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特表2024-519205抗ＢＣＭＡ抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）をガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用する併用療法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-05-09
(54)【発明の名称】抗ＢＣＭＡ抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）をガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用する併用療法
(51)【国際特許分類】
A61K 47/68 20170101AFI20240430BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240430BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240430BHJP
A61K 31/55 20060101ALI20240430BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240430BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20240430BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20240430BHJP
【ＦＩ】
A61K47/68
A61P35/00
A61P43/00 121
A61K31/55
A61K39/395 T
A61P35/02
C12N15/13 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023566580
(86)(22)【出願日】2022-04-29
(85)【翻訳文提出日】2023-11-15
(86)【国際出願番号】 US2022026899
(87)【国際公開番号】W WO2022232488
(87)【国際公開日】2022-11-03
(31)【優先権主張番号】63/182,598
(32)【優先日】2021-04-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】508027464
【氏名又は名称】セルジーン コーポレーション
【氏名又は名称原語表記】ＣＥＬＧＥＮＥ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100162684
【弁理士】
【氏名又は名称】呉 英燦
(74)【代理人】
【識別番号】100221523
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 渉
(74)【代理人】
【識別番号】100126778
【弁理士】
【氏名又は名称】品川 永敏
(72)【発明者】
【氏名】ウー，カイダ
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076CC27
4C076CC41
4C076EE59
4C076GG06
4C076GG47
4C085AA14
4C085AA25
4C085BB01
4C085BB11
4C085BB31
4C085BB33
4C085BB34
4C085BB35
4C085BB36
4C085BB37
4C085BB41
4C085BB43
4C085GG02
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB11
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086ZB26
4C086ZC20
4C086ZC75
(57)【要約】
本開示は、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせたＢＣＭＡ（ＢＣＭＡ）及びそのアイソフォーム、並びに相同体に特異的に結合する抗体コンジュゲートの治療方法などでの使用方法に関する。また、抗体コンジュゲート及びＧＳＩを含む医薬組成物及びキットも提供される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
癌の治療又は予防を必要とする対象における癌を治療又は予防する方法であって、前記対象に、
ａ）有効量の下記式：
【化1】
ｎが、１～４であり、
前記抗体が、配列番号１３のＶＨ領域と配列番号１４のＶＬ領域とを含み、
前記抗体が、ＥＵナンバリングスキームに従って、部位ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の各々において置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み、
前記式の括弧内の各構造が、前記ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで前記抗体に結合されている、抗体コンジュゲートと、
ｂ）有効量の下記式：
【化2】
【請求項2】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、前記対象の体重の約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
ＢＭＳ－９８６４０５の前記有効量が、約２５ｍｇである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項4】
前記有効量の前記抗体コンジュゲートが、前記対象に３週間毎に１回投与され、前記有効量のＢＭＳ－９８６４０５が、前記対象に２１日のサイクル中に毎週３回投与される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項5】
前記有効量の前記抗体コンジュゲートが、前記対象に前記２１日のサイクルの１日目に投与され、前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、又は６．７ｍｇ／ｋｇである、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
前記有効量のＢＭＳ－９８６４０５が、前記対象に前記２１日のサイクルの１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、及び１９日目に投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、０．３ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項8】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、０．６ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項9】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、１．２５ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項10】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項11】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、３．０ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項12】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、４．５ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項13】
前記抗体コンジュゲートの前記有効量が、６．７ｍｇ／ｋｇである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項14】
ＢＭＳ－９８６４０５の前記有効量が、約２５ｍｇである、請求項４～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記有効量の前記抗体コンジュゲートが、静脈内投与される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項16】
ｎが、１である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
ｎが、２である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項18】
ｎが、３である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
ｎが、４である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
少なくとも１つの定常領域ドメインを更に含む、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
前記定常領域が、配列番号１９及び２０、又はその両方から選択される配列を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
前記抗体が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、又はＩｇＭである、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
前記抗体が、ヒト化されているか、又はヒトである、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
前記抗体が、アグリコシル化されている、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項26】
前記抗体が、抗体断片である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項27】
前記抗体断片が、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、及びｓｃＦｖ－Ｆｃ断片から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記抗体が、ｓｃＦｖ断片である、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記抗体が、ｓｃＦｖ－Ｆｃ断片である、請求項２７に記載の方法。
【請求項30】
前記抗体が、カニクイザルＢＣＭＡ受容体に特異的に結合する、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項31】
前記抗体が、マウスＢＣＭＡ受容体に特異的に結合する、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
前記抗体コンジュゲートが、前記ＢＭＳ－９８６４０５と同時に投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
前記抗体コンジュゲートが、前記ＢＭＳ－９８６４０５の前記投与の前に投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項34】
前記抗体コンジュゲートが、前記ＢＭＳ－９８６４０５の前記投与の後に投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項35】
前記抗体コンジュゲート及び前記ＢＭＳ－９８６４０５が、空腹時に投与される、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項36】
前記抗体コンジュゲート及び前記ＢＭＳ－９８６４０５が、満腹時に投与される、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項37】
前記癌が、白血病である、請求項１～３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項38】
前記癌が、リンパ腫である、請求項１～３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項39】
前記癌が、多発性骨髄腫である、請求項１～３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項40】
前記多発性骨髄腫が、国際病期分類又は改訂国際病期分類に従って、ステージＩである、請求項３９に記載の方法。
【請求項41】
前記多発性骨髄腫が、国際病期分類又は改訂国際病期分類に従って、ステージＩＩである、請求項３９に記載の方法。
【請求項42】
前記多発性骨髄腫が、国際病期分類又は改訂国際病期分類に従って、ステージＩＩＩである、請求項３９に記載の方法。
【請求項43】
前記多発性骨髄腫が、新たに診断された多発性骨髄腫である、請求項３９に記載の方法。
【請求項44】
前記多発性骨髄腫が、再発性又は難治性多発性骨髄腫である、請求項３９に記載の方法。
【請求項45】
キットであって、ａ）１つまたはそれ以上の用量の下記式：
【化3】
ｎが、１～４であり、
前記抗体が、配列番号１３のＶＨ領域と配列番号１４のＶＬ領域とを含み、
前記抗体が、ＥＵナンバリングスキームに従って、部位ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の各々において置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み、
前記式の括弧内の各構造が、前記ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで前記抗体に結合されている、抗体コンジュゲートと、
ｂ）１つまたはそれ以上の用量の下記式：
【化4】
前記抗体コンジュゲート及び前記ＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書とを含む、キット。
【請求項46】
前記抗体コンジュゲートが、凍結乾燥されている、請求項４５に記載のキット。
【請求項47】
前記凍結乾燥抗体コンジュゲートの再構成のための流体を更に含む、請求項４６に記載のキット。
【請求項48】
前記抗体コンジュゲートが、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇを含む量で存在する、請求項４５～４７のいずれか一項に記載のキット。
【請求項49】
前記ＢＭＳ－９８６４０５が、約２５ｍｇを含む量で存在する、請求項４５～４８のいずれか一項に記載のキット。
【請求項50】
前記キットが、前記抗体コンジュゲート及び前記ＢＭＳ－９８６４０５を含む１つまたはそれ以上の容器を備える、請求項４５～４９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項51】
前記抗体コンジュゲート及び前記ＢＭＳ－９８６４０５が、別個の容器に入れられている、請求項５０に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２１年４月３０日に出願された米国仮特許出願第６３／１８２，５９８号の利益を主張する。
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２１年４月３０日に出願された米国仮特許出願第６３／１８２，５９８号の利益を主張する。
【0002】
電子的に提出された配列表への言及
本出願は、２０２２年４月１５日に作成され、１４２４７－６６０－２２８＿ＳＥＱ＿ＬＩＳＴＩＮＧ．ｔｘｔと題名が付けられ、３０，２２４バイトのサイズを有するテキストファイルとして本出願と一緒に提出された配列表を参照により組み込む。
本出願は、２０２２年４月１５日に作成され、１４２４７－６６０－２２８＿ＳＥＱ＿ＬＩＳＴＩＮＧ．ｔｘｔと題名が付けられ、３０，２２４バイトのサイズを有するテキストファイルとして本出願と一緒に提出された配列表を参照により組み込む。
【0003】
本明細書に提供されるのは、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に対して結合特異性を有する抗体コンジュゲートを治療方法などで使用する方法である。また、本明細書に提供されるのは、抗体コンジュゲートとガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）とを含む医薬組成物及びキットである。コンジュゲート及び組成物を使用する方法は、例えば、多発性骨髄腫（例えば、再発性又は難治性多発性骨髄腫）などの細胞増殖及び癌の治療法並びに予防法において有用である。
【背景技術】
【0004】
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）は、Ｂ細胞活性化因子を認識する腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーの一員である。ヒトにおいてこのタンパク質は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）においてコードされ、成熟Ｂ細胞リンパ球で優先的に発現される。
【0005】
ＢＣＭＡは、Ｂ細胞の成熟及び形質細胞への分化の調節において重要な役割を果たす。これは、ＢＡＦＦ受容体（ＢＡＦＦ－Ｒ）及び膜貫通型活性化因子／カルシウム調節因子／シクロフィリンリガンド相互作用因子（ＴＡＣＩ）と密接に関係している。ＢＣＭＡ、ＢＡＦＦ－Ｒ、及びＴＡＣＩは、発達の異なる段階でＢ細胞の生存を促進するＩＩＩ型膜貫通型タンパク質であるが、ＢＣＭＡは、形質芽細胞及び分化した形質細胞などのＢ細胞系統細胞で独占的に発現される（Ａｖｅｒｙ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１２（２）：２８６－２９７；Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９（１）：９１－９８）。それは、形質細胞分化中に選択的に誘導され、分化した細胞におけるＢＡＦＦ－Ｒ発現の喪失と共に同時に生じる（Ｄａｒｃｅ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７８（９）：５６１２－５６２２）。ＢＣＭＡ発現は、正常な形質細胞及び形質芽細胞の生存を支援するように見えるが、典型的には、ナイーブな大部分のメモリーＢ細胞には通常は存在しない。したがって、それは全体的なＢ細胞の恒常性に必要であるとは考えられないが、骨髄における長期生存型形質細胞の最適な生存に必要とされる（Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ ｅｔ ａｌ．（２００４）（上記）；Ｘｕ，Ｓ．ａｎｄ Ｋ．Ｐ．Ｌａｍ（２００１）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２１（１２）：４０６７－４０７４）。
【0006】
多発性骨髄腫において、ＢＣＭＡは、悪性形質細胞中では高レベルで例外なく広範囲にわたって発現されることが示されているが、典型的には、形質細胞以外の正常なヒト組織では検出されない。多発性骨髄腫細胞株上の細胞表面受容体としてのその選択的発現のために、ＢＣＭＡは、多発性骨髄腫を治療するための療法において標的化される可能性があり得る。ＢＣＭＡの発現は、白血病及びリンパ腫にも関連している。したがって、ＢＣＭＡの活性を標的化及び／又は調整する改善された方法が必要とされている。形質細胞上のＢＣＭＡの特異的発現及び非癌組織におけるより低い発現を考慮すると、ＢＣＭＡを発現若しくは過剰発現する細胞及び組織を特異的に標的とすることができる改善された治療薬に対するニーズがある。ＢＣＭＡに対する抗体コンジュゲートは、そのような疾患の治療若しくは診断のために、治療的若しくは診断的ペイロード部分を、ＢＣＭＡを発現する標的細胞に送達するために使用することができる。
【発明の概要】
【0007】
本明細書に提供されるのは、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）と組み合わせて、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に選択的に結合する抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）を治療方法などで使用する方法である。抗体コンジュゲートは、１つ以上のペイロード部分に連結された、ＢＣＭＡに結合する抗体を含む。抗体は、リンカーによってペイロードに連結されている。ＢＣＭＡ抗体は、有用なペイロード部分として、及び有用なリンカーとして本明細書に詳細に記載されている。同様に、ＢＭＳ－９８６４０５などのＧＳＩも本明細書に詳細に記載される。
【0008】
いくつかの実施形態では、本発明は、１つ以上のペイロード部分を、ＢＣＭＡを発現する標的細胞又は組織に送達する方法である。いくつかの実施形態では、本方法は、治療の方法である。いくつかの実施形態では、抗体コンジュゲートは、疾患又は状態を治療するために使用される。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は癌であり、例えば、多発性骨髄腫である。
【0009】
別の態様では、本明細書に提供されるのは、抗体コンジュゲートとＧＳＩとを含むキットである。
【0010】
いくつかの実施形態では、抗体コンジュゲートは、ヒトＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、抗体コンジュゲートは、ヒトＢＣＭＡの相同体にも結合する。いくつかの態様では、抗体コンジュゲートは、カニクイザル及び／又はマウスＢＣＭＡにも結合する。
【0011】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、癌の治療又は予防を必要とする対象における癌を治療又は予防する方法であって、対象に、ａ）有効量の下記式に従う抗体コンジュゲートであって、
式中、ｎは、１～４であり、抗体は、配列番号１３のＶＨ領域と、配列番号１４のＶＬ領域とを含み、抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従うＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を含む重鎖定常領域を更に含み、式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合している、抗体コンジュゲートと、ｂ）有効量のＢＭＳ－９８６４０５とを投与することを含む、方法である。他の実施形態では、抗体は、（ｉ）配列番号５若しくは６を含むＣＤＲ１；配列番号７若しくは８を含むＣＤＲ２；配列番号９を含むＣＤＲ３を含むＶＨ領域と、（ｉｉ）配列番号１０を含むＣＤＲ１；配列番号１１を含むＣＤＲ２；及び配列番号１２を含むＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。抗体コンジュゲートのより具体的な実施形態では、ｎは、１、２、３、又は４である。特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、少なくとも１つの定常領域ドメインを更に含む。例えば、具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、例えば、ヒト定常領域ドメインを含む。更に他の具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域、ヒトＩｇＧ１カッパ軽鎖領域、又はヒトＩｇＧ１重鎖定常領域、及びヒトＩｇＧ１カッパ軽鎖領域を含む定常領域ドメインを含む。抗体コンジュゲートのより具体的な実施形態では、定常領域は、配列番号１９及び２０から選択される配列を含むか、又は配列番号１９と配列番号２０の両方を含む。他の実施形態では、抗体コンジュゲートは、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。例えば、抗体コンジュゲートは、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖を含んでもよく、ここではＥＵナンバリングスキームに従うＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０に対応するアミノ酸の各々は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基に置換されている。他の実施形態では、抗体コンジュゲートは、配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。更に他の実施形態では、抗体コンジュゲートは、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。例えば、抗体コンジュゲートは、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号１７のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含み、ここでは、ＥＵナンバリングスキームに従う重鎖（ＨＣ）－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０に対応するアミノ酸の各々は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基に置換されている。
【化1】
【0012】
本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、又はＩｇＭである。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、ヒト化されているか、又はヒト抗体である。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、アグリコシル化されている。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、又はｓｃＦｖ－Ｆｃ断片である。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、ヒトＢＣＭＡ及びカニクイザルＢＣＭＡに特異的に結合する。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかのある特定の実施形態では、抗体は、ヒトＢＣＭＡ及びマウスＢＣＭＡに特異的に結合する。
【0013】
ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は、対象の体重の約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＧＳＩは、ＢＭＳ－９８６４０５である。特定の実施形態では、投与されるＢＭＳ－９８６４０５の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、対象に３週間毎に１回投与され、ＧＳＩ、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は対象に、２１日のサイクルの間に毎週３回投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（コンジュゲート４）は、対象に３週間毎に１回投与され、３週間毎が２１日のサイクル（例えば、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）が対象に投与される間）である。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、対象に、２１日サイクルの最初の日（１日目）に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、対象に毎２１日サイクルの最初の日（１日目）に投与される。ある特定の実施形態では、２１日サイクルは、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、又は１５回行われる。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートが、対象に２１日サイクルの最初の日（１日目）に投与され、有効量の抗体コンジュゲートは、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、又は６．７ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量のＢＭＳ－９８６４０５は、対象に、２１日サイクルの１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、及び１９日目に投与される。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、０．３ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、０．６ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、１．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、３．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、４．５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、６．７ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量のＢＭＳ－９８６４０５は、２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、静脈内投与される。ある特定の実施形態では、ＧＳＩ、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は経口投与され、例えば、カプセル形態で投与される。
【0014】
ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、ＢＭＳ－９８６４０５と同時に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、ＢＭＳ－９８６４０５の投与の前に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、ＢＭＳ－９８６４０５の投与後に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とは、空腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とは、満腹時に対象に投与される。
【0015】
ある特定の実施形態では、癌は白血病又はリンパ腫である。ある特定の実施形態では、癌は、多発性骨髄腫である。具体的な実施形態では、当該多発性骨髄腫は、国際病期分類（International Staging System）又は改訂国際病期分類（Revised International Staging System）に従って、ステージＩ、ステージＩＩ、又はステージＩＩＩである。ある特定の実施形態では、当該多発性骨髄腫は、新たに診断された多発性骨髄腫である。他の実施形態では、当該多発性骨髄腫は、再発性又は難治性多発性骨髄腫である。
【0016】
本明細書に更に提供されるのは、有効量の本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれか、及び有効量のＢＭＳ－９８６４０５、並びに抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書を含むキットである。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、凍結乾燥されている。別の具体的な実施形態では、キットは、凍結乾燥された抗体の再構成のための流体を更に含む。具体的な実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇである。具体的な実施形態では、有効量のＢＭＳ－９８６４０５は、約２５ｍｇである。具体的な実施形態では、キットは、有効量の抗体コンジュゲートと有効量のＢＭＳ－９８６４０５とを含む１つ以上の容器を含む。具体的な実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートと有効量のＢＭＳ－９８６４０５とは、別々の容器に入っている。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、別々の容器に入った有効量の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、例えば、コンジュゲート４及び有効量のＢＭＳ－９８６４０５、並びに抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書を含むキットである。
【0017】
また、本明細書に提供されるのは、１つ以上の用量の本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれか、及び１つ以上の用量のＢＭＳ－９８６４０５、並びに抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書を含むキットである。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、凍結乾燥されている。別の具体的な実施形態では、キットは、凍結乾燥された抗体コンジュゲートの再構成のための流体を更に含む。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇを含む量で存在する。具体的な実施形態では、ＢＭＳ－９８６４０５は、約２５ｍｇを含む量で存在する。具体的な実施形態では、キットは、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とを含む１つ以上の容器を含む。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とは、別々の容器に入れられる。
【図面の簡単な説明】
【0018】
【図1】ＣＤＲ－Ｈ１についてのＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａナンバリングシステムの比較を提供する。Ｍａｒｔｉｎ Ａ．Ｃ．Ｒ．（２０１０）．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ．Ｉｎ Ｒ．Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＆ Ｓ．Ｄｕｅｂｅｌ（Ｅｄｓ．），Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｖｏｌ．２（ｐｐ． ３３－５１）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇから編集。
【図2】再発性及び難治性多発性骨髄腫を有する対象における、コンジュゲート４、ＢＣＭＡ抗体薬物コンジュゲートの第１相、多施設、オープンラベル、用量設定試験の試験デザインの全体を例示する。特に、第１相試験は、再発性及び難治性ＭＭを有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法、及びＢＭＳ－９８６４０５（ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ））と組み合わせた用量漸増（パートＡ）及びコホート用量拡大（パートＢ）、ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験である。
【発明を実施するための形態】
【0019】
１．定義
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語、表記法、及び他の科学用語は、本発明が関係する技術分野における当業者によって一般的に理解される意味を有することが意図される。場合によっては、一般的に理解されている意味を有する用語が、明確さのために及び／又は容易に参照できるように本明細書で定義されており、本明細書にそのような定義を含めることは、必ずしも当該技術分野において一般的に理解されているものとの違いを表すものとして解釈されるべきではない。本明細書に記載され、又は言及される技術及び手順は、一般に十分に理解されており、例えば、Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ４ｔｈ ｅｄ．（２０１２），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓに記載される広く利用されている分子クローニング方法論などの当業者によって、従来の方法論を使用して一般に用いられている。必要に応じて、市販のキット及び試薬の使用を伴う手順は、特に明記されない限り、通常、製造元が規定したプロトコル及び条件に従って実行される。
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語、表記法、及び他の科学用語は、本発明が関係する技術分野における当業者によって一般的に理解される意味を有することが意図される。場合によっては、一般的に理解されている意味を有する用語が、明確さのために及び／又は容易に参照できるように本明細書で定義されており、本明細書にそのような定義を含めることは、必ずしも当該技術分野において一般的に理解されているものとの違いを表すものとして解釈されるべきではない。本明細書に記載され、又は言及される技術及び手順は、一般に十分に理解されており、例えば、Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ４ｔｈ ｅｄ．（２０１２），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓに記載される広く利用されている分子クローニング方法論などの当業者によって、従来の方法論を使用して一般に用いられている。必要に応じて、市販のキット及び試薬の使用を伴う手順は、特に明記されない限り、通常、製造元が規定したプロトコル及び条件に従って実行される。
【0020】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈において別途明確に示さない限り、複数の指示対象を含む。
【0021】
「約」という用語は、示された値及びその値を上回るまた下回る範囲を示し、包含する。ある特定の実施形態では、「約」という用語は、表示された値±１０％、±５％、又は±１％を示す。ある特定の実施形態では、「約」という用語は、示された値±その値の標準偏差１を示す。
【0022】
「その組み合わせ」という用語は、その用語が指す要素のあらゆる可能な組み合わせを含む。例えば、「α２がＡの場合、α３はＤではなく；α５はＳではなく；又はα６はＳではなく；又はそれらの組み合わせである」で始まる文章は、以下の組み合わせを含む：α２がＡのとき：（１）α３はＤではなく；（２）α５はＳではなく；（３）α６はＳではなく；（４）α３はＤではなく；α５はＳではなく；且つα６はＳではなく；（５）α３はＤではなく且つα５はＳではなく；（６）α３はＤではなく且つα６はＳではなく；及び（７）α５はＳではなく且つα６はＳではない。
【0023】
「ＢＣＭＡ」と呼び、「Ｂ細胞成熟抗原」という用語は、本明細書で互換的に使用される。ＢＣＭＡはまた、とりわけ、ＢＣＭ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１７（「ＴＮＦＲＳＦ１７」）、ＣＤ２６９、ＴＮＦＲＳＦ１３Ａ、及びＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー１７を含む同意語によっても知られている。別段の定めがない限り、この用語は、細胞によって天然に発現される、又はＢＣＭＡ若しくはＢＣＭＡ遺伝子でトランスフェクトされた細胞によって発現されるヒトＢＣＭＡの任意の変異体、アイソフォーム、種相同体を含む。ＢＣＭＡタンパク質は、例えば、ヒトＢＣＭＡアイソフォーム１（配列番号１）及びヒトＢＣＭＡアイソフォーム２（配列番号２）を含む。いくつかの実施形態では、ＢＣＭＡタンパク質は、カニクイザルＢＣＭＡ（配列番号３）を含む。いくつかの実施形態では、ＢＣＭＡタンパク質は、ネズミＢＣＭＡ（配列番号４）を含む。
【0024】
「免疫グロブリン」という用語は、一般に、ポリペプチド鎖の２つの対：軽（Ｌ）鎖の１つの対及び重（Ｈ）の１つの対を含む構造的に関連するタンパク質の一部類を指す。「インタクトな免疫グロブリン」において、これらの鎖の４つ全ては、ジスルフィド結合によって相互接続されている。免疫グロブリンの構造は、十分に特性評価されている。例えば、Ｐａｕｌ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７ｔｈ ｅｄ．，Ｃｈ．５（２０１３）Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡを参照されたい。簡単に言うと、各重鎖は、典型的には、重鎖可変領域（ＶＨ又はＶＨ）と重鎖定常領域（ＣＨ又はＣＨ）とを含む。重鎖定常領域は、典型的には、３つのドメイン、ＣＨ１（又はＣＨ１）、ＣＨ２（又はＣＨ２）、及びＣＨ３（又はＣＨ３）と略記されるものを含む。各重鎖は、典型的には、軽鎖可変領域（ＶＬ又はＶＬ）と軽鎖定常領域とを含む。軽鎖定常領域は、典型的には、ＣＬ又はＣＬと略記される１つのドメインを含む。
【0025】
「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子の一種を説明し、本明細書では、その最も広い意味で使用される。抗体は、具体的には、インタクトな抗体（例えば、インタクトな免疫グロブリン）、及び抗体断片を含む。抗体は、少なくとも１つの抗原結合ドメインを含む。抗原結合ドメインの１つの例は、ＶＨ－ＶＬ二量体によって形成される抗原結合ドメインである。「ＢＣＭＡ」、「抗ＢＣＭＡ抗体」、「ＢＣＭＡ Ａｂ」、「ＢＣＭＡ特異的抗体」、「抗ＢＣＭＡ Ａｂ」、「ＢＣＭＡ抗体」、「抗ＢＣＭＡ抗体」、「ＢＣＭＡ Ａｂ」、「ＢＣＭＡ特異的抗体」、又は「抗ＢＣＭＡ Ａｂ」、若しくは「ＢＣＭＡ」が「ＴＮＦＳＦ１７」によって置き換えられているこれらの語句の任意の反復は、本明細書に記載されるようにＢＣＭＡに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＢＣＭＡの細胞外ドメインに結合する。
【0026】
ＶＨ及びＶＬ領域は、より保存されている領域が散在する、超可変性の領域（「超可変領域（ＨＶＲ）」；「相補性決定領域」（ＣＤＲ）とも呼ばれる）に更に細分され得る。より保存された領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。各ＶＨ及びＶＬは、以下の順番で（Ｎ末端からＣ末端に向かって）配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲ：ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４を含む。ＣＤＲは、抗原結合に関与し、抗体の抗原特異性及び結合親和性に影響を及ぼす。Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ ５ｔｈ ｅｄ．（１９９１）Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【0027】
脊椎動物種由来の軽鎖は、定常ドメインを配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる２つのタイプの１つに割り当てることができる。
【0028】
脊椎動物種由来の重鎖は、５つの異なるクラス（又はアイソタイプ）：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭのうちの１つに割り当てることができる。これらのクラスはまた、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと表示される。ＩｇＧ及びＩｇＡクラスは、配列及び機能における違いに基づいて、サブクラスに更に分けられる。ヒトは以下のサブクラスを発現する：ＩｇＧ１， ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２。
【0029】
ＣＤＲのアミノ酸の境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，上記（「Ｋａｂａｔ」ナンバリングスキーム）；Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」ナンバリングスキーム）；ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（「Ｃｏｎｔａｃｔ」ナンバリングスキーム）；Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，２７：５５－７７（「ＩＭＧＴ」ナンバリングスキーム）；及びＨｏｎｅｇｇｅ ａｎｄ Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００１，３０９：６５７－７０（「ＡＨｏ」ナンバリングスキーム）（これらの各々が、その全体が参照により組み込まれる）によって記載されるものを含む多数の既知のナンバリングスキームのいずれかを使用して、当業者によって決定することができる。
【0030】
表１は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａスキームによって特定されるようなＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３の位置を提供する。ＣＤＲ－Ｈ１については、残基ナンバリングは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａナンバリングスキームの両方を使用して提供されている。
【0031】
【表1】
【0032】
別段の定めがない限り、本明細書の特定のＣＤＲの同定に使用されるナンバリングスキームは、Ｋａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングスキームである。これらの２つのナンバリングスキームによって包含される残基が分岐する場合（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１及び／又はＣＤＲ－Ｈ２）、ナンバリングスキームは、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａのいずれかとして特定される。便宜上、ＣＤＲ－Ｈ３は、本明細書ではＫａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａのいずれかと称されることがある。しかしながら、これは、それらが存在しない配列の違いを意味するものではなく、当業者は配列を調べることによって配列が同じであるか、又は異なるかを容易に確認することができる。
【0033】
ＣＤＲは、例えば、ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／ａｂｎｕｍ／で入手可能であり、その全体が参照により組み込まれる、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００８，４５：３８３２－３８３９に記載されるＡｂｎｕｍなどの抗体ナンバリングソフトウェアを使用して割り当てることができる。
【0034】
「ＥＵナンバリングスキーム」は、一般に、抗体重鎖定常領域中の残基を指す場合に使用される（例えば、Ｋａｂａｔら、上記に報告されるように）。特に明記しない限り、ＥＵナンバリングスキームは、本明細書に記載の抗体重鎖定常領域中の残基を指すために使用される。
【0035】
「抗体断片」は、インタクトな抗体の抗原結合領域又は可変領域などのインタクトな抗体の一部を含む。抗体断片としては、例えば、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、及びｓｃＦｖ－Ｆｃ断片が挙げられる。
【0036】
「Ｆｖ」断片は、１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインとの非共有結合で連結された二量体を含む。
【0037】
「Ｆａｂ」断片は、重鎖及び軽鎖可変ドメインに加えて、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。Ｆａｂ断片は、例えば、組換え方法によって、又は完全長抗体のパパイン消化によって生成され得る。
【0038】
「Ｆ（ａｂ’）２」断片は、ジスルフィド結合によってヒンジ領域の近傍で接合された２つのＦａｂ’断片を含有する。Ｆ（ａｂ’）２断片は、例えば、組換え方法によって、又はインタクトな抗体のペプシン消化によって生成され得る。Ｆ（ａｂ’）断片は、例えば、β－メルカプトエタノールによる処理によって解離され得る。
【0039】
「一本鎖Ｆｖ」、又は「ｓＦｖ」、又は「ｓｃＦｖ」抗体断片は、一本鎖ポリペプチド中にＶＨドメインとＶＬドメインとを含む。ＶＨ及びＶＬは、一般に、ペプチドリンカーによって連結される。Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎ Ａ．（１９９４）を参照されたい。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号２６である。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号２７である。抗体は、大腸菌（Escherichia coli）に由来する。Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ Ｍ．＆ Ｍｏｏｒｅ Ｇ．Ｐ．（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｖｏｌ．１１３（ｐｐ．２６９－３１５）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（その全体が参照により組み込まれる）。
【0040】
「ｓｃＦｖ－Ｆｃ」断片は、Ｆｃドメインに結合したｓｃＦｖを含む。例えば、Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖのＣ末端に結合することができる。Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖ内の可変ドメインの配向性（すなわち、ＶＨ－ＶＬ又はＶＬ－ＶＨ）に応じて、ＶＨ又はＶＬに後続し得る。当該技術分野において既知であるか、又は本明細書に記載される任意の好適なＦｃドメインが使用されてもよい。いくつかの場合では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインは、配列番号１９、又はその一部を含む。配列番号１９は、ヒトＩｇＧ１定常領域のＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３の配列を提供する。
【0041】
「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一の抗体の集団に由来する抗体を指す。実質的に均一の抗体の集団は、モノクローナル抗体の産生中に正常に生じ得る変異体を除く、実質的に類似し、且つ同じエピトープに結合する抗体を含む。そのような変異体は、一般に、ほんの微量で存在する。モノクローナル抗体は、典型的には、複数の抗体からの単一の抗体の選択を含むプロセスによって得られる。例えば、選択プロセスは、複数のクローン、例えば、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、酵母クローン、細菌クローン、又は他の組換えＤＮＡクローンのプールからの唯一のクローンの選択であり得る。選択された抗体は、例えば、標的に対する親和性を改善するため（「親和性成熟」）、抗体をヒト化するため、細胞培養下でその産生を改善するため、且つ／又は対象におけるその免疫原性を低減するため、更に改変され得る。
【0042】
「キメラ抗体」という用語は、重鎖及び／又は軽鎖の一部が特定の供給源又は種に由来する一方で、重鎖及び／又は軽鎖の残りが異なる供給源又は種に由来する抗体を指す。
【0043】
非ヒト抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。ヒト化抗体は、一般に、１つ以上のＣＤＲからの残基が非ヒト抗体（ドナー抗体）の１つ以上のＣＤＲからの残基によって置換されたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ドナー抗体は、所望される特異性、親和性、又は生物学的効果を有する任意の好適な非ヒト抗体、例えば、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、又は非ヒト霊長類抗体であり得る。場合によっては、レシピエント抗体の選択されたフレームワーク領域残基は、ドナー抗体からの対応するフレームワーク領域残基によって置換される。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体又はドナー抗体のいずれにも見出されない残基を含んでもよい。そのような修飾は、抗体機能を更に改良するため、行われてもよい。更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８６，３２１：５２２－５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２：３２３－３２９；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２：５９３－５９６（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【0044】
「ヒト抗体」は、ヒト又はヒト細胞によって産生される、又はヒト抗体レパートリー若しくはヒト抗体コード配列（例えば、ヒト供給源から得られるか又は新規に設計される）を利用する非ヒト供給源に由来する抗体の場合に対応するアミノ酸配列を有するものである。ヒト抗体では、具体的にはヒト化抗体が除外される。
【0045】
「単離された抗体」は、その天然環境の成分から分離及び／又は回収されているものである。天然環境の成分は、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性又は非タンパク質性材料を含んでもよい。いくつかの実施形態では、単離された抗体は、例えば、スピニングカップ配列決定装置の使用により、少なくとも１５残基のＮ末端又は内部アミノ酸配列を得るのに十分な程度まで精製される。いくつかの実施形態では、単離された抗体は、還元又は非還元条件下でゲル電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）により均一になるまで精製され、クーマシーブルー又は銀染色により検出される。単離された抗体は、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないことから、組換え細胞内のインサイチュでの抗体を含む。いくつかの態様では、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【0046】
いくつかの実施形態では、単離された抗体は、少なくとも８０重量％、８５重量％、９０重量％、９５重量％、又は９９重量％に精製される。いくつかの実施形態では、単離された抗体は、少なくとも８０体積％、８５体積％、９０体積％、９５体積％、又は９９体積％に精製される。いくつかの実施形態では、単離された抗体は、少なくとも８５重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％、９９重量％～１００重量％を含む溶液として提供される。いくつかの実施形態では、単離された抗体は、少なくとも８５体積％、９０体積％、９５体積％、９８体積％、９９体積％～１００体積％を含む溶液として提供される。
【0047】
「親和性」は、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の全合計の強さを指す。特に指定されない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」は、結合対（例えば、抗体及び抗原）のメンバー間の１：１相互作用を反映する固有結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、解離定数（ＫＤ）により表すことができる。親和性は、当該技術分野で既知の一般的方法、例えば、本明細書に記載のものにより、測定され得る。親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）機器を用いて決定され得る。いくつかの実施形態では、親和性は、２５℃で決定される。
【0048】
抗体の標的分子への結合に関連して、特定の抗原（例えば、ポリペプチド標的）又は特定の抗原上のエピトープに対して、「特異的結合」、「特異的に結合する」、「特異的な」、「選択的に結合する」、及び「選択的な」という用語は、測定可能に非特異的又は非選択的相互作用と異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、分子の結合を対照分子の結合と比べて決定することにより測定され得る。特異的結合はまた、標的上の抗体結合部位を模倣する対照分子との競合によって決定され得る。その場合、特異的結合は、抗体の標的への結合が対照分子によって競合的に阻害される場合、示される。
【0049】
「ｋｄ」又は「ｋｄ」（秒－１）という用語は、本明細書で使用される場合、特定の抗体－抗原相互作用の解離速度定数を指す。この値はｋｏｆｆ値とも称される。
【0050】
「ｋａ」又は「ｋａ」（Ｍ－１×秒－１）という用語は、本明細書で使用される場合、特定の抗体－抗原相互作用の会合速度定数を指す。この値はｋｏｎ値とも称される。
【0051】
「ＫＤ」（「Ｋｄ」又は「ＫＤ」、Ｍ又はｎＭとも称される）という用語は、本明細書で使用される場合、特定の抗体－抗原相互作用の解離平衡定数を指す。ＫＤ＝ｋｄ／ｋａである。ＫＤの値は、典型的には、タンパク質分子の半分が平衡状態でリガンドに結合しているリガンドの濃度と大きさが等しくなる。
【0052】
「ＫＡ」又は「Ｋａ」（Ｍ－１）という用語は、本明細書で使用される場合、特定の抗体－抗原相互作用の会合平衡定数を指す。ＫＡ＝ｋａ／ｋｄである。
【0053】
「親和性成熟された」抗体は、改変を有しない親抗体と比べて、抗体のその抗原に対する親和性における改善をもたらす、１つ以上のＣＤＲ又はＦＲにおける１つ以上の改変を有するものである。一実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモル又はピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で既知の様々な方法を用いて産生されてもよい。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．（Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：７７９－７８３、その全体が参照により組み込まれる）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟について記載している。ＣＤＲ及び／又はフレームワーク残基のランダム突然変異誘発は、例えば、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９４，９１：３８０９－３８１３）；Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ，１９９５，１６９：１４７－１５５；Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９５，１５５：１９９４－２００４；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９５，１５４：３３１０－３３１９９；及びＨａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２２６：８８９－８９６（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）により記載されている。
【0054】
２つ以上の抗体と関連して本明細書で使用されるとき、「～と競合する」又は「～と交差競合する」という用語は、２つ以上の抗体が抗原（例えば、ＢＣＭＡ）への結合に対して競合することを示す。１つの例示的なアッセイでは、ＢＣＭＡは、プレート上にコーティングされ、第１の抗体への結合とその後の第２の標識抗体の付加を可能にする。第１の抗体の存在により第２の抗体の結合が低下する場合、抗体は競合する。別の例示的なアッセイでは、第１の抗体はプレート上にコーティングされ、抗原への結合と、その後の第２の抗体の付加を可能にする。「～と競合する」という用語はまた、１つの抗体が別の抗体の結合を低減するが、抗体が逆順で付加されるときに競合が認められない場合の抗体の組み合わせを含む。しかし、いくつかの実施形態では、第１及び第２の抗体は、それらが付加される順序と無関係に互いの結合を阻害する。いくつかの実施形態では、１つの抗体が、別の抗体のその抗原への結合を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％低減する。
【0055】
「エピトープ」という用語は、抗体に特異的に結合することができる抗原の一部を意味する。エピトープは、表面接近可能アミノ酸残基及び／又は糖側鎖からなることが多く、特異的な三次元構造特性、並びに特異的な電荷特性を有することがある。立体構造及び非立体構造エピトープは、後者ではなく前者への結合が変性溶媒の存在下で失われる点で区別される。エピトープは、その結合に直接的に関与するアミノ酸残基、及びその結合に直接的に関与しない他のアミノ酸残基を含んでもよい。抗体が結合する相手のエピトープは、例えば、異なる点突然変異を有するＢＣＭＡ変異体への抗体の結合についての試験など、エピトープ測定のための既知の技術を用いて決定され得る。
【0056】
ポリペプチド配列と参照配列との間のパーセント「同一性」は、最大パーセント配列同一性を得るため、必要な場合、配列を整列し、ギャップを導入した後、参照配列内のアミノ酸残基と同一であるポリペプチド配列内のアミノ酸残基の百分率と定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定することを目的とする整列化は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、ＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、又はＣＬＵＳＴＡＬＷ、ＣＬＵＳＴＡＬ ＯＭＥＧＡ、又はＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを用いて、当該技術分野の範囲内に含まれる様々な方法で達成され得る。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大整列化を達成するのに要求される任意のアルゴリズムを含む、配列を整列するための適切なパラメータを決定することができる。
【0057】
「保存的置換」又は「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸の化学的又は機能的に類似したアミノ酸による置換を指す。類似のアミノ酸を提供する保存的置換表は、当該技術分野において周知である。そのような置換を有するポリペプチド配列は、「保存的修飾変異体」として知られる。例として、表２～４に提供されるアミノ酸のグループは、いくつかの実施形態では、互いに対して保存的置換と見なされる。
【0058】
【表2】
【0059】
【表3】
【0060】
【表4】
【0061】
追加的な保存的置換は、例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ２ｎｄ ｅｄ．（１９９３）Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ中に見出され得る。親抗体中にアミノ酸残基の１つ以上の保存的置換を作製することによって生成される抗体は、「保存的修飾変異体」と称される。
【0062】
「アミノ酸」という用語は、２０の共通の天然に存在するアミノ酸を指す。天然に存在するアミノ酸は、アラニン（Ａｌａ；Ａ）、アルギニン（Ａｒｇ；Ｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ；Ｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ；Ｄ）、システイン（Ｃｙｓ；Ｃ）；グルタミン酸（Ｇｌｕ；Ｅ）、グルタミン（Ｇｌｎ；Ｑ）、グリシン（Ｇｌｙ；Ｇ）；ヒスチジン（Ｈｉｓ；Ｈ）、イソロイシン（Ｉｌｅ；Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ；Ｌ）、リジン（Ｌｙｓ；Ｋ）、メチオニン（Ｍｅｔ；Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ；Ｆ）、プロリン（Ｐｒｏ；Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ；Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ；Ｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ；Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ；Ｙ）、及びバリン（Ｖａｌ；Ｖ）を含む。
【0063】
天然にコードされたアミノ酸は、当業者に既知のタンパク質原性アミノ酸である。それらは、２０の一般的なアミノ酸（アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリン）、並びにあまり一般的でないピロリシン及びセレノシステインを含む。天然にコードされたアミノ酸は、２２の天然に存在するアミノ酸の翻訳後変異体、例えば、プレニル化アミノ酸、イソプレニル化アミノ酸、ミリソイル化（ｍｙｒｉｓｏｙｌａｔｅｄ）アミノ酸、パルミトイル化アミノ酸、Ｎ－結合型グリコシル化アミノ酸、Ｏ－結合型グリコシル化アミノ酸、リン酸化アミノ酸及びアシル化アミノ酸を含む。
【0064】
「非天然アミノ酸」という用語は、タンパク質原性アミノ酸でないアミノ酸、又はその翻訳後修飾変異体を指す。特に、同用語は、２０の一般的なアミノ酸の１つでないアミノ酸又はピロリシン若しくはセレノシステイン、又はその翻訳後修飾変異体を指す。
【0065】
「コンジュゲート」又は「抗体コンジュゲート」という用語は、１つ以上のペイロード部分に連結された抗体を指す。この抗体は、本明細書に記載の任意の抗体であり得る。ペイロードは、本明細書に記載の任意のペイロードであり得る。この抗体は、共有結合を介してペイロードに直接的に連結され得るか、又はこの抗体はリンカーを介してペイロードに間接的に連結され得る。典型的には、リンカーは、この抗体に共有結合され、ペイロードにも共有結合される。「抗体薬物コンジュゲート」又は「ＡＤＣ」という用語は、少なくとも１つのペイロードが薬物などの治療部分である場合のコンジュゲートを指す。
【0066】
「ペイロード」という用語は、抗体にコンジュゲートされ得る分子部分を指す。特定の実施形態では、ペイロードは、治療部分及び標識部分からなる群から選択される。
【0067】
「リンカー」という用語は、少なくとも２つの共有結合を形成することができる分子部分を指す。典型的には、リンカーは、抗体に対して少なくとも１つの共有結合、またペイロードに対して少なくとももう１つの共有結合を形成する能力がある。ある特定の実施形態では、リンカーは、抗体に対して２つ以上の共有結合を形成し得る。ある特定の実施形態では、リンカーは、１つのペイロードに対して２つ以上の共有結合を形成し得るか、又は２つ以上のペイロードに対して共有結合を形成し得る。リンカーが抗体、又はペイロード、又は双方に対する結合を形成した後、残りの構造、すなわち１つ以上の共有結合が形成された後のリンカーの残基もまた、本明細書で「リンカー」となお称されてもよい。「リンカー前駆体」という用語は、抗体又はペイロード、又は双方と共有結合を形成する能力がある１つ以上の反応基を有するリンカーを指す。いくつかの実施形態では、リンカーは、切断可能リンカーである。例えば、切断可能リンカーは、操作されていても又は操作されていなくてもよい、生体不安定機能によって放出されるリンカーであり得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、切断不可リンカーである。例えば、切断不可リンカーは、抗体の分解の際に放出されるリンカーであり得る。
【0068】
任意の疾患又は障害に対しての「治療する」又は「治療」は、ある特定の実施形態では、対象中に存在する疾患又は障害を寛解させることを指す。別の実施形態では、「治療する」又は「治療」は、対象によって識別不能であり得る、少なくとも１つの身体的パラメータを寛解させることを含む。更に別の実施形態では、「治療する」又は「治療」は、身体的に（例えば、識別可能な症状の安定化）又は生理学的に（例えば、身体的パラメータの安定化）又は双方のいずれかで疾患又は障害を調節することを含む。更に別の実施形態では、「治療する」又は「治療」は、疾患又は障害の発症を遅延又は予防することを含む。
【0069】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」又は「有効量」という用語は、対象に投与されるとき、疾患又は障害を治療するのに有効である抗体又は組成物の量を指す。いくつかの実施形態では、治療有効量又は有効量は、対象に投与されるとき、疾患又は疾患の進行を予防若しくは寛解するのに有効であり、症状の寛解をもたらす抗体又は組成物の量を指す。
【0070】
本明細書で使用される場合、「成長を阻害する」（例えば、細胞、例えば、腫瘍細胞を参照するとき）という用語は、ＢＣＭＡ抗体と接触されるときの細胞成長（例えば、腫瘍細胞成長）における、ＢＣＭＡ抗体と接触状態にない同じ細胞の成長と比べての任意の測定可能な減少を含むことが意図される。いくつかの実施形態では、成長は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９９％、又は１００％阻害され得る。細胞成長における減少は、限定はされないが、抗体内在化、アポトーシス、壊死、及び／又はエフェクター機能に媒介される活性を含む種々の機構によって生じ得る。
【0071】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳類対象を意味する。例示的な対象としては、ヒト、サル、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ラクダ、鳥類、ヤギ、及びヒツジが挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に提供される抗体で治療又は診断され得る疾患を有する。いくつかの実施形態では、疾患は、白血病、リンパ腫、又は多発性骨髄腫、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、Ｂ細胞系悪性腫瘍、形質細胞腫瘍、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、低悪性度Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質芽球性リンパ腫、又は濾胞性リンパ腫である。
【0072】
本明細書に図示されるいくつかの化学構造では、ある特定の置換基、化学基、及び原子は、置換基、化学基、及び原子の結合を介する原子を示すため、結合（単数又は複数）を交差させる曲線／波線（例えば、
）で表される。例えば、限定はされないが、
などのいくつかの構造では、この曲線／波線は、図示される化学実体の結合相手のコンジュゲート又はリンカー－ペイロード構造の骨格内の原子を示す。限定はされないが、
などのいくつかの構造では、この曲線／波線は、抗体又は抗体断片中、並びに図示される化学実体の結合相手のコンジュゲート又はリンカー－ペイロード構造の骨格内の原子を示す。
【化2】
【化3】
【化4】
【0073】
「部位特異的な」という用語は、ポリペプチド中の所定の配列位置でのポリペプチドの修飾を指す。修飾は、ポリペプチドの単一の予測可能な残基に存在し、ここで変異はほとんど又は全く伴わない。特定の実施形態では、修飾アミノ酸がその配列位置に、例えば、組換え的に又は合成的に導入される。同様に、ある部分がポリペプチド中の特定の配列位置の残基に「部位特異的に」連結され得る。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、２つ以上の部位特異的修飾を含み得る。
【0074】
２．コンジュゲート
本明細書に提供されるのは、ガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）と組み合わせて使用され得るＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートである。コンジュゲートは、ペイロードに対してリンカーを介して共有結合的に連結されたＢＣＭＡに対する抗体を含む。ある特定の実施形態では、この抗体は、１つのペイロードに連結される。更なる実施形態では、抗体は、２つ以上のペイロードに連結される。ある特定の実施形態では、この抗体は、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、又はそれより多くのペイロードに連結される。
本明細書に提供されるのは、ガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）と組み合わせて使用され得るＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートである。コンジュゲートは、ペイロードに対してリンカーを介して共有結合的に連結されたＢＣＭＡに対する抗体を含む。ある特定の実施形態では、この抗体は、１つのペイロードに連結される。更なる実施形態では、抗体は、２つ以上のペイロードに連結される。ある特定の実施形態では、この抗体は、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、又はそれより多くのペイロードに連結される。
【0075】
本明細書に提供されるコンジュゲートにおいて、抗体は、任意の種に由来し得る。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡは、脊椎動物ＢＣＭＡである。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡは、哺乳動物ＢＣＭＡである。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡは、ヒトＢＣＭＡである。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡは、マウスＢＣＭＡである。ある特定の実施形態では、ＢＣＭＡは、カニクイザルＢＣＭＡである。
【0076】
抗体は、典型的には、複数のポリペプチド鎖を含むタンパク質である。ある特定の実施形態では、抗体は、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖を含むヘテロ四量体である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合により、重鎖に連結され得る。各重鎖は、１つ以上の共有ジスルフィド結合により、その他の重鎖に連結され得る。各重鎖及び各軽鎖はまた、１つ以上の鎖間ジスルフィド結合を有し得る。当業者に既知であるように、各重鎖は、典型的には、可変ドメイン（ＶＨ）と後続するいくつかの定常ドメインとを含む。各軽鎖は、典型的には、一端に可変ドメイン（ＶＬ）及び定常ドメインを含む。当業者に既知であるように、抗体は、典型的には、それらの標的分子、すなわち抗原に対して選択的親和性を有する。
【0077】
本明細書に提供される抗体は、当業者に既知の任意の抗体型を有し得る。それらは、完全長、又は断片であり得る。例示的な完全長抗体としては、ＩｇＡ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭなどが挙げられる。例示的な断片としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆｃ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃなどが挙げられる。
【0078】
ある特定の実施形態では、コンジュゲートの抗体は、本明細書に記載のＣＤＲ配列の６つを含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲートの抗体は、本明細書に記載の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲートの抗体は、本明細書に記載の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲートの抗体は、本明細書に記載の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び本明細書に記載の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲートの抗体は、本明細書に記載の対合された重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメイン（ＶＨ－ＶＬペア）を含む。
【0079】
ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、１つ以上の反応基を含む抗体から形成され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、全ての天然にコードされたアミノ酸を含む抗体から形成され得る。当業者は、いくつかの天然にコードされたアミノ酸が、ペイロード又はリンカーにコンジュゲート可能な反応基を含むことを認識するであろう。これらの反応基は、システイン側鎖、リジン側鎖、及びアミノ末端基を含む。これらの実施形態では、抗体コンジュゲートは、抗体反応基の残基に連結されたペイロード又はリンカーを含み得る。これらの実施形態では、ペイロード前駆体又はリンカー前駆体は、抗体反応基との結合を形成することが可能である反応基を含む。典型的な反応基としては、マレイミド基、活性化炭酸塩（限定はされないが、ｐ－ニトロフェニルエステルを含む）、活性化エステル（限定はされないが、Ｎ－ヒドロキシサクシニミド、ｐ－ニトロフェニルエステル、及びアルデヒドを含む）が挙げられる。特に有用な反応基としては、システイン及びリジン側鎖との結合を形成するために、マレイミド及びサクシニミド、例えば、Ｎ－ヒドロキシサクシニミドが挙げられる。更なる反応基が、下記のセクション及び実施例に記載される。
【0080】
更なる実施形態では、抗体は、本明細書に記載の通り、反応基を有する１つ以上の修飾アミノ酸を含む。典型的には、修飾アミノ酸は、天然にコードされたアミノ酸ではない。これらの修飾アミノ酸は、リンカー前駆体又はペイロード前駆体に対して共有結合を形成するのに有用な反応基を含み得る。当業者は、ポリペプチドを修飾アミノ酸に対して共有結合を形成する能力がある任意の分子実体に連結するため、その反応基を用いることができる。したがって、本明細書に提供されるのは、ペイロードに直接的に又はリンカーを介して間接的に連結された修飾アミノ酸残基を含む抗体を含むコンジュゲートである。例示的な修飾アミノ酸は、下記のセクションに記載されている。一般に、修飾アミノ酸は、相補的反応基を有するリンカー又はペイロードに対する結合を形成することが可能な反応基を有する。
【0081】
ある特定の実施形態では、非天然アミノ酸は、抗体のポリペプチド鎖内の選択された位置に位置付けられる。これらの位置は、非天然アミノ酸との置換のための最適な部位を提供するものとして特定された。各部位は、抗体を産生するための最適な構造、機能、及び／又は方法を伴う非天然アミノ酸を担持することが可能である。
【0082】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、安定である抗体を提供する。安定性は、当業者にとって明白な任意の技術により測定され得る。
【0083】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、最適な機能特性を有する抗体を提供する。例えば、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、その標的抗原に対する結合親和性の喪失をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して増強された結合を示し得る。
【0084】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、有利に作製され得る抗体を提供する。例えば、ある特定の実施形態では、抗体は、以下で論じられるその合成方法において有利な特性を示す。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、産生収率の喪失をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強された産生収率を示し得る。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、ｔＲＮＡ抑制の喪失をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、産生において部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強されたｔＲＮＡ抑制を示し得る。
【0085】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、有利な溶解度を有する抗体を提供する。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、溶解度の低下をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強された溶解度を示し得る。
【0086】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、有利な発現を有する抗体を提供する。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、発現の減少をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強された発現を示し得る。
【0087】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、有利なフォールディングを有する抗体を提供する。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、適切なフォールディングの減少をほとんど又は全く示し得ない。ある特定の実施形態では、抗体は、部位特異的非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強されたフォールディングを示し得る。
【0088】
ある特定の実施形態では、置換のための部位特異的位置は、有利なコンジュゲーションが可能である抗体を提供する。以下に記載されるように、いくつかの非天然アミノ酸は、この抗体の第２の薬剤への直接的な又はリンカーを介したコンジュゲーションを促進する側鎖又は官能基を有する。ある特定の実施形態では、抗体は、他の位置に同じ又は他の非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強されたコンジュゲーション効率を示し得る。ある特定の実施形態では、抗体は、他の位置に同じ又は他の非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強されたコンジュゲーション収率を示し得る。ある特定の実施形態では、抗体は、他の位置に同じ又は他の非天然アミノ酸を伴わない抗体と比較して、増強されたコンジュゲーション特異性を示し得る。
【0089】
１つ以上の非天然アミノ酸は、抗体の少なくとも１つのポリペプチド鎖内の選択された部位特異的位置に位置付けられる。ポリペプチド鎖は、限定はされないが、いずれかの軽鎖又はいずれかの重鎖を含む抗体の任意のポリペプチド鎖であり得る。部位特異的位置は、任意の可変ドメイン及び任意の定常ドメインを含む、抗体の任意のドメイン内に存在し得る。
【0090】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、部位特異的位置に１つの非天然アミノ酸を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、部位特異的位置に２つの非天然アミノ酸を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、部位特異的位置に３つの非天然アミノ酸を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、部位特異的位置に３つを超える非天然アミノ酸を含む。
【0091】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａ又はＥＵナンバリングスキームに従って、位置ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０において、それぞれ非天然アミノ酸、又はその翻訳後修飾変異体を含む。これらの表示では、ＨＣは重鎖残基を示し、ＬＣは軽鎖残基を示す。当業者は、抗体アミノ酸配列中の残基ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０を非天然アミノ酸が置換することを認識するであろう。ある特定の実施形態では、非天然アミノ酸は、本明細書では式（３０）の残基である。
【0092】
３．コンジュゲート基及びその残基
コンジュゲート基は、本明細書に記載のペイロードの第２の化合物、例えば、本明細書に記載の抗体へのコンジュゲートを促進する。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、本明細書ではＲと名付けられる。コンジュゲート基は、当業者に既知の任意の好適な反応機構を介して反応し得る。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、本明細書で詳述される通り、［３＋２］アルキン－アジド環化付加反応、逆電子要請型ディールス・アルダーライゲーション反応、チオール－求電子試薬反応、又はカルボニル－オキシアミン反応を通じて反応する。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、アルキン、例えば、歪んだアルキンを含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、
である。追加のコンジュゲート基は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０３５６３８５号明細書、米国特許出願公開第２０１３／０１８９２８７号明細書、米国特許出願公開第２０１３／０２５１７８３号明細書、米国特許第８，７０３，９３６号明細書、米国特許第９，１４５，３６１号明細書、米国特許第９，２２２，９４０号明細書、及び米国特許第８，４３１，５５８号明細書に記載されている。
コンジュゲート基は、本明細書に記載のペイロードの第２の化合物、例えば、本明細書に記載の抗体へのコンジュゲートを促進する。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、本明細書ではＲと名付けられる。コンジュゲート基は、当業者に既知の任意の好適な反応機構を介して反応し得る。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、本明細書で詳述される通り、［３＋２］アルキン－アジド環化付加反応、逆電子要請型ディールス・アルダーライゲーション反応、チオール－求電子試薬反応、又はカルボニル－オキシアミン反応を通じて反応する。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、アルキン、例えば、歪んだアルキンを含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲート基は、
【化5】
【0093】
コンジュゲーション後、コンジュゲート基の二価残基が形成され、第２の化合物の残基に結合される。二価残基の構造は、コンジュゲートの形成に用いられるコンジュゲーション反応のタイプにより判定される。
【0094】
ある特定の実施形態では、コンジュゲートが［３＋２］アルキン－アジド環化付加反応を通じて形成されるとき、コンジュゲート基の二価残基は、トリアゾール環又はトリアゾール環を含む融合環式基を含む。ある特定の実施形態では、コンジュゲートが歪み促進型［３＋２］アルキン－アジド環化付加（ＳＰＡＡＣ）反応を通じて形成されるとき、コンジュゲート基の二価残基は、
である。
【化6】
【0095】
実施形態では、本明細書に提供されるのは、式１０１ａ～１０５ｂのいずれかによるコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは抗ＢＣＭＡ抗体の残基を示し、ＰＡＹはペイロード部分を示す。
【化7】
【0096】
前述の実施形態のいずれかにおいて、コンジュゲートは、個数ｎのＰＡＹ部分を含み、このｎは１～８の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。いくつかの実施形態では、ｎは６である。いくつかの実施形態では、ｎは７である。いくつかの実施形態では、ｎは８である。
【0097】
特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、式１０５ａ～１０５ｂのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＥＵナンバリングシステムに従う重鎖位置４０４での、式１０５ａ～１０５ｂのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＥＵナンバリングシステムに従う重鎖位置１８０での、式１０５ａ～１０５ｂのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。
当業者は、式（３０）などのアミノ酸がポリペプチド及び抗体に残基として組込まれることを認識するであろう。例えば、式（３０）の残基は、以下の式：
に従い得る。
例えば、－Ｎ３での更なる修飾も、本明細書の残基という用語内に包含される。
【化8】
【化9】
例えば、－Ｎ３での更なる修飾も、本明細書の残基という用語内に包含される。
【0098】
実施形態では、本明細書に提供されるのは、式１０５ｃ～１０５ｄのいずれかによるコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは抗ＢＣＭＡ抗体の残基を示し、ＰＡＹはペイロード部分を示す。
【化10】
【0099】
前述の実施形態のいずれかにおいて、コンジュゲートは、個数ｎのＰＡＹ部分を含み、このｎは１～８の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。いくつかの実施形態では、ｎは６である。いくつかの実施形態では、ｎは７である。いくつかの実施形態では、ｎは８である。
【0100】
特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、式１０５ｃ～１０５ｄのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＥＵナンバリングシステムに従う重鎖位置４０４での、式１０５ｃ～１０５ｄのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、ＥＵナンバリングシステムに従う重鎖位置１８０での、式１０５ｃ～１０５ｄのいずれかによる抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり、式中、ＣＯＭＰは以下の式（３０）による非天然アミノ酸の残基を示す。
当業者は、式（３０）などのアミノ酸がポリペプチド及び抗体に残基として組込まれることを認識するであろう。例えば、式（３０）の残基は、以下の式：
に従い得る。
例えば、－Ｎ３での更なる修飾も、本明細書の残基という用語内に包含される。
【化11】
【化12】
例えば、－Ｎ３での更なる修飾も、本明細書の残基という用語内に包含される。
【0101】
特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、コンジュゲートＭの構造を有する抗ＢＣＭＡコンジュゲートであり：
式中、ｎは１～６の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは１～４の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。例えば、特定の実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、下記の構造を有する。
【化13】
【化14】
【0102】
いくつかの実施形態では、ｎは４である。例えば、特定の実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、下記の構造を有する。
【化15】
【0103】
抗ＢＣＭＡコンジュゲートがコンジュゲートＭによる構造を有する前述の実施形態のいずれかにおいて、括弧付きの構造は、Ｋａｂａｔ又はＫａｂａｔのＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位で抗体の１つ以上の非天然アミノ酸に共有結合され得る。特定の実施形態では、各非天然アミノ酸は、式（３０）による残基である。
【0104】
一実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、下記式：
の構造を有するコンジュゲート４であり、
抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列と配列番号１７に提供される軽鎖配列とを含み；
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【化16】
抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列と配列番号１７に提供される軽鎖配列とを含み；
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【0105】
一実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、コンジュゲート４であり、優勢な種は下記式であり：
抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列と配列番号１７に提供される軽鎖配列とを含み；
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【化17】
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【0106】
一実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、コンジュゲート４であり、優勢な種は下記式であり：
抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列と配列番号１７に提供される軽鎖配列とを含み；
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【化18】
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【0107】
一実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、コンジュゲート４であり、優勢な種は下記式であり：
抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列と配列番号１７に提供される軽鎖配列とを含み；
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【化19】
抗体は、ＥＵナンバリングスキームに従って、ＨＣ－Ｆ４０４及びＨＣ－Ｙ１８０の部位の各々で置換するｐ－アジドメチル－フェニルアラニンの残基を更に含み；並びに
式の括弧内の各構造は、ｐ－アジドメチル－フェニルアラニン残基のうちの１つで抗体に結合されている。
【0108】
４．抗体特異性
コンジュゲートは、ヒトＢＣＭＡに選択的に結合する抗体を含む。いくつかの態様では、抗体は、ヒトＢＣＭＡ（ヒトＢＣＭＡ）の細胞外ドメインに選択的に結合する。
コンジュゲートは、ヒトＢＣＭＡに選択的に結合する抗体を含む。いくつかの態様では、抗体は、ヒトＢＣＭＡ（ヒトＢＣＭＡ）の細胞外ドメインに選択的に結合する。
【0109】
いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＢＣＭＡの相同体に結合する。いくつかの態様では、抗体は、サル、マウス、イヌ、ネコ、ラット、ウシ、ウマ、ヤギ、及びヒツジから選択される種に由来するヒトＢＣＭＡの相同体に結合する。いくつかの態様では、相同体は、カニクイザル相同体である。いくつかの態様では、相同体は、マウス又はネズミ相同体である。
【0110】
いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖を含む。いくつかの態様では、軽鎖は、カッパ軽鎖である。いくつかの態様では、軽鎖は、ラムダ軽鎖である。具体的な実施形態では、カッパ軽鎖は、配列番号２０に提供されるアミノ酸配列を含む定常領域を含む。
【0111】
いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖を含む。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＡである。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＤである。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＥである。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＧである。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＭである。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＧ１である。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＧ２である。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＧ３である。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＧ４である。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＡ１である。いくつかの態様では、重鎖は、ＩｇＡ２である。
【0112】
いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、Ｆｖ断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、Ｆａｂ断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、Ｆ（ａｂ’）２断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、Ｆａｂ’断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片である。いくつかの態様では、抗体断片は、ｓｃＦｖ－Ｆｃ断片である。
【0113】
いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ポリクローナル抗体である。
【0114】
いくつかの実施形態では、抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト抗体である。
【0115】
いくつかの実施形態では、抗体は、親和性成熟抗体である。いくつかの態様では、抗体は、本開示に提供される例示的な配列に由来する親和性成熟抗体である。
【0116】
本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、癌を含む様々な疾患及び状態の治療に有用であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、固形腫瘍の癌の治療に有用であり得る。例えば、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、結腸直腸癌の治療に有用であり得る。
【0117】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１３に提供されるＶＨ配列を含むか、それからなるか、又はそれから本質的になる。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１４に提供されるＶＬ配列を含むか、それからなるか、又はそれから本質的になる。いくつかの実施形態では、抗体は、ＶＨ配列とＶＬ配列とを含む。いくつかの態様では、ＶＨ配列は、配列番号１３のいずれか１つを含むか、それからなるか、又はそれから本質的になるＶＨ配列であり、ＶＬ配列は、配列番号１４のいずれか１つを含むか、それからなるか、又はそれから本質的になるＶＬ配列である。ある特定の実施形態では、抗体は、配列番号１５に提供される重鎖配列を含むか、それからなるか、又はそれから本質的になる。具体的な実施形態では、重鎖配列、例えば、配列番号１５に提供される重鎖配列は、Ｎ末端メチオニンを追加的に含む。ある特定の実施形態では、そのような重鎖配列は、配列番号１６に提供されるヌクレオチド配列によってコードされる。ある特定の実施形態では、抗体は、配列番号１７に提供される軽鎖配列を含むか、それからなるか、又はそれから本質的になる。具体的な実施形態では、軽鎖配列、例えば、配列番号１７に提供される軽鎖配列は、Ｎ末端メチオニンを追加的に含む。ある特定の実施形態では、そのような軽鎖配列は、配列番号１８に提供されるヌクレオチド配列によってコードされる。
【0118】
いくつかの実施形態では、抗体は、以下の表５に示されるＣＤＲの６つを含む。特定の実施形態では、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲが選択される。特定の実施形態では、Ｋａｂａｔ ＣＤＲが選択される。
【0119】
【表5】
【0120】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５及び６のうちの１つを含むＣＤＲ－Ｈ１；配列番号７及び８のうちの１つを含むＣＤＲ－Ｈ２；配列番号９を含むＣＤＲ－Ｈ３のうちの３つと、配列番号１０を含むＣＤＲ－Ｌ１；配列番号１１を含むＣＤＲ－Ｌ２；及び配列番号１２を含むＣＤＲ－Ｌ３のうちの１つ、２つ、又は３つ全てを含む。特定の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａに従う。特定の実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従う。
【0121】
５．生殖細胞系
いくつかの実施形態では、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体は、特定の生殖細胞系遺伝子、又はその変異体によってコードされる可変領域を含む抗体である。本明細書に提供される例示的な抗体は、重鎖可変領域の生殖細胞系遺伝子ＶＨ１－１８、ＶＨ３－３３、ＶＨ２－５、ＶＨ２－７０、及びＶＨ４－３０－４、又はその変異体、並びに軽鎖可変領域の生殖細胞系遺伝子Ｖκ１－５、Ｖκ３－１１、Ｖκ２－２０、Ｖκ１－３３、及びＶκ１－１６、又はその変異体によってコードされる可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体は、特定の生殖細胞系遺伝子、又はその変異体によってコードされる可変領域を含む抗体である。本明細書に提供される例示的な抗体は、重鎖可変領域の生殖細胞系遺伝子ＶＨ１－１８、ＶＨ３－３３、ＶＨ２－５、ＶＨ２－７０、及びＶＨ４－３０－４、又はその変異体、並びに軽鎖可変領域の生殖細胞系遺伝子Ｖκ１－５、Ｖκ３－１１、Ｖκ２－２０、Ｖκ１－３３、及びＶκ１－１６、又はその変異体によってコードされる可変領域を含む。
【0122】
当業者は、本明細書に提供されるＣＤＲ配列が、他の可変領域の生殖細胞系遺伝子、又はその変異体によってコードされる可変領域と組み合わされる場合にまた有用であり得ることを認識するであろう。特に、本明細書に提供されるＣＤＲ配列は、上で述べた可変領域の生殖細胞系遺伝子と構造的に類似している可変領域の生殖細胞系遺伝子、又はその変異体によってコードされる可変領域と組み合わされる場合に有用であり得る。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＣＤＲ－Ｈ配列は、ＶＨ１、ＶＨ２、ＶＨ３、又はＶＨ４ファミリー、若しくはその変異体から選択される可変領域の生殖細胞系遺伝子によってコードされる可変領域と組み合わされてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＣＤＲ－Ｌ配列は、Ｖκ１、Ｖκ２、又はＶκ３、若しくはその変異体から選択される可変領域の生殖細胞系遺伝子によってコードされる可変領域と組み合わされてもよい。
【0123】
６．グリコシル化変異体
ある特定の実施形態では、抗体は、それがグリコシル化される程度を増強、低減又は除去するため、改変されてもよい。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、「Ｎ－結合型」又は「Ｏ－結合型」のいずれかである。
ある特定の実施形態では、抗体は、それがグリコシル化される程度を増強、低減又は除去するため、改変されてもよい。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、「Ｎ－結合型」又は「Ｏ－結合型」のいずれかである。
【0124】
「Ｎ－結合型」グリコシル化は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付着を指す。トリペプチド配列アスパラギン－Ｘ－セリン及びアスパラギン－Ｘ－スレオニン（式中、Ｘはプロリンを除く任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素付着のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中のこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在により、有望なグリコシル化部位が作り出される。
【0125】
「Ｏ－結合型」グリコシル化は、５－ヒドロキシプロリン又は５－ヒドロキシリジンもまた用いられてもよいが、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリン又はスレオニンへの糖Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、又はキシロースのうちの１つの付着を指す。
【0126】
抗体に対するＮ－結合型グリコシル化部位の付加又は欠失は、上記のトリペプチド配列の１つ以上が作り出されるか、又は除去されるようにアミノ酸配列を改変することにより達成されてもよい。Ｏ－結合型グリコシル化部位の付加又は欠失は、（場合に応じて）抗体の配列における又は抗体の配列への１つ以上のセリン又はスレオニン残基の付加、欠失、又は置換によって達成されてもよい。
【0127】
７．Ｆｃ変異体
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域変異体を生成するため、アミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入されてもよい。ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域変異体は、全部でなく一部のエフェクター機能を有する。そのような抗体は、例えば、インビボでの抗体の半減期が重要である場合の用途では有用であり得るが、特定のエフェクター機能は不要又は有害である。エフェクター機能の例としては、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）及び抗体介在性補体媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）が挙げられる。改変されたエフェクター機能を伴う極めて多数の置換又は欠失は、当該技術分野において既知である。
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域変異体を生成するため、アミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入されてもよい。ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域変異体は、全部でなく一部のエフェクター機能を有する。そのような抗体は、例えば、インビボでの抗体の半減期が重要である場合の用途では有用であり得るが、特定のエフェクター機能は不要又は有害である。エフェクター機能の例としては、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）及び抗体介在性補体媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）が挙げられる。改変されたエフェクター機能を伴う極めて多数の置換又は欠失は、当該技術分野において既知である。
【0128】
いくつかの実施形態では、Ｆｃは、ＣＨ３配列のうちの少なくとも１つにおいて１つ以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、ＣＨ２配列のうちの少なくとも１つにおいて１つ又は修飾を含む。例えば、Ｆｃは、Ｖ２６２Ｅ、Ｖ２６２Ｄ、Ｖ２６２Ｋ、Ｖ２６２Ｒ、Ｖ２６２Ｓ、Ｖ２６４Ｓ、Ｖ３０３Ｒ、及びＶ３０５Ｒからなる群から選択される１つ以上の修飾を含み得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、単一ポリペプチドである。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、複数のペプチド、例えば、２つのポリペプチドである。Ｆｃ領域中の例示的な修飾は、例えば、２０１７年６月１４日に出願された国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０３７５４５号明細書に記載されている。
【0129】
ＣＤＣ及び／又はＡＤＣＣ活性における改変は、インビトロ及び／又はインビボアッセイを用いて確認され得る。例えば、ＦｃγＲ結合を測定するため、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイが実施され得る。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞として、ＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞でのＦｃＲの発現が、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，９：４５７－４９２（その全体が参照により組み込まれる）にまとめられている。
【0130】
目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号明細書及び同第５，８２１，３３７号明細書；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８６，８３：７０５９－７０６３；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８５，８２：１４９９－１５０２；並びにＢｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９８７，１６６：１３５１－１３６１（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）に提供されている。そのようなアッセイにとって有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替的に、又は追加的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：６５２－６５６（その全体が、参照により組み込まれる）に開示されるような動物モデルを用いてインビボで評価されてもよい。
【0131】
抗体がＣ１ｑに結合することができず、それ故にＣＤＣ活性が欠如することを確認するため、Ｃ１ｑ結合アッセイが更に実施されてもよい。Ｃ１ｑ結合アッセイの例としては、国際公開第２００６／０２９８７９号パンフレット及び国際公開第２００５／１００４０２号パンフレット（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）に記載のものが挙げられる。
【0132】
補体活性化アッセイは、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９６，２０２：１６３－１７１；Ｃｒａｇｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００３，１０１：１０４５－１０５２；及びＣｒａｇｇ ａｎｄ Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：２７３８－２７４３（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）に記載のものを含む。
【0133】
ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス（半減期決定）についても、例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１８：１７５９－１７６９（その全体が参照により組み込まれる）に記載の方法を用いて測定され得る。
【0134】
８．修飾アミノ酸
抗体コンジュゲートが修飾アミノ酸を含む場合、修飾アミノ酸は、施術者により好適であると見なされる任意の修飾アミノ酸であり得る。特定の実施形態では、修飾アミノ酸は、ｐ－アジド－メチル－Ｌ－フェニルアラニン（ｐ－メチルアジドフェニルアラニンとも称される）である。特定の実施形態では、非天然アミノ酸は、化合物（３０）：
又はその塩である。そのような非天然アミノ酸は、塩の形態であってもよい。当業者は、ｐ－アジド－メチル－Ｌ－フェニルアラニン残基のアジド部分がコンジュゲート基と反応して、本明細書に記載の特定のコンジュゲートを作製するために使用される歪み促進型［３＋２］アルキン－アジド環化付加反応を通じて形成される縮合環基のトリアゾールを形成することを理解するであろう。
抗体コンジュゲートが修飾アミノ酸を含む場合、修飾アミノ酸は、施術者により好適であると見なされる任意の修飾アミノ酸であり得る。特定の実施形態では、修飾アミノ酸は、ｐ－アジド－メチル－Ｌ－フェニルアラニン（ｐ－メチルアジドフェニルアラニンとも称される）である。特定の実施形態では、非天然アミノ酸は、化合物（３０）：
【化20】
【0135】
９．抗体コンジュゲートの調製
９．１．抗原の調製
抗体の単離に使用されるＢＣＭＡタンパク質は、インタクトなＢＣＭＡ又はＢＣＭＡの断片であってもよい。インタクトなＢＣＭＡタンパク質又はＢＣＭＡの断片は、単離されたタンパク質又は細胞によって発現されたタンパク質の形態であってもよい。抗体を生成するのに有用なＢＣＭＡの他の形態は、当業者には明らかであろう。
９．１．抗原の調製
抗体の単離に使用されるＢＣＭＡタンパク質は、インタクトなＢＣＭＡ又はＢＣＭＡの断片であってもよい。インタクトなＢＣＭＡタンパク質又はＢＣＭＡの断片は、単離されたタンパク質又は細胞によって発現されたタンパク質の形態であってもよい。抗体を生成するのに有用なＢＣＭＡの他の形態は、当業者には明らかであろう。
【0136】
９．２．モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６：４９５－４９７（その全体が参照により組み込まれる）により最初に記載されたハイブリドーマ法を用いて、且つ／又は組換えＤＮＡ法（例えば、その全体が参照により組み込まれる、米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）により、得られてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えば、ファージ又は酵母に基づくライブラリーを用いて得られてもよい。例えば、米国特許第８，２５８，０８２号明細書及び同第８，６９１，７３０号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６：４９５－４９７（その全体が参照により組み込まれる）により最初に記載されたハイブリドーマ法を用いて、且つ／又は組換えＤＮＡ法（例えば、その全体が参照により組み込まれる、米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）により、得られてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えば、ファージ又は酵母に基づくライブラリーを用いて得られてもよい。例えば、米国特許第８，２５８，０８２号明細書及び同第８，６９１，７３０号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【0137】
ハイブリドーマ法では、免疫化のために用いられるタンパク質に特異的に結合することになる抗体を産生するか、又は産生することができるリンパ球を誘発するため、マウス又は他の適切な宿主動物が免疫化される。或いは、リンパ球は、インビトロで免疫化されてもよい。次いで、リンパ球は、好適な融剤、例えば、ポリエチレングリコールを用いて骨髄腫細胞と融合され、ハイブリドーマ細胞を形成する。Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ．Ｗ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ３ｒｄ ｅｄ．（１９８６）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【0138】
ハイブリドーマ細胞は、融合されていない親骨髄腫細胞の増殖又は生存を阻害する１つ以上の物質を含有する好適な培地中で播種され、増殖される。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠如している場合、ハイブリドーマのための培地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を阻止する物質である、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含むことになる（ＨＡＴ培地）。
【0139】
有用な骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞により抗体の安定な高レベルの産生を支持し、ＨＡＴ培地の存在又は不在などの高感度培地条件であるものである。これらの中で好ましい骨髄腫細胞株は、ネズミ骨髄腫株、例えば、ＭＯＰ－２１及びＭＣ－１１マウス腫瘍（Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手可能）由来のもの、及びＳＰ－２又はＸ６３－Ａｇ８－６５３細胞（アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ），Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）である。ヒトモノクローナル抗体の産生のため、ヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株についても記載がなされている。例えば、Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９８４，１３３：３００１（その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【0140】
所望される特異性、親和性、及び／又は生物学的活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞の特定後、選択されたクローンは、限界希釈法によりサブクローニングされ、標準的方法により増殖されてもよい。Ｇｏｄｉｎｇ、上記を参照されたい。この目的に適した培地としては、例えば、Ｄ－ＭＥＭ又はＲＰＭＩ－１６４０培地が挙げられる。更に、ハイブリドーマ細胞は、動物における腹水腫瘍としてインビボで増殖されてもよい。
【0141】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、通常の手順を用いて（例えば、モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを用いることにより）、容易に単離され、配列決定され得る。したがって、ハイブリドーマ細胞は、所望される特性を有する抗体をコードするＤＮＡの有用な供給源として役立ち得る。一旦単離されると、ＤＮＡは発現ベクター内に配置されてもよく、次いで、細菌（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））、酵母（例えば、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）又はピキア菌種（Ｐｉｃｈｉａ ｓｐ．））、ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又は本来なら抗体を産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞にトランスフェクトされ、モノクローナル抗体を産生する。
【0142】
９．３．ヒト化抗体
ヒト化抗体は、モノクローナル抗体の構造部分の大部分又は全部を対応するヒト抗体配列で置き換えることによって生成されてもよい。結果として、抗原特異的な可変部、又はＣＤＲのみが非ヒト配列から構成されるハイブリッド分子が生成される。ヒト化抗体を得るための方法としては、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３４９：２９３－２９９；Ｒａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：８９１０－８９１５；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３６０７３－３６０７８；Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８９，８６：１００２９－１００３３；並びに米国特許第５，５８５，０８９号明細書、同第５，６９３，７６１号明細書、同第５，６９３，７６２号明細書、及び同第６，１８０，３７０号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）に記載されているものが挙げられる。
ヒト化抗体は、モノクローナル抗体の構造部分の大部分又は全部を対応するヒト抗体配列で置き換えることによって生成されてもよい。結果として、抗原特異的な可変部、又はＣＤＲのみが非ヒト配列から構成されるハイブリッド分子が生成される。ヒト化抗体を得るための方法としては、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３４９：２９３－２９９；Ｒａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：８９１０－８９１５；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３６０７３－３６０７８；Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８９，８６：１００２９－１００３３；並びに米国特許第５，５８５，０８９号明細書、同第５，６９３，７６１号明細書、同第５，６９３，７６２号明細書、及び同第６，１８０，３７０号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）に記載されているものが挙げられる。
【0143】
９．４ヒト抗体
ヒト抗体は、当該技術分野において既知の様々な技術により、例えば、トランスジェニック動物（例えば、ヒト化マウス）を用いることにより生成され得る。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９３，９０：２５５１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２：２５５－２５８；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏ．，１９９３，７：３３；並びに米国特許第５，５９１，６６９号明細書、同第５，５８９，３６９号明細書、及び同第５，５４５，８０７号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。ヒト抗体は又はジディスプレイライブラリー（例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２７：３８１－３８８；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２２：５８１－５９７；並びに米国特許第５，５６５，３３２号明細書及び同第５，５７３，９０５号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい）から誘導され得る。ヒト抗体はまた、インビトロ活性化Ｂ細胞（例えば、米国特許第５，５６７，６１０号明細書及び同第５，２２９，２７５号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい）によって生成されてもよい。ヒト抗体はまた、酵母に基づくライブラリー（例えば、その全体が参照により組み込まれる米国特許第８，６９１，７３０号明細書を参照されたい）から誘導されてもよい。
ヒト抗体は、当該技術分野において既知の様々な技術により、例えば、トランスジェニック動物（例えば、ヒト化マウス）を用いることにより生成され得る。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９３，９０：２５５１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２：２５５－２５８；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏ．，１９９３，７：３３；並びに米国特許第５，５９１，６６９号明細書、同第５，５８９，３６９号明細書、及び同第５，５４５，８０７号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。ヒト抗体は又はジディスプレイライブラリー（例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２７：３８１－３８８；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２２：５８１－５９７；並びに米国特許第５，５６５，３３２号明細書及び同第５，５７３，９０５号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい）から誘導され得る。ヒト抗体はまた、インビトロ活性化Ｂ細胞（例えば、米国特許第５，５６７，６１０号明細書及び同第５，２２９，２７５号明細書（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい）によって生成されてもよい。ヒト抗体はまた、酵母に基づくライブラリー（例えば、その全体が参照により組み込まれる米国特許第８，６９１，７３０号明細書を参照されたい）から誘導されてもよい。
【0144】
９．５コンジュゲーション
抗体コンジュゲートは、標準的技術により調製され得る。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体からペイロードへの結合を形成するのに適した条件下でペイロード前駆体と接触され、抗体－ペイロードコンジュゲートを形成する。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体からリンカーへの結合を形成するのに好適な条件下でリンカー前駆体と接触される。得られる抗体－リンカーは、抗体－リンカーからペイロードへの結合を形成するのに適した条件下でペイロード前駆体と接触され、抗体－リンカー－ペイロードコンジュゲートを形成する。ある特定の実施形態では、ペイロード前駆体は、ペイロードからリンカーへの結合を形成するのに好適な条件下でリンカー前駆体と接触される。得られるペイロード－リンカーは、ペイロード－リンカーから抗体への結合を形成するのに好適な条件下で抗体と接触され、抗体－リンカー－ペイロードコンジュゲートを形成する。抗体コンジュゲートを調製するために好適なリンカーが本明細書に開示され、コンジュゲーションのための例示的な条件が以下の実施例に記載される。
抗体コンジュゲートは、標準的技術により調製され得る。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体からペイロードへの結合を形成するのに適した条件下でペイロード前駆体と接触され、抗体－ペイロードコンジュゲートを形成する。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体からリンカーへの結合を形成するのに好適な条件下でリンカー前駆体と接触される。得られる抗体－リンカーは、抗体－リンカーからペイロードへの結合を形成するのに適した条件下でペイロード前駆体と接触され、抗体－リンカー－ペイロードコンジュゲートを形成する。ある特定の実施形態では、ペイロード前駆体は、ペイロードからリンカーへの結合を形成するのに好適な条件下でリンカー前駆体と接触される。得られるペイロード－リンカーは、ペイロード－リンカーから抗体への結合を形成するのに好適な条件下で抗体と接触され、抗体－リンカー－ペイロードコンジュゲートを形成する。抗体コンジュゲートを調製するために好適なリンカーが本明細書に開示され、コンジュゲーションのための例示的な条件が以下の実施例に記載される。
【0145】
いくつかの実施形態では、抗ＢＣＭＡコンジュゲートは、本明細書に開示されるような抗ＢＣＭＡ抗体を、構造（Ｍ）：
を有するリンカー前駆体と接触させることによって調製される。そのようなリンカー前駆体は、標準的な技術によって調製され得るか、又は市販の供給源から得ることができ、例えば、国際公開第２０１９／０５５９３１号パンフレット、国際公開第２０１９／０５５９０９号パンフレット、国際公開第２０１７／１３２６１７号パンフレット、国際公開第２０１７／１３２６１５号パンフレット（これらの各々は、その全体が参照により組み込まれる）である。
【化21】
【0146】
本明細書に開示されるコンジュゲーション反応からのコンジュゲートは、コンジュゲートと抗体に取り付けられた１つ以上の薬物（例えば、ＰＡＹ部分）の配分との混合物をもたらし得る。個々のコンジュゲートは、例えば、質量分析法によって混合物中で特定されることができ、ＨＰＬＣ、例えば、当該技術分野において既知のそのような方法を含む疎水性相互作用クロマトグラフィーによって分離することができる。ある特定の実施形態では、コンジュゲートの混合物は、優勢なコンジュゲート種を含む。ある特定の実施形態では、単一の薬物抗体比（ＤＡＲ）値を有する均一なコンジュゲートは、例えば、電気泳動又はクロマトグラフィーによってコンジュゲーション混合物から単離され得る。
【0147】
ＤＡＲは、コンジュゲート当たり１～８単位の範囲である。ｎ関するＤＡＲの量的分布も決定することができる。いくつかの場合では、ｎが特定の値である均一なコンジュゲートの分離、精製、及び特性評価は、電気泳動などの手段によって達成され得る。
【0148】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、１～８の範囲である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約２～約６、約３～約５の範囲である。
【0149】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約１である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約２である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約２．５である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約３である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約３．５である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約４である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約３．０、約３．１、約３．２、約３．３、約３．４、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、又は約３．９である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約５である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約６である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約７である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約８である。
【0150】
いくつかの好ましい実施形態では、本明細書に提供されるコンジュゲートについてのＤＡＲは、約４である。
【0151】
１０．ベクター、宿主細胞、及び組換え方法
実施形態はまた、抗ＢＣＭＡ抗体をコードする単離された核酸、その核酸を含むベクター及び宿主細胞、並びに抗体を産生するための組換え技術の提供を目的とする。
実施形態はまた、抗ＢＣＭＡ抗体をコードする単離された核酸、その核酸を含むベクター及び宿主細胞、並びに抗体を産生するための組換え技術の提供を目的とする。
【0152】
抗体の組換え産生については、それをコードする核酸は、更なるクローニング（すなわちＤＮＡの増幅）又は発現のため、単離され、複製可能なベクターに挿入されてもよい。いくつかの態様では、核酸は、例えば、米国特許第５，２０４，２４４号明細書（その全体が参照により組み込まれる）に記載のように、相同組換えによって産生されてもよい。
【0153】
多種のベクターが当該技術分野において既知である。ベクター成分としては、一般に、例えば、米国特許第５，５３４，６１５号明細書（その全体が参照により組み込まれる）に記載のように、シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列のうちの１つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。
【0154】
好適な宿主細胞の例示的な例が下記に提示される。これらの宿主細胞は、限定することを意味するものではない。
【0155】
好適な宿主細胞としては、任意の原核生物（例えば、細菌）、下等真核生物（例えば、酵母）、又は高等真核生物（例えば、哺乳動物）細胞が挙げられる。好適な原核生物としては、真正細菌、例えば、グラム陰性又はグラム陽性生物、例えば、腸内細菌科（Enterobacteriaceae）、例えば、エシェリキア（Escherichia）（大腸菌（E.coli））、エンテロバクター（Enterobacter）、エルウィニア（Erwinia）、クレブシエラ（Klebsiella）、プロテウス（Proteus）、サルモネラ（Salmonella）（ネズミチフス菌（S.typhimurium））、セラチア（Serratia）（セラチア・マルセッセンス（Ｓ．ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ））、シゲラ（Shigella）、桿菌（Bacilli）（枯草菌（B.subtilis）及びバシラス・リケニフォルミス（B.licheniformis））、シュードモナス（Pseudomonas）（緑膿菌（P.aeruginosa））、及びストレプトマイセス（Streptomyces）が挙げられる。１つの有用な大腸菌（E.coli）クローニング宿主は大腸菌（E.coli）２９４であるが、大腸菌（E.coli）Ｂ、大腸菌（E.coli）Ｘ１７７６、及び大腸菌（E.coli）Ｗ３１１０などの他の株は好適である。
【0156】
原核生物に加えて、糸状菌又は酵母などの真核微生物もまた、抗ＢＣＭＡ抗体をコードするベクターに好適なクローニング又は発現宿主である。出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）、又は通常のパン酵母は、一般に用いられる下等真核生物宿主微生物である。しかし、多数の他の属、種、及び株、例えば、スポドプテラ・フルギペルダ（Spodoptera frugiperda）（例えば、ＳＦ９）、分裂酵母（Schizosaccharomyces pombe）、クルイベロマイセス（Kluyveromyces）（クルイベロマイセス・ラクティス（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）、クルイベロマイセス・フラジリス（K.fragilis）、クルイベロマイセス・ブルガリカス（K.bulgaricus）、クルイベロマイセス・ウィッカラミイ（K.wickeramii）、クルイベロマイセス・ワルティ（K.waltii）、クルイベロマイセス・ドロソフィラルム（K.drosophilarum）、クルイベロマイセス・サーモトレランス（K.thermotolerans）、及びクルイベロマイセス・マルシアヌス（K.marxianus））、ヤロウイア（Yarrowia）、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）、カンジダ（Candida）（カンジダ・アルビカンス（C.albicans））、トリコデルマ・レーシア（Trichoderma reesia）、アカバンカビ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ）、シュワンニオマイセス（Schwanniomyces）（シュワンニオミセス・オシデンタリス（S.occidentalis））、及び糸状菌、例えば、アオカビ（Penicillium）、トリポクラジウム（Tolypocladium）、及びアスペルギルス（Aspergillus）（アスペルギルス・ニデュランス（A.nidulans）及びアスペルギルス・ニガー（A.niger））などが利用可能であり、有用である。
【0157】
有用な哺乳動物宿主細胞としては、ＣＯＳ－７細胞、ＨＥＫ２９３細胞；ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞；チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）；マウスセルトリ細胞；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）などが挙げられる。
【0158】
本発明の抗ＢＣＭＡ抗体を産生するのに用いられる宿主細胞は、種々の培地中で培養されてもよい。例えば、ハムＦ１０、最小必須培地（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ－１６４０、及びダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）などの市販の培地は、宿主細胞の培養に好適である。更に、Ｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．，１９７９，５８：４４；Ｂａｒｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８０，１０２：２５５；並びに米国特許第４，７６７，７０４号明細書、同第４，６５７，８６６号明細書、同第４，９２７，７６２号明細書、同第４，５６０，６５５号明細書、及び同第５，１２２，４６９号明細書、又は国際公開第９０／０３４３０号パンフレット及び国際公開第８７／００１９５号パンフレット記載される培地のいずれかが用いられてもよい。前述の参考文献の各々は、その全体が参照により組み込まれる。
【0159】
これらの培地のいずれかは、必要に応じて、ホルモン及び／又は他の成長因子（インスリン、トランスフェリン、又は上皮増殖因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシン及びチミジンなど）、抗生物質、微量元素（通常、マイクロモル範囲内の最終濃度で存在する無機化合物と定義される）、及びグルコース又は等価なエネルギー源で補充されてもよい。任意の他の必要な補給剤もまた、当業者に既知である適切な濃度で含まれてもよい。
【0160】
培養条件、例えば、温度、ｐＨなどは、発現用に選択された宿主細胞で以前に用いられたものであり、当業者にとって明らかになるであろう。
【0161】
組換え技術を用いるとき、抗体は、細胞内のペリプラズム空間内で産生され得るか、又は直接的に培地に分泌され得る。最初のステップとして抗体が細胞内で産生される場合、宿主細胞又は溶解断片のいずれかの微粒子片が、例えば、遠心分離又は限外濾過により除去される。例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：１６３－１６７）は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）のペリプラズム空間に分泌される抗体を単離するための手順を記述している。簡潔に述べると、細胞ペーストが、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下で、約３０分かけて解凍される。細胞片は、遠心分離により除去され得る。
【0162】
いくつかの実施形態では、抗体は、無細胞系内で産生される。いくつかの態様では、無細胞系は、Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７－２２５（その全体が参照により組み込まれる）に記載のようなインビトロ転写及び翻訳系である。いくつかの態様では、無細胞系は、真核細胞又は原核細胞からの無細胞抽出液を利用する。いくつかの態様では、原核細胞は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）である。抗体の無細胞発現は、例えば、抗体が不可溶性凝集体として細胞内で蓄積する場合、又はペリプラズム発現からの収量が低い場合、有用であり得る。無細胞系で産生される抗体は、細胞の供給源に応じてグリコシル化されてもよい。
【0163】
抗体が培地中に分泌される場合、そのような発現系からの上清は、一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）Ｐｅｌｌｃｏｎ（登録商標）限外濾過ユニットを用いて最初に濃縮される。タンパク質加水分解を阻害するため、前述のステップのいずれかにＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤が含まれてもよく、また偶発的な汚染物質の成長を阻止するため、抗生物質が含まれてもよい。
【0164】
細胞から調製される抗体組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティークロマトグラフィーを用いて精製され得、ここでアフィニティークロマトグラフィーは特に有用な精製技術である。親和性リガンドとしてのプロテインＡの適合性は、抗体中に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。ヒトγ１、γ２、又はγ４重鎖に基づく抗体を精製するため、プロテインＡを用いることができる（その全体が参照により組み込まれる、Ｌｉｎｄｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１９８３，６２：１－１３）。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に対して有用である（その全体が参照により組み込まれる、Ｇｕｓｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１９８６，５：１５６７－１５７５）。
【0165】
親和性リガンドが付着する対象のマトリックスはアガロースであることが最も多いが、他のマトリックスが利用可能である。制御された細孔ガラス又はポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定なマトリックスは、アガロースで達成され得る場合よりも速い流速及び短い処理時間を可能にする。この抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、ＢａｋｅｒＢｏｎｄ ＡＢＸ（登録商標）樹脂は精製にとって有用である。
【0166】
タンパク質精製のための他の技術、例えば、イオン交換カラムでの分画、エタノール沈降、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィー、ヘパリンＳｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）でのクロマトグラフィー、クロマト分画、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈降もまた利用可能であり、当業者により適用され得る。
【0167】
任意の予備精製ステップ後、目的の抗体及び汚染物質を含む混合物は、一般に低い塩濃度（例えば、約０～０．２５Ｍ塩）で実施される、約２．５～４．５の間のｐＨでの溶出緩衝液を用いる低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーにかけてもよい。
【0168】
１１．ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）
本明細書に提供されるのは、本明細書に提供されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートと組み合わせて使用され得るガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）である。本明細書に提供されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートのいずれか、例えば、コンジュゲート４は、ＧＳＩと組み合わせて使用され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、以前はＪＳＭＤ１９４又はＬＹ３０３９４７８として知られていた）、アバガセスタット（ａｖａｇａｃｅｓｔａｔ）（ＢＭＳ－７０８１６３；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＫ－０７５２（Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．）、Ｒ０４９２９０９７（Ｒｏｃｈｅ）、セマガセスタット（ｓｅｍａｇａｃｅｓｔａｔ）（ＬＹ－４５０１３９；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ＆ Ｃｏ．）、ＤＡＰＴ（Ｎ－［Ｎ－（３，５－ジフルオロフェニルアセチル－Ｌ－アラニル）］－Ｓ－フェニルグリシンｔ－ブチルエステル）、Ｌ６８５，４５８、化合物Ｅ（（ｓ，ｓ）－２－（３，５－ジフルオロフェニル）－アセチルアミノ１－Ｎ－（１－メチル－２－オキソ－５－フェニル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］［１，４］ジアゼピン－３－イル）－プロピオンアミド）、ＤＢＺ（ジベンズアゼピン）、ＪＬＫ６（７－アミノ－４－クロロ－３－メトキシイソクマリン）、又は［１１－エンド］－Ｎ－（５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロ－６，９－メタノベンゾ［９］［８］アヌレン－１１－イル）－チオフェン－２－スルホンアミド、又はＧＳＩの薬学的に許容される塩、固体形態、クラスレート、溶媒和物、互変異性体、若しくはラセミ混合物と組み合わせて投与される。
本明細書に提供されるのは、本明細書に提供されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートと組み合わせて使用され得るガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）である。本明細書に提供されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートのいずれか、例えば、コンジュゲート４は、ＧＳＩと組み合わせて使用され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、以前はＪＳＭＤ１９４又はＬＹ３０３９４７８として知られていた）、アバガセスタット（ａｖａｇａｃｅｓｔａｔ）（ＢＭＳ－７０８１６３；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＫ－０７５２（Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．）、Ｒ０４９２９０９７（Ｒｏｃｈｅ）、セマガセスタット（ｓｅｍａｇａｃｅｓｔａｔ）（ＬＹ－４５０１３９；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ＆ Ｃｏ．）、ＤＡＰＴ（Ｎ－［Ｎ－（３，５－ジフルオロフェニルアセチル－Ｌ－アラニル）］－Ｓ－フェニルグリシンｔ－ブチルエステル）、Ｌ６８５，４５８、化合物Ｅ（（ｓ，ｓ）－２－（３，５－ジフルオロフェニル）－アセチルアミノ１－Ｎ－（１－メチル－２－オキソ－５－フェニル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］［１，４］ジアゼピン－３－イル）－プロピオンアミド）、ＤＢＺ（ジベンズアゼピン）、ＪＬＫ６（７－アミノ－４－クロロ－３－メトキシイソクマリン）、又は［１１－エンド］－Ｎ－（５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロ－６，９－メタノベンゾ［９］［８］アヌレン－１１－イル）－チオフェン－２－スルホンアミド、又はＧＳＩの薬学的に許容される塩、固体形態、クラスレート、溶媒和物、互変異性体、若しくはラセミ混合物と組み合わせて投与される。
【0169】
ＢＭＳ－９４６４０５についてのＩＵＰＡＣ名は、４，４，４－トリフルオロ－Ｎ－［（１Ｓ）－１－｛［（１０Ｓ）－８－（２－ヒドロキシエチル）－９－オキソ－６，８－ジアザトリシクロ［９．４．０．０２，７］ペンタデカ－１（１１），２（７），３，５，１２，１４－ヘキサエン－１０イル］カルバモイル｝エチル］ブタンアミド水和物である。ＢＭＳ－９８６４０５についてのＣＡ索引名は、ブタンアミド，Ｎ－［（１Ｓ）－２－［［（７Ｓ）－６，７－ジヒドロ－５－（２－ヒドロキシエチル）－６－オキソ－５Ｈ－ピリド［３，２－ａ］［３］ベンズアゼピン－７－イル］アミノ］－１－メチル－２－オキソエチル］－４，４，４－トリフルオロ－水和物）である。
【0170】
ＢＭＳ－９８６４０５は、以下の式を有する。
ある特定の実施形態では、ＧＳＩは、下記式によるＢＭＳ－９８６４０５である。
ある特定の実施形態では、ＧＳＩは、下記式：
によるＢＭＳ－９８６４０５であるか、又はその薬学的に許容される塩、クラスレート、固体形態、溶媒和物、立体異性体、互変異性体、若しくはラセミ混合物である。ある特定の実施形態では、ＧＳＩは、下記式：
によるＢＭＳ－９８６４０５であるか、又はその薬学的に許容される塩である。
【化22】
【化23】
【化24】
【化25】
【0171】
ある特定の実施形態では、有効量のＢＭＳ－９８６４０５が、対象に投与される。ある特定の実施形態では、ＢＭＳ－９８６４０５が、対象に経口投与される。ある特定の実施形態では、ＢＭＳ－９８６４０５が、カプセルとして対象に投与される。
【0172】
１２．医薬組成物及び投与方法
本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、当該技術分野で利用可能な方法及び本明細書で開示される方法を用いて医薬組成物に配合され得る。同様に、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、当該技術分野で利用可能な方法及び本明細書で開示される方法を用いて医薬組成物に配合され得る。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかは、適切な医薬組成物中に提供され、好適な投与経路により投与され得る。
本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、当該技術分野で利用可能な方法及び本明細書で開示される方法を用いて医薬組成物に配合され得る。同様に、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、当該技術分野で利用可能な方法及び本明細書で開示される方法を用いて医薬組成物に配合され得る。本明細書に提供される抗体コンジュゲートのいずれかは、適切な医薬組成物中に提供され、好適な投与経路により投与され得る。
【0173】
本明細書に提供される方法は、本明細書に提供される少なくとも１つの抗体コンジュゲート及び１つ以上の適合でき、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を投与することを包含する。同様に、本明細書に提供される方法は、本明細書に提供される少なくとも１つのガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）及び１つ以上の適合でき、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を投与することを包含する。これに関連して、「薬学的に許容される」という用語は、連邦又は州政府の規制当局により認可されている又は米国薬局方（U.S.Pharmacopeia）若しくは他の一般に認められている薬局方に、動物、より詳細にはヒトでの使用に関して列記されていることを意味する。「担体」という用語は、希釈剤、アジュバント（例えば、フロイントアジュバント（完全及び不完全））、賦形剤、又は治療薬と共に投与されるビヒクルを含む。そのような薬学的担体は、滅菌液体、例えば、水及び油、例えば、石油、動物、植物又は合成起源のもの、例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などであり得る。医薬組成物が静脈内に投与されるとき、担体として水を用いることができる。液体担体として、特に注射可能溶液用に、生理食塩水及び水性デキストロース及びグリセロール溶液もまた用いることができる。好適な薬学的担体の例は、Ｍａｒｔｉｎ，Ｅ．Ｗ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。
【0174】
実際の臨床では、本明細書に提供される医薬組成物又は抗体コンジュゲート又はガンマセクレターゼ阻害剤は、当該技術分野で既知の任意の経路により投与されてもよい。例示的な投与経路としては、吸入、動脈内、経皮、筋肉内、腹腔内、静脈内、鼻腔、非経口、肺、及び皮下経路が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物又は抗体コンジュゲートは、非経口投与される。
【0175】
非経口投与用の組成物は、乳濁液又は滅菌溶液であり得る。非経口組成物は、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、及び注射可能有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）を含んでもよい。これらの組成物はまた、湿潤剤、等張化剤、乳化剤、分散剤、及び安定化剤を含有し得る。滅菌は、いくつかの方法で、例えば、細菌学的フィルターを用いて、放射線により、又は加熱により実施され得る。非経口組成物はまた、滅菌水又は任意の他の注射可能な滅菌培地における使用時に溶解され得る滅菌固体組成物の形態で調製され得る。
【0176】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される組成物は、医薬組成物又は単回単位剤形である。本明細書に提供される医薬組成物及び単回単位剤形は、１つ以上の予防又は治療抗体コンジュゲートを予防又は治療有効量で含む。
【0177】
医薬組成物は、１つ以上の薬学的賦形剤を含み得る。任意の好適な薬学的賦形剤を使用することができ、当業者は好適な薬学的賦形剤を選択することが可能である。好適な賦形剤の非限定的な例としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。特定の賦形剤が医薬組成物又は剤形への組み込みに適するか否かは、当該技術分野で周知の種々の要素、例えば、限定はされないが、剤形が対象に投与される方法及び剤形中の特異的抗体に依存する。組成物又は単回単位剤形はまた、必要に応じて、少量の湿潤剤又は乳化剤、又はｐＨ緩衝液を含有し得る。したがって、以下に提供される薬学的賦形剤は、例示することを意図しており、限定するものではない。追加の薬学的賦形剤としては、例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ Ｅｄ．（２００９）に記載されているものが挙げられる。
【0178】
いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、消泡剤を含む。任意の好適な消泡剤が使用されてもよい。いくつかの態様では、消泡剤は、アルコール、エーテル、油、ワックス、シリコーン、界面活性剤、及びそれらの組み合わせから選択される。いくつかの態様では、消泡剤は、鉱油、植物油、エチレンビスステアラミド、パラフィンワックス、エステルワックス、脂肪アルコールワックス、長鎖脂肪アルコール、脂肪酸石鹸、シリコングリコール、フルオロシリコーン、ポリエチレングリコール－ポリプロピレングリコールコポリマー、ポリジメチルシロキサン－二酸化ケイ素、エーテル、オクチルアルコール、キャプリルアルコール、トリオレイン酸ソルビタン、エチルアルコール、２－エチル－ヘキサノール、ジメチコン、オレイルアルコール、シメチコン、及びそれらの組み合わせから選択される。
【0179】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、共溶媒を含む。共溶媒の例示的な例としては、エタノール、ポリ（エチレン）グリコール、ブチレングリコール、ジメチルアセトアミド、グリセリン、及びプロピレングリコールが挙げられる。
【0180】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、緩衝液を含む。緩衝液の例示的な例としては、酢酸塩、ホウ酸塩、炭酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、水酸化物、ジエタノールアミン、モノエタノールアミン、グリセリン、メチオニン、グアーガム、及びグルタミン酸一ナトリウムが挙げられる。
【0181】
いくつかの実施形態では、医薬組成部は、担体又は充填剤を含む。担体又は充填剤の例示的な例としては、ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、ソルビトール、キトサン、ステアリン酸、キサンタンガム、及びグアーガムが挙げられる。
【0182】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、界面活性剤を含む。界面活性剤の例示的な例としては、ｄ－アルファトコフェロール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、ドクセートナトリウム、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、ラウリン酸、ヒドロキシステアリン酸マクロゴール１５、ミリスチルアルコール、リン脂質、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリオキシグリセリド、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル、ビタミンＥポリエチレン（グリコール）スクシネートが挙げられる。
【0183】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、固化防止剤を含む。固化防止剤の例示的な例としては、リン酸三カルシウム、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及び酸化マグネシウムが挙げられる。
【0184】
医薬組成物と共に使用され得る他の賦形剤としては、例えば、アルブミン、抗酸化剤、抗菌剤、抗真菌剤、生体吸収性ポリマー、キレート剤、制御放出剤、希釈剤、分散剤、溶解促進剤、乳化剤、ゲル化剤、軟膏基剤、浸透促進剤、防腐剤、可溶化剤、溶媒、安定剤、及び糖が挙げられる。これらの薬剤の各々の具体的な例は、例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ Ｅｄ．（２００９）に記載されている。
【0185】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、溶媒を含む。いくつかの態様では、溶媒は、無菌等張生理食塩水などの生理食塩水又はデキストロース溶液である。いくつかの態様では、溶媒は、注射用水である。
【0186】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、マイクロ粒子又はナノ粒子などの微粒子形態である。マイクロ粒子及びナノ粒子は、ポリマー又は脂質などの任意の好適な材料から形成され得る。いくつかの態様では、マイクロ粒子又はナノ粒子は、ミセル、リポソーム、又はポリマーソームである。
【0187】
本明細書に更に提供されるのは、抗体コンジュゲートを含む無水医薬組成物及び単位剤形であり、これはいくつかの実施形態では、水が一部の抗体の分解を容易にすることができるためである。
【0188】
本明細書に提供される無水医薬組成物及び単位剤形は、無水の若しくは低水分を含有する成分、及び低水分若しくは低湿度条件を使用して調製することができる。ラクトースと、一級又は二級アミンを含む少なくとも１つの活性成分とを含む医薬組成物及び単位剤形は、製造、パッケージング、及び／又は貯蔵中に水分及び／又は湿度との実質的な接触が予想される場合、無水であり得る。
【0189】
無水医薬組成物は、その無水性が維持されるように調製及び貯蔵される必要がある。したがって、無水組成物は、好適なフォーミュラリーキット中に含めることができるように、水への曝露を防止することが知られる材料を用いてパッケージングされ得る。好適なパッケージングの例として、限定はされないが、密封ホイル、プラスチック、単位用量容器（例えば、バイアル）、ブリスターパック、及びストリップパックが挙げられる。
【0190】
本明細書に提供されるラクトースを含まない組成物は、当該技術分野において既知であり、例えば、米国薬局方（ＵＳＰ）ＳＰ（ＸＸＩ）／ＮＦ（ＸＶＩ）に列記される賦形剤を含み得る。一般に、ラクトースを含まない組成物は、活性成分、結合剤／充填剤、及び滑沢剤を、薬学的に適合でき、薬学的に許容される量で含む。例示的なラクトースを含まない剤形は、活性成分、微結晶性セルロース、予備ゼラチン化デンプン、及びステアリン酸マグネシウムを含む。
【0191】
更に提供されるのは、抗体又は抗体コンジュゲートが分解することになる速度を低減する１つ以上の賦形剤を含む医薬組成物及び剤形である。本明細書で「安定剤」と称されるそのような賦形剤としては、限定はされないが、アスコルビン酸などの抗酸化剤、ｐＨ緩衝液、又は塩緩衝液を含む。
【0192】
１２．１．非経口剤形
ある特定の実施形態では、提供されるのは、非経口剤形である。非経口剤形は、限定はされないが、皮下、静脈内（ボーラス注射を含む）、筋肉内、及び動脈内を含む様々な経路により対象に投与され得る。それらの投与が、典型的には、汚染物質に対する対象の自然防御を迂回することから、非経口剤形は、典型的には、無菌であるか又は対象への投与前に滅菌され得る。非経口剤形の例としては、限定はされないが、注射用即時溶液、注射用の薬学的に許容される溶媒に溶解又は懸濁されるべき即時乾燥生成物、注射用即時懸濁液、及び乳濁液が挙げられる。
ある特定の実施形態では、提供されるのは、非経口剤形である。非経口剤形は、限定はされないが、皮下、静脈内（ボーラス注射を含む）、筋肉内、及び動脈内を含む様々な経路により対象に投与され得る。それらの投与が、典型的には、汚染物質に対する対象の自然防御を迂回することから、非経口剤形は、典型的には、無菌であるか又は対象への投与前に滅菌され得る。非経口剤形の例としては、限定はされないが、注射用即時溶液、注射用の薬学的に許容される溶媒に溶解又は懸濁されるべき即時乾燥生成物、注射用即時懸濁液、及び乳濁液が挙げられる。
【0193】
非経口剤形を提供するのに使用可能な好適なビヒクルは、当業者に周知である。例としては、限定はされないが、注射用水（ＵＳＰ）；水性ビヒクル、例えば、限定はされないが、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、及び乳酸リンゲル注射液；水混和性ビヒクル、例えば、限定はされないが、エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール；並びに非水性ビヒクル、例えば、限定はされないが、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジルが挙げられる。
【0194】
本明細書に開示される抗体の１つ以上の溶解度を増加させる賦形剤もまた、非経口剤形中に組み込まれ得る。
【0195】
１２．２．投与量及び単位剤形
ヒト治療薬では、医師は、予防的又は根治的治療に従い、また年齢、体重、状態及び治療されるべき対象に特異的な他の要素に従い、最適であると考える薬量を決定することになる。
ヒト治療薬では、医師は、予防的又は根治的治療に従い、また年齢、体重、状態及び治療されるべき対象に特異的な他の要素に従い、最適であると考える薬量を決定することになる。
【0196】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される組成物は、医薬組成物又は単回単位剤形である。本明細書に提供される医薬組成物及び単回単位剤形は、１つ以上の予防又は治療抗体を予防又は治療有効量で含む。
【0197】
障害又はその１つ以上の症状の予防又は治療において有効となる抗体コンジュゲート、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）又は組成物の量は、疾患又は状態の性質及び重症度、並びに抗体が投与される経路と共に変動することになる。頻度及び投与量もまた、施される特定の治療（例えば、治療薬又は予防薬）や、障害、疾患、又は状態の重症度、投与経路に依存する各対象に特異的な要素、並びに対象の年齢、体重、応答、及び過去の病歴に従って変動することになる。有効用量は、インビトロ又は動物モデル試験系から得られる用量反応曲線から外挿されてもよい。
【0198】
ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）、又は組成物の例示的な用量は、対象又は試料重量のキログラム当たりの抗体のミリグラム又はマイクログラム量（例えば、約１０マイクログラム／キログラム～約５０ミリグラム／キログラム、約１００マイクログラム／キログラム～約２５ミリグラム／キログラム、又は約１００マイクログラム／キログラム～約１０ミリグラム／キログラム）を含む。ある特定の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲートの、抗体の重量に基づく投与量は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５．１ｍｇ／ｋｇ、５．２ｍｇ／ｋｇ、５．３ｍｇ／ｋｇ、５．４ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．６ｍｇ／ｋｇ、５．７ｍｇ／ｋｇ、５．８ｍｇ／ｋｇ、５．９ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．１ｍｇ／ｋｇ、７．２ｍｇ／ｋｇ、７．３ｍｇ／ｋｇ、７．４ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．６ｍｇ／ｋｇ、７．７ｍｇ／ｋｇ、７．８ｍｇ／ｋｇ、７．９ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０．２５ｍｇ／ｋｇ、１０．５ｍｇ／ｋｇ、１０．７５ｍｇ／ｋｇ、１１．０ｍｇ／ｋｇ、１１．２５ｍｇ／ｋｇ、１１．５ｍｇ／ｋｇ、１１．７５ｍｇ／ｋｇ、１２．０ｍｇ／ｋｇ、１２．２５ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１２．７５ｍｇ／ｋｇ、１３．０ｍｇ／ｋｇ、１３．２５ｍｇ／ｋｇ、１３．５ｍｇ／ｋｇ、１３．７５ｍｇ／ｋｇ、１４．０ｍｇ／ｋｇ、１４．２５ｍｇ／ｋｇ、１４．５ｍｇ／ｋｇ、１４．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１５ｍｇ／ｋｇ、若しくはそれ以上（対象の体重）である。ある特定の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲートの、抗体の重量に基づく投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５．１ｍｇ／ｋｇ、５．２ｍｇ／ｋｇ、５．３ｍｇ／ｋｇ、５．４ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．６ｍｇ／ｋｇ、５．７ｍｇ／ｋｇ、５．８ｍｇ／ｋｇ、５．９ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．１ｍｇ／ｋｇ、７．２ｍｇ／ｋｇ、７．３ｍｇ／ｋｇ、７．４ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．６ｍｇ／ｋｇ、７．７ｍｇ／ｋｇ、７．８ｍｇ／ｋｇ、７．９ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０．２５ｍｇ／ｋｇ、１０．５ｍｇ／ｋｇ、１０．７５ｍｇ／ｋｇ、１１．０ｍｇ／ｋｇ、１１．２５ｍｇ／ｋｇ、１１．５ｍｇ／ｋｇ、１１．７５ｍｇ／ｋｇ、１２．０ｍｇ／ｋｇ、１２．２５ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１２．７５ｍｇ／ｋｇ、１３．０ｍｇ／ｋｇ、１３．２５ｍｇ／ｋｇ、１３．５ｍｇ／ｋｇ、１３．７５ｍｇ／ｋｇ、１４．０ｍｇ／ｋｇ、１４．２５ｍｇ／ｋｇ、１４．５ｍｇ／ｋｇ、１４．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１５ｍｇ／ｋｇ、若しくはそれ以上（対象の体重）である。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲートの、抗体の重量に基づく投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１４ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１３ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１１ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ～０．５ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１３ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１４ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１３ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１１ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１４ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１３ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１１ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～８ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、又は３．０ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇである。
【0199】
別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、０．１ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、２．０ｍｇ、２．５ｍｇ、３．０ｍｇ、３．５ｍｇ、４．０ｍｇ、４．５ｍｇ、５．０ｍｇ、５．５ｍｇ、６．０ｍｇ、６．５ｍｇ、７．０ｍｇ、７．５ｍｇ、８．０ｍｇ、８．５ｍｇ、９．０ｍｇ、９．５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、又は２００ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、０．１ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、２．０ｍｇ、２．５ｍｇ、３．０ｍｇ、３．５ｍｇ、４．０ｍｇ、４．５ｍｇ、５．０ｍｇ、５．５ｍｇ、６．０ｍｇ、６．５ｍｇ、７．０ｍｇ、７．５ｍｇ、８．０ｍｇ、８．５ｍｇ、９．０ｍｇ、９．５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、又は２００ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、１５００ｍｇ、１６００ｍｇ、１７００ｍｇ、１８００ｍｇ、１９００ｍｇ、又は２０００ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、０．１ｍｇ～２００ｍｇ、０．１ｍｇ～１００ｍｇ、０．１ｍｇ～５０ｍｇ、０．１ｍｇ～２５ｍｇ、０．１ｍｇ～２０ｍｇ、０．１ｍｇ～１５ｍｇ、０．１ｍｇ～１０ｍｇ、０．１ｍｇ～７．５ｍｇ、０．１ｍｇ～５ｍｇ、０．１～２．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２０ｍｇ、０．２５～１５ｍｇ、０．２５～１２ｍｇ、０．２５～１０ｍｇ、０．２５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２．５ｍｇ、０．５ｍｇ～２０ｍｇ、０．５～１５ｍｇ、０．５～１２ｍｇ、０．５～１０ｍｇ、０．５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．５ｍｇ～５ｍｇ、０．５ｍｇ～２．５ｍｇ、１ｍｇ～２０ｍｇ、１ｍｇ～１５ｍｇ、１ｍｇ～１２ｍｇ、１ｍｇ～１０ｍｇ、１ｍｇ～７．５ｍｇ、１ｍｇ～５ｍｇ、又は１ｍｇ～２．５ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、０．１ｍｇ～２００ｍｇ、０．１ｍｇ～１００ｍｇ、０．１ｍｇ～５０ｍｇ、０．１ｍｇ～２５ｍｇ、０．１ｍｇ～２０ｍｇ、０．１ｍｇ～１５ｍｇ、０．１ｍｇ～１０ｍｇ、０．１ｍｇ～７．５ｍｇ、０．１ｍｇ～５ｍｇ、０．１～２．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２０ｍｇ、０．２５～１５ｍｇ、０．２５～１２ｍｇ、０．２５～１０ｍｇ、０．２５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２．５ｍｇ、０．５ｍｇ～２０ｍｇ、０．５～１５ｍｇ、０．５～１２ｍｇ、０．５～１０ｍｇ、０．５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．５ｍｇ～５ｍｇ、０．５ｍｇ～２．５ｍｇ、１ｍｇ～２０ｍｇ、１ｍｇ～１５ｍｇ、１ｍｇ～１２ｍｇ、１ｍｇ～１０ｍｇ、１ｍｇ～７．５ｍｇ、１ｍｇ～５ｍｇ、又は１ｍｇ～２．５ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、０．１ｍｇ～２００ｍｇ、０．１ｍｇ～１００ｍｇ、０．１ｍｇ～５０ｍｇ、０．１ｍｇ～２５ｍｇ、０．１ｍｇ～２０ｍｇ、０．１ｍｇ～１５ｍｇ、０．１ｍｇ～１０ｍｇ、０．１ｍｇ～７．５ｍｇ、０．１ｍｇ～５ｍｇ、０．１～２．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２０ｍｇ、０．２５～１５ｍｇ、０．２５～１２ｍｇ、０．２５～１０ｍｇ、０．２５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．２５ｍｇ～５ｍｇ、０．２５ｍｇ～２．５ｍｇ、０．５ｍｇ～２０ｍｇ、０．５～１５ｍｇ、０．５～１２ｍｇ、０．５～１０ｍｇ、０．５ｍｇ～７．５ｍｇ、０．５ｍｇ～５ｍｇ、０．５ｍｇ～２．５ｍｇ、１ｍｇ～２０ｍｇ、１ｍｇ～１５ｍｇ、１ｍｇ～１２ｍｇ、１ｍｇ～１０ｍｇ、１ｍｇ～７．５ｍｇ、１ｍｇ～５ｍｇ、又は１ｍｇ～２．５ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供される抗体コンジュゲート又は組成物の投与量は、１０ｍｇ～２０００ｍｇ、１０ｍｇ～１９００ｍｇ、１０ｍｇ～１８００ｍｇ、１０ｍｇ～１７００ｍｇ、１０ｍｇ～１６００ｍｇ、１０ｍｇ～１５００ｍｇ、１０ｍｇ～１４００ｍｇ、１０ｍｇ～１３００ｍｇ、１０ｍｇ～１２００ｍｇ、１０ｍｇ～１１００ｍｇ、１０ｍｇ～１０００ｍｇ、１０ｍｇ～９００ｍｇ、１０ｍｇ～８００ｍｇ、１０ｍｇ～７００ｍｇ、１０ｍｇ～６００ｍｇ、１０ｍｇ～５００ｍｇ、１０ｍｇ～４００ｍｇ、１０ｍｇ～３００ｍｇ、１０ｍｇ～２００ｍｇ、１０ｍｇ～１００ｍｇ、１５ｍｇ～２０００ｍｇ、１５ｍｇ～１９００ｍｇ、１５ｍｇ～１８００ｍｇ、１５ｍｇ～１７００ｍｇ、１５ｍｇ～１６００ｍｇ、１５ｍｇ～１５００ｍｇ、１５ｍｇ～１４００ｍｇ、１５ｍｇ～１３００ｍｇ、１５ｍｇ～１２００ｍｇ、１５ｍｇ～１１００ｍｇ、１５ｍｇ～１０００ｍｇ、１５ｍｇ～９００ｍｇ、１５ｍｇ～８００ｍｇ、１５ｍｇ～７００ｍｇ、１５ｍｇ～６００ｍｇ、１５ｍｇ～５００ｍｇ、１５ｍｇ～４００ｍｇ、１５ｍｇ～３００ｍｇ、１５ｍｇ～２００ｍｇ、又は１５ｍｇ～１００ｍｇである。
【0200】
別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与量は、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２１ｍｇ、２２ｍｇ、２３ｍｇ、２４ｍｇ、２５ｍｇ、２６ｍｇ、２７ｍｇ、２８ｍｇ、２９ｍｇ、３０ｍｇ、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３３ｍｇ、３４ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、又は５０ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与量は、約１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２１ｍｇ、２２ｍｇ、２３ｍｇ、２４ｍｇ、２５ｍｇ、２６ｍｇ、２７ｍｇ、２８ｍｇ、２９ｍｇ、３０ｍｇ、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３３ｍｇ、３４ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、又は５０ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与量は、１０ｍｇ～５０ｍｇ、１０ｍｇ～４５ｍｇ、１０ｍｇ～４０ｍｇ、１０ｍｇ～３５ｍｇ、１０ｍｇ～３０ｍｇ、１０ｍｇ～２５ｍｇ、１０ｍｇ～２０ｍｇ、１０ｍｇ～１５ｍｇ、２０ｍｇ～５０ｍｇ、２０ｍｇ～４５ｍｇ、２０ｍｇ～４０ｍｇ、２０ｍｇ～３５ｍｇ、２０ｍｇ～３０ｍｇ、又は２０ｍｇ～２５ｍｇである。別の実施形態では、対象における障害、又はその１つ以上の症状を予防する、治療する、処置する、又は寛解させるために投与される、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与量は、約１０ｍｇ～５０ｍｇ、１０ｍｇ～４５ｍｇ、１０ｍｇ～４０ｍｇ、１０ｍｇ～３５ｍｇ、１０ｍｇ～３０ｍｇ、１０ｍｇ～２５ｍｇ、１０ｍｇ～２０ｍｇ、１０ｍｇ～１５ｍｇ、２０ｍｇ～５０ｍｇ、２０ｍｇ～４５ｍｇ、２０ｍｇ～４０ｍｇ、２０ｍｇ～３５ｍｇ、２０ｍｇ～３０ｍｇ、又は２０ｍｇ～２５ｍｇである。
【0201】
用量は、好適なスケジュール、例えば、週に１回、２回、３回、又は４回に従って投与され得る。ある特定の実施形態では、用量は、３週間毎に１回、又は４週間毎に１回投与され得る。業者にとって明らかになるように、場合によっては、本明細書に開示される範囲外の抗体コンジュゲート又はガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）の投与量を用いることが必要であり得る。更に、臨床医又は治療医師が対象応答と共に治療をいつどのように介入し、調節し、又は終結させるか知ることになることが記録される。
【0202】
異なる治療有効量は、当業者により容易に理解されるように、異なる疾患及び状態に適用可能であり得る。同様に、そのような障害を予防する、処置する、治療する、又は寛解させるのに十分であるが、本明細書に提供される抗体に関連した有害作用を引き起こすのに不十分であるか、又は低減するのに十分である量もまた、本明細書に記載される用量及び投与頻度スケジュールにより包含される。更に、本明細書に提供される組成物が複数回投与量で対象に投与されるとき、投与量の全てが同じである必要はない。例えば、対象に投与される投与量は、組成物の予防又は治療効果を改善するように増加されてもよく、又は特定の対象が経験している１つ以上の副作用を低減するように低減されてもよい。
【0203】
ある特定の実施形態では、治療又は予防は、１つ以上の負荷用量、その後の１つ以上の維持用量の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、又は組成物を用いて開始され得る。
【0204】
ある特定の実施形態では、対象の血液又は血清中で本明細書に提供される抗体、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）、又は組成物の定常状態を達成するように、本明細書に提供される抗体コンジュゲート、ガンマセクレターゼ阻害剤、又は組成物の用量が投与される。定常状態濃度は、当業者に利用可能な技術による測定により決定され得るか、又は対象の身長、体重及び年齢などの身体的特徴を基準とし得る。
【0205】
ある特定の実施形態では、同じ組成物の投与は、反復されてもよく、その投与は、少なくとも１日、２日、３日、５日、１０日、１５日、３０日、４５日、２ヶ月、７５日、３ヶ月、又は６ヶ月で分割されてもよい。他の実施形態では、同じ予防薬又は治療薬の投与は、反復されてもよく、その投与は、少なくとも１日、２日、３日、５日、１０日、１５日、３０日、４５日、２ヶ月、７５日、３ヶ月、又は６ヶ月で分割されてもよい。
【0206】
本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の前に（例えば、直前に）、それと同時に、又はその後に（例えば、その直後に）投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、又は２４時間前に投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の１日、２日、３日、４日、５日、６日、又は７日前に投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の１週間、２週間、３週間、又は４週間前に投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、又は２４時間後に投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の１日、２日、３日、４日、５日、６日、又は７日後に投与され得る。ある特定の実施形態では、本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の投与の１週間、２週間、３週間、又は４週間後に投与され得る。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、３週間毎に１回対象に投与され、有効量のＢＭＳ－９８６４０５は、２１日のサイクル中に、毎週３回対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）及び有効量のガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、空腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、空腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量のガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、空腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）及び有効量のガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、満腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、満腹時に対象に投与される。ある特定の実施形態では、有効量のガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、満腹時に対象に投与される。
【0207】
ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、３週間毎に１回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日のサイクル中に、毎週１週間に３回（例えば、１日目、３日、５日、８日、１０日、１２日、１５日、１７及び１９日目）投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、３週間毎に１回対象に投与され、ここで、３週間毎は、２１日サイクルである（例えば、その間、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）が対象に投与される）。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、２１日サイクルの最初の日（１日目）に対象に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、各２１日サイクルの最初の日（１日目）に対象に投与される。ある特定の実施形態では、２１サイクルは、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、又は１５回行われる。ある特定の実施形態では、有効量の抗体コンジュゲートは、２１日サイクルの最初の日（１日目）に対象に投与され、抗体コンジュゲートの有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、又は６．７ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、有効量のＢＭＳ－９８６４０５は、２１日サイクルの１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、及び１９日目に対象に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）であり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日のサイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．６ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１．２５ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約２．０ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約３．０ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約４．５ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約６．７ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１０．０ｍｇ／ｋｇであり、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は、２１日サイクル中に毎週週に３回対象に投与され、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は、約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量である。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量であり、この有効量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。ある特定の実施形態では、投与されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は有効量である。ある特定の実施形態では、投与されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）の量は有効量であり、この有効量は、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２１ｍｇ、２２ｍｇ、２３ｍｇ、２４ｍｇ、２５ｍｇ、２６ｍｇ、２７ｍｇ、２８ｍｇ、２９ｍｇ、３０ｍｇ、３１ｍｇ、３２ｍｇ、３３ｍｇ、３４ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、又は５０ｍｇである。ある特定の実施形態では、投与されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）は有効量であり、この有効量は、２５ｍｇである。
【0208】
抗体コンジュゲートが、単剤療法として投与されるある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．６ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約３．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約４．５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約６．７ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、３週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１０．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量である。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量であり、この有効量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。
【0209】
抗体コンジュゲートが単剤療法として投与されるある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．３ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約０．６ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約３．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約４．５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約６．７ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、４週間毎に１回対象に投与され、投与される抗体コンジュゲートの量は、約１０．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量である。ある特定の実施形態では、投与される抗体コンジュゲートの量は有効量であり、この有効量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．１ｍｇ／ｋｇ、６．２ｍｇ／ｋｇ、６．３ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、６．６ｍｇ／ｋｇ、６．７ｍｇ／ｋｇ、６．８ｍｇ／ｋｇ、６．９ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．２５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、７．７５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．２５ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、８．７５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．２５ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、９．７５ｍｇ／ｋｇ、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。
【0210】
１２．３追加の併用療法及び製剤
本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、単剤療法として投与されてもよく、又は本明細書に提供されるようなガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）と組み合わせて投与されてもよい。ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせてＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートを使用することを含むある特定の実施形態では、１つ以上の追加の治療薬が本明細書に提供される組成物、治療用製剤、及び治療の方法の一部として使用されてもよい。ある特定の実施形態では、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートは、本明細書に開示される１つ以上の化学療法剤、及びそのような組み合わせを、それを必要としている対象に投与することを含む治療の方法と組み合わせて使用されてもよい。化学療法剤の例としては、ベンダムスチン（ＴＲＥＡＮＤＡ（登録商標）、Ｃｅｐｈａｌｏｎ）、ベネトクラクスＶＥＮＣＬＥＸＴＡ（登録商標）、Ａｂｂｖｉｅ，Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、デノスマブ（ＸＧＥＶＡ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ；ＰＲＯＬＩＡ（登録商標）、カルフィルゾミブ（ＫＹＰＲＯＬＩＳ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、イキサゾミブ（ＮＩＮＬＡＲＯ（登録商標）、Ｔａｋｅｄａ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スーテント（ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５－ＦＵ（５－フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ＳＣＨ ６６３３６）、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３－９００６、Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ）、及びゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１；Ｓｕｇｅｎ）、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロスホスファミド；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロメラミン（trimethylomelamine）を含むエチレンイミン及びメチルアメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニンヌスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、ウンシアラマイシン、カリケミシン・ガムマール、及びカリケミシン・オメガール（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３－１８６）；ジネミシンＡを含むジネミシン；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラマイシン；並びにネオカルジノスタチンクロモフォー及び関連するクロモタンパク質エンジイン抗生物質クロモフォー）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ミトマイシン、例えば、ミトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノシタチン、ゾルビシン；抗代謝物、例えば、メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プラジエノリドＢ、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアムニプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン、ドロモスタノロン、プロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗アドレナル、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充物（replenisher）、例えば、フロリン酸（frolinic acid）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシン及びアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピロブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（クレモフォールフリー）、パクリタキセルのアルブミン安定化ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドセタキセル；Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチンＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テノポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸；及び上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に開示される抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）は、単剤療法として投与されてもよく、又は本明細書に提供されるようなガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）と組み合わせて投与されてもよい。ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせてＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートを使用することを含むある特定の実施形態では、１つ以上の追加の治療薬が本明細書に提供される組成物、治療用製剤、及び治療の方法の一部として使用されてもよい。ある特定の実施形態では、ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用されるＢＣＭＡに対する抗体のコンジュゲートは、本明細書に開示される１つ以上の化学療法剤、及びそのような組み合わせを、それを必要としている対象に投与することを含む治療の方法と組み合わせて使用されてもよい。化学療法剤の例としては、ベンダムスチン（ＴＲＥＡＮＤＡ（登録商標）、Ｃｅｐｈａｌｏｎ）、ベネトクラクスＶＥＮＣＬＥＸＴＡ（登録商標）、Ａｂｂｖｉｅ，Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、デノスマブ（ＸＧＥＶＡ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ；ＰＲＯＬＩＡ（登録商標）、カルフィルゾミブ（ＫＹＰＲＯＬＩＳ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、イキサゾミブ（ＮＩＮＬＡＲＯ（登録商標）、Ｔａｋｅｄａ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スーテント（ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、イマチニブメシル酸塩（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５－ＦＵ（５－フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ＳＣＨ ６６３３６）、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３－９００６、Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ）、及びゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１；Ｓｕｇｅｎ）、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロスホスファミド；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロメラミン（trimethylomelamine）を含むエチレンイミン及びメチルアメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニンヌスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、ウンシアラマイシン、カリケミシン・ガムマール、及びカリケミシン・オメガール（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３－１８６）；ジネミシンＡを含むジネミシン；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラマイシン；並びにネオカルジノスタチンクロモフォー及び関連するクロモタンパク質エンジイン抗生物質クロモフォー）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ミトマイシン、例えば、ミトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノシタチン、ゾルビシン；抗代謝物、例えば、メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プラジエノリドＢ、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアムニプリン、チオグアニン；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン、ドロモスタノロン、プロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗アドレナル、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充物（replenisher）、例えば、フロリン酸（frolinic acid）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシン及びアンサミトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピロブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（クレモフォールフリー）、パクリタキセルのアルブミン安定化ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドセタキセル；Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチンＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テノポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸；及び上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【0211】
ある特定の実施形態では、提供されるのは、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤と組み合わせた、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートのいずれかを含む組成物、治療用製剤、及び治療若しくは使用の方法、並びにそのような組み合わせを必要としている対象に投与することを含む治療の方法である。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１経路の小分子ブロッカーを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１活性を阻害する抗体を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＣＡ－１７０、ＢＭＳ－８、ＢＭＳ－２０２、ＢＭＳ－９３６５５８、ＣＫ－３０１、及びＡＵＮＰ１２からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アベルマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＡＭＰ－２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＭＥＤＩ０６８０／ＡＭＰ－５１４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、セミプリマブ、ＴＳＲ－０４２（Ｔｅｓａｒｏ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、チスレリズマブ／ＢＧＢ－Ａ３１７（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＣＫ－３０１（Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＢＭＳ－９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、セミプリマブ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、カムレリズマブ、シンチリマブ、トリパリマブ、ゲノリムズマブ、及びＡ１６７（Ｓｉｃｈｕａｎ Ｋｅｌｕｎ－Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＭＧＡ０１２（Ｉｎｃｙｔｅ／ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ）、ＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ／Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ）、ＬＹ３３０００５４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、ＦＡＺ０５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＤ－１１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＣＸ－０７２（ＣｙｔｏｍＸ）、ＢＧＢ－Ａ３３３（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＢＩ７５４０９１（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＪＮＪ－６３７２３２８３（Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｊｏｈｎｓｏｎ／Ｊａｎｎｓｅｎ）、ＡＧＥＮ２０３４（Ａｇｅｎｕｓ）、ＣＡ－３２７（Ｃｕｒｉｓ）、ＣＸ－１８８（ＣｙｔｏｍＸ）、ＳＴＩ－Ａ１１１０（Ｓｅｒｖｉｅｒ）、ＪＴＸ－４０１４（Ｊｏｕｎｃｅ）、ＡＭ０００１（Ａｒｍｏ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、ＣＢＴ－５０２（ＣＢＴ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＦＳ１１８（Ｆ－Ｓｔａｒ／Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ）、ＸｍＡｂ２０７１７（Ｘｅｎｃｏｒ）、ＸｍＡｂ２３１０４（Ｘｅｎｃｏｒ）、ＡＢ１２２（Ａｒｃｕｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＫＹ１００３（Ｋｙｍａｂ）、ＲＸＩ－７６２（ＲＸｉ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＲＳ－３３２（Ｐｉｅｒｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＡＬＰＮ－２０２（Ａｌｐｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、ＴＳＲ－０７５（Ｔｅｓａｒｏ／Ａｎａｐｔｙｓ Ｂｉｏ）、ＭＣＬＡ－１４５（Ｍｅｒｕｓ）、ＭＧＤ０１３（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＭＧＤ０１９（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＲＯ７１２１６６１（Ｈｏｆｆｍａｎ－Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）、ＬＹ３４１５２４４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上のＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１阻害剤は、例えば、国際公開第２０１６／０７７３９７号パンフレット、国際公開第２０１８／１５６７７７号パンフレット、及び２０１８年５月２３日に出願された国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３４２１３号明細書に記載される抗ＰＤ１単一特異性又は二重特異性抗体から選択される。
【0212】
ある特定の実施形態では、提供されるのは、１つ以上のＬＡＧ３阻害剤と組み合わせた、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートのいずれかを含む組成物、治療用製剤、及び治療若しくは使用の方法、並びにそのような組み合わせを必要としている対象に投与することを含む治療の方法である。いくつかの実施形態では、１つ以上のＬＡＧ３阻害剤は、ＬＡＧ３経路の小分子ブロッカーを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＬＡＧ３阻害剤は、ＬＡＧ３活性を阻害する抗体を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＬＡＧ３阻害剤は、ＩＭＰ３２１（エフチラジモドアルファ、Ｉｍｍｕｔｅｐ）、レラチリマブ（Ｂｒｉｓｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＬＡＧ５２５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＭＫ４２８０（Ｍｅｒｃｋ）、ＢＩ７５４１１１（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＲＥＧＮ３７６７（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）、Ｓｙｍ０２２（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）、及びＴＳＲ－０３３（Ｔｅｓａｒｏ／ＧＳＫ）からなる群から選択される。
【0213】
ある特定の実施形態では、提供されるのは、１つ以上のＴＩＭ３阻害剤と組み合わせた、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートのいずれかを含む組成物、治療用製剤、及び治療若しくは使用の方法、並びにそのような組み合わせを必要としている対象に投与することを含む治療の方法である。いくつかの実施形態では、１つ以上のＴＩＭ３阻害剤は、ＴＩＭ３経路の小分子ブロッカーを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＴＩＭ３阻害剤は、ＴＩＭ３活性を阻害する抗体を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＴＩＭ３阻害剤は、ＳＲ－０２２（Ｔｅｓａｒｏ）、ＬＹ３３２１３６７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、Ｓｙｍ０２３（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）、及びＭＢＧ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）からなる群から選択される。
【0214】
ある特定の実施形態では、提供されるのは、１つ以上のＣＤ７３阻害剤と組み合わせた、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートのいずれかを含む組成物、治療用製剤、及び治療若しくは使用の方法、並びにそのような組み合わせを必要としている対象に投与することを含む治療の方法である。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ７３阻害剤は、ＣＤ７３経路の小分子ブロッカーを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ７３阻害剤は、ＣＤ７３活性を阻害する抗体を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ７３阻害剤は、ＭＥＤＩ９４４７（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＡＢ６８０（Ａｒｃｕｓ）、及びＢＭＳ－９８６１７９（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）からなる群から選択される。
【0215】
ある特定の実施形態では、提供されるのは、１つ以上のＣＤ３９阻害剤と組み合わせた、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートのいずれかを含む組成物、治療用製剤、及び治療若しくは使用の方法、並びにそのような組み合わせを必要としている対象に投与することを含む治療の方法である。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ３９阻害剤は、ＣＤ３９経路の小分子ブロッカーを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ３９阻害剤は、ＣＤ３９活性を阻害する抗体を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤ３９阻害剤は、ＣＰＩ－４４４（Ｃｏｒｖｕｓ）、ＰＢＦ－５０９（パブロビオ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＭＫ－３８１４（Ｍｅｒｃｋ）、及びＡＺＤ４６３５（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）からなる群から選択される。
【0216】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）と組み合わせて使用される抗体コンジュゲートは、ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）（ボルテゾミブ）、ＫＹＰＲＯＬＩＳ（登録商標）（カルフィルゾミブ）、ＮＩＮＬＡＲＯ（登録商標）（イキサゾミブ）と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ＦＡＲＹＤＡＫ（登録商標）（パノビノスタット）と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ＤＡＲＺＡＬＥＸ（登録商標）（ダラツムマブ）と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ＥＭＰＬＩＣＩＴＩ（登録商標）（エロツズマブ）と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ＡＲＥＤＩＡ（登録商標）（パミドロネート）又はＺＯＭＥＴＡ（登録商標）（ゾレンドロン酸）と組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、ＸＧＥＶＡ（登録商標）（デノスマブ）又はＰＲＯＬＩＡ（登録商標）（デノスマブ）と組み合わせて投与される。
【0217】
本明細書に開示される抗体コンジュゲートと組み合わせて投与される薬剤は、抗体コンジュゲートの投与の直前、同時、又は直後に投与することができる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、第１の投与スケジュールで投与され、１つ以上の第２の薬剤は、それら独自の投与スケジュールで投与される。本開示の目的上、そのような投与レジメンは、抗体コンジュゲートが追加の治療的活性成分と「組み合わせて」投与されることが考えられる。実施形態には、本明細書に開示される抗体コンジュゲートが、本明細書に開示される化学療法剤、ＰＤ－１阻害剤、又はＰＤ－Ｌ１阻害剤のうちの１つ以上と一緒に製剤化されている医薬組成物が含まれる。
【0218】
１３．治療用適用
治療目的の場合、本発明の抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）は、当該技術分野において既知であり、また上述した薬学的に許容される投与形態で、哺乳動物、一般的にはヒトに投与される。例えば、抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、ボーラスとして静脈内に投与されるか、一定期間にわたり持続的に点滴するか、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、間接内、腔内、髄腔内、又は腫瘍内経路によって投与することができる。抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）はまた、全身的な治療効果だけではなく、局所的な治療効果を発揮するためには、腫瘍周辺、病巣内、又は病変部近傍の経路により好適に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは静脈内投与され、ＧＳ１、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、例えば、カプセル形態で経口投与される。
治療目的の場合、本発明の抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）は、当該技術分野において既知であり、また上述した薬学的に許容される投与形態で、哺乳動物、一般的にはヒトに投与される。例えば、抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、ボーラスとして静脈内に投与されるか、一定期間にわたり持続的に点滴するか、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、間接内、腔内、髄腔内、又は腫瘍内経路によって投与することができる。抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）はまた、全身的な治療効果だけではなく、局所的な治療効果を発揮するためには、腫瘍周辺、病巣内、又は病変部近傍の経路により好適に投与される。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは静脈内投与され、ＧＳ１、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、例えば、カプセル形態で経口投与される。
【0219】
ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、点滴により少なくとも６０分にわたって投与され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、点滴により少なくとも５０分にわたって投与され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、点滴により少なくとも４０分にわたって投与され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、点滴により少なくとも３０分にわたって投与され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは、点滴により少なくとも２０分にわたって投与され得る。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートは点滴により投与されてもよく、最初の２つの点滴は少なくとも６０分にわたって投与され、後続の点滴は少なくとも３０分にわたって投与される。
【0220】
本明細書に提供される抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤は、ＢＣＭＡが関与するあらゆる疾患又は状態の治療に有用である。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、ＢＣＭＡの過剰発現によって診断され得る疾患又は状態である。いくつかの実施形態では、疾患又は状態とは、抗ＢＣＭＡ抗体及び／又はガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）による治療から利益を得ることができる疾患又は状態である。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、癌である。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、白血病、リンパ腫又は多発性骨髄腫である。
【0221】
任意の好適な癌を、本明細書に提供される抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）の組み合わせを用いて治療することができる。例示的な好適な癌としては、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、副腎皮質癌、肛門癌、虫垂癌、星細胞腫、基底細胞癌、脳腫瘍、胆管癌、膀胱癌、骨癌、乳癌、気管支腫瘍、原発不明癌、心臓腫瘍、頸癌、脊索腫、結腸癌、大腸癌、頭蓋咽頭腫、管状癌、胚性腫瘍、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、嗅神経芽細胞腫、維性組織球腫、ユーイング肉腫、眼癌、胚細胞腫瘍、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質性腫瘍、妊娠性絨毛疾患、神経膠腫、頭頸部癌、肝細胞癌、組織球症、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼内黒色腫、膵島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、口唇及び口腔癌、肝臓癌、非浸潤性小葉癌、肺癌、マクログロブリン血症、悪性線維性組織球腫、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、原発不明転移性扁平頸癌、ＮＵＴ遺伝子関与正中線路癌、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、鼻腔／副鼻腔癌、上咽頭癌、神経芽腫、非小細胞肺癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫症、傍神経節腫、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、胸膜肺胞腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂尿管癌、網膜芽細胞腫、ラブドイド腫瘍、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、脊髄腫瘍、胃癌、Ｔ細胞リンパ腫、テラトイド腫瘍、精巣癌、咽頭癌、胸腺腫及び胸腺癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰癌及びウィルムス腫瘍が挙げられる。
【0222】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）の組み合わせにより治療される疾患は、胃癌、大腸癌、腎細胞癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、子宮癌、子宮内膜癌、前立腺癌、乳癌、頭頸部癌、脳腫瘍、肝癌、膵臓癌、中皮腫及び／又は上皮由来の癌である。特定の実施形態では、疾患は大腸癌である。いくつかの実施形態では、疾患は卵巣癌である。いくつかの実施形態では、疾患は乳癌である。いくつかの実施形態では、疾患は肺癌である。いくつかの実施形態では、疾患は頭頸部癌である。いくつかの実施形態では、疾患は、腎細胞癌である。いくつかの実施形態では、疾患は脳腫瘍である。いくつかの実施形態では、疾患は子宮内膜癌である。
【0223】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体コンジュゲート及びガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）の組み合わせで治療される疾患は、多発性骨髄腫である。具体的な実施形態では、多発性骨髄腫は、国際病期分類又は改訂国際病期分類によるステージＩ、ステージＩＩ又はステージＩＩＩである。ある特定の実施形態では、当該多発性骨髄腫は、新たに診断された多発性骨髄腫である。他の実施形態では、当該多発性骨髄腫は、再発性又は難治性の多発性骨髄腫である。
【0224】
国際病期分類（ＩＳＳ）では、多発性骨髄腫の病期は以下の通りである：ステージＩ：血清β２ミクログロブリンが＜３．５ｍｇ／Ｌ且つ血清アルブミンが≧３．５ｇ／ｄＬ、ステージＩＩ：ステージＩ又はステージＩＩＩではない、ステージＩＩＩ：血清β２ミクログロブリンが≧５．５ｍｇ／Ｌ。改訂国際病期分類（Ｒ－ＩＳＳ）では、多発性骨髄腫の病期は以下の通りである；ステージＩ：ＩＳＳステージＩ及び蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）による標準リスクの染色体異常（すなわち、ハイリスクではない）及び血清乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）値が正常の上限以下；ステージＩＩ：Ｒ－ＩＳＳステージＩ又はＩＩＩではない；ステージＩＩＩ：ＩＳＳステージＩＩＩで、ＦＩＳＨによる高リスクの染色体異常（例えば、ｄｅｌ（１７ｐ）及び／又は転座ｔ（４；１４）及び／又は転座ｔ（１４；１６）の存在）又は血清ＬＤＨ値が正常上限値を超える。
【0225】
多発性骨髄腫は、Ｄｕｒｉｅ－Ｓａｌｍｏｎシステムを使用してステージを分類することもできる。このシステムでは、多発性骨髄腫はステージＩ、ＩＩ又はＩＩＩ（１、２、又は３）に分類される。各ステージは、腎機能への影響の有無により、更にＡ又はＢに分類され、Ｂに分類された場合は、腎機能が著しく低下していることを意味する。ステージＩ：患者に症状は無いが、癌が腎機能に影響を及ぼしている場合は、ステージにかかわらず予後が悪くなる可能性がある。ステージＩに特徴的な要素は、以下の通りである：赤血球数が、正常範囲内であるか、又はわずかに少ない；血液中のカルシウム量が正常である；血液中又は尿中のＭタンパク質のレベルが低い；Ｍタンパク質が、ＩｇＧでは＜５ｇ／ｄＬ；ＩｇＡでは＜３ｇ／ｄＬ；尿中の軽鎖が＜４ｇ／２４時間である；及び／又はＸ線検査で骨の損傷がないか、又は１つの骨病変しか認められない。ステージＩＩ：ステージＩＩでは、体内に多くの癌細胞が存在しており、腎機能に影響が出ている場合は、ステージに関わらず予後が悪化する。ステージＩＩの基準は、ステージＩにもステージＩＩＩにも当てはまらないものと定義されている。ステージＩＩＩ：ステージＩＩＩでは、体内に多くの癌細胞が存在している。このステージに特徴的な要素は以下の通りである：ヘモグロビンが、＜８．５ｇ／ｄＬの貧血；高カルシウム血症；進行した骨損傷（３つ以上の骨病変）；血中又は尿中の高レベルのＭタンパク質；及び／又はＭタンパク質がＩｇＧでは＞７ｇ／ｄＬ；ＩｇＡ＞５ｇ／ｄＬ；尿中軽鎖では＞１２ｇ／２４時間。
【0226】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≧１８歳の年齢のヒト男性又はヒト女性である。
【0227】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、再発性及び難治性疾患の多発性骨髄腫の病歴を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、再発性及び難治性疾患の多発性骨髄腫の病歴を有するヒトであり、再発性及び難治性疾患の多発性骨髄腫は、対象に施された最新の抗骨髄腫療法に非応答性（例えば、最小奏効（ＭＲ）又はそれより良好なものを得ることに失敗）であったか、又は対象が、対象に施された最新の抗骨髄腫療法の最後の投与から６０日以内に、対象が記録された疾患の進行を有している。特定の実施形態では、対象に施された最新の抗骨髄腫療法は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法である。特定の実施形態では、対象に施された最新の骨髄腫療法は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法であり、対象は、ＣＡＲ Ｔ細胞療法に対して非応答性（例えば、最小奏効（ＭＲ）又はそれ以上のものを得ることに失敗）である疾患を有しているか、又は対象は、ＣＡＲ Ｔ細胞注入後に６０日を超えて記録された疾患の進行を有している。
【0228】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、少なくとも１つ、２つ、又は３つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けたヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、３つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けたヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、２つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けたヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、１つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けたヒトである。ある特定の実施形態では、多発性骨髄腫治療レジメンは、少なくとも２つの連続した治療サイクルを含む。例えば、多発性骨髄腫治療レジメンは、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、又は８つの連続した治療サイクルを含んでもよい。いくつかの実施形態では、連続した治療サイクルは同じ治療であってもよく、又は異なる治療であってよい。特定の実施形態では、各治療レジメンは、少なくとも２つの連続した治療サイクルを有する。特定の実施形態では、各治療レジメンは、２つの連続した治療サイクルを有する。特定の実施形態では、各治療レジメンは、２つより少ない連続した治療サイクルを有し、対象は、治療レジメンに対する最良の応答として進行（ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ（ＰＤ））を有していた。特定の実施形態では、造血幹細胞移植を伴うか又は伴わない誘導、及び維持療法を伴うか又は伴わない誘導は、単一のレジメンである。特定の実施形態では、対象は、（１）プロテアソーム阻害剤、（２）免疫調節剤、及び（３）抗ＣＤ３８抗体を以前に受けている。特定の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブである。特定の実施形態では、対象は、再発性及び難治性のＭＭに対する療法に不耐性を有する、及び／又は不耐性であるかで先行治療に失敗している。
【0229】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、少なくとも１つ、２つ、又は３つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けているヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、３つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けているヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、２つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けているヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、１つの先行する多発性骨髄腫治療レジメンを受けているヒトである。特定の実施形態では、造血幹細胞移植を伴うか又は伴わない誘導、及び維持療法を伴うか又は伴わない誘導は、単一のレジメンである。特定の実施形態では、対象は、（１）免疫調節剤、及び／又はプロテアソーム阻害剤、（２）抗ＣＤ３８単剤療法又は抗ＣＤ３８組み合わせレジメン、並びに自家幹細胞移植を以前に受けている。特定の実施形態では、対象は、（１）免疫調節剤、及び／又はプロテアソーム阻害剤（対象は、少なくとも２つの完全な治療サイクルを受けた）、（２）抗ＣＤ３８単剤療法又は抗ＣＤ３８組み合わせレジメン、並びに自家幹細胞移植を以前に受けている。特定の実施形態では、免疫調節剤は、レナリドミド又はポマリドミドである。特定の実施形態では、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、又はイキサゾミブである。特定の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブである。
【0230】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、測定可能な疾患を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、血清タンパク質電気泳動（ｓＰＥＰ）によって決定される≧０．５ｇ／ｄＬのＭタンパク質の量を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、尿タンパク電気泳動（ｕＰＥＰ）によって決定される≧２００ｍｇ／２４時間の採尿を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、＞１００ｍｇ／Ｌの血清ＦＬＣレベル（軽鎖を伴うミリグラム／リットル）及び検出可能な血清又は尿Ｍタンパク質を有さない対象における異常なカッパ／ラムダ（κ／λ）比を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベルを有するヒトであり、対象は、免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有し、骨髄腫は、定量的免疫グロブリン測定によって測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベルを有するヒトであり、対象は、免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有し、骨髄腫は、定量的免疫グロブリン測定によってだけ測定することができる。
【0231】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、連続骨髄穿刺及び／又は生検に同意している。
【0232】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、０～１のＥＣＯＧ ＰＳを有するヒトである。
【0233】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、７日間の増殖因子サポートなしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、１４日間の増殖因子サポートなしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）を有するヒトであり、対象は、ペグフィルグラスチムを投与されている。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、（１）≧７５×１０９／Ｌの血小板数（ｐｌｔ）（対象は、７日間輸血を受けていない）、又は（２）≧５０×１０９／Ｌのｐｌｔ及び≧５０％の骨髄（ＢＭ）形質細胞を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、カリウムが正常範囲内であるか、又は栄養補助食品で補正可能なヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≦２．５倍の正常上限値（ＵＬＮ）のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）を有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≦１．５倍のＵＬＮの血清ビリルビンを有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≦２．０倍のＵＬＮを有するヒトであり、この対象は、ギルバート症候群を有している。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、≦２．０倍のＵＬＮを有するヒトであり、この対象は、ギルバート症候群を有することが記録されている。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、コッククロフト・ゴールト式を使用するか、又は２４時間の採尿法から直接計算された≧６０ｍＬ／分の推算血清クレアチニンクリアランスを有するヒトである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、＜１．５倍のＵＬＮの国際標準比（ＩＮＲ）及び＜１．５倍のＵＬＮの活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）を有するヒトである。
【0234】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）のヒトであり、（１）対象は、子宮摘出術又は両側卵巣摘出術を受けておらず、又は（２）対象は、自然閉経後２４ヶ月を経過していない。更なる実施形態では、女性対象は、異性との性交渉を完全に控えるか、又は少なくとも２つの有効な避妊方法を使用することに同意している。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４の最後の投与後に、最長４２日間にわたって異性との性交渉を完全に控えるか、又は少なくとも２つの有効な避妊方法を使用することに同意している。特定の実施形態では、有効な避妊法は、経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除である。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４を受ける前に、２回の妊娠検査が陰性でなければならない。特定の実施形態では、陰性の妊娠検査は陰性の血清妊娠検査であり、陰性の血清妊娠検査の感度は、少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬであるか、又は治療のサイクル１の１日目の前の７２時間以内、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内の陰性の血清若しくは尿妊娠検査である。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４の最後の投与後４２日間避妊する。更なる実施形態では、女性対象は、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間避妊する。更なる実施形態では、女性対象は、継続する妊娠検査に同意している。
【0235】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、性交渉を完全に控えるか、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドームを使用することを同意したヒト男性である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、コンジュゲート４の中止後少なくとも４２日間、及びＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間にわたって性交渉を完全に控えるか、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドームを使用することを同意したヒト男性である。特定の実施形態では、ヒト男性は、精管切除を受けている。
【0236】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）のヒトであり、（１）対象は、子宮摘出術又は両側卵巣摘出術を受けておらず、又は（２）対象は、自然閉経後２４ヶ月を経過していない。更なる実施形態では、女性対象は、異性との性交渉を完全に控えるか、又は少なくとも２つの有効な避妊方法を使用することに同意している。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４の最後の投与後に、最長２２０日間及びＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後２２０日間にわたって異性との性交渉を完全に控えるか、又は少なくとも２つの有効な避妊方法を使用することに同意している。特定の実施形態では、有効な避妊法は、経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除である。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４を受ける前に、２回の妊娠検査が陰性でなければならない。特定の実施形態では、陰性の妊娠検査は陰性の血清妊娠検査であり、陰性の血清妊娠検査の感度は、少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬであるか、又は治療のサイクル１の１日目の前の７２時間以内、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内の陰性の血清若しくは尿妊娠検査である。更なる実施形態では、女性対象は、コンジュゲート４の最後の投与後２２０日間避妊する。更なる実施形態では、女性対象は、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後２２０日間避妊する。更なる実施形態では、女性対象は、継続する妊娠検査に同意している。
【0237】
上記実施形態のいずれかでは、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、性交渉を完全に控えるか、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドームを使用することを同意したヒト男性である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法に従って癌を治療される対象は、コンジュゲート４の中止後少なくとも１３０日間、及びＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後１３０日間にわたって性交渉を完全に控えるか、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドームを使用することを同意したヒト男性である。特定の実施形態では、ヒト男性は、精管切除を受けている。
【0238】
１４．親和性精製試薬
本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、親和性精製剤として使用することができる。このプロセスにおいて、抗体コンジュゲートは、当該技術分野において周知の方法を用いて、樹脂又は濾紙などの固相に固定化されてもよい。固定化された抗体コンジュゲートを、精製すべきＢＣＭＡタンパク質（又は、その断片）を含有する試料と接触させた後、固定化抗体に結合しているＢＣＭＡタンパク質以外の試料中の物質を、実質的に全て除去する好適な溶媒を用いて支持体を洗浄する。最後に、支持体を、別の好適な溶媒、例えば、抗体からＢＣＭＡタンパク質を放出するグリシン緩衝液（ｐＨ５．０など）で洗浄する。
本明細書に提供される抗体コンジュゲートは、親和性精製剤として使用することができる。このプロセスにおいて、抗体コンジュゲートは、当該技術分野において周知の方法を用いて、樹脂又は濾紙などの固相に固定化されてもよい。固定化された抗体コンジュゲートを、精製すべきＢＣＭＡタンパク質（又は、その断片）を含有する試料と接触させた後、固定化抗体に結合しているＢＣＭＡタンパク質以外の試料中の物質を、実質的に全て除去する好適な溶媒を用いて支持体を洗浄する。最後に、支持体を、別の好適な溶媒、例えば、抗体からＢＣＭＡタンパク質を放出するグリシン緩衝液（ｐＨ５．０など）で洗浄する。
【0239】
１５．キット
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）とガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）との組み合わせは、キットの形態、すなわち、その手順を行うための指示書と共に所定量の試薬がパッケージに組み合わせた形態で提供される。いくつかの実施形態では、手順とは、診断アッセイである。他の実施形態では、手順は、治療手順である。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲート（例えば、コンジュゲート４）とガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）との組み合わせは、キットの形態、すなわち、その手順を行うための指示書と共に所定量の試薬がパッケージに組み合わせた形態で提供される。いくつかの実施形態では、手順とは、診断アッセイである。他の実施形態では、手順は、治療手順である。
【0240】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、有効量の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、例えば、コンジュゲート４と、有効量のＢＭＳ－９８６４０５と、抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書と、を含むキットである。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、別個の容器内の有効量の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、例えば、コンジュゲート４と、有効量のＢＭＳ－９８６４０５と、抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書と、を含むキットである。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、凍結乾燥されている。別の具体的な実施形態では、キットは、凍結乾燥抗体の再構成用の流体を更に含む。いくつかの実施形態では、キットは、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートの再構成のための溶媒を更に含む。
【0241】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、１つ以上の用量の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、例えば、コンジュゲート４と、１つ以上の用量のＢＭＳ－９８６４０５と、抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書と、を含むキットである。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇを含む量で存在する。ある特定の実施形態では、ＢＭＳ－９８６４０５は、約２５ｍｇを含む量で存在する。ある特定の実施形態では、キットは、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とを含む１つ以上の容器を含む。ある特定の実施形態では、抗体コンジュゲートとＢＭＳ－９８６４０５とは、別個の容器に入っている。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるのは、別個の容器内の本明細書に提供される抗体コンジュゲート、例えば、コンジュゲート４と、ＢＭＳ－９８６４０５と、抗体コンジュゲート及びＢＭＳ－９８６４０５の使用説明書と、を含むキットである。具体的な実施形態では、抗体コンジュゲートは、凍結乾燥されている。別の具体的な実施形態では、キットは、凍結乾燥抗体の再構成のための流体を更に含む。いくつかの実施形態では、キットは、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートの再構成のための溶媒を更に含む。
【0242】
１６．医薬組成物
いくつかの実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートは、医薬組成物の形態で提供される。いくつかの実施形態では、ＧＳＩ、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、医薬組成物の形態で提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートとガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）とを含む医薬組成物である。いくつかの実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートとＧＳＩの両方が対象に提供される。
いくつかの実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートは、医薬組成物の形態で提供される。いくつかの実施形態では、ＧＳＩ、例えば、ＢＭＳ－９８６４０５は、医薬組成物の形態で提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートとガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）（例えば、ＢＭＳ－９８６４０５）とを含む医薬組成物である。いくつかの実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体コンジュゲートとＧＳＩの両方が対象に提供される。
【実施例】
【0243】
実施例１
抗ＢＣＭＡ抗体の生成
生成及びファージディスプレイ選択
ファージディスプレイを使用して、最初のヒト抗体のリード物質２１９０－Ｂ０１及び２２１３－Ａ０６を発見した。抗体Ｆａｂライブラリーを、改変した市販ｐ３ファージミドベクター（Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌａｂｓ）においてコドン最適化されたトラスツズマブＦａｂ配列を用いて構築した。簡単に説明すると、ファージミドベクターを、Ｃ末端のｐ３融合タンパク質としてＦａｂ重鎖を発現するように改変し、制御領域（開始コドン、制限酵素部位、ペリプラズムリーダー配列）を、Ｆａｂディスプレイレベルに合わせて最適化した。ライブラリーは、重鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）を標的とする変異導入プライマーを用いた標準的なオーバーラップエクステンションＰＣＲプロトコルを用いて構築した。Ｈｅｃｋｍａｎ ａｎｄ Ｐｅａｓｅ，Ｎａｔ．Ｐｒｏｔｏｃ．，２００７，２：９２４－９３２を参照されたい。ライブラリーは、Ｍ１３－Ｋ０７に感染したＳＳ３２０大腸菌（E.coli）細胞のエレクトロポレーションにより導入した。ライブラリーの選択は、標準的なファージディスプレイプロトコルを用いて行った。Ｒａｊａｎ ＆ Ｓｉｄｈｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２０１２，５０２：３－２３；Ｍａｒｋｓ ＆ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．，２００４，２４８：１６１－７６を参照されたい。複数回の選択工程後、Ｆａｂ重鎖プールを、無細胞発現ベクターに移し、Ｈｉｓ６及びＦＬＡＧタグ付きＩｇＧ１として発現させた。
抗ＢＣＭＡ抗体の生成
生成及びファージディスプレイ選択
ファージディスプレイを使用して、最初のヒト抗体のリード物質２１９０－Ｂ０１及び２２１３－Ａ０６を発見した。抗体Ｆａｂライブラリーを、改変した市販ｐ３ファージミドベクター（Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌａｂｓ）においてコドン最適化されたトラスツズマブＦａｂ配列を用いて構築した。簡単に説明すると、ファージミドベクターを、Ｃ末端のｐ３融合タンパク質としてＦａｂ重鎖を発現するように改変し、制御領域（開始コドン、制限酵素部位、ペリプラズムリーダー配列）を、Ｆａｂディスプレイレベルに合わせて最適化した。ライブラリーは、重鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）を標的とする変異導入プライマーを用いた標準的なオーバーラップエクステンションＰＣＲプロトコルを用いて構築した。Ｈｅｃｋｍａｎ ａｎｄ Ｐｅａｓｅ，Ｎａｔ．Ｐｒｏｔｏｃ．，２００７，２：９２４－９３２を参照されたい。ライブラリーは、Ｍ１３－Ｋ０７に感染したＳＳ３２０大腸菌（E.coli）細胞のエレクトロポレーションにより導入した。ライブラリーの選択は、標準的なファージディスプレイプロトコルを用いて行った。Ｒａｊａｎ ＆ Ｓｉｄｈｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２０１２，５０２：３－２３；Ｍａｒｋｓ ＆ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．，２００４，２４８：１６１－７６を参照されたい。複数回の選択工程後、Ｆａｂ重鎖プールを、無細胞発現ベクターに移し、Ｈｉｓ６及びＦＬＡＧタグ付きＩｇＧ１として発現させた。
【0244】
リボソームディスプレイ選択
リボソームディスプレイを使用して、最初のヒト抗体リード物質２１３７－Ａ０５及び２１３７－Ｃ０７を発見した。またリボソームディスプレイを用いて、２１３７－Ｃ０７、２１３７－Ａ０５、２１９０－Ｂ０１、及び２２１３－Ａ０６を親和成熟させ、特に改良型の誘導体２２６５を生成させた。
リボソームディスプレイを使用して、最初のヒト抗体リード物質２１３７－Ａ０５及び２１３７－Ｃ０７を発見した。またリボソームディスプレイを用いて、２１３７－Ｃ０７、２１３７－Ａ０５、２１９０－Ｂ０１、及び２２１３－Ａ０６を親和成熟させ、特に改良型の誘導体２２６５を生成させた。
【0245】
抗体Ｆａｂライブラリーは、相補性決定領域（ＣＤＲ）を標的とする変異導入プライマーを用いた標準的なオーバーラップエクステンションＰＣＲプロトコルを用いて構築した。Ｈｅｃｋｍａｎ ＆ Ｐｅａｓｅｍ、（上記）を参照されたい。新規抗体の選択は、標準的なリボソームディスプレイプロトコルを用いて行った。Ｈａｎｅｓ ＆ Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９７，９４：４９３７－４９４２を参照されたい。具体的には、Ｆａｂをベースとしたリボソームディスプレイ選択は、公開されているプロトコルに従って実施した。Ｓｔａｆｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．２７：９７－１０９；Ｄｒｅｉｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎ，２０１１，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ６８７：２８３－３０６を参照されたい。複数回の選択後、ＲＴ－ＰＣＲの情報から得たＤＮＡを、標準的な分子生物工学技術を用いて、無細胞発現のために最適化されたベクターにクローニングした。Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ｍＡｂｓ ４：２１７－２２５を参照されたい。全ての構築物は、スクリーニング中の精製及び試験を効率化するために、ＨＩＳ－及びＦＬＡＧ－タグを付けた。
【0246】
例示的な抗体を、表６に報告する。抗体４は、本明細書では「抗体２２６５－Ｆ０２」とも称される。
【0247】
【表6】
【0248】
実施例２
抗体の一次スクリーニング
抗体変異体の一次ＥＬＩＳＡスクリーニング
選択ワークフローで生成した抗体変異体のライブラリーを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に形質転換し、抗生物質（カナマイシン）を添加した寒天プレートで増殖させた。個々のコロニーを、液体ブロス（ＴＢ＋抗生物質カナマイシン）中で増殖させて、ローリングサークル増幅法（ＲＣＡ）によるＤＮＡ増幅のテンプレートとして使用した。次いで、変異体を、記載の通りに、無細胞タンパク質合成反応で発現させた。Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７－２２５を参照されたい。簡単に言うと、無細胞抽出物を、５０μＭのヨードアセトアミドを用いてＲＴ（２０℃）で３０分間処理し、無細胞成分（Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｐｒｇ，２０１５，３：８２３－８３１を参照されたい）、目的のＨＣ変異体の１０％（ｖ／ｖ）ＲＣＡ ＤＮＡテンプレート（約１０μｇ／ｍＬのＤＮＡ）及び２．５μｇ／ｍＬのトラスツズマブＬＣを含有するプレミックスに添加した。６０μＬの細胞不含（ＣＦ）反応物を、シェーカー（６５０ｒｐｍ）上にて３０℃で１２時間、９６ウェルプレート中でインキュベートした。４００～１５００個のコロニーを、様々な選択キャンペーンの予測される変動に応じてスクリーニングした。合成後、各反応を１：２００に希釈し、ＥＬＩＳＡによりヒト又はカニクイザルのＢＣＭＡ－Ｆｃタンパク質との結合を試験した。簡単に言うと、ＢＣＭＡ－Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を、０．１Ｍの炭酸水素塩（ｐＨ８．９）中で３８４ウェルのＭａｘｉｓｏｒｐプレートにコーティングし、ＰＢＳＴ中の１％ＢＳＡでブロッキングした。１：２００で希釈したＣＦ反応から得た抗体を、プレート上でインキュベートして洗浄し、ＨＲＰコンジュゲート抗ヒトＦａｂ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）及びＰｉｅｒｃｅ Ｐｉｃｏ Ｓｕｐｅｒｓｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ基質（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて検出した。
抗体の一次スクリーニング
抗体変異体の一次ＥＬＩＳＡスクリーニング
選択ワークフローで生成した抗体変異体のライブラリーを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に形質転換し、抗生物質（カナマイシン）を添加した寒天プレートで増殖させた。個々のコロニーを、液体ブロス（ＴＢ＋抗生物質カナマイシン）中で増殖させて、ローリングサークル増幅法（ＲＣＡ）によるＤＮＡ増幅のテンプレートとして使用した。次いで、変異体を、記載の通りに、無細胞タンパク質合成反応で発現させた。Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７－２２５を参照されたい。簡単に言うと、無細胞抽出物を、５０μＭのヨードアセトアミドを用いてＲＴ（２０℃）で３０分間処理し、無細胞成分（Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｐｒｇ，２０１５，３：８２３－８３１を参照されたい）、目的のＨＣ変異体の１０％（ｖ／ｖ）ＲＣＡ ＤＮＡテンプレート（約１０μｇ／ｍＬのＤＮＡ）及び２．５μｇ／ｍＬのトラスツズマブＬＣを含有するプレミックスに添加した。６０μＬの細胞不含（ＣＦ）反応物を、シェーカー（６５０ｒｐｍ）上にて３０℃で１２時間、９６ウェルプレート中でインキュベートした。４００～１５００個のコロニーを、様々な選択キャンペーンの予測される変動に応じてスクリーニングした。合成後、各反応を１：２００に希釈し、ＥＬＩＳＡによりヒト又はカニクイザルのＢＣＭＡ－Ｆｃタンパク質との結合を試験した。簡単に言うと、ＢＣＭＡ－Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を、０．１Ｍの炭酸水素塩（ｐＨ８．９）中で３８４ウェルのＭａｘｉｓｏｒｐプレートにコーティングし、ＰＢＳＴ中の１％ＢＳＡでブロッキングした。１：２００で希釈したＣＦ反応から得た抗体を、プレート上でインキュベートして洗浄し、ＨＲＰコンジュゲート抗ヒトＦａｂ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）及びＰｉｅｒｃｅ Ｐｉｃｏ Ｓｕｐｅｒｓｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ基質（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて検出した。
【0249】
ハイスループット細胞結合
小規模（６０μＬ）の無細胞反応で産生した抗体の細胞結合を、迅速に評価するために、ハイスループットの一次スクリーニングを行った。このスクリーニングでは、Ｕ底９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｃａｔ＃６５０２０１）又は平底３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｃａｔ＃７８１２０１）に、４成分を等量ずつ合わせて、最終的に１００μＬ／ウェルとした。これらの成分は以下のものである：１）ＢＣＭＡ発現ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞をアッセイ緩衝液（１×ＰＢＳ＋０．２％ＢＳＡ、無菌濾過）で希釈し、最終濃度５００，０００個細胞／ウェルにしたもの、２）ＢＣＭＡ陰性ＭＯＬＴ－４細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ＃３４５５５）で染色し、アッセイ緩衝液で希釈し、最終濃度５００，０００個細胞／ウェルにしたもの、３）目的の抗体を産生する無細胞反応物をアッセイ緩衝液で１：５０に希釈したもの、及び４）二次抗ヒト抗体（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７ ＡｆｆｉｎｉＰｕｒｅ Ｆ（ａｂ’）２ ロバ抗ヒトＩｇＧ、Ｆｃ特異性；Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃａｔ＃７０９－６０６－０９８）をアッセイ緩衝液で１：１００に希釈したもの。その後、プレートを氷上で１時間インキュベートした。細胞を、５分間、１５００×ｇで回転させてペレット化し、アッセイ緩衝液に再懸濁した。その後、ＦＡＣＳ装置（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩ又はＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて、再懸濁した細胞に対してハイスループットのフローサイトメトリーを行い、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを用いてデータを解析した。抗体結合は、ＮＣＩＨ９２９ ＢＣＭＡ陽性細胞の二次抗体シグナル（目的の抗体との結合によるものと推定される）とＭＯＬＴ－４ ＢＣＭＡ陰性細胞のシグナルとを比較した比率により評価した。
小規模（６０μＬ）の無細胞反応で産生した抗体の細胞結合を、迅速に評価するために、ハイスループットの一次スクリーニングを行った。このスクリーニングでは、Ｕ底９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｃａｔ＃６５０２０１）又は平底３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｃａｔ＃７８１２０１）に、４成分を等量ずつ合わせて、最終的に１００μＬ／ウェルとした。これらの成分は以下のものである：１）ＢＣＭＡ発現ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞をアッセイ緩衝液（１×ＰＢＳ＋０．２％ＢＳＡ、無菌濾過）で希釈し、最終濃度５００，０００個細胞／ウェルにしたもの、２）ＢＣＭＡ陰性ＭＯＬＴ－４細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ＃３４５５５）で染色し、アッセイ緩衝液で希釈し、最終濃度５００，０００個細胞／ウェルにしたもの、３）目的の抗体を産生する無細胞反応物をアッセイ緩衝液で１：５０に希釈したもの、及び４）二次抗ヒト抗体（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７ ＡｆｆｉｎｉＰｕｒｅ Ｆ（ａｂ’）２ ロバ抗ヒトＩｇＧ、Ｆｃ特異性；Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃａｔ＃７０９－６０６－０９８）をアッセイ緩衝液で１：１００に希釈したもの。その後、プレートを氷上で１時間インキュベートした。細胞を、５分間、１５００×ｇで回転させてペレット化し、アッセイ緩衝液に再懸濁した。その後、ＦＡＣＳ装置（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩ又はＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて、再懸濁した細胞に対してハイスループットのフローサイトメトリーを行い、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを用いてデータを解析した。抗体結合は、ＮＣＩＨ９２９ ＢＣＭＡ陽性細胞の二次抗体シグナル（目的の抗体との結合によるものと推定される）とＭＯＬＴ－４ ＢＣＭＡ陰性細胞のシグナルとを比較した比率により評価した。
【0250】
実施例３
抗体の二次スクリーニング
ＩｇＧの調製
初回スクリーニングで得られたトップリード物質を培養し、メーカーの指示書に従ってＱｉａｐｒｅｐ ９６ Ｔｕｒｂｏ ｍｉｎｉｐｒｅｐ キット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いてミニプレップ（ｍｉｎｉｐｒｅｐｐｅｄ）した。７．５μｇ／ｍＬのミニプレップしたＨＣ ＤＮＡと２．５μｇ／ｍＬのトラスツズマブＬＣを４ｍＬの無細胞反応に加え、３０℃、６５０ｒｐｍで一晩１２時間インキュベートした。清澄化した無細胞反応から得た発現した変異体を、半自動化高スループットのバッチ精製法を用いてＩＭＡＣ精製により精製した。簡単に言うと、精製は９６ウェルプレートの形式で行い、５０μＬ／ウェルのＩＭＡＣ樹脂（Ｎｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を、ＩＭＡＣ結合緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８．０）、３００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのイミダゾール）中で平衡化し、１ｍＬの無細胞反応物と１５分間インキュベートした後、ＩＭＡＣ結合緩衝液中で２回洗浄した。その後、２００μＬのＩＭＡＣ溶出緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８．０）、３００ｍＭのＮａＣｌ、５００ｍＭのイミダゾール）を用いてＨｉｓタグ付き抗体変異体を溶出し、９６ウェルのＺｅｂａプレート（７ｋＤ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）を用いてＰＢＳに緩衝液を交換した。精製された抗体を、Ｌａｂｃｈｉｐ ＧＸＩＩ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を用いて、メーカーの指示に従いハーセプチンの標準曲線に対してハイスループットキャピラリー電気泳動を介して定量した。
抗体の二次スクリーニング
ＩｇＧの調製
初回スクリーニングで得られたトップリード物質を培養し、メーカーの指示書に従ってＱｉａｐｒｅｐ ９６ Ｔｕｒｂｏ ｍｉｎｉｐｒｅｐ キット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いてミニプレップ（ｍｉｎｉｐｒｅｐｐｅｄ）した。７．５μｇ／ｍＬのミニプレップしたＨＣ ＤＮＡと２．５μｇ／ｍＬのトラスツズマブＬＣを４ｍＬの無細胞反応に加え、３０℃、６５０ｒｐｍで一晩１２時間インキュベートした。清澄化した無細胞反応から得た発現した変異体を、半自動化高スループットのバッチ精製法を用いてＩＭＡＣ精製により精製した。簡単に言うと、精製は９６ウェルプレートの形式で行い、５０μＬ／ウェルのＩＭＡＣ樹脂（Ｎｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を、ＩＭＡＣ結合緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８．０）、３００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのイミダゾール）中で平衡化し、１ｍＬの無細胞反応物と１５分間インキュベートした後、ＩＭＡＣ結合緩衝液中で２回洗浄した。その後、２００μＬのＩＭＡＣ溶出緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８．０）、３００ｍＭのＮａＣｌ、５００ｍＭのイミダゾール）を用いてＨｉｓタグ付き抗体変異体を溶出し、９６ウェルのＺｅｂａプレート（７ｋＤ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）を用いてＰＢＳに緩衝液を交換した。精製された抗体を、Ｌａｂｃｈｉｐ ＧＸＩＩ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を用いて、メーカーの指示に従いハーセプチンの標準曲線に対してハイスループットキャピラリー電気泳動を介して定量した。
【0251】
ｓｃＦｖの調製
ＶＨドメインとＶＬドメインの間にリンカー配列を有するＶＨＶＬ又はＶＬＶＨのいずれかの配向のいずれかで単鎖抗体を作製する。典型的には、ｓｃＦｖのリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２８）の繰り返しにより構成されており、式中、ｎ＝３、４、５又は６であり、それぞれ１５、２０、２５、又は３０残基のリンカーとなる。無細胞で発現させる場合は、Ｎ末端にＭｅｔを付加するが、哺乳類で発現させる場合はリーダーペプチドを付加する。ｓｃＦｖのＣ末端には、インビボ半減期を延ばすためにＦｃ配列を付加できるが、ｓｃＦｖを直接的に使用することも可能である。ｓｃＦｖとＦｃの間には、任意選択のリンカー配列を組み込むことができる。例示的なｓｃＦｖ－Ｆｃリンカー配列は、ＡＡＧＳＤＱＥＰＫＳＳ（配列番号２７）である。精製及びアッセイ発色を容易にするために、Ｃ末端の親和性タグを適宜追加することができる。例示的な親和性タグは、Ｃ末端ＦｌａｇＨｉｓタグＧＳＧＤＹＫＤＤＤＤＫＧＳＧＨＨＨＨＨＨ（配列番号２５）である。停止コドンは、通常、配列の最後に挿入される。例示的なｓｃＦｖは、Ｎ末端のＭｅｔ残基、ＶＨドメイン、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号２６）リンカー、ＶＬドメイン、ＡＡＧＳＤＱＥＰＫＳＳ（配列番号２７）リンカー、Ｆｃドメイン、ＦｌａｇＨｉｓタグ及び停止コドンを含み得る。
ＶＨドメインとＶＬドメインの間にリンカー配列を有するＶＨＶＬ又はＶＬＶＨのいずれかの配向のいずれかで単鎖抗体を作製する。典型的には、ｓｃＦｖのリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２８）の繰り返しにより構成されており、式中、ｎ＝３、４、５又は６であり、それぞれ１５、２０、２５、又は３０残基のリンカーとなる。無細胞で発現させる場合は、Ｎ末端にＭｅｔを付加するが、哺乳類で発現させる場合はリーダーペプチドを付加する。ｓｃＦｖのＣ末端には、インビボ半減期を延ばすためにＦｃ配列を付加できるが、ｓｃＦｖを直接的に使用することも可能である。ｓｃＦｖとＦｃの間には、任意選択のリンカー配列を組み込むことができる。例示的なｓｃＦｖ－Ｆｃリンカー配列は、ＡＡＧＳＤＱＥＰＫＳＳ（配列番号２７）である。精製及びアッセイ発色を容易にするために、Ｃ末端の親和性タグを適宜追加することができる。例示的な親和性タグは、Ｃ末端ＦｌａｇＨｉｓタグＧＳＧＤＹＫＤＤＤＤＫＧＳＧＨＨＨＨＨＨ（配列番号２５）である。停止コドンは、通常、配列の最後に挿入される。例示的なｓｃＦｖは、Ｎ末端のＭｅｔ残基、ＶＨドメイン、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号２６）リンカー、ＶＬドメイン、ＡＡＧＳＤＱＥＰＫＳＳ（配列番号２７）リンカー、Ｆｃドメイン、ＦｌａｇＨｉｓタグ及び停止コドンを含み得る。
【0252】
示差走査蛍光定量法
タンパク質サーマルシフトアッセイは、アッセイ対象のタンパク質と環境感受性の高い色素（ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃａｔ＃Ｓ－６６５０）を、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で混合し、制御下で熱変性を与えながら混合物の蛍光をリアルタイムでモニターすることにより行った。０．２～２ｍｇ／ｍＬのタンパク質溶液を、ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅの１：５００のＰＢＳ希釈溶液と、１：１の体積比で混合した（ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅのストック色素はＤＭＳＯ中で５０００倍）。タンパク質－染料混合物の１０μＬアリコートを、３８４ウェルマイクロプレート（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｃａｔ＃ＭＳＰ－３８５２）に４回に分けて分注し、光学的に透明なシールフィルム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｃａｔ＃ＭＳＢ－１００１）でプレートを封止し、３８４ウェルプレートのリアルタイムサーモサイクラー（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＣＦＸ３８４ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｓｙｓｔｅｍ）に入れた。タンパク質－染料混合物を、２５℃～９５℃まで、１サイクル当たり０．１℃の増分で加熱して（１分当たり約１．５℃）、各温度で３秒間の平衡化を行った後、蛍光測定を行った。実験の最後に、Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＣＦＸ ｍａｎａｇｅｒソフトウェアを用いて、転移融解温度（ＴＭ１及びＴＭ２）を決定した。ＴＭ１は、Ｆｃドメインの融解温度を表す。ＴＭ２は、Ｆａｂドメインの融解温度を表す。
タンパク質サーマルシフトアッセイは、アッセイ対象のタンパク質と環境感受性の高い色素（ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃａｔ＃Ｓ－６６５０）を、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で混合し、制御下で熱変性を与えながら混合物の蛍光をリアルタイムでモニターすることにより行った。０．２～２ｍｇ／ｍＬのタンパク質溶液を、ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅの１：５００のＰＢＳ希釈溶液と、１：１の体積比で混合した（ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅのストック色素はＤＭＳＯ中で５０００倍）。タンパク質－染料混合物の１０μＬアリコートを、３８４ウェルマイクロプレート（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｃａｔ＃ＭＳＰ－３８５２）に４回に分けて分注し、光学的に透明なシールフィルム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｃａｔ＃ＭＳＢ－１００１）でプレートを封止し、３８４ウェルプレートのリアルタイムサーモサイクラー（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＣＦＸ３８４ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｓｙｓｔｅｍ）に入れた。タンパク質－染料混合物を、２５℃～９５℃まで、１サイクル当たり０．１℃の増分で加熱して（１分当たり約１．５℃）、各温度で３秒間の平衡化を行った後、蛍光測定を行った。実験の最後に、Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＣＦＸ ｍａｎａｇｅｒソフトウェアを用いて、転移融解温度（ＴＭ１及びＴＭ２）を決定した。ＴＭ１は、Ｆｃドメインの融解温度を表す。ＴＭ２は、Ｆａｂドメインの融解温度を表す。
【0253】
ビアコア（Ｂｉａｃｏｒｅ）オフレート及び反応速度分析
抗Ｆａｂ又は抗Ｆｃポリクローナル抗体を、アミンカップリング化学反応（Ａｍｉｎｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｋｉｔ、ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてＣＭ５チップ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に固定化した。固定化工程は、１×ＨＢＳ－ＥＰ＋緩衝液（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ；１０×ストックを使用前に希釈した）で２５μＬ／分の流量にて行った。ＮＨＳ（０．０５Ｍ）及びＥＤＣ（０．２Ｍ）の混合液を用いて、センサー表面を７分間活性化した。抗Ｆａｂ抗体又は抗Ｆｃ抗体を、７分間、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）中に２５μｇ／ｍｌの濃度で、４つのフローセル全てに注入した。エタノールアミン（１Ｍ、ｐＨ８．５）を７分間注入し、残存する活性化基をブロックした。各フローセルに、平均１２，０００応答単位（ＲＵ）の捕捉抗体を固定した。
抗Ｆａｂ又は抗Ｆｃポリクローナル抗体を、アミンカップリング化学反応（Ａｍｉｎｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｋｉｔ、ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてＣＭ５チップ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）に固定化した。固定化工程は、１×ＨＢＳ－ＥＰ＋緩衝液（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ；１０×ストックを使用前に希釈した）で２５μＬ／分の流量にて行った。ＮＨＳ（０．０５Ｍ）及びＥＤＣ（０．２Ｍ）の混合液を用いて、センサー表面を７分間活性化した。抗Ｆａｂ抗体又は抗Ｆｃ抗体を、７分間、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．５）中に２５μｇ／ｍｌの濃度で、４つのフローセル全てに注入した。エタノールアミン（１Ｍ、ｐＨ８．５）を７分間注入し、残存する活性化基をブロックした。各フローセルに、平均１２，０００応答単位（ＲＵ）の捕捉抗体を固定した。
【0254】
オフレート及び反応速度結合実験は、１×ＨＢＳ－ＥＰ＋緩衝液を用いて２５℃で行った。テスト抗体及び対照抗体を、フローセル２、３及び４で、１０μＬ／分の流量で１２秒間、５～１０μｇ／ｍＬの濃度で抗Ｆａｂ又は抗Ｆｃ表面に注入し、その後同じ流量で３０秒間緩衝液洗浄を行った。抗体試料の反応速度特性評価は、１～１００ｎＭの範囲の抗原濃度と、０ｎＭの抗原を１回注入して行った（例えば、１００、５０、２５、６．２５、１．５６、及び０ｎＭなど）。リガンド（抗体）を、抗Ｆａｂ又は抗Ｆｃ表面で捕捉した後、分析物（それぞれ、ヒトＢＣＭＡ－Ｆｃ、カニクイザルＢＣＭＡ－Ｆｃ又はヒトＢＣＭＡ；Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，ｃｕｓｔｏｍ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ、又はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を１８０秒間結合させ、その後５０μＬ／分の流量で６００秒間の解離相を行った。各リガンド捕捉サイクルと分析物の結合サイクルの間に、１０ｍＭグリシン（ｐＨ２．０）を、３０μＬ／分で３０秒間２回注入することで再生を行い、その後３０秒間の緩衝液洗浄工程を行った。
【0255】
データは、ビアコアＴ２００ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを用いて、１－１ Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデルを用いてフィットさせた。ＫＤ（親和性、ｎＭ）は、会合相と解離相のフィットから算出した速度定数の比として決定した。
【0256】
細胞株及び細胞培養条件
ＮＣＩ－Ｈ９２９、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＯＬＴ－４及びＡＲＰ－１は、ＡＴＣＣ及びＫｅａｔｓ Ｌａｂ（Ｔｇｅｎ，Ｐｈｏｅｎｉｘ，ＡＺ）から入手した。２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ及び２９３Ｔ－ラットＢＣＭＡ組換え細胞は、２９３Ｔ細胞をカニクイザル又はラットのＢＣＭＡのｃＤＮＡ配列を含有するプラスミドによりトランスフェクトして、細胞表面にカニクイザルＢＣＭＡ又はラットＢＣＭＡが最も安定して発現しているものを選択することによって生成した。ＮＣＩ－Ｈ９２９、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＯＬＴ－４細胞は、２０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）及び２ｍｍｏｌ／Ｌ－ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を補充したＲＰＭＩ－１６４０（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）にて維持した。２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ及び２９３Ｔ－ラットＢＣＭＡ細胞は、１０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）及び２ｍｍｏｌ／Ｌ－ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を補充したハムのＦ－１２－高グルコースＤＭＥＭ（５０－５０）（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）で維持した。
ＮＣＩ－Ｈ９２９、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＯＬＴ－４及びＡＲＰ－１は、ＡＴＣＣ及びＫｅａｔｓ Ｌａｂ（Ｔｇｅｎ，Ｐｈｏｅｎｉｘ，ＡＺ）から入手した。２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ及び２９３Ｔ－ラットＢＣＭＡ組換え細胞は、２９３Ｔ細胞をカニクイザル又はラットのＢＣＭＡのｃＤＮＡ配列を含有するプラスミドによりトランスフェクトして、細胞表面にカニクイザルＢＣＭＡ又はラットＢＣＭＡが最も安定して発現しているものを選択することによって生成した。ＮＣＩ－Ｈ９２９、Ｕ２６６Ｂ１、ＭＯＬＴ－４細胞は、２０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）及び２ｍｍｏｌ／Ｌ－ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を補充したＲＰＭＩ－１６４０（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）にて維持した。２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ及び２９３Ｔ－ラットＢＣＭＡ細胞は、１０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）及び２ｍｍｏｌ／Ｌ－ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を補充したハムのＦ－１２－高グルコースＤＭＥＭ（５０－５０）（Ｃｅｌｌｇｒｏ－Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ；Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）で維持した。
【0257】
細胞結合実験
二次スクリーニングで十分量のタンパク質として精製された変異体を、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）の細胞結合アッセイにて試験した。ＢＣＭＡ陽性のＮＣＩ－Ｈ９２９細胞、２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ細胞及びＢＣＭＡ陰性の２９３Ｔ細胞を、ＦＡＣＳ結合剤のスクリーニングに使用した。２９３Ｔ細胞は、ＢＣＭＡの流出（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を防ぐため、細胞結合の２４時間前に１μＭのＤＡＰＴで処理した。ＢｉｏＭｅｋＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて、約１００～２００ｎＭの抗体濃度から開始した抗ＢＣＭＡ変異体の６～１２点希釈溶液を、各ウェルに分注した。その後、細胞を、氷上で１時間インキュベートし、ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＢｉｏＭｅｋＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて分注した２．５μｇ／ｍｌのＡｌｅｘａ６４７コンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧを含有する５０ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と共に氷上で１時間インキュベートした。その後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、２％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）を含む２００ｍＬのＰＢＳで１０分間固定した後、蛍光検出を行った。試料は、Ｂｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＬＳＲＩＩ ＦＡＣＳを使用して取得した。ＢＣＭＡ抗体結合の幾何学的平均蛍光強度は、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェア（Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ，Ｉｎｃ）を用いて分析した。
二次スクリーニングで十分量のタンパク質として精製された変異体を、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）の細胞結合アッセイにて試験した。ＢＣＭＡ陽性のＮＣＩ－Ｈ９２９細胞、２９３Ｔ－カニクイザルＢＣＭＡ細胞及びＢＣＭＡ陰性の２９３Ｔ細胞を、ＦＡＣＳ結合剤のスクリーニングに使用した。２９３Ｔ細胞は、ＢＣＭＡの流出（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を防ぐため、細胞結合の２４時間前に１μＭのＤＡＰＴで処理した。ＢｉｏＭｅｋＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて、約１００～２００ｎＭの抗体濃度から開始した抗ＢＣＭＡ変異体の６～１２点希釈溶液を、各ウェルに分注した。その後、細胞を、氷上で１時間インキュベートし、ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＢｉｏＭｅｋＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて分注した２．５μｇ／ｍｌのＡｌｅｘａ６４７コンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧを含有する５０ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と共に氷上で１時間インキュベートした。その後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、２％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）を含む２００ｍＬのＰＢＳで１０分間固定した後、蛍光検出を行った。試料は、Ｂｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＬＳＲＩＩ ＦＡＣＳを使用して取得した。ＢＣＭＡ抗体結合の幾何学的平均蛍光強度は、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェア（Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ，Ｉｎｃ）を用いて分析した。
【0258】
細胞殺傷分析
ＢＣＭＡ陽性細胞に対する細胞殺傷アッセイにおいて、二次抗体にコンジュゲートさせた薬剤により、抗体の内在化を評価した。ＢＣＭＡ陽性細胞株ＡＲＰ－１及びＵ２６６Ｂ１を用いて、内在化リード物質のスクリーニングを行った。細胞は、カルシウム及びマグネシウムを含まないダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）で２回洗浄し、Ａｃｃｕｔａｓｅ（登録商標）（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で採取し、Ｖｉ－ＣＥＬＬ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ）で計測した。アッセイ当日は、２５マイクロリットルの容量で合計１２，５００個の細胞を３８４ウェル平底白色ポリスチレンプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ）に播種した。リード抗体を、細胞培養液に４倍の開始濃度で配合し、ＭｕｌｔｉＳｃｒｅｅｎＨＴＳ ９６－Ｗｅｌｌ Ｆｉｌｔｅｒ Ｐｌａｔｅｓ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ；Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）で濾過した。連続希釈した抗体（１００ｎＭから開始した１：３の連続希釈）（１２．５μＬ）を、処理ウェルに加え、次にコンジュゲートＰ（切断可能なリンカーを介したヘミアステルリン）又はコンジュゲートＭ（非切断可能なリンカーを介したメイタンシノイド）によりコンジュゲートした抗ヒトナノボディ（１２．５μＬ）を、２０ｎＭの固定最終濃度で各ウェルに添加した。アッセイプレートは、ＣＯ２インキュベーター内において３７℃で７２時間培養した後、アッセイを行った。細胞生存率の測定には、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、各ウェルに各々３０μＬ添加し、製品の説明書に従ってプレートを処理した。ＥＮＶＩＳＩＯＮ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて相対的な発光を測定した。対照として未処理の細胞を用い、相対的な発光の測定値を％生存率に変換した。データは、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ ｖ５．０，Ｓｏｆｔｗａｒｅ；Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて、ｌｏｇ（阻害剤）対応答－可変傾斜、４パラメーターフィットを用いた非線形回帰分析にフィッティングさせた。データは、相対的な細胞生存率（ＡＴＰ含量）％対抗体の用量で表した。
ＢＣＭＡ陽性細胞に対する細胞殺傷アッセイにおいて、二次抗体にコンジュゲートさせた薬剤により、抗体の内在化を評価した。ＢＣＭＡ陽性細胞株ＡＲＰ－１及びＵ２６６Ｂ１を用いて、内在化リード物質のスクリーニングを行った。細胞は、カルシウム及びマグネシウムを含まないダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）で２回洗浄し、Ａｃｃｕｔａｓｅ（登録商標）（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で採取し、Ｖｉ－ＣＥＬＬ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ）で計測した。アッセイ当日は、２５マイクロリットルの容量で合計１２，５００個の細胞を３８４ウェル平底白色ポリスチレンプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ，Ｍｏｎｒｏｅ，ＮＣ）に播種した。リード抗体を、細胞培養液に４倍の開始濃度で配合し、ＭｕｌｔｉＳｃｒｅｅｎＨＴＳ ９６－Ｗｅｌｌ Ｆｉｌｔｅｒ Ｐｌａｔｅｓ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ；Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）で濾過した。連続希釈した抗体（１００ｎＭから開始した１：３の連続希釈）（１２．５μＬ）を、処理ウェルに加え、次にコンジュゲートＰ（切断可能なリンカーを介したヘミアステルリン）又はコンジュゲートＭ（非切断可能なリンカーを介したメイタンシノイド）によりコンジュゲートした抗ヒトナノボディ（１２．５μＬ）を、２０ｎＭの固定最終濃度で各ウェルに添加した。アッセイプレートは、ＣＯ２インキュベーター内において３７℃で７２時間培養した後、アッセイを行った。細胞生存率の測定には、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、各ウェルに各々３０μＬ添加し、製品の説明書に従ってプレートを処理した。ＥＮＶＩＳＩＯＮ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ；Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて相対的な発光を測定した。対照として未処理の細胞を用い、相対的な発光の測定値を％生存率に変換した。データは、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ ｖ５．０，Ｓｏｆｔｗａｒｅ；Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて、ｌｏｇ（阻害剤）対応答－可変傾斜、４パラメーターフィットを用いた非線形回帰分析にフィッティングさせた。データは、相対的な細胞生存率（ＡＴＰ含量）％対抗体の用量で表した。
【0259】
実施例４
例示した抗ＢＣＭＡ抗体の特徴
表７Ａ及び７Ｂは、最初のリード物質及び親和成熟後のリボソーム及びファージディスプレイから得た抗体を用いた結果を示す。
例示した抗ＢＣＭＡ抗体の特徴
表７Ａ及び７Ｂは、最初のリード物質及び親和成熟後のリボソーム及びファージディスプレイから得た抗体を用いた結果を示す。
【0260】
【表7】
【0261】
【表8】
【0262】
実施例５
抗体－薬物コンジュゲーション及びＤＡＲ比の決定
抗体－薬物コンジュゲーションは、Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ ＥＳ，ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，２５（２），ｐｐ ３５１－３６１に記載されている。簡単に言うと、精製した抗ＢＣＭＡ抗体変異体を、細胞傷害性薬剤にコンジュゲートさせる。ストック薬物を、ＤＭＳＯに溶解し、最終濃度を５ｍＭとする。この化合物を、ＰＢＳで１ｍＭに希釈した後、最終薬物濃度が１００μＭとなるように、精製したタンパク質の試料に添加した。混合物を、ＲＴ（２０℃）で１７時間インキュベートした。反応試料を、製剤緩衝液で平衡化したＺｅｂａプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の７０００ＭＷＣＯ樹脂に通すことで、取り込まれなかった薬物を除去した。その後、濾液を、ＭＵＳＴＡＮＧ（登録商標）Ｑプレート（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐ．）に通してエンドトキシンを除去した。
抗体－薬物コンジュゲーション及びＤＡＲ比の決定
抗体－薬物コンジュゲーションは、Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ ＥＳ，ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，２５（２），ｐｐ ３５１－３６１に記載されている。簡単に言うと、精製した抗ＢＣＭＡ抗体変異体を、細胞傷害性薬剤にコンジュゲートさせる。ストック薬物を、ＤＭＳＯに溶解し、最終濃度を５ｍＭとする。この化合物を、ＰＢＳで１ｍＭに希釈した後、最終薬物濃度が１００μＭとなるように、精製したタンパク質の試料に添加した。混合物を、ＲＴ（２０℃）で１７時間インキュベートした。反応試料を、製剤緩衝液で平衡化したＺｅｂａプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の７０００ＭＷＣＯ樹脂に通すことで、取り込まれなかった薬物を除去した。その後、濾液を、ＭＵＳＴＡＮＧ（登録商標）Ｑプレート（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐ．）に通してエンドトキシンを除去した。
【0263】
精製の後、精製抗体又は抗体薬物コンジュゲート試料は、同じＰｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓ ＬａｂＣｈｉｐ（Ｃａｌｉｐｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃７６０４９９）により行ったＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）の質量標準と比較することにより、Ｃａｌｉｐｅｒ ＧＸＩＩシステムで定量された。試料は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔ（Ｃａｌｉｐｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃７６０３２８）に記載されているように分析のために調製したが、試料（試料緩衝液＋５０ｍＭのＮＥＭと混合）をＣａｌｉｐｅｒシステムで分析する前に、６５℃で１０分間加熱した以外は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｋｉｔに記載されている通りに製造した。
【0264】
抗体薬物コンジュゲートを、１０ｍＭのＴＣＥＰ（Ｐｉｅｒｃｅ）において３７℃で１０分間還元した。還元した試料に、３０ｕＬのＴＡ３０（３０％のアセトニトリル、７０％の０．１％トリフルオロ酢酸）を添加した。２０ｍｇのｓｕｐｅｒ－ＤＨＢ（Ｓｉｇｍａ、ｐａｒｔ Ｎｏ．５０８６２）を、ＴＡ５０（５０％のアセトニトリル、５０％の０．１％トリフルオロ酢酸）に溶解し、試料マトリックスを生成した。次に、ＴＡ３０の０．５ｕＬの試料を、ＴＡ５０の０．８ｕＬのｓｕｐｅｒ－ＤＨＢマトリックスに添加し、ＭＡＬＤＩ試料プレートに結合させる。スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｕｔｏｆｌｅｘ Ｓｐｅｅｄ ＭＡＬＤＩ装置で以下の初期設定により得た：質量範囲７０００～７００００Ｄａ；試料レート及びデジタイザーの設定は０．０５、０．１、０．５、１、２、リアルタイムスムージングはＨｉｇｈに設定し、ベースラインオフセットは調整しなかった。高電圧をオンにし、イオン源１を２０ｋＶに調整した。２００ｎｓのパルスイオン抽出、偏向時のマトリックス抑制及び最大６０００Ｄａまで抑制する。ピーク検出アルゴリズムは、信号雑音比閾値２０のセントロイド、ピーク幅は１５０ｍ／ｚ、高さは８０％、ベースラインはＴｏｐＨａｔを控除する。スムージングアルゴリズムはＳａｖｔｚｋｙＧｏｌａｙ法であり、幅は１０ｍ／ｚ、サイクルは１０であった。全試料についての薬物－抗体比（ＤＡＲ）は、各コンジュゲートのデコンボリューション後の質量スペクトルの曲線下面積の加重平均として実測した。
【0265】
実施例６
コンジュゲート４の化学特性
コンジュゲート４は、抗体と薬物－リンカーとのコンジュゲートである。コンジュゲート４は、アグリコシル化抗Ｂ細胞成熟抗原（抗ＢＣＭＡ）ヒト化ＩｇＧ１抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であって、ＥＵナンバリングによる公称位置１８０及び４０４（実際の位置１８６及び４１０）の非天然アミノ酸（ｎｎＡＡ）パラアジドメチル－Ｌ－フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）残基を、２０－メチル－１－（３－メチル－３，９－ジヒドロ－８Ｈジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］アゾシン－８－イル）－１，５，２１－トリオキソ－８，１１，１４，１７－テトラオキソ－４，２０－ジアザペンタコサン－２５－オイル（脱アセチル）メイタンシノイド薬物－リンカーに共有結合によりコンジュゲートされた抗ＢＣＭＡ ＩｇＧ１ヒト化抗体（アグリコシル化２２６５－Ｆ０２）から構成される。ＡＤＣであるコンジュゲート４は、薬物対抗体比（ＤＡＲ）が４の単一で優勢なコンジュゲートされた種類（２つのレジオ異性体の約１：１の混合物として存在）である。コンジュゲート４の分子量は、約１５１ｋＤａである。本明細書に記載した方法を使用して調製したコンジュゲート４の試料は、本明細書に記載の方法で測定及び計算したところ、３．９～４のＤＡＲを示した（例えば、実施例６を参照されたい）。
コンジュゲート４の化学特性
コンジュゲート４は、抗体と薬物－リンカーとのコンジュゲートである。コンジュゲート４は、アグリコシル化抗Ｂ細胞成熟抗原（抗ＢＣＭＡ）ヒト化ＩｇＧ１抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であって、ＥＵナンバリングによる公称位置１８０及び４０４（実際の位置１８６及び４１０）の非天然アミノ酸（ｎｎＡＡ）パラアジドメチル－Ｌ－フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）残基を、２０－メチル－１－（３－メチル－３，９－ジヒドロ－８Ｈジベンゾ［ｂ，ｆ］［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］アゾシン－８－イル）－１，５，２１－トリオキソ－８，１１，１４，１７－テトラオキソ－４，２０－ジアザペンタコサン－２５－オイル（脱アセチル）メイタンシノイド薬物－リンカーに共有結合によりコンジュゲートされた抗ＢＣＭＡ ＩｇＧ１ヒト化抗体（アグリコシル化２２６５－Ｆ０２）から構成される。ＡＤＣであるコンジュゲート４は、薬物対抗体比（ＤＡＲ）が４の単一で優勢なコンジュゲートされた種類（２つのレジオ異性体の約１：１の混合物として存在）である。コンジュゲート４の分子量は、約１５１ｋＤａである。本明細書に記載した方法を使用して調製したコンジュゲート４の試料は、本明細書に記載の方法で測定及び計算したところ、３．９～４のＤＡＲを示した（例えば、実施例６を参照されたい）。
【0266】
コンジュゲート４中のジスルフィド結合は、以下の通りである：鎖間（ＬＣ１）：Ｃｙｓ２４－Ｃｙｓ８９；Ｃｙｓ１３５－Ｃｙｓ１９５。鎖間（ＨＣ１）：Ｃｙｓ２３－Ｃｙｓ９７；Ｃｙｓ１５０－Ｃｙｓ２０６；Ｃｙｓ２６７－Ｃｙｓ３２７；Ｃｙｓ３７３－Ｃｙｓ４３１。鎖間（ＨＣ２）：Ｃｙｓ２３－Ｃｙｓ９７；Ｃｙｓ１５０－Ｃｙｓ２０６；Ｃｙｓ２６７－Ｃｙｓ３２７；Ｃｙｓ３７３－Ｃｙｓ４３１。鎖間（ＬＣ２）：Ｃｙｓ２４－Ｃｙｓ８９；Ｃｙｓ１３５－Ｃｙｓ１９５。Ｉｎｔｒａ－ＬＣ１－ＨＣ－１：Ｃｙｓ２１５－Ｃｙｓ２２６。Ｉｎｔｒａ－ＬＣ２－ＨＣ－２：Ｃｙｓ２１５－Ｃｙｓ２２６。Ｉｎｔｒａ－ＨＣ－ＨＣ－Ｈｉｎｇｅ－１：Ｃｙｓ２３２－Ｃｙｓ２３２。Ｉｎｔｒａ－ＨＣ－ＨＣ－Ｈｉｎｇｅ－２：Ｃｙｓ２３５－Ｃｙｓ２３５。
【0267】
実施例７
配列
表８は、本明細書において引用される配列を提供する。
配列
表８は、本明細書において引用される配列を提供する。
【0268】
【表9】
【0269】
【表10】
【0270】
【表11】
【0271】
【表12】
【0272】
【表13】
【0273】
【表14】
【0274】
実施例８
再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法又は組み合わせのオープンラベル、第１相、用量漸増（パートＡ）及び臨床用量拡大（パートＢ）ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験
この実施例は、再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるＢＣＭＡ抗体－薬物コンジュゲートであるコンジュゲート４の第１相多施設、オープンラベル、用量設定試験を概説する。特に、第１相試験は、再発性及び難治性ＭＭを有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５（ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ））との組み合わせの用量漸増（パートＡ）及び用量拡大（パートＢ）、ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験である。この試験の主な目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの安全性及び忍容性を決定すること、並びに（２）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの最大耐用量（ＭＴＤ）、及び／又は第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を明確にすることである。この試験の副次的目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭにおけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの予備的な有効性を評価すること、（２）単剤療法におけるコンジュゲート４及びコンジュゲート４とＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの薬物動態（ＰＫ）を特性化すること、並びに（３）コンジュゲート４の抗薬物抗体（ＡＤＡ）の存在、頻度、及び機能的影響を決定することである。
再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法又は組み合わせのオープンラベル、第１相、用量漸増（パートＡ）及び臨床用量拡大（パートＢ）ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験
この実施例は、再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるＢＣＭＡ抗体－薬物コンジュゲートであるコンジュゲート４の第１相多施設、オープンラベル、用量設定試験を概説する。特に、第１相試験は、再発性及び難治性ＭＭを有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５（ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ））との組み合わせの用量漸増（パートＡ）及び用量拡大（パートＢ）、ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験である。この試験の主な目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの安全性及び忍容性を決定すること、並びに（２）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの最大耐用量（ＭＴＤ）、及び／又は第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を明確にすることである。この試験の副次的目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭにおけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの予備的な有効性を評価すること、（２）単剤療法におけるコンジュゲート４及びコンジュゲート４とＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの薬物動態（ＰＫ）を特性化すること、並びに（３）コンジュゲート４の抗薬物抗体（ＡＤＡ）の存在、頻度、及び機能的影響を決定することである。
【0275】
選択基準
以下の基準を満たす対象が本試験に登録され得る：（１）対象（男性又は女性）は、ＩＣＦに署名する時点で≧１８歳であること；（２）対象は、再発性及び難治性疾患のＭＭの病歴を有し、（ａ）最後の抗骨髄腫療法中に応答しない疾患を有し得る（最小奏効（ＭＲ）以上を得ることに失敗する）か、又は最後の抗骨髄腫療法の最後の投与から６０日以内に疾患の進行が記録されていること、（ｂ）少なくとも３回の先行するＭＭ治療レジメンを受けた可能性があること（各レジメンは、進行（ＰＤ）がレジメンに対する最良の反応でない限り、各レジメンは少なくとも２回の連続する治療サイクルを有し得る（注：造血幹細胞移植の有無にかかわらず、及び維持療法の有無にかかわらず、誘導は、単一のレジメンと見なされる））、（ｃ）プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、及び抗ＣＤ３８抗体（例えば、ダラツムマブ）を受けた可能性があること、並びに（ｄ）再発性及び難治性ＭＭにおいて、臨床的有用性を提供することが知られている全ての確立された療法での治療に失敗したか、又は不寛容であること；（３）対象は、以下のような基準のうちの少なくとも１つを含む測定可能疾患を有し得ること：（ａ）血清タンパク質電気泳動（ｓＰＥＰ）による≧０．５ｇ／ｄＬのＭタンパク質量、又は（ｂ）尿タンパク質電気泳動（ｕＰＥＰ）による≧２００ｍｇ／２４時間の採尿、又は（ｃ）＞１００ｍｇ／Ｌ（軽鎖を伴うミリグラム／リットル）の血清ＦＬＣレベル、及び検出可能な血清若しくは尿Ｍタンパク質を伴わずに患者における異常なカッパ／ラムダ（κ／λ）比、又は（ｄ）免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有する対象については、その疾患は定量的免疫グロブリン測定によってのみ確実に測定でき、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベル；（４）対象が、連続的な骨髄穿刺及び生検に同意していること；（５）対象が、０～１のＥＣＯＧ ＰＳを有していること；（６）対象が、以下の臨床検査値を有し得ること：（ａ）７日間の増殖因子のサポート（ペグフィルグラスチムの場合は１４日間）なしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）、（ｂ）７日間輸血を受けずに、≧７５×１０９／Ｌの血小板数（ｐｌｔ）又はＢＭ形質細胞が≧５０％の場合は、≧５０×１０９／Ｌのｐｌｔ、（ｃ）正常範囲内にあるか、又は栄養補助食品で補正可能なカルシウム、（ｄ）≦２．５倍の正常上限値（ＵＬＮ）のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）、（ｅ）≦１．５倍のＵＬＮの血清ビリルビン（又はギルバート症候群を有していると記録された対象については、≦２．０倍のＵＬＮ）、（ｆ）コッククロフト・ゴールト式を使用するか、又は２４時間の採尿法から直接計算された≧６０ｍＬ／分の推算血清クレアチニンクリアランス、（ｇ）＜１．５倍のＵＬＮの国際標準比（ＩＮＲ）及び＜１．５倍のＵＬＮの活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）；（７）妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）（妊娠可能な女性は、１）子宮摘出術（子宮の外科的切除）又は両側卵巣摘出術（両方の卵巣の外科的切除）を受けていないか、又は２）自然閉経後２４ヶ月を経過していない（例えば、過去２４ヶ月連続する任意の時点で月経があった）性的に成熟した女性である）が、（ａ）異性との性交渉を完全に控える（性交渉を完全に控えることは、対象の好ましい通常のライフスタイルと合致している場合に同意される。［注：周期的禁欲法（例えば、月経周期、排卵、基礎体温、排卵後を考慮した避妊）及びウィズドロアル法は容認できる避妊法ではない］）か、又は少なくとも２つの有効な避妊方法（経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除）を使用することに同意し、且つ遵守することができること（これらのうちの１つは、ＩＣＦに署名することの、試験全体を通して、コンジュゲート４の最後の投与後最大４２日間、障壁になる可能性がある）、並びに（ｂ）コンジュゲート４を開始する前に、２回の妊娠検査が陰性であること。彼女は、試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）。対象は以下の通りに、妊娠検査の結果が陰性であることが確認されるまでＩＰを受けることができない：（ｉ）スクリーニング時に血清妊娠検査が陰性（少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬの感度）、（ｉｉ）試験処置のサイクル１の１日目の前の７２時間以内に、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内に尿妊娠検査が陰性（スクリーニング時の血清妊娠検査は、７２時間前以内に実施されるならば、１日目の試験処置に先行する検査として用いることができることに留意されたい）。各妊娠の可能性のある女性（ＦＣＢＰ）に対して、血清又は尿妊娠検査はまた、試験終了時に実施され得る）；（ｃ）アーム２においては、コンジュゲート４の最後の投与後４２日間避妊し、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間避妊すること、（ｄ）試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る。更なる実施形態では、女性対象は、継続する妊娠検査に同意していること（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）；（８）男性は、彼が精管切除を受けている場合であっても、試験に参加している間、投与中断中、及びコンジュゲート４の中止後少なくとも４２日間、またアーム２では、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間、性交渉を完全に控えるか（１ヶ月単位で検討され得る）で、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドーム（ラテックスコンドームが推奨される）を使用することを同意し、ＩＣＦの署名の障壁となることを避けることができること；（９）対象が、試験中の来院スケジュール及びその他のプロトコル要件を遵守する意欲があり、遵守することが可能であること。
以下の基準を満たす対象が本試験に登録され得る：（１）対象（男性又は女性）は、ＩＣＦに署名する時点で≧１８歳であること；（２）対象は、再発性及び難治性疾患のＭＭの病歴を有し、（ａ）最後の抗骨髄腫療法中に応答しない疾患を有し得る（最小奏効（ＭＲ）以上を得ることに失敗する）か、又は最後の抗骨髄腫療法の最後の投与から６０日以内に疾患の進行が記録されていること、（ｂ）少なくとも３回の先行するＭＭ治療レジメンを受けた可能性があること（各レジメンは、進行（ＰＤ）がレジメンに対する最良の反応でない限り、各レジメンは少なくとも２回の連続する治療サイクルを有し得る（注：造血幹細胞移植の有無にかかわらず、及び維持療法の有無にかかわらず、誘導は、単一のレジメンと見なされる））、（ｃ）プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、及び抗ＣＤ３８抗体（例えば、ダラツムマブ）を受けた可能性があること、並びに（ｄ）再発性及び難治性ＭＭにおいて、臨床的有用性を提供することが知られている全ての確立された療法での治療に失敗したか、又は不寛容であること；（３）対象は、以下のような基準のうちの少なくとも１つを含む測定可能疾患を有し得ること：（ａ）血清タンパク質電気泳動（ｓＰＥＰ）による≧０．５ｇ／ｄＬのＭタンパク質量、又は（ｂ）尿タンパク質電気泳動（ｕＰＥＰ）による≧２００ｍｇ／２４時間の採尿、又は（ｃ）＞１００ｍｇ／Ｌ（軽鎖を伴うミリグラム／リットル）の血清ＦＬＣレベル、及び検出可能な血清若しくは尿Ｍタンパク質を伴わずに患者における異常なカッパ／ラムダ（κ／λ）比、又は（ｄ）免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有する対象については、その疾患は定量的免疫グロブリン測定によってのみ確実に測定でき、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベル；（４）対象が、連続的な骨髄穿刺及び生検に同意していること；（５）対象が、０～１のＥＣＯＧ ＰＳを有していること；（６）対象が、以下の臨床検査値を有し得ること：（ａ）７日間の増殖因子のサポート（ペグフィルグラスチムの場合は１４日間）なしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）、（ｂ）７日間輸血を受けずに、≧７５×１０９／Ｌの血小板数（ｐｌｔ）又はＢＭ形質細胞が≧５０％の場合は、≧５０×１０９／Ｌのｐｌｔ、（ｃ）正常範囲内にあるか、又は栄養補助食品で補正可能なカルシウム、（ｄ）≦２．５倍の正常上限値（ＵＬＮ）のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）、（ｅ）≦１．５倍のＵＬＮの血清ビリルビン（又はギルバート症候群を有していると記録された対象については、≦２．０倍のＵＬＮ）、（ｆ）コッククロフト・ゴールト式を使用するか、又は２４時間の採尿法から直接計算された≧６０ｍＬ／分の推算血清クレアチニンクリアランス、（ｇ）＜１．５倍のＵＬＮの国際標準比（ＩＮＲ）及び＜１．５倍のＵＬＮの活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）；（７）妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）（妊娠可能な女性は、１）子宮摘出術（子宮の外科的切除）又は両側卵巣摘出術（両方の卵巣の外科的切除）を受けていないか、又は２）自然閉経後２４ヶ月を経過していない（例えば、過去２４ヶ月連続する任意の時点で月経があった）性的に成熟した女性である）が、（ａ）異性との性交渉を完全に控える（性交渉を完全に控えることは、対象の好ましい通常のライフスタイルと合致している場合に同意される。［注：周期的禁欲法（例えば、月経周期、排卵、基礎体温、排卵後を考慮した避妊）及びウィズドロアル法は容認できる避妊法ではない］）か、又は少なくとも２つの有効な避妊方法（経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除）を使用することに同意し、且つ遵守することができること（これらのうちの１つは、ＩＣＦに署名することの、試験全体を通して、コンジュゲート４の最後の投与後最大４２日間、障壁になる可能性がある）、並びに（ｂ）コンジュゲート４を開始する前に、２回の妊娠検査が陰性であること。彼女は、試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）。対象は以下の通りに、妊娠検査の結果が陰性であることが確認されるまでＩＰを受けることができない：（ｉ）スクリーニング時に血清妊娠検査が陰性（少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬの感度）、（ｉｉ）試験処置のサイクル１の１日目の前の７２時間以内に、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内に尿妊娠検査が陰性（スクリーニング時の血清妊娠検査は、７２時間前以内に実施されるならば、１日目の試験処置に先行する検査として用いることができることに留意されたい）。各妊娠の可能性のある女性（ＦＣＢＰ）に対して、血清又は尿妊娠検査はまた、試験終了時に実施され得る）；（ｃ）アーム２においては、コンジュゲート４の最後の投与後４２日間避妊し、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間避妊すること、（ｄ）試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る。更なる実施形態では、女性対象は、継続する妊娠検査に同意していること（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）；（８）男性は、彼が精管切除を受けている場合であっても、試験に参加している間、投与中断中、及びコンジュゲート４の中止後少なくとも４２日間、またアーム２では、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間、性交渉を完全に控えるか（１ヶ月単位で検討され得る）で、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドーム（ラテックスコンドームが推奨される）を使用することを同意し、ＩＣＦの署名の障壁となることを避けることができること；（９）対象が、試験中の来院スケジュール及びその他のプロトコル要件を遵守する意欲があり、遵守することが可能であること。
【0276】
試験デザイン
本試験の用量漸増パート（パートＡ）は、ベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ）によってガイドされたコンジュゲート４の最大耐用量（ＭＴＤ）を決定するために、単剤療法で（アーム１）又はＢＭＳ－９８６４０５と組み合わせて（アーム２）ＩＶ投与された漸増用量のコンジュゲート４の安全性及び忍容性を評価する。修正された加速漸増デザインを、アーム１及びアーム２に使用する。ＭＴＤは、Ｑ３Ｗ（３週間毎に１回）及びＱ４Ｗ（４週間毎に１回）で投与されたコンジュゲート４について別々に確立され得る。用量拡大部分（パートＢ）は、第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を決定するために、約８０人の評価可能な対象の選択された用量拡大コホートにおいて、ＭＴＤ以下で投与された単剤療法（アーム１）又は組み合わせ（アーム２）でのコンジュゲート４の安全性及び有効性を更に評価する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、非臨床データ、ＰＫ、ＰＤ、安全性、及び有効性データなどのコンジュゲート４のデータの全体に基づいてＲＰ２Ｄを決定するためにコホート用量拡大のために選択され得る。全ての対象は、ＩＭＷＧ基準に従う確認された疾患の進行、許容できない毒性、又は対象／治験責任医師が中止を決定するまで処置される。パートＡ及びＢは、３つの期間：スクリーニング、処置、及びフォローアップからなる。試験デザインの全体が、図２に示されている。
本試験の用量漸増パート（パートＡ）は、ベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ）によってガイドされたコンジュゲート４の最大耐用量（ＭＴＤ）を決定するために、単剤療法で（アーム１）又はＢＭＳ－９８６４０５と組み合わせて（アーム２）ＩＶ投与された漸増用量のコンジュゲート４の安全性及び忍容性を評価する。修正された加速漸増デザインを、アーム１及びアーム２に使用する。ＭＴＤは、Ｑ３Ｗ（３週間毎に１回）及びＱ４Ｗ（４週間毎に１回）で投与されたコンジュゲート４について別々に確立され得る。用量拡大部分（パートＢ）は、第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を決定するために、約８０人の評価可能な対象の選択された用量拡大コホートにおいて、ＭＴＤ以下で投与された単剤療法（アーム１）又は組み合わせ（アーム２）でのコンジュゲート４の安全性及び有効性を更に評価する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、非臨床データ、ＰＫ、ＰＤ、安全性、及び有効性データなどのコンジュゲート４のデータの全体に基づいてＲＰ２Ｄを決定するためにコホート用量拡大のために選択され得る。全ての対象は、ＩＭＷＧ基準に従う確認された疾患の進行、許容できない毒性、又は対象／治験責任医師が中止を決定するまで処置される。パートＡ及びＢは、３つの期間：スクリーニング、処置、及びフォローアップからなる。試験デザインの全体が、図２に示されている。
【0277】
治療の方法
パートＡのアーム１において、コンジュゲート４の開始用量（コホート１）は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇである。コホート１における初回投与後に、後続の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量で忍容性が認められない場合、より低い用量レベル（すなわち、コホート１、０．３ｍｇ／ｋｇ）又は代替投与間隔（すなわち、Ｑ４Ｗ）が探索されてもよい。最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。最初の２回のコンジュゲート４の輸注は、少なくとも６０分にわたって投与される。前の輸注中に顕著なＩＲＲ又は過敏症がない場合には、次の輸注が３０分かけて投与され得る。
パートＡのアーム１において、コンジュゲート４の開始用量（コホート１）は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇである。コホート１における初回投与後に、後続の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量で忍容性が認められない場合、より低い用量レベル（すなわち、コホート１、０．３ｍｇ／ｋｇ）又は代替投与間隔（すなわち、Ｑ４Ｗ）が探索されてもよい。最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。最初の２回のコンジュゲート４の輸注は、少なくとも６０分にわたって投与される。前の輸注中に顕著なＩＲＲ又は過敏症がない場合には、次の輸注が３０分かけて投与され得る。
【0278】
アーム１用量漸増についての投与コホートが、表９に要約される。
【0279】
【表15】
【0280】
パートＡのアーム２では、コンジュゲート４の開始用量は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇであり、ＢＭＳ－９８６４０５の用量は、２５ｍｇ ＴＩＷ（すなわち、１週間に３回）に固定される。特に、ＢＭＳ－９８６４０５の用量は、２１日のサイクル中毎週ＴＩＷ（例えば、１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、及び１９日目）で経口投与され、１週間以内の各投与の間には４８時間（±１２時間）がある。第１のアーム２コホートにおけるコンジュゲート４の初回投与後に、コンジュゲート４のその後の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量がアーム２で忍容性でない場合、より低いコンジュゲート４の用量レベル／又はコンジュゲート４の代替投与間隔（例えば、Ｑ４Ｗ）が探索され得る。アーム２コホートにおいて、最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。アーム２用量漸増についての投与コホートが、表１０に要約される。
【0281】
【表16】
【0282】
用量漸増中に、投与コホート内の追加の対象を評価するための決定、次に高い用量レベル、中間用量レベル、又はＭＴＤの申告が、所与の用量レベルについてのベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ、以下に記載）推奨、臨床及び実験室安定性データ（ＤＬＴ及び非ＤＬＴ安定性データの両方）、ＰＫ、及びＰＤに基づいて、安全性審査委員会（ＳＲＣ）によって決定される。ＳＲＣは、異なるスケジュール（例えば、Ｑ４Ｗ）を用いて１つ以上の並行用量漸増コホートを試験することを推奨してもよい。代替投与間隔が探索される場合、そのコホートについての開始用量は、忍容性があると決定された用量レベル以下である。更に、ＳＲＣは、ベースライン時の骨髄腫の腫瘍組織量（例えば、骨髄形質細胞のパーセンテージ、ＢＣＭＡ発現、又は他の変数）などの対象に特有の変数に基づいて、用量漸増を２つ以上の並行する用量漸増コホートに分割するように推奨してもよい。
【0283】
用量漸増（パートＡ）の完了後に、再発性及び難治性ＭＭを有する対象の選択されたコホートは、用量拡張相（パートＢ）に登録され得る。用量拡張は、パートＡからの安全性、ＰＫ、及びＰＤデータの検討に基づいて、用量漸増相で確立された用量及びスケジュールを使用する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、ＲＰ２Ｄを決定するために、用量拡張コホートにおいて探索され得る。ＳＲＣは、用量拡張コホートのための目的の用量、スケジュール、治療レジメン、及び／又は再発性及び難治性ＭＭ対象集団を選択する。
【0284】
エンドポイント
応答は、各サイクルの１日目（サイクル２の１日目に開始）及び治療終了時（ＥＯＴ）に、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）が定める多発性骨髄腫の効果判定基準（Ｕｎｉｆｏｒｍ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｒｉｔｅｒｉａ）（Ｋｕｍａｒ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，”Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．，２０１６；１７（８）：ｅ３２８－４６）を使用して治験責任医師によって評価される。
応答は、各サイクルの１日目（サイクル２の１日目に開始）及び治療終了時（ＥＯＴ）に、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）が定める多発性骨髄腫の効果判定基準（Ｕｎｉｆｏｒｍ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｒｉｔｅｒｉａ）（Ｋｕｍａｒ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，”Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．，２０１６；１７（８）：ｅ３２８－４６）を使用して治験責任医師によって評価される。
【0285】
重要な有効性評価には、以下が含まれる：血清中の骨髄腫パラタンパク質（Ｍタンパク質）及び２４時間の採尿；血清免疫グロブリン；血清遊離軽鎖；補正血清カルシウム；骨髄中の形質細胞のパーセント；溶解性骨病変のＸ線撮影評価；髄外形質細胞腫（ＥＭＰ）評価；及び試料が評価可能な場合、ＥｕｒｏＦｌｏｗ及び／又は次世代シーケンシング（ＮＧＳ）による微小残存病変（ＭＲＤ）。
【0286】
分析される他の有効な変数としては、全奏効率（ＯＲＲ）、奏効に至るまでの期間、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、及び全生存期間（ＯＳ）が挙げられる。
【0287】
主な関心事の有効性変数は、最小奏効（ＭＲ）及びＩＭＷＧ基準に従う疾患の進行を含む骨髄腫応答である（Ｋｕｍａｒ，Ｓ ｅｔ ａｌ．，２０１６（上記を参照））。追加の変数が要約されており、これらには奏効に至るまでの期間：治療の開始から応答（部分奏効（ＰＲ）以上）が最初に記録されるまでの時間、及び奏効期間：応答（ＰＲ以上）が最初に記録されてから疾患の進行が最初に記録されるまでの時間が含まれる。無増悪生存期間及びＯＳは、エンドポイントの以前のリストに加えて分析される。有効性変数は、カテゴリー変数の度数分布表又はイベントエンドポイントまでの時間と連続変数の記述統計を使用して要約される。
【0288】
全奏効率（ＯＲＲ）
全奏効率は、ＩＭＷＧ効果判定基準に従って、部分的奏効以上（例えば、ＰＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、完全奏効（ＣＲ）、又は厳格な完全奏効（ｓＣＲ））を達成した対象の比率として定義される。ＯＲＲの分析は、安全性集団及び有効性評価可能な集団に基づいている。以下の応答カテゴリーにおける対象の数及びパーセンテージが提示される：厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、ｓＣＲ＋ＣＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）、全奏効（ｓＣＲ＋ＣＲ＋ＶＧＰＲ＋ＰＲ）、最小奏効（ＭＲ）、全奏効＋ＭＲ（ｓＣＲ、ＣＲ、ＶＧＰＲ、ＰＲ、及びＭＲ）、安定（ＳＤ）、進行（ＰＤ）、及び評価不能（ＮＥ）。各応答カテゴリーについての対応する９０％の正確なＣＩも提供される。
全奏効率は、ＩＭＷＧ効果判定基準に従って、部分的奏効以上（例えば、ＰＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、完全奏効（ＣＲ）、又は厳格な完全奏効（ｓＣＲ））を達成した対象の比率として定義される。ＯＲＲの分析は、安全性集団及び有効性評価可能な集団に基づいている。以下の応答カテゴリーにおける対象の数及びパーセンテージが提示される：厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、ｓＣＲ＋ＣＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）、全奏効（ｓＣＲ＋ＣＲ＋ＶＧＰＲ＋ＰＲ）、最小奏効（ＭＲ）、全奏効＋ＭＲ（ｓＣＲ、ＣＲ、ＶＧＰＲ、ＰＲ、及びＭＲ）、安定（ＳＤ）、進行（ＰＤ）、及び評価不能（ＮＥ）。各応答カテゴリーについての対応する９０％の正確なＣＩも提供される。
【0289】
微小残存病変（ＭＲＤ）の陰性率は、最初の投与後のいずれかの時点でＭＲＤ陰性を有する対象の比率として定義される。ＭＲＤの陰性率は、持続性ＭＲＤ陰性、フローＭＲＤ陰性、シーケンシングＭＲＤ陰性、及びイメージングプラスＭＲＤ陰性を含む異なる方法によって評価されるようなＭＲＤ陰性率は、安全性集団に基づいて報告されている。対応する９０％の正確なＣＩが提供されている。
【0290】
奏効に至るまでの期間
奏効に至るまでの期間は、最初の試験処置投与日から最初の応答（ＰＲ以上）が記録された日付までの時間として定義される。この分析は、応答した対象に限定される。奏効に至るまでの期間は、安全性集団についての記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。
奏効に至るまでの期間は、最初の試験処置投与日から最初の応答（ＰＲ以上）が記録された日付までの時間として定義される。この分析は、応答した対象に限定される。奏効に至るまでの期間は、安全性集団についての記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。
【0291】
奏効期間
奏効期間は、応答（≧ＰＲ）の最も早い日付から疾患進行又は死亡（いずれか早い方）の最初の記録までの時間として定義される。奏効期間は、カプラン・マイヤー推定法を使用して要約される。分析集団は、応答した者に限定される。データカットオフの日付までに進行せず生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。奏効期間はまた、記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。カプラン・マイヤー法を用いて観察及び打ち切られた値の両方に基づいて計算される中央値を除いて、全ての他の統計値（平均値、標準偏差、最小値及び最大値）は、観察された値のみに基づいて計算される。
奏効期間は、応答（≧ＰＲ）の最も早い日付から疾患進行又は死亡（いずれか早い方）の最初の記録までの時間として定義される。奏効期間は、カプラン・マイヤー推定法を使用して要約される。分析集団は、応答した者に限定される。データカットオフの日付までに進行せず生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。奏効期間はまた、記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。カプラン・マイヤー法を用いて観察及び打ち切られた値の両方に基づいて計算される中央値を除いて、全ての他の統計値（平均値、標準偏差、最小値及び最大値）は、観察された値のみに基づいて計算される。
【0292】
無増悪生存期間
無増悪生存期間は、試験処置の最初の投与からＰＤ又は何らかの原因による死亡（いずれか早い方）までの時間として定義される。データカットオフの日付まで進行もなく生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。ＰＦＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
無増悪生存期間は、試験処置の最初の投与からＰＤ又は何らかの原因による死亡（いずれか早い方）までの時間として定義される。データカットオフの日付まで進行もなく生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。ＰＦＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
【0293】
全生存期間
全生存期間は、試験処置の最初の投与から何らかの原因による死亡までの時間として定義される。分析のための臨床カットオフ日になお生存している対象は、生存日最後に打ち切られる。ＯＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
全生存期間は、試験処置の最初の投与から何らかの原因による死亡までの時間として定義される。分析のための臨床カットオフ日になお生存している対象は、生存日最後に打ち切られる。ＯＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
【0294】
表１１は、一次エンドポイント、二次エンドポイント、及び探索的エンドポイントを含む試験エンドポイントを提供する。
【0295】
【表17】
【0296】
【表18】
【0297】
実施例９
再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法又は組み合わせのオープンラベル、第１相、用量漸増（パートＡ）及び臨床用量拡大（パートＢ）ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験
この実施例は、再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるＢＣＭＡ抗体－薬物コンジュゲートであるコンジュゲート４の第１相多施設、オープンラベル、用量設定試験を概説する。特に、第１相試験は、再発性及び難治性ＭＭを有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５（ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ））との組み合わせの用量漸増（パートＡ）及び用量拡大（パートＢ）、ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験である。この試験の主な目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの安全性及び忍容性を決定すること、並びに（２）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの最大耐用量（ＭＴＤ）、及び／又は第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を明確にすることである。この試験の副次的目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭにおけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの予備的な有効性を評価すること、（２）単剤療法におけるコンジュゲート４及びコンジュゲート４とＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの薬物動態（ＰＫ）を特性化すること、並びに（３）コンジュゲート４の抗薬物抗体（ＡＤＡ）の存在、頻度、及び機能的影響を決定することである。
再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法又は組み合わせのオープンラベル、第１相、用量漸増（パートＡ）及び臨床用量拡大（パートＢ）ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験
この実施例は、再発性及び難治性多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象におけるＢＣＭＡ抗体－薬物コンジュゲートであるコンジュゲート４の第１相多施設、オープンラベル、用量設定試験を概説する。特に、第１相試験は、再発性及び難治性ＭＭを有する対象におけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５（ガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ））との組み合わせの用量漸増（パートＡ）及び用量拡大（パートＢ）、ヒト初回投与（ＦＩＨ）臨床試験である。この試験の主な目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの安全性及び忍容性を決定すること、並びに（２）再発性及び難治性ＭＭを有する対象において、コンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの最大耐用量（ＭＴＤ）、及び／又は第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を明確にすることである。この試験の副次的目的は、（１）再発性及び難治性ＭＭにおけるコンジュゲート４の単剤療法及びＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの予備的な有効性を評価すること、（２）単剤療法におけるコンジュゲート４及びコンジュゲート４とＢＭＳ－９８６４０５との組み合わせの薬物動態（ＰＫ）を特性化すること、並びに（３）コンジュゲート４の抗薬物抗体（ＡＤＡ）の存在、頻度、及び機能的影響を決定することである。
【0298】
選択基準
以下の基準を満たす対象が本試験に登録され得る：（１）対象（男性又は女性）は、ＩＣＦに署名する時点で≧１８歳であること；（２）対象は、再発性及び難治性疾患のＭＭの病歴を有し、（ａ）最後の抗骨髄腫療法中に応答しない疾患を有し得る（最小奏効（ＭＲ）以上を得ることに失敗する）か、又は最後の抗骨髄腫療法の最後の投与から６０日以内に疾患の進行が記録されていること（注：最後の骨髄腫療法としてキメラ抗原受容体［ＣＡＲ］Ｔ細胞を受けた疾患進行を記録した対象は、非応答性である疾患を有する（ＭＲ以上を得ることに失敗）か、又はＣＡＲ Ｔ輸注から６０日を超えて疾患進行を記録した対象として登録されることが許容される）並びに（ｂ）少なくとも３回の先行するＭＭ治療レジメンを受けた可能性があること（注：造血幹細胞移植の有無にかかわらず、及び維持療法の有無にかかわらず、誘導は、単一のレジメンと見なされる）（対象は、以下の両方の各々を以前に受けている：（ｉ）免疫調節剤（例えば、レナリドミド、ポマリドミド）及びプロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、イキサゾミブ）を単独で、又は組み合わせて含んだレジメン（対象は、疾患の進行がレジメンに最良の応答でない限り、少なくとも２つの治療の完全なサイクルを受けてもよい）；（ｉｉ）単剤療法で、又は併用レジメンの一部として抗ＣＤ３８（例えば、ダラツムマブ）を含んだレジメン；並びに（ｉｉｉ）対象が不適格でない限り、自家幹細胞移植）；（３）対象は、以下のような基準のうちの少なくとも１つを含む測定可能疾患を有し得ること：（ａ）血清タンパク質電気泳動（ｓＰＥＰ）による≧０．５ｇ／ｄＬのＭタンパク質量、又は（ｂ）尿タンパク質電気泳動（ｕＰＥＰ）による≧２００ｍｇ／２４時間の採尿、又は（ｃ）＞１００ｍｇ／Ｌ（軽鎖を伴うミリグラム／リットル）の血清ＦＬＣレベル、及び検出可能な血清若しくは尿Ｍタンパク質を伴わずに患者における異常なカッパ／ラムダ（κ／λ）比、又は（ｄ）免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有する対象については、その疾患は定量的免疫グロブリン測定によってのみ確実に測定でき、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベル；（４）対象が、連続的な骨髄穿刺及び生検に同意していること；（５）対象が、０～１のＥＣＯＧ ＰＳを有していること；（６）対象が、以下の臨床検査値を有し得ること：（ａ）７日間の増殖因子のサポート（ペグフィルグラスチムの場合は１４日間）なしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）、（ｂ）７日間輸血を受けずに、≧７５×１０９／Ｌの血小板数（ｐｌｔ）又はＢＭ形質細胞が≧５０％の場合は、≧５０×１０９／Ｌのｐｌｔ、（ｃ）正常範囲内にあるか、又は栄養補助食品で補正可能なカルシウム、（ｄ）≦２．５倍の正常上限値（ＵＬＮ）のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）、（ｅ）≦１．５倍のＵＬＮの血清ビリルビン（又はギルバート症候群を有していると記録された対象については、≦２．０倍のＵＬＮ）、（ｆ）コッククロフト・ゴールト式を使用するか、又は２４時間の採尿法から直接計算された≧６０ｍＬ／分の推算血清クレアチニンクリアランス、（ｇ）＜１．５倍のＵＬＮの国際標準比（ＩＮＲ）及び＜１．５倍のＵＬＮの活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）；（７）妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）（妊娠可能な女性は、１）子宮摘出術（子宮の外科的切除）又は両側卵巣摘出術（両方の卵巣の外科的切除）を受けていないか、又は２）自然閉経後２４ヶ月を経過していない（例えば、過去２４ヶ月連続する任意の時点で月経があった）性的に成熟した女性である）が、（ａ）異性との性交渉を完全に控える（性交渉を完全に控えることは、対象の好ましい通常のライフスタイルと合致している場合に同意される。［注：周期的禁欲法（例えば、月経周期、排卵、基礎体温、排卵後を考慮した避妊）及びウィズドロアル法は容認できる避妊法ではない］）か、又は少なくとも２つの有効な避妊方法（経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除）を使用することに同意し、且つ遵守することができること（これらのうちの１つは、ＩＣＦに署名することの、試験全体を通して、コンジュゲート４の最後の投与後最大４２日間、障壁になる可能性がある）、並びに（ｂ）コンジュゲート４を開始する前に、２回の妊娠検査が陰性であること。彼女は、試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）。対象は以下の通りに、妊娠検査の結果が陰性であることが確認されるまでＩＰを受けることができない：（ｉ）スクリーニング時に血清妊娠検査が陰性（少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬの感度）、（ｉｉ）試験処置のサイクル１の１日目の前の７２時間以内に、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内に尿妊娠検査が陰性（スクリーニング時の血清妊娠検査は、７２時間前以内に実施されるならば、１日目の試験処置に先行する検査として用いることができることに留意されたい）。各妊娠の可能性のある女性（ＦＣＢＰ）に対して、血清又は尿妊娠検査はまた、試験終了時に実施され得る）；（ｃ）アーム２においては、コンジュゲート４の最後の投与後４２日間避妊し、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間避妊すること、（ｄ）試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得ること（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）；（８）男性は、彼が精管切除を受けている場合であっても、試験に参加している間、投与中断中、及びコンジュゲート４の中止後少なくとも４２日間、またアーム２では、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間、性交渉を完全に控えるか（１ヶ月単位で検討され得る）で、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドーム（ラテックスコンドームが推奨される）を使用することを同意し、ＩＣＦの署名の障壁となることを避けることができること；（９）対象が、試験中の来院スケジュール及びその他のプロトコル要件を遵守する意欲があり、遵守することが可能であること。
以下の基準を満たす対象が本試験に登録され得る：（１）対象（男性又は女性）は、ＩＣＦに署名する時点で≧１８歳であること；（２）対象は、再発性及び難治性疾患のＭＭの病歴を有し、（ａ）最後の抗骨髄腫療法中に応答しない疾患を有し得る（最小奏効（ＭＲ）以上を得ることに失敗する）か、又は最後の抗骨髄腫療法の最後の投与から６０日以内に疾患の進行が記録されていること（注：最後の骨髄腫療法としてキメラ抗原受容体［ＣＡＲ］Ｔ細胞を受けた疾患進行を記録した対象は、非応答性である疾患を有する（ＭＲ以上を得ることに失敗）か、又はＣＡＲ Ｔ輸注から６０日を超えて疾患進行を記録した対象として登録されることが許容される）並びに（ｂ）少なくとも３回の先行するＭＭ治療レジメンを受けた可能性があること（注：造血幹細胞移植の有無にかかわらず、及び維持療法の有無にかかわらず、誘導は、単一のレジメンと見なされる）（対象は、以下の両方の各々を以前に受けている：（ｉ）免疫調節剤（例えば、レナリドミド、ポマリドミド）及びプロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、イキサゾミブ）を単独で、又は組み合わせて含んだレジメン（対象は、疾患の進行がレジメンに最良の応答でない限り、少なくとも２つの治療の完全なサイクルを受けてもよい）；（ｉｉ）単剤療法で、又は併用レジメンの一部として抗ＣＤ３８（例えば、ダラツムマブ）を含んだレジメン；並びに（ｉｉｉ）対象が不適格でない限り、自家幹細胞移植）；（３）対象は、以下のような基準のうちの少なくとも１つを含む測定可能疾患を有し得ること：（ａ）血清タンパク質電気泳動（ｓＰＥＰ）による≧０．５ｇ／ｄＬのＭタンパク質量、又は（ｂ）尿タンパク質電気泳動（ｕＰＥＰ）による≧２００ｍｇ／２４時間の採尿、又は（ｃ）＞１００ｍｇ／Ｌ（軽鎖を伴うミリグラム／リットル）の血清ＦＬＣレベル、及び検出可能な血清若しくは尿Ｍタンパク質を伴わずに患者における異常なカッパ／ラムダ（κ／λ）比、又は（ｄ）免疫グロブリンクラスＡ（ＩｇＡ）骨髄腫を有する対象については、その疾患は定量的免疫グロブリン測定によってのみ確実に測定でき、≧０．５０ｇ／ｄＬの血清モノクローナルＩｇＡレベル；（４）対象が、連続的な骨髄穿刺及び生検に同意していること；（５）対象が、０～１のＥＣＯＧ ＰＳを有していること；（６）対象が、以下の臨床検査値を有し得ること：（ａ）７日間の増殖因子のサポート（ペグフィルグラスチムの場合は１４日間）なしで、≧１．０×１０９／Ｌの絶対好中球数（ＡＮＣ）、（ｂ）７日間輸血を受けずに、≧７５×１０９／Ｌの血小板数（ｐｌｔ）又はＢＭ形質細胞が≧５０％の場合は、≧５０×１０９／Ｌのｐｌｔ、（ｃ）正常範囲内にあるか、又は栄養補助食品で補正可能なカルシウム、（ｄ）≦２．５倍の正常上限値（ＵＬＮ）のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）、（ｅ）≦１．５倍のＵＬＮの血清ビリルビン（又はギルバート症候群を有していると記録された対象については、≦２．０倍のＵＬＮ）、（ｆ）コッククロフト・ゴールト式を使用するか、又は２４時間の採尿法から直接計算された≧６０ｍＬ／分の推算血清クレアチニンクリアランス、（ｇ）＜１．５倍のＵＬＮの国際標準比（ＩＮＲ）及び＜１．５倍のＵＬＮの活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）；（７）妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）（妊娠可能な女性は、１）子宮摘出術（子宮の外科的切除）又は両側卵巣摘出術（両方の卵巣の外科的切除）を受けていないか、又は２）自然閉経後２４ヶ月を経過していない（例えば、過去２４ヶ月連続する任意の時点で月経があった）性的に成熟した女性である）が、（ａ）異性との性交渉を完全に控える（性交渉を完全に控えることは、対象の好ましい通常のライフスタイルと合致している場合に同意される。［注：周期的禁欲法（例えば、月経周期、排卵、基礎体温、排卵後を考慮した避妊）及びウィズドロアル法は容認できる避妊法ではない］）か、又は少なくとも２つの有効な避妊方法（経口注射可能、又は埋め込み可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊具；殺精子剤を有するバリア避妊薬；又はパートナーの精管切除）を使用することに同意し、且つ遵守することができること（これらのうちの１つは、ＩＣＦに署名することの、試験全体を通して、コンジュゲート４の最後の投与後最大４２日間、障壁になる可能性がある）、並びに（ｂ）コンジュゲート４を開始する前に、２回の妊娠検査が陰性であること。彼女は、試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得る（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）。対象は以下の通りに、妊娠検査の結果が陰性であることが確認されるまでＩＰを受けることができない：（ｉ）スクリーニング時に血清妊娠検査が陰性（少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬの感度）、（ｉｉ）試験処置のサイクル１の１日目の前の７２時間以内に、及び治療のその後の毎回のサイクルの１日目の前の７２時間以内に尿妊娠検査が陰性（スクリーニング時の血清妊娠検査は、７２時間前以内に実施されるならば、１日目の試験処置に先行する検査として用いることができることに留意されたい）。各妊娠の可能性のある女性（ＦＣＢＰ）に対して、血清又は尿妊娠検査はまた、試験終了時に実施され得る）；（ｃ）アーム２においては、コンジュゲート４の最後の投与後４２日間避妊し、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間避妊すること、（ｄ）試験の過程中、及び試験処置の終了後に継続する妊娠検査に同意し得ること（これは、対象が異性との性交渉を完全に控えている場合であっても適用する）；（８）男性は、彼が精管切除を受けている場合であっても、試験に参加している間、投与中断中、及びコンジュゲート４の中止後少なくとも４２日間、またアーム２では、ＢＭＳ－９８６４０５の最後の投与後３ヶ月間、性交渉を完全に控えるか（１ヶ月単位で検討され得る）で、又は妊婦若しくはＦＣＢＰとの性交渉の際にコンドーム（ラテックスコンドームが推奨される）を使用することを同意し、ＩＣＦの署名の障壁となることを避けることができること；（９）対象が、試験中の来院スケジュール及びその他のプロトコル要件を遵守する意欲があり、遵守することが可能であること。
【0299】
試験デザイン
本試験の用量漸増パート（パートＡ）は、ベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ）によってガイドされたコンジュゲート４の最大耐用量（ＭＴＤ）を決定するために、単剤療法で（アーム１）又はＢＭＳ－９８６４０５と組み合わせて（アーム２）ＩＶ投与された漸増用量のコンジュゲート４の安全性及び忍容性を評価する。修正された加速漸増デザインを、アーム１及びアーム２に使用する。ＭＴＤは、Ｑ３Ｗ及びＱ４Ｗで投与されたコンジュゲート４について別々に確立され得る。用量拡大部分（パートＢ）は、第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を決定するために、約８０人の評価可能な対象の選択された用量拡大コホートにおいて、ＭＴＤ以下で投与された単剤療法（アーム１）又は組み合わせ（アーム２）でのコンジュゲート４の安全性及び有効性を更に評価する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、非臨床データ、ＰＫ、ＰＤ、安全性、及び有効性データなどのコンジュゲート４のデータの全体に基づいてＲＰ２Ｄを決定するためにコホート用量拡大のために選択され得る。全ての対象は、ＩＭＷＧ基準に従う確認された疾患の進行、許容できない毒性、又は対象／治験責任医師が中止を決定するまで処置される。パートＡ及びＢは、３つの期間：スクリーニング、処置、及びフォローアップからなる。試験デザインの全体が、図２に示されている。
本試験の用量漸増パート（パートＡ）は、ベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ）によってガイドされたコンジュゲート４の最大耐用量（ＭＴＤ）を決定するために、単剤療法で（アーム１）又はＢＭＳ－９８６４０５と組み合わせて（アーム２）ＩＶ投与された漸増用量のコンジュゲート４の安全性及び忍容性を評価する。修正された加速漸増デザインを、アーム１及びアーム２に使用する。ＭＴＤは、Ｑ３Ｗ及びＱ４Ｗで投与されたコンジュゲート４について別々に確立され得る。用量拡大部分（パートＢ）は、第２相推奨用量（ＲＰ２Ｄ）を決定するために、約８０人の評価可能な対象の選択された用量拡大コホートにおいて、ＭＴＤ以下で投与された単剤療法（アーム１）又は組み合わせ（アーム２）でのコンジュゲート４の安全性及び有効性を更に評価する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、非臨床データ、ＰＫ、ＰＤ、安全性、及び有効性データなどのコンジュゲート４のデータの全体に基づいてＲＰ２Ｄを決定するためにコホート用量拡大のために選択され得る。全ての対象は、ＩＭＷＧ基準に従う確認された疾患の進行、許容できない毒性、又は対象／治験責任医師が中止を決定するまで処置される。パートＡ及びＢは、３つの期間：スクリーニング、処置、及びフォローアップからなる。試験デザインの全体が、図２に示されている。
【0300】
治療の方法
パートＡのアーム１において、コンジュゲート４の開始用量（コホート１）は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇである。コホート１における初回投与後に、後続の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量で忍容性が認められない場合、より低い用量レベル（すなわち、コホート１、０．３ｍｇ／ｋｇ）又は代替投与間隔（すなわち、Ｑ４Ｗ）が探索されてもよい。最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。最初の２回のコンジュゲート４の輸注は、少なくとも６０分にわたって投与される。前の輸注中に顕著なＩＲＲ又は過敏症がない場合には、次の輸注が３０分かけて投与され得る。
パートＡのアーム１において、コンジュゲート４の開始用量（コホート１）は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇである。コホート１における初回投与後に、後続の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量で忍容性が認められない場合、より低い用量レベル（すなわち、コホート１、０．３ｍｇ／ｋｇ）又は代替投与間隔（すなわち、Ｑ４Ｗ）が探索されてもよい。最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。最初の２回のコンジュゲート４の輸注は、少なくとも６０分にわたって投与される。前の輸注中に顕著なＩＲＲ又は過敏症がない場合には、次の輸注が３０分かけて投与され得る。
【0301】
アーム１用量漸増についての投与コホートが、表１２に要約される。
【0302】
【表19】
【0303】
パートＡのアーム２では、コンジュゲート４の開始用量は、対象当たり０．６ｍｇ／ｋｇであり、ＢＭＳ－９８６４０５の用量は、２５ｍｇ ＴＩＷ（すなわち、１週間に３回）に固定される。特に、ＢＭＳ－９８６４０５の用量は、２１日のサイクル中毎週ＴＩＷ（例えば、１日目、３日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、及び１９日目）で経口投与され、１週間以内の各投与の間には４８時間（±１２時間）がある。第１のアーム２コホートにおけるコンジュゲート４の初回投与後に、コンジュゲート４のその後の用量がＱ３Ｗで与えられる。コンジュゲート４の開始用量がアーム２で忍容性でない場合、より低いコンジュゲート４の用量レベル／又はコンジュゲート４の代替投与間隔（例えば、Ｑ４Ｗ）が探索され得る。アーム２コホートにおいて、最初の２回の用量漸増増分はおよそ２倍であり、２．０ｍｇ／ｋｇの投与レベルを超えると、用量の増加は５０％以下になる。アーム２用量漸増についての投与コホートが、表１３に要約される。
【0304】
【表20】
【0305】
用量漸増中に、投与コホート内の追加の対象を評価するための決定、次に高い用量レベル、中間用量レベル、又はＭＴＤの申告が、所与の用量レベルについてのベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ、以下に記載）推奨、臨床及び実験室安定性データ（ＤＬＴ及び非ＤＬＴ安定性データの両方）、ＰＫ、及びＰＤに基づいて、安全性審査委員会（ＳＲＣ）によって決定される。ＳＲＣは、異なるスケジュール（例えば、Ｑ４Ｗ）を用いて１つ以上の並行用量漸増コホートを試験することを推奨してもよい。代替投与間隔が探索される場合、そのコホートについての開始用量は、忍容性があると決定された用量レベル以下である。更に、ＳＲＣは、ベースライン時の骨髄腫の腫瘍組織量（例えば、骨髄形質細胞のパーセンテージ、ＢＣＭＡ発現、又は他の変数）などの対象に特有の変数に基づいて、用量漸増を２つ以上の並行する用量漸増コホートに分割するように推奨してもよい。
【0306】
用量漸増（パートＡ）の完了後に、再発性及び難治性ＭＭを有する対象の選択されたコホートは、用量拡張相（パートＢ）に登録され得る。用量拡張は、パートＡからの安全性、ＰＫ、及びＰＤデータの検討に基づいて、用量漸増相で確立された用量及びスケジュールを使用する。１つ以上の用量及び投与レジメンは、ＲＰ２Ｄを決定するために、用量拡張コホートにおいて探索され得る。ＳＲＣは、用量拡張コホートのための目的の用量、スケジュール、治療レジメン、及び／又は再発性及び難治性ＭＭ対象集団を選択する。
【0307】
エンドポイント
応答は、各サイクルの１日目（サイクル２の１日目に開始）及び治療終了時（ＥＯＴ）に、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）が定める多発性骨髄腫の効果判定基準（Ｋｕｍａｒ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，”Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．，２０１６；１７（８）：ｅ３２８－４６）を使用して治験責任医師によって評価される。
応答は、各サイクルの１日目（サイクル２の１日目に開始）及び治療終了時（ＥＯＴ）に、国際骨髄腫ワーキンググループ（ＩＭＷＧ）が定める多発性骨髄腫の効果判定基準（Ｋｕｍａｒ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ，”Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．，２０１６；１７（８）：ｅ３２８－４６）を使用して治験責任医師によって評価される。
【0308】
重要な有効性評価には、以下が含まれる：血清中の骨髄腫パラタンパク質（Ｍタンパク質）及び２４時間の採尿；血清免疫グロブリン；血清遊離軽鎖；補正血清カルシウム；骨髄中の形質細胞のパーセント；溶解性骨病変のＸ線撮影評価；髄外形質細胞腫（ＥＭＰ）評価；及び試料が評価可能な場合、ＥｕｒｏＦｌｏｗ及び／又は次世代シーケンシング（ＮＧＳ）による微小残存病変（ＭＲＤ）。
【0309】
分析される他の有効な変数としては、全奏効率（ＯＲＲ）、奏効に至るまでの期間、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、及び全生存期間（ＯＳ）が挙げられる。
【0310】
主な関心事の有効性変数は、最小奏効（ＭＲ）及びＩＭＷＧ基準に従う疾患の進行を含む骨髄腫応答である（Ｋｕｍａｒ，Ｓ ｅｔ ａｌ．，２０１６（上記を参照））。追加の変数が要約されており、これらには奏効に至るまでの期間：治療の開始から応答（部分奏効（ＰＲ）以上）が最初に記録されるまでの時間、及び奏効期間：応答（ＰＲ以上）が最初に記録されてから疾患の進行が最初に記録されるまでの時間が含まれる。無増悪生存期間及びＯＳは、エンドポイントの以前のリストに加えて分析される。有効性変数は、カテゴリー変数の度数分布表又はイベントエンドポイントまでの時間と連続変数の記述統計を使用して要約される。
【0311】
全奏効率（ＯＲＲ）
全奏効率は、ＩＭＷＧ効果判定基準に従って、部分的奏効以上（例えば、ＰＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、完全奏効（ＣＲ）、又は厳格な完全奏効（ｓＣＲ））を達成した対象の比率として定義される。ＯＲＲの分析は、安全性集団及び有効性評価可能な集団に基づいている。以下の応答カテゴリーにおける対象の数及びパーセンテージが提示される：厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、ｓＣＲ＋ＣＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）、全奏効（ｓＣＲ＋ＣＲ＋ＶＧＰＲ＋ＰＲ）、最小奏効（ＭＲ）、全奏効＋ＭＲ（ｓＣＲ、ＣＲ、ＶＧＰＲ、ＰＲ、及びＭＲ）、安定（ＳＤ）、進行（ＰＤ）、及び評価不能（ＮＥ）。各応答カテゴリーについての対応する９０％の正確なＣＩも提供される。
全奏効率は、ＩＭＷＧ効果判定基準に従って、部分的奏効以上（例えば、ＰＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、完全奏効（ＣＲ）、又は厳格な完全奏効（ｓＣＲ））を達成した対象の比率として定義される。ＯＲＲの分析は、安全性集団及び有効性評価可能な集団に基づいている。以下の応答カテゴリーにおける対象の数及びパーセンテージが提示される：厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、ｓＣＲ＋ＣＲ、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）、全奏効（ｓＣＲ＋ＣＲ＋ＶＧＰＲ＋ＰＲ）、最小奏効（ＭＲ）、全奏効＋ＭＲ（ｓＣＲ、ＣＲ、ＶＧＰＲ、ＰＲ、及びＭＲ）、安定（ＳＤ）、進行（ＰＤ）、及び評価不能（ＮＥ）。各応答カテゴリーについての対応する９０％の正確なＣＩも提供される。
【0312】
微小残存病変（ＭＲＤ）の陰性率は、最初の投与後のいずれかの時点でＭＲＤ陰性を有する対象の比率として定義される。ＭＲＤの陰性率は、持続性ＭＲＤ陰性、フローＭＲＤ陰性、シーケンシングＭＲＤ陰性、及びイメージングプラスＭＲＤ陰性を含む異なる方法によって評価されるようなＭＲＤ陰性率は、安全性集団に基づいて報告されている。対応する９０％の正確なＣＩが提供されている。
【0313】
奏効に至るまでの期間
奏効に至るまでの期間は、最初の試験処置投与日から最初の応答（ＰＲ以上）が記録された日付までの時間として定義される。この分析は、応答した対象に限定される。奏効に至るまでの期間は、安全性集団についての記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。
奏効に至るまでの期間は、最初の試験処置投与日から最初の応答（ＰＲ以上）が記録された日付までの時間として定義される。この分析は、応答した対象に限定される。奏効に至るまでの期間は、安全性集団についての記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。
【0314】
奏効期間
奏効期間は、応答（≧ＰＲ）の最も早い日付から疾患進行又は死亡（いずれか早い方）の最初の記録までの時間として定義される。奏効期間は、カプラン・マイヤー推定法を使用して要約される。分析集団は、応答した者に限定される。データカットオフの日付までに進行せず生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。奏効期間はまた、記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。カプラン・マイヤー法を用いて観察及び打ち切られた値の両方に基づいて計算される中央値を除いて、全ての他の統計値（平均値、標準偏差、最小値及び最大値）は、観察された値のみに基づいて計算される。
奏効期間は、応答（≧ＰＲ）の最も早い日付から疾患進行又は死亡（いずれか早い方）の最初の記録までの時間として定義される。奏効期間は、カプラン・マイヤー推定法を使用して要約される。分析集団は、応答した者に限定される。データカットオフの日付までに進行せず生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。奏効期間はまた、記述統計（平均値、標準偏差、中央値、最小値及び最大値）を用いて要約される。カプラン・マイヤー法を用いて観察及び打ち切られた値の両方に基づいて計算される中央値を除いて、全ての他の統計値（平均値、標準偏差、最小値及び最大値）は、観察された値のみに基づいて計算される。
【0315】
無増悪生存期間
無増悪生存期間は、試験処置の最初の投与からＰＤ又は何らかの原因による死亡（いずれか早い方）までの時間として定義される。データカットオフの日付まで進行もなく生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。ＰＦＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
無増悪生存期間は、試験処置の最初の投与からＰＤ又は何らかの原因による死亡（いずれか早い方）までの時間として定義される。データカットオフの日付まで進行もなく生存していた対象は、最後の適切な腫瘍評価の日に打ち切られる。ＰＦＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
【0316】
全生存期間
全生存期間は、試験処置の最初の投与から何らかの原因による死亡までの時間として定義される。分析のための臨床カットオフ日になお生存している対象は、生存日最後に打ち切られる。ＯＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
全生存期間は、試験処置の最初の投与から何らかの原因による死亡までの時間として定義される。分析のための臨床カットオフ日になお生存している対象は、生存日最後に打ち切られる。ＯＳは、安全性集団についてのカプラン・マイヤー法を用いて要約される。
【0317】
表１４は、一次エンドポイント、二次エンドポイント、及び探索的エンドポイントを含む試験エンドポイントを提供する。
【0318】
【表21】
【0319】
【表22】
【0320】
均等物
上に記載される開示は、独立した有用性を持つ複数の異なる発明を包含する場合がある。これらの発明の各々は、その好ましい形態にて開示されているが、様々な変形が可能であるため、本明細書に開示及び図示されたそれらの特異的な実施形態は、限定的な意味として理解されるべきではない。本発明の主題は、本明細書に開示された様々な要素、特徴、機能及び／又は特性の全ての新規及び自明でない組み合わせ、及びサブコンビネーションを含むものである。以下の特許請求の範囲は、特に、新規且つ自明でないと見なされるある特定の組み合わせ及びサブコンビネーションを意図している。特徴、機能、要素、及び／又は特性の他の組み合わせ及びサブコンビネーションにおいて具体化された発明は、本願、本願の優先権主張出願又は関連出願の権利を求め得る。このような請求は、異なる発明又は同じ発明を対象としているかどうか、及び元の請求と比較して範囲が広いか、狭いか、同等か、又は異なるかにかかわらず、本開示の発明の主題に含まれるものと見なされる。
上に記載される開示は、独立した有用性を持つ複数の異なる発明を包含する場合がある。これらの発明の各々は、その好ましい形態にて開示されているが、様々な変形が可能であるため、本明細書に開示及び図示されたそれらの特異的な実施形態は、限定的な意味として理解されるべきではない。本発明の主題は、本明細書に開示された様々な要素、特徴、機能及び／又は特性の全ての新規及び自明でない組み合わせ、及びサブコンビネーションを含むものである。以下の特許請求の範囲は、特に、新規且つ自明でないと見なされるある特定の組み合わせ及びサブコンビネーションを意図している。特徴、機能、要素、及び／又は特性の他の組み合わせ及びサブコンビネーションにおいて具体化された発明は、本願、本願の優先権主張出願又は関連出願の権利を求め得る。このような請求は、異なる発明又は同じ発明を対象としているかどうか、及び元の請求と比較して範囲が広いか、狭いか、同等か、又は異なるかにかかわらず、本開示の発明の主題に含まれるものと見なされる。
【0321】
本明細書又は図に記載された任意の実施形態から、１つ以上の特徴は、本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書又は図に記載された任意の他の実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせることができる。
【0322】
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願は、あたかも個々の刊行物又は特許出願が参照により組み込まれることが具体的且つ個別に示されているものとして、参照により本明細書に組み込まれる。前述の発明は、理解を明確にする目的で、図示及び実施例により、ある程度詳細に説明されているが、添付の特許請求の範囲の精神又は範囲から逸脱することなく、ある特定の変更及び修正がなされ得ることは、本発明の教示に照らして当業者には容易に明らかであろう。
【図1】
【図2】
【配列表】
【国際調査報告】