知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングの特許一覧
特表2024-520441一体型かつ連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換のための方法及びシステム
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-05-24
(54)【発明の名称】一体型かつ連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換のための方法及びシステム
(51)【国際特許分類】
C12M 3/06 20060101AFI20240517BHJP
C12Q 1/24 20060101ALI20240517BHJP
C12P 21/02 20060101ALI20240517BHJP
【ＦＩ】
C12M3/06
C12Q1/24
C12P21/02 C
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023572852
(86)(22)【出願日】2022-05-24
(85)【翻訳文提出日】2023-11-24
(86)【国際出願番号】 US2022030783
(87)【国際公開番号】W WO2022251261
(87)【国際公開日】2022-12-01
(31)【優先権主張番号】63/192,662
(32)【優先日】2021-05-25
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】503385923
【氏名又は名称】ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング
(74)【代理人】
【識別番号】100094569
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 伸一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100103610
【弁理士】
【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦
(74)【代理人】
【識別番号】100109070
【弁理士】
【氏名又は名称】須田 洋之
(74)【代理人】
【識別番号】100119013
【弁理士】
【氏名又は名称】山崎 一夫
(74)【代理人】
【識別番号】100123777
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 さつき
(74)【代理人】
【識別番号】100111796
【弁理士】
【氏名又は名称】服部 博信
(74)【代理人】
【識別番号】100123766
【弁理士】
【氏名又は名称】松田 七重
(74)【代理人】
【識別番号】100179925
【弁理士】
【氏名又は名称】上出 真紀
(72)【発明者】
【氏名】キャプロン チャールズ
(72)【発明者】
【氏名】ゴドフリー スコット
(72)【発明者】
【氏名】イコン ニキタ
(72)【発明者】
【氏名】コーリ ジョエル
(72)【発明者】
【氏名】オロスコ ラケル
(72)【発明者】
【氏名】ズー ミン
【テーマコード（参考）】
4B063
4B064
【Ｆターム（参考）】
4B063QA20
4B063QQ79
4B063QS12
4B064AG01
4B064AG27
4B064CA05
4B064CA06
4B064CA10
4B064CA19
4B064CE06
4B064CE20
(57)【要約】
一体型かつ連続したウイルスろ過及び生物学的生成物の濃縮のための方法及びシステムは、最終精製システムに連結された初期生成システムを含む。初期生成システムは、ウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）スキッドを含み、最終精製システムはシングルパス・タンジェンシャルろ過－透析ろ過（ＳＰＴＦＦ－ＤＦ）スキッドを含む。
【選択図】 図３
【選択図】 図３
【特許請求の範囲】
【請求項1】
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムであって、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む前記単回使用システム。
【請求項2】
処理が、ろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を含む、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項3】
前記生物学的生成物がタンパク質である、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項4】
前記生物学的生成物がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項5】
前記ウイルスろ過ユニット操作が、ポンプ、少なくとも１つのプレフィルタ、及び１以上のウイルス低減ろ過膜を含む、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項6】
前記ＳＰＴＦＦ－ＤＦユニット操作が、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、ポンプ、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項7】
さらに前記ウイルスろ過ユニット操作に連結された供給物貯蔵槽を含む、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項8】
前記供給物貯蔵槽が精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体を約５～約２０ｇ／Ｌの濃度で保持する、請求項７に記載の単回使用システム。
【請求項9】
前記供給物貯蔵槽が精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体を約８～約１２ｇ／Ｌの濃度で保持する、請求項７に記載の単回使用システム。
【請求項10】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約８時間の時間枠内に行う、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項11】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約２４時間以下の時間内に行う、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項12】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約１２時間以下の時間内に行う、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項13】
前記システムが、前記生物学的生成物の濃度を１０倍に増加させる処理が可能である、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項14】
処理された生物学的生成物を提供するための一体型の連続的方法であって、ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含み、
前記工程ｂ）～ｄ）は、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作により行われる前記方法。
【請求項15】
前記ウイルスろ過ユニット操作が、ポンプ、少なくとも１つのプレフィルタ、及び１以上のウイルス低減ろ過膜を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
前記ＳＰＴＦＦ－ＤＦユニット操作が、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、ポンプ、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項17】
前記初期の生物学的生成物がタンパク質である、請求項１４に記載の方法。
【請求項18】
前記初期の生物学的生成物がモノクローナル抗体である、請求項１４に記載の方法。
【請求項19】
前記方法が、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、従来の方法と比較して約５０％短縮された時間枠内に行う、請求項１４に記載の方法。
【請求項20】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約２４時間以下の時間内に行う、請求項１４に記載のシステム。
【請求項21】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約１２時間以下の時間内に行う、請求項１４に記載のシステム。
【請求項22】
前記システムが、前記初期の生物学的生成物の濃度を１０倍に増加させる処理を行う、請求項１５に記載のシステム。
【請求項23】
目的の生物学的生成物の製造方法であって、（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法の工程ＩＶは、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む、前記製造方法。
【請求項24】
前記目的の生物学的生成物が組換えタンパク質である、請求項２４に記載の方法。
【請求項25】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が流加細胞培養で行われる、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が連続細胞培養で行われる、請求項２４に記載の方法。
【請求項27】
目的の生物学的生成物の製造方法であって、（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法の工程ＩＶは、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む前記製造方法。
【請求項28】
前記目的の生物学的生成物が組換えタンパク質である、請求項２８に記載の方法。
【請求項29】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が流加細胞培養で行われる、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が連続細胞培養で行われる、請求項２８に記載の方法。
【請求項31】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、約８時間以下の時間枠内に行う、請求項１に記載の単回使用システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本明細書において、生物学的生成物（例えば、タンパク質）の製造において使用するためのシステム及び方法が開示され、より具体的には、一体型かつ連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換のための単回使用のシステム及び方法が開示される。特定の実施形態において、システムは、生物学的生成物又は目的の材料を含む供給流の処理において使用するための、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作（ｏｐｅｒａｔｉｏｎ）に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む一体型の単回使用システムである。
【背景技術】
【0002】
治療薬の製造における重要な課題は、環境汚染やプロセス関連の汚染がない、要求される純度の効能を有する製品を一貫して提供する能力である。生物製剤の製造は、生きた細胞の関与を考慮すると、特に困難である。
【0003】
従来の生物製剤の製造は、類似の一連の単位操作を含み、上流及び下流の２つの主要部分に分けられる。上流の単位操作は、通常、細胞培養及び採取工程を含み、下流は複数の精製工程で構成される。具体的には、下流プロセスの最後は、通常、ウイルス低減ろ過（ＶＲＦ又はＶＦ）工程を含み、その後、生成物の濃縮及び緩衝剤の交換のための限外ろ過／透析ろ過（ＵＦ／ＤＦ）が行われる。
【0004】
従来、ＶＲＦシステム及びＵＦ／ＤＦシステムは切り離されて、多くの場合は別々の日に連続して実行され、かなりの空間を占める大型の装置を利用する。新しい技術は、定期的／継続的なろ過を用いたＶＲＦシステムのプロセス時間を生産工程にわたって短縮しようとしているが、ウイルスのブレイクスルーに関する懸念は依然として残っている。
【0005】
当該技術分野において、ウイルスのブレイクスルーのリスクを最小限に抑えながら、単回使用の装置を使用して、迅速な時間枠で、小さい設置面積における大規模生産を可能とする、改善されたプロセス、特にＶＲＦプロセス及びＵＦ／ＤＦプロセスが必要とされている。
【発明の概要】
【0006】
本明細書において、モノクローナル抗体等の生物学的生成物の製造、特に、目的の生物学的生成物のバッチ又は連続製造によって生成される供給流の処理において使用するための、一体型の連続したウイルスろ過、限外ろ過、及び透析ろ過のためのシステム及び方法が開示される。
【0007】
一態様において、初期の生物学的生成物（ｉｎｉｔｉａｌ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔ）の一体型の連続した処理のための単回使用システムが提供され、前記システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む。
【0008】
別の態様において、処理された生物学的生成物を提供するための一体型の連続した方法が提供され、前記方法は、ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流（例えば、流体供給物）を提供すること；ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及びｄ）緩衝液交換を行って、処理された生物学的生成物を生成することを含む。
【0009】
第３の態様において、目的の生物学的生成物の製造方法が提供され、前記方法は、
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む。
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む。
【0010】
第４の態様において、目的の生物学的生成物の製造方法が提供され、前記方法は、
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流（例えば、流体供給物）を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む。
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流（例えば、流体供給物）を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む。
【0011】
第５の態様において、ウイルスろ過－限外ろ過及び透析ろ過（ＶＦ－ＵＦＤＦ）システムが開示され、前記システムは、初期精製ユニット操作及び最終精製ユニット操作を含み、前記のユニット操作は連結されている。
【0012】
一実施形態において、前記初期精製ユニット操作は、ウイルス粒子を除去するための少なくとも１つのウイルスろ過膜を含み、前記最終精製ユニット操作は、濃縮及び緩衝剤交換のためのシングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）システムを含む。
【0013】
一実施形態において、前記初期精製ユニット操作は、ポンプ、少なくとも１つのプレフィルタ、及び１以上のウイルス低減ろ過膜を含む。
【0014】
一実施形態において、前記最終精製ユニット操作は、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、ポンプ、又はそれらの組み合わせを含む。
【0015】
一実施形態において、前記材料はタンパク質である。
【0016】
具体的な実施形態において、前記材料はモノクローナル抗体である。
【0017】
一実施形態において、前記処理は、従来の処理システムと比較して約５０％短縮された時間枠内で行われる。
【0018】
一実施形態において、前記処理は約２４時間以下の時間内に行われる。
【0019】
一実施形態において、前記処理は約１２時間以下の時間内に行われる。
【0020】
一実施形態において、前記処理は結果として材料の濃度を１０倍に増加させる。
【0021】
一実施形態において、前記システムはさらに前記初期精製アセンブリに連結された供給物貯蔵槽を含む。
【0022】
具体的な実施形態において、前記供給物貯蔵槽は精製及びポリッシュされた（ｐｏｌｉｓｈｅｄ）モノクローナル抗体を約５～約２０ｇ／Ｌ、より具体的には約８～約１２ｇ／Ｌの濃度で保持する。
【0023】
本発明の前記及び他の特徴及び態様は、本発明の特定の例示的な実施形態についての以下の説明を参照し、添付の図面と併せて読むことによって最もよく理解され得る。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【図1】図１は、例示的な実施形態に基づいた、最終の精製スイート（ｓｕｉｔｅ）における濃縮及び緩衝剤交換のためのシングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）システムに連結された、初期の精製スイートにおける最後の工程としてのウイルスろ過（ＶＦ）を含む、最終精製処理を行うための一体型単回使用システムの概略図を示す。
【図5A】図５Ａは、例示的な実施形態に基づいた、ポール４インシリーズの体積変換係数流束変動プロファイル（分子１）のグラフを示し、ＳＰＴＦＦ膜用のポール社製４連膜を用いた、様々な開始濃度における分子１の体積変換係数（ＶＣＦ）対供給流束を示す。
【0025】
図面は本発明の例示的な実施形態を示すにすぎず、したがってその範囲を限定するものとみなされるべきではなく、本発明は他の同様に効果的な実施形態も許容し得る。
【発明を実施するための形態】
【0026】
流体（例えば、細胞培養培地又は清澄化細胞培養培地）から生物学的生成物を生成するためには、精製及び／又は粒子分離が必要な場合がある。従来のアプローチにおいて、流体を精製するプロセス及び／又は流体から粒子（すなわち固体）を分離するプロセスは多くの工程を含み、それぞれの工程は別々の装置システムで行われる。プロセスのコストには、通常、各処理工程に関連する制御及び処理ハードウェアのための個別の装置及びスペースのコストが含まれる。
【0027】
本明細書において、例えばタンパク質等の分子のろ過処理に使用される方法、システム、及び装置が開示され、より具体的には、分子の、一体型かつ連続したウイルスろ過、限外ろ過、及び透析ろ過の処理のための方法及びシステムが開示される。有利には、本明細書に開示されるシステム及び方法は、コンパクトな形式で、すなわち従来のアプローチよりも小さい設置面積で、ウイルスろ過、限外ろ過、及び透析ろ過を可能とする。
【0028】
本発明の例示的な実施形態の説明は、ある特定の装置の利用とともに以下に示されるが、本発明の別の実施形態は、同一又は類似の機能を実行し、従来のシステムと比較して全体的に省スペースである、プロセス内で用いられる他の種類の装置に適用可能である。
【0029】
Ｉ．定義
「生物学的生成物（ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔ）」又は「生物学的材料（ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｍａｔｅｒｉａｌ）」という用語は、一般に、生物学的プロセスを介して、又は既存の生物学的生成物の化学修飾又は触媒修飾を介して生成される目的の生成物を示す。生物学的プロセスとしては、細胞培養、発酵、代謝、呼吸等が挙げられる。目的の生物学的生成物としては、例えば、抗体、抗体フラグメント、タンパク質、ホルモン、ワクチン、天然タンパク質のフラグメント（ワクチンとして使用されるバクテリア毒素のフラグメント、例えば、破傷風トキソイド等）、融合タンパク質又はペプチド複合体（例えば、サブユニットワクチン等）、ウイルス様粒子（ＶＬＰｓ）等が挙げられる。
「生物学的生成物（ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔ）」又は「生物学的材料（ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｍａｔｅｒｉａｌ）」という用語は、一般に、生物学的プロセスを介して、又は既存の生物学的生成物の化学修飾又は触媒修飾を介して生成される目的の生成物を示す。生物学的プロセスとしては、細胞培養、発酵、代謝、呼吸等が挙げられる。目的の生物学的生成物としては、例えば、抗体、抗体フラグメント、タンパク質、ホルモン、ワクチン、天然タンパク質のフラグメント（ワクチンとして使用されるバクテリア毒素のフラグメント、例えば、破傷風トキソイド等）、融合タンパク質又はペプチド複合体（例えば、サブユニットワクチン等）、ウイルス様粒子（ＶＬＰｓ）等が挙げられる。
【0030】
本明細書で使用される「連続」という用語は、間に最小の保持量を有する２以上の一体型の（物理的に接続された）連続したユニット操作を指す。このようなプロセスは、完全連続又はエンドツーエンド連続とも称される。プロセスがバッチ及び連続ユニット操作の両方で構成される場合、例えば、連続上流プロセス（細胞培養及び標的タンパク質の合成）及びバッチ下流プロセス（タンパク質の原薬又は医薬品への精製及び処方化）で構成される場合、プロセスはハイブリッドである。本明細書に記載される、関連付けられたユニット操作の特定の文脈において、「連続」という用語は、一定又は非周期的な液体輸送を指す。一実施形態において、本明細書に記載される方法及びシステムは、タンパク質のバッチについて連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を可能にする。
【0031】
「透析ろ過」又は「ＤＦ」という用語は、緩衝剤交換、すなわち、あるセットの緩衝塩を別のセットに交換することを意味するために用いられる。
【0032】
「ダイアボリューム（ｄｉａｖｏｌｕｍｅ）」又は「ＤＶ」という用語は、透析ろ過工程中に行われた洗浄の程度の尺度である。それは、保持物の体積に対する、ユニット操作に導入される透析ろ過の緩衝剤の量に基づく。
【0033】
「下流」又は「下流処理」という用語は、一般に、生物学的生成物が生成された元の溶液からの生物学的生成物の捕捉、望ましくない成分及び不純物を除いた生物学的生成物の精製、病原体（例えば、ウイルス、エンドトキシン）のろ過又は不活性化、並びに処方化及び包装のために必要な工程の一部又は全てを指す。
【0034】
「高濃縮」という用語は、開始濃度よりも高い、好ましくは以前よりも著しく高い濃度を示す。濃度の増加量は、例えば、選択された生体分子及び媒体、並びに使用された限外ろ過及び透析ろ過の装置の条件及びパラメータに依存する。本明細書に記載される特定の実施形態において、タンパク質の最終濃度は、約１～約８０ｇ／Ｌ、約１０～約８０ｇ／Ｌ、約２０～約８０ｇ／Ｌ、約２０～約７０ｇ／Ｌ、約３０～約７０ｇ／Ｌであり、又はより具体的には、約１～約１０ｇ／Ｌ、約１０～約２０ｇ／Ｌ、約２０～約３０ｇ／Ｌ、約３０～約４０ｇ／Ｌ、約４０ｇ／Ｌ～約５０ｇ／Ｌ、約５０～約６０ｇ／Ｌ、約６０～約７０ｇ／Ｌ、約７０～約８０ｇ／Ｌである。特定の実施形態において、タンパク質の最終濃度は約８０ｇ／Ｌよりも高い。特定の実施形態において、タンパク質の最終濃度は、供給物中のタンパク質の濃度よりも２倍、３倍、４倍、５倍、又は１０倍以上増加する。具体的な実施形態において、１００Ｌ中１０ｇ／Ｌの材料が１０Ｌ中１００ｇ／Ｌに、すなわち、濃度が１０倍に増加する。
【0035】
「供給物」、「供給試料」、及び「供給流」という用語は、ろ過されるユニット操作（例えば、ウイルスろ過、ＳＰＴＦＦ）に送達される（例えば、連続的に、バッチとして）溶液を指す。
【0036】
本明細書で使用される「ろ過」という用語は、膜を用いて溶液又は懸濁液中の成分を、成分間のサイズの違いに従って分離する圧力駆動の分離プロセスを指す。ろ過の結果、少なくとも一部（例えば、少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％）の望ましくない生物学的汚染物質（例えば、哺乳類の細胞、バクテリア、酵母細胞、ウイルス、又はマイコバクテリア）及び／又は粒子状物質（例えば、沈殿タンパク質）が、液体（例えば、本明細書に記載されるいずれかのシステム又はプロセスに存在する液体培養培地又は流体）から除去される。
【0037】
本明細書で使用される「ろ液」という用語は、フィルタ（例えば、プレフィルタ又はウイルスフィルタ）から放出される、検出可能な量の組換え抗体を含む流体を意味する。
【0038】
本明細書で使用される「流路」という用語は、システム又はサブシステムの全て又は一部を通る液体（例えば、供給物、保持物、透過物）の流れを支持するチャネルを指す。
【0039】
本明細書におけるシステム又はプロセスに関する「一体型（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ）」という用語は、特定の結果（例えば、液体培養培地からのモノクローナル抗体の生成）を達成するために構造要素が協働して機能するシステム又はプロセスを意味する。
【0040】
「精密ろ過」という用語は、直径約０．０５μｍ～約１μｍの範囲の孔径を用いて、混合物から、インタクト（ｉｎｔａｃｔ）な細胞及び比較的大きなデブリ（ｄｅｂｒｉｓ）若しくはタンパク質の凝集体を分離するために使用されるろ過を指す。
【0041】
本明細書で使用される「灌流細胞培養」という用語は、バイオリアクタに新鮮な培地を連続的に供給し、反応器内に細胞を保持しながら細胞を含まない使用済み培地を絶えず除去することによって行われる灌流培養を指し、したがって、細胞が、細胞保持デバイスを介して反応器内に保持されるため、灌流培養においては、連続培養と比較してより高い細胞密度を得ることができる。灌流速度は、細胞株の要求、供給物中の栄養素の濃度、及び毒素化のレベルに依存する。
【0042】
「ポリペプチド」、「ポリペプチド生成物」、「タンパク質」、及び「タンパク質生成物」という用語は、本明細書において互換的に使用され、当該技術分野で知られるように、２以上のアミノ酸からなる分子、例えば、連続的なペプチド結合を介して結合された少なくとも１つのアミノ酸鎖を示す。一実施形態において、「目的のタンパク質」又は「目的のポリペプチド」は、宿主細胞に形質転換された外因性の核酸分子によってコードされたタンパク質であり、外因性のＤＮＡがアミノ酸配列を決定する。別の実施形態において、「目的のタンパク質」は、宿主細胞にとって内因性である核酸分子によってコードされるタンパク質である。
【0043】
本明細書で使用される「プレフィルタ」という用語は、ウイルスろ過膜の上流のフィルタを指す。プレフィルタの目的は、目的の生物学的生成物の通過を許容しながら、ウイルスを低減するろ過工程の前に目詰まり成分を選択的に保持することである。
【0044】
本明細書で使用される「保持物」という用語は、膜によって保持される特定の生物学的生成物（例えば、タンパク質）の画分を指す。また、見かけの保持又は固有の保持のいずれとしても計算することもできる。
【0045】
本明細書で使用される「単回使用」という用語は、一回使用してその後廃棄するのに適した物品、及び本発明によるプロセスで一回のみ使用され、その後そのプロセスでは使用されない再利用可能な物品を指す。そのような物品は「使い捨て」とも称される。
【0046】
「スキッド」という用語は、システムが容易に輸送されるようにする枠組の内に含まれる構成のシステムを指す。個々のスキッドは、完全なプロセスのシステム、又はプロセスの特定の態様を実行するシステムを含むことができる。複数のスキッドが組み合わされて、より大きなシステム又は運搬可能な設備全体を作ることもできる。
【0047】
「シングルパス・タンジェンシャルフローろ過」又は「ＳＰＴＦＦ」という用語は、供給流が、再循環しない単一通過でフィルタ装置を通るように方向づけられるタンジェンシャルフローろ過の一種である。
【0048】
「タンジェンシャルフローろ過」又は「ＴＦＦ」は、クロスフローろ過としても知られ、供給流が膜面と平行に流れるプロセスを指す。圧力を加えると、流量の一部は膜を通過し（ろ液／透過物）、流量の残部は保持される（保持物）。従来のＴＦＦにおいて、保持物は供給物貯蔵槽に再循環される。
【0049】
「膜間圧」又は「ＴＭＰ」という用語は、供給物から膜のろ液側に加えられる平均圧力を指す。
【0050】
本明細書で使用される「限外ろ過」又は「ＵＦ」という用語は、溶液又は懸濁液を、溶媒及び小さな溶質分子を通過させる一方、高分子を保持する半透膜に供する任意の技術を指す。限外ろ過は、溶液又は懸濁液中の高分子の濃度を高めるために使用され得る。一実施形態において、限外ろ過は、水中のタンパク質の濃度を高めるために使用される。膜の評価は、例えば、公称分子量（ＮＭＷ）で、かつ約１ｋＤから約１，０００ｋＤの範囲で表現し得る。
【0051】
「ユニット操作（ｕｎｉｔ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ）」という用語は、液体培養培地から生物学的物質を製造するプロセスにおいて実施され得る機能的な工程を指す。
【0052】
「ウイルス低減ろ過」又は「ＶＲＦ」又は「ＶＦ」という用語は、ウイルス汚染を低減することを目的としたバイオ製造における一般的なユニット操作を指す。このプロセスはウイルス粒子をフィルタの表面及び孔内に保持し、ウイルスのサイズに基づいて行われる。ウイルスフィルタは、典型的なタンパク質精製プロセスにおけるさまざまな位置に配置することができる。一実施形態において、ウイルスフィルタは、ＵＦ／ＤＦのすぐ上流に配置される。ウイルス低減レベルは、前処理された負荷（ｌｏａｄ）物質中のウイルス量と、後処理された試料中のウイルス量とを比較することにより計算される。レベルは、典型的には、低減の対数（ｌｏｇ１０）に換算して表現される。ウイルス除去フィルタは、大きく２つのカテゴリ：大きなウイルス、典型的には８０～１００ｎｍの内因性レトロウイルスを、＞４又は＞６ｌｏｇ１０で除去するフィルタ；並びに小型及び大型ウイルス（１８～２４ｎｍのパルボウイルスより大きい）を、＞４ｌｏｇ１０で除去するフィルタに分類される。ウイルス粒子の数の減少は、約１％～約９９％、好ましくは約２０％～約９９％、より好ましくは約３０％～約９９％、より好ましくは約４０％～約９９％、さらに好ましくは約５０％～約９９％、さらに好ましくは約６０％～約９９％、さらにより好ましくは約７０％～約９９％、さらにより好ましくは約８０％～９９％、及びさらにより好ましくは約９０％～約９９％程度とすることができる。特定の非限定的な実施形態において、精製された抗体生成物中のウイルス量は、存在する場合、そのウイルスのＩＤ５０（標的とする集団の５０パーセントを感染させるウイルスの量）未満、好ましくはそのウイルスのＩＤ５０の少なくとも１０分の１未満、より好ましくはそのウイルスのＩＤ５０の少なくとも１００分の１未満、及びさらにより好ましくはそのウイルスのＩＤ５０の少なくとも１，０００分の１未満である。
【0053】
開示されるシステム及び方法は、各図の同等の部分が同じ参照符号によって識別され、以下に簡単に説明される添付の図面を参照して、非限定的な例示の実施形態の以下の説明を読むことによって、よりよく理解され得る。
ＩＩ．システム
ＩＩ．システム
【0054】
本明細書に開示されるシステムは、連続又はバッチ製造を含む任意の適切な生物学的製造プロセスによって生成される材料（モノクローナル抗体等の生物学的生成物）の量を処理するのに適している。
【0055】
一実施形態において、システムは、例えば、連続（灌流）細胞培養、捕捉、ウイルス不活化、ポリッシング、又はそれらの組み合わせを含む１以上の一体型の連続した上流操作を含むシステムによって生成されたある量の材料（生物学的生成物）の処理を可能にする。
【0056】
特定の実施形態において、本明細書に開示されるシステム及び方法は、単回使用の流路を用いた小さいスイートにおいて、ｉＳＫＩＤ（例えば、国際公開第２０２０／２０５５５９号を参照）とともに用いるのに適している。本明細書において言及される場合、「ｉＳＫＩＤ」は、初期精製、ウイルス不活化、及びポリッシング工程を、連続的に、灌流操作（例えば、２週間の高強度灌流操作）の間にわたって実施するタンパク質生成プラットフォームである。本明細書に開示されるシステム及び方法は、ｉＳＫＩＤを用いた用途に限定されず、モノクローナル抗体等の生物学的生成物を生成するために使用される任意のシステムである。
【0057】
一実施形態において、初期精製アセンブリ及び最終精製アセンブリの両方を含むＶＦ－ＵＦＤＦシステム（ＶＦ－ＴＦＦシステムとも呼ばれる）が提供され、これらのアセンブリは接続、連結、又はその他の方法で一体化される。特定の実施形態において、システムは単回使用である。
【0058】
ＶＦ－ＵＦＤＦシステムはさらに、供給物貯蔵槽、例えば、精製及びポリッシュされたタンパク質を保持し、特定の実施形態において、初期の精製ユニット操作に接続された、タンパク質プールタンクを含み得る。供給物貯蔵槽は十分に混合される。タンパク質プールタンクの容量は異なっていてもよい。一実施形態において、タンパク質プールタンクは、約２００リットル～約５，０００リットルの間の容量を有する。特定の実施形態において、タンパク質プールタンクは、最大４０ｋｇの精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体、又は精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体を約５～約２０ｇ／Ｌ、又は約５～約１５ｇ／Ｌの間、又は約８～約１２ｇ／Ｌ、又は約９～約１１ｇ／Ｌ若しくは約１０ｇ／Ｌの間の濃度で貯蔵する。
【0059】
任意で、システムは、タンパク質凝集体等のより大きな不純物又は汚染物質を除去するための前ろ過工程（例えば、精密ろ過）を包含してもよい。
【0060】
一実施形態において、初期の精製スイートにおける第１のウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）スキッドと、最終精製スイートにおける第２のシングルパス・タンジェンシャルフローろ過－透析ろ過（ＳＰＴＦＦ－ＤＦ）スキッドとを含む、２つのスキッド体を含むシステムが提供される。
【0061】
特定の実施形態において、ＶＲＦスキッドは、ＶＲＦポンプ、少なくとも１つのＶＲＦプレフィルタ、及び１以上のＶＲＦフィルタを含む。特定の実施形態において、１以上のＶＲＦフィルタがＶＲＦマニホールド内に配置される。圧力を加えることにより、流体の一部がフィルタ膜を通ってろ液の流れに送り込まれる。特定の実施形態において、ポンプは圧力供給容器に置き換えられる。
【0062】
ＶＲＦポンプは異なっていてもよい。一実施形態において、ＶＲＦポンプの流量は４０キログラムの生成物用に設計され、より具体的には、流量は、約８０リットル／時間～６８０リットル／時間、約４００リットル／時間～５６０リットル／時間、又は約４４０リットル／時間～５２０リットル／時間である。一般に、このようなポンプの流量の動作範囲は、約５リットル／時間～１，２００リットル／時間の範囲である。
【0063】
１以上のＶＲＦ膜は異なっていてもよい。操作において、生成物は、ＶＲＦ膜の孔を自由に通って透過物に入る一方、ウイルス粒子は、存在する場合、膜に保持される。
【0064】
ウイルスフィルタは、流体がフィルタを通って流れるときに、組換え抗体を含む流体（例えば、液体培養培地、又は本明細書に記載される任意のプロセスに存在する流体）から少なくとも一部（例えば、少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％、又は１００％）のウイルスを除去することができる。
【0065】
ＶＲＦにおいては、ろ過のモード、膜面積、膜の孔側、膜材料、モジュール構成、及び試験方法によって異なる様々なフィルタを利用することができる。
【0066】
代表的、非限定的な膜材料としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン酢酸ビニル共重合体、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、酢酸セルロース、再生セルロース、セルロース複合材料、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリアリールスルホン、ポリフェニルスルホン、ポリアクリロニトリル、ポリフッ化ビニリデン、不織布及び織布の繊維材料等の高分子材料、又は無機材料が挙げられる。
【0067】
一般に、必要とされる膜面積は、どのくらい（すなわち、体積又は質量）のろ過を意図しているかに依存する。具体的な実施形態において、フィルタは、約１～約１０ｍ2、又は約１～約８ｍ2、若しくは約８ｍ2、約６ｍ2、約４ｍ2、又は約２ｍ2以下である。一実施形態において、フィルタは、１５ｋｇに対して約４ｍ2以下であり、又は４０ｋｇに対して約８ｍ2以下である。
【0068】
膜の孔径は異なっていてもよく、一実施形態において、約１０～約１００ｎｍ、より具体的には約１５～約５０ｎｍ、さらにより具体的には約２０～約３０ｎｍ、さらにより具体的には約２０ｎｍである。
【0069】
特定の実施形態において、ＶＲＦ膜は予め滅菌される。他の実施形態において、ＶＲＦ膜は、滅菌に適した材料から形成される。市販のＶＲＦ膜の例としては、Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ（登録商標） Ｐｒｏ（ミリポア）、Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ（旭化成）、及びＶｉｒｏｓａｒｔ（ザルトリウス）が挙げられる。
【0070】
一実施形態において、１以上のＶＲＦ膜は終端のフィルタである。終端のフィルタにおいて、分離される（又は供給される）溶液又は懸濁液の流れは、膜に対して垂直である。
【0071】
ＶＲＦシステムの能力は異なっていてもよい。一般に、ウイルスの低減は、供給原料中のウイルス力価と、関連する生成物の画分との比によって測定され、ｌｏｇ１０減少係数（ＬＲＦ）と呼ばれる。一実施形態において、ＶＲＦは、約６ＬＲＦ超、約５ＬＲＦ超、約４ＬＲＦ超、約３ＬＲＦ超、又は約２ＬＲＦ超を可能とする。単一の製造プロセスの全体的なＬＲＦは、各プロセスの工程の個別のＬＲＦに基づく。特定の実施形態において、ウイルスのブレイクスルーは観察されない。
【0072】
特定の実施形態において、ＶＲＦアセンブリは、ＶＲＦフィルタのマニホールドに取り付けられたプレフィルタにより構成され、単回使用の無菌接続部を介して最終処方のブレイクタンクに連結される。
【0073】
一般に、ＶＲＦ操作は、体積処理量を最大化し、処理時間を最小化し、及び確実なウイルス除去を保証する条件を特定するよう最適化される。
【0074】
一実施形態において、体積処理量は、約２００～約１，０００Ｌ／ｍ2であり、より具体的には約４００～約６００Ｌ／ｍ2である。特定の実施形態において、体積処理量は、約４００～約４５０、約４５０～約５００、約５００～約５５０、又は約５５０～約６００Ｌ／ｍ2である。
【0075】
一実施形態において、質量処理量は、約１～約１０ｋｇ／ｍ2、より具体的には約３～約５ｋｇである。
【0076】
特定の実施形態において、処理時間は、最大４０ｋｇに対して約８時間以下である。例えば、約８時間、約７時間、約６時間、約５時間、約４時間、約３時間、約２時間、又は約１時間以下である。
【0077】
特定の実施形態において、処理時間は、約１５ｋｇに対して約８時間以下である。例えば、約８時間、約７時間、約６時間、約５時間、約４時間、約３時間、約２時間、又は約１時間以下である。
【0078】
ＳＰＴＦＦ－ＤＦアセンブリは、システムの最終精製の構成要素として機能し、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、及びポンプで構成される。この第２のスキッドには、空間を節約するために、水を用いてインラインで希釈される濃縮された緩衝剤が供給されている。
【0079】
一実施形態において、アセンブリは、ブレイクタンク、透析ろ過（ＤＦ）の緩衝剤濃縮物、注射用水（ＷＦＩ）、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド、ＵＦ／ＤＦプール供給チューブ、及びＵＦＤＦプールタンクを含む。
【0080】
この実施形態によれば、ブレイクタンクは、流量がウイルスろ過スキッドとＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッドとの間で完全に一致しない場合に、圧力ブレイク及び安全性を提供するように設計される。一実施形態において、ブレイクタンクは、約２０リットル～約１００リットルの容量を有する。ブレイクタンクはＶＲＦスキッド及びＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッドの両方に接続される。
【0081】
透析ろ過（ＤＦ）の緩衝剤濃縮物及びＷＦＩは、ＤＦ緩衝剤濃縮物が緩衝剤交換に適切な濃度に希釈されるよう、一緒に混合されるように設計される。
【0082】
ＷＦＩは、下流の装置をフラッシングし、ＤＦ緩衝剤濃縮物の濃度をプロセスで使用される適切な濃度／強度に調整するための水を提供するように設計される。
【0083】
ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッドは、スキッド上に予め取り付けられ、かつ容易に輸送できる状態であるスキッドユニットであり、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッドを他の装置及びウイルスろ過スキッドの下流に流動的に連結するためのいくつかの無菌接続を有するスキッドユニットである。一実施形態において、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッドは、ＳＰＴＦＦポンプ、ＳＰＴＦＦ１膜、ＤＦプール１タンク、ＤＦプール２タンク、ＤＦ緩衝剤ポンプ、ＷＦＩポンプ、インラインミキサ、ＤＦプール１ポンプ、ＤＦプール２ポンプ、ＤＦ膜、及び任意のＳＰＴＦＦ２膜を含む。例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく、追加の装置を使用してもよい。さらに、特定の装置を組み合わせてもよいが、組み合わされた装置は、例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく、同じ又は類似の機能を保持し得る。
【0084】
一実施形態において、第１のタンクが濃縮生成物で満たされた後、ＳＰＴＦＦプロセスが第２のタンクを充填し続ける間に、材料は従来のＴＦＦ膜を通して透析ろ過（ｄｉａｆｉｌｔｅｒｉｎｇ）を開始する。一実施形態において、第１のプールを空にすること及び／又は最終のＵＦＤＦプールへの濃縮は、第２のプールが透析ろ過を開始する前に完了する必要はない（すなわち、モード１）。別の実施形態において、第１のタンクが終了し（材料が透析ろ過され、最終のＵＦＤＦプールにむけて空になる／濃縮される）、第２のタンクが満たされると、第２のタンクは透析ろ過を開始する（すなわち、モード２）。有利なことに、これにより、必要とされる時間をほぼ半分に短縮し、１２時間の枠内で操作を完了する。特定の実施形態において、ＵＦ／ＤＦの時間は従来の操作と比較して約５０％短縮され、同じ時間枠内でより多くの材料を処理する操作が可能になる。また、有利なことに、ポンプに対する要求がいつでも低減され、同じ総量の材料に対してより小さいポンプシステムを用いることが可能になる。さらに、単回使用の流路を使用することにより、操作が完了した後にシステムの洗浄に必要な時間と資源が低減される。
【0085】
このシステムは、（ｉ）手動／部分自動モード、又は（ｉｉ）完全自動モードの２つのモードのうちの１つで操作することができる。両方の操作モードにおいて、ＶＲＦは同じ自動化で動作し、唯一異なるのは流量及び膜面積である。
【0086】
負荷量及び膜性能に応じて、フィルタのマニホールド内での操作のために複数のＶＲＦ膜が設定され、必要に応じて切り替えられてもよい。
【0087】
ここで図１～３を参照すると、一体型のウイルスろ過、濃縮、及び透析ろ過プロセス１０５を実施するための、一体型単回使用システム１００は、初期精製システム２００及び最終精製システム３００を含む。
【0088】
初期精製システム２００は、タンパク質プールタンク２１０、ウイルス低減フィルタ（ＶＲＦ）洗浄（ｗａｓｈ）２２０、注射用水（ＷＦＩ）タンク２３０、ウイルスろ過スキッド２４０、及びブレイクタンク供給管２９０を含む。本明細書においては、初期精製システム２００の一部として特定の装置が含まれるが、例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく、追加の装置を使用するか、又は装置を組み合わせてもよい。
【0089】
タンパク質プールタンク２１０は、精製及びポリッシュされたタンパク質を保持するように設計されたタンクであり、いくつかの例示的な実施形態によれば、５００リットル～約５，０００リットルの容量を有する。しかしながら、タンパク質プールタンク２１０の容量は、他の実施形態において異なっていてもよい。タンパク質プールタンク２１０は、約５キログラム～約４０キログラムの精製及びポリッシュされたｍＡＢを貯蔵し、単回使用のミキサである。タンパク質プールタンク２１０内のタンパク質は、５グラム／リットル～約１５グラム／リットルの範囲であり、好ましくは約１０グラム／リットルである。タンパク質プールタンク２１０は、タンパク質プールタンク無菌接続部２４１においてウイルスろ過スキッド２４０に接続するタンパク質プールタンク排出ライン２１２を介して、ウイルスろ過スキッド２４０に流動的に連結される。
【0090】
ＶＲＦ洗浄２２０は、一体型単回使用システム１００、特に、ウイルスフィルタ２７０及びウイルスろ過スキッド２４０をフラッシュするように設計される。ＶＲＦ洗浄２２０は、ＶＲＦ洗浄無菌接続部２４４においてウイルスろ過スキッド２４０に接続するＶＲＦ洗浄排出ライン２２２を介して、ウイルスろ過スキッド２４０に流動的に連結される。
【0091】
ＷＦＩ２３０は、フィルタをフラッシュするための、必要に応じてウイルスフィルタ又はプレフィルタをフラッシュするための水を供給するように設計される。ＷＦＩ２３０は、ＷＦＩ無菌接続部２４７においてウイルスろ過スキッド２４０に接続するＷＦＩ排出ライン２３２を介して、ウイルスろ過スキッド２４０に流動的に連結される。
【0092】
ウイルスろ過スキッド２４０は、スキッド上に予め設置されたスキッドユニットであり、容易に輸送できる状態になっており、ウイルスろ過スキッド２４０を他の装置に流動的に連結するためのいくつかの無菌接続部を有する。ウイルスろ過スキッド２４０は、ＶＲＦポンプ２５０、ＶＲＦプレフィルタ２６０、及びＶＲＦマニホールド２７１内に任意に配置される１以上のＶＲＦ膜２７０を含む。本明細書においては、特定の装置がウイルスろ過スキッド２４０の一部として含まれるが、例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく、追加の装置を使用するか、又は装置を組み合わせてもよい。
【0093】
ＶＲＦポンプ２５０は、ＶＲＦポンプ２５０及びタンパク質プールタンク無菌接続部２４１の間に位置するＶＲＦポンプ吸引ライン制御弁２４３を含むＶＲＦポンプ吸引ライン２４２を介して、タンパク質プールタンク無菌接続部２４１に流動的に連結される。ＶＲＦポンプ２５０は、また、ＶＲＦ洗浄供給ライン２４５を介してＶＲＦ洗浄無菌接続部２４４に流動的に連結され、ＶＲＦ洗浄供給ライン２４５は、ＶＲＦ洗浄無菌接続部２４４から、ＶＲＦポンプ吸引ライン制御弁２４３及びＶＲＦポンプ２５０の間に位置するＶＲＦポンプ吸引管接合部２５１まで延び、ＶＲＦポンプ吸引管接合部２５１及びＶＲＦ洗浄無菌接続部２４４の間に配置されたＶＲＦ洗浄供給ライン制御弁２４６を含む。さらに、ＶＲＦポンプ２５０は、ＷＦＩ供給ライン２４８を介してＷＦＩ無菌接続部２４７に流動的に連結され、ＷＦＩ供給ライン２４８は、ＷＦＩ無菌接続部２４７からＶＲＦポンプ吸引管接合部２５１まで延び、ＶＲＦポンプ吸引管接合部２５１及びＷＦＩ無菌接続部２４７の間に配置されたＷＦＩ供給ライン制御弁２４９を含む。ＶＲＦポンプは、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＶＲＦポンプ２５０は、８０リットル／時間～６８０リットル／時間の供給流量（１０リットル／時間～１，２００リットル／時間の動作範囲）を有するＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプであるか、又は約４８０リットル／時間の供給流量（５リットル／時間～９５０リットル／時間の動作範囲）を有するＷａｔｓｏｎ Ｍａｒｌｏｗ ６００ポンプであるが、他の実施形態においては、他の種類のポンプも使用し得る。
【0094】
ＶＲＦプレフィルタ２６０は、ＶＲＦポンプ排出ライン２５４を介してＶＲＦポンプ２５０に流動的に連結される。
【0095】
ＶＲＦ膜２７０は、ＶＲＦプレフィルタ排出ライン２６２を介してＶＲＦプレフィルタ２６０に流動的に連結される。いくつかの例示的な実施形態によれば、複数のＶＲＦ膜２７０Ａ、２７０Ｂ、２７０Ｃ（又はそれ以上）が、互いに並列に、及び任意でＶＲＦマニホールド２７１に配置されて、ＶＲＦプレフィルタ２６０に流動的に連結される。ＶＲＦ膜２７０のサイズは、１平方メートルから４×４平方メートル（１６平方メートル）の範囲である。特定の実施形態において、ＶＲＦ膜２７０は、Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ、Ｐｌａｎｏｖａ ＢｉｏＥＸ、又はＶｉｒｅｓｏｌｖｅ Ｐｒｏであり、それぞれ２０ＬＭＨ～７０ＬＭＨ、３５ＬＭＨ～１７０ＬＭＨ、又は１００～３５０ＬＭＨの流束範囲を有する。ＶＲＦ膜２７０は、ＶＲＦ膜排出ライン２７６を介してブレイクタンク無菌接続部２７８に流動的に連結されており、ＶＲＦ膜排出ライン２７６は、ＶＲＦ膜２７０及びブレイクタンク無菌接続部２７８の間に位置するＶＲＦ膜排出ライン制御弁２７７を含む。ＶＲＦ廃棄物排出ライン２７３は、ＶＲＦ膜排出ライン制御弁２７７及びＶＲＦ膜２７０の間に位置するＶＲＦ膜排出管接合部２７２においてＶＲＦ膜排出ライン２７６に連結され、ＶＲＦ膜排出管接合部２７２及び廃棄物２８０の間に配置されたＶＲＦ廃棄物排出ライン制御弁２７４を有する。
【0096】
ウイルスろ過スキッド２４０は、初期精製システム２００を完成させる。ブレイクタンク無菌接続部２７８は、ブレイクタンク供給管２９０を介して最終精製システム３００に流動的に連結される。いくつかの例示的な実施形態によれば、このブレイクタンク供給管２９０は、初期精製スイート２００を最終精製スイート３００から分離する壁（図示せず）のマウスホールを通る。
【0097】
最終精製システム３００は、ブレイクタンク３１０、透析ろ過（ＤＦ）緩衝剤濃縮物３２０、注射用水（ＷＦＩ）３３０、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過及び透析ろ過（ＳＰＴＦＦ－ＤＦ）スキッド３４０、ＵＦＤＦプール供給管３９０、及びＵＦＤＦプールタンク３９５を含む。本明細書においては、特定の装置が最終精製システム３００の一部として含まれるが、例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく、追加の装置を使用するか、又は装置を組み合わせてもよい。
【0098】
ブレイクタンク３１０は、流量がウイルスろ過スキッド２４０（図２）とＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０との間で完全に一致しない場合に圧力ブレイク及び安全性を提供するように設計されたタンクである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ブレイクタンクは、２０リットル～約１００リットルの容量を有するが、ブレイクタンク３１０の容量は、他の実施形態においては異なっていてもよい。ブレイクタンク３１０は、ブレイクタンク供給管２９０を介してウイルスろ過スキッド２４０（図２）に流動的に連結される。ブレイクタンク３１０は、また、ブレイクタンク無菌接続部３４１においてＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に接続するブレイクタンク排出ライン３１２を介して、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に流動的に連結される。
【0099】
透析ろ過（ＤＦ）緩衝剤濃縮物３２０及びＷＦＩ３３０は、ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０が適切な濃度に希釈されるよう、一緒に混合されるように設計される。ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０は、ＤＦ緩衝剤濃縮物無菌接続部３４４においてＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に接続するＤＦ緩衝剤濃縮物排出ライン３２２を介して、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に流動的に連結される。
【0100】
ＷＦＩ３３０は、下流の装置をフラッシングし、ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０の濃度を適切な濃度に調整するための水を提供するように設計される。ＷＦＩ３３０は、ＷＦＩ無菌接続部３４７においてＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に接続するＷＦＩ排出ライン３３２を介して、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０に流動的に連結される。
【0101】
ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０は、スキッド上に予め取り付けられ、かつ容易に輸送できる状態であるスキッドユニットであり、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０をウイルスろ過スキッド２４０の下流の他の装置に流動的に連結するためのいくつかの無菌接続部を有する。ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０は、ＳＰＴＦＦポンプ３０００、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０、ＤＦプール１タンク３０２０、ＤＦプール２タンク３０３０、ＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０、ＷＦＩポンプ３０５０、インラインミキサ３０６０、ＤＦプール１ポンプ３０７０、ＤＦプール２ポンプ３０８０、ＤＦ膜３０９０、及び任意のＳＰＴＦＦ２膜３１００を含む。本明細書においては、特定の装置がＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一部として含まれるが、例示的な実施形態の範囲及び精神から逸脱することなく追加の装置を使用するか、又は装置を組み合わせてもよい。
【0102】
ＳＰＴＦＦポンプ３０００は、ＳＰＴＦＦポンプ吸引ライン３４２を介してブレイクタンク無菌接続部３４１に流動的に連結されており、ＳＰＴＦＦポンプ吸引ライン３４２は、ＳＰＴＦＦポンプ３０００及びブレイクタンク無菌接続部３４１の間に位置するＳＰＴＦＦポンプ吸引ライン制御弁３４３を含む。ＳＰＴＦＦポンプ３０００は、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＳＰＴＦＦポンプ３０００は、２０リットル／時間～１，２００リットル／時間の供給流量の範囲を有するＱＦ１２００ＳＵクアトロフロー低せん断ポンプである。
【0103】
ＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０は、ＤＦ緩衝剤ポンプ吸引ライン３４５を介してＤＦ緩衝剤濃縮物無菌接続部３４４に流動的に連結され、ＤＦ緩衝剤ポンプ吸引ライン３４５は、ＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０及びＤＦ緩衝剤濃縮物無菌接続部３４４の間に位置するＤＦ緩衝剤ポンプ吸引ライン制御弁３４６を含む。ＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０は、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０は、２０リットル／時間～１，２００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプである。
【0104】
ＷＦＩポンプ３０５０は、ＷＦＩポンプ吸引ライン３４８を介してＷＦＩ無菌接続部３４７に流動的に連結されており、ＷＦＩポンプ吸引ライン３４８は、ＷＦＩポンプ３０５０及びＷＦＩ無菌接続部３４７の間に位置するＷＦＩポンプ吸引ライン制御弁３４９を含む。ＷＦＩポンプ３０５０は流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＷＦＩポンプ３０５０は、２０リットル／時間～１，２００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプである。
【0105】
インラインミキサ３０６０は、ＤＦ緩衝剤ポンプ排出ライン３０４２を介してＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０に流動的に連結される。インラインミキサ３０６０は、また、ＷＦＩポンプ３０５０からＷＦＩポンプ排出管接合部３０４１まで延びるＷＦＩポンプ排出ライン３０５２を介して、ＷＦＩポンプ３０５０に流動的に連結され、ＷＦＩポンプ排出管接合部３０４１は、インラインミキサ３０６０及びＤＦ緩衝剤ポンプ３０４０の間のＤＦ緩衝剤ポンプ排出ライン３０４２に沿って位置する。インラインミキサ３０６０は、ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０のための、ＷＦＩ３３０を用いたインライン希釈システムであり、らせん状のインラインミキサを含む。
【0106】
ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、ＳＰＴＦＦポンプ排出ライン３００２を介してＳＰＴＦＦポンプ３０００に流動的に連結される。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、また、ＳＰＴＦＦ１膜フラッシュライン３０６２を介して、インラインミキサ３０６０に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ１膜フラッシュライン３０６２は、インラインミキサ３０６０からＳＰＴＦＦポンプ排出管接合部３００１まで延び、ＳＰＴＦＦ１膜フラッシュ制御弁３０６３を含み、ＳＰＴＦＦポンプ排出管接合部３００１は、ＳＰＴＦＦポンプ３０００及びＳＰＴＦＦ１膜３０１０の間のＳＰＴＦＦポンプ排出ライン３００２に沿って位置する。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＳＰＴＦＦ１ユニット３０１０は、約０．９平方メートルから約２０平方メートルまでのサイズ容量を有する一連の膜（例えば、Ｃｅｎｔｒａｓｔａｋ１００に積み重ねられたＣｅｎｔｒａｓｅｔｔｅカセット）で構成される。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＳＰＴＦＦ１ユニット３０１０は、９連構成で設置される。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０のサイズは、一体型単回使用システム１００を介した４０キログラムの生成物用に設計された場合、最大２０平方メートルである。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、ＳＰＴＦＦ透過物廃棄ライン３０１１を介して廃棄物３９６に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ透過物廃棄ライン３０１１は、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０から廃棄物３９６までの透過物の流れを制御するためのＳＰＴＦＦ透過物廃棄制御弁３０１２を含む。
【0107】
ＤＦプール１タンク３０２０は、保持物プール１ライン３０１４を介してＳＰＴＦＦ１膜３０１０に流動的に連結され、保持物プール１ライン３０１４は、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０及びＤＦプール１タンク３０２０の間に位置する保持物プール１ライン制御弁３０１５を含む。ＤＦプール１タンク３０２０は、第１モード及び第２モードで操作することができ、これらは一体型単回使用システム１００の操作と関連してさらに詳細に説明される。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦプール１タンク３０２０は、２０～１００リットルのタンク容量を有する。特定の実施形態において、スキッドの接続は無菌的である。ＤＦプール１タンク３０２０は、また、ＤＦ緩衝剤プール１ライン３０６４を介してインラインミキサ３０６０に流動的に連結され、ＤＦ緩衝剤プール１ライン３０６４は、ＤＦプール１タンク３０２０から、インラインミキサ３０６０及びＳＰＴＦＦ１膜フラッシュ制御弁３０６３の間に位置するインラインミキサ排出管接合部３０６１まで延び、インラインミキサ排出管接合部３０６１に隣接するＤＦプールタンク制御弁３０６５及びＤＦプール１タンク３０２０に隣接するＤＦプール１タンク制御弁３０６６を含む。
【0108】
ＤＦプール２タンク３０３０は、また、保持物プール２ライン３０１６を介してＳＰＴＦＦ１膜３０１０に流動的に連結され、保持物プール２ライン３０１６は、ＤＦプール２タンク３０３０から、保持物プール１ライン３０１４に沿ってＳＰＴＦＦ１膜３０１０及び保持物プール１ライン制御弁３０１５の間に位置する保持物プール１配管接合部３０１３まで延び、保持物プール１配管接合部３０１３及びＤＦプール２タンク３０３０の間に位置する保持物プール２ライン制御弁３０１７を含む。ＤＦプール２タンク３０３０は、第１モード及び第２モードで操作することができ、これらは一体型単回使用システム１００の操作と関連してさらに詳細に説明される。例示的な実施形態によれば、ＤＦプール２タンク３０３０は、ＤＦプール１タンク３０２０と同様である。さらに、ＳＰＴＦＦ１膜保持物廃棄ライン３０１８は、保持物プール１配管接合部３０１３から廃棄物３９６まで延び、廃棄物３９６に行く保持物の流れを制御するためのＳＰＴＦＦ１膜保持物廃棄ライン制御弁３０１９を含む。ＤＦプール２タンク３０３０は、また、ＤＦ緩衝剤プール２ライン３０６７を介してインラインミキサ３０６０に流動的に連結され、ＤＦ緩衝剤プール２ライン３０６７は、ＤＦプールタンク制御弁３０６５及びＤＦプール１タンク制御弁３０６６の間に位置するＤＦ緩衝剤プール１配管接合部３０６８から、ＤＦプール２タンク３０３０及び残留物プール２ライン制御弁３０１７の間に位置するＤＦ緩衝剤プール２配管接合部３０６９まで延び、ＤＦプール２タンク制御弁３１６０を含む。
【0109】
ＤＦプール１ポンプ３０７０は、ＤＦプール１ポンプ吸引ライン３０２２を介してＤＦプール１タンク３０２０に流動的に連結される。ＤＦプール１ポンプ３０７０は、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦプール１ポンプ３０７０は、１５０リットル／時間～５，０００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ４４００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプ、５０リットル／時間～５，０００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ５０５０ＳＵ、又は実施形態に応じて適切な容量を有する他のポンプである。ＤＦプール２ポンプ３０８０は、ＤＦプール２ポンプ吸引ライン３０３２を介してＤＦプール２タンク３０３０に流動的に連結される。ＤＦプール２ポンプ３０８０は、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドである。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦプール２ポンプ３０８０は、ＤＦプール１ポンプ３０７０と同一又は類似である。
【0110】
ＤＦ膜３０９０は、ＤＦプール１ポンプ排出ライン３０７２を介してＤＦプール１ポンプ３０７０に流動的に連結され、ＤＦプール１ポンプ制御弁３０７３を含む。ＤＦ膜３０９０は、また、ＤＦプール２ポンプ排出ライン３０８２を介して、ＤＦプール２ポンプ３０８０に流動的に連結され、ＤＦプール２ポンプ排出ライン３０８２は、ＤＦプール２ポンプ３０８０から、ＤＦ膜３０９０及びＤＦプール１ポンプ制御弁３０７３の間に位置するＤＦ膜プールポンプ配管接合部３０７４まで延び、ＤＦプール２ポンプ制御弁３０８３を含む。ＤＦ膜３０９０は、また、ＤＦ膜フラッシュライン３１６１を介してインラインミキサ３０６０に流動的に連結され、ＤＦ膜フラッシュライン３１６１は、インラインミキサ排出管接合部３０６１から、ＤＦプール１ポンプ排出ライン３０７２に沿ってＤＦ膜ポンププールポンプ配管接合部３０７４及びＤＦ膜３０９０の間に位置するＤＦ膜フラッシュ配管接合部３１６２まで延び、ＤＦ膜フラッシュ制御弁３１６３を含む。ＤＦ膜３０９０は、第１のモード及び第２のモードで操作することができ、これらは一体型単回使用システム１００の操作と関連してさらに詳細に説明される。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦ膜３０９０は、０．９平方メートルから２０平方メートルまでのサイズ容量を有するＣｅｎｔｒａｓｔａｋ１００膜である。ＤＦ膜３０９０は、ＤＦ透過物廃棄ライン３０９１を介して廃棄物３９７に流動的に連結され、ＤＦ透過物廃棄ライン３０９１は、ＤＦ膜３０９０から廃棄物３９７への透過物の流れを制御するためのＤＦ透過物廃棄制御弁３０９２を含む。
【0111】
ＤＦ膜３０９０は、ＤＦ膜３０９０からＤＦプール１タンク３０２０まで延びるＤＦプール１保持物リサイクルライン３０９３を介してＤＦプール１タンク３０２０に流動的に連結され、ＤＦプール１保持物リサイクル制御弁３０９４を含む。ＤＦ膜３０９０は、また、ＤＦプール２保持物リサイクルライン３０９５を介してＤＦプール２タンク３０３０に流動的に連結され、ＤＦプール２保持物リサイクルライン３０９５は、ＤＦプール１保持物リサイクルライン３０９３に沿ってＤＦ膜３０９０及びＤＦプール１保持物リサイクル制御弁３０９４の間に位置するＤＦプールタンク保持物配管接合部３０９６から、ＤＦプール２タンク３０３０まで延び、ＤＦプール２保持物リサイクル制御弁３０９７を含む。ＤＦ膜３０９０の保持物部分は、ＤＦ膜保持物廃棄ライン３０９８を介して廃棄物３９７に流動的に連結され、ＤＦ膜保持物廃棄ライン３０９８は、ＤＦプールタンク保持物配管接合部３０９６から廃棄物３９７まで延び、ＤＦ膜３０９０から廃棄物３９７への保持物の流れを制御するためのＤＦ膜保持物廃棄制御弁３０９９を含む。いくつかの実施形態によれば、ＤＦ膜保持物廃棄ライン３０９８は、廃棄物３９７に直接導かれ、或いは、ＤＦ透過物廃棄ライン３０９１等の別の廃棄ラインと組み合わされてもよい。
【0112】
ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、ＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン３０７６を介してＤＦプール１ポンプ３０７０に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン３０７６は、ＳＰＴＦＦ２膜３１００から、ＤＦプール１ポンプ排出ライン３０７２に沿ってＤＦプール１ポンプ３０７０及びＤＦプール１ポンプ制御弁３０７３の間に位置するＳＰＴＦＦ２膜プール１供給管接合部３０７５まで延び、ＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン制御弁３０７７を含む。ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、また、ＳＰＴＦＦ２膜プール２供給ライン３０８６を介してＤＦプール２ポンプ３０８０に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２膜プール２供給ライン３０８６は、ＤＦプール２ポンプ排出ライン３０８２に沿ってＤＦプール２ポンプ３０８０及びＤＦプール２ポンプ制御弁３０８３の間に位置するＳＰＴＦＦ２膜プール２供給管接合部３０８５から、ＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン３０７６に沿ってＳＰＴＦＦ２膜３１００及びＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン制御弁３０７７の間に位置する第２のＳＰＴＦＦ２膜プール２供給管接合部３０８７まで延び、ＳＰＴＦＦ２膜プール２供給ライン制御弁３０８８を含む。ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、また、ＳＰＴＦＦ２膜フラッシュライン３１６４を介してインラインミキサ３０６０に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２膜フラッシュライン３１６４は、インラインミキサ排出管接合部３０６１からＳＰＴＦＦ２膜フラッシュ配管接合部３０８７まで延び、ＳＰＴＦＦ２膜フラッシュ制御弁３１６５を含む。ＳＰＴＦＦ２膜３１００は任意である。いくつかの実施形態によれば、ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０と同様である。ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、ＳＰＴＦＦ２透過物廃棄ライン３１０１を介して廃棄物３９７に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２透過物廃棄ライン３１０１は、ＳＰＴＦＦ２膜３１００から廃棄物３９７への透過物の流れを制御するためのＳＰＴＦＦ２透過廃棄物制御弁３１０２を含む。
【0113】
ＳＰＴＦＦ２膜３１００は、ＳＰＴＦＦ２保持物ライン３１０５を介してＵＦＤＦプールタンク無菌接続部３８０に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２保持物ライン３１０５は、ＳＰＴＦＦ２膜３１００からＵＦＤＦプールタンク無菌接続部３８０まで延び、ＳＰＴＦＦ２保持物制御弁３１０６を含む。ＳＰＴＦＦ２膜３１００の保持物部分は、ＳＰＴＦＦ２保持物廃棄ライン３１０７を介して廃棄物３９７に流動的に連結され、ＳＰＴＦＦ２保持物廃棄ライン３１０７は、ＳＰＴＦＦ２保持物ライン３１０５に沿ってＳＰＴＦＦ２膜３１００及びＳＰＴＦＦ２保持物制御弁３１０６の間に位置するＳＰＴＦＦ２膜保持物配管接合部３１０８から、廃棄物３９７まで延び、ＳＰＴＦＦ２膜保持物廃棄制御弁３１０９を含む。いくつかの実施形態によれば、ＳＰＴＦＦ２保持物廃棄ライン３１０７は、廃棄物３９７に直接導かれ、或いは、ＤＦ透過物廃棄ライン３０９１又はＳＰＴＦＦ２透過物廃棄ライン３１０１等の別の廃棄ラインと組み合わされてもよい。
【0114】
ＵＦＤＦプールタンク３９５は、ＵＦＤＦプール供給管３９０を介してＵＦＤＦプールタンク無菌接続部３８０に流動的に連結される。ＵＦＤＦプールタンク３９５は、１００リットル～５００リットルの容量を有するように設計される。ＵＦＤＦプールタンク３９５は濃縮された材料を、含まれる場合、ＳＰＴＦＦ２膜３１００から受け取るか、又は、ＤＦ膜３０９０が保持物をＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０に再循環して戻した後にＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０からそれぞれ受け取る。ＵＦＤＦプールタンク３９５が濃縮された材料を受け取った後、濃縮された材料は、本明細書に記載されない、既知のプロセス及び手順に従って最終ろ過及び最終処方を経る。
【0115】
図１から図３の概略図を説明したので、ここで一体型単回使用システム１００の操作について説明する。一体型単回使用システム１００の簡単な概要によれば、一体型単回使用システム１００は、（ｉ）ウイルスろ過スキッド２００によって実行されるウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）によって、及びその後の（ｉｉ）シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）、透析ろ過（ＤＦ）による緩衝剤交換、ＳＰＴＦＦによる任意の第２の濃縮による濃縮によって、単回ポリッシュされたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）のプール５～４０ｋｇを、プレ最終ろ過（ＵＦＤＦ）プールに１２時間未満（非稼働時の設定及び分解時間を含む）の単回バッチで採取するように設計され、これらは全てＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３００により実行される。この一体型単回使用システム１００は、２つのモード、モード１若しくは第１モードと呼ばれる単回１２時間のバッチで最大１５キログラムを処理できる手動／部分自動モード、又はモード２若しくは第２モードと呼ばれる単回１２時間のバッチで最大４０キログラムを処理できる完全自動モード、のうちの１つにより操作することができる。全ての流路、膜、ポンプヘッド、及び連結部は、滅菌された単回使用の材料により作られる。
【0116】
以下に説明する操作は、１２時間で５キログラムから４０キログラムの抗体を処理するための推定操作範囲を有するが、当業者はこれらの操作範囲を変更して、１２時間で５キログラムから４０キログラムより多い又は少ない抗体を処理するか、又は時間を調整することができる。操作を開始する前に、ＶＲＦ膜２７０、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０、使用する場合ＳＰＴＦＦ２膜３１００、及びＤＦ膜３０９０は、関連するライン及びタンクとともに、ＶＲＦ洗浄２２０及び／又はＷＦＩ２３０及び／又はＤＦ緩衝剤及び／又はＷＦＩ３３０を用いてフラッシュされ及び準備される。
【0117】
モード１又はモード２の両方の操作モードにおいて、ウイルスろ過スキッド２４０は、流れパラメータ及び膜面積のみが異なる、同じ自動化によって運転される。負荷量及び膜性能に応じて、複数のＶＲＦ膜２７０をＶＲＦマニホールド２７１内で操作するように互いに並列に設定し、必要に応じて切り替えてもよい。
【0118】
例示的な実施形態によれば、初期精製２００において、５キログラムから４０キログラムの精製及びポリッシュされたｍＡｂが、２００～５，０００Ｌの単回使用ミキサ（ＳＵＭ）又は貯蔵タンクであるタンパク質プールタンク２１０に約１０ｇ／リットル（７～１３ｇ／Ｌ）で貯蔵される。ＶＲＦポンプ２５０は、材料を、８０～６８０リットル／時間の供給流量で、タンパク質プールタンクからＶＲＦプレフィルタ２６０にポンプで送り、次にＶＲＦ膜２７０に送る。ＶＲＦポンプ２５０は、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドを備え、２０リットル／時間～１，２００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプである。０．９平方メートルから８平方メートルのＶＲＦ膜２７０が使用され、最大３００ＬＭＨとなり得る目標流束６４ＬＭＨで、最大６００リットル／平方メートルとなり得る３８５リットル／平方メートルの容量まで負荷される。流れは、ＶＲＦ膜２７０から、最終精製３００の一部である２０リットル～１００リットルのタンクであるブレイクタンク３１０まで続く。初期精製２００は、６時間、又はタンパク質プールタンク２１０内に貯蔵される全ての出発材料が処理され、ブレイクタンク３１０への充填が開始されるまで連続して運転される。初期精製２００の運転中、ＶＲＦポンプ吸引ライン制御弁２４３及びＶＲＦ膜排出ライン制御弁２７７は、それらを通って流れることを可能にするため開位置にあり、ＶＲＦ洗浄供給ライン制御弁２４６、ＷＦＩ供給ライン制御弁２４９、及びＶＲＦ廃棄物排出ライン制御弁２７４は、それらを通る流れを防止するため閉位置にある。
【0119】
特定の実施形態において、全ての供給材料が負荷された後、ＶＲＦ膜２７０は１０リットル／平方メートルのＶＲＦ洗浄２２０によりフラッシュされる。初期精製２００の洗浄が実施される場合、初期精製２００の運転前後において、ＶＲＦポンプ吸引ライン制御弁２４３及びＷＦＩ供給ライン制御弁２４９は、それらを通る流れを防止するため閉位置に配置され、ＶＲＦ洗浄供給ライン制御弁２４６及びＶＲＦ膜排出ライン制御弁２７７は、それらを通って流れることを可能にするため開位置に配置される。洗浄流体は初期精製２００を出てブレイクタンク３１０まで行く。
【0120】
ブレイクタンク３１０が充填を開始すると、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０上のＳＰＴＦＦポンプ３０００は、８０リットル／時間～６８０リットル／時間であるＶＲＦポンプ２５０と同等の供給流量で、ブレイクタンク３１０からＳＰＴＦＦ１膜３０１０を通って材料を送り出し始める。
【0121】
ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の動作は、動作が大きく異なるモード１又はモード２のどちらに基づいて操作されるかによって、この工程以降変化する。ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０が、より自動化されないモード１において操作される場合、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０は、最大１５キログラムのタンパク質を処理することができ、タンパク質プールタンク２１０内にあった材料を、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０である、２つの連続するＤＦプールタンク３０２０、３０３０に分割する。１５キログラムを超えるタンパク質を処理する場合、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０はモード２で動作し、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０は、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０内の処理材料の間で交互に切り替えることによって、多くのより短い透析ろ過（ＤＦ）工程を実行する。
【0122】
ここで、モード１におけるＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の動作について説明する。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、９連構成で設定される。他の実施形態において、連続は、４連、５連、６連、７連、８連、又は９連とすることができる。ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の操作には、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドを備えたＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプが使用され、２０リットル／時間～１，２００リットル／時間の動作範囲を有する。１５キログラムのタンパク質を処理する場合、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、操作上３平方メートル～２０平方メートルの間で変動する約９平方メートルの膜面積を有する。一貫した体積濃縮係数（変数）を達成するために、１０ＬＭＨ～５０ＬＭＨとすることができる一定流束が目標とされ、動作の過程で透過流束が減少した場合、供給流束を変更して一定のＶＣＦを維持することができる。例えば、開始濃度１０ｇ／Ｌで４連膜構成を用いた分子１では、８倍のＶＣＦ及び目標濃度８０グラム／リットルを達成するために供給流束２５．５ＬＭＨが目標とされた。目標濃度、流束、及び膜面積の要件は、図５Ａ、５Ｂ、及び５Ｃの分子１、２、及び３にそれぞれ示されるように、流束変動実験によって、開発における運転前に決定する必要がある。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０の膜面積は、ＶＲＦ流量と一致する比較的一定の流束を維持するために、分子特有の性質に応じて増加又は減少させ得る。膜ホルダは、Ｃｅｎｔｒａｓｔａｋ１００であり、０．９平方メートルから２０平方メートルの膜面積を収容できる。濃縮材料、又はＳＰＴＦＦ１膜３０１０の保持物は、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０から、透析ろ過に使用される最大１００リットルの単回使用の混合タンクであるＤＦプール１タンク３０２０に流出する。この間、保持物プール１ライン制御弁３０１５は開位置にあり、保持物プール２ライン制御弁３０１７及びＳＰＴＦＦ１膜保持物廃棄ライン制御弁３０１９は閉位置にある。初期精製２００からの材料をＳＰＴＦＦ１膜３０１０内で処理する途中、保持物プール１ライン制御弁３０１５が閉位置に切り替わり、保持物プール２ライン制御弁３０１７が開位置に切り替わって、ＤＦプール１タンク３０２０の負荷を停止し、ＤＦプール２タンク３０３０の負荷を開始する。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦプール２タンク３０３０は、ＤＦプール１タンク３０２０とサイズが類似又は同じである単回使用の混合タンクである。ブレイクタンク３１０が空になると、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０は、ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０及びＷＦＩ洗浄３３０の混合物である洗浄緩衝剤の膜保持容量の２倍でフラッシュされる。
【0123】
ＳＰＴＦＦ１膜３０１０の運転の途中、保持物プール１ライン制御弁３０１５が閉位置に切り替わり、保持物プール２ライン制御弁３０１７が開位置に切り替わると、ＤＦプール１タンク３０２０は透析ろ過を開始する。ＤＦプール１ポンプ３０７０は、ＤＦプール１タンク３０２０から材料の汲み出しを開始し、いくつかの例示的な実施形態によれば２平方メートルから２０平方メートルの面積を有するＤＦ膜３０９０に、８００リットル／時間～７，０００リットル／時間又は３６０ＬＭＨの目標供給流量で材料を通過させる。ＤＦ膜３０９０の操作には、ＤＦプール１ポンプ３０７０がＳＰＴＦＦ供給ポンプよりも大きいサイズのポンプであることが必要とされる。いくつかの例示的な実施形態によれば、ＤＦプール１ポンプは、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドであり、１５０リットル／時間～５，０００リットル／時間の動作範囲を有するＱＦ４４００ＳＵクアトロフロー低せん断ポンプである。ＳＰＴＦＦ１膜３０１０の面積と同様に、ＤＦ膜３０９０の面積は、分子ごとに調整することができる。膜ホルダはＣｅｎｔｒａｓｔａｋ１００であり、０．９０平方メートルから２０平方メートルを収容できる。８０グラム／リットルの流れにおいて、透析ろ過は平均１０％の変換率又は３６ＬＭＨの流束を有することが期待される。透析ろ過緩衝剤濃縮物３２０は、インラインでＷＦＩ３３０と混合され、得られた混合物は、ＤＦ膜３０９０を出る透過物の流量に自動的に一致する量で、ＤＦ透過物廃棄ライン３０９１を通ってＤＦプール１タンク３０２０に加えられる。７～１０ダイアボリューム（ＤＶ）の混合物がＤＦプール１タンク３０２０に加えられた後、材料は適切に緩衝剤交換されるべきであり、これは１以上のタンク内／インラインセンサ（図示せず）を介して検出され得る。８ＤＶの混合物を加えるためには、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦ膜３０９０を用いたこのプロセスは約３時間かかると予想される。ＤＦ膜３０９０の保持物は、ＤＦプール１保持物リサイクルライン３０９３を通ってＤＦプール１タンク３０２０にリサイクルして戻される。ＤＦ緩衝剤濃縮物３２０及びＷＦＩ３３０の混合物のＤＦプール１タンク３０２０への添加が完了し、かつ緩衝剤交換が適切に完了すると、同様のプロセスが、ＳＰＴＦＦ１膜３０１０が後半の動作を終了した後にＤＦプール２タンク３０３０で繰り返される。
【0124】
任意のＳＰＴＦＦ２膜３１００は最終目標濃度（最終的な所望の濃度は、この濃縮工程に必要な経路長／膜面積を決定する）を達成するために使用することができる。緩衝後にＤＦプール１タンク３０２０に存在する材料は、ＤＦプール１ポンプ３０７０を通って、ＳＰＴＦＦ２膜プール１供給ライン３０７６を介してＳＰＴＦＦ２膜３１００にポンプで送られる。材料がＳＰＴＦＦ２膜３１００を通って流れると、保持物の濃縮された材料は、最終ろ過及び最終処方の前に、１００リットル～５００リットルのタンクであるＵＦＤＦプールタンク３９５に流れる。ＤＦプール１タンク３０２０からの材料がＳＰＴＦＦ２膜３０９０を通って処理されると、ＳＰＴＦＦ２膜３１００を通る同様のプロセスが、ＤＦプール２タンク３０３０内に存在する材料を用いて繰り返される。ＳＰＴＦＦ２膜３１００が存在しない別の実施形態においては、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０内の緩衝材料は、それぞれのタンク３０２０、３０３０からＵＦＤＦプールタンク３９５に順次移送される。
【0125】
或いは、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０は、以下に説明するモード２で動作することができる。モード２で動作するＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一般的な動作原理は、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０がモード１で動作するときと同じであるが、ＤＦプール１タンク３０２０を完全に充填し、かつタンパク質プールタンク２１０から送られる材料を途中で切り替えてＤＦプール２タンク３０３０を充填する代わりに、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０の充填が、モード２でのＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の動作中に何度も切り替えられ、多くのより少なく充填されたＤＦプールタンク３０２０、３０３０が前後に繰り返し処理される。ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０の一方のタンクがＤＦ膜３０９０ＤＦによる透析ろ過を行い、次いで材料をＳＰＴＦＦ２膜３１００に（又は直接ＵＦＤＦプールタンク３９５に）送る間、他方のタンクが満たされる。高い頻度で切り替えられるほど、同じ時間内に処理できる材料が多くなる。このモード２では、総体積、ｐＨ、導電率、濃度、及び流量の監視及び反応を行いながら、ＤＦプール１タンク３０２０及びＤＦプール２タンク３０３０の間で流体の流れを切り替える弁（弁切り替え）の追加の自動化が必要となり得る。
【0126】
ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０を操作するために選択されたモードに応じてモード１又はモード２の動作が完了すると、一体型単回使用システム１００はその後フラッシュされ、単回使用の流路は廃棄される。
【0127】
図４は、例示的な実施形態によるモード１ ４１０又はモード２ ４５０で動作するときの一体型単回使用システムの動作時間を比較するモード１及び２の図形的な時間表現４００を示す。図４を参照すると、モード１ ４１０は最小の自動化で動作して最大１５キログラムの材料を処理し、モード２は追加の自動化で動作して最大４０キログラムの材料を処理する。モード１ ４１０は、ウイルスろ過スキッド２４０におけるウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）４１５、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一部におけるシングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）４２５、及びＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一部における透析ろ過（ＤＦ）４３５の動作を含む。ＶＲＦ４１５、ＳＰＴＦＦ４２５、及びＤＦ４３５は、一体型単回使用システム１００（図１）のプロセス全体を集合的に形成する。したがって、ＶＲＦ４１５はプロセスを開始してモード１ ４１０で完了するまでに、最大１５キログラムの材料に対して５．８時間を要する。モード１ ４１０のＳＰＴＦＦ４２５は、ＶＲＦ４１５の開始直後に開始して、完了までに６時間を要する。ＤＦ４３５はＳＰＴＦＦ４１５の中間点から開始して完了までに６時間を要し、ＤＦプール１タンク３０２０（図３）では３時間及びＤＦプール２タンク３０３０（図３）では３時間を要する。したがって、モード１ ４１０で動作する一体型単回使用システム１００（図１）のプロセス全体は、最大１５キログラムの材料の処理を完了するために１０時間未満を要し、これは臨床上の要求に対処するのに十分な量である。
【0128】
モード２ ４５０は、ウイルスろ過スキッド２４０におけるウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）４５５、ＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一部におけるシングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）４６５、及びＳＰＴＦＦ－ＤＦスキッド３４０の一部における透析ろ過（ＤＦ）４７５の動作を含む。ＶＲＦ４５５、ＳＰＴＦＦ４６５、及びＤＦ４７５は、一体型単回使用システム１００（図１）のプロセス全体を集合的に形成する。したがって、ＶＲＦ４５５はプロセスを開始してモード２ ４５０で完了するまでに、最大４０キログラムの材料に対して８．５時間を要する。モード２ ４５０のＶＲＦ４５５は、同様に処理される材料の量が増加するため、モード１ ４１０のＶＲＦ４１５よりも多くの時間を要する。モード２ ４５０のＳＰＴＦＦ４６５は、ＶＲＦ４５５の開始直後に開始して、完了までに９時間を要する。ＤＦ４７５は、ＳＰＴＦＦ４６５の開始直後に開始して、ＤＦプール１タンク３０２０（図３）及びＤＦプール２タンク３０３０（図３）それぞれ１０サイクル（各サイクルは５５分よりやや短い）を完了するまでに約９時間を要する。したがって、モード２ ４５０で動作する一体型単回使用システム１００（図１）のプロセス全体は、最大４０キログラムの材料の処理を完了するために１０時間未満を要し、これは臨床上の要求に対処し、かつ商業的な要求に対処するのに十分な量である。ＤＦ４７５がＳＰＴＦＦ４６５の開始直後に開始でき、ＤＦプール１タンク３０２０（図３）及びＤＦプール２タンク３０３０（図３）の間で短い反復サイクルで動作することから、モード２ ４５０はモード１ ４１０よりもさらに多くの材料を処理できる。
【0129】
図５Ａは、ポール４インシリーズの流束変動の体積変換係数（ＶＣＦ、分子１）のグラフ５００を示し、例示的な実施形態に基づいて、様々な開始濃度においてシングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）１膜３０１０（図３）用のポール社製４連膜を用いた、分子１の体積変換係数（ＶＣＦ）５１０対供給流束５２０を示す。本質的に、このグラフ５００から分かることは、高い開始濃度では最大潜在変換係数は減少するが、より低い流束もより大きい影響を有するということである。高濃度の材料で始める場合、流束が低いほど、より高い濃度を得ることができる。低濃度の材料で開始する場合、流束が低いほど、変換係数に対する影響が少ない。これらの実験は、所望の変換係数及び最終濃度について、与えられた分子の最適な流束を決定するために、生成物の大規模な濃縮を行う前に実施することができる。したがって、タンパク質プールタンク２１０の開始濃度（～１０グラム／リットル）において、所望の８０グラム／リットルまで濃縮するためには流束はかなり低くなければならない（～１０ＬＭＨ）。一体型単回使用システム１００（図１）又はＶＦＴＦＦシステムを所望の流束で動作させるために、９連（又は特定の実施形態においては９連未満、例えば４連以上９未満）又は９連超のＳＰＴＦＦ１膜３０１０（図３）の構成が必要となる。
【0130】
図５Ｂは、ポール９インシリーズの流束変動の体積変換係数（ＶＣＦ、分子２）のグラフ５４０を示し、例示的な実施形態に基づいて、様々な開始濃度においてＳＰＴＦＦ１膜（図３）用のポール社製９連膜を用いた分子２の体積変換係数（ＶＣＦ）５５０対供給流束５６０を示す。図５Ｂを参照すると、高い開始濃度では最大潜在変換係数は減少するが、より低い流束もより大きい影響を有することが分かる。９連のＳＰＴＦＦは、４連と同様の流束でより高い濃度を達成でき、より低速なＶＦシステムとより簡単に組み合わせることができ、ＶＦ－ＴＦＦシステムにおけるＳＰＴＦＦ配置の理想的な候補となる。１つの制限は、より高い供給濃度においては、圧力閾値によってシステムの最大供給流束がより低くなることである。追加の膜面積を用いてこれに対応できない場合、特にＤＦ工程で必要な濃度が低い場合は、代わりにより小さい（例えば、７連又は４連）システムを使用することができる。この一組の流束変動は、一体型単回使用システム１００（図１）又はＶＦＴＦＦシステムの動作範囲における供給流束が、妥当な供給流束で所望の濃縮係数を達成できることを示している。
【0131】
図５Ｃは、ポール９インシリーズの流束変動の体積変換係数（ＶＣＦ、分子３）のグラフ５７０を示し、例示的な実施形態に基づいて、様々な開始濃度においてＳＰＴＦＦ１膜（図３）用のポール社製９連膜を用いた分子３の体積変換係数（ＶＣＦ）５８０対供給流束５９０を示す。図５Ｃを参照すると、高い開始濃度では最大潜在変換係数は減少するが、より低い流束もより大きい影響を有することがわかる。９連のＳＰＴＦＦは、４連と同様の流束でより高い濃度を達成でき、より低速なＶＦシステムとより簡単に組み合わせることができ、ＶＦ－ＴＦＦシステムにおけるＳＰＴＦＦ配置の理想的な候補となる。より高いＶＦ流量が用いられるか又はより高い供給濃度である場合、特にＤＦ工程で必要とされる濃度が低い場合は、代わりにより小さい（例えば、７連又は４連）システムを使用することができる。この一組の流束変動は、一体型単回使用システム１００（図１）又はＶＦＴＦＦシステムの動作範囲における供給流束が、妥当な供給流束で所望の濃縮係数を達成できることを示している。以上を考慮すると、一体型単回使用システム１００は、生物学的生成物（例えば、タンパク質）をろ過プロセスを通じて処理するときの、リスク回避、省スペース、及び時間の節約のうちの少なくとも１つを提供する。
【0132】
リスク回避に関して、このシステムの原理の１つは、全ての材料を単一のバッチで処理できることである。ウイルスろ過を一度に行うことにより、継続的又は定期的に行う場合とは対照的に、流量や圧力の変化による操作上の問題と同様に、ウイルスのブイレイクスルーのリスクを最小限に抑えられる。また、「サブバッチ」がないため、バッチ定義に関する規制上の懸念も回避される。
【0133】
省スペースに関して、ＳＰＴＦＦ及びＶＲＦを、流量を一致させることと並行して実施することにより、ウイルスろ過材料を保持するために必要なスペースが減少し、それにより、２０リットルから１００リットルの容量を有する小さなブレイクタンクのみが必要となる。透析ろ過（ＤＦ）に必要なタンクのサイズは、また、高い初期の濃縮係数、すなわちいくつかの例示的な実施形態においては８倍を目標とすることによって最小化され、ＶＲＦプールを１０グラム／リットルから８０グラム／リットルにする。具体的な実施形態において、タンクは約３５０Ｌである。スペースの節約は、いくつかの例示的な実施形態によるらせん状インラインミキサを介して、ＤＦ緩衝剤のインライン希釈システムを用いることによっても達成される。
【0134】
具体的な実施形態において、システムはモード１で行われ、ＤＦタンクのサイズは開始タンクの少なくとも約６分の１の大きさしかない。例えば、２，０００Ｌの開始タンクに対して約３５０Ｌ×２タンクである。
【0135】
具体的な実施形態において、システムはモード２で行われ、ＤＦに必要なタンクのサイズは開始タンクの少なくとも約８、少なくとも約１０、少なくとも約１２、少なくとも約１４、少なくとも約１６、又は少なくとも約２０分の１の大きさしかない。
【0136】
時間の節約に関して、ＶＲＦをＳＰＴＦＦと並行して実行することにより、これらのプロセスは従来別々の日（ＶＲＦの実施が最初の日及びＵＦＤＦの実施が次の日）に行われることから、少なくとも１日の自動的な時間の節約となる。また、時間の節約は、２タンクＤＦシステムを用いることによっても達成される。第１のＤＦタンクが濃縮生成物で満たされた後、材料は従来のＴＦＦ膜を通して透析ろ過を開始し、一方、ＳＰＴＦＦプロセスは第２のＤＦタンクの充填を継続する。第１のＤＦタンクが終了し（材料が透析ろ過されて空になる）、第２のタンクが充填されると、第２のＤＦタンクは透析ろ過を開始する。このプロセスにより、モード２で運転している場合、１２時間以内に運転を完了するためにＵＦ／ＤＦ時間をほぼ半分に短縮できる（図４）。
【0137】
別の利点は、このシステムは、任意の時点におけるポンプに対する要求を低減し、より小さいポンプシステムとすることができ、それによってコストを削減できることである。さらに、単回使用の流路を使用することにより、運転完了後のシステムの洗浄に必要な時間及び資源が低減される。
ＩＩＩ．方法
ＩＩＩ．方法
【0138】
本明細書において、また、一体型の連続したやり方で生物学的生成物（例えば、タンパク質）をろ過及び濃縮／緩衝剤交換することによってウイルスを除去する方法が開示される。
【0139】
一実施形態において、この方法は、（ｉ）溶液中の生物学的生成物を提供すること；及び（ｉｉ）溶液を、（ａ）ウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）、（ｂ）シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）による濃縮、（ｃ）透析ろ過（ＤＦ）による緩衝剤交換、及び（ｄ）任意で、ＳＰＴＦＦによる第２の濃縮に供すること、を含む。
【0140】
上述のように、バイオ医薬品での使用を意図した生物学的生成物を含む組成物中に存在し得るウイルスのろ過は、品質管理の重要な側面である。生物学的生成物は、数ある物質の中でも、例えば、タンパク質、核酸、炭水化物、脂質、又は生体材料であり得る。タンパク質は、例えば、とりわけ、抗体、抗体フラグメント、抗体誘導体、サイトカイン、成長因子、ホルモン、酵素、若しくは血液凝固因子等の治療用タンパク質、又は、とりわけ、抗原タンパク質等のワクチンタンパク質であり得る。生物学的生成物は、細胞、組織、又は生物体等の生物系によって、とりわけ、哺乳類細胞、植物細胞、又は細菌細胞等によって生成され得る。生物学的生成物は、撹拌タンクバイオリアクタ、エアリフトバイオリアクタ、若しくはウェーブバイオリアクタの使用に基づく懸濁培養等の均一プロセス、又はマイクロキャリアベースのシステム、充填床バイオリアクタ、若しくは中空糸バイオリアクタに基づく付着培養等の不均一プロセスによって、バッチ培養若しくは流加培養等の不連続モード、又は灌流を伴う連続培養等の連続モードで実行され、かつ、実験室、パイロット、若しくは生産規模等の任意の適切な規模で実行されることにより生成することができる。ウイルスは、細菌（すなわち、「ファージ」とも呼ばれる「バクテリオファージ」）、又は、とりわけ、生物学的生成物の投与が意図される、個々のヒト又は動物等のヒト及び／又は動物に感染し得るウイルスであってもよい。ウイルスは、無菌状態の維持に不注意に失敗したこと等による外因性供給源から、又は生物学的生成物を作るために使用された生物系等の内因性供給源から、生物学的生成物を含む組成物に導入された可能性がある。
【0141】
本発明の方法は、生物学的生成物の製造中に、例えばウイルス汚染に基づいて存在した可能性があるウイルスを、確実に除去又は排除するために使用することができる。複数の異なる種類のウイルス及び／又は既定の種類のウイルスの複数の活性粒子が存在する可能性がある限り、本発明の方法を用いて、複数の異なる種類及び／又は既定の種類の複数の活性粒子を除去することができる。したがって、例えば、本発明の方法は、最終的に生物学的生成物を含むバイオ医薬品が、任意の種類のウイルスの活性粒子を、許容限界を超えるいかなる量も含まないこと、例えばバイオ医薬品がウイルスの活性粒子を含まないこと、を保証するために使用することができる。
【0142】
特定の実施形態において、本発明の方法は、１２時間未満（非稼働時の設定及び分解時間を含む）の単回バッチにおけるウイルスろ過、濃縮、及び透析ろ過を含む。一実施形態において、本発明の方法は、１２時間未満、１１時間未満、１０時間未満、９時間未満、８時間未満、７時間未満、６時間未満、又は５時間以下を要する。
【0143】
一実施形態において、（ｉ）溶液中の生物学的生成物の提供は、５００～２，０００Ｌの単回使用ミキサ（ＳＵＭ）又は貯蔵タンクに約１０ｇ／Ｌ（５～１５ｇ／Ｌ）で保管された約５～約４０ｋｇの精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を提供することを含む。
【0144】
一実施形態において、（ｉｉ）溶液を、（ａ）ウイルス低減ろ過（ＶＲＦ）に供することは、材料がプレフィルタを通ってＶＲＦ膜（Ｐｌａｎｏｖａ ＢｉｏＥＸ）まで、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドを備えたＱＦ１２００ＳＵ Ｑｕａｔｔｒｏｆｌｏｗ低せん断ポンプ（動作範囲２０～１，２００Ｌ／ｈｒ）を用いて、約８０～約６８０Ｌ／ｈｒの供給流量で至ることを含む。０.９～８ｍ2のＶＲＦ膜を使用し、６４ＬＭＨ（最大１５０ＬＭＨ）の目標流束で３８５Ｌ／ｍ2（最大６００Ｌ／ｍ2）の容量まで負荷する。このプロセスは６時間、又は全ての開始材料が処理されるまで連続して行われる。全ての供給材料が負荷された後、膜は１０Ｌ／ｍ2の洗浄緩衝剤でフラッシュされる。
【0145】
流れは、最終精製において２０～１００Ｌのブレイクタンクまで続く。ブレイクタンクが充填を開始すると、第２のスキッド上のＳＰＴＦＦポンプがＶＲＦ供給ポンプと同等の供給流量（８０～６８０Ｌ／ｈｒ）でＳＰＴＦＦ膜を通して材料を送り出し始める。
【0146】
（ｂ）シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）による濃縮の方法は異なっていてもよい。すなわち、ＳＰＴＦＦ－ＤＦは操作モードに応じて動作が異なる。あまり自動化されていないモード１において操作する場合、最大１５ｋｇを処理でき、ＶＲＦプールを２つの連続したＤＦプールに分割する。１５ｋｇを超える量をモード２で処理する場合、ＤＦプール１及びＤＦプール２の間で交互に切り替えながら、多くのより短いＤＦ工程を実行する。
【0147】
モード１：ＳＰＴＦＦ膜は、４～９連構成で設定される。ＳＰＴＦＦの操作には、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドを備えたＱＦ１２００ＳＵクアトロフロー低せん断ポンプ（動作範囲２０～１，２００Ｌ／ｈｒ）が使用される。目標濃度及び流束は、図１と同様の流束変動実験によって、開発運転前に決定する必要がある。膜面積は、比較的一定の流束を維持するために、分子特有の性質に応じて増加又は減少させ得る。膜ホルダはＣｅｎｔｒａｓｔａｋ １００であり、０．９～２０ｍ2を収容できる。濃縮された材料はＳＰＴＦＦから流出し、透析ろ過のために２つの１００Ｌの単回使用の混合タンクのうちの第１のタンクに流れる。ＶＲＦからの材料を処理する途中、ＳＰＴＦＦの出口にある弁が切り替わり、第２の１００Ｌの単回使用の混合タンクへの負荷が開始される。ブレイクタンクが空になった後、膜は膜保持容量の２倍の洗浄緩衝剤によりフラッシュされる。
【0148】
ＳＰＴＦＦ操作の途中、ＳＰＴＦＦの出口弁が第２の１００Ｌのタンクに切り替わると、第１のタンクは透析ろ過を開始する。ポンプは、材料を０．９～２０ｍ2のＴＦＦ膜上に目標供給流量８００～７，０００Ｌ／ｈｒ又は３６０ＬＭＨで通過させ始める。ＤＦ操作には、流路に組み込まれた単回使用のポンプヘッドを備えたより大きいＱＦ４４００ＳＵクアトロフロー低せん断ポンプ（動作範囲１５０～５，０００Ｌ／ｈｒ）が必要とされる。ＳＰＴＦＦの操作と同様に、ＤＦ操作の膜面積は分子ごとに調整することができる。膜ホルダはＣｅｎｔｒａｓｔａｋ１００であり、０．９～２０ｍ2を収容できる。８０ｇ／Ｌの透析ろ過では、平均１０％の変換率（３６ＬＭＨの流束）を有することが予想される。透析ろ過の緩衝剤濃縮物は、インラインで水と混合され、透過物の流量に自動的に一致する量で混合タンクに加えられる。５～１０ダイアボリューム（ＤＶ）の後、材料は適切に緩衝剤交換される必要がある（タンク内／インラインセンサにより検出）。８ＤＶについては、このプロセスは約３時間かかると予想される。ＳＰＴＦＦプロセスが終了した後、このプロセスは第２の透析ろ過タンクで繰り返される。
【0149】
任意の第２のＳＰＴＦＦ膜をＵＦ２に使用して、最終目標濃度（最終的な所望の濃度は、この濃縮工程に必要な経路長を決定する）を達成することができる。この濃縮された材料は、最終ろ過及び最終処方の前に、最終の２００～５００Ｌのプールに送られる。
【0150】
モード２：一般的な動作原理は同一であるが、ＤＦプールを完全に充填してＶＲＦプールの途中で切り替える代わりに、ＤＦプールは、多くのより小さなＤＦプールの動作中に何度も切り替えられる。一方のタンクがＤＦを行い、次いで材料を第２のＳＰＴＦＦに（又は直接最終プールに）送る間、他方のタンクが充填される。切り替え頻度が高くなるほど、同じ時間内に処理できる材料が多くなる。
【0151】
システムはその後フラッシュされ、単回使用の流路は廃棄される。本明細書に開示されるシステム及び方法は、目的のあらゆる生物学的生成物（例えば、タンパク質）を含む水性製剤を提供するために使用され得る。
【0152】
本発明の方法は、システムに関して上述した利点、すなわち、ろ過プロセスを通じて生物学的生成物（例えば、タンパク質）を処理するときの、リスク回避、省スペース、及び時間の節約を提供する。
【0153】
当該技術分野において既知の、目的の生物学的生成物を製造又は生成する方法は、本明細書に記載される流体供給物をろ過するシステム及び方法と組み合わせて用いることができる。例えば、当業者は、組換えタンパク質等の生物学的生成物を発酵を用いて製造又は生成する方法を知っている。特定の実施形態において、目的の生物学的生成物の生成は、細胞培養において目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養することを含む。細胞培養において目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養することは、増殖及び／又はタンパク質の生成／発現を可能にする適切な培地及び条件下で真核細胞を維持することを含み得る。目的の生物学的生成物は、流加又は連続細胞培養によって生成され得る。したがって、真核細胞は流加又は連続細胞培養で、好ましくは連続細胞培養で培養され得る。
【0154】
特定の実施形態において、真核宿主細胞は酵母細胞である。一実施形態において、真核宿主細胞は哺乳類細胞である。本明細書で使用される哺乳類細胞は、分泌された組換え治療用タンパク質の生成に適した哺乳類細胞株であり、したがって「宿主細胞」とも呼ばれる。特定の実施形態において、哺乳類細胞は、ハムスター細胞等のげっ歯類細胞である。哺乳類細胞は、分離された細胞又は細胞株である。特定の実施形態において、哺乳類細胞は、形質転換及び／又は不死化細胞株である。特定の実施形態において、哺乳類細胞は、細胞培養における連続継代に適応しており、初代非形質転換細胞又は器官構造の一部である細胞を含まない。特定の実施形態において、哺乳類細胞は、ＢＨＫ２１、ＢＨＫ ＴＫ－、ジャーカット細胞、２９３細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＶ－１細胞、３Ｔ３細胞、ＣＨＯ、ＣＨＯ－Ｋ１、ＣＨＯ－ＤＸＢ１１（ＣＨＯ－ＤＵＫＸ又はＤｕｘＢ１１とも呼ばれる）、ＣＨＯ－Ｓ細胞及びＣＨＯ－ＤＧ４４細胞、又はそのような細胞株のいずれかの誘導体／子孫である。特定の実施形態において、哺乳類細胞は、ＣＨＯ細胞、例えば、ＣＨＯ－ＤＧ４４、ＣＨＯ－Ｋ１、及びＢＨＫ２１であり、さらにより好ましくは、ＣＨＯ－ＤＧ４４細胞及びＣＨＯ－Ｋ１細胞である。特定の実施形態において、哺乳類細胞はＣＨＯ－ＤＧ４４細胞である。哺乳類細胞、特にＣＨＯ－ＤＧ４４細胞及びＣＨＯ－Ｋ１細胞のグルタミンシンセターゼ（ＧＳ）欠損誘導体も包含される。一実施形態において、哺乳類細胞はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、例えばＣＨＯ－ＤＧ４４細胞、ＣＨＯ－Ｋ１細胞、ＣＨＯ ＤＸＢ１１細胞、ＣＨＯ－Ｓ細胞、ＣＨＯ ＧＳ欠損細胞又はそれらの誘導体である。
【0155】
特定の実施形態において、宿主細胞は、治療用タンパク質、例えば組換え分泌治療用タンパク質等の異種タンパク質をコードする１以上の発現カセットをさらに含み得る。特定の実施形態において、宿主細胞は、また、ＮＳ０及びＳｐ２／０細胞といったマウス骨髄腫細胞等のマウス細胞、又はそのような細胞株のいずれかの誘導体／子孫であってもよい。
【0156】
目的の生物学的生成物又は組換えタンパク質の発現は、目的の生物学的生成物又は組換えタンパク質をコードするＤＮＡ配列を含む細胞内で起こり、これが転写され、翻訳後修飾を含むタンパク質配列に翻訳されて、細胞培養中の目的の生物学的生成物又は組換えタンパク質を生成する。
【0157】
本明細書において、目的の生物学的生成物の製造方法が開示され、前記方法は、
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む。
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む。
【0158】
本明細書において、目的の生物学的生成物の製造方法が開示され、前記方法は、
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流（又は流体供給物）を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む。
（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法は、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流（又は流体供給物）を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む。
【0159】
特定の実施形態において、目的の生物学的生成物は組換えタンパク質である。特定の実施形態において、細胞培養において目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する工程は流加細胞培養で行われる。特定の実施形態において、細胞培養において目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する工程は連続細胞培養で行われる。
【0160】
本発明を特定の実施形態を参照して説明してきたが、これらの説明は限定的な意味で解釈されることを意図したものではない。開示された実施形態の様々な修正、及び本発明の代替の実施形態は、本発明の説明を参照して当業者に明らかになるであろう。開示された概念及び特定の実施形態は、本発明と同じ目的を実行するための他の構造又は方法を修正又は設計するための基礎として容易に利用できることが当業者に理解されるはずである。また、そのような同等な構造が、付属の特許請求の範囲に記載される本発明の精神及び範囲から逸脱しないことも、当業者に理解されるべきである。したがって、特許請求の範囲は、本発明の範囲に含まれるそのようなあらゆる修正又は実施形態を網羅するものと考えられる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【手続補正書】
【提出日】2023-11-24
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムであって、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む前記単回使用システム。
【請求項2】
処理が、ろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を含む、請求項１に記載の単回使用システム。
【請求項3】
前記生物学的生成物がタンパク質である、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項4】
前記生物学的生成物がモノクローナル抗体である、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項5】
前記ウイルスろ過ユニット操作が、ポンプ、少なくとも１つのプレフィルタ、及び１以上のウイルス低減ろ過膜を含む、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項6】
前記ＳＰＴＦＦ－ＤＦユニット操作が、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、ポンプ、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項7】
さらに前記ウイルスろ過ユニット操作に連結された供給物貯蔵槽を含む、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項8】
前記供給物貯蔵槽が精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体を５～２０ｇ／Ｌの濃度で保持する、請求項７に記載の単回使用システム。
【請求項9】
前記供給物貯蔵槽が精製及びポリッシュされたモノクローナル抗体を８～１２ｇ／Ｌの濃度で保持する、請求項７に記載の単回使用システム。
【請求項10】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、８時間の時間枠内に行う、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項11】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、２４時間以下の時間内に行う、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項12】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、１２時間以下の時間内に行う、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項13】
前記システムが、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、８時間以下の時間内に行う、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項14】
前記システムが、前記生物学的生成物の濃度を１０倍に増加させる処理が可能である、請求項１又は２に記載の単回使用システム。
【請求項15】
処理された生物学的生成物を提供するための一体型の連続的方法であって、ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含み、
前記工程ｂ）～ｄ）は、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作により行われる前記方法。
【請求項16】
前記ウイルスろ過ユニット操作が、ポンプ、少なくとも１つのプレフィルタ、及び１以上のウイルス低減ろ過膜を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
前記ＳＰＴＦＦ－ＤＦユニット操作が、１以上のＳＰＴＦＦ膜、ＤＦ混合タンク、ＤＦ膜、センサ、ポンプ、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項18】
前記初期の生物学的生成物がタンパク質である、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項19】
前記初期の生物学的生成物がモノクローナル抗体である、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項20】
前記方法が、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、従来の方法と比較して５０％短縮された時間枠内に行う、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項21】
前記方法が、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、２４時間以下の時間内に行う、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項22】
前記方法が、一体型の連続したウイルスろ過、濃縮、及び緩衝剤交換を、１２時間以下の時間内に行う、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項23】
前記方法が、前記初期の生物学的生成物の濃度を１０倍に増加させる処理を行う、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項24】
目的の生物学的生成物の製造方法であって、（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法の工程ＩＶは、さらに、前記流体供給物を、初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための単回使用システムに通過させる工程を含み、
初期の生物学的生成物の一体型連続処理のための前記単回使用システムは、シングルパス・タンジェンシャルフローろ過（ＳＰＴＦＦ）及び透析ろ過（ＤＦ）ユニット操作に連結されたウイルスろ過ユニット操作を含む、前記製造方法。
【請求項25】
前記目的の生物学的生成物が組換えタンパク質である、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が流加細胞培養で行われる、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項27】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が連続細胞培養で行われる、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項28】
目的の生物学的生成物の製造方法であって、（Ｉ）細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養すること；
（ＩＩ）前記目的の生物学的生成物を、前記細胞培養から、目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む流体供給物の形態で採取すること；
（ＩＩＩ）目的の生物学的生成物及び１以上の不純物若しくは緩衝剤成分を含む前記流体供給物を精製して、前記流体供給物から、前記目的の生物学的生成物を分離すること；及び
（ＩＶ）任意で、前記目的の生物学的生成物を、投与に適した薬学的に許容可能な製剤に処方すること；の工程を含み、
前記方法の工程ＩＶは、さらに、
ａ）初期の生物学的生成物を含む供給流を提供すること；
ｂ）前記供給流をろ過してウイルス性汚染物質を除去すること；
ｃ）前記初期の生物学的生成物を濃縮すること；及び
ｄ）緩衝剤交換を行って、処理された生物学的生成物を生成すること、を含む前記製造方法。
【請求項29】
前記目的の生物学的生成物が組換えタンパク質である、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が流加細胞培養で行われる、請求項２８又は２９に記載の方法。
【請求項31】
細胞培養において前記目的の生物学的生成物を発現する真核細胞を培養する前記工程が連続細胞培養で行われる、請求項２８又は２９に記載の方法。
【国際調査報告】