特表 2024-525369 炎症治療用酵母

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-07-12

(54)【発明の名称】炎症治療用酵母

(51)【国際特許分類】

   C12N 1/16 20060101AFI20240705BHJP

   A61K 36/06 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 41/00 20200101ALI20240705BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 35/741 20150101ALI20240705BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 31/07 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 31/375 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 31/539 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 33/30 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240705BHJP

   A23L 31/10 20160101ALI20240705BHJP

【ＦＩ】

C12N1/16

A61K36/06 Z

A61P29/00

A61K41/00

A61P1/04

A61P1/00

A61K35/741

A61K9/08

A61K9/14

A61K31/07

A61K31/375

A61K31/539

A61K33/30

A61P43/00 121

A23L31/10

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023578086

(86)(22)【出願日】2022-06-29

(85)【翻訳文提出日】2024-02-16

(86)【国際出願番号】 SE2022050656

(87)【国際公開番号】W WO2023277778

(87)【国際公開日】2023-01-05

(31)【優先権主張番号】2150837-9

(32)【優先日】2021-06-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】SE

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522125630

【氏名又は名称】ミルメド ウニコ アーベー

(74)【代理人】

【識別番号】100120891

【弁理士】

【氏名又は名称】林 一好

(74)【代理人】

【識別番号】100165157

【弁理士】

【氏名又は名称】芝 哲央

(74)【代理人】

【識別番号】100205659

【弁理士】

【氏名又は名称】齋藤 拓也

(74)【代理人】

【識別番号】100126000

【弁理士】

【氏名又は名称】岩池 満

(74)【代理人】

【識別番号】100185269

【弁理士】

【氏名又は名称】小菅 一弘

(72)【発明者】

【氏名】アーチャー トレヴァー

(72)【発明者】

【氏名】ブシナロ リタ

(72)【発明者】

【氏名】レンツ トーマス

【テーマコード（参考）】

4B018

4B065

4C076

4C084

4C086

4C087

4C206

【Ｆターム（参考）】

4B018LB08

4B018LB10

4B018LE02

4B018LE05

4B018MD81

4B018ME11

4B018ME14

4B018MF14

4B065AA72X

4B065AA80X

4B065AA81X

4B065AB10

4B065AC20

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4B065BB20

4B065CA44

4C076AA12

4C076AA29

4C076BB01

4C076CC04

4C076CC16

4C076FF70

4C084AA11

4C084MA17

4C084MA43

4C084MA52

4C084NA14

4C084ZA66

4C084ZB11

4C084ZC75

4C086AA01

4C086AA02

4C086BA18

4C086DA14

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA17

4C086MA43

4C086MA52

4C086NA14

4C086ZA66

4C086ZB11

4C086ZC75

4C087AA01

4C087AA02

4C087BC12

4C087CA09

4C087MA17

4C087MA43

4C087MA52

4C087NA14

4C087ZA66

4C087ZB11

4C087ZC75

4C206AA01

4C206AA02

4C206CA10

4C206MA01

4C206MA02

4C206MA04

4C206MA37

4C206MA63

4C206MA72

4C206NA14

4C206ZA66

4C206ZB11

4C206ZC75

(57)【要約】

【要約】炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための酵母細胞であって、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞、又は１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から増殖された酵母細胞、及びこのような酵母細胞を含む組成物。
【選択図】図１Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための酵母細胞であって、
１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞、又は１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から増殖された酵母細胞。

【請求項2】

前記炎症とは、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、自己免疫疾患、微生物によって引き起こされる炎症、からなる群から選択され、及び／又は、
前記炎症によって引き起こされる症状とは、熱、痛み、赤み、腫れ、機能低下及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、
請求項１記載の酵母細胞。

【請求項3】

前記炎症とは、クローン病や潰瘍性大腸炎等の炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、又は過敏性腸症候群（ＩＢＳ）である、
請求項１又は２記載の酵母細胞。

【請求項4】

前記電磁波は、例えば１０ＧＨｚから１００ＧＨｚ、例えば３０ＧＨｚから７０ＧＨｚ、例えば４０ＧＨｚから６５ＧＨｚ等の約１ＧＨｚから約２００ＧＨｚの範囲内である、
請求項１から３のいずれかに記載の酵母細胞。

【請求項5】

前記電磁波は、３０ＧＨｚ、３１ＧＨｚ、３２ＧＨｚ、３３ＧＨｚ、３４ＧＨｚ、３５ＧＨｚ、３６ＧＨｚ、３７ＧＨｚ、３７．５ＧＨｚ、３８ＧＨｚ、３９ＧＨｚ、４０ＧＨｚ、４１ＧＨｚ、４２ＧＨｚ、４３ＧＨｚ、４４ＧＨｚ、４５ＧＨｚ、４６ＧＨｚ、４７ＧＨｚ、４８ＧＨｚ、４９ＧＨｚ、５０ＧＨｚ、５１ＧＨｚ、５２ＧＨｚ、５３ＧＨｚ、５４ＧＨｚ、５５ＧＨｚ、５６ＧＨｚ、５７ＧＨｚ、５８ＧＨｚ、５９ＧＨｚ、６０ＧＨｚ、６１ＧＨｚ、６２ＧＨｚ、６３ＧＨｚ、６４ＧＨｚ、６５ＧＨｚ、６６ＧＨｚ、６７ＧＨｚ、６８ＧＨｚ、６９ＧＨｚ、７０ＧＨｚ、７１ＧＨｚ、７２ＧＨｚ、７３ＧＨｚ、７４ＧＨｚ、７５ＧＨｚ、７６ＧＨｚ、７７ＧＨｚ、７８ＧＨｚ、７９ＧＨｚ、８０ＧＨｚ、８１ＧＨｚ、８２ＧＨｚ、８３ＧＨｚ、８４ＧＨｚ、８５ＧＨｚ、８６ＧＨｚ、８７ＧＨｚ、８８ＧＨｚ、８９ＧＨｚ、及び９０ＧＨｚからなる群から選択される、
請求項４記載の酵母細胞。

【請求項6】

前記電磁波の電力密度は１ｍＷ／ｃｍ^２未満であり、
好ましくは、前記電磁波の電力密度は０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の範囲にある、
請求項１から５のいずれかに記載の酵母細胞。

【請求項7】

前記電磁波は、平均周波数の０．０１％から約０．５％の範囲内の周波数において変調される、
請求項１から６のいずれかに記載の酵母細胞。

【請求項8】

酵母細胞は、例えば２０から１３０分間、例えば２０から１２０分間、例えば３０から９０分間、例えば３５から８５分間、例えば４５から８０分間、例えば４０分間、例えば５０分間、例えば６０分間、例えば７０分間、例えば８０分間等の１０から２４０分の間の期間、電磁波で処理される、
請求項１から７のいずれかに記載の酵母細胞。

【請求項9】

酵母細胞はサッカロミセス属であり、例えばサッカロミセス・セレビシエ、サッカロミセス・カールスベルゲンシスからなる群から選択される酵母細胞である、
請求項１から７のいずれかに記載の酵母細胞。

【請求項10】

炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための組成物であって、
請求項１～９のいずれかに記載の少なくとも１の酵母細胞と、賦形剤、及び／又は担体とを含む、
組成物。

【請求項11】

少なくとも１のビタミン及び／又は少なくとも１のミネラルをさらに含む、
請求項１０記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物は経口摂取用である、
請求項１０又は１１記載の組成物。

【請求項13】

前記組成物は液体組成物である、
請求項１０から１２のいずれかに記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物は、１０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから５０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、好ましくは２０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから４０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、例えば３０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌの量の酵母細胞を含む、
請求項１３記載の組成物。

【請求項15】

前記組成物は粉末組成物である、
請求項１０から１２のいずれかに記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための酵母細胞、ならびにこの酵母細胞を含む組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

炎症とは、病原体、有毒化合物、損傷した細胞、又は放射線照射等の有害刺激に対する身体の防御反応である。慢性炎症とは、数か月から数年続く軽度の長期的な炎症である。自己炎症は、身体が自身の組織に対して炎症反応を示す際に発生する。炎症の主症状として、熱、痛み、赤み、腫れ、及び機能低下が挙げられる。

【0003】

通常、炎症の治療として、いくつかの異なる薬剤が使用されるが、薬剤の多くは反作用を有する。

【0004】

したがって、炎症及び／又は炎症に関連する症状に対してより良い治療又は緩和を可能にする新規の組成物及び方法が必要とされている。

【0005】

本発明は、上記の問題を解決することを目的とする。

【発明の概要】

【0006】

第１の態様によれば、本発明の上記及び他の目的は、請求項１によって定義される酵母細胞によって、完全に又は少なくとも部分的に達成される。この請求項によれば、これらの目的は、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための酵母細胞であって、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞、又は１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から増殖された酵母細胞によって達成される。この酵母細胞は、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から、数世代、例えば最大３００、２００、１００世代や、例えば最大９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０世代や、例えば４７、４５、４２、４０、３７、３５、３２、３０、２７、２５、２２、２０、１７、１５、１２、１０、７、５世代にわたり増殖され得る。

【0007】

本開示の酵母細胞の利点として、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和の改善及びコスト効率（ｃｏｓｔ－ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）の改善が挙げられる。

【0008】

第２の態様によれば、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための組成物であって、本開示の酵母細胞のうちの少なくとも１つと、賦形剤（添加材。ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）、及び／又は担体（キャリア、保菌体。ｃａｒｒｉｅｒ）とを含む組成物が提供される。

【0009】

本発明及びその実施形態の更なる有利な特徴は、添付の特許請求の範囲及び発明を実施するための形態に定義される。

【0010】

本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な開示、添付の特許請求の範囲、及び図面から明らかになるであろう。本発明は、特徴の全ての可能な組み合わせに関することに留意されたい。

【0011】

一般に、特許請求の範囲で使用される全ての用語は、本明細書で明示的に定義されていない限り、技術分野におけるそれらの通常の意味に従って解釈されるべきである。「ａ／ａｎ／ｔｈｅ」が付された「要素、デバイス、構成要素、手段、ステップ等」への言及の全ては、別に明示的に述べられていない限り、上記要素、デバイス、構成要素、手段、ステップ等の少なくとも１つの例を指すものとして広く解釈されるべきである。本明細書に開示された任意の方法のステップは、明示的に述べられない限り、開示されたとおりの順序で実行される必要はない。

【0012】

本明細書で使用される「含む（有する）」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）という用語及びその変形は、他の追加物、構成要素、整数、又はステップを除外することを意図するものではない。

【図面の簡単な説明】

【0013】

更なる目的、特徴、及び利点は、添付の図面を参照しながら、以下の発明を実施するための形態から明らかになるであろう。

【0014】

【図1】図１Ａは、未処理酵母細胞の増殖曲線を示す図である。図１Ｂは、処理済細胞の増殖曲線を示す図である。

【図2】ＩＬ－１βのＬＰＳ誘導性発現（LPS-induced expression）に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図3】ＩＬ－６のＬＰＳ誘導性発現に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図4】ＴＮＦ－αのＬＰＳ誘導性発現に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図5(1)】ｉＮＯＳのＬＰＳ誘導性発現に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図5(2)】ｉＮＯＳのＬＰＳ誘導性発現に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図6】ＡＲＧ－１発現のＬＰＳ誘導性減少に対する本開示の組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【図7】細胞面積におけるＬＰＳ誘導性変化に対する本開示による組成物の効果を示す図である（対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５）。

【発明を実施するための形態】

【0015】

医学、生物学、バイオテクノロジー等の非伝統的な分野での低強度の電磁ミリ波の使用は、１９６０年代半ばにロシアで始まった。

【0016】

驚くべきことに、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞（いわゆる処理済酵母細胞又は処理済酵母）又は処理済酵母細胞から増殖した酵母細胞は、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に有効であることが発見された。本開示の酵母細胞の利点として、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和の改善及びコスト効率（ｃｏｓｔ－ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）の改善が挙げられる。この酵母細胞は、遺伝子組換えされていない酵母細胞である。

【0017】

この酵母細胞は、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から、数世代、例えば最大３００、２００、１００世代や、例えば最大９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０世代や、例えば４７、４５、４２、４０、３７、３５、３２、３０、２７、２５、２２、２０、１７、１５、１２、１０、７、５世代にわたり増殖され得る。したがって、この酵母細胞は、本明細書に記載のように電磁波で処理された後、数世代、例えば最大３００、２００、１００世代や、例えば最大９５、９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０世代や、例えば４７、４５、４２、４０、３７、３５、３２、３０、２７、２５、２２、２０、１７、１５、１２、１０、７、５世代にわたり増殖され得る。

【0018】

通常、本明細書に記載された用途で使用される酵母細胞は、例えば１５から４０世代、例えば２０から３０世代、例えば２５から３０世代、例えば２６、２７、２８又は２９世代等１０から５０世代にわたって増殖されている。好ましくは、本明細書に記載の用途で使用される酵母細胞は、２５から３０世代、より好ましくは２７世代にわたって増殖され得る。

【0019】

電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0020】

一実施形態において、炎症とは、炎症性腸疾患（ＩＢＤ、inflammatory bowel disease）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ、irritable bowel syndrome）、自己免疫疾患、微生物によって引き起こされる炎症、からなる群から選択され、炎症によって引き起こされる症状とは、熱、痛み、赤み、腫れ、機能低下及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。

【0021】

炎症とは、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）からなる群から選択され得る。

【0022】

この炎症性腸疾患（ＩＢＤ）とは、クローン病や潰瘍性大腸炎であり得る。

【0023】

自己免疫疾患とは、多発性硬化症、乾癬、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ、systemic lupus erythematosus）、又はリウマチ性多発筋痛症であり得る。

【0024】

微生物によって引き起こされる炎症とは、帯状疱疹やライム病関節炎による炎症であり得る。

【0025】

微生物によって引き起こされる炎症とは、慢性副鼻腔炎であり得る。

【0026】

他の実施形態において、炎症とは、クローン病や潰瘍性大腸炎等の炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、又は過敏性腸症候群（ＩＢＳ）である。

【0027】

さらに他の実施形態において、電磁波は、例えば１０ＧＨｚから１００ＧＨｚ、例えば３０ＧＨｚから７０ＧＨｚ、例えば４０ＧＨｚから６５ＧＨｚ等の約１ＧＨｚから約２００ＧＨｚの範囲内である。振動周波数は、約３５ＧＨｚから約６５ＧＨｚの範囲内であり得る。振動周波数は、４２．２ＧＨｚであり得る。

【0028】

電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0029】

さらなる実施形態において、電磁波は、３０ＧＨｚ、３１ＧＨｚ、３２ＧＨｚ、３３ＧＨｚ、３４ＧＨｚ、３５ＧＨｚ、３６ＧＨｚ、３７ＧＨｚ、３７．５ＧＨｚ、３８ＧＨｚ、３９ＧＨｚ、４０ＧＨｚ、４１ＧＨｚ、４２ＧＨｚ、４３ＧＨｚ、４４ＧＨｚ、４５ＧＨｚ、４６ＧＨｚ、４７ＧＨｚ、４８ＧＨｚ、４９ＧＨｚ、５０ＧＨｚ、５１ＧＨｚ、５２ＧＨｚ、５３ＧＨｚ、５４ＧＨｚ、５５ＧＨｚ、５６ＧＨｚ、５７ＧＨｚ、５８ＧＨｚ、５９ＧＨｚ、６０ＧＨｚ、６１ＧＨｚ、６２ＧＨｚ、６３ＧＨｚ、６４ＧＨｚ、６５ＧＨｚ、６６ＧＨｚ、６７ＧＨｚ、６８ＧＨｚ、６９ＧＨｚ、７０ＧＨｚ、７１ＧＨｚ、７２ＧＨｚ、７３ＧＨｚ、７４ＧＨｚ、７５ＧＨｚ、７６ＧＨｚ、７７ＧＨｚ、７８ＧＨｚ、７９ＧＨｚ、８０ＧＨｚ、８１ＧＨｚ、８２ＧＨｚ、８３ＧＨｚ、８４ＧＨｚ、８５ＧＨｚ、８６ＧＨｚ、８７ＧＨｚ、８８ＧＨｚ、８９ＧＨｚ、及び９０ＧＨｚからなる群から選択される。好ましくは、電磁波は、３７．５ＧＨｚ及び７５ＧＨｚからなる群から選択される。当業者は、上記周波数が小数点なしで最も近い完全な数値に切り上げ／切り下げられていることを認識する。したがって、例えば４０ＧＨｚは、４０±０．５と理解される。電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0030】

特定の一実施形態において、振動周波数は４２１９４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の１００ＭＨｚ帯域で線形変調される。電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0031】

別の特定の実施形態において、振動周波数は５３５３４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0032】

別の特定の実施形態において、振動周波数は６０１２４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。電磁波は、当技術分野において既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイスを用いて伝送され得る。この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0033】

一実施形態において、電磁波の電力密度は１ｍＷ／ｃｍ^２未満であり、好ましくは、電磁波の電力密度は０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の範囲にある。したがって、電磁波の電力密度は約０．１ｍＷ／ｃｍ^２であり得る。

【0034】

他の実施形態において、電磁波は、平均周波数の０．０１％から約０．５％の範囲内の周波数において変調される。

【0035】

さらなる実施形態において、酵母細胞は、例えば２０から１３０分間、例えば２０から１２０分間、例えば３０から９０分間、例えば３５から８５分間、例えば４５から８０分間、例えば４０分間、例えば５０分間、例えば６０分間、例えば７０分間、例えば８０分間等の１０から２４０分の間の期間、電磁波で処理される。場合によっては、酵母細胞は、３０から５０分間、より好ましくは４０分間、電磁波で処理される。

【0036】

好ましくは、酵母細胞は、例えば４０から１０５分間、例えば５０から１００分間、例えば６０から９５分間、例えば７０から９０分間、例えば７５から８５分間、より好ましくは８０分間等の３０から１１０分の間の期間、電磁波で処理される。

【0037】

特定の実施形態において、酵母細胞は、３０ＧＨｚから９０ＧＨｚの範囲の電磁波で２０から６０分間処理される。

【0038】

この酵母細胞は、３５ＧＨｚから８０ＧＨｚの範囲の電磁波で３０から５０分間処理されてもよい。

【0039】

この酵母細胞は、３７．５ＧＨｚの電磁波で３０から５０分間、好ましくは４０分間処理されてもよい。

【0040】

この酵母細胞は、７５ＧＨｚの電磁波で３０から５０分間、好ましくは４０分間処理されてもよい。

【0041】

好適な特定の実施形態において、酵母細胞は、３０ＧＨｚから９０ＧＨｚの範囲の電磁波で６０から１００分間処理される。

【0042】

この酵母細胞は、３５ＧＨｚから８０ＧＨｚの範囲の電磁波で７０から９０分間処理されてもよい。

【0043】

この酵母細胞は、３７．５ＧＨｚの電磁波で７０から９０分間、好ましくは８０分間処理されてもよい。

【0044】

この酵母細胞は、７５ＧＨｚの電磁波で７０から９０分間、好ましくは８０分間処理されてもよい。

【0045】

さらに他の実施形態において、酵母細胞はサッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属であり、例えばサッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）又はサッカロミセス・カールスベルゲンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）からなる群から選択される酵母細胞である。これらの利点として、このような酵母は容易に安価で入手できることが挙げられる。

【0046】

酵母細胞は、サッカロミセス・セレビシエＳ イヴォフスカヤ－ミルメッド（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ Ｓ Ｉｖｏｖｓｋａｊａ－Ｍｉｌｍｅｄ）であってもよい。この株はＤＳＭ３３１４８として寄託されている。この株は以前にＹ２４８３として寄託された。

【0047】

酵母細胞は、サッカロミセス・カールスベルゲンシスであってもよい。この株（本明細書に記載のように処理済）はＤＳＭ３４１４３として寄託されている。したがって、ＤＳＭ３４１４３として寄託された株は処理済酵母である。

【0048】

本開示の第２の態様によれば、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和に使用するための組成物であって、本開示の酵母細胞のうちの少なくとも１つと、賦形剤、及び／又は担体とを含む組成物が提供される。組成物は、無菌麦汁（ｓｔｅｒｉｌｅ ｗｏｒｔ）を、好ましくは５から２０ｗｔ％、例えば８から１５ｗｔ％、例えば１０から１２ｗｔ％、例えば１１ｗｔ％含み得る。組成物は、グルコース（ｇｌｕｃｏｓｅ）及び／又はサッカロース（ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ）等の炭水化物を含み得る。

【0049】

一実施形態において、組成物は、少なくとも１種のビタミン及び／又は少なくとも１種のミネラルをさらに含む。ビタミンは、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、又はこれらの組み合わせからなる群から選択され得る。ミネラルは、亜鉛、マグネシウム、セレン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。ミネラルは塩の形態であってもよい。

【0050】

一実施形態において、組成物は経口摂取用である。これは、患者が自分で組成物を服用することを可能にする点で利点を有する。更に、経口摂取は消化管での摂取により全身的な効果をもたらす。経口摂取用の組成物は懸濁液であってもよい。

【0051】

処理済酵母は、液体、粉末、ゲル、又は錠剤(pill)等の任意の適切な形態で対象に分配されてもよい。

【0052】

単回用量（ｓｉｎｇｌｅ ｄｏｓｅ）は、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／用量から１７，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば２００×１０^６ＣＦＵ／用量から１５，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／用量から１２，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／用量から１０，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／用量から８，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば１，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から６，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば２，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から５，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば３，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から４，０００×１０^６ＣＦＵ／用量等の１０×１０^６ＣＦＵ／用量から２０，０００×１０^６ＣＦＵ／用量であり得る。ＣＦＵ＝コロニー形成単位である。

【0053】

好ましくは、ヒトの単回用量は、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／用量から３，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば６００×１０^６ＣＦＵ／用量から１，０００×１０^６ＣＦＵ／用量等の１００×１０^６ＣＦＵ／用量から６，０００×１０^６ＣＦＵ／用量である。

【0054】

好ましくは、馬や牛等の大型哺乳類の単回用量は、例えば８，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から１８，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば１０，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から１５，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば１２，０００×１０^６ＣＦＵ／用量等の６，０００×１０^６ＣＦＵ／用量から２０，０００×１０^６ＣＦＵ／用量である。

【0055】

好ましくは、兎、猫、犬等の小型哺乳類の単回用量は、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／用量から１，０００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば２００×１０^６ＣＦＵ／用量から８００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／用量から６００×１０^６ＣＦＵ／用量、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／用量等の１０×１０^６ＣＦＵ／用量から１，５００×１０^６ＣＦＵ／用量である。

【0056】

本開示に係る酵母細胞は、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／日から８，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／日から５，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば７００×１０^６ＣＦＵ／日から４，０００×１０６ＣＦＵ／日、例えば８００×１０^６ＣＦＵ／日から３，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば９００×１０６ＣＦＵ／日から２，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば１，０００×１０ＣＦＵ／日から１，５００×１０^６ＣＦＵ／日等、５０×１０^６ＣＦＵ／日から１０，０００×１０^６ＣＦＵ／日の量で投与されてもよい。

【0057】

本開示に係る酵母細胞は、例えば７５０×１０^６ＣＦＵ／日から１，５００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば８００×１０^６ＣＦＵ／日から１，２００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば９００×１０^６ＣＦＵ／日等、５００×１０^６ＣＦＵ／日から１，５００×１０^６ＣＦＵ／日の量でヒトに投与されてもよい。

【0058】

本開示に係る酵母細胞は、例えば２，０００×１０^６ＣＦＵ／日から８，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば３，０００×１０^６ＣＦＵ／日から６，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば４，０００×１０^６ＣＦＵ／日から５，０００×１０^６ＣＦＵ／日等、１，０００×１０^６ＣＦＵ／日から１０，０００×１０^６ＣＦＵ／日の量で馬や牛等の大型哺乳類に投与されてもよい。

【0059】

本開示に係る酵母細胞は、例えば５０×１０^６ＣＦＵ／日から１，５００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／日から１，０００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば２００×１０^６ＣＦＵ／日から８００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／日から６００×１０^６ＣＦＵ／日、例えば４００×１０^６ＣＦＵ／日から５００×１０^６ＣＦＵ／日等、１０×１０^６ＣＦＵ／日から２，０００×１０^６ＣＦＵ／日の量で兎、猫、犬等の小型哺乳類に投与されてもよい。

【0060】

本開示に係る酵母細胞は、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／週から５０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／週から２５，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば１，０００×１０^６ＣＦＵ／週から２０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば１，５００×１０^６ＣＦＵ／週から１５，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば３，０００×１０^６ＣＦＵ／週から１０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば５，０００×１０^６ＣＦＵ／週から７，５００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば６，０００×１０^６ＣＦＵ／週等、２００×１０^６ＣＦＵ／週から７０，０００×１０^６ＣＦＵ／週の量で投与されてもよい。

【0061】

本開示に係る酵母細胞は、例えば４，５００×１０^６ＣＦＵ／週から８，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば５，０００×１０^６ＣＦＵ／週から７，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば６，０００×１０^６ＣＦＵ／週等、３，５００×１０^６ＣＦＵ／週から９，０００×１０^６ＣＦＵ／週の量でヒトに投与されてもよい。

【0062】

本開示に係る酵母細胞は、例えば１０，０００×１０^６ＣＦＵ／週から５０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば１５，０００×１０^６ＣＦＵ／週から４０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば２０，０００×１０^６ＣＦＵ／週から３０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば２２，０００×１０^６ＣＦＵ週から２７，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば２４，０００×１０^６ＣＦＵ／週から２６，０００×１０^６ＣＦＵ週、例えば２５，０００×１０^６ＣＦＵ／週等、７，０００×１０^６ＣＦＵ／週から７０，０００×１０^６ＣＦＵ／週の量で馬や牛等の大型哺乳類に投与されてもよい。

【0063】

本開示に係る酵母細胞は、例えば１００×１０^６ＣＦＵ／週から１０，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば３００×１０^６ＣＦＵ／週から６，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／週から４，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば７００×１０^６ＣＦＵ／週から３，０００×１０^６ＣＦＵ／週、例えば１，０００×１０^６ＣＦＵ／週から２，０００×１０^６ＣＦＵ／週等、７０×１０^６ＣＦＵ／週から１４，０００×１０^６ＣＦＵ／週の量で兎、猫、犬等の小型哺乳類に投与されてもよい。

【0064】

治療期間は、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも１５週間、又は少なくとも２０週間であり得る。とある場合においては、治療期間は２０週間より長くてもよい。

【0065】

一実施形態において、組成物は液体組成物である。

【0066】

特定の一実施形態において、組成物は、麦芽飲料（malt beverage）の形態、又は処理済酵母若しくは処理済酵母から増殖した酵母細胞を含む任意の種類の飲料の形態を有する。

【0067】

一実施形態において、液体組成物は、１０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから５０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、好ましくは２０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから４０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、例えば３０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌの量の酵母細胞を含む。このような組成物は、週に１、２、３、４、５、６又は７回、好ましくは週に２又は３回投与され得る。好適な一実施形態において、３０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌを含む合計２００ｍｌの組成物が週に２、３回に分けて投与される。別の好適な実施形態においては、４０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌを含む合計２００ｍｌの組成物が週に２、３回に分けて投与される。

【0068】

一実施形態において、組成物は粉末組成物である。

【0069】

とある場合においては、粉末組成物は、乾燥生酵母（生乾燥酵母、乾燥酵母生細胞。ｖｉａｂｌｅ，ｄｒｉｅｄ ｙｅａｓｔ）を含み得る。乾燥酵母は、例えば５から２０ｗｔ％、例えば８から１５ｗｔ％、例えば１０から１２ｗｔ％、例えば１１ｗｔ％の麦汁中の酵母細胞の懸濁液から調製されてもよい。酵母の乾燥は、当業者に周知の標準的な手順である。

【0070】

とある場合においては、粉末組成物は、凍結乾燥処理済生酵母（ｖｉａｂｌｅ，ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｙｅａｓｔ）を含み得る。凍結乾燥酵母は、例えば５から２０ｗｔ％、例えば８から１５ｗｔ％、例えば１０から１２ｗｔ％、例えば１１ｗｔ％の麦汁中の酵母細胞の懸濁液から調製されてもよい。酵母の凍結乾燥は、当業者に周知の標準的な手順である。

【0071】

他の場合においては、粉末組成物は、噴霧乾燥処理済生酵母（ｖｉａｂｌｅ，ｓｐｒａｙ－ｄｒｉｅｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｙｅａｓｔ）を含み得る。噴霧乾燥酵母は、例えば５から２０ｗｔ％、例えば８から１５ｗｔ％、例えば１０から１２ｗｔ％、例えば１１ｗｔ％の麦汁中の酵母細胞の懸濁液から調製されてもよい。酵母の噴霧乾燥は、当業者に周知の標準的な手順である。

【0072】

又は、粉末組成物は、無菌温風（ｓｔｅｒｉｌｅ ｗａｒｍ ａｉｒ）中で乾燥させた処理済生酵母（ｖｉａｂｌｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｙｅａｓｔ）を含んでもよい。無菌温風中での乾燥とは、酵母細胞を穏やかに乾燥させる方法である。無菌温風中で乾燥された酵母は、例えば５から２０ｗｔ％、例えば８から１５ｗｔ％、例えば１０から１２ｗｔ％、例えば１１ｗｔ％の麦汁中の酵母細胞の懸濁液から調製されてもよい。乾燥工程中の酵母細胞を保護するために、温風乾燥前に酵母細胞に乳化剤が添加される。

【0073】

粉末組成物は、グルコース及び／又はサッカロース等の炭水化物を含み得る。

【0074】

好ましくは、粉末組成物は、例えば２．５×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇから３．５×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇ、例えば２．７×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇから３．２×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇ、例えば２．８×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇから３．１×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇ、例えば２．９×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇから３．０×１０^１０ＣＦＵ／ｍ等、２×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇから４×１０^１０ＣＦＵ／ｍｇ含む。

【0075】

好ましくは、粉末組成物の含水率（ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｃｏｎｔｅｎｔ）は、例えば７．５ｗｔ％未満、例えば５ｗｔ％未満、例えば４ｗｔ％未満、例えば３．９ｗｔ％未満、例えば３．８ｗｔ％未満、例えば３．７ｗｔ％等、１０ｗｔ％未満である。

【0076】

このような粉末組成物は、週に１、２、３、４、５、６又は７回投与され得る。好ましくは、粉末組成物は、週に２～４回、例えば３回投与される。又は、粉末組成物は、１日に１、２、３又は４回、好ましくは１日に２から３回投与され得る。

【0077】

粉末組成物は、摂取前に、水又はジュースなどの水性飲料等の液体中に懸濁されてもよい。この液体は、グルコース及び／又はサッカロース等の炭水化物を含み得る。粉末組成物がグルコース及び／又はサッカロース等の炭水化物を含む場合、粉末組成物は水中に懸濁され得る。好ましくは、粉末組成物は、１０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから５０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、好ましくは２０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌから４０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌ、例えば３０×１０^６ＣＦＵ／ｍｌの濃度まで懸濁される。

【0078】

粉末組成物は、経口摂取用のカプセル又は錠剤（capsule or tablet）として製剤されてもよい。好ましくは、このようなカプセル又は錠剤は、例えば４００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から７，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば５００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から６，５００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば７５０×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から６，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば１，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から５，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば２，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から４，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば２，５００×１０^６ＣＦＵカプセル又は錠剤から３，５００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば３，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤等、３００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から７，５００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤を含む。

【0079】

このようなカプセル又は錠剤は、週に１、２、３、４、５、６又は７回、好ましくは週に２又は３回投与され得る。

【0080】

このような週２、３回摂取用のカプセル又は錠剤は、好ましくは１，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から５，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば２，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤から４，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤、例えば３，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤を含む。より好ましくは、このような週２、３回摂取用のカプセル又は錠剤は、４，０００×１０^６ＣＦＵ／カプセル又は錠剤を含む。

【0081】

又は、１つのカプセル又は錠剤が、１日１回経口投与されてもよい。このような毎日摂取用のカプセル又は錠剤は、好ましくは、１００×１０^６ＣＦＵから３，０００×１０^６ＣＦＵ、例えば２００×１０^６ＣＦＵから２，５００×１０^６ＣＦＵ、例えば３００×１０^６ＣＦＵから２，０００×１０^６ＣＦＵ、５００×１０^６ＣＦＵから１，５００×１０^６ＣＦＵ、例えば７５０×１０^６ＣＦＵから１，５００×１０^６ＣＦＵ、例えば８００×１０^６ＣＦＵ／カプセルから１，２００×１０^６ＣＦＵ／カプセルを含み、例えば１日に９００×１０ＣＦＵが投与される。

【0082】

本開示に係る組成物は、増殖培地を準備するステップと、増殖培地を滅菌又は低温殺菌するステップと、増殖培地で酵母細胞を増殖するステップと、酵母を３０ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理するステップと、を含む方法によって得られる。電磁波は、好ましくは約１から３００ＧＨｚの範囲、例えば１から２００ＧＨｚの範囲内であり、より好ましくは１０から１００ＧＨｚの範囲、例えば２０から８０ＧＨｚ、例えば３０から７０ＧＨｚ、例えば３５から約６５ＧＨｚ、例えば４０から６５ＧＨｚ、例えば３０ＧＨｚ、３１ＧＨｚ、３２ＧＨｚ、３３ＧＨｚ、３４ＧＨｚ、３５ＧＨｚ、３６ＧＨｚ、３７ＧＨｚ、３７．５ＧＨｚ、３８ＧＨｚ、３９ＧＨｚ、４０ＧＨｚ、４１ＧＨｚ、４２ＧＨｚ、４３ＧＨｚ、４４ＧＨｚ、４５ＧＨｚ、４６ＧＨｚ、４７ＧＨｚ、４８ＧＨｚ、４９ＧＨｚ、５０ＧＨｚ、５１ＧＨｚ、５２ＧＨｚ、５３ＧＨｚ、５４ＧＨｚ、５５ＧＨｚ、５６ＧＨｚ、７ＧＨｚ、５８ＧＨｚ、５９ＧＨｚ、６０ＧＨｚ、６１ＧＨｚ、６２ＧＨｚ、６３ＧＨｚ、６４ＧＨｚ、６５ＧＨｚ、６６ＧＨｚ、６７ＧＨｚ、６８ＧＨｚ、６９ＧＨｚ、７０ＧＨｚ、７１ＧＨｚ、７２ＧＨｚ、７３ＧＨｚ、７４ＧＨｚ、７５ＧＨｚ、７６ＧＨｚ、７７ＧＨｚ、７８ＧＨｚ、７９ＧＨｚ、８０ＧＨｚ、８１ＧＨｚ、８２ＧＨｚ、８３ＧＨｚ、８４ＧＨｚ、８５ＧＨｚ、８６ＧＨｚ、８７ＧＨｚ、８８ＧＨｚ、８９ＧＨｚ、及び９０ＧＨｚである。

【0083】

好ましくは、電磁波は、３７．５ＧＨｚ及び７５ＧＨｚからなる群から選択される。

【0084】

好ましくは、振動周波数は４２１９４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の１００ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0085】

好適な一実施形態において、振動周波数は４２１９４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の１００ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0086】

別の好適な実施形態において、振動周波数は５３５３４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0087】

別の好適な実施形態において、振動周波数は６０１２４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0088】

電磁波は、ＩＭＰＡＴＴダイオード発振器に基づいて、当技術分野で既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイス、例えばＹＡＶ－１治療デバイスによって伝送され得る。

【0089】

この電磁波の電力密度は、例えば約０．１ｍＷ／ｃｍ^２や、例えば０．００４ｍＷ／ｃｍ^２から０．２ｍＷ／ｃｍ^２の間等の１ｍＷ／ｃｍ^２以下であり得る。

【0090】

本開示はさらに、炎症及び／又は炎症によって引き起こされる症状の治療及び／又は緩和方法を提供し、この方法は、上記のように、１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞又は１ＧＨｚから３００ＧＨｚの範囲の電磁波で処理された酵母細胞から増殖した酵母細胞を、それらを必要とする対象に投与することを含む。

【0091】

この対象とは、ヒト等の任意の哺乳類であり得る。また、哺乳類とは、馬、牛、ラクダ、猫又は犬等の家畜哺乳類であり得る。したがって、ＥＨＦエネルギーは、ＥＨＦ放射によって外部から刺激された処理済酵母の形態で治療対象に伝達される。

【0092】

本発明は、発明の要旨から逸脱することなく、食品、飼料、他の飲料製品等、又はこれらの任意の組み合わせを含む任意の適切な形態で実施することができる。

【0093】

ＥＨＦ処理
ＥＨＦ（ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｈｉｇｈ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ）処理の効果を図１に示す（ＷＯ２０１１／０２３７６９にも記載されている）。

【0094】

図１Ａは、未処理細胞の増殖曲線である。Ｎ／Ｎ_０（Ｙ軸）は、培養中の細胞数Ｎと開始数（ｓｔａｒｔｉｎｇ ｎｕｍｂｅｒ）Ｎ_Ｏの比率であり、ｔ（時間、Ｘ軸）は培養発達時間（ｃｕｌｔｕｒｅ－ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｔｉｍｅ）である。図１Ｂは、処理済細胞の増殖曲線である。細胞によって生じた振動の周波数は、細胞の情報構造の対応する再構成によって同調することができ、これにより、個々の細胞の分裂周期期間の差異が実質的に除去され、増殖曲線が「階段状」となる。図１Ｂから明らかなように、各分裂周期後の細胞数は同調して倍加されるため、細胞数の時間依存性が階段状曲線（ｓｔｅｐ ｃｕｒｖｅ）によって表される。

【0095】

表１は、異なる電力密度レベル（Ｐ、ｍＷ／ｃｍ^２）での全ての細胞の細胞分裂を放射周波数４２．２ＧＨｚで同調させるのに必要な最小時間（ｔ０、分）の概要を示す。

【0096】

表１：異なる電力密度レベル（Ｐ、ｍＷ／ｃｍ^２）での全ての細胞の細胞分裂を放射周波数４２．２ＧＨｚで同調させるのに必要な最小時間（ｔ０、分）

【表1】

【0097】

表２は、異なる電力密度レベル（Ｐ、ｍＷ／ｃｍ^２）での１５％の細胞の細胞分裂を放射周波数４２．２ＧＨｚで同調させるのに要する時間（ｔ０、分）の概要を示す。

【0098】

表２：異なる電力密度レベル（Ｐ、ｍＷ／ｃｍ^２）での１５％の細胞の細胞分裂を放射周波数４２．２ＧＨｚで同調させるのに要する時間（ｔ０、分）

【表2】

【0099】

したがって、好適なＥＨＦ治療時間は、２０から１２０分の範囲にある。

【0100】

この方法は、処理済酵母細胞を増殖培地で増殖するステップを更に含んでいてもよい。所望の細胞濃度に達したら、いつでも増殖を中止し得る。

【0101】

増殖培地は、麦汁、即ち、麦汁及び酵母から得られるトニック麦芽飲料（tonic malt beverage）であってもよい。あらゆる種類の酵母が用いられ得る。あらゆる種類の麦汁が用いられ得る。また、麦汁は、醸造所から入手してもよいし、大麦麦芽から製造してもよいし、麦汁濃縮物から製造してもよい。

【0102】

麦汁は、７０から７５℃で３０分以上加熱する等して低温殺菌され得る。その後、麦汁は１８から２０℃の温度で最大２週間密閉容器に保管され得る。

【0103】

Ｓ．セレビシエ（Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）は、少量の１１ｗｔ％の無菌麦汁中への懸濁により活性化され得る。他の微生物による麦汁の汚染が無いことが重要である。

【0104】

その後、活性化された培養物を、寒天で固めた麦汁（ａｇａｒｉｚｅｄ ｗｏｒｔ）を含むいくつものペトリ皿に植菌し、純粋な酵母培養物を得る。これは顕微鏡によって確認され得る。

【0105】

ＥＨＦ処理の前に、これらの無菌純粋培養物を含むペトリ皿のうちの１つの酵母を、１１ｗｔ％の無菌麦汁を例えば５から５０ｍＬ、例えば６から４０ｍＬ、例えば７から３０ｍＬ、例えば８から２０ｍＬ、例えば９から１５ ｍＬ、例えば１０から１２ｍＬ収容する試験管（管、チューブ。ｔｕｂｅ）に移す。通常、これらの培養物を２５から２８℃で２０から２４時間、皮膜（ｓｋｉｍ）が現れるまで増殖する。

【0106】

そして、この酵母培養物をＥＨＦフィールドで処理する。これは、まず、無菌のペトリ皿を酵母懸濁液で満たすことによって行われ得る。その後、ペトリ皿に蓋をし、ＥＨＦ装置に入れる。このような装置は、ＥＨＦ領域（EHF-range）で電磁振動を生じさせるあらゆる装置であり得る。ＥＨＦ処理時間は、２４０分未満、例えば１３０分未満、例えば１２０分未満、例えば１１０分未満、例えば１００分未満であり、好ましくは、９０分未満、例えば８５分、例えば８０分、例えば７０分、例えば６０分、例えば５０分、例えば４０分である。ＥＨＦ振動の電力密度は、好ましくは約０．１ｍＷ／ｃｍ^２である。振動周波数は、３０から３００ＧＨｚの範囲内である。電磁波は、約３０から９０ＧＨｚの範囲内、例えば３５から６５ＧＨｚ、例えば３０ＧＨｚ、３１ＧＨｚ、３２ＧＨｚ、３３ＧＨｚ、３４ＧＨｚ、３５ＧＨｚ、３６ＧＨｚ、３７ＧＨｚ、３７．５ＧＨｚ、３８ＧＨｚ、３９ＧＨｚ、４０ＧＨｚ、４１ＧＨｚ、４２ＧＨｚ、４３ＧＨｚ、４４ＧＨｚ、４５ＧＨｚ、４６ＧＨｚ、４７ＧＨｚ、４８ＧＨｚ、４９ＧＨｚ、５０ＧＨｚ、５１ＧＨｚ、５２ＧＨｚ、５３ＧＨｚ、５４ＧＨｚ、５５ＧＨｚ、５６ＧＨｚ、５７ＧＨｚ、５８ＧＨｚ、５９ＧＨｚ、６０ＧＨｚ、６１ＧＨｚ、６２ＧＨｚ、６３ＧＨｚ、６４ＧＨｚ、６５ＧＨｚ、６６ＧＨｚ、６７ＧＨｚ、６８ＧＨｚ、６９ＧＨｚ、７０ＧＨｚ、７１ＧＨｚ、７２ＧＨｚ、７３ＧＨｚ、７４ＧＨｚ、７５ＧＨｚ、７６ＧＨｚ、７７ＧＨｚ、７８ＧＨｚ、７９ＧＨｚ、８０ＧＨｚ、８１ＧＨｚ、８２ＧＨｚ、８３ＧＨｚ、８４ＧＨｚ、８５ＧＨｚ、８６ＧＨｚ、８７ＧＨｚ、８８ＧＨｚ、８９ＧＨｚ、及び９０ＧＨｚであり得る。好ましくは、電磁波は、３７．５ＧＨｚ及び７５ＧＨｚからなる群から選択される。

【0107】

特定の実施形態において、振動周波数は４２１９４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の１００ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0108】

別の特定の実施形態において、振動周波数は５３５３４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0109】

さらに別の特定の実施形態において、振動周波数は６０１２４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調される。

【0110】

電磁波は、ＩＭＰＡＴＴダイオード発振器に基づいて、当技術分野で既知の任意の電子デバイス又はフォトニックデバイス、例えばＹＡＶ－１治療デバイスによって伝送され得る。

【0111】

電磁波の周波数変調は、それぞれの平均周波数の０％から約０．５％、例えばそれぞれの平均周波数の０．５％であり得る。

【0112】

ＥＨＦ装置での処理後、１１ｗｔ％の無菌麦汁を収容する試験管、例えば５０から１００ｍＬ試験管等に、上述の処理済懸濁液を移す。細胞を、通常２５から２８℃で２０から２４時間、皮膜が現れるまで増殖することができる。これが種材料（シードマテリアル。ｓｅｅｄ ｍａｔｅｒｉａｌ）である。

【0113】

そして、この種材料を、通常４から５Ｌの、語の量よりもわずかに大きい公称容量（ｎｏｍｉｎａｌ ｃａｐａｃｉｔｙ）の容器（試験管、缶等）に入れられた、通常２から３Ｌの低温殺菌又は無菌麦汁に添加し、細胞濃度が３０×１０^６ｃｅｌｌ／ｍＬになるまで、通常２５から２８℃で２０から２４時間培養する。

【0114】

もし大量の飲料を製造する場合、上述の処理は、以前の培養周期の成果物を種材料として無菌麦汁に種材料：麦汁＝１：１０の比率で添加することによって、いくつかの段階で実施されてもよい。細胞は、通常２５から２８℃で２０から２４時間、皮膜が現れるまで増殖することができる。飲料製造段階の最終段階は、細胞濃度が３０００万ｃｅｌｌ／ｍＬ以上となったら終了すると考えられる。

【0115】

この製造段階が完了後、飲料はいつでも消費・摂取可能な状態となり、ボトルや缶等の適切な輸送容器に移され得る。保存が必要であれば、飲料を約２から６℃、例えば２から４℃に冷却した後、例えば最大３週間保存してもよい。

【0116】

サッカロミセス・カールスベルゲンシスも上記と同様に処理され得る。

【0117】

処理済酵母細胞
以下に製造手順に関する実施可能な実施形態を示す。しかしながら、多くの異なる代替の製造手順が可能であり、このことは当業者であれば認識できるであろう。

【0118】

麦汁は醸造所から入手し、希釈麦汁中の乾物の重量分率は１１ｗｔ％（１１ｗｔ％の麦汁）とした。

【0119】

麦汁は、オートクレーブチャンバー（高圧蒸気滅菌室、高圧蒸気滅菌器。ａｕｔｏｃｌａｖｅ ｃｈａｍｂｅｒ）内で０．０５ＭＰａの圧力で２０分間滅菌され、１８から２０℃で保存された。

【0120】

酵母Ｓ．セレビシエ（Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（ＤＳＭ３３１４８）は、無菌状態での少量の１１ｗｔ％の無菌麦汁中への懸濁により活性化された。

【0121】

この酵母を、寒天で固めた麦汁を含むいくつものペトリ皿に植菌し、純粋な酵母培養物を得た。これは顕微鏡によって確認された。

【0122】

ＥＨＦ処理の前に、これらの無菌純粋培養物を含むペトリ皿のうちの１つの酵母を、１１ｗｔ％の無菌麦汁を１１ｍＬ収容する試験管に移した。この培養物を２８℃で２０から２４時間、皮膜が現れるまで増殖した。

【0123】

そして、この酵母培養物をＥＨＦフィールドで処理した。これは、まず、無菌のペトリ皿を酵母懸濁液で満たすことによって行われた。その後、ペトリ皿に蓋をし、ＥＨＦ装置に入れ、ＥＨＦ領域で電磁振動を生じさせた。ＥＨＦ処理時間は８０分であった。ＥＨＦ振動の電力密度は、０．１ｍＷ／ｃｍ^２付近で維持された。振動周波数は５３５３４±１０ＭＨｚであり、この周波数の前後の５０ＭＨｚ帯域で線形変調された。ＩＭＰＡＴＴダイオード発振器に基づく、ＹＡＶ－１治療デバイスによって電磁放射線が生成された。

【0124】

ＥＨＦ装置での処理後、上述の処理済懸濁液を、１１ｗｔ％の無菌麦汁を収容する７５ｍＬ試験管に移した。この細胞を、２８℃で２２時間、皮膜が現れるまで増殖した。これが種材料であった。

【0125】

そして、この種材料を、５Ｌの公称容量の試験管に入れられた、３Ｌの低温殺菌又は無菌麦汁に添加し、細胞濃度が３０×１０^６ｃｅｌｌ／ｍＬになるまで培養した。この処理済酵母細胞を下記の研究に用いた。

【0126】

また、この処理済酵母細胞は凍結乾燥し、カプセルとして製剤されてもよい。このようなカプセルは下記の患者研究で用いた。

【0127】

実験データ
本開示に係る組成物は、炎症のｉｎ ｖｉｔｒｏ（インビトロ）モデルにおいて評価された。要するに、本開示に係る組成物（すなわち、本開示に係る処理済酵母細胞を含む組成物）は、炎症誘発性マーカー（ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍａｒｋｅｒ）であるＩＬ－１β、Ｉ１－６、及びＴＮＦ－α、及びＬＰＳによって誘導されるｉＮＯＳの発現を減少させることによって抗炎症効果を示す。さらに、本開示に係る組成物（すなわち、本開示に係る処理済酵母細胞を含む組成物）は、抗炎症マーカー（ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍａｒｋｅｒ）であるＡＲＧ－１の発現を増加させることによって抗炎症効果を示す。

【0128】

材料
ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ、Dulbecco's Modified Eagle Medium）高グルコース、（Ａｕｒｏｇｅｎｅ社）；ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Fetal Bovine Serum）（Ｃｏｒｎｉｎｇ社）；大腸菌Ｏ１１１：Ｂ４由来リポ多糖（ＬＰＳ（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ） from Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１１１：Ｂ４）（Ｓｉｇｍａ社）；ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（カルシウム，マグネシウム不含）（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ ｗ／ｏ Ｃａｌｃｉｕｍ，ｗ／ｏ Ｍａｇｎｅｓｉｕｍ）（Ａｕｒｏｇｅｎｅ社）；ＱＩＡｚｏｌ Ｌｙｓｉｓ Ｒｅａｇｅｎｔ ５０ｍｌ（Ｑｉａｇｅｎ社）；組織培養処理済ウェル細胞培養クラスター平底蓋付き（Ｗｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｌｕｓｔｅｒ Ｆｌａｔ Ｂｏｔｔｏｍ ｗｉｔｈ Ｌｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｔｒｅａｔｅｄ）、（Ｃｏｒｎｉｎｇ社）。

【0129】

方法
組成物 Ａ：２％（重量／体積）グルコースを添加した麦汁中の処理済酵母細胞。
組成物 Ｂ：２％（重量／体積）グルコースを添加した酵母抽出ペプトンデキストロース（ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ ｐｅｐｔｏｎｅ ｄｅｘｔｒｏｓｅ：ＹＥＰＤ）中の乾燥処理済酵母細胞。
未処理細胞：２％（重量／体積）グルコースを添加した酵母抽出ペプトンデキストロース（ＹＥＰＤ）中の乾燥未処理酵母細胞。

【0130】

１日目：ＤＭＥＭ高グルコース培地＋５％ＦＢＳ中で増殖させた１，０００，０００個のＢＶ２細胞（Ｃ５７／ＢＬ６マウス由来のミクログリア細胞の一種）を６ウェルプレートに植菌した（各ウェルに１，０００，０００／ｍｌの細胞（１４条件））。各ウェルはそれぞれ１ｍＬ培地を収容した。このプレートを３７℃で一晩置いた。

【0131】

２日目：本開示に係る組成物を、ウェルごとに５×１０^２ＣＦＵの濃度でＢＶ－２細胞に添加し、３７℃で４５分間培養した。対照実験では、ＢＶ細胞を３７℃で４５分間培養した。この前処理の後、リポ多糖（ＬＰＳ）（５０ｎｇ／ｍＬ ＰＢＳ）を終濃度１ｎｇ／ｍＬまで添加し、細胞を３７℃で３時間及び４時間培養した。４時間後、上清をオートクレーブ処理した１．５ｍｌエッペンドルフチューブに回収し、１２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、ペレット（沈殿物、ｐｅｌｌｅｔ）を除去し、－８０℃で保存した。接着細胞（ａｄｈｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌ）も７００μｌのＱｉａｚｏｌを添加して回収し、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲで逆転写して分析したＲＮＡ抽出まで－８０℃で保存した。

【0132】

分析
抗炎症マーカーＡＲＧ－１ならびに炎症誘発性マーカーＩＬ－１β、Ｉｌ－６、ＴＮＦ－α、及びｉＮＯＳのｍＲＮＡ発現をＲＴ－ＰＣＲによって分析した。ＩＬ－１βは、ＬＰＳに反応してアップレギュレーション（発現上昇、上方制御、上向き調節。ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅ）される強力な炎症誘発性サイトカインである。これは感染と闘う作用を有する。Ｉｌ－６は、（リンパ組織由来の）強力な炎症誘発性サイトカインだが、（筋肉組織由来の）抗炎症性マイオカイン（ｍｙｏｋｉｎｅ）でもある。ＩＬ－６はＬＰＳに反応してアップレギュレーションされる。ＴＮＦ－αは、ＩＬ－１βと同様の作用を有する強力な炎症誘発性サイトカインであり、ＬＰＳに反応してアップレギュレーションされる。誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ、inducible nitric oxide synthase）は、病原体に対する身体の防衛機構に関する一酸化窒素（ＮＯ）の生成に触媒作用を及ぼし、それによって炎症を誘発する。ｉＮＯＳはＬＰＳに反応してアップレギュレーションされる。ＡＲＧ‐１はアルギナーゼをコードする遺伝子であり、免疫学的交差反応性、すなわち異なる抗原が免疫系とどの程度類似しているように見えるかに関する。

【0133】

細胞面積（「未処理細胞」及び「組成物Ｂ」に対応する組成物に曝露後）は、Ａｐｏｔｏｍｅ顕微鏡のコンピュータ化されたプログラムを利用したアクチン免疫蛍光実験により算出された。

【0134】

結果
図２から図６に示した結果は、上記のように処理したサッカロミセス・セレビシエ（ＤＳＭ３３１４８として寄託）を使用した研究の結果である。図７に示した結果は、サッカロミセス・カールスベルゲンシス（ＤＳＭ３４１４３として寄託）を使用した研究の結果である。

【0135】

図２から図７：対応のあるｔ検定：＊ ｐ＜０．０５，＊＊ ｐ＜０．０１，＊＊＊ ｐ＜０．００５

【0136】

ＩＬ－１βの発現：図２ａ及び図２ｂに示すように、ＩＬ－１βのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳに曝露された細胞においてアップレギュレーションされる。ＩＬ－１βは、本開示に係る組成物での処理後アップレギュレーションされない。重要なこととして、ＩＬ－１βのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳのみによる処理と比較して、ＬＰＳと本開示に係る組成物との併用処理によって大幅に減少するため、本開示に係る組成物は抗炎症効果を有する。つまり、本開示に係る組成物は、炎症誘発性ＬＰＳの効果を阻害する。未処理酵母細胞（すなわち、上述のようなＥＨＦ処理されていない酵母細胞）は、ＬＰＳによって引き起こされるＩＬ－１βのアップレギュレーションを、処理済酵母よりも低い程度まで阻害した（データは不図示）。

【0137】

ＩＬ－６の発現：図３ａ及び図３ｂに示すように、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳに曝露された細胞においてアップレギュレーションされる。ＩＬ－６は、本開示に係る組成物での処理後アップレギュレーションされない。重要なこととして、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳのみによる処理と比較して、ＬＰＳと本開示に係る組成物との併用処理によって大幅に減少するため、本開示に係る組成物は抗炎症効果を有する。つまり、本開示に係る組成物は、炎症誘発性ＬＰＳの効果を阻害する。未処理酵母細胞（すなわち、上述のようなＥＨＦ処理されていない酵母細胞）は、ＬＰＳによって引き起こされるＩＬ－６のアップレギュレーションを、処理済酵母よりも低い程度まで阻害した（データは不図示）。

【0138】

ＴＮＦ－αの発現：図４ａ及び図４ｂに示すように、ＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳに曝露された細胞においてアップレギュレーションされる。ＴＮＦ－αは、本開示に係る組成物での処理後アップレギュレーションされない。重要なこととして、ＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳのみによる処理と比較して、ＬＰＳと本開示に係る組成物との併用処理によって大幅に減少するため、本開示に係る組成物は抗炎症効果を有する。つまり、本開示に係る組成物は、炎症誘発性ＬＰＳの効果を阻害する。未処理酵母細胞（すなわち、上述のようなＥＨＦ処理されていない酵母細胞）は、ＬＰＳによって引き起こされるＩＬ－６のアップレギュレーションを、処理済酵母よりも低い程度まで阻害した（データは不図示）。

【0139】

ｉＮＯＳの発現：図５ａ及び図５ｂに示すように、ｉＮＯＳのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳに曝露された細胞においてアップレギュレーションされる。ｉＮＯＳは、本開示に係る組成物での処理後アップレギュレーションされない。重要なこととして、ｉＮＯＳのｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳのみによる処理と比較して、ＬＰＳと本開示に係る組成物との併用処理によって大幅に減少するため、本開示に係る組成物は抗炎症効果を有する。つまり、本開示に係る組成物は、炎症誘発性ＬＰＳの効果である、炎症性ＮＯ生成を阻害する。また、図５ａ及び図５ｃに示すデータは、未処理酵母細胞を含む組成物での処理後、ｉＮＯＳがＬＰＳに曝露された細胞においてアップレギュレーションされることを示す。したがって、抗炎症効果は、本開示に係る組成物（上述のＥＨＦ処理済酵母）のみに対して実証される。つまり、ＢＶ２細胞に対するＬＰＳの炎症誘発効果の阻害は、本開示に係る組成物のみに対して見られ、未処理酵母組成物に対しては見られなかった。

【0140】

ＡＲＧ－１の発現：図６ａ及び図６ｂに示すように、ＡＲＧ－１のｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳに曝露された細胞においてダウンレギュレーション（発現低下、下方制御、下向き調節。ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅ）される。ＡＲＧ－１は、本開示に係る組成物での処理後わずかにアップレギュレーションされる。重要なこととして、ＡＲＧ－１のｍＲＮＡ発現は、ＬＰＳのみによる処理と比較して、ＬＰＳと本開示に係る組成物との併用処理によって大幅に増加するため、本開示に係る組成物は炎症誘発効果を有する。本開示に係る組成物は、直接的な抗炎症効果を引き起こし、つまり、ＬＰＳの抗炎症誘発効果とは関係無い。つまり、本開示に係る組成物は、抗炎症性表現型の方面で細胞に影響を及ぼす。

【0141】

細胞サイズ：一般に、ＢＶ２細胞は直径約１０から１５μｍ（約８０から１８０μｍ^２の面積に相当）まで様々であり、一様に丸く、時折薄い細胞質突起が現れる（データは不図示）。同時ＬＰＳ活性化に伴うリポ多糖（ＬＰＳ）による処理後、ＢＶ２細胞は通常、直径が大きくなり（２５から３０μｍ（約４９０から７１０μｍ^２の面積に相当））、多形となり、多くは厚い細胞質突起が現れる（データ不図示）。処理済酵母細胞（すなわち、本開示に係る酵母細胞）の存在下におけるＢＶ２細胞は、未処理酵母細胞（「ＣＴＲ」及び「ＹＰ Ｇｌｕ ２％」）の存在下におけるＢＶ２細胞よりも小さい。これは、さらにＬＰＳで処理した細胞（「ＬＰＳ」及び「ＹＰ Ｇｌｕ ２％＋ＬＰＳ」）にも当てはまる。特に、試験したすべての条件下において、ＢＶ２細胞は、未処理酵母の存在下よりも処理済酵母（すなわち、本開示に係る酵母細胞）の存在下において小さくなる。つまり、処理済酵母細胞（すなわち、本開示に係る酵母細胞）に抗炎症効果があることは明らかである。

【0142】

患者研究
ＩＢＤ及びＩＢＳの症状に対する本開示に係る組成物の効果を研究により評価した。本開示に係る乾燥組成物を評価した。組成物は、サッカロミセス・カールスベルゲンシス（ＤＳＭ３４１４３として寄託）、すなわち、本明細書に記載のように処理され、無菌熱風中で乾燥され、カプセル（約５．８×０^９ＣＦＵに相当する２００ｍｇ／カプセル）として製剤化された酵母細胞を含む。２つのグループの患者が治療を受けた。１つのグループ（「グループＡ」）には、上述の通り処理した酵母細胞（サッカロミセス・セレビシエ（ＤＳＭ３３１４８））を投与した。もう一方のグループ（「グループＢ」）には、未処理酵母細胞（サッカロミセス・セレビシエ（ＤＳＭ３３１４８））を与えた。

【0143】

グループＡには６人の被験者（２５から６６歳の女性６人）が含まれ、そのうち５人がＩＢＳと診断され、１人がＩＢＤと診断された。

【0144】

グループＢには６人の被験者（３９から７０歳の女性５人、７９歳の男性１人）が含まれ、そのうち２人がＩＢＳと診断され、４人がＩＢＤと診断された。

【0145】

被験者たちは、週３回、朝食前に１カプセルを水と一緒に服用するように指示され、つまり、週に合計で６００ｍｇ服用した。１２週間後、各被験者は各自のＩＢＳ／ＩＢＤの症状を評価し、症状の改善があったかどうかを述べるように求められた。

【0146】

この研究により、本開示に記載のように処理されたサッカロミセス・セレビシエを服用した６人の被験者全員において、ＩＢＳ及びＩＢＤの症状が治療によって明らかに改善されたことが実証された（「グループＡ］）。未処理酵母細胞を服用した対照群（「グループＢ」）では、たった１人の被験者だけがおなら（ガス。ｇａｓ）の量がわずかに減ったように感じた。特に、有害な効果（吐き気）があった被験者は１人のみであり、摂取後に１回のみであった。他には、本開示に係る組成物を服用したグループでは有害な反作用は報告されなかった。各被験者について以下に説明する。各被験者のコメントは、翻訳後に以下に引用される。

【0147】

グループＡ（本開示に係る組成物を服用）
被験者Ａ１：女性、６６歳、ＩＢＳと診断されて５年。症状：胃痛、吐き気、おなら、下痢、便秘、膨満感、胸焼け、こむらがえり。感じられた改善：胃痛と膨満感の軽減。反作用：有害な反作用なし。

【0148】

被験者Ａ２：女性、５６歳、ＩＢＳと診断されて１０年。症状：胃痛、吐き気、おなら、下痢、便秘、膨満感、胸焼け、腰痛、こむらがえり。感じられた改善：腸の不調と胃痛と胸焼けの軽減。反作用：有害な反作用なし。

【0149】

被験者Ａ３：女性、６５歳、ＩＢＳと診断されて２２年。症状：胃痛、おなら、下痢、膨満感。感じられた改善：膨満感の軽減。反作用：有害な反作用なし。

【0150】

被験者Ａ４：女性、２５歳、ＩＢＳと診断されて４年。症状：胃痛、吐き気、おなら、下痢、膨満感、胸焼け。感じられた改善：胃痛、吐き気、胸焼け、下痢の解消。多少のおならと膨満感のみ残る。反作用：有害な反作用なし。

【0151】

被験者Ａ５：女性、２８歳、ＩＢＤと診断されて５年。症状：胃痛、おなら、下痢、便秘、膨満感、こむらがえり。感じられた改善：再発からの回復が早かった。反作用：有害な反作用なし。

【0152】

被験者Ａ６：女性、５１歳、ＩＢＳと診断。症状：胃痛、吐き気、おなら、便秘、膨満感。感じられた改善：便秘の軽減。反作用：１度だけ服用後に吐き気を感じた。その他：有害な反作用なし。

【0153】

グループＢ（未処理酵母を服用）
被験者Ｂ１：男性、７９歳、ＩＢＳと診断されて６年。症状：胃痛、吐き気、おなら、下痢、膨満感、胸焼け。感じられた改善：なし。反作用：有害な反作用なし。

【0154】

被験者Ｂ２：女性、５０歳、ＩＢＤと診断されて７年。症状：胃痛、おなら、下痢、膨満感。感じられた改善：なし。反作用：有害な反作用なし。

【0155】

被験者Ｂ３：女性、７０歳、ＩＢＤと診断されて２年。症状：下痢。感じられた改善：おならのごくわずかな軽減。反作用：有害な反作用なし。

【0156】

被験者Ｂ４：女性、３９歳、ＩＢＤと診断されて４年。症状：胃痛、下痢、こむらがえり、膨満感。感じられた改善：なし。反作用：有害な反作用なし。

【0157】

被験者Ｂ５：女性、６３歳、ＩＢＤと診断されて４２年。症状：胃痛、吐き気、おなら、下痢、膨満感。感じられた改善：なし。反作用：有害な反作用なし。

【0158】

被験者Ｂ６：女性、３６歳、ＩＢＳと診断されて８年。症状：胃痛、おなら、下痢、胸焼け、こむらがえり、膨満感。感じられた改善：なし。反作用：有害な反作用なし。

【図1A】

【図1B】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5(1)】

【図5(2)】

【図6】

【図7】

【国際調査報告】