特表 2024-524987 セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩を含む徐放性製剤組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-07-09

(54)【発明の名称】セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩を含む徐放性製剤組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/26 20060101AFI20240702BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20240702BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20240702BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20240702BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20240702BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20240702BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20240702BHJP

   A61P 25/16 20060101ALI20240702BHJP

   A61P 25/14 20060101ALI20240702BHJP

   A61P 23/00 20060101ALI20240702BHJP

【ＦＩ】

A61K38/26

A61P3/10

A61K9/14

A61K47/34

A61P3/04

A61P1/16

A61P25/28

A61P25/16

A61P25/14

A61P23/00 171

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023579126

(86)(22)【出願日】2022-06-23

(85)【翻訳文提出日】2023-12-22

(86)【国際出願番号】 KR2022008984

(87)【国際公開番号】W WO2022270956

(87)【国際公開日】2022-12-29

(31)【優先権主張番号】63/213,805

(32)【優先日】2021-06-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】10-2022-0077146

(32)【優先日】2022-06-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】505404220

【氏名又は名称】ペプトロン インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100167689

【弁理士】

【氏名又は名称】松本 征二

(72)【発明者】

【氏名】チャン， セウン グ

(72)【発明者】

【氏名】チョ， ジャエ ピョング

(72)【発明者】

【氏名】リー， ジ ヒャング

(72)【発明者】

【氏名】ヂャン， ユン セオ

(72)【発明者】

【氏名】チェ， ホ イル

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

【Ｆターム（参考）】

4C076AA31

4C076AA94

4C076BB11

4C076CC21

4C076EE24M

4C076FF31

4C076FF65

4C076GG09

4C084AA03

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA19

4C084BA23

4C084DB35

4C084MA05

4C084MA43

4C084MA66

4C084NA12

4C084ZA02

4C084ZA15

4C084ZA16

4C084ZA36

4C084ZA70

4C084ZC35

(57)【要約】

本発明は、薬物の初期過剰放出（initial burst）がなく、長期間持続放出が可能でありながらも、放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れた、セマグルチド（semaglutide）又はその薬学的に許容可能な塩を含む徐放性微粒球、及びそれを含む徐放性製剤組成物に関する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを含む徐放性微粒球を含み、
前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩は、前記徐放性微粒球の３重量％以上９重量％未満で含まれ、
前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの混合物である、徐放性製剤組成物。

【請求項2】

前記混合物における前記低粘度ＰＬＧＡと前記高粘度ＰＬＧＡとの重量比は１：０．２～５である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項3】

前記高粘度ＰＬＧＡのラクチド対グリコリドのモル比が５０：４５～５５である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項4】

前記徐放性微粒球は、前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩と前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを氷酢酸に溶解し、超音波噴霧ノズルを用いて噴射した後、乾燥空気を用いて溶媒を揮発させて製造する、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項5】

前記超音波噴霧ノズルの周波数は６０ｋＨｚである、請求項４に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項6】

ＳＤラットに投与された後、前記セマグルチドが２４時間以内に５％未満で放出され、２週間以内に３０％以上または４週間以内に６０％以上放出される、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項7】

対象に１ヶ月～３ヶ月の間隔で投与される、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項8】

前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、前記徐放性微粒球の９１～９７重量％である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項9】

前記徐放性微粒球は、平均粒度が１５～２５μｍである、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項10】

糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎または退行性脳疾患の治療用である、請求項１に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項11】

前記退行性脳疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳卒中および多発性硬化症からなる群より選択されるいずれかである、請求項１０に記載の徐放性製剤組成物。

【請求項12】

セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを有機溶媒に溶解して混合溶液を製造するステップと、
前記混合溶液を乾燥して微粒球を得るステップとを含み、
前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの混合物である、徐放性製剤組成物の製造方法。

【請求項13】

前記混合物における前記低粘度ＰＬＧＡと前記高粘度ＰＬＧＡとの重量比は１：０．２～５である、請求項１２に記載の徐放性製剤組成物の製造方法。

【請求項14】

前記高粘度ＰＬＧＡのラクチド対グリコリドのモル比が５０：４５～５５である、請求項１２に記載の徐放性製剤組成物の製造方法。

【請求項15】

前記混合溶液の乾燥は、噴霧乾燥法によって行われる、請求項１２に記載の徐放性製剤組成物の製造方法。

【請求項16】

請求項１～１０のいずれかに記載の徐放性製剤組成物を対象に投与するステップを含む、糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎または退行性脳疾患の治療方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、徐放性製剤組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

グルカゴン様ペプチド－１受容体アゴニスト（Glucagon－like peptide receptor agonist, GLP－1 RA）は、２型糖尿病の治療に使用される薬物群であり、血糖値を下げるのに非常に効果的である。ＧＬＰ－１ ＲＡは、スルホニルウレア又はメグリチニドのような古いインスリン分泌促進薬に比べて低血糖を引き起こすリスクが低い利点があるが、作用時間が短い欠点がある。

【0003】

２型糖尿病のような慢性疾患の治療には長期間にわたる投与が必要であるため、患者の負担を軽減できる持効性（long－acting）の医薬品が望まれており、医薬品の投与間隔が長いほど、より多く使用される傾向がある。最初のＧＬＰ－１ ＲＡ医薬品である「バイエッタ」は１日２回（twice－a－day）投与する注射剤であり、その後１日１回（once－a－day）投与する注射剤が開発されて市場を主導していたが、現在は１週１回の注射剤がほとんどの市場を占めている。

【0004】

ＧＬＰ－１ ＲＡ医薬品の大きな成功と普及に後押しされて、薬効持続時間がさらに延長された１ヶ月１回（once－a－month）又はそれ以上である医薬品の需要が増加しており、その開発が求められている状況である。しかし、技術的な限界のため、１週１回よりも投与間隔が長い持効性（long－acting）の医薬品はまだ出ていないのが実情である。

【0005】

一方、長期間の持続放出効果を実現するために、生分解性高分子を用いた徐放性製剤が開発されているが、この製剤の場合は、薬物放出期間（duration）の延長および初期過剰放出を防止するために、薬物放出が遅い生分解性高分子を使用している。このため、投与後のかなりの期間（短くは２～３週間、長くは１ヶ月以上）薬物が出ないか、または薬物の累積放出率が３０％以下と低い放出遅滞現象が現れ、薬効の空白期が生じる問題がある。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明は、薬物の初期過剰放出（initial burst）がなく、長期間持続放出が可能でありながらも放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れた徐放性微粒球を含む徐放性製剤を提供することを目的とする。

【0007】

本発明は、薬物の初期過剰放出（initial burst）がなく、長期間持続放出が可能でありながらも放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れた徐放性微粒球を含む徐放性製剤組成物の製造方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0008】

１．セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを含む徐放性微粒球を含み、
前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩は、前記徐放性微粒球の３重量％以上９重量％未満で含まれ、
前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの混合物である、徐放性製剤組成物。

【0009】

２．前記項目１において、前記混合物における前記低粘度ＰＬＧＡと前記高粘度ＰＬＧＡとの重量比は１：０．２～５である、徐放性製剤組成物。

【0010】

３．前記項目１において、前記高粘度ＰＬＧＡのラクチド対グリコリドのモル比が５０：４５～５５である、徐放性製剤組成物。

【0011】

４．前記項目１において、前記徐放性微粒球は、前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩と前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを氷酢酸に溶解し、超音波噴霧ノズルを用いて噴射した後、乾燥空気を用いて溶媒を揮発させて製造する、徐放性製剤組成物。

【0012】

５．前記項目４において、前記超音波噴霧ノズルの周波数は６０ｋＨｚである、徐放性製剤組成物。

【0013】

６．前記項目１において、ＳＤラットに投与された後、前記セマグルチドが２４時間以内に５％未満で放出され、２週間以内に３０％以上または４週間以内に６０％以上放出される、徐放性製剤組成物。

【0014】

７．前記項目１において、対象に１ヶ月～３ヶ月の間隔で投与される、徐放性製剤組成物。

【0015】

８．前記項目１において、前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、前記徐放性微粒球の９１～９７重量％である、徐放性製剤組成物。

【0016】

９．前記項目１において、前記徐放性微粒球は、平均粒度が１５～２５μｍである、徐放性製剤組成物。

【0017】

１０．前記項目１において、糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎または退行性脳疾患の治療用である、徐放性製剤組成物。

【0018】

１１．前記項目１０において、前記退行性脳疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳卒中および多発性硬化症からなる群より選択されるいずれかである、徐放性製剤組成物。

【0019】

１２．セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを有機溶媒に溶解して混合溶液を製造するステップと、
前記混合溶液を乾燥して微粒球を得るステップとを含み、
前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの混合物である、徐放性製剤組成物の製造方法。

【0020】

１３．前記項目１２において、前記混合物における前記低粘度ＰＬＧＡと前記高粘度ＰＬＧＡとの重量比は１：０．２～５である、徐放性製剤組成物の製造方法。

【0021】

１４．前記項目１２において、前記高粘度ＰＬＧＡのラクチド対グリコリドのモル比が５０：４５～５５である、徐放性製剤組成物の製造方法。

【0022】

１５．前記項目１２において、前記混合溶液の乾燥は、噴霧乾燥法により行われる、徐放性製剤組成物の製造方法。

【0023】

１６．前記項目１～１０のいずれかに記載の徐放性製剤組成物を対象に投与するステップを含む、糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎または退行性脳疾患の治療方法。

【発明の効果】

【0024】

本発明の徐放性製剤組成物は、薬物の初期過剰放出がなく、長期間持続放出が可能である。また、放出遅滞現象がなく、生体利用率に優れる。

【0025】

本発明の徐放性製剤組成物は、１ヶ月以上の間隔で対象に投与することができる。

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1】図１は、本発明の徐放性微粒球を皮下注射した後のセマグルチドの放出の様子を簡略に示す概略図である。

【図2】図２は、実施例３、６と比較例１～４の製剤の徐放性微粒球のインビトロ（in vitro）初期放出評価の結果（６時間経過後）を示す。

【図3】図３は、ＳＤラットにセマグルチドと実施例３の製剤の徐放性微粒球（PT403）を皮下注射した後の線形時間依存性ブドウ糖低下効果を示す。血糖値は、注射後２８日間アキュチェック（Accu－Chek）を用いて測定した。

【図4】図４は、ＳＤラットにセマグルチドと実施例３の製剤の徐放性微粒球（PT403）を皮下注射した後の体重変化を示す。

【図5】図５は、セマグルチド含有量（Loading Capacity、LC）がそれぞれ３、４、６重量％である実施例３、４及び６の製剤を、それぞれ、８週齢の雄ＳＤラットに４ｍｐｋの同じ量で投与した後の時間による血中薬物濃度を示す。

【図6】図６は、セマグルチド含有量（Loading Capacity、LC）がそれぞれ３、４、６重量％である実施例３、４及び６の製剤を、それぞれ、８週齢の雄ＳＤラットに４ｍｐｋの同じ量で投与した後の時間によるセマグルチド累積放出率を示す。

【図7】図７は、実施例３の製剤を雄ビーグルに４ｍｐｋで投与した後の時間による血中薬物濃度を示す。

【図8】図８は、実施例３の製剤を雄ビーグルに４ｍｐｋで投与した後の時間によるセマグルチド累積放出率を示す。

【図9】図９は、有効成分として、リラグルチドが含有された比較例１３及び１４の製剤の微粒球を８週齢の雄ＳＤラットに４ｍｐｋで投与した後の時間による血中薬物濃度を示す。

【発明を実施するための形態】

【0027】

本発明は、薬物の初期過剰放出（initial burst）がなく長期間持続放出が可能でありながらも、放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れたセマグルチド（semaglutide）又はその薬学的に許容可能な塩を含む徐放性微粒球、及びそれを含む組成物に関する。

【0028】

本発明は、セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを含む徐放性微粒球を含む、徐放性製剤組成物を提供する。

【0029】

セマグルチドは、ＷＯ２００６／０９７５３７の実施例４に記載されているように製造できるＧＬＰ－１受容体アゴニストであり、Ｎ^６，２６－｛１８－［Ｎ－（１７－カルボキシヘプタデカンオイル）－Ｌ－γ－グルタミル］－１０－オキソ－３，６，１２，１５－テトラオキサ－９，１８－ジアザオクタデカンオイル｝－［８－（２－アミノ－２－プロパン酸），３４－Ｌ－アルギニン］ヒトグルカン様ペプチド１（７－３７）としても知られている。

【0030】

セマグルチドの構造は下記化学式１に示す通りである。

【0031】

【化1】

【0032】

本発明の「薬学的に許容可能な塩」とは、患者に比較的非毒性で無害な有効作用を有する濃度の塩であり、この塩に起因する副作用がセマグルチドの有益な効果を低下させない任意の塩を意味し、酸付加塩または塩基付加塩であってもよい。セマグルチドの薬学的に許容可能な塩において、酸付加塩は、例えば、セマグルチドの塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、ニコチン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩または重炭酸塩であってもよい。

【0033】

前記セマグルチドの薬学的に許容可能な塩において、塩基付加塩は、例えば、セマグルチドのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩または第４級アンモニウム塩であってもよい。

【0034】

本発明のセマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩と、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とを含む徐放性微粒球の重量は、２０ｍｇ～６０００ｍｇ、２０ｍｇ～４０００ｍｇ、１００ｍｇ～６０００ｍｇ、１００ｍｇ～４０００ｍｇ、５００ｍｇ～６０００ｍｇ、５００ｍｇ～４０００ｍｇ、１０００ｍｇ～６０００ｍｇ、１０００ｍｇ～４０００ｍｇ、１５００ｍｇ～６０００ｍｇ、１５００ｍｇ～４０００ｍｇ、２０００ｍｇ～６０００ｍｇ、２０００ｍｇ～４０００ｍｇ、２４００ｍｇ～６０００ｍｇ、２４００ｍｇ～４０００ｍｇ、または２４００ｍｇ～３６００ｍｇであってもよい。

【0035】

本発明の徐放性微粒球に含まれるセマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩は、徐放性微粒球の全重量に対して９重量％未満で含まれ、好ましくは、３重量％以上９重量％未満、３重量％以上８．８重量％以下、３重量％以上８．５重量％以下、３重量％以上８．２重量％以下、３重量％以上８重量％以下、または３重量％以上６重量％以下で含まれていてもよい。セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩の含有量が３重量％以上１０重量％以下であると、生体利用率に優れるが、セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩の含有量が９重量％以上であると、初期放出量が急激に増加する。従って、セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩は、徐放性微粒球の全重量に対して３重量％以上９重量％未満で含まれることが好ましい。

【0036】

本発明の徐放性微粒球に含まれるポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（Polylactide-co-glycolide，PLGA）は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの混合物であってもよい。前記低粘度ＰＧＬＡと高粘度ＰＬＧＡとの混合物における、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとの重量比は、１：０．２～５、１：０．２～３、１：０．３～５、１：０．３～３、１：０．５～５、１：０．５～３、１：０．５～２、１：１～５、１：１～３、１：１～２．５、１：１．５～２．５、または１：１．８～２．２であってもよく、好ましくは１：１．８～２．２であってもよい。

【0037】

徐放性微粒球に含まれるポリ（ラクチド－コ－グリコリド）が、低粘度ＰＬＧＡのみからなる場合には、セマグルチドの初期放出量が多くなりすぎ、高粘度ＰＬＧＡのみからなる場合には、セマグルチドの初期放出量は少ないが、放出遅滞（Lag phase）が発生することがあり、全体的な放出量が少なくなって生体利用率が低くなる問題がある。

【0038】

本発明の徐放性微粒球は、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとが混合されたポリ（ラクチド－コ－グリコリド）混合物を含むことにより、好ましくは、低粘度ＰＬＧＡと高粘度ＰＬＧＡとを１：０．２～５の重量比で混合することにより、より好ましくは、低粘度ＰＬＧＡと高粘度ＰＬＧＡとを１：１．８～２．２の重量比で混合することにより、セマグルチドの初期過剰放出が発生しないとともに、放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れる。

【0039】

本発明のポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（Polylactide－co－glycolide、PLGA）の固有粘度（Intrinsic Viscosity、IV）とは、クロロホルムに０．１％（Ｗ／Ｖ）の濃度で溶解した後、２５℃においてウベローデ粘度計を用いて測定した粘度である。

【0040】

固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡは、ラクチドとグリコリドのモル比が８０～４５：５０、８０～７０：５０、７５～５０：５０、７０～４５：５０、６５～５０：５０、または５５～４５：５０であってもよく、好ましくは５５～４５：５０であってもよい。市販の物質のうち、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡの例としては、エボニック（Evonik）社のＲＧ５０２、ＲＧ５０２Ｈ、ＲＧ７５２Ｈ、ＲＧ７５２Ｓなどがある。

【0041】

固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡは、ラクチドとグリコリドのモル比が８０～４５：５０、７５～５０：５０、７０～４５：５０、６５～５０：５０または５５～４５：５０であってもよく、好ましくは５５～４５：５０であってもよい。市販の物質のうち、固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡの例としては、エボニック（Evonik）社のＲＧ５０３、ＲＧ５０３Ｈ、ＲＧ６５３Ｈ、ＲＧ７５２Ｈ、ＲＧ７５３Ｓなどがある。

【0042】

本発明の徐放性微粒球に含まれる、固有粘度が０．１４～０．２４ｄＬ／ｇの低粘度ＰＬＧＡと固有粘度が０．３２～０．４４ｄＬ／ｇの高粘度ＰＬＧＡとが混合されたポリ（ラクチド－コ－グリコリド）の混合物は、微粒球の全重量に対して８０重量％以上または９０重量％以上含まれていてもよく、より具体的には、９０～９９重量％、９０～９７重量％、９０～９６重量％、９１～９９重量％、９１～９７重量％、９１～９６重量％、９２～９９重量％、９２～９７重量％、９２～９６重量％、９３～９９重量％、９３～９７重量％、９３～９６重量％、９４～９９重量％、９４～９７重量％、または９４～９６重量％含まれていてもよい。

【0043】

本発明の徐放性微粒球は、例えば、３重量％以上９重量％未満のセマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩、９０～９７重量％または９１～９７重量％のポリ（ラクチド－コ－グリコリド）が含まれていてもよく、付加的にコーティング物質、添加剤または賦形剤などがさらに含まれていてもよい。

【0044】

本発明の徐放性微粒球が含まれた徐放性製剤組成物は、スプラーグドーリーラット（Sprague Dawley Rat、SD Rat、SDラット）に投与された後、前記セマグルチドが２４時間以内に５％以下で放出され、２週間以内に３０％以上、または４週間以内に６０％以上放出され得る。

【0045】

本発明の一実施形態では、本発明の徐放性微粒球をＳＤラットに投与した後、セマグルチドが２４時間以内に５％以下で放出され、２週間以内に３０％以上、４週間以内に６０％以上放出されることを確認した（図６及び表７を参照）。また、ビーグル（Beagle Dog）においても、セマグルチドが２４時間以内に５％以下で放出され、２週間以内に３０％以上、４週間以内に６０％以上放出されることを確認した（図８、表８）。

【0046】

本発明の徐放性微粒球は、リシンでコーティングされていてもよい。徐放性微粒球にコーティングされたリシンは、コーティング前の徐放性微粒球の１００重量部に対して、０．０１～５、０．０１～３、０．０１～１、０．１～１重量部、０．２～０．８または０．４～０．６重量部含まれていてもよい。

【0047】

本発明の徐放性微粒球が含まれた徐放性製剤組成物は、投与対象により１回投与で３週間または１ヶ月以上薬効を持続することができ、本発明の徐放性製剤組成物は、対象に１ヶ月～３ヶ月、１ヶ月～２ヶ月、１ヶ月～１．５ヶ月、または１ヶ月間隔で投与することができる。

【0048】

本発明の一実施形態では、本発明の徐放性微粒球をラットに投与した場合、３週間以上（Ｔ ｌａｓｔ＝３５日）持続的にセマグルチドが放出されることを確認した。また、ビーグル（Beagle Dog）に投与した場合、４週間以上（Ｔ ｌａｓｔ＝６３日）持続的にセマグルチドが放出されることを確認した。一般に、投与対象となる動物種により、個体サイズが大きい種であるほど、薬物の吸収、分布、代謝過程などの時間とそれによる薬物の放出及び持続時間が長くなることが知られているように（allometric scaling）、本発明の一実施形態においてもラットよりもビーグルにおいてセマグルチドの薬効持続期間が長いことを確認した。同じ理由で、個体サイズがより大きいヒトに投与した場合には、ビーグルに投与した場合よりも薬効持続期間が長い。したがって、ヒトを対象として投与する場合、１回投与で１ヶ月以上薬効を持続することができ、より具体的には、１ヶ月～３ヶ月、１ヶ月～２ヶ月、または１ヶ月～１．５ヶ月間薬効を持続することができる。

【0049】

本発明の徐放性微粒球は、微粒球の平均粒度が５～５０μｍ、５～４０μｍ、５～３０μｍ、１０～５０μｍ、１０～４０μｍ、１０～３０μｍ、１０～２５μｍ、１５～５０μｍ、１５μｍ～４０μｍ、１５μｍ～３０μｍ、または１５～２５μｍであってもよい。本明細書で「平均粒度（Ｄ５０）」とは、粒度分布曲線における体積％の５０％に相当する粒度を意味する。

【0050】

本発明の徐放性微粒球のスパン値（Span value）は２以下であり、より具体的には、０．１～２、０．１～１．８、０．３～２、０．３～１．８、０．５～２、０．５～１．８、０．８～２、０．８～１．８、１～２、１～１．８または１～１．６である。

【0051】

本発明の徐放性微粒球またはそれを含む徐放性製剤組成物は、本発明の属する技術分野における薬剤の製剤化に通常使用される添加剤および賦形剤をさらに含むことができる。

【0052】

本発明の徐放性微粒球は、ポリビニルアルコール、アルブミン、ポリビニルピロリドン、ゼラチン等からなる群より選択される１種以上の保護コロイドをさらに含むことができる。前記保護コロイド物質は、セマグルチドが含まれた微粒球の間の凝集を防止し、分散性を改善する役割を果たす。前記保護コロイドは、徐放性微粒球の全重量に対して０．０２～１．０重量％であることが好ましい。

【0053】

本発明による徐放性微粒球が含まれた徐放性製剤組成物は、糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎（Non-alcoholic Steatohepatitis、NASH）または退行性脳疾患の治療に用いることができる。

【0054】

前記退行性脳疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳卒中および多発性硬化症からなる群より選択されるいずれかであってもよい。

【0055】

本発明の徐放性微粒球は、前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩と前記ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）を氷酢酸に溶解し、超音波噴霧ノズルを用いて噴射した後、乾燥空気を用いて溶媒を揮発させて製造することができる。

【0056】

本発明は、薬物の初期過剰放出（initial burst）がなく、長期間持続放出が可能でありながらも放出遅滞（Lag phase）がなく、生体利用率に優れた徐放性微粒球の製造方法を提供する。

【0057】

本発明の徐放性製剤組成物の製造方法は、セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）を有機溶媒に溶解して混合溶液を製造するステップと、前記混合溶液を乾燥して微粒球を得るステップとを含む。

【0058】

本発明の徐放性製剤組成物の製造方法において、セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩と共に溶解するポリ（ラクチド－コ－グリコリド）の種類は、本発明の徐放性微粒球について説明した通りである。

【0059】

本発明の徐放性製剤組成物の製造方法において、有機溶媒に溶解させるセマグルチドとポリ（ラクチド－コ－グリコリド）との重量比は、製造される徐放性微粒球中のセマグルチド含有量が９重量％未満となるように、好ましくは３重量％以上９重量％未満、３重量％以上８．８重量％以下、３重量％以上８．５重量％以下、３重量％以上８．２重量％以下、３重量％以上８重量％以下、または３重量％以上６重量％以下となるように適宜調整することができる。

【0060】

前記有機溶媒は、クロロホルム、酢酸エチル、メチレンクロリド、メチルエチルケトン、炭素数１～５のアルコール、氷酢酸、蟻酸、ジメチルスルホキシド、およびｎ－メチルピロリドンからなる群より選択される１つまたはこれらの混合溶媒であってもよく、好ましくは氷酢酸であってもよい。

【0061】

本発明の徐放性製剤組成物の製造方法では、前記混合溶液を乾燥して微粒球を得る方法として噴霧乾燥法を用いることができる。

【0062】

噴霧乾燥法は、前記セマグルチド又はその薬学的に許容可能な塩とポリ（ラクチド－コ－グリコリド）とが溶解した混合溶液を噴霧乾燥機に５～２０ｍＬ／ｍｉｎ、５～１５ｍＬ／ｍｉｎまたは５～１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で供給し、１００～２００℃、１００～１５０℃又は１２０～１５０℃の乾燥空気を供給して行うことができる。また、噴霧乾燥機の周波数は、４０～８０ｋＨｚ、５０～７０ｋＨＺまたは５５～７５ｋＨｚであってもよく、好ましくは６０ｋＨＺであってもよい。

【0063】

本発明の製剤組成物の製造方法は、前記混合溶液を乾燥して微粒球を得るステップの後に、前記乾燥した微粒球をリシン塩酸塩が溶解した水溶液に懸濁してリシンコーティングするステップをさらに含むことができる。

【0064】

前記リシン塩酸塩が溶解した水溶液中のリシン塩酸塩の濃度は、０．０１Ｍ～１Ｍであってもよく、好ましくは０．１Ｍ～０．６Ｍであってもよい。リシン塩酸塩の濃度が０．０１Ｍよりも低いと、微粒球の表面にリシンを十分にコーティングできず、１Ｍよりも高いと、リシン塩酸塩が過飽和になるため非効率的である。

【0065】

また、前記リシン塩酸塩が溶解した水溶液は、１％（Ｗ／Ｖ）ポリビニルアルコールがさらに含んでいてもよい。

【0066】

本発明は、本発明による徐放性微粒球が含まれた徐放性製剤組成物を対象に投与するステップを含む、糖尿病、肥満、非アルコール性脂肪肝炎または退行性脳疾患の治療方法を提供する。

【0067】

前記退行性脳疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、ルーゲーリッグ病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳卒中および多発性硬化症からなる群より選択されるいずれかであってもよい。

【0068】

本発明の徐放性微粒球が含まれた徐放性製剤組成物は、経口または非経口の経路で投与することができ、好ましくは、静脈投与、皮下投与、筋肉投与、腹腔内投与などの非経口経路で投与することができる。

【0069】

本発明による徐放性製剤組成物の有効投与量は、患者の年齢、疾患の種類及び程度、患者の状態等によって適宜調節できる。例えば、有効成分量を基準として０．１～１０ｍｇ／ｗｅｅｋであってもよい。前記分量を一度に投与するか、または分けて投与することができる。

【0070】

以下、実施例により本発明をより詳細に説明する。

【0071】

製造例．徐放性微粒球の製造および製造された微粒球の粒度
１）徐放性微粒球の製造（実施例１～６及び比較例１～１２）
ＧＬＰ－１アゴニストであるセマグルチドと生分解性高分子であるポリ（ラクチド－コ－グリコリド、PLGA）またはポリ乳酸（Poly（lactic acid）、PLA）を氷酢酸（glacial acetic acid）に完全に溶解して混合溶液を得た後、スプレー乾燥（Spray drying）工程により微粒球を製造した。微粒球の製造に用いた生分解性高分子の種類は下記表１に示す通りであり、セマグルチドを含有する様々な微粒球の製造組成は表２に示す通りである。ＰＬＧＡはエボニック（Evonik）社の市販のＲｅｓｏｍｅｒを使用し、下記表１に示すように、ＰＬＧＡ７５Ａ、ＰＬＧＡ７５Ｂ、ＰＬＧＡ６５Ｂ、ＰＬＧＡ５０Ａ、ＰＬＧＡ５０Ｂは、それぞれ順にエボニック（Evonik）社の市販のＲｅｓｏｍｅｒであるＲＧ７５２Ｈ、ＲＧ７５３Ｈ、ＲＧ６５３Ｈ、ＲＧ５０２Ｈ、ＲＧ５０３Ｈを用いた。

【0072】

【表1】

【0073】

スプレー乾燥工程は、製造された混合溶液を、液体蠕動ポンプ（Master flex, Peristaltic pump）を用いて、超音波ノズル（Sonictopia, 60kHz）付き噴霧乾燥機（EIN System）に７．５ｍＬ／ｍｉｎの流速で供給し、発振器（Sonictopia, 60kHz）のパワーを５０～７５％の間で調整し、１３５℃の乾燥空気を供給することによって行った。スプレー乾燥工程により製造された微粒球を保護コロイドとして１％（Ｗ／Ｖ）ポリビニルアルコール（Mitsubish Chemical Corporation）、０．５Ｍ Ｌ－リシン塩酸塩（Merck）を含有する水溶液に分散して３時間撹拌する。その後、ろ過及び蒸留水洗浄過程を経て微粒球を回収し、１０％Ｄ－マンニトール（ROQUETTE）、０．５％ Ｌ－リシン塩酸塩（Merck）溶液を添加して懸濁した後、凍結乾燥して、本発明の徐放性微粒球を得た。表２は、徐放性微粒球製剤別の生分解性高分子の種類及び配合比を示す。

【0074】

【表2】

【0075】

表３は、噴霧乾燥法による徐放性微粒球の製造に使用した生分解性高分子（ＰＬＧＡ及びＰＬＡ）、薬物（セマグルチド）及び溶媒の量を示す。

【0076】

【表3】

【0077】

２）製造された微粒球の粒度の測定
製造された微粒球の平均粒度および分布図を定量的に測定した。５０ｍＬのコニカルチューブに微粒球１８０ｍｇと１％ＰＶＡ１０ｍＬを投入し、１分間超音波発生器に入れて分散した後、粒度分析装置（CILAS、Fench）に入れて粒度を測定した。粒度サイズの均一性の指標としてのスパン値は下記数学式１により求めた。

【0078】

［数学式１］
スパン値（Span Value）＝（Ｄ９０－Ｄ１０）／Ｄ５０

【0079】

表４は、製造された微粒球の平均粒度およびスパン値を示す。

【0080】

【表4】

【0081】

実験例１．微粒球の初期放出量の測定（In vitro release）
セマグルチド１００μｇを含む微粒球量を取り、３ｍＬ放出液０．５％ＰＶＡ＋０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を入れたガラス容器で懸濁し、水が漏れないように密封した後、容器を３７℃に予熱した水中に入れて２０ｒｐｍの速度で回転を行った。一定時間が経過した後、サンプルを取ってＨＰＬＣ分析を行った。その結果、薬物ローディング量、および生分解性高分子の種類と配合比によって異なる初期放出率を示すことを確認した。

【0082】

全般的に、薬物含有量が高くなるほど初期放出が漸進的に増加し、薬物含有量が９％を超えると、初期放出が急激に増加した（図２参照）。このことから、急激な初期放出なしに微粒球内に薬物を最大限にローディングできる量は９％（ｗ／ｗ）未満であると判断した。

【0083】

表５は、薬物（セマグルチド）のローディング量による初期放出の変化（インビトロ放出試験、６時間及び２４時間経過後）を示す。

【0084】

【表5】

【0085】

低粘度高分子のみを使用した場合、または粘度の低い高分子２種を混合して使用した場合には、初期放出が高かった（比較例５、６、９、１１、１２）。これに対して、高粘度高分子を使用した場合には、初期放出が低く（比較例７、８、１０）、高粘度高分子と低粘度高分子とを混合した場合も初期放出が低かった（実施例１、２、３）。表６は、高分子の種類及び配合による初期放出の変化（インビトロ放出試験、２４時間経過後）を示す。

【0086】

【表6】

【0087】

前記表６に示すように、高粘度高分子からなる微粒球の場合は、初期放出は低かったが、放出遅滞（Lag phase）が長くなり、全体の放出量が低くて生体利用率が低下する欠点があった。そのため、本発明が目指す、ｉ）初期過剰放出（initial burst）がなく、ｉｉ）長期間持続放出が可能でありながらも、ｉｉｉ）放出遅滞（Lag phase）がなく、ｉｖ）生体利用率に優れた徐放性製剤の成分としては適切ではなかった。これに対して、高粘度高分子と低粘度高分子とを混合して使用した場合には、初期過剰放出を防止できることを確認した。これと同時に、放出遅滞を抑制できるかどうかを確認するために、後述のようにラットでのＰＫプロファイルを確認した（実験例３を参照）。

【0088】

実験例２．セマグルチドを含む徐放性微粒球の血糖調節および体重減少効果の実験（インビボ実験）
本発明のセマグルチドが含まれた徐放性微粒球の血糖降下効果を確認するために、経口ブドウ糖負荷試験（OGTT）を行った。まず、８週齢のＳＤラットの１８匹（各群あたり６匹）を合計３つの群に分けて実験を行った。陰性対照群（Control）、陽性対照群（API）、実施例３製剤投与群（PT403）に分け、陽性対照群（API）ではセマグルチドを０.１２３ｍｐｋで１回皮下注射し、実施例３製剤投与群（PT403）では、実施例３の製剤を４ｍｐｋで皮下注射した。

【0089】

薬物投与後、合計５回（１、７、１６、２１及び２８日目）のＯＧＴＴを行い、１８時間絶食したＳＤラットに２ｇ／ｋｇのグルコースを経口投与した。グルコースの投与直後、そして１５分、３０分、６０分、９０分、１２０分、１８０分後に尾から血液を採取して血糖を測定した。

【0090】

図３に示すように、実施例３製剤投与群（PT403）は時間依存的にグルコースレベルの減少を誘導し、特に、血糖降下効果が約２１日目まで持続した。これに対して、陽性対照群（API）では１日目には血糖降下効果があったが、７日目には元に戻った（図３）。また、ＯＧＴＴの分析と並行して各ラットの体重を時間により測定した。実施例３製剤投与群（PT403）では、陽性対照群（API）のみならず、陰性対照群と比較して、統計的に有意な約１０％の体重減少効果を示した（図４）。

【0091】

このことから、本発明のセマグルチドを含む徐放性製剤組成物は、単回投与だけでも長時間効果を維持できる製剤であることが分かる。

【0092】

実験例３．ラットにおけるセマグルチド含有量による徐放性微粒球の薬動学プロファイル（実施例３、４及び６の製剤）
８週齢のＳＤラットにセマグルチドが含有された微粒球を投与して一定時間間隔で採血し、血中薬物の濃度を評価し、体内における微粒球内の薬物の放出パターンを評価しようとした。ＰＫ試験では、実施例３、４及び６の製剤を使用した。ラットに投与する薬物（セマグルチド）の量は、製剤に関係なく同様に４ｍｐｋとした。

【0093】

実施例３、４及び６の製剤を８週齢の雄ＳＤラットに皮下注射（Ｓ．Ｃ）した後、時間によるセマグルチドの血中濃度を観察した。注射後１時間、３時間、６時間、２４時間、３日、５日、７日、９日、１１日、１４日、１６日、１８日、２１日、２４日、２８日、３１日及び３５日目に、頸静脈から血液を０．５ｍｌずつ採取し、－８０℃で保存した。その後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を行った。

【0094】

時間による血中濃度曲線から曲線下面積（AUC、area under the curve）を求めて相対的な生体利用率を比較した結果（図５）、含有された薬物含有量が増加するほど生体利用率が増加することを確認した。特に、含有されたセマグルチドの含有量が６重量％である実施例６の微粒球が、最も優れた生体利用率を示すことを確認した。

【0095】

表７は実施例３、４及び６のＳＤラットにおけるＰＫパラメータを示し、表８はセマグルチドの累積放出率を示す。

【0096】

【表7】

【0097】

【表8】

【0098】

実験例４．ビーグルにおけるセマグルチド含有徐放性微粒球の薬動学プロファイル（実施例３の製剤）
ラットに続いてビーグル（beagle dog）のＰＫ試験では、実施例３の製剤を使用した。投与した薬物の量は、実験例３と同様に４ｍｐｋとした。

【0099】

実施例３の製剤を雄ビーグルに皮下注射（Ｓ．Ｃ）した後、時間によるセマグルチド血中濃度を観察した。注射後１時間、３時間、６時間、２４時間、３日、５日、７日、９日、１１日、１４日、１６日、１８日、２１日、２３日、２５日、２８日、３１日、３５日、３８日、４２日、４５日、４９日、５６日、６３日及び７０日目に頸静脈から血液を１ｍｌずつ採取し、－８０℃で保存した。その後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を行った。

【0100】

時間による血中濃度曲線から曲線下面積を求めて相対的な生体利用率を比較した結果（図７）、ＳＤラットと比較してビーグルの場合には、セマグルチドの放出持続期間がさらに増えたことを確認することができた。

【0101】

表９はビーグルにおける実施例３の製剤のＰＫパラメータを示し、表１０はセマグルチドの累積放出率を示す。

【0102】

【表9】

【0103】

【表10】

【0104】

実験例５．ラットにおけるリラグルチド含有徐放性微粒球の薬動学プロファイル
前記実験例３と同様に行う一方、セマグルチドを含有する実施例３の製剤の代わりに、リラグルチドを含有する比較例１３及び１４の製剤をラットに皮下注射（Ｓ．Ｃ）した後、時間によるリラグルチド血中濃度を観察した。

【0105】

表１１は、比較例１３及び１４の製剤の成分を示す。

【0106】

【表11】

【0107】

注射後１時間、３時間、２４時間、３日、５日、７日、９日、１１日、１４日、１７日、２１日、２４日及び２８日目に頸静脈から血液を０．５ｍｌずつ採取し、－８０℃で保存した。その後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を行い、時間による血中濃度曲線から曲線下面積（AUC、area under the curve）を求めて相対的な生体利用率を比較した（図９）。

【0108】

その結果、リラグルチドは、本発明のセマグルチドと類似した構造の同じＧＬＰ－１ ＲＡ系のペプチドであるにもかかわらず、薬物の放出自体がほとんど見られなかった。このことから、同じ条件の生分解性高分子を使用しても含有するペプチドの種類が異なると、どのような効果を示すかを予測しにくいことが分かる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【国際調査報告】