特表 2024-520854 ＩＤＨ阻害剤耐性の対象を治療する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-05-24

(54)【発明の名称】ＩＤＨ阻害剤耐性の対象を治療する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/5365 20060101AFI20240517BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240517BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240517BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240517BHJP

   A61K 31/53 20060101ALI20240517BHJP

   C07D 498/04 20060101ALI20240517BHJP

【ＦＩ】

A61K31/5365

A61P35/00

A61P35/02

A61P43/00 111

A61P43/00 121

A61K31/53

C07D498/04 111

C07D498/04 CSP

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023576219

(86)(22)【出願日】2022-06-09

(85)【翻訳文提出日】2024-02-09

(86)【国際出願番号】 US2022032774

(87)【国際公開番号】W WO2022261279

(87)【国際公開日】2022-12-15

(31)【優先権主張番号】63/208,625

(32)【優先日】2021-06-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(72)【発明者】

【氏名】ブルックス，ネイサン アーサー

(72)【発明者】

【氏名】ギルモア，レイモンド

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BC64

4C086CB22

4C086GA07

4C086GA08

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZB26

4C086ZB27

4C086ZC75

(57)【要約】

本発明は、本明細書に開示の変異イソクエン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤によるヒトがん対象の治療に関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

がんを治療する方法であって、治療上の有効量の式：

【化1】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異、および１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するヒトがん対象に投与することを含む、方法。

【請求項2】

Ｘが、Ｎである、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

Ｘが、Ｎであり、Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、ならびにＲ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン
である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

【化2】

で示される、前記化合物またはその塩である、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

【化3】

で示される、前記化合物である、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記がんが、固形腫瘍がんである、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記固形腫瘍がんが、胆管がん、頭頸部がん、軟骨肉腫、肝細胞がん、メラノーマ、膵臓がん、星細胞腫、乏突起神経膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱がん、大腸がん、肺がん、または鼻副鼻腔未分化がんである、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記固形腫瘍がんが、胆管がんである、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記化合物が、

【化4】

で示され、前記がんが、胆管がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項11】

前記がんが、血液悪性腫瘍である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症、または慢性骨髄性白血病である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病である、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記化合物が、

【化5】

で示され、前記がんが、急性骨髄性白血病である、請求項１に記載の方法。

【請求項15】

前記ヒトがん対象が、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異を有する、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記ヒトがん対象が、ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有する、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、またはＧ２６０Ａのうちの１つまたはそれ以上である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６ＥまたはＩ３１９Ｍのうちの１つまたはそれ以上である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

前記ヒト対象が、式：

【化6】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩以外のＩＤＨ２阻害剤で治療されている、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記ヒト対象が、エナシデニブで治療されている、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異、および１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するヒト対象においてがんの治療に使用するための、式：

【化7】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項22】

Ｘが、Ｎである、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２１に記載の使用のための化合物。

【請求項23】

Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルである、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２１または２２に記載の使用のための化合物。

【請求項24】

Ｒ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２１～２３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項25】

７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン
である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２１に記載の使用のための化合物。

【請求項26】

【化8】

で示される、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２１に記載の使用のための化合物。

【請求項27】

【化9】

で示される、請求項２６に記載の使用のための化合物。

【請求項28】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、またはＧ２６０Ａのうちの１つまたはそれ以上である、請求項２１～２７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項29】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６ＥまたはＩ３１９Ｍのうちの１つまたはそれ以上である、請求項２１～２７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項30】

前記がんが、固形腫瘍がんである、請求項２１～２９のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項31】

前記固形腫瘍がんが、胆管がん、頭頸部がん、軟骨肉腫、肝細胞がん、メラノーマ、膵臓がん、星細胞腫、乏突起神経膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱がん、大腸がん、肺がん、または鼻副鼻腔未分化がんである、請求項３０に記載の使用のための化合物。

【請求項32】

前記固形腫瘍がんが、胆管がんである、請求項３１に記載の使用のための化合物。

【請求項33】

前記がんが、血液悪性腫瘍である、請求項２１～２９のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項34】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症、または慢性骨髄性白血病である、請求項３３に記載の使用のための化合物。

【請求項35】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病である、請求項３４に記載の使用のための化合物。

【請求項36】

前記対象が、式：

【化10】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩以外の変異ＩＤＨ２阻害剤で治療されている、請求項２１～３５のいずれか１項に記載の使用のための化合物。

【請求項37】

前記対象が、エナシデニブで治療されている、請求項３６に記載の使用のための化合物。

【請求項38】

ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異、および１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するヒト対象においてがんの治療剤の製造における、式：

【化11】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される、化合物または医薬的に許容される塩の使用。

【請求項39】

Ｘが、Ｎである、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項３８に記載の使用。

【請求項40】

Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルである化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項３８または３９に記載の使用。

【請求項41】

Ｒ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項３８～４０のいずれか１項に記載の使用。

【請求項42】

７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項３８に記載の使用。

【請求項43】

【化12】

で示される、前記化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項３８に記載の使用。

【請求項44】

前記化合物が、

【化13】

である、請求項４３に記載の使用。

【請求項45】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、またはＧ２６０Ａのうちの１つまたはそれ以上である、請求項３８～４４のいずれか１項に記載の使用。

【請求項46】

前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異が、Ｑ３１６ＥまたはＩ３１９Ｍのうちの１つまたはそれ以上である、請求項３８～４４のいずれか１項に記載の使用。

【請求項47】

前記がんが、固形腫瘍がんである、請求項３８～４６のいずれか１項に記載の使用。

【請求項48】

前記固形腫瘍がんが、胆管がん、頭頸部がん、軟骨肉腫、肝細胞がん、メラノーマ、膵臓がん、星細胞腫、乏突起神経膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱がん、大腸がん、肺がん、または鼻副鼻腔未分化がん、請求項４７に記載の使用。

【請求項49】

前記固形腫瘍がんが、胆管がんである、請求項４８に記載の使用。

【請求項50】

前記がんが、血液悪性腫瘍である、請求項３８～４６のいずれか１項に記載の使用。

【請求項51】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症、または慢性骨髄性白血病である、請求項５０に記載の使用。

【請求項52】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病である、請求項５１に記載の使用。

【請求項53】

前記対象が、式：

【化14】

［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩以外の変異ＩＤＨ２阻害剤で治療されている、請求項３８～５２のいずれか１項に記載の使用。

【請求項54】

前記対象が、エナシデニブで治療されている、請求項５３に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、本明細書に開示の変異イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＤＨ）阻害剤を用いて対象における癌の治療に関する。

【0002】

ＩＤＨ１およびＩＤＨ２は、イソクエン酸からα－ケトグルタル酸への変換を触媒し、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰ^＋）をＮＡＤＰＨに還元する酵素である（Megias-Vericat J, et al., Blood Lymph. Cancer: Targets and Therapy 2019; 9: 19-32）。

【0003】

ＩＤＨ１における新形態（ｄｅ ｎｏｖｏ）変異（例えば、ＩＤＨ１アミノ酸残基Ｒ１３２における変異）は、固形腫瘍がんおよび血液悪性腫瘍を含む数種類のタイプのがんにおける腫瘍形成の原因となる（Badur MG, et al., Cell Reports 2018; 25: 1680）。ＩＤＨ１変異は、高レベルの２－ヒドロキシグルタル酸（２－ＨＧ）を生成して、細胞分化を阻害することができ、変異ＩＤＨ１阻害剤は、２－ＨＧレベルを減少させて、細胞分化を促進することができる（Molenaar RJ, et al., Oncogene 2018; 37: 1949-1960）。変異はまた、ＩＤＨ２（例えば、アミノ酸残基Ｒ１４０およびＲ１７２）で生じる（Yang H, et al., Clin. Cancer. Res. 2012; 18: 5562-5571; Mondesir J, et al., J. Blood Med. 2016; 7: 171-180）。

【0004】

例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、長期間の治療の選択圧力下において動的に進化する、多種多様な範囲の変異遺伝子と、前白血病および白血病クローンを含むマルチクローン遺伝子構造とによって特徴付けられる（Bloomfield CD, et al., Blood Revs. 2018: 32: 416-425）。

【0005】

シタラビンおよびアントラサイクリンによる導入化学療法（「７＋３」）は、ＡＭＬと新たに診断された対象に対して、４０年以上の間標準治療となっている。近年、下記の薬がＡＭＬの治療についてアメリカ食品医薬品局によって承認された：ミドスタウリン、エナシデニブ、ＣＰＸ－３５１、およびゲムツズマブ オゾガマイシン（Bloomfield CD, et al., Blood Revs. 2018; 32: 416-425）、およびイボシデニブ（Megias-Vericat J, et al., Blood Lymph. Cancer: Targets and Therapy 2019; 9: 19-32）。

【0006】

ＡＭＬに罹っている成人の約６０％～７０％は、適切な導入療法後に完全寛解（ＣＲ）状態に到ることを予測することができ、ＡＭＬに罹っている成人の２５％以上（ＣＲに到る患者の約４５％）は、３年またはそれ以上生存することを予測することができ、治癒しうる。

【0007】

エナシデニブ結合部位における変異（ＩＤＨ２－Ｑ３１６ＥおよびＩＤＨ２－Ｉ３１９Ｍ）は、エナシデニブを用いて再発したＩＤＨ２変異ＡＭＬ患者で同定された（Intlekofer et al., "Acquired resistance to IDH inhibition through trans or cis dimer-interface mutations." Nature 559, 125-129 (2018)）。前臨床試験により、エナシデニブは、もはや結合し、変異酵素を阻害することができないことが示された（Intlekofer et al., 2018）。これらは、本明細書で定義さるように、いわゆる「第２の」ＩＤＨ２変異と呼ばれ、変異ＩＤＨ２阻害剤による治療後に再発する原因となりうる。

【0008】

よって、特に、第２のＩＤＨ２変異が、最初の変異ＩＤＨ２阻害剤治療後に生じる対象に対して、代替的な変異ＩＤＨ２に関連するがん治療が必要とされている。

【0009】

一定の変異ＩＤＨ１およびＩＤＨ２阻害剤は、ＷＯ２０１８／１１１７０７Ａ１に開示され、（α－ＫＧ）レベルに影響を及ぼすことなく、酵素を迅速に不活性化し、２－ＨＧ生成を選択的に阻害する、アロステリック結合ポケットにおける単一システイン（Ｃｙｓ２６９）を修飾する変異ＩＤＨ１のコバレント阻害剤である、「化合物Ａ」として本明細書で定義される化合物が含まれる（ＷＯ２０１８／１１１７０７Ａ１）。

【0010】

本発明は、がんを治療する方法であって、治療上有効量の式Ｉ：

【化1】

Ｉ
［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；ならびに
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩を、ＩＤＨ２ Ｒ１４０またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異、および１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するヒトがん対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0011】

本発明の方法のある態様において、式Ｉの化合物において、Ｘは、Ｎであるか、その医薬的に許容される塩である。別の態様において、Ｘは、Ｎであり、Ｒ^１は、－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、ならびにＲ^２は、－ＣＨ_２ＣＨ_３であり、あるいはその医薬的に許容される塩である。別の態様において、Ｘは、Ｎであり、Ｒ^１は、－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、ならびにＲ^２は、－ＣＨ_２ＣＨ_３である。

【0012】

別の態様において、式Ｉの化合物は、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；もしくは
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
またはこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩である。

【0013】

別の態様において、式Ｉの化合物は、７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オンである。

【0014】

別の態様において、式Ｉの化合物は：

【化2】

の化合物（「化合物Ａ」とも称される）またはその医薬的に許容される塩である。別の態様において、前記化合物は、化合物Ａである。

【0015】

本発明はまた、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異、および１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するヒト対象においてがんの治療に使用するための、式Ｉ：

【化3】

Ｉ
［式中：
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり；
Ｒ^２は、－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
Ｘは、ＮまたはＣＨである］
の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。

【0016】

式Ｉの化合物について、Ｘが、Ｎであるか、またはその医薬的に許容される塩であることが好ましく；Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルであるか、またはその医薬的に許容される塩であることが好ましく；Ｒ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３であるか、またはその医薬的に許容される塩であることが好ましく；Ｘが、Ｎであり、Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、ならびにＲ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３であるか、またはその医薬的に許容される塩であることがより好ましく；Ｘが、Ｎ、であり、Ｒ^１が、－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、ならびにＲ^２が、－ＣＨ_２ＣＨ_３であることが最も好ましい。

【0017】

式Ｉの好ましい化合物は、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン；
であるか、これらのいずれか１つのその医薬的に許容される塩である。

【0018】

より好ましい式Ｉの化合物は、

【化4】

（化合物Ａ）
またはその医薬的に許容される塩である。

【0019】

１の実施態様において、ＩＤＨ２変異は、Ｒ１４０変異である。別の態様において、Ｒ１４０変異は、Ｒ１４０Ｑ、Ｒ１４０Ｌ、またはＲ１４０Ｗである。別の態様において、Ｒ１４０変異は、Ｒ１４０Ｑである。別の態様において、Ｒ１４０変異は、Ｒ１４０Ｌである。別の態様において、Ｒ１４０変異は、Ｒ１４０Ｗである。

【0020】

別の態様において、ＩＤＨ２変異は、Ｒ１７２変異である。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｋ、Ｒ１７２Ｍ、Ｒ１７２Ｇ、Ｒ１７２Ｓ、またはＲ１７２Ｗである。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｋである。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｍである。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｇである。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｓである。別の態様において、Ｒ１７２変異は、Ｒ１７２Ｗである。

【0021】

１の実施態様において、前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、またはＧ２６０Ａである。１の実施態様において、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、Ｑ３１６ＥまたはＩ３１９Ｍである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２の変異は、Ｑ３１６Ｅである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２の変異は、Ｉ３１９Ｍである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２の変異は、Ｐ１６７Ｒである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２の変異は、Ｇ２６０Ａである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、およびＧ２６０Ａである。別の態様において、前記１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、Ｑ３１６ＥおよびＩ３１９Ｍである。

【0022】

別の態様において、対象は、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。

【0023】

別の態様において、対象は、組織においてＩＤＨ２ Ｒ１４０変異または組織においてＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、組織においてＩＤＨ２ Ｒ１４０変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、組織においてＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。

【0024】

別の態様において、対象は、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するものとして同定される。

【0025】

別の態様において、がんは、血液悪性腫瘍であり、対象は、血液、骨髄、リンパ節、またはリンパ液において、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、血液細胞、骨髄細胞、血液細胞、リンパ節細胞、またはリンパ液細胞において、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するものとして同定される。

【0026】

別の態様において、がんは、固形腫瘍がんであり、対象は、固形腫瘍組織において、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、固形腫瘍組織は、胆管がん組織である。別の態様において、対象は、固形腫瘍組織細胞において、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するものとして同定される。別の態様において、対象は、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するものとして同定される。

【0027】

１の実施態様において、がんは、固形腫瘍である。別の態様において、固形腫瘍は、胆管がん、頭頸部がん、軟骨肉腫、肝細胞がん、メラノーマ、膵臓がん、星細胞腫、乏突起神経膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱がん、大腸がん、肺がん、または鼻副鼻腔未分化がんである。別の態様において、肺がんは、非小細胞肺がんである。別の態様において、固形腫瘍は、胆管がんである。別の態様において、固形腫瘍は、神経膠腫である。

【0028】

別の態様において、がんは、血液悪性腫瘍である。別の態様において、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症、または慢性骨髄性白血病である。別の態様において、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病である。

【0029】

別の態様において、対象は、式Ｉの化合物以外の変異ＩＤＨ２阻害剤で治療されている。別の態様において、式Ｉの化合物以外の変異ＩＤＨ２阻害剤は、エナシデニブである。別の態様において、対象は、式Ｉの化合物による治療前に、式Ｉの化合物以外の変異ＩＤＨ２阻害剤で治療されている。

【0030】

別の態様において、がんは、再発がんである。別の態様において、再発がんは、固形腫瘍がんである。別の態様において、再発固形腫瘍がんは、胆管がんである。別の態様において、再発がんは、血液悪性腫瘍である。別の態様において、再発血液悪性腫瘍は、再発ＡＭＬである。

【0031】

別の態様において、がんは、難治性がんである。別の態様において、難治性がんは、固形腫瘍がんである。別の態様において、難治性固形腫瘍がんは、胆管がんである。別の態様において、難治性がんは、血液悪性腫瘍である。別の態様において、難治性血液悪性腫瘍は、難治性ＡＭＬである。

【0032】

別の態様において、がんは、進行がんである。別の態様において、進行がんは、進行固形腫瘍がんである。別の態様において、進行固形腫瘍がんは、胆管がんである。別の態様において、進行がんは、進行血液悪性腫瘍である。別の態様において、進行血液悪性腫瘍は、進行ＡＭＬである

【0033】

別の態様において、ＡＭＬは、急性前骨髄球性白血病である。

【0034】

上記で用いられ、本発明の記載を通して、下記の用語は、特に示されていない限り、下記の意味を有するものと理解されるべきである。

【0035】

用語「血液組織」は、血液、骨髄、脾臓、リンパ節、またはリンパ液を意味する。

【0036】

用語「固形腫瘍組織」は、血液組織ではない組織を意味する。固形組織の非限定的な例は、胆管組織、膵臓組織、頭部組織、頸部組織、肝臓組織、皮膚組織、星細胞腫組織、乏突起膠組織、グリア組織、脳組織、膀胱組織、結腸直腸組織、肺組織、および鼻副鼻腔未分化がんである。

【0037】

用語「固形腫瘍がん」は、血液、骨髄、リンパ節、またはリンパ液ではない組織を起源とするがんを意味する。

【0038】

用語「血液悪性腫瘍」は、血液、骨髄、リンパ節、またはリンパ液におけるがんに関する。

【0039】

用語「進行血液悪性腫瘍」は、リンパ節、あるいは血液または骨髄の外の他の組織に広がった悪性腫瘍を意味する。

【0040】

用語「がん対象」は、がんと診断された対象を意味する。

【0041】

用語「難治がん」は、治療されたが、治療に応答しないヒトがん対象のがんを意味する。

【0042】

用語「再発がん」は、長期間の治療に応答を示したが、再発したヒトがん対象のがんを意味する。

【0043】

用語「進行がん」は、リンパ節またはがんの起源部位の外の他の組織に広がったがんを意味する。例えば、進行急性骨髄性白血病は、血液または骨髄の他の組織に広がった急性骨髄性白血病である。

【0044】

用語「固形腫瘍対象」は、固形腫瘍がんと診断された対象を意味する。１の実施態様において、固形腫瘍がんは、胆管がんである。

【0045】

用語「血液悪性腫瘍対象」は、血液悪性腫瘍と診断された対象を意味する。１の実施態様において、血液悪性腫瘍対象は、ＡＭＬ対象である。用語「ＡＭＬ対象」は、ＡＭＬと診断された対象を意味する。ＡＭＬを診断する方法は、例えば、Dohner H, et al., Blood 2017; 129: 424-447において当業者に公知である。

【0046】

用語「急性骨髄性白血病」、「急性骨髄性白血病」、および「急性非リンパ性白血病」は、同義である。

【0047】

「血液悪性腫瘍（例えば、ＡＭＬ）治療に応答性を有する」は、完全寛解（骨髄中の５％未満の骨髄芽球によって決定される）、血中の骨髄芽球の不存在、血液学的回復（赤血球の輸血を必要とすることなく、末梢血の絶対好中球数１，０００細胞／μＬ以上および血小板数１００，０００／μＬ以上、および髄外疾患の不存在によって示される）として特徴付けられる、全生存率の改善、部分奏功、長期安定な疾患、または長期生存率の改善などが含まれる（Bloomfield CD, et al., Blood Revs. 2018; 32: 416-425）.

【0048】

用語「ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異」は、例えば、対象の核酸（例えば、ＤＮＡ）において決定されるように、対象のＩＤＨ２酵素のアミノ酸残基１４０におけるＩＤＨ２変異を意味する。本明細書で用いられるように、「ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異」は、「第２のＩＤＨ２変異」ではない。

【0049】

用語「ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異」は、例えば、対象の核酸（例えば、ＤＮＡ）において決定されるように、対象のＩＤＨ２酵素のアミノ酸残基１７２におけるＩＤＨ２変異を意味する。本明細書で用いられるように、「ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異」は、「第２のＩＤＨ２変異」ではない。

【0050】

用語「第２のＩＤＨ２変異」は、本明細書に記載の式Ｉの化合物以外の変異ＩＤＨ２阻害剤による治療後にヒト対象におけるＩＤＨ２酵素で生じるＩＤＨ２変異を意味する。１の実施態様において、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、ＩＤＨ２におけるＱ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、またはＧ２６０Ａのうちの１つまたはそれ以上である。１の実施態様において、１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異は、ＩＤＨ２におけるＱ３１６ＥまたはＩ３１９Ｍのうちの１つまたはそれ以上である。しかしながら、他の第２のＩＤＨ２変異は、後に報告されたものであってもよい。本明細書で用いられるように、「第２のＩＤＨ２変異」は、「ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異」または「ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異」ではない。

【0051】

用語「変異ＩＤＨ２阻害剤」は、変異ＩＤＨ２酵素による２－ＨＧの酵素活性および／または生成を阻害する化合物を意味する。変異ＩＤＨ２酵素活性をアッセイする方法は、例えば、ＷＯ２０１８／１１１７０７ Ａ１において、当業者に公知である。用語「変異ＩＤＨ２阻害剤」における単語「変異」は、ＩＤＨ２遺伝子を意味するものであって、阻害剤を意味するものではない。

【0052】

用語「ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異を有するとして同定される」は、ヒト対象の組織または細胞からの核酸（例えば、ＤＮＡ）が、ヒト対象がＩＤＨ２ Ｒ１４０変異を有するか否かを調べるために分析されることを意味する。１の実施態様において、ヒト対象の血液細胞、骨髄細胞、リンパ節、リンパ節細胞、リンパ液、またはリンパ液細胞のうちの１つまたはそれ以上が、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異について分析される。別の態様において、ヒト対象の固形組織が、ＩＤＨ２ Ｒ１４０変異について分析される。

【0053】

用語「ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するとして同定される」は、ヒト対象の組織または細胞からの核酸（例えば、ＤＮＡ）が、ヒト対象がＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するか否かを調べるために分析されることを意味する。１の実施態様において、ヒト対象の血液細胞、骨髄細胞、リンパ節、リンパ節細胞、リンパ液、またはリンパ液細胞のうちの１つまたはそれ以上が、ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異について分析される。別の態様において、ヒト対象の固形組織が、ＩＤＨ２ Ｒ１７２変異について分析される。

【0054】

本発明の方法において、ヒト対象をＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するとして同定する集団は、化合物を投与する集団と異なっていてもよい。１の実施態様において、ヒト対象をＩＤＨ２ Ｒ１４０変異またはＩＤＨ２ Ｒ１７２変異を有するとして同定する集団は、化合物を投与する集団とは異なる。

【0055】

用語「１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するとして同定される」は、ヒト対象の血液細胞、骨髄細胞、リンパ節、リンパ節細胞、リンパ液またはリンパ液細胞のうちの１つまたはそれ以上からの核酸（例えば、ＤＮＡ）が、ヒト対象が１つまたはそれ以上の第２のＩＤＨ２変異を有するか否かを決定するために分析されることを意味する。

【0056】

遺伝子変異を同定するための分析方法は、当業者（Clark, O., et al., Clin. Cancer. Res. 2016; 22: 1837-42）に公知であり、以下に限定されないが、核型分析（Guller JL, et al., J. Mol. Diagn. 2010; 12: 3-16）、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（Yeung DT, et al., Pathology 2011; 43: 566-579）、サンガーシークエンス（Lutha, R et al., Haematologica 2014; 99: 465-473）、代謝プロファイリング（Miyata S, et al., Scientific Reports 2019; 9: 9787）、ポリメラーゼ鎖反応法（Ziai, JM and AJ Siddon, Am. J. Clin. Pathol 2015; 144: 539-554）、および次世代シークエンス（例えば、全トランスクリプトームシークエンス）（Lutha, R et al., Haematologica 2014; 99: 465-473; Wang H-Y, et al., J. Exp. Clin. Cancer Res. 2016; 35: 86）が挙げられる。

【0057】

用語「治療（treatment）」、「治療する（treat）」、「治療（treating）」などは、がんの進行を遅延させ、停止させ、または逆にさせることを含むことを意味する。これらの用語にはまた、がんが実際に排除されない場合であっても、がんの進行がそれ自体遅延させ、停止させ、または逆にさせない場合であっても、障害または病気の１つまたはそれ以上の症状を軽減し、緩和し、減衰し、排除し、または減少することが含まれる。

【0058】

「治療上有効量」は、対象における生物学的または医学的な応答あるいは所望される治療効果を生じる、対象に投与される化合物またはその医薬的に許容される塩の量を意味する。治療上有効量は、公知技術を使用すること、および同様の状況下で得られた結果を観察することによって当業者として担当医が容易に決定することができる。対象の有効量を決定する際に、以下に限定されないが、対象の大きさ、年齢、および総体的な健康；関連する具体的な疾患または障害；疾患または障害の程度、関連、または重症度；各対象の応答性；投与される具体的な化合物；投与様式；投与される製剤のバイオアベイラビリティの特徴；選択される投薬レジメン；併用医薬の使用；およびその他の関連事項を含む、多くの因子が担当医によって考慮される。

【0059】

本明細書に記載の式Ｉの化合物は、経口、静脈内、および経皮経路を含む、化合物を生体利用可能にするいずれかの経路によって投与される医薬組成物として、適宜製剤化することができる。このような組成物は、経口投与のために製剤化されることが好ましい。このような医薬組成物およびこれを製造する方法は、当該技術分野で周知である（例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy (D.B. Troy, Editor, 21st Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2006を参照のこと）。

【0060】

「医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤」は、生物学的に活性な薬剤の哺乳類（例えば、ヒト）への送達のために当該技術分野で一般的に許容される媒体である。

【0061】

本発明の方法で投与される化合物が塩を形成することができることは、当業者によって理解されている。化合物は、多くの無機酸および有機酸のいずれかと反応して、医薬的に許容される酸付加塩を形成する。このような医薬的に許容される酸付加塩およびこれらを調製する一般的な方法は、当該技術分野で周知である。例えば、P. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2008を参照のこと。

【0062】

「医薬的に許容される塩」は、本発明の化合物の比較的非毒性の無機塩および有機塩を意味する（S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 66, No. 1, January 1977）。

【実施例】

【0063】

材料、方法、および結果
化合物および製剤
化合物Ａは、ＷＯ／１８／１１１７０７に記載されるように合成されうる。化合物Ａは、１００％ ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）（Ｓｉｇｍａ，Ｄ２４３８）中の２０ｍＭ 保存液として調製し、１００％ ＤＭＳＯ中で連続希釈して所望される濃度とする。ＤＭＳＯ調製物は、アッセイで加える前に細胞培養培地でさらに希釈する。

【0064】

細胞株
Ｕ－８７ ＭＧ細胞（ＡＴＣＣ，ＨＴＢ－１４）を、２ｍＭ ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｇｉｂｃｏ，３５０５０）、１ｍＭ ピルビン酸（Ｇｉｂｃｏ，１１３６０）、０．１ｍＭ ＮＥＡＡ（（非必須アミノ酸）Ｇｉｂｃｏ，１１１４０）、および１０％ 透析ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（Ｇｉｂｃｏ，２６４００）を含むＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ，１１０９５）中で培養し、アッセイする。

【0065】

細胞に基づく阻害アッセイ
細胞に基づくアッセイは、ＩＤＨ２変異が発現されるＵ－８７ ＭＧ細胞中の２－ＨＧを測定することで行う。

【0066】

ＩＤＨ２変異をコードするＤＮＡ構築物を、トランスフェクション（Ｐｒｏｍｅｇａ ＦｕＧＥＮＥ ＨＤ，Ｅ２３１１）またはレンチウイルス形質導入を用いて、Ｕ－８７ ＭＧ細胞に導入し、ＩＤＨ２変異を発現する細胞株を、ブラストサイジン（５μｇ／ｍｌ）またはピューロマイシン（１μｇ／ｍｌ）を用いて選別する。第２の部位の変異（Ｑ３１６Ｅ、Ｉ３１９Ｍ、Ｐ１６７Ｒ、およびＧ２６０Ａ）を、シス（ダイマー内のドライバー変異と同一のモノマー）またはトランス（ダイマー内のドライバー変異とは反対のモノマー）で評価する。化合物の処理では、培養培地（各々、１５０μｌまたは１００μｌ）中で１ウェルあたり１２，５００または５０，０００細胞を、処理２時間前に９６ウェル細胞培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ，３５３３７７）にプレーティングする。細胞を、標準的な増殖培地中の化合物Ａの連続希釈液で処理する。プレートを、哺乳類細胞培養インキュベーター（加湿，３７℃，５％ ＣＯ_２）内で１６または７２時間インキュベートする。インキュベーション時間後、該培地を吸引し、細胞抽出物を、イオン対ＬＣ－ＭＳ法のために、１ウェルあたり液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）内部標準物（１μＭ ^１３Ｃ_４ α－ＫＧおよび^１３Ｃ_５ ２－ＨＧ）を含有する氷冷８０％ メタノール／２０％ 水（１００μＬ）を加えることによって調製する。次に、９６ウェル試料プレートを密閉し、４５０ｒｐｍで１０分間攪拌し、次いで－２０℃に置き、ＬＣ－ＭＳ分析まで保存する。

【0067】

条件培地および細胞溶解物のＬＣ－ＭＳ代謝解析
２－ＨＧ濃度による阻害剤の効果を、下記に記載されるように、イオン対法を用いて細胞溶解物のＬＣ－ＭＳ分析によって調べる。

【0068】

検量線を、２－ＨＧおよびα－ＫＧを、ＬＣ－ＭＳ内部標準（１μＭ ^１３Ｃ_４ α－ＫＧおよび１μＭ ^１３Ｃ_５ ２－ＨＧ）を含有する８０％ メタノール／２０％ 水にスパイクすることによって調製する。２－ＨＧおよびα－ＫＧの定量を、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）プローブを備えたＡＢ Ｓｃｉｅｘ ６５００質量分光計を用いて行い、ネガティブ多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードでＵｌｔｒａ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）システムで適合させる。前記ＵＨＰＬＣシステムは、Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０バイナリポンプ、サーモスタット付きカラムコンパートメント（ＴＣＣ）、およびサンプラーから構成される。インジェクション体積は、細胞培養抽出物の１μＬである。該抽出物を、Ｈｙｐｅｒｃａｒｂカラム、２．１ｘ２０ｍｍ、５．０ｍｍ Ｊａｖｅｌｉｎ ＨＴＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＰＮ：３５００５－０２２１３５）を用いてクロマトグラフにより分析する。移動相Ａは、水／１０ｍＭ トリブチルアミン／１５ｍＭ 酢酸である。移動相Ｂは、アセトニトリル／２０ｍＭ トリブチルアミン／３０ｍＭ 酢酸である。溶媒流速は、１．０ｍＬ／分である。定組成条件は、２６％ 移動相Ｂで保つ。バルブ、サンプルループ、およびニードルを、５０％ アセトニトリル：５０％ メタノールで２０秒間洗浄する。カラム温度を５５℃に保つ。検量線を、１／ｘ加重による最小二乗線形回帰により算出する。２－ＨＧおよびα－ＫＧを、内部標準に対する分析物の標準曲線およびピーク面積比を用いて定量化する。データ解析を、ＭｕｌｔｉＱｕａｎｔ ３．０（ＡＢ Ｓｃｉｅｘ）を用いて行う。生データをＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌスプレッドシートにエクスポートする。

【0069】

ＩＣ_５０曲線の決定
各化合物のＩＣ_５０曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ／Ｐｒｉｓｍソフトフェアにおける４パラメータデータ適合分析を用いて取得する。

【0070】

本質的に上記に記載されるように行った実験において、表１～５に示すＩＣ_５０の結果を得た。

【0071】

表１：化合物ＡによるＩＤＨ２変異Ｔ細胞における７２時間のインキュベーション時間での２－ＨＧ生成の阻害

【表1】

Std Devは、標準偏差を意味し、nは、アッセイ流動数を意味する。
１２．５Ｋ細胞／ウェル；１５０μｌ培地／ウェル
表１の結果は、化合物Ａが、変異ＩＤＨ２阻害剤エナシデニブに対して耐性を有するＩＤＨ２ドライバー変異（Ｒ１４０ＱおよびＲ１７２Ｋ）およびＩＤＨ２第２部位変異（Ｑ３１６ＥおよびＩ３１９Ｍ）に対して活性を有することを示す。

【0072】

表２：化合物ＡによるＩＤＨ２ Ｒ１４０Ｑ変異Ｔ細胞における１６時間のインキュベーション時間での２－ＨＧ生成の阻害

【表2】

Std Devは、標準偏差を意味し、nは、アッセイ流動数を意味する。
５０Ｋ細胞／ウェル；１００μｌ培地／ウェル
^＊７２時間のインキュベーション時間でのＩＣ_５０；１２．５Ｋ細胞／ウェル
表２の結果は、化合物Ａが、ＩＤＨ２ドライバー変異（Ｒ１４０Ｑ）およびＩＤＨ２第２部位変異（Ｉ３１９Ｍ、Ｑ３１６Ｅ、Ｐ１６７Ｒ、およびＧ２６０Ａ）に対して活性を有することを示す。

【0073】

表３：化合物ＡによるＩＤＨ２ Ｒ１４０Ｌ変異Ｔ細胞における１６時間のインキュベーション時間での２－ＨＧ生成の阻害

【表3】

Std Devは、標準偏差を意味し、nは、アッセイ流動数を意味する。
５０Ｋ細胞／ウェル；１００μｌ培地／ウェル
表３の結果は、化合物Ａが、ＩＤＨ２ドライバー変異（Ｒ１４０Ｌ）およびＩＤＨ２第２部位変異（Ｑ３１６Ｅ）に対して活性を有することを示す。

【0074】

表４：化合物ＡによるＩＤＨ２ Ｒ１７２Ｋ変異Ｔ細胞における１６時間のインキュベーション時間での２－ＨＧ生成の阻害

【表4】

Std Devは、標準偏差を意味し、nは、アッセイ流動数を意味する。
５０Ｋ細胞／ウェル；１００μｌ培地／ウェル
表４の結果は、化合物Ａが、ＩＤＨ２ドライバー変異（Ｒ１７２Ｋ）およびＩＤＨ２第２部位変異（Ｑ３１６Ｅ、Ｐ１６７Ｒ、およびＧ２６０Ａ）に対して活性を有することを示す。

【0075】

表５：化合物ＡによるＩＤＨ２ Ｒ１７２Ｗ変異Ｔ細胞における１６時間のインキュベーション時間での２－ＨＧ生成の阻害

【表5】

Std Devは、標準偏差を意味し、nは、アッセイ流動数を意味する。
５０Ｋ細胞／ウェル；１００μｌ培地／ウェル
^＊７２時間のインキュベーション時間でのＩＣ_５０；１２．５Ｋ細胞／ウェル
表５の結果は、化合物Ａが、ＩＤＨ２ドライバー変異（Ｒ１７２Ｗ）およびＩＤＨ２第２部位変異（Ｐ１６７Ｒ）に対して活性を有することを示す。

【0076】

化合物Ａは、現在、進行性血液悪性腫瘍（ＮＣＴ０４６０３００１）および進行固形腫瘍（ＮＣＴ０４５２１６８６）についての第１相臨床試験である。予備データにより、化合物Ａの投与は、以前にエナシデニブ治療を受け、ＩＤＨ２第２部位変異を有する２人のＡＭＬ患者（１人の患者は、ＩＤＨ２ Ｒ１７２Ｋ変異およびＧ２６０Ａ第２部位変異を有し；もう１人の患者は、ＩＤＨ１変異、およびＩＤＨ２ Ｒ１４０Ｌ変異とＱ３１６Ｅ第２部位変異を有する）において２－ＨＧの阻害を生じることが示されている。

【国際調査報告】