特表 2024-525445 炎症および老化に関連する過程に対抗し、細胞エネルギおよび／または代謝をサポートする組成物および方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-07-12

(54)【発明の名称】炎症および老化に関連する過程に対抗し、細胞エネルギおよび／または代謝をサポートする組成物および方法

(51)【国際特許分類】

   A23L 33/105 20160101AFI20240705BHJP

   A61K 36/185 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/21 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/23 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/31 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/45 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/53 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/63 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/73 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/74 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/752 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/81 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/87 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/8962 20060101ALI20240705BHJP

   A61K 36/9068 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 3/02 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 39/06 20060101ALI20240705BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240705BHJP

【ＦＩ】

A23L33/105

A61K36/185

A61K36/21

A61K36/23

A61K36/31

A61K36/45

A61K36/53

A61K36/63

A61K36/73

A61K36/74

A61K36/752

A61K36/81

A61K36/87

A61K36/8962

A61K36/9068

A61P3/02

A61P29/00

A61P39/06

A61P43/00 121

【審査請求】有

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2023580432

(86)(22)【出願日】2022-06-17

(85)【翻訳文提出日】2024-02-26

(86)【国際出願番号】 US2022033999

(87)【国際公開番号】W WO2023278181

(87)【国際公開日】2023-01-05

(31)【優先権主張番号】63/215,716

(32)【優先日】2021-06-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/285,591

(32)【優先日】2021-12-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522311680

【氏名又は名称】デイリーカラーズ ヘルス，インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＤＡＩＬＹＣＯＬＯＲＳ ＨＥＡＬＴＨ ＩＮＣ．

【住所又は居所原語表記】８６０ Ｊｏｎｉｖｅ Ｒｏａｄ，Ｓｅｂａｓｔｏｐｏｌ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ９５４７２（ＵＳ）

(74)【代理人】

【識別番号】100109634

【弁理士】

【氏名又は名称】舛谷 威志

(74)【代理人】

【識別番号】100129263

【弁理士】

【氏名又は名称】中尾 洋之

(74)【代理人】

【識別番号】100160831

【弁理士】

【氏名又は名称】大谷 元

(72)【発明者】

【氏名】ポンド，ハートレイ

【テーマコード（参考）】

4B018

4C088

【Ｆターム（参考）】

4B018LB10

4B018MD01

4B018MD08

4B018MD23

4B018MD44

4B018MD49

4B018MD52

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4B018MD66

4B018ME06

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4B018MF01

4B018MF02

4C088AB12

4C088AB14

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4C088AB38

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4C088MA37

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4C088MA52

4C088NA05

4C088NA14

4C088ZB11

4C088ZB22

4C088ZC21

4C088ZC35

4C088ZC37

4C088ZC52

4C088ZC75

(57)【要約】

企図される組成物および方法は、地中海食に一般的に見られるポリフェノールの組み合わせに基づくものであり、その組み合わせにより、炎症性シグナル伝達および老化関連遺伝子の発現を低下させ、ミトコンドリア生合成および細胞エネルギ代謝をサポートする。特に、観察された多面発現効果は、複数のシグナル伝達経路にまたがるだけでなく、加齢に伴うエネルギ低下、免疫力の低下、慢性亜急性炎症の増加や持続に関連する多くのマーカに関しても、相乗的な作用を示した。別の観点から見ると、企図される組成物は、地中海食で一般的に観察される多くの利点の基礎を形成する生化学的に多様な分子の調和を表す。
【選択図】図２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を組み合わせた栄養学的に許容される担体を含み、
前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する、ことを特徴とする、栄養組成物。

【請求項2】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも一つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも二つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項5】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも三つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項6】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）およびイソプロスタンの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項7】

前記組成物がさらにＮＦκＢの発現を低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、細胞へのブドウ糖取り込みをさらに増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

前記組成物が、細胞におけるミトコンドリア生合成をさらに増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物が、活性酸素種による酸化的損傷をさらに低減する、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物が、炎症性アディポカインの発現をさらに減少させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物が、老化関連遺伝子の発現をさらに低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項13】

前記組成物が経口投与用に処方される、請求項１に記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物が単回投与単位で処方される、請求項１３に記載の組成物。

【請求項15】

前記単回投与単位が５０～１０００ｍｇの組成物を含有する、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記単回投与単位が、カプセル、グミ、または粉末として製剤化される、請求項１４に記載の組成物。

【請求項17】

ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項18】

ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項19】

前記組成物が、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を治療または軽減することに有効である、請求項１に記載の組成物。

【請求項20】

被験者の健康をサポートする方法であって、請求項１に記載の組成物を個体に投与する、ことを含む方法。

【請求項21】

前記組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を処置または軽減することに有効な量で投与される、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記組成物が、少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇの間で投与される、請求項２０または２１に記載の方法。

【請求項23】

組成物の経口投与により被験者の健康をサポートする請求項１に記載の組成物の使用方法。

【請求項24】

前記組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を処置または軽減することに有効な量で投与される、請求項２３に記載の使用方法。

【請求項25】

前記組成物が、少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇの間で投与される、請求項２４または２５に記載の使用方法。

【請求項26】

被験者の炎症老化を軽減する方法であって、
被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を組み合わせた栄養学的に許容される担体を投与することを含み、
前記植物素材の組み合わせがヒト細胞における少なくとも一つの炎症性サイトカインの放出を減少させ、ヒト細胞における少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させる、ことを特徴とする方法。

【請求項27】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、地中海食の一部である、請求項２６に記載の方法。

【請求項29】

最も典型的には、前記炎症性サイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、およびイソプロスタンからなる群より選択される、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト細胞における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記老化関連遺伝子が、ＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６^ＩＮＫ、およびｐ２１からなる群より選択される、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記炎症老化の軽減は、加齢に伴う免疫の低下の軽減、加齢に伴うエネルギ代謝の低下の軽減、加齢に伴うミトコンドリア生合成の低下の軽減、炎症に関連した少なくとも一つの症状の軽減、および／またはメタボリックシンドロームに関連した少なくとも一つの症状の軽減からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項33】

前記組成物の投与はさらに、ＮＦκＢの発現を減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞内のミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または細胞内ＡＴＰを増加させる、請求項２６に記載の方法。

【請求項34】

前記被験者への投与は、前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材の経口投与からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項35】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を約５０～１０００ｍｇの用量で投与する、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材が、錠剤、ドリンク剤、またはグミとして処方される、請求項３４に記載の方法。

【請求項37】

植物素材の組み合わせが、ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項38】

前記植物素材の組み合わせは、ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項39】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を、少なくとも３０日間にわたって少なくとも一日一回投与する、請求項２６に記載の方法。

【請求項40】

被験者の炎症を軽減する方法であって、
被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を組み合わせた栄養学的に許容される担体を投与することを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させ、および／または少なくとも一つの炎症性アディポカインを減少させる、ことを特徴とする方法。

【請求項41】

前記植物素材の組み合わせは、少なくとも一つのサイトカインの減少に関して相乗的な組み合わせである、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させる、請求項４０または４１に記載の方法。

【請求項43】

前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させ、少なくとも一つの炎症性アディポカインを減少させる、請求項４０または４１に記載の方法。

【請求項44】

細胞内のブドウ糖取り込みを増加させる方法であって、
赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を組み合わせた栄養学的に許容される担体を細胞に接触させることを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせが接触すると、前記細胞へのブドウ糖取り込みが増加する、ことを特徴とする方法。

【請求項45】

細胞内へのブドウ糖取り込みの増加は、チアゾリンジオン系薬剤を用いた場合のブドウ糖取り込みの増加と同等かそれ以上である、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記接触させることは経口投与を含む、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

細胞内のＡＴＰレベルを増加させる方法であって、
赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を組み合わせた栄養学的に許容される担体を細胞に接触させることを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせが接触すると、前記細胞内のＡＴＰレベルが増加する、ことを特徴とする方法。

【請求項47】

前記細胞が筋肉細胞である、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材であって、前記植物素材を摂取する個体における炎症老化の少なくとも一つの症状を軽減するために使用される植物素材。

【請求項49】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項４８に記載の使用方法。

【請求項50】

ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させ、ＮＦκＢシグナル伝達を減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞におけるミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させる、請求項１に記載の栄養組成物の使用方法。

【発明の詳細な説明】

【関連出願】

【0001】

本出願は、２０２１年６月２８日に出願されたシリアル番号６３／２１５７１６の米国仮特許出願および２０２１年１２月３日に出願されたシリアル番号６３／２８５５９１の米国仮特許出願に基づき優先権を主張するものであり、これら両出願を参照により本明細書に組み込むものとする。

【技術分野】

【0002】

本発明の分野は、栄養補助食品の組成および方法であり、特にポリフェノールおよびポリフェノール混合物、ならびに軽度／慢性炎症、加齢に伴う免疫力の低下、エネルギ代謝の低下、および／または肥満などの加齢に伴う様々な状態の軽減におけるこれらの使用に関するものである。

【背景技術】

【0003】

背景の説明には、本開示を理解する上で有用な情報が含まれている。本明細書で提供される情報のいずれかが先行技術であること、または現在特許請求されている発明に関連するものであること、あるいは特定的または暗黙的に言及されている刊行物が先行技術であることを認めるものではない。

【0004】

本明細書におけるすべての刊行物および特許出願は、個々の刊行物または特許出願が参照により組み込まれることが、具体的かつ個別に示されている場合と同じ程度まで、参照により組み込まれる。組み込まれた引用文献における用語の定義または使用が、本書に規定されたその用語の定義と矛盾または反する場合、本書に規定されたその用語の定義が適用され、引用文献におけるその用語の定義は適用されない。

【0005】

ビタミンやその他の単離栄養化合物にはかなりの種類があり、そのような化合物の利点として、免疫サポート、抗炎症作用、抗老化作用、心臓サポート、消化器サポートなどが挙げられる。あいにく、ビタミンやその他の単離栄養化合物を摂取した場合に、これらの利点があるとされるいくつかの側面を立証する証拠は、かなり少ない。同様に、栄養補助食品が植物部位の抽出物やパウダである場合、さまざまな効能が宣伝されるが、実際の効能は証明されていないか、あるいはまったく証明されていないことが多い。さらに、単離栄養化合物や個々の植物抽出物や濃縮物は、一般的に健康的な食生活を反映していない。

【0006】

特に、全体的な健康、長寿、および／または身体的回復力に関連する特定の地理的および民族的な食事の種類があり、そのような有益な効果は実際によく文書化され、立証されている。例えば、地中海食は一般的に、心血管リスク因子の低下（例えば、Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ２０１８，１０，３７９；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｎｕ１００３０３７９を参照）、炎症性・代謝性バイオマーカの低下、アルツハイマ病リスクの低下（例えば、Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ．２０１０；２２（２）：４８３－４９２を参照）、特定の炎症マーカの減少（例えば、Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ２０１８，１０，６２；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｎｕ１００１００６２を参照）を伴う。このような食事によく含まれる成分のひとつにはポリフェノールがあり、個々の食事性ポリフェノール（例えば、Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｐｈｅｎｏｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ Ａｇａｉｎｓｔ Ｅｎｚｙｍｅｓ Ｌｉｎｋｅｄ ｗｉｔｈ Ｈｕｍａｎ Ｄｉｓｅａｓｅｓ：ＵＲＬ：ｄｘ．ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．５７７２／６６８４４を参照）や厳選された着色ポリフェノールの具体的な効果について、さまざまな研究が発表されている（例えば、Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ．Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ． Ｔｅｃｈｎｏｌ．２０２０．１１：１０．１‐１０．３８を参照）。しかし、化学的に異なるポリフェノールが多数存在し複雑であるため、多くの研究は、一種類のポリフェノールとその化合物の特定の生化学的効果に焦点を当てるにとどまり、また、食餌の詳細な分子学的特徴を明らかにすることなく、一般的な疫学情報を提供しているにすぎない。

【0007】

複数のポリフェノールを食事で補うために、さまざまなサプリメントが知られている。例えば、バイタルレッズ（Ｇｕｎｄｒｙ ＭＤ社）は、エネルギを増加させ、消化を改善するために、多くの赤色植物素材からの濃縮ポリフェノールパウダブレンドを市販している。このようなブレンドには、化学的に異なるさまざまなポリフェノールが有利に含まれる。しかし、ポリフェノールの供給源として使用される植物素材の選択は、一般的な食事からの摂取量を反映したものではない。同様に、酸化ストレスから細胞を保護する抗酸化製剤として、ブドウ、オリーブ、ザクロ、緑茶、グレープフルーツ、ビルベリ、オレンジ抽出物の市販混合物であるＦｙｔｅｘｉａ社のＯｘｘｙｎｅａが提供されている（例えば、Ｆｙｔｅｘｉａ社のＯｘｘｙｎｅａを参照）。酸化ストレスの軽減には有益であるが、このような抗酸化剤製剤の原料となる成分は、（慢性亜急性）炎症、ＮＦκＢシグナル伝達、エネルギ代謝低下、老化、加齢に伴う免疫低下、および／または肥満に関連する分子署名に影響を与えることは一般的には証明されていない。

【0008】

このように、様々な栄養補助食品が当技術分野で知られているにもかかわらず、そのすべて、あるいはほとんどすべてが、様々な欠点を抱えている。その結果、栄養補助食品、特に、（慢性亜急性）炎症、ＮＦκＢシグナル伝達、エネルギ代謝の低下、老化、加齢に伴う免疫力の低下、および／または肥満に対抗することが証明された、改良した組成物および方法を提供する必要がある。

【発明の概要】

【0009】

本発明者は現在、地中海食の食物アイテムに一般的に見られるポリフェノールおよび／またはポリフェノールを豊富に含む素材（例えば、抽出物やパウダ）の特定の組み合わせについて、加齢に伴う免疫力の低下、炎症、エネルギ代謝の低下、および／または肥満に関連する様々な分子署名を有益に調節する、様々な組成物および方法を見出した。その結果、本明細書で提示されるポリフェノールおよび／またはポリフェノールを豊富に含む素材は、加齢に伴う免疫力の低下、炎症の増加または慢性化、エネルギ代謝の低下、および／または肥満の一つ以上を特徴とし得る炎症老化と闘うための栄養学に基づくアプローチに有利に使用することができる。

【0010】

本発明主題の一つの態様において、本発明者は、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養的に許容される担体を含む栄養組成物を企図し、特に好ましい実施の形態において、前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する。

【0011】

例えば、前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる。別の観点から見ると、有色植物素材は地中海食に基づいて選択されるか、またはその一部であってもよい。

【0012】

いくつかの実施の形態では、前記炎症性サイトカイン放出は、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）、およびイソプロスタンのうちの少なくとも一つ、または少なくとも二つ、または少なくとも三つの放出である。他の実施の形態では、前記炎症性サイトカイン放出は、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）、およびイソプロスタンの放出である。

【0013】

本明細書に提示される組成物は、ＮＦκＢの発現をさらに減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞におけるミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または一つ以上の老化関連遺伝子の発現を減少させ得ることが、さらに理解されるべきである。

【0014】

最も一般的には、組成物は経口投与用に処方され、バルク材料として、または単回投与単位で処方されるが、必ずしもその必要はない。例えば、前記単回投与単位は５０～１０００ｍｇの組成物を含み、カプセル、グミ、バルク粉末として製剤化することができる。また、企図される組成物は、ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含んでもよいことが容易に理解できるであろう。同様に、企図される組成物はまた、ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質を含んでもよい。

【0015】

したがって、企図される組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を治療または軽減することに有効であると考えられる。

【0016】

したがって、本発明者は、本明細書に示した組成物が個人に投与される被験者の健康をサポートする方法を企図する。例えば、組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を処置または軽減することに有効な量で投与されてもよい。したがって、投与は少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇで行ってもよい。このように、企図される組成物は、組成物の経口投与により被験者の健康および健康的な老化を支援するために使用されてもよい。

【0017】

したがって、本発明主題のさらなる態様では、本発明者はまた、被験者における炎症老化を減少させる方法を企図しており、前記方法は、被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせて、栄養学的に許容される担体を投与することを含み、前記植物素材の組み合わせがヒト細胞における少なくとも一つの炎症性サイトカインの放出を減少させ、ヒト細胞における少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させる。

【0018】

特定の実施の形態では、前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなってもよい。したがって、前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、地中海食の一部である、または地中海食に基づいて選択することができる。

【0019】

最も典型的には、前記炎症性サイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、およびイソプロスタンからなる群より選択される。特に好ましい態様では、前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト細胞における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する。前記老化関連遺伝子に関しては、前記老化関連遺伝子がＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６ＩＮＫ、ｐ２１からなる群より選択されることが企図される。

【0020】

有益なことに、炎症老化の軽減は、加齢に伴う免疫の低下の軽減、加齢に伴うエネルギ代謝の低下の軽減、加齢に伴うミトコンドリア生合成の低下の軽減、炎症に関連した少なくとも一つの症状の軽減、および／またはメタボリックシンドロームに関連した少なくとも一つの症状の軽減からなる。

【0021】

さらに、少なくともいくつかの実施の形態では、組成物の投与は、ＮＦκＢの発現をさらに有利に減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞内のミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または細胞内ＡＴＰを増加させることが理解されるべきである。

【0022】

被験者への投与は、複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材の経口投与からなり、例えば、約５０～１，０００ｍｇの間の投与量であることが好ましいが、必ずしもその必要はない。所望により、複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を、錠剤、ドリンク剤、またはグミとして処方してもよい。さらに、企図される材料は、ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含んでよい。同様に、前記植物素材の組み合わせは、ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含むことができる。

【0023】

本発明主題のさらに別の態様では、本発明者はまた、被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせて栄養学的に許容される担体を被験者に投与することを含む、被験者の炎症を軽減する方法を企図する。好ましくは、前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる。そのような方法において、前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させ、および／または少なくとも一つの炎症性アディポカインを減少させる。前記植物素材の組み合わせは、少なくとも一つのサイトカインの減少に関して相乗的な組み合わせであることが好ましいが、必ずしもその必要はない。

【0024】

本発明主題のさらに別の態様では、本発明者は、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を細胞に接触させる工程を含む、細胞におけるブドウ糖取り込みを増加させる方法を企図し、前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる。このような方法において、植物素材の組み合わせが細胞に接触すると、細胞へのブドウ糖取り込みが増加する。特に、以下に詳述するように、細胞内へのブドウ糖取り込みの増加は、ロシグリタゾンなどのチアゾリンジオン系薬剤を用いた場合のブドウ糖取り込みの増加（それ以外は同じ条件下）と同等かそれ以上であることが観察された。

【0025】

本発明主題のさらなる態様では、本発明者は、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を細胞に接触させる工程を含む、細胞におけるＡＴＰレベルを上昇させる方法も企図し、前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる。このような方法では、植物素材の組み合わせが細胞に接触すると、細胞（特に筋肉細胞）のＡＴＰレベルが上昇する。

【0026】

したがって、別の観点から見ると、本発明者は、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材であって、前記植物素材を摂取する個体における炎症老化の少なくとも一つの症状を軽減するために使用される植物素材を企図する。

【0027】

同様に、本発明者はまた、ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させ、ＮＦκＢシグナル伝達を減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞におけるミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させるために、本明細書に提示された栄養組成物の使用を企図する。

【0028】

本発明の主題の様々な目的、特徴、態様、および利点は、同様の数字が同様の成分を表す添付の図面と共に、好ましい実施の形態の以下の詳細な説明からより明らかになる。

【図面の簡単な説明】

【0029】

【図1】図１は、初代ヒト単球における様々なサイトカインに対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0030】

【図2】図２は、初代ヒト単球における選択されたサイトカインに対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0031】

【図3】図３は、初代ヒト単球におけるＴＮＦ－アルファ放出に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0032】

【図4】図４は、初代ヒト単球におけるＩＬ－６放出に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0033】

【図5】図５は、初代ヒト単球におけるＰＧＥ_２放出に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0034】

【図6】図６は、初代ヒト単球におけるイソプロスタン放出に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0035】

【図7】図７は、初代ヒトリンパ球におけるＩＬ－２合成に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0036】

【図8】図８は、初代ヒト単球における選択したサイトカインに対する、代表的な組成物の緑色サブブレンドの効果の例示的結果を示すグラフである。

【0037】

【図9】図９は、初代ヒト単球における選択したサイトカインに対する、代表的な組成物の赤色サブブレンドの効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0038】

【図10】図１０は、初代ヒト単球の選択したサイトカインに対する、代表的な組成物の橙色／黄色サブブレンドの効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0039】

【図11】図１１は、初代ヒト単球の選択したサイトカインに対する、代表的な組成物の紫色／青色サブブレンドの効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0040】

【図12】図１２は、初代ヒト単球における選択したサイトカインに対する、複合サブブレンド（代表的組成物）の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0041】

【図13】図１３は、Ｃ２Ｃ１２細胞におけるＩＬ－６のｍＲＮＡ発現に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0042】

【図14】図１４は、Ｃ２Ｃ１２細胞におけるＴＮＦ－アルファのｍＲＮＡ発現に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0043】

【図15】図１５は、ＨＥＫ２９３モデル系におけるＮＦκＢ発現に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0044】

【図16】図１６は、Ｃ２Ｃ１２筋肉細胞へのブドウ糖取り込みに対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0045】

【図17】図１７は、ミトコンドリア生合成に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0046】

【図18】図１８は、マウスＲＡＷ２６４．１マクロファージにおけるＡＴＰレベルに対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0047】

【図19】図１９は、マウスＣ２Ｃ１２筋肉細胞におけるＡＴＰレベルに対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0048】

【図20】図２０は、マウスノマクロファージにおける活性酸素種（ＲＯＳ）に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0049】

【図21】図２１は、選択したアディポキニンに対する、代表的な組成物の抑制効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0050】

【図22】図２２は、選択した第一のアディポキニンのセットに対する、代表的な組成物の刺激効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0051】

【図23】図２３は、選択した第二のアディポキニンのセットに対する、代表的な組成物の抑制効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0052】

【図24】図２４は、老化に関連する選択した遺伝子の遺伝子発現に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0053】

【図25】図２５は、アセチルコリンエステラーゼ活性に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【0054】

【図26】図２６は、マクロファージの細胞生存率および代謝に対する、代表的な組成物の効果の例示的な結果を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0055】

本発明者は、ポリフェノール含有物質（およびこれに含まれるポリフェノール）の特定の組み合わせが、炎症の増加または慢性化、ＮＦκＢシグナル伝達、エネルギ代謝の低下、老化、加齢に伴う免疫力の低下、および／または肥満に関連する数多くのバイオマーカを強く変化させることを見出した。特にこのような組み合わせは、地中海食に含まれる成分とポリフェノール含有物質（およびポリフェノール）と密接に一致していた。これらの知見に鑑み、本発明者は、栄養補助食品およびその他の栄養製品、組成物、および薬膳料理における使用、ひいては医薬における使用のための様々な組成物を企図する。

【0056】

本発明者は、その広範な研究に基づいて、以下に詳述するように、地中海食でよく見られる厳選された植物素材（およびそれに含まれるポリフェノール）の特定の混合を調製することで、炎症老化および細胞エネルギに関連する様々なバイオマーカの変化において立証されるように、地中海食の利点を模倣できることを発見した。他のバイオマーカのうち、特に様々な炎症性サイトカインや転写因子（例えば、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－６、ＰＧＥ_２、イソプロスタン、ＮＦκＢ）、様々なアディポカイン（例えば、レプチン、オンコスタチンＭ、レジスチン、ＦＧＦ２１、ＨＧＦ、ＩＬ－１１）、ミトコンドリア生合成、細胞のブドウ糖摂取、細胞内ＡＴＰ、活性酸素種によって測定される抗酸化力、および様々な老化関連遺伝子の発現に関するバイオマーカが企図される。

【0057】

特に、本発明者は、本発明の主題である組成物が、異なる炎症経路で作用する炎症性サイトカインの産生および分泌を阻害または減少させるだけでなく、炎症性反応に必須の転写因子を下方制御することを見出した。さらに意外なことに、このような炎症成分の調節作用は、赤色、緑色、橙黄色、紫青色の化学的に異なる複数のポリフェノール含有植物素材を組み合わせた場合に、特に顕著であり、相乗的に増強された。さらに驚くべき結果として、本発明者は、化学的に異なるポリフェノール含有植物素材の組み合わせが、抗炎症作用をはるかに超えた、さらなる有益な効果をもたらすことを見出した。とりわけ、且つ以下により詳細に示されるように、本明細書に提示される組成物は、細胞へのブドウ糖取り込みとミトコンドリア生合成を増加させ、有意な抗酸化効果を提供しつつＡＴＰレベルを増加させるという顕著な作用を有していた。さらに、この組成物は、炎症とエネルギ代謝に関する特定のアディポキニンに対しても有意な影響を示した。最後に、このような組成物は、様々な老化関連遺伝子の遺伝子発現も低下させた。これらの効果は、特に総合すると、地中海食で一般的に観察されるものと同等または類似の有益な分子メカニズムを示唆しているように思われる。したがって、本発明者は、特定の理論や仮説に拘束を望むことなく、本明細書に提示される組成物は、地中海食で見られる多くの利点の基礎となる生化学的に多様な分子の根底となる調和を表すと考えている。このような状況において、長寿と健康的な老化に関する他の様々な食生活（ブルーゾーンダイエット）が、健康や寿命に要となる経路やシグナル伝達を他の物質と協働して強化するポリフェノールを含有する原料の供給源となり得ることを理解されたい。

【0058】

好ましくは、ブレンドとしては、複数の異なる色グループ（例えば、少なくとも二種類、少なくとも三種類、または少なくとも四種類）に属する有色植物素材の組み合わせが企図されており、特に、赤色、緑色、橙色／黄色、および／または紫／青色の植物素材である。例えば、このような組成物の一実施の形態では、以下に詳細に示すように、ポリフェノール含有生成物／抽出物は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、ビート根を含む赤色原料、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、ケールなどの緑色原料、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジンなど、橙色／黄色原料、およびブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ、エルダーベリーを含む紫色／青色着色原料から得られ、特定の成分と比率は以下に詳述する。別の観点から見ると、企図される組成物は、有機酸、フェノール、フラボノール、フラバノール、アントシアニン、クロロゲン酸、ベタシアニンなどを含む、少なくとも二つ、少なくとも三つ、または少なくとも四つの異なるポリフェノールクラスに属する数多くのポリフェノールを含む。植物素材の具体的な選択については、植物素材中の所望の（ポリフェノール）成分と、特定の生物学的システムおよび／またはシグナル伝達経路に対するその効果に依存することが容易に理解できるであろう。

【0059】

もちろん、植物素材は、新鮮な状態または乾燥形態の植物素材の全体またはその一部（例えば、根、果実、葉など）、新鮮な状態または乾燥形態の植物素材またはその一部からのジュースまたは浸漬物、および前述の植物素材の水性または水性／アルコール性抽出物およびクロマトグラフィ画分を含む様々な形態で提供され得ることも理解されるべきである。さらに、植物素材の一つ以上のポリフェノールは、一般的には、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の化学的純度を有する精製された（天然の単離された又は合成された）化学的実体として提供されることもあることに留意されたい。しかしながら、殆どの実施の形態において、植物素材は、数多くの異なる分子実体（例えば、酵素、受容体、イオンチャネル）に対する所望の生物学的効果の組み合わせを提供する複雑な混合物であり、これら効果のうち少なくともいくつかが相乗的な生物学的効果（例えば、少なくとも一つ、少なくとも二つ、または少なくとも三つなど）がであると認識されたい。さらに、特定の分子実体に対する生物学的効果も、生物学的機能において相補的であり、場合によっては相乗的でさえあることが企図される。したがって、以下にさらに詳述する試験および所望する標的に基づいて、本発明における主題となる組成物は、特定の必要性を満たすように配合され得ることが理解されるべきである。しかしながら、特に好ましい態様において、複数の異なる（例えば、少なくとも二つ、少なくとも三つ、少なくとも四つなど）シグナル伝達経路における複数の標的（例えば、少なくとも二つ、少なくとも三つ、少なくとも四つなど）好ましくは炎症、免疫反応、および／またはエネルギ代謝に関連する標的を阻害する組成物が企図される。

【0060】

その結果、別の観点から見ると、企図される組成物の作用機序は、単一の特定の機能（例えば、抗酸化剤）に限定されるものではなく、また特定の化学的カテゴリ（例えば、ビタミン）に限定されるものではなく、実際には、異なる代謝およびシグナル伝達経路、さらにはミトコンドリア生合成やブドウ糖更新のような他の重要な細胞の健康機能にわたる複数の生物学的作用を相補的かつ相乗的に提供することが理解されるであろう。このように、企図される組成物および方法は、エネルギ代謝、免疫機能、炎症などを含む様々な生物学的システムを標的とする。別の観点から見ると、企図される組成物および方法は、当該組成物を摂取する被験者の炎症老化を抑制する。本明細書において、「炎症老化」という用語は、少なくとも一つの炎症成分（例えば、炎症状態、炎症性サイトカインの過剰発現、および／または炎症性シグナル伝達経路の過剰作用）と、少なくとも一つの典型的な加齢に伴う細胞エネルギまたはミトコンドリア生合成の低下、および／または老化関連遺伝子の発現の継続または増加を含む、生理学的事象の複雑な集まりを指す。さらに、植物素材は、組成物中のポリフェノールおよび他の有色色素の機能を補助または補完するために、様々な微量栄養素も提供することが企図されている。

【0061】

他の利点の中でも、本明細書で提示される組成物および方法は、炎症性シグナル伝達をコントロールする複数の経路にわたって顕著な相補的作用を提供し、その結果、より望ましい範囲の生理学的効果を有することが理解されるであろう。例えば、以下にさらに詳細に示すように、企図される組成物は、炎症性サイトカイン放出の有意な減少を示しただけでなく、別々のシグナル伝達経路で作用する更なる炎症性メディエータであるＮＦκＢシグナル伝達、ＰＧＥ_２、アディポカイン、およびイソプロスタン放出も減少させる。注目すべきことに、企図された組成物のサブブレンドは、上記の炎症性メディエータを調節する上でいくらかの効果を示したが、サブブレンドを組み合わせることで上記のすべての要素において強い相乗効果を示した。さらに、本明細書で企図する組成物は、活性酸素種（ＲＯＳ：Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ Ｓｐｅｃｉｅｓ）の減少によって決まる有意な抗酸化作用をさらに示し、これにより潜在的な細胞ストレスおよび炎症性シグナル伝達をさらに減少させる。

【0062】

同様に注目すべきことに、企図される組成物は細胞エネルギの管理に影響を及ぼし、特にブドウ糖の摂取、ミトコンドリア生合成、ＡＴＰレベルにも大きな影響を及ぼした。実際、企図される組成物によって、一般的な抗糖尿病薬であるロシグリタゾンで観察される効果と同等であり、場合によってはそれを上回るブドウ糖摂取の改善が見られた。有益なことに、このようなエネルギ摂取の増加はフリーラジカル産生の増加にはつながらなかったが、企図された組成物はミトコンドリア生合成を有意に刺激し、細胞内ＡＴＰレベルを増加させた。そのため、これらの処理を組み合わせることで、加齢に伴うエネルギ代謝の低下に対抗していると見ることができる。さらに、加齢に伴う衰えに関して、本発明者は、企図した組成物が数多くの老化関連遺伝子の発現を低下させることも見出した。

【0063】

その結果、本明細書で企図される組成物は、適切な免疫機能のサポート、炎症軽減のサポート、ブドウ糖レベル（特に細胞内へのブドウ糖摂取）のサポートなど、健康および健康的な老化の様々な側面をサポートするための単独製品として有利に使用され得ることが理解されるであろう。別の観点から見ると、企図される組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を治療または軽減するために使用され得ることが理解されるであろう。このような文脈で、生理学的機能または状態とともに使用される場合、「サポート」という用語は、生理学的機能または状態に関する一つ以上の成分または成分の作用の低下の防止、生理学的機能または状態に関する一つ以上の成分または成分の作用の低下の少なくとも部分的な逆転、生理学的機能または状態に関する一つ以上の成分または成分の作用の正常な機能の維持、生理学的機能または状態に関する一つ以上の成分の異常な過剰作用（または過剰発現）の防止、および／または生理学的機能または状態に関する一つ以上の成分の異常な過剰作用（または過剰発現）の少なくとも部分的な逆転を意味することに留意されたい。あるいは、本明細書で企図される組成物は、他の栄養補助食品および／またはビタミンと組み合わせて、当該栄養補助食品またはビタミンでは得られない有益な効果を提供することもできる。

【0064】

企図される組成物を用いて観察される様々な効果の基礎となる分子メカニズムついて、本発明者は、様々なサイトカイン、ＮＦ－κＢ、様々なアディポカイン、ブドウ糖摂取、ミトコンドリア生合成、ＡＴＰレベル、活性酸素種、老化関連遺伝子の発現、およびアセチルコリンエステラーゼを含む、企図される化合物によって良好に調節され得る様々な潜在的標的を調査した。

【0065】

インターロイキン－６：インターロイキン－６（ＩＬ－６）は、免疫応答、急性期反応、造血を制御する多機能性サイトカインであり、宿主防御メカニズムにおいても中心的な役割を果たしていると考えられる。ＩＬ－６は様々な細胞から産生される多面発現性サイトカインである。幅広い組織に作用し、標的細胞の性質に応じて、それぞれ成長促進、成長抑制、分化を発揮する。特に、ＩＬ－６は正常細胞では構成的に産生されないが、様々なサイトカイン、リポ多糖のような細菌成分、あるいはウイルス感染によって発現が容易に誘導される。ＩＬ－６は一般的に炎症部位で産生され、ＩＬ－６はその可溶性レセプタｓＩＬ－６Ｒαと結合して、白血球浸潤の性質（多形核好中球から単球／マクロファージへ）を変化させることにより、急性炎症から慢性炎症への移行を決定づける。さらに、ＩＬ－６はＴ細胞やＢ細胞を刺激し、慢性炎症反応を促進する。そのため、ＩＬ－６およびＩＬ－６シグナル伝達を下方制御する試みは、様々な慢性炎症性疾患（関節リウマチなど）の治療に有用であると考えられている。以下により詳細に示すように、企図される組成物はＩＬ－６放出に顕著な影響を及ぼし、その結果、（慢性および／または亜急性の）炎症性疾患に一般的に見られる一つ以上の症状軽減または予防に寄与すると考えられる。

【0066】

腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）：腫瘍壊死因子ーアルファ（ＴＮＦ－アルファ）は、主に活性化マクロファージ、Ｔリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞によって産生され、炎症の中心的な調節因子である。ＴＮＦ－アルファ拮抗薬や阻害物質は、ＴＮＦ－アルファが重要な病因的役割を果たす炎症性疾患の治療において興味深いアプローチである。ＴＮＦの阻害は、関節リウマチ、およびや乾癬、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、炎症性腸疾患などの炎症性疾患の患者にとって有効な治療法であることが証明されている。さらに、敗血症性ショックやエイズの予防効果も示唆されている。現在成功している生物学的療法には、エタネルセプト、インフリキシマブ、完全ヒト型単クローナル抗体、アダリムマブなどがある。しかし、現在知られている合成抗体療法ではコストと副作用が高いため、本明細書で紹介する組成物のような天然のＴＮＦ阻害物質は注目を集める手段である。実際、以下に詳細に示すように、企図される組成物は、ＴＮＦ－アルファの分泌に対して実質的な阻害効果を有しているため、様々な（慢性および／または亜急性の）炎症性疾患に一般的に見られる一つ以上の症状の軽減または予防にも寄与すると考えられる。

【0067】

プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）：プロスタグランジン（ＰＧ）は動物における主要な脂質メディエータであり、生体内でシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ－１またはＣＯＸ－２）を律速酵素としてアラキドン酸から合成される。プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）は、様々な組織で最も多く検出されるＰＧであり、四つの受容体サブタイプ（ＥＰ１－４）を介して様々な生理的および病理学的作用を発揮する。アスピリンやインドメタシンなどの非ステロイド性抗炎症薬は、ＣＯＸ活性を阻害し、結果としてＰＧを抑制することにより、強力な抗炎症作用を発揮する。ＰＧＥ_２は、分子および細胞レベルで、急性および慢性炎症、ならびに自己免疫疾患を制御する。急性炎症、発熱、疼痛におけるＰＧＥ_２の主要な役割の一つは、血管平滑筋細胞の血管拡張であると理解されていた。ＰＧＥ_２が肥満細胞の活性化を誘導し、その結果血管透過性を亢進させ、ＰＧＥ_２による急性炎症の一因となることが後の追加データで示された。さらに、ＰＧＥ_２はＴｈ１細胞の分化、Ｔｈ１７細胞の増殖、Ｔｈ２２細胞からのＩＬ－２２産生を促進し、慢性炎症や様々な自己免疫疾患を悪化させる。さらに、ＰＧＥ_２はＥＰ３受容体を介した肥満細胞の活性化を通じて急性炎症を引き起こす。ＰＧＥ_２はまた、ＥＰ２およびＥＰ４受容体を介して、Ｔヘルパー１（Ｔｈ１）細胞の分化、Ｔｈ１７細胞の増殖、Ｔｈ２２細胞からのＩＬ－２２産生を介して、慢性炎症と様々な自己免疫疾患を誘導する。特に、以下にさらに詳細に示すように、本発明者は、本明細書に提示される組成物がＰＧＥ２の合成および放出に対して有意な阻害効果を有することを発見した。したがって、企図される組成物は、様々な（慢性および／または亜急性の）炎症性疾患および自己免疫疾患で一般的に見られる一つ以上の症状の軽減または予防にも寄与するだけではなく、悪化した免疫反応を下方制御すると考えられる。

【0068】

イソプロスタン：イソプロスタンはＣＯＸ－２に依存することのない炎症促進過程のメディエータであり、疼痛の知覚を増強する。イソプロスタンはさらに、ヒト静脈内皮細胞への好中球付着を増加させ、酸化ストレスに応答して内皮細胞の透過性を増加させることによって、炎症に寄与する場合がある。したがって、企図される組成物はさらに、様々な、特に酸化ストレスに関連する（慢性および／または亜急性の）炎症性疾患で一般的に見られる一つ以上の症状の軽減または予防にも寄与するだけではなく、軽減または予防にも寄与すると考えられる。

【0069】

したがって、本明細書で提示された組成物は、複数の異なる炎症性シグナル伝達要素およびシグナル伝達経路にわたって予期せぬ多面発現効果を示し、様々な（慢性および／または亜急性の）炎症状態を広範かつ全身に軽減し得ることが理解されるであろう。さらに意外なことに、本発明者は、ＩＬ－６、ＴＮＦ－アルファ、およびＰＧＥ_２の阻害が、本明細書に提示した組成物中に存在する種々のサブブレンドの相乗効果に基づくこと（以下のデータを参照）、およびサブブレンド単独の阻害効果は実質的に顕著でないことを発見した。

【0070】

上記のような個々のサイトカインに対する効果に加えて、本発明者は、本明細書に示した組成物がＮＦ－κＢに対して有意な下方制御効果を有することも見出した。このような状況で、ＮＦ－κＢがサイトカイン、ケモカイン、ＣＯＸ－２をコードする遺伝子を含む様々な炎症性遺伝子の発現を誘導し、またインフラマソームの制御にも関与していることが理解されるであろう。さらに、ＮＦ－κＢは自然免疫細胞や炎症性Ｔ細胞の生存、活性化、分化を制御する上で重要な役割を果たしており、自然免疫反応や標的特異的免疫反応に影響を及ぼす。

【0071】

ＮＦ－κＢは様々な疾患の炎症部位で非常に活性化され、接着分子、ＭＭＰ、誘導性一酸化窒素（ｉＮＯＳ）の転写も誘導する。例えば、関節リウマチでは、炎症を起こした滑膜でＮＦ－κＢが過剰発現し、その作用が炎症細胞の動員とＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－αのような炎症性メディエータの産生を促進すると考えられる。ｐ５０とｐ６５はいずれも滑膜表層細胞やサブライニング領域の単核細胞の核に局部集中する。ヘリコバクタ・ピロリ関連胃炎は、胃上皮細胞におけるＮＦ－κＢ活性の亢進によってもマークされ、ＮＦ－κＢ陽性細胞の数は胃炎の程度と相関する。同様に、炎症性腸疾患においてもＮＦ－κＢ活性化の証拠があり、この場合、固有層マクロファージは活性化したｐ５０、ｃ－Ｒｅｌ、特にｐ６５を示す。神経疾患やアテローム性動脈硬化に伴う炎症も、部分的にはＮＦ－κＢによってメディエートされる。さらに、ヒトの炎症性気道疾患もサイトカインや接着分子の発現と関連する。このことは、喘息患者の気管支生検におけるＮＦ－κＢの活性化と相関する。特に、炎症性サイトカイン、ケモカイン、ｉＮＯＳ、Ｃｏｘ－２が豊富に発現している気道上皮細胞で、核の局在を伴うＮＦ－κＢ活性の上昇が観察された。その他のＮＦ－κＢ関連疾患には、アテローム性動脈硬化症、多発性硬化症、喘息、炎症性腸疾患、全身性炎症反応症候群などがある。したがって、ＮＦ－κＢの発現を調節できる組成物は、上述した炎症状態に関連する症状の少なくとも一部に対処する上で、重要な可能性を持ち得る。したがって、繰り返すが企図される組成物は、様々な（慢性および／または亜急性の）炎症性疾患で一般的に見られる一つ以上の症状の軽減または予防にも寄与すると考えられる。

【0072】

さらに、特に、個体が肥満度指数（ＢＭＩ）の増加、または過体重または肥満の場合、企図される組成物は、以下でより詳細に議論され示されるように、アディポカインシグナル伝達に対してプラスの効果を有し得る。

【0073】

世界的な肥満の流行により、脂肪細胞の生物学、脂肪組織や肥満患者の体内で起こる現象を理解することを目的とした研究に大きな注目が集まっている。興味深いことに、肥満が慢性的な低度（亜急性）の炎症を引き起こし、それが肥満関連疾患に関する全身の代謝機能不全一因となっている可能性を示す証拠が多く見つかっている。実際、脂肪組織は、脂肪由来分泌因子あるいはアディポカインとして知られる複数の生物活性物質を分泌することにより、重要な内分泌器官として機能しており、場合によっては炎症促進あるいは抗炎症活性を有する。脂肪組織の機能不全に起因するこれらのアディポカインの産生や分泌の調節異常は、肥満に関連した合併症の発症に寄与することがある。

【0074】

炎症性アディポカイン：肥満状態では殆どのアディポカインの産生が亢進し、これらの炎症性タンパク質は通常、肥満に関する代謝性疾患を促進させるように機能する。レプチン、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－６に加えて、最近同定された炎症を促進するアディポカインには、レジスチン、レチノール結合タンパク質４（ＲｂＰ４）、リポカリン２、ＩＬ－１８、アンジオポエチン状タンパク質２（ＡＮＧＰＴＬ２）、ＣＣ－ケモカインリガンド２（ＣＣＬ２）、ＣＸＣ－ケモカインリガンド５（ＣＸＣＬ５）、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）などがある。これらの因子（およびその他の因子）の上方制御によって、慢性炎症状態の発症を引き起こし、代謝機能不全を引き起こす一因となる。

【0075】

抗炎症性アディポカイン：上述した数多くの炎症性アディポカインに加えて、脂肪組織はさらに、鋭意研究が進められているアディポネクチン、および最近アディポカインとして同定されたｓＦＲＰ５のような少数の抗炎症因子を分泌する。

【0076】

本発明者は現在、アディポカインの分泌に関して、本明細書で提示される組成物が、ＴＮＦ－アルファ誘導脂肪細胞においてＩＧＦＢＰ－１、レプチン、オンコスタチンＭ、およびレジスチンの分泌を完全に阻害することを見出している。これらのアディポカインの重要性については後述する。

【0077】

レプチン：アディポカインであるレプチンは、肥満遺伝子（ｏｂ；Ｌｅｐとしても知られる）は、ポジショナルクローニングによってｏｂ／ｏｂマウスで同定された。レプチンは中枢神経系を通じて摂食行動を制御する。レプチンを欠くマウス（ｏｂ／ｏｂマウス）は、過食症（摂食量の異常な増加）、肥満、インスリン耐性を示すものの、ｏｂ／ｏｂマウスにレプチンを投与すると、これらの変化が逆転する。また、脂肪萎縮マウス（皮下脂肪組織を欠くためレプチン濃度が低い）にレプチンを投与すると、インスリン耐性や高脂血症などの代謝異常が改善される。レプチンはまた、リポジストロフィや先天性レプチン欠損の患者における代謝機能不全の改善にも有効であることが示されている。しかし、血中のレプチン濃度は脂肪量と正の相関があり、レプチン耐性の発生を示し、肥満の個体（個人）は、予想される拒食反応なしにレプチン濃度が高い。レプチンは、ＩＬ－２や成長ホルモン１を含む螺旋状サイトカインファミリに構造的に似ており、炎症促進作用を有すると考えられている。実際、レプチンは単球によるＴＮＦとＩＬ－６の産生を増加させ、ＪＡＫ２（ヤヌスキナーゼ２）－ｓＴＡＴ３（シグナル伝達物質と転写活性化因子３）経路を活性化することによって、マクロファージによるＣＣ－ケモカインリガンド（即ち、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５）の産生を刺激する。単球においても、レプチンは活性酸素種の産生を刺激し、細胞増殖と遊走反応を促進する。血清中および脂肪組織中のレプチン濃度は、ＴＮＦやリポ多糖（ＬＰ）などの炎症性刺激に反応して上昇する。さらに、レプチンはＴ細胞や単核細胞によるＴＨ１型サイトカインＩＬ－２やＩＦＮγの産生を増加させ、ＴＨ２型サイトカインＩＬ－４の産生を抑制するため、Ｔ細胞をＴＨ１細胞表現型に偏極させる。上述の知見と一致して、レプチンの欠乏はＴ細胞でメディエートされた肝炎モデルにおける肝障害を予防する。このように、レプチンは炎症性アディポカインとして作用することが一般に認められている。

【0078】

オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）：ＯＳＭはｇｐ１３０サイトカインであり、ｇｐ１３０とヘテロ二量体化し、ＯＳＭの作用の大部分をメディエートする独自の特異的受容体ＯＳＭＲを有する。ＯＳＭは白血病抑制因子（ＬＩＦ）と実質的な配列同一性を有し、肝発生と肝再生、肝インスリン耐性と脂肪肝、炎症、心筋細胞の脱分化とリモデリングなど、様々な生物学的プロセスを調節することができる。さらに、ＯＳＭは肥満時の炎症状態を助長し、インスリン耐性の発症に関与する場合がある。

【0079】

レジスチン：レジスチンは、システインに富むレジスチン様分子（ＲＥＬｍ）ファミリのメンバであり、炎症過程の活性化に関係する。レジスチンはマウスのインスリン耐性を誘発することが示されており、レジスチンを欠くマウスは肝臓でのブドウ糖産生が低いため、空腹後の血糖値が低い。ｏｂ／ｏｂマウスのレジスチン欠損は肥満の増大をもたらすが、この重度の肥満マウスでは耐糖能とインスリン感受性が改善されている。ブドウ糖の代謝を調節するレジスチンの能力は、脂肪細胞におけるインスリンシグナル伝達阻害物質であるサイトカインシグナル伝達抑制因子３（ｓＯＣｓ３）の活性化と関連する。動物モデルの研究では、レジスチンがインスリン耐性を促進することが一貫して示されているが、ヒトにおけるこの効果の証拠はあまり明確ではない。レジスチンは二つの第四級形態で存在する。豊富な高分子量の六量体と、肝インスリン耐性を強く誘導する、量は少ないが生物活性の高い三量体である。ヒト単核細胞では、レジスチン遺伝子（ＲＥＴＮ）の転写はＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦなどの炎症性サイトカインによって誘導され、白色脂肪組織ではＰＰＡＲγアゴニストであるロシグリタゾンによって抑制されることから、ロシグリタゾンの抗炎症作用の一部はＲＥＴＮの転写の減衰によってメディエートされていることが示唆される。さらに最近、脂肪細胞における内因性レジスチンの発現を欠くが、マクロファージにおいてヒトＲＥＴＮ導入遺伝子を発現するマウスの研究によって、マクロファージ由来のレジスチンの炎症促進特性が生体内におけるインスリン耐性に寄与していることが示された。ヒト単核細胞におけるレジスチンの炎症促進特性は、レジスチンがこれらの細胞によるＴＮＦとＩＬ－６の発現を促進するため、明らかである。さらに、レジスチンは、血管内皮細胞において炎症性接着分子である血管細胞接着分子１（ｖＣＡｍ１）、細胞間接着分子１（ＩＣＡｍ１）、ペントラキシン３の発現を促進することにより、血管内皮細胞におけるアディポネクチンの抗炎症作用に直接対抗し、白血球の接着を促進する。

【0080】

ＩＧＦＢＰ－１：インスリン様成長因子結合タンパク質１（ＩＢＰ－１）は、胎盤タンパク質１２（ＰＰ１２）としても知られるタンパク質で、ヒトではＩＧＦＢＰ１遺伝子によってコードされている。このタンパク質はインスリン様成長因子（ＩＧＦ）ＩとＩＩの両方に結合し、血漿中を循環している。このタンパク質が結合すると、ＩＧＦの半減期が延長され、細胞表面受容体との相互作用が変化する。ＩＧＦシステムが心血管系疾患の発症に関与している可能性が高まっている。循環するＩＧＦの血管系への影響は、細胞表面ＩＧＦ受容体へのアクセスをコントロールするＩＧＦＢＰによって大きく調節される。ＩＧＦＢＰ－１は、糖質調節ホルモンによる代謝調節を受けるため、ＩＧＦの生物学的利用能の急性調節因子として提唱されてきた。ＩＧＦＢＰ－１の翻訳後リン酸化は、ＩＧＦ－Ｉに対する親和性を著しく増加させるので、ＩＧＦの生物学的利用能をコントロールするさらなるメカニズムを表している。

【0081】

加えて、本発明者はまた、アディポカイン分泌に関して、本明細書で提示される組成物が、ＴＮＦ－アルファで誘導された脂肪細胞において、ＡＮＧＰＴ－Ｌ３、Ｃ反応性タンパク質、エンドカン、ＦＧＦ－２１、ＨＧＦ、ＩＧＦＢＰ－２、ＩＬ－１１、ＲＢＰ４、およびペントラキシン２の分泌を刺激する（ＴＮＦ－アルファのみで誘導された脂肪細胞では観察可能な刺激はない）ことを見出し、これらの誘導されたアディポカインの意義について以下に述べる。

【0082】

ＲＢＰ４：血清ＲｂＰ４は肝細胞から分泌される因子で、レチノール（ビタミンＡ）の全身輸送を担っている。最近、ＲｂＰ４は脂肪細胞やマクロファージからも分泌されることがわかった。ＲｂＰ４の発現は、ブドウ糖輸送体４型（ＧＬｕＴ４；ｓＬＣ２Ａ４としても知られる）の発現と逆相関しており、正常マウスに組換えＲｂＰ４を投与するとインスリン感受性が低下する。ＲｂＰ４は脂肪細胞から放出され、インスリンによって誘導されるインスリン受容体基質１（ＩＲｓ１）のリン酸化を自己分泌的にあるいは傍分泌的に阻害する。これらデータは、ＲｂＰ４が２型糖尿病モデルにおけるブドウ糖ホメオスタシスの制御に重要な脂肪組織分泌因子であることを示唆している。

【0083】

ＡＮＧＰＴＬ３：アンジオポエチン様タンパク質３（ＡＮＧＰＴＬ３）は、リポタンパク質および内皮リパーゼの阻害物質としての機能で最もよく知られている。遺伝的あるいは薬理学的なＡＮＧＰＴＬ３抑制は、循環リポ蛋白を顕著に減少させる能力があり、そのような抑制による心保護作用が証明されていることから、ＡＮＧＰＴＬ３は、抗体およびアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）治療薬が臨床試験されている新たな治療標的となっている。この抗体は循環ＡＮＧＰＴＬ３に対して比較的選択的であるが、ＡＳＯは肝細胞内タンパク質も減少させ、肝臓におけるＡＮＧＰＴＬ３の細胞自律的機能を示す証拠が出現している。これには、肝細胞のブドウ糖および脂肪酸の取り込み、インスリン感受性、ＬＤＬ／ＶＬＤＬ残渣の取り込み、ＶＬＤＬの組み立て／分泌、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）およびＰＵＦＡ由来の脂質メディエータ含量、遺伝子発現の調節が含まれる。

【0084】

線維芽細胞増殖因子２１：線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）は、哺乳類ではＦＧＦ２１遺伝子によってコードされるタンパク質である。この遺伝子によってコードされるタンパク質は、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリのメンバであり、具体的にはＦＧＦ２３とＦＧＦ１５／１９を含む内分泌サブファミリのメンバである。ＦＧＦ２１は、共受容体ＦＧＦ受容体１とβ－ＫｌｏｔｈｏからなるＦＧＦ２１受容体の主要な内因性アゴニストである。ＦＧＦ２１はヘパトカイン、即ち、肝臓から分泌されるホルモンであり、視床下部の室傍核にあるＦＧＦ２１受容体を経たシグナル伝達を介して、単純な糖分摂取と甘い食物への嗜好を調節し、側座核内のドーパミン神経伝達の低下と相関する。ＦＧＦ２１は脂肪細胞におけるブドウ糖の取り込みを刺激するが、他の細胞型では刺激しない。この効果は、インスリンの活性と相加的である。脂肪細胞のＦＧＦ２１処置は、ＦＧＦ受容体とＲａｓ／ＭＡＰキナーゼ経路をつなぐタンパク質であるＦＲＳ２のリン酸化と関連している。ｏｂ／ｏｂマウスにＦＧＦ２１を注射すると、脂肪組織でＧｌｕｔ１が増加する。ＦＧＦ２１はまた、遺伝子導入マウスに過剰発現させると、食事誘発性肥満からマウスを守り、糖尿病のネズミに投与すると血糖値とトリグリセリド値を下げる。マウスにＦＧＦ２１を投与すると、エネルギ消費、脂肪利用、脂質排泄が増加する。

【0085】

インターロイキン１１：インターロイキン１１（ＩＬ－１１）は抗炎症性サイトカインであり、全身の殆どの細胞種と組織に受容体が存在する。その抗炎症特性は、サイトカイン合成の抑制を通じてメディエートされるが、その大部分はＮＦ－カッパＢの活性化を防ぐことによる。脂肪組織はインスリン耐性の確立に関するサイトカインを合成・分泌するが、ＩＬ－１１にはサイトカイン合成を抑制する能力があることから、脂肪組織におけるＩＬ－１１によって開始されるシグナル伝達経路を明らかにするための研究を開始した。

【0086】

肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）：肥満とそれに伴う脂肪組織の慢性炎症は、高血圧やアテローム性動脈硬化症などいくつかの病状に関係するインスリン耐性を引き起こす。高脂肪食（ＨＦＤ）を１４週間摂取した野生型マウスの体重は、インスリン耐性を伴い有意に増加したが、ＨＧＦ遺伝子導入マウスでは体重増加とインスリン耐性が抑制された。ＨＧＦ遺伝子導入マウスでは、脂肪組織におけるマクロファージの蓄積と炎症性メディエータレベルの上昇が、野生型マウスと比較して、有意に抑制された。ＨＧＦ中和抗体を投与した野生型マウスでは、ＨＦＤによる肥満が耐糖能試験で悪化した。これらの機能獲得および機能喪失研究では、ＨＦＤによって誘導されるＨＧＦレベルの上昇が、肥満とインスリン耐性に対して保護的な役割を持つことが示される。

【0087】

ＩＧＦＢＰ－２：脂肪細胞前駆体の増殖と成熟脂肪細胞への分化は、哺乳類における肥満の発生に寄与している。ＩＧＦ－Ｉは強力な分裂促進因子であり、脂肪細胞の分化に重要な刺激物である。ＩＧＦの生物学的作用は、主に阻害効果を発揮するＩＧＦ結合タンパク質ファミリ（ＩＧＦＢＰ）によって緊密に制御されている。ＩＧＦＢＰ－２は、分化しつつある白色前脂肪細胞から分泌される主要な結合タンパク質であり、肥満の発症への関与の可能性を示唆している。ヒトＩＧＦＢＰ－２をその本来のプロモータ遺伝子のコントロール下で過剰発現させた遺伝子導入マウスを用いた研究では、ＩＧＦＢＰ－２の過剰発現が、肥満への感受性の低下とインスリン感受性の改善に関連することが示された。同腹の野生型マウスでは、加齢とともに耐糖能異常と血圧上昇が引き起こされたが、ＩＧＦＢＰ－２を過剰発現させたマウスでは保護された。さらに、高脂肪・高エネルギ食を与えると、ＩＧＦＢＰ－２を過剰発現したマウスは肥満の発症とインスリン耐性に抵抗を示した。この痩せた表現型は、同量の高脂肪食を摂取した野生型動物と比較して、レプチン濃度の低下、ブドウ糖感受性の上昇、血圧の低下と関連していた。これらの知見は、肥満予防におけるＩＧＦＢＰ－２の重要な役割を示唆している。

【0088】

ブドウ糖の取り込みとミトコンドリア生合成：高齢者では、骨格筋のタンパク質合成がインスリンの同化作用に耐性を有し得る。インスリン耐性はまた、筋肉のタンパク質分解経路の活性化とも関連しており、筋肉を減少させる可能性がある。さらに、筋肉はインスリンに依存するブドウ糖取り込みの主要な部位であり、インスリンを介してブドウ糖を取り込む筋肉の表面積が減少すると、末梢のインスリン耐性がさらに悪化し、悪循環に陥る可能性がある。経口インスリン増感剤は筋肉量を維持することが報告されているが、筋力に関する同様の関連性はまだ調査されていない。興味深いことに、２型糖尿病では骨格筋のミトコンドリア機能が低下しており、末梢のインスリン増感剤によって改善される可能性がある。このような背景のもと、本発明者は、本明細書で提示する組成物が、以下に詳述するように、筋肉細胞におけるブドウ糖取り込みに対して非常に有益な効果を有することを見出した。さらに、本明細書で提示した組成物は、ミトコンドリア機能の改善、特に以下にさらに詳細に示すように、ミトコンドリア生合成の増加にも及ぶ利点を有する。このように、本明細書で提示される組成物は、加齢に伴う筋肉へのブドウ糖取り込みの減少を緩和させるだけではなく、むしろ逆転させ、さらにミトコンドリア生合成を増加させることさえあると認識されたい。

【0089】

本明細書で提示する組成物が細胞内のエネルギ負荷を増加させうるかどうかを判定するため、細胞内ＡＴＰレベルについても試験を行なった。実際、以下に詳細に示すように、細胞内ＡＴＰのレベルは、特に企図される組成物の濃度または投与量が高い場合に改善された。

【0090】

活性酸素種：一般的に、活性酸素種（ＲＯＳ）には、好気的代謝で通常発生する副生成物としての酸素分子の誘導体が含まれ、異なるＲＯＳの形成が増加すると、一般的に分子損傷（「酸化ストレス」）をもたらす。ＲＯＳである過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）とスーパーオキシドアニオンラジカル（Ｏ２－）は、生理的レベルでは酸化還元シグナル伝達物質として作用し、成長因子やサイトカインのコントロール下で、ＮＡＤＰＨ酸化酵素やミトコンドリア電子伝達鎖を含む４０超の酵素によって生成されることが多いが、シグナル伝達やＲＯＳレベルが長期化すると、酸化的損傷の蓄積や代謝障害につながる。そこで本発明者は、企図される組成物が酸化ストレスに対抗できるかどうかを調べることにした。特に、企図された組成物は、上述したすべての有益な機能に加えて、以下に詳細に示すように、活性酸素の有意な減少も示した。

【0091】

さらに、企図された組成物は地中海食（長寿の人々の共通項として知られる）の成分に基づいているため、本発明者は、本明細書で提示された組成物が老化関連遺伝子に影響を及ぼすかどうかも調査を開始した。以下の例示的な結果では、様々な老化関連遺伝子の有意な下方制御が実証された。

【0092】

アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）は、主に血液と神経シナプスに存在する酵素で、様々な認知プロセスにおいて重要な役割を果たしている。ＡＣｈＥは、神経伝達物質アセチルコリンをコリンと酢酸へ加水分解する触媒であり、コリン作動性ニューロンが活性化後に静止状態に戻るために必要な反応である。ＡＣｈＥ阻害（例えば、ドネペジルなど）はアルツハイマ病の治療において重要な標的であり、ＡＣｈＥ阻害物質はその治療に最もよく使用される薬剤である。アルツハイマ病以外にも、ＡＣｈＥ阻害物質は緑内障、重症筋無力症、膀胱拡張などの疾患の診断や治療に有用である。したがって、ＡＣｈＥ阻害物質には認知を促進する作用があると考えられている。この目的で、本発明者は、本明細書で紹介する組成物がＡＣｈＥに対する阻害効果を有するかどうかも判定した。特に、以下にさらに詳細に示すように、本明細書で提示する組成物はＡＣｈＥに対して実質的な阻害効果を有し、その結果、他の利点の中でも特に認知を有意に改善する可能性がある。

【0093】

本発明主題のさらに企図される側面において、本明細書に提示される組成物は、種々の形態で処方することが可能であり、特に好ましい処方としては、栄養学的または薬学的に受容可能な担体と組み合わせたものが挙げられ、経口投与用に処方される（但し、非経口投与もまた明示的に企図される）ことが最も好ましいことが理解されるであろう。したがって、想定される組成物は、固体または液体製品として処方することができる。例えば、企図される組成物が固形製品として処方される場合、適切な製品形態としては、カプセル、錠剤、粉末などの単回投与単位の処方が挙げられ、他の固形製剤としては、スナックバー、グミ、または組成物が（例えば、シリアルに）コーティングされるか、または組成物が（例えば、チューインガムに）混合もしくは層状化された、他の食用製品が挙げられる。別の例として企図される組成物が液体製品として処方される場合、適切な製品形態としては、風味付けおよび／または炭酸飲料（例えば、茶、ジュース）、および／または機能性飲料（例えば、スポーツ飲料またはエネルギ飲料）、若しくは輸液、または液体乳製品（例えば、ヨーグルト、ケフィア）が挙げられる。

【0094】

したがって、企図される組成物は、食用または飲用製品の一部として、纏めて提供されてもよく、および／または消費用に単回投与単位で提供されてもよい。最も典型的には、企図される組成物（担体を除く）の一日投与量は、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも７５０ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、または少なくとも１，５００ｍｇであることが好ましい。例えば、好適な投与量は１０～５０ｍｇ、５０～１００ｍｇ、１００～２００ｍｇ、２００～４００ｍｇ、３００～６００ｍｇ、４００～８００ｍｇ、６００～１，０００ｍｇ、または１，０００～２，０００ｍｇである。

【0095】

最も典型的には、企図される組成物は、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも４週間、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも６ヶ月、または少なくとも１年以上の長期間にわたって経口投与され、健康的な老化を維持またはサポートする。投与は毎日、少なくとも週二回、または少なくとも週三回であることが好ましい。いくつかの実施の形態では、企図される組成物は局所的に投与してもよく、一般的にはクリーム、ローション、エッセンスエリキシル、またはシャンプーの形態であってもよい。この場合、組成物は（任意で濾過することで）水またはヒドロアルコール抽出物として、透明な溶液を得ることができる。

【0096】

企図される組成物は、さらに望ましい機能性を付与するために、一つ以上の追加成分と組み合わせてもよいことが容易に理解されるであろう。適切な追加成分としては、ビタミン（例えば、単一のビタミン、またはマルチビタミンブレンドなどのビタミンブレンド）、食物中の微量元素またはミネラル（例えば、個々の元素またはミネラル、あるいは様々な形態で混合された複数の元素やミネラル）、様々な特殊化合物および混合物（例えば、プレバイオティクス、ヒトミルクオリゴ糖）、および／または一つ以上のプロバイオティクス微生物（例えば、乳酸菌属、ビフィドバクテリウム属、リューコノストック属、サッカロミセス・ブラウディなど）、ポストバイオティクス（酪酸などの短鎖脂肪酸、（タウロ）ウルソデオキシコール酸などの二次胆汁酸など）、食物繊維（例えば、水溶性食物繊維または不溶性食物繊維）、および／または、栄養学的に許容されるオリゴ糖（例えば、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）またはフラクトオリゴ糖（ＦＯＳ））が挙げられる。同様に、企図される組成物はまた、ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質を含んでもよく、それによって細胞内ＮＡＤおよび／またはＮＡＤＰレベル（ならびにそれぞれの還元型ＮＡＤＨおよびＮＡＤＰＨ）を増加させる。このように、企図される組成物は、特に細胞代謝およびエネルギをさらに（相乗的に）増強またはサポートし得る。

【0097】

もちろん、本発明の主題による組成物は、ヒトだけでなく、他の非ヒト哺乳動物、特に家畜およびコンパニオン動物（例えば、イヌ、ネコ、ウマ）にも投与してもよいことを認識されたい。投与は通常、少なくとも二日間、三日間、五日間、一週間、二週間～四週間、一ヶ月～三ヶ月間、さらにそれ以上の期間にわたって、一日一回から一日三回（場合によってはさらに複数の回数）行われる。最も典型的には、投与は、少なくとも症状（例えば、炎症に伴う疼痛および腫脹、エネルギレベルの低下、頻繁な感染症など）の緩和に十分な期間、または健康状態の重症化を回避または軽減するのに役立つ予防的に行うことができる。

【実施例】

【0098】

代表的な組成：
特段示唆することがない限り、すべての試験は、地中海食に共通する選ばれたポリフェノール含有生成物／抽出物の定義された混合物を用いて実施した。ポリフェノール含有生成物／抽出物は、以下のような色を特徴とする原料から得られた。赤色グループ（サブブレンド）：リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、ビート根、緑色グループ（サブブレンド）：オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、ケール；橙色／黄色グループ（サブブレンド）：タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン；且つ、紫色／青色グループ（サブブレンド）：ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ、エルダーベリー。トウモロコシ澱粉、シリカ、ヒマワリレシチンを加工助剤として使用した。相対的な比率を以下の表１に示す。

【表1】

【0099】

植物化学ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析：上記の例示的組成物のＨＰＬＣ／ＭＳ組成分析により、以下の原料および割合が明らかになった。表２～表８の各列は、分析物ＩＤ（列１）、化学的実体（列２）、Ｍ－Ｈ（列３）、ＲＴ（列４）、ピーク強度（列５）、およびＭＳ／ＭＳフラグメント（列６）を示す。

【表2】

【表3】

【表4】

【表5】

【表6】

【表7】

【表8】

【0100】

特に明記しない限り、代表的な組成物の作用は、軽度／慢性炎症、加齢に伴う免疫力の低下、エネルギ代謝、老化、活性酸素種、アセチルコリンエステラーゼ活性、肥満、および生存能力に関連する様々な標的実体に対する調節効果について試験され、例示的な活性結果が以下に示される。
サイトカイン：

【0101】

以下の実験において、本発明者は代表的な組成物およびサブブレンドが様々なサイトカインに及ぼす影響を調べるために一連の試験を行った。この目的で、試験した組成物を、ＬＰＳ処理した初代ヒト単球と、ＳＥＢ誘導Ｔリンパ球（Ｔヘルパー細胞、ＣＤ４＋）を用いて、選択した炎症性サイトカインに関する特異的反応を測定した。特段の記載がない限り、すべての試験材料は水に溶解した固体粉末として提供された。

【0102】

ここで、本発明者は、確立された公開された方法を用いて、以下に詳述する試験品の抗炎症作用を試験するために、初代ヒト単球／リンパ球を使用した。ヒト単球は、グラム陰性菌が産生する細菌性リポ多糖（ＬＰＳ）の影響を受ける主要な細胞であるため、末梢の炎症に関与する主要な細胞型の一つである。さらに、単球からのサイトカイン放出も炎症カスケードの最初のステップの一つであると考えられており、代表的なサイトカインには、インターロイキン－１（ＩＬ－１）ベータ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－２３、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ_２）などの炎症性サイトカイン、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１、別名ＣＣＬ２）やマクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１）などのケモカイン、イソプロスタンなど遊離基や酸化ストレスマーカなどである。単球は線維芽細胞など他の細胞種でも炎症カスケードを引き起こすが、Ｔ細胞はサイトカインシグナル伝達に反応し、適応免疫反応において中心的な役割を果たす。

【0103】

Ｔ細胞は、細胞表面にＴ細胞受容体（ＴＣＲ）が存在することで、他のリンパ球と容易に区別することができる。インターロイキン－２（ＩＬ－２）は、主に活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞（Ｔヘルパー細胞）により産生される１５．５－１６ｋＤａのタンパク質であり、例えば、グラム陽性菌である黄色ブドウ球菌により産生されるエンテロトキシンであって、ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）としても知られるエンテロトキシンＢ型により産生される。ＩＬ－２は、免疫をつかさどる白血球（白血球、多くはリンパ球）の活動を制御している。ＩＬ－２は、微生物感染に対する胴体部の自然な反応の一部であり、異物（「非自己」）と「自己」を識別する。調査したパラメータは、炎症に関し、疼痛や炎症を誘発することによって炎症カスケードに重要な役割を有すると知られる、確立された炎症性メディエータである。

【0104】

初代ヒト単球におけるサイトカインの測定：ヒト初代単球は、健康なヒト血液ドナーの軟膜から単離（濃縮）される。ＥＬＩＳＡ実験のために、細胞を２４ウェルプレートに播種する（１ｍｌ中、約５００，０００細胞／ｍｌ）。細胞はＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍｌ）と２４時間培養される。代表的な組成物（５用量）と抗炎症コントロールとしてのデキサメタゾンを、ＬＰＳ処理の３０分前に添加した（未処理の細胞は陰性対照とした）。２４時間後、上清を除去し、遠心分離し、ＥＬＩＳＡ（ＭＣＰ－１、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－６、ＩＬ－２３、およびＩＬ－８、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｅ社研究開発部門）を用いて、ＭＣＰ－１、ＩＬ－８、ＩＬ－６、ＩＬ－２３、およびＴＮＦ－アルファ濃度などの要求される炎症パラメータを製造業者のプロトコールに従って調べた。各投与量は、２～３人の異なるドナーの２～３の軟膜で６回調査された（軟膜あたりｎ＝２～３、合計ｎ＝６）。

【0105】

初代ヒト単球におけるＰＧＥ２とイソプロスタン（遊離基マーカ）の測定：ヒト初代単球は、健康なヒト血液ドナーの軟膜から単離（濃縮）された。ＥＩＡ実験用に、細胞を２４ウェルプレートに播種した（１ｍｌ中、約５００，０００細胞／ｍｌ）。細胞はＬＰＳ（１０ｎｇ／ｍｌ）と２４時間培養された。代表的な組成物（５用量）と抗炎症コントロールとしてのデキサメタゾンを、ＬＰＳ処理の３０分前に添加する（未処理の細胞は陰性対照とした）。２４時間後、上清を除去し、遠心分離し、ＥＩＡ（Ｃａｙｍａｎ社製、販売元Ｂｉｏｍｏｌ、ドイツ、ハンブルグ）を用いてイソプロスタンとＰＧＥ２の濃度を調べた。各投与量は、３人の異なるドナーの２～３の軟膜で６回調査された（軟膜あたりｎ＝２～３、合計ｎ＝６）。

【0106】

初代Ｔ細胞におけるＩＬ－２の測定：ヒト初代Ｔ細胞は、健康なヒト血液ドナーの軟膜から単離（濃縮）される。ＥＬＩＳＡ実験のために、細胞を２４ウェルプレートに播種する（１ｍｌ中、約５００，０００細胞／ｍｌ）。細胞はＳＥＢ（１μｇ／ｍｌ）と２４時間培養される。代表的な組成物（５用量）と抗炎症コントロールとしてのデキサメタゾンまたはヒドロコルチゾンを、ＳＥＢ処理の３０分前に添加した（未処理の細胞は陰性対照とした）。２４時間後、上清を除去し、遠心分離し、メーカのプロトコールに従ってＥＬＩＳＡ（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｅ、ドイツ、ヴィースバーデン）を用いてＩＬ－２濃度を調べた（他のパラメータも可能）。各投与量は、２～３人の異なるドナーの２～３の軟膜で６回調査された（軟膜あたりｎ＝２～３、合計ｎ＝６）。

【0107】

図１～図７に示したデータからわかるように、代表的な組成物は、ＬＰＳで処理した初代ヒト単球において、さまざまな炎症性マーカに対して有意な効果を示した。図１の概要に示すように、代表的な組成物は、１０μｇ／ｍｌの低用量から、ＬＰＳで誘発されるＩＬ－６、ＴＮＦ－アルファ、ＰＧＥ２の放出を強力かつ有意に阻害した。遊離基マーカであるＬＰＳ誘発性イソプロスタン（ＰＧＦ２ーアルファ）の放出は、抽出の高用量で抑制された。ＬＰＳ誘発のＩＬ－２３放出は影響を受けなかったが、ＩＬ－８とＭＣＰ１のレベルはわずかに上昇した。ＬＰＳを介したＩＬ－１ベータ放出は、この組成物によって増強された。抗炎症薬と陽性対照のデキサメタゾンは、ＩＬ－２３以外のすべてのパラメータを強力に阻止した。図２は、初代ヒト単球における様々なＬＰＳ誘発炎症性サイトカインに対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。より詳細には、図３は、初代ヒト単球におけるＬＰＳ誘発ＴＮＦ－アルファ放出に対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。図４は、初代ヒト単球におけるＬＰＳ誘発ＩＬ－６放出に対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。図５は、初代ヒト単球におけるＬＰＳ誘発ＰＧＥ２放出に対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。図６は、初代ヒト単球におけるＬＰＳ誘発イソプロスタン放出に対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。

【0108】

図７のデータからさらにわかるように、代表的な組成物は、ＳＥＢで処理した初代ヒト単球（初代ヒトＴ細胞）におけるＩＬ－２合成にも有意な効果を示した。ここで、代表的な組成物は、高用量（例えば、２５０μｇ／ｍｌ）でＬＰＳ誘発ＩＬ－２を有意に阻害した。抗炎症薬と陽性対照のデキサメタゾンは、上述のように実験の過程においてＩＬ－２合成を強力に阻害した。図７は、初代ヒトリンパ球におけるＳＥＢ誘発Ｌ－２放出に対する代表的組成物の阻害効果を示す（ＳＥＢ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。特筆すべきは、代表的な組成物は、炎症性シグナル伝達を鈍らせるか減少させる点で有効である一方で、（抗原特異的免疫反応に一般的に必要とされる）Ｔ細胞刺激を中程度のみ、あるいは全く減少させないということである。

【0109】

代表的な組成物に含まれる潜在的な活性分画を調査するため、本発明者は次に、上記した特定のサブブレンドのみを使用して上記のような実験を行った。この目的で、本発明者は、赤色グループのサブブレンド、緑色グループのサブブレンド、橙色／黄色グループのサブブレンド、および紫色／青色グループのサブブレンドを試験し、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－６、およびＰＧＥ_２に関する典型的な結果を図８－１１に示した（ＬＰＳ対照（Ｔ検定）に関して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。図８は、緑色グループのサブブレンドに関する阻害データの概要を示し、図９は、赤色グループのサブブレンドに関する阻害データの概要を示し、図１０は、橙色／黄色グループのサブブレンドに関する阻害データの概要を示し、図１１は、紫色／青色グループのサブブレンドに関する阻害データの概要を示す。

【0110】

図８のデータから容易にわかるように、緑色サブブレンドのみを用いたＴＮＦ－アルファおよびＩＬ－６のサイトカイン放出阻害は、用量依存的に中程度であったが、試験したすべての濃度において明らかなＰＧＥ２放出阻害は見られなかった。一方、赤色サブブレンドを使用した場合、図９に示すように、試験したすべてのサイトカインについて有意な阻害は観察されなかった。しかし、高濃度の赤色サブブレンドでは、ＩＬ－６とＴＮＦ－アルファが増加した。同様に、橙色／黄色サブブレンドは、図１０からわかるように、試験したすべてのサイトカインにおいて有意な阻害または増加をもたらさなかった。図１１に示すように、紫色／青色サブブレンドが使用された場合にのみ、ＴＮＦ－アルファのわずかな阻害が見られた。

【0111】

注目すべきことに、図１２から容易にわかるように（ＬＰＳ対照（Ｔ－検定）に関して＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）、四つのサブブレンドを併用した場合、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－６、ＰＧＥ_２に関して強い阻害相乗効果が観察された。このような相乗特性は予想外であるだけではなく、この相乗効果のある組み合わせが、複数の異なる炎症性経路にまたがる様々な炎症状態（亜急性、慢性、疾患関連、アレルギ関連など）の徴候や症状を軽減するのに効果的であることを強く示唆している。このようなマルチ経路阻害は、従来の抗炎症薬よりも著しく効果的で、生理学的に忍容性の高い抗炎症性免疫調節になると考えられている。さらに、代表的な組成物の成分はすべて食品に由来するため、従来の抗炎症薬にありがちな副作用を伴うことなく、（複数の異なる経路を標的とすることにより）多くの症状における炎症の軽減を有益な形で達成することができる。

【0112】

代表的な組成物が他の組織（例えば、筋肉細胞）にも影響を及ぼすかどうかを調べるために、本発明者はネズミＣ２Ｃ１２筋肉細胞（不死化マウス筋芽細胞株）におけるＩＬ－６およびＴＮＦ－アルファのｍＲＮＡ発現を測定した。Ｃ２Ｃ１２細胞はスペイン、コルドバのコルドバ大学から提供された。細胞は、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、４，５ｍＭのＬ－グルタミン、１％のペニシリンとストレプトマイシン抗生物質を含むダルベッコ変法イーグル培地で培養維持した。すべての実験において、細胞は２４ウェルプレートで８０～９０％のコンフルエンスまで増殖させた。

【0113】

ＲＮＡ単離と定量ＰＣＲ：培養細胞を、水（１～１００μｇ／ｍｌ）に溶解した様々な濃度の代表的組成物とともに４時間培養した。Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＲＮＡ Ｋｉｔ（ｒｏｂｏｋｌｏｎ社）を用いて全ＲＮＡを抽出した。ｃＤＮＡ合成は、Ｍｏｌｏｎｅｙ Ｍｕｒｉｎｅ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｖｉｒｕｓ（Ｍ－ＭＬＶ）逆転写酵素（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、ＲＮａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｒＲＮａｓｉｎ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、ｄＮＴＰマスターミックス（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、およびランダム六量体プライマ（Ｂｉｏｍｅｒｓ、ドイツ）を用いて、１μｇの全ＲＮＡから逆転写した。リアルタイムでのＰＣＲ増幅は、ｈｉｇｈＱｕ社（ドイツ、クライヒタル）のＯＲＡ^TMｑＰＣＲ Ｇｒｅｅｎ ＲＯＸ Ｈ Ｍｉｘ， ２Ｘを用いて、Ａｎａｌｙｔｉｋ Ｊｅｎａ社のｑＴＯＷＥＲ ２．０／２．２ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒｓで行った。反応条件は、９５℃で３分、９５℃で１５秒、５０℃で３０秒、７２℃で４５秒のサイクルを４０回行い、サイクルごとにプレート読み取りを行った。その後、９５°Ｃで１分、５５°Ｃで１分、６５°Ｃ、９５°Ｃで、０．５°Ｃ刻みで５秒のメルトカーブ条件で行い、最終プレートの読み取りを行った。グリセルアルデヒド３リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）は、サンプルの正規化のための内部対照として機能し、データの定量化には比較サイクル閾値Ｃｔ法が用いられた。

【0114】

Ｃ２Ｃ１２筋肉細胞におけるＩＬ－６およびＴＮＦ－アルファｍＲＮＡレベルに対する代表的な組成物の効果は、図１３および図１４の例示的な結果に示されている（いずれも＊ｐ＜０．０５， ＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１）。容易に明らかとなるように、代表的な組成物は、１０μｇ／ｍｌの用量から、強力かつ用量依存的にＩＬ－６およびＴＮＦ－アルファｍＲＮＡレベルを低下させた。したがって、代表的な組成物は、選択されたサイトカインの合成と分泌に大きな影響を及ぼすことが理解されるであろう。
ＮＦκＢ：

【0115】

以下の実験において、本発明者はＮＦ－κＢが炎症促進性遺伝子発現の最も重要な調節因子の一つであるため、代表的な組成物がＮＦκＢに及ぼす影響を調べるために一連の実験を行った。例えば、ＴＮＦ－アルファ、ＩＬ－１ベータ、ＩＬ－６、ＩＬ－８などの様々なサイトカインの合成は、シクロオキシゲナーゼ２（Ｃｏｘ－２）の発現と同様に、ＮＦ－κＢによってメディエートされる。

【0116】

ＮＦ－カッパＢ転写活性を測定するために、本発明者は、ＮＦ－κＢ（活性化Ｂ細胞の核因子カッパ－軽鎖エンハンサ）を発現し、上流のＮＦ－κＢ遺伝的応答要素に機能的に連結されたルシフェラーゼレポーター遺伝子を含むＨＥＫ２９３ｔ細胞を用いたアッセイキットを使用した。このように、ルシフェラーゼ発現の変化を定量化することで、ＮＦ－κＢ活性化レベルの変化を高感度に代用することができる。ＮＦ－κＢはシグナル伝達依存性の転写因子である。このＮＦ－κＢレポータ細胞株は、ＴＮＦα、あるいはタンパク質キナーゼＣ活性化物質であるホルボール１２－ミリステート１３－アセテート（ＰＭＡ）で処理すると、用量依存的な強固な活性化反応を示すことが検証された。そのため、このアッセイは、被験試料がＮＦ－κＢ活性を誘導または抑制する可能性のある機能的活性を定量化するための被験試料のスクリーニングに特に適している。ここで、ＮＦ－カッパＢ転写活性検査は、メーカの指示に従って行った（ＩＮＤＩＧＯ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｂｉｏｍｏｌ）から市販されているアッセイ）。

【0117】

代表的な組成の効果は、上述のアッセイ法を用いて観察した。図１５（＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１。）のデータから明らかなように、ＮＦ－カッパＢのＰＭＡ誘導活性化は低用量（１および１０μｇ／ｍｌ、試験系のアーチファクトと思われる）で増強されるが、高用量では、５０μｇ／ｍｌの用量から始まり、１００μｇ／ｍｌと２５０μｇ／ｍｌの抽出物を用いて、ＮＦ－カッパＢの活性化を強く、用量依存的にほぼ完全に阻害した。特に、この阻害は既知のＮＦ－カッパＢ阻害物質ＱＮＺよりも強力であった。このＮＦ－カッパＢの阻害は、上で示したように、様々な炎症性サイトカインや経路にわたって観察された阻害とも一致していた。
ブドウ糖の取り込み：

【0118】

以下の実験において、本発明者は、エネルギ代謝、特にブドウ糖取り込みに対する代表的な組成物の効果を判定するために、一連のアッセイを行った。

【0119】

この目的で、Ｃ２Ｃ１２細胞（５ｘ１０^４）を９６ウェルブラックプレートに播種し、２４時間培養した。その後、培地を除去し、細胞をＯｐｔｉＭＥＭで培養し、５０μＭの２－ＮＢＤＧ（２－［Ｎ－（７－ニトロベンズ－２－オクサ－１，３－ジアゾル－４－イル）アミノ］－２－デオキシ－Ｄ－グルーコス）で標識し、代表的な組成物または陽性対照ロシグリタゾンで２４時間処理した。培地を除去し、ウェルをＰＢＳで丁寧に洗浄し、ＰＢＳ（１００μｌ／ウェル）で培養した。最終的に、製造元の指示に従って蛍光を測定した。

【0120】

図１６は、マウスＣ２Ｃ１２筋肉細胞におけるブドウ糖取り込みに対する代表的な組成物の効果に関する例示的な結果を示している（＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１）。グラフのデータから容易にわかるように、代表的な組成物のブドウ糖取り込みに対する効果は非常に高く、実際、既知の抗糖尿病化合物であるロシグリタゾンに匹敵する効力があった。このように、代表的な組成物は顕著な抗糖尿病治療効果を有し、細胞エネルギを実質的に促進したことが理解されるであろう。
ミトコンドリア生合成：

【0121】

利用可能なエネルギ基質が大幅に増加したことから、本発明者は一連の実験を行い、増加したエネルギ代謝産物が解糖および細胞呼吸で有効に利用できるかどうかを調べた。細胞呼吸にはミトコンドリアの活性が必要であるため、本発明者は、神経細胞におけるミトコンドリア生合成に対する代表的な組成物の効果を調べようとした。

【0122】

この目的で、Ｎｅｕｒｏ－２ａ（Ｎ２ａ）（ＡＴＣＣ、米国バージニア州マナサス）細胞を、１０％のＦＢＳ、２ｍＭのｌ－グルタミン、１％ペニシリン／ストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭで培養した。細胞は５％のＣＯ２を含む加湿雰囲気中、３７℃に維持された。

【0123】

ミトコンドリア生合成の判定。Ｎ２ａ細胞を９６ウェルプレートに播種し（１ウェルあたり３．５×１０^３細胞）、２４時間後、代表的な組成物（５用量）の濃度を増加させた３連ウェルで７２時間刺激した。その後、Ｍｉｔｏｔｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ（１００ｎＭ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、米国マサチューセッツ州ウォルサム）を３０分間培地に加えた。細胞をＰＢＳで洗浄し、新しい培地を加えた。画像を撮影し、細胞イメージングシステムＩｎｃｕＣｙｔｅ ＨＤ（Ｅｓｓｅｎ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ社、英国ハートフォードシャー）を使用して蛍光を測定した。陽性対照としてロシグリタゾンを用いた。

【0124】

図１７の結果から容易にわかるように、代表的な組成物はミトコンドリア生合成を有意に増加させた。意外なことに、代表的な組成物を用いたミトコンドリア生合成は、このアッセイにおける陽性対照であるロシグリタゾンを上回った。
ＡＴＰ：

【0125】

以下の実験において、本発明者は代表的な組成物が様々な細胞内ＡＴＰレベルに及ぼす影響を調べるために一連の試験を行った。この目的で、本発明者はＲＡＷ２６４．１マウスのマクロファージとＣ２Ｃ１２マウスの筋肉細胞（ドイツ、フライブルク大学から取得）を使用した。

【0126】

細胞は、１０％のＦＢＳと１％の抗生物質ペニシリン／ストレプトマイシンを含む添加後のＤＭＥＭ培地（ＤＭＥＭ完全培地）中で、３７℃で、５％のＣＯ２の加湿雰囲気で維持した。ＡＴＰアッセイでは、ＲＡＷ細胞とＣ２Ｃ１２を９６ウェルプレートに２ｘ１０^４細胞／ウェルの密度で播種し、ＤＭＥＭ培地中、３７℃で、５％のＣＯ２の加湿雰囲気で一晩培養した。次に、選択した濃度（５用量、ｎ＝４）の代表的な組成物で細胞培養を刺激した。細胞中のＡＴＰはＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（Ｒ）２．０ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ／ＡＴＰ Ａｓｓａｙで測定した。

【0127】

特に、マクロファージでは、代表的な組成物の低用量１μｇ／ｍｌのみが、図１８に見られるように、ＡＴＰレベルに対する中程度の増加効果を示した（＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１）。それ以外の用量では効果がなかった。Ｃ２Ｃ１２細胞では、代表的な組成物はＡＴＰレベルを弱いながらも用量依存的に阻害した（図１９参照：＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１）。
活性酸素種（ＲＯＳ）：

【0128】

以下の実験において、本発明者は、マクロファージモデル系における活性酸素種（ＲＯＳ）を判定することによって、細胞の抗酸化力に対する代表的な組成物の効果を判定するために一連の実験を行った。

【0129】

この目的で、本発明者はドイツのＵｎｉｋｌｉｎｉｋ Ｆｒｅｉｂｕｒｇ社から入手したＲＡＷ２６４．１マウスのマクロファージを使用した。細胞は、１０％のＦＢＳと１％の抗生物質ペニシリン／ストレプトマイシンを含む添加後のＤＭＥＭ培地（ＤＭＥＭ完全培地）中で、３７℃で、５％のＣＯ２の加湿雰囲気で維持した。代表的な組成物および制御（陰性対照として化合物なし、陽性対照としてトロロックスとビタミンＣ）の存在下で細胞反応を調べた。図１９の結果から明らかなように、Ｈ_２Ｏ_２によって誘導されたＲＯＳレベルは、１μｇ／ｍｌという比較的低用量から、代表的な組成物によって強力に減少した。注目すべきことに、最大ＲＯＳ抑制は５０μｇ／ｍｌのＤＣで達成され、これは最も強力で一般的に使用されている抗酸化剤のひとつであるトロロックスＣに匹敵する効力である。
アディポカイン：

【0130】

以下の実験において、本発明者は、肥満や代謝性疾患に関連する様々なアディポカインに対する代表的な組成物の効果を調べるために一連の実験を行った。より具体的には、本発明者は標準的な細胞培養モデルで３Ｔ３－Ｌ１細胞（前駆脂肪細胞線維芽細胞）を用い、プロテオーム・プロファイラー・キットを用いてアディポカインの拡張セットの発現レベルを測定した。

【0131】

低継代数３Ｔ３－Ｌ１細胞（ＡＴＣＣ）は、２５ｍＭのブドウ糖、４ｍＭのＬ－グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウムに１０％の（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清を添加したＤＭＥＭ（ＤＭＥＭ／ＦＢＳと呼ぶ）で培養した。細胞は１２ウェルプレートで、５％（ｖ／ｖ）のＣＯ２を添加した３７℃の加湿培養器で培養した。コンフルエンスから二日後、ＤＭＥＭ／ＦＢＳ中、２μｇ／ｍＬのインスリン、０．５ｍＭのイソブチルメチルキサンチン、０．２５μＭのデキサメタゾン、２μＭのロシグリタゾン（すべてシグマ社から購入）という刺激物質のカクテルで脂肪細胞への分化を誘導した。三日後、分化培地を除去し、細胞を分化後培地（ＤＭＥＭ／ＦＢＳに２μｇ ｍＬ－１のインスリンを加えたもの）でさらに６～９日間維持し、培地交換は二日ごと、あるいは必要に応じて行った。分化は毎日顕微鏡で観察した。

【0132】

分化後、細胞をＰＢＳで洗浄し、完全ＤＭＥＭ培地で培養し、代表的な組成物の非存在下および存在下（１０μｇ／ｍｌおよび１００μｇ／ｍｌ、水に溶解）で、ＴＮＦα（５０ｎｇ／ｍｌ）で２４時間処理した。上清を回収し、アディポカインおよびその他の関連可溶性メディエータを検出するためにアッセイした。アディポカインおよびその他の肥満関連タンパク質は、半定量的プロテオームプロファイラマウスのアディポカインアレイキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍ社、米国ミネソタ州ミネアポリス）を用いて検出した。現像したＸ線フィルムの画素密度をスキャナーで収集し、処理・解析プログラムＩｍａｇｅＪ（ＮＩＨ社、米国メリーランド州ベセスダ）を用いて解析した。

【0133】

以下のアディポカインと可溶性メディエータを同時にモニタリングした。アディポネクチン、ＡｇＲＰ、ＡＮＧＰＴ－Ｌ３、Ｃ反応性タンパク質、ＤＰＰＩＶ、エンドカン、フェチュインＡ、酸性ＦＧＦ、ＦＧＦ－２１、ＨＧＦ、ＩＣＡＭ－１、ＩＧＦ－Ｉ、ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＦＢＰ－１、ＩＧＦＢＰ－２、ＩＧＦＢＰ－３、ＩＧＦＢＰ－５、ＩＧＦＢＰ－６、ＩＬ－６ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、レプチン、ＬＩＦ、リポカリン－２、ＭＣＰ－１、Ｍ－ＣＳＦ、オンコスタチンＭ、ペントラキシン２、ペントラキシン３、Ｐｒｅｆ－１、ＲＡＧＥ、ＲＡＮＴＥＳ、ＲＢＰ４、レジスチン、セルピンＥ１、ＴＩＭＰ－１、ＴＮＦ－アルファ、ＶＥＧＦ。

【0134】

図１９～図２２は、分化した３Ｔ３－Ｌ１細胞における肥満関連タンパク質の分泌に対する代表的な組成物の選択した効果示すものである。最も特筆すべきは、ＴＮＦαがＩＧＦＢＰ－１、レプチン、オンコスタチンＭおよびレジスチンの分泌を誘導したことであり、この分泌は、図２１に示されるように代表的な組成物によって完全に阻害された。一方、図２２および図２３に示すように、ＡＮＧＰＴ－Ｌ３、Ｃ反応性タンパク質、エンドカン、ＦＧＦ－２１、ＨＧＦ、ＩＧＦＢＰ－２、ＩＬ－１１、ＲＢＰ４およびペントラキシン２は、明らかにＴＮＦα＋代表組成物によって誘導されたが、ＴＮＦα単独では誘導されなかったことから、これらのタンパク質の合成が代表組成物によって誘導されたことが示唆された。
老化：

【0135】

以下の実験において、本発明者は、正常なヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）における選択された老化マーカの遺伝子発現に対する代表的な組成物の効果を調べるために一連の実験を行った。

【0136】

ＮＨＤＦ細胞はドイツのＡＴＣＣ社から購入した。ＮＨＤＦ細胞は、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、４，５ｍＭのＬ－グルタミン、１％のペニシリンとストレプトマイシン抗生物質を含むダルベッコ変法イーグル培地で培養維持された。ＮＨＤＦ細胞は５％のＣＯ２加湿下で、３７℃で培養した。すべての実験において、細胞は２４ウェルプレートで８０～９０％のコンフルエンスまで増殖させた。細胞培養の２４時間後に培地を交換し、老化させるためにＮＨＤＦ細胞を６日間保存する。

【0137】

老化正常ヒト皮膚線維芽細胞を用いて定量的リアルタイムＰＣＲ（ｑＰＣＲ）を行った。培養した老化ＮＨＤＦ細胞を、水（１～１００μｇ／ｍｌ）に溶解した様々な濃度の代表的組成物とともに４時間培養した。その後Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＲＮＡ Ｋｉｔ（ｒｏｂｏｋｌｏｎ社）を用いて全ＲＮＡを抽出した。ｃＤＮＡ合成は、Ｍｏｌｏｎｅｙ Ｍｕｒｉｎｅ Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｖｉｒｕｓ（Ｍ－ＭＬＶ）逆転写酵素（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、ＲＮａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｒＲＮａｓｉｎ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、ｄＮＴＰマスターミックス（Ｐｒｏｍｅｇａ社、ドイツ、マンハイム）、およびランダム六量体プライマ（Ｂｉｏｍｅｒｓ、ドイツ）を用いて、１μｇの全ＲＮＡから逆転写した。リアルタイムでのＰＣＲ増幅は、ｈｉｇｈＱｕ社（ドイツ、クライヒタル）のＯＲＡ^ＴＭｑＰＣＲ Ｇｒｅｅｎ ＲＯＸ Ｈ Ｍｉｘ，２Ｘを用いて、Ａｎａｌｙｔｉｋ Ｊｅｎａ社のｑＴＯＷＥＲ ２．０／２．２ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒｓで行った。ＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６^ＩＮＫ、ｐ２１をコードする遺伝子を増幅するプライマを設計した。反応条件は、９５℃で３分、９５℃で１５秒、５０℃で３０秒、７２℃で４５秒のサイクルを４０回行い、サイクルごとにプレート読み取りを行った。その後、９５°Ｃで１分、５５°Ｃで１分、６５°Ｃ、９５°Ｃで、０．５°Ｃ刻みで５秒のメルトカーブ条件で行い、最終プレートの読み取りを行った。グリセルアルデヒド３リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）は、サンプルの正規化のための内部対照として機能し、データの定量化には比較サイクル閾値Ｃｔ法が用いられた。

【0138】

特筆すべきは、図２４からわかるように、代表的な組成物は、非常に低い投与量でも、老化関連遺伝子ＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６^ＩＮＫ、ｐ２１の発現を強く阻害したことである。
アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）：

【0139】

以下の実験において、本発明者は、神経機能に関する潜在的な標的としてのＡＣｈＥに対する代表的な組成物の効果を調べるために一連の実験を行った。

【0140】

この目的で、本発明者はＡｍｐｌｉｔｅＴＭ Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ａｓｓａｙ（ＡＡＴ Ｂｉｏｑｕｅｓｔ社製）をメーカの指示に従って使用した。ＮＩＣ（阻害制御無添加）用のアッセイ緩衝剤４０μｌ、ＡＨＥ溶液４０μｌ、陰性対照としてアッセイ緩衝剤で希釈したドネペジル原液４０μｌを９６ウェルプレートの別々のウェルにピペッティングした。陰性対照、ＮＩＣｓ、被験試料溶液について、各ウェルにアセチルコリンエステラーゼ溶液（４ｍＵ／１０μｌ）１０μｌを添加した。制御試料と代表的な組成の試料を、室温で１５分間、ゆっくりと振盪培養した。５０μＬのＡＣｈＥ作業溶液を各ウェルに加え、アセチルコリンエステラーゼの総アッセイ量を１００μｌ／ウェルとした（ｔ＝０ｍｉｎ）。遮光し、室温で６０分間反応物を培養した（ｔ＝６０ ｍｉｎ）。吸光度は、時点ｔ＝０分およびｔ＝６０分で、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社 （ドイツ、ロートガウ）のＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｖｉｃｔｏｒ Ｘ５ ２０３０－００５０ Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ Ｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒを用いて４０５ｎｍで測定した。

【0141】

代表的な組成物のアセチルコリンエステラーゼ活性への影響を示す図２５において、例示的な試験結果を示す。結果は相対単位±ＳＤで表した（＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊ｐ＜０．００１）。容易にわかるように、代表的な組成物は、高濃度で有意なＡＣｈＥ阻害効果を示した。
生存率：

【0142】

以下の実験において、本発明者は代表的な組成物がマクロファージの細胞生存率に及ぼす影響を調べるために一連の実験を行った。ここで、ＲＡＷ２６４．１マウスのマクロファージをフライブルグのＵｎｉｋｌｉｎｉｋから取得し、１０％のＦＢＳと１％の抗生物質ペニシリン／ストレプトマイシンを含む添加後のＤＭＥＭ培地（ＤＭＥＭ完全培地）中で、３７℃で、５％のＣＯ２の加湿雰囲気で維持した。

【0143】

細胞毒性アッセイは、９６ウェルプレートにＲＡＷ細胞を２ｘ１０^４個／ウェルの密度で播種し、ＤＭＥＭ培地中、３７℃、５％のＣＯ_２の加湿雰囲気で一晩培養して行った。次に、選択した濃度（７用量、ｎ＝４）の代表的な組成物で細胞培養を刺激し、ＮａＦを毒性対照としてアラマー青色染色により細胞生存率を測定した。例示的な結果を図２６に示す。結果から容易にわかるように、５００μｇ／ｍｌ以上の高用量のみが細胞生存率や細胞代謝に何らかの影響を示したのに対し、低濃度では細胞生存率や細胞代謝に統計的に有意な影響は見られなかった。

【0144】

本明細書での使用に適したさらなる側面、考察、および企図は、米国特許第１１０６５２９５号に開示されており、参照により本明細書に組み込まれる。

【0145】

いくつかの実施の形態では、本発明の特定の実施の形態の説明および主張に使用される原料の量を表す数値、濃度や反応条件などの特性は、「約」という用語によって一部の場合に修飾されると理解されるものとする。したがって、一部の実施の形態では、記載および添付された請求項に記載された数値パラメータは、特定の実施の形態によって得られる特性によって異なることがある近似値である。ここに記載する値の範囲の列挙は、単に、その範囲内に入る各別個の値を個々に言及する簡潔な方法として機能することが意図される。ここに別段の指示がない限り、個別の値はそれぞれ、ここに個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。

【0146】

本明細書で使用される場合、医薬組成物または栄養補助食品組成物を「投与する」という用語は、医薬組成物または栄養補助食品組成物の直接投与および間接投与の両方を指し、医薬組成物または栄養補助食品組成物の直接投与は、一般的には医療専門家（例えば、医師、看護師、栄養士など）によって行われ、間接投与は、直接投与のために、医療専門家またはそれを必要とする個人に医薬組成物または栄養補助食品組成物を提供または利用可能にするステップ（例えば、注射、輸液、経口投与、局所投与など）を含む。さらに、病態、感受性、または意図された治療に対する反応を「予後する」または「予測する」という用語は、被検者における疾患の進行、改善、および／または持続の速度を含む、病態、感受性、および／または反応を予測する行為または予測（但し、治療または診断ではない）を含むことを意味することに留意すべきである。

【0147】

ここに記載される全ての方法は、ここに別段の指示がない限り、または状況によって明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実施することができる。ここに提供される任意のおよび全ての例、または特定の実施の形態に対する例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に本発明をよりよく明らかにすることを意図しており、別途請求される発明の範囲に制限を課すものではない。本明細書のいかなる文言も、発明の実施に不可欠な、請求されていない素子を示すものとして解釈されるべきではない。

【0148】

本明細書および以下の特許請求の範囲で使用される場合、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」の意味は、文脈上明らかにそうでない場合を除き、複数の参照を含む。また、本明細書で使用される”ｉｎ”の意味は、文脈上明らかにそうでない場合を除き、”ｉｎ”および”ｏｎ”を含む。本明細書でも使用されるように、また文脈から別段の指示がない限り、用語”ｃｏｕｐｌｅｄ ｔｏ”は、直接的なｃｏｕｐｌｉｎｇ（互いに結合される二つの要素が互いに接触する）および間接的なｃｏｕｐｌｉｎｇ（少なくとも一つの追加要素が二つの要素の間に位置する）の両方を含むことが意図される。したがって、”ｃｏｕｐｌｅｄ ｔｏ”と”ｃｏｕｐｌｅｄ ｗｉｔｈ”は同義語として使用される。

【0149】

当業者であれば、本明細書の発明概念を逸脱することなく、既に説明した例以外にも多くの変形例が可能であることは明らかであろう。従って、本発明の主題は、添付の特許請求の範囲以外に限定されない。さらに、明細書と特許請求の範囲の両方の解釈において、すべての用語は、文脈と一致する可能な限り広義に解釈されるべきである。特に、”ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ”および”ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”という用語は、非排他的な態様で要素、構成要素、またはステップを指すものとして解釈されるべきであり、言及された要素、構成要素、またはステップが、明示的に言及されていない他の要素、構成要素、またはステップと存在し、利用され、または組み合わされてもよいことを示す。明細書または特許請求の範囲において、Ａ、Ｂ、Ｃ．．．．．．およびＮからなる群から選択される少なくとも一つと言及している場合、当該テキストはＡプラスＮ、ＢプラスＮなどではなく、群から一つの要素のみを要求していると解釈すべきである。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【手続補正書】

【提出日】2023-12-08

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を含み、
前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する、ことを特徴とする、栄養組成物。

【請求項2】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも一つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも二つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項5】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも三つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項6】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびイソプロスタンの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項7】

前記組成物がさらにＮＦκＢの発現を低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、細胞へのブドウ糖取り込みをさらに増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

前記組成物が、細胞におけるミトコンドリア生合成をさらに増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物が、活性酸素種による酸化的損傷をさらに低減する、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物が、炎症性アディポカインの発現をさらに減少させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物が、老化関連遺伝子の発現をさらに低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項13】

前記組成物が経口投与用に処方される、請求項１に記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物が単回投与単位で処方される、請求項１３に記載の組成物。

【請求項15】

前記単回投与単位が５０～１０００ｍｇの組成物を含有する、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記単回投与単位が、カプセル、グミ、または粉末として製剤化される、請求項１４に記載の組成物。

【請求項17】

ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項18】

ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項19】

前記組成物が、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を治療または軽減することに有効である、請求項１に記載の組成物。

【請求項20】

被験者の健康をサポートする方法であって、請求項１に記載の組成物を個体に投与する、ことを含む方法。

【請求項21】

前記組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を処置または軽減することに有効な量で投与される、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記組成物が、少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇの間で投与される、請求項２０または２１に記載の方法。

【請求項23】

組成物の経口投与により被験者の健康をサポートする請求項１に記載の組成物の使用方法。

【請求項24】

前記組成物は、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を処置または軽減することに有効な量で投与される、請求項２３に記載の使用方法。

【請求項25】

前記組成物が、少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇの間で投与される、請求項２４または２５に記載の使用方法。

【請求項26】

被験者の炎症老化を軽減する方法であって、
被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を投与することを含み、
前記植物素材の組み合わせがヒト細胞における少なくとも一つの炎症性サイトカインの放出を相乗的に減少させ、ヒト細胞における少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させる、ことを特徴とする方法。

【請求項27】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、地中海食の一部である、請求項２６に記載の方法。

【請求項29】

最も典型的には、前記炎症性サイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、およびイソプロスタンからなる群より選択される、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト細胞における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記老化関連遺伝子が、ＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６ＩＮＫ、およびｐ２１からなる群より選択される、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記炎症老化の軽減は、加齢に伴う免疫の低下の軽減、加齢に伴うエネルギ代謝の低下の軽減、加齢に伴うミトコンドリア生合成の低下の軽減、炎症に関連した少なくとも一つの症状の軽減、および／またはメタボリックシンドロームに関連した少なくとも一つの症状の軽減からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項33】

前記組成物の投与はさらに、ＮＦκＢの発現を減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞内のミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または細胞内ＡＴＰを増加させる、請求項２６に記載の方法。

【請求項34】

前記被験者への投与は、前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材の経口投与からなる、請求項２６に記載の方法。

【請求項35】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を約５０～１０００ｍｇの用量で投与する、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材が、錠剤、ドリンク剤、またはグミとして処方される、請求項３４に記載の方法。

【請求項37】

植物素材の組み合わせが、ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項38】

前記植物素材の組み合わせは、ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項39】

前記複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材を、少なくとも３０日間にわたって少なくとも一日一回投与する、請求項２６に記載の方法。

【請求項40】

被験者の炎症を軽減する方法であって、
被験者に、赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を投与することを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを相乗的に減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させ、および／または少なくとも一つの炎症性アディポカインを減少させる、ことを特徴とする方法。

【請求項41】

前記植物素材の組み合わせは、少なくとも一つのサイトカインの減少に関して相乗的な組み合わせである、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させる、請求項４０または４１に記載の方法。

【請求項43】

前記植物素材の組み合わせは、投与時に、前記被験者において、少なくとも一つの炎症性サイトカインを減少させ、ＮＦκＦシグナル伝達を減少させ、少なくとも一つの炎症性アディポカインを減少させる、請求項４０または４１に記載の方法。

【請求項44】

細胞内のブドウ糖取り込みを増加させる方法であって、
赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を細胞に接触させることを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせが接触すると、前記細胞へのブドウ糖取り込みが増加する、ことを特徴とする方法。

【請求項45】

細胞内へのブドウ糖取り込みの増加は、チアゾリンジオン系薬剤を用いた場合のブドウ糖取り込みの増加と同等かそれ以上である、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

細胞内のＡＴＰレベルを増加させる方法であって、
赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を細胞に接触させることを含み、
前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、
前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、
橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、およびニンジン粉末からなり、
紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、およびエルダーベリー粉末からなり、且つ、
前記植物素材の組み合わせが接触すると、前記細胞内のＡＴＰレベルが増加する、ことを特徴とする方法。

【請求項47】

前記細胞が筋肉細胞である、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材であって、前記植物素材を摂取する個体における炎症老化の少なくとも一つの症状を軽減するために使用される植物素材。

【請求項49】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項４８に記載の使用方法。

【請求項50】

ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させ、ＮＦκＢシグナル伝達を減少させ、細胞へのブドウ糖取り込みを増加させ、細胞におけるミトコンドリア生合成を増加させ、活性酸素種による酸化的損傷を減少させ、炎症性アディポカインの発現を減少させ、および／または少なくとも一つの老化関連遺伝子の発現を減少させる、請求項１に記載の栄養組成物の使用方法。

【手続補正書】

【提出日】2024-02-26

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

赤色、緑色、橙黄色、および紫青色を有する複数の化学的に異なるポリフェノール含有植物素材と組み合わせた栄養学的に許容される担体を含み、
前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、ヒト白血球における炎症性サイトカイン放出を減少させることに関して相乗作用のある量で存在する、ことを特徴とする、炎症状態、代謝異常、神経学的状態、心血管状態、老化、および／または酸化ストレスに関連する症状を治療または軽減するための栄養組成物。

【請求項2】

前記赤色植物素材は、リンゴ抽出物、ザクロ抽出物、トマト粉末、およびビート根粉末からなり、前記緑色植物素材は、オリーブ抽出物、ローズマリー抽出物、未焙煎コーヒー豆抽出物、およびケール粉末からなり、前記橙黄色植物素材は、タマネギ抽出物、ショウガ抽出物、グレープフルーツ抽出物、ニンジン粉末からなり、および／または前記紫青色植物素材は、ブドウ抽出物、ブルーベリー抽出物、スグリ粉末、エルダーベリー粉末からなる、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記炎症性サイトカイン放出が、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－アルファ）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）およびイソプロスタンのうちの少なくとも一つの放出である、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

前記組成物が、さらにＮＦκＢの発現を低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

前記組成物が、さらに細胞へのブドウ糖取り込みを増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

前記組成物が、さらに細胞におけるミトコンドリア生合成を増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項7】

前記組成物が、さらに活性酸素種による酸化的損傷を低減する、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、さらに炎症性アディポカインの発現を減少させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

前記組成物が、さらに老化関連遺伝子の発現を低下させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物が経口投与用に処方される、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物が単回投与単位で処方される、請求項１０に記載の組成物。

【請求項12】

前記単回投与単位が５０～１０００ｍｇの組成物を含有する、請求項１１に記載の組成物。

【請求項13】

前記単回投与単位が、カプセル、グミ、または粉末として製剤化される、請求項１１に記載の組成物。

【請求項14】

ビタミン、食物中の微量元素またはミネラル、プロバイオティクス、および／またはプレバイオティクスをさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項15】

ナイアシン、ナイアシンアミド、ニコチンアミドリボシド、ニコチンアミドモノヌクレオチド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、および／または栄養学的に許容されるＣＤ３８阻害物質をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物が、少なくとも３０日間にわたって、および／または一日量５０～１０００ｍｇの間で投与される、請求項１に記載の組成物。

【請求項17】

前記赤色植物素材、前記緑色植物素材、前記橙黄色植物素材、および前記紫青色植物素材は、地中海食の一部である、請求項１に記載の組成物。

【請求項18】

前記老化関連遺伝子が、ＨＧＦ、ｃ－ｆｏｓ、ｐ１６^ＩＮＫ、およびｐ２１からなる群より選択される、請求項９に記載の組成物。

【請求項19】

前記炎症状態の軽減は、加齢に伴う免疫の低下の軽減、加齢に伴うエネルギ代謝の低下の軽減、加齢に伴うミトコンドリア生合成の低下の軽減、炎症に関連した少なくとも一つの症状の軽減、および／またはメタボリックシンドロームに関連した少なくとも一つの症状の軽減からなる、請求項１に記載の組成物。

【請求項20】

さらに細胞内ＡＴＰを増加させる、請求項１に記載の組成物。

【請求項21】

細胞内へのブドウ糖取り込みの増加は、チアゾリンジオン系薬剤を用いた場合のブドウ糖取り込みの増加と同等かそれ以上である、請求項５に記載の組成物。

【請求項22】

前記細胞が筋肉細胞である、請求項２０に記載の組成物。

【国際調査報告】