特表 2024-520500 アニデュラファンギン誘導体の調製方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-05-24

(54)【発明の名称】アニデュラファンギン誘導体の調製方法

(51)【国際特許分類】

   C07K 7/54 20060101AFI20240517BHJP

   C07D 207/08 20060101ALI20240517BHJP

   A61P 31/10 20060101ALI20240517BHJP

   A61K 38/12 20060101ALI20240517BHJP

【ＦＩ】

C07K7/54

C07D207/08 CSP

A61P31/10

A61K38/12

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023573153

(86)(22)【出願日】2022-06-02

(85)【翻訳文提出日】2023-11-24

(86)【国際出願番号】 CN2022096760

(87)【国際公開番号】W WO2022253297

(87)【国際公開日】2022-12-08

(31)【優先権主張番号】202110617888.3

(32)【優先日】2021-06-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523238368

【氏名又は名称】上海森▲輝▼医▲葯▼有限公司

(71)【出願人】

【識別番号】523236560

【氏名又は名称】上海盛迪医▲葯▼有限公司

(71)【出願人】

【識別番号】519352757

【氏名又は名称】江▲蘇▼恒瑞医▲薬▼股▲フン▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＪＩＡＮＧＳＵ ＨＥＮＧＲＵＩ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＣＯ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】ＮＯ．７ ＫＵＮＬＵＮＳＨＡＮ ＲＯＡＤ， ＥＣＯＮＯＭＩＣ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＣＡＬ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＺＯＮＥ， ＬＩＡＮＹＵＮＧＡＮＧ， ＪＩＡＮＧＳＵ ２２２０４７， ＣＨＩＮＡ

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】姜 威

(72)【発明者】

【氏名】黄 建

(72)【発明者】

【氏名】胡 ▲軍▼▲強▼

(72)【発明者】

【氏名】曹 ▲維▼▲湊▼

(72)【発明者】

【氏名】周 益南

【テーマコード（参考）】

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA01

4C084AA06

4C084BA01

4C084BA17

4C084BA24

4C084CA59

4C084MA16

4C084MA66

4C084NA14

4C084NA20

4C084ZB35

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA14

4H045BA35

4H045EA29

4H045FA20

(57)【要約】

本開示は、アニデュラファンギン誘導体の調製方法に関する。具体的には、本開示は式（Ｉ）で示されるアニデュラファンギン誘導体の調製方法及びその中間体に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）で示されるアニデュラファンギン誘導体を調製する方法であって、アニデュラファンギンを式（ＩＩ）の化合物と反応させて下記の生成物を得るステップを含むことを特徴とする方法：

【化1】

。

【請求項2】

当該反応は、酸Ａ１とＡ２の存在下で行われ、前記酸Ａ１はフェニルボロン酸又は３，４－ジメトキシフェニルボロン酸であり、好ましくは３，４－ジメトキシフェニルボロン酸であり、前記酸Ａ２はｐ－トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸又はトリフルオロ酢酸であり、好ましくはカンファースルホン酸又はトリフルオロ酢酸であり、好ましくはトリフルオロ酢酸であることを特徴とする請求項１に記載の方法。

【請求項3】

当該反応は溶媒Ｓ１において行われ、前記溶媒Ｓ１は無水ジオキサン又はアセトニトリルであり、好ましくはアセトニトリルであることを特徴とする請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：１～５０、好ましくは１：１～３０、好ましくは１：１～１０、好ましくは１：１～６、好ましくは１：３０又は１：６であることを特徴とする請求項１～３の何れか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記アニデュラファンギンと酸Ａ１のモル比は１：１～１０、好ましくは１：１～５、好ましくは１：１～２、好ましくは１：１．３であることを特徴とする請求項２～４の何れか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記アニデュラファンギンと酸Ａ２のモル比は１：１～１０、好ましくは１：１～５、好ましくは１：５であり、又は前記アニデュラファンギンと酸Ａ２の重量体積比は、ｇ／ｍＬで、１：１～５、好ましくは１：１～２．５、好ましくは１：２．５であることを特徴とする請求項２～５の何れか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記反応温度は０～５０℃、好ましくは１０～４０℃、好ましくは２０～３０℃、好ましくは常温であることを特徴とする請求項１～６の何れか一項に記載の方法。

【請求項8】

Ｎ－メチルプロリノールをｐ－トルエンスルホン酸メチルと反応させて下記の生成物を得るステップを更に含むことを特徴とする請求項１～７の何れか一項に記載の方法：

【化2】

。

【請求項9】

前記Ｎ－メチルプロリノールとｐ－トルエンスルホン酸メチルのモル比は１：１～５、好ましくは１：１～３、好ましくは１：１であることを特徴とする請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応は溶媒Ｓ３において行われ、前記溶媒Ｓ３はアセトンであることを特徴とする請求項８又は９に記載の方法。

【請求項11】

前記の式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は０～８０℃、好ましくは１０～７０℃、好ましくは２０～６０℃、好ましくは３０～６０℃、好ましくは４０～６０℃、好ましくは５０～６０℃であることを特徴とする請求項８～１０の何れか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記式（ＩＩ）の化合物は

【化3】

であり、式（Ｉ）の化合物は

【化4】

であることを特徴とする請求項１～１１の何れか一項に記載の方法。

【請求項13】

式（ＩＩ）で示される中間体化合物：

【化5】

。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、医薬化学分野に属し、アニデュラファンギン誘導体の調製方法に関し、具体的には、式（Ｉ）で示される化合物の調製方法を提供する。

【背景技術】

【0002】

抗真菌治療レジメンの開発は、現代社会が直面している継続的なチャレンジになっている。現在、真菌感染症を治療するために利用可能な薬剤は、真菌膜ステロールと相互作用するマクロライドポリエンであるアムホテリシンＢと、真菌タンパク質及びＤＮＡ生合成と相互作用するフルオロピリミジンであるフルシトシンと、真菌膜－ステロール生合成を阻害する複数種のアゾール系抗真菌薬（例えば、ケトコナゾール、イトラコナゾール及びフルコナゾール）（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｒｕｇｓ， ５４：６５７， １９９７）とを含む。アムホテリシンＢは広範囲の活性を有し、抗真菌療法の「ゴールドスタンダード」と見なされるが、その適用は注入関連反応及び腎毒性により制限されているる（Ｗａｒｎｏｃｋ， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１：９５， １９９８）。薬剤耐性微生物の発達及びその狭い活性スペクトルのために、フルシトシンの使用も制限されている。アゾール系抗真菌薬の広範な使用により、カンジダ菌種（Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ）の臨床的薬剤耐性株の出現が引き起こされている。

【0003】

エキノカンジン系薬剤は、全く新規な抗真菌薬であり、通常、環状ヘキサペプチドと、アミド結合によりヘキサペプチドコアに結合される親油性尾部とを含む。このような薬剤は、β－１，３－グルコース合成酵素を非競合的に阻害し、真菌細胞壁β－１，３－グルコースの合成に干渉することにより、真菌細胞壁の透過性を変化させ、細胞を溶解して死滅させる。ヒト細胞に細胞壁が含まれないが、真菌細胞に細胞壁が含まれ、エキノカンジン系抗真菌薬が真菌細胞壁成分に直接作用することができるため、このような薬剤は、人体に対する毒性が低く、これまで安全性が最も高い抗真菌薬である。

【0004】

現在、市販されているこのような薬剤は、カスポファンギン、ミカファンギン、アニデュラファンギンを含む。カスポファンギン（ｃａｓｐｏｆｕｎｇｉｎ）は、最初のエキノカンジン系抗真菌薬であり、米国のメソスケールディスカバリー（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）によって研究開発され、２００４年に米国ＦＤＡにより真菌感染症を治療するために販売承認され、２００８年に子供のカンジダ感染症を治療するために承認された。ミカファンギン（Ｍｙｃａｍｉｎｅ）は、２００２年に日本で市販され、新規な半合成抗真菌薬である。アニデュラファンギン（ａｎｉｄｕｌａｆｕｎｇｉｎ）は、２００６年に市販され、第３世代のエキノカンジン系の半合成抗真菌薬である。

【0005】

出願ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１３３８１５は、下記の式（Ｉ）で示されるアニデュラファンギン誘導体を提供し、当該化合物は、強い抗真菌活性を有することが既に発見された。

【0006】

【化1】

。

【発明の概要】

【0007】

本開示は、式（Ｉ）で示される化合物の調製方法を提供し、それは、アニデュラファンギンを式（ＩＩ）の化合物と反応させて下記の生成物を得るステップを含む：

【化2】

。

【0008】

幾つかの実施形態において、当該反応は、酸Ａ１とＡ２の存在下で行われる。

【0009】

幾つかの実施形態において、上記酸Ａ１は、フェニルボロン酸又は３，４－ジメトキシフェニルボロン酸である。

【0010】

幾つかの実施形態において、上記酸Ａ１は、３，４－ジメトキシフェニルボロン酸である。

【0011】

幾つかの実施形態において、上記酸Ａ２は、ｐ－トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸又はトリフルオロ酢酸である。

【0012】

幾つかの実施形態において、上記酸Ａ２は、カンファースルホン酸又はトリフルオロ酢酸である。

【0013】

幾つかの実施形態において、上記酸Ａ２はトリフルオロ酢酸である。

【0014】

幾つかの実施形態において、当該反応は溶媒Ｓ１において行われる。

【0015】

幾つかの実施形態において、上記溶媒Ｓ１は無水ジオキサン又はアセトニトリルである。

【0016】

幾つかの実施形態において、上記溶媒Ｓ１はアセトニトリルである。

【0017】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：１～５０である。

【0018】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：１～３０である。

【0019】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：１～１０である。

【0020】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：１～６である。

【0021】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：３０である。

【0022】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと式（ＩＩ）の化合物のモル比は１：６である。

【0023】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ１のモル比は１：１～１０である。

【0024】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ１のモル比は１：１～５である。

【0025】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ１のモル比は１：１～２である。

【0026】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ１のモル比は１：１．３である。

【0027】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２のモル比は１：１～１０である。

【0028】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２のモル比は１：１～５である。

【0029】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２のモル比は１：５である。

【0030】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２の重量体積比は、ｇ／ｍＬで、１：１～５である。

【0031】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２の重量体積比は、ｇ／ｍＬで、１：１～２．５である。

【0032】

幾つかの実施形態において、上記アニデュラファンギンと酸Ａ２の重量体積比は、ｇ／ｍＬで、１：２．５である。

【0033】

幾つかの実施形態において、上記反応温度は０～５０℃である。

【0034】

幾つかの実施形態において、上記反応温度は１０～４０℃である。

【0035】

幾つかの実施形態において、上記反応温度は２０～３０℃である。

【0036】

幾つかの実施形態において、上記反応温度は常温である。

【0037】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、アニデュラファンギン及び酸Ａ１を溶媒Ｓ２に溶け、常温で撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、式（ＩＩ）の化合物、酸Ａ２及び溶媒Ｓ１を加え、窒素保護下、常温で撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えて反応をクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣで精製して生成物を得ることである。

【0038】

幾つかの実施形態において、上記溶媒Ｓ２はＴＨＦである。

【0039】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、１ ｅｑのアニデュラファンギンと２ ｅｑのフェニルボロン酸をＴＨＦに溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、６ ｅｑの式（ＩＩ）の化合物、５ ｅｑのカンファースルホン酸、無水ジオキサンを加え、窒素保護下、常温で一晩撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えて反応をクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣで精製して生成物を得ることである。

【0040】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、１ ｅｑのアニデュラファンギンと１．３ ｅｑの３，４－ジメトキシフェニルボロン酸をＴＨＦに溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、３０ ｅｑの式（ＩＩ）の化合物、２．５体積重量比のトリフルオロ酢酸、アセトニトリルを加え、窒素保護下、常温で３時間撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えて反応をクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣで精製して生成物を得ることであり、ここで、体積重量比はトリフルオロ酢酸とアニデュラファンギンの体積重量比であり、ｍＬ／ｇで計算される。

【0041】

幾つかの実施形態において、上記調製方法は、Ｎ－メチルプロリノールをｐ－トルエンスルホン酸メチルと反応させて下記の生成物を得ることを更に含む：

【化3】

。

【0042】

幾つかの実施形態において、上記Ｎ－メチルプロリノールとｐ－トルエンスルホン酸メチルのモル比は１：１～５である。

【0043】

幾つかの実施形態において、上記Ｎ－メチルプロリノールとｐ－トルエンスルホン酸メチルのモル比は１：１～３である。

【0044】

幾つかの実施形態において、上記Ｎ－メチルプロリノールとｐ－トルエンスルホン酸メチルのモル比は１：１である。

【0045】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応は、溶媒Ｓ３において行われる。

【0046】

幾つかの実施形態において、上記溶媒Ｓ３はアセトンである。

【0047】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は０～８０℃である。

【0048】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は１０～７０℃である。

【0049】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は２０～６０℃である。

【0050】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は３０～６０℃である。

【0051】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は４０～６０℃である。

【0052】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物を調製する反応の温度は５０～６０℃である。

【0053】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、Ｎ－メチルプロリノールを溶媒Ｓ３に溶け、ｐ－トルエンスルホン酸メチルを徐々に加え、反応を加熱しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して生成物を得ることである。

【0054】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、Ｎ－メチルプロリノールをアセトンに溶け、ｐ－トルエンスルホン酸メチルを徐々に加え、反応を加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して生成物を得ることである。

【0055】

幾つかの実施形態において、上記の当該反応の具体的なステップは、１ ｅｑのＮ－メチルプロリノールをアセトンに溶け、１ ｅｑのｐ－トルエンスルホン酸メチルを徐々に加え、反応を加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して生成物を得ることである。

【0056】

幾つかの実施形態において、上記方法は、１ ｅｑのＮ－メチルプロリノールをアセトンに溶け、１ ｅｑのｐ－トルエンスルホン酸メチルを徐々に加え、反応を加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して式（ＩＩ）の化合物を得るステップと、
１ ｅｑのアニデュラファンギンと２ ｅｑのフェニルボロン酸をＴＨＦに溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、６ ｅｑの式（ＩＩ）の化合物、５ ｅｑのカンファースルホン酸及び無水ジオキサンを加え、窒素保護下、常温で一晩撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えて反応をクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣで精製して式（Ｉ）で示されるアニデュラファンギン誘導体を得るステップと、を含む。

【0057】

幾つかの実施形態において、上記方法は、１ ｅｑのＮ－メチルプロリノールをアセトンに溶け、１ ｅｑのｐ－トルエンスルホン酸メチルを徐々に加え、反応を加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して式（ＩＩ）の化合物を得るステップと、
１ ｅｑのアニデュラファンギンと１．３ ｅｑの３，４－ジメトキシフェニルボロン酸をＴＨＦに溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、３０ ｅｑの式（ＩＩ）の化合物、２．５体積重量比のトリフルオロ酢酸とアセトニトリルを加え、窒素保護下、常温で３時間撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えて反応をクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣで精製して式（Ｉ）で示されるアニデュラファンギン誘導体を得るステップであって、ここで、体積重量比はトリフルオロ酢酸とアニデュラファンギンの体積重量比であり、ｍＬ／ｇで計算されるステップと、を含む。

【0058】

幾つかの実施形態において、上記式（ＩＩ）の化合物は

【化4】

であり、式（Ｉ）の化合物は

【化5】

である。

【0059】

本開示は、式（ＩＩ）で示される中間体化合物を更に提供する：

【化6】

。

【図面の簡単な説明】

【0060】

【図1】化合物を静脈内投与した後のヒスタミン濃度の変化である。

【図2】化合物を静脈内投与してから３０ ｍｉｎ後のヒスタミン濃度の比較である。

【発明を実施するための形態】

【0061】

以下、実施例と合わせて本発明を更に説明するが、これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものではない。

【0062】

本発明の実施例において具体的な条件が明記されていない実験方法は一般的に、通常の条件に従うか、又は原料若しくは商品メーカーにより推薦された条件に従う。具体的な供給源が明示されていない試薬は、市販される通常の試薬である。

【0063】

アニデュラファンギン及びカスポファンギンは、何れも台州市科徳化工から購入された。Ｒｅｚａｆｕｎｇｉｎは、ＣＮ１０３８８９２２１Ａに基づいて合成された。

【0064】

ＨＰＬＣ純度分析方法：カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｘｔｉｍａｔｅ Ｃ１８（３ μｍ、４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ）、移動相：０．０５％ＴＦＡの水溶液／０．０５％ＴＦＡのＡＣＮ溶液、検出波長：ＵＶ ２１４ ｎｍ。

【0065】

化合物の構造は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）又は／及び質量分析（ＭＳ）によって確定される。ＮＭＲシフト（δ）は、１０^－６（ｐｐｍ）の単位で示される。ＮＭＲの測定には、核磁気共鳴装置Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ－４００が使用され、測定溶媒が重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ－ｄ_６）、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ_３）及び重水素化メタノール（ＣＤ_３ＯＤ）であり、内部標準がテトラメチルシラン（ＴＭＳ）である。

【0066】

実施例における反応進行の監視には、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）が使用され、反応に使用された展開溶媒、化合物を精製するためのカラムクロマトグラフィーの溶離剤系及び薄層クロマトグラフィーの展開溶媒系は、Ａ：ジクロロメタン／メタノール系、Ｂ：ｎ－ヘキサン／酢酸エチル系、Ｃ：石油エーテル／酢酸エチル系、Ｄ：石油エーテル／酢酸エチル／メタノールを含み、溶媒の体積比は化合物の極性によって調整し、少量のトリエチルアミン及び酢酸などの塩基性又は酸性試薬を加えて調整してもよい。

【0067】

高分解能質量分析方法：クロマトグラフィーカラム：Ｗａｔｅｒｓ ＢＥＨ Ｃ１８ １．７ Ｕ ２．１ ｍｍ×５０ ｍｍ、移動相：０．１％ＦＡの水溶液／０．１％ＦＡのアセトニトリル溶液。

【0068】

常温は２５℃である。

【0069】

実施例１

【化7】

Ｎ－メチル－Ｄ－プロリノール（３．００ ｇ、２６．０５ ｍｍｏｌ）を３０ ｍＬのアセトンに溶け、ｐ－トルエンスルホン酸メチル（４．８５ ｇ、１．０ ｅｑ．）を徐々に加え、４時間加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して白い固体である式（ＩＩ）の化合物７．３３ ｇを得て、収率が９３．４％であった。Ｍｓ： １３０．０［Ｍ ^＋］。
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ－ｄ_４） δ ７．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．００ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２７ （ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６－３．９３ （ｍ， １Ｈ）， ３．８４－３．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６３－３．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．０５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２７－２．２４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４ - ２．１０ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３ - １．９１ （ｍ， １Ｈ）。

【0070】

【化8】

アニデュラファンギン（２．５ ｇ、２．１９ ｍｍｏｌ）とフェニルボロン酸（０．５３５ ｇ、２ ｅｑ．）をＴＨＦ（５０ ｍＬ）に溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、式（ＩＩ）の化合物（３．９６ ｇ、６ ｅｑ．）、カンファースルホン酸（２．５４ ｇ、５ ｅｑ．）及び無水ジオキサン（７５ ｍＬ）を加え、窒素保護下、常温で一晩撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えてクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣ分取で精製し、１．９６ ｇの生成物（式（Ｉ）の化合物）を得て、純度が９６．９％、収率が６８％であった。ＨＲＭＳ：１２５１．６１７３［Ｍ ^＋］。
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭＥＴＨＡＮＯＬ－ｄ_４） δ ７．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８１ （ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６９ － ７．７６ （ｍ， ４Ｈ）， ７．６１ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．４２（ｄ，Ｊ＝ ２．４Ｈｚ，１Ｈ）， ５．０３ （ｄ，Ｊ＝ ３．２Ｈｚ，１Ｈ）， ４．９２－４．９３（ｍ，１Ｈ），４．７４ － ４．７８ （ｍ， １Ｈ）， ４．５７ － ４．６１ （ｍ， ３Ｈ），４．３８ （ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３２ － ４．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２４－４．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１６ － ４．２０（ｍ， １Ｈ）， ４．０６ － ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．９７ － ４．０４（ｍ，４Ｈ）， ３．８１ － ３．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４６ － ３．６３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２１（ｓ， ３Ｈ）， ３．００ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４２ － ２．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２６ - ２．３１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２-２．１５ （ｍ， ５Ｈ）， １．９０（ｓ， ３Ｈ），１．７８-１．８５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４０－ １．５２ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５ － １．２８ （ｍ， ６Ｈ）， １．０８ （ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ， ３Ｈ），０．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）。

【0071】

実施例２

【化9】

Ｎ－メチル－Ｄ－プロリノール（３．００ ｇ、２６．０５ ｍｍｏｌ）を３０ ｍＬのアセトンに溶け、ｐ－トルエンスルホン酸メチル（４．８５ ｇ、１．０ ｅｑ．）を徐々に加え、４時間加熱還流しながら撹拌し、石油エーテルを加えて固体を析出させ、ろ過し、乾燥して白い固体である式（ＩＩ）の化合物７．３３ ｇを得て、収率が９３．４％であった。Ｍｓ： １３０．０［Ｍ ^＋］。
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ－ｄ_４） δ ７．７３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．００ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２７ （ｄ，Ｊ＝８．００Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６－３．９３ （ｍ， １Ｈ）， ３．８４－３．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６３－３．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．０５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２７－２．２４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４ - ２．１０ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３ - １．９１ （ｍ， １Ｈ）。

【0072】

【化10】

アニデュラファンギン（２．０ ｇ、１．７５ ｍｍｏｌ）と３，４－ジメトキシフェニルボロン酸（０．４１５ ｇ、１．３ ｅｑ．）をＴＨＦ（４０ ｍＬ）に溶け、常温で１時間撹拌し、乾燥になるまで濃縮し、式（ＩＩ）の化合物（１５．８６ ｇ、３０ ｅｑ．）、トリフルオロ酢酸（５ ｍＬ、２．５ ｖ）及びアセトニトリル（２０ ｍＬ）を加え、窒素保護下、常温で３ ｈ撹拌し、酢酸ナトリウムの水溶液を加えてクエンチし、濃縮し、粗生成物を得て、ＨＰＬＣ分取で精製し、１．９５ ｇの生成物（式（Ｉ）の化合物）を得て、純度が９８．５％、収率が８５％であった。ＨＲＭＳ：１２５１．６１７３［Ｍ ^＋］。
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭＥＴＨＡＮＯＬ－ｄ_４） δ ７．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．８１ （ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６９ － ７．７６ （ｍ， ４Ｈ）， ７．６１ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．４２（ｄ，Ｊ＝ ２．４Ｈｚ，１Ｈ）， ５．０３ （ｄ，Ｊ＝ ３．２Ｈｚ，１Ｈ）， ４．９２－４．９３（ｍ，１Ｈ），４．７４ － ４．７８ （ｍ， １Ｈ）， ４．５７ － ４．６１ （ｍ， ３Ｈ），４．３８ （ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３２ － ４．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２４－４．２８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１６ － ４．２０（ｍ， １Ｈ）， ４．０６ － ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．９７ － ４．０４（ｍ，４Ｈ）， ３．８１ － ３．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４６ － ３．６３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２１（ｓ， ３Ｈ）， ３．００ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４２ － ２．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２６ － ２．３１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２-２．１５ （ｍ， ５Ｈ）， １．９０（ｓ， ３Ｈ），１．７８-１．８５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４０－ １．５２ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５ － １．２８ （ｍ， ６Ｈ）， １．０８ （ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ， ３Ｈ），０．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）。

【0073】

試験例１：抗真菌活性の試験方法
試験化合物を勾配希釈した後、カンジダ標準株に対してＭＩＣ検出を行い、アスペルギルス標準株に対してＭＥＣ検出を行った。最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の検出方法は、米国臨床検査標準協議会（ＣＬＳＩ Ｍ２７－Ａ３）のガイドラインを参照して操作し、最小有効濃度（ＭＥＣ）の検出方法は、米国臨床検査標準協議会（ＣＬＳＩ Ｍ３８－Ａ２）のガイドラインを参照して操作した。

【0074】

真菌接種液の調製
カンジダ：
凍結保存された菌株を少なくとも２回継代し、単一コロニーを選択して生理食塩水又は滅菌水管に再懸濁させ、ボルテックスで振とうし、分光光度計により５３０ ｎｍの波長で菌懸濁液を０．５ ＭｃＦ（１×１０^６～５×１０^６ ＣＦＵ／ｍＬ）に調整した。生理食塩水で５０倍希釈した後、１×ＲＰＭＩ １６４０ブロスで２０倍（１×１０^３～５×１０^３ ＣＦＵ／ｍＬ）希釈した。１０ μＬ取ってＳＤＡプレートに塗布してコロニーを計数し、範囲は約１０～５０個の単一コロニーであった。

【0075】

調製された薬剤感受性プレートを室温で完全に溶けた後、マルチチャンネルピペットにより９６ウェルプレートに菌懸濁液を加え、１ウェルあたり１００ μＬであった。この時、各ウェル中の菌濃度は、０．５×１０^３～２．５×１０^３ ＣＦＵ／ｍＬとすべきである。

【0076】

アスペルギルス（クラスII生物学的安全キャビネットで操作）：
アスペルギルスをＳＤＡプレートに継代して３５℃で４８ ｈ～７ ｄ培養し、胞子の形成を誘導した。約１ ｍＬの０．８５％生理食塩水又は滅菌水でプレート上のコロニーを被覆した（ポリソルベート２０を最終濃度が０．１％～０．０１％になるように加えた）。ｔｉｐヘッド又は滅菌綿棒により培地の表面を軽く拭き取り（培地を突き破らないように注意）、胞子の菌糸の再懸濁液を滅菌試験管に移し、比較的重い粒子が沈殿されるように３～５ ｍｉｎ静置し、上層の均質な懸濁液を新しい滅菌試験管に移し、キャップをしっかり閉め、ボルテックスで１５ ｓ振とうした（注意：懸濁液はキャップを再び開ける場合にエアロゾルを生じ得る）。分光光度計により５３０ ｎｍで懸濁液濃度をＯＤ値が０．０９～０．１３になるように調整した。１×ＲＰＭＩ １６４０で懸濁液を５０倍希釈した。希釈後の２ ｈ以内に、９６ウェルプレートの各ウェルに試料１００ μＬを加えた（最終的に薬剤感受性プレートにおける胞子の濃度は０．４×１０^４～５×１０^４ ＣＦＵ／ｍＬとすべきである）。

【0077】

コロニーの計数：ＲＰＭＩ １６４０で希釈した懸濁液を更に１０倍希釈し、１０ μＬ取ってＳＤＡプレートに塗布し、２８℃で培養して毎日観察し、目視可能なコロニーが現れると直ちに計数した。

【0078】

培養
酵母型真菌検出プレートをインキュベータに置き、３５℃、湿度８５％で、２４ ｈインキュベートした後にＭＩＣ値を読み取った。エキノカンジン系薬剤には、アスペルギルスを２８℃で２１～２６ ｈインキュベートした後、ＭＥＣ結果を読み取った。

【0079】

ＭＩＣ又はＭＥＣの読み取り
酵母型真菌：９６ウェルプレートに使い捨ての密封パラフィルムを貼り付け、振とうして均一に混合し、プレート読み取りミラーにより目視観察し、増殖対照に比べて、≧５０％の増殖阻害に対応する最小化合物濃度がＭＩＣとして定義される。そして自動プレートリーダーによって撮影して写真を保存した。

【0080】

アスペルギルス：エキノカンジン系薬剤には、プレート読み取りミラー下で増殖対照と比べ、菌糸が小さくて丸くて密着した菌糸粒子を形成するようにできる最小薬物濃度がＭＥＣとして定義される。ＭＥＣ値を正確に測定するために、プレートを読み取る前にボルテックスで振とうしてはならない。

【0081】

【表1】

備考：１、カンジダ・パラプシローシスＡＴＣＣ ２２０１９、カンジダ・クルセイＡＴＣＣ６２５８はコントロール菌株である。ＣＬＳＩ－Ｍ６０によると、ＡＮＩはＡＴＣＣ２２０１９に対する２４時間ＭＩＣが（０．２５～２）μｇ／ｍＬであり、ＣＡＳが（０．２５～１）μｇ／ｍＬであり、ＡＮＩはＡＴＣＣ６２５８に対する２４時間ＭＩＣが（０．０３～０．１２）μｇ／ｍＬであり、ＣＡＳが（０．１２～１）μｇ／ｍＬである。

【0082】

【表2】

試験データによると、本開示の式（Ｉ）の化合物は優れた抗真菌活性を有する。

【0083】

試験例２：化合物の血漿ヒスタミン濃度及び薬物動態試験
試験の方法：
１２匹のＳＤラットを２群に分け、１群当たり６匹の動物であり、雄と雌が半分ずつであった。毎日少なくとも１回観察した。投与前に体重を１回測定した。単回静脈注射で投与し、各動物に２０分間投与した。投与前及び投与後の５分間、３０分間、１時間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間にそれぞれＰＫ検出を１回行った。投与前及び投与後の３０分間、４時間、８時間、２４時間にそれぞれヒスタミン検出を１回行った。

【0084】

【表3】

【0085】

主な結果は、以下の通りである：
一般状態観察
投与当日に第２群における２匹の雌性（２／３の割合）は、一過的に僅かな運動低下が現れた。

【0086】

それ以外、各群のＳＤラットは、一般状態が良好であり、自発運動が正常であり、皮膚と毛が清浄であり、糞尿が正常であり、他の異常反応も認められなかった。

【0087】

ヒスタミン検査
図１に示すように、第１群及び第２群は、静脈内投与が何れもラットのヒスタミンを一過的に上昇させることができ、血漿ヒスタミン濃度が３０ ｍｉｎでピークに達し、４ ｈ後に回復傾向が見られ、８～２４ ｈ後に基本的に正常に回復した。図２に示すように、投与後の３０ ｍｉｎに、第１群はラット血漿における平均ヒスタミン濃度が２９６．６ ｎｇ／ｍＬであり、第２群はラット血漿における平均ヒスタミン濃度が１３３３．０ ｎｇ／ｍＬであり、平均ヒスタミン濃度が第１群の４．５倍であり、第１群（ｐ＝０．０４６）よりも顕著に高い。同じ用量で、第１群は、第２群に比べてラットのヒスタミンを上昇させる能力が顕著に低い。

【0088】

薬物動態
第１群又は第２群に投与した後、動物のインビボ薬物動態パラメータは、下記の表に示す通りである：

【0089】

【表4】

【0090】

試験データから明らかなように、同じ用量で、第１群と第２群は単回静脈注射で投与した後、血漿薬物暴露レベル（Ｃ_ｍａｘ及びＡＵＣ）が同程度であり、有意な性差がなく、且つ他の薬物動態パラメータが何れもほぼ一致している。

【0091】

以上説明したように、１０ ｍｇ／ｋｇでの式（Ｉ）の化合物は単回静脈注射で投与した後、血漿薬物暴露量が同じ用量でのＲｅｚａｆｕｎｇｉｎ酢酸塩と同程度であるが、ラットヒスタミンを上昇させる能力がＲｅｚａｆｕｎｇｉｎ酢酸塩より顕著に低い。Ｒｅｚａｆｕｎｇｉｎに比べて、式（Ｉ）の化合物は、臨床的にアレルギー反応を引き起こし難いことが示唆される。

【図1】

【図2】

【国際調査報告】