特表 2024-522349 Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）結合分子及びその使用方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-06-18

(54)【発明の名称】Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）結合分子及びその使用方法

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/28 20060101AFI20240611BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240611BHJP

   C12N 5/078 20100101ALI20240611BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 17/02 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/7105 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/711 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 35/12 20150101ALI20240611BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/675 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/137 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240611BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20240611BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240611BHJP

   C12P 21/08 20060101ALN20240611BHJP

【ＦＩ】

C07K16/28 ZNA

C07K19/00

C12N15/13

C12N15/62 Z

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12N5/078

A61P43/00 105

A61P37/06

A61P11/06

A61P1/16

A61P27/02

A61P17/00

A61P19/02

A61P29/00 101

A61P25/00

A61P17/06

A61P17/02

A61P1/04

A61K38/17 100

A61K48/00

A61K31/7105

A61K31/711

A61K35/12

A61K39/395 N

A61K39/395 D

A61P43/00 121

A61K45/00

A61K31/573

A61K31/675

A61K31/137

A61K31/519

A61K31/5377

A61K31/506

A61P35/00

A61P15/00

A61P1/00

A61P11/00

A61K39/395 T

A61K39/395 U

A61K39/395 E

C12P21/08

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023573117

(86)(22)【出願日】2022-05-25

(85)【翻訳文提出日】2024-01-22

(86)【国際出願番号】 US2022072573

(87)【国際公開番号】W WO2022251853

(87)【国際公開日】2022-12-01

(31)【優先権主張番号】63/193,060

(32)【優先日】2021-05-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】523445542

【氏名又は名称】エーデルワイス イミューン インク

(74)【代理人】

【識別番号】100112737

【弁理士】

【氏名又は名称】藤田 考晴

(74)【代理人】

【識別番号】100136168

【弁理士】

【氏名又は名称】川上 美紀

(74)【代理人】

【識別番号】100196117

【弁理士】

【氏名又は名称】河合 利恵

(72)【発明者】

【氏名】ライフェイ ホウ

(72)【発明者】

【氏名】アイリーン リモルド－オドンネル

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C084

4C085

4C086

4C087

4C206

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG27

4B064CA10

4B064CA20

4B064CC15

4B064CC24

4B064CE08

4B064DA01

4B064DA13

4B065AA91X

4B065AA91Y

4B065AA93Y

4B065AA94X

4B065AB01

4B065AB05

4B065AC14

4B065BA02

4B065BA21

4B065BB19

4B065BD13

4B065CA25

4B065CA44

4B065CA46

4C084AA02

4C084AA07

4C084AA13

4C084AA19

4C084AA22

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA22

4C084BA23

4C084DA39

4C084MA02

4C084MA16

4C084MA66

4C084NA14

4C084ZA01

4C084ZA33

4C084ZA59

4C084ZA66

4C084ZA75

4C084ZA81

4C084ZA89

4C084ZA96

4C084ZB08

4C084ZB15

4C084ZB21

4C084ZB26

4C084ZC41

4C084ZC75

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB31

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC22

4C085CC23

4C085DD62

4C085EE01

4C085EE03

4C085GG02

4C085GG04

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC42

4C086BC73

4C086CB05

4C086CB09

4C086DA10

4C086DA35

4C086EA16

4C086GA07

4C086GA12

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA03

4C086MA04

4C086MA16

4C086MA66

4C086NA14

4C086ZA01

4C086ZA33

4C086ZA59

4C086ZA66

4C086ZA75

4C086ZA89

4C086ZA96

4C086ZB08

4C086ZB21

4C086ZB26

4C086ZC41

4C086ZC75

4C087AA01

4C087AA02

4C087BB65

4C087MA16

4C087MA66

4C087NA14

4C087ZA01

4C087ZA33

4C087ZA59

4C087ZA66

4C087ZA75

4C087ZA89

4C087ZA96

4C087ZB08

4C087ZB21

4C087ZB26

4C087ZC41

4C087ZC75

4C206AA01

4C206AA02

4C206FA10

4C206KA01

4C206MA01

4C206MA02

4C206MA03

4C206MA04

4C206MA36

4C206MA86

4C206NA14

4C206ZA01

4C206ZA33

4C206ZA59

4C206ZA66

4C206ZA89

4C206ZA96

4C206ZB08

4C206ZB15

4C206ZB21

4C206ZB26

4C206ZC51

4C206ZC75

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045BA50

4H045BA72

(57)【要約】

本発明は、様々な実施形態において、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）（例えば、ヒトＣＸＣＲ６）に特異的に結合するポリペプチドを提供する。本発明はまた、様々な実施形態において、ポリペプチド、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、ポリペプチドの発現に適したベクター及び宿主細胞の１つ又は複数を含む融合タンパク質、並びに疾患又は障害（例えば、免疫系の疾患又は癌）を治療、診断及び／又は予後診断するための組成物及び方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）のそれぞれＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と少なくとも９０％同一である重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）に特異的に結合するポリペプチド。

【請求項2】

配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの免疫グロブリン軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）のそれぞれＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも９０％同一である軽鎖相補性決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を更に含む、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項3】

Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを含む抗体の前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、前記抗体の前記Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌが、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せ：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１４／配列番号５０；
配列番号１５／配列番号５１；
配列番号１６／配列番号５２；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１８／配列番号５４；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；
配列番号２１／配列番号５７；
配列番号２２／配列番号５８；
配列番号２３／配列番号５９；
配列番号２４／配列番号６０；
配列番号２５／配列番号６１；
配列番号２３／配列番号６２；
配列番号２６／配列番号６３；
配列番号２７／配列番号６４；
配列番号２８／配列番号６５；
配列番号２９／配列番号６５；
配列番号３０／配列番号６６；
配列番号３１／配列番号６７；
配列番号３２／配列番号６８；
配列番号３３／配列番号６９；
配列番号３４／配列番号７０；
配列番号３５／配列番号７１；
配列番号３６／配列番号７２；
配列番号３７／配列番号７３；
配列番号３８／配列番号７４；
配列番号３９／配列番号７５；
配列番号４０／配列番号７６；
配列番号４１／配列番号７７；
配列番号４２／配列番号７８；
配列番号４３／配列番号６９；
配列番号４４／配列番号７９；
配列番号４５／配列番号８０；
配列番号１８／配列番号８１；及び
配列番号４６／配列番号８２
から選択される、請求項２に記載のポリペプチド。

【請求項4】

前記抗体の前記Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌが、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せ：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；及び
配列番号２１／配列番号５７
から選択される、請求項３に記載のポリペプチド。

【請求項5】

Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを含む免疫グロブリン分子である、請求項１～４のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項6】

ａ）前記ポリペプチドの前記Ｖ_Ｌが、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列と少なくとも８５％同一であるか、
ｂ）前記ポリペプチドの前記Ｖ_Ｈが、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列と少なくとも８５％同一であるか、又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
である、請求項５に記載のポリペプチド。

【請求項7】

以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せ：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１４／配列番号５０；
配列番号１５／配列番号５１；
配列番号１６／配列番号５２；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１８／配列番号５４；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；
配列番号２１／配列番号５７；
配列番号２２／配列番号５８；
配列番号２３／配列番号５９；
配列番号２４／配列番号６０；
配列番号２５／配列番号６１；
配列番号２３／配列番号６２；
配列番号２６／配列番号６３；
配列番号２７／配列番号６４；
配列番号２８／配列番号６５；
配列番号２９／配列番号６５；
配列番号３０／配列番号６６；
配列番号３１／配列番号６７；
配列番号３２／配列番号６８；
配列番号３３／配列番号６９；
配列番号３４／配列番号７０；
配列番号３５／配列番号７１；
配列番号３６／配列番号７２；
配列番号３７／配列番号７３；
配列番号３８／配列番号７４；
配列番号３９／配列番号７５；
配列番号４０／配列番号７６；
配列番号４１／配列番号７７；
配列番号４２／配列番号７８；
配列番号４３／配列番号６９；
配列番号４４／配列番号７９；
配列番号４５／配列番号８０；
配列番号１８／配列番号８１；及び
配列番号４６／配列番号８２
のいずれか１つと同一のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む、請求項６に記載のポリペプチド。

【請求項8】

以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せ：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；及び
配列番号２１／配列番号５７
のいずれか１つと同一のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む、請求項７に記載のポリペプチド。

【請求項9】

抗体又はその抗原結合断片である、請求項１～８のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項10】

前記抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、又はＦｖから選択される、請求項９に記載のポリペプチド。

【請求項11】

前記抗原結合断片がｓｃＦｖである、請求項１０に記載のポリペプチド。

【請求項12】

ａ）抗体重鎖定常領域の配列、
ｂ）抗体軽鎖定常領域の配列、又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を更に含む、請求項９に記載のポリペプチド。

【請求項13】

前記抗体重鎖定常領域がヒトＩｇＧ重鎖定常領域である、請求項１２に記載のポリペプチド。

【請求項14】

前記抗体重鎖定常領域がＩｇＧ１重鎖定常領域である、請求項１２又は１３に記載のポリペプチド。

【請求項15】

前記抗体軽鎖定常領域がヒト定常領域である、請求項１２～１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項16】

前記抗体軽鎖定常領域がκ軽鎖定常領域である、請求項１２～１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項17】

前記ＣＸＣＲ６が霊長類ＣＸＣＲ６である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項18】

前記霊長類ＣＸＣＲ６がヒトＣＸＣＲ６（配列番号１）である、請求項１～１７のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項19】

前記霊長類ＣＸＣＲ６がカニクイザルＣＸＣＲ６（配列番号６）である、請求項１７に記載のポリペプチド。

【請求項20】

配列番号２で示されるアミノ酸配列内のエピトープに特異的に結合する、請求項１～１９のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項21】

配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、又はそれらの組合せで示されるアミノ酸配列内のエピトープに特異的に結合する、請求項１～１９のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項22】

異種部分にコンジュゲートされている、請求項１～２１のいずれか一項に記載のポリペプチド。

【請求項23】

前記異種部分が、治療剤、診断剤又はそれらの組合せである、請求項２２に記載のポリペプチド。

【請求項24】

請求項１～２３のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、融合タンパク質。

【請求項25】

請求項１～２３のいずれか一項に記載のポリペプチド又は請求項２４に記載の融合タンパク質をコードする配列を含む、ポリヌクレオチド。

【請求項26】

線状デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、線状リボ核酸（ＲＮＡ）、環状ＤＮＡ又は環状ＲＮＡである、請求項２５に記載のポリヌクレオチド。

【請求項27】

請求項２５又は２６に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。

【請求項28】

請求項２５若しくは２６に記載のポリヌクレオチド又は請求項２７に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。

【請求項29】

請求項１～２３のいずれか一項に記載のポリペプチド、請求項２４に記載の融合タンパク質、請求項２５若しくは２６に記載のポリヌクレオチド、請求項２７に記載の発現ベクター、又は請求項２８に記載の宿主細胞を含む、組成物。

【請求項30】

医薬賦形剤、希釈剤、又は担体のうちの１つ又は複数を更に含む、請求項２９に記載の組成物。

【請求項31】

ＣＸＣＲ６陽性白血球を調節する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項32】

ＣＸＣＲ６陽性白血球の走化性を遮断する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項33】

ＣＸＣＲ６陽性白血球を不活性化する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項34】

ＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項35】

前記ＣＸＣＲ６陽性白血球が、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、γδ Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、ＮＫ細胞又は好中球である、請求項３１～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と約１分間～約１０日間接触させることを含み、前記組成物が、約０．０５～２０μｇ／ｍｌの請求項１～２３のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、請求項３１～３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項37】

抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）又はそれらの組合せによって前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる、請求項３４～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

ＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項39】

ＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を維持する方法であって、前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と接触させることを含む、方法。

【請求項40】

前記ＣＸＣＲ６陽性白血球が、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、γδ Ｔ細胞、ＮＫ Ｔ細胞、ＮＫ細胞又は好中球である、請求項３８又は３９に記載の方法。

【請求項41】

前記ＣＸＣＲ６陽性白血球を請求項２９又は３０に記載の組成物と約１分間～約１０日間接触させることを含み、前記組成物が、約０．０５～２０μｇ／ｍｌの請求項１～２３のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む、請求項３８～４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

ＣＸＣＲ６陽性白血球の枯渇を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性白血球を枯渇させる方法であって、有効量の請求項２９又は３０に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項43】

疾患の治療又は予防を必要とする対象において疾患を治療又は予防する方法であって、有効量の請求項２９又は３０に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項44】

前記対象が、急性移植片対宿主病（ａＧｖＨＤ）、同種移植片拒絶、喘息、自己免疫性肝炎、自己免疫性ブドウ膜炎、接触性皮膚炎、クローン病、若年性関節リウマチ、多発性硬化症、非アルコール性脂肪性肝炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ブドウ膜炎又は潰瘍性大腸炎を有するか、又は発症するリスクがある、請求項４２又は４３に記載の方法。

【請求項45】

前記対象が、ａＧｖＨＤ、多発性硬化症又は関節リウマチを有するか、又は発症するリスクがある、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記対象がヒトである、請求項４２～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

請求項２９又は３０に記載の組成物が静脈内投与される、請求項４２～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項48】

請求項２９又は３０に記載の組成物が皮下投与される、請求項４２～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

治療有効量の更なる治療剤を前記対象に投与することを更に含む、請求項４２～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記更なる治療剤が、モノクローナル抗体、ステロイド、免疫抑制剤、又はＩＬ－２３／ＩＬ－１７軸を標的とする薬剤である、請求項４９に記載の方法。

【請求項51】

前記更なる治療剤が、ＣＤ２０、ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３ｐ４０、ＴＮＦα、又はそれらの組合せに特異的に結合するモノクローナル抗体である、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

前記更なる治療剤がプレドニゾンである、請求項５０に記載の方法。

【請求項53】

前記更なる治療剤が、シクロホスファミド、フィンゴリモド又はメトトレキサートである、請求項５０に記載の方法。

【請求項54】

前記更なる治療剤がヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤である、請求項５０に記載の方法。

【請求項55】

前記ＪＡＫ阻害剤が、ルキソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、モメロチニブ、フェドラチニブ（ＴＧ１０１３４８）又はトファシチニブである、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

ＣＸＣＲ６陽性細胞の活性化を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性細胞を活性化する方法であって、有効量の請求項２９又は３０に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項57】

前記対象が、癌を有するか、又は癌を発症するリスクがある、請求項５６に記載の方法。

【請求項58】

前記癌が、乳癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、メラノーマ、非小細胞肺癌又は食道癌である、請求項５７に記載の方法。

【請求項59】

前記癌が結腸癌である、請求項５８に記載の方法。

【請求項60】

前記対象がヒトである、請求項５６～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

請求項２９又は３０に記載の組成物が静脈内投与される、請求項５６～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

請求項２９又は３０に記載の組成物が皮下投与される、請求項５６～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

治療有効量の更なる治療剤を前記対象に投与することを更に含む、請求項５６～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記更なる治療剤が、化学療法剤又は免疫チェックポイント阻害剤である、請求項６３に記載の方法。

【請求項65】

前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ－１抗体又は組換え融合タンパク質、抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はプロボディ、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗ＬＡＧ－３抗体、抗ＴＩＭ－３抗体又は抗ＣＴＬＡ－４抗体である、請求項６４に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２１年５月２５日に出願された米国仮特許出願第６３／１９３，０６０号の利益を主張する。上記出願の全教示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

ＡＳＣＩＩテキストファイルへの資料の参照による組込み
本出願は、本明細書と同時に提出されている以下のＡＳＣＩＩテキストファイルに含まれる配列表を参照により組み込む。
ファイル名：５７４７１０００００１＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ；２０２２年５月２４日に作成され、サイズは１６４，０００バイトである。

【背景技術】

【0003】

ＣＤ４ Ｔ細胞及びＣＤ８ Ｔ細胞の両方を含むＴリンパ球は、免疫障害及び腫瘍において極めて重要な役割を果たす。Ｔ細胞の活性化は、２つの必須シグナルを含む。最初に、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上の抗原負荷ＭＨＣ分子に結合する。第２に、Ｔ細胞上のＣＤ２８及びＣＤ４０Ｌは、それぞれＡＰＣ上のＢ７及びＣＤ４０と相互作用する（共刺激シグナル伝達）。適切なＴ細胞活性化シグナル伝達は、サイトカイン産生及び増殖並びに腫瘍細胞の活発な殺傷をもたらす。過度の活性化を制限するために、Ｔ細胞を、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ－４）及びプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）等の阻害性分子を発現するように誘導して、それぞれＡＰＣ及びＰＤ－Ｌ１によって発現されるＢ７に結合することによって共阻害性シグナルを伝達する。ＰＤ－Ｌ１は腫瘍及びＡＰＣによって発現される。

【0004】

高分化高活性化Ｔ細胞のサブセットである病原性Ｔ細胞は、自己免疫疾患、同種移植片拒絶、急性又は慢性移植片対宿主病、骨髄移植、Ｔ細胞主導サイトカインストーム、アレルギー性疾患及び急性ウイルス感染等の免疫障害における炎症及び組織損傷の原動力である。現在利用可能な免疫抑制薬には、ステロイド、シクロスポリンＡ、細胞傷害性剤（例えば、シクロホスファミド及びメトトレキサート）、ナタリズマブ（白血球接着を遮断する）、及びフィンゴリモド（リンパ系組織からのリンパ球移出を防止する）等が含まれる。これらの薬物は、正常な免疫系及び免疫防御も損なうので、疾患症状を改善することができるが、しばしば重篤な副作用及び許容できない感染リスクを引き起こす。したがって、免疫障害を治療するためには、病原性Ｔ細胞を選択的に標的とする新しい治療薬が必要である。

【0005】

腫瘍病理の対照的なシナリオでは、Ｔ細胞が腫瘍に浸潤して腫瘍細胞を排除する。しかしながら、腫瘍内の免疫抑制性微小環境のために、浸潤したＴ細胞は、サイトカイン産生、細胞傷害性、増殖及び生存の障害を伴う機能的疲弊に向かって変化することが多い。現在利用可能な抗体治療薬は、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ４）、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ１）、及びプログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）等の免疫チェックポイント阻害剤を遮断する。これらの薬物は免疫系を非選択的に活性化するので、重篤な自己免疫症状の孤立した症例をもたらした。したがって、腫瘍浸潤Ｔ細胞を選択的に標的とする新しい治療法が、癌を治療するために必要とされている。

【発明の概要】

【0006】

本明細書に開示される発明は、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）が病原性Ｔ細胞の精巧なマーカであり、腫瘍に浸潤した免疫コンピテントＴ細胞の特異的マーカであるという発見に少なくとも部分的に基づく。

【0007】

一態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６に特異的に結合するポリペプチドであって、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３とそれぞれ少なくとも約９０％同一である重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含むポリペプチドを提供する。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６に結合する（例えば、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１１～１７に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と少なくとも約９０％同一である重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む）。いくつかの実施形態では、ポリペプチドはヒトＣＸＣＲ６に結合するが、カニクイザルＣＸＣＲ６には結合しない（例えば、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１８～４６に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と少なくとも約９０％同一である重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む）。

【0008】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの免疫グロブリン軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）の、それぞれＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも９０％同一である軽鎖相補性決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を更に含む。

【0009】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチドの１つ又は複数を含む融合タンパク質を提供する。

【0010】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチド又は融合タンパク質の１つ又は複数をコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドを提供する。

【0011】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチドの１つ又は複数を含む発現ベクターを提供する。

【0012】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド又は発現ベクターの１つ又は複数を含む宿主細胞（例えば、発現宿主細胞）を提供する。

【0013】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質、ポリヌクレオチド、発現ベクター又は宿主細胞の１つ又は複数を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は医薬組成物である。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のポリペプチド又は融合タンパク質の１つ又は複数を含む。

【0014】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球を調節する方法を提供する。

【0015】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球の走化性を遮断する方法を提供する。

【0016】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球を不活性化する方法を提供する。

【0017】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷する方法を提供する。

【0018】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化する方法を提供する。

【0019】

別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させることを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を維持する方法を提供する。

【0020】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載の１つ又は複数の組成物（例えば、医薬組成物）の有効量を対象に投与することを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球の枯渇を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性白血球を枯渇させる方法を提供する。

【0021】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）の１つ又は複数の有効量を対象に投与することを含む、疾患の治療又は予防を必要とする対象の疾患を治療又は予防する方法を提供する。

【0022】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載の１つ又は複数の組成物（例えば、医薬組成物）の有効量を対象に投与することを含む、ＣＸＣＲ６陽性細胞の活性化を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性細胞を活性化させる方法を提供する。

【0023】

別の態様では、本発明は、有効量の本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）の１つ又は複数を対象に投与することを含む、ＣＸＣＲ６陽性細胞の生存をそれを必要とする対象において維持する方法を提供する。

【0024】

特許又は出願ファイルは、カラーで作成された少なくとも１つの図面を含む。カラー図面を伴うこの特許又は特許出願公開の写しは、請求及び必要な料金の支払いに応じて特許庁によって提供される。

【0025】

上記は、異なる図を通して同様の参照符号は同じ部分を指す、添付の図面に示されているように、例示的な実施形態の以下のより具体的な説明から明らかになるであろう。図面は必ずしも縮尺通りではなく、代わりに実施形態を示すことに重点が置かれている。

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1】ＣＸＣＲ６陽性病原性Ｔ細胞のＣＸＣＲ６モノクローナル抗体（ｍＡｂ）媒介枯渇による急性移植片対宿主病（ａＧｖＨＤ）治療のスキームを示す図である。

【図2】ＣＸＣＲ６陽性免疫コンピテントＴ細胞のＣＸＣＲ６ ｍＡｂ媒介増殖による癌治療のスキームを示す図である。

【図3A】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞が、炎症促進性サイトカインインターロイキン（ＩＬ）－１７及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）を産生するコラーゲン誘導性関節炎における主要な集団であることを示す図であり、脾臓のＣＸＣＲ６陰性又はＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞におけるサイトカインプロファイルを示す。各記号は個々のマウスを表す。＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１。黒丸：ＣＸＣＲ６陰性ＣＤ４ Ｔ細胞。黒三角：ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞。

【図3B】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞が、炎症促進性サイトカインインターロイキン（ＩＬ）－１７及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）を産生するコラーゲン誘導性関節炎における主要な集団であることを示す図であり、リンパ節のＣＸＣＲ６陰性又はＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞におけるサイトカインプロファイルを示す。各記号は個々のマウスを表す。＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１。黒丸：ＣＸＣＲ６陰性ＣＤ４ Ｔ細胞。黒三角：ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞。

【図4A】ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞がａＧｖＨＤ（Ｃ５７ＢＬ／６からＢＡＬＢ／Ｃ）に蓄積することを示す図であり、ａＧｖＨＤ罹患マウスにおける体重の減少を示す。各記号は個々のマウスを表す。＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図4B】ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞がａＧｖＨＤ（Ｃ５７ＢＬ／６からＢＡＬＢ／Ｃ）に蓄積することを示す図であり、ａＧｖＨＤ罹患マウスにおける早期死亡を示す。各記号は個々のマウスを表す。＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図4C】ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞がａＧｖＨＤ（Ｃ５７ＢＬ／６からＢＡＬＢ／Ｃ）に蓄積することを示す図であり、ナイーブマウスとａＧｖＨＤマウスとの間のリンパ節及び脾臓におけるＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の割合を比較する。各記号は個々のマウスを表す。＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図5】ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞がａＧｖＨＤにおける主要な病原性Ｔ細胞であることを示す図である。高度に炎症誘発性の亜集団であるＩＦＮγ及びＧｚｍＢ二重陽性細胞は、ＣＤ４及びＣＤ８細胞の両方において排他的にＣＸＣＲ６陽性であった。各記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図6】ＣＸＣＲ６がａＧｖＨＤ発症において必須でないことを示す図である。ＷＴ Ｃ５７ＢＬ／６又はＣｘｃｒ６^－／－Ｃ５７ＢＬ／６ドナー細胞のいずれかを受けたＢＡＬＢ／Ｃマウスは、体重の同様に実質的且つ長期的な減少によって判断されるように、同等に重度のａＧｖＨＤを発症し、ドナー細胞上のＣｘｃｒ６の欠損は生存を増加させなかった。

【図7】抗ＣＸＣＲ６抗体治療がａＧｖＨＤマウスの生存を増加させたことを示す図である。ＷＴ Ｃ５７ＢＬ／６ドナー細胞を受けたＢＡＬＢ／Ｃマウスを、指示された日にアイソタイプ対照抗体又は抗ＣＸＣＲ６抗体で治療し、生存をモニターした。

【図8A】ＣＸＣＲ６^＋ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞が腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）において濃縮されていることを示す図であり、アイソタイプ対照ｍＡｂ又は抗ＰＤ－１ ｍＡｂで治療したＢ１６メラノーママウスにおけるＴＩＬ中のＣＸＣＲ６発現ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の平均（±ＳＥＭ）パーセントを示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図8B】ＣＸＣＲ６^＋ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞が腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）において濃縮されていることを示す図であり、ＭＣ３８結腸腫瘍マウスにおけるＴＩＬ中のＣＸＣＲ６発現ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の平均（±ＳＥＭ）パーセントを示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１。

【図9A】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞が、Ｂ１６メラノーマモデルにおけるＴＩＬ中の主要なＩＦＮ－γ及びＧＭ－ＣＳＦ産生細胞であることを示す図である。ＣＸＣＲ６陰性ＣＤ４ Ｔ細胞と比較して、ＣＸＣＲ６陽性細胞は、ＩＦＮ－γ及びＧＭ－ＣＳＦを産生する能力がより高い。図９Ａは、代表的なフローサイトメトリー結果を示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１。

【図9B】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞が、Ｂ１６メラノーマモデルにおけるＴＩＬ中の主要なＩＦＮ－γ及びＧＭ－ＣＳＦ産生細胞であることを示す図である。図９Ｂは、データの統計分析を示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１。

【図10A】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ８ Ｔ細胞が、Ｂ１６メラノーマモデルにおけるＴＩＬ中の主要なグランザイムＢ産生体であることを示す図である。ＣＸＣＲ６陰性ＣＤ８ Ｔ細胞と比較して、ＣＸＣＲ６陽性細胞はＩＦＮ－γ及びグランザイムＢの両方を産生する能力が高い。図１０Ａは、代表的なフローサイトメトリーの結果を示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１。

【図10B】ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ８ Ｔ細胞が、Ｂ１６メラノーマモデルにおけるＴＩＬ中の主要なグランザイムＢ産生体であることを示す図である。図１０Ｂは、データの統計分析を示す。記号は個々のマウスを表す。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１。

【図11】ヒト、カニクイザル又はマウスＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞への９つの候補抗体の結合を示す図である。ＣＮＧｓ－１Ｂ７、ＣＮＥ－６Ｅ１０、ＣＯＸ－１Ｂ１０、ＣＯＸ－２Ｄ２及びＢｅａｃｏｎ１－Ｇ１２はヒトＣＸＣＲ６に結合する。Ｇｅｎｏｖａｃ１－Ｇ２、Ｂｅａｃｏｎ２－Ｇ５、Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１及びＢｅａｃｏｎ１－Ｂ２は、ヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方に結合する。

【図12A】ヒト特異的ｍＡｂがヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端内のエピトープ残基に結合することを示す図である。

【図12B】ヒト／カニクイザル交差種ｍＡｂがヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端内のエピトープ残基に結合しないことを示す図である。

【図13】ヒト／カニクイザル交差種ｍＡｂがｃｙｎｏ－ＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端内のエピトープ残基に結合しないことを示す図である。

【図14A】ヒトＣＸＣＲ６への結合について、Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１ではなくＣＯＸ－１Ｂ１０がＲ＆Ｄシステム由来抗ヒトＣＸＣＲ６ ｍＡｂと競合したことを示す図である。

【図14B】図１４Ａのカラー版である。

【図15A】キメラ抗体が全長マウスＩｇＧ１の結合能力及び高親和性を保持することを示す図であり、ＣＯＸ－１Ｂ１０及びＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１がヒトＣＸＣＲ６に結合することを示す。

【図15B】キメラ抗体が全長マウスＩｇＧ１の結合能力及び高親和性を保持することを示す図であり、ＣＯＸ－１Ｂ１０及びＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１がカニクイザルＣＸＣＲ６に結合することを示す。

【図16】ＣＸＣＬ－１６の存在下又は非存在下でのヒトＣＸＣＲ６過剰発現細胞へのキメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１の結合を示す図である。

【図17】ヒト／マウスキメラＣＸＣＲ６ ｍＡｂの抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）アッセイを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0027】

例示的な実施形態の説明を以下に続ける。

【0028】

本発明のいくつかの態様は、例示のみを目的として実施例を参照して以下に記載される。本発明の完全な理解を提供するために、多数の具体的な詳細、関係、及び方法が記載されていることを理解されたい。しかしながら、当業者であれば、特定の詳細のうちの１つ又は複数を用いずに本発明を実施することができ、又は他の方法、プロトコール、試薬、細胞株及び動物を用いて実施することができることを容易に認識するであろう。本発明は、いくつかの動作が異なる順序で、及び／又は他の動作若しくは事象と同時に起こり得るため、動作又は事象の図示された順序によって限定されない。更に、本発明による方法を実施するために、全ての例示された動作、工程、又はイベントが必要とされるわけではない。本明細書に記載又は参照される技術及び手順の多くは、当業者によって従来の方法論を使用してよく理解され、一般的に採用されている。

【0029】

本開示のＣＸＣＲ６結合ポリペプチド
本発明は、一般に、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）タンパク質に結合するポリペプチド（例えば、抗体又はその抗原結合断片）及びその使用に関する。一態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６に結合するポリペプチドであって、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの免疫グロブリン重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３とそれぞれ少なくとも８０％同一である重鎖相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含むポリペプチドを提供する。配列番号１１～４６として同定された配列を本明細書の表２に示す。

【0030】

用語「ポリペプチド」、「ペプチド」又は「タンパク質」は、長さ又は翻訳後修飾（例えば、グリコシル化又はリン酸化）にかかわらず、アミド結合によって共有結合された少なくとも２つのアミノ酸のポリマーを意味する。タンパク質、ペプチド又はポリペプチドは、任意の適切なＬ－及び／又はＤ－アミノ酸、例えば、共通のα－アミノ酸（例えば、アラニン、グリシン、バリン）、非α－アミノ酸（例えば、β－アラニン、４－アミノ酪酸、６－アミノカプロン酸、サルコシン、スタチン）、及び異常なアミノ酸（例えば、シトルリン、ホモシトルリン、ホモセリン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン）を含むことができる。ペプチド上のアミノ、カルボキシル及び／又は他の官能基は、遊離していてもよく（例えば、未改変）、又は適切な保護基で保護されていてもよい。アミノ基及びカルボキシル基に適した保護基、並びに保護基を付加又は除去する方法は、当技術分野で公知であり、例えば、グリーン（Ｇｒｅｅｎ）及びウッツ（Ｗｕｔｓ）、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ）、１９９１年に開示されている。タンパク質、ペプチド又はポリペプチドの官能基は、当技術分野で公知の方法を使用して誘導体化（例えば、アルキル化）又は標識（例えば、検出可能な標識、例えば、フルオロゲン又はハプテンを用いて）することもできる。タンパク質、ペプチド又はポリペプチドは、必要に応じて、１つ又は複数の修飾（例えば、アミノ酸リンカー、アシル化、アセチル化、アミド化、メチル化、末端修飾剤（例えば、環化修飾）、Ｎ－メチル－α－アミノ基置換）を含むことができる。更に、タンパク質、ペプチド又はポリペプチドは、公知の及び／又は天然に存在するペプチドの類似体、例えば、保存的アミノ酸残基置換を有するペプチド類似体であり得る。

【0031】

「特異的に結合すること」又は「特異的に結合する」という用語は、他の抗原又はアミノ酸配列と比較して、優先的な相互作用、すなわち、例えば抗体又はその抗原結合断片とそのエピトープとの間の有意に高い結合親和性を指す。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、例えば抗体は、ヒトＣＸＣＲ６に特異的に結合する。

【0032】

いくつかの実施形態では、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物は、野生型ＣＸＣＲ６タンパク質、例えば野生型ヒトＣＸＣＲ６（配列番号１）、野生型カニクイザル（カニクイザル）ＣＸＣＲ６（配列番号６）、又はその両方に結合する。配列番号１及び配列番号６として同定された配列を本明細書の表１に示す。

【0033】

いくつかの実施形態では、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物は、ＣＸＣＲ６タンパク質の細胞外Ｎ末端、例えばヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端（配列番号２）、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端（配列番号７）、又はその両方に結合する。配列番号２及び配列番号７として同定された配列を本明細書の表１に示す。

【0034】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ＣＸＣＲ６タンパク質の１つ又は複数の細胞外ループ、例えばヒトＣＸＣＲ６の細胞外ループ１（配列番号３）、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外ループ１（配列番号８）、ヒトＣＸＣＲ６の細胞外ループ２（配列番号４）、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外ループ２（配列番号９）、ヒトＣＸＣＲ６の細胞外ループ３（配列番号５）、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外ループ３（配列番号１０）、又はそれらの組合せに結合する。配列番号３～５及び８～１０として同定された配列を本明細書の表１に示す。

【0035】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、野生型ＣＸＣＲ６と比較して（例えば、配列番号１又は配列番号６と比較して）１つ又は複数のアミノ酸置換、欠失及び／又は挿入を含むＣＸＣＲ６タンパク質の変異体に結合する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６変異体は、野生型ＣＸＣＲ６配列に対して少なくとも約９０％の配列同一性、例えば野生型ＣＸＣＲ６配列に対して少なくとも約９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、又は９９．９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、配列同一性は、約９０～９９．９％、９０～９９．８％、９２～９９．８％、９２～９９．６％、９４～９９．６％、９４～９９．５％、９５～９９．５％、９５～９９．４％、９６～９９．４％、９６～９９．２％、９７～９９．２％又は９７～９９％である。

【0036】

本明細書で使用される場合、「配列同一性」という用語は、パーセンテージとして表される最大レベルの同一性を達成するように配列を整列させた場合に、２つのヌクレオチド配列又は２つのアミノ酸配列が同じ位置に同じ残基を有する程度を指す。配列アラインメント及び比較のために、典型的には、試験配列が比較される参照配列として１つの配列が指定される。参照配列と試験配列との間の配列同一性は、最大レベルの同一性を達成するための参照配列及び試験配列のアラインメント時に、参照配列及び試験配列が同じヌクレオチド又はアミノ酸を共有する、参照配列の全長にわたる位置のパーセンテージとして表される。例えば、最大レベルの同一性を達成するためのアラインメント時に、試験配列が参照配列の全長にわたって同じ位置の８０％に同じヌクレオチド又はアミノ酸残基を有する場合、２つの配列は８０％の配列同一性を有すると見なされる。

【0037】

最大レベルの同一性を達成するための比較のための配列のアラインメントは、適切なアラインメント方法又はアルゴリズムを使用して当業者によって容易に行うことができる。場合によっては、アラインメントは、最大レベルの同一性を提供するために導入されたギャップを含むことができる。例えば、スミス＆ウォーターマン（Ｓｍｉｔｈ＆Ｗａｔｅｒｍａｎ）の局所相同性アルゴリズム、応用数学における進歩（Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ）、第２巻、ｐ．４８２、１９８１年、ニードルマン（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ）及びブンシュ（Ｗｕｎｓｃｈ）の相同性アラインメントアルゴリズム、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第４８巻、ｐ．４４３、１９７０年、ピアソン（Ｐｅａｒｓｏｎ）及びリプマン（Ｌｉｐｍａｎ）の類似法に対する調査、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第８５巻、ｐ．２４４４、１９８８年、これらのアルゴリズムのコンピュータ化された実装（ウィスコンシン遺伝子ソフトエアパッケージ（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ）、遺伝子コンピュータグループ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ）、５７５、サイエンスドクター、マディソン、ウィス（Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ）におけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）並びに目視検査を参照されたい（概して、オーズベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）ら著、分子生物学実験プロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）を参照されたい）。

【0038】

一例では、配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験配列及び参照配列がコンピュータに入力され、必要に応じて後続の座標が指定され、配列アルゴリズムプログラムパラメータが指定される。次いで、配列比較アルゴリズムは、指定されたプログラムパラメータに基づいて、参照配列に対する試験配列（又は試験配列）の配列同一性パーセントを計算する。配列同一性パーセントを決定するために一般的に使用されるツールは、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）の国立バイオテクノロジー情報センター、国立医学図書館を通じて入手可能なタンパク質基本局所アラインメント検索ツール（ＢＬＡＳＴＰ）である（アルトシュル（Ａｌｔｓｃｈｕｌ）ら著、１９９０年を参照されたい）。

【0039】

本明細書で使用される場合、「相補性決定領域（ＣＤＲ）」という用語は、抗体の抗原結合部位を指す。ＣＤＲは、様々な用語を使用して定義され得る：（ｉ）配列可変性（ウー（Ｗｕ）及びカバト（Ｋａｂａｔ）ジャーナルオブエクスペリメンタルメディスン（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．）、第１３２巻：ｐ．２１１－５０、１９７０年；カバト（Ｋａｂａｔ）ら著、免疫学的関心のタンパク質の配列（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ）、第５版、公衆衛生局、国立衛生研究所、ベゼスタ、メリーランド州、１９９１年）に基づいて、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３；（ｉｉ）コチア（Ｃｈｏｔｈｉａ）及びレスク（Ｌｅｓｋ）によって定義された構造に基づく「超可変領域」（ＨＶＲ又はＨＶ）Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｌ１、Ｌ２及びＬ３（コチア（Ｃｈｏｔｈｉａ）及びレスク（Ｌｅｓｋ）、モレキュラーバイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第１９６巻、ｐ．９０１～１７、１９８７年））；（ｉｉｉ）国際イムノジェネティクス（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ）（ＩＭＧＴ）データベース（ｗｗｗ＿ｉｍｇｔ＿ｏｒｇ）は、抗原結合部位の標準化された番号付け及び定義を提供する。ＣＤＲ、ＨＶ、及びＩＭＧＴの描写間の対応は、ルフラン（Ｌｅｆｒａｎｃ）ら著、免疫学の発展及び比較（Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐａｒａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）第２７巻、ｐ．５５～７７、２００３年を参照されたい。本明細書で使用される「ＣＤＲ」、「ＨＣＤＲ１」、「ＨＣＤＲ２」、「ＨＣＤＲ３」、「ＬＣＤＲ１」、「ＬＣＤＲ２」及び「ＬＣＤＲ３」という用語は、特に明記しない限り、カバト（Ｋａｂａｔ）、コチア（Ｃｈｏｔｈｉａ）及びレスク（Ｌｅｓｋ）、又はＩＭＧＴに記載の方法のいずれかによって定義されるＣＤＲを含む。表５及び６は、ＩＭＧＴに基づいて定義されたＨＣＤＲ及びＬＣＤＲアミノ酸配列を示す。表７及び８は、カバト（Ｋａｂａｔ）ら著（例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／を参照されたい）に基づいて定義されたＨＣＤＲ及びＬＣＤＲアミノ酸配列を示す。

【0040】

１つ又は複数のＣＤＲ残基の置換又は１つ又は複数のＣＤＲの省略が可能である。例えば、パドラン（Ｐａｄｌａｎ）ら著、「抗体における特異性決定残基の同定（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」、ＦＡＳＥＢジャーナル（ＦＡＳＥＢ Ｊ．）９（１）、ｐ．１３３～９、１９９５年を参照されたい。公開されている結晶構造に基づく抗体とそれらの抗原との間の接触領域の分析により、ＣＤＲ残基の約１／５～１／３のみが実際に抗原と接触するという結論が導かれた。１つ又は複数のＣＤＲ残基は、省かれてもよく、又は別のヒト抗体配列又はそのような配列のコンセンサスにおいて対応する位置を占めるアミノ酸で置換されてもよい。置換位置及び置換するアミノ酸は経験的に選択することができる。

【0041】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの免疫グロブリンＶ_ＨのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と少なくとも約８５％同一であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む。例えば、配列同一性は、少なくとも約９０％、９５％、９８％又は９９％、又は約：８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％であり得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２０及び配列番号２１（例えば、配列番号１１又は配列番号２０）に示される少なくとも１つの免疫グロブリンＶ_ＨのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と少なくとも約８５％（例えば、少なくとも約９０％）同一であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む。

【0042】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１～４６に示される免疫グロブリンＶ_ＨのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３とそれぞれ同一のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２０及び配列番号２１（例えば、配列番号１１又は配列番号２０）に示される免疫グロブリンＶ_ＨのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３とそれぞれ同一のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む。

【0043】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの免疫グロブリン軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一であるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を更に含む。例えば、配列同一性は、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９８％若しくは９９％又は約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％であり得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６及び配列番号５７（例えば、配列番号４７又は配列番号５６）に示される少なくとも１つの免疫グロブリンＶ_ＬのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８５％（例えば、少なくとも約９０％）同一であるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を更に含む。

【0044】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７～８２に示される免疫グロブリンＶ_ＬのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３とそれぞれ同一のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６及び配列番号５７（例えば、配列番号４７又は配列番号５６）に示される免疫グロブリンＶ_ＬのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３とそれぞれ同一のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0045】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにそれぞれＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌは、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せから選択される。
配列番号１１／配列番号４７（Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１）；
配列番号１２／配列番号４８（Ｇｅｎｏｖａｃ１－Ｇ２）；
配列番号１３／配列番号４９（Ｂｅａｃｏｎ２－Ｇ５）；
配列番号１４／配列番号５０（Ｂｅａｃｏｎ２－Ｆ１）；
配列番号１５／配列番号５１（ＣＮＥ－６Ｅ５－Ｃ１）；
配列番号１６／配列番号５２（ＣＮＧｓ－３Ｂ２）；
配列番号１７／配列番号５３（Ｂｅａｃｏｎ１－Ｂ２）；
配列番号１８／配列番号５４（ＣＮＧｓ－１Ｂ７）；
配列番号１９／配列番号５５（ＣＮＥ－６Ｅ１０）；
配列番号２０／配列番号５６（ＣＯＸｓ－１Ｂ１０）；
配列番号２１／配列番号５７（ＣＯＸｓ－２Ｄ２）；
配列番号２２／配列番号５８（Ｂｅａｃｏｎ１－Ｄ１０）；
配列番号２３／配列番号５９（Ｂｅａｃｏｎ１－Ｇ１２）；
配列番号２４／配列番号６０（ＣＯＸｓ－１Ｂ１１）；
配列番号２５／配列番号６１（ＣＯＸｓ－２Ｄ４）；
配列番号２３／配列番号６２（ＣＯＸｓ－４Ｈ５）；
配列番号２６／配列番号６３（ＣＯＸｓ－７Ａ７）；
配列番号２７／配列番号６４（ＣＯＸｓ－７Ｅ６）；
配列番号２８／配列番号６５（ＣＯＸｓ－９Ｄ６）；
配列番号２９／配列番号６５（ＣＯＸｓ－１１Ｅ５）；
配列番号３０／配列番号６６（ＣＯＸｓ－１１Ｈ４）；
配列番号３１／配列番号６７（ＣＯＸｓ－１２Ｅ７）；
配列番号３２／配列番号６８（ＣＮＥ－７Ｂ１）；
配列番号３３／配列番号６９（ＣＮＦ－２Ｆ８）；
配列番号３４／配列番号７０（ＣＮＧｓ－１Ｃ１）；
配列番号３５／配列番号７１（ＣＮＧｓ－２Ｆ１１）；
配列番号３６／配列番号７２（ＣＮＥ－６Ｈ７－Ｇ７）；
配列番号３７／配列番号７３（ＣＮＧｓ－１Ｂ７－Ｅ４）；
配列番号３８／配列番号７４（ＣＮＧｓ－１Ｅ１－Ｇ５）；
配列番号３９／配列番号７５（ＣＮＧｓ－３Ｇ６－Ｇ５）；
配列番号４０／配列番号７６（ＣＮＧｓ－３Ｈ２－Ｂ７）；
配列番号４１／配列番号７７（Ｂｅａｃｏｎ２－Ａ３）；
配列番号４２／配列番号７８（Ｂｅａｃｏｎ２－Ａ７）；
配列番号４３／配列番号６９（Ｂｅａｃｏｎ２－Ｄ５）；
配列番号４４／配列番号７９（Ｂｅａｃｏｎ２－Ｅ５）；
配列番号４５／配列番号８０（Ｇｅｎｏｖａｃ１－Ｄ１２）；
配列番号１８／配列番号８１（Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｈ２）；及び
配列番号４６／配列番号８２（Ｂｅａｃｏｎ１－Ａ４）。

【0046】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにそれぞれＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌは、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せから選択される。
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；又は
配列番号２１／配列番号５７。

【0047】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１１／配列番号４７に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0048】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１２／配列番号４８に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0049】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１３／配列番号４９に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0050】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１７／配列番号５３に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0051】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号１９／配列番号５５に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0052】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号２０／配列番号５６に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0053】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ、配列番号２１／配列番号５７に示されるＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む抗体のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と少なくとも約８０％同一（例えば、少なくとも約：８５％、９０％、９５％又は９９％同一、又は同一）であるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む。

【0054】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを含む免疫グロブリン分子である。

【0055】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
ａ）配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％同一であるＶ_Ｈ；
ｂ）配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％同一であるＶ_Ｌ；又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を含む。

【0056】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％同一のＶ_Ｈを含む。例えば、配列同一性は、少なくとも約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％、又は約６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％であり得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２０又は配列番号２１（例えば、配列番号１１又は配列番号２０）に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％（例えば、少なくとも約：７０％、８０％、９０％又は９５％）同一のＶ_Ｈを含む。

【0057】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％同一のＶ_Ｌを含む。例えば、配列同一性は、少なくとも約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％、又は約６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％であり得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６及び配列番号５７（例えば、配列番号４７又は配列番号５６）に示される少なくとも１つの配列と少なくとも約６０％（例えば、少なくとも約：７０％、８０％、９０％又は９５％）同一のＶ_Ｌを含む。

【0058】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
ａ）配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列に対して１つ又は複数のアミノ酸置換を含むＶ_Ｈ；
ｂ）配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列に対して１つ又は複数のアミノ酸置換を含むＶ_Ｌ；又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を含む。

【0059】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列に対して１つ又は複数のアミノ酸置換を含むＶ_Ｈを含む。例えば、アミノ酸置換の数は、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０、又は約１～２０、１～１９、２～１９、２～１８、２～１７、３～１７、３～１６、４～１６、４～１５、５～１５、５～１４、６～１４、６～１３、７～１３、７～１２、８～１２、８～１１若しくは９～１１であり得る。いくつかの実施形態では、Ｖ_Ｈは、配列番号１１～４６に示される少なくとも１つの配列に対して、約１～２０、１～１５、１～１０又は１～５個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、Ｖ_Ｈは、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２０又は配列番号２１（例えば、配列番号１１又は配列番号２０）に示される少なくとも１つの配列に対して、約１～２０、１～１５、１～１０又は１～５個のアミノ酸置換を含む。

【0060】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列に対して１つ又は複数のアミノ酸置換を含むＶ_Ｌを含む。例えば、アミノ酸置換の数は、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０、又は約１～２０、１～１９、２～１９、２～１８、２～１７、３～１７、３～１６、４～１６、４～１５、５～１５、５～１４、６～１４、６～１３、７～１３、７～１２、８～１２、８～１１若しくは９～１１であり得る。いくつかの実施形態では、Ｖ_Ｌは、配列番号４７～８２に示される少なくとも１つの配列に対して、約１～２０、１～１５、１～１０又は１～５個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、Ｖ_Ｌは、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６及び配列番号５７（例えば、配列番号４７又は配列番号５６）に示される少なくとも１つの配列に対して、約１～２０、１～１５、１～１０又は１～５個のアミノ酸置換を含む。

【0061】

いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は保存的置換である。本明細書で使用される場合、「保存的アミノ酸置換」又は「保存的置換」という用語は、アミノ酸置換についてＢＬＯＳＵＭ６２マトリックス中で０以上の値を有するアミノ酸置換を指す。

【0062】

いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は高度に保存的な置換である。本明細書中で使用されるとき、用語「高度に保存的なアミノ酸置換」又は「高度に保存的な置換」とは、ＢＬＯＳＵＭ６２において少なくとも１（例えば、２以上）の値を有するアミノ酸置換のことを指す。

【0063】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
ａ）配列番号１１～４６のいずれか１つに記載の配列を含むＶ_Ｈ；
ｂ）配列番号４７～８２のいずれか１つに記載の配列を含むＶ_Ｌ；又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を含む。

【0064】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せのいずれか１つと同一のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１４／配列番号５０；
配列番号１５／配列番号５１；
配列番号１６／配列番号５２；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１８／配列番号５４；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；
配列番号２１／配列番号５７；
配列番号２２／配列番号５８；
配列番号２３／配列番号５９；
配列番号２４／配列番号６０；
配列番号２５／配列番号６１；
配列番号２３／配列番号６２；
配列番号２６／配列番号６３；
配列番号２７／配列番号６４；
配列番号２８／配列番号６５；
配列番号２９／配列番号６５；
配列番号３０／配列番号６６；
配列番号３１／配列番号６７；
配列番号３２／配列番号６８；
配列番号３３／配列番号６９；
配列番号３４／配列番号７０；
配列番号３５／配列番号７１；
配列番号３６／配列番号７２；
配列番号３７／配列番号７３；
配列番号３８／配列番号７４；
配列番号３９／配列番号７５；
配列番号４０／配列番号７６；
配列番号４１／配列番号７７；
配列番号４２／配列番号７８；
配列番号４３／配列番号６９；
配列番号４４／配列番号７９；
配列番号４５／配列番号８０；
配列番号１８／配列番号８１；及び
配列番号４６／配列番号８２。

【0065】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せのいずれか１つと同一のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；及び
配列番号２１／配列番号５７。

【0066】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１１／配列番号４７に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１２／配列番号４８に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１３／配列番号４９に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１７／配列番号５３に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号１９／配列番号５５に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２０／配列番号５６に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２１／配列番号５７に記載のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含む。

【0067】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
ａ）抗体重鎖定常領域配列；
ｂ）抗体軽鎖定常領域配列；又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を含む。

【0068】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、抗体（例えば、全抗体、インタクト抗体）又はその抗原結合断片等の免疫グロブリン分子である。

【0069】

免疫グロブリンは、重鎖定常ドメインアミノ酸配列に応じて、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭに割り当てられ得る。ＩｇＡは、アイソタイプＩｇＡ_１、ＩｇＡ_２として更に下位分類される。ＩｇＧは、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３及びＩｇＧ_４として更に下位分類される。任意の脊椎動物種の抗体軽鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、２つの明確に異なるタイプ、すなわちカッパ（κ）及びラムダ（λ）のうちの１つに割り当てることができる。

【0070】

いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域は、ＩｇＡ定常領域、ＩｇＤ定常領域、ＩｇＥ定常領域、ＩｇＧ定常領域及びＩｇＭ定常領域からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域はＩｇＧ定常領域である。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ定常領域はＩｇＧ１定常領域、ＩｇＧ２定常領域、ＩｇＧ３定常領域又はＩｇＧ４定常領域である。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ２定常領域は、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ定常領域又はＩｇＧ２ｃ定常領域である。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域はＩｇＧ１定常領域（例えば、ＩＧＨＶ５－５１）である。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域はＩｇＧ４定常領域である。

【0071】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるポリペプチドは抗体である。「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して、ポリペプチド、炭水化物、ポリヌクレオチド又は脂質等の標的に特異的に結合することができる免疫グロブリン分子を指す。本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、ジスルフィド結合又はその多量体（例えば、ＩｇＭ）によって相互に連結された２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖を含む完全長抗体を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び重鎖定常領域（ドメインＣＨ１、ヒンジＣＨ２及びＣＨ３を含む）を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。Ｖ_Ｈ領域及びＶ_Ｌ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）内に散在するＣＤＲと呼ばれる超可変領域に更に細分することができる。Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはそれぞれ、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって以下の順序で配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲセグメントを含む：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４。

【0072】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドはモノクローナル抗体である。「モノクローナル抗体」とは、抗体重鎖からのＣ末端リジンの除去等の可能な周知の変更を除いて、各重鎖及び各軽鎖に単一のアミノ酸組成を有する抗体集団を指す。モノクローナル抗体は、抗体集団内で不均一なグリコシル化を有し得る。モノクローナル抗体は、一価、二価又は多価であり得る。モノクローナル抗体は、単一特異性（１つの抗原エピトープに結合する）又は多重特異性（２つ（二重特異性）以上の異なる抗原又はエピトープに結合する）であり得る。

【0073】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、免疫チェックポイントタンパク質及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。

【0074】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、単離された抗体又はその抗原結合断片であり、すなわち、他の抗体を実質的に含まない（例えば、ＣＸＣＲ６タンパク質に特異的に結合しない抗体）。いくつかの実施形態では、抗ＣＸＣＲ６抗体又はその抗原結合断片は、少なくとも８０％純粋であり、例えば約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％純粋である。

【0075】

抗体は、マウス抗体又はヒト抗体等の任意の種のものであり得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドはヒト抗体である。

【0076】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドのＶ_Ｈ、Ｖ_Ｌ又は両方は、１つ又は複数のヒトフレームワーク領域を含む。

【0077】

「ヒト化抗体」は、抗原結合部位が非ヒト種に由来し、可変領域フレームワークがヒト免疫グロブリン配列に由来する抗体を指す。ヒト化抗体は、フレームワークが、発現されたヒト免疫グロブリン又は生殖系列遺伝子配列の正確なコピーではない可能性があるように、フレームワーク領域に意図的に導入された突然変異を含み得る。

【0078】

「ヒト抗体」は、フレームワーク及び抗原結合部位の両方がヒト起源の配列に由来する重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を有する抗体を指す。抗体が定常領域又は定常領域の一部を含む場合、定常領域もヒト起源の配列に由来する。抗原結合部位が非ヒト種に由来する抗体は、「ヒト抗体」の定義に含まれない。

【0079】

当業者には理解されるように、特定のＦｃアイソタイプを有する抗体を、異なるＦｃアイソタイプを有する抗体に変換することができる。例えば、マウスＩｇＧ１ Ｆｃを有する抗体は、可変ドメインを変化させることなくヒトＩｇＧ４を有する抗体に変換することができ、抗原への結合特性は、Ｆｃドメインの性質にかかわらず同一又は実質的に同様であると予想される。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインは、米国特許出願公開第２０１００３３１５２７号明細書に開示されているような２つ以上のアミノ酸変化を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩｇＧ４ Ｆｃは、二量体安定化を促進するために、ヒンジ領域にセリンからプロリンへの変異（Ｓ１０８Ｐ）を含む。

【0080】

ヒト抗体は、抗体の可変領域がヒト生殖細胞系免疫グロブリン又は再編成免疫グロブリン遺伝子を使用する系から得られる場合、ヒト起源の配列に由来する重鎖可変領域又は軽鎖可変領域を含む。非限定的な例示的システムには、ファージ上に提示されるヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリー、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座を有するマウス又はラット等のトランスジェニック非ヒト動物が含まれる。ヒト抗体は、典型的には、例えば、天然に存在する体細胞変異、フレームワーク又は抗原結合部位における意図的な置換、及び非ヒト動物におけるクローニング又はＶＤＪ組換え中に導入された置換に起因して、ヒト生殖系列又は再編成された免疫グロブリン配列と比較した場合のアミノ酸の相違を含む。典型的には、ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系又は再編成された免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とアミノ酸配列が少なくとも８０％同一である。例えば、約：８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である。いくつかの場合、ヒト抗体は、ヒトフレームワーク配列分析（例えば、カナピック（Ｋｎａｐｐｉｋ）ら著、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第２９６巻：ｐ．５７～８６、２０００年、を参照されたい）に由来するコンセンサスフレームワーク配列、又はファージ上に提示されたヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリーに組み込まれた合成ＨＣＤＲ３（例えば、シ（Ｓｈｉ）ら著、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、第３９７巻：ｐ．３８５～９６、２０１０年、及び国際公開第２００９／０８５４６２号パンフレットを参照されたい）を含み得る。

【0081】

いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域配列は、ヒトＩｇＧ１（例えば、配列番号３４５）又はヒトＩｇＧ４（例えば、配列番号３４６）と少なくとも約６０％同一である。例えば、抗体重鎖定常領域配列は、ヒトＩｇＧ１（例えば、配列番号３４５）又はヒトＩｇＧ４（例えば、配列番号３４６）と、少なくとも約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％若しくは９５％、又は約：６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一であり得る。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域配列はヒトＩｇＧ１（例えば、配列番号３４５）又はヒトＩｇＧ４（例えば、配列番号３４６）と同一である。配列番号３４５及び配列番号３４６として特定される配列を以下に示す：

【化1】

【0082】

いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域配列は、ヒトＩｇＧ１（例えば、配列番号３４５）又はヒトＩｇＧ４（例えば、配列番号３４６）と比較して１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。例えば、アミノ酸置換の数は、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０、又は約１～２０、１～１９、２～１９、２～１８、２～１７、３～１７、３～１６、４～１６、４～１５、５～１５、５～１４、６～１４、６～１３、７～１３、７～１２、８～１２、８～１１若しくは９～１１であり得る。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域配列は、ヒトＩｇＧ１（例えば、配列番号３４５）又はヒトＩｇＧ４（例えば、配列番号３４６）と比較して約１～１０個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は保存的置換である。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は高度に保存的な置換である。

【0083】

いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域は、κ定常領域及びλ定常領域からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域はκ定常領域である。

【0084】

いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４７又は配列番号３４８と少なくとも約６０％同一である。例えば、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４７若しくは配列番号３４８と、少なくとも約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％若しくは９５％、又は約６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％同一であり得る。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４７と同一である。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４８と同一である。配列番号３４７又は配列番号３４８として特定される配列を以下に示す：

【0085】

ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号３４７）

【0086】

ＧＱＰＫＡＮＰＴＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＧＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＫＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ（配列番号３４８）

【0087】

いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４７又は配列番号３４８と比較して１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。例えば、アミノ酸置換の数は、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０、又は約１～２０、１～１９、２～１９、２～１８、２～１７、３～１７、３～１６、４～１６、４～１５、５～１５、５～１４、６～１４、６～１３、７～１３、７～１２、８～１２、８～１１若しくは９～１１であり得る。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖定常領域配列は、配列番号３４７又は配列番号３４８と比較して、約１～１０個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は保存的置換である。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のアミノ酸置換は高度に保存的な置換である。

【0088】

いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域はＩｇＧ１定常領域であり、抗体軽鎖定常領域はκ定常領域である。いくつかの実施形態では、抗体重鎖定常領域はＩｇＧ１定常領域であり、抗体軽鎖定常領域はλ定常領域である。

【0089】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるポリペプチドは、断片、例えば抗原結合断片である。「抗原結合断片」という用語は、親完全長抗体の抗原結合特性を保持する免疫グロブリン分子（例えば、抗体）の一部を指す。抗原結合断片の非限定的な例としては、ＬＣＤＲ１、２及び／又は３、ＨＣＤＲ１、２及び／又は３、Ｖ_Ｈ領域、Ｖ_Ｌ領域、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、及び１つのＶ_Ｈドメイン又は１つのＶ_Ｌドメインからなるドメイン抗体（ｄＡｂ）等が挙げられる。Ｖ_Ｈドメイン及びＶ_Ｌドメインは、合成リンカーを介して互いに連結されて、Ｖ_Ｈ／Ｖ_Ｌドメインが分子内で対形成する種々のタイプの一本鎖抗体設計を形成してもよく、又はＶ_Ｈドメイン及びＶ_Ｌドメインが別々の鎖によって発現される場合には分子間で対形成して、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）又はダイアボディ等の一価抗原結合部位を形成してもよい。例えば、内容が本明細書に組み込まれる、国際公開第１９９８／４４００１号パンフレット、国際公開第１９８８／０１６４９号パンフレット、国際公開第１９９４／１３８０４号パンフレット及び国際公開第１９９２／０１０４７号パンフレットを参照されたい。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるポリペプチドは、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、又はＦｖから選択される抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドはｓｃＦｖである。

【0090】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは抗体模倣物である。「抗体模倣物」という用語は、抗原に結合する抗体の能力を模倣することができるが、天然の抗体構造とは構造的に異なるポリペプチドを指す。抗体模倣物の非限定的な例としては、アドネクチン、アフィボディ、アフィリン、アフィマー、アフィチン、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、ＤＡＲＰｉｎｓ、フィノマー、クニッツドメインペプチド、モノボディ、ナノボディ、ナノＣＬＡＭＰ及びバーサボディが挙げられる。

【0091】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは組換え生産される。「組換え」には、組換え手段によって調製、発現、作製又は単離される抗体及び他のタンパク質が含まれる。

【0092】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは合成的に産生される。

【0093】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、異種部分にコンジュゲートされる。「コンジュゲート」という用語は、共有結合又は非共有結合相互作用を介して結合していることを指す。コンジュゲーションは、任意の適切な連結剤を使用することができる。非限定的な例としては、ペプチドリンカー、化合物リンカー、及び化学架橋剤が挙げられる。

【0094】

いくつかの実施形態では、異種部分は、治療剤、診断剤又はそれらの組合せである。

【0095】

いくつかの実施形態では、異種部分は診断剤である。いくつかの実施形態では、診断剤は、検出可能な標識、レポーター分子、又はその両方を含む。診断剤の非限定的な例としては、放射性同位体（例えば、^３Ｈ、^１４Ｃ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、又は^１２５ｌ）、蛍光部分（例えば、フルオレセインイソチオシアネート又はローダミン）、化学発光部分及び酵素（例えば、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ又はルシフェラーゼ）が挙げられる。

【0096】

いくつかの実施形態では、異種部分は、ヒト炎症促進性メディエーター、ヒトサイトカイン、又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、異種部分は、ヒト炎症促進性メディエーターを含む。ヒト炎症促進性メディエーターの非限定的な例としては、パーフォリン－Ａ及びグランザイムＡ（ＧｚｍＡ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、異種部分は、サイトカイン、例えばヒトサイトカインを含む。ヒトサイトカインの非限定的な例としては、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）、インターロイキン（ＩＬ）－１７（ＩＬ－１７）、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、ＩＬ－２、ＩＬ－７及びＩＬ－１５が挙げられる。いくつかの実施形態では、異種部分は、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１７、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＦＮγ若しくはＧＭ－ＣＳＦ、又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施形態では、異種部分は、ＩＬ－２、ＩＬ－７若しくはＩＬ－１５、又はそれらの組合せを含む。

【0097】

いくつかの実施形態では、異種部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アヘキサデカン酸、ナノ粒子、ヒドロゲル、多量体化ドメイン及び／又はキャリアペプチドである。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、脂質ナノ粒子である。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、ポリマーナノ粒子である。いくつかの実施形態では、ポリマーは両親媒性ポリマーである。他の実施形態では、ポリマーは、疎水性又は親水性ポリマーである。ポリマーの例には、ポリ（乳酸）－ポリ（エチレングリコール）、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）－ポリ（エチレングリコール）、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）－ｄ－α－トコフェリルポリエチレングリコールスクシネート、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）－エチレンオキシドフマレート、ポリカプロラクトン－ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グリコール酸）－ポリ（エチレングリコール）、又はそれらの任意の塩が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ポリマーナノ粒子は、ポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール）酸（ＰＬＧＡ）を含む。

【0098】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは「中和抗体」である。本明細書で使用される場合、「中和抗体」という用語は、ＣＸＣＲ６への結合がＣＸＣＲ６の少なくとも１つの生物学的活性の阻害をもたらす抗体を指す。例えば、本発明の抗体は、肝病態におけるＮＫ Ｔ細胞等の特定の環境での走化性機能を遮断し得る。

【0099】

融合タンパク質
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチドの１つ又は複数を含む融合タンパク質を提供する。

【0100】

「融合タンパク質」という用語は、合成、半合成、又は組換え単一タンパク質分子を指す。融合タンパク質は、共有結合（例えば、ペプチド結合）によって結合された２つ以上の異なるタンパク質及び／又はポリペプチドの全部又は一部を含むことができる。

【0101】

本発明の融合タンパク質は、当技術分野で周知の日常的な方法及び試薬を使用して、例えば組換え又は合成により製造することができる。例えば、本発明の融合タンパク質は、当技術分野で公知の方法に従って、適切な宿主細胞（例えば、細菌細胞）中で組換え生産することができる。例えば、分子生物学実験プロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、第２版、オーズベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）ら編、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ）、１９９２年、及びモレキュラークローニング：実験室マニュアル（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ）、第２版、サンブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）ら著、１９８９年、コールドスプリングハーバーラボラトリープレス（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）を参照されたい。例えば、本明細書に記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子は、適切な宿主細胞（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に導入して発現させることができ、発現した融合タンパク質は、常套的な方法及び容易に入手可能な試薬を使用して宿主細胞（例えば、封入体）から単離／精製することができる。例えば、異なるタンパク質配列（例えば、光応答性ドメイン、異種ペプチド成分）をコードするＤＮＡ断片を、従来の技術に従ってインフレームで一緒に連結することができる。別の実施形態では、融合遺伝子は、自動ＤＮＡ合成機を含む従来の技術によって合成することができる。或いは、核酸断片のＰＣＲ増幅は、アンカープライマーを使用して行うことができ、アンカープライマーは、２つの連続する核酸断片間に相補的なオーバーハングを生じさせ、その後アニールし、再増幅してキメラ核酸配列を生成することができる（オーズベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）ら著、分子生物学実験プロトコール（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、１９９２年を参照されたい）。

【0102】

核酸、発現ベクター、発現宿主細胞
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチド又は融合タンパク質のいずれか１つをコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドを提供する。いくつかの実施形態では、本発明のポリペプチド又は融合タンパク質は、単一のポリヌクレオチドによってコードされる。いくつかの実施形態では、本発明のポリペプチド又は融合タンパク質は、複数のポリヌクレオチドによってコードされる。ポリヌクレオチドの非限定的な例としては、線状デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、線状リボ核酸（ＲＮＡ）、環状ＤＮＡ及び環状ＲＮＡ等が挙げられる。

【0103】

いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、選択された宿主細胞に対してコドン最適化されたヌクレオチド配列を含む。

【0104】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチドのいずれか１つ又は複数を含む発現ベクターを提供する。

【0105】

「発現ベクター」という用語は、発現ベクターが適切な発現宿主細胞に形質転換されたときに１つ又は複数のタンパク質が発現され得る複製可能な核酸を指す。

【0106】

いくつかの実施形態では、発現ベクターは、ポリヌクレオチドに作動可能に連結された発現制御ポリヌクレオチド配列、選択マーカをコードするポリヌクレオチド配列、又はその両方を更に含む。いくつかの実施形態では、発現制御ポリヌクレオチド配列は、プロモーター配列、エンハンサー配列、又はその両方を含む。いくつかの実施形態では、発現制御ポリヌクレオチド配列は誘導性プロモーター配列を含む。「プロモーター」という用語は、ＲＮＡポリメラーゼが結合し、遺伝子の転写を開始するＤＮＡの領域を指す。用語「作動可能に連結された」は、核酸が、それが連結されている要素（例えば、プロモーター）の制御下で核酸の発現を可能にするように、組換えポリヌクレオチド、例えばベクター中に配置されることを意味する。「選択マーカ要素」という用語は、人為的選択に適した形質を付与する要素である。選択可能なマーカ要素は、陰性又は陽性の選択マーカであり得る。

【0107】

別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリヌクレオチド又は発現ベクターのいずれか１つ又は複数を含む発現宿主細胞を提供する。

【0108】

「発現宿主細胞」という用語は、ベクターを受け取り、維持し、再生し、増幅するのに有用な細胞を指す。発現宿主細胞の非限定的な例としては、哺乳動物細胞、例えばハイブリドーマ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ細胞、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）、酵母細胞、例えばピキア・パストリス細胞、又は細菌細胞、例えばＤＨ５α等が挙げられる。

【0109】

組成物
別の態様では、本発明は、本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質、ポリヌクレオチド、発現ベクター又は宿主細胞の１つ又は複数を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のポリペプチド又は融合タンパク質の１つ又は複数を含む。いくつかの実施形態では、組成物は医薬組成物である。

【0110】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、薬学的に許容される担体、賦形剤、安定剤、希釈剤又は張化剤を更に含む（レミントンの薬学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）第１６版、オソル（Ｏｓｏｌ）、Ａ．編、１９８０年）。適切な薬学的に許容される担体、賦形剤、又は安定剤は、使用される投与量及び濃度でレシピエントに対して非毒性である。薬学的に許容され得る担体、賦形剤、安定剤、希釈剤又は等張剤の非限定的な例としては、緩衝剤（例えば、ホスフェート、シトレート、ヒスチジン）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸又はメチオニン）、保存剤、タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリン）；親水性ポリマー、アミノ酸、炭水化物（例えば、単糖類、二糖類、グルコース、マンノース又はデキストリン）；キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）、糖（例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール）、塩形成対イオン（例えば、ナトリウム）、金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）；非イオン性界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ）、プルロニック（ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標））及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が挙げられる。

【0111】

様々な送達系を使用して、本発明の医薬組成物を投与することができ、例えば、リポソーム（例えば、ランガー（Ｌａｎｇｅｒ）、「薬物送達のための新しい方法（Ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ）」、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、２４９巻（４９７６）、ｐ．１５２７～３３、１９９０年を参照されたい）、マイクロ粒子、マイクロカプセル、変異ウイルスを発現することができる組換え細胞、受容体媒介エンドサイトーシス（例えば、ウー及びウー（Ｗｕ＆Ｗｕ）著、「可溶型ＤＮＡ担体系による、受容体媒介インビトロ遺伝子転換（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ａ ｓｏｌｕｂｌｅ ＤＮＡ ｃａｒｒｉｅｒ ｓｙｓｔｅｍ）」、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ）、第２６２第１０号、ｐ．４４２９～３２、１９８７年）に封入することができる。本発明の組成物（例えば、医薬組成物）を送達するためのナノ粒子の使用も本明細書で企図される。抗体コンジュゲート化ナノ粒子及び調製方法及び使用方法に関する更なる情報については、例えば、アルエボ（Ａｒｒｕｅｂｏ）ら著、「生物医学的応用のための抗体コンジュゲートナノ粒子（Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）」、ナノマテリアルのジャーナル（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、２００９年及び米国特許第８，２５７，７４０号明細書及び米国特許第８，２４６，９９５号明細書を参照されたく、その内容は、その全体が本明細書に組み込まれる。

【0112】

いくつかの実施形態では、本発明の組成物（例えば、医薬組成物）は、適切な投与経路のために製剤化される。投与経路の非限定的な例としては、経口、経鼻、経膣、直腸、粘膜、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、腹腔内、肺、局所及び経粘膜（経口、鼻腔内、膣内又は直腸内）が挙げられる。いくつかの実施形態では、組成物は静脈内投与用に製剤化される。いくつかの実施形態では、組成物は、皮下投与用に製剤化される。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、水溶液又は乾燥製剤（例えば、凍結乾燥）の形態で保存される。いくつかの実施形態では、投与経路の非限定的な例としては、経口、経鼻、経膣、直腸、粘膜、静脈内、筋肉内、皮下及び局所が挙げられる。

【0113】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、併用療法として追加の治療剤（例えば、第２の治療剤）と共に投与されるように製剤化される。

【0114】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１４／配列番号５０；
配列番号１５／配列番号５１；
配列番号１６／配列番号５２；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１８／配列番号５４；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；
配列番号２１／配列番号５７；
配列番号２２／配列番号５８；
配列番号２３／配列番号５９；
配列番号２４／配列番号６０；
配列番号２５／配列番号６１；
配列番号２３／配列番号６２；
配列番号２６／配列番号６３；
配列番号２７／配列番号６４；
配列番号２８／配列番号６５；
配列番号２９／配列番号６５；
配列番号３０／配列番号６６；
配列番号３１／配列番号６７；
配列番号３２／配列番号６８；
配列番号３３／配列番号６９；
配列番号３４／配列番号７０；
配列番号３５／配列番号７１；
配列番号３６／配列番号７２；
配列番号３７／配列番号７３；
配列番号３８／配列番号７４；
配列番号３９／配列番号７５；
配列番号４０／配列番号７６；
配列番号４１／配列番号７７；
配列番号４２／配列番号７８；
配列番号４３／配列番号６９；
配列番号４４／配列番号７９；
配列番号４５／配列番号８０；
配列番号１８／配列番号８１；又は
配列番号４６／配列番号８２。

【0115】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；又は
配列番号２１／配列番号５７。

【0116】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号１１／配列番号４７のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号１２／配列番号４８のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号１３／配列番号４９のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号１７／配列番号５３のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号１９／配列番号５５のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号２０／配列番号５６のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、配列番号２１／配列番号５７のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せを含むポリペプチドを含む。

【0117】

使用方法
別の態様では、本発明は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物の１つ又は複数と接触させ、それによりＣＸＣＲ６陽性白血球を調節することを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球を調節する方法を提供する。

【0118】

いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球は、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、ガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞若しくは好中球、又はそれらの組合せを含む。

【0119】

一部の実施形態では、方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を、少なくとも約０．０１μｇ／ｍｌの濃度で、本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と接触させることを含む。例えば、いくつかの実施形態では、濃度は少なくとも約０．０２μｇ／ｍｌ、０．０３μｇ／ｍｌ、０．０４μｇ／ｍｌ、０．０５μｇ／ｍｌ、０．１０μｇ／ｍｌ、０．２５μｇ／ｍｌ、０．５０μｇ／ｍｌ、０．７５μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、２μｇ／ｍｌ、３μｇ／ｍｌ、４μｇ／ｍｌ、５μｇ／ｍｌ、６μｇ／ｍｌ、７μｇ／ｍｌ、８μｇ／ｍｌ、９μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１１μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１３μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１５μｇ／ｍｌ、１６μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、１８μｇ／ｍｌ、１９μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ若しくは１００μｇ／ｍｌ、又は約：０．０１～１００μｇ／ｍｌ、０．０２～１００μｇ／ｍｌ、０．０２～５０μｇ／ｍｌ、０．０３～５０μｇ／ｍｌ、０．０３～４０μｇ／ｍｌ、０．０４～４０μｇ／ｍｌ、０．０４～３０μｇ／ｍｌ、０．０５～３０μｇ／ｍｌ又は０．０５～２０μｇ／ｍｌである。

【0120】

いくつかの実施形態では、方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と少なくとも約１分間、例えば少なくとも約２分間、３分間、４分間、５分間、６分間、７分間、８分間、９分間、１０分間、１２分間、１５分間、２０分間、２５分間、３０分間、３５分間、４０分間、４５分間、５０分間、５５分間、６０分間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３０時間、３６時間、４２時間、４８時間、５４時間、６０時間、６６時間、７２時間、７８時間、８４時間、９０時間、９６時間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間又は１０日間接触させることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と約１分～１０日間、例えば３分～１０日、３分～８日、１０分～８日、１０分～６日、１５分～６日、１５分～４日、３０分～４日、３０分～４８時間、４５分～４８時間、４５分～３６時間、１～３６時間、１～２４時間、２～２４時間、２～１８時間、３～１８時間、３～１２時間、４～１２時間又は４～６時間、接触させることを含む。

【0121】

いくつかの実施形態では、方法はＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。いくつかの実施形態では、方法は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）によってＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。いくつかの実施形態では、方法は補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）によってＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。いくつかの実施形態では、方法は、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）によってＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。いくつかの実施形態では、方法は、中間代謝を変化させること及び／又は壊死を誘導することによってＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。いくつかの実施形態では、方法は、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ若しくはＡＤＣＰによって、又は壊死を誘導することによって、又はそれらの組合せによってＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷させる。

【0122】

いくつかの実施形態では、方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球の走化性を低下させる（例えば、阻害又は遮断する）。

【0123】

いくつかの実施形態では、方法はＣＸＣＲ６陽性白血球（例えば、シグナル伝達を介して）を不活性化する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球を不活性化する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を、約０．０５～２０μｇ／ｍｌの濃度で、例えば、ヒト体内での抗体の半減期の通常の範囲の後、数分間から数日間まで、本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と接触させることを含む。ヒトにおける抗体半減期は様々であり、例えば、用量（より高い用量は半減期を有意に延長することができる）及び抗体の免疫原性（抗薬物抗体の存在は半減期を有意に短縮することができる）に応じて、例えば、数日から１０日より長い範囲である。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球を不活性化する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と少なくとも約１分間、例えば少なくとも約２分間、３分間、４分間、５分間、６分間、７分間、８分間、９分間、１０分間、１２分間、１５分間、２０分間、２５分間、３０分間、３５分間、４０分間、４５分間、５０分間、５５分間、６０分間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３０時間、３６時間、４２時間、４８時間、５４時間、６０時間、６６時間、７２時間、７８時間、８４時間、９０時間、９６時間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間又は１０日間接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を不活性化する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と約１分～１０日間、例えば３分～１０日、３分～８日、１０分～８日、１０分～６日、１５分～６日、１５分～４日、３０分～４日、３０分～４８時間、４５分～４８時間、４５分～３６時間、１～３６時間、１～２４時間、２～２４時間、２～１８時間、３～１８時間、３～１２時間、４～１２時間、又は４～６時間、接触させることを含む。

【0124】

いくつかの実施形態では、方法は、
ａ）増殖及び／又はサイトカイン産生を増加させることによってＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化するか、
ｂ）ＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を維持するか、又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
である。

【0125】

いくつかの実施形態では、方法はＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化する。いくつかの実施形態では、方法はＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を維持する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化及び／又は生存を維持する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を、本発明のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と、例えば、約０．０５～２０μｇ／ｍｌの濃度で、ヒト体内での抗体の半減期の通常の範囲の後の数日間までの数分間接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化及び／又は生存を維持する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と少なくとも約１分間、例えば少なくとも約２分間、３分間、４分間、５分間、６分間、７分間、８分間、９分間、１０分間、１２分間、１５分間、２０分間、２５分間、３０分間、３５分間、４０分間、４５分間、５０分間、５５分間、６０分間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３０時間、３６時間、４２時間、４８時間、５４時間、６０時間、６６時間、７２時間、７８時間、８４時間、９０時間、９６時間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間又は１０日間接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を活性化及び／又は維持する方法は、ＣＸＣＲ６陽性白血球を本発明のポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）と約１分～１０日間、例えば約：３分～１０日、３分～８日、１０分～８日、１０分～６日、１５分～６日、１５分～４日、３０分～４日、３０分～４８時間、４５分～４８時間、４５分～３６時間、１～３６時間、１～２４時間、２～２４時間、２～１８時間、３～１８時間、３～１２時間、４～１２時間、又は４～６時間、接触させることを含む。

【0126】

別の態様では、本発明は、有効量の本明細書に記載される組成物（例えば、薬学的に許容され得る担体と、活性成分として、本明細書に記載のポリペプチド及び／又は融合タンパク質とを含む医薬組成物）を対象に投与することを含む、ＣＸＣＲ６陽性白血球の枯渇を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性白血球を枯渇させる方法を提供する。

【0127】

「対象」又は「患者」という用語は、動物（例えば、哺乳動物）を指す。いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、対象は、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウマ、ブタ、ヒツジ、ウシ、チンパンジー、マカク、カニクイザル及びヒトからなる群より選択される哺乳動物である。いくつかの実施形態では、対象は霊長類（例えば、カニクイザル）である。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。

【0128】

いくつかの実施形態では、対象は小児患者である。いくつかの実施形態では、対象は若年患者である。いくつかの実施形態では、対象は成人患者である。

【0129】

いくつかの実施形態では、対象は、２歳以上、例えば、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２歳以上である。いくつかの実施形態では、対象は、４歳又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、対象は、５歳又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、対象は、６歳又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、対象は、１２歳又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、対象は、１８歳又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、対象は１８～７５歳である。いくつかの実施形態では、対象は、４０歳以上、例えば、少なくとも４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５又は９０歳である。

【0130】

いくつかの実施形態では、対象は、疾患（例えば、自己免疫疾患）を有するか、又は発症するリスクがある。いくつかの実施形態では、対象は、急性ＧｖＨＤ（ａＧｖＨＤ）、慢性ＧｖＨＤ（ｃＧｖＨＤ）、同種移植片拒絶、喘息、自己免疫性肝炎、自己免疫性ブドウ膜炎、接触性皮膚炎、クローン病、若年性関節リウマチ、多発性硬化症、非アルコール性脂肪性肝炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ブドウ膜炎又は潰瘍性大腸炎を有するか、又は発症するリスクがある。いくつかの実施形態では、対象はａＧｖＨＤを有するか、又はａＧｖＨＤを発症する危険性がある。

【0131】

別の態様では、本発明は、有効量の本発明の組成物（例えば、本明細書に記載の医薬組成物）を対象に投与することを含む、それを必要とする対象の疾患（例えば、自己免疫疾患）を治療又は予防する方法を提供する。

【0132】

「治療する」又は「治療」という用語は、本明細書に例示される特定の適応症等の疾患、病理学的状態、又は障害を改善、改善、改善、安定化（すなわち、悪化させない）、予防、又は治癒することを意図した対象の医学的管理を指す。この用語には、積極的治療（疾患、病的状態又は障害を改善することを目的とした治療）、原因治療（関連する疾患、病的状態又は障害の原因に対する治療）、緩和治療（症状の緩和のために設計された治療）、予防治療（関連する疾患、病的状態、又は障害の発症を最小限に抑えること、又は部分的若しくは完全に抑制することを目的とした治療）、及び支持療法（別の治療を補うために用いられる治療）が含まれる。治療には、疾患、障害又は状態の程度の減少；疾患、障害又は状態の拡大の防止；疾患、障害又は状態の進行を遅延又は遅くさせること；疾患、障害又は状態の改善又は緩和；検出可能であろうと検出不能であろうと、（部分的であろうと全体的であろうと）寛解を含む。疾患、障害又は状態を「改善する」又は「緩和する」とは、治療なしの場合の程度又は時間経過と比較して、疾患、障害又は状態の程度及び／又は望ましくない臨床症状が軽減され、並びに／或いは進行の時間経過が遅くなるか又は長くなることを意味する。「治療」はまた、治療の非存在下での予想される生存と比較して、生存を延長することを意味し得る。治療を必要とする者には、疾患、障害又は状態を既に伴う（例えば、有する、含む、罹患している）者、並びに状態又は障害を有する傾向がある者、又は疾患、障害又は状態が予防されるべきである者が含まれる。

【0133】

本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、特定の症状（例えば、自己免疫疾患）と診断された対象、又はそのような症状を発症するリスクがある対象であり得る。診断は、当技術分野で公知の任意の方法又は技術によって行うことができる。当業者は、本開示に従って治療される対象が、標準的な試験に供されていてもよく、又は検査なしで、疾患又は状態に関連する１つ又は複数の危険因子の存在に起因して危険性があると同定されていてもよいことを理解するであろう。

【0134】

いくつかの実施形態では、疾患は、ａＧｖＨＤ、ｃＧｖＨＤ、同種移植片拒絶、喘息、自己免疫性肝炎、自己免疫性ブドウ膜炎、接触性皮膚炎、クローン病、若年性関節リウマチ、多発性硬化症、非アルコール性脂肪性肝炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ブドウ膜炎又は潰瘍性大腸炎である。いくつかの実施形態では、疾患はａＧｖＨＤである。

【0135】

いくつかの実施形態では、方法は予防療法に使用される。いくつかの実施形態では、有効投与量は、対象が疾患又は状態（例えば、自己免疫疾患）を発症するのを予防するのに十分である。

【0136】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ＩＬ－１β、ＩＬ－１７、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＬ－２３、ＩＦＮγ若しくはＧＭ－ＣＳＦ、又はそれらの組合せを含む異種部分を含む。

【0137】

いくつかの実施形態では、方法は、治療有効量の少なくとも１つの更なる治療剤を対象に投与する工程を更に含む。更なる治療剤の非限定的な例としては、モノクローナル抗体、ステロイド（例えば、コルチコステロイド）及び免疫抑制剤（例えば、ＩＬ－２３／ＩＬ－１７軸を標的とする薬剤）が挙げられる。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物（例えば、医薬組成物）及び少なくとも１つの更なる治療剤を同時に投与する。いくつかの実施形態では、組成物及び少なくとも１つの更なる治療剤は、連続的に又は別々に投与される。

【0138】

いくつかの実施形態では、更なる作用物質は抗体、例えばモノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体（例えば、リツキシマブ）、抗ＩＬ－１βモノクローナル抗体（例えば、カナキヌマブ）、抗ＩＬ－６モノクローナル抗体（例えば、クラザキズマブ、シルツキシマブ又はシルクマブ）又は抗ＩＬ－６受容体モノクローナル抗体（例えば、オロキズマブ、サリルマブ、サトラリズマブ、トシリズマブ若しくはボバリリズマブ）、抗ＩＬ－１２／ＩＬ－２３ｐ４０阻害剤（例えば、ウステキヌマブ）又は抗ＴＮＦαモノクローナル抗体（例えば、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール又はインフリキシマブ）である。

【0139】

いくつかの実施形態では、ステロイドはプレドニゾンである。

【0140】

いくつかの実施形態では、免疫抑制剤はシクロホスファミド、フィンゴリモド、メトトレキサート又はヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤である。いくつかの実施形態では、免疫抑制剤はシクロホスファミド、フィンゴリモド又はメトトレキサートである。いくつかの実施形態では、免疫抑制剤はＪＡＫ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＪＡＫ阻害剤は、ルキソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、モメロチニブ、フェドラチニブ（ＴＧ１０１３４８）又はトファシチニブである。

【0141】

別の態様では、本発明は、有効量の本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質及び／又は組成物（例えば、薬学的に許容され得る担体と、活性成分として、本明細書に記載のポリペプチド及び／又は融合タンパク質とを含む医薬組成物）を対象に投与することを含む、癌の治療を必要とする対象において癌を治療する方法を提供する。

【0142】

いくつかの実施形態では、対象は、癌を有するヒト患者である。いくつかの実施形態では、対象は、癌を発症するリスクがあるヒト患者である。いくつかの実施形態では、対象は、１５歳又はそれ以上である。

【0143】

いくつかの実施形態では、癌は、乳癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、メラノーマ、非小細胞肺癌又は食道癌（ｏｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ））（すなわち、食道癌（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ））である。いくつかの実施形態では、癌は結腸癌である。

【0144】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ヒトＩｇＧ４定常領域配列（例えば、配列番号３４６）を含む。ＩｇＧ４は、ＡＤＣＣ又はＣＤＣを介して腫瘍浸潤Ｔ細胞を殺傷させない。

【0145】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、免疫チェックポイントタンパク質及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ＰＤ－１及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ＰＤ－Ｌ１及びＣＸＣＲ６に結合する二重特異性抗体である。

【0146】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ＩＬ－２、ＩＬ－７若しくはＩＬ－１５、又はそれらの組合せを含む異種部分を含む。

【0147】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は、化学療法剤、標的化抗癌療法、癌治療のための標準的なケア薬物、又は免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される。

【0148】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ－３）抗体、抗ＴＩＭ３抗体、又は抗ＣＴＬＡ－４抗体である。

【0149】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はニボルマブ、ペンブロリズマブ、スパルタリズマブ、セミプリマブ、カムレリズマブ、チスレリズマブ、ドスタリマブ、ＭＥＤＩ－０６８０又はＳＳＩ－３６１である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はニボルマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はペンブロリズマブである。抗ＰＤ－１抗体の非限定的な例に関する更なる情報については、例えば、米国特許第７，５９５，０４８号明細書（ニボルマブ）、米国特許第８，９５２，１３６号明細書（ペンブロリズマブ）、米国特許第９，６８３，０４８号明細書（スパルタリズマブ）、米国特許第９，９８７，５００号明細書（セミプリマブ）、米国特許第１０，３４４，０９０号明細書（カムレリズマブ）、米国特許第８，７３５，５５３号明細書（チスレリズマブ）、米国特許第９，８１５，８９７号明細書（ドスタリマブ）、米国特許第８，６０９，０８９号明細書（ＭＥＤＩ－０６８０）及び米国特許第１０，９１３，７９７号明細書（ＳＳＩ－３６１）を参照されたく、これらの内容はその全体が本明細書に組み込まれる。

【0150】

いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、
ａ）それぞれ配列番号３４９及び配列番号３５０；
ｂ）それぞれ配列番号３５１及び配列番号３５２；
ｃ）それぞれ配列番号３５３及び配列番号３５４；又は
ｄ）それぞれ配列番号３５５及び配列番号３５６
のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌアミノ酸配列を含む。

【0151】

配列番号３４９～３５６として同定された配列を本明細書の表９に示す。

【0152】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体はアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ－９３６５５９又はエンバフォリマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体はアベルマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体はデュルバルマブである。抗ＰＤ－Ｌ１抗体の非限定的な例に関する更なる情報については、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号明細書（アテゾリズマブ）、米国特許第９，６２４，２９８号明細書（アベルマブ）及び米国特許第８，７７９，１０８号明細書（デュルバルマブ）、米国特許第７，９４３，７４３号明細書（ＢＭＳ－９３６５５９）並びに米国特許出願公開第２０１８０３２７４９４号明細書（エンバフォリマブ）を参照されたく、これらの内容はその全体が本明細書に組み込まれる。

【0153】

いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、
ａ）それぞれ配列番号３５７及び配列番号３５８；
ｂ）それぞれ配列番号３５９及び配列番号３６０；又は
ｃ）それぞれ配列番号３６１及び配列番号３６２
のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌアミノ酸配列を含む。

【0154】

配列番号３５７～３６２として同定された配列を本明細書の表９に示す。

【0155】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＰＤ－Ｌ２抗体である。

【0156】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＬＡＧ－３抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＬＡＧ－３抗体は、レラトリマブ、ＢＭＳ－９８６０１６又はＲＥＧＮ３７６７である。また、例えば、米国特許第１０，３４４，０８９号明細書を参照されたく、その内容はその全体が本明細書に組み込まれる。

【0157】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＴＩＭ－３抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体は、ＭＧＢ４５３、ＴＳＲ－０２２、Ｓｙｍ０２３、ＢＧＢＡ４２５、Ｒ０７１２１６６１、ＬＹ３３２１３６７、ＩＣＡＧＮ０２３９０又はＢＭＳ－９８６２５８である。抗ＴＩＭ－３抗体に関する更なる情報については、例えば、アチャラ（Ａｃｈａｒｙａ）ら著、「Ｔｉｍ－３は、癌免疫療法ランドスケープにおいてその場所を見出す（Ｔｉｍ－３ ｆｉｎｄｓ ｉｔｓ ｐｌａｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｌａｎｄｓｃａｐｅ）」、（Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ Ｃａｎｃｅｒ）第８章、第１号、ｐ．ｅ０００９１１、２０２０年を参照されたく、その内容はその全体が本明細書に組み込まれる。

【0158】

いくつかの実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体は、
ａ）それぞれ配列番号３６３及び配列番号３６４；又は
ｂ）それぞれ配列番号３６５及び配列番号３６６
のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌアミノ酸配列を含む。

【0159】

配列番号３６３～３６６として同定された配列を本明細書の表９に示す。

【0160】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は抗ＣＴＬＡ－４抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＣＴＬＡ－４抗体はイピリムマブである。

【0161】

抗ＰＤ－１、抗ＰＤ－Ｌ１、抗ＰＤ－Ｌ２、抗ＬＡＧ３、抗ＴＩＭ３及び抗ＣＴＬＡ－４抗体は、デノボで生成され得る。

【0162】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤はプロボディ（例えば、ＣＸ－０７２（パクミリマブ））である。

【0163】

いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤は組換え融合タンパク質（例えば、ＡＭＰ－２２４）である。

【0164】

いくつかの実施形態では、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物（例えば、医薬組成物）及び免疫チェックポイント阻害剤を同時に投与する。いくつかの実施形態では、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物及び免疫チェックポイント阻害剤は、連続的に又は別々に投与される。

【0165】

いくつかの実施形態では、本発明の方法は、放射線療法、化学療法、手術又はそれらの組合せを投与することを更に含む。放射線療法の非限定的な例には、外部ビーム放射線、強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）、集束放射線、及びＧＡＭＭＡ ＫＮＩＦＥ（登録商標）、ＣＹＢＥＲＫＮＩＦＥ（登録商標）、線形加速器（Ｌｉｎａｃ）、及び間質性放射線（例えば、埋め込まれた放射性シード、ＧｌｉａＳｉｔｅバルーン）を含む任意の形態の放射線手術が含まれる。

【0166】

使用され得る集束放射線法には、定位的放射線手術、分割定位放射線手術、及び強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）が含まれる。定位的放射線手術は、周囲の非腫瘍性正常組織を回避しながら、腫瘍性組織、例えば脳腫瘍への放射線の正確な送達を伴うことが明らかである。定位的放射線手術を用いて適用される放射線の線量は、典型的には１Ｇｙ～約３０Ｇｙで変動し得、例えば、線量が１Ｇｙ～５Ｇｙ、１０Ｇｙ、１５Ｇｙ、２０Ｇｙ、２５Ｇｙ、最大３０Ｇｙを含む中間範囲を包含し得る。非侵襲的固定装置のために、定位放射線は単一の治療で送達される必要はない。治療計画は、毎日確実に反復することができ、それによって複数の分割線量の放射線を送達することができる。経時的に腫瘍を治療するために使用される場合、放射線手術は「分割定位放射線手術」又はＦＳＲと呼ばれる。対照的に、定位的放射線手術は、１回限りの治療を指す。分割定位放射線手術は、高い治療比、すなわち腫瘍細胞の高い殺傷率及び正常組織に対する低い効果をもたらし得る。腫瘍及び正常組織は、高単回線量の放射線対複数のより少ない線量の放射線に対する異なる応答を示す。１回の高線量の放射線は、数回の低線量の放射線よりも多くの正常組織を殺傷させ得る。したがって、複数回のより少ない線量の放射線は、正常組織を温存しながらより多くの腫瘍細胞を殺傷させることができる。分割定位放射線を使用して適用される放射線の線量は、１Ｇｙ～約５０Ｇｙの範囲で変化し得、例えば、低分割線量における１Ｇｙ～５Ｇｙ、１０Ｇｙ、１５Ｇｙ、２０Ｇｙ、２５Ｇｙ、３０Ｇｙ、４０Ｇｙ、最大５０Ｇｙを含む中間範囲を包含し得る。強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）も使用され得る。ＩＭＲＴは、高精度３次元原体放射線療法（３ＤＣＲＴ）の先進モードであり、コンピュータ制御線形加速器を使用して悪性腫瘍又は腫瘍内の特定の領域に正確な放射線量を送達する。３ＤＣＲＴでは、各放射ビームのプロファイルは、マルチリーフコリメータ（ＭＬＣ）を使用してビームの視線（ＢＥＶ）からターゲットのプロファイルに適合するように成形され、それによって多数のビームを生成する。ＩＭＲＴは、複数の小体積の放射線ビームの強度を調節することによって、放射線量が腫瘍の三次元（３Ｄ）形状により正確に適合することを可能にする。したがって、ＩＭＲＴは、周囲の正常な重要な構造への線量を最小限に抑えながら、より高い放射線量を腫瘍内の領域に集中させることを可能にする。ＩＭＲＴは、例えば、腫瘍が脊髄又は主要な器官又は血管等の脆弱な構造の周りに巻き付けられた場合に、治療体積を凹状腫瘍形状に適合させる能力を改善する。

【0167】

治療的投与
「治療有効量」、「有効量」又は「有効投与量」は、所望の治療結果（例えば、生理学的応答又は状態の治療、治癒、阻害又は改善等）を達成するために、必要な投与量及び期間で有効な量である。完全な治療効果は、必ずしも１用量の投与によって生じるわけではなく、一連の用量の投与後にのみ生じ得る。したがって、治療有効量を１回又は複数回の投与で投与することができる。治療有効量は、哺乳動物の疾患状態、年齢、性別及び体重、投与様式及び治療薬の能力、又は治療薬の組合せ等の因子に応じて変化し、個体において所望の応答を誘発し得る。

【0168】

投与される薬剤（例えば、本明細書に記載の化合物又は組成物）の有効量は、本明細書に提供されるガイダンス及び当技術分野で公知の他の方法を使用して、当業者によって決定することができる。関連因子としては、所与の薬剤、医薬製剤、投与経路、疾患又は障害の種類、対象（例えば、年齢、性別、体重）又は治療されている宿主の同一性等が挙げられる。例えば、適切な投与量は、治療当たり約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。特定の薬剤、対象及び疾患の投与量を決定することは、十分に当業者の能力の範囲内である。好ましくは、投与量は、副作用を引き起こさないか、又は最小限に抑える。

【0169】

所望の応答又は所望の結果には、細胞レベル、組織レベル又は臨床結果での効果が含まれる。したがって、「治療有効量」又はそれと同義語は、それが適用されている文脈に依存する。例えば、いくつかの実施形態では、組成物の投与なしで得られた応答と比較して、治療応答を達成するのに十分な組成物の量である。他の実施形態では、それは、対照と比較して対象において有益な又は所望の結果をもたらす量である。本明細書で定義されるように、本開示の組成物の治療有効量は、当業者によって、当技術分野で公知の日常的な方法によって容易に決定され得る。投与計画及び投与経路は、最適な治療応答を提供するように調整され得る。

【0170】

「薬学的に許容される担体」は、対象に対して非毒性である、活性成分以外の医薬組成物中の成分を指す。薬学的に許容される担体には、緩衝剤、賦形剤、安定剤又は保存剤が含まれるが、これらに限定されない。担体は、希釈剤、アジュバント、賦形剤、又はポリペプチドが投与されるビヒクルであり得る。そのようなビヒクルは、落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油等の石油、動物、植物又は合成起源のものを含む、液体、例えば水及び油であり得る。例えば、０．４％生理食塩水及び０．３％グリシンを使用することができる。これらの溶液は無菌であり、一般に粒子状物質を含まない。それらは、従来の周知の滅菌技術（例えば、濾過）によって滅菌することができる。組成物は、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、安定化剤、増粘剤、潤滑剤及び着色剤等の生理学的条件に近似するために必要に応じて、薬学的に許容される補助物質を含有し得る。そのような薬学的製剤中のポリペプチド抗体の濃度は、広く、すなわち、約０．５％未満、少なくとも約１％、又は１５％若しくは２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％若しくは５０重量％まで変動し得る。濃度は、投与様式に応じて、主に必要な用量、液量、粘度等に基づいて選択される。他のヒトタンパク質、例えばヒト血清アルブミンを含む適切なビヒクル及び製剤は、例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）：薬学の化学及び実行（Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ）、第２１版、トロイ（Ｔｒｏｙ）、Ｄ．Ｂ編、リピンコットウィリアムズ（Ｌｉｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ）及びウィルキンンズ（Ｗｉｌｋｉｎｓ）、フィラデルフィア、ペンシルベニア州、２００６年、第５部、ファーマスーティカルマニュファクチャリング（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ）、ｐ．６９１～１０９２（例えば、９５８～８９ページ）に記載される。

【0171】

例えば、ポリペプチド、融合タンパク質、ポリヌクレオチド、発現ベクター又は宿主細胞又は組成物（例えば、医薬組成物）の投与様式は、本明細書に記載されるものを含む任意の適切な非経口又は非経口投与であり得る。投与経路の非限定的な例としては、経口、経鼻、経膣、直腸、粘膜、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、腹腔内、肺、局所及び経粘膜（経口、鼻腔内、膣内又は直腸内）が挙げられる。いくつかの実施形態では、組成物は静脈内投与用に製剤化される。

【0172】

いくつかの実施形態では、組成物（例えば、医薬組成物）は静脈内注入によって投与される。いくつかの実施形態では、静脈内注入は、１５、３０、４５又は６０分かけて行われる。いくつかの実施形態では、静脈内注入は、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２時間にわたって行われる。

【0173】

用量、例えば、対象（例えば、ヒト患者）に与えられる組成物、ポリヌクレオチド、融合タンパク質又はポリペプチドの用量は、治療されている疾患を緩和又は少なくとも部分的に停止させるのに十分である（「治療有効量」）。治療有効量の非限定的な例としては、約０．００５ｍｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．０５～３０、５～２５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０又は１００ｍｇ／ｋｇが挙げられる。いくつかの実施形態では、用量は、患者の表面積、例えば５００、４００、３００、２５０、２００又は１００ｍｇ／ｍ^２に基づく。固定単位用量はまた、例えば、少なくとも約０．１ｍｇ、例えば、少なくとも約１、５、１０、５０、１００、２００、５００若しくは１０００ｍｇ、又は約：０．１～８００ｍｇ、１～６００ｍｇ、５～５００ｍｇ、又は１０～４００ｍｇの初期用量として与えられてもよい。

【0174】

投与量はまた、疾患に依存し得る。通常、１～８用量、例えば、１、２、３、４、５、６、７又は８用量が投与され得る。いくつかの実施形態では、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０又はそれを超える用量が投与され得る。

【0175】

投与、例えば、ポリペプチド、融合タンパク質又は組成物（例えば、医薬組成物）の投与を繰り返してもよい。いくつかの実施形態では、初期用量の後に、第２の用量又は複数の後続用量の組成物（例えば、医薬組成物）が投与され、後続用量は、例えば、少なくとも１～３日、例えば、少なくとも１、２、３、４、５若しくは６日、１、２、３、４、５、６若しくは７週間、又は１、２、３、４、５若しくは６ヶ月、又はそれを超える期間だけ隔てられる。

【0176】

いくつかの実施形態では、反復投与は、初期用量の量とほぼ同じ又はそれ未満の量である。いくつかの実施形態では、反復投与は、より高い用量である量である。例えば、ポリペプチド（例えば、抗体）は、８週間にわたって毎週間隔をおいて８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与され、続いて更に１６週間にわたって２週間ごとに８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与され、続いて静脈内注入によって４週間ごとに８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇで投与され得る。いくつかの実施形態では、投与はサイクル、例えば毎週、隔週、２８日又は毎月である。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の治療を以前に受けていたか又は投与されていた。他の実施形態では、対象は治療未経験である。

【0177】

検出方法
別の態様では、本発明は、試料（例えば、対象由来の生物学的試料）を本明細書に記載のポリペプチド、融合タンパク質又は組成物と接触させること、及びＣＸＣＲ６が試料中に存在するかどうかを判定すること、及び／又は試料中のＣＸＣＲ６のレベルを測定することを含む、ＣＸＣＲ６を検出及び／又は定量する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、対象のＣＸＣＲ６関連疾患又は障害（例えば、自己免疫疾患）を診断又は予後判定するために使用される。

【0178】

いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、検出可能な標識又はレポーター分子（例えば、そのＮ末端又はＣ末端又はその近くに）とコンジュゲートされる。或いは、本発明の非標識ポリペプチド（例えば、抗ＣＸＣＲ６抗体）は、検出可能に標識された二次抗体と組み合わせて使用される。検出可能な標識又はレポーター分子の非限定的な例としては、ビオチン、放射性同位体（例えば、^３Ｈ、^１４Ｃ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、又は^１２５ｌ）、蛍光又は化学発光部分（例えば、フルオレセインイソチオシアネート又はローダミン）、及び酵素（例えば、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ又はルシフェラーゼ）が挙げられる。

【0179】

適切なアッセイの非限定的な例としては、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）及びラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）が挙げられる。

【0180】

生物学的試料の非限定的な例には、正常又は病理学的条件下で、検出可能な量のＣＸＣＲ６タンパク質又はその断片を含む、対象（例えば、ヒト患者）から得られる任意の組織又は体液試料が含まれる。

【0181】

いくつかの実施形態では、生物学的試料中のＣＸＣＲ６のレベルを、ＣＸＣＲ６のベースライン又は標準レベルと比較する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ６に関連する疾患に罹患していない対象（例えば、健康な対象）から得られた生物学的試料中のＣＸＣＲ６のレベルを、ＣＸＣＲ６のベースライン又は標準レベルとして使用する。

【0182】

例示
自己免疫障害の治療の背後にある原理は、非病原性Ｔ細胞に影響を及ぼすことなく病原性Ｔ細胞を選択的に欠失させるか又は危険にさらすことであり、それによって副作用を最小限に抑え、保護的Ｔ細胞機能を維持する。腫瘍治療の原理は、副作用を回避するために最小限に操作された他のＴ細胞集団を残しながら、腫瘍浸潤Ｔ細胞を選択的に増殖及び／又は活性化することである。結果として、両方の場合における主要な課題は、免疫障害における病原性Ｔ細胞及び腫瘍に浸潤した免疫コンピテントＴ細胞を特異的に同定するために使用することができるマーカを見出すことである。

【0183】

ＣＸＣＲ６は、ＣＤ１８６又はＢｏｎｚｏ又はＳＴＲＬ３３とも呼ばれ、一般にＧＰＣＲと呼ばれるＧタンパク質共役受容体のファミリーに属する。ＣＸＣＲ６は、活性化Ｔ細胞、γδ Ｔ細胞、ＮＫ細胞及びＮＫ Ｔ細胞のサブセットによって発現されることが最初に見出されたケモカイン受容体である。ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞は、乾癬、同種移植片拒絶反応、多発性硬化症、クローン病、野兎病（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）生ワクチン株による肺感染等を含む多くの免疫障害に関与している。しかしながら、マウスモデルにおけるＣＸＣＲ６の遺伝的欠損は、上記の全ての免疫障害の免疫病理学をわずかに改善するだけであり、又は免疫病理学に影響を及ぼさない。したがって、ＣＸＣＲ６の発現の変化は、炎症及び免疫障害の治療に有効ではない可能性がある。

【0184】

ＣＸＣＲ６の有意性は、炎症促進性サイトカインＩＬ－１７、ＧＭ－ＣＳＦ及びＩＦＮγを高産生；炎症組織が高度に濃縮されている；細胞傷害性顆粒を含有する、の特性を有する、多発性硬化症における病原性Ｔ細胞の優れたマーカとして定義された。抗ＣＸＣＲ６モノクローナル抗体（ｍＡｂ）によるこの集団の枯渇は、多発性硬化症の動物モデルを劇的に逆転させ、ＣＸＣＲ６が病原性ＣＤ４細胞をマークすることを確認した。本明細書に開示されるように、ＣＸＣＲ６は、コラーゲン誘導性関節炎及び急性移植片対宿主病（ａＧｖＨＤ）において、ほとんどの病原性ＣＤ４及び／又はＣＤ８ Ｔ細胞によって高度に発現される。更に、移植免疫細胞におけるＣＸＣＲ６分子の欠損はａＧｖＨＤを改善しなかったが、抗ＣＸＣＲ６ ｍＡｂの投与はａＧｖＨＤ疾患を大幅に改善し、ＣＸＣＲ６発現がａＧｖＨＤにおける病原性細胞を同定することを示した。

【0185】

ＣＸＣＲ６は、腫瘍に浸潤した免疫コンピテントＴ細胞の特異的マーカとして本明細書で更に定義される。ＣＸＣＲ６は、主に腫瘍浸潤ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞、特にＣＤ４ Ｔ細胞の中でより高いＩＦＮ－γ及びＧＭ－ＣＳＦ産生、並びにＣＤ８ Ｔ細胞の中でより高いグランザイム－Ｂ発現を有する免疫コンピテント細胞によって発現される。ＣＸＣＲ６^＋Ｔ細胞は末梢免疫器官内のごく少数の集団であるので、それらの活性化は全身免疫活性化又は重度の副作用を誘導する可能性は低い。

【0186】

注目すべきことに、ＣＸＣＲ６は、これらの障害におけるＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の機能には必須ではないが、ＣＸＣＲ６は、肝臓の炎症及び線維形成を媒介するＮＫ Ｔ細胞のサブセットに必須であることが報告された。また、ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ８ Ｔ細胞は、自己攻撃的活性化機構を介して非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を媒介することが報告された。

【0187】

したがって、ＣＸＣＲ６に特異的に結合する新規ペプチド（例えば、抗体又はその抗原結合断片）等の新規薬剤が必要とされている。例えば、ヒト起源のＣＸＣＲ６及び非ヒト哺乳動物起源のＣＸＣＲ６の両方に特異的に結合する抗ＣＸＣＲ６抗体は、治療薬として、並びに前臨床及び臨床インビボ研究に有用であり得る。特異的な高親和性抗ＣＸＣＲ６抗体は、その天然リガンドＣＸＣＬ－１６とのＣＸＣＲ６相互作用を遮断するために必要とされ得る。ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及び／又はＣＤＣを誘導する抗ＣＸＣＲ６抗体は、自己免疫疾患、ＮＡＳＨ、ａＧｖＨＤ、同種移植片拒絶、急性ウイルス感染又はＴ細胞主導サイトカインストーム（図１）等の疾患においてＣＸＣＲ６陽性病原性Ｔ細胞を枯渇させるために必要とされ得る。ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及びＣＤＣを誘導するか又は誘導しない抗ＣＸＣＲ６抗体もまた、腫瘍浸潤ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞を活性化して、例えば直接活性化又は複合成長因子（図２）を介して腫瘍を治療するために必要とされ得る。

【0188】

実施例１．ＣＸＣＲ６はコラーゲン誘導性関節炎における病原性ＣＤ４ Ｔ細胞を同定する
図３Ａ～３Ｂに示す実験は、ＣＸＣＲ６がコラーゲン誘導性関節炎において病原性ＣＤ４ Ｔ細胞を同定することを実証している。コラーゲン誘導性関節炎を、雄のＤＢＡ／１マウスにおいて、１日目に完全フロイントアジュバント及びＩＩ型コラーゲンのエマルジョンで免疫化し、２１日目に同じエマルジョンで追加免疫することによって誘導した。追加免疫後、マウスのほぼ１００％が２９日目までにヒト関節リウマチと同様の関節炎症状を示した。このモデルでは、自己反応性ＣＤ４ Ｔ細胞が関節炎の推進力である。３５日目にマウスを屠殺し、脾臓（図３Ａ）とリンパ節（図３Ｂ）の両方を免疫学的評価に供した。ＣＸＣＲ６陰性及びＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞におけるサイトカインプロファイルは、ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞が炎症促進性サイトカインＩＬ－１７及びＩＦＮγを産生する主要な集団であることを示唆している。

【0189】

実施例２．ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞はａＧｖＨＤにおける主要な病原性Ｔ細胞である
図４Ａ～４Ｃに示される実験は、ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞が急性移植片対宿主病（ａＧｖＨＤ）における主要な病原性Ｔ細胞であることを実証している。ａＧｖＨＤを、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ドナー）に由来する骨髄細胞及び脾細胞を致死量の放射線を照射したＢＡＬＢ／Ｃマウス（レシピエント）に移入することによって誘導した。「照射のみ」として特定される照射レシピエントの一群は、細胞移入を受けず、１４日目までに死亡した。「ＢＡＬＢ／ＣへのＢＡＬＢ／Ｃ」として識別される別の群の放射線照射レシピエントは、同じ系統から骨髄及び脾細胞を受け、正常に生存した。「ＢＡＬＢ／ＣへのＣ５７ＢＬ／６」として特定されるＣ５７ＢＬ／６由来骨髄細胞及び脾細胞を投与されたレシピエントＢＡＬＢ／Ｃマウスは、体重減少（図４Ａ）及び早期死亡（図４Ｂ）として現れるａＧｖＨＤ疾患を発症した。移入後６日目に、レシピエントマウスの脾臓及びリンパ節においてＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞の有意な蓄積が観察されたが（図４Ｃ）、これらはナイーブＢＡＬＢ／Ｃマウスでは検出されなかった。

【0190】

ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞は病原性が高く、ＣＸＣＲ６陰性細胞と比較して有意に増加したサイトカインを産生した。特に、高度に炎症誘発性の亜集団であるＩＦＮγ及びＧｚｍＢ二重陽性細胞は、ＣＤ４及びＣＤ８細胞の両方において排他的にＣＸＣＲ６陽性であった（図５）。

【0191】

実施例３．ＣＸＣＲ６はａＧｖＨＤ発症において分注可能であるが、ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞を枯渇させるとａＧｖＨＤが改善される
図６に示す実験は、ＣＸＣＲ６がａＧｖＨＤ発達において必須でないことを実証している。ＢＡＬＢ／Ｃマウスに致死量の放射線を照射し、ＷＴ Ｃ５７ＢＬ／６又はＣｘｃｒ６^－／－Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来の骨髄及び脾細胞を移入した。ＷＴ Ｃ５７ＢＬ／６又はＣｘｃｒ６^－／－Ｃ５７ＢＬ／６ドナー細胞のいずれかを投与されたＢＡＬＢ／Ｃマウスは、両方の群において同様に実質的で長期にわたる体重減少によって証明されるように、同等に重度のａＧｖＨＤを発症し、ドナー細胞上のＣｘｃｒ６の欠損は生存を増加させなかった（図６）。対照的に、ＢＡＬＢ／Ｃドナー由来の細胞を移入した対照群のマウスは、初期体重減少から十分に回復し、全て生存した（図６）。

【0192】

図７に示す異なる実験は、ＣＸＣＲ６がａＧｖＨＤにおける病原性Ｔ細胞のマーカとしてのみ機能し得、抗ＣＸＣＲ６抗体治療が生存を改善することによってａＧｖＨＤ疾患を改善することを実証する。

【0193】

実施例４．Ｂ１６メラノーマ及びＭＣ３８結腸腫瘍モデルにおけるＣＸＣＲ６^＋Ｔ細胞
図８Ａ～図１０Ｂに示す実験は、ＣＸＣＲ６陽性Ｔ細胞が腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）において濃縮されていることを実証する。Ｂ１６は、強い免疫応答を誘発しない「冷たい腫瘍」である。対照的に、ＭＣ３８は強い免疫応答を誘発する。Ｂ１６メラノーマモデルを作製するために、野生型ＣＢ７ＢＬ／６マウスにＢ１６メラノーマを接種し、４日ごとにアイソタイプ対照ｍＡｂ又は抗ＰＤ－１ ｍＡｂで治療した。マウスを２０日目に屠殺し、脾細胞及びＴＩＬをフローサイトメトリーによって分析した。ＭＣ３８結腸腫瘍モデルを作製するために、野生型ＣＢ７ＢＬ／６マウスにＭＣ３８結腸腫瘍細胞を接種し、２０日目に屠殺した。脾細胞及びＴＩＬをフローサイトメトリーによって分析した。ＣＸＣＲ６^＋ＣＤ４及びＣＤ８ Ｔ細胞は、Ｂ１６メラノーマモデル及びＭＣ３８結腸腫瘍モデルの両方においてＴＩＬが濃縮されていた（図８Ａ－８Ｂ）。ＣＸＣＲ６^＋Ｔ細胞は、ＴＩＬに優先的に蓄積し（図８Ａ－８Ｂ）、ＰＤ－１抗体処理によって増殖させることができた（図８Ａ）。

【0194】

Ｂ１６メラノーマモデルにおいて、マウスを２０日目に屠殺し、ＴＩＬを、サイトカイン発現についてフローサイトメトリーによって分析する前に、ブレフェルジンＡ（ＢＦＡ）（１０μｇ／ｍｌ）の存在下においてホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）／イオノマイシンで４時間刺激した。図９Ａ～図９Ｂに示すように、ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ４ Ｔ細胞は、ＴＩＬにおける主要なＩＦＮ－γ及びＧＭ－ＣＳＦ産生細胞であり、これらがＴＩＬにおける主要なエフェクター細胞であることを示唆している。図１０Ａ～１０Ｂに示すように、ＣＸＣＲ６陽性ＣＤ８ Ｔ細胞は、ＴＩＬにおける主要なグランザイムＢ産生細胞であり、これらがＴＩＬにおける主要なキラー細胞であることを示唆している。

【0195】

実施例５．抗体の産生及び特性評価
野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを免疫し、完全長ヒトＣＸＣＲ６ベクターで追加免疫した。免疫化の前に、ベクターを、トランスフェクトされた哺乳動物細胞株上の天然ヒトＣＸＣＲ６の細胞表面発現についてフローサイトメトリーによって試験して、免疫化及びスクリーニングの成功を確実にした。遺伝子免疫化を、ＤＮＡ被覆金粒子を野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスの皮膚に安定的に送達して、標的特異的免疫応答を誘発することによって行った。ヒトＣＸＣＲ６及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方に十分な抗体結合力価を示す血清試験後、マウスを屠殺した。単一のＢ細胞プラットフォームを使用して、ヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方への結合について骨髄抗体産生形質細胞を連続的にスクリーニングした。従来のハイブリドーマ技術を脾細胞及びリンパ節細胞に使用した。親細胞ではなく、ヒト及び／又はカニクイザルＣＸＣＲ６過剰発現細胞に特異的に結合する候補クローンを同定した。Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌを配列決定した後、異なるＣＤＲを有するクローンを完全長マウス抗体又はヒトキメラ抗体として更に発現させた。ヒトＣＸＣＲ６（ｈｕ－ＣＸＣＲ６）、カニクイザルＣＸＣＲ６（ｃｙｎｏ－ＣＸＣＲ６）又はマウスＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞に結合する個々の抗体の能力を試験した。

【0196】

ヒトＣＸＣＲ６（ｈｕ－ＣＸＣＲ６）、カニクイザルＣＸＣＲ６（ｃｙｎｏ－ＣＸＣＲ６）又はマウスＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞を、１０％ＦＣＳを含有するＤＭＥＭ培地で培養した。使用前に、細胞を回収し、洗浄し、０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有する氷冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に再懸濁し、連続希釈した抗体で染色した。ＰＢＳ／０．５％ＢＳＡ緩衝液で２回洗浄した後、更に蛍光色素標識二次抗体で染色した。更に２回洗浄した後、細胞をＰＢＳ／０．５％ＢＳＡに再懸濁し、固定し、フローサイトメトリーによって収集し、分析した。

【0197】

スクリーニング段階でヒト若しくはカニクイザルＣＸＣＲ６又はブランク細胞株への結合について、表２及び３の全ての抗体を試験した（「はい」又は「いいえ」を得るための単一濃度）。配列番号１１～１７はヒト／カニクイザル交差種結合剤であり、残り（配列番号１８～４６）は全てヒトのみの結合剤である。

【0198】

図１１は、様々な濃度の抗体によるトップヒットの更なる分析である。最初のスクリーニングデータに基づいて、ヒトのみの結合剤の５つのトップヒットを選択し（ＣＮＧｓ－１Ｂ７、ＣＮＥ－６Ｅ１０、ＣＯＸ－１Ｂ１０、ＣＯＸ－２Ｄ２及びＢｅａｃｏｎ１－Ｇ１２）、それらのうちの３つ（ＣＮＥ－６Ｅ１０、ＣＯＸ－１Ｂ１０及びＣＯＸ－２Ｄ２）が他の２つのクローン（ＣＮＧｓ－１Ｂ７及びＢｅａｃｏｎ１－Ｇ１２）よりも高い親和性を有することが見出され、これは図１１から結論付けることができる。次いで、更なる特性評価のために３つのヒトのみ結合剤（ＣＮＥ－６Ｅ１０、ＣＯＸ－１Ｂ１０及びＣＯＸ－２Ｄ２）を選択した。

【0199】

ヒト／カニクイザル交差種結合剤に関して、図１１の４つの試験クローンのうち３つを更なる特性評価のために進めた（図１２）。Ｂｅａｃｏｎ１－Ｂ２は、その抗体がユニークであるヒト、カニクイザル及びマウスＣＸＣＲ６の全てに結合するので、図１２に示される実験では更に特徴づけられなかった。更に、ヒトＣＸＣＲ６に対するＢｅａｃｏｎ１－Ｂ２の親和性は、他の３つのヒト／カニクイザル交差種結合剤ほど優れていない。

【0200】

図１２Ａ～１４に示す実験は、ヒト特異的モノクローナル抗体及びヒト／カニクイザル交差種モノクローナル抗体がＣＸＣＲ６の異なるエピトープ残基に結合することを実証している。ヒトＣＸＣＲ６のみに結合する３つの候補抗体、及びヒトＣＸＣＲ６及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方に結合する３つの候補抗体を更に分析して、それらのエピトープ残基を特定した。ヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端とヒトＩｇＧ１のＦｃ領域を連結してＮ末端融合タンパク質を作製した。ヒトＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞を染色する前に、候補抗体（１μｇ／ｍｌ）をＮ末端融合タンパク質（２５μｇ／ｍｌ）と室温で１５分間プレインキュベートした。ヒトＣＸＣＲ６にのみ結合し、カニクイザル又はマウスＣＸＣＲ６には結合しない市販の抗体（Ｒ＆Ｄシステム、ミネソタ州ミネアポリス）を対照抗体として使用した。図１２Ａに示すように、ヒトのみのバインダーは、ヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端に結合する。図１２Ｂに示すように、ヒト／カニクイザル二重結合剤は、ヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端に結合しない。結果は、ヒト／カニクイザル二重結合剤がヒトＣＸＣＲ６の１つ又は複数の細胞外ループに結合することを示唆している。

【0201】

これらの３つのヒト／カニクイザル二重結合剤がカニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端に結合するかどうかを独立して試験するために、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端とヒトＩｇＧ１のＦｃ領域とを連結する融合タンパク質を生成した。カニクイザルＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞を染色する前に、抗体（１μｇ／ｍｌ）を融合タンパク質（２５μｇ／ｍｌ）と共に室温で１５分間プレインキュベートした。図１３に示すように、ヒト／カニクイザル二重結合剤はまた、カニクイザルＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端に結合せず、これらがカニクイザルＣＸＣＲ６の１つ又は複数の細胞外ループに結合する可能性が高いことを示唆する。

【0202】

これらの結論は、抗体競合実験の結果と一致している（図１４Ａ～１４Ｂ）。ヒトＣＸＣＲ６過剰発現細胞を、ＣＯＸ－１Ｂ１０（ヒトのみの結合剤）又はＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１（ヒト／カニクイザル交差種結合剤）のいずれかと１５分間プレインキュベートし、続いてＡＰＣ標識抗マウスＩｇＧ（二次抗体）で染色した。細胞を洗浄し、フィコエリトリン（ＰＥ）標識ヒトのみの結合剤（Ｒ＆Ｄシステム、ミネソタ州ミネアポリス）で染色した。図１４Ａ～１４Ｂに示すように、ヒト／カニクイザル交差種結合剤（Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１）のみが、ヒトのみの結合剤（ＣＯＸ－１Ｂ１０）ではなく、ヒトＣＸＣＲ６を過剰発現する細胞を市販のヒトのみの結合剤（Ｒ＆Ｄシステム、ミネソタ州ミネアポリス）と共染色することができた。したがって、Ｇｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１はヒトＣＸＣＲ６の１つ又は複数の細胞外ループに結合し、ＣＯＸ－１Ｂ１０はヒトＣＸＣＲ６の細胞外Ｎ末端に結合する。

【0203】

実施例６．ＣＯＸ－１Ｂ１０及びＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１キメラ抗体
図１５Ａ～図１５Ｂに示す実験は、キメラ抗体が完全長マウスＩｇＧ１の結合能及び高親和性を保持することを実証している。ヒトＣＸＣＲ６単独に対して最も良好な親和性を有するクローンであるＣＯＸ－１Ｂ１０、並びにヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６に対して最も良好な親和性を有するクローンであるＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１を、マウス由来のＶ_Ｈ及びＶ_ＬをヒトＩｇＧ１抗体に移植することによってヒトキメラｍＡｂとして発現させた。マウス及びヒトキメラ抗体の両方を、ヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６へのそれらの結合について試験した。図１５Ａ及び図１５Ｂに示すように、両方のクローンが結合特異性及び親和性を維持した。キメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１クローンは、そのマウス対応物と比較して改善された特性さえ示す。したがって、キメラ抗体は、全長マウスＩｇＧ１の結合能及び高い親和性を保持する。

【0204】

図１６に示す実験は、ヒト／マウスキメラｍＡｂがＣＸＣＬ－１６の存在下で結合特異性及び親和性を保持することを実証している。ヒトＣＸＣＲ６過剰発現細胞を、１，５００ｎｇ／ｍｌのｈｕＣＸＣＬ－１６（全長ヒトＣＸＣＬ－１６のＡｓｎ４９－Ｐｒｏ１３７、ＭＷ：１０ＫＤ）の有無にかかわらず５分間プレインキュベートし、次いで、キメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１を添加し、室温で更に１５分間染色した。洗浄及び二次抗体による染色の後、細胞をフローサイトメトリーによって分析した。ヒトＣＸＣＲ６へのｈｕＣＸＣＬ－１６結合のＥＤ_５０は１０～５０ｎｇ／ｍｌである。したがって、１，５００ｎｇ／ｍｌのｈｕＣＸＣＬ－１６は、キメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１と競合するための圧倒的な濃度である。ｈｕＣＸＣＬ－１６の非存在下では、ヒトＣＸＣＲ６へのキメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１結合のＥＤ_５０は０．５μｇ／ｍｌであった（図１６）。ｈｕＣＸＣＬ－１６（１，５００ｎｇ／ｍｌ）の存在下では、ヒトＣＸＣＲ６へのキメラＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１結合のＥＤ_５０は１．５μｇ／ｍｌであった（図１６）。したがって、ヒト／マウスキメラｍＡｂは、ＣＸＣＬ－１６の存在下で結合特異性及び親和性を保持する。

【0205】

実施例７．キメラＣＸＣＲ６ ｍＡｂの抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）
図１７に示す実験は、結合エピトープ（すなわち、ＣＸＣＲ６のＮ末端又は細胞外ループ（ＥＣＬ）にかかわらず、試験した全ての抗体がインビトロで堅牢なＡＤＣＣ機能を誘導できることを実証している。（Ｎ末端結合剤は典型的にはヒトＣＸＣＲ６のみを認識し、ＥＣＬ結合剤は典型的にはヒトＣＸＣＲ６及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方を認識する）。

【0206】

クローンＣＮＥ－６Ｅ１０、ＣＯＸ－２Ｄ２及びＣＯＸ－１Ｂ１０はヒトＣＸＣＲ６に結合し、クローンＧｅｎｏｖａｃ１－Ｇ２及びＧｅｎｏｖａｃ２－Ｃ１はヒト及びカニクイザルＣＸＣＲ６の両方に結合する。全てのクローンは、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃを有するヒト／マウスキメラ抗体であった。

【0207】

エフェクター細胞は、健康なヒトドナーの新鮮血液から調製した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から単離した。等体積のＰＢＳで希釈し、血液をＨｉｓｔｏｐａｑｕｅ（登録商標）－１０７７密度勾配細胞分離培地（シグマアルドリッチ、ミズーリ州セントルイス）の上に置いた後、室温で４００ｇで３０分間（休みなく）遠心分離した。遠心分離後、単層を回収し、洗浄し、完全培地（１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ－１６４０）に再懸濁した。ＮＫ細胞を、磁気ビーズを使用して新たに調製したＰＢＭＣから単離した。

【0208】

標的細胞、ＣＸＣＲ６過剰発現２９３Ｆ（ＣＸＣＲ６^＋２９３Ｆ）細胞を、９６ウェルＵ底プレートに１５分間播種した。各ウェルは、ｍＡｂを有さないか、又は１０μｇ／ｍｌの異なる抗ＣＸＣＲ６ ｍＡｂクローンのいずれかを有する。

【0209】

自発的な細胞死を測定するために、等量のＮＫ細胞を９６ウェルプレートのウェルに添加した。各試験ウェルは、抗ＣＸＣＲ６ ｍＡｂクローンの存在下で共培養されたＮＫ（エフェクター）細胞及びＣＸＣＲ６^＋２９３Ｆ（標的）細胞を含む。陰性対照ウェルは、エフェクター細胞のみ、標的細胞のみ、又は抗ＣＸＣＲ６ ｍＡｂクローンの非存在下でのエフェクター及び標的細胞の共培養を含む。各培養条件を反復した。９６ウェルプレートを３７℃及び５％ＣＯ_２の細胞培養インキュベーター内で更に４時間インキュベートした。

【0210】

乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）活性を定量するための標準曲線を作成した。既知の数の段階希釈した標的細胞を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００の存在下、３７℃及び５％ＣＯ_２で４時間、完全培地中で培養した。培養体積はＡＤＣＣ反応アッセイ体積と同じであった。

【0211】

ＬＤＨ活性を測定するために、９６ウェルプレートを細胞培養プロセスの最後に遠心分離し、上清（約５０μｌ）を除去した。ＬＤＨ活性を、ＬＤＨアッセイキットを使用して測定し、ＯＤ値をプレートリーダーで報告した。ＬＤＨは死細胞からのみ漏出するので、上清中に検出されるＬＤＨ活性は細胞死を反映する。各試験ウェルからの細胞の最終死比を標準曲線に対して正規化した。データ（図１７）は、結合エピトープにかかわらず、全ての試験抗体がインビトロで堅牢なＡＤＣＣ機能を誘導できることを実証している。

【0212】

本明細書に引用される全ての特許、公開出願及び参考文献の教示は、その全体が参照により組み込まれる。

【0213】

例示的な実施形態を特に示し説明したが、添付の特許請求の範囲に含まれる実施形態の範囲から逸脱することなく、形態及び詳細の様々な変更を行うことができることが当業者には理解されよう。

【0214】

【表1】

【0215】

【表2】

【0216】

【表3】

【0217】

【表4】

【0218】

【表5】

【0219】

【表6】

【0220】

【表7】

【0221】

【表8】

【0222】

【表9】

【0223】

【表10】

【0224】

【表11】

【0225】

【表12】

【図1】

【図2】

【図3A】

【図3B】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8A】

【図8B】

【図9A】

【図9B】

【図10A】

【図10B】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【図13】

【図14A】

【図14B】

【図15A】

【図15B】

【図16】

【図17】

【配列表】

2024522349000001.app

【手続補正書】

【提出日】2024-04-11

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体６（ＣＸＣＲ６）に特異的に結合するポリペプチドであって、
配列番号８３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有する重鎖可変領域（Ｖ _Ｈ ）；及び配列番号１５８のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、配列番号１５９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有する軽鎖可変領域（Ｖ _Ｌ ）；
配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１５９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号９０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号９１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号９８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１７０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１７１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号９９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１００のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１７９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１９１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１２９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１３０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１３１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１４１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２１１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１５１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２０９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２１９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号９９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２２９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２３０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２２８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２３１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２３９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３０９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３１１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２４８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号１８８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３１９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２６１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２５１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２６１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２００のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２７０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２７８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２９１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２５９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３３９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３４０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
配列番号２４１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３４１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；又は
配列番号２３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、及び配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を有するＶ _Ｈ ；及び配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を有するＶ _Ｌ ；
を含み、
前記ポリペプチドは抗体又はその抗原結合断片である、ポリペプチド。

【請求項2】

以下のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌの組合せ：
配列番号１１／配列番号４７；
配列番号１２／配列番号４８；
配列番号１３／配列番号４９；
配列番号１４／配列番号５０；
配列番号１５／配列番号５１；
配列番号１６／配列番号５２；
配列番号１７／配列番号５３；
配列番号１８／配列番号５４；
配列番号１９／配列番号５５；
配列番号２０／配列番号５６；
配列番号２１／配列番号５７；
配列番号２２／配列番号５８；
配列番号２３／配列番号５９；
配列番号２４／配列番号６０；
配列番号２５／配列番号６１；
配列番号２３／配列番号６２；
配列番号２６／配列番号６３；
配列番号２７／配列番号６４；
配列番号２８／配列番号６５；
配列番号２９／配列番号６５；
配列番号３０／配列番号６６；
配列番号３１／配列番号６７；
配列番号３２／配列番号６８；
配列番号３３／配列番号６９；
配列番号３４／配列番号７０；
配列番号３５／配列番号７１；
配列番号３６／配列番号７２；
配列番号３７／配列番号７３；
配列番号３８／配列番号７４；
配列番号３９／配列番号７５；
配列番号４０／配列番号７６；
配列番号４１／配列番号７７；
配列番号４２／配列番号７８；
配列番号４３／配列番号６９；
配列番号４４／配列番号７９；
配列番号４５／配列番号８０；
配列番号１８／配列番号８１；及び
配列番号４６／配列番号８２
のいずれか１つと同一であるＶ _Ｈ ／Ｖ _Ｌ の組合せを含む、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項3】

前記ポリペプチドが、抗原結合断片（Ｆａｂ）、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆａｂ’、又は一本鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）から選択される抗体の抗原結合断片である、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項4】

ａ）ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域配列、
ｂ）ヒトκ軽鎖定常領域配列、又は
ｃ）ａ）及びｂ）の両方
を更に含む、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項5】

前記ＣＸＣＲ６が霊長類ＣＸＣＲ６である、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項6】

前記霊長類ＣＸＣＲ６がヒトＣＸＣＲ６（配列番号１）又はカニクイザルＣＸＣＲ６（配列番号６）である、請求項５に記載のポリペプチド。

【請求項7】

ａ） 配列番号２、又は
ｂ） 配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、又はそれらの組合せ、
で示されるアミノ酸配列内のエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項8】

治療剤、診断剤又はそれらの組合せにコンジュゲートされている、請求項１に記載のポリペプチド。

【請求項9】

請求項１に記載のポリペプチドをコードする配列を含む、ポリヌクレオチド。

【請求項10】

請求項９に記載のポリヌクレオチドを含む、宿主細胞。

【請求項11】

請求項１～８のいずれか一項に記載のポリペプチド又は請求項９に記載のポリヌクレオチド、及び、医薬賦形剤、希釈剤、又は担体のうちの１つ又は複数を含む、組成物。

【請求項12】

ａ） ＣＸＣＲ６陽性白血球を調節する、ＣＸＣＲ６陽性白血球の走化性を遮断する、ＣＸＣＲ６陽性白血球を不活性化する、及び／又はＣＸＣＲ６陽性白血球を殺傷するための、又は
ｂ） ＣＸＣＲ６陽性白血球を活性化する、及び／又はＣＸＣＲ６陽性白血球の生存を維持するための、
請求項１１に記載の組成物。

【請求項13】

前記ＣＸＣＲ６陽性白血球が、ＣＤ４ Ｔ細胞、ＣＤ８ Ｔ細胞、γδ Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、ＮＫ細胞又は好中球である、請求項１２に記載の組成物。

【請求項14】

ａ） ＣＸＣＲ６陽性白血球の枯渇を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性白血球を枯渇させるための、及び／又は
ｂ） 疾患の治療又は予防を必要とする対象において疾患を治療又は予防するための、
請求項１１に記載の組成物。

【請求項15】

ａ） 前記対象が、急性移植片対宿主病（ａＧｖＨＤ）、同種移植片拒絶、喘息、自己免疫性肝炎、自己免疫性ブドウ膜炎、接触性皮膚炎、クローン病、若年性関節リウマチ、多発性硬化症、非アルコール性脂肪性肝炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ブドウ膜炎又は潰瘍性大腸炎を有するか、又は発症するリスクがある、
ｂ） 前記対象がヒトである、又は
ｃ） ａ）及びｂ）の両方
である請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物が静脈内投与用又は皮下投与用である、請求項１４に記載の組成物。

【請求項17】

前記組成物が、更なる治療剤とともに前記対象に投与されるものである、請求項１４に記載の組成物。

【請求項18】

前記更なる治療剤が、モノクローナル抗体、ステロイド、免疫抑制剤、又はＩＬ－２３／ＩＬ－１７軸を標的とする薬剤である、請求項１７に記載の組成物。

【請求項19】

前記更なる治療剤が、
ａ） ＣＤ２０、ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３ｐ４０、ＴＮＦα、又はそれらの組合せに特異的に結合するモノクローナル抗体、
ｂ） プレドニゾン、
ｃ） シクロホスファミド、フィンゴリモド又はメトトレキサート、又は
ｄ） ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤、
である、請求項１８に記載の組成物。

【請求項20】

前記ＪＡＫ阻害剤が、ルキソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、モメロチニブ、フェドラチニブ（ＴＧ１０１３４８）又はトファシチニブである、請求項１９に記載の組成物。

【請求項21】

ＣＸＣＲ６陽性細胞の活性化を必要とする対象においてＣＸＣＲ６陽性細胞を活性化するための請求項１１に記載の組成物。

【請求項22】

ａ） 前記対象が、癌を有するか、又は癌を発症するリスクがある、
ｂ） 前記対象がヒトである、又は
ｃ） ａ）及びｂ）の両方
である、請求項２１に記載の組成物。

【請求項23】

前記癌が、乳癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、肺癌、リンパ腫、メラノーマ、非小細胞肺癌又は食道癌である、請求項２２に記載の組成物。

【請求項24】

前記組成物が静脈内投与用又は皮下投与用である、請求項２１に記載の組成物。

【請求項25】

前記組成物が、更なる治療剤とともに前記対象に投与されるものである、請求項２１に記載の組成物。

【請求項26】

前記更なる治療剤が、化学療法剤又は免疫チェックポイント阻害剤である、請求項２５に記載の組成物。

【請求項27】

前記更なる治療剤が、抗ＰＤ－１抗体又は組換え融合タンパク質、抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はプロボディ、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗ＬＡＧ－３抗体、抗ＴＩＭ－３抗体又は抗ＣＴＬＡ－４抗体から選択される免疫チェックポイント阻害剤である、請求項２６に記載の組成物。

【国際調査報告】