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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-06-04
(54)【発明の名称】勃起不全を治療するための製剤および方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/53 20060101AFI20240528BHJP
A61P 15/10 20060101ALI20240528BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240528BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240528BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20240528BHJP
A61K 9/12 20060101ALI20240528BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20240528BHJP
A61K 47/34 20170101ALI20240528BHJP
A61K 47/14 20170101ALI20240528BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20240528BHJP
A61K 31/4985 20060101ALI20240528BHJP
【ＦＩ】
A61K31/53
A61P15/10
A61K45/00
A61P43/00 121
A61K9/08
A61K9/12
A61K47/10
A61K47/34
A61K47/14
A61K31/519
A61K31/4985
【審査請求】未請求
【予備審査請求】有
(21)【出願番号】P 2023572709
(86)(22)【出願日】2021-12-01
(85)【翻訳文提出日】2023-11-22
(86)【国際出願番号】 US2021061488
(87)【国際公開番号】W WO2022250731
(87)【国際公開日】2022-12-01
(31)【優先権主張番号】PCT/US2021/034334
(32)【優先日】2021-05-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523442208
【氏名又は名称】ストラテジック ドラッグ ソリューションズ， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】240000327
【弁護士】
【氏名又は名称】弁護士法人クレオ国際法律特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】チャウ モーゼ
(72)【発明者】
【氏名】チャウ シェリル エル．
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA11
4C076AA24
4C076BB02
4C076BB25
4C076CC17
4C076DD37E
4C076DD37N
4C076DD38E
4C076DD38N
4C076DD46E
4C076DD46N
4C076EE23E
4C076EE23N
4C076FF33
4C076FF34
4C076FF68
4C084AA19
4C084MA02
4C084MA57
4C084MA59
4C084NA02
4C084NA05
4C084NA10
4C084NA11
4C084ZA811
4C084ZA812
4C084ZC751
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB05
4C086CB06
4C086CB09
4C086MA02
4C086MA05
4C086MA13
4C086MA17
4C086MA57
4C086MA59
4C086NA02
4C086NA05
4C086NA10
4C086NA11
4C086ZA81
4C086ZC75
(57)【要約】
本明細書に開示される製剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、および／または関連するホスホジエステラーゼ阻害剤もしくは他のイオン化可能な化合物の少なくとも１つの溶解性および透過性（フラックス）を増強する有益な特性を有する。特に、製剤は、化合物が粘膜を通過する際に有益な特性を付与し、有効な血漿薬剤濃度をもたらす。いくつかの実施形態において、製剤は、アルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、および／または有機塩、またはそれらの任意の組み合わせのうちの少なくとも１つを含み得る有機水溶性溶媒を含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。また、本明細書では、勃起不全または他の疾患の治療のために１つ以上の化合物を投与する際の製剤の使用であって、１つ以上の化合物が経粘膜的（経鼻的または舌下的）に投与される使用も開示される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
鼻粘膜中のバルデナフィルの透過を増強するための製剤であって、前記製剤は、（ａ）バルデナフィルと、
（ｂ）アルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせからなる有機水溶性溶媒と、
を含み、
（ｃ）前記製剤は約３．５～約８．０のｐＨを有し、前記有機水溶性溶媒は、前記バルデナフィルの水への溶解度と比較して前記バルデナフィルの溶解度を高める、製剤。
【請求項2】
前記有機水溶性溶媒は、アルコールを含む、請求項１に記載の製剤。
【請求項3】
前記アルコールは、エタノールまたはグリセロールである、請求項２に記載の製剤。
【請求項4】
前記エタノールは、５％～４０％の濃度で存在する、請求項３に記載の製剤。
【請求項5】
前記エタノールは、１２％、２５％または３０％の濃度で存在する、請求項４に記載の製剤。
【請求項6】
前記有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む、請求項１に記載の製剤。
【請求項7】
前記ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである、請求項６に記載の製剤。
【請求項8】
前記ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である、請求項７に記載の製剤。
【請求項9】
前記ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する、請求項７または８のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項10】
前記ポリエチレングリコールは、５％の濃度で存在する、請求項９に記載の製剤。
【請求項11】
前記製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項12】
前記バルデナフィルは、勃起不全を治療するための１つ以上の他の有効成分と組み合わせて提供される、請求項１～１１のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項13】
前記１つ以上の他の有効成分は、別のホスホジエステラーゼ阻害剤を含む、請求項１２に記載の製剤。
【請求項14】
前記他のホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである、請求項１３に記載の製剤。
【請求項15】
前記他のホスホジエステラーゼ阻害剤は、タダラフィルである、請求項１３に記載の製剤。
【請求項16】
必要とする被験体の勃起不全を治療する方法であって、前記方法は、前記被験体の鼻粘膜を請求項１～１５のいずれか１項に記載の製剤と接触させ、それにより前記被験体の勃起不全を治療する、方法。
【請求項17】
前記粘膜に接触させることは、鼻腔内投与を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記粘膜に接触させることは、舌下投与を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項19】
請求項１～１５のいずれか１項に記載の製剤を調製する方法であって、前記方法は、
前記バルデナフィルを前記有機水溶性溶媒に添加するステップと、
前記バルデナフィルを含む前記有機水溶性溶媒のｐＨを約３．５～８．０に調整するステップと、
を含む、方法。
【請求項20】
前記バルデナフィルの溶解度は、前記バルデナフィルの水への溶解度と比較して前記有機水溶性溶媒中で増加する、請求項１９に記載の方法。
【請求項21】
鼻粘膜中の前記バルデナフィルの透過は、水中での前記バルデナフィルの透過と比較して、前記有機水溶性溶媒中で増大する、請求項１９に記載の方法。
【請求項22】
前記バルデナフィルの生物学的利用能は、水中での前記バルデナフィルの生物学的利用能と比較して前記有機水溶性溶媒中で増加する、請求項１９に記載の方法。
【請求項23】
前記有機水溶性溶媒は、アルコールを含む、請求項１９～２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項24】
前記アルコールは、エタノールまたはグリセロールである、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
前記エタノールは、５％～４０％の濃度で存在する、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
前記エタノールは、１２％、２５％または３０％の濃度で存在する、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
前記有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む、請求項１９～２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項28】
前記ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
前記ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する、請求項２８または２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項31】
前記ポリエチレングリコールは、５％の濃度で存在する、請求項３０に記載の方法。
【請求項32】
前記製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する、請求項１９～３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項33】
前記バルデナフィルを、勃起不全を治療するための他の活性剤と組み合わせる、請求項１９～３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項34】
前記他の活性剤は、他のホスホジエステラーゼ阻害剤である、請求項３３に記載の方法。
【請求項35】
前記他のホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである、請求項３４に記載の方法。
【請求項36】
前記他のホスホジエステラーゼ阻害剤は、タダラフィルである、請求項３４に記載の方法。
【請求項37】
鼻粘膜中の前記バルデナフィルの透過を増強するのに使用するための製剤であって、前記製剤は、請求項１～１５のいずれか１項に記載の製剤を含む、製剤。
【請求項38】
経鼻投与による勃起不全の治療に使用するための、請求項３７に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２１年５月２６日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２１／３４３３４号の一部継続出願である。
本出願は、２０２１年５月２６日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２１／３４３３４号の一部継続出願である。
【0002】
勃起不全を治療するための改良された製剤および方法に対する必要性が存在する。 本技術は、一般に、ホスホジエステラーゼ阻害剤を用いて勃起不全を治療する製剤および方法に関するものであるが、経粘膜投与、例えば舌下投与または経鼻投与を用いて異なる疾患状態を治療する際の他の薬剤にも適用することができる。
【背景技術】
【0003】
勃起不全は、男性における性機能障害の最も一般的な形態と考えられており、加齢とともにますます一般的になる。４０～７０歳の男性の約５０％、７０歳以上の男性の７０％が勃起不全を患っていると推定されている。勃起不全は、神経学的、血管学的、内分泌学的、心理学的要因の１つ以上によって引き起こされる可能性があるため、この症状は高齢男性に限定されるものではない。心血管疾患、高血圧、糖尿病、高コレステロール血症、喫煙などの他の危険因子は、勃起不全の有病率の増加と強く関連している。その結果、勃起不全の効果的な治療の必要性が高まっている。
【発明の概要】
【0004】
例えば、バルデナフィル、シルデナフィル、およびタダラフィルを含むホスホジエステラーゼ阻害剤を十分に可溶化し、十分な透過を可能にする組成物および方法に対する必要性が存在する。本明細書において開示されるのは、いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤を十分に可溶化することが可能であるとともに、ヒト被験者によって比較的安全であるかまたは十分に許容される有機水性混合物である。いくつかの実施形態において、有機水性混合物は、ホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度に基づいてスクリーニングされ、同定される。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はシルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はタダラフィルである。いくつかの実施形態において、ｐＨおよび浸透効果が決定される。
【0005】
本明細書において、いくつかの実施形態において、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解性および透過性を増強するための処方物を同定する方法であって、以下を含む方法が記載される：（ａ）１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビター；および（ｂ）アルコール、グリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒；を含み；ここで、製剤は、約３．５～約８．０であり、有機水溶性溶媒は、水中での１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度と比較して、１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を高める。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される製剤は、１つ以上の弱塩を含む。例示的な弱塩としては、例えば、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などの弱塩、またはＮ－メチルプリロリドン（ＮＭＰ）を含む、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物と、１種以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせとの組み合わせである。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは５％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はシルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はタダラフィルである。
【0006】
本明細書に記載される、いくつかの実施形態では、それを必要とする被験体の勃起不全を治療する方法であって、被験体の粘膜を本明細書に開示される製剤と接触させ、それによって被験体の勃起不全を治療することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、経鼻投与を含む。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、舌下投与を含む。
【0007】
本明細書において、いくつかの実施形態では、被験体の勃起不全を治療するための製剤を調製する方法であって、以下を含む方法が記載される：（ａ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を、アルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒に添加する工程；（ｂ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を含む有機水溶性溶媒のｐＨを約３．５～約８．０に調整する工程であって、勃起不全を処置することが、被験体の粘膜と製剤とを接触させることを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１つ以上の弱塩を含む。例示的な弱塩としては、例えば、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などの弱塩、またはＮ－メチルプリロリドン（ＮＭＰ）を含む、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物と、１つ以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせとの組み合わせである。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度は、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの水中での溶解度と比較して、有機水溶性溶媒中で増大する。いくつかの実施形態において、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性は、水中における１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性と比較して、有機水溶性溶媒中で増大する。いくつかの実施形態において、インビトロでの人工膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過は、水中での１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能は、水中での１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは、５％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はタダラフィルである。
【図面の簡単な説明】
【0008】
【図6】図６は、ＰＡＭＰＡまたはＣａｌｕ－３細胞株モデルのいずれかを用いた、異なる溶液におけるバルデナフィルＰａｐｐ値の比較を示す。開円は水溶液を表す。閉円は、ＥｔＯＨ（１２％）、ＰＥＧ４００（１５％）、ＮＭＰ（１０％）、乳酸カルシウム（５％）、ＥｔＯＨ／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）、ＥｔＯＨ／乳酸カルシウム（）１２％／５％を表す。）ＰＥＧ４００（１５％）の最も低いＰａｐｐ（左下）だけが、水中より有意に低い（ｐ＜０．０５ｔ－ｔｅｓｔ）。
【図9】図９は、ＰＡＭＰまたはＣａｌｕ－３細胞株モデルのいずれかを用いた、異なる溶液中のＰａｐｐ値の比較を示している。開円は水溶液を表す。閉円は酢酸／ＮＭＰ／乳酸カルシウム（５／１０／３．５％）、酢酸／乳酸カルシウム（５／３．５％）、酢酸／乳酸カルシウム（１／３．５％）、ＮＭＰ（１０％）、乳酸カルシウム（３．５％）を示す。
【発明を実施するための形態】
【0009】
本発明は、粘膜中のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性および透過性を最適化する製剤および方法に関する。本明細書で提供される製剤および方法は、例えば、勃起不全の治療に使用することができる。本明細書に開示される製剤および方法は、酸性化合物および塩基性化合物、ならびにホスホジエステラーゼ阻害剤ではない薬剤または他の化合物を含む、任意のイオン化可能な化合物に適用可能であることが、当業者には理解されるであろう。本明細書に開示される製剤を通して粘膜中に投与され得るイオン化可能な化合物の非限定的な例としては、レボドパ、クロロチアジド、フロセミド、イブプロフェン、レボドパ、ワルファリン、アセタゾラミド、フェニトイン、テオフィリン、クロロプロパミド、ブメタニド、ジアゼパム、アロプリノール、アルプレノロール、アンフェタミン、アトロピン、コデイン、リドカイン、メトプロロール、エピネフリン、イミプラミン、メタドン、メタンフェタミン、モルヒネ、ニコチン、ノルエピネフリン、およびピロカルピンが挙げられる。
【0010】
正常な陰茎の勃起は、陰茎の血液の流入と平滑筋の弛緩から生じる。このプロセスは、脊髄反射、Ｌ－アルギニン－一酸化窒素－グアニリルシクラーゼ－環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）経路、および感覚的および精神的刺激によって媒介される。神経と内皮細胞は陰茎で直接一酸化窒素を放出し、そこで一酸化窒素はグアニリルシクラーゼを刺激してｃＧＭＰを産生し、細胞内カルシウム濃度を低下させる。これが動脈および海綿体平滑筋の弛緩を誘発し、動脈の拡張、静脈の収縮、勃起につながる。収縮と弛緩を刺激する因子のバランスが、陰茎血管系と海綿体平滑筋の緊張を決定する。
【0011】
ホスホジエステラーゼ５（ＰＤＥ５）は、海綿体において優勢なホスホジエステラーゼである。ＰＤＥ５の触媒部位は、通常、ｃＧＭＰを分解し、シルデナフィルのようなＰＤＥ５阻害剤は、触媒部位での分解を阻害することにより、ｃＧＭＰの内因性の増加を増強する。ＰＤＥ５のリン酸化は、その酵素活性を高めるだけでなく、ｃＧＭＰに対するアロステリック部位（非触媒／ＧＡＦドメイン）の親和性を高める。アロステリック部位へのｃＧＭＰの結合は、さらに酵素活性を刺激する。このように、ＰＤＥ５のリン酸化と非触媒部位へのｃＧＭＰの結合は、ｃＧＭＰ経路の負のフィードバック制御を媒介する。
【0012】
シルデナフィル、タダラフィル、およびバルデナフィルは、勃起不全の治療薬としてＦＤＡによって承認されている。これらの薬剤はすべてホスホジエステラーゼ阻害剤として作用する。ホスホジエステラーゼ阻害薬とは、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）という酵素の５つのサブタイプのうち１つ以上を阻害し、細胞内セカンドメッセンジャーである環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）と環状グアノシン一リン酸（ｃＭＰ）の不活性化を防ぐ薬剤である。ホスホジエステラーゼは、平滑筋の弛緩と性的刺激時の勃起の引き金となる環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の分解に関与していることから、これらの薬剤による１つ以上のホスホジエステラーゼの阻害は、ｃＧＭＰを増加させることによって勃起機能を高めることになる。
【0013】
シルデナフィル（バイアグラ）
シルデナフィル（バイアグラ）の有効量は、必要に応じて１日１回２５～１００ｍｇである。有効成分はクエン酸シルデナフィルである。その平均最高血漿中濃度は約６０分（範囲３０～９０分）で、絶対的バイオアベイラビリティは約４１％である。本剤は主にチトクロームＰ４５０３Ａ４（ＣＹＰ３Ａ４）で代謝され、半減期は約４時間である（１）。
シルデナフィル（バイアグラ）の有効量は、必要に応じて１日１回２５～１００ｍｇである。有効成分はクエン酸シルデナフィルである。その平均最高血漿中濃度は約６０分（範囲３０～９０分）で、絶対的バイオアベイラビリティは約４１％である。本剤は主にチトクロームＰ４５０３Ａ４（ＣＹＰ３Ａ４）で代謝され、半減期は約４時間である（１）。
【0014】
タダラフィル（シアリス）
タダラフィル（シアリス）の有効量は、必要に応じて１日１回５～２０ｍｇである。有効成分はタルダフィルである。最高血漿中濃度の平均時間（Ｔｍａｘ）は、単回投与後約２時間（範囲３０分～６時間）である（２）。本薬剤は主にＣＹＰ３Ａ４で代謝され、カテコール代謝物となり、さらにグルクロン酸抱合体となる。平均終末半減期は健常人において約１７．５時間である（２）。経口投与後の絶対的バイオアベイラビリティは８０％を超えないと報告されている（３）。
タダラフィル（シアリス）の有効量は、必要に応じて１日１回５～２０ｍｇである。有効成分はタルダフィルである。最高血漿中濃度の平均時間（Ｔｍａｘ）は、単回投与後約２時間（範囲３０分～６時間）である（２）。本薬剤は主にＣＹＰ３Ａ４で代謝され、カテコール代謝物となり、さらにグルクロン酸抱合体となる。平均終末半減期は健常人において約１７．５時間である（２）。経口投与後の絶対的バイオアベイラビリティは８０％を超えないと報告されている（３）。
【0015】
バルデナフィル（レビトラ）
バルデナフィル（レビトラ）の標準的な推奨用量は、必要に応じて１日１回１０～２０ｍｇ錠である。有効成分はバルデナフィル塩酸塩三水和物である。最高血漿中濃度の平均時間（Ｔｍａｘ）は約６０分（３０分～２時間）であり、経口投与後の絶対的バイオアベイラビリティは約１５％である。本薬はほとんどＣＹＰ３Ａ４で代謝され、Ｍ１代謝物は全薬理活性の約７％を占める。バルデナフィルまたはＭ１代謝物の終末半減期は約４～５時間であり、治療効果の発現は約３０分である（４）。
バルデナフィル（レビトラ）の標準的な推奨用量は、必要に応じて１日１回１０～２０ｍｇ錠である。有効成分はバルデナフィル塩酸塩三水和物である。最高血漿中濃度の平均時間（Ｔｍａｘ）は約６０分（３０分～２時間）であり、経口投与後の絶対的バイオアベイラビリティは約１５％である。本薬はほとんどＣＹＰ３Ａ４で代謝され、Ｍ１代謝物は全薬理活性の約７％を占める。バルデナフィルまたはＭ１代謝物の終末半減期は約４～５時間であり、治療効果の発現は約３０分である（４）。
【0016】
これら３種類のホスホジエステラーゼ阻害薬は、それぞれ勃起不全に対してＦＤＡによって承認されており、最大濃度の平均時間（Ｔｍａｘ）は約６０分以上であり、初期のＴｍａｘは３０分である。したがって、これらの薬剤の作用発現は通常３０分以降であり、最大効果は１時間後である。ｐＨ４．０～７（鼻腔および舌下膜における生理的ｐＨ範囲に近い）（５－７）における水溶性が低いため、これらの薬剤は速効性を得るために舌下または鼻腔内に投与する場合、水溶液としての投与には適さない。
【0017】
舌下または鼻の部位で良好な透過および／または吸収を達成するためには、薬剤は分子量が小さく（＜１ｋＤ）、膜分配係数が良好で（ｌｏｇ Ｐが良好）、水溶性が良好でなければならない（７－９）。経鼻・舌下投与では、鼻や舌の膜が薄いため、経口投与よりも速やかに吸収される（６、７）。さらに、経鼻および舌下投与経路は肝臓での初回代謝をバイパスすることができ、経口投与によるバイオアベイラビリティよりも高いバイオアベイラビリティを得ることができる（１０－１１）。しかしながら、３種類のホスホジエステラーゼ阻害薬のｐＨ４．０－７．０における水溶性は低く、これは鼻腔または舌下での効率的な透過および／または吸収の大きな障害となる。舌下または鼻腔内投与経路による粘膜透過および／または吸収を最適化するためには、溶解度を向上させ、これらの部位における適切なｐＨにおける透過性と同様またはそれ以上の透過性を達成することができる適切な溶媒（有機水性混合溶媒など）が必要である。しかし、これらの溶媒における最適ｐＨでの溶解度と透過性を予測する信頼できる方法はない。
【0018】
定義
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形は、文脈上明らかにそうでないことが指示されない限り、複数の参照を含む。したがって、例えば、「方法」への言及は、本開示等を読めば当業者に明らかになるであろう、本明細書に記載される種類の１つ以上の方法、および／またはステップを含む。
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形は、文脈上明らかにそうでないことが指示されない限り、複数の参照を含む。したがって、例えば、「方法」への言及は、本開示等を読めば当業者に明らかになるであろう、本明細書に記載される種類の１つ以上の方法、および／またはステップを含む。
【0019】
他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書において、量、時間的持続時間などのような測定可能な値に言及する際に使用される「約」は、開示される組成物に対して、または開示される方法を実施するために、そのような変動が適切であるように、指定された値から±２０％、±１０％、または±５％、さらには±１％の変動を包含することを意味する。
【0020】
標準的な化学用語の定義は、参考文献Ｃａｒｅｙ ａｎｄ Ｓｕｎｄｂｅｒｇ“ＡＤＶＮＣＥＤ ＯＲＧＡＮＩＣ ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ ４ＴＨ ＥＤ”Ｖｏｌｓ．Ａ（２０００）およびＢ（２００１），Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを含む参考文献で見つけることもできる。特に断らない限り、質量分析、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術および薬理学の当業者の慣用的な方法が採用される。特定の定義が提供されない限り、本明細書に記載される分析化学、有機合成化学、および医薬化学に関連して採用される命名法、ならびに実験室での手順および技術は、当技術分野で公知のものである。標準的な技術は、化学合成、化学分析、医薬の調製、製剤化、および送達、ならびに患者の治療に使用することができる。反応および精製技術は、例えば、製造業者の仕様のキットを用いて、または当該技術分野において一般的に達成されるように、または本明細書に記載されるように、実施することができる。前述の技術および手順は、当技術分野で公知の方法、および本明細書を通して引用され、議論される様々な一般的およびより具体的な参考文献に記載されるように、一般的に実施することができる。
【0021】
本明細書で使用される場合、「浸透」または「吸収」という用語は、別段の指定がない限り、粘膜を通る医薬の活性化合物の「浸透」を意味する。「浸透」および「吸収」という用語は、互換的に使用することができる。
【0022】
本明細書で使用される場合、「経粘膜」または「粘膜中に」という用語は、別段の指定がない限り、粘膜を介する任意の投与経路を意味する。例としては、医薬品または医薬品の活性化合物の舌下、鼻腔、膣および直腸投与が挙げられるが、これらに限定されない。
【0023】
本明細書中で使用される場合、用語「ホスホジエステラーゼ阻害剤」は、酵素ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）の１つ以上のサブタイプをブロックし、それによってそれぞれのＰＤＥサブタイプ（複数可）による細胞内セカンドメッセンジャー環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）および環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の不活性化を防止する任意の薬剤を指す。用語「ホスホジエステラーゼ阻害剤」は、ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３、ＰＤＥ４、ＰＤＥ５、ＰＤＥ６、ＰＤＥ７、ＰＤＥ８、ＰＤＥ９、ＰＤＥ１０、ＰＤＥ１１および／またはＰＤＥ１２の阻害剤を指し得る。ホスホジエステラーゼ阻害剤には、選択的阻害剤と非選択的阻害剤がある。
【0024】
本明細書において、「被験体」という用語は、動物およびヒトを意味する。
【0025】
「環境」または「投与環境」という用語は、医薬品の活性化合物が粘膜を透過して吸収される環境を意味する。例えば、投与が舌下で行われる場合、環境は唾液であり、これは薬剤を含み、舌下粘膜を「浴」している。
【0026】
特定のｐＨを有する環境を提供する実施形態の方法は、医薬の投与中に好ましいｐＨを有する環境を提供すること、および医薬自体が所望のｐＨを有する環境を提供することができるように医薬の適切な製剤を作製することを含む。いくつかの実施形態では、後者が好ましい。この場合、好ましくは緩衝剤が製剤に関与する。
【0027】
本明細書に記載される実施形態は、治療有効濃度を達成するために可溶化され、次いで粘膜を横切って透過または吸収される必要があるバルデナフィル量の推定範囲（バルデナフィルＡＰＩの最小量から最小有効量を表す２倍量まで）を計算することを含むことができる。
【0028】
本明細書に記載の実施形態は、投与形態または投与経路に依存する様々な製剤または組成物を含むことができる。例えば、医薬品を含む製剤または組成物が舌下に投与される場合、錠剤、丸薬、ペレット、粉末、液体またはスプレーの形態であり得る。他の適切な製剤または組成物の例としては、軟膏、カプセル、溶液、シロップ、滴下、顆粒および座薬が挙げられるが、これらに限定されない。いずれの製剤または組成物においても、医薬品は、治療上有効な量の活性化合物またはその薬学的に許容される形態、あるいはいずれかの実体および薬学的に許容される担体を含むことができる。別の例として、医薬品を含む製剤または組成物が経鼻投与される場合、製剤または組成物は液体形態であり得る。経鼻投与に適した液体形態は、例えば、点鼻薬および点鼻薬である。
【0029】
いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターは舌下投与される。１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの舌下投与のために、製剤または組成物は、上記の形態のいずれかであり得る。舌下投与のために錠剤、丸薬、ペレット、粉末、液体またはスプレーを製造する任意の方法を使用することができる。錠剤を製造するには、例えば、顆粒化した粉末をプレスして小さな錠剤にする。錠剤は唾液と混ざると崩壊し、薬剤の可溶化と吸収をもたらす。薬剤の透過および／または吸収のために所望のｐＨ範囲を得るために、例えば唾液との混合を考慮して錠剤を製剤化する。
【0030】
アルコール粉末は、舌下投与用の錠剤の製造に使用することができる。別の例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を舌下投与用の錠剤の製造に使用することができる。アルコール粉末もＰＥＧも水と混和性である。使用できる例示的な液体ＰＥＧには、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、およびＰＥＧ６００が含まれるが、これらに限定されない。使用可能な例示的なワックス状または固体ＰＥＧとしては、ＰＥＧ３０００、ＰＥＧ３３５０、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００、ＰＥＧ８０００などの平均分子量が約６００ｇ／ｍｏｌ（ＰＥＧ６００）を超えるＰＥＴＧが挙げられるが、これらに限定されない。
【0031】
いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターは経鼻投与される。１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの経鼻投与のために、製剤または組成物は、例えば、点鼻スプレーまたは液体滴を含む、上記の形態のいずれかであり得る。設定された容量の経鼻投与または舌下投与には、特別な装置を使用することができる。このような装置の例示的な容量は、１０μｌ～１．６ｍｌの範囲とすることができ、これを２つの鼻孔のそれぞれに送達することができる。さらに例示的な容量は、少なくとも１つの鼻孔につき２５μｌ～１．０ｍｌ、５０μｌ～８００μｌ、７５μｌ～６００μｌ、１００μｌ～５００μｌ、または２００μｌ～３００μｌの範囲とすることができる。 経鼻投与用の装置は、例えばＡｐｔａｒ社から市販されている。
【0032】
鼻腔内（ＩＮ）薬剤投与、例えば鼻腔スプレーによる投与は、便利な投与経路である。 この投与経路は、経口薬剤投与と比較して以下の利点を達成することができる。（ａ）より速い効果をもたらし、（ｂ）等しい効果を達成するために薬剤曝露量がより少量であり、（ｃ）嚥下用の水を必要とせずに投与することができる。このような経鼻投与の利点は、（腸上皮と比較して）鼻粘膜を覆う漏出性の上皮、広範な血管供給、比較的大きな表面積（微絨毛を含めて約９．６ｍ２）、および初回通過代謝の回避により可能となる（３－９）。ＩＮ経路での薬剤吸収の表面積が比較的大きいことも、舌下経路より有利である。舌下経路も迅速な効果発現が可能であるが、表面積がはるかに小さい（２６ｃｍ２）ため、バルデナフィルのような薬剤の吸収には限界があり、複数回投与しない限り十分な治療効果が得られない。
【0033】
鼻の部位で良好な透過および／または吸収を達成するためには、低分子量（＜１ｋＤ）が好ましく、良好な膜分配係数（良好ｌｏｇＰ）、良好な水溶性、および鼻の生理的ｐＨでイオン化および良好な透過をもたらし得る望ましいｐＫａを有する。鼻の生理的ｐＨは６．４であるため、鼻粘膜の刺激を避けるために、製剤のｐＨをｐＨ３．５－７．５の間に保つことが一般的に推奨されている（５、１０－１１）。しかし、個々の薬剤の溶解性と透過性を最適化するためには、製剤のｐＨを生理的ｐＨから逸脱させる必要がある場合もある。推奨される想定される目標ｐＨはｐＨ３．５－７．５である（１１）。
【0034】
バルデナフィルＨＣＬ三水和物の分子量は５７９．１である（１２）。バルデナフィル遊離塩基の分子量は４８８．６であり、ｌｏｇＰ＝３．６４、ｐＫａ＝７．１５（主に塩基性）および９．８６（主に酸性）である。塩基性化合物であるバルデナフィルの水溶性はｐＨに依存し、ｐＨ４－７（１２－１３）では２ｍｇ／ｍｌ以下であると報告されている。バルデナフィル塩酸塩三水和物の水に対する溶解度はバルデナフィル塩基よりも高いが、バルデナフィル原薬の溶解度はまださらなる改善が必要である（図２－３）。薬剤は、治療効果を発揮する前に速やかに経鼻吸収されるために可溶性でなければならないため、バルデナフィルＩＮ製剤の基本的なステップとしては、十分な溶解性と望ましい薬剤量の透過性を達成することである。バルデナフィル原薬のＩＮ製剤を最適化するためには、ｐＨ３．５－７．５における溶解性と透過性を実験的に決定する必要がある。
【0035】
製剤試薬
アルコール類
特定の実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の透過性を増加させるための製剤および組成物は、少なくとも１つのアルコールを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための製剤および組成物は、１つ以上の弱塩を含む。例示的な弱塩としては、例えば、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などの弱塩、またはＮ－メチルプリロリドン（ＮＭＰ）を含む、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物と、１種以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせとの組み合わせ。アルコールは、アルキル基の炭素原子に結合した１つ以上のヒドロキシル（－ＯＨ）基を含む化合物のファミリーである。アルコールは、鎖中に任意の数の炭素原子を持つことができる。アルコールは第一級アルコール、第二級アルコール、第三級アルコールのいずれでもあり得る。一価アルコールおよび多価アルコールが知られている。例示的な一価アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノールなどが挙げられる。例示的な多価アルコールとしては、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール（グリセリン）などが挙げられる。 いくつかの実施形態において、アルコールはエタノールである。いくつかの実施形態において、アルコールは、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、およびその間の任意の数または範囲の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは約５％～約４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、約１２％、約２５％、または約３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、アルコールはグリセロール（グリセリン）である。いくつかの実施形態において、グリセロールは、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％の濃度で存在する。
アルコール類
特定の実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の透過性を増加させるための製剤および組成物は、少なくとも１つのアルコールを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための製剤および組成物は、１つ以上の弱塩を含む。例示的な弱塩としては、例えば、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウムまたは類似の有機塩などの弱塩、またはＮ－メチルプリロリドン（ＮＭＰ）を含む、Ｔｗｅｅｎ８０または類似の有機化合物と、１種以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせとの組み合わせ。アルコールは、アルキル基の炭素原子に結合した１つ以上のヒドロキシル（－ＯＨ）基を含む化合物のファミリーである。アルコールは、鎖中に任意の数の炭素原子を持つことができる。アルコールは第一級アルコール、第二級アルコール、第三級アルコールのいずれでもあり得る。一価アルコールおよび多価アルコールが知られている。例示的な一価アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノールなどが挙げられる。例示的な多価アルコールとしては、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール（グリセリン）などが挙げられる。 いくつかの実施形態において、アルコールはエタノールである。いくつかの実施形態において、アルコールは、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、およびその間の任意の数または範囲の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは約５％～約４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、約１２％、約２５％、または約３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、アルコールはグリセロール（グリセリン）である。いくつかの実施形態において、グリセロールは、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％の濃度で存在する。
【0036】
ポリエーテル
勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための、本明細書に記載の製剤および組成物は、特定の実施形態において、ポリエーテルを含有し得る。ポリエーテルは、１つ以上のエーテル官能基を含むポリマーである。ポリエーテルとしては、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリテトラメチレングリコール（ＰＴＭＧ）、ポリテトラメチレンエーテルグリコール（ＰＴＭＥＧ）、およびパラホルムアルデヒドが挙げられる。芳香族ポリエーテルとしては、例えば、ポリフェニルエーテル（ＰＰＥ）およびポリ（ｐ－フェニレンオキシド）（ＰＰＯ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ポリエーテルはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の分子量は、３００ｇ／ｍｏｌ～１０００００００ｇ／ｍｏｌの範囲であり得る。いくつかの実施形態において、ポリエーテルはＰＥＧ６０００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、約０．５％、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２５％、約３０％、およびその間の任意の数または範囲の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、約１％～約２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は約５％の濃度で存在する。
勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための、本明細書に記載の製剤および組成物は、特定の実施形態において、ポリエーテルを含有し得る。ポリエーテルは、１つ以上のエーテル官能基を含むポリマーである。ポリエーテルとしては、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリテトラメチレングリコール（ＰＴＭＧ）、ポリテトラメチレンエーテルグリコール（ＰＴＭＥＧ）、およびパラホルムアルデヒドが挙げられる。芳香族ポリエーテルとしては、例えば、ポリフェニルエーテル（ＰＰＥ）およびポリ（ｐ－フェニレンオキシド）（ＰＰＯ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ポリエーテルはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の分子量は、３００ｇ／ｍｏｌ～１０００００００ｇ／ｍｏｌの範囲であり得る。いくつかの実施形態において、ポリエーテルはＰＥＧ６０００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、約０．５％、約１．０％、約２．０％、約３．０％、約４．０％、約５．０％、約６．０％、約７．０％、約８．０％、約９．０％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２５％、約３０％、およびその間の任意の数または範囲の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は、約１％～約２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）は約５％の濃度で存在する。
【0037】
グリセリド
特定の実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための製剤および組成物は、少なくとも１つ以上のグリセリドを含む。グリセリドは、グリセロールと脂肪酸とから形成されるエステルである。例示的なグリセリドには、モノ、ジーおよびトリグリセリドが含まれる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される製剤および組成物は、中鎖グリセリドを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される配合物および組成物は、ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドを含む。いくつかの実施形態において、ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドは、飽和ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される配合物および組成物は、グリセリドの混合物を含む。混合物中のグリセリドは、不飽和または飽和であり得る。いくつかの実施形態において、グリセリドの混合物は、追加の化学物質または化合物を含む。いくつかの実施形態において、グリセリドは、ポリオキシルグリセリドを含む。いくつかの実施形態において、グリセリドは、カプリロカプロイルポリオキシル－８グリセリドまたはカプリロカプロイルマクロゴール－８グリセリドからなる。いくつかの実施形態において、グリセリドは、カプリル酸／カプリン酸グリセリドからなる。いくつかの実施形態において、カプリル／カプリン酸グリセリドは、例えばＰＥＧ－８などのポリエチレングリコールをさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤および組成物は、ＬＡＢＲＡＳＯＬ（登録商標）を含む。
特定の実施形態において、本明細書に記載される、勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性を増加させるための製剤および組成物は、少なくとも１つ以上のグリセリドを含む。グリセリドは、グリセロールと脂肪酸とから形成されるエステルである。例示的なグリセリドには、モノ、ジーおよびトリグリセリドが含まれる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される製剤および組成物は、中鎖グリセリドを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される配合物および組成物は、ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドを含む。いくつかの実施形態において、ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドは、飽和ポリグリコリド化Ｃ８～Ｃ１０グリセリドである。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される配合物および組成物は、グリセリドの混合物を含む。混合物中のグリセリドは、不飽和または飽和であり得る。いくつかの実施形態において、グリセリドの混合物は、追加の化学物質または化合物を含む。いくつかの実施形態において、グリセリドは、ポリオキシルグリセリドを含む。いくつかの実施形態において、グリセリドは、カプリロカプロイルポリオキシル－８グリセリドまたはカプリロカプロイルマクロゴール－８グリセリドからなる。いくつかの実施形態において、グリセリドは、カプリル酸／カプリン酸グリセリドからなる。いくつかの実施形態において、カプリル／カプリン酸グリセリドは、例えばＰＥＧ－８などのポリエチレングリコールをさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤および組成物は、ＬＡＢＲＡＳＯＬ（登録商標）を含む。
【0038】
溶剤安定剤／浸透促進剤
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の浸透性を増加させるための製剤および組成物は、溶媒、安定剤または浸透促進剤として機能する特定の他の化合物または化学物質を含有し得る。例として、本明細書に記載の製剤および組成物は、ジエチレングリコールモノエチルエーテルを含有し得る。ジエチレングリコールモノエチルエーテルは、２－（２－エトキシエトキシ）エタノールとしても知られており、ＴＲＡＮＳＣＵＴＯＬの商品名で販売されている。この化合物は、高純度溶媒および安定剤として機能し、局所投与剤形における皮膚浸透性の増強に関連する。他の適切な溶媒、安定剤および浸透促進剤は、当業者に周知であろう。このような化合物の量は、０．１～９９．９重量％、１．０～９９重量％、５～９５重量％、１０～９０重量％、または２０～８０重量％の範囲など、所望の製剤に応じて変化させることができる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される勃起不全を治療するための、１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を増加させるための、および／または１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の浸透性を増加させるための製剤および組成物は、溶媒、安定剤または浸透促進剤として機能する特定の他の化合物または化学物質を含有し得る。例として、本明細書に記載の製剤および組成物は、ジエチレングリコールモノエチルエーテルを含有し得る。ジエチレングリコールモノエチルエーテルは、２－（２－エトキシエトキシ）エタノールとしても知られており、ＴＲＡＮＳＣＵＴＯＬの商品名で販売されている。この化合物は、高純度溶媒および安定剤として機能し、局所投与剤形における皮膚浸透性の増強に関連する。他の適切な溶媒、安定剤および浸透促進剤は、当業者に周知であろう。このような化合物の量は、０．１～９９．９重量％、１．０～９９重量％、５～９５重量％、１０～９０重量％、または２０～８０重量％の範囲など、所望の製剤に応じて変化させることができる。
【0039】
緩衝剤
本明細書に記載される実施形態において使用され得る緩衝化剤は、当業者に公知であろう。参照により本明細書に組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ （Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ａｉｎｌｅｙ Ｗａｄｅ ａｎｄ Ｐａｕｌ Ｊ Ｗ Ｗｅｌｌｅｒ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ Ｌｏｎｄｏｎ，１９９４を参照されたい。例示される緩衝剤としては、リン酸ナトリウムのようなリン酸塩；リン酸二水素ナトリウムおよびリン酸二水素カリウムのような一塩基性リン酸塩；リン酸水素二ナトリウムおよびリン酸水素二カリウムのような二塩基性リン酸塩；クエン酸ナトリウム（無水物または脱水物）のようなクエン酸塩；炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムのような炭酸水素塩が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に記載の製剤および方法において使用される緩衝剤の量は、好ましいｐＨ値に依存して、当業者によって容易に決定される。本明細書で企図される特定の実施形態は、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、約３．９、約４．０、約４．１、約４．２、約４．３、約４．４、約４。５、約４．６、約４．７、約４．８、約４．９、約５．０、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、約６．０、約６．１、約６．２、約６．３、約６．４、約６．５、約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約８．０、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８．０、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、約８．５、約８．６、約８．７、約８．８、約８．９または約９．０、およびその間の任意の数または範囲である。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約３．５～約６．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約４．０～約５．０のｐＨを有する。
本明細書に記載される実施形態において使用され得る緩衝化剤は、当業者に公知であろう。参照により本明細書に組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ （Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ａｉｎｌｅｙ Ｗａｄｅ ａｎｄ Ｐａｕｌ Ｊ Ｗ Ｗｅｌｌｅｒ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ Ｌｏｎｄｏｎ，１９９４を参照されたい。例示される緩衝剤としては、リン酸ナトリウムのようなリン酸塩；リン酸二水素ナトリウムおよびリン酸二水素カリウムのような一塩基性リン酸塩；リン酸水素二ナトリウムおよびリン酸水素二カリウムのような二塩基性リン酸塩；クエン酸ナトリウム（無水物または脱水物）のようなクエン酸塩；炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウムのような炭酸水素塩が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に記載の製剤および方法において使用される緩衝剤の量は、好ましいｐＨ値に依存して、当業者によって容易に決定される。本明細書で企図される特定の実施形態は、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、約３．９、約４．０、約４．１、約４．２、約４．３、約４．４、約４。５、約４．６、約４．７、約４．８、約４．９、約５．０、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、約６．０、約６．１、約６．２、約６．３、約６．４、約６．５、約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約８．０、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８．０、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、約８．５、約８．６、約８．７、約８．８、約８．９または約９．０、およびその間の任意の数または範囲である。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約３．５～約６．５のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤または組成物は、約４．０～約５．０のｐＨを有する。
【0040】
キャリア
本明細書に記載の実施形態において好適に使用されるキャリアは、医薬の特定の製剤または組成物に依存する。キャリアとしては、これらに限定されないが、充填剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、甘味剤および香味剤、保存剤、崩壊剤、焼成剤、浸透促進剤が挙げられる。キャリアの例としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類、トウモロコシ、アカシアなどの天然および合成ガム、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、寒天、ベントナイト、寒天ガム、ステアリン酸ナトリウムなどのステアリン酸塩、ＨＰＭＣ、パルミチン酸、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド、２－ピロリドン、１－メチル－２－ピロリドン、１、５－ジメチル－２－ピロリドン、１－エチル－２－ピロリドン、２－ピロリド－５－カルボン酸、Ｎ、Ｎ－ジメチル－ｍ－トルアミド、尿素、酢酸エチル、１－ドデシルアザシクロヘプタン－２－オン（アゾン（登録商標））、オレイン酸、エチレン酢酸ビニル共重合体、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、フタル酸ポリジエチル。
本明細書に記載の実施形態において好適に使用されるキャリアは、医薬の特定の製剤または組成物に依存する。キャリアとしては、これらに限定されないが、充填剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、甘味剤および香味剤、保存剤、崩壊剤、焼成剤、浸透促進剤が挙げられる。キャリアの例としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類、トウモロコシ、アカシアなどの天然および合成ガム、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、寒天、ベントナイト、寒天ガム、ステアリン酸ナトリウムなどのステアリン酸塩、ＨＰＭＣ、パルミチン酸、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド、２－ピロリドン、１－メチル－２－ピロリドン、１、５－ジメチル－２－ピロリドン、１－エチル－２－ピロリドン、２－ピロリド－５－カルボン酸、Ｎ、Ｎ－ジメチル－ｍ－トルアミド、尿素、酢酸エチル、１－ドデシルアザシクロヘプタン－２－オン（アゾン（登録商標））、オレイン酸、エチレン酢酸ビニル共重合体、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、フタル酸ポリジエチル。
【0041】
様々な実施形態の一般的説明
粘膜を通過する１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性／透過性を高めるための例示的な製剤
本明細書において、いくつかの実施形態において、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解性／透過性を増強するための製剤であって、以下：（ａ）１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビター；および（ｂ）アルコール、グリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒；を含み；ここで、製剤は、約３．５～約８．０であり、有機水溶性溶媒は、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの水への溶解度と比較して、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を高める。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは、％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、弱塩を含む。弱塩の非限定的な例としては、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウム、類似の有機塩、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０、または類似の有機化合物が挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１つ以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約５．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、タダラフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルおよび／またはタダラフィルと組み合わせたバルデナフィルである。
粘膜を通過する１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性／透過性を高めるための例示的な製剤
本明細書において、いくつかの実施形態において、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解性／透過性を増強するための製剤であって、以下：（ａ）１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビター；および（ｂ）アルコール、グリコール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒；を含み；ここで、製剤は、約３．５～約８．０であり、有機水溶性溶媒は、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの水への溶解度と比較して、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度を高める。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは、％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、弱塩を含む。弱塩の非限定的な例としては、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウム、類似の有機塩、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０、または類似の有機化合物が挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１つ以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約５．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、タダラフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルおよび／またはタダラフィルと組み合わせたバルデナフィルである。
【0042】
勃起不全を治療するための例示的な方法
本明細書に記載される、いくつかの実施形態では、それを必要とする被験体の勃起不全を治療する方法であって、被験体の粘膜を本明細書に開示される製剤と接触させ、それによって被験体の勃起不全を治療することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、経鼻投与を含む。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、舌下投与を含む。
本明細書に記載される、いくつかの実施形態では、それを必要とする被験体の勃起不全を治療する方法であって、被験体の粘膜を本明細書に開示される製剤と接触させ、それによって被験体の勃起不全を治療することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、経鼻投与を含む。いくつかの実施形態において、粘膜を接触させることは、舌下投与を含む。
【0043】
勃起不全治療用製剤の例示的調製方法
本明細書において、いくつかの実施形態では、被験体の勃起不全を治療するための製剤を調製する方法であって、以下を含む方法が記載される：（ａ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を、アルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒に添加する工程；（ｂ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を含む有機水溶性溶媒のｐＨを約３．５～約８．０に調整する工程；ここで、勃起不全を処置することは被験体の粘膜を製剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度は、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの水への溶解度と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、粘膜中の１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性は、水中における１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性と比較して、有機水溶性溶媒中で増大する。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能は、水中における１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは、５％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、弱塩を含む。弱塩の非限定的な例としては、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウム、類似の有機塩、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０、または類似の有機化合物が挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１つ以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約５．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はタダラフィルである。
本明細書において、いくつかの実施形態では、被験体の勃起不全を治療するための製剤を調製する方法であって、以下を含む方法が記載される：（ａ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を、アルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１種以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む有機水溶性溶媒に添加する工程；（ｂ）１種以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を含む有機水溶性溶媒のｐＨを約３．５～約８．０に調整する工程；ここで、勃起不全を処置することは被験体の粘膜を製剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの溶解度は、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの水への溶解度と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、粘膜中の１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性は、水中における１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの透過性と比較して、有機水溶性溶媒中で増大する。いくつかの実施形態において、１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能は、水中における１つ以上のホスホジエステラーゼインヒビターの生物学的利用能と比較して、有機水溶性溶媒中で増加する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒はアルコールを含む。いくつかの実施形態において、アルコールは、エタノールまたはグリセロールである。いくつかの実施形態において、エタノールは、５％～４０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、１２％、２５％、または３０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒は、ポリエーテルを含む。いくつかの実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールである。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、ＰＥＧ６０００またはＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは、１％～２０％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールは５％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、弱塩を含む。弱塩の非限定的な例としては、クエン酸、酒石酸、酢酸、フルマリン酸、乳酸、塩化アンモニウム、類似の有機塩、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、Ｔｗｅｅｎ８０、または類似の有機化合物が挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１つ以上のアルコール、ポリエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、中鎖グリセリド、１つ以上の飽和ポリグリコール化Ｃ８－Ｃ１０グリセリド、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約５．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、バルデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤は、シルデナフィルである。いくつかの実施形態において、ホスホジエステラーゼ阻害剤はタダラフィルである。
【0044】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製剤は、１種以上の有機溶媒または成分を含む有機水溶性溶媒を含む。例示的な有機溶媒または成分の混合物としては、例えば、水中のＰＥＧおよびエタノールが挙げられる。いくつかの実施形態において、水性有機溶媒混合物中のＰＥＧは、ＰＥＧ４００である。いくつかの実施形態において、エタノールは、約５％～約４０％の濃度で水性有機溶媒混合物中に存在する。いくつかの実施形態において、エタノールは、水性有機溶媒混合物中に約１２％の濃度で存在する。いくつかの実施形態において、ＰＥＧは、約１％～約４０％の濃度で水性有機溶媒混合物中に存在する。いくつかの実施形態において、ＰＥＧ４００は、約１％～約４０％の濃度で水性有機溶媒混合物中に存在する。いくつかの実施形態において、ＰＥＧ４００は、約１０％、約１５％、または約２０％の濃度で水性有機溶媒混合物中に存在する。いくつかの実施形態において、製剤は、１２％エタノール中に１０％のＰＥＧ４００を含む。いくつかの実施形態において、製剤は、１２％のエタノール中の１５％のＰＥＧ４００からなる。いくつかの実施形態において、製剤は、１２％のエタノール中の２０％のＰＥＧ４００からなる。１つ以上の有機溶媒または成分を水中に含む製剤は、本明細書に記載される方法のいずれにおいても使用することができる。
【0045】
いくつかの実施形態において、有機水溶性溶媒が１種以上の有機溶媒または成分を含む場合、第２の有機成分は、溶解性、安定性、浸透性、および安全性の群から選択される少なくとも１つの特性を増強する目的で選択される。いくつかの実施形態において、製剤は、約３．５～約８．０のｐＨを有する。
【0046】
本明細書に開示された実施例の多くは、勃起不全の治療に使用される製剤に関するものであるが、この製剤は、任意のイオン化可能な薬剤の１つ以上と組み合わせることができ、その結果、この製剤は、１つ以上のイオン化可能な薬剤によって標的とされる任意の疾患、障害、または症状の治療に使用されることが想定されることが理解されるであろう。
【0047】
処方例
本明細書に開示されるように、新規粘膜製剤（例えば、ＩＮ、舌下製剤）は、（ａ）良好な治療効果または体内の有効薬剤濃度（例えば、血漿薬剤濃度）だけでなく、（ｂ）確立された経口投与経路からのものと比較して迅速な効果発現または体内の迅速なピーク薬剤濃度（Ｔｍａｘ）を達成するか、または確立された注射投与経路（例えば、静脈内または皮下経路）からのものと同様の効果を達成するのに役立つ。いくつかの選択肢において、製剤は、以下の方法論を用いて、所定のイオン化可能な化合物に対して最適化される。
本明細書に開示されるように、新規粘膜製剤（例えば、ＩＮ、舌下製剤）は、（ａ）良好な治療効果または体内の有効薬剤濃度（例えば、血漿薬剤濃度）だけでなく、（ｂ）確立された経口投与経路からのものと比較して迅速な効果発現または体内の迅速なピーク薬剤濃度（Ｔｍａｘ）を達成するか、または確立された注射投与経路（例えば、静脈内または皮下経路）からのものと同様の効果を達成するのに役立つ。いくつかの選択肢において、製剤は、以下の方法論を用いて、所定のイオン化可能な化合物に対して最適化される。
【0048】
ステップ１：粘膜製剤の有効薬剤量の推定
効果的な薬剤投与量を推定する目的は、経口または注射経路からの薬剤と同等の効果または濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を達成するようにすることである。いくつかの選択肢では、有効粘膜投与量を計算するために、確立された経口薬剤の経口投与によるバイオアベイラビリティ、または注射薬剤の注射投与によるバイオアベイラビリティを最初に検討する。例えば、薬剤Ｘの経口バイオアベイラビリティが、肝臓初回通過代謝のために静脈内投与と比較して０．５である場合。ＩＮ経路では肝初回通過代謝が回避されるため、ＩＮ用量は経口用量の半分と推定できる。したがって、薬剤Ｘの経口投与量が１０ｍｇの場合、ＩＮ投与量は約５ｍｇと推定できる。
効果的な薬剤投与量を推定する目的は、経口または注射経路からの薬剤と同等の効果または濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を達成するようにすることである。いくつかの選択肢では、有効粘膜投与量を計算するために、確立された経口薬剤の経口投与によるバイオアベイラビリティ、または注射薬剤の注射投与によるバイオアベイラビリティを最初に検討する。例えば、薬剤Ｘの経口バイオアベイラビリティが、肝臓初回通過代謝のために静脈内投与と比較して０．５である場合。ＩＮ経路では肝初回通過代謝が回避されるため、ＩＮ用量は経口用量の半分と推定できる。したがって、薬剤Ｘの経口投与量が１０ｍｇの場合、ＩＮ投与量は約５ｍｇと推定できる。
【0049】
ステップ２：粘膜薬剤投与に必要な最小可溶性薬剤濃度またはＳｏｌｍｉｎ
ある種の粘膜投与では、投与部位に投与できる量に制限がある。例えば、ＩＮ投与の場合、鼻腔スプレーによる最適容量は、「垂れ落ち」を防止するために、鼻孔あたり通常０．１～０．１５ｍｌで０．２ｍｌ以下である。したがって、両鼻孔に投与する溶液量は約０．２～０．３ｍｌとなる。従って、上記のＩＮ５ｍｇ薬剤Ｘの例（ステップ１）で必要なＳｏｌｍｉｎは、２つの鼻孔にそれぞれ０．１ｍｌスプレーまたは０．１５ｍｌ／スプレーを使用する場合、それぞれ５ｍｇ／０．２ｍｌまたは５ｍｇ／０．３ｍｌ＝２５ｍｇ／ｍｌまたは１７ｍｇ／ｍｌと推定される。同様に、舌下スプレーの場合、選択された所望の容量を使用して、このようなＳｏｌｍｉｎは同様に計算することができる。
ある種の粘膜投与では、投与部位に投与できる量に制限がある。例えば、ＩＮ投与の場合、鼻腔スプレーによる最適容量は、「垂れ落ち」を防止するために、鼻孔あたり通常０．１～０．１５ｍｌで０．２ｍｌ以下である。したがって、両鼻孔に投与する溶液量は約０．２～０．３ｍｌとなる。従って、上記のＩＮ５ｍｇ薬剤Ｘの例（ステップ１）で必要なＳｏｌｍｉｎは、２つの鼻孔にそれぞれ０．１ｍｌスプレーまたは０．１５ｍｌ／スプレーを使用する場合、それぞれ５ｍｇ／０．２ｍｌまたは５ｍｇ／０．３ｍｌ＝２５ｍｇ／ｍｌまたは１７ｍｇ／ｍｌと推定される。同様に、舌下スプレーの場合、選択された所望の容量を使用して、このようなＳｏｌｍｉｎは同様に計算することができる。
【0050】
ステップ３：基準薬剤フラックスまたはＪｓｓ（ｒｅｆ）の決定
薬剤フラックスまたはＪｓｓ（ｒｅｆ）は、特定のｐＨの粘膜に投与された水溶液中の薬剤から粘膜を横切って透過する面積あたりの時間あたりの薬剤の基準量として定義される。薬剤フラックスまたはＪｓｓは溶解度Ｘ見かけの透過性（Ｐａｐｐ）で構成されることがよく知られており、生体膜を通過する薬剤のＰａｐｐは主に非撹拌水層（ＵＷＬ）と薬剤に対する膜の透過性に依存する。粘膜（鼻粘膜など）のＵＷＬは、水を主成分とするゲル状の液体である粘液で覆われている。このような構造から、本特許では、純粋な水溶液中の薬剤のＪｓｓが、有機水溶性溶媒中の薬剤のＪｓｓ（粘膜投与を意図した新しい製剤である。Ｊｓｓ＝（Ｐａｐｐ）（溶解度）であるから、Ｐａｐｐは人工膜ＰＡＭＰＡ（膜の両面がＵＷＬと接触している）によって決定することができる（１６－１９）。ＰＡＭＰＡからのＰａｐｐは、Ｊｓｓ（ｒｅｆ）の推定に有用なアプローチであり、薬剤の有機水性製剤化の指針となることが提案されている。従って、本特許では、さらに以下を提案する。
ここで、飽和水溶液中のイオン化可能な薬剤について、ＪｓｓｐＨｍａｘは、ＰＡＭＰＡによって決定されたＪｓｓ ｖｓ ｐＨプロットからのＪｓｓの最大値であり、最大Ｊｓｓに対応するｐＨはｐＨｍａｘであり、Ｓｏｌｍｉｎ、Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘは、ｐＨｍａｘにおける薬剤の飽和溶解度である。Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘとＰａｐｐとは通常、室温、大気圧で測定される。
薬剤フラックスまたはＪｓｓ（ｒｅｆ）は、特定のｐＨの粘膜に投与された水溶液中の薬剤から粘膜を横切って透過する面積あたりの時間あたりの薬剤の基準量として定義される。薬剤フラックスまたはＪｓｓは溶解度Ｘ見かけの透過性（Ｐａｐｐ）で構成されることがよく知られており、生体膜を通過する薬剤のＰａｐｐは主に非撹拌水層（ＵＷＬ）と薬剤に対する膜の透過性に依存する。粘膜（鼻粘膜など）のＵＷＬは、水を主成分とするゲル状の液体である粘液で覆われている。このような構造から、本特許では、純粋な水溶液中の薬剤のＪｓｓが、有機水溶性溶媒中の薬剤のＪｓｓ（粘膜投与を意図した新しい製剤である。Ｊｓｓ＝（Ｐａｐｐ）（溶解度）であるから、Ｐａｐｐは人工膜ＰＡＭＰＡ（膜の両面がＵＷＬと接触している）によって決定することができる（１６－１９）。ＰＡＭＰＡからのＰａｐｐは、Ｊｓｓ（ｒｅｆ）の推定に有用なアプローチであり、薬剤の有機水性製剤化の指針となることが提案されている。従って、本特許では、さらに以下を提案する。
【数1】
ここで、飽和水溶液中のイオン化可能な薬剤について、ＪｓｓｐＨｍａｘは、ＰＡＭＰＡによって決定されたＪｓｓ ｖｓ ｐＨプロットからのＪｓｓの最大値であり、最大Ｊｓｓに対応するｐＨはｐＨｍａｘであり、Ｓｏｌｍｉｎ、Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘは、ｐＨｍａｘにおける薬剤の飽和溶解度である。Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘとＰａｐｐとは通常、室温、大気圧で測定される。
【0051】
ステップ４：有機水溶性溶媒中の薬剤のＪｓｓｐＨｍａｘの測定
有機水溶性溶媒中の薬剤のＤｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘおよびｐＨｍａｘまたはＰａｐｐｐＨｍａｘにおけるＰａｐｐは、それぞれ通常の「シェイクフラスコ」法(溶解度の決定)（２０－２２）およびＰＡＭＰＡ（透過性の決定）を用いてスクリーニングする。Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ≧Ｓｏｌｍｉｎ（ステップ２で定義）であり、所定の有機水溶性溶媒（または粘膜投与用の特定の製剤）中の薬剤に関する複合（Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）（ＰａｐｐｐＨｍａｘ）またはＪｓｓｐＨｍａｘがＪｓｓ（ｒｅｆ）と等しいか、またはそれを超える場合、その特定の製剤は、投与される薬剤の適切な粘膜製剤として適格である（例えば、ＩＮまたは舌下投与による）。例えば、ＩＮまたは舌下投与により、ステップ１で計算された経口投与によるものと同等の治療効果およびより短いＴｍａｘを達成することができる。
有機水溶性溶媒中の薬剤のＤｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘおよびｐＨｍａｘまたはＰａｐｐｐＨｍａｘにおけるＰａｐｐは、それぞれ通常の「シェイクフラスコ」法(溶解度の決定)（２０－２２）およびＰＡＭＰＡ（透過性の決定）を用いてスクリーニングする。Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ≧Ｓｏｌｍｉｎ（ステップ２で定義）であり、所定の有機水溶性溶媒（または粘膜投与用の特定の製剤）中の薬剤に関する複合（Ｄｒｕｇ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）（ＰａｐｐｐＨｍａｘ）またはＪｓｓｐＨｍａｘがＪｓｓ（ｒｅｆ）と等しいか、またはそれを超える場合、その特定の製剤は、投与される薬剤の適切な粘膜製剤として適格である（例えば、ＩＮまたは舌下投与による）。例えば、ＩＮまたは舌下投与により、ステップ１で計算された経口投与によるものと同等の治療効果およびより短いＴｍａｘを達成することができる。
【0052】
ステップ５：適切な細胞株モデルを用いたＪｓｓｐＨｍａｘのコンフォメーション
ＰＡＭＡによって得られるＰａｐｐは比較的単純で簡便であるが、水溶液や様々な有機水溶性溶媒中での薬剤のＰａｐｐを決定する、より生理学的なアプローチは、上記のステップ１－４で記載された選択された製剤のさらなる確認を提供する。ＩＮ製剤の場合、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いて決定された適切なＰａｐｐの確認を用いることができる（２３－２４）。舌下製剤の場合、ＨＯ－１Ｕ－１細胞株を用いることができる（２５）。ｐＨｍａｘで水溶液中の製剤と比較して有意に低いＰａｐｐを示す有機水溶液製剤は除外すべきである。
ＰＡＭＡによって得られるＰａｐｐは比較的単純で簡便であるが、水溶液や様々な有機水溶性溶媒中での薬剤のＰａｐｐを決定する、より生理学的なアプローチは、上記のステップ１－４で記載された選択された製剤のさらなる確認を提供する。ＩＮ製剤の場合、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いて決定された適切なＰａｐｐの確認を用いることができる（２３－２４）。舌下製剤の場合、ＨＯ－１Ｕ－１細胞株を用いることができる（２５）。ｐＨｍａｘで水溶液中の製剤と比較して有意に低いＰａｐｐを示す有機水溶液製剤は除外すべきである。
【0053】
使用例
ホスホジエステラーゼ阻害剤の効果的なＩＮ投与または舌下投与を達成するための特定の製剤および方法の同定に関連する追加の実施形態をさらに詳細に開示する。これらは、特許請求の範囲を限定することを決して意図するものではない。さらに、本明細書に記載される有効なＩＮまたは舌下投与を達成するための特定の処方および方法の同定は、任意の他のイオン化可能な化合物に適用可能である。以下に含まれる具体例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、およびＤ１～Ｄ４は、溶解性および透過性プロフィールの組み合わせ、ならびにバルデナフィルおよびシルデナフィルが体内で迅速かつ有効な濃度を達成するために必要とされる投与量に基づいて、望ましいＩＮ製剤を同定する方法の連続的なステップを表す。Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３およびＤ５の具体例は、上記の段階的方法によって特定された製剤およびＩＮ投与方法の適切性を確認する生体内の証拠である。
ホスホジエステラーゼ阻害剤の効果的なＩＮ投与または舌下投与を達成するための特定の製剤および方法の同定に関連する追加の実施形態をさらに詳細に開示する。これらは、特許請求の範囲を限定することを決して意図するものではない。さらに、本明細書に記載される有効なＩＮまたは舌下投与を達成するための特定の処方および方法の同定は、任意の他のイオン化可能な化合物に適用可能である。以下に含まれる具体例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、およびＤ１～Ｄ４は、溶解性および透過性プロフィールの組み合わせ、ならびにバルデナフィルおよびシルデナフィルが体内で迅速かつ有効な濃度を達成するために必要とされる投与量に基づいて、望ましいＩＮ製剤を同定する方法の連続的なステップを表す。Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３およびＤ５の具体例は、上記の段階的方法によって特定された製剤およびＩＮ投与方法の適切性を確認する生体内の証拠である。
【0054】
実施例Ａ１
経鼻（ＩＮ）投与と処方
本明細書に記載の承認された経口投与と同等の治療効果を達成するために必要なホスホジエステラーゼ阻害剤、例えばバルデナフィル／シルデナフィルの最小ＩＮ有効投与要件の実施形態は、特定の計算を用いて推定された。このような計算は、十分なバルデナフィル／シルデナフィルおよび鼻腔透過性が同定され、所望の血漿中濃度およびバイオアベイラビリティを導くことができると仮定している。
経鼻（ＩＮ）投与と処方
本明細書に記載の承認された経口投与と同等の治療効果を達成するために必要なホスホジエステラーゼ阻害剤、例えばバルデナフィル／シルデナフィルの最小ＩＮ有効投与要件の実施形態は、特定の計算を用いて推定された。このような計算は、十分なバルデナフィル／シルデナフィルおよび鼻腔透過性が同定され、所望の血漿中濃度およびバイオアベイラビリティを導くことができると仮定している。
【0055】
所望の投与にはさらに、バルデナフィル原薬またはシルデナフィル原薬のＩＮ製剤が必要であり、経口経路からの投与と同様であるが有意に早い有効濃度を達成する量のバルデナフィル塩酸塩三水和物を提供する。例えば、１０－２０ｍｇのバルデナフィル経口投与がＦＤＡによって承認されている場合、適切な製剤によるＩＮ投与は、経口投与と同様のバイオアベイラビリティを達成しつつ、より早いピーク時間（Ｔｍａｘ）を達成するはずである。ＩＮ投与は鼻腔スプレーまたは点鼻薬のいずれかで行われるため、ＩＮ投与量は経鼻投与されたバルデナフィル製剤溶液の量と相対的バイオアベイラビリティ調整後の濃度から推定することができる。以下に計算例を示す。
【0056】
ＩＮ投与では通常、各鼻孔に５０～２００ｕｌ／スプレーを使用するため（２００ｕｌを超えるスプレー量は鼻から垂れ落ちる可能性が高い）、１０ｍｇのバルデナフィル経口投与量に相当するＩＮ投与量として、望ましいスプレー量を１００ｕｌ／鼻孔または２×１００ｕｌ／２鼻孔に設定することができる。点鼻薬の量を２倍にすれば、２０ｍｇの経口投与量に相当するＩＮ用量が得られる。タダラフィルやシルデナフィルのような他のホスホジエステラーゼ阻害剤のＩＮ用量／投与量も、同様に経口投与量と同等に計算できる。
【0057】
経口投与によるバルデナフィル水溶液の吸収が、適切な製剤のＩＮ投与に関連すると仮定し、経口投与によるバルデナフィルの既知のバイオアベイラビリティ／薬剤動態学に基づくと、経鼻投与は０．４－０．８経口投与と同等のバイオアベイラビリティをもたらすと仮定することができるが、はるかに早いピーク濃度を達成することができる。これは、肝臓での初回通過代謝を回避できる経鼻投与の既知の利点に基づくものであり、以前に発表された肺吸入によるバイオアベイラビリティと同様に、鼻腔膜を介した迅速な透過を達成することができる（２６）。このため、ＩＮ製剤には最低２ｍｇ／１００ｕｌの濃度または最低２０ｍｇ／ｍｌのバルデナフィル塩酸塩三水和物の溶解度が必要となる。シルデナフィルやタダラフィルのような他のホスホジエステラーゼ阻害剤も同様の方法で計算できる。鼻腔内投与には特別な装置を使用し、２つの鼻孔のそれぞれに投与することができる。経鼻投与用の装置は、例えばＡｐｔａｒ社から市販されている。
【0058】
実施例Ａ２
バルデナフィルの有機水性混合溶媒に対する溶解性および安定性のスクリーニング
本明細書に記載されたバルデナフィルの溶解性および安定性の実施形態は、様々な有機水性混合物中で測定された。
バルデナフィルの有機水性混合溶媒に対する溶解性および安定性のスクリーニング
本明細書に記載されたバルデナフィルの溶解性および安定性の実施形態は、様々な有機水性混合物中で測定された。
【0059】
医薬品有効成分である塩酸バルデナフィル三水和物の分子量は５７９．１ｇ／モルであり、対応する遊離塩基は４８８．６ｇ／モルである（１２）。バルデナフィル塩基はｐＫａ＝７．１５および９．８８、ｌｏｇＰ＝３．６４である。バルデナフィルの溶解度は、ｐＨ１で約８．８ｇ／Ｌ、ｐＨ２で３ｇ／Ｌ、ｐＨ３で１．６ｇ／Ｌ、ｐＨ４で０．８８ｇ／Ｌ、ｐＨ５で０．１６ｇ／Ｌ、ｐＨ６で０．０１９ｇ／Ｌである（１３）。医薬品有効成分（ＡＰＩ）であるバルデナフィル塩酸塩三水和物の水への溶解度ははるかに良好である（図３）。しかしながら、このような溶解度は依然として低く、ｐＨの上昇に伴って低下する水溶性は、舌下および鼻腔内投与による迅速かつ十分な透過および／または吸収を達成する上で重要な障害となる。従って、バルデナフィル塩基の優れた膜分配係数（ぉｇＰ＝３．６４）にもかかわらず、バルデナフィル水溶液を用いた舌下または経鼻投与は、鼻または舌下部位の適切な生理的ｐＨに近い、または適切な生理的ｐＨで投与した場合、経口投与と比較して十分なバイオアベイラビリティを得ることができない（実施例Ａ１の計算を参照）。
【0060】
しかしながら、バルデナフィル原薬は、特定の溶媒、例えばアルコール（１３）または他の有機水性混合溶媒において改善された溶解度を達成することができる。バルデナフィルの純粋なアルコール溶液の使用は、潜在的な膜刺激および損傷のために懸念される。したがって、「一般に安全とみなされる」または「ＧＲＡＳ」のカテゴリーに属する有機化合物（比較的低濃度）のような、ヒト被験者にとって比較的安全であるか、または忍容性の高いアルコール水性混合溶媒または他の有機水性混合溶媒が望ましい。このような理由から、点鼻薬における１２％アルコール溶媒の使用は、ＦＤＡによってヒト被験者に対する許容濃度として認められている（２７，２８）。１２％アルコールはバルデナフィル原薬を速やかに可溶化することができるが、２４時間以内に沈殿する。したがって、飽和溶解度を測定するために３日間にわたる「シェイクフラスコ」法が利用された（２０－２２。
【0061】
一例として、異なるｐＨにおける飽和バルデナフィルの水への溶解度をまずスクリーニングし、続いて異なるｐＨにおける透過性をスクリーニングした。このような情報は、水系における最適な溶解性と透過性の組み合わせ（すなわちＪｓｓ）を生成するために使用され、これは、所望の適切なＩＮバルデナフィル製剤および用量として使用される有機水溶性溶媒の望ましいｐＨ、溶解性および透過性の初期手がかりを提供するために使用される。
【0062】
加えて、いかなる混合溶媒も、舌下投与または経鼻投与された場合に迅速かつ十分な吸収のためにバルデナフィルを可溶化できるものでなければならない。
【0063】
一例として、バルデナフィル原薬のエタノール水性混合物への溶解度をまずスクリーニングし、続いて異なるｐＨにおける透過性をスクリーニングして、舌下投与および経鼻投与に適する最適な溶解度および透過性を決定した。
【0064】
材料
塩酸バルデナフィル（ＣＡＳ番号２２４７８５－９１－５）を、Ｉｎｄｉａ Ａｌｅｍｂｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｌｔｄ，Ｇｕｊａｒａｔ－３９１４５０から購入した（ロット番号１７０４００２３６１）。
塩酸バルデナフィル（ＣＡＳ番号２２４７８５－９１－５）を、Ｉｎｄｉａ Ａｌｅｍｂｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｌｔｄ，Ｇｕｊａｒａｔ－３９１４５０から購入した（ロット番号１７０４００２３６１）。
【0065】
タダラフィル（ＴＤＡ）５ｍｇ錠剤をＰｏｌｐｈａｒａｍ（ポーランド）から購入した。
【0066】
アセトニトリル≧９９．５％ ＡＣＳ（ＣＡＳ Ｎｏ．７５－０５－８）をＶＷＲ Ｃｈｅｍｉａｌｓ ＢＤＨ（登録商標）から購入した。
【0067】
メタノール（「ＭｅＯＨ」）をＶＷＲ Ｃｈｅｍｉａｌｓ ＢＤＨ（登録商標）から購入した。
【0068】
エタノール１９０－Ｐｒｏｏｆ（ＣＡＳ番号６４－１７－５）をＥＤＭ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0069】
細孔サイズｗ／０．２μｍセルロースアセテート膜（Ｃａｔ＃２８１４５－４７５）のシリンジフィルターをＶＷＲ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0070】
ポリエチレングリコール４００（Ｌｏｔ ５２０８１３１４）をＥＤＭ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0071】
グリセリンまたはグリセロール（Ｌｏｔ ７０Ｋ００４４）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0072】
乳酸カルシウム五水和物（Ｌｏｔ ＳＬＧＢ７１７３）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0073】
氷酢酸（Ｌｏｔ Ｂ２１Ｒ０２６）をＡｌｆａ Ａｅｓａ（米国マサチューセッツ州ハーバーヒル）から購入した。
【0074】
ＮＭＰ（１－メチル－２－ピロリジノン）（Ｌｏｔ ５１Ｋ３６８３）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0075】
設備
ベーシックｐＨメーターをＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（英国レスターシャー州）から購入した。
ベーシックｐＨメーターをＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（英国レスターシャー州）から購入した。
【0076】
Ｇ１３１１Ｂ １２６９ Ｑｕａｔポンプ、Ｂ７１２９ １２６０バイアルサンプラー、Ｇ１３１５Ｄ １２６０ ＤＡＤ ＶＡＬ検出器からなるＡｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＨＰＬＣシステムをＡｇｉｌｅｎｔ（カリフォルニア州サンタクララ）から購入した。
【0077】
分析天秤をＭｅｔｔｌｅｒ－Ｔｏｌｅｄｏ，ＬＬＣ（オハイオ州コロンバス）から購入した。
【0078】
手順
様々な有機溶媒をスクリーニングするために、まず、様々な％エタノール水混合溶媒におけるバルデナフィル原薬の溶解度を調べ、純水中の溶解度と比較した。本明細書に開示されているように、溶液は「シェイクフラスコ」法によって調製された。簡単に言うと、バルデナフィル原薬を飽和するまで様々な混合物に添加した。飽和した有機水性混合物をｐＨメーターを用いてｐＨ調整した（ｐＨ３．５～７．５の範囲）。飽和溶液は、室温でマグネチックスターラーを用いてゆっくり振とうするか、１日に数回、２４時間またはそれ以上、最長３日間、急速に振とうした。その後、溶液をＶＷＲの０．２ミクロンフィルターでろ過した。ろ液は透明度の検査に使用し、濃度はＨＰＬＣで測定した。さらに、バルデナフィルの様々な有機水溶性溶媒、例えばグリセリン（グリセロール）、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ）および２つの有機溶媒の組み合わせにおける飽和溶解度を調べた。バルデナフィルの他の代表的な有機水溶性溶媒に対する溶解性も調査した。
様々な有機溶媒をスクリーニングするために、まず、様々な％エタノール水混合溶媒におけるバルデナフィル原薬の溶解度を調べ、純水中の溶解度と比較した。本明細書に開示されているように、溶液は「シェイクフラスコ」法によって調製された。簡単に言うと、バルデナフィル原薬を飽和するまで様々な混合物に添加した。飽和した有機水性混合物をｐＨメーターを用いてｐＨ調整した（ｐＨ３．５～７．５の範囲）。飽和溶液は、室温でマグネチックスターラーを用いてゆっくり振とうするか、１日に数回、２４時間またはそれ以上、最長３日間、急速に振とうした。その後、溶液をＶＷＲの０．２ミクロンフィルターでろ過した。ろ液は透明度の検査に使用し、濃度はＨＰＬＣで測定した。さらに、バルデナフィルの様々な有機水溶性溶媒、例えばグリセリン（グリセロール）、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ）および２つの有機溶媒の組み合わせにおける飽和溶解度を調べた。バルデナフィルの他の代表的な有機水溶性溶媒に対する溶解性も調査した。
【0079】
（ａ）バルデナフィル濃度測定のためのＨＰＬＣ法
溶解性試験および透過性試験（実施例Ｂ１およびＢ２参照）からの濃度決定のために、試料をＭｅＯＨと１：１で混合してＨＰＬＣ分析用に調製した。標準曲線はＭｅＯＨで調製し、分析マトリックスが同じになるようにＰＢＳと混合した。ＨＰＬＣ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ－Ｃ８、５μｍ、４×２５０ｍｍコラム（ＰＮ７９９２６Ｂ８－５８４、ＳＮ ＵＳＵＥ０００４８０、ＬＮ５１２０１０９６１）を用い、アセトニトリル:０．０２Ｍリン酸ナトリウムバッファーｐＨ４（３５：６５ｖ／ｖ）イソクラティックフローを１ｍＬ／分で１０分間行った。
溶解性試験および透過性試験（実施例Ｂ１およびＢ２参照）からの濃度決定のために、試料をＭｅＯＨと１：１で混合してＨＰＬＣ分析用に調製した。標準曲線はＭｅＯＨで調製し、分析マトリックスが同じになるようにＰＢＳと混合した。ＨＰＬＣ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ－Ｃ８、５μｍ、４×２５０ｍｍコラム（ＰＮ７９９２６Ｂ８－５８４、ＳＮ ＵＳＵＥ０００４８０、ＬＮ５１２０１０９６１）を用い、アセトニトリル:０．０２Ｍリン酸ナトリウムバッファーｐＨ４（３５：６５ｖ／ｖ）イソクラティックフローを１ｍＬ／分で１０分間行った。
【0080】
結果
アッセイの妥当性は、直線性、感度、反復性、安定性、精度、および正確さに関してＦＤＡガイダンスに従って評価された。バルデナフィルの検量線は０．２－２００ｕｇ／ｍｌの濃度範囲で直線的であった。相関係数（ｒ２）は、３つの異なるランのそれぞれで０．９９より大きかった。０．５、１０および２００ｕｇ／ｍｌの品質管理サンプルについて、精度の相対標準偏差（ＲＳＤ）値は１．８～６．１％（日間）および０．０７～４．１％（日中）であった。精度は－４．２％～２．２％（日間）、－０．９～３．４％（日中）であった。定量下限は０．２ｕｇ／ｍｌであった。
アッセイの妥当性は、直線性、感度、反復性、安定性、精度、および正確さに関してＦＤＡガイダンスに従って評価された。バルデナフィルの検量線は０．２－２００ｕｇ／ｍｌの濃度範囲で直線的であった。相関係数（ｒ２）は、３つの異なるランのそれぞれで０．９９より大きかった。０．５、１０および２００ｕｇ／ｍｌの品質管理サンプルについて、精度の相対標準偏差（ＲＳＤ）値は１．８～６．１％（日間）および０．０７～４．１％（日中）であった。精度は－４．２％～２．２％（日間）、－０．９～３．４％（日中）であった。定量下限は０．２ｕｇ／ｍｌであった。
【0081】
表１は、異なるｐＨにおけるいくつかの有機水溶性溶媒へのバルデナフィル濃度の飽和溶解度の比較を示す。表２は、６つの異なる溶液と２つの異なるｐＨ値を含む溶液の日間精度と精度を、各溶液の標準曲線を用いて測定し、５０％メタノール標準曲線と比較したものである。表３は、異なる溶媒におけるｐＨ４．０でのバルデナフィル原薬の飽和溶解度の比較である。
各有機水溶性溶媒に対する飽和溶解度の比較
指示された有機水溶性溶媒の分析における希釈精度とバイアスの比較
【表1】
【表2】
【0082】
希釈精度は、２０ｍｇ／ｍｌで様々な溶液を比較することによって決定された。ＲＳＤは３．１％であった。品質管理サンプルの安定性は、再構成後０、９、１８および２４時間後にサンプルを再注入し、２００℃でオートサンプラーに保存することにより試験した。ＲＳＤ値は２．８－７．８％であった。
異なる溶媒*におけるｐＨ４でのバルデナフィル原薬の溶解度
＊室温、平均ｐＨ４．０（３．９－４．１）、Ｓａｔ濃度－飽和濃度、ＳＤ標準偏差。
【表3】
＊室温、平均ｐＨ４．０（３．９－４．１）、Ｓａｔ濃度－飽和濃度、ＳＤ標準偏差。
【0083】
結論
本明細書に開示されているように、エタノール水性混合物のような有機水性混合物は、純粋な水溶液中の溶解度と比較して、バルデナフィルの溶解度を著しく高めることができる（図３および表３）。バルデナフィル原薬の溶解度はｐＨ依存性であり、ｐＨが低いほど溶解度は高くなる。エタノール水性混合物のような有機水性混合物は、水への溶解度と比較してバルデナフィルの溶解度を著しく高めることができる。バルデナフィルの溶解性は、例えばエタノールなどの有機溶媒濃度を増加させることにより、さらに向上させることができる。さらに、ある種の有機溶液混合物を組み合わせることにより、バルデナフィルの溶解性を向上させることができる。例えば、ＰＥＧ１５水溶液と比較した場合、１５％ＰＥＧ－１２％ＥｔＯＨ－水溶液混合物が挙げられる。
本明細書に開示されているように、エタノール水性混合物のような有機水性混合物は、純粋な水溶液中の溶解度と比較して、バルデナフィルの溶解度を著しく高めることができる（図３および表３）。バルデナフィル原薬の溶解度はｐＨ依存性であり、ｐＨが低いほど溶解度は高くなる。エタノール水性混合物のような有機水性混合物は、水への溶解度と比較してバルデナフィルの溶解度を著しく高めることができる。バルデナフィルの溶解性は、例えばエタノールなどの有機溶媒濃度を増加させることにより、さらに向上させることができる。さらに、ある種の有機溶液混合物を組み合わせることにより、バルデナフィルの溶解性を向上させることができる。例えば、ＰＥＧ１５水溶液と比較した場合、１５％ＰＥＧ－１２％ＥｔＯＨ－水溶液混合物が挙げられる。
【0084】
本明細書に開示された結果は、メタノール標準曲線をアッセイに使用することにより、異なる溶媒または溶媒混合物、および異なるｐＨにおいて、正確かつ精密なバルデナフィル濃度測定が可能であることを示している。２０ｍｇ／ｍＬ濃度からの１００倍希釈も、±１５％以内で正確／精密に測定できる。
【0085】
バルデナフィル原薬のｐＨ４における最小溶解度２０ｍｇ／ｍｌがＩＮ製剤に望まれる場合、ｐＨ４における平均飽和溶解度が２０ｍｇ／ｍｌを下回る水はバルデナフィルＩＮ製剤に適した溶媒ではない。しかし、ｐＨ４で２０ｍｇ／ｍｌの高い溶解度を持つＧＲＡＳ分類の他の有機水溶性溶媒が多数同定されており（表３参照）、本明細書に開示されているように、これらの溶液のさらなる混合物がバルデナフィルＩＮ製剤に適している可能性が高い。
【0086】
実施例Ｂ１
バルデナフィルＩＮ製剤選択のためのＰＡＭＰＡを用いた透過性とフラックスのスクリーニング
この実施例は、パラレル人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を用いたバルデナフィルの透過性の決定を記述する。
バルデナフィルＩＮ製剤選択のためのＰＡＭＰＡを用いた透過性とフラックスのスクリーニング
この実施例は、パラレル人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を用いたバルデナフィルの透過性の決定を記述する。
【0087】
本明細書に開示されているように、室温および大気圧における異なる溶媒中のバルデナフィル原薬の透過性は、生体外ＰＡＭＰＡを用いてスクリーニングされた。ＰＡＭＰＡは薬剤の受動的吸収を予測し、エタノール（濃度３０％まで）を含む多くの溶液を用いた研究に適している（２２－２４）。測定単位は定常状態で得られる見かけの透過率（Ｐａｐｐ）で、ｃｍ／秒で表される。また、Ｐａｐｐと飽和溶解度から計算される、特定のｐＨにおける最大薬剤流束（Ｊｓｓ）は、１秒あたりの単位面積を横切る薬剤量として表される。
【0088】
本明細書で開示されるように、粘膜を横切る薬剤の透過性／吸収性を改善するエタノール水溶液の効果が決定された。１２％エタノール-水溶液および３０％エタノール水溶液が溶解度を有意に改善し得ることを考慮して、異なるｐＨでの透過性研究がさらに実施された。研究以前は、異なるエタノール水溶液濃度におけるｐＨが透過に及ぼす影響は未知であり、正確に予測することはできなかった。
【0089】
材料と設備
トランスポートレシーバプレート（Ｃａｔ＃ＴＲＮＳ５０）およびマルチスクリーンＩＰフィルタープレート（Ｃａｔ＃ＭＡＩＰＮ４５５０）をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
トランスポートレシーバプレート（Ｃａｔ＃ＴＲＮＳ５０）およびマルチスクリーンＩＰフィルタープレート（Ｃａｔ＃ＭＡＩＰＮ４５５０）をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0090】
塩酸バルデナフィル（ＣＡＳ番号２２４７８５－９１－５）；Ｉｎｄｉａ Ａｌｅｍｂｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｌｔｄ，Ｇｕｊａｒａｔ－３９１４５０（ロット番号１７０４００２３６１）。
【0091】
エタノール１９０－プルーフ（ＣＡＳ番号６４－１７－５）をＥＭＥ
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0092】
アセトニトリル（Ｃａｔ＃ＢＤＨ８３６３９．４００）をＢＤＨ
Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0093】
ドデカン（Ｃａｔ＃Ｄ２２１１０４）、リン酸ナトリウム一塩基性（Ｃａｔ＃Ｓ０７５１）、リン酸ナトリウム二塩基性（Ｃａｔ＃Ｓ０８７６）およびポリエチレングリコール６０００（Ｃａｔ＃８．０７４９１）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0094】
レシチン精製物質（Ｃａｔ＃３６４８６）をＡｌｆａ Ａｅｓａｒ（米国マサチューセッツ州ハーバーヒル）から購入した。
【0095】
細孔サイズｗ／０．２μｍセルロースアセテート膜（Ｃａｔ＃２８１４５－４７５）のシリンジフィルターをＶＷＲ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0096】
ポリエチレングリコール４００（Ｌｏｔ５２０８１３１４）をＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0097】
手順
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のバルデナフィル塩酸塩三水和物（５ｍｌ）の飽和溶液を、バルデナフィルの量を増加させることにより調製し、上記の実施例Ａ２に記載したように、所望のｐＨ（ｐＨメーターを用いて３．５～６．０の範囲)に調整した。飽和溶液を室温で２４時間ゆっくり振るか、または急速に数回振り、室温で２４時間またはそれ以上保持した。その後、０．２μｍフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過試験に使用した。
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のバルデナフィル塩酸塩三水和物（５ｍｌ）の飽和溶液を、バルデナフィルの量を増加させることにより調製し、上記の実施例Ａ２に記載したように、所望のｐＨ（ｐＨメーターを用いて３．５～６．０の範囲)に調整した。飽和溶液を室温で２４時間ゆっくり振るか、または急速に数回振り、室温で２４時間またはそれ以上保持した。その後、０．２μｍフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過試験に使用した。
【0098】
（ｂ）ＰＡＭＰＡを用いた透過試験
バルデナフィルの透過試験は、レシーバープレートおよびマルチスクリーン-ＩＰフィルタープレートを用いたＰａｒａｌｌｅｌ Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（ＰＡＭＰＡ）を用いて行った。ＰＡＭＰＡアッセイは薬剤の受動的吸収を予測し、エタノール溶媒を用いた試験に適している（２２－２３）。定常状態透過アッセイは、定常状態を表すために、３連以上で、６時間または２４時間実施した。いくつかの溶液では、６時間と２４時間の両方を実施し、２つの持続時間間の一貫性を確立した。ドナーチャンバーに１５０μＬの希望サンプルを移す前に、ドデカン中の３％（ｗ／ｖ）レシチンでドナーチャンバーを５ｕｌコーティングした。その後、３００μｌのリン酸緩衝液をアクセプターウェルに移した。６時間または２４時間の透過後、ＨＰＬＣを用いた濃度分析のために、サンプルをドナーとレシーバーのチャンバーから採取した。
バルデナフィルの透過試験は、レシーバープレートおよびマルチスクリーン-ＩＰフィルタープレートを用いたＰａｒａｌｌｅｌ Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（ＰＡＭＰＡ）を用いて行った。ＰＡＭＰＡアッセイは薬剤の受動的吸収を予測し、エタノール溶媒を用いた試験に適している（２２－２３）。定常状態透過アッセイは、定常状態を表すために、３連以上で、６時間または２４時間実施した。いくつかの溶液では、６時間と２４時間の両方を実施し、２つの持続時間間の一貫性を確立した。ドナーチャンバーに１５０μＬの希望サンプルを移す前に、ドデカン中の３％（ｗ／ｖ）レシチンでドナーチャンバーを５ｕｌコーティングした。その後、３００μｌのリン酸緩衝液をアクセプターウェルに移した。６時間または２４時間の透過後、ＨＰＬＣを用いた濃度分析のために、サンプルをドナーとレシーバーのチャンバーから採取した。
【0099】
ｃｍ／秒で表される見掛けの透過係数（Ｐapp）の決定は、定常状態における以下の式に基づいて計算した（２４）。
【数2】
【0100】
ここで、パラメータは以下の通りである。
【0101】
ＶＤ＝ドナーチャンバーの容量
【0102】
ＶＡ＝アクセプターチャンバーの容量
【0103】
Ａ＝膜の有効面積（ＰＡＭＰＡ：０．３ｃｍ２）
【0104】
ｔ＝透過性試験の時間
【0105】
ＣＡ＝試験終了時のアクセプターウェル中の薬剤濃度
【0106】
ＣＥ＝両方のウェルにおける平衡濃度、および
【数3】
【0107】
定常フラックス（Ｊｓｓ）
ｕｇ／秒／ｃｍ２として表されるＪｓｓは、以下の式に基づいて計算された。
ｕｇ／秒／ｃｍ２として表されるＪｓｓは、以下の式に基づいて計算された。
【数4】
【0108】
ここで、パラメータは以下の通りである。
【0109】
ＣＤ＝ドナーチャンバー内の負荷濃度
【0110】
ｐＨ４における異なる溶媒中のバルデナフィルのＰａｐｐとＪｓｓの比較を表４に示す。
バルデナフィル原薬の透過性とフラックス*に対する溶媒の影響
＊室温、２４時間の平均ｐＨ４．０（３．９－４．１）でＰＡＭＰＡにより決定；＃バルデナフィル有機水性混合物（飽和溶解度≧２０ｍｇ／ｍｌ）のＪｓｓは、水またはＪｓｓ（ｒｅｆ）（下記参照）のＪｓｓよりはるかに高い、ｐ＜０．０５（－テスト）；ＳＤ＝標準偏差。
【表4】
＊室温、２４時間の平均ｐＨ４．０（３．９－４．１）でＰＡＭＰＡにより決定；＃バルデナフィル有機水性混合物（飽和溶解度≧２０ｍｇ／ｍｌ）のＪｓｓは、水またはＪｓｓ（ｒｅｆ）（下記参照）のＪｓｓよりはるかに高い、ｐ＜０．０５（－テスト）；ＳＤ＝標準偏差。
【0111】
ｐＨ３．５－８．０以上では、バルデナフィル水溶液のｐＨ－溶解度時間ｐＨ－Ｐａｐｐプロファイルは、ｐＨ－フラックスまたｐＨ－Ｊｓｓプロファイルとなる（図１０ｂのプロファイルを参照）。最も高いＪｓｓに対応するｐＨはｐＨｍａｘであり、それに対応するバルデナフィル水溶液飽和溶解度はＶ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘと指定される。したがってｐＨｍａｘまたはＪｓｓｐＨｍａｘでのＪｓｓは、ＪｓｓまたはＪｓｓ（ｒｅｆ）として指定される、必要な最小溶解度に対応する参照Ｓｏｌｍｉｎ（［００６１］の前の計算による最小ＩＮ用量２ｍｇ／ノストリルに対して２０ｍｇ／ｍｌである）を計算するために使用することができる。
ここで、Ｓｏｌｍｉｎは、要求される最小溶解度(最小ＩＮ用量２ｍｇ／ノストリルバルデナフィルの場合は２０ｍｇ／ｍｌ、またはＩＮ用量に対応する高い値)である；Ｖ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）は、ｐＨｍａｘ（すなわち、図１０ｂによるｐＨ４）における水性バルデナフィル飽和溶解度であり、１８．１９である（表３から）。Ｓｏｌｍｉｎ＝２０、Ｖ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）＝１８．１９、ＪｓｓｐＨｍａｘ＝７．７４ Ｅ－０５ｕｇ／ｓ／ｃｍ２（表４より）、Ｊｓｓ（ｒｅｆ）＝８．５Ｅ－０５ｕｇ／ｓ／ｃｍ２を用いると、必要バルデナフィルＩＮ用量は２ｍｇ／ノストリルとなる。
【数5】
ここで、Ｓｏｌｍｉｎは、要求される最小溶解度(最小ＩＮ用量２ｍｇ／ノストリルバルデナフィルの場合は２０ｍｇ／ｍｌ、またはＩＮ用量に対応する高い値)である；Ｖ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）は、ｐＨｍａｘ（すなわち、図１０ｂによるｐＨ４）における水性バルデナフィル飽和溶解度であり、１８．１９である（表３から）。Ｓｏｌｍｉｎ＝２０、Ｖ（ｓｓｏｌ）ｐＨｍａｘ）＝１８．１９、ＪｓｓｐＨｍａｘ＝７．７４ Ｅ－０５ｕｇ／ｓ／ｃｍ２（表４より）、Ｊｓｓ（ｒｅｆ）＝８．５Ｅ－０５ｕｇ／ｓ／ｃｍ２を用いると、必要バルデナフィルＩＮ用量は２ｍｇ／ノストリルとなる。
【0112】
任意のｐＨ（ｐＨ３．５－７．５の範囲内）におけるバルデナフィル有機水性混合物であって、２０ｍｇ／ｍｌを超える溶解度を有し、対応するＪｓｓ値≧Ｊｓｓ（ｒｅｆ）を有するものは、ＩＮバルデナフィル製剤として適格である。
【0113】
（ｃ）ＨＰＬＣアッセイ
１００μＬのドナーまたはレシービングチャンバーサンプルを１００μＬのＭｅＯＨおよび１０μＬの内部標準と２分間混合した後、ＨＰＬＣ注入前にサンプルを１００００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＨＰＬＣ注入前に、負荷原液を５０％ＭｅＯＨ50%で希釈した。ＨＰＬＣアッセイは実施例Ａ２に記載したように行った。
１００μＬのドナーまたはレシービングチャンバーサンプルを１００μＬのＭｅＯＨおよび１０μＬの内部標準と２分間混合した後、ＨＰＬＣ注入前にサンプルを１００００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＨＰＬＣ注入前に、負荷原液を５０％ＭｅＯＨ50%で希釈した。ＨＰＬＣアッセイは実施例Ａ２に記載したように行った。
【0114】
結果
表４に示す比較透過試験の結果。これらの６時間および２４時間の浸透試験の間のＰａｐｐ結果の優れた相関が観察され、Ｐａｐｐ実験の一貫性を示した。例えば、純粋な水溶液および他のエタノール水混合物を用いた追加の個々の試験も図５に示すように、透過性に対するｐＨの影響の同様の傾向を支持した。
表４に示す比較透過試験の結果。これらの６時間および２４時間の浸透試験の間のＰａｐｐ結果の優れた相関が観察され、Ｐａｐｐ実験の一貫性を示した。例えば、純粋な水溶液および他のエタノール水混合物を用いた追加の個々の試験も図５に示すように、透過性に対するｐＨの影響の同様の傾向を支持した。
【0115】
結論
本明細書に開示されているように、バルデナフィルＡＰＩはｐＨが低下するにつれて溶解度が増加する。しかしながら、バルデナフィルの透過性（Ｐａｐｐ）は、ｐＨが３．５から５．０に増加するにつれて増加する（組合された種のより高い％に対応する）ことが理論的に予想される（図５バルデナフィル水溶液の薬剤フラックスまたはＪｓｓ（Ｐａｐｐ、飽和溶解度の倍で構成されるパラメータ）は、ｐＨ４．０で最適となる（図５ｂ）。代表的なバルデナフィル有機水溶性（ＥｔＯＨ（１２％）－水）溶媒も同様の傾向を示す(図５Ｂ)。これらのデータから、Ｊｓｓｍａｘ、ｐＨ４が選択される。
本明細書に開示されているように、バルデナフィルＡＰＩはｐＨが低下するにつれて溶解度が増加する。しかしながら、バルデナフィルの透過性（Ｐａｐｐ）は、ｐＨが３．５から５．０に増加するにつれて増加する（組合された種のより高い％に対応する）ことが理論的に予想される（図５バルデナフィル水溶液の薬剤フラックスまたはＪｓｓ（Ｐａｐｐ、飽和溶解度の倍で構成されるパラメータ）は、ｐＨ４．０で最適となる（図５ｂ）。代表的なバルデナフィル有機水溶性（ＥｔＯＨ（１２％）－水）溶媒も同様の傾向を示す(図５Ｂ)。これらのデータから、Ｊｓｓｍａｘ、ｐＨ４が選択される。
【0116】
ｐＨ４で２０ｍｇ／ｍｌを超える溶解度を有する多くの有機溶媒は、バルデナフィルの水溶液またはＪｓｓ（ｒｅｆ）の平均Ｊｓｓ（８．５Ｅ－０５ｕｇ／ｓ／ｃｍ２）をも著しく上回ることが発見されており、バルデナフィルＩＮのための適切な製剤と考えることができる（表４）。
【0117】
多くの有機水性混合物または有機－有機水性混合物は、バルデナフィルの現在の医薬品有効成分であるバルデナフィル塩酸塩三水和物の溶解度および透過度を改善することができる。一方、水中での２つの異なる有機溶媒の組み合わせは、例えば１２％ＥｔＯＨ－水溶液のような単一の有機水性混合溶媒と比較して溶解性が改善されなくても、透過性を改善することができる。いかなる理論によっても限定されたり束縛されたりすることなく、本明細書に記載された溶媒および鼻腔または舌下部位における生理学的ｐＨに近いｐＨ範囲において異なるホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性を改善することができる他の適切な有機水溶性溶媒もまた、それらの透過性を改善することができ、鼻腔および舌下送達に適していると考えられる。
【0118】
実施例Ｂ２
Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いた選択溶液中におけるバルデナフィルの透過性の測定
この実施例では、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたバルデナフィルの透過性の測定について説明する。
Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いた選択溶液中におけるバルデナフィルの透過性の測定
この実施例では、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたバルデナフィルの透過性の測定について説明する。
【0119】
本明細書に開示されているように、生体内細胞株モデルＣａｌｕ－３（非小細胞肺癌株）を用いて、異なる溶媒におけるバルデナフィル原薬の透過性をスクリーニングした。バルデナフィル原薬の透過性に及ぼす各種溶媒の影響は、ＰＡＭＰＡ法を用いて効率的にスクリーニングすることが可能であるが、標的膜に類似した細胞株などの生理学的モデルを用いて確認することにより、その信頼性を向上させることができる。そこで本研究では、ＩＮ透過のモデルとして好適なＣａｌｕ－３細胞株を用いて、ＰＡＭＰＡ試験結果の透過性を確認した。
【0120】
Ｃａｌｕ－３細胞株モデルによって決定された水溶性薬剤のＰａｐｐは、ｐＨ７．４で決定された場合、動物実験におけるＩＮ吸収に関連することが示されている（２３－２４）。本明細書で開示するように、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルは、様々な有機水溶性溶媒のＰａｐｐの相対値を、ｐＨ４．０の水中と比較して確認するために利用された（バルデナフィル製剤のＩＮ投与をシミュレートするため）。
【0121】
材料
氷酢酸（純度９９％以上、ＣＡＳ６４－１９－７）をＡｌｆａ Ａｅｓａｒ（米国マサチューセッツ州ハーバーヒル）から購入した。
氷酢酸（純度９９％以上、ＣＡＳ６４－１９－７）をＡｌｆａ Ａｅｓａｒ（米国マサチューセッツ州ハーバーヒル）から購入した。
【0122】
アセトニトリル≧９９．５％ ＡＣＳ（ＣＡＳ Ｎｏ．７５－０５－８）をＶＷＲ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ＢＤＨ（登録商標）から購入した。
【0123】
ナトリウムリン酸塩一塩基一水和物（リン酸バッファー）をＢＤＨ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0124】
ＮａＯＨ（水酸化ナトリウム）をＢｉｏｂａｓｉｃ Ｃａｎａｄａ Ｉｎｃ．（カナダ、オンタリオ州マーカム）から購入した。
【0125】
ナトリウムリン酸二塩基性、Ｈｅｐｔａｈｙｄｒａｔｅ（リン酸バッファー）をＥＭＤ
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0126】
バルデナフィル塩酸塩三水和物ＵＳＰをＳＭＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｌｔｄ．(インド)から購入した。
【0127】
Ｇｉｂｃｏ Ｈａｎｋ′Ｓ Ｂａｌａｃｅｄ Ｓａｌｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ＨＢＳＳ）、ｏ－リン酸、８５％（ＨＰＬＣ）、浸透性ポリカーボネート膜インサートトリエチルアミンを有するトランスウエル（登録商標）マルチウエルプレートをＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｆｉｃ（米国マサチューセッツ州ウォルサム）から購入した。
【0128】
０．２ｕｍ酢酸セルロース膜付きシリンジフィルターをＡｖａｎｔｏｒのＶＷＲ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0129】
設備
ベーシックｐＨメーターをＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（英国レスターシャー州）から購入した。
ベーシックｐＨメーターをＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（英国レスターシャー州）から購入した。
【0130】
Ｇ１３１１Ｂ １２６９ Ｑｕａｔ Ｐｕｍｐ，Ｇ７１２９ １２６０バイアルサンプラー、Ｇ１３１５Ｄ １２６０ ＤＡＤ ＶＡＬ検出器からなるＡｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＨＰＬＣシステムをＡｇｉｌｅｎｔ（カリフォルニア州サンタクララ）から購入した。
【0131】
分析天秤をＭｅｔｔｌｅｒ－Ｔｏｌｅｄｏ，ＬＬＣ（オハイオ州コロンバス）から購入した。
【0132】
使用した水は、ナノピュア水ろ過システム（Ｂａｒｎｓｔｅｄ Ｎａｎｏｐｏｕｒｅ Ｄｉａｍｏｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ＵＶ／ＵＦシステム（Ｃａｔ＃１１９３１０，ＡＰＳ Ｗａｔｅｒ Ｓｅｒｖｉｖｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（米国カリフォルニア州レイクバルボア）から購入）から得た。
【0133】
経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ、単位：Ω.ｃｍ２）測定装置。
【0134】
手順
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のバルデナフィル（２ｍｇ／ｍＬ）の飽和溶液を調製し、上記の実施例Ａ２およびＢ１に記載されているように、所望のｐＨ（ｐＨメーターを使用して３．９～４．１の範囲）に調整した。２ｍｇ／ｍｌのバルデナフィルを含む様々な溶液を、ボルテックスにより各粉末を完全に溶解し、次いで回転台上で一晩混合することにより調製した。その後、０．２μｍのフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過／浸透性試験に使用した。
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のバルデナフィル（２ｍｇ／ｍＬ）の飽和溶液を調製し、上記の実施例Ａ２およびＢ１に記載されているように、所望のｐＨ（ｐＨメーターを使用して３．９～４．１の範囲）に調整した。２ｍｇ／ｍｌのバルデナフィルを含む様々な溶液を、ボルテックスにより各粉末を完全に溶解し、次いで回転台上で一晩混合することにより調製した。その後、０．２μｍのフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過／浸透性試験に使用した。
【0135】
（ｂ）Ｃａｌｕ－３の培養と単層の調製
研究は、以前に記載されたものと同様に実施した（２６－２７）。ヒト気管支粘膜下腺癌細胞株であるＣａｌｕ－３を、１０％ＦＢＳおよび１％ペニシリン／ストレプトマイシン溶液を補充したＤＭＥＭ：Ｈａｍ′ｓ Ｆ－１２（１：１）混合液中で増殖させた。細胞を０．２５％トリプシン－ＥＤＴＡで回収し、ポリカーボネートフィルター（孔径：０．４μｍ、増殖面積：１．１２ｃｍ２、１２ウェル／プレート、コーニング社製）に５×１０５セル／ウェルの密度で播種した。実験期間中、培地は２日ごとに交換した。播種後９～１０日目に単層を生体内輸送試験に使用した。
研究は、以前に記載されたものと同様に実施した（２６－２７）。ヒト気管支粘膜下腺癌細胞株であるＣａｌｕ－３を、１０％ＦＢＳおよび１％ペニシリン／ストレプトマイシン溶液を補充したＤＭＥＭ：Ｈａｍ′ｓ Ｆ－１２（１：１）混合液中で増殖させた。細胞を０．２５％トリプシン－ＥＤＴＡで回収し、ポリカーボネートフィルター（孔径：０．４μｍ、増殖面積：１．１２ｃｍ２、１２ウェル／プレート、コーニング社製）に５×１０５セル／ウェルの密度で播種した。実験期間中、培地は２日ごとに交換した。播種後９～１０日目に単層を生体内輸送試験に使用した。
【0136】
（ｃ）Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたインビトロ透過性試験
単層膜のＴＥＥＲを測定し、約５００Ｏｈｍ．ｃｍ２、増殖培地を吸引し、上下のチャンバーを輸送培地（ＴＭ：１５ｍＭグルコースと１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液を添加したハンクのバランス塩類溶液ｐＨ７．４）で洗浄した。
単層膜のＴＥＥＲを測定し、約５００Ｏｈｍ．ｃｍ２、増殖培地を吸引し、上下のチャンバーを輸送培地（ＴＭ：１５ｍＭグルコースと１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液を添加したハンクのバランス塩類溶液ｐＨ７．４）で洗浄した。
【0137】
１０分間のインキュベーションの後、アピカルチャンバー内の溶液をｐＨ４．０の研究バルデナフィル溶液と交換した。ＢＳＬ２フード下で、１５、３０、４５、６０、９０、１２０分後に、基底側からサンプルのアリコート（５０μＬ）を採取した。輸送培地５０μＬを毎回補充し、ＴＥＥＲ測定を定期的に行った。
【0138】
（ｄ）ＨＰＬＣアッセイの調製と測定
レセプターチャンバーとアピカルチャンバーから５０μｌのサンプルを５０μｌの５０％ＭｅＯＨと１０μｌの内部標準物質と混合するか、５０μｌの培地と内部標準物質で希釈した。ＨＰＬＣ分析用に遠心分離後、上清を採取した。ＨＰＬＣアッセイは、実施例Ａ２およびＢ１で概説したように行った。
レセプターチャンバーとアピカルチャンバーから５０μｌのサンプルを５０μｌの５０％ＭｅＯＨと１０μｌの内部標準物質と混合するか、５０μｌの培地と内部標準物質で希釈した。ＨＰＬＣ分析用に遠心分離後、上清を採取した。ＨＰＬＣアッセイは、実施例Ａ２およびＢ１で概説したように行った。
【0139】
（ｅ）パップの計算
Ｐａｐｐ（単位：ｃｍ／秒）は、ＨＰＬＣで分析した試料から式を使って計算した。
Ｐａｐｐ（単位：ｃｍ／秒）は、ＨＰＬＣで分析した試料から式を使って計算した。
【0140】
【数6】
【0141】
ｄＱｄｔは、受容チャンバー内の薬剤の出現（ｎｍｏｌ／秒）、Ａは、単分子膜の表面積（１．１２ｃｍ２）、Ｃは、先端チャンバー内の薬剤の初期濃度である。
【0142】
結果
異なるバルデナフィル溶液の計算された平均Ｐａｐｐを表５に示す。大部分のＰａｐｐ値は、１５％ＰＥＧ４００溶液中のバルデナフィルのＰａｐｐ値を除いて、水中のバルデナフィルのＰａｐｐ値に近かった。１５％ＰＥＧ４００溶液中のバルデナフィルでは、ＴＥＥＲ値は最初のベースライン値より約１２００Ｏｈｍ．ｃｍ２まで上昇し、１２０分後にはベースライン値と同様のレベル（約５００Ｏｈｍ．ｃｍ２）まで徐々に低下した。ＥｔＯＨ／ＰＥＧ（１２％／１５％）を添加した場合も初期ＴＥＥＲは約１２００Ｏｈｍ．ｃｍ２上昇したが、４０分後にはベースラインと同程度のレベルまで、より迅速に戻った。他のほとんどの溶液は通常、２０～４０分未満でＴＥＥＲを５００Ｏｈｍ．ｃｍ２ベースライン値以下まで急速に低下させた。
Ｃａｌｕ－３細胞株モデル＊を用いたバルデナフィル原薬の透過性
異なるバルデナフィル溶液の計算された平均Ｐａｐｐを表５に示す。大部分のＰａｐｐ値は、１５％ＰＥＧ４００溶液中のバルデナフィルのＰａｐｐ値を除いて、水中のバルデナフィルのＰａｐｐ値に近かった。１５％ＰＥＧ４００溶液中のバルデナフィルでは、ＴＥＥＲ値は最初のベースライン値より約１２００Ｏｈｍ．ｃｍ２まで上昇し、１２０分後にはベースライン値と同様のレベル（約５００Ｏｈｍ．ｃｍ２）まで徐々に低下した。ＥｔＯＨ／ＰＥＧ（１２％／１５％）を添加した場合も初期ＴＥＥＲは約１２００Ｏｈｍ．ｃｍ２上昇したが、４０分後にはベースラインと同程度のレベルまで、より迅速に戻った。他のほとんどの溶液は通常、２０～４０分未満でＴＥＥＲを５００Ｏｈｍ．ｃｍ２ベースライン値以下まで急速に低下させた。
【表5】
【0143】
結論
この実験では、各溶液の濃度が２ｍｇ／ｍｌであるため、溶液の相対的なＰａｐｐ値も相対的なＪｓｓ値を直接反映している。異なる有機水溶性溶媒中のバルデナフィル原薬のＰａｐｐ値は、２０倍低い１５％ＰＥＧ４００溶液を除いて、ほとんどの溶液で水中のバルデナフィルのＰａｐｐ値とほぼ同じである（ｐ＜０．００１、２標本ｔテスト）。これは、バルデナフィルを含む有機水溶性溶媒のＴＥＥＲが１５％ＰＥＧ４００溶液で増加したこと（培地の初期ＴＥＥＲ、すなわち５００Ｏｈｍ．ｃｍ２）に対応していると考えられる。ＴＥＥＲの増加は、細胞膜のタイトジャンクション機能の増加を示しているのかもしれない。この仮説を支持するものとして、ＰＥＧ４００にエタノールを加えた場合（エタノールは膜透過性を高めることが知られている）、ＴＥＥＲ値は有意に低下した。したがって、ＰＡＭＰＡによって最初に同定されたバルデナフィル製剤をさらにスクリーニングするためにＣａｌｕ－３モデルを使用することは、望ましくない製剤を排除する上で有用なステップとなりうる。
この実験では、各溶液の濃度が２ｍｇ／ｍｌであるため、溶液の相対的なＰａｐｐ値も相対的なＪｓｓ値を直接反映している。異なる有機水溶性溶媒中のバルデナフィル原薬のＰａｐｐ値は、２０倍低い１５％ＰＥＧ４００溶液を除いて、ほとんどの溶液で水中のバルデナフィルのＰａｐｐ値とほぼ同じである（ｐ＜０．００１、２標本ｔテスト）。これは、バルデナフィルを含む有機水溶性溶媒のＴＥＥＲが１５％ＰＥＧ４００溶液で増加したこと（培地の初期ＴＥＥＲ、すなわち５００Ｏｈｍ．ｃｍ２）に対応していると考えられる。ＴＥＥＲの増加は、細胞膜のタイトジャンクション機能の増加を示しているのかもしれない。この仮説を支持するものとして、ＰＥＧ４００にエタノールを加えた場合（エタノールは膜透過性を高めることが知られている）、ＴＥＥＲ値は有意に低下した。したがって、ＰＡＭＰＡによって最初に同定されたバルデナフィル製剤をさらにスクリーニングするためにＣａｌｕ－３モデルを使用することは、望ましくない製剤を排除する上で有用なステップとなりうる。
【0144】
実施例Ｃ１
ホスホジエステラーゼ阻害剤の投与方法
この実施例では、ホスホジエステラーゼ阻害剤の鼻腔内投与および舌下投与の方法を説明する。
ホスホジエステラーゼ阻害剤の投与方法
この実施例では、ホスホジエステラーゼ阻害剤の鼻腔内投与および舌下投与の方法を説明する。
【0145】
ホスホジエステラーゼ阻害剤を有機水性混合溶媒に添加し、溶媒のｐＨを調整する。ホスホジエステラーゼ阻害剤としては、例えば、バルデナフィル（レビトラ）、シルデナフィル（バイアグラ）、タダラフィル（シアリス）など、任意のものを使用することができる。ホスホジエステラーゼ阻害剤を所定のｐＨの有機水溶性溶媒に添加すると、ホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度および透過性が増大する。任意の有機水性混合物または溶媒を使用することができ、これには、ヒト被験者に比較的安全であるか、または十分に許容され、ホスホジエステラーゼ阻害剤を十分に可溶化し、透過性を高めることができる任意の有機水溶性溶媒が含まれる。
【0146】
ホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度の改善は、例えば、バルデナフィル、シルデナフィル、またはタダラフィルなどのホスホジエステラーゼ阻害剤の粘膜中のフラックス（溶解度×透過性またはＪｓｓ）の改善をもたらし得る。有機水性混合物中のホスホジエステラーゼ阻害剤の粘膜流束は、約４．０から約８．０のｐＨ範囲で好適である。粘膜中のフラックスが改善された結果、同じホスホジエステラーゼ阻害剤の経口投与と比較して、ホスホジエステラーゼ阻害剤のＣｍａｘおよびバイオアベイラビリティを増加させ、Ｔｍａｘを短縮させることができる。このことは、同じ用量のホスホジエステラーゼ阻害剤の経口投与と比較して、鼻腔内または舌下投与では血漿中濃度が高くなり、作用発現が速くなることを意味する。
【0147】
ホスホジエステラーゼ阻害剤は、任意の剤形で鼻腔または舌下膜を介して送達され得るが、溶液製剤、例えばスプレーを使用することは、他の剤形と比較して最も速い効果発現をもたらすはずである。一例として、ホスホジエステラーゼ阻害剤の量を有機水性混合溶媒に添加し、所望の量のホスホジエステラーゼ阻害剤を、１噴霧あたり１００μｌ容量で、鼻腔内または舌下に送達することができる。
【0148】
上記のように溶解性および浸透性が改善されたホスホジエステラーゼ阻害剤は、例えば勃起不全の治療のために投与される。
【0149】
ホスホジエステラーゼ阻害剤に加えて、この方法はあらゆるイオン化可能な化合物に適用できる。
【0150】
実施例Ｃ２
ラットにおけるバルデナフィルの静脈内投与と経口投与の比較
この実施例では、経口投与またはＩＮ投与後のバルデナフィルのバイオアベイラビリティの測定、および製剤のバリエーションが薬剤動態にどのように影響するかについて説明する。
ラットにおけるバルデナフィルの静脈内投与と経口投与の比較
この実施例では、経口投与またはＩＮ投与後のバルデナフィルのバイオアベイラビリティの測定、および製剤のバリエーションが薬剤動態にどのように影響するかについて説明する。
【0151】
ＩＮ投与により、化合物は肝臓代謝をバイパスすることができる。さらに、鼻粘膜の層が薄いため、適切な製剤が投与されれば、ＩＮ投与は経口投与と比較して、薬剤の迅速な吸収、より高い生物学的利用能、およびより速いピーク濃度時間（Ｔｍａｘ）を可能にする。特定の製剤は、生体内においてバルデナフィルのＪｓｓまたはＰａｐｐが異なることが判明している。したがって、これらの製剤の違いは、ＩＮ経路で投与された場合、上記の薬剤動態パラメータに影響を及ぼす可能性が高い。研究に先立ち、適切な投与量／薬剤濃度を推定し、ＩＮ投与に望ましい溶解性および透過性を有する特定の製剤を同定し確認することで、用量の経口投与と比較して改善された適切なバルデナフィル血漿中濃度を達成する段階的アプローチは不明であった。
【0152】
手順
バルデナフィル水溶液および有機水溶液を、実施例Ａ２に記載したのと同じプロトコルを用いて調製した。頸静脈カニューレを挿入したＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットをＥｎｖｉｇｏ ＲＭＡ（インディアナ州インディアナポリス）に注文した。到着後、ラットは薬剤動態試験前の１週間、ウエスタン大学のヘルスサイエンスの動物飼育室の環境に慣らした。麻酔および試験手順は、以前に発表された研究（２９）と同様に行った。合計６種類の製剤をＩＮ投与で１種類を経口投与で試験した（下記表６参照）。
バルデナフィル水溶液および有機水溶液を、実施例Ａ２に記載したのと同じプロトコルを用いて調製した。頸静脈カニューレを挿入したＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットをＥｎｖｉｇｏ ＲＭＡ（インディアナ州インディアナポリス）に注文した。到着後、ラットは薬剤動態試験前の１週間、ウエスタン大学のヘルスサイエンスの動物飼育室の環境に慣らした。麻酔および試験手順は、以前に発表された研究（２９）と同様に行った。合計６種類の製剤をＩＮ投与で１種類を経口投与で試験した（下記表６参照）。
【0153】
ラットのサブセットにバルデナフィル（５．６ｍｇ／ｋｇ）を含む製剤を経口(ＰＯ、または経口)投与した。他のラットのサブセットには、バルデナフィル（２．８ｍｇ／ｋｇ）を含有する製剤を経鼻投与（ＩＮ）した。ＩＮラット群には、鼻孔あたり約１２．５ｕｌ投与でマイクロピペットを通して製剤を投与した。ＩＮ経路で水およびＰＥＧ製剤の製剤を与えられたラットは、それぞれ１．７ｍｇ／ｋｇおよび２．０ｍｇ／ｋｇであった。ラットは６種類の製剤を投与するように無作為に割り付けられた（表６参照）。
【0154】
製剤の投与後、０、２、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０、１２０、１８０分後にラットから２００ｕｌの血液を得た。投与１週間後、ラットのヘマトクリット値は、試験において無作為に選択されたラットの血漿によって確認されたように、正常値に戻った。このようなヘマトクリットの反応、一般的な身体活動、およびカニューレの開通性に基づいて、ラットは１週間後に同じ血液サンプルを採取して、異なる製剤治療に切り替えられた。採血終了後、サンプルは遠心分離され、血漿は液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析法（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００およびＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ１２００システム）を用いて分析するために採取・保存された。測定には、標準曲線を構築するためにラット血漿が用いられ、シルデナフィルは内部標準（ＩＳ）として用いられた。アッセイ手順は、以下に記載するヒト試験と同様であった（実施例Ｃ３のバルデナフィルの血漿中濃度の測定を参照）。
【0155】
結果
ラット血漿中のバルデナフィル濃度測定のための標準曲線は、優れた相関係数を示した（濃度０．１－１０００ｎｇ／ｍｌについてＲ２＝０．９９８１）。バルデナフィルの製剤とＩＮおよびＰＯ投与ラットの数を表６に示す。エタノール／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）の経口投与製剤とＩＮ投与製剤の薬剤動態パラメータを表７に示す。製剤２～６のＩＮ投与時の薬剤動態を表８に示す。
バルデナフィルを含む製剤をラットに経口または静脈内投与
エタノール／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）の経鼻・経口投与によるバルデナフィルの薬剤動態パラメータ
＊ｍｇ／ｋｇ投与あたり標準化
バルデナフィルの5製剤のＩＮ投与時の薬剤動態パラメータ＊
Ｆ＝製剤、＊ｍｇ／ｋｇ用量あたり正規化。Ｆ６（水製剤）と比較して＊＊Ｐ＜０．０１（ｔテスト）
ラット血漿中のバルデナフィル濃度測定のための標準曲線は、優れた相関係数を示した（濃度０．１－１０００ｎｇ／ｍｌについてＲ２＝０．９９８１）。バルデナフィルの製剤とＩＮおよびＰＯ投与ラットの数を表６に示す。エタノール／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）の経口投与製剤とＩＮ投与製剤の薬剤動態パラメータを表７に示す。製剤２～６のＩＮ投与時の薬剤動態を表８に示す。
【表6】
【表7】
＊ｍｇ／ｋｇ投与あたり標準化
【表8】
Ｆ＝製剤、＊ｍｇ／ｋｇ用量あたり正規化。Ｆ６（水製剤）と比較して＊＊Ｐ＜０．０１（ｔテスト）
【0156】
考察と結論
相対的バイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ（ピーク濃度）およびＴｍａｘ（Ｃｍａｘの時間）の結果は、実施例Ａ２、Ｂ２、Ｂ２およびＣ１で同定された製剤から予想されるものと一致している。水中と比較してＰａｐｐ／ｆｌｕｘが低い溶媒、例えば生体内のＰＡＭＰＡおよび／またはＣａｌｕ－３試験から、１５％ＰＥＧ４００中または１５％ＰＥＧ－１０％ＮＭＰ中のバルデナフィルは、ＩＮ経路で投与された場合、比較的低いバイオアベイラビリティをもたらす可能性がある。水製剤（Ｆ６）と比較して、Ｆ５のＡＵＣは有意に低い。４号製剤のＡＵＣおよびＣｍａｘもＦ６号製剤のＡＵＣおよびＣｍａｘと比較して有意に低いが、試験を完了したラットの数が少ないため、値はｐ＜０．０５で統計学的に有意ではない。しかしながら、水中と同様／より良好なＰａｐｐ／fluxを有する溶媒、例えばバルデナフィルの１２％エタノール中およびエタノール／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）中は、水中と同様／より良好なバイオアベイラビリティをもたらす可能性がある。したがって、これらのラットのデータは、実施例Ａ１、Ａ２，Ｂ１、およびＢ２で実証された段階的アプローチを用いた、所望の製剤をスクリーニングし選択する現在の方法を裏付けるものである。
相対的バイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ（ピーク濃度）およびＴｍａｘ（Ｃｍａｘの時間）の結果は、実施例Ａ２、Ｂ２、Ｂ２およびＣ１で同定された製剤から予想されるものと一致している。水中と比較してＰａｐｐ／ｆｌｕｘが低い溶媒、例えば生体内のＰＡＭＰＡおよび／またはＣａｌｕ－３試験から、１５％ＰＥＧ４００中または１５％ＰＥＧ－１０％ＮＭＰ中のバルデナフィルは、ＩＮ経路で投与された場合、比較的低いバイオアベイラビリティをもたらす可能性がある。水製剤（Ｆ６）と比較して、Ｆ５のＡＵＣは有意に低い。４号製剤のＡＵＣおよびＣｍａｘもＦ６号製剤のＡＵＣおよびＣｍａｘと比較して有意に低いが、試験を完了したラットの数が少ないため、値はｐ＜０．０５で統計学的に有意ではない。しかしながら、水中と同様／より良好なＰａｐｐ／fluxを有する溶媒、例えばバルデナフィルの１２％エタノール中およびエタノール／ＰＥＧ４００（１２％／１５％）中は、水中と同様／より良好なバイオアベイラビリティをもたらす可能性がある。したがって、これらのラットのデータは、実施例Ａ１、Ａ２，Ｂ１、およびＢ２で実証された段階的アプローチを用いた、所望の製剤をスクリーニングし選択する現在の方法を裏付けるものである。
【0157】
実施例Ｃ３
ヒトにおける選択的ホスホジエステラーゼ阻害薬の静脈内投与と経口投与の比較
この実施例では、ヒトにおける経口投与またはＩＮ投与後のバルデナフィルのバイオアベイラビリティの測定、ならびに製剤のバリエーションが薬剤動態にどのように影響するかについて説明する。
ヒトにおける選択的ホスホジエステラーゼ阻害薬の静脈内投与と経口投与の比較
この実施例では、ヒトにおける経口投与またはＩＮ投与後のバルデナフィルのバイオアベイラビリティの測定、ならびに製剤のバリエーションが薬剤動態にどのように影響するかについて説明する。
【0158】
本明細書に開示されているように、この研究は、鼻腔スプレー（ＩＮ投与）として投与されたＳＤＳ－０８９溶液（１２％ＥｔＯＨ／１５％ＰＥＧ４００に溶解したバルデナフィル２０ｍｇ／ｍｌからなる）を、レビトラ経口錠剤１０ｍｇ（経口、またはＰＯ投与）と比較した。バルデナフィルの溶解度＞２０ｍｇ／ｍｌ、鼻腔薬剤送達のための１２％エタノール－１５％ＰＥＧ４００中のその溶液を選択するためのステップは、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２およびＣ１に記載されている。
【0159】
材料
バルデナフィル点鼻液（ＳＤＳ－０８９点鼻液）を、研究責任者の処方に従って、研究に参加する各ヒト被験者のために調製した。
バルデナフィル点鼻液（ＳＤＳ－０８９点鼻液）を、研究責任者の処方に従って、研究に参加する各ヒト被験者のために調製した。
【0160】
医薬品有効成分は、ＵＳＰ規格に適合するインドのＡｌｅｍｂｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｌｔｄ．のもの（バッチ１７０４００２３６１）である。
【0161】
点鼻液はバルデナフィルＡＰＩ２０ｍｇ／ｍｌを１２％エタノールと１５％ＰＥＧ４００に可溶化したもので、ｐＨは約４．０であった。ＳＤＳ－０８９点鼻スプレー溶液を濾過し（０．２２μｍフィルター）、小容量５ｍＬ琥珀ボトルに移し、１スプレーあたり１００μＬを供給する点鼻スプレー装置を取り付けた（Aptar, Pharma,フランス製）。パイロット臨床試験の前に、Ａｐｔａｒ製点鼻スプレー装置が１回１００μＬを噴霧できることを確認した。このスプレーは、１噴霧あたり２ｍｇのバルデナフィル塩酸塩を１２％エタノールと１５％ＰＥＧ４００溶液に溶解して投与した。
【0162】
バイエル薬品社製のバルデナフィル塩酸塩（レビトラ）１０ｍｇ経口錠（ＮＤＣ：Ｄ１７３－０８３０－１３、ロット番号：５９３０２４８）を薬局から購入した。
【0163】
ＳＦＳ０８９は、米国カリフォルニア州ポモナにあるウエスタン大学ヘルスサイエンスの患者ケアセンター内のメディカルセンターで、免許を持つ薬剤師の監督のもと、免許を持つ薬剤師によって調製された。
【0164】
手順
この研究に採用された１２人のヒト被験者は、２１歳から４５歳までの健康なボランティアであった。各被験者は２つの試験治療を受けた：ＳＤＳ－０８９点鼻液（４ｍｇバルデナフィル塩酸塩三水和物）およびレビトラ経口錠（１０ｍｇ）を、７±１日の期間をおいて無作為に連続して投与した。
この研究に採用された１２人のヒト被験者は、２１歳から４５歳までの健康なボランティアであった。各被験者は２つの試験治療を受けた：ＳＤＳ－０８９点鼻液（４ｍｇバルデナフィル塩酸塩三水和物）およびレビトラ経口錠（１０ｍｇ）を、７±１日の期間をおいて無作為に連続して投与した。
【0165】
試験当日、被験者には静脈カテーテルが挿入された。すべての被験者に、１０ｍｇのレビトラ錠剤（経口ＰＯ）または４ｍｇのＳＤＳ－０８９溶液（鼻孔あたり２ｍｇ／スプレー）鼻腔スプレーのいずれかをＩＮ投与した。投与後、２４０ｍｌの水を飲ませた。１週間後、各被験者において治療をクロスオーバーさせた（以前ＩＮ投与を行った被験者にはＰＯ投与を行い、以前ＰＯ投与を行った被験者にはＩＮ投与を行った）。各被験者は薬剤投与と同時に２４０ｍｌの水を摂取し、単回投与後２時間は水や透明な液体を飲むことが許可された。食事は投与後４時間以上経過してから摂取させた。
【0166】
薬剤製剤の投与後、合計１７の血液サンプル（各２ｃｃ）を採取した。血液サンプルは、０（投与前）、２分、５分、１０分、１５分、３０分、４５分、６０分、９０分、２時間、３時間、４時間、６時間、８時間、および１０時間に採取した。すべての血液サンプルは、直ちに３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、バイオ分析の準備が整うまで－８０℃で保存した。
【0167】
試験期間中、安全性評価には、有害事象モニタリング、バイタルサイン、および医療監督者の判断に従った必要な病歴および身体検査が含まれた。
【0168】
（ａ）バルデナフィルの血漿中濃度の測定
血漿中のバルデナフィル濃度の分析は、南カリフォルニア大学薬学部のスタンルイ博士が提供する分析認定研究所の委託サービスを通じて、液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００およびＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ１２００システム）を用いて実施した。検証実験中、各校正用標準品とＱＣサンプルは、指定量のバルデナフィル塩酸塩（ＵＳＰ製）とシルデナフィル（ＬＥＴＣＯＬ製）を内部標準としてブランクヒト血漿にスパイクして調製した。５０ｕｌの分析物のアリコートを８５０ｕｌのメタノールで抽出し、遠心分離し、上澄みを乾燥させた。粉末を６０ｕｌの５０％メタノールで再構成し、ろ過後３０ｕｌをＬＣＭＳに注入した。分離された分析物は、逆相高性能Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８コラム（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いて分離された。各標準物質中の分析物の濃度は、エレクトロスプレーイオン化モード（ＥＳＩ）のポジティブモードで動作するトリプル四重極タンデム質量分析計を用いて定量した。バルデナフィルおよびシルデナフィルは、それぞれの分析物について多重反応モニタリング（ＭＲＭ）を用いて検出された。平均測定精度は９２～１１０％だった。検量線のＲ２Rは０．９９７７から０．９９９８の範囲であった。変動係数（ＣＶ）＝（標準偏差／測定値の平均値×１００％）で定義される精度は４～８％の範囲であった。定量下限は０．０５ｎｇ／ｍｌであった。
血漿中のバルデナフィル濃度の分析は、南カリフォルニア大学薬学部のスタンルイ博士が提供する分析認定研究所の委託サービスを通じて、液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００およびＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ１２００システム）を用いて実施した。検証実験中、各校正用標準品とＱＣサンプルは、指定量のバルデナフィル塩酸塩（ＵＳＰ製）とシルデナフィル（ＬＥＴＣＯＬ製）を内部標準としてブランクヒト血漿にスパイクして調製した。５０ｕｌの分析物のアリコートを８５０ｕｌのメタノールで抽出し、遠心分離し、上澄みを乾燥させた。粉末を６０ｕｌの５０％メタノールで再構成し、ろ過後３０ｕｌをＬＣＭＳに注入した。分離された分析物は、逆相高性能Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８コラム（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いて分離された。各標準物質中の分析物の濃度は、エレクトロスプレーイオン化モード（ＥＳＩ）のポジティブモードで動作するトリプル四重極タンデム質量分析計を用いて定量した。バルデナフィルおよびシルデナフィルは、それぞれの分析物について多重反応モニタリング（ＭＲＭ）を用いて検出された。平均測定精度は９２～１１０％だった。検量線のＲ２Rは０．９９７７から０．９９９８の範囲であった。変動係数（ＣＶ）＝（標準偏差／測定値の平均値×１００％）で定義される精度は４～８％の範囲であった。定量下限は０．０５ｎｇ／ｍｌであった。
【0169】
結果
代表的なバルデナフィル濃度時間曲線を図１２に示し、平均比較薬剤動態パラメータを表９に示す。０から無限大までの濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣＯ－ｉｎｆ）に基づき、ＳＤＳ点鼻薬の全体的なバイオアベイラビリティは、経口バルデナフィルの約１．４倍であると計算された。最大濃度発現時間（Ｔｍａｘ）は、経口投与では５８分であったのに対し、ＳＤＳ０８９点鼻では中央値で１０分であった。Ｔｍａｘは、ＩＮ投与を受けた被験者の８５％で６～１５分であったのに対し、経口投与を受けた被験者の９２％で４５～６０分であった）ＳＤＳ０８９投与後の最大濃度（Ｃｍａｘ）は、経口投与後のＣｍａｘの範囲内であった。これらのデータから、ＳＤＳ０８９点鼻スプレー４ｍｇのバイオアベイラビリティは、１０ｍｇ経口投与のそれに近いことが示されたが、Ｔｍａｘより短いことが示された。
点鼻薬と経口錠剤の平均薬剤動態パラメータの比較
代表的なバルデナフィル濃度時間曲線を図１２に示し、平均比較薬剤動態パラメータを表９に示す。０から無限大までの濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣＯ－ｉｎｆ）に基づき、ＳＤＳ点鼻薬の全体的なバイオアベイラビリティは、経口バルデナフィルの約１．４倍であると計算された。最大濃度発現時間（Ｔｍａｘ）は、経口投与では５８分であったのに対し、ＳＤＳ０８９点鼻では中央値で１０分であった。Ｔｍａｘは、ＩＮ投与を受けた被験者の８５％で６～１５分であったのに対し、経口投与を受けた被験者の９２％で４５～６０分であった）ＳＤＳ０８９投与後の最大濃度（Ｃｍａｘ）は、経口投与後のＣｍａｘの範囲内であった。これらのデータから、ＳＤＳ０８９点鼻スプレー４ｍｇのバイオアベイラビリティは、１０ｍｇ経口投与のそれに近いことが示されたが、Ｔｍａｘより短いことが示された。
【表9】
【0170】
２つの治療期間中、４７件の有害事象（ＡＥ）が発生した。４７件の有害事象のうち、４２件が副作用（ＡＤＲ）として記録され、そのうち３３件が点鼻薬に関連し、９件が経口錠剤に関連した。観察された副作用は、頭痛、くしゃみ、鼻水、涙目、鼻刺激、のど刺激などであった。ＳＤＳ－０８９点鼻スプレー製剤はより多くの鼻症状を引き起こしたが、全体的に副作用は一過性であり、被験者の忍容性は良好であった。報告された頭痛は、軽度および中等度の頭痛をＣｍａｘおよびＡＵＣＯ－ｉｎｆと相関させた場合、関連を示さなかった。
【0171】
結論
本明細書に開示されているように、１２人の健康なボランティアにおいて、バデナフィルの経鼻投与と経口投与を比較した。副作用は、経鼻投与においてより一般的であったが、これらの影響は一過性であり、忍容可能であった。この試験の全体的な結果は、ラットにおける結果と一致しており、ＩＮ投与は、より早いＴｍａｘ、より良好なバイオアベイラビリティを達成した。これらのヒトでの試験結果は、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１およびＢ２に記載されたような段階的アプローチを用いて、適切な製剤および用量を同定できることをさらに確認するものである。
参考文献
本明細書に開示されているように、１２人の健康なボランティアにおいて、バデナフィルの経鼻投与と経口投与を比較した。副作用は、経鼻投与においてより一般的であったが、これらの影響は一過性であり、忍容可能であった。この試験の全体的な結果は、ラットにおける結果と一致しており、ＩＮ投与は、より早いＴｍａｘ、より良好なバイオアベイラビリティを達成した。これらのヒトでの試験結果は、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１およびＢ２に記載されたような段階的アプローチを用いて、適切な製剤および用量を同定できることをさらに確認するものである。
参考文献
【0172】
以下の各文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
１．シルデナフィル（バイアグラ）の処方情報、２０１７年
２．タダラフィル（シアリス）の処方情報、２０１８年
３.Ｋｉｍ Ｊ．Ｓ．，Ｋｉｍ ＭＳ，Ｂａｅｃｋ ＩＨ，ビーグル犬における経鼻投与後のタダラフィルのバイオアベイラビリティの向上。Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ２０１８年１０月１５；１０（４）：ｄｏｉ：１０．３３９０／Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ１００４０１８７
４．バルデナフィル（レビトラ）の処方情報、２０１４年
５．Ｂｈｉｓｅ，Ｓ．Ｂ，Ｙａｄａｖ ＡＶ，Ａｖａｃｈａｔ ＡＭ，Ｍａｌａｙａｎｄｉ Ｒ．経鼻薬剤送達システムのバイオアベイラビリティＡｓｉａｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ２００８；２：２０１－２１５
６.Ｒｏｍｅｏ，ＶＤ，ｄｅＭｅｉｒｅｌｅｓ Ｊ，Ｓｉｌｅｎｏ ＡＰ，Ｐｉｍｐｌａｓｋａｒ ＨＫ，Ｂｅｈｌ ＣＲ．全身経鼻薬剤送達における物理化学的特性およびその他の要因の影響Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ１９９８;２９：８９－１１６
７.Ｗａｎｇ，Ｙ．，Ｃｈｏｗ，Ｍ．Ｓ．Ｓ．，Ｚｕｏ，Ｚ．両性化合物のｐＨ依存溶解性と膜透過性のメカニズム解析：シルデナフィルへの応用Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，２００８；３５２，２１７－２２４
８．Ｃｈｈａｊｅｄ，Ｓａｎｇａｌｅ Ｓ，Ｂａｒｈａｔｅ 鼻腔薬剤搬送システムの利点：Ｒｅｖｉｅｗ．ｈｔｔｐ：／／ｉｊｐｓｒ．ｃｏｍ／ｂｆｔ－ａｒｔｉｃｌｅ／ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ－ｄｒｕｇ－ｄｅｌｉｖｅｒｙ－ｓｙｓｔｅｍ－ａ－ｒｅｖｉｅｗ／ｖｉｅｗ＝ｆｕｌｌｔｅｘｔ；ＤＯＩ：ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０.１３０４０／ＩＪＰＳＲ．０９７５－８２３２.２（６）．１３２２－３６.
９．Ａｕｏｒａ，Ｊ．鼻腔送達システムの開発 総説Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ２００２；２：１－８
１０．鼻および副鼻腔の呼吸器粘膜の生理と病態生理ＧＭＳ
Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｏｔｏｒｈｉｎｏｌａｒｙｎｇｏｌ Ｈｅａｄ Ｎｅｃｋ Ｓｕｒｇ．２０１０；９：１－２４
１1．Ｂｉｔｔｅｒ，Ｃ．，Ｓｕｔｅｒ－Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｋ．，＆Ｓｕｒｂｅｒ，Ｃ（２０１１）ヒトにおける経鼻薬剤送達Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｂｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌ，４０，２０－３５ ｈｔｐｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５９／０００３２１０４４
１２．Ｐａｒｋ Ｊ，Ａｇｙｅｍａｎｇ Ａ，Ｃｈｏｗ Ｍ．Ｓ．Ｓ．（２０１９）Ｃａｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｅｒｅｃｔｉｌｅ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｅ ｒｅ＝ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ ｔｏ ａｃｈｉｖｅ ｒａｐｉｄ ｅｆｆｅｃｔ？Ｊ．Ａｓｉａｎ Ａｓｓｏｃ ｏｆ Ｓｃｈｏｏｌｓ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ８，５８－６３
１３．ＳｃｉｅｎｃｅＦｉｎｄｅｒ ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．Ｓｃｉｆｉｎｄｅｒ．ｃｏｍ
１４．Ｍａｌｐａｎｉ，Ａ．，Ｐａｎｋａｊ，Ｗ．，Ｂｅｌｏｎｋａｒ，Ｎ．Ｖ．，（２００９）水溶性の測定と予測ツールＰｈａｒｍａｉｎｆｏｌｎｅｔ Ｌａｔｅｓｔ Ｒｅｖｉｅｗｓ，７，１－１５
１５．Ｅｒｉｃ，Ｓ．，Ｋａｌｉｎｉｃ，Ｍ．，Ｐｏｐｏｖｉｃ，Ａ．，ｅｔ ａｌ，（２０２０），ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄａｔａ ｆｏｒ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ，Ｊ．Ｓｅｒｂ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７５，４８３－４９５
１６．Ｂｅｒｂｅｎ Ｐ，Ｂａｕｅｒ－Ｂｒａｎｄｌ Ａ，Ｂｒａｎｄｌ Ｍ，Ｆａｌｌｅｒ Ｂ，Ｆｌａｔｅｎ ＧＥ，Ｊａｃｏｂｓｅｎ ＡＣ，Ｂｒｏｕｗｅｒｓ Ｊ，Ａｕｇｕｓｔｉｊｎｓ Ｐ．無細胞浸透ツールを用いた薬剤透過性プロファイリング：概要と応用Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．２０１８ Ｊｕｌ １；１１９：２１９－２３３．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｊｐｓ．２０１８.０４.０１６.Ｅｐｕｂ ２０１８ Ａｐｒ １３
１７．Ｋａｎｓｙ，Ｍ．，Ｓｅｎｎｅｒ，Ｆ．，Ｇｕｂｅｒｎａｔｏｒ，Ｋ．，（１９９８）物理化学的ハイスループットスクリーニング：受動的吸収過程の記述におけるパラレル人工膜透過アッセイ。日本医化学、４１、１００７１０１０
１８．人工膜を用いたハイスループット透過性ｐＨプロファイルとハイスループットアルカン／水ログＰ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００１；４４，ｐ．９２３－９３０
１９．Ｎｉｅｌｓｅｎ ＰＥ．，Ａｖｄｅｅｆ Ａ．（２００４）．ＰＡＭＰＡ－ａ薬剤吸収生体外モデル８見かけのフィルター多孔性と非撹拌水層Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ２２：３３－４１
２０．Ｂｉｒｃｈ，Ｈ．，Ｒｅｄｍａｎ，Ａ．Ｄ．， Ｌｅｔｉｎｓｋｉ，Ｄ．Ｊ．，Ｌｙｏｎ，Ｄ．Ｙ．，＆Ｍａｙｅｒ，Ｐ（２０１９）難試験物質の水溶性の決定：チュートリアルレビューＡｎａｌ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ，１０８６，１６－２８ ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ａｃａ．２０１９．２０１９.０７．０３４
２１．Ｈｅ，Ｙ．，Ｈｏ，Ｃ．，Ｙａｎｇ，Ｄ．，Ｃｈｅｎ，Ｊ．，＆Ｏｒｔｏｎ，Ｅ．（２０１７）医薬品塩の溶解度の測定と正確な解釈Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，１０５（５），１１９０－１１９６ ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｘｐｈｓ．２０１７．０１．０２３
２２．Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ，Ｃ．，Ａｖｄｅｅｆ，Ａ．，（２０１９）溶解度の測定と解釈における展望Ａｄｍｅｔ＆ＤＭＰＫ ７，８８－１０５
２３．Ｉｎｏｕｅ，Ｄ．，Ｆｕｒｕｂａｙａｓｈｉ，Ｔ．，Ｔａｎａｋａ，Ａ．ｅｔ ａｌ（２０２０）ラット経鼻投与後の生体内バイオアベイラビリティ予測のためのＣａｌｕ－３細胞層を介した生体外膜透過性を用いた鼻粘膜からの薬剤透過の定量的評価 Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈａｒｍ．，１４９，１４５－１５３
２４．古林 崇、井上大輔、西山直樹、他（２０２０）薬剤透過性を推定するための様々な細胞株および三次元粘膜組織モデルシステムの比較とラットにおける鼻腔内薬剤吸収を予測する生体外輸送試験 薬学１２、１－１４
２５．Ｗａｎｇ，Ｙ，Ｚｕｏ，Ｚ，Ｃｈｏｗ，ＭＳ（２００８）舌下薬剤送達スクリーニングのためのＨＱ－１ｕ－１モデル－ｐＨ、浸透圧および浸透促進剤の影響Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０９ Ｍａｒ ３１；３７０（１－２）：６８－７４.Ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｊｐｈａｒｍ．２００８.１１．０１０
２６．吸入用超音波ネブライザーを用いたバルデナフィルの薬剤動態と１０ｍｇ経口錠剤単回投与との比較Ｊ ｓｅｘ Ｍｅｄ．２０１６ Ｊｕｌ；１３（７）：１１１１－８．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．１７４３－６１０９．２００９．０１４０３．ｘ．ＰＭＩＤ：２７３１８０２１
２７．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｎｄａ／２０１２／２０２８１３Ｏｒｉｇｌｓ０００ＳｕｍＲ．ｐｄｆ
２８．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｄｒｕｇｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ＲｘＤｒｕｇｓ／Ｂ／Ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｎｅ％２０Ｄｉｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ％２０ＨＦＡ．ｈｔｍｌ
２９．Ｑｉａｎ，Ｓ，Ｗｏｎｇ，ＹＣ，Ｚｕｏ，Ｚ（２０１４），Ｄｅｖｅｌｏｐｅｍｅｎｔ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｓｉｔｕ ｇｅｌ ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｏｒ ｉｎｔｒａｎａｓａｌ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｔａｃｒｉｎｅ．Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ ２０１４ Ｊｕｌ １；４６８（１－２）：２７２－８２．ｄｏｉ；１０．１０１６／ｊ．ｉｊｐｈａｒｍ．２０１４．０４．０１５．Ｅｐｕｂ ２０１４ Ａｐｒ ５．ｐｍｉｄ：２４７０９２２０
３０．Ｌｕ，ＨＴ．，Ｃｈｅｎ，Ｒ．，Ｓｈｅｕ，Ｍ他（２０１１）マイクロエマルジョンシステムによる速効性シルデナフィル点鼻スプレー：ウサギにおける生体外評価および生体内薬剤動態試験Ｘｅｎｏｂｉｏｉｃａ ＤＯＩ：１０．３１０９／００４９８２５４.２０１１．５６３８７７
１．シルデナフィル（バイアグラ）の処方情報、２０１７年
２．タダラフィル（シアリス）の処方情報、２０１８年
３.Ｋｉｍ Ｊ．Ｓ．，Ｋｉｍ ＭＳ，Ｂａｅｃｋ ＩＨ，ビーグル犬における経鼻投与後のタダラフィルのバイオアベイラビリティの向上。Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ２０１８年１０月１５；１０（４）：ｄｏｉ：１０．３３９０／Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ１００４０１８７
４．バルデナフィル（レビトラ）の処方情報、２０１４年
５．Ｂｈｉｓｅ，Ｓ．Ｂ，Ｙａｄａｖ ＡＶ，Ａｖａｃｈａｔ ＡＭ，Ｍａｌａｙａｎｄｉ Ｒ．経鼻薬剤送達システムのバイオアベイラビリティＡｓｉａｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ２００８；２：２０１－２１５
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８．Ｃｈｈａｊｅｄ，Ｓａｎｇａｌｅ Ｓ，Ｂａｒｈａｔｅ 鼻腔薬剤搬送システムの利点：Ｒｅｖｉｅｗ．ｈｔｔｐ：／／ｉｊｐｓｒ．ｃｏｍ／ｂｆｔ－ａｒｔｉｃｌｅ／ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ－ｄｒｕｇ－ｄｅｌｉｖｅｒｙ－ｓｙｓｔｅｍ－ａ－ｒｅｖｉｅｗ／ｖｉｅｗ＝ｆｕｌｌｔｅｘｔ；ＤＯＩ：ｈｔｔｐ：／／ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０.１３０４０／ＩＪＰＳＲ．０９７５－８２３２.２（６）．１３２２－３６.
９．Ａｕｏｒａ，Ｊ．鼻腔送達システムの開発 総説Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ２００２；２：１－８
１０．鼻および副鼻腔の呼吸器粘膜の生理と病態生理ＧＭＳ
Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｏｔｏｒｈｉｎｏｌａｒｙｎｇｏｌ Ｈｅａｄ Ｎｅｃｋ Ｓｕｒｇ．２０１０；９：１－２４
１1．Ｂｉｔｔｅｒ，Ｃ．，Ｓｕｔｅｒ－Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ｋ．，＆Ｓｕｒｂｅｒ，Ｃ（２０１１）ヒトにおける経鼻薬剤送達Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｂｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌ，４０，２０－３５ ｈｔｐｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５９／０００３２１０４４
１２．Ｐａｒｋ Ｊ，Ａｇｙｅｍａｎｇ Ａ，Ｃｈｏｗ Ｍ．Ｓ．Ｓ．（２０１９）Ｃａｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｅｒｅｃｔｉｌｅ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｅ ｒｅ＝ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ ｔｏ ａｃｈｉｖｅ ｒａｐｉｄ ｅｆｆｅｃｔ？Ｊ．Ａｓｉａｎ Ａｓｓｏｃ ｏｆ Ｓｃｈｏｏｌｓ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ８，５８－６３
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１６．Ｂｅｒｂｅｎ Ｐ，Ｂａｕｅｒ－Ｂｒａｎｄｌ Ａ，Ｂｒａｎｄｌ Ｍ，Ｆａｌｌｅｒ Ｂ，Ｆｌａｔｅｎ ＧＥ，Ｊａｃｏｂｓｅｎ ＡＣ，Ｂｒｏｕｗｅｒｓ Ｊ，Ａｕｇｕｓｔｉｊｎｓ Ｐ．無細胞浸透ツールを用いた薬剤透過性プロファイリング：概要と応用Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．２０１８ Ｊｕｌ １；１１９：２１９－２３３．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｊｐｓ．２０１８.０４.０１６.Ｅｐｕｂ ２０１８ Ａｐｒ １３
１７．Ｋａｎｓｙ，Ｍ．，Ｓｅｎｎｅｒ，Ｆ．，Ｇｕｂｅｒｎａｔｏｒ，Ｋ．，（１９９８）物理化学的ハイスループットスクリーニング：受動的吸収過程の記述におけるパラレル人工膜透過アッセイ。日本医化学、４１、１００７１０１０
１８．人工膜を用いたハイスループット透過性ｐＨプロファイルとハイスループットアルカン／水ログＰ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００１；４４，ｐ．９２３－９３０
１９．Ｎｉｅｌｓｅｎ ＰＥ．，Ａｖｄｅｅｆ Ａ．（２００４）．ＰＡＭＰＡ－ａ薬剤吸収生体外モデル８見かけのフィルター多孔性と非撹拌水層Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ２２：３３－４１
２０．Ｂｉｒｃｈ，Ｈ．，Ｒｅｄｍａｎ，Ａ．Ｄ．， Ｌｅｔｉｎｓｋｉ，Ｄ．Ｊ．，Ｌｙｏｎ，Ｄ．Ｙ．，＆Ｍａｙｅｒ，Ｐ（２０１９）難試験物質の水溶性の決定：チュートリアルレビューＡｎａｌ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ，１０８６，１６－２８ ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ａｃａ．２０１９．２０１９.０７．０３４
２１．Ｈｅ，Ｙ．，Ｈｏ，Ｃ．，Ｙａｎｇ，Ｄ．，Ｃｈｅｎ，Ｊ．，＆Ｏｒｔｏｎ，Ｅ．（２０１７）医薬品塩の溶解度の測定と正確な解釈Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，１０５（５），１１９０－１１９６ ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｘｐｈｓ．２０１７．０１．０２３
２２．Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ，Ｃ．，Ａｖｄｅｅｆ，Ａ．，（２０１９）溶解度の測定と解釈における展望Ａｄｍｅｔ＆ＤＭＰＫ ７，８８－１０５
２３．Ｉｎｏｕｅ，Ｄ．，Ｆｕｒｕｂａｙａｓｈｉ，Ｔ．，Ｔａｎａｋａ，Ａ．ｅｔ ａｌ（２０２０）ラット経鼻投与後の生体内バイオアベイラビリティ予測のためのＣａｌｕ－３細胞層を介した生体外膜透過性を用いた鼻粘膜からの薬剤透過の定量的評価 Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈａｒｍ．，１４９，１４５－１５３
２４．古林 崇、井上大輔、西山直樹、他（２０２０）薬剤透過性を推定するための様々な細胞株および三次元粘膜組織モデルシステムの比較とラットにおける鼻腔内薬剤吸収を予測する生体外輸送試験 薬学１２、１－１４
２５．Ｗａｎｇ，Ｙ，Ｚｕｏ，Ｚ，Ｃｈｏｗ，ＭＳ（２００８）舌下薬剤送達スクリーニングのためのＨＱ－１ｕ－１モデル－ｐＨ、浸透圧および浸透促進剤の影響Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０９ Ｍａｒ ３１；３７０（１－２）：６８－７４.Ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｊｐｈａｒｍ．２００８.１１．０１０
２６．吸入用超音波ネブライザーを用いたバルデナフィルの薬剤動態と１０ｍｇ経口錠剤単回投与との比較Ｊ ｓｅｘ Ｍｅｄ．２０１６ Ｊｕｌ；１３（７）：１１１１－８．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．１７４３－６１０９．２００９．０１４０３．ｘ．ＰＭＩＤ：２７３１８０２１
２７．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｎｄａ／２０１２／２０２８１３Ｏｒｉｇｌｓ０００ＳｕｍＲ．ｐｄｆ
２８．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｄｒｕｇｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ＲｘＤｒｕｇｓ／Ｂ／Ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｎｅ％２０Ｄｉｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ％２０ＨＦＡ．ｈｔｍｌ
２９．Ｑｉａｎ，Ｓ，Ｗｏｎｇ，ＹＣ，Ｚｕｏ，Ｚ（２０１４），Ｄｅｖｅｌｏｐｅｍｅｎｔ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｓｉｔｕ ｇｅｌ ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｏｒ ｉｎｔｒａｎａｓａｌ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｔａｃｒｉｎｅ．Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ ２０１４ Ｊｕｌ １；４６８（１－２）：２７２－８２．ｄｏｉ；１０．１０１６／ｊ．ｉｊｐｈａｒｍ．２０１４．０４．０１５．Ｅｐｕｂ ２０１４ Ａｐｒ ５．ｐｍｉｄ：２４７０９２２０
３０．Ｌｕ，ＨＴ．，Ｃｈｅｎ，Ｒ．，Ｓｈｅｕ，Ｍ他（２０１１）マイクロエマルジョンシステムによる速効性シルデナフィル点鼻スプレー：ウサギにおける生体外評価および生体内薬剤動態試験Ｘｅｎｏｂｉｏｉｃａ ＤＯＩ：１０．３１０９／００４９８２５４.２０１１．５６３８７７
【0173】
実施例Ｄ１
シルデナフィルの経鼻（ＩＮ）投与と製剤化
シルデナフィルの溶解性および安定性を含む特性を、様々な有機水性混合物中で測定した。
シルデナフィルの経鼻（ＩＮ）投与と製剤化
シルデナフィルの溶解性および安定性を含む特性を、様々な有機水性混合物中で測定した。
【0174】
シルデナフィルは、ＥＤ治療のための経口錠剤としてＦＤＡにより承認されており、通常２５～１００ｍｇの用量で使用される（１）。その医薬品有効成分であるクエン酸シルデナフィルの分子量は６６６．７ｇ／モルであり、シルデナフィル塩基の分子量は４７４．６ｇ／モルである（１）。シルデナフィル塩基のｐＫａは７．２、ｌｏｇＰは２．７である（１２）。その溶解度は、ｐＨ３－４で約７．０ｍｇ／ｍｌ、ｐＨで２．１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ６で０．１１、ｐＨ７で０．０３ｍｇ／ｍｌである（７）。このような水への溶解度は、適切なＩＮ製剤を開発するには低すぎる。（ＩＮ投与によるバイオアベイラビリティが経口投与によるものより２倍優れていると仮定すると、少なくとも２５ｍｇの経口投与と同等の有効濃度を達成するためには、約４２ｍｇ／ｍｌのシルデナフィル塩基の溶解度が必要である。このような濃度は、鼻孔あたり０．１５０ｍｌの望ましい噴霧量に基づいて計算されるため、必要な濃度は両鼻孔で１２．５ｍｇ／０．３ｍｌ＝４２ｍｇ／ｍｌとなる）。このように、優れた膜分配係数（ｌｏｇＰ＝２．７）を有するにもかかわらず、水性シルデナフィルを用いた経鼻投与は、最も溶解性の高いｐＨ範囲（ｐＨ３－４）であっても、有効なＩＮ用量（少なくとも２５ｍｇの経口用量に相当）を達成することは不可能である。
【0175】
しかしながら、クエン酸シルデナフィルは、特定の油（例えばオレイン酸、サフラワー油）または界面活性剤（例えばＴｗｅｅｎ２０）、クレモホールＲＨ６０、クレモホールＥＬ）または共界面活性剤（例えばＰＥＧ２００）（３０）において、改善された溶解性を達成することができる。経鼻シルデナフィル製剤のための４０％オレイン酸、１０％Ｈ２０、および５０％Ｔｗｅｅｎ８０エタノール（重量比１：４）からなるマイクロエマルション系は、迅速な作用をもたらすことが判明している（３０）。しかし、このような油性の溶液は、点鼻薬による通常の使用には適さない。したがって、安全性が高く、適切な溶解性と浸透性を達成できる単純な有機水性混合物からなる油分を含まない新しい製剤が最も望ましい。
【0176】
実施例Ｄ２
様々な有機水性混合物の溶解性および安定性特性のスクリーニング：シルデナフィル
一例として、バルデナフィルＩＮスプレー製剤について述べた方法を用いて、異なるｐＨにおける飽和シルデナフィルの水への溶解度をまずスクリーニングし、続いて異なるｐＨにおける透過性をスクリーニングした。このような情報は、水系における最適な溶解度と透過度の組み合わせ（すなわち、Ｊｓｓ）を生成するために使用される。この情報は、所望の適切な舌下およびＩＮシルデナフィル製剤および用量として使用される有機水溶液の望ましいｐＨ、溶解度および透過度の初期手がかりを提供するために使用される。さらに、様々な溶媒に対するシルデナフィルの飽和溶解度を約ｐＨ４．０－６．０で測定した。
様々な有機水性混合物の溶解性および安定性特性のスクリーニング：シルデナフィル
一例として、バルデナフィルＩＮスプレー製剤について述べた方法を用いて、異なるｐＨにおける飽和シルデナフィルの水への溶解度をまずスクリーニングし、続いて異なるｐＨにおける透過性をスクリーニングした。このような情報は、水系における最適な溶解度と透過度の組み合わせ（すなわち、Ｊｓｓ）を生成するために使用される。この情報は、所望の適切な舌下およびＩＮシルデナフィル製剤および用量として使用される有機水溶液の望ましいｐＨ、溶解度および透過度の初期手がかりを提供するために使用される。さらに、様々な溶媒に対するシルデナフィルの飽和溶解度を約ｐＨ４．０－６．０で測定した。
【0177】
材料
クエン酸シルデナフィルは、Teva API（イスラエル）で製造されたＡｓｓｉａｎ Ｃｈｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ（イスラエル）から購入した。
クエン酸シルデナフィルは、Teva API（イスラエル）で製造されたＡｓｓｉａｎ Ｃｈｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ（イスラエル）から購入した。
【0178】
使用した水は、ナノピュア水ろ過システム（Ｂａｒｎｓｔｅａｄ Ｎａｎｏｐｕｒｅ Ｄｉａｍｏｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ＵＶ／ＵＦシステム（Ｃａｔ ＃Ｄ１１９３１０をＡＰＳ Ｗａｔｅｒ Ｓｅｒｖｉｖｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（米国カリフォルニア州レイクバルボア）から購入）から得た。
【0179】
タダラフィル（ＴＡＤ）５ｍｇ錠剤をＰｏｌｐｈａｒｍａ（ポーランド）から購入した。
【0180】
アセトニトリル≧９９．５％ＡＣＳ（ＣＡＳ Ｎｏ．７５－０５－８）をＶＷＲ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ＢＤＨ（登録商標）から購入した。
【0181】
メタノール（「ＭｅＯＨ」）をＶＷＲ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ＢＤＨ（登録商標）から購入した。
【0182】
エタノール１９０－Ｐｒｏｏｆ（ＣＡＳ Ｎｏ．６４－１７－５）をＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0183】
グリセリンまたはグリセロール（Ｌｏｔ ７０Ｋ００４４）をSigma-Aldrich（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0184】
乳酸カルシウム五水和物（Ｌｏｔ ＳＬＣＢ７１７３）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0185】
氷酢酸（Ｌｏｔ Ｂ２１Ｒ０２６）をＡｌｆａ Ａｅｓａｒ（米国マサチューセッツ州ハーバーヒル）から購入した。
【0186】
ＮＭＰ（１－Ｍｅｔｈｙｌ－２－Ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｏｎｅ）（Ｌｏｔ ５１Ｋ３６８３）をＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0187】
ナトリウムリン酸塩一塩基水和物（リン酸バッファー）（Ｃａｔ＃ ＢＤＨ９２９８，Ｌｏｔ＃ １９Ｅ０３５６４０７）をＢＤＨ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0188】
ＮａＯＨ（水酸化ナトリウム）（Ｃａｔ＃ ＳＢ０６１７，Ｌｏｔ＃ Ｃ２６Ｓ６１７Ｒ０Ｓ）をＢｉｏｂａｓｉｃ Ｃａｎａｄａ Ｉｎｃ（カナダオンタリオ州マーカム）から購入した。
【0189】
ジエチレングリコールモノエチルエーテル（Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）（Ｃａｔ＃ ８．０３１２７，Ｌｏｔ＃ Ｓ７５９１８２７ ８３１）
【0190】
マルチスクリーン－ＩＰフィルタープレート（Ｃａｔ＃ ＭＡＩＰＮ４５５０）
【0191】
二塩基性リン酸ナトリウム七水和物（リン酸緩衝液）（Ｃａｔ＃ ８２１０，Ｌｏｔ＃ ＢＢ－０６８０Ｒ）
【0192】
ポリエチレングリコール４００（Ｃａｔ＃ ＰＸ１２８６Ｂ－２，Ｌｏｔ＃ ６０２９７０４５）をＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（米国マサチューセッツ州バーリントン）から購入した。
【0193】
ＨＣ１（塩酸）（Ｃａｔ＃ ３２０３３１；Ｌｏｔ＃ ＳＨＢＧ２４３５Ｖ）
【0194】
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、錠剤）（Ｃａｔ＃ Ｐ４４１７；Ｌｏｔ＃ＳＬＣＤ５９３８）をＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（米国ミズーリ州セントルイス）から購入した。
【0195】
Ｏ－リン酸、８５％（ＨＰＬＣ）（Ｃａｔ＃Ａ２６０）
【0196】
トリエチルアミン（Ｃａｔ＃ ０４８８４；Ｌｏｔ＃ ０１１４６４）をＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（米国マサチューセッツ州ウォルサム）から購入した。
【0197】
孔サイズ０．２μｍのセルロースアセテート膜付きシリンジフィルター（Ｃａｔ＃ ２８１４５－４７５）をＶＷＲ（米国ペンシルバニア州ラドナー）から購入した。
【0198】
ＥＭＤミリポア社（米国マサチューセッツ州バーリントン）のＴｗｅｅｎ２０およびＴｗｅｅｎ８０
【0199】
設備
以下の実験で使用した装置は、実施例Ａ２で説明したものと同じである。
以下の実験で使用した装置は、実施例Ａ２で説明したものと同じである。
【0200】
手順
シルデナフィル水溶液および複数の有機シルデナフィル水溶液を飽和溶解度についてスクリーニングした。異なるｐＨにおけるシルデナフィルの飽和溶解度を測定するために、過剰量のクエン酸シルデナフィル原薬を用い、ｐＨメーターを用いてｐＨを調整（ｐＨ３．５～７．５の範囲）した溶液を「シェイクフラスコ」法によって室温で調製した。その後、溶液をＶＷＲ０．２μフィルターでろ過した。その後、濾液をＨＰＬＣでシルデナフィル濃度を測定し、内部標準としてタダラフィルを用い、実施例Ａ１およびＢ１に記載したバルデナフィルＨＰＬＣ測定と同様の方法で行った。
シルデナフィル水溶液および複数の有機シルデナフィル水溶液を飽和溶解度についてスクリーニングした。異なるｐＨにおけるシルデナフィルの飽和溶解度を測定するために、過剰量のクエン酸シルデナフィル原薬を用い、ｐＨメーターを用いてｐＨを調整（ｐＨ３．５～７．５の範囲）した溶液を「シェイクフラスコ」法によって室温で調製した。その後、溶液をＶＷＲ０．２μフィルターでろ過した。その後、濾液をＨＰＬＣでシルデナフィル濃度を測定し、内部標準としてタダラフィルを用い、実施例Ａ１およびＢ１に記載したバルデナフィルＨＰＬＣ測定と同様の方法で行った。
【0201】
結果
シルデナフィルＨＰＬＣアッセイの有効性を、品質管理サンプルおよび標準曲線に関して、有効なバルデナフィルアッセイ（実施例Ａ２）を参照して評価した。同様の結果が得られ、定量下限は０．２ｕｇ／ｍｌであった。
シルデナフィルＨＰＬＣアッセイの有効性を、品質管理サンプルおよび標準曲線に関して、有効なバルデナフィルアッセイ（実施例Ａ２）を参照して評価した。同様の結果が得られ、定量下限は０．２ｕｇ／ｍｌであった。
【0202】
表１０は、ｐＨ３．５－７．５の範囲内で、いくつかの溶媒に対するシルデナフィルの飽和溶解度の比較を示している。ｐＨが低いほど溶解度は高くなり、ｐＨ４．５を超えると溶解度は大きく低下する。異なるｐＨ値における水溶液中のシルデナフィルＪＳＳの比較を図８に示す。このようなデータに基づき、水中でのシルデナフィルＪｓｓｐＨｍａｘはｐＨ４．６と推定される。しかし、代表的な有機水溶液の溶解度はｐＨ４．２－４．５が最適と思われ、これはシルデナフィルＪｓｓｐＨｍａｘの範囲内（図８に示すようにｐＨ４．２－５．２）に相当する。工業的応用を考慮し、表１１および表１２に異なる溶媒におけるｐＨ４．２およびｐＨ４．５付近でのシルデナフィルの飽和溶解度を示す。
ｐＨ＊の異なる溶媒に対するシルデナフィルの飽和溶解度
シルデナフィルのｐＨ４．２＊における各種溶媒への飽和溶解度
ｐＨ４．４＊におけるシルデナフィルの各種溶媒への飽和溶解度
【表10】
【表11】
【表12】
【0203】
結論
本明細書に開示されているように、酢酸／ＮＭＰ／乳酸カルシウム－水性混合溶媒のような特定の有機水性混合溶媒は、純粋な水溶液における溶解度と比較して、シルデナフィルの溶解度を有意に高めることができる（表１１および１２）。シルデナフィルの溶解度はｐＨに依存する。本研究の結果から、飽和シルデナフィルの溶解度は、有機溶媒濃度を高めることでさらに高めることができる。
本明細書に開示されているように、酢酸／ＮＭＰ／乳酸カルシウム－水性混合溶媒のような特定の有機水性混合溶媒は、純粋な水溶液における溶解度と比較して、シルデナフィルの溶解度を有意に高めることができる（表１１および１２）。シルデナフィルの溶解度はｐＨに依存する。本研究の結果から、飽和シルデナフィルの溶解度は、有機溶媒濃度を高めることでさらに高めることができる。
【0204】
ＩＮ製剤に望まれるシルデナフィルの最小溶解度が４２ｍｇ／ｍｌの場合（実施例Ｄ１に示した計算）、シルデナフィルの水性飽和溶解度はｐＨ４で５ｍｌ／ｍｌ以下であり、シルデナフィルのＩＮ製剤には適さない溶媒である。しかし、約ｐＨ４で少なくとも４２ｍｇ／ｍｌの溶解度を有する他の有機水溶性溶媒または混合物が多数同定されており（表１１および１２を参照）、それらの透過性値がシルデナフィル水溶液の透過性値と同等かそれ以上であれば、シルデナフィルＩＮ製剤に適している可能性が高い（以下の実施例Ｄ３の表１３および１４を参照）。
【0205】
実施例Ｄ３
ＰＡＭＰＡを用いたシルデナフィルの透過性とフラックスのスクリーニング
この実施例では、パラレル人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を用いたシルデナフィルの透過性の測定について説明する。
ＰＡＭＰＡを用いたシルデナフィルの透過性とフラックスのスクリーニング
この実施例では、パラレル人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）を用いたシルデナフィルの透過性の測定について説明する。
【0206】
本明細書に開示されているように、室温および大気圧における異なる溶媒中のシルデナフィルの透過性は、生体外ＰＡＭＰＡを用いてスクリーニングされた。ＰＡＭＰＡは薬剤の受動的吸収を予測する（２２－２４）。測定単位は定常状態で得られる見かけの透過率（Ｐａｐｐ）で、ｃｍ／秒で表される。また、Ｐａｐｐと飽和溶解度から計算される特定のｐＨにおけるフラックス（Ｊｓｓ）は、１秒間に単位面積を横切る薬剤の量として表される。
【0207】
本明細書に開示されているように、飽和シルデナフィル水溶液の透過性に対するｐＨの効果が決定された。さらに、ｐＨ４．２および４．６において、飽和シルデナフィルの透過性を改善するための異なる有機水溶液も測定した。我々の研究以前は、異なる有機水溶液中でのシルデナフィルの透過に対するｐＨの影響は不明であり、正確に予測することはできなかった。
【0208】
材料と設備
材料および装置は実施例Ｂ１に記載したものと同様であり、シルデナフィルおよび溶媒はＤ２に記載したものと同じである。
材料および装置は実施例Ｂ１に記載したものと同様であり、シルデナフィルおよび溶媒はＤ２に記載したものと同じである。
【0209】
手続き
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のシルデナフィル塩酸塩三水和物（３ｍｌ）の飽和溶液を、上記実施例Ｅ２に記載したように、シルデナフィルの量を増加させ、所望のｐＨ（ｐＨメーターを用いて３．５～６．０の範囲)に調整することにより調製した。
（ａ）溶液の調製
異なる溶媒中のシルデナフィル塩酸塩三水和物（３ｍｌ）の飽和溶液を、上記実施例Ｅ２に記載したように、シルデナフィルの量を増加させ、所望のｐＨ（ｐＨメーターを用いて３．５～６．０の範囲)に調整することにより調製した。
【0210】
（ｂ）ＰＡＭＰＡを用いた透過試験
シルデナフィルの透過試験は、実施例Ｂ２でバルデナフィルについて記載したように、ＰＡＭＰＡを用い、レシーバープレートおよびマルチスクリーン－ＩＰフィルタープレートを用いて行った。ｐＨ４．２および４．５における異なる溶媒中のシルデナフィルを表１３および１４に示す。
シルデナフィルの透過試験は、実施例Ｂ２でバルデナフィルについて記載したように、ＰＡＭＰＡを用い、レシーバープレートおよびマルチスクリーン－ＩＰフィルタープレートを用いて行った。ｐＨ４．２および４．５における異なる溶媒中のシルデナフィルを表１３および１４に示す。
【0211】
（ｃ）ＨＰＬＣ分析
供与チャンバーまたは受容チャンバー中のシルデナフィルの濃度は、バルデナフィルについて記載したのと同様に調製し、ＨＰＬＣアッセイは実施例Ｄ２に記載したのと同様に行った。
供与チャンバーまたは受容チャンバー中のシルデナフィルの濃度は、バルデナフィルについて記載したのと同様に調製し、ＨＰＬＣアッセイは実施例Ｄ２に記載したのと同様に行った。
【0212】
結果
ｐＨ４．２および４．５における異なるシルデナフィル溶液中のシルデナフィルの平均ＰａｐｐおよびＪｓｓを表１３および１４に示す。
ｐｈ４．２＊におけるシルデナフィルの透過性とフラックスに対する溶媒の影響
ｐＨ４．５＊におけるシルデナフィルの透過性とフラックスに対する溶媒の影響
ｐＨ４．２および４．５における異なるシルデナフィル溶液中のシルデナフィルの平均ＰａｐｐおよびＪｓｓを表１３および１４に示す。
【表13】
【表14】
【0213】
結論
本明細書で開示するように、シルデナフィルの溶解度はｐＨ依存性である。シルデナフィル水溶液は、ｐＨが増加するにつれて透過／浸透性が増加する（ｐＨが２．２５から７．０に増加するにつれて、理論的に予想される結合種の割合が高くなることに対応する）（図８）。シルデナフィル水溶液の薬剤フラックスは、ｐＨ４．５付近またはｐＨ４．６付近で最適と思われる。
本明細書で開示するように、シルデナフィルの溶解度はｐＨ依存性である。シルデナフィル水溶液は、ｐＨが増加するにつれて透過／浸透性が増加する（ｐＨが２．２５から７．０に増加するにつれて、理論的に予想される結合種の割合が高くなることに対応する）（図８）。シルデナフィル水溶液の薬剤フラックスは、ｐＨ４．５付近またはｐＨ４．６付近で最適と思われる。
【0214】
鼻孔１つにつき１５０ｕｌまたは０．１５ｍｌ、あるいは両鼻孔で０．３ｍｌの点鼻薬量に基づき、シルデナフィルの１ＩＮ投与に必要なソルミンは４２ｍｇ／ｍｌ（１２．５ｍｇ／０．３ｍｌ＝４２ｍｇ）と推定される（実施例Ｄ１の計算を参照）。
【0215】
【数7】
（実施例Ｂ1の式を参照）であるから、ｐＨｍａｘ４．５－４．６において、シルデナフィルの水溶性は３．３４ｍｇ／ｍｌ（表１０）であり、ＪｓｓｐＨｍａｘは１．８３Ｅ－０４ｕｇ／秒／ｃｍ２である。
【数8】
【0216】
同様に、ｐＨｍａｘ４．２で見積もった場合、シルデナフィルの水溶性は３．５４ｍｇ／ｍｌ（表９）であり、ＪｓｓＨｍａｘは１．０８Ｅ－０４ｕｇ／秒／ｃｍ２である。
【0217】
【数9】
【0218】
実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、およびＢ２に記載された処方および方法に従って、溶解度が４２ｍｇ／ｍｌを超え、対応するＪｓｓ値が１．３Ｅ－０３～２．３Ｅ－０３ｕｇ／秒／ｃｍ２であるシルデナフィル有機水性混合物は、ＩＮシルデナフィル処方として適格であるべきである。
【0219】
約ｐＨ４．２において４２ｍｇ／ｍｌを超える溶解度を有する多くの有機溶媒が、１．２８Ｅ－０３ｕｇ／秒／ｃｍ２のシルデナフィルＪｓｓ（参考値）を満たすか、または超えることが発見されており、ＩＮシルデナフィル（表１１を参照）に適した製剤と考えることができる。同様に、ｐＨ４．５で４２ｍｇ／ｍｌを超える溶解度を有する多くの有機溶媒も、２．３Ｅ－０３ｕｇ／秒／ｃｍ２のシルデナフィルＪｓｓ（参考値）を満たすか、または超えることが指摘されており、Ｃａｌｕ－３試験で適切な候補がさらに確認されれば、ＩＮシルデナフィルに適した製剤とみなすことができる（表１４参照）。
【0220】
実施例Ｄ４
Ｃａｌｕ－３細胞株を用いたシルデナフィルの透過性スクリーニング
この実施例では、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたシルデナフィルの透過性の測定について説明する。
Ｃａｌｕ－３細胞株を用いたシルデナフィルの透過性スクリーニング
この実施例では、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたシルデナフィルの透過性の測定について説明する。
【0221】
本明細書に開示されているように、３７℃および大気圧における異なる溶媒中のシルデナフィルの透過性が、生体内細胞株モデルであるＣａｌｕ－３（非小細胞肺癌株）を用いてスクリーニングされた。
【0222】
Ｃａｌｕ－３細胞株モデルによって決定された水溶性薬剤のＰａｐｐは、ｐＨ７．４で決定された場合、動物実験におけるＩＮ吸収に関連することが示されている（２５－２６）。本明細書で開示されるように、Ｃａｌｕ－３細胞株モデルは、異なる有機水溶液のシルデナフィルＰａｐｐ値の整合性を、水中と比較して確認するために利用された。
【0223】
材料
使用した材料は、実施例Ｂ２に記載したバルデナフィル試験およびＥ２に記載したシルデナフィル溶液と同様であった。
使用した材料は、実施例Ｂ２に記載したバルデナフィル試験およびＥ２に記載したシルデナフィル溶液と同様であった。
【0224】
設備
使用した装置は、実施例Ｂ２に記載したバルデナフィルの試験と同様である。
使用した装置は、実施例Ｂ２に記載したバルデナフィルの試験と同様である。
【0225】
手続き
（ａ）溶液の調製
シルデナフィルの飽和溶液（１．５ｍｇ／ｍＬ）を６種類の選択された溶媒で調製し、前述のように約ｐＨ４．２またはｐＨ４．５に調整した。シルデナフィル粉末を溶解した後、溶液を回転台上で一晩攪拌した。その後、０．２ｍフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過試験に使用した。
（ａ）溶液の調製
シルデナフィルの飽和溶液（１．５ｍｇ／ｍＬ）を６種類の選択された溶媒で調製し、前述のように約ｐＨ４．２またはｐＨ４．５に調整した。シルデナフィル粉末を溶解した後、溶液を回転台上で一晩攪拌した。その後、０．２ｍフィルターを用いて溶液をろ過した。濾液を透過試験に使用した。
【0226】
（ｂ）Ｃａｌｕ－３の培養と単層の調製
培養は、前出［２５－２６］および実施例Ｂ２に記載したものと同様に行った
培養は、前出［２５－２６］および実施例Ｂ２に記載したものと同様に行った
【0227】
（ｃ）Ｃａｌｕ－３細胞株モデルを用いたインビトロ透過性試験
ＴＥＥＲの測定、増殖培地および手順は、実施例Ｂ２に記載したものと同様であった。
ＴＥＥＲの測定、増殖培地および手順は、実施例Ｂ２に記載したものと同様であった。
【0228】
（ｄ）ＨＰＬＣアッセイの調製と測定
レセプターおよびアピカルチャンバーからの５０μのサンプルを、５０μｌの５０％ＭｅＯＨおよび１０μｌの内部標準物質と混合するか、または５０μｌの培地および内部標準物質で希釈した。ＨＰＬＣアッセイ用に遠心分離後、上清を採取した。ＨＰＬＣアッセイはＤ２のように行われた。
レセプターおよびアピカルチャンバーからの５０μのサンプルを、５０μｌの５０％ＭｅＯＨおよび１０μｌの内部標準物質と混合するか、または５０μｌの培地および内部標準物質で希釈した。ＨＰＬＣアッセイ用に遠心分離後、上清を採取した。ＨＰＬＣアッセイはＤ２のように行われた。
【0229】
（ｅ）パップの計算
ｃｍ／秒で表したＰａｐｐは、実施例Ｂ２に記載した式を用いて、ＨＰＬＣで分析したサンプルから計算した。
ｃｍ／秒で表したＰａｐｐは、実施例Ｂ２に記載した式を用いて、ＨＰＬＣで分析したサンプルから計算した。
【0230】
結果
ＰＡＭＰＡによるシルデナフィルのＰａａｐとＣａｌｕ－３によるＰａｐｐの比較を図９に示す。データ点数が少ないため、ベストフィットの直線の周囲でかなりの点の散乱が観察される。このプロットの目的は、シルデナフィル（有機水溶液で得られた）のＰａｐｐを、ＰＡＭＰＡとＣａｌｕ－３の両方の方法によって水溶液で得られたものと比較することであるため、シルデナフィル水溶液からのＰａｐｐよりも有意に低い値は、左下四分円に容易に特定することができる。他の点はすべて、水溶液から得られたＰａｐｐと同等かそれ以上のＰａｐｐ値を示している。図９では、左下四分円に低い点が１つあり、それは乳酸カルシウム（３．５％）－水溶液に相当するが、その大きさは大きくなく、ＰＡＭＰＡまたはＣａｌｕ－３によってそれぞれ決定された乳酸カルシウム（３．５％）－水溶液からのシルデナフィルＰａｐｐと水溶液中のシルデナフィルＰａｐｐを比較しても、統計的な有意差はない。
ＰＡＭＰＡによるシルデナフィルのＰａａｐとＣａｌｕ－３によるＰａｐｐの比較を図９に示す。データ点数が少ないため、ベストフィットの直線の周囲でかなりの点の散乱が観察される。このプロットの目的は、シルデナフィル（有機水溶液で得られた）のＰａｐｐを、ＰＡＭＰＡとＣａｌｕ－３の両方の方法によって水溶液で得られたものと比較することであるため、シルデナフィル水溶液からのＰａｐｐよりも有意に低い値は、左下四分円に容易に特定することができる。他の点はすべて、水溶液から得られたＰａｐｐと同等かそれ以上のＰａｐｐ値を示している。図９では、左下四分円に低い点が１つあり、それは乳酸カルシウム（３．５％）－水溶液に相当するが、その大きさは大きくなく、ＰＡＭＰＡまたはＣａｌｕ－３によってそれぞれ決定された乳酸カルシウム（３．５％）－水溶液からのシルデナフィルＰａｐｐと水溶液中のシルデナフィルＰａｐｐを比較しても、統計的な有意差はない。
【0231】
結論
各溶液の濃度が１．５ｍｇ／ｍｌであるため、様々な溶液の相対的なＰａｐｐ値も、相対的なＪｓｓ値を直接反映している。
各溶液の濃度が１．５ｍｇ／ｍｌであるため、様々な溶液の相対的なＰａｐｐ値も、相対的なＪｓｓ値を直接反映している。
【0232】
ｐＨ４．２におけるシルデナフィルＰＡＭＰＡ ＰａｐｐはｐＨ４．５におけるそれに近いので、ｐＨ４．２におけるＰＡＭＰＡ Ｐａｐｐ対Ｃａｌｕ－３ Ｐａｐｐの関係は、ｐＨ４．５で示された関係（図９）と同様であると予想される。今回の方法によって提案された有機水溶液におけるシルデナフィルの溶解度とＰａｐｐの要件、およびさまざまな有機水溶液におけるシルデナフィルの溶解度と透過性の結果から、酢酸／乳酸カルシウム（１％／３．５％）水溶液、酢酸／乳酸カルシウム（５％／３．５％）水溶液、酢酸／ＮＭＰ／乳酸カルシウム（５％／１０％／３．５％）水溶液（ｐＨ４．２またはｐＨ４．５）が、シルデナフィルＩＮ製剤として適していると考えられる。
【0233】
実施例Ｄ５
ラットにおける選択的ホスホジエステラーゼ阻害薬の経口投与と静脈内投与の比較
本実施例では、（１）経口経路と比較して、ＩＮにより適切な製剤を投与した場合のシルデナフィルのバイオアベイラビリティの改善、および（２）ＩＮシルデナフィル製剤に必要な特定の溶解度、Ｐａｐｐ、および濃度の同定における、現在提案されている方法の確認について説明する。
ラットにおける選択的ホスホジエステラーゼ阻害薬の経口投与と静脈内投与の比較
本実施例では、（１）経口経路と比較して、ＩＮにより適切な製剤を投与した場合のシルデナフィルのバイオアベイラビリティの改善、および（２）ＩＮシルデナフィル製剤に必要な特定の溶解度、Ｐａｐｐ、および濃度の同定における、現在提案されている方法の確認について説明する。
【0234】
ＩＮ投与により、化合物は肝代謝をバイパスし、急速な経粘膜透過（適切な製剤を使用した場合）とともに、経口投与と比較して、より速い吸収（より速いピーク濃度時間またはＴｍａｘ）、より高いピーク濃度（Ｃｍａｘ）、およびより高いバイオアベイラビリティをもたらすことができる。シルデナフィルは肝臓での初回通過代謝が高いため、経口投与が有効である。ＩＮ投与によるＣｍａｘ、Ｔｍａｘおよびバイオアベイラビリティの向上を達成するためには、適切な製剤が不可欠である。従って、現行法に準じたシルデナフィルＩＮ製剤に必要な特異的溶解度、Ｐａｐｐ、濃度が必要となる。本研究に先立ち、ＩＮ製剤に適したシルデナフィルの溶解度およびＰａｐｐに対する特定の有機水性製剤（水性含量が５０％以上）の影響は不明である。今回のＤ５の研究は、ＩＮ製剤から優れた結果を得るためのシルデナフィルに対する提案法の適用を確認するものである。
【0235】
手順
シルデナフィル水溶液および有機水溶液は、先に記載したのと同じプロトコルを用いて調製した。頸静脈カニューレを挿入したＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットをＥｎｖｉｇｏ ＲＭＳ社（インディアナ州インディアナポリス）に注文した。到着後、ラットは薬剤動態試験の１週間前からＷｅｓｔｅｒｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの動物飼育室の環境に慣らした。麻酔および試験手順は、以前に発表された研究（２９）と同様に行った。合計３種類のシルデナフィル製剤が、その溶解性、浸透性、および提案された方法に従って適切なＩＮ製剤に必要な濃度に基づいて選択された。３つの製剤（表参照）はすべてＩＮ経路で投与され、１つは経口（ＰＯ）経路で経管投与された。
シルデナフィル水溶液および有機水溶液は、先に記載したのと同じプロトコルを用いて調製した。頸静脈カニューレを挿入したＳｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットをＥｎｖｉｇｏ ＲＭＳ社（インディアナ州インディアナポリス）に注文した。到着後、ラットは薬剤動態試験の１週間前からＷｅｓｔｅｒｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの動物飼育室の環境に慣らした。麻酔および試験手順は、以前に発表された研究（２９）と同様に行った。合計３種類のシルデナフィル製剤が、その溶解性、浸透性、および提案された方法に従って適切なＩＮ製剤に必要な濃度に基づいて選択された。３つの製剤（表参照）はすべてＩＮ経路で投与され、１つは経口（ＰＯ）経路で経管投与された。
【0236】
バルデナフィルについて記載したラット試験（実施例Ｃ２参照）と同様に、製剤の投与は無作為化し、２匹のラットが各処置を受け、１週間後にクロスオーバーした。各ラットから、０、２、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０、１２０、１８０分後に２００ｕｌの血液を採取した（経口製剤を投与されたラットでは、２分間のサンプルは省略された。いずれの採血も終了後、サンプルを遠心分離し、血漿を採取し、液体クロマトグラフ・タンデム質量分析計（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ、Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００およびＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ １２００システム）を用いた分析のために保存した。測定には、標準曲線を構築するためにラット血漿を用い、内部標準（ＩＳ）としてタダラフィルを用いた。アッセイ手順はバルデナフィルアッセイと同様であった（実施例Ｃ３のシルデナフィルの血漿中濃度の測定を参照）。
【0237】
結果
ラット血漿中のシルデナフィル濃度測定のための標準曲線は、優れた相関係数を示した（２ｎｇ／ｍｌ－５００ｎｇ／ｍｌの濃度について、Ｒ２＝０．９９２４－０．９９７６）。品質管理（ＱＣ）サンプルの精度は、試験した４つのＱＣサンプルについて９６－１００％の範囲であった。精度またはＣＶは１．９～４．６％であった。シルデナフィルの製剤およびＩＮおよびＰＯ投与ラットの数を表１５に示す。ＩＮ製剤および経口投与製剤の薬剤動態を表１６に示す。表１６に示すように、ｍｇ／ｋｇ用量で規格化した場合、経口投与製剤と比較してＩＮ投与製剤ではＣｍａｘ及びＡＵＣが有意に高かった。同じ製剤をＩＮ投与と経口投与で比較すると、ＩＮ投与の方がＡＵＣが６倍高かった。また、Ｔｍａｘは経口投与に比べＩＮ投与で有意に短かった。ＩＮ投与と経口投与のＣｍａｘまたはＴｍａｘの平均差は１０倍以上であった。これらのパラメータには、ＩＮ投与による３製剤間で有意差は認められなかった。
シルデナフィルを含む製剤をラットに経口または静脈内投与した場合
ラットにおけるシルデナフィルの点鼻薬および経口錠剤の薬剤動態パラメータ（データは平均値±ＳＤで表した）
ラット血漿中のシルデナフィル濃度測定のための標準曲線は、優れた相関係数を示した（２ｎｇ／ｍｌ－５００ｎｇ／ｍｌの濃度について、Ｒ２＝０．９９２４－０．９９７６）。品質管理（ＱＣ）サンプルの精度は、試験した４つのＱＣサンプルについて９６－１００％の範囲であった。精度またはＣＶは１．９～４．６％であった。シルデナフィルの製剤およびＩＮおよびＰＯ投与ラットの数を表１５に示す。ＩＮ製剤および経口投与製剤の薬剤動態を表１６に示す。表１６に示すように、ｍｇ／ｋｇ用量で規格化した場合、経口投与製剤と比較してＩＮ投与製剤ではＣｍａｘ及びＡＵＣが有意に高かった。同じ製剤をＩＮ投与と経口投与で比較すると、ＩＮ投与の方がＡＵＣが６倍高かった。また、Ｔｍａｘは経口投与に比べＩＮ投与で有意に短かった。ＩＮ投与と経口投与のＣｍａｘまたはＴｍａｘの平均差は１０倍以上であった。これらのパラメータには、ＩＮ投与による３製剤間で有意差は認められなかった。
【表15】
【表16】
【0238】
考察と結論
ＩＮと経口経路の間の相対的バイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ（ピーク濃度）およびＴｍａｘ（Ｃｍａｘの時間）の結果は有意に異なり、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２に記載された本発明の新しい方法により同定されたＩＮ製剤から予想されるものと一致する。したがって、これらのラットデータは、所望のＩＮ製剤を同定する本方法の有効性および有用性をさらに確認するものである。
ＩＮと経口経路の間の相対的バイオアベイラビリティ（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ（ピーク濃度）およびＴｍａｘ（Ｃｍａｘの時間）の結果は有意に異なり、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２に記載された本発明の新しい方法により同定されたＩＮ製剤から予想されるものと一致する。したがって、これらのラットデータは、所望のＩＮ製剤を同定する本方法の有効性および有用性をさらに確認するものである。
【0239】
実施例Ｅ
１種類以上のホスホジエステラーゼ阻害剤およびその他のイオン化可能な塩基性／酸性薬剤の、粘膜を介した透過およびフラックスを促進する製剤
この実施例は、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性および透過性（フラックス）を増強するための製剤を記載する。
１種類以上のホスホジエステラーゼ阻害剤およびその他のイオン化可能な塩基性／酸性薬剤の、粘膜を介した透過およびフラックスを促進する製剤
この実施例は、粘膜を横切る１つ以上のホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解性および透過性（フラックス）を増強するための製剤を記載する。
【0240】
本明細書に開示されるように、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２に記載される方法に基づいて、同定される製剤は、ｐＨ４．０でエタノールおよびＰＥＧ４００からなる有機水溶性溶媒に溶解されたホスホジエステラーゼ阻害剤バルデナフィルからなり、有機水溶性溶媒は、水中でのホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度に対してホスホジエステラーゼ阻害剤の溶解度を高める。この製剤は、成分として１２％のエタノールを含む。他の選択肢では、製剤はグリセロールのような任意のアルコールを含んでもよく、２５％および３０％を含む５％～４０％の任意の濃度で存在してもよい。本明細書に開示されているように、この製剤の有機水溶性溶媒は、別の成分、１５％のＰＥＧ４００からなる。他の選択肢では、製剤は、ＰＥＧ６０００などの任意のポリエーテルまたはポリエチレングリコールを１％～２０％の濃度で含んでもよい。本明細書に開示されているように、製剤はｐＨ４．０である。他の選択肢では、製剤は３．５から７．５の間の任意のｐＨであってもよい。本明細書に開示されるように、製剤のホスホジエステラーゼ阻害剤はバルデナフィルである。他の選択肢では、製剤は、実施例Ａ１、Ａ２、Ｂ１およびＢ２と同様に記載された製剤および方法に従って同定された適切なオルジアン水溶液中の他の薬剤を含んでもよい。次いで、製剤は、勃起不全または適切な他の疾患を治療するために被験者に経鼻投与される。経鼻投与により、製剤は被験者の粘膜に接触する。他の選択肢では、被験体への舌下投与により、粘膜が製剤と接触される。
【0241】
本明細書における実質的に任意の複数および／または単数の用語の使用に関して、当業者であれば、文脈および／または用途に適切であるように、複数から単数へ、および／または単数から複数へ翻訳することができる。様々な単数／複数の順列は、明確にするために本明細書で明示することができる。
【0242】
文脈が他に必要としない限り、本明細書および特許請求の範囲全体を通して、「含む」、「含有する」、または「～によって特徴付けられる」と互換的に使用される「～からなる」（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）および「～からなる」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）などの「～からなる」（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）という語およびその変形は、包括的またはオープンエンドな言語であり、追加の、再述されていない要素または方法ステップを排除するものではない。
【0243】
「からなる」という文言は、請求項に明記されていない要素、ステップ、または成分を除外する。
【0244】
「から本質的になる」という語句は、クレームの範囲を、指定された材料またはステップ、およびクレームされた発明の基本的かつ新規な特性に重大な影響を与えないものに限定する。本開示は、これらの句のそれぞれの範囲に対応する本発明の製剤、組成物、および方法の実施形態を企図する。したがって、記載された要素またはステップからなる製剤、組成物、または方法は、製剤、組成物、または方法が本質的にこれらの要素またはステップからなるか、またはこれらの要素またはステップからなる特定の実施形態を企図する。
【0245】
成物または製剤を使用する方法（例えば、製剤を投与することからなる、または製剤を粘膜に接触させることからなる、勃起不全を処置する方法）が本明細書において開示される場合、使用のための対応する組成物または製剤もまた明示的に企図される。例えば、製剤を投与することからなる、または有機－性溶媒中に１以上のホスホジエステラーゼ阻害剤を含む製剤を粘膜に接触させることからなる、勃起不全を処置する方法の開示については、勃起不全を処置するための対応する組成物または製剤もまた企図される。
【0246】
本明細書全体を通して「一実施形態」または「一実施形態」または「一態様」という言及は、実施形態に関連して記載される特定の特徴、構造または特性が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書を通じて様々な箇所で「一実施形態において」または「一態様において」という表現が現れるが、必ずしもすべてが同じ実施形態を指すわけではない。
【0247】
さらに、特定の特徴、構造、または特性は、１つまたは複数の実施形態において任意の適切な方法で組み合わせることができる。
【0248】
上述した様々な実施形態を組み合わせて、さらなる実施形態を提供することができる。 これらおよび他の変更は、上記の詳細な説明に照らして実施形態に加えることができる。 一般に、以下の特許請求の範囲において、使用される用語は、特許請求の範囲を明細書および特許請求の範囲に開示される特定の実施形態に限定するように解釈されるべきではなく、そのような特許請求の範囲が権利を有する等価物の全範囲と共に、全ての可能な実施形態を含むように解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は、本開示によって限定されるものではない。
【0249】
本明細書において様々な態様および実施形態を開示したが、他の態様および実施形態も当業者には明らかであろう。本明細書に開示された様々な態様および実施形態は、説明のためのものであり、限定することを意図するものではなく、真の範囲および精神は、以下の特許請求の範囲によって示される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【国際調査報告】