特表 2024-519888 カプシド変異を有する組換えアデノ随伴ウイルス及びその応用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-05-21

(54)【発明の名称】カプシド変異を有する組換えアデノ随伴ウイルス及びその応用

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/015 20060101AFI20240514BHJP

   C12N 7/00 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 15/35 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20240514BHJP

   A61K 35/76 20150101ALI20240514BHJP

   A61K 31/7088 20060101ALI20240514BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20240514BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20240514BHJP

   C12N 15/864 20060101ALN20240514BHJP

【ＦＩ】

C07K14/015 ZNA

C12N7/00

C12N15/35

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/21

C12N5/10

C12N1/19

A61K35/76

A61K31/7088

A61K48/00

A61P27/02

C12N15/864 100Z

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023571788

(86)(22)【出願日】2022-05-27

(85)【翻訳文提出日】2023-11-17

(86)【国際出願番号】 CN2022095422

(87)【国際公開番号】W WO2022247917

(87)【国際公開日】2022-12-01

(31)【優先権主張番号】202110594986.X

(32)【優先日】2021-05-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523435750

【氏名又は名称】上海瑞宏迪医薬有限公司

【氏名又は名称原語表記】Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｒｅｇｅｎｅｌｅａｄ Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ Ｃｏ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｓｅｃｏｎｄ Ｆｌｏｏｒ， Ｎｏ．１３ Ｂｕｉｌｄｉｎｇ， Ｎｏ． ２７ Ｘｉｎｊｉｎｑｉａｏ Ｒｏａｄ， Ｆｒｅｅ Ｔｒａｄｅ Ｐｉｌｏｔ Ｚｏｎｅ， Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ａｒｅａ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１２０６， Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100138911

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻井 陽子

(72)【発明者】

【氏名】張 文涛

(72)【発明者】

【氏名】廖 成

(72)【発明者】

【氏名】寧 威

【テーマコード（参考）】

4B065

4C084

4C086

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA95X

4B065AA95Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA44

4C084AA13

4C084NA05

4C084NA06

4C084NA13

4C084ZA331

4C084ZA332

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA02

4C086MA05

4C086MA66

4C086NA05

4C086NA13

4C086NA14

4C086ZA33

4C087AA01

4C087AA02

4C087BC83

4C087CA12

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA01

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

カプシド変異を有する組換えアデノ随伴ウイルス及びその応用を提供する。具体的には、変異体アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質、上記変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を含む組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）のウイルス粒子及びその標的細胞（例えば、網膜細胞）に遺伝子産物を送達する応用を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して挿入したポリペプチドを含む変異体アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質であって、
前記挿入したポリペプチドは、以下の１）～６）：
１）ＬＧＤＴＴＲＰ（配列番号１２）又はＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡ（配列番号１８）、
２）ＬＡＥＴＴＲＰ（配列番号１１）又はＬＡＬＡＥＴＴＲＰＡ（配列番号１７）、
３）ＬＧＥＴＴＲＮ（配列番号１３）又はＬＡＬＧＥＴＴＲＮＡ（配列番号１９）、
４）ＫＡＤＴＴＫＮ（配列番号１４）又はＬＡＫＡＤＴＴＫＮＡ（配列番号２０）、
５）ＫＤＤＴＴＲＮ（配列番号１５）又はＬＡＫＤＤＴＴＲＮＡ（配列番号２１）、
６）ＬＡＤＴＴＫＮ（配列番号１６）又はＬＡＬＡＤＴＴＫＮＡ（配列番号２２）
からなる群より選ばれた何れか一項に示されるポリペプチド又はそれらの任意の組み合わせを含む、
変異体ＡＡＶカプシドタンパク質。

【請求項2】

前記１）～６）の何れか一項のポリペプチド又はそれらの任意の組み合わせは、前記ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨ環内に位置し、
好ましくは、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＶＰ１をコードするアミノ酸配列の第５７０位と６１１位との間の任意のアミノ酸残基の後に位置し、
より好ましくは、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＶＰ１をコードするアミノ酸配列の第５８７位と５８８位との間、又は親ＡＡＶ９カプシドタンパク質のＶＰ１をコードするアミノ酸配列の第５８８位と５８９位との間、又は他の親ＡＡＶ血清型カプシドタンパク質の対応する位置に位置する、
請求項１に記載の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質。

【請求項3】

１Ｌ、１５Ｐ、３４Ａ、５７Ｄ、６６Ｋ、８１Ｑ、１０１Ｒ、１０９Ｔ、１４４Ｋ、１４４Ｍ、１６４Ｋ、１７６Ｐ、１８８Ｉ、１９６Ｙ、２２６Ｅ、２３６Ｖ、２４０Ｔ、２５０Ｓ、３１２Ｋ、３６３Ｌ、３６８Ｈ、４４９Ｄ、４５６Ｋ、４６３Ｙ、４７２Ｎ、４８４Ｃ、５２４Ｔ、５３５Ｓ、５５１Ｓ、５９３Ｅ、６９８Ｖ、７０８Ｉ、７１９Ｍ、７２１Ｌ及び７３５Ｑからなる群より選ばれた１つ又は複数のアミノ酸残基の点変異を更に含み、前記変異の位置は、配列番号１に示されるＡＡＶ２のカプシドタンパク質、又は他のＡＡＶ血清型カプシドタンパク質の対応する位置に基づき、
好ましくは、前記点変異は７０８Ｉである、
請求項１又は２に記載の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質。

【請求項4】

アミノ酸配列は、配列番号３～９及び２３～２７の何れか１つに示されるか、或いはそれと少なくとも９０％又は９５％の配列同一性を有する、
請求項１～３の何れか一項に記載の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質。

【請求項5】

組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子であって、
（ａ）請求項１～４の何れか一項に記載の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質と、
（ｂ）異種ポリヌクレオチドと、を含む、
（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子。

【請求項6】

前記異種ポリヌクレオチドは、ポリペプチド、干渉ＲＮＡ又はアプタマーから選ばれる遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドを含み、
前記ポリペプチドは、好ましくは抗体又はその抗原結合断片、融合タンパク質である、
請求項５に記載のｒＡＡＶウイルス粒子。

【請求項7】

前記異種ポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｇ）：
（ａ）５’末端逆位反復配列（５’ＩＴＲ）及び／又は３’末端逆位反復配列（３’ＩＴＲ）、
（ｂ）５’未翻訳領域（５’ＵＴＲ）及び／又は３’未翻訳領域（３’ＵＴＲ）、
（ｃ）プロモーター、
（ｄ）エンハンサー、
（ｅ）転写後調節エレメント、
（ｆ）ポリアデニル化シグナル（ｐｏｌｙＡ）、及び
（ｇ）Ｋｏｚａｋ配列
からなる群より選ばれた１つ又は複数を更に含み、
好ましくは、前記異種ポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｇ）：
（ａ）ＡＡＶ２に由来する５’ＩＴＲ及び／又は３’ＩＴＲ、
（ｂ）Ｘｅｎｏｐｕｓ ｇｌｏｂｉｎに由来する５’ＵＴＲ及び／又は３’ＵＴＲ、
（ｃ）ＣＭＶプロモーター、
（ｄ）ＣＭＶエンハンサー、
（ｅ）ＷＰＲＥ、
（ｆ）ＳＶ４０ ｐｏｌｙＡ、及び
（ｇ）Ｋｏｚａｋ配列
からなる群より選ばれた１つ又は複数を更に含む、
請求項６に記載のｒＡＡＶウイルス粒子。

【請求項8】

前記異種ポリヌクレオチドは、５’末端から３’末端へ、下記のように操作可能に連結され、以下の（ａ）～（ｈ）：
（ａ）エンハンサー、
（ｂ）プロモーター、
（ｃ）５’ＵＴＲ、
（ｄ）Ｋｏｚａｋ配列、
（ｅ）遺伝子産物をコードするポリヌクレオチド、
（ｆ）３’ＵＴＲ、
（ｇ）ＷＰＲＥ、
（ｈ）ｐｏｌｙＡ
のように順序付けられたポリヌクレオチドを含む、
請求項７に記載のｒＡＡＶウイルス粒子。

【請求項9】

前記ポリペプチドは、神経保護ポリペプチド、抗血管新生ポリペプチド、網膜細胞機能を強化するポリペプチドであり、
好ましくは、前記抗血管新生ポリペプチドはＶＥＧＦアンタゴニストであり、
より好ましくは、前記ＶＥＧＦアンタゴニストはアフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）である、
請求項６～８の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子。

【請求項10】

前記異種ポリヌクレオチドは、配列番号３８に示されるアフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを含み、
好ましくは、前記異種ポリヌクレオチドは、配列番号３９～４１の何れか１つに示されるか、或いはそれと少なくとも９０％又は９５％の配列同一性を有するポリヌクレオチドを含む、
請求項５～９の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子。

【請求項11】

分離したポリヌクレオチドであって、
請求項１～４の何れか一項に記載の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質をコードする、
ポリヌクレオチド。

【請求項12】

ベクターであって、
（ａ）請求項１１に記載の分離したポリヌクレオチドと、又は
（ｂ）請求項１１に記載の分離したポリヌクレオチド及び請求項５～１０の何れか一項に記載の異種ポリヌクレオチドと、を含む、
ベクター。

【請求項13】

請求項１２に記載のベクターを含む、
宿主細胞。

【請求項14】

医薬組成物であって、
（ａ）請求項５～１０の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子と、
（ｂ）１種又は複数種の薬学的に許容されるベクター、希釈剤、賦形剤又は緩衝液と、を含む、
医薬組成物。

【請求項15】

網膜細胞に特異的に感染する方法であって、
有効量の請求項５～１０の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子、請求項５～１０の何れか一項に記載の異種ポリヌクレオチド又は請求項１４に記載の医薬組成物を眼内に注射するステップを含み、好ましくは、硝子体内注射又は網膜下注射による、
方法。

【請求項16】

眼部関連疾患を治療する方法であって、
予防又は治療有効量の請求項５～１０の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子、請求項５～１０の何れか一項に記載の異種ポリヌクレオチド又は請求項１４に記載の医薬組成物を、必要とする対象に投与することを含み、好ましくは、硝子体内注射又は網膜下注射による、
方法。

【請求項17】

前記眼部関連疾患は網膜細胞疾患であり、好ましくは、前記網膜細胞疾患は、光受容細胞、網膜神経節細胞、Ｍｕｌｌｅｒ細胞、双極細胞、アマクリン細胞、水平細胞又は網膜色素上皮細胞から選ばれる疾患である、
請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

前記眼部関連疾患は、網膜色素変性、黄斑変性、湿性ＡＭＤ、乾性ＡＭＤ、網膜血管新生、脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜病変、増殖性糖尿病網膜病変、網膜静脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜静脈分枝閉塞症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性網膜虚血、虚血性網膜病変、糖尿病性網膜浮腫、網膜剥離、緑内障、レーベル先天性黒内障及び／又は色盲から選ばれる、
請求項１６又は１７に記載の方法。

【請求項19】

体外及び／又は体内で標的細胞に異種ポリヌクレオチドを送達する方法であって、
前記標的細胞を、請求項５～１０の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子、請求項５～１０の何れか一項に記載の異種ポリヌクレオチド又は請求項１４に記載の医薬組成物と接触させることを含む、
方法。

【請求項20】

ｒＡＡＶウイルス粒子産生システムであって、
（ａ）請求項１１に記載の分離したポリヌクレオチドと、
（ｂ）遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチドと、
（ｃ）遺伝子産物をコードする（ｂ）の異種ポリヌクレオチドを（ａ）の変異体ＡＡＶカプシドにパッケージングするのに十分なＡＡＶ ｒｅｐ機能及びヘルパー機能を有するヘルパーエレメントと、を含む、
システム。

【請求項21】

請求項５～１０の何れか一項に記載のｒＡＡＶウイルス粒子を産生又は製造する方法であって、
請求項１２に記載のベクター、ヘルパーエレメントを含むベクターを産生細胞に導入し、前記ｒＡＡＶウイルス粒子をパッケージング、精製することを含む、
方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願は、２０２１年０５月２８日に提出された、出願番号が２０２１１０５９４９８６．Ｘである中国特許出願の優先権を主張する。

【0002】

本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）技術分野に関し、具体的には、カプシド変異を有するｒＡＡＶウイルス粒子及び標的細胞（例えば、網膜細胞）に遺伝子産物を送達するその応用に関する。

【背景技術】

【0003】

アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、パルボウイルス科（Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ）のディペンドウイルス属（Ｄｅｐｅｎｄｏｖｉｒｕｓ）に属し、小さな（２５ｎｍ）、非エンベロープ単鎖ＤＮＡウイルスであり、核酸が二十面体カプシド（ｃａｐ）でカプセル化されている。ＡＡＶは、ゲノム複製に必要な４つのタンパク質（Ｒｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２及びＲｅｐ４０）をコードするためのｒｅｐ、ウイルスカプシド構築に必要な３つの構造タンパク質（ＶＰ１～ＶＰ３）をコードするためのｃａｐである２つのオープンリーディングフレームを含む。

【0004】

ＡＡＶは、ベクターとして、遺伝性疾患、先天性疾患の治療に対する大きな潜在力を示し、遺伝子補充療法（遺伝子強化療法とも呼ばれる）に使用されている。欠失した遺伝子機能を補完することにより、変異による遺伝子機能の喪失や調節不全を回復して、目的細胞の生物学的機能を正常な生理状態に回復させる。臨床前疾患モデル及びヒト臨床試験におけるＡＡＶに基づいたベクターの表現が、幾つかの疾患治療の適用の将来性を示し、例えば、遺伝子の網膜細胞への効率的な転移及び長期的且つ持続的発現を達成することができることが研究により示されている（Ｂｏｙｅ ｅｔ ａｌ． Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１３ Ｍａｒ、２１（３）：５０９－１９． Ｔｒａｐａｎｉ ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｇ Ｒｅｔｉｎ Ｅｙｅ Ｒｅｓ． ２０１４ Ｎｏｖ、４３：１０８－２８．）。現在、臨床で使用されているＡＡＶベクターは、遺伝子工学改変により、ヘルパーウイルス無しで潜伏状態を呈し、その安全性及び導入遺伝子の長期発現は、齧歯類動物モデル、非ヒト霊長類動物及び複数の人体試験で広く試験されている（ＭａｃＬａｒｅｎ ｅｔ ａｌ． Ｌａｎｃｅｔ．２０１４ Ｍａｒ ２９、３８３（９９２３）：１１２９－３７、Ｍａｇｕｉｒｅ ｅｔ ａｌ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ２００８ Ｍａｙ ２２、３５８（２１）：２２４０－８、Ｓｉｍｏｎｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ． Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ． ２０１０ Ｍａｒ、１８（３）：６４３－５０、Ｎａｔｈｗａｎｉ ｅｔ ａｌ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ２０１４ Ｎｏｖ ２０、３７１（２１）：１９９４－２００４）。

【0005】

ＡＡＶカプシドタンパク質は、組成及び構造において異なる天然に存在し、異なるカプシドは、異なる組織指向性を有する。複数の相同霊長類ＡＡＶ血清型及び非ヒト霊長類ＡＡＶ血清型が同定されており、異なる改変されたＡＡＶ変異体（ＡＡＶ血清型とも呼ばれる）が開発されている。ＡＡＶベクターは、様々な生体及び組織において、ある程度の拡散感染が示されているが、多くの臨床試験、特に眼部遺伝子治療における応用において、何れも局所的な病変領域注入が使用されている。現在の主な眼部臨床実施形態は、網膜下腔注射（即ち、ＲＰＥと光受容細胞との間に液体を注射した後に形成された空洞）及び硝子体腔注射である。網膜下腔注射により、ＡＡＶがＲＰＥ及び光受容細胞に十分に接触でき、局所感染効果が高いが、注射操作に対するリスクが高く、網膜脱落を引き起こしやすい。硝子体腔注射の場合、ＡＡＶ製剤は、まず硝子体液中に均一に分布し、次に網膜を層ごとに拡散感染する。網膜層の緻密な構造及び複雑な細胞集団構成のため、眼部に対する強い浸潤性を有するネイティブ血清型のＡＡＶ８、ＡＡＶ２は、硝子体腔注射時に効果が低いが、部分的に改変されたカプシドは、硝子体腔注射を実施する時に強い感染能力（例えば、ＡＡＶＤＪ、ＡＡＶ２．７Ｍ８など）が示されている。

【0006】

当該分野では、依然として新型ＡＡＶ変異体が必要である。本開示は、新しい構造のカプシドタンパク質を有し、網膜組織に対する感染指向性が高く、異種遺伝子に対する発現効率が高い組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）のウイルス粒子を提供するため、臨床治療のためにより潜在力のある方法を提供する。

【発明の概要】

【0007】

本開示は、変異体ＡＡＶカプシドタンパク質及びそれが保有し得る遺伝子産物、上記カプシドタンパク質を含むｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、上記ｒＡＡＶウイルス粒子に感染する細胞（例えば、網膜細胞）、疾患（例えば、眼部疾患）を治療及び予防する方法並びに製薬用途を提供する。

【0008】

変異体アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質
本開示は、親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して挿入したポリペプチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質を提供しており、上記挿入したポリペプチドは、以下の１）～６）：
１）ＬＡＥＴＴＲＰ（配列番号１１）又は配列番号１１からなるポリペプチド、
２）ＬＧＤＴＴＲＰ（配列番号１２）又は配列番号１２からなるポリペプチド、
３）ＬＧＥＴＴＲＮ（配列番号１３）又は配列番号１３からなるポリペプチド、
４）ＫＡＤＴＴＫＮ（配列番号１４）又は配列番号１４からなるポリペプチド、
５）ＫＤＤＴＴＲＮ（配列番号１５）又は配列番号１５からなるポリペプチド、
６）ＬＡＤＴＴＫＮ（配列番号１６）又は配列番号１６からなるポリペプチド
からなる群より選ばれた何れか一項に示されるポリペプチド又はそれらの任意の組み合わせを含む。

【0009】

本開示は、親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して挿入したポリペプチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質を提供しており、上記ポリペプチドは、Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ＴＴＸ_４Ｘ_５（配列番号３５）を含むか、又は配列番号３５からなり、そのうち、Ｘ_１はＬ又はＫから選ばれ、Ｘ_２はＧ、Ｄ又はＡから選ばれ、Ｘ_３はＤ又はＥから選ばれ、Ｘ_４はＲ又はＫから選ばれ、Ｘ_５はＰ又はＮから選ばれる。

【0010】

幾つかの実施形態において、上記１）～６）又は配列番号３５に示されるポリペプチドは、そのアミノ末端及び／又はカルボキシ末端において１個～４個のスペーサーアミノ酸（Ｙ_１～Ｙ_４）を有する。幾つかの具体的な実施形態において、上記スペーサーアミノ酸は、Ａ、Ｌ、Ｇ、Ｓ及びＴを含むが、これらに限定されない。

【0011】

本開示は、親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して挿入したポリペプチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質を提供しており、上記ポリペプチドは、Ｙ_１Ｙ_２Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ＴＴＸ_４Ｘ_５Ｙ_３Ｙ_４（配列番号３６）を含むか、又は配列番号３６からなり、そのうち、Ｘ_１はＬ又はＫから選ばれ、Ｘ_２はＧ、Ｄ又はＡから選ばれ、Ｘ_３はＤ又はＥから選ばれ、Ｘ_４はＲ又はＫから選ばれ、Ｘ_５はＰ又はＮから選ばれ、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４は独立的に存在又は非存在であってもよく、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４は独立的にＡ、Ｌ、Ｇ、Ｓ及びＴから選ばれてもよい。例えば、Ｙ_１はＬ、Ｙ_２はＡ、Ｙ_３はＡ、Ｙ_４は存在しない。

【0012】

本開示は、親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して挿入したポリペプチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質を提供しており、上記挿入したポリペプチドは、以下の１－１）～１－６）：
１－１）ＬＡＬＡＥＴＴＲＰＡ（配列番号１７）を含むか、又は配列番号１７からなるポリペプチド、
２－１）ＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡ（配列番号１８）を含むか、又は配列番号１８からなるポリペプチド、
３－１）ＬＡＬＧＥＴＴＲＮＡ（配列番号１９）を含むか、又は配列番号１９からなるポリペプチド、
４－１）ＬＡＫＡＤＴＴＫＮＡ（配列番号２０）を含むか、又は配列番号２０からなるポリペプチド、
５－１）ＬＡＫＤＤＴＴＲＮＡ（配列番号２１）を含むか、又は配列番号２１からなるポリペプチド、
６－１）ＬＡＬＡＤＴＴＫＮＡ（配列番号２２）を含むか、又は配列番号２２からなるポリペプチド
からなる群より選ばれた何れか一項に示されるポリペプチド又はそれらの任意の組み合わせを含む。

【0013】

幾つかの実施形態において、上記ＡＡＶカプシドタンパク質は、ＡＡＶ２カプシドタンパク質、又はＡＡＶ９カプシドタンパク質である。

【0014】

幾つかの実施形態において、上記１）～６）、１－１）～６－１）、配列番号３５又は３６のポリペプチドは、親ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨ環又はＩＶ環（環状ドメインＩＶ）に、例えばＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨ環又はＩＶ環の溶媒接近性部分に位置する（ｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１４：８０９、Ｐａｄｒｏｎ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７９：５０４７、及びＳｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１５：１９５５を参照）。「親ＡＡＶカプシドタンパク質」は、挿入したポリペプチドを含まない同じＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質を指す（野生型ＡＡＶ血清型又はその変異体カプシドタンパク質、例えば本開示の配列番号１に示されるＡＡＶ２カプシドタンパク質又は配列番号３７に示されるＡＡＶ９カプシドタンパク質を含み、上記ＡＡＶ２カプシドタンパク質はＶ７０８Ｉ変異を有してもよく有さなくてもよい）。

【0015】

幾つかの実施形態において、上記ＡＡＶは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）から選ばれる。

【0016】

幾つかの実施形態において、上記挿入したポリペプチドは、親ＡＡＶカプシドタンパク質のアミノ酸残基の４１１位と６５０位との間に、又は４３２位と６４０位との間に、又は５７０位と６７１位との間に、又は５７０位と６１４位との間に、又は５７０位と６１０位との間に、又は５８０位と６００位との間に、又は５７０位と５７５位との間に、又は５７５位と５８０位との間に、又は５８０位と５８５位との間に、又は５８５位と５９０位との間に、又は５９０位と６００位との間に、又は６００位と６１４位との間に位置する。例えば、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７０位と６１１位との間に、親ＡＡＶ１カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７１位と６１２位との間に、親ＡＡＶ５カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５６０位と６０１位との間に、親ＡＡＶ６カプシドタンパク質のアミノ酸の５７１位と６１２位との間に、親ＡＡＶ７カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７２位と６１３位との間に、親ＡＡＶ８カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７３位と６１４位との間に、親ＡＡＶ９カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７１位と６１２位との間に、又は親ＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７３位と６１４位との間に位置する。

【0017】

幾つかの実施形態において、上記挿入したポリペプチドは、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８７位と５８８位との間に、又は親ＡＡＶ９カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８８位と５８９位との間に、又は他の親ＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質の対応する位置に位置する。幾つかの実施形態において、挿入したポリペプチドは、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８７位と５８８位との間に、又は親ＡＡＶ９カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８８位と５８９位との間に、又は他の親ＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質の対応する位置に位置する。他の血清型は、例えばＡＡＶ１、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８又はＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）から選ばれる。ＡＡＶ２のカプシドタンパク質ＶＰ１のアミノ酸５７０～６１１に対応する異なるＡＡＶ血清型における配列は、当該分野で公知である（例えば、ＷＯ２０１２１４５６０１Ａの図６、及び、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＰ＿０４９５４２のＡＡＶ１、ＡＡＤ１３７５６のＡＡＶ５、ＡＡＢ９５４５９のＡＡＶ６、ＹＰ＿０７７１７８のＡＡＶ７、ＹＰ＿０７７１８０のＡＡＶ８、ＡＡＳ９９２６４のＡＡＶ９及びＡＡＴ４６３３７のＡＡＶ１０を参照）。幾つかの実施形態において、挿入したポリペプチドは、親ＡＡＶ１カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５９０位と５９１位との間に、親ＡＡＶ５カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５７５位と５７６位との間に、親ＡＡＶ６カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５９０位と５９１位との間に、親ＡＡＶ７カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８９位と５９０位との間に、親ＡＡＶ８カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５９０位と５９１位との間に、親ＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８８位と５８９位との間に位置する。

【0018】

本開示のアミノ酸残基の数は、ＡＡＶカプシドタンパク質のＶＰ１をコードするアミノ酸配列のＮ末端から自然数でカウントされている。例えば、「挿入したポリペプチドがＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸残基の５８７位と５８８位との間に位置する」とは、上記ポリペプチドがＡＡＶ２カプシドタンパク質のＶＰ１をコードするアミノ酸配列の第５８７位と５８８位との間に位置し、ＶＰ２をコードするアミノ酸配列において第４５０位と４５１位との間に対応し、ＶＰ３をコードするアミノ酸配列において第３８５位と３８６位との間に対応する。

【0019】

幾つかの実施形態において、上記挿入したポリペプチドは、親ＡＡＶカプシドタンパク質のアミノ酸残基の４５０位と４６０位との間に、例えば親ＡＡＶ２のアミノ酸残基の４５３位、親ＡＡＶ１のアミノ酸残基の４５４位、親ＡＡＶ６のアミノ酸残基の４５４位、親ＡＡＶ７のアミノ酸残基の４５６位、親ＡＡＶ８のアミノ酸残基の４５６位、親ＡＡＶ９のアミノ酸残基の４５４位、親ＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）のアミノ酸残基の４５６位の前又は後に位置する。ＷＯ２０１２１４５６０１Ａの図１７に示される異なるＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質のアミノ酸残基及びそれらの対応関係の全体は、ここに組み込まれている。

【0020】

幾つかの実施形態において、本開示は、上記１）～６）、１－１）～６－１）、配列番号３５又は３６のポリペプチドを含む変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を提供する。

【0021】

幾つかの実施形態において、本開示の上記変異体ＡＡＶカプシドタンパク質は、１つ又は複数のアミノ酸残基の点変異（置換、欠失及び／又は付加を含む）を更に含む。

【0022】

幾つかの実施形態において、上記アミノ酸残基の点変異は、１位、１５位、３４位、５７位、６６位、８１位、１０１位、１０９位、１４４位、１６４位、１７６位、１８８位、１９６位、２２６位、２３６位、２４０位、２５０位、３１２位、３６３位、３６８位、４４９位、４５６位、４６３位、４７２位、４８４位、５２４位、５３５位、５５１位、５９３位、６９８位、７０８位、７１９位、７２１位及び７３５位に位置する１つ又はそれらの任意の組み合わせである。

【0023】

幾つかの実施形態において、上記アミノ酸残基の点変異（置換）は、１Ｌ、１５Ｐ、３４Ａ、５７Ｄ、６６Ｋ、８１Ｑ、１０１Ｒ、１０９Ｔ、１４４Ｋ又はＭ、１６４Ｋ、１７６Ｐ、１８８Ｉ、１９６Ｙ、２２６Ｅ、２３６Ｖ、２４０Ｔ、２５０Ｓ、３１２Ｋ、３６３Ｌ、３６８Ｈ、４４９Ｄ、４５６Ｋ、４６３Ｙ、４７２Ｎ、４８４Ｃ、５２４Ｔ、５３５Ｓ、５５１Ｓ、５９３Ｅ、６９８Ｖ、７０８Ｉ、７１９Ｍ、７２１Ｌ及び７３５Ｑからなる群より選ばれた１つ又はそれらの任意の組み合わせであり、例えば３１２Ｋ、４４９Ｄ、４７２Ｎ、５５１Ｓ、６９８Ｖ、７３５Ｑ、２７３Ｆ、４４４Ｆ、５００Ｆ、７３０Ｆ、７０８Ｉの１つ又は複数、例えば７０８Ｉである。

【0024】

幾つかの実施形態において、上記アミノ酸残基の点変異（置換）は、Ｍ１Ｌ、Ｌ１５Ｐ、Ｐ３４Ａ、Ｎ５７Ｄ、Ｎ６６Ｋ、Ｒ８１Ｑ、Ｑ１０１Ｒ、Ｓ１０９Ｔ、Ｒ１４４Ｋ、Ｒ１４４Ｍ、Ｑ１６４Ｋ、Ｔ１７６Ｐ、Ｌ１８８Ｉ、Ｓ１９６Ｙ、Ｇ２２６Ｅ、Ｇ２３６Ｖ、Ｉ２４０Ｔ、Ｐ２５０Ｓ、Ｎ３１２Ｋ、Ｐ３６３Ｌ、Ｄ３６８Ｈ、Ｎ４４９Ｄ、Ｔ４５６Ｋ、Ｓ４６３Ｙ、Ｄ４７２Ｎ、Ｒ４８４Ｃ、Ａ５２４Ｔ、Ｐ５３５Ｓ、Ｎ５５１Ｓ、Ａ５９３Ｅ、Ｉ６９８Ｖ、Ｖ７０８Ｉ、Ｖ７１９Ｍ、Ｓ７２１Ｌ、Ｌ７３５Ｑ、Ｙ２７３Ｆ、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆからなる群より選ばれた１つ又はそれらの任意の組み合わせであり、例えばＮ３１２Ｋ、Ｎ４４９Ｄ、Ｄ４７２Ｎ、Ｎ５５１Ｓ、Ｉ６９８Ｖ、Ｌ７３５Ｑ、Ｙ２７３Ｆ、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆ、Ｖ７０８Ｉの１つ又は複数である。

【0025】

幾つかの具体的な実施形態において、上記アミノ酸残基の点変異（置換）は７０８Ｉ及び／又は４４９Ｄ、或いは、Ｖ７０８Ｉ及び／又はＮ４４９Ｄである。幾つかの具体的な実施形態において、上記アミノ酸残基の変異（置換）は２７３Ｆ、４４４Ｆ、５００Ｆ及び／又は７３０Ｆ、或いは、Ｙ２７３Ｆ、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ及び／又はＹ７３０Ｆである。

【0026】

上記点変異は、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質の対応する位置に対するものであり、例えば、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質の対応する位置に対するものである。

【0027】

ＷＯ２０１２１４５６０１Ａ、ＷＯ２０１７１９７３５５Ａ、ＷＯ２０１８０２２９０５Ａのカプシドタンパク質の変異の全体は、本開示に組み込まれている。

【0028】

幾つかの実施形態において、本開示のＡＡＶカプシドはキメラカプシドである。例えば、カプシドは、第１のＡＡＶ血清型ＡＡＶカプシドの一部及び第２の血清型ＡＡＶカプシドの一部を含み、上記血清型は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０（ＡＡＶｒｈ１０を含む）を含むが、これらに限定されない。例えば、上記ＡＡＶカプシドは、ＡＡＶ２及びＡＡＶ９に由来する配列を含むＡＡＶ２Ｇ９であってもよく、ＵＳ２０１６００１７００５のＡＡＶ２Ｇ９配列の全体は、ここに組み込まれている。

【0029】

幾つかの実施形態において、本開示の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質は、分離されるか、及び／又は精製される。

【0030】

幾つかの実施形態において、本開示は、対応する親ＡＡＶ２カプシドタンパク質（例えば配列番号１に示される）と比較してカプシドタンパク質ＧＨ環又はＩＶ環（環状ドメインＩＶ）においてポリペプチドを含む変異体ＡＡＶ２カプシドタンパク質を提供しており、上記ポリペプチドは、上記１）～６）、１－１）～６－１）、配列番号３５又は３６から選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１２又は１８であるか、又はそれらを含む。幾つかの具体的な実施形態において、ポリペプチドは、親ＡＡＶ２カプシドタンパク質のＶＰ１の第５８７位と５８８位のアミノ酸残基の間に位置する。

【0031】

幾つかの実施形態において、本開示は、対応する親ＡＡＶ９カプシドタンパク質（例えば配列番号３７に示される）と比較してカプシドタンパク質ＧＨ環又はＩＶ環（環状ドメインＩＶ）においてポリペプチドを含む変異体ＡＡＶ９カプシドタンパク質を提供しており、上記ポリペプチドは、上記１）～６）、１－１）～６－１）、配列番号３５又は３６から選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、ポリペプチドは、配列番号１２又は１８であるか、又はそれらを含む。幾つかの具体的な実施形態において、ポリペプチドは、親ＡＡＶ９カプシドタンパク質のＶＰ１の第５８８位と５８９位のアミノ酸残基の間に位置する。

【0032】

幾つかの実施形態において、本開示は、変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を提供しており、そのアミノ酸配列が配列番号３～９、２３～２７の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の配列同一性を有する。

【0033】

幾つかの実施形態において、本開示により提供される変異体ＡＡＶカプシドタンパク質は、
（ａ）対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子の眼組織（例えば、網膜細胞）の感染性と比較して、眼組織（例えば、網膜細胞）の感染性が増加する、特に網膜神経細胞層の感染性が増加すること、
（ｂ）対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子の指向性と比較して、細胞指向性が変化すること、
（ｃ）対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子と比較して、内境界膜（ＩＬＭ）に結合する及び／又はそれを通過する能力が増加すること、及び／又は
（ｄ）対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子と比較して、眼組織（例えば、網膜組織、房水、硝子体）において、カプセル化又は保有される遺伝子産物に対する発現量が増加すること、
という特性を有する。

【0034】

組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子
本開示は、以下を含む組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）のウイルス粒子を提供し、
（ａ）本開示の任意の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を含み、
（ｂ）場合により、異種ポリヌクレオチドを含む。

【0035】

幾つかの実施形態において、上記異種ポリヌクレオチドは、遺伝子産物を発現又はコードするポリヌクレオチドを含む。幾つかの実施形態において、上記遺伝子産物はＡＡＶに対して異種である。幾つかの実施形態において、上記遺伝子産物は標的細胞に対して異種又は内因性である。幾つかの実施形態において、上記遺伝子産物は１つ又は複数（例えば、２個、３個、４個）である。

【0036】

幾つかの実施形態において、上記異種ポリヌクレオチドには、遺伝子産物の発現又はコードを調節する調節配列を含む。

【0037】

遺伝子産物について：
幾つかの実施形態において、上記遺伝子産物は疾患、病状に対して治療的又は予防的である。

【0038】

幾つかの実施形態において、上記遺伝子産物は、干渉ＲＮＡ（ＲＮＡｉ）、アプタマー、ポリペプチドから選ばれる。

【0039】

幾つかの具体的な実施形態において、上記遺伝子産物はＲＮＡｉであり、例えば細胞におけるアポトーシス因子又は血管新生因子のレベルを減少、低減するＲＮＡｉである。例えば、ＲＮＡｉは、細胞におけるアポトーシスを誘導又は促進する遺伝子産物のレベルを低減するｓｈＲＮＡ又はｓｉＲＮＡであってもよく、上記アポトーシスを促進する遺伝子産物は、Ｂａｘ、Ｂｉｄ、Ｂａｋ及びＢａｄなどの遺伝子産物を含む（ＵＳ７，８４６，７３０を参照し、且つ全てここに組み込まれている）。別の例として、ＲＮＡｉは、例えばＶＥＧＦ（例えばＣａｎｄ５、ＵＳ２０１１／０１４３４００、ＵＳ２００８／０１８８４３７を参照し、且つ全てここに組み込まれている）、ＶＥＧＦＲ１（例えばＳｉｒｎａ－０２７、Ｋａｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ａｍ．Ｊ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１５０：３３、及びＳｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．１３：２２５を参照し、且つ全てここに組み込まれている）又はＶＥＧＦＲ２（例えばＫｏｕ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．４４：１５０６４を参照し、且つ全てここに組み込まれている）などの血管新産生物に対するものであってもよい。

【0040】

幾つかの具体的な実施形態において、上記遺伝子産物は、ＶＥＧＦに対する特異的アプタマー（例えば５’－ｃｇｃａａｕｃａｇｕｇａａｕｇｃｕｕａｕａｃａｕｃｃｇ－３’、Ｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ５：１２３、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２：１８９０２を参照し、且つ全てここに組み込まれている）、ＰＤＧＦに対する特異的アプタマー（例えばＥ１００３０、ＮｉとＨｕｉ（２００９）Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ ２２３：４０１、及びＡｋｉｙａｍａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ．ＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ．２０７：４０７を参照し、且つ全てここに組み込まれている）などのアプタマーである。

【0041】

幾つかの具体的な実施形態において、上記遺伝子産物はポリペプチドである。

【0042】

幾つかの具体的な実施形態において、上記遺伝子産物は、神経保護ポリペプチド、抗血管新生ポリペプチド又は網膜細胞機能を強化するポリペプチドである。

【0043】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ポリペプチドは、網膜細胞の機能を強化する、例えば、桿体若しくは錐体光受容細胞、網膜神経節細胞、Ｍｕｌｌｅｒ細胞、双極細胞、アマクリン細胞、水平細胞又は網膜色素上皮細胞の機能を強化することができる。

【0044】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ポリペプチドは、神経保護ポリペプチド（例えば、ＧＤＮＦ、ＣＮＴＦ、ＮＴ４、ＮＧＦ及びＮＴＮ）、抗血管新生ポリペプチド（例えば、可溶性血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）受容体、抗ＶＥＧＦ抗体又はその抗原結合断片、エンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）、タムスタチン（ｔｕｍｓｔａｔｉｎ）、アンギオスタチン（ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ）、可溶性Ｆｌｔポリペプチド及びＦｃ領域との融合タンパク質（Ｌａｉ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１２：６５９、Ｐｅｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．１６：１０を参照）、色素上皮衍生因子（ＰＥＤＦ）、可溶性Ｔｉｅ－２受容体など）、組織金属プロテアーゼ阻害剤－３（ＴＩＭＰ－３）、光応答性オプシン（例えばロドプシン）、抗アポトーシスポリペプチド（例えばＢｃｌ－２、Ｂｃｌ－Ｘｌ）などを含むか、又はそれらから選ばれる。

【0045】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ポリペプチドは、上皮成長因子、ロドプシン、Ｘ連鎖アポトーシス阻害タンパク質を含むが、これらに限定されない。

【0046】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ポリペプチドは、網膜スプリットタンパク質（ｒｅｔｉｎｏｓｃｈｉｓｉｎ）、網膜色素変性ＧＴＰ酵素モジュレーター（ＲＧＰＲ）相互作用タンパク質－１（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＯ． Ｑ９６ＫＮ７、Ｑ９ＥＰＱ２、Ｑ９ＧＬＭ３）、末梢タンパク質－２（Ｐｒｐｈ２）（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＯ． ＮＰ＿０００３１３）、網膜色素上皮特異的タンパク質（ＲＰＥ６５）（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＯ． ＡＡＣ３９６６０）を含むが、これらに限定されない。

【0047】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ポリペプチドは、欠損又は欠失の場合に、ＣＨＭ（脈絡膜欠損（ｃｈｏｒｏｉｄｅｒｍｉａ）（Ｒａｂエスコートタンパク質１））（Ｄｏｎｎｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．３：１０１７）などの無脈絡膜を引き起こすポリペプチド、欠損又は欠失の場合に、デブリホモログ１（ＣＲＢ１）（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＯ． ＣＡＭ２３３２８）などのレーベル先天性黒内障を引き起こすポリペプチド及び色素性網膜炎を引き起こすポリペプチド、欠損又は欠失の場合に、桿体光受容ｃＧＭＰ－ゲートチャネルサブユニットα（ＣＮＧＡ３）（ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＮＯ． ＮＰ＿００１２８９）、桿体光受容ｃＧＭＰ－ゲートチャネルβサブユニット（ＣＮＧＢ３）、グアニンヌクレオチド結合タンパク質（Ｇタンパク質）、α形質導入活性ポリペプチド２（ＧＮＡＴ２）（ＡＣＨＭ４）、ＡＣＨＭ５、Ｌ－オプシン、Ｍ－オプシン及びＳ－オプシンなどの色盲を引き起こすポリペプチドを含むが、これらに限定されない。

【0048】

幾つかの具体的な実施形態において、上記遺伝子産物は、遺伝子機能の部位特異性をノックダウンするための部位特異的エンドヌクレアーゼを提供しており、例えば、エンドヌクレアーゼは網膜疾患に関連する対立遺伝子をノックアウトする。例えば、優性対立遺伝子が、野生型に属する時の網膜構造タンパク質及び／又は正常な網膜機能を提供する遺伝子の欠損コピーをコードする場合、部位特異的エンドヌクレアーゼは、欠損対立遺伝子を標的とし、欠損対立遺伝子をノックアウトすることができる。上記部位特異的エンドヌクレアーゼは、例えば、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮｓ）及び転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮｓ）であり、そのうち、このような部位特異的エンドヌクレアーゼは、天然に存在せず、特定の遺伝子を標的とするように修飾されている。

【0049】

また、ＷＯ２０１２１４５６０１Ａ、ＷＯ２０１７１９７３５５Ａ、ＷＯ２０１８０２２９０５Ａの上記遺伝子産物の配列、由来は、本開示によりその全体が組み込まれている。

【0050】

幾つかの具体的な実施形態において、本開示の遺伝子産物は、抗ＶＥＧＦ抗体若しくはその抗原結合断片などの抗血管新生ポリペプチドを含む抗血管新生剤であり、別の例として、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えばＶＥＧＦ－Ａ、Ｂ、Ｃアンタゴニスト）又はＰＤＧＦアンタゴニストである。

【0051】

幾つかの具体的な実施形態において、ＶＥＧＦアンタゴニストは、ラニビズマブ（ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）、ベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）、ＫＨ９０２ ＶＥＧＦ受容体－Ｆｃ融合タンパク質、２Ｃ３抗体、ＯＲＡ１０２、ペガプタニブナトリウム（ｐｅｇａｐｔａｎｉｂ）、ベバシラニブ（ｂｅｖａｓｉｒａｎｉｂ）、ＳＩＲＮＡ－０２７、デクルシン（ｄｅｃｕｒｓｉｎ）、デクルシノール（ｄｅｃｕｒｓｉｎｏｌ）、ピクロポドフィリン（ｐｉｃｒｏｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎ）、ググルステロン（ｇｕｇｇｕｌｓｔｅｒｏｎｅ）、ＰＬＧ１０１、エイコサノイドＬＸＡ４、ＰＴＫ７８７、パゾパニブ（ｐａｚｏｐａｎｉｂ）、アキシチニブ（ａｘｉｔｉｎｉｂ）、ＣＤＤＯ－Ｍｅ、ＣＤＤＯ－Ｉｍｍ、シコニン（ｓｈｉｋｏｎｉｎ）、β－ヒドロキシイソバレリルシコニン（ｂｅｔａ－ｈｙｄｒｏｘｙｉｓｏｖａｌｅｒｙｌｓｈｉｋｏｎｉｎ）、又はガングリオシドＧＭ３、ＤＣ１０１抗体、Ｍａｂ２５抗体、Ｍａｂ７３抗体、４Ａ５抗体、４Ｅ１０抗体、５Ｆ１２抗体、ＶＡ０１抗体、ＢＬ２抗体、ＶＥＧＦ関連タンパク質、ｓＦＬＴ０１、ｓＦＬＴ０２、ペプチドＢ３、ＴＧ１００８０１、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、スニトナブ（ｓｕｎｉｔｎａｂ）、Ｇ６－３１抗体、又はその薬学的に許容される塩を含むが、これらに限定されない。ＷＯ２０１８１６０６８６ＡのＶＥＧＦアンタゴニスト情報は、全てここに組み込まれている。

【0052】

ラニビズマブ（Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標））の配列情報はＵＳ７，０６０，２６９（図１）を参照し、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））の配列情報はＵＳ６，０５４，２９７（図１）を参照し、アフリベルセプト（Ｅｙｅｌｅａ（登録商標））の配列情報はＤｏ ｅｔ ａｌ．（Ｂｒ Ｊ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．２００９，９３：１４４－９）を参照し、ここでその全体が参照により組み込まれる。

【0053】

幾つかの実施形態において、ＶＥＧＦアンタゴニストは、天然に存在するタンパク質ｓＦｌｔ－１若しくはその機能断片であるか、又はそれらを含む（例えば、ｓＦｌｔ－１ドメイン２、ＵＳ５，８６１，４８４のｓＦｌｔ－１配列情報、ＵＳ２０１３／０３２３３０２のｓＦｌｔ－１ドメイン２配列情報を参照し、全てここに組み込まれている）。

【0054】

幾つかの実施形態において、ＶＥＧＦアンタゴニストはＶＥＧＦ結合融合タンパク質であり、ＵＳ７、６３５、４７４のＶＥＧＦに結合する融合タンパク質の配列情報の全体は、ここに組み込まれている。

【0055】

幾つかの具体的な実施形態において、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）のアミノ酸配列は配列番号３８に示され、配列番号３８をコードするポリヌクレオチド配列、例えば、コドンにより最適化されたポリヌクレオチド配列を提供し、配列番号３９～４１の何れか１つに示される。

【0056】

調節配列について：
幾つかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｈ）：
（ａ）５’末端逆位反復配列（５’ＩＴＲ）及び／又は３’末端逆位反復配列（３’ＩＴＲ）、
（ｂ）５’未翻訳領域（５’ＵＴＲ）及び／又は３’未翻訳領域（３’ＵＴＲ）、
（ｃ）プロモーター、
（ｄ）エンハンサー、
（ｅ）イントロン（ｉｎｔｒｏｎ）、
（ｆ）転写後調節エレメント、
（ｇ）ポリアデニル化シグナル（ｐｏｌｙＡ）、
（ｈ）Ｋｏｚａｋ配列
の何れか一項のポリヌクレオチド（調節配列）又は任意の組み合わせを含む。

【0057】

幾つかの実施形態において、ＡＡＶ ＩＴＲは、野生型ヌクレオチド配列を有する必要がなく、ヌクレオチドの挿入、欠失又は置換により変更されてもよく、或いは、ＡＡＶ ＩＴＲは、幾つかのＡＡＶ血清型、例えばＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９及びＡＡＶ１０の何れか１つから得られてもよい。幾つかの具体的な実施形態において、５’ＩＴＲ及び３’ＩＴＲはＡＡＶ２の５’ＩＴＲ及び３’ＩＴＲである。

【0058】

幾つかの実施形態において、遺伝子産物をコードするヌクレオチド配列は、組織特異的若しくは細胞型特異的調節エレメントに操作可能に連結され、例えば光受容性特異的調節エレメント（例えば、光受容性特異的プロモーター）に操作可能に連結され、別の例として、光受容性細胞内に操作可能に連結された遺伝子の選択的発現を付与する調節エレメントに連結される。

【0059】

幾つかの具体的な実施形態において、（ａ）～（ｈ）の任意の組み合わせは、遺伝子産物（例えば、抗血管新生剤（又は抗血管新生ポリペプチド）、別の例として、抗ＶＥＧＦ抗体若しくはその抗原結合断片、アフリベルセプト）発現の機能、例えば対象の眼組織（例えば房水、網膜組織）発現の機能を満たすことができる。

【0060】

幾つかの具体的な実施形態において、上記（ａ）～（ｈ）の何れか一項のポリヌクレオチド又は任意の組み合わせは、上記遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドに操作可能に接続される。

【0061】

幾つかの具体的な実施形態において、上記５’ＩＴＲ及び／又は３’ＩＴＲは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ又はＡＡＶ－ＤＪ８に由来し、例えば、ＡＡＶ２、ＡＡＶ９に由来する。

【0062】

幾つかの具体的な実施形態において、上記５’ＵＴＲ及び／又は３’ＵＴＲは、ヘモペキシン（ｈｅｍｏｐｅｘｉｎ、ＨＰＸ）、βグロビン（ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｓｕｂｕｎｉｔ ｂｅｔａ、ＨＢＢ）、ＨＳＰＢ１、ＣＣＬ１３、ツメガエルグロビン（Ｘｅｎｏｐｕｓ ｇｌｏｂｉｎ）に由来する。例えば、５’ＵＴＲの配列は配列番号３０に示され、３’ＵＴＲの配列は配列番号３２に示される。

【0063】

幾つかの具体的な実施形態において、上記プロモーターは、構成的プロモーター又は誘導性プロモーターであってもよい。

【0064】

幾つかの具体的な実施形態において、上記プロモーターは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーター、ＵＢ６プロモーター、ニワトリβ－アクチンプロモーター、ＣＡＧプロモーター、ＲＰＥ６５プロモーター、ＣＢｈプロモーター、ＥＦＳプロモーター、ＥＦ１（例えばＥＦ－１α）プロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、Ｕｂｉプロモーター、オプシンプロモーター又はそれらの任意の組み合わせから選ばれる。上記オプシンプロモーターは、ロドプシンプロモーター、ロドプシンキナーゼプロモーター（Ｙｏｕｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．４４：４０７６）、βホスホジエステラーゼ遺伝子プロモーター（Ｎｉｃｏｕｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｇｅｎｅ Ｍｅｄ．９：１０１５）、網膜色素変性症遺伝子プロモーター（Ｎｉｃｏｕｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）上記と同様）、光受容性レチノイン酸結合タンパク質（ＩＲＢＰ）遺伝子プロモーター（Ｙｏｋｏｙａｍａ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｅｘｐ Ｅｙｅ Ｒｅｓ．５５：２２５）を含むが、これらに限定されない。例えば、プロモーターはＣＭＶプロモーターであり、その配列は、例えば配列番号２９に示される。

【0065】

幾つかの具体的な実施形態において、上記エンハンサーは、Ｕｂｉ、ＣＭＶ、ＲＳＶ、ＩＲＢＰ遺伝子エンハンサー（Ｎｉｃｏｕｄ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｇｅｎｅ Ｍｅｄ．９：１０１５）又はその任意の組み合わせから選ばれる。例えば、エンハンサーはＣＭＶエンハンサーであり、その配列は、例えば配列番号２８に示される。

【0066】

幾つかの具体的な実施形態において、上記イントロンは、ＭＶＭ、ＳＶ４０、β Ｇｌｏｂｉｎ、ＥＦ１（例えばＥＦ－１α）、ｈｙｂｒｉｄイントロン、又はその任意の組み合わせから選ばれる。

【0067】

幾つかの具体的な実施形態において、上記ｐｏｌｙＡは、ＰＡ７５ ｐｏｌｙＡ、ＳＶ４０ ｐｏｌｙＡ、ｈＧＨ ｐｏｌｙＡ、ＢＧＨ ｐｏｌｙＡ、ｒｂＧｌｏｂ ｐｏｌｙＡ又はそれらの任意の組み合わせから選ばれる。例えば、ｐｏｌｙＡはＳＶ４０ ｐｏｌｙＡであり、その配列は、例えば配列番号３４に示される。

【0068】

幾つかの具体的な実施形態において、上記転写後調節エレメントは、ＷＰＲＥ、ＨＰＲＥ又はその組み合わせから選ばれる。例えば、転写後調節エレメントはＷＰＲＥであり、その配列は、例えば配列番号３３に示される。

【0069】

幾つかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｇ）：
（ａ）ＡＡＶ２に由来する５’ＩＴＲ及び／又は３’ＩＴＲ、
（ｂ）Ｘｅｎｏｐｕｓ ｇｌｏｂｉｎに由来する５’ＵＴＲ及び／又は３’ＵＴＲ、
（ｃ）ＣＭＶプロモーター、
（ｄ）ＣＭＶエンハンサー、
（ｅ）ＷＰＲＥ、
（ｆ）Ｋｏｚａｋ配列、
（ｇ）ＳＶ４０ ｐｏｌｙＡ
の何れか一項のポリヌクレオチド（調節配列）又は任意の組み合わせを含む。

【0070】

例示的には、ポリヌクレオチドは、５’末端から３’末端への順序は、以下の通りである（括弧内は、任意の調節配列である）。

【0071】

５’ＩＴＲ－エンハンサー－プロモーター－５’ＵＴＲ－（Ｋｏｚａｋ配列）－遺伝子産物－３’ＵＴＲ－（ＷＰＲＥ）－ｐｏｌｙＡ－３’ＩＴＲ、又は
エンハンサー－プロモーター－５’ＵＴＲ－（Ｋｏｚａｋ配列）－遺伝子産物－３’ＵＴＲ－（ＷＰＲＥ）－ｐｏｌｙＡ、
プロモーター－（５’ＵＴＲ）－（Ｋｏｚａｋ配列）－遺伝子産物－（３’ＵＴＲ）～（ＷＰＲＥ）－ｐｏｌｙＡ。

【0072】

ｒＡＡＶウイルス粒子の効果について：
幾つかの実施形態において、ｒＡＡＶウイルス粒子は感染性を有し、別の幾つかの実施形態において、ｒＡＡＶウイルス粒子は感染性を有しない。

【0073】

幾つかの実施形態において、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子の細胞への感染性と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子は、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍、少なくとも５０倍又はそれ以上が強化された細胞感染性を示し、上記細胞は、
１）網膜細胞、
２）光受容細胞、
３）ＲＰＥ細胞、
４）双極細胞、
５）アマクリン細胞、及び／又は
６）水平細胞
から選ばれる。

【0074】

幾つかの実施形態において、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子の内境界膜（ＩＬＭ）を通過する能力と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子は、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍、少なくとも５０倍又は５０倍以上が強化された、ＩＬＭを通過する能力を示す。

【0075】

幾つかの実施形態において、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子は、網膜細胞に選択的に感染し、例えば、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子は、非網膜細胞（例えば非眼組織細胞）よりも２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、５０倍又は５０倍以上強く網膜細胞に特異的に感染する。

【0076】

幾つかの実施形態において、ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドタンパク質を含むｒＡＡＶウイルス粒子と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子（例えば、カプシドタンパク質にｓｅｑ２が含まれたｒＡＡＶウイルス粒子）は、眼全体組織における遺伝子産物（例えばアフリベルセプト）の発現量が２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、５０倍又は５０倍以上強化される。

【0077】

幾つかの実施形態において、ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドタンパク質を含むｒＡＡＶウイルス粒子と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子（例えば、カプシドタンパク質にｓｅｑ２が含まれたｒＡＡＶウイルス粒子）は、房水における遺伝子産物（例えばアフリベルセプト）の発現量が２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、５０倍又は５０倍以上強化される。

【0078】

幾つかの実施形態において、ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドタンパク質を含むｒＡＡＶウイルス粒子と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子（例えば、カプシドタンパク質にｓｅｑ２が含まれたｒＡＡＶウイルス粒子）は、硝子体における遺伝子産物（例えばアフリベルセプト）の発現量が２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、５０倍又は５０倍以上強化される。

【0079】

幾つかの実施形態において、ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドタンパク質を含むｒＡＡＶウイルス粒子と比較して、本開示の上記ｒＡＡＶウイルス粒子（例えば、カプシドタンパク質にｓｅｑ２が含まれたｒＡＡＶウイルス粒子）は、網膜組織における遺伝子産物（例えばアフリベルセプト）の発現量が２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、５０倍又は５０倍以上強化される。

【0080】

幾つかの実施形態において、上記ｒＡＡＶウイルス粒子の投与方法は硝子体内注射である。

【0081】

ポリヌクレオチド及び（発現）ベクター
本開示はアフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを提供し、コードされているアミノ酸配列は配列番号３８に示される。

【0082】

幾つかの実施形態において、本開示は、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするコドンにより最適化されたポリヌクレオチドを提供し、配列番号３９～４１の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の配列同一性を有する。

【0083】

本開示は、本開示の上記の任意の遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドを提供する。

【0084】

本開示は、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質をコードするポリヌクレオチドを提供する。

【0085】

幾つかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、ＲＮＡ、ＤＮＡ又はｃＤＮＡであってもよい。

【0086】

幾つかの実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、分離したポリヌクレオチドである。

【0087】

本開示のポリヌクレオチドはベクター形態であってもよく、ベクター内に存在する及び／又はベクターの一部であってもよく、当該ベクターは、例えばプラスミド、コステロプラスミド、ＹＡＣ又はウイルスベクターであってもよい。ベクターは、例えば、発現ベクター、即ち、体外及び／又は体内で（即ち、適切な宿主細胞、宿主有機体及び／又は発現システム中で）ポリヌクレオチドの発現を提供することができるベクターであってもよい。当該発現ベクターは通常、少なくとも１つの本開示のポリヌクレオチドを含み、それが１つ又は複数の適切な発現調節エレメント（例えばプロモーター、エンハンサー、ターミネーターなど）に操作可能に連結する。

【0088】

本開示のポリヌクレオチドは、既知の方法（例えば、自動ＤＮＡ合成及び／又は組換えＤＮＡ技術）により製造又は取得されてもよく、及び／又は、適切な天然源から分離されてもよい。

【0089】

本開示は、以下を含むベクターを提供する。

【0090】

（ａ）本開示の上記任意の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質（配列番号３～９及び２３～２７の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも９０％若しくは９５％の配列同一性を有する）をコードする分離したポリヌクレオチド、
（ｂ）本開示の上記任意の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質（配列番号３～９及び２３～２７の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも９０％若しくは９５％の配列同一性を有する）をコードする分離したポリヌクレオチド、及び／又は、上記遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチド（配列番号３８に示されるアフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチド、配列番号３９～４１の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも９０％若しくは９５％の配列同一性を有するポリヌクレオチド）。

【0091】

幾つかの実施形態において、（ｂ）における変異体ＡＡＶカプシドタンパク質をコードするポリヌクレオチド及び遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチドは、異なるベクターに存在する。

【0092】

宿主細胞
本開示は、本開示の上記任意のポリヌクレオチド又は（発現）ベクターを含む宿主細胞を提供する。

【0093】

幾つかの実施形態において、上記宿主細胞は、分離した細胞、例えば体外細胞培養物に由来する細胞であってもよい。このような細胞は、本開示の上記任意のｒＡＡＶカプシドタンパク質、遺伝子産物又はｒＡＡＶウイルス粒子を産生するために使用され、産生細胞とも呼ばれる。

【0094】

幾つかの具体的な実施形態において、産生細胞は細菌細胞、真菌細胞又は哺乳動物細胞である。例示的な産生細胞は、ＨｅＬａ、ＣＨＯ、２９３（２９３Ｔを含む）、Ｖｅｒｏ、ＮＩＨ ３Ｔ３、Ｈｕｈ－７、ＢＨＫ、ＰＣ１２、ＣＯＳ（ＣＯＳ－７を含む）、ＲＡＴ１、ＨｅｐＧ２細胞などを含むが、これらに限定されない。例示的な哺乳動物細胞は、２９３（２９３Ｔ）、ＣＯＳ、ＨｅＬａ、Ｖｅｒｏ、３Ｔ３、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２、ＣＨＯ細胞を含むが、これらに限定されない。産生細胞は、両生類細胞、昆虫細胞、植物細胞、及び当該分野でタンパク質、ウイルス粒子を発現するための任意の他の細胞を使用してもよい。例示的な昆虫細胞は、ツマジロクサヨトウ、ショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）細胞株、又はヒトスジシマカ（Ａｅｄｅｓａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）由来細胞株などの蚊細胞株を含むが、これらに限定されず、Ｓｅ３０１、ＳｅＩＺＤ２１０９、ＳｅＵＣＲ１、Ｓｆ９、Ｓｆ９００＋、Ｓｆ２１、ＢＴＩ－ＴＮ－５Ｂ１－４、ＭＧ－１、Ｔｎ３６８、ＨｚＡｍ１、Ｈａ２３０２、Ｈｚ２Ｅ５、ＨｉｇｈＦｉｖｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＣＡ、ＵＳＡ）、ＡＯ３８及びＢＭ－Ｎ細胞を含むが、これらに限定されない。

【0095】

ｒＡＡＶウイルス粒子の産生、製造方法
ｒＡＡＶウイルス粒子を産生する方法は、当該分野において一般的である。ＷＯ２０００２８００４、ＷＯ２００１２３００１、ＷＯ２００４１１２７２７、ＷＯ２００５００５６１０、ＷＯ２００５０７２３６４、ＷＯ２０１３１２３５０３、ＷＯ２０１５１９１５０８及びＵＳ２０１３０１９５８０１におけるｒＡＡＶウイルス粒子の産生、製造方法の全体は、本開示に組み込まれている。上記ｒＡＡＶウイルス粒子は送達効率を向上させる特性を有し、効率的にパッケージングすることができ、高頻度及び最小限の毒性で標的細胞（例えば哺乳動物又はヒト細胞）にうまく感染することができる。

【0096】

本開示は、本開示の任意のポリヌクレオチドをＡＡＶカプシドにパッケージングすることを含む、ｒＡＡＶウイルス粒子を産生、製造する方法を提供する。

【0097】

幾つかの実施形態において、本開示の上記の遺伝子産物をコードするポリヌクレオチド又はその（発現）ベクター、本開示の上記の任意のＡＡＶカプシドタンパク質をコードするポリヌクレオチド又はその（発現）ベクター、及びヘルパー機能プラスミド（例えば、ｐＨｅｌｐｅｒ）を、産生細胞（例えば２９３細胞）に導入し、パッケージングし、精製し、ｒＡＡＶウイルス粒子を得ることを含む、ｒＡＡＶウイルス粒子を産生、製造する方法提供する。

【0098】

幾つかの実施形態において、ｒＡＡＶウイルス粒子を産生、製造する産生方法を提供し、
１）本開示の任意の遺伝子産物をコードするポリヌクレオチド又は（発現）ベクター、本開示の上記の任意のＡＡＶカプシドタンパク質をコードするポリヌクレオチドを含むＲｅｐ及びＣａｐ遺伝子を発現するベクター（例えば、ｐＲ２Ｃ９）、及びヘルパーベクター（ヘルパー機能を実現するもの、例えばｐＨｅｌｐｅｒ）は、哺乳動物細胞（例えば２９３細胞）に同時コトランスフェクションする方法と、
２）遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドを含むｒＡＡＶウイルス粒子を取得、精製する方法と、を含む。

【0099】

幾つかの実施形態において、本開示の上記任意のｒＡＡＶウイルス粒子を産生するためのｒＡＡＶウイルス粒子の産生システムを提供し、
１）ＡＡＶカプシドタンパク質をコードするポリヌクレオチドと、
２）本開示の任意の遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチド又はその（発現）ベクター（例えば、ｐＧＯＩプラスミド）と、
３）十分なＡＡＶ ｒｅｐ機能及びヘルパー機能を有し、２）における遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチドをＡＡＶカプシドにパッケージングするためのヘルパーエレメントと、を含む。

【0100】

幾つかの具体的な実施形態において、十分なＡＡＶ ｒｅｐ機能及びヘルパー機能は、パッケージング細胞又はｐＨｅｌｐｅｒ、ｐＲ２Ｃ９、ｐＧＯＩの３つのプラスミドにより提供され、上記パッケージング細胞は、ｐＨｅｌｐｅｒ、ｐＲ２Ｃ９、ｐＧＯＩという３つのプラスミドを含んでもよい。

【0101】

幾つかの実施形態において、Ｒｅｐ遺伝子は、ＡＡＶゲノムの複製などの機能を調節する非構造タンパク質をコードし、Ｒｅｐ７８、Ｒｅｐ６８、Ｒｅｐ５２、Ｒｅｐ４０から選ばれてもよい。Ｒｅｐ７８及びＲｅｐ６８は通常、ｐ５プロモーターから転写されるが、Ｒｅｐ５２及びＲｅｐ４０は通常、ｐ１９プロモーターから転写される。Ｃａｐ遺伝子は、ウイルスのカプシドを形成するために構築する構造タンパク質ＶＰ１、ＶＰ２及び／又はＶＰ３をコードする。Ｃａｐ遺伝子は通常、ｐ４０プロモーターから転写される。
幾つかの実施形態において、上記ＡＡＶ産生方法又は産生システムにより産生されたｒＡＡＶウイルス粒子を提供する。

【0102】

医薬組成物
本開示は、
（ａ）本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質又はｒＡＡＶウイルス粒子と、
（ｂ）１種又は複数種の薬学的に許容されるベクター、希釈剤、賦形剤又は緩衝液と、を含む医薬組成物を提供する。

【0103】

本開示は、
（ａ）予防又は治療有効量の活性成分と、
（ｂ）１種又は複数種の薬学的に許容されるベクター、希釈剤、賦形剤又は緩衝液と、を含む医薬組成物を提供する。

【0104】

上記活性成分は、例えば、本開示の上記任意のｒＡＡＶウイルス粒子、配列番号３９～４１又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の同一性配列を有する遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドから選ばれる。

【0105】

幾つかの実施形態において、上記医薬組成物の単位用量には、０．０１重量％～９９重量％のポリヌクレオチド（例えばＶＥＧＦ阻害剤、別の例として、アフリベルセプトをコードするポリヌクレオチド）又はｒＡＡＶウイルス粒子が含まれてもよい。幾つかの具体的な実施形態において、医薬組成物の単位用量に含まれている遺伝子産物（例えばＶＥＧＦ阻害剤、別の例として、アフリベルセプト）のコピー量は０．１～１０×１０^１３である。幾つかの具体的な実施形態において、医薬組成物におけるｒＡＡＶウイルス粒子の濃度は、１×１０^８個／ｍＬ又はそれ以上であり、一般的には１×１０^１５個／ｍＬ以下である。

【0106】

幾つかの実施形態において、本開示の上記任意のｒＡＡＶウイルス粒子で細胞にトランスフェクトし、次に上記細胞を対象に移転又は移植することができる。

【0107】

幾つかの実施形態において、医薬組成物には本開示の上記任意のｒＡＡＶウイルス粒子が含まれ、上記ｒＡＡＶウイルス粒子にポリヌクレオチドがカプセル化され、上記ポリヌクレオチドは、配列番号３９～４１の何れか１つに示されるか、又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の同一性配列を有する。

【0108】

疾患を治療、予防する方法及び製薬用途
本開示は、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを疾患又は症状の治療、寛解又は改善として使用する方法又は用途を提供する。

【0109】

幾つかの実施形態において、必要とする対象に遺伝子産物を送達する方法であって、有効量の本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを上記対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0110】

幾つかの実施形態において、標的細胞に遺伝子産物を送達する方法であって、上記標的細胞を本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドと接触させることを含む、方法を提供する。幾つかの具体的な実施形態において、標的細胞は、肝細胞、膵臓細胞、骨格筋細胞、心筋細胞、線維芽細胞、網膜細胞、滑膜関節細胞、肺細胞、Ｔ細胞、ニューロン、神経膠細胞、幹細胞、内皮細胞又はがん細胞から選ばれる。幾つかの具体的な実施形態において、標的細胞は体外であり、別の幾つかの具体的な実施形態において、標的細胞は体内である。本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを使用して標的細胞に異種核酸を送達する製薬用途を同時に提供する。

【0111】

幾つかの実施形態において、網膜細胞に特異的に感染する方法であって、予防又は治療有効量の本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを眼内に投与すること、例えば硝子体内注射又は網膜下注射によることを含む、方法を提供する。本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを使用して網膜細胞に特異的に感染する薬剤の製造における製薬用途を同時に提供する。

【0112】

幾つかの具体的な実施形態において、光受容細胞、網膜神経節細胞、Ｍｕｌｌｅｒ細胞、双極細胞、アマクリン細胞、水平細胞又は網膜色素上皮細胞からなる群より選ばれた網膜細胞の疾患又は病状を治療するための、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを提供する。幾つかの場合において、網膜細胞は光受容細胞、例えば桿体細胞又は錐体細胞である。

【0113】

幾つかの具体的な実施形態において、急性黄斑神経網膜病変、ベーチェット病、脈絡膜血管新生、糖尿病性ブドウ膜炎、ヒストプラズマ症、急性黄斑変性、非滲出性加齢性黄斑変性症及び滲出性加齢性黄斑変性症などの黄斑変性、黄斑浮腫、黄斑嚢胞様浮腫及び糖尿病性黄斑浮腫などの浮腫、多巣性脈絡膜炎、眼の後部部位又は位置に影響を及ぼす眼外傷、眼の腫瘍、網膜中心静脈閉塞症、糖尿病性網膜病変（増殖性糖尿病性網膜病変を含む）、増殖性硝子体網膜病変（ＰＶＲ）、網膜動脈閉塞性疾患、網膜剥離及びブドウ膜炎性網膜疾患などの網膜病状、交感性眼炎、フォークト・小柳・原田病（Ｖｏｇｔ Ｋｏｙａｎａｇｉ－Ｈａｒａｄａ）（ＶＫＨ）症候群、ブドウ膜拡散、眼科レーザー治療によって引き起こされるか、又はそれによって影響を受ける後眼部の病状、光線力学治療によって引き起こされるか、又はそれによって影響を受ける後眼部の病状、光凝固法、放射性網膜病変、網膜前膜病状、網膜静脈分枝閉塞症、前部虚血性視神経病変、非網膜病変、糖尿病性網膜機能障害、網膜剥離症、網膜色素変性、緑内障、アッシャー症候群、錐体－桿体栄養失調、スターガルト病（眼底黄斑症）、遺伝性黄斑変性、脈絡膜網膜変性、レーベル先天性黒内障、先天性定常夜盲症、コロイデレミア、バルデー・ビードル症候群、黄斑毛細血管拡張症、レーベル遺伝性視神経病変、未熟児網膜病変、及び全色盲、赤色盲、緑色盲及び青色盲を含む色覚病状、遺伝性網膜色素変性からなる群より選ばれた網膜細胞の疾患又は病状を治療するための、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを提供する。

【0114】

幾つかの実施形態において、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを眼部疾患の治療として使用する方法又は用途であって、上記眼部疾患が、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、湿性ＡＭＤ、乾性ＡＭＤ、網膜血管新生、脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜病変、増殖性糖尿病網膜病変、網膜静脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜静脈分枝閉塞症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病性網膜虚血、虚血性網膜病変又は糖尿病性網膜浮腫を含むが、これらに限定されない、方法又は用途を提供する。選択的に、硝子体内注射又は網膜下注射による。

【0115】

幾つかの実施形態において、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを使用して網膜関連疾患を治療する方法又は用途を提供する。

【0116】

本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを使用して上記疾患を治療又は予防する薬剤の製造における製薬用途を同時に提供する。

【0117】

投与方法
本開示は、本開示の上記任意のＡＡＶカプシドタンパク質、ｒＡＡＶウイルス粒子、医薬組成物、アフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をコードするポリヌクレオチドを上記眼部疾患（例えば網膜関連疾患）の治療として使用する投与方法であって、眼内注射によって投与される、方法を提供する。

【0118】

幾つかの実施形態において、眼内注射は、硝子体内注射、網膜下注射、脈絡膜上注射又はｒＡＡＶウイルス粒子の眼への送達をもたらす任意の他の好適な投与形態又は投与経路を含む。他の好適な投与形態又は投与経路は、静脈内、動脈内、眼周囲、前房内、結膜下及び眼球嚢下の注射並びに局所投与及び鼻内投与を含むが、これらに限定されない。

【図面の簡単な説明】

【0119】

【図1】ＡＡＶ２カプシドタンパク質配列及びＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３の開始部位、環状ドメインＩ～Ｖの模式図である。

【図2】７０８部位変異を有する、５８７位と５８８位との間にペプチド断片が挿入された本開示の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質の模式図である。

【図3】マウス網膜に感染した本開示のｒＡＡＶベクターウイルスＡＡＶ２ ｓｅｑ１、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４、ＡＡＶ２ ｓｅｑ５、ＡＡＶ２ ｓｅｑ６及びＡＡＶ２、ＡＡＶ２．７ｍ８の蛍光シグナル検査結果図である。

【図4A】及び

【図4B】マウス網膜に感染した本開示のｒＡＡＶベクターウイルスＡＡＶ２ ｓｅｑ１、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４、ＡＡＶ９ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２、ＡＡＶ２．７ｍ８の蛍光シグナル検査結果図であり、図４Ａは１週目の眼底検査結果、図４Ｂは４週目の眼底検査結果である。

【図5A】ＶＥＧＦ Ｔｒａｐ（アフリベルセプト）を発現する核酸分子を含むベクター構成図である。

【図5B】ＡＡＶパッケージングプラスミドの模式図である。

【図6】マウス眼球において目的遺伝子（アフリベルセプト）を発現するｒＡＡＶベクターウイルスＡＡＶ２ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２．７ｍ８の検査結果である。

【図7】ウサギ眼球において目的遺伝子（アフリベルセプト）タンパク質を発現するｒＡＡＶベクターウイルスＡＡＶ２ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２．７ｍ８の検査結果であり、それは、ウイルス注射の１４日後に、房水中の目的遺伝子タンパク質含有量の検出である。

【図8】ウサギ眼球において目的遺伝子タンパク質を発現するｒＡＡＶベクターウイルスＡＡＶ２ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２．７ｍ８の検査結果であり、それは、ウイルス注射の２８日後に、房水中の目的遺伝子タンパク質のモル濃度の検出である。

【発明を実施するための形態】

【0120】

本開示が更に容易に理解されるように、以下、幾つかの技術・科学用語を具体的に定義する。本明細書で別途明確に定義しない限り、本明細書に使用される他の技術・科学用語の全ては、当業者に通常理解されている意味を持っている。

【0121】

「ＡＡＶ」は、アデノ随伴ウイルスの略語であり、且つウイルス自体又はその誘導体を指すために使用することができる。別途指定しない限り、当該用語は全てのＡＡＶアイソフォーム及び天然存在形態と組換え形態を包含する。「ＡＡＶ」は、ＡＡＶ１型（ＡＡＶ１）、ＡＡＶ２型（ＡＡＶ２）、ＡＡＶ３型（ＡＡＶ３）、ＡＡＶ４型（ＡＡＶ４）、ＡＡＶ５型（ＡＡＶ５）、ＡＡＶ６型（ＡＡＶ６）、ＡＡＶ７型（ＡＡＶ７）、ＡＡＶ８型（ＡＡＶ８）、ＡＡＶ９型（ＡＡＶ９）、ＡＡＶ１０型（ＡＡＶ１０）、ＡＡＶｒｈ１０型（ＡＡＶｒｈ１０）、並びに、様々な種類のトリＡＡＶ、ウシＡＡＶ、イヌＡＡＶ、ウマＡＡＶ、霊長類ＡＡＶ、非霊長類ＡＡＶとヒツジＡＡＶを含むが、これらに限定されない。

【0122】

ＡＡＶは、非エンベロープ二十面体カプシドに含まれる４．７ ｋｂ単鎖ＤＮＡゲノムで構成された非病原性パルボウイルスであり、ゲノムには、ウイルス複製及びパッケージングシグナルの起点として機能する末端逆位反復配列（ＩＴＲ）に隣接する３つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）が含まれる。Ｒｅｐ ＯＲＦは、ウイルス複製、転写調節、部位特異的組込み、及びウイルス粒子構築において機能する４つの非構造タンパク質をコードする。Ｃａｐ ＯＲＦは、６０量体ウイルスカプシドを形成するために構築する３つの構造タンパク質（ＶＰ１－３）をコードする。最終的に、ｃａｐ遺伝子内の代替リーディングフレームとして存在するＯＲＦは、細胞核内でＡＡＶカプシドタンパク質を局在させ、カプシドの構築中に機能するウイルスタンパク質である構築活性化タンパク質（ＡＡＰ）を産生する。

【0123】

様々な血清型ＡＡＶのゲノム配列及び天然末端逆位反復配列（ＩＴＲ）、Ｒｅｐタンパク質配列及びカプシドサブユニット配列は、当該分野で公知である。このような配列は、文献又はＧｅｎＢａｎｋなどのパブリックデータベースから見出すことができる。例えば、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＣ＿００２０７７．１（ＡＡＶ１）、ＡＦ０６３４９７．１（ＡＡＶ１）、ＮＣ＿００１４０１．２（ＡＡＶ２）、ＡＦ０４３３０３．１（ＡＡＶ２）、Ｊ０１９０１．１（ＡＡＶ２）、Ｕ４８７０４．１（ＡＡＶ３）、ＮＣ＿００１７２９．１（ＡＡＶ３）、ＮＣ＿００１８２９．１（ＡＡＶ４）、Ｕ８９７９０．１（ＡＡＶ４）、ＮＣ＿００６１５２．１（ＡＡＶ５）、ＡＦ０８５７１６．１（ＡＡＶ５）、ＡＦ０２８７０４．１（ＡＡＶ６）、ＮＣ＿００６２６０．１（ＡＡＶ７）、ＡＦ５１３８５１．１（ＡＡＶ７）、ＡＦ５１３８５２．１（ＡＡＶ８）ＮＣ＿００６２６１．１（ＡＡＶ８）、ＡＹ５３０５７９．１（ＡＡＶ９）、及びＳｒｉｖｉｓｔａｖａ ｅｔ ａｌ．（１９８３）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ４５：５５５、Ｃｈｉｏｒｉｎｉ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ７１：６８２３、Ｃｈｉｏｒｉｎｉ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ７３：１３０９、Ｂａｎｔｅｌ－Ｓｃｈａａｌ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ７３：９３９、Ｘｉａｏ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ７３：３９９４、Ｍｕｒａｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ２２１：２０８、Ｓｈａｄｅ ｅｔ ａｌ．（１９８６）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．５８：９２１、Ｇａｏ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９９：１１８５４、Ｍｏｒｉｓ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ３３：３７５－３８３、及びＷＯ００／２８０６１、ＷＯ９９／６１６０１、ＷＯ９８／１１２４４、ＵＳ６１５６３０３、ＷＯ２０１２１４５６０１Ａ、ＷＯ２０１７１９７３５５Ａ、ＷＯ２０１８０２２９０５Ａを参照する。以上の内容は、本開示によりその全体が組み込まれている。

【0124】

ＡＡＶカプシドのＧＨ環又は環ＩＶについては、例えばｖａｎ Ｖｌｉｅｔ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１４：８０９、Ｐａｄｒｏｎ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７９：５０４７、及びＳｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１５：１９５５を参照する。

【0125】

「ＡＡＶビリオン」又は「ＡＡＶウイルス粒子」は、少なくとも１つのＡＡＶカプシドタンパク質及びカプシド化ＡＡＶポリヌクレオチドで構成されたビリオンを指す。

【0126】

「ｒＡＡＶ」は組換えアデノ随伴ウイルスを指し、ポリヌクレオチドに適用される「組換え」は、ポリヌクレオチドがクローニング、制限又はライゲーションの様々な組み合わせの産物であること、及び天然に見出されるものとは異なるポリヌクレオチドの構築物をもたらす他のプロセスを指す。組換えウイルスは、組換えポリヌクレオチドを含むビリオンである。

【0127】

「ＡＡＶウイルス粒子」が異種ポリヌクレオチド（即ち、標的細胞に送達される遺伝子産物（例えば、導入遺伝子、ＲＮＡｉなど）などの、野生型ＡＡＶゲノム以外のポリヌクレオチド）を含む場合、これは、一般的に「組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）ウイルス粒子」又は「ｒＡＡＶビリオン」又は「ｒＡＡＶベクターウイルス」と呼ばれる。一般的には、異種ポリヌクレオチドの両側は少なくとも１つ、一般的には２つのＡＡＶ末端逆位反復配列（ＩＴＲ）である。

【0128】

「ｒＡＡＶベクター」は、ｒＡＡＶポリヌクレオチドを含むｒＡＡＶウイルス粒子を包含し、且つｒＡＡＶをコードするポリヌクレオチド（例えば、ｒＡＡＶをコードする単鎖ポリヌクレオチド（ｓｓ－ｒＡＡＶ）、ｒＡＡＶをコードする二本鎖ポリヌクレオチド（ｄｓ－ｒＡＡＶ）、例えばｒＡＡＶをコードするプラスミドなど）も包含する。

【0129】

「ＡＡＶ変異体」、「ＡＡＶ突然変異体」又は「カプシド変異ｒＡＡＶ」は、以下からなるビリオンを意味する：（ａ）対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質と比較して少なくとも１つのアミノ酸相違（例えばアミノ酸置換、挿入又は欠失）を含み、天然に存在するＡＡＶカプシドタンパク質のアミノ酸配列と異なるか、又は非対応である、変異体ＡＡＶカプシドタンパク質、及び任意選択的に、（ｂ）異種遺伝子産物をコードする異種ポリヌクレオチドを含み、変異体ＡＡＶカプシドタンパク質が、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含むＡＡＶウイルス粒子への結合と比較して、ヘパリン様又はヘパリン硫酸プロテオグリカンとの増加した結合を付与する。

【0130】

「パッケージング」は、ＡＡＶ粒子の構築及びカプシド化をもたらす一連の細胞内事象を指す。

【0131】

「ｒｅｐ」及び「ｃａｐ」遺伝子は、アデノ随伴ウイルスの複製タンパク質及びカプシド化タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を指す。ＡＡＶ ｒｅｐ及びｃａｐは、本明細書ではＡＡＶ「パッケージング遺伝子」と呼ばれる。

【0132】

「ヘルパーウイルス」は、ＡＡＶ（例えば、野生型ＡＡＶ）が哺乳動物細胞によって複製され、パッケージングされることを可能にするウイルスを指す。ＡＡＶの様々なヘルパーウイルスが当該分野で公知であり、アデノウイルス、ヘルペスウイルス及びワクシニアなどのポックスウイルスを含む。アデノウイルスは多くの異なる亜集団を包含するが、Ｃ亜集団のアデノウイルス５型が最もよく使用され、ヘルペスファミリーのウイルスには、例えば、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）及びエシェリウイルス（ＥＢＶ）並びにサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）及び偽狂犬病ウイルス（ＰＲＶ）が含まれる。ヒト、非ヒト哺乳動物及び鳥類由来の多くのアデノウイルス、ヘルペスウイルスなどが知られており、ＡＴＣＣなどのメカニズムから入手可能である。

【0133】

「ヘルパーウイルス機能」又は「ヘルパー機能」は、ＡＡＶの複製及びパッケージングを可能にするヘルパーウイルスゲノムにコードされた機能を指す（本明細書に記載される複製及びパッケージングに対する他の必要性と組み合わせて行われる）。本開示において、「ヘルパーウイルス機能」は、ヘルパーウイルスを提供すること、又は例えば、輸送中の産生細胞に必須機能をコードするポリヌクレオチド配列を提供することを含む、多くの方法で提供することができる。

【0134】

「感染性」ウイルス又はビリオンは、適切に構築されたウイルスカプシドを含み、ウイルス種が好む細胞にポリヌクレオチド成分を送達することができ、ウイルスが複製能力を有することを必ずしも示唆していないウイルス又はビリオンである。感染性ビリオンのカウントを行う測定は、当該分野で公知である。ウイルス感染性は、全ビリオンに対する感染性ビリオンの比として発現することができる。全ビリオンに対する感染性ビリオンの比を決定する方法は、当該分野で公知である。例えば、Ｇｒａｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００５）『分子療法（Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．）』１１：Ｓ３３７（ＴＣＩＤ_５０感染力価が測定される）、Ｚｏｌｏｔｕｋｈｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９９）『遺伝子療法（Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．）』６：９７３を参照する。

【0135】

「指向性」又は「特異的」は、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）が特定の宿主種の細胞又は宿主種内の特定の細胞型を優先的に標的とすることを指す。例えば、心臓、肺、肝臓及び筋肉の細胞に感染できるウイルスは、肺及び筋肉の細胞にのみ感染する可能性のあるウイルスよりも広い（即ち増加する）指向性を有する。指向性は、宿主の特定の種類の細胞表面分子に対するウイルス依存性を更に含んでもよい。例えば、幾つかのウイルスは、表面グリコサミノグリカンを有する細胞にのみ感染することができるが、他のウイルスは、シアル酸を有する細胞にのみ感染することができる（この依存性は、特定の種類の分子を欠く様々な細胞株を、ウイルス感染のための潜在的な宿主細胞として使用して試験してもよい）。場合によっては、ウイルス指向性はウイルスの相対的な好みを記述する。例えば、第１ウイルスは全ての細胞型に感染できる可能性があるが、表面グリコサミノグリカンによる感染においてより成功する。第２ウイルスも同じ特徴を好む（例えば、第２ウイルスは、表面グリコサミノグリカンによる細胞の感染においてもより成功する）場合、第２ウイルスは、絶対的形質導入効率が類似していない場合であっても、第１ウイルスと類似（又は一致）する指向性を有すると考えられる。例えば、第２ウイルスは、試験される各々の所定の細胞型に感染する際に第１ウイルスよりも効果的であるが、相対的好みが類似（又は一致）する場合、第２ウイルスは、依然として第１ウイルスと類似（又は一致）する指向性を有すると考えられてもよい。幾つかの実施例において、天然に存在するウイルス粒子と比較して、本開示の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を含むウイルス粒子の指向性は変化していない。幾つかの実施例において、天然に存在するウイルス粒子と比較して、本開示の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を含むウイルス粒子の指向性は拡張される（即ち、広くなる）。幾つかの実施例において、天然に存在するウイルス粒子と比較して、本開示の変異体ＡＡＶカプシドタンパク質を含むウイルス粒子の指向性は低減する。

【0136】

「ポリヌクレオチド」は、デオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドを含む、任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態又はその類似体を指す。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びヌクレオチド類似体などの修飾ヌクレオチドを含んでもよく、且つ非ヌクレオチド成分によって分断されてもよい。ヌクレオチド構造に対する修飾は、ポリマーを構築する前後に行うことができる。ポリヌクレオチドは、二本鎖分子及び単鎖分子を互換可能に指し、別段の指示がない限り、本開示のポリヌクレオチドは、二本鎖形態、及び二本鎖形態を構成する２つの相補的な単鎖形態を包含する。

【0137】

「相同性」又は「同一性」は、２つのポリヌクレオチド配列間又は２つのポリペプチド間の配列の類似性を指す。２つの比較される配列における位置が何れも同じヌクレオチド又はアミノ酸モノマーサブユニットに占められる場合、例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置が同じヌクレオチドに占められる場合、上記分子は当該位置で相同である。２つの配列間の相同性百分率は、２つの配列の共有するマッチング又は相同位置数を比較される位置数で割って１００％をかける関数である。例えば、配列が最適にアラインメントされる場合、２つの配列における１０個の位置のうち６個がマッチングするか又は相同である場合、２つの配列は６０％相同である。配列類似性は、多くの異なる方法で測定することができる。配列同一性を測定するために、インターネットアドレスｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ／から得ることができるＢＬＡＳＴなどの方法及びコンピュータプログラムを使用して配列をアラインメントすることができる。別のアライメントアルゴリズムは、Ｍａｄｉｓｏｎ， Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ， ＵＳＡ， ａ ｗｈｏｌｌｙ ｏｗｎｅｄ ｓｕｂｓｉｄｉａｒｙ ｏｆ Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒｏｕｐ， ＩｎｃのＧｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ（ＧＣＧ）パッケージングから得ることができるＦＡＳＴＡである。他のアラインメント技術は、Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ．２６６： Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ（１９９６）， Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ ｅｄ．， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， ａｄｉｖｉｓｉｏｎ ｏｆ Ｈａｒｃｏｕｒｔ Ｂｒａｃｅ＆Ｃｏ．， ＳａｎＤｉｅｇｏ， Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ， ＵＳＡの方法に記載されている。特に興味深いのは、配列におけるギャップを許容する比較手順である。Ｓｍｉｔｈ－Ｗａｔｅｒｍａｎは、配列アライメントにおけるギャップを許容するアルゴリズムの一種である。Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．７０：１７３～１８７（１９９７）を参照する。Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ比較法を使用するＧＡＰプログラムも、配列アライメントとして使用することができる。Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３（１９７０）を参照する。

【0138】

「遺伝子」は、転写及び場合によって翻訳後に特定の遺伝子産物をコードすることができる少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含むポリヌクレオチドを指す。「遺伝子」又は「コード配列」は、遺伝子産物をコードする体外又は体内のヌクレオチド配列を指す。幾つかの場合において、遺伝子は、コード配列、即ち遺伝子産物をコードする配列からなるか、又は本質的にそれからなる。他の場合において、遺伝子は、別の非コード配列を含む。例えば、遺伝子は、コード領域の前後の領域（例えば、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、及び各コード領域（エクソン）間の挿入配列（イントロン））を含んでもよく、含まなくてもよい。

【0139】

「遺伝子産物」は、特定の遺伝子の発現によって生成される分子、例えば、ポリペプチド、アプタマー、干渉ＲＮＡ、ｍＲＮＡなどである。幾つかの実施形態において、「遺伝子産物」は、ポリペプチド、ペプチド、タンパク質又は干渉ＲＮＡであり、短鎖干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ｍｉＲＮＡ又は短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を含む。幾つかの具体的な実施形態において、遺伝子産物は、治療用ポリペプチドなどの治療用遺伝子産物である。上記治療用遺伝子産物は、それが存在する細胞、組織又は哺乳動物に、病状或いは疾患の徴候又は症状の改善、病状或いは疾患の予防又は阻害、若しくは所望の特徴の付与を含む有益な効果を付与する。遺伝子がポリペプチドをコードする場合、「遺伝子産物」と「目的遺伝子発現産物」は、互換的に使用される。

【0140】

「ＲＮＡ干渉剤」又は「ＲＮＡｉ試薬」は、遺伝子（上記で定義される通り）の発現を変化させるために有用な任意の試薬（又はそのような試薬をコードするポリヌクレオチド）を含む。当業者に公知のＲＮＡｉ試薬の実例は、（ｉ）ｓｉＲＮＡ試薬（「低分子干渉」又は「短鎖干渉ＲＮＡ」（又はｓｉＲＮＡ））、（ｉｉ）アンチセンスＲＮＡ、（ｉｉｉ）ＣＲＩＳＰＲ試薬、（ｉｖ）ジンクフィンガーヌクレアーゼ試薬、及び（ｖ）転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）試薬を含むが、これらに限定されない。ＷＯ２０１７１９７３５５Ａによる（ｉ）～（ｖ）の定義の全体は、本開示に組み込まれている。

【0141】

そのうち、ｓｉＲＮＡ試薬は、目的の遺伝子（「標的遺伝子」）のヌクレオチドを標的とするＲＮＡ二本鎖である。「ＲＮＡ二本鎖」は、ＲＮＡ分子の２つの領域間の相補的ペアリングによって形成され、それによって二本鎖ＲＮＡの領域（ｄｓＲＮＡ）を形成する構造を指す。ｓｉＲＮＡの二本鎖部分のヌクレオチド配列が標的遺伝子のヌクレオチド配列と相補的であるため、ｓｉＲＮＡが遺伝子を「標的」とする。幾つかの実施形態において、ｓｉＲＮＡの二重鎖の長さは、３０ヌクレオチド未満である。幾つかの実施形態において、二本鎖は、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１又は１０ヌクレオチド長であってもよい。幾つかの実施形態において、二本鎖の長さは、１９～２５ヌクレオチド長である。ｓｉＲＮＡのＲＮＡ二本鎖部分は、ヘアピン構造の一部であってもよい。ヘアピンを含むｓｉＲＮＡ試薬は、「ｓｈＲＮＡ（短鎖ヘアピンＲＮＡ）試薬」と呼ばれてもよい。ヘアピン構造は、二本鎖部分に加えて、二本鎖を形成する２つの配列の間に位置する環部分を含んでもよい。環の長さが変化してもよい。幾つかの実施形態において、環の長さは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２又は１３ヌクレオチドである。ヘアピン構造は、３’又は５’突出末端部分を更に含んでもよい。幾つかの実施形態において、突出末端は、０、１、２、３、４又は５ヌクレオチド長の３’又は５’突出末端である。一般的には、標的遺伝子の発現産物（例えば、ｍＲＮＡ、ポリペプチドなど）のレベルは、５’非翻訳（ＵＴＲ）領域、ＯＲＦ、又は３’ＵＴＲ領域を含む、標的遺伝子の転写産物の１９～２５ヌクレオチド長のセグメント（例えば、２０～２１ヌクレオチド配列）に少なくとも相補的な特定の二本鎖ヌクレオチド配列を含むｓｉＲＮＡ試薬（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡなど）によって低減される。幾つかの実施形態において、短鎖干渉ＲＮＡの長さは約１９～２５ ｎｔである。例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ０／４４８９５、ＷＯ９９／３２６１９、ＷＯ０１／７５１６４、ＷＯ０１／９２５１３、ＷＯ０１／２９０５８、ＷＯ０１／８９３０４、ＷＯ０２／１６６２０、及ＷＯ０２／２９８５８、及び米国特許公開番号２００４００２３３９０（ｓｉＲＮＡ技術に関する記載）を参照する。ｓｉＲＮＡ及び／又はｓｈＲＮＡは核酸配列によってコードされてもよく、且つ当該核酸配列はプロモーターを更に含んでもよい。核酸配列は、ポリアデニル化シグナルを更に含んでもよい。幾つかの実施形態において、ポリアデニル化シグナルは、合成された最小ポリアデニル化シグナルである。

【0142】

そのうち、アンチセンスＲＮＡは、遺伝子発現産物に相補的なＲＮＡである。例えば、特定のｍＲＮＡを標的とするアンチセンスＲＮＡは、ｍＲＮＡに相補的なＲＮＡベースの試薬であり（又は修飾ＲＮＡであってもよく）、そのうち、ｍＲＮＡに対するアンチセンスＲＮＡのハイブリダイゼーションは、ｍＲＮＡの発現を変更する（例えば、ＲＮＡの安定性の変更、ＲＮＡの翻訳の変更などによる）。アンチセンスＲＮＡをコードする核酸も、「アンチセンスＲＮＡ」に含まれる。

【0143】

「ＶＥＧＦ」は、例えば、ＶＥＧＦ－Ａ／ＶＰＦ遺伝子の代替的スプライシングによって産生される、様々なアイソフォームのＶＥＧＦ（血管透過因子（ＶＰＦ）及びＶＥＧＦ－Ａとも呼ばれる）を含む、血管新生又は血管新生プロセスを誘導する血管内皮成長因子を指し（米国特許出願公開第２０１２０１００１３６号の図２（Ａ）及び（Ｂ）を参照する）、ＶＥＧＦ１２１、ＶＥＧＦ１６５及びＶＥＧＦ１８９を含む。更に、「ＶＥＧＦ」は、ＰＩＧＦ（胎盤成長因子）、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ及びＶＥＧＦ－ＥなどのＶＥＧＦ関連血管新生因子を含み、上記ＶＥＧＦ関連血管新生因子は、血管新生又は血管新生プロセスを誘導するように同種ＶＥＧＦ受容体（即ちＶＥＧＦＲ）によって作用する。

【0144】

本明細書において、「ｓＦｌｔ－１」又は「ｓＦｌｔ－１タンパク質」は、ｓＦｌｔ－１タンパク質又はポリペプチドがＶＥＧＦ及び／又はＶＥＧＦ受容体に結合するように、天然に存在するヒトｓＦＬＴ－１配列に対して少なくとも９０％又はそれ以上相同であるポリペプチド配列又はその機能断片を指す。

【0145】

「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指し、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、リン酸化又は標識成分との複合などによって修飾されたアミノ酸のポリマーを更に含む。

【0146】

「調節エレメント」又は「調節配列」は、複製、反復、転写、スプライシング、翻訳又は分解を含むポリヌクレオチドの機能調節を促進する分子の相互作用に関与するヌクレオチド配列である。調節は、プロセスの頻度、速度又は特異性に影響を与え、本質的には、増強又は阻害特性を有する。既知の制御エレメントは、プロモーター及びエンハンサーなどの転写調節配列を含む。プロモーターは、ある条件でＲＮＡポリメラーゼに結合し、且つ通常プロモーターの下流（３’方向）に位置するコード領域の転写を開始することができるＤＮＡ領域である。

【0147】

「発現ベクター」は、目的遺伝子産物をコードする領域を含むベクターであり、且つ目的の標的細胞において遺伝子産物の発現を実現するために用いられ、上記ベクターは目的の遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドを含む。発現ベクターは、標的における遺伝子産物の発現を促進するために、コード領域に操作可能に連結された制御エレメントを更に含む。プロモーター、エンハンサー、ＵＴＲ、ｍｉＲＮＡ標的配列などの制御エレメントと、発現のためにそれらと操作可能に連結された１つ又は複数の遺伝子との組み合わせは、「発現カセット」と呼ばれる場合がある。多くの発現カセットは、当該分野で公知で、且つ取得可能であるか、又は当該分野で取得可能な成分から容易に構築することができる。

【0148】

「操作的に連結された」又は「操作可能に連結された」は、遺伝子エレメントが、意図された形式で操作することを可能にする関係にある、遺伝子エレメントの並列を指す。例えば、プロモーターがコードポリヌクレオチド配列の転写の開始を補助する場合、プロモーターは、コードポリヌクレオチド配列に操作的に連結され、この機能的関係が維持される限り、プロモーターとコードポリヌクレオチド配列との間に挿入された核酸残基が存在する可能性がある。

【0149】

「投与」又は「導入」は、組換え遺伝子又はタンパク質の発現のためのベクターを、細胞、対象の細胞及び／又は器官、或いは対象に送達することを指す。そのような投与又は導入は、体内、体外又はエクスビボで起こり得る。遺伝子産物を発現するためのベクターは、物理的手段（例えば、リン酸カルシウムトランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション又はリポトランスフェクション）によって異種ＤＮＡを細胞内に挿入することを通常意味するトランスフェクション、感染剤即ちウイルスによって導入されることを通常意味する感染、細胞に細胞を安定的に感染させること、又はウイルス剤（例えば細菌性ファージ）を介してある微生物からの遺伝子材料を、別の微生物に移入することを通常意味する形質導入によって細胞内に導入することができる。「形質転換」は、一般的に、異種ＤＮＡを含む細菌、又はがん遺伝子を発現し、且つ連続的な増殖パターンに転換された細胞、例えば腫瘍細胞を指すために使用される。細胞を「形質転換」するために使用されるベクターは、プラスミド、ウイルス、又は他のビヒクルであってもよい。異種ＤＮＡ（即ち、ベクター）を細胞に投与、導入又は挿入するための方法に応じて、細胞は、一般的に、「形質導入」、「感染」、「トランスフェクション」又は「形質転換」と呼ばれる。「形質導入」、「トランスフェクション」及び「形質転換」は、異種ＤＮＡの導入方法を考慮せず、本明細書において互換可能に使用される。

【0150】

「宿主細胞」は、ベクターで形質導入、感染、トランスフェクト又は形質転換された細胞を指し、最初の形質導入、感染、トランスフェクト又は形質転換された細胞及びその子孫を包含する。ベクターは、プラスミド、ビリオン、ファージなどであってもよい。温度、ｐＨなどの培養条件は、当業者にとって明らかである。

【0151】

「治療」は、一般的に、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを意味するように使用される。効果は、疾患又はその症状の完全又は部分的な予防において予防的であってもよく、例えば、対象における疾患又はその症状の発症の可能性を低減し、及び／又は、疾患及び／又は疾患によって引き起こされる不良反応の部分的又は完全な治癒において治療的であってもよい。「治療」は、哺乳動物における疾患の任意の治療を網羅し、（ａ）疾患にかかっている傾向がある可能性があるが、疾患にかかっていると診断されていない対象において疾患が発生することを防止すること、（ｂ）疾患の進行を阻害又は中断すること、或いは（ｃ）疾患（又はそれに起因する症状）を軽減するか、又は疾患を退行させることを含む。疾患又は傷害の発症前、発症中又は発症後に治療剤を投与することができる。特に進行中の疾患の治療の場合、上記治療は、患者の望ましくない臨床症状を安定化又は低減する。幾つかの好ましい形態において、そのような治療は、影響を受ける組織の機能が完全に失われる前に行われる。幾つかの好ましい形態において、本開示の治療は、疾患の症状期の間に、及び場合によっては疾患の症状期の後に投与される。

【0152】

「有効量」は、医学障害の症状又は病状を改善又は予防するために十分な量を含む。有効量は、診断の許容又は促進に十分な量を更に意味する。特定の対象に使用される有効量は、治療される病状、対象の全体的健康状態、投与の方法、経路や用量、及び副作用の重症度といった要因に応じて変化することができる。有効量は、顕著な副作用又は毒性作用を回避する最大用量又は投与計画であってもよい。

【0153】

本開示における「網膜細胞」は、網膜を含む細胞型の何れか１つを指してもよく、例えば、網膜神経節細胞、アマクリン細胞、水平細胞、双極細胞、桿体及び錐体を含む光受容細胞、ミラーグリア細胞（Ｍｕｌｌｅｒ ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ）、星状細胞（例えば網膜星状細胞）及び網膜色素上皮細胞である。

【0154】

「個体」、「対象」及び「患者」は、本明細書において互換可能に使用され、ヒト及び非ヒト霊長類動物、例えばサル、ヒト及び他の哺乳類動物（例えばウマ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ及び齧歯動物（例えばマウス、ラットなど））を含むが、これらに限定されず、好ましくはヒトである。

【0155】

本開示において、「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、互換可能に使用される。
実施例

【0156】

以下、実施例と合わせて本開示を更に説明するが、これらの実施例は本開示の範囲を限定するものではない。本開示の実施例において具体的な条件が明記されていない実験方法は、一般的に、通常の条件に従い、又は原料や商品のメーカーにより勧められた条件に従う。具体的な供給源が明記されていない試薬である場合、当該試薬は、何れかの分子生物学的試薬の供給元から、分子生物学的応用のための品質／純度で得ることができる。
実施例１． ＡＡＶカプシド改変

【0157】

分子動力学シミュレーション及びタンパク質フィンガープリント技術は、タンパク質工学、抗体親和性改変において広く適用され、抗体及び受容体の物理化学的性質の動力学シミュレーションを通して、アミノ酸改変による局所親和性影響をある程度で予測することができる。

【0158】

ヘパラン硫酸受容体は、網膜及び視神経細胞の感染に重要な役割を果たすＡＡＶ細胞感染を媒介する最も重要な受容体であることが証明されており、ＡＡＶ２ネイティブ血清型カプシドタンパク質のアミノ酸配列には、その空間構造特徴に従い、５つの環状ドメイン（図１に示す）がウイルス感染能力に関与していることが研究により証明された。そのうち、環状ドメインＩＶの第５８７位と第５８８位との間に７～１２アミノ酸の短いペプチドを挿入することは、ウイルスカプシドタンパク質の構築に影響を与えず、同時にＡＡＶカプシドと細胞受容体（ヘパラン硫酸）との相互作用の形式を大幅に変化させることができ、それにより宿主細胞に対するＡＡＶ感染能力に影響を与える。

【0159】

本開示は、ＡＡＶ２ネイティブ血清型カプシドタンパク質のアミノ酸配列における第５８７位と第５８８位との間に幾つかのランダムアミノ酸配列（７～１２アミノ酸長）を挿入し、且つカプシドタンパク質とヘパラン硫酸受容体との間の相互作用を予測するために、自律的に開発されたバイオインフォマティクスアルゴリズムを利用する。後続の検証を行うために、アルゴリズムにおける、感染能力を大きく向上及び予測できる配列を選択する。アルゴリズム予測に従って、各配列の長さがそれぞれ１０アミノ酸長である、表１に示す６個のアミノ酸配列ｓｅｑ１～ｓｅｑ６を選択した。同時に、ＡＡＶ２ネイティブ血清型カプシドタンパク質のアミノ酸配列における第７０８位のアミノ酸－バリン（Ｖ）をイソロイシン（Ｉ）に置換した。第５８７位と第５８８位との間の挿入方法及び第７０８位におけるアミノ酸の置換方法は図２に示されており、工学的に改変されたＡＡＶカプシドタンパク質配列を得た。同時に、ＡＡＶ９の対応する位置にｓｅｑ２を挿入したカプシドを製造した。

【0160】

【表1】

ＡＡＶカプシドタンパク質は、発現後にＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３の３つの単量体タンパク質が一定の割合で構築され、通常の組換えタンパク質と比較してより高次の構造を有するため、ＡＡＶカプシドタンパク質に生じるポリペプチド挿入による機能的影響は、それによる物理化学的性質の変化に限定されず、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３の３つの単量体タンパク質の構築においてより複雑な影響を与える可能性が高い。
実施例２． ｒＡＡＶベクターウイルス感染マウスモデルの網膜機能の検出

【0161】

機能を検証するために、本発明者らは、配列番号３～配列番号８、ＡＡＶ２（配列番号１）、ＡＡＶ２．７ｍ８（配列番号２）の８つの配列を有するカプシドで、ＣＭＶプロモーターによって駆動されるＥＧＦＰ目的遺伝子を含み、且つ発現できるプラスミドｐＧＯＩをそれぞれパッケージングした。ＥＧＦＰ発現能力を有する上記の異なるＡＡＶカプシドでパッケージングしたＡＡＶベクターを、マウス硝子体に同量注入し、蛍光眼底撮影によりＥＧＦＰの発現が検出され、ＥＧＦＰ蛍光シグナルの強度の差で網膜組織への異なるＡＡＶカプシドの感染効率の差を評価した。

【0162】

ｒＡＡＶベクターウイルスのパッケージング及び精製ステップは、ｐＨｅｌｐｅｒ、ｐＲ２Ｃ９、ｐＧＯＩの３つのプラスミド系を２９３Ｔ接着細胞にトランスフェクトし、細胞及び上清を回収し、イオギソール遠心法により精製され、更に限外ろ過により濃縮し、緩衝液をＤＰＢＳに置換することを含む。ウイルスのパッケージング及び精製が完了した後、ｑＰＣＲによって力価（単位：ｖｇ）が検出された。ＥＧＦＰ目的遺伝子を発現する８つのウイルス（カプシドは、それぞれＡＡＶ２、ＡＡＶ２．７ｍ８、ＡＡＶ２ ｓｅｑ１、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４、ＡＡＶ２ ｓｅｑ５、ＡＡＶ２ ｓｅｑ６である）を、それぞれＤＰＢＳ緩衝液で同じ力価１．０３Ｅ＋１２に希釈した。週齢が１０週のＣ５７マウス（北京維通利華実験動物技術有限公司から購入）に、片側眼硝子体注射を１ μＬの体積で行い、ＡＡＶベクター１種類あたり３匹（ｎ＝３）を注射し、注射後１週間から４週間まで、生体蛍光眼底撮影を毎週行った。

【0163】

結果の一部を図３に示す通りであり、ＡＡＶ２群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ５群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ６群は、他の群よりも蛍光シグナルの強度が明らかに弱かった。ＡＡＶ２ ｓｅｑ１群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４群は、蛍光シグナルの強度がＡＡＶ２．７ｍ８と比較的類似し、網膜組織への感染効率が比較的高いことを示した。

【0164】

表１の「ＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡ」配列をＡＡＶ９カプシド中の同じ位置（第５８８位と第５８９位との間）に挿入し、ＡＡＶ９ ｓｅｑ２を得た。ＡＡＶ２、ＡＡＶ２．７ｍ８、ＡＡＶ２ ｓｅｑ１、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４、ＡＡＶ９ ｓｅｑ２の合計７つのカプシドで、ＣＭＶプロモーターによって駆動されるＥＧＦＰ目的遺伝子を含み、且つ発現することができるプラスミドベクターをそれぞれパッケージングした。ＥＧＦＰ発現能力を有する上記の異なるＡＡＶカプシドでパッケージングしたＡＡＶベクターを、マウス硝子体に同量注入し、蛍光眼底撮影によりＥＧＦＰの発現が検出され、ＥＧＦＰシグナルの強度の差で網膜組織への異なるＡＡＶカプシドの感染効率の差を評価した。

【0165】

上記の方法を用いて、ＡＡＶウイルスベクターをパッケージング及び精製した。ＥＧＦＰ目的遺伝子を発現する７つのウイルス（カプシドは、それぞれＡＡＶ２、ＡＡＶ２．７ｍ８、ＡＡＶ２ ｓｅｑ１、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３、ＡＡＶ２ ｓｅｑ４、ＡＡＶ２ ｓｅｑ５、ＡＡＶ９ ｓｅｑ２である）を、それぞれＤＰＢＳ緩衝液で同じ力価１．０３Ｅ＋１２に希釈した。週齢が１０週のＣ５７マウスに、片側眼硝子体注射を１ μＬの体積で行い、ＡＡＶベクター１種類あたり３匹（ｎ＝３）を注射し、注射後１週間から４週間まで、生体蛍光眼底撮影を毎週行った。

【0166】

結果を図４Ａ、図４Ｂに示すが、そのうち、ＡＡＶ２群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２群、ＡＡＶ２ ｓｅｑ３群は、他の群よりも蛍光シグナルの強度が明らかに強く、且つＡＡＶ２．７ｍ８と類似した。
実施例３． マウスモデルの網膜感染に対するｒＡＡＶベクターウイルスの生物学的機能の検出

【0167】

網膜組織へのｓｅｑ２カプシドの感染能力及びそれらに関連する生物学的機能を更に検証するために、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２．７ｍ８で、ＣＭＶプロモーターによって駆動されるアフリベルセプト（ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）を含む目的プラスミドベクター（ＡＡＶ２ ｓｅｑ２－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ、ＡＡＶ２．７ｍ８－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）をそれぞれパッケージングし、２つのウイルスをそれぞれニュージーランドウサギ及びＣ５７マウスに硝子体注射し、注射の２週間後に、眼組織に注射したアフリベルセプトタンパク質の含有量を検出して、網膜への対応するＡＡＶウイルスの感染及びそれらに関連する生物学的機能を評価した。

【0168】

そのうち、ｒＡＡＶ送達遺伝子発現カセットの構造は、その５’末端から３’末端へ、ＣＭＶエンハンサー、プロモーター、５’ＵＴＲ、Ｋｏｚａｋ配列（ｇｃｃａｃｃ）、ＶＥＧＦ阻害剤であるアフリベルセプト、３’ＵＴＲ、ＷＰＲＥ及びＳＶ４０ｐｏｌｙＡを含む（図５Ａに示す）。そのうち、ＣＭＶエンハンサーの塩基配列は配列番号２８に示され、ＣＭＶプロモーターの塩基配列は配列番号２９に示され、５’ＵＴＲは配列番号３０に示され、Ｋｏｚａｋ配列は配列番号３１に示され、３’ＵＴＲは配列番号３２に示され、ＷＰＲＥは配列番号３３に示され、ＳＶ４０ｐｏｌｙＡは配列番号３４に示された。

【0169】

発現ベクターの構築は、ＣＭＶエンハンサー、プロモーター、５’ＵＴＲ、Ｋｏｚａｋ配列（ｇｃｃａｃｃ）、ＶＥＧＦ ｔｒａｐ（アフリベルセプト）、３’ＵＴＲ、ＷＰＲＥ及びＳＶ４０ｐｏｌｙＡを順に含む発現カセットを構築し、酵素切断、連結、形質転換及びクローニングスクリーニング同定などの従来の分子生物学的操作によってアフリベルセプトを発現するＡＡＶパッケージングプラスミドを構築することであり、発現カセットの両側は末端逆位反復配列（ＩＴＲ）であり、その構成図は図５Ｂに示され、ＥｃｏＲＶ及びＢＳＭＩは酵素切断部位である。

【0170】

実施例２の方法に従って、ベクターのパッケージング及びｒＡＡＶベクターウイルスの精製を行った。

【0171】

精製されたＡＡＶ ｓｅｑ２－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ及びＡＡＶ２．７ｍ８－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔの２つのウイルスを、ＤＰＢＳ緩衝液で同じ力価９Ｅ＋１２ｖｇ／ｍＬにそれぞれ希釈し、週齢が８週～１０週のＣ５７マウスに、両眼硝子体注射を１ μＬの体積で行い、ｒＡＡＶベクターウイルス１種類あたり４匹（ｎ＝４）を注射した。注射後の２週間、マウスを屠殺し、眼組織を採取してそれぞれ研磨し、各注射群の左眼と右眼にそれぞれ異なる２種類の方法で組織研磨処理を行った。左眼は、ＰＢＳ＋プロテアーゼ阻害剤で研磨し、遠心分離後に上清を取るといった方法１を使用した。右眼は、ＲＩＰ Ｂｕｆｆｅｒ＋プロテアーゼ阻害剤で研磨し、遠心分離後に上清を取るといった方法２を使用した。酵素結合免疫アッセイを用いて、上清中のアフリベルセプトタンパク質の含有量を検出した（１注射群当たり４個のサンプル、各サンプルについて３回の反復を検出した）。結果を図６に示された。そのうち、ブランク対照はＰＢＳ注射群であり、縦座標であるＨＲＡＭＤ／総タンパク質は、組織総タンパク質１ ｍｇ当たりのアフリベルセプトタンパク質のｎｇ数であった。

【0172】

【表2-1】

【表2-2】

図６、表２の結果は、マウスにおけるＡＡＶ ｓｅｑ２－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ群の発現量がＡＡＶ２．７ｍ８－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ群よりも高いことを示した。
実施例４． ウサギモデル網膜感染に対するｒＡＡＶベクターウイルスの生物学的機能の検出

【0173】

実施例２の方法に従って、ベクターのパッケージング及びｒＡＡＶベクターウイルスの精製を行った。

【0174】

精製されたＡＡＶ ｓｅｑ２－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ及びＡＡＶ２．７ｍ８－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔの２つのウイルスを、ＤＰＢＳ緩衝液で４Ｅ＋９ｖｇ／ｍＬにそれぞれ希釈し、週齢が８週～１０週のニュージーランドウサギ（北京維通利華実験動物技術有限公司から購入）に、両眼硝子体注射を５０ μＬの体積で行い、ｒＡＡＶベクターウイルス１種類あたり２匹（ｎ＝２）を注射した。注射後の２週間、ウサギを屠殺し、房水、硝子体及び全眼組織を採取してそれぞれ研磨し、各注射群の左眼と右眼にそれぞれ異なる２種類の方法で組織研磨処理を行った。左眼は、ＰＢＳ＋プロテアーゼ阻害剤で研磨し、遠心分離後に上清を取るといった方法１を使用した。右眼は、ＲＩＰ Ｂｕｆｆｅｒ＋プロテアーゼ阻害剤で研磨し、遠心分離後に上清を取るといった方法２を使用した。酵素結合免疫アッセイを用いて、上清中のアフリベルセプトタンパク質の含有量を検出した（１注射群当たり２個のサンプル、各サンプルについて３回反復検出した）。結果を図７に示された。そのうち、ブランク対照はＰＢＳ注射群であり、縦座標であるＨＲＡＭＤ／総タンパク質は、組織総タンパク質１ ｍｇ当たりのアフリベルセプトタンパク質のｎｇ数であった。

【0175】

図７の結果は、ニュージーランドウサギにおけるＡＡＶ ｓｅｑ２－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ群の発現量が何れもＡＡＶ２．７ｍ８－ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ群よりも高いことを示した。ウサギは眼の体積が大きいため、アフリベルセプトは、全眼研磨処理後に組織液に希釈されるため、濃度が硝子体や房水よりも遥かに低い。ＡＡＶでパッケージされたベクターは、ＡＡＶウイルスが細胞への感染に成功した後にのみ、保有される目的遺伝子タンパク質の発現に成功するので、図７の結果は、細胞に対するＡＡＶ２ ｓｅｑ２カプシドの感染効率がＡＡＶ２．７ｍ８カプシドよりも高いことを示した。

【0176】

また、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２及びＡＡＶ２．７ｍ８カプシドにより送達された目的遺伝子タンパク質（ＶＥＧＦ阻害剤）の発現量を更に比較した。実験方法は、表３の用量に従って、８匹のニュージーランドウサギを両眼に注射し、各用量群で２匹のウサギを４つの眼に注射し、合計４群とした。注射後の２８日目に、実験動物を屠殺して房水を抽出し、ＥＬＩＳＡ法を用いて房水サンプル中の目的遺伝子タンパク質のモル濃度を検出した。

【0177】

結果は、図８に示されるように、ＡＡＶ２ ｓｅｑ２で発現される目的遺伝子タンパク質のモル濃度が、等用量注射でＡＡＶ２．７ｍ８も明らかに高かった。

【0178】

【表3-1】

【表3-2】

以下は本開示の一部の配列である。

【0179】

＞ ＡＡＶ２カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号１
＞ ＡＡＶ２．７ｍ８カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＧＥＴＴＲＰＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ１カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＡＥＴＴＲＰＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号３
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ２カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ＊
配列番号４
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ３カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＧＥＴＴＲＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号５
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ４カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＫＡＤＴＴＫＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号６

＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ５カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＫＤＤＴＴＲＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号７
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ６カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＡＤＴＴＫＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＩＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号８
＞ ＡＡＶ９ ｓｅｑ２カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＮＬＳＥＧＩＲＥＷＷＡＬＫＰＧＡＰＱＰＫＡＮＱＱＨＱＤＮＡＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＧＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＡＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＱＱＬＫＡＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＬＬＥＰＬＧＬＶＥＥＡＡＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＱＳＰＱＥＰＤＳＳＡＧＩＧＫＳＧＡＱＰＡＫＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＴＥＳＶＰＤＰＱＰＩＧＥＰＰＡＡＰＳＧＶＧＳＬＴＭＡＳＧＧＧＡＰＶＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＳＳＳＧＮＷＨＣＤＳＱＷＬＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＮＳＴＳＧＧＳＳＮＤＮＡＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＤＮＮＧＶＫＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＤＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＥＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＩＰＱＹＧＹＬＴＬＮＤＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＱＦＳＹＥＦＥＮＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＫＴＩＮＧＳＧＱＮＱＱＴＬＫＦＳＶＡＧＰＳＮＭＡＶＱＧＲＮＹＩＰＧＰＳＹＲＱＱＲＶＳＴＴＶＴＱＮＮＮＳＥＦＡＷＰＧＡＳＳＷＡＬＮＧＲＮＳＬＭＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＥＧＥＤＲＦＦＰＬＳＧＳＬＩＦＧＫＱＧＴＧＲＤＮＶＤＡＤＫＶＭＩＴＮＥＥＥＩＫＴＴＮＰＶＡＴＥＳＹＧＱＶＡＴＮＨＱＳＡＱＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡＡＱＡＱＴＧＷＶＱＮＱＧＩＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＮＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＭＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＤＰＰＴＡＦＮＫＤＫＬＮＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＹＫＳＮＮＶＥＦＡＶＮＴＥＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号９
＞ ＥＧＦＰアミノ酸配列
ＭＶＳＫＧＥＥＬＦＴＧＶＶＰＩＬＶＥＬＤＧＤＶＮＧＨＫＦＳＶＳＧＥＧＥＧＤＡＴＹＧＫＬＴＬＫＦＩＣＴＴＧＫＬＰＶＰＷＰＴＬＶＴＴＬＴＹＧＶＱＣＦＳＲＹＰＤＨＭＫＱＨＤＦＦＫＳＡＭＰＥＧＹＶＱＥＲＴＩＦＦＫＤＤＧＮＹＫＴＲＡＥＶＫＦＥＧＤＴＬＶＮＲＩＥＬＫＧＩＤＦＫＥＤＧＮＩＬＧＨＫＬＥＹＮＹＮＳＨＮＶＹＩＭＡＤＫＱＫＮＧＩＫＶＮＦＫＩＲＨＮＩＥＤＧＳＶＱＬＡＤＨＹＱＱＮＴＰＩＧＤＧＰＶＬＬＰＤＮＨＹＬＳＴＱＳＡＬＳＫＤＰＮＥＫＲＤＨＭＶＬＬＥＦＶＴＡＡＧＩＴＬＧＭＤＥＬＹＫ
配列番号１０
＞ ｓｅｑ１（リンカー無）
ＬＡＥＴＴＲＰ
配列番号１１
＞ ｓｅｑ２（リンカー無）
ＬＧＤＴＴＲＰ
配列番号１２
＞ ｓｅｑ３（リンカー無）
ＬＧＥＴＴＲＮ
配列番号１３
＞ ｓｅｑ４（リンカー無）
ＫＡＤＴＴＫＮ
配列番号１４
＞ ｓｅｑ５（リンカー無）
ＫＤＤＴＴＲＮ
配列番号１５
＞ ｓｅｑ６（リンカー無）
ＬＡＤＴＴＫＮ
配列番号１６
＞ ｓｅｑ１
ＬＡＬＡＥＴＴＲＰＡ
配列番号１７
＞ ｓｅｑ２
ＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡ
配列番号１８
＞ ｓｅｑ３
ＬＡＬＧＥＴＴＲＮＡ
配列番号１９
＞ ｓｅｑ４
ＬＡＫＡＤＴＴＫＮＡ
配列番号２０
＞ ｓｅｑ５
ＬＡＫＤＤＴＴＲＮＡ
配列番号２１
＞ ｓｅｑ６
ＬＡＬＡＤＴＴＫＮＡ
配列番号２２
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ２カプシドアミノ酸配列（Ｖ７０８Ｉを含まない）
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＧＤＴＴＲＰＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２３
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ３カプシドアミノ酸配列（Ｖ７０８Ｉを含まない）
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＧＥＴＴＲＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２４
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ４カプシドアミノ酸配列（Ｖ７０８Ｉを含まない）
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＫＡＤＴＴＫＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２５

＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ５カプシドアミノ酸配列（Ｖ７０８Ｉを含まない）
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＫＤＤＴＴＲＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２６
＞ ＡＡＶ２ ｓｅｑ６カプシドアミノ酸配列（Ｖ７０８Ｉを含まない）
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＴＬＳＥＧＩＲＱＷＷＫＬＫＰＧＰＰＰＰＫＰＡＥＲＨＫＤＤＳＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＦＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＥＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＲＱＬＤＳＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＶＬＥＰＬＧＬＶＥＥＰＶＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＨＳＰＶＥＰＤＳＳＳＧＴＧＫＡＧＱＱＰＡＲＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＡＤＳＶＰＤＰＱＰＬＧＱＰＰＡＡＰＳＧＬＧＴＮＴＭＡＴＧＳＧＡＰＭＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＳＱＳＧＡＳＮＤＮＨＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＱＮＤＧＴＴＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＥＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＱＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＶＰＱＹＧＹＬＴＬＮＮＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＴＦＳＹＴＦＥＤＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲＮＷＬＰＧＰＣＹＲＱＱＲＶＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨＬＮＧＲＤＳＬＶＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＤＤＥＥＫＦＦＰＱＳＧＶＬＩＦＧＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶＭＩＴＤＥＥＥＩＲＴＴＮＰＶＡＴＥＱＹＧＳＶＳＴＮＬＱＲＧＮＬＡＬＡＤＴＴＫＮＡＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＨＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＬＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＮＰＳＴＴＦＳＡＡＫＦＡＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＮＫＳＶＮＶＤＦＴＶＤＴＮＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号２７
＞ ＣＭＶエンハンサー配列
ＣＧＴＴＡＣＡＴＡＡＣＴＴＡＣＧＧＴＡＡＡＴＧＧＣＣＣＧＣＣＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＣＣＣＡＡＣＧＡＣＣＣＣＣＧＣＣＣＡＴＴＧＡＣＧＴＣＡＡＴＡＡＴＧＡＣＧＴＡＴＧＴＴＣＣＣＡＴＡＧＴＡＡＣＧＣＣＡＡＴＡＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＡＴＴＧＡＣＧＴＣＡＡＴＧＧＧＴＧＧＡＧＴＡＴＴＴＡＣＧＧＴＡＡＡＣＴＧＣＣＣＡＣＴＴＧＧＣＡＧＴＡＣＡＴＣＡＡＧＴＧＴＡＴＣＡＴＡＴＧＣＣＡＡＧＴＡＣＧＣＣＣＣＣＴＡＴＴＧＡＣＧＴＣＡＡＴＧＡＣＧＧＴＡＡＡＴＧＧＣＣＣＧＣＣＴＧＧＣＡＴＴＡＴＧＣＣＣＡＧＴＡＣＡＴＧＡＣＣＴＴＡＴＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＴＡＣＴＴＧＧＣＡＧＴＡＣＡＴＣＴＡＣＧＴＡＴＴＡＧＴＣＡＴＣＧＣＴＡＴＴＡＣＣＡＴＧ
配列番号２８
＞ＣＭＶプロモーター配列
ＴＧＣＴＧＡＴＧＣＧＧＴＴＴＴＧＧＣＡＧＴＡＣＡＣＣＡＡＴＧＧＧＣＧＴＧＧＡＴＡＧＣＧＧＴＴＴＧＡＣＴＣＡＣＧＧＧＧＡＴＴＴＣＣＡＡＧＴＣＴＣＣＡＣＣＣＣＡＴＴＧＡＣＧＴＣＡＡＴＧＧＧＡＧＴＴＴＧＴＴＴＴＧＧＣＡＣＣＡＡＡＡＴＣＡＡＣＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＡＡＡＡＴＧＴＣＧＴＡＡＴＡＡＣＣＣＣＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＣＧＣＡＡＡＴＧＧＧＣＧＧＴＡＧＧＣＧＴＧＴＡＣＧＧＴＧＧＧＡＧＧＴＣＴＡＴＡＴＡＡＧＣＡＧＡＧＣＴＣＧＴＴＴＡＧＴＧＡＡＣＣＧＴＣＡＧＡＴＣＧＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＣＣＡＴＣＣＡＣＧＣＴＧＴＴＴＴＧＡＣＣＴＣＣＡＴＡＧＴＧＧＡＣＡＣＣＧＧＧＡＣＣＧＡＴＣＣＡＧＣＣＴＣＣＧＣＧＴＣＴＣＡＧＧＧＧＡＡＧＣＴＴ
配列番号２９
＞５’ＵＴＲ配列
ＣＴＴＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＡＧＣＴＣＡＧＡＡＴＡＡＡＣＧＣＴＣＡＡＣＴＴＴＧＧ
配列番号３０
＞Ｋｏｚａｋ配列
ＧＣＣＡＣＣ
配列番号３１
＞３’ＵＴＲ配列
ＧＴＣＴＡＧＡＡＡＣＣＡＧＣＣＴＣＡＡＧＡＡＣＡＣＣＣＧＡＡＴＧＧＡＧＴＣＴＣＴＡＡＧＣＴＡＣＡＴＡＡＴＡＣＣＡＡＣＴＴＡＣＡＣＴＴＴＡＣＡＡＡＡＴＧＴＴＧＴＣＣＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＡＧＣＣＡＴＴＣＧＴＡＴＣＴＧＣＴＣＣＴＡＡＴＡＡＡＡＡＧＡＡＡＧＴＴＴＣＴＴＣＡＣ
配列番号３２
＞ＷＰＲＥ配列
ＡＡＴＣＡＡＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＡＣＡＡＡＡＴＴＴＧＴＧＡＡＡＧＡＴＴＧＡＣＴＧＧＴＡＴＴＣＴＴＡＡＣＴＡＴＧＴＴＧＣＴＣＣＴＴＴＴＡＣＧＣＴＡＴＧＴＧＧＡＴＡＣＧＣＴＧＣＴＴＴＡＡＴＧＣＣＴＴＴＧＴＡＴＣＡＴＧＣＴＡＴＴＧＣＴＴＣＣＣＧＴＡＴＧＧＣＴＴＴＣＡＴＴＴＴＣＴＣＣＴＣＣＴＴＧＴＡＴＡＡＡＴＣＣＴＧＧＴＴＧＣＴＧＴＣＴＣＴＴＴＡＴＧＡＧＧＡＧＴＴＧＴＧＧＣＣＣＧＴＴＧＴＣＡＧＧＣＡＡＣＧＴＧＧＣＧＴＧＧＴＧＴＧＣＡＣＴＧＴＧＴＴＴＧＣＴＧＡＣＧＣＡＡＣＣＣＣＣＡＣＴＧＧＴＴＧＧＧＧＣＡＴＴＧＣＣＡＣＣＡＣＣＴＧＴＣＡＧＣＴＣＣＴＴＴＣＣＧＧＧＡＣＴＴＴＣＧＣＴＴＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＴＡＴＴＧＣＣＡＣＧＧＣＧＧＡＡＣＴＣＡＴＣＧＣＣＧＣＣＴＧＣＣＴＴＧＣＣＣＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＧＧＧＣＴＣＧＧＣＴＧＴＴＧＧＧＣＡＣＴＧＡＣＡＡＴＴＣＣＧＴＧＧＴＧＴＴＧＴＣＧＧＧＧＡＡＡＴＣＡＴＣＧＴＣＣＴＴＴＣＣＴＴＧＧＣＴＧＣＴＣＧＣＣＴＧＴＧＴＴＧＣＣＡＣＣＴＧＧＡＴＴＣＴＧＣＧＣＧＧＧＡＣＧＴＣＣＴＴＣＴＧＣＴＡＣＧＴＣＣＣＴＴＣＧＧＣＣＣＴＣＡＡＴＣＣＡＧＣＧＧＡＣＣＴＴＣＣＴＴＣＣＣＧＣＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＣＧＧＣＴＣＴＧＣＧＧＣＣＴＣＴＴＣＣＧＣＧＴＣＴＴＣＧＣＣＴＴＣＧＣＣＣＴＣＡＧＡＣＧＡＧＴＣＧＧＡＴＣＴＣＣＣＴＴＴＧＧＧＣＣＧＣＣＴＣＣＣＣＧＣ
配列番号３３
＞ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ配列：
ＣＣＴＡＧＧＴＡＡＧＡＴＡＣＡＴＴＧＡＴＧＡＧＴＴＴＧＧＡＣＡＡＡＣＣＡＣＡＡＣＴＡＧＡＡＴＧＣＡＧＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＧＣＴＴＴＡＴＴＴＧＴＧＡＡＡＴＴＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＴＴＧＣＴＴＴＡＴＴＴＧＴＡＡＣＣＡＴＴＡＴＡＡＧＣＴＧＣＡＡＴＡＡＡＣＡＡＧＴＴＡＴＣＧＡＴＡＧＡＴＣＴ
配列番号３４
＞ ＡＡＶ９カプシドアミノ酸配列
ＭＡＡＤＧＹＬＰＤＷＬＥＤＮＬＳＥＧＩＲＥＷＷＡＬＫＰＧＡＰＱＰＫＡＮＱＱＨＱＤＮＡＲＧＬＶＬＰＧＹＫＹＬＧＰＧＮＧＬＤＫＧＥＰＶＮＡＡＤＡＡＡＬＥＨＤＫＡＹＤＱＱＬＫＡＧＤＮＰＹＬＫＹＮＨＡＤＡＥＦＱＥＲＬＫＥＤＴＳＦＧＧＮＬＧＲＡＶＦＱＡＫＫＲＬＬＥＰＬＧＬＶＥＥＡＡＫＴＡＰＧＫＫＲＰＶＥＱＳＰＱＥＰＤＳＳＡＧＩＧＫＳＧＡＱＰＡＫＫＲＬＮＦＧＱＴＧＤＴＥＳＶＰＤＰＱＰＩＧＥＰＰＡＡＰＳＧＶＧＳＬＴＭＡＳＧＧＧＡＰＶＡＤＮＮＥＧＡＤＧＶＧＳＳＳＧＮＷＨＣＤＳＱＷＬＧＤＲＶＩＴＴＳＴＲＴＷＡＬＰＴＹＮＮＨＬＹＫＱＩＳＮＳＴＳＧＧＳＳＮＤＮＡＹＦＧＹＳＴＰＷＧＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤＷＱＲＬＩＮＮＮＷＧＦＲＰＫＲＬＮＦＫＬＦＮＩＱＶＫＥＶＴＤＮＮＧＶＫＴＩＡＮＮＬＴＳＴＶＱＶＦＴＤＳＤＹＱＬＰＹＶＬＧＳＡＨＥＧＣＬＰＰＦＰＡＤＶＦＭＩＰＱＹＧＹＬＴＬＮＤＧＳＱＡＶＧＲＳＳＦＹＣＬＥＹＦＰＳＱＭＬＲＴＧＮＮＦＱＦＳＹＥＦＥＮＶＰＦＨＳＳＹＡＨＳＱＳＬＤＲＬＭＮＰＬＩＤＱＹＬＹＹＬＳＫＴＩＮＧＳＧＱＮＱＱＴＬＫＦＳＶＡＧＰＳＮＭＡＶＱＧＲＮＹＩＰＧＰＳＹＲＱＱＲＶＳＴＴＶＴＱＮＮＮＳＥＦＡＷＰＧＡＳＳＷＡＬＮＧＲＮＳＬＭＮＰＧＰＡＭＡＳＨＫＥＧＥＤＲＦＦＰＬＳＧＳＬＩＦＧＫＱＧＴＧＲＤＮＶＤＡＤＫＶＭＩＴＮＥＥＥＩＫＴＴＮＰＶＡＴＥＳＹＧＱＶＡＴＮＨＱＳＡＱＡＱＡＱＴＧＷＶＱＮＱＧＩＬＰＧＭＶＷＱＤＲＤＶＹＬＱＧＰＩＷＡＫＩＰＨＴＤＧＮＦＨＰＳＰＬＭＧＧＦＧＭＫＨＰＰＰＱＩＬＩＫＮＴＰＶＰＡＤＰＰＴＡＦＮＫＤＫＬＮＳＦＩＴＱＹＳＴＧＱＶＳＶＥＩＥＷＥＬＱＫＥＮＳＫＲＷＮＰＥＩＱＹＴＳＮＹＹＫＳＮＮＶＥＦＡＶＮＴＥＧＶＹＳＥＰＲＰＩＧＴＲＹＬＴＲＮＬ
配列番号３７
＞アフリベルセプトタンパク質配列
ＭＰＬＬＬＬＬＰＬＬＷＡＧＡＬＡＳＤＴＧＲＰＦＶＥＭＹＳＥＩＰＥＩＩＨＭＴＥＧＲＥＬＶＩＰＣＲＶＴＳＰＮＩＴＶＴＬＫＫＦＰＬＤＴＬＩＰＤＧＫＲＩＩＷＤＳＲＫＧＦＩＩＳＮＡＴＹＫＥＩＧＬＬＴＣＥＡＴＶＮＧＨＬＹＫＴＮＹＬＴＨＲＱＴＮＴＩＩＤＶＶＬＳＰＳＨＧＩＥＬＳＶＧＥＫＬＶＬＮＣＴＡＲＴＥＬＮＶＧＩＤＦＮＷＥＹＰＳＳＫＨＱＨＫＫＬＶＮＲＤＬＫＴＱＳＧＳＥＭＫＫＦＬＳＴＬＴＩＤＧＶＴＲＳＤＱＧＬＹＴＣＡＡＳＳＧＬＭＴＫＫＮＳＴＦＶＲＶＨＥＫＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号３８
＞アフリベルセプト核酸配列１
ＡＴＧＣＣＣＣＴＧＣＴＣＣＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＧＧＣＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＡＧＣＧＡＣＡＣＣＧＧＣＡＧＡＣＣＣＴＴＣＧＴＧＧＡＧＡＴＧＴＡＣＡＧＣＧＡＧＡＴＣＣＣＣＧＡＧＡＴＣＡＴＣＣＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＧＧＧＣＡＧＡＧＡＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＧＣＡＧＡＧＴＧＡＣＡＡＧＣＣＣＣＡＡＣＡＴＣＡＣＣＧＴＧＡＣＣＣＴＧＡＡＡＡＡＡＴＴＣＣＣＴＣＴＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＣＣＣＣＧＡＣＧＧＣＡＡＧＡＧＡＡＴＣＡＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＣＡＧＡＡＡＧＧＧＣＴＴＣＡＴＣＡＴＣＡＧＣＡＡＣＧＣＣＡＣＣＴＡＣＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＣＴＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＧＡＧＧＣＣＡＣＣＧＴＧＡＡＣＧＧＣＣＡＣＣＴＧＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＡＣＴＡＣＣＴＧＡＣＣＣＡＣＡＧＡＣＡＧＡＣＣＡＡＣＡＣＣＡＴＣＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＴＧＣＴＧＡＧＣＣＣＴＡＧＣＣＡＣＧＧＣＡＴＣＧＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＧＧＣＧＡＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＣＴＡＧＡＡＣＣＧＡＧＣＴＧＡＡＣＧＴＧＧＧＣＡＴＣＧＡＣＴＴＣＡＡＣＴＧＧＧＡＧＴＡＣＣＣＴＡＧＣＡＧＣＡＡＧＣＡＴＣＡＧＣＡＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＡＡＣＡＧＡＧＡＣＣＴＧＡＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＣＧＧＣＡＧＣＧＡＧＡＴＧＡＡＧＡＡＧＴＴＣＣＴＧＡＧＣＡＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＧＡＣＧＧＣＧＴＧＡＣＡＡＧＡＡＧＣＧＡＣＣＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＣＣＴＧＣＧＣＣＧＣＴＡＧＣＡＧＣＧＧＣＣＴＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＧＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＴＣＧＴＧＡＧＡＧＴＧＣＡＴＧＡＧＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＣＣＡＣＡＣＣＴＧＣＣＣＣＣＣＣＴＧＣＣＣＣＧＣＴＣＣＴＧＡＡＣＴＧＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＣＣＣＣＣＣＡＡＧＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＡＣＴＣＡＴＧＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＣＧＴＧＧＡＣＧＴＧＡＧＣＣＡＣＧＡＧＧＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＡＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＣＡＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＧＣＣＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＡＧＧＧＧＣＡＧＣＣＴＡＧＡＧＡＧＣＣＣＣＡＡＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＡＧＡＧＡＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＡＧＴＧＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＣＴＡＣＣＣＴＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＣＧＧＧＣＡＧＣＣＣＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＣＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＣＴＧＴＡＣＡＧＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＡＴＧＧＣＡＧＣＡＡＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＣＡＧＣＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＡＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＣＣＣＧＧＣＡＡＧＴＧＡ
配列番号３９
＞アフリベルセプト核酸配列２
ＡＴＧＣＣＴＣＴＧＣＴＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＣＣＴＣＴＧＣＴＧＴＧＧＧＣＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＧＣＣＡＧＣＧＡＣＡＣＡＧＧＣＣＧＣＣＣＣＴＴＣＧＴＧＧＡＡＡＴＧＴＡＣＡＧＣＧＡＧＡＴＣＣＣＴＧＡＧＡＴＣＡＴＣＣＡＣＡＴＧＡＣＡＧＡＧＧＧＣＣＧＧＧＡＡＣＴＧＧＴＣＡＴＣＣＣＴＴＧＴＡＧＡＧＴＧＡＣＡＴＣＴＣＣＡＡＡＣＡＴＣＡＣＣＧＴＧＡＣＣＣＴＧＡＡＡＡＡＧＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＡＣＡＣＡＣＴＧＡＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＣＡＡＡＡＧＡＡＴＣＡＴＣＴＧＧＧＡＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＧＧＣＴＴＣＡＴＣＡＴＣＡＧＣＡＡＴＧＣＣＡＣＣＴＡＣＡＡＧＧＡＡＡＴＣＧＧＡＣＴＧＣＴＧＡＣＣＴＧＴＧＡＡＧＣＣＡＣＡＧＴＧＡＡＣＧＧＣＣＡＣＣＴＧＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＡＣＴＡＣＣＴＧＡＣＣＣＡＴＡＧＧＣＡＧＡＣＣＡＡＴＡＣＣＡＴＣＡＴＣＧＡＴＧＴＧＧＴＧＣＴＧＴＣＴＣＣＴＴＣＴＣＡＣＧＧＣＡＴＣＧＡＧＣＴＣＡＧＣＧＴＣＧＧＣＧＡＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＣＣＡＧＡＡＣＣＧＡＧＣＴＧＡＡＣＧＴＧＧＧＣＡＴＣＧＡＣＴＴＣＡＡＣＴＧＧＧＡＡＴＡＣＣＣＣＡＧＴＴＣＴＡＡＧＣＡＣＣＡＧＣＡＣＡＡＧＡＡＡＣＴＧＧＴＴＡＡＴＡＧＡＧＡＴＣＴＧＡＡＧＡＣＣＣＡＡＡＧＣＧＧＣＡＧＣＧＡＧＡＴＧＡＡＡＡＡＧＴＴＴＣＴＧＴＣＴＡＣＡＣＴＧＡＣＡＡＴＴＧＡＣＧＧＴＧＴＴＡＣＣＡＧＡＡＧＣＧＡＴＣＡＧＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＣＡＴＧＣＧＣＣＧＣＴＴＣＴＡＧＣＧＧＣＣＴＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＧＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＴＣＧＴＧＣＧＧＧＴＧＣＡＣＧＡＧＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＣＣＡＣＡＣＣＴＧＣＣＣＣＣＣＣＴＧＴＣＣＡＧＣＴＣＣＴＧＡＡＣＴＧＣＴＧＧＧＡＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＣＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＴＡＴＧＡＴＴＡＧＣＡＧＡＡＣＡＣＣＴＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＣＧＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＣＧＡＧＧＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＡＡＴＴＴＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＴＧＧＣＧＴＧＧＡＡＧＴＴＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＣＡＧＡＧＡＧＧＡＡＣＡＧＴＡＣＡＡＣＡＧＣＡＣＡＴＡＴＡＧＡＧＴＧＧＴＧＴＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＴＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＡＡＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＣＡＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＴＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＴＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＡＣＣＴＣＧＧＧＡＡＣＣＣＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＣＡＧＣＣＧＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＡＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＡＧＣＧＡＴＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＡＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＣＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＡＡＣＧＡＣＣＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＴＧＡＴＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＣＴＧＴＡＣＡＧＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＡＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＣＴＣＡＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＴＡＡＴＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＡＡＧＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＣＣＴＧＧＣＡＡＧＴＧＡ
配列番号４０
＞アフリベルセプト核酸配列３
ＡＴＧＣＣＡＣＴＧＣＴＣＴＴＧＣＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＧＣＴＴＴＧＧＧＣＴＧＧＴＧＣＣＣＴＴＧＣＣＴＣＡＧＡＣＡＣＴＧＧＡＡＧＧＣＣＧＴＴＣＧＴＡＧＡＡＡＴＧＴＡＣＴＣＣＧＡＧＡＴＣＣＣＴＧＡＡＡＴＡＡＴＣＣＡＣＡＴＧＡＣＧＧＡＧＧＧＧＣＧＡＧＡＧＴＴＧＧＴＧＡＴＡＣＣＡＴＧＴＣＧＡＧＴＴＡＣＧＡＧＣＣＣＧＡＡＴＡＴＴＡＣＡＧＴＡＡＣＡＴＴＧＡＡＧＡＡＡＴＴＣＣＣＡＣＴＣＧＡＣＡＣＴＣＴＣＡＴＴＣＣＡＧＡＴＧＧＴＡＡＧＡＧＡＡＴＴＡＴＡＴＧＧＧＡＴＴＣＡＣＧＡＡＡＧＧＧＣＴＴＣＡＴＴＡＴＡＴＣＴＡＡＣＧＣＴＡＣＴＴＡＣＡＡＡＧＡＧＡＴＡＧＧＣＴＴＧＣＴＣＡＣＡＴＧＣＧＡＧＧＣＡＡＣＴＧＴＣＡＡＴＧＧＣＣＡＣＴＴＧＴＡＴＡＡＡＡＣＣＡＡＴＴＡＴＣＴＣＡＣＡＣＡＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＡＡＴＡＣＧＡＴＡＡＴＡＧＡＣＧＴＴＧＴＣＣＴＴＴＣＴＣＣＧＡＧＣＣＡＴＧＧＣＡＴＴＧＡＡＴＴＧＡＧＴＧＴＣＧＧＴＧＡＧＡＡＧＣＴＣＧＴＡＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＣＴＡＧＧＡＣＣＧＡＧＣＴＴＡＡＣＧＴＡＧＧＧＡＴＣＧＡＣＴＴＴＡＡＣＴＧＧＧＡＧＴＡＣＣＣＡＴＣＡＴＣＡＡＡＧＣＡＴＣＡＧＣＡＴＡＡＡＡＡＧＣＴＣＧＴＣＡＡＣＣＧＧＧＡＣＣＴＴＡＡＧＡＣＧＣＡＧＡＧＴＧＧＣＴＣＡＧＡＧＡＴＧＡＡＧＡＡＧＴＴＣＣＴＴＴＣＴＡＣＡＣＴＧＡＣＣＡＴＣＧＡＴＧＧＴＧＴＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＧＡＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＴＡＴＡＣＣＴＧＴＧＣＣＧＣＡＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＴＴＡＴＧＡＣＧＡＡＧＡＡＡＡＡＣＡＧＣＡＣＡＴＴＴＧＴＴＣＧＧＧＴＣＣＡＣＧＡＧＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＴＣＡＴＡＣＧＴＧＴＣＣＧＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＣＣＣＣＡＧＡＡＴＴＧＣＴＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＣＣＣＴＣＣＡＡＡＧＣＣＡＡＡＧＧＡＣＡＣＧＣＴＴＡＴＧＡＴＴＴＣＡＡＧＧＡＣＴＣＣＣＧＡＡＧＴＣＡＣＣＴＧＣＧＴＣＧＴＧＧＴＴＧＡＣＧＴＴＴＣＴＣＡＴＧＡＧＧＡＣＣＣＡＧＡＧＧＴＧＡＡＡＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＴＧＧＡＧＴＡＧＡＧＧＴＡＣＡＴＡＡＣＧＣＣＡＡＡＡＣＡＡＡＡＣＣＡＣＧＡＧＡＡＧＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＣＴＣＡＡＣＧＴＡＴＣＧＧＧＴＡＧＴＴＴＣＴＧＴＧＣＴＴＡＣＧＧＴＴＣＴＣＣＡＣＣＡＡＧＡＴＴＧＧＴＴＧＡＡＴＧＧＡＡＡＡＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＴＡＡＡＧＴＣＴＣＡＡＡＣＡＡＡＧＣＣＣＴＧＣＣＧＧＣＡＣＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＴＡＧＣＡＡＡＧＣＡＡＡＡＧＧＣＣＡＡＣＣＴＡＧＡＧＡＡＣＣＧＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＧＴＴＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＡＧＧＧＡＴＧＡＡＣＴＴＡＣＧＡＡＧＡＡＴＣＡＡＧＴＡＴＣＡＣＴＣＡＣＡＴＧＴＴＴＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＴＴＴＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＡＧＡＡＴＧＧＧＡＧＡＧＴＡＡＣＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＡＡＡＴＡＡＣＴＡＴＡＡＧＡＣＧＡＣＡＣＣＣＣＣＴＧＴＴＴＴＧＧＡＴＴＣＴＧＡＣＧＧＴＴＣＡＴＴＴＴＴＴＴＴＧＴＡＴＡＧＴＡＡＡＣＴＣＡＣＡＧＴＣＧＡＣＡＡＧＡＧＴＣＧＣＴＧＧＣＡＡＣＡＡＧＧＴＡＡＴＧＴＡＴＴＴＡＧＣＴＧＴＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＴＧＡＡＧＣＴＴＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＴＧＴＣＴＣＴＧＴＣＴＣＣＧＧＧＡＡＡＡＴＧＡ
配列番号４１

【図1】

【図2】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【図6】

【図7】

【図8】

【配列表】

2024519888000001.app

【国際調査報告】