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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-06-11
(54)【発明の名称】高血圧の治療又は予防のためのピリダジノン
(51)【国際特許分類】
C07D 237/14 20060101AFI20240604BHJP
C07D 409/06 20060101ALI20240604BHJP
C07D 403/12 20060101ALI20240604BHJP
A61K 31/50 20060101ALI20240604BHJP
A61K 31/501 20060101ALI20240604BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240604BHJP
A61P 9/12 20060101ALI20240604BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240604BHJP
【ＦＩ】
C07D237/14 CSP
C07D409/06
C07D403/12
A61K31/50
A61K31/501
A61K45/00
A61P9/12
A61P43/00 121
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023574484
(86)(22)【出願日】2022-06-10
(85)【翻訳文提出日】2023-12-01
(86)【国際出願番号】 GB2022051469
(87)【国際公開番号】W WO2022258992
(87)【国際公開日】2022-12-15
(31)【優先権主張番号】2108303.5
(32)【優先日】2021-06-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】510179537
【氏名又は名称】ウニヴァーシテテット イ オスロ
【住所又は居所原語表記】Ｐ．Ｏ． Ｂｏｘ １０７２，Ｂｌｉｎｄｅｒｎ，０３１６ Ｏｓｌｏ Ｎｏｒｗａｙ
(74)【代理人】
【識別番号】110000040
【氏名又は名称】弁理士法人池内アンドパートナーズ
(72)【発明者】
【氏名】モルツァウ、リーゼ ロマン
(72)【発明者】
【氏名】アンドレセン、ヘンリエッテ
(72)【発明者】
【氏名】レヴィー、フィン オーラヴ
(72)【発明者】
【氏名】クラーヴェネス、ジョー
(72)【発明者】
【氏名】イザキアン、ザキエ
(72)【発明者】
【氏名】カタリオッティ、アレッサンドロ
(72)【発明者】
【氏名】ヴェゲルト、アニータ
(72)【発明者】
【氏名】リーンダース、ルベン
(72)【発明者】
【氏名】ニェチポル、ピョートル
【テーマコード（参考）】
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084MA02
4C084MA52
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA421
4C084ZA422
4C084ZA832
4C084ZC202
4C084ZC432
4C084ZC502
4C084ZC75
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC41
4C086GA04
4C086GA07
4C086MA01
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA52
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZA42
4C086ZC75
(57)【要約】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体及び薬学的に許容される塩を、高血圧の治療又は予防に使用するために提供し、
【化１】
式中、Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ1～6アルキル、Ｃ1～6ハロアルキル、及び－ＣＮから選択され、ただし、Ｒ1及びＲ2の少なくとも１つは、Ｈ以外であり、Ｒ3は、以下の式の基であり、
【化２】
式中、ｎは、０又は１であり、Ｒ4は、Ｈ又はＣ1～3アルキルであり、Ｌ1は、結合、－（ＣＨ2）Ｐ－（式中、ｐは１～３の整数）、及びＣ3～6シクロアルキレンから選択された連結基であり、Ｘは、（ｉ）Ｃ1～3アルキル、Ｃ1～3アルコキシ、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されているアリール基、（ｉｉ）Ｃ1～3アルキル、Ｃ1～3アルコキシ、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン及び任意に置換されているフェニルから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されている５又は６員複素環、並びに（ｉｉｉ）Ｃ1～3アルキル、Ｃ1～3ハロアルキル及びハロゲンから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているシクロアルキル基によって任意に置換されているアリール基から選択される。
【化１】
【化２】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
高血圧の治療又は予防に使用するための式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であって、【化38】
Ｒ1及びＲ2が、
－Ｈ
－ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、
－Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、
－Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）、及び
－ＣＮ、から独立して選択され、
ただし、Ｒ1及びＲ2のうちの少なくとも１つが、－Ｈ以外であり、
Ｒ3が、以下の式の基であり、
【化39】
Ｒ4が、Ｈ又はＣ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）であり、
Ｌ1が、
－結合、
－－（ＣＨ2）p－（式中、ｐが１～３の整数、好ましくは１又は２である）、
－Ｃ3～6シクロアルキレン（例えば、Ｃ3～4シクロアルキレン）、から選択された連結基であり、
Ｘが、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩。
【請求項2】
前記高血圧が、抵抗性高血圧である、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項3】
肺高血圧、妊娠中の高血圧、妊娠性高血圧又は妊娠誘発性高血圧の治療又は予防における、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項4】
式（Ｉ）において、Ｒ1及びＲ2が独立して、Ｈ及びハロゲンから、好ましくはＨ、Ｃｌ及びＢｒから選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項5】
式（Ｉ）において、Ｒ1及びＲ2が、両方ともハロゲン、好ましくは両方ともＣｌである、請求項４に記載の使用のための化合物。
【請求項6】
式（Ｉ）において、Ｒ1がハロゲン（例えば、Ｃｌ）であり、Ｒ2がＨである、請求項４に記載の使用のための化合物。
【請求項7】
式（Ｉａ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化40】
Ｒ1及びＲ2が、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
Ｘが、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意に置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項8】
式（Ｉｂ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化41】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びＬ1が、請求項１及び４～６のいずれか１項で定義された通りであり、
Ｘが、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているアリール基、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意に置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されている５又は６員複素環、から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項9】
式（Ｉｃ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化42】
Ｒ1及びＲ2が、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りである、
請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項10】
式（Ｉｄ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化43】
Ｒ1及びＲ2が、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
各Ｙ1が、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑが、０～３の整数、好ましくは１又は２である、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項11】
式（Ｉｅ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化44】
Ｒ1及びＲ2が、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
Ｙ1が、請求項１０で定義した通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ若しくはＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2が、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒが、０～２の整数、好ましくは０又は１である、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項12】
式（Ｉｆ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化45】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐが、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
各Ｙ1が、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑが、０～３の整数、好ましくは１又は２である、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項13】
式（Ｉｇ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩であり、【化46】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐが、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
Ｚが、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意に置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されている５又は６員複素環である、
請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項14】
以下の化合物、それらの立体異性体、及びそれらの薬学的に許容される塩のうちのいずれかから選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。【表6-1】
【表6-2】
【表6-3】
【表6-4】
【請求項15】
請求項１及び４～１４のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体又は薬学的に許容される塩を、１種以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と共に含み、追加の降圧薬を更に含む、医薬組成物。
【請求項16】
経口投与のために適している、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項17】
前記化合物、立体異性体、又は薬学的に許容される塩が、追加の降圧薬と組み合わせて（例えば、同時に、別々に、又は連続して）投与される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の使用のための化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩。
【請求項18】
前記降圧薬が、レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の阻害剤、チアジド利尿薬、カルシウムチャネル遮断薬、又はベータ遮断薬である、請求項１７に記載の使用のための化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩。
【請求項19】
前記降圧薬が、ベナゼプリル、ゾフェノプリル、ペリンドプリル、トランドラプリル、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ラミプリル、ロサルタン、テルミサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、オルメサルタン、バルサルタン、サプリサルタン、ヒドロクロロチアジド、ベンドロフルメチアジド、クロルタリドン、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニフェジピン、ニモジピン、レルカニジピン、ベラパミル、ジルチアゼム、メトプロロール、プロプラノロール、チモロール、アテノロール、ビソプロロール、エスモロール、カルベジロール、ネビボロール、スピロノラクトン、エプレレノン、プラゾシン、タムスロジン、サクビトリル、及びサクブリトリル－バルサルタンから選択される、請求項１７に記載の使用のための化合物、その立体異性体又は薬学的に許容される塩。
【請求項20】
（ｉ）請求項１及び４～１４のいずれか一項に記載の化合物、立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は前記化合物、立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を含む医薬組成物と、（ｉｉ）請求項１～３のいずれか一項に記載の状態又は障害のうちのいずれかの治療、例えば、抵抗性高血圧の治療又は予防における（ｉ）の使用に関する印刷された説明書及び／又はラベルと、を含む、パッケージ。
【請求項21】
一般式（ＩＩ）の化合物、若しくはその立体異性体、又はその薬学的に許容される塩であって、【化47】
Ｒ1及びＲ2が、請求項１及び４～６のいずれか一項で定義された通りであり、
Ｙ1が、請求項１０で定義した通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2が、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒが、０～２の整数、好ましくは０又は１であり、
ただし、前記化合物が、
４－クロロ－２－［２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メトキシフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；又は
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メチルフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン以外である、
一般式（ＩＩ）の化合物、若しくはその立体異性体、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項22】
一般式（ＩＩａ）を有し、【化48】
Ｒ1が、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）又は－ＣＮ、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、例えば、Ｃｌであり、
Ｙ1が、請求項１０で定義した通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2が、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒが、０～２の整数、好ましくは０又は１である、請求項２１に記載の化合物、若しくはその立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項23】
請求項１４の番号３、４、６、１１、１２、１３、１４又は２４で表される、請求項２１に記載の化合物、若しくはその立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項24】
番号２４で表される化合物である、請求項２３に記載の化合物、若しくはその立体異性体又はその薬学的に許容される塩の立体異性体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａ（natriuretic peptide receptor-A、ＮＰＲ－Ａ）によって媒介される状態の治療又は予防におけるピリダジノン誘導体の使用に関する。具体的には、本発明は、高血圧、特に抵抗性高血圧の治療又は予防におけるそのような化合物の使用に関する。本発明は更に、ある種の新規ピリダジノン誘導体、それらを含有する医薬組成物、及びそのような治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【0002】
２０１５年に、世界保健機関（World Health Organization、ＷＨＯ）は、世界中で１１億３０００万人の患者が、「血圧上昇」としても知られている高血圧と診断されたことを報告した（Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．２０１７；７０：５－９）。高血圧は、動脈内の血圧が持続的に上昇する医学的状態である。長期血圧上昇は、冠動脈疾患、脳卒中、心不全、心房細動、末梢動脈疾患、慢性腎疾患、認知症及び視力喪失などの状態の主要な危険因子である。血圧は、収縮期及び拡張期血圧の２つの測定値によって表される。第１の（収縮期）数は、心臓が収縮又は拍動するときの血管内の圧力を表す。第２の（拡張期）数は、心拍の間に心臓が弛緩するときの血管内の圧力を表す。成人において、高血圧は、安静時血圧が持続的に１４０／９０ｍｍＨｇ以上である場合に存在すると考えられる。
【0003】
高血圧のための標準的な薬物療法は、患者の大きな群において有効である。現在の治療は、１つのクラスの降圧薬剤を用いた単剤療法、又は異なるクラスの降圧薬剤を用いた併用療法のいずれかによる血圧の制御を含む。高血圧の治療に使用される異なる薬物クラスは、異なる作用機序を有し、レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の阻害剤、チアジド利尿薬、カルシウムチャネル遮断薬及びベータ遮断薬を含む。各クラス内で、選択性、効力、有効性及び有害作用プロファイルが異なるいくつかの薬物が市販されている。
【0004】
降圧薬剤を生活様式の変化と組み合わせると、血圧が低下するだけでなく、心血管疾患及び死亡のリスクも低下するという強力な証拠がある。しかしながら、現在利用可能な薬剤で治療することができない高血圧患者の群が増えている。これらの患者は、「抵抗性高血圧」（「resistant hypertension、ＲＨＴ」）として知られるものに罹患しており、心血管罹患率及び死亡のリスクが高い。ＲＨＴは、異なる作用機序を有する３つ以上の降圧薬剤が同時に処方されているにもかかわらず、標的レベルを超えたままである血圧上昇として定義される。この群の患者は、高血圧を有する人口の１０～３０％に相当する（Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．２０１７；７０：５－９）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0005】
【非特許文献1】Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．２０１７；７０：５－９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
したがって、特に抵抗性高血圧に罹患している患者において、上昇した血圧を制御することができる新たな薬物の開発が、依然として必要とされている。具体的には、異なる作用機序を有し、したがって現在利用可能な降圧療法と組み合わせて使用することができる、そのような治療のための新しい薬物が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【0007】
［発明の概要］
本発明者らは、今回、アロステリックエンハンサーとして機能する薬物を使用してナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａ（「ＮＰＲ－Ａ」）を標的とすることによる高血圧、具体的には抵抗性高血圧の治療を提案する。
本発明者らは、今回、アロステリックエンハンサーとして機能する薬物を使用してナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａ（「ＮＰＲ－Ａ」）を標的とすることによる高血圧、具体的には抵抗性高血圧の治療を提案する。
【0008】
ナトリウム利尿ペプチドは、血圧の調節において重要である。心房性ナトリウム利尿ペプチド及び脳性ナトリウム利尿ペプチド（それぞれ、atrial natriuretic peptide、ＡＮＰ及びbrain natriuretic peptide、ＢＮＰ）の両方は、受容体ＮＰＲ－Ａを活性化し、第２のメッセンジャー分子である環状グアノシン一リン酸（cyclic guanosine monophosphate、ｃＧＭＰ）の産生を引き起こし、これは、いくつかの機構を介して血圧を低下させる（図１を参照のこと）。動物研究において、ＡＮＰ若しくはＢＮＰ又は受容体それ自体（ＮＰＲ－Ａ）のいずれかのノックアウトが高血圧を引き起こすことが示されている（Ｊｏｈｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９５；２６７：６７９－８１；Ｊｏｈｎ ｅｔ ａｌ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９６；２７１：Ｒ１０９－１４；Ｈｏｌｄｉｔｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．２０１５；６６：１９９－２１０；Ｌｏｐｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９５；３７８：６５－８；及びＯｌｉｖｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９９７；９４：１４７３０－５）。また、ＮＰＲ－Ａ受容体における変異が血圧上昇に関連することも示されており（Ｎａｋａｙａｍａ ｅｔ ａｌ．Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ．２０００；８６：８４１－５）、かつナトリウム利尿ペプチドの増加したレベルを与える遺伝的変異を有するヒトは、より低い血圧を有する（Ｎｅｗｔｏｎ－Ｃｈｅｈ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．２００９；４１：３４８－５３）。
【0009】
以前の研究は、高血圧を有する患者において、ＢＮＰ及びＡＮＰのレベルの低下並びにＮＰＲ－Ａ活性化の低下が存在することを示している（Ｂｅｌｌｕａｒｄｏ ｅｔ ａｌ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．Ｈｅａｒｔ ａｎｄ Ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２００６；２９１：Ｈ１５２９－３５；及びＭａｃｈｅｒｅｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ａｍ Ｃｏｌｌ Ｃａｒｄｉｏｌ．２０１２；６０：１５５８－６５）。その結果、置換療法としての組換えＢＮＰが、研究されている。概念実証研究において、組換えＢＮＰは、制御されていない高血圧において追加の降圧薬剤を必要とせずに持続的な血圧低下をもたらすことが示された（Ｃａｔａｌｉｏｔｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｉｃ ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ．２０１２；８７：４１３－５）。
【0010】
ＡＮＰ及びＢＮＰの降圧（すなわち血圧低下）効果に加えて、ＮＰＲ－Ａの活性化は、心肥大の阻害、レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の阻害並びにナトリウム利尿及び利尿の増加などのいくつかの有益な心血管及び腎臓の効果に関連する（図１を参照されたい）（Ｋｕｈｎ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｖ．２０１６；９６：７５１－８０４）。これらの有利な作用は一緒になって、高血圧及びＲＨＴを有する患者における心血管罹患率及び死亡率のリスクを低減することができる。ＮＰＲ－Ａ活性化剤はまた、心不全の潜在的な治療であり得る。
【0011】
内因性ナトリウム利尿ペプチドＡＮＰ及びＢＮＰは、不十分な生物学的利用能及び短い半減期を有し、高血圧における有効な治療選択肢としてのそれらの使用に対する深刻な課題をもたらす。ＮＰＲ－Ａ受容体を刺激するために多くの取り組みがなされてきた。近年、改善された安全及び生物学的半減期を有するナトリウム利尿ペプチドを設計することに焦点が当てられている（Ｍｅｅｍｓ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＣ．Ｂａｓｉｃ ｔｏ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ．２０１６；１：５５７－５６７）。しかしながら、ペプチドは、通常、低い代謝安定性及び短い半減期を有し、注射によって投与されなければならない。これは多くの患者にとって不便であり、患者のコンプライアンスを低下させる。
【0012】
小ペプチド様分子もまた、ＮＰＲ－Ａ受容体を刺激することが提案されているが、これらの分子は、受容体のオルソステリック部位、すなわち内因性リガンドが結合する部位に結合する（Ｉｗａｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．２０１７；２７：４９０４－４９０７；Ｉｗａｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０１７；２５：１７６２－１７６９；及びＩｗａｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０１７；２５：６６８０－６６９４）。
【0013】
本発明者らは、ここで、有効なＮＰＲ－Ａ活性化剤として小分子薬物を使用するが、以前の提案とは対照的にアロステリックエンハンサーである、すなわち内因性リガンドとは異なる部位に結合する、高血圧の治療のための新しい作用機序を提案する。したがって、これらの化合物は、この受容体に対する内因性リガンドと競合せず、むしろ内因性効果を増強する。以前に公開された要約書は、心不全の潜在的な治療のためのＮＰＲ－Ａのアロステリックエンハンサーを提案したが、この要約書は、分子の結合性部位又は構造を明らかにしていない（Ｂｕｒｎｅｔｔ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｒｄｉａｃ Ｆａｉｌｕｒｅ．２０１７；２３：Ｓ１９）。
【0014】
初期のペプチド様分子とは対照的に、本明細書で提案される小分子薬物は、より長い生物学的半減期を有する。結果として、それらは、ＮＰＲ－Ａを活性化するために経口投与されてよく、患者の利便性及びコンプライアンスを増加させる。本開示の主題であるアロステリックエンハンサーの安全性の利点は、それらの効果が内因性ＢＮＰ及びＡＮＰの作用を増強することによって達成されるので、現在の降圧薬と比較して重篤な副作用のリスクが低いことである。
【0015】
ナトリウム利尿ペプチド系も標的とするＥｎｔｒｅｓｔｏ（登録商標）（バルサルタン／サクビトリル）は、最近、うっ血性心不全の治療のために承認された（Ｐｏｎｉｋｏｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｊ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌ．２０１６；１８：８９１－９７５）。これは、アンジオテンシン受容体を遮断し、ネプリライシンと呼ばれるナトリウム利尿ペプチド分解酵素を阻害する併用療法である。しかしながら、ナトリウム利尿ペプチドに加えて、ネプリライシンは、血圧に対して反対の効果を有する他のペプチドを分解することが知られている。ネプリライシン阻害剤とは対照的に、本発明者らによって現在提案されている小分子化合物は、ナトリウム利尿ペプチド系の直接的な効果に影響を及ぼすだけであり、ネプリライシンを阻害するときに見られるオフターゲット効果を有さない。
【0016】
ＮＰＲ－Ａのアロステリックエンハンサーとして、本明細書で提案される化合物は、ナトリウム利尿ペプチドＢＮＰ及びＡＮＰの有効性及び効力を、ＮＰＲ－Ａを活性化し、したがってｃＧＭＰを生成するそれらの能力において増加させる。したがって、これらの知見は、高血圧の治療に使用される。ＮＰＲ－Ａを活性化するそれらの能力に起因して、本明細書中に記載される化合物はまた、特定の心血管状態及び腎臓状態、例えば、肺高血圧、子癇前症、糖尿病、心不全、心血管疾患、心線維症及び心肥大、並びに腎臓及び肺のような他の器官及び組織における線維症に関連する疾患を含むが、これらに限定されないＮＰＲ－Ａが関与する他の状態の治療又は予防に好適であると考えられる。
【0017】
一態様において、本発明は、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害の治療又は予防に使用するための、具体的には高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防に使用するための、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、及び薬学的に許容される塩を提供し、
【0018】
【化1】
【0019】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、
－Ｈ
－ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、
－Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、
－Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）、及び
－ＣＮ、から独立して選択され、
ただし、Ｒ1及びＲ2のうちの少なくとも１つは、－Ｈ以外であり、
Ｒ3は、以下の式の基であり、
Ｒ1及びＲ2は、
－Ｈ
－ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、
－Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、
－Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）、及び
－ＣＮ、から独立して選択され、
ただし、Ｒ1及びＲ2のうちの少なくとも１つは、－Ｈ以外であり、
Ｒ3は、以下の式の基であり、
【0020】
【化2】
【0021】
式中、ｎは、０又は１であり、
Ｒ4は、Ｈ又はＣ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）であり、
Ｌ1は、
－結合、
－－（ＣＨ2）p－（式中、ｐは１～３の整数、好ましくは１又は２である）、
－Ｃ3～6シクロアルキレン（例えば、Ｃ3～4シクロアルキレン）、から選択された連結基であり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
Ｒ4は、Ｈ又はＣ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）であり、
Ｌ1は、
－結合、
－－（ＣＨ2）p－（式中、ｐは１～３の整数、好ましくは１又は２である）、
－Ｃ3～6シクロアルキレン（例えば、Ｃ3～4シクロアルキレン）、から選択された連結基であり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
【0022】
好ましい態様において、本発明は、高血圧の治療又は予防に使用するための、具体的には、抵抗性高血圧の治療又は予防に使用するための、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、及び薬学的に許容される塩を提供する。
【0023】
別の態様において、本発明は、医薬として使用するための式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、及び薬学的に許容される塩を提供する。
【0024】
更なる態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と一緒に含む、医薬組成物に関する。
【0025】
更なる態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩を、追加の降圧薬などの１つ以上の追加の原薬と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【0026】
別の態様において、本発明は、本明細書に記載の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の新規化合物、それらの立体異性体、及びそれらの薬学的に許容される塩に関する。
【0027】
更なる態様において、本発明は、医薬として使用するための、本明細書に記載の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩に関する。
【0028】
更なる態様において、本発明は、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防における使用のための、本明細書に記載される式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩に関する。
【0029】
更なる態様において、本発明は、本明細書に記載の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩の調製方法に関する。
【0030】
別の態様において、本発明は、本明細書に記載の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と一緒に含む、医薬組成物に関する。
【0031】
更なる態様において、本発明は、本明細書に記載の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、若しくは薬学的に許容される塩を、１つ以上の追加の原薬と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【0032】
ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、又はより好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防において使用するための医薬の製造における、本明細書に記載の化合物のいずれか、又はその立体異性体、若しくは薬学的に許容される塩の使用は、本発明の更なる態様を形成する。
【0033】
ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、又はより好ましくは抵抗性高血圧を治療又は予防する方法であって、それを必要とする患者（例えば、ヒト対象）に、薬学的有効量の本明細書に記載の任意の化合物又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を投与するステップを含む当該方法は、本発明のその上更なる態様を形成する。
【図面の簡単な説明】
【0034】
【図1】いくつかの機序を介して血圧を低下させるｃＧＭＰの産生を引き起こすＡＮＰ及びＢＮＰの作用によるＮＰＲ－Ａの活性化を概略的に示す。
【図2】ＨｅＬａ細胞で行ったＭＴＴアッセイからの結果を示す。細胞を、漸増濃度の示された化合物とともに２４時間及び４８時間インキュベートした。データは、陰性対照（１％ＤＭＳＯ）のパーセンテージとしてホルマザン形成（吸光度）を表す。
【発明を実施するための形態】
【0035】
定義
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、一価の飽和、直鎖状又は分枝状の炭素鎖を指す。アルキル基の例として、限定されないが、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソ－ペンチル、ネオ－ペンチル、ｎ－ヘキシル等が挙げられる。アルキル基は、好ましくは、１～６個の炭素原子、例えば、１～４個の炭素原子を含む。
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、一価の飽和、直鎖状又は分枝状の炭素鎖を指す。アルキル基の例として、限定されないが、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソ－ペンチル、ネオ－ペンチル、ｎ－ヘキシル等が挙げられる。アルキル基は、好ましくは、１～６個の炭素原子、例えば、１～４個の炭素原子を含む。
【0036】
「アルコキシ」という用語は、－Ｏ－アルキル基を指し、アルキルは、本明細書に定義される通りである。アルコキシ基の例として、限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ等が挙げられる。
【0037】
「シクロアルキル」という用語は、一価の飽和環状炭素系を指す。それは単環式、二環式及び三環式環を含む。これらが二環式又は三環式環を含有する場合、環は結合によって連結されていてもよく、又はこれらは縮合されていてもよい。典型的には、それらは融合される。単環式環は３～８個の炭素原子を含有してもよく、二環式及び三環式環は７～１４個の炭素原子を含有してもよい。単環式シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【0038】
「シクロアルキレン」という用語は、二価の飽和環状炭素系を指す。これは、３～６個の炭素原子、好ましくは３～５個の炭素原子、例えば３又は４個の炭素原子を含有する単環式環を含む。単環式シクロアルキレン基の例としては、シクロプロピレン及びシクロブチレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【0039】
「ハロゲン」及び「ハロゲン原子」という用語は、本明細書において互換的に使用され、好ましくはＦ、Ｃｌ又はＢｒを指す。
【0040】
「ハロアルキル」という用語は、アルキル基の水素原子のうちの少なくとも１つがハロゲン原子、好ましくはＦ、Ｃｌ、又はＢｒによって置き換えられる、本明細書に定義されるアルキル基を指す。そのような基の例としては、－ＣＨ2Ｆ、－ＣＨＦ2、－ＣＦ3、－ＣＣｌ3、－ＣＨＣｌ2、－ＣＨ2ＣＦ3などが挙げられる。
【0041】
本明細書で使用される「複素環」という用語は、飽和又は部分的に不飽和の炭素環系を指し、少なくとも１つの環原子は、窒素、酸素、及び硫黄から選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子は炭素である。複素環構造は、炭素原子又は窒素原子を介して分子の残りの部分に連結され得る。
【0042】
「アリール」及び「芳香族環」という用語は、本明細書において互換的に使用され、芳香族環系を指す。そのような環系は、単環式又は二環式であり得、少なくとも１つの芳香族環を含有し得る。このような系が２つ以上の環を含む場合、少なくとも１つの環は非芳香族であってもよい。これらが二環式環を含む場合、これらは結合によって連結されていてもよく、又はこれらは縮合していてもよい。任意の縮合二環式環系は、非芳香族環（例えば、５又は６員不飽和炭素環式環）に縮合した芳香族環を含有し得る。好ましくは、任意のアリール基は、６～２０個の炭素原子、例えば、６又は１０個の炭素原子のいずれかを含有するだろう。「アリール」基の例としては、フェニル、１－ナフチル及び２－ナフチルが挙げられるが、これらに限定されない。好ましいアリール基は、フェニルである。
【0043】
「ヘテロアリール」及び「ヘテロ芳香族環」という用語は、本明細書において互換的に使用され、複素環式芳香族基を指す。そのような基は、単環式又は二環式であり得、少なくとも１つの不飽和複素芳香族環系を含有し得る。これらが単環式である場合、これらは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含んでよく、かつ、芳香族系を形成するのに十分な共役結合を含む、５又は６員環を含んでよい。これらが二環式である場合、これらは、９～１１個の環原子を含有し得る。「ヘテロアリール基」の例としては、チオフェニル、チエニル、ピリジル、チアゾリル、フリル、ピロリル、トリアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、イミダゾロニル、オキサゾロニル、チアゾロニル、テトラゾリル、チアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾフリル、インドリル、イソインドリル、ピリドニル、ピリダジニル、ピリミジニル、イミダゾピリジル、オキサゾピリジル、チアゾロピリジル、イミダゾピリダジニル、オキサゾロピリダジニル、チアゾロピリダジニル、及びプリニルが挙げられる。
【0044】
特に明記しない限り、全ての置換基は互いに独立している。
【0045】
下付き文字が整数０（すなわちゼロ）である場合、その下付き文字が言及する基が存在しないこと、すなわち、その特定の基の両側の基の間に直接結合が存在することが意図される。
【0046】
本明細書に記載の特定の化合物は、１つ以上の立体中心を含んでもよく、したがって、異なる立体異性体型で存在し得る。「立体異性体」という用語は、同一の化学構成を有するが、原子又は基の空間配置に関して異なる化合物を指す。立体異性体の例は、鏡像異性体及びジアステレオマー（「ジアステレオ異性体」とも呼ばれる）である。「鏡像異性体」という用語は、互いに重ね合わせ不可能な鏡像である化合物の２つの立体異性体を指す。「ジアステレオマー」又は「ジアステレオ異性体」という用語は、互いに鏡像ではない２つ以上の立体中心を有する立体異性体を指す。本発明は、ジアステレオマー及び鏡像異性体、並びに鏡像異性体の比が１：１以外であるラセミ混合物及び鏡像異性体が豊富な混合物にまで及ぶと考えられる。
【0047】
本明細書に記載の化合物は、それらの鏡像異性体及び／又はジアステレオマーに分離され得る。例えば、これらが１つの立体中心のみを含有する場合、これらは、ラセミ化合物若しくはラセミ混合物（鏡像異性体の５０：５０混合物）の形態で提供され得るか、又は純粋な鏡像異性体として、すなわち、Ｒ又はＳ形態で提供され得る。ラセミ化合物として生じる化合物のいずれかは、キラル相上でのカラム分離などの当該技術分野で既知の方法によって、又は光学的に活性な溶媒からの再結晶化によって、それらの鏡像異性体に分離され得る。少なくとも２個の不斉炭素原子を有するこれらの化合物は、それ自体既知の方法を使用して、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分画結晶化によって、それらの物理化学的差異に基づいてそれらのジアステレオマーに分離され得、これらの化合物がラセミ形態で得られる場合、それらはその後、それらの鏡像異性体に分離され得る。
【0048】
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物のいずれかの任意の薬学的に許容される有機塩又は無機塩を指す。薬学的に許容される塩は、対イオン等の１つ以上の追加の分子を含み得る。対イオンは、親化合物の電荷を安定させる任意の有機基又は無機基であり得る。本発明の化合物が塩基である場合、好適な薬学的に許容される塩は、遊離塩基と有機又は無機酸との反応によって調製され得る。本発明の化合物が酸である場合、好適な薬学的に許容される塩は、遊離酸と有機又は無機塩基との反応によって調製され得る。
【0049】
「薬学的に許容される」という用語は、化合物又は組成物が、製剤の他の成分又は治療される患者（例えば、ヒト）と化学的及び／又は毒物学的に適合性があることを意味する。
【0050】
「医薬組成物」とは、医療目的で使用するのに好適な任意の形態の組成物を意味する。
【0051】
本明細書で使用される場合、「治療」は、ヒト又は非ヒト動物（例えば、非ヒト哺乳動物）に利益をもたらし得る任意の治療用途を含む。ヒト及び動物の両方の治療が本発明の範囲内であるが、主に、本発明はヒトの治療を目的としている。治療は、既存の疾患若しくは状態に関するものであってもよいか、又は予防的であってもよい。
【0052】
本明細書で使用される場合、「薬学的に有効な量」は、所望の薬理学的及び／又は治療効果につながる量、すなわち、その意図される目的を達成するのに有効な薬剤の量に関する。個々の患者のニーズは様々であり得るが、有効量の活性剤のための最適範囲の決定は、当業者の能力の範囲内である。一般に、本明細書に記載の化合物のいずれかで疾患又は状態を治療するための投与レジメンは、医療状態の性質及びその重症度を含む様々な要因に従って選択される。
【0053】
本明細書で使用される場合、「ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａ」又は「ＮＰＲ－Ａ」は、心房及び脳ナトリウム利尿ペプチド（それぞれ、ＡＮＰ及びＢＮＰ）の両方の受容体として機能する膜結合型グアニリルシクラーゼを指す。それはまた、「グアニリルシクラーゼＡ」又は「ＧＣ－Ａ」としても知られ得る。ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａは、ＡＮＰ及びＢＮＰによって活性化されると、３’，５’－環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の産生を引き起こし、これは、多くの異なる機序を介して血圧を低下させる（図１参照）。
【0054】
本明細書における「ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａの活性化」への言及はいずれも、ｃＧＭＰを産生するその酵素活性の増強に関する。ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａの活性化剤（又はエンハンサー）への言及は、それに応じて解釈されるべきである。したがって、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａの活性化剤は、その活性を増加させ、したがってｃＧＭＰの産生を増加させる化合物である。
【0055】
本明細書で言及され、「血圧上昇」とも呼ばれ得る「高血圧」は、動脈における持続的な血圧上昇を特徴とする長期の医学的状態である。血圧上昇からの長期合併症には、冠動脈疾患、脳卒中、心不全、心房細動、末梢動脈疾患、慢性腎疾患、認知症、網膜症及び視力喪失が含まれる。ＷＨＯによれば、高血圧は、成人（すなわち、１８歳以上のヒト対象）において２つの異なる日に測定された場合に、両方の日の収縮期血圧読み取り値が≧１４０ｍｍＨｇであり、かつ／又は両方の日の拡張期血圧読み取り値が≧９０ｍｍＨｇである場合に診断される。高血圧は、例えば、「２０１８ ＥＳＣ／ＥＳＨ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ａｒｔｅｒｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ」（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊｏｕｒｎａｌ，３９（３３）：３０２１－３１０４，１ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１８）において更に定義されており、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【0056】
本発明は、少なくとも部分的に、特定のピリダジノン誘導体がナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａを標的とし、ｃＧＭＰの産生を引き起こすことができるという発見に基づく。この発見は、ＮＰＲ－Ａの活性によって媒介される、対象（例えば、ヒト）における状態又は疾患を治療又は予防するためのこのような化合物の使用を導く。ＮＰＲ－Ａの活性化剤として、本明細書に記載の化合物は、高血圧、具体的には抵抗性高血圧などのＮＰＲ－Ａ活性化の低下に関連する状態又は疾患を治療又は予防するのに好適である。
【0057】
一態様において、本発明は、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害の治療又は予防に使用するための、具体的には高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩を提供し、
【0058】
【化3】
【0059】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、
－Ｈ、
－ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、
－Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、
－Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）、及び
－ＣＮ、から独立して選択され、
ただし、Ｒ1及びＲ2のうちの少なくとも１つは、－Ｈ以外であり、
Ｒ3は、以下の式の基であり、
Ｒ1及びＲ2は、
－Ｈ、
－ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、
－Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、
－Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）、及び
－ＣＮ、から独立して選択され、
ただし、Ｒ1及びＲ2のうちの少なくとも１つは、－Ｈ以外であり、
Ｒ3は、以下の式の基であり、
【0060】
【化4】
【0061】
式中、ｎは、０又は１であり、
Ｒ4は、Ｈ又はＣ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）であり、
Ｌ1は、
－結合、
－－（ＣＨ2）p－（式中、ｐは１～３の整数、好ましくは１又は２である）、
－Ｃ3～6シクロアルキレン（例えば、Ｃ3～4シクロアルキレン）、から選択された連結基であり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
Ｒ4は、Ｈ又はＣ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）であり、
Ｌ1は、
－結合、
－－（ＣＨ2）p－（式中、ｐは１～３の整数、好ましくは１又は２である）、
－Ｃ3～6シクロアルキレン（例えば、Ｃ3～4シクロアルキレン）、から選択された連結基であり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
【0062】
式（Ｉ）において、式（Ｉ）中のＲ1及びＲ2の少なくとも１つは水素以外であり、すなわち、Ｒ1及びＲ2の両方が水素であることはできない。
【0063】
一実施形態において、Ｒ1及びＲ2は、独立して、Ｈ及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から、好ましくはＨ、Ｃｌ及びＢｒから選択される。例えば、Ｒ1及びＲ2の少なくとも１つは、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、好ましくはＣｌ又はＢｒであってもよい。
【0064】
一実施形態において、Ｒ1及びＲ2は両方ともハロゲンであり、例えば、それらは両方ともＣｌ又はＢｒであってもよい。一実施形態では、Ｒ1及びＲ2の両方がＣｌである。
【0065】
別の実施形態において、Ｒ1及びＲ2の一方はハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、他方は水素である。一実施形態において、Ｒ1はハロゲンであってよく、Ｒ2は水素であってよい。例えば、Ｒ1はＣｌであってよく、Ｒ2は水素であってよい。
【0066】
式（Ｉ）において、ｎは０又は１のいずれかである。ｎが０である場合、基Ｘはカルボニル基に直接結合してケトンを形成する。ｎが１である場合、基Ｒ3は、式（Ｉ）中のカルボニル基に直接結合してアミドを形成する窒素原子を含む。
【0067】
一実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉａ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0068】
【化5】
【0069】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、及びハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているシクロアルキル基（例えば、三環式シクロアルキル基）、から選択される。
【0070】
別の実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｂ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0071】
【化6】
【0072】
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びＬ1は、本明細書で定義される通りであり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、から選択される。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びＬ1は、本明細書で定義される通りであり、
Ｘは、
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び－ＣＮから選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されているアリール基、並びに
－Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環、から選択される。
【0073】
実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｃ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0074】
【化7】
【0075】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りである。
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りである。
【0076】
別の実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｄ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0077】
【化8】
【0078】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２である。
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２である。
【0079】
別の実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｅ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0080】
【化9】
【0081】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｙ1は本明細書で定義の通りであり、好ましくはＣ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１である。
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｙ1は本明細書で定義の通りであり、好ましくはＣ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１である。
【0082】
別の実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｆ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0083】
【化10】
【0084】
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２である。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２である。
【0085】
別の実施形態において、本発明で使用するための化合物は、式（Ｉｇ）の化合物、それらの立体異性体、及びその薬学的に許容される塩であり、
【0086】
【化11】
【0087】
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
Ｚは、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環である。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
Ｚは、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環である。
【0088】
本発明に従って使用するための化合物の例には、以下の、それらの立体異性体、及びそれらの薬学的に許容される塩が含まれるが、これらに限定されない。
【0089】
【表1-1】
【0090】
【表1-2】
【0091】
【表1-3】
【0092】
【表1-4】
【0093】
本発明で使用するのに好ましい化合物は、化合物番号１、２、１１及び２４である。
【0094】
本明細書に記載される特定の化合物は新規であり、これらは本発明の更なる態様を形成する。したがって、更なる態様において、本発明は、一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の以下の化合物、それらの立体異性体、並びにそれらの薬学的に許容される塩を提供し、
【0095】
【化12】
【0096】
式中、
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｙ1は、本明細書で定義の通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１であり、
ただし、本化合物は、
４－クロロ－２－［２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メトキシフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；又は
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メチルフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン以外である。
Ｒ1及びＲ2は、本明細書で定義される通りであり、
Ｙ1は、本明細書で定義の通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１であり、
ただし、本化合物は、
４－クロロ－２－［２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メトキシフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン；又は
４，５－ジクロロ－２－［２－（４－メチルフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オン以外である。
【0097】
【化13】
【0098】
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２であり、
ただし、本化合物は、
４，５－ジクロロ－Ｎ－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド又は４，５－ジクロロ－Ｎ－［２－（２，４－ジクロロフェニル）エチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド以外である。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
各Ｙ1は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）及び－ＣＮから選択され、
ｑは、０～３の整数、好ましくは１又は２であり、
ただし、本化合物は、
４，５－ジクロロ－Ｎ－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド又は４，５－ジクロロ－Ｎ－［２－（２，４－ジクロロフェニル）エチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド以外である。
【0099】
【化14】
【0100】
式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
Ｚは、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環であり、
ただし、本化合物は、
４，５－ジクロロ－Ｎ－［［４－（２－メチルプロピル）－２－モルホリニル］メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－６－オキソＮ－（４－ピリジニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［（３－メチル－４－ピリジニル）メチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－（４－ピリジニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－Ｎ－［（３－メチル－４－ピリジニル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［［５－（４－クロロフェニル）－２－フラニル］メチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－（２－チエニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－Ｎ－［［４－（２－メチルプロピル）－２－モルホリニル］メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－（２－フラニルメチル）－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－［（テトラヒドロ－２－フラニル）メチル］－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；及び４，５－ジクロロ－Ｎ－［（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－２－イル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド以外である。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4及びｐは、本明細書に定義される通りであり、
Ｚは、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル（例えば、－ＣＦ3）、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ又はＢｒ）、及び任意選択で置換されているフェニル（例えば、非置換フェニル）から選択される１つ以上の置換基で任意選択で置換されている５又は６員複素環であり、
ただし、本化合物は、
４，５－ジクロロ－Ｎ－［［４－（２－メチルプロピル）－２－モルホリニル］メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－６－オキソＮ－（４－ピリジニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［（３－メチル－４－ピリジニル）メチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－（４－ピリジニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－Ｎ－［（３－メチル－４－ピリジニル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－［［５－（４－クロロフェニル）－２－フラニル］メチル］－６－オキソ１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－（２－チエニルメチル）－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジブロモ－Ｎ－［［４－（２－メチルプロピル）－２－モルホリニル］メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－Ｎ－（２－フラニルメチル）－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；
４，５－ジクロロ－６－オキソ－Ｎ－［（テトラヒドロ－２－フラニル）メチル］－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド；及び４，５－ジクロロ－Ｎ－［（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－２－イル）メチル］－６－オキソ－１（６Ｈ）－ピリダジンアセトアミド以外である。
【0101】
一実施形態において、本発明による化合物は、Ｒ2が水素である式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物である。一実施形態において、本発明による化合物は、Ｒ2が水素であり、Ｒ1がハロゲン（例えば、Ｃｌ）である式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物である。
【0102】
一実施形態において、本発明は、一般式（ＩＩａ）の化合物、それらの立体異性体、及びそれらの薬学的に許容される塩を提供し、
【0103】
【化15】
【0104】
式中、
Ｒ1は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）又は－ＣＮ、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、例えば、Ｃｌであり、
Ｙ1は、本明細書で定義の通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１である。
Ｒ1は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、Ｃ1～6アルキル（例えば、Ｃ1～3アルキル）、Ｃ1～6ハロアルキル（例えば、Ｃ1～3ハロアルキル）又は－ＣＮ、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）、例えば、Ｃｌであり、
Ｙ1は、本明細書で定義の通りであり、好ましくは、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮであり、
各Ｙ2は、独立して、Ｃ1～3アルキル（例えば、－ＣＨ3）、Ｃ1～3アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ3）、Ｃ1～3ハロアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）又は－ＣＮから選択され、好ましくはハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ又はＢｒ）であり、
ｒは、０～２の整数、好ましくは０又は１である。
【0105】
本発明による新規化合物には、本明細書に列挙した化合物番号３、４、６、８、１１、１２、１３、１４、１６、１７、１８、１９、２０及び２４、それらの立体異性体及び薬学的に許容される塩が含まれるが、これらに限定されない。
【0106】
更なる態様において、本発明は、医薬として使用するための、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩を提供する。
【0107】
更なる態様において、本発明は、ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、又はより好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防に使用するための、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩を提供する。
【0108】
別の態様において、本発明は、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）の化合物、その立体異性体、又は薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と一緒に含む、医薬組成物に関する。
【0109】
更なる態様において、本発明は、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、又は薬学的に許容される塩を、更なる原薬と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【0110】
ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、又はより好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防において使用するための医薬の製造における、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、若しくは薬学的に許容される塩の使用は、本発明の更なる態様を形成する。
【0111】
ナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａによって媒介される状態又は障害、具体的には高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧を治療又は予防する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体、若しくは薬学的に許容される塩を投与するステップを含む当該方法は、本発明のその上更なる態様を形成する。
【0112】
本明細書に記載の化合物のいずれも、その塩、特に無機若しくは有機の酸又は塩基を有するその薬学的に許容される塩に変換され得る。塩形成のための手順は、当該技術分野の従来のものである。
【0113】
当然のことながら、本明細書に記載の化合物は、鏡像異性体、ジアステレオマー、及びそれらの混合物を含む、様々な立体異性体形態で存在し得る。本発明は、本明細書に記載の化合物の全ての光学異性体及び光学異性体の混合物を包含する。したがって、ジアステレオマー、ラセミ化合物、及び／又は鏡像異性体として存在する化合物は、本発明の範囲内である。
【0114】
式（Ｉ）の化合物は、当技術分野で公知であるか、又は当業者に公知の方法によって調製することができる。いくつかの化合物は、Ｅｎａｍｉｎｅ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ及びＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍを含む供給源から市販されている。
【0115】
当技術分野で知られていない本明細書に記載の化合物のいずれも、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物を含めて、容易に入手可能な出発物質から、当技術分野で知られている合成方法、例えば、公知の教科書、例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍａｒｃｈ，Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，５th ２００１）又はＡｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｃａｒｅｙ ａｎｄ Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，ＫＡ／ＰＰ，４th Ｅｄ．２００１）に記載されている方法を使用して調製することができる。
【0116】
以下のスキーム１及び２は、本明細書に記載の化合物を調製するのに好適である一般的な方法を例示する。式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物を調製するためのそのような方法は、本発明の更なる態様を形成する。出発物質として使用される化合物は、文献から知られているか、又は市販されている可能性がある。代替的に、これらは、文献から既知の方法によって容易に得ることができる。理解されるように、他の合成経路を使用して、異なる出発物質、異なる試薬、及び／又は異なる反応条件を使用して化合物を調製することができる。本発明に従って化合物を調製する方法のより詳細な説明は、実施例に見出される。
【0117】
【化16】
【0118】
本明細書に記載の化合物は、有益な薬理学的特性、具体的にはナトリウム利尿ペプチド受容体－Ａ（ＮＰＲ－Ａ）を活性化する能力を有する。したがって、本化合物は、ＮＰＲ－Ａによって媒介される任意の状態又は疾患、具体的にはＮＰＲ－Ａ活性化の低下の結果として生じる状態又は疾患の治療又は予防に好適である。
【0119】
ＮＰＲ－Ａは、正常血圧の維持において中心的な役割を果たす。したがって、本明細書に記載の化合物は、降圧薬としての使用に特に好適である。具体的には、それらは、原発性（本態性）高血圧又は二次性高血圧を治療又は予防するために使用され得る。原発性高血圧は、生活様式及び遺伝的要因に起因して生じ、最も一般的なタイプである血圧上昇として定義される。原発性高血圧のリスクを増加させる生活様式因子には、食事中の過剰な塩分、過剰な体重、喫煙及びアルコール摂取が含まれる。二次性高血圧は、慢性腎疾患、腎動脈の狭窄、又はクッシング症候群、甲状腺機能亢進、若しくは甲状腺機能低下などの内分泌障害などの特定可能な原因によって生じる。二次性高血圧の他の原因には、肥満、妊娠、過剰なアルコール消費、ある種の処方薬及び刺激薬、例えばコカイン及びメタアンフェタミンが含まれる。子癇前症は、高血圧にも関連する。
【0120】
特定の実施形態において、本明細書に記載の化合物は、現在の降圧治療に応答しない高血圧患者における血圧の低下、すなわち、いわゆる「抵抗性高血圧」の治療に使用される。本明細書で使用される場合、「抵抗性高血圧」という用語は、対象（例えば、ヒト患者）が、異なる作用機序を有する３つ以上の降圧薬剤を同時に服用しているにもかかわらず、対象において標的レベルを超えたままである（例えば、１４０／９０ｍｍＨｇを超える）血圧上昇を指す。したがって、本発明による治療から利益を得ることができる対象（例えば、患者）には、高血圧と診断され、少なくとも３つの異なる降圧薬剤の同時投与を含む治療を以前に処方された（すなわち、受けた）が、応答しなかった対象が含まれる。
【0121】
高血圧は、心臓に深刻な損傷を引き起こし得る。過剰な圧力は、動脈を硬化させ、心臓への血液及び酸素の流れを減少させ得る。この上昇した圧力及び減少した血流は、他の合併症（例えば、アンギナ、冠動脈疾患、心臓発作、心筋梗塞、心不全、及び突然死に至り得る不規則な心拍）を引き起こし得る。高血圧はまた、脳に血液及び酸素を供給する動脈を破裂又は遮断して、脳卒中を引き起こし得る。それはまた、腎臓損傷を引き起こす可能性があり、それは最終的に腎不全につながる可能性がある。血圧上昇の他の長期的影響には、認知症、網膜症及び視力喪失が含まれ得る。したがって、本明細書に記載される化合物はまた、対象（例えば、患者）がこれらの列挙された合併症のいずれかを発症するリスクを治療、予防、又は低減するために使用され得る。一実施形態において、本明細書に記載の化合物は、以下の状態：狭心症、冠動脈疾患、心臓発作、心筋梗塞、心不全、不整脈、脳卒中、腎障害、腎不全、認知症、網膜症、及び視力喪失のいずれかの治療又は予防に使用することができる。
【0122】
一実施形態において、本明細書に記載される化合物は、肺高血圧、子癇前症、糖尿病、心不全又は心血管疾患を治療又は予防するために使用され得る。別の実施形態において、化合物は、心線維症若しくは心肥大、又は腎臓若しくは肺を含むがこれらに限定されない他の器官若しくは組織における線維症を伴う任意の疾患若しくは状態を治療又は予防するために使用され得る。高血圧の治療、具体的には抵抗性高血圧の治療は、本発明の好ましい実施形態である。
【0123】
更なる態様から見ると、本発明は、治療における使用のための、本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩を提供する。別途指定されない限り、本明細書で使用される「療法」という用語は、治療及び予防の両方を含むことが意図される。
【0124】
更なる態様において、本発明は、本明細書に記載の状態のいずれかの治療又は予防、例えば、高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防に使用するための、本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩を提供する。
【0125】
別の態様において、本発明は、本明細書に記載の状態のいずれかの治療又は予防、例えば、高血圧、より好ましくは抵抗性高血圧の治療又は予防の方法における使用のための医薬の製造における、本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【0126】
また、本明細書に記載の状態のいずれかと闘うか又は予防するための、例えば、高血圧、より具体的には抵抗性高血圧と闘うか又は予防するための、ヒト又は非ヒト動物の身体の治療方法であって、当該身体に有効量の本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩を投与するステップを含む方法も、提供される。
【0127】
治療的又は予防的治療で使用するために、本明細書に記載の化合物は、典型的には、薬学的製剤として製剤化されることになる。したがって、更なる態様において、本発明は、本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤と一緒に含む、医薬組成物を提供する。
【0128】
治療的使用のための許容される担体、賦形剤及び希釈剤は、当技術分野で周知であり、意図される投与経路及び標準的な薬務に関して選択することができる。例としては、結合剤、潤滑剤、懸濁剤、コーティング剤、可溶化剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤、界面活性剤、甘味料、着色剤、香味剤、抗酸化剤、臭気剤、緩衝剤、安定剤及び／又は塩が挙げられる。
【0129】
本明細書に記載の化合物は、当該技術分野で周知の技法に従って、１つ以上の従来の担体及び／又は賦形剤とともに製剤化され得る。典型的には、組成物は、経口又は非経口投与のために、例えば、皮内、皮下、筋肉内、腹腔内、又は静脈内注射によって適合される。非経口投与のためには、皮下、筋肉内又は静脈内投与に適した組成物が一般に好ましい。
【0130】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、皮下注射に適合される。皮下注射のための典型的な組成物は、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩の滅菌水性懸濁液又は溶液である。
【0131】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、筋肉内注射に適合される。筋肉内注射のための典型的な組成物は、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩が油性懸濁液中に製剤化されている無菌持続放出製剤である。
【0132】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、静脈内注射に適合される。静脈内注射のための典型的な組成物は、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩の滅菌水溶液である。
【0133】
注射用組成物は、好ましくは等張溶液（オスモル濃度約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ）である。わずかに高張性の溶液（６００ｍＯｓｍ／ｋｇ未満のオスモル濃度）も許容される。任意の注射溶液は、１つ以上の生理学的に許容される塩又は他の薬学的に許容される添加剤、例えば、許容されるオスモル濃度を提供するための糖化合物などを更に含み得る。
【0134】
本明細書において式（Ｉ）によって定義されるいくつかの化合物は、限定された水溶性を有する。式（Ｉ）のいずれかの化合物が、それ自体が水性注射溶液を提供するために、十分に水溶性でない場合、可能であれば、薬学的に許容される塩として製剤化されることが好ましい。本発明による注射に好適である他の組成物は、可溶化剤を含む組成物である。典型的な可溶化剤は、例えばエタノール、グリセロール及びポリエチレングリコールのような水溶性共溶媒である。他の可溶化剤としては、例えばポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０）のような界面活性剤が挙げられる。可溶化剤の好ましい群は、シクロデキストリン及びそれらの薬学的に許容される塩、好ましくは、２－ヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン、４－スルホブチル－ベータ－シクロデキストリン又はスルホブチルエーテル－ベータ－シクロデキストリン、及びそれらの薬学的に許容される塩（例えば、それらのナトリウム塩）である。式（Ｉ）によって定義される化合物のシクロデキストリン複合体は、本発明の更なる態様を形成する。これらは、インサイツで、又は少量の水とともに乳鉢及び乳棒を使用し、続いて組成物の調製前に複合体を乾燥させる別個のプロセスにおいて調製され得る。可溶化剤などの医薬添加剤及び限られた水溶解度を有する化合物の医薬組成物の調製方法は、薬科学における標準的な教本に十分に記載されている。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２３rd ｅｄｉｔｉｏｎ，２０２０，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓを参照されたい。
【0135】
別の態様において、本発明は、注射に適した水性医薬製剤であって、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又は薬学的に許容される塩を、少なくとも１種の薬学的に許容される可溶化剤、例えばシクロデキストリン又は薬学的に許容されるその塩と一緒に含む当該製剤を提供する。一実施形態において、製剤中に存在する式（Ｉ）の化合物は、本明細書に記載の式（ＩＩａ）を有する化合物である。
【0136】
本明細書に記載の化合物のいずれかの滅菌組成物は、典型的には、オートクレーブ処理又は滅菌ろ過によって調製することができる。最終的な注射組成物は、予め充填されたシリンジの形態で、又は注射バイアルとして提供され得る。
【0137】
好ましい実施形態において、化合物は、経口投与に適合され得る。例えば、これらは、従来の賦形剤、例えば、溶媒、希釈剤、結合剤、甘味料、香料、ｐＨ調整剤、粘度調整剤、抗酸化剤などを使用して、従来の経口投与形態、例えば、錠剤、コーティング錠、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、分散剤、懸濁剤、シロップ剤、乳剤などに製剤化され得る。好適な賦形剤には、例えば、コーンスターチ、ラクトース、グルコース、微結晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、エタノール、グリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セチルステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロース、又は飽和脂肪などの脂肪物質、又はそれらの好適な混合物などが含まれ得る。
【0138】
化合物の経口投与に好ましい剤形は、錠剤及びカプセル剤である。式（Ｉ）によって定義される化合物のいくつかは、経口生物学的利用能を改善するために添加剤とともに製剤化され得る。このような添加剤は、薬科学における標準的な教本に十分に記載されており、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，２０２０，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓを参照されたい。典型的なこのような添加剤としては、種々のシクロデキストリン（例えば、ベータ－シクロデキストリン）、界面活性剤及び種々の疎水性賦形剤が挙げられる。好ましい賦形剤の１つの群は、胃腸系においてエマルジョンを形成することができるもの（すなわち、「自己乳化」製剤）である。
【0139】
本明細書に記載の化合物の所望の活性を達成するために必要な投与量は、選択される化合物、その投与方法及び頻度、治療が治療的又は予防的であるかどうか、並びに疾患又は状態の性質及び重症度などの様々な要因に依存する。通常、医師は個々の対象に最も好適である実際の投与量を決定する。特定の患者の特定の用量レベル及び投与頻度は、変化することがあり、使用される特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、患者の年齢、投与方法及び投与時間、並びに特定の状態の重症度などの要因に依存する。化合物及び／又は医薬組成物は、１日１回又は２回など、１日１回～６回のレジメンに従って投与することができる。
【0140】
本明細書に記載の化合物の好適な１日投与量は、０．１ｍｇ～１ｇの範囲の化合物；１ｍｇ～５００ｍｇの化合物；１ｍｇ～３００ｍｇの化合物；５ｍｇ～１００ｍｇの化合物、又は１０ｍｇ～１００ｍｇの化合物であると予想される。「１日投与量」とは、２４時間当たりの投与量を意味する。
【0141】
本明細書に記載の化合物は、本明細書に記載の状態のいずれかの治療において単独で使用することができる。代替的に、本明細書中に記載される治療の方法のいずれかは、治療されるべき障害又は疾患を治療する際に有効である１つ以上の更なる活性薬剤の投与と有利に組み合わせられ得る（すなわち、現在のレジメンに対するアドオン治療として）。
【0142】
一実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１つ以上の従来の降圧薬剤と組み合わせて使用され得る。このような治療方法は、本明細書中に記載されるような化合物、又はこの化合物を含む医薬組成物、及び更なる降圧薬（単数又は複数）の同時投与、別個投与又は連続投与を包含し得る。活性物質が同時に投与される場合、これらは組み合わせ調製物の形態で提供され得る。したがって、本明細書に記載の医薬組成物のいずれかは、１つ以上のそのような活性薬剤、例えば１つ以上の降圧薬を更に含有してもよい。
【0143】
本発明による使用のための好ましい組み合わせは、本明細書に記載の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩と、心血管疾患の治療のための規制認可（例えば、米国又はＥＵにおいて）を有する、例えば、高血圧又はより好ましくは抵抗性高血圧の治療のために認可されている少なくとも１種の原薬との組み合わせである。本発明における使用に好ましいのは、異なる作用機序を有する薬物の組み合わせである。異なる作用機序を有する薬物は、異なる生物学的標的に結合若しくは干渉するもの、又は同じ生物学的標的上の異なる部位に結合若しくは干渉するものである。異なる作用機序を有する薬物の組み合わせの使用は、より低用量の薬物の使用を可能にするか、又はより少ない副作用及び／若しくは改善された有効性で治療の安全性を改善するという点で、有利であり得る。
【0144】
本発明による使用のための組み合わせ調製物は、経口投与に適合されたものを含む。したがって、一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩＩ）若しくは（ＩＶ）の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を、本明細書に記載の１つ以上の追加の原薬と一緒に含む、経口投与に適した組み合わせ製剤を提供する。一実施形態において、組み合わせ製剤は、単位用量形態で、例えば錠剤又はカプセル剤の形態で提供される。好適な単位用量は、１，０００ｍｇまで、例えば８００ｍｇまで、又は６００ｍｇまでの重量を有し得る。
【0145】
本明細書に記載の化合物と同時投与することができる降圧薬剤の例としては、レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の阻害剤、例えば、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（ＡＣＥ阻害剤）、例えば、ベナゼプリル、ゾフェノプリル、ペリンドプリル、トランドラプリル、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、及びラミプリル；アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、例えば、ロサルタン、テルミサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、オルメサルタン、バルサルタン及びサプリサルタン；チアジド利尿薬、例えば、ヒドロクロロチアジド及びベンドロフルメチアジド；チアジド様利尿薬、例えば、クロロサリドン；ジヒドロピリンなどのカルシウムチャネル遮断薬、例えば、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピンニフェジピン、ニモジピン、レルカニジピン、ベラパミル又はジルチアゼム；ベータ遮断薬、例えば、メトプロロール、プロプラノロール、チモロール、アテノロールビソプロロール、エスモロール、ネビボロール及びカルベジロール；スピロノラクトン及びエプレレノンなどのアルドステロンアンタゴニスト；並びにプラゾシン及びタムスロシンなどのアルファ遮断薬が挙げられる。一実施形態において、降圧薬剤は、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、セリプロロール、メトプロロール、ネビボロール又はエスモロールなどのβ1選択的ベータ遮断薬であってもよい。別の実施形態において、降圧薬剤は、ラベタロール又はカルベジロールなどのアルファ及びベータ遮断薬の組み合わせであってもよい。同時投与され得る他の降圧薬剤としては、サクビトリル及びサクビトリル－バルサルタン（ＬＣＺ５９６）が挙げられる。
【0146】
別の実施形態において、本発明はまた、（ｉ）本明細書に記載の化合物、立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は当該化合物、立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を含む医薬組成物、及び（ｉｉ）本明細書に記載の状態又は障害のうちのいずれかの治療、例えば、対象（例えば、患者）における高血圧、より具体的には抵抗性高血圧の治療又は予防における（ｉ）の使用に関する印刷された説明書及び／又はラベルを含むパッケージを提供する。
【0147】
本発明は更に、そのような治療を必要とする対象における高血圧、例えば抵抗性高血圧の治療のための併用療法の方法を提供し、当該方法は、治療有効量の本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩、及び同時に又は別々に（例えば、逐次的に）１つ以上の降圧薬剤を当該対象に投与するステップを含む。
【0148】
本発明はまた、本明細書に記載の化合物、立体異性体又は薬学的に許容される塩、及び１つ以上の降圧薬剤、例えば、レニン－アンジオテンシン－アルドステロン系の阻害剤、チアジド利尿薬、カルシウムチャネル遮断薬、又はベータ遮断薬を、任意選択で少なくとも１つの薬学的に許容される担体又は賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。
【0149】
本発明の化合物の薬理学的特性は、機能活性のための標準アッセイを使用して分析することができる。本発明の化合物の試験のための詳細なプロトコルを実施例に提供する。
【0150】
［実施例］
ここで、本発明を、以下の非限定的な実施例において、及び添付の図を参照して、より詳細に説明する。
［図１］ いくつかの機序を介して血圧を低下させるｃＧＭＰの産生を引き起こすＡＮＰ及びＢＮＰの作用によるＮＰＲ－Ａの活性化を概略的に示す。
［図２］ ＨｅＬａ細胞で行ったＭＴＴアッセイからの結果を示す。細胞を、漸増濃度の示された化合物とともに２４時間及び４８時間インキュベートした。データは、陰性対照（１％ＤＭＳＯ）のパーセンテージとしてホルマザン形成（吸光度）を表す。
ここで、本発明を、以下の非限定的な実施例において、及び添付の図を参照して、より詳細に説明する。
［図１］ いくつかの機序を介して血圧を低下させるｃＧＭＰの産生を引き起こすＡＮＰ及びＢＮＰの作用によるＮＰＲ－Ａの活性化を概略的に示す。
［図２］ ＨｅＬａ細胞で行ったＭＴＴアッセイからの結果を示す。細胞を、漸増濃度の示された化合物とともに２４時間及び４８時間インキュベートした。データは、陰性対照（１％ＤＭＳＯ）のパーセンテージとしてホルマザン形成（吸光度）を表す。
【0151】
中間体の調製：
メチル２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセテートの調製：
メチル２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセテートの調製：
【0152】
【化17】
【0153】
この化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（１．６０ｇ、収率８５％）として調製した。
Ｃ7Ｈ6Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２３６／２３８（計算値）２３７／２３９（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８１（ｓ，１Ｈ），４．９１（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ）。
Ｃ7Ｈ6Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２３６／２３８（計算値）２３７／２３９（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８１（ｓ，１Ｈ），４．９１（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ）。
【0154】
ｔｅｒｔ－ブチル２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセテートの調製：
【0155】
【化18】
【0156】
この化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（１．５４ｇ、収率９２％）として調製した。
Ｃ10Ｈ12Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２７８／２８０（計算値）２２３／２２５（［Ｍ－ｔ－Ｂｕ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８０（ｓ，１Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ）。
Ｃ10Ｈ12Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２７８／２８０（計算値）２２３／２２５（［Ｍ－ｔ－Ｂｕ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８０（ｓ，１Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ）。
【0157】
２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）酢酸の調製：
【0158】
【化19】
【0159】
１００ｍｌフラスコ中で、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセテート（１．５４ｇ、５．５０ｍｍｏｌ、実施例７参照）を、ジオキサン中の過剰の塩化水素で７０℃にて処理した。変換が完了したら、混合物を蒸発乾固して、残留物をヘプタンから粉砕し、固体をガラスフィルター上でろ別し、１．１９グラムのオフホワイトの固体（収率９６％）を得た。
Ｃ6Ｈ4Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２２２／２２４（計算値）２２３／２２５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ９．３８（ｖｅｒｙ ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ）．
Ｃ6Ｈ4Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２２２／２２４（計算値）２２３／２２５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ９．３８（ｖｅｒｙ ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ）．
【0160】
一般的手順：
以下の一般的手順において、基Ｒ1、Ｒ2及びＸは、本明細書で定義した通りであり、Ｑは脱離基である。
以下の一般的手順において、基Ｒ1、Ｒ2及びＸは、本明細書で定義した通りであり、Ｑは脱離基である。
【0161】
一般手順Ａ：ピリダジノンアルキル化
【0162】
【化20】
【0163】
適切なピリダジン－３（２Ｈ）－オン（１．０当量）、ハロアセトフェノン又はハロアセテート（１．２当量）及び炭酸カリウム（１．５当量）をアセトニトリル（０．０５～０．２０Ｍ）に懸濁させる。混合物を７０℃で１～３時間加熱する。混合物をｉｓｏｌｕｔｅに吸収させ、乾燥させた後、残渣をフラッシュクロマトグラフィーに供し、通常、ヘプタン中の酢酸エチル（５％～５０％）の勾配で溶出する。生成物の画分を集め、蒸発乾固して、所望の化合物を得る。
【0164】
一般手順Ｂ：アミドの調製
【0165】
【化21】
【0166】
２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）酢酸（１．０当量）及びトリエチルアミン（１．２当量）の乾燥ＤＭＦ（０．１０Ｍ）溶液に、不活性雰囲気下でＨＡＴＵ（１．１当量）を添加する。溶液を、適切なアミン（１．１当量）を添加する前に、１時間撹拌した。撹拌を１～４時間続け、次いで分取クロマトグラフィーによって直接精製して、標的アミドを白色又はオフホワイト色の固体として得る。
【0167】
実施例１－４－クロロ－２－（２－（４－クロロフェニル）－２－オキソエチル）ピリダジン－３（２Ｈ）－オンの調製
【0168】
【化22】
【0169】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（２７ｍｇ、収率９５％）として調製した。
Ｃ12Ｈ8Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８２／２８４（計算値）２８３／２８５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．９８－７．９０（ｍ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ）。
Ｃ12Ｈ8Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８２／２８４（計算値）２８３／２８５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．９８－７．９０（ｍ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ）。
【0170】
実施例２－５－クロロ－２－（２－（４－クロロフェニル）－２－オキソエチル）ピリダジン－３（２Ｈ）－オンの調製。
【0171】
【化23】
【0172】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（２７ｍｇ、収率９５％）として調製した。
Ｃ12Ｈ8Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８２／２８４（計算値）２８３／２８５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．９６－７．８９（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ）。
Ｃ12Ｈ8Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８２／２８４（計算値）２８３／２８５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．９６－７．８９（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４－７．４６（ｍ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ）。
【0173】
実施例３－４，５－ジクロロ－２－（２－（４－メトキシフェニル）－２－オキソエチル）ピリダジン－３（２Ｈ）－オンの調製
【0174】
【化24】
【0175】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（３０ｍｇ、収率９３％）として調製した。
Ｃ13Ｈ10Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３１２／３１４（計算値）３１３／３１５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ８．０１－７．９２（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．０２－６．９４（ｍ，２Ｈ），５．５７（ｓ，２Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ）。
Ｃ13Ｈ10Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３１２／３１４（計算値）３１３／３１５（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ８．０１－７．９２（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．０２－６．９４（ｍ，２Ｈ），５．５７（ｓ，２Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ）。
【0176】
実施例４－４－（２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセチル）ベンゾニトリルの調製。
【0177】
【化25】
【0178】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（２８ｍｇ、収率８９％）として調製した。
Ｃ13Ｈ7Ｃｌ2Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３０７／３０９（計算値）３０８／３１０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ８．１２－８．０５（ｍ，２Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．８５－７．８０（ｍ，２Ｈ），５．５８（ｓ，２Ｈ）。
Ｃ13Ｈ7Ｃｌ2Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３０７／３０９（計算値）３０８／３１０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ８．１２－８．０５（ｍ，２Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．８５－７．８０（ｍ，２Ｈ），５．５８（ｓ，２Ｈ）。
【0179】
実施例５－５－クロロ－２－（２－（５－クロロチオフェン－２－イル）－２－オキソエチル）ピリダジン－３（２Ｈ）－オンの調製
【0180】
【化26】
【0181】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（１９ｍｇ、収率９３％）として調製した。
Ｃ10Ｈ6Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2Ｓについては、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８８／２９０（計算値）２８９／２９１（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．７８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０５－７．００（ｍ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ）。
Ｃ10Ｈ6Ｃｌ2Ｎ2Ｏ2Ｓについては、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ２８８／２９０（計算値）２８９／２９１（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．７８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０５－７．００（ｍ，２Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ）。
【0182】
実施例６－４，５－ジクロロ－２－［２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オンの調製
【0183】
【化27】
【0184】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の４，５－ジクロロ－２Ｈ－ピリダジン－３－オン（１６５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク－７－エン（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２，２’，４’－トリクロロアセトフェノン（２２３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に０℃で滴下した。反応混合物を室温に到達させ、一晩撹拌した。反応が完了した後（ＴＬＣにより制御）、溶媒を減圧下で蒸発させた。水（１５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン：１／３）を用いて精製し、表題化合物を白色固体として得た（精製後５０ｍｇ、１４％）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ５．７０（ｓ，２Ｈ），７．７１－７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），７．９（ｓ，１Ｈ），８．０３－８．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６），８．４０（ｓ，１Ｈ）．
13Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ６１．６６，１２７．８３，１３０．７０，１３１．６４，１３２．８４，１３４．２２，１３４．４４，１３６．３９，１３７．２５，１３９．１７，１５６．８８，１９２．０７
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ５．７０（ｓ，２Ｈ），７．７１－７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），７．９（ｓ，１Ｈ），８．０３－８．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６），８．４０（ｓ，１Ｈ）．
13Ｃ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ６１．６６，１２７．８３，１３０．７０，１３１．６４，１３２．８４，１３４．２２，１３４．４４，１３６．３９，１３７．２５，１３９．１７，１５６．８８，１９２．０７
【0185】
実施例７－４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロ－３－フルオロ－フェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オンの調製
【0186】
【化28】
【0187】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の４，５－ジクロロ－２Ｈ－ピリダジン－３－オン（１６５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク－７－エン（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２－クロロ－１－（４－クロロ－３－フルオロフェニル）エタノン（２０７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に０℃で滴下した。反応混合物を室温に到達させ、一晩撹拌した。反応が完了した後（ＴＬＣにより制御）、溶媒を減圧下で蒸発させた。水（１５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン：１／３）を用いて精製し、表題化合物を白色固体として得た（精製後４５ｍｇ、１３％）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ５．８０（ｓ，２Ｈ），７．８４－７．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．９１－９．９４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），８．０８－８．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ），８．３２（ｓ，１Ｈ）
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ５．８０（ｓ，２Ｈ），７．８４－７．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．９１－９．９４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），８．０８－８．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ），８．３２（ｓ，１Ｈ）
【0188】
実施例８－４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロ－２－メチル－フェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オンの調製
【0189】
【化29】
【0190】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の４，５－ジクロロ－２Ｈ－ピリダジン－３－オン（１６５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク－７－エン（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２－クロロ－１－（４－クロロ－２－メチルフェニル）エタノン（２０３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に０℃で滴下した。反応混合物を室温に到達させ、一晩撹拌した。反応が完了した後（ＴＬＣにより制御）、溶媒を減圧下で蒸発させた。水（１５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン：１／３）を用いて精製し、表題化合物を白色固体として得た（精製後１６ｍｇ、５％）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ２．４３（ｓ，３Ｈ），５．６３（ｓ，２Ｈ），７．４８－７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．００－８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．３２（ｓ，１Ｈ）
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ２．４３（ｓ，３Ｈ），５．６３（ｓ，２Ｈ），７．４８－７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．００－８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．３２（ｓ，１Ｈ）
【0191】
実施例９－４，５－ジクロロ－２－［２－（４－クロロ－３－メチル－フェニル）－２－オキソ－エチル］ピリダジン－３－オンの調製
【0192】
【化30】
【0193】
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の４，５－ジクロロ－２Ｈ－ピリダジン－３－オン（１６５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）及び１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク－７－エン（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２－クロロ－１－（４－クロロ－３－メチルフェニル）エタノン（２０３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に０℃で滴下した。反応混合物を室温に到達させ、一晩撹拌した。反応が完了した後（ＴＬＣにより制御）、溶媒を減圧下で蒸発させた。水（１５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン：１／３）を用いて精製し、表題化合物を白色固体として得た（精製後４７ｍｇ、１４％）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ２．４３（ｓ，３Ｈ），５．７６（ｓ，２Ｈ），７．６４－７．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．８８－７．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ），８．０７－８．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７），８．３２（ｓ，１Ｈ）
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ２．４３（ｓ，３Ｈ），５．７６（ｓ，２Ｈ），７．６４－７．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．８８－７．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ），８．０７－８．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７），８．３２（ｓ，１Ｈ）
【0194】
実施例１０－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（４－イソプロピルフェネチル）アセトアミドの調製
【0195】
【化31】
【0196】
１０ｍｌチューブ中で、２－（４－イソプロピルフェニル）エタン－１－アミン（０．０１７ｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で乾燥トルエン（１．０ｍｌ）に溶解した。溶液をトリメチルアルミニウム（０．０５３ｍｌ、０．１０５ｍｍｏｌ）のトルエン中２Ｍ溶液で処理したところ、いくらかの発煙が観察された。１５分間撹拌した後、メチル２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）アセテート（０．０２４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を添加し、淡橙色混合物を７０℃で一晩加熱した。冷却後、１Ｎ ＨＣｌ水溶液を滴下してクエンチした後、得られた懸濁液を水で希釈し、ＤＣＭで３回抽出した。抽出物を合わせ、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過し、蒸発させると、粗生成物の淡橙色固体が残った。ｉｓｏｌｕｔｅに吸収させた後、ヘプタン中の酢酸エチル（１０％～１００％）の勾配で溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。生成物画分は、１４ｍｇ（収率３７％）の白色固体を与えた。
Ｃ17Ｈ19Ｃｌ2Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３６７／３６９（計算値）３６８／３７０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８１（ｓ，１Ｈ），７．１８－７．０３（ｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｍ，４Ｈ），５．９２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．７７（ｓ，２Ｈ），３．５３（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）。
Ｃ17Ｈ19Ｃｌ2Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３６７／３６９（計算値）３６８／３７０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８１（ｓ，１Ｈ），７．１８－７．０３（ｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｍ，４Ｈ），５．９２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．７７（ｓ，２Ｈ），３．５３（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）。
【0197】
実施例１１－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（２－（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）エチル）アセトアミドの調製
【0198】
【化32】
【0199】
表題化合物を、一般的な手順Ｂに従って白色固体として調製した。
Ｃ17Ｈ15Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３９１／３９３（計算値）３９２／３９４（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
Ｃ17Ｈ15Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３９１／３９３（計算値）３９２／３９４（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
【0200】
実施例１２－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（２，６－ジクロロフェネチル）アセトアミドの調製
【0201】
【化33】
【0202】
表題化合物を、一般的な手順Ｂに従って白色固体として調製した。
Ｃ14Ｈ11Ｃｌ4Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ／３９３／３９５／３９７（計算値）３９４／３９６／３９８（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
Ｃ14Ｈ11Ｃｌ4Ｎ3Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ／３９３／３９５／３９７（計算値）３９４／３９６／３９８（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
【0203】
実施例１３－ｒａｃ－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）シクロプロピル）アセトアミドの調製
【0204】
【化34】
【0205】
表題化合物を、一般的な手順Ｂに従って白色固体として調製した。
Ｃ18Ｈ15Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４０３／４０５（計算値）４０４／４０６（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８６（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．２４（ｐｓｅｕｄｏ ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｓ，１Ｈ），４．８１（ｓ，２Ｈ），２．８４－２．７７（ｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｍ，１Ｈ），１．９７（ｄｄｄ，Ｊ＝９．７，６．７，３．３Ｈｚ，１Ｈ），１．２１－１．０９（ｍ，２Ｈ）。
Ｃ18Ｈ15Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ４０３／４０５（計算値）４０４／４０６（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ ７．８６（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．２４（ｐｓｅｕｄｏ ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｓ，１Ｈ），４．８１（ｓ，２Ｈ），２．８４－２．７７（ｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｍ，１Ｈ），１．９７（ｄｄｄ，Ｊ＝９．７，６．７，３．３Ｈｚ，１Ｈ），１．２１－１．０９（ｍ，２Ｈ）。
【0206】
実施例１４－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）アセトアミドの調製
【0207】
【化35】
【0208】
表題化合物を、一般的な手順Ｂに従って白色固体として調製した。
Ｃ15Ｈ11Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３６３／３６５（計算値）３６４／３６６（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
Ｃ15Ｈ11Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３６３／３６５（計算値）３６４／３６６（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
【0209】
実施例１５－２－（４，５－ジクロロ－６－オキソピリダジン－１（６Ｈ）－イル）－Ｎ－（（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アセトアミドの調製
【0210】
【化36】
【0211】
表題化合物を、一般的な手順Ｂに従って白色固体として調製した。
Ｃ16Ｈ13Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３７７／３７９（計算値）３７８／３８０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
Ｃ16Ｈ13Ｃｌ2Ｎ5Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３７７／３７９（計算値）３７８／３８０（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
【0212】
実施例１６－４－クロロ－２－（２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－オキソエチル）ピリダジン－３（２Ｈ）－オンの調製
【0213】
【化37】
【0214】
表題化合物を、一般的な手順Ａに従って白色固体（１６ｍｇ、収率９９％）として調製した。
Ｃ12Ｈ7Ｃｌ3Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ／３１６／３１８／３２０（計算値）３１７／３１９／３２１（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．９Ｈｚ，１Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ）．
Ｃ12Ｈ7Ｃｌ3Ｎ2Ｏ2については、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ／３１６／３１８／３２０（計算値）３１７／３１９／３２１（［Ｍ＋Ｈ］+実測値）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．９Ｈｚ，１Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ）．
【0215】
実施例１７－化合物のインビトロ試験
材料：
化合物１、２、７、９及び１０は、Ｅｎａｍｉｎｅから購入した。試験した他の化合物は、上記実施例に従って作製した。
材料：
化合物１、２、７、９及び１０は、Ｅｎａｍｉｎｅから購入した。試験した他の化合物は、上記実施例に従って作製した。
【0216】
細胞培養：
ヒト（ｈ）ナトリウム利尿ペプチド受容体Ａ（ｈＮＰＲ－Ａ）及びｈＮＰＲ－Ｂで安定にトランスフェクトされたＱＢＩＨＥＫ２９３Ａ細胞を、Ｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｕｎｙｎ Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１４；３８７：５－１４に記載されているように作製した。細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン、及び選択抗生物質として０．４ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８（ゲネチシン）を補充したＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で増殖させた。
ヒト（ｈ）ナトリウム利尿ペプチド受容体Ａ（ｈＮＰＲ－Ａ）及びｈＮＰＲ－Ｂで安定にトランスフェクトされたＱＢＩＨＥＫ２９３Ａ細胞を、Ｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｕｎｙｎ Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１４；３８７：５－１４に記載されているように作製した。細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン、及び選択抗生物質として０．４ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８（ゲネチシン）を補充したＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で増殖させた。
【0217】
ｃＧＭＰについてのＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ
ｃＧＭＰについてのＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を、Ｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．（上記を参照のこと）に記載されるように行った。ＮＰＲ－Ａ及びＮＰＲ－Ｂを発現するＨＥＫ２９３細胞を実験前日に分割し、ＥＤＴＡ溶液（Ｖｅｒｓｅｎｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して回収した。最終濃度６０００個の細胞／ウェルを、ＩＢＭＸ（最終０．７ｍＭ）を含む刺激緩衝液（ＨＢＳＳ中５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、０．１％ＢＳＡ）中に再懸濁した。化合物を刺激緩衝液に溶解し、漸増濃度でウェルに添加した。様々な濃度のアゴニスト（ヒトＢＮＰ、ヒトＣＮＰ又はヒトプロＢＮＰ）を添加する２０分前に、細胞を、示された化合物とともにインキュベートした。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアクセプタービーズミックス（ｐＨ７．４の５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液中のアクセプタービーズ－抗ｃＧＭＰ抗体及び０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０）を添加することにより、反応を停止させる（すなわち、細胞を溶解させる）前に、細胞をアゴニストで２０分間刺激した。１時間のインキュベーション後、ドナービーズミックス（ドナービーズ、ビオチン化ｃＧＭＰ、ｐＨ７．４の５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液中の０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０）を添加し（総容量４０μｌ）、インキュベーションを２時間続けた。発光シグナルを、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ発光５７０ｎｍフィルターを使用してＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）でプレートを読み取ることによって定量的に分析した。実験は、０．１ｎＭ／２ｎＭのＢＮＰ／プロＢＮＰが存在し、化合物の漸増濃度（それぞれの濃度の化合物＋０．１ｎＭ ＢＮＰ／２ｎＭプロＢＮＰ）、又は１０μＭの化合物の存在下でＢＮＰの漸増濃度（それぞれの濃度のＢＮＰ／プロＢＮＰ＋１０μＭ化合物）のいずれかで行い、濃度－応答曲線を作成して－ＬｏｇＥＣ50（効力）及び最大応答値（有効性）を得た。
ｃＧＭＰについてのＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を、Ｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．（上記を参照のこと）に記載されるように行った。ＮＰＲ－Ａ及びＮＰＲ－Ｂを発現するＨＥＫ２９３細胞を実験前日に分割し、ＥＤＴＡ溶液（Ｖｅｒｓｅｎｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して回収した。最終濃度６０００個の細胞／ウェルを、ＩＢＭＸ（最終０．７ｍＭ）を含む刺激緩衝液（ＨＢＳＳ中５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、０．１％ＢＳＡ）中に再懸濁した。化合物を刺激緩衝液に溶解し、漸増濃度でウェルに添加した。様々な濃度のアゴニスト（ヒトＢＮＰ、ヒトＣＮＰ又はヒトプロＢＮＰ）を添加する２０分前に、細胞を、示された化合物とともにインキュベートした。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアクセプタービーズミックス（ｐＨ７．４の５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液中のアクセプタービーズ－抗ｃＧＭＰ抗体及び０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０）を添加することにより、反応を停止させる（すなわち、細胞を溶解させる）前に、細胞をアゴニストで２０分間刺激した。１時間のインキュベーション後、ドナービーズミックス（ドナービーズ、ビオチン化ｃＧＭＰ、ｐＨ７．４の５ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液中の０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０）を添加し（総容量４０μｌ）、インキュベーションを２時間続けた。発光シグナルを、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ発光５７０ｎｍフィルターを使用してＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）でプレートを読み取ることによって定量的に分析した。実験は、０．１ｎＭ／２ｎＭのＢＮＰ／プロＢＮＰが存在し、化合物の漸増濃度（それぞれの濃度の化合物＋０．１ｎＭ ＢＮＰ／２ｎＭプロＢＮＰ）、又は１０μＭの化合物の存在下でＢＮＰの漸増濃度（それぞれの濃度のＢＮＰ／プロＢＮＰ＋１０μＭ化合物）のいずれかで行い、濃度－応答曲線を作成して－ＬｏｇＥＣ50（効力）及び最大応答値（有効性）を得た。
【0218】
全細胞結合アッセイ：
結合アッセイを、Ｄｉｃｋｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００９；２８４：１９１９６－２０２に記載されているように、インタクトなＮＰＲ－Ａ発現ＨＥＫ２９３細胞において、実施した。
結合アッセイを、Ｄｉｃｋｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００９；２８４：１９１９６－２０２に記載されているように、インタクトなＮＰＲ－Ａ発現ＨＥＫ２９３細胞において、実施した。
【0219】
血管弛緩：
オスのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（６～８週齢）ラットを頸部脱臼によって屠殺した。胸部大動脈を切開し、リング（長さ約４ｍｍ）を生理食塩水（ＰＳＳ；組成（ｍＭ）：ＮａＣｌ １１９、ＫＣｌ ４．７、ＣａＣｌ2 ２．５、ＭｇＳＯ4 １．２、ＮａＨＣＯ3 ２５、ＫＨ2ＰＯ4 １．２、及びグルコース ５．５）を含有する臓器浴に取り付け、３７℃に維持し、Ｏ2中５％ＣＯ2を供給した。等尺性張力の変化を、１ｇの基礎張力下で組織において測定した。平衡後、応答が再現可能になるまで、血管をＫＣｌ（４８ｍＭ）で繰り返し収縮させた。次いで、累積濃度－応答曲線を、トロンボキサン受容体アゴニストである９，１１－ジデオキシ－１１α，９α－エポキシメタノ－プロスタグランジンＦ２α（Ｕ４６６１９；１０ｎｍ－１μＭ）に対して、構築した。次いで、動脈を酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）阻害剤Ｌ－ＮＧ－ニトロアルギニンメチルエステル（３００μＭ；内因性一酸化窒素の産生を遮断するために）で処理し、ＥＣ80濃度のＵ４６６１９で事前収縮させた。安定な応答が達成されたら、化合物１又は化合物２（全て１０μＭ、ＡＮＰの投与前に３０分間インキュベート）の非存在下又は存在下で、ＡＮＰ（０．００１－１μＭ）に対する累積濃度－応答曲線を構築した。
オスのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（６～８週齢）ラットを頸部脱臼によって屠殺した。胸部大動脈を切開し、リング（長さ約４ｍｍ）を生理食塩水（ＰＳＳ；組成（ｍＭ）：ＮａＣｌ １１９、ＫＣｌ ４．７、ＣａＣｌ2 ２．５、ＭｇＳＯ4 １．２、ＮａＨＣＯ3 ２５、ＫＨ2ＰＯ4 １．２、及びグルコース ５．５）を含有する臓器浴に取り付け、３７℃に維持し、Ｏ2中５％ＣＯ2を供給した。等尺性張力の変化を、１ｇの基礎張力下で組織において測定した。平衡後、応答が再現可能になるまで、血管をＫＣｌ（４８ｍＭ）で繰り返し収縮させた。次いで、累積濃度－応答曲線を、トロンボキサン受容体アゴニストである９，１１－ジデオキシ－１１α，９α－エポキシメタノ－プロスタグランジンＦ２α（Ｕ４６６１９；１０ｎｍ－１μＭ）に対して、構築した。次いで、動脈を酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）阻害剤Ｌ－ＮＧ－ニトロアルギニンメチルエステル（３００μＭ；内因性一酸化窒素の産生を遮断するために）で処理し、ＥＣ80濃度のＵ４６６１９で事前収縮させた。安定な応答が達成されたら、化合物１又は化合物２（全て１０μＭ、ＡＮＰの投与前に３０分間インキュベート）の非存在下又は存在下で、ＡＮＰ（０．００１－１μＭ）に対する累積濃度－応答曲線を構築した。
【0220】
ＭＴＴアッセイ：
ＭＴＴ（３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド）テトラゾリウム還元アッセイを使用して、化合物の細胞毒性をインビトロで測定した。活発な代謝を有する生細胞は、ＭＴＴを、５７０ｎｍ付近に最大吸光度を有する紫色のホルマザン生成物に変換する。ＨｅＬａ細胞を、実験の前日に、培養培地（１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））中の９６ウェルプレートに播種した。細胞を、漸増濃度の各化合物（１％ＤＭＳＯ中）とともに、３７℃で２４時間又は４８時間インキュベートした。培養培地中の１％ＤＭＳＯ及び２０ｍＭ Ｈ2Ｏ2を、それぞれ陰性対照及び陽性対照として使用した。最終濃度０．４５ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ溶液をウェルに添加し、細胞を３７℃で１～４時間インキュベートした。可溶化溶液（４０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）氷酢酸及び１６％（ｗｔ／ｖｏｌ）ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ））を、各ウェルに添加してホルマザン結晶を溶解した。吸光度を５７０ｎｍで測定した。
ＭＴＴ（３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド）テトラゾリウム還元アッセイを使用して、化合物の細胞毒性をインビトロで測定した。活発な代謝を有する生細胞は、ＭＴＴを、５７０ｎｍ付近に最大吸光度を有する紫色のホルマザン生成物に変換する。ＨｅＬａ細胞を、実験の前日に、培養培地（１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））中の９６ウェルプレートに播種した。細胞を、漸増濃度の各化合物（１％ＤＭＳＯ中）とともに、３７℃で２４時間又は４８時間インキュベートした。培養培地中の１％ＤＭＳＯ及び２０ｍＭ Ｈ2Ｏ2を、それぞれ陰性対照及び陽性対照として使用した。最終濃度０．４５ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ溶液をウェルに添加し、細胞を３７℃で１～４時間インキュベートした。可溶化溶液（４０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）氷酢酸及び１６％（ｗｔ／ｖｏｌ）ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ））を、各ウェルに添加してホルマザン結晶を溶解した。吸光度を５７０ｎｍで測定した。
【0221】
結果：
ｃＧＭＰ産生、結合親和性データ及び血管弛緩に対する効果についての結果を以下の表１～４に示す。
ｃＧＭＰ産生、結合親和性データ及び血管弛緩に対する効果についての結果を以下の表１～４に示す。
【0222】
ＭＴＴアッセイからの結果を図２に示す。モノクロロ類似体（化合物２及び２４）は、対応するジクロロ化合物（化合物３及び１１）よりも低い毒性を示した。
【0223】
化合物２４は、１５μＭ未満の濃度（標的における化合物２４のＥＣ50よりも＞７０～８０倍高い濃度）で、細胞数、核サイズ、ＤＮＡ構造、細胞膜透過性、ミトコンドリア質量、ミトコンドリア膜電位及びシトクロムｃなどのパラメータに対して細胞毒性効果を示さなかった（細胞毒性スクリーニングは、Ｃｙｐｒｏｔｅｘ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｔｄ．（Ｃｈｅｓｈｉｒｅ、ＵＫ）によって実施された）。化合物２４を、７８個の異なる標的に対するアゴニスト／アンタゴニスト／阻害／遮断効果に対する選択性について試験した（安全薬理パネル（ＳａｆｅｔｙＳｃａｎ Ｅ／ＩＣ５０ ＥＬＥＣＴ（Ｄｉｓｃｏｖｅｒ Ｘ／Ｅｕｒｏｆｉｎｓ））。７８個の標的のうち、化合物２４は、６μＭを超えるＩＣ50値で、ドーパミンＤ1－受容体、β1－及びβ2－アドレナリン受容体に対して弱い活性を示した。
【0224】
【表2-1】
【0225】
【表2-2】
【0226】
【表2-3】
【0227】
【表2-4】
【0228】
【表3】
【0229】
【表4】
【0230】
【表5】
【0231】
実施例１８－注射製剤
スルホブチルエーテル－β－シクロデキストリンナトリウム塩（３０ｇ、ＢｉｏＳｙｎｔｈ ＣａｒｂｏＳｙｎｔｈ）を滅菌水に溶解した（１００ｍｌまで）。１０ｍｌの得られた溶液に化合物２４（２．５４ｍｇ）を撹拌し、約１００℃に加熱することにより溶解した。溶液を滅菌ろ過し、滅菌２ｍｌ注射バイアルに無菌的に充填した。
１ｍｌ溶液は、０．２５４ｍｇの化合物２４を含んでいた。化合物の濃度は、８００μＭであった。
スルホブチルエーテル－β－シクロデキストリンナトリウム塩（３０ｇ、ＢｉｏＳｙｎｔｈ ＣａｒｂｏＳｙｎｔｈ）を滅菌水に溶解した（１００ｍｌまで）。１０ｍｌの得られた溶液に化合物２４（２．５４ｍｇ）を撹拌し、約１００℃に加熱することにより溶解した。溶液を滅菌ろ過し、滅菌２ｍｌ注射バイアルに無菌的に充填した。
１ｍｌ溶液は、０．２５４ｍｇの化合物２４を含んでいた。化合物の濃度は、８００μＭであった。
【0232】
溶液は、静脈内、筋肉内又は皮下投与に好適である。
【0233】
実施例１９－ゼラチンカプセル剤
化合物２４を含有する硬ゼラチンカプセル剤は、以下に記載するように調製することができる。
化合物２４ ２０ｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｇ
マンニトール ５０ｇ
微結晶セルロース５００ｇまでの適量
化合物２４を含有する硬ゼラチンカプセル剤は、以下に記載するように調製することができる。
化合物２４ ２０ｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｇ
マンニトール ５０ｇ
微結晶セルロース５００ｇまでの適量
【0234】
これらの成分をミキサー中で容量的に混合し、１０００個の硬ゼラチンカプセル剤サイズ０に充填する。各カプセル剤は、１５ｍｇの活性化合物２４を含む。カプセル剤を標準的なカプセル箱（箱当たり１００カプセル）に包装し、ラベルを付け、添付文書とともに包装する。
【図1】
【図2】
【国際調査報告】