱＧＳＨＶＰＬＴ

【0409】

配列番号３１８ トリパリマブのＶＨ
ＱＧＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＥＭＨＷＶＲＱＡＰＩＨＧＬＥＷＩＧＶＩＥＳＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＴＶＡＴＴＹＹＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ

【0410】

配列番号３１９ トリパリマブのＶＬ
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＨＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＶＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ

【0411】

配列番号３２０ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ２の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを除く）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ

【0412】

配列番号３２１ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ２の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを含む）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

【0413】

配列番号３２２ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ２の完全軽鎖（Ｎ末端のマスキング部分及びリンカーを含む）
ＥＶＧＳＹＰＮＰＳＳＤＣＶＰＹＹＹＡＣＡＹＳＧＲＳＡＧＧＧＧＴＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＲＧＲＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＳＳＷＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【0414】

配列番号３２３ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ １の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを除く）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ

【0415】

配列番号３２４ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ １の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを含む）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

【0416】

配列番号３２５ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ １の完全軽鎖（Ｎ末端のマスキング部分及びリンカーを含む）
ＥＶＧＳＹＮＦＶＡＤＳＣＰＤＨＰＹＰＣＳＡＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＲＧＲＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＳＳＷＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【0417】

配列番号３２６ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ３の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを除く）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ

【0418】

配列番号３２７ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ３の完全重鎖（Ｃ末端のリジンを含む）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＹＳＩＳＳＧＹＨＷＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＬＡＲＩＤＷＤＤＤＫＹＹＳＴＳＬＫＳＲＬＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＬＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＹＶＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

【0419】

配列番号３２８ 抗ＣＴＬＡ４ ＳＡＦＥｂｏｄｙ ３の完全軽鎖（Ｎ末端のマスキング部分及びリンカーを含む）
ＥＶＧＳＹＩＶＨＨＳＤＣＤＡＦＹＰＹＣＤＳＳＧＲＳＡＧＧＧＧＳＰＬＧＬＡＧＳＧＧＳＤＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＲＧＲＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＳＳＷＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【図13A】

【図13B】

【図14A】

【図14B】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18A】

【図18B】

【図19A】

【図19B】

【図20A】

【図20B】

【図21A】

【図21B】

【図22A】

【図22B】

【図23A】

【図23B】

【図24A】

【図24B】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32A】

【図32B】

【図33】

【図34】

【図35A】

【図35B】

【図35C】

【図36】

【図37】

【図38】

【配列表】

2024517381000001.app

【国際調査報告】