特表 2024-521082 アミロイド障害を処置するための抗体－ペプチド融合タンパク質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-05-28

(54)【発明の名称】アミロイド障害を処置するための抗体－ペプチド融合タンパク質

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20240521BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20240521BHJP

   C07K 14/435 20060101ALI20240521BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20240521BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240521BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240521BHJP

   C12N 15/12 20060101ALI20240521BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240521BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20240521BHJP

   A61K 38/16 20060101ALI20240521BHJP

   A61K 38/10 20060101ALI20240521BHJP

   A61K 51/10 20060101ALI20240521BHJP

   A61K 49/00 20060101ALI20240521BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20240521BHJP

【ＦＩ】

C07K19/00 ZNA

C07K16/18

C07K14/435

C12N15/62

C12N15/63 Z

C12N15/13

C12N15/12

C12N5/10

A61K47/68

A61K38/16

A61K38/10

A61K51/10

A61K49/00

A61P25/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023571517

(86)(22)【出願日】2022-05-18

(85)【翻訳文提出日】2023-12-21

(86)【国際出願番号】 US2022072413

(87)【国際公開番号】W WO2022246433

(87)【国際公開日】2022-11-24

(31)【優先権主張番号】63/190,191

(32)【優先日】2021-05-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】504326686

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ テネシー リサーチ ファウンデーション

(71)【出願人】

【識別番号】522189850

【氏名又は名称】アトララス・インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100127926

【弁理士】

【氏名又は名称】結田 純次

(74)【代理人】

【識別番号】100140132

【弁理士】

【氏名又は名称】竹林 則幸

(74)【代理人】

【識別番号】100216105

【弁理士】

【氏名又は名称】守安 智

(72)【発明者】

【氏名】ジョナサン・エス・ウォール

(72)【発明者】

【氏名】ジェームズ・エス・フォスター

(72)【発明者】

【氏名】スペンサー・ガスリー

(72)【発明者】

【氏名】ジョーム・ポンズ

(72)【発明者】

【氏名】ミヒャエル・エル・クライン

【テーマコード（参考）】

4B065

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA25

4C076AA95

4C076CC01

4C076CC41

4C076EE59

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA18

4C084BA19

4C084CA53

4C084NA13

4C084ZA15

4C084ZA16

4C085HH03

4C085HH11

4C085KA03

4C085KB07

4C085KB09

4C085KB18

4C085KB82

4C085LL13

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA70

4H045BA71

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

4H045GA23

(57)【要約】

本明細書では、抗体に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。また、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質を投与することによってアミロイドベースの疾患を処置する方法が提供される。
【選択図】図３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
アミロイド反応性ペプチド、及び
貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記重鎖または前記軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項2】

前記軽鎖は、軽鎖定常領域を含み、前記重鎖は、重鎖定常領域を含む、請求項１に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項3】

前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記軽鎖の前記Ｃ末端で連結されている、請求項１または２に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項4】

前記スペーサーは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択される、請求項１または２に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項5】

前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項6】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含み、各軽鎖は、前記Ｃ末端で前記アミロイド反応性ペプチドに連結されている、請求項１～５のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項7】

前記抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体である、請求項１～６のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項8】

前記抗体は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する、請求項１～７のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項9】

ａ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、
ｂ）前記ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、または
ｃ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む
、請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項10】

前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項11】

ａ）前記ＶＬは、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含む、または
ｆ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４９に示されるアミノ酸配列を含む、
請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項12】

前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項13】

前記抗体は、全長抗体である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項14】

前記Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１アイソタイプのものである、請求項１３に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項15】

抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
アミロイドフィブリルに結合する抗体であって、前記抗体の軽鎖をそれぞれ含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、及び前記抗体の重鎖をそれぞれ含む第３及び第４のポリペプチドを含む、前記抗体、ならびに
前記軽鎖または前記重鎖のＮ末端またはＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチド
を含み、
ａ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、
前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項16】

抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド、及び
ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、前記抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項17】

抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド、及び
ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、前記抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項18】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド基質について１．５ｎＭ未満のＥＣ５０を示す、請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項19】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされており、前記検出可能な標識は、蛍光標識または放射性標識を含む、請求項１～１８のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項20】

前記放射性標識は、Ｉ－１２３、Ｉ－１２４、Ｆ－１８、ＺＲ－８９、またはＴｃ－９９ｍである、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照ＩｇＧ抗体と比較して改善された生体内分布、汎アミロイド反応性、及び向上した貪食から選択される１つ以上のｉｎ ｖｉｖｏ特徴を示す、請求項１～２０のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項22】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌ、Ａβ、Ａβ（１－４０）、ＩＡＡＰ、ＡＬκ４、Ａｌλ１、ＡＴＴＲ、α－シヌクレイン、またはタウ４４１フィブリルに結合する、請求項１～２１のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項23】

組成物であって、
抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
ｉ）アミロイド反応性ペプチド、及び
ｉｉ）貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記重鎖または前記軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質を含み、
前記抗体－ペプチド融合タンパク質の少なくとも９０％は、インタクトである、前記組成物。

【請求項24】

前記インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含む、請求項２３に記載の組成物。

【請求項25】

前記組成物は、１０％以下の切断生成物を含み、前記切断生成物は、配列番号８９によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖または配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む、請求項２３に記載の組成物。

【請求項26】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、１つ以上のアミロイド基質についてＥＣ５０結合親和性を示し、前記ＥＣ５０結合親和性は、１．５ｎＭ未満である、請求項２３～２５のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項27】

薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項２３～２６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項28】

請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。

【請求項29】

請求項２８に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。

【請求項30】

請求項２９に記載のベクターを含む宿主細胞。

【請求項31】

前記宿主細胞は、哺乳動物細胞、任意にチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項３０に記載の宿主細胞。

【請求項32】

抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法であって、
ａ）前記抗体－ペプチド融合タンパク質の発現に好適なかん流細胞培養条件下で抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む宿主細胞を培養すること、及び
ｂ）約１２～３６時間毎に前記抗体－ペプチド融合タンパク質を回収すること
を含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、
ｉ）アミロイド反応性ペプチド、及び
ｉｉ）貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに前記抗体に連結されている、前記方法。

【請求項33】

工程ｂ）において回収された抗体－ペプチド融合体を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること及び前記陽イオン交換クロマトグラフィーカラムから前記抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させることをさらに含む、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、切断型抗体－ペプチド融合タンパク質とは別々に溶出される、請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、請求項１～２２のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含む、請求項３２～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞である、請求項３２～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質の純度を決定することをさらに含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質の前記純度は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、またはそれらの組み合わせを含む１つ以上の分析方法を使用して決定される、請求項３２～３６のいずれかに記載の方法。

【請求項38】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも９０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質まで精製される、請求項３２～３７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

請求項３２～３８のいずれかに記載の方法によって生成された抗体－ペプチド融合タンパク質。

【請求項40】

アミロイド沈着物を含むアミロイド関連障害を有する対象を処置する方法であって、治療的有効量の請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項41】

前記アミロイド関連障害は、全身性または局在化アミロイドーシスである、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記アミロイド関連障害は、ＡＬ、ＡＨ、Ａβ２Ｍ、ＡＴＴＲ、トランスチレチン、ＡＡ、ＡＡｐｏＡＩ、ＡＡｐｏＡＩＩ、ＡＧｅｌ、ＡＬｙｓ、ＡＬＥｃｔ２、ＡＦｉｂ、ＡＣｙｓ、ＡＣａｌ、ＡＭｅｄ、ＡＩＡＰＰ、ＡＰｒｏ、ＡＩｎｓ、ＡＰｒＰ、パーキンソン病、アルツハイマー病、またはＡβアミロイドーシスからなる群から選択される、請求項４０または４１に記載の方法。

【請求項43】

前記アミロイド沈着物は、前記抗体－ペプチド融合タンパク質によってオプソニン化される、請求項４０～４２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項44】

前記対象を前記抗体－ペプチド融合タンパク質で処置することは、前記アミロイド沈着物の貪食を引き起こす、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項45】

アミロイドベースの疾患を有するまたはアミロイドベースの疾患を有することが疑われる対象を処置する方法であって、
ａ）前記対象が、
ｉ）請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及び
ｉｉ）前記検出可能な標識に関連するシグナルが前記対象から検出され得るかどうかを決定すること
によってアミロイド沈着物を有するかどうかを決定すること、及び
ｂ）前記シグナルが検出された場合、前記対象にアミロイドーシス処置を適用すること
を含む、前記方法。

【請求項46】

シグナルが検出されない場合、アミロイド沈着物の後の成長について前記対象をモニタリングする、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記シグナルの強度を決定すること及び前記シグナルを閾値と比較することをさらに含み、前記閾値を超える場合、前記対象は、アミロイド沈着物を保有すると決定される、請求項４５または４６に記載の方法。

【請求項48】

前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング、ＰＥＴ／ＣＴイメージング、ガンマシンチグラフィー、または光学的イメージングによって検出される、請求項４５～４７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項49】

前記アミロイドーシス処置は、請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、請求項４５～４８のいずれかに記載の方法。

【請求項50】

対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及び前記抗体ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む、前記方法。

【請求項51】

対象におけるアミロイドクリアランスをモニタリングする方法であって、
前記対象におけるアミロイド基質を請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物と接触させることであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質の前記ペプチドは、アミロイド基質についての結合親和性を有する、前記接触させること、及び
前記検出可能な標識からのシグナルを決定し、それにより前記アミロイドクリアランスを検出すること
を含む、前記方法。

【請求項52】

前記対象は、ヒトである、請求項４０～５１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

請求項４０～５２のいずれか１項に記載の方法において使用するための、請求項１～２２及び３９のいずれか１項に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または請求項２３～２７のいずれか１項に記載の組成物を含むキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年５月１８日に出願された米国仮出願番号６３／１９０，１９１の優先権を主張し、その内容は、それらの全体が参照により組み込まれる。

【0002】

ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：コンピュータ可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：１６５９９２０００６４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２２年５月１８日、サイズ：６９，１０４バイト）。

【0003】

本出願は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体－ペプチド融合タンパク質、及びそれを使用する方法に関する。

【背景技術】

【0004】

アミロイドーシスは、不可欠な器官及び組織におけるタンパク質フィブリル及びヘパラン硫酸プロテオグリカンの凝集及び沈着によって特性化される致命的タンパク質フォールディング障害である（Ｍｅｒｌｉｎｉ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９，５８３－５９６；Ｍｅｒｌｉｎｉ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．２５５，１５９－１７８；Ｄｅ Ｌｏｒｅｎｚｉ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１１，１０６５－１０８４；Ｍｅｒｌｉｎｉ，Ｇ．（２００４）Ｎｅｔｈ．Ｊ．Ｍｅｄ．６２，１０４－１０５）。アミロイドの頑固な蓄積は、器官機能不全及び重度の罹患率または死亡率に必ずつながる。沈着物は、アルツハイマー病、ハンチントン病またはプリオン病を有する患者のように脳性であり得、または軽鎖関連（ＡＬ）アミロイドーシス、トランスチレチン関連（ＡＴＴＲ）アミロイドーシス、及び２型糖尿病を有する患者に見られるように末梢性であり得る。局在性または全身性へのさらなるサブグループ化は、前駆体タンパク質が、局所的に（沈着の部位で）生成されるか、または血流において循環し、それぞれ、遠位の解剖学的部位で沈着するかどうかを示す（Ｗｅｓｔｅｒｍａｒｋ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．（２００７）Ａｍｙｌｏｉｄ．１４，１７９－１８３）。アミロイドは、任意の器官または組織に影響を及ぼし得るが、腎臓、膵臓、肝臓、脾臓、神経組織及び心臓は、家族性または散発性型の全身性アミロイドーシスを有する患者において沈着の主要な部位を構成する。アルツハイマー病は現在、４百万人超のアメリカ人を罹患させ、この数は、２０５０年までに１６００万人超まで増加すると推定される。それは、一般に希少障害とみなされるアミロイドーシスの中で最も一般的な形態であるが、米国において２００，０００症例を超える推定を伴って広く過小診断されている。

【0005】

これらのうち、主要な末梢アミロイドーシスは、トランスチレチン関連（ＡＴＴＲ）アミロイドーシス、続いて軽鎖関連（ＡＬ）アミロイドーシスである。前者は、野生型（散発性）またはバリアントトランスチレチン（遺伝性）の沈着に起因し、臨床的に、主に末梢神経及び心臓に現れる；しかしながら筋骨格障害が共通し、数十年器官沈着に先行し得る。後者は、免疫グロブリン軽鎖タンパク質から構成されるフィブリルの沈着をもたらす散発性単クローン性血漿細胞悪液質である。ＡＬは、すべての末梢アミロイドの症例のおよそ３分の２を占め、米国において１年当たり１００，０００人当たり約１．４人の計算された発生頻度を有し、これは急性リンパ球性及び慢性骨髄性白血病のものに匹敵する（Ｇｒｏｕｐ，Ｕ．Ｓ．Ｃ．Ｓ．Ｗ．（２００７）Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ：１９９９－２００３ Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｗｅｂ－Ｂａｓｅｄ Ｒｅｐｏｒｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ａｔｌａｎｔａ）。ＡＬは、関連する血漿細胞悪液質多発性骨髄腫の５分の１程度の頻度であるが、器官破壊の急速進行性特質、有効な抗アミロイド治療剤の欠如及び器官不全が生じる前に疾患を有効に診断することが不可能であることに部分的に起因して、１３．２ヶ月のみの生存中央値を伴ってほぼ間違いなくより壊滅的である。すべてのＡＬ患者の５％未満は、診断時から１０年以上生存する（Ｃｏｍｅｎｚｏ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｌｏｏｄ ９９，４２７６－４２８２）。その上、心臓ＡＬアミロイドーシスを有する患者において、生存中央値は、５ヶ月未満である。

【0006】

ＡＴＴＲは、全身性アミロイドーシスの一形態である。ＡＴＴＲアミロイドーシスを有する患者の２５％は、診断の２４ヶ月以内に死亡する。（Ｇｅｒｔｚ ａｎｄ Ｄｉｓｐｅｎｚｉｅｒｉ ＪＡＭＡ ３２４（１）７９－８９（２００２））。現行の療法は、器官損傷を予防しない。ＡＴＴＲアミロイドーシスは、トランスサイレチン（ＴＴＲ）フィブリルによって引き起こされる。トランスチレチンは、血液において甲状腺ホルモン及びビタミンＡの運搬を補助する肝臓によって生成されるタンパク質である。通常、ＴＴＲは、４つの一本鎖単量体から構成される四量体である。遺伝性ＡＴＴＲアミロイドーシスでは、ＴＴＲ遺伝子変異は、タンパク質を不安定化し、アミロイドフィブリルに凝集する単量体への四量体解離を引き起こすと考えられている。野生型ＡＴＴＲアミロイドーシスでは、正常なＴＴＲタンパク質は、不安定になり、ミスフォールディングし、アミロイドフィブリルを形成する。

【0007】

次いでこれらのアミロイドフィブリルは、全身にわたる複数の器官、例えば、手首において、例えば、手根管と呼ばれる狭い経路において蓄積する。これは、手及び腕のしびれ及びうずきを引き起こす手根管症候群を引き起こし得る。脊柱の狭窄（脊椎狭窄）を引き起こし得る脊柱管。心不全及び／または不規則な心臓リズム（心房細動と呼ばれる）を引き起こし得る心臓。

【0008】

米国における末梢アミロイドーシスの別の広まっている形態は、炎症関連（ＡＡ）アミロイドーシスであり、これは、慢性炎症性障害、例えば、関節炎、結核及び家族性地中海熱に関連する。ＡＡの発生頻度は、欧州の所定の地域で最も高く、頻度は民族間で様々である（Ｂｕｃｋ，Ｆ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｍｏｄ．Ｐａｔｈｏｌ．２，３７２－３７７）。家族性地中海熱が広まっており、処置されていない地域では、ＡＡの発生頻度は、１００％であり得る。欧州において、発生頻度は、デンマークで実施された剖検研究に基づいて、０．８６％と推定されている（Ｌｏｆｂｅｒｇ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ａｃｔａ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ，ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａ，ｅｔ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ ９５，２９７－３０２）；しかしながら、リウマチまたは乾癬性関節炎を有する患者では、ＡＡの発生は、２６％ほどの高さであり得る。そのような高い蔓延率は、疾患をより早く検出するためのスクリーニングプログラムを必要にし得る。アミロイドの沈着は、アミロイドフィブリルの前駆体である血清アミロイドタンパク質Ａ（ｓＡＡ）の血漿濃度の持続した増加に関連する（Ｒｏｃｋｅｎ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｖｉｒｃｈｏｗｓ Ａｒｃｈ．４４０，１１１－１２２）。ＡＡは、沈着する前駆体タンパク質のタイプがＡＬとは異なるが、いずれともフィブリル形成及び沈着に関連する共通のメカニズム的特徴を共有する（Ｒｏｃｋｅｎ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．２１０，４７８－４８７；Ｒｏｃｋｅｎ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（２００１）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５８，１０２９－１０３８）。

【0009】

アミロイドの病因論が十分に確立された障害に加えて、アミロイドの構造的及び着色的特性を有するフィブリル状沈着物が他の症候群で同定されているが、疾患状態に対するそれらの関連性は、まだ確立されていない。例えば、２型糖尿病では、膵島アミロイド前駆体タンパク質（ＩＡＰＰ）は、ランゲルハンス島においてアミロイドとして沈着する（Ｊａｉｋａｒａｎ，Ｅ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ １５３７，１７９－２０３）。ＩＡＰＰの凝集は、膵臓細胞に対して毒性であるオリゴマー構造をもたらす（Ｌｉｎ，Ｃ．Ｙ．ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｄｉａｂｅｔｅｓ ５６，１３２４－１３３２）。よって、１型糖尿病患者におけるＩＡＰＰアミロイドの形成は、β細胞破壊に寄与し、インスリン依存性への移行をもたらすことを示唆される（Ｊａｉｋａｒａｎ，Ｅ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ １５３７，１７９－２０３）。別の例では、アポリポタンパク質Ａ－Ｉから構成されるアミロイドフィブリルを含有する斑は、アテローム性動脈硬化性頸動脈を有する患者の半数以上において同定された（Ｗｅｓｔｅｒｍａｒｋ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４７，１１８６－１１９２；Ｍｕｃｃｈｉａｎｏ，Ｇ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１９３，２７０－２７５）。これらのフィブリルの沈着は、高齢患者においてより一般的であるが、アポＡ－Ｉは、疑いなく斑成長において早期に存在する（Ｖｏｌｌｍｅｒ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｖｉｒｃｈｏｗｓ Ａｒｃｈ．Ａ．Ｐａｔｈｏｌ．Ａｎａｔ．Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．４１９，７９－８８）。最後の例として、アポ－Ａ－Ｉアミロイドもまた、膝代替手術を有する患者から得られた関節半月板において同定され、関節の物理的劣化に寄与し得る（Ｓｏｌｏｍｏｎ，Ａ．ｅｔ ａｌ．（２００６）Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．５４，３５４５－３５５０）。

【0010】

合計で、２９種を超えるタンパク質が、アミロイド沈着物におけるフィブリルの構成成分として化学的または血清学的に同定されている。それは、疾患を識別し、処置を決定し、予後を確立するこれらのタンパク質の特質である。アミロイドフィブリルは、臨床的に異種の群の疾患に関連し、構造的に区別され、かつ機能的に多様な前駆体タンパク質から形成し得るが、沈着物自体は、フィブリル構造、フィブリルエピトープならびにヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）を含む同様の付随分子の発生を含む多数の極めて同様な特徴を共有する。アミロイドは、フィブリルに加えて、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）及び特にパールカンＨＳＰＧを含む異種複合体である（Ａｎｃｓｉｎ，Ｊ．Ｂ．（２００３）Ａｍｙｌｏｉｄ １０，６７－７９；Ａｉｌｌｅｓ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．６９，４４３－４４８；Ｋｉｓｉｌｅｖｓｋｙ，Ｒ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．９，２３－２４；Ｋｉｓｉｌｅｖｓｋｙ，Ｒ．（１９９０）Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．６３，５８９－５９１；Ｓｎｏｗ，Ａ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．５６，１２０－１２３；Ｌｉ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ Ｓ Ａ １０２，６４７３－６４７７）。

【0011】

現在まで、器官機能の回復を促進し、改善された予後をもたらし得る、アミロイド沈着物を除去するための最も有効な治療的介入は、免疫療法の手段としてアミロイド反応性抗体の使用を伴う。ＡＬアミロイドーシスの処置のためのモノクローナル抗体１１－１Ｆ４、ＡＬアミロイドーシスを有する患者のためのＮＥＯＤ００１、アミロイドーシスのためのＧＳＫ２３９８８５２（抗ＳＡＰモノクローナル抗体）、アルツハイマー病のためのソラネズマブ、アルツハイマー病のための静脈内ＩｇＧ（ＩＶＩＧ）、及びアルツハイマー病のためのバピネウズマブ、ならびにアルツハイマー病のためのアデュカムマブを含むいくつかの免疫療法（抗体）がアミロイド関連疾患のために開発されてきた。これらのアプローチの各々は、制限を有し、または後期段階の臨床試験（第２／３相）において主要アウトカムを満たさなかった。

【0012】

したがって、アミロイドーシス及びアミロイド関連疾患のための有効な処置が必要とされている。

【発明の概要】

【0013】

本明細書では、抗体に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む抗体－ペプチド融合タンパク質、ならびにそれを作製する方法及び使用する方法が提供される。

【0014】

一態様では、本明細書では、アミロイド反応性ペプチド；及びアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質であって、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖または軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている、抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する。

【0015】

いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。

【0016】

いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択される。

【0017】

いくつかの実施形態では、軽鎖は、軽鎖定常領域をさらに含み、重鎖は、重鎖定常領域を含む。

【0018】

いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0019】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含み、各軽鎖は、そのＣ末端でアミロイド反応性ペプチドと連結されている。

【0020】

いくつかの実施形態では、抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体である。

【0021】

いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。

【0022】

いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。

【0023】

いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号４９に示されるアミノ酸配列を含む。

【0024】

いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む。

【0025】

いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプのものである。いくつかの実施形態では抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプである。

【0026】

別の態様では、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質であって、アミロイドフィブリルに結合する抗体であって、抗体の軽鎖をそれぞれ含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、及び抗体の重鎖をそれぞれ含む第３及び第４のポリペプチドを含む、抗体、ならびに軽鎖または重鎖のＮ末端またはＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含み、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。

【0027】

別の態様では、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質であって、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド；及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み；アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている、抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。

【0028】

別の態様では、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質であって、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド；及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み；アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３からなるに示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている、抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。

【0029】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド基質について１．５ｎＭ未満のＥＣ５０を示す。

【0030】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされており、検出可能な標識は、蛍光標識または放射性標識を含む。いくつかの実施形態では、放射性標識は、Ｉ－１２３、Ｉ－１２４、Ｆ－１８、ＺＲ－８９、またはＴｃ－９９ｍである。

【0031】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照ＩｇＧ抗体と比較して改善された生体内分布、汎アミロイド反応性、及び向上した貪食から選択される１つ以上のｉｎ ｖｉｖｏ特徴を示す。

【0032】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌ、Ａβ、Ａβ（１－４０）、ＩＡＡＰ、ＡＬκ４、Ａｌλ１、ＡＴＴＲ、α－シヌクレイン、またはタウ４４１フィブリルに結合する。

【0033】

別の態様では、本明細書では、組成物であって、抗体－ペプチド融合タンパク質であって、ｉ）アミロイド反応性ペプチド；及びｉｉ）抗体を含み、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている、抗体－ペプチド融合タンパク質を含み；抗体－ペプチド融合タンパク質の少なくとも９０％は、インタクトである、組成物が提供される。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0034】

いくつかの実施形態では、組成物は、１０％以下の切断生成物を含み、切断生成物は、配列番号８９によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くＶＨ及び配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くＶＬを含む。

【0035】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、１つ以上のアミロイド基質についてＥＣ５０結合親和性を示し、ＥＣ５０結合親和性は、１．５ｎＭ未満である。

【0036】

いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。

【0037】

別の態様では、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするポリヌクレオチドが提供される。別の態様では、本明細書では、ポリヌクレオチドを含むベクターが提供される。別の態様では、本明細書では、ベクターを含む宿主細胞が提供される。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、哺乳動物細胞、任意にチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。

【0038】

別の態様では、本明細書では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法であって、ａ）抗体－ペプチド融合タンパク質の発現に好適なかん流細胞培養条件下で抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む宿主細胞を培養すること；及びｂ）約１２～３６時間毎に抗体－ペプチド融合タンパク質を回収することを含み；抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｉ）アミロイド反応性ペプチド；及びｉｉ）抗体を含み、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている、方法が提供される。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、抗体軽鎖の定常ドメインのＣ末端に連結されている。

【0039】

いくつかの実施形態では、方法は、工程ｂ）において回収された抗体－ペプチド融合体を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること及び陽イオン交換クロマトグラフィーカラムから抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させることをさらに含む。

【0040】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、切断型抗体－ペプチド融合タンパク質とは別々に溶出される。

【0041】

いくつかの実施形態では、宿主細胞は、ＣＨＯ細胞である。

【0042】

いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質の純度を決定することをさらに含み、抗体－ペプチド融合タンパク質の純度は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、またはそれらの組み合わせを含む１つ以上の分析方法を使用して決定される。

【0043】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも９０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質からの精製される。

【0044】

別の態様では、本明細書では、本明細書に記載の方法によって生成された抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。

【0045】

いくつかの態様では、本明細書では、アミロイド沈着物を含むアミロイド関連障害を有する対象を処置する方法であって、治療的有効量の抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、アミロイド関連障害は、全身性または局在化アミロイドーシスである。いくつかの実施形態では、アミロイド関連障害は、ＡＬ、ＡＨ、Ａβ２Ｍ、ＡＴＴＲ、トランスチレチン、ＡＡ、ＡＡｐｏＡＩ、ＡＡｐｏＡＩＩ、ＡＧｅｌ、ＡＬｙｓ、ＡＬＥｃｔ２、ＡＦｉｂ、ＡＣｙｓ、ＡＣａｌ、ＡＭｅｄ、ＡＩＡＰＰ、ＡＰｒｏ、ＡＩｎｓ、ＡＰｒＰ、パーキンソン病、アルツハイマー病、またはＡβアミロイドーシスからなる群から選択される。

【0046】

いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、抗体－ペプチド融合タンパク質によってオプソニン化される。いくつかの実施形態では、対象を抗体－ペプチド融合タンパク質で処置することは、アミロイド沈着物の貪食を引き起こす。いくつかの実施形態では、対象を抗体－ペプチド融合タンパク質で処置することは、下肢の腫れ、重度疲労、重度衰弱、息切れ、呼吸困難、しびれ、手、手首、または足における疼痛、下痢、便秘、意図的でない体重減少、舌肥大、皮膚の変化、不整脈、嚥下困難を含む群から選択される１つ以上の臨床的特徴の改善をもたらす。

【0047】

別の態様では、本明細書では、アミロイドベースの疾患を有する、または有すると疑われる対象を処置する方法であって、ａ）対象が、ｉ）抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することであって、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、投与すること、及びｉｉ）検出可能な標識に関連するシグナルが対象から検出され得るかどうかを決定することによってアミロイド沈着物を有するかどうかを決定すること；及びｂ）シグナルが検出された場合、対象にアミロイドーシス処置を適用することを含む、方法が提供される。

【0048】

いくつかの実施形態では、シグナルが検出されない場合、アミロイド沈着物の後の成長について対象をモニタリングする。いくつかの実施形態では、方法は、シグナルの強度を決定すること及びシグナルを閾値と比較することをさらに含み、閾値を超える場合、対象は、アミロイド沈着物を保有することが決定される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング、ＰＥＴ／ＣＴイメージング、ガンマシンチグラフィー、または光学的イメージングによって検出される。

【0049】

いくつかの実施形態では、アミロイドーシス処置は、抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質の投与は、対象におけるアミロイド沈着物の貪食を引き起こす。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質の投与は、対象におけるアミロイド沈着物のクリアランスをもたらす。

【0050】

別の態様では、本明細書では、対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することであって、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、投与すること、及び抗体ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む、方法が提供される。

【0051】

別の態様では、本明細書では、対象におけるアミロイドクリアランスをモニタリングする方法であって、対象におけるアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることであって、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質のペプチドは、アミロイド基質に対する結合親和性を有する、接触させること；及び検出可能な標識からのシグナルを決定し、それによりアミロイドクリアランスを検出することを含む、方法が提供される。

【0052】

いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。

【0053】

別の態様では、本明細書では、本明細書で提供される方法において使用するための、抗体－ペプチド融合タンパク質を含むキットが提供される。

【図面の簡単な説明】

【0054】

【図1】短い硬質スペーサーを介して軽鎖のＮ末端に融合されたペプチドを有する抗体－ペプチド融合タンパク質の概略図を示している。

【図2】短い硬質スペーサーを介して重鎖のＣ末端に融合されたペプチドを有する抗体－ペプチド融合タンパク質の概略図を示している。

【図3】短い硬質スペーサーを介して軽鎖のＣ末端に融合されたペプチドを有する抗体－ペプチド融合タンパク質の概略図を示している。

【図4】長い軟質スペーサーを介して軽鎖のＣ末端に融合されたペプチドを有する抗体－ペプチド融合タンパク質の概略図を示している。

【図5A】合成ｒＶλ６Ｗｉｌ軽鎖アミロイド様フィブリルへのキメラ（ｃ）１１－１Ｆ４、及びヒト化バリアント、ＶＨ１０／ＶＬ４、ＶＨ９／ＶＬ４、ＶＨ８／ＶＬ４、ＶＨ７／ＶＬ４、またはＶＨ６／ＶＬ３の結合を測定するユーロピウム結合免疫吸着アッセイ（ＥｕＬＩＳＡ）からのデータを示している。

【図5B】ｒＶλ６ＷｉｌフィブリルへのＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５（６－３－ｐ５）、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒ（６－３－ｐ５Ｒ）、ｃ１１－１Ｆ４、またはＶＨ６／ＶＬ３の結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。

【図5C】ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ抽出物、Ｋｅｎ ＡＴＴＲ抽出物、ＳＨＩ ＡＬλ肝臓抽出物、またはＴＡＬ ＡＬκ肝臓抽出物へのＶＨ９／ＶＬ／４－ｐ５Ｒの結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。

【図5D】ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ抽出物、Ｋｅｎ ＡＴＴＲ抽出物、ＳＨＩ ＡＬλ肝臓抽出物、またはＴＡＬ ＡＬκ肝臓抽出物へのＶＨ９／ＶＬ／４－ｐ５の結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。

【図5E】ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルへのｃ１１－１Ｆ４、ｍ１１－１Ｆ４、またはＶＨ９／ＶＬ４の結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。

【図5F】Ｓｎｏ ＡＴＴＲ抽出物（暗灰色の丸）またはＫｅｎ ＡＴＴＲ抽出物（明灰色の丸）へのＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５の結合、及びＳｎｏ ＡＴＴＲ抽出物（黒色の四角）へのｃ１１－１Ｆ４結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。

【図5G】Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ（灰色の丸、標識を参照されたい）、Ｓｎｏ ＡＴＴＲ抽出物（暗灰色の丸）、またはＫｅｎ ＡＴＴＲ抽出物（明灰色の丸）へのＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒの結合、及びＳｎｏ ＡＴＴＲ抽出物（黒色の四角）へのｃ１１－１Ｆ４結合を測定するＥｕＬＩＳＡからのデータを示している。モノクローナル抗体の対数変換されたモル濃度（－ｌｏｇ（Ｍ））がｘ軸に示されており、結合のレベル（フェムトモルのユーロピウム）がｙ軸に示されている。

【図6】プルダウンアッセイにおいて組織から得られたｒＶλ６Ｗｉｌアミロイド様フィブリル及びヒトアミロイド抽出物への^１２５Ｉ－ｍＩｇｐ５結合の結果を示している。ｙ軸は、結合した^１２５Ｉ－ｍＩｇＧ－ｐ５のパーセンテージを示しており、各サンプルについての結合したパーセンテージは、ヒストグラムのバーの上に示されている。ｘ軸は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、ＳＮＯ遺伝性（ｈ）ＡＴＴＲ、ＫＥＮ ｈＡＴＴＲ、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ、Ｐｅｒ２５３野生型（ｗｔ）ＡＴＴＲ、ＡＬκ ＨＩＧ抽出物、ＡＬκ ＴＡＬ抽出物、ＡＬλ ＳＨＩ抽出物、及びＡＬλ ＴＹＬ抽出物を含む試験されたアミロイド抽出物のタイプを示している。エラーバーは、標準偏差を表す。

【図7A】ｘ軸上で左から右に示されているように、ヒトＴＨＰ－１マクロファージ単独、またはヒト（ｈ）ＩｇＧ対照、ｃｈ１１－１Ｆ４、ｍｕＩｇｐ５（ｅｘｐｉＨＥＫ２９３細胞株で生成された）、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５、またはＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒの存在下でのｐＨｒｏｄｏレッド標識ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルの取り込みを示している。ｙ軸は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル取り込み（蛍光単位で測定される）のレベルを示しており、エラーバーは、標準偏差を表す。

【図7B】ｘ軸上で左から右まで示されるように、ＴＨＰ－１単独の存在下でまたはＴＨＰ－１とｈＩｇＧ対照、ｃ１１－１Ｆ４、ｍＩｇｐ５、ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５、またはＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５Ｒとの存在下でのマクロファージによるｐＨｒｏｄｏレッド標識されたｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルの貪食を示している。ｙ軸は、貪食のレベルを示しており（蛍光単位）、エラーバーは、標準偏差を表す。

【図7C】ｘ軸上で左から右まで示されるように、５μｇのリツキサン（陰性対照としてのキメラｍＡｂ）、５μｇのｃ１１－１Ｆ４、５μｇのＶＨ６／ＶＬ３、５μｇのＶＨ９／ＶＬ４、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒ、またはＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５の存在下でのマクロファージによるｐＨｒｏｄｏレッド標識されたｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルの貪食を示している。ｙ軸は、貪食のレベルを示しており（ｐＨｒｏｄｏ蛍光）、エラーバーは、標準偏差を表す。

【図8A】インタクトＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒを生成するために使用された流加及びかん流ワークフローを示している。純度（％インタクト融合タンパク質）が各生成方法について示されている。

【図8B】ｒＶλＷＩＬに対する流加精製されたＦＢ．１及びかん流精製されたＰＦ．１の親和性を試験する結合実験の結果を示している。左のｙ軸スケールは、流加精製されたＦＢ．１のために使用されており、右のｙ軸スケールは、かん流精製されたＰＦ．１のために使用されている。

【図9A】放射性標識された（１２５Ｉ）抗体ｈＩｇＧ１対照と比較した、放射性標識された（１２５Ｉ）ＰＦ．１抗体－ペプチド融合タンパク質のゲル分析を示している。還元された（還元）及び還元されていない（ＮＲ）サンプルが示されており、各タンパク質についてのＩｇＧ、ＩｇＨ、及びＩｇＬの位置が示されている。遊離放射性ヨウ素（１２５Ｉ）も表示されている。

【図9B】ＰＦ．１または１２５Ｉ－ｈＩｇＧ１のいずれかの注射から２４時間後の全身性ＡＡアミロイドーシスマウスの単一光子放射コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及びコンピューター断層撮影（ＣＴ）イメージングを示している。

【図9C】注射から２４時間後のＡＡマウスにおける異なる組織間の１２５Ｉ－ＰＦ．１及び１２５Ｉ－ｈＩｇＧ１の生体内分布を示している。

【図9D】ＡＡマウスの１２５Ｉ－ＰＦ．１または１２５Ｉ－ｈＩｇＧ１での注射から２４時間後の肝臓（左）、脾臓（中央）、及び心臓（右）組織のミクロオートラジオグラフィーを示している。

【図10A】ビオチン化ＰＦ．１及びコンゴーレッドでのＡＴＴＲ、ＡＬ、ＡＬＥＴＣ２またはＡβアミロイドを含有する異なるヒト組織（心臓、腎臓、脾臓、及び脳）の免疫組織化学染色を示している。黒色の矢印は、組織サンプルに結合したビオチン化ＰＦ．１を強調しており、白色の矢印は、組織サンプルにおけるアミロイドの存在を強調している（コンゴーレッド染色）。

【図10B】ビオチン化ＰＦ．１及びコンゴーレッドでのＡＴＴＲ、ＡＬ、ＡＬＥＴＣ２またはＡβアミロイドを含有する異なるヒト組織（心臓、腎臓、脾臓、及び脳）の免疫組織化学染色を示している。黒色の矢印は、組織サンプルに結合したビオチン化ＰＦ．１を強調しており、白色の矢印は、組織サンプルにおけるアミロイドの存在を強調している（コンゴーレッド染色）。

【図10C】ビオチン化ＰＦ．１及びコンゴーレッドでのＡＴＴＲ、ＡＬ、ＡＬＥＴＣ２またはＡβアミロイドを含有する異なるヒト組織（心臓、腎臓、脾臓、及び脳）の免疫組織化学染色を示している。黒色の矢印は、組織サンプルに結合したビオチン化ＰＦ．１を強調しており、白色の矢印は、組織サンプルにおけるアミロイドの存在を強調している（コンゴーレッド染色）。

【図10D】ビオチン化ＰＦ．１及びコンゴーレッドでのＡＴＴＲ、ＡＬ、ＡＬＥＴＣ２またはＡβアミロイドを含有する異なるヒト組織（心臓、腎臓、脾臓、及び脳）の免疫組織化学染色を示している。黒色の矢印は、組織サンプルに結合したビオチン化ＰＦ．１を強調しており、白色の矢印は、組織サンプルにおけるアミロイドの存在を強調している（コンゴーレッド染色）。

【図10E】ビオチン化ＰＦ．１及びコンゴーレッドでのＡＴＴＲ、ＡＬ、ＡＬＥＴＣ２またはＡβアミロイドを含有する異なるヒト組織（心臓、腎臓、脾臓、及び脳）の免疫組織化学染色を示している。黒色の矢印は、組織サンプルに結合したビオチン化ＰＦ．１を強調しており、白色の矢印は、組織サンプルにおけるアミロイドの存在を強調している（コンゴーレッド染色）。

【図11】Ａは、ｐＨｒｏｄｏレッド標識アミロイドの注射後のマウスにおけるｐＨｒｏｄｏレッドからの定量蛍光放出を示しており、注射されたアミロイドは、ＰＦ．１とまたは単独でプレインキュベートされた。増加した蛍光放出は、アミロイド貪食を示す。Ｂは、注射から１２日後のＰＦ．１で処置された及び対照で処置されたマウスの蛍光放出を示している。

【図12】Ａ～Ｄは、ＡＬκ、ＡＬλ、ＡＴＴＲｖ、及びＡＴＴＲｗｔアミロイド抽出物に対するＰＦ．１及びヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）対照を用いて実施されたｅｘ ｖｉｖｏ貪食アッセイの結果を示している。貪食は、ｐＨ感受性色素スクシンイミジル－ｐＨｒｏｄｏレッドフルオロフォアでの標識によって検出され、蛍光放出の増加は、向上した貪食を示す。ＡＴＴＲｗｔは、野生型トランスチレチン関連アミロイドーシスである。ＡＴＴＲｖは、バリアントトランスチレチン関連アミロイドーシスである。

【図13】Ａは、ｒＶλＷＩＬ Ａβ（１－４０）、ＡＴＴＲｗｔ、ＡＴＴＲＶ、ＡＬλ、及びＡＬκアミロイド抽出物に対するＰＦ．１の親和性を試験する結合実験の結果を示している。ＡＴＴＲｗｔは、野生型トランスチレチン関連アミロイドーシスである。ＡＴＴＲｖは、バリアントトランスチレチン関連アミロイドーシスである。Ｂは、図１２Ａにおいて使用された同じアミロイド抽出物パネルについてのヒトＩｇＧ１対照の親和性を試験する結合実験の結果を示している。

【図14】合成アミロイド様フィブリルα－シヌクレイン、タウ４４１、及びＡβ（１－４０）に対するＰＦ．７の親和性を試験する結合実験の結果を示している。ＰＦ．７は、かん流培養の７日後に収集されたＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒ抗体－ペプチド融合タンパク質である。

【図15】ヒト補体源としての２０％ヒト血清の存在または非存在下でｒＶλＷＩＬ（ＷＩＬ）及びＡＬκ（ＴＡＬ）フィブリルに対してＰＦ．１で実施されたｅｘ ｖｉｖｏ貪食アッセイの結果を示している。＋Ｃは、ヒト血清補体の存在を示す。

【発明を実施するための形態】

【0055】

本明細書では、アミロイドを結合させる抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。

【0056】

Ｉ．定義
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が別途明らかに示さない限り、単数及び複数の両方を指す。略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、ラテン語ｅｘｅｍｐｌｉ ｇｒａｔｉａに由来し、非限定的な例を示すために本明細書で使用される。よって、略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、用語「例えば（ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ）」と同義である。本明細書で使用される場合、用語「含む」は、「含まれる」を意味する。

【0057】

範囲は、「およそ」１つの特定の値、及び／または「およそ」別の特定の値として本明細書で表され得る。そのような範囲が表される場合、別の態様には、その範囲の１つの特定の値及び／またはその範囲の他の特定の値が含まれる。範囲の各々の端点は、他の端点に関連して、また、他の端点に独立して重要であることがさらに理解される。同様に、値が近似値として表される場合、先行詞「約」の使用によって、特定の値が別の態様を形成することが理解される。所定の例示的な実施形態では、用語「約」は、当該技術分野における正常な許容の範囲内、例えば、平均の２標準偏差内として理解される。約は、記述された値の１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、または０．０１％以内として理解され得る。別途文脈から明らかでない限り、本明細書で提供されるすべての数値は、約という用語によって修飾され得る。さらに、「例」、「例示的な」、または「例示された」等の本明細書で使用される用語は、好ましいことを示すことを意味しておらず、むしろ、その後に論述される態様が、示された態様の１つの例にすぎないことを説明することを意味している。

【0058】

核酸またはポリペプチドについて与えられたすべての塩基サイズまたはアミノ酸サイズ、及びすべての分子量または分子質量値は、おおよそであり、説明のために提供されることをさらに理解されたい。本明細書に記載のものと同様のまたは同等の方法及び物質が、本開示の実施または試験において使用され得るが、好適な方法及び物質が以下に記載される。矛盾する場合、用語の説明を含む本明細書が優先するであろう。また、物質、方法、及び例は、例示にすぎず、限定することは意図されていない。

【0059】

本開示の様々な実施形態のレビューを容易化するために、特定の用語の以下の説明が提供される：

【0060】

アミロイド、アミロイド沈着物、アミロイドフィブリル、及びアミロイド線維という用語は、特定の構造的形質を共有する不溶性線維性タンパク質凝集体を指す。そのタンパク質凝集体は、例えば、いくつかの異なるタンパク質のいずれかの凝集によって形成され、線維軸に対して垂直に積層されたβシートの秩序のある配置からなる三次構造を有する。Ｓｕｎｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９７）２７３：７２９－３９を参照されたい。器官におけるアミロイドの異常な蓄積は、アミロイドーシスをもたらし得る。それらは、それらの発生が多様であるが、すべてのアミロイドは、それらが特定の色素、例えば、コンゴーレッドで染色し、染色後に偏光で特徴的な赤緑色の複屈折外観を有するという共通のモルフォロジー的特性を有する。アミロイドはまた、共通の超微形態的特徴ならびに共通のＸ線回折及び赤外線スペクトルを共有する。

【0061】

アミロイドーシスは、アミロイドの存在、例えば、アミロイド沈着物の存在によって特性化される病理学的病態または疾患を指す。「アミロイド疾患」または「アミロイドーシス」は、アミロイドフィブリルの形成、沈着、蓄積または持続性に関連する疾患である。そのような疾患には、アルツハイマー病、ダウン症候群、Ｄｕｔｃｈ型のアミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、及び脳ベータ－アミロイド血管症が含まれるがこれらに限定されない。他のアミロイド疾患、例えば、全身性ＡＡアミロイドーシス、ＡＬアミロイドーシス、ＡＴＴＲアミロイドーシス、ＡＬｅｃｔ２アミロイドーシス、及びＩＩ型糖尿病のＩＡＰＰアミロイドーシスもまた、アミロイド疾患である。

【0062】

アミロイド形成性は、アミロイド沈着物を生成することまたは生成する傾向があることを指す。例えば、所定の可溶性単量体タンパク質は、よく秩序化された非分岐状の８～１０ｎｍの幅のフィブリルへのそれらの凝集をもたらす広範なフォーメーション的変化を受け得、これはアミロイド凝集体の形成をもたらす。３０種を超えるタンパク質が、例えば、ヒトにおいてアミロイド沈着物（またはアミロイド）を形成することが見出されている。免疫グロブリン軽鎖等の、多様なタンパク質のクラス内のすべてのタンパク質がアミロイドを形成することが可能であるわけではない。すなわち、いくつかのタンパク質は、それらがアミロイドを形成する傾向がないことを意味する非アミロイド形成性である。しかしながら、そのクラスの他のタンパク質は、アミロイド沈着物を形成し得、よって、アミロイド形成性である。さらに、軽鎖タンパク質のクラス内で、一部は、それらがアミロイドフィブリルを形成する容易性に基づいて他のものよりも「アミロイド形成性」であるとみなされ得る。所定の軽鎖タンパク質は、患者においてまたはｉｎ ｖｉｔｒｏでアミロイドフィブリルを容易に形成するそれらの不能性により、非アミロイド形成性またはアミロイド形成性がより低いとみなされる。

【0063】

動物：例えば、哺乳動物及び鳥類を含むカテゴリである、生存多細胞脊椎動物生物。哺乳動物という用語には、ヒト及び非ヒト哺乳動物の両方が含まれる。同様に、用語「対象」には、ヒト及び獣医学的対象の両方が含まれる。いくつかの例では、対象は、対象、例えば、アミロイド疾患に罹患している対象である。

【0064】

クリアランス：用語「消失させる」または「クリアランス」は、測定可能な程度低減または除去することを指す。例えば、本明細書に記載されるアミロイド沈着物のクリアランスは、沈着物を測定可能なまたは識別可能な程度まで低減または除去することに関する。クリアランスは、１００％の除去をもたらし得るが、それまで必要とされない。むしろ、クリアランスは、１００％未満の除去、例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％またはそれを超える除去をもたらし得る。

【0065】

コンジュゲート：本明細書で使用される場合、用語「コンジュゲート」は、２つ以上の物質のカップリングまたは接続生成物を指し、得られる生成物は、少なくとも２つの区別される要素、例えば、少なくとも２つのドメインを有する。カップリングされた物質は、同じであり、または異なり得る。そのようなカップリングは、１つ以上の連結基を介するものであり得る。「タンパク質コンジュゲート」は、例えば、２つ以上のアミノ酸配列のカップリングに起因する。２つのタンパク質のコンジュゲートは、例えば、個々に接続されたタンパク質の各々に対応するドメインを有する単一のタンパク質をもたらす。

【0066】

本明細書における用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、具体的にはモノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異的抗体（例えば、二重特異的抗体）、及び所望の生物学的活性を示す限り抗体断片を包含する。

【0067】

「単離された」抗体は、その天然環境の成分から同定、分離、及び／または回収されたものである。その天然環境の混入成分は、抗体の研究的、診断的、または治療的使用を妨害するであろう材料であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含み得る。いくつかの実施形態では、抗体は、（１）抗体が、例えば、ローリー法によって決定された場合、９５重量％超、いくつかの実施形態では、９９重量％超の抗体になるまで、（２）例えば、スピニングカップ配列決定装置の使用によって、少なくとも１５残基のＮ末端または内部アミノ酸配列を得るために十分な程度まで、または（３）例えば、クマシーブルーまたはシルバー染色を使用して、還元または非還元条件下でのＳＤＳ－ＰＡＧＥによる均質性まで精製される。単離された抗体には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないので、組換え細胞内のｉｎ ｓｉｔｕの抗体が含まれる。通常、しかしながら、単離された抗体、少なくとも１つの精製工程によって調製されるであろう。

【0068】

「ネイティブ抗体」は通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成される約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されているが、ジスルフィド連結の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖はまた、規則的に間隔を空けて鎖内ジスルフィド架橋を有する。各重鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、いくつかの定常ドメインが続く。各軽鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他方の端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列しており、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。

【0069】

用語「定常領域」は、免疫グロブリンの他の部分である抗原結合部位を含有する可変領域と比べてより保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の一部分を指す。定常領域は、重鎖のＣＲ１、ＣＲ２及びＣＲ３ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３とも称される；まとめてＣＨ）及び軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬもしくはＣＬ１）ドメインを含有する。

【0070】

抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「ＶＨ」と称され得る。軽鎖の可変ドメインは、「ＶＬ」と称され得る。これらのドメインは通常、抗体の最も可変性の高い部分であり、抗原結合部位を含有する。

【0071】

用語「可変」は、可変ドメインの所定の部分の配列が抗体間で大きく異なり、各特定の抗体のその特定の抗原に対する結合及び特異性において使用されるという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均等には分布していない。それは、軽鎖及び重鎖の可変ドメインの両方において、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。ネイティブ重鎖及び軽鎖の可変ドメインはそれぞれ、ベータ－シート構造を接続し、いくつかの場合では、ベータ－シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＣＤＲによって接続されたベータ－シート構成を大いに採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖におけるＣＤＲは、ＦＲ領域によって近接して一緒に保持され、他の鎖からＣＤＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ，（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接的に関与しないが、例えば、抗体依存性細胞毒性における抗体の関与等の様々なエフェクター機能を示す。

【0072】

任意の哺乳動物種からの抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる、２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てられ得る。

【0073】

用語ＩｇＧ「アイソタイプ」または「サブクラス」は、本明細書で使用される場合、それらの定常領域の化学的及び抗原的特徴によって定義される免疫グロブリンのサブクラスのいずれかを意味する。

【0074】

それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、抗体（免疫グロブリン）は、異なるクラスに割り当てられ得る。５つの主要なクラスの免疫グロブリン：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらの一部は、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２にさらに分けられ得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構成及び三次元立体配置はよく知られており、概して、例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）に記載されている。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合的または非共有結合的会合によって形成される、より大きな融合分子の一部であり得る。

【0075】

用語「全長抗体」、「インタクト抗体」及び「完全抗体」は、以下に定義される抗体－断片ではなく、その実質的にインタクト形態の抗体を指すために本明細書で互換的に使用される。その用語は特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。

【0076】

本明細書における目的のための「むき出しの抗体」は、細胞傷害性部位または放射性標識にコンジュゲートされていない抗体である。

【0077】

「抗体断片」は、インタクト抗体の一部分（好ましくはその抗原結合領域を含む）を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体断片は、抗原結合断片である。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦｖ断片；ダイアボディ；線状抗体；一本鎖抗体分子；及び抗体断片から形成された多重特異的抗体が含まれる。

【0078】

抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片（各々が単一の抗原－結合部位を有する）、及び残りの「Ｆｃ」断片（その名称は、容易に結晶化するその能力を反映する）を生成する。ペプシン処置は、２つの抗原結合部位を有し、かつ依然として抗原を架橋させることが可能であるＦ（ａｂ’）_２断片を生成する。

【0079】

「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含有する最小抗体断片である。一実施形態では、２鎖Ｆｖ種は、緊密な非共有結合性会合で１重鎖及び１軽鎖可変ドメインの二量体からなる。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種において、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖及び重鎖が２鎖Ｆｖ種におけるものと類似する「二量体」構造において関連し得るように軟質ペプチドリンカーによって共有結合的に連結され得る。この構成では、各可変ドメインの３つのＣＤＲは、ＶＨ－ＶＬ二量体の表面上で抗原－結合部位を画定するように相互作用する。まとめると、６つのＣＤＲは、抗原－結合特異性を抗体に付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのみのＣＤＲを含むＦｖの半分）でさえも、全結合部位よりも低い親和性ではあるが、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。

【0080】

Ｆａｂ断片は、軽鎖及び重鎖可変ドメインを含有し、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨＩ．）も含有する。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨＩドメインのカルボキシ末端での数個の残基の付加によりＦａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、本明細書において、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離のチオール基を保有するＦａｂ’のための呼称である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体断片は元々、Ｆａｂ’断片の間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成された。抗体断片の他の化学的カップリングも知られている。

【0081】

「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖に存在する。通常、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、これにより、ｓｃＦｖは、抗原結合のための所望の構造を形成することが可能となる。ｓｃＦｖのレビューについては、例えば、Ｐｌｕｃｋｆｈｕｎ，ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－ Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４），ｐｐ．２６９－３１５を参照されたい。

【0082】

用語「モノクローナル抗体」は、本明細書で使用される場合、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体を指し、例えば、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能性のある変異、例えば、天然に存在する変異を除いて同一である。よって、「モノクローナル」という修飾語は、別個の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。所定の実施形態では、そのようなモノクローナル抗体は、典型的には、標的を結合させるポリペプチド配列を含む抗体を含み、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列からの単一の標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって得られたものである。例えば、選択プロセスは、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、または組換えＤＮＡクローンのプール等の複数のクローンからの独自のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列は、例えば、標的への親和性の改善、標的結合配列のヒト化、細胞培養中でのその生成の改善、ｉｎ ｖｉｖｏでのその免疫原性の低減、多重特異性抗体の作製等を行うようにさらに改変され得ること、及び改変された標的結合配列を含む抗体も本発明のモノクローナル抗体であることが理解されるべきである。異なる決定基（エピトープ）に対して仕向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して仕向けられている。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、それらには通常、他の免疫グロブリンが混在していないという点で有利である。

【0083】

「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものとして解釈されないものとする。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５－９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，．１．４（３）：２５３－２６０（．１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１ ））、リコンビナントＤＮＡ法（例えば、米国特許番号４，８．１６，５６７を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）；及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）を参照されたい）、及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を生成するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ １１ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７：３３（１９９３）；米国特許番号５，５４５，８０７；５，５４５，８０６；５，５６９，８２５；５，６２５，１２６；５，６３３，４２５及び５，６６１，０１６；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １４：８２６（１９９６）；ならびにＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ １３：６５－９３（１９９５）を参照されたい）を含む多様な技術によって生成され得る。

【0084】

モノクローナル抗体には、本明細書では具体的に、「キメラ」抗体であって、重鎖及び／または軽鎖の一部分は、特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同であるのに対し、鎖（複数可）の残部は、別の種に由来するまたは別の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である、「キメラ」抗体、ならびに所望の生物学的活性を示す限りそのような抗体の断片が含まれる（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照されたい）。キメラ抗体には、抗体の抗原結合領域が、例えば、マカクサルを対象となる抗原で免疫することによって生成される抗体に由来する霊長類化抗体が含まれる。

【0085】

非ヒト（例えば、ネズミ）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＣＤＲからの残基が、所望の特異性、親和性及び／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類等の非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体で、またはドナー抗体では見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体性能をさらに改良するために行われ得る。通常、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含むことになり、その場合、超可変ループのすべてまたは実質的にすべては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲのすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを任意に含むことになる。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ ２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１ ：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）：及び米国特許番号６，９８２，３２１及び７，０８７，４０９も参照されたい。

【0086】

「ヒト抗体」は、ヒトによって生成された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製する技術のいずれかを使用して作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当該技術分野において知られている様々な技術を使用して生成され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。ヒトモノクローナル抗体の調製のために、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（ｌ）：８６－９５（１９９１）に記載の方法も利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５：３６８－７４（２００１）も参照されたい。ヒト抗体は、抗原負荷に応答してそのような抗体を生成するように改変されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化異種マウスに抗原を投与することにより調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関する米国特許番号６，０７５，１８１及び６，１５０，５８４を参照されたい）。例えば、Ｌｉ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）ｒｅｇａｒｄｉｎｇ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｖｉａ ａ ｈｕｍａｎ Ｂ－ｃｅｌｌ ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙも参照されたい。

【0087】

用語「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、本明細書で使用される場合、エピトープ、例えば、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体－可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は、６つのＣＤＲを含み、３つがＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）にあり、３つがＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）にある。ネイティブ抗体では、Ｈ３及びＬ３は、６つのＣＤＲのうちで最も高い多様性を示し、Ｈ３は特に、優れた特異性を抗体に与える上で独自の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）；Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｗｕ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３））を参照されたい。実際、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科動物抗体は、軽鎖の非存在下で機能的かつ安定である。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）ａｎｄ Ｓｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照されたい。

【0088】

多数のＣＤＲ描写が本明細書で使用され、本明細書に包含される。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＫａｂａｔＣＤＲであり得、これは配列可変性に基づき、最も一般的に使用されている（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（上掲））。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲであり得る。Ｃｈｏｔｈｉａは、むしろ、構造的ループの位置に言及する（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＡｂＭ ＣＤＲであり得る。ＡｂＭ ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を表し、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、「ｃｏｎｔａｃｔ」ＣＤＲであり得る。「ｃｏｎｔａｃｔ」ＣＤＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＣＤＲの各々からの残基が以下に記述されている。

【表1】

【0089】

ＣＤＲは、以下のように「伸長ＣＤＲ」を含み得る：ＶＬ中、２４～３６または２４～３４（Ｌ１）、４６～５６または５０～５６（Ｌ２）及び８９～９７または８９～９６（Ｌ３）、ならびにＶＨ中、２６～３５（Ｈ１）、５０～６５または４９～６５（好ましい実施形態）（Ｈ２）及び９３～１０２、９４～１０２または９５～１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの伸長ＣＤＲ定義の各々について、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（上掲）に従って付番される。

【0090】

「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＣＤＲ残基以外のそれらの可変ドメイン残基である。

【0091】

本明細書で使用される場合、用語「に特異的に認識する」または「に特異的である」は、生物学的分子を含む分子の異種集団の存在下で標的の存在を決定する、標的と抗体との間の結合等の測定可能な及び再生可能な相互作用を指す。例えば、標的（エピトープであり得る）に特異的に結合する抗体は、他の分子に結合する場合よりもより高い親和性、アビディティで、より容易に、及び／またはより長い継続期間でこの標的を結合させる抗体である。一実施形態では、関連しない標的への抗体の結合の程度は、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定された場合、標的への抗体の結合の約１０％未満である。所定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、＜１Μ、＜１００μＭ、＜１０ｎＭ、＜１ｎＭ、または＜０．１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を有する。所定の実施形態では、抗体は、異なる種からのタンパク質間で保存されたタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合には、排他的結合が含まれ得るが、それを必要としない。

【0092】

有効量または治療的有効量：障害または疾患のいずれかの症状及び／または根底にある原因を防止、処置（予防を含む）、低減及び／または改善するために、例えば、アミロイドーシスを防止及び／または阻害するために十分な薬剤の量。いくつかの実施形態では、「有効量」は、疾患の症状を低減または排除するために十分である。有効量は、１回以上投与され得る。例えば、ペプチドの有効量は、アミロイドを結合させために十分な量である。ペプチドは、体重１ｋｇ当たり約１μｇ超から約３０ｍｇ／ｋｇまでの量で非経口で投与される場合、有効であり得る。

【0093】

阻害する：測定可能な程度低減すること。阻害は、例えば、機能の完全な喪失または測定されている態様の完全な休止を必要としない。例えば、斑形成を阻害することは、斑のさらなる成長を停止させること、斑のさらなる成長を減速させること、または斑のサイズを低減することを意味し得る。

【0094】

疾患を阻害することまたは処置すること：疾患または病態の完全な発症を阻害すること、例えば、アミロイドーシスを阻害すること。「処置」は、発症し始めた後に疾患または病理学的病態の兆候または症状を改善する治療的介入を指す。疾患または病理学的状態に関する用語「改善すること」は、処置の任意の観察可能な有益な効果を指す。有益な効果は、罹患しやすい対象における疾患の臨床的症状の遅延した発症、疾患のいくつかのまたはすべての臨床的症状の重症度の低減、疾患の進行を減速させること、対象の健康全般または健全性の改善によって、または特定の疾患に特異的な当該技術分野でよく知られている他のパラメータによって明らかにされ得る。「予防」処置は、病理を発症するリスクを低下させる目的で疾患の兆候を示さないまたは早期徴候のみを示さない対象に投与される処置である。

【0095】

アミロイド沈着物形成に関して、「阻害」は、例えば、対照と比較した場合、アミロイド沈着物の形成の低減の防止を指す。例えば、阻害は、対照と比較してアミロイド沈着物の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％またはそれを超える低減をもたらし得る。

【0096】

標識は、別の分子の検出を容易化するためにその分子に直接的にまたは間接的にコンジュゲートされた任意の検出可能な化合物または組成物を指す。標識の具体的な非限定的な例には、蛍光タグ、化学発光タグ、ハプテン、酵素連結物、及び放射性同位体が含まれる。「検出可能に標識された」タンパク質は、例えば、タンパク質の存在が、タンパク質に関連する標識によって決定され得ることを意味する。

【0097】

単離された：「単離された」生物学的成分、例えば、ペプチド（例えば、本明細書に開示されるペプチドの１つ以上）、細胞、核酸、または血清サンプルは、その成分が天然に発生する生物の細胞における他の生物学的成分、例えば、他の染色体及び染色体外ＤＮＡ及びＲＮＡ、及びタンパク質から実質的に分離され、それから離れるように生成され、またはそれから離れるように精製されている。「単離された」核酸、ペプチド及びタンパク質には、標準的な精製方法によって精製された核酸及びタンパク質が含まれる。その用語はまた、細胞における組換え発現によって調製された核酸、ペプチド及びタンパク質ならびに化学的に合成されたペプチド及び核酸を包含する。用語「単離された」または「精製された」は、絶対的な純粋性を必要としない；むしろ、それは、相対的な用語として意図される。よって、例えば、単離されたペプチド調製物は、ペプチドまたはタンパク質がそのペプチドまたはタンパク質が細胞内のその天然環境にある場合よりも濃縮されているものである。好ましくは、調製物は、タンパク質またはペプチドが、調製物の総ペプチドまたはタンパク質含有量の少なくとも５０％、例えば、ペプチドまたはタンパク質濃度の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、またはさらに少なくとも９９％を表すように精製される。

【0098】

接続する：本明細書で使用される場合、用語「接続する」、「接続された」、「連結する」、または「連結された」は、タンパク質及び／またはタンパク質ドメインを機能的に接続させるための当該技術分野で知られている任意の方法を指す。例えば、あるタンパク質ドメインは、例えば、組換え融合タンパク質において、介在配列またはドメインを伴ってまたは伴わずに、共有結合を介して別のタンパク質ドメインに連結され得る。接続にはまた、例えば、配列が共に発現するように同じ核酸鎖に２つの核酸配列を共に配置すること等、２つの配列を共に統合することが含まれる。

【0099】

核酸：ホスホジエステル結合を介して連結されたヌクレオチド単位（リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、関連する天然に存在する構造的バリアント、及び合成の天然に存在しないそれらのアナログ）から構成されるポリマー、関連する天然に存在する構造的バリアント、及び合成の天然に存在しないそれらのアナログ。よって、その用語には、ヌクレオチド及びそれらの間の連結が天然に存在しない合成アナログ、例えば及び限定されないが、ホスホロチオエート、ホスホルアミデート、メチルホスホネート、キラル－メチルホスホネート、２－Ｏ－メチルリボヌクレオチド、ペプチド－核酸（ＰＮＡ）等を含むヌクレオチドポリマーが含まれる。そのようなポリヌクレオチドは、例えば、自動化ＤＮＡ合成機を使用して、合成され得る。用語「オリゴヌクレオチド」は、典型的には、通常は約５０ヌクレオチド以下の短いポリヌクレオチドを指す。ヌクレオチド配列がＤＮＡ配列（すなわち、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ）によって表される場合、これにはまた、「Ｕ」が「Ｔ」に置き換わるＲＮＡ配列（すなわち、Ａ、Ｕ、Ｇ、Ｃ）が含まれることが理解される。

【0100】

ヌクレオチドには、糖に連結された塩基、例えば、ピリミジン、プリンまたはその合成アナログ、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）のようにアミノ酸に連結された塩基を含むモノマーを含むがこれらに限定されない。ヌクレオチドは、ポリヌクレオチドにおける１つのモノマーである。ヌクレオチド配列は、ポリヌクレオチドにおける塩基の配列を指す。

【0101】

ヌクレオチド配列を記載するために従来の表記が本明細書で使用される：一本鎖ヌクレオチド配列の左側の末端は、５’末端である；二本鎖ヌクレオチド配列の左側方向は、５’方向と称される。生成中のＲＮＡ転写産物へのヌクレオチドの５’から３’への付加の方向は、転写方向と称される。ｍＲＮＡと同じ配列を有するＤＮＡ鎖は、「コード鎖」と称される；そのＤＮＡから転写されたｍＲＮＡと同じ配列を有するＤＮＡ鎖上にあり、かつＲＮＡ転写産物の５’末端に対して５’に位置する配列は、「上流配列」と称される；ＲＮＡと同じ配列を有するＤＮＡ鎖上にあり、かつコードＲＮＡ転写産物の３’末端に対して３’にある配列は、「下流配列」と称される。

【0102】

「ｃＤＮＡ」は、一本鎖または二本鎖形態のいずれかのｍＲＮＡと相補的または同一であるＤＮＡを指す。

【0103】

コードするは、ヌクレオチド（例えば、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ及びｍＲＮＡ）の定義された配列またはアミノ酸の定義された配列のいずれかを有する生物学的プロセスにおける他のポリマー及びマクロ分子の合成のための鋳型として機能するための、ポリヌクレオチド、例えば、遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡにおけるヌクレオチドの特定の配列の内在する特性またはそれに起因する生物学的特性を指す。よって、遺伝子は、その遺伝子によって生成されるｍＲＮＡの転写及び翻訳が細胞または他の生物学的システムにおいてタンパク質を生成する場合、タンパク質をコードする。コード鎖（そのヌクレオチド配列は、ｍＲＮＡ配列と同一であり、通常は配列表に提供される）、及び遺伝子またはｃＤＮＡの転写のための鋳型として使用される非コード鎖はいずれとも、その遺伝子またはｃＤＮＡのタンパク質または他の生成物をコードすると称され得る。別途特定されない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」には、互いのバージョンを変性させ、同じアミノ酸配列をコードするすべてのヌクレオチド配列が含まれる。タンパク質及びＲＮＡをコードするヌクレオチド配列には、イントロンが含まれ得る。

【0104】

薬学的に許容可能な担体：使用される薬学的に許容可能な担体は、従来のものである。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｂｙ Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９^ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９５）は、本明細書に開示される融合タンパク質の薬学的送達に好適な組成物及び製剤を記載している。

【0105】

通常、担体の特質は、用いられている特定の投与様式に依存する。例えば、非経口製剤は通常、ビヒクルとして薬学的に及び生理的に許容可能な流体、例えば、水、生理食塩水、平衡化塩溶液、水性デキストロース、グリセロール等を含む注射可能な流体を含む。固体組成物（例えば、粉末、丸剤、錠剤、またはカプセル形態）の場合、従来の非毒性固体担体には、例えば、薬学的グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、またはステアリン酸マグネシウムが含まれ得る。生物学的に中性の担体に加えて、投与される薬学的組成物は、少量の非毒性補助物質、例えば、浸潤または乳化剤、防腐剤、及びｐＨ緩衝剤等、例えば、酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラウレートを含有し得る。

【0106】

ポリペプチド：モノマーがアミド結合を介して互いに接続されたアミノ酸残基であるポリマー。アミノ酸がアルファ－アミノ酸である場合、Ｌ－光学的異性体またはＤ－光学的異性体のいずれかが使用され得、Ｌ－異性体が好ましい。用語「ポリペプチド」または「タンパク質」は、本明細書で使用される場合、任意のアミノ酸配列を包含することが意図され、それには、修飾された配列、例えば、糖タンパク質が含まれる。用語「ポリペプチド」は、天然に存在するタンパク質、ならびに組換え的にまたは合成的に生成されたものを包含することが具体的に意図されている。いくつかの例では、ペプチドは、本明細書に開示されるペプチドの１つ以上である。

【0107】

精製された：用語「精製された」は、絶対純度を必要としない；むしろ、それは、相対的用語として意図される。よって、例えば、精製されたタンパク質調製物は、言及されるタンパク質が、細胞内または生成反応チャンバー内（適切な場合）のその天然環境におけるタンパク質よりも純粋であるものである。

【0108】

組換え：組換え核酸は、天然に存在しない配列を有する、または２つの別途分離された配列のセグメントの人工的組み合わせによって作製された配列を有するものである。この人工的組み合わせは、しばしば、化学的合成によってまたは、より一般的には、核酸の単離されたセグメントの人工操作によって、例えば、遺伝子操作技術によって達成され得る。

【0109】

配列同一性：２つの核酸配列、または２つのアミノ酸配列間の類似性は、別途配列同一性と称される、配列間の類似性の観点から表される。配列同一性は、同一（または類似もしくは相同）パーセンテージの観点から頻繁に測定される；パーセンテージが高いほど、２つの配列が類似する。

【0110】

比較のための配列のアライメントの方法は、当該技術分野でよく知られている。様々なプログラム及びアライメントアルゴリズムが Ｓｍｉｔｈ ＆ Ｗａｔｅｒｍａｎ Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２，１９８１；Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ＆ Ｗｕｎｓｃｈ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３，１９７０；Ｐｅａｒｓｏｎ ＆ Ｌｉｐｍａｎ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４，１９８８；Ｈｉｇｇｉｎｓ ＆ Ｓｈａｒｐ Ｇｅｎｅ ７３：２３７－２４４，１９８８；Ｈｉｇｇｉｎｓ ＆ Ｓｈａｒｐ ＣＡＢＩＯＳ ５：１５１－１５３，１９８９；Ｃｏｒｐｅｔ ｅｔ ａｌ．Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６，１０８８１－９０，１９８８；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｐｐｌｓ．Ｉｎ ｔｈｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ８，１５５－６５，１９９２；及びＰｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．２４，３０７－３１，１９９４に記載されている。Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０，１９９０）は、配列アライメント方法及び相同性計算の詳細な考慮事項を提示している。

【0111】

ＮＣＢＩ Ｂａｓｉｃ Ｌｏｃａｌ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ Ｓｅａｒｃｈ Ｔｏｏｌ（ＢＬＡＳＴ）（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０，１９９０）は、配列分析プログラムｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎ及びｔｂｌａｓｔｘと組み合わせて使用するために、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）を含むいくつかのソースから及びインターネット上で利用可能である。

【0112】

機能的に連結された：第１の核酸配列は、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的に関連して配置されている場合、第２の核酸配列と機能的に連結されている。例えば、プロモーターは、プロモーターがコード配列の転写または発現に影響を与える場合、機能的に連結されている。通常、機能的に連結されたＤＮＡ配列は、連続しており、２つのタンパク質コード領域を接続するために必要な場合、同じリーディングフレームにある。

【0113】

薬学的薬剤：対象または細胞に適切に投与された場合に所望の治療的または予防的効果を誘導することが可能な化学的化合物または組成物。

【0114】

ベクター：宿主細胞に導入され、それにより形質転換された宿主細胞を生成する核酸分子。組換えＤＮＡベクターは、組換えＤＮＡを有するベクターである。ベクターには、宿主細胞において複製を可能とする核酸配列、例えば、複製起点が含まれ得る。ベクターにはまた、１つ以上の選択マーカー遺伝子及び当該技術分野で知られている他の遺伝子的要素が含まれ得る。ウイルスベクターは、１つ以上のウイルスに由来する少なくともいくつかの核酸配列を有する組換えＤＮＡベクターである。ベクターという用語には、プラスミド、線状核酸分子、ならびに至る所で記載されるように、アデノウイルスベクター及びアデノウイルスが含まれる。

【0115】

対象または個体は、哺乳動物、例えば、ヒトを指す。対象は、ヒト患者であり得る。対象は、疾患または病態に罹患している、または罹患していると疑われる患者であり得、処置または診断を必要とし得、または疾患または病態の進行のモニタリングを必要とし得る。患者はまた、有効性についてモニタリングすることが必要な処置療法を受けている場合がある。いくつかの例示的な実施形態では、対象には、アミロイドーシス、例えば、アルツハイマー病、ハンチントンもしくはプリオン病、または軽鎖（ＡＬ）アミロイドーシス及び２型糖尿病を有する患者に見られるような末梢アミロイドーシスに罹患している個体が含まれる。

【0116】

好ましくは、同一ではない残基位置は、保存的アミノ酸置換によって異なる。用語「保存的アミノ酸置換」は、同様の側鎖を有する残基の互換性を指す。例えば、脂肪族側鎖を有するアミノ酸の群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンであり；脂肪族－ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸の群は、セリン及びトレオニンであり；アミド含有側鎖を有するアミノ酸の群は、アスパラギン及びグルタミンであり；芳香族側鎖を有するアミノ酸の群は、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンであり；塩基性側鎖を有するアミノ酸の群は、リジン、アルギニン、及びヒスチジンであり；硫黄含有側鎖を有するアミノ酸の群は、システイン及びメチオニンである。好ましい保存的アミノ酸置換の群は、バリン－ロイシン－イソロイシン、フェニルアラニン－チロシン、リジン－アルギニン、アラニンバリン、グルタミン酸－アスパラギン酸、及びアスパラギン－グルタミンである。

【0117】

本明細書で論述されるように、抗体または免疫グロブリン分子のアミノ酸配列における小さなバリエーションは、本発明によって包含されるものとして企図され、アミノ酸配列におけるバリエーションが少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％、及び最も好ましくは９９％を維持することを提供する。特に、保存的アミノ酸置き換えが企図される。保存的置き換えは、それらの側鎖において関連するアミノ酸のファミリー内で生じるものである。遺伝子的にコードされたアミノ酸は通常、次のファミリーに分けられる：（１）酸性アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸であり、（２）塩基性アミノ酸は、リジン、アルギニン、ヒスチジンであり、（３）非極性アミノ酸は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファンであり、（４）非荷電極性アミノ酸は、グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシンである。親水性アミノ酸には、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、ヒスチジン、リジン、セリン、及びトレオニンが含まれる。疎水性アミノ酸には、アラニン、システイン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファン、チロシン及びバリンが含まれる。アミノ酸の他のファミリーには、（ｉ）脂肪族ヒドロキシファミリーであるセリン及びトレオニン、（ｉｉ）アミド含有ファミリーであるアスパラギン及びグルタミン、（ｉｉｉ）脂肪族ファミリーであるアラニン、バリン、ロイシン及びイソロイシン、及び（ｉｖ）芳香族ファミリーであるフェニルアラニン、トリプトファン及びチロシンが含まれる。例えば、ロイシンとイソロイシンまたはバリンとの、アスパラギン酸とグルタミン酸との、トレオニンとセリンの独立した置き換え、またはアミノ酸と構造的に関連するアミノ酸との同様との置き換えは、特に置き換えがフレームワーク部位内のアミノ酸に関与しない場合、得られる分子の結合または特性に対する主要な効果を有しないであろうということを予測することが妥当である。アミノ酸変化が機能的ペプチドをもたらすかどうかは、ポリペプチド誘導体の特定の活性をアッセイすることによって決定され得、アッセイは、本明細書に詳細に記載されている。抗体または免疫グロブリン分子の断片またはアナログは、当業者によって容易に調製され得る。断片またはアナログの好ましいアミノ及びカルボキシ末端は、機能的ドメインの境界の近くで生じる。構造的及び機能的ドメインは、公共または私有の配列データベースに対するヌクレオチド及び／またはアミノ酸配列データの比較によって同定され得る。好ましくは、既知の構造及び／または機能の他のタンパク質で生じる配列モチーフまたは予測されたタンパク質コンフォメーションドメインを同定するためにコンピューター化された比較方法が使用される。既知の三次元構造にフォールディングするタンパク質配列を同定するための方法は、知られている。（Ｂｏｗｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３：１６４（１９９１）。よって、前述の例は、当業者が、本発明に従って構造的及び機能的ドメインを定義するために使用され得る配列モチーフ及び構造的コンフォメーションを認識し得ることを実証する。

【0118】

好ましいアミノ酸置換は、（１）タンパク質分解に対する感受性を低減する、（２）酸化に対する感受性を低減する、（３）タンパク質複合体を形成するための結合親和性を改変する、（４）結合親和性を改変する、及び（４）そのようなアナログの他の物理化学的または機能的特性を付与または修飾するものである。アナログには、天然に存在するペプチド配列以外の配列の様々な変異タンパク質が含まれ得る。例えば、単一のまたは複数のアミノ酸置換（好ましくは保存的アミノ酸置換）は、天然に存在する配列（好ましくは分子間接触を形成するドメイン（複数可）外のポリペプチドの一部分）において行われ得る。保存的アミノ酸置換は、親配列の構造的特徴を実質的に変化させるべきではない（例えば、置き換えアミノ酸は、親配列で生じるヘリックスを破断する傾向がないべきであり、または親配列を特性化する二次構造の他のタイプを破壊するべきではない）。当該技術分野で認識されているポリペプチド二次及び三次構造の例は、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ（Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８４））；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｃ．Ｂｒａｎｄｅｎ ａｎｄ Ｊ．Ｔｏｏｚｅ，ｅｄｓ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９１））；及びＴｈｏｒｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ３５４：１０５（１９９１）に記載されている。

【0119】

ＶＨにおけるＣＤＲ１を除き、ＣＤＲは通常、超可変ループを形成するアミノ酸残基を含む。ＣＤＲはまた、抗原を接触させる残基である「特異性決定残基」または「ＳＤＲ」を含む。ＳＤＲは、短縮ＣＤＲ、またはａ－ＣＤＲと呼ばれるＣＤＲの領域内に含まれる。例示的なａ－ＣＤＲ（ａ－ＣＤＲ－Ｌｌ、ａ－ＣＤＲ－Ｌ２、ａ－ＣＤＲ－Ｌ３、ａ－ＣＤＲ－Ｈｌ、ａ－ＣＤＲ－Ｈ２、及びａ－ＣＤＲ－Ｈ３）は、ＬＩの３１～３４、Ｌ２の５０～５５、Ｌ３の８９～９６、ＨＩの３１－３５Ｂ、Ｈ２の５０～５８、及びＨ３の９５～１０２のアミノ酸残基で生じる。（Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照されたい）。

【0120】

ＩＩ．抗体－ペプチド融合タンパク質
本明細書では、アミロイドを標的とする抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。そのような抗体－ペプチド融合タンパク質には、例えば、抗体、その断片、抗原結合（Ｆａｂ）領域のＮ末端またはＣ末端軽鎖タンパク質の伸長により、または抗体の重鎖のＮ末端またはＣ末端を介して抗体に連結され、それによりペプチド－抗体融合体を形成するアミロイド反応性ペプチドが含まれ、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。抗体－ペプチド融合タンパク質は、例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することによって、アミロイドーシスを有するまたはアミロイドーシスを有することが疑われる対象を処置するために使用され得る。

【0121】

いくつかの実施形態では、本明細書では、アミロイド反応性ペプチド；及び貪食を誘導する、またはオプソニンとして作用する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。いくつかの実施形態では、オプソニンは、標的に結合し、その標的の貪食を誘導するタンパク質である。いくつかの実施形態では、オプソニンは、抗体または抗体－ペプチド融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイドに結合し、アミロイドの貪食を促進することによってオプソニンとして作用する。いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ及び／またはＣ末端及び／または重鎖のＮ及び／またはＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体に連結された複数のアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、ペプチドスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、以下の表１に示されるアミノ酸配列を含む。

【0122】

いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド抗体融合体は、ＮからＣ末端方向でアミロイド反応性ペプチド、スペーサー、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を順序正しく含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド抗体融合体は、ＮからＣ末端方向でＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを順序正しく含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド抗体融合体は、ＮからＣ末端方向でアミロイド反応性ペプチド、スペーサー、ＶＬ、及びＣＬを順序正しく含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド抗体融合体は、ＮからＣ末端方向でＶＬ、及びＣＬ、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを順序正しく含む軽鎖を含む。

【表2】

【0123】

いかなる特定の理論にも縛られることなく、抗体－ペプチド融合タンパクのアミロイド反応性ペプチドは、対象に投与された場合、抗体－ペプチド融合タンパク質をアミロイド沈着物に標的化すると考えられる。次いでＦｃドメインがアミロイドの部位で免疫反応を誘発させ、それにより例えば、オプソニン化によってアミロイドの除去をもたらす。また、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチド単独よりも長い半減期を有すると考えられる。例えば、ヒトにおけるＩｇＧの循環半減期は、およそ２１日である一方で、ヒトにおけるアミロイド反応性ペプチド単独の半減期は、およそ１１時間である。よって、Ｉｇは、循環における抗体－ペプチド融合タンパク質の半減期を延長させる。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質の半減期は、アミロイド反応性ペプチド単独と比較して約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％またはそれ以上増加する。このように、抗体－ペプチド融合タンパク質は、対象に投与された場合、アミロイド沈着物の部位でより長くその免疫刺激効果を発揮し得、それによりアミロイド沈着物の部位で免疫反応を増加させる。

【0124】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のアミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３のいずれか１つとして示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％またはそれ以上同一である、例えば、配列番号１～１３のいずれか１つとして示されるアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体またはその機能的断片に連結されたアミロイド反応性ペプチドは、約１０～約５５アミノ酸を含み、またはそれからなり得る。本発明のアミロイド反応性ペプチドは、例えば、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、または５５アミノ酸を含み、またはそれからなり得る。そのようなペプチドは、例えば、国際特許出願ＷＯ２０１６０３２９４９及びＷａｌｌ ｅｔ ａｌ．（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．２０１３ Ｊｕｎ ４；８（６）：ｅ６６１８１）（それらの全体が本明細書に組み込まれる）に記載されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％またはそれを超える配列同一性配列を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％またはそれを超える配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、１つ以上のアミノ酸置換を含む配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１３に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３のいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む。

【0125】

抗体またはその断片に結合したアミロイド反応性ペプチドのすべてまたは一部を形成するアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸の立体異性体及び修飾物、天然に存在しないアミノ酸、翻訳後に修飾されたアミノ酸、酵素的に合成されたアミノ酸、誘導体化アミノ酸、アミノ酸を模倣するために設計されたコンストラクトまたは構造等であり得る。本発明のペプチドを形成するアミノ酸は、天然に存在するタンパク質に見られる２０種の一般的なアミノ酸の１つ以上、または修飾されたアミノ酸及び非通常アミノ酸の１つ以上であり得る。抗体－ペプチド融合タンパク質は、標準的な分子生物学的技術を使用して化学的合成または組換え手段を含む、当業者に知られている任意の技術によって作製され得る。

【0126】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体は、表２に示される抗体の１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲを含む。

【表3】

【0127】

特定の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体を含み、抗体は、（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含み、抗体は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0128】

特定の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体を含み、抗体は、（ａ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌｌ、（ｂ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬを含み、抗体は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。

【0129】

一実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ及び配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体を含み、抗体は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。配列番号１５及び配列番号１６のアミノ酸配列が以下に提供される。
m１１－１Ｆ４ ＶＨ 配列番号１５
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＬＳＩＳＫＤＩＳＫＳＱＶＬＦＫＬＮＳＬＱＴＤＤＴＡＴＹＹＣＶＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
m１１－１Ｆ４ ＶＬ 配列番号１６
ＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＬＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ

【0130】

別の態様では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体を含み、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨ、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌｌ、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬを含み、抗体は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表１に列挙されるアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。

【0131】

別の態様では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体を含み、抗体は、配列番号１５に示される配列を有するＶＨのＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、及びＶＨ ＣＤＲ３ならびに配列番号１６に示される配列を有するＶＬのＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２、及びＶＬを含み、抗体は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表１に列挙されるアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１～１３のいずれかのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。

【0132】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、Ｃ末端リジン残基を有しない配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含み、抗体は、アミロイド反応性ペプチドに連結されている。

【0133】

別の態様では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表１に列挙されるアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１～１３のいずれかのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、抗体軽鎖のＮ末端もしくはＣ末端または重鎖のＮもしくはＣ末端に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体はまた、アミロイド反応性ペプチドと抗体軽鎖のＮ末端もしくはＣ末端または重鎖のＮもしくはＣ末端との間にスペーサーアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、ペプチドスペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、軟質または硬質である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、軽鎖のＣ末端に連結されている。いくつかの実施形態では、配列番号２に示されるアミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して軽鎖のＣ末端に連結されている。

【0134】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、表１のアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号１～１３のいずれかのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0135】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、表１のアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号１～１３のいずれかのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0136】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、表１のアミノ酸配列のいずれかを含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0137】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号１のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｎ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｃ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0138】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号２のアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｎ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｃ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0139】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む重鎖及び配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む軽鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号１～１３のいずれかのアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドに連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｎ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、Ｃ末端で軽鎖に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0140】

また、本明細書では、アミロイド反応性ペプチドに融合されたヒトアミロイドフィブリルに結合するヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質が提供される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、本明細書に記載されるヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、ｍ１１－１Ｆ４に由来するヒト化ＶＨ及び／またはＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０６０５９６（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるヒト化抗体を含む。ヒト化ＶＨ及びＶＬ領域の例示的なアミノ酸配列が以下の表３～４に提供される。表３～４では、ＣＤＲ配列は、下線が引かれており、逆変異残基ならびにヒト化バリアントＶＬ４及びＶＨ９に導入されたさらなる変異は、太字かつイタリック体である。ＶＬ４及びＶＨ９に導入されたさらなる変異が表３～４のＩｇＧ欄に列挙されている；これらの変異は、ＶＬまたはＶＨのＮ末端に対して付番されている。修飾されたＣＤＲを有するＶＬ４及びＶＨ９のバリアントについてのＣＤＲアミノ酸配列は、以下のＶＬ４及びＶＨ９と比較して表５及び表６に提示されている。

【表4】

【表5-1】

【表5-2】

【表6】

【表7】

【0141】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び重鎖可変領域（ＶＨ）を含むヒト化抗体を含み、ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、表２に示される抗体の１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、配列番号１５に示される配列を有するＶＨのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３のアミノ酸配列をそれぞれ含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３、ならびに配列番号１６に示される配列を有するＶＬのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３のアミノ酸配列をそれぞれ含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0142】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び重鎖可変領域（ＶＨ）を含むヒト化抗体を含み、ＶＬは、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、ＶＨは、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する、表２に示される抗体の１、２、３、４、５、または６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１５に示される配列を有するＶＨのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３のアミノ酸配列をそれぞれ含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３、ならびに１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号１６に示される配列を有するＶＬのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３のアミノ酸配列をそれぞれ含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0143】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0144】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0145】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0146】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0147】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0148】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７５に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0149】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７６に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0150】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0151】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0152】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0153】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号８０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0154】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４～７０からなる群から選択されるアミノ酸配列アミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0155】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0156】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６５に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0157】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６６に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0158】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0159】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0160】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0161】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0162】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬ、ならびに配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して配列番号２に示されるアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＩｇＧ１アイソタイプを有する。いくつかの実施形態では、抗体ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端までＶＬ、ＣＬ、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを順序正しく含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して軽鎖のＣ末端に融合されている。

【0163】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬのアミノ酸配列を含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、表３に示されるＶＬ２、ＶＬ３、ＶＬ４、ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ、ＶＬ４－Ｎ３３Ｑ、ＶＬ４－Ｎ３３Ｅ、ＶＬ４－Ｎ３３Ａ、ＶＬ４－Ｎ３３Ｈ、ＶＬ４－Ｇ３４Ａ、またはＶＬ４－Ｇ３４Ｖからなる群から選択されるＶＬを含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、配列番号３２～４２からなる群に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0164】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表４に示されるＶＨのアミノ酸配列を含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、表４に示されるように、ＶＨ２、ＶＨ３、ＶＨ４、ＶＨ５、ＶＨ６、ＶＨ７、ＶＨ８、ＶＨ９、ＶＨ１０、ＶＨ９－Ｄ５４Ｓ、ＶＨ９－Ｄ５４Ｑ、ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ、ＶＨ９－Ｄ５４Ａ、ＶＨ９－Ｄ５４Ｈ、ＶＨ９－Ｇ５５Ａ、ＶＨ９－Ｇ５５Ｖ、ＶＨ９－Ｍ６４Ｖ、ＶＨ９－Ｍ６４Ｉ、ＶＨ９－Ｍ６４Ｌ、またはＶＨ９－Ｍ６４Ａからなる群から選択されるＶＨを含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号４３～６３からなる群に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0165】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0166】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３３に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0167】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0168】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0169】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0170】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３７に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0171】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0172】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３９に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0173】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0174】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号４１に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0175】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号４２に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３～６３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0176】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４３に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0177】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４４に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0178】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４５に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0179】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４６に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0180】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４７に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0181】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0182】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４９に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0183】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0184】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0185】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0186】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５３に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0187】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５４に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0188】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0189】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５６に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0190】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５７に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0191】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５８に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0192】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５９に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0193】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号６０に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0194】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号６１に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0195】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号６２に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0196】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３２～４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号６３に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0197】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0198】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0199】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0200】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0201】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４９に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0202】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、スペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して軽鎖のＣ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して配列番号２に示されるアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。

【0203】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ４のＶＬ、及び表４に示されるＶＨ９のＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0204】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ４－Ｎ３３ＳのＶＬ、及び表４に示されるＶＨ９－Ｄ５４ＥのＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0205】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ３のＶＬ、及び表４に示されるＶＨ６のＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0206】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ４のＶＬ、及び表４に示されるＶＨ１０のＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ４のＶＬ、及び表４に示されるＶＨ８のＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、表３に示されるＶＬ４のＶＬ、及び表４に示されるＶＨ７のＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含むＶＬ、及び配列番号６９に示されるアミノ酸配列を含むＶＨを含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0207】

いくつかの実施形態では、ヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、表１に示されるペプチドのうちの１つ以上を含む。所定のいくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。

【0208】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、軽鎖のＮ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、軽鎖のＣ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーによって軽鎖のＮ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーによって軽鎖のＣ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、ペプチドスペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、軟質スペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、グリシン及びセリン残基を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、アミノ酸配列ＧＧＧＹＳを含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２７に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、硬質スペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、非荷電である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６に示されるアミノ酸配列を含む。

【0209】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、重鎖のＮ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、重鎖のＣ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、重鎖を含み、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーによって重鎖のＮ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒト化抗体を含み、ヒト化抗体は、重鎖を含み、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーによって重鎖のＣ末端に融合されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、ペプチドスペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、軟質スペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、硬質スペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、非荷電である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。

【0210】

所定の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質には、軽鎖のＣまたはＮ末端または重鎖のＣまたはＮ末端とアミロイド反応性ペプチドとの間にアミノ酸のスペーサー配列が含まれ得る。所定の実施形態では、ペプチド－Ｉｇコンジュゲートには、ペプチドのＮ末端と、試薬を発現する細胞からのＩｇ－ペプチドの分泌のために必要とされるリーダー配列との間にアミノ酸のスペーサー配列が含まれ得る。いくつかの実施形態では、スペーサーは、軟質スペーサーである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、硬質スペーサーペプチドである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、非荷電である。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、約３～約５５アミノ酸を含み、またはそれからり得る。本発明のスペーサーペプチドは、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、または５５アミノ酸を含み、またはそれからなり得る。本明細書で使用される場合、核酸配列またはアミノ酸配列は、そのような核酸配列またはアミノ酸配列が配列において互いに近接している場合、別の核酸配列またはアミノ酸配列と「隣接」している。例えば、２つの核酸配列は、本明細書に記載されるように互いに隣接し得るが、依然として介在スペーサー配列を含み得る。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、以下の表９に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６に示されるアミノ酸配列を含む。

【表8】

【0211】

いくつかの実施形態では、表１に示されるペプチドの１つ以上は、軽鎖タンパク質のＣまたはＮ末端または重鎖のＣまたはＮ末端を介してヒト化抗体またはその機能的断片に連結され得、それにより、ヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質を形成する。すなわち、以下の表１に特定される配列のいずれかは、抗体－ペプチド融合タンパク質を形成するために、独立してまたは同時にヒト化抗体またはその機能的断片の重鎖または軽鎖に連結され得る。例えば、アミロイド反応性ペプチドの２つは、例えば、アミロイド反応性ペプチドアミノ酸配列をヒト化抗体軽鎖のＮ末端に連結させること、またはアミロイド反応性ペプチドアミノ酸配列をヒト化抗体軽鎖のＣ末端に接続させることによって単一の抗体と連結され得る。

【0212】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、軽鎖定常領域（例えば、ＣＬ１を含む）をさらに含む軽鎖を含み、重鎖定常領域（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む）を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの軽鎖及び２つの重鎖を含む。

【0213】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド及び軽鎖を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端方向で、アミロイド反応性ペプチド、スペーサー、可変軽鎖領域、及び定常軽鎖領域を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0214】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、軽鎖及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端方向で、可変軽鎖領域、定常軽鎖領域、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0215】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、スペーサーペプチド、及び軽鎖を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、スペーサー、ＶＬ、及びＣＬ１を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0216】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、軽鎖、スペーサーペプチド、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ、ＣＬ１、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0217】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、分泌リーダーペプチド、第１のスペーサーペプチド、アミロイド反応性ペプチド、第２のスペーサーペプチド、及び軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、第１のスペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のスペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第２のスペーサーペプチドは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２のスペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。

【0218】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、分泌リーダーペプチド、第１のスペーサーペプチド、軽鎖、第２のスペーサーペプチド、及びアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、第１のスペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のスペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第２のスペーサーペプチドは、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２のスペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。

【0219】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ、及びＣＬ１を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0220】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びアミロイド反応性ペプチドを含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ、及びＣＬ１を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びアミロイド反応性ペプチドを含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0221】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、スペーサーペプチド、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ、及びＣＬ１を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、スペーサー、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0222】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ及びＣＬ１を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬは、本明細書に記載のＶＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、スペーサーペプチド、及びアミロイド反応性ペプチドを含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーペプチドは、配列番号８３～８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨは、本明細書に記載のＶＨのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＬ、及びＣＬ１を含む第１及び第２の軽鎖、ならびに、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む第１及び第２の重鎖を含み、第１及び第２の重鎖のＣＨ２及びＣＨ３は、二量体を形成する。

【0223】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、アミロイド反応性ペプチド、スペーサーペプチド、及び軽鎖を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８７に示されるアミノ酸を含む軽鎖、及び配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＮ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、図１に示される構造を含む。

【0224】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、重鎖、スペーサーペプチド、及びアミロイド反応性ペプチドを含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８８に示されるアミノ酸を含む軽鎖、及び配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖を含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第３及び第４のポリペプチドを含み、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、図２に示される構造を含む。

【0225】

いくつかの実施形態では、抗体ペプチド融合体は、Ｎ末端からＣ末端方向で可変軽鎖領域、定常軽鎖領域、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８９に示されるアミノ酸を含む軽鎖、及び配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、図３に示される構造を含む。

【0226】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＮからＣ末端まで、軽鎖、スペーサーペプチド、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、重鎖は、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号９０に示されるアミノ酸を含む軽鎖、及び配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、図４に示される構造を含む。

【0227】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイドフィブリルに結合する抗体であって、抗体の軽鎖をそれぞれ含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびに抗体の重鎖をそれぞれ含む第３及び第４のポリペプチドを含む、抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、軽鎖または重鎖のＮ末端またはＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介してアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して配列番号２に示されるアミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含む。

【0228】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体ペプチド融合体は、Ｎ末端からＣ末端方向で可変軽鎖領域、定常軽鎖領域、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含む。

【0229】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイドにおける１つ以上のアミロイド形成ペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイドは、アミロイド形成λ６可変ドメインタンパク質（Ｖλ６Ｗｉｌ）またはアミロイド形成免疫グロブリン軽鎖（ＡＬ）、Ａβ（１－４０）アミロイド様フィブリルまたはアミロイド形成Ａβ前駆体タンパク質、または血清アミロイドタンパク質Ａ（ＡＡ）を含む。他の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイドは、アミロイド形成形態の免疫グロブリン重鎖（ＡＨ）、β_２－ミクログロブリン（Ａβ_２Ｍ）、トランスチレチンバリアント（ＡＴＴＲ）、アポリポタンパク質ＡＩ（ＡＡｐｏＡＩ）、アポリポタンパク質ＡＩＩ（ＡＡｐｏＡＩＩ）、ゲルソリン（ＡＧｅｌ）、リゾチーム（ＡＬｙｓ）、白血球化学走化性因子（ＡＬｅｃｔ２）、フィブリノゲンバリアント（ＡＦｉｂ）、シスタチンバリアント（ＡＣｙｓ）、カルシトニン（ＡＣａｌ）、ラクトアドヘリン（ＡＭｅｄ）、膵島アミロイドポリペプチド（ＡＩＡＰＰ）、プロラクチン（ＡＰｒｏ）、インスリン（ＡＩｎｓ）、プリオンタンパク質（ＡＰｒＰ）；α－シヌクレイン（ＡαＳｙｎ）、タウ（ＡＴａｕ）、心房性ナトリウム利尿因子（ＡＡＮＦ）、またはＩＡＡＰ、ＡＬκ４、ＡＬλ１他のアミロイド形成ペプチドを含む。抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイド形成ペプチドは、タンパク質、タンパク質断片、またはタンパク質ドメインであり得る。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物またはアミロイドフィブリルは、組換えアミロイド形成タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、アミロイドは、疾患の病理の一部である。

【0230】

いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、アミロイド軽鎖フィブリルに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、様々なアミロイドフィブリル、例えば、アミロイド形成λ６可変ドメインタンパク質（Ｖλ６Ｗｉｌ）またはアミロイド形成免疫グロブリン軽鎖（ＡＬ）、Ａβ（１－４０）アミロイド様フィブリルまたはアミロイド形成Ａβ前駆体タンパク質、または血清アミロイドタンパク質Ａ（ＡＡ）に結合する。他の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイドは、アミロイド形成形態の免疫グロブリン重鎖（ＡＨ）、β_２－ミクログロブリン（Ａβ_２Ｍ）、トランスチレチンバリアント（ＡＴＴＲ）、アポリポタンパク質ＡＩ（ＡＡｐｏＡＩ）、アポリポタンパク質ＡＩＩ（ＡＡｐｏＡＩＩ）、ゲルソリン（ＡＧｅｌ）、リゾチーム（ＡＬｙｓ）、白血球化学走化性因子（ＡＬｅｃｔ２）、フィブリノゲンバリアント（ＡＦｉｂ）、シスタチンバリアント（ＡＣｙｓ）、カルシトニン（ＡＣａｌ）、ラクトアドヘリン（ＡＭｅｄ）、膵島アミロイドポリペプチド（ＡＩＡＰＰ）、プロラクチン（ＡＰｒｏ）、インスリン（ＡＩｎｓ）、プリオンタンパク質（ＡＰｒＰ）；α－シヌクレイン（ＡαＳｙｎ）、タウ（ＡＴａｕ）、心房性ナトリウム利尿因子（ＡＡＮＦ）、またはＩＡＡＰ、ＡＬκ４、ＡＬλ１他のアミロイド形成ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、ヘパラン硫酸グリコサミノグリカンに結合する。

【0231】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物またはフィブリルは、１つ以上の器官に位置する。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、１つ以上の組織タイプに位置する。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物またはフィブリルは、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び血液のうちの１つ以上に位置する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の器官または組織タイプに位置するアミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、汎アミロイド反応性を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び／または血液に位置するアミロイド沈着物またはフィブリルに対する反応性を示す。

【0232】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、抗体ペプチド融合体は、Ｎ末端からＣ末端方向で可変軽鎖領域、定常軽鎖領域、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、汎アミロイド反応性を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び／または血液に位置するアミロイド沈着物またはフィブリルに対する反応性を示す。

【0233】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、高い結合親和性でアミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、高い結合親和性でアミロイド基質に結合する。いくつかの実施形態では、結合親和性は、５００ｎＭ、４００ｎＭ、３００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、または１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、５００ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、１００ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、１０ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、０．０５ｎＭ～１００ｎＭ、０．１ｎＭ～５０ｎＭ、０．２ｎＭ～２５ｎＭ、０．３ｎＭ～１０ｎＭ、０．４ｎＭ～５ｎＭ、０．５ｎＭ～２ｎＭ、０．６ｎＭ～１ｎＭ、または０．２ｎＭ～１．５ｎＭである。いくつかの実施形態では、結合親和性は、異なるアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、結合親和性は、ヒトアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、結合親和性は、合成アミロイド基質について同じまたは異なる。

【0234】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＥＣ５０結合親和性によって表される結合親和性でアミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＥＣ５０結合親和性によって表される結合親和性でアミロイド基質に結合する。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、５００ｎＭ、４００ｎＭ、３００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、または１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、１０ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、異なるアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、ヒトアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、合成アミロイド基質について同じまたは異なる。

【0235】

当業者が理解するように、断片抗原結合（またはＦａｂ領域）は、標的抗原と自然に相互作用する抗体の頭部である。Ｆａｂ領域の成分により、例えば、抗体は、特定のリガンドに結合し、その相互作用を介して、免疫系をさらに活性化することが可能となる。ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭ抗体アイソタイプの場合、Ｉｇは、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含むインタクトＩｇを形成するために対で相互作用する２つのタンパク質、すなわち、重鎖及び軽鎖から構成される。重鎖及び軽鎖の両方は、可変ドメイン及び定常ドメイン（Ｆａｂ機能性領域を含む軽及び重可変ドメインならびに細胞受容体及び補体と相互作用するフラグメント結晶化可能（Ｆｃ）ドメインを形成する重鎖）にさらに分けられる。ＩｇのＦｃ領域は、高度に保存されたＮ－グリコシル化部位を保有する。

【0236】

所定の例示的な実施形態では、以下の表１に示されるペプチドの１つ以上が、軽鎖タンパク質のＣまたはＮ末端または重鎖のＣまたはＮ末端を介して抗体またはその機能的断片に連結され得、それにより抗体－ペプチド融合タンパク質を形成する。すなわち、表１において以下に特定される配列のいずれかが、抗体またはその機能的断片の重鎖または軽鎖に独立して、または同時に連結されてペプチド－抗体コンジュゲートが形成され得る。例えば、そのアミロイド反応性ペプチドのうちの２つが、アミロイド反応性ペプチドアミノ酸配列をＩｇ軽鎖タンパク質のＮ末端に接続させること等によって、単一の抗体と連結され得る。

【0237】

所定の例示的な実施形態では、組換えＤＮＡ技術が用いられ得、その場合、本発明のペプチドをコードするヌクレオチド配列がクローニングされ、発現ベクター内にＩｇ軽鎖に融合され、適切な宿主細胞に形質転換またはトランスフェクションされ、発現のために好適な条件下で培養される。次いでペプチド－Ｉｇ軽鎖融合体が単離される。有利には、また、当業者が本開示の観点から理解するように、本明細書に記載の方法は、任意のペプチド配列を抗体に接続するために使用され得る。すなわち、アミロイド反応性ペプチドは、抗体に連結されたペプチドの例として使用されるが、ペプチドを抗体（例えば、軽鎖タンパク質のＮ及び／またはＣ末端及び／またはＩｇ重鎖タンパク質のＮ及び／またはＣ末端）に連結させる方法は、多様な異なるペプチドを抗体に接続するために使用され得る。

【0238】

所定の例示的な実施形態では、複数の同じまたは異なるペプチドが、単一の抗体またはその機能的断片に連結され得る。例えば、第１の発現ベクターには、ペプチドＡが軽鎖タンパク質のＮ末端に連結されたものとして発現するように、ベクター内に位置するペプチドＡのための核酸配列と共に、ペプチドＡをコードする核酸配列と統合された軽鎖核酸配列が含まれ得る。さらに、第２の発現ベクターには、ペプチドＢが軽鎖タンパク質のＮ末端に連結されたものとして発現するように、ベクター内に位置するペプチドＢのための核酸配列と共に、ペプチドＢをコードする核酸配列と統合された重鎖核酸配列が含まれ得る。

【0239】

そのような例示的な実施形態では、両方の発現ベクターが同じ細胞内で発現する場合、得られるＩｇタンパク質は、各軽鎖のＮ末端上に１つのペプチドＡ配列（合計で２つのペプチドＡ）及び重鎖のＮ末端上にペプチドＢを有し得る。所定の例示的な実施形態では、ベクターには、Ｃ末端上にペプチドＣが含まれ得、それにより２つのペプチドＡ配列（各軽鎖上に１つ）、重鎖のＮ末端上にペプチドＢ配列、及び重鎖のＣ末端に連結されたペプチドＣ配列を有する抗体をもたらす。このように、また、当業者が本開示に基づいて理解するように、発現ベクターは、タンパク質の同じまたは異なる組み合わせを有するように免疫グロブリンを修飾するために調整され得る。アミロイド反応性ペプチドを使用する特定の例として、抗体－ペプチド融合タンパク質には、２つのｐ５タンパク質配列（配列番号１）（すなわち、各軽鎖Ｎ末端上に１つ）が含まれ得る。他の例示的な実施形態では、免疫グロブリンに連結されたペプチドは、リガンドに対する親和性を有し得、これによりリガンドを検出するために使用され得る。

【0240】

いくつかの実施形態では、本開示のヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質は、Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質は、Ｆｃ媒介抗体エフェクター機能を促進する。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体依存性細胞貪食を促進する。

【0241】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１００、１０、１、０．１、０．０１μＭ未満である解離定数（Ｋｄ）でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、５０、７５、または１００μＭ（これらの値の間の任意の値または範囲を含む）であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、５００、１００、１０、または１ｎＭ未満であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２５０、５００、７５０、１０００、２０００、または２２００ｎＭ未満であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２５０、５００、７５０、１０００、２０００、または２２００ｎＭ（これらの値の間の任意の値または範囲を含む）であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約４０～５０ｎＭであるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、４０～５０ｎＭであるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、５０ｎＭ未満であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合するｃ１１－１Ｆ４のＫｄ未満であるＫｄでヒトアミロイドフィブリルに結合する。

【0242】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約０．０１、０．１、または１μＭ未満である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約０．００１、０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０μＭ（これらの値の間の任意の値または範囲を含む）である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１、１０、１００、または１０００ｎＭ未満である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１００、２５０、５００、７５０、または１０００ｎＭ（これらの値の間の任意の値または範囲を含む）である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１７ｎＭ、７ｎＭ、１６ｎＭ、７５ｎＭ、または９５ｎＭである抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１０ｎＭ、２０ｎＭ、８０ｎＭ、または１００ｎＭ未満である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合するｃ１１－１Ｆ４のＥＣ_５０未満である抗体の濃度（ＥＣ_５０）で半数最大結合でヒトアミロイドフィブリルに結合する。

【0243】

解離定数及びＥＣ_５０を計算するための方法は、当該技術分野で知られており、例えば、表面プラズモン共鳴及びユーロピウム結合免疫吸着アッセイ（ＥｕＬＩＳＡ）を含む。いくつかの実施形態では、解離定数は、例えば、表面プラズモン共鳴を使用して、Ｌｅｎ（１－２２）モノマーペプチドへの結合を測定することによって決定される。いくつかの実施形態では、ＥＣ_５０は、ＥｕＬＩＳＡを使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＥＣ_５０は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ抽出物、Ｋｅｎ ＡＴＴＲ抽出物、ＳＨＩ ＡＬλ肝臓抽出物、またはＴＡＬ ＡＬκ肝臓抽出物への結合のレベルを測定するためにＥｕＬＩＳＡを使用して決定される。

【0244】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされている。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、放射性核種（例えば、Ｉ－^１２５、Ｉ－^１２３、Ｉ－^１２４、Ｉ－^１３１、Ｚｒ－^８９、Ｔｃ－^９９ｍ、Ｃｕ－^６４、Ｂｒ－^７６、Ｆ－^１８）；酵素（ホースラディッシュペルオキシダーゼ）；ビオチン；及びフルオロフォア等からなる群から選択される。タンパク質を検出可能に標識するために当該技術分野で知られている任意の手段が使用され、及び／または本明細書に記載の方法と共に使用するために適応され得る。例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質は、放射性同位体で放射性標識され、または蛍光タグまたは化学発光タグで標識され得る。例示的な放射性同位体には、例えば、^１８Ｆ、^１１１Ｉｎ、^９９ｍＴｃ、及び^１２３Ｉ、及び^１２５Ｉが含まれる。これらの及び他の放射性同位体は、例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質の軽鎖タンパク質に共有結合的に連結されたＤＴＰＡまたはＤＯＴＡ等のキレート剤の使用を伴う場合があり、または伴わない場合があるよく知られている化学を使用して抗体－ペプチド融合タンパク質に結合され得る。例示的な蛍光または化学発光タグには、リジン、システイン、グルタミン酸、及びアスパラギン酸側鎖との反応によって抗体－ペプチド融合タンパク質にコンジュゲートされ得るフルオレセイン、テキサスレッド、ローダミン、Ａｌｅｘａ色素、及びルシフェラーゼが含まれる。１つの例示的な実施形態では、標識は、使用されるタグのために適切な励起及び放出波長を使用して、蛍光マイクロプレートリーダー、または蛍光光度計を使用して検出される。放射性標識は、例えば、放射性放出のタイプに応じてガンマまたはシンチレーションカウンターを使用して、また、特定の放射性核種の正確な検出のために好適なエネルギーウインドウを使用することによって検出され得る。しかしながら、放射性同位体の検出のための任意の他の好適な技術もまた、標識を検出するために使用され得る。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、^１２５Ｉである。

【0245】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ抽出物、ＫＥＮ ｈＡＴＴＲ抽出物、ＳＨＩ ＡＬλ肝臓抽出物、及び／またはＴＡＬ ＡＬκ肝臓抽出物に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド沈着物またはフィブリルに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイドにおける１つ以上のアミロイド形成ペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイドは、アミロイド形成λ６可変ドメインタンパク質（Ｖλ６Ｗｉｌ）またはアミロイド形成免疫グロブリン軽鎖（ＡＬ）、Ａβ（１－４０）アミロイド様フィブリルまたはアミロイド形成Ａβ前駆体タンパク質、または血清アミロイドタンパク質Ａ（ＡＡ）を含む。他の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイドは、アミロイド形成形態の免疫グロブリン重鎖（ＡＨ）、β_２－ミクログロブリン（Ａβ_２Ｍ）、トランスチレチンバリアント（ＡＴＴＲ）、アポリポタンパク質ＡＩ（ＡＡｐｏＡＩ）、アポリポタンパク質ＡＩＩ（ＡＡｐｏＡＩＩ）、ゲルソリン（ＡＧｅｌ）、リゾチーム（ＡＬｙｓ）、白血球化学走化性因子（ＡＬｅｃｔ２）、フィブリノゲンバリアント（ＡＦｉｂ）、シスタチンバリアント（ＡＣｙｓ）、カルシトニン（（ＡＣａｌ）、ラクトアドヘリン（ＡＭｅｄ）、膵島アミロイドポリペプチド（ＡＩＡＰＰ）、プロラクチン（ＡＰｒｏ）、インスリン（ＡＩｎｓ）、プリオンタンパク質（ＡＰｒＰ）；α－シヌクレイン（ＡαＳｙｎ）、タウ（ＡＴａｕ）、心房性ナトリウム利尿因子（ＡＡＮＦ）、またはＩＡＡＰ、ＡＬκ４、Ａｌλ１他のアミロイド形成ペプチドを含む。抗体－ペプチド融合タンパク質が結合するアミロイド形成ペプチドは、タンパク質、タンパク質断片、またはタンパク質ドメインであり得る。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物またはアミロイドフィブリルは、組換えアミロイド形成タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、アミロイドは、疾患の病理の一部である。

【0246】

いくつかの実施形態では、ヒトアミロイドへの抗体－ペプチド融合タンパク質の結合は、ヒトアミロイドフィブリルの貪食を促進する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルをオプソニン化する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルをオプソニン化する。いくつかの実施形態では、マクロファージの存在下でヒトアミロイドフィブリルを本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、マクロファージによるヒトアミロイドフィブリルの取り込みを促進する。いくつかの実施形態では、マクロファージの存在下でヒトアミロイドフィブリルを本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、ヒトアミロイドフィブリルのオプソニン化を促進する。いくつかの実施形態では、ヒトアミロイドフィブリルへの抗体－ペプチド融合タンパク質の結合は、ヒトアミロイドの貪食を、対照抗体（例えば、ｈＩｇＧ及び／またはｃ１１－１Ｆ４）と同等またはそれよりも高い程度まで促進する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、抗体依存性細胞貪食を促進する。

【0247】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して改善された生体内分布、汎アミロイド反応性、及び向上した貪食から選択される１つ以上のｉｎ ｖｉｖｏ特徴を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して改善された生体内分布を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、身体にわたって器官において検出可能である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、改善された生体内分布を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び血液のうちの１つ以上において検出可能である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して汎アミロイド反応性を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｉｎ ｖｉｖｏで１つ以上の異なるアミロイド基質に対する反応性を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び血液におけるアミロイド基質に対して反応性である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して向上した貪食を示し、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、増加したレベルの貪食をもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド基質のクリアランスをもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド基質の向上した貪食及びクリアランスをもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド関連障害を有する個体のための治療的利益をもたらす。いくつかの実施形態では、参照抗体は、アミロイド基質を結合させるように操作されていない。いくつかの実施形態では、参照抗体は、アミロイド反応性ペプチドを含まない。いくつかの実施形態では、参照抗体は、アミロイド反応性ペプチドに融合されていない。いくつかの実施形態では、参照抗体は、陰性対照として機能する。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプである。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプである。

【0248】

また、本明細書では、アミロイド反応性ペプチド及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質を含む組成物が提供される。いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、組成物は、抗体－ペプチド融合タンパク質を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質の少なくとも８０％は、インタクトである。いくつかの実施形態では、組成物は、抗体－ペプチド融合タンパク質を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質の少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または９９．５％は、インタクトである。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、タンパク質分解に供されていないものである。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体－ペプチド融合タンパク質からなる。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８７～９２からなる群から選択される全長アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0249】

いくつかの実施形態では、組成物は、組成物に存在するインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の量によって定義される純度を有する。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、タンパク質分解に供されていないものである。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体－ペプチド融合タンパク質からなる。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８７～９２からなる群から選択される全長アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも８０％の純度を有する。例えば、８０％の純度を有する組成物は、８０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または９９．５％の純度を有する。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体－ペプチド融合タンパク質からなる。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号８７～９２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。

【0250】

いくつかの実施形態では、組成物は、アミロイド反応性ペプチド及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。

【0251】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では切断生成物は、Ｎ末端からＣ末端方向で可変軽鎖領域、定常軽鎖領域、スペーサー、及びアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｃ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、アミロイド反応性ペプチドに連結された抗体を含み、抗体またはアミロイド反応性ペプチドは、ＮまたはＣ末端で１つ以上の残基を欠く。いくつかの実施形態では切断生成物は、Ｎ末端からＣ末端方向でアミロイド反応性ペプチド、スペーサー、可変軽鎖領域、及び定常軽鎖領域を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0252】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８７～９０によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８７によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８７～９０によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８９～９０によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１～９２によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１～９２によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９２によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む軽鎖または重鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0253】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８９によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８９によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｃ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、アミロイド反応性ペプチドに融合された抗体を含み、アミロイド反応性ペプチドは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１５アミノ酸切断されている。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、インタクト融合タンパク質と比較してＮまたはＣ末端で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１５アミノ酸を欠く。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0254】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８７によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８７によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0255】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８８によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号８８によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９２に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９２に示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｃ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0256】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９０によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９０によって示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｃ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠くアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。

【0257】

いくつかの実施形態では、組成物は、抗体－ペプチド融合タンパク質を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質は、１つ以上のアミロイド基質に対するＥＣ５０結合親和性を示す。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、５００ｎＭ、４００ｎＭ、３００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、または１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、約１００ｎＭまたは１００ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、約１０ｎＭまたは１０ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、約１．５ｎＭまたは１．５ｎＭ未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、異なるアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、ヒトアミロイド基質について同じまたは異なる。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０結合親和性は、合成アミロイド基質について同じまたは異なる。

【0258】

いくつかの実施形態では、組成物は、抗体－ペプチド融合タンパク質を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して改善された生体内分布、汎アミロイド反応性、及び向上した貪食から選択される１つ以上のｉｎ ｖｉｖｏ特徴を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して改善された生体内分布を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、身体にわたって器官において検出可能である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、改善された生体内分布を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び血液のうちの１つ以上において検出可能である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して汎アミロイド反応性を示し、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｉｎ ｖｉｖｏで１つ以上の異なるアミロイド基質に対する反応性を示す。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、肝臓、脾臓、心臓、腎臓、脳、筋肉、膵臓、胃、上部腸、下部腸、及び血液におけるアミロイド基質に対して反応性である。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照抗体と比較して向上した貪食を示し、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、増加したレベルの貪食をもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド基質のクリアランスをもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド基質の向上した貪食及びクリアランスをもたらす。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏでアミロイド基質を抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることは、アミロイド関連障害を有する個体のための治療的利益をもたらす。いくつかの実施形態では、参照抗体は、アミロイド基質を結合させない。いくつかの実施形態では、参照抗体は、アミロイド反応性ペプチドを含まない。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプである。いくつかの実施形態では、参照抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプである。

【0259】

いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。いくつかの実施形態では、薬学的に許容可能な担体は、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、もしくは封入物質、またはそれらの組み合わせであり得る。

【0260】

様々な実施形態では、本開示による組成物は、任意の投与経路を介する送達のために製剤化され得る。これには、例えば、エアロゾル、鼻、経口、経粘膜、経皮、非経口または経腸が含まれ得る。いくつかの実施形態では、投与は、静脈内または皮下である。

【0261】

抗体－ペプチド融合タンパク質抗体を含む薬学的製剤が提供される。薬学的組成物及び製剤には通常、１つ以上の任意の薬学的に許容可能な担体または賦形剤が含まれる。いくつかの実施形態では、組成物には、少なくとも１つの追加の治療剤が含まれる。

【0262】

用語「薬学的製剤」は、調製物であって、それに含有される活性成分の生物学的活性が有効になるような形態にあり、かつ製剤が投与されるであろう対象にとって許容できないほどに有毒である追加の成分を含有しない、調製物を指す。

【0263】

「薬学的に許容可能な担体」は、対象に対して非毒性である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容可能な担体には、緩衝液、賦形剤、安定化剤、または防腐剤が含まれるがこれらに限定されない。

【0264】

緩衝剤は、いくつかの態様では、組成物に含まれる。好適な緩衝剤には、例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸カリウム、及び様々な他の酸及び塩が含まれる。いくつかの態様では、２つ以上の緩衝剤の混合物が使用される。緩衝剤またはそれらの混合物は、典型的には、組成物全体の約０．００１重量％～約４重量％の量で存在する。投与可能な薬学的組成物を調製するための方法は、知られている。例示的な方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ；２１ｓｔ ｅｄ．（Ｍａｙ １，２００５）においてより詳細に記載されている。

【0265】

また、本明細書では、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれかを含む薬学的組成物が提供される。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。

【0266】

所定の例示的な実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、単離または精製によって得られ得る。タンパク質精製技術は、あるレベルで、ペプチド及び非ペプチド画分への細胞、組織、または器官の均一化及び粗分画を伴う。他のタンパク質精製技術には、例えば、硫酸アンモニウム、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、抗体等を用いた、または熱変性による沈殿と、それに続く：遠心分離；クロマトグラフィー工程、例えば、イオン交換、ゲル濾過、逆相、ヒドロキシルアパタイト及びアフィニティークロマトグラフィー；等電点電気泳動；ゲル電気泳動、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動；ならびにこれらの及び他の技術の組み合わせが含まれる。

【0267】

様々なクロマトグラフィー技術には、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル排除クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、イムノアフィニティークロマトグラフィー、及び逆相クロマトグラフィーが含まれるがこれらに限定されない。ペプチドを精製するための特に効率的な方法は、迅速性能液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）またはさらに高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）である。所定の例示的な実施形態では、Ｆｃドメインは、ＧＧＧＹＳリンカー配列（配列番号２７）を介してアミロイド反応性ペプチドに連結され得る。

【0268】

ＩＩＩ．診断及び検出方法
また、本明細書では、対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法が提供される。

【0269】

いくつかの実施形態では、本明細書では、対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれか１つを対象に投与することであって、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、投与すること、及び抗体ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む、方法が提供される。本明細書に記載の検出可能に標識された抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれか１つが使用され得る。いくつかの実施形態では、対象は、アミロイドを含まない、または意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、もしくは１つ以上の関連する血漿細胞疾患に罹患していると決定される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0270】

いくつかの実施形態では、本明細書では、リガンドを検出する方法であって、リガンドを本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれか１つと接触させることであって、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含み、抗体－ペプチド融合タンパク質のペプチドは、リガンドに対する結合親和性を有する、接触させること、及び検出可能な標識からのシグナルを決定し、それによりリガンドを検出することを含む、方法が提供される。本明細書に記載の検出可能に標識された抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれか１つが使用され得る。

【0271】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、例えば、融合ペプチドが精製された後に、ｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイでそれらの検出を可能とするために様々な薬剤で標識され得る。限定されないが、これには、放射性核種（例えば、Ｉ－^１２５、Ｉ－^１２３、Ｉ－^１３１、Ｚｒ－^８９、Ｔｃ－^９９ｍ、Ｃｕ－^６４、Ｂｒ－^７６、Ｆ－^１８）；酵素（ホースラディッシュペルオキシダーゼ）；ビオチン；フルオロフォア等が含まれ得る。タンパク質を検出可能に標識するための当該技術分野で知られている任意の手段が使用され、及び／または本明細書に記載の方法で使用するために適応され得る。例えば、抗体またはその断片、及び／またはアミロイド反応性ペプチドは、放射性同位体で放射性標識され、または蛍光タグもしくは化学発光タグで標識され得る。例示的な放射性同位体には、例えば、^１８Ｆ、^１１１Ｉｎ、^９９ｍＴｃ、及び^１２３Ｉ、及び^１２５Ｉが含まれる。これらの及び他の放射性同位体は、例えば、抗体の軽鎖タンパク質に共有結合的に連結されたＤＴＰＡまたはＤＯＴＡ等のキレート剤の使用を伴う場合があり、または伴わない場合があるよく知られている化学を使用して単離された免疫グロブリン軽鎖に結合され得る。例示的な蛍光または化学発光タグには、リジン、システイン、グルタミン酸、及びアスパラギン酸側鎖との反応によってタンパク質にコンジュゲートされ得るフルオレセイン、テキサスレッド、ローダミン、Ａｌｅｘａ色素、及びルシフェラーゼが含まれる。１つの例示的な実施形態では、標識は、使用されるタグのために適切な励起及び放出波長を使用して、蛍光マイクロプレートリーダー、または蛍光光度計を使用して検出される。放射性標識は、例えば、放射性放出のタイプに応じて及び特定の放射性核種の正確な検出に好適なエネルギーウィンドウを使用することによって、ガンマまたはシンチレーションカウンターを使用して検出され得る。しかしながら、放射性同位体の検出のための任意の他の好適な技術もまた、標識を検出するために使用され得る。

【0272】

アミロイドーシスに関して、そのような標識は、例えば、アミロイドの存在を診断するために、アミロイドタンパク質負荷を決定するために、抗体－ペプチド融合タンパク質が特定の対象におけるアミロイドを結合させる能力をモニタリングするために、アミロイドーシスの進行をモニタリングするために、及び／またはアミロイド処置（対象への抗体－ペプチド融合タンパク質の投与に関連する処置を含む）に対する対象の反応をモニタリングするために使用され得る。例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質は、本明細書に記載される検出可能な標識で標識され、その後アミロイドベースの疾患（例えば、アミロイドーシス、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、または関連する血漿細胞疾患）に罹患している、または罹患していると疑われる対象に投与される。その後、対象は、例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質の存在を検出するために画像化され得る。

【0273】

所定の例示的な実施形態では、検出可能に標識された抗体－ペプチド融合タンパク質からのシグナルが定量され得、それにより対象におけるアミロイド沈着物のレベルの指標を提供する。例えば、シグナル強度は、標準シグナル閾値と比較され得、閾値を超える場合、アミロイドーシスが存在するが、閾値を下回る場合、アミロイドーシスが存在しないまたは低いレベルにある。対象は、アミロイドを有すると診断され得、その場合、化学療法、コルチコステロイド薬（レナリドミドまたはサリドマイド）及び／またはボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）等の処置が投与され得る。追加的にまたは代替的に、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質は、本明細書に記載される対象を処置する努力の中で対象に投与され得る。所定の例示的な実施形態では、対象は、１つ以上の群、例えば、低アミロイド負荷、中アミロイド負荷、または高アミロイド負荷に層別化され、次いでそれに応じて処置され得る。処置進行をモニタリングするために、対象は、抗体－ペプチド融合タンパク質が再投与され、これによりそれらのアミロイド負荷について再評価され得る。

【0274】

ＩＶ．処置方法
また、本明細書では、アミロイド関連障害を有する対象を処置する方法であって、有効量の本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質を対象に投与することを含む、方法が提供される。

【0275】

いくつかの実施形態では、アミロイド疾患（例えば、アミロイドーシス）を処置する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれか１つをそれを必要とする対象に投与することを含む、方法が提供される。

【0276】

他の実施形態では、アミロイドーシスは、全身性アミロイドーシスである。いくつかの実施形態では、アミロイドーシスは、家族性アミロイドーシスである。他の実施形態では、アミロイドーシスは、散発性アミロイドーシスである。いくつかの実施形態では、アミロイドーシスまたはアミロイド関連疾患は、ＡＡアミロイドーシス、ＡＬアミロイドーシス、ＡＨアミロイドーシス、Ａβアミロイドーシス、ＡＴＴＲアミロイドーシス、ｈＡＴＴＲアミロイドーシス、ＡＬｅｃｔ２アミロイドーシス、及びＩＩ型糖尿病のＩＡＰＰアミロイドーシス、アルツハイマー病、ダウン症候群、Ｄｕｔｃｈ型のアミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、脳ベータ－アミロイド血管症、海綿状脳症、甲状腺腫瘍、パーキンソン病、レビー小体型認知症、タウオパチー、ハンチントン病、老人性全身性アミロイドーシス、家族性血液透析、老人性全身性加齢、加齢下垂体障害、医原性症候群、海綿状脳症、反応性慢性炎症、甲状腺腫瘍、骨髄腫または他の形態のがんである。いくつかの実施形態では、アミロイド関連疾患は、ＡＬ、ＡＨ、Ａβ２Ｍ、ＡＴＴＲ、トランスチレチン、ＡＡ、ＡＡｐｏＡＩ、ＡＡｐｏＡＩＩ、ＡＡｐｏＡＩＶ、ＡＡｐｏＣＩＩ、ＡＡｐｏＣＩＩ、ＡＧｅｌ、ＡＬｙｓ、ＡＬＥｃｔ２、ＡＦｉｂ、ＡＣｙｓ、ＡＣａｌ、ＡＭｅｄ、ＡＩＡＰＰ、ＡＰｒｏ、ＡＩｎｓ、ＡＰｒＰ、ＡＳＰＣ、ＡＧａｌ７、ＡＣｏｒ、Ａｋｅｒ、ＡＬａｃ、ＡＯＡＰＰ、ＡＳｅｍ１、ＡＥｎｆ、またはＡβアミロイドーシスからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質での処置は、アミロイドのクリアランスをもたらす。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、正常な加齢に関連するアミロイドに結合する。他の実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、対象におけるアミロイドーシスまたはアミロイド関連疾患の診断、処置、または予後において使用される。

【0277】

いくつかの実施形態では、アミロイド関連疾患は、局在化アミロイドーシスである。

【0278】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、皮内、皮下、筋肉内、心臓内、血管内、静脈内、眼内、動脈内、硬膜外、髄腔内、体外、髄腔内、腹腔内、胸膜内、管腔内、硝子体内、海綿体内、脳室内、骨内、関節内、細胞内、または肺経路を介して投与される。

【0279】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、免疫系の細胞（例えば、マクロファージ）によるアミロイドの貪食を誘導するために十分な量で投与される。

【0280】

いくつかの実施形態では、対象は、哺乳動物、例えば、霊長類、ウシ、げっ歯類、またはブタである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。

【0281】

また、本明細書では、クリアランスのためにアミロイド沈着物を標的化する方法が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、アミロイド沈着物を本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることを含む。

【0282】

いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、疾患の病理に寄与し得る。他の実施形態では、アミロイド沈着物は、対象におけるアミロイドーシスまたはアミロイド関連疾患を示し得る。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイドーシスを有する対象におけるアミロイドに結合する。いくつかの実施形態では、アミロイドーシスは、特定の組織または器官系、例えば、肝臓、心臓、または中枢神経系に局在化される。

【0283】

いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、除去される。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、消失される。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、抗体－ペプチド融合タンパク質によってオプソニン化される。いくつかの実施形態では、ヒトアミロイドフィブリルへの抗体－ペプチド融合タンパク質の結合は、ヒトアミロイドフィブリルの貪食及びアミロイド沈着物の除去を促進する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ヒトアミロイドフィブリルをオプソニン化し、それによりアミロイド沈着物を除去する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルをオプソニン化する。いくつかの実施形態では、ヒトアミロイドフィブリルへの抗体－ペプチド融合タンパク質の結合は、ヒトアミロイドフィブリルの貪食及び／またはオプソニン化を、対照抗体（例えば、ｍＩｇｐ５及び／またはｃ１１－１Ｆ４）と同等またはそれよりも高い程度まで促進する。

【0284】

いくつかの実施形態では、本明細書では、アミロイド関連障害を処置する方法であって、検出可能な標識にコンジュゲートされた抗体－ペプチド融合タンパク質を投与すること、標識を検出すること、及びシグナルが検出された場合にアミロイドーシス処置を対象に適用することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、放射性標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、Ｉ^１２５、Ｔｃ^９９標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、蛍光標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、酵素標識である。いくつかの実施形態では、標識は、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼである。標識には、特定の関連する検出可能な部位、例えば、標識されたアビジンへの結合を介して検出され得るビオチン等の化学的部位がさらに含まれる。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、対象の肝臓、脾臓、または血液において同定される。いくつかの実施形態では、アミロイドーシス処置は、本明細書で提供される抗体－ペプチド融合タンパク質を含む。

【0285】

また、本明細書では、対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、抗体－ペプチド融合タンパク質を投与することを含み、抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされている、方法が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、放射性標識である。いくつかの実施形態では検出可能な標識は、Ｉ^１２５、Ｔｃ^９９標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、蛍光標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、酵素標識である。いくつかの実施形態では、標識は、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼである。標識には、特定の関連する検出可能な部位、例えば、標識されたアビジンへの結合を介して検出され得るビオチン等の化学的部位がさらに含まれる。いくつかの実施形態では、アミロイド沈着物は、対象の肝臓、脾臓、または血液において同定される。

【0286】

いくつかの実施形態では、本明細書では、リガンドを検出する方法であって、リガンドを検出可能な標識にコンジュゲートされた抗体－ペプチド融合と接触させること、及び検出可能な標識からのシグナルを決定することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、放射性標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、Ｉ^１２５、Ｔｃ^９９標識である。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、蛍光標識である。いくつかの実施形態では検出可能な標識は、酵素標識である。いくつかの実施形態では、標識は、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼである。標識には、特定の関連する検出可能な部位、例えば、標識されたアビジンへの結合を介して検出され得るビオチン等の化学的部位がさらに含まれる。いくつかの実施形態では、検出は、ｉｎ ｖｉｔｒｏである。いくつかの実施形態では、検出は、ｉｎ ｖｉｖｏである。

【0287】

Ｖ．核酸、ベクター、宿主細胞、及びペプチド－抗体融合タンパク質を作製する方法
また、本明細書では、本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードする核酸（複数可）が提供される。抗体－ペプチド融合タンパク質は、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれかであり得る。

【0288】

いくつかの実施形態では、本明細書で提供される核酸は、１つ以上のベクターにある。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書では、抗体の重鎖及び軽鎖を含むベクターであって、軽鎖は、ペプチドに連結されている、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、ペプチドに連結された重鎖及び軽鎖は、異なるベクターにある。

【0289】

いくつかの実施形態では、ベクターは、本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードする核酸（複数可）を含む。

【0290】

抗体生成のため、ペプチド発現ベクターに連結された重鎖及び軽鎖は、当該技術分野で知られている適切な生成細胞株に導入され得る。発現ベクターの導入は、エレクトロポレーションまたは当該技術分野で利用可能な任意の他の好適な形質転換技術を介して共トランスフェクションによって達成され得る。次いで抗体生成細胞株が選択され、増殖させられ、抗体が精製される。次いで精製された抗体は、標準的な技術、例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析され得る。

【0291】

また、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれかをコードする核酸を含む宿主細胞が提供される。抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現のための好適な宿主細胞には、本明細書に記載の原核細胞または真核細胞が含まれる。例えば、抗体－ペプチド融合タンパク質は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合、細菌において生成され得る。細菌における抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許番号５，６４８，２３７、５，７８９，１９９、及び５，８４０，５２３を参照されたい。（Ｅ．ｃｏｌｉの抗体断片の発現を記載しているＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４も参照されたい）。発現後、ペプチドに連結された抗体は、可溶性画分中の細菌細胞ペーストから単離され得、さらに精製され得る。

【0292】

いくつかの実施形態では、本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードする核酸（複数可）を含むベクターを含む宿主細胞。

【0293】

グリコシル化抗体の発現のための好適な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）に由来する。無脊椎動物細胞の例には、植物及び昆虫細胞が含まれる。特に、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために、昆虫細胞と併せて使用され得る多数のバキュロウイルス株が同定されている。

【0294】

植物細胞培養物も宿主として利用され得る。例えば、米国特許番号５，９５９，１７７、６，０４０，４９８、６，４２０，５４８、７，１２５，９７８、及び６，４１７，４２９（トランスジェニック植物において抗体を生成するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術について記載している）を参照されたい。

【0295】

脊椎動物細胞も宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で成長するように適応された哺乳類細胞株が有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶｌ株（ＣＯＳ－７）；ヒト胚性腎臓株（２９３細胞または、例えば、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載される２９３細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０）に記載されるＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶｌ）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２）；例えば、Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２）に記載されるＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株には、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６（１９８０））を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞；ならびにＹ０，ＮＳ０及びＳｐ２／０等の骨髄腫細胞株が含まれる。抗体生成のために好適な所定の哺乳動物宿主細胞株の総説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ ａｎｄ Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５－２６８（２００３）を参照されたい。

【0296】

ＶＩ．精製方法
また、本明細書では、本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターの発現に好適な条件下で本開示の宿主細胞を培養すること及び抗体－ペプチド融合タンパク質を回収することを含む。

【0297】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、ｉ）抗体－ペプチド融合タンパク質の発現に好適なかん流細胞培養条件下で抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む宿主細胞を培養すること；及びｉｉ）約１２～３６時間毎に抗体－ペプチド融合タンパク質を回収することを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチド及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0298】

いくつかの実施形態では、方法は、流加培養法を使用して宿主細胞を培養することを含む。流加培養は、細胞を培養する方法であって、細胞培養物に新たな培地が補充される、すなわち、細胞に新たな培地が「供給」されるが、消費された培地が除去されない、方法を指す。典型的には、「流加」培養プロセスは、バイオリアクター内で実施され、追加の成分（例えば、栄養補充剤）が培養プロセスの開始後のいくつかの時点で培養物に添加される。栄養素の制御添加は、培養物の成長速度に直接的に影響を及ぼし、オーバーフロー代謝産物の構築の回避を可能とする（例えば、Ｗｌａｓｃｈｉｎ，Ｋ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．，“Ｆｅｄｂａｔｃｈ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｄｙｎａｍｉｃ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｆｅｅｄｉｎｇ，”Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，１０１ ：４３－７４（２００６）ａｎｄ Ｌｅｅ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，“Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｆｅｄ－ｂａｔｃｈ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｓ，”Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｄｖ．，１７：２９－４８（１９９９）を参照されたい）。流加培養は、典型的には、いくつかの点で停止させられ、培地中の細胞及び／または成分は、回収され、任意に精製される。

【0299】

いくつかの実施形態では、方法は、かん流培養法を使用して宿主細胞を培養することを含む。かん流は、細胞を培養する方法であって、追加の新たな培地が培養物に提供され、使用済培地が培養物から除去される、方法を指す。かん流は、培養物が播種された後に開始させられ、継続的または間欠的に、所望により、ある期間にわたって行われ得る。かん流中に添加された新たな培地は、典型的には、培養プロセス中に枯渇した細胞のための栄養補充剤を提供する。かん流はまた、細胞培養物からの細胞消費生成物及び毒性副生成物の除去を可能とする。かん流は、細胞の成長段階中に実施され、細胞が流加細胞培養に移された後にも継続され得る。

【0300】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質の発現に好適なかん流細胞培養条件下で抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む宿主細胞を培養することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質の生成のために流加培養法を使用することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質の生成のためにかん流培養法を使用することを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチド及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0301】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、連続細胞培養法をさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、かん流条件下で細胞を培養することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、約１２～３６時間毎に抗体－ペプチド融合タンパク質を回収することを含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１２～２４時間毎に回収され、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間毎に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約２４～３６時間毎に回収され、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、または３６時間毎に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１２～１６時間、１４～１８時間、１６～２０時間、１６～２４時間、２０～３２時間、１８～３６時間、２４～３２時間、または１６～２８時間毎に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、１２、１６、２０、２４、２８、３２、または３６時間以下の後に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、およそ毎日回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１、２、３、４、５、６、または７日毎に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、約１～４日、２～５日、３～６日、１～５日、３～７日、または１～７日毎に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、１、２、３、４、５、６、または７日以下の後に回収される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド反応性ペプチド及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、重鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、軽鎖のＣ末端で連結されており、アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに抗体に連結されている。いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。

【0302】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、回収工程において回収された抗体－ペプチド融合体を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用することをさらに含む。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を単離するために使用される。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質から切断型抗体－ペプチド融合タンパク質を分離するために使用される。いくつかの実施形態では、回収された抗体－ペプチド融合体は、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用される。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、溶解した塩を含む１つ以上の緩衝液で洗浄される。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、低塩緩衝液で洗浄される。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、高塩緩衝液で洗浄される。いくつかの実施形態では、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムは、まず低塩緩衝液で洗浄され、続いて高塩緩衝溶出緩衝液が適用される。いくつかの実施形態では、低塩緩衝液は、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムから切断型抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させる。いくつかの実施形態では、高塩緩衝液は、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムからインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させる。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること、次いでカラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄すること、次いでインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を高塩濃度を含有する第２の緩衝液で溶出させることを含む。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、切断型抗体－ペプチド融合タンパク質とは別々に溶出される。いくつかの実施形態では、方法は、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の濃縮をもたらす。いくつかの実施形態では、方法は、単離されたインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質からの切断型抗体－ペプチド融合タンパク質の除去をもたらす。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること、次いでカラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄することを含み、次いで高塩濃度を含有する第２の緩衝液を適用することは、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の単離をもたらす。

【0303】

いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること、次いでカラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄することを含み、次いで高塩濃度を含有する第２の緩衝液で洗浄することは、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の単離をもたらす。いくつかの実施形態では、カラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄することは、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムから切断型抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させる。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、２００ｍＭ、２１０ｍＭ、２２０ｍＭ、２３０ｍＭ、２４０ｍＭ、２５０ｍＭ、２６０ｍＭ、２７０ｍＭ、２８０ｍＭ、２９０ｍＭ、または３００ｍＭ以下の塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、２００ｍＭ～３００ｍＭ、２１０ｍＭ～２８０ｍＭ、２２０ｍＭ～２６０ｍＭ、２１０ｍＭ～２９０ｍＭ、２４０ｍＭ～２７０ｍＭ、または２３０ｍＭ～２６０ｍＭの塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、約２２０ｍＭ、２４０ｍＭ、２６０ｍＭ、もしくは２８０ｍＭまたはこれらの値の間の任意の範囲である塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、第１の緩衝液は、約２００ｍＭ～約３００ｍＭ、または約２２０ｍＭ～約２８０ｍＭの塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、約２６０ｍＭである塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、カラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄した後にカラムを高塩濃度を含有する第２の緩衝液で洗浄することは、陽イオン交換クロマトグラフィーカラムからインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させる。いくつかの実施形態では、高塩濃度を含む第２の緩衝液は、３５０ｍＭ、３６０ｍＭ、３７０ｍＭ、３８０ｍＭ、３９０ｍＭ、４００ｍＭ、４１０ｍＭ、４２０ｍＭ、４３０ｍＭ、４４０ｍＭ、または４５０ｍＭ以上の塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、高塩濃度を含む第２の緩衝液は、３５０ｍＭ～４５０ｍＭ、３６０ｍＭ～４３０ｍＭ、３７０ｍＭ～４１０ｍＭ、３６０ｍＭ～４４０ｍＭ、３９０ｍＭ～４２０ｍＭ、もしくは３８０ｍＭ～４１０ｍＭまたはこれらの点の間の任意の範囲の塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、第２の緩衝液は、３５０ｍＭ～４５０ｍＭまたは３８０ｍＭ～４２０ｍＭの塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、約３８０ｍＭ、４００ｍＭ、４２０ｍＭ、または４４０ｍＭである塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、低塩濃度を含む第１の緩衝液は、約４００ｍＭである塩の濃度を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の緩衝液のｐＨは、４．５～６．５、４．７～６．３、５．１～５．７、４．７～６．１、５．５～５．９、または５．３～５．７である。いくつかの実施形態では、第１及び第２の緩衝液のｐＨは、約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、または６．０である。いくつかの実施形態では、第１及び第２の緩衝液のｐＨは、約５．５である。いくつかの実施形態では、第１及び第２の緩衝液のｐＨは、同じである。いくつかの実施形態では、第１及び第２の緩衝液のｐＨは、異なる。

【0304】

いくつかの実施形態では、生成する方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること、次いでカラムを低塩濃度を含有する第１の緩衝液で洗浄することを含み、次いで高塩濃度を含有する第２の緩衝液で溶出させることは、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の単離をもたらす。いくつかの実施形態では、方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質を、ある負荷密度で陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用することを含み、負荷密度は、１リットルの樹脂（ｇ／Ｌ）当たりの抗体－ペプチド融合タンパク質のグラムとして定義される。いくつかの実施形態では、負荷密度は、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、または５５ｇ／Ｌ以下、これらの点の間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、負荷密度は、少なくとも１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ｇ／Ｌである。いくつかの実施形態では、負荷密度は、１５～５５、２０～４５、２５～５０、２０～３５、３０～４０、３５～５０、または２０～５０ｇ／Ｌである。いくつかの実施形態では、負荷密度は、５０ｇ／Ｌである。

【0305】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、宿主細胞を培養することを含み、宿主細胞は、哺乳動物細胞である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、ＣＨＯ細胞である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、本明細書に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質のいずれかを含む、抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む。

【0306】

いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法は、抗体－ペプチド融合タンパク質の純度を決定することをさらに含む。例えば、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）は、モノクローナル抗体の定量的分析を含む、タンパク質の純度を評価するために使用される分析方法である。抗体サンプルは、交換可能なＳＤＳ－ゲル緩衝液と混合され、次いでＳＤＳ－ゲル充填キャピラリーを介して電気泳動される。サンプルは、高電圧を使用してキャピラリー口に注入される。分離マトリックスを介するタンパク質移行は、陽極方向で生じ、定量的検出は、ＵＶ吸光検出システムを使用してキャピラリーの遠位末端の近くで生じる。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質の純度は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、またはそれらの組み合わせを含む１つ以上の分析方法を使用して決定される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質の純度は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）を使用して決定される。

【0307】

いくつかの実施形態では、方法は、純度を決定することをさらに含み、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも８０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質まで精製される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、存在するインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の量によって定義される純度を有する。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体－ペプチド融合体からなる。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも８０％の純度を有する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または９９．５％の純度を有する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、８０％～１００％、８２％～９６％、８５％～９０％、８４％～９２％、８０％～８８％、９０％～９８％、または９５％～１００％の純度を有する。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質純度は、アミロイド基質結合と正に相関する。

【0308】

いくつかの実施形態では、方法は、純度を決定することをさらに含み、抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも８０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質まで精製される。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、存在するインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の量によって定義される純度を有する。いくつかの実施形態では、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、全長抗体－ペプチド融合体からなる。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、２０％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、切断生成物は、Ｎ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、２０％、１５％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％以下の切断生成物を含む。いくつかの実施形態では、抗体－ペプチド融合タンパク質は、２０％～０％、１５％～２％、１２％～４％、１５％～８％、１０％～１％、５％～２％、または２％～０％の切断生成物を含む。

【0309】

ＶＩＩ．キット
本開示はまた、本開示の抗体－ペプチド融合タンパク質を含有するキットを提供する。本開示のキットには、精製された抗体－ペプチド融合タンパク質を含む１つ以上の容器が含まれ得る。いくつかの実施形態では、キットは、本開示の方法に従って使用するための指示書をさらに含む。いくつかの実施形態では、これらの指示書は、本開示の任意の方法に従って、アミロイド疾患を処置するための本明細書に記載される抗体－ペプチド融合タンパク質の投与の説明を含む。

【0310】

いくつかの実施形態では、指示書は、例えば、対象において、組織サンプルにおいて、または細胞において、アミロイド沈着物を検出する仕方の説明を含む。キットは、個体が本明細書に記載されるアミロイド疾患を有するかどうかを同定することに基づいて処置に好適なその個体を選択する説明をさらに含み得る。

【0311】

ラベルまたはパッケージ挿入物は、組成物が、例えば、本開示の疾患を処置するために使用されることを示す。指示書は、本明細書に記載の方法のいずれかを実施するために提供され得る。
ＶＩＩＩ．

【実施例】

【0312】

以下の実施例は、本発明をさらに例示するが、どのようにもその範囲を限定するものとしてとして解釈されるべきではない。本開示及び当該技術分野における通常の技術レベルの観点から、当業者は、以下の実施例が例示的にすぎないことが意図されていること及び多数の変更、修飾、及び変化が本開示の主題の範囲から逸脱することなく用いられ得ることを理解するであろう。添付の図は、本開示の明細書及び説明の不可分の一部として考慮されることを意味する。

【0313】

実施例１．抗体－ペプチド融合タンパク質の設計
以下の例は、例示的なアミロイド反応性ペプチド－抗体融合タンパク質コンストラクトの設計を記載する。例示的なコンストラクトの構造が図１～４に提供される。コンストラクトのアミノ酸配列が以下の表Ｅ１及び表Ｅ２に提供される。表Ｅ１～Ｅ２において、アミロイド反応性ペプチドｐ５Ｒのアミノ酸配列は、太字で示されており、スペーサー配列は、下線が引かれており、イタリック体である。

【表9】

【表10-1】

【表10-2】

【0314】

実施例２．Ｌｅｎ（１－２２）モノマーペプチドへのヒト化抗アミロイド抗体の結合親和性
ヒト化抗アミロイド抗体の結合親和性は、例えば、国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０６０５９６に記載されているように決定された。以下の表Ｅ３は、Ｌｅｎ（１－２２）モノマーペプチドへのヒト化抗アミロイド抗体の結合を測定する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイの結果を提供する。具体的には、ヒト化ＶＨ９及びＶＬ４配列を、表Ｅ３の「リガンド」欄に示されるように、追加のアミノ酸置換を伴ってまたは伴わずに試験した。

【表11】

【0315】

実施例３．ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルへのヒト化抗アミロイド抗体の結合親和性
ヒト化抗アミロイド抗体がｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルを結合させる能力を、キメラ抗体ｃ１１－１Ｆ４と比較して、例えば、ユーロピウム結合免疫吸着アッセイ（ＥｕＬＩＳＡ）によって、試験した（図５Ａ）。図５Ａに示されるそのデータに基づいて、ｃ１１－１Ｆ４は約７２ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ１０／ＶＬ４は１７ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ９／ＶＬ４は７ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ８／ＶＬ４は１６ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ７／ＶＬ４は７５ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ６／ＶＬ３は９５ｎＭのＥＣ_５０値で結合した。ＶＨ９／ＶＬ４は、ｃ１１－１Ｆ４と比べて増加した結合を示した（図５Ａ）。ＶＨ９／ＶＬ４抗体は、ＶＨ６／ＶＬ３よりも高い程度までアミロイドフィブリルを結合させた（図５Ａ）。

【0316】

ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０６０５９６（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）にさらに記載されるように、ペプチドｐ５及びｐ５ＲをＶＨ９／ＶＬ４及びＶＨ６／ＶＬ３を有するヒト化抗体の軽鎖Ｎ末端に付加した。図５Ｂに示されているように、ＶＨ６／ＶＬ３の軽鎖のＮ末端へのペプチドｐ５及びｐ５Ｒの付加は、ｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルへの結合を約３０倍向上させた（ＥＣ_５０に基づく）。図５Ｂに示されるそのデータに基づいて、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５は３ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒは３ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ｃ１１－１Ｆ４は約１００ｎＭのＥＣ_５０値で結合し、ＶＨ６／ＶＬ３は９５ｎＭのＥＣ_５０値で結合した。

【0317】

概して、ｐ５のアルギニンバリアントを有するバリアント（ｐ５Ｒ）は、ｐ５バリアントよりも優れていた（図５Ｃ及び図５Ｄ）。

【0318】

図５Ｅに示されているように、ＶＨ９／ＶＬ４は、ネズミ親と同じｒＶλ６Ｗｉｌフィブリルに対する反応性を有していた。

【0319】

図５Ｅ及び図５Ｆに示されているように、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５及びＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒの両方が、ｈＡＴＴＲアミロイド抽出物への結合を示す。図５Ｅ及び図５Ｆにおけるデータに基づいて、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５は５０ｎＭのＥＣ_５０値でＳｎｏ ｈＡＴＴＲ抽出物に、及び９０ｎＭのＥＣ_５０値でＫｅｎ ＡＴＴＲ抽出物に結合し、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒは４７ｎＭのＥＣ_５０値でＳｎｏ ＡＴＴＲ抽出物に、７０ｎＭのＥＣ_５０値でＫｅｎ ＡＴＴＲ抽出物に、及び８５ｎＭのＥＣ_５０値でＰｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲに結合した。

【0320】

以下の表Ｅ４は、ｍＩｇｐ５、ｈＩｇＧ１、ｃ１１－１Ｆ４、ｍ１１－１Ｆ４、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５、ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５、及びＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５ＲがｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル、Ｐｅｒ１２５ ｗｔＡＴＴＲ抽出物、ＫＥＮ ｈＡＴＴＲ抽出物、ＳＨＩ ＡＬλ肝臓抽出物、及びＴＡＬ ＡＬκ肝臓抽出物を結合させる能力を測定するＥｕＬＩＳＡの結果を提供する。抗体及び基質の各組み合わせについて、対数変換されたＥＣ_５０、ＥＣ_５０、及びアッセイにおける結合の最大レベルが示されている。「ｎａ」と表示された条件は試験されなかった。表Ｅ４に示されているように、ｐ５またはｐ５Ｒに融合されたヒト化抗アミロイド抗体は、様々なアミロイドフィブリル及びアミロイド抽出物に結合することができた。ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５、ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５、及びＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５Ｒは、ｍ１１－１Ｆ４及びすべての他の対照抗体よりも高い親和性で試験されたすべてのフィブリル及び抽出物を結合させた（ＥＣ_５０測定に基づく）。ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５Ｒは概して、ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５よりも低いＥＣ_５０を示し、ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５は概して、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５よりも低いＥＣ_５０を示した。

【表12-1】

【表12-2】

【0321】

実施例４．ヒト化抗アミロイド抗体によってプルダウンされるＷｉｌフィブリル基質
抗アミロイド抗体が基質をプルダウンする能力をＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０６０５９６に記載されているように試験した。ｍＩｇＧ－ｐ５は、プルダウンアッセイにおいてＷｉｌフィブリル及びアミロイド抽出物への優れた結合をもたらした（図６）。基質をプルダウンするＶＨ９／ＶＬ４親及びバリアントの能力は、以下の表Ｅ５に示されているようにｍＩｇｐ５と比べて有意に低下した。表Ｅ５において、示される値は結合率であり、データのないセルは、試験されなかった抗体／基質の組み合わせを表す。

【表13】

【0322】

ヒト化抗アミロイド抗体がアミロイドフィブリルのためのオプソニンとして作用する（すなわち、アミロイドフィブリルの貪食を促進する）能力をＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０６０５９６に記載されているように試験した。ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５及びＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５Ｒは、ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５及びＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒよりも良好にｒＶλ６Ｗｉｌフィブリル取り込みを促進し、これは、上述したＥＬＩＳＡ結合データにおける差と一貫していた（図７Ａ及び図７Ｂを参照されたい）。図７Ｃに示されているように、ペプチドを有しないＶＨ９／ＶＬ４は、ｐ５またはｐ５Ｒが結合したＶＨ６／ＶＬ３とおよそ同じくらい良好であり、ペプチドを有しないＶＨ６／Ｖｌ３より何倍も良好であった。ＶＨ９／ＶＬ４は単独で、ｃ１１－１Ｆ４よりも良好なオプソニンであった（図７Ｂ）。ＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５及びＶＨ６／ＶＬ３－ｐ５Ｒは、ｍＩｇｐ５と同等のレベルのフィブリル取り込みを促進し、ｃ１１－１Ｆ４よりも良好に機能した（図７Ａ）。ＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５及びＶＨ９／ＶＬ４－ｐ５Ｒはまた、ｍＩｇｐ５と同等のレベルのフィブリル取り込みを促進し、ｃ１１－１Ｆ４よりも良好に機能した（図７Ｂ）。驚くべきことに、ｐ５またはｐ５Ｒペプチドにコンジュゲートされたヒト化抗アミロイド抗体は、ｃ１１－１Ｆ４よりも有意に良好にオプソニン化を提供した。

【0323】

実施例５．ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒの流加及びかん流生成；アミロイド基質の結合
流加及び他の半連続的培養法は、しばしば、それらの高い培養密度、高い生成物収率、及びフレキシブルな生産性用途のため、組換えタンパク質及び抗体の生成のために使用される。しかしながら、高い密度の培養物は、全体的な生成収率またはストラテジーに有害であり得る阻害性酵素及び毒素の活性に影響を及ぼし得る。哺乳動物細胞による早期抗体－ペプチド融合タンパク質コンストラクトの発現の評価は、融合タンパク質が、おそらく宿主細胞由来プロテアーゼによって、切断に対して非常に感受性であることを示していた。かん流は、高密度培養法（例えば、流加）に関連する問題を回避する連続的培養法の一種であるが、かん流は、より低い生成収率及び増加した複雑性を問題としている。この例では、ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ（ＶＳＰＳＶスペーサーを有する）を、図８Ａに概説される例示的な流加及びかん流様式の培養法を使用して単離し、純度（インタクト融合タンパク質率）について評価した。流加及びかん流様式の培養法を使用して生成された抗体－ペプチド融合タンパク質の結合親和性を試験し、基質は、アミロイド様フィブリルｒＶλ６ＷＩＬであった（図８Ｂ）。

【0324】

チャイニーズハムスター卵巣細胞を、流加様式及びかん流様式の培養法によるタンパク質生成のために使用した。細胞を、１２０ＲＰＭで旋回させながら新たな培地（化学的に定義、タンパク質非含有）を伴って０．１～２ｘ１０^６細胞／ｍＬの密度で３～１５ｃｍのプレートに播種し、３７℃（５％ＣＯ_２）でインキュベートした。ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒの生成のため、ＶＨ９－Ｄ５４Ｅを含む抗体重鎖をコードするプラスミド及びＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒを含む抗体軽鎖をコードする別のプラスミドでのトランスフェクションの前日に５０～２００ｘ１０^６細胞を１ｘ１０^６細胞／ｍＬで新たな培地中で継代した。細胞を洗浄し、流加様式の培養またはかん流様式の培養のいずれかのための新たな培地に移した。分泌された抗体－ペプチド融合タンパク質（ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒ）を約７日後に流加培養から収集した。次いで収集された抗体ペプチド融合タンパク質をプロテインＡクロマトグラフィーカラム、続いて陰イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用した。陰イオン交換カラムからの溶出液を収集し、この流加培養法からの単離された抗体－ペプチド融合タンパク質をＦＢ．１（流加１）と指定した。

【0325】

表Ｅ６は、代替的流加培養法を使用した抗体－ペプチド融合タンパク質の質量分析純度分析を示している。

【表14】

【0326】

流加細胞培養中に観察された切断を是正するために、かん流細胞培養を評価した。かん流細胞をバイオリアクター内で成長させ、ここで、細胞培養物を膜カートリッジに通過させ、膜カートリッジは、細胞を保持したが、タンパク質を細胞及び細胞デブリから離れるように通過させた。分泌された抗体－ペプチド融合タンパク質（ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ＶＳＰＳＶ－ｐ５Ｒ）を１または７日後に収集し、サンプル処理に直ちに移行した。次いで分泌された抗体ペプチド融合タンパク質をプロテインＡクロマトグラフィーカラム、続いて陰イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用した。陰イオン交換カラムからの溶出液を収集し、陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィーにさらに供し、ここで、サンプルを２０．０～５０．０ｇ／Ｌ樹脂の負荷密度で負荷し、２６０ｍＭのＮａＣｌを含む洗浄緩衝液（ｐＨ５．５）で洗浄し、次いで４００ｍＭのＮａＣＬを含む溶出緩衝液（ｐＨ５．５）で溶出させた。ＣＥＸカラムへの抗体－ペプチド融合タンパク質の適用により、インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質の抗体－ペプチド融合タンパク質の切断型の分離が可能となった。抗体－ペプチド融合タンパク質の切断型を洗浄工程中に洗浄緩衝液で除去した。インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出緩衝液で溶出させた。ＣＥＸカラムからの溶出液を収集し、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）を分析して、単離された抗体－ペプチド融合タンパク質の純度を決定した。ＣＥＸカラムクロマトグラフィーを用いてかん流法を使用して９９％超の純度が達成された（表Ｅ７）。この溶出液をＰＦ．１（かん流１）と指定し、アミロイド基質結合分析のために調製した。

【表15】

【0327】

抗体－ペプチド融合タンパク質純度の機能的帰結を評価するために、流加またはかん流様式の生成スキームを介して得るために、ＦＢ．１及びＰＦ．１抗体－ペプチド融合タンパク質をアミロイド基質結合分析のために調製した。アミロイド様フィブリルｒＶλ６ＷＩＬを、ＦＢ．１またはＰＦ．１の結合親和性を調査するために基質として使用した。ＦＢ．１抗体－ペプチド融合タンパク質を１００ｎＭで開始する２倍段階希釈でウェルに添加し、ＰＦ．１抗体－ペプチド融合タンパク質を５ｎＭで開始する２倍段階希釈でウェルに添加した。結合したＦＢ．１またはＰＦ．１の検出を、ビオチン化ヤギ抗ヒトＦｃ－反応性二次抗体及びストレプトアビジン－ユーロピウムコンジュゲートの添加後に、時間分解蛍光を測定することによって評価した。３回の反復の平均及び標準偏差（ＳＤ）を計算し、効力（ＥＣ５０）を、対数ｘ軸を用いてシグモイド４パラメーターロジスティック（４ＰＬ）方程式（Ｐｒｉｓｍ）でフィッティングした後に決定した（図８Ｂ）。

【0328】

ｒＶλ６ＷＩＬへのＦＢ．１の結合についての推定効力（ＥＣ５０）値は１３．４ｎＭであったのに対し、ｒＶλ６ＷＩＬへのＰＦ．１の結合についてのＥＣ５０値は０．１５ｎＭであった。これらのデータは、かん流様式の培養及び陽イオン交換クロマトグラフィー法を使用して生成された非常に純粋なインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質（ＰＦ．１）が、流加培養法を使用して生成された抗体－ペプチド融合タンパク質（ＦＢ．１）よりも有意に高いｒＶλ６ＷＩＬアミロイド基質に対する結合親和性を有することを実証する。後のすべての例について、抗体－ペプチド融合タンパク質は、この例に記載のかん流培養及び陽イオン交換クロマトグラフィー法を使用して生成した。

【0329】

実施例６．マウスにおけるＰＦ．１（ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ）の生体内分布
この研究のため、ＰＦ．１（ＶＳＰＳＶスペーサーを有するＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ）を安定的にトランスフェクションされたＣＨＯ細胞によって発現させ、かん流組織培養法によって１日間生成した。ＰＦ．１抗体－ペプチド融合体を実施例５に記載されているようにプロテインＡ及び陽イオン交換クロマトグラフィーによって精製した。ＰＦ．１抗体－ペプチド融合体及び対照ｈＩｇＧ１を、チロシン側鎖への酸化的組み込みによってヨウ素－１２５で放射性標識した。遊離放射性ヨウ素をサイズ排除クロマトグラフィーによって分離し、放射性純度をＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びオートラジオグラフィーによって評価した（図９Ａ）。試薬の重鎖及び軽鎖タンパク質の両方を放射性標識し、遊離放射性ヨウ素の証拠はなかった。ＰＦ．１の軽鎖は、均一（単一の種）であり、ｐ５Ｒペプチドの存在により、対照ＩｇＧ１と比較して明白に高い分子量を有していた。

【0330】

およそ１００μＣｉ（１０μｇの試薬）を、主に肝臓及び脾臓に関与する全身性ＡＡアミロイドーシスを有するマウスの側部尾静脈に静脈内（ＩＶ）注射した。注射から２４時間後、マウス（１群当たりｎ＝３）をイソフルラン過剰投薬によって安楽死させ、ＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を取得した（図９Ｂ）。１２５Ｉ－ＰＦ．１画像は、ＡＡマウスの肝臓、脾臓及びＧＩ管における放射能の低減を明らかにし、これは、注射から２４時間後のＡＡマウスにおける１２５Ｉ－ｈＩｇＧ１の画像と対照的であった。また、対照試薬と比較して、１２５Ｉ－ＰＦ．１が投与された動物におけるマウス心臓の心房領域において明白により多い放射能が存在し、これは、このマウスモデルにおいてより高い血液プール放射能及び乏しい心臓アミロイド沈着物を示し得る。

【0331】

その後直ちに、サンプルまたは器官及び血液を器官における試薬の生体内分布の指標としての組織関連放射能の測定のために収集し、ここで、生体内分布を、組織１グラム当たりで測定された注射された用量のパーセンテージとして定義した。１群当たり３匹のマウスを試験し、標準偏差（ＳＤ）を伴って平均生体内分布を計算した。器官分析は、筋肉、肝臓、膵臓、脾臓、左腎臓、右腎臓、胃、上部腸、下部腸、心臓、肺、及び血液を含んでいた。この分析は、肝臓、脾臓、腎臓、及び胃において対照ｈＩｇＧ１と比較して１２５Ｉ－ＰＦ．１の有意に高い保持を明らかにした（図９Ｃ）。これは、ＰＦ．１試薬がこれらの器官においてアミロイドによって選択的に保持されることを示唆している。

【0332】

次いでマウス器官における放射性標識された試薬の分布をミクロオートラジオグラフィーを使用して評価した。簡潔には、組織のサンプルを１０％緩衝ホルマリン中で２４時間固定し、パラフィンブロック内に包埋し、組織の６μｍ厚の切片をガラススライド上に調製した。スライドを写真乳剤に３日間曝露し、次いでヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色で対比染色した。組織における放射能の存在が、黒銀粒の沈着によって明らかとなった。評価されたすべての器官において、１２５Ｉ－ＰＦ．１の結合は、組織におけるアミロイド沈着物に関連して観察され、肝臓、脾臓及び心臓の代表的な切片を示す病理への特異的結合を示している（図９Ｄ）（棒＝５００μｍ）。対照的に、１２５Ｉ－ｈＩｇＧ１対照の保持は見られなかった。

【0333】

実施例７．ヒト組織におけるアミロイドへのＰＦ．１の結合
ホルマリン固定パラフィン包埋切片を、ＡＴＴＲ（図１０Ａ）、ＡＬ（図１０Ｂ及び１０Ｃ）、またはＡＬＥＴＣ２（図１０Ｄ）アミロイドを含有するいくつかのヒト組織から調製した。アルツハイマー病を有する患者から脳組織の追加のサンプルも評価した（図１０Ｅ）。組織を標準的な免疫組織化学法を使用してＶＳＰＳＶスペーサーを有するビオチン化ＰＦ．１（ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ；ＰＢＳ中に２μｇ／ｍＬ）で染色し、ジアミノベンジジンの添加後に可視化した（黒色の矢印）。同じ組織からのスライドにおけるアミロイドの存在を、アルカリ性コンゴーレッドの溶液での組織の染色後にコンゴーレッド蛍光によって可視化した（白色の矢印）。

【0334】

ＰＦ．１は、ＡＴＴＲｖアミロイドーシスの２つのサンプル（Ｔ６０Ａ ＫＥＮ及びＴ６０Ａ ＳＮＯ）（図１０Ａ）及びＡＬアミロイドーシスの２つのサンプル（ＡＬκＴＡＬ及びＡＬκＢＡＢ）（図１０Ｂ）において心筋細胞の周囲の心臓アミロイド沈着物に特異的に結合した。同様に、アミロイドとの特異的結合が、腎臓におけるＡＬアミロイド沈着物（ＡＬκＨＵＮ及びＡＬκＪＯＮ）で観察された（図１０Ｃ）。ＡＬＥＣＴ２アミロイドへのＰＦ．１の特異的結合が腎臓及び脾臓組織サンプルにおいて観察された（図１０Ｄ）。最後に、アルツハイマー病を有する患者の脳におけるＡβアミロイドから構成される広範性及びコア斑は、ＰＦ．１で陽性染色された（図１０Ｅ）。

【0335】

これらのデータは、ＰＦ．１と、多様な組織における様々なタイプの組織アミロイド沈着物との特異的反応性を実証する。よって、ｐ５Ｒペプチドによって媒介されるＰＦ．１の汎アミロイド反応性は、アミロイド関連疾患の４つの最も一般的な形態からの組織を使用して免疫組織化学染色によって明らかである。

【0336】

実施例８．ｉｎ ｖｉｖｏでのＰＦ．１によるヒトＡＬアミロイド抽出物の貪食
ヒトＡＬ（ＢＡＬ）アミロイド抽出物のサンプルをｐＨ感受性色素スクシンイミジル－ｐＨｒｏｄｏレッドフルオロフォアで標識した。ｐＨｒｏｄｏレッドは、ｐＨ７．５で弱い蛍光を示すが、貪食後にマクロファージのファゴリソソームに見られるように、ｐＨがより酸性になるにつれて増強する。ヒトＡＬ（ＢＡＬ）アミロイド抽出物（約１０％ｗ／ｗのｐＨｒｏｄｏレッド標識物質）を、ＰＦ．１（ＶＳＰＳＶスペーサーを有するＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ；２ｍｇのＡＬ抽出物当たり５００μｇのＰＦ．１）と約３０分間プレインキュベートした。対照として、ＡＬ抽出物をＰＦ．１を有しない同様の体積のＰＢＳ中でインキュベートした。免疫不全（ＮＵ／ＮＵ）マウス（１群当たりｎ＝４）に２ｍｇのＰＦ．１被覆ＡＬ抽出物を背中の皮下に投与した。ｐＨｒｏｄｏレッド標識アミロイドからの蛍光放出を、イソフルラン（空気中に１～２％）麻酔下でマウスの光学的イメージングによって検出した。マウスをアミロイドの注射から１日、５日、７日、１０日、及び１２日後に画像化し、蛍光放出を定量した。

【0337】

アミロイドとＰＦ．１とのプレインキュベートは、ｐＨｒｏｄｏレッド蛍光放出の増加によって明らかにされるように、注射後１２日にわたってアミロイドの貪食の急速かつ持続的な増加をもたらした（図１１Ａ）。対照的に、アミロイド抽出物単独（対照）からの蛍光放出は、有意に低かった（図１１Ａ）。注射から１２日後においてＰＦ．１処置群と対照群との間の蛍光放出の差は、処置群（代表的なマウスが図１１Ｂに示されている）において明白に向上した。

【0338】

これらのデータは、アミロイド結合ＰＦ．１が、ｉｎ ｖｉｖｏで食細胞、主にマクロファージによるアミロイドの貪食を増強し得ることを実証する。

【0339】

実施例９．ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＦ．１によるヒトＡＬアミロイド抽出物の貪食
ヒトＡＬ抽出物（ＡＬκまたはＡＬλ）及びヒトＡＴＴＲ（ｖまたはｗｔ）アミロイド抽出物を、ｅｘ ｖｉｖｏ貪食アッセイにおいて使用するために、ｐＨ感受性色素スクシンイミジル－ｐＨｒｏｄｏレッドフルオロフォアで標識した。ヒトＴＨＰ－１細胞をホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）の添加によって活性化し、２４ウェル組織培養プレートのウェルに播種した。２０μｇの質量のアミロイド抽出物を増加量のＰＦ．１（ＶＳＰＳＶスペーサーを有するＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ）または対照ｈＩｇＧ１抗体（６ｎＭ、２０ｎＭ、６０ｎＭ、及び２００ｎＭ）と共にウェルに添加し、プレートを１時間３７℃でインキュベートした。ウェルを倒立蛍光顕微鏡（Ｋｅｙａｎｃｅ ＢＺ Ｘ８００）を使用して観察し、４つのデジタル画像（４ｘ対物レンズ）を各ウェルについて捕捉した。各画像における蛍光をスペクトルセグメント化を使用して定量し、４つの画像の平均及び標準偏差（ＳＤ）を決定した（図１２Ａ～１２Ｄ）。

【0340】

結果は、ＰＦ．１は、ＡＬκ抽出物（図１２Ａ）、ＡＬλ抽出物（図１２Ｂ）、ＡＴＴＲｖ抽出物（図１２Ｃ）、及びＡＴＴＲｗｔ抽出物（図１２Ｄ）についておよそ６０ｎＭのＰＦ．１で観察されたこれらのアッセイ条件において最大の効果を伴って、活性化ヒトＴＨＰ－１マクロファージによって用量依存的に多様なアミロイド抽出物の貪食を向上させたことを実証する。アミロイド基質の増加した貪食による蛍光放出の向上は、すべての例において対照ｈＩｇＧ１よりも有意に高かった。

【0341】

これらのデータは、ＰＦ．１によるヒトアミロイドのオプソニン化が、ヒトマクロファージによる物質の有意な貪食をもたらすことを実証する。

【0342】

実施例１０．ＰＦ．１による多様なアミロイド基質の強力な結合
合成アミロイド様フィブリル（ｒＶλ６ＷＩＬ及びＡβ（１－４０））ならびにヒトＡＬ抽出物（ＡＬλまたはＡＬκ）及びヒトＡＴＴＲＶ及びＡＴＴＲｗｔアミロイド抽出物をＰＦ．１の結合親和性を調べるための基質として使用した。抗体－ペプチドコンジュゲートを１００ｎＭで開始する２倍段階希釈でウェルに添加した。ｒＶλ６ＷＩＬを含有するウェルについて、抗体－ペプチドコンジュゲートを５ｎＭで開始する２倍段階希釈でウェルに添加した。結合したＰＦ．１（ＶＳＰＳＶスペーサーを有するＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ）の検出を、ビオチン化ヤギ抗ヒトＦｃ－反応性二次抗体及びストレプトアビジン－ユーロピウムコンジュゲートの添加後に、時間分解蛍光を測定することによって評価した。３回の反復の平均及び標準偏差（ＳＤ）を計算し、効力（ＥＣ５０）を、対数ｘ軸を用いてシグモイド４パラメーターロジスティック（４ＰＬ）方程式（Ｐｒｉｓｍ）でフィッティングした後に決定した（図１３Ａ）。非反応性ｈＩｇＧ１を並行アッセイにおいて陰性対照として使用した（図１３Ｂ）。

【0343】

アミロイド基質へのＰＦ．１の結合の推定効力（ＥＣ５０）値は、合成フィブリルの場合の０．１５ｎＭからＡＬκ（ＧＲＡ）アミロイド抽出物の場合の０．６ｎＭまで様々であった（表Ｅ８）。これらのデータは、合成フィブリルならびにヒトＡＬ及びＡＴＴＲアミロイド抽出物に対するＰＦ．１の高い親和性の結合を実証する。

【表16】

【0344】

実施例１１．ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＦ．７による合成アミロイド基質の結合
この研究のため、ＰＦ．１について記載されたものと同様の方法を使用して、ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ（ＶＳＰＳＶスペーサーを有する）をＣＨＯ細胞によって発現させ、かん流組織培養法によって７日間生成した。抗体－ペプチド融合体をプロテインＡ及び陽イオン交換クロマトグラフィーによって精製し、単離された物質をＰＦ．７と指定した。合成アミロイド様フィブリル（タウ４４１、α－シヌクレイン、及びＡβ（１－４０））をＰＦ．７結合分析のための基質として使用した。ＰＦ．７を１００ｎＭで開始する２倍段階希釈でウェルに添加した。結合したＰＦ．７の検出を、ビオチン化ヤギ抗ヒトＦｃ－反応性二次抗体及びストレプトアビジン－ユーロピウムコンジュゲートの添加後に、時間分解蛍光を測定することによって評価した。３回の反復の平均及び標準偏差（ＳＤ）を計算し、効力（ＥＣ５０）を、対数ｘ軸を用いてシグモイド４パラメーターロジスティック（４ＰＬ）方程式（Ｐｒｉｓｍ）でフィッティングした後に決定した（図１４）。非反応性ｈＩｇＧ１を並行アッセイにおいて陰性対照として使用した（図１３Ｂ）。

【0345】

異なるフィブリル基質へのＰＦ．７の結合についての推定効力（ＥＣ５０）値は、α－シヌクレイン、タウ４４１、及びＡβ（１－４０）について１２７ｎＭ、１．３ｕＭ、及び０．４ｎＭであった（表Ｅ９）。

【表17】

【0346】

実施例１２．ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＰＦ．１によるヒトＡＬアミロイド抽出物の貪食は、ヒト血清によって向上する。
合成ｒＶλ６ＷＩＬ（Ｗｉｌ）フィブリル及びヒトＡＬκ（ＴＡＬ）アミロイド抽出物をｅｘ ｖｉｖｏ貪食アッセイにおいて使用するために、ｐＨ感受性色素スクシンイミジル－ｐＨｒｏｄｏレッドフルオロフォアで標識した。ヒトＴＨＰ－１細胞をホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）の添加によって活性化し、２４ウェル組織培養プレートのウェルに播種した。２０μｇの質量のアミロイド抽出物を補体源としての２０％ヒト血清の存在または非存在下で６０ｎＭのＰＦ．１（ＶＳＰＳＶスペーサーを有するＶＨ９－Ｄ５４Ｅ／ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ－ｐ５Ｒ）を有するウェルに添加した。プレートを１時間３７℃でインキュベートした。ウェルを倒立蛍光顕微鏡（Ｋｅｙａｎｃｅ ＢＺ Ｘ８００）を使用して観察し、４つのデジタル画像（４ｘ対物レンズ）を各ウェルについて捕捉した。各画像における蛍光をスペクトルセグメント化を使用して定量し、４つの画像の平均及び標準偏差（ＳＤ）を決定した（図１５）。

【0347】

結果は、補体源としてのヒト血清が、活性化ヒトＴＨＰ－１マクロファージによるＰＦ．１によるオプソニン化後のアミロイド基質の貪食を有意に向上させたことを実証する。

【0348】

これらのデータは、ＰＦ．１によるヒトアミロイドのオプソニン化及びヒトマクロファージによる貪食が、補体源としてのヒト血清によって有意に向上し得ることを実証する。

【0349】

ＩＸ．例示的な実施形態
１．アミロイド反応性ペプチド；及びヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質であって、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに軽鎖のＣ末端で連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0350】

２．前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して前記軽鎖の前記Ｃ末端に連結されている、実施形態１に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0351】

３．前記スペーサーは、ペプチドスペーサーである、実施形態１または実施形態２に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0352】

４．前記軽鎖は、軽鎖定常領域をさらに含み、前記重鎖は、重鎖定常領域を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0353】

５．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの軽鎖及び２つの重鎖を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0354】

６．前記スペーサーは、配列番号２３～２４、２７、及び８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0355】

７．アミロイド反応性ペプチド；及びアミロイドフィブリルに結合する抗体を含む抗体－ペプチド融合タンパク質であって、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記軽鎖のＮ及び／またはＣ末端及び／または前記重鎖のＮ及び／またはＣ末端で連結されており、前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して前記抗体に連結されており、前記スペーサーは、配列番号８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0356】

８．前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記軽鎖の前記Ｎ末端または前記重鎖の前記Ｎ末端で連結されている、実施形態７に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0357】

９．前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記軽鎖の前記Ｃ末端または前記重鎖の前記Ｃ末端で連結されている、実施形態７に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0358】

１０．前記軽鎖は、軽鎖定常領域をさらに含み、前記重鎖は、重鎖定常領域を含む、実施形態７～９のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0359】

１１．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの軽鎖及び２つの重鎖を含む、実施形態７～１０のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0360】

１２．前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0361】

１３．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも２つのアミロイド反応性ペプチドを含み、前記アミロイド反応性ペプチドは、同じペプチドまたは異なるペプチドを含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0362】

１４．前記ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0363】

１５．前記抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体である、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0364】

１６．ａ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む；ｂ）前記ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１；配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む；またはｃ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２；及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、実施形態１～１３及び１５に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0365】

１７．前記ＶＬは、配列番号３２～４２からなる群に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１６のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0366】

１８．前記ＶＨは、配列番号４３～６３からなる群に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１７のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0367】

１９．ａ）前記ＶＬは、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含む；ｂ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含む；ｃ）前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む；ｄ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含む；ｅ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含む；またはｆ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号６９に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0368】

２０．前記ＶＬは、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１９のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0369】

２１．前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１９のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0370】

２２．前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１４～１９のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0371】

２３．前記抗体は、全長抗体、Ｆａｂ断片、またはｓｃＦｖである、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0372】

２４．前記抗体は、Ｆｃ領域を含む、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0373】

２５．前記Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプのものである、実施形態２４に記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0374】

２６．抗体－ペプチド融合タンパク質であって、ａ）ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＮ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、ｂ）ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖を含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第３及び第４のポリペプチドを含み、前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む、ｃ）ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、またはｄ）ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の軽鎖のＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチドを含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、ならびにヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体の重鎖を含む第３及び第４のポリペプチドを含み、前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0375】

２７．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされている、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0376】

２８．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌ、Ａβ、Ａβ（１－４０）、ＩＡＡＰ、ＡＬκ４、Ａｌλ１、またはＡＴＴＲフィブリルに結合する、先行実施形態のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0377】

２９．実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含む薬学的組成物。

【0378】

３０．実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードする核酸（複数可）。

【0379】

３１．実施形態３０に記載の核酸（複数可）を含むベクター。

【0380】

３２．実施形態３１に記載のベクター宿主細胞。

【0381】

３３．前記宿主細胞は、哺乳動物細胞、任意にチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、実施形態３２に記載の宿主細胞。

【0382】

３４．抗体－ペプチド融合タンパク質を作製する方法であって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質をコードする前記ベクターの発現に好適な条件下で実施形態３２または実施形態３３に記載の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。

【0383】

３５．前記方法は、前記抗体－ペプチド融合タンパク質を回収することをさらに含む、実施形態３４に記載の方法。

【0384】

３６．アミロイド関連障害を有する対象を処置する方法であって、治療的有効量の実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【0385】

３７．前記アミロイド関連障害は、全身性または局在化アミロイドーシスである、実施形態３６に記載の方法。

【0386】

３８．前記アミロイド関連障害は、ＡＬ、ＡＨ、Ａβ２Ｍ、ＡＴＴＲ、ＡＡ、ＡＡｐｏＡＩ、ＡＡｐｏＡＩＩ、ＡＧｅｌ、ＡＬｙｓ、ＡＬＥＣＴ２、ＡＦｉｂ、ＡＣｙｓ、ＡＣａｌ、ＡＭｅｄ、ＡＩＡＰＰ、ＡＰｒｏ、ＡＩｎｓ、ＡＰｒＰ、またはＡβアミロイドーシスからなる群から選択される、実施形態３６に記載の方法。

【0387】

３９．前記抗体－ペプチド融合タンパク質での処置は、アミロイドのクリアランスをもたらす、実施形態３６～３８のいずれか１つに記載の方法。

【0388】

４０．前記対象は、ヒトである、実施形態３６～３９のいずれか１つに記載の方法。

【0389】

４１．クリアランスのためにアミロイド沈着物を標的化する方法であって、アミロイド沈着物を実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることを含む、前記方法。

【0390】

４２．前記アミロイド沈着物は、除去される、実施形態４１に記載の方法。

【0391】

４３．前記アミロイド沈着物は、前記抗体－ペプチド融合タンパク質によってオプソニン化される、実施形態４１または４２に記載の方法。

【0392】

４４．アミロイドベースの疾患に罹患している、または罹患していると疑われる対象を処置する方法であって、ａ）前記対象が、ｉ）実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及びｉｉ）前記検出可能な標識に関連するシグナルが前記対象から検出され得るかどうかを決定することによってアミロイド沈着物を有するかどうかを決定すること、及びｂ）前記シグナルが検出された場合、前記対象にアミロイドーシス処置を適用することを含む、前記方法。

【0393】

４５．シグナルが検出されない場合、アミロイド沈着物の後の成長について前記対象をモニタリングする、実施形態４４に記載の方法。

【0394】

４６．前記シグナルの強度を決定すること及び前記シグナルを閾値と比較することをさらに含み、前記閾値を超える場合、前記対象は、アミロイド沈着物を保有すると決定される、実施形態４５に記載の方法。

【0395】

４７．前記アミロイドーシス処置は、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を前記対象に投与することを含む、実施形態４４～４６のいずれかに記載の方法。

【0396】

４８．前記抗体－ペプチド融合タンパク質の投与は、前記対象における前記アミロイド沈着物のクリアランスをもたらす、実施形態４７に記載の方法。

【0397】

４９．対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及び前記抗体ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む、前記方法。

【0398】

５０．前記対象は、アミロイドを含まない、または意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、もしくは１つ以上の関連する血漿細胞疾患に罹患していると決定される、実施形態４４～４９のいずれかに記載の方法。

【0399】

５１．リガンドを検出する方法であって、前記リガンドを実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質と接触させることであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質の前記ペプチドは、前記リガンドに対する結合親和性を有する、前記接触させること、及び前記検出可能な標識からのシグナルを決定し、それにより前記リガンドを検出することを含む、前記方法。

【0400】

５２．実施形態３６～５１のいずれか１つに記載の方法において使用するための、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含むキット。

【0401】

１Ａ．抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
アミロイド反応性ペプチド、及び
貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記重鎖または前記軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0402】

２Ａ．前記軽鎖は、軽鎖定常領域を含み、前記重鎖は、重鎖定常領域を含む、実施形態１Ａに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0403】

３Ａ．前記アミロイド反応性ペプチド及び前記抗体は、前記軽鎖の前記Ｃ末端で連結されている、実施形態１Ａまたは２Ａに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0404】

４Ａ．前記スペーサーは、配列番号８３及び配列番号８６からなる群から選択される、実施形態１Ａまたは２Ａに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0405】

５Ａ．前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号１～１３として示されるアミノ酸配列のいずれか１つと少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１Ａ～４Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0406】

６Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含み、各軽鎖は、前記Ｃ末端で前記アミロイド反応性ペプチドに連結されている、実施形態１Ａ～５Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0407】

７Ａ．前記抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体である、実施形態１Ａ～６Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0408】

８Ａ．前記抗体は、ヒトアミロイドフィブリルに結合する、実施形態１Ａ～７Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0409】

９Ａ．
ａ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、
ｂ）前記ＶＬは、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、または
ｃ）前記ＶＬは、配列番号６４～７０に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７１～８１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む
、実施形態１Ａ～８Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0410】

１０Ａ．前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む、実施形態１Ａ～８Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0411】

１１Ａ．
ａ）前記ＶＬは、配列番号３４に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４８に示されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５２に示されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５０に示されるアミノ酸配列を含む、または
ｆ）前記ＶＬは、配列番号３５に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号４９に示されるアミノ酸配列を含む
、実施形態１Ａ～８Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0412】

１２Ａ．前記ＶＬは、配列番号３６に示されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＨは、配列番号５５に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１Ａ～１１Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0413】

１３Ａ．前記抗体は、全長抗体である、実施形態１Ａ～１２Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0414】

１４Ａ．前記Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１アイソタイプのものである、実施形態１３Ａに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0415】

１５Ａ．抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
アミロイドフィブリルに結合する抗体であって、前記抗体の軽鎖をそれぞれ含む第１のポリペプチド及び第２のポリペプチド、及び前記抗体の重鎖をそれぞれ含む第３及び第４のポリペプチドを含む、前記抗体、ならびに
前記軽鎖または前記重鎖のＮ末端またはＣ末端に連結されたアミロイド反応性ペプチド
を含み、
ａ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８７に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８８に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９２に示されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号８９に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、配列番号９０に示されるアミノ酸を含み、前記第３及び第４のポリペプチドは、配列番号９１に示されるアミノ酸配列を含む
、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0416】

１６Ａ．抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
配列番号１または配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド、及び
ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、前記抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号２３～２４、２７、８３～８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0417】

１７Ａ．抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むアミロイド反応性ペプチド、及び
ヒトアミロイドフィブリルに結合する抗体を含み、前記抗体は、可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）を含み、前記ＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、前記ＶＬは、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び配列番号２２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、
前記アミロイド反応性ペプチドは、配列番号８３に示されるアミノ酸配列を含むスペーサーを介して前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0418】

１８Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、アミロイド基質について１．５ｎＭ未満のＥＣ５０を示す、実施形態１Ａ～１７Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0419】

１９Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識にコンジュゲートされており、前記検出可能な標識は、蛍光標識または放射性標識を含む、実施形態１Ａ～１８Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0420】

２０Ａ．前記放射性標識は、Ｉ－１２３、Ｉ－１２４、Ｆ－１８、ＺＲ－８９、またはＴｃ－９９ｍである、実施形態１９Ａに記載の方法。

【0421】

２１Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、参照ＩｇＧ抗体と比較して改善された生体内分布、汎アミロイド反応性、及び向上した貪食から選択される１つ以上のｉｎ ｖｉｖｏ特徴を示す、実施形態１Ａ～２０Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0422】

２２Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、ｒＶλ６Ｗｉｌ、Ａβ、Ａβ（１－４０）、ＩＡＡＰ、ＡＬκ４、Ａｌλ１、ＡＴＴＲ、α－シヌクレイン、またはタウ４４１フィブリルに結合する、実施形態１Ａ～２１Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0423】

２３Ａ．組成物であって、
抗体－ペプチド融合タンパク質であって、
ｉ）アミロイド反応性ペプチド、及び
ｉｉ）貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記重鎖または前記軽鎖のＮ末端またはＣ末端で連結されており、前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに前記抗体に連結されている、前記抗体－ペプチド融合タンパク質、
前記抗体－ペプチド融合タンパク質の少なくとも９０％は、インタクトである、前記組成物。

【0424】

２４Ａ．前記インタクト抗体－ペプチド融合タンパク質は、実施形態１Ａ～２２Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含む、実施形態２３Ａに記載の組成物。

【0425】

２５Ａ．前記組成物は、１０％以下の切断生成物を含み、前記切断生成物は、配列番号８９によって示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く重鎖または配列番号９１に示されるアミノ酸配列と比較してＮ末端またはＣ末端から１つ以上のアミノ酸残基を欠く軽鎖を含む、実施形態２３Ａに記載の組成物。

【0426】

２６Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、１つ以上のアミロイド基質についてＥＣ５０結合親和性を示し、前記ＥＣ５０結合親和性は、１．５ｎＭ未満である、実施形態２３Ａ～２５Ａのいずれか１つに記載の組成物。

【0427】

２７Ａ．薬学的に許容可能な担体をさらに含む、実施形態２３Ａ～２６Ａのいずれか１つに記載の組成物。

【0428】

２８Ａ．実施形態１Ａ～２２Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。

【0429】

２９Ａ．実施形態２８Ａに記載のポリヌクレオチドを含むベクター。

【0430】

３０Ａ．実施形態２９Ａに記載のベクターを含む宿主細胞。

【0431】

３１Ａ．前記宿主細胞は、哺乳動物細胞、任意にチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、実施形態３０Ａに記載の宿主細胞。

【0432】

３２Ａ．抗体－ペプチド融合タンパク質を生成する方法であって、
ａ）前記抗体－ペプチド融合タンパク質の発現に好適なかん流細胞培養条件下で抗体－ペプチド融合タンパク質をコードするベクターを含む宿主細胞を培養すること、及び
ｂ）約１２～３６時間毎に前記抗体－ペプチド融合タンパク質を回収すること
を含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、
ｉ）アミロイド反応性ペプチド、及び
ｉｉ）貪食を誘導し、オプソニンとして機能することが可能な抗体を含み、前記抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）を含む重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む軽鎖を含み、前記アミロイド反応性ペプチド及び抗体は、前記軽鎖のＣ末端で連結されており、前記アミロイド反応性ペプチドは、スペーサーを介して、またはスペーサーを伴わずに前記抗体に連結されている、前記方法。

【0433】

３３Ａ．工程ｂ）において回収された抗体－ペプチド融合体を陽イオン交換クロマトグラフィーカラムに適用すること及び前記陽イオン交換クロマトグラフィーカラムから前記抗体－ペプチド融合タンパク質を溶出させることをさらに含む、実施形態３２Ａに記載の方法。

【0434】

３４Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、切断型抗体－ペプチド融合タンパク質とは別々に溶出される、実施形態３３Ａに記載の方法。

【0435】

３５Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、実施形態１Ａ～２２Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質を含む、実施形態３２Ａ～３４Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0436】

３６Ａ．前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞である、実施形態３２Ａ～３５Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0437】

３７Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質の純度を決定することをさらに含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質の前記純度は、ドデシル硫酸ナトリウムキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＳＤＳ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）、質量分析（ＭＳ）、またはそれらの組み合わせを含む１つ以上の分析方法を使用して決定される、実施形態３２Ａ～３６Ａのいずれかに記載の方法。

【0438】

３８Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、少なくとも９０％のインタクト抗体－ペプチド融合タンパク質まで精製される、実施形態３２Ａ～３７Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0439】

３９Ａ．実施形態３２Ａ～３８Ａのいずれかに記載の方法によって生成された抗体－ペプチド融合タンパク質。

【0440】

４０Ａ．アミロイド沈着物を含むアミロイド関連障害を有する対象を処置する方法であって、治療的有効量の実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【0441】

４１Ａ．前記アミロイド関連障害は、全身性または局在化アミロイドーシスである、実施形態４０Ａに記載の方法。

【0442】

４２Ａ．前記アミロイド関連障害は、ＡＬ、ＡＨ、Ａβ２Ｍ、ＡＴＴＲ、トランスチレチン、ＡＡ、ＡＡｐｏＡＩ、ＡＡｐｏＡＩＩ、ＡＧｅｌ、ＡＬｙｓ、ＡＬＥｃｔ２、ＡＦｉｂ、ＡＣｙｓ、ＡＣａｌ、ＡＭｅｄ、ＡＩＡＰＰ、ＡＰｒｏ、ＡＩｎｓ、ＡＰｒＰ、パーキンソン病、アルツハイマー病、またはＡβアミロイドーシスからなる群から選択される、実施形態４０Ａまたは４１Ａに記載の方法。

【0443】

４３Ａ．前記アミロイド沈着物は、前記抗体－ペプチド融合タンパク質によってオプソニン化される、実施形態４０Ａ～４２Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0444】

４４Ａ．前記対象を前記抗体－ペプチド融合タンパク質で処置することは、前記アミロイド沈着物の貪食を引き起こす、実施形態４０Ａ～４３Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0445】

４５Ａ．アミロイドベースの疾患を有するまたはアミロイドベースの疾患を有することが疑われる対象を処置する方法であって、
ａ）前記対象が、
ｉ）実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及び
ｉｉ）前記検出可能な標識に関連するシグナルが前記対象から検出され得るかどうかを決定すること
によってアミロイド沈着物を有するかどうかを決定すること、及び
ｂ）前記シグナルが検出された場合、前記対象にアミロイドーシス処置を適用すること
を含む、前記方法。

【0446】

４６Ａ．シグナルが検出されない場合、アミロイド沈着物の後の成長について前記対象をモニタリングする、実施形態４５Ａに記載の方法。

【0447】

４７Ａ．前記シグナルの強度を決定すること及び前記シグナルを閾値と比較することをさらに含み、前記閾値を超える場合、前記対象は、アミロイド沈着物を保有すると決定される、実施形態４５Ａまたは４６Ａに記載の方法。

【0448】

４８Ａ．前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング、ＰＥＴ／ＣＴイメージング、ガンマシンチグラフィー、または光学的イメージングによって検出される、実施形態４５Ａ～４７Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0449】

４９Ａ．前記アミロイドーシス処置は、実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、実施形態４５Ａ～４８Ａのいずれかに記載の方法。

【0450】

５０Ａ．対象におけるアミロイド沈着物を同定する方法であって、実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含む、前記投与すること、及び前記抗体ペプチド融合タンパク質からのシグナルを検出することを含む、前記方法。

【0451】

５１Ａ．対象におけるアミロイドクリアランスをモニタリングする方法であって、
前記対象におけるアミロイド基質を実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物と接触させることであって、前記抗体－ペプチド融合タンパク質は、検出可能な標識を含み、前記抗体－ペプチド融合タンパク質の前記ペプチドは、アミロイド基質についての結合親和性を有する、前記接触させること、及び
前記検出可能な標識からのシグナルを決定し、それにより前記アミロイドクリアランスを検出すること
を含む、前記方法。

【0452】

５２Ａ．前記対象は、ヒトである、実施形態４０Ａ～５１Ａのいずれか１つに記載の方法。

【0453】

５３Ａ．実施形態４０Ａ～５２Ａのいずれか１つに記載の方法において使用するための、実施形態１Ａ～２２Ａ及び３９Ａのいずれか１つに記載の抗体－ペプチド融合タンパク質または実施形態２３Ａ～２７Ａのいずれか１つに記載の組成物を含むキット。

【0454】

例示的な配列
すべてのポリヌクレオチド配列は、５’→３方向で示されている。すべてのポリペプチド配列は、Ｎ末端からＣ末端方向で示されている。

【化1】

１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｈ１配列（配列番号１７）
ＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳ
１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｈ２配列（配列番号１８）
ＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｈ３配列（配列番号１９）
ＬＤＹ
１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｌ１配列（配列番号２０）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨ
１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｌ２配列（配列番号２１）
ＫＶＳＮＲＦＳ
１１－１Ｆ４ ＣＤＲ－Ｌ３配列（配列番号２２）
ＦＱＴＴＹＶＰＮＴ
５’スペーサー配列（配列番号２３）
ＡＱＡＧＱＡＧＱＡＱＧＧＧＹＳ
３’スペーサー配列（配列番号２４）
ＶＴＰＴＶ
Ｉｇｐ５軽鎖コンストラクト（配列番号２５）
ＡＱＡＧＱＡＧＱＡＱＧＧＧＹＳＫＡＱＫＡＱＡＫＱＡＫＱＡＱＫＡＱＫＡＱＡＫＱＡＫＱＶＴＰＴＶＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＬＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ｐ５－３’スペーサー－１１－１Ｆ４ ＶＬ配列（配列番号２６）
ＫＡＱＫＡＱＡＫＱＡＫＱＡＱＫＡＱＫＡＱＡＫＱＡＫＱＶＴＰＴＶＤＶＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＬＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
リンカー配列（配列番号２７）
ＧＧＧＹＳ
ＩＧＫＶ２－３０＊０２－ヒト生殖系列配列（配列番号２８）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＳＤＧＮＴＹＬＮＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＫＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＭＱＧＴＨＷＰＰ
ヒトＶＬアクセプター配列（配列番号２９）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＳＤＧＮＴＹＬＮＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＫＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＩＧＨＶ４－４＊０８－ヒト生殖系列配列（配列番号３０）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲ
ヒトＶＬアクセプター配列（配列番号３１）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＬ１（配列番号３２）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ２（配列番号３３）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ３（配列番号３４）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＬＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４（配列番号３５）ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ（配列番号３６）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＳＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｑ（配列番号３７）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＱＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｅ（配列番号３８）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＥＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｎ３３Ａ（配列番号３９）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＡＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｈ（配列番号４０）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＨＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｇ３４Ａ（配列番号４１）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＡＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＬ４－Ｇ３４Ｖ（配列番号４２）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＶＨＲＶＧＮＴＹＬＨＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＦＣＦＱＴＴＹＶＰＮＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
ＶＨ１（配列番号４３）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ２（配列番号４４）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ３（配列番号４５）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＬＳＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＴＹＹＣＶＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ４（配列番号４６）
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ＶＨ５（配列番号４７）
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ＶＨ６（配列番号４８）
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ＶＨ７（配列番号４９）
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ＶＨ８（配列番号５０）
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ＶＨ９（配列番号５１）
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ＶＨ１０（配列番号５２）
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ＶＨ９－Ｄ５４Ｓ（配列番号５３）
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ＶＨ９－Ｄ５４Ｑ（配列番号５４）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＱＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＳＱＶＬＦＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ（配列番号５５）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＥＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＳＱＶＬＦＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ａ（配列番号５６）
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ＶＨ９－Ｄ５４Ｈ（配列番号５７）
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ＶＨ９－Ｇ５５Ａ（配列番号５８）
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ＶＨ９－Ｇ５５Ｖ（配列番号５９）
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ＶＨ９－Ｍ６４Ｖ（配列番号６０）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＶＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＳＱＶＬＦＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ｉ（配列番号６１）
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ＶＨ９－Ｍ６４Ｌ（配列番号６２）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＬＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＳＱＶＬＦＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ａ（配列番号６３）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＳＹＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＡＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＳＱＶＬＦＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＴＬＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｓ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６４）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＳＧＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｑ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６５）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＱＧＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｅ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６６）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＥＧＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｎ３３Ａ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６７）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＡＧＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｎ３３Ｈ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６８）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＨＧＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｇ３４Ａ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号６９）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＡＮＴＹＬＨ
ＶＬ４－Ｇ３４Ｖ ＣＤＲ－Ｌ１（配列番号７０）
ＲＳＳＱＳＬＶＨＲＮＶＮＴＹＬＨ
ＶＨ９－Ｄ５４Ｓ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７１）
ＶＩＷＧＳＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ｑ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７２）
ＶＩＷＧＱＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ｅ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７３）
ＶＩＷＧＥＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ａ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７４）
ＶＩＷＧＡＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｄ５４Ｈ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７５）
ＶＩＷＧＨＧＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｇ５５Ａ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７６）
ＶＩＷＧＤＡＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｇ５５Ｖ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７７）
ＶＩＷＧＤＶＳＴＮＹＨＰＮＬＭＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ｖ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７８）
ＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＶＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ｉ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号７９）
ＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＩＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ｌ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号８０）
ＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＬＳ
ＶＨ９－Ｍ６４Ａ ＣＤＲ－Ｈ２（配列番号８１）
ＶＩＷＧＤＧＳＴＮＹＨＰＮＬＡＳ
Ｉｇ軽鎖のＮ末端（配列番号８２）
ＤＶＶＭＴＱＴＰ
短い硬質スペーサー（配列番号８３）
ＶＳＰＳＶ
長い硬質スペーサー（配列番号８４）
ＶＳＰＳＶＶＳＰＳＶ
短い軟質スペーサー（配列番号８５）
ＧＧＳＧＧ
長い軟質スペーサー（配列番号８６）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図5E】

【図5F】

【図5G】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【図9A】

【図9B】

【図9C】

【図9D】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図10E】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【配列表】

2024521082000001.app

【国際調査報告】