特表 2024-521575 ＡＣＴＲＩＩタンパク質およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-06-03

(54)【発明の名称】ＡＣＴＲＩＩタンパク質およびその使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/16 20060101AFI20240527BHJP

   A61P 9/12 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 25/22 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 25/24 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240527BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20240527BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/5585 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/4985 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/4965 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/505 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/19 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/4412 20060101ALI20240527BHJP

   A61K 31/4418 20060101ALI20240527BHJP

   C07K 14/705 20060101ALI20240527BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240527BHJP

【ＦＩ】

A61K38/16

A61P9/12

A61P11/00

A61P11/06

A61P35/00

A61P3/04

A61P21/04

A61P25/22

A61P25/24

A61P37/02

A61P19/02

A61P29/00 101

A61P9/00

A61K47/68

A61K45/00

A61K31/5585

A61K31/4985

A61K31/4965

A61K31/505

A61K31/506

A61K31/519

A61K31/19

A61K31/4412

A61K31/4418

C07K14/705 ZNA

C07K19/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023575554

(86)(22)【出願日】2022-06-10

(85)【翻訳文提出日】2024-02-06

(86)【国際出願番号】 US2022033007

(87)【国際公開番号】W WO2022261436

(87)【国際公開日】2022-12-15

(31)【優先権主張番号】63/209,871

(32)【優先日】2021-06-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】509125475

【氏名又は名称】アクセルロン ファーマ インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】リ，ガン

(72)【発明者】

【氏名】アンドレ，パトリック

(72)【発明者】

【氏名】クマール，ラヴィンドラ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

4C206

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076CC11

4C076CC15

4C076CC41

4C076EE41

4C076EE59

4C084AA02

4C084AA19

4C084BA01

4C084BA20

4C084BA21

4C084BA22

4C084BA41

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZA05

4C084ZA12

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4C084ZA42

4C084ZA59

4C084ZA70

4C084ZA94

4C084ZA96

4C084ZB07

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4C084ZB26

4C086AA01

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4C086BC17

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4C086BC48

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4C086MA01

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4C086NA14

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4C086ZA36

4C086ZA42

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4C086ZA94

4C086ZA96

4C086ZB07

4C086ZB15

4C086ZB26

4C206AA01

4C206AA02

4C206DA29

4C206MA01

4C206MA02

4C206MA04

4C206NA05

4C206NA14

4C206ZA05

4C206ZA12

4C206ZA36

4C206ZA42

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4C206ZA70

4C206ZA94

4C206ZA96

4C206ZB07

4C206ZB15

4C206ZB26

4H045AA30

4H045BA09

4H045BA41

4H045DA50

4H045EA20

4H045FA74

4H045GA21

4H045GA22

4H045GA23

4H045GA26

(57)【要約】

いくつかの態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する、特に合併症に関連する１つ以上の肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療、予防またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを含む組成物および方法に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法。

【請求項2】

肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項3】

前記肺疾患に関連する１つ以上の肺高血圧症の合併症が、持続性咳、湿性咳、喘鳴、運動不耐性、呼吸器感染症、気管支拡張症、慢性感染症、鼻ポリープ、喀血、気胸、呼吸不全、呼吸困難、胸痛、喀血、気胸、肺血管リモデリング、肺線維症、肺血管内皮機能不全、慢性肺傷害による低酸素症、低酸素性肺血管収縮、炎症、平滑筋肥大、および右室肥大からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項5】

閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項6】

前記閉塞性肺疾患が、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症、喘息、気腫、リンパ脈管筋腫症、および慢性気管支炎からなる群から選択される、請求項４または５に記載の方法。

【請求項7】

前記閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症が、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生存率の低下からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項9】

拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項10】

前記拘束性肺疾患が、肺線維症、間質性肺疾患、サルコイドーシス、特発性肺線維症、塵肺症、肥満症、脊柱側弯症、重症筋無力症、および胸水からなる群から選択される、請求項８または９に記載の方法。

【請求項11】

前記拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症が、運動時の息切れ、安静時の息切れ、最小限の活動での息切れ、咳、乾性咳、湿性咳、慢性咳、疲労、体重減少、不安、うつ病および線維症からなる群から選択される、請求項９に記載の方法。

【請求項12】

閉塞性および拘束性の混合性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項13】

前記閉塞性および拘束性の混合性肺疾患が、肺実質障害である、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記肺実質障害が、
ａ．サルコイドーシス
ｂ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および間質性肺疾患（ＩＬＤ）
ｃ．ＣＯＰＤおよび特発性肺線維症
ｄ．塵肺症
ｅ．ＩＬＤ
ｆ．ランゲルハンス細胞組織球症
ｇ．特発性肺線維症（ＩＰＦ）
ｈ．肺胞蛋白症
ｉ．リンパ脈管筋腫症
ｊ．閉塞性細気管支炎症候群
からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記塵肺症が、珪肺症、石炭労働者の肺およびベリリウム症からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記ＩＬＤが、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、結合組織疾患、間質性肺炎、狭窄性細気管支炎、または特発性器質化肺炎に関連する、請求項１４に記載の方法。

【請求項17】

前記閉塞性および拘束性の混合性肺疾患が、肺実質障害と非肺疾患との組み合わせである、請求項１２に記載の方法。

【請求項18】

前記肺実質障害と非肺疾患との組み合わせが、
ａ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）と他の非実質疾患；
ｂ．うっ血性心不全（ＣＨＦ）と他の非肺疾患；
ｃ．喘息と他の障害；
ｄ．間質性肺疾患（ＩＬＤ）と肥満症；
ｅ．ＩＬＤとＣＨＦ；および
ｆ．肺形成不全と脊柱側弯症
からなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記ＣＯＰＤと他の非実質疾患が、
ａ．ＣＯＰＤとうっ血性心不全（ＣＨＦ）；
ｂ．ＣＯＰＤと肥満症；
ｃ．ＣＯＰＤと胸部手術；
ｄ．ＣＯＰＤと横隔膜麻痺；
ｅ．ＣＯＰＤと脊柱側弯症；および
ｆ．ＣＯＰＤと胸膜癒着
からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

前記ＣＨＦと他の非肺疾患が、
ａ．ＣＨＦと脊柱側弯症；
ｂ．ＣＨＦと肺切除；および
ｃ．ＣＨＦと肥満症
からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。

【請求項21】

前記喘息と他の障害が、
ａ．喘息と肥満症；
ｂ．喘息と肺切除；
ｃ．喘息と放射線線維症；
ｄ．喘息とトラップ肺（ｔｒａｐｐｅｄ ｌｕｎｇ）；および
ｅ．喘息とＣＨＦ
からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。

【請求項22】

間質性肺疾患（ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法。

【請求項23】

間質性肺疾患（ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項24】

前記ＩＬＤが、結合組織疾患、サルコイドーシス、進行性実質線維症による血管破壊、血管炎症、血管周囲線維症、血栓性血管障害、および内皮機能障害からなる群から選択される状態に関連する、請求項１６または２３に記載の方法。

【請求項25】

前記結合組織疾患が、全身性硬化症、関節リウマチ、多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｏｓｉｔｉｓ）、皮膚筋炎およびシェーグレン症候群からなる群から選択される、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項27】

慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項28】

前記ＣＯＰＤに関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症が、喘鳴、湿性咳、頻繁な咳、胸部圧迫感、身体活動によらない息切れ、身体活動による息切れ、呼吸器感染症、体重減少、下肢の筋力低下、下肢の腫脹、および心疾患からなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記患者が、慢性閉塞性肺疾患のためのグローバルイニシアチブ（Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｌｕｎｇ Ｄｉｓｅａｓｅ）によって認定される、Ｇｏｌｄグレード１、Ｇｏｌｄグレード２、Ｇｏｌｄグレード３またはＧｏｌｄグレード４のＣＯＰＤを有する、請求項２６～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

前記患者が、グループＡのＣＯＰＤ、グループＢのＣＯＰＤ、グループＣのＣＯＰＤ、またはグループＤのＣＯＰＤを有する、請求項２６～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記患者が、ステージ１、ステージ２、ステージ３、およびステージ４からなる群から選択されるＣＯＰＤを有する、請求項２６～３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

前記患者がアルファ－１－アンチトリプシン欠損症を有する、請求項２６～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項34】

気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項35】

線維性特発性間質性肺炎（ＩＩＰ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項36】

線維性特発性間質性肺炎（ＩＩＰ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項37】

前記患者が、治療前に高い線維性スコアおよび低い一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）からなる群から選択される１つ以上の診断パラメータを有する、請求項３５または３６に記載の方法。

【請求項38】

特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項39】

特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項40】

前記ＩＰＦに関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症が、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生残性の低下からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項42】

非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項43】

前記ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤが、喫煙関連ＩＬＤ、過敏性肺臓炎関連ＩＬＤ、結合組織関連ＩＬＤ、職業関連ＩＬＤ、および医薬品誘発ＩＬＤからなる群から選択される、請求項４１または４２に記載の方法。

【請求項44】

非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症が、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生残性の低下からなる群から選択される、請求項４２に記載の方法。

【請求項45】

非特異性間質性肺炎（ＮＳＩＰ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法。

【請求項46】

非特異性間質性肺炎（ＮＳＩＰ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供。

【請求項47】

前記患者が、治療前に３５ｍｍＨｇを超える右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を有する、請求項１～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項48】

前記患者の前記ＲＶＳＰを低下させる、請求項１～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

前記患者の前記ＲＶＳＰを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％低下させる、請求項１～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記患者の前記ＲＶＳＰを２５ｍｍＨｇ未満に低下させる、請求項１～４９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項51】

前記患者が、治療前に２５ｍｍＨｇを超える肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）を有する、請求項１～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項52】

前記患者が、治療前に少なくとも３５ｍｍＨｇ、４０ｍｍＨｇ、４５ｍｍＨｇ、５０ｍｍＨｇ、５５ｍｍＨｇ、または６０ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する、請求項１～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項53】

前記患者の前記ＰＡＳＰを低下させる、請求項１～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

前記患者の前記ＰＡＳＰを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％低下させる、請求項１～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項55】

前記患者の前記ＰＡＳＰを少なくとも５ｍｍＨｇ、少なくとも１０ｍｍＨｇ、少なくとも１５ｍｍＨｇ、少なくとも２０ｍｍＨｇ、または少なくとも２５ｍｍＨｇ低下させる、請求項１～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記患者の前記ＰＡＳＰを２５ｍｍＨｇ未満に低下させる、請求項１～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項57】

前記患者の前記ＰＡＳＰを２０ｍｍＨｇ未満に低下させる、請求項１～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項58】

前記患者が、治療前に３Ｗｏｏｄ単位以上の肺血管抵抗（ＰＶＲ）を有する、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項59】

前記患者の前記ＰＶＲを低下させる、請求項１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項60】

前記患者の前記ＰＶＲを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記ＰＶＲを３Ｗｏｏｄ単位未満に低下させる、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

前記患者の治療前の平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）が、
ａ．少なくとも１７ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｂ．少なくとも２０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｃ．少なくとも２５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｄ．少なくとも３０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｅ．少なくとも３５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｆ．少なくとも４０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；
ｇ．少なくとも４５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ；および
ｈ．少なくとも５０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、
からなる群から選択される、請求項１～６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

前記患者が、治療前に２１～２４ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、および少なくとも３Ｗｏｏｄ単位のＰＶＲを有する、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記患者が、治療前に２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰ、および２．０Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数（ＣＩ）を有する、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

前記患者が、治療前に２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰ、および２．５Ｌ／分／ｍ^２未満のＣＩを有する、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項66】

前記患者の前記ｍＰＡＰを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％低下させる、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項67】

前記患者の前記ｍＰＡＰを少なくとも３ｍｍＨｇ、５、７、１０、１２、１５、２０または２５ｍｍＨｇ低下させる、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

前記ｍＰＡＰを、
ａ．１７ｍｍＨｇ未満；
ｂ．２０ｍｍＨｇ未満；
ｃ．２５ｍｍＨｇ未満；および
ｄ．３０ｍｍＨｇ未満、
からなる群から選択される値に低下させる、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

前記患者の治療前の平均右心房圧（ｍＲＡＰ）が、
ａ．少なくとも５ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；
ｂ．少なくとも６ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；
ｃ．少なくとも８ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；
ｄ．少なくとも１０ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；
ｅ．少なくとも１２ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；
ｆ．少なくとも１４ｍｍＨｇのｍＲＡＰ；および
ｇ．少なくとも１６ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、
からなる群から選択される、請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

前記患者の平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を改善する、請求項１～５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

前記ｍＲＡＰの改善が、前記ｍＲＡＰの低下である、請求項７０に記載の方法。

【請求項72】

前記患者の前記ｍＲＡＰを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる、請求項１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項73】

前記患者の前記ｍＲＡＰを少なくとも１ｍｍ Ｈｇ、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５ｍｍ Ｈｇ低下させる、請求項１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項74】

前記患者が、治療前に４Ｌ／分未満の心拍出量を有する、請求項１～７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項75】

前記患者の前記心拍出量を少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％増加させる、請求項１～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

前記患者の前記心拍出量を、前記患者において少なくとも０．５Ｌ／分、１、１．５、２、２．５、３、３．５、または４Ｌ／分増加させる、請求項１～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項77】

前記患者の前記心拍出量を少なくとも４Ｌ／分に増加させる、請求項１～７６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

前記患者が、治療前に２．５Ｌ／分／ｍ^２、２．０、１．５、または１Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数（ＣＩ）を有する、請求項１～７７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項79】

前記患者の前記ＣＩを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％増加させる、請求項１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項80】

前記患者の前記ＣＩを少なくとも０．２Ｌ／分／ｍ^２、０．４、０．６、０．８、１、１．２、１．４、１．６、１．８、または２Ｌ／分／ｍ^２増加させる、請求項１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項81】

前記患者の前記ＣＩを少なくとも２．５Ｌ／分／ｍ^２に増加させる、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項82】

前記患者の運動耐容能を増加させる、請求項１～８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項83】

前記患者が、治療前にボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）で少なくとも０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、または１０指数ポイントを有する、請求項１～８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項84】

前記患者のボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を低下させる、請求項１～８３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項85】

前記患者のＢＤＩを少なくとも０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、または１０指数ポイント低下させる、請求項１～８４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項86】

前記患者が、治療前に５５０メートル、５００、４５０、４４０、４００、３８０、３５０、３００、２５０、２００、または１５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する、請求項１～８５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項87】

前記患者の６ＭＷＤを少なくとも１０メートル、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２５０、３００、または４００メートル増加させる、請求項１～８５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項88】

世界保健機関（ＷＨＯ）によって認定される、肺高血圧症機能分類の進行を予防または軽減する、請求項１～８７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項89】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、機能分類Ｉから分類ＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する、請求項１～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項90】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、機能分類ＩＩから分類ＩＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する、請求項１～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項91】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、機能分類ＩＩＩから分類ＩＶ肺高血圧症への進行を予防または軽減する、請求項１～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項92】

ＷＨＯによって認定される、肺高血圧症機能分類の退行を促進または増進する、請求項１～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項93】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、分類ＩＶから分類ＩＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する、請求項１～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項94】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、分類ＩＩＩから分類ＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する、請求項１～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項95】

ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の、分類ＩＩから分類Ｉ肺高血圧症への退行を促進または増進する、請求項１～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項96】

前記患者が、治療前に健康な患者よりも高いＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する、請求項１～９５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項97】

前記患者が、治療前に正常ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する、請求項１～９５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項98】

前記患者が、治療前に少なくとも１００ｐｇ／ｍＬ、１５０、２００、３００、４００、５００、１０００、３０００、５０００、１０，０００、１５，０００、または２０，０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する、請求項１～９５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項99】

前記患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを低下させる、請求項１～９８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項100】

前記患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、または少なくとも８０％低下させる、請求項１～９９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項101】

前記患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも３０％低下させる、請求項１～１００のいずれか一項に記載の方法。

【請求項102】

ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを正常レベルまで低下させる、請求項１～１０１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項103】

ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの正常レベルが１００ｐｇ／ｍｌ未満である、請求項１０２に記載の方法。

【請求項104】

前記患者が、治療前に健康な患者よりも高い脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）レベルを有する、請求項１～１０３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項105】

前記患者が、治療前に正常ＢＮＰレベルを有する、請求項１～１０３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項106】

前記患者が、治療前に少なくとも１００ｐｇ／ｍＬ、１５０、２００、３００、４００、５００、１０００、３０００、５０００、１０，０００、１５，０００、または２０，０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰレベルを有する、請求項１～１０５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項107】

前記患者のＢＮＰレベルを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、または８０％低下させる、請求項１～１０６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項108】

ＢＮＰレベルを正常レベル（１００ｐｇ／ｍｌ未満）まで低下させる、請求項１～１０７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項109】

前記患者が、治療前に７ｍｍＨｇを超える拡張期圧較差（ＤＰＧ）を有する、請求項１～１０８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項110】

前記患者が、治療前に少なくとも７１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する、請求項１～１０８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項111】

前記患者の前記ＤＰＧを低下させる、請求項１～１０８および１１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項112】

前記患者の前記ＤＰＧを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる、請求項１～１０８、１１０および１１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項113】

前記患者の前記ＤＰＧを７ｍｍＨｇ未満に低下させる、請求項１～１０８、１１０および１１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項114】

前記患者の生活の質を、ケンブリッジ肺高血圧転帰レビュー（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｒｅｖｉｅｗ：ＣＡＭＰＨＯＲ）を使用して測定して、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％向上させる、請求項１～１１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項115】

前記患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％低下させる、請求項１１４に記載の方法。

【請求項116】

前記患者が肺線維症を有する、請求項１～１１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項117】

前記患者の前記肺線維症を減少させる、請求項１１６に記載の方法。

【請求項118】

前記患者の前記肺線維症を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる、請求項１１６または１１７に記載の方法。

【請求項119】

前記患者が、治療前に６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、または２０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する、請求項１～１１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項120】

前記患者の前記ＤＬ_ＣＯを増加させる、請求項１～１１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項121】

前記患者の前記ＤＬ_ＣＯを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項122】

前記ＤＬ_ＣＯを少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、または６５％まで増加させる、請求項１～１２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項123】

前記患者の一酸化炭素移動係数（Ｋ_ＣＯ）が、予測値の６０％未満、予測値の５５％未満、予測値の５０％未満、予測値の４５％未満、予測値の４０％未満、予測値の３５％未満、予測値の３０％未満、予測値の２５％未満、または予測値の２０％未満である、請求項１～１２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項124】

前記患者の前記Ｋ_ＣＯを増加させる、請求項１～１２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項125】

前記患者の前記Ｋ_ＣＯを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項126】

前記Ｋ_ＣＯを少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、または６５％まで増加させる、請求項１～１２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項127】

前記患者の複合生理学的指標（ＣＰＩ）が、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５または８０より大きい、請求項１～１２６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項128】

前記患者の前記ＣＰＩを低下させる、請求項１～１２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項129】

前記患者の前記ＣＰＩを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる、請求項１～１２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項130】

前記ＣＰＩを７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５未満まで低下させる、請求項１～１２９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項131】

前記患者の治療前の動脈酸素飽和度が９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、または３０％未満である、請求項１～１３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項132】

前記患者の前記動脈酸素飽和度を増加させる、請求項１～１３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項133】

前記患者の前記動脈酸素飽和度を少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項134】

前記動脈酸素飽和度を少なくとも８５％、９０％、または９５％まで増加させる、請求項１～１３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項135】

前記動脈酸素飽和度が安静時に測定される、請求項１３１～１３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項136】

前記患者が、治療前に２０ｍｍ、１８、１６、１４、または１２ｍｍ未満の三尖弁輪収縮期移動距離（ＴＡＰＳＥ）を有する、請求項１～１３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項137】

前記ＴＡＰＳＥを少なくとも２０ｍｍ、２２、２４、２６、２８、または３０ｍｍまで増加させる、請求項１～１３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項138】

前記患者の治療前の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）が、
ａ．７０％超；
ｂ．６０％～６９％；
ｃ．５０％～５９％；
ｄ．３５％～４９％；および
ｅ．３５％未満
からなる群から選択される、請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項139】

前記患者の前記ＦＥＶ_１を増加させる、請求項１～１３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項140】

前記患者の前記ＦＥＶ_１を少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項141】

前記ＦＥＶ_１を少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％まで増加させる、請求項１～１４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項142】

前記患者の治療前の努力肺活量（ＦＶＣ）が、
ａ．８０％超；
ｂ．７０％超；
ｃ．６０％～６９％；
ｄ．５０％～５９％；
ｅ．３５％～４９％；および
ｆ．３５％未満
からなる群から選択される、請求項１～１４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項143】

前記患者の前記ＦＶＣを増加させる、請求項１～１４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項144】

前記患者の前記ＦＶＣを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項145】

前記ＦＶＣを少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％まで増加させる、請求項１～１４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項146】

前記患者の右室機能を改善する、請求項１～１４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項147】

前記右室機能の改善が、右室面積変化率の増加によるものである、請求項１４６に記載の方法。

【請求項148】

前記右室機能の改善が、右室肥大の減少によるものである、請求項１４６に記載の方法。

【請求項149】

前記右室機能の改善が、駆出率の増加によるものである、請求項１４６に記載の方法。

【請求項150】

前記右室機能の改善が、右室面積変化率および駆出率の増加によるものである、請求項１４６に記載の方法。

【請求項151】

前記患者の右室肥大を減少させる、請求項１～１５０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項152】

前記患者の右室肥大を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる、請求項１～１５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項153】

前記患者の平滑筋肥大を減少させる、請求項１～１５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項154】

前記患者の平滑筋肥大を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる、請求項１～１５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項155】

死亡のリスクを低下させる、請求項１～１５４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項156】

肺動脈高血圧症に関連する死亡のリスクを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる、請求項１～１５５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項157】

前記患者の無移植生存率を増加させる、請求項１～１５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項158】

前記患者の無移植生存率を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる、請求項１～１５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項159】

肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の併存症を治療する、請求項１～１５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項160】

前記肺疾患に関連する肺高血圧症の１つまたは複数の併存症が、全身性高血圧症、腎機能低下、真性糖尿病、高脂血症、肥満症、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、閉塞性睡眠時無呼吸、肺塞栓症、心不全、心房細動および貧血からなる群から選択される、請求項１５９に記載の方法。

【請求項161】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項162】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項163】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項163】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、免疫グロブリンのＦｃドメインをさらに含む融合タンパク質である、請求項１６１～１６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項164】

前記免疫グロブリンのＦｃドメインが、ＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃドメインである、請求項１６３に記載の方法。

【請求項165】

前記Ｆｃ融合タンパク質が、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインと免疫グロブリンのＦｃドメインとの間に配置されたリンカードメインをさらに含む、請求項１６３または１６４に記載の方法。

【請求項166】

前記リンカードメインが、ＴＧＧＧ（配列番号２０）、ＴＧＧＧＧ（配列番号１８）、ＳＧＧＧＧ（配列番号１９）、ＧＧＧＧＳ（配列番号２２）、ＧＧＧ（配列番号１６）、ＧＧＧＧ（配列番号１７）、およびＳＧＧＧ（配列番号２１）からなる群から選択される、請求項１６５に記載の方法。

【請求項167】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項168】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項169】

前記ポリペプチドが、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記ポリペプチドがアクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する、請求項１～１６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項170】

前記ポリペプチドが、配列番号１の残基２１～１３５に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記ポリペプチドがアクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する、請求項１～１６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項171】

前記ポリペプチドが凍結乾燥されている、請求項１～１６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項172】

前記ポリペプチドが可溶性である、請求項１～１７１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項173】

前記ポリペプチドを皮下注射を用いて投与する、請求項１～１７２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項174】

前記ポリペプチドを約３週間毎に投与する、請求項１～１７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項175】

前記ポリペプチドを約４週間毎に投与する、請求項１～１７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項176】

前記ポリペプチドがホモ二量体タンパク質複合体の一部である、請求項１～１７５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項177】

前記ポリペプチドがグリコシル化されている、請求項１～１７６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項178】

前記ポリペプチドが、チャイニーズハムスター卵巣細胞における発現によって得ることができるグリコシル化パターンを有する、請求項１～１７７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項179】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、アクチビンＡ、アクチビンＢ、およびＧＤＦ１１からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドに結合する、請求項１～１７８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項180】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドが、ＢＭＰ１０、ＧＤＦ８、およびＢＭＰ６からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドにさらに結合する、請求項１７９に記載の方法。

【請求項181】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．１ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１～１８０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項182】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１～１８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項183】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．７ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１～１８２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項184】

追加の活性剤および／または支持療法を前記患者にさらに投与することを含む、請求項１～１８３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項185】

前記追加の活性剤および／または支持療法が、β遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、利尿剤、脂質低下薬、エンドセリン遮断薬、ＰＤＥ５阻害剤、およびプロスタサイクリンからなる群から選択される、請求項１８４に記載の方法。

【請求項186】

前記追加の活性剤および／または支持療法が、プロスタサイクリンおよびその誘導体（例えば、エポプロステノール、トレプロスチニルおよびイロプロスト）；プロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、セレキシパグ）；エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、テリン、アンブリセンタン、マシテンタンおよびボセンタン）；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、アムロジピン、ジルチアゼムおよびニフェジピン；抗凝固剤（例えば、ワルファリン）；ジゴキシン、利尿薬；酸素療法；心房中隔切開術；肺血栓内膜摘出術；ホスホジエステラーゼ５型阻害剤（例えば、シルデナフィルおよびタダラフィル）；可溶性グアニル酸シクラーゼのアクチベーター（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）；ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＣＩＩＡ；ＳＣＨ７９７９７；ＧＳ－４９９７；ＭＳＣ２０３２９６４Ａ；３Ｈ－ナフト［１，２，３－ｄｅ］キニリン－２，７－ジオン、ＮＱＤＩ－１；２－チオキソ－チアゾリジン、５－ブロモ－３－（４－オキソ－２－チオキソ－チアゾリジン－５－イリデン）－１，３－ジヒドロ－インドール－２－オン）；ＮＦ－κＢ拮抗薬（例えば、ｄｈ４０４、ＣＤＤＯ－エポキシド；２．２－ジフルオロプロピオンアミド；Ｃ２８イミダゾール（ＣＤＤＯ－Ｉｍ）；２－シアノ－３，１２－ジオキソオレアン－１，９－ジエン－２８－オイック酸（ＣＤＤＯ）；３－アセチルオレアノール酸；３－トリフルオロアセチルオレアノール酸；２８－メチル－３－アセチルオレアナン；２８－メチル－３－トリフルオロアセチルオレアナン；２８－メチルオキシオレアノール酸；ＳＺＣ０１４；ＳＣＺ０１５；ＳＺＣ０１７；オレアノール酸のＰＥＧ化誘導体；３－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［ａ－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［α－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル－オレアノール酸；３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ１）；オレアノール酸３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ２）；メチル３，１１ジオキソオレアン－１２－エン－２８－オレート（ＤＩＯＸＯＬ）；ＺＣＶＩ_４－２；ベンジル３－デヒドロ－オキシ－１，２，５－オキサジアゾロ［３’，４’：２，３］オレノレート）；左室補助装置（ＬＶＡＤ）、酸素療法、ならびに肺および／または心臓移植からなる群から選択される、請求項１８５に記載の方法。

【請求項187】

前記患者が、ホスホジエステラーゼ５型阻害剤、可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激薬、プロスタサイクリン受容体アゴニストおよびエンドセリン受容体拮抗薬からなる群から選択される１つ以上の薬剤で治療されている、請求項１～１８３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項188】

前記１つ以上の薬剤が、ボセンタン、シルデナフィル、ベラプロスト、マシテンタン、セレキシパグ、エポプロステノール、トレプロスチニル、イロプロスト、アンブリセンタン、およびタダラフィルからなる群から選択される、請求項１８７に記載の方法。

【請求項189】

ホスホジエステラーゼ５型阻害剤、可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激薬、プロスタサイクリン受容体アゴニストおよびエンドセリン受容体拮抗薬からなる群から選択される１つ以上の薬剤の投与をさらに含む、請求項１～１８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項190】

前記１つ以上の薬剤が、ボセンタン、シルデナフィル、ベラプロスト、マシテンタン、セレキシパグ、エポプロステノール、トレプロスチニル、イロプロスト、アンブリセンタン、およびタダラフィルからなる群から選択される、請求項１８９に記載の方法。

【請求項191】

前記患者が、前記ポリペプチドの投与前に１つ以上の血管拡張剤で治療されている、請求項１～１９０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項192】

１つ以上の血管拡張剤の投与をさらに含む、請求項１～１９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項193】

前記１つ以上の血管拡張剤が、プロスタサイクリン、エポプロステノールおよびシルデナフィルからなる群から選択される、請求項１９１または１９２に記載の方法。

【請求項194】

前記血管拡張剤がプロスタサイクリンである、請求項１９３に記載の方法。

【請求項195】

前記患者が、肺疾患に関連する肺高血圧症のための１つ以上の療法を受けている、請求項１～１９４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項196】

前記肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の療法が、トレプロスチニル、ピルフェニドン、ニンテダニブ、プロスタサイクリンおよびその誘導体（例えば、エポプロステノール、トレプロスチニルおよびイロプロスト）；プロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、セレキシパグ）；エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、テリン、アンブリセンタン、マシテンタンおよびボセンタン）；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、アムロジピン、ジルチアゼムおよびニフェジピン；抗凝固剤（例えば、ワルファリン）；利尿薬；酸素療法；心房中隔切開術；肺血栓内膜摘出術；ホスホジエステラーゼ５型阻害剤（例えば、シルデナフィルおよびタダラフィル）；可溶性グアニル酸シクラーゼの活性化剤（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）；ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＣＩＩＡ；ＳＣＨ７９７９７；ＧＳ－４９９７；ＭＳＣ２０３２９６４Ａ；３Ｈ－ナフト［１，２，３－ｄｅ］キニリン－２，７－ジオン、ＮＱＤＩ－１；２－チオキソ－チアゾリジン、５－ブロモ－３－（４－オキソ－２－チオキソ－チアゾリジン－５－イリデン）－１，３－ジヒドロ－インドール－２－オン）；ＮＦ－κＢ拮抗薬（例えば、ｄｈ４０４、ＣＤＤＯ－エポキシド；２．２－ジフルオロプロピオンアミド；Ｃ２８イミダゾール（ＣＤＤＯ－Ｉｍ）；２－シアノ－３，１２－ジオキソオレアン－１，９－ジエン－２８－オイック酸（ＣＤＤＯ）；３－アセチルオレアノール酸；３－トリフルオロアセチルオレアノール酸；２８－メチル－３－アセチルオレアナン；２８－メチル－３－トリフルオロアセチルオレアナン；２８－メチルオキシオレアノール酸；ＳＺＣ０１４；ＳＣＺ０１５；ＳＺＣ０１７；オレアノール酸のＰＥＧ化誘導体；３－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［ａ－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［α－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル－オレアノール酸；３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ１）；オレアノール酸３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ２）；メチル３，１１ジオキソオレアン－１２－エン－２８－オレート（ＤＩＯＸＯＬ）；ＺＣＶＩ_４－２；ベンジル３－デヒドロ－オキシ－１，２，５－オキサジアゾロ［３’，４’：２，３］オレノレート）；左室補助装置（ＬＶＡＤ）、酸素療法、ならびに肺および／または心臓移植からなる群から選択される、請求項１９５に記載の方法。

【請求項197】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを約１週間毎、約２週間毎、約３週間毎、または約４週間毎に前記患者に投与する、請求項１～１９６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項198】

前記ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを約３週間毎に前記患者に投与する、請求項１９７に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年６月１１日に出願された米国仮出願第６３／２０９，８７１号の利益および優先権を主張する。前述の出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

本出願は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する、特に合併症に関連する１つ以上の肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療、予防またはその進行速度および／もしくは重症度を低減するＡｃｔＲＩＩポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを含む組成物および方法に関する。

【背景技術】

【0003】

肺高血圧症（ＰＨ）は、肺動脈、肺静脈および肺毛細血管を含む肺血管系における高血圧を特徴とする疾患である。一般に、ＰＨは、安静時に２０ｍｍ Ｈｇを超える、または運動時に３０ｍｍ Ｈｇを超える平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）として定義される［Ｈｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｃａｒｅ ５４（７）：９５８－６８（２００９）］。ＰＨの主な症状の１つは、呼吸困難または息切れであり、他の症状には、疲労、めまい、失神、末梢浮腫（足、脚または足首の腫脹）、青みがかった唇および皮膚、胸痛、狭心症、運動中の意識朦朧、非湿性咳、頻脈および動悸が含まれる。ＰＨは、肺高血圧症を有する人々の最も一般的な死因の１つである、心不全を引き起こす重度の疾患であり得る。術後肺高血圧症は、多くの種類の手術または処置を複雑にし、高い死亡率に関連する課題を与える可能性がある。

【0004】

ＰＨは、病態生理学的機序、臨床症状、および治療アプローチにおける類似性を共有する疾患の種々の症状に基づいて分類され得る［Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ ５４（１）：Ｓ４４－５４（２００９）］。ＰＨの臨床分類は１９７３年に最初に提案され、最近の更新された臨床分類は、２０１８年に世界保健機関（ＷＨＯ）によって承認された。更新されたＰＨ臨床分類によれば、ＰＨには主に以下の５つのグループ：肺動脈楔入圧（ＰＡＷＰ）＜１５ｍｍ Ｈｇを特徴とする肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）；ＰＡＷＰ＞１５ｍｍ Ｈｇを特徴とする、左心疾患によるＰＨ（肺静脈高血圧症またはうっ血性心不全としても知られる）；肺疾患および／または低酸素症によるＰＨ；肺動脈閉塞によるＰＨ；ならびに不明な病因および／または多因子性の病因によるＰＨ、がある［Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ ５４（１）：Ｓ４４－５４（２００９）；Ｈｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｃａｒｅ ５４（７）：９５８－６８（２００９）］。ＰＡＨはさらに、特発性ＰＡＨ（ＩＰＡＨ）、すなわちＰＡＨの家族歴も、特定された危険因子もない散発性疾患；遺伝性ＰＡＨ；薬物および毒素によって誘導されるＰＡＨ；結合組織疾患、ＨＩＶ感染症、門脈圧亢進症、先天性心疾患、住血吸虫症、および慢性溶血性貧血に関連するＰＡＨ；および新生児の持続性ＰＨに分類される［Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，（２０１９）Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ：５３：１８０１９１３］。多種多様なＰＨの診断には一連の検査が必要である。

【0005】

一般に、ＰＨ治療は、ＰＨの原因または分類に依存する。ＰＨが既知の医薬または医学的状態によって引き起こされる場合、それは二次ＰＨとして知られており、その治療は通常、基礎疾患を対象とする。グループ３肺高血圧症の治療は、従来、根底にある肺疾患の治療を最適化し、低酸素状態の人に長期酸素療法を施すことであった。この患者群における肺血管拡張剤の有効性は不明である。さらに、血管拡張剤の運動耐性および生活の質への効果を評価するメタアナリシスからの結果は様々である。血管拡張剤治療から最も利益を得ることができる患者群を確立するためには、さらなる研究が必要であるが、現在のアドバイスは、血圧ではなく肺を治療することである。例えば、ＭｃＧｅｔｔｒｉｃｋ Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｇｌｏｂ Ｃａｒｄｉｏｌ Ｓｃｉ Ｐｒａｃｔ．２０２０ Ａｐｒ ３０；２０２０（１）を参照されたい。

【0006】

肺高血圧症を治療するための有効な治療法への、高い満たされていないニーズが存在する。したがって、本開示の目的は、ＰＨの治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減、特に、１つ以上のＰＨ関連合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減のための方法を提供することである。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Ｈｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｃａｒｅ ５４（７）：９５８－６８（２００９）

【非特許文献2】Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ ５４（１）：Ｓ４４－５４（２００９）

【非特許文献3】Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，（２０１９）Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ：５３：１８０１９１３

【非特許文献4】ＭｃＧｅｔｔｒｉｃｋ Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｇｌｏｂ Ｃａｒｄｉｏｌ Ｓｃｉ Ｐｒａｃｔ．２０２０ Ａｐｒ ３０；２０２０（１）

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法を提供する。

【0009】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する１つ以上の肺高血圧症関連合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する１つ以上の肺高血圧症の合併症は、持続性咳、湿性咳、喘鳴、運動不耐性、呼吸器感染症、気管支拡張症、慢性感染症、鼻ポリープ、喀血、気胸、呼吸不全、呼吸困難、胸痛、喀血、気胸、肺血管リモデリング、肺線維症、肺血管内皮機能不全、慢性肺傷害による低酸素症、低酸素性肺血管収縮、炎症、平滑筋肥大、および右室肥大からなる群から選択される。

【0010】

特定の態様では、本開示は、閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0011】

特定の態様では、本開示は、閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0012】

いくつかの実施形態では、閉塞性肺疾患は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症、喘息、気腫、リンパ脈管筋腫症、および慢性気管支炎からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、閉塞性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生存率の低下からなる群から選択される。

【0013】

特定の態様では、本開示は、拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0014】

特定の態様では、本開示は、拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0015】

いくつかの実施形態では、拘束性肺疾患は、肺線維症、間質性肺疾患、サルコイドーシス、特発性肺線維症、塵肺症、肥満症、脊柱側弯症、重症筋無力症、および胸水からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、拘束性肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、運動時の息切れ、安静時の息切れ、最小限の活動での息切れ、咳、乾性咳、湿性咳、慢性咳、疲労、体重減少、不安、うつ病および線維症からなる群から選択される。

【0016】

特定の態様では、本開示は、閉塞性および拘束性の混合性肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0017】

いくつかの実施形態では、閉塞性および拘束性の混合性肺疾患は、肺実質障害である。いくつかの実施形態では、肺実質障害は、サルコイドーシス、ＣＯＰＤおよびＩＬＤ、ＣＯＰＤおよび特発性肺線維症、塵肺症、ＩＬＤ、ランゲルハンス細胞組織球症、ＩＰＦ、肺胞蛋白症、リンパ脈管筋腫症、および閉塞性細気管支炎症候群からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、塵肺症は、珪肺症、石炭労働者の肺およびベリリウム症からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＩＬＤは、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、結合組織疾患、間質性肺炎、狭窄性細気管支炎、または特発性器質化肺炎に関連する。

【0018】

いくつかの実施形態では、閉塞性および拘束性の混合性肺疾患は、肺実質障害および非肺疾患の組み合わせである。いくつかの実施形態では、肺実質障害と非肺疾患との組み合わせは、ＣＯＰＤと他の非実質疾患、ＣＨＦと他の非肺疾患、喘息と他の障害、ＩＬＤと肥満症、ＩＬＤとＣＨＦ、および肺形成不全と脊柱側弯症からなる群から選択される。

【0019】

いくつかの実施形態では、ＣＯＰＤと他の非実質疾患は、ＣＯＰＤとうっ血性心不全（ＣＨＦ）、ＣＯＰＤと肥満症、ＣＯＰＤと胸部手術、ＣＯＰＤと横隔膜麻痺、ＣＯＰＤと脊柱側弯症、およびＣＯＰＤと胸膜癒着からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＣＨＦと他の非肺疾患は、ＣＨＦと脊柱側弯症、ＣＨＦと肺切除、およびＣＨＦと肥満症からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、喘息と他の障害は、喘息と肥満症、喘息と肺切除、喘息と放射線線維症、喘息とトラップ肺（ｔｒａｐｐｅｄ ｌｕｎｇ）、および喘息とＣＨＦからなる群から選択される。

【0020】

特定の態様では、本開示は、間質性肺疾患（ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法を提供する。

【0021】

特定の態様では、本開示は、間質性肺疾患（ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0022】

いくつかの実施形態では、ＩＬＤは、結合組織疾患、サルコイドーシス、進行性実質線維症による血管破壊、血管炎症、血管周囲線維症、血栓性血管障害、および内皮機能障害からなる群から選択される状態に関連する。いくつかの実施形態において、結合組織疾患は、全身性硬化症、関節リウマチ、多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｏｓｉｔｉｓ）、皮膚筋炎およびシェーグレン症候群からなる群から選択される。

【0023】

特定の態様では、本開示は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0024】

特定の態様では、本開示は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0025】

いくつかの実施形態では、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、喘鳴、湿性咳、頻繁な咳、胸部圧迫感、身体活動によらない息切れ、身体活動による息切れ、呼吸器感染症、体重減少、下肢の筋力低下、下肢の腫脹、および心疾患からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、患者は、慢性閉塞性肺疾患のためのグローバルイニシアチブ（Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｌｕｎｇ Ｄｉｓｅａｓｅ）によって認定される、Ｇｏｌｄグレード１、Ｇｏｌｄグレード２、Ｇｏｌｄグレード３またはＧｏｌｄグレード４のＣＯＰＤを有する。いくつかの実施形態では、患者は、グループＡのＣＯＰＤ、グループＢのＣＯＰＤ、グループＣのＣＯＰＤ、またはグループＤのＣＯＰＤを有する。いくつかの実施形態では、患者は、ステージ１、ステージ２、ステージ３、およびステージ４からなる群から選択されるＣＯＰＤを有する。いくつかの実施形態では、患者はアルファ－１－アンチトリプシン欠損症を有する。

【0026】

特定の態様では、本開示は、気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0027】

特定の態様では、本開示は、気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0028】

特定の態様では、本開示は、線維性特発性間質性肺炎（ＩＩＰ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0029】

特定の態様では、本開示は、線維性特発性間質性肺炎（ＩＩＰ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、患者は、高い線維性スコアおよび低い一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）からなる群から選択される１つ以上の診断パラメータを有する。

【0030】

特定の態様では、本開示は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0031】

特定の態様では、本開示は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生存率の低下からなる群から選択される。

【0032】

特定の態様では、本開示は、非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0033】

特定の態様では、本開示は、非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤは、喫煙関連ＩＬＤ、過敏性肺臓炎関連ＩＬＤ、結合組織関連ＩＬＤ、職業関連ＩＬＤ、および医薬品誘発ＩＬＤからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤに関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、酸素補給の必要性の増加、可動性の低下、および生存率の低下からなる群から選択される。

【0034】

特定の態様では、本開示は、非特異性間質性肺炎（ＮＳＩＰ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0035】

特定の態様では、本開示は、非特異性間質性肺炎（ＮＳＩＰ）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供する。

【0036】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に３５ｍｍＨｇを超える右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを２５ｍｍＨｇ未満に低下させる。

【0037】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２５ｍｍＨｇを超える肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に少なくとも３５ｍｍＨｇ、４０ｍｍＨｇ、４５ｍｍＨｇ、５０ｍｍＨｇ、５５ｍｍＨｇ、または６０ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも５ｍｍＨｇ（例えば、少なくとも５ｍｍＨｇ、１０ｍｍＨｇ、１５ｍｍＨｇ、２０ｍｍＨｇ、または２５ｍｍＨｇ）低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを２５ｍｍＨｇ未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを２０ｍｍＨｇ未満に低下させる。

【0038】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に３Ｗｏｏｄ単位以上の肺血管抵抗（ＰＶＲ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる。いくつかの実施形態において、方法は、ＰＶＲを３Ｗｏｏｄ単位未満に低下させる。

【0039】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に、少なくとも１７ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも２０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも２５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも３０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも３５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも４０ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、少なくとも４５ｍｍＨｇのｍＰＡＰ、および少なくとも５０ｍｍＨｇのｍＰＡＰからなる群から選択される平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、２１～２４ｍｍＨｇの治療前のｍＰＡＰ、および少なくとも３Ｗｏｏｄ単位の治療前のＰＶＲとを有する。

【0040】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰを有し、心係数（ＣＩ）は２．０Ｌ／分／ｍ^２未満である。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰを有し、ＣＩは２．５Ｌ／分／ｍ^２未満である。

【0041】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも１０％、１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、または少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも３ｍｍＨｇ、５、７、１０、１２、１５、２０または２５ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを、１７ｍｍＨｇ未満、２０ｍｍＨｇ未満、２５ｍｍＨｇ未満および３０ｍｍＨｇ未満からなる群から選択される値に低下させる。

【0042】

いくつかの実施形態では、患者の治療前の平均右心房圧（ｍＲＡＰ）は、少なくとも５ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、少なくとも６ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、少なくとも８ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、少なくとも１０ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、少なくとも１２ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、少なくとも１４ｍｍＨｇのｍＲＡＰ、および少なくとも１６ｍｍＨｇのｍＲＡＰからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを改善する。いくつかの実施形態では、ｍＲＡＰの改善は、ｍＲＡＰの低下である。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５ｍｍＨｇ低下させる。

【0043】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に４Ｌ／分未満の心拍出量を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を、患者において少なくとも０．５Ｌ／分、１、１．５、２、２．５、３、３．５、または４Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも４Ｌ／分に増加させる。

【0044】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２．５Ｌ／分／ｍ^２、２．０、１．５、または１Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数（ＣＩ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを患者の少なくとも０．２Ｌ／分／ｍ^２、０．４、０．６、０．８、１、１．２、１．４、１．６、１．８、または２Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも２．５Ｌ／分／ｍ^２に増加させる。

【0045】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の運動耐容能を増加させる。いくつかの実施形態では、患者は、治療前にボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）で少なくとも０．５の指数ポイント、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、または１０の指数ポイントを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、または１０指数ポイント減少させる。

【0046】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に５５０メートル、５００、４５０、４４０、４００、３８０、３５０、３００、２５０、２００、または１５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１０メートル、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２５０、３００、または４００メートル増加させる。

【0047】

いくつかの実施形態では、方法は、世界保健機関（ＷＨＯ）によって認定される、肺高血圧症機能分類の進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類Ｉから分類ＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類ＩＩから分類ＩＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類ＩＩＩから分類ＩＶ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、肺高血圧症機能分類の退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＶから分類ＩＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＩＩから分類ＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＩから分類Ｉ肺高血圧症への退行を促進または増進する。

【0048】

いくつかの実施形態において、患者は、治療前、健康な患者よりも高いＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態において、患者は、正常なＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に少なくとも１００ｐｇ／ｍＬ、１５０、２００、３００、４００、５００、１０００、３０００、５０００、１０，０００、１５，０００、または２０，０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または８０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを正常レベルまで低下させる。いくつかの実施形態では、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの正常レベルは１００ｐｇ／ｍｌ未満である。

【0049】

いくつかの実施形態において、患者は、治療前、健康な患者よりも高い脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）レベルを有する。いくつかの実施形態において、患者は、治療前に正常なＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に少なくとも１００ｐｇ／ｍＬ、１５０、２００、３００、４００、５００、１０００、３０００、５０００、１０，０００、１５，０００、または２０，０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％または少なくとも８０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＢＮＰレベルを正常レベル（すなわち、１００ｐｇ／ｍｌ未満）まで低下させる。

【0050】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に７ｍｍＨｇを超える拡張期圧較差（ＤＰＧ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に少なくとも７ｍｍＨｇ（例えば、少なくとも７、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ｍｍＨｇ）のＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも１０％（例えば、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または少なくとも５０％）低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを７ｍｍＨｇ未満に低下させる。

【0051】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質を少なくとも１％（例えば、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％）向上させる。いくつかの実施形態では、患者の生活の質は、ケンブリッジ肺高血圧転帰レビュー（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｒｅｖｉｅｗ：ＣＡＭＰＨＯＲ）を使用して測定される。

【0052】

いくつかの実施形態では、患者は肺線維症を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる。

【0053】

いくつかの実施形態では、患者は、治療前に６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、または２０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％または６５％まで増加させる。

【0054】

いくつかの実施形態では、患者の一酸化炭素移動係数（Ｋ_ＣＯ）は、予測値の６０％未満、予測値の５５％未満、予測値の５０％未満、予測値の４５％未満、予測値の４０％未満、予測値の３５％未満、予測値の３０％未満、予測値の２５％未満、または予測値の２０％未満である。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＫ_ＣＯを増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＫ_ＣＯを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、Ｋ_ＣＯを少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％または６５％まで増加させる。

【0055】

いくつかの実施形態では、患者の治療前の複合生理学的指標（ＣＰＩ）は、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５および８０より大きい。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５未満に低下させる。

【0056】

いくつかの実施形態では、患者の治療前の動脈酸素飽和度は９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、または３０％未満である。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、動脈酸素飽和度を少なくとも８５％、９０％、または９５％に増加させる。いくつかの実施形態では、動脈酸素飽和度は、安静時に測定される。

【0057】

いくつかの実施形態において、患者のＴＡＰＳＥは、２０ｍｍ、１８、１６、１４または１２ｍｍ未満である。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２０ｍｍ、２２、２４、２６、２８または３０ｍｍまで増加させる。

【0058】

いくつかの実施形態では、患者の治療前の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）は、７０％超、６０％～６９％、５０％～５９％、３５％～４９％、および３５％未満からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％まで増加させる。

【0059】

いくつかの実施形態では、患者の治療前の努力肺活量（ＦＶＣ）は、８０％超、７０％超、６０％～６９％、５０％～５９％、３５％～４９％、および３５％未満からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％まで増加させる。

【0060】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室機能を改善する。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、右室面積変化率の増加によるものである。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、右室肥大の減少によるものである。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、駆出率の増加によるものである。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、右室面積変化率および駆出率の増加によるものである。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる。

【0061】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％減少させる。

【0062】

いくつかの実施形態では、方法は、死亡のリスクを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺動脈高血圧症に関連する死亡のリスクを少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％低下させる。

【0063】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％増加させる。

【0064】

いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の併存症を治療する。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つまたは複数の併存症は、全身性高血圧症、腎機能低下、真性糖尿病、高脂血症、肥満症、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、閉塞性睡眠時無呼吸、肺塞栓症、心不全、心房細動および貧血からなる群から選択される。

【0065】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0066】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、免疫グロブリンのＦｃドメインをさらに含む融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、免疫グロブリンのＦｃドメインは、ＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃドメインである。いくつかの実施形態では、Ｆｃ融合タンパク質は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインと免疫グロブリンのＦｃドメインとの間に配置されたリンカードメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、リンカードメインは、ＴＧＧＧ（配列番号２０）、ＴＧＧＧＧ（配列番号１８）、ＳＧＧＧＧ（配列番号１９）、ＧＧＧＧＳ（配列番号２２）、ＧＧＧ（配列番号１６）、ＧＧＧＧ（配列番号１７）、およびＳＧＧＧ（配列番号２１）からなる群から選択される。

【0067】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。

【0068】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、ポリペプチドはアクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基２１～１３５に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、ポリペプチドはアクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する。

【0069】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは可能性である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、皮下注射を使用して投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、約３週間毎に投与される。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、約４週間毎に投与される。

【0070】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ホモ二量体タンパク質複合体の一部である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドはグリコシル化されている。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、チャイニーズハムスター卵巣細胞における発現によって得ることができるグリコシル化パターンを有する。

【0071】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、アクチビンＡ、アクチビンＢ、およびＧＤＦ１１からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドに結合する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、ＢＭＰ１０、ＧＤＦ８、およびＢＭＰ６からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドにさらに結合する。

【0072】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを、０．１ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．７ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。

【0073】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、追加の活性剤および／または支持療法を患者にさらに投与することを含む。いくつかの実施形態では、追加の活性剤および／または支持療法は、β遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）、利尿剤、脂質低下薬、エンドセリン遮断薬、ＰＤＥ５阻害剤、およびプロスタサイクリンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、追加の活性剤および／または支持療法は、プロスタサイクリンおよびその誘導体（例えば、エポプロステノール、トレプロスチニルおよびイロプロスト）；プロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、セレキシパグ）；エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、テリン、アンブリセンタン、マシテンタンおよびボセンタン）；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、アムロジピン、ジルチアゼムおよびニフェジピン；抗凝固剤（例えば、ワルファリン）；ジゴキシン、利尿薬；酸素療法；心房中隔切開術；肺血栓内膜摘出術；ホスホジエステラーゼ５型阻害剤（例えば、シルデナフィルおよびタダラフィル）；可溶性グアニル酸シクラーゼのアクチベーター（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）；ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＣＩＩＡ；ＳＣＨ７９７９７；ＧＳ－４９９７；ＭＳＣ２０３２９６４Ａ；３Ｈ－ナフト［１，２，３－ｄｅ］キニリン－２，７－ジオン、ＮＱＤＩ－１；２－チオキソ－チアゾリジン、５－ブロモ－３－（４－オキソ－２－チオキソ－チアゾリジン－５－イリデン）－１，３－ジヒドロ－インドール－２－オン）；ＮＦ－κＢ拮抗薬（例えば、ｄｈ４０４、ＣＤＤＯ－エポキシド；２．２－ジフルオロプロピオンアミド；Ｃ２８イミダゾール（ＣＤＤＯ－Ｉｍ）；２－シアノ－３，１２－ジオキソオレアン－１，９－ジエン－２８－オイック酸（ＣＤＤＯ）；３－アセチルオレアノール酸；３－トリフルオロアセチルオレアノール酸；２８－メチル－３－アセチルオレアナン；２８－メチル－３－トリフルオロアセチルオレアナン；２８－メチルオキシオレアノール酸；ＳＺＣ０１４；ＳＣＺ０１５；ＳＺＣ０１７；オレアノール酸のＰＥＧ化誘導体；３－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［ａ－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［α－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル－オレアノール酸；３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ１）；オレアノール酸３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ２）；メチル３，１１ジオキソオレアン－１２－エン－２８－オレート（ＤＩＯＸＯＬ）；ＺＣＶＩ_４－２；ベンジル３－デヒドロ－オキシ－１，２，５－オキサジアゾロ［３’，４’：２，３］オレノレート）；左室補助装置（ＬＶＡＤ）、酸素療法、ならびに肺および／または心臓移植からなる群から選択される。

【0074】

いくつかの実施形態では、患者は、ホスホジエステラーゼ５型阻害剤、可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激薬、プロスタサイクリン受容体アゴニストおよびエンドセリン受容体拮抗薬からなる群から選択される１つまたは複数の薬剤で治療されている。いくつかの実施形態では、１つ以上の薬剤は、ボセンタン、シルデナフィル、ベラプロスト、マシテンタン、セレキシパグ、エポプロステノール、トレプロスチニル、イロプロスト、アンブリセンタン、およびタダラフィルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、方法は、ホスホジエステラーゼ５型阻害剤、可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激薬、プロスタサイクリン受容体アゴニストおよびエンドセリン受容体拮抗薬からなる群から選択される１つまたは複数の薬剤の投与をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の薬剤は、ボセンタン、シルデナフィル、ベラプロスト、マシテンタン、セレキシパグ、エポプロステノール、トレプロスチニル、イロプロスト、アンブリセンタン、およびタダラフィルからなる群から選択される。

【0075】

いくつかの実施形態では、患者は、ポリペプチドの投与前に１つ以上の血管拡張剤で治療されている。いくつかの実施形態では、方法は、１つ以上の血管拡張剤の投与をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の血管拡張剤は、プロスタサイクリン、エポプロステノールおよびシルデナフィルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、血管拡張剤はプロスタサイクリンである。

【0076】

いくつかの実施形態では、患者は、肺疾患に関連する肺高血圧症のための１つ以上の治療を受けている。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の療法は、トレプロスチニル、ピルフェニドン、ニンテダニブ、プロスタサイクリンおよびその誘導体（例えば、エポプロステノール、トレプロスチニルおよびイロプロスト）；プロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、セレキシパグ）；エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、テリン、アンブリセンタン、マシテンタンおよびボセンタン）；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、アムロジピン、ジルチアゼムおよびニフェジピン；抗凝固剤（例えば、ワルファリン）；利尿薬；酸素療法；心房中隔切開術；肺血栓内膜摘出術；ホスホジエステラーゼ５型阻害剤（例えば、シルデナフィルおよびタダラフィル）；可溶性グアニル酸シクラーゼの活性化剤（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）；ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＣＩＩＡ；ＳＣＨ７９７９７；ＧＳ－４９９７；ＭＳＣ２０３２９６４Ａ；３Ｈ－ナフト［１，２，３－ｄｅ］キニリン－２，７－ジオン、ＮＱＤＩ－１；２－チオキソ－チアゾリジン、５－ブロモ－３－（４－オキソ－２－チオキソ－チアゾリジン－５－イリデン）－１，３－ジヒドロ－インドール－２－オン）；ＮＦ－κＢ拮抗薬（例えば、ｄｈ４０４、ＣＤＤＯ－エポキシド；２．２－ジフルオロプロピオンアミド；Ｃ２８イミダゾール（ＣＤＤＯ－Ｉｍ）；２－シアノ－３，１２－ジオキソオレアン－１，９－ジエン－２８－オイック酸（ＣＤＤＯ）；３－アセチルオレアノール酸；３－トリフルオロアセチルオレアノール酸；２８－メチル－３－アセチルオレアナン；２８－メチル－３－トリフルオロアセチルオレアナン；２８－メチルオキシオレアノール酸；ＳＺＣ０１４；ＳＣＺ０１５；ＳＺＣ０１７；オレアノール酸のＰＥＧ化誘導体；３－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［ａ－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［α－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル－オレアノール酸；３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ１）；オレアノール酸３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ２）；メチル３，１１ジオキソオレアン－１２－エン－２８－オレート（ＤＩＯＸＯＬ）；ＺＣＶＩ_４－２；ベンジル３－デヒドロ－オキシ－１，２，５－オキサジアゾロ［３’，４’：２，３］オレノレート）；左室補助装置（ＬＶＡＤ）、酸素療法、ならびに肺および／または心臓移植からなる群から選択される。

【0077】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを約毎週、約２週間毎、約３週間毎、または約４週間毎に患者に投与する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを３週間毎に患者に投与する。

【0078】

この特許のファイルは、カラーで作成された少なくとも１つの図面／写真を含む。（１または複数の）カラー図面／（１または複数の）写真を有する本特許の写しは、請求および必要な料金の支払いに応じて特許庁によって提供される。

【図面の簡単な説明】

【0079】

【図1】複数のＡｃｔＲＩＩＢおよびＡｃｔＲＩＩＡ結晶構造の複合分析に基づいて、囲み線で示されるリガンドに直接接触すると本明細書で推論される残基を含む、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ（配列番号３１）およびヒトＡｃｔＲＩＩＡ（配列番号２）の細胞外ドメインのアライメントを示す。

【図2】様々な脊椎動物ＡｃｔＲＩＩＡタンパク質およびヒトＡｃｔＲＩＩＡ（配列番号６～１０および３６～３８）の多重配列アライメントを示す。

【図3】Ｃｌｕｓｔａｌ ２．１を使用した、ヒトＩｇＧアイソタイプ由来のＦｃドメインの多重配列アライメントを示す。ヒンジ領域は点線の下線で示されている。二重下線は、非対称鎖ペアリングを促進するためにＩｇＧ１ Ｆｃ（配列番号３２）において操作された位置、ならびに他のアイソタイプＩｇＧ２（配列番号３３）、ＩｇＧ３（配列番号３４）およびＩｇＧ４（配列番号３５）に関して対応する位置の例を示す。

【図4A】ＣＨＯ細胞において発現されるＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃの精製を示す。タンパク質は、サイジングカラムによって可視化されるように、単一の明確に定義されたピークとして精製される。

【図4B】ＣＨＯ細胞において発現されるＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃの精製を示す。タンパク質は、クーマシー染色ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって可視化されるように、単一の明確に定義されたピークとして精製される（左レーン：分子量標準；右レーン：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃ）。

【図5A】Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）アッセイによって測定された、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃのアクチビンへの結合を示す。

【図5B】Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）アッセイによって測定された、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃのＧＤＦ－１１への結合を示す。

【図6A】Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図6B】Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図6C】Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図6D】Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図7A】Ｂｌｅｏ／Ｓｕ／Ｈｘ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図7B】Ｂｌｅｏ／Ｓｕ／Ｈｘ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図7C】Ｂｌｅｏ／Ｓｕ／Ｈｘ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。Ｒｘ：ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ ｓ．ｃ．５ｍｐｋ、ＢＩＷ；Ｂｌｅｏ：ブレオマイシン；ＭＣＴ：モノクロタリン

【図8A】ＬＰＳ誘発ＣＯＰＤラットモデルにおけるグループ３肺高血圧症に対するＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。

【図8B】ＬＰＳ誘発ＣＯＰＤラットモデルにおけるグループ３肺高血圧症に対するＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。

【図8C】ＬＰＳ誘発ＣＯＰＤラットモデルにおけるグループ３肺高血圧症に対するＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を示す。

【発明を実施するための形態】

【0080】

１．概要
本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療する組成物および方法に関し、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む。特定の実施形態では、本開示は、治療有効量の本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを個体に投与することによって、それを必要とする個体における肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）を治療または予防する方法を提供する。

【0081】

ほとんどの肺疾患は、閉塞性または拘束性のいずれかに分類することができる。閉塞性および拘束性の両方を特徴とする肺疾患はまれに発生し、一般に肺実質障害および非肺障害の組み合わせによって引き起こされる。閉塞性肺疾患（例えば、ＣＯＰＤ、慢性気管支炎、喘息、気管支拡張症、細気管支炎、および嚢胞性線維症）は、気道の閉塞を特徴とし、健康な個体よりも遅く浅い呼息によって定義される。拘束性肺疾患（例えば、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、塵肺症、肺炎、好酸球性肺炎、結核、サルコイドーシス、肺線維症および特発性肺線維症、胸水、および胸膜炎）は、総肺容量の減少を特徴とし、健康な個体で予想されるものよりもはるかに少ない吸息で肺が満たされることで定義される。肺疾患の顕著な合併症の１つは肺高血圧症である。肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）［世界保健機関グループ３ ＰＨ］は、肺組織の炎症および不可逆的な瘢痕化を特徴とする進行性疾患である。慢性肺疾患は、肺高血圧症の第２の主因である。肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）を有する患者の死亡率は、肺高血圧症の５つの診断群のいずれにおいても最も高いことが報告されている。現在、肺疾患に関連する肺高血圧症のために米国食品医薬品局が承認した唯一の治療薬は、肺動脈高血圧症（ＰＡＨ；ＷＨＯグループ１肺高血圧症）の治療にも承認されているトレプロスチニルである。肺疾患に関連する肺高血圧症の臨床診療における他のすべての治療は、根底にある肺疾患の管理、ならびに肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）［世界保健機関（ＷＨＯ）グループ１ ＰＨ］について承認された特定の治療の適用外使用に基づく。

【0082】

肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）は、右心カテーテル処置を用いて確定診断することができるが、心エコー検査は、リスクがあると考えられる患者のための良好なスクリーニングおよびモニタリングツールとして存続する。心エコー検査は、肺動脈収縮期圧（ｅＰＡＳＰ）の上昇ならび右室構造の変化、または機能不全および左心疾患の証拠を検出するために使用される。他の評価および／またはツール（例えば、６分間歩行試験（６ＭＷＴ）、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャン、および肺機能検査）。肺疾患に関連する肺高血圧症の唯一の確定検査であるにもかかわらず、右心カテーテル処置は、この疾患を有すると疑われるすべての患者に必要とされるわけではない。しかしながら、中等度または重度の肺高血圧症が疑われる場合、ならびに肺高血圧症の別の病因が疑われる場合、右心カテーテル処置が推奨される。

【0083】

特定の態様では、本開示は、肺疾患（例えば、閉塞性肺疾患、拘束性肺疾患、または閉塞性および拘束性の混合性肺疾患）に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症は、持続性咳、湿性咳、喘鳴、運動不耐性、呼吸器感染症、気管支拡張症、慢性感染症、鼻ポリープ、喀血、気胸、呼吸不全、呼吸困難、胸痛、喀血、気胸、肺血管リモデリング、肺線維症、肺血管内皮機能不全、慢性肺傷害による低酸素症、低酸素性肺血管収縮、炎症、平滑筋肥大、および右室肥大からなる群から選択される。

【0084】

本明細書で使用される用語は、一般に、本開示の文脈内および各用語が使用される特定の文脈内で、当技術分野における通常の意味を有する。特定の用語は、本開示の組成物および方法ならびにそれらを作製および使用する方法を説明する際に実施者に追加のガイダンスを提供するために、以下または本明細書の他の箇所で論じられる。用語の任意の使用の範囲または意味は、それが使用される特定の文脈から明らかになるであろう。

【0085】

「配列類似性」という用語は、そのすべての文法的形態において、共通の進化的起源を共有してもしなくてもよい核酸またはアミノ酸配列間の同一性または対応の程度を指す。

【0086】

基準ポリペプチド（またはヌクレオチド）配列に関する「パーセント（％）配列同一性」は、必要に応じて、配列をアライメントし、ギャップを導入して最大パーセント配列同一性を達成した後の、基準ポリペプチド（ヌクレオチド）配列中のアミノ酸残基（または核酸）と同一である候補配列中のアミノ酸残基（または核酸）のパーセンテージとして定義され、いかなる保存的置換も配列同一性の一部として考慮しない。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するためのアライメントは、例えば、公的に入手可能なコンピュータソフトウェア、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、当技術分野の技能の範囲内である様々な方法で達成することができる。当業者は、配列をアライメントするための適切なパラメータ（比較される配列の全長にわたる最大アライメントを達成するために必要なあらゆるアルゴリズムを含む）を決定することができる。しかしながら、本明細書の目的のために、％アミノ酸（核酸）配列同一性値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ－２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ－２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって作られ、ソースコードは、米国著作権局、ワシントンＤ．Ｃ．，２０５５９にユーザ文書と共に提出され、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７で登録されている。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、カリフォルニア州サウスサンフランシスコのＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．から公的に入手可能であるか、またはソースコードからコンパイルされてもよい。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、Ｄｉｇｉｔａｌ ＵＮＩＸ Ｖ４．０Ｄを含む、ＵＮＩＸオペレーティングシステムで使用するためにコンパイルする必要がある。すべての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ－２プログラムによって設定され、変更しない。

【0087】

「苦悩させる（ａｇｏｎｉｚｅ）」は、そのすべての文法的形態において、タンパク質および／または遺伝子を（例えば、そのタンパク質の遺伝子発現を活性化もしくは増幅することによって、または不活性タンパク質を活性状態に入るように誘導することによって）活性化する、またはタンパク質および／または遺伝子の活性を増加させるプロセスを指す。

【0088】

「拮抗する」は、そのすべての文法的形態において、タンパク質および／または遺伝子を（例えば、そのタンパク質の遺伝子発現を阻害もしくは減らすことによって、または活性タンパク質を不活性状態に入るように誘導することによって）阻害する、またはタンパク質および／または遺伝子の活性を減少させるプロセスを指す。

【0089】

「約（ａｂｏｕｔ）」および「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」という用語は、本明細書および特許請求の範囲を通して数値に関連して使用される場合、当業者によく知られている許容可能な精度の間隔を示す。一般に、このような精度の間隔は±１０％である。あるいは、特に生物学系において、「約（ａｂｏｕｔ）」および「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」という用語は、所与の値の１桁以内、好ましくは５倍以下、より好ましくは２倍以下の値を意味し得る。

【0090】

本明細書に開示される数値範囲は、範囲を定義する数を含む。本出願で使用される「間」という用語は、範囲を定義する数を含む。さらに、本明細書に開示されるすべての範囲は、その中に包含されるありとあらゆる部分範囲を包含すると理解されるべきである。例えば、「１から１０」または「１から１０の間」と記載された範囲は、１以上、例えば１から６．１の最小値を含み、１０以下、例えば５．５から１０の最大値で終わる、ありとあらゆる部分範囲を含むと見なされるべきである。

【0091】

「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」という用語は、その用語が使用される文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、複数の指示対象を含む。「１つの（ａ）」（または「１つの（ａｎ）」）という用語、ならびに「１つ以上」および「少なくとも１つ」という用語は、本明細書では互換的に使用することができる。さらに、本明細書で使用される場合、「および／または」は、他のものの有無にかかわらず、２つ以上の指定された特徴または構成要素のそれぞれの具体的な開示として解釈されるべきである。したがって、本明細書で「Ａおよび／またはＢ」などの句で使用される「および／または」という用語は、「ＡおよびＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、および「Ｂ」（単独）を含むことを意図している。同様に、「Ａ、Ｂ、および／またはＣ」などの語句で使用される「および／または」という用語は、以下の態様：Ａ、ＢおよびＣ；Ａ、ＢまたはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；ＡおよびＣ；ＡおよびＢ；ＢおよびＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）のそれぞれを包含することが意図されている。

【0092】

本明細書を通して、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または変形、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、記載された整数または整数群を含むが、任意の他の整数または整数群を除外しないことを意味すると理解される。

【0093】

２．ＡｃｔＲＩＩポリペプチド
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤ、もしくは（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症、または肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）の１つ以上の合併症を、例えば治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度を低減するＡｃｔＲＩＩポリペプチドおよびその使用に関する。本明細書で使用される場合、「ＡｃｔＲＩＩ」という用語は、ＩＩ型アクチビン受容体のファミリーを指す。このファミリーには、アクチビン受容体ＩＩＡ型（ＡｃｔＲＩＩＡ）およびアクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩＢ）が含まれる。

【0094】

特定の実施形態では、本開示は、配列番号１、２、３、２３、２７、３０、および４１のいずれかに示されるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有するＡｃｔＲＩＩポリペプチドに関する。本明細書で使用される場合、「ＡｃｔＲＩＩ」という用語は、アクチビン受容体ＩＩＡ型（ＡｃｔＲＩＩＡ）タンパク質のファミリー、アクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩＢ）タンパク質のファミリー、またはそれらの組み合わせおよび／またはバリアントを指す。ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、任意の種から誘導することができ、そのようなＡｃｔＲＩＩタンパク質から突然変異誘発または他の修飾によって誘導されたバリアントを含む。本明細書におけるＡｃｔＲＩＩへの言及は、現在特定されている形態のいずれか１つへの言及であると理解される。ＡｃｔＲＩＩファミリーのメンバーは、一般に、システインリッチ領域を含むリガンド結合細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、および予測されるセリン／トレオニンキナーゼ活性を有する細胞質ドメインで構成される膜貫通タンパク質である。

【0095】

ＡｃｔＲＩＩポリペプチドという用語は、ＡｃｔＲＩＩファミリーメンバーの任意の自然発生ポリペプチド、ならびに有用な活性を保持するその任意のバリアント（変異体、断片、融合物、およびペプチド模倣形態を含む）を含むポリペプチドを含む。本明細書に記載のすべてのＡｃｔＲＩＩ関連ポリペプチドのアミノ酸のナンバリングは、特に明記しない限り、以下に提供されるヒトＡｃｔＲＩＩ前駆体タンパク質配列（配列番号１）のナンバリングに基づく。

【0096】

標準的なヒトＡｃｔＲＩＩ前駆体タンパク質配列は以下の通りである。

【0097】

シグナルペプチドを一重下線で示し、細胞外ドメインを太字で示し、潜在的な内因性Ｎ結合型グリコシル化部位を二重下線で示す。

【0098】

プロセシングされた（成熟）細胞外ヒトＡｃｔＲＩＩポリペプチド配列は以下の通りである。

【0099】

細胞外ドメインのＣ末端「尾部」を一重下線で示す。「尾部」が欠失した配列（Δ１５配列）は以下の通りである。

【0100】

ヒトＡｃｔＲＩＩ前駆体タンパク質をコードする核酸配列を、Ｇｅｎｂａｎｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ＮＭ＿００１６１６．４のヌクレオチド１５９～１７００に従って以下に示す（配列番号４）。シグナル配列に下線を付す。

【0101】

プロセシングされた可溶性（細胞外）ヒトＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードする核酸配列は以下の通りである。

【0102】

ヒトＡｃｔＲＩＩＡ細胞外ドメインおよびヒトＡｃｔＲＩＩＢ細胞外ドメインのアミノ酸配列のアライメントを図１に示す。このアライメントは、ＡｃｔＲＩＩリガンドと直接接触すると考えられる両方の受容体内のアミノ酸残基を示す。例えば、複合ＡｃｔＲＩＩ構造は、ＡｃｔＲＩＩＡリガンド結合ポケットが部分的に、残基Ｆ３１、Ｎ３３、Ｎ３５、Ｋ３８～Ｔ４１、Ｅ４７、Ｙ５０、Ｋ５３～Ｋ５５、Ｒ５７、Ｈ５８、Ｆ６０、Ｔ６２、Ｋ７４、Ｗ７８～Ｎ８３、Ｙ８５、Ｒ８７、Ｅ９２、およびＫ９４～Ｆ１０１によって定義されることを示した。これらの位置では、保存的変異が許容されることが予想される。

【0103】

ＡｃｔＲＩＩは脊椎動物において良好に保存されており、細胞外ドメインの大きなストレッチは完全に保存されている。例えば、図２は、様々なＡｃｔＲＩＩＡオーソログと比較したヒトＡｃｔＲＩＩＡ細胞外ドメインの多重配列アライメントを示す。ＡｃｔＲＩＩＡに結合するリガンドの多くも高度に保存されている。したがって、これらのアライメントから、正常なＡｃｔＲＩＩ－リガンド結合活性に重要なリガンド結合ドメイン内で鍵になるアミノ酸位置を予測すること、ならびに正常なＡｃｔＲＩＩ－リガンド結合活性を有意に変化させることなく、置換に耐性でありそうなアミノ酸位置を予測することが可能である。したがって、本開示の方法に従って有用な活性ヒトＡｃｔＲＩＩバリアントポリペプチドは、別の脊椎動物ＡｃｔＲＩＩの配列からの１つ以上のアミノ酸を対応する位置に含み得るか、またはヒトもしくは他の脊椎動物の配列のものと類似の残基を含み得る。

【0104】

限定することを意味するものではないが、以下の実施例は、この、活性ＡｃｔＲＩＩバリアントを定義することへのアプローチを説明する。図２に示すように、ヒト細胞外ドメインのＦ１３は、ヒツジ（配列番号７）、ニワトリ（配列番号１０）、ウシ（配列番号３６）、メンフクロウ（配列番号３７）、およびコウモリ種（Ｍｙｏｔｉｓ ｄａｖｉｄｉｉ）（配列番号３８）ＡｃｔＲＩＩＡにおけるＹであり、Ｆ、Ｗ、およびＹを含む芳香族残基がこの位置で許容されることを示している。ヒト細胞外ドメインのＱ２４は、ウシＡｃｔＲＩＩＡにおけるＲであり、Ｄ、Ｒ、Ｋ、Ｈ、およびＥを含む荷電残基がこの位置で許容されることを示している。ヒト細胞外ドメインのＳ９５は、ニワトリおよびメンフクロウＡｃｔＲＩＩＡにおけるＦであり、この部位が、極性残基、例えばＥ、Ｄ、Ｋ、Ｒ、Ｈ、Ｓ、Ｔ、Ｐ、Ｇ、Ｙ、およびおそらくは疎水性残基、例えばＬ、ＩまたはＦを含む、多様な変化に許容性があり得ることを示している。ヒト細胞外ドメインのＥ５２は、ヒツジＡｃｔＲＩＩＡにおけるＤであり、ＤおよびＥを含む酸性残基がこの位置で許容されることを示している。ヒト細胞外ドメインのＰ２９は、比較的低度に保存され、ヒツジＡｃｔＲＩＩＡにおけるＳおよびコウモリ種（Ｍｙｏｔｉｓ ｄａｖｉｄｉｉ）ＡｃｔＲＩＩＡにおけるＬとして出現し、したがって、本質的にあらゆるアミノ酸がこの位置で許容されるはずである。

【0105】

さらに、上記のように、ＡｃｔＲＩＩタンパク質は、構造的／機能的特性の観点から、特にリガンド結合に関して当技術分野で特徴付けられている［Ａｔｔｉｓａｎｏ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｃｅｌｌ ６８（１）：９７－１０８；Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ６（１）：１８－２２；Ａｌｌｅｎｄｏｒｐｈ ｅｔ ａｌ．（２００６）ＰＮＡＳ １０３（２０：７６４３－７６４８；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｔｈｅ ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ ２２（７）：１５５５－１５６６；ならびに米国特許第７，７０９，６０５号、７，６１２，０４１号、および７，８４２，６６３号］。例えば、定義する構造モチーフは３フィンガー毒素フォールド（ｔｈｒｅｅ－ｆｉｎｇｅｒ ｔｏｘｉｎ ｆｏｌｄ）として知られおり、Ｉ型およびＩＩ型受容体によるリガンド結合に重要であり、各モノマー受容体の細胞外ドメイン内の様々な位置に配置された保存システイン残基によって形成される［Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ ６：１８－２２；およびＨｉｎｃｋ（２０１２）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ ５８６：１８６０～１８７０］。本明細書における教示に加えて、これらの参考文献は、１つ以上の所望の活性（例えば、リガンド結合活性）を保持するＡｃｔＲＩＩバリアントの生成方法についての十分なガイダンスを提供する。

【0106】

例えば、定義する構造モチーフは３フィンガー毒素フォールド（ｔｈｒｅｅ－ｆｉｎｇｅｒ ｔｏｘｉｎ ｆｏｌｄ）として知られおり、Ｉ型およびＩＩ型受容体によるリガンド結合に重要であり、各モノマー受容体の細胞外ドメイン内の様々な位置に配置された保存システイン残基によって形成される［Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｌ ６：１８－２２；およびＨｉｎｃｋ（２０１２）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ ５８６：１８６０～１８７０］。したがって、これらの保存されたシステインの最外部によって画定されるヒトＡｃｔＲＩＩのコアリガンド結合ドメインは、配列番号１（ＡｃｔＲＩＩ前駆体）の位置３０～１１０に対応する。したがって、これらのシステイン画定コア配列に隣接する、構造的にあまり整っていないアミノ酸は、リガンド結合を必ずしも変更することなく、Ｎ末端で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、または２９残基、およびＣ末端で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５残基によって切断され得る。例示的なＡｃｔＲＩＩ細胞外ドメイン切断には、配列番号２および３が含まれる。

【0107】

したがって、ＡｃｔＲＩＩの活性部分（例えば、リガンド結合）の一般式は、配列番号１のアミノ酸３０～１１０を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドである。したがって、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、例えば、配列番号１のアミノ酸２１～３０のいずれか１つに対応する残基で始まり（例えば、アミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つで始まり）、配列番号１のアミノ酸１１０～１３５のいずれか１つに対応する位置で終わる（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）ＡｃｔＲＩＩの一部と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなることができる。他の例としては、配列番号１の２１～３０（例えば、アミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つから始まる）、２２～３０（例えば、アミノ酸２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つから始まる）、２３～３０（例えば、アミノ酸２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つから始まる）、２４～３０（例えば、アミノ酸２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つから始まる）から選択される位置で始まり、配列番号１の１１１～１３５（例えば、アミノ酸１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）、１１２～１３５（例えば、アミノ酸１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）、１１３～１３５（例えば、アミノ酸１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）、１２０～１３５（例えば、アミノ酸１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）、１３０～１３５（例えば、アミノ酸１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）、１１１～１３４（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３または１３４のいずれか一つで終わる）、１１１～１３３（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２または１３３のいずれか一つで終わる）、１１１～１３２（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１または１３２のいずれか一つで終わる）または１１１～１３１（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０または１３１のいずれか一つで終わる）から選択される位置で終わる構築物が挙げられる。これらの範囲内のバリアントはまた、特に、配列番号１の対応する部分と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるものが企図される。したがって、いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸３０～１１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるポリペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなり得る。場合により、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸３０～１１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であり、リガンド結合ポケットに１、２、５、１０または１５以下の保存的アミノ酸変化を含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、ホモ二量体タンパク質複合体の一部である。

【0108】

特定の実施形態では、本開示は、その断片、機能的バリアント、および修飾形態を含むＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）、ならびにその使用（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症、例えばＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症を治療、予防または軽減する）に関する。好ましくは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは可溶性である（例えば、ＡｃｔＲＩＩの細胞外ドメイン）。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、１つ以上のＧＤＦ／ＢＭＰリガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］の、（例えば、Ｓｍａｄシグナル伝達）を阻害する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、１つ以上のＧＤＦ／ＢＭＰリガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］に結合する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸２１～３０に対応する残基で始まり（例えば、アミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つで始まり）、配列番号１のアミノ酸１１０～１３５のいずれか１つに対応する位置で終わる（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）ＡｃｔＲＩＩの一部と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸３０～１１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなる。特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸２１～１３５と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなる。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号１、２、３、２３、２７、３０および４１のいずれか一つのアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなる。

【0109】

いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなる。いくつかの代替実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、配列番号２３）は、Ｃ末端リジンを欠いていてもよい。いくつかの実施形態では、Ｃ末端リジンを欠くＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号４１である。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなる。いくつかの実施形態では、患者は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを投与される。いくつかの実施形態では、患者は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、それからなるか、または本質的にそれからなるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを投与される。いくつかの実施形態において、患者には、配列番号２３と配列番号４１との組み合わせが投与される。

【0110】

一定の態様では、本開示は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）に関する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩトラップは、バリアントＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）であり、それは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、「野生型」または未修飾ＡｃｔＲＩＩポリペプチド）の細胞外ドメイン（リガンド結合ドメインとも呼ばれる）に１つ以上の変異（例えば、アミノ酸の付加、欠失、置換、およびそれらの組み合わせ）を含み、その結果バリアントＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、対応する野生型ＡｃｔＲＩＩポリペプチドと比べて１つまたは複数の変更されたリガンド結合活性を有する。いくつかの実施形態では、本開示のバリアントＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、対応する野生型ＡｃｔＲＩＩポリペプチドと類似する活性を少なくとも１つ保持する。例えば、好ましいＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、アクチビン、ＧＤＦ１１および／またはＧＤＦ８に結合し、その機能を阻害する（例えば、拮抗する）。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、ＧＤＦ／ＢＭＰのリガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］の１つまたは複数にさらに結合して阻害する。したがって、本開示は、１つまたは複数のＡｃｔＲＩＩリガンドに対して変化した結合特異性を有するＡｃｔＲＩＩポリペプチドを提供する。

【0111】

例示すると、変更されたリガンド結合ドメインの、１つ以上のＡｃｔＲＩＩ結合リガンド、例えばアクチビン（アクチビンＡまたはアクチビンＢ）、特にアクチビンＡを超えるＧＤＦ１１および／またはＧＤＦ８への選択性を高める１つ以上の変異を選択することができる。場合により、変更されたリガンド結合ドメインでの、アクチビン結合のＫ_ｄのＧＤＦ１１および／またはＧＤＦ８結合のＫ_ｄに対する比は、野生型リガンド結合ドメインでの比よりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍またはさらには１０００倍大きい。場合により、変更されたリガンド結合ドメインの、アクチビンを阻害するためのＩＣ_５０のＧＤＦ１１および／またはＧＤＦ８を阻害するためのＩＣ_５０に対する比は、野生型リガンド結合ドメインと比較して少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍またはさらには１０００倍大きい。場合により、変更されたリガンド結合ドメインは、ＧＤＦ１１および／またはＧＤＦ８を、アクチビンを阻害するためのＩＣ_５０よりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍またはさらには１０００倍低いＩＣ_５０で阻害する。

【0112】

特定の実施形態では、本開示は、ポリペプチドのグリコシル化を変化させるように、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）の特定の変異を企図する。そのような変異は、Ｏ結合型またはＮ結合型グリコシル化部位など、１つ以上のグリコシル化部位を導入または排除するように選択され得る。アスパラギン結合型グリコシル化認識部位は、一般に、適切な細胞グリコシル化酵素によって特異的に認識されるトリペプチド配列、アスパラギン－Ｘ－トレオニンまたはアスパラギン－Ｘ－セリン（「Ｘ」は任意のアミノ酸である）を含む。変化はまた、（Ｏ結合型グリコシル化部位について）ポリペプチドの配列への１つ以上のセリンまたはトレオニン残基の付加、またはそれによる置換によって行われ得る。グリコシル化認識部位の第１または第３のアミノ酸位置の一方または両方における様々なアミノ酸置換または欠失（および／または第２の位置におけるアミノ酸欠失）は、修飾トリペプチド配列において非グリコシル化をもたらす。ポリペプチド上の炭水化物部分の数を増加させる別の手段は、グリコシドのポリペプチドへの化学的または酵素的カップリングによるものである。使用されるカップリングモードに応じて、（１または複数の）糖は、（ａ）アルギニンおよびヒスチジン；（ｂ）遊離カルボキシル基；（ｃ）遊離スルフヒドリル基、例えばシステインのもの；（ｄ）遊離ヒドロキシル基、例えばセリン、トレオニンまたはヒドロキシプロリンのもの；（ｅ）芳香族残基、例えばフェニルアラニン、チロシンまたはトリプトファンのもの；または（ｆ）グルタミンのアミド基に結合していてもよい。ポリペプチド上に存在する１つ以上の炭水化物部分の除去は、化学的かつ／または酵素的に達成され得る。化学的脱グリコシル化は、例えば、化合物トリフルオロメタンスルホン酸または等価化合物へのポリペプチドの曝露を含み得る。この処理は、アミノ酸配列を無傷で残しながら、連結糖（Ｎ－アセチルグルコサミンまたはＮ－アセチルガラクトサミン）を除くほとんどまたはすべての糖の切断をもたらす。ポリペプチド上の炭水化物部分の酵素的切断は、Ｔｈｏｔａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．［Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９８７）１３８：３５０］によって記載されているように、様々なエンドグリコシダーゼおよびエキソグリコシダーゼの使用によって達成することができる。ポリペプチドの配列は、哺乳動物、酵母、昆虫、および植物細胞はすべて、ペプチドのアミノ酸配列によって影響され得る異なるグリコシル化パターンを導入する可能性があるので、使用される発現系の種類に応じて適宜調整されてもよい。一般に、ヒトで使用するための本開示のポリペプチドは、適切なグリコシル化を提供する哺乳動物細胞株、例えばＨＥＫ２９３またはＣＨＯ細胞株で発現され得るが、他の哺乳動物発現細胞株も同様に有用であると予想される。

【0113】

本開示はさらに、変異体、特にＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）のコンビナトリアル変異体のセット、ならびに切断変異体を生成する方法を企図する。コンビナトリアル変異体のプールは、機能的に活性な（例えば、ＧＤＦ／ＢＭＰリガンド結合）ＡｃｔＲＩＩ配列を同定するのに特に有用である。そのようなコンビナトリアルライブラリをスクリーニングする目的は、例えば、薬物動態の変化またはリガンド結合の変化など、変化した特性を有するポリペプチドバリアントを生成することであり得る。様々なスクリーニングアッセイを以下に提供し、そのようなアッセイを使用してバリアントを評価することができる。例えば、ＡｃｔＲＩＩバリアントは、１つ以上のＧＤＦ／ＢＭＰリガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］に結合する能力、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドならびにそのヘテロ多量体へのＧＤＦ／ＢＭＰリガンドの結合を防ぐ能力、および／またはＧＤＦ／ＢＭＰリガンドによって引き起こされるシグナル伝達を妨害する能力についてスクリーニングされ得る。

【0114】

ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）またはそのバリアントの活性も、細胞ベースまたはインビボアッセイで試験することができる。例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の病因に関与する遺伝子の発現へのＡｃｔＲＩＩポリペプチドの効果を評価することができる。これは、必要に応じて、１つまたは複数の組換えリガンドタンパク質［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］の存在下で行われてもよく、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド、および場合によりＧＤＦ／ＢＭＰリガンドを生成するように細胞をトランスフェクトしてもよい。同様に、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドをマウスまたは他の動物に投与してもよく、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、ＣＯＰＤ、ＩＬＤまたはＣＰＦＥに関連する肺高血圧症）の病因に対する効果を、当技術分野で認識されている方法を使用して評価してもよい。同様に、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドまたはそのバリアントの活性は、例えば、本明細書に記載のアッセイおよび当技術分野の常識のアッセイによって、血球前駆細胞においてこれらの細胞の増殖に対する任意の効果について試験することができる。ＳＭＡＤ応答性レポーター遺伝子をそのような細胞株で使用して、下流のシグナル伝達に対する効果をモニターすることができる。

【0115】

基準ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）と比較して選択性が向上した、または一般に効力が増大したコンビナトリアル誘導性バリアントを生成することができる。そのようなバリアントは、組換えＤＮＡ構築物から発現される場合、遺伝子治療プロトコルに使用することができる。同様に、変異誘発によって、対応する未修飾ＡｃｔＲＩＩポリペプチドとは劇的に異なる細胞内半減期を有するバリアントが生じ得る。例えば、変化したタンパク質は、未修飾ポリペプチドの破壊、さもなければ不活性化をもたらすタンパク質分解性の分解または他の細胞プロセスを、より安定またはより不安定にすることができる。そのようなバリアント、およびそれらをコードする遺伝子は、ポリペプチドの半減期を調節することによってポリペプチド複合体レベルを変化させるために利用することができる。例えば、短い半減期は、より多くの一過性生物学的効果を起こすことができ、誘導性発現系の一部である場合、細胞内の組換えポリペプチド複合体レベルのより厳密な制御を可能にし得る。Ｆｃ融合タンパク質では、リンカー（存在すれば）および／またはＦｃ部分に変異を作製して、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの半減期を変化させることができる。

【0116】

コンビナトリアルライブラリは、それぞれが潜在的ＡｃｔＲＩＩポリペプチド配列の少なくとも一部を含むポリペプチドのライブラリをコードする、遺伝子の縮重ライブラリによって作製され得る。例えば、合成オリゴヌクレオチドの混合物を、潜在的なＡｃｔＲＩＩをコードするヌクレオチド配列の縮重セットが個々のポリペプチドとして、あるいはより大きな融合タンパク質（例えば、ファージディスプレイの場合）のセットとして発現できるように、遺伝子配列に酵素的にライゲートすることができる。

【0117】

多くの方法によって、潜在的なホモログのライブラリを縮重オリゴヌクレオチド配列から生成することができる。縮重遺伝子配列の化学合成は、自動ＤＮＡ合成装置で行うことができ、次いで、合成遺伝子を発現のための適切なベクターにライゲートすることができる。縮重オリゴヌクレオチドの合成は、当技術分野で周知である［Ｎａｒａｎｇ，ＳＡ（１９８３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ３９：３；Ｉｔａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（１９８１）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ，Ｐｒｏｃ．３ｒｄ Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ Ｓｙｍｐｏｓ．Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ｅｄ．ＡＧ Ｗａｌｔｏｎ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ ｐｐ２７３－２８９；Ｉｔａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（１９８４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５３：３２３；Ｉｔａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（１９８４）Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８：１０５６；およびＩｋｅ ｅｔ ａｌ．（１９８３）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１１：４７７］。そのような技術は、他のタンパク質の指向性進化において使用されてきた［Ｓｃｏｔｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：３８６－３９０；Ｒｏｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．（１９９２）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８９：２４２９－２４３３；Ｄｅｖｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：４０４－４０６；Ｃｗｉｒｌａ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８７：６３７８－６３８２；ならびに米国特許第５，２２３，４０９号、第５，１９８，３４６号、および第５，０９６，８１５号］。

【0118】

あるいは、変異誘発の他の形態を利用して、コンビナトリアルライブラリを生成することができる。例えば、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発［Ｒｕｆ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３３：１５６５－１５７２；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：３０９５－３０９９；Ｂａｌｉｎｔ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｇｅｎｅ １３７：１０９－１１８；Ｇｒｏｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２１８：５９７－６０１；Ｎａｇａｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２８８８－２８９２；Ｌｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３０：１０８３２－１０８３８；およびＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１－１０８５］を使用するスクリーニングによって、リンカースキャニング変異誘発［Ｇｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １９３：６５３－６６０；およびＢｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１２：２６４４－２６５２；ＭｃＫｎｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．（１９８２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３２：３１６］によって、飽和変異誘発［Ｍｅｙｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３２：６１３］によって、ＰＣＲ変異誘発［Ｌｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｍｅｔｈｏｄ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １：１１－１９］によって、または化学的変異誘発を含むランダム変異誘発［Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ａ Ｓｈｏｒｔ Ｃｏｕｒｓｅ ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，ＣＳＨＬ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；およびＧｒｅｅｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｉｎ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ７：３２－３４］によって、ライブラリから生成および単離することができる。リンカースキャニング変異誘発は、特にコンビナトリアル設定において、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの切断型（生物活性）形態を同定するための魅力的な方法である。

【0119】

点変異および切断によって作製されたコンビナトリアルライブラリの遺伝子産物をスクリーニングするための、さらに言えば、ｃＤＮＡライブラリをある特性を有する遺伝子産物についてスクリーニングするための広範囲の技術が当技術分野で公知である。そのような技術は、一般に、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）のコンビナトリアル変異誘発によって生成された遺伝子ライブラリの迅速なスクリーニングに適合可能である。大きな遺伝子ライブラリをスクリーニングするための最も広く使用されている技術は、典型的には、遺伝子ライブラリを複製可能な発現ベクターにクローニングすること、得られたベクターのライブラリで適切な細胞を形質転換すること、および所望の活性の検出が、その産物が検出された遺伝子をコードするベクターの比較的容易な単離を助長する条件下で、コンビナトリアル遺伝子を発現させることを含む。例示的なアッセイとしては、リガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］結合アッセイ、および／またはリガンド媒介性細胞シグナル伝達アッセイが挙げられる。

【0120】

当業者によって認識されるように、本明細書中に記載されたほとんどの記載された変異、バリアントまたは修飾は、核酸レベルで、またはいくつかのケースでは翻訳後修飾または化学合成によって行われ得る。そのような技術は当技術分野で周知であり、そのいくつかは本明細書に記載されている。部分的には、本開示は、本明細書で提供される開示の範囲内で他のバリアントＡｃｔＲＩＩポリペプチドを生成および使用するための指針として使用することができる、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）の機能的に活性な部分（断片）およびバリアントを同定する。

【0121】

特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの機能的に活性な断片は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードする核酸の対応する断片から組換えによって作製されたポリペプチドをスクリーニングすることによって得ることができる。さらに、断片は、当技術分野で公知の技術、例えば従来のメリフィールド固相ｆ－Ｍｏｃまたはｔ－Ｂｏｃ化学を使用して化学的に合成することができる。断片を（組換えまたは化学合成によって）作製し、試験して、ＡｃｔＲＩＩ受容体および／または１つ以上のリガンド［例えば、ＧＤＦ１１、ＧＤＦ８、アクチビンＡ、アクチビンＢ、ＧＤＦ３、ＢＭＰ４、ＢＭＰ６、ＢＭＰ１０、および／またはＢＭＰ１５］の拮抗薬（阻害剤）として機能することができる、ペプチジル断片を同定することができる。

【0122】

特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド中に天然に存在する任意のものに加えて、翻訳後修飾をさらに含み得る。そのような修飾には、アセチル化、カルボキシル化、グリコシル化、リン酸化、脂質化、およびアシル化が含まれるが、これらに限定されない。結果として、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、ポリエチレングリコール、脂質、多糖または単糖、およびリン酸塩などの非アミノ酸要素を含み得る。リガンドトラップポリペプチドの機能性に対するそのような非アミノ酸要素の影響は、他のＡｃｔＲＩＩバリアントについて本明細書に記載されるように試験することができる。本開示のポリペプチドが、ポリペプチドの新生形態を切断することによって細胞内で作製される場合、翻訳後プロセシングもまた、タンパク質の正しいフォールディングおよび／または機能にとって重要であり得る。異なる細胞（例えば、ＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＭＤＣＫ、２９３、ＷＩ３８、ＮＩＨ－３Ｔ３またはＨＥＫ２９３）は、そのような翻訳後活性のための固有の細胞機構および特徴的な機序を有し、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの正しい修飾およびプロセシングを確実にするように選択され得る。

【0123】

特定の態様では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの少なくとも一部（ドメイン）および１つ以上の異種部分（ドメイン）を有する融合タンパク質を含む。そのような融合ドメインの周知の例には、ポリヒスチジン、Ｇｌｕ－Ｇｌｕ、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、プロテインＡ、プロテインＧ、免疫グロブリン重鎖定常領域（Ｆｃ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）またはヒト血清アルブミンが含まれるが、これらに限定されない。融合ドメインは、所望の特性を付与するように選択され得る。例えば、いくつかの融合ドメインは、アフィニティークロマトグラフィーによる融合タンパク質の単離に特に有用である。アフィニティー精製の目的のために、グルタチオン、アミラーゼ、およびニッケルまたはコバルトにコンジュゲートした樹脂など、アフィニティークロマトグラフィーに適切なマトリックスが使用される。そのようなマトリックスの多くは、「キット」形態、例えば（ＨＩＳ_６）融合パートナーと共に有用なＰｈａｒｍａｃｉａ ＧＳＴ精製システムおよびＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓ（商標）システム（Ｑｉａｇｅｎ）で入手可能である。別の例として、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの検出を容易にするように融合ドメインを選択してもよい。そのような検出ドメインの例には、様々な蛍光タンパク質（例えば、ＧＦＰ）、ならびに通常は特異的抗体が利用可能な短いペプチド配列である「エピトープタグ」が含まれる。特異的モノクローナル抗体が容易に入手可能な周知のエピトープタグとしては、ＦＬＡＧ、インフルエンザウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）およびｃ－ｍｙｃタグが挙げられる。いくつかのケースでは、融合ドメインはプロテアーゼ切断部位、例えばＸａ因子またはトロンビンを有し、それにより、関連するプロテアーゼが融合タンパク質を部分的に消化し、それによって組換えタンパク質をそこから遊離させることができる。次いで、遊離したタンパク質を、その後のクロマトグラフィー分離によって融合ドメインから単離することができる。選択され得る他のタイプの融合ドメインとしては、多量体化（例えば、二量化、四量化）ドメイン、および、例えば免疫グロブリン由来の定常ドメイン（例えば、Ｆｃドメイン）を含む、（さらなる生物学的機能を与える）機能的ドメインが挙げられる。

【0124】

特定の態様では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）は、ポリペプチドを「安定化」することができる１つ以上の修飾を含む。「安定化する」とは、インビトロ半減期、血清半減期を延長する何らかのものを意味し、これが分解の減少、腎臓によるクリアランスの減少、または薬剤の他の薬物動態学的効果に起因するかどうかは関係ない。例えば、そのような修飾は、ポリペプチドの貯蔵寿命を改良し、ポリペプチドの循環半減期を改良し、かつ／またはポリペプチドのタンパク質分解を減少させる。そのような安定化修飾には、融合タンパク質（例えば、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインおよび安定剤ドメインを含む融合タンパク質を含む）、グリコシル化部位の修飾（例えば、本開示のポリペプチドへのグリコシル化部位の付加を含む）、および炭水化物部分の修飾（例えば、本開示のポリペプチドからの炭水化物部分の除去を含む）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「安定化剤ドメイン」という用語は、融合タンパク質の場合のように融合ドメイン（例えば、免疫グロブリンＦｃドメイン）を指すだけでなく、炭水化物部分などの非タンパク質性修飾、またはポリエチレングリコールなどの非タンパク質性部分も含む。特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、ポリペプチドを安定化する異種ドメイン（「安定化剤」ドメイン）、好ましくはインビボでのポリペプチドの安定性を増加させる異種ドメインと融合される。免疫グロブリンの定常ドメインとの融合（例えば、Ｆｃドメイン）は、広範囲のタンパク質に望ましい薬物動態特性を付与することが知られている。同様に、ヒト血清アルブミンへの融合は、望ましい特性を付与することができる。

【0125】

ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分（Ｇ１Ｆｃ）に使用され得る天然アミノ酸配列の例を以下に示す（配列番号１１）。点線の下線はヒンジ領域を示し、実線の下線は自然発生バリアントを含む位置を示す。一部において、本開示は、配列番号１１と７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを提供する。Ｇ１Ｆｃ中の天然発生バリアントは、配列番号１１で使用されるナンバリングシステムによるＥ１３４ＤおよびＭ１３６Ｌを含むであろう（Ｕｎｉｐｒｏｔ Ｐ０１８５７を参照）。

【0126】

場合により、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインは、Ａｓｐ－２６５、リジン３２２およびＡｓｎ－４３４などの残基に１つ以上の変異を有する。特定の場合において、これらの変異の１つ以上（例えば、Ａｓｐ－２６５変異）を有する変異ＩｇＧ１ Ｆｃドメインは、野生型Ｆｃドメインと比較して、Ｆｃγ受容体への結合能が低下している。他の場合では、これらの変異の１つ以上（例えば、Ａｓｎ－４３４変異）を有する変異Ｆｃドメインは、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃドメインと比較して、ＭＨＣクラスＩ関連Ｆｃ受容体（ＦｃＲＮ）への結合能が増加している。

【0127】

ヒトＩｇＧ２のＦｃ部分（Ｇ２Ｆｃ）に使用され得る天然アミノ酸配列の例を以下に示す（配列番号１２）。点線の下線はヒンジ領域を示し、二重下線は配列内にデータベース不一致がある位置を示す（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０１８５９による）。一部において、本開示は、配列番号１２と７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを提供する。

【0128】

ヒトＩｇＧ３のＦｃ部分（Ｇ３Ｆｃ）に使用され得るアミノ酸配列の２つの例を以下に示す。Ｇ３Ｆｃのヒンジ領域は、最大で他のＦｃ鎖の４倍の長さであり得、同様の１７残基セグメントが先行する３つの同一の１５残基セグメントを含む。以下に示す第１のＧ３Ｆｃ配列（配列番号１３）は、単一の１５残基セグメントからなる短いヒンジ領域を含有し、第２のＧ３Ｆｃ配列（配列番号１４）は全長ヒンジ領域を含有する。いずれの場合も、点線の下線はヒンジ領域を示し、実線の下線はＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０１８５９による自然発生バリアントを含む位置を示す。一部において、本開示は、配列番号１３および１４と７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを提供する。

【0129】

Ｇ３Ｆｃの自然発生バリアントには（例えば、Ｕｎｉｐｒｏｔ Ｐ０１８６０を参照のこと）、配列番号１３で使用されるナンバリングシステムに変換した場合のＥ６８Ｑ、Ｐ７６Ｌ、Ｅ７９Ｑ、Ｙ８１Ｆ、Ｄ９７Ｎ、Ｎ１００Ｄ、Ｔ１２４Ａ、Ｓ１６９Ｎ、Ｓ１６９ｄｅｌ、Ｆ２２１Ｙが含まれ、本開示は、これらのバリアントのうちの１つ以上を含有するＧ３Ｆｃドメインを含む融合タンパク質を提供する。また、ヒト免疫グロブリンＩｇＧ３遺伝子（ＩＧＨＧ３）は、異なるヒンジ長を特徴とする構造多型を示す（Ｕｎｉｐｒｏｔ Ｐ０１８６０参照）。具体的には、バリアントＷＩＳは、Ｖ領域の大部分およびＣＨ１領域のすべてを欠いている。それは、ヒンジ領域に通常存在する１１に加えて、位置７に余分な鎖間ジスルフィド結合を有する。バリアントＺＵＣは、Ｖ領域の大部分、ＣＨ１領域のすべて、およびヒンジの一部を欠く。バリアントＯＭＭは、対立遺伝子型または別のガンマ鎖サブクラスを表し得る。本開示は、これらのバリアントの１つ以上を含有するＧ３Ｆｃドメインを含む追加の融合タンパク質を提供する。

【0130】

ヒトＩｇＧ４のＦｃ部分（Ｇ４Ｆｃ）に使用され得る天然アミノ酸配列の例を以下に示す（配列番号１５）。点線の下線はヒンジ領域を示す。一部において、本開示は、配列番号１５と７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを提供する。

【0131】

Ｆｃドメイン中の操作された多様な変異は、Ｇ１Ｆｃ配列に関して本明細書に提示されており（配列番号１１）、Ｇ２Ｆｃ、Ｇ３Ｆｃ、およびＧ４Ｆｃ中の類似の変異は、図３のＧ１Ｆｃとのそれらのアライメントから誘導することができる。ヒンジ長が異なるため、アイソタイプアライメントに基づく類似のＦｃ位置（図３）は、配列番号１１、１２、１３、１４および１５において異なるアミノ酸番号を有する。ヒンジ領域、Ｃ_Ｈ２領域およびＣ_Ｈ３領域からなる免疫グロブリン配列における所与のアミノ酸位置は（例えば、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５）、Ｕｎｉｐｒｏｔデータベースのようにナンバリングが（Ｃ_Ｈ１、ヒンジ、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３領域からなる）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン全体を包含する場合、同じ位置とは異なる番号によって特定されることも理解され得る。例えば、ヒトＧ１Ｆｃ配列（配列番号１１）、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン（Ｕｎｉｐｒｏｔ Ｐ０１８５７）およびヒトＩｇＧ１重鎖における選択されたＣ_Ｈ３位置間の対応は以下の通りである。

【表1】

【0132】

単一細胞株においてＦｃ含有融合ポリペプチド鎖の所望のペアリングを増加させて、許容可能な収率で非対称融合タンパク質を産生する様々な方法が当技術分野で公知である［Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ（２０１２）ｍＡｂｓ ４：６５３－６６３；ａｎｄ Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ（２０１５）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７（２Ａ）：９５－１０６］。Ｆｃ含有鎖の所望のペアリングを得るための方法としては、これらに限定されないが、電荷ベースのペアリング（静電的ステアリング（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ ｓｔｅｅｒｉｎｇ））、「ノブス・イントゥ・ホール（ｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ）」立体ペアリング、ＳＥＥＤｂｏｄｙペアリング、およびロイシンジッパーベースのペアリングが挙げられる［Ｒｉｄｇｗａｙ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ ９：６１７－６２１；Ｍｅｒｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ（１９９８）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ １６：６７７－６８１；Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ（２０１０）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ ２３：１９５－２０２；Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ ｅｔ ａｌ（２０１０）；２８５：１９６３７－１９６４６；Ｗｒａｎｉｋ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８７：４３３３１－４３３３９；米国特許第５９３２４４８号；国際公開第１９９３／０１１１６２号；国際公開第２００９／０８９００４号、および国際公開第２０１１／０３４６０５号］。

【0133】

融合タンパク質（例えば、免疫グロブリンＦｃ融合タンパク質）の種々の要素は、所望の機能性と一致する任意の様式で配置され得ることが理解される。例えば、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインが、異種ドメインに向かうＣ末端に配置されてもよく、あるいは異種ドメインが、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインに向かうＣ末端に配置されてもよい。ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインおよび異種ドメインは、融合タンパク質中で隣接している必要はなく、追加のドメインまたはアミノ酸配列が、いずれかのドメインに向かうＣ末端またはＮ末端、またはドメイン間に含まれていてもよい。

【0134】

例えば、ＡｃｔＲＩＩ受容体融合タンパク質は、式Ａ－Ｂ－Ｃに示されるアミノ酸配列を含み得る。Ｂ部分は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメイン（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）に対応する。Ａ部分およびＣ部分は、独立して、０個、１個または複数のアミノ酸であり得、Ａ部分およびＣ部分の両方は、存在する場合、Ｂに対して異種である。Ａ部分および／またはＣ部分は、リンカー配列を介してＢ部分に結合され得る。リンカーは、グリシンリッチ（例えば、２～１０、２～５、２～４、２～３個のグリシン残基）またはグリシンおよびプロリン残基リッチであり得、例えば、トレオニン／セリンおよびグリシンの単一配列またはトレオニン／セリンおよび／またはグリシンの反復配列、例えばＧＧＧ（配列番号１６）、ＧＧＧＧ（配列番号１７）、ＴＧＧＧＧ（配列番号１８）、ＳＧＧＧＧ（配列番号１９）、ＴＧＧＧ（配列番号２０）、ＳＧＧＧ（配列番号２１）またはＧＧＧＧＳ（配列番号２２）シングレット、または反復を含み得る。特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ融合タンパク質は、式Ａ－Ｂ－Ｃに示されるアミノ酸配列を含み、式中、Ａはリーダー（シグナル）配列であり、ＢはＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインからなり、Ｃはインビボ安定性、インビボ半減期、取り込み／投与、組織の局在化もしくは分布、タンパク質複合体の形成、および／または浄化の１つ以上を改良するポリペプチド部分である。特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ融合タンパク質は、式Ａ－Ｂ－Ｃに示されるアミノ酸配列を含み、式中、ＡはＴＰＡリーダー配列であり、ＢはＡｃｔＲＩＩ受容体ポリペプチドドメインからなり、Ｃは免疫グロブリンＦｃドメインである。例示的な融合タンパク質は、配列番号２３、２７、３０および４１のいずれか一つに示されるアミノ酸配列を含む。

【0135】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法に従って使用されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、単離されたポリペプチドである。本明細書で使用される場合、単離されたタンパク質またはポリペプチドは、その天然環境の成分から分離されたものである。いくつかの実施形態では、本開示のポリペプチドは、例えば電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）またはクロマトグラフィー（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）によって測定すると、純度９５％、９６％、９７％、９８％または９９％超まで精製される。純度を評価するための方法は、当技術分野で周知である［例えば、Ｆｌａｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，（２００７）Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ ８４８：７９－８７を参照］。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法に従って使用されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、組換えポリペプチドである。

【0136】

本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、当技術分野で公知の様々な技術によって生成することができる。例えば、本開示のポリペプチドは、標準的なタンパク質化学技術、例えばＢｏｄａｎｓｋｙ，Ｍ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ（１９９３）、およびＧｒａｎｔ Ｇ．Ａ．（ｅｄ．），Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ Ｕｓｅｒ’ｓ Ｇｕｉｄｅ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９２）に記載されているものを使用して合成することができる。さらに、自動ペプチド合成装置が市販されている（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ Ｍｏｄｅｌ ３９６；Ｍｉｌｌｉｇｅｎ／Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ ９６００）。あるいは、本開示のポリペプチドは、その断片またはバリアントを含めて、当該分野で周知の種々の発現系［例えば、大腸菌、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ細胞、バキュロウイルス］を用いて組換えで生成され得る。さらなる実施形態では、本開示の修飾または非修飾ポリペプチドは、例えばプロテアーゼ、例えばトリプシン、サーモリシン、キモトリプシン、ペプシン、または対の塩基性アミノ酸変換酵素（ＰＡＣＥ）を使用することにより、組換え生成された全長ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの消化によって生成され得る。コンピュータ分析（市販のソフトウェア、例えばＭａｃＶｅｃｔｏｒ、Ｏｍｅｇａ、ＰＣＧｅｎｅ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．を使用して）を使用して、タンパク質分解切断部位を同定することができる。あるいは、そのようなポリペプチドは、化学的切断（例えば、臭化シアン、ヒドロキシルアミンなど）を使用して、組換え生成された完全長ＡｃｔＲＩＩポリペプチドから生成され得る。

【0137】

３．ＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードする核酸
特定の実施形態では、本開示は、その断片、機能的バリアント、および融合タンパク質を含むＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）をコードする単離された核酸および／または組換え核酸を提供する。

【0138】

本明細書で使用される場合、（１または複数の）単離された核酸は、その自然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離された核酸は、普通は核酸分子を含む細胞に含有される核酸分子を含むが、その核酸分子は染色体外に、またはその天然の染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。

【0139】

特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードする核酸は、配列番号４、５、または２８のいずれか１つのバリアントである核酸を含むと理解される。バリアントヌクレオチド配列は、対立遺伝子バリアントを含む、１つ以上のヌクレオチド置換、付加、または欠失によって異なる配列を含み、したがって、配列番号４、５、または２８のいずれか１つで示されたヌクレオチド配列とは異なるコード配列を含む。

【0140】

特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、配列番号４、５、または２８のいずれか１つと少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である単離核酸配列および／または組換え核酸配列によってコードされる。当業者は、配列番号４、５または２８に相補的な配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一である核酸配列、およびそのバリアントも本開示の範囲内であることを理解するであろう。さらなる実施形態では、本開示の核酸配列は、単離され、組換型であり、かつ／または異種ヌクレオチド配列と融合され、またはＤＮＡライブラリ中にあり得る。

【0141】

他の実施形態では、本開示の核酸は、配列番号４、５、もしくは２８で示されたヌクレオチド配列、配列番号４、５、もしくは２８の相補配列、またはそれらの断片に高度に厳密な条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列も含む。上述のように、当業者は、ＤＮＡハイブリダイゼーションを促進する適切な厳密性条件が変更され得ることを、容易に理解するであろう。当業者は、ＤＮＡハイブリダイゼーションを促進する適切な厳密性条件が変更され得ることを、容易に理解するであろう。例えば、約４５℃で６．０×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）でハイブリダイゼーションを行った後、５０℃で２．０×ＳＳＣの洗浄を行うことができる。例えば、洗浄工程における塩濃度は、５０℃で約２．０×ＳＳＣの低度の厳密性から５０℃で約０．２×ＳＳＣの高度の厳密性まで選択することができる。さらに、洗浄工程の温度は、室温、約２２℃の低度の厳密性条件から約６５℃の高度の厳密性条件に上げることができる。温度および塩の両方を変化させてもよく、または他の変数を変化させながら温度または塩濃度を一定に保持してもよい。一実施形態では、本開示で提供する核酸は、室温で６×ＳＳＣの低度の厳密性条件下でハイブリダイズし、その後室温で２×ＳＳＣで洗浄する。

【0142】

遺伝暗号の縮重に応じて配列番号４、５または２８に示される核酸とは異なる単離された核酸も、本開示の範囲内である。例えば、いくつかのアミノ酸は、２つ以上のトリプレットによって指定される。同じアミノ酸またはシノニム（例えば、ＣＡＵおよびＣＡＣはヒスチジンのシノニムである）を指定するコドンは、タンパク質のアミノ酸配列に影響を及ぼさない「サイレント」変異をもたらし得る。しかしながら、主題タンパク質のアミノ酸配列の変化をもたらすＤＮＡ配列多型が哺乳動物細胞の間に存在することが予想される。当業者は、特定のタンパク質をコードする核酸の１つまたは複数のヌクレオチド（ヌクレオチドの最大約３～５％）におけるこれらの変異が、天然の対立遺伝子変異に起因して所与の種の個体において存在し得ることを理解するであろう。そのようなヌクレオチド変異および結果として生じるアミノ酸多型のすべては、本開示の範囲内である。

【0143】

特定の実施形態において、本開示の組換え核酸は、発現構築物中の１つ以上の調節ヌクレオチド配列に作動可能に連結され得る。調節ヌクレオチド配列は、一般に、発現に使用される宿主細胞に適している。多数のタイプの適切な発現ベクターおよび適切な調節配列が当技術分野で公知であり、様々な宿主細胞で使用することができる。典型的には、１つ以上の調節ヌクレオチド配列は、プロモーター配列、リーダーまたはシグナル配列、リボソーム結合部位、転写開始および終結配列、翻訳開始および終結配列、ならびにエンハンサーまたは活性化因子配列を含み得るが、これらに限定されない。当技術分野で公知の構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターが本開示によって企図される。プロモーターは、自然発生のプロモーター、または２つ以上のプロモーターの要素を組み合わせるハイブリッドプロモーターのいずれかであり得る。発現構築物は、プラスミドなどのエピソーム上の細胞に存在してもよく、または発現構築物は染色体に挿入されてもよい。いくつかの実施形態では、発現ベクターは選択マーカー遺伝子を含有して、形質転換された宿主細胞の選択を可能にする。選択マーカー遺伝子は当技術分野で周知であり、使用される宿主細胞によって変化してもよい。

【0144】

特定の態様では、本明細書に開示される主題の核酸は、少なくとも１つの調節配列に作動可能に連結されたＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、またはそれらの組み合わせ）をコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターで提供される。調節配列は当技術分野で認識されており、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの発現を指示するように選択される。したがって、調節配列という用語は、プロモーター、エンハンサー、および他の発現制御要素を含む。例示的な調節配列は、Ｇｏｅｄｄｅｌ；Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９０）に記載されている。例えば、ＤＮＡ配列の発現を制御する多種多様な発現制御配列のいずれかは、作動可能に連結された場合、これらのベクターにおいて使用して、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を発現させることができる。そのような有用な発現制御配列には、例えば、ＳＶ４０の初期および後期プロモーター、ｔｅｔプロモーター、アデノウイルスまたはサイトメガロウイルス前初期プロモーター、ＲＳＶプロモーター、ｌａｃ系、ｔｒｐ系、ＴＡＣまたはＴＲＣ系、発現がＴ７ ＲＮＡポリメラーゼによって指示されるＴ７プロモーター、ファージラムダの主要なオペレーターおよびプロモーター領域、ｆｄコートタンパク質の制御領域、３－ホスホグリセリン酸キナーゼまたは他の解糖酵素のプロモーター、酸性ホスファターゼのプロモーター、例えば、Ｐｈｏ５、酵母α接合因子のプロモーター、バキュロウイルス系のポリヘドロンプロモーター、ならびに原核細胞または真核細胞またはそれらのウイルスの遺伝子の発現を制御することが知られている他の配列、ならびにそれらの様々な組み合わせが含まれる。発現ベクターの設計は、形質転換される宿主細胞の選択および／または発現されることが望まれるタンパク質のタイプなどの要因に依存し得ることを理解されたい。さらに、ベクターのコピー数、そのコピー数を制御する能力、および抗生物質マーカーなど、ベクターによってコードされる任意の他のタンパク質の発現も考慮されるべきである。

【0145】

本開示の組換え核酸は、クローン化遺伝子またはその一部を、原核細胞、真核細胞（酵母、鳥類、昆虫または哺乳動物）またはその両方での発現に適したベクターにライゲートすることによって作製することができる。組換えＡｃｔＲＩＩポリペプチドを作製するための発現ビヒクルには、プラスミドおよび他のベクターが含まれる。例えば、適切なベクターには、以下のタイプのプラスミド：ｐＢＲ３２２由来プラスミド、ｐＥＭＢＬ由来プラスミド、ｐＥＸ由来プラスミド、ｐＢＴａｃ由来プラスミド、および原核細胞、例えば大腸菌における発現のためのｐＵＣ由来プラスミドが含まれる。

【0146】

いくつかの哺乳動物発現ベクターは、細菌におけるベクターの増殖を促進するための原核生物配列と、真核細胞において発現される１つ以上の真核生物転写単位の両方を含有する。ｐｃＤＮＡＩ／ａｍｐ、ｐｃＤＮＡＩ／ｎｅｏ、ｐＲｃ／ＣＭＶ、ｐＳＶ２ｇｐｔ、ｐＳＶ２ｎｅｏ、ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ、ｐＴｋ２、ｐＲＳＶｎｅｏ、ｐＭＳＧ、ｐＳＶＴ７、ｐｋｏ－ｎｅｏおよびｐＨｙｇ由来ベクターは、真核細胞のトランスフェクションに適した哺乳動物発現ベクターの例である。これらのベクターのいくつかは、ｐＢＲ３２２などの細菌プラスミド由来の配列で修飾されて、原核細胞および真核細胞の両方における複製および薬物耐性選択を促進する。あるいは、ウシパピローマウイルス（ＢＰＶ－１）またはエプスタイン・バーウイルス（ｐＨＥＢｏ、ｐＲＥＰ由来およびｐ２０５）などのウイルスの誘導体を、真核細胞におけるタンパク質の一過性発現のために使用することができる。他のウイルス（レトロウイルスを含む）発現系の例は、遺伝子治療送達系の説明において以下に見出すことができる。プラスミドの調製および宿主生物の形質転換に使用される様々な方法は、当技術分野で周知である。原核細胞および真核細胞の両方のための他の適切な発現系、ならびに一般的な組換え手順は、例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ ｒｄ Ｅｄ．，ｅｄ．ｂｙ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、２００１）。いくつかの例では、バキュロウイルス発現系の使用によって組換えポリペプチドを発現させることが望ましい場合がある。そのようなバキュロウイルス発現系の例としては、ｐＶＬ由来ベクター（例えば、ｐＶＬ１３９２、ｐＶＬ１３９３およびｐＶＬ９４１）、ｐＡｃＵＷ由来ベクター（ｐＡｃＵＷ１など）、およびｐＢｌｕｅＢａｃ由来ベクター（ｐＢｌｕｅＢａｃ ＩＩＩを含有するβ－ｇａｌなど）が挙げられる。

【0147】

一実施形態において、ベクターは、ＣＨＯ細胞での主題のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの作製用に設計された、例えば、Ｐｃｍｖ－Ｓｃｒｉｐｔベクター（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａｌｉｆ．）、ｐｃＤＮＡ４ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ．）およびｐＣＩ－ｎｅｏベクター（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓｃ．）であるだろう。明らかなように、主題の遺伝子構築物を使用して、培養で増殖させた細胞において主題のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを発現させる、例えば、精製のために、融合タンパク質またはバリアントタンパク質を含むタンパク質を生成することができる。

【0148】

本開示はまた、主題のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの１つ以上のコード配列を含む組換え遺伝子でトランスフェクトされた宿主細胞に関する。宿主細胞は、任意の原核細胞または真核細胞であり得る。例えば、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、大腸菌などの細菌細胞、昆虫細胞（例えば、バキュロウイルス発現系を使用する）、酵母、または哺乳動物細胞［例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株］で発現され得る。他の適切な宿主細胞は、当業者に公知である。

【0149】

したがって、本開示はさらに、主題のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを製造する方法に関する。例えば、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドをコードする発現ベクターでトランスフェクトした宿主細胞を適切な条件下で培養して、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの発現を発生させることができる。ポリペプチドは分泌され、細胞、およびポリペプチドを含有する培地との混合物から単離され得る。あるいは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは細胞質によって、または膜画分中に保持され、細胞が回収され、溶解され、タンパク質が単離され得る。細胞培養物は、宿主細胞、培地および他の副産物を含む。細胞培養に適した培地は、当技術分野で周知である。主題のポリペプチドは、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、限外濾過、電気泳動、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの特定のエピトープに特異的な抗体による免疫親和性精製、およびＡｃｔＲＩＩポリペプチドに融合したドメインに結合する薬剤による親和性精製（例えば、プロテインＡカラムを使用してＡｃｔＲＩＩ－Ｆｃ融合タンパク質を精製することができる）を含む、タンパク質を精製するための当技術分野で公知の技術を使用して、細胞培養培地、宿主細胞、またはその両方から単離することができる。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、その精製を容易にするドメインを含む融合タンパク質である。

【0150】

いくつかの実施形態では、精製は、例えば、任意の順序で以下の３つ以上を含む一連のカラムクロマトグラフィー工程によって達成される：プロテインＡクロマトグラフィー、Ｑセファロースクロマトグラフィー、フェニルセファロースクロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、および陽イオン交換クロマトグラフィー。ウイルス濾過および緩衝液交換によって精製を完了することができた。ＡｃｔＲＩＩタンパク質は、サイズ排除クロマトグラフィーによって決定される場合、９０％超、９５％超、９６％超、９８％超または９９％超の純度、ＳＤＳ ＰＡＧＥによって決定される場合、９０％超、９５％超、９６％超、９８％超または９９％超の純度に精製され得る。純度の目標レベルは、哺乳動物系、特に非ヒト霊長類、げっ歯類（マウス）およびヒトにおいて望ましい結果を達成するのに十分なレベルでなければならない。

【0151】

別の実施形態では、精製リーダー配列、例えば組換えＡｃｔＲＩＩポリペプチドの所望の部分のＮ末端におけるポリ－（Ｈｉｓ）／エンテロキナーゼ切断部位配列をコードする融合遺伝子は、Ｎｉ^２＋金属樹脂を使用したアフィニティークロマトグラフィーによる発現した融合タンパク質の精製を可能にすることができる。次いで、精製リーダー配列を、続いてエンテロキナーゼによる処理によって取り出して、精製ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを得ることができる。例えば、Ｈｏｃｈｕｌｉ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ４１１：１７７；およびＪａｎｋｎｅｃｈｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８８：８９７２を参照されたい。

【0152】

融合遺伝子を作製するための技術は周知である。本質的に、異なるポリペプチド配列をコードする様々なＤＮＡ断片の連結は、従来の技術に従って、ライゲーションのための平滑末端または付着末端、適切な終端をもたらすための制限酵素消化、必要に応じた凝集性末端の充填、望ましくない連結を回避するためのアルカリホスファターゼ処理、および酵素的ライゲーションを使用して行われる。別の実施形態では、融合遺伝子は、自動ＤＮＡ合成装置を含む従来の技術によって合成することができる。あるいは、２つの連続する遺伝子断片間に相補的なオーバーハングを生じさせ、その後アニーリングされてキメラ遺伝子配列を生成することができるアンカープライマーを使用して、遺伝子断片のＰＣＲ増幅を行うことができる。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ：１９９２を参照されたい。

【0153】

４．使用方法
部分的には、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療する方法に関し、方法は、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの有効量をそれを必要とする患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の１つ以上の合併症を治療、予防またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法に関し、方法は、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを、０．１ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．３ｍｇ／ｋｇまたは０．７ｍｇ／ｋｇ）の用量範囲で投与する。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、１つまたは複数の血行動態または機能パラメータの変化（例えば、肺血管抵抗（ＰＶＲ）の減少；６分間歩行距離（６ＭＷＤ）の増加；Ｎ末端プロＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ）レベルの低下；世界保健機関（ＷＨＯ）によって認定される肺高血圧症機能分類進行の予防または遅延；ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の退行の促進または増進；右室機能の改善；および肺動脈圧の改善）をもたらす。

【0154】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法に関する。

【0155】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供に関する。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する１つ以上の肺高血圧症の合併症は、持続性咳、湿性咳、喘鳴、運動不耐性、呼吸器感染症、気管支拡張症、慢性感染症、鼻ポリープ、喀血、気胸、呼吸不全、呼吸困難、胸痛、喀血、気胸、肺血管リモデリング、肺線維症、肺血管内皮機能不全、慢性肺傷害による低酸素症、低酸素性肺血管収縮、炎症、平滑筋肥大、および右室肥大からなる群から選択される。

【0156】

これらの方法は、動物、より具体的にはヒトの治療的および予防的処置を特に目的とする。「対象」、「個体」または「患者」という用語は、本明細書全体を通して交換可能であり、ヒトまたは非ヒト動物のいずれかを指す。これらの用語には、哺乳動物、例えばヒト、非ヒト霊長類、実験動物、家畜動物（ウシ、ブタ、ラクダなどを含む）、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコ、その他の飼育動物など）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）が含まれる。特定の実施形態では、患者、対象または個体はヒトである。

【0157】

「治療」、「治療すること」、「緩和すること」、「進行速度を低下させること」、「重症度を低下させること」などの用語は、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得ることを一般に意味するために本明細書で使用され、治療されている状態（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症）の１つまたは複数の臨床的合併症を改善、緩和、および／またはその重症度を低下させることを指すためにも使用され得る。効果は、疾患、状態もしくはその合併症の発症または再発を完全もしくは部分的に遅延させるという点で予防的であり得、かつ／または疾患もしくは状態および／もしくは疾患もしくは状態に起因する有害作用の部分的もしくは完全な治癒という点で治療的であり得る。本明細書で使用される「治療」は、哺乳動物、特にヒトの疾患または状態の任意の治療を包含する。本明細書で使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬とは、統計的サンプルにおいて、未治療対照サンプルと比較して治療サンプルにおける障害または状態の発生を減少させるか、または未治療対照サンプルと比較して疾患または状態の発症を遅延させる化合物を指す。

【0158】

一般に、本開示に記載される疾患または状態（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症）の治療または予防は、本開示の１つまたは複数のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを「有効量」で投与することによって達成される。薬剤の有効量は、所望の治療的または予防的結果を達成するために、必要な投与量および期間で有効な量を指す。本開示の薬剤の「治療有効量」は、個体の疾患状態、年齢、性別および体重などの因子、ならびに薬剤の個体において所望の応答を誘発する能力に従って変動し得る。「予防有効量」は、所望の予防的結果を達成するために、必要な投与量および期間で有効な量を指す。

【0159】

特定の態様では、本開示は、疾患または状態（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症）を治療または予防するための１つ以上の追加の活性剤または他の支持療法と組み合わせた、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの使用を企図する。本明細書で使用される場合、「投与との組み合わせ」、「投与の組み合わせ」、「投与と組み合わせた」、または「合同投与」は、追加の活性剤または支持療法（例えば、２つ目、３つ目、４つ目、他）が依然として体内で有効であるような（例えば、複数の化合物が、ある期間中、患者において同時に有効であり、それらの化合物の相乗効果を含んでもよい）、任意の投与形態を指す。有効性は、血液、血清または血漿中の薬剤の測定可能な濃度と相関しない場合がある。例えば、異なる治療化合物は、同じ製剤または別個の製剤のいずれかで、同時にまたは連続的に、および別々のスケジュールで投与することができる。したがって、このような治療を受ける対象は、異なる活性剤または療法の併用効果から利益を得ることができる。本開示の１つまたは複数のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、１つ以上の他の追加の薬剤または支持療法、例えば本明細書に開示されるものと同時、その前または後に投与することができる。一般に、各活性剤または療法は、その特定の薬剤について決定された用量および／または時間スケジュールで投与される。レジメンで使用する特定の組み合わせは、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドと追加の活性薬剤または療法との適合性、および／または所望の効果を考慮に入れる。

【0160】

ＷＨＯ分類概要
本明細書に記載の方法によって治療される肺高血圧症状態は、世界保健機関（ＷＨＯ）に従って認定される状態のいずれか１つまたは複数を含むことができる。例えば、Ｓｉｍｏｎｎｅａｕ（２０１９）Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ：５３：１８０１９１３を参照されたい。

【表2】

【0161】

本明細書で使用される場合、「肺血行動態パラメータ」という用語は、心臓および肺血管系を通る血流を説明または評価するために使用される任意のパラメータを指す。肺血行動態パラメータの例には、平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）、拡張期肺動脈圧（ｄＰＡＰ）［肺動脈拡張期圧（ＰＡＤＰ）としても知られる］、収縮期肺動脈圧（ｓＰＡＰ）［肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）としても知られる］、平均右心房圧（ｍＲＡＰ）、肺毛細血管楔入圧（ＰＣＷＰ）［肺動脈楔入圧（ＰＡＷＰ）としても知られる］、肺血管抵抗（ＰＶＲ）および心拍出量（ＣＯ）が含まれるが、これらに限定されない。

【0162】

上記の肺血行動態パラメータの多くは相互に関連している。例えば、ＰＶＲは、以下の式：ＰＶＲ＝（ｍＰＡＰ－ＰＣＷＰ）／ＣＯ［Ｗｏｏｄ単位］に従って、ｍＰＡＰ、ＰＣＷＰおよびＣＯに関連する。

【0163】

ＰＶＲは、左側充満圧の影響を受けずに肺血管系によって課される流れに対する抵抗を測定する。ＰＶＲは、以下の式に従って測定することもできる。

【0164】

ＰＶＲ＝ＴＰＧ×８０／ＣＯ［単位：ダイン秒－ｃｍ^－５］またはＰＶＲ＝（ｍＰＡＰ－ＰＣＷＰ）×８０／ＣＯ［単位：ダイン秒－ｃｍ^－５］
いくつかの実施形態では、総ＰＶＲは、以下の式を使用して測定することができる。

【0165】

ＴＰＲ＝ｍＰＡＰ／ＣＯ
いくつかの実施形態では、正常なＰＶＲは、２０～１８０ダイン秒－ｃｍ^－５、または典型的には０．５～２Ｗｏｏｄ単位未満である。いくつかの実施形態によれば、上昇したＰＶＲとは、２Ｗｏｏｄ単位を越える、２．５Ｗｏｏｄ単位を越える、３Ｗｏｏｄ単位を越える、または３．５Ｗｏｏｄ単位を越えるＰＶＲを指し得る。

【0166】

さらに別の例として、ｍＰＡＰは、以下の式：ｍＰＡＰ＝（２／３）ｄＰＡＰ＋（１／３）ｓＰＡＰに従ってｄＰＡＰおよびｓＰＡＰに関連する。

【0167】

いくつかの実施形態では、肺血行動態パラメータは直接、例えば右心カテーテル処置中に測定される。他の実施形態では、肺血行動態パラメータは、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）または心エコー検査などの他の技術によって推定および／または評価される。

【0168】

例示的な肺血行動態パラメータには、ｍＰＡＰ、ＰＡＷＰおよびＰＶＲが含まれる。１つまたは複数の肺血行動態パラメータは、任意の適切な手順によって、例えば右心カテーテル処置または心エコー検査を利用することによって測定することができる。ＰＨ、および肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の様々な血行動態特性を表２に示す。

【表3】

【0169】

本明細書に記載のＰＡＨの臨床分類または血行動態特性および関連する診断パラメータは、新規または既存のデータソースの利用可能性に基づいて、または追加の臨床実体が考慮される場合、更新または変更することができる。

【0170】

肺疾患に関連する肺高血圧症の特徴
肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）（ＷＨＯ グループ３ ＰＨ）は、肺高血圧症の２番目に一般的な形態であり、罹患率および死亡率の増加と関連付けられている。グループ３の肺高血圧症を有する患者は、グループ１の肺高血圧症を有する患者よりも転帰が不良である。同様に、グループ１の肺動脈高血圧症および関連する肺疾患を有する患者は、グループ１の肺動脈高血圧症のみを有する患者と比較してさらに悪い転帰を被る。

【0171】

様々な因子が、肺疾患に関連する肺高血圧症の病因に寄与する。これらの因子は、根底にある肺疾患に基づいて変化する。例えば、ＣＯＰＤによって引き起こされる肺高血圧症では、肺高血圧症の最も顕著な病因は、肺血管床のリモデリングを伴う低酸素性肺血管収縮（ＨＰＶＣ）である。血管リモデリング中の初期変化には、細動脈の遠位性の新たな筋性動脈化（ｎｅｏｍｕｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）、内膜肥厚、および中膜肥大が含まれる。このリモデリングは、最終的に血管の減少、およびその結果として、肺高血圧症で見られる末梢血管抵抗の増加をもたらす。ＩＬＤ関連肺高血圧症の根底にあるさらなる機序としては、進行性実質線維症による血管破壊、血管炎症、血管周囲線維症、血栓性血管障害および内皮機能障害が挙げられる。より具体的には、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症を有する患者は、血管リモデリングを促進する異常な遺伝子発現プロファイルを特徴とする異常な血管表現型を有し得る。

【0172】

肺疾患に関連する肺高血圧症は、２５ｍｍＨｇを超える平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）で診断することができる。肺疾患に関連する肺高血圧症は、持続性咳、湿性咳、喘鳴、運動不耐性、呼吸器感染症、気管支拡張症、慢性感染症、鼻ポリープ、喀血、気胸、呼吸不全、呼吸困難、胸痛、喀血、気胸、肺血管リモデリング、肺線維症、肺血管内皮機能不全、慢性肺傷害による低酸素症、低酸素性肺血管収縮、炎症、平滑筋肥大、および右室肥大をもたらし得る。肺高血圧症に関連する肺疾患は、閉塞性肺疾患または拘束性肺疾患のいずれかに分類され得る。閉塞性肺疾患（例えば、ＣＯＰＤ、嚢胞性線維症、喘息、気腫、および慢性気管支炎）は、呼気困難によって特徴付けられる。あるいは、拘束性肺疾患は、内因性（例えば、肺線維症、間質性肺疾患、サルコイドーシス、特発性肺線維症）および外因性（肥満症、脊柱側弯症、重症筋無力症、および胸水）障害にさらに分けることができ、完全な肺拡張の制限を特徴とする。

【0173】

肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症）は、根底にある肺の状態の異質性のために診断が困難であり得る。肺疾患の多くの症状は、肺高血圧症の症状に類似する。しかしながら、肺疾患に関連する肺高血圧症の診断を促すいくつかの臨床的特徴がある（例えば、実質性肺疾患または睡眠障害によって十分に説明されない労作性呼吸困難または低酸素血症、運動時の動脈酸素化の急速な低下、右心不全を示唆する何らかの臨床的特徴、肺動脈拡大、末梢肺血管系の減弱、または高分解能コンピュータ断層撮影法（ＨＲＣＴ）によって示される右室拡大、肺機能試験によって示される拡散能の重度の低下、および肺生検）。Ｋｌｉｎｇｓ，Ｅ．Ｓ．（２０２１）．Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ｄｕｅ ｔｏ ｌｕｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ／ｏｒ ｈｙｐｏｘｅｍｉａ（ｇｒｏｕｐ ３ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ）：Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ．ＵｐＴｏＤａｔｅ．２０２１年４月６日に検索した、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｕｐｔｏｄａｔｅ．ｃｏｍ／ｃｏｎｔｅｎｔｓ／ｐｕｌｍｏｎａｒｙ－ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ－ｄｕｅ－ｔｏ－ｌｕｎｇ－ｄｉｓｅａｓｅ－ａｎｄ－ｏｒ－ｈｙｐｏｘｅｍｉａ－ｇｒｏｕｐ－３－ｐｕｌｍｏｎａｒｙ－ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ－ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ－ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ－ａｎｄ－ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ－ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ－ｉｎ－ａｄｕｌｔｓより。

【0174】

心エコー検査は、根底にある肺疾患および／または睡眠時呼吸障害の病因が不明の肺高血圧症が疑われる患者を調査する場合の標準的な検査であるが、心エコー検査は、重度の肺疾患を有する患者の肺高血圧症を正確に診断するには信頼性が低い可能性がある。そのような場合、右心カテーテル処置（ＲＨＣ）は、より正確な評価を与えることができる。

【0175】

慢性閉塞性肺疾患
いくつかの実施形態では、本開示は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。慢性閉塞性肺疾患（慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）とも言う）は、肺からの気流の閉塞を引き起こす炎症性肺疾患である。この疾患群の中には、気腫および慢性気管支炎がある。米国疾病予防管理センターによると、数百万人がＣＯＰＤに罹患しており、そのうち１６００万人が米国にいる。

【0176】

ＣＯＰＤの重症度は、肺活量測定結果によって判定される、慢性閉塞性肺疾患のためのグローバルイニシアチブ（Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｌｕｎｇ Ｄｉｓｅａｓｅ：ＧＯＬＤ）ステージングまたはグレーディングシステムを使用して決定される（ＧＯＬＤ １：軽度、ＧＯＬＤ ２：中等度、ＧＯＬＤ ３：重度、ＧＯＬＤ ４：非常に重度）。このシステムは、いくつかの要因（例えば、全体的な症状、ＣＯＰＤが悪化した回数、ＣＯＰＤの悪化による入院、および肺活量測定の結果）に基づいてＣＯＰＤのステージを決定する。ＣＯＰＤによって引き起こされる肺高血圧症の患者の大部分は、重度または非常に重度の気流閉塞（ＧＯＬＤ肺活量測定ステージ３または４、ＦＥＶ－１＜予測値の５０％）または重度の気腫、および軽度から中等度の前毛細血管性肺高血圧症を呈する。ＣＯＰＤの現在の治療には、短時間作用型気管支拡張薬、長時間作用型気管支拡張薬、吸入ステロイド、気管支拡張薬および吸入ステロイドの両方または複数種の気管支拡張薬を含む組み合わせ吸入器、経口ステロイド、ホスホジエステラーゼ－４阻害剤、テオフィリン、抗生物質、様々な種類の肺療法、および在宅非侵襲性換気療法が含まれる。

【0177】

間質性肺疾患
いくつかの実施形態では、本開示は、間質性肺疾患（ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。間質性肺疾患またはＩＬＤは、肺の瘢痕化、炎症、および呼吸の問題を引き起こす、肺の気嚢間の損傷の結果として生じる慢性肺疾患である。ＩＬＤは、感染、医薬品、および空気中の有害粒子の吸入によって引き起こされ得る。ＩＬＤの根本原因は治療の過程を決定する。ＩＬＤは、全体として、疾患を有しながら生きる者の生活の質を低下させ、全体的にその者の寿命を短縮する可能性がある。

【0178】

ＩＬＤには、その根本的な原因に基づいておよそ５つのカテゴリー：曝露または職業に関連して引き起こされるＩＬＤ（例えば、石綿肺症、珪肺症、過敏性肺炎）、薬物治療および／または医学的治療（例えば、化学療法、放射線療法）に関連するＩＬＤ、自己免疫障害および／または結合組織疾患（例えば、狼瘡、強皮症、多発性筋炎または皮膚筋炎、関節リウマチ）に関連するＩＬＤ、サルコイドーシス、および特発性ＩＬＤがある ５つの一般的なカテゴリー外に、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、閉塞性細気管支炎、組織球増加症Ｘ、慢性好酸球性肺炎、コラーゲン血管疾患、肉芽腫性血管炎、グッドパスチャー症候群および肺胞蛋白症などのＩＬＤが残されている。

【0179】

ＩＬＤの症状は個人によって、同様に特定のＩＬＤに基づいて変化し得るが、ＩＬＤの様々な形態間の共通の接点は、すべてのＩＬＤが細気管支の炎症（例えば、細気管支炎）、肺胞の炎症（例えば、肺胞炎）、または毛細血管の炎症（血管炎）から始まることである。ＩＬＤの最も一般的な症状、例えば、息切れ（特に運動による）、疲労および脱力感、食欲不振、体重減少、痰を出さない乾性咳、胸部の不快感、努力呼吸、および肺の出血は、他の肺状態または医学的問題に類似する場合がある。

【0180】

線維症は、気嚢、気嚢間および気嚢周辺の肺組織、ならびに肺毛細血管の持続的な破壊をもたらす。疾患の進行は、漸進的または急速であり得、非常に軽度、中等度、または非常に重度の症状を呈し得る。ＩＬＤの経過は予測不可能であるが、医学的介入によって改善し得る。

【0181】

間質性肺疾患は、肺機能検査（ＰＦＴ）、胸部Ｘ線、血液検査（例えば、血液中の二酸化炭素および酸素の量を決定するための動脈血液ガスの分析）、高分解能ＣＴ（ＨＲＣＴ、ＣＴ、またはＣＡＴスキャン）、気管支鏡検査、気管支肺胞洗浄、および肺生検を用いて診断される。

【0182】

ＩＬＤの治療計画は、典型的には、個人の年齢、全体的な健康状態、および病歴、疾患の程度、特定の医薬品、処置、および／または療法に対する個人の耐性、疾患の経過に対する予想、ならびに個人の意見または希望に基づいて決定される。これらの治療計画は、経口薬（例えば、コルチコステロイド）、酸素補給、および肺移植を含み得る。

【0183】

特発性肺線維症および他の特発性間質性肺炎
いくつかの実施形態では、本開示は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。特発性肺線維症（ＩＰＦ）は（特発性線維化肺胞炎、慢性特発性線維化肺胞炎、間質性肺炎も）、最も頻繁に診断される間質性肺疾患（ＩＬＤ）の１つであり、世界中で１００，０００人当たり約１３～２０人が罹患しており、毎年３０，０００～４０，０００の新規の症例が診断されている。ＩＰＦのための医学的治療が利用可能であるが、この疾患は依然として重篤であり、臨床的な悪化が予想される。

【0184】

ＩＰＦの進行に影響を及ぼすいくつかの根本的な因子があり、そのうちの１つは、肺胞上皮の慢性および／または反復性の微小損傷であると考えられている（例えば、環境汚染物質への曝露、胃食道逆流による酸の誤嚥、およびウイルス感染症）。上皮への損傷の後、肺の血管および間質コンパートメントに沿って並ぶ細胞、遠位気道の上皮、常在マクロファージの傷害および／または活性化が続く。遺伝的要因がＩＰＦに寄与する可能性があり、これは、まれな遺伝性障害を有する患者におけるＩＰＦ様疾患の発生、および家族性特発性間質性肺炎の症例によって示唆される。

【0185】

現在、疾患の進行を止めるのに有効であることが証明されている治療法はないが、より新しい医薬品（例えば、ピルフェニドンおよびニンテダニブ）が食品医薬品局によって承認されて、疾患の進行の遅延に役立っている。

【0186】

非特発性肺線維症間質性肺疾患
いくつかの実施形態では、本開示は、非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ ＩＬＤ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。非特発性肺線維症間質性肺疾患（ｎｏｎ－ＩＰＦ）は、ガス交換障害をもたらす、肺間質の炎症および線維症を引き起こす。ｎｏｎ－ＩＰＦの推定有病率は、１００，０００人当たり２５～７４人に及ぶと推定される。２００を超えるｎｏｎ－ＩＰＦの原因が知られており、それらは典型的に、職業曝露および環境曝露、過敏性肺臓炎を引き起こす有機物質、薬物誘発性肺毒性、結合組織疾患、および全身性疾患として分類することができる。

【0187】

ｎｏｎ－ＩＰＦの病因は、損傷の段階（例えば、遠位の気腔への再発性および直接的上皮／内皮傷害、ならびに肺胞－毛細血管基底膜の破壊）、マクロファージによる炎症促進性サイトカインおよびケモカイン（例えば、トランスフォーミング増殖因子β）の放出によって引き起こされる炎症、および修復（例えば、筋線維芽細胞の形成ならびに線維性タンパク質、および細胞外マトリックスを形成する基質の分泌）を含む、２００を超える公知の原因のいずれか１つから生じるｎｏｎ－ＩＰＦ間で同様である。しかしながら、このプロセスを経時的に繰り返すと、肺実質の肥厚および不可逆的な線維化の継続につながる。

【0188】

疾患の治療および管理は、支持療法、酸素補給、および特定の状態において、コルチコステロイドを含む。肺移植は、重篤または進行性の症例における選択肢として考えられ得る。死亡率は、ｎｏｎ－ＩＰＦの急性増悪中に１００％もの高さになり得る。

【0189】

気腫合併肺線維症
いくつかの実施形態では、本開示は、気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）は、呼吸困難、上葉肺気腫、下葉肺線維症、およびガス交換の異常を特徴とする。ＣＰＦＥは、肺高血圧症、急性肺傷害、および肺癌によってさらに複雑化する可能性がある。線維症または気腫のみを診断するために使用される肺機能検査（ＰＦＴ）とは異なるＰＦＴを使用して、ＣＰＦＥを診断する。さらに、ＨＲＣＴスキャンを使用して、気腫および肺線維症の同時発生を検出することができる。

【0190】

ＣＰＦＥは、喫煙、アスベストおよび鉱物ダストへの曝露、過敏性肺臓炎（または農夫肺）、ならびに男性であることに関連付けられており、著しい死亡率を有する。生存率期間中央値は２．１～８．５年の範囲であり、肺高血圧症が存在する場合、１年生存率はわずか６０％である。この相違にもかかわらず、支持療法（例えば、禁煙）以外のＣＰＦＥの具体的な治療法はない。

【0191】

肺疾患に関連する肺高血圧症の診断
肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の診断は、機能グループを含み、血行動態および他の基準が満たされているかどうかを判定するための包括的なパラメータセットのレビューを使用して、症状および身体的検査に基づいて決定することができる。考慮され得る基準のいくつかには、患者の臨床症状（例えば、息切れ、疲労、脱力感、狭心症、失神、乾性咳、運動誘発性悪心および嘔吐）、心電図（ＥＣＧ）の結果、胸部Ｘ線写真の結果、肺機能検査、動脈血ガス、心エコー検査の結果、換気／灌流肺スキャンの結果、高分解能ＣＴの結果、造影ＣＴの結果、肺血管造影の結果、心臓磁気共鳴画像法、血液検査（例えば、ＢＮＰまたはＮＴ－ｐｒｏＢＮＰなどのバイオマーカー）、免疫学、腹部超音波スキャン、右心カテーテル処置（ＲＨＣ）、血管反応性、および遺伝子検査が含まれる。Ｇａｌｉｅ Ｎ．，ｅｔ ａｌ Ｅｕｒｏ Ｈｅａｒｔ Ｊ．（２０１６）３７，６７－１１９．
肺疾患に関連する肺高血圧症（グループ３肺高血圧症）の診断は、肺高血圧症を有する人に慢性肺疾患および／または低酸素血症が存在する場合に決定され、代替的な肺高血圧症の原因を特定することはできない。臨床評価および心エコー結果に基づいてグループ３肺高血圧症とすることができ、右心カテーテル処置によって確定的に確認することができる。肺疾患に関連する肺高血圧症は、他の種類の肺高血圧症と症候的および病因的に重複するが、いくつかの特徴がこのグループを他のグループと区別する（例えば、中等度～重度の障害（ＣＯＰＤ患者ではＦＥＶ_１＜６０％、肺線維症患者ではＦＶＣ＜７０％）、肺障害の特徴的なイメージングまたは睡眠障害の睡眠ポリグラフ検査所見、呼気予備量の減少、正常な酸素パルス、正常値の下限を超えた混合静脈酸素飽和度、および（特にＣＯＰＤにおける）運動中の二酸化炭素の動脈分圧の上昇、ならびに心エコー検査または右心カテーテル処置における軽度～中等度の肺高血圧症の存在）。

【0192】

グループ３ ＰＨの測定値
様々な肺血行動態パラメータは、疾患の進行および治療プロトコルに対する患者の応答性を評価するのに役立つ。典型的には、これらのパラメータは、心臓および肺血管系を通る血流を説明または評価する。肺血行動態パラメータの例には、平均肺動脈圧（ｍＰＡＰ）、拡張期肺動脈圧（ｄＰＡＰ）［肺動脈拡張期圧（ＰＡＤＰ）としても知られる］、収縮期肺動脈圧（ｓＰＡＰ）［肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）としても知られる］、平均右心房圧（ｍＲＡＰ）、肺毛細血管楔入圧（ＰＣＷＰ）［肺動脈楔入圧（ＰＡＷＰ）としても知られる］、肺血管抵抗（ＰＶＲ）および心拍出量（ＣＯ）が含まれるが、これらに限定されない。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、以下のパラメータの１つ以上を変更または改変する方法に関する：
ａ）右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を低下させる；
ｂ）ｍＰＡＰを低下させる
ｃ）ｍＲＡＰを低下させる；
ｄ）ＰＶＲの低下させる；
ｅ）拡張期圧較差（ＤＰＧ）を減少させる；
ｆ）ＢＮＰレベルを低下させる；
ｇ）ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを低下させる；
ｈ）平滑筋肥大を減少させる；
ｉ）患者のＣＡＭＰＨＯＲスコアを減少させる；
ｊ）心室機能を改善する；
ｋ）右室肥大を減少させる；
ｌ）心係数を増加させる；
ｍ）心拍出量を増加させる；
ｎ）複合生理学的指標を減少させる；
ｏ）動脈酸素飽和度を増加させる；
ｐ）運動耐容能を増加させる；
ｑ）努力呼気量を増加させる；
ｒ）努力肺活量（ＦＶＣ）を増加させる；
ｓ）ＤＬ_ＣＯを増加させる；
ｔ）肺線維症を軽減する；および／または
ｕ）患者の無移植での生存率を増加させる。

【0193】

ｍＰＡＰ
肺血圧は通常、全身血圧よりもはるかに低い。正常な肺動脈圧は、典型的には安静時に８～２０ｍｍＨｇである。肺動脈内の圧力が安静時に２５ｍｍＨｇ超または身体活動中に３０ｍｍＨｇ超である場合、それは異常に高く、肺高血圧症として特徴付けられる。

【0194】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のｍＰＡＰを少なくとも１０％下げる方法に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも１７ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも２０ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも２５ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、２５～３４ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも３０ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも３５ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも４０ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも４５ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも５０ｍｍＨｇのｍＰＡＰを有する患者に関する。

【0195】

いくつかの実施形態では、方法は、２１～２４ｍｍＨｇのｍＰＡＰおよび少なくとも３Ｗｏｏｄ単位のＰＶＲを有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰを有し、心係数（ＣＩ）が２．０Ｌ／分／ｍ^２未満である患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、２５ｍｍＨｇ超のｍＰＡＰを有し、ＣＩが２．５Ｌ／分／ｍ^２未満である患者に関する。

【0196】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも１０％（例えば、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または少なくとも５０％）低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも１５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも２０％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも２５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも３０％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも３５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも４０％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも４５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＰＡＰを少なくとも５０％低下させることに関する。

【0197】

いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＰＡＰを少なくとも３ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも５ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも７ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも１０ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも１２ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも１５ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも２０ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを少なくとも２５ｍｍＨｇ低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを１７ｍｍＨｇ未満まで低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを２０ｍｍＨｇ未満まで低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを２５ｍｍＨｇ未満まで低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ｍＰＡＰを３０ｍｍＨｇ未満まで低下させることに関する。

【0198】

ｍＲＡＰ
右心房圧（ＲＡＰ）は、心臓の右心房内の血圧である。ＲＡＰは、心臓に戻る血液の量および血液を動脈系に圧送する心臓の能力を反映する。正常な右心房圧は、典型的には２ ｍｍＨｇ～６ ｍｍＨｇである。右心房圧の上昇は右室（ＲＶ）負荷を反映し、確立された危険因子である。

【0199】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のｍＲＡＰを少なくとも１０％下げる方法に関する。

【0200】

いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも５ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも６ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも８ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも１０ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも１２ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも１４ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも１６ｍｍＨｇの平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平均右心房圧（ｍＲＡＰ）を改善する。いくつかの実施形態では、ｍＲＡＰの改善は、ｍＲＡＰの低下である。

【0201】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも３０％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも３５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも４０％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも４５％低下させることに関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のｍＲＡＰを少なくとも５０％低下させることに関する。

【0202】

いくつかの実施形態では、方法は、ｍＲＡＰを少なくとも１ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも２ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも３ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも４ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも５ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも６ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも７ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも８ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも９ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１０ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１１ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１２ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１３ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１４ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者においてｍＲＡＰを少なくとも１５ｍｍＨｇ低下させる。

【0203】

ＰＶＲ
血管抵抗は、血液を循環系に押し通し、流れを作り出すために克服しなければならない抵抗である。肺血管抵抗は、肺動脈から左心房への血流に対する抵抗である。総血流は心拍出量（５～６Ｌ／分）を意味する。従来の単位を使用した肺血管抵抗の正常値は、０．２５～１．６ｍｍＨｇ 分／ｌである。肺血管抵抗は、ダイン／秒／ｃｍ５の単位で表すこともできる（正常＝３７～２５０ダイン／秒／ｃｍ５）。ＰＶＲの増加に寄与する因子の１つは低酸素血症である。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のＰＶＲを少なくとも１０％下げる方法に関する。

【0204】

いくつかの実施形態では、患者は、３Ｗｏｏｄ単位以上の肺血管抵抗（ＰＶＲ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＶＲを少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態において、方法は、ＰＶＲを３Ｗｏｏｄ単位未満に低下させる。

【0205】

ＤＰＧ
肺動脈の拡張期圧較差、ＤＰＧは、歴史的に、拡張期肺動脈圧と楔入圧との間の差を決定するために使用されてきた。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のＤＰＧを少なくとも１０％下げる方法に関する。

【0206】

いくつかの実施形態では、患者は、７ｍｍＨｇを超える拡張期圧較差（ＤＰＧ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも７ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１５ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２５ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３５ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも４０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも４５ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも５０ｍｍＨｇのＤＰＧを有する。

【0207】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも１０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも１５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも２０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも２５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも３０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも３５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも４０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも４５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを少なくとも５０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＰＧを７ｍｍＨｇ未満に低下させる。

【0208】

ＢＮＰ
脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）およびＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは、心内圧上昇による心房および心室の膨張のマーカーである。ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）は、症状の重症度に基づいて、うっ血性心不全（ＣＨＦ）の４段階機能分類システムを開発した。研究により、循環ＢＮＰおよびＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの測定濃度は、ＮＹＨＡ分類に基づくＣＨＦの重症度とともに増加することが実証された。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のＢＮＰレベルを下げる方法に関する。

【0209】

いくつかの実施形態では、患者は、健康な患者（例えば、同様の年齢および性別の健常者）と比較して上昇したＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は正常なＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１５０ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも４００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも５００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも５０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１０，０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１５，０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２０，０００ｐｇ／ｍＬのＢＮＰのレベルを有する。

【0210】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも５５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも６０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも６５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも７０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも７５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを少なくとも８０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＮＰレベルを正常レベル（すなわち、１００ｐｇ／ｍｌ未満）まで低下させる。

【0211】

ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを下げる方法に関する。

【0212】

いくつかの実施形態では、患者は、健康な患者（例えば、同様の年齢および性別の健常者）と比較して上昇したＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態において、患者は、正常なＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１５０ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも４００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも５００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも３０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも５０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１０，０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも１５，０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２０，０００ｐｇ／ｍＬのＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを有する。

【0213】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも５５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも６０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも６５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも７０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも７５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも８０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルを正常レベルまで低下させる。いくつかの実施形態では、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの正常レベルは１００ｐｇ／ｍｌ未満である。

【0214】

平滑筋肥大
ＣＯＰＤを有する患者は、気道壁の肥厚および気流閉塞をもたらす、主に小気道での気道壁リモデリングを頻繁に経験する。同様に、平滑筋細胞の増加および気道周囲の平滑筋層の肥厚を特徴とする気管支平滑筋肥大は、慢性喘息に似た疾患状態における気道壁リモデリングの特徴である。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、平滑筋肥大を減少させる方法に関する。

【0215】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも１０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも１５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも２０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも２５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも３０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも３５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも４０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも４５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の平滑筋肥大を少なくとも５０％減少させる。

【0216】

生活の質
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の生活の質を向上させる方法に関する。

【0217】

いくつかの実施形態では、患者の生活の質は、ケンブリッジ肺高血圧転帰レビュー（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｒｅｖｉｅｗ：ＣＡＭＰＨＯＲ）を使用して測定される。ＣＡＭＰＨＯＲは、肺高血圧症患者の生活の質を評価する、疾患特有の患者報告転帰尺度である。ＣＡＭＰＨＯＲの３つの局面が、症状、機能、および生活の質を評価する。生活の質（ＱｏＬ）スケールは、社会化、役割、承認、自尊心、自立性、および安全性に焦点を合わせた２５の項目を有する。同様に、症状局面は、活力、息切れ、および気分の３つのサブスケールに分類された２５の症状からなる。活動スケールは１５項目である。ＱｏＬおよび症状のスコアは０～２５にの範囲であり、スコアが高いほど生活の質が悪いことを示す。活動スコアは０～３０の範囲であり、高いスコアが高いほど身体的制約が多いことを示す。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも１％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも２％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも３％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも４％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも５５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも６０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも６５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも７０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも７５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも８０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも８５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも９０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも９５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の生活の質（ＱｏＬ）スコアを少なくとも１００％低下させる。いくつかの実施形態では、患者の生活の質は、ケンブリッジ肺高血圧転帰レビュー（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｒｅｖｉｅｗ：ＣＡＭＰＨＯＲ）を使用して測定されるように向上する。

【0218】

心室機能
特定の態様では、本開示は、心室機能（例えば、左室機能または右室機能）を改善または維持する方法に関する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室機能を改善する。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、右室面積変化率の増加によるものである。いくつかの実施形態では、右室機能の改善は、右室肥大の減少によるものである。いくつかの実施形態では、駆出率が改善される。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を改善する。

【0219】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の診断試験および方法に関する。心エコー検査は、患者の肺高血圧症の重症度を判定するための有用な非侵襲的スクリーニングツールである。心室機能（例えば、左室機能または右室機能）の改善または維持は、多くの心エコー測定値によって評価することができる。心室機能を評価するためのそのような定量的アプローチの１つは、三尖弁輪収縮期移動距離（ＴＡＰＳＥ）の測定である。ＴＡＰＳＥは、尖端部に向かう外側三尖弁輪の収縮期可動域のレベルを測定することによってＲＶ収縮期の機能を推定する。心室機能の維持および／または改善を評価するために使用され得る他の心エコー測定値には、右室面積変化率（ＲＶＦＡＣ）、右室拡張末期面積（ＲＶＥＤＡ）、右室収縮末期面積（ＲＶＥＳＡ）、右室自由壁厚（ＲＶＦＷＴ）、右室駆出率（ＲＶＥＦ）、右室－肺動脈（ＲＶ－ＰＡ）カップリング、肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）、肺動脈加速時間（ＰＡＡＴ）、三尖弁逆流速度（ＴＲＶ）、左室肥大および右室肥大が含まれるが、これらに限定されない。

【0220】

ＴＡＰＳＥ
三尖弁輪収縮期移動距離（ＴＡＰＳＥ）は、心エコー検査を使用して得ることができ、ＲＶ長軸方向機能の尺度を表す。ＴＡＰＳＥは、ＲＶ全体的収縮機能を推定するパラメータと良好な相関を有することが以前に示されている。１７ｍｍ未満のＴＡＰＳＥは、ＲＶ収縮機能不全を強く示唆する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は２０ｍｍ未満のＴＡＰＳＥを有する。いくつかの実施形態では、患者は１８ｍｍ未満のＴＡＰＳＥを有する。いくつかの実施形態では、患者は１６ｍｍ未満のＴＡＰＳＥを有する。いくつかの実施形態では、患者は１４ｍｍ未満のＴＡＰＳＥを有する。いくつかの実施形態では、患者は１２ｍｍ未満のＴＡＰＳＥを有する。

【0221】

いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２０ｍｍまで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２２ｍｍまで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２４ｍｍまで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２６ｍｍまで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも２８ｍｍまで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＴＡＰＳＥを少なくとも３０ｍｍまで増加させる。

【0222】

ＰＡＳＰおよびＲＶＳＰ
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を少なくとも１０％低下させる方法に関する。

【0223】

いくつかの実施形態では、ＰＡＳＰは安静時ＰＡＳＰである。いくつかの態様では、ＰＡＳＰは、三尖弁逆流速度（ＴＲＶ）および右動脈（ＲＡ）圧を使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＰＡＳＰは、以下の式を使用して決定される。

【0224】

ＰＡＳＰ＝ＴＲＶ^２×４＋ＲＡ圧
ＴＲＶは、安静時および運動時のＰＡＳＰと相関することが示されている。右室と右房との間の圧較差は、修正ベルヌーイ方程式（Δｐ＝４Ｖ^２）を使用して計算することができる。

【0225】

いくつかの実施形態では、右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）はＰＡＳＰに等しい。いくつかの実施形態では、ＲＶＳＰは、右室流出路閉塞の非存在下で測定される。いくつかの実施形態では、ＲＶＳＰは、以下の式を使用して決定される。

【0226】

ＲＶＳＰ＝４Ｖ^２＋ＲＡＰ
上式において、Ｖは三尖逆流ジェット速度のピークを表し、ＲＡＰは平均右心房圧である。ＲＶＳＰは、ＰＡＳＰを推定するために頻繁に使用される。

【0227】

いくつかの実施形態では、患者は、３５ｍｍＨｇを超える右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを少なくとも５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＲＶＳＰを２５ｍｍＨｇ未満まで低下させる。

【0228】

いくつかの実施形態では、患者は、２０ｍｍＨｇを超える肺動脈収縮期圧（ＰＡＳＰ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、２５ｍｍＨｇを超えるＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも３５ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも４０ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも５０ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも５５ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも６０ｍｍＨｇのＰＡＳＰを有する。

【0229】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも５０％低下させる。

【0230】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも５ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも１０ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも１５ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも２０ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを少なくとも２５ｍｍＨｇ低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを２５ｍｍＨｇ未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＰＡＳＰを２０ｍｍＨｇ未満に低下させる。

【0231】

右室肥大
右室肥大（ＲＶＨ）は、最も一般的には重度の肺疾患に起因する、圧負荷に応答した右室の筋肉量の病的な増加である。肺高血圧症によるＲＶＨの症状には、労作性胸痛、末梢浮腫、労作性失神、および右上腹部痛が含まれる。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症の治療、予防、または進行速度および／もしくは重症度の低減の方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供に関する。

【0232】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも１０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも１５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも２０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも２５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも３０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも３５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも４０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも４５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の右室肥大を少なくとも５０％減少させる。

【0233】

心係数
心係数（ＣＩ）は、患者の体格に基づく心拍出量の評価である。心拍出量および心係数の両方は、心臓が十分な血液を送り出しているか、および細胞に十分な酸素を送達しているかどうかを判定するのに重要である。心係数は、異なる体格の個体間での心機能の比較を可能にする。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、心係数を増加させる方法に関する。

【0234】

いくつかの実施形態では、患者は、２．５Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数を有する。いくつかの実施形態では、患者は、２．０Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数を有する。いくつかの実施形態では、患者は、１．５Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数を有する。いくつかの実施形態では、患者は、１．０Ｌ／分／ｍ^２未満の心係数を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも０．２Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも０．４Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも０．６Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも０．８Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１．２Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１．４Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１．６Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも１．８Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも２Ｌ／分／ｍ^２増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＩを少なくとも２．５Ｌ／分／ｍ^２に増加させる。

【0235】

心拍出量
一般に、安静時の正常な心拍出量は約２．５～４．２Ｌ／分／ｍ２であり、心拍出量は正常の範囲を逸脱することなく、およそ４０％減少してもよい。約２．５Ｌ／分／ｍ２未満の低い心係数は、一般に心血管機能の障害を示す。心拍出量を利用して、心係数を計算することができる（例えば、心係数＝心拍出量／体表面積）。心拍出量を利用して、１回拍出量を計算することもできる（例えば、１回拍出量＝ＣＯ／心拍数）。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、心拍出量を増加させる方法に関する。

【0236】

いくつかの実施形態では、患者の心拍出量は４Ｌ／分未満である。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも０．５Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも１Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも１．５Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも２Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも２．５Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも３Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも３．５Ｌ／分増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の心拍出量を少なくとも４Ｌ／分増加させる。

【0237】

複合生理学的指標（ＣＰＩ）
複合生理学的指標（ＣＰＩ）を使用して、肺線維症の程度を決定することができる。線維性肺疾患（例えば、特発性肺線維症）の臨床経過を予測することは困難である。ＣＰＩモデルは、線維性疾患の進行の予測因子として使用することができる。特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、複合生理学的指標を低下させる方法に関する。

【0238】

いくつかの実施形態では、患者は、１５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は２０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は２５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は３０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は３５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は４０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は４５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は５０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は５５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は６０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は６５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は７０を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は７５を超えるＣＰＩを有する。本明細書の方法のいくつかの実施形態では、患者は８０を超えるＣＰＩを有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＣＰＩを５０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを７０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを６５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを６０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを５５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを５０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを４５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを４０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを３５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを３０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを２５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを２０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを１５未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを１０未満に低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＰＩを５未満に低下させる。

【0239】

安静時の酸素飽和度
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、動脈酸素飽和度を増加させる方法に関する。

【0240】

いくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は９５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は９０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は８５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は８０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は７５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は７０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は６５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は６０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は５５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は５０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は４５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は４０％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は３５％未満である。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者の動脈酸素飽和度は３０％未満である。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも５％増加させる。

【0241】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも８５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも９０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の動脈酸素飽和度を少なくとも９５％増加させる。いくつかの実施形態では、動脈酸素飽和度は、安静時に測定される。

【0242】

運動耐容能（６ＭＷＤおよびＢＤＩ）
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の運動耐容能を増加させる方法に関する。

【0243】

運動耐容能の任意の適切な尺度を使用することができる。例えば、対象が６分間で歩くことができる距離、すなわち６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を測定する６分間歩行試験（６ＭＷＴ）での運動耐容能は、肺高血圧症の重症度および疾患の進行を評価するために頻繁に使用される。ＢＤＩは、知覚された呼吸困難（呼吸の不快感）を評価するための数値スケールであり、運動耐容能を測定するために使用され得る。これは、例えば、６ＭＷＴの完了後に、息切れの程度を測定し、ＢＤＩの０は息切れ無しを示し、１０は最大の息切れを示す。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に５５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に５５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に５００メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に４５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に４００メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に３５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に３００メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に２００メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、治療前に１５０メートル未満の６分間歩行距離（６ＭＷＤ）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも２０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも２５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも３０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも３５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも４０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも４５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも５０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも５５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも６０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも６５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも７０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも７５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも８０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも８５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも９０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも９５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１００メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１２５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１５０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも１７５メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも２００メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも２５０メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも３００メートル増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の６ＭＷＤを少なくとも４００メートル増加させる。

【0244】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の運動耐容能を増加させる。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも０．５の指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも１指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも１．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも２指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも２．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも３指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも３．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも４指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも４．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも５．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも６指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも６．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも７指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも７．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも８指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも８．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも９指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも９．５指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、患者は、ボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を少なくとも１０指数ポイントで有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のボルグ呼吸困難指数（ＢＤＩ）を低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも０．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも１指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも１．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも２指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも２．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも３指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも３．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも４指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも４．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも５．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも６指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも６．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも７指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも７．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも８指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも８．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも９指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも９．５指数ポイント減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＢＤＩを少なくとも１０指数ポイント減少させる。

【0245】

肺機能試験
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の肺機能を改善する方法に関する。

【0246】

肺活量測定または呼吸の測定は、対象が吸入し、吐き出す空気の量および／または速度（流量）を判定することができる主要な肺機能試験である。肺活量計は、他の特性の中でもとりわけ、努力呼気量（ＦＥＶ）試験において（予測されるリットルおよび／またはパーセンテージ単位で測定される）努力肺活量（ＦＶＣ）を測定するために使用される。ＦＥＶ試験では、対象は深く吸息し、できるだけ長く（例えば、少なくとも６秒）センサ内に吐き出す。肺活量測定を使用して吸息を試験することもできる。ＦＥＶ試験は、通常、精度を確保するために少なくとも３回繰り返される。ＦＶＣの「正常」範囲は、典型的には、予測の８０％～１００％であると考えられる。「予測の」とは、対象の結果を、同様の特徴（例えば、身長、性別、年齢、人種、体重）を有する健康な対象の既知の予測値のパーセンテージとして報告することを指す。得ることができる他の測定値には、ＦＶＣが努力呼気の最初の１秒以内に測定されるＦＥＶ_１、および／または努力呼気の途中部分の間に肺から出る空気の流量を測定する努力呼気流量（ＦＥＦ）が含まれるが、これらに限定されない。ＦＥＶ_１／ＦＶＣ比も典型的に計算される。

【0247】

本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は、７０％を超える努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）を有する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は、６０％～６９％の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）を有する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は、５０％～５９％の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）を有する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は、３５％～４９％の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）を有する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、患者は、３５％未満の努力肺活量一秒量（ＦＥＶ_１）を有する。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＥＶ_１を少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも６０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも６５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも７０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも７５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも８０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも８５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも９０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＥＶ_１を少なくとも９５％まで増加させる。

【0248】

いくつかの実施形態では、患者は、８０％を超える努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、７０％を超える努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。

【0249】

いくつかの実施形態では、患者は、６０％～６９％の努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、５０％～５９％の努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、３５％～４９％の努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、３５％未満の努力肺活量（ＦＶＣ）を有する。

【0250】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＦＶＣを少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも６０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも６５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも７０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも７５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも８０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも８５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも９０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＦＶＣを少なくとも９５％まで増加させる。

【0251】

一酸化炭素移動係数Ｋｃｏ
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の一酸化炭素拡散能を増加させる方法に関する。

【0252】

一酸化炭素拡散能またはＤＬ_ＣＯは、肺活量測定および肺容量評価と併せて使用して、根底にある肺疾患を診断することができる（例えば、ＤＬ_ＣＯの減少に関連する正常な肺活量測定および肺容量は、貧血、肺血管障害、早期ＩＬＤまたは早期気腫を示唆する場合がある）。いくつかの実施形態では、患者は、６０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、５５％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、５０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、４５％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、４０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、３５％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、３０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、２５％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。いくつかの実施形態では、患者は、２０％未満の一酸化炭素拡散能（ＤＬ_ＣＯ）を有する。

【0253】

いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者のＤＬ_ＣＯを少なくとも５０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも４０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも４５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも５０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも５５％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも６０％まで増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＤＬ_ＣＯを少なくとも６５％まで増加させる。

【0254】

肺線維症
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の肺線維症を減少させる方法に関する。

【0255】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも１０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも１５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも２０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも２５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも３０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも３５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも４０％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも４５％減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の肺線維症を少なくとも５０％減少させる。

【0256】

無移植生存率
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、患者の無移植生存率を増加させる方法に関する。

【0257】

いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも１０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも１５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも２０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも２５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも３０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも３５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも４０％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも４５％増加させる。いくつかの実施形態では、方法は、患者の無移植生存率を少なくとも５０％増加させる。

【0258】

死亡
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含み、死亡のリスクを下げる方法に関する。

【0259】

いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも１０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも１５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも２０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも２５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも３０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも３５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも４０％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも４５％低下させる。いくつかの実施形態では、方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する死亡のリスクを少なくとも５０％低下させる。

【0260】

併用療法
場合により、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減するための、特に肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）の１つ以上の合併症の治療、予防またはその進行速度および／もしくは重症度を低減するための開示された方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための１つ以上の支持療法または追加の活性剤を患者に投与することをさらに含み得る。例えば、患者はまた、ナイトレート、ヒドララジン、ピリドン（例えば、ピルフェニドン）、小分子チロシン－キナーゼ阻害剤（例えば、ニンテダニブ）、プロスタサイクリンおよびその誘導体（例えば、エポプロステノール、トレプロスチニル、およびイロプロスト）；プロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、セレキシパグ）；エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、テリン、アンブリセンタン、マシテンタン、ダルセンタンおよびボセンタン）；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、アムロジピン、ジルチアゼムおよびニフェジピン；抗凝固剤（例えば、ワルファリン）；利尿薬；酸素療法；心房中隔切開術；肺血栓内膜摘出術；ホスホジエステラーゼ５型阻害剤（例えば、シルデナフィルおよびタダラフィル）；可溶性グアニル酸シクラーゼのアクチベーター（例えば、シナシグアト、ベルイシグアトおよびリオシグアト）；ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＣＩＩＡ；ＳＣＨ７９７９７；ＧＳ－４９９７；ＭＳＣ２０３２９６４Ａ；３Ｈ－ナフト［１，２，３－ｄｅ］キニリン－２，７－ジオン、ＮＱＤＩ－１；２－チオキソ－チアゾリジン、５－ブロモ－３－（４－オキソ－２－チオキソ－チアゾリジン－５－イリデン）－１，３－ジヒドロ－インドール－２－オン）；ＮＦ－κＢ拮抗薬（例えば、ｄｈ４０４、ＣＤＤＯ－エポキシド；２．２－ジフルオロプロピオンアミド；Ｃ２８イミダゾール（ＣＤＤＯ－Ｉｍ）；２－シアノ－３，１２－ジオキソオレアン－１，９－ジエン－２８－オイック酸（ＣＤＤＯ）；３－アセチルオレアノール酸；３－トリフルオロアセチルオレアノール酸；２８－メチル－３－アセチルオレアナン；２８－メチル－３－トリフルオロアセチルオレアナン；２８－メチルオキシオレアノール酸；ＳＺＣ０１４；ＳＣＺ０１５；ＳＺＣ０１７；オレアノール酸のＰＥＧ化誘導体；３－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［β－Ｄ－グルコピラノシル－（１－－＞２）－β－Ｄ－グルコピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；３－Ｏ－［ａ－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸；３－Ｏ－［α－Ｌ－ラムノピラノシル－（１－－＞３）－β－Ｄ－グルクロノピラノシル］オレアノール酸２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシルエステル；２８－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル－オレアノール酸；３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ１）；オレアノール酸３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→３）－β－Ｄ－グルコピラノシドウロン酸（ＣＳ２）；メチル３，１１ジオキソオレアン－１２－エン－２８－オレート（ＤＩＯＸＯＬ）；ＺＣＶＩ_４－２；ベンジル３－デヒドロ－オキシ－１，２，５－オキサジアゾロ［３’，４’：２，３］オレノレート）；、酸素療法、肺および／または心臓移植からなる群から選択される１つ以上の支持療法または活性剤を投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者にピルフェニドンを投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される方法は、ニンテダニブを患者に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者に経口プロスタサイクリンを投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための１つの追加の支持療法または追加の活性剤（すなわち、二重療法）を患者に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための２つの追加の支持療法または追加の活性剤（すなわち、三重療法）を患者に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための３つの追加の支持療法または追加の活性剤（すなわち、四重療法）を患者に投与することをさらに含み得る。

【0261】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、アンジオテンシン拮抗薬（例えば、アンジオテンシン受容体遮断薬、ＡＲＢ）を患者に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、患者は、ロサルタン、イルベサルタン、オルメサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、フィマサルタン、アジルサルタン、サルプリサルタンおよびテルミサルタンからなる群から選択される１つまたは複数のＡＲＢをさらに投与される。いくつかの実施形態では、患者にロサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にイルベサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にオルメサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にカンデサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にバルサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にフィマサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にアジルサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にサルプリサルタンを投与する。いくつかの実施形態では、患者にテルミサルタンを投与する。

【0262】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者に１つ以上のＡＣＥ阻害剤を投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＡＣＥ阻害剤は、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ペリンドプリル、ラミプリル（例えば、ラミペン）、トランドラプリルおよびゾフェノプリルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、患者にベナゼプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にカプトプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にエナラプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にリシノプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にぺリンドプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にラミプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にトランドラプリルを投与する。いくつかの実施形態では、患者にゾフェノプリルを投与する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者にＡＲＢおよびＡＣＥ阻害剤を投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、アンジオテンシン拮抗作用への代替アプローチは、ＡＣＥ阻害剤および／またはＡＲＢをアルドステロン拮抗薬と組み合わせることである。

【0263】

いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための１つ以上の支持療法または追加の活性剤は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与の前に投与される。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための１つ以上の支持療法または追加の活性剤は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）を治療するための１つ以上の支持療法または追加の活性剤は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与の後に投与される。

【0264】

機能分類
ベースライン時の肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）は、例えば、肺高血圧症を有する患者における疾患重症度の尺度である世界保健機関（ＷＨＯ）の機能分類によって測定される場合、軽度、中等度または重度であり得る。ＷＨＯ機能分類は、ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）システムの適応であり、活動耐性を性質的に評価するために、例えば、疾患の進行および治療に対する応答の監視において慣例的に使用されている（Ｒｕｂｉｎ（２００４）Ｃｈｅｓｔ １２６：７－１０）。ＷＨＯシステムでは、以下の４つの機能分類が認定されている：機能分類Ｉ：身体活動の制限をもたらさない肺高血圧症；通常の身体活動では、過度の呼吸困難または疲労、胸痛または前失神に至らない；機能分類ＩＩ：身体活動のわずかな制限をもたらす肺高血圧症；患者は安静時には快適であり；通常の身体活動で、過度の呼吸困難もしくは疲労、胸痛または前失神が生じる；機能分類ＩＩＩ：身体活動の著しい制限をもたらす肺高血圧症；患者は安静時には快適であり；通常よりも低度の活動で過度の呼吸困難もしくは疲労、胸痛または前失神が生じる；機能分類ＩＶ：いかなる身体活動の実施も症状をもたらす肺高血圧症；患者は右心不全の徴候を示し；安静時であっても呼吸困難および／または疲労が存在する場合があり；いかなる身体活動によっても不快感が増大する。本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、方法は、世界保健機関（ＷＨＯ）によって認定される、肺高血圧症機能分類の進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類Ｉから分類ＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類ＩＩから分類ＩＩＩ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の機能分類ＩＩＩから分類ＩＶ肺高血圧症への進行を予防または軽減する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、肺高血圧症機能分類の退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＶから分類ＩＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＩＩから分類ＩＩ肺高血圧症への退行を促進または増進する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される肺高血圧症機能分類の分類ＩＩから分類Ｉ肺高血圧症への退行を促進または増進する。

【0265】

いくつかの実施形態では、本開示は、肺高血圧症機能分類の進行を予防または軽減する方法であって、それを必要とする患者に有効量のＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列）を投与することを含む方法に関する。いくつかの実施形態では、機能分類進行の軽減は、機能分類進行の遅延である。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、肺高血圧症機能分類の進行を予防または軽減することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類Ｉ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される機能分類Ｉ肺高血圧症から機能分類ＩＩ肺高血圧症への患者の進行を予防または軽減することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される機能分類ＩＩ肺高血圧症から機能分類ＩＩＩ肺高血圧症への患者の進行を予防または軽減することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩＩ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される機能分類ＩＩＩ肺高血圧症から機能分類ＩＶ肺高血圧症への患者の進行を予防または軽減することに関する。

【0266】

特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）、または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）における肺高血圧症機能分類の退行を促進または増進する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法に関する。いくつかの態様において、患者は、ＷＨＯによって認定される、機能分類Ｉ、機能分類ＩＩ、機能分類ＩＩＩまたは機能分類ＩＶの肺高血圧症を有する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩ肺高血圧症から機能分類Ｉ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩＩ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩＩ肺高血圧症から機能分類ＩＩ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＩＩ肺高血圧症から機能分類Ｉ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＶ肺高血圧症を有する患者に関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＶ肺高血圧症から機能分類ＩＩＩ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＶ肺高血圧症から機能分類ＩＩ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。いくつかの実施形態では、方法は、ＷＨＯによって認定される、機能分類ＩＶ肺高血圧症から機能分類Ｉ肺高血圧症への患者の退行を促進することに関する。

【0267】

いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を４週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を８週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を１２週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を１６週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を２０週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を２２週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を２４週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を２６週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を２８週間受けた後に機能分類の退行を試験する。いくつかの実施形態では、患者が本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用する治療を４８週間受けた後に機能分類の退行を試験する。

【0268】

持続的な治療効果
特定の態様では、本開示は、肺疾患に関連する肺高血圧症の１つ以上の合併症を持続的な様式で治療、予防、またはその進行速度および／もしくは重症度を低減する方法であって、それを必要とする患者に、配列番号１のアミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか１つで始まり、配列番号１のアミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、または１３５のいずれか１つで終わるアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む有効量のポリペプチドを投与することを含む方法を提供に関する。いくつかの実施形態では、持続的な様式は、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与を減らした後の持続的な治療効果を含む。いくつかの実施形態では、持続的な様式は、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与を中止した後の持続的な治療効果を含む。いくつかの実施形態では、持続的な治療効果は、機能的または血液学的測定値を経時的に維持することに関する。いくつかの実施形態では、持続的な治療効果は、ＰＶＲの持続的な減少として測定される。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも１週間～少なくとも１２週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも１週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも２週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも３週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも４週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも５週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも６週間増加しない。いくつかの実施形態では、患者のＰＶＲレベルは、本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩポリペプチド治療の中止後少なくとも１ヶ月～少なくとも６ヶ月間増加しない。

【0269】

特定の態様では、本開示は、患者における肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症）に関連する心肺リモデリングを治療または予防する方法であって、有効量のＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドをそれを必要とする患者に投与することを含む方法に関し、前記方法は、心臓リモデリングを減速させ、かつ／または心臓リモデリングを逆行させる。いくつかの実施形態では、逆行は持続的な逆行である。いくつかの実施形態では、心臓リモデリングは心室リモデリングである。いくつかの実施形態では、心室リモデリングは左室リモデリングである。いくつかの実施形態では、心室リモデリングは右室リモデリングである。いくつかの実施形態では、心臓リモデリングは心室拡張である。いくつかの実施形態では、方法は、心室中隔の拡張末期を減少させる。いくつかの実施形態では、方法は、心室後隔の拡張末期を減少させる。

【0270】

いくつかの実施形態では、心エコー測定値を使用して、持続的な治療効果を評価することができる。いくつかの実施形態では、心エコー測定値は、ＲＶ面積変化率（ＲＶＦＡＣ）、ｓＰＡＰ、三尖弁輪収縮期速度（ＴＡＳＶ）、およびＴｅｉ指数を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドで治療された患者は、持続的な治療効果を示す。いくつかの実施形態では、持続的な治療効果は、左室への腹壁の侵入の減少をもたらす。いくつかの実施形態では、持続的な治療効果は、右室面積変化率（ＲＶＦＡＣ）の増加をもたらす。

【0271】

様々なパラメータの経時的な測定
特定の実施形態では、本明細書に記載される肺高血圧症（例えば、肺疾患に関連する肺高血圧症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患（ＩＬＤ）または気腫合併肺線維症（ＣＰＦＥ）に関連する肺高血圧症））の１つ以上の測定値は、様々な治療期間にわたって測定することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して４週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して８週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して１２週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して１６週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して２０週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して２２週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して２４週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して２６週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して２８週間の治療を受けた後に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の肺高血圧症の測定値の１つまたは複数は、患者が本明細書に開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを利用して４８週間の治療を受けた後に測定される。

【0272】

５．医薬組成物および投与様式
特定の実施形態では、本開示の治療方法は、組成物を全身、またはインプラントもしくは装置として局所に投与することを含む。投与される場合、本開示で使用するための治療用組成物は、実質的にパイロジェンフリー、またはパイロジェンフリーの生理学的に許容される形態である。任意で上記の組成物に含まれていてもよい、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド以外の治療的に有用な薬剤は、本明細書に開示される方法において主題の化合物と同時にまたは連続的に投与され得る。

【0273】

典型的には、本明細書に開示されるタンパク質治療剤は、非経口的に、特に静脈内または皮下に投与される。非経口投与に適した医薬組成物は、１つ以上の薬学的に許容される滅菌等張水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または使用直前に滅菌注射液もしくは分散液に再構成され得る滅菌粉末と組み合わせて１つ以上のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを含み得、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、意図されるレシピエントの血液との等張性を製剤に与える溶質、または懸濁化剤または増粘剤を含み得る。本開示の医薬組成物に使用され得る適切な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）およびそれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用、分散液の場合には必要な粒径の維持、および界面活性剤の使用によって維持することができる。製剤は、アンプルおよびバイアルなど、単位用量または複数用量の密封容器で提供することができ、使用直前に、注射用の滅菌液体賦形剤、例えば水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射溶液および懸濁液は、本明細書に記載の種類の滅菌粉末、顆粒、および錠剤から調製することができる。

【0274】

組成物および製剤は、所望であれば、活性成分を含有する１つ以上の単位剤形を含有し得るパックまたはディスペンサー装置で提供され得る。パックは、例えば、ブリスターパックなどの金属またはプラスチック箔を含むことができる。パックまたはディスペンサー装置は、投与のための説明書を伴うことができる。

【0275】

さらに、組成物は、標的組織部位への送達のための形態にカプセル化または注入され得る。特定の実施形態では、本発明の組成物は、１つ以上の治療化合物（例えばＡｃｔＲＩＩポリペプチド）を標的組織部位に送達することができ、発達する組織のための構造を提供し、最適には体内に再吸収されることが可能なマトリックスを含み得る。例えば、マトリックスはＡｃｔＲＩＩポリペプチドの徐放を提供し得る。そのようなマトリックスは、他の移植医療用途に現在使用されている材料で形成されてもよい。

【0276】

マトリックス材料の選択は、生体適合性、生分解性、機械的特性、美容的な外観および界面特性に基づく。主題組成物の特定の用途は、適切な製剤を定義する。組成物用の可能性あるマトリックスは、生分解性であり、化学的に定義された硫酸カルシウム、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト、ポリ乳酸およびポリ無水物であり得る。他の可能性のある材料は、生分解性であり、生物学的に十分に定義されている、例えば骨または皮膚コラーゲンである。さらなるマトリックスは、純粋なタンパク質または細胞外マトリックス成分から構成される。他の可能性のあるマトリックスは、非生分解性であり、化学的に定義されている、例えば、焼結ヒドロキシアパタイト、バイオガラス、アルミン酸塩または他のセラミックである。マトリックスは、ポリ乳酸とヒドロキシアパタイトまたはコラーゲンとリン酸三カルシウムなど、上記の種類の材料のいずれかの組み合わせから構成されてもよい。バイオセラミックは、リン酸カルシウム－アルミン酸塩などの組成を変更してもよく、プロセシングを変更して細孔径、粒径、粒子形状、および生分解性を変更してもよい。

【0277】

特定の実施形態では、本発明の方法は、それぞれが活性成分として所定量の薬剤を含有する、例えばカプセル、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ（香味基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカントを使用する）、粉末、顆粒の形態で、または水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、または水中油型もしくは油中水型液体エマルジョンとして、またはエリキシル剤もしくはシロップとして、または香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤を使用する）として、および／または洗口剤等として経口的に投与することができる。薬剤はまた、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与されてもよい。

【0278】

経口投与用の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠、粉末、顆粒等）では、１つ以上の本発明の治療化合物を、１つ以上の薬学的に許容される担体、例えばクエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、および／または以下のいずれかと混合することができる：（１）充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸；（２）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシア；（３）保湿剤、例えばグリセロール；（４）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム；（５）溶解抑制剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒｅｔａｒｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、例えばパラフィン；（６）吸収促進剤、例えば４級アンモニウム化合物；（７）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール；（８）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイトクレイ；（９）潤滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物；ならびに（１０）着色剤。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、医薬組成物は緩衝剤も含み得る。同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として使用され得る。

【0279】

経口投与のための液体剤形としては、薬学的に許容され得るエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が挙げられる。活性成分に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、およびそれらの混合物を含有し得る。不活性希釈剤に加えて、経口組成物は、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤、着色剤、芳香剤および保存剤も含むことができる。

【0280】

懸濁液は、活性化合物に加えて、懸濁化剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、およびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、およびそれらの混合物を含有し得る。

【0281】

本発明の組成物はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などのアジュバントを含有し得る。微生物の活動の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含めることによって確実にすることができる。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウムなどを組成物に含めることも望ましい場合がある。さらに、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を含めることによって、注射用医薬形態の遅延吸収をもたらすことができる。

【0282】

投与レジメンは、本開示の主題化合物（例えばＡｃｔＲＩＩポリペプチド）の作用を変更する様々な因子を考慮して、主治医によって決定されることが理解される。様々な因子には、患者の年齢、性別および食事、重症度疾患、投与回数、ならびに他の臨床的因子が含まれるが、これらに限定されない。場合により、投与量は、再構成に使用されるマトリックスの種類および組成物中の化合物の種類によって異なり得る。いくつかの実施形態では、患者の血液学的パラメータは、正常な赤血球レベルおよび／またはヘモグロビンレベル（例えば、ヘモグロビンレベル＞１６．０ｇ／ｄＬまたはヘモグロビンレベル＞１８．０ｇ／ｄＬ）よりも高いかどうかを判定するために、定期的な評価によって監視することができる。いくつかの実施形態では、正常な赤血球レベルおよび／またはヘモグロビンレベルよりも高い患者は、レベルが正常または許容可能なレベルに戻るまで、遅延または低減された用量を受けることができる。

【0283】

患者が１８ｇ／ｄＬを超えるヘモグロビンレベルまたは２ｇ／ｄＬを超えるヘモグロビンの増加を有する可能性は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドでの初期治療中に上昇する場合がある。特定の実施形態では、投薬レジメンを使用して、ヘモグロビンレベルの有害な変化を予防、改善、または減少させることができる。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドは、投薬レジメンを使用して投与される。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの、第１の期間のための０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇの前記ポリペプチドの第１の用量、および続いて第２の期間に投与される０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇの前記ポリペプチドの第２の用量を含む、治療有効量の投薬レジメンを患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの、第１の期間のための０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇの前記ポリペプチドの第１の用量、第２の期間に投与される０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇの前記ポリペプチドの第２の用量、および続いて第３の期間に投与される０．１ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋｇの前記ポリペプチドの第３の用量を含む、治療有効量の投薬レジメンを患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第１の用量は、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約０．４ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第１の用量は、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第２の用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約０．８ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第２の用量は、０．７ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第３の用量は、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約０．４ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの第３の用量は、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される。

【0284】

いくつかの実施形態では、投薬レジメンは、第１の用量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与し、引き続いて第２の用量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．７ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、投薬レジメンは、第１の用量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与すること、第２の用量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．７ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与すること、および第３の用量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇの量で患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、第２の用量は第１の用量を超える。いくつかの実施形態では、第１の用量は第２の用量を超える。いくつかの実施形態では、第３の用量は第２の用量を超える。いくつかの実施形態では、第２の用量は第３の用量を超える。いくつかの実施形態では、第１の期間は少なくとも３週間である。いくつかの実施形態では、第２の期間は少なくとも３週間である。いくつかの実施形態では、第３の期間は少なくとも３週間である。いくつかの実施形態では、第２の期間は少なくとも２１週間である。いくつかの実施形態では、第２の期間は少なくとも４５週間である。いくつかの実施形態では、第２の期間は第１の期間を超える。いくつかの実施形態では、第３の期間は第１の期間を超える。いくつかの実施形態では、第３の期間は第２の期間を超える。

【0285】

いくつかの実施形態では、第１の用量と第２の用量との間の投与量の変化は、様々な因子（例えば、ヘモグロビンレベル）を考慮して主治医によって決定される。いくつかの実施形態では、第２の用量と第３の用量との間の投与量の変化は、様々な因子（例えば、ヘモグロビンレベル）を考慮して主治医によって決定される。いくつかの実施形態では、様々な因子には、一定期間にわたる患者の血液学的パラメータの変化が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、患者の血液学的パラメータは、正常な赤血球レベルおよび／またはヘモグロビンレベル（例えば、ヘモグロビンレベル＞１６．０ｇ／ｄＬまたはヘモグロビンレベル＞１８．０ｇ／ｄＬ）よりも高いかどうかを判定するために監視される。いくつかの実施形態では、患者の血液学的パラメータは、一定期間にわたるヘモグロビンレベルの上昇が正常よりも高い（例えば、３週間未満で２ｇ／ｄＬを超えるヘモグロビンレベルの上昇）かどうかを判定するために監視される。いくつかの実施形態では、治療前または治療中の患者の血液学的パラメータの１つまたは複数が異常である場合、患者の本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの用量は減少される（例えば、用量を０．７ｍｇ／ｋｇから０．３ｍｇ／ｋｇへ減らす）。いくつかの実施形態では、治療前または治療中の患者の血液学的パラメータの１つまたは複数が異常である場合、患者の本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの用量は維持される（例えば、０．３ｍｇ／ｋｇから０．７ｍｇ／ｋｇで維持される）。

【0286】

いくつかの実施形態では、投薬レジメンは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドの有害作用を予防、改善、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される投薬レジメンによるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、有害な副作用の減少をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される投薬レジメンによるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、第１の期間中にヘモグロビンレベルが１８ｇ／ｄＬを超える可能性を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される投薬レジメンによるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、治療の最初の３週間にヘモグロビンレベルが１８ｇ／ｄＬを超える可能性を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される投薬レジメンによるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、第１の期間中にヘモグロビンレベルの上昇が２ｇ／ｄＬを超える可能性を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される投薬レジメンによるＡｃｔＲＩＩポリペプチドの投与は、治療の最初の３週間にヘモグロビンレベルの上昇が２ｇ／ｄＬを超える可能性を低下させる。

【0287】

いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを、０．１ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇの用量範囲で投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．１ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．２ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．３ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．４ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．５ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．６ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．７ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．８ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを０．９ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．０ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．１ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．２ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．３ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．４ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．５ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．６ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．７ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．８ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１．９ｍｇ／ｋｇで投与する。いくつかの実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを２．０ｍｇ／ｋｇで投与する。

【0288】

特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１日１回投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを１日２回投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを週に１回投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを週に２回投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを週に３回投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを２週間毎に投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを３週間毎に投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを４週間毎に投与する。特定の実施形態では、本開示のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを毎月投与する。

【0289】

特定の実施形態では、本発明は、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドのインビボ産生のための遺伝子療法も提供する。そのような療法は、上記の障害を有する細胞または組織へのＡｃｔＲＩＩポリペプチドポリヌクレオチド配列の導入によって、その治療効果を達成するであろう。ＡｃｔＲＩＩポリペプチドポリヌクレオチド配列の送達は、組換え発現ベクター、例えばキメラウイルスまたはコロイド分散系を使用して達成することができる。標的化リポソームは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドポリヌクレオチド配列の治療的送達のために使用することができる。

【0290】

本明細書で教示される遺伝子療法に利用することができる様々なウイルスベクターには、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニア、または好ましくはレトロウイルスなどのＲＮＡウイルスが含まれる。好ましくは、レトロウイルスベクターは、マウスまたは鳥類レトロウイルスの誘導体である。単一の外来遺伝子を挿入することができるレトロウイルスベクターの例には、モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ）、ハーベイマウス肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ）、マウス乳癌ウイルス（ＭｕＭＴＶ）およびラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかのさらなるレトロウイルスベクターは、複数の遺伝子を組み込むことができる。これらのベクターはすべて、形質導入された細胞が同定および生成され得るように、選択マーカーのための遺伝子を移入または組み込むことができる。レトロウイルスベクターは、例えば、糖、糖脂質、またはタンパク質を結合させることによって標的特異的にすることができる。標的化は、抗体を使用することによって達成され得る。当業者は、特定のポリヌクレオチド配列をレトロウイルスゲノムに挿入するか、またはウイルスエンベロープに付着させて、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドを含むレトロウイルスベクターの標的特異的送達を可能にすることができることを認識するであろう。一実施形態では、ベクターは骨または軟骨を標的とする。

【0291】

あるいは、組織培養細胞を、従来のリン酸カルシウムトランスフェクションによって、レトロウイルス構造遺伝子ｇａｇ、ｐｏｌおよびｅｎｖをコードするプラスミドで直接トランスフェクトすることができる。次いで、これらの細胞に、目的の遺伝子を含むベクタープラスミドをトランスフェクトする。得られた細胞は、培養培地中にレトロウイルスベクターを放出する。

【0292】

ＡｃｔＲＩＩポリペプチドポリヌクレオチド用の別の標的化送達系は、コロイド分散系である。コロイド分散系には、高分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、ならびに水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む脂質ベース系が含まれる。本発明の１つのコロイド系はリポソームである。リポソームは、インビトロおよびインビボでの送達ビヒクルとして有用な人工膜ベシクルである。ＲＮＡ、ＤＮＡおよび無傷のビリオンを水性内部に封入し、生物学的に活性な形態で細胞に送達することができる（例えば、Ｆｒａｌｅｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，６：７７，１９８１を参照されたい）。リポソームビヒクルを使用する効率的な遺伝子導入のための方法は、当技術分野で公知であり、例えば、Ｍａｎｎｉｎｏ，ｅｔ ａｌ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，６：６８２，１９８８を参照されたい。リポソームの組成は、通常、リン脂質の組み合わせであり、通常、ステロイド、特にコレステロールと組み合わせられる。他のリン脂質または他の脂質も使用され得る。リポソームの物理的特性は、ｐＨ、イオン強度、および二価カチオンの存在に依存する。

【0293】

リポソーム製造に有用な脂質の例としては、ホスファチジル化合物、例えばホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴ脂質、セレブロシド、およびガングリオシドが挙げられる。例示的なリン脂質としては、卵ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリンおよびジステアロイルホスファチジルコリンが挙げられる。リポソームの標的化はまた、例えば、器官特異性、細胞特異性およびオルガネラ特異性に基づいて可能であり、当該分野で公知である。

【0294】

本開示は、ｐＨを調整するための酸および塩基；ならびにｐＨを狭い範囲内に維持するための緩衝剤を含むように変更され得る製剤を提供する
６．キット
本開示は、凍結乾燥ポリペプチドおよび注射装置を含むキットを提供する。特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、ＡｃｔＲＩＩポリペプチド（例えば、配列番号１のアミノ酸３０～１１０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一であるポリペプチド）、またはその断片、機能的バリアント、もしくは修飾形態を含む。特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、アクチビンＡ、アクチビンＢ、およびＧＤＦ１１からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドに結合する。特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、ＢＭＰ１０、ＧＤＦ８、およびＢＭＰ６からなる群から選択される１つまたは複数のリガンドにさらに結合する。特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、アクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する。

【0295】

いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸２１～３０のいずれか１つに対応する残基で始まり（例えば、アミノ酸２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０のいずれか一つで始まり）、配列番号１のアミノ酸１１０～１３５のいずれか１つに対応する位置で終わる（例えば、アミノ酸１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４または１３５のいずれか一つで終わる）ポリペプチドの一部と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％、９５％または９９％同一のアミノ酸配列を含み、ポリペプチドはアクチビンおよび／またはＧＤＦ１１に結合する。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基３０～１１０に対応するアミノ酸配列からなる。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基２１～１３５に対応するアミノ酸配列と少なくとも９０％、９５％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基２１～１３５に対応するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１の残基２１～１３５に対応するアミノ酸配列からなる。

【0296】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列から本質的になる。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列からなる。

【0297】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３のアミノ酸配列からなる。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３のアミノ酸配列からなる。

【0298】

前述の特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、免疫グロブリンのＦｃドメインをさらに含む融合タンパク質を含む。特定のこのような実施形態では、免疫グロブリンのＦｃドメインは、ＩｇＧ１免疫グロブリンのＦｃドメインである。他の実施形態では、融合タンパク質は、ポリペプチドドメインと免疫グロブリンのＦｃドメインとの間に配置されたリンカードメインをさらに含む。特定の実施形態では、リンカードメインは、ＴＧＧＧ（配列番号２０）、ＴＧＧＧＧ（配列番号１８）、ＳＧＧＧＧ（配列番号１９）、ＧＧＧＧＳ（配列番号２２）、ＧＧＧ（配列番号１６）、ＧＧＧＧ（配列番号１７）、およびＳＧＧＧ（配列番号２１）からなる群から選択される。特定の実施形態では、リンカードメインは、ＴＧＧＧ（配列番号２０）を含む。

【0299】

特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列からなる。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２３のアミノ酸配列からなる。

【0300】

特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３０のアミノ酸配列からなる。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３０のアミノ酸配列からなる。

【0301】

特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列からなる。他の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４１のアミノ酸配列からなる。

【0302】

特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドは、ホモ二量体タンパク質複合体の一部である。特定の実施形態では、ポリペプチドはグリコシル化されている。

【0303】

本開示は、本明細書に開示される凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末および注射装置を含むキットを提供する。本明細書に開示されるキットのいくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末は、１つ以上の容器、例えば１つ以上のバイアルに予め充填される。

【0304】

特定の実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末のｐＨ範囲は、７～８である。いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末は、緩衝剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、少なくとも１０ｍＭの量で添加され得る。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、約１０ｍＭ～約２００ｍＭの範囲の量で添加されてもよい。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、クエン酸一水和物および／またはクエン酸三ナトリウム二水和物を含む。

【0305】

いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末は、界面活性剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、界面活性剤はポリソルベートを含む。いくつかの実施形態では、界面活性剤はポリソルベート８０を含む。

【0306】

いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末は、ライオプロテクタントをさらに含む。いくつかの実施形態では、ライオプロテクタントは、二糖（例えば、スクロース）などの糖を含む。いくつかの実施形態では、ライオプロテクタントは、スクロース、トレハロース、マンニトール、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、デキストロースおよび／またはグリシンを含む。いくつかの実施形態では、ライオプロテクタントはスクロースを含む。いくつかの実施形態では、滅菌粉末は、ライオプロテクタントおよび凍結乾燥ポリペプチドを、少なくとも１：１の凍結乾燥ポリペプチド対ライオプロテクタントの重量比で含む。いくつかの実施形態では、滅菌粉末は、ライオプロテクタントおよび凍結乾燥ポリペプチドを、１：１～１：１０の凍結乾燥ポリペプチド対ライオプロテクタントの重量比で含む。いくつかの実施形態では、滅菌粉末は、ライオプロテクタントおよび凍結乾燥ポリペプチドを、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、または１：１０の凍結乾燥ポリペプチド対ライオプロテクタントの重量比で含む。いくつかの実施形態では、滅菌粉末は、ライオプロテクタントおよび凍結乾燥ポリペプチドを、１：６の凍結乾燥ポリペプチド対ライオプロテクタントの重量比で含む。前述の特定の実施形態では、滅菌粉末は、凍結乾燥ポリペプチドを安定化するのに十分な量のライオプロテクタントを含む。

【0307】

本明細書に開示されるキットの特定の実施形態では、注射装置はシリンジを含む。特定のそのような実施形態では、シリンジは再構成溶液で予め充填されている。いくつかの実施形態では、再構成溶液は、薬学的に許容される担体および／または賦形剤を含む。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される担体は、水溶液、例えば、水、生理学的に緩衝化された生理食塩水、または他の溶媒もしくはビヒクル、例えば、グリコール、グリセロール、油もしくは注射可能な有機エステルを含む。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、ハライト、金属酸化物、糖、糖アルコール、デンプン、グリコール、ポビドン、鉱物炭化水素、アクリルポリマー、脂肪アルコール、ステアリン酸鉱物、グリセリンおよび／または脂質から選択される薬学的に許容される賦形剤を含む。特定の実施形態では、再構成溶液は、薬学的に許容される滅菌等張水溶液または非水溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョンを含む。特定のこのような実施形態では、再構成溶液は、製剤を意図するレシピエントの血液と等張にする抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および／または溶質を含む。他の実施形態では、再構成溶液は、懸濁化剤または増粘剤を含む。

【0308】

本明細書に開示されるキットの特定の実施形態では、キットはバイアルアダプタをさらに含む。いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末で予め充填されたバイアルは、バイアルアダプタの一端に結合される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される再構成溶液で予め充填されたシリンジは、バイアルアダプタの端部に結合される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される再構成溶液で予め充填されたシリンジおよび凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末で予め充填されたバイアルは、バイアルアダプタの両端に結合される。いくつかの実施形態では、再構成溶液は、予め充填されたシリンジからバイアルに移される。いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを含む滅菌粉末で予め充填されたバイアルへの再構成溶液の移送によって、凍結乾燥ポリペプチドが滅菌注射液に再構成される。いくつかの実施形態では、凍結乾燥ポリペプチドを滅菌注射液に再構成する。いくつかの実施形態では、使用前に凍結乾燥ポリペプチドを滅菌注射液に再構成する。

【0309】

本明細書に開示されるキットの他の実施形態では、キットはポンプ装置をさらに含む。特定の実施形態では、ポンプ装置は、電気機械式ポンプアセンブリを含む。特定の実施形態では、ポンプ装置は、滅菌注射液を保持するためのリザーバを備える。特定の実施形態では、リザーバは、１ｍＬの滅菌注射液を保持する。特定の実施形態では、ポンプ装置は、滅菌注射液を含む１つ以上のバイアルまたはカートリッジを含む。特定の実施形態では、バイアルまたはカートリッジは、滅菌注射液で予め充填される。特定の実施形態では、バイアルまたはカートリッジは、凍結乾燥ポリペプチドから再構成された滅菌注射液を含む。特定の実施形態では、リザーバはバイアルまたはカートリッジに連結される。特定の実施形態では、バイアルまたはカートリッジは、１～２０ｍＬの滅菌注射液を保持する。特定の実施形態では、電気機械式ポンプアセンブリは、ポンプチャンバを含む。特定の実施形態では、電気機械式ポンプアセンブリは、リザーバに連結される。特定の実施形態では、滅菌注射液は、リザーバからポンプチャンバ内に受容される。いくつかの実施形態では、電気機械式ポンプアセンブリはプランジャを含み、それは、ポンプチャンバ内の滅菌注射液がプランジャと直接接触するように配置される。特定の実施形態では、滅菌注射液は、第１のポンピング段階中にリザーバからポンプチャンバに受容され、第２のポンピング段階中にポンプチャンバから対象に送達される。特定の実施形態では、電気機械式ポンプアセンブリは、制御回路を含む。特定の実施形態では、制御回路は、プランジャを駆動して、（ａ）第１のポンピング段階中にポンプチャンバ内に滅菌注射液を吸い込み、（ｂ）第２のポンピング段階中にプランジャの複数の分散した動作でポンプチャンバから滅菌注射液を送達し、それにより、第２のポンピング段階全体を通して制御された別々の複数の投与量で治療物質を対象に送達する。特定の実施形態では、所望の用量が投与されるまで、第１および第２のポンピング段階が交互に起こるサイクルを繰り返してもよい。特定の実施形態では、ポンプ装置はウェアラブルパッチに連結される。特定の実施形態では、ポンプ装置はウェアラブルポンプ装置である。いくつかの実施形態では、ポンプ装置は３週間毎に用量を投与する。いくつかの実施形態では、ポンプ装置は、皮下注射を介して用量を投与する。

【0310】

本開示は、凍結乾燥ポリペプチドを滅菌注射液に再構成するために使用されるキットを提供する。特定の実施形態において、得られた滅菌注射液は、本明細書中に開示される方法において有用である。

【0311】

本明細書に開示されるキットの特定の実施形態では、キットは、滅菌注射液の非経口投与において使用するための注射用装置をさらに含む。いくつかの実施形態では、滅菌注射液は皮下注射によって投与される。いくつかの実施形態では、滅菌注射液は皮内注射によって投与される。いくつかの実施形態では、滅菌注射液は筋肉内注射によって投与される。いくつかの実施形態では、滅菌注射液は静脈内注射によって投与される。いくつかの実施形態では、滅菌注射液は自己投与される。いくつかの態様では、滅菌注射液は治療有効用量を含む。いくつかの実施形態では、治療有効用量は、重量ベースの用量を含む。いくつかの実施形態では、重量ベース用量は０．３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、重量ベース用量は０．７ｍｇ／ｋｇである。

【0312】

本明細書に開示されるキットのいくつかの実施形態では、キットは、凍結乾燥ポリペプチドを含有する１つ以上のバイアルまたはカートリッジをさらに含む。いくつかの実施形態では、キットは、凍結乾燥ポリペプチドを含有する少なくとも２つのバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、キットは、凍結乾燥ポリペプチドを含有する少なくとも３つのバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、２つのバイアルは、同じまたは異なる量の凍結乾燥ポリペプチドを含有することができる。いくつかの実施形態では、バイアルまたはカートリッジは、２５ｍｇ～６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有するバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、バイアルまたはカートリッジの少なくとも１つは、６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有するバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、バイアルまたはカートリッジの少なくとも１つは、４５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有するバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、バイアルまたはカートリッジの少なくとも１つは、３０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有するバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、バイアルまたはカートリッジの少なくとも１つは、２５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有するバイアルまたはカートリッジを含む。いくつかの実施形態では、第１のバイアルまたはカートリッジは４５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第２のバイアルまたはカートリッジは６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有する。いくつかの実施形態では、第１のバイアルまたはカートリッジは３０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第２のバイアルまたはカートリッジは６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有する。いくつかの実施形態では、第１のバイアルまたはカートリッジは３０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第２のバイアルまたはカートリッジは４５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第３のバイアルまたはカートリッジは６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有する。いくつかの実施形態では、第１のバイアルまたはカートリッジは２５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第２のバイアルまたはカートリッジは４５ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有し、第３のバイアルまたはカートリッジは６０ｍｇの凍結乾燥ポリペプチドを含有する。いくつかの実施形態において、１つ以上のバイアルまたはカートリッジは、２～８℃で冷蔵される。

【0313】

７．実施例
上記の開示は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解され、それらは本発明の特定の実施形態の例示の目的のためだけに含まれ、限定を意図するものではない。

【0314】

［実施例１］
ＡｃｔＲＩＩＡ－Ｆｃ融合タンパク質
最小リンカーを間に挟んでヒトまたはマウスＦｃドメインに融合されたヒトＡｃｔＲＩＩＡの細胞外ドメインを有する、可溶性ＡｃｔＲＩＩＡ融合タンパク質を構築した。構築物は、それぞれＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃと呼ばれる。

【0315】

ＣＨＯ細胞株から精製した場合のＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃを以下に示す（配列番号２３）。

【0316】

【0317】

ＣＨＯ細胞株から精製した場合の、Ｃ末端リジンを欠くさらなるＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃを以下に示す（配列番号４１）：

【0318】

ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃタンパク質をＣＨＯ細胞株で発現させた。３つの異なるリーダー配列を検討した：
（ｉ）ミツバチメリチン（ＨＢＭＬ）：ＭＫＦＬＶＮＶＡＬＶＦＭＶＶＹＩＳＹＩＹＡ（配列番号２４）
（ｉｉ）組織プラスミノーゲンアクチベーター（ＴＰＡ）：ＭＤＡＭＫＲＧＬＣＣＶＬＬＬＣＧＡＶＦＶＳＰ（配列番号２５）
（ｉｉｉ）天然：ＭＧＡＡＡＫＬＡＦＡＶＦＬＩＳＣＳＳＧＡ（配列番号２６）。

【0319】

選択された形態は、ＴＰＡリーダーを使用し、以下の未処理アミノ酸配列を有する。

【0320】

【0321】

このポリペプチドは、以下の核酸配列によってコードされる。

【0322】

【0323】

ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃの両方が、組換え発現に著しく適していた。図４Ａおよび図４Ｂに示すように、タンパク質を、単一の、明確に定義されたピークとして精製した。Ｎ末端配列決定により、－ＩＬＧＲＳＥＴＱＥの単一配列が明らかになった（配列番号２９）。精製は、例えば、任意の順序で以下の３つ以上を含む一連のカラムクロマトグラフィー工程によって達成することができた：プロテインＡクロマトグラフィー、Ｑセファロースクロマトグラフィー、フェニルセファロースクロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、および陽イオン交換クロマトグラフィー。ウイルス濾過および緩衝液交換によって精製を完了することができた。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃタンパク質を、サイズ排除クロマトグラフィーによって測定して９８％超、ＳＤＳ ＰＡＧＥによって測定して９５％超の純度に精製した。

【0324】

ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃは、リガンドに対して高い親和性を示した。ＧＤＦ１１またはアクチビンＡを、標準的なアミンカップリング手順を用いてＢｉａｃｏｒｅ（商標）ＣＭ５チップに固定化した。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃタンパク質をシステムにロードし、結合を測定した。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃは、５×１０^－１２の解離定数（Ｋ_Ｄ）でアクチビンに結合し、９．９６×１０^－９のＫ_ＤでＧＤＦ１１に結合した。図５Ａおよび図５Ｂを参照されたい。同様の結合アッセイを使用して、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃは、例えばアクチビンＢ、ＧＤＦ８、ＢＭＰ６、およびＢＭＰ１０を含む他のＴＧＦ－βスーパーファミリーリガンドに対して高～中程度の親和性を有すると決定された。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃも同様に挙動した。

【0325】

ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃは、薬物動態試験において非常に安定していた。ラットに１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇのＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃタンパク質を投与し、タンパク質の血漿レベルを２４、４８、７２、１４４、および１６８時間で測定した。別の試験では、ラットに１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇを投与した。ラットでは、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃは１１～１４日の血清半減期を有し、薬物の循環レベルは２週間後に非常に高かった（１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの初期投与に対して、それぞれ１１μｇ／ｍｌ、１１０μｇ／ｍｌ、または３０４μｇ／ｍｌ。）。カニクイザルでは、血漿半減期は実質的に１４日を超え、薬物の循環レベルは、１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの初期投与でそれぞれ２５μｇ／ｍｌ、３０４μｇ／ｍｌ、または１４４０μｇ／ｍｌであった。

【0326】

［実施例２］
ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃタンパク質の特性評価
ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃ融合タンパク質を、配列番号２５の組織プラスミノゲンリーダー配列を使用して、ｐＡＩＤ４ベクター（ＳＶ４０ ｏｒｉ／エンハンサー、ＣＭＶプロモーター）から安定にトランスフェクトされたＣＨＯ－ＤＵＫＸ Ｂ１１細胞で発現させた。実施例１で上述されるように精製したタンパク質は、配列番号２３の配列を有していた。Ｆｃ部分は、配列番号２３に示されるように、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ配列である。タンパク質分析は、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃ融合タンパク質がジスルフィド結合を有するホモ二量体として形成されることを明らかにする。

【0327】

ＣＨＯ細胞発現材料は、ヒト２９３細胞で発現されるＡｃｔＲＩＩＡ－ｈＦｃ融合タンパク質について報告されたものよりも高いアクチビンＢリガンドに対する親和性を有する［ｄｅｌ Ｒｅ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７９（５１）：５３１２６－５３１３５］。さらに、他のリーダー配列と比較して、ＴＰＡリーダー配列の使用はより多くの産物をもたらし、天然のリーダーで発現されるＡｃｔＲＩＩＡ－Ｆｃとは異なり、高純度のＮ末端配列をもたらした。天然のリーダー配列を使用すると、ＡｃｔＲＩＩＡ－Ｆｃの２つの主要な種が得られ、それぞれ異なるＮ末端配列を有する。

【0328】

［実施例３］
代替ＡｃｔＲＩＩＡ－Ｆｃタンパク質
本明細書に記載の方法に従って使用され得る様々なＡｃｔＲＩＩＡバリアントは、国際公開第２００６／０１２６２７号として公開された国際特許出願に記載されており（例えば、５５～５８頁を参照のこと）、その全体は、参照により本明細書に組み込まれる。代替構築物は、Ｃ末端尾部（ＡｃｔＲＩＩＡの細胞外ドメインの最後の１５アミノ酸）の欠失を有し得る。そのような構築物の配列を以下に示す（Ｆｃ部分に下線を引く）（配列番号３０）：

【0329】

［実施例４］
２つのブレオマイシン誘発肺高血圧症および線維症ラットモデルにおけるＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃのグループ３肺高血圧症への効果
ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ融合タンパク質（実施例１に記載のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃホモ二量体）の効果を、グループ３肺高血圧症（Ｇｒｐ３－ＰＨ）の２つのラットモデルで調べた［Ｘｉｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ７１（１）：３４－５５（２０１８）；Ｓｃｈｒｏｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｓｐｉｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ １７０（１）：３２－３６（２０１０）］。

【0330】

１つのモデルでは、１２匹のＷｉｓｔａｒ雄ラットに、０日目に単回用量のブレオマイシン（Ｂｌｅｏ、０．６Ｕ／ラット）を気管内投与し、以下の２つの処置群に無作為化した（ラット６匹／群）：１）モノクロタリン（ＭＣＴ、試験７日目に単回用量として６０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）およびトリス緩衝生理食塩水（３日毎に１ｍｌ／ｋｇ、ｓ．ｃ．）による処置（ビヒクル処置群）、２）ＭＣＴ（試験の７日目に単回用量として６０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）およびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ（３日毎に５ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）による処置。ラットを３５日間処置した。試験の初めから終わりまで体重を毎週記録した。

【0331】

４２日目に、ラットを約３～４％イソフルランで麻酔し、制御された加熱パッド上に置いた。右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）は、約１．５～２％イソフルオラン麻酔下で、右頸静脈を介して右心室（ＲＶ）に２Ｆ曲線先端圧力変換カテーテル（ＳＰＲ－５１３、Ｍｉｌｌａｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を前進させることによって測定した。ＲＶ自由壁とＬＶ＋隔壁との重量比（ＲＶ／ＬＶ＋Ｓ、Ｆｕｌｔｏｎ’ｓ Ｉｎｄｅｘ）を得ることによってＲＶ肥大を評価した。肺を回収し、１０％ホルマリンで固定し、パラフィンに包埋し、マッソントリクローム染色用に切片化して線維症を評価した。

【0332】

Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ ＰＨ－ＩＬＤラットモデルにおける肺高血圧症およびＲＶ肥大のＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置の効果を図６Ａ～図６Ｄに示す。図６Ｂおよび図６Ｃに示すように、Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ処置ラット（Ｂｌｅｏ／ＭＣＴ－ＰＢＳ群）は、対照動物と比較してＲＶＳＰの上昇および右心肥大を有することが観察され、肺高血圧症およびＲＶリモデリングの確立を示している。さらに、肺線維症の増加がＢｌｅｏ－ＭＣＴラットで観察された（図６Ｄ）。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置は、ＲＶＳＰの増加（７３％）および心肥大（８７％）を有意に減少させた。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置は、肺線維症の減少傾向も示した。

【0333】

別のモデルでは、６匹のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ雄ラットに、０日目に単回用量のブレオマイシン（Ｂｌｅｏ、０．６Ｕ／ラット）を気管内投与し、以下の２つの処置群に無作為化した：１）セマキサニブ（試験７日目に単回用量として２０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）／低酸素およびトリス緩衝生理食塩水（３日毎に１ｍｌ／ｋｇ、ｓ．ｃ．投与）による処置（Ｂｌｅｏ／Ｓｕ／Ｈｘ－ＰＢＳ群）、２）セマキサニブ（試験の７日目に単回用量として２０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）およびＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ（３日毎に５ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ．投与）による処置。ラットを３５日間処置した。試験の初めから終わりまで体重を毎週記録した。

【0334】

４２日目に、ラットを約３～４％イソフルランで麻酔し、制御された加熱パッド上に置いた。右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）は、約１．５～２％イソフルオラン麻酔下で、右頸静脈を介して右心室（ＲＶ）に２Ｆ曲線先端圧力変換カテーテル（ＳＰＲ－５１３、Ｍｉｌｌａｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を前進させることによって測定した。ＲＶ自由壁とＬＶ＋隔壁との重量比（ＲＶ／ＬＶ＋Ｓ、Ｆｕｌｔｏｎ’ｓ Ｉｎｄｅｘ）を得ることによってＲＶ肥大を評価した。

【0335】

図７Ａから図７Ｃに示すように、Ｂｌｅｏ－ＭＣＴ処置ラット（Ｂｌｅｏ／Ｓｕ／Ｈｘ－ＰＢＳ群）は、対照動物と比較して増加したＲＶＳＰおよび右心肥大を有することが観察され、肺高血圧症およびＲＶリモデリングの確立を示している。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置は、ＲＶＳＰの増加（８７％）および心肥大（８４％）を有意に減少させた。

【0336】

まとめると、これらのデータは、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃが２つのブレオマイシン誘発グループ３肺高血圧症モデルにおいて肺高血圧症の改善に有効であることを実証している。特に、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃは、ＲＶＳＰおよび右心肥大の減少に有意な効果を有していた。さらに、データは、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドが、グループ３ ＰＨの治療、特にグループ３ ＰＨの様々な合併症の予防または重症度の軽減に有用であり得ることを示している。

【0337】

［実施例５］
ＰＨのＬＰＳ誘発ＣＯＰＤモデルにおけるＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃのグループ３肺高血圧症に対する効果
ＰＨ－ＣＯＰＤを、１２匹のＷｉｓｔａｒ雄ラットにおいて、リポ多糖（ＬＰＳ）（０．９％のＮａＣｌで希釈した０．６ｍｇ／ｍＬ、１ｍＬ／ｋｇ体重で７週間にわたる隔週の気管内投与、および２週間のＬＰＳの気管内滴下後の５週間にわたる慢性低酸素（１０％ Ｏ_２）への曝露によって誘導した。ＰＨ－ＣＯＰＤラットを以下の３つの処置群に無作為化した：１）リン酸緩衝生理食塩水（２～７週目に１ｍｌ／ｋｇをｂｉｗ ｓ．ｃ．）（ビヒクル処置群）、２）ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ（２～７週目に１０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ ｂｉｗ投与）、および３）ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ（３～７週目に１０ｍｇ／ｋｇをｓ．ｃ ｂｉｗ投与）。試験の初めから終わりまで体重を毎週記録した。治療プロトコルを図８Ａに示す。

【0338】

７週目に、ラットを約３～４％イソフルランで麻酔し、制御された加熱パッド上に置いた。右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）は、約１．５～２％イソフルオラン麻酔下で、右頸静脈を介して右心室（ＲＶ）に２Ｆ曲線先端圧力変換カテーテル（ＳＰＲ－５１３、Ｍｉｌｌａｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を前進させることによって測定した。ＲＶ自由壁とＬＶ＋隔壁との重量比（ＲＶ／ＬＶ＋Ｓ、Ｆｕｌｔｏｎ’ｓ Ｉｎｄｅｘ）を得ることによってＲＶ肥大を評価した。

【0339】

図８Ｂおよび図８Ｃに示すように、ビヒクル処置ラット（処置群１）は、対照動物と比較して増加したＲＶＳＰおよび右心肥大を有することが観察され、肺高血圧症およびＲＶリモデリングの確立を示している。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置は、ＲＶＳＰの増加を処置群２で８０％、処置群３で９０％有意に減少させた。ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃ処置は、ＲＶ肥大の増加を処置群２で８４％、処置群３で８３％有意に減少させた。

【0340】

これらのデータは、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃが、ＬＰＳ／低酸素誘発ＰＨ－ＣＯＰＤ（グループ３のＰＨ）ラット肺高血圧症モデルにおける肺高血圧症の改善に有効であることを実証している。特に、ＡｃｔＲＩＩＡ－ｍＦｃは、ＲＶＳＰおよび右心肥大の減少に有意な効果を有していた。さらに、データは、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドが、グループ３ ＰＨの治療、特にグループ３ ＰＨの様々な合併症の予防または重症度の軽減に有用であり得ることを示している。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【配列表】

2024521575000001.app

【国際調査報告】