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特表2024-524567ＣＤＫ４／６阻害剤および三環系抗うつ剤を含む癌の予防または治療のための薬学的組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-07-05
(54)【発明の名称】ＣＤＫ４／６阻害剤および三環系抗うつ剤を含む癌の予防または治療のための薬学的組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 45/06 20060101AFI20240628BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240628BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240628BHJP
A61K 31/506 20060101ALI20240628BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20240628BHJP
A61K 31/55 20060101ALI20240628BHJP
A61K 31/137 20060101ALI20240628BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240628BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20240628BHJP
A61P 1/00 20060101ALI20240628BHJP
【ＦＩ】
A61K45/06
A61P35/00
A61P43/00 121
A61P43/00 111
A61K31/506
A61K31/519
A61K31/55
A61K31/137
A61P11/00
A61P15/00
A61P1/00
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024500343
(86)(22)【出願日】2022-06-30
(85)【翻訳文提出日】2024-01-05
(86)【国際出願番号】 KR2022009462
(87)【国際公開番号】W WO2023282544
(87)【国際公開日】2023-01-12
(31)【優先権主張番号】10-2021-0088445
(32)【優先日】2021-07-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514039912
【氏名又は名称】ナショナル キャンサー センター
(74)【代理人】
【識別番号】100112656
【弁理士】
【氏名又は名称】宮田 英毅
(74)【代理人】
【識別番号】100089118
【弁理士】
【氏名又は名称】酒井 宏明
(72)【発明者】
【氏名】チョイ，ヨン ドゥ
(72)【発明者】
【氏名】ゴウ，スン ホ
【テーマコード（参考）】
4C084
4C086
4C206
【Ｆターム（参考）】
4C084AA20
4C084MA02
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA591
4C084ZA592
4C084ZA661
4C084ZA662
4C084ZA811
4C084ZA812
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZC412
4C084ZC75
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC32
4C086BC42
4C086CB05
4C086CB09
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZA59
4C086ZA66
4C086ZA81
4C086ZB26
4C086ZC41
4C086ZC75
4C206AA01
4C206AA02
4C206FA07
4C206MA02
4C206MA04
4C206NA05
4C206NA14
4C206ZA59
4C206ZA66
4C206ZA81
4C206ZB26
4C206ZC75
(57)【要約】
本発明の目的は、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤（tricyclic antidepressants）を有効成分として含む癌の改善、予防、または治療のための組成物を提供することである。
本発明によるＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤を含む組成物を併用投与する場合、抗がん相乗効果を示し、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少する。また、本発明による組成物投与によりＣＤＫ４/６阻害剤の副作用を緩和する効果も示すので、ＣＤＫ４/６阻害剤及び三環系抗うつ剤を有効成分として含む組成物は、癌の予防または治療剤として有用に使用することができる。
本発明によるＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤を含む組成物を併用投与する場合、抗がん相乗効果を示し、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少する。また、本発明による組成物投与によりＣＤＫ４/６阻害剤の副作用を緩和する効果も示すので、ＣＤＫ４/６阻害剤及び三環系抗うつ剤を有効成分として含む組成物は、癌の予防または治療剤として有用に使用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤（tricyclic antidepressants）を有効成分として含む癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項2】
前記ＣＤＫ４/６阻害剤は、アベマシクリブ（abemaciclib）、リボシクリブ（ribociclib）、またはパルボシクリブ（palbociclib）である、請求項１に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項3】
前記三環系抗うつ剤は、7-OH-アモキサピン（7-OH-Amoxapine）、アメゼピン（Amezepine）、アミネプチン（Amineptine）、アミトリプチリン（Amitriptyline）、アミトリプチリンオキシド（Amitriptylinoxide）、アモキサピン（Amoxapine）、アプタザピン（Aptazapine）、アゼピンドール（Azepindole）、アジプラミン（Azipramine）、バテラピン（Batelapine）、ブトリプチリン（Butriptyline）、シアノプラミン（Cianopramine）、シクラジンドール（Ciclazindol）、シクロプラミン（Ciclopramine）、シドキセピン（Cidoxepin）、クロミプラミン（Clomipramine）、コトリプチリン（Cotriptyline）、シアノドチエピン（Cyanodothiepin）、デメキシプチリン（Demexiptiline）、デプラミン（Depramine（バリプラミン（balipramine）））、デシプラミン（Desipramine（デスメチルイミプラミン（desmethylimipramine）））、デスメチルクロミプラミン（Desmethylclomipramine）、デスメチルトリミプラミン（Desmethyltrimipramine）、ジベンゼピン（Dibenzepin）、ジメタクリン（Dimetacrine）、ドスレピン（Dosulepin（ドチエピン（dothiepin）））、ドキセピン（Doxepin）、エンプラゼピン（Enprazepine）、エスミルタザピン（Esmirtazapine）、ファントリドン（Fantridone）、フルオトラセン(Fluotracen)、ヘプジジン（Hepzidine）、ホモピプラモール（Homopipramol）、イミプラミン（Imipramine）、イミプラミンオキシド（Imipraminoxide）、イントリプチリン（Intriptyline）、イプリンドール（Iprindole）、ケチプラミン（Ketipramine）、リトラセン（Litracen）、ロフェプラミン（Lofepramine）、ロシンドール（Losindole）、ロキサピン（Loxapine）、マプロチリン（Maprotiline）、マリプチリン（Mariptiline）、マジンドール（Mazindol）、メリトラセン（Melitracen）、メタプラミン（Metapramine）、メゼピン（Mezepine）、ミアンセリン（Mianserin）、ミルタザピン（Mirtazapine）、モノメタリン（Monometarine）、ナラノール（Naranol）、ニトロキサゼピン（Nitroxazepine）、ノルブトリプチリン（Norbutriptyline）、ノルドキセピン（Nordoxepin）、ノルチアデン（Northiaden（ノルドスレピン（nordosulepin）））、ノルトリプチリン（Nortriptyline（ノルアミトリプチリン（noramitriptiline) ））、ノキシプチリン（Noxiptiline）、オクトリプチリン（Octriptyline）、オピプラモール（Opipramol）、オキサプロチリン（Oxaprotiline）、ピポフェジン（Pipofezine）、ピランダミン（Pirandamine）、プロメタジン（Promethazine）、プロピゼピン（Propizepine）、プロトリプチリン（Protriptyline）、キヌプラミン（Quinupramine）、セチプチリン（Setiptiline（テキプチリン（teciptiline）））、スピロキセピン（Spiroxepin）、タンダミン（Tandamine）、タンプラミン（Tampramine）、チアネプチン（Tianeptine）、チエノプラミン（Tienopramine）、トリミプラミン（Trimipramine）、またはイミプラミン・ブルー（imipramine blue）である、請求項１に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項4】
前記薬学的組成物は、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の併用投与用である、請求項１に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項5】
前記薬学的組成物は、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤が混合された混合剤形態であるか、またはＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤がそれぞれ製剤化され、同時的または逐次的に投与されるものである、請求項４に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項6】
前記癌は、肺がん、膵臓がん、咽頭がん、喉頭がん、食道がん、胃がん、十二指腸がん、小腸がん、大腸がん、結腸がん、直腸がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、肝がん、甲状腺がん、腎臓がん、子宮がん、脳腫瘍、皮膚がん、 黒色腫、悪性骨腫瘍、膀胱がん、または血液がんである、請求項１に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項7】
前記癌は、肺がん、大腸がん、または乳がんである、請求項６に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【請求項8】
前記薬学的組成物は、薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を追加で含むものである、請求項１に記載の癌の予防または治療のための薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤（tricyclic antidepressants）を有効成分として含む癌の改善、予防、または治療のための組成物に関するものである。
【背景技術】
【0002】
サイクリン依存性タンパク質リン酸化酵素（Cyclin-dependent kinase；以下、ＣＤＫ）は細胞分裂および増殖を調節する酵素であり、細胞周期の進行はサイクリンおよびそれに関連するＣＤＫによって制御される。ほとんどの癌細胞は、ＣＤＫが調節されない特性を示し、ＣＤＫ阻害が様々な癌に対する潜在的な治療法として浮上している。ＣＤＫ４/６は、サイクリンタンパク質Ｄ１をリン酸化して活性を高めることによって、細胞周期中のG1期からS期へと進行する過程を決定する調節を担当する。
【0003】
ＣＤＫ４/６阻害剤は、ＣＤＫ４/６-サイクリンＤ１複合体形成を遮断し、細胞分裂を止める薬物で、パルボシクリブ（palbociclib）、リボシクリブ（ribociclib）、およびアベマシクリブ（abemaciclib）の3種の阻害剤が、HR（+）、HER2（-）、進行性または転移性乳がんでの治療薬として承認された（U.S. Pharm. 2020; 45（5）（Specialty＆Oncology suppl）：3-8．）。さらに、ＣＤＫ４/６阻害剤は、乳がんの治療に使用される薬物であるレトロゾール（letrozole）またはフルベストラント（fulvestrant）と共に併用療法として使用する臨床試験が行われている。
【0004】
しかし、ＣＤＫ４/６阻害剤を使用する際に様々な副作用が発生するが、ほとんどの副作用は１段階または２段階の低リスクの副作用であり、３-４段階の胃腸障害、好中球減少症、白血球減少症などの副作用も頻繁に発生すると報告されている。副作用が発生する場合、ＣＤＫ４/６阻害剤の使用を中止したり、使用量を減らしたりして副作用を減らす方法をとる。
【0005】
一方、がん患者の場合、治療過程で現れる苦痛によってうつ病の発生頻度が高く現れ、これを解決するために抗うつ剤の処方が頻繁に行われており、処方は様々な濃度範囲で施行されている。抗うつ剤の処方で現れる副作用は、不眠症、体重減少、口腔乾燥症、胸痛などがあるが、ＣＤＫ４/６阻害剤の副作用とは異なり、血液細胞減少などの危険な副作用は現れないことが知られている（Oncology（Williston Park）．33(2)：62-8．）。
【0006】
また、がん患者の抗うつ剤使用による生存率を調べた研究によると、抗うつ剤の使用によるがん患者の生存率は悪化しない様相を示しており、特に三環系抗うつ剤（tri-cyclic antidepressant）の場合、肺がん患者グループで生存率が有意に増加する結果を示した（参考文献 Cancer Treat Res Commun. 2017；10：33-39．）。
【発明の詳細な説明】
【0007】
このような背景の下で、本発明者らは、副作用を最小限に抑えながら抗がん効果を最大化できる方策を開発するために鋭意研究努力をした結果、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤を併用投与する場合、優れた抗がん効果が現れることを確認し、本発明を完成した。
【発明の概要】
【技術的課題】
【0008】
本発明の目的は、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤（tri-cyclic antidepressant）を有効成分として含む癌の予防または治療のための薬学的組成物を提供することである。
【0009】
本明細書に開示されている発明の技術的思想によって成し遂げようとする技術的課題は、以上で言及した問題点を解決するための課題に制限されず、言及されていない他の課題は、以下の記載から通常の技術者に明確に理解されるだろう。
【技術的解決方法】
【0010】
これを具体的に説明すると以下の通りである。一方、本出願で開示された各々の説明および実施形態は、各々の他の説明および実施形態にも適用することができる。すなわち、本出願で開示された様々な要素のすべての組み合わせが、本出願の範疇に属する。さらに、以下に記載される具体的な叙述によって本出願の範疇が制限されると見られない。
【0011】
前記目的を達成するための一態様として、本発明は、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤（tri-cyclic antidepressant）を有効成分として含む癌の予防または治療のための薬学的組成物を提供する。
【0012】
本発明の用語「ＣＤＫ（Cyclin-dependent kinase）」は、サイクリン依存性タンパク質リン酸化酵素を指し、細胞周期（cell cycle）を調節する機能を有するリン酸化酵素で、サイクリンとの結合が活性発現に必須である。ＣＤＫファミリーのうち、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６は、サイクリンタンパク質Ｄ１をリン酸化して活性を高めることによって、細胞周期中にG1期からS期へと進行する過程を決定する調節を担当する。
【0013】
本発明の用語「ＣＤＫ４/６阻害剤」は、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の両方を阻害する薬物を意味し、ＣＤＫ４/６は、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の両方を指すように本文書の全般にわたって使用される。ＣＤＫ４/６阻害剤は、ＣＤＫ４/６-サイクリンD複合体の形成を遮断し、細胞分裂を止める薬物であれば制限なく使用することができ、具体的には、アベマシクリブ（abemaciclib）、リボシクリブ（ribociclib）、パルボシクリブ（palbociclib）、またはそれらの薬学的に許容可能な塩であり得る。
【0014】
本発明の用語「三環系抗うつ剤」は、精神病治療薬として長い間使用されてきた抗うつ剤の１つであり、抗うつ剤の化学構造上３つの環（ring）がある薬物を指す。神経末端から分泌されるアミン系神経伝達物質の再吸収を妨げ、多くの物質が神経連接部にそのまま残るようにする。具体的には、前記三環系抗うつ剤は、7-OH-アモキサピン（7-OH-Amoxapine）、アメゼピン（Amezepine）、アミネプチン（Amineptine）、アミトリプチリン（Amitriptyline）、アミトリプチリンオキシド（Amitriptylinoxide）、アモキサピン（Amoxapine）、アプタザピン（Aptazapine）、アゼピンドール（Azepindole）、アジプラミン（Azipramine）、バテラピン（Batelapine）、ブトリプチリン（Butriptyline）、シアノプラミン（Cianopramine）、シクラジンドール（Ciclazindol）、シクロプラミン（Ciclopramine）、シドキセピン（Cidoxepin）、クロミプラミン（Clomipramine）、コトリプチリン（Cotriptyline）、シアノドチエピン（Cyanodothiepin）、デメキシプチリン（Demexiptiline）、デプラミン（Depramine（バリプラミン（balipramine）））、デシプラミン（Desipramine（デスメチルイミプラミン（desmethylimipramine）））、デスメチルクロミプラミン（Desmethylclomipramine）、デスメチルトリミプラミン（Desmethyltrimipramine）、ジベンゼピン（Dibenzepin）、ジメタクリン（Dimetacrine）、ドスレピン（Dosulepin（ドチエピン（dothiepin）））、ドキセピン（Doxepin）、エンプラゼピン（Enprazepine）、エスミルタザピン（Esmirtazapine）、ファントリドン（Fantridone）、フルオトラセン(Fluotracen)、ヘプジジン（Hepzidine）、ホモピプラモール（Homopipramol）、イミプラミン（Imipramine）、イミプラミンオキシド（Imipraminoxide）、イントリプチリン（Intriptyline）、イプリンドール（Iprindole）、ケチプラミン（Ketipramine）、リトラセン（Litracen）、ロフェプラミン（Lofepramine）、ロシンドール（Losindole）、ロキサピン（Loxapine）、マプロチリン（Maprotiline）、マリプチリン（Mariptiline）、マジンドール（Mazindol）、メリトラセン（Melitracen）、メタプラミン（Metapramine）、メゼピン（Mezepine）、ミアンセリン（Mianserin）、ミルタザピン（Mirtazapine）、モノメタリン（Monometarine）、ナラノール（Naranol）、ニトロキサゼピン（Nitroxazepine）、ノルブトリプチリン（Norbutriptyline）、ノルドキセピン（Nordoxepin）、ノルチアデン（Northiaden（ノルドスレピン（nordosulepin）））、ノルトリプチリン（Nortriptyline（ノルアミトリプチリン（noramitriptiline）））、ノキシプチリン（Noxiptiline）、オクトリプチリン（Octriptyline）、オピプラモール（Opipramol）、オキサプロチリン（Oxaprotiline）、ピポフェジン（Pipofezine）、ピランダミン（Pirandamine）、プロメタジン（Promethazine）、プロピゼピン（Propizepine）、プロトリプチリン（Protriptyline）、キヌプラミン（Quinupramine）、セチプチリン（Setiptiline（テキプチリン（teciptiline）））、スピロキセピン（Spiroxepin）、タンダミン（Tandamine）、タンプラミン（Tampramine）、チアネプチン（Tianeptine）、チエノプラミン（Tienopramine）、トリミプラミン（Trimipramine）、イミプラミン・ブルー（imipramine blue）、またはそれらの薬学的に許容される塩であり得るが、これらに制限されない。より具体的には、前記三環系抗うつ剤は、アミトリプチリン、クロミプラミン、デシプラミン、イミプラミン、プロメタジン、またはイミプラミン・ブルーであり得る。
【0015】
本発明の用語「有効成分」は、単独で目的である活性を表すか、またはそれ自体は活性のない担体と共に活性を表すことができる成分を意味する。
【0016】
本発明の用語「癌（または腫瘍）」は、原発癌または転移癌を区別せず、すべてを含む。本発明において、前記癌は、固形癌または血液癌であり得る。具体的には、前記癌は、肺がん、膵臓がん、咽頭がん、喉頭がん、食道がん、胃がん、十二指腸がん、小腸がん、大腸がん、結腸がん、直腸がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、肝がん、甲状腺がん、腎臓がん、子宮がん、脳腫瘍、皮膚癌、黒色腫、悪性骨腫瘍、膀胱癌、または血液癌であり得るが、これらに制限されない。より具体的には、前記癌は、肺がん、大腸がん、または乳がんであり得る。
【0017】
本発明の用語「予防」は、本発明の前記薬学的組成物を個体に投与して、癌の発生を抑制または遅延させる全ての行為を意味する。
【0018】
本発明の用語「治療」は、本発明の前記薬学的組成物を個体に投与して、癌が好転、緩和、または改善されるなど有益になるようにする全ての行為を意味する。
【0019】
本発明の薬学的組成物は、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の併用投与用であり得る。具体的には、前記薬学的組成物は、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤が混合された混合剤形態であるか、またはＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤がそれぞれ製剤化され、同時的または逐次的に投与されるものであり得るが、これらに制限されない。
【0020】
ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤を併用投与する場合、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の投与濃度比率は、１：０．００１乃至１：１０００であり得、具体的には、１：０．００３乃至１：５００、１：０．０１乃至１：５００、１：０．１乃至１：５００、または１：０．７乃至１：５００であり得、より具体的には、１：０．００３、１：０．０１、１：０．０２、１：０．０３、１：０．０５、１：０．０８、 １：０．１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：７、１：８、１：１０、１：１１、１：１２、１：２０、１：２５、１：１００、１：１２５、１：２００、または１：５００であり得るが、これらに制限されない。
【0021】
本発明の薬学的組成物は、通常の方法による薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤をさらに含むことができる。薬学的に許容される担体は投与経路または製剤によって当業界に周知されており、具体的には「大韓民国薬典」を含む各国の薬局方を参照することができる。本発明の組成物に含まれ得る担体、賦形剤、および希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、水、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱物油が挙げられるが、これらに制限されない。さらに、本発明の組成物に含まれ得る担体、賦形剤、および希釈剤は、非天然担体であり得るが、これらに制限されない。
【0022】
本発明の薬学的組成物は、通常の方法に従って、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口製剤、外用剤、坐剤、または滅菌注射用溶液の形態で製剤化して使用することができる。具体的には、製剤化する際に通常使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を用いて調製することができる。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、これらの固形製剤は、前記化合物に少なくとも1つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、カルシウムカーボネート、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどを混合して調製することができる。さらに、単純な賦形剤以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの潤滑剤も使用することができる。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、一般的に使用される単純希釈剤である水、液体パラフィン以外にも様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれる。非経口投与のための製剤には、滅菌した水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、および坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、エチルオレートのような注射可能なエステルなどを用いることができる。坐剤の基剤としては、ウイテプソール、マクロゴール、ツイン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどを用いることができる。薬学的組成物の具体的な製剤化に関しては、当業界で公知されてあり、例えば、文献の[Remington's Pharmaceutical Sciences（19th ed.、1995）]などを参照することができる。前記の文献は本明細書の一部と見なされる。
【0023】
本発明の薬学的組成物は、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤を有効成分として含むいかなる製剤にも適用可能であり、経口用または非経口用製剤に製造することができる。具体的には、投与方式には制限はないが、口腔（oral）、直腸（rectal）、鼻腔（nasal）、局所的（topical；頬および舌下を含む）、皮下、膣（vaginal）、または非経口（parenteral；筋肉内、皮下、および静脈内を含む）投与に適した形態、または吸入（inhalation）または注入（insufflation）による投与に適した形態を含む。
【0024】
本発明の薬学的組成物は、薬学的に有効な量で投与する。前記薬学的に有効な量は、医学的治療に適用可能で合理的な受益/リスク比で疾患を治療するのに十分であり、副作用を引き起こさない程度の量を意味し、有効用量水準は、患者の健康状態、疾患の種類、重症度、薬物の活性、薬物に対する感度、投与方法、投与時間、投与経路、および排出率、治療期間、配合または同時使用される薬物を含む要素、および他の医学分野で周知の要素に応じて決定することができる。投与量および回数は、いかなる面でも本発明の範囲を制限するものではない。
【0025】
本発明の薬学的組成物は、マウス、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒトなどの哺乳動物に様々な経路を介して投与することができる。
本発明の投与は、１日に１回の投与することができ、数回に分けて投与することもできる。
本発明の投与は、１日に１回の投与することができ、数回に分けて投与することもできる。
【0026】
本発明の薬学的組成物は、単独で、または手術、放射線治療、ホルモン治療、化学療法、および生物学的反応調節剤など、通常技術分野で使用される様々な抗癌療法と共に併用して使用することができる。この意味で、本発明の薬学的組成物は、他の抗癌剤の抗癌効果を増大させるか、または副作用を抑制または改善させる抗癌補助剤形態を含むことができる。
【0027】
前記目的を達成するための本発明の他の態様として、前記薬学的組成物を薬剤学的に有効な量で個体に投与する段階を含む、癌の予防または治療方法を提供する。
【0028】
本発明の用語「個体」は、癌が発症する可能性があるか、または発症したマウス、家畜、ヒトなどを含む哺乳動物などの動物を制限なく含む。
【0029】
本発明の癌の予防または治療方法において、前記薬学的組成物の投与経路は、目的組織に到達できる限り、いかなる一般的な経路を介しても投与することができる。本発明の薬学的組成物は、特にこれに制限されないが、経口投与、静脈投与、直腸内投与などの様々な経路を介して投与することができ、場合によっては、目的に応じて他の経路で投与することもできる。
【0030】
前記目的を達成するための本発明の他の態様として、癌の予防または治療のためのＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の組み合わせの使用；または、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤を有効成分として含む組成物の使用を提供する。他の態様として、癌の治療、または予防用薬剤の製造のための、ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の組み合わせ；または、ＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤を含む組成物の使用を提供する。
【発明の効果】
【0031】
本発明によるＣＤＫ４/６阻害剤および三環系抗うつ剤を含む組成物を併用投与する場合には、抗がん相乗効果を示し、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少する。また、本発明による組成物投与により、高い抗がん効果を得ながらもＣＤＫ４/６阻害剤の副作用は緩和する効果を得ることができるので、ＣＤＫ４/６阻害剤及び三環系抗うつ剤を有効成分として含む組成物は、がんの予防または治療剤として有用に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【0032】
【発明を実施するための形態】
【0033】
以下、実施例を通じて本発明の構成及び効果をさらに詳細に説明する。これらの実施例は、専ら本発明を例示するためのものであり、本発明の範囲がこれによって限定されるものではない。
【0034】
実施例１：ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の併用投与によるがん細胞死滅効果の確認
細胞培養
本実験は、肺がん細胞株Ｈ４６０、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６、乳がん細胞株ＭＣＦ７で行った。各細胞株の遺伝的特徴としては、肺がん細胞株Ｈ４６０はＫＲＡＳ突然変異[p.Q61H]、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６はＫＲＡＳ突然変異[p.G13D]を有し、乳がん細胞株ＭＣＦ７はエストロゲン受容体とプロゲステロン受容体とに対しては陽性であるが、ＨＥＲ２に対しては陰性である特徴を有している。Ｈ４６０およびＭＣＦ７細胞株は、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン-ストレプトマイシンで組成されたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて培養し、ＨＣＴ１１６細胞株は、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン-ストレプトマイシンで組成されたMcCoy's 5A培地を用いて細胞を培養した。
細胞培養
本実験は、肺がん細胞株Ｈ４６０、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６、乳がん細胞株ＭＣＦ７で行った。各細胞株の遺伝的特徴としては、肺がん細胞株Ｈ４６０はＫＲＡＳ突然変異[p.Q61H]、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６はＫＲＡＳ突然変異[p.G13D]を有し、乳がん細胞株ＭＣＦ７はエストロゲン受容体とプロゲステロン受容体とに対しては陽性であるが、ＨＥＲ２に対しては陰性である特徴を有している。Ｈ４６０およびＭＣＦ７細胞株は、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン-ストレプトマイシンで組成されたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて培養し、ＨＣＴ１１６細胞株は、１０％ＦＢＳと１％ペニシリン-ストレプトマイシンで組成されたMcCoy's 5A培地を用いて細胞を培養した。
【0035】
1．2．がん細胞死滅効果の確認
ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の様々な組み合わせを用いて、がん細胞死滅効果を確認した。
ＣＤＫ４/６阻害剤と三環系抗うつ剤の様々な組み合わせを用いて、がん細胞死滅効果を確認した。
【0036】
具体的には、ＣＤＫ４/６阻害剤としてアベマシクリブ、リボシクリブ、およびパルボシクリブを使用し、薬物のストック（stock）を作るための溶媒としてＤＭＳＯを使用した。三環系抗うつ剤としてイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、およびイミプラミン・ブルーを使用し、薬物のストックを作るための溶媒として蒸留水（DW）を使用し、イミプラミン・ブルーのみにＤＭＳＯを使用した。各薬物は、下記表１（抗うつ剤使用濃度（μＭ））および表２（ＣＤＫ４/６阻害剤使用濃度（μＭ））に示した濃度に希釈して使用した。
【0037】
Ｈ４６０、ＨＣＴ１１６、ＭＣＦ７細胞株を９６ウェルプレートに３×１０３cells／wellで培養した。翌日、各薬物を表１および表２の濃度で準備して培地に混合した後、各ウェルに入れて４８時間置いた。４８時間後、WST-１試薬を１０ul/wellずつ加え、１時間の間、反応させた。ＷＳＴ-１反応させたサンプルをＥＬＩＳＡ ４５０nMで分析し、同じ条件を３回繰り返して平均値と標準誤差を計算した。
【0038】
【表1】
【0039】
【表2】
【0040】
各細胞株別の実験結果を以下のように観察した。
（１）肺がん（細胞株Ｈ４６０）での抗がん効能試験
アベシクリプト４μＭ単独処理時の肺がん細胞生存率は７１％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
（１）肺がん（細胞株Ｈ４６０）での抗がん効能試験
アベシクリプト４μＭ単独処理時の肺がん細胞生存率は７１％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0041】
【表3】
【0042】
表３に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるアベマシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。リボシクリプ５０μＭ単独処理時の肺がん細胞生存率は７２％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は、以下のように示された。
【0043】
【表4】
【0044】
表４に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるリボシクリプと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。パルボシクリブ１５μＭ単独処理時の肺がん細胞生存率は６７％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0045】
【表5】
【0046】
表５に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるパルボシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。
【0047】
（２）大腸がん（細胞株ＨＣＴ１１６）での抗がん効能試験
アベシクリプト０．２μＭ単独処理時の大腸がん細胞生存率は８７％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
アベシクリプト０．２μＭ単独処理時の大腸がん細胞生存率は８７％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0048】
【表6】
【0049】
表６に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるアベマシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。リボシクリブ２０μＭ単独処理時の大腸がん細胞生存率は７３％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【表7】
【0050】
表７に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるリボシクリプと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。パルボシクリブ５μＭ単独処理時の肺がん細胞生存率は７９％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0051】
【表8】
【0052】
表８に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるパルボシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。
【0053】
（３）乳がん（細胞株ＭＣＦ７）での抗がん効能試験
アベシクリプト１０μＭ単独処理時の乳がん細胞生存率は５９％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
アベシクリプト１０μＭ単独処理時の乳がん細胞生存率は５９％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0054】
【表9】
【0055】
表９に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるアベマシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。リボシクリプト３０μＭ単独処理時の乳がん細胞生存率は８０％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0056】
【表10】
【0057】
表１０に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるリボシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びイミプラミン・ブルーのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６抑制剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。パルボシクリブ２０μＭ単独処理時の乳がん細胞生存率は７５％であり、抗うつ剤単独処理群及び併用処理群の生存率は以下のように示された。
【0058】
【表11】
【0059】
表１１に示すように、ＣＤＫ４/６阻害剤であるパルボシクリブと抗うつ剤であるイミプラミン、クロミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、及びアミトリプチリンのいずれかを一緒に処理した場合、ＣＤＫ４/６阻害剤または抗うつ剤を単独処理した群に比べてがん細胞生存率が著しく減少し、抗がん相乗効果が現れたことを確認した。
【0060】
実施例２：デシプラミンとアベマシクリブの併用投与による腫瘍成長抑制効果の分析
2．1．腫瘍モデルの構築
デシプラミンとアベマシクリブの併用処理による治療効果の向上を評価するために、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６を用いて皮下腫瘍モデルを構築した。
2．1．腫瘍モデルの構築
デシプラミンとアベマシクリブの併用処理による治療効果の向上を評価するために、大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６を用いて皮下腫瘍モデルを構築した。
【0061】
具体的には、ヒト大腸がん細胞株ＨＣＴ１１６は、American Type Culture Collection（ATCC、米国）から購入し、ウシ胎児血清（FBS）１０％およびペニシリン-ストレプトマイシンで組成されたMcCoy's ５Ａ培地で３７℃、５％二酸化炭素および標準湿度条件下で培養した。ＨＣＴ１１６癌細胞５×１０６ Cells／100μＬだけヌードマウス（Balb／c nude）の皮下に注射し、約７～１０日後に腫瘍が生成したことを確認した。腫瘍の大きさが６０～７０mm3になったとき、マウスを４グループ（陰性対照群、デシプラミン単独治療群、アベマシクリブ単独治療群、そしてデシプラミンとアベマシクリブの併用治療群）に分けて実験を行った。デシプラミンは、２０mg/kgの用量で腹腔内に注射し、アベマシクリブは、３０mg/kgで経口投与を通して進行した。デシプラミンとアベマシクリブは、実験終了時まで毎日1回投与し、対照群はVehicleを投与した。
【0062】
2．2．腫瘍成長抑制効果の分析
抗腫瘍効果の評価は、治療後１４日目まで毎日腫瘍の大きさを測定し、各グループ間の差を分析した。腫瘍の大きさは、Ｖ（mm3）＝１/２×長軸（mm）×短軸（mm）×高さ（mm）で計算した。１４日目までに腫瘍の大きさを測定して腫瘍増殖グラフを作成し、各グループ間の腫瘍の大きさを比較分析した。図１ａおよび図１ｂの結果から分かるように、デシプラミンとアベマシクリブの併用治療群での抗腫瘍効果が最も優れたことが確認でき、１４日目にデシプラミン単独治療群、アベマシクリブ単独治療群、またはデシプラミンとアベマシクリブの併用治療群の腫瘍の大きさは、それぞれ陰性対照群の７５．２％（＊＊Ｐ＜０．０１）、５４．６％（＊＊＊Ｐ＜０．００１）、または２５．９％（＊＊＊Ｐ＜０．００１）として測定され、単独治療群に比べて併用治療により抗がん相乗効果があることが確認された（図１）。
抗腫瘍効果の評価は、治療後１４日目まで毎日腫瘍の大きさを測定し、各グループ間の差を分析した。腫瘍の大きさは、Ｖ（mm3）＝１/２×長軸（mm）×短軸（mm）×高さ（mm）で計算した。１４日目までに腫瘍の大きさを測定して腫瘍増殖グラフを作成し、各グループ間の腫瘍の大きさを比較分析した。図１ａおよび図１ｂの結果から分かるように、デシプラミンとアベマシクリブの併用治療群での抗腫瘍効果が最も優れたことが確認でき、１４日目にデシプラミン単独治療群、アベマシクリブ単独治療群、またはデシプラミンとアベマシクリブの併用治療群の腫瘍の大きさは、それぞれ陰性対照群の７５．２％（＊＊Ｐ＜０．０１）、５４．６％（＊＊＊Ｐ＜０．００１）、または２５．９％（＊＊＊Ｐ＜０．００１）として測定され、単独治療群に比べて併用治療により抗がん相乗効果があることが確認された（図１）。
【0063】
実施例３：薬物投与による毒性評価
デシプラミンとアベマシクリブの投与による生体毒性効果を評価するために、１４日目に主要正常臓器である心臓、肺、肝臓、脾臓、および腎臓を採取し、これに対する切片を作製した後、ヘマトキシリンおよびエオシン染色（Hematoxylin＆Eosin）を介して組織学的変化の有無を確認した。
デシプラミンとアベマシクリブの投与による生体毒性効果を評価するために、１４日目に主要正常臓器である心臓、肺、肝臓、脾臓、および腎臓を採取し、これに対する切片を作製した後、ヘマトキシリンおよびエオシン染色（Hematoxylin＆Eosin）を介して組織学的変化の有無を確認した。
【0064】
デシプラミンとアベマシクリブをそれぞれまたは併用投与したグループに対して主要臓器の組織検査の結果、対照群に比べて組織学的変化が観察されなかった（図２ａ）。また、デシプラミンとアベマシクリブをそれぞれまたは併用投与したグループに対して１４日間体重を測定した結果、各グループ間に有意な体重の差は観察されなかった（図２ｂ）。
【0065】
デシプラミンとアベマシクリブをそれぞれまたは併用投与したグループに対して、治療１４日目に、マウスの血液を採取して血液生化学分析を行った際に、血液中の様々な毒性関連因子が各グループ間で有意な差を見せなかった（図３）。これらの結果を総合してみると、デシプラミンとアベマシクリブを併用投与した用量に対して、相乗癌治療効果を得ながらも、正常組織に対する毒性は現れないことを確認した。
【図1a】
【図1b】
【図2a】
【図2b】
【図3a】
【図3b】
【国際調査報告】