知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ シュピーンゴテック ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングの特許一覧
特表2024-519321重篤患者におけるコルチコステロイドの療法層別化のための成熟アドレノメデュリン
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-05-10
(54)【発明の名称】重篤患者におけるコルチコステロイドの療法層別化のための成熟アドレノメデュリン
(51)【国際特許分類】
G01N 33/68 20060101AFI20240501BHJP
G01N 33/53 20060101ALI20240501BHJP
A61K 31/57 20060101ALI20240501BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240501BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20240501BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20240501BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20240501BHJP
【ＦＩ】
G01N33/68
G01N33/53 D
A61K31/57
A61P11/00
A61P31/00
A61P31/14
A61P31/04
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023568556
(86)(22)【出願日】2022-05-06
(85)【翻訳文提出日】2023-12-25
(86)【国際出願番号】 EP2022062322
(87)【国際公開番号】W WO2022234111
(87)【国際公開日】2022-11-10
(31)【優先権主張番号】21172844.9
(32)【優先日】2021-05-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】21201767.7
(32)【優先日】2021-10-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
２．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】514122524
【氏名又は名称】シュピーンゴテック ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(74)【代理人】
【識別番号】100170852
【弁理士】
【氏名又は名称】白樫 依子
(72)【発明者】
【氏名】デボラー ベルクマン
(72)【発明者】
【氏名】フロリアン ウーレ
【テーマコード（参考）】
2G045
4C086
【Ｆターム（参考）】
2G045AA25
2G045CA11
2G045CA12
2G045CA17
2G045CA24
2G045CA25
2G045CA26
2G045DA04
2G045DA20
2G045DA36
2G045DA38
2G045DA42
2G045DA51
4C086AA01
4C086AA02
4C086DA10
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA20
4C086ZA59
4C086ZB33
4C086ZB35
(57)【要約】
本発明の主題は、コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法である。本発明の主題はまた、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法であって、該患者の体液試料を提供することと、該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することとを含み、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、●前記患者の体液試料を提供することと、
●前記試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
●前記ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
前記ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法又はコルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法。
【請求項2】
前記閾値を上回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が採用され、前記閾値を下回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が保留される、請求項１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項3】
前記重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、請求項１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項4】
前記ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、前記体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、請求項１及び３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項5】
前記捕捉結合剤が、ＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端部分（配列番号９）に特異的に結合し、前記捕捉結合剤が、結合のためにＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端アミドを特異的に必要とする、請求項４に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項6】
前記捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、請求項４及び５に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項7】
前記患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、請求項１～６に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項8】
前記グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、請求項７に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項9】
前記ミネラルコルチコイドが、フルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、請求項７に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項10】
前記コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、請求項３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項11】
前記体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、請求項１～１０に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項12】
前記ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは前記閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、請求項１～１１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項13】
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、請求項１～１２に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項14】
前記更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ＤＰＰ３、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、請求項１～１３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
【請求項15】
重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、前記患者は、前記患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、前記ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較した場合に、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片の前記所定の閾値を上回る値であるか、又は先に測定されたレベルを上回る値であることを特徴とし、前記重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、
コルチコステロイド。
【請求項16】
重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、前記患者は、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが前記患者の体液試料において決定され、前記ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較され、前記閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法が採用されることを特徴とし、前記重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、
コルチコステロイド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明の主題は、コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法である。本発明の主題はまた、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法であって、該患者の体液試料を提供することと、該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することとを含み、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
【0002】
本発明の主題は更に、重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、
●該患者の体液試料を提供することと、
●該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
●該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法又はコルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
●該患者の体液試料を提供することと、
●該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
●該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法又はコルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
【背景技術】
【0003】
ペプチドアドレノメデュリン（ＡＤＭ）は、５２個のアミノ酸を含む新たな降圧性ペプチドとして最初にＫｉｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．（Ｋｉｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．１９９３．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ １９２（２）：５５３－５６０）に報告され、これはヒト褐色細胞腫から単離された。同年、１８５個のアミノ酸を含む前駆体ペプチドをコードするｃＤＮＡ、及びこの前駆体ペプチドの完全なアミノ酸配列も報告された。特にＮ末端に２１個のアミノ酸のシグナル配列を含む前駆体ペプチドは、「プレプロアドレノメデュリン」（ｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭ）と呼ばれる。ｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭは、１８５個のアミノ酸（配列番号１）を含む。ｐｒｏ－ＡＤＭは更にプロセシングされて、ｐｒｏ－ＡＤＭのＮ末端の２０個のペプチド（ＰＡＭＰ；配列番号２）、中央領域のｐｒｏ－ＡＤＭ（ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ；配列番号３）、アドレノテンシンｐｒｏ－ＡＤＭ １５３～１８５（ＣＴ－ｐｒｏ ＡＤＭ；配列番号６）、及び未成熟ＡＤＭ、Ｃ末端グリシン延長型のＡＤＭ（ＡＤＭ－Ｇｌｙ；配列番号５）になる。これは、Ｃ末端の酵素的アミド化によって、５２個のアミノ酸を含むＡＤＭの成熟生物活性形態（ｂｉｏ－ＡＤＭ；ＡＤＭ－ＮＨ２；配列番号４）に変換される。
【0004】
１９９３年にＡＤＭが発見され特徴が明らかにされたことによって精力的な研究活動が開始され、その結果は様々な総説論文にまとめられており、本明細書の文脈では、特に「Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」のＡＤＭ特集号に掲載された論文（Ｔａｋａｈａｓｈｉ ２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１６９１；Ｅｔｏ ２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１６９３－１７１１）を参照する。更なる総説は、Ｈｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０００（Ｈｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０００．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２１（２）：１３８－１６７）である。これまでの科学的研究において、とりわけ、ＡＤＭが多機能性調節ペプチドと見なされ得ることが判明している。上述のように、それはグリシンによって伸長された不活性形態で血液循環中に放出される（Ｋｉｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．１９９８．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２４４（２）：５５１－５５５）。ＡＤＭに特異的であり、同様に推定としてＡＤＭの効果を調節する結合タンパク質も存在する（Ｐｉｏ ｅｔ ａｌ．２００１．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７６（１５）：１２２９２－１２３００）。これまでの研究において最も重要なＡＤＭ及びＰＡＭＰの生理作用は、血圧に影響を及ぼす作用であった。
【0005】
したがって、ＡＤＭは有効な血管拡張因子であり、降圧作用をＡＤＭのＣ末端部分の特定のペプチドセグメントと関連づけることができる。更に、ｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭから形成される上述の生理活性ペプチドＰＡＭＰは、ＡＤＭとは異なる作用機序を持つように見える場合であっても、同様に降圧作用を示すことが見出されている（上述の総説論文Ｅｔｏ ｅｔ ａｌ．２００１及びＨｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０００に加えて、Ｋｕｗａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．１９９７．ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ ４１４（１）：１０５－１１０；Ｋｕｗａｓａｋｉ ｅｔ ａｌ．１９９９．Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３６：６２２－６２８；Ｔｓｕｒｕｄａ ｅｔ ａｌ．２００１ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．６９（２）：２３９－２４５、及びＥＰ－Ａ２ ０ ６２２ ４５８も参照のこと）。更に、血液循環及び他の生体液中で測定できるＡＤＭの濃度は、いくつかの病理学的状態では、健康な対照となる対象において見られる濃度よりも大幅に上回っていることが判明している。したがって、うっ血性心不全、心筋梗塞、腎疾患、高血圧障害、真性糖尿病を有する患者、ショックの急性期並びに敗血症及び敗血症性ショックにある患者のＡＤＭレベルは、程度は異なるが大幅に増加している。ＰＡＭＰ濃度もまた、上記病理学的状態のいくつかにおいて増加するが、血漿レベルはＡＤＭに比べて減少している（Ｅｔｏ ２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１６９３－１７１１）。高濃度のＡＤＭが敗血症で観察され、敗血症性ショックで最高濃度となることが報告されている（Ｅｔｏ ２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１６９３－１７１１；Ｈｉｒａｔａ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ８１（４）：１４４９－１４５３；Ｅｈｌｅｎｚ ｅｔ ａｌ．１９９７．Ｅｘｐ Ｃｌｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｄｉａｂｅｔｅｓ １０５：１５６－１６２；Ｔｏｍｏｄａ ｅｔ ａｌ．２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１７８３－１７９４；Ｕｅｄａ ｅｔ ａｌ．１９９９．Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．１６０：１３２－１３６及びＷａｎｇ ｅｔ ａｌ．２００１．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２２：１８３５－１８４０）。更に、ＡＤＭの血漿中濃度は心不全患者で上昇し、疾患の重症度と相関している（Ｈｉｒａｙａｍａ ｅｔ ａｌ．１９９９．Ｊ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ １６０：２９７－３０３；Ｙｕ ｅｔ ａｌ．２００１．Ｈｅａｒｔ ８６：１５５－１６０）。高血漿ＡＤＭは、これらの対象での独立した負の予後指標となる（Ｐｏｙｎｅｒ ｅｔ ａｌ．２００２．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ ５４：２３３－２４６）。
【0006】
適応症
敗血症は、内因性因子によって大幅に増幅され得る感染病原体に対する多面的な宿主応答である。敗血症の当初の概念は、４つのＳＩＲＳ基準のうち少なくとも２つを有する感染症とされ、炎症過剰のみに焦点を当てていた。しかしながら、敗血症の病態を説明するＳＩＲＳの妥当性は疑問視されてきた。現在では、敗血症は、心血管、神経、自律神経、ホルモン、生体エネルギー、代謝、及び凝固などの非免疫学的経路における大きな変化とともに、炎症性反応及び抗炎症性反応の両方の早期活性化を伴うことが認識されている。今日、敗血症は、Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ Ｓｅｐｔｉｃ Ｓｈｏｃｋ（Ｓｅｐｓｉｓ－３）に従って、感染症に対する調節不全の宿主応答によって引き起こされる生命を脅かす臓器機能不全として定義されている（Ｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ．３１５（８）：８０１－１０）。臨床的な運用では、臓器機能不全は連続［敗血症関連］臓器不全評価（ＳＯＦＡ）スコアの２ポイント以上の上昇によって表すことができ、これは１０％を超える院内死亡率と関連している。
敗血症は、内因性因子によって大幅に増幅され得る感染病原体に対する多面的な宿主応答である。敗血症の当初の概念は、４つのＳＩＲＳ基準のうち少なくとも２つを有する感染症とされ、炎症過剰のみに焦点を当てていた。しかしながら、敗血症の病態を説明するＳＩＲＳの妥当性は疑問視されてきた。現在では、敗血症は、心血管、神経、自律神経、ホルモン、生体エネルギー、代謝、及び凝固などの非免疫学的経路における大きな変化とともに、炎症性反応及び抗炎症性反応の両方の早期活性化を伴うことが認識されている。今日、敗血症は、Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ Ｓｅｐｔｉｃ Ｓｈｏｃｋ（Ｓｅｐｓｉｓ－３）に従って、感染症に対する調節不全の宿主応答によって引き起こされる生命を脅かす臓器機能不全として定義されている（Ｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ．３１５（８）：８０１－１０）。臨床的な運用では、臓器機能不全は連続［敗血症関連］臓器不全評価（ＳＯＦＡ）スコアの２ポイント以上の上昇によって表すことができ、これは１０％を超える院内死亡率と関連している。
【0007】
敗血症性ショックは、感染に応答した臓器障害又は損傷である敗血症が、危険なほどの低血圧及び細胞代謝の異常をもたらす場合に生じる、死に至る可能性のある医学的状態である。Ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ Ｓｅｐｔｉｃ Ｓｈｏｃｋ（Ｓｅｐｓｉｓ－３）は、敗血症性ショックを、敗血症のサブセットで、特に深刻な循環系異常、細胞異常、及び代謝異常が敗血症単独よりも高い死亡リスクと関連しているものとして定義している。敗血症性ショックを有する患者は、循環血液量減少が無い状態で平均動脈圧を６５ｍｍＨｇ以上に維持するために昇圧剤を必要とすること、及び血清乳酸レベルが２ｍｍｏｌ／Ｌを超えること（１８ｍｇ／ｄＬ超）によって臨床的に識別することができる。この組み合わせは、４０％を超える病院死亡率に関連する（Ｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ．３１５（８）：８０１－１０）。一次感染は、最も一般的には細菌によって引き起こされるが、真菌、ウイルス、又は寄生虫によっても引き起こされ得る。これは身体のいずれの部分にも位置する可能性があるが、最も一般的には、肺、脳、尿路、皮膚、又は腹部器官に位置し得る。これにより、多臓器機能不全症候群（以前は多臓器不全として知られていた）が引き起こされ、死に至ることもある。多くの場合に、敗血症性ショックの患者は集中治療室内で治療を受ける。小児、免疫不全の個体、及び高齢者が最もよく罹患するが、これは彼らの免疫系が健康な成人ほど効果的に感染に対処することができないためである。敗血症性ショックによる死亡率は約２５～５０％である。
【0008】
Ｔｈｅ Ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ Ｓｅｐｓｉｓ Ｃａｍｐａｉｇｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ ２０１６は、血行動態の安定が輸液蘇生及び昇圧剤療法によって達成され得ない敗血症性ショック（難治性敗血症性ショック）患者におけるヒドロコルチゾン静注の使用を推奨している。そのガイドラインは、適切な輸液蘇生及び昇圧剤投与により血行動態の安定化が可能となる場合には、敗血症性ショックを有する患者を治療するためにヒドロコルチゾン静注を使用しないことを提案している（Ｒｈｏｄｅｓ ｅｔ ａｌ．２０１７．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ４３（３）：３０４－３７７）。
【0009】
敗血症性ショックにおけるヒドロコルチゾン療法を試験した大規模臨床試験では、相反する結果が得られている。個々の免疫反応に応じてヒドロコルチゾン治療の恩恵を受けるサブグループが存在し得る。前向き無作為化比較多施設試験では、一貫してショックの早期回復が報告されているが（Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ａｌ．２００９．ＪＡＭＡ．（２００９）３０１：２３６２－７５；Ｖｅｎｋａｔｅｓｈ ｅｔ ａｌ．２０１８．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３７８：７９７－８０８）、敗血症性ショックを有する患者における「低用量」（２００ｍｇ／日）ヒドロコルチゾン（ＨＣ）の有用性は依然として議論の余地がある。一方、２つのフランスの研究では、ヒドロコルチゾン＋経口フルドロコルチゾンの組み合わせによる転帰の恩恵が報告されており（Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ａｌ．２００２．ＪＡＭＡ ２８８：８６２－７１；Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ｌａ．２０１８．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７８：８０９－１８）、汎欧州ＣＯＲＴＩＣＵＳ試験及び５ヶ国ＡＤＲＥＮＡＬ試験では、ヒドロコルチゾン単独による生存効果は見出されなかった（Ｖｅｎｋａｔｅｓｈ ｅｔ ａｌ．２０１８．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３７８：７９７－８０８；Ｓｐｒｕｎｇ ｅｔ ａｌ．２００８．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３５８：１１１－２４）。敗血症性ショックを呈する患者は、過度に炎症を起こしているが、同時に免疫抑制されていることが認識されつつある（Ｈｏｔｃｈｋｉｓｓ ｅｔ ａｌ．２０１３．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３：８６２－７４６；Ｋａｕｆｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．２０１８．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ １７：３５－５６）。コルチコステロイドは、伝統的に、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）を介した免疫抑制、並びにＡＰ－１及びＮＦｋＢなどの炎症促進性転写因子に対する抑制効果を誘導すると考えられている（Ｂａｓｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ．２０１３．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ ３８０：１０８－１８）。したがって、全体的に免疫抑制状態にある患者は、免疫抑制薬の投与によって危険にさらされる可能性がある。しかしながら、この議論は、コルチコステロイド及びＧＲが免疫再構築プロセスに関与していることを示す証拠が増えつつあることにより複雑になっている。このコルチコステロイドの免疫活性化作用は、末梢免疫反応を増強する急性ストレスに対する反応として説明されているが、慢性的なコルチコステロイド曝露は免疫抑制につながる（Ｃｒｕｚ－Ｔｏｐｅｔｅ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ２２：２０－３２）。このようにコルチコステロイドの効果は、タイミング及び副作用に対する利点によって異なるため、その適用を導くためのバイオマーカーの必要性が支持されている。
【0010】
重度の肺炎を有する患者におけるヒドロコルチゾン療法の有益な効果は、敗血症のリスクがある患者における低用量ヒドロコルチゾンの早期投与の効果を調査した二重盲検試験で観察された。この試験の所見は、敗血症性ショックなどの生命を脅かす敗血症関連合併症の発症を予防するためのヒドロコルチゾンによる早期治療の可能性を支持するものであったが（Ｃｏｎｆａｌｏｎｉｅｒｉ ｅｔ ａｌ．２００５．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ Ｖｏｌ １７１：２４２－２４８）が、これらの知見を確認するためのより大規模な無作為化二重盲検臨床試験（ＨＹＰＲＥＳＳ試験）では、ヒドロコルチゾンの予防的投与が１４日以内に敗血症性ショックのリスクを低減させないことが見出された。死亡率などの他の二次評価項目についても同様に、本治療による改善は見られなかった（Ｋｅｈ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１６（１７）：１７７５－１７８５）。
【0011】
ヒドロコルチゾンの副作用は文献に記載されている。ＣＯＲＴＩＣＵＳ試験ではより多くの二次感染が報告されているが、ＡＤＲＥＮＡＬ及びＨＹＰＲＥＳＳ試験ではこれらの所見を確認することができなかった。
【0012】
最近になって、血清インターフェロンガンマ（ＩＦγ）とインターロイキン１０（ＩＬ－１０）の比率が、ヒドロコルチゾンによる治療の可否の決定を導く有望なバイオマーカーであることが示された（Ｋｏｅｎｉｇ ｅｔ ａｌ．２０２１．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ １２：６０７２１７）。
【0013】
低用量コルチコステロイドは、マウスモデルにおいて敗血症の初期段階でｐｒｏ－ＡＤＭレベルを有意に低下させることが示された（Ｐｒａｓｔｅｙｏ ｅｔ ａｌ．２０１４．ＭＫＢ ４６（２）：６８－７２）。対照的に、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ濃度は、高血圧を有する患者のフルドロコルチゾン又はデキサメタゾン治療後に有意に変化しなかった（Ｖｏｇｔ ｅｔ ａｌ．２０１２．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ３４（８）：５８２－５８７）。
【0014】
国際公開第２０１９０７７０８２号には、対象における治療をモニタリングするための方法であって、該対象が、該対象から得られた体液中の中央領域プロアドレノメデュリン（ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ）、Ｃ末端プロアドレノメデュリン（ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ）、及び／又はプロアドレノメデュリンＮ末端２０ペプチド（ＰＡＭＰ）、若しくはその断片（ただし成熟ＡＤＭではない）を含む群から選択されるプレプロアドレナメデュリンの断片のレベルを決定することと、該プレプロアドレノメデュリンの断片のレベルを、該患者の治療手段の適応要件と関連付けることであって、該治療手段がヒドロコルチゾンを含む群から選択される、関連付けることと、によってアドレノメデュリンに対する結合剤による治療下にある、方法について記載される。
【0015】
コロナウイルスは、ヒト及びいくつかの他の脊椎動物に蔓延しており、呼吸器疾患、腸疾患、肝疾患、及び神経疾患を引き起こす。注目すべきことに、２００３年の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）及び２０１２年の中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）は、ヒトでの流行を引き起こした。ＳＡＲＳ－ＣｏＶとの比較では、いくつかの有意な相違点及び類似点が示されている。ＭＥＲＳ ＣｏＶ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶの両方は、症例致死率がはるかに高い（それぞれ４０％及び１０％）（ｄｅ Ｗｉｔ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＳＡＲＳ ａｎｄ ＭＥＲＳ：ｒｅｃｅｎｔ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ １４（８）：５２３－３４；Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ．２０２０．Ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｏｕｔｂｒｅａｋ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｎｅｗ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｏｆ ｐｒｏｂａｂｌｅ ｂａｔ ｏｒｉｇｉｎ．Ｎａｔｕｒｅ ５７９（７７９８）：２７０－２７３）。現在のＳＡＲＳ ＣｏＶ－２は、そのゲノムの７９％がＳＡＲＳ－ＣｏＶと共通しているが、感染力ははるかに高いようである。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされる疾患は、コロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）と呼ばれる。
【0016】
ＣＯＶＩＤ－１９に対して特異的で有効な治療又は処置は存在していない（Ｓｉｅｍｉｅｎｉｕｋ ｅｔ ａｌ．２０２０．ＢＭＪ．３７０：ｍ２９８０）。したがって、ＣＯＶＩＤ－１９の管理の基本は対症療法であり、これには、症状を緩和するための治療、輸液療法、必要に応じての酸素サポート及び腹臥位ポジショニング、並びに他の罹患した重要臓器をサポートするための医薬又はデバイス、例えば体外式膜型人工肺（ＥＣＭＯ）が含まれる。この疾患におけるステロイドの役割についても議論されている。治療のためのＣＯＶＩＤ－１９におけるグルココルチコイドの使用は、議論の余地があると論じられている（総説については、Ｇｏｌａｍａｒｉ ｅｔ ａｌ．２０２１．Ｊ Ｃｏｍ Ｈｏｓｐ Ｉｎｔ Ｍｅｄ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ １１（２）：１８７－１９３）。ある研究では、メチルプレドニゾロンが有益であり、ＡＲＤＳを有する患者における死亡リスクの低下につながり得ることが報告された（Ｗｕ ｅｔ ａｌ．２０２０．ＪＡＭＡ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ．２０２０；１８０（７）：９３４－９４３）。いくつかの研究では、ＣＯＶＩＤ－１９を有するがん患者における低用量のプレドニゾンによる有益な効果が示されている（Ｒｕｓｓｅｌｌ ｅｔ ａｌ．２０２０．ｅｃａｎｃｅｒ １４：１０２３）。１つの無作為化比較試験及び２２のコホート研究のメタアナリシスでは、グルココルチコイド療法により発熱期間が短縮されたが、死亡率、入院期間、又は肺炎症吸収期間には影響がなかったことが示された（Ｌｕ ｅｔ ａｌ．２０２０．Ａｎｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ８（１０）：６２７）。
【0017】
デキサメタゾンと通常のケアを比較して試験した最近発表された非盲検試験では、デキサメタゾンとともに侵襲的人工呼吸を受けた又は酸素を投与された患者において２８日死亡率が改善することが示された（Ｒｅｃｏｖｅｒｙ試験）。しかしながら、この肯定的な結果は、呼吸酸素サポートを受けている患者にのみ当てはまった（Ｈｏｒｂｙ ｅｔ ａｌ．２０２０．ＮＥＪＭ ＤＯＩ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ ２０２１４３６）。
【0018】
まとめると、コルチコステロイド、特にヒドロコルチゾン又はデキサメサゾンのようなグルココルチコイドによる治療のために、重篤患者（例えば、敗血症、敗血症性ショック、又はＣＯＶＩＤ－１９に罹患している）を層別化することは、アンメットメディカルニーズである。敗血症性ショックを予防するためのヒドロコルチゾンによる治療のために敗血症を有する患者を層別化することは、具体的なアンメットメディカルニーズである。デキサメタゾンによる治療のためにＣＯＶＩＤ－１９を有する患者を層別化することは、別の具体的なアンメットメディカルニーズである。
【0019】
重篤患者において、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが所定の閾値未満である場合、コルチコステロイドの投与が該患者において禁忌であることは、本発明の驚くべき発見であった。
【0020】
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、肺での広範な炎症の急速な発症を特徴とする呼吸不全の一種である。症状としては、息切れ、速い呼吸、及び皮膚の青みがかった変色が挙げられる。ＡＲＤＳは、高い死亡率（３５～４５％）を伴う（Ｂｅｌｌａｎｉ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１５（８）：７８８－８００）。一命を取り留めた患者でも、生活の質が低下するのが一般的である。原因としては、敗血症、膵炎、外傷、肺炎、及び誤嚥が挙げられ得る。根底にある機序は、肺の微視的な気嚢の隔壁を形成する細胞へのびまん性損傷、サーファクタント機能不全、免疫系の活性化、及び血液凝固の体内調節の機能不全を伴う。実際に、ＡＲＤＳは、肺の酸素と二酸化炭素を交換する能力を損なう。診断は、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）が５ｃｍ Ｈ２Ｏを超えるにもかかわらず、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比（動脈血酸素分圧と吸入気酸素分画の比）が３００ｍｍＨｇ未満であることに基づく。一次治療は、根本原因を対象とした治療とともに人工呼吸を伴う。換気戦略は、低容量及び低圧を使用することを含む。酸素導入が不十分なままである場合、肺リクルートメント手技及び神経筋遮断薬を使用してもよい。これが不十分である場合、体外式膜型人工肺（ＥＣＭＯ）が選択肢となり得る。
【0021】
９つの試験で、ＡＲＤＳにおける長期のグルココルチコイド治療が調査された（総説については、Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ａｌ．２０１７．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ４３：１７５１－１７６３を参照のこと）。これらの試験の１つは市中肺炎に起因するＡＲＤＳを有する患者におけるものであり（Ｃｏｎｆａｌｏｎｉｅｒｉ ｅｔ ａｌ．２００５．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １７１（３）：２４２－２４８５９）、別の試験は敗血症性ショックにおける最初のコルチコステロイド試験のサブグループ解析であった（Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ａｌ．２００６．Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ３４（１）：２２－３０）。これらの試験では、一貫して、グルココルチコイド治療が、全身性炎症のマーカー（炎症性サイトカイン及び／又はＣ反応性蛋白レベル）の有意な減少、人工呼吸期間の約７日間の短縮、並びに軽度及び重度のＡＲＤＳを有する患者においてそれぞれ約７％及び１１％の病院死亡率の推定減少と関連することが見出された。しかしながら、ＡＲＤＳにおけるそれらの使用は依然として議論の余地があり、現在の救命救急医療学会のガイドラインでは、中等度から重度のＡＲＤＳを有する患者におけるグルココルチコイドの使用について条件付きの推奨がなされている（Ａｎｎａｎｅ ｅｔ ａｌ．２０１７．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ ４３：１７５１－１７６３）。ガイドラインでは、初期ＡＲＤＳ（発症７日目まで）において１ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量でのメチルプレドニゾロンの使用が条件付きで推奨されており、後期持続性ＡＲＤＳ（発症６日目以降）については、ガイドラインでは２ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量で、その後漸減することを推奨している。ＡＲＤＳに対するグルココルチコイド療法の開始のタイミングもまた、対象となる問題である。ＡＲＤＳ発症の１週間以内でのグルココルチコイド治療の開始は有意な生存効果をもたらしたが、ＡＲＤＳ診断後１週間を超えて治療開始しても有意な生存効果はもたらされなかった。このことは、不可逆的な肺損傷段階後のグルココルチコイドの使用が、あまり有益ではない可能性があることを示唆している。したがって、グルココルチコイド療法の恩恵を受けるＡＲＤＳを有する患者、特に後期段階のＡＲＤＳ患者を区別するツールが必要である。そのため、本発明は、コルチコステロイドによる治療／療法のために後期持続性ＡＲＤＳを有する患者を選択することを可能にする。
【0022】
重度のＣＡＰを有する患者の治療におけるコルチコステロイドの臨床的に有意な死亡率の改善を示すデータは限られている。いくつかのメタアナリシスでは、そのような患者におけるコルチコステロイド使用による死亡リスクの低下が見出されている（Ｈｏｒｉｔａ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｓｃｉ Ｒｅｐ ５：１４０６１；Ｓｉｅｍｉｅｎｉｅｕｋ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ａｎｎ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ １６３（７）：５１９－５２８；Ｊｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１９．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ）９８（２６）：ｅ１６２３９）が、そうでないものもあり（Ｂｒｉｅｌ ｅｔ ａｌ．２０１８．Ｃｌｉｎ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ ６６（３）：３４６－３５４；Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｅｍｅｒｇ Ｍｅｄ ６（３）：１７２－１７８）、メタアナリシスに含まれる試験は、重度のＣＡＰの質及び定義にばらつきがあった。更に、コルチコステロイドが、軽度から中等度のＣＡＰを有する患者における死亡率又は他の有害な臨床転帰を減少させるという証拠はない。新たなＡＴＳ／ＩＤＳＡガイドラインでは、ＣＡＰ又はインフルエンザ肺炎の補助的コルチコステロイド治療を、コルチコステロイドの使用の他の適応症、例えば喘息、ＣＯＰＤ、又は自己免疫疾患を有する患者を除いて、行わないよう勧告している（Ｍｅｔｌａｙ ｅｔ ａｌ．２０１９．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ Ｖｏｌ ２００，Ｉｓｓ ７，ｐｐ ｅ４５－ｅ６７）。したがって、ＣＡＰ、特に軽度から中等度のＣＡＰを有する患者におけるコルチコイド療法層別化はアンメットメディカルニーズである。したがって、本発明は、コルチコステロイドによる治療／療法のために軽度から中等度のＣＡＰを有する患者を選択することを可能にする。
【0023】
心肺バイパスを使用する心臓手術では、全身性炎症反応がもたらされる。この反応の潜在的な有害作用を軽減するために、コルチコステロイドが広く使用されてきた。「人工心肺装置」としても知られる心肺バイパス手術（ＣＰＢ）では、患者の主要な血管にカニューレを留置し、血液を体外に送り出し、酸素を加えて二酸化炭素を除去し、その後、血液を体内に戻す。これにより心臓を停止させて血液を空にすることができ、外科医は拍動していない心臓を無血野で手術することが可能となる（Ｂａｒｒｙ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ａｎｄ Ａｎａｌｇｅｓｉａ １２０（４）：７４９－７６９）。その結果、白血球及び血小板の活性化、並びに凝固カスケードが生じ（Ｔａｒｎｏｋ ｅｔ ａｌ．２００１．Ｓｈｏｃｋ １６（Ｓｕｐｐｌ １）：２４－３２）、サイトカインによりエンドシグナル伝達が行われる。内皮透過性が増加し、フリーラジカルによる実質損傷が生じる（Ｆｕｄｕｌｕ ｅｔ ａｌ．２０１６．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｌｏｎｇｅｖｉｔｙ ２０１６：１９７１４５２；Ｐｅｓｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１６．Ａｃｔａ Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｉｃａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ ６０（１０）：１３８６－１３９４）。体液が循環血から組織に漏れ出し、血管が拡張し、循環血液量減少が起こり、その結果血圧が低下する。心臓手術の合併症の多く、例えば多臓器不全及び死亡は、これらの機構に起因する（Ｈｕｆｆｍｙｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ＆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ ２９（２）：１６３－１７５）。それにもかかわらず、予防的コルチコステロイドが、心臓手術後の臨床転帰、特に小児に対して及ぼす影響は依然として不明確である。コルチコステロイドの投与の可否について（Ｆｕｄｕｌｕ ｅｔ ａｌ．２０１８．Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏｒ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ａｎｄ Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ Ｈｅａｒｔ Ｓｕｒｇｅｒｙ ９（３）：２８９－２９３）、又はコルチコステロイドの種類、投与レジメンについて、又はそれらがいつ有益となり得るか（例えば、術前、術中、術後）に関して、コンセンサスは得られていない。したがって、コルチコステロイド療法のために心肺バイパス手術を受けている患者を層別化することはアンメットメディカルニーズである。
【0024】
米国では毎年４０万人を超える患者で心停止が発生しており、心停止による全死亡率は依然として悪く、生存率は１０％未満である（Ｇｏ ｅｔ ａｌ．２０１４．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １２９（３）：ｅ２８－２９２）。生存及び生活の質を改善する試みにおいて、国際的な心停止ガイドラインは、心停止中の治療を最適化することの重要性だけでなく、心停止後期間中の患者の管理についても強調している（Ｆｉｅｌｄ ｅｔ ａｌ．２０１０．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １２２（１８ Ｓｕｐｐｌ ３）：Ｓ６４０－５６；Ｎｏｌａｎ ｅｔ ａｌ．２０１０．Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ．８１（１０）：１２１９－１２７６）。心停止後症候群は、全身性炎症反応及び血行動態の乱れを含む敗血症性ショック状態に類似した様々な病態生理学的特徴を特徴とし、微小循環障害及び心筋抑制を含み得る（Ａｄｒｉｅ ｅｔ ａｌ．２００２．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １０６ （５）：５６２－５６８；Ｎｏｌａｎ ｅｔ ａｌ．２００８．Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ ７９（３）：３５０－３７９）。しかしながら、ショックを有する心停止後患者におけるコルチコステロイド療法の有用性及び潜在的な効力は依然として未知であり、異なる結果を示した研究がわずかに存在するのみである（Ｍｅｎｔｚｅｌｏｐｏｕｌｏｓ ｅｔ ａｌ．２０１３．ＪＡＭＡ．３１０（３）：２７０－２７９；Ｄｏｎｎｉｎｏ ｅｔ ａｌ．２０１６．Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ ２０：８２）。
【0025】
細菌性髄膜炎は、髄膜（脳及び脊髄を覆う膜）の重症感染症であり、最適な抗生物質療法及び救命救急医療の進歩にもかかわらず、高い死亡率と罹患率を伴う。これは、通常、耳又は呼吸器感染から広がる細菌によって引き起こされ、抗生物質で治療される。脳神経障害、特に難聴などの後期続発症は、患者の５％～４０％で起こる。実験動物研究において、コルチコステロイドによる治療は、脳脊髄液（ＣＳＦ）の炎症反応の低減、脳浮腫の回復、及び転帰の改善をもたらすことが示された（Ｓｃｈｅｌｄ ｅｔ ａｌ．１９８０．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ６６（２）：２４３－２５３）；Ｔａｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．１９８５．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ５１（３）：５２８－５３４）。このような病態生理学的な洞察から、研究者たちは急性細菌性髄膜炎の補助療法としてコルチコステロイドを評価するようになった。しかしながら、細菌性髄膜炎患者におけるコルチコステロイドの効果を評価した臨床試験では、相反する結果が示された（総説については、Ｂｒｏｕｗｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１５．Ｃｏｃｈｒａｎｅ Ｄａｔａｂａｓｅ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｓｓｕｅ ９．Ａｒｔ．Ｎｏ．：ＣＤ００４４０５を参照のこと）。したがって、この療法から恩恵を受ける、髄膜炎、特に細菌性髄膜炎を有する患者におけるコルチコイド療法層別化は、アンメットメディカルニーズである。
【発明を実施するための形態】
【0026】
本発明の主題は、コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法である。
【0027】
本発明の主題はまた、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化のための方法であって、
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法である。
【0028】
本発明の一実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法であって、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、方法に関する。
【0029】
本発明の文脈において、重篤患者は、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である。
【0030】
本出願の一実施形態において、患者は、敗血症又は敗血症性ショックに罹患している患者である。
【0031】
本出願の一実施形態において、患者は、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択されるコロナウイルスに、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２に感染している。
【0032】
本出願の一実施形態において、患者は、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）に罹患している患者である。より具体的な実施形態において、ＡＲＤＳを有する患者は、症状の発症から７日以上の後期である。
【0033】
本出願の一実施形態において、患者は、市中肺炎（ＣＡＰ）に罹患している患者である。より具体的な実施形態において、患者は、軽度から中等度（非重度）のＣＡＰを有する。ＣＡＰの重症度は、現在、ＩＤＳＡ／ＡＴＳ ２００７基準によって分類される生理学的障害の程度によって定義されている（Ｐｉｆｆｅｒ ｅｔ ａｌ．２００７．Ｂｒｅａｔｈｅ ４（２）：１１０－１１５）。
【0034】
本出願の一実施形態において、患者は、髄膜炎、特に細菌性髄膜炎に罹患している患者である。
【0035】
本出願の文脈において、重篤患者は、該患者におけるＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルの増加をもたらす任意の薬物、医薬、抗体、及び／又は他の薬剤若しくは療法、特にＡＤＭ－ＮＨ２に特異的に結合する抗体、抗体断片、又は非Ｉｇ足場で治療されない。
【0036】
本出願の文脈において、重篤患者は、コルチコステロイドに加えて、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルの増加をもたらさない任意の薬物、医薬、又は治療剤で治療され得る。上記の追加の薬物、医薬、又は治療剤は、昇圧剤、輸液療法、抗菌療法（抗生物質及び抗ウイルス剤を含む）、腎代替療法を含む群から選択され得る。
【0037】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、方法に関する。
【0038】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端部分に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定され、該捕捉結合剤が、結合のためにＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端アミドを特異的に必要とする、方法に関する。
【0039】
本発明の別の具体的な実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、方法に関する。
【0040】
本発明の別の好ましい実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが該対象の体液試料において決定され、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、方法に関する。
【0041】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが、異なる方法、例えばイムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法によって決定される、方法に関する。
【0042】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、方法に関する。
【0043】
本発明の一実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、方法に関する。
【0044】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、方法に関する。
【0045】
本発明の別の具体的な実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該ミネラルコルチコイドがフルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、方法に関する。
【0046】
本発明の一実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、方法に関する。
【0047】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、方法に関する。
【0048】
本発明の別の好ましい実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、方法に関する。
【0049】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、方法に関する。
【0050】
本発明の別の実施形態は、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、方法に関する。
【0051】
本出願の別の実施形態は、敗血症性ショックを予防するためのヒドロコルチゾンによる治療のために敗血症を有する患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてヒドロコルチゾンによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてヒドロコルチゾンによる療法を採用しないことと、を含む、方法に関する。
【0052】
本出願の別の実施形態は、敗血症性ショックを予防するための敗血症を有する患者におけるヒドロコルチゾン療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを
所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、ヒドロコルチゾン療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを
所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、ヒドロコルチゾン療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
【0053】
本出願の別の実施形態は、デキサメタゾンによる治療のためにＣＯＶＩＤ－１９を有する患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてデキサメタゾンによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてデキサメタゾンによる療法を採用しないことと、にある、方法に関する。
【0054】
本出願の別の実施形態は、ＣＯＶＩＤ－１９を有する患者におけるデキサメタゾン療法ガイダンス及び／又はコルチコイド療法層別化のための方法であって、
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、デキサメタゾン療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、デキサメタゾン療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
【0055】
該ヒドロコルチゾンは、患者に１～１０ｍｇ／ｈの用量で持続注入として適用され得る。ヒドロコルチゾンは、昇圧剤が患者に並行して与えられる限り、１０ｍｇ／ｈの用量で持続注入として適用され得る。ヒドロコルチゾンは、昇圧剤を停止した後に５ｍｇ／ｈの用量で持続注入として適用され得る。ヒドロコルチゾン用量は、１ｍｇ／ｈまで段階的に低減され得る（１日あたり１ｍｇ／ｈの低減）。
【0056】
ヒドロコルチゾンは、５０ｍｇの静脈内ボーラスとして適用され、続いて、５日目に２００ｍｇ、６日目及び７日目に１００ｍｇ、８日目及び９日目に５０ｍｇ、並びに１０日目及び１１日目に２５ｍｇの２４時間持続注入として適用され得る。
【0057】
ヒドロコルチゾンはフルドロコルチゾンと組み合わせてもよい。具体的な実施形態において、５０ｍｇのヒドロコルチゾンのボーラス注入が６時間ごとに適用され、フルドロコルチゾン（５０μｇ）が毎日経口で補充される。
【0058】
本出願の別の具体的な実施形態において、コルチコステロイド療法は、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬの閾値レベル、最も好ましくは閾値レベル７０ｐｇ／ｍＬを超えている場合に開始される。
【0059】
本出願の別の具体的な実施形態において、コルチコステロイド療法は、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬの閾値レベル、最も好ましくは閾値レベル７０ｐｇ／ｍＬを超えている場合に継続される。
【0060】
本出願の別の具体的な実施形態において、コルチコステロイド療法は、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬの閾値レベル、最も好ましくは閾値レベル７０ｐｇ／ｍＬ未満である場合に停止される。
【0061】
本出願の別の実施形態において、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルは該対象の体液試料において決定され、該決定はＡＤＭに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤は抗体である。
【0062】
本出願の別の実施形態において、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルは該対象の体液試料において決定され、該決定はＡＤＭ－ＮＨ２のレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤は表面上に固定化されている。
【0063】
本出願の別の実施形態において、患者はコルチコステロイドで治療され、該コルチコステロイドはグルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択される。
【0064】
本出願の別の実施形態において、グルココルチコイドは、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る。
【0065】
本出願の一実施形態において、ミネラルコルチコイドは、フルドロコルチゾンを含む群から選択され得る。
【0066】
本発明による体液は、１つの特定の実施形態において、血液試料である。血液試料は、全血、血清、及び血漿を含む群から選択され得る。診断方法の具体的な実施形態において、該試料は、ヒトクエン酸血漿、ヘパリン血漿、及びＥＤＴＡ血漿を含む群から選択される。
【0067】
一実施形態において、ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度は、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それは７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である。
【0068】
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定してもよい。該更なるバイオマーカーは、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択され得る。
【0069】
本発明の主題はまた、コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料を提供することと、該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法である。
【0070】
本発明の一実施形態は、コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化のステップを更に含み、該方法が、
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを
所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを
所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法に関する。
【0071】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、方法に関する。
【0072】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をプロアドレノメデュリン又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、方法に関する。
【0073】
本発明の別の好ましい実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、方法に関する。
【0074】
本発明の別の具体的な実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが該対象の体液試料において決定され、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、方法に関する。
【0075】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが、異なる方法、例えばイムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法によって決定される、方法に関する。
【0076】
本発明の別の好ましい実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、方法に関する。
【0077】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の選択の方法であって、該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、方法に関する。
【0078】
本発明の別の具体的な実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、方法に関する。
【0079】
本発明の一実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該ミネラルコルチコイドがフルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、方法に関する。
【0080】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、方法に関する。
【0081】
本発明の別の好ましい実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、方法に関する。
【0082】
本発明の別の具体的な実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、方法に関する。
【0083】
本発明の別の実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、方法に関する。
【0084】
本発明の別の好ましい実施形態は、コルチコステロイドによる治療のための重篤患者の選択、並びに重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、方法に関する。
【0085】
本出願の主題はまた、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較した場合に、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片の該所定の閾値を上回る値であるか、又は先に測定されたレベルに対する値であることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイドである。
【0086】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが該患者の体液試料において決定され、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較され、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法が採用されることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイドに関する。
【0087】
本発明の別の好ましい実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、コルチコステロイドに関する。
【0088】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、コルチコステロイドに関する。
【0089】
本発明の一実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、コルチコステロイドに関する。
【0090】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、コルチコステロイドに関する。
【0091】
本発明の別の好ましい実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、コルチコステロイドに関する。
【0092】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、コルチコステロイドに関する。
【0093】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、コルチコステロイドに関する。
【0094】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが該対象の体液試料において決定され、該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、コルチコステロイドに関する。
【0095】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、ＡＤＭのレベルが、異なる方法、例えばイムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法によって決定される、コルチコステロイドに関する。
【0096】
本発明の別の実施形態は、重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、コルチコステロイドに関する。
【0097】
定義
疾患の重症度は、患者の臓器系障害又は生理学的代償不全の程度として定義される。重症度は、例えばスコアリングシステムを使用して種々の段階に分類され得る。
疾患の重症度は、患者の臓器系障害又は生理学的代償不全の程度として定義される。重症度は、例えばスコアリングシステムを使用して種々の段階に分類され得る。
【0098】
本明細書で使用される場合、臓器機能不全は、臓器がその予想される機能を果たさない病状又は健康状態を意味する。「臓器不全」とは、外部からの臨床的介入なしでは正常な恒常性を維持できない程度までの臓器機能不全を意味する。上記の臓器不全は、腎臓、肝臓、心臓、肺、神経系を含む群から選択される臓器に関連し得る。対照的に、臓器機能は、生理学的範囲内のそれぞれの臓器の予想される機能を表す。当業者であれば、診察時に臓器のそれぞれの機能を認識する。
【0099】
臓器機能不全は、逐次臓器不全評価スコア（ＳＯＦＡスコア）又はその構成要素によって定義することができる。ＳＯＦＡスコアは、以前は敗血症関連臓器不全評価スコアとして知られており（Ｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１５（８）：８０１－１０）、集中治療室（ＩＣＵ）入室中のヒトの状態を追跡し、ヒトの臓器機能の程度又は不全率を決定するために使用される。スコアは６つの異なるスコアに基づき、呼吸器系、心血管系、肝臓系、凝固系、腎臓系、及び神経系について１つずつ、それぞれ０～４でスコア付けされ、スコアが高くなるほど臓器機能不全の悪化を反映している。ＳＯＦＡスコアの評価基準は、例えばＬａｍｄｅｎ ｅｔ ａｌ．（総説については、Ｌａｍｂｄｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１９．Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ ２３：３７４を参照のこと）に記載されている。ＳＯＦＡスコアは、従来、ＩＣＵへの入室時及びその後の２４時間ごとに計算され得る。特に、上記の臓器機能不全は、腎機能低下、心機能障害、肝機能障害、又は呼吸器機能障害を含む群から選択される。
【0100】
クイックＳＯＦＡスコア（ｑｕｉｃｋＳＯＦＡ又はｑＳＯＦＡ）は、２０１６年２月にＳｅｐｓｉｓ－３グループによって、感染による転帰不良のリスクが高い患者を特定するための最初の方法として、ＳＯＦＡスコアの簡略版として導入された（Ａｎｇｕｓ ｅｔ ａｌ．２０１６．Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．４４（３）：ｅ１１３－ｅ１２１）。ｑＳＯＦＡは、ＳＯＦＡスコアを大幅に簡略化しており、その３つの臨床基準のみを含み、かつＧＣＳ１５未満の代わりに「意識変容（altered mentation）」を含む。ｑＳＯＦＡは、患者に対して容易かつ迅速に連続して繰り返すことができる。スコアは０～３点の範囲である。１点が、低血圧（１００ｍｍＨｇ以下のＳＢＰ）、高呼吸数（２２回／分以上）、意識変容（１５以下のＧＣＳ）に対して与えられる。感染の発症に近い２点以上のｑＳＯＦＡポイントの存在は、死亡又は長期の集中治療室入室のリスクがより高いことと関連していた。これらは、合併症のない感染患者よりも敗血症である可能性がある感染患者でより一般的な結果となる。これらの知見に基づいて、Ｔｈｉｒｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｓｅｐｓｉｓでは、敗血症の可能性が高いＩＣＵ外の感染患者を特定するための簡単なプロンプトとしてｑＳＯＦＡを推奨している（Ｓｅｙｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１５（８）：７６２－７７４）。
【0101】
生命を脅かす悪化は、中枢神経系不全、腎不全、肝不全、代謝不全、又は呼吸不全などの生命維持に必要な臓器系不全を伴う、死亡リスクの高い患者の急性状態として定義される。
【0102】
有害事象は、死亡、臓器機能不全、又はショックとして定義される。
【0103】
上記の臨床パラメータ又は臨床スコアは、低血圧の既往歴、昇圧剤の必要性、挿管、人工呼吸、Ｈｏｒｏｖｉｔｚ指数、ＳＯＦＡスコア、クイックＳＯＦＡスコアを含む群から選択される。
【0104】
特に「療法層別化」という用語は、患者の分類に応じて治療手段を受ける又は受けない療法群など、異なる群に患者をグループ化、選択、又は分類することに関する。
【0105】
層別化された患者群には、治療の開始を必要とする患者及び治療の開始を必要としない患者が含まれ得る。
【0106】
本明細書で使用される場合、「療法ガイダンス」という用語は、１つ以上のバイオマーカー及び／又は臨床パラメータ及び／又は臨床スコアの値に基づいて特定の治療又は医学的介入を適用すること、並びに該患者のコルチコステロイドによる治療の調整を含む治療のモニタリングを行うこと（例えば治療の有効性に関するフィードバックを得ることによって）を指す。
【0107】
本発明の一実施形態において、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片の該決定は、１人の重篤患者で２回以上行われる。
【0108】
本発明の別の実施形態において、該モニタリングは、コルチコステロイドによる治療に対する該重篤患者の応答を評価するために実施される。
【0109】
更に、該患者は、以下の群：
（ｉ）該治療を受けた後に好ましい効果を示す、該疾患の該コルチコステロイド治療に対する応答者、
（ｉｉ）該コルチコステロイド治療を受けた後に効果を示さない（好ましい効果も好ましくない効果も示さない）、該疾患の該コルチコステロイド治療に対する非応答者、
（ｉｉｉ）該コルチコステロイド治療を受けた後に好ましくない効果を示す患者、
のうちの１つに層別化され得る。
（ｉ）該治療を受けた後に好ましい効果を示す、該疾患の該コルチコステロイド治療に対する応答者、
（ｉｉ）該コルチコステロイド治療を受けた後に効果を示さない（好ましい効果も好ましくない効果も示さない）、該疾患の該コルチコステロイド治療に対する非応答者、
（ｉｉｉ）該コルチコステロイド治療を受けた後に好ましくない効果を示す患者、
のうちの１つに層別化され得る。
【0110】
実施例６のデータは、ＡＤＭ－ＮＨ２を使用する敗血症患者におけるコルチコステロイド（特にヒドロコルチゾン）療法層別化が敗血症性ショックの発症を予防し得ることを明確に実証しており、入院期間の短縮及び追加治療の低減により患者が恩恵を受け得ることを示す。
【0111】
本発明の別の特定の利点は、本方法が、該療法から恩恵を受ける可能性がより高い患者を、該療法から恩恵を受ける可能性がより低い患者から区別することができることである。
【0112】
該コルチコステロイド療法からの恩恵は、例えば、疾患の症状（病理生理学的症状、バイオマーカー値など）の消失、他の生命維持療法の離脱、又は患者の肯定的な転帰（例えば、生存）であり得る。
【0113】
好ましい実施形態において、治療は、試料中のＡＤＭ－ＮＨ２のレベルを示す試料分析の結果が提供されるとすぐに開始又は変更される。更なる実施形態において、治療は、１２時間以内、好ましくは６、４、２、１、０．５、０．２５時間以内に、又は試料分析の結果を受け取った直後に開始され得る。
【0114】
コルチコステロイドは、脊椎動物によって生理的に産生されるか（天然コルチコステロイド）又は製造される（合成コルチコステロイド）、ステロイドホルモンである。内因性コルチコステロイドは副腎皮質で合成され、血液中に分泌されて広範な生理系を調節する。全てのステロイドホルモンはコレステロールから合成され、ヒトでは、副腎皮質の主要な分泌物は、コルチゾール（グルココルチコイドファミリーのメンバー）及びアルドステロン（ミネラルコルチコイドファミリーのメンバー）である（総説については、Ｗｉｌｌｉａｍｓ ２０１８．Ｒｅｓｐｉｒ Ｃａｒｅ ６３（６）：６５５－６７０を参照のこと）。グルココルチコイドは、脂質、グルコース、及びタンパク質代謝を調節し、抗炎症／免疫抑制作用、並びに血管収縮効果を発揮するのに対して、ミネラルコルチコイドは、電解質及び水分バランスの主な調節因子である。フルドロコルチゾン及びデスオキシコルチコステロンアセテートを除いて、合成コルチコステロイドの大部分は、内因性グルココルチコイドの作用を再現している（表１参照）。実際、それらの臨床的効力はコルチゾールよりもはるかに高く、ミネラルコルチコイド作用は示さない。全身的に使用されるコルチコステロイドは、効力、ミネラルコルチコイド作用、及び視床下部－下垂体－副腎系抑制の持続期間によって分類される。効力はヒドロコルチゾンに対して表され、相当量を決定するのに有用である。ミネラルコルチコイド活性もまた、ヒドロコルチゾンに対して記載され、ステロイド分子に対する構造的修飾は、これらの薬剤が、アレルギー反応、炎症反応、又は免疫反応を予防又は治療するために薬理学的用量で使用される場合に、効力を高めるとともにミネラルコルチコイド作用を最小化するように設計される。これらの薬剤は、視床下部－下垂体－副腎系抑制の持続時間に基づいて、短時間作用型、中時間作用型、又は長時間作用型として分類される。
【0115】
【表1】
【0116】
該コルチコステロイドは、静脈内ボーラス若しくは持続注入として患者に適用されてもよく、又は経口投与されてもよい。
【0117】
本明細書で使用される「患者」という用語は、疾患のために医療を受けている又は医療を受ける必要がある生きているヒト又は非ヒト生物を指す。これには、病状の徴候について調査されている明確な病気を有していないヒトが含まれる。したがって、本明細書に記載される方法及びアッセイは、ヒト及び獣医学的疾患の両方に適用可能である。
【0118】
「重篤患者」という用語は、急性疾患又は急性状態に罹患している患者を指す。該重篤患者は、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止を含む群から選択され得る。
【0119】
このような急性疾患又は状態に罹患している患者は、慢性疾患（例えば、がん）のような併存疾患を有し得る。本発明による治療は、特に急性疾患又は状態の治療を目的とする。それは、がんを有する患者における急性疾患又は状態の治療であってもよく、必ずしもがん自体が治療されることを意味するものではない。本発明の具体的な実施形態において、該重篤患者は、当初、慢性疾患又は状態に罹患していない。本発明の非常に具体的な実施形態において、該重篤患者はアジソン病に罹患していない。
【0120】
閾値レベルは、例えばカプラン・マイヤー分析から得ることができ、そこでは疾患の発生が集団におけるバイオマーカーの四分位数と相関している。この分析によれば、バイオマーカーレベルが７５パーセンタイルを超える対象は、本発明による疾患に罹患するリスクが有意に高い。この結果は、古典的リスク因子を十分に調整したＣｏｘ回帰分析によって更に支持される。最高四分位数と他の全ての対象との比較は、本発明による疾患に罹患するリスクの増加と非常に有意に関連している。
【0121】
他の好ましいカットオフ値は、例えば、正常集団の９０パーセンタイル、９５パーセンタイル、又は９９パーセンタイルである。７５パーセンタイルよりも高いパーセンタイルを使用することにより、同定される偽陽性対象の数は減少するが、中程度であるが依然としてリスクが高い対象を同定し損なう可能性がある。したがって、「偽陽性」も同定してしまうことと引き換えにリスクのある対象の大部分を同定することがより適切と考えるか、又は中程度のリスクのいくつかの対象を見落としてしまうことと引き換えに主として高リスクの対象を同定することがより適切であると考えるか、に応じてカットオフ値を採用し得る。
【0122】
上述の閾値は、本発明で使用されるアッセイシステムとは異なって較正されている場合、他のアッセイでは異なる場合がある。したがって、上述の閾値は、較正の差を考慮し、そのような較正の異なるアッセイに合わせて適用されるものとする。較正の差を定量する１つの可能性は、目的のアッセイ（例えば、ｂｉｏ－ＡＤＭアッセイ）と本発明で使用する各バイオマーカーアッセイとの方法比較分析（相関）であり、試料中の各バイオマーカー（例えば、ｂｉｏ－ＡＤＭ）を両方の方法を用いて測定することにより行う。別の可能性は、この検査が十分な分析感度を有することを前提として、目的のアッセイを用いて代表的な正常集団のバイオマーカーレベルの中央値を決定し、結果を文献（例えば、Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７．ＪＡＬＭ ２（２）：２２２－２３３）に記載されているバイオマーカーレベルの中央値と比較し、この比較によって得られた差異に基づいて較正を再計算することである。本発明で使用する較正を用いて、正常な（健常）対象からの試料を測定した：血漿ｂｉｏ－ＡＤＭ（成熟ＡＤＭ－ＮＨ２）の中央値は１３．７ｐｇ／ｍＬ（四分位範囲［ＩＱＲ］９．６～１８．７ｐｇ／ｍＬ）であった（Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７．ＪＡＬＭ ２（２）：２２２－２３３）。
【0123】
本明細書を通して、本発明による「抗体」又は「抗体断片」又は「非Ｉｇ足場」はＡＤＭに結合することができ、したがって、ＡＤＭ指向性であり、したがって、「抗ＡＤＭ抗体」、「抗ＡＤＭ抗体断片」、又は「抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場」と呼ぶことができる。
【0124】
成熟ＡＤＭ、ｂｉｏ－ＡＤＭ、及びＡＤＭ－ＮＨ２は、本出願を通して同義的に使用され、配列番号４による分子である。
【0125】
診断方法の具体的な実施形態において、該結合剤は、プロアドレノメデュリン又はその断片（配列番号４によるＡＤＭ－ＮＨ２ではない）及びＡＤＭ－ＮＨ２に対して、少なくとも１０７Ｍ－１、好ましくは１０８Ｍ－１の結合親和性を示し、好ましい親和性は１０９Ｍ－１より大きく、最も好ましくは１０１０Ｍ－１より大きい。当業者であれば、より高用量の化合物を適用することによって、より低い親和性を補うことが考えられ得ることを知っており、この措置は本発明の範囲を逸脱するものではない。
【0126】
アドレノメデュリンに対する抗体の親和性を決定するために、固定化抗体に対するアドレノメデュリンの結合動態を、Ｂｉａｃｏｒｅ ２０００システム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｅｕｒｏｐｅ ＧｍｂＨ，Ｆｒｅｉｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いた非標識表面プラズモン共鳴によって決定した。抗体の可逆的固定化は、ＣＭ５センサー表面に高密度で共有結合させた抗マウスＦｃ抗体を使用して、製造元の説明書に従って行った（マウス抗体捕捉キット；ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、（Ｌｏｒｅｎｚ ｅｔ ａｌ．２０１１．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．５５（１）：１６５－１７３）。
【0127】
本方法の具体的な実施形態において、アッセイはＡＤＭ－ＮＨ２のレベルを決定するために使用され、そのようなアッセイは、サンドイッチアッセイ、好ましくは完全自動化アッセイである。
【0128】
本発明の一実施形態において、これは、完全自動化アッセイシステムを必要とせずに、患者の近くで１時間未満以内に検査を行うことを可能にする検査技術である、いわゆるＰＯＣ検査（臨床現場即時検査（point-of-care））であってもよい。この技術の一例としては、イムノクロマトグラフィー検査技術、例えばマイクロ流体デバイスである。
【0129】
診断方法の一実施形態において、そのようなアッセイは、酵素標識、化学発光標識、電気化学発光標識を含むがこれらに限定されない任意の種類の検出技術を使用するサンドイッチイムノアッセイであり、好ましくは完全自動化アッセイである。診断方法の一実施形態において、そのようなアッセイは、酵素標識サンドイッチアッセイである。自動化又は完全自動化アッセイの例としては、以下のシステム：Ｒｏｃｈｅ Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔ（登録商標）、Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｃｅｎｔａｕｅｒ（登録商標）、Ｂｒａｈｍｓ Ｋｒｙｐｔｏｒ（登録商標）、ＢｉｏｍｅｒｉｅｕｘＶｉｄａｓ（登録商標）、Ａｌｅｒｅ Ｔｒｉａｇｅ（登録商標）のうちの１つに使用され得るアッセイが挙げられる。
【0130】
様々なイムノアッセイが知られており、本発明のアッセイ及び方法に使用することができる。これらとしては、ラジオイムノアッセイ（「ＲＩＡ」）、均一酵素増幅イムノアッセイ（「ＥＭＩＴ」）、酵素結合免疫吸着アッセイ（「ＥＬＩＳＡ」）、アポ酵素再活性化イムノアッセイ（「ＡＲＩＳ」）、ディップスティックイムノアッセイ、及びイムノクロマトグラフィーアッセイが挙げられる。
【0131】
好ましい実施形態において、該標識は、化学発光標識、酵素標識、蛍光標識、放射性ヨウ素標識を含む群から選択される。
【0132】
アッセイは、均一又は不均一アッセイ、競合及び非競合アッセイであり得る。一実施形態において、アッセイは非競合イムノアッセイであるサンドイッチアッセイの形態であり、検出及び／又は定量される分子は、第１の抗体及び第２の抗体に結合される。第１の抗体は、固相、例えばビーズ、ウェル又は他の容器の表面、チップ又はストリップに結合され得、第２の抗体は、例えば色素、放射性同位体、又は反応性部分若しくは触媒活性部分で標識された抗体である。次いで、分析物に結合した標識抗体の量を、適切な方法によって測定する。「サンドイッチアッセイ」に関与する全般的な構成及び手順は確立されており、当業者に公知である（Ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｅｄ． Ｄａｖｉｄ Ｗｉｌｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ ＬＴＤ，Ｏｘｆｏｒｄ；３ｒｄ ｅｄ．（Ｍａｙ ２００５），ＩＳＢＮ－１３：９７８－００８０４４５２６７；Ｈｕｌｔｓｃｈｉｇ Ｃ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ．２００６ Ｆｅｂ；１０（１）：４－１０．ＰＭＩＤ：１６３７６１３４）。
【0133】
別の実施形態において、アッセイは、液体反応混合物中に分散物として存在する２つの捕捉分子、好ましくは抗体を含み、第１の標識成分は第１の捕捉分子に付着し、該第１の標識成分は蛍光又は化学発光－消光又は増幅に基づく標識システムの一部であり、該マーキングシステムの第２の標識成分は第２の捕捉分子に付着し、その結果、両方の捕捉分子が分析物に結合すると、測定可能なシグナルが生成され、試料を含む溶液中で形成されたサンドウィッチ複合体の検出が可能になる。
【0134】
別の実施形態において、該標識システムは、蛍光色素又は化学発光色素、特にシアニン系の色素と組み合わせた希土類クリプテート又は希土類キレートを含む。
【0135】
本発明の文脈において、蛍光に基づくアッセイは、色素の使用を含み、該色素は、例えば、ＦＡＭ（５－又は６－カルボキシフルオレセイン）、ＶＩＣ、ＮＥＤ、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＩＲＤ－７００／８００、シアニン色素、例えばＣＹ３、ＣＹ５、ＣＹ３．５、ＣＹ５．５、Ｃｙ７、キサンテン、６－カルボキシ－２’，４’，７’，４，７－ヘキサクロロフルオレセイン（ＨＥＸ）、ＴＥＴ、６－カルボキシ－４’，５’－ジクロロ－２’，７’－ジメトジフルオレセイン（dimethodyfluorescein）（ＪＯＥ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－６－カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、６－カルボキシ－Ｘ－ローダミン（ＲＯＸ）、５－カルボキシローダミン－６Ｇ（Ｒ６Ｇ５）、６－カルボキシローダミン－６Ｇ（ＲＧ６）、ローダミン、ローダミングリーン、ローダミンレッド、ローダミン１１０、ＢＯＤＩＰＹ色素、例えばＢＯＤＩＰＹ ＴＭＲ、オレゴングリーン、クマリン、例えばウンベリフェロン、ベンズイミド、例えばＨｏｅｃｈｓｔ ３３２５８；フェナントリジン、例えばＴｅｘａｓ Ｒｅｄ、Ｙａｋｉｍａ Ｙｅｌｌｏｗ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ、ＰＥＴ、エチジウムブロミド、アクリジニウム色素、カルバゾール色素、フェノキサジン色素、ポルフィリン色素、ポリメチン色素などを含む群から選択され得る。
【0136】
本発明の文脈において、化学発光に基づくアッセイは、（Ｋｉｒｋ－Ｏｔｈｍｅｒ，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．，ｅｘｅｃｕｔｉｖｅ ｅｄｉｔｏｒ，Ｊ．Ｉ．Ｋｒｏｓｃｈｗｉｔｚ；ｅｄｉｔｏｒ，Ｍ．Ｈｏｗｅ－Ｇｒａｎｔ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９３，ｖｏｌ．１５，ｐ．５１８－５６２（５５１～５６２頁の引用を含め、参照により本明細書に組み込まれる）において化学発光材料について記載された物理的原理に基づく色素の使用を含む。好ましい化学発光色素は、アクリジニウムエステルである。
【0137】
本明細書で言及される場合、「アッセイ」又は「診断アッセイ」は、診断の分野において適用される任意のタイプのものであり得る。このようなアッセイは、検出される分析物が１つ以上の捕捉プローブに特定の親和性で結合することに基づき得る。捕捉分子と標的分子又は目的の分子との間の相互作用に関して、親和定数は、好ましくは１０８Ｍ－１より大きい。
【0138】
本方法の具体的な実施形態において、該２つの結合剤の少なくとも１つは、検出されるために標識される。
【0139】
本発明は更に、本発明の方法を実施するためのキットであって、患者からの試料中のＡＤＭ－ＮＨ２のレベルを決定するための検出試薬と、該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬ、最も好ましくは７０ｐｇ／ｍＬであることに対応する基準データ、例えば基準レベル及び／又は閾値レベルと、を含み、該基準データは、好ましくはコンピュータ可読媒体に保存され、かつ／又はＡＤＭ－ＮＨ２の決定されたレベルが該基準データと比較されるように構成されたコンピュータ実行可能コードの形態で用いられる、キットに関する。
【0140】
本明細書に記載される方法の一実施形態において、該方法は、重篤患者におけるＡＤＭ－ＮＨ２の決定されたレベルを基準レベル及び／又は閾値レベルと比較することを更に含み、該比較は、コンピュータ実行可能コードを使用してコンピュータプロセッサにおいて実施される。
【0141】
本発明の方法は、部分的にコンピュータ実装されてもよい。例えば、マーカー、例えばＡＤＭ－ＮＨ２の検出されたレベルを基準レベル及び／又は閾値レベルと比較するステップは、コンピュータシステムにおいて実施することができる。例えば、決定された値は、コンピュータシステムに（医療従事者によって手動で、又はそれぞれのマーカーレベルを決定した装置から自動的に）入力され得る。コンピュータシステムは、臨床現場（例えば、初期医療ユニット又はＥＤ）に直接あってもよく、又はコンピュータネットワークを介して（例えば、インターネット、又は医療用クラウドシステムを介して、任意選択で病院情報システム（ＨＩＳ）などの他のＩＴシステム若しくはプラットフォームと組み合わせることができる）接続された遠隔地にあってもよい。あるいは、又はそれに加えて、関連する療法ガイダンス及び／又は療法層別化は、ユーザ（典型的には医師などの医療従事者）のために表示及び／又は印刷される。
【0142】
上記の文脈を踏まえ、以下の連続して付番された実施形態が本発明の更なる具体的な態様を提供する。
１．コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法。
２．
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、
実施形態１に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
３．該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、実施形態１及び２に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
４．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をプロアドレノメデュリン又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、実施形態１～３に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
５．該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、実施形態１～４に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
６．ＡＤＭのレベルが該対象の体液試料において決定され、該決定がＡＤＭのレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、実施形態１～５に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
７．ＡＤＭのレベルが異なる方法、例えばイムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法によって決定される、実施形態１～６に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
８．ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、実施形態１～７に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
９．該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、実施形態１～８に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１０．該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、実施形態１～９に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１１．該ミネラルコルチコイドがフルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、実施形態１～１０に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１２．該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、実施形態１～１１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１３．該体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、実施形態１～１２に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１４．ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、実施形態１～１３に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１５．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、実施形態１～１４に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１６．該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、実施形態１～１５に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１．コルチコステロイドによる治療のために重篤患者を選択する方法であって、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用し、該閾値を下回る値においてコルチコステロイドによる療法を採用しないことと、を含む、方法。
２．
ａ．該患者の体液試料を提供することと、
ｂ．該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
ｃ．該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、
実施形態１に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
３．該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、実施形態１及び２に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
４．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をプロアドレノメデュリン又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、実施形態１～３に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
５．該決定が、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、実施形態１～４に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
６．ＡＤＭのレベルが該対象の体液試料において決定され、該決定がＡＤＭのレベルに特異的に結合する捕捉結合剤の使用を含み、該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、実施形態１～５に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
７．ＡＤＭのレベルが異なる方法、例えばイムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法によって決定される、実施形態１～６に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
８．ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該アッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、実施形態１～７に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
９．該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、実施形態１～８に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１０．該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、実施形態１～９に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１１．該ミネラルコルチコイドがフルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、実施形態１～１０に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１２．該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、実施形態１～１１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１３．該体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、実施形態１～１２に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１４．ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、実施形態１～１３に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１５．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、実施形態１～１４に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
１６．該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、実施形態１～１５に記載の重篤患者におけるコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又は層別化のための方法。
【0143】
上記の文脈を踏まえ、以下の連続して付番された更なる実施形態が本発明の更なる具体的な態様を提供する。
１．重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、
●該患者の体液試料を提供することと、
●該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
●該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法。
２．該閾値を上回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が採用され、該閾値を下回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が保留される、実施形態１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
３．該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、実施形態１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
４．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、実施形態１及び３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
５．該捕捉結合剤が、ＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端部分（配列番号９）に特異的に結合し、該捕捉結合剤が、結合のためにＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端アミドを特異的に必要とする、実施形態４に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
６．該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、実施形態４及び５に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
７．該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、実施形態４～６に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
８．ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが、イムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法を含む群から選択される方法によって決定される、実施形態１～７に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
９．ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該イムノアッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、実施形態８に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１０．該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、実施形態１～９に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１１．該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、実施形態１０に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１２．該ミネラルコルチコイドが、フルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、実施形態１０に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１３．該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、実施形態３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１４．該体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、実施形態１～１３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１５．ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、実施形態１～１４に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１６．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、実施形態１～１５に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１７．該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、実施形態１～１６に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１８．重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較した場合に、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片の該所定の閾値を上回る値であるか、又は先に測定されたレベルを上回る値であることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイド。
１９．重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが該患者の体液試料において決定され、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較され、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法が採用されることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイド。
１．重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法であって、
●該患者の体液試料を提供することと、
●該試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを決定することと、
●該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較することと、
を含み、
ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、コルチコステロイド療法の開始が必要であるかどうかの指標である、方法。
２．該閾値を上回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が採用され、該閾値を下回るＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルにおいてコルチコステロイドによる療法が保留される、実施形態１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
３．該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、実施形態１に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
４．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該体液試料をＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に特異的に結合する捕捉結合剤と接触させることによって決定される、実施形態１及び３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
５．該捕捉結合剤が、ＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端部分（配列番号９）に特異的に結合し、該捕捉結合剤が、結合のためにＡＤＭ－ＮＨ２のＣ末端アミドを特異的に必要とする、実施形態４に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
６．該捕捉結合剤が、抗体、抗体断片、又は非ＩｇＧ足場の群から選択され得る、実施形態４及び５に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
７．該捕捉結合剤が表面上に固定化されている、実施形態４～６に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
８．ＡＤＭ－ＮＨ２のレベルが、イムノアッセイ、活性アッセイ、質量分析法を含む群から選択される方法によって決定される、実施形態１～７に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
９．ＡＤＭ－ＮＨ２を検出するための該イムノアッセイのアッセイ感度が、健常対象のＡＤＭ－ＮＨ２を定量することができ、それが７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、及びより好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、実施形態８に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１０．該患者が、グルココルチコイド又はミネラルコルチコイドからなる群から選択されるコルチコステロイドで治療される、実施形態１～９に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１１．該グルココルチコイドが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、又はベタメタゾンを含む群から選択され得る、実施形態１０に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１２．該ミネラルコルチコイドが、フルドロコルチゾンを含む群から選択され得る、実施形態１０に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１３．該コロナウイルスが、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－１、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶを含む群から選択され、特にＳａｒｓ－ＣｏＶ－２である、実施形態３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１４．該体液が、全血、血清、及び血漿を含む群から選択される、実施形態１～１３に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１５．ＡＤＭ－ＮＨ２の閾値レベルが、２０～１５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは３０～１００ｐｇ／ｍＬ、更により好ましくは４０～８０ｐｇ／ｍＬであり、最も好ましくは該閾値レベルが７０ｐｇ／ｍＬである、実施形態１～１４に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１６．ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片に加えて、更なるバイオマーカーを測定することができる、実施形態１～１５に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１７．該更なるバイオマーカーが、Ｄ－ダイマー、プロカルシトニン（ＰＣＴ）、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、ラクテート、ｐｅｎＫｉｄ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、白血球数、リンパ球数、好中球数、ヘモグロビン、血小板数、アルブミン、アラニントランスアミナーゼ、クレアチニン、血中尿素、乳酸デヒドロゲナーゼ、クレアチニンキナーゼ、心筋トロポニンＩ、プロトロンビン時間、血清フェリチン、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１０、ＩＬ－２、ＩＬ－７、インターフェロンガンマ（ＩＦ－γ）、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１αを含む群から選択される、実施形態１～１６に記載の重篤患者のコルチコステロイド療法ガイダンス及び／又はコルチコステロイド療法層別化の方法。
１８．重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、該患者の体液試料中のＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルを所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較した場合に、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片の該所定の閾値を上回る値であるか、又は先に測定されたレベルを上回る値であることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイド。
１９．重篤患者の治療に使用するためのコルチコステロイドであって、該患者は、ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが該患者の体液試料において決定され、該ＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルが、所定の閾値又は先に測定されたＡＤＭ－ＮＨ２又はその断片のレベルと比較され、該閾値を上回る値においてコルチコステロイドによる療法が採用されることを特徴とし、該重篤患者が、重症感染症、敗血症、敗血症性ショック、急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）、市中肺炎（ＣＡＰ）、髄膜炎（例えば、細菌性又はウイルス性髄膜炎）、コロナウイルス感染症（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）、心肺バイパス術（ＣＰＢ）、及び心停止の群から選択される疾患に罹患している患者である、コルチコステロイド。
【図面の簡単な説明】
【0144】
【図1】典型的なｂｉｏ－ＡＤＭ用量／シグナル曲線及び１００μｇ／ｍＬの抗体ＮＴ－Ｈの存在下でのｂｉｏ－ＡＤＭ用量シグナル曲線を示す。
【0145】
【図2】７０ｐｇ／ｍＬ超／未満のｂｉｏ－ＡＤＭ及び治療群（ＰＰ集団）ごとの敗血症性ショックを発症している患者の百分率（％）（薄灰色）を示す（ｐ＝０．０３３）。
【0146】
【図3】７０ｐｇ／ｍＬ超／未満のｂｉｏ－ＡＤＭ及び治療群（ＰＰ集団）ごとの９０日死亡率を示す。
【0147】
【図4】７０ｐｇ／ｍＬ超／未満のｂｉｏ－ＡＤＭ及び治療群（ＰＰ集団）ごとの入院期間を示す。
【実施例】
【0148】
実施例１－抗体の作製及びその親和定数の決定
本発明者らは、ｂｉｏ－ＡＤＭのＮ末端（ＮＴ－ＡＤＭ）、中央領域（ＭＲ－ＡＤＭ）、及びＣ末端（ＣＴ－ＡＤＭ）部分に結合するマウスモノクローナル抗体を開発し、それらの親和定数を決定した（表２）。
本発明者らは、ｂｉｏ－ＡＤＭのＮ末端（ＮＴ－ＡＤＭ）、中央領域（ＭＲ－ＡＤＭ）、及びＣ末端（ＣＴ－ＡＤＭ）部分に結合するマウスモノクローナル抗体を開発し、それらの親和定数を決定した（表２）。
【0149】
免疫化のためのペプチド
ペプチドは、ＪＰＴ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）によって供給された。ペプチドは、スルホ－ＳＭＣＣ架橋法を用い、ＢＳＡに結合させた。この架橋手順は、製造業者（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ／Ｐｉｅｒｃｅ）の説明書に従い行った。
ペプチドは、ＪＰＴ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）によって供給された。ペプチドは、スルホ－ＳＭＣＣ架橋法を用い、ＢＳＡに結合させた。この架橋手順は、製造業者（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ／Ｐｉｅｒｃｅ）の説明書に従い行った。
【0150】
マウス抗体の作製
Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目及び１４日目に１００μｇのペプチド－ＢＳＡ－コンジュゲート（１００μｌの完全フロイントアジュバント中に乳化）で、そして２１日目及び２８日目に５０μｇ（１００μｌの不完全フロイントアジュバント中）で免疫化した。融合実験を実施する３日前に、動物に１００μｌの生理食塩水に溶解した５０μｇのコンジュゲートを１回の腹腔内注射及び１回の静脈内注射として投与した。
Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目及び１４日目に１００μｇのペプチド－ＢＳＡ－コンジュゲート（１００μｌの完全フロイントアジュバント中に乳化）で、そして２１日目及び２８日目に５０μｇ（１００μｌの不完全フロイントアジュバント中）で免疫化した。融合実験を実施する３日前に、動物に１００μｌの生理食塩水に溶解した５０μｇのコンジュゲートを１回の腹腔内注射及び１回の静脈内注射として投与した。
【0151】
免疫化したマウスからの脾細胞及び骨髄腫細胞株ＳＰ２／０の細胞を、５０％ポリエチレングリコール１ｍｌにより、３０秒間、３７℃で融合した。洗浄後、細胞を９６ウェル細胞培養プレートに播種した。ハイブリッドクローンを、ＨＡＴ培地（２０％ウシ胎児血清及びＨＡＴサプリメントを補充したＲＰＭＩ １６４０培養培地）の中で増殖させることによって選択した。２週間後、ＨＡＴ培地をＨＴ培地と交換して３回継代した後、通常の細胞培養培地に戻した。
【0152】
この細胞培養上清を、融合の３週間後に抗原特異的ＩｇＧ抗体について一次スクリーニングした。陽性の試験したマイクロ培養物を、増殖のために２４ウェルプレートに移した。再試験の後、選択された培養物を、限界希釈法を用いてクローニング及び再クローニングし、アイソタイプを決定した（Ｌａｎｅ，１９８５．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．８１：２２３－２２８；Ｚｉｅｇｌｅｒ ｅｔ ａｌ．１９９６．Ｈｏｒｍ．Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｓ．２８：１１－１５）。
【0153】
【表2】
【0154】
モノクローナル抗体の生成
抗体を標準的な抗体生成方法によって生成し（Ｍａｒｘ ｅｔ ａｌ，１９９７．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ＡＴＬＡ ２５，１２１）、プロテインＡによって精製した。抗体純度は、ＳＤＳゲル電気泳動分析に基づいて９５％超であった。
抗体を標準的な抗体生成方法によって生成し（Ｍａｒｘ ｅｔ ａｌ，１９９７．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ＡＴＬＡ ２５，１２１）、プロテインＡによって精製した。抗体純度は、ＳＤＳゲル電気泳動分析に基づいて９５％超であった。
【0155】
親和定数
アドレノメデュリンに対する抗体の親和性を決定するために、固定化抗体に対するアドレノメデュリンの結合動態を、Ｂｉａｃｏｒｅ ２０００システム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｅｕｒｏｐｅ ＧｍｂＨ，Ｆｒｅｉｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いた非標識表面プラズモン共鳴によって決定した。抗体の可逆的固定化は、ＣＭ５センサー表面に高密度で共有結合させた抗マウスＦｃ抗体を使用して、製造元の説明書に従って行った（マウス抗体捕捉キット；ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）。
アドレノメデュリンに対する抗体の親和性を決定するために、固定化抗体に対するアドレノメデュリンの結合動態を、Ｂｉａｃｏｒｅ ２０００システム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｅｕｒｏｐｅ ＧｍｂＨ，Ｆｒｅｉｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いた非標識表面プラズモン共鳴によって決定した。抗体の可逆的固定化は、ＣＭ５センサー表面に高密度で共有結合させた抗マウスＦｃ抗体を使用して、製造元の説明書に従って行った（マウス抗体捕捉キット；ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）。
【0156】
標識手順（トレーサー）
１００μｇ（１００ｕＬ）の抗体（ＰＢＳ中１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ７．４）を、１０μＬのアクリジニウムＮＨＳエステル（アセトニトリル中１ｍｇ／ｍＬ、ＩｎＶｅｎｔ ＧｍｂＨ， Ｇｅｒｍａｎｙ）（ＥＰ ０ ３５３ ９７１）と混合し、２０分間室温でインキュベートした。標識したＣＴ－Ｈを、Ｂｉｏ－Ｓｉｌ（登録商標）ＳＥＣ ４００－５（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）でゲル濾過ＨＰＬＣにより精製した。精製された標識抗体を、（リン酸カリウム３００ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮａＣｌ １００ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｎａ－ＥＤＴＡ １０ｍｍｏｌ／Ｌ、ウシ血清アルブミン５ｇ／Ｌ、ｐＨ７．０）中に希釈した。最終濃度は、２００μＬ当たり約８００．０００の相対発光量（ＲＬＵ）の標識化合物（約２０ｎｇの標識抗体）であった。アクリジニウムエステル化学発光を、ＡｕｔｏＬｕｍａｔ ＬＢ ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．ＫＧ）を用いて測定した。
１００μｇ（１００ｕＬ）の抗体（ＰＢＳ中１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ７．４）を、１０μＬのアクリジニウムＮＨＳエステル（アセトニトリル中１ｍｇ／ｍＬ、ＩｎＶｅｎｔ ＧｍｂＨ， Ｇｅｒｍａｎｙ）（ＥＰ ０ ３５３ ９７１）と混合し、２０分間室温でインキュベートした。標識したＣＴ－Ｈを、Ｂｉｏ－Ｓｉｌ（登録商標）ＳＥＣ ４００－５（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）でゲル濾過ＨＰＬＣにより精製した。精製された標識抗体を、（リン酸カリウム３００ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮａＣｌ １００ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｎａ－ＥＤＴＡ １０ｍｍｏｌ／Ｌ、ウシ血清アルブミン５ｇ／Ｌ、ｐＨ７．０）中に希釈した。最終濃度は、２００μＬ当たり約８００．０００の相対発光量（ＲＬＵ）の標識化合物（約２０ｎｇの標識抗体）であった。アクリジニウムエステル化学発光を、ＡｕｔｏＬｕｍａｔ ＬＢ ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．ＫＧ）を用いて測定した。
【0157】
固相
ポリスチレンチューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＧ，Ａｕｓｔｒｉａ）を、抗体（抗体１．５μｇ／０．３ｍＬ、ＮａＣｌ １００ｍｍｏｌ／Ｌ、トリス／ＨＣｌ ５０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．８）によりコーティングした（室温で１８時間）。５％ウシ血清アルブミンでブロッキングした後、チューブをＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄し、真空乾燥した。
ポリスチレンチューブ（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＧ，Ａｕｓｔｒｉａ）を、抗体（抗体１．５μｇ／０．３ｍＬ、ＮａＣｌ １００ｍｍｏｌ／Ｌ、トリス／ＨＣｌ ５０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．８）によりコーティングした（室温で１８時間）。５％ウシ血清アルブミンでブロッキングした後、チューブをＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄し、真空乾燥した。
【0158】
キャリブレーター
合成ヒトＡＤＭ（ｈＡＤＭ）（Ｂａｃｈｅｍ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を、５０ｍＭトリス／ＨＣｌ、２５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、０．５％ＢＳＡ、２０錠／ＬのプロテアーゼＣｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤カクテル錠（Ｒｏｃｈｅ ＡＧ）；ｐＨ ７．８を用い、線形希釈した。キャリブレーターは、使用まで－２０℃で保管した。
合成ヒトＡＤＭ（ｈＡＤＭ）（Ｂａｃｈｅｍ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を、５０ｍＭトリス／ＨＣｌ、２５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、０．５％ＢＳＡ、２０錠／ＬのプロテアーゼＣｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤カクテル錠（Ｒｏｃｈｅ ＡＧ）；ｐＨ ７．８を用い、線形希釈した。キャリブレーターは、使用まで－２０℃で保管した。
【0159】
実施例２－高シグナル／ノイズ比を生じる抗体の組み合わせの決定
ＡＤＭイムノアッセイ
５０μｌの試料（又はキャリブレーター）を、コーティングしたチューブにピペットで入れ、標識した二次抗体（２００μｌ）を加えた後、チューブを室温で２時間インキュベートした。未結合のトレーサーを、洗浄液（２０ｍＭ ＰＢＳ、ｐＨ７．４、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００）で、５回洗浄（各１ｍｌ）することにより除去した。チューブに結合した化学発光を、ＬＢ ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．ＫＧ）を用いて測定した。
ＡＤＭイムノアッセイ
５０μｌの試料（又はキャリブレーター）を、コーティングしたチューブにピペットで入れ、標識した二次抗体（２００μｌ）を加えた後、チューブを室温で２時間インキュベートした。未結合のトレーサーを、洗浄液（２０ｍＭ ＰＢＳ、ｐＨ７．４、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００）で、５回洗浄（各１ｍｌ）することにより除去した。チューブに結合した化学発光を、ＬＢ ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．ＫＧ）を用いて測定した。
【0160】
全ての抗体を、コーティングされたチューブ及び標識抗体として、サンドイッチイムノアッセイにおいて使用し、以下のバリエーションで組み合わせた（表３参照）。インキュベーションは、ｈＡＤＭ－イムノアッセイ下で記載のように実施した。結果は、特異的シグナル（１０ｎｇ／ｍｌ ＡＤＭにおいて）／バックグラウンド（ＡＤＭを含まない試料）シグナルの比で示す。
【0161】
【表3】
【0162】
続いて、本発明者らは、この抗体の組み合わせを、ｂｉｏ－ＡＤＭを測定するための更なる調査に使用した。本発明者らは、固相抗体として抗ＭＲ－ＡＤＭを、標識抗体として抗ＣＴ－ＡＤＭを使用した。典型的な用量／シグナル曲線を図１に示す。アッセイの分析感度（１０回の実行の平均、ＡＤＭ不含試料＋２ＳＤ）は、２ｐｇ ＡＤＭ／ｍｌであった。
【0163】
実施例３－ヒトアドレノメデュリンの安定性
ヒトＡＤＭをヒトクエン酸血漿中に希釈し（ｎ＝５、最終濃度１０ｎｇ ＡＤＭ／ｍｌ）、２４℃でインキュベートした。選択された時点で、アリコートを－２０℃で凍結した。試料を解凍した直後に、ｈＡＤＭを、上記のｈＡＤＭイムノアッセイを使用することによって定量した。
ヒトＡＤＭをヒトクエン酸血漿中に希釈し（ｎ＝５、最終濃度１０ｎｇ ＡＤＭ／ｍｌ）、２４℃でインキュベートした。選択された時点で、アリコートを－２０℃で凍結した。試料を解凍した直後に、ｈＡＤＭを、上記のｈＡＤＭイムノアッセイを使用することによって定量した。
【0164】
表４は、２４℃でのヒト血漿中のｈＡＤＭの安定性を示す。
【表4】
【0165】
驚くべきことに、サンドイッチ免疫アッセイにおいてＭＲ－ＡＤＭ及びＣＴ－ＡＤＭの抗体の組み合わせを使用すると、分析物の分析前安定性が高かった（わずか０．９％／ｈの免疫反応性の平均喪失）。対照的に、他のアッセイ方法を使用して、わずか２２分の血漿半減期が報告されている（Ｈｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０００ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２１（２）：１３８－１６７）。病院ルーチンでの試料採取から分析までの時間は２時間未満であるため、使用されるＡＤＭ検出法は、ルーチン診断に適している。注目すべきことには、許容可能なＡＤＭ－免疫反応安定性に到達するために、試料へのいかなる非ルーチン添加剤（アプロチニンなど（Ｏｈｔａ ｅｔ ａｌ．１９９９．Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ ４５（２）：２４４－２５１））も必要とされない。
【0166】
実施例４－キャリブレーター調製物の再現性
本発明者らは、ＡＤＭアッセイのためのキャリブレーターの調製において、結果の変動が大きいことを見出した（平均ＣＶ ８．５％、表４参照）。これは、プラスチック及びガラス表面へのｈＡＤＭの高い吸着によるものであり得る（Ｌｅｗｉｓ ｅｔ ａｌ．１９９８．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４４（３）：５７１－５７７）。この作用は、界面活性剤（最大１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ １００又は１％Ｔｗｅｅｎ ２０）、タンパク質（最大５％ＢＳＡ）を添加することによって、及び高イオン強度（最大１Ｍ ＮａＣｌ）又はそれらの組み合わせによってわずかに減少しただけであった。驚くべきことに、過剰の抗ＡＤＭ抗体（１０μｇ／ｍｌ）をキャリブレーター希釈緩衝液に添加した場合、ＡＤＭアッセイキャリブレーター調製物の回収及び再現性は、調製物間ＣＶの１％未満まで実質的に改善された（表５）。
本発明者らは、ＡＤＭアッセイのためのキャリブレーターの調製において、結果の変動が大きいことを見出した（平均ＣＶ ８．５％、表４参照）。これは、プラスチック及びガラス表面へのｈＡＤＭの高い吸着によるものであり得る（Ｌｅｗｉｓ ｅｔ ａｌ．１９９８．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４４（３）：５７１－５７７）。この作用は、界面活性剤（最大１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ １００又は１％Ｔｗｅｅｎ ２０）、タンパク質（最大５％ＢＳＡ）を添加することによって、及び高イオン強度（最大１Ｍ ＮａＣｌ）又はそれらの組み合わせによってわずかに減少しただけであった。驚くべきことに、過剰の抗ＡＤＭ抗体（１０μｇ／ｍｌ）をキャリブレーター希釈緩衝液に添加した場合、ＡＤＭアッセイキャリブレーター調製物の回収及び再現性は、調製物間ＣＶの１％未満まで実質的に改善された（表５）。
【0167】
幸いなことに、Ｎ末端抗体の存在は、ＭＲ－及びＣ末端抗体の組み合わせによって生成されたｂｉｏ－ＡＤＭシグナルに影響を及ぼさなかった（図１）。
【0168】
【表5】
【0169】
キャリブレーターの調製物間の変動
ＡＤＭアッセイキャリブレーターは、１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体を添加したものと添加しないもので上記のように調製した。変動係数は、５回の独立した調製の実行から得られたものである。キャリブレーターは、上記のＡＤＭアッセイを用いて測定した（ｓ／ｎ－ｒ＝シグナル対ノイズ比）。以下の全ての試験について、本発明者らは、１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体、及びトレーサー緩衝液中のサプリメントとしての１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体の存在下で調製されたキャリブレーターに基づいてＡＤＭアッセイを使用した。
ＡＤＭアッセイキャリブレーターは、１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体を添加したものと添加しないもので上記のように調製した。変動係数は、５回の独立した調製の実行から得られたものである。キャリブレーターは、上記のＡＤＭアッセイを用いて測定した（ｓ／ｎ－ｒ＝シグナル対ノイズ比）。以下の全ての試験について、本発明者らは、１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体、及びトレーサー緩衝液中のサプリメントとしての１０μｇ／ｍｌのＮＴ－ＡＤＭ抗体の存在下で調製されたキャリブレーターに基づいてＡＤＭアッセイを使用した。
【0170】
実施例５
感度
アッセイ感度の目標は、健常対象のＡＤＭ濃度を完全に網羅することであった。
感度
アッセイ感度の目標は、健常対象のＡＤＭ濃度を完全に網羅することであった。
【0171】
健常対象におけるｂｉｏ－ＡＤＭ濃度
健常対象（ｎ＝１００、平均年齢５６歳）を、ｂｉｏ－ＡＤＭアッセイを使用して測定した。中央値は２４．７ｐｇ／ｍＬであり、最低値は１１ｐｇ／ｍＬであり、９９パーセンタイルは４３ｐｇ／ｍＬであった。アッセイ感度は２ｐｇ／ｍＬであったので、全健常対象の１００％が、記載されたｂｉｏ－ＡＤＭアッセイを使用して検出可能であった。
健常対象（ｎ＝１００、平均年齢５６歳）を、ｂｉｏ－ＡＤＭアッセイを使用して測定した。中央値は２４．７ｐｇ／ｍＬであり、最低値は１１ｐｇ／ｍＬであり、９９パーセンタイルは４３ｐｇ／ｍＬであった。アッセイ感度は２ｐｇ／ｍＬであったので、全健常対象の１００％が、記載されたｂｉｏ－ＡＤＭアッセイを使用して検出可能であった。
【0172】
実施例６－ＨＹＰＲＥＳＳ試験
試験の詳細
ＨＹＰＲＥＳＳ試験は、２００９年１月１３日から２０１３年８月２７日まで実施された二重盲検無作為化臨床試験であり、２０１４年２月２３日まで１８０日間のフォローアップが行われた（Ｋｅｈ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１６（１７）：１７７５－１７８５）。試験は、ドイツの大学及び地域病院の３４の中間又は集中治療室で実施され、敗血症性ショックではない重篤な敗血症を有する３８０人の成人患者を対象とした。
試験の詳細
ＨＹＰＲＥＳＳ試験は、２００９年１月１３日から２０１３年８月２７日まで実施された二重盲検無作為化臨床試験であり、２０１４年２月２３日まで１８０日間のフォローアップが行われた（Ｋｅｈ ｅｔ ａｌ．２０１６．ＪＡＭＡ ３１６（１７）：１７７５－１７８５）。試験は、ドイツの大学及び地域病院の３４の中間又は集中治療室で実施され、敗血症性ショックではない重篤な敗血症を有する３８０人の成人患者を対象とした。
【0173】
患者を、大学及び地域病院の中間治療室又は集中治療室（ＩＣＵ）において適格性についてスクリーニングし、書面によるインフォームドコンセントを、患者、患者が承認した代理人、又は法定代理人から得た。患者は、全ての選択基準を満たした場合に登録された：（１）インフォームドコンセントを提供すること；（２）感染の証拠があること；（３）全身性炎症反応症候群の基準１２のうち少なくとも２つとして定義される感染に対する全身性反応の証拠があること；及び（４）４８時間以内に存在する臓器機能不全の証拠があること。主な除外基準は敗血症性ショックであった。他の除外基準は、１８歳未満であること、ヒドロコルチゾン若しくはマンニトール（プラセボ）に対する既知の過敏症を有すること、又はグルココルチコイドの投薬歴があり、療法継続の適応症がある若しくはグルココルチコイドによる治療の他の適応症があることであった。登録前７２時間以内にエトミデートを使用した患者、登録前７２時間以内に短期間のグルココルチコイドを使用した患者、又は局所若しくは吸入グルココルチコイドを使用した患者は除外されなかった。
【0174】
敗血症性ショックは、４時間を超えて適切なボリュームステータスにもかかわらず敗血症誘発性低血圧であること（すなわち、平均動脈圧＜６５ｍｍＨｇ、収縮期動脈圧＜９０ｍｍＨｇ、又は平均動脈圧≧６５ｍｍＨｇ若しくは収縮期動脈圧≧９０ｍｍＨｇを維持するための昇圧剤の使用）として定義された。最初の蘇生中に昇圧剤を一時的に必要としたが、低血圧ではなく、少なくとも２時間にわたって昇圧剤を使用しなかった患者は、無作為化の時点で敗血症性ショックが存在しなかった場合に登録に適格とした。適切なボリュームステータスは、中心静脈圧が８ｍｍＨｇ以上（人工呼吸された患者では１２ｍｍＨｇ以上）であり、中心静脈酸素飽和度が７０％を超えるものと定義された。補液のために、患者は、少なくとも５００～１０００ｍＬのクリスタロイド又は３００～５００ｍＬのコロイドを３０分間にわたって投与されるものとした。ヒドロキシエチルデンプン製剤の使用は、腎機能に有害な影響を及ぼす可能性があるため推奨されなかった。昇圧剤の使用は、少なくとも５μｇ／ｋｇ／分の用量のドーパミンによる療法、又は任意の用量のエピネフリン、ノルエピネフリン、バソプレシン、若しくは他の昇圧剤による療法として定義された。
【0175】
治験薬（ヒドロコルチゾン及びプラセボ）は、ＢＡＧ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ ＧｍｂＨによって製造され、発売された。医薬は、患者１人に対して褐色ガラスバイアルが１７本ずつ入った箱で提供された。各バイアルには、１００ｍｇの凍結乾燥ヒドロコルチゾン水素サクシネート、又はプラセボとしてヒドロコルチゾンと区別がつかないようにされた同量の凍結乾燥マンニトールが入っていた。医薬は、５０ｍｇの静脈内ボーラスとして投与され、続いて、５日目に２００ｍｇ、６日目及び７日目に１００ｍｇ、８日目及び９日目に５０ｍｇ、並びに１０日目及び１１日目に２５ｍｇを２４時間持続注入として投与された。
【0176】
本分析では、ＳｅｐＮｅｔ試験ＨＹＰＲＥＳＳ試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ番号：ＮＣＴ００６７０２５４）のｉｎｔｅｎｔｉｏｎ－ｔｏ－ｔｒｅａｔデータセットから合計ｎ＝１１０の症例及び対照を選択し、そのうちｎ＝９７をプロトコルに従って治療し、分析のために選択した。ＩＣＵ入室中に敗血症性ショックを有する患者と有していない患者とを１：１の比で選択した。対照患者は、人口統計、臓器機能不全、併用薬、及び他の転帰に従ってマッチングした。
【0177】
症例対照試験の一次エンドポイントは、２８日以内の敗血症性ショックの発生、又はＩＣＵ退室であった。目標は、ｂｉｏ－ＡＤＭのレベル（７０ｐｇ／ｍＬ未満／超）と治療群（ヒドロコルチゾン対プラセボ）との間の潜在的相互作用を特定することであった。
【0178】
結果
ＰＰ集団からのｎ＝９７人の患者のうち、ｎ＝４７人（４９％）をヒドロコルチゾンで治療し、ｎ＝４１人（４２％）は登録時にｂｉｏ－ＡＤＭが上昇しており（＞７０ｐｇ／ｍＬ）、ｎ＝２５人（２６％）は９０日以内に死亡した。ヒドロコルチゾンで治療した患者におけるｂｉｏ－ＡＤＭの中央値は６７ｐｇ／ｍＬであり、プラセボでは５６ｐｇ／ｍＬであった（ｐ＝０．２７９）。ｂｉｏ－ＡＤＭは、治療群とは無関係に敗血症性ショックを予測した：ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者の６１％（ｎ＝２５／４１）が敗血症性ショックを発症したが、ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の場合には３６％（ｎ＝２０／５６）しか発症しなかった（ｐ＝０．０２４）。
ＰＰ集団からのｎ＝９７人の患者のうち、ｎ＝４７人（４９％）をヒドロコルチゾンで治療し、ｎ＝４１人（４２％）は登録時にｂｉｏ－ＡＤＭが上昇しており（＞７０ｐｇ／ｍＬ）、ｎ＝２５人（２６％）は９０日以内に死亡した。ヒドロコルチゾンで治療した患者におけるｂｉｏ－ＡＤＭの中央値は６７ｐｇ／ｍＬであり、プラセボでは５６ｐｇ／ｍＬであった（ｐ＝０．２７９）。ｂｉｏ－ＡＤＭは、治療群とは無関係に敗血症性ショックを予測した：ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者の６１％（ｎ＝２５／４１）が敗血症性ショックを発症したが、ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の場合には３６％（ｎ＝２０／５６）しか発症しなかった（ｐ＝０．０２４）。
【0179】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合、４０％がショックを発症したのに対し、プラセボ群では３２．３％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合、５０％がショックを発症したのに対し、プラセボ群では７３．７％であった（４群全てを比較したｐ値＝０．０３３；相互作用のｐ値＝０．１１９、図２）。
【0180】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合、７６．０％が９０日間のフォローアップを生存したのに対し、プラセボ群では７６．７％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合、７２．７％が９０日間のフォローアップを生存したのに対し、プラセボ群では６８．４％であった（相互作用のｐ値＝有意差なし、図３）。
【0181】
この所見を裏付けるように、対照群においてｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者は、より入院期間が長く、より多くの追加治療が必要であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合の入院期間中央値は２５日であったのに対し、プラセボ群では３５日であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合の入院期間中央値は２２日であったのに対し、プラセボ群では２２日であった（４群全てを比較したｐ値＝０．５９７、図４）。
【0182】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療して外科的介入を必要としたのは２７．３％のみであったのに対し、プラセボ群では５７．９％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合、外科的介入を必要としたのは４８．０％であったのに対し、プラセボ群では６１．３％であった（４群全てを比較したｐ値＝０．０８５）。
【0183】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にプロポフォールによる追加治療を必要としたのは４．５％のみであったのに対し、プラセボ群では３１．６％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にプロポフォールによる追加治療を必要としたのは１６．０％であったのに対し、プラセボ群では１２．９％であった（４群全てを比較したｐ値＝０．１１４）。
【0184】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にベンゾジアゼピンによる追加治療を必要としたのは１３．６％のみであったのに対し、プラセボ群では３１．６％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にベンゾジアゼピンによる追加治療を必要としたのは１２．０％であったのに対し、プラセボ群では１２．９％であった（４群全てを比較したｐ値＝０．２８２）。
【0185】
ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬを超える患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にオピオイドによる追加治療を必要としたのは３１．８％のみであったのに対し、プラセボ群では５７．９％であった。ｂｉｏ－ＡＤＭが７０ｐｇ／ｍＬ未満の患者では、ヒドロコルチゾンで治療した場合にオピオイドによる追加治療を必要としたのは４０．０％であったのに対し、プラセボ群では４１．９％であった（４群全てを比較したｐ値＝０．４０１）。
配列
配列番号１（ｐｒｅｐｒｏＡＤＭ：１８５アミノ酸）
ＭＫＬＶＳＶＡＬＭＹＬＧＳＬＡＦＬＧＡＤＴＡＲＬＤＶＡＳＥＦＲＫＫＷＮＫＷＡＬＳＲＧＫＲＥＬＲＭＳＳＳＹＰＴＧＬＡＤＶＫＡＧＰＡＱＴＬＩＲＰＱＤＭＫＧＡＳＲＳＰＥＤＳＳＰＤＡＡＲＩＲＶＫＲＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹＧＲＲＲＲＲＳＬＰＥＡＧＰＧＲＴＬＶＳＳＫＰＱＡＨＧＡＰＡＰＰＳＧＳＡＰＨＦＬ
配列番号２（プロアドレノメデュリンＮ－２０末端ペプチド、ＰＡＭＰ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸２２～４１）
ＡＲＬＤＶＡＳＥＦ ＲＫＫＷＮＫＷＡＬＳ Ｒ
配列番号３（中間領域プロアドレノメデュリン、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸４５～９２）
ＥＬＲＭＳＳ ＳＹＰＴＧＬＡＤＶＫ ＡＧＰＡＱＴＬＩＲＰ ＱＤＭＫＧＡＳＲＳＰ ＥＤＳＳＰＤＡＡＲＩ ＲＶ
配列番号４（成熟ヒトアドレノメデュリン（成熟ＡＤＭ）； アミド化ＡＤＭ； ｂｉｏ－ＡＤＭ）：ｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸１～５２又はアミノ酸９５～１４６
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ２
配列番号５（アドレノメデュリン１－５２－Ｇｌｙ（ＡＤＭ １－５２－Ｇｌｙ）：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸９５～１４７）
ＹＲＱＳＭＮ ＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣ ＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬ ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫ ＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫ ＩＳＰＱＧＹＧ
配列番号６（Ｃ末端プロアドレノメデュリン、ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸１４８～１８５）
ＲＲＲ ＲＲＳＬＰＥＡＧＰＧ ＲＴＬＶＳＳＫＰＱＡ ＨＧＡＰＡＰＰＳＧＳ ＡＰＨＦＬ
配列番号７（ヒトＡＤＭ １－２１）
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ
配列番号８（ヒトＡＤＭ ２１－３２）
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ
配列番号９（ヒトＡＤＭ Ｃ－４２－５２）
ＣＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ２
配列
配列番号１（ｐｒｅｐｒｏＡＤＭ：１８５アミノ酸）
ＭＫＬＶＳＶＡＬＭＹＬＧＳＬＡＦＬＧＡＤＴＡＲＬＤＶＡＳＥＦＲＫＫＷＮＫＷＡＬＳＲＧＫＲＥＬＲＭＳＳＳＹＰＴＧＬＡＤＶＫＡＧＰＡＱＴＬＩＲＰＱＤＭＫＧＡＳＲＳＰＥＤＳＳＰＤＡＡＲＩＲＶＫＲＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹＧＲＲＲＲＲＳＬＰＥＡＧＰＧＲＴＬＶＳＳＫＰＱＡＨＧＡＰＡＰＰＳＧＳＡＰＨＦＬ
配列番号２（プロアドレノメデュリンＮ－２０末端ペプチド、ＰＡＭＰ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸２２～４１）
ＡＲＬＤＶＡＳＥＦ ＲＫＫＷＮＫＷＡＬＳ Ｒ
配列番号３（中間領域プロアドレノメデュリン、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸４５～９２）
ＥＬＲＭＳＳ ＳＹＰＴＧＬＡＤＶＫ ＡＧＰＡＱＴＬＩＲＰ ＱＤＭＫＧＡＳＲＳＰ ＥＤＳＳＰＤＡＡＲＩ ＲＶ
配列番号４（成熟ヒトアドレノメデュリン（成熟ＡＤＭ）； アミド化ＡＤＭ； ｂｉｏ－ＡＤＭ）：ｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸１～５２又はアミノ酸９５～１４６
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ２
配列番号５（アドレノメデュリン１－５２－Ｇｌｙ（ＡＤＭ １－５２－Ｇｌｙ）：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸９５～１４７）
ＹＲＱＳＭＮ ＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣ ＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬ ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫ ＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫ ＩＳＰＱＧＹＧ
配列番号６（Ｃ末端プロアドレノメデュリン、ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏＡＤＭのアミノ酸１４８～１８５）
ＲＲＲ ＲＲＳＬＰＥＡＧＰＧ ＲＴＬＶＳＳＫＰＱＡ ＨＧＡＰＡＰＰＳＧＳ ＡＰＨＦＬ
配列番号７（ヒトＡＤＭ １－２１）
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ
配列番号８（ヒトＡＤＭ ２１－３２）
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ
配列番号９（ヒトＡＤＭ Ｃ－４２－５２）
ＣＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ２
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【配列表】
【国際調査報告】