特表 2024-523555 ベンチトップ型バイオリアクター用マクロスパージャー

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-06-28

(54)【発明の名称】ベンチトップ型バイオリアクター用マクロスパージャー

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/04 20060101AFI20240621BHJP

   C12M 1/00 20060101ALI20240621BHJP

【ＦＩ】

C12M1/04

C12M1/00 D

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023579533

(86)(22)【出願日】2022-06-14

(85)【翻訳文提出日】2024-02-21

(86)【国際出願番号】 US2022033353

(87)【国際公開番号】W WO2023278137

(87)【国際公開日】2023-01-05

(31)【優先権主張番号】63/216,761

(32)【優先日】2021-06-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】397068274

【氏名又は名称】コーニング インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100073184

【弁理士】

【氏名又は名称】柳田 征史

(74)【代理人】

【識別番号】100175042

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 秀明

(74)【代理人】

【識別番号】100224775

【弁理士】

【氏名又は名称】南 毅

(72)【発明者】

【氏名】ハシェミ，ナシム

【テーマコード（参考）】

4B029

【Ｆターム（参考）】

4B029AA02

4B029AA27

4B029BB01

4B029CC01

4B029DB11

4B029GA02

4B029GA08

4B029GB07

(57)【要約】

ベンチトップ型バイオリアクター（３７０）用マクロスパージャー（３００）は、管（３１０）と、基部（３３０）とを含む。基部は、管およびベンチトップ型バイオリアクターの内部と気体連通した複数のスパージング部（３２０）を含む。各スパージング部は、側壁部によって接続された上面および底面によって形成された内部コンパートメントを有する円筒体を含み、上面と底面は略楕円形状である。ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流バイオリアクターでありうる。マクロスパージャーおよびベンチトップ型バイオリアクターを含む関連システムを、連続細胞培養を行うために用いうる。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ベンチトップ型バイオリアクター用マクロスパージャーにおいて、
管と、
前記管および前記ベンチトップ型バイオリアクターの内部と気体連通した複数のスパージング部を含む基部と
を含み、
各前記スパージング部は、側壁部によって接続された上面および底面によって形成された内部コンパートメントを有する円筒体を含むものであり、
前記上面と前記底面は略楕円形状であるマクロスパージャー。

【請求項2】

前記上面および前記底面は、略平坦である、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項3】

前記上面は、複数の開口部を含み、前記コンパートメントは、前記ベンチトップ型バイオリアクターの前記内部と該複数の開口部を通して気体連通するものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項4】

前記複数の開口部の各開口部は、前記上面で均一に離間したものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項5】

各前記スパージング部の前記上面および前記底面は、前記ベンチトップ型バイオリアクターの底部と平行に構成されたものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項6】

前記管は、前記スパージング部および気体供給源と気体連通したものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項7】

前記管は、略垂直の第１の部分、および、略水平の第２の部分を含むものであり、
前記第２の部分は、前記基部に接続するものであり、
前記基部は、更に、接続管を含むものであり、
前記接続管は、２つのスパージング部を前記第２の部分に接続して、該第２の部分と交わるものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項8】

前記第２の部分は、スパージング部に接続するものである、請求項７に記載のマクロスパージャー。

【請求項9】

前記管は、更に、略垂直の第３の部分を含むものであり、
前記第１の部分は、前記第２の部分の第１の端部に接続されて、該第２の部分の他方の端部は、前記第３の部分に接続されたものである、請求項７に記載のマクロスパージャー。

【請求項10】

各前記スパージング部は、相互交換可能である、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項11】

前記スパージング部は、非浸出性かつ非抽出性材料で形成されたものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項12】

前記ベンチトップ型バイオリアクターは、５００ｍＬ容量のベンチトップ型バイオリアクターであり、
各前記スパージング部の高さは、約３ｍｍから約５ｍｍの範囲であり、
各前記スパージング部の幅は、約１０ｍｍから約２０ｍｍの範囲であり、
各前記スパージング部の長さは、約２０ｍｍから約３０ｍｍの範囲である、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項13】

前記ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流スピナーフラスコであり、
前記マクロスパージャーの前記基部は、前記バイオリアクターの前記底部上に静止したものであり、
前記マクロスパージャーの前記基部は、前記バイオリアクターに配置された混合部の下端部の下方の空間に静止したものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項14】

前記マクロスパージャーの前記管は、前記ベンチトップ型バイオリアクターの開口部またはポートを通って延伸するものであり、
前記開口部またはポートは、前記ベンチトップ型バイオリアクターの蓋部に配置されたものであり、
前記管は、前記バイオリアクターの内壁に沿うように構成されたものである、請求項１に記載のマクロスパージャー。

【請求項15】

前記混合部は、前記バイオリアクターの外側に位置する磁気攪拌プレートによって回転自在である、請求項１３に記載のマクロスパージャー。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本願は、米国特許法第１１９条の下、２０２１年６月３０日出願の米国仮特許出願第６３／２１６，７６１号の優先権の利益を主張し、その内容は依拠され、全体として参照により本明細書に組み込まれる。

【技術分野】

【0002】

本開示は、概して、バイオプロセス分野に関し、特に、ベンチトップ型バイオリアクターで用いられるマクロスパージャーに関する。

【背景技術】

【0003】

バイオプロセス手順は、哺乳類、昆虫または微生物細胞でありうる培養細胞からの関心治療製品の製造に関連する上流側および下流側処理を含む。バイオ製薬産業におけるバイオプロセス手順は、製品コストの削減、製造速度の向上、および、製造柔軟性の改良のために変化している。バイオ製薬産業の変化の一例は、シードトレイン強化のために灌流系ベンチトップ型バイオリアクターの使用など、次世代アプローチの使用である。いくつかの強化された細胞培養処理は、バイオ製薬品をベンチトップスケールバイオリアクターで、大容量の製造速度で製造する。しかしながら、そのような技術は、特に、製造に剪断を受け易い哺乳類細胞の使用を必要としうる場合に設計が困難である。

【0004】

更に、ベンチトップ型バイオリアクターの中の細胞密度が増加し続けると、より高い物質移動速度、および、より効率的な混合の必要性が高まる。したがって、ベンチトップ型攪拌バイオリアクターは、シードトレイン強化などの利用例について、より均一な流れ、および、より高い物質移動速度を提供しうる。そのようなシステムにおいて、気体‐液体物質移動は、表面上（頭隙）方法、または、表面下（スパージング）法を通して実現されうる。いくつかの利用例において、頭隙を通したエアレーションが、気体－液体物質移動の要求を満たすのに十分である。しかしながら、数値流体力学（ＣＦＤ）の結果および公表結果は、頭隙からの酸素移動は、有意義な細胞密度には不十分であることを示している。

【0005】

ベンチトップ型攪拌バイオリアクターにおいて、酸素移動は、様々な変数、特に、スパージャーの構成および表面上気体速度の影響を受けうる。剪断を受け易い哺乳類細胞は、穏やかなエアレーションを必要とする。穏やかなエアレーションが必要なことから、強化処理のためのスパージャーは、幾何学形状、孔直径、孔の個数、および、気体流入速度（ＧＥＶ）を要因として考慮して設計しなくてはならない。スパージャーの種類の選択基準も、望ましい性能および顧客の要求に応じて異なりうる。市販のベンチトップ型バイオリアクターには、パイプスパージャー、ドリル孔スパージャー、および、マイクロスパージャーを含む異なるエアレーション構成が備えられている。

【0006】

シードトレイン強化に使用するために、市販のベンチトップ型バイオリアクターは、典型的には、酸素の送出に効率的な（例えば、約０．５ｍｍ以下の直径を有する）マイクロサイズの気泡を生成するマイクロスパージャーに依存するものである。しかしながら、マイクロスパージャーは、多数の欠点がある。例えば、５００ｍＬのスピナーフラスコについてのＣＦＤの結果は、ドリル孔スパージャーで促進されたバイオリアクターと比べて、マイクロスパージャーによって促進されたバイオリアクターは、より低い物質移動速度を表すことが示された。ＣＦＤの結果は、マイクロスパージャーによって生成された、より多い数の気泡が存在することによるものであり、それは、ベンチトップ型バイオリアクターの小さい作動体積で気泡の凝集を促進して、物質移動速度に負の影響を与える。他の問題は、マイクロスパージャーから放出された気体流入速度の制御が困難であることを含み、それは、バイオリアクターにおける細胞死滅の大きな理由でありうる。更に、マイクロスパージャーは、液体表面の上での過剰泡沫形成の影響も受けて、それにより、ベンチトップ型バイオリアクターにおける生産性を低下させる。

【0007】

更に、ベンチトップ型バイオリアクターで用いられる市販のマクロスパージャーは、典型的には、気体流をバイオリアクターの中に向ける１つまたは多数の開口部を有する、ある長さのパイプまたは管からなる。開口部の直径は、ミリメートルオーダーであり、その結果、マイクロスパージャーを用いた場合より大きい気泡が形成される。しかしながら、気泡サイズが大きくなると、気体－液体界面の表面積が減少し、それは、物質移動速度の低下につながり、高い細胞密度の培養において望ましくない。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

したがって、ベンチトップ型バイオリアクターについて、最小の泡沫気泡および剪断で、高い物質移動速度を提供するエアレーション装置の必要性がある。

【課題を解決するための手段】

【0009】

態様において、本開示の実施形態は、ベンチトップ型バイオリアクターで用いられるマクロスパージャーに関する。本明細書に記載の実施形態によるマクロスパージャーは、典型的にベンチトップ型バイオリアクターで用いられる市販のスパージャーと比べて、より少ない剪断破損および泡沫気泡形成で、より高い物質移動速度を可能にする。本開示の実施形態によるマクロスパージャーは、独立に制御自在なエアレーション用の複数のスパージング部を含む。各スパージング部について、例えば、気体流量、孔の個数、および、孔のサイズを独立に制御自在である。

【0010】

１つの態様において、本開示の実施形態は、管と基部とを含むベンチトップ型バイオリアクター用マクロスパージャーに関する。基部は、管およびベンチトップ型バイオリアクターの内部と気体連通した複数のスパージング部を含む。各スパージング部は、上面および底面によって形成された内部コンパートメントを有する円筒体を含み、上面と底面は、側壁部によって接続され、上面と底面は略楕円形状である。

【0011】

いくつかの実施形態において、上面および底面は、略平坦である。いくつかの実施形態において、上面は、複数の開口部を含み、コンパートメントは、ベンチトップ型バイオリアクターの内部と複数の開口部を通して気体連通するものである。いくつかの実施形態において、複数の開口部の各開口部は、上面で均一に離間、または、均一に配置されたものである。

【0012】

いくつかの実施形態において、各スパージング部の上面および底面は、ベンチトップ型バイオリアクターの底部と平行に構成されたものである。

【0013】

いくつかの実施形態において、管は、スパージング部および気体供給源と気体連通したものである。

【0014】

いくつかの実施形態において、管は、可撓性または曲げ性の中空管である。

【0015】

いくつかの実施形態において、管は、ガラスまたはポリマー材料で形成されたものである。

【0016】

いくつかの実施形態において、管は、略垂直の第１の部分、および、略水平の第２の部分を含むものである。いくつかの実施形態において、第２の部分は、基部に接続するものである。

【0017】

いくつかの実施形態において、基部は、更に、接続管を含むものである。いくつかの実施形態において、接続管は、２つのスパージング部を第２の部分に接続して、第２の部分と交わるものである。

【0018】

いくつかの実施形態において、第２の部分は、スパージング部に接続するものである。

【0019】

いくつかの実施形態において、管は、更に、略垂直の第３の部分を含むものである。いくつかの実施形態において、第１の部分は、第２の部分の第１の端部に接続されて、第２の部分の他方の端部は、第３の部分に接続されたものである。

【0020】

いくつかの実施形態において、各スパージング部は、相互交換可能である。

【0021】

いくつかの実施形態において、スパージング部は、非浸出性かつ非抽出性材料で形成されたものである。

【0022】

いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターは、５００ｍＬ容量のベンチトップ型バイオリアクターである。いくつかの実施形態において、各スパージング部の高さは、約３ｍｍから約５ｍｍの範囲である。いくつかの実施形態において、高さは、約４ｍｍである。いくつかの実施形態において、各スパージング部の幅は、約１０ｍｍから約２０ｍｍの範囲である。いくつかの実施形態において、幅は、約１５ｍｍである。いくつかの実施形態において、各スパージング部の長さは、約２０ｍｍから約３０ｍｍの範囲である。いくつかの実施形態において、長さは、約２４ｍｍである。

【0023】

いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流バイオリアクターである。いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流スピナーフラスコである。

【0024】

いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの管は、ベンチトップ型バイオリアクターの開口部またはポートを通って延伸するものである。いくつかの実施形態において、開口部またはポートは、ベンチトップ型バイオリアクターの蓋部に配置されたものである。いくつかの実施形態において、蓋部は、ベンチトップ型バイオリアクターに、取外し自在に取り付けられたものである。

【0025】

いくつかの実施形態において、管は、バイオリアクターの内壁に沿うように構成されたものである。いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの基部は、バイオリアクターの底部上に静止したものである。

【0026】

いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの基部は、バイオリアクターに配置された混合部の下端部の下方の空間に静止したものである。いくつかの実施形態において、混合部は、下端部に取り付けられたインペラを含むものである。いくつかの実施形態において、混合部は、バイオリアクターの外側に位置する磁気攪拌プレートによって回転自在である。

【0027】

次に、本開示の更なる態様を示し、それは、部分的には、以下の詳細な記載、図面、および、請求項に示し、部分的には、詳細な記載から導かれるか、または、本開示を実施することで分かるものである。ここまでの概略的記載、および、次の詳細な記載の両方が例示であり、説明のために過ぎず、本開示を限定するものではないと理解すべきである。

【図面の簡単な説明】

【0028】

【図1】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図2】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの上面図である。

【図3】本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクターのマクロスパージャーの斜視図である。

【図4】本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクターのマクロスパージャーの斜視図である。

【図5】本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクターのマクロスパージャーの上面図である。

【図6】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの上面図である。

【図7】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図8】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図9】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図10】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図11】本開示の実施形態によるマクロスパージャーの斜視図である。

【図12】本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクターのマクロスパージャーの側面図である。

【図13】本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクターシステムのマクロスパージャーを示す図である。

【図14】５００ｍＬのスピナーフラスコの中での気体流量の物質移動速度に対する影響を示すグラフ画像である。

【発明を実施するための形態】

【0029】

１つの態様において、本明細書に記載の主題は、マクロスパージャー、または、ベンチトップ型バイオリアクターで用いられるマクロスパージャーに関する。本明細書に記載の実施形態によるマクロスパージャーは、従来からベンチトップ型バイオリアクターで用いられている市販のスパージャーと比べて、少ない剪断破損および泡沫気泡形成で、より高い物質移動速度を可能にする。本明細書に記載のマクロスパージャーの実施形態は、高いレベルの溶存酸素（約４５ １／ｈ（約４５ｈ^－１）より高い）を、１００×１０^６細胞／ｍＬより高い細胞密度などの高い細胞密度の時に提供するように構成される。マクロスパージャーは、エアレーション用の複数のスパージング部を含み、気体流量、孔の個数、および、孔のサイズは、各スパージング部について独立に制御自在である。

【0030】

いくつかの実施形態において、マクロスパージャーは、少ない泡沫気泡形成で、ベンチトップ型バイオリアクターの中で高い物質移動速度を提供するように構成される。例えば、高い物質移動速度は、４５ １／ｈ（４５ｈ^－１）より高い物質移動速度である。いくつかの実施形態において、物質移動速度は、約５０ １／ｈ（約５０ｈ^－１）でありうる。いくつかの実施形態において、異なるスパージング部は、異なる望ましい物質移動速度を実現するように構成され、そのような違いは、異なる個数の複数の開口部、および／または、異なるサイズの複数の開口部をスパージング部の上面に備えることによって実現される。

【0031】

本明細書の実施形態に記載のマクロスパージャーは、細胞培養培地への穏やかで効率的な気体移動を可能にする。ベンチトップ型バイオリアクターで用いられる従来のスパージャーと比べて、本明細書に記載のマクロスパージャーは、バイオリアクターの中で、改良された二酸化炭素（ＣＯ_２）除去率を提供して、物質移動速度の上昇、および、気体－液体接触面積の増加を可能にする。本明細書に記載のマクロスパージャーは、バイオリアクター全体に亘って、より均一な気泡分布、気体流入速度およびスパージャーの表面での剪断の制御、並びに、スケールアップを容易にする設計を可能にする。

【0032】

この設計は、マクロスパージャーの幾何学形状により、スケールアップが容易である。例えば、スケールアップの際に、異なるスケールに亘っても物質移動速度を一定に保つのが重要であり、異なるスケールでは、スパージング部の孔の個数を変化させることによって、本明細書に記載の実施形態のマクロスパージャー構成を用いて実現される。更に、本明細書に記載の実施形態のマクロスパージャー構成を用いることで、異なるスケールに亘って、気体流入速度を一定に保つことが可能になる。

【0033】

スパージャーは、複数の略楕円形状のスパージング部を含み、それは、各スパージング部の上面に異なるサイズの直径の孔または開口部、および、異なる個数の孔または開口部を備えうる。いくつかの実施形態において、スパージング部は、相互交換可能で、取外し自在である。スパージング部の数は、望ましい物質移動速度に応じたものである。各略楕円形状のスパージング部を、独立に制御自在な気体源に接続しうる。したがって、望ましい物質移動速度および気体流入速度を、気体流を各略楕円形状のスパージング部に合わせて調節することによって実現しうる。

【0034】

本明細書に記載の実施形態の態様は、シードトレイン強化処理のために酸素を供給するエアレーションされたベンチトップ型バイオリアクター用のマクロスパージャーに関する。本明細書に記載のマクロスパージャーの実施形態を用いて、ベンチトップ型バイオリアクターで従来から用いられているマイクロスパージャーの場合の主な課題である泡沫気泡形成を減らして、高い物質移動速度を実現しうる。

【0035】

本明細書に記載の実施形態による態様において、複数の略楕円形状のスパージング部を含むマクロスパージャーが備えられる。各スパージング部は、スパージング部の上面に複数の開口部または孔を備えうる。異なるスパージング部は、異なる個数の孔または開口部を、各スパージング部の上面に有しうる。更に、１つのスパージング部の各孔または開口部は、他のスパージング部の各孔または開口部と異なるサイズまたは直径を有しうる。各スパージング部の表面の開口部のサイズおよび個数が異なることで、結果的に高い物質移動速度になる。

【0036】

マクロスパージャーは、任意の適した材料で形成されうる。いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの構成要素は、異なる材料で形成される。いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの管は、第１の材料で形成され、スパージング部は、第２の材料で形成される。

【0037】

管は、細胞培養利用に適した任意の材料で形成されうる。いくつかの実施形態において、管は、ポリマーまたはガラス材料から形成される。ポリマー材料の管の限定するものではない例は、シリコーン管、および、ポリエチレンまたは高密度ポリエチレン管を含む。いくつかの実施形態において、ガラス材料は、ホウケイ酸ガラス、または、Ｇｏｒｉｌｌａ（登録商標）ガラス（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ、Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）などの独占的ガラス配合を含みうる。

【0038】

複数のスパージング部は、任意の適した材料で構成されうる。いくつかの実施形態において、スパージング部は、非浸出性かつ非抽出性材料で形成される。いくつかの実施形態において、材料は、液体不透過性かつ気体不透過性材料である。浸出性でも抽出性でもない材料の限定するものではない例は、ステンレス鋼（ＳＳ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリエチレン（ＰＥ）、または、浸出性および抽出性ではない他のポリマー材料を含む。

【0039】

図１は、マクロスパージャー１００の実施形態の斜視図であり、図２は、マクロスパージャー１００の上面図である。マクロスパージャーは、管１１０および基部１３０を含む。管１１０は、空洞の気体不透過性管を含み、それは、曲げ性または可撓性でありうる。管１１０は、略垂直の第１の部分１１３を含む。管１１０は、更に、第１の部分１１３から略垂直に延伸する第２の部分１１５を含む。第２の部分１１５は、マクロスパージャーの基部１３０の方で略水平方向に延伸する。第２の部分１１５は、基部１３０に、接続管１４０の中心で接続される。

【0040】

スパージャーのフットプリントまたはマクロスパージャーの基部の幅は、Ｗ_ＭＳによって指定されて、用いられるバイオリアクターの直径より小さい任意の適した幅でありうる。接続管１４０は、管１１０および複数のスパージング部１２０と気体連通した空洞管である。図１および図２に示すように、複数のスパージング部は、第１のスパージング部および第２のスパージング部を含む。各スパージング部は、略楕円形状の底面１２７に側壁部１２３によって接続された略楕円形状の上面１２５を含み、スパージング部にコンパートメントを形成する。スパージング部の長さは、Ｌ_ＳＥとして指定され、スパージング部の幅は、Ｗ_ＳＥとして指定される。略楕円形状の上面を形成するには、長さを幅より長くするべきである。各スパージング部の高さＨ_ＳＥは、バイオリアクターの底部の空間で、バイオリアクターにおいて望ましいエアレーションを可能にする任意の適した高さでありうる。そのような空間は、バイオリアクターの底部およびバイオリアクターの底部に向かって延伸しうる混合部によって限定されうる。限定するものではない例として、マクロスパージャー基部について利用可能なバイオリアクター空間が約６ｍｍの場合、Ｈ_ＳＥは、約３ｍｍから約５ｍｍの範囲でありうる。各スパージング部１２０のコンパートメントまたは内部は、バイオリアクターの内部と、各スパージング部１２０の上面１２５の複数の開口部または孔を通って気体連通するように構成される。

【0041】

図３において、マクロスパージャー３００は、バイオリアクター３７０に配置される。管３１０は、バイオリアクター３７０の開口部またはポート３８０を通って延伸する。管３１０の第１の部分３１３は、バイオリアクター３７０の側壁部３７３に沿って、略垂直に延伸して、管３１０は、管３１０の第２の部分３１５（および、複数のスパージング部３２０および接続管３４０を含む基部３３０）がバイオリアクター３７０の底部３７７に沿って略水平に延伸するように曲がる。

【0042】

図４において、マクロスパージャー４００は、バイオリアクター４７０に配置される。管４１０は、バイオリアクター４７０の開口部またはポート４８０で、蓋部またはキャップ４８５を通って延伸する。管４１０は、管４１０の第１の部分４１３がバイオリアクター４７０の側壁部４７３に沿って略垂直に延伸するように曲がり、管４１０は、再び、管４１０の第２の部分４１５（および、複数のスパージング部４２０および接続管４４０を含む基部４３０）がバイオリアクター４７０の底部４７７に沿って略水平に延伸するように曲がる。

【0043】

図５は、バイオリアクター５７０に配置されたマクロスパージャー５００の上面図である。バイオリアクター５７０は、半径Ｒおよび内側容積部５７５を有する円筒状の槽を形成する側壁部５７３を含む。図５の目的に関しては、バイオリアクターは、約３７ｍｍの半径Ｒを有する５００ｍＬのスピナーフラスコである。本実施形態において、スパージング部の長さＬ_ＳＥは、２０ｍｍから３０ｍｍの範囲であり、いくつかの実施形態において、約２４ｍｍでありうる。本実施形態において、スパージング部の幅Ｗ_ＳＥは、１０ｍｍから２０ｍｍの範囲であり、いくつかの実施形態において、約１５ｍｍでありうる。本実施形態において、マクロスパージャーの基部またはマクロスパージャーフットプリントの幅Ｗ_ＭＳは、約５０ｍｍでありうる。

【0044】

図６は、マクロスパージャー６００の基部６３０の実施形態の拡大図を示し、複数の開口部または孔６２１が見えている。接続管６４０は、第１のスパージング部６２０の側部から第２のスパージング部６２０の側部まで配置される。接続管６４０は、マクロスパージャー管６１０の第２の部分６１５と交わる。第１および第２のスパージング部６２０は、同じ方向または向きに、接続管６４０の両側で配列される。各スパージング部６２０は、略楕円形状の上面６２５を含む。上面６２５は、複数の開口部６２１を含む。図６に示した実施形態において、複数の開口部は、上面６２５上で均一に離間した１６個の開口部または孔を含む。開口部は、円形で、任意の適した直径を有しうる。例えば、各開口部の直径は、約１００マイクロメートルでありうる。より低い物質移動速度が望ましいなどのいくつかの実施形態において、孔または開口部の直径は、１００マイクロメートルより大きいものでありうる。更に、孔または開口部の数は、利用例での必要性に応じて異なりうる。例えば、いくつかの実施形態において、複数の孔または開口部における孔の数は、１６より大きい。いくつかの実施形態において、複数の孔または開口部における孔の数は、１６より小さい。

【0045】

いくつかの実施形態において、複数のスパージング部の各スパージング部は、同じ向き、または、方向に配列または配置され、例えば、１つの略楕円形状のスパージング部の長辺が他の略楕円形状のスパージング部の長辺と平行に配列されうる。いくつかの実施形態において、複数のスパージング部の１つ以上のスパージング部は、複数のスパージング部の他のスパージング部から垂直の向き、または、方向に配列または配置されうる。例えば、１つの略楕円形状のスパージング部の長辺が、他の略楕円形状のスパージング部の長辺と垂直に配列されうる。

【0046】

いくつかの実施形態において、略楕円形状のスパージング部は、接続部または第２の部分にスパージング部の側部で接続されることによって、接続管またはマクロスパージャー管の第２の部分と気体連通されうる。いくつかの実施形態において、スパージング部の側部は、略楕円形状のスパージング部の長辺を含みうる。いくつかの実施形態において、スパージング部の側部は、略楕円形状のスパージング部の短辺を含みうる。

【0047】

いくつかの実施形態において、マクロスパージャーの基部上の略楕円形状のスパージング部は、相互交換可能で、取外し自在である。エアレーション部（略楕円形状のスパージング部）の個数または量は、望ましい物質移動速度に応じたものである。マクロスパージャーの実施形態について、複数のスパージング部の異なる構成を、図７～１１に示している。

【0048】

図７は、マクロスパージャー７００の実施形態を示している。接続管７４０は、第１のスパージング部７２０の側部から第２のスパージング部７２０の側部まで配置される。マクロスパージャー管７１０の第２の部分７１５は、第１の部分７１３から略垂直に延伸する。第２の部分７１５は、接続管７４０に、接続管に垂直に接続管の中心で接続される。第１および第２のスパージング部７２０は、同じ方向または向きに、接続管７４０の両側で配列される。各スパージング部７２０は、略楕円形状の上面７２５、および、略楕円形状の底面７２７を含み、上面と底面は、側壁部７２３よって接続されて、スパージング部の中にコンパートメントを形成する。上面７２５は、複数の開口部（不図示）を含み、スパージング部の中のコンパートメントは、バイオリアクターの内部と複数の開口部を通って気体連通する。

【0049】

図８は、マクロスパージャーの実施形態を示す。図８に示した実施形態において、複数のスパージング部は、３つのスパージング部８２０を含む。接続管８４０は、第１のスパージング部８２０の側部に配置されて、第２のスパージング部８２０の側部まで延伸する。接続管８４０は、マクロスパージャー管８１０の第２の部分８１５と交わる。マクロスパージャー管８１０の第２の部分８１５は、マクロスパージャー管８１０の第１の部分８１３から、第３のスパージング部８２０の側部まで水平に延伸する。図示した実施形態において、第１、第２、および、第３のスパージング部は、同じ方向または向きを有する。

【0050】

図９は、マクロスパージャーの実施形態を示している。図９に示した実施形態において、複数のスパージング部は、３つのスパージング部９２０を含む。接続管９４０は、第１のスパージング部９２０の側部に配置されて、第２のスパージング部９２０の側部まで延伸する。接続管９４０は、マクロスパージャー管９１０の第２の部分９１５と交わる。マクロスパージャー管９１０の第２の部分９１５は、マクロスパージャー管９１０の第１の部分９１３から、第３のスパージング部９２０の側部まで水平に延伸する。図示した実施形態において、第１と第２のスパージング部は、同じ方向、または、向きが共通で、一方、第３のスパージング部は、方向または向きが、第１および第２のスパージング部の方向または向きと垂直となるように配置される。

【0051】

図１０は、バイオリアクターからのＣＯ_２除去率の改良を実現するためのマクロスパージャーの実施形態を示している。ＣＯ_２が蓄積した場合に、マクロスパージャーは、３つの略楕円形状のスパージング部を含む。接続管１０４０は、第１のスパージング部１０２０の側部に配置されて、第２のスパージング部１０２０の側部まで延伸する。接続管１０４０は、マクロスパージャー管１０１０の第２の部分１０１５と交わる。マクロスパージャー管１０１０の第２の部分１０１５は、マクロスパージャー管１０１０の第１の部分１０１３から、第３のスパージング部１０２０の側部まで水平に延伸する。図示した実施形態において、第１と第２のスパージング部は、方向または向きが共通で、一方、第３のスパージング部は、方向または向きが、第１および第２のスパージング部の方向または向きと垂直となるように配置される。バイオリアクターからのＣＯ２除去率を改良するために、第３のスパージング部は、バイオリアクターの中心から更に離れるように、したがって、インペラから更に離れるように配置されうる。

【0052】

図１１は、１つより多くの気体接続を有するためのマクロスパージャーの実施形態を示している。例えば、各略楕円形状のスパージング部は、独立して制御自在な気体源に接続されうる。したがって、望ましい物質移動速度および気体流入速度を、各略楕円形状のスパージング部への気体の流れを調節することによって実現しうる。

【0053】

図１２は、バイオリアクター１２７０に配置されたマクロスパージャー１２００の実施形態を示している。図示したバイオリアクター１２７０は、灌流スピナーフラスコであり、磁気攪拌プレート１２９０上に配置される。バイオリアクター１２７０は、底部１２７７および内側容積部１２７５を有する槽を含む。バイオリアクターは、１つ以上の開口部またはポート１２８０をバイオリアクターの最上部の方に含む。マクロスパージャー１２００は、１つのそのような開口部またはポート１２８０を通って延伸する。マクロスパージャー管１２１０は、開口部またはポート１２８０を通って延伸し、第１の部分１２１３は曲がって、バイオリアクターの側壁部に沿って略垂直に進行し、ここで、Ｈ_Ｐは、バイオリアクターの底部からポートまでの高さであり、第２の部分１２１５は、再び曲がって、バイオリアクターの底部に沿って、マクロスパージャーの基部１２３０まで略水平に進行する。マクロスパージャーの基部１２３０は、バイオリアクターの底部１２７７の中心に配置されうる。バイオリアクター１２７０は、シャフト１２８７、および、シャフト１２８７の端部または底部に位置するインペラ１２８９を有する混合部１２８５を含みうる。マクロスパージャーの基部１２３０は、混合部１２８５の底部の下方で、バイオリアクターの底部１２７７の上方で、高さＨ_Ｍの空間に配置されうる。いくつかの実施形態において、バイオリアクターは、５００ｍＬのスピナーフラスコで、Ｈ_Ｐは、約９１ｍｍで、Ｈ_Ｍは、約６ｍｍである。

【0054】

図１３を参照すると、本開示の実施形態によるベンチトップ型バイオリアクター１３７０にマクロスパージャー１３００を含むシステム１３０１の基本的な構成要素を概略的に示している。バイオリアクター１３７０は、側壁部および底部によって形成された内側容積部１３７５、開口部またはポート１３８０、更に、任意で、開口部またはポート用の蓋部を含みうる。

【0055】

未使用培地ボトル１３９０は、その内容物、つまり、ペリスタルティックポンプ１３４５のポンプヘッドによって内側容積部１３７５の中に送られる未使用の培地を有し、使用済み培地および細胞分泌物は、ペリスタルティックポンプ１３４５の他のポンプヘッドによって、バイオリアクター１３７０の内側容積部１３７５から使用済み培地ボトル１３９５の中に送られうる。スパージングポンプとも称されるエアポンプ１３０５、および、空気流量計１３０６を、マクロスパージャー１３００と組み合わせて用いて、細胞がバイオリアクター１３７０の内側容積部１３７５の中で曝されるエアレーションの量を制御しうる。磁気攪拌プレート１３９０は、その中の回転磁気容器を用いて、混合部のインペラおよびシャフトを、バイオリアクター１３７０の内側容積部１３７５の中で回転させうる。ここまでの記載に鑑みて、混合部１３８５による攪拌を通して細胞が成長培地で培養されうる内側容積部１３７５（内部コンパートメント）を有するベンチトップ型バイオリアクター１３７０を開示するものである。未使用の培地１３９０を、バイオリアクター１３７０の内側容積部１３７５（内部コンパートメント）に供給管１３９３を通って連続して供給し、その間に、栄養欠乏培地１３９５がバイオリアクター１３７０の内側容積部１３７５から真空ポート（例えば、使用済み培地管１３９７）を通って流出しうる。

【0056】

実施形態において、蓋部は、バイオリアクターの開口部、開口またはポートに取外し自在に取り付けられるか、バイオリアクターに永続的に取り付けられうる。蓋部は、開口部を覆うために、バイオリアクターに取付け（例えば、ネジ留め、押込み）自在である。実施形態において、次に、蓋部はバイオリアクターと一体であり、バイオリアクターが組み立てられて閉じられると、一体化装置になることを可能にする。実施形態において、蓋部は取外し自在で、バイオリアクターがユーザによって分解されて、ユーザが内容物にアクセスすることを可能にしうる。

【0057】

いくつかの実施形態において、未使用培地ポート、および、使用済み培地ポートは、両方共、蓋部を通って延伸しうる。いくつかの実施形態において、未使用培地ポート、および、使用済み培地ポートは、バイオリアクターの開口部または開口を通って延伸しうる。未使用培地ポートは、バイオリアクターの内側容積部に位置する端部を有する未使用培地管を受け付けるように構成される。未使用培地管を用いて、未使用の培地をバイオリアクターの内側容積部に供給する。使用済み培地ポートは、バイオリアクターの内側容積部に位置する端部を有する使用済み培地管を受け付けるように構成される。使用済み培地管を用いて、使用済み培地、および、細胞分泌物（例えば、組換え蛋白質、抗体、ウイルス粒子、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖、脂質、バイオディーゼル、無機粒子、ブタノール、代謝副産物）をバイオリアクターから除去する。

【0058】

実施形態において、任意の適した混合部を用いうる。混合部は、シャフトを含み、シャフトの底部または端部にインペラを備えうる。インペラおよびシャフトは、両方共、バイオリアクターの内側容積部の中に配置されうる。例えば、インペラは、シャフトの下端部に取り付けられ、シャフトの他方の端部は、取外し自在の蓋部に回転自在に取り付けられ、そこから、下方に延伸しうる。混合部は、磁性でありうる。インペラは、バイオリアクターの下に位置する磁気攪拌プレートによって回転されうる。

【0059】

いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターシステムは、更に、バイオリアクターの外側に位置する磁気攪拌プレートを含みうる。磁気攪拌プレートは、インペラ、および、シャフトを回転するように構成される。

【0060】

本開示の実施形態によるマクロスパージャーとも称しうる気体スパージャーは、ベンチトップ型バイオリアクターに収容された細胞への酸素の利用可能性を最適化しうる。マクロスパージャーを用いて、バイオリアクターの内側容積部の培地に酸素を加えうる。

【0061】

いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターシステムは、更に、複数のセンサ（例えば、温度、ＤＯ_２、ＣＯ_２、ｐＨ、細胞密度）を含む。任意で、センサポートを、バイオリアクターの内側容積部に位置する端部を有するセンサに接続しうる。例えば、センサは、溶存酸素（ＤＯ_２）センサ、二酸化炭素（ＣＯ_２）センサ、ｐＨセンサ、細胞密度センサ、グルコースセンサ、流量若しくは剪断応力および温度センサ、または、任意の他のセンサでありうる。

【0062】

バイオリアクターは、連続運転されうる。組み立てられたマクロスパージャー、ベンチトップ型バイオリアクター、および、他のシステム構成要素は、ガンマ線放射、電子線滅菌、紫外線（ＵＶ）滅菌、エタノール滅菌、または、気体滅菌されうる。いくつかの実施形態において、マクロスパージャー、および、ベンチトップ型バイオリアクターシステムは、培養中に、インキュベータの中に配置されうる。

【0063】

バイオリアクターは、プラスチック、ガラス、セラミック、または、ステンレス鋼でありうる。実施形態において、バイオリアクターは、堅い容器であるか、または、可撓性バッグでありうる。

【0064】

バイオリアクターは、任意のサイズでありうる。いくつかの実施形態において、バイオリアクターは、約０．１リットルから約１０００リットル、または、それ以上のサイズを有する。いくつかの実施形態において、ベンチトップ型バイオリアクターは、米国特許出願公開第２０１９／００４８３０５号明細書に記載のものなどの灌流バイオリアクターでありうるもので、その内容は本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、バイオリアクターは、５００ｍＬのスピナーフラスコの灌流バイオリアクターである。

【0065】

図１４は、５００ｍＬのスピナーフラスコの中での気体流量の物質移動速度に対する影響を示すグラフ画像である。哺乳類細胞の培養について、スパージャーを通る気体流量は、スパージャーの種類に応じたものである。本明細書に記載の実施形態によるマクロスパージャーなどのマクロスパージャーについて、合計気体流量は、０．１から０．３ｖｖｍ（単位体積培地あたりの気体体積流量）の間である。したがって、５００ｍＬのスピナーフラスコの中での気体流量の物質移動速度に対する効果を評価するために、２つの異なる気体流量を検討した。図１４に示すように、左側のグラフ画像は、０．２ｖｖｍの気体流量を検討し、一方、右側のグラフ画像は、０．３ｖｖｍの気体流量を検討している。左右のグラフ画像は、両方共、気体スパージング部について、同じ直径の孔（１００マイクロメートル）および同じ個数の孔（１５個の孔）を検討している。図１４が示すように、同じ孔直径、および、同じ個数の孔の場合に、各気体流量が０．２ｖｖｍから０．３ｖｖｍまで増加すると、物質移動係数（ｋ_Ｌａ）は、３２．１（１／ｈ（ｈ^－１））から１５９．９（１／ｈ（ｈ^－１））まで強化された。更に、最大推奨気体流量である０．３ｖｖｍにおいて取得された１５９．９（１／ｈ（ｈ^－１））の物質移動速度は、シードトレイン強化に必要とされる約５０（１／ｈ（ｈ^－１））の物質移動速度より非常に高かった。したがって、本明細書に記載の実施形態によるマクロスパージャーを用いることで、高い細胞密度培養で必要な酸素量を、より低い気体流量で満たすことができ、その結果、バイオリアクターでの細胞破損および泡沫気泡生成を最小化しうる。

【0066】

様々な開示した実施形態は、特定の実施形態に関して記載した特定の特徴、要素、または、工程を含みうることが分かるだろう。特定の特徴、要素、または、工程を、１つの特定の実施形態に関して記載しても、代わりの実施形態と、様々な例示していない組合せ、または置換えで交換または組み合わせうることも分かるだろう。

【0067】

本明細書で用いるように、原文の英語の定冠詞または不定冠詞は、そうではないと明示しない限りは、「少なくとも１つの」を意味し、「１つのみ」に限定されるべきではないことも理解すべきである。したがって、例えば、原文の英語で不定冠詞を付した「開口部」は、そうではないことが文脈から明らかではない限り、そのような「開口部」を２つ以上有する例を含む。

【0068】

本明細書において、範囲を、「約」１つの特定の値から、および／または、「約」他の特定の値までと表しうる。そのような範囲を表した場合、例は、その１つの特定の値から、および／または、他方の特定の値までを含む。同様に、「約」を付して、値を概数で表した場合、その特定の値が他の態様を形成すると理解されるものである。更に、各範囲の端点は、他方の端点との関連でと、他方の端点とは独立にとの両方で重要であることも理解されよう。

【0069】

本明細書に記載の全ての数値は、そうではないと明記しない限りは、「約」を含むものとして、そのように記載したかに関わらず解釈されるべきである。しかしながら、記載した各数値は、「約」その値と記載したかに関わらず、綿密に企図されたものでもあることも、更に理解されよう。したがって、「１０ｍｍ未満の寸法」、および、「約１０ｍｍ未満の寸法」は、両方共、「１０ｍｍ未満の寸法」の実施形態に追加で、「約１０ｍｍの寸法」の実施形態を含む。

【0070】

別段に明示しない限りは、本明細書に示したいずれの方法も、その工程が特定の順序で行われることを要すると解釈されることを全く意図しない。したがって、方法の請求項が、工程を行う順序を実際に記載しないか、そうではなく、請求項または明細書で、工程は特定の順序に限定されると具体的に記載しない限りは、任意の特定の順序が推測されることを全く意図しない。

【0071】

特定の実施形態の様々な特徴、要素または工程を、「含む」という移行句を用いて開示しうるが、「からなる」、または、「から実質的になる」という移行句を用いて記載しうる実施形態を含む代わりの実施形態も含意すると理解すべきである。したがって、例えば、Ａ＋Ｂ＋Ｃを含む方法に含意された代わりの実施形態は、方法がＡ＋Ｂ＋Ｃからなる実施形態と、方法がＡ＋Ｂ＋Ｃから実質的になる実施形態とを含む。

【0072】

本開示の多数の実施形態を、添付の図面に示し、上記詳細な記載に記載したが、本開示は、開示した実施形態に限定されるものではなく、ここまでに示し、次の請求項によって画定された本開示を逸脱することなく、多数の再配列、変更、および、置換えが可能であると理解すべきである。

【0073】

以下、本発明の好ましい実施形態を項分け記載する。

【0074】

実施形態１
ベンチトップ型バイオリアクター用マクロスパージャーにおいて、
管と、
前記管および前記ベンチトップ型バイオリアクターの内部と気体連通した複数のスパージング部を含む基部と
を含み、
各前記スパージング部は、側壁部によって接続された上面および底面によって形成された内部コンパートメントを有する円筒体を含むものであり、
前記上面と前記底面は略楕円形状であるマクロスパージャー。

【0075】

実施形態２
前記上面および前記底面は、略平坦である、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0076】

実施形態３
前記上面は、複数の開口部を含み、前記コンパートメントは、前記ベンチトップ型バイオリアクターの前記内部と該複数の開口部を通して気体連通するものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0077】

実施形態４
前記複数の開口部の各開口部は、前記上面で均一に離間したものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0078】

実施形態５
各前記スパージング部の前記上面および前記底面は、前記ベンチトップ型バイオリアクターの底部と平行に構成されたものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0079】

実施形態６
前記管は、前記スパージング部および気体供給源と気体連通したものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0080】

実施形態７
前記管は、可撓性または曲げ性の中空管である、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0081】

実施形態８
前記管は、ガラスまたはポリマー材料で形成されたものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0082】

実施形態９
前記管は、略垂直の第１の部分、および、略水平の第２の部分を含むものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0083】

実施形態１０
前記第２の部分は、前記基部に接続するものである、実施形態９に記載のマクロスパージャー。

【0084】

実施形態１１
前記基部は、更に、接続管を含むものである、実施形態１０に記載のマクロスパージャー。

【0085】

実施形態１２
前記接続管は、２つのスパージング部を前記第２の部分に接続して、該第２の部分と交わるものである、実施形態１１に記載のマクロスパージャー。

【0086】

実施形態１３
前記第２の部分は、スパージング部に接続するものである、実施形態１０に記載のマクロスパージャー。

【0087】

実施形態１４
前記管は、更に、略垂直の第３の部分を含むものである、実施形態９に記載のマクロスパージャー。

【0088】

実施形態１５
前記第１の部分は、前記第２の部分の第１の端部に接続されて、該第２の部分の他方の端部は、前記第３の部分に接続されたものである、実施形態１４に記載のマクロスパージャー。

【0089】

実施形態１６
各前記スパージング部は、相互交換可能である、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0090】

実施形態１７
前記スパージング部は、非浸出性かつ非抽出性材料で形成されたものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0091】

実施形態１８
前記ベンチトップ型バイオリアクターは、５００ｍＬ容量のベンチトップ型バイオリアクターである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0092】

実施形態１９
各前記スパージング部の高さは、約３ｍｍから約５ｍｍの範囲である、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0093】

実施形態２０
前記高さは、約４ｍｍである、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0094】

実施形態２１
各前記スパージング部の幅は、約１０ｍｍから約２０ｍｍの範囲である、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0095】

実施形態２２
前記幅は、約１５ｍｍである、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0096】

実施形態２３
各前記スパージング部の長さは、約２０ｍｍから約３０ｍｍの範囲である、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0097】

実施形態２４
前記長さは、約２４ｍｍである、実施形態１８に記載のマクロスパージャー。

【0098】

実施形態２５
前記ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流バイオリアクターである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0099】

実施形態２６
前記ベンチトップ型バイオリアクターは、灌流スピナーフラスコである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0100】

実施形態２７
前記マクロスパージャーの前記管は、前記ベンチトップ型バイオリアクターの開口部またはポートを通って延伸するものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0101】

実施形態２８
前記開口部またはポートは、前記ベンチトップ型バイオリアクターの蓋部に配置されたものである、実施形態２７に記載のマクロスパージャー。

【0102】

実施形態２９
前記蓋部は、前記ベンチトップ型バイオリアクターに、取外し自在に取り付けられたものである、実施形態２８に記載のマクロスパージャー。

【0103】

実施形態３０
前記管は、前記バイオリアクターの内壁に沿うように構成されたものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0104】

実施形態３１
前記マクロスパージャーの前記基部は、前記バイオリアクターの前記底部上に静止したものである、実施形態１に記載のマクロスパージャー。

【0105】

実施形態３２
前記マクロスパージャーの前記基部は、前記バイオリアクターに配置された混合部の下端部の下方の空間に静止したものである、実施形態３１に記載のマクロスパージャー。

【0106】

実施形態３３
前記混合部は、前記下端部に取り付けられたインペラを含むものである、実施形態３２に記載のマクロスパージャー。

【0107】

実施形態３４
前記混合部は、前記バイオリアクターの外側に位置する磁気攪拌プレートによって回転自在である、実施形態３３に記載のマクロスパージャー。

【符号の説明】

【0108】

１００、３００、４００、５００、７００、１２００、１３００ マクロスパージャー
１１０、３１０、４１０、６１０、７１０、８１０、９１０、１０１０、１２１０ 管
１２０、６２０、７２０、８２０、９２０、１０２０、 スパージング部
１４０、３４０、４４０、６４０、７４０、８４０、９４０、１０４０ 接続管
１２８５、１３８５ 混合部

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【国際調査報告】