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特表2024-523406α１－アンチトリプシン欠乏症の処置のための組成物およびそれらの使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-06-28
(54)【発明の名称】α１－アンチトリプシン欠乏症の処置のための組成物およびそれらの使用
(51)【国際特許分類】
A61K 31/445 20060101AFI20240621BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240621BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20240621BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240621BHJP
【ＦＩ】
A61K31/445
A61P11/00
A61P3/00
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023577946
(86)(22)【出願日】2022-06-15
(85)【翻訳文提出日】2024-02-01
(86)【国際出願番号】 GB2022051502
(87)【国際公開番号】W WO2022263816
(87)【国際公開日】2022-12-22
(31)【優先権主張番号】2108523.8
(32)【優先日】2021-06-15
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523473165
【氏名又は名称】センテッサ ファーマシューティカルズ （ユーケー） リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ラムズデン， ナイジェル
(72)【発明者】
【氏名】フォックス， デイビッド ジョン
(72)【発明者】
【氏名】ハンティントン， ジェイムズ アンドリュー
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC21
4C086GA16
4C086MA52
4C086MA65
4C086NA14
4C086ZA59
4C086ZC21
4C086ZC41
(57)【要約】
本発明は、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を含む薬学的組成物およびそれらの医学的使用（例えば、α１－アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）の処置における使用のための）に関する。本発明者らは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、驚くべきことに、Ｍ Ａ１ＡＴのまたはＡ１ＡＴのＳｉｉｙａｍａ改変体のインビトロ分泌に対する効果を有しない一方で、Ｚ Ａ１ＡＴのレベルの増大にあたって、インビトロおよびインビボの両方で非常に有効であることを見出した。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ヒト被験体におけるα１－アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）の低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害を処置することにおける使用のための化合物、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸【化4】
【請求項2】
前記組成物は、前記ヒト被験体に、約２～５ｍｇ／ｋｇ、例えば、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇまたは約５ｍｇ／ｋｇの１日用量において投与される、請求項１に記載の使用のための薬学的組成物。
【請求項3】
薬学的にまたは治療的に受容可能な賦形剤またはキャリアをさらに含む、請求項１または請求項２のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
【請求項4】
前記組成物は、経口形態においてまたは静脈に投与される、前述の請求項のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物。
【請求項5】
ヒト被験体におけるＡ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害の処置のための医薬の製造における請求項１において定義される化合物の使用であって、ここで前記医薬は、前記ヒト被験体に、約１～６ｍｇ／ｋｇの１日用量において投与される、使用。
【請求項6】
ヒト被験体におけるＡ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害を処置する方法であって、前記方法は、請求項１～４のいずれかに定義される薬学的組成物を、約１～６ｍｇ／ｋｇの１日用量において投与する工程を包含する方法。
【請求項7】
前記疾患または障害は、α１－アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）である、請求項１～４のいずれかに記載の使用のための薬学的組成物、請求項５に記載の使用のための化合物、または請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を含む薬学的組成物およびそれらの医学的使用に関する。
【背景技術】
【0002】
α１－アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）は、肝臓によって生成され、血中へと分泌されるセルピンスーパーファミリーのメンバーである。それは、種々のセリンプロテアーゼ、特に好中球エラスターゼを阻害する。Ａ１ＡＴの血中レベルが低い場合、過剰な好中球エラスターゼ活性が肺組織を分解し、呼吸器合併症（例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ））を生じる。
【0003】
血中のＡ１ＡＴの基準範囲は、０．９～２．３ｇ／Ｌである。これより低いレベルが、α１－アンチトリプシン欠乏症（Ａ１ＡＤまたはＡＡＴＤ）（Ａ１ＡＴをコードするＳＥＲＰＩＮＡ１遺伝子における変異によって引き起こされる遺伝的障害）では代表的である。ＡＡＴＤの最も一般的な原因であるＺ変異は、Ａ１ＡＴ（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ － Ｐ０１００９（Ａ１ＡＴ＿ＨＵＭＡＮ））の位置３６６（これは、成熟形態における位置３４２に相当する）においてグルタミンからリジンへの置換である（Ｚ Ａ１ＡＴ）。Ｚ変異は、Ａ１ＡＴの折りたたみに影響を及ぼし、その結果、ごく一部のみが、天然の／活性な状態を獲得する。残りは、誤って折りたたまれたタンパク質として除かれるかまたは安定なポリマーとして肝臓中に蓄積するかのいずれかである。誤った折りたたみの結果として、Ｚ変異のホモ接合性キャリア（ＺＺ）は、正常の１０～１５％であるＡ１ＡＴの血漿レベルを有し、ＣＯＰＤの素因のあるキャリアになる。肝細胞中のＺ Ａ１ＡＴポリマーの蓄積は、肝硬変、肝臓がん、および他の肝臓病理の素因のあるキャリアになる。
【0004】
ＡＡＴＤの肺発現に関する現在の処置は、血液ドナーの血漿から調製されたＡ１ＡＴ濃縮物を使用する増強療法を含む。米国ＦＤＡは、４種のＡ１ＡＴ生成物： Ｐｒｏｌａｓｔｉｎ、Ｚｅｍａｉｒａ、Ｇｌａｓｓｉａ、およびＡｒａｌａｓｔの使用を承認している。投与は、１週間に１回の静脈内注入を介するものである。増強療法は、ＣＯＰＤの進行を遅らせることが明らかに示されている。ＡＡＴＤの肝臓発現（例えば、肝硬変およびがん）は、ステロイドおよび肝移植で処置される。肝臓発現の改善された処置への治験アプローチ（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ）は、Ｚ Ａ１ＡＴ重合の阻害およびオートファジーの活性化を介するポリマーのクリアランスの増大を含む。肺発現および肝臓発現の両方の処置の改善への治験アプローチは、Ｚ Ａ１ＡＴ折りたたみおよび分泌の改善に関する。
【0005】
Ｅｌｌｉｏｔｔら（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２０００， ９， １２７４－１２８１）は、Ａ１ＡＴのＸ線結晶構造を記載し、Ｚ Ａ１ＡＴ重合に影響を及ぼす薬剤を開発するために合理的薬物設計の潜在的標的である５つの腔を特定した。
【0006】
Ｐａｒｆｒｅｙら（Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２００３， ２７８， ３５， ３３０６０－３３０６６）は、Ｚ Ａ１ＡＴ重合に影響を及ぼす薬剤を開発するために合理的薬物設計の潜在的標的である１つの腔をさらに定義した。
【0007】
Ｋｎａｕｐｐら（Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ２０１０， ３９６， ３７５－３８３）は、ビス－ＡＮＳ（４，４’－ジアニリノ－１，１’－ビナフチル－５，５’－ジスルホネート）が、１：１ 化学量論および７００ｎＭのＫｄでＺ Ａ１ＡＴに結合し得るが、野生型Ａ１ＡＴ（Ｍ）に結合しないことを示した。
【0008】
Ｃｈａｎｇら（Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｍｅｄ．， ２００９， １３， ８Ｂ， ２３０４－２３１６）は、Ｚ Ａ１ＡＴ重合を阻害する一連のペプチド（Ａｃ－ＴＴＡＩ－ＮＨ２を含む）を報告した。
【0009】
Ｂｕｒｒｏｗｓら（Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ２０００， ９７， ４， １７９６－１８０１）は、一連の非選択的シャペロン（４－フェニル酪酸、グリセロールおよびトリメチルアミンオキシドを含む）が、細胞上清およびマウスモデルにおいてＺ Ａ１ＡＴレベルを増大し得ることを示した。
【0010】
Ｂｏｕｃｈｅｃａｒｅｉｌｈら（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２０１２， ２８７， ４５， ３８２６５－３８２７８）は、細胞からのＭおよびＺ両方のＡ１ＡＴの分泌を増大させるためのヒストンデアセチラーゼインヒビター、特に、ＳＡＨＡ（スベロイルアニリドヒドロキサム酸）の使用を記載する。
【0011】
Ｂｅｒｔｈｅｌｉｅｒら（ＰＬＯＳ ＯＮＥ， Ｍａｙ １１， ２０１５）は、Ｓ－（４－ニトロベンジル）－６－チオグアノシンがＺ Ａ１ＡＴ重合をインビボで防止し得ることを明らかに示した。
【0012】
Ｍａｌｌｙａら（Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ２００７， ５０， ２２， ５３５７－５３６３）は、一連のフェノール（例えば、Ｎ－（４－ヒドロキシ－３，５－ジメチルフェニル）－２，５－ジメチルチオフェン－３－スルホンアミド）が、Ｚ Ａ１ＡＴの重合をインビトロで遮断し得ることを記載する。
【0013】
Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ（ＸＩＩＩｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ， Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ， ２３ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１２および７ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ， １ｓｔ Ａｐｒｉｌ ２０１４）は、Ｚ Ａ１ＡＴ重合に影響を及ぼす薬剤を開発するために合理的薬物設計の潜在的標的であるＺ Ａ１ＡＴのＸ線結晶構造からの腔を考察した。
【0014】
米国特許第８，４３６，０１３Ｂ２号は、マイクロモル濃度範囲において細胞からのＺ Ａ１ＡＴの分泌を増大させ得る広く種々の構造を開示する。
【0015】
Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ ｖｏｌ ５６， ｎｏ ３３， ２０１７， ９８８１－９８８５は、除草剤としての１－（（４－クロロフェニル）スルホニル）ピペリジン－４－カルボン酸を開示する。
【0016】
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｖｏｌ ２， ｎｏ ６， ２０１３， １５０１－１５０８は、抗細菌剤としての１－（４－（トリフルオロメチル）フェニルスルホニル）ピペリジン－４－カルボン酸の合成を開示する。
【0017】
ＵＳ２０１１／００６５７０７Ａ１は、試薬としての１－（２－クロロベンゼン－スルホニル）－ピペリジン－４－カルボン酸の使用を開示する。
【0018】
ＥＰ０５２０３３６Ａ２は、１－（８－キノイル－スルホニル）－ピペリジン－４－カルボン酸を開示する。
【0019】
ＷＯ２０１９／２４３８４１Ａ１は、α－１－アンチトリプシンの調節因子としてのオキソインドリン－４－カルボキサミド化合物、およびα－１－アンチトリプシンと関連する疾患を処置することにおける使用を開示する。
ＷＯ２０２０／０８１２５７Ａ１は、α－１－アンチトリプシンの調節因子としてのピロロ－インダゾリル－プロパン酸化合物を開示する。
ＵＳ２０２０／０３６１９３９Ａ１は、α－１－アンチトリプシンの調節因子としてのピロロ－インダゾリル－プロパン酸化合物をさらに開示する。
ＷＯ２０２０／０８１２５７Ａ１は、α－１－アンチトリプシンの調節因子としてのピロロ－インダゾリル－プロパン酸化合物を開示する。
ＵＳ２０２０／０３６１９３９Ａ１は、α－１－アンチトリプシンの調節因子としてのピロロ－インダゾリル－プロパン酸化合物をさらに開示する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0020】
【特許文献1】米国特許第８，４３６，０１３号明細書
【特許文献2】米国特許出願公開第２０１１／００６５７０７号明細書
【特許文献3】欧州特許出願公開第０５２０３３６号明細書
【特許文献4】国際公開第２０１９／２４３８４１号
【特許文献5】国際公開第２０２０／０８１２５７号
【特許文献6】米国特許出願公開第２０２０／０３６１９３９号明細書
【非特許文献】
【0021】
【非特許文献1】Ｅｌｌｉｏｔｔら（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２０００， ９， １２７４－１２８１）
【非特許文献2】Ｐａｒｆｒｅｙら（Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２００３， ２７８， ３５， ３３０６０－３３０６６）
【非特許文献3】Ｋｎａｕｐｐら（Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．， ２０１０， ３９６， ３７５－３８３）
【非特許文献4】Ｃｈａｎｇら（Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｍｅｄ．， ２００９， １３， ８Ｂ， ２３０４－２３１６）
【非特許文献5】Ｂｕｒｒｏｗｓら（Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ２０００， ９７， ４， １７９６－１８０１）
【非特許文献6】Ｂｏｕｃｈｅｃａｒｅｉｌｈら（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２０１２， ２８７， ４５， ３８２６５－３８２７８）
【非特許文献7】Ｂｅｒｔｈｅｌｉｅｒら（ＰＬＯＳ ＯＮＥ， Ｍａｙ １１， ２０１５）
【非特許文献8】Ｍａｌｌｙａら（Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ２００７， ５０， ２２， ５３５７－５３６３）
【非特許文献9】Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ（ＸＩＩＩｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ， Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ， ２３ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１２
【非特許文献10】Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ（７ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ， １ｓｔ Ａｐｒｉｌ ２０１４）
【非特許文献11】Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ ｖｏｌ ５６， ｎｏ ３３， ２０１７， ９８８１－９８８５
【非特許文献12】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｖｏｌ ２， ｎｏ ６， ２０１３， １５０１－１５０８
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0022】
１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の構造に基づく先行技術調査を、本発明をなした後に行った。その調査によって遡及的に特定された最も近い先行技術分子は、ラセミ化合物、１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（ＣＡＳ登録番号 ８９１３９２－６８－０）であった。この化合物は、Ａｕｒｏｒａ、ＣｈｅｍＤｉｖおよびｔｈｅ ＦＣＨ Ｇｒｏｕｐから市販されているとしてリストにあるが、刊行物は記録されていない。別の近い先行技術分子は、１－（１－トシル－１，２，５，６－テトラヒドロピリジン－３－イル）エタン－１－オン（ＵＳ９０８４７８２Ｂ２の実施例１６）である。その化合物は、血管新生を阻害し、細胞コレステロールレベルを下げると述べられている（しかしＵＳ９０８４７８２Ｂ２ではこの化合物に関して生物学的データは提供されていない）。
【0023】
本発明の第１の局面によれば、ヒト被験体におけるＡ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害を処置することにおける使用のための化合物、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸：
を含む薬学的組成物であって、ここで上記組成物は、約１～６ｍｇ／ｋｇ（すなわち、上記ヒト被験体の質量（ｋｇ単位）あたり約１～６ｍｇの薬学的組成物）の１日用量において上記ヒト被験体に投与される組成物が提供される。
【化1】
【0024】
上記組成物は、約２～５ｍｇ／ｋｇ、または例えば、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ 約３ｍｇ／ｋｇ、約３．５ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約４．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約５．５ｍｇ／ｋｇ、もしくは約６ｍｇ／ｋｇの１日用量において上記ヒト被験体に投与され得る。
【0025】
本発明の他の局面において、上記組成物は、上記ヒト被験体に、異なる間隔において、例えば、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごとまたは６日ごと、または１週間に１回、本明細書で特定される１日用量に等しい用量において投与され得る。
【発明を実施するための形態】
【0026】
以下で詳述されるように、本発明者らは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、驚くべきことに、Ｍ Ａ１ＡＴのまたはＡ１ＡＴのＳｉｉｙａｍａ改変体のインビトロ分泌に対する効果を有しない一方で、Ｚ Ａ１ＡＴのレベルの増大にあたって、インビトロおよびインビボの両方で非常に有効であることを見出した。
【0027】
さらに、実施例７、８および１４に示されるように、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸は、そのエナンチオマーである（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸：
より驚くほど低い用量においてＡＡＴＤを処置するために有効であることを示す薬物動態特性を示す。
【化2】
【0028】
本発明の薬学的組成物中の化合物は、薬学的に受容可能な塩形態にあり得る。
【0029】
用語「薬学的に受容可能な塩（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ ｓａｌｔ）」とは、本発明の化合物の薬学的に受容可能なモノ有機塩または無機塩に言及する。これは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、１－デオキシ－２－（メチルアミノ）－Ｄ－グルシトール、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛、水酸化アルミニウム、水酸化鉄（ＩＩ）もしくは水酸化鉄（ＩＩＩ）、水酸化アンモニウムのような塩基または有機アミン（例えば、Ｎ－メチルグルカミン、コリン、アルギニンなど）に由来するものを含み得る。薬学的に受容可能な塩の他の例に関しては、Ｇｏｕｌｄ（１９８６， Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ ３３： ２０１－２１７）が参照され得る。
【0030】
本発明の薬学的組成物は、薬学的にまたは治療的に受容可能な賦形剤またはキャリアをさらに含み得る。
【0031】
用語「薬学的にまたは治療的に受容可能な賦形剤またはキャリア（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ ｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ ｏｒ ｃａｒｒｉｅｒ）」とは、活性成分の有効性または生物学的活性に干渉せずかつ宿主（これは、ヒトまたは動物のいずれかであり得、これらに投与され得る）に対して毒性でない、固体または液体の充填剤、希釈剤または被包化物質をいう。特定の投与経路に依存して、種々の薬学的に受容可能なキャリア（例えば、当該分野で周知のもの）が使用され得る。非限定的な例としては、糖、デンプン、セルロースおよびその誘導体、麦芽、ゼラチン、タルク、硫酸カルシウム、植物性油、合成油、ポリオール、アルギン酸、リン酸緩衝化塩類溶液、乳化剤、等張性塩類溶液、および発熱物質非含有水が挙げられる。
【0032】
全ての適切な投与様式は、本発明に従って企図される。例えば、上記組成物または医薬の投与は、経口経路、皮下経路、直接的な静脈内経路、ゆっくりとした静脈内注入、連続的な静脈内注入、静脈内もしくは硬膜外患者制御無痛法（ＰＣＡおよびＰＣＥＡ）、筋肉内経路、髄腔内経路、硬膜外経路、大槽内（ｉｎｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌ）経路、腹腔内経路、経皮経路、局所経路、経粘膜経路、口内経路、舌下経路、経粘膜経路、吸入、鼻内経路、関節内（ｉｎｔｒａ－ａｔｒｉｃｕｌａｒ）経路、鼻内経路、直腸経路または眼経路を介するものであり得る。上記組成物または医薬は、別個の投与単位において（例えば、本発明の１日投与レジメンによって要求されるように）製剤化され得、薬学分野において周知の方法のうちのいずれかによって調製され得る。
【0033】
上記組成物は、特に、経口形態で投与され得る。あるいは、上記組成物は、静脈内投与され得る。
【0034】
全ての適切な薬学的投与形態が企図される。医薬の投与は、例えば、経口液剤および懸濁物、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、発泡錠、経粘膜フィルム、坐剤、口内用製品（ｂｕｃｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、または口腔用粘膜保持製品（ｏｒａｌ ｍｕｃｏｒｅｔｅｎｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、局所クリーム剤、軟膏剤、ゲル、フィルムおよびパッチ、経皮パッチ、乱用抑止（ａｂｕｓｅ ｄｅｔｅｒｒｅｎｔ）製剤および乱用抵抗（ａｂｕｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ）製剤、無菌液剤 懸濁物、ならびに非経口使用のためのデポーなどの形態にあり得、即時放出、徐放、遅延された放出、制御された放出、長期放出などとして投与され得る。
【0035】
本発明の別の局面は、ヒト被験体におけるＡ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害の処置のための医薬の製造における（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の使用であって、ここで上記医薬は、約１～６ｍｇ／ｋｇの１日用量（上記で記載されるとおりの用量のものを含む）において上記ヒト被験体に投与される、使用である。
【0036】
本発明はまた、ヒト被験体におけるＡ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられる疾患または障害を処置する方法であって、上記方法は、約１～６ｍｇ／ｋｇの１日用量（上記で記載されるとおりの用量のものを含む）において（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を含む、本明細書で定義されるとおりの薬学的組成物を投与する工程を包含する方法を含む。
【0037】
本発明の関連する局面に従う処置に適した疾患または障害は、Ａ１ＡＴの低血漿レベルによって特徴づけられるもの（例えば、α１－アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ））である。
【0038】
この説明の中での数値範囲の使用は、本発明の範囲内に、上記範囲内の全ての個々の整数ならびに所定の範囲の最も広い範囲内の上限および下限の数字の組み合わせ全て含むことが明確に意図される。
【0039】
本明細書で使用される場合、用語「含む、包含する（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、含むおよびからなるの両方を意味すると読んで理解されるべきである。結論として、本発明が化合物を「活性成分として含む薬学的組成物」に関連する場合、この用語法は、他の活性成分が存在し得る組成物および定義されるとおりの１つの活性成分のみからなる組成物も、両方を網羅することが意図される。
【0040】
別段定義されなければ、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の通常の専門家によって通常理解されるものと同じ意味を有する。同様に、全ての刊行物、特許出願、全ての特許および本明細書で言及される全ての他の参考文献は、（法的に許容される場合には）それらの全体において本明細書に参考として援用される。
【図面の簡単な説明】
【0041】
本発明の特定の非限定的な例は、以下の図面を参照しながらここで記載される。
【0042】
【0043】
【0044】
【0045】
【図4】図４は、ヒトＺ Ａ１ＡＴを発現するマウス（ｈｕＺマウス）におけるＺ Ａ１ＡＴレベルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の効果を示すグラフである。マウスを、ビヒクル、５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇの（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸で１日に２回、１４連続日にわたって強制経口投与で処置した。血液を、－１２日目、－７日目および－５日目に採取し、ヒトＺ Ａ１ＡＴの循環基底レベルを決定するために血漿を調製した。試験の最後の３日間（１２日目、１３日目および１４日目）に収集した血漿サンプルを、基底レベルと比較して、循環ヒトＺ Ａ１ＡＴレベルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸処置の効果を決定するために使用した。ｘ軸は、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の処置用量（ｍｇ／ｋｇ単位）である；ｙ軸は、各処置群に関するベースラインレベルと比較した、ヒトＺ Ａ１ＡＴの平均パーセンテージレベルである。
【0046】
【0047】
【0048】
【実施例】
【0049】
実験
実施例１： （Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、以下の合成手順を使用して調製した。
（Ｓ）－ピペリジン－３－カルボン酸（１ｇ， ７．７ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム（４３４ｍｇ， ７．７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２．１４ｇ， １５．４ｍｍｏｌ）を、水（２０ｍｌ）に添加し、撹拌した。２－（トリフルオロメチル）ベンゼンスルホニルクロリド（１．８９ｇ， ７．７ｍｍｏｌ）を添加し、その反応物を、室温において３時間撹拌した。その反応物を０℃へと冷却し、２Ｍ 塩酸で酸性化して、白色沈殿を得た。この沈殿を乾燥させ、ｎ－ペンタンで粉砕して、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を得た。
実施例１： （Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、以下の合成手順を使用して調製した。
【化3】
【0050】
Ｔｌｃ Ｒｆ ０．３ ヘキサン中７０％ 酢酸エチル。
m/z: 337.98 (計算値338.03)
1H NMR (400 MHz, d6 DMSO) δ 12.33 (1H, s), 8.04 (2H, m), 7.90 (2H, m), 3.69 (1H, dd), 3.50 (1H, dd), 2.93 (1H, m), 2.81 (1H, m), 1.91 (1H, m), 1.72 (1H, m), 1.50 (2H, m).
m/z: 337.98 (計算値338.03)
1H NMR (400 MHz, d6 DMSO) δ 12.33 (1H, s), 8.04 (2H, m), 7.90 (2H, m), 3.69 (1H, dd), 3.50 (1H, dd), 2.93 (1H, m), 2.81 (1H, m), 1.91 (1H, m), 1.72 (1H, m), 1.50 (2H, m).
【0051】
実施例２： （Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸
（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸と同じように、しかし（Ｒ）－ピペリジン－３－カルボン酸を使用して調製した。
Ｔｌｃ Ｒｆ ０．３ ヘキサン中７０％ 酢酸エチル
m/z: 338.03 (計算値338.03)
1H NMR (400 MHz, d6 DMSO) δ 12.53 (1H, s), 8.04 (2H, m), 7.90 (2H, m), 3.69 (1H, dd), 3.49 (1H, dd), 2.93 (1H, m), 2.81 (1H, m), 1.90 (1H, m), 1.72 (1H, m), 1.49 (2H, m).
（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸と同じように、しかし（Ｒ）－ピペリジン－３－カルボン酸を使用して調製した。
Ｔｌｃ Ｒｆ ０．３ ヘキサン中７０％ 酢酸エチル
m/z: 338.03 (計算値338.03)
1H NMR (400 MHz, d6 DMSO) δ 12.53 (1H, s), 8.04 (2H, m), 7.90 (2H, m), 3.69 (1H, dd), 3.49 (1H, dd), 2.93 (1H, m), 2.81 (1H, m), 1.90 (1H, m), 1.72 (1H, m), 1.49 (2H, m).
【0052】
実施例３： ＨＥＫ－Ｚ細胞を使用するＡ１ＡＴ細胞分泌アッセイにおける（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0053】
方法
ＨＥＫ－Ｚ細胞（ヒトＺ Ａ１ＡＴ遺伝子で安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、四連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ｓｕｂｅｒａｎｉｌｏｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ ａｃｉｄ）（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０ｎＭ、３３ｎＭ、１００ｎＭおよび３３３ｎＭの濃度で）を含む無血清培地を使用する処理で、培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
ＨＥＫ－Ｚ細胞（ヒトＺ Ａ１ＡＴ遺伝子で安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、四連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ｓｕｂｅｒａｎｉｌｏｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ ａｃｉｄ）（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０ｎＭ、３３ｎＭ、１００ｎＭおよび３３３ｎＭの濃度で）を含む無血清培地を使用する処理で、培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
【0054】
簡潔には、９６ウェルプレートを、ヒトＡ１ＡＴ捕捉抗体で一晩、室温においてコーティングした（ストックから１：１８０希釈、１００μｌ 最終容積／ウェル）。次いで、その捕捉抗体を除去し、ウェルを３００μｌ 洗浄緩衝液（ＰＢＳ中０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）で３回洗浄し、次いで、２００μｌ 試薬希釈物（ＰＢＳ中２５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）を、各ウェル中で１時間、室温でインキュベートした。次いで、希釈したサンプル、標準物質（１２５ｐｇ／ｍｌ、２５０ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ、１０００ｐｇ／ｍｌ、２０００ｐｇ／ｍｌ、４０００ｐｇ／ｍｌおよび８０００ｐｇ／ｍｌのＡ１ＡＴ）またはブランクを、各ウェルに二連で添加し、そのプレートを、プレートシーラーで覆い、室温で２時間放置した。サンプルインキュベーション工程の最後に、サンプルを除去し、全てのウェルを先のように洗浄し、１００μｌ 検出抗体（ストックから１：１８０希釈）を各ウェルに添加し、さらに２時間、室温でインキュベートした。検出抗体とのインキュベーションの後、上清を除去し、ウェルを先のように洗浄し、１００μｌ ストレプトアビジン－ＨＲＰ溶液（ストックから１：２００希釈）を各ウェルに２０分間、遮光して添加した。その後、５０μｌ 停止溶液（２Ｍ Ｈ２ＳＯ４）を添加し、各ウェルの光学密度（ＯＤ）を、マイクロプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍ ブランクを各ウェルから差し引いて４５０ｎｍで読み取った。４パラメーターロジスティック曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７を使用して構築し、Ａ１ＡＴ濃度を、標準曲線からの内挿および適切な希釈率を乗算することによって、各サンプルで決定した。
【0055】
結果
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
【0056】
図１中のデータは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、用量依存性様式においてヒトＺ Ａ１ＡＴの分泌を刺激することを示す。
【0057】
図５中のデータは、（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、用量依存性様式においてヒトＺ Ａ１ＡＴの分泌を刺激することを示す。
【0058】
実施例４： ＨＥＫ－Ｍ細胞を使用するＡ１ＡＴ細胞分泌アッセイにおける（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0059】
方法
ＨＥＫ－Ｍ細胞（Ｍ Ａ１ＡＴで安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、六連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０μＭで）または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０μＭで）のいずれかを含む無血清培地で培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
ＨＥＫ－Ｍ細胞（Ｍ Ａ１ＡＴで安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、六連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０μＭで）または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１０μＭで）のいずれかを含む無血清培地で培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
【0060】
簡潔には、９６ウェルプレートを、ヒトＡ１ＡＴ捕捉抗体で一晩、室温においてコーティングした（ストックから１：１８０希釈、１００μｌ 最終容積／ウェル）。次いで、その捕捉抗体を除去し、ウェルを３００μｌ 洗浄緩衝液（ＰＢＳ中０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）で３回洗浄し、次いで、２００μｌ 試薬希釈物（ＰＢＳ中２５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）を、各ウェル中で１時間、室温でインキュベートした。次いで、希釈したサンプル、標準物質（１２５ｐｇ／ｍｌ、２５０ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ、１０００ｐｇ／ｍｌ、２０００ｐｇ／ｍｌ、４０００ｐｇ／ｍｌおよび８０００ｐｇ／ｍｌのＡ１ＡＴ）またはブランクを、各ウェルに二連で添加し、そのプレートを、プレートシーラーで覆い、室温で２時間放置した。サンプルインキュベーション工程の最後に、サンプルを除去し、全てのウェルを先のように洗浄し、１００μｌ 検出抗体（ストックから１：１８０希釈）を各ウェルに添加し、さらに２時間、室温でインキュベートした。検出抗体とのインキュベーションの後、上清を除去し、ウェルを先のように洗浄し、１００μｌ ストレプトアビジン－ＨＲＰ溶液（ストックから１：２００希釈）を各ウェルに２０分間、遮光して添加した。その後、５０μｌ 停止溶液（２Ｍ Ｈ２ＳＯ４）を添加し、各ウェルの光学密度（ＯＤ）を、マイクロプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍ ブランクを各ウェルから差し引いて４５０ｎｍで読み取った。４パラメーターロジスティック曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７を使用して構築し、Ａ１ＡＴ濃度を、標準曲線からの内挿および適切な希釈率を乗算することによって、各サンプルで決定した。
【0061】
結果
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
【0062】
図２中のデータは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、１０μＭにおいてヒトＭ Ａ１ＡＴの分泌を刺激しないことを示す。対照的に、陽性コントロールである１０μＭ ＳＡＨＡは、Ｍ Ａ１ＡＴ分泌の増大を刺激する。
【0063】
図６中のデータは、（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、１０μＭにおいてヒトＭ Ａ１ＡＴの分泌を刺激しないことを示す。対照的に、陽性コントロールである１０μＭ ＳＡＨＡは、Ｍ Ａ１ＡＴ分泌の増大を刺激する。
【0064】
実施例５： ＨＥＫ－Ｓｉｉｙａｍａ細胞を使用するＡ１ＡＴ細胞分泌アッセイにおける（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0065】
希なＳｉｉｙａｍａ変異（Ｓｅｒ ５３からＰｈｅへ， 成熟Ａ１ＡＴ番号付けによる）を、ＡＡＴＤを有する日本人男性において特定した（Ｓｅｙａｍａら（Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ （１９９１） ２６６：１２６２７－３２）。Ｓｅｒ５３は、１つの保存されたセルピン残基であり、Ａ１ＡＴ分子の内部コアの組織化にとって重要であると考えられる。タンパク質の保存された骨格上での荷電されていない極性アミノ酸から大きな非極性アミノ酸への変化は、折りたたみおよびＳｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴの細胞内プロセシングに影響を及ぼす。
【0066】
方法
ＨＥＫ－Ｓｉｉｙａｍａ細胞（Ｓｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴ遺伝子で安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、八連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１μＭまたは１０μＭで）または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１μＭまたは１０μＭで）を含む無血清培地で培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
ＨＥＫ－Ｓｉｉｙａｍａ細胞（Ｓｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴ遺伝子で安定してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞株）を、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気中、９６ウェルプレート（３．０×１０５ 細胞／ｍｌと２００μｌの培地／ウェル）へと、一晩、３７℃においてプレートした。インキュベーション後、細胞を、２００μｌ 無血清培地で３回洗浄し、八連で４８時間、３７℃ インキュベーター中、最終容積２００μｌにおいて、ビヒクル、１０μＭ スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１μＭまたは１０μＭで）または（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１μＭまたは１０μＭで）を含む無血清培地で培地を交換した。インキュベーション工程の最後に、その上清をウェルから取り出し、１０００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってヒトＡ１ＡＴレベルをアッセイした。
【0067】
簡潔には、９６ウェルプレートを、ヒトＡ１ＡＴ捕捉抗体で一晩、室温においてコーティングした（ストックから１：１８０希釈、１００μｌ 最終容積／ウェル）。次いで、その捕捉抗体を除去し、ウェルを３００μｌ 洗浄緩衝液（ＰＢＳ中０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）で３回洗浄し、次いで、２００μｌ 試薬希釈物（ＰＢＳ中２５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）を、各ウェル中で１時間、室温でインキュベートした。次いで、希釈したサンプル、標準物質（１２５ｐｇ／ｍｌ、２５０ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ、１０００ｐｇ／ｍｌ、２０００ｐｇ／ｍｌ、４０００ｐｇ／ｍｌおよび８０００ｐｇ／ｍｌのＡ１ＡＴ）またはブランクを、各ウェルに二連で添加し、そのプレートを、プレートシーラーで覆い、室温で２時間放置した。サンプルインキュベーション工程の最後に、サンプルを除去し、全てのウェルを先のように洗浄し、１００μｌ 検出抗体（ストックから１：１８０希釈）を各ウェルに添加し、さらに２時間、室温でインキュベートした。検出抗体とのインキュベーションの後、上清を除去し、ウェルを先のように洗浄し、１００μｌ ストレプトアビジン－ＨＲＰ溶液（ストックから１：２００希釈）を各ウェルに２０分間、遮光して添加した。その後、５０μｌ 停止溶液（２Ｍ Ｈ２ＳＯ４）を添加し、各ウェルの光学密度（ＯＤ）を、マイクロプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍ ブランクを各ウェルから差し引いて４５０ｎｍで読み取った。４パラメーターロジスティック曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７を使用して構築し、Ａ１ＡＴ濃度を、標準曲線からの内挿および適切な希釈率を乗算することによって、各サンプルで決定した。
【0068】
結果
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
トランスフェクトしたＨＥＫ－ＥＢＮＡ細胞から培地へと分泌されたヒトＡ１ＡＴの量を、ＥＬＩＳＡによって測定した。１０μＭのＳＡＨＡを、全てのインビトロＡ１ＡＴ分泌実験に関して陽性コントロールとして使用した。
【0069】
図３中のデータは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、１μＭまたは１０μＭにおいてヒトＳｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴの分泌を刺激しないことを示す。対照的に、陽性コントロールである１０μＭ ＳＡＨＡは、Ｓｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴ分泌の増大を刺激する。
【0070】
図７中のデータは、（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、ＥＬＩＳＡによって測定されるように、１μＭまたは１０μＭにおいてヒトＳｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴの分泌を刺激しないことを示す。対照的に、陽性コントロールである１０μＭ ＳＡＨＡは、Ｓｉｉｙａｍａ Ａ１ＡＴ分泌の増大を刺激する。
【0071】
実施例６： ｈｕＺマウスにおける（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
ｈｕＺマウス（ＰｉＺＺマウスともいわれる）は、2つの別個のグループ（Ｄｙｃａｉｃｏら（Ｓｃｉｅｎｃｅ （１９８８） ２４２：１４０９－１２）およびＣａｒｌｓｏｎら（Ｊ． Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ （１９８９） ８３：１１８３－９０））によって開発された、ヒトＡ１ＡＴ遺伝子のＺ改変体の多数のコピーを含むトランスジェニックマウス系統である。ＨｕＺマウスは、Ｃ５７Ｂｌ／６がバックグラウンドであり、ヒトＺ Ａ１ＡＴタンパク質を肝臓組織中に発現する。この試験において使用されるマウスは、Ｃａｒｌｓｏｎおよび同僚らの子孫に由来する（トランスジェニック系統Ｚ１１．０３）。ＨｕＺマウスをツールとして使用して、血漿中のＺ Ａ１ＡＴの循環レベルの増大に対する化合物の効果、または肝臓中のＺ Ａ１ＡＴポリマーの蓄積および関連の肝臓病理に対する化合物の効果のいずれかを評価する。
ｈｕＺマウス（ＰｉＺＺマウスともいわれる）は、2つの別個のグループ（Ｄｙｃａｉｃｏら（Ｓｃｉｅｎｃｅ （１９８８） ２４２：１４０９－１２）およびＣａｒｌｓｏｎら（Ｊ． Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ （１９８９） ８３：１１８３－９０））によって開発された、ヒトＡ１ＡＴ遺伝子のＺ改変体の多数のコピーを含むトランスジェニックマウス系統である。ＨｕＺマウスは、Ｃ５７Ｂｌ／６がバックグラウンドであり、ヒトＺ Ａ１ＡＴタンパク質を肝臓組織中に発現する。この試験において使用されるマウスは、Ｃａｒｌｓｏｎおよび同僚らの子孫に由来する（トランスジェニック系統Ｚ１１．０３）。ＨｕＺマウスをツールとして使用して、血漿中のＺ Ａ１ＡＴの循環レベルの増大に対する化合物の効果、または肝臓中のＺ Ａ１ＡＴポリマーの蓄積および関連の肝臓病理に対する化合物の効果のいずれかを評価する。
【0072】
２００～６００μｇ／ｍｌの間の基底ヒトＡ１ＡＴ血漿レベルを有するＨｕＺマウス（ｎ＝４／群； 雄性または雌性）を、ビヒクル、または５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇもしくは５０ｍｇ／ｋｇの（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸のいずれかで、１日に２回、１４連続日にわたって強制経口投与によって処置した。マウスは、飼料（標準的なマウス飼料、ＳＡＦＥ飼料）および水に自由にアクセスできた。試験１４日目に、各マウスに、最後の手順の１時間前に投与した。血液を、投与前の－１２日目、－７日目および－５日目、および投与している１２日目、１３日目および１４日目に各マウスの尾静脈から採取した。ＥＤＴＡを含むマイクロベットの中に血液を採取し、血漿を、２７００×ｇで、４℃において１０分間遠心分離することによって調製した。血漿をアリコートに分け、－８０℃で生体分析のために貯蔵した。投与前の－１２日目、－７日目および－５日目の血漿サンプルを使用して、各マウスに関するヒトＺ Ａ１ＡＴの平均基底レベルを決定した。試験の投与日の最後の３日間（１２日目、１３日目および１４日目）に収集した血漿サンプルを、ヒトＺ Ａ１ＡＴレベルを測定し、各マウスに関して基底レベルと比較することによって、ヒトＺ Ａ１ＡＴ分泌に対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の効果を決定するために使用した。マウス血漿サンプル中のヒトＡ１ＡＴレベルを、ＥＬＩＳＡ（Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｐｉｎ Ａ１／α１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｕｏ ｓｅｔ ＥＬＩＳＡ， Ｒ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ＤＹ１２６８）によって、製造業者の説明書に従ってアッセイした。
【0073】
簡潔には、９６ウェルプレートを、ヒトＡ１ＡＴ捕捉抗体で一晩、室温においてコーティングした（ストックから１：１８０希釈、１００μｌ 最終容積／ウェル）。次いで、その捕捉抗体を除去し、ウェルを３００μｌ 洗浄緩衝液（ＰＢＳ中０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）で３回洗浄し、次いで、２００μｌ 試薬希釈物（ＰＢＳ中２５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標） ２０）を、各ウェル中で１時間、室温でインキュベートした。次いで、希釈したサンプル、標準物質（１２５ｐｇ／ｍｌ、２５０ｐｇ／ｍｌ、５００ｐｇ／ｍｌ、１０００ｐｇ／ｍｌ、２０００ｐｇ／ｍｌ、４０００ｐｇ／ｍｌおよび８０００ｐｇ／ｍｌのＡ１ＡＴ）またはブランクを、各ウェルに二連で添加し、そのプレートを、プレートシーラーで覆い、室温で２時間放置した。サンプルインキュベーション工程の最後に、サンプルを除去し、全てのウェルを先のように洗浄し、１００μｌ 検出抗体（ストックから１：１８０希釈）を各ウェルに添加し、さらに２時間、室温でインキュベートした。検出抗体とのインキュベーションの後、上清を除去し、ウェルを先のように洗浄し、１００μｌ ストレプトアビジン－ＨＲＰ溶液（ストックから１：２００希釈）を各ウェルに２０分間、遮光して添加した。その後、５０μｌ 停止溶液（２Ｍ Ｈ２ＳＯ４）を添加し、各ウェルの光学密度（ＯＤ）を、マイクロプレートリーダーを使用して、５７０ｎｍ ブランクを各ウェルから差し引いて４５０ｎｍで読み取った。４パラメーターロジスティック曲線を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７を使用して構築し、Ａ１ＡＴ濃度を、標準曲線からの内挿および適切な希釈率を乗算することによって、各サンプルで決定した。
【0074】
結果
ヒトＺ Ａ１ＡＴの循環レベルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の効果を、ｈｕＺマウスモデルにおいて評価した。マウスを、１４連続日にわたって、５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇまたは５０ｍｇ／ｋｇで１日２回の強制経口投与によって処置した。
ヒトＺ Ａ１ＡＴの循環レベルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の効果を、ｈｕＺマウスモデルにおいて評価した。マウスを、１４連続日にわたって、５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇまたは５０ｍｇ／ｋｇで１日２回の強制経口投与によって処置した。
【0075】
図４中のデータは、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸が、用量依存性様式において、ｈｕＺマウスでのベースラインレベルと比較して、ヒトＺ Ａ１ＡＴの分泌を刺激することを示す。
【0076】
実施例７： マウスにおける（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の薬物動態
【0077】
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、雄性Ｃ５７ＢＩ／６マウスに、静脈内に（２ｍｇ／ｋｇ）または強制経口投与（１０ｍｇ／ｋｇ）によって投与した。水で希釈した全血を、投与後２４時間までの時間経過にわたってこれらの投与した動物から調製して、薬物の血中濃度を、ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって測定することを可能にした。測定した薬物レベルによって、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸に関して以下のパラメーターの計算が可能になった。
【0078】
血中半減期（ｔ１／２）＝１．２時間
実測クリアランス＝４．７ｍｌ／分／ｋｇ
分布容積（Ｖｚ）＝０．４９ ｌ／ｋｇ
経口Ｃｍａｘ＝３３５２０ｎｇ／ｍｌ
ＡＵＣａｌｌ＝５４２３４ｎｇ．ｈ／ｍｌ
ＡＵＣＩＮＦ＝５４３７２ｎｇ．ｈ／ｍｌ
実測クリアランス＝４．７ｍｌ／分／ｋｇ
分布容積（Ｖｚ）＝０．４９ ｌ／ｋｇ
経口Ｃｍａｘ＝３３５２０ｎｇ／ｍｌ
ＡＵＣａｌｌ＝５４２３４ｎｇ．ｈ／ｍｌ
ＡＵＣＩＮＦ＝５４３７２ｎｇ．ｈ／ｍｌ
【0079】
実施例８： マウスにおける（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の薬物動態
【0080】
（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、雄性Ｃ５７ＢＩ／６マウスに、静脈内に（２ｍｇ／ｋｇ）または強制経口投与（１０ｍｇ／ｋｇ）によって投与した。水で希釈した全血を、投与後２４時間までの時間経過にわたってこれらの投与した動物から調製して、薬物の血中液濃度を、ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって測定することを可能にした。測定した薬物レベルによって、（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸に関して以下のパラメーターの計算が可能になった。
【0081】
血中半減期（ｔ１／２）＝０．５４時間
実測クリアランス＝８．２ｍｌ／分／ｋｇ
分布容積（Ｖｚ）＝０．３８ ｌ／ｋｇ
経口Ｃｍａｘ＝１５５９９ｎｇ／ｍｌ
ＡＵＣａｌｌ＝２４１５８ｎｇ．ｈ／ｍｌ
ＡＵＣＩＮＦ＝２４７３６ｎｇ．ｈ／ｍｌ
実測クリアランス＝８．２ｍｌ／分／ｋｇ
分布容積（Ｖｚ）＝０．３８ ｌ／ｋｇ
経口Ｃｍａｘ＝１５５９９ｎｇ／ｍｌ
ＡＵＣａｌｌ＝２４１５８ｎｇ．ｈ／ｍｌ
ＡＵＣＩＮＦ＝２４７３６ｎｇ．ｈ／ｍｌ
【0082】
実施例９： （Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸のマウスおよびヒト肝細胞安定性
【0083】
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の固有クリアランス（ＣＬｉｎｔ）および半減期を、凍結保存された雄性Ｃ５７ＢＬ６マウス肝細胞の肝細胞懸濁物または凍結保存されたヒト肝細胞の混合肝細胞懸濁物中で測定した。簡潔には、上記化合物を、肝細胞懸濁物とともに３７℃で一定の時間経過にわたってインキュベートし、各時点で残っている化合物を、質量分析計（ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）によって評価した。両方の化合物に関して、マウス肝細胞におけるＣＬｉｎｔは、＜３μｌ／分／１０６ 細胞であり、ヒト肝細胞では、＜３μｌ／分／１０６ 細胞であった。両方の化合物に関して、マウス肝細胞における半減期は、＞４６０分であり、ヒト肝細胞では、＞４６０分であった。
【0084】
実施例１０： （Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の血漿タンパク質結合
【0085】
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸がヒトまたはマウス血液内のアルブミンおよびα－１酸性糖タンパク質のような血漿タンパク質に結合している程度を、迅速平衡透析法（ｒａｐｉｄ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ ｄｉａｌｙｓｉｓ）によって決定した。化合物を、５μＭで４時間、３７℃においてインキュベートした。（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸に関しては、マウス血漿中で結合している血漿タンパク質は、７８．１％であり、ヒト血漿中では、９１．５％であった。（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸に関しては、マウス血漿中で結合している血漿タンパク質は、８３．８％であり、ヒト血漿中では、９０．５％であった。
【0086】
実施例１１： シトクロムＰ４５０に対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0087】
特定のプローブ基質と組み合わせてＥ．ｃｏｌｉ ＣＹＰＥＸ膜を使用して、（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸による個々のＣＹＰｓの阻害を評価した（Ｗｅａｖｅｒら， ２００３， Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ ３１：７， ９５５－９６６を参照のこと）。
【0088】
【表1】
【0089】
実施例１２： ＨＥＲＧチャネルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0090】
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸を、Ｐａｔｃｈｌｉｎｅｒ自動パッチクランプを使用して、心臓カリウム（ｈＥＲＧ）チャネルの阻害に関して試験した。６点濃度応答曲線を、１００μＭの最大最終試験濃度からの半対数系列希釈（ｈａｌｆ－ｌｏｇ ｓｅｒｉａｌ ｄｉｌｕｔｉｏｎ）を使用して生成した。ＩＣ５０値を、濃度応答データの４パラメーターロジスティック適合から得た。（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸は、１００μＭにおいて７％ 阻害でＩＣ５０＞１００μＭを有することを示した。参照化合物値は、文献中に示されたものと一致した（Ｅｌｋｉｎｓら， ２０１３ Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘ．Ｍｅｔｈ． ６８：１１－１２２）。
【0091】
実施例１３： 酵素、イオンチャネル、およびレセプターのパネルに対する（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の活性
【0092】
（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸および（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸は、１０μＭにおいてＤｉｓｃｏｖｅｒＸ Ｓａｆｅｔｙ４７ＴＭパネルに対して試験した場合に、非常にきれいなオフターゲットプロフィールを示した。いずれの化合物についても、この濃度で２５％超阻害した標的はなかった。
【0093】
実施例１４： ヒト等価用量の決定
【0094】
現在まで有効性試験に使用したマウスでの（Ｓ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸の最高用量は、５０ｍｇ／ｋｇである（データは示さず）。これを、ＵＳ ＦＤＡ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ＣＤＥＲ） 「Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ： Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｍａｘｉｍｕｍ Ｓａｆｅ Ｓｔａｒｔｉｎｇ Ｄｏｓｅ ｉｎ Ｉｎｉｔｉａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｉｎ Ａｄｕｌｔ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ」（２００５公開 － ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｍｅｄｉａ／７２３０９／ｄｏｗｎｌｏａｄを参照のこと）の表１を使用してヒト等価用量に変換すると、４ｍｇ／ｋｇというヒト等価用量（ＨＥＤ）が示される。
【0095】
比較によれば、実施例７および８に示されるように、エナンチオマーである（Ｒ）－１－（（２－（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ピペリジン－３－カルボン酸は、マウスにおいて２．２倍短いｔ１／２。および２．２倍低いＡＵＣを有する。臨床的有効性が、所定の濃度を上回ってＡＵＣまたは時間のいずれかによって駆動されることを期待して、本発明者らは、Ｒエナンチオマーの等価な有効性が、Ｓエナンチオマーと比較して、２．２倍高い用量または８．８ｍｇ／ｋｇにあると結論づける。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【国際調査報告】