特表 2024-522234 新規な併用療法及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-06-11

(54)【発明の名称】新規な併用療法及びその使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240604BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20240604BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240604BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 13/02 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 13/08 20060101ALI20240604BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20240604BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20240604BHJP

   A61K 51/10 20060101ALI20240604BHJP

   A61K 47/55 20170101ALI20240604BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 D

C07K16/28 ZNA

C12N15/13

C12N15/63 Z

A61K39/395 N

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K45/00

A61K39/395 U

A61P35/02

A61P11/00

A61P1/00

A61P13/12

A61P13/02

A61P17/00

A61P15/00

A61P13/08

A61P35/04

A61K38/17 100

A61K51/10 100

A61K39/395 C

A61K39/395 L

A61K39/395 T

A61K39/395 E

A61K47/55

A61P43/00 111

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023577758

(86)(22)【出願日】2022-06-17

(85)【翻訳文提出日】2024-02-15

(86)【国際出願番号】 EP2022066566

(87)【国際公開番号】W WO2022263632

(87)【国際公開日】2022-12-22

(31)【優先権主張番号】2108712.7

(32)【優先日】2021-06-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB

(31)【優先権主張番号】2115119.6

(32)【優先日】2021-10-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】503211529

【氏名又は名称】アリゲーター・バイオサイエンス・アーベー

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】カリン・エネル・スミス

(72)【発明者】

【氏名】ペーテル・エルマルク

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA11

4C076AA16

4C076BB11

4C076BB13

4C076CC09

4C076CC15

4C076CC16

4C076CC17

4C076CC18

4C076CC27

4C076CC29

4C076CC41

4C084AA02

4C084AA12

4C084AA19

4C084BA44

4C084DA39

4C084MA16

4C084MA66

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZA59

4C084ZA66

4C084ZA81

4C084ZA89

4C084ZB26

4C084ZB27

4C084ZC02

4C084ZC41

4C084ZC75

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA21

4C085BB31

4C085BB36

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC22

4C085CC23

4C085DD62

4C085EE03

4C085GG01

4C085GG02

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045DA76

4H045FA72

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、対象においてがんを治療するための併用療法、及びその使用のための方法に関する。併用療法は、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む。本発明はまた、本発明の併用療法を含む薬学的組成物、その使用、使用方法、及び本発明の併用療法を含むキットにも関する。がんは、固形腫瘍であり得る。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象におけるがんの治療又は予防に使用するための併用療法であって、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片と、（ｂ）ＰＤ－１阻害剤と、を含む、併用療法。

【請求項2】

前記がんが、固形腫瘍である、請求項１に記載の併用療法。

【請求項3】

前記がん及び／又は固形腫瘍が、前立腺がん；乳がん；結腸直腸がん；腎臓がん；膵臓がん；卵巣がん；肺がん；子宮頸がん；横紋筋肉腫；神経芽腫；骨がん；多発性骨髄腫；白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病［ＡＬＬ］及び急性骨髄性白血病［ＡＭＬ］）、皮膚がん（例えば、黒色腫）、膀胱がん及び膠芽腫、アデノーマ、芽細胞腫、がん腫、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、胚細胞腫瘍、リンパ腫、肉腫、ウィルムス腫瘍、肺腫瘍、結腸腫瘍、リンパ腫瘍、乳房腫瘍並びに黒色腫からなる群から選択される、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項4】

前記がん及び／又は固形腫瘍が、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）若しくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ））、頭部及び／若しくは頸部がん、胃がん、食道がん、腎臓がん、尿路上皮がん、黒色腫、中皮腫、乳がん、子宮頸がん、前立腺がん、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）がん、ＤＮＡミスマッチ修復（ｄＭＭＲ）に関連するがん、並びに／又は高腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）がんであり、好ましくは、前記がん及び／又は固形腫瘍が、転移性である、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項5】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
ａ）ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、
ｂ）ＣＤ１３７アゴニストであり、かつ／又は
ｃ）ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」の結合を阻害することができ、
任意選択的に、前記抗体、又は抗原結合断片が、ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、ＣＤ１３７アゴニストであり、かつヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」の結合を阻害することができる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項6】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
ａ）ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、
ｂ）ＣＤ１３７アゴニストであり、かつ／又は
ｃ）ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができ、
任意選択的に、前記抗体、又は抗原結合断片が、ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、ＣＤ１３７アゴニストであり、かつヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項7】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片が、以下の特性：
ａ）架橋依存性機構を介してＣＤ１３７を刺激し、Ｔ細胞及び他の免疫細胞を活性化する能力、並びに／又は
ｂ）カニクイザルＣＤ１３７抗体との交差反応性、のうちの１つ以上を示す、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項8】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、Ｆｃ受容体に結合することができ、任意選択的に、前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、ＣＤ１３７及びＦｃ受容体に同時に結合することができる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項9】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合してＴ細胞を活性化する抗体の能力が、ＣＤ１３７及びＦｃ受容体の両方への結合に依存する、請求項８に記載の併用療法。

【請求項10】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、ＣＤ１３７を発現する細胞への結合時に、
ａ）抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、
ｂ）抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、及び／又は
ｃ）補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導することが実質的にできない、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項11】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、腫瘍免疫を誘導することができる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項12】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、参照抗体１６３０／１６３１が結合することができるＣＤ１３７上のエピトープと少なくとも部分的に重複するＣＤ１３７の細胞外ドメイン上のエピトープに結合することができる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項13】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片が、参照抗体２６７４／２６７５が結合することができるＣＤ１３７上のエピトープと少なくとも部分的に重複するＣＤ１３７の細胞外ドメイン上のエピトープに結合することができる、請求項１２に記載の併用療法。

【請求項14】

前記エピトープが、ヒトＣＤ１３７のアミノ酸６６～１０７に、又はその中に位置する、請求項１２又は１３に記載の併用療法。

【請求項15】

ＣＤ１３７が細胞の表面上に局在化する、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項16】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片が、インタクトな抗体、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３若しくはＩｇＧ４抗体を含むか、又はそれらからなる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項17】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、ＩｇＧ４抗体を含むか、又はそれからなる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項18】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、Ｆｖ断片（例えば、単鎖Ｆｖ及びジスルフィド結合Ｆｖ）、Ｆａｂ様断片（例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片及びＦ（ａｂ）_２断片）、並びにドメイン抗体（例えば、単一のＶ_Ｈ可変ドメイン又はＶ_Ｌ可変ドメイン）からなる群から選択される抗原結合断片を含むか、又はそれらからなる、請求項１～１５のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項19】

前記抗原結合断片が、ｓｃＦｖを含むか、又はそれからなる、請求項１８に記載の併用療法。

【請求項20】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、組み替えポリペプチドである、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項21】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、モノクローナルである、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項22】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、ヒト又はヒト化されている、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項23】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
ａ）コンセンサス配列Ｇ、Ｆ、Ｔ／Ｎ、Ｆ、Ｇ、Ｙ、Ｓ、Ｙを有する重鎖ＣＤＲ１配列と、
ｂ）コンセンサス配列Ｉ、Ｇ、Ｓ、Ｇ／Ｔ、Ｓ、Ｓ、Ｙ／Ｈ、Ｔを有する重鎖ＣＤＲ２配列と、
ｃ）配列ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹを有する重鎖ＣＤＲ３配列と、を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項24】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
ａ）コンセンサス配列Ｑ、Ｓ、Ｉ、Ｓ／Ｇ、Ｓ、Ｙ／Ｔを有する軽鎖ＣＤＲ１配列と、
ｂ）コンセンサス配列Ａ／Ｇ、Ａ、Ｓを有する軽鎖ＣＤＲ２配列と、
ｃ）配列ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴを有する軽鎖ＣＤＲ３配列と、を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項25】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、以下のＣＤＲ：
ａ）ＧＦＴＦＧＹＳＹ［配列番号３］、又は配列番号３と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｂ）ＩＧＳＧＳＳＹＴ［配列番号４］、又は配列番号４と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｃ）ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹ［配列番号５］、又は配列番号５と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、を含む重鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項26】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号３、４及び５のＣＤＲを含む重鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項27】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、請求項２６に記載の併用療法。

【請求項28】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、以下のＣＤＲ：
ａ）ＱＳＩＳＳＹ［配列番号６］、又は配列番号６と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｂ）ＡＡＳ［配列番号７］、又は配列番号７と比較して最大２個のアミノ酸変異、例えば、１若しくは２個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｃ）ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴ［配列番号８］、又は配列番号８と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、を含む軽鎖可変領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項29】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号６、７及び８のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む、請求項２８に記載の併用療法。

【請求項30】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号２のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２９に記載の併用療法。

【請求項31】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号３、４、５、６、７及び８のＣＤＲを含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項32】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる重鎖可変領域と、配列番号２のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる軽鎖可変領域と、を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項33】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、以下のＣＤＲ：
ａ）ＧＦＮＦＧＹＳＹ［配列番号２１］、又は配列番号２１と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｂ）ＩＧＳＴＳＳＨＴ［配列番号２２］、又は配列番号２２と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｃ）ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹ［配列番号２３］、又は配列番号２３と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、を含む重鎖可変領域を含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項34】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号２１、２２及び２３のＣＤＲを含む重鎖可変領域を含む、請求項３３に記載の併用療法。

【請求項35】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号１９のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、請求項３４に記載の併用療法。

【請求項36】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、以下のＣＤＲ：
ａ）ＱＳＩＧＳＴ［配列番号２４］、又は配列番号２４と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｂ）ＧＡＳ［配列番号２５］、又は配列番号２５と比較して最大２個のアミノ酸変異、例えば、１若しくは２個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、
ｃ）ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴ［配列番号２６］、又は配列番号２６と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲと、を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１～２４又は３３～３５のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項37】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号２４、２５及び２６のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む、請求項３６に記載の併用療法。

【請求項38】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号２０のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項３７に記載の併用療法。

【請求項39】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号２１、２２、２３、２４、２５及び２６のＣＤＲを含む、請求項３３～３８のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項40】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、配列番号１９のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる重鎖可変領域と、配列番号２０のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる軽鎖可変領域と、を含む、請求項３３～３９のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項41】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、重鎖定常領域、又はその一部を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項42】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記重鎖定常領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４からなる群から選択される免疫グロブリンサブタイプのものである、請求項４１に記載の併用療法。

【請求項43】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記重鎖定常領域が、免疫グロブリンサブタイプＩｇＧ４のものである、請求項４２に記載の併用療法。

【請求項44】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記重鎖定常領域が、配列番号１２、１３、１４及び１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、又はそれらからなる、請求項４３に記載の併用療法。

【請求項45】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、軽鎖定常領域、又はその一部を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項46】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記軽鎖定常領域が、カッパ又はラムダ軽鎖のものである、請求項４５に記載の併用療法。

【請求項47】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記軽鎖定常領域が、カッパ軽鎖のものである、請求項４６に記載の併用療法。

【請求項48】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記軽鎖定常領域が、配列番号１６のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる、請求項４７に記載の併用療法。

【請求項49】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、Ｆｃ領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項50】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記Ｆｃ領域が、天然に存在する、請求項４９に記載の併用療法。

【請求項51】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記Ｆｃ領域が、天然に存在しない、請求項４９に記載の併用療法。

【請求項52】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片の前記Ｆｃ領域が、前記抗体又は抗原結合断片の半減期を短くするための変異を含む、請求項５１に記載の併用療法。

【請求項53】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号１３の定常領域と一緒になった配列番号１の可変領域、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１及び／若しくは１３に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、重鎖と、
（ｂ）配列番号１６の定常領域と一緒になった配列番号２の可変領域、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号２及び／若しくは１６に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、軽鎖と、を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項54】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号１３の定常領域と一緒になった配列番号１９の可変領域、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１９若しくは１３に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、重鎖と、
（ｂ）配列番号１６の定常領域と一緒になった配列番号２０の可変領域、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号２０若しくは１６に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、軽鎖と、を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項55】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を有する２つの重鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列を有する２つの軽鎖、又はそれらと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１７及び／若しくは１８に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又はそれらからなる、インタクトなＩｇＧ４分子である、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項56】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体が、配列番号２９のアミノ酸配列を有する２つの重鎖、及び配列番号３０のアミノ酸配列を有する２つの軽鎖、又はそれらと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号２９及び／若しくは３０に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又はそれらからなる、インタクトなＩｇＧ４分子である、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項57】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、細胞傷害性部分を更に含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項58】

前記細胞傷害性部分が、放射性同位体を含むか、又はそれからなる、請求項５７に記載の併用療法。

【請求項59】

前記細胞傷害性部分が、細胞傷害性薬物を含むか、又はそれからなる、請求項５７に記載の併用療法。

【請求項60】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、検出可能な部分を更に含む、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項61】

前記検出可能な部分が、放射性同位体を含むか、又はそれからなる、請求項６０に記載の併用療法。

【請求項62】

前記細胞傷害性部分及び／又は検出可能な部分が、連結部分を介してＣＤ１３７に間接的に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片に接続される、請求項５７～６１のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項63】

前記連結部分が、キレート剤である、請求項６２に記載の併用療法。

【請求項64】

前記キレート剤が、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン－１，４，７，１０，四酢酸（ＤＯＴＡ）の誘導体、デフェロキサミン（ＤＦＯ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）の誘導体、Ｓ－２－（４－イソチオシアナトベンジル）－１，４，７－トリアザシクロノナン－１，４，７－三酢酸（ＮＯＴＡ）の誘導体、及び１，４，８，１１－テトラアザシクロドデカン－１，４，８，１１－四酢酸（ＴＥＴＡ）の誘導体からなる群から選択される、請求項６３に記載の併用療法。

【請求項65】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片が、細胞傷害性部分又は検出可能な部分を含まない、請求項１～５６のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項66】

前記ＰＤ－１阻害剤が、抗ＰＤ－１抗体、若しくはＰＤ－１機能を阻害することができるその抗原結合断片を含むか、又はそれらからなる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項67】

前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、セミプリマブ、ＡＭＰ－２２４、ＰＤＲ－００１、ＭＥＤＩ－０６８０、ＪＴＸ－４０１４（ピミバリマブ）、スパルタリズマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、ドスタルリマブ、及びＩＮＣＭＧＡ０００１２（レチファンリマブ）からなる群から選択され、好ましくは、前記抗ＰＤ－１抗体が、ペムブロリズマブ又はニボルマブである、請求項６６に記載の併用療法。

【請求項68】

前記ＰＤ－１阻害剤が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、若しくはＰＤ－１機能を阻害することができるその抗原結合断片を含むか、又はそれらからなる、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項69】

前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（商標）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ－４７３６）、アベルマブ、ＭＤＸ－１１０５、ＫＮ０３５（エンバフォリマブ）及びＣＫ－３０１（コシベリマブ）からなる群から選択され、好ましくは、前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（商標）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）である、請求項６８に記載の併用療法。

【請求項70】

前記ＰＤ－１阻害剤が、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断し、任意選択的に、前記ＰＤ－１阻害剤が、ＰＤ－Ｌ１がＰＤ－１に結合する能力を阻害する様式でＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合する、先行請求項のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項71】

前記ＰＤ－１阻害剤が、好ましくは、Ｔ細胞受容体シグナル伝達分子の下流のシグナル伝達分子を脱リン酸化するチロシンホスファターゼＳＨＰ－２によって媒介される阻害性シグナル伝達を遮断することによって、ＰＤ－１を発現するＴ細胞を再活性化する、併用療法。

【請求項72】

固形腫瘍を治療する方法において使用するための、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分であって、
前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分が、更なる免疫療法剤と組み合わせて使用するためのものであり、前記更なる免疫療法剤が、ＰＤ－１阻害剤である、抗体、又はその抗原結合部分。

【請求項73】

前記抗体、又はその抗原結合部分が、請求項５～６５のいずれか一項に定義される通りである、請求項７２に記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【請求項74】

前記ＰＤ－１阻害剤が、請求項６６～７１のいずれか一項に定義される通りである、請求項７２又は７３に記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【請求項75】

固形腫瘍を治療するための医薬の調製における、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分の使用であって、
前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分が、更なる免疫療法剤と組み合わせて使用するためのものであり、前記更なる免疫療法剤が、ＰＤ－１阻害剤である、使用。

【請求項76】

前記抗体、又はその抗原結合部分が、請求項５～６５のいずれか一項に定義される通りである、請求項７５に記載の使用。

【請求項77】

ＰＤ－１阻害剤が、請求項６６～７１のいずれか一項に定義される通りである、請求項７５又は７６に記載の使用。

【請求項78】

（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、前記更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む、薬学的組成物。

【請求項79】

前記抗体、又はその抗原結合部分が、請求項５～６５のいずれか一項に定義される通りである、請求項７８に記載の薬学的組成物。

【請求項80】

前記ＰＤ－１阻害剤が、請求項６６～７１のいずれか一項に定義される通りである、請求項７８又は７９に記載の薬学的組成物。

【請求項81】

医薬に使用するための、請求項７８～８０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。

【請求項82】

がんの治療に使用するための、請求項７８～８１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。

【請求項83】

（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、前記更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む、固形腫瘍を治療するためのキット。

【請求項84】

前記抗体、又はその抗原結合部分が、請求項５～６５のいずれか一項に定義される通りである、請求項８３に記載のキット。

【請求項85】

前記ＰＤ－１阻害剤が、請求項６６～７１のいずれか一項に定義される通りである、請求項８３又は８４に記載のキット。

【請求項86】

対象において固形腫瘍を治療するための方法であって、前記方法が、（ａ）前記対象に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分を投与すること、及び（ｂ）前記対象に、治療有効量の更なる免疫療法剤を投与することであって、前記更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、投与することといった、治療有効量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項87】

前記ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分が、請求項５～６５のいずれか一項に定義される通りである、請求項８６に記載の方法。

【請求項88】

前記ＰＤ－１阻害剤が、請求項６６～７１のいずれか一項に定義される通りである、請求項８６又は８７に記載の方法。

【請求項89】

ステップ（ａ）及び（ｂ）が、互いに同時又は２４時間以内に実行される、請求項８６～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項90】

ステップ（ａ）が、腫瘍部位に対する前記抗体の全身投与を含む、請求項８６～８９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項91】

ステップ（ａ）で投与される抗体の量の少なくとも３０％が、投与後４時間で前記腫瘍部位に保持され、好ましくは、前記量の少なくとも４０％が、投与後４時間で前記腫瘍部位に保持される、請求項８６～９０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項92】

ステップ（ｂ）の前記更なる免疫療法剤が、少なくとも１つの薬学的に許容される希釈剤又は担体との全身投与に好適な組成物として製剤化される、請求項８６～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項93】

ステップ（ａ）が、複数の別個の機会に実施され、ステップ（ｂ）が、前記更なる免疫療法剤への前記対象の曝露が、前記方法の持続時間にわたって連続するように実施される、請求項８６～９２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項94】

前記対象が、ヒトである、請求項８６～９３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項95】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含む、キット。

【請求項96】

前記第１及び／又は第２の単離された核酸分子が、ｃＤＮＡ分子である、請求項９５に記載のキット。

【請求項97】

前記第１及び／又は第２の単離された核酸分子が、抗体重鎖若しくはその可変領域をコードし、かつ／又は抗体軽鎖若しくはその可変領域をコードする、請求項９５又は９６に記載のキット。

【請求項98】

前記第１の単離された核酸分子が、配列番号９及び／又は配列番号１０のヌクレオチド配列を含むか、又はそれらからなる、請求項９５～９７のいずれか一項に記載のキット。

【請求項99】

前記第１の単離された核酸分子が、配列番号２７及び／又は配列番号２８のヌクレオチド配列を含むか、又はそれらからなる、請求項９５～９７のいずれか一項に記載のキット。

【請求項100】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含むベクター（例えば発現ベクター）を含み、
任意選択的に、前記第１の単離された核酸が、請求項９５～９９のいずれか一項に定義される通りである、キット。

【請求項101】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含む宿主細胞（例えば、哺乳動物細胞、例えば、ヒト細胞、又はチャイニーズハムスター卵巣細胞、例えば、ＣＨＯＫ１ＳＶ細胞）を含み、
任意選択的に、前記第１の単離された核酸が、請求項９５～９９のいずれか一項に定義される通りである、キット。

【請求項102】

明細書を参照して特許請求の範囲に定義される通りである、併用療法、方法、使用、又はキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、対象においてがんを治療するための併用療法、及びその使用のための方法に関する。併用療法は、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む。本発明はまた、本発明の併用療法を含む薬学的組成物、その使用、使用方法、及び本発明の併用療法を含むキットにも関する。がんは、固形腫瘍であり得る。

【背景技術】

【0002】

がんは、先進国において早死の主な原因である。がんにおける免疫療法の目的は、腫瘍、特に固形腫瘍に対して、身体による効果的な免疫応答を仕掛けることである。このことは、例えば、腫瘍抗原に対する寛容性を破壊すること、抗腫瘍免疫応答を増強すること、及び腫瘍部位における局所的なサイトカイン応答を刺激することによって達成され得る。長期にわたる抗腫瘍免疫応答の主要なエフェクター細胞は、活性化された腫瘍特異的エフェクターＴ細胞である。活性化エフェクターＴ細胞の強力な拡張は、免疫応答を腫瘍に対して再指向することができる。これに関連して、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、抗腫瘍免疫を阻害する役割を果たす。したがって、Ｔｒｅｇを枯渇させるか、阻害するか、元に戻すか、又は不活性化することにより、抗腫瘍効果を提供し、腫瘍微小環境における免疫抑制を元に戻すことができる。更に、例えば、樹状細胞によるエフェクターＴ細胞の不完全な活性化は、Ｔ細胞アネルギーを引き起こす可能性があり、これにより非効率的な抗腫瘍応答が生じるのに対し、樹状細胞による十分な誘導は、活性化エフェクターＴ細胞の強力な拡張を生じさせ、免疫応答を腫瘍に対して再指向することができる。加えて、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、下方制御されたヒト白血球抗原（ＨＬＡ）を発現して腫瘍細胞を攻撃することによって、また、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することによって、腫瘍免疫学的に重要な役割を果たす。したがって、ＮＫ細胞を刺激することにより、腫瘍の成長をも低下させ得る。

【0003】

ＣＤ１３７（４－１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９）はＴＮＦ受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーのメンバーであり、活性化されたＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ、ＤＣ、単球、肥満細胞並びに好酸球上で発現する。ＣＤ１３７の活性化は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞の活性化及び生存において重要な役割を果たす（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｐｕｌｌｅ ｅｔ ａｌ．，２００６）。それは、エフェクター機能を開始させるのではなく、持続及び増強させ、Ｔｈ１サイトカイン産生を優先的に支持する（Ｓｈｕｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９７）。ＣＤ４^＋Ｔ細胞において、ＣＤ１３７刺激は最初に活性化、後に活性化誘導性細胞死をもたらし、なぜＣＤ１３７アゴニスト抗体が腫瘍免疫だけではなく自己免疫においても治療効果を示したかを説明する（Ｚｈａｎｇ，ＪＣＩ，２００７，Ｓｕｎ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２００３）。ＣＤ１３７はＴｒｅｇ機能も抑制する（Ｓｏ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖ，２００８）。ＣＤ１３７の活性化は、受容体のオリゴマー化に依存する（Ｒａｂｕ ｅｔ ａｌ．，２００５；Ｗｙｚｇｏｌ ｅｔ ａｌ．，２００９）。

【0004】

ＣＤ１３７アゴニスト抗体は、腫瘍環境において内皮細胞を活性化し、ＩＣＡＭ－１及びＶＣＡＭ－１の上方制御及びＴ細胞動員の改善をもたらすことが示されている（Ｐａｌａｚｏｎ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０１１）。

【0005】

ＣＤ１３７は、マウス又はヒトにおいて、それぞれサイトカイン又はＣＤ１６によって活性化されたＮＫ細胞で上方制御される（例えば、Ｍｅｌｅｒｏ，ＣＣＲ １９（５）１０４４－５３，２０１３及びそこに引用される参考文献を参照されたい）。ＣＤ１３７は、マウスだけではなくヒトにおいてもＮＫ細胞を活性化し、ＡＤＣＣを増強することが示されている（Ｋｏｈｒｔ ｅｔ ａｌ．，２０１４）が、マウスにおいてＮＫ細胞活性化をもたらし、ヒトにおいて阻害をもたらすという、マウス及びヒトにおいてＮＫ細胞に対する反対の作用を示唆する報告が存在する（Ｂａｅｓｓｌｅｒ，Ｂｌｏｏｄ，２０１０）。

【0006】

いくつかの研究は、アゴニストＣＤ１３７抗体を用いた処置による腫瘍免疫の誘導を実証している（Ｄｕｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．，２０１０；Ｇａｕｔｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４；Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００１；ＭｃＭｉｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｓａｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４；Ｔａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｖｉｎａｙ ａｎｄ Ｋｗｏｎ，２０１２；Ｗｉｌｃｏｘ ｅｔ ａｌ．，２００２）。加えて、それは、前臨床モデルにおいていくつかの免疫調整剤と相互作用を発揮する（Ｃｕｒｒａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１１、Ｇｒａｙ ｅｔ ａｌ．，２００８、Ｇｕｏ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｋｗｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００４、Ｍｏｒａｌｅｓ－Ｋａｓｔｒｅｓａｎａ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｐａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２、Ｓｔ Ｒｏｓｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６、Ｗｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１０、Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４ａ、Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４ｂ）。

【0007】

ウレルマブは、限られた臨床的有効性が実証されている強力な４－１ＢＢアゴニストである（Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７、Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．２０１８）。しかしながら、ウレルマブの開発は、０．３ｍｇ／ｋｇ以上の用量での肝毒性によって妨げられた（１ｍｇ／ｋｇ以上の用量での２例の致命的事象を含む）（Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．２０１７）。したがって、最大忍容用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ（又は８ｍｇの均一用量）に設定された。その後の研究では、単剤療法としてのウレルマブについて明確な客観的奏効は観察されなかった（Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７）。肝毒性の背後にある機序は完全には理解されていない。

【0008】

一方、ウトミルマブは、ウレルマブよりも弱いアゴニストとみなされ、限られた臨床的有効性も示されている（Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．２０１８、Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．２０１８、Ｔｏｌｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７）。ウトミルマブは、用量制限毒性（ＤＬＴ）がない状態で、最大１０ｍｇ／ｋｇの許容可能な臨床安全性プロファイルを示した。

【0009】

ウトミルマブは、ウレルマブとは異なり、そのアゴニスト効果を発揮するためにＦｃγＲ架橋に依存する。血液中のＦｃγＲは、内因性循環ヒトＩｇＧによって飽和されるため、およそ１０ｇ／Ｌで、ウトミルマブなどのＦｃγＲ架橋依存性抗体は、ＦｃγＲに結合するＩｇＧと競合する必要がある（Ｊｏｌｌｉｆｆ １９８２）。１０ｇ／Ｌの内因性ＩｇＧは、最高臨床用量のウトミルマブ（１０ｍｇ／ｋｇで１５５μｇ／ｍＬ）で到達した最大血清濃度（Ｃ_ｍａｘ）より６０倍大きい（Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．２０１８）。肝臓は、高度に血管新生された臓器であり、肝臓における内因性ＩｇＧ濃度は、循環レベルと同様であることが示されている（Ｅｉｇｅｎｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．２０１７）。したがって、ＦｃγＲ架橋依存性４－１ＢＢ活性化も、内因性ＩｇＧとの競合に起因して、肝臓において低下することが予想され得る。肝臓におけるウトミルマブのＦｃγＲ架橋についてのこの可能性の低下は、ウレルマブで検出された肝毒性がウトミルマブでは存在しないことを説明し得る。ＡＬＧ．ＡＰＶ－５２７による４－１ＢＢ活性化は、５Ｔ４架橋依存性であり、５Ｔ４が肝臓で発現されないため、ＡＰＶ－５２７による肝毒性は予想されない。

【0010】

９種類の更なる単一特異性４－１ＢＢ抗体：０．０３～１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、現在Ｉ／ＩＩ相にある（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．２０１７）ＡＤＧ１０６、並びにＣＴＸ－４７１、ＡＧＥＮ２３７３、ＬＶＧＮ６０５１ ＡＴＯＲ－１０１７、ＥＵ１０１（ＩＮＤ／ＣＴＡ）、ＰＥ０１１６、ＳＴＡ５５１及びＨＯＴ１０３０は、２０１８～２０２１年の間に臨床開発に入っており、現在、第Ｉ相試験において、安全性について評価されている。

【0011】

ＣＤ１３７抗体のアゴニスト効果は、Ｆｃ領域のアイソタイプによって影響を受ける。診療所で検査される抗体は、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４のいずれかである。ほとんどのＴＮＦＲファミリーメンバーと同様に、ＣＤ１３７は活性化のために架橋に依存する（Ｗｉｌｓｏｎ ２０１１，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ）。ＡＰＣの膜上に発現されるＣＤ１３７Ｌは、受容体の著しい複数の架橋を誘導し得る。抗体は、それ自体では２つのＣＤ１３７受容体と架橋できるのみであり、強いシグナルを誘導するためには、他の細胞上で発現されるＦｃγＲを介した更なる架橋（トランス）が強いＣＤ１３７媒介シグナルの誘導に必要であり得る。これに対する例外は、未知の機構によって架橋非依存性シグナル伝達を誘導するＩｇＧ２抗体であり得る（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ，２０１５ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ）。Ｔ細胞はＦｃγＲを発現せず、インビボでのＦｃγＲ媒介性架橋は、単球、マクロファージ、ＤＣ、並びに潜在的にＢ細胞及び他の細胞型によって媒介されると考えられている。

【0012】

考慮すべき別の要因は、ＦｃγＲ受容体の関与が、抗体でコーティングした細胞で、ＡＤＣＣ、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）も引き起こす可能性があるということである（簡略化のために、以下のＡＤＣＣはＡＤＣＰ及びＣＤＣを含むものとする）。典型的には、ヒトＩｇＧ１は、標的の性質、細胞型及び受容体密度に応じて、ＮＫ／マクロファージ依存性ＡＤＣＣの強力な誘導物質である。ＩｇＧ４抗体もまたＡＤＣＣを誘導し得るが、ＩｇＧ１よりも低い程度である（Ｗａｎｇ ２０１５，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍ；Ｖｉｄａｒｓｏｎ ２０１４ Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍ）。

【0013】

したがって、アイソタイプが異なるＣＤ１３７アゴニスト抗体の効果は、１）より強い免疫活性化をもたらす架橋の誘導と、２）エフェクターＴ細胞（主にＣＤ８Ｔ細胞）及びＴｒｅｇの両方の死滅をもたらし得るＡＤＣＣの誘導とのバランスによって影響を受け得る。１）及び２）の正味の効果は、ＣＤ１３７発現細胞の分布、標的細胞がＦｃγＲ発現免疫細胞と結合する可能性、受容体密度及び親和性、並びにＡＤＣＣに対するＴｅｆｆ対Ｔｒｅｇの感受性に依存する可能性が高い。ＣＤ１３７の発現は、黒色腫腫瘍においてＣＤ８及びＴｒｅｇの両方で高い（Ｑｕｅｚａｄａ，ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ＳＩＴＣ ２０１５）。ＩｇＧ４型は、マクロファージ及び単球によるＦｃγＲＩ媒介性架橋を可能にするが、それでもなおエフェクターＣＤ８Ｔ細胞のＮＫ媒介性ＡＤＣＣを最小限に抑える。

【0014】

しかしながら、上記で概説したように、マウスとヒトのＦｃＲ間の発現及び親和性の違いのために、マウスモデルにおいて異なるヒトＦｃの比較を説明することは困難である。更に、ＣＤ１３７に対するＣＤ１３７Ｌの結合を遮断する抗体のインビボでの機能的帰結が現在議論されているが、ＣＤ１３７Ｌを遮断し、したがって、Ｃ１３７Ｌ及びＣＤ１３７アゴニスト抗体を介した同時活性化を可能にしないＣＤ１３７アゴニストは、誇張された活性化及び全身毒性を誘導するリスクが低いと推測され得る。

【0015】

いくつかの研究は、アゴニストＣＤ１３７ ｍＡｂを用いた処置による腫瘍免疫の誘導を実証している（Ｄｕｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．，２０１０；Ｇａｕｔｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４；Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００１；ＭｃＭｉｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｓａｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４；Ｔａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｖｉｎａｙ ａｎｄ Ｋｗｏｎ，２０１２；Ｗｉｌｃｏｘ ｅｔ ａｌ．，２００２）。２つの異なる抗体、Ｌｏｂ１２．３及び３Ｈ３が、マウスのインビボ試験に一般的に使用される（Ｓｈｕｆｏｒｄ １９９７ Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ）。

【0016】

マウスモデルに見られる毒性は、時間依存的ではあるが用量依存的ではない様式で反復投与した後に検出された（Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０ Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃ，Ｄｕｂｒｏｔ ２０１０ Ｃａｎ Ｉｍｍ，Ｎｉｕ ２００７ ＪＩ）。毒性は、皮膚毒性及び肝毒性：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ／アラニンアミノトランスフェラーゼ比（ＡＳＡＴ／ＡＬＡＴ）及びサイトカイン放出を含む。これは、毒性が、免疫細胞集団（おそらくＴ細胞）のＣＤ１３７媒介性の事前活性化を必要とするか、又は増強された架橋をもたらし得るＣＤ１３７抗体の凝集体を潜在的に形成する抗薬物抗体（ＡＤＡ）応答によって引き起こされる二次効果に依存するかを示唆しているマウスに見られる毒性は可逆的であり、ＴＮＦα／ＣＤ８細胞依存性に依存すると考えられる（Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０ Ｓｅｍ Ｏｎｃ）。サルの毒性試験では、４週間にわたって週１回、最大１００ｍｇ／ｋｇの単回投与及び反復投与の両方が、皮膚毒性又は肝毒性が検出されることなく許容されることが示された（Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０，Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃ）。

【0017】

ＴＮＦ受容体ファミリーメンバーを介した長期かつ継続的な活性化は、免疫枯渇につながる可能性がある。したがって、受容体を発現している細胞の休止期間を可能にする様式でそのような抗体を投与することが有利であるかもしれない。特定の投薬プロトコルにおいて休止期間を延長するための１つのアプローチは、例えば、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）との結合を減少させることによって、抗体の半減期を短縮することである。これは、投与経路にもよるが、治療に付随する毒性も軽減することができる。

【0018】

プログラム死１（ＰＤ－１）受容体は、腫瘍内の細胞表面上に発現される、そのリガンドＰＤ－Ｌ１によって係合されるときに抗腫瘍Ｔ細胞エフェクター機能の負の制御因子である（Ｒｉｂａｓ ａｎｄ Ｗｏｌｃｈｏｋ ２０１８）。ＰＤ－１は、免疫チェックポイントであり、その阻害機能は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達分子の下流のシグナル伝達分子を脱リン酸化するチロシンホスファターゼＳＨＰ－２によって媒介される。ＰＤ－１は、主に炎症促進性サイトカインへの曝露時に多くの体細胞によって広く発現されるプログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１、ＣＤ２７４又はＢ７－Ｈ１としても既知である）、及び抗原提示細胞においてより限定的な発現を有するプログラム死リガンド２（ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ２７３又はＢ７－ＤＣとしても既知である）といった２つのリガンドを有する。腫瘍微小環境における炎症誘導性ＰＤ－Ｌ１発現は、ＰＤ－１媒介性Ｔ細胞疲弊を引き起こし、抗腫瘍細胞傷害性Ｔ細胞応答を阻害する。ＰＤ－Ｌ１は、腫瘍細胞及び骨髄細胞の両方で発現される。ＰＤ－１抵抗性は、一次抵抗性又は二次（獲得）抵抗性に広く細分され得る。（Ｋｌｕｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０２０）。正しい種類の併用治療を選択するためには、ＰＤ－１抵抗性の性質を理解することが不可欠である（Ｙｕａｎ ｅｔ ａｌ．２０２１）。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0019】

【非特許文献1】Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｐｕｌｌｅ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献2】Ｓｈｕｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９７

【非特許文献3】Ｚｈａｎｇ，ＪＣＩ，２００７，Ｓｕｎ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２００３

【非特許文献4】Ｓｏ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖ，２００８

【非特許文献5】Ｒａｂｕ ｅｔ ａｌ．，２００５；Ｗｙｚｇｏｌ ｅｔ ａｌ．，２００９

【非特許文献6】Ｐａｌａｚｏｎ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０１１

【非特許文献7】Ｍｅｌｅｒｏ，ＣＣＲ １９（５）１０４４－５３，２０１３

【非特許文献8】Ｋｏｈｒｔ ｅｔ ａｌ．，２０１４

【非特許文献9】Ｂａｅｓｓｌｅｒ，Ｂｌｏｏｄ，２０１０

【非特許文献10】Ｄｕｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．，２０１０

【非特許文献11】Ｇａｕｔｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４

【非特許文献12】Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００１

【非特許文献13】ＭｃＭｉｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献14】Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７

【非特許文献15】Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献16】Ｓａｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４

【非特許文献17】Ｔａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献18】Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献19】Ｖｉｎａｙ ａｎｄ Ｋｗｏｎ，２０１２

【非特許文献20】Ｗｉｌｃｏｘ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献21】Ｃｕｒｒａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１１

【非特許文献22】Ｇｒａｙ ｅｔ ａｌ．，２００８

【非特許文献23】Ｇｕｏ ｅｔ ａｌ．，２０１３

【非特許文献24】Ｋｗｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１３

【非特許文献25】Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００４

【非特許文献26】Ｍｏｒａｌｅｓ－Ｋａｓｔｒｅｓａｎａ ｅｔ ａｌ．，２０１３

【非特許文献27】Ｐａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献28】Ｓｔ Ｒｏｓｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３

【非特許文献29】Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献30】Ｗｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３

【非特許文献31】Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１０

【非特許文献32】Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４ａ

【非特許文献33】Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４ｂ

【非特許文献34】Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献35】Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．２０１８

【非特許文献36】Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献37】Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献38】Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献39】Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．２０１８

【非特許文献40】Ｓｅｇａｌ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献41】Ｃｈｅｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献42】Ｅｉｇｅｎｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献43】Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．２０１７

【非特許文献44】Ｗｉｌｓｏｎ ２０１１，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ

【非特許文献45】Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ，２０１５ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ

【非特許文献46】Ｗａｎｇ ２０１５，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍ

【非特許文献47】Ｖｉｄａｒｓｏｎ ２０１４ Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍ

【非特許文献48】Ｑｕｅｚａｄａ，ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ＳＩＴＣ ２０１５

【非特許文献49】Ｄｕｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．，２０１０

【非特許文献50】Ｇａｕｔｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４

【非特許文献51】Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００１

【非特許文献52】ＭｃＭｉｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献53】Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７

【非特許文献54】Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献55】Ｓａｌｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４

【非特許文献56】Ｔａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献57】Ｕｎｏ ｅｔ ａｌ．，２００６

【非特許文献58】Ｖｉｎａｙ ａｎｄ Ｋｗｏｎ，２０１２

【非特許文献59】Ｗｉｌｃｏｘ ｅｔ ａｌ．，２００２

【非特許文献60】Ｓｈｕｆｏｒｄ １９９７ Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ

【非特許文献61】Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０

【非特許文献62】Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃ，Ｄｕｂｒｏｔ ２０１０

【非特許文献63】Ｃａｎ Ｉｍｍ，Ｎｉｕ ２００７ ＪＩ

【非特許文献64】Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０ Ｓｅｍ Ｏｎｃ

【非特許文献65】Ａｓｃｉｅｒｔｏ ２０１０，Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃ

【非特許文献66】ｉｂａｓ ａｎｄ Ｗｏｌｃｈｏｋ ２０１８

【非特許文献67】Ｋｌｕｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０２０

【非特許文献68】Ｙｕａｎ ｅｔ ａｌ．２０２１

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0020】

したがって、改善されたがん療法、特に、固形腫瘍の治療及びその併用療法に使用するのに好適な抗ＣＤ１３７抗体に対する必要性が依然として存在する。

【課題を解決するための手段】

【0021】

本発明者らは、驚くべきことに、抗ＣＤ１３７抗体又はその抗原結合断片とＰＤ－１阻害剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、又はそれらの抗原結合断片）を含む併用療法が、がんの治療において驚くほど有効であることを見出した。
したがって、本発明の第１の態様は、対象におけるがんの治療又は予防に使用するための併用療法であって、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む併用療法を提供する。

【0022】

本発明の第２の態様は、がんを治療する方法で使用するための、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分であって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分が、ＰＤ－１阻害剤と組み合わせて使用するためのものである、抗体、又はその抗原結合部分を提供する。好ましくは、がんは、固形腫瘍である。

【0023】

関連する本発明の第３の態様は、固形腫瘍を治療するための医薬の調製における、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分の使用であって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分が、ＰＤ－１阻害剤と組み合わせて使用するためのものである、使用を提供する。

【0024】

本発明の第４の態様は、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む、薬学的組成物を提供する。

【0025】

本発明の第５の態様は、固形腫瘍を治療するためのキットであって、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片と、（ｂ）ＰＤ－１阻害剤と、を含む、キットを提供する。

【0026】

本発明の第６の態様は、対象において、がん、例えば、固形腫瘍を治療又は予防するための方法であって、本方法が、（ａ）対象に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分を投与すること、及び（ｂ）対象に、治療有効量のＰＤ－１阻害剤を投与することといった、治療有効量を対象に投与することを含む、方法。いくつかの実施形態では、本方法は、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）ＰＤ－１阻害剤とを同時に投与することを含む。他の実施形態では、本方法は、（ｂ）ＰＤ－１阻害剤を投与する前に、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分を投与することを含む。他の実施形態では、本方法は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分を投与する前に、ＰＤ－１阻害剤を投与することを含む。

【0027】

更なる態様では、本発明は、がんを治療する方法において使用するためのＰＤ－１阻害剤であって、ＰＤ－１阻害剤が、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と組み合わせて使用するためのものである、ＰＤ－１阻害剤を提供する。好ましくは、がんは、固形腫瘍である。

【0028】

関連する本発明の更なる態様は、固形腫瘍を治療するための医薬の調製における、ＰＤ－１阻害剤の使用であって、ＰＤ－１阻害剤が、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と組み合わせて使用するためのものである、使用を提供する。

【0029】

本発明の更なる態様は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）と、を含むキットを提供する。

【0030】

本発明の更なる態様は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含むベクターを含む、キットを提供する。

【0031】

本発明の更なる態様は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含む宿主細胞を含む、キットを提供する。

【0032】

更なる態様は、
ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）、
ｂ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
ｃ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）、
ｄ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合部分、
ｅ）ＰＤ－１阻害剤、
ｆ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖を含むベクター、
ｇ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖を含むベクター、
ｈ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖を含む宿主細胞、並びに／あるいは
ｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖を含む宿主細胞、のうちの任意の２つ以上を含むキットを提供する。

【0033】

上に概説したように、本発明の第１の態様は、対象におけるがんの治療又は予防に使用するための併用療法であって、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む併用療法を提供する。

【0034】

一実施形態では、がんは、固形腫瘍である。一実施形態では、がん及び／又は固形腫瘍は、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）若しくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ））、頭部及び／若しくは頸部がん、胃がん、食道がん、腎臓がん、尿路上皮がん、黒色腫、乳がん、子宮頸がん、前立腺がん、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）がん、ＤＮＡミスマッチ修復（ｄＭＭＲ）に関連するがん、並びに／又は高腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）結腸直腸がん；腎臓がん；膵臓がん；卵巣がん；横紋筋肉腫；神経芽腫；骨がん；多発性骨髄腫；白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病［ＡＬＬ］及び急性骨髄性白血病［ＡＭＬ］）、皮膚がん（例えば、黒色腫）、膀胱がん、膠芽腫、アデノーマ、芽細胞腫、がん腫、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、胚細胞腫瘍、リンパ腫、肉腫、ウィルムス腫瘍、肺腫瘍、結腸腫瘍、リンパ腫瘍、乳房腫瘍並びに黒色腫からなる群から選択される。

【0035】

好ましい実施形態では、がん及び／又は固形腫瘍は、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）若しくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ））、頭部及び／若しくは頸部がん、胃がん、食道がん、腎臓がん、尿路上皮がん、黒色腫、乳がん、子宮頸がん、前立腺がん、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）がん、ＤＮＡミスマッチ修復（ｄＭＭＲ）に関連するがん、及び／又は高腫瘍変異負荷（ＴＭＢ）がんであり、好ましくは、がん及び／又は固形腫瘍は、転移性である。

【0036】

一実施形態では、がん及び／又は固形腫瘍は、転移性である。

【0037】

（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体
一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片（「抗体ポリペプチド」）は、
ａ）ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、
ｂ）ＣＤ１３７アゴニストであり、かつ／又は
ｃ）ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」の結合を阻害することができる。

【0038】

いくつかの実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、ＣＤ１３７アゴニストであり、かつヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」の結合を阻害することができる。

【0039】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片（「抗体ポリペプチド」）は、
ａ）ＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、
ｂ）ＣＤ１３７アゴニストであり、かつ／又は
ｃ）ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＣＤ１３７のドメイン２に対する結合特異性を有し、ＣＤ１３７アゴニストであり、かつヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる。

【0040】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」及び／又は「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる。

【0041】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ヒトＣＤ１３７に対する１つ以上の参照抗体の結合を阻害することができ、例えば、ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」及び／又は「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる。例示的な抗ＣＤ１３７抗体は、Ａｌｌｉｇａｔｏｒ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＡＢに対するＷＯ２０１８／０９１７４０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。例えば、そのような抗ＣＤ１３７抗体は、ＷＯ２０１８／０９１７４０の７～８、１１～１２、１６～１７及び１９ページに明示的に開示されており、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【0042】

「ＣＤ１３７」は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＡＡＨ０６１９６．１（その配列は以下の配列番号１１に記載される）に記載されるような、ヒトＣＤ１３７タンパク質を特に含む。ＣＤ１３７は、科学文献において４－１ＢＢ及びＴＮＦＲＳＦ９としても既知である。
ヒトＣＤ１３７、アミノ酸配列：＞ｇｉ｜５７１３２１｜ｇｂ｜ＡＡＡ５３１３３．１｜４－１ＢＢ［ホモサピエンス］

【化1】

［配列番号１１］
「ドメイン２」は、ヒトＣＤ１３７のアミノ酸６６～１０７に対応する上述のものを指す（上の配列番号１１の太字の下線領域を参照）。

【0043】

したがって、本発明の併用療法は、ＣＤ１３７に特異的に結合する、すなわちＣＤ１３７に対する特異性を有する、抗体又は抗原結合断片を含む。「特異性」は、抗体ポリペプチドが、インビボで、すなわち、ＣＤ１３７が人体内に存在する生理学的条件下で、ＣＤ１３７に結合することができることを意味する。好ましくは、抗体ポリペプチドは、インビボでは他のいかなるタンパク質にも結合しない。そのような結合特異性は、ＣＤ１３７を発現するトランスフェクト細胞を用いたＥＬＩＳＡ、免疫組織化学、免疫沈降、ウェスタンブロット、フローサイトメトリーなどの当該技術分野で周知の方法によって決定することができる。

【0044】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、好ましくは、１０ｘ１０^－９Ｍ未満、又は７×１０^－９Ｍ未満、より好ましくは４、又は２×１０^－９Ｍ未満、最も好ましくは１．２×１０^－９Ｍ未満であるＫｄ値で、ヒトＣＤ１３７に結合する。有利には、抗体ポリペプチドは、ＣＤ１３７に選択的に結合することができる、すなわち、他のいかなるタンパク質と比べて少なくとも１０倍強力にＣＤ１３７に結合する。抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、ＣＤ１３７に特異的に結合する、すなわち、ＣＤ１３７に結合するが、他の分子（例えば、ＯＸ４０及び／若しくはＣＤ４０）に結合しないか、又はより低い親和性（例えば、１０分の１低い親和性）で結合する。したがって、別の分子に結合する場合よりも高い結合親和性でＣＤ１３７に結合する。したがって、典型的には、ヒトＣＤ１３７に対する抗体のＫｄは、マウスＣＤ１３７、他のＴＮＦＲスーパーファミリーメンバー、又は任意の他の無関係な物質若しくは環境中の付随する物質などの他の非標的分子に対するＫｄの２倍、好ましくは５倍、より好ましくは１０倍未満であろう。より好ましくは、Ｋｄは、５０倍未満、更により好ましくは１００倍未満、及び更により好ましくは２００倍未満であろう。

【0045】

相互作用（抗体とリガンドとの間の相互作用など）の全体的な親和性（ＫＤ）並びにオン速度（ｋａ）及びオフ速度（ｋｄ）を測定するための方法は、当該技術分野で周知である。例示的なｉｎ ｖｉｔｒｏ法は、添付の実施例に記載される。フローサイトメトリーに基づく方法を使用することも考えられる（Ｓｋｌａｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｂｉｏｍｏｌ Ｓｔｒｕｃｔ，（３１），９７－１１９，２００２）。

【0046】

本明細書で使用される用語ＣＤ１３７は、典型的には、ヒトＣＤ１３７を指す。抗体は、非ヒト霊長類、例えばＭａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ（カニクイザル）由来のＣＤ１３７などの、他の哺乳動物由来のＣＤ１３７に対してある程度の結合親和性を有し得る。抗体は、好ましくは、マウスＣＤ１３７に結合せず、かつ／又は他のヒトＴＮＦＲスーパーファミリーメンバー、例えばヒトＯＸ４０若しくはＣＤ４０に結合しない。

【0047】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、その天然状態にあるＣＤ１３７、特に細胞の表面上に局在化するＣＤ１３７に対する親和性を有し得る。

【0048】

「細胞の表面上に局在化する」は、ＣＤ１３７の１つ以上の領域が細胞表面の外面に存在するように、ＣＤ１３７が細胞と会合していることを意味する。例えば、ＣＤ１３７は、細胞外表面に提示された１つ以上の領域とともに細胞原形質膜に挿入され得る（すなわち、膜貫通タンパク質として配向される）。これは細胞によるＣＤ１３７の発現の過程で起こり得る。したがって、一実施形態では、「細胞の表面上に局在化する」とは、「細胞の表面上で発現する」ことを意味し得る。あるいは、ＣＤ１３７は、共有結合性及び／又はイオン性の相互作用で細胞の外側に存在して、それを細胞表面の特定の領域又は複数の領域に局在化させてもよい。

【0049】

一実施形態では、本明細書に定義されるＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、及びその抗原結合断片は、ＣＤ１３７アゴニストである。例えば、それらはＣＤ８＋Ｔ細胞からのインターフェロンガンマの放出を誘導することが可能であり得る。抗ＣＤ１３７抗体のアゴニスト活性は、初代ＣＤ８＋Ｔ細胞に基づくＴ細胞アッセイにおいて評価され得る（実施例を参照）。

【0050】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、ＣＤ１３７を発現する細胞の活性を調節することができ、この調節は、当該細胞の活性の増加又は低下である。細胞は、典型的にはＴ細胞である。抗体は、ＣＤ４＋若しくはＣＤ８＋エフェクター細胞の活性を増加させることができるか、又は制御性Ｔ細胞（Ｔ ｒｅｇ）の活性を低下させることができるか、若しくは当該細胞を枯渇させることができる。いずれの場合も、抗体の正味の効果は、エフェクターＴ細胞、特にＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＮＫエフェクターＴ細胞の活性の増加である。エフェクターＴ細胞の活性の変化を決定するための方法は、周知であり、先に記載された通りである。

【0051】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、好ましくはインビボでＣＤ８＋Ｔ細胞における活性の増加を引き起こし、任意選択的に、当該活性の増加は、Ｔ細胞による増殖、ＩＦＮ－γ産生及び／又はＩＬ－２産生の増加である。増加は、同じアッセイで測定されたアイソタイプ対照抗体によって引き起こされる活性の変化より、好ましくは少なくとも２倍、より好ましくは少なくとも１０倍、更により好ましくは少なくとも２５倍高い。

【0052】

上で概説したように、ヒトＣＤ１３７に対する１つ以上の参照抗体の結合を阻害することができる抗体、又はその抗原結合断片が提供される。本明細書に記載される参照抗体は、参照抗体１６３０／１６３１及び参照抗体２６７４／２６７５である。

【0053】

例示的な抗ＣＤ１３７抗体は、Ａｌｌｉｇａｔｏｒ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ＡＢに対するＷＯ２０１８／０９１７４０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。

【0054】

参照抗体「１６３０／１６３１」は、それぞれ配列番号１７及び１８のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖を含むインタクトなＩｇＧ抗体を意味する。
１６３０／１６３１－全配列重鎖
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＧＹＳＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＧＳＧＳＳＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
［配列番号１７］
１６３０／１６３１－全配列軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
［配列番号１８］

【0055】

参照抗体「２６７４／２６７５」は、それぞれ配列番号２９及び３０のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖を含むインタクトなＩｇＧ抗体を意味する。抗体２６７４／２６７５は、ＡＴＯＲ－１０１７としても既知であり、これらの用語は、完全に互換性がある。
２６７４／２６７５－全配列重鎖
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＧＹＳＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＧＳＴＳＳＨＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
［配列番号２９］
２６７４／２６７５－全配列軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＧＳＴＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
［配列番号３０］

【0056】

以下に論じるように、参照抗体「１６３０／１６３１」は、ＣＤ１３７のドメイン２に結合する。参照抗体２６７４／２６７５もまた、ＣＤ１３７のドメイン２に結合する。したがって、本発明の併用療法におけるＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片も、ＣＤ１３７のドメイン２に結合することを理解されたい。いくつかの実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＣＤ１３７のドメイン２に結合する。

【0057】

「ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「１６３０／１６３１」の結合を阻害することができる」とは、本発明の併用療法の抗体ポリペプチドの存在が、ヒトＣＤ１３７に対する「１６３０／１６３１」の結合を全体的又は部分的に阻害することを意味する。同様に、「ヒトＣＤ１３７に対する参照抗体「２６７４／２６７５」の結合を阻害することができる」とは、本発明の併用療法の抗体ポリペプチドの存在が、ヒトＣＤ１３７に対する「２６７４／２６７５」の結合を全体的又は部分的に阻害することを意味する。したがって、本発明の併用療法で使用される抗ＣＤ１３７抗体又はその断片は、ヒトＣＤ１３７に対する結合について、「参照抗体」１６３０／１６３１及び／又は「参照抗体」２６７４／２６７５と競合し得る。そのような競合的結合阻害は、当該技術分野で周知のアッセイ及び方法を用いて、例えば、固定化されたＣＤ１３７を有するＢＩＡｃｏｒｅチップを使用して、試験される抗体ポリペプチドを用いて、また、用いずに、参照抗体「１６３０／１６３１」又は「２６７４／２６７５」存在下でインキュベートすることにより決定することができる。あるいは、参照抗体「１６３０／１６３１」又は「２６７４／２６７５」をＢＩＡｃｏｒｅチップの表面に固定化し、ＣＤ１３７抗原を固定化した抗体に結合させ、次いで二次抗体を同時ＣＤ１３７結合能について試験する、ペアワイズマッピング手法を用いることができる（例えば、「ＢＩＡｃｏｒｅ Ａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ’，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２９－０１９４－００ ＡＡ ０５／２０１２（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0058】

更なる代替案として、競合的結合阻害は、フローサイトメトリーを用いて決定することができる。例えば、試験抗体が、細胞表面抗原に対する１６３０／１６３１又は２６７４／２６７５参照抗体の結合を阻害することができるかどうかを調べるために、抗原を発現する細胞を、細胞を洗浄する前に試験抗体とともに２０分間プレインキュベートし、フローサイトメトリーによって検出することができるフルオロフォアにコンジュゲートした参照１６３０／１６３１又は２６７４／２６７５抗体とともにインキュベートすることができる。試験抗体とのプレインキュベーションがフローサイトメトリーにおける参照１６３０／１６３１又は２６７４／２６７５抗体の検出率を低下させる場合、試験抗体は、細胞表面抗原に対する参照抗体の結合を阻害する。試験された抗体がＣＤ１３７に対して高い親和性を示す場合、期間を短くしたプレインキュベーションが使用され得る（又は、プレインキュベーションを全くしない）。

【0059】

更なる代替例では、競合的結合阻害は、ＥＬＩＳＡを用いて決定することができる。

【0060】

いくつかの実施形態では、本発明の併用療法のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、及び抗原結合断片は、参照抗体１６３０／１６３１及び２６７４／２６７５の可変領域を参照することによって定義される。

【0061】

「１６３０／１６３１」と命名された参照抗体は以下を含む：
（ａ）配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＧＹＳＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＧＳＧＳＳＹＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
［配列番号１］
及び
（ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
［配列番号２］

【0062】

「２６７４／２６７５」と命名された参照抗体は以下を含む：
（ａ）配列番号１９のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＧＹＳＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＧＳＴＳＳＨＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
［配列番号１９］
及び
（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＧＳＴＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
［配列番号２０］

【0063】

本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、標準的な２０個の遺伝的にコードされたアミノ酸及びそれらの対応する（天然の「ｌ」型と比較して）「Ｄ」型の立体異性体、オメガ－アミノ酸及び他の天然に存在するアミノ酸、非従来型アミノ酸（例えば、α，α－二置換アミノ酸、Ｎ－アルキルアミノ酸など）、並びに化学的に誘導されたアミノ酸を含む（以下参照）。

【0064】

「アラニン」、「Ａｌａ」、「Ａ」のようにアミノ酸を具体的に列挙する場合、明示的に別段の記載がない限り、この用語は、ｌ－アラニン及びｄ－アラニンの両方を指す。所望の機能的特性がポリペプチドによって保持される限り、他の非従来型アミノ酸もまた、本発明のポリペプチドに好適な成分であり得る。示されるペプチドについて、適切な場合、各コードされたアミノ酸残基は、従来型アミノ酸の慣用名に対応する単一の文字指定によって表される。

【0065】

一実施形態では、本明細書に定義される抗体ポリペプチドは、ｌ－アミノ酸を含むか、又はそれからなる。

【0066】

「ポリペプチド」は、２つ以上のサブユニットアミノ酸、アミノ酸類似体、又は他のペプチド模倣体の化合物を指すために、その最も広い意味で本明細書で使用される。したがって、「ポリペプチド」という用語は、短いペプチド配列、及びより長いポリペプチド及びタンパク質を含む。本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、グリシン、及びＤ及びＬ光学異性体の両方、並びにアミノ酸類似体及びペプチド模倣体を含む、天然及び／又は非天然若しくは合成のアミノ酸のいずれかを指す。

【0067】

当業者は、抗体又はその抗原結合断片の結合特異性が、構成要素の重鎖及び軽鎖の可変領域内の相補性決定領域（ＣＤＲ）、例えば、本明細書に記載されるＣＤＲなどの存在によって付与されることを理解するであろう。

【0068】

当業者は更に、上の可変領域を含む任意のインタクトなＩｇＧ抗体が、ＣＤ１３７に対する１６３０／１６３１又は２６７４／２６７５の結合を競合的に阻害する本発明の併用療法の抗体ポリペプチドを同定するための参照抗体として使用され得ることを理解するであろう。しかしながら、好ましくは、参照抗体１６３０／１６３１は、それぞれ配列番号１７及び１８に定義される重鎖及び軽鎖からなり、参照抗体２６７４／２６７５は、それぞれ配列番号２９及び３０に定義される重鎖及び軽鎖からなる。

【0069】

競合的結合は、典型的には、試験抗体が参照抗体（この場合は１６３０／１６３１若しくは２６７４／２６７５）に結合する抗原のエピトープで結合するか、又は少なくともそれに非常に近接して結合するために生じる。しかしながら、当業者は、競合的結合が立体障害によっても生じ得ることを理解するであろう。したがって、試験抗体は、参照抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープで結合し得るが、それでもなお参照抗体と抗原との結合を妨げるのに十分なサイズ又は構成であり得る。

【0070】

ＣＤ１３７に結合し、本発明の併用療法の一部である抗体、及び抗原結合断片を、がんの診断薬及び治療薬として特に好適なものにする特性を示すことに基づいて、抗ＣＤ１３７抗体のスクリーニング後に同定した。

【0071】

したがって、一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、以下の特性のうちの１つ以上を示す。
ａ）架橋依存性機構を介してＣＤ１３７を刺激し、Ｔ細胞及び他の免疫細胞を活性化する能力（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞からのインターフェロンガンマの放出を誘導するため、実施例を参照）、並びに／又は
ｂ）カニクイザルＣＤ１３７との交差反応性（実施例を参照）。

【0072】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、上の特性の両方を示し得る。抗体は、本明細書に開示される特定の抗ＣＤ１３７抗体のうちの１つのバリアント若しくは断片であってもよく、又はそれらを含んでいてもよく、但し、上述のバリアント若しくは断片は、ＣＤ１３７に対する特異性を保持し、いくつかの実施形態では、上の機能的特徴（ａ）～（ｂ）のうちの少なくとも１つを保持する。

【0073】

上述のように、ＣＤ１３７に特異的に結合し、本発明の併用療法の一部を含む抗体は、架橋依存性機構を有し得る。「架橋依存性機構」は、ＣＤ１３７を刺激するために抗体がＣＤ１３７及びＦｃ受容体の両方に結合しなければならない、Ｆｃ架橋依存性機構を含む。そのため、いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤ１３７及びＦｃ受容体の両方に結合することができなければならない。

【0074】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合ドメインは、Ｆｃ受容体に結合することができる。一実施形態では、抗体又は抗原結合ドメインは、ＣＤ１３７及びＦｃ受容体に同時に結合することができる。好ましい実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合してＴ細胞を活性化する抗体及び／又はその抗原結合ドメインの能力は、ＣＤ１３７及びＦｃ受容体の両方への結合に依存する。

【0075】

好ましい実施形態では、標的とされるＦｃ受容体は、ＦｃγＲである。ＦｃγＲの例として、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ及びＦｃγＲＩＩＢが挙げられる。したがって、一実施形態では、ＦｃγＲは、ＦｃγＲＩＩＡであり得る。ＦｃγＲＩＩＡは、ＦｃγＲＩＩＡのＲ１３１及びＨ１３１アロタイプの両方を含む。したがって、一実施形態では、標的とされるＦｃγＲは、ＦｃγＲＩＩＡのＲ１３１アロタイプである。

【0076】

代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体は、Ｆｃ架橋非依存性であってもよく、その結果、Ｆｃ受容体に対する結合の非存在下でＣＤ１３７を刺激することができる。

【0077】

したがって、例示的な抗体２６７４／２６７５及び１６３０／１６３１は、共刺激性ＣＤ１３７受容体を標的とするＦｃγＲ架橋依存性アゴニスト抗体である。したがって、それらはＣＤ１３７及びＦｃγＲを発現する細胞を含有する組織又は腫瘍においてのみ活性である。「ＣＤ１３７及びＦｃγＲを発現する細胞を含有する腫瘍」は、ＣＤ１３７及びＦｃγＲを発現する腫瘍細胞及び／又は腫瘍浸潤免疫細胞（単球、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞及び顆粒球など）を含む腫瘍又は腫瘍流入領域リンパ節を含む。ＣＤ１３７及びＦｃγＲは、腫瘍内の別々の細胞上で発現され得ること、かつ／又は同じ細胞で同時発現され得ることを理解されたい。したがって、参照抗体２６７４／２６７５及び１６３０／１６３１は、腫瘍の微小環境においてＣＤ１３７及びＦｃγＲの両方を発現する細胞に関連した適応症において腫瘍指向性の免疫活性化を提供するであろう。これは、全身性免疫活性化を誘導することができるＦｃγＲ非依存性ＣＤ１３７アゴニスト（例えば、ウレルマブ）とは対照的である。抗体２６７４／２６７５及び１６３０／１６３１の腫瘍局在化作用は、主として異なるＦｃγＲを発現する腫瘍浸潤マクロファージ／骨髄細胞の数に依存する。

【0078】

ＩｇＧ４は、ＦｃγＲＩに対して高親和性で結合し、またＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩＩｂに対して中程度／低い親和性で結合することが既知である。ＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩａは単球に発現し、ＦｃγＲＩＩｂはＢ細胞に高密度で発現する。抗体２６７４／２６７５及び１６３０／１６３１の架橋は、腫瘍内で及び隣接する流入領域リンパ節において優先的に起こる。血清ＩｇＧレベルが高い全身血中では、遊離型の非ブロックＦｃγＲの利用可能性は、効果的な架橋が起こるには低すぎると考えられる。したがって、全身性免疫活性化のリスクは低いと考えられており、これは他のＣＤ１３７ ｍＡｂと比較してリスク便益プロファイルを改善する。

【0079】

２６７４／２６７５及び１６３０／１６３１などのＣＤ１３７に特異的に結合し、本発明の併用療法の一部を形成する抗体による治療のための患者選択及びバイオマーカーの理論的根拠は、ＣＤ１３７及びＦｃγＲを発現する浸潤細胞を有する腫瘍型によって導かれ得る。したがって、本発明の併用療法は、ＣＤ１３７及びＦｃγＲを発現する細胞を含有する腫瘍を有することに基づいて（すなわち、コンパニオン診断試験として）選択された患者に使用するためのものであり得る。

【0080】

「浸潤細胞」は、単球、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、顆粒球などの腫瘍浸潤免疫細胞を含む

【0081】

有利には、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、腫瘍免疫を誘導することができる。腫瘍免疫は、当該技術分野で周知の方法を用いて、例えば、同じ腫瘍を用いたＣＤ３１７抗体治療によって所与の腫瘍から治癒したマウスを再チャレンジすることによって、及び／又は同じ腫瘍を用いた本発明の併用療法によって所与の腫瘍から治癒したマウスを再チャレンジすることによって、実証することができる。腫瘍免疫が抗体療法及び／又は併用療法によって誘導されている場合、その腫瘍は再チャレンジの際に拒絶される。

【0082】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＣＤ１３７を発現する細胞への結合時に、
ａ）抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）
ｂ）抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）及び／又は
ｃ）補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導することが実質的にできない。

【0083】

抗体は、本明細書に開示される特定の抗ＣＤ１３７抗体のうちの１つのバリアント若しくは断片であってもよく、又はそれらを含んでいてもよく、但し、上述のバリアント若しくは断片は、ＣＤ１３７に対する特異性を保持し、ＣＤ１３７を発現する細胞への結合時に、（ａ）～（ｃ）のうちの１つ以上を誘導することができない。

【0084】

細胞試料中のＡＤＣＣ媒介性溶解又はアポトーシスのレベルを決定するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、クロム－５１放出アッセイ、ユーロピウム放出アッセイ、又は硫黄－３５放出アッセイを使用してもよい。そのようなアッセイにおいて、抗原を発現する以前に標識された標的細胞株を、試験される抗体とともにインキュベートする。洗浄後、エフェクター細胞（典型的には、Ｆｃ受容体ＣＤ１６を発現する）を、抗体標識された標的細胞とともにインキュベートする。続いて、標的細胞溶解を、シンチレーションカウンター又は分光光度法による細胞内標識の放出によって測定する。そのようなアッセイで必要とされる放射性同位体による標識の代替例として、標的細胞に天然に存在する酵素の放出を測定することによって溶解が検出される方法が使用され得る。これは、酵素触媒反応の生成物の検出（例えば、生物発光検出）によって達成され得る。そのようなアッセイでは、細胞の以前の標識は必要とされない。そのようなアッセイで検出される典型的な細胞酵素は、ＧＡＰＤＨである。

【0085】

細胞試料中のＡＤＣＰのレベルを決定するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、腫瘍抗原を発現するがん細胞は、ｍＡｂ及びヒト白血病単球細胞株ＴＨＰ－１の滴定の存在下でインキュベートされ得る。エフェクター及び標的細胞の両方が蛍光標識されてもよく、細胞貪食はフローサイトメトリーによって測定されてもよい。また、顕微鏡又はイメージングサイトメトリーを使用して食作用を確認してもよい。

【0086】

細胞試料中のＣＤＣのレベルを決定するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、補体系の成分を含む血清（典型的にはヒト血清）は、検出される抗体によって結合される標的細胞と混合されてもよく、次いで、細胞死は、好適な方法によって決定され得る。細胞死は、標的細胞に放射性化合物を予め保持させることによって決定することができる。細胞が死滅すると、放射性化合物が細胞から放出される。したがって、細胞死を媒介する抗体の有効性は、放射能レベルによって決定され得る。非放射性ＣＤＣアッセイも使用されてもよく、これは、蛍光又は発光の測定を用いて、ＧＡＰＤＨなどの豊富な細胞成分の放出を決定してもよい。

【0087】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、参照抗体１６３０／１６３１及び／又は２６７４／２６７５が結合することができるＣＤ１３７上のエピトープと少なくとも部分的に重複する、ＣＤ１３７の細胞外ドメイン上のエピトープに結合することができる。したがって、抗体又は抗原結合断片は、ＣＤ１３７のドメイン２（すなわち、ヒトＣＤ１３７のアミノ酸６６～１０７）に／その中に位置するエピトープに結合することが可能であり得る。

【0088】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、インタクトな抗体（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３若しくはＩｇＧ４抗体）を含むか、又はそれらからなる。好ましい実施形態では、抗体は、ＩｇＧ４抗体である。

【0089】

代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、Ｆｖ断片（例えば、単鎖Ｆｖ及びジスルフィド結合Ｆｖ）、Ｆａｂ様断片（例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片及びＦ（ａｂ）_２断片）、並びにドメイン抗体（例えば、単一のＶ_Ｈ可変ドメイン又はＶ_Ｌ可変ドメイン）からなる群から選択される抗原結合断片を含むか、又はそれらからなる。特に、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ｓｃＦｖであり得る。

【0090】

更なる実施形態では、上で論じたように、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、アフィボディ、テトラネクチン（ＣＴＬＤ）、アドネクチン（モノボディ）、アンチカリン、ＤＡＲＰｉｎ（アンキリン）、アビマー、ｉＭａｂ、マイクロボディ、ペプチドアプタマー、クニッツドメイン及びアフィリンを含むか、又はそれらからなる群から選択される抗体模倣物を含むか、又はそれらからなる。

【0091】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、
ａ）コンセンサス配列Ｇ、Ｆ、Ｔ／Ｎ、Ｆ、Ｇ、Ｙ、Ｓ、Ｙを有する重鎖ＣＤＲ１配列、
ｂ）コンセンサス配列Ｉ、Ｇ、Ｓ、Ｇ／Ｔ、Ｓ、Ｓ、Ｙ／Ｈ、Ｔを有する重鎖ＣＤＲ２配列、及び
ｃ）配列ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹを有する重鎖ＣＤＲ３配列、を含む。

【0092】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、
ａ）コンセンサス配列Ｑ、Ｓ、Ｉ、Ｓ／Ｇ、Ｓ、Ｙ／Ｔを有する軽鎖ＣＤＲ１配列、
ｂ）コンセンサス配列Ａ／Ｇ、Ａ、Ｓを有する軽鎖ＣＤＲ２配列、及び
ｃ）配列ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴを有する軽鎖ＣＤＲ３配列、を含む。

【0093】

好ましい実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、以下のＣＤＲを含む重鎖可変領域を含む。
ａ）ＧＦＴＦＧＹＳＹ［配列番号３］、又は配列番号３と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、
ｂ）ＩＧＳＧＳＳＹＴ［配列番号４］、又は配列番号４と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、及び
ｃ）ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹ［配列番号５］、又は配列番号５と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ。

【0094】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号３、４及び５のＣＤＲのうちの１個、２個、又は３個全てを含む重鎖可変領域を含み得る。

【0095】

例えば、抗体又はその抗原結合断片は、１６３０／１６３１参照抗体の対応する領域のアミノ酸配列、すなわち配列番号１を有する重鎖可変領域を含み得る。

【0096】

代替の好ましい実施形態では、本発明の第１又は第２の態様による抗体又はその抗原結合断片は、以下のＣＤＲを含む重鎖可変領域を含む。
ａ）ＧＦＮＦＧＹＳＹ［配列番号２１］、又は配列番号２１と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、
ｂ）ＩＧＳＴＳＳＨＴ［配列番号２２］、又は配列番号２２と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、及び
ｃ）ＡＲＶＹＳＳＰＧＩＤＹ［配列番号２３］、又は配列番号２３と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ。

【0097】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号２１、２２及び２３のＣＤＲのうちの１個、２個、又は３個全てを含む重鎖可変領域を含み得る。

【0098】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、２６７４／２６７５参照抗体の対応する領域のアミノ酸配列、すなわち配列番号１９を有する重鎖可変領域を含み得る。

【0099】

しかしながら、ＣＤＲ配列内の低レベルの変異（典型的には、わずか１、２，又は３個のアミノ酸）は、ＣＤ１３７に対する抗体又は抗原結合断片の特異性を喪失することなく許容され得ることを理解されたい（いずれかの実施形態に関して、１６３０／１６３１又は２６７４／２６７５）。

【0100】

例えば、代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、上で定義されたＣＤＲを含む重鎖可変領域を含んでもよく、Ｈ１及びＨ２のＣＤＲは、それぞれ、配列番号３及び４の変異態様であり、Ｈ３ ＣＤＲは配列番号５である。

【0101】

更なる代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、上で定義されたＣＤＲを含む重鎖可変領域を含んでもよく、Ｈ１及びＨ２のＣＤＲは、それぞれ、配列番号２１及び２２の変異態様であり、Ｈ３ ＣＤＲは配列番号２３である。

【0102】

いくつかの実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号１のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む。

【0103】

パーセント配列同一性は、例えば、Ｅｘｐａｓｙ機関のサイト（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｈ．ｅｍｂｎｅｔ．ｏｒｇ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／ＬＡＬＩＧＮ＿ｆｏｒｍ．ｈｔｍｌ）において、パラメータとして、グローバルアライメントオプション、スコアリングマトリックスＢＬＯＳＵＭ６２、開始ギャップペナルティ－１４、伸長ギャップペナルティ－４を使用して、ＬＡＬＩＧＮプログラム（Ｈｕａｎｇ ａｎｄ Ｍｉｌｌｅｒ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．（１９９１）１２：３３７－３５７（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））によって決定することができる。あるいは、２つのポリペプチド間のパーセント配列同一性は、好適なコンピュータプログラム、例えば、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ ＧｒｏｕｐのＧＡＰプログラムを使用して決定されてもよく、パーセント配列同一性は、配列が最適にアラインメントされたポリペプチドに関連して算出されることを理解されたい。

【0104】

あるいは、アラインメントは、Ｃｌｕｓｔａｌ Ｗプログラムを使用して実行され得る（参照により本明細書に組み込まれる、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．２２：４６７３－４６８０に記載の通り）。使用されるパラメータは、以下のようであってもよい：
－高速ペアワイズアラインメントパラメータ：Ｋ－ｔｕｐｌｅ（ワード）サイズ；１、ウィンドウサイズ；５、ギャップペナルティ；３、上の対角線の数；５。スコアリング方法：ｘ％。
－複数のアラインメントパラメータ：ギャップオープンペナルティ；１０、ギャップエクステンションペナルティ；０．０５。
－スコアリングマトリックス：ＢＬＯＳＵＭ。

【0105】

あるいは、ＢＥＳＴＦＩＴプログラムは、局所配列のアラインメントを決定するために使用されてもよい。

【0106】

更に好ましい実施形態では、本発明の第１の態様によるＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、以下のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。
ａ）ＱＳＩＳＳＹ［配列番号６］、又は配列番号６と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、
ｂ）ＡＡＳ［配列番号７］、又は配列番号７と比較して最大２個のアミノ酸変異、例えば、１若しくは２個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、及び
ｃ）ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴ［配列番号８］、又は配列番号８と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ。

【0107】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号６、７及び８のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含み得る。

【0108】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、１６３０／１６３１参照抗体の対応する領域、すなわち、配列番号２のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含み得る。

【0109】

代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、上で定義されたＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含んでもよく、Ｌ１及びＬ２のＣＤＲは、それぞれ、配列番号６及び７の変異態様であり、Ｌ３のＣＤＲは配列番号８である。

【0110】

更に好ましい実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合し、本発明の第１の態様の併用療法の一部を含み得る抗体、又はその抗原結合断片は、以下のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。
ａ）ＱＳＩＧＳＴ［配列番号２４］、又は配列番号２４と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば、１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、
ｂ）ＧＡＳ［配列番号２５］、又は配列番号２５と比較して最大２個のアミノ酸変異、例えば、１若しくは２個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ、及び
ｃ）ＱＱＹＹＴＷＶＰＦＴ［配列番号２６］、又は配列番号２６と比較して最大３個のアミノ酸変異、例えば１、２若しくは３個の変異を含有するアミノ酸配列のＣＤＲ。

【0111】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号２４、２５及び２６のＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含み得る。

【0112】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、２６７４／２６７５参照抗体の対応する領域のアミノ酸配列、すなわち配列番号２０を有する軽鎖可変領域を含み得る。

【0113】

代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、上で定義されたＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含んでもよく、Ｌ１及びＬ２のＣＤＲは、それぞれ、配列番号２４及び２５の変異態様であり、Ｌ３のＣＤＲは配列番号２６である。

【0114】

本発明の併用療法及び方法で使用される抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号３～５のＣＤＲ配列のうちの１個、２個、若しくは３個全て、及び／又は配列番号６～８のＣＤＲ配列のうちの１個、２個、若しくは３個全てを含む抗体であり得る。抗体は、配列番号３～８の６個全てのＣＤＲ配列を含み得る。

【0115】

抗体は、配列番号２の軽鎖可変領域配列及び／又は配列番号１の重鎖可変領域配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１及び／若しくは配列番号２に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでもよく、又はそれらからなってもよい。

【0116】

抗体は、配列番号２の軽鎖可変領域配列及び配列番号１の重鎖可変領域配列を含む抗体であってもよく、又はそれと同じエピトープに結合してもよい。加えて、抗体は、配列番号１６の軽鎖定常領域配列及び／又は配列番号１３の重鎖定常領域配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１６及び／若しくは配列番号１３に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでもよい。

【0117】

本発明の併用療法及び方法で使用される抗ＣＤ１３７抗体は、配列番号２１～２３のＣＤＲ配列のうちの１個、２個、若しくは３個全て、及び／又は配列番号２４～２６のＣＤＲ配列のうちの１個、２個、若しくは３個全てを含む抗体であり得る。抗体は、配列番号２１～２６の６個全てのＣＤＲ配列を含み得る。

【0118】

抗体は、配列番号２０の軽鎖可変領域配列及び／又は配列番号１９の重鎖可変領域配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号２０及び／若しくは１９に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでもよい。

【0119】

抗体は、配列番号２０の軽鎖可変領域配列及び配列番号１９の重鎖可変領域配列を含む抗体であってもよく、又はそれと同じエピトープに結合してもよい。加えて、抗体は、配列番号１６の軽鎖定常領域配列及び／又は配列番号１３の重鎖定常領域配列、又はそれと少なくとも６０％の配列同一性、例えば、配列番号１６及び／若しくは１３に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでもよい。

【0120】

ヒト治療の場合、ヒト抗体又はヒト化抗体が好ましく使用されることは、当業者には理解されることだろう。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化形態は、好ましくは非ヒト抗体に由来する最小部分を有する、遺伝子操作されたキメラ抗体又は抗体断片である。ヒト化抗体は、ヒト抗体（レシピエント抗体）の相補的決定領域が、所望の機能を有するマウス、ラット、又はウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）の相補的決定領域に由来する残基によって置き換えられた抗体を含む。いくつかの場合では、ヒト抗体のＦｖフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基で置換される。ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも導入された相補性決定領域やフレームワーク配列にも存在しない残基も含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、及び典型的には２つの可変ドメインの実質的な全てを含み、相補性決定領域の全て又は実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、フレームワーク領域の全て、又は実質的に全てが関連するヒトコンセンサス配列のものに対応する。ヒト化抗体は、最適には、典型的にヒト抗体由来のＦｃ領域などの抗体定常領域の少なくとも一部を含む（例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６．Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９；Ｐｒｅｓｔａ，１９９２，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0121】

非ヒト抗体をヒト化するための方法は、当該技術分野で周知である。一般に、ヒト化抗体は、非ヒトであるソースからその中に導入される１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、しばしば導入残基と呼ばれ、通常、輸入された可変ドメインから取り出される。ヒト化は、本質的に、ヒト相補性決定領域を対応するげっ歯類の相補性決定領域で置換することにより、記載されるように行うことができる（例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５、Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８．Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２７、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４－１５３６ｌ、ＵＳ４，８１６，５６７（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。したがって、そのようなヒト化抗体はキメラ抗体であり、インタクトなヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が、非ヒト種からの対応する配列で置換されているものである。実際には、ヒト化抗体は、相補性決定領域残基の一部と、場合によってはフレームワーク残基が齧歯類抗体の類似部位の残基で置換された、典型的なヒト抗体であると考えられる。キメラ抗体は、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌによって論じられている（１９９８，８^ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｐａｒｔ ２，７９２－７９９）。

【0122】

ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリーを含む当該技術分野で既知の様々な技術を用いて同定することもできる（例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ＆ Ｗｉｎｔｅｒ，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐｐ．７７、Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：８６－９５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0123】

当業者は、ＣＤ１３７に特異的に結合するヒト化抗体、又は抗原結合断片が、重鎖定常領域又はその一部を更に含み得ることを理解するであろう（以下を参照）。

【0124】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ重鎖（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４重鎖など）のＣＨ１、ＣＨ２、及び／又はＣＨ３領域を含む。したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ４重鎖由来の定常領域の一部又は全部を含んでもよい。例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、ＣＨ１及びＣＬ定常領域を、それぞれ上で定義された重及び軽可変領域のいずれかと組み合わせて構成されるＦａｂ断片であってもよい。

【0125】

同様に、上で定義されたＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、軽鎖定常領域又はその一部を更に含み得る（以下を参照）。例えば、抗体ポリペプチドは、カッパ又はラムダ軽鎖由来のＣＬ領域を含み得る。

【0126】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合し、本発明の併用療法に含まれる抗体、又は抗原結合断片は、抗体Ｆｃ領域を含む。当業者は、Ｆｃ部分がＩｇＧ抗体、又は異なるクラスの抗体（ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ又はＩｇＥなど）に由来し得ることを理解するであろう。一実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４抗体に由来する。しかしながら、有利には、Ｆｃ領域はＩｇＧ４抗体に由来する。

【0127】

Ｆｃ領域は、天然に存在し得る（例えば、内因性に産生された抗体の一部）か、又は人工的であり得る（例えば、天然に存在するＦｃ領域に対して１つ以上の点変異を含む）。Ｆｃ領域のバリアントは、典型的には、ＦｃγＲ及び／又は新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）などのＦｃ受容体に改変された親和性で結合し、ポリペプチドの機能及び／又は半減期を改善する。生物学的機能及び／又は半減期は、天然Ｆｃ領域を含むポリペプチドの半減期と比較して、延長するか又は減少するかのいずれかであり得る。バリアントＦｃ領域の存在によって調節され得るそのような生物学的機能の例としては、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、及び／又はアポトーシスが挙げられる。

【0128】

したがって、Ｆｃ領域は、天然に存在し得る（例えば、内因性に産生されたヒト抗体の一部）か、又は人工的であり得る（例えば、天然に存在するヒトＦｃ領域に対して１つ以上の点変異を含む）。

【0129】

当該技術分野で周知であるように、抗体のＦｃ領域は、その血清中半減期と、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、及び抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）などのエフェクター機能を媒介する。

【0130】

治療用モノクローナル抗体やＦｃ融合タンパク質のＦｃ領域を操作することで、求められる薬理活性に適した分子を生成できる（Ｓｔｒｏｈｌ，２００９，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ２０（６）：６８５－９１，その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。

【0131】

（ａ）半減期を延長するための操作されたＦｃ領域
抗体医薬の有効性を向上させる１つのアプローチは、抗体の血清持続性を高めることで、より高い循環レベル、より少ない投与回数、より少ない投与量を可能にする。

【0132】

ＩｇＧの半減期は、新生児受容体ＦｃＲｎとのｐＨ依存的な結合に依存する。内皮細胞表面上に発現しているＦｃＲｎは、ｐＨ依存的にＩｇＧと結合し、分解からそれを保護する。

【0133】

ｐＨ７．４ではなく、ｐＨ６．０でＦｃＲｎに選択的に結合する抗体の中には、様々な動物モデルで高い半減期を示す。

【0134】

ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインとの間の界面に位置するいくつかの変異、例えば、Ｔ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌ（Ｈｉｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７９（８）：６２１３－６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）及びＭ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ＋Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ（Ｖａｃｃａｒｏ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（１０）：１２８３－８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）は、ＦｃＲｎに対する結合親和性及びＩｇＧ１のインビボでの半減期を増加させることが示されている。

【0135】

（ｂ）エフェクター機能を変化させるための操作されたＦｃ領域
抗体医薬やＦｃ融合タンパク質の用途によっては、エフェクター機能（ＡＤＣＣなど）を低下させるか増加させることが望まれる場合がある。

【0136】

細胞表面分子、特に免疫細胞上の分子を標的とする抗体の場合、エフェクター機能を奪うことが特定の臨床適応に必要となる場合がある。

【0137】

４つのヒトＩｇＧアイソタイプは、活性化Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩａ）、阻害性ＦｃγＲＩＩｂ受容体、及び補体の第１成分（Ｃ１ｑ）と異なる親和性で結合し、非常に異なるエフェクター機能をもたらす（Ｂｒｕｈｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｂｌｏｏｄ．１１３（１６）：３７１６－２５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。

【0138】

ＩｇＧ４対ＩｇＧ２のＦｃγＲＩ結合親和性
Ｂｒｕｈｎｓらは、既知のヒトＦｃγＲ及びそれらの多型バリアントの、異なるヒトＩｇＧサブクラスに対する特異性及び親和性を評価する一連の実験を行った（Ｂｒｕｈｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｂｌｏｏｄ．１１３（１６）：３７１６－２５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。この研究において、ＩｇＧ２はＦｃγＲＩに対して検出可能な親和性を有しなかったが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４は全て、ＦｃγＲＩに対するナノモル範囲の結合親和性を示したことが明確に実証された（Ｂｒｕｈｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｂｌｏｏｄ．１１３（１６）：３７１６－２５，Ｌｕ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．１１２（３）：８３３－８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。主要なヒトＦｃγＲ及びそれらのバリアントとＩｇＧアイソタイプとの間の相対的結合親和性の概要を表１にまとめる。（Ｓｔｅｗａｒｔ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２（２９）（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【表1】

【0139】

しかしながら、細胞活性化は、ＩｇＧ免疫複合体に対するＦｃγＲＩの親和性に影響を及ぼし、Ｂｒｕｈｎｓの論文における表面プラズモン共鳴によって生成されたデータは、炎症部位で起こることを正確に再現しない可能性がある。Ｈｏｇａｒｔｈ ｅｔ ａｌによる総説（Ｈｏｇａｒｔｈ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ １１（４）：３１１－３１（その開示は、参照により本明細書に組み込まれる））は、この研究及びＩｇＧに対するＦｃγＲの結合に焦点を当てた他の研究の概要をまとめたものである。

【0140】

骨髄細胞サブセットにおけるＦｃγＲＩ発現
ヒトＦｃγＲは主に骨髄系統の細胞によって発現され、このことは循環骨髄細胞サブセットに関する多数の研究において実証されている。一般的にＣＤ１４^＋ＣＤ１６^－として同定される古典的な単球は、高レベルのＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、中間レベルのＦｃγＲＩ、及び低レベルのＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）を提示する（Ａｌｍｅｉｄａ ｅｔ ａｌ．２００１，１００（３）：３２５－３８、Ｃｈｅｅｓｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．２０１６，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ １１（５）：ｅ０１５４６５６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。しかしながら、ＣＤ１４^－ＣＤ１６^＋の非古典的な単球は、高レベルのＦｃγＲＩＩＩ、中間レベルのＦｃγＲＩＩ、及び低レベルのＦｃγＲＩを提示する（Ａｌｍｅｉｄａ ｅｔ ａｌ．２００１）。異なる骨髄細胞サブセットにおけるヒトＦｃγＲ遺伝子の発現を示すいくつかの公表されているマイクロアレイデータセットの概要及び編纂が、これらの観察を裏付けている（Ｇｕｉｌｌｉａｍｓ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４（２）：９４－１０８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0141】

一旦、組織内に入ると、単球はマクロファージに分化し、環境要因に応じて、これらのマクロファージは特定の表現型を得る。Ｒｏｕｓｓｅｌ ｅｔ ａｌによる研究（Ｒｏｕｓｓｅｌ ｅｔ ａｌ．２０１７，Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ．１０２（２）：４３７－４４７（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））では、様々な炎症性刺激を用いることにより末梢血単球を異なるマクロファージ系統に分極させ、これらの細胞の発現プロファイルを評価した。この場合、ＩＦＮ－γで刺激した単球は、特異的にＣＤ６４の高度に上昇した発現をもたらした。循環ＣＤ１４^＋単球上でＣＤ６４発現の増加が検出されたＳＬＥ患者において同様の観察結果が認められ、それはインターフェロン刺激遺伝子の発現と相関していた（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２０１０，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ １２（３）：Ｒ９０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0142】

様々なヒト腫瘍内の骨髄細胞浸潤
炎症性単球、単球性骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）及びマクロファージなどの様々な骨髄細胞サブセットが、多数の研究において、がん患者に蓄積することが示されている（Ｓｏｌｉｔｏ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ １３１９：４７－６５．，Ｈｕ ｅｔ ａｌ．２０１６，Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｏｎｃｏｌ．１８（３）：２５１－８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。最近の試みは、これらの細胞の特徴付けを標準化するための戦略を提案することを目的としているが（Ｂｒｏｎｔｅ ｅｔ ａｌ．２０１６，Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ．７：１２１５０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））、これらの細胞集団の多くの表現型の定義は依然として文献中に見出すことができる（Ｅｌｌｉｏｔｔ ｅｔ ａｌ．２０１７，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．８：８６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。最も一般的には、これらの細胞は、マーカーＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ３３の発現及びＨＬＡ－ＤＲ（単球ＭＤＳＣ）の低発現によって定義される（Ｂｒｏｎｔｅ ｅｔ ａｌ．２０１６）。加えて、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）は、ＣＤ６４及びＣＤ６８（Ｍ１分極化、抗腫瘍形成性）、又はＣＤ１６３及びＣＤ２０６（Ｍ２分極化、抗腫瘍形成性）の発現によって一般に同定される（Ｅｌｌｉｏｔｔ ｅｔ ａｌ．２０１７）。

【0143】

Ｅｌｌｉｏｔｔ ｅｔ ａｌによる最近の総説は、がん患者において骨髄細胞サブセットを同定するために使用される多数の表現型をまとめている。これらの研究のほとんどは、循環細胞にそれらの分析の重点を置いており、骨髄ＣＤ１１ｂ^＋細胞の頻度の増加が、例えば、膀胱がん、乳がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん及び腎細胞がんの患者の血中に観察されている（Ｓｏｌｉｔｏ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｅｌｌｉｏｔｔ ｅｔ ａｌ．２０１７）。他の研究もまた、これらの細胞の腫瘍組織への浸潤のレベルを特徴付けることを試みた。結腸直腸腫瘍では、高頻度のＣＤ１４^＋ＣＤ１６９^＋細胞が観察された。これらの細胞は、ＣＤ１６３及びＣＤ２０６も発現したことから、Ｍ２分極化ＴＡＭであることが示唆された（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２０１５，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ １０（１０）：ｅ０１４１８１７（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。結腸直腸がん患者における別の研究はまた、健康な個体と比較して増加した数のＣＤ１１ｂ^＋ＣＤ３３^＋ＨＬＡ－ＤＲ^－細胞を検出した（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１３，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８（２）：ｅ５７１１４（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0144】

同様に、ＣＤ１１ｂ^＋骨髄細胞も膀胱腫瘍において同定されており、それらは全有核細胞の１０～２０％を占めていた（Ｅｒｕｓｌａｎｏｖ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ １３０（５）：１１０９－１９（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。更に高い頻度のＣＤ１１ｂ^＋細胞が膵臓がんにおいて観察され、ＣＤ４５^＋細胞の６０％より多くがＣＤ１１ｂ^＋ＣＤ１５^＋ＣＤ３３^＋であった（Ｐｏｒｅｍｂｋａ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ６１（９）：１３７３－８５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。また、ある研究では、非小細胞肺がん内の主要な骨髄細胞集団はＣＤ１１ｂ^＋ＣＤ１５^＋ＣＤ６６ｂ^＋好中球様集団であると結論付けた。興味深いことに、一旦これらの細胞が血液から腫瘍組織に移動すると、これらの細胞は上方制御されたＦｃγＲＩを含む発現プロファイルの改変を示す（Ｅｒｕｓｌａｎｏｖ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１２４（１２）：５４６６－８０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0145】

腫瘍浸潤細胞におけるＦｃγＲＩの発現
多数の研究がヒト腫瘍内の骨髄細胞の高い浸潤を確認したが、これらの細胞上のＦｃγＲの発現を詳細に探求した研究はない。しかしながら、いくつかの刊行物が腫瘍組織内のＦｃγＲＩ発現細胞の存在を示している。

【0146】

Ｍｏｒｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌによる研究（Ｍｏｒｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．１９９０，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．８０（３）：２８７－９４（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）は、免疫細胞化学により１２のヒト試料からの神経膠腫を評価し、これらを腫瘍周囲対照組織と比較した。この研究は、腫瘍周囲組織と比較して、神経膠腫における高いマクロファージの存在（マーカーＣＤ１６３、ＲＭ３／１を使用）、並びにＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）の増加を実証した。Ｇｒｉｅｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌによる、より最近の研究（Ｇｒｉｅｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９１（９）：４８８０－８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）は、様々な小児脳腫瘍型のフローサイトメトリー分析を実施することによりこれらの観察を確認した。ここで、高頻度のＣＤ４５^＋ＣＤ１１ｂ^＋骨髄細胞が、毛様細胞性星細胞腫及び上衣腫患者由来の組織に観察された。これらの細胞はまた、高レベルのＦｃγＲＩも発現した。

【0147】

脳腫瘍に加えて、ＦｃγＲＩ発現は他の種類の腫瘍についても示されている。Ｇｒｕｇａｎら（Ｇｒｕｇａｎ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８９（１１）：５４５７－６６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）は、ヒト乳房腫瘍組織内のＣＤ１１ｂ^＋ＣＤ１４^＋細胞の存在を実証した。これらの細胞は、高レベルのＦｃγＲＩ及びＦｃγＲＩＩａ、並びにＦｃγＲＩＩｂ及びＦｃγＲＩＩＩを発現することが示された。また、ＦｃγＲＩの発現を提示する消化管間質腫瘍において、ＣＤ４５^＋ＣＤ１１ｂ^＋ＣＤ１４^＋ＣＤ６８^＋ＴＡＭが同定された（Ｃａｖｎａｒ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２１０（１３）：２８７３－８６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。ＣＤ４５^＋ＣＤ１１ｂ^＋ＦｃγＲＩ^＋細胞も、結腸直腸がん患者において同定されており、これらの細胞は健康な対照組織と比較して、腫瘍組織において、より高いＦｃγＲＩの発現を示した（Ｎｏｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１６，Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．５（４）：ｅ７６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。ＦｃγＲＩ発現はまた、黒色腫転移についても実証されている（Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．２００６，Ａｃｔａ Ｏｎｃｏｌ ４５（４）：４００－５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0148】

ＩｇＧとＦｃγＲｓ又はＣ１ｑとの結合は、ヒンジ領域とＣＨ２ドメインに位置する残基によって決まる。ＣＨ２ドメインの２つの領域は、ＦｃγＲ及びＣ１ｑの結合に重要であり、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４では固有の配列を有する。２３３～２３６位のＩｇＧ２残基、並びに３２７、３３０及び３３１位のＩｇＧ４残基のヒトＩｇＧ１への置換は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを大きく減少させることが示された（Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（８）：２６１３－２４、Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７６（９）：６５９１－６０４（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。更に、Ｉｄｕｓｏｇｉｅらは、Ｋ３２２を含む異なる位置でのアラニン置換が、補体活性化を有意に減少させることを実証した（Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４（８）：４１７８－８４（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。同様に、マウスＩｇＧ２ＡのＣＨ２ドメインにおける変異は、ＦｃγＲＩ及びＣ１ｑとの結合を減少させることが示された（Ｓｔｅｕｒｅｒ．ｅｔ ａｌ．，１９９５．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５（３）：１１６５－７４（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0149】

ヒトＩｇＧ１のＣＨ２ドメインに数多くの変異が加えられ、ＡＤＣＣ及びＣＤＣへの影響がインビトロで試されてきた（上記引用文献を参照）。とりわけ、３３３位のアラニン置換は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣの両方を増加させることが報告された（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，ｓｕｐｒａ；Ｓｔｅｕｒｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９５，ｓｕｐｒａ）。Ｌａｚａｒ ｅｔ ａｌ．は、ＦｃγＲＩＩＩａに対してより高い親和性を有し、ＦｃγＲＩＩｂに対してより低い親和性を有し、結果としてＡＤＣＣの増強をもたらす三重変異体（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ）について記載した（Ｌａｚａｒ ｅｔ ａｌ．，２００６，ＰＮＡＳ １０３（１１）：４００５－４０１０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。同じ変異を用いて、ＡＤＣＣが増大した抗体を生成した（Ｒｙａｎ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．６：３００９－３０１８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。Ｒｉｃｈａｒｄｓらは、マクロファージによる標的細胞の食作用の増強を媒介する、改善されたＦｃγＲＩＩＩａ親和性及びＦｃγＲＩＩａ／ＦｃγＲＩＩｂ比を有する、わずかに異なる三重変異体（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ｇ２３６Ａ）を研究した（Ｒｉｃｈａｒｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００８．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．７（８）：２５１７－２７（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。

【0150】

ＩｇＧ４抗体は、そのエフェクター機能の欠如のために、細胞枯渇を伴わない受容体調節のための好ましいＩｇＧサブクラスを意味する。ＩｇＧ４分子は、Ｆａｂ－ａｒｍ交換と呼ばれる動的なプロセスで半分子を交換することができる。この現象は、治療用抗体と内因性ＩｇＧ４との間のインビボでも起こりうる。

【0151】

Ｓ２２８Ｐ変異は、この組換えプロセスを妨げ、それほど予測不能ではない治療用ＩｇＧ４抗体の設計を可能にすることが示されている（Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２７（８）：７６７－７１（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。

【0152】

更なる実施形態では、Ｆｃ領域のエフェクター機能は、その中のＣＨ２ドメイン内の炭水化物部分の修飾によって、例えば、産生中のフコース、ガラクトース、バイセクティングＮ－アセチルグルコサミン及び／又はシアル酸の相対レベルを変更することによって改変され得る（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，２００９，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．８（３）：２２６－３４ ａｎｄ Ｒａｊｕ，２００８，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０（４）：４７１－８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0153】

したがって、Ｆｃ領域中のフコース残基が欠如しているか又は少ない治療用抗体は、ヒトにおいて増強されたＡＤＣＣ活性を示し得ることが既知である（例えば、Ｐｅｉｐｐ ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｂｌｏｏｄ １１２（６）：２３９０－９、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ＆Ｓａｔｏｈ，２００９，ＭＡｂｓ １（３）：２３０－２６、Ｉｉｄａ ｅｔ ａｌ．，２００９，ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ ９；５８（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。低フコース抗体ポリペプチドは、キンフネンシンなどのマンノシダーゼの阻害剤を含有する培地中で培養した細胞における発現によって産生することができる（以下の実施例Ｉを参照）。

【0154】

抗体のグリコシル化を低フコース型に変更するための他の方法は、ラムノースを代謝することができない細胞における細菌酵素ＧＤＰ－６－デオキシ－Ｄ－リキソ－４－ヘキスロースレダクターゼの使用を含む（例えばＰｒｏＢｉｏＧｅｎ ＡＧ（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のＧｌｙｍａｘＸ（登録商標）技術を用いる）。

【0155】

低フコース抗体を作製するための別の方法は、抗体産生細胞におけるアルファ－（１，６）－フコシルトランスフェラーゼの阻害又は枯渇による（例えば、Ｌｏｎｚａ Ｌｔｄ（Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）のＰｏｔｅｌｌｉｇｅｎｔ（登録商標）ＣＨＯＫ１ＳＶ技術を用いる）。

【0156】

（完全な重鎖を形成するために）本明細書に開示の任意のＶＨ領域配列と組み合わせられ得る例示的な重鎖定常領域アミノ酸配列は、以下に再現されるＩｇＧ１重鎖定常領域配列である。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
［配列番号１２］

【0157】

他の重鎖定常領域配列は、当該技術分野で既知であり、本明細書に開示の任意のＶＨ領域と組み合わせることもできる。例えば、前述のように、好ましい定常領域は、本明細書で再現されるものなどの修飾されたＩｇＧ４定常領域である。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
［配列番号１３］

【0158】

この修飾されたＩｇＧ４配列は、ＩｇＧ４のコアヒンジの安定化をもたらし、ＩｇＧ４をより安定にし、Ｆａｂアーム交換を阻止する。

【0159】

別の好ましい定常領域は、以下に再現されるものなどの修飾ＩｇＧ４定常領域である。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＲＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
［配列番号１４］

【0160】

この修飾ＩｇＧ４配列は、ＦｃＲｎ結合の低下を呈し、したがって野生型ＩｇＧ４と比較して血清半減期の低下をもたらす。加えて、ＩｇＧ４のコアヒンジの安定化を呈し、ＩｇＧ４をより安定にし、Ｆａｂアーム交換を妨げる。

【0161】

また、本明細書で再現されるものなどの野生型ＩｇＧ４定常領域も、本発明のポリペプチドにおける使用に好適である。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ
［配列番号１５］

【0162】

（完全な軽鎖を形成するために）本明細書に開示の任意のＶＬ領域配列と組み合わせられ得る例示的な軽鎖定常領域アミノ酸配列は、以下に再現されるカッパ鎖定常領域配列である。
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
［配列番号１６］

【0163】

他の軽鎖定常領域配列は、当該技術分野で既知であり、本明細書に開示の任意のＶＬ領域と組み合わせることもできる。

【0164】

本発明の例示的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号１３及び１６のＩｇＧ４定常領域を含み得る。

【0165】

したがって、ＣＤ１３７に特異的に結合する例示的な抗体、又はその抗原結合断片は、
（ａ）配列番号１３の定常領域と一緒に配列番号１の可変領域を含む重鎖と、
（ｂ）配列番号１６の定常領域と一緒に配列番号２の可変領域を含む軽鎖と、を含み得る。

【0166】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列を有する２つの重鎖と、配列番号１８のアミノ酸配列を有する２つの軽鎖と、を含むか、又はそれらからなる、インタクトなＩｇＧ４分子であり得る。

【0167】

ＣＤ１３７に特異的に結合する代替の例示的な抗体、又は抗原結合断片は、
（ａ）配列番号１３の定常領域と一緒に配列番号１９の可変領域を含む重鎖と、
（ｂ）配列番号１６の定常領域と一緒に配列番号２０の可変領域を含む軽鎖と、を含み得る。

【0168】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、配列番号２９のアミノ酸配列を有する２つの重鎖と、配列番号３０のアミノ酸配列を有する２つの軽鎖と、を含むか、又はそれらからなる、インタクトなＩｇＧ４分子であり得る。

【0169】

一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、「融合」ポリペプチドであるか、又はそれを含む。

【0170】

薬物動態特性を改善するために、ある部分に融合されていることに加えて、本発明の併用療法の一部を形成するＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片はまた、当該ポリペプチドの精製を容易にするためにグルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）又はプロテインＡなどのポリペプチドに融合され得ることを理解されたい。そのような融合体の例は、当業者に周知である。同様に、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、Ｈｉｓ６などのオリゴ－ヒスチジンタグ、又は周知のＭｙｃタグエピトープなどの抗体によって認識されるエピトープに融合され得る。上述の抗体、又はその抗原結合断片の任意のバリアント又は誘導体への融合体もまた、本発明の範囲に含まれる。ＩＬ－１Ｒ結合特性又はインビボ半減期などの望ましい特性を保持又は改善する融合体（又はそのバリアント、誘導体若しくは融合体）が好ましいことを理解されたい。

【0171】

したがって、融合体は、本発明の併用療法に含まれる上述のポリペプチドに望ましい特徴を付与する更なる部分と一緒に、上に詳述したようなアミノ酸配列を含み得る。例えば、その部分は、ポリペプチドを検出若しくは単離すること、又はポリペプチドの細胞取り込みを促進することにおいて有用であり得る。当該部分は、当業者に周知であるように、例えば、ビオチン部分、放射活性部分、蛍光部分、例えば小さなフルオロフォア又は緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）フルオロフォアであり得る。この部分は、当業者に既知のように、免疫原性タグ、例えば、Ｍｙｃタグであり得るか、又は当業者に既知のように、ポリペプチドの細胞取り込みを促進することができる親油性分子又はポリペプチドドメインであり得る。

【0172】

当業者は、本発明の併用療法に含まれるＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、修飾又は誘導体化されている１つ以上のアミノ酸を含み得るか、又はそれらからなり得ることを理解するであろう。

【0173】

１つ以上のアミノ酸の化学誘導体は、官能側鎖との反応によって達成され得る。そのような誘導体化分子としては、例えば、遊離アミノ基が誘導体化されて、塩酸アミン、ｐ－トルエンスルホニル基、カルボキシベンゾキシ基、ｔ－ブチルオキシカルボニル基、クロロアセチル基又はホルミル基を形成している分子が挙げられる。遊離カルボキシル基は、塩、メチルエステル及びエチルエステル、又は他のタイプのエステル及びヒドラジドを形成するように誘導体化され得る。遊離ヒドロキシル基は、Ｏ－アシル又はＯ－アルキル誘導体を形成するために誘導体化され得る。また化学誘導体として、２０個の標準アミノ酸の天然に存在するアミノ酸誘導体を含有するペプチドも含まれる。例えば、４－ヒドロキシプロリンは、プロリンに置き換えられてもよく、５－ヒドロキシリジンは、リジンに置き換えられてもよく、３－メチルヒスチジンは、ヒスチジンに置き換えられてもよく、ホモセリンは、セリンに置き換えられてもよく、オルニチンは、リジンに置き換えられてもよい。誘導体はまた、必要な活性が維持される限り、１つ以上の付加又は欠失を含有するペプチドを含む。他の含まれる修飾は、アミド化、アミノ末端アシル化（例えば、アセチル化又はチオグリコール酸アミド化）、末端カルボキシルアミド化（例えば、アンモニア又はメチルアミンによる）などの末端修飾である。

【0174】

ペプチド模倣化合物も有用であり得ることは、当業者によって更に理解されるであろう。「ペプチド模倣物」という用語は、治療剤として特定のペプチドの立体構造及び望ましい特徴を模倣する化合物を指す。

【0175】

例えば、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、アミノ酸残基がペプチド（－ＣＯ－ＮＨ－）連結によって接合している分子だけでなく、ペプチド結合が逆転している分子も含み得る。そのようなｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅｒｓｏペプチド模倣物は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＭｅｚｉｅｒｅ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９，３２３０－３２３７に記載されるものなどの、当該技術分野で既知の方法を用いて作製されてもよい。このアプローチは、側鎖の配向ではなく、主鎖に関与する変化を含有する疑似ペプチドを作製することを含む。ＣＯ－ＮＨペプチド結合の代わりにＮＨ－ＣＯ結合を含有する、ｒｅｔｒｏ－ｉｎｖｅｒｓｅペプチドは、タンパク質分解に対してはるかに耐性がある。あるいは、上記ポリペプチドは、１つ以上のアミノ酸残基が、従来のアミド結合の代わりに－ｙ（ＣＨ_２ＮＨ）－結合によって連結されたペプチド模倣化合物であり得る。

【0176】

更なる代替において、ペプチド結合は、アミノ酸残基の炭素原子間の間隔を保持する適切なリンカー部分が使用されることを条件として、完全に分配されてもよく、リンカー部分が、ペプチド結合と実質的に同じ電荷分布及び実質的に同じ平坦性を有することが有利であり得る。

【0177】

また、エキソタンパク質分解消化に対する感受性を低下させるのに役立つように、上述の抗体、又はその抗原結合断片は、そのＮ末端又はＣ末端で都合よく遮断され得ることも理解されたい。

【0178】

Ｄ－アミノ酸及びＮ－メチルアミノ酸などの様々な非コードアミノ酸又は修飾アミノ酸も、哺乳動物ペプチドを修飾するために使用されている。加えて、推定される生体活性コンフォメーションは、環化などの共有結合的修飾によって、又はラクタム若しくは他のタイプの架橋の組み込みによって安定化されてもよく、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｖｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７５：２６３６及びＴｈｕｒｓｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１１１：１６６を参照されたい。

【0179】

典型的には、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、「裸の」抗体ポリペプチドであり、すなわち、細胞傷害性部分又は検出可能な部分などの任意の追加の機能的部分を含まない。例えば、治療効果が、例えば、炎症を低減するために、免疫細胞に対する本発明の併用療法に含まれる直接的作用によって媒介される場合、抗体は任意の細胞傷害活性を欠くことが有利であり得る。

【0180】

しかしながら、代替的な実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、例えば、診断（例えば、インビボイメージング）薬剤又は療法剤としてのそれらの意図された使用を容易にするために機能的部分を用いて増強されてもよい。したがって、一実施形態では、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、治療用部分と直接的又は間接的に連結している。好適な治療用部分は、がん細胞（又は関連する幹細胞若しくは前駆細胞）の成長を減少させるか、若しくは阻害すること、又は特に死滅させることができる部分である。例えば、療法剤は、放射性同位元素（例えば、^９０Ｙ、^１７７Ｌｕ、^９９Ｔｃ^ｍなど）又は細胞傷害性薬物（例えば、代謝拮抗薬、毒素、細胞分裂阻害薬）などの細胞傷害性部分であってもよい。

【0181】

あるいは、細胞傷害性部分は、光子活性化療法、中性子活性化療法、中性子誘導性オージェ電子療法、シンクロトロン照射療法、又は低エネルギーＸ線光子活性化療法などの活性化療法における使用に好適な１つ以上の部分を含み得るか、又はそれらからなり得る。

【0182】

任意選択的に、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、検出可能な部分を更に含んでもよい。例えば、検出可能な部分は、^９９ｍＴｃ、^１１１Ｉｎ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^７２Ａｓ、^８９Ｚｒ、^１２３Ｉ及び^２０１Ｔｌからなる群から選択される放射性同位元素などの放射性同位元素を含み得るか、又はそれらからなり得る。任意選択的に、薬剤は、^８６Ｙ／^９０Ｙ又は^１２４Ｉ／^２１１Ａｔなどの一対の検出可能な細胞傷害性の放射性核種を含み得る。あるいは、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、いわゆる「マルチモーリティ・セラノスティクス（Ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙ ｔｈｅｒａｇｎｏｓｔｉｃｓ）」を提供するために、検出可能な部分として、また細胞傷害性部分としてマルチモーダル様式で同時に作用することが可能な放射性同位元素を含んでもよい。したがって、結合部分は、放射性核種又は化学療法薬などの細胞傷害性薬物を用いた治療能力と一緒に、マルチイメージング（例えば、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ、光学的、又は超音波）の能力を有するナノ粒子に結合されてもよい。

【0183】

治療的部分及び／又は検出可能な部分（放射性同位元素、細胞傷害性部分など）は、抗体又はその断片に直接的又は間接的に連結していてもよい。好適なリンカーは当該技術分野で既知であり、例えば、補欠分子族、非フェノール系リンカー（Ｎ－スクシミジルベンゾエートの誘導体；ドデカボレート）、大環状化合物及び非環式キレート剤の両方のキレート化部分、例えば、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン－１，４，７，１０，四酢酸（ＤＯＴＡ）の誘導体、デフェロキサミン（ＤＦＯ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）の誘導体、Ｓ－２－（４－イソチオシアナトベンジル）－１，４，７－トリアザシクロノナン－１，４，７－三酢酸（ＮＯＴＡ）の誘導体、及び１，４，８，１１－テトラアザシクロドデカン－１，４，８，１１－四酢酸（ＴＥＴＡ）の誘導体、３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］－ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－４－（Ｓ）－（４－イソチオシアナト－ベンジル）－３，６，９－三酢酸（ＰＣＴＡ）の誘導体、５－Ｓ－（４－アミノベンジル）－１－オキサ－４，７，１０－トリアザシクロドデカン－４，７，１０－トリス（酢酸）（ＤＯ３Ａ）の誘導体、並びに他のキレート化部分を含む。

【0184】

好ましいリンカーの１つは、例えば、^１７７Ｌｕ－ＤＴＰＡ－［抗体ポリペプチド］において使用されるＤＴＰＡである。更に好ましいリンカーは、例えば、^８９Ｚｒ－ＤＦＯ－［抗体ポリペプチド］において使用されるデフェロキサミン、ＤＦＯである。

【0185】

しかしながら、当業者は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片を含む本発明の併用療法の多くの医学的用途が、細胞傷害性部分又は診断用部分の存在を必要としないことを理解するであろう。

【0186】

上で論じたように、本発明の併用療法に含まれる抗体ポリペプチドの産生のための方法は当該技術分野で周知である。

【0187】

好都合なことに、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片は、組換えポリペプチドであるか、又はそれを含む。そのような組換えポリペプチドの産生に好適な方法は、当該技術分野で周知であり、例えば、原核生物又は真核生物の宿主細胞における発現などである（例えば、文献内の関連性のある開示内容が参照により本明細書に組み込まれる、Ｇｒｅｅｎ＆Ｓａｍｂｒｏｏｋ，２０１２，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい）。

【0188】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体は、ポリクローナル抗体であってもよいが、抗体がモノクローナル抗体であること、又はその抗原結合断片、バリアント、融合体若しくは誘導体がモノクローナル抗体に由来することが好ましい。

【0189】

好適なモノクローナル抗体は、既知の技術、例えば、“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ；Ａ ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”，Ｈ Ｚｏｌａ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８８）及び“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ”，ＳＧＲ Ｈｕｒｒｅｌｌ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８２）」、に開示される技術によって調製され得る。多重特異性又は単一特異性のポリクローナル抗体が産生され得る。それらは単一特異性であることが好ましい。

【0190】

本発明の併用療法に含まれる抗体ポリペプチドはまた、ウサギ網状赤血球溶解物又はコムギ胚芽溶解物（Ｐｒｏｍｅｇａから入手可能）などの市販のインビトロ翻訳系を用いて産生することもできる。好ましくは、翻訳系は、ウサギ網状赤血球溶解物である。好都合には、翻訳系は、ＴＮＴ転写翻訳系（Ｐｒｏｍｅｇａ）などの転写系にカップリングされ得る。この系は、翻訳と同じ反応でコードＤＮＡポリヌクレオチドから好適なｍＲＮＡ転写物を生成する利点を有する。

【0191】

当業者は、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合断片が、あるいは、例えば周知の液相又は固相合成技術（例えば、ｔ－Ｂｏｃ又はＦｍｏｃ固相ペプチド合成）を用いて、人工的に合成され得ることを理解するであろう。

【0192】

（ｂ）更なる免疫療法剤（ＰＤ－１阻害剤）
本発明の併用療法は、更なる免疫療法剤を含み、更なる免疫療法剤は、ＰＤ－１阻害剤である。ＰＤ－１阻害剤は、がんの治療に有効であってもよく、かつ／又はＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合し得る。更なる免疫療法剤の治療上の利益は、阻害性免疫チェックポイント分子ＰＤ－１の機能を弱めることによって媒介され得ることが理解されるであろう。

【0193】

したがって、本発明の一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、がんの治療に有効な免疫療法剤である。

【0194】

「免疫療法剤」という用語は、対象における腫瘍又はがんに対する免疫応答をもたらすように宿主免疫系を刺激することができる任意の分子、ペプチド、抗体、又は他の薬剤を含むことを意図している。様々な免疫療法剤が本明細書に記載の組成物及び方法で有用である。一実施形態では、免疫療法剤は、ＰＤ－１に特異的に結合することができる抗ＰＤ－１抗体又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合することができる抗ＰＤ－Ｌ１抗体などの抗体、又はその抗原結合断片である。

【0195】

「免疫応答」という用語は、Ｔ細胞媒介性及び／又はＢ細胞媒介性免疫応答を含む。例示的な免疫応答には、Ｔ細胞応答、例えば、サイトカイン産生及び細胞傷害が含まれる。加えて、免疫応答という用語には、Ｔ細胞活性化、例えば、抗体産生（体液性応答）及びサイトカイン応答性細胞、例えば、マクロファージの活性化によって間接的にもたらされる免疫応答が含まれる。

【0196】

免疫チェックポイント分子は、ＣＤ４＋及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞、樹状細胞、ＮＫ細胞、及びマクロファージなどの免疫細胞の細胞表面上のタンパク質群だけではなく、免疫応答を調節する特定の腫瘍細胞上のタンパク質群も含む。ＰＤ－１が阻害性免疫チェックポイント分子であることは、当業者には理解されよう。

【0197】

ＰＤ－１などの１つ以上の免疫チェックポイント分子の遮断又は中和により、阻害性シグナル伝達が遮断されるか、又はさもなければ中和され、それにより、がんをより有効に治療するために、免疫応答が上方制御され得る。阻害性免疫チェックポイントを遮断するのに有用な例示的な薬剤としては、阻害性免疫チェックポイントタンパク質に結合し、かつ／又は不活性化若しくは阻害のいずれかをし得る抗体、小分子、ペプチド、ペプチド模倣薬、天然リガンド、及び天然リガンドの誘導体、又はそれらの断片；並びに阻害性免疫チェックポイント核酸の発現及び／若しくは活性を下方制御することができるＲＮＡ干渉、アンチセンス、核酸アプタマーなど、又はこれらの断片が挙げられる。免疫応答を上方制御するための例示的な薬剤としては、タンパク質とその天然受容体（複数可）との間の相互作用を遮断する１つ以上の阻害性免疫チェックポイントタンパク質に対する抗体、１つ以上の免疫チェックポイント阻害剤タンパク質の非活性化形態（例えば、ドミナントネガティブポリペプチド）、１つ以上の阻害性免疫チェックポイントタンパク質とその天然受容体（複数可）との間の相互作用を遮断する小分子又はペプチド、その天然受容体（複数可）に結合する融合タンパク質（例えば、抗体又は免疫グロブリンのＦｃ部分に融合した免疫チェックポイント阻害タンパク質の細胞外部分）、阻害性免疫チェックポイント核酸転写又は翻訳を遮断する核酸分子などが挙げられる。そのような薬剤は、１つ以上の阻害性免疫チェックポイントとその天然受容体（複数可）（例えば、抗体）との間の相互作用を直接的に遮断し、阻害性シグナル伝達を阻止し、免疫応答を上方制御することができる。あるいは、薬剤は、１つ以上の阻害性免疫チェックポイントタンパク質とその天然受容体（複数可）との間の相互作用を間接的に遮断し、阻害性シグナル伝達を阻止し、免疫応答を上方制御することができる。例えば、安定化した細胞外ドメインなどの免疫チェックポイントタンパク質リガンドの可溶性態様は、その受容体に結合して、適切なリガンドに結合するための受容体の有効濃度を間接的に低減することができる。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体及び／又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体を単独で、又は組み合わせて使用して、免疫チェックポイントを阻害する。

【0198】

したがって、一実施形態では、更なる免疫療法剤は、阻害性免疫チェックポイント分子に結合し、その機能を阻害するＰＤ－１阻害剤である。

【0199】

「ＰＤ－１阻害剤」（又は「ＰＤ－１経路阻害剤」）は、ＰＤ－１経路を阻害することができる要素を含む。

【0200】

ＰＤ－１は、そのリガンドＰＤ－Ｌ１又はＰＤ－Ｌ２と係合するとき、Ｔ細胞活性化の負の調節因子として機能する。ＰＤ－Ｌ１は、特に、黒色腫を含む多くの固形腫瘍によって発現する。したがって、これらの腫瘍は、Ｔ細胞上の阻害性ＰＤ－１受容体の活性化を通じて、免疫媒介性抗腫瘍効果を下方制御し得る。ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１との間の相互作用を遮断することによって、免疫応答のチェックポイントを取り除くことができ、抗腫瘍Ｔ細胞応答の増強につながる。この相互作用は、ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１又は任意の他の好適な薬剤に特異的な抗体によって遮断され得る。そのような抗体及び薬剤は、一般に、ＰＤ－１阻害剤と称され得る。本発明の方法のステップ（ｂ）における更なる免疫療法剤は、ＰＤ－１阻害剤である。

【0201】

したがって、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１（プログラム細胞死タンパク質１）とそのリガンドＰＤ－Ｌ１（プログラム死－リガンド１）との相互作用を遮断する。したがって、そのようなＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－１のいずれか又は両方に作用することができる。したがって、ＰＤ－１阻害剤という用語は、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１阻害剤の両方を含む。ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１免疫チェックポイントタンパク質の活性を遮断する。

【0202】

「ＰＤ－１」は、具体的には、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ００５００９．２（その配列は以下の配列番号３５に記載される）に記載されるような、ヒトＰＤ－１タンパク質を含む。ＰＤ－１は、科学文献ではＰＤ１、ＣＤ２７９、ＰＤＣＤ１及びＳＬＥＢ２としても既知である。

【化2】

［配列番号３５］

【0203】

「ＰＤ－Ｌ１」は、具体的には、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＩ１３７３５．１（その配列は以下の配列番号３６に記載される）に記載されるような、ヒトＰＤ－Ｌ１タンパク質を含む。ＰＤ－Ｌ１は、科学文献ではＣＤ２７４、Ｂ７－Ｈ１、Ｂ７－Ｈ、ＰＤＣＤ１Ｌ１及びＰＤＣＤ１ＬＧ１としても既知である。

【化3】

［配列番号３６］

【0204】

したがって、本発明の併用療法は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する、すなわち、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する特異性を有するＰＤ－１阻害剤を含む。「特異性」は、阻害剤が、インビボで、すなわち、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１がヒト体内に存在する生理学的条件下で、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合することができることを意味する。好ましくは、ＰＤ－１阻害剤は、インビボで任意の他のタンパク質（ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１以外）に結合しない。そのような結合特異性は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１を発現するトランスフェクト細胞を用いたＥＬＩＳＡ、免疫組織化学、免疫沈降、ウェスタンブロット、フローサイトメトリーなどの当該技術分野で周知の方法によって決定され得る。

【0205】

ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するＰＤ－１阻害剤は、好ましくは、１０×１０^－９Ｍ未満又は７×１０^－９Ｍ未満、より好ましくは４、又は２×１０^－９Ｍ未満、最も好ましくは１．２×１０^－９Ｍ未満であるＫｄ値でヒトＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合する。有利なことに、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に選択的に結合することができる、すなわち、任意の他のタンパク質よりもＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対して少なくとも１０倍強力に結合する。ＰＤ－１阻害剤は、好ましくは、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する、すなわち、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合するが、他の分子（例えば、ＯＸ４０及び／若しくはＣＤ４０）に結合しないか、又はより低い親和性（例えば、１０分の１低い親和性）で結合する。したがって、別の分子に結合する場合よりも高い結合親和性でＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合する。したがって、典型的には、ヒトＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体のＫｄは、マウスＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１、他の免疫チェックポイント分子、又は任意の他の無関係な物質若しくは環境中の付随する物質などの他の非標的分子に対するＫｄの２倍、好ましくは５倍、より好ましくは１０倍未満であろう。より好ましくは、Ｋｄは、５０倍未満、更により好ましくは１００倍未満、及び更により好ましくは２００倍未満であろう。

【0206】

相互作用（抗体とリガンドとの間の相互作用など）の全体的な親和性（ＫＤ）並びにオン速度（ｋａ）及びオフ速度（ｋｄ）を測定するための方法は、当該技術分野で周知である。例示的なインビトロ法は、添付の実施例に記載される。フローサイトメトリーに基づく方法を使用することも考えられる（Ｓｋｌａｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｂｉｏｍｏｌ Ｓｔｒｕｃｔ，（３１），９７－１１９，２００２）。

【0207】

本明細書で使用されるＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１という用語は、典型的には、ヒトＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１を指す。阻害剤は、非ヒト霊長類、例えばＭａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ（カニクイザル）由来のＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１などの、他の哺乳動物由来のＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１に対してある程度の結合親和性を有し得る。抗体は、好ましくは、マウスＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に結合せず、かつ／又は他の免疫チェックポイント分子に結合しない。

【0208】

一実施形態では、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するそのＰＤ－１阻害剤は、その天然状態でのＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１、例えば、細胞の表面上に局在化するＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対して親和性を有し得る。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１ ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断する。例えば、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１がＰＤ－１に結合する能力を阻害する様式で、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合してもよく、それによって、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断する。

【0209】

「細胞の表面上に局在化する」は、ＰＤ－１の１つ以上の領域が細胞表面の外面に存在するように、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１が細胞と会合していることを意味する。例えば、ＰＤ－１は、細胞外表面に提示された１つ以上の領域とともに細胞原形質膜に挿入され得る（すなわち、膜貫通タンパク質として配向される）。これは細胞によるＰＤ－１の発現の過程で起こり得る。したがって、一実施形態では、「細胞の表面上に局在化する」とは、「細胞の表面上で発現する」ことを意味し得る。あるいは、ＰＤ－１は、共有結合性及び／又はイオン性の相互作用で細胞の外側に存在して、それを細胞表面の特定の領域又は複数の領域に局在化させてもよい。

【0210】

一実施形態では、本明細書に記載のＰＤ－１阻害剤は、免疫チェックポイント遮断を介して、抗腫瘍免疫を誘導することができる。ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１がＰＤ－１に結合するのを阻害する様式で、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に結合し、すなわち、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断する。ＰＤ－１阻害剤は、Ｔ細胞応答を増強することができ、例えば、Ｔ細胞エフェクター機能を増強又は回復することができる。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、腫瘍反応性ＣＤ８＋Ｔ細胞の確立された腫瘍への浸潤を促進し得る。

【0211】

したがって、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１を発現する細胞の活性を調節することができ、当該調節は、当該細胞の活性の増加又は低下である。細胞は、典型的にはＴ細胞である。阻害剤は、ＣＤ４＋若しくはＣＤ８＋エフェクター細胞の活性を増加させることができるか、又は制御性Ｔ細胞（Ｔ ｒｅｇ）の活性を低下させることができるか、若しくは当該細胞を枯渇させることができる。いずれの場合も、抗体の正味の効果は、エフェクターＴ細胞、特にＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＮＫエフェクターＴ細胞の活性の増加である。エフェクターＴ細胞の活性の変化を決定するための方法は、周知であり、先に記載された通りである。

【0212】

ＰＤ－１阻害剤は、好ましくはインビトロでＴ細胞（好ましくはＣＤ８＋Ｔ細胞）における活性の増加を引き起こし、任意選択的に、当該活性の増加は、Ｔ細胞による増殖、ＩＦＮ－γ産生及び／又はＩＬ－２産生の増加である。増加は、同じアッセイで測定されたアイソタイプ対照抗体によって引き起こされる活性の変化より、好ましくは少なくとも２倍、より好ましくは少なくとも１０倍、更により好ましくは少なくとも２５倍高い。

【0213】

一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、別の免疫療法の有効性を改善することができる。

【0214】

一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、腫瘍内の細胞の表面上で発現される、そのリガンドＰＤ－Ｌ１に対するプログラム死１（ＰＤ－１）受容体を遮断する（Ｒｉｂａｓ ａｎｄ Ｗｏｌｃｈｏｋ ２０１８）。ＰＤ－１は、免疫チェックポイントであり、その阻害機能は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達分子の下流のシグナル伝達分子を脱リン酸化するチロシンホスファターゼＳＨＰ－２によって媒介される。好ましい実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、好ましくは、チロシンホスファターゼＳＨＰ－２（Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達分子の下流のシグナル伝達分子を脱リン酸化する）によって媒介される阻害性シグナル伝達を遮断することによって、ＰＤ－１発現Ｔ細胞を再活性化する。

【0215】

ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１機能を阻害することができる抗ＰＤ－１抗体又はその抗原結合断片（例えば、ペンブロリズマブ（ランブロリズマブとしても既知である）、ニボルマブ、ピジリズマブ、セミプリマブ、ＡＭＰ－２２４、ＰＤＲ－００１、ＭＥＤＩ－０６８０（ＡＭＰ－５１４としても既知である）、ＪＴＸ－４０１４（ピミバリマブ）、スパルタリズマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、ドスタリマブ及びＩＮＣＭＧＡ０００１２（レチファンリマブ）であってもよい。

【0216】

あるいは、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１機能を阻害することができる抗ＰＤ－Ｌ１抗体、又はその抗原結合断片を含み得るか、又はそれらからなり得る（例えば、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（商標）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ－４７３６）、アベルマブ、ＭＤＸ－１１０５、ＫＮ０３５（エンバフォリマブ）及びＣＫ－３０１（コシベリマブ））を含み得るか、又はそれらからなり得る。

【0217】

あるいは、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１の小分子又はペプチド系阻害剤であってもよい。例えば、ＰＤ－１阻害剤は、ＣＡ－１７０などのＰＤ－Ｌ１の小分子阻害剤であってもよい。あるいは、ＰＤ－１阻害剤は、ＡＵＮＰ１２又はＢＭＳ－９８６１８９などのＰＤ－Ｌ１のペプチド阻害剤であってもよい。

【0218】

一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１ ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断するエピトープに結合する。

【0219】

一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ヒトＰＤ－１に対する参照抗体ペムブロリズマブ又はニボルマブの結合を阻害することができる。

【0220】

別の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ヒトＰＤ－Ｌ１に対する参照抗体アテゾリズマブの結合を阻害することができる。

【0221】

「ヒトＰＤ－１に対する参照抗体ペムブロリズマブの結合を阻害することができる」とは、本発明の併用療法のＰＤ－１阻害剤の存在が、ヒトＰＤ－１に対するペムブロリズマブの結合を全体的又は部分的に阻害することを意味する。同様に、「ヒトＰＤ－１に対する参照抗体ニボルマブの結合を阻害することができる」とは、本発明の併用療法の抗体ポリペプチドの存在が、ヒトＰＤ－１に対するニボルマブの結合を全体的又は部分的に阻害することを意味する。したがって、本発明の併用療法で使用されるＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１に対する結合について、「参照抗体」ペムブロリズマブ及び／又は「参照抗体」ニボルマブと競合し得る。そのような競合的結合阻害は、当該技術分野で周知のアッセイ及び方法を用いて、例えば、固定化されたＰＤ－１を有するＢＩＡｃｏｒｅチップを使用して、試験される抗体ポリペプチドを用いて、また、用いずに、参照抗体ペムブロリズマブ及びニボルマブの存在下でインキュベートすることにより決定することができる。あるいは、参照抗体ペムブロリズマブ又はニボルマブをＢＩＡｃｏｒｅチップの表面に固定化し、ＰＤ－１抗原を、固定化した抗体に結合させ、次いで二次抗体を同時ＰＤ－１結合能について試験する、ペアワイズマッピング手法を用いることができる（例えば、‘ＢＩＡｃｏｒｅ Ａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ’，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２９－０１９４－００ ＡＡ ０５／２０１２（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0222】

「ヒトＰＤ－Ｌ１に対する参照抗体アテゾリズマブの結合を阻害することができる」とは、本発明の併用療法の抗体ポリペプチドの存在が、ヒトＰＤ－Ｌ１に対するアテゾリズマブの結合を全体的又は部分的に阻害することを意味する。したがって、本発明の併用療法で使用されるＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１に対する結合について、「参照抗体」アテゾリズマブと競合し得る。そのような競合的結合阻害は、当該技術分野で周知のアッセイ及び方法を用いて、例えば、固定化されたＰＤ－Ｌ１を有するＢＩＡｃｏｒｅチップを使用して、試験される抗体ポリペプチドを用いて、また、用いずに、参照抗体アテゾリズマブの存在下でインキュベートすることにより決定することができる。あるいは、参照抗体アテゾリズマブをＢＩＡｃｏｒｅチップの表面に固定化し、ＰＤ－Ｌ１抗原を、固定化した抗体に結合させ、次いで二次抗体を同時ＰＤ－Ｌ１結合能について試験する、ペアワイズマッピング手法を用いることができる（例えば、‘ＢＩＡｃｏｒｅ Ａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ’，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２９－０１９４－００ ＡＡ ０５／２０１２（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0223】

更なる代替例では、競合的結合阻害は、フローサイトメトリーを用いて決定することができる。例えば、試験抗体が、細胞表面抗原に対するペムブロリズマブ又はニボルマブ（又はアテゾリズマブ）参照抗体の結合を阻害することができるかどうかを調べるために、抗原を発現する細胞を、細胞を洗浄する前に試験抗体とともに２０分間プレインキュベートし、フローサイトメトリーによって検出することができるフルオロフォアにコンジュゲートした参照ペムブロリズマブ又はニボルマブ（又はアテゾリズマブ）抗体とともにインキュベートすることができる。試験抗体とのプレインキュベーションがフローサイトメトリーにおける参照ペムブロリズマブ又はニボルマブ（又はアテゾリズマブ）抗体の検出率を低下させる場合、試験抗体は、細胞表面抗原に対する参照抗体の結合を阻害する。試験された抗体がＰＤ－１（又はＰＤ－Ｌ１）に対して高い親和性を示す場合、期間を短くしたプレインキュベーションが使用され得る（又は、プレインキュベーションを全くしない）。

【0224】

「ペムブロリズマブ」とは、それぞれ配列番号３３及び３４のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖を含むインタクトなＩｇＧ抗体を意味する。
ペムブロリズマブの重鎖配列（配列番号３３）：

【化4】

ペムブロリズマブの軽鎖配列（配列番号３４）：

【化5】

【0225】

「ニボルマブ」とは、それぞれ配列番号３１及び３２のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖を含むインタクトなＩｇＧ抗体を意味する。
ニボルマブの重鎖配列（配列番号３１）：

【化6】

ニボルマブの軽鎖配列（配列番号３２）

【化7】

ピジリズマブの重鎖配列（配列番号３７）

【化8】

ピジリズマブの軽鎖配列（配列番号３８）

【化9】

セミプリマブの重鎖配列（配列番号３９）

【化10】

セミプリマブの軽鎖配列（配列番号４０）

【化11】

スパルタリズマブの重鎖配列（配列番号４１）

【化12】

スパルタリズマブの軽鎖配列（配列番号４２）

【化13】

カムレリズマブの重鎖配列（配列番号４３）

【化14】

カムレリズマブの軽鎖配列（配列番号４４）

【化15】

チスレリズマブの重鎖配列（配列番号４５）

【化16】

チスレリズマブの軽鎖配列（配列番号４６）

【化17】

トリパリマブの重鎖配列（配列番号４７）

【化18】

トリパリマブの軽鎖配列（配列番号４８）

【化19】

ドスタルリマブの重鎖配列（配列番号４９）

【化20】

ドスタルリマブの軽鎖配列（配列番号５０）

【化21】

ＩＮＣＭＧＡ０００１２の重鎖配列（配列番号５１）

【化22】

ＩＮＣＭＧＡ０００１２の軽鎖配列（配列番号５２）

【化23】

【0226】

「アテゾリズマブ」とは、それぞれ配列番号５３及び５４のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖を含むインタクトなＩｇＧ抗体を意味する。
アテゾリズマブの重鎖配列（配列番号５３）

【化24】

アテゾリズマブの軽鎖配列（配列番号５４）

【化25】

デュルバルマブの重鎖配列（配列番号５５）

【化26】

デュルバルマブの軽鎖配列（配列番号５６）

【化27】

アベルマブの重鎖配列（配列番号５７）

【化28】

アベルマブの軽鎖配列（配列番号５８）

【化29】

ＣＫ－３０１（コシベリマブ）の重鎖配列（配列番号５９）

【化30】

ＣＫ－３０１（コシベリマブ）の軽鎖配列（配列番号６０）

【化31】

ＪＴＸ－４０１４の重鎖配列（配列番号６１）

【化32】

ＪＴＸ－４０１４の軽鎖配列（配列番号６２）

【化33】

【0227】

そのようなＰＤ－１阻害剤はまた、ＵＳ８３５４５０９Ｂ２及びＵＳ８７７９１０５Ｂ２に記載されており、ＵＳ８３５４５０９Ｂ２及びＵＳ８７７９１０５Ｂ２のＰＤ－１阻害剤（特に抗ＰＤ－１抗体）は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0228】

一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、抗体又はその抗原結合断片であり、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合し、本発明の併用療法に含まれる抗体、又は抗原結合断片は、抗体Ｆｃ領域を含む。当業者は、Ｆｃ部分がＩｇＧ抗体、又は異なるクラスの抗体（ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ又はＩｇＥなど）に由来し得ることを理解するであろう。一実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４抗体に由来する。しかしながら、有利には、Ｆｃ領域はＩｇＧ４抗体に由来する。

【0229】

Ｆｃ領域は、天然に存在し得る（例えば、内因性に産生された抗体の一部）か、又は人工的であり得る（例えば、天然に存在するＦｃ領域に対して１つ以上の点変異を含む）。Ｆｃ領域のバリアントは、典型的には、ＦｃγＲ及び／又は新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）などのＦｃ受容体に改変された親和性で結合し、ポリペプチドの機能及び／又は半減期を改善する。生物学的機能及び／又は半減期は、天然Ｆｃ領域を含むポリペプチドの半減期と比較して、延長するか又は減少するかのいずれかであり得る。バリアントＦｃ領域の存在によって調節され得るそのような生物学的機能の例としては、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、及び／又はアポトーシスが挙げられる。

【0230】

したがって、Ｆｃ領域は、天然に存在し得る（例えば、内因性に産生されたヒト抗体の一部）か、又は人工的であり得る（例えば、天然に存在するヒトＦｃ領域に対して１つ以上の点変異を含む）。

【0231】

当該技術分野で周知であるように、抗体のＦｃ領域は、その血清中半減期と、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、及び抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）などのエフェクター機能を媒介する。

【0232】

Ｆｃ領域は、本発明の併用療法のＣＤ１３７抗体に関して上述のように操作され得る。

【0233】

抗体及び阻害剤
以下の定義は、本発明のＣＤ１３７及びＰＤ－１阻害剤のいずれか又は両方に適用され、ＰＤ－１阻害剤は、抗体（ＰＤ－１に特異的な抗体又はＰＤ－Ｌ１に特異的な抗体のいずれか）である。

【0234】

本明細書で言及される「抗体」という用語は、全抗体及び任意の抗原結合断片（すなわち、「抗原結合部分」）又はその一本鎖を含む。抗体は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖、又はそれらの抗原結合部分を含む糖タンパク質を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書でＶＨと略される）及び重鎖定常領域から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書でＶＬと略される）及び軽鎖定常領域から構成される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された領域が点在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域に更に細分することができる。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織又は因子に対する免疫グロブリンの結合を媒介し得る。

【0235】

「抗体又はその抗原結合断片」は、実質的にインタクトな抗体分子だけではなく、キメラ抗体、ヒト化抗体、単離されたヒト抗体、単鎖抗体、二重特異性抗体、抗体重鎖、抗体軽鎖、抗体重鎖及び／又は軽鎖のホモ二量体及びヘテロ二量体、並びにそれらの抗原結合断片及び誘導体を含む。好適な抗原結合断片及び誘導体として、必ずしも限定されないが、Ｆｖ断片（例えば、単鎖Ｆｖ及びジスルフィド結合Ｆｖ）、Ｆａｂ様断片（例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片及びＦ（ａｂ）_２断片）、単一可変ドメイン（例えばＶ_Ｈ及びＶ_Ｌドメイン）及びドメイン抗体（ｄＡｂ、単一及び二重形式［すなわちｄＡｂ－リンカー－ｄＡｂ］を含む）が挙げられる。抗体全体ではなく、抗体断片を使用することの利点は、数倍になる。断片のサイズが小さくなることで、固形組織への浸透性が向上するなど、薬理学的特性が改善される可能性がある。更に、Ｆａｂ、Ｆｖ、ＳｃＦｖ、及びｄＡｂ抗体断片などの抗原結合断片は、大腸菌で発現させ、及びそこから分泌させることができるので、大量に生産することが容易にできる。

【0236】

例えば、抗原結合断片は、ｓｃＦｖ分子、すなわち、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌパートナードメインが柔軟なオリゴペプチドを介して連結している分子を含んでもよい。

【0237】

重鎖は、ＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４サブタイプ）、ＩｇＡ（ＩｇＡ１及びＩｇＡ２サブタイプ）、ＩｇＭ及びＩｇＥを含む任意のアイソタイプのものであり得る。

【0238】

軽鎖には、カッパ鎖及びラムダ鎖が含まれる。

【0239】

抗体としては、合成抗体、モノクローナル抗体、単一ドメイン抗体、一本鎖抗体、組換え生成された抗体、多重特異性抗体（二重特異性抗体を含む）、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、細胞内抗体、ｓｃＦｖ（例えば、単一特異的及び二重特異性などを含む）、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、並びに上記のもののうちのいずれかのエピトープ結合断片が挙げられるが、これらに限定されない。

【0240】

特に関連しているのは、それが自然に生じ得るものとは異なる物理的環境に存在するように「単離された」、又はアミノ酸配列において天然に存在する抗体とは異なるように修飾された抗体及びその抗原結合断片である。

【0241】

また、「抗体又はその抗原結合断片」という表現は、抗体模倣物（例えば、高い安定性を持ちながら特定の位置で可変性を導入できる非抗体足場構造）を包含することを意図する。生化学の当業者は、Ｇｅｂａｕｅｒ＆Ｓｋｅｒｒａ，２００９，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ １３（３）：２４５－２５５（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）に論じられるように、多くのそのような分子に精通しているであろう。例示的な抗体模倣物として、アフィボディ（トリネクチンとも称される、Ｎｙｇｒｅｎ，２００８，ＦＥＢＳ Ｊ，２７５，２６６８－２６７６）、ＣＴＬＤ（テトラネクチンとも称される、Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．（２００６），２７－３０）、アドネクチン（モノボディとも呼ばれる；Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３５２（２００７），９５－１０９）、アンチカリン（Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ（２００５），１０，２３－３３）、ＤＡＲＰｉｎｓ（アンキリン；Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００４），２２，５７５－５８２）、アビマー（Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００５），２３，１５５６－１５６１）、マイクロボディ（ＦＥＢＳ Ｊ，（２００７），２７４，８６－９５）、ペプチドアプタマー（Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．（２００５），５，７８３－７９７）、クニッツドメイン（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（２００６）３１８，８０３－８０９）、アフィリン（Ｔｒｅｎｄｓ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００５），２３，５１４－５２２）、アフィマー（Ａｖａｃｔａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗｅｔｈｅｒｂｙ，ＵＫ）が挙げられる。

【0242】

当業者は更に、本発明が、現在存在するか、又は将来的に存在するかにかかわらず、抗体及びその抗原結合断片の修飾態様、例えば、ポリエチレングリコール又は別の好適なポリマーの共有結合により修飾された態様を含む併用療法も包含することを理解するであろう（以下を参照）。

【0243】

抗体は、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体であり得る。抗体は、任意の好適な方法によって産生され得る。

【0244】

抗体及び抗体断片を生成する方法は、当該技術分野で周知である。例えば、抗体分子のインビボ産生の誘導、免疫グロブリンライブラリーのスクリーニング（Ｏｒｌａｎｄｉ．ｅｔ ａｌ，１９８９．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：３８３３－３８３７、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ ３４９：２９３－２９９（それらの開示は参照により本明細書に組み込まれる））、又は培養中の細胞株によるモノクローナル抗体分子の生成を用いるいくつかの方法のうちのいずれか１つを介して抗体を生成することができる。ハイブリドーマ法、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）ハイブリドーマ法などがあるが、これらに限定されない（Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ ．，１９７５．Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５０４９７、Ｋｏｚｂｏｒ ｅｔ ａｌ．，１９８５．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ８１：３１－４２；Ｃｏｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９８３．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８０：２０２６－２０３０；Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，１９８４．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．６２：１０９－１２０（その開示は参照により本明細書に組み込まれる））。

【0245】

モノクローナル抗体の産生のための好適な方法はまた、“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”，Ｈ Ｚｏｌａ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８８、その開示は参照により本明細書に組み込まれる）及び“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ｊ Ｇ Ｒ Ｈｕｒｒｅｌｌ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９８２、その開示は参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。

【0246】

同様に、抗体断片は、当該技術分野で周知の方法を使用して得ることができる（例えば、Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅ，１９８８，“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ”，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、その開示は参照により本明細書に組み込まれる）。例えば、本発明による抗体断片は、抗体のタンパク質分解性加水分解によって、又は断片をコードするＤＮＡのＥ．ｃｏｌｉ若しくは哺乳動物細胞（例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞培養物又は他のタンパク質発現系）における発現によって調製することができる。あるいは、抗体断片は、従来の方法による全抗体のペプシン又はパパイン消化によって得ることができる。

【0247】

抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」という用語は、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上の断片を指す（例えば、ＣＤ１３７、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１）。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって発揮され得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例としては、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片、及び単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。ＳｃＦｖなどの一本鎖抗体、及びＶＨＨ及びラクダ抗体などの重鎖抗体も、抗体の「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含されることが意図される。これらの抗体断片は、当業者に既知の従来の技術を使用して得られてもよく、断片は、インタクトな抗体と同じ方法で、有用性についてスクリーニングされてもよい。

【0248】

「結合活性」及び「結合親和性」という用語は、分子（例えば、抗体分子）が標的に結合する傾向又は結合しない傾向を指すことが意図されている。結合親和性は、抗体及びその標的の解離定数（Ｋｄ）を決定することによって定量化され得る。同様に、抗体のその標的に対する結合の特異性は、抗体及び別の非標的分子に対する解離定数と比較して、その標的に対する抗体の比較解離定数（Ｋｄ）の観点から定義され得る。

【0249】

典型的には、標的に対する抗体のＫｄは、無関係な物質若しくは環境中の付随する物質などの他の非標的分子に対するＫｄの２倍、好ましくは５倍、より好ましくは１０倍未満であろう。より好ましくは、Ｋｄは、５０倍未満、更により好ましくは１００倍未満、及び更により好ましくは２００倍未満であろう。

【0250】

この解離定数の値は、周知の方法によって直接決定することができ、複雑な混合物についてでさえ、例えば、Ｃａｃｅｃｉ ｅｔ ａｌ．（Ｂｙｔｅ ９：３４０－３６２，１９８４）に記載されるものなどの方法によって算出することができる。例えば、Ｗｏｎｇ＆Ｌｏｈｍａｎ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０，５４２８－５４３２，１９９３）に開示されるものなどの二重フィルターニトロセルロースフィルター結合アッセイを使用して、Ｋｄを確立することができる。例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット、ＲＩＡ、及びフローサイトメトリー分析を含む、標的に対する抗体などのリガンドの結合能力を評価するための他の標準アッセイが、当該技術分野で既知である。抗体の結合速度（例えば結合親和性）もまた、当該技術分野で既知の標準アッセイによって、例えばＢｉａｃｏｒｅ（商標）システム分析などによって評価することができる。

【0251】

標的に対する抗体の結合が、その標的の別の既知のリガンド、例えば別の抗体などによる標的の結合と比較される、競合結合アッセイを実施してもよい。５０％の阻害が生じる濃度は、Ｋｉとして既知である。理想的な条件下では、ＫｉはＫｄと等価である。Ｋｉ値は、Ｋｄ未満になることは決してないため、好都合なことに、Ｋｉの測定値を代入してＫｄの上限を求めることができる。

【0252】

本発明の併用療法及び方法で使用される抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、別の非標的分子に結合するその親和性の少なくとも２倍、１０倍、５０倍、１００倍以上の親和性で、その標的に結合することができる。

【0253】

本発明の併用療法及び方法で使用されるＰＤ－１阻害剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）は、好ましくは、別の非標的分子に結合するその親和性の少なくとも２倍、１０倍、５０倍、１００倍以上の親和性で、その標的に結合することができる。

【0254】

本発明の方法で使用するための抗体は、ヒト抗体であり得る。「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことを意図する。更に、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域はまた、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでのランダム若しくは部位特異的変異誘発によって、又はインビボでの体細胞変異によって導入される変異）を含み得る。しかしながら、「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖配列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフト接合された抗体を含むことを意図していない。そのような抗体は、典型的には、キメラ又はヒト化と称される。

【0255】

本発明の方法を使用するためのヒト抗体は、典型的には、ヒトモノクローナル抗体である。そのようなヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えば、トランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生され得る。ヒト抗体はまた、ヒトリンパ球のインビトロ免疫付与、続いてエプスタイン・バー・ウイルスによるリンパ球の形質転換によって調製され得る。「ヒト抗体誘導体」という用語は、ヒト抗体の任意の修飾形態、例えば、抗体と別の薬剤又は抗体とのコンジュゲートを指す。

【0256】

あるいは、本発明の方法における使用のための抗体は、ヒト化抗体であり得る。

【0257】

「ヒト化」という用語は、非ヒト種由来の免疫グロブリンに由来する抗原結合部位と、ヒト免疫グロブリンの構造及び／又は配列に基づく残りの免疫グロブリン構造とを有する、一般的に組換え技術を使用して調製された抗体分子を指す。抗原結合部位は、ヒト定常ドメインに融合された完全な非ヒト抗体可変ドメイン、又はヒト可変ドメインの適切なヒトフレームワーク領域にグラフト接合されたそのような可変ドメインの相補性決定領域（ＣＤＲ）のみを含み得る。そのようなヒト化分子のフレームワーク残基は、野生型（例えば、完全ヒト）であってもよく、又はそれらは、配列がヒト化の基礎として機能しているヒト抗体に見出されない１つ以上のアミノ酸置換を含有するように修飾されてもよい。ヒト化は、分子の定常領域がヒト個体における免疫原として機能する可能性を低減又は排除するが、外来可変領域に対する免疫応答の可能性は残る（ＬｏＢｕｇｌｉｏ，Ａ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）“Ｍｏｕｓｅ／Ｈｕｍａｎ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｍａｎ：Ｋｉｎｅｔｉｃｓ Ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ，”Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）８６：４２２０－４２２４）。別のアプローチは、ヒト由来の定常領域を提供することだけでなく、可変領域を修正して、それらを可能な限りヒト形態に近づけることに焦点を当てる。重鎖及び軽鎖の両方の可変領域は、問題の抗原に応答して変化し、結合能力を決定する３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し、所与の種において比較的保存され、ＣＤＲに足場を提供すると推定される４つのフレームワーク領域（ＦＲ）に隣接することが既知である。非ヒト抗体が、特定の抗原に関して調製される場合、可変領域は、修飾されるヒト抗体中に存在するＦＲ上に、非ヒト抗体に由来するＣＤＲをグラフト接合することによって「再形成」又は「ヒト化」され得る。様々な抗体に対するこのアプローチの適用は、Ｓａｔｏ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５３：８５１－８５６．Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．（１９８８）“Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，” Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２７、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９８８）“Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｇｒａｆｔｉｎｇ Ａｎ Ａｎｔｉｌｙｓｏｚｙｍｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ，” Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４－１５３６、Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ，Ｃ．Ａ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）“Ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ａ Ｍｏｕｓｅ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｂｙ ＣＤＲ－Ｇｒａｆｔｉｎｇ：Ｔｈｅ Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ Ｏｆ Ｆｒａｍｅｗｏｒｋ Ｒｅｓｉｄｕｅｓ Ｏｎ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，” Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ４：７７３－３７８３、Ｍａｅｄａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）“Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｏｆ Ｒｅｓｈａｐｅｄ Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｗｉｔｈ ＨＩＶ－Ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ Ａｃｔｉｖｉｔｙ，” Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ ２：１２４－１３４、Ｇｏｒｍａｎ，Ｓ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）“Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ Ａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ＣＤ４ Ａｎｔｉｂｏｄｙ，” Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）８８：４１８１－４１８５、Ｔｅｍｐｅｓｔ，Ｐ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）“Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ Ａ Ｈｕｍａｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｏ Ｉｎｈｉｂｉｔ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｓｙｎｃｙｔｉａｌ Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ，” Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：２６６－２７１、Ｃｏ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）“Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ，” Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）８８：２８６９－２８７３、Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）“Ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ａｎ Ａｎｔｉ－ｐ１８５ｈｅｒ２ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｏｒ Ｈｕｍａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，” Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）８９：４２８５－４２８９、及びＣｏ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）“Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ａｎｄ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｗｉｔｈ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ Ｆｏｒ Ｔｈｅ ＣＤ３３ Ａｎｔｉｇｅｎ，”Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１１４９－１１５４によって報告されている。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、全てのＣＤＲ配列を保存する（例えば、マウス抗体からの６つ全てのＣＤＲを含有するヒト化マウス抗体）。他の実施形態では、ヒト化抗体は、元の抗体に対して改変された１以上のＣＤＲ（１、２、３、４、５、６）を有し、これらは元の抗体に由来する１つ以上のＣＤＲに「由来する」１つ以上のＣＤＲとも呼ばれる。抗原をヒト化する能力は周知である（例えば、米国特許第５，２２５，５３９号、同第５，５３０，１０１号、同第５，５８５，０８９号、同第５，８５９，２０５号、同第６，４０７，２１３号、同第６，８８１，５５７号を参照されたい）。

【0258】

抗体は、本明細書に開示される特定の抗体のうちの１つのバリアント若しくは断片であってもよく、又はそれらを含んでいてもよく、但し、上述のバリアント若しくは断片は、その標的に対する特異性を保持する。例えば、抗体は、本明細書に開示される特定の抗ＣＤ１３７抗体のうちの１つのバリアント若しくは断片であってもよく、又はそれらを含んでいてもよく、但し、上述のバリアント若しくは断片は、ＣＤ１３７に対する特異性を保持する。あるいは、又は加えて、抗体は、本明細書に開示される特定の抗ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１抗体のうちの１つのバリアント若しくは断片であってもよく、又はそれらを含んでいてもよく、但し、上述のバリアント若しくは断片は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する特異性を保持する。

【0259】

断片は、好ましくは、上述の抗体の抗原結合部分である。断片は、先端切断、例えば、ポリペプチドのＮ末端及び／又はＣ末端からの１つ以上のアミノ酸の除去によって作製され得る。このようにして、最大１０個、最大２０個、最大３０個、最大４０個、又はそれ以上のアミノ酸をＮ末端及び／又はＣ末端から除去してもよい。断片は、１つ以上の内部欠失によっても生成され得る。

【0260】

バリアントは、本明細書に開示される特定の抗ＣＤ１３７抗体又は他の抗体（例えば、抗ＰＤ－１抗体又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）の配列に関して、１つ以上の置換、欠失、又は付加を含み得る。バリアントは、本明細書に開示される特定の配列からの１個、２個、３個、４個、５個、最大１０個、最大２０個、最大３０個、又はそれ以上のアミノ酸置換及び／又は欠失を含み得る。「欠失」バリアントは、個々のアミノ酸の欠失、アミノ酸の小群、例えば２個、３個、４個、若しくは５個のアミノ酸の欠失、又はより大きなアミノ酸領域の欠失、例えば特定のアミノ酸ドメイン若しくは他の特徴の欠失を含んでもよい。「置換」バリアントは、好ましくは、１個以上のアミノ酸を同数のアミノ酸に置き換え、保存的なアミノ酸置換を行うことを伴う。例えば、アミノ酸は、類似の特性を有する代替的なアミノ酸、例えば、別の塩基性アミノ酸、別の酸性アミノ酸、別の中性アミノ酸、別の荷電アミノ酸、別の親水性アミノ酸、別の疎水性アミノ酸、別の極性アミノ酸、別の芳香族アミノ酸、又は別の脂肪族アミノ酸で置換されてもよい。

【0261】

好適な置換基を選択するために使用することのできる２０種の主なアミノ酸のいくつかの特性は、以下の通りである。

【表2】

【0262】

好ましい「バリアント」としては、天然に存在するアミノ酸の代わりに、配列内に現れるアミノ酸がその構造的類似体であるものが挙げられる。配列内で使用されるアミノ酸はまた、抗体の機能が著しく悪影響を受けない限り、誘導体化又は修飾、例えば標識されてもよい。

【0263】

バリアントは、抗体の合成中に、若しくは産生後の修飾によって調製されてもよく、又は抗体が組換え形態である場合は、部位特異的変異誘発、ランダム変異誘発、又は核酸の酵素的切断及び／若しくは連結反応の既知の技術を使用して調製されてもよい。

【0264】

好ましくは、バリアント抗体は、本明細書に開示される抗体のＶＬ又はＶＨドメインに対して、６０％より大きく、又は７０％より大きく（例えば、７５％若しくは８０％）、好ましくは、８５％より大きく、例えば、９０％若しくは９５％より大きいアミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を有する。アミノ酸同一性のこのレベルは、関連した配列番号の配列の全長にわたって、又は全長ポリペプチドのサイズに応じて、２０、３０、５０、７５、１００、１５０、２００、若しくはそれ以上のアミノ酸にわたるなど、配列の一部にわたって見られ得る。

【0265】

アミノ酸配列との関連で、「配列同一性」は、ＣｌｕｓｔａｌＷ（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４、上記）を使用し、以下のパラメータを用いて評価した場合に、記載される値を有する配列を指す。

【0266】

ペアワイズアラインメントパラメータ－方法：正確、マトリックス：ＰＡＭ、ギャップオープンペナルティ：１０．００、ギャップエクステンションペナルティ；０．１０；

【0267】

複数のアラインメントパラメータ－マトリックス：ＰＡＭ、ギャップオープンペナルティ：１０．００、遅延のための同一性％：３０、エンドギャップのペナルティ：オン、ギャップ分離距離：０、ネガティブマトリックス：なし、ギャップエクステンションペナルティ：０．２０、残基特異的ギャップペナルティ：オン、親水性ギャップペナルティ：オン、親水性残基：ＧＰＳＮＤＱＥＫＲ。特定の残基における配列同一性は、単に誘導体化されている同一の残基を含むよう意図される。

【0268】

本発明の併用療法及び方法で使用するための抗ＣＤ１３７抗体又はＰＤ－１阻害剤は、本明細書に開示される特定の抗体と同じエピトープに結合し得る（例えば、抗ＣＤ１３７抗体は、ＣＤ１３７のドメイン２に結合し得る）。これは、そのような抗体が、開示される抗体の作用を模倣する可能性が高いためである。ある抗体が別の抗体と同じエピトープに結合するかどうかは、日常的な方法によって決定し得る。例えば、標的に対する各抗体の結合は、競合結合アッセイを使用してもよい。競合結合アッセイを実施するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、それらは、抗体が標的分子に結合することができる条件下で、抗体と標的分子とを一緒に接触させることを伴い得る。次いで、抗体／標的複合体を第２の（試験）抗体と接触させてもよく、試験抗体が抗体／標的複合体から第１の抗体を置き換えることができる程度を評価してもよい。そのような評価は、例えば、表面プラズモン共鳴、ＥＬＩＳＡ、又はフローサイトメトリーを含む任意の適切な技術を使用してもよい。試験抗体が標的に対する第１の抗体の結合を阻害する能力は、試験抗体が標的に対する結合について前記第１の抗体と競合することができ、したがって、試験抗体が第１の抗体と同じ標的上のエピトープ又は領域に結合し、したがって、第１の抗体の作用を模倣し得ることを示す。

【0269】

本明細書で言及される任意の抗体は、単離された形態で提供されてもよく、又は任意選択的に、別の部分に（直接的又は間接的に）連結されて提供されてもよい。他の部分は、細胞傷害性部分又は薬物などの治療用分子であり得る。

【0270】

治療用分子は、例えば、化学的コンジュゲーションによって、本発明の抗体に直接接続され得る。分子を抗体にコンジュゲートするための方法は、当該技術分野で既知である。例えば、カルボジイミドコンジュゲーション（Ｂａｕｍｉｎｇｅｒ＆Ｗｉｌｃｈｅｋ（１９８０）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．７０，１５１－１５９）を使用して、ドキソルビシンを含む様々な薬剤を抗体又はペプチドにコンジュゲートすることができる。水溶性カルボジイミド、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）は、官能部分を結合部分にコンジュゲートするのに特に有用である。

【0271】

ある部分を抗体にコンジュゲートするための他の方法もまた使用することができる。例えば、過ヨウ素酸ナトリウム酸化、続いて適切な反応剤の還元アルキル化を使用することができ、グルタルアルデヒド架橋も同様に可能である。しかしながら、本発明のコンジュゲートを産生する方法がどのように選択されるかにかかわらず、抗体がその標的化能力を維持し、機能的部分がその関連する機能を維持するという決定がなされなければならないと認識されている。

【0272】

細胞傷害性部分は、直接及び／又は間接的に細胞傷害性であり得る。「直接的に細胞傷害性」とは、その部分がそれ自体が細胞傷害性である部分であることを意味する。「間接的に細胞傷害性」とは、その部分が、それ自体は細胞傷害性ではないが、例えば、更なる分子に対するその作用又はそれに対する更なる作用によって、細胞傷害性を誘導することができる部分であることを意味する。細胞傷害性部分は、細胞内でのみ細胞傷害性であってもよく、細胞外では細胞傷害性ではないことが好ましい。

【0273】

抗体又は抗原結合断片は、直接的に細胞傷害性の化学療法剤である細胞傷害性部分に連結している。任意選択的に、細胞傷害性部分は、直接的に細胞傷害性のポリペプチドである。細胞傷害性の化学療法剤は、当該技術分野で周知である。

【0274】

抗がん剤などの細胞傷害性化学療法剤としては、メクロレタミン（ＨＮ２）、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン（Ｌ－サルコリシン）及びクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタードを含むアルキル化剤；ヘキサメチルメラミン、チオテパなどのエチレンイミン及びメチルメラミン；ブスルファンなどのアルキルスルホネート；カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル－ＣＣＮＵ）及びストレプトゾチン（ストレプトゾトシン）などのニトロソウレア；及びデカルバジン（ＤＴＩＣ、ジメチルトリアゼノイミダゾール－カルボキサミド）などのトリアゼン；メトレキサート（アメトプテリン）などの葉酸類似体を含む抗代謝物質；フルオロウラシル（５－フルオロウラシル、５－ＦＵ）、フロキソウリジン（フルオデオキシウリジン、ＦＵｄＲ）及びシタラビン（シトシンアラビノシド）などのピリミジン類似体；並びにメルカプトプリン（６－メルカプトプリン、６－ＭＰ）、チオグアニン（６－チオグアニン、ＴＧ）、及びペントスタチン（２’－デオキシコホルマイシン）が挙げられる。ビンブラスチン（ＶＬＢ）及びビンクリスチンなどのビンカアルカロイド；エトポシド及びテニポシドなどのエピポドフィロトキシン；ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ダウノルビシン（ダウノマイシン；ルビドマイシン）、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン（ミトラマイシン）及びマイトマイシン（マイトマイシンＣ）などの抗生物質；Ｌ－アスパラギナーゼなどの酵素；並びにインターフェロンアルフェノームなどの生物学的応答調整剤を含む、天然産物。シスプラチン（ｃｉｓ－ＤＤＰ）及びカルボプラチンなどの白金配位錯体；ミトキサントロン及びアントラサイクリンなどのアントラセンジオン；ヒドロキシウレアなどの置換ウレア；プロカルバジン（Ｎ－メチルヒドラジン、ＭＩＨ）などのメチルヒドラジン誘導体；及びミトタン（ｏ，ｐ’－ＤＤＤ）及びアミノグルテチミドなどの副腎皮質抑制剤；タキソール及び類似体／誘導体；並びにフルタミド及びタモキシフェンなどのホルモンアゴニスト／アンタゴニストを含む、その他の薬剤。

【0275】

細胞傷害性部分は、細胞傷害性ペプチド、又は細胞死につながるポリペプチド部分であり得る。細胞傷害性ペプチド及びポリペプチド部分は、当該技術分野で周知であり、例えば、リシン、アブリン、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素、組織因子などが挙げられる。それらを抗体などの標的化部分に連結するための方法もまた、当該技術分野で既知である。他のリボソーム不活性化タンパク質は、ＷＯ９６／０６６４１に細胞傷害性薬剤として記載されている。Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素も、細胞傷害性ポリペプチドとして使用され得る。ＴＮＦα及びＩＬ－２などの特定のサイトカインも、細胞傷害性薬剤として有用であり得る。

【0276】

特定の放射性原子はまた、十分な用量で送達される場合、細胞傷害性であり得る。したがって、細胞傷害性部分は、使用中に、細胞傷害性であるように十分な量の放射性を標的部位に送達する放射性原子を含み得る。好適な放射性原子としては、リン－３２、ヨウ素－１２５、ヨウ素－１３１、インジウム－１１１、レニウム－１８６、レニウム－１８８若しくはイットリウム－９０、又は隣接する細胞、小器官若しくは核酸を破壊するのに十分なエネルギーを放出する任意の他の同位体が挙げられる。好ましくは、本発明の薬剤における放射性原子の同位体及び密度は、４０００ｃＧｙを超える線量（好ましくは、少なくとも６０００、８０００又は１００００ｃＧｙ）が標的部位、好ましくは、標的部位の細胞及びそれらの細胞小器官、特に核に送達されるようなものである。

【0277】

放射性原子は、抗体、抗原結合断片、バリアント、融合体又はその誘導体に既知の方法で接続され得る。例えば、ＥＤＴＡ又は別のキレート剤を結合部分に接続させてもよく、１１１Ｉｎ又は９０Ｙを接続させるために使用してもよい。チロシン残基を、１２５Ｉ又は１３１Ｉで直接標識してもよい。

【0278】

細胞傷害性部分は、好適な間接的に細胞傷害性のポリペプチドであり得る。間接的に細胞傷害性のポリペプチドは、酵素活性を有し、非毒性及び／又は比較的非毒性のプロドラッグを細胞傷害性薬物に変換することができるポリペプチドであり得る。抗体では、この種の系は、多くの場合、ＡＤＥＰＴ（抗体指向酵素プロドラッグ療法）と称される。その系は、抗体が酵素部分を患者の体内の所望の部位に配置し、酵素が部位で局在化する時間を与えた後、酵素の基質であるプロドラッグを投与することを必要とし、触媒作用の最終生成物は、細胞傷害性化合物である。このアプローチの目的は、所望の部位における薬物の濃度を最大化し、正常組織中の薬物の濃度を最小化することである。細胞傷害性部分は、非細胞傷害性プロドラッグを細胞傷害性薬物に変換することが可能であり得る。

【0279】

本明細書に記載の標的化酵素を使用する系の酵素及びプロドラッグは、以前に提案されたもののいずれかであり得る。細胞傷害性物質は、アルキル化剤などの任意の既存の抗がん薬物；ＤＮＡにインターカレートする薬剤；ジヒドロ葉酸レダクターゼ、チミジン合成酵素、リボヌクレオチドレダクターゼ、ヌクレオシドキナーゼ又はトポイソメラーゼなどの任意の重要な酵素を阻害する薬剤；又は任意の他の細胞成分と相互作用することによって細胞死を引き起こす薬剤であり得る。エトポシドは、トポイソメラーゼ阻害剤の一例である。

【0280】

報告されたプロドラッグ系には、表２に列記されているものが含まれる。

【表3】

【0281】

酵素部分の一部を形成するための好適な酵素としては、エキソペプチダーゼ、例えば、カルボキシペプチダーゼＧ、Ｇ１及びＧ２（グルタミル化マスタードプロドラッグ用）、カルボキシペプチダーゼＡ及びＢ（ＭＴＸベースのプロドラッグ用）、及びアミノペプチダーゼ（２－α－アミノシルＭＴＣプロドラッグ用）；エンドペプチダーゼ、例えば、トロンボリシン（トロンビンプロドラッグ用）；加水分解酵素、例えば、ホスファターゼ（例えば、アルカリホスファターゼ）又はスルファターゼ（例えば、アリールスルファターゼ）（リン酸化又は硫酸化プロドラッグ用）；アミダーゼ、例えば、ペニシリンアミダーゼ及びアリールアシルアミダーゼ；ラクタマーゼ、例えば、β－ラクタマーゼ；グリコシダーゼ、例えば、β－グルクロノシダーゼ（β－グルクロノミドアントラシクシン用）、α－ガラクトシダーゼ（アミグダリン用）及びβ－ガラクトシダーゼ（β－ガラクトースアントラサイクリン用）；デアミナーゼ、例えば、シトシンデアミナーゼ（５ＦＣ用）；キナーゼ、例えば、ウロキナーゼ及びチミジンキナーゼ（ガンシクロビル用）；レダクターゼ、例えば、ニトロレダクターゼ（ＣＢ１９５４及び類似体用）；アゾレダクターゼ（アゾベンゼンマスタード用）及びＤＴ－ジアホラーゼ（ＣＢ１９５４用）；オキシダーゼ、例えば、グルコースオキシダーゼ（グルコース用）、キサンチンオキシダーゼ（キサンチン用）及びラクトペルオキシダーゼ；ＤＬ－ラセマーゼ、触媒抗体及びシクロデキストリンが挙げられる。

【0282】

好ましくは、プロドラッグは、細胞傷害性薬物と比較して、比較的非毒性である。典型的には、好適なインビトロ細胞傷害性試験で測定した場合、それは、毒性の１０％未満、好ましくは、毒性の１％未満を有する。

【0283】

プロドラッグを細胞傷害性薬物に変換することができる部分は、本発明の薬剤の残りの部分から単離して活性である可能性が高いが、（ａ）本発明の薬剤の残りの部分と組み合わせている場合、及び（ｂ）本発明の薬剤が標的細胞に接続し、隣接し、又は標的細胞内に内在化している場合にのみ、活性であることが必要である。

【0284】

各部分がポリペプチドである場合、２つの部分は、ポリペプチドを架橋する従来の方法のいずれかによって一緒に連結され得る。例えば、抗体又は抗原結合断片は、チオール基が濃縮されていてもよく、更なる部分は、それらのチオール基と反応することができる二官能性剤、例えば、ヨード酢酸のＮ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＩＡ）又はＮ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）と反応する。例えば、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルで達成されるアミド結合及びチオエーテル結合は、一般に、ジスルフィド結合よりもインビボでより安定である。

【0285】

細胞傷害性部分は、放射線増感剤であり得る。放射線増感剤としては、フルオロピリミジン、チミジン類似体、ヒドロキシウレア、ゲムシタビン、フルダラビン、ニコチンアミド、ハロゲン化ピリミジン、３－アミノベンズアミド、３－アミノベンゾジアミド、エタニキサドール、ピモニダゾール及びミゾニダゾールが挙げられる。また、細胞への遺伝子の送達により、それらを放射線増感化することができ、例えば、ｐ５３遺伝子又はサイクリンＤの送達である。更なる部分は、照射時に細胞傷害性になるか、又は細胞傷害性部分を放出する部分であり得る。例えば、ホウ素－１０同位体は、適切に照射されると、細胞傷害性であるα粒子を放出する。同様に、細胞傷害性部分は、フォトフリンなどの光線力学療法において有用なものであり得る。

【0286】

方法及び併用療法
本発明は、対象におけるがん（例えば、固形腫瘍）の治療に使用するための併用療法であって、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分と、（ｂ）更なる免疫療法剤であって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、更なる免疫療法剤と、を含む併用療法を提供する。

【0287】

ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分及びＰＤ－１阻害剤は、上述の通りである。

【0288】

２つの活性薬剤（上で詳述されるような）の存在が、対象における固形腫瘍の治療において相乗的利点をもたらし得ることが、当業者には理解されよう。「相乗的」とは、２つの薬剤の組み合わせの治療効果が（例えば、腫瘍の成長速度又はサイズを参照して決定される）、それら自身に投与される２つの薬剤の付加的な治療効果よりも大きいことを含む。そのような相乗作用は、固形腫瘍の関連細胞株モデルにおいて、活性剤を単独で、また組み合わせて試験することによって特定され得る。

【0289】

本明細書で使用される「併用療法」又は「併用治療」又は「組み合わせた」という用語は、少なくとも２つの異なる療法剤による同時又は連続治療の任意の形態を示す。

【0290】

特定の実施形態によれば、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片、及びＰＤ－１阻害剤は、同じ組成物又は別個の組成物のいずれかで同時に投与される。他の実施形態によれば、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片、及びＰＤ－１阻害剤は、順次投与され、すなわち、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片は、ＰＤ－１阻害剤の投与の前又は後のいずれかに投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片、及びＰＤ－１阻害剤の投与は、同時であり、すなわち、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片の投与期間と、ＰＤ－１阻害剤の投与期間とが互いに重複する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片、及びＰＤ－１阻害剤の投与は、非同時、又は連続的である。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片の投与は、ＰＤ－１阻害剤が投与される前に終了する。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１阻害剤の投与は、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片が投与される前に終了する。

【0291】

特定の典型的な実施形態によれば、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片、及びＰＤ－１阻害剤は、単一の治療用組成物として投与される。いくつかの実施形態によれば、治療用組成物は、治療的に許容される希釈剤又は担体を更に含む。

【0292】

全身性のＰＤ－１阻害剤と抗ＣＤ１３７抗体との組み合わせは、腫瘍によるＰＤ－Ｌ１の発現のために、単に魅力的なものではない。ＣＤ１３７刺激は、腫瘍浸潤Ｔ細胞の活性化を引き起こし、それらが腫瘍細胞を死滅させることを可能にする。しかしながら、ＣＤ１３７が媒介するＴ細胞の活性化はまた、Ｔ細胞上のＰＤ－１の上方制御を引き起こす（及び腫瘍細胞上のＰＤ－Ｌ１の上方制御を間接的に引き起こす）。逆に、ＰＤ－１阻害は、腫瘍特異性Ｔ細胞の再活性化（又は阻害の除去）を引き起こす。ＰＤ－１阻害剤によって再活性化されたＴ細胞は、ＣＤ１３７を発現する。ＣＤ１３７を発現するＴ細胞のＣＤ１３７刺激は、腫瘍細胞を死滅させ、それらが疲弊するのを防ぐ（又は疲弊からそれらを救出する）能力を増加させる。

【0293】

したがって、更なる免疫療法剤は、ＰＤ－１阻害剤であり、好ましくは、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１のうちの少なくとも１つに特異的に結合する抗体又は他の薬剤であり得る（既に上述したように）。

【0294】

更なる免疫療法剤が抗体、又は抗体を含む二重特異性分子である場合、抗体の定義、抗体の抗原結合断片、追加の治療部分への任意選択的なコンジュゲーションなどに関して上述した一般的な考慮事項の全てが、更なる免疫療法剤である抗体にも適用されることが理解されるであろう。同様に、抗ＣＤ１３７抗体について上述した標的特異性／親和性の定義及び特異性／親和性を決定するための方法は、ＣＤ１３７の代わりに薬剤の特異的標的を読み取ることを除いて、更なる免疫療法剤である抗体に等しく適用されることが理解されるであろう。更なる免疫療法剤である抗体のバリアント及び断片はまた、抗ＣＤ１３７抗体のバリアント及び断片と同じ方法で定義されてもよい。

【0295】

本発明は、対象におけるがん、好ましくは固形腫瘍を治療するための方法を提供する。腫瘍は、典型的には悪性であり、転移性であり得る。

【0296】

一実施形態では、本発明の併用療法を使用して、がんに罹患しているか、又はがんに罹患するリスクがある患者又は対象を治療し得る。

【0297】

「治療」は、患者の治療的治療及び予防的治療の両方を含む。「予防的」という用語は、患者若しくは対象におけるがんの可能性、又はがん細胞の蔓延、播種、若しくは転移を予防又は低減する、本明細書に記載される薬剤又はその製剤の使用を包含するように使用される。「予防的」という用語はまた、新生物性障害のために以前に治療されたことのある患者におけるがんの再発を予防するための、本明細書に記載される薬剤又はその製剤の使用も包含する。

【0298】

がんは、固形腫瘍の形成と関連していてもよく、又は血液がんであってもよい。治療され得るがんの種類には、がん腫、肉腫、リンパ腫、白血病、芽細胞腫及び胚細胞腫瘍が含まれる。

【0299】

がんは、前立腺がん；乳がん；結腸直腸がん；腎臓がん；膵臓がん；卵巣がん；肺がん；子宮頸がん；横紋筋肉腫；神経芽腫；骨がん；多発性骨髄腫；白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病［ＡＬＬ］及び急性骨髄性白血病［ＡＭＬ］）、皮膚がん（例えば、黒色腫）、膀胱がん及び膠芽腫からなる群から選択され得る。

【0300】

一実施形態では、がんは、以下の表４又は表５（ＷＯ２０１８／０９１７４０から得た）のがんのリストから選択され得る。

【表4-1】

【表4-2】

【表5-1】

【表5-2】

【表5-3】

【0301】

典型的には、本発明の併用療法における療法剤は、例えば血流中への注射又は腫瘍の部位若しくはその近傍への注射によって、非経口形態で投与され得る。典型的には、本発明の併用療法における療法剤は、静脈内に投与される。

【0302】

一実施形態では、本発明の併用療法及び又は方法は、事前にスクリーニングされ、ＣＤ１３７及びＦｃγＲ、例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ又はそれらの組み合わせを発現する細胞を含む腫瘍を有すると同定された患者を治療するために使用され得る。

【0303】

本発明の併用療法は、患者におけるがんの唯一の治療として、又は追加の併用治療（追加の治療は、薬学的薬剤、放射線療法及び／又は手術であり得る）の一部として用いられ得ることを更に理解されたい。

【0304】

がんは、固形腫瘍であり得る。固形腫瘍は、乳房、結腸など、それらが由来する組織によって古典的に定義される。しかしながら、免疫療法は、腫瘍自体ではなく免疫系に作用するため、腫瘍の免疫状態は、腫瘍の起源よりも応答をより予測することができる。本明細書で提示される支援研究において、ＭＣ３８結腸がんモデルは、より詳細に評価され、これは、概して免疫原性であり、ＰＤ－１療法単独に応答する。

【0305】

本発明の一実施形態では、腫瘍は、免疫原性である。そのような腫瘍は、Ｔ細胞及び骨髄起源の細胞などの免疫細胞の浸潤を特徴とする。ＣＤ８ Ｔ細胞の浸潤、すなわち、より免疫原性の高い腫瘍プロファイルが、例えば、結腸がんにおいて、療法後の良好な予後と相関することが実証されている（Ｇａｌｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．２３２（２）：１９９－２０９）。

【0306】

本発明の代替的な実施形態では、腫瘍は、非免疫原性又は低免疫原性である。低免疫原性腫瘍は、多くの場合、ＭＨＣＩ発現が低いか、又は全く起こらず、Ｔ細胞及び骨髄起源の細胞などの浸潤免疫細胞の数が少ないことを特徴とする（Ｌｅｃｈｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ３６（９）：４７７－８９）。腫瘍は、アデノーマ、腺がん、芽細胞腫、がん腫、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、胚細胞腫瘍、リンパ腫、肉腫、ウィルムス腫瘍、肺腫瘍、結腸腫瘍、リンパ腫瘍、乳房腫瘍又は黒色腫であり得る。

【0307】

芽細胞腫の種類には、肝芽細胞腫、神経膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、又は網膜芽細胞腫が含まれる。がん腫の種類には、乳がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん又は肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、胃がん、尿路上皮がん、腎臓がん、メルケル細胞がん、食道がん、子宮頸がん、及び頭頸部がん、及び腺がんが含まれる。肉腫の種類としては、ユーイング肉腫、骨肉腫、横紋筋肉腫、又は任意の他の軟部組織肉腫が挙げられる。黒色腫の種類には、悪性黒子、悪性黒子黒色腫、表在拡大型黒色腫、末端黒子型黒色腫、粘膜部黒色腫、結節型黒色腫、ポリポイド型黒色腫、神経向性黒色腫、無色素性黒色腫、軟部組織黒色腫、小さな母斑様細胞を伴う黒色腫、スピッツ母斑の特徴を有する黒色腫、及びぶどう膜黒色腫が含まれる。リンパ腫の種類としては、前駆Ｔ細胞白血病／リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病／リンパ腫、ＭＡＬＴリンパ腫、バーキットリンパ腫、菌状息肉症、末梢Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫の結節性硬化症型、ホジキンリンパ腫の混合細胞性サブタイプが挙げられる。肺腫瘍の種類としては、非小細胞肺がん（腺がん、扁平上皮がん及び大細胞がん）及び小細胞肺がんの腫瘍が挙げられる。

【0308】

本発明の一実施形態では、がんは、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がん、及び／又は欠損ミスマッチ修復（ｄＭＭＲ）がん、及び／又は高腫瘍変異負荷（すなわち、ＴＭＢ－高）に関連するがんであり得る。

【0309】

本発明の一実施形態では、がんは、中皮腫であってもよい。

【0310】

本発明の方法は、（ａ）対象に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体を投与することと、（ｂ）対象に、治療有効量の更なる免疫療法剤を全身投与することと、を含み、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤であり、任意選択的に、ＰＤ－１阻害剤は、全身投与される。ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されてもよい。あるいは、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、ステップ（ｂ）の前に順次提供されるステップ（ａ）を実行してもよい。ステップ（ａ）では、抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、腫瘍に全身投与され、最も好ましくは、抗ＣＤ１３７抗体は、静脈内投与される。

【0311】

ある物質の「治療有効量」とは、所与の物質が、ある状態を患う対象に、その状態又はその症状のうちの１つ以上を治癒、軽減、又は部分的に抑えるのに十分な量で投与されることを意味する。そのような療法的治療は、疾患症状の重症度の減少、又は無症状期間の頻度若しくは持続期間の増加をもたらし得る。所与の目的及び所与の薬剤の有効量は、疾患又は傷害の重症度、並びに対象の体重及び一般的な状態に依存する。本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、任意の哺乳動物、好ましくはヒトを含む。

【0312】

本発明はまた、以下を提供する。
－対象における固形腫瘍を治療するための方法で使用するためのＣＤ１３７に特異的に結合する抗体であって、当該方法が、（ａ）対象に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する上述の抗体を投与することと、（ｂ）対象に、治療有効量のＰＤ－１阻害剤を全身投与することと、を含む、抗体。ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されてもよい。あるいは、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、ステップ（ｂ）の前に順次提供されるステップ（ａ）を実行してもよい。ステップ（ａ）において、上述の抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、腫瘍に局所的に投与される。
－対象における固形腫瘍を治療するための医薬の製造における、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体の使用であって、当該治療することが、（ａ）腫瘍に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する上述の抗体を投与することと、（ｂ）対象に、治療有効量のＰＤ－１阻害剤を全身投与することと、を含む、使用。ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されてもよい。あるいは、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、ステップ（ｂ）の前に順次提供されるステップ（ａ）を実行してもよい。ステップ（ａ）では、上述の抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、全身投与され、最も好ましくは、上述の抗ＣＤ１３７抗体は、静脈内投与される。
－対象における固形腫瘍を治療する方法における同時、別個、又は連続した使用のための（１）ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体と、（２）ＰＤ－１阻害剤と、を含有する、製品であって、当該方法が、（ａ）腫瘍に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する上述の抗体を全身投与することと、任意選択的に（ｂ）対象に、治療有効量のＰＤ－１阻害剤を全身投与することと、を含む、製品。ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されてもよい。あるいは、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、ステップ（ｂ）の前に順次提供されるステップ（ａ）を実行してもよい。ステップ（ａ）において、上述の抗ＣＤ１３７抗体は、好ましくは、腫瘍に局所的に投与される。

【0313】

ステップ（ａ）及び（ｂ）のタイミング及び順序
一実施形態では、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、順次（すなわち、異なる時間に）実行されてもよく、ステップ（ａ）は、ステップ（ｂ）の前に実行される。

【0314】

ステップ（ａ）及び（ｂ）は、組み合わされた抗腫瘍効果が最適化されるような間隔で分離され得る。ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）の少なくとも１つの生理学的効果がそのピークレベルにあるか、又はそれに近い、ステップ（ａ）の後の十分に長い間隔で行われてもよい。例えば、抗ＣＤ１３７抗体は、典型的には、ＣＤ１３７を刺激し、Ｔ細胞及び／又は他の免疫細胞を活性化する（例えば、ＣＤ８＋細胞からのインターフェロンガンマの放出を誘導するため）。活性化されたＴ細胞は、抗ＣＤ１３７による治療の約２４時間以内に、より高いレベルの免疫系チェックポイント分子（ＰＤ－１など）の発現を開始し得る。これらの免疫系チェックポイント分子は、抗腫瘍応答を負に調節し得る。ステップ（ｂ）で投与される更なる免疫療法剤は、ＰＤ－１阻害剤であり、したがって、好ましくは、ＰＤ－１のそのような活性を遮断又は阻害する抗ＰＤ－１又は抗ＰＤＬ１抗体であり得る。ステップ（ｂ）で投与される更なる免疫療法剤が、そのような薬剤である場合、ステップ（ｂ）は、対象の細胞における免疫系チェックポイント分子（ＰＤ－１など）の発現レベル、又は上述の免疫系チェックポイント分子を発現する対象の細胞の数が、ステップ（ａ）の前の対象の上述のレベル若しくは数に対して、又は健康な対象の上述のレベル若しくは数に対して上昇するように、ステップ（ａ）の後に十分に長い間隔で実行され得る。この文脈では、ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）の後の２４時間以内、ステップ（ａ）の後の２４時間から２週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から１週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から７２時間の間、又はステップ（ａ）の後の２４時間から４８時間の間に行われる。好ましくは、ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）の後の２４時間以内に行われる。

【0315】

あるいは、対象の細胞における免疫系チェックポイント分子（ＰＤ－１など）の発現レベル、又は上述の免疫系チェックポイント分子を発現する対象の細胞の数が、ステップ（ａ）の前の対象の上述のレベル若しくは数に対して、又は健康な対象の上述のレベル若しくは数に対して上昇することが決定される場合、ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）のある時点で行われてもよい。

【0316】

対象の細胞における免疫系チェックポイント分子（ＰＤ－１など）の発現レベル、又はそのような分子を発現する対象における細胞の数は、任意の好適な手段、例えば、対象から採取された試料のフローサイトメトリー分析によって決定され得る。

【0317】

あるいは、最も好ましい実施形態では、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同じ日に実行される。両方のステップが同じ日に、又は治療センターへの同じ訪問中に行われ得るように、ステップ（ａ）及び（ｂ）を同時に（すなわち、同じ時に）、又は互いに２４時間以内に実行することが好ましい場合がある。これは、治療センターへのアクセスが制限されている場合に特に有利であり得る。この文脈では、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されてもよく、又は２４時間未満間隔で、１２時間未満間隔で、１０時間未満間隔で、６時間未満間隔で、４時間未満間隔で、３時間未満間隔で、又は２時間未満間隔で実行されてもよい。

【0318】

更なる実施形態では、ステップ（ａ）及び（ｂ）は、同時に実行されるか、又はステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）の後の２４時間から２週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から１週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から７２時間の間、又はステップ（ａ）の後の２４時間から４８時間の間に実行される。

【0319】

上述の実施形態のいずれかでは、ステップ（ａ）は、第１の場合の後に複数の更なる場合で実行され得る。すなわち、対象は、一連の用量の抗ＣＤ１３７抗体を受け得る。これらの用量は、対象が抗ＣＤ１３７抗体への断続的な曝露のみを有するように、好ましくは、対象の免疫細胞が枯渇しないように、かつ／又は対象が抗ＣＤ１３７抗体へのタキフィラキシーに罹患しないように、投与される。これらの症状のいずれかを検出したら、抗ＣＤ１３７抗体の次の投与が遅らせられるか、又はキャンセルされ得る。複数回の用量の抗ＣＤ１３７が投与される場合、ステップ（ｂ）は、好ましくは、ステップ（ｂ）の開始後、ステップ（ａ）の任意の第２の場合及び更なる場合を含む方法の期間中、対象の更なる免疫療法剤（ＰＤ－１阻害剤）への連続的な曝露を可能にする様式で実施される。このことは、追加の薬剤が、免疫系チェックポイント分子ＰＤ－１のそのような活性を遮断又は阻害する抗ＰＤ－１又は抗ＰＤＬ１抗体である場合、特に適切であり得る。連続的な受容体の遮断は、そのような薬剤の治療効果にとって特に重要であり得る。

【0320】

したがって、一実施形態では、ステップ（ａ）は、複数の別個の機会に実施され、ステップ（ｂ）は、更なる免疫療法剤への対象の曝露が、本方法の持続時間にわたって連続するように実施される。

【0321】

ステップ（ａ）
本方法のステップ（ａ）は、固形腫瘍を有する対象に対する抗ＣＤ１３７抗体の局所投与又は全身投与に関する。好ましくは、ステップ（ａ）は、例えば、静脈内投与又は皮下投与による、抗ＣＤ１３７抗体の全身投与に関する。最も好ましい実施形態では、ステップ（ａ）は、抗ＣＤ１３７抗体の静脈内投与を伴う。

【0322】

代替的な実施形態では、抗ＣＤ１３７抗体、又はその抗原結合断片は、対象の腫瘍部位に局所投与される。腫瘍部位への局所投与には、注射などの任意の好適な手段による腫瘍周囲、腫瘍近傍、腫瘍内、病変内、病変周囲、頭蓋内及び膀胱内投与が含まれる。局所投与はまた、腫瘍の部位に応じて、空洞内注入及び吸入を含み得る。

【0323】

抗ＣＤ１３７抗体の高い割合は、上述の抗体の投与後の長期間にわたって、インビボで、すなわち腫瘍微小環境内にある腫瘍部位に保持され得る。すなわち、抗体は、特に腫瘍部位に局所的に投与される場合、腫瘍部位から血管又はリンパ循環への低減された漏出を示す。好ましくは、本方法に従って腫瘍に投与される抗体用量の少なくとも３０％が、投与後４時間で腫瘍部位に保持され、より好ましくは、用量の少なくとも４０％が、投与後４時間で保持され、最も好ましくは、用量の少なくとも５０％が、投与後４時間で保持される。

【0324】

「固形腫瘍の部位に保持される」とは、抗ＣＤ１３７抗体が、腫瘍領域からゆっくりとのみ放出されることを含む。腫瘍微小環境における抗体保持は、抗体をマウスモデルの腫瘍に注射し、投与後の経時的な抗体の血清レベルを測定することによって研究することができる。あるいは、抗体の分布は、マウスモデルで腫瘍に注射された放射性標識抗体を使用して測定することができる。好適な技術は、当業者に既知である。例えば、腫瘍部位における抗体の保持は、投与後の抗体の血清レベルを監視することによって評価され得る（Ｍａｎｇｓｂｏ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１１１５－１１２６（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。例えば、一実施形態では、３０μｇ（６０μＬ中）の抗体の腫瘍内注射の４時間後の抗ＣＤ１３７の血清レベルは、１μＬ／ｍｌ未満である。

【0325】

ステップ（ｂ）
本方法のステップ（ｂ）は、対象に対するＰＤ－１阻害剤の全身投与に関する。本明細書に記載の任意の薬剤（ステップ（ａ）の抗ＣＤ１３７抗体を含む）の全身投与は、血管系及び／又はリンパ系を含む対象の循環系への投与を意味する。そのような投与は、任意の好適な経路によるものであり得るが、典型的には非経口である。

【0326】

したがって、一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、対象の腫瘍部位に局所的に投与される。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、対象に、全身的に、例えば、静脈内又は皮下に投与される。好ましい態様では、ＰＤ－１阻害剤の全身投与は、静脈内である。

【0327】

本明細書で使用される「非経口投与」という語句は、典型的には注射、注入又は移植によって達成される、経腸投与及び局所投与以外の投与態様を意味する。好適な経路としては、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄、脳内、くも膜下腔内、骨内、又は他の非経口投与経路が挙げられる。

【0328】

キット及び薬学的組成物
本発明はまた、対象におけるがん、好ましくは固形腫瘍を治療するためのキットであって、上で定義される併用療法を含む、キットを提供する。例えば、キットは、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合し、任意選択的に投与後に腫瘍部位に保持される治療有効量の抗体と、（ｂ）治療有効量のＰＤ－１阻害剤と、を含み得る。ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体は、好ましくは、腫瘍部位への局所投与に好適な形態で提供される。

【0329】

本発明のキットは、上述の実施形態のいずれかを実施することを可能にする１つ以上の他の試薬又は器具を更に含み得る。そのような試薬又は器具は、好適な緩衝液（複数可）（水溶液）、並びに抗ＣＤ１３７抗体及び／又はＰＤ－１阻害剤を投与する手段（例えば、針を含む容器又は器具）のうちの１つ以上を含む。

【0330】

本発明の方法で使用されるか、又は本発明のキットに提供される抗ＣＤ１３７抗体及びＰＤ－１阻害剤は各々、薬学的に許容される担体とともに製剤化される別個の薬学的組成物として提供され得る。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、生理学的に適合性であり、また、必要な投与経路と適合性である、任意及び全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張化剤、並びに吸収遅延剤などを含む。

【0331】

したがって、抗ＣＤ１３７抗体及びＰＤ－１阻害剤の担体は、全身投与に好適であってもよく、上で定義されるように、これは、血管系及び／又はリンパ系を含む対象の循環系への投与を意味する。そのような投与は、任意の好適な経路によるものであり得るが、典型的には非経口である。本明細書で使用される「非経口投与」という語句は、典型的には注射、注入又は移植によって達成される、経腸投与及び局所投与以外の投与態様を意味する。好適な経路としては、静脈内、筋肉内、皮内、腹腔内、皮下、脊髄、又は他の非経口投与経路が挙げられる。

【0332】

しかしながら、抗ＣＤ１３７抗体の担体は、好ましくは、注射などの任意の好適な手段による、上に定義されるように、腫瘍周囲、腫瘍近傍、腫瘍内、病変内、病変周囲、頭蓋内及び膀胱内投与を含む、局所投与に好適である。局所投与はまた、腫瘍の部位に応じて、空洞内注入及び吸入を含み得る。

【0333】

投与経路に応じて、抗体及び／又は薬剤を不活性化又は変性させ得る酸及び他の自然条件の作用から抗体を保護するための材料で、抗体及び／又は薬剤をコーティングしてもよい。好ましい薬学的に許容される担体は、水性担体又は希釈剤を含む。本発明の薬学的組成物に用いられ得る好適な水性担体の例としては、水、緩衝水、及び生理食塩水が挙げられる。他の担体の例としては、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及びこれらの好適な混合物、オリーブ油などの植物油、並びにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用、分散液の場合は必要な粒子径の維持、及び界面活性剤の使用により維持できる。多くの場合、等張化剤、例えば、糖、多価アルコール、例えば、マンニトール、ソルビトール、又は塩化ナトリウムを組成物中に含むことが好ましい。

【0334】

当業者は、本発明の併用療法の抗体成分が、典型的には、各々が治療有効量の抗体成分（複数可）を薬学的に許容される緩衝液、賦形剤、希釈剤又は担体とともに含有する、１つ以上の薬学的組成物の形態で提供されることを理解するであろう。

【0335】

薬学的組成物には、ＥＤＴＡ、クエン酸塩、ＥＧＴＡ、又はグルタチオンなどのキレート剤を含む、追加の化合物もまた含まれ得ることが当業者によって理解されるだろう。

【0336】

「薬学的に許容される」は、本発明の抗体ポリペプチドのＣＤ１３７結合活性の有効性を低下させない非毒性物質を意味する。そのような薬学的に許容される緩衝剤、担体又は賦形剤は、当該技術分野で周知である（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９０）、及びｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｋｉｂｂｅ，Ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０００）（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0337】

本明細書で使用される場合、「治療有効量」又は「有効量」又は「治療上有効な」は、所与の条件及び投与レジメンに対して治療効果を提供する量を指す。これは、必要な添加剤及び希釈剤、すなわち、担体又は投与ビヒクルと関連して、所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性抗体である。更に、宿主の活性、機能、及び応答における臨床的に有意な欠損を軽減又は防止するのに十分な量を意味することが意図される。あるいは、治療有効量は、宿主における臨床的に重要な状態の改善をもたらすのに十分な量である。当業者には理解されるように、化合物の量は、その特定の活性に依存して変化し得る。好適な投与量は、必要な希釈剤と関連して所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性組成物を含有することができる。

【0338】

治療有効量は、当該技術分野で周知であるように、年齢、体重、性別、状態、合併症、他の疾患などの患者特性に基づいて、通常の熟練した医学又は獣医学従事者が決定することができる。

【0339】

薬学的組成物は、薬学的に許容される抗酸化剤を含み得る。これらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などのアジュバントを含有してもよい。微生物の存在の防止は、滅菌手順（上記を参照）、並びに様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、ソルビン酸フェノールなどの包含の両方によって確実にされ得る。また、糖、塩化ナトリウムなどの等張化剤を組成物に含めることが望ましい場合がある。加えて、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを含めることによって、注射用剤型の長期吸収をもたらすことができる。

【0340】

薬学的組成物は、典型的には、製造条件及び保存条件で無菌であり、かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、リポソーム、又は高い薬物濃度に好適な他の規則的な構造として製剤化され得る。無菌注射用溶液は、必要に応じて上に挙げた成分のうちの１つ又は組み合わせを含む適切な溶媒に必要量の活性薬剤（例えば抗体）を組み込み、続いて無菌精密濾過することによって調製することができる。一般に、分散液は、活性薬剤を、基本的な分散媒及び上に挙げたものから必要な他の成分を含有する無菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。無菌注射可能溶液を調製するための無菌粉末の場合、好ましい調製方法は、活性薬剤及びその予め滅菌濾過された溶液から任意の追加の所望の成分の粉末を得る、高減圧乾燥及び冷凍乾燥（凍結乾燥）である。薬学的組成物は、追加の活性成分、及び上述のものを含み得る。

【0341】

好適な薬学的に許容される緩衝剤、希釈剤、担体及び賦形剤は、当該技術分野で周知である（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９０）、及びｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３^ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｋｉｂｂｅ，Ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０００）（それらの開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0342】

「緩衝液」という用語は、ｐＨを安定させる目的で酸－塩基混合物を含む水溶液を含有することが意図される。緩衝液の実施例としては、Ｔｒｉｚｍａ、Ｂｉｃｉｎｅ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、ＭＯＰＳ、ＭＯＰＳＯ、ＭＯＢＳ、Ｔｒｉｓ、Ｈｅｐｅｓ、ＨＥＰＢＳ、ＭＥＳ、リン酸、炭酸、酢酸、クエン酸、グリコール酸、乳酸、ボレート、ＡＣＥＳ、ＡＤＡ、酒石酸、ＡＭＰ、ＡＭＰＤ、ＡＭＰＳＯ、ＢＥＳ、ＣＡＢＳ、カコディレート、ＣＨＥＳ、ＤＩＰＳＯ、ＥＰＰＳ、エタノールアミン、グリシン、ＨＥＰＰＳＯ、イミダゾール、イミダゾール乳酸、ＰＩＰＥＳ、ＳＳＣ、ＳＳＰＥ、ＰＯＰＳＯ、ＴＡＰＳ、ＴＡＢＳ、ＴＡＰＳＯ、及びＴＥＳである。

【0343】

「希釈剤」という用語は、薬学的調製物中の薬剤を希釈する目的で、水性又は非水性溶液を含むことが意図される。希釈剤は、生理食塩水、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、油類（サフラワー油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、又はゴマ油など）から選択される１つ以上であってもよい。

【0344】

「アジュバント」という用語は、本発明の薬剤の生物学的効果を増加させるために製剤に添加される任意の化合物を含むことを意図している。アジュバントは、異なるアニオンを有する１つ以上の亜鉛塩、銅塩又は銀塩であってもよく、例えば、限定されないが、異なるアシル組成の、フッ化物、塩化物、臭化物、ヨウ化物、チオシアン酸塩、亜硫酸塩、水酸化物、リン酸塩、炭酸塩、乳酸塩、グリコール酸塩、クエン酸塩、ホウ酸塩、酒石酸塩、及び酢酸塩であり得る。また、アジュバントは、カチオン化セルロースエーテル、カチオン化セルロースエステル、脱アセチル化ヒアルロン酸、キトサン、カチオン化デンドリマー、ポリ（ビニルイミダゾール）などのカチオン化合成高分子、及びポリヒスチン、ポリリジン、ポリアルギニン、並びにこれらのアミノ酸を含有するペプチドなどのカチオニックポリペプチドのようなカチオン化ポリペプチドであってもよい。

【0345】

賦形剤は、糖質、高分子、脂質、及びミネラルの１つ以上であってもよい。炭水化物の実施例としては、ラクトース、グルコース、スクロース、マンニトール、シクロデキストリンなどがあり、これらは、例えば、凍結乾燥を促進するために組成物に添加される。ポリマーの例は、全て異なる分子量の、デンプン、セルロースエーテル、セルロースカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、アルギネート、カラギーナン、ヒアルロン酸及びそれらの誘導体、ポリアクリル酸、ポリスルホン酸、ポリエチレングリコール／ポリエチレンオキシド、ポリエチレンオキシド／ポリプロピレンオキシドコポリマー、加水分解の程度が異なるポリビニルアルコール／ポリビニルアセテート、及びポリビニルピロリドンであり、これらは、例えば、粘度制御のため、生体接着を達成するため、又は化学的分解及びタンパク質分解から脂質を保護するために組成物に添加される。脂質の実施例としては、脂肪酸、リン脂質、モノ－、ジ－、及びトリグリセリド、セラミド、スフィンゴ脂質、及び糖脂質などがあり、全てのアシル鎖長や飽和度が異なるもの、卵レシチン、大豆レシチン、水素添加卵及び大豆レシチンなどは、ポリマーのそれらと同様の理由で組成物に添加される。ミネラルの実施例としては、タルク、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、及び酸化チタンなどがあり、液溜まりの軽減や有利な顔料特性などの利点を得るために組成物に添加される。

【0346】

本発明の活性抗体ベースの薬剤は、その送達に好適であることが当該技術分野で既知である任意の種類の薬学的組成物に製剤化され得る。

【0347】

一実施形態では、本発明の薬学的組成物はリポソームの形態であってもよく、薬剤は、他の薬学的に許容される担体に加えて、ミセル、不溶性単層、及び液晶として凝集形態で存在する脂質などの両親媒性薬剤と組み合わされる。リポソーム製剤に好適な脂質としては、特に限定されないが、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸類、及び類似物を含む。また、好適な脂質としては、血流循環時間を延長するための極性ヘッドグループにおけるポリ（エチレングリコール）によって修飾された上記脂質を含む。そのようなリポソーム製剤の調製は、例えば、ＵＳ４，２３５，８７１及びＥＰ ０ ２１３ ３０３に見出すことができ、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【0348】

また、本発明の薬学的組成物は、生分解性微粒子の形態であってもよい。ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）、ＰＬＡ及びＰＧＡのコポリマー（ＰＬＧＡ）又はポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、並びにポリ無水物などの脂肪族ポリエステルは、微粒子の生成において生分解性ポリマーとして広く使用されている。そのような微粒子の調製物は、ＵＳ５，８５１，４５１及びＥＰ ０ ２１３ ３０３に見出すことができ、それらの開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【0349】

更なる実施形態では、本発明の薬学的組成物は、例えばポリ－ガンマグルタミン酸に基づくナノ粒子の形態で提供される。そのようなナノ粒子の調製及び使用の詳細は、ＷＯ２０１１／１２８６４２に見出すことができ、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。当業者は、本発明の併用療法の活性成分のうちの１つ以上が別々のナノ粒子に製剤化されてもよく、又は両方の活性成分が同じナノ粒子に製剤化されてもよいことを理解するであろう。

【0350】

更なる実施形態では、本発明の薬学的組成物は、ポリマーゲルの形態で提供され、ここで、ポリマー、例えば、デンプン、セルロースエーテル、セルロースカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、アルギネート、カラギーナン、ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリアクリル酸、ポリビニルイミダゾール、ポリスルホネート、ポリエチレングリコール／ポリエチレンオキシド、ポリエチレンオキシド／ポリプロピレンオキシドコポリマー、加水分解度の異なるポリビニルアルコール／ポリビニル酢酸、ポリビニルピロリドンは、薬剤を含有する溶液の増粘に使用される。また、ポリマーは、ゼラチンやコラーゲンを含んでいてもよい。

【0351】

あるいは、薬剤は、食塩水、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール若しくは油（ベニバナ油、トウモロコシ油、ピーナッツ油、綿実油又はゴマ油など）、トラガカントガム、及び／又は様々な緩衝液に単純に溶解してもよい。

【0352】

本発明の薬学的組成物は、活性薬剤の作用を増強するためのイオン及び規定のｐＨを含み得ることを理解されたい。加えて、組成物は、滅菌などの従来の製薬操作に供され、及び／又は、保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤、充填剤などの従来のアジュバントを含有することができる。

【0353】

本発明による薬学的組成物は、当業者に既知である任意の好適な経路で投与することができる。したがって、投与経路は、非経口（静脈内、皮下、筋肉内）、局所、眼、鼻、肺、頬、口腔、非経口、膣、及び直腸を含む。また、インプラントからの投与も可能である。

【0354】

有利には、薬学的組成物は、腫瘍の部位又はその近傍、例えば、腫瘍内又は腫瘍周辺への投与に好適である。

【0355】

薬学的組成物は、非経口投与に好適であることが好ましく、例えば、薬学的組成物は、好ましくは、静脈内、脳室内、関節内、動脈内、腹腔内、髄腔内、心室内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、若しくは皮下、又は注入技術による投与に好適である。非経口投与に好適な薬学的組成物などの薬学的組成物に抗体を製剤化するための方法は、医薬及び薬学の当業者に周知であろう。好ましい組成物は、添付の実施例に記載される。

【0356】

非経口投与に好適な製剤には、水性及び非水性の滅菌注射液があり、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を意図するレシピエントの血液と等張性にする溶質を含有することができ；及び水性及び非水性の滅菌懸濁液があり、懸濁剤及び増粘剤を含むこともできる。製剤は、例えば密封されたアンプルやバイアルなどの単位用量又は複数用量容器で提供され得、使用直前に滅菌液体担体、例えば注射用水、の添加を要するだけで凍結乾燥（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射溶液及び懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製することができる。

【0357】

したがって、本発明の薬学的組成物は、非経口投与、例えば静脈内投与に特に好適である。

【0358】

本発明の併用療法は、注射可能な徐放性薬物送達系を使用して送達され得る。これらは、特に注入頻度を低下させるように設計されている。そのような系の一例は、一度注入されると、持続期間にわたって徐々にｒｈＧＨを放出する生分解性微粒子中に組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）を封入するＮｕｔｒｏｐｉｎ Ｄｅｐｏｔである。好ましくは、送達は、筋肉内（ｉ．ｍ．）及び／又は皮下（ｓ．ｃ．）及び／又は静脈内（ｉ．ｖ．）で行われる。

【0359】

本発明の併用療法は、薬物を必要な部位に直接放出する外科的に移植されたデバイスによって投与することができる。例えば、Ｖｉｔｒａｓｅｒｔは、ＣＭＶ網膜炎を治療するために、ガンシクロビルを眼に直接放出する。この毒性剤を疾患部位に直接適用することで、薬物の重大な全身の副作用なく、効果的な療法を達成する。

【0360】

エレクトロポレーション療法（ＥＰＴ）システムはまた、本発明の併用療法の投与のために用いることができる。パルス電界を細胞に送達するデバイスは、薬物に対する細胞膜の透過性を増加させ、細胞内薬物送達の有意な増強をもたらす。

【0361】

本発明の併用療法はまた、電子組み込み（ＥＩ）によって送達され得る。ＥＩは、皮膚の表面上の直径が最大３０ミクロンの小さな粒子が、エレクトロポレーションで使用されるものと同一又は類似の電気パルスを受けるときに生じる。ＥＩでは、これらの粒子は、角質層を通って皮膚のより深い層に駆動される。粒子は、薬物又は遺伝子を担持又はコーティングすることができ、又は単に、薬物が入ることができる皮膚内の孔を生成する「弾丸」として作用することができる。

【0362】

本発明の代替的な併用療法は、温度感受性であるＲｅＧｅｌ注射システムである。体温未満では、ＲｅＧｅｌは注射可能な液体であるが、体温ではすぐにゲルリザーバーを形成し、これが徐々に浸食され、既知の安全な生分解性ポリマーに溶解する。活性物質は、バイオポリマーが溶解するにつれて経時的に送達される。

【0363】

本発明の併用療法はまた、経口で送達され得る。このプロセスは、タンパク質及びペプチドを共送達するために、体内のビタミンＢ_１２及び／又はビタミンＤの経口取り込みのための自然なプロセスを採用する。ビタミンＢ_１２及び／又はビタミンＤ取り込みシステムに乗ることによって、本発明の薬剤、医薬及び薬学的組成物は、腸壁を通って移動することができる。複合体は、ビタミンＢ_１２類似体及び／又はビタミンＤ類似体と、複合体のビタミンＢ_１２部分／ビタミンＤ部分における内因性因子（ＩＦ）に対する有意な親和性及び複合体の活性物質の有意な生物活性の両方を保持する薬物との間で合成される。

【0364】

本発明の併用療法は、「Ｔｒｏｊａｎペプチド」によって細胞に導入することができる。これらは、移動特性を有し、形質膜を横切って親水性化合物を運ぶことができる、ペネトラチンと呼ばれるポリペプチドの一種である。このシステムは、細胞質及び核へのオリゴペプチドの直接標的化を可能にし、細胞型特異的ではなく、非常に効率的であり得る。Ｄｅｒｏｓｓｉ ｅｔ ａｌ．（１９９８），Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．８，８４－８７を参照されたい。

【0365】

好ましくは、本発明の併用療法は、活性成分の１日用量又は単位、１日の部分用量、又はその適切な割分を含有する単位用量である。

【0366】

本発明の併用療法は、通常、経口投与又は任意の非経口経路によって、任意選択的に薬学的に許容される剤形の非毒性有機又は無機の酸若しくは塩基付加塩の形態で、活性成分を含む薬学的組成物の形態で投与される。治療される障害及び患者、並びに投与経路に応じて、組成物は、様々な用量で投与され得る。

【0367】

ヒト療法において、本発明の併用療法は、単独で投与することができるが、概して、意図される投与経路及び標準的な薬学的慣行に関して選択される好適な薬学的賦形剤、希釈剤又は担体と混合して投与される。

【0368】

例えば、本発明の併用療法は、即時放出、遅延放出又は制御放出用途のために、錠剤、カプセル、アヴュール（ｏｖｕｌｅ）、エリキシル、溶液又は懸濁液の形態で、経口、口腔又は舌下投与されてもよく、香味剤又は着色剤を含有し得る。本発明の薬剤、薬物及び薬学的組成物はまた、海綿体内注射を介して投与されてもよい。

【0369】

そのような錠剤は、微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二塩基カルシウム及びグリシンなどの賦形剤、デンプン（好ましくはトウモロコシ、ジャガイモ又はタピオカデンプン）、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム及び特定の複合ケイ酸塩などの崩壊剤、並びにポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシ－プロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチン及びアカシアなどの造粒結合剤を含有し得る。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリル、及びタルクなどの潤滑剤が含まれてもよい。

【0370】

類似の種類の固体組成物はまた、ゼラチンカプセルの充填剤としても使用され得る。この観点において好ましい賦形剤としては、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖又は高分子量ポリエチレングリコールが挙げられる。水性懸濁液及び／又はエリキシル剤の場合、本発明の薬剤、医薬及び薬学的組成物は、様々な甘味料又は香味料、着色料又は色素、乳化剤及び／又は懸濁剤、及び水、エタノール、プロピレングリコール及びグリセリンなどの希釈剤、並びにそれらの組み合わせと組み合わせることができる。

【0371】

本発明の併用療法は、非経口的に、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、髄内、心室内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、若しくは皮下に投与されてもよく、又は注入技術によって投与されてもよい。例えば、それらは、溶液を血液と等張性にするのに十分な塩類やグルコースなどの他の物質を含有することができる滅菌水溶液の形態で最も良く使用される。水溶液は、必要に応じて、適切に緩衝化（好ましくは、ｐＨ３～９に）されるべきである。滅菌条件下での好適な非経口製剤の調製は、当業者に周知である標準的な製薬技術によって容易に達成される。

【0372】

非経口投与に好適な医薬及び薬学的組成物には、水性及び非水性の滅菌注射液（抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、及び製剤を意図するレシピエントの血液と等張性にする溶質を含有することができる）並びに水性及び非水性の滅菌懸濁液（懸濁剤及び増粘剤を含むことができる）が含まれる。医薬及び薬学的組成物は、例えば密封されたアンプル及びバイアルなどの単位用量又は複数用量容器で提供されてもよく、使用直前に滅菌液体担体、例えば注射用水を添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射溶液及び懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製することができる。

【0373】

したがって、本発明の薬学的組成物は、非経口投与、例えば静脈内投与に特に好適である。

【0374】

本発明の併用療法はまた、鼻腔内に又は吸入によって投与することもでき、簡便には、乾燥粉末吸入剤の形態で、又は例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、１，１，１，２－テトラフルオロエタン（ＨＦＡ １３４Ａ３又は１，１，１，２，３，３，３－ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ ２２７ＥＡ３）などのヒドロフルオロアルカン、二酸化炭素、又は他の好適な気体などの好適な噴射剤を使用して、加圧容器、ポンプ、スプレー又はネブライザーからのエアロゾルスプレー提示形態で、送達される。加圧エアロゾルの場合、投薬量単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することによって決定され得る。加圧容器、ポンプ、スプレー、又はネブライザーは、例えば、エタノールと、溶媒としての噴射剤との混合物を使用する活性薬剤の溶液又は懸濁液を含有してもよく、これは更に、滑沢剤、例えばトリオレイン酸ソルビタンを更に含有してもよい。吸入器又は送気器に使用するカプセル及びカートリッジ（例えば、ゼラチンから作られる）は、本発明の薬剤の粉末混合物とラクトース又はデンプンなどの好適な粉末基剤を含有するように製剤化することができる。

【0375】

エアゾール又は乾燥粉末製剤は、好ましくは、各定量用量又は「パフ」が、患者に送達するための本発明の化合物を少なくとも１ｍｇ含有するように用意される。エアロゾルによる１日の総投与量は、患者によって異なり、１回の投与で、又はより通常、１日を通して分割して投与することができることが理解されるだろう。

【0376】

あるいは、本発明の併用療法は、坐剤若しくはペッサリーの形態で投与することができるか、又はローション、溶液、クリーム、ゲル、軟膏若しくは散布剤の形態で局所適用されてもよい。また、本発明の薬剤、医薬、及び薬学的組成物は、例えば、皮膚パッチの使用により、経皮投与されてもよい。それらはまた、特に眼の疾患を治療するために、眼経路によって投与されてもよい。

【0377】

眼に使用するために、本発明の併用療法は、任意選択的に塩化ベンジルアルコニウムなどの防腐剤と組み合わせた、等張性のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の微粒子化した懸濁液として、又は好ましくは、等張性のｐＨ調整した滅菌生理食塩水中の溶液として製剤化することができる。あるいは、ペトロラタムのような軟膏に配合することもできる。

【0378】

皮膚への局所適用のために、本発明の併用療法は、例えば、以下のうちの１つ以上との混合物中に懸濁又は溶解された活性薬剤を含有する好適な軟膏として製剤化することができる：鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン薬剤、乳化ワックス及び水。あるいは、例えば、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、及び水の１つ以上の混合物に懸濁又は溶解して、好適なローション又はクリームとして配合することができる。

【0379】

口腔への局所投与に好適な製剤としては、フレーバーベース、通常はスクロース及びアカシア若しくはトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ；ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアなどの不活性基剤中に活性成分を含むトローチ剤；並びに好適な液体担体中に活性成分を含む口腔洗浄剤が挙げられる。

【0380】

一般に、ヒトでは、腫瘍の部位又はその近くでの本発明の併用療法の局所投与、特に腫瘍内又は腫瘍周辺投与が好ましい経路である。

【0381】

薬学的組成物は、上に記載した通り、薬学的に有効な用量／治療有効量で患者に投与されるだろう。本発明の組成物の製造方法及び使用において、治療有効量の活性成分が提供される。治療有効量は、当該技術分野で周知であるように、年齢、体重、性別、状態、合併症、他の疾患などの患者特性に基づいて、通常の熟練した医学又は獣医学従事者が決定することができる。

【0382】

薬学的に有効な用量の投与は、個々の用量単位又はいくつかのより小さい用量単位の形態での単一投与と、特定の間隔での細分化された用量の複数回の投与の両方によって実施することができる。あるいは、投与量は、長期にわたる連続注入として提供され得る。抗体ポリペプチドは、使用されるポリペプチドの有効性／毒性に応じて様々な濃度で配合され得る。例えば、製剤は、活性抗体ポリペプチドを、０．１μＭ～１ｍＭ、より好ましくは１μＭ～５００μＭ、５００μＭ～１ｍＭ、３００μＭ～７００μＭ、１μＭ～１００μＭ、１００μＭ～２００μＭ、２００μＭ～３００μＭ、３００μＭ～４００μＭ、４００μＭ～５００μＭ、５００μＭ～６００μＭ、６００μＭ～７００μＭ、８００μＭ～９００μＭ、又は９００μＭ～１ｍＭの濃度で含み得る。典型的には、製剤は、３００μＭ～７００μＭの濃度で活性抗体ポリペプチドを含む。

【0383】

典型的には、ヒト患者における抗体ポリペプチドの治療用量（治療的部分を含むか又は含まない）は、投与１回当たり１００μｇ～１ｇの範囲である（７０ｋｇの体重に基づいて、例えば、投与１回当たり３００μｇ～７００ｍｇである）。例えば、最大治療用量は、投与１回当たり０．１～１０ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば１～１０ｍｇ／ｋｇ、又は０．１～５ｍｇ／ｋｇ、又は１～５ｍｇ／ｋｇ、又は０．１～２ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。最も好ましくは、治療用量は、１～１０ｍｇ／ｋｇ、任意選択的に２．５～７．５ｍｇ／ｋｇである。そのような用量は、腫瘍医／医師によって決定されるように、異なる間隔で投与され得、例えば、用量は、毎日、週２回、毎週、隔週、又は毎月投与され得ることが理解されるだろう。

【0384】

当業者は、本発明のポリペプチド及び薬学的製剤が医学及び獣医学の両方の分野で有用性を有することを更に理解するであろう。したがって、本発明の方法は、ヒト及び非ヒト動物（ウマ、イヌ、及びネコなど）の両方の治療において使用され得る。しかしながら、好ましくは、患者はヒトである。

【0385】

獣医学的使用のために、本発明の併用療法は、通常の獣医学的慣行に従って好適に許容される製剤として投与され、獣医は、特定の動物に最も適切であろう投与レジメン及び投与経路を決定する。

【0386】

本発明はまた、対象において固形腫瘍を治療するためのキットであって、当該キットが、（ａ）治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体と、（ｂ）対象への全身投与に好適な治療有効量の更なる免疫療法剤と、を含む、キットを提供する。更なる免疫療法剤は、任意選択的に第１の態様で定義されるような、ＰＤ－１阻害剤である。ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体は、好ましくは、腫瘍への局所投与に好適な形態で提供される。

【0387】

核酸、ベクター、及び宿主
本発明はまた、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子（又はその構成要素のペプチド鎖）と、を含むキットを提供する。

【0388】

「核酸分子」は、一本鎖又は二本鎖であり得るＤＮＡ（例えば、ゲノムＤＮＡ又は相補的ＤＮＡ）及びｍＲＮＡ分子を含む。「単離された」は、核酸分子が細胞内に位置しないか、又は別様に細胞内に提供されていないことを意味する。

【0389】

一実施形態では、第１及び／又は第２の核酸分子（複数可）は、ｃＤＮＡ分子（複数可）である。

【0390】

一実施形態では、第１及び／又は第２の単離された核酸分子は、抗体重鎖若しくはその可変領域をコードし、かつ／又は抗体軽鎖若しくはその可変領域をコードする。

【0391】

好ましくは、第１の核酸分子は、以下に再現される、配列番号９及び配列番号１０のいずれかから選択される１つ以上のヌクレオチド配列を含む。
「１６３０」のＶＨ領域をコードするヌクレオチド配列
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＴＴＧＧＡＧＡＧＣＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＧＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＡＧＣＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＧＧＴＴＡＣＴＣＴＴＡＣＡＴＧＴＣＴＴＧＧＧＴＣＣＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＴＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＴＧＧＴＴＣＴＴＣＴＴＡＣＡＣＡＴＡＣＴＡＴＧＣＡＧＡＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＣＧＴＧＡＣＡＡＴＴＣＣＡＡＧＡＡＣＡＣＧＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＴＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＴＡＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＧＣＧＣＧＴＴＴＡＣＴＣＴＴＣＴＣＣＧＧＧＴＡＴＴＧＡＣＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ
［配列番号９］
「１６３１」のＶＬ領域をコードするヌクレオチド配列
ＧＡＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＣＴＣＣＣＴＧＡＧＣＧＣＡＴＣＴＧＴＡＧＧＡＧＡＣＣＧＣＧＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＴＴＧＣＣＧＧＧＣＡＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＴＴＧＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＡＧＧＧＡＡＡＧＣＣＣＣＴＡＡＧＣＴＣＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＴＧＣＡＴＣＣＡＧＴＴＴＧＣＡＡＡＧＴＧＧＧＧＴＣＣＣＡＴＣＡＣＧＴＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＣＧＧＧＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＴＣＴＧＣＡＡＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＣＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＧＴＡＣＴＡＣＡＣＴＴＧＧＧＴＴＣＣＧＴＴＣＡＣＴＴＴＴＧＧＣＣＡＧＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＡＴＣＡＡＡ
［配列番号１０］

【0392】

代替の好ましい実施形態では、第１の核酸分子は、以下に再現される、配列番号２７及び／又は配列番号２８のいずれかから選択される１つ以上のヌクレオチド配列を含む。
「２６７４」のＶＨ領域をコードするヌクレオチド配列
ｇａｇｇｔｇｃａｇｔｔｇｔｔｇｇａａｔｃｔｇｇｃｇｇａｇｇａｔｔｇｇｔｇｃａｇｃｃｔｇｇｃｇｇａｔｃｔｃｔｇａｇａｃｔｇｔｃｔｔｇｔｇｃｃｇｃｃｔｃｔｇｇｃｔｔｃａａｃｔｔｃｇｇｃｔａｃｔｃｃｔａｃａｔｇｔｃｃｔｇｇｇｔｃｃｇａｃａｇｇｃｔｃｃｔｇｇｃａａａｇｇａｃｔｇｇａａｔｇｇｇｔｇｔｃｃｔｃｃａｔｃｇｇｃｔｃｃａｃｃａｇｃｔｃｔｃａｃａｃｃｔａｃｔａｃｇｃｃｇａｔｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃａｇａｔｔｃａｃｃａｔｃａｇｃｃｇｇｇａｃａａｃｔｃｃａａｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｃｔｇｃａｇａｔｇａａｃｔｃｃｃｔｇａｇａｇｃｃｇａｇｇａｃａｃｃｇｃｃｇｔｇｔａｃｔａｃｔｇｔｇｃｃａｇａｇｔｇｔａｃｔｃｃｔｃｔｃｃｔｇｇｃａｔｃｇａｔｔａｔｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇｃａｃａｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｔｃｔｇｃｔｔｃｔａｃｃａａｇｇｇａｃｃｃｔｃｔｇｔｇｔｔｃｃｃｔｃｔｇｇｃｔｃｃｔｔｇｃｔｃｃａｇａｔｃｃａｃｃｔｃｔｇａｇｔｃｔａｃｃｇｃｔｇｃｔｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｔｔａｃｔｔｔｃｃｔｇａｇｃｃｔｇｔｇａｃｃｇｔｇｔｃｔｔｇｇａａｃｔｃｃｇｇｔｇｃｔｃｔｇａｃａｔｃｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃａｔｔｔｃｃａｇｃｔｇｔｇｃｔｇｃａｇｔｃｃｔｃｃｇｇｃｃｔｇｔａｃｔｃｔｃｔｇｔｃｃｔｃｔｇｔｃｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｔｔｃｔａｇｃｔｃｔｃｔｇｇｇｃａｃｃａａｇａｃｃｔａｃａｃｃｔｇｔａａｃｇｔｇｇａｃｃａｃａａｇｃｃｔｔｃｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇｃｇｃｇｔｇｇａａｔｃｔａａｇｔａｃｇｇｃｃｃｔｃｃａｔｇｔｃｃａｃｃａｔｇｔｃｃｔｇｃｔｃｃａｇａａｔｔｃｃｔｃｇｇｃｇｇａｃｃａａｇｃｇｔｇｔｔｃｃｔｇｔｔｔｃｃｔｃｃａａａｇｃｃｔａａｇｇａｃａｃｃｃｔｇａｔｇａｔｃｔｃｔｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａａｇｔｇａｃｃｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｔｇｔｇｔｃｔｃａａｇａｇｇａｃｃｃａｇａａｇｔｇｃａｇｔｔｃａａｔｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｃｇｇｃｇｔｇｇａａｇｔｇｃａｃａａｃｇｃｃａａｇａｃｃａａｇｃｃｔａｇａｇａｇｇａａｃａｇｔｔｃａａｃｔｃｃａｃｃｔａｃａｇａｇｔｇｇｔｇｔｃｃｇｔｇｃｔｇａｃｃｇｔｇｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｔｔｇｇｃｔｇａａｃｇｇｃａａａｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇｃｃｔｇｃｃｔｔｃｃａｇｃａｔｃｇａａａａｇａｃｃａｔｃｔｃｃａａｇｇｃｔａａｇｇｇｃｃａｇｃｃｔｃｇｇｇａａｃｃｔｃａｇｇｔｔｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｔｃｃａａｇｃｃａａｇａｇｇａａａｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｃｇｔｇａａｇｇｇａｔｔｃｔａｃｃｃｔｔｃｃｇａｔａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａａｔｇｇｇａｇｔｃｔａａｃｇｇｃｃａｇｃｃａｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃａａｃｃｃｃｔｃｃｔｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｔｔｔｃｔｔｃｃｔｇｔａｔｔｃｔｃｇｃｃｔｇａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇｔｃｔｃｇｇｔｇｇｃａａｇａｇｇｇｃａａｃｇｔｇｔｔｃｔｃｃｔｇｃｔｃｔｇｔｇａｔｇｃａｃｇａｇｇｃｃｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃａｃａｇａａｇｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｔｇｔｃｃｃｔｇｇｇｃａａｇ
［配列番号２７］
「２６７５」のＶＬ領域をコードするヌクレオチド配列
ｇａｃａｔｃｃａｇａｔｇａｃｃｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｔｃｔｇｔｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｇｇｇｃｇａｃａｇａｇｔｇａｃｃａｔｃａｃｃｔｇｔｃｇｇｇｃｔｔｃｔｃａｇｔｃｃａｔｃｇｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａａｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａｇｃｃｔｇｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔａａｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｔａｔｇｇｃｇｃｔａｇｃｔｃｔｃｔｇｃａｇｔｃｔｇｇｃｇｔｇｃｃｃｔｃｔａｇａｔｔｔｔｃｃｇｇｃｔｃｔｇｇｃｔｃｔｇｇｃａｃｃｇａｃｔｔｃａｃｃｃｔｇａｃａａｔｃａｇｔｔｃｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａｇｇａｃｔｔｃｇｃｃａｃｃｔａｃｔａｃｔｇｃｃａｇｃａｇｔａｃｔａｃａｃｃｔｇｇｇｔｇｃｃｃｔｔｔａｃｃｔｔｔｇｇｃｃａｇｇｇｃａｃｃａａｇｃｔｇｇａａａｔｃａａｇａｇａａｃｃｇｔｇｇｃｃｇｃｔｃｃｔｔｃｃｇｔｇｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃａｃｃａｔｃｔｇａｃｇａｇｃａｇｃｔｇａａｇｔｃｃｇｇｃａｃａｇｃｔｔｃｔｇｔｃｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｃａａｃｔｔｃｔａｃｃｃｔｃｇｇｇａａｇｃｃａａｇｇｔｇｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｃａａｔｇｃｃｃｔｇｃａｇｔｃｃｇｇｃａａｃｔｃｃｃａａｇａｇｔｃｔｇｔｇａｃｃｇａｇｃａｇｇａｃｔｃｃａａｇｇａｃｔｃｔａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｇｔｃｃｔｃｃａｃａｃｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｔａａｇｇｃｃｇａｃｔａｃｇａｇａａｇｃａｃａａｇｇｔｇｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｇａｃｃｃａｔｃａｇｇｇａｃｔｇｔｃｔａｇｃｃｃｃｇｔｇａｃｃａａｇｔｃｃｔｔｃａａｃａｇａｇｇｃｇａｇｔｇｔ
［配列番号２８］

【0393】

第１の核酸分子は、特定の宿主細胞における抗体ポリペプチドの発現、例えば、ヒト細胞における発現のためにコドン最適化され得ることが当業者には理解されよう（例えば、Ａｎｇｏｖ，２０１１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｊ．６（６）：６５０－６５９（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0394】

本発明はまた、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含むベクターを含む、キットを提供する。

【0395】

一実施形態では、ベクターは、発現ベクターである。第１及び／又は第２の単離された核酸は、先に記載された通りであってもよい。

【0396】

本発明はまた、ＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、若しくはその抗原結合断片をコードする第１の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、
（ｉ）ＰＤ－１阻害剤、及び／又は
（ｉｉ）ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するその抗原結合断片の抗体をコードする第２の単離された核酸分子、又はその構成要素のペプチド鎖と、を含む宿主細胞を含む、キットを提供する。

【0397】

好ましくは、宿主細胞は、哺乳動物細胞（例えばヒト細胞、若しくはチャイニーズハムスター卵巣細胞、例えばＣＨＯＫ１ＳＶ細胞）、細菌細胞、又は酵母細胞であってもよい。第１及び／又は第２の単離された核酸は、先に記載された通りであってもよい。第１及び／又は第２の単離された核酸は、発現ベクターなどのベクターに含まれ得る。

【0398】

配列表の簡単な説明
配列番号１は、「１６３０」のＶＨ領域のアミノ酸配列である。

【0399】

配列番号２は、「１６３１」のＶＬ領域のアミノ酸配列である。

【0400】

配列番号３は、「１６３０」のＨＣＤＲ１のアミノ酸配列である。

【0401】

配列番号４は、「１６３０」のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列である。

【0402】

配列番号５は、「１６３０」のＨＣＤＲ３のアミノ酸配列である。

【0403】

配列番号６は、「１６３１」のＬＣＤＲ１のアミノ酸配列である。

【0404】

配列番号７は、「１６３１」のＬＣＤＲ２のアミノ酸配列である。

【0405】

配列番号８は、「１６３１」のＬＣＤＲ３のアミノ酸配列である。

【0406】

配列番号９は、「１６３０」のＶＨ領域をコードするヌクレオチド配列である。

【0407】

配列番号１０は、「１６３１」のＶＬ領域をコードするヌクレオチド配列である。

【0408】

配列番号１１は、ヒトＣＤ１３７配列のアミノ酸配列（アミノ酸６６～１０７は、ヒトＣＤ１３７のドメイン２に対応する）である。

【0409】

配列番号１２は、ＩｇＧ１重鎖定常領域のアミノ酸配列である。

【0410】

配列番号１３は、修飾ＩｇＧ４定常領域のアミノ酸配列である。

【0411】

配列番号１４は、修飾ＩｇＧ４定常領域のアミノ酸配列である。

【0412】

配列番号１５は、野生型ＩｇＧ４定常領域のアミノ酸配列である。

【0413】

配列番号１６は、カッパ鎖定常領域のアミノ酸配列である。

【0414】

配列番号１７は、「１６３０」の重鎖の完全アミノ酸配列である。

【0415】

配列番号１８は、「１６３１」の軽鎖の完全アミノ酸配列である。

【0416】

配列番号１９は、「２６７４」のＶＨ領域のアミノ酸配列である。

【0417】

配列番号２０は、「２６７５」のＶＬ領域のアミノ酸配列である。

【0418】

配列番号２１は、「２６７４」のＨＣＤＲ１のアミノ酸配列である。

【0419】

配列番号２２は、「２６７４」のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列である。

【0420】

配列番号２３は、「２６７４」のＨＣＤＲ３のアミノ酸配列である。

【0421】

配列番号２４は、「２６７５」のＬＣＤＲ１のアミノ酸配列である。

【0422】

配列番号２５は、「２６７５」のＬＣＤＲ２のアミノ酸配列である。

【0423】

配列番号２６は、「２６７５」のＬＣＤＲ３のアミノ酸配列である。

【0424】

配列番号２７は、「２６７４」のＶＨ領域をコードするヌクレオチド配列である。

【0425】

配列番号２８は、「２６７５」のＶＬ領域をコードするヌクレオチド配列である。

【0426】

配列番号２９は、重鎖「２６７４」の完全アミノ酸配列である。

【0427】

配列番号３０は、「２６７５」の軽鎖の完全アミノ酸配列である。

【0428】

配列番号３１は、ニボルマブの重鎖アミノ酸配列である。

【0429】

配列番号３２は、ニボルマブの軽鎖アミノ酸配列である。

【0430】

配列番号３３は、ペムブロリズマブの重鎖アミノ酸配列である。

【0431】

配列番号３４は、ペムブロリズマブの軽鎖アミノ酸配列である。

【0432】

配列番号３５は、ヒトＰＤ－１配列のアミノ酸配列である。

【0433】

配列番号３６は、ヒトＰＤ－Ｌ１配列のアミノ酸配列である。

【0434】

配列番号３７は、ピジリズマブの重鎖配列である。

【0435】

配列番号３８は、ピジリズマブの軽鎖配列である。

【0436】

配列番号３９は、セミプリマブの重鎖配列である。

【0437】

配列番号４０は、セミプリマブの軽鎖配列である。

【0438】

配列番号４１は、スパルタリズマブの重鎖配列である。

【0439】

配列番号４２は、スパルタリズマブの軽鎖配列である。

【0440】

配列番号４３は、カムレリズマブの重鎖配列である。

【0441】

配列番号４４は、カムレリズマブの軽鎖配列である。

【0442】

配列番号４５は、チスレリズマブの重鎖配列である。

【0443】

配列番号４６は、チスレリズマブの軽鎖配列である。

【0444】

配列番号４７は、トリパリマブの重鎖配列である。

【0445】

配列番号４８は、トリパリマブの軽鎖配列である。

【0446】

配列番号４９は、ドスタルリマブの重鎖配列である。

【0447】

配列番号５０は、ドスタルリマブの軽鎖配列である。

【0448】

配列番号５１は、ＩＮＣＭＧＡ０００１２の重鎖配列である。

【0449】

配列番号５２は、ＩＮＣＭＧＡ０００１２の軽鎖配列である。

【0450】

配列番号５３は、アテゾリズマブの重鎖配列である。

【0451】

配列番号５４は、アテゾリズマブの軽鎖配列である。

【0452】

配列番号５５は、デュルバルマブの重鎖配列である。

【0453】

配列番号５６は、デュルバルマブの軽鎖配列である。

【0454】

配列番号５７は、アベルマブの重鎖配列である。

【0455】

配列番号５８は、アベルマブの軽鎖配列である。

【0456】

配列番号５９は、ＣＫ－３０１の重鎖配列である。

【0457】

配列番号６０は、ＣＫ－３０１の軽鎖配列である。

【0458】

配列番号６１は、ＪＴＸ－４０１４の重鎖配列である。

【0459】

配列番号６２は、ＪＴＸ－４０１４の軽鎖配列である。

【0460】

本発明の実施形態は、以下のものを含むが、それらに限定されない。

【0461】

Ａ．対象において固形腫瘍を治療するための方法であって、方法が、（ａ）対象に、治療有効量のＣＤ１３７に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（好ましくは、投与後に腫瘍部位に保持される）を投与することと、（ｂ）対象に、治療有効量の更なる免疫療法剤を全身投与することであって、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、投与することと、を含む、方法。

【0462】

Ｂ．当該ＰＤ－１阻害剤が、抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、実施形態Ａに記載の方法。

【0463】

Ｃ．固形腫瘍が、アデノーマ、芽細胞腫、がん腫、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、胚細胞腫瘍、リンパ腫、肉腫、ウィルムス腫瘍、肺腫瘍、結腸腫瘍、リンパ腫瘍、乳房腫瘍又は黒色腫である、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0464】

Ｄ．固形腫瘍が、肺腫瘍（例えば、非小細胞肺がん若しくは小細胞肺がん）；頭部及び／若しくは頸部腫瘍、胃腫瘍、食道腫瘍、腎臓腫瘍、尿路上皮腫瘍、高ＭＳＩ腫瘍、ｄＭＭＲ腫瘍、高ＴＭＢ腫瘍、乳房腫瘍、子宮頸部腫瘍、前立腺腫瘍、又は黒色腫であり、好ましくは、固形腫瘍が、転移性である、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0465】

Ｅ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号３、４、５、６、７及び８から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0466】

Ｆ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号３、４、及び５並びに／又は配列番号６、７及び８のＣＤＲ配列を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0467】

Ｇ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号２の軽鎖可変領域及び／又は配列番号１の重鎖可変領域を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0468】

Ｈ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号１６の軽鎖定常領域及び／又は配列番号１３の重鎖定常領域を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0469】

Ｉ．ステップ（ａ）の抗体が、ヒトＣＤ１３７に対する結合について、配列番号２の軽鎖可変領域と配列番号１の重鎖可変領域とを含む抗体と競合する、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0470】

Ｊ．ステップ（ａ）の抗体が、２１、２２、２３、２４、２５及び２６から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含み、任意選択的に、ステップ（ａ）の抗体が、配列番号２１、２２及び２３並びに／又は配列番号２４、２５及び２６のＣＤＲ配列を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0471】

Ｋ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号２０の軽鎖可変領域及び／又は配列番号１９の重鎖可変領域を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0472】

Ｌ．ステップ（ａ）の抗体が、配列番号１６の軽鎖定常領域及び／又は配列番号１３の重鎖定常領域を含む、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0473】

Ｍ．ステップ（ａ）の抗体が、ヒトＣＤ１３７に対する結合について、配列番号２０の軽鎖可変領域と配列番号１９の重鎖可変領域とを含む抗体と競合する、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0474】

Ｎ．ステップ（ａ）及び（ｂ）が同時に行われるか、又はステップ（ｂ）が、ステップ（ａ）の後の２４時間以内、ステップ（ａ）の後の２４時間から２週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から１週間の間、ステップ（ａ）の後の２４時間から７２時間の間、若しくはステップ（ａ）の後の２４時間から４８時間の間に行われ、好ましくは、ステップ（ｂ）が、ステップ（ａ）の後の２４時間以内に行われる、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0475】

Ｏ．ステップ（ａ）が、対象への抗体の全身投与を含み、任意選択的に、抗体が、少なくとも１つの薬学的に許容される希釈剤又は担体との全身投与に好適な組成物として製剤化される、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0476】

Ｐ．ステップ（ａ）で投与される抗体の量の少なくとも３０％が、投与後４時間で腫瘍部位に保持され、好ましくは、当該量の少なくとも４０％が、投与後４時間で腫瘍部位に保持される、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0477】

Ｑ．ステップ（ｂ）の更なる免疫療法剤が、少なくとも１つの薬学的に許容される希釈剤又は担体との全身投与に好適な組成物として製剤化される、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0478】

Ｒ．ステップ（ａ）が、複数の別個の機会に実施され、ステップ（ｂ）が、更なる免疫療法剤への対象の曝露が、本方法の持続時間にわたって連続するように実施される、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0479】

Ｓ．対象が、ヒトである、先行実施形態のうちのいずれか１つに記載の方法。

【0480】

Ｔ．対象において固形腫瘍を治療するためのキットであって、キットが、（ａ）ＣＤ１３７に特異的に結合し、好ましくは投与後に腫瘍部位に保持される治療有効量の抗体と、任意選択的に（ｂ）対象への全身投与に好適な治療有効量の更なる免疫療法剤と、を含み、更なる免疫療法剤がＰＤ－１阻害剤である、キット。

【0481】

Ｕ．１つ以上の更なる免疫療法剤と組み合わせて対象において固形腫瘍などのがんを治療する際に使用するための、ＣＤ１３７に特異的に結合し、好ましくは投与後に腫瘍部位に保持されることが可能であり、１つ以上の更なる免疫療法剤（複数可）がＰＤ－１阻害剤である、抗体、又はその抗原結合部分。

【0482】

Ｖ．当該ＰＤ－１阻害剤が、抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、実施形態Ｕに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0483】

Ｗ．固形腫瘍が、アデノーマ、芽細胞腫、がん腫、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、内分泌腫瘍、胚細胞腫瘍、リンパ腫、肉腫、ウィルムス腫瘍、肺腫瘍、結腸腫瘍、リンパ腫瘍、乳房腫瘍又は黒色腫である、実施形態Ｕ又はＶのいずれかに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0484】

Ｘ．固形腫瘍が、肺腫瘍（例えば、非小細胞肺がん若しくは小細胞肺がん）；頭部及び／若しくは頸部腫瘍、胃腫瘍、食道腫瘍、腎臓腫瘍、尿路上皮腫瘍、高ＭＳＩ腫瘍、ｄＭＭＲ腫瘍、高ＴＭＢ腫瘍、乳房腫瘍、子宮頸部腫瘍、前立腺腫瘍、又は黒色腫であり、好ましくは、固形腫瘍が、転移性である、実施形態Ｕ～Ｗのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0485】

Ｙ．配列番号３、４、５、６、７及び８から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む、実施形態Ｕ～Ｘのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0486】

Ｚ．配列番号２１、２２、２３、２４、２５及び２６から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む、実施形態Ｕ～Ｙのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0487】

ＡＡ．配列番号３、４、５、６、７及び８又は配列番号２１、２２、２３、２４、２５及び２６のＣＤＲ配列を含む、実施形態Ｕ～Ｚのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0488】

ＢＢ．配列番号２の軽鎖可変領域及び／若しくは配列番号１の重鎖可変領域を含むか、又は配列番号２０の軽鎖可変領域及び／若しくは配列番号１９の重鎖可変領域を含む、実施形態Ｕ～ＡＡのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0489】

ＣＣ．配列番号１６の軽鎖定常領域及び／又は配列番号１３の重鎖定常領域を含む、実施形態Ｕ～ＢＢのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0490】

ＤＤ．抗体、又はその抗原結合部分が、ヒトＣＤ１３７に対する結合について、配列番号１の軽鎖可変領域と配列番号２の重鎖可変領域とを含む抗体と競合し、かつ／又はヒトＣＤ１３７に対する結合について、配列番号１９の軽鎖可変領域と配列番号２０の重鎖可変領域とを含む抗体と競合する、実施形態Ｕ～ＣＣのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0491】

ＥＥ．抗体が、少なくとも１つの薬学的に許容される希釈剤又は担体との局所投与に好適な組成物として製剤化され、組成物がＰＤ－１阻害剤を含む、実施形態Ｕ～ＤＤのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分。

【0492】

ＦＦ．当該ＰＤ－１阻害剤が、任意選択的に、本明細書の任意の態様に従って定義されるように、抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、実施形態ＥＥに記載の併用療法。

【0493】

ＧＧ．対象における固形腫瘍を治療するための医薬の調製における、実施形態Ｕ～ＤＤのうちのいずれか１つに記載の抗体、又はその抗原結合部分の使用。

【0494】

開示される併用療法及び方法の異なる用途は、当該技術分野における特定の必要性に合わせて調整され得ることを理解されたい。本明細書で使用される用語は、本発明の特定の実施形態を説明することのみを目的とし、限定することが意図されないことも理解されるべきである。ある特徴が特定の態様を参照して説明される場合、当業者は、その特徴が他の関連する態様にも適用され得ることを理解するであろう。

【0495】

加えて、本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形の「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈から明らかにそうではない限り、複数の参照物を含む。したがって、例えば、「抗体（ａｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ）」への言及は、「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を含み、「抗原（ａｎ ａｎｔｉｇｅｎ）」への言及は、２つ以上のそのような抗原を含み、「対象（ａ ｓｕｂｊｅｃｔ）」への言及は、２以上のそのような対象を含む、などである。

【0496】

本明細書で引用される全ての刊行物、特許及び特許出願は、上記又は下記にかかわらず、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0497】

本明細書における明らかに以前に公開された文書のリスト又は議論は、必ずしも、その文書が最新技術の一部であるか又は通常の一般的な知識であることを認めているとみなされるべきではない。

【0498】

本発明を以下の実施例によって更に説明するが、これは更なる限定として解釈されるべきではない。本出願全体を通して引用される全ての図及び全ての参考文献、特許及び公開された特許出願の内容は、参照により本明細書に明確に組み込まれる。

【0499】

本発明の特定の態様を具体化する好ましい非限定的な実施例を、以下の図面を参照して説明する。

【図面の簡単な説明】

【0500】

【図1】ＭＣ３８結腸腺がん細胞に感染した雌ｈ４－１ＢＢｔｇマウスにおける、抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）及び／又はＰＤ－１阻害剤（ＲＭＰ１－１４クローン）の投与が腫瘍体積に及ぼす効果を示す。

【図2A】ＭＣ３８結腸腺がん細胞に感染した雌ｈ４－１ＢＢｔｇマウスにおける、抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）及び／又はＰＤ－１阻害剤（ＲＭＰ１－１４クローン）の投与が生存率に及ぼす効果を示す。

【図2B】ＭＣ３８結腸腺がん細胞に感染した雌ｈ４－１ＢＢｔｇマウスにおける、抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）及び／又はＰＤ－１阻害剤（ＲＭＰ１－１４クローン）の投与が生存率に及ぼす効果を示す。

【図3】ＭＣ３８結腸腺がん細胞に感染した雌ｈ４－１ＢＢｔｇマウスにおける、抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）及び／又はＰＤ－１阻害剤（ＲＭＰ１－１４クローン）の投与が腫瘍成長阻害に及ぼす効果を示す。

【図4A】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図4B】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図5A】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ペムブロリズマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図5B】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ペムブロリズマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図6A】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図6B】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図7A】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（アテゾリズマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図7B】混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（アテゾリズマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図8A】疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞による混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図8B】疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞による混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【図8C】疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞による混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７）によるＴ細胞活性化を示す。

【発明を実施するための形態】

【0501】

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Ｌｕ Ｊ，Ｃｈｕ Ｊ，Ｚｏｕ Ｚ ｅｔ ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＦｃγＲＩ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ Ｆｃ ｒｅｖｅａｌｓ ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ｇｌｙｃａｎ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｉｇｈ－ａｆｆｉｎｉｔｙ ＩｇＧ ｂｉｎｄｉｎｇ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２０１５ Ｊａｎ ２０；１１２（３）：８３３－８
ＭｃＭｉｌｌｉｎ，Ｄ．Ｗ．，Ｈｅｗｅｓ，Ｂ．，Ｇａｎｇａｄｈａｒａｎ，Ｂ．，Ａｒｃｈｅｒ，Ｄ．Ｒ．，Ｍｉｔｔｌｅｒ，Ｒ．Ｓ．，ａｎｄ Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｈ．Ｔ．（２００６）Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｌａｒｇｅ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｕｓｉｎｇ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １７，７９８－８０６．
Ｍｅｌｅｒｏ，Ｉ．，Ｓｈｕｆｏｒｄ，Ｗ．Ｗ．，Ｎｅｗｂｙ，Ｓ．Ａ．，Ａｒｕｆｆｏ，Ａ．，Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ，Ｊ．Ａ．，Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｋ．Ｅ．，Ｍｉｔｔｌｅｒ，Ｒ．Ｓ．，ａｎｄ Ｃｈｅｎ，Ｌ．（１９９７）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｔｈｅ ４－１ＢＢ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｕｍｏｕｒｓ．Ｎａｔ Ｍｅｄ ３，６８２－６８５．
Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ，Ｄａｎｉｅｌ Ｈｉｒｓｃｈｈｏｒｎ－Ｃｙｍｅｒｍａｎ，Ａｉｚｅａ Ｍｏｒａｌｅｓ－Ｋａｓｔｒｅｓａｎａ，ｅｔ ａｌ．Ａｇｏｎｉｓｔ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ ＴＮＦＲ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ Ｔｈａｔ Ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｅ Ｔ ａｎｄ ＮＫ ｃｅｌｌｓ Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１３；１９：１０４４－１０５３．Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎｌｉｎｅ Ｍａｒｃｈ ３，２０１３．
Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ，Ａｎｔｏｎｉｏ Ｍ．Ｇｒｉｍａｌｄｉ，Ｊｏｓｅ Ｌ．Ｐｅｒｅｚ－Ｇｒａｃｉａ，ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｆｏｒ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ． Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１３；１９：９９７－１００８．
Ｍｉｌｌｅｒ，Ｒ．Ｅ．，Ｊｏｎｅｓ，Ｊ．，Ｌｅ，Ｔ．，Ｗｈｉｔｍｏｒｅ，Ｊ．，Ｂｏｉａｎｉ，Ｎ．，Ｇｌｉｎｉａｋ，Ｂ．，ａｎｄ Ｌｙｎｃｈ，Ｄ．Ｈ．（２００２）４－１ＢＢ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａ ＣＤ４０－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６９，１７９２－１８００．
Ｍｏｒａｌｅｓ－Ｋａｓｔｒｅｓａｎａ，Ａ．，Ｓａｎｍａｍｅｄ，Ｍ．Ｆ．，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ，Ｉ．，Ｐａｌａｚｏｎ，Ａ．，Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｆｏｒｅｒｏ，Ｉ．，Ｌａｂｉａｎｏ，Ｓ．，Ｈｅｒｖａｓ－Ｓｔｕｂｂｓ，Ｓ．，Ｓａｎｇｒｏ，Ｂ．，Ｏｃｈｏａ，Ｃ．，Ｒｏｕｚａｕｔ，Ａ．，Ａｚｐｉｌｉｋｕｅｔａ，Ａ．，Ｂｏｌａｎｏｓ，Ｅ．，Ｊｕｒｅ－Ｋｕｎｋｅｌ，Ｍ．，Ｇｕｔｇｅｍａｎｎ，Ｉ．，ａｎｄ Ｍｅｌｅｒｏ，Ｉ．（２０１３）Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｅｘｔｅｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ａｎ ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ． Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９，６１５１－６１６２．
Ｍｏｒｉｍｕｒａ Ｔ，Ｎｅｕｃｈｒｉｓｔ Ｃ，Ｋｉｔｚ Ｋ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｇｌｉｏｍａｓ：ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｃ ａｎｄ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ． Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ． １９９０；８０（３）：２８７－９４．
Ｎｏｒｔｏｎ ＳＥ，Ｄｕｎｎ ＥＴ，ＭｃＣａｌｌ ＪＬ ｅｔ ａｌ．Ｇｕｔ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｉｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｎ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ． Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ． ２０１６ Ａｐｒ ２９；５（４）：ｅ７６．
Ｎｉｕ，Ｌ．，Ｓｔｒａｈｏｔｉｎ，Ｓ．，Ｈｅｗｅｓ，Ｂ．，Ｚｈａｎｇ，Ｂ．，Ｚｈａｎｇ，Ｙ．，Ａｒｃｈｅｒ，Ｄ．，Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｔ．，Ｄｉｌｌｅｈａｙ，Ｄ．，Ｋｗｏｎ，Ｂ．，Ｃｈｅｎ，Ｌ．，Ｖｅｌｌａ，Ａ．Ｔ．，ａｎｄ Ｍｉｔｔｌｅｒ，Ｒ．Ｓ．（２００７）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ，ｈｅｍｏｐｏｉｅｓｉｓ，ａｎｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｐｅｎｉａ，ａｎｅｍｉａ，ａｎｄ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉａ ｉｎ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７－ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ． Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ． １７８，４１９４－４２１３．
Ｏｖｅｒｄｉｊｋ ＭＢ，Ｖｅｒｐｌｏｅｇｅｎ Ｓ，Ｏｒｔｉｚ Ｂｕｉｊｓｓｅ Ａ，Ｖｉｎｋ Ｔ，Ｌｅｕｓｅｎ ＪＨ，Ｂｌｅｅｋｅｒ ＷＫ，Ｐａｒｒｅｎ ＰＷ． Ｃｒｏｓｓｔａｌｋ ｂｅｔｗｅｅｎ ｈｕｍａｎ ＩｇＧ ｉｓｏｔｙｐｅｓ ａｎｄ ｍｕｒｉｎｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｃｅｌｌｓ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１２ Ｏｃｔ １；１８９（７）：３４３０－８． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ： ２２９５６５７７．
Ｐａｌａｚｏｎ Ａ，Ｉｖａｎ Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｆｏｒｅｒｏ，Ａｌｖａｒｏ Ｔｅｉｊｅｉｒａ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ＨＩＦ－１ａ Ｈｙｐｏｘｉａ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ Ｔｕｍｏｕｒ－Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ Ｔ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ Ｉｎｄｕｃｅｓ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ２０１２；２：６０８－６２３．Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ＯｎｌｉｎｅＦｉｒｓｔ Ｊｕｎｅ １９，２０１２．
Ｐａｌａｚｏｎ Ａ，Ｔｅｉｊｅｉｒａ Ａ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｆｏｒｅｒｏ Ｉ，Ｈｅｒｖａｓ－Ｓｔｕｂｂｓ Ｓ，Ｒｏｎｃａｌ Ｃ，Ｐｅｎｕｅｌａｓ Ｉ，Ｄｕｂｒｏｔ Ｊ，Ｍｏｒａｌｅｓ－Ｋａｓｔｒｅｓａｎａ Ａ，Ｐｅｒｅｚ－Ｇｒａｃｉａ ＪＬ，Ｏｃｈｏａ ＭＣ，Ｏｃｈｏａ－Ｃａｌｌｅｊｅｒｏ Ｌ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ａ，Ｌｕｑｕｅ Ａ，Ｄｉｎｃｈｕｋ Ｊ，Ｒｏｕｚａｕｔ Ａ，Ｊｕｒｅ－Ｋｕｎｋｅｌ Ｍ，Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ．Ａｇｏｎｉｓｔ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ ｍＡｂ ａｃｔ ｏｎ ｔｕｍｏｕｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｅｎｈａｎｃｅ ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１１ Ｆｅｂ １；７１（３）：８０１－１１．ｄｏｉ：１０．１１５８／０００８－５４７２．ＣＡＮ－１０－１７３３． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ： ２１２６６３５８．
Ｐａｎ，Ｐ．Ｙ．，Ｚａｎｇ，Ｙ．，Ｗｅｂｅｒ，Ｋ．，Ｍｅｓｅｃｋ，Ｍ．Ｌ．，ａｎｄ Ｃｈｅｎ，Ｓ．Ｈ．（２００２）ＯＸ４０ ｌｉｇａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ａｎ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｃ ｃｏｌｏｎ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ ６，５２８－５３６．
Ｐｏｒｅｍｂｋａ ＭＲ，Ｍｉｔｃｈｅｍ ＪＢ，Ｂｅｌｔ ＢＡ ｅｔ ａｌ．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎｄｕｃｅｓ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｙｅｌｏｉｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｃｅｌｌｓ ｗｈｉｃｈ ｐｒｏｍｏｔｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． ２０１２ Ｓｅｐ；６１（９）：１３７３－８５．
Ｐｕｌｌｅ，Ｇ．，Ｖｉｄｒｉｃ，Ｍ．，ａｎｄ Ｗａｔｔｓ，Ｔ．Ｈ．（２００６）ＩＬ－１５－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ４－１ＢＢ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ａｎｔｉｇｅｎ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ＣＤ８ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １７６，２７３９－２７４８．
Ｒａｂｕ，Ｃ．，Ｑｕｅｍｅｎｅｒ，Ａ．，Ｊａｃｑｕｅｓ，Ｙ．，Ｅｃｈａｓｓｅｒｉｅａｕ，Ｋ．，Ｖｕｓｉｏ，Ｐ．，ａｎｄ Ｌａｎｇ，Ｆ．（２００５）Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｔｒｉｍｅｒｉｃ ＣＤ１３７Ｌ（４－１ＢＢＬ）． Ｃｒｏｓｓ－ｌｉｎｋｉｎｇ ｉｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｔｏ ｉｔｓ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｏ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８０，４１４７２－４１４８１．
Ｒｉｂａｓ ａｎｄ Ｗｏｌｃｈｏｃｋ，Ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｕｓｉｎｇ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｌｏｃｋａｄｅ． Ｓｃｉｅｎｃｅ． ２０１８，３５９（６３８２）：１３５０－１３５５．
Ｒｏｕｓｓｅｌ Ｍ，Ｆｅｒｒｅｌｌ ＰＢ Ｊｒ，Ｇｒｅｅｎｐｌａｔｅ ＡＲ ｅｔ ａｌ．Ｍａｓｓ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｄｅｅｐ ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｐｈａｇｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｍｙｅｌｏｉｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ． Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ．２０１７ Ａｕｇ；１０２（２）：４３７－４４７
Ｓａｌｌｉｎ，Ｍ．Ａ．，Ｚｈａｎｇ，Ｘ．，Ｓｏ，Ｅ．Ｃ．，Ｂｕｒｃｈ，Ｅ．，Ｃａｉ，Ｌ．，Ｌｉｎ，Ｗ．，Ｃｈａｐｏｖａｌ，Ａ．Ｉ．，ａｎｄ Ｓｔｒｏｍｅ，Ｓ．Ｅ．（２０１４）Ｔｈｅ ａｎｔｉ－ｌｙｍｐｈｏｍａ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｒｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｉｎ ＦｃｇａｍｍａＲＩＩＩ（－／－）ｍｉｃｅ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． ６３，９４７－９５８．
Ｓａｎｍａｍｅｄ，Ｍ．Ｆ．，Ｐａｓｔｏｒ，Ｆ．，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ，Ａ．，Ｐｅｒｅｚ－Ｇｒａｃｉａ，Ｊ．Ｌ．，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ－Ｒｕｉｚ，Ｍ．Ｅ．，Ｊｕｒｅ－Ｋｕｎｋｅｌ，Ｍ．，ａｎｄ Ｍｅｌｅｒｏ，Ｉ．（２０１５）Ａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ Ｃｏ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ａｇａｉｎｓｔ ＣＤ１３７，ＯＸ４０，ＧＩＴＲ，ＣＤ２７，ＣＤ２８，ａｎｄ ＩＣＯＳ． Ｓｅｍｉｎ． Ｏｎｃｏｌ． ４２，６４０－６５５．
Ｓｅｇａｌ ＮＨ ｅｔ ａｌ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｎ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｓａｆｅｔｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｕｒｅｌｕｍａｂ，ａｎ Ａｇｏｎｉｓｔ Ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１７，２３（８）：１９２９－１９３６．
Ｓｅｇａｌ ＮＨ ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｓｅ Ｉ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｓｉｎｇｌｅ－Ａｇｅｎｔ Ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ（ＰＦ－０５０８２５６６），ａ ４－１ＢＢ／ＣＤ１３７ Ａｇｏｎｉｓｔ，ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１８，２４（８）：１８１６－１８２３．
Ｓｈｕｆｏｒｄ，Ｗ．Ｗ．，Ｋｌｕｓｓｍａｎ，Ｋ．，Ｔｒｉｔｃｈｌｅｒ，Ｄ．Ｄ．，Ｌｏｏ，Ｄ．Ｔ．，Ｃｈａｌｕｐｎｙ，Ｊ．，Ｓｉａｄａｋ，Ａ．Ｗ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｔ．Ｊ．，Ｅｍｓｗｉｌｅｒ，Ｊ．，Ｒａｅｃｈｏ，Ｈ．，Ｌａｒｓｅｎ，Ｃ．Ｐ．，Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｔ．Ｃ．，Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ，Ｊ．Ａ．，Ａｒｕｆｆｏ，Ａ．，ａｎｄ Ｍｉｔｔｌｅｒ，Ｒ．Ｓ．（１９９７）４－１ＢＢ ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ｓｉｇｎａｌｓ ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｉｎｄｕｃｅ ＣＤ８＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｅａｄ ｔｏ ｔｈｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ ｏｆ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ． Ｊ Ｅｘｐ． Ｍｅｄ １８６，４７－５５．
Ｓｏ，Ｔ．，Ｌｅｅ，Ｓ．Ｗ．，ａｎｄ Ｃｒｏｆｔ，Ｍ．（２００８）Ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ＯＸ４０ ａｎｄ ４－１ＢＢ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖ．１９，２５３－２６２．
Ｓｏｌｉｔｏ Ｓ，Ｍａｒｉｇｏ Ｉ，Ｐｉｎｔｏｎ Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｍｙｅｌｏｉｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｃｅｌｌ ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒｓ． Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．２０１４ Ｊｕｎ；１３１９：４７－６５．
Ｓｔｅｗａｒｔ Ｒ，Ｈａｍｍｏｎｄ Ｓ，Ｏｂｅｒｓｔ Ｍ，Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ Ｒ．（２０１４）Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ Ｆｃ ｇａｍｍａ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． ２：２９
Ｓｔ Ｒｏｓｅ，Ｍ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｒ．Ａ．，Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｙ，Ｓ．，Ｑｕｉ，Ｈ．Ｚ．，Ｈａｇｙｍａｓｉ，Ａ．Ｔ．，Ｖｅｌｌａ，Ａ．Ｔ．，ａｎｄ Ａｄｌｅｒ，Ａ．Ｊ．（２０１３）ＣＤ１３４／ＣＤ１３７ ｄｕａｌ ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ－ｅｌｉｃｉｔｅｄ ＩＦＮ－ｇａｍｍａ ｍａｘｉｍｉｚｅｓ ｅｆｆｅｃｔｏｒ Ｔ－ｃｅｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｕｔ ｌｉｍｉｔｓ Ｔｒｅｇ ｅｘｐａｎｓｉｏｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．９１，１７３－１８３．
Ｓｕｎ Ｙ，Ｓｕｂｕｄｈｉ ＳＫ，Ｆｕ ＹＸ． Ｃｏ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ａｇｏｎｉｓｔｓ ａｓ ａ ｎｅｗ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ． Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．２００３ Ｎｏｖ；９（１１）：４８３－９． Ｒｅｖｉｅｗ． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ：１４６０４８２６．
Ｔａｒａｂａｎ，Ｖ．Ｙ．，Ｒｏｗｌｅｙ，Ｔ．Ｆ．，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ，Ｌ．，Ｃｈａｎ，Ｈ．Ｔ．，Ｈａｓｗｅｌｌ，Ｌ．Ｅ．，Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．Ｈ．，Ｔｕｔｔ，Ａ．Ｌ．，Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｍ．Ｊ．，ａｎｄ Ａｌ－Ｓｈａｍｋｈａｎｉ，Ａ．（２００２）Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ＴＮＦ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒｓ ＣＤ１３４（ＯＸ４０）ａｎｄ ＣＤ１３７（４－１ＢＢ），ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｕｒ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３２，３６１７－３６２７．
Ｔｏｌｃｈｅｒ ＡＷ ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｓｅ Ｉｂ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ（ＰＦ－０５０８２５６６），ａ ４－１ＢＢ／ＣＤ１３７ Ａｇｏｎｉｓｔ，ｉｎ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（ＭＫ－３４７５）ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１７，２３（１８）：５３４９－５３５７．
Ｕｎｏ，Ｔ．，Ｔａｋｅｄａ，Ｋ．，Ｋｏｊｉｍａ，Ｙ．，Ｙｏｓｈｉｚａｗａ，Ｈ．，Ａｋｉｂａ，Ｈ．，Ｍｉｔｔｌｅｒ，Ｒ．Ｓ．，Ｇｅｊｙｏ，Ｆ．，Ｏｋｕｍｕｒａ，Ｋ．，Ｙａｇｉｔａ，Ｈ．，ａｎｄ Ｓｍｙｔｈ，Ｍ．Ｊ．（２００６）Ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｂａｓｅｄ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１２，６９３－６９８．
Ｖｉｄａｒｓｓｏｎ Ｇ，Ｄｅｋｋｅｒｓ Ｇ，Ｒｉｓｐｅｎｓ Ｔ．ＩｇＧ ｓｕｂｃｌａｓｓｅｓ ａｎｄ ａｌｌｏｔｙｐｅｓ：ｆｒｏｍ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｔｏ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ． Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１４ Ｏｃｔ ２０；５：５２０．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１４．００５２０． Ｒｅｖｉｅｗ． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ： ２５３６８６１９；ＰｕｂＭｅｄ Ｃｅｎｔｒａｌ ＰＭＣＩＤ：
ＰＭＣ４２０２６８８．
Ｖｉｎａｙ，Ｄ．Ｓ．ａｎｄ Ｋｗｏｎ，Ｂ．Ｓ．（２０１２）Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ４－１ＢＢ． Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ． １１，１０６２－１０７０．
Ｗａｎｇ Ｗ，Ｅｒｂｅ ＡＫ，Ｈａｎｋ ＪＡ，Ｍｏｒｒｉｓ ＺＳ，Ｓｏｎｄｅｌ ＰＭ． ＮＫ Ｃｅｌｌ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ． Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１５ Ｊｕｌ ２７；６：３６８．ｄｏｉ： １０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１５．００３６８． Ｒｅｖｉｅｗ． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ： ２６２８４０６３；ＰｕｂＭｅｄ Ｃｅｎｔｒａｌ ＰＭＣＩＤ： ＰＭＣ４５１５５５２．
Ｗｅｉ，Ｈ．，Ｚｈａｏ，Ｌ．，Ｌｉ，Ｗ．，Ｆａｎ，Ｋ．，Ｑｉａｎ，Ｗ．，Ｈｏｕ，Ｓ．，Ｗａｎｇ，Ｈ．，Ｄａｉ，Ｍ．，Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．，Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｋ．Ｅ．，ａｎｄ Ｇｕｏ，Ｙ．（２０１３）Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ ＰＤ－１ ｂｌｏｃｋａｄｅ ａｎｄ ＣＤ１３７ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｈａｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｃａｎｃｅｒ ｍｏｄｅｌｓ ａｎｄ ｓｙｎｅｒｇｉｚｅｓ ｗｉｔｈ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ． ＰＬｏＳ． ＯＮＥ． ８，ｅ８４９２７．
Ｗｅｓｔｗｏｏｄ，Ｊ．Ａ．，Ｄａｒｃｙ，Ｐ．Ｋ．，Ｇｕｒｕ，Ｐ．Ｍ．，Ｓｈａｒｋｅｙ，Ｊ．，Ｐｅｇｒａｍ，Ｈ．Ｊ．，Ａｍｏｓ，Ｓ．Ｍ．，Ｓｍｙｔｈ，Ｍ．Ｊ．，ａｎｄ Ｋｅｒｓｈａｗ，Ｍ．Ｈ．（２０１０）Ｔｈｒｅｅ ａｇｏｎｉｓｔ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ ＩＬ－２ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ． Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ． Ｍｅｄ．８，４２．
Ｗｅｓｔｗｏｏｄ，Ｊ．Ａ．，Ｍａｔｔｈｅｗｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｓｈｏｒｔｔ，Ｊ．，Ｆａｕｌｋｎｅｒ，Ｄ．，Ｐｅｇｒａｍ，Ｈ．Ｊ．，Ｄｕｏｎｇ，Ｃ．Ｐ．，Ｃｈｅｓｉ，Ｍ．，Ｂｅｒｇｓａｇｅｌ，Ｐ．Ｌ．，Ｓｈａｒｐ，Ｌ．Ｌ．，Ｈｕｈｎ，Ｒ．Ｄ．，Ｄａｒｃｙ，Ｐ．Ｋ．，Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅ，Ｒ．Ｗ．，ａｎｄ Ｋｅｒｓｈａｗ，Ｍ．Ｈ．（２０１４ａ）Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ ａｎｄ ａｎｔｉ－ＣＤ４０ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｍｙｃ－ｄｒｉｖｅｎ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒｓ． Ｌｅｕｋ． Ｒｅｓ．３８，９４８－９５４．
Ｗｈｉｔｅ ＡＬ，Ｃｈａｎ ＨＴ，Ｆｒｅｎｃｈ ＲＲ，Ｗｉｌｌｏｕｇｈｂｙ Ｊ，Ｍｏｃｋｒｉｄｇｅ ＣＩ，Ｒｏｇｈａｎｉａｎ Ａ，Ｐｅｎｆｏｌｄ ＣＡ，Ｂｏｏｔｈ ＳＧ，Ｄｏｄｈｙ Ａ，Ｐｏｌａｋ ＭＥ，Ｐｏｔｔｅｒ ＥＡ，Ａｒｄｅｒｎ－Ｊｏｎｅｓ ＭＲ，Ｖｅｒｂｅｅｋ ＪＳ，Ｊｏｈｎｓｏｎ ＰＷ，Ａｌ－Ｓｈａｍｋｈａｎｉ Ａ，Ｃｒａｇｇ ＭＳ，Ｂｅｅｒｓ ＳＡ，Ｇｌｅｎｎｉｅ ＭＪ． Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ２ ｈｉｎｇｅ ｉｍｐａｒｔｓ ｓｕｐｅｒａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｔｏ ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ． ２０１５ Ｊａｎ １２；２７（１）：１３８－４８．ｄｏｉ：１０．１０１６／ ｊ．ｃｃｅｌｌ．２０１４．１１．００１． ＰｕｂＭｅｄ ＰＭＩＤ： ２５５００１２２；ＰｕｂＭｅｄ Ｃｅｎｔｒａｌ ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ４２９７２９０．
Ｗｅｓｔｗｏｏｄ，Ｊ．Ａ．，Ｐｏｔｄｅｖｉｎ Ｈｕｎｎａｍ，Ｔ．Ｃ．，Ｐｅｇｒａｍ，Ｈ．Ｊ．，Ｈｉｃｋｓ，Ｒ．Ｊ．，Ｄａｒｃｙ，Ｐ．Ｋ．，ａｎｄ Ｋｅｒｓｈａｗ，Ｍ．Ｈ．（２０１４ｂ）Ｒｏｕｔｅｓ ｏｆ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｆｏｒ ＣｐＧ ａｎｄ ａｎｔｉ－ＣＤ１３７ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｔｕｍｏｕｒｓ ｉｎ ｍｉｃｅ． ＰＬｏＳ． ＯＮＥ． ９，ｅ９５８４７．
Ｗｉｌｃｏｘ，Ｒ．Ａ．，Ｆｌｉｅｓ，Ｄ．Ｂ．，Ｚｈｕ，Ｇ．，Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ａ．Ｊ．，Ｔａｍａｄａ，Ｋ．，Ｃｈａｐｏｖａｌ，Ａ．Ｉ．，Ｓｔｒｏｍｅ，Ｓ．Ｅ．，Ｐｅａｓｅ，Ｌ．Ｒ．，ａｎｄ Ｃｈｅｎ，Ｌ．（２００２）Ｐｒｏｖｉｓｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ａｎｄ ＣＤ１３７ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｂｒｅａｋｓ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｇｎｏｒａｎｃｅ，ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｏｏｒｌｙ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ ｔｕｍｏｕｒｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １０９，６５１－６５９．
Ｗｉｌｓｏｎ，Ｎ．Ｓ．，Ｙａｎｇ，Ｂ．，Ｙａｎｇ，Ａ．，Ｌｏｅｓｅｒ，Ｓ．，Ｍａｒｓｔｅｒｓ，Ｓ．，Ｌａｗｒｅｎｃｅ，Ｄ．，Ｌｉ，Ｙ．，Ｐｉｔｔｉ，Ｒ．，Ｔｏｔｐａｌ，Ｋ．，Ｙｅｅ，Ｓ．，Ｒｏｓｓ，Ｓ．，Ｖｅｒｎｅｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｌｕ，Ｙ．，Ａｄａｍｓ，Ｃ．，Ｏｆｆｒｉｎｇａ，Ｒ．，Ｋｅｌｌｅｙ，Ｂ．，Ｈｙｍｏｗｉｔｚ，Ｓ．，Ｄａｎｉｅｌ，Ｄ．，Ｍｅｎｇ，Ｇ．，ａｎｄ Ａｓｈｋｅｎａｚｉ，Ａ．（２０１１ｂ）Ａｎ Ｆｃｇａｍｍａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｄｒｉｖｅｓ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔａｒｇｅｔ－ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ １９，１０１－１１３．
Ｗｙｚｇｏｌ，Ａ．，Ｍｕｌｌｅｒ，Ｎ．，Ｆｉｃｋ，Ａ．，Ｍｕｎｋｅｌ，Ｓ．，Ｇｒｉｇｏｌｅｉｔ，Ｇ．Ｕ．，Ｐｆｉｚｅｎｍａｉｅｒ，Ｋ．，ａｎｄ Ｗａｊａｎｔ，Ｈ．（２００９）Ｔｒｉｍｅｒ ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｔｒｉｍｅｒｓ ｏｆ ＣＤ２７Ｌ，ＣＤ４０Ｌ，４１ＢＢＬ，ａｎｄ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ ＴＮＦ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｇａｎｄ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８３，１８５１－１８６１．
Ｙｕａｎ Ｙ ｅｔ ａｌ．Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ Ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１ Ｂｌｏｃｋａｄｅ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ． Ｃａｎｃｅｒｓ ２０２１，１３，６６３．
Ｚｈａｎｇ，Ｎ．，Ｓａｄｕｎ，Ｒ．Ｅ．，Ａｒｉａｓ，Ｒ．Ｓ．，Ｆｌａｎａｇａｎ，Ｍ．Ｌ．，Ｓａｃｈｓｍａｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｎｉｅｎ，Ｙ．Ｃ．，Ｋｈａｗｌｉ，Ｌ．Ａ．，Ｈｕ，Ｐ．，ａｎｄ Ｅｐｓｔｅｉｎ，Ａ．Ｌ．（２００７）Ｔａｒｇｅｔｅｄ ａｎｄ ｕｎｔａｒｇｅｔｅｄ ＣＤ１３７Ｌ ｆｕｓｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ． Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１３，２７５８－２７６７．
Ｚｈａｎｇ Ｂ，Ｗａｎｇ Ｚ，Ｗｕ Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｍｙｅｌｏｉｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ． ＰＬｏＳ Ｏｎｅ． ２０１３；８（２）：ｅ５７１１４

【実施例】

【0502】

実施例１
ＭＣ３８結腸がん腫瘍を保有するｈ４－１ＢＢトランスジェニックマウスにおける、ＰＤ－１阻害剤と組み合わせた抗ＣＤ１３７抗体の抗腫瘍有効性
ヒト抗４－１ＢＢ（抗ＣＤ１３７）アゴニストＩｇＧ４抗体であるＡＴＯＲ－１０１７は、ヒト４－１ＢＢに対してトランスジェニック（ｈ４－１ＢＢｔｇ）であるＭＣ３８結腸がん腫瘍を保有するマウスにおいて、強力な用量依存性抗腫瘍有効性を引き起こす。このことは、腫瘍体積の減少、腫瘍成長阻害の改善、及び完全奏効者の誘導、並びにマウスの生存の延長によって実証される。

【0503】

本発明者らは、驚くべきことに、抗ＣＤ１３７抗体（ＡＴＯＲ－１０１７など）とＰＤ－１阻害剤（サロゲートの抗ＰＤ－１抗体クローンＲＰＭ１－１４）との併用療法が、更なる改善された抗腫瘍有効性をもたらすことを見出した。

【0504】

材料及び方法
８週齢の雌ｈ４－１ＢＢｔｇマウスに、５×１０^５個のＭＣ３８結腸腺がん細胞を、１００μｌの体積で右前脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）接種した。接種後７日目に、マウスを６つの試験群に無作為に分け、５ｍｇ／ｋｇのサロゲートの抗ＰＤ－１抗体（クローンＲＭＰ１－１４、カタログ番号ＢＥ０１４６、ＢｉｏＸＣｅｌｌ，３９ Ｌａｂｏｍｂａｒｄ Ｒｄ，Ｌｅｂａｎｏｎ，ＮＨ ０３７６６，ＵＳＡにより供給された）による追加の治療を行うか、又は行わずに、０．５ｍｇ／ｋｇ又は５ｍｇ／ｋｇの２回用量で与えられた抗ＣＤ１３７抗体ＡＴＯＲ－１０１７により腹腔内（ｉ．ｐ．）で治療した。対照は、５ｍｇ／ｋｇのヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体を受けた。治療は、合計で最大６回の投与機会を合計して、３週間にわたって週２回与えられた。腫瘍成長を週に２回測定し、腫瘍体積が３０００ｍｍ^３の倫理的限界に近づくと、マウスを安楽死させた。

【0505】

結果及び結論
図１は、０．５ｍｇ／ｋｇで与えられる抗ＣＤ１３７抗体ＡＴＯＲ－１０１７による治療が、アイソタイプ対照と比較して有意に減少した腫瘍体積（１８日目にｐ＝０．００１５）をもたらすことを示し、この効果は、ＡＴＯＲ－１０１７を５ｍｇ／ｋｇで与えた場合により顕著である。抗ＰＤ－１と組み合わせた２つの用量のＡＴＯＲ－１０１７のいずれかを受けるマウスでは、対応するＡＴＯＲ－１０１７単剤療法と比較すると、腫瘍体積は更に減少する。併用療法のこの効果は、５ｍｇ／ｋｇの用量で与えられるＡＴＯＲ－１０１７についての片側マン・ホイットニー検定において統計的に有意である（３５日目にｐ＝０．０４８２）。

【0506】

抗ＣＤ１３７抗体ＡＴＯＲ－１０１７を１０μｇ／マウス及び／又は１００μｇ／マウスの用量で治療するか、又はサロゲートの抗ＰＤ－１抗体クローンＲＰＭ１－１４を用いた治療は、ｈｕＩｇＧ４アイソタイプ対照と比較して、雌マウスの生存率を増加させた（図２Ａ）。ＡＴＯＲ－１０１７及び抗ＰＤ－１の組み合わせを受けるマウスでは、対応する単剤療法と比較すると、生存率が更に増加する（図２Ａ及び２Ｂ）。

【0507】

４６日目に、１０μｇ／マウスのＡＴＯＲ－１０１７及び１００μｇ／マウスの抗ＰＤ－１抗体を含む併用療法を受けるマウスの生存率は、個々の単剤療法と比較して著しく増加した（図２Ｂ）。

【0508】

図３は、１００μｇ／匹の抗ＣＤ１３７抗体ＡＴＯＲ－１０１７、及び１００μｇ／マウスのサロゲートの抗ＰＤ－１抗体クローンＲＰＭ１－１４の組み合わせによる治療が、対応する単剤療法と比較して、腫瘍成長抑制（ＴＧＩ、％）に及ぼす効果を実証する。本発明者らは、驚くべきことに、対応するＡＴＯＲ－１０１７単独療法と比較して、ＴＧＩに対する効果が併用療法を受けたマウスにおいて更に増加することを同定した。併用療法の効果は、Ｔ検定で統計的に有意であり（ｐ＝０．０３６６）、２つの薬剤間の相乗効果を実証する。

【0509】

更に、完全奏効者の数を監視し（表３）、ＡＴＯＲ－１０１７と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせを受けたマウスにおいて増加した。

【表6】

【0510】

全体として、ＣＤ１３７及びＰＤ－１の阻害剤を標的とする治療の組み合わせの抗がん効果の結果は、単独療法単独による治療と比較して増加する。結論として、これらのデータは、がんの治療におけるＡＴＯＲ－１０１７及び抗ＰＤ－１抗体の併用療法の予想外の有効性を示す。

【0511】

実施例２Ａ
混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤と組み合わせたＡＴＯＲ－１０１７のＴ細胞活性化
背景技術及び目的
ＡＴＯＲ－１０１７とＰＤ－１阻害剤との組み合わせのＴ細胞活性化に対する相乗効果を実証するために、Ｔ細胞活性化は、ヒト初代ＣＤ４＋Ｔ細胞及び成熟単球由来樹状細胞（ｍＭｏ－ＤＣ）を使用した混合リンパ球反応（ＭＬＲ）において評価され、ここで、両方の標的（４－１ＢＢ及びＰＤ－１）が内因的に発現される。

【0512】

材料及び方法
増殖したＣＤ４＋Ｔ細胞の生成：
製造業者の指示に従って、ＣＤ４＋Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（１３０－０９６－５３３、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ Ｌｔｄ）を使用して、白血球濃縮物からヒト初代ＣＤ４＋Ｔ細胞を単離した。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（商標）Ｈｕｍａｎ Ｔ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ ＣＤ３／ＣＤ２８（１１１３１Ｄ、Ｇｉｂｃｏ）を、１：１のビーズ対細胞比で５０ＩＵ／ｍＬの組換えヒトＩＬ－２（２０２－ＩＬ，Ｒ＆Ｄ）の存在下で使用して、細胞を７日間増殖させた。Ｄｙｎａｂｅａｄｓを除去し、ＣＤ４＋Ｔ細胞を、低減された１０ＩＵ／ｍＬの組換えヒトＩＬ－２とともに一晩休息させた。

【0513】

ｍＭｏ－ＤＣの分化：
単球を、Ｈｕｍａｎ ＣＤ１４ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（１３０－０５０－２０１、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ Ｌｔｄ，ＵＫ）を使用して、製造元の指示に従って、ヒトＰＢＭＣから単離した。ＩＬ－４及びＧＭ－ＣＳＦ（１３０－０９４－８１２、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を含有するＭｏ－ＤＣ分化培地を使用して、単球由来ＤＣ（Ｍｏ－ＤＣ）へと単球を分化させた。Ｍｏ－ＤＣを、Ｉｌ－１β（１３０－０９３－５６３、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）、ＩＬ－６（１３０－０９５－３５２、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）、ＴＮＦα（１３０－０９４－０２３、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）及びＰＧＥ２（Ｐ０４０９－１ＭＧ、Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）のカクテルを使用して、更に成熟Ｍｏ－ＤＣ（ｍＭｏ－ＤＣ）へと成熟させた。

【0514】

固定濃度の４５ｎＭのＦ（ａｂ）２抗Ｉｇ架橋剤（１０９－００６－００８、Ｊａｃｋｓｏｎ）の存在下でのＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤の滴定を使用して、ｍＭｏ－ＤＣ細胞と増殖したＣＤ４＋Ｔ細胞との１：１０の混合物を７日間処理した。上清を、Ｍｏｎｋｅｙ ＩＦＮ ｇａｍｍａ Ｅｌｉｓａ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｋｉｔ（３４２１Ｍ－１Ｈ－２０、Ｍａｂｔｅｃｈ）を使用して、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）について分析した。本発明者によって試験されるＰＤ－１阻害剤には、抗ＰＤ－１抗体ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）（図４に示される）及び抗ＰＤ－１抗体ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、Ｍｅｒｃｋ）（図５に示される）が含まれる。
ニボルマブの重鎖配列（配列番号３１）：

【化34】

ニボルマブの軽鎖配列（配列番号３２）

【化35】

ペムブロリズマブの重鎖配列（配列番号３３）：

【化36】

ペムブロリズマブの軽鎖配列（配列番号３４）

【化37】

【0515】

結果及び結論
両方のＰＤ－１阻害剤は、単独でＣＤ４＋Ｔ細胞を活性化することができたが、ＡＴＯＲ－１０１７単独では、ＭＬＲアッセイで不十分なＣＤ４＋Ｔ細胞活性化を誘導した（図４Ａ、ニボルマブ、図５Ａ、ペムブロリズマブ）。図４Ａ及び５Ａの点線は、ＭＬＲアッセイにおけるＣＤ４＋Ｔ細胞の同種異系刺激のベースラインレベル（バックグラウンドレベル）を示す。しかしながら、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤の併用治療は、個々の単剤療法単独と比較して、Ｔ細胞活性化の効力を相乗的に改善した（図４Ｂ及び５Ｂ）。図４Ｂ及び５Ｂに示される点線は、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤単剤療法の相加効果を示す。

【0516】

結論として、これらのデータは、Ｔ細胞活性化及びがんの治療のための、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体）との併用療法の予想外の効果を示す。

【0517】

実施例図２Ｂ
混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、ＰＤ－１阻害剤と組み合わせたＡＴＯＲ－１０１７のＴ細胞活性化
実施例２Ａは、実施例２Ａに記載されているのと同じ材料及び方法で、但し、抗ＰＤ－１抗体ニボルマブ（図６）又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ）（図７）をＰＤ－１阻害剤として使用し、架橋に使用される抗Ｆ（ａｂ）２を様々な濃度使用して、繰り返された。配列番号５３はアテゾリズマブの重鎖配列であり、配列番号５４はアテゾリズマブの軽鎖配列である。抗Ｆ（ａｂ）２を、固定濃度の抗Ｆ（ａｂ）２の代わりに、ＡＴＯＲ－１０１７用量（抗Ｆ（ａｂ）２／ＡＴＯＲ－１０１７比５：１）の比で投与した。ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤の併用治療は、個々の単剤療法単独と比較して、Ｔ細胞活性化の効力を相乗的に改善した（図６Ａ、ニボルマブ；図７Ａ、アテゾリズマブ）。図６Ａ及び７Ａの点線は、ＭＬＲアッセイにおけるＣＤ４＋Ｔ細胞の同種異系刺激のベースラインレベル（バックグラウンドレベル）を示す。

【0518】

単剤療法及び併用研究のために調査された投薬量は、０．００５、０．０２、０．０９、０．３５、１．４、５．６２及び２２．５ｎＭであった。単剤療法のための５．６２ｎＭの投薬量について、その単剤療法の濃度は、５．６２ｎＭである。併用療法のための５．６２ｎＭの投薬量の場合、各要素（ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤）は、５．６２ｎＭで存在する。

【0519】

ＭＬＲアッセイにおける２２．５ｎＭの用量は、ヒト患者に投与される場合、およそ０．１ｍｇ／ｋｇの用量に対応する。

【0520】

図６Ｂ（ニボルマブ）及び図７Ｂ（アテゾリズマブ）に示されるように、高濃度（２２．５ｎＭ）で併用療法の相乗的改善が観察された。図６Ｂ及び７Ｂに示される点線は、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤単剤療法の相加効果を示し、組み合わせの相乗効果を示している。

【0521】

実施例３
混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおける、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせたＡＴＯＲ－１０１７の疲弊したＴ細胞活性化
背景技術及び目的
ＡＴＯＲ－１０１７を抗ＰＤ－１と組み合わせることが、疲弊したＴ細胞活性化に及ぼす相乗的な活性を実証すること。Ｔ細胞活性化は、疲弊した表現型を有するヒト初代ＣＤ４＋Ｔ細胞及び成熟単球由来樹状細胞（ｍＭｏ－ＤＣ）を使用した混合リンパ球反応（ＭＬＲ）において評価され、ここで、両方の標的（４－１ＢＢ及びＰＤ－１）が内因的に発現される。

【0522】

材料及び方法
疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞の生成：
以前に増殖したＣＤ４＋Ｔ細胞の生成について記載されているように、ＣＤ４＋Ｔ細胞を８日間増殖させた。ただし、２日ごとに、８日間の増殖期間中に合計３回、新鮮なＣＤ３／ＣＤ２８ ＤｙｎａｂｅａｄｓをＣＤ４＋Ｔ細胞に添加した。８日後、疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞を、フローサイトメトリーを用いて、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３及びＬＡＧ－３の発現が増加していると特徴付けた。

【0523】

ｍＭｏ－ＤＣの分化：
成熟ｍＭｏ－ＤＣは、ｍＭｏ－ＤＣの分化のために前述したように生成された。

【0524】

Ｆ（ａｂ）２抗Ｉｇ架橋剤（１０９－００６－００８、Ｊａｃｋｓｏｎ）の存在下でのＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤（ニボルマブ）の滴定を使用して、ｍＭｏ－ＤＣ細胞と増殖したＣＤ４＋Ｔ細胞との１：１０の混合物を７日間処理した。上清を、Ｍｏｎｋｅｙ ＩＦＮ ｇａｍｍａ Ｅｌｉｓａ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｋｉｔ（３４２１Ｍ－１Ｈ－２０、Ｍａｂｔｅｃｈ）を使用して、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）について分析した。

【0525】

単剤療法及び併用研究のために調査された投薬量は、０．００５、０．０２、０．０９、０．３５、１．４、５．６２及び２２．５ｎＭであった。単剤療法のための５．６２ｎＭの投薬量について、その単剤療法の濃度は、５．６２ｎＭである。併用療法のための５．６２ｎＭの投薬量の場合、各要素（ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤）は、５．６２ｎＭで存在する。

【0526】

ＭＬＲアッセイにおける２２．５ｎＭの用量は、ヒト患者に投与される場合、およそ０．１ｍｇ／ｋｇの用量に対応する。

【0527】

結果及び結論
疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３及びＬＡＧ－３の発現の増加、並びに同種異系刺激に応答する能力の低下を有することを特徴とする。抗ＰＤ－１単独では、疲弊したＣＤ４＋Ｔ細胞を活性化することができたが、ＡＴＯＲ－１０１７単独では、ＭＬＲアッセイで不十分なＣＤ４＋Ｔ細胞活性化を誘導した（図８Ａ）。しかしながら、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤の併用治療は、各単剤治療単独と比較して、疲弊したＣＤ４^＋Ｔ細胞活性化の効力を相乗的に改善した（図８Ｂ及び８Ｃ）。

【0528】

結論として、これらのデータは、いずれかの薬剤単独による単独療法と比較して、がん患者の疲弊したＴ細胞を活性化して抗腫瘍活性の増強をもたらすための、ＡＴＯＲ－１０１７及びＰＤ－１阻害剤（特にＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１遮断抗体）による併用療法の理論的根拠を裏付けるものである。

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7A】

【図7B】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【配列表】

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【国際調査報告】