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特表2024-525475タノトランスミッションを促進するように操作された免疫細胞及びその使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-07-12
(54)【発明の名称】タノトランスミッションを促進するように操作された免疫細胞及びその使用
(51)【国際特許分類】
C12N 5/10 20060101AFI20240705BHJP
C12N 5/0783 20100101ALI20240705BHJP
C12N 5/0786 20100101ALI20240705BHJP
A61K 35/15 20150101ALI20240705BHJP
A61K 35/17 20150101ALI20240705BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240705BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20240705BHJP
A61P 35/04 20060101ALI20240705BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20240705BHJP
A61P 33/00 20060101ALI20240705BHJP
A61P 31/18 20060101ALI20240705BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20240705BHJP
A61P 31/20 20060101ALI20240705BHJP
A61P 31/22 20060101ALI20240705BHJP
A61P 31/06 20060101ALI20240705BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240705BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240705BHJP
A61K 39/00 20060101ALI20240705BHJP
A61K 38/19 20060101ALI20240705BHJP
A61K 35/768 20150101ALI20240705BHJP
A61K 38/07 20060101ALI20240705BHJP
A61K 31/167 20060101ALI20240705BHJP
A61K 31/18 20060101ALI20240705BHJP
A61K 31/4045 20060101ALI20240705BHJP
A61K 31/192 20060101ALI20240705BHJP
C12N 15/62 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/12 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/11 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/10 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/33 20060101ALN20240705BHJP
C12N 15/38 20060101ALN20240705BHJP
【ＦＩ】
C12N5/10
C12N5/0783 ZNA
C12N5/0786
A61K35/15
A61K35/17
A61P35/00
A61P35/02
A61P35/04
A61P37/04
A61P33/00
A61P31/18
A61P31/14
A61P31/20
A61P31/22
A61P31/06
A61K45/00
A61K39/395 T
A61K39/395 E
A61K39/00 H
A61K38/19
A61K35/768
A61K39/395 U
A61K38/07
A61K31/167
A61K31/18
A61K31/4045
A61K31/192
C12N15/62 Z
C12N15/13
C12N15/12
C12N15/11 Z
C12N15/10 200Z
C12N15/33
C12N15/38
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023580689
(86)(22)【出願日】2022-06-29
(85)【翻訳文提出日】2024-02-19
(86)【国際出願番号】 US2022035612
(87)【国際公開番号】W WO2023278641
(87)【国際公開日】2023-01-05
(31)【優先権主張番号】63/216,505
(32)【優先日】2021-06-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/308,195
(32)【優先日】2022-02-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】519263969
【氏名又は名称】フラグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ，インコーポレーテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002572
【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】シュミット，ダービー，ライ
(72)【発明者】
【氏名】ナガラジャン，ニランジャナ，アディティ
(72)【発明者】
【氏名】カイザー，ウィリアム，ジョゼフ
(72)【発明者】
【氏名】ガフ，ピーター，ジョゼフ
(72)【発明者】
【氏名】ダカル，サビン
(72)【発明者】
【氏名】ユボー，アレクシ，ブノワ
【テーマコード（参考）】
4B065
4C084
4C085
4C086
4C087
4C206
【Ｆターム（参考）】
4B065AA94X
4B065AB01
4B065AC12
4B065AC14
4B065AC20
4B065BA01
4B065CA24
4B065CA44
4C084AA02
4C084AA19
4C084BA01
4C084BA09
4C084BA16
4C084BA24
4C084BA32
4C084BA44
4C084DA01
4C084MA65
4C084MA66
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4C084ZB262
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4C084ZB272
4C084ZC202
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4C085GG10
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4C086AA02
4C086BC13
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4C086ZB26
4C086ZB27
4C086ZB32
4C086ZB33
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4C206ZB32
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4C206ZB35
4C206ZB37
4C206ZC55
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(57)【要約】
特定の態様では、本開示は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞に関する。免疫細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする１つ又は複数の核酸配列も含み得る。操作された免疫細胞を使用して、タノトランスミッションを促進し、免疫応答を促進し、癌を処置する方法も開示される。
【選択図】図１Ａ－１Ｂ
【選択図】図１Ａ－１Ｂ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ａ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドであって、前記ＣＡＲが、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、ポリヌクレオチド；並びに（ｂ）免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドであって、前記免疫細胞の活性化時に前記ポリヌクレオチドの発現を誘導する異種プロモーターに作動可能に連結された、ポリヌクレオチド
を含み、前記免疫細胞が、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、又はマクロファージである、免疫細胞。
【請求項2】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、少なくとも１つのＴＣＲ型シグナル伝達ドメインを含む、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項3】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項２に記載の免疫細胞。
【請求項4】
前記ＣＡＲが、ヒンジドメインをさらに含む、請求項３に記載の免疫細胞。
【請求項5】
前記プロモーターが、前記抗原結合ドメインが抗原に結合すると、前記ポリヌクレオチドの発現を誘導する、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項6】
前記異種プロモーターが、活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）プロモーター、ＳＴＡＴプロモーター、ＡＰ－１プロモーター、ＮＦ－κＢプロモーター、及びＩＲＦ４プロモーターからなる群から選択される、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項7】
前記ＴＣＲ型シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む、請求項２に記載の免疫細胞。
【請求項8】
ＣＤ３ゼータの前記細胞内ドメインが、１つ又は複数の免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）における１つ又は複数のチロシン残基の突然変異を含む、請求項７に記載の免疫細胞。
【請求項9】
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、以下： （ａ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；
（ｂ）４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；及び
（ｃ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメイン、４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメイン、ＣＤ２７又はＣＤ１３４の共刺激シグナル伝達ドメイン、及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン
からなる群から選択されるドメインの組み合わせを含む、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項10】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項11】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項12】
前記抗原結合ドメインが、癌細胞の表面で優先的に発現されるタンパク質に結合する、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項13】
前記癌細胞が、固形癌である、請求項１２に記載の免疫細胞。
【請求項14】
前記癌が、非固形癌である、請求項１２に記載の免疫細胞。
【請求項15】
前記抗原結合ドメインが、メソテリンに結合する、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項16】
前記抗原結合ドメインが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、カッパ軽鎖、ＣＤ５、ＣＤ３０、ＣＤ７０、ＣＤ３８、ＣＤ１３８、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＣＤ４４ｖ６、ＣＳ１及びＲＯＲ１からなる群から選択されるタンパク質に結合する、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項17】
前記抗原結合ドメインが、ＣＤ４４ｖ６、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＤ１３３、肝細胞増殖因子受容体（ｃ－Ｍｅｔ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＩＩＩ型変異体上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）、上皮細胞接着分子（Ｅｐｃａｍ）、エリスロポエチン産生肝細胞癌Ａ２（ＥｐｈＡ２）、胎児アセチルコリン受容体、葉酸受容体アルファ（ＦＲａ）、ガングリオシドＧＤ２（ＧＤ２）、グリピカン－３（ＧＰＣ３）、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＵＣＹ２Ｃ）、ヒト上皮増殖因子受容体１（ＨＥＲ１）、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、インターロイキン１３受容体ａ２（ＩＬ１３Ｒａ２）、インターロイキン１１受容体ａ（ＩＬ１１Ｒａ）、Ｋｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（Ｋｒａｓ）、Ｋｒａｓ Ｇ１２Ｄ、Ｌ１細胞接着分子（Ｌ１ＣＡＭ）、ＭＡＧＥ、ＭＥＴ、メソテリン、ムチン１（ＭＵＣ１）、ムチン１６（ＭＵＣ１６ ｅｃｔｏ）、ナチュラルキラーグループ２メンバーＤ（ＮＫＧ２Ｄ）、ＮＹ－ＥＳＯ－１、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、ウィルムス腫瘍１（ＷＴ－１）、ＰＳＭＡ１、ＬＡＰ３、ＡＮＸＡ３、マスピン、オルファクトメジン４、ＣＤ１１ｂ、インテグリンアルファ２、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、Ｌｅｗｉｓ－Ｙ及びＴＡＧ７２からなる群から選択されるタンパク質に結合する、請求項１に記載の免疫細胞。
【請求項18】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＴＲＩＦ又はその変異体をコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項19】
前記ＴＲＩＦ変異体が、表２に列挙されるＴＲＩＦ変異体である、請求項１８に記載の免疫細胞。
【請求項20】
前記ＴＲＩＦ変異体が、表２に列挙されるアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載の免疫細胞。
【請求項21】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、デスフォールドドメインをコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項22】
前記デスフォールドドメインが、デスドメイン、ピリンドメイン、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）、Ｃ末端カスパーゼ動員ドメイン（ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体からなる群から選択される、請求項２１に記載の免疫細胞。
【請求項23】
前記デスドメインが、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、Ｆａｓ、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、腫瘍壊死因子受容体１型（ＴＮＦＲ１）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する、請求項２２に記載の免疫細胞。
【請求項24】
前記ピリンドメインが、ＮＬＲファミリーピリンドメイン含有３（ＮＬＲＰ３）及びアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）からなる群から選択されるタンパク質に由来する、請求項２２に記載の免疫細胞。
【請求項25】
前記デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）が、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、カスパーゼ－８及びカスパーゼ－１０からなる群から選択されるタンパク質に由来する、請求項２２に記載の免疫細胞。
【請求項26】
前記ＣＡＲＤが、ＲＩＰ関連ＩＣＨ１／ＣＥＤ３相同タンパク質（ＲＡＩＤＤ）、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、ミトコンドリア抗ウイルスシグナル伝達タンパク質（ＭＡＶＳ）、カスパーゼ１、及びその変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する、請求項２２に記載の免疫細胞。
【請求項27】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、Ｔｏｌｌ／インターロイキンＩ受容体（ＴＩＲ）ドメインをコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項28】
前記ＴＩＲドメインが、骨髄分化一次応答タンパク質８８（ＭｙＤ８８）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）、転座鎖関連膜タンパク質（ＴＲＡＭ）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する、請求項２７に記載の免疫細胞。
【請求項29】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＴＩＲドメインを含むタンパク質をコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項30】
ＴＩＲドメインを含む前記タンパク質が、骨髄分化一次応答タンパク質８８（ＭｙＤ８８）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）、転座鎖関連膜タンパク質（ＴＲＡＭ）、及びそれらの変異体からなる群から選択される、請求項２９に記載の免疫細胞。
【請求項31】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、細胞性ＦＬＩＣＥ（ＦＡＤＤ様ＩＬ－１β変換酵素）阻害タンパク質（ｃ－ＦＬＩＰ）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ１（ＲＩＰＫ１）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ３（ＲＩＰＫ３）、Ｚ－ＤＮＡ結合タンパク質１（ＺＢＰ１）、混合系統キナーゼドメイン様シュードキナーゼ（ＭＬＫＬ）、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質のドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＤ）、ｍｙｒ－ＦＡＤＤ－ＤＤ、阻害剤ｋＢαスーパーリプレッサー（ＩｋＢα－ＳＲ）、インターロイキン１受容体関連キナーゼ１（ＩＲＡＫ１）、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、カスパーゼ８のドミナントネガティブ変異体、インターフェロン制御因子３（ＩＲＦ３）、ガスダーミンＡ（ＧＳＤＭ－Ａ）、ガスダーミンＢ（ＧＳＤＭ－Ｂ）、ガスダーミン－Ｃ（ＧＳＤＭ－Ｃ）、ガスダーミン－Ｄ（ＧＳＤＭ－Ｄ）、ガスダーミン－Ｅ（ＧＳＤＭ－Ｅ）、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、グランザイムＡ、二量体化ドメインを有するＣ末端カスパーゼ動員ドメインを含むアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ－ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるポリペプチドをコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項32】
ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦの前記Ｎ末端切断体が、ヒトＴＲＩＦのアミノ酸残基１～３１１の欠失を含む、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項33】
ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦの前記Ｎ末端切断体が、配列番号１２を含むか、又は配列番号１２からなる、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項34】
前記ｃＦＬＩＰが、ヒトｃＦＬＩＰである、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項35】
前記ｃＦＬＩＰが、カスパーゼ８及びＦＡＤＤ様アポトーシス調節因子（ｃＦＬＡＲ）である、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項36】
前記ＺＢＰ１が、受容体相互作用タンパク質ホモタイプ相互作用モチーフ（ＲＨＩＭ）Ｃの欠失、ＲＨＩＭ Ｄの欠失、及びＺａ１ドメインのＮ末端の欠失を含む、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項37】
前記ＺＢＰ１が、ＺＢＰ１－Ｚａ１／ＲＨＩＭＡ切断型である、請求項３１に記載の免疫細胞。
【請求項38】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ウイルス遺伝子を含む、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項39】
前記ウイルス遺伝子が、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）由来のｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１／Ｋ１３）、伝染性軟属腫（Ｍｏｌｌｕｓｃｕｍ Ｃｏｎｔａｇｉｏｕｓｕｍ）ウイルス由来のＭＣ１５９Ｌ、ウマヘルペスウイルス２由来のＥ８、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）又はマウスサイトメガロウイルス（ＭＣＭＶ）由来のｖＩＣＡ、牛痘ウイルス由来のＣｒｍＡ、及びキンウワバ（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）多カプシド核多角体病ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）由来のＰ３５からなる群から選択されるポリペプチドをコードする、請求項３８に記載の免疫細胞。
【請求項40】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドが、２つ以上の異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードし、前記２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドが、以下：ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、ＴＲＩＦ、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ、ガスダーミンＥ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＳＦ）タンパク質、及びそれらの変異体からなる群から選択される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項41】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドが、少なくとも２つのポリヌクレオチドを含み、各ポリヌクレオチドが、以下：ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、ＴＲＩＦ、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ、ガスダーミンＥ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＳＦ）タンパク質、及びそれらの変異体からなる群から選択される、異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードする、請求項４０に記載の免疫細胞。
【請求項42】
前記ポリヌクレオチドの少なくとも１つが、少なくとも２つの前記タノトランスミッションポリペプチドを含むキメラタンパク質をコードする、請求項４０に記載の免疫細胞。
【請求項43】
前記ポリヌクレオチドの少なくとも１つは、前記２つ以上の異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードする単一の転写物として転写される、請求項４０に記載の免疫細胞。
【請求項44】
前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＴＲＩＦ又はその変異体を含む、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項45】
前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項46】
前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＴＲＩＦ又はその変異体を含み、前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項47】
前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＭＡＶＳ又はその変異体を含み、前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む、請求項４０～４３のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項48】
前記ＴＲＩＦ変異体が、表２に列挙されるＴＲＩＦ変異体であるか、又は表２に列挙されるアミノ酸配列を含む、請求項４４に記載の免疫細胞。
【請求項49】
前記ＴＲＩＦ変異体が、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体である、請求項４４に記載の免疫細胞。
【請求項50】
前記ＴＲＩＦ変異体が、ヒトＴＲＩＦのアミノ酸残基１～３１１の欠失を含む、請求項４４に記載の免疫細胞。
【請求項51】
ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦの前記Ｎ末端切断体が、配列番号１２を含むか、又は配列番号１２からなる、請求項４９に記載の免疫細胞。
【請求項52】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドが、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドをさらにコードする、請求項１～５１のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項53】
カスパーゼ活性を阻害する前記ポリペプチドが、ＦＡＤＤドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＮ）、ｃＦＬＩＰ、ｖＩＣＡ、カスパーゼ８ドミナントネガティブ変異体（Ｃａｓｐ８－ＤＮ）、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、Ｔａｋ１、ＩＫＫ、及びそれらの変異体からなる群から選択される、請求項５２に記載の免疫細胞。
【請求項54】
カスパーゼ活性を阻害する前記ポリペプチドが、ＦＡＤＤ－ＤＮである、請求項５２に記載の免疫細胞。
【請求項55】
カスパーゼ活性を阻害する前記ポリペプチドが、ｃＦＬＩＰである、請求項５２に記載の免疫細胞。
【請求項56】
カスパーゼ活性を阻害する前記ポリペプチドが、ｖＩＣＡである、請求項５２に記載の免疫細胞。
【請求項57】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ガスダーミン又はその変異体をコードする、請求項１～５６のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項58】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＴＲＩＦ又はその変異体をコードし、タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＲＩＰＫ３又はその変異体をコードし、タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ガスダーミン又はその変異体をコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項59】
タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＭＡＶＳ又はその変異体をコードし、タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ＲＩＰＫ３又はその変異体をコードし、タノトランスミッションを促進する前記１つ又は複数のポリヌクレオチドのうちの少なくとも１つが、ガスダーミン又はその変異体をコードする、請求項１～１７のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項60】
前記ガスダーミンが、ガスダーミンＥ又はその変異体である、請求項５７～５９のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項61】
前記変異体が、前記タノトランスミッションポリペプチドの機能性断片である、請求項１８～６０のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項62】
前記免疫細胞が、二量体化ドメインをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドをさらに含む、請求項１～６１のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項63】
前記タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つが、二量体化ドメインをさらに含む融合タンパク質内に含まれる、請求項１～６２のいずれか１項に記載の免疫細胞。
【請求項64】
前記二量体化ドメインが、前記タノトランスミッションポリペプチドに対して異種である、請求項６２又は６３に記載の免疫細胞。
【請求項65】
対象においてタノトランスミッションを促進する方法であって、前記方法が、前記対象においてタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、請求項１～６４のいずれか１項に記載の免疫細胞を投与することを含む、方法。
【請求項66】
標的細胞によるタノトランスミッションを促進する方法であって、前記方法が、標的細胞又は前記標的細胞を含む組織を、前記標的細胞がタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、請求項１～６４のいずれか１項に記載の免疫細胞と接触させることを含む、方法。
【請求項67】
それを必要とする対象において免疫応答を促進する方法であって、前記方法が、請求項１～６４のいずれか１項に記載の免疫細胞を、前記免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で前記対象に投与し、それにより前記対象の免疫応答を促進することを含む、方法。
【請求項68】
前記免疫細胞が、標的細胞におけるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、前記対象に投与される、請求項６５～６７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項69】
前記標的細胞が、癌細胞、免疫細胞、内皮細胞及び線維芽細胞からなる群から選択される、請求項６８に記載の方法。
【請求項70】
前記対象が、感染症を有する、請求項６５～６９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項71】
前記標的細胞が、病原体に感染している、請求項６６及び６８～７０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項72】
前記感染症が、ウイルス感染症である、請求項７０又は７１に記載の方法。
【請求項73】
前記感染症が、慢性感染症である、請求項７０～７２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項74】
前記慢性感染症が、ＨＩＶ感染症、ＨＣＶ感染症、ＨＢＶ感染症、ＨＰＶ感染症、Ｂ型肝炎感染症、Ｃ型肝炎感染症、ＥＢＶ感染症、ＣＭＶ感染症、ＴＢ感染症、及び寄生虫による感染症から選択される、請求項７３に記載の方法。
【請求項75】
それを必要とする対象において癌を処置する方法であって、前記方法が、請求項１～６４のいずれか１項に記載の免疫細胞を前記対象に投与し、それにより前記対象の前記癌を処置することを含む、方法。
【請求項76】
前記免疫細胞を前記対象に投与すると、前記対象における癌細胞の増殖が低減する、請求項７５に記載の方法。
【請求項77】
前記癌細胞の増殖が、前記対象に投与される癌療法から起こる癌細胞の過剰増殖である、請求項７６に記載の方法。
【請求項78】
前記免疫細胞を前記対象に投与すると、前記対象における癌細胞の転移が低減する、請求項７５～７７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項79】
前記免疫細胞を前記対象に投与すると、前記対象における腫瘍の新生血管形成が低減する、請求項７５～７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項80】
前記癌の処置が、以下：腫瘍量の減少、腫瘍サイズの減少、腫瘍増殖の阻害、処置前に進行性癌を有する対象における癌の安定化の達成、癌が進行するまでの時間の延長、及び生存期間の延長のうちのいずれか１つ又は複数を含む、請求項７５～７９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項81】
免疫刺激細胞ターンオーバー経路が、前記癌において誘導される、請求項７５～８０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項82】
前記癌は、前記免疫刺激細胞ターンオーバー経路が欠損している、請求項８１に記載の方法。
【請求項83】
前記免疫刺激細胞ターンオーバー経路が、ネクロトーシス、外因性アポトーシス、フェロトーシス及びパイロトーシスからなる群から選択される、請求項８１又は８２に記載の方法。
【請求項84】
前記癌が、免疫チェックポイント療法に応答性の癌である、請求項７５～８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項85】
前記癌が、癌腫、肉腫、リンパ腫、黒色腫、及び白血病から選択される、請求項７５～８４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項86】
前記癌が、転移性癌である、請求項７５～８５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項87】
前記癌が、固形腫瘍である、請求項７５～８６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項88】
前記固形腫瘍が、結腸癌、軟部組織肉腫（ＳＴＳ）、転移性明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、卵巣癌、胃腸癌、結腸直腸癌、肝細胞癌（ＨＣＣ）、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、乳癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肉腫、悪性胸膜中皮腫（ＭＰＭ）、網膜芽細胞腫、神経膠腫、髄芽腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、膵臓癌、肺癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、食道癌、肝臓癌、前立腺癌、婦人科系の癌、上咽頭癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、尿路上皮膀胱癌、神経芽細胞腫、及び子宮頸癌からなる群から選択される、請求項８７に記載の方法。
【請求項89】
前記癌が、以下：黒色腫、子宮頸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、尿路上皮癌、膀胱癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肉腫、大腸腺癌、胃腸間質腫瘍、胃食道癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、肝細胞癌、悪性中皮腫、白血病、リンパ腫、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、移行上皮癌、神経芽細胞腫、形質細胞腫、ウィルムス腫瘍、及び肝細胞癌からなる群から選択される、請求項７５～８７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項90】
前記癌が、固形腫瘍でない、請求項７５～８６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項91】
前記癌が、白血病、リンパ腫、Ｂ細胞悪性腫瘍、Ｔ細胞悪性腫瘍、多発性骨髄腫、骨髄性悪性腫瘍、及び血液悪性腫瘍からなる群から選択される、請求項９０に記載の方法。
【請求項92】
前記免疫細胞が、前記対象に静脈内投与される、請求項６５～９１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項93】
前記免疫細胞が、前記対象に腫瘍内投与される、請求項６５～９１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項94】
前記方法が、抗腫瘍薬を前記対象に投与することをさらに含む、請求項６５～９３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項95】
前記抗腫瘍薬が、化学療法薬である、請求項９４に記載の方法。
【請求項96】
前記抗腫瘍薬が、生物学的製剤である、請求項９４に記載の方法。
【請求項97】
前記生物学的製剤が、抗原結合タンパク質である、請求項９６に記載の方法。
【請求項98】
前記生物学的製剤が、腫瘍溶解性ウイルスである、請求項９６に記載の方法。
【請求項99】
前記抗腫瘍薬が、免疫療法薬である、請求項９４に記載の方法。
【請求項100】
前記免疫療法薬が、以下：Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、細胞ベース療法、サイトカイン、癌ワクチン、及び免疫チェックポイント分子の免疫チェックポイントモジュレーターからなる群から選択される、請求項９９に記載の方法。
【請求項101】
前記細胞ベース療法が、キメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ細胞）療法である、請求項１００に記載の方法。
【請求項102】
前記免疫チェックポイント分子が、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＡＤＯＲＡ２Ａ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡから選択される、請求項１００に記載の方法。
【請求項103】
前記免疫チェックポイント分子が、刺激性免疫チェックポイント分子であり、前記免疫チェックポイントモジュレーターは、前記刺激性免疫チェックポイント分子のアゴニストである、請求項１００に記載の方法。
【請求項104】
前記免疫チェックポイント分子が、抑制性免疫チェックポイント分子であり、前記免疫チェックポイントモジュレーターが、前記抑制性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストである、請求項１００に記載の方法。
【請求項105】
前記免疫チェックポイントモジュレーターが、小分子、抑制性ＲＮＡ、アンチセンス分子、及び免疫チェックポイント分子結合タンパク質から選択される、請求項１００～１０４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項106】
前記免疫チェックポイント分子が、ＰＤ－１であり、前記免疫チェックポイントモジュレーターが、ＰＤ－１阻害剤である、請求項１００に記載の方法。
【請求項107】
前記ＰＤ－１阻害剤が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピディリズマブ、ＳＨＲ－１２１０、ＭＥＤＩ０６８０Ｒ０１、ＢＢｇ－Ａ３１７、ＴＳＲ－０４２、ＲＥＧＮ２８１０及びＰＦ－０６８０１５９１から選択される、請求項１０６に記載の方法。
【請求項108】
前記免疫チェックポイント分子が、ＰＤ－Ｌ１であり、前記免疫チェックポイントモジュレーターが、ＰＤ－Ｌ１阻害剤である、請求項１００に記載の方法。
【請求項109】
前記ＰＤ－Ｌ１阻害剤が、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ＭＤＸ－１１０５、ＡＭＰ－２２４及びＬＹ３３０００５４から選択される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項110】
前記免疫チェックポイント分子が、ＣＴＬＡ－４であり、前記免疫チェックポイントモジュレーターが、ＣＴＬＡ－４阻害剤である、請求項１００に記載の方法。
【請求項111】
前記ＣＴＬＡ－４阻害剤が、イピリムマブ、トレメリムマブ、ＪＭＷ－３Ｂ３及びＡＧＥＮ１８８４から選択される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項112】
前記抗腫瘍薬が、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤である、請求項９４に記載の方法。
【請求項113】
前記ヒストンデアセチラーゼ阻害剤が、ヒドロキサム酸、ベンズアミド、環状テトラペプチド、デプシペプチド、求電子ケトン、又は脂肪族化合物である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項114】
前記ヒドロキサム酸が、ボリノスタット（ＳＡＨＡ）、ベリノスタット（ＰＸＤ１０１）、ＬＡＱ８２４、トリコスタチンＡ、又はパノビンオスタット（ＬＢＨ５８９）である、請求項１１３に記載の方法。
【請求項115】
前記ベンズアミドが、エンチノスタット（ＭＳ－２７５）、０１９９４、又はモセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）である、請求項１１３に記載の方法。
【請求項116】
前記環状テトラペプチドが、トラポキシンＢである、請求項１１３に記載の方法。
【請求項117】
前記脂肪族化合物が、フェニル酪酸又はバルプロ酸である、請求項１１３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本出願は、２０２２年２月９日に出願された米国仮特許出願第６３／３０８，１９５号、及び２０２１年６月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／２１６，５０５号に対する優先権を主張し、それぞれの全内容は、参照により明示的に本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２２年２月９日に出願された米国仮特許出願第６３／３０８，１９５号、及び２０２１年６月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／２１６，５０５号に対する優先権を主張し、それぞれの全内容は、参照により明示的に本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表の提出
本出願に関連する配列表は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子形式で提出され、参照により明細書全体に組み込まれる。配列表を含むテキストファイルの名称は、１２９９８３＿００８２０＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇである。テキストファイルのサイズは、７２，１８３バイトで、テキストファイルは、２０２２年６月２８日に作成された。
本出願に関連する配列表は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子形式で提出され、参照により明細書全体に組み込まれる。配列表を含むテキストファイルの名称は、１２９９８３＿００８２０＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇである。テキストファイルのサイズは、７２，１８３バイトで、テキストファイルは、２０２２年６月２８日に作成された。
【背景技術】
【0003】
後生動物において、プログラム細胞死は、不可欠な遺伝的にプログラムされたプロセスであり、これは、組織の恒常性を維持すると共に、潜在的に有害な細胞を排除する。
【図面の簡単な説明】
【0004】
【図1A-1B】図１Ａは、免疫細胞における発現のための例示的なキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）構築物を示す。図１Ｂは、免疫細胞におけるタノトランスミッションを促進するタンパク質の発現のための例示的な構築物を示す。
【図2A-2B】タノトランスミッションの誘導後のＣＴ－２６マウス大腸癌細胞の相対生存率を示す。
【図3A】マクロファージにおけるＩＦＮ関連遺伝子活性化の刺激に対する、タノトランスミッションポリペプチド発現（例えば、ＴＲＩＦ発現単独又はＲＩＰＫ３（ｃＲ３）及び／若しくはガスダーミンＥ（ｃＧＥ）と組み合わせて）後にＣＴ－２６マウス大腸癌細胞から産生された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）の誘導の影響を示す。図３Ａにおいて、Ｔｅｔ誘導性ＲＩＰＫ３は「ＲＩＰＫ３」と称され、構成的ＰＧＫプロモーターを含むＲＩＰＫ３構築物は「ＰＧＫ＿ＲＩＰＫ３」と称される。図３Ｂでは、各タノトランスミッションモジュールについて、処置群は、左から右に、対照（ＣＴＬ）、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、及びドキシサイクリン＋Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（Ｄｏｘ＋Ｄｉｍｅｒｉｚｅｒ）である。
【図3B】マクロファージにおけるＩＦＮ関連遺伝子活性化の刺激に対する、タノトランスミッションポリペプチド発現（例えば、ＴＲＩＦ発現単独又はＲＩＰＫ３（ｃＲ３）及び／若しくはガスダーミンＥ（ｃＧＥ）と組み合わせて）後にＣＴ－２６マウス大腸癌細胞から産生された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）の誘導の影響を示す。図３Ａにおいて、Ｔｅｔ誘導性ＲＩＰＫ３は「ＲＩＰＫ３」と称され、構成的ＰＧＫプロモーターを含むＲＩＰＫ３構築物は「ＰＧＫ＿ＲＩＰＫ３」と称される。図３Ｂでは、各タノトランスミッションモジュールについて、処置群は、左から右に、対照（ＣＴＬ）、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、及びドキシサイクリン＋Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（Ｄｏｘ＋Ｄｉｍｅｒｉｚｅｒ）である。
【図4】骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）における活性化マーカーの発現の刺激に対する、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ３又はＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３発現の誘導後にＣＴ－２６マウス大腸癌細胞から産生された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）の影響を示す。ＭＦＩは、平均蛍光強度である。
【図5A】ＣＴ－２６マウス大腸癌細胞を移植したマウスの生存に対するタノトランスミッションポリペプチド発現の影響を示す。「ＣＴ２６－ＴＦ」は、ＴＲＩＦだけを発現するＣＴ－２６細胞を表し、「ＣＴ２６－Ｐ＿Ｒ３」は、ＲＩＰＫ３だけを発現する細胞を表す。図４Ｂでは、全てのマウスを抗ＰＤ１抗体で処置した。
【図5B-5C】ＣＴ－２６マウス大腸癌細胞を移植したマウスの生存に対するタノトランスミッションポリペプチド発現の影響を示す。「ＣＴ２６－ＴＦ」は、ＴＲＩＦだけを発現するＣＴ－２６細胞を表し、「ＣＴ２６－Ｐ＿Ｒ３」は、ＲＩＰＫ３だけを発現する細胞を表す。図４Ｂでは、全てのマウスを抗ＰＤ１抗体で処置した。
【図6A】図６Ａは、様々なタノトランスミッションペイロードを発現するＵ９３７白血病細胞からの細胞培養物で処置され、且つ、カスパーゼ阻害剤（Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ）単独、又はＲＩＰＫ３阻害剤（ＧＳＫ８７２）と組み合わせて処置したＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞における相対ＮＦ－ｋＢ活性を示す。図６Ｂ及び６Ｃは、様々なタノトランスミッションペイロードを発現するＵ９３７白血病細胞由来の細胞培養物で処置され、且つ、カスパーゼ阻害剤（Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ）単独で、又はＲＩＰＫ３阻害剤（ＧＳＫ８７２）と組み合わせて処置されたＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞における相対ＩＲＦ活性を示す。Ｕ９３７細胞はまた、（タノトランスミッションポリペプチド発現を誘導するために）ドキシサイクリン単独で、又は（二量体化を誘導するために）Ｂ／Ｂホモ二量体化剤と組み合わせて処置された。図６Ａ～６Ｃにおいて、＋はドキシサイクリンで処置したＵ９３７細胞を示し、＋＋はドキシサイクリン及びＢ／Ｂホモ二量体で処置したＵ９３７細胞を示す。
【図6B-6C】図６Ｂ及び６Ｃは、様々なタノトランスミッションペイロードを発現するＵ９３７白血病細胞由来の細胞培養物で処置され、且つ、カスパーゼ阻害剤（Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ）単独で、又はＲＩＰＫ３阻害剤（ＧＳＫ８７２）と組み合わせて処置されたＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞における相対ＩＲＦ活性を示す。Ｕ９３７細胞はまた、（タノトランスミッションポリペプチド発現を誘導するために）ドキシサイクリン単独で、又は（二量体化を誘導するために）Ｂ／Ｂホモ二量体化剤と組み合わせて処置された。図６Ａ～６Ｃにおいて、＋はドキシサイクリンで処置したＵ９３７細胞を示し、＋＋はドキシサイクリン及びＢ／Ｂホモ二量体で処置したＵ９３７細胞を示す。
【図7B】図７Ｂは、マクロファージにおけるＩＦＮ関連遺伝子活性化の刺激に対する、単独で、又はカスパーゼ阻害剤と組み合わせて、タノトランスミッションポリペプチド発現の誘導後にＣＴ－２６マウス大腸癌細胞から産生された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）の影響を示す。
【図8】誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物の発現を駆動する抗メソテリンＣＡＲの図を示す。
【図9A】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株の総細胞死パーセントを示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図9B】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株の総細胞死パーセントを示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図9C】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株の総細胞死パーセントを示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図10A】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株におけるアポトーシス細胞死に対する壊死性細胞死の比を示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図10B】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株におけるアポトーシス細胞死に対する壊死性細胞死の比を示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図10C】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株におけるアポトーシス細胞死に対する壊死性細胞死の比を示す。細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８、又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図11A】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株から収集された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）で処置されたＴＨＰ－１単球における相対ＩＲＦ活性を示す。ＣＴＦの収集前に、細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図11B】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株から収集された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）で処置されたＴＨＰ－１単球における相対ＩＲＦ活性を示す。ＣＴＦの収集前に、細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【図11C】抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞株から収集された細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）で処置されたＴＨＰ－１単球における相対ＩＲＦ活性を示す。ＣＴＦの収集前に、細胞を様々な濃度のメソテリン又はＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターで処置し、２４、４８又は７２時間インキュベートした。Ｘ軸の数値は、メソテリン濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【0005】
特定の態様では、本開示は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞に関する。
【0006】
特定の態様では、本開示は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物に関する。
【0007】
一実施形態では、組成物は、標的細胞において生物学的応答を誘導するのに十分な量の免疫細胞を含む。一実施形態では、免疫細胞は、異種ターゲティングドメインを含む。一実施形態では、異種ターゲティングドメインは、抗原結合ドメインである。一実施形態では、免疫細胞は、細胞ターンオーバーを引き起こす異種シグナル伝達ドメインを含む。一実施形態では、異種シグナル伝達ドメインは、細胞内シグナル伝達ドメインである。一実施形態では、ターゲティングドメインは、シグナル伝達ドメインに作動可能に連結される。一実施形態では、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、シグナル伝達ドメインの活性化時に遺伝子の発現を誘導する異種プロモーターに作動可能に連結される。一実施形態では、異種プロモーターは、活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）プロモーター、ＳＴＡＴプロモーター、ＡＰ－１プロモーター、ＮＦ－κＢプロモーター、及びＩＲＦ４プロモーターからなる群から選択される。一実施形態では、免疫細胞は、抗原結合ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む。
【0008】
特定の態様では、本開示は、以下：
（ａ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする１つ又は複数の核酸配列であって、ＣＡＲが、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、核酸配列；並びに
（ｂ）免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドであって、免疫細胞の活性化時にポリヌクレオチドの発現を誘導する異種プロモーターに作動可能に連結された、ポリヌクレオチド
を含む免疫細胞に関し、ここで、免疫細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、又はマクロファージである。
（ａ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする１つ又は複数の核酸配列であって、ＣＡＲが、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、核酸配列；並びに
（ｂ）免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドであって、免疫細胞の活性化時にポリヌクレオチドの発現を誘導する異種プロモーターに作動可能に連結された、ポリヌクレオチド
を含む免疫細胞に関し、ここで、免疫細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、又はマクロファージである。
【0009】
一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも１つのＴＣＲ型シグナル伝達ドメインを含む。一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一実施形態では、ＣＡＲは、ヒンジドメインをさらに含む。一実施形態では、プロモーターは、抗原結合ドメインが抗原に結合すると、ポリヌクレオチドの発現を誘導する。一実施形態では、プロモーターは、活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）プロモーター、ＳＴＡＴプロモーター、ＮＦ－κＢプロモーター、ＡＰ－１プロモーター、又はＩＲＦ４プロモーターである。一実施形態では、ＴＣＲ型シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む。一実施形態では、ＣＤ３ゼータの細胞内ドメインは、１つ又は複数の免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）における１つ又は複数のチロシン残基の突然変異を含む。
【0010】
一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、以下：（ａ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；（ｂ）４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；及び（ｃ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメイン、４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメイン、ＣＤ２７又はＣＤ１３４の共刺激シグナル伝達ドメイン、及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインからなる群から選択されるドメインの組み合わせを含む。一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む。一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む。
【0011】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、癌細胞の表面で優先的に発現されるタンパク質に結合する。一実施形態では、癌細胞は、固形癌である。一実施形態では、癌は、非固形癌である。一実施形態では、抗原結合ドメインは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２３、カッパ軽鎖、ＣＤ５、ＣＤ３０、ＣＤ７０、ＣＤ３８、ＣＤ１３８、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＣＤ４４ｖ６、ＣＳ１及びＲＯＲ１からなる群から選択されるタンパク質に結合する。一実施形態では、抗原結合ドメインは、ＣＤ４４ｖ６、ＣＡＩＸ（炭酸脱水酵素ＩＸ）、ＣＥＡ（癌胎児性抗原）、ＣＤ１３３、ｃ－Ｍｅｔ（肝細胞増殖因子受容体）、ＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）、ＥＧＦＲｖＩＩＩ（ＩＩＩ型変異体上皮増殖因子受容体）、Ｅｐｃａｍ（上皮細胞接着分子）、ＥｐｈＡ２（エリスロポエチン産生肝細胞癌Ａ２）、胎児アセチルコリン受容体、ＦＲａ（葉酸受容体アルファ）、ＧＤ２（ガングリオシドＧＤ２）、ＧＰＣ３（グリピカン－３）、ＧＵＣＹ２Ｃ（グアニリルシクラーゼＣ）、ＨＥＲ１（ヒト上皮増殖因子受容体１）、ＨＥＲ２（ヒト上皮増殖因子受容体２）（ＥＲＢＢ２）、ＩＣＡＭ－１（細胞間接着分子１）、ＩＬ１３Ｒａ２（インターロイキン１３受容体ａ２））、ＩＬ１１Ｒａ（インターロイキン１１受容体ａ）、Ｋｒａｓ（Ｋｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ）、Ｋｒａｓ Ｇ１２Ｄ、Ｌ１ＣＡＭ（Ｌ１細胞接着分子）、ＭＡＧＥ、ＭＥＴ、メソテリン、ＭＵＣ１（ムチン１）、ＭＵＣ１６ｅｃｔｏ（ムチン１６）、ＮＫＧ２Ｄ（ナチュラルキラーグループ２メンバーＤ）、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原）、ＷＴ－１（ウィルムス腫瘍１）、ＰＳＭＡ１、ＬＡＰ３、ＡＮＸＡ３、マスピン、オルファクトメジン４、ＣＤ１１ｂ、インテグリンアルファ２、ＦＡＰ（線維芽細胞活性化タンパク質）、Ｌｅｗｉｓ－Ｙ及びＴＡＧ７２からなる群から選択されるタンパク質に結合する。一実施形態では、抗原結合ドメインは、メソテリンに結合する。
【0012】
一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、デスフォールドドメインをコードする。一実施形態では、デスフォールドドメインは、デスドメイン、ピリンドメイン、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）、Ｃ末端カスパーゼ動員ドメイン（ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体からなる群から選択される。一実施形態では、デスドメインは、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、Ｆａｓ、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、腫瘍壊死因子受容体１型（ＴＮＦＲ１）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する。一実施形態では、ピリンドメインは、ＮＬＲファミリーピリンドメイン含有３（ＮＬＲＰ３）及びアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）からなる群から選択されるタンパク質に由来する。一実施形態では、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）は、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、カスパーゼ－８及びカスパーゼ－１０からなる群から選択されるタンパク質に由来する。一実施形態では、ＣＡＲＤは、ＲＩＰ関連ＩＣＨ１／ＣＥＤ３相同タンパク質（ＲＡＩＤＤ）、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、ミトコンドリア抗ウイルスシグナル伝達タンパク質（ＭＡＶＳ）、カスパーゼ１、及びその変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する。
【0013】
一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、Ｔｏｌｌ／インターロイキン－１受容体（ＴＩＲ）ドメインをコードする。一実施形態では、ＴＩＲドメインは、骨髄分化一次応答タンパク質８８（ＭｙＤ８８）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）、転座鎖関連膜タンパク質（ＴＲＡＭ）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるタンパク質に由来する。一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ＴＩＲドメインを含むタンパク質をコードする。一実施形態では、ＴＩＲドメインを含むタンパク質は、骨髄分化一次応答タンパク質８８（ＭｙＤ８８）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）、転座鎖関連膜タンパク質（ＴＲＡＭ）、及びそれらの変異体からなる群から選択される。
【0014】
一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ変異体をコードする。一実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、表２に列挙されるＴＲＩＦ変異体である。一実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、表２に列挙されるアミノ酸配列を含む。一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、細胞性ＦＬＩＣＥ（ＦＡＤＤ様ＩＬ－１β変換酵素）阻害タンパク質（ｃ－ＦＬＩＰ）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ１（ＲＩＰＫ１）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ３（ＲＩＰＫ３）、Ｚ－ＤＮＡ結合タンパク質１（ＺＢＰ１）、混合系統キナーゼドメイン様シュードキナーゼ（ＭＬＫＬ）、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質のドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＤ）、ｍｙｒ－ＦＡＤＤ－ＤＤ、阻害剤ｋＢαスーパーリプレッサー（ＩｋＢα－ＳＲ）、インターロイキン１受容体関連キナーゼ１（ＩＲＡＫ１）、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、カスパーゼ８のドミナントネガティブ変異体、インターフェロン制御因子３（ＩＲＦ３）、ガスダーミンＡ（ＧＳＤＭ－Ａ）、ガスダーミンＢ（ＧＳＤＭ－Ｂ）、ガスダーミン－Ｃ（ＧＳＤＭ－Ｃ）、ガスダーミン－Ｄ（ＧＳＤＭ－Ｄ）、ガスダーミン－Ｅ（ＧＳＤＭ－Ｅ）、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、グランザイムＡ、二量体化ドメインを有するＣ末端カスパーゼ動員ドメインを含むアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ－ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるポリペプチドをコードする。一部の実施形態では、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体は、ヒトＴＲＩＦのアミノ酸残基１～３１１の欠失を含む。一部の実施形態では、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体は、配列番号１２を含むか、又は配列番号１２からなる。
【0015】
一実施形態では、ｃＦＬＩＰは、ヒトｃＦＬＩＰである。一実施形態では、ｃＦＬＩＰは、カスパーゼ８及びＦＡＤＤ様アポトーシス調節因子（ｃＦＬＡＲ）である。一実施形態では、ＺＢＰ１は、受容体相互作用タンパク質ホモタイプ相互作用モチーフ（ＲＨＩＭ）Ｃの欠失、ＲＨＩＭ Ｄの欠失、及びＺａ１ドメインのＮ末端の欠失を含む。一実施形態では、ＺＢＰ１は、ＺＢＰ１－Ｚａ１／ＲＨＩＭＡ切断型である。
【0016】
一実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ウイルス遺伝子である。一実施形態では、ウイルス遺伝子は、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）由来のｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１／Ｋ１３）、伝染性軟属腫（Ｍｏｌｌｕｓｃｕｍ Ｃｏｎｔａｇｉｏｕｓｕｍ）ウイルス由来のＭＣ１５９Ｌ、ウマヘルペスウイルス２由来のＥ８、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）又はマウスサイトメガロウイルス（ＭＣＭＶ）由来のｖＩＣＡ、牛痘ウイルス由来のＣｒｍＡ、及びキンウワバ（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）多カプシド核多角体病ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）由来のＰ３５からなる群から選択されるポリペプチドをコードする。
【0017】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、２つ以上の異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードし、ここで、２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドは、以下：ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、ＴＲＩＦ、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ、ガスダーミンＥ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＳＦ）タンパク質、及びそれらの変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、ポリヌクレオチドの少なくとも１つは、少なくとも２つのタノトランスミッションポリペプチドを含むキメラタンパク質をコードする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチドの少なくとも１つは、２つ以上の異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードする単一の転写物として転写される。
【0018】
一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、ＮＦ－κＢを活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、外因性アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、プログラム壊死を促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、外因性アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死を促進する。
【0019】
一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、外因性アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死を促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、アポトーシスを促進し、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死を促進する。一部の実施形態では、プログラム壊死は、ネクロトーシスを含む。一部の実施形態では、プログラム壊死は、パイロトーシスを含む。
【0020】
一部の実施形態では、ＮＦ－ｋＢを活性化するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＮＦＳＦタンパク質、及びそれらの変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＭｙＤ８８、ＭＡＶＳ、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３及びそれらの変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、外因性アポトーシスを促進するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ１、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＲＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、及びそれらの変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、プログラム壊死を促進するタノトランスミッションポリペプチドは、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミン、及びそれらの変異体からなる群から選択される。
【0021】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその変異体を含む。一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む。一部の実施形態では、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその変異体を含み、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む。一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその変異体を含み、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含む。
【0022】
一部の実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、表２に列挙されるＴＲＩＦ変異体である。一部の実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、表２に列挙されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体である。一部の実施形態では、ＴＲＩＦ変異体は、ヒトＴＲＩＦのアミノ酸残基１～３１１の欠失を含む。一部の実施形態では、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体は、配列番号１２を含むか、又は配列番号１２からなる。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドは、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドをさらにコードする。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ＦＡＤＤドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＮ）、ｃＦＬＩＰ、ｖＩＣＡ、カスパーゼ８ドミナントネガティブ変異体（Ｃａｓｐ８－ＤＮ）、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、Ｔａｋ１、ＩＫＫ、及びそれらの変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ＦＡＤＤ－ＤＮである。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ｃＦＬＩＰである。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ｖＩＣＡである。
【0023】
一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドは、少なくとも１つのガスダーミン又はその変異体をコードする。一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその変異体を含み、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含み、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミン又はその変異体を含む。一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその変異体を含み、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその変異体を含み、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミン又はその変異体を含む。一部の実施形態では、ガスダーミンは、ガスダーミンＥ又はその変異体である。一部の実施形態では、変異体は、タノトランスミッションポリペプチドの機能性断片である。
【0024】
一部の実施形態では、細胞は、二量体化ドメインをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドをさらに含む。一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、二量体化ドメインをさらに含む融合タンパク質内に含まれる。一部の実施形態では、二量体化ドメインは、タノトランスミッションポリペプチドに対して異種である。
【0025】
特定の態様では、本開示は、対象においてタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、対象においてタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、本明細書に記載の免疫細胞を投与することを含む。
【0026】
特定の態様では、本開示は、標的細胞によるタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、標的細胞又は標的細胞を含む組織を、標的細胞によるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、本明細書に記載の免疫細胞と接触させることを含む。
【0027】
特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において免疫応答を促進する方法に関し、この方法は、本明細書に記載の免疫細胞を、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で対象に投与し、それにより対象の免疫応答を促進することを含む。
【0028】
一実施形態では、免疫細胞は、標的細胞におけるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、対象に投与される。一実施形態では、標的細胞は、癌細胞、免疫細胞、内皮細胞及び線維芽細胞からなる群から選択される。一実施形態では、対象は感染症に罹患している。一実施形態では、標的細胞は、病原体に感染している。一実施形態では、感染症は、ウイルス感染症である。一実施形態では、感染症は慢性感染症である。一実施形態では、慢性感染症は、ＨＩＶ感染症、ＨＣＶ感染症、ＨＢＶ感染症、ＨＰＶ感染症、Ｂ型肝炎感染症、Ｃ型肝炎感染症、ＥＢＶ感染症、ＣＭＶ感染症、ＴＢ感染症、及び寄生虫による感染症から選択される。
【0029】
特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において癌を処置する方法に関し、この方法は、本明細書に記載の免疫細胞を対象に投与し、それにより対象の癌を処置することを含む。一実施形態では、免疫細胞を対象に投与すると、対象における癌細胞の増殖が低減する。一実施形態では、癌細胞の増殖は、対象に投与された癌治療から生じる癌細胞の過増殖である。一実施形態では、免疫細胞を対象に投与すると、対象における癌細胞の転移が低減する。一実施形態では、免疫細胞を対象に投与すると、対象における腫瘍の新生血管形成が低減する。
【0030】
一実施形態では、癌の処置は、腫瘍量の減少、腫瘍サイズの縮小、腫瘍増殖の阻害、処置前の進行癌を有する対象における安定な癌の達成、癌の進行までの時間の増加、及び生存期間の増加のうちのいずれか１つ又は複数を含む。一実施形態では、免疫刺激細胞ターンオーバー経路は、癌において誘導される。一実施形態では、癌は、免疫刺激細胞ターンオーバー経路が欠損している。一実施形態では、免疫刺激細胞ターンオーバー経路は、ネクロトーシス、外因性アポトーシス、フェロトーシス及びパイロトーシスからなる群から選択される。一実施形態では、癌は、免疫チェックポイント療法に応答性の癌である。一実施形態では、癌は、癌腫、肉腫、リンパ腫、黒色腫、及び白血病から選択される。一実施形態では、癌は転移性癌である。一実施形態では、癌は、固形腫瘍である。
【0031】
一実施形態では、固形腫瘍は、結腸癌、軟部組織肉腫（ＳＴＳ）、転移性明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、卵巣癌、胃腸癌、結腸直腸癌、肝細胞癌（ＨＣＣ）、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、乳癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肉腫、悪性胸膜中皮腫（ＭＰＭ）、網膜芽細胞腫、神経膠腫、髄芽腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、膵臓癌、肺癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、食道癌、肝臓癌、前立腺癌、婦人科系の癌、上咽頭癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、尿路上皮膀胱癌、神経芽細胞腫、及び子宮頸癌からなる群から選択される。
【0032】
一実施形態では、癌は、以下：黒色腫、子宮頸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、尿路上皮癌、膀胱癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肉腫、大腸腺癌、胃腸間質腫瘍、胃食道癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、肝細胞癌、悪性中皮腫、白血病、リンパ腫、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、移行上皮癌、神経芽細胞腫、形質細胞腫、ウィルムス腫瘍、及び肝細胞癌からなる群から選択される。一実施形態では、癌は、固形腫瘍ではない。一実施形態では、癌は、白血病、リンパ腫、Ｂ細胞悪性腫瘍、Ｔ細胞悪性腫瘍、多発性骨髄腫、骨髄性悪性腫瘍、及び血液悪性腫瘍からなる群から選択される。
【0033】
一実施形態では、免疫細胞は、対象に静脈内投与される。一実施形態では、免疫細胞は、対象に腫瘍内投与される。
【0034】
一実施形態では、本方法は、抗腫瘍薬を対象に投与することをさらに含む。一実施形態では、抗腫瘍薬は、化学療法薬である。一実施形態では、抗腫瘍薬は、生物学的製剤である。一実施形態では、生物学的製剤は、抗原結合タンパク質である。一実施形態では、生物学的製剤は、腫瘍溶解性ウイルスである。
【0035】
一実施形態では、抗腫瘍薬は、免疫療法薬である。一実施形態では、免疫療法薬は、以下：Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、細胞ベース療法、サイトカイン、癌ワクチン、及び免疫チェックポイント分子の免疫チェックポイントモジュレーターからなる群から選択される。一実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、コーリー毒素及びカルメット・ゲラン桿菌（Ｂａｃｉｌｌｅ Ｃａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ）（ＢＣＧ）から選択される。一実施形態では、細胞ベース療法は、キメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ細胞）療法である。
【0036】
一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＡＤＯＲＡ２Ａ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡから選択される。一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、刺激性免疫チェックポイント分子であり、免疫チェックポイントモジュレーターは、刺激性免疫チェックポイント分子のアゴニストである。一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、阻害性免疫チェックポイント分子であり、免疫チェックポイントモジュレーターは、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストである。一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、小分子、阻害性ＲＮＡ、アンチセンス分子、及び免疫チェックポイント分子結合タンパク質から選択される。
【0037】
一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－１であり、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－１阻害剤である。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピディリズマブ、ＳＨＲ－１２１０、ＭＥＤＩ０６８０Ｒ０１、ＢＢｇ－Ａ３１７、ＴＳＲ－０４２、ＲＥＧＮ２８１０及びＰＦ－０６８０１５９１から選択される。一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１であり、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ１阻害剤である。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ＭＤＸ－１１０５、ＡＭＰ－２２４及びＬＹ３３０００５４から選択される。一実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＣＴＬＡ－４であり、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＴＬＡ－４阻害剤である。一実施形態では、ＣＴＬＡ－４阻害剤は、イピリムマブ、トレメリムマブ、ＪＭＷ－３Ｂ３及びＡＧＥＮ１８８４から選択される。一実施形態では、抗腫瘍薬は、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤である。一実施形態では、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、ヒドロキサム酸、ベンズアミド、環状テトラペプチド、デプシペプチド、求電子ケトン、又は脂肪族化合物である。一実施形態では、ヒドロキサム酸は、ボリノスタット（ＳＡＨＡ）、ベリノスタット（ＰＸＤ１０１）、ＬＡＱ８２４、トリコスタチンＡ、又はパノビンオスタット（ＬＢＨ５８９）である。
【0038】
一実施形態では、ベンズアミドは、エンチノスタット（ＭＳ－２７５）、０１９９４、又はモセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）である。一実施形態では、環状テトラペプチドは、トラポキシンＢである。一実施形態では、脂肪族酸は、フェニル酪酸又はバルプロ酸である。
【0039】
本発明は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞に関する。タノトランスミッションは、細胞間、例えば、シグナル伝達細胞（例えば、本明細書に記載の操作された免疫細胞）と応答細胞との間の連絡のプロセスであり、これは、シグナル伝達細胞における細胞ターンオーバー経路の活性化、例えば、プログラム細胞死の結果起こり、応答細胞にシグナル伝達して、生物学的応答を受けるようにする。タノトランスミッションは、細胞ターンオーバー経路遺伝子、例えば、プログラム細胞死経路遺伝子の発現によって、シグナル伝達細胞において誘導され得る。細胞ターンオーバー経路が活性化されたシグナル伝達細胞は、シグナル伝達細胞によって能動的に放出される因子を介して、又はシグナル伝達細胞のターンオーバー（例えば、細胞死）中に応答細胞に曝露されるようになるシグナル伝達細胞の細胞内因子を介して、応答細胞にシグナル伝達することができる。本発明の様々な実施形態では、操作された免疫細胞によって発現される１つ又は複数のポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリペプチドの発現又は活性を増加させることによって、且つ／又は免疫細胞におけるタノトランスミッションを抑制する１つ又は複数のポリペプチドの発現若しくは活性を低下させることによって、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する。従って、特定の態様では、本発明は、対象においてタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、本明細書に記載の操作された免疫細胞を投与することを含む。
【0040】
一部の実施形態では、シグナル伝達細胞（例えば、本明細書に記載の操作された免疫細胞）は、標的細胞との接触又は近接を介して標的細胞（例えば、癌細胞）によるタノトランスミッションを促進することによって、対象におけるタノトランスミッションをさらに促進し得る。例えば、細胞ターンオーバー中に操作された免疫細胞によって放出される因子は、標的細胞においても同様に細胞ターンオーバー、例えばプログラム細胞死を開始し、それにより、標的細胞によるタノトランスミッションを促進し得る。従って、本発明はまた、標的細胞によるタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、標的細胞又は標的細胞を含む組織を、本明細書に記載の操作された免疫細胞と接触させることを含む。
【0041】
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、細胞ターンオーバー、例えばプログラム細胞死を引き起こす、異種シグナル伝達ドメインをさらに含む。シグナル伝達ドメインは、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）細胞内シグナル伝達ドメインであってもよい。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、シグナル伝達ドメインの活性化時にポリヌクレオチドの発現を誘導するプロモーターの転写制御下にある。
【0042】
Ｉ．定義
本明細書で使用される「投与する」、「投与すること」又は「投与」という用語は、医薬組成物又は薬剤を対象の系に、又は対象の内部若しくは外部の特定の領域に送達するあらゆる方法を含む。
本明細書で使用される「投与する」、「投与すること」又は「投与」という用語は、医薬組成物又は薬剤を対象の系に、又は対象の内部若しくは外部の特定の領域に送達するあらゆる方法を含む。
【0043】
本明細書で使用される「併用投与」、「同時投与」、若しくは「併用療法」は、個別の製剤若しくは単一の医薬製剤を用いた２種以上の活性剤の投与、又は両方（若しくは全て）の活性剤がそれらの生物学的活性を発揮する期間が重なるような任意の順序での連続投与として理解される。本明細書では、１つの活性剤（例えば、細胞ターンオーバー又はプログラム細胞死を受けタノトランスミッションを開始するように操作された免疫細胞）が、第２の治療薬（例えば、免疫療法薬）の活性を改善することができる、例えば、標的細胞、例えば癌細胞を第２の治療薬の活性に感作させることができる、又は第２の治療薬と相乗効果を有し得ることが企図される。「併用投与」は、薬剤が同時に、同じ頻度で、又は同じ投与経路によって投与される必要はない。本明細書で使用される「併用投与」、「同時投与」、又は「併用療法」には、１又は複数種の追加の治療薬、例えば、免疫療法薬（例えば、免疫チェックポイントモジュレーター）と共に、細胞ターンオーバーを受けタノトランスミッションを開始するように操作された免疫細胞の投与が含まれる。免疫療法薬の例は、本明細書に提供される。
【0044】
本明細書で使用される「抗原結合ドメイン」という用語は、標的細胞又は標的病原体（例えば、真菌、細菌又はウイルス）の表面上の別のタンパク質に結合するタンパク質を指す。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む、免疫グロブリン鎖又はその断片である。「抗原結合ドメイン」という用語は、抗体及び抗体断片を包含するが、これらに限定されない。
【0045】
本明細書で使用される「抗体断片」という用語は、抗原のエピトープと特異的に相互作用する能力（例えば、結合、立体障害、安定化／不安定化、空間分布によって）を保持する抗体の少なくとも一部分を指す。抗体断片の例として、限定はされないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、直鎖抗体、ｓｄＡｂ（ＶＬ又はＶＨ）などの単一ドメイン抗体、ラクダ科動物のＶＨＨドメイン、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片などの抗体断片から形成された多重特異性抗体、及び単離されたＣＤＲ又は抗体の他のエピトープ結合断片が挙げられる。抗原結合断片はまた、単一ドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、ナノボディ、イントラボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ－ＮＡＲ、及びｂｉｓ－ｓｃＦｖに組み込むことができる（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３：１１２６－１１３６，２００５を参照）。抗原結合断片は、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などのポリペプチドに基づく足場にグラフトすることもできる（フィブロネクチンポリペプチドミニボディが記載される米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照）。
【0046】
「ｓｃＦｖ」という用語は、軽鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片と、重鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片とを含む、融合タンパク質を指し、ここで、軽鎖及び重鎖の可変領域は、例えば、合成リンカー、例えば短い柔軟なポリペプチドリンカーを介して連続的に連結されており、単鎖ポリペプチドとして発現することができ、ｓｃＦｖは、それが由来する無傷の抗体の特異性を保持する。特に指定しない限り、本明細書で使用される場合、ｓｃＦｖは、ＶＬ可変領域及びＶＨ可変領域をいずれの順序で有してもよく、例えば、ポリペプチドのＮ末端及びＣ末端に関して、ｓｃＦｖは、ＶＬ－リンカー－ＶＨを含んでもよく、又はＶＨ－リンカー－ＶＬを含んでもよい。
【0047】
本明細書で使用される「キメラ抗原受容体」又は「ＣＡＲ」という用語は、免疫細胞内で発現されると、標的細胞（例えば、癌細胞）に対する特異性及び細胞内シグナル生成を細胞に提供するポリペプチドのセットを指す。一部の実施形態では、ＣＡＲは、少なくとも細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む。細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも１つの免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも１つのＴＣＲ型シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、以下に定義するように、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＡＲを構成するポリペプチドのセットは、同じポリペプチド鎖内にある（例えば、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、キメラ融合タンパク質である）。一部の実施形態では、ＣＡＲを構成するポリペプチドのセットは互いに隣接しておらず、例えば、異なるポリペプチド鎖内にある。一部の実施形態では、ＣＡＲを構成するポリペプチドのセットは、二量体化分子の存在時、ポリペプチドを互いに結合させることができる、例えば、抗原結合ドメインを細胞内シグナル伝達ドメインに結合させることができる、二量体化スイッチを含む。一実施形態では、ＣＡＲのＴＣＲ型シグナル伝達ドメインは、Ｔ細胞受容体複合体に関連するＣＤ３ゼータ鎖である。
【0048】
本明細書で使用される「Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）型シグナル伝達ドメイン」又は「ＴＣＲ型シグナル伝達ドメイン」という用語は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介して抗原依存性の一次活性化を開始するＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインの成分を指す。
【0049】
本明細書で使用される「共刺激シグナル伝達ドメイン」という用語は、共刺激リガンドと特異的に結合し、それにより、限定はされないが増殖などの、Ｔ細胞による共刺激応答を媒介する、Ｔ細胞上の同族結合パートナーからのドメインを指す。共刺激シグナル伝達ドメインは、効率的な免疫応答に必要な抗原受容体又はそのリガンド以外の細胞表面分子に由来し得る。例えば、共刺激シグナル伝達ドメインは、限定はされないが、ＭＨＣクラスＩ分子、ＴＮＦ受容体タンパク質、免疫グロブリン様タンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、活性化ＮＫ細胞受容体、ＢＴＬＡ、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＫＩＲＤＳ２、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＩＬ２Ｒベータ、ＩＬ２Ｒガンマ、ＩＬ７Ｒアルファ、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンドを含む、タンパク質に由来し得る。
【0050】
本明細書で使用される「シグナル伝達ドメイン」という用語は、二次メッセンジャーを生成することによって、又はそのようなメッセンジャーに応答することによりエフェクターとして機能することによって、定義されたシグナル伝達経路を介して細胞内で情報を伝達して細胞活性を調節することによって作用する、タンパク質の機能性部分を指す。
【0051】
ポリペプチドに関して本明細書で使用される「変異体」という用語は、対応する野生型ポリペプチドから少なくとも１つのアミノ酸残基だけ異なるポリペプチドを指す。一部の実施形態では、変異体ポリペプチドは、対応する天然に存在するポリペプチドとは異なる少なくとも１つの活性を有する。ポリヌクレオチドに関して本明細書で使用される用語「変異体」は、対応する野生型ポリヌクレオチドから少なくとも１ヌクレオチドだけ異なるポリヌクレオチドを指す。一部の実施形態では、変異体ポリペプチド又は変異体ポリヌクレオチドは、対応する野生型ポリペプチド又はポリヌクレオチドに対して少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、変異体は、ポリペプチドの機能性断片である。
【0052】
ポリペプチドに関して本明細書で使用される「機能性断片」という用語は、ポリペプチドの少なくとも１つの生物学的活性、例えば、タノトランスミッションを促進する能力を保持するポリペプチドの一部を指す。一部の実施形態では、機能性断片は、ポリペプチドのドメイン、例えば、ＲＨＩＭドメイン、デスフォールドドメイン、又はＴＩＲドメインである。一部の実施形態では、ポリペプチドの機能性断片は、ドメインの少なくとも１つの生物学的活性を保持するドメインの一部である。
【0053】
本明細書で使用される「デスフォールドドメイン」という用語は、アポトーシス、炎症、及び他の細胞シグナル伝達プロセスに関与するタンパク質上に見られる、６～７個の密なコイル状のα－ヘリックスを特徴とする構造的に定義されたモチーフを指す。デスフォールドドメインは、ホモタイプタンパク質間相互作用を介して互いに結合し、細胞ターンオーバー及び他の細胞シグナル伝達経路の開始に関与する大きな機能性複合体の形成をもたらす。デスフォールドドメインの例には、デスドメイン（ＤＤ）、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）、カスパーゼ動員ドメイン（ＣＡＲＤ）、ピリンドメイン（ＰＹＤ）、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、Ｆａｓデスドメイン、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、及び腫瘍壊死因子受容体１型（ＴＮＦＲ１）が含まれる。その全内容が参照により本明細書に組み込まれるＬａｈｍ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ＆Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ １０：１０－１２を参照。
【0054】
本明細書で使用される「リンカー」という用語は、２つのポリペプチド配列を連結するために単独で又は組み合わせて使用されるグリシン及び／又はセリン残基などのアミノ酸からなる柔軟なペプチドを指す。一実施形態では、リンカーは、Ｇｌｙ／Ｓｅｒリンカーであり、アミノ酸配列（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎを含み、ｎは１以上の正の整数である。例えば、ｎ＝１、ｎ＝２、ｎ＝３、ｎ＝４、ｎ＝５、ｎ＝６、ｎ＝７、ｎ＝８、ｎ＝９、ｎ＝１０、ｎ＝１１、ｎ＝１２、ｎ＝１３、ｎ＝１４、又はｎ＝１５。一部の実施形態では、リンカーとして、限定はされないが、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）４又は（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３が挙げられる。別の実施形態では、リンカーは、（Ｇｌｙ２Ｓｅｒ）、（ＧｌｙＳｅｒ）、又は（Ｇｌｙ３Ｓｅｒ）の複数の反復を含む。また、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１２／１３８４７５号パンフレットに記載されているリンカーも含まれる。一部の実施形態では、リンカーは、Ｗｈｉｔｌｏｗ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．（１９９３）６（８）：９８９－８９５に記載されるＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号２６）である。一部の実施形態では、リンカーは、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、又は５０個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、リンカーは、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５又は５０個未満のアミノ酸残基を含む。リンカーは、薬物の結合又は固体支持体への結合などのさらなる機能のために修飾することもできる。本明細書で使用される「上昇する」及び「低下する」という用語はそれぞれ、参照と比較してパラメータの量、機能、又は活性をより上昇させる又はより低下させる調節を指す。例えば、本明細書に記載の組成物の投与に続いて、パラメータ（例えば、ＩＲＦの活性化、ＮＦ－ｋＢの活性化、マクロファージの活性化、腫瘍のサイズ又は増殖）は、投与前のパラメータ量に対して少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９８％以上対象で上昇又は低下し得る。一般に、測定基準は、投与に続いて、投与の効果が現れた時点、例えば、治療計画が開始されてから少なくとも１日後、１週間後、１ヶ月後、３ヶ月後、６ヶ月後に測定される。同様に、前臨床パラメータ（インビトロでの細胞のＮＦ－ｋＢ又はＩＲＦの活性化、及び／又は本明細書に記載の組成物による試験哺乳動物の腫瘍負荷の低下など）は、投与前のパラメータの量と比較して少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９８％以上上昇又は低下し得る。
【0055】
本明細書で使用される「抗腫瘍剤」は、癌の処置に使用される薬物を指す。抗腫瘍剤には、化学療法剤（例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、有糸分裂阻害剤、コルチコステロイド、及び酵素）、生物学的抗癌剤、及び免疫チェックポイント調節剤が含まれる。
【0056】
「癌治療計画」又は「抗腫瘍療法」は、特定のスケジュールで対象への特定の量の１つ又は複数の抗腫瘍剤の投与を含む、癌の処置のための臨床的に認められた投薬プロトコルである。
【0057】
本明細書で使用される「異種」という用語は、組み合わせて自然に存在しない要素の組合せを指す。例えば、免疫細胞に対して異種であるポリヌクレオチドとは、免疫細胞において天然に存在しないポリヌクレオチド、又は免疫細胞において自然界に存在する位置とは異なる位置に存在するポリヌクレオチドを指す。例えば、異種ポリヌクレオチドの５’及び３’末端は、本来は結合していない核酸配列に結合し得る。免疫細胞に対して異種であるポリペプチドとは、免疫細胞内に天然には存在しないポリペプチドを指す。
【0058】
本明細書で使用される「免疫チェックポイント」又は「免疫チェックポイント分子」は、シグナルを調節する免疫系の分子である。免疫チェックポイント分子は、刺激性チェックポイント分子である、即ちシグナルを上昇させるか、又は抑制性チェックポイント分子である、即ちシグナルを低下させることができる。本明細書で使用される「刺激性チェックポイント分子」は、シグナルを上昇させる又は共刺激性である免疫系の分子である。本明細書で使用される「抑制性チェックポイント分子」は、シグナルを低下させる又は共抑制性である免疫系の分子である。
【0059】
本明細書で使用される「免疫チェックポイントモジュレーター」は、対象における免疫チェックポイントの活性を変化させることができる薬剤である。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、限定されるものではないが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＡＤＯＲＡ２Ａ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡを含む、１つ又は複数の免疫チェックポイント分子の機能を変化させる。免疫チェックポイントモジュレーターは、免疫チェックポイントのアゴニスト又はアンタゴニストであり得る。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、免疫チェックポイント結合タンパク質（例えば、抗体、抗体Ｆａｂ断片、二価抗体、抗体薬物コンジュゲート、ｓｃＦｖ、融合タンパク質、二価抗体、又は四価抗体）である。他の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは小分子である。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、抗ＰＤ－１、抗ＰＤ－Ｌ１、又は抗ＣＴＬＡ－４結合タンパク質、例えば、抗体又は抗体断片である。
【0060】
本明細書で使用される「免疫療法剤」は、免疫応答を誘導又は増強する、薬学的に許容される化合物、組成物、又は療法剤を指す。免疫療法剤には、限定されるものではないが、免疫チェックポイントモジュレーター、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、細胞ベースの治療法、サイトカイン、及び癌ワクチンが含まれる。
【0061】
本明細書で使用される「腫瘍性障害」又は「癌」又は「新生物」は、限定されるものではないが：白血病、リンパ腫、黒色腫、癌腫、及び肉腫を含む、ヒトに見られるすべての種類の癌又は新生物を指す。本明細書で使用される「腫瘍性障害」、「癌」、及び「新生物」という用語は、互換的に、そして単数形又は複数形のいずれかで使用され、宿主生物にとって細胞を異常にする悪性形質転換を受けた細胞を指す。原発性癌細胞（即ち、悪性形質転換部位の近くから得られた細胞）は、十分に確立された技術、特に組織学的検査によって非癌性細胞と容易に区別することができる。本明細書で使用される癌細胞の定義には、原発性癌細胞だけでなく、癌幹細胞、並びに、癌前駆細胞又は癌細胞の祖先に由来する任意の細胞が含まれる。これには、転移した癌細胞、並びに癌細胞に由来するインビトロ培養物及び細胞株が含まれる。
【0062】
癌のステージ分類の特定の基準は、腫瘍サイズ、組織学的特徴、腫瘍マーカー、及び当業者に公知の他の基準に基づく特定の癌の種類に依存する。一般に、癌のステージは次のように説明することができる：（ｉ）ステージ０、上皮内癌；（ｉｉ）ステージＩ、ステージＩＩ、及びステージＩＩＩ（数値が大きいほど、腫瘍のサイズ、並びに／又は癌がリンパ節及び／若しくは組織の近くで最初に発生した臓器若しくは原発腫瘍の位置に隣接する臓器を超えた癌の転移を含む、より広範な疾患を示す）；並びに（ｉｉｉ）ステージＩＶ（癌が遠隔の組織又は臓器に転移している）。
【0063】
「固形腫瘍」は、例えばＣＡＴスキャン、ＭＲイメージング、Ｘ線、超音波、又は触診などの方法によって腫瘍量に基づいて検出可能であり、且つ／又は患者から入手可能なサンプル中の１つ又は複数の癌特異的抗原の発現のために検出可能である腫瘍である。腫瘍は、測定可能な寸法である必要はない。
【0064】
本発明の方法によって処置される「対象」は、ヒト又は非ヒト動物のいずれか、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを意味し得る。特定の実施形態において、対象は、本発明の方法を用いる処置の開始前に、検出可能な癌又は診断された癌を有する。特定の実施形態では、対象は、本発明の方法を用いる処置の開始前に、検出可能な感染症又は診断された感染症、例えば、慢性感染症を有する。
【0065】
本明細書で使用される「自殺遺伝子」とは、薬物の非毒性前駆体を細胞傷害性化合物に変換するタンパク質（例えば、酵素）をコードする遺伝子を指す。
【0066】
本明細書で使用される「細胞ターンオーバー」は、細胞内の物質を再構成して拡散させ、最終的に細胞死をもたらし得る動的プロセスを指す。細胞ターンオーバーは、細胞ターンオーバー因子の産生及び細胞からの放出を含む。
【0067】
本明細書で使用される「細胞ターンオーバー因子」は、細胞ターンオーバーを受けている細胞によって産生される分子及び細胞断片であり、最終的に細胞から放出され、他の細胞の生物学的活性に影響を及ぼす。細胞ターンオーバー因子は、タンパク質、ペプチド、炭水化物、脂質、核酸、小分子、及び細胞断片（例えば、小胞及び細胞膜断片）を含み得る。
【0068】
本明細書で使用される「細胞ターンオーバー経路遺伝子」は、細胞ターンオーバー経路を促進、誘導、又はそうでなければそれに寄与するポリペプチドをコードする遺伝子を指す。
【0069】
本明細書で使用される「プログラム細胞死」は、多細胞生物の細胞の重要な最終経路を指し、形態形成、組織恒常性の維持、及び有害な細胞の除去を含む、様々な生物学的事象に関与する。
【0070】
本明細書で使用される「プログラム細胞死遺伝子」は、プログラム細胞死経路を促進、誘導、又はそうでなければそれに寄与するポリペプチドをコードする遺伝子を指す。
【0071】
本明細書で使用される「タノトランスミッション」は、細胞間の連絡のプロセスであり、これは、シグナル伝達細胞（例えば、本明細書に記載の操作された免疫細胞）における細胞ターンオーバー経路の活性化、例えば、プログラム細胞死の結果起こり、応答標的細胞にシグナル伝達して、生物学的応答を受けるようにする。タノトランスミッションは、例えば、そのような経路を促進する異種遺伝子の発現を介して、上記細胞における細胞ターンオーバー経路遺伝子の調節によりシグナル伝達細胞に誘導され得る。表１～６は、様々な細胞ターンオーバー経路を促進することができる例示的な遺伝子及びポリペプチドを記載する。細胞ターンオーバー経路がこのように活性化されたシグナル伝達細胞は、シグナル伝達細胞によって能動的に放出される因子を介して、又はシグナル伝達細胞の細胞ターンオーバー（例えば、細胞死）中に応答標的細胞に曝露されるようになるシグナル伝達細胞の細胞内因子を介して、応答標的細胞にシグナル伝達することができる。特定の実施形態では、活性化シグナル伝達細胞は、応答標的細胞（例えば、免疫細胞）における免疫刺激応答（例えば、炎症誘発性応答）を促進する。
【0072】
本明細書で使用される「タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチド」は、シグナル伝達細胞（例えば、本明細書に記載の操作された免疫細胞）におけるその発現が、シグナル伝達細胞によるタノトランスミッションの増加をもたらすポリヌクレオチドを指す。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを促進するポリペプチド、即ち、標的細胞におけるその発現が、シグナル伝達細胞によるタノトランスミッションを増大するポリペプチドをコードする。他の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを抑制するポリペプチドのシグナル伝達細胞における発現及び／又は活性を低下させる。例えば、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを抑制するポリペプチドのシグナル伝達細胞における発現及び／又は活性を低下させるＲＮＡ分子をコードし得る。
【0073】
「治療有効量」とは、疾患を処置するために患者に投与されると、その疾患のそのような処置を有効にするのに十分な化合物又は組成物の量を意味する。疾患を予防するために投与される場合、その量は、疾患の発症を回避又は遅らせるのに十分である。「治療有効量」は、化合物又は組成物、疾患及びその重症度、並びに処置される患者の年齢、体重などによって異なる。治療有効量は治癒的である必要はない。治療有効量は、疾患又は状態の発生を防ぐ必要はない。代わりに治療有効量は、疾患又は状態の発症、重症度、又は進行を少なくとも遅延又は軽減する量である。
【0074】
本明細書で使用される場合、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、及びその同源語は、疾患、病的状態、又は障害を改善する、和らげる、安定化させる、予防する、又は治癒することを目的とした対象の医学的管理を指す。この用語には、積極的処置（疾患、病的状態、又は障害を改善することを目的とした処置）、原因処置（関連する疾患、病的状態、又は障害の原因を対象とした処置）、緩和処置（症状を軽減するように設計された処置）、予防的処置（関連する疾患、病的状態、又は障害の発症を最小限に抑えるか、又は部分的若しくは完全に阻害することを目的とした処置）；及び支援処置（別の療法を補完するために使用される処置）が含まれる。
【0075】
ＩＩ．細胞ターンオーバー経路
本明細書に記載の免疫細胞は、免疫細胞における細胞ターンオーバー経路を調節するように操作され、それにより免疫細胞によるタノトランスミッションを開始し得る。一部の実施形態では、免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞における免疫刺激細胞ターンオーバー経路を誘導するように操作される。
本明細書に記載の免疫細胞は、免疫細胞における細胞ターンオーバー経路を調節するように操作され、それにより免疫細胞によるタノトランスミッションを開始し得る。一部の実施形態では、免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞における免疫刺激細胞ターンオーバー経路を誘導するように操作される。
【0076】
免疫刺激細胞ターンオーバー経路は、細胞内で活性化されると、別の免疫細胞などの応答細胞において免疫刺激応答を促進する細胞ターンオーバー経路である。免疫刺激細胞ターンオーバー経路としては、限定はされないが、プログラム壊死（例えば、ネクロトーシス、パイロトーシス）、アポトーシス、例えば、外因性及び／又は内因性アポトーシス、オートファジー、フェロトーシス、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【0077】
プログラム壊死
本明細書で使用される「プログラム壊死」は、遺伝的に制御された細胞死を指し、これは、アポトーシス中に起こる膜の完全性の保持とは対照的に、細胞腫脹（腫瘍症）、膜破裂、及び細胞内容物の放出などの形態学的特徴を伴う。一部の実施形態では、プログラム壊死はパイロトーシスである。一部の実施形態では、プログラム壊死は、ネクロトーシスである。
本明細書で使用される「プログラム壊死」は、遺伝的に制御された細胞死を指し、これは、アポトーシス中に起こる膜の完全性の保持とは対照的に、細胞腫脹（腫瘍症）、膜破裂、及び細胞内容物の放出などの形態学的特徴を伴う。一部の実施形態では、プログラム壊死はパイロトーシスである。一部の実施形態では、プログラム壊死は、ネクロトーシスである。
【0078】
パイロトーシス
本明細書で使用される「パイロトーシス」は、カスパーゼ１－、カスパーゼ４－、又はカスパーゼ５－依存性プログラム細胞死に固有の炎症過程を指す。パイロトーシスの最も特徴的な生化学的特徴は、カスパーゼ－１の早期誘導媒介性媒介活性化である。カスパーゼ－１、４、又は５のパイロトーシス活性化は、カスパーゼ－１活性化を促進するアダプタータンパク質ＡＳＣを動員するＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）、又はメラノーマ２には存在しない（ＡＩＭ２）細胞質ＤＮＡセンサーなどの他のセンサーを含む、インフラマソームとして知られる多重タンパク質プラットフォームの状況下で発生し得る。カスパーゼ－４／５は、ＬＰＳによって直接活性化され得る。どちらの場合も、活性カスパーゼ－１は、タンパク質分解性成熟並びに発熱性インターロイキン－１β（ＩＬ－１β）及びＩＬ－１８の放出を触媒する。さらに、一部の（しかし、すべてではない）事例では、カスパーゼ活性化は、ＧＳＤＭ－Ｄを標的として、膜破裂及び細胞死を駆動する。Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
本明細書で使用される「パイロトーシス」は、カスパーゼ１－、カスパーゼ４－、又はカスパーゼ５－依存性プログラム細胞死に固有の炎症過程を指す。パイロトーシスの最も特徴的な生化学的特徴は、カスパーゼ－１の早期誘導媒介性媒介活性化である。カスパーゼ－１、４、又は５のパイロトーシス活性化は、カスパーゼ－１活性化を促進するアダプタータンパク質ＡＳＣを動員するＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）、又はメラノーマ２には存在しない（ＡＩＭ２）細胞質ＤＮＡセンサーなどの他のセンサーを含む、インフラマソームとして知られる多重タンパク質プラットフォームの状況下で発生し得る。カスパーゼ－４／５は、ＬＰＳによって直接活性化され得る。どちらの場合も、活性カスパーゼ－１は、タンパク質分解性成熟並びに発熱性インターロイキン－１β（ＩＬ－１β）及びＩＬ－１８の放出を触媒する。さらに、一部の（しかし、すべてではない）事例では、カスパーゼ活性化は、ＧＳＤＭ－Ｄを標的として、膜破裂及び細胞死を駆動する。Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
【0079】
本開示の方法において、パイロトーシスは、免疫細胞にパイロトーシスを誘導するポリペプチドをコードする１つ若しくは複数の異種ポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞に誘導され得る。免疫細胞においてパイロトーシスを誘導し得るポリペプチドとしては、限定するものではないが、ＮＬＲ、ＡＳＣ、ＧＳＤＭ－Ｄ、ＡＩＭ２、及びＢＩＲＣ１が挙げられる。
【0080】
いくつかの方法が当技術分野で知られており、それらを使用して、パイロトーシスを受けている細胞を同定すると共に、特定のマーカーの検出による他のタイプの細胞分解及び／又は細胞死から区別することができる。パイロトーシスは、カスパーゼ－１、カスパーゼ－４、又はカスパーゼ－５活性を必要とし、通常、プロ－ＩＬ－１ｂ及び／又はプロＩＬ－１８のプロセシング、これらの成熟サイトカインの放出、並びにＧＳＤＭ－Ｄのカスパーゼ－１／４／５切断断片による膜透過処置を伴う。ＧＳＤＭ－ＢやＧＳＤＭ－Ｅを含む他のガスダーミンもパイロトーシスに関与しており、パイロトーシスのマーカーとして使用され得る。
【0081】
ネクロトーシス
ネクロトーシスは、プログラム細胞死経路の主要な種類である。ネクロトーシスには、細胞の膨張、細胞小器官の機能不全及び細胞の溶解が含まれる（Ｗｕ Ｗ，ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．８２，２４９－２５８）。偶然又は無制御で通常発生する壊死とは異なり、ネクロトーシスは、細胞の代謝及び遺伝毒性ストレス、又は様々な抗癌剤によって誘発することができる、制御されたプロセスである。ネクロトーシスは、正常な発達において不可欠な役割を果たす。さらに、これは、癌を含む様々なヒト疾患の発症に関与しているとされている（Ｆｕｌｄａ Ｓ，（２０１３），Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．１４（１１）：９９９－１００４）。一部の実施形態では、ネクロトーシスは、受容体相互作用プロテインキナーゼ３（ＲＩＰ１－及び／又はＲＩＰＫ３）／混合系統キナーゼ様（ＭＬＫＬ）依存性壊死を指す。アルキル化ＤＮＡ損傷、興奮性毒素及び細胞死受容体のライゲーションを含め、いくつかのトリガーが、ネクロトーシスを引き起こし得る。例えば、カスパーゼ（特に、カスパーゼ－８又はカスパーゼ－１０）が遺伝子操作（例えば、遺伝子ノックアウト若しくはＲＮＡ干渉、ＲＮＡｉ）によって阻害されるか、又は薬理学的物質（例えば、化学的カスパーゼ阻害剤）によって遮断されると、ＲＩＰＫ３は、ＭＬＫＬをリン酸化し、ＭＬＫＬを膜孔にアセンブリングし、それが、最終的に壊死性細胞死の実行を活性化する。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
ネクロトーシスは、プログラム細胞死経路の主要な種類である。ネクロトーシスには、細胞の膨張、細胞小器官の機能不全及び細胞の溶解が含まれる（Ｗｕ Ｗ，ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．８２，２４９－２５８）。偶然又は無制御で通常発生する壊死とは異なり、ネクロトーシスは、細胞の代謝及び遺伝毒性ストレス、又は様々な抗癌剤によって誘発することができる、制御されたプロセスである。ネクロトーシスは、正常な発達において不可欠な役割を果たす。さらに、これは、癌を含む様々なヒト疾患の発症に関与しているとされている（Ｆｕｌｄａ Ｓ，（２０１３），Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．１４（１１）：９９９－１００４）。一部の実施形態では、ネクロトーシスは、受容体相互作用プロテインキナーゼ３（ＲＩＰ１－及び／又はＲＩＰＫ３）／混合系統キナーゼ様（ＭＬＫＬ）依存性壊死を指す。アルキル化ＤＮＡ損傷、興奮性毒素及び細胞死受容体のライゲーションを含め、いくつかのトリガーが、ネクロトーシスを引き起こし得る。例えば、カスパーゼ（特に、カスパーゼ－８又はカスパーゼ－１０）が遺伝子操作（例えば、遺伝子ノックアウト若しくはＲＮＡ干渉、ＲＮＡｉ）によって阻害されるか、又は薬理学的物質（例えば、化学的カスパーゼ阻害剤）によって遮断されると、ＲＩＰＫ３は、ＭＬＫＬをリン酸化し、ＭＬＫＬを膜孔にアセンブリングし、それが、最終的に壊死性細胞死の実行を活性化する。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
【0082】
本開示の方法において、ネクロトーシスは、免疫細胞においてネクロトーシスを誘導するポリペプチドをコードする１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞に誘導され得る。免疫細胞にネクロトーシスを誘発し得るポリペプチドとしては、限定はされないが、以下のものが挙げられる：Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、ＴＬＲ４、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン－１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｚ－ＤＮＡ結合タンパク質１（ＺＢＰ１）、受容体相互作用セリン／トレオニン－タンパク質キナーゼ１（ＲＩＰＫ１）、受容体相互作用セリン／トレオニン－タンパク質キナーゼ３（ＲＩＰＫ３）、混合系統キナーゼドメイン様プソイドキナーゼ（ＭＬＫＬ）、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）、ＦＳ－７関連表面抗原（ＦＡＳ）、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド受容体（ＴＲＡＩＬＲ）及び腫瘍壊死因子受容体１型関連死ドメインタンパク質（ＴＲＡＤＤ）。
【0083】
いくつかの方法が当技術分野で知られており、それらを使用して、ネクロトーシスを受けている細胞を同定すると共に、特定のマーカーの検出による他のタイプの細胞分解及び／又は細胞死から区別することができる。これらには、これらの翻訳後修飾を検出する抗体によるＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、及びＭＬＫＬのリン酸化が含まれ、典型的には、細胞のイムノブロット又は免疫染色によって行う。ネクロトーシスは、カスパーゼ活性化の非存在、急速な膜透過化、膜へのＭＬＫＬ再局在化、界面活性剤不溶性画分へのＲＩＰＫ３及びＭＬＫＬの蓄積、ＲＩＰＫ３／ＭＬＫＬ複合体形成、及びＭＬＫＬオリゴマー化によって、アポトーシス及びパイロトーシスから区別することができる。ネクロトーシスは、ＲＩＰＫ３とＭＬＫＬの両方の要件、並びにそれらの活性化によって遺伝的及び薬理学的に定義することができる。
【0084】
アポトーシス
本明細書で使用されるアポトーシスは、細胞の収縮、核の凝縮と断片化、動的な膜の小疱形成、及び近隣又は細胞外マトリックスとの接着の喪失を含む、死んでいる細胞の特定の形態学的及び生化学的変化を特徴とする一種のプログラム細胞死を指す（Ｎｉｓｈｉｄａ Ｋ，ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．１０３，３４３－３５１）。２つの基本的なアポトーシスシグナル伝達経路：外因性経路及び内因性経路が存在する（Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅ Ｉ，ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｃｅｌｌ．１４３：１１９２－２）。内因性アポトーシス経路は、ＤＮＡ損傷、増殖因子の欠乏、酸化ストレスを含む、様々な細胞内刺激によって活性化される。アポトーシスの外因性経路は、細胞死リガンドが細胞死受容体に結合することによって開始され、続いて細胞死誘導シグナル伝達複合体が構築され、これが下流のエフェクターカスパーゼを活性化して細胞死を直接誘導するか、又はミトコンドリア媒介性内因性アポトーシス経路を活性化する（Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅ Ｉ，ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｃｅｌｌ．１４３：１１９２－２）。
本明細書で使用されるアポトーシスは、細胞の収縮、核の凝縮と断片化、動的な膜の小疱形成、及び近隣又は細胞外マトリックスとの接着の喪失を含む、死んでいる細胞の特定の形態学的及び生化学的変化を特徴とする一種のプログラム細胞死を指す（Ｎｉｓｈｉｄａ Ｋ，ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．１０３，３４３－３５１）。２つの基本的なアポトーシスシグナル伝達経路：外因性経路及び内因性経路が存在する（Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅ Ｉ，ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｃｅｌｌ．１４３：１１９２－２）。内因性アポトーシス経路は、ＤＮＡ損傷、増殖因子の欠乏、酸化ストレスを含む、様々な細胞内刺激によって活性化される。アポトーシスの外因性経路は、細胞死リガンドが細胞死受容体に結合することによって開始され、続いて細胞死誘導シグナル伝達複合体が構築され、これが下流のエフェクターカスパーゼを活性化して細胞死を直接誘導するか、又はミトコンドリア媒介性内因性アポトーシス経路を活性化する（Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅ Ｉ，ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｃｅｌｌ．１４３：１１９２－２）。
【0085】
外因性アポトーシス
本明細書において使用される用語「外因性アポトーシス」は、特定の膜貫通受容体によって感知及び伝播される細胞外ストレスシグナルによって誘導されるアポトーシス細胞死の例を指す。外因性アポトーシスは、ＦＡＳ／ＣＤ９５リガンド（ＦＡＳＬ／ＣＤ９５Ｌ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、及びＴＮＦ（リガンド）スーパーファミリー、メンバー１０（ＴＮＦＳＦ１０、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド、ＴＲＡＩＬとして最もよく知られている）などのリガンドが、様々な細胞死受容体（即ち、それぞれ、ＦＡＳ／ＣＤ９５、ＴＮＦα受容体１（ＴＮＦＲ１）、及びＴＲＡＩＬ受容体（ＴＲＡＩＬＲ）１－２）との結合によって開始され得る。或いは、外因性アポトーシス促進シグナルは、ネトリン受容体（例えば、ａｎｓ－Ｄであり、大腸癌で欠失している、ＤＣＣ）を含むいわゆる「依存性受容体」によって送達され得るが、それらは、それらの特異的リガンドの濃度が臨界閾値レベルを下回った場合にのみ致死的機能を発揮する。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
本明細書において使用される用語「外因性アポトーシス」は、特定の膜貫通受容体によって感知及び伝播される細胞外ストレスシグナルによって誘導されるアポトーシス細胞死の例を指す。外因性アポトーシスは、ＦＡＳ／ＣＤ９５リガンド（ＦＡＳＬ／ＣＤ９５Ｌ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、及びＴＮＦ（リガンド）スーパーファミリー、メンバー１０（ＴＮＦＳＦ１０、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド、ＴＲＡＩＬとして最もよく知られている）などのリガンドが、様々な細胞死受容体（即ち、それぞれ、ＦＡＳ／ＣＤ９５、ＴＮＦα受容体１（ＴＮＦＲ１）、及びＴＲＡＩＬ受容体（ＴＲＡＩＬＲ）１－２）との結合によって開始され得る。或いは、外因性アポトーシス促進シグナルは、ネトリン受容体（例えば、ａｎｓ－Ｄであり、大腸癌で欠失している、ＤＣＣ）を含むいわゆる「依存性受容体」によって送達され得るが、それらは、それらの特異的リガンドの濃度が臨界閾値レベルを下回った場合にのみ致死的機能を発揮する。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．Ｍａｒ；２５（３）：４８６－５４１を参照されたい。
【0086】
本開示の方法において、外因性アポトーシスは、標的細胞において外因性アポトーシスを誘導するポリペプチドをコードする１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞に誘導され得る。標的細胞に外因性アポトーシスを誘導し得るポリペプチドとして、限定はされないが、ＴＮＦ、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＴＲＡＩＬ（及びその同族受容体）、ＴＲＡＤＤ、細胞死ドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、トランスフォーミング増殖因子β活性化キナーゼ１（Ｔａｋ１）、カスパーゼ－８、ＸＩＡＰ、ＢＩＤ、カスパーゼ－９、ＡＰＡＦ－１、ＣｙｔｏＣ、カスパーゼ－３及びカスパーゼ－７が挙げられる。標的細胞において外因性アポトーシスを阻害し得るポリペプチドとしては、アポトーシスタンパク質１の細胞阻害剤（ｃＩＡＰ１）、ｃＩＡＰ２、Ｉｋｋａ及びＩｋｋｂが挙げられる。いくつかの方法が当技術分野で知られており、これらを使用して、アポトーシスを受けている細胞を同定すると共に、特定のマーカーの検出により他のタイプの細胞分解及び／又は細胞死と区別することができる。アポトーシスは、カスパーゼ活性化を必要とするため、カスパーゼ活性化の阻害剤及び／又はカスパーゼ－８若しくはカスパーゼ－９などのカスパーゼの非存在による細胞死の阻止によって抑制することができる。カスパーゼ活性化は、ＰＡＲＰ及びＤＦＦ４５などの特定の基質、並びに６００を超える追加タンパク質の切断によって細胞を体系的に分解する。アポトーシス細胞膜は、最初はホスホチジル－セリンの外在化及び付随する膜ブレビングに際して無傷のままである。ミトコンドリアの外膜は、典型的には破壊されて、ＣｙｔｏＣ及びＨＴＲＡ２などの細胞質ゾルタンパク質中に放出される。核ＤＮＡは、離散断片に切断され、これらは、当技術分野で公知のアッセイによって検出され得る。
【0087】
オートファジー
本明細書で使用される「オートファジー」という用語は、細胞質高分子及び細胞小器官を取り囲む二重膜結合構造であり、再循環する運命にあるオートファゴソームの形成で始まる、進化的に保存された異化プロセスを指す（Ｌｉｕ ＪＪ，ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．３００，１０５－１１４）。オートファジーは、生理学的に、ストレス条件下で生存するための細胞の戦略及びメカニズムである。特定の状況下で過剰に活性化されると、過剰なオートファジーは細胞死を引き起こす（Ｂｏｙａ Ｐ，ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｎａｔ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１５（７）：７１３－２０）。
本明細書で使用される「オートファジー」という用語は、細胞質高分子及び細胞小器官を取り囲む二重膜結合構造であり、再循環する運命にあるオートファゴソームの形成で始まる、進化的に保存された異化プロセスを指す（Ｌｉｕ ＪＪ，ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．３００，１０５－１１４）。オートファジーは、生理学的に、ストレス条件下で生存するための細胞の戦略及びメカニズムである。特定の状況下で過剰に活性化されると、過剰なオートファジーは細胞死を引き起こす（Ｂｏｙａ Ｐ，ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｎａｔ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１５（７）：７１３－２０）。
【0088】
本開示の方法において、オートファジーは、免疫細胞においてオートファジーを誘導するポリペプチドをコードする１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞に誘導され得る。
【0089】
フェロトーシス
本明細書で使用される「フェロトーシス」という用語は、鉄依存性であって、活性酸素種の産生を伴う調節された細胞死のプロセスを指す。一部の実施形態では、フェロトーシスは、致死レベルまでの脂質ヒドロペルオキシドの鉄依存性蓄積を伴う。フェロトーシスに対する感受性は、アミノ酸、鉄、及び多不飽和脂肪酸の代謝を含む多くの生物学的プロセス、並びにグルタチオン、リン脂質、ＮＡＤＰＨ、及びコエンザイムＱ１０の生合成に密接に関連している。フェロトーシスは、ミトコンドリアとは無関係であるが、いくつかの細胞環境においてＮＡＤＰＨオキシダーゼに依存する、細胞質及び脂質のＲＯＳの両方の産生をもたらす代謝機能障害を伴う（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＤｉｘｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｃｅｌｌ １４９（５）：１０６０－７２を参照）。
本明細書で使用される「フェロトーシス」という用語は、鉄依存性であって、活性酸素種の産生を伴う調節された細胞死のプロセスを指す。一部の実施形態では、フェロトーシスは、致死レベルまでの脂質ヒドロペルオキシドの鉄依存性蓄積を伴う。フェロトーシスに対する感受性は、アミノ酸、鉄、及び多不飽和脂肪酸の代謝を含む多くの生物学的プロセス、並びにグルタチオン、リン脂質、ＮＡＤＰＨ、及びコエンザイムＱ１０の生合成に密接に関連している。フェロトーシスは、ミトコンドリアとは無関係であるが、いくつかの細胞環境においてＮＡＤＰＨオキシダーゼに依存する、細胞質及び脂質のＲＯＳの両方の産生をもたらす代謝機能障害を伴う（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＤｉｘｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｃｅｌｌ １４９（５）：１０６０－７２を参照）。
【0090】
本開示の方法において、フェロトーシスは、免疫細胞において発現されると、フェロトーシスを阻害する免疫細胞にとって内因性のタンパク質の発現又は活性を低下させる、１つ又は複数の異種ポリヌクレオチドの発現を介して免疫細胞に誘導され得る。フェロトーシスを阻害するタンパク質として、限定はされないが、ＦＳＰ１、ＧＰＸ４、及びＳｙｓｔｅｍ ＸＣが挙げられる。
【0091】
いくつかの方法が当技術分野で知られており、それらを使用して、フェロトーシスを受けている細胞を同定すると共に、特定のマーカーの検出による他の種類の細胞分解及び／又は細胞死から区別することができる。（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｔｏｃｋｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｃｅｌｌ １７１：２７３－２８５を参照）。例えば、フェロトーシスは致死的な過酸化脂質に起因し得るため、過酸化脂質の測定は、鉄依存性細胞分解を受けている細胞を特定する１つの方法を提供する。Ｃ１１－ＢＯＤＩＰＹ及びＬｉｐｅｒｆｌｕｏは、脂質ＲＯＳを検出するための迅速で間接的な手段を提供する親油性ＲＯＳセンサーである（Ｄｉｘｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｃｅｌｌ １４９：１０６０－１０７２）。液体クロマトグラフィー（ＬＣ）／タンデム質量分析（ＭＳ）分析を使用して、特定の酸化脂質を直接検出することもできる（Ｆｒｉｅｄｍａｎｎ Ａｎｇｅｌｉ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１６：１１８０－１１９１；Ｋａｇａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３：８１－９０）。イソプロスタン及びマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）を使用して、過酸化脂質を測定することもできる（Ｍｉｌｎｅ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｎａｔ．Ｐｒｏｔｏｃ．２：２２１－２２６；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６６（２）：４４９－４６５）。ＭＤＡを測定するためのキットが市販されている（Ｂｅｙｏｔｉｍｅ，Ｈａｉｍｅｎ，Ｃｈｉｎａ）。
【0092】
フェロトーシスを研究するための他の有用なアッセイには、鉄存在量及びＧＰＸ４活性の測定が含まれる。鉄の存在量は、誘導結合プラズマＭＳ又はカルセインＡＭ消光、及びその他の特定の鉄プローブを使用して測定でき（Ｈｉｒａｙａｍａ ａｎｄ Ｎａｇａｓａｗａ，２０１７，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｎｕｔｒ．６０：３９－４８；Ｓｐａｎｇｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１２：６８０－６８５）、ＧＰＸ４活性は、ＬＣ－ＭＳを使用した細胞溶解物中のホスファチジルコリンヒドロペルオキシドの還元を用いて検出することができる（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｃｅｌｌ １５６：３１７－３３１）。さらに、フェロトーシスは、グルタチオン（ＧＳＨ）含有量を測定することによって評価され得る。ＧＳＨは、例えば、市販のＧＳＨ－Ｇｌｏグルタチオンアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を使用することによって測定することができる。
【0093】
フェロトーシスは、１つ又は複数のマーカータンパク質の発現を測定することによっても評価され得る。適切なマーカータンパク質には、限定されるものではないが、グルタチオンペルオキシダーゼ４（ＧＰＸ４）、プロスタグランジン－エンドペルオキシドシンターゼ２（ＰＴＧＳ２）、及びシクロオキシゲナーゼ－２（ＣＯＸ－２）が含まれる。マーカータンパク質又はマーカータンパク質をコードする核酸の発現レベルは、限定されるものではないが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅反応、逆転写酵素ＰＣＲ分析、定量的リアルタイムＰＣＲ、一本鎖高次構造多型分析（ＳＳＣＰ）、ミスマッチ切断検出、ヘテロ二重鎖分析、ノーザンブロット分析、インサイチューハイブリダイゼーション、アレイ分析、デオキシリボ核酸配列決定、制限断片長多型分析、及びそれらの組み合わせ又は部分的な組み合わせを含む当技術分野で公知の適切な技術を用いて決定することができる。
【0094】
ＩＶ．本発明の操作された免疫細胞
本発明の免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドを含むように操作されている。一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドを含む。他の実施形態では、操作された免疫細胞は、標的細胞内でのタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドを含む。
本発明の免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドを含むように操作されている。一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドを含む。他の実施形態では、操作された免疫細胞は、標的細胞内でのタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする少なくとも１つの異種ポリヌクレオチドを含む。
【0095】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、免疫細胞の活性化時にポリヌクレオチドの発現を誘導する、異種プロモーターの転写制御下にあり得る（例えば、異種プロモーターに作動可能に連結されている）。一部の実施形態では、免疫細胞は、免疫細胞に含まれるシグナル伝達ドメインの活性化及び／又は標的抗原への結合時に活性化される。好適なプロモーターとして、限定はされないが、活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）プロモーター、ＳＴＡＴプロモーター、ＡＰ－１プロモーター、ＮＦ－κＢプロモーター、及びＩＲＦ４プロモーターが挙げられる。
【0096】
免疫細胞におけるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド又はポリペプチドの発現は、免疫細胞における細胞ターンオーバー経路を変化させ得る。例えば、免疫細胞における１つ又は複数のポリヌクレオチド又はポリペプチドの発現は、免疫細胞の正常な細胞ターンオーバー経路を、例えばネクロトーシス、アポトーシス、オートファジー、フェロトーシス又はパイロトーシスなどの、タノトランスミッションを促進する細胞ターンオーバー経路に変化させ得る。
【0097】
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、タノトランスミッションを促進するポリペプチドをそれぞれコードする、少なくとも２、３、４又は５個のポリヌクレオチドを含む。タノトランスミッションを促進する例示的なポリペプチドを以下の表１に記載する。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、野生型タンパク質をコードする。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、野生型タンパク質の生物学的に活性な断片、例えば、野生型タンパク質のＮ末端又はＣ末端切断体をコードする。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、１つ又は複数の突然変異を含むタンパク質をコードする。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ヒトタンパク質、例えば、ヒト野生型タンパク質をコードする。
【0098】
【表1-1】
【0099】
【表1-2】
【0100】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ３（ＲＩＰＫ３）、Ｚ－ＤＮＡ結合タンパク質１（ＺＢＰ１）、混合系統キナーゼドメイン様シュードキナーゼ（ＭＬＫＬ）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体、インターフェロン制御因子３（ＩＲＦ３）、デスドメインを有する切断型Ｆａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、及び細胞性ＦＬＩＣＥ（ＦＡＤＤ様ＩＬ－１β変換酵素）阻害タンパク質（ｃ－ＦＬＩＰ）のいずれか１つ又は複数をコードする。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、ガスダーミンＡ（ＧＳＤＭ－Ａ）、ガスダーミンＢ（ＧＳＤＭ－Ｂ）、ガスダーミン－Ｃ（ＧＳＤＭ－Ｃ）、ガスダーミン－Ｄ（ＧＳＤＭ－Ｄ）、ガスダーミン－Ｅ（ＧＳＤＭ－Ｅ）、二量体化ドメインを有するＣ末端カスパーゼ動員ドメインを含むアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ－ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体からなる群から選択されるポリペプチドをコードする。一部の実施形態では、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断は、ヒトＴＲＩＦ（例えば、ｍｉｎｉＴＲＩＦ）のアミノ酸残基１～３１１の欠失を含む。
【0101】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、ＴＲＩＦの変異体、例えば、野生型ヒトＴＲＩＦタンパク質の変異体をコードする。例示的なヒトＴＲＩＦ変異体を以下の表２に記載する。
【0102】
【表2】
【0103】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＸＩＡＰ及びＮｅｍｏから選択されるポリペプチドをコードする。これらのポリペプチドは細胞死を抑制し得るが、例えばＮＦ－ｋＢ活性化を促進することによって、タノトランスミッションを促進し得る。従って、一部の実施形態では、免疫細胞におけるｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＩＫＫα、ＩＫＫβ、ＸＩＡＰ及び／又はＮｅｍｏの発現の増加は、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進する。他の実施形態では、免疫細胞におけるｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＩＫＫα、ＩＫＫβ、ＸＩＡＰ及び／又はＮｅｍｏの発現の減少は、例えば、これらのタンパク質による細胞死の抑制を弱めることによって、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進し、それにより細胞ターンオーバーを促進する。
【0104】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、デスフォールドドメインをコードする。デスフォールドドメインの例として、限定はされないが、デスフォールドドメインは、デスドメイン、ピリンドメイン、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）、Ｃ末端カスパーゼ動員ドメイン（ＣＡＲＤ）、及びそれらの変異体が挙げられる。
【0105】
一部の実施形態では、デスドメインは、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質のデスドメイン（ＦＡＤＤ）、Ｆａｓ受容体のデスドメイン、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメインタンパク質のデスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、腫瘍壊死因子受容体１型（ＴＮＦＲ１）のデスドメイン、及びその変異体から選択される。ＦＡＤＤは２３ｋＤａのタンパク質であり、２０８個のアミノ酸から構成されている。これは、２つの主要ドメイン：Ｃ末端デスドメイン（ＤＤ）及びＮ末端デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）を含む ドメインは構造的に互いに類似しており、それぞれが６つのα－ヘリックスで構成されている。ＦＡＤＤのＤＤは、そのＤＤを介して細胞膜のＦａｓ受容体などの受容体に結合する。ＦＡＤＤのＤＥＤは、プロカスパーゼ８などの細胞内分子のＤＥＤに結合する。一部の実施形態では、ＦＡＤＤ－ＤＤは、ＦＡＤＤ－ＤＤのドミナントネガティブ変異体、又はミリストイル化（ｍｙｒｉｓｔｏｌａｔｅｄ）ＦＡＤＤ－ＤＤ（ｍｙｒ－ＦＡＤＤ－ＤＤ）である。
【0106】
一部の実施形態では、ピリンドメインは、ＮＬＲファミリーピリンドメイン含有３（ＮＬＲＰ３）及びアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）から選択されるタンパク質に由来する。
【0107】
一部の実施形態では、デスエフェクタードメイン（ＤＥＤ）は、デスドメインを有するＦａｓ関連タンパク質（ＦＡＤＤ）、カスパーゼ－８及びカスパーゼ－１０から選択されるタンパク質に由来する。
【0108】
一部の実施形態では、ＣＡＲＤは、ＲＩＰ関連ＩＣＨ１／ＣＥＤ３相同タンパク質（ＲＡＩＤＤ）、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、ミトコンドリア抗ウイルスシグナル伝達タンパク質（ＭＡＶＳ）、カスパーゼ１、及びその変異体から選択されるタンパク質に由来する。
【0109】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ＴＩＲドメインを含むタンパク質をコードする。ＴＩＲドメインは、限定はされないが、骨髄分化一次応答タンパク質８８（ＭｙＤ８８）、Ｔｏｌｌ／インターロイキン１受容体（ＴＩＲ）ドメイン含有アダプター誘導インターフェロンβ（ＴＲＩＦ）、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）、Ｔｏｌｌ様受容体４（ＴＬＲ４）、ＴＩＲドメイン含有アダプタータンパク質（ＴＩＲＡＰ）及び転座鎖関連膜タンパク質（ＴＲＡＭ）を含むタンパク質に由来し得る。
【0110】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、細胞性ＦＬＩＣＥ（ＦＡＤＤ様ＩＬ－１β変換酵素）阻害タンパク質（ｃ－ＦＬＩＰ）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ１（ＲＩＰＫ１）、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ３（ＲＩＰＫ３）、Ｚ－ＤＮＡ結合タンパク質１（ＺＢＰ１）、混合系統キナーゼドメイン様シュードキナーゼ（ＭＬＫＬ）、ＴＩＲドメイン及びＲＨＩＭドメインのみを含むＴＲＩＦのＮ末端切断体、ＦＡＤＤ、阻害剤ｋＢαスーパーリプレッサー（ＩｋＢα－ＳＲ）、インターロイキン１受容体関連キナーゼ１（ＩＲＡＫ１）、腫瘍壊死因子受容体１型関連デスドメイン（ＴＲＡＤＤ）、カスパーゼ８のドミナントネガティブ変異体、インターフェロン制御因子３（ＩＲＦ３）、ガスダーミンＡ（ＧＳＤＭ－Ａ）及びその変異体、ガスダーミンＢ（ＧＳＤＭ－Ｂ）及びその変異体、ガスダーミン－Ｃ（ＧＳＤＭ－Ｃ）及びその変異体、ガスダーミン－Ｄ（ＧＳＤＭ－Ｄ）及びその変異体、ガスダーミン－Ｅ（ＧＳＤＭ－Ｅ）及びその変異体、アポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ）、グランザイムＡ、及び二量体化ドメインを有するＣ末端カスパーゼ動員ドメインを含むアポトーシス関連スペック様タンパク質（ＡＳＣ－ＣＡＲＤ）及びその変異体からなる群から選択されるポリペプチドをコードする。
【0111】
一部の実施形態では、ｃＦＬＩＰは、ヒトｃＦＬＩＰである。一部の実施形態では、ｃＦＬＩＰは、カスパーゼ８及びＦＡＤＤ様アポトーシス調節因子（ｃＦＬＡＲ）である。
【0112】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ウイルス遺伝子である。一部の実施形態では、ウイルス遺伝子は、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）由来のｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１／Ｋ１３）、伝染性軟属腫（Ｍｏｌｌｕｓｃｕｍ Ｃｏｎｔａｇｉｏｕｓｕｍ）ウイルス由来のＭＣ１５９Ｌ、ウマヘルペスウイルス２由来のＥ８、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）又はマウスサイトメガロウイルス（ＭＣＭＶ）由来のｖＩＣＡ、牛痘ウイルス由来のＣｒｍＡ、及びキンウワバ（Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）多カプシド核多角体病ウイルス（ＡｃＭＮＰＶ）由来のＰ３５から選択されるポリペプチドをコードする。
【0113】
本明細書に記載される免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するポリペプチドはいずれも、変異してタノトランスミッションを促進する能力をさらに強化し得ることが理解されよう。例えば、一部の実施形態では、ＺＢＰ１をコードするポリヌクレオチドは、受容体相互作用タンパク質ホモタイプ相互作用モチーフ（ＲＨＩＭ）Ｃの欠失、ＲＨＩＭ Ｄの欠失、ＲＨＩＭ Ｂの欠失、及びＺα１ドメインのＮ末端をコードする領域の欠失のいずれか１つ又はそれらの任意の組み合わせを含む。一部の実施形態では、ＺＢＰ１は、ＺＢＰ１－Ｚａ１／ＲＨＩＭＡ切断型である。
【0114】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドは、受容体相互作用セリン／スレオニンプロテインキナーゼ１（ＲＩＰＫ１）の発現又は活性を阻害する。ＲＩＰＫ１は、ＴＮＦ及びＦａｓなどの細胞死受容体の下流でネクロトーシスを駆動することにより、タノトランスミッションを促進し得る。しかし、ＲＩＰＫ１のＲＨＩＭドメインは、異常なＲＨＩＭオリゴマー化を防ぐことによりＴＲＩＦ及びＺＢＰ１媒介性ネクロトーシスも阻害する可能性があり、その結果、ネクロトーシスはＲＩＰＫ１の非存在下でも強化され得る。従って、一部の実施形態では、ＲＩＰＫ１は、ＴＲＩＦ及びＺＢＰ１媒介性ネクロトーシスを阻害することによって、タノトランスミッションを阻害し得る。
【0115】
タノトランスミッションを促進する融合タンパク質
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、融合タンパク質をコードし得る。融合タンパク質は、以下の表３に列挙されるドメインのうちの２つ以上、例えば、表３に列挙されるドメインの２、３、４又は５つを含み得る。例えば、一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ＴＲＩＦ ＴＩＲドメイン、ＴＲＩＦ ＲＨＩＭドメイン、及びＡＳＣ－ＣＡＲＤを含む融合タンパク質をコードする。この融合タンパク質は、カスパーゼ－１を動員し、パイロトーシスを活性化する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＺＢＰ１ Ｚａ２ドメイン及びＡＳＣ－ＣＡＲＤを含む。この融合タンパク質は、パイロトーシスを活性化する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＲＩＰＫ３ ＲＨＩＭドメイン及びカスパーゼ大サブユニット／小サブユニット（Ｌ／Ｓ）ドメインを含む。この融合タンパク質は、カスパーゼの構成的活性化を駆動し、表３に示すように、選択されたカスパーゼＬ／Ｓドメインに応じて異なる種類の細胞死を引き起こす。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＴＲＩＦ ＴＩＲドメイン、ＴＲＩＦ ＲＨＩＭドメイン及びＦＡＤＤデスドメイン（ＦＡＤＤ－ＤＤ）を含む。この融合タンパク質は、アポトーシスを阻止するが、ネクロトーシスを誘発する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、阻害剤ｋＢαスーパーリプレッサー（ＩｋＢαＳＲ）及びカスパーゼ８ＤＥＤドメインを含む。この融合タンパク質は、ＮＦ－ｋＢを阻害し、アポトーシスを誘導する。
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、融合タンパク質をコードし得る。融合タンパク質は、以下の表３に列挙されるドメインのうちの２つ以上、例えば、表３に列挙されるドメインの２、３、４又は５つを含み得る。例えば、一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、ＴＲＩＦ ＴＩＲドメイン、ＴＲＩＦ ＲＨＩＭドメイン、及びＡＳＣ－ＣＡＲＤを含む融合タンパク質をコードする。この融合タンパク質は、カスパーゼ－１を動員し、パイロトーシスを活性化する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＺＢＰ１ Ｚａ２ドメイン及びＡＳＣ－ＣＡＲＤを含む。この融合タンパク質は、パイロトーシスを活性化する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＲＩＰＫ３ ＲＨＩＭドメイン及びカスパーゼ大サブユニット／小サブユニット（Ｌ／Ｓ）ドメインを含む。この融合タンパク質は、カスパーゼの構成的活性化を駆動し、表３に示すように、選択されたカスパーゼＬ／Ｓドメインに応じて異なる種類の細胞死を引き起こす。一部の実施形態では、融合タンパク質は、ＴＲＩＦ ＴＩＲドメイン、ＴＲＩＦ ＲＨＩＭドメイン及びＦＡＤＤデスドメイン（ＦＡＤＤ－ＤＤ）を含む。この融合タンパク質は、アポトーシスを阻止するが、ネクロトーシスを誘発する。一部の実施形態では、融合タンパク質は、阻害剤ｋＢαスーパーリプレッサー（ＩｋＢαＳＲ）及びカスパーゼ８ＤＥＤドメインを含む。この融合タンパク質は、ＮＦ－ｋＢを阻害し、アポトーシスを誘導する。
【0116】
【表3】
【0117】
一部の実施形態では、免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する１つのみのポリヌクレオチドを含むように操作される。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するこの単一のポリヌクレオチドは、１つのみのタノトランスミッションポリペプチドをコードする。一部の実施形態では、この単一のポリヌクレオチドは、２つ以上のタノトランスミッションポリペプチド、例えば、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、ＴＲＩＦ、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ、ガスダーミンＥ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＳＦ）タンパク質、それらの変異体、及びそれらの機能性断片からなる群から選択される、２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドをコードする。
【0118】
他の実施形態では、免疫細胞は、タノトランスミッションを促進する２つ以上のポリヌクレオチドを含むように操作され、ここで、各ポリヌクレオチドは、異なるタノトランスミッションポリペプチドをコードし、例えば、異なるタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、ＴＲＩＦ、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ、ガスダーミンＥ、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＳＦ）タンパク質、それらの変異体、及びそれらの機能性断片からなる群から選択される。
【0119】
好適なカスパーゼとしては、カスパーゼ－１、カスパーゼ－２、カスパーゼ－２、カスパーゼ－３、カスパーゼ－４、カスパーゼ－５、カスパーゼ－６、カスパーゼ－７、カスパーゼ－８、カスパーゼ－９、カスパーゼ－１０、カスパーゼ－１１及びカスパーゼ－１２が挙げられる。
【0120】
例示的なＴＮＦＳＦタンパク質を以下の表４に記載する。
【0121】
【表4】
【0122】
タノトランスミッションポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を以下の表５に記載する。表５のタノトランスミッションポリペプチドをコードする（又はそれと少なくとも８５％、８７％、９０％、９５％、９７％、９８％、若しくは９９％同一のポリペプチドをコードする）任意の他のポリヌクレオチド配列も、本明細書に記載の方法及び組成物で使用することができる。
【0123】
【表5-1】
【0124】
【表5-2】
【0125】
２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドは、個別のポリペプチドとして発現されてもよいし、又はキメラタンパク質内に含まれていてもよい。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドの少なくとも１つは、２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドをコードする単一の転写物として転写される。
【0126】
本明細書に記載のタノトランスミッションポリペプチドは、限定はされないが、ＮＦ－κＢの活性化、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７の活性化、アポトーシスの促進、並びにプログラム壊死（例えば、ネクロトーシス若しくはパイロトーシス）の促進を含め、様々な機構を介してタノトランスミッションを促進し得る。２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドの組み合わせが使用される場合、２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドの各々は、類似の機構を介し、又は異なる機構を介してタノトランスミッションを促進し得る。例えば、一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、ＮＦ－κＢを活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドのうち少なくとも２つは、プログラム壊死（例えば、ネクロトーシス又はパイロトーシス）を促進する。
【0127】
２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドが異なる機構を介してタノトランスミッションを促進する場合、様々な組み合わせの機構を使用することができる。例えば、一部の実施形態では、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＮＦ－κＢを活性化し、１つ若しくは複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死（例えば、ネクロトーシス又はパイロトーシス）を促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、アポトーシスを促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化し、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死（例えば、ネクロトーシス又はパイロトーシス）を促進する。一部の実施形態では、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、アポトーシスを促進し、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、プログラム壊死（例えば、ネクロトーシス又はパイロトーシス）を促進する。
【0128】
一部の実施形態では、ＮＦ－ｋＢを活性化するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＴＲＡＤＤ、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ６、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、ＮＯＤ２、ＭｙＤ８８、ＴＲＡＭ、ＨＯＩＬ、ＨＯＩＰ、シャーピン、ＩＫＫｇ、ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ、ＲｅｌＡ、ＭＡＶＳ、ＲＩＧＩ、ＭＤＡ５、Ｔａｋ１、ＴＮＦＳＦタンパク質、並びにそれらの機能性断片及び変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＩＲＦ３及び／又はＩＲＦ７を活性化するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＭｙＤ８８、ＭＡＶＳ、ＴＢＫ１、ＩＫＫｅ、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、ＩＲＦ１、ＴＲＡＦ３、並びにそれらの機能性断片及び変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、アポトーシスを促進するタノトランスミッションポリペプチドは、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ１、カスパーゼ、ＦＡＤＤ、ＴＲＡＤＤ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＳ、Ｂａｘ、Ｂａｋ、Ｂｉｍ、Ｂｉｄ、Ｎｏｘａ、Ｐｕｍａ、並びにそれらの機能性断片及び変異体からなる群から選択される。一部の実施形態では、プログラムされた壊死（例えば、ネクロトーシス又はパイロトーシス）を促進するタノトランスミッションポリペプチドは、ＺＢＰ１、ＲＩＰＫ１、ＲＩＰＫ３、ＭＬＫＬ、ガスダーミン、並びにそれらの機能性断片及び変異体からなる群から選択される。
【0129】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの組み合わせは、以下から選択される：ＴＲＡＤＤとＴＲＡＦ２、ＴＲＡＤＤとＴＲＡＦ６、ＴＲＡＤＤとｃＩＡＰ１、ＴＲＡＤＤとｃＩＡＰ２、ＴＲＡＤＤとＸＩＡＰ、ＴＲＡＤＤとＮＯＤ２、ＴＲＡＤＤとＭｙＤ８８、ＴＲＡＤＤとＴＲＡＭ、ＴＲＡＤＤとＨＯＩＬ、ＴＲＡＤＤとＨＯＩＰ、ＴＲＡＤＤとシャーピン、ＴＲＡＤＤとＩＫＫｇ、ＴＲＡＤＤとＩＫＫａ、ＴＲＡＤＤとＩＫＫｂ、ＴＲＡＤＤとＲｅｌＡ、ＴＲＡＤＤとＭＡＶＳ、ＴＲＡＤＤとＲＩＧＩ、ＴＲＡＤＤとＭＤＡ５、ＴＲＡＤＤとＴａｋ１、ＴＲＡＤＤとＴＢＫ１、ＴＲＡＤＤとＩＫＫｅ、ＴＲＡＤＤとＩＲＦ３、ＴＲＡＤＤとＩＲＦ７、ＴＲＡＤＤとＩＲＦ１、ＴＲＡＤＤとＴＲＡＦ３、ＴＲＡＤＤとカスパーゼ、ＴＲＡＤＤとＦＡＤＤ、ＴＲＡＤＤとＴＮＦＲ１、ＴＲＡＤＤとＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＤＤとＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＤＤとＦＡＳ、ＴＲＡＤＤとＢａｘ、ＴＲＡＤＤとＢａｋ、ＴＲＡＤＤとＢｉｍ、ＴＲＡＤＤとＢｉｄ、ＴＲＡＤＤとＮｏｘａ、ＴＲＡＤＤとＰｕｍａ、ＴＲＡＤＤとＴＲＩＦ、ＴＲＡＤＤとＺＢＰ１、ＴＲＡＤＤとＲＩＰＫ１、ＴＲＡＤＤとＲＩＰＫ３、ＴＲＡＤＤとＭＬＫＬ、ＴＲＡＤＤとガスダーミンＡ、ＴＲＡＤＤとガスダーミンＢ、ＴＲＡＤＤとガスダーミンＣ、ＴＲＡＤＤとガスダーミンＤ、ＴＲＡＤＤとガスダーミンＥ、ＴＲＡＦ２とＴＲＡＦ６、ＴＲＡＦ２とｃＩＡＰ１、ＴＲＡＦ２とｃＩＡＰ２、ＴＲＡＦ２とＸＩＡＰ、ＴＲＡＦ２とＮＯＤ２、ＴＲＡＦ２とＭｙＤ８８、ＴＲＡＦ２とＴＲＡＭ、ＴＲＡＦ２とＨＯＩＬ、ＴＲＡＦ２とＨＯＩＰ、ＴＲＡＦ２とシャーピン、ＴＲＡＦ２とＩＫＫｇ、ＴＲＡＦ２とＩＫＫａ、ＴＲＡＦ２とＩＫＫｂ、ＴＲＡＦ２とＲｅｌＡ、ＴＲＡＦ２とＭＡＶＳ、ＴＲＡＦ２とＲＩＧＩ、ＴＲＡＦ２とＭＤＡ５、ＴＲＡＦ２とＴａｋ１、ＴＲＡＦ２とＴＢＫ１、ＴＲＡＦ２とＩＫＫｅ、ＴＲＡＦ２とＩＲＦ３、ＴＲＡＦ２とＩＲＦ７、ＴＲＡＦ２とＩＲＦ１、ＴＲＡＦ２とＴＲＡＦ３、ＴＲＡＦ２とカスパーゼ、ＴＲＡＦ２とＦＡＤＤ、ＴＲＡＦ２とＴＮＦＲ１、ＴＲＡＦ２とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＦ２とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＦ２とＦＡＳ、ＴＲＡＦ２とＢａｘ、ＴＲＡＦ２とＢａｋ、ＴＲＡＦ２とＢｉｍ、ＴＲＡＦ２とＢｉｄ、ＴＲＡＦ２とＮｏｘａ、ＴＲＡＦ２とＰｕｍａ、ＴＲＡＦ２とＴＲＩＦ、ＴＲＡＦ２とＺＢＰ１、ＴＲＡＦ２とＲＩＰＫ１、ＴＲＡＦ２とＲＩＰＫ３、ＴＲＡＦ２とＭＬＫＬ、ＴＲＡＦ２とガスダーミンＡ、ＴＲＡＦ２とガスダーミンＢ、ＴＲＡＦ２とガスダーミンＣ、ＴＲＡＦ２とガスダーミンＤ、ＴＲＡＦ２とガスダーミンＥ、ＴＲＡＦ６とｃＩＡＰ１、ＴＲＡＦ６とｃＩＡＰ２、ＴＲＡＦ６とＸＩＡＰ、ＴＲＡＦ６とＮＯＤ２、ＴＲＡＦ６とＭｙＤ８８、ＴＲＡＦ６とＴＲＡＭ、ＴＲＡＦ６とＨＯＩＬ、ＴＲＡＦ６とＨＯＩＰ、ＴＲＡＦ６とシャーピン、ＴＲＡＦ６とＩＫＫｇ、ＴＲＡＦ６とＩＫＫａ、ＴＲＡＦ６とＩＫＫｂ、ＴＲＡＦ６とＲｅｌＡ、ＴＲＡＦ６とＭＡＶＳ、ＴＲＡＦ６とＲＩＧＩ、ＴＲＡＦ６とＭＤＡ５、ＴＲＡＦ６とＴａｋ１、ＴＲＡＦ６とＴＢＫ１、ＴＲＡＦ６とＩＫＫｅ、ＴＲＡＦ６とＩＲＦ３、ＴＲＡＦ６とＩＲＦ７、ＴＲＡＦ６とＩＲＦ１、ＴＲＡＦ６とＴＲＡＦ３、ＴＲＡＦ６とカスパーゼ、ＴＲＡＦ６とＦＡＤＤ、ＴＲＡＦ６とＴＮＦＲ１、ＴＲＡＦ６とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＦ６とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＦ６とＦＡＳ、ＴＲＡＦ６とＢａｘ、ＴＲＡＦ６とＢａｋ、ＴＲＡＦ６とＢｉｍ、ＴＲＡＦ６とＢｉｄ、ＴＲＡＦ６とＮｏｘａ、ＴＲＡＦ６とＰｕｍａ、ＴＲＡＦ６とＴＲＩＦ、ＴＲＡＦ６とＺＢＰ１、ＴＲＡＦ６とＲＩＰＫ１、ＴＲＡＦ６とＲＩＰＫ３、ＴＲＡＦ６とＭＬＫＬ、ＴＲＡＦ６とガスダーミンＡ、ＴＲＡＦ６とガスダーミンＢ、ＴＲＡＦ６とガスダーミンＣ、ＴＲＡＦ６とガスダーミンＤ、ＴＲＡＦ６とガスダーミンＥ、ｃＩＡＰ１とｃＩＡＰ２、ｃＩＡＰ１とＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１とＮＯＤ２、ｃＩＡＰ１とＭｙＤ８８、ｃＩＡＰ１とＴＲＡＭ、ｃＩＡＰ１とＨＯＩＬ、ｃＩＡＰ１とＨＯＩＰ、ｃＩＡＰ１とシャーピン、ｃＩＡＰ１とＩＫＫｇ、ｃＩＡＰ１とＩＫＫａ、ｃＩＡＰ１とＩＫＫｂ、ｃＩＡＰ１とＲｅｌＡ、ｃＩＡＰ１とＭＡＶＳ、ｃＩＡＰ１とＲＩＧＩ、ｃＩＡＰ１とＭＤＡ５、ｃＩＡＰ１とＴａｋ１、ｃＩＡＰ１とＴＢＫ１、ｃＩＡＰ１とＩＫＫｅ、ｃＩＡＰ１とＩＲＦ３、ｃＩＡＰ１とＩＲＦ７、ｃＩＡＰ１とＩＲＦ１、ｃＩＡＰ１とＴＲＡＦ３、ｃＩＡＰ１とカスパーゼ、ｃＩＡＰ１とＦＡＤＤ、ｃＩＡＰ１とＴＮＦＲ１、ｃＩＡＰ１とＴＲＡＩＬＲ１、ｃＩＡＰ１とＴＲＡＩＬＲ２、ｃＩＡＰ１とＦＡＳ、ｃＩＡＰ１とＢａｘ、ｃＩＡＰ１とＢａｋ、ｃＩＡＰ１とＢｉｍ、ｃＩＡＰ１とＢｉｄ、ｃＩＡＰ１とＮｏｘａ、ｃＩＡＰ１とＰｕｍａ、ｃＩＡＰ１とＴＲＩＦ、ｃＩＡＰ１とＺＢＰ１、ｃＩＡＰ１とＲＩＰＫ１、ｃＩＡＰ１とＲＩＰＫ３、ｃＩＡＰ１とＭＬＫＬ、ｃＩＡＰ１とガスダーミンＡ、ｃＩＡＰ１とガスダーミンＢ、ｃＩＡＰ１とガスダーミンＣ、ｃＩＡＰ１とガスダーミンＤ、ｃＩＡＰ１とガスダーミンＥ、ｃＩＡＰ２とＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ２とＮＯＤ２、ｃＩＡＰ２とＭｙＤ８８、ｃＩＡＰ２とＴＲＡＭ、ｃＩＡＰ２とＨＯＩＬ、ｃＩＡＰ２とＨＯＩＰ、ｃＩＡＰ２とシャーピン、ｃＩＡＰ２とＩＫＫｇ、ｃＩＡＰ２とＩＫＫａ、ｃＩＡＰ２とＩＫＫｂ、ｃＩＡＰ２とＲｅｌＡ、ｃＩＡＰ２とＭＡＶＳ、ｃＩＡＰ２とＲＩＧＩ、ｃＩＡＰ２とＭＤＡ５、ｃＩＡＰ２とＴａｋ１、ｃＩＡＰ２とＴＢＫ１、ｃＩＡＰ２とＩＫＫｅ、ｃＩＡＰ２とＩＲＦ３、ｃＩＡＰ２とＩＲＦ７、ｃＩＡＰ２とＩＲＦ１、ｃＩＡＰ２とＴＲＡＦ３、ｃＩＡＰ２とカスパーゼ、ｃＩＡＰ２とＦＡＤＤ、ｃＩＡＰ２とＴＮＦＲ１、ｃＩＡＰ２とＴＲＡＩＬＲ１、ｃＩＡＰ２とＴＲＡＩＬＲ２、ｃＩＡＰ２とＦＡＳ、ｃＩＡＰ２とＢａｘ、ｃＩＡＰ２とＢａｋ、ｃＩＡＰ２とＢｉｍ、ｃＩＡＰ２とＢｉｄ、ｃＩＡＰ２とＮｏｘａ、ｃＩＡＰ２とＰｕｍａ、ｃＩＡＰ２とＴＲＩＦ、ｃＩＡＰ２とＺＢＰ１、ｃＩＡＰ２とＲＩＰＫ１、ｃＩＡＰ２とＲＩＰＫ３、ｃＩＡＰ２とＭＬＫＬ、ｃＩＡＰ２とガスダーミンＡ、ｃＩＡＰ２とガスダーミンＢ、ｃＩＡＰ２とガスダーミンＣ、ｃＩＡＰ２とガスダーミンＤ、ｃＩＡＰ２とガスダーミンＥ、ＸＩＡＰとＮＯＤ２、ＸＩＡＰとＭｙＤ８８、ＸＩＡＰとＴＲＡＭ、ＸＩＡＰとＨＯＩＬ、ＸＩＡＰとＨＯＩＰ、ＸＩＡＰとシャーピン、ＸＩＡＰとＩＫＫｇ、ＸＩＡＰとＩＫＫａ、ＸＩＡＰとＩＫＫｂ、ＸＩＡＰとＲｅｌＡ、ＸＩＡＰとＭＡＶＳ、ＸＩＡＰとＲＩＧＩ、ＸＩＡＰとＭＤＡ５、ＸＩＡＰとＴａｋ１、ＸＩＡＰとＴＢＫ１、ＸＩＡＰとＩＫＫｅ、ＸＩＡＰとＩＲＦ３、ＸＩＡＰとＩＲＦ７、ＸＩＡＰとＩＲＦ１、ＸＩＡＰとＴＲＡＦ３、ＸＩＡＰとカスパーゼ、ＸＩＡＰとＦＡＤＤ、ＸＩＡＰとＴＮＦＲ１、ＸＩＡＰとＴＲＡＩＬＲ１、ＸＩＡＰとＴＲＡＩＬＲ２、ＸＩＡＰとＦＡＳ、ＸＩＡＰとＢａｘ、ＸＩＡＰとＢａｋ、ＸＩＡＰとＢｉｍ、ＸＩＡＰとＢｉｄ、ＸＩＡＰとＮｏｘａ、ＸＩＡＰとＰｕｍａ、ＸＩＡＰとＴＲＩＦ、ＸＩＡＰとＺＢＰ１、ＸＩＡＰとＲＩＰＫ１、ＸＩＡＰとＲＩＰＫ３、ＸＩＡＰとＭＬＫＬ、ＸＩＡＰとガスダーミンＡ、ＸＩＡＰとガスダーミンＢ、ＸＩＡＰとガスダーミンＣ、ＸＩＡＰとガスダーミンＤ、ＸＩＡＰとガスダーミンＥ、ＮＯＤ２とＭｙＤ８８、ＮＯＤ２とＴＲＡＭ、ＮＯＤ２とＨＯＩＬ、ＮＯＤ２とＨＯＩＰ、ＮＯＤ２とシャーピン、ＮＯＤ２とＩＫＫｇ、ＮＯＤ２とＩＫＫａ、ＮＯＤ２とＩＫＫｂ、ＮＯＤ２とＲｅｌＡ、ＮＯＤ２とＭＡＶＳ、ＮＯＤ２とＲＩＧＩ、ＮＯＤ２とＭＤＡ５、ＮＯＤ２とＴａｋ１、ＮＯＤ２とＴＢＫ１、ＮＯＤ２とＩＫＫｅ、ＮＯＤ２とＩＲＦ３、ＮＯＤ２とＩＲＦ７、ＮＯＤ２とＩＲＦ１、ＮＯＤ２とＴＲＡＦ３、ＮＯＤ２とカスパーゼ、ＮＯＤ２とＦＡＤＤ、ＮＯＤ２とＴＮＦＲ１、ＮＯＤ２とＴＲＡＩＬＲ１、ＮＯＤ２とＴＲＡＩＬＲ２、ＮＯＤ２とＦＡＳ、ＮＯＤ２とＢａｘ、ＮＯＤ２とＢａｋ、ＮＯＤ２とＢｉｍ、ＮＯＤ２とＢｉｄ、ＮＯＤ２とＮｏｘａ、ＮＯＤ２とＰｕｍａ、ＮＯＤ２とＴＲＩＦ、ＮＯＤ２とＺＢＰ１、ＮＯＤ２とＲＩＰＫ１、ＮＯＤ２とＲＩＰＫ３、ＮＯＤ２とＭＬＫＬ、ＮＯＤ２とガスダーミンＡ、ＮＯＤ２とガスダーミンＢ、ＮＯＤ２とガスダーミンＣ、ＮＯＤ２とガスダーミンＤ、ＮＯＤ２とガスダーミンＥ、ＭｙＤ８８とＴＲＡＭ、ＭｙＤ８８とＨＯＩＬ、ＭｙＤ８８とＨＯＩＰ、ＭｙＤ８８とシャーピン、ＭｙＤ８８とＩＫＫｇ、ＭｙＤ８８とＩＫＫａ、ＭｙＤ８８とＩＫＫｂ、ＭｙＤ８８とＲｅｌＡ、ＭｙＤ８８とＭＡＶＳ、ＭｙＤ８８とＲＩＧＩ、ＭｙＤ８８とＭＤＡ５、ＭｙＤ８８とＴａｋ１、ＭｙＤ８８とＴＢＫ１、ＭｙＤ８８とＩＫＫｅ、ＭｙＤ８８とＩＲＦ３、ＭｙＤ８８とＩＲＦ７、ＭｙＤ８８とＩＲＦ１、ＭｙＤ８８とＴＲＡＦ３、ＭｙＤ８８とカスパーゼ、ＭｙＤ８８とＦＡＤＤ、ＭｙＤ８８とＴＮＦＲ１、ＭｙＤ８８とＴＲＡＩＬＲ１、ＭｙＤ８８とＴＲＡＩＬＲ２、ＭｙＤ８８とＦＡＳ、ＭｙＤ８８とＢａｘ、ＭｙＤ８８とＢａｋ、ＭｙＤ８８とＢｉｍ、ＭｙＤ８８とＢｉｄ、ＭｙＤ８８とＮｏｘａ、ＭｙＤ８８とＰｕｍａ、ＭｙＤ８８とＴＲＩＦ、ＭｙＤ８８とＺＢＰ１、ＭｙＤ８８とＲＩＰＫ１、ＭｙＤ８８とＲＩＰＫ３、ＭｙＤ８８とＭＬＫＬ、ＭｙＤ８８とガスダーミンＡ、ＭｙＤ８８とガスダーミンＢ、ＭｙＤ８８とガスダーミンＣ、ＭｙＤ８８とガスダーミンＤ、ＭｙＤ８８とガスダーミンＥ、ＴＲＡＭとＨＯＩＬ、ＴＲＡＭとＨＯＩＰ、ＴＲＡＭとシャーピン、ＴＲＡＭとＩＫＫｇ、ＴＲＡＭとＩＫＫａ、ＴＲＡＭとＩＫＫｂ、ＴＲＡＭとＲｅｌＡ、ＴＲＡＭとＭＡＶＳ、ＴＲＡＭとＲＩＧＩ、ＴＲＡＭとＭＤＡ５、ＴＲＡＭとＴａｋ１、ＴＲＡＭとＴＢＫ１、ＴＲＡＭとＩＫＫｅ、ＴＲＡＭとＩＲＦ３、ＴＲＡＭとＩＲＦ７、ＴＲＡＭとＩＲＦ１、ＴＲＡＭとＴＲＡＦ３、ＴＲＡＭとカスパーゼ、ＴＲＡＭとＦＡＤＤ、ＴＲＡＭとＴＮＦＲ１、ＴＲＡＭとＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＭとＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＭとＦＡＳ、ＴＲＡＭとＢａｘ、ＴＲＡＭとＢａｋ、ＴＲＡＭとＢｉｍ、ＴＲＡＭとＢｉｄ、ＴＲＡＭとＮｏｘａ、ＴＲＡＭとＰｕｍａ、ＴＲＡＭとＴＲＩＦ、ＴＲＡＭとＺＢＰ１、ＴＲＡＭとＲＩＰＫ１、ＴＲＡＭとＲＩＰＫ３、ＴＲＡＭとＭＬＫＬ、ＴＲＡＭとガスダーミンＡ、ＴＲＡＭとガスダーミンＢ、ＴＲＡＭとガスダーミンＣ、ＴＲＡＭとガスダーミンＤ、ＴＲＡＭとガスダーミンＥ、ＨＯＩＬとＨＯＩＰ、ＨＯＩＬとシャーピン、ＨＯＩＬとＩＫＫｇ、ＨＯＩＬとＩＫＫａ、ＨＯＩＬとＩＫＫｂ、ＨＯＩＬとＲｅｌＡ、ＨＯＩＬとＭＡＶＳ、ＨＯＩＬとＲＩＧＩ、ＨＯＩＬとＭＤＡ５、ＨＯＩＬとＴａｋ１、ＨＯＩＬとＴＢＫ１、ＨＯＩＬとＩＫＫｅ、ＨＯＩＬとＩＲＦ３、ＨＯＩＬとＩＲＦ７、ＨＯＩＬとＩＲＦ１、ＨＯＩＬとＴＲＡＦ３、ＨＯＩＬとカスパーゼ、ＨＯＩＬとＦＡＤＤ、ＨＯＩＬとＴＮＦＲ１、ＨＯＩＬとＴＲＡＩＬＲ１、ＨＯＩＬとＴＲＡＩＬＲ２、ＨＯＩＬとＦＡＳ、ＨＯＩＬとＢａｘ、ＨＯＩＬとＢａｋ、ＨＯＩＬとＢｉｍ、ＨＯＩＬとＢｉｄ、ＨＯＩＬとＮｏｘａ、ＨＯＩＬとＰｕｍａ、ＨＯＩＬとＴＲＩＦ、ＨＯＩＬとＺＢＰ１、ＨＯＩＬとＲＩＰＫ１、ＨＯＩＬとＲＩＰＫ３、ＨＯＩＬとＭＬＫＬ、ＨＯＩＬとガスダーミンＡ、ＨＯＩＬとガスダーミンＢ、ＨＯＩＬとガスダーミンＣ、ＨＯＩＬとガスダーミンＤ、ＨＯＩＬとガスダーミンＥ、
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ＩＲＦ１とＴＲＡＦ３、ＩＲＦ１とカスパーゼ、ＩＲＦ１とＦＡＤＤ、ＩＲＦ１とＴＮＦＲ１、ＩＲＦ１とＴＲＡＩＬＲ１、ＩＲＦ１とＴＲＡＩＬＲ２、ＩＲＦ１とＦＡＳ、ＩＲＦ１とＢａｘ、ＩＲＦ１とＢａｋ、ＩＲＦ１とＢｉｍ、ＩＲＦ１とＢｉｄ、ＩＲＦ１とＮｏｘａ、ＩＲＦ１とＰｕｍａ、ＩＲＦ１とＴＲＩＦ、ＩＲＦ１とＺＢＰ１、ＩＲＦ１とＲＩＰＫ１、ＩＲＦ１とＲＩＰＫ３、ＩＲＦ１とＭＬＫＬ、ＩＲＦ１とガスダーミンＡ、ＩＲＦ１とガスダーミンＢ、ＩＲＦ１とガスダーミンＣ、ＩＲＦ１とガスダーミンＤ、ＩＲＦ１とガスダーミンＥ、ＴＲＡＦ３とカスパーゼ、ＴＲＡＦ３とＦＡＤＤ、ＴＲＡＦ３とＴＮＦＲ１、ＴＲＡＦ３とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＲＡＦ３とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＦ３とＦＡＳ、ＴＲＡＦ３とＢａｘ、ＴＲＡＦ３とＢａｋ、ＴＲＡＦ３とＢｉｍ、ＴＲＡＦ３とＢｉｄ、ＴＲＡＦ３とＮｏｘａ、ＴＲＡＦ３とＰｕｍａ、ＴＲＡＦ３とＴＲＩＦ、ＴＲＡＦ３とＺＢＰ１、ＴＲＡＦ３とＲＩＰＫ１、ＴＲＡＦ３とＲＩＰＫ３、ＴＲＡＦ３とＭＬＫＬ、ＴＲＡＦ３とガスダーミンＡ、ＴＲＡＦ３とガスダーミンＢ、ＴＲＡＦ３とガスダーミンＣ、ＴＲＡＦ３とガスダーミンＤ、ＴＲＡＦ３とガスダーミンＥ、カスパーゼとＦＡＤＤ、カスパーゼとＴＮＦＲ１、カスパーゼとＴＲＡＩＬＲ１、カスパーゼとＴＲＡＩＬＲ２、カスパーゼとＦＡＳ、カスパーゼとＢａｘ、カスパーゼとＢａｋ、カスパーゼとＢｉｍ、カスパーゼとＢｉｄ、カスパーゼとＮｏｘａ、カスパーゼとＰｕｍａ、カスパーゼとＴＲＩＦ、カスパーゼとＺＢＰ１、カスパーゼとＲＩＰＫ１、カスパーゼとＲＩＰＫ３、カスパーゼとＭＬＫＬ、カスパーゼとガスダーミンＡ、カスパーゼとガスダーミンＢ、カスパーゼとガスダーミンＣ、カスパーゼとガスダーミンＤ、カスパーゼとガスダーミンＥ、ＦＡＤＤとＴＮＦＲ１、ＦＡＤＤとＴＲＡＩＬＲ１、ＦＡＤＤとＴＲＡＩＬＲ２、ＦＡＤＤとＦＡＳ、ＦＡＤＤとＢａｘ、ＦＡＤＤとＢａｋ、ＦＡＤＤとＢｉｍ、ＦＡＤＤとｂｉｄ、ＦＡＤＤとＮｏｘａ、ＦＡＤＤとＰｕｍａ、ＦＡＤＤとＴＲＩＦ、ＦＡＤＤとＺＢＰ１、ＦＡＤＤとＲＩＰＫ１、ＦＡＤＤとＲＩＰＫ３、ＦＡＤＤとＭＬＫＬ、ＦＡＤＤとガスダーミンＡ、ＦＡＤＤとガスダーミンＢ、ＦＡＤＤとガスダーミンＣ、ＦＡＤＤとガスダーミンＤ、ＦＡＤＤとガスダーミンＥ、ＴＮＦＲ１とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＮＦＲ１とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＮＦＲ１とＦＡＳ、ＴＮＦＲ１とＢａｘ、ＴＮＦＲ１とＢａｋ、ＴＮＦＲ１とＢｉｍ、ＴＮＦＲ１とＢｉｄ、ＴＮＦＲ１とＮｏｘａ、ＴＮＦＲ１とＰｕｍａ、ＴＮＦＲ１とＴＲＩＦ、ＴＮＦＲ１とＺＢＰ１、ＴＮＦＲ１とＲＩＰＫ１、ＴＮＦＲ１とＲＩＰＫ３、ＴＮＦＲ１とＭＬＫＬ、ＴＮＦＲ１とガスダーミンＡ、ＴＮＦＲ１とガスダーミンＢ、ＴＮＦＲ１とガスダーミンＣ、ＴＮＦＲ１とガスダーミンＤ、ＴＮＦＲ１とガスダーミンＥ、ＴＲＡＩＬＲ１とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＩＬＲ１とＦＡＳ、ＴＲＡＩＬＲ１とＢａｘ、ＴＲＡＩＬＲ１とＢａｋ、ＴＲＡＩＬＲ１とＢｉｍ、ＴＲＡＩＬＲ１とＢｉｄ、ＴＲＡＩＬＲ１とＮｏｘａ、ＴＲＡＩＬＲ１とＰｕｍａ、ＴＲＡＩＬＲ１とＴＲＩＦ、ＴＲＡＩＬＲ１とＺＢＰ１、ＴＲＡＩＬＲ１とＲＩＰＫ１、ＴＲＡＩＬＲ１とＲＩＰＫ３、ＴＲＡＩＬＲ１とＭＬＫＬ、ＴＲＡＩＬＲ１とガスダーミンＡ、ＴＲＡＩＬＲ１とガスダーミンＢ、ＴＲＡＩＬＲ１とガスダーミンＣ、ＴＲＡＩＬＲ１とガスダーミンＤ、ＴＲＡＩＬＲ１とガスダーミンＥ、ＴＲＡＩＬＲ２とＦＡＳ、ＴＲＡＩＬＲ２とＢａｘ、ＴＲＡＩＬＲ２とＢａｋ、ＴＲＡＩＬＲ２とＢｉｍ、ＴＲＡＩＬＲ２とＢｉｄ、ＴＲＡＩＬＲ２とＮｏｘａ、ＴＲＡＩＬＲ２とＰｕｍａ、ＴＲＡＩＬＲ２とＴＲＩＦ、ＴＲＡＩＬＲ２とＺＢＰ１、ＴＲＡＩＬＲ２とＲＩＰＫ１、ＴＲＡＩＬＲ２とＲＩＰＫ３、ＴＲＡＩＬＲ２とＭＬＫＬ、ＴＲＡＩＬＲ２とガスダーミンＡ、ＴＲＡＩＬＲ２とガスダーミンＢ、ＴＲＡＩＬＲ２とガスダーミンＣ、ＴＲＡＩＬＲ２とガスダーミンＤ、ＴＲＡＩＬＲ２とガスダーミンＥ、ＦＡＳとＢａｘ、ＦＡＳとＢａｋ、ＦＡＳとＢｉｍ、ＦＡＳとＢｉｄ、ＦＡＳとＮｏｘａ、ＦＡＳとＰｕｍａ、ＦＡＳとＴＲＩＦ、ＦＡＳとＺＢＰ１、ＦＡＳとＲＩＰＫ１、ＦＡＳとＲＩＰＫ３、ＦＡＳとＭＬＫＬ、ＦＡＳとガスダーミンＡ、ＦＡＳとガスダーミンＢ、ＦＡＳとガスダーミンＣ、ＦＡＳとガスダーミンＤ、ＦＡＳとガスダーミンＥ、ＢａｘとＢａｋ、ＢａｘとＢｉｍ、ＢａｘとＢｉｄ、ＢａｘとＮｏｘａ、ＢａｘとＰｕｍａ、ＢａｘとＴＲＩＦ、ＢａｘとＺＢＰ１、ＢａｘとＲＩＰＫ１、ＢａｘとＲＩＰＫ３、ＢａｘとＭＬＫＬ、ＢａｘとガスダーミンＡ、ＢａｘとガスダーミンＢ、ＢａｘとガスダーミンＣ、ＢａｘとガスダーミンＤ、ＢａｘとガスダーミンＥ、ＢａｋとＢｉｍ、ＢａｋとＢｉｄ、ＢａｋとＮｏｘａ、ＢａｋとＰｕｍａ、ＢａｋとＴＲＩＦ、ＢａｋとＺＢＰ１、ＢａｋとＲＩＰＫ１、ＢａｋとＲＩＰＫ３、ＢａｋとＭＬＫＬ、ＢａｋとガスダーミンＡ、ＢａｋとガスダーミンＢ、ＢａｋとガスダーミンＣ、ＢａｋとガスダーミンＤ、ＢａｋとガスダーミンＥ、ＢｉｍとＢｉｄ、ＢｉｍとＮｏｘａ、ＢｉｍとＰｕｍａ、ＢｉｍとＴＲＩＦ、ＢｉｍとＺＢＰ１、ＢｉｍとＲＩＰＫ１、ＢｉｍとＲＩＰＫ３、ＢｉｍとＭＬＫＬ、ＢｉｍとガスダーミンＡ、ＢｉｍとガスダーミンＢ、ＢｉｍとガスダーミンＣ、ＢｉｍとガスダーミンＤ、ＢｉｍとガスダーミンＥ、ＢｉｄとＮｏｘａ、ＢｉｄとＰｕｍａ、ＢｉｄとＴＲＩＦ、ＢｉｄとＺＢＰ１、ＢｉｄとＲＩＰＫ１、ＢｉｄとＲＩＰＫ３、ＢｉｄとＭＬＫＬ、ＢｉｄとガスダーミンＡ、ＢｉｄとガスダーミンＢ、ＢｉｄとガスダーミンＣ、ＢｉｄとガスダーミンＤ、ＢｉｄとガスダーミンＥ、ＮｏｘａとＰｕｍａ、ＮｏｘａとＴＲＩＦ、ＮｏｘａとＺＢＰ１、ＮｏｘａとＲＩＰＫ１、ＮｏｘａとＲＩＰＫ３、ＮｏｘａとＭＬＫＬ、ＮｏｘａとガスダーミンＡ、ＮｏｘａとガスダーミンＢ、ＮｏｘａとガスダーミンＣ、ＮｏｘａとガスダーミンＤ、ＮｏｘａとガスダーミンＥ、ＰｕｍａとＴＲＩＦ、ＰｕｍａとＺＢＰ１、ＰｕｍａとＲＩＰＫ１、ＰｕｍａとＲＩＰＫ３、ＰｕｍａとＭＬＫＬ、ＰｕｍａとガスダーミンＡ、ＰｕｍａとガスダーミンＢ、ＰｕｍａとガスダーミンＣ、ＰｕｍａとガスダーミンＤ、ＰｕｍａとガスダーミンＥ、ＴＲＩＦとＺＢＰ１、ＴＲＩＦとＲＩＰＫ１、ＴＲＩＦとＲＩＰＫ３、ＴＲＩＦとＭＬＫＬ、ＴＲＩＦとガスダーミンＡ、ＴＲＩＦとガスダーミンＢ、ＴＲＩＦとガスダーミンＣ、ＴＲＩＦとガスダーミンＤ、ＴＲＩＦとガスダーミンＥ、ＺＢＰ１とＲＩＰＫ１、ＺＢＰ１とＲＩＰＫ３、ＺＢＰ１とＭＬＫＬ、ＺＢＰ１とガスダーミンＡ、ＺＢＰ１とガスダーミンＢ、ＺＢＰ１とガスダーミンＣ、ＺＢＰ１とガスダーミンＤ、ＺＢＰ１とガスダーミンＥ、ＲＩＰＫ１とＲＩＰＫ３、ＲＩＰＫ１とＭＬＫＬ、ＲＩＰＫ１とガスダーミンＡ、ＲＩＰＫ１とガスダーミンＢ、ＲＩＰＫ１とガスダーミンＣ、ＲＩＰＫ１とガスダーミンＤ、ＲＩＰＫ１とガスダーミンＥ、ＲＩＰＫ３とＭＬＫＬ、ＲＩＰＫ３とガスダーミンＡ、ＲＩＰＫ３とガスダーミンＢ、ＲＩＰＫ３とガスダーミンＣ、ＲＩＰＫ３とガスダーミンＤ、ＲＩＰＫ３とガスダーミンＥ、ＭＬＫＬとガスダーミンＡ、ＭＬＫＬとガスダーミンＢ、ＭＬＫＬとガスダーミンＣ、ＭＬＫＬとガスダーミンＤ、ＭＬＫＬとガスダーミンＥ、ガスダーミンＡとガスダーミンＢ、ガスダーミンＡとガスダーミンＣ、ガスダーミンＡとガスダーミンＤ、ガスダーミンＡとガスダーミンＥ、ガスダーミンＢとガスダーミンＣ、ガスダーミンＢとガスダーミンＤ、ガスダーミンＢとガスダーミンＥ、ガスダーミンＣとガスダーミンＤ、ガスダーミンＣとガスダーミンＥ、ガスダーミンＤとガスダーミンＥ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＤＤ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＦ２、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＦ６、ＴＮＦＳＦタンパク質とｃＩＡＰ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とｃＩＡＰ２、ＴＮＦＳＦタンパク質とＸＩＡＰ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＮＯＤ２、ＴＮＦＳＦタンパク質とＭｙＤ８８、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＭ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＨＯＩＬ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＨＯＩＰ、ＴＮＦＳＦタンパクとシャーピン、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＫＫｇ、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＫＫａ、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＫＫｂ、ＴＮＦＳＦタンパクとＲｅｌＡ、ＴＮＦＳＦタンパクとＭＡＶＳ、ＴＮＦＳＦタンパクとＲＩＧＩ、ＴＮＦＳＦタンパクとＭＤＡ５、ＴＮＦＳＦタンパクとＴａｋ１、ＴＮＦＳＦタンパクとＴＢＫ１、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＫＫｅ、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＲＦ３、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＲＦ７、ＴＮＦＳＦタンパクとＩＲＦ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＦ３、ＴＮＦＳＦタンパク質とカスパーゼ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＦＡＤＤ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＮＦＲ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＮＦＳＦタンパク質とＦＡＳ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＢａｘ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＢａｋ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＢｉｍ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＢｉｄ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＮｏｘａ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＰｕｍａ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＴＲＩＦ、ＴＮＦＳＦタンパク質とＺＢＰ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とＲＩＰＫ１、ＴＮＦＳＦタンパク質とＲＩＰＫ３、ＴＮＦＳＦタンパク質とＭＬＫＬ、ＴＮＦＳＦタンパク質とガスダーミンＡ、ＴＮＦＳＦタンパク質とガスダーミンＢ、ＴＮＦＳＦタンパク質とガスダーミンＣ、ＴＮＦＳＦタンパク質とガスダーミンＤ、ＴＮＦＳＦタンパク質とガスダーミンＥ、並びにそれらの変異体及びそれらの機能性断片。
ＨＯＩＰとシャーピン、ＨＯＩＰとＩＫＫｇ、ＨＯＩＰとＩＫＫａ、ＨＯＩＰとＩＫＫｂ、ＨＯＩＰとＲｅｌＡ、ＨＯＩＰとＭＡＶＳ、ＨＯＩＰとＲＩＧＩ、ＨＯＩＰとＭＤＡ５、ＨＯＩＰとＴａｋ１、ＨＯＩＰとＴＢＫ１、ＨＯＩＰとＩＫＫｅ、ＨＯＩＰとＩＲＦ３、ＨＯＩＰとＩＲＦ７、ＨＯＩＰとＩＲＦ１、ＨＯＩＰとＴＲＡＦ３、ＨＯＩＰとカスパーゼ、ＨＯＩＰとＦＡＤＤ、ＨＯＩＰとＴＮＦＲ１、ＨＯＩＰとＴＲＡＩＬＲ１、ＨＯＩＰとＴＲＡＩＬＲ２、ＨＯＩＰとＦＡＳ、ＨＯＩＰとＢａｘ、ＨＯＩＰとＢａｋ、ＨＯＩＰとＢｉｍ、ＨＯＩＰとＢｉｄ、ＨＯＩＰとＮｏｘａ、ＨＯＩＰとＰｕｍａ、ＨＯＩＰとＴＲＩＦ、ＨＯＩＰとＺＢＰ１、ＨＯＩＰとＲＩＰＫ１、ＨＯＩＰとＲＩＰＫ３、ＨＯＩＰとＭＬＫＬ、ＨＯＩＰとガスダーミンＡ、ＨＯＩＰとガスダーミンＢ、ＨＯＩＰとガスダーミンＣ、ＨＯＩＰとガスダーミンＤ、ＨＯＩＰとガスダーミンＥ、シャーピンとＩＫＫｇ、シャーピンとＩＫＫａ、シャーピンとＩＫＫｂ、シャーピンとＲｅｌＡ、シャーピンとＭＡＶＳ、シャーピンとＲＩＧＩ、シャーピンとＭＤＡ５、シャーピンとＴａｋ１、シャーピンとＴＢＫ１、シャーピンとＩＫＫｅ、シャーピンとＩＲＦ３、シャーピンとＩＲＦ７、シャーピンとＩＲＦ１、シャーピンとＴＲＡＦ３、シャーピンとカスパーゼ、シャーピンとＦＡＤＤ、シャーピンとＴＮＦＲ１、シャーピンとＴＲＡＩＬＲ１、シャーピンとＴＲＡＩＬＲ２、シャーピンとＦＡＳ、シャーピンとＢａｘ、シャーピンとＢａｋ、シャーピンとＢｉｍ、シャーピンとＢｉｄ、シャーピンとＮｏｘａ、シャーピンとＰｕｍａ、シャーピンとＴＲＩＦ、シャーピンとＺＢＰ１、シャーピンとＲＩＰＫ１、シャーピンとＲＩＰＫ３、シャーピンとＭＬＫＬ、シャーピンとガスダーミンＡ、シャーピンとガスダーミンＢ、シャーピンとガスダーミンＣ、シャーピンとガスダーミンＤ、シャーピンとガスダーミンＥ、ＩＫＫｇとＩＫＫａ、ＩＫＫｇとＩＫＫｂ、ＩＫＫｇとＲｅｌＡ、ＩＫＫｇとＭＡＶＳ、ＩＫＫｇとＲＩＧＩ、ＩＫＫｇとＭＤＡ５、ＩＫＫｇとＴａｋ１、ＩＫＫｇとＴＢＫ１、ＩＫＫｇとＩＫＫｅ、ＩＫＫｇとＩＲＦ３、ＩＫＫｇとＩＲＦ７、ＩＫＫｇとＩＲＦ１、ＩＫＫｇとＴＲＡＦ３、ＩＫＫｇとカスパーゼ、ＩＫＫｇとＦＡＤＤ、ＩＫＫｇとＴＮＦＲ１、ＩＫＫｇとＴＲＡＩＬＲ１、ＩＫＫｇとＴＲＡＩＬＲ２、ＩＫＫｇとＦＡＳ、ＩＫＫｇとＢａｘ、ＩＫＫｇとＢａｋ、ＩＫＫｇとＢｉｍ、ＩＫＫｇとＢｉｄ、ＩＫＫｇとＮｏｘａ、ＩＫＫｇとＰｕｍａ、ＩＫＫｇとＴＲＩＦ、ＩＫＫｇとＺＢＰ１、ＩＫＫｇとＲＩＰＫ１、ＩＫＫｇとＲＩＰＫ３、ＩＫＫｇとＭＬＫＬ、ＩＫＫｇとガスダーミンＡ、ＩＫＫｇとガスダーミンＢ、ＩＫＫｇとガスダーミンＣ、ＩＫＫｇとガスダーミンＤ、ＩＫＫｇとガスダーミンＥ、ＩＫＫａとＩＫＫｂ、ＩＫＫａとＲｅｌＡ、ＩＫＫａとＭＡＶＳ、ＩＫＫａとＲＩＧＩ、ＩＫＫａとＭＤＡ５、ＩＫＫａとＴａｋ１、ＩＫＫａとＴＢＫ１、ＩＫＫａとＩＫＫｅ、ＩＫＫａとＩＲＦ３、ＩＫＫａとＩＲＦ７、ＩＫＫａとＩＲＦ１、ＩＫＫａとＴＲＡＦ３、ＩＫＫａとカスパーゼ、ＩＫＫａとＦＡＤＤ、ＩＫＫａとＴＮＦＲ１、ＩＫＫａとＴＲＡＩＬＲ１、ＩＫＫａとＴＲＡＩＬＲ２、ＩＫＫａとＦＡＳ、ＩＫＫａとＢａｘ、ＩＫＫａとＢａｋ、ＩＫＫａとＢｉｍ、ＩＫＫａとＢｉｄ、ＩＫＫａとＮｏｘａ、ＩＫＫａとＰｕｍａ、ＩＫＫａとＴＲＩＦ、ＩＫＫａとＺＢＰ１、ＩＫＫａとＲＩＰＫ１、ＩＫＫａとＲＩＰＫ３、ＩＫＫａとＭＬＫＬ、ＩＫＫａとガスダーミンＡ、ＩＫＫａとガスダーミンＢ、ＩＫＫａとガスダーミンＣ、ＩＫＫａとガスダーミンＤ、ＩＫＫａとガスダーミンＥ、ＩＫＫｂとＲｅｌＡ、ＩＫＫｂとＭＡＶＳ、ＩＫＫｂとＲＩＧＩ、ＩＫＫｂとＭＤＡ５、ＩＫＫｂとＴａｋ１、ＩＫＫｂとＴＢＫ１、ＩＫＫｂとＩＫＫｅ、ＩＫＫｂとＩＲＦ３、ＩＫＫｂとＩＲＦ７、ＩＫＫｂとＩＲＦ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＦ３、ＩＫＫｂとカスパーゼ、ＩＫＫｂとＦＡＤＤ、ＩＫＫｂとＴＮＦＲ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＩＬＲ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＩＬＲ２、ＩＫＫｂとＦＡＳ、ＩＫＫｂとＢａｘ、ＩＫＫｂとＢａｋ、ＩＫＫｂとＢｉｍ、ＩＫＫｂとＢｉｄ、ＩＫＫｂとＮｏｘａ、ＩＫＫｂとＰｕｍａ、ＩＫＫｂとＴＲＩＦ、ＩＫＫｂとＺＢＰ１、ＩＫＫｂとＲＩＰＫ１、ＩＫＫｂとＲＩＰＫ３、ＩＫＫｂとＭＬＫＬ、ＩＫＫｂとガスダーミンＡ、ＩＫＫｂとガスダーミンＢ、ＩＫＫｂとガスダーミンＣ、ＩＫＫｂとガスダーミンＤ、ＩＫＫｂとガスダーミンＥ、ＩＫＫｂとＲｅｌＡ、ＩＫＫｂとＭＡＶＳ、ＩＫＫｂとＲＩＧＩ、ＩＫＫｂとＭＤＡ５、ＩＫＫｂとＴａｋ１、ＩＫＫｂとＴＢＫ１、ＩＫＫｂとＩＫＫｅ、ＩＫＫｂとＩＲＦ３、ＩＫＫｂとＩＲＦ７、ＩＫＫｂとＩＲＦ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＦ３、ＩＫＫｂとカスパーゼ、ＩＫＫｂとＦＡＤＤ、ＩＫＫｂとＴＮＦＲ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＩＬＲ１、ＩＫＫｂとＴＲＡＩＬＲ２、ＩＫＫｂとＦＡＳ、ＩＫＫｂとＢａｘ、ＩＫＫｂとＢａｋ、ＩＫＫｂとＢｉｍ、ＩＫＫｂとＢｉｄ、ＩＫＫｂとＮｏｘａ、ＩＫＫｂとＰｕｍａ、ＩＫＫｂとＴＲＩＦ、ＩＫＫｂとＺＢＰ１、ＩＫＫｂとＲＩＰＫ１、ＩＫＫｂとＲＩＰＫ３、ＩＫＫｂとＭＬＫＬ、ＩＫＫｂとガスダーミンＡ、ＩＫＫｂとガスダーミンＢ、ＩＫＫｂとガスダーミンＣ、ＩＫＫｂとガスダーミンＤ、ＩＫＫｂとガスダーミンＥ、ＲｅｌＡとＭＡＶＳ、ＲｅｌＡとＲＩＧＩ、ＲｅｌＡとＭＤＡ５、ＲｅｌＡとＴａｋ１、ＲｅｌＡとＴＢＫ１、ＲｅｌＡとＩＫＫｅ、ＲｅｌＡとＩＲＦ３、ＲｅｌＡとＩＲＦ７、ＲｅｌＡとＩＲＦ１、ＲｅｌＡとＴＲＡＦ３、ＲｅｌＡとカスパーゼ、ＲｅｌＡとＦＡＤＤ、ＲｅｌＡとＴＮＦＲ１、ＲｅｌＡとＴＲＡＩＬＲ１、ＲｅｌＡとＴＲＡＩＬＲ２、ＲｅｌＡとＦＡＳ、ＲｅｌＡとＢａｘ、ＲｅｌＡとＢａｋ、ＲｅｌＡとＢｉｍ、ＲｅｌＡとＢｉｄ、ＲｅｌＡとＮｏｘａ、ＲｅｌＡとＰｕｍａ、ＲｅｌＡとＴＲＩＦ、ＲｅｌＡとＺＢＰ１、ＲｅｌＡとＲＩＰＫ１、ＲｅｌＡとＲＩＰＫ３、ＲｅｌＡとＭＬＫＬ、ＲｅｌＡとガスダーミンＡ、ＲｅｌＡとガスダーミンＢ、ＲｅｌＡとガスダーミンＣ、ＲｅｌＡとガスダーミンＤ、ＲｅｌＡとガスダーミンＥ、ＭＡＶＳとＲＩＧＩ、ＭＡＶＳとＭＤＡ５、ＭＡＶＳとＴａｋ１、ＭＡＶＳとＴＢＫ１、ＭＡＶＳとＩＫＫｅ、ＭＡＶＳとＩＲＦ３、ＭＡＶＳとＩＲＦ７、ＭＡＶＳとＩＲＦ１、ＭＡＶＳとＴＲＡＦ３、ＭＡＶＳとカスパーゼ、ＭＡＶＳとＦＡＤＤ、ＭＡＶＳとＴＮＦＲ１、ＭＡＶＳとＴＲＡＩＬＲ１、ＭＡＶＳとＴＲＡＩＬＲ２、ＭＡＶＳとＦＡＳ、ＭＡＶＳとＢａｘ、ＭＡＶとＢａｋ、ＭＡＶとＢｉｍ、ＭＡＶＳとＢｉｄ、ＭＡＶＳとＮｏｘａ、ＭＡＶＳとＰｕｍａ、ＭＡＶＳとＴＲＩＦ、ＭＡＶＳとＺＢＰ１、ＭＡＶＳとＲＩＰＫ１、ＭＡＶＳとＲＩＰＫ３、ＭＡＶＳとＭＬＫＬ、ＭＡＶＳとガスダーミンＡ、ＭＡＶＳとガスダーミンＢ、ＭＡＶＳとガスダーミンＣ、ＭＡＶＳとガスダーミンＤ、ＭＡＶＳとガスダーミンＥ、ＲＩＧＩとＭＤＡ５、ＲＩＧＩとＴａｋ１、ＲＩＧＩとＴＢＫ１、ＲＩＧＩとＩＫＫｅ、ＲＩＧＩとＩＲＦ３、ＲＩＧＩとＩＲＦ７、ＲＩＧＩとＩＲＦ１、ＲＩＧＩとＴＲＡＦ３、ＲＩＧＩとカスパーゼ、ＲＩＧＩとＦＡＤＤ、ＲＩＧＩとＴＮＦＲ１、ＲＩＧＩとＴＲＡＩＬＲ１、ＲＩＧＩとＴＲＡＩＬＲ２、ＲＩＧＩとＦＡＳ、ＲＩＧＩとＢａｘ、ＲＩＧＩとＢａｋ、ＲＩＧＩとＢｉｍ、ＲＩＧＩとＢｉｄ、ＲＩＧＩとＮｏｘａ、ＲＩＧＩとＰｕｍａ、ＲＩＧＩとＴＲＩＦ、ＲＩＧＩとＺＢＰ１、ＲＩＧＩとＲＩＰＫ１、ＲＩＧＩとＲＩＰＫ３、ＲＩＧＩとＭＬＫＬ、ＲＩＧＩとガスダーミンＡ、ＲＩＧＩとガスダーミンＢ、ＲＩＧＩとガスダーミンＣ、ＲＩＧＩとガスダーミンＤ、ＲＩＧＩとガスダーミンＥ、ＭＤＡ５とＴａｋ１、ＭＤＡ５とＴＢＫ１、ＭＤＡ５とＩＫＫｅ、ＭＤＡ５とＩＲＦ３、ＭＤＡ５とＩＲＦ７、ＭＤＡ５とＩＲＦ１、ＭＤＡ５とＴＲＡＦ３、ＭＤＡ５とカスパーゼ、ＭＤＡ５とＦＡＤＤ、ＭＤＡ５とＴＮＦＲ１、ＭＤＡ５とＴＲＡＩＬＲ１、ＭＤＡ５とＴＲＡＩＬＲ２、ＭＤＡ５とＦＡＳ、ＭＤＡ５とＢａｘ、ＭＤＡ５とＢａｋ、ＭＤＡ５とＢｉｍ、ＭＤＡ５とＢｉｄ、ＭＤＡ５とＮｏｘａ、ＭＤＡ５とＰｕｍａ、ＭＤＡ５とＴＲＩＦ、ＭＤＡ５とＺＢＰ１、ＭＤＡ５とＲＩＰＫ１、ＭＤＡ５とＲＩＰＫ３、ＭＤＡ５とＭＬＫＬ、ＭＤＡ５とガスダーミンＡ、ＭＤＡ５とガスダーミンＢ、ＭＤＡ５とガスダーミンＣ、ＭＤＡ５とガスダーミンＤ、ＭＤＡ５とガスダーミンＥ、Ｔａｋ１とＴＢＫ１、Ｔａｋ１とＩＫＫｅ、Ｔａｋ１とＩＲＦ３、Ｔａｋ１とＩＲＦ７、Ｔａｋ１とＩＲＦ１、Ｔａｋ１とＴＲＡＦ３、Ｔａｋ１とカスパーゼ、Ｔａｋ１とＦＡＤＤ、Ｔａｋ１とＴＮＦＲ１、Ｔａｋ１とＴＲＡＩＬＲ１、Ｔａｋ１とＴＲＡＩＬＲ２、Ｔａｋ１とＦＡＳ、Ｔａｋ１とＢａｘ、Ｔａｋ１とＢａｋ、Ｔａｋ１とＢｉｍ、Ｔａｋ１とＢｉｄ、Ｔａｋ１とＮｏｘａ、Ｔａｋ１とＰｕｍａ、Ｔａｋ１とＴＲＩＦ、Ｔａｋ１とＺＢＰ１、Ｔａｋ１とＲＩＰＫ１、Ｔａｋ１とＲＩＰＫ３、Ｔａｋ１とＭＬＫＬ、Ｔａｋ１とガスダーミンＡ、Ｔａｋ１とガスダーミンＢ、Ｔａｋ１とガスダーミンＣ、Ｔａｋ１とガスダーミンＤ、Ｔａｋ１とガスダーミンＥ、ＴＢＫ１とＩＫＫｅ、ＴＢＫ１とＩＲＦ３、ＴＢＫ１とＩＲＦ７、ＴＢＫ１とＩＲＦ１、ＴＢＫ１とＴＲＡＦ３、ＴＢＫ１とカスパーゼ、ＴＢＫ１とＦＡＤＤ、ＴＢＫ１とＴＮＦＲ１、ＴＢＫ１とＴＲＡＩＬＲ１、ＴＢＫ１とＴＲＡＩＬＲ２、ＴＢＫ１とＦＡＳ、ＴＢＫ１とＢａｘ、ＴＢＫ１とＢａｋ、ＴＢＫ１とＢｉｍ、ＴＢＫ１とＢｉｄ、ＴＢＫ１とＮｏｘａ、ＴＢＫ１とＰｕｍａ、ＴＢＫ１とＴＲＩＦ、ＴＢＫ１とＺＢＰ１、ＴＢＫ１とＲＩＰＫ１、ＴＢＫ１とＲＩＰＫ３、ＴＢＫ１とＭＬＫＬ、ＴＢＫ１とガスダーミンＡ、ＴＢＫ１とガスダーミンＢ、ＴＢＫ１とガスダーミンＣ、ＴＢＫ１とガスダーミンＤ、ＴＢＫ１とガスダーミンＥ、ＩＫＫｅとＩＲＦ３、ＩＫＫｅとＩＲＦ７、ＩＫＫｅとＩＲＦ１、ＩＫＫｅとＴＲＡＦ３、ＩＫＫｅとカスパーゼ、ＩＫＫｅとＦＡＤＤ、ＩＫＫｅとＴＮＦＲ１、ＩＫＫｅとＴＲＡＩＬＲ１、ＩＫＫｅとＴＲＡＩＬＲ２、ＩＫＫｅとＦＡＳ、ＩＫＫｅとＢａｘ、ＩＫＫｅとＢａｋ、ＩＫＫｅとＢｉｍ、ＩＫＫｅとＢｉｄ、ＩＫＫｅとＮｏｘａ、ＩＫＫｅとＰｕｍａ、ＩＫＫｅとＴＲＩＦ、ＩＫＫｅとＺＢＰ１、ＩＫＫｅとＲＩＰＫ１、ＩＫＫｅとＲＩＰＫ３、ＩＫＫｅとＭＬＫＬ、ＩＫＫｅとガスダーミンＡ、ＩＫＫｅとガスダーミンＢ、ＩＫＫｅとガスダーミンＣ、ＩＫＫｅとガスダーミンＤ、ＩＫＫｅとガスダーミンＥ、ＩＲＦ３とＩＲＦ７、ＩＲＦ３とＩＲＦ１、ＩＲＦ３とＴＲＡＦ３、ＩＲＦ３とカスパーゼ、ＩＲＦ３とＦＡＤＤ、ＩＲＦ３とＴＮＦＲ１、ＩＲＦ３とＴＲＡＩＬＲ１、ＩＲＦ３とＴＲＡＩＬＲ２、ＩＲＦ３とＦＡＳ、ＩＲＦ３とＢａｘ、ＩＲＦ３とＢａｋ、ＩＲＦ３とＢｉｍ、ＩＲＦ３とＢｉｄ、ＩＲＦ３とＮｏｘａ、ＩＲＦ３とＰｕｍａ、ＩＲＦ３とＴＲＩＦ、ＩＲＦ３とＺＢＰ１、ＩＲＦ３とＲＩＰＫ１、ＩＲＦ３とＲＩＰＫ３、ＩＲＦ３とＭＬＫＬ、ＩＲＦ３とガスダーミンＡ、ＩＲＦ３とガスダーミンＢ、ＩＲＦ３とガスダーミンＣ、ＩＲＦ３とガスダーミンＤ、ＩＲＦ３とガスダーミンＥ、ＩＲＦ７とＩＲＦ１、ＩＲＦ７とＴＲＡＦ３、ＩＲＦ７とカスパーゼ、ＩＲＦ７とＦＡＤＤ、ＩＲＦ７とＴＮＦＲ１、ＩＲＦ７とＴＲＡＩＬＲ１、ＩＲＦ７とＴＲＡＩＬＲ２、ＩＲＦ７とＦＡＳ、ＩＲＦ７とＢａｘ、ＩＲＦ７とＢａｋ、ＩＲＦ７とＢｉｍ、ＩＲＦ７とＢｉｄ、ＩＲＦ７とＮｏｘａ、ＩＲＦ７とＰｕｍａ、ＩＲＦ７とＴＲＩＦ、ＩＲＦ７とＺＢＰ１、ＩＲＦ７とＲＩＰＫ１、ＩＲＦ７とＲＩＰＫ３、ＩＲＦ７とＭＬＫＬ、ＩＲＦ７とガスダーミンＡ、ＩＲＦ７とガスダーミンＢ、ＩＲＦ７とガスダーミンＣ、ＩＲＦ７とガスダーミンＤ、ＩＲＦ７とガスダーミンＥ、
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【0130】
特定の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0131】
特定の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0132】
特定の実施形態では、１つ又は複数のタノトランスミッションポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片を含み、１つ又は複数のポリヌクレオチドによってコードされるタノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片を含む。
【0133】
特定の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0134】
特定の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＬＫＬ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0135】
一部の実施形態では、Ｂｉｄの機能性断片は、短縮型Ｂｉｄ（ｔＢＩＤ）である。ＴＮＦＲ１／Ｆａｓの関与により、細胞質ゾルＢｉｄの切断が起こり、短縮型のｔＢＩＤが形成され、これは、ミトコンドリアに転位する。ｔＢＩＤポリペプチドは、膜標的細胞死リガンドとして機能する。Ｂａｋ欠損ミトコンドリア及び遮断抗体により、ｔＢＩＤがそのミトコンドリアパートナーＢＡＫに結合して、シトクロムｃを放出することが明らかにされる。活性化されたｔＢＩＤは、ＢＡＫのアロステリック活性化をもたらし、その膜内オリゴマー化をシトクロムｃ放出のために提示された細孔に誘導し、細胞死受容体から細胞死までの経路を統合する。Ｗｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｇｅｎｅｓ ＆ Ｄｅｖ．１４：２０６０－２０７１を参照。
【0136】
特定の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ｔＢＩＤ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0137】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドを含むように操作されたウイルスは、ＴＲＩＦをコードするポリヌクレオチドを含まない。
【0138】
操作されたウイルスに含まれるさらなるポリヌクレオチドを以下に記載する。
【0139】
カスパーゼ阻害剤
操作されたウイルスは、標的細胞におけるカスパーゼ活性を阻害する１つ又は複数のポリヌクレオチドをさらに含み得る。一部の実施形態では、標的細胞においてカスパーゼ活性を阻害するポリヌクレオチドは、標的細胞に内因性である１つ又は複数のカスパーゼの発現又は活性を低減する。カスパーゼの発現を低減するポリヌクレオチドとして、限定するものではないが、アンチセンスＤＮＡ分子、アンチセンスＲＮＡ分子、二本鎖ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、又はクラスター化され、規則的に間隔をあけて配置された短い回文配列の反復（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連（Ｃａｓ）（ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ）システムガイドＲＮＡを含み得る。
操作されたウイルスは、標的細胞におけるカスパーゼ活性を阻害する１つ又は複数のポリヌクレオチドをさらに含み得る。一部の実施形態では、標的細胞においてカスパーゼ活性を阻害するポリヌクレオチドは、標的細胞に内因性である１つ又は複数のカスパーゼの発現又は活性を低減する。カスパーゼの発現を低減するポリヌクレオチドとして、限定するものではないが、アンチセンスＤＮＡ分子、アンチセンスＲＮＡ分子、二本鎖ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、又はクラスター化され、規則的に間隔をあけて配置された短い回文配列の反復（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連（Ｃａｓ）（ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ）システムガイドＲＮＡを含み得る。
【0140】
一部の実施形態では、標的細胞においてカスパーゼ活性を阻害するポリヌクレオチドは、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドをコードする。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ウイルスタンパク質又はその変異体若しくは機能性断片である。例示的なウイルスタンパク質カスパーゼ阻害剤は、以下の表６に提供される。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ヒトタンパク質又はその変異体若しくは機能性断片である。一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、カスパーゼ１、カスパーゼ２、カスパーゼ３、カスパーゼ４、カスパーゼ５、カスパーゼ６、カスパーゼ７、カスパーゼ８、カスパーゼ９及びカスパーゼ１０からなる群から選択される１つ又は複数のカスパーゼを阻害する。特定の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、カスパーゼ８を阻害する。特定の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、カスパーゼ１０を阻害する。特定の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、カスパーゼ８及びカスパーゼ１０を阻害する。
【0141】
【表6】
【0142】
一部の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、以下：Ｆａｓ関連死ドメインタンパク質（ＦＡＤＤ）ドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＮ）、カスパーゼ８活性化のウイルス阻害剤（ｖＩＣＡ）、細胞ＦＬＩＣＥ（ＦＡＤＤ様ＩＬ－１β変換酵素）－阻害性タンパク質（ｃＦＬＩＰ）、カスパーゼ８ドミナントネガティブ変異体（Ｃａｓｐ８－ＤＮ）、アポトーシスタンパク質－１の細胞阻害剤（ｃＩＡＰ１）、アポトーシスタンパク質－１の細胞阻害剤（ｃＩＡＰ２）、アポトーシスのＸ連鎖阻害剤（ＸＩＡＰ）、ＴＧＦβ活性化キナーゼ１（Ｔａｋ１）、ＩκＢキナーゼ（ＩＫＫ）、及びそれらの機能性断片からなる群から選択される。
【0143】
特定の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ＦＡＤＤ－ＤＮである。細胞死誘導シグナル伝達複合体（ＤＩＳＣ）は、ＦＡＤＤなどのアダプタータンパク質とカスパーゼ８などの誘導型カスパーゼを動員する。Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ＆ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ８，ｐａｇｅ ６９６－７０５を参照されたい。ＤＩＳＣへのカスパーゼ８の凝集は、カスパーゼカスケード及びアポトーシスの活性化をもたらす。ＦＡＤＤは、デスドメインとデスエフェクタードメインの２つのタンパク質相互作用ドメインから構成される。ＦＡＤＤは、ＤＩＳＣの必須成分であるため、細胞死ドメインを含むが、細胞死エフェクタードメインを含まないドミナントネガティブ変異体（ＦＡＤＤ－ＤＮ）は、細胞死受容体誘発アポトーシスの研究で広く使用されている。ＦＡＤＤ－ＤＮは、受容体に結合するが、カスパーゼ８を動員することができないため、ドミナントネガティブ阻害剤として機能する。
【0144】
特定の実施形態では、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ｖＩＣＡである。ｖＩＣＡタンパク質は、ＵＬ３６遺伝子によってコードされるヒトサイトメガロウイルス（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）（ＣＭＶ）タンパク質である。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｋａｌｅｔｓｋａｙａ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ Ｊｕｌｙ ３，２００１ ９８（１４）７８２９－７８３４を参照されたい。ｖＩＣＡタンパク質は、カスパーゼ－８のプロドメインに結合して、その活性化を妨げることにより、Ｆａｓ媒介性アポトーシスを阻害する。
【0145】
特定の実施形態において、カスパーゼ活性を阻害するポリペプチドは、ｃＦＬＩＰである。ｃＦＬＩＰタンパク質は、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）、Ｆａｓ－Ｌ、及びＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）誘発アポトーシスを抑制するマスター抗アポトーシス調節因子及び耐性因子である。参照により本明細書に全体が組み込まれる、Ｓａｆａ，２０１２，Ｅｘｐ Ｏｎｃｏｌ Ｏｃｔ；３４（３）：１７６－８４を参照されたい。ｃＦＬＩＰタンパク質は、ヒト細胞において長鎖（ｃＦＬＩＰ（Ｌ））、短鎖（ｃＦＬＩＰ（Ｓ））、及びｃＦＬＩＰ（Ｒ）スプライス変異体として発現される。ｃＦＬＩＰタンパク質は、リガンド依存性及び非依存性様式で、ＦＡＤＤ及び／又はカスパーゼ－８若しくは１０及びＴＲＡＩＬ受容体５（ＤＲ５）に結合し、アポトーシス阻害性複合体（ＡＩＣ）を形成する。この相互作用は、次に、細胞死誘導グナル伝達複合体（ＤＩＳＣ）の形成と、それに続くカスパーゼカスケードの活性化を阻止する。ｃ－ＦＬＩＰ（Ｌ）及びｃ－ＦＬＩＰ（Ｓ）は、様々なシグナル伝達経路で多機能な役割を果たすことも知られている。特定の実施形態では、ｃＦＬＩＰは、ｃＦＬＩＰ（Ｌ）である。特定の実施形態では、ｃＦＬＩＰは、ｃＦＬＩＰ（Ｓ）である。
【0146】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＦＡＤＤ－ＤＮ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0147】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ｖＩＣＡ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0148】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ｃＦＬＩＰ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0149】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＦＡＤＤ－ＤＮ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0150】
ガスダーミン
ガスダーミンは、膜透過及びパイロトーシスを引き起こす孔形成エフェクタータンパク質のファミリーである。ガスダーミンタンパク質には、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ及びガスダーミンＥが含まれる。ガスダーミンは、柔軟なリンカーによって連結された細胞傷害性Ｎ末端ドメインとＣ末端リプレッサードメインを含む。これら２つのドメイン間のタンパク質分解的切断は、細胞傷害性ドメインに対する分子内阻害を解除し、それを細胞膜内に挿入して、大きなオリゴマー孔の形成を可能にするが、これにより、イオン恒常性が崩壊して、細胞死が誘導される。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｂｒｏｚ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２０：１４３－１５７を参照されたい。例えば、ガスダーミンＥ（ＧＳＤＭＥ、別名：ＤＦＮＡ５）は、カスパーゼ３によって切断され得るが、それにより、ＧＳＤＭＥ発現細胞において非炎症性アポトーシスがパイロトーシスに変換される。同様に、カスパーゼ１、４及び５は、ガスダーミンＤを切断して活性化する。
ガスダーミンは、膜透過及びパイロトーシスを引き起こす孔形成エフェクタータンパク質のファミリーである。ガスダーミンタンパク質には、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ及びガスダーミンＥが含まれる。ガスダーミンは、柔軟なリンカーによって連結された細胞傷害性Ｎ末端ドメインとＣ末端リプレッサードメインを含む。これら２つのドメイン間のタンパク質分解的切断は、細胞傷害性ドメインに対する分子内阻害を解除し、それを細胞膜内に挿入して、大きなオリゴマー孔の形成を可能にするが、これにより、イオン恒常性が崩壊して、細胞死が誘導される。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｂｒｏｚ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２０：１４３－１５７を参照されたい。例えば、ガスダーミンＥ（ＧＳＤＭＥ、別名：ＤＦＮＡ５）は、カスパーゼ３によって切断され得るが、それにより、ＧＳＤＭＥ発現細胞において非炎症性アポトーシスがパイロトーシスに変換される。同様に、カスパーゼ１、４及び５は、ガスダーミンＤを切断して活性化する。
【0151】
２つ以上のタノトランスミッションポリペプチドをコードする核酸分子、又はベクター（例えば、ウイルス、プラスミド若しくはトランスポゾン）、細胞又は医薬組成物は、ガスダーミン又はその機能性断片若しくは変異体をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチド（例えば、機能性断片）を含んでもよい。一部の実施形態では、ガスダーミンの機能性断片は、ガスダーミンＡ、ガスダーミンＢ、ガスダーミンＣ、ガスダーミンＤ又はガスダーミンＥのＮ末端ドメインである。
【0152】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミン又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0153】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＴＲＩＦ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＲＩＰＫ３又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミンＥ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0154】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミンＤ Ｎ末端ドメイン又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0155】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミンＥ Ｎ末端ドメイン又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0156】
一部の実施形態では、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ＭＡＶＳ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ｔＢＩＤ又はその機能性断片若しくは変異体であり、タノトランスミッションポリペプチドの少なくとも１つは、ガスダーミンＥ又はその機能性断片若しくは変異体である。
【0157】
操作された免疫細胞で発現する追加のタンパク質
上記の表５に記載されるものなどのタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドに加えて、本明細書に開示される操作された免疫細胞は、免疫刺激タンパク質をコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドをさらに含み得る。一実施形態では、免疫刺激タンパク質は、トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦ－β）のアンタゴニスト、コロニー刺激因子、サイトカイン、免疫チェックポイントモジュレーター、ｆｌｔ３リガンド、又はｆｌｔ３の抗体アゴニストである。
上記の表５に記載されるものなどのタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドに加えて、本明細書に開示される操作された免疫細胞は、免疫刺激タンパク質をコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドをさらに含み得る。一実施形態では、免疫刺激タンパク質は、トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦ－β）のアンタゴニスト、コロニー刺激因子、サイトカイン、免疫チェックポイントモジュレーター、ｆｌｔ３リガンド、又はｆｌｔ３の抗体アゴニストである。
【0158】
コロニー刺激因子は、顆粒球－マクロファージコロニー－刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）であってもよい。一実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦをコードするポリヌクレオチドは、ＩＣＰ３４．５遺伝子座に挿入される。
【0159】
サイトカインは、インターロイキンであってもよい。一部の実施形態では、インターロイキンは、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＩＬ－２４、ＩＬ－３３、ＩＬ－３６α、ＩＬ－３６β及びＩＬ－３６γからなる群から選択される。さらに別の好適なサイトカインとしては、Ｉ型インターフェロン、インターフェロンγ、ＩＩＩ型インターフェロン及びＴＮＦαが挙げられる。
【0160】
一部の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、阻害性免疫チェックポイントタンパク質のアンタゴニストである。阻害性免疫チェックポイントタンパク質の例として、限定するものではないが、ＡＤＯＲＡ２Ａ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＫＩＲ、ＶＩＳＴＡ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＬＡＧ３、Ｔｉｍ３、ＢＴＬＡ及びＣＴＬＡ４が挙げられる。一部の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、刺激性免疫チェックポイントタンパク質のアゴニストである。刺激性免疫チェックポイントタンパク質の例として、限定するものではないが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ及び４－１ＢＢが挙げられる。一部の実施形態では、刺激性免疫チェックポイントタンパク質のアゴニストは、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）、ＩＣＯＳリガンド、ＧＩＴＲリガンド、４－１－ＢＢリガンド、０Ｘ４０リガンド及びそれらのいずれかの修飾形態から選択される。一部の実施形態では、刺激性免疫チェックポイントタンパク質のアゴニストは、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、ＧＩＴＲ、４－１－ＢＢ及び０Ｘ４０から選択されるタンパク質の抗体アゴニストである。
【0161】
上記の表５に記載されるものなどのタノトランスミッションを促進するポリペプチドをコードする１つ又は複数のポリヌクレオチドに加えて、本明細書に開示される操作された免疫細胞は、自殺遺伝子をさらに含み得る。用語「自殺遺伝子」とは、薬物の非毒性前駆体を細胞傷害性化合物に変換するタンパク質（例えば、酵素）をコードする遺伝子を指す。一部の実施形態では、自殺遺伝子は、ＦＫ５０６結合タンパク質（ＦＫＢＰ）－ＦＡＳ、ＦＫＢＰ－カスパーゼ－８、ＦＫＢＰ－カスパーゼ－９、シトシンデアミナーゼ（ＣＤａｓｅ）活性を有するポリペプチド、チミジンキナーゼ活性を有するポリペプチド、ウラシルホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＵＰＲＴａｓｅ）活性を有するポリペプチド、及びプリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性を有するポリペプチドからなる群から選択されるポリペプチドをコードする。
【0162】
一部の実施形態では、ＣＤａｓｅ活性を有するポリペプチドは、ＦＣＹ１、ＦＣＡ１又はＣｏｄＡである。
【0163】
一部の実施形態では、ＵＰＲＴａｓｅ活性を有するポリペプチドは、ＦＵＲ１又はその変異体、例えば、ＦＵＲ１Δ１０５である。ＦＵＲ１Δ１０５は、コード領域の５’領域の最初の１０５ヌクレオチドを欠失したＦＵＲ１遺伝子であり、これは、Ｎ末端で最初の３５アミノ酸残基が欠失したＵＰＲＴａｓｅの合成を可能にする。ＦＵＲ１Δ１０５は、天然タンパク質の３６位のメチオニンから開始する。
【0164】
自殺遺伝子は、融合タンパク質、例えば、ＣＤａｓｅ及びＵＰＲＴａｓｅ活性を有する融合タンパク質をコードし得る。一部の実施形態では、融合タンパク質は、以下：ｃｏｄＡ：：ｕｐｐ、ＦＣＹ１：：ＦＵＲ１、ＦＣＹｌ：：ＦＵＲ１Δ１０５（ＦＣＵ１）及びＦＣＵ１－８ポリペプチドから選択される。
【0165】
タノトランスミッションを阻害するポリペプチド
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを阻害する免疫細胞に対し内因性であるポリペプチドの免疫細胞における発現又は活性を低下させるポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡをコードするポリヌクレオチド）である。免疫細胞に内因性であり、タノトランスミッションを阻害し得る例示的なポリペプチドを以下の表７に記載する。
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、タノトランスミッションを阻害する免疫細胞に対し内因性であるポリペプチドの免疫細胞における発現又は活性を低下させるポリヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡをコードするポリヌクレオチド）である。免疫細胞に内因性であり、タノトランスミッションを阻害し得る例示的なポリペプチドを以下の表７に記載する。
【0166】
【表7】
【0167】
タノトランスミッションを阻害する遺伝子の発現を低減するポリヌクレオチドとして、限定するものではないが、アンチセンスＤＮＡ分子、アンチセンスＲＮＡ分子、二本鎖ＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、又はクラスター化され、規則的に間隔をあけて配置された短い回文配列の反復（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連（Ｃａｓ）（ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ）システムガイドＲＮＡを含み得る。
【0168】
ＩＶ．シグナル伝達ドメイン及びターゲティングドメイン
本発明の操作された免疫細胞は、細胞ターンオーバーを引き起こす異種シグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）及び／又は操作された免疫細胞を標的細胞に導く異種ターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）を含み得る。シグナル伝達ドメインとターゲティングドメインが作動可能に連結していることは必ずしも必要ではない。例えば、一部の実施形態では、シグナル伝達ドメイン及びターゲティングドメインは、ヘテロ二量体化小分子の存在下でのみ構築され、その結果、標的抗原が関与し、小分子がシグナル伝達ドメインとターゲティングドメインを結合する場合にのみ、操作された免疫細胞が活性化される。Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｏｃｔ １６；３５０（６２５８）：ａａｂ４０７７を参照。
本発明の操作された免疫細胞は、細胞ターンオーバーを引き起こす異種シグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）及び／又は操作された免疫細胞を標的細胞に導く異種ターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）を含み得る。シグナル伝達ドメインとターゲティングドメインが作動可能に連結していることは必ずしも必要ではない。例えば、一部の実施形態では、シグナル伝達ドメイン及びターゲティングドメインは、ヘテロ二量体化小分子の存在下でのみ構築され、その結果、標的抗原が関与し、小分子がシグナル伝達ドメインとターゲティングドメインを結合する場合にのみ、操作された免疫細胞が活性化される。Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｏｃｔ １６；３５０（６２５８）：ａａｂ４０７７を参照。
【0169】
一部の実施形態では、異種シグナル伝達ドメインは、本明細書に記載の細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、ＩＴＡＭを含むシグナル伝達ドメインを含む。しかし、本明細書に記載の細胞内シグナル伝達ドメイン以外の他の種類の異種シグナル伝達ドメインも、操作された免疫細胞における使用に好適である。例えば、一部の実施形態では、異種シグナル伝達ドメインは、合成Ｎｏｔｃｈ（ｓｙｎＮｏｔｃｈ）受容体シグナル伝達系を含む。ＳｙｎＮｏｔｃｈ受容体シグナル伝達系は、細胞間シグナル伝達受容体Ｎｏｔｃｈからのコア制御性ドメインを含有するが、合成抗原結合ドメイン（例えば、一本鎖抗体）及び合成細胞内転写ドメインを有する（Ｇｏｒｄｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１５；Ｍｏｒｓｕｔ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。ｓｙｎＮｏｔｃｈ受容体が同族抗原に結合すると、ｓｙｎＮｏｔｃｈ受容体は天然のＮｏｔｃｈ活性化と同様の誘導性膜貫通切断を受け、それにより細胞内転写ドメインが放出されて核に入り、同族の上流シス活性化プロモーターによって調節される標的遺伝子の発現が活性化される。従って、ｓｙｎＮｏｔｃｈシグナル伝達システムを使用して、カスタマイズされた抗原認識イベントが異種ポリヌクレオチド、例えばタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドの発現を駆動できる、操作された免疫細胞を生成することができる。ＳｙｎＮｏｔｃｈシグナル伝達系は、例えば、米国特許第９，６７０，２８１号明細書；Ｒｏｙｂａｌ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｃｅｌｌ １６７：４１９－４３２；及びＭｏｒｓｕｔ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｃｅｌｌ １６４（４）：７８０－９１に記載されている。
【0170】
一部の実施形態では、異種ターゲティングドメインは、抗原結合ドメインである。しかし、抗原結合ドメイン以外の他の種類の異種ターゲティングドメインも、操作された免疫細胞での使用に好適である。例えば、一部の実施形態では、異種ターゲティングドメインは、ＨＩＦ１αの酸素感受性サブドメインである。この酸素感受性のサブドメインは、特定の腫瘍の特徴である低酸素環境に反応する。Ｊｕｉｌｌｅｒａｔ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．７：３９８３３を参照。
【0171】
一部の実施形態では、ターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）は、シグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）に作動可能に連結される。一部の実施形態では、ターゲティングドメイン及びシグナル伝達ドメインは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）内に含まれる。
【0172】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
本発明の操作された免疫細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする異種ポリヌクレオチドをさらに含み得る。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、所望の抗原（腫瘍抗原など）に対する抗体に基づく特異性と、Ｔ細胞受容体を活性化する細胞内ドメインを組み合わせて、特異的な免疫活性を示すキメラタンパク質を生成する分子である。
本発明の操作された免疫細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする異種ポリヌクレオチドをさらに含み得る。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、所望の抗原（腫瘍抗原など）に対する抗体に基づく特異性と、Ｔ細胞受容体を活性化する細胞内ドメインを組み合わせて、特異的な免疫活性を示すキメラタンパク質を生成する分子である。
【0173】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、シグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、操作された免疫細胞を標的細胞に導くターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインを含む。ＣＡＲは、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間にヒンジドメインをさらに含み得る。
【0174】
一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドは、例えばＣＡＲの抗原結合ドメインの標的抗原への結合時、及び／又はシグナル伝達ドメイン、例えばＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインの活性化時に、免疫細胞の活性化時にポリヌクレオチドの発現を誘導する、異種プロモーターの転写制御下にあり得る（例えば、異種プロモーターに作動可能に連結されている）。
【0175】
免疫細胞におけるタノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド又はポリペプチドの発現は、免疫細胞における細胞ターンオーバー経路を変化させ得る。例えば、免疫細胞における１つ又は複数のポリヌクレオチド又はポリペプチドの発現は、免疫細胞の正常な細胞ターンオーバー経路を、例えばネクロトーシス、アポトーシス、オートファジー、フェロトーシス又はパイロトーシスなどの、タノトランスミッションを促進する細胞ターンオーバー経路に変化させ得る。
【0176】
Ａ．抗原結合ドメイン及びその標的
抗原結合ドメインは、標的細胞又は病原体（例えば、癌細胞、真菌細胞、細菌細胞、又はウイルス）上の表面マーカーを認識する、操作された免疫細胞の表面上の標的特異的結合要素である。ＣＡＲの抗原結合ドメインの選択は、標的細胞又は病原体の表面に見られる標的タンパク質の種類に依存する。例えば、一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、癌細胞（例えば、固形腫瘍細胞又は非固形癌細胞）の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、真菌細胞、例えば、アスペルギルス・フミガーツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、細菌細胞の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ウイルス、例えばＨＩＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ又はＣＭＶの、表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、病原体に感染した宿主細胞の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。
抗原結合ドメインは、標的細胞又は病原体（例えば、癌細胞、真菌細胞、細菌細胞、又はウイルス）上の表面マーカーを認識する、操作された免疫細胞の表面上の標的特異的結合要素である。ＣＡＲの抗原結合ドメインの選択は、標的細胞又は病原体の表面に見られる標的タンパク質の種類に依存する。例えば、一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、癌細胞（例えば、固形腫瘍細胞又は非固形癌細胞）の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、真菌細胞、例えば、アスペルギルス・フミガーツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、細菌細胞の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ウイルス、例えばＨＩＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ又はＣＭＶの、表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、病原体に感染した宿主細胞の表面上の標的タンパク質に特異的に結合する。
【0177】
標的細胞が腫瘍細胞である場合、抗原結合ドメイン標的タンパク質は腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）又は腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）であり得る。ＴＳＡは、腫瘍細胞に固有であり、体内の他の細胞では発生しない。ＴＡＡは腫瘍細胞に固有のものではなく、抗原に対する免疫寛容状態を誘導できない条件下では正常（例えば、非癌）細胞でも発現する。ＴＡＡは、免疫系が未熟で応答できない胎児の発育中に正常細胞に発現する抗原であり得、又は通常、正常細胞には極めて低いレベルで存在するが、腫瘍細胞でははるかに高いレベルで発現される抗原であり得る。
【0178】
抗原結合ドメイン及び癌細胞上の対応する標的タンパク質の選択は、処置される癌の特定の種類に依存する。一部の実施形態では、癌細胞は、固形腫瘍細胞である。固形腫瘍細胞の表面に見られるタンパク質は当技術分野で公知であり、例えば、Ｍａｒｔｉｎｅｚ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｆｅｂ ５；１０：１２８；及びＦｅｓｎａｋ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ．２０１６ Ａｕｇ ２３；１６（９）：５６６－８１に記載されている。抗原結合ドメインによって標的とされ得る固形腫瘍細胞の表面上の非限定的な例示的タンパク質を以下の表８に記載する。特定の実施形態では、抗原結合ドメインは、メソテリンに結合する。
【0179】
【表8-1】
【0180】
【表8-2】
【0181】
参考文献
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１７．Ｈｏｓｅｉｎｉ Ｓ，Ｃｈｅｕｎｇ Ｎ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｕｓｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．（２０１７）３３９：４４－５２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃａｎｌｅｔ．２０１７．０４．０１３
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１９．Ｖｏｒａ Ｐ，Ｃｈｏｋｓｈｉ Ｃ，Ｑａｚｉ Ｍ，Ｖｅｎｕｇｏｐａｌ Ｃ，Ｍａｈｅｎｄｒａｍ Ｓ，Ｓｉｎｇｈ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ＣＤ１３３ ＢｉＴＥｓ ａｎｄ ＣＡＲ－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ［ａｂｓｔｒａｃｔ］．Ｉｎ：Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ ＣＲＩ－ＣＩＭＴＥＡＴＩ－ ＡＡＣＲ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ：Ｔｒａｎｓｌａｔｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｔｏ Ｓｕｒｖｉｖａｌ．（２０１６）Ｓｅｐｔ ２５－２８；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ：ＡＡＣＲ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．（２０１６）４（１１ Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ｎｒ Ｂ０７９．ｄｏｉ：１０．１１５８／２３２６－６０６６．ＩＭＭ２０１６－Ｂ０７９
２０．Ｔｃｈｏｕ Ｊ，Ｚｈａｏ Ｙ，Ｌｅｖｉｎｅ Ｂ，Ｚｈａｎｇ Ｐ，Ｄａｖｉｓ Ｍ，Ｍｅｌｅｎｈｏｒｓｔ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．（２０１７）５：１１５２－６１．ｄｏｉ：１０．１１５８／２３２６－６０６６．ＣＩＲ－１７－０１８９
２１．ＬｉＨ，Ｈｕａｎｇ Ｙ，Ｊｉａｎｇ Ｄ，Ｃｕｉ Ｌ，Ｈｅ Ｚ，Ｗａｎｇ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＥＧＦＲ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ．９：１７７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１４１９－０１７－ ０２３８－６
２２．Ｈａｎ Ｊ，Ｃｈｕ Ｊ，Ｋｅｕｎｇ Ｃ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｙ，Ｃｏｈｅｎ Ｊ．ＣＡＲ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＮＫ ｃｅｌｌｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ ＥＧＦＲ ａｎｄ ＥＧＦＲｖＩＩＩ Ｅｎｈａｎｃｅ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ａｎｄ ｐａｔｉｅｎｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ．（２０１５）．５：１１４８３．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ１１４８３
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２４．Ｙｕ Ｓ，Ｌｉ Ａ，Ｌｉｕ Ｑ，Ｌｉ Ｔ，Ｙｕａｎ Ｘ，Ｈａｎ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ａ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ．ＪＨｅｍａｔｏｌ Ｏｎｃｏｌ．（２０１７）１０：７８．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３０４５－０１７－０４４４－９
２５．Ａｎｇ Ｗ，Ｌｉ Ｚ，Ｃｈｉ Ｚ，Ｄｕ Ｓ，Ｃｈｅｎ Ｃ，Ｔａｙ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｔａｂｌｙ ａｎｄ ｔｒａｎｓｉｅｎｔｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａｎｔｉ－ＥｐＣＡＭ ＣＡＲ ｉｎ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｔｏｓｉｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：１３５４５－５９．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１４５９２
２６．Ｃｈｏｗ Ｋ，Ｎａｉｋ Ｓ，Ｋａｋａｒｌａ Ｓ，Ｂｒａｗｌｅｙ Ｖ，Ｓｈａｆｆｅｒ Ｄ，Ｙｉ Ｚ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ｔｏ ＥｐｈＡ２ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１３）２１：６２９－３７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔ．２０１２．２１０
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３９．Ｍｉｎ Ｉ，Ｓｈｅｖｌｉｎ Ｅ，Ｖｅｄｖｙａｓ Ｙ，ＺａｍａｎＭ，Ｗｙｒｗａｓ Ｂ，Ｓｃｏｇｎａｍｉｇｌｉｏ Ｔ，ｅｔ ａｌ．ＣＡＲ Ｔ ｔｈｅｒａｐｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＩＣＡＭ－１ ｅｌｉｍｉｎａｔｅｓ ａｄｖａｎｃｅｄＨｕｍａｎ ｔｈｙｒｏｉｄ ｔｕｍｏｒｓ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０１７）２３：７５６９－８３．ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１７－２００８
４０．Ｐａｒｋ Ｓ，Ｓｈｅｖｌｉｎ Ｅ，Ｖｅｄｖｙａｓ Ｙ，Ｚａｍａｎ Ｍ，Ｐａｒｋ Ｓ，Ｈｓｕ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｍｉｃｒｏｍｏｌａｒ ａｆｆｉｎｉｔｙ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ＩＣＡＭ－１ ａｃｈｉｅｖｅｓ ｒａｐｉｄ ｔｕｍｏｒ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｗｈｉｌｅ ａｖｏｉｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ．（２０１７）７：１４３６６６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９８－０１７－１４７４９－３
４１．Ｐｉｔｕｃｈ Ｋ，Ｍｉｓｋａ Ｊ，Ｋｒｅｎｃｉｕｔｅ Ｇ，Ｐａｎｅｋ Ｗ，Ｌｉ Ｇ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ－Ｃｒｕｚ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ａｄｏｐｔｉｖｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ＩＬ１３Ｒａ２－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｃｒｅａｔｅｓ ａ ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１８）２６：９８６－９５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１８．０２．００１
４２．Ｂｒｏｗｎ Ｃ，ＡｌｉｚａｄｅｈＤ，Ｓｔａｒｒ Ｒ，Ｗｅｎｇ Ｌ，Ｗａｇｎｅｒ Ｊ，Ｎａｒａｎｊｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ａｆｔｅｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．（２０１６）３７５：２５６１－９．ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１６１０４９７
４３．Ｔｏｍａｓｉｎｉ Ｐ，Ｗａｌｉａ Ｐ，Ｌａｂｂｅ Ｃ，Ｊａｏ Ｋ，Ｌｅｉｇｈｌ Ｎ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ＫＲＡＳ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ（２０１６）２１：１４５０－６０．ｄｏｉ：１０．１６３４／ｔｈｅｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ．２０１５－００８４
４４．Ｔｒａｎ Ｅ，Ｒｏｂｂｉｎｓ Ｐ，Ｌｕ Ｙ，Ｐｒｉｃｋｅｔｔ Ｔ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｊ，Ｊｉａ Ｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｕｔａｎｔ ＫＲＡＳ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．（２０１６）３７５：２２５５－６２．ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１６０９２７９
４５．ＨｏｎｇＨ，Ｂｒｏｗｎ Ｃ，Ｏｓｔｂｅｒｇ Ｊ，Ｐｒｉｃｅｍａｎ Ｓ，Ｃｈａｎｇ Ｗ，Ｗｅｎｇ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｌ１ Ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄＨｕｍａｎ ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｈｉｂｉｔ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔＨｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ（２０１６）１１：ｅ０１４６８８５．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１４６８８５
４６．Ｋｉｍ ＳＨ，Ｌｅｅ Ｓ，Ｌｅｅ ＣＨ，Ｌｅｅ ＭＫ，Ｋｉｍ ＹＤ，Ｓｈｉｎ ＤＨ，ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ－ｔｅｓｔｉｓ ａｎｔｉｇｅｎｓ ＭＡＧＥ－Ａ３／６ ａｎｄ ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．Ｌｕｎｇ（２００９）１８７：４０１－１１．ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ００４０８－００９－９１８１－３
４７．Ｔｈｏｍａｓ Ｒ，Ａｌ－Ｋｈａｄａｉｒｉ Ｇ，Ｒｏｅｌａｎｄｓ Ｊ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋ Ｗ，Ｄｅｒｍｉｍｅ Ｓ，Ｂｅｄｏｇｎｅｔｔｉ Ｄ，ｅｔ ａｌ．ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｂａｓｅｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１８）９：９４７．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．００９４７
４８．Ｔｈａｙａｐａｒａｎ Ｔ，Ｐｅｔｒｏｖｉｃ Ｒ，Ａｃｈｋｏｖａ Ｄ，Ｚａｂｉｎｓｋｉ Ｔ，Ｄａｖｉｅｓ Ｄ，Ｋｌａｍｐａｔｓａ Ａ，ｅｔ ａｌ．ＣＡＲ Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＭＥＴ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１７）６：ｅ１３６３１３７．ｄｏｉ：１０．１０８０／２１６２４０２Ｘ．２０１７．１３６３１３７
４９．Ｏ’Ｈａｒａ Ｍ，Ｓｔａｓｈｗｉｃｋ Ｃ，Ｈａａｓ Ａ，Ｔａｎｙｉ Ｊ．Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｓ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ（２０１６）８：４４９－６０．ｄｏｉ：１０．２２１７／ｉｍｔ．１６．４
５０．Ｂｒｏｎｔｅ Ｇ，Ｉｎｃｏｒｖａｉａ Ｌ，Ｒｉｚｚｏ Ｓ，Ｐａｓｓｉｇｌｉａ Ｆ，Ｇａｌｖａｎｏ Ａ，Ｒｉｚｚｏ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｐｌｅｕｒａｌ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ：ｗｈｙＨａｓ ｎｏｔ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｂｅｅｎＨｉｔ ｙｅｔ？ ＯｎｃｏｌｏｇｙＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ（２０１６）１０７：２０－３２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｒｉｔｒｅｖｏｎｃ．２０１６．０８．０１１
５１．Ｓｕｎ Ｑ，Ｚｈｏｕ Ｓ，Ｚｈａｏ Ｊ，Ｄｅｎｇ Ｃ，Ｔｅｎｇ Ｒ，Ｚｈａｏ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｅｌｉｍｉｎａｔｅ ｌｕｎｇ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｉｎ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１８）９：１３６９４－７０５．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２４１２２
５２．Ｌｉｕ Ｚ，ＲａｏＭ，Ｐｏｉｒｅｔ Ｔ，Ｎａｖａ Ｓ，Ｍｅｎｇ Ｑ，ｖｏｎ Ｌａｎｄｅｎｂｅｒｇ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎＨｕｍａｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：８０２０８－２２．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２０３０３
５３．Ｋｏｎｅｒｕ Ｍ，Ｐｕｒｄｏｎ Ｔ，Ｓｐｒｉｇｇｓ Ｄ，Ｋｏｎｅｒｕ Ｓ，Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ Ｒ．ＩＬ－１２ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｔｕｍｏｒ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｏｖａｒｉａｎ ｔｕｍｏｒｓ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１５）４：ｅ９９４４４６．ｄｏｉ：１０．４１６１／２１６２４０２Ｘ．２０１４．９９４４４６
５４．Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ，Ｇｏｅｔｚ，Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｓｃｈａｆｔ Ｎ，Ｄｏｅｒｒｉｅ Ｊ，Ｆｕｌｌ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｄｉｒｅｃｔｉｎｇ Ｔ Ｃｅｌｌｓ ｔｏ Ｅｗｉｎｇ’ｓ Ｓａｒｃｏｍａ Ｆａｍｉｌｙ ｏｆ Ｔｕｍｏｒｓ ｂｙ ａ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ＮＫＧ２Ｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｏｒ ｍＲＮＡ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ（２０１２）７：ｅ３１２１０．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００３１２１０
５５．Ｓｉｎｇｈ Ｎ，Ｋｕｌｉｋｏｖｓｋａｙａ Ｉ，Ｂａｒｒｅｔｔ Ｄ，Ｂｉｎｄｅｒ－Ｓｃｈｏｌｌ Ｇ，Ｊａｋｏｂｓｅｎ Ｂ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｇａｉｎｓｔ ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．（２０１６）５：ｅ１０４０２１６．ｄｏｉ：１０．１０８０／２１６２４０２Ｘ．２０１５．１０４０２１６
５６．Ｃｈｕｅｈ Ａ，Ｌｉｅｗ ＭＳ，Ｒｕｓｓｅｌ ＰＡ，Ｗａｌｋｉｅｗｉｃｚ Ｍ，Ｊａｙａｃｈａｎｄｒａｎ Ａ，Ｓｔａｒｍａｎｓ ＭＨＷ，ｅｔ ａｌ．ＰｒｏｍｏｔｅｒＨｙｐｏｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＹ－ＥＳＯ－１，ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ａｎｄ ＰＤ－Ｌ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：７４０３６－４８．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１８１９８
５７．Ｍｏｈａｍｍｅｄ Ｓ，Ｓｕｋｕｍａｒａｎ Ｓ，Ｂａｊｇａｉｎ Ｐ，Ｗａｔａｎａｂｅ Ｎ，ＨｅｓｌｏｐＨ，Ｒｏｏｎｅｙ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ
７１．Ｙａｎｇ Ｑ，Ｒｏｅｈｒｌ Ｍ，Ｗａｎｇ Ｊ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ＰＳＭＡ１，ＬＡＰ３，ＡＮＸＡ３，ａｎｄ ｍａｓｐｉｎ ａｓ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｍａｒｋｅｒｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）９：３９９６－４０１９．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２３５８３
７２．Ｙａｎｇ Ｑ，Ｂａｖｉ Ｐ，Ｗａｎｇ Ｊ，Ｒｏｅｈｒｌ Ｍ．Ｉｍｍｕｎｏ－ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｕｔｏａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ｏｌｆａｃｔｏｍｅｄｉｎ ４，ＣＤ１１ｂ，ａｎｄ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ａｌｐｈａ－２ ａｓ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｊ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ（２０１７）１６８：５３－６５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｐｒｏｔ．２０１７．０６．０２１
９８．Ｈｅｇｅ ＫＭ，Ｂｅｒｇｓｌａｎｄ ＥＫ，Ｆｉｓｈｅｒ ＧＡ，Ｎｅｍｕｎａｉｔｉｓ ＪＪ，Ｗａｒｒｅｎ ＲＳ，ＭｃＡｒｔｈｕｒ ＪＧ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ，ｔｕｍｏｒ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｏｒ ＴＡＧ－７２ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ Ｃａｎｃｅｒ．（２０１７）５：２２．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ４０４２５－０１７－０２２２－９
１０４．Ｓｃｈｕｂｅｒｔｈ ＰＣ，Ｈａｇｅｄｏｒｎ Ｃ，Ｊｅｎｓｅｎ ＳＭ，Ｇｕｌａｔｉ Ｐ，ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｒｏｅｋ Ｍ，Ｍｉｓｃｈｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｐｌｅｕｒａｌ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ ｂｙ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｒｅ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１３）１１：１８７．ｄｏｉ：１０．１１８６／１４７９－５８７６－１１－１８７．
１２．Ｌｅｕｃｉ Ｖ，Ｃａｓｕｃｃｉ ＧＭ，Ｇｒｉｇｎａｎｉ Ｇ，Ｒｏｔｏｌｏ Ｒ，Ｒｏｓｓｏｔｔｉ Ｕ，Ｖｉｇｎａ Ｅ，ｅｔ ａｌ．ＣＤ４４ｖ６ ａｓ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｓａｒｃｏｍａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ＣＡＲ－ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ＣＩＫ ｃｅｌｌｓ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１８）７：ｅ１４２３１６７．ｄｏｉ：１０．１０８０／２１６２４０２Ｘ．２０１７．１４２３１６７
１３．Ｔｏｄａｒｏ Ｍ，Ｇａｇｇｉａｎｅｓｉ Ｍ，Ｃａｔａｌａｎｏ Ｖ，Ｂｅｎｆａｎｔｅ Ａ，Ｉｏｖｉｎｏ Ｆ，Ｂｉｆｆｏｎｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．ＣＤ４４ｖ６ ｉｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｒｉｖｉｎｇ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｃｅｌｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ．（２０１４）１４：３４２－５６．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｓｔｅｍ．２０１４．０１．００９
１４．Ｓｕａｒｅｚ ＥＲ，Ｃｈａｎｇ ｄｅ Ｋ，Ｓｕｎ Ｊ，Ｓｕｉ Ｊ，Ｆｒｅｅｍａｎ ＧＪ，Ｓｉｇｎｏｒｅｔｔｉ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ａｎｔｉ－ＰＤ－Ｌ１ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｒｅｓｓ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ａＨｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１６）７：３４３４１－５５．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．９１１４
１５．Ｌａｍｅｒｓ ＣＨＪ，Ｋｌａｖｅｒ Ｙ，Ｇｒａｔａｍａ ＪＷＣ，Ｓｌｅｉｊｆｅｒ Ｓ，Ｄｅｂｅｔｓ Ｒ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ｍＲＣＣ）ｗｉｔｈ ＣＡＩＸ ＣＡＲ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｔｃｅｌｌｓ－ ａ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ ｓｔｕｄｙ ｏｖｅｒｖｉｅｗ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｏｃ Ｔｒａｎｓ．（２０１６）４４：９５１－９．ｄｏｉ：１０．１０４２／ＢＳＴ２０１６００３７
１６．Ｔｈｉｓｔｌｅｔｈｗａｉｔｅ Ｆ，Ｇｉｌｈａｍ Ｄ，Ｇｕｅｓｔ Ｒ，Ｒｏｔｈｗｅｌｌ Ｄ，Ｐｉｌｌａｉ Ｍ，Ｂｕｒｔ Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｆｉｒｓｔ－ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ（ＣＥＡＣＡＭ５）－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｌｉｍｉｔｅｄ ｂｙ ｐｏｏｒ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｏｎｏｔｈｅｒ．（２０１７）６６：１４２５－３６．ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ００２６２－０１７－２０３４－７
１７．Ｈｏｓｅｉｎｉ Ｓ，Ｃｈｅｕｎｇ Ｎ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｕｓｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．（２０１７）３３９：４４－５２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃａｎｌｅｔ．２０１７．０４．０１３
１８．Ｚｈｕ Ｘ，ＣａｉＨ，Ｚｈａｏ Ｌ，Ｎｉｎｇ Ｌ，Ｌａｎｇ Ｊ．ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ：ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｂｅｎｃｈ ｔｏ ｔｈｅ ｂｅｄｓｉｄｅ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：６４６０７－２１．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１９９２９
１９．Ｖｏｒａ Ｐ，Ｃｈｏｋｓｈｉ Ｃ，Ｑａｚｉ Ｍ，Ｖｅｎｕｇｏｐａｌ Ｃ，Ｍａｈｅｎｄｒａｍ Ｓ，Ｓｉｎｇｈ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ＣＤ１３３ ＢｉＴＥｓ ａｎｄ ＣＡＲ－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ［ａｂｓｔｒａｃｔ］．Ｉｎ：Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ ＣＲＩ－ＣＩＭＴＥＡＴＩ－ ＡＡＣＲ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ：Ｔｒａｎｓｌａｔｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｉｎｔｏ Ｓｕｒｖｉｖａｌ．（２０１６）Ｓｅｐｔ ２５－２８；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ：ＡＡＣＲ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．（２０１６）４（１１ Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ｎｒ Ｂ０７９．ｄｏｉ：１０．１１５８／２３２６－６０６６．ＩＭＭ２０１６－Ｂ０７９
２０．Ｔｃｈｏｕ Ｊ，Ｚｈａｏ Ｙ，Ｌｅｖｉｎｅ Ｂ，Ｚｈａｎｇ Ｐ，Ｄａｖｉｓ Ｍ，Ｍｅｌｅｎｈｏｒｓｔ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．（２０１７）５：１１５２－６１．ｄｏｉ：１０．１１５８／２３２６－６０６６．ＣＩＲ－１７－０１８９
２１．ＬｉＨ，Ｈｕａｎｇ Ｙ，Ｊｉａｎｇ Ｄ，Ｃｕｉ Ｌ，Ｈｅ Ｚ，Ｗａｎｇ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＥＧＦＲ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ．９：１７７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１４１９－０１７－ ０２３８－６
２２．Ｈａｎ Ｊ，Ｃｈｕ Ｊ，Ｋｅｕｎｇ Ｃ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｙ，Ｃｏｈｅｎ Ｊ．ＣＡＲ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＮＫ ｃｅｌｌｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ ＥＧＦＲ ａｎｄ ＥＧＦＲｖＩＩＩ Ｅｎｈａｎｃｅ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ａｎｄ ｐａｔｉｅｎｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ．（２０１５）．５：１１４８３．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ１１４８３
２３．Ｋｌａｍｐａｔｓａ Ａ，Ａｃｈｋｏｖａ Ｄ，Ｄａｖｉｅｓ Ｄ，Ｐａｒｅｎｔｅ－Ｐｅｒｅｉｒａ Ａ，Ｗｏｏｄｍａｎ Ｎ，Ｒｏｓｅｋｉｌｌｙ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｒａｃａｖｉｔａｒｙ‘Ｔ４ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ’ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ ｕｓｉｎｇ ｐａｎ－ＥｒｂＢ ｒｅ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．（２０１７）３９３：５２－９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃａｎｌｅｔ．２０１７．０２．０１５
２４．Ｙｕ Ｓ，Ｌｉ Ａ，Ｌｉｕ Ｑ，Ｌｉ Ｔ，Ｙｕａｎ Ｘ，Ｈａｎ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ：ａ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ．ＪＨｅｍａｔｏｌ Ｏｎｃｏｌ．（２０１７）１０：７８．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３０４５－０１７－０４４４－９
２５．Ａｎｇ Ｗ，Ｌｉ Ｚ，Ｃｈｉ Ｚ，Ｄｕ Ｓ，Ｃｈｅｎ Ｃ，Ｔａｙ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｔａｂｌｙ ａｎｄ ｔｒａｎｓｉｅｎｔｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａｎｔｉ－ＥｐＣＡＭ ＣＡＲ ｉｎ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｔｏｓｉｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：１３５４５－５９．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１４５９２
２６．Ｃｈｏｗ Ｋ，Ｎａｉｋ Ｓ，Ｋａｋａｒｌａ Ｓ，Ｂｒａｗｌｅｙ Ｖ，Ｓｈａｆｆｅｒ Ｄ，Ｙｉ Ｚ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ｔｏ ＥｐｈＡ２ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１３）２１：６２９－３７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔ．２０１２．２１０
２７．Ｙｕ Ｚ，Ｐｒｉｎｚｉｎｇ Ｂ，Ｃａｏ Ｆ，Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋ Ｓ，Ｋｒｅｎｃｉｕｔｅ Ｇ．Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ ＥｐｈＡ２－ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｄｏｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃｌｉｎ Ｄｅｖ．（２０１８）９：７０－８０．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｏｍｔｍ．２０１８．０１．００９
２８．Ｗａｎｇ Ｚ，Ｌｉ Ｂ，Ｒｅｎ Ｙ，Ｙｅ Ｚ．Ｔ－ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ：ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ａｎｄ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１６）７：３５３．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１６．００３５３
２９．Ｙｕ Ｊ，Ｗｕ Ｘ，Ｙａｎ Ｊ，ＹｕＨ，Ｘｕ Ｌ，Ｃｈｉ Ｚ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉ－ＧＤ２／４－１ＢＢ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｌａｎｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ．ＪＨｅｍａｔｏｌ Ｏｎｃｏｌ．（２０１８）１１：１．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３０４５－０１７－０５４８－２
３０．Ｐｒａｐａ Ｍ，Ｇａｌｄｒｅｒ Ｓ，Ｓｐａｎｏ Ｃ，Ｂｅｓｔａｇｎｏ Ｍ，Ｇｏｌｉｎｅｌｌｉ Ｇ，Ｇｒｉｓｅｎｄｉ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉ－ＧＤ２／４－１ＢＢ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｒｉｇｇｅｒｓ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｋｉｌｌｉｎｇ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１５）６：２４８８４－２４８９４．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．４６７０
３１．Ｇａｒｇｅｔｔ Ｔ，Ｙｕ Ｗ，Ｄｏｔｔｉ Ｇ，Ｙｖｏｎ Ｅ，Ｃｈｒｉｓｔｏ Ｓ，Ｈａｙｂａｌｌ Ｊ，ｅｔ ａｌ．ＧＤ２－ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｕｎｄｅｒｇｏ ｐｏｔｅｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ａｎｔｉｇｅｎ ｅｎｃｏｕｎｔｅｒ ｂｕｔ ｃａｎ ｂｅ ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ ｂｙ ＰＤ－１ ｂｌｏｃｋａｄｅ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１６）２４：１１３５－４９．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔ．２０１６．６３
３２．Ｚｈｉｗｕ Ｊ，Ｊｉａｎｇ Ｘ，Ｃｈｅｎ Ｓ，Ｌａｉ Ｙ，Ｗｅｉ Ｘ，Ｂａｉｈｅｎｇ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉ－ ＧＰＣ３－ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｄｅｒｉｖｅｄ ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ ｏｆＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６９０．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１６．００６９０
３３．ＭａｇｅｅＭ，ＡｂｒａｈａｍＴ，Ｂａｙｂｕｔｔ Ｔ，Ｆｌｉｃｋｉｎｇｅｒ Ｊ，Ｒｉｄｇｅ Ｎ，Ｍａｒｓｚａｌｏｗｉｃｚ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｈｕｍａｎ ＧＵＣＹ２Ｃ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｌｉｍｉｎａｔｅ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．（２０１８）６：５０９－１６．ｄｏｉ：１０．１１５８／２３２６－６０６６．ＣＩＲ－１６－０３６２
３４．Ｃａｂａｌｌｅｒｏ Ｉ，Ａｉｒａ Ｌ，Ｌａｖａｓｔｉｄａ Ａ，Ｐｏｐａ Ｘ，Ｒｉｖｅｒｏ Ｊ，Ｇｏｎｚａｅｌｅｚ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａＨｕｍａｎ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １（ＨＥＲ１）－ｂａｓｅｄ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ：ａ ｄｏｓｅ－ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ ｐｈａｓｅ Ｉ ｓｔｕｄｙ ｔｒｉａｌ．Ｆｒｏｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．８：２６３．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｐｈａｒ．２０１７．００２６３
３５．Ｓｕｎ Ｍ，ＳｈｉＨ，Ｌｉｕ Ｃ，Ｌｉｕ Ｊ，Ｌｉｕ Ｘ，Ｓｕｎ Ｙ．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌＨｕｍａｎｉｚｅｄＨＥＲ２－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０１４）１６：Ｒ６１．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｂｃｒ３６７４
３６．Ｈａｎ Ｙ，Ｌｉｕ Ｃ，Ｌｉ Ｇ，Ｌｉ Ｊ，Ｌｙ Ｘ，ＳｈｉＨ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌＨＥＲ２ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｔｏ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｏｄｅｌｓ．Ａｍ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０１８）８：１０６－１１９．
３７．Ｍｅｒｋｅｒ Ｍ，Ｐｆｉｒｒｍａｎｎ Ｖ，Ｏｅｌｓｎｅｒ Ｓ，Ｆｕｌｄａ Ｓ，Ｋｌｉｎｇｅｂｅｉ Ｔ，Ｗｅｌｓ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＥｒｂＢ２－ＣＡＲ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆＨｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｓｏｆｔ ｔｉｓｓｕｅ ｓａｒｃｏｍａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：６６１３７－５３．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１９８２１
３８．Ａｈｍｅｄ Ｎ，Ｂｒａｗｌｅｙ Ｖ，Ｈｅｇｄｅ Ｍ，Ｂｉｅｌａｍｏｗｉｃｚ Ｋ，Ｋａｉｒａ Ｍ，Ｌａｎｄｉ Ｄ，ｅｔ ａｌ．ＨＥＲ２－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｖｉｒｕｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ：ａ ｐｈａｓｅ １ ｄｏｓｅ－ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ ｔｒｉａｌ．ＪＡＭＡ Ｏｎｃｏｌ．（２０１７）３：１０９４－１０１．ｄｏｉ：１０．１００１／ｊａｍａｏｎｃｏｌ．２０１７．０１８４
３９．Ｍｉｎ Ｉ，Ｓｈｅｖｌｉｎ Ｅ，Ｖｅｄｖｙａｓ Ｙ，ＺａｍａｎＭ，Ｗｙｒｗａｓ Ｂ，Ｓｃｏｇｎａｍｉｇｌｉｏ Ｔ，ｅｔ ａｌ．ＣＡＲ Ｔ ｔｈｅｒａｐｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＩＣＡＭ－１ ｅｌｉｍｉｎａｔｅｓ ａｄｖａｎｃｅｄＨｕｍａｎ ｔｈｙｒｏｉｄ ｔｕｍｏｒｓ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０１７）２３：７５６９－８３．ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１７－２００８
４０．Ｐａｒｋ Ｓ，Ｓｈｅｖｌｉｎ Ｅ，Ｖｅｄｖｙａｓ Ｙ，Ｚａｍａｎ Ｍ，Ｐａｒｋ Ｓ，Ｈｓｕ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｍｉｃｒｏｍｏｌａｒ ａｆｆｉｎｉｔｙ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ＩＣＡＭ－１ ａｃｈｉｅｖｅｓ ｒａｐｉｄ ｔｕｍｏｒ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｗｈｉｌｅ ａｖｏｉｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｓｃｉ Ｒｅｐ．（２０１７）７：１４３６６６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９８－０１７－１４７４９－３
４１．Ｐｉｔｕｃｈ Ｋ，Ｍｉｓｋａ Ｊ，Ｋｒｅｎｃｉｕｔｅ Ｇ，Ｐａｎｅｋ Ｗ，Ｌｉ Ｇ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ－Ｃｒｕｚ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ａｄｏｐｔｉｖｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ＩＬ１３Ｒａ２－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｃｒｅａｔｅｓ ａ ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１８）２６：９８６－９５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１８．０２．００１
４２．Ｂｒｏｗｎ Ｃ，ＡｌｉｚａｄｅｈＤ，Ｓｔａｒｒ Ｒ，Ｗｅｎｇ Ｌ，Ｗａｇｎｅｒ Ｊ，Ｎａｒａｎｊｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ａｆｔｅｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．（２０１６）３７５：２５６１－９．ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１６１０４９７
４３．Ｔｏｍａｓｉｎｉ Ｐ，Ｗａｌｉａ Ｐ，Ｌａｂｂｅ Ｃ，Ｊａｏ Ｋ，Ｌｅｉｇｈｌ Ｎ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ＫＲＡＳ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ（２０１６）２１：１４５０－６０．ｄｏｉ：１０．１６３４／ｔｈｅｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ．２０１５－００８４
４４．Ｔｒａｎ Ｅ，Ｒｏｂｂｉｎｓ Ｐ，Ｌｕ Ｙ，Ｐｒｉｃｋｅｔｔ Ｔ，Ｇａｒｔｎｅｒ Ｊ，Ｊｉａ Ｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｕｔａｎｔ ＫＲＡＳ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．（２０１６）３７５：２２５５－６２．ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１６０９２７９
４５．ＨｏｎｇＨ，Ｂｒｏｗｎ Ｃ，Ｏｓｔｂｅｒｇ Ｊ，Ｐｒｉｃｅｍａｎ Ｓ，Ｃｈａｎｇ Ｗ，Ｗｅｎｇ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｌ１ Ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄＨｕｍａｎ ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｈｉｂｉｔ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔＨｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ（２０１６）１１：ｅ０１４６８８５．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１４６８８５
４６．Ｋｉｍ ＳＨ，Ｌｅｅ Ｓ，Ｌｅｅ ＣＨ，Ｌｅｅ ＭＫ，Ｋｉｍ ＹＤ，Ｓｈｉｎ ＤＨ，ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ－ｔｅｓｔｉｓ ａｎｔｉｇｅｎｓ ＭＡＧＥ－Ａ３／６ ａｎｄ ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．Ｌｕｎｇ（２００９）１８７：４０１－１１．ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ００４０８－００９－９１８１－３
４７．Ｔｈｏｍａｓ Ｒ，Ａｌ－Ｋｈａｄａｉｒｉ Ｇ，Ｒｏｅｌａｎｄｓ Ｊ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋ Ｗ，Ｄｅｒｍｉｍｅ Ｓ，Ｂｅｄｏｇｎｅｔｔｉ Ｄ，ｅｔ ａｌ．ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｂａｓｅｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１８）９：９４７．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．００９４７
４８．Ｔｈａｙａｐａｒａｎ Ｔ，Ｐｅｔｒｏｖｉｃ Ｒ，Ａｃｈｋｏｖａ Ｄ，Ｚａｂｉｎｓｋｉ Ｔ，Ｄａｖｉｅｓ Ｄ，Ｋｌａｍｐａｔｓａ Ａ，ｅｔ ａｌ．ＣＡＲ Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＭＥＴ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１７）６：ｅ１３６３１３７．ｄｏｉ：１０．１０８０／２１６２４０２Ｘ．２０１７．１３６３１３７
４９．Ｏ’Ｈａｒａ Ｍ，Ｓｔａｓｈｗｉｃｋ Ｃ，Ｈａａｓ Ａ，Ｔａｎｙｉ Ｊ．Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｓ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ（２０１６）８：４４９－６０．ｄｏｉ：１０．２２１７／ｉｍｔ．１６．４
５０．Ｂｒｏｎｔｅ Ｇ，Ｉｎｃｏｒｖａｉａ Ｌ，Ｒｉｚｚｏ Ｓ，Ｐａｓｓｉｇｌｉａ Ｆ，Ｇａｌｖａｎｏ Ａ，Ｒｉｚｚｏ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｐｌｅｕｒａｌ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ：ｗｈｙＨａｓ ｎｏｔ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｂｅｅｎＨｉｔ ｙｅｔ？ ＯｎｃｏｌｏｇｙＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ（２０１６）１０７：２０－３２．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｒｉｔｒｅｖｏｎｃ．２０１６．０８．０１１
５１．Ｓｕｎ Ｑ，Ｚｈｏｕ Ｓ，Ｚｈａｏ Ｊ，Ｄｅｎｇ Ｃ，Ｔｅｎｇ Ｒ，Ｚｈａｏ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｅｌｉｍｉｎａｔｅ ｌｕｎｇ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｉｎ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１８）９：１３６９４－７０５．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２４１２２
５２．Ｌｉｕ Ｚ，ＲａｏＭ，Ｐｏｉｒｅｔ Ｔ，Ｎａｖａ Ｓ，Ｍｅｎｇ Ｑ，ｖｏｎ Ｌａｎｄｅｎｂｅｒｇ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎＨｕｍａｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：８０２０８－２２．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２０３０３
５３．Ｋｏｎｅｒｕ Ｍ，Ｐｕｒｄｏｎ Ｔ，Ｓｐｒｉｇｇｓ Ｄ，Ｋｏｎｅｒｕ Ｓ，Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ Ｒ．ＩＬ－１２ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｔｕｍｏｒ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｏｖａｒｉａｎ ｔｕｍｏｒｓ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１５）４：ｅ９９４４４６．ｄｏｉ：１０．４１６１／２１６２４０２Ｘ．２０１４．９９４４４６
５４．Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ，Ｇｏｅｔｚ，Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｓｃｈａｆｔ Ｎ，Ｄｏｅｒｒｉｅ Ｊ，Ｆｕｌｌ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｄｉｒｅｃｔｉｎｇ Ｔ Ｃｅｌｌｓ ｔｏ Ｅｗｉｎｇ’ｓ Ｓａｒｃｏｍａ Ｆａｍｉｌｙ ｏｆ Ｔｕｍｏｒｓ ｂｙ ａ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ＮＫＧ２Ｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｏｒ ｍＲＮＡ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ（２０１２）７：ｅ３１２１０．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００３１２１０
５５．Ｓｉｎｇｈ Ｎ，Ｋｕｌｉｋｏｖｓｋａｙａ Ｉ，Ｂａｒｒｅｔｔ Ｄ，Ｂｉｎｄｅｒ－Ｓｃｈｏｌｌ Ｇ，Ｊａｋｏｂｓｅｎ Ｂ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＮＹ－ＥＳＯ－１ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｇａｉｎｓｔ ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ．Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．（２０１６）５：ｅ１０４０２１６．ｄｏｉ：１０．１０８０／２１６２４０２Ｘ．２０１５．１０４０２１６
５６．Ｃｈｕｅｈ Ａ，Ｌｉｅｗ ＭＳ，Ｒｕｓｓｅｌ ＰＡ，Ｗａｌｋｉｅｗｉｃｚ Ｍ，Ｊａｙａｃｈａｎｄｒａｎ Ａ，Ｓｔａｒｍａｎｓ ＭＨＷ，ｅｔ ａｌ．ＰｒｏｍｏｔｅｒＨｙｐｏｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＹ－ＥＳＯ－１，ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ａｎｄ ＰＤ－Ｌ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）８：７４０３６－４８．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１８１９８
５７．Ｍｏｈａｍｍｅｄ Ｓ，Ｓｕｋｕｍａｒａｎ Ｓ，Ｂａｊｇａｉｎ Ｐ，Ｗａｔａｎａｂｅ Ｎ，ＨｅｓｌｏｐＨ，Ｒｏｏｎｅｙ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ
７１．Ｙａｎｇ Ｑ，Ｒｏｅｈｒｌ Ｍ，Ｗａｎｇ Ｊ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ＰＳＭＡ１，ＬＡＰ３，ＡＮＸＡ３，ａｎｄ ｍａｓｐｉｎ ａｓ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｍａｒｋｅｒｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ（２０１７）９：３９９６－４０１９．ｄｏｉ：１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２３５８３
７２．Ｙａｎｇ Ｑ，Ｂａｖｉ Ｐ，Ｗａｎｇ Ｊ，Ｒｏｅｈｒｌ Ｍ．Ｉｍｍｕｎｏ－ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｕｔｏａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ｏｌｆａｃｔｏｍｅｄｉｎ ４，ＣＤ１１ｂ，ａｎｄ ｉｎｔｅｇｒｉｎ ａｌｐｈａ－２ ａｓ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｊ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ（２０１７）１６８：５３－６５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｐｒｏｔ．２０１７．０６．０２１
９８．Ｈｅｇｅ ＫＭ，Ｂｅｒｇｓｌａｎｄ ＥＫ，Ｆｉｓｈｅｒ ＧＡ，Ｎｅｍｕｎａｉｔｉｓ ＪＪ，Ｗａｒｒｅｎ ＲＳ，ＭｃＡｒｔｈｕｒ ＪＧ，ｅｔ ａｌ．Ｓａｆｅｔｙ，ｔｕｍｏｒ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｏｒ ＴＡＧ－７２ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ Ｃａｎｃｅｒ．（２０１７）５：２２．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ４０４２５－０１７－０２２２－９
１０４．Ｓｃｈｕｂｅｒｔｈ ＰＣ，Ｈａｇｅｄｏｒｎ Ｃ，Ｊｅｎｓｅｎ ＳＭ，Ｇｕｌａｔｉ Ｐ，ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｒｏｅｋ Ｍ，Ｍｉｓｃｈｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｐｌｅｕｒａｌ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ ｂｙ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｒｅ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１３）１１：１８７．ｄｏｉ：１０．１１８６／１４７９－５８７６－１１－１８７．
【0182】
一部の実施形態では、標的細胞は、非固形腫瘍細胞、即ち、非固形癌細胞である。非固形腫瘍細胞の表面に見られるタンパク質は当技術分野で公知であり、例えば、Ｆｅｓｎａｋ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ．２０１６ Ａｕｇ ２３；１６（９）：５６６－８１に記載されている。抗原結合ドメインによって標的とされ得る非固形腫瘍細胞の表面上の非限定的な例示的タンパク質を以下の表９に記載する。
【0183】
【表9】
【0184】
３４．Ｃａｓｕｃｃｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．ＣＤ４４ｖ６－ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｍｅｄｉａｔｅ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ．Ｂｌｏｏｄ．２０１３；１２２：３４６１－３４７２．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１３－０４－４９３３６１ ［ＰｕｂＭｅｄ：２４０１６４６１］
１７３．Ｇｉｏｒｄａｎｏ Ａｔｔｉａｎｅｓｅ ＧＭ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｂｙ ａｎｔｉ－ＣＤ２３ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｂｌｏｏｄ．２０１１；１１７：４７３６－４７４５．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１０－１０－３１１８４５［ＰｕｂＭｅｄ：２１４０６７１８］
１７４．Ｍａｍｏｎｋｉｎ Ｍ，Ｒｏｕｃｅ ＲＨ，ＴａｓｈｉｒｏＨ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＭＫ．Ａ Ｔ－ｃｅｌｌ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２０１５；１２６：９８３－９９２．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１５－０２－６２９５２７［ＰｕｂＭｅｄ：２６０５６１６５］
１７５．Ｓｈａｆｆｅｒ ＤＲ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ＣＤ７０ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＣＤ７０－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２０１１；１１７：４３０４－４３１４．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１０－０４－２７８２１８［ＰｕｂＭｅｄ：２１３０４１０３］
１７６．Ｍｉｈａｒａ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｇａｉｎｓｔ ＣＤ３８ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｎ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ ｍｙｅｌｏｍａ ｃｅｌｌｓ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１２；２６：３６５－３６７．ＤＯＩ：１０．１０３８／ｌｅｕ．２０１１．２０５［ＰｕｂＭｅｄ：２１８３６６１０］
１７３．Ｇｉｏｒｄａｎｏ Ａｔｔｉａｎｅｓｅ ＧＭ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｂｙ ａｎｔｉ－ＣＤ２３ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｂｌｏｏｄ．２０１１；１１７：４７３６－４７４５．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１０－１０－３１１８４５［ＰｕｂＭｅｄ：２１４０６７１８］
１７４．Ｍａｍｏｎｋｉｎ Ｍ，Ｒｏｕｃｅ ＲＨ，ＴａｓｈｉｒｏＨ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＭＫ．Ａ Ｔ－ｃｅｌｌ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２０１５；１２６：９８３－９９２．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１５－０２－６２９５２７［ＰｕｂＭｅｄ：２６０５６１６５］
１７５．Ｓｈａｆｆｅｒ ＤＲ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ＣＤ７０ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＣＤ７０－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２０１１；１１７：４３０４－４３１４．ＤＯＩ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１０－０４－２７８２１８［ＰｕｂＭｅｄ：２１３０４１０３］
１７６．Ｍｉｈａｒａ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｇａｉｎｓｔ ＣＤ３８ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｎ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ ｍｙｅｌｏｍａ ｃｅｌｌｓ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２０１２；２６：３６５－３６７．ＤＯＩ：１０．１０３８／ｌｅｕ．２０１１．２０５［ＰｕｂＭｅｄ：２１８３６６１０］
【0185】
一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、病原体、例えば、細菌細胞、真菌細胞又はウイルス上の、標的タンパク質に結合する。抗原結合ドメインによって標的とされ得る病原体の表面上のタンパク質は当技術分野で公知であり、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＳｅｉｆ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：２７１１に記載されている。抗原結合ドメインによって標的とされ得る病原体の表面上の非限定的な例示的タンパク質を以下の表１０に記載する。
【0186】
【表10】
【0187】
１８．Ｚｈｅｎ Ａ，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ ＣＷ，Ｃａｒｒｉｌｌｏ ＭＡ，Ｒｅｄｄｙ ＳＳ，Ｙｏｕｎ ＣＳ，Ｌａｍ ＢＢ，ｅｔ ａｌ．Ｌｏｎｇｔｅｒｍ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａ ｎｏｎ－ｈｕｍａｎ ｐｒｉｍａｔｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆＨＩＶ／ＡＩＤＳ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ．（２０１７）１３：ｅ１００６７５３．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｐａｔ．１００６７５３
１９．Ｚｈｅｎ Ａ，Ｋａｍａｔａ Ｍ，Ｒｅｚｅｋ Ｖ，Ｒｉｃｋ Ｊ，Ｌｅｖｉｎ Ｂ，Ｋａｓｐａｒｉａｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．ＨＩＶ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１５）２３：１３５８－６７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔ．２０１５．１０２
２０．Ｌｅｉｂｍａｎ ＲＳ，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ ＭＷ，Ｅｌｌｅｂｒｅｃｈｔ ＣＴ，Ｍａｌｄｉｎｉ ＣＲ，Ｇｌｏｖｅｒ ＪＡ，Ｓｅｃｒｅｔｏ ＡＪ，ｅｔ ａｌ．Ｓｕｐｒａｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｖｅｒＨＩＶ－１ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｒｅ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＣＤ４－ｂａｓｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ．（２０１７）１３：１－３０．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｐａｔ．１００６６１３
２１．Ｌｉｕ Ｂ，Ｚｏｕ Ｆ，Ｌｕ Ｌ，Ｃｈｅｎ Ｃ，Ｈｅ Ｄ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｇｕｉｄｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ－ｃｈａｉｎ Ｆｖ ｏｆ ａ ｂｒｏａｄｌｙ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｖｉｒｕｓ ｒｅａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｌａｔｅｎｃｙ ｉｎ ＣＤ４ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍＨＩＶ－１－ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１６）９０：９７１２－２４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００８５２－１６
２２．Ｍａｓｉｅｒｏ Ｓ，Ｄｅｌ Ｖｅｃｃｈｉｏ Ｃ，Ｇａｖｉｏｌｉ Ｒ，Ｍａｔｔｉｕｚｚｏ Ｇ，Ｃｕｓｉ ＭＧ，Ｍｉｃｈｅｌｉ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｂｙ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ｔ－ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｔｙｐｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅＨＩＶ－１ ｇｐ１２０．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．（２００５）１２：２９９－３１０．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｊ．ｇｔ．３３０２４１３
２３．Ｇｈａｎｅｍ ＭＨ，Ｂｏｌｉｖａｒ－Ｗａｇｅｒｓ Ｓ，Ｄｅｙ Ｂ，Ｈａｊｄｕｃｚｋｉ Ａ，Ｖａｒｇａｓ－Ｉｎｃｈａｕｓｔｅｇｕｉ ＤＡ，Ｄａｎｉｅｌｓｏｎ ＤＴ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ＣＤ４ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ａｎｄＨｉｇｈ－ｍａｎｎｏｓｅ Ｇｌｙｃａｎｓ ｏｆ ｇｐ１２０ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｆｏｒ ａｎｔｉ－ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｐｏｔｅｎｃｙ ａｎｄ ｂｒｅａｄｔｈ ｗｉｔｈ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．（２０１８）２０：４０７－１９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｃｙｔ．２０１７．１１．００１
２４．Ｈａｌｅ Ｍ，Ｍｅｓｏｊｅｄｎｉｋ Ｔ，Ｉｂａｒｒａ ＧＳＲ，Ｓａｈｎｉ Ｊ，Ｂｅｒｎａｒｄ Ａ，Ｓｏｍｍｅｒ Ｋ，ｅｔ ａｌ．ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＨＩＶ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，ａｎｔｉ－ＨＩＶ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１７）２５：５７０－９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１６．１２．０２３
２５．Ｌｉｕ Ｌ，Ｐａｔｅｌ Ｂ，Ｇｈａｎｅｍ ＭＨ，Ｂｕｎｄｏｃ Ｖ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｍｏｒｇａｎ ＲＡ，ｅｔ ａｌ．Ｎｏｖｅｌ ＣＤ４－ｂａｓｅｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｆｏｒ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｎｔｉＨＩＶ ｐｏｔｅｎｃｙ ａｎｄ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆＨＩＶ ｅｎｔｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１５）８９：６６８５－９４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００４７４－１５
２６．Ａｎｔｈｏｎｙ－Ｇｏｎｄａ Ｋ，Ｂａｒｄｈｉ Ａ，Ｒａｙ Ａ，Ｆｌｅｒｉｎ Ｎ，Ｌｉ Ｍ，Ｃｈｅｎ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉ－ＨＩＶ ｄｕｏＣＡＲ－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｄｉｓｐｌａｙ ｂｒｏａｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＨＩＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａＨｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１：ｅａａｖ５６８５．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａｖ５６８５
２７．Ｂｏｈｎｅ Ｆ，Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ Ｍ，Ｅｂｅｒｔ Ｇ，Ｗｉｅｇｍａｎｎ Ｋ，Ｋｕｅｒｓｃｈｎｅｒ Ｔ，Ｓｃｈｕｌｚｅ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｌｉｍｉｎａｔｅ ｉｎｆｅｃｔｅｄＨｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．（２００８）１３４：２３９－４７．ｄｏｉ：１０．１０５３／ｊ．ｇａｓｔｒｏ．２００７．１１．００２
２８．Ｋｒｅｂｓ Ｋ，Ｂｏｅｔｔｉｎｇｅｒ Ｎ，Ｈｕａｎｇ ＬＲ，Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ Ｍ，Ａｒｚｂｅｒｇｅｒ Ｓ，Ｇａｓｔｅｉｇｅｒ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｈａｔ ｂｉｎｄｓＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｃｏｎｔｒｏｌ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．（２０１３）１４５：４５６－６５．ｄｏｉ：１０．１０５３／ｊ．ｇａｓｔｒｏ．２０１３．０４．０４７
２９．Ｆｅｓｔａｇ ＭＭ，Ｆｅｓｔａｇ Ｊ，Ｆｒａｅβｌｅ ＳＰ，Ａｓｅｎ Ｔ，Ｓａｃｈｅｒｌ Ｊ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｆｕｌｌｙＨｕｍａｎ，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ａｎ ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１９）２７：９４７－５９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１９．０２．００１
３０．Ｋｒｕｓｅ ＲＬ，Ｓｈｕｍ Ｔ，ＴａｓｈｉｒｏＨ，Ｂａｒｚｉ Ｍ，Ｙｉ Ｚ，Ｗｈｉｔｔｅｎ－Ｂａｕｅｒ Ｃ，ｅｔ ａｌ．ＨＢｓＡｇ－ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｈｉｂｉｔ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎＨＢＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄＨｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｍｉｃｅ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．（２０１８）２０：６９７－７０５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｃｙｔ．２０１８．０２．００２
３１．Ｓａｕｔｔｏ ＧＡ，Ｗｉｓｓｋｉｒｃｈｅｎ Ｋ，Ｃｌｅｍｅｎｔｉ Ｎ，Ｃａｓｔｅｌｌｉ Ｍ，Ｄｉｏｔｔｉ ＲＡ，Ｇｒａｆ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ（ＨＣＶ）Ｅ２ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ．Ｇｕｔ．（２０１６）６５：５１２－２３．ｄｏｉ：１０．１１３６／ｇｕｔｊｎｌ－２０１４－３０８３１６
３２．Ｓａｕｔｔｏ Ｇ，Ｔａｒｒ ＡＷ，Ｍａｎｃｉｎｉ Ｎ，Ｃｌｅｍｅｎｔｉ Ｍ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ｏｆＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ Ｅ２ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｂｙ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃｌｉｎ Ｄｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１３）２０１３：４５０９６３．ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１３／４５０９６３
３３．Ｆｕｌｌ Ｆ，Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ，Ｔｈｏｎｎ Ｖ，Ｇｏｅｔｚ Ｇ，Ｓｃｈｏｌｚ Ｂ，Ｋａｕｆｍａｎｎ ＫＢ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１０）８４：４０８３－８．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．０２１１７－０９
３４．Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｗａｌｔｅｒｓｋｉｒｃｈｅｎ Ｃ，Ｂｒｅｙ Ｃ，Ｇｅｙｅｒｅｇｇｅｒ Ｒ，Ｆｕｌｌ Ｆ，Ｅｎｓｓｅｒ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｒｅｓｉｓｔ Ｔ ｃｅｌｌ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ｉｎ ａｎＨＬＡ－ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｆｒｏｎｔ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（２０１６）７：１－１５．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｍｉｃｂ．２０１６．００８４４
３５．Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｂｒｅｙ ＣＵ，Ｅｎｓｓｅｒ Ａ，Ｈｏｌｔｅｒ Ｗ，Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ．Ｔｕｒｎｉｎｇ ｔｈｅ ｔａｂｌｅｓ ｏｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ：ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｖｉｒａｌ Ｆｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｂｙ ＣＡＲｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｍｕｔａｔｅｄ ＣＨ２－ＣＨ３ ＩｇＧ ｓｐａｃｅｒ ｄｏｍａｉｎｓ．Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１８）１－１２．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１２９６７－０１８－１３９４－ｘ
３６．Ｋｕｍａｒｅｓａｎ ＰＲ，Ｍａｎｕｒｉ ＰＲ，Ａｌｂｅｒｔ ＮＤ，Ｍａｉｔｉ Ｓ，ＳｉｎｇｈＨ，Ｍｉ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｔａｒｇｅｔ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｔｏ ｔｒｅａｔ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｓｔｉｃ ｆｕｎｇａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．（２０１４）１１１：１０６６０－５．ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．１３１２７８９１１１
１９．Ｚｈｅｎ Ａ，Ｋａｍａｔａ Ｍ，Ｒｅｚｅｋ Ｖ，Ｒｉｃｋ Ｊ，Ｌｅｖｉｎ Ｂ，Ｋａｓｐａｒｉａｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．ＨＩＶ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１５）２３：１３５８－６７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔ．２０１５．１０２
２０．Ｌｅｉｂｍａｎ ＲＳ，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ ＭＷ，Ｅｌｌｅｂｒｅｃｈｔ ＣＴ，Ｍａｌｄｉｎｉ ＣＲ，Ｇｌｏｖｅｒ ＪＡ，Ｓｅｃｒｅｔｏ ＡＪ，ｅｔ ａｌ．Ｓｕｐｒａｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｖｅｒＨＩＶ－１ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｒｅ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＣＤ４－ｂａｓｅｄ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ．（２０１７）１３：１－３０．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｐａｔ．１００６６１３
２１．Ｌｉｕ Ｂ，Ｚｏｕ Ｆ，Ｌｕ Ｌ，Ｃｈｅｎ Ｃ，Ｈｅ Ｄ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｇｕｉｄｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ－ｃｈａｉｎ Ｆｖ ｏｆ ａ ｂｒｏａｄｌｙ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｖｉｒｕｓ ｒｅａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｌａｔｅｎｃｙ ｉｎ ＣＤ４ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍＨＩＶ－１－ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１６）９０：９７１２－２４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００８５２－１６
２２．Ｍａｓｉｅｒｏ Ｓ，Ｄｅｌ Ｖｅｃｃｈｉｏ Ｃ，Ｇａｖｉｏｌｉ Ｒ，Ｍａｔｔｉｕｚｚｏ Ｇ，Ｃｕｓｉ ＭＧ，Ｍｉｃｈｅｌｉ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｂｙ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ｔ－ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｔｙｐｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｆｏｒ ｔｈｅＨＩＶ－１ ｇｐ１２０．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．（２００５）１２：２９９－３１０．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｊ．ｇｔ．３３０２４１３
２３．Ｇｈａｎｅｍ ＭＨ，Ｂｏｌｉｖａｒ－Ｗａｇｅｒｓ Ｓ，Ｄｅｙ Ｂ，Ｈａｊｄｕｃｚｋｉ Ａ，Ｖａｒｇａｓ－Ｉｎｃｈａｕｓｔｅｇｕｉ ＤＡ，Ｄａｎｉｅｌｓｏｎ ＤＴ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ＣＤ４ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ａｎｄＨｉｇｈ－ｍａｎｎｏｓｅ Ｇｌｙｃａｎｓ ｏｆ ｇｐ１２０ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｆｏｒ ａｎｔｉ－ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｐｏｔｅｎｃｙ ａｎｄ ｂｒｅａｄｔｈ ｗｉｔｈ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．（２０１８）２０：４０７－１９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｃｙｔ．２０１７．１１．００１
２４．Ｈａｌｅ Ｍ，Ｍｅｓｏｊｅｄｎｉｋ Ｔ，Ｉｂａｒｒａ ＧＳＲ，Ｓａｈｎｉ Ｊ，Ｂｅｒｎａｒｄ Ａ，Ｓｏｍｍｅｒ Ｋ，ｅｔ ａｌ．ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＨＩＶ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，ａｎｔｉ－ＨＩＶ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１７）２５：５７０－９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１６．１２．０２３
２５．Ｌｉｕ Ｌ，Ｐａｔｅｌ Ｂ，Ｇｈａｎｅｍ ＭＨ，Ｂｕｎｄｏｃ Ｖ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｍｏｒｇａｎ ＲＡ，ｅｔ ａｌ．Ｎｏｖｅｌ ＣＤ４－ｂａｓｅｄ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｆｏｒ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｎｔｉＨＩＶ ｐｏｔｅｎｃｙ ａｎｄ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆＨＩＶ ｅｎｔｒｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１５）８９：６６８５－９４．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００４７４－１５
２６．Ａｎｔｈｏｎｙ－Ｇｏｎｄａ Ｋ，Ｂａｒｄｈｉ Ａ，Ｒａｙ Ａ，Ｆｌｅｒｉｎ Ｎ，Ｌｉ Ｍ，Ｃｈｅｎ Ｗ，ｅｔ ａｌ．Ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉ－ＨＩＶ ｄｕｏＣＡＲ－Ｔ ｃｅｌｌｓ ｄｉｓｐｌａｙ ｂｒｏａｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＨＩＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａＨｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１：ｅａａｖ５６８５．ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．ａａｖ５６８５
２７．Ｂｏｈｎｅ Ｆ，Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ Ｍ，Ｅｂｅｒｔ Ｇ，Ｗｉｅｇｍａｎｎ Ｋ，Ｋｕｅｒｓｃｈｎｅｒ Ｔ，Ｓｃｈｕｌｚｅ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｌｉｍｉｎａｔｅ ｉｎｆｅｃｔｅｄＨｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．（２００８）１３４：２３９－４７．ｄｏｉ：１０．１０５３／ｊ．ｇａｓｔｒｏ．２００７．１１．００２
２８．Ｋｒｅｂｓ Ｋ，Ｂｏｅｔｔｉｎｇｅｒ Ｎ，Ｈｕａｎｇ ＬＲ，Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ Ｍ，Ａｒｚｂｅｒｇｅｒ Ｓ，Ｇａｓｔｅｉｇｅｒ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｈａｔ ｂｉｎｄｓＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｃｏｎｔｒｏｌ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．（２０１３）１４５：４５６－６５．ｄｏｉ：１０．１０５３／ｊ．ｇａｓｔｒｏ．２０１３．０４．０４７
２９．Ｆｅｓｔａｇ ＭＭ，Ｆｅｓｔａｇ Ｊ，Ｆｒａｅβｌｅ ＳＰ，Ａｓｅｎ Ｔ，Ｓａｃｈｅｒｌ Ｊ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｆｕｌｌｙＨｕｍａｎ，Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ ａｎ ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．（２０１９）２７：９４７－５９．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｍｔｈｅ．２０１９．０２．００１
３０．Ｋｒｕｓｅ ＲＬ，Ｓｈｕｍ Ｔ，ＴａｓｈｉｒｏＨ，Ｂａｒｚｉ Ｍ，Ｙｉ Ｚ，Ｗｈｉｔｔｅｎ－Ｂａｕｅｒ Ｃ，ｅｔ ａｌ．ＨＢｓＡｇ－ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｈｉｂｉｔ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎＨＢＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄＨｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｍｉｃｅ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ．（２０１８）２０：６９７－７０５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊｃｙｔ．２０１８．０２．００２
３１．Ｓａｕｔｔｏ ＧＡ，Ｗｉｓｓｋｉｒｃｈｅｎ Ｋ，Ｃｌｅｍｅｎｔｉ Ｎ，Ｃａｓｔｅｌｌｉ Ｍ，Ｄｉｏｔｔｉ ＲＡ，Ｇｒａｆ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｔ ｃｅｌｌｓ ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ（ＨＣＶ）Ｅ２ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ．Ｇｕｔ．（２０１６）６５：５１２－２３．ｄｏｉ：１０．１１３６／ｇｕｔｊｎｌ－２０１４－３０８３１６
３２．Ｓａｕｔｔｏ Ｇ，Ｔａｒｒ ＡＷ，Ｍａｎｃｉｎｉ Ｎ，Ｃｌｅｍｅｎｔｉ Ｍ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ａｎｄ ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ｏｆＨｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ Ｅ２ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｂｙ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃｌｉｎ Ｄｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１３）２０１３：４５０９６３．ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１３／４５０９６３
３３．Ｆｕｌｌ Ｆ，Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ，Ｔｈｏｎｎ Ｖ，Ｇｏｅｔｚ Ｇ，Ｓｃｈｏｌｚ Ｂ，Ｋａｕｆｍａｎｎ ＫＢ，ｅｔ ａｌ．Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊ Ｖｉｒｏｌ．（２０１０）８４：４０８３－８．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．０２１１７－０９
３４．Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｗａｌｔｅｒｓｋｉｒｃｈｅｎ Ｃ，Ｂｒｅｙ Ｃ，Ｇｅｙｅｒｅｇｇｅｒ Ｒ，Ｆｕｌｌ Ｆ，Ｅｎｓｓｅｒ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｒｅｓｉｓｔ Ｔ ｃｅｌｌ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ｉｎ ａｎＨＬＡ－ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｆｒｏｎｔ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（２０１６）７：１－１５．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｍｉｃｂ．２０１６．００８４４
３５．Ｐｒｏｆｆ Ｊ，Ｂｒｅｙ ＣＵ，Ｅｎｓｓｅｒ Ａ，Ｈｏｌｔｅｒ Ｗ，Ｌｅｈｎｅｒ Ｍ．Ｔｕｒｎｉｎｇ ｔｈｅ ｔａｂｌｅｓ ｏｎ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ：ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｖｉｒａｌ Ｆｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｂｙ ＣＡＲｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｍｕｔａｔｅｄ ＣＨ２－ＣＨ３ ＩｇＧ ｓｐａｃｅｒ ｄｏｍａｉｎｓ．Ｊ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１８）１－１２．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１２９６７－０１８－１３９４－ｘ
３６．Ｋｕｍａｒｅｓａｎ ＰＲ，Ｍａｎｕｒｉ ＰＲ，Ａｌｂｅｒｔ ＮＤ，Ｍａｉｔｉ Ｓ，ＳｉｎｇｈＨ，Ｍｉ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｔａｒｇｅｔ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｔｏ ｔｒｅａｔ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｓｔｉｃ ｆｕｎｇａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．（２０１４）１１１：１０６６０－５．ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．１３１２７８９１１１
【0188】
一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、例えばｇｐ１２０上の、標的タンパク質に結合する。特定の実施形態では、抗原結合ドメインは、共受容体結合に関与するｇｐ１２０上の高度に保存されたＣＤ４誘導性エピトープを認識する１７ｂヒトモノクローナル抗体の単鎖可変断片にＣＤ４セグメントが連結されている二重特異性分子を含むか、又はそれからなる。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ８９（１３）：６６８５－６６９４を参照されたい。さらに特定の実施形態では、抗原結合ドメインは、ヒトＣ型レクチンの炭水化物認識ドメインに連結されたヒトＣＤ４のセグメントを含む二重特異性分子を含むか、又はそれからなる。これらの抗原結合ドメインは、臨床的に重要なウイルス変異体上に保存されていると考えられるＨＩＶ－１ ｇｐ１２０上の２つの独立した領域（即ち、一次受容体結合部位及び高密度オリゴマンノースパッチ）を標的とする。Ｇｈａｎｅｍ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ ２０１８；２０（３）：４０７－４１９を参照。
【0189】
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、それぞれが異なるタンパク質を標的とする２つ以上の抗原結合ドメイン（例えば、２、３、４又は５つの抗原結合ドメイン）を含む。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、ＴＣＲ型シグナル伝達ドメインに作動可能に連結された第１の抗原結合ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインに作動可能に連結された第２の抗原結合ドメインを含む。
【0190】
Ｂ．ヒンジドメイン
ＣＡＲの細胞外領域、即ちＣＡＲの抗原結合ドメインは、ヒンジドメイン、例えば、ヒトタンパク質由来のヒンジを介して、膜貫通ドメインに結合していてもよい。例えば、一部の実施形態では、ヒンジは、ヒトＩｇ（免疫グロブリン）ヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ、又はＣＤ８ａヒンジであり得る。一部の実施形態では、ヒンジドメインは、ＩｇＤヒンジを含むか、又はＩｇＤヒンジからなる。一部の実施形態では、ヒンジドメインは、抑制性キラー細胞Ｉｇ様受容体（ＫＩＲ）２ＤＳ２ヒンジを含む。好適なヒンジドメインのアミノ酸配列及びヒンジドメインをコードする核酸配列は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第８，９１１，９９３号及び米国特許第１０，２７３，３００号に記載されており、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ＣＡＲの細胞外領域、即ちＣＡＲの抗原結合ドメインは、ヒンジドメイン、例えば、ヒトタンパク質由来のヒンジを介して、膜貫通ドメインに結合していてもよい。例えば、一部の実施形態では、ヒンジは、ヒトＩｇ（免疫グロブリン）ヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ、又はＣＤ８ａヒンジであり得る。一部の実施形態では、ヒンジドメインは、ＩｇＤヒンジを含むか、又はＩｇＤヒンジからなる。一部の実施形態では、ヒンジドメインは、抑制性キラー細胞Ｉｇ様受容体（ＫＩＲ）２ＤＳ２ヒンジを含む。好適なヒンジドメインのアミノ酸配列及びヒンジドメインをコードする核酸配列は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第８，９１１，９９３号及び米国特許第１０，２７３，３００号に記載されており、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0191】
Ｃ．膜貫通ドメイン
ＣＡＲは、任意選択によりヒンジドメインを介して、ＣＡＲの抗原結合ドメインに融合した膜貫通ドメインを含み得る。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＡＲ内の他のドメインの１つと天然に関連しており、例えば、ＣＡＲの他のドメインの１つと同じタンパク質に由来する。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、同じ又は異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへの膜貫通ドメインの結合を回避して、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小限とするために、アミノ酸置換によって選択又は修飾される。膜貫通ドメインは、天然に存在するタンパク質に由来するものであってもよく、又は操作されたものであってもよい。供給源が天然である場合、膜貫通ドメインは任意の膜結合タンパク質又は膜貫通タンパク質に由来し得る。特に興味深い膜貫通領域は、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４のアルファ鎖、ベータ鎖、又はゼータ鎖に由来し得る（例えば、少なくともその膜貫通領域を含む）。
ＣＡＲは、任意選択によりヒンジドメインを介して、ＣＡＲの抗原結合ドメインに融合した膜貫通ドメインを含み得る。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＡＲ内の他のドメインの１つと天然に関連しており、例えば、ＣＡＲの他のドメインの１つと同じタンパク質に由来する。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、同じ又は異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへの膜貫通ドメインの結合を回避して、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小限とするために、アミノ酸置換によって選択又は修飾される。膜貫通ドメインは、天然に存在するタンパク質に由来するものであってもよく、又は操作されたものであってもよい。供給源が天然である場合、膜貫通ドメインは任意の膜結合タンパク質又は膜貫通タンパク質に由来し得る。特に興味深い膜貫通領域は、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４のアルファ鎖、ベータ鎖、又はゼータ鎖に由来し得る（例えば、少なくともその膜貫通領域を含む）。
【0192】
或いは、膜貫通ドメインを操作してもよく、その場合、ロイシン及びバリンなどの疎水性残基を主に含むことになる。一部の実施形態では、操作された膜貫通は、膜貫通ドメインの各末端にフェニルアラニン、トリプトファン及びバリンのトリプレットを含む。任意選択により、短いポリペプチドリンカー、例えば、２～１０アミノ酸長のポリペプチドリンカーは、ＣＡＲの膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインの間に結合を形成してもよい。グリシン－セリンダブレットは、好適なリンカーの一例である。特定の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８膜貫通ドメインである。
【0193】
Ｄ．細胞内シグナル伝達ドメイン
ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲが発現する免疫細胞のエフェクター機能の少なくとも１つの活性化の原因となる。「エフェクター機能」という用語は、細胞の特殊な機能を指す。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、サイトカインの分泌を含む細胞溶解活性又はヘルパー活性であり得る。タンパク質の細胞内シグナル伝達ドメイン全体を使用できるが、多くの場合、鎖全体を使用する必要はない。細胞内シグナル伝達ドメインの切断部分が使用される範囲で、エフェクター機能シグナルを伝達する限り、そのような切断部分は無傷の鎖の代わりに使用され得る。従って、細胞内シグナル伝達ドメインという用語は、エフェクター機能シグナルを形質導入するのに十分なタンパク質の細胞内シグナル伝達ドメインの切断された部分を含むことを意味する。
ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲが発現する免疫細胞のエフェクター機能の少なくとも１つの活性化の原因となる。「エフェクター機能」という用語は、細胞の特殊な機能を指す。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、サイトカインの分泌を含む細胞溶解活性又はヘルパー活性であり得る。タンパク質の細胞内シグナル伝達ドメイン全体を使用できるが、多くの場合、鎖全体を使用する必要はない。細胞内シグナル伝達ドメインの切断部分が使用される範囲で、エフェクター機能シグナルを伝達する限り、そのような切断部分は無傷の鎖の代わりに使用され得る。従って、細胞内シグナル伝達ドメインという用語は、エフェクター機能シグナルを形質導入するのに十分なタンパク質の細胞内シグナル伝達ドメインの切断された部分を含むことを意味する。
【0194】
ＣＡＲにおける使用に好適な様々な細胞内シグナル伝達ドメインが当技術分野で公知であり、例えば、Ｆｅｓｎａｋ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ．２０１６ Ａｕｇ ２３；１６（９）：５６６－８１；及びＴｏｋａｒｅｗ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．Ｊａｎ；１２０（１）：２６－３７に記載されている。ＣＡＲにおける使用のための細胞内シグナル伝達ドメインの成分の例として、抗原受容体結合後に協調して作用してシグナル伝達を開始するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列及び共受容体、並びにこれらの配列の任意の誘導体又は変異体、及び同じ機能的能力を有する任意の合成配列が挙げられる。ＴＣＲのみを介して生成されるシグナルだけではＴ細胞を完全に活性化するには不十分であり、二次又は共刺激シグナルも必要であることが知られている。従って、Ｔ細胞の活性化は、２つの異なるクラスの細胞質シグナル伝達配列：ＴＣＲ（即ち、ＴＣＲ型シグナル伝達ドメイン）を介して抗原依存性の一次活性化を開始するもの、及び抗原非依存的に作用して二次又は共刺激シグナルを提供するもの（即ち、共刺激シグナル伝達ドメイン）によって媒介されているといえる。
【0195】
ＴＣＲ型シグナル伝達ドメインは、ＴＣＲ複合体の一次活性化を刺激的又は抑制的に調節する。刺激的に作用するＴＣＲ型シグナル伝達ドメインは、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含有し得る。一次細胞質含有するシグナル伝達配列をＩＴＡＭの例には、ＴＣＲゼータ、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄに由来するものが含まれる。
【0196】
特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータからの細胞質シグナル伝達配列を含む。ヒトＣＤ３ゼータタンパク質アミノ酸配列は、例えば、Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｐ２０９６３に記載されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ＣＤ３ゼータの細胞質シグナル伝達配列は、ＣＤ３ゼータタンパク質のアミノ酸残基５２～１６４から構成される。ＣＤ３ゼータの細胞質シグナル伝達配列は、ＣＤ３ゼータタンパク質のアミノ酸残基６１～８９、１００～１２８、及び１３１～１５９にある３つのＩＴＡＭを含む。一部の実施形態では、１つ又は複数のＣＤ３ゼータＩＴＡＭ中の１つ又は複数のチロシン残基が変異している。３つのＣＤ３ゼータＩＴＡＭを全て組み込んだＣＡＲにおけるシグナル伝達の冗長性が、逆効果であるＴ細胞の分化及び枯渇を助長し得ると考えられている。従って、１つ又は複数のＣＤ３ゼータＩＴＡＭの１つ又は複数のチロシン残基を変異させると、そのリン酸化及び下流のシグナル伝達が妨げられ、その結果、治療プロファイルが強化されたＣＡＲが生じ得る。その全内容が参照により本明細書に組み込まれるＦｅｕｃｈｔ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊａｎ；２５（１）：８２－８８を参照。一部の実施形態では、チロシン残基は、別のアミノ酸、例えば、フェニルアラニンによる置換によって変異する。
【0197】
細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激分子からの１つ又は複数の共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。共刺激分子は、抗原に対するリンパ球の効率的な応答に必要な、抗原受容体又はそのリガンド以外の、細胞表面分子である。このような分子の例には、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンドが含まれる。例えば、特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータ鎖部分及び１つ又は複数の共刺激シグナル伝達ドメインを含み得る。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、免疫刺激分子に由来し、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンドのうち１つ又は複数に由来する。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、抑制性免疫チェックポイントタンパク質、例えば、ＰＤ－１又はＢ７－Ｈ３に由来する。
【0198】
ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメイン内のＴＣＲ型シグナル伝達ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインは、ランダム又は特定の順序で相互に連結され得る。任意選択により、例えば２～１０アミノ酸長の短いポリペプチドリンカーが結合を形成してもよい。グリシン－セリンダブレットは、好適なリンカーの一例である。
【0199】
一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータの細胞内ドメインを含む。シグナル伝達ドメインの様々な組み合わせも使用され得る。例えば、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも２、３、４、又は５つの異なるタンパク質からのシグナル伝達ドメインを含み得る。例えば、一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータの細胞内ドメイン及びＣＤ２８のシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータの細胞内ドメイン及び４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータの細胞内ドメイン並びにＣＤ２８及び４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータの細胞内ドメイン、ＣＤ２８及び４－１ＢＢのシグナル伝達ドメイン、並びにＣＤ２７又はＣＤ１３４のシグナル伝達ドメインを含む。ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインにおける使用に好適な様々なシグナル伝達ドメインのアミノ酸配列、及びそれらをコードする核酸配列は当技術分野で公知であり、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８，９１１，９９３号に記載されている。
【0200】
例えば、一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、以下：（ａ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；（ｂ）４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメインとＣＤ３ゼータの細胞内ドメイン；及び（ｃ）ＣＤ２８の共刺激シグナル伝達ドメイン、４－１ＢＢの共刺激シグナル伝達ドメイン、ＣＤ２７又はＣＤ１３４の共刺激シグナル伝達ドメイン、及びＣＤ３ゼータの細胞内ドメインの組み合わせから選択されるシグナル伝達ドメインの組み合わせを含む。
【0201】
操作された免疫細胞は、ＣＡＲ活性化時に構成的又は誘導的に発現されるサイトカイン（例えば、インターロイキン１２（ＩＬ－１２））などのタンパク質をさらに含み得る。これらのＣＡＲで形質導入されたＴ細胞は、普遍的なサイトカイン媒介性殺傷のためにリダイレクトされたＴ細胞（ＴＲＵＣＫ）と呼ばれる。これらのＣＡＲの活性化は、エキソサイトーシス（パーフォリン、グランザイム）又はデスリガンド－細胞死受容体（Ｆａｓ－ＦａｓＬ、ＴＲＡＩＬ）系などのいくつかの相乗機構を介して、所望のサイトカインの産生及び分泌を促進し、腫瘍の死滅を促進する。Ｔｏｋａｒｅｗ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．Ｊａｎ；１２０（１）：２６－３７を参照。
【0202】
一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＩＬ－１２の活性化又は転写を駆動するドメインを含み得る。例えば、ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインは、ＳＴＡＴ３／５結合モチーフを有するＩＬ－２Ｒβ切断型細胞内インターロイキン２β鎖受容体などの、ＩＬ－１２活性化又はＩＬ－１２転写を駆動するドメインをさらに含み得る。この受容体の抗原特異的活性化は、ＴＣＲ（例えば、ＣＤ３ζドメインを介して）、共刺激（例えば、ＣＤ２８ドメイン）、及びサイトカイン（ＪＡＫ－ＳＴＡＴ３／５）シグナル伝達を同時に引き起こし、これは、完全なＴ細胞の活性化及び増殖を駆動するために生理学的に必要な３つ全ての相乗シグナルを効果的に提供する。Ｔｏｋａｒｅｗ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．Ｊａｎ；１２０（１）：２６－３７を参照。
【0203】
ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインに存在し得るシグナル伝達ドメインの非限定的な例示的組み合わせを以下の表１１に記載する。
【0204】
【表11】
【0205】
参考文献
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２５．２５．Ｓｍｉｔｈ，Ａ．Ｊ．，Ｏｅｒｔｌｅ，Ｊ．，Ｗａｒｒｅｎ，Ｄ．＆Ｐｒａｔｏ，Ｄ．Ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）Ｔ ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｃａｎｃｅｒｓ：ｓｕｍｍａｒｙ ａｎｄ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２，５９－６８（２０１６）．
２９．Ｋａｇｏｙａ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．Ａ ｎｏｖｅｌ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａ ＪＡＫ－ＳＴＡＴ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｄｏｍａｉｎ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２４，３５２（２０１８）．
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【0206】
ＣＡＲをコードするベクター
操作された免疫細胞における発現のためのＣＡＲは、ＣＡＲのドメインをコードする核酸配列、例えば、抗原結合ドメインをコードする核酸配列、膜貫通ドメインをコードする核酸配列、及び細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列を含む、ＤＮＡ構築物によってコードされ得、その全てが作動可能に連結されている。ＣＡＲをコードするＤＮＡ構築物は、ヒンジドメインをコードする核酸配列をさらに含み得る。これらのドメインをコードする核酸配列は、標準的な技術を使用して、例えば、遺伝子を発現する細胞からライブラリーをスクリーニングすることによって、遺伝子を含むことが知られているベクターから遺伝子を誘導することによって、又は遺伝子を含有する細胞及び組織から直接単離することによってなどの、当技術分野で公知の組換え方法を使用して得てもよい。或いは、目的の遺伝子をクローニングするのではなく、合成的に産生することができる。
操作された免疫細胞における発現のためのＣＡＲは、ＣＡＲのドメインをコードする核酸配列、例えば、抗原結合ドメインをコードする核酸配列、膜貫通ドメインをコードする核酸配列、及び細胞内シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列を含む、ＤＮＡ構築物によってコードされ得、その全てが作動可能に連結されている。ＣＡＲをコードするＤＮＡ構築物は、ヒンジドメインをコードする核酸配列をさらに含み得る。これらのドメインをコードする核酸配列は、標準的な技術を使用して、例えば、遺伝子を発現する細胞からライブラリーをスクリーニングすることによって、遺伝子を含むことが知られているベクターから遺伝子を誘導することによって、又は遺伝子を含有する細胞及び組織から直接単離することによってなどの、当技術分野で公知の組換え方法を使用して得てもよい。或いは、目的の遺伝子をクローニングするのではなく、合成的に産生することができる。
【0207】
ＣＡＲをコードするＤＮＡ構築物は、免疫細胞への導入のためにベクターに挿入される。レンチウイルスなどのレトロウイルス由来のベクターは、導入遺伝子の長期の安定な組込み及び娘細胞におけるその増殖を可能にすることから、長期遺伝子導入を達成するために好適なツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞に形質導入できるという点で、マウス白血病ウイルスなどのオンコレトロウイルス由来のベクターに対してさらなる利点を有する。また、免疫原性が低いという追加の利点も有する。
【0208】
ＣＡＲをコードする天然又は合成核酸の発現は、典型的にはＣＡＲポリペプチド又はその部分をコードする核酸をプロモーターに作動可能に連結し、構築物を発現ベクターに組み込むことにより達成される。ベクターは、真核生物における複製及び組み込みに適し得る。典型的なクローニングベクターは、所望される核酸配列の発現の調節にとって有用な転写及び翻訳ターミネーター、開始配列、並びにプロモーターを有する。遺伝子送達の方法は当技術分野で公知である。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号、第５，５８０，８５９号、第５，５８９，４６６号を参照。一部の実施形態では、ベクターは遺伝子療法ベクターである。核酸配列は、多数の種類のベクター、例えば、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、及びコスミドにクローニングできる。特に興味深いベクターには、発現ベクター及び複製ベクターが含まれる。発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供されてもよい。ウイルスベクター技術は当技術分野で周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、並びに他のウイルス学及び分子生物学のマニュアルに記載されている。ベクターとして有用であるウイルスとして、限定はされないが、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ヘルペスウイルス、及びレンチウイルスが挙げられる。
【0209】
一般に、好適なベクターは、少なくとも１つの生物において機能的な複製起点、プロモーター配列、便宜的な制限エンドヌクレアーゼ部位、及び１以上の選択可能マーカーを有する（例えば、国際公開第０１／９６５８４号パンフレット；国際公開第０１／２９０５８号パンフレット；及び米国特許第６，３２６，１９３号明細書）。哺乳動物細胞への遺伝子導入のために、多数のウイルスベースのシステムが開発されている。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達系に好都合なプラットフォームを提供する。選択された遺伝子は、当技術分野で公知の技術を使用してベクターに挿入し、レトロウイルス粒子にパッケージングすることができる。
【0210】
次いで、組換えウイルスを単離し、インビボ又はエクスビボで対象の細胞に送達することができる。多くのレトロウイルス系が当技術分野で公知である。一部の実施形態では、アデノウイルスベクターが使用される。多くのアデノウイルスベクターが当技術分野で公知である。一実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。追加のプロモーター要素、例えばエンハンサーは、転写開始の頻度を調節する。好適なプロモーターの一例が、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチド配列の発現を高レベルで駆動する能力がある強力な構成的プロモーター配列である。好適なプロモーターの他の例には、伸長増殖因子Ｉα（ＥＦ－１α）、ホスホグリセリン酸キナーゼ１（ＰＧＫ）、又は遺伝子発現を駆動する能力を保持するそれらの断片が含まれる。しかし、他の構成的プロモーター配列、例えば限定はされないが、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長末端リピート（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バー・ウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、並びにヒト遺伝子プロモーター、例えば限定はされないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、及びクレアチンキナーゼプロモーターも使用されてもよい。誘導性プロモーターを使用することもできる。誘導性プロモーターの使用により、それが作動可能に連結される対象のポリヌクレオチド配列の発現を、その発現が所望されるときに活性化するか、又は発現が所望されないときにその発現を不活性化する能力がある分子スイッチが提供される。誘導性プロモーターの例として、限定はされないが、メタロチオニンプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、及びテトラサイクリンプロモーターが挙げられる。
【0211】
ＣＡＲポリペプチド又はその一部の発現を評価するために、免疫細胞に導入されるべき発現ベクターはまた、ウイルスベクターを介してトランスフェクト又は感染されることが探求された細胞の集団から細胞を発現する同定及び選択を促進するため、選択可能マーカー遺伝子若しくはレポーター遺伝子のいずれか又は双方を有し得る。他の態様では、選択可能マーカーは、ＤＮＡの分離片に対して実施され、同時トランスフェクション法において使用されてもよい。宿主細胞内での発現を可能にするため、選択可能マーカーとレポーター遺伝子の双方は、適切な制御性配列と隣接していてもよい。有用な選択可能マーカーは、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子を含む。リポータ遺伝子は、トランスフェクトされた可能性がある免疫細胞を同定する、及び制御性配列の機能性を評価するために使用される。好適なリポータ遺伝子としては、ルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼをコード化する遺伝子、又は緑色蛍光タンパク質遺伝子を挙げることができる（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）。
【0212】
操作された免疫細胞は、安全スイッチとしてセツキシマブエピトープ又はリツキシマブエピトープをさらに含んでもよく、必要に応じてセツキシマブ又はリツキシマブの投与を介して操作された免疫細胞を死滅させることができる。Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｂｌｏｏｄ １１８：１２５５－６３；ａｎｄ Ｓｏｍｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２７（６）：１１２６－１１３８を参照。
【0213】
ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を産生する方法は、当技術分野で周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．を参照（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。
【0214】
ＩＩＩ．操作される免疫細胞の種類
タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、並びに／又は細胞ターンオーバーを引き起こすシグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）と操作された免疫細胞を標的細胞に導くターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）とを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作され得る免疫細胞は、限定はされないが、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）、マクロファージ、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞及び樹状細胞を含む。
タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、並びに／又は細胞ターンオーバーを引き起こすシグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）と操作された免疫細胞を標的細胞に導くターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）とを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作され得る免疫細胞は、限定はされないが、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）、マクロファージ、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞及び樹状細胞を含む。
【0215】
Ｔリンパ球（Ｔ細胞）
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）である。Ｔ細胞は、Ｂ細胞が抗体産生細胞に成長するのを助ける能力、単球／マクロファージの殺菌作用を高める能力、特定の種類の免疫応答の阻害、標的細胞の直接的な死滅、及び炎症反応の動員を含む、幅広い免疫機能を仲介する。（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ”，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。Ｔ細胞は、それらが発現する細胞表面受容体に基づいて２つの異なるクラスに細分される。Ｔ細胞の大部分は、α鎖とβ鎖からなるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現する。Ｔ細胞の小群は、γ鎖とδ鎖からなる受容体を発現する。α／β Ｔ細胞には、２つの亜系統：補助受容体分子ＣＤ４を発現するＴ細胞（ＣＤ４＋ Ｔ細胞）；及びＣＤ８を発現するＴ細胞（ＣＤ８＋ Ｔ細胞）が存在する。これらの細胞は、抗原を認識する方法と、エフェクター及び制御性機能が異なる。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ若しくは複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作されたＴ細胞は、α／β Ｔ細胞である。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ若しくは複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作されたＴ細胞は、γ／δ Ｔ細胞である。
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）である。Ｔ細胞は、Ｂ細胞が抗体産生細胞に成長するのを助ける能力、単球／マクロファージの殺菌作用を高める能力、特定の種類の免疫応答の阻害、標的細胞の直接的な死滅、及び炎症反応の動員を含む、幅広い免疫機能を仲介する。（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ”，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。Ｔ細胞は、それらが発現する細胞表面受容体に基づいて２つの異なるクラスに細分される。Ｔ細胞の大部分は、α鎖とβ鎖からなるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現する。Ｔ細胞の小群は、γ鎖とδ鎖からなる受容体を発現する。α／β Ｔ細胞には、２つの亜系統：補助受容体分子ＣＤ４を発現するＴ細胞（ＣＤ４＋ Ｔ細胞）；及びＣＤ８を発現するＴ細胞（ＣＤ８＋ Ｔ細胞）が存在する。これらの細胞は、抗原を認識する方法と、エフェクター及び制御性機能が異なる。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ若しくは複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作されたＴ細胞は、α／β Ｔ細胞である。一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ若しくは複数の異種ポリヌクレオチドを含むように操作されたＴ細胞は、γ／δ Ｔ細胞である。
【0216】
ＣＤ４＋ Ｔ細胞は、免疫系の主要な制御性細胞である。それらの制御機能は、Ｔ細胞が活性化されると発現が誘導されるＣＤ４０リガンドなどのそれらの細胞表面分子の発現、及び活性化されると分泌する様々なサイトカインの発現の両方に依存する。Ｔ細胞はまた、重要なエフェクター機能を媒介し、そのいくつかは、それらが分泌するサイトカインのパターンによって決定される。サイトカインは、標的細胞に対して直接的に毒性であり得、強力な炎症メカニズムを動員し得る。加えて、Ｔ細胞、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）によって認識される抗原を発現する標的細胞を効率的に溶解できるＣＴＬに成長し得る（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。Ｔ細胞はまた、機能に基づいてヘルパーＴ細胞；細胞性免疫の誘導に関与するＴ細胞；制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞；及び細胞傷害性Ｔ細胞として分類することができる。
【0217】
Ｔ細胞は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位の組織、腹水、胸水、脾臓組織、腫瘍を含む、多くの供給源から入手できる。Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離などの当業者に公知の任意の数の技術を使用して、対象から採取された血液の単位から得ることができる。Ｔ細胞はまた、個体から全血を取り出し、選択成分に分離し、残りを循環に戻すプロセスである、アフェレーシスによって収集してもよい。アフェレーシス産物は、典型的にはリンパ球を含有し、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、その他の有核白血球、赤血球、及び血小板を含む。一態様では、アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、任意選択により、その後のプロセシングステップのために細胞を適切な緩衝液又は培地に入れてもよい。一実施形態では、細胞は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。血液サンプルからＴ細胞を単離する方法は当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第８，９１１，９９３号及び第１０，２７３，３００号明細書に記載されており、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。さらに、当技術分野で利用可能な任意の数のＴ細胞株を使用され得る。Ｔ細胞の遺伝子改変（例えば、望ましいＣＡＲ及び／又はタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドを発現させるため）の前又は後に、Ｔ細胞は一般的に、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号；第６，５３４，０５５号；第６，９０５，６８０号；第６，６９２、９６４号；第５，８５８，３５８号；第６，８８７，４６６号；第６，９０５，６８１号；第７，１４４，５７５号；第７，０６７，３１８号；第７，１７２，８６９号；第７，２３２，５６６号；第７，１７５，８４３号；第５，８８３，２２３号；第６，９０５，８７４号；第６，７９７，５１４号；第６，８６７，０４１号明細書；及び米国特許出願公開第２００６０１２１００５号明細書に記載の方法を使用して、活性化及び増殖させることができる。本開示の方法の一部の実施形態では、Ｔ細胞は、処置される対象に対して自家性である。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、処置される対象に対して同族異系である。
【0218】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するようにＴ細胞を操作する方法は、本明細書及び当該技術分野において記載され、例えば、米国特許第８，９１１，９９３号及び米国特許第１０，２７３，３００号に記載されており、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0219】
マクロファージ
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、マクロファージである。マクロファージは、食作用と呼ばれるプロセスで、細胞残屑、異物、微生物、癌細胞などの物質を飲み込んで消化する。食作用に加えて、マクロファージは、非特異的防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特定の防御機構（適応免疫）を開始するのにも役立つ。例えば、マクロファージは、Ｔ細胞への抗原プレゼンター（ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｅｒ）として重要である。
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、マクロファージである。マクロファージは、食作用と呼ばれるプロセスで、細胞残屑、異物、微生物、癌細胞などの物質を飲み込んで消化する。食作用に加えて、マクロファージは、非特異的防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特定の防御機構（適応免疫）を開始するのにも役立つ。例えば、マクロファージは、Ｔ細胞への抗原プレゼンター（ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｅｒ）として重要である。
【0220】
本明細書に記載の組成物及び方法における使用のためのマクロファージは、例えば、増殖性で条件付き発生が停止された一次マクロファージ前駆体から調製され得る。非形質転換自己再生前駆細胞は、ＧＭ－ＣＳＦ又はＦｌｔ３Ｌを補充した培地中で、骨髄前駆細胞における転写因子Ｈｏｘｂ８の過剰発現によって確立される。Ｈｏｘｂ８活性は、前駆細胞の分化の遮断につながる。これにより、急速に増殖するクローニング可能な細胞が生じる。Ｈｏｘｂ８活性を除去すると、前駆細胞が分化を再開し、分化したマクロファージを産生できるようになる。Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｊ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌｅａｓｅ．２０１６ Ｏｃｔ ２８；２４０：５２７－５４０を参照。本開示の方法の一部の実施形態では、マクロファージは、処置される対象に対して自家性である。一部の実施形態では、マクロファージは、処置される対象に対して同族異系である。
【0221】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するようにマクロファージを操作する方法は、本明細書及び当該技術分野において記載され、例えば、Ｋｌｉｃｈｉｎｓｋｙ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌに記載されている。例えば、ヒト臍帯血由来のＣＤ３４＋造血幹／前駆細胞（ＨＳ／ＰＣ）に形質導入し、クローン原性アッセイで増殖させてもよい。タノトランスミッションを促進する異種ポリヌクレオチドは、ｈＴＩＥ２プロモーターの制御下で発現され得る。ＴＩＥ２プロモーターは、腫瘍部位でのマクロファージの分化時に発現する。Ｅｓｃｏｂａｒ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ６，２１７ｒａ３を参照。ＴＩＥ２は、２つの免疫グロブリン様ドメイン、３つの上皮増殖因子（ＥＧＦ）様ドメイン、及び３つのフィブロネクチンＩＩＩ型リピートを含有する固有の細胞外領域を有する。これはヒト腫瘍で広く発現しており、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）及びサイトカインの分泌を刺激することにより、多くの癌の進行において中心的な役割を果たしている。
【0222】
一部の実施形態では、操作されたマクロファージは、ＣＤ１４７分子の細胞内ドメインを含む、キメラ抗原受容体を発現する。ＣＤ１４７はヒトの免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーであり、ヒト腫瘍で広く発現しており、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）及びサイトカインの分泌を刺激することにより、多くの癌の進行において中心的な役割を果たしている。ＣＤ１４７は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の分解の原因となるＭＭＰの発現を介したＥＣＭのリモデリングに必須である。ＥＣＭの分解により、標的細胞、例えば、腫瘍細胞へのアクセスが改善する。例えば、ＥＣＭの分解により、免疫細胞による腫瘍浸潤が改善し得る。Ｃａｒｕａｎａ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｍａｙ；２１（５）：５２４－５２９を参照。タノトランスミッションを促進する異種ポリヌクレオチドは、ＣＤ１４７によって活性化されるプロモーターの制御下で発現され得る。ＣＤ１４７によって活性化されるプロモーターの例として、限定はされないが、ＮＦ－κＢプロモーター、ＡＰ１結合及び環状ＡＭＰ応答エレメント結合タンパク質プロモーター、及び活性化転写因子２プロモーターが挙げられる。Ｘｉｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｓｃｉ．Ｏｃｔ；１５（１０）：１７４１１－１７４４１を参照。一部の実施形態では、操作されたマクロファージは、腫瘍抗原ＨＥＲ２の認識後に活性化されてＣＤ１４７の内部シグナル伝達を誘発し、ＭＭＰの発現を増加させる、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する。例えば、一部の実施形態では、ＣＡＲは、ヒトＨＥＲ２を標的とする単鎖抗体断片を含む。特定の実施形態では、ＣＡＲは、ヒトＨＥＲ２を標的とする単鎖抗体断片、マウスＩｇｈＧ１のヒンジ領域、並びにＣＤ１４７（例えば、マウスＣＤ１４７分子）の膜貫通領域及び細胞内領域を含む。Ｓｅｅ Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ｖｏｌｕｍｅ １２１，ｐａｇｅｓ ８３７－８４５を参照。
【0223】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。ＮＫ細胞は、一切の事前の刺激も免疫化もなしに特定の腫瘍及びウイルス感染細胞を溶解する細胞傷害性リンパ球である。ＮＫ細胞は、末梢血から単離してもよく、臍帯血、骨髄、ヒト胚性幹細胞、及び人工多能性幹細胞からインビトロで生成することもできる。例えば、ＮＫ－９２、ＮＫＬ、及びＹＴＳなどのＮＫ細胞株を安定にトランスフェクトして、本明細書に記載のキメラ抗原受容体構築物のいずれかを発現させ得る。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、異種シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、異種シグナル伝達ドメインは、ＤＡＰ１０の細胞質ドメインからのＹＩＮＭドメイン、及び／又はＣＤ２４４の細胞質ドメインからのチロシンベースモチーフＴＩＹＸＸ（Ｖ／Ｉ）を含む。Ｌａｎｉｅｒ，２００８，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．９（５）：４９５－５０２を参照。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、異種ターゲティングドメイン、例えば、抗原結合ドメインを含む。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ジシアロガングリオシドＧＤ２を認識する。例えば、一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、抗ＧＤ２ ｃｈ１４．１８単鎖Ｆｖ抗体融合タンパク質からなるか、又はそれを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、キメラ抗原受容体を発現し得る。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、ジシアロガングリオシドＧＤ２を認識する抗原結合ドメイン、例えば、抗ＧＤ２ｃｈ１４．１８一本鎖Ｆｖ抗体融合タンパク質を含むか、又はそれからなる、抗原結合ドメインを含む。キメラ抗原受容体は、シグナル伝達部分としてＣＤ３鎖をさらに含み得る。Ｅｓｓｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１６：５６９－５８１を参照。
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。ＮＫ細胞は、一切の事前の刺激も免疫化もなしに特定の腫瘍及びウイルス感染細胞を溶解する細胞傷害性リンパ球である。ＮＫ細胞は、末梢血から単離してもよく、臍帯血、骨髄、ヒト胚性幹細胞、及び人工多能性幹細胞からインビトロで生成することもできる。例えば、ＮＫ－９２、ＮＫＬ、及びＹＴＳなどのＮＫ細胞株を安定にトランスフェクトして、本明細書に記載のキメラ抗原受容体構築物のいずれかを発現させ得る。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、異種シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、異種シグナル伝達ドメインは、ＤＡＰ１０の細胞質ドメインからのＹＩＮＭドメイン、及び／又はＣＤ２４４の細胞質ドメインからのチロシンベースモチーフＴＩＹＸＸ（Ｖ／Ｉ）を含む。Ｌａｎｉｅｒ，２００８，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．９（５）：４９５－５０２を参照。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、異種ターゲティングドメイン、例えば、抗原結合ドメインを含む。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ジシアロガングリオシドＧＤ２を認識する。例えば、一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、抗ＧＤ２ ｃｈ１４．１８単鎖Ｆｖ抗体融合タンパク質からなるか、又はそれを含む。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、キメラ抗原受容体を発現し得る。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、ジシアロガングリオシドＧＤ２を認識する抗原結合ドメイン、例えば、抗ＧＤ２ｃｈ１４．１８一本鎖Ｆｖ抗体融合タンパク質を含むか、又はそれからなる、抗原結合ドメインを含む。キメラ抗原受容体は、シグナル伝達部分としてＣＤ３鎖をさらに含み得る。Ｅｓｓｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１６：５６９－５８１を参照。
【0224】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するようにＮＫ細胞を操作する方法は、本明細書及び当該技術分野において記載され、例えば、米国特許第１０，２７３，３００号に記載されている。本開示の方法の一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、処置される対象に対して自家性である。一部の実施形態では、ＮＫ細胞は、処置される対象に対して同族異系である。
【0225】
樹状細胞
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、樹状細胞である。樹状細胞（ＤＣ）は、病原体に対する免疫応答を刺激し、無害な抗原に対する免疫恒常性を維持する上で重要な役割を果たす。ＤＣは、免疫応答の誘導及び調節に不可欠な、特殊な抗原感知細胞及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）の異種群を表す。末梢血では、ヒトＤＣは、Ｔ細胞（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８）、Ｂ細胞（ＣＤ１９、ＣＤ２０）、及び単球マーカー（ＣＤ１４、ＣＤ１６）を欠いているが、ＨＬＡ－ＤＲ及び他のＤＣ系統マーカー（例えば、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｃ）を高度に発現する細胞として特徴づけられる。Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊａｎｅｗａｙ’ｓ Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ．８ｔｈ ｅｄ．Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ：２０１２．８６８ｐを参照されたい。樹状細胞を調製及び操作するための方法は当技術分野で公知であり、例えば、Ｏｓａｄａ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｍａｙ；３８（４）：１５５－６４に記載されている。
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、樹状細胞である。樹状細胞（ＤＣ）は、病原体に対する免疫応答を刺激し、無害な抗原に対する免疫恒常性を維持する上で重要な役割を果たす。ＤＣは、免疫応答の誘導及び調節に不可欠な、特殊な抗原感知細胞及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）の異種群を表す。末梢血では、ヒトＤＣは、Ｔ細胞（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８）、Ｂ細胞（ＣＤ１９、ＣＤ２０）、及び単球マーカー（ＣＤ１４、ＣＤ１６）を欠いているが、ＨＬＡ－ＤＲ及び他のＤＣ系統マーカー（例えば、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｃ）を高度に発現する細胞として特徴づけられる。Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊａｎｅｗａｙ’ｓ Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ．８ｔｈ ｅｄ．Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ：２０１２．８６８ｐを参照されたい。樹状細胞を調製及び操作するための方法は当技術分野で公知であり、例えば、Ｏｓａｄａ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｍａｙ；３８（４）：１５５－６４に記載されている。
【0226】
ＶＩ．操作された免疫細胞の標的細胞
タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、並びに／又は細胞ターンオーバーを引き起こすシグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）と操作された免疫細胞を標的細胞に導くターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）とを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む本発明の操作された免疫細胞は、様々な異なる標的細胞において生物学的応答を誘導し得る。
タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、並びに／又は細胞ターンオーバーを引き起こすシグナル伝達ドメイン（例えば、細胞内シグナル伝達ドメイン）と操作された免疫細胞を標的細胞に導くターゲティングドメイン（例えば、抗原結合ドメイン）とを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む本発明の操作された免疫細胞は、様々な異なる標的細胞において生物学的応答を誘導し得る。
【0227】
標的細胞の種類としては、癌細胞、免疫細胞、内皮細胞、及び線維芽細胞が挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、操作された免疫細胞によるタノトランスミッションは、対象における内因性免疫細胞の免疫活性を誘導又は増加させ、それにより対象における免疫刺激応答を促進する。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞によるタノトランスミッションは、腫瘍関連マクロファージなどの内因性免疫細胞の表現型を変化させ、炎症性を高め得る。操作された免疫細胞によって標的細胞内で調節され得る他の生物学的応答には、例えば、癌細胞の増殖及び血管新生の促進が含まれる。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞によるタノトランスミッションは、内因性の癌関連線維芽細胞の表現型を癌促進表現型から変化させ得る。一部の実施形態では、操作された免疫細胞によるタノトランスミッションは、内因性内皮細胞による血管新生を阻害し得る。
【0228】
操作された免疫細胞によって標的細胞において誘導される生物学的応答は、標的細胞によるタノトランスミッションの促進でもあり得る。例えば、操作された免疫細胞による細胞ターンオーバー因子の産生は、今度は標的細胞における細胞ターンオーバーを誘導し、それにより標的細胞によるタノトランスミッションを促進し得る。操作された免疫細胞は、２つ以上の種類の標的細胞を有し得る。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、内因性免疫細胞の免疫活性を増加させ、癌細胞などの別の種類の標的細胞によるタノトランスミッションも促進する。癌細胞によるタノトランスミッションの促進は、内因性免疫細胞の免疫活性を増加させる癌細胞によるさらなる細胞ターンオーバー因子の産生を誘導し、それにより対象における免疫刺激応答をさらに増幅させることができる。標的細胞によるタノトランスミッションを促進し得る細胞ターンオーバー因子として、限定はされないが、サイトカイン（例えば、ＩＬ６及びＩＬ１などの炎症性サイトカイン）、免疫調節タンパク質（例えば、ＩＦＮ）、増殖因子（例えば、ＦＧＦ ＶＥＧＦ）、ケモカイン、ＡＴＰ、ヒストン、核酸（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ）、ホスファチジルセリン、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）、高移動度グループボックス１タンパク質（ＨＭＧＢ１）及びカルレティキュリンが挙げられる。
【0229】
操作された免疫細胞は、標的細胞が受ける細胞ターンオーバーの種類を変化させることによって、標的細胞（例えば、癌細胞）におけるタノトランスミッションを促進させ得る。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞による細胞ターンオーバー因子の産生により、標的細胞における細胞ターンオーバー経路が、非免疫刺激細胞ターンオーバー経路から免疫刺激胞ターンオーバー経路、例えば、ネクロトーシス、外因性アポトーシス、フェロトーシス、パイロトーシス及びそれらの組み合わせに変化し得る。
【0230】
操作された免疫細胞によって産生される様々な異なる細胞ターンオーバー因子は、標的細胞によって、例えば標的細胞内で免疫刺激細胞ターンオーバー経路を誘導することによって、タノトランスミッションを促進し得る。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、標的細胞におけるタノトランスミッションを促進するグランザイム（例えば、グランザイムＡ）を産生し得る。グランザイムは、パーフォリン媒介性細孔を介して標的細胞に送達され得るセリンプロテアーゼのファミリーである。細胞傷害性リンパ球からのグランザイムＡがＧＳＤＭ－Ｂを切断して、標的癌細胞においてパイロトーシスを引き起こすことが示されている。Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ．，２０２０，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３６８（６４９４）を参照。従って、操作された免疫細胞によって産生されたグランザイムＡの標的癌細胞への送達は、癌細胞におけるパイロトーシスの誘導を通じて癌細胞によるタノトランスミッションを促進し得る。一部の実施形態では、操作された免疫細胞によって産生される細胞ターンオーバー因子は、標的細胞において免疫刺激細胞ターンオーバー経路を誘導し、それにより標的細胞によるタノトランスミッションを促進する、サイトカインである。他の細胞ターンオーバー因子には、癌細胞上のパートナーと結合し、癌細胞の細胞ターンオーバーを誘導し、それによりタノトランスミッションを促進する、ＦａｓＬ又は他のＴＮＦファミリーメンバーが含まれる。
【0231】
本明細書に記載される癌のいずれかの細胞は、操作された免疫細胞の標的細胞として好適であり得る。一部の実施形態では、標的細胞は、転移性癌細胞である。一部の実施形態では、標的細胞は、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、癌関連線維芽細胞（ＣＡＦ）、又は腫瘍関連内皮細胞などの、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）内の細胞である。
【0232】
一部の実施形態では、標的細胞は、肥満細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、マクロファージ、樹状細胞、リンパ球（例えば、Ｂ細胞及びＴ細胞）並びに本明細書に記載の他の免疫細胞のいずれかから選択される免疫細胞である。
【0233】
標的細胞は、操作された免疫細胞によって産生される細胞ターンオーバー因子と接触するのに十分なほど操作された免疫細胞に近接している。
【0234】
ＶＩＩ．タノトランスミッションを促進する方法
本発明の操作された免疫細胞は、対象におけるタノトランスミッションを促進するために使用され得る。例えば、特定の態様では、本発明は、対象においてタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、対象においてタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、本明細書に記載の操作された免疫細胞を投与することを含む。操作された免疫細胞におけるタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドの発現は、操作された免疫細胞が、免疫細胞によって能動的に放出されるか、又は免疫細胞のターンオーバー（例えば、死）中に露出される、細胞ターンオーバー因子を産生するように誘導する。これらの因子は、応答細胞（例えば、免疫細胞）に生物学的応答（例えば、免疫活性の増大）を受けるようにシグナル伝達する。
本発明の操作された免疫細胞は、対象におけるタノトランスミッションを促進するために使用され得る。例えば、特定の態様では、本発明は、対象においてタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、対象においてタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、本明細書に記載の操作された免疫細胞を投与することを含む。操作された免疫細胞におけるタノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドの発現は、操作された免疫細胞が、免疫細胞によって能動的に放出されるか、又は免疫細胞のターンオーバー（例えば、死）中に露出される、細胞ターンオーバー因子を産生するように誘導する。これらの因子は、応答細胞（例えば、免疫細胞）に生物学的応答（例えば、免疫活性の増大）を受けるようにシグナル伝達する。
【0235】
一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、標的細胞、例えば、癌細胞によるタノトランスミッションをさらに促進し得る。例えば、操作された免疫細胞によって産生される細胞ターンオーバー因子に標的細胞が曝露されると、今度は標的細胞内でも細胞ターンオーバー因子の産生が開始され、それにより標的細胞によるタノトランスミッションも促進され得る。従って、特定の態様では、本開示は、標的細胞によるタノトランスミッションを促進する方法に関し、この方法は、標的細胞又は標的細胞を含む組織を、標的細胞がタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で、本明細書に記載の操作された免疫細胞と接触させることを含む。
【0236】
免疫活性を高める方法
一態様では、本発明の操作された免疫細胞を用いて、対象、例えば、免疫活性の増大から利益を被り得る対象の免疫活性を増大することができる。特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において免疫応答を促進する方法に関し、この方法は、本明細書に記載の操作された免疫細胞を、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で対象に投与し、それにより対象の免疫応答を促進することを含む。例えば、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドの発現時に、操作された免疫細胞によって産生される因子は、応答細胞（例えば、免疫細胞）に免疫刺激応答（例えば、炎症誘発性応答）を誘導し得る。一実施形態では、免疫応答は抗癌応答である。
一態様では、本発明の操作された免疫細胞を用いて、対象、例えば、免疫活性の増大から利益を被り得る対象の免疫活性を増大することができる。特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において免疫応答を促進する方法に関し、この方法は、本明細書に記載の操作された免疫細胞を、免疫細胞によるタノトランスミッションを促進するのに十分な量及び時間で対象に投与し、それにより対象の免疫応答を促進することを含む。例えば、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドの発現時に、操作された免疫細胞によって産生される因子は、応答細胞（例えば、免疫細胞）に免疫刺激応答（例えば、炎症誘発性応答）を誘導し得る。一実施形態では、免疫応答は抗癌応答である。
【0237】
本開示の方法によれば、免疫活性は、操作された免疫細胞と対象に内因性である多種多様な免疫細胞との相互作用によって調節され得るが、こうした免疫細胞は、例えば、肥満細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好塩基球、好中球、単球、マクロファージ、樹状細胞、好酸球、リンパ球（Ｂリンパ球（Ｂ細胞））、及びＴリンパ球（Ｔ細胞））のいずれか１つ又は複数を含む。
【0238】
免疫細胞のタイプ
肥満細胞は、ヒスタミンと抗凝固剤であるヘパリンが豊富な顆粒を含む顆粒球の一種である。活性化されると、肥満細胞は、炎症性化合物を顆粒から局所微小環境に放出する。肥満細胞は、アレルギー、アナフィラキシー、創傷治癒、血管新生、免疫寛容、病原体に対する防御、及び血液脳関門機能において役割を果たす。
肥満細胞は、ヒスタミンと抗凝固剤であるヘパリンが豊富な顆粒を含む顆粒球の一種である。活性化されると、肥満細胞は、炎症性化合物を顆粒から局所微小環境に放出する。肥満細胞は、アレルギー、アナフィラキシー、創傷治癒、血管新生、免疫寛容、病原体に対する防御、及び血液脳関門機能において役割を果たす。
【0239】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、一切の事前の刺激も免疫化もなしに特定の腫瘍及びウイルス感染細胞を溶解する細胞傷害性リンパ球である。ＮＫ細胞はまた、様々なサイトカイン、例えば、ＩＦＮ－ガンマ（ＩＦＮγ）、ＴＮＦ－アルファ（ＴＮＦα）、ＧＭ－ＣＳＦ、及びＩＬ－３の強力な産生細胞である。従って、ＮＫ細胞は、免疫系の制御性細胞としても機能し、他の細胞及び反応に影響を与えるとも考えられている。ヒトでは、ＮＫ細胞は、ＣＤ５６＋ＣＤ３－リンパ球として広く定義されている。ＮＫ細胞の細胞毒性は、細胞表面の受容体からの活性化シグナルと抑制性シグナルのバランスによって厳密に制御されている。ＮＫ細胞の活性化を阻害する主な受容体群は、抑制性キラー免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）である。標的細胞上の自己ＭＨＣクラスＩ分子を認識すると、これらの受容体は、シグナル伝達カスケードの活性化を停止する阻害シグナルを伝達し、正常なＭＨＣクラスＩ発現を示す細胞をＮＫ細胞溶解から保護する。活性化受容体には、標的細胞表面上の様々なリガンドとの結合を介して細胞溶解作用に向けてバランスを押し上げる天然の細胞毒性受容体（ＮＣＲ）及びＮＫＧ２Ｄが含まれる。従って、標的細胞のＮＫ細胞の認識は、複数の活性化及び抑制性受容体から送達されるシグナルの統合を含むプロセスによって厳密に制御される。
【0240】
単球は、組織に動員されるまで数時間／数日の間血中を循環する骨髄由来単核食細胞である。Ｗａｃｌｅｃｈｅ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｖｉｒｕｓｅｓ（１０）２：６５を参照されたい。単球の表面での様々なケモカイン受容体及び細胞接着分子の発現により、これらが、骨髄を出て血中に入り、その後、血液から組織内に動員されるのが可能となる。単球は、ウイルス感染、細菌感染、真菌感染、又は寄生虫感染に対する応答を提供する免疫系の生得的な武器（ｉｎｎａｔｅ ａｒｍ）に属する。それらの機能には、食作用による病原体の死滅、活性酸素種（ＲＯＳ）、一酸化窒素（ＮＯ）、ミエロペルオキシダーゼ、及び炎症性サイトカインの産生が含まれる。特定の条件下では、単球は、癌並びに感染症及び自己免疫疾患の際にＴ細胞応答を刺激又は阻害し得る。単球はまた、組織の修復及び血管新生に関与する。
【0241】
マクロファージは、食作用と呼ばれるプロセスで、細胞残屑、異物、微生物、癌細胞などの物質を飲み込んで消化する。食作用に加えて、マクロファージは、非特異的防御（自然免疫）において重要な役割を果たし、リンパ球などの他の免疫細胞を動員することによって特定の防御機構（適応免疫）を開始するのにも役立つ。例えば、マクロファージは、Ｔ細胞への抗原プレゼンター（ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｅｒ）として重要である。マクロファージは、炎症を増加させ、免疫系を刺激するだけでなく、重要な抗炎症の役割も果たし、サイトカインの放出を介して免疫反応を低下させ得る。炎症を促進するマクロファージは、Ｍ１マクロファージと呼ばれ、炎症を軽減して組織の修復を促進するマクロファージは、Ｍ２マクロファージと呼ばれる。一部の実施形態では、マクロファージは、腫瘍関連マクロファージである。
【0242】
樹状細胞（ＤＣ）は、病原体に対する免疫応答を刺激し、無害な抗原に対する免疫恒常性を維持する上で重要な役割を果たす。ＤＣは、免疫応答の誘導及び調節に不可欠な、特殊な抗原感知細胞及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）の異種群を表す。末梢血では、ヒトＤＣは、Ｔ細胞（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８）、Ｂ細胞（ＣＤ１９、ＣＤ２０）、及び単球マーカー（ＣＤ１４、ＣＤ１６）を欠いているが、ＨＬＡ－ＤＲ及び他のＤＣ系統マーカー（例えば、ＣＤ１ａ、ＣＤ１ｃ）を高度に発現する細胞として特徴づけられる。Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊａｎｅｗａｙ’ｓ Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ．８ｔｈ ｅｄ．Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ：２０１２．８６８ｐを参照されたい。一部の実施形態では、樹状細胞は、ＣＤ１０３＋樹状細胞である。
【0243】
「リンパ球」という用語は、体全体のリンパ組織及び正常な成人で形成される小さな白血球を指し、疾患から体を防御するのに大きな役割を果たす、循環血液中の白血球の総数の約２２～２８％を占める。個々のリンパ球は、（例えば、Ｔ細胞受容体とＢ細胞受容体を形成するために）それらの遺伝物質の組換えを介して、構造的に関連する抗原の限られたセットに応答することにコミットしているという点で特殊化されている。免疫系が所与の抗原と最初に接触する前に存在するこのコミットメントは、リンパ球の表面膜における抗原上の決定基（エピトープ）に特異的な受容体の存在によって表される。各リンパ球は、受容体のユニークな集団を有しており、そのすべてが同一の結合部位を有する。リンパ球の１つのセット又はクローンは、その受容体の結合領域の構造が別のクローンとは異なるため、認識できるエピトープが異なる。リンパ球は、それらの受容体の特異性だけでなく、それらの機能も互いに異なる（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９），ａｔ ｐ．１０２）。
【0244】
リンパ球には、抗体分泌細胞の前駆細胞であるＢリンパ球（Ｂ細胞）、及びＴリンパ球（Ｔ細胞）が含まれる。
【0245】
Ｂリンパ球（Ｂ細胞）
Ｂリンパ球は、骨髄の造血細胞に由来する。成熟したＢ細胞は、その細胞表面によって認識されるエピトープを発現する抗原で活性化することができる。活性化プロセスは、抗原による膜Ｉｇ分子の架橋に依存し、直接的である（架橋依存性Ｂ細胞活性化）、又は同族支援（ｃｏｇｎａｔｅ ｈｅｌｐ）と呼ばれるプロセスにおけるヘルパーＴ細胞との相互作用を介し、間接的であり得る。多くの生理学的状況では、受容体架橋刺激及び同族支援は、相乗作用を助けてより活発なＢ細胞応答を引き起こす（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
Ｂリンパ球は、骨髄の造血細胞に由来する。成熟したＢ細胞は、その細胞表面によって認識されるエピトープを発現する抗原で活性化することができる。活性化プロセスは、抗原による膜Ｉｇ分子の架橋に依存し、直接的である（架橋依存性Ｂ細胞活性化）、又は同族支援（ｃｏｇｎａｔｅ ｈｅｌｐ）と呼ばれるプロセスにおけるヘルパーＴ細胞との相互作用を介し、間接的であり得る。多くの生理学的状況では、受容体架橋刺激及び同族支援は、相乗作用を助けてより活発なＢ細胞応答を引き起こす（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0246】
各Ｂ細胞は、同一の可変領域を有するＩｇ分子を発現するため、架橋依存性Ｂ細胞活性化には、抗原が細胞表面受容体の結合部位に相補的なエピトープの複数のコピーを発現する必要がある。このような要件は、微生物の莢膜多糖又はウイルスエンベロープタンパク質などの、反復エピトープを有する他の抗原によって満たされる。架橋依存性Ｂ細胞活性化は、これらの微生物に対して開始される主要な防御免疫応答である（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ”，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0247】
同族支援により、Ｂ細胞は、受容体を架橋できない抗原に対する応答を開始することができ、同時に、弱い架橋事象によって刺激されたときにＢ細胞を不活化から救う共刺激シグナルを提供する。同族支援は、Ｂ細胞の膜免疫グロブリン（Ｉｇ）による抗原の結合、抗原のエンドサイトーシス、及び細胞のエンドソーム／リソソーム区画内のペプチドへのその断片化に依存する。得られたペプチドのいくつかは、クラスＩＩ主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子として知られている特殊な一連の細胞表面タンパク質の溝にロードされる。得られたクラスＩＩ／ペプチド複合体は、細胞表面で発現され、ＣＤ４＋ Ｔ細胞と呼ばれる一連のＴ細胞の抗原特異的受容体のリガンドとして機能する。ＣＤ４＋ Ｔ細胞は、Ｂ細胞クラスＩＩ／ペプチド複合体に特異的な受容体をその表面に有する。Ｂ細胞活性化は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介したＴ細胞の結合に依存するだけでなく、この相互作用により、Ｔ細胞上の活性化リガンド（ＣＤ４０リガンド）が、Ｂ細胞活性化をシグナル伝達するＢ細胞（ＣＤ４０）上の受容体に結合することも可能になる。加えて、Ｔヘルパー細胞は、Ｂ細胞上のサイトカイン受容体に結合することによって、刺激されたＢ細胞の成長及び分化を調節するいくつかのサイトカインを分泌する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，“Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0248】
抗体産生の同族支援の間に、ＣＤ４０リガンドは、活性化されたＣＤ４＋ Ｔヘルパー細胞で一過性に発現され、抗原特異的Ｂ細胞上のＣＤ４０に結合し、それにより第２の共刺激シグナルを変換する。後者のシグナルは、抗原に遭遇した胚中心Ｂ細胞のアポトーシスを防止することによるＢ細胞の増殖及び分化並びにメモリーＢ細胞の生成に不可欠である。Ｂ細胞及びＴ細胞の両方でのＣＤ４０リガンドの過剰発現は、ヒトＳＬＥ患者の病原性自己抗体産生に関係している（Ｄｅｓａｉ－Ｍｅｈｔａ，Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｖｏｌ．９７（９），２０６３－２０７３，（１９９６））。
【0249】
Ｔリンパ球（Ｔ細胞）
造血組織の前駆体に由来するＴリンパ球は、胸腺で分化し、末梢リンパ組織及びリンパ球の再循環プールに撒かれる。Ｔリンパ球又はＴ細胞は、幅広い免疫機能を仲介する。免疫機能には、Ｂ細胞が抗体産生細胞に成長するのを助ける能力、単球／マクロファージの殺菌作用を高める能力、特定のタイプの免疫応答の阻害、標的細胞の直接的な死滅、及び炎症反応の動員が含まれる。これらの効果は、特定の細胞表面分子のＴ細胞発現及びサイトカインの分泌に依存する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ”，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
造血組織の前駆体に由来するＴリンパ球は、胸腺で分化し、末梢リンパ組織及びリンパ球の再循環プールに撒かれる。Ｔリンパ球又はＴ細胞は、幅広い免疫機能を仲介する。免疫機能には、Ｂ細胞が抗体産生細胞に成長するのを助ける能力、単球／マクロファージの殺菌作用を高める能力、特定のタイプの免疫応答の阻害、標的細胞の直接的な死滅、及び炎症反応の動員が含まれる。これらの効果は、特定の細胞表面分子のＴ細胞発現及びサイトカインの分泌に依存する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ”，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0250】
Ｔ細胞は、Ｂ細胞とは抗原認識のメカニズムが異なる。Ｂ細胞の受容体である免疫グロブリンは、可溶性分子又は粒子表面の個々のエピトープに結合する。Ｂ細胞受容体は、天然分子の表面に発現するエピトープを認識する。抗体及びＢ細胞受容体は、細胞外液中の微生物に結合して防御するように進化したが、Ｔ細胞は、他の細胞の表面にある抗原を認識し、これらの抗原提示細胞（ＡＰＣ）と相互作用してその挙動を変化させることによってそれらの機能を仲介する。Ｔ細胞を活性化できる末梢リンパ器官には、主要な３種類のＡＰＣ：樹状細胞、マクロファージ、及びＢ細胞が存在する。これらの中で樹状細胞が最も強力であり、その唯一の機能は外来抗原をＴ細胞に提示することである。未熟な樹状細胞は、皮膚、腸、気道を含む体全体の組織に存在する。未熟な樹状細胞は、これらの部位で侵入微生物に遭遇すると、病原体及びその産物を取り込み、リンパを介して局所リンパ節又は腸関連リンパ器官に輸送する。病原体との遭遇により、樹状細胞が、抗原捕捉細胞からＴ細胞を活性化できるＡＰＣに成熟するように誘導される。ＡＰＣは、Ｔ細胞を活性化してエフェクター細胞にする際に役割を果たす３種類のタンパク質分子：（１）Ｔ細胞受容体に外来抗原を提示するＭＨＣタンパク質；（２）Ｔ細胞表面の相補的受容体に結合する共刺激タンパク質；及び（３）活性化するまで十分に長くＴ細胞をＡＰＣに結合することを可能にする細胞間接着分子を表面に提示する（“Ｃｈａｐｔｅｒ ２４：Ｔｈｅ ａｄａｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ，Ａｌｂｅｒｔｓ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，ＮＹ，（２００２））。
【0251】
Ｔ細胞は、それらが発現する細胞表面受容体に基づいて２つの異なるクラスに細分される。Ｔ細胞の大部分は、α鎖とβ鎖からなるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現する。Ｔ細胞の小群は、γ鎖とδ鎖からなる受容体を発現する。α／β Ｔ細胞には、２つの亜系統：補助受容体分子ＣＤ４を発現するＴ細胞（ＣＤ４＋ Ｔ細胞）；及びＣＤ８を発現するＴ細胞（ＣＤ８＋ Ｔ細胞）が存在する。これらの細胞は、抗原を認識する方法と、エフェクター及び調節機能が異なる。ＣＤ４＋Ｔ細胞は、Ｔ細胞抗原受容体を使用して、エンドソーム又はファゴソームで生成され、主要組織適合性複合体分子に結合して宿主細胞表面に提示されるペプチドを認識する、適応免疫系の重要な細胞である。それらの制御機能は、Ｔ細胞が活性化されると発現が誘導されるＣＤ４０リガンドなどのそれらの細胞表面分子の発現、及び活性化されると分泌する様々なサイトカインの発現の両方に依存する。
【0252】
Ｔ細胞はまた、重要なエフェクター機能を媒介し、そのいくつかは、それらが分泌するサイトカインのパターンによって決定される。サイトカインは、標的細胞に対して直接的に毒性であり得、強力な炎症メカニズムを動員し得る。
【0253】
加えて、Ｔ細胞、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）によって認識される抗原を発現する標的細胞を効率的に溶解できるＣＴＬに成長し得る（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0254】
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、クラスＩＩ又はクラスＩ ＭＨＣタンパク質の特殊な溝に結合した抗原のタンパク質分解によって得られるペプチドからなる複合体を認識する。ＣＤ４＋ Ｔ細胞は、ペプチド／クラスＩＩ複合体のみを認識し、ＣＤ８＋ Ｔ細胞は、ペプチド／クラスＩ複合体を認識する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0255】
ＴＣＲのリガンド（即ち、ペプチド／ＭＨＣタンパク質複合体）はＡＰＣ内で生成される。一般に、クラスＩＩ ＭＨＣ分子は、エンドサイトーシスプロセスを介してＡＰＣに取り込まれたタンパク質に由来するペプチドに結合する。次に、これらのペプチドがロードされたクラスＩＩ分子が細胞の表面に発現され、これらは、発現した細胞表面複合体を認識できるＴＣＲを有するＣＤ４＋ Ｔ細胞によって結合され得る。従って、ＣＤ４＋ Ｔ細胞は、細胞外供給源に由来する抗原と反応するように特殊化されている（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0256】
対照的に、クラスＩ ＭＨＣ分子には、ウイルスタンパク質などの内部合成タンパク質に由来するペプチドが主にロードされている。これらのペプチドは、プロテオソームによるタンパク質分解によって細胞質タンパク質から生成され、粗面小胞体に移動する。このようなペプチドは、一般に、９アミノ酸長から構成されており、クラスＩ ＭＨＣ分子に結合して細胞表面に運ばれ、適切な受容体を発現するＣＤ８＋ Ｔ細胞によって認識され得る。これにより、Ｔ細胞系、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞に、生物の残りの細胞のタンパク質（例えば、ウイルス抗原）又は変異抗原（活性腫瘍遺伝子産物など）とは異なるタンパク質、又はこれらよりもはるかに大量に産生されるタンパク質を発現する細胞を、これらのタンパク質が無傷の形で細胞表面に発現も分泌もされなくても、検出する能力が付与される（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0257】
Ｔ細胞はまた、機能に基づいてヘルパーＴ細胞；細胞性免疫の誘導に関与するＴ細胞；サプレッサーＴ細胞；及び細胞傷害性Ｔ細胞として分類することができる。
【0258】
ヘルパーＴ細胞
ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞を刺激してタンパク質及びその他のＴ細胞依存性抗原に対する抗体反応を引き起こすＴ細胞である。Ｔ細胞依存性抗原は、個々のエピトープが１回のみ又は限られた回数しか出現しないため、Ｂ細胞の膜免疫グロブリン（Ｉｇ）を架橋できないか、非効率的にしか架橋できない免疫原である。Ｂ細胞は、それらの膜Ｉｇを介して抗原に結合し、この複合体は、エンドサイトーシスを受ける。エンドソーム及びリソソーム区画内で、抗原は、タンパク質分解酵素によってペプチドに断片化され、生成されたペプチドの１つ又は複数がクラスＩＩ ＭＨＣ分子にロードされ、この小胞区画を通過する。次に、得られたペプチド／クラスＩＩ ＭＨＣ複合体は、Ｂ細胞表面膜に輸送される。ペプチド／クラスＩＩ分子複合体に特異的な受容体を有するＴ細胞は、Ｂ細胞表面でこの複合体を認識する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９９９））。
ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞を刺激してタンパク質及びその他のＴ細胞依存性抗原に対する抗体反応を引き起こすＴ細胞である。Ｔ細胞依存性抗原は、個々のエピトープが１回のみ又は限られた回数しか出現しないため、Ｂ細胞の膜免疫グロブリン（Ｉｇ）を架橋できないか、非効率的にしか架橋できない免疫原である。Ｂ細胞は、それらの膜Ｉｇを介して抗原に結合し、この複合体は、エンドサイトーシスを受ける。エンドソーム及びリソソーム区画内で、抗原は、タンパク質分解酵素によってペプチドに断片化され、生成されたペプチドの１つ又は複数がクラスＩＩ ＭＨＣ分子にロードされ、この小胞区画を通過する。次に、得られたペプチド／クラスＩＩ ＭＨＣ複合体は、Ｂ細胞表面膜に輸送される。ペプチド／クラスＩＩ分子複合体に特異的な受容体を有するＴ細胞は、Ｂ細胞表面でこの複合体を認識する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９９９））。
【0259】
Ｂ細胞の活性化は、そのＴＣＲを介したＴ細胞の結合、及びＴ細胞ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）とＢ細胞上のＣＤ４０との相互作用の両方に依存する。Ｔ細胞は、ＣＤ４０Ｌを構成的に発現しない。むしろ、ＣＤ４０Ｌの発現は、Ｔ細胞のＴＣＲによって認識される同族抗原及びＣＤ８０又はＣＤ８６の両方を発現するＡＰＣとの相互作用の結果として誘導される。ＣＤ８０／ＣＤ８６は、一般に、Ｂ細胞の休止状態ではなく活性化によって発現されるため、活性化Ｂ細胞及びＴ細胞を伴うヘルパーの相互作用が、効率的な抗体産生をもたらし得る。しかしながら、多くの場合、Ｔ細胞上のＣＤ４０Ｌの最初の誘導は、樹状細胞などのＣＤ８０／８６を構成的に発現するＡＰＣの表面での抗原の認識に依存する。次に、このような活性化ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞と効率的に相互作用して支援することができる。Ｂ細胞上の膜Ｉｇの架橋は、たとえ非効率的であっても、ＣＤ４０Ｌ／ＣＤ４０相互作用と相乗作用して、活発なＢ細胞の活性化をもたらし得る。増殖、Ｉｇの分泌、及び発現しているＩｇクラスのクラスの切り替えを含む、Ｂ細胞応答におけるその後の事象は、Ｔ細胞由来サイトカインの作用に依存するか、又はその作用によって増強される（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0260】
ＣＤ４＋ Ｔ細胞は、主にサイトカインＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、及びＩＬ－１０を分泌する細胞（ＴＨ２細胞）、又は主にＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、及びリンホトキシンを産生する細胞（ＴＨ１細胞）に分化する傾向がある。ＴＨ２細胞は、Ｂ細胞が抗体産生細胞に成長するのを助けるのに非常に効果的であり、ＴＨ１細胞は、単球及びマクロファージの殺菌活性の増強に関与し、結果として細胞内の小胞区画の微生物の溶解効率を向上させる、細胞免疫応答の効果的な誘導因子である。ＴＨ２細胞の表現型（即ち、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、及びＩＬ－１０）を有するＣＤ４＋ Ｔ細胞は効率的なヘルパー細胞であるが、ＴＨ１細胞はヘルパーになる能力も有する（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，“Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0261】
細胞性免疫誘導へのＴ細胞の関与
Ｔ細胞はまた、単球及びマクロファージの能力を増強して、細胞内微生物を破壊するように作用し得る。特に、ヘルパーＴ細胞によって産生されるインターフェロン－ガンマ（ＩＦＮ－γ）は、単核食細胞が、一酸化窒素の生成及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）産生の誘導を含む、細胞内細菌及び寄生虫を破壊するいくつかのメカニズムを促進する。ＴＨ１細胞は、ＩＦＮ－γを産生するため、殺菌作用を高めるのに効果的である。対照的に、ＴＨ２細胞によって産生される２つの主要なサイトカインであるＩＬ－４及びＩＬ－１０は、これらの活性をブロックする（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
Ｔ細胞はまた、単球及びマクロファージの能力を増強して、細胞内微生物を破壊するように作用し得る。特に、ヘルパーＴ細胞によって産生されるインターフェロン－ガンマ（ＩＦＮ－γ）は、単核食細胞が、一酸化窒素の生成及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）産生の誘導を含む、細胞内細菌及び寄生虫を破壊するいくつかのメカニズムを促進する。ＴＨ１細胞は、ＩＦＮ－γを産生するため、殺菌作用を高めるのに効果的である。対照的に、ＴＨ２細胞によって産生される２つの主要なサイトカインであるＩＬ－４及びＩＬ－１０は、これらの活性をブロックする（Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，“Ｃｈａｐｔｅｒ １：Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａｎ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄ．Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，（１９９９））。
【0262】
制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞
免疫恒常性は、免疫応答の開始とダウンレギュレーションとの間の制御されたバランスによって維持される。アポトーシス及びＴ細胞アネルギーの両方のメカニズム（抗原との遭遇後にＴ細胞が本質的に機能的に不活性化される耐性メカニズム（Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｒ．Ｈ．，“Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ”，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．２１：３０５－３３４（２００３））は、免疫応答のダウンレギュレーションに寄与する。第３のメカニズムは、サプレッサー又は制御性ＣＤ４＋ Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞による活性化Ｔ細胞の能動的抑制によって提供される（Ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ Ｋｒｏｎｅｎｂｅｒｇ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４３５：５９８－６０４（２００５））。ＩＬ－２受容体アルファ（ＩＬ－２Ｒα）鎖を構成的に発現するＣＤ４＋ Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋）は、アネルギー性及び抑制性である天然に存在するＴ細胞のサブセットである（Ｔａａｍｓ，Ｌ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｖｏｌ．３１：１１２２－１１３１（２００１））。ヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇは、マウスの対応物と同様に胸腺で生成され、細胞間接触依存性メカニズムを介してレスポンダーＴ細胞の増殖を抑制する能力、ＩＬ－２を産生できないこと、及びインビトロでのアネルギー表現型によって特徴づけられる。ヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔ細胞は、ＣＤ２５の発現レベルに応じて抑制性（ＣＤ２５ｈｉｇｈ）細胞及び非抑制性（ＣＤ２５ｌｏｗ）細胞に分割することができる。転写因子のフォークヘッドファミリーのメンバーであるＦＯＸＰ３は、マウス及びヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇで発現することが示され、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇの発生を制御するマスター遺伝子であると考えられる（Ｂａｔｔａｇｌｉａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１７７：８３３８－８３４７，（２００６））。従って、いくつかの実施形態では、免疫応答の上昇は、制御性Ｔ細胞の活性化又は増殖の欠如に関連し得る。
免疫恒常性は、免疫応答の開始とダウンレギュレーションとの間の制御されたバランスによって維持される。アポトーシス及びＴ細胞アネルギーの両方のメカニズム（抗原との遭遇後にＴ細胞が本質的に機能的に不活性化される耐性メカニズム（Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｒ．Ｈ．，“Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ”，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．２１：３０５－３３４（２００３））は、免疫応答のダウンレギュレーションに寄与する。第３のメカニズムは、サプレッサー又は制御性ＣＤ４＋ Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞による活性化Ｔ細胞の能動的抑制によって提供される（Ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ Ｋｒｏｎｅｎｂｅｒｇ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４３５：５９８－６０４（２００５））。ＩＬ－２受容体アルファ（ＩＬ－２Ｒα）鎖を構成的に発現するＣＤ４＋ Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋）は、アネルギー性及び抑制性である天然に存在するＴ細胞のサブセットである（Ｔａａｍｓ，Ｌ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｖｏｌ．３１：１１２２－１１３１（２００１））。ヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇは、マウスの対応物と同様に胸腺で生成され、細胞間接触依存性メカニズムを介してレスポンダーＴ細胞の増殖を抑制する能力、ＩＬ－２を産生できないこと、及びインビトロでのアネルギー表現型によって特徴づけられる。ヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔ細胞は、ＣＤ２５の発現レベルに応じて抑制性（ＣＤ２５ｈｉｇｈ）細胞及び非抑制性（ＣＤ２５ｌｏｗ）細胞に分割することができる。転写因子のフォークヘッドファミリーのメンバーであるＦＯＸＰ３は、マウス及びヒトＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇで発現することが示され、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ Ｔｒｅｇの発生を制御するマスター遺伝子であると考えられる（Ｂａｔｔａｇｌｉａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．１７７：８３３８－８３４７，（２００６））。従って、いくつかの実施形態では、免疫応答の上昇は、制御性Ｔ細胞の活性化又は増殖の欠如に関連し得る。
【0263】
細胞傷害性Ｔリンパ球
標的細胞内で産生されたタンパク質からペプチドを認識するＣＤ８＋ Ｔ細胞は、標的細胞の溶解を引き起こすという点で細胞傷害性を有する。ＣＴＬ誘導性溶解のメカニズムには、標的細胞の膜に挿入してその細胞の溶解を促進できる分子であるパーフォリンのＣＴＬによる産生が含まれる。パーフォリンを介した溶解は、活性化されたＣＴＬによって産生される一連の酵素であるグランザイムによって促進される。多くの活性ＣＴＬはまた、それらの表面に大量のｆａｓリガンドを発現する。ＣＴＬの表面のｆａｓリガンドと標的細胞の表面のｆａｓとの相互作用は、標的細胞のアポトーシスを開始し、これらの細胞の死をもたらす。ＣＴＬを介した溶解は、ウイルスに感染した細胞を破壊するための主要なメカニズムであると考えられる。
標的細胞内で産生されたタンパク質からペプチドを認識するＣＤ８＋ Ｔ細胞は、標的細胞の溶解を引き起こすという点で細胞傷害性を有する。ＣＴＬ誘導性溶解のメカニズムには、標的細胞の膜に挿入してその細胞の溶解を促進できる分子であるパーフォリンのＣＴＬによる産生が含まれる。パーフォリンを介した溶解は、活性化されたＣＴＬによって産生される一連の酵素であるグランザイムによって促進される。多くの活性ＣＴＬはまた、それらの表面に大量のｆａｓリガンドを発現する。ＣＴＬの表面のｆａｓリガンドと標的細胞の表面のｆａｓとの相互作用は、標的細胞のアポトーシスを開始し、これらの細胞の死をもたらす。ＣＴＬを介した溶解は、ウイルスに感染した細胞を破壊するための主要なメカニズムであると考えられる。
【0264】
リンパ球の活性化
「活性化」又は「リンパ球の活性化」という用語は、ＲＮＡ、タンパク質、及びＤＮＡの合成及びリンホカインの産生をもたらし；その後、様々なエフェクター細胞及びメモリー細胞の増殖及び分化が生じる、特定の抗原、非特異的マイトジェン、又は同族異系細胞によるリンパ球の刺激を指す。Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体と、クラスＩ又はクラスＩＩ ＭＨＣ分子の溝に結合したペプチドであるその同族リガンドとの相互作用に依存する。受容体の結合によって引き起こされる分子事象は複雑である。初期のステップでは、チロシンキナーゼの活性化が、いくつかのシグナル伝達経路を制御する一連の基質のチロシンリン酸化をもたらすと考えられる。これらには、ＴＣＲをｒａｓ経路に連結する一連のアダプタータンパク質、ホスホリパーゼＣγ１が含まれ、そのチロシンリン酸化は、その触媒活性を高め、イノシトールリン脂質代謝経路に関与し、細胞内遊離カルシウム濃度の上昇、並びにプロテインキナーゼＣと、細胞の成長及び分化を制御する他の一連の酵素の活性化をもたらす。Ｔ細胞の完全な応答性には、受容体の関与に加えて、アクセサリー細胞が提供する共刺激活性、例えば、ＡＰＣ上のＣＤ８０及び／又はＣＤ８６によるＴ細胞上のＣＤ２８の関与が必要である。
「活性化」又は「リンパ球の活性化」という用語は、ＲＮＡ、タンパク質、及びＤＮＡの合成及びリンホカインの産生をもたらし；その後、様々なエフェクター細胞及びメモリー細胞の増殖及び分化が生じる、特定の抗原、非特異的マイトジェン、又は同族異系細胞によるリンパ球の刺激を指す。Ｔ細胞の活性化は、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体と、クラスＩ又はクラスＩＩ ＭＨＣ分子の溝に結合したペプチドであるその同族リガンドとの相互作用に依存する。受容体の結合によって引き起こされる分子事象は複雑である。初期のステップでは、チロシンキナーゼの活性化が、いくつかのシグナル伝達経路を制御する一連の基質のチロシンリン酸化をもたらすと考えられる。これらには、ＴＣＲをｒａｓ経路に連結する一連のアダプタータンパク質、ホスホリパーゼＣγ１が含まれ、そのチロシンリン酸化は、その触媒活性を高め、イノシトールリン脂質代謝経路に関与し、細胞内遊離カルシウム濃度の上昇、並びにプロテインキナーゼＣと、細胞の成長及び分化を制御する他の一連の酵素の活性化をもたらす。Ｔ細胞の完全な応答性には、受容体の関与に加えて、アクセサリー細胞が提供する共刺激活性、例えば、ＡＰＣ上のＣＤ８０及び／又はＣＤ８６によるＴ細胞上のＣＤ２８の関与が必要である。
【0265】
Ｔメモリー細胞
適応免疫応答による病原体の認識と根絶に続いて、Ｔ細胞の大部分（９０～９５％）が、残りの細胞と共にアポトーシスを受け、メモリーＴ細胞、指定セントラルメモリーＴ細胞（ＴＣＭ）、エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ）、及び常在メモリーＴ細胞（ＴＲＭ）のプールが形成される（Ｃｌａｒｋ，Ｒ．Ａ．，“Ｒｅｓｉｄｅｎｔ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．，７，２６９ｒｖ１，（２０１５））。
適応免疫応答による病原体の認識と根絶に続いて、Ｔ細胞の大部分（９０～９５％）が、残りの細胞と共にアポトーシスを受け、メモリーＴ細胞、指定セントラルメモリーＴ細胞（ＴＣＭ）、エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ）、及び常在メモリーＴ細胞（ＴＲＭ）のプールが形成される（Ｃｌａｒｋ，Ｒ．Ａ．，“Ｒｅｓｉｄｅｎｔ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．，７，２６９ｒｖ１，（２０１５））。
【0266】
標準的なＴ細胞と比較して、これらのメモリーＴ細胞は、特定の表面マーカーの発現、様々なサイトカインプロファイルの迅速な産生、直接エフェクター細胞機能の能力、独自のホーミング分布パターンなどの異なる表現型で長寿命である。メモリーＴ細胞は、オフェンダー（ｏｆｆｅｎｄｅｒ）の再感染を排除し、それにより免疫系のバランスを迅速に回復するために、それぞれの抗原に再曝露されると迅速な応答を示す。自己免疫メモリーＴ細胞が自己免疫疾患の処置又は治癒のほとんどの試みを妨げることを実証する証拠が増えている（Ｃｌａｒｋ，Ｒ．Ａ．，“Ｒｅｓｉｄｅｎｔ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．７，２６９ｒｖ１，（２０１５））。
【0267】
免疫活性の増加
本明細書に記載のタノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む、操作された免疫細胞は、本明細書に記載される免疫細胞、例えば、組織又は対象におけるマクロファージ、単球、樹状細胞、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及びＣＤ４＋、ＣＤ８＋又はＣＤ３＋細胞（例えばＣＤ４＋、ＣＤ８＋若しくはＣＤ３＋Ｔ細胞）のいずれか１つ若しくは複数のレベル若しくは活性を増大することによって、組織又は対象の免疫活性を増加させることができる。例えば、一実施形態では、操作された免疫細胞は、以下：マクロファージのレベル若しくは活性、単球のレベル若しくは活性、樹状細胞のレベル若しくは活性、Ｔ細胞のレベル若しくは活性、Ｂ細胞のレベル若しくは活性、及びＣＤ４＋、ＣＤ８＋又はＣＤ３＋細胞（例えば、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋若しくはＣＤ３＋Ｔ細胞）のレベル若しくは活性の１つ若しくは複数を組織又は対象において増加させるのに十分な量で投与される。
本明細書に記載のタノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む、操作された免疫細胞は、本明細書に記載される免疫細胞、例えば、組織又は対象におけるマクロファージ、単球、樹状細胞、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及びＣＤ４＋、ＣＤ８＋又はＣＤ３＋細胞（例えばＣＤ４＋、ＣＤ８＋若しくはＣＤ３＋Ｔ細胞）のいずれか１つ若しくは複数のレベル若しくは活性を増大することによって、組織又は対象の免疫活性を増加させることができる。例えば、一実施形態では、操作された免疫細胞は、以下：マクロファージのレベル若しくは活性、単球のレベル若しくは活性、樹状細胞のレベル若しくは活性、Ｔ細胞のレベル若しくは活性、Ｂ細胞のレベル若しくは活性、及びＣＤ４＋、ＣＤ８＋又はＣＤ３＋細胞（例えば、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋若しくはＣＤ３＋Ｔ細胞）のレベル若しくは活性の１つ若しくは複数を組織又は対象において増加させるのに十分な量で投与される。
【0268】
いくつかの態様では、本開示は、組織又は対象におけるマクロファージ、単球、Ｂ細胞、Ｔ細胞及び／又は樹状細胞のレベル若しくは活性を増加させる方法に関し、これは、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を、組織又は対象に投与することを含み、ここで、免疫細胞は、操作された免疫細胞で処置されていない組織又は対象と比較して、マクロファージ、単球、Ｂ細胞、Ｔ細胞及び／又は樹状細胞のレベル又は活性を上昇させるのに十分な量で投与される。一実施形態では、対象は、マクロファージ、単球、樹状細胞、Ｂ細胞、及び／又はＴ細胞のレベル若しくは活性の増加を必要としている。一実施形態では、マクロファージ、単球、Ｂ細胞、Ｔ細胞又は樹状細胞のレベル若しくは活性は、操作された免疫細胞で処置されていない組織又は対象と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％若しくは１００％、又は少なくとも２倍、４倍、６倍、８倍、若しくは１０倍増加する。
【0269】
いくつかの態様では、本開示は、組織又は対象のＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＣＤ３＋細胞のレベル又は活性を高める方法に関し、この方法は、操作された免疫細胞で処置されていない組織又は対象に対して、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＣＤ３＋細胞のレベル又は活性を高めるのに十分な量の、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を対象に投与することを含む。一態様では、対象は、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＣＤ３＋細胞のレベル若しくは活性の増加を必要としている。一実施形態では、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、又はＣＤ３＋細胞のレベル若しくは活性は、操作された免疫細胞で処置されていない組織又は対象と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％若しくは１００％、又は少なくとも２倍、４倍、６倍、８倍、若しくは１０倍増加する。
【0270】
本発明の操作された免疫細胞はまた、免疫細胞によって産生される免疫促進性サイトカインのレベル又は活性を増加させることによって、細胞、組織又は対象の免疫活性を増加させ得る。例えば、一部の実施形態では、操作された免疫細胞は、細胞、組織、又は対象において、免疫細胞で産生された免疫促進性サイトカインのレベル又は活性を上昇させるのに十分な量で投与される。一実施形態では、免疫促進性サイトカインは、ＩＦＮ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１７及びＧＭＣＳＦから選択される。
【0271】
いくつかの態様では、本開示は、組織又は対象対して内因性の免疫細胞において炎症誘発性転写反応を誘導する、例えば、組織又は対象の免疫細胞においてＮＦｋＢ経路、インターフェロンＩＲＦシグナル伝達、及び／又はＳＴＡＴシグナル伝達を誘導する方法に関し、これは、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞、並びに／又は形質導入ドメイン及び／若しくはターゲティングドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を、内因性免疫細胞のＮＦｋＢ経路、インターフェロンＩＲＦシグナル伝達、及び／又はＳＴＡＴシグナル伝達における炎症誘発性転写反応を誘導するのに十分な量で、組織又は対象に投与することを含む。
【0272】
本発明の操作された免疫細胞はまた、核酸の細胞内センサー、例えば、インターフェロン遺伝子の刺激物質（ＳＴＩＮＧ）を介したシグナル伝達の調節によって、細胞、組織又は対象の免疫活性を増加させることができる。従って、いくつかの態様では、本開示は、核酸の細胞内センサー、例えば、インターフェロン遺伝子の刺激物質（ＳＴＩＮＧ）を介したシグナル伝達の調節によって、細胞、組織又は対象の免疫活性を増加させるのに十分な量で、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を、細胞、組織又は対象に投与することを含む、核酸の細胞内センサー、例えば、インターフェロン遺伝子の刺激物質（ＳＴＩＮＧ）を介したシグナル伝達の調節によって、細胞、組織又は対象の免疫活性を増加させる方法に関する。
【0273】
本発明の操作された免疫細胞はまた、抗体応答の誘導又は調節によって組織又は対象の免疫活性を増加させることもできる。例えば、一部の実施形態では、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞は、組織又は対象における抗体応答を調節するのに十分な量で投与される。
【0274】
従って、いくつかの態様では、本開示は、組織又は対象の免疫細胞における抗体応答の誘導又は調節によって組織又は対象における免疫活性を増加させる方法に関し、これは、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を、組織又は対象に投与することを含み、ここで、免疫細胞は、操作された免疫細胞で処置されていない組織又は対象と比較して、組織又は対象の免疫活性を上昇させるのに十分な量で投与される。
【0275】
いくつかの態様では、本開示は、細胞、組織又は対象における免疫促進性サイトカインのレベル若しくは活性を増加させる方法に関し、これは、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数のポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を、組織又は対象に投与することを含み、ここで、免疫細胞は、操作された免疫細胞で処置されていない細胞、組織又は対象と比較して、炎症促進性サイトカインのレベル又は活性を上昇させるのに十分な量で投与される。一実施形態では、免疫促進性サイトカインは、ＩＦＮ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１７及びＧＭＣＳＦから選択される。一実施形態では、対象は、免疫促進性サイトカインのレベル又は活性の増加を必要としている。一実施形態では、免疫促進性サイトカインのレベル若しくは活性は、操作された免疫細胞で処置されていない細胞、組織又は対象と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％若しくは１００％、又は少なくとも２倍、４倍、６倍、８倍、若しくは１０倍増加する。
【0276】
一部の実施形態では、本明細書に開示される方法は、操作された免疫細胞を投与する前に、以下：マクロファージのレベル又は活性；単球のレベル又は活性；樹状細胞のレベル又は活性；ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、若しくはＣＤ３＋細胞のレベル又は活性；Ｔ細胞のレベル又は活性；Ｂ細胞のレベル又は活性、及び免疫促進性サイトカインのレベル又は活性の１つ若しくは複数について、細胞、組織又は対象を評価するステップをさらに含む。
【0277】
一部の実施形態では、本発明の方法は、さらに、操作された免疫細胞の投与後に、以下：ＮＦｋＢ、ＩＲＦ若しくはＳＴＩＮＧのレベル又は活性；マクロファージのレベル又は活性；単球のレベル又は活性；樹状細胞のレベル又は活性；ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞若しくはＣＤ３＋細胞のレベル又は活性；Ｔ細胞のレベル又は活性；免疫促進性サイトカインのレベル又は活性の１つ若しくは複数について、細胞、組織又は対象を評価するステップをさらに含む。
【0278】
ＮＦｋＢ、ＩＲＦ、又はＳＴＩＮＧのレベル又は活性；マクロファージのレベル又は活性；単球のレベル又は活性；樹状細胞のレベル又は活性；ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、又はＣＤ３＋細胞のレベル又は活性；Ｔ細胞のレベル又は活性；及び免疫促進性サイトカインのレベル又は活性を測定する方法は当技術分野で公知である。
【0279】
例えば、ＮＦｋＢ、ＩＲＦ、又はＳＴＩＮＧのタンパク質のレベル又は活性は、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット又はインサイチューハイブリダイゼーションを含む当技術分野で公知の適切な技術によって測定することができる。ＮＦｋＢ、ＩＲＦ、又はＳＴＩＮＧをコードする核酸（例えば、ｍＲＮＡ）のレベルは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅反応、逆転写酵素ＰＣＲ分析、定量的リアルタイムＰＣＲ、一本鎖高次構造多型分析（ＳＳＣＰ）、ミスマッチ切断検出、ヘテロ二重鎖分析、ノーザンブロット分析、インサイチューハイブリダイゼーション、アレイ分析、デオキシリボ核酸配列決定、制限断片長多型分析、及びそれらの組み合わせ又は部分的な組み合わせを含む当技術分野で公知の適切な技術を用いて測定することができる。
【0280】
マクロファージのレベル及び活性を測定するための方法は、例えば、Ｃｈｉｔｕ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｔｏｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ １４：１－３３に記載されている。単球のレベル及び活性は、例えば、Ｈｅｎｎｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ４２３：７８－８４に記載されているようにフローサイトメトリーによって測定することができる。樹状細胞のレベル及び活性は、例えば、Ｄｉｘｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ．６９（７）：４３５１－４３５７に記載されているようにフローサイトメトリーによって測定することができる。これらの参考文献のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0281】
Ｔ細胞のレベル又は活性は、ヒトＣＤ４＋ Ｔ細胞ベースの増殖アッセイを使用して評価することができる。例えば、細胞は、蛍光色素５，６－カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）で標識されている。増殖するこれらの細胞は、フローサイトメトリーによって直接測定されるＣＦＳＥ蛍光強度の低下を示す。別法では、放射性チミジンの取り込みを使用して、Ｔ細胞の増殖速度を評価することができる。
【0282】
いくつかの実施形態では、免疫応答の上昇は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の活性化の低下に関連し得る。機能的活性Ｔｒｅｇは、インビトロでのＴｒｅｇ抑制アッセイを使用して評価することができる。そのようなアッセイは、Ｃｏｌｌｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｖｉｇｎａｌｉに記載されている（その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０１１；７０７：２１－３７）。
【0283】
免疫促進性サイトカインのレベル又は活性は、例えば、ＣＤ８＋ Ｔ細胞で定量することができる。実施形態では、免疫促進性サイトカインは、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ－α）、インターロイキン－１（ＩＬ－１）、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－４、ＩＬ－６、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ＩＬ－１７、及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）から選択される。定量は、抗原刺激に応答して所与のサイトカイン（例えば、ＩＦＮ－α）を分泌するＴ細胞を検出するＥＬＩＳＰＯＴ（酵素結合免疫スポット）技術を使用して行うことができる。Ｔ細胞は、例えば抗ＩＦＮ－α抗体でコーティングされたウェル内で抗原提示細胞と共に培養される。分泌されたＩＦＮ－αは、コーティングされた抗体によって捕捉され、発色基質に結合した二次抗体で明らかになる。従って、局所的に分泌されたサイトカイン分子はスポットを形成し、各スポットは１つのＩＦＮ－α分泌細胞に対応する。スポットの数により、分析されたサンプル中の所与の抗原に特異的なＩＦＮ－α分泌細胞の頻度を決定することができる。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、ＴＮＦ－α、インターロイキン－４（ＩＬ－４）、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、及びＧＭＣＳＦの検出についても説明されている。
【0284】
ＶＩＩＩ．障害を処置する方法
タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む、本発明の操作された免疫細胞は、細胞又は対象における免疫活性を高めるために使用され得る。従って、本発明の操作された免疫細胞は、癌並びに感染性疾患及び障害などの、免疫活性の増大から利益を被り得る障害の処置において使用され得る。
タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含む、本発明の操作された免疫細胞は、細胞又は対象における免疫活性を高めるために使用され得る。従って、本発明の操作された免疫細胞は、癌並びに感染性疾患及び障害などの、免疫活性の増大から利益を被り得る障害の処置において使用され得る。
【0285】
Ａ．癌
本明細書に提供されるように、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞は、内因性免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞など）の免疫活性を促進又は誘導することができ、そのため、例えば、癌の処置のための免疫療法に関与するものなどの免疫細胞機能を強化することができる。従って、特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において癌を処置する方法に関し、この方法は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を対象に投与し、それにより対象の癌を処置することを含む。
本明細書に提供されるように、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞は、内因性免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞など）の免疫活性を促進又は誘導することができ、そのため、例えば、癌の処置のための免疫療法に関与するものなどの免疫細胞機能を強化することができる。従って、特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象において癌を処置する方法に関し、この方法は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を対象に投与し、それにより対象の癌を処置することを含む。
【0286】
免疫系が自己と非自己を区別するのを防止する、様々な複雑で重複するメカニズムを利用する癌細胞の能力は、免疫監視を回避するための癌の基本的なメカニズムを表している。メカニズムには、抗原提示の阻害、Ｔ細胞の活性化又は阻害を制御する調節経路の破壊（免疫チェックポイント調節）、免疫抑制に寄与する細胞（Ｔｒｅｇ、ＭＤＳＣ）の動員、又は免疫活性に影響を与える因子（ＩＤＯ、ＰＧＥ２）の放出が含まれる（それぞれの内容がその全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｈａｒｒｉｓ ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ Ｃａｎｃｅｒ １：１２；Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３９：１；Ｐａｒｄｏｌｌ，ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ：Ｃａｎｃｅｒ １２：２５２；ａｎｄ Ｓｈａｒｍａ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｃｅｌｌ １６１：２０５を参照）。
【0287】
本明細書に記載の方法を用いた処置の対象となる癌は、例えば、哺乳動物に見出されるあらゆる種類の癌又は新生物又は悪性腫瘍を含み、限定はされないが、肉腫、黒色腫、癌腫、白血病、及びリンパ腫を含む。
【0288】
「肉腫」という用語は、一般に胚性結合組織のような物質から成り、且つ、概して線維状又は均質な物質に埋め込まれた密集した細胞から構成される腫瘍を指す。本発明の方法で処置することができる肉腫の例としては、例えば、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒色肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、アベメシ肉腫（Ａｂｅｍｅｔｈｙ’ｓ ｓａｒｃｏｍａ）、脂肪性肉腫、脂肪肉腫、肺巣状軟部肉腫、エナメル上皮線維肉腫、ブドウ状肉腫、緑色肉腫（ｃｈｌｏｒｏｍａ ｓａｒｃｏｍａ）、絨毛膜癌、胎児性肉腫、ウィルムス腫瘍肉腫、子宮内膜肉腫、間質肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞の免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞の免疫芽球性肉腫、イエンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉腫、傍骨性肉腫、細網肉腫、ラウス肉腫、漿液嚢肉腫（ｓｅｒｏｃｙｓｔｉｃ ｓａｒｃｏｍａ）、滑膜肉腫、子宮肉腫、粘液性脂肪肉腫、平滑筋肉腫、紡錘細胞肉腫、線維形成性肉腫（ｄｅｓｍｏｐｌａｓｔｉｃ ｓａｒｃｏｍａ）、及び毛細血管拡張性肉腫が挙げられる。
【0289】
「黒色腫」という用語は、皮膚及び他の器官のメラニン細胞系から生じる腫瘍を意味すると解釈される。本発明の方法で処置することができる黒色腫には、例えば、末端黒子型黒色腫、メラニン欠乏性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫、Ｓ９１黒色腫、ハーディング－パッセー黒色腫、若年性黒色腫、悪性黒子型黒色腫、悪性黒色腫、結節性黒色腫、爪下黒色腫、及び表在拡大型黒色腫が含まれる。
【0290】
「癌腫」という用語は、周囲の組織に浸潤して転移を引き起こす傾向がある上皮細胞からなる悪性の悪性新生物を指す。本明細書に記載されるように本発明の方法で処置することができる癌腫として、例えば、以下のものが挙げられる：腺房癌、腺房細胞癌、腺嚢胞癌、腺様嚢胞癌、腺腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｕｍ）、副腎皮質癌、肺胞上皮癌、肺胞細胞癌、基底細胞癌（ｂａｓａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、基底細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、肺類基底細胞癌（ｂａｓａｌｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、基底扁平上皮癌（ｂａｓｏｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、気管支肺胞上皮癌（ｂｒｏｎｃｈｉｏａｌｖｅｏｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、気管支癌、気管支原性癌、大脳様癌、胆管細胞癌、絨毛膜癌、コロイド癌、結腸の結腸腺癌、面疱癌、子宮体癌（ｃｏｒｐｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、篩状癌（ｃｒｉｂｒｉｆｏｒｍ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、鎧状癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｅｎ ｃｕｉｒａｓｓｅ）、皮膚癌、円柱状癌（ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、円柱状細胞癌（ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腺管癌、硬膜癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｄｕｒｕｍ）、胎児性癌（ｅｍｂｒｙｏｎａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、脳様癌（ｅｎｃｅｐｈａｌｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、類表皮癌（ｅｐｉｅｒｍｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、上皮性腺様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｅ ａｄｅｎｏｉｄｅｓ）、外向発育癌（ｅｘｏｐｈｙｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、潰瘍癌、線維性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｆｉｂｒｏｓｕｍ）、膠様癌、膠様腺癌（ｇｅｌａｔｉｎｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨細胞癌（ｇｉａｎｔ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨大細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、腺癌、顆粒膜細胞癌、毛母癌、血様癌（ｈｅｍａｔｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子質癌（ｈｙａｌｉｎｅ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、副腎様癌（ｈｙｐｅｍｅｐｈｒｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、小児胎児性癌（ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｅｍｂｒｙｏｎａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、上皮内癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｓｉｔｕ）、表皮内癌、上皮内癌（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クロムペッヘル癌（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クルキツキー細胞癌（Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ－ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、大細胞癌、レンズ状癌（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）、脂肪腫性癌（ｌｉｐｏｍａｔｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、リンパ上皮癌、髄様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄質癌（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色癌、軟性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｏｌｌｅ）、メルケル細胞癌、粘液性癌（ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液分泌癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｉｐａｒｕｍ）、粘液細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、粘膜表皮癌、粘液性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｏｓｕｍ）、粘膜癌、粘液腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｙｘｏｍａｔｏｄｅｓ）、鼻咽腔癌、燕麦細胞癌、骨化性癌、類骨癌、乳頭癌、門脈周囲性癌種（ｐｅｒｉｐｏｒｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、前浸潤癌、棘細胞癌、粥状癌種（ｐｕｌｔａｃｅｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腎臓の腎細胞癌、貯蔵細胞癌、肉腫性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｓａｒｃｏｍａｔｏｄｅｓ）、シュナイダー癌、硬性癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソラノイド癌、球状細胞精巣癌、紡錘細胞癌、海綿様癌、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、紐様癌（ｓｔｒｉｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、毛細血管拡張性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｔｉｃｕｍ）、毛細血管拡張性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔｏｄｅｓ）、移行上皮癌、結節癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、結節癌（ｔｕｂｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、疣贅性癌（ｖｅｒｒｕｃｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、子宮頸部扁平上皮癌、扁桃扁平上皮細胞癌（ｔｏｎｓｉｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、及び絨毛癌。特定の実施形態では、癌は腎細胞癌である。
【0291】
「白血病」という用語は、「芽球」と呼ばれる未熟白血球の異常な増加を特徴とする血液又は骨髄の癌の一種を指す。白血病は、様々な疾患を網羅する広義の用語である。次に、白血病は、血液、骨髄、及びリンパ系に影響を与えるさらに広範な疾患群の一部であり、これらはすべて血液学的腫瘍として知られている。白血病は、急性リンパ性（又はリンパ芽球性）白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性（又は骨髄性又は非リンパ性）白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、及び慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の４つの主要な区分に分類することができる。白血病のさらなる種類には、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、Ｔ細胞前リンパ球性白血病（Ｔ－ＰＬＬ）、大顆粒リンパ球性白血病、及び成人Ｔ細胞白血病が含まれる。特定の実施形態では、白血病は急性白血病を含む。特定の実施形態では、白血病は慢性白血病を含む。
【0292】
「リンパ腫」という用語は、リンパ細胞に由来する血球腫瘍群を指す。リンパ腫の２つの主要な種類は、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）と非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。リンパ腫には、リンパ組織のあらゆる腫瘍が含まれる。主なクラスは、リンパ液及び血液の両方に属し、両方に広がる白血球の一種であるリンパ球の癌である。
【0293】
一部の実施形態では、本開示の操作された免疫細胞、及び操作された免疫細胞を含む組成物は、様々な種類の固形腫瘍、例えば、乳癌（例えば、三重陰性乳癌）、膀胱癌、泌尿生殖器癌、大腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓（腎細胞）癌、膵臓癌、前立腺癌、甲状腺癌（例えば、甲状腺乳頭癌）、皮膚癌、骨癌、脳腫瘍、子宮頸癌、肝臓癌、胃癌、口腔癌（ｍｏｕｔｈ ａｎｄ ｏｒａｌ ｃａｎｃｅｒ）、食道癌、腺様嚢胞癌、神経芽細胞腫、精巣癌、子宮癌、甲状腺癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌）、中皮腫、卵巣癌、肉腫、胃癌、子宮癌、子宮頸癌、髄芽細胞腫、及び外陰癌の処置に使用される。特定の実施形態では、皮膚癌には、黒色腫、扁平上皮癌、及び皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）が含まれる。
【0294】
一部の実施形態では、固形腫瘍は、結腸癌、軟部組織肉腫（ＳＴＳ）、転移性明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、卵巣癌、胃腸癌、結腸直腸癌、肝細胞癌（ＨＣＣ）、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、乳癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肉腫、悪性胸膜中皮腫（ＭＰＭ）、網膜芽細胞腫、神経膠腫、髄芽腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、膵臓癌、肺癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、食道癌、肝臓癌、前立腺癌、婦人科系の癌、上咽頭癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、尿路上皮膀胱癌、神経芽細胞腫、及び子宮頸癌からなる群から選択される。これらの固形腫瘍を標的とするための例示的な抗原結合ドメイン標的タンパク質を表８に記載する。
【0295】
特定の実施形態では、癌は、「免疫学的に冷たい」癌、例えば、浸潤Ｔ細胞をほとんど含まない腫瘍、又は認識されず、免疫系による強い応答を引き起こさず、そのため、既存の免疫療法での治療が困難な癌であってもよい。例えば、一実施形態では、癌は、以下：黒色腫、子宮頸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、尿路上皮癌、膀胱癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肉腫、結腸直腸腺癌、消化管間質腫瘍、胃食道癌、大腸癌、膵臓癌、腎臓癌、悪性中皮腫、白血病、リンパ腫、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、移行細胞癌、神経芽細胞腫、形質細胞腫、ウィルムス腫瘍、及び肝細胞癌（例えば、肝細胞癌）からなる群から選択される。
【0296】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の治療法は、別の抗腫瘍（例えば免疫療法）療法による癌の治療に以前失敗した対象に施すことができる。「抗腫瘍療法に失敗した対象」とは、ＲＥＣＩＳＴ １．１基準に基づく抗腫瘍療法による処置に応答しない、若しくは応答しなくなった、即ち、標的病変における完全寛解、部分寛解、若しくは安定した疾患を達成しないか；又は、抗腫瘍療法の最中又は完了後のいずれかで、単独で又は外科手術及び／又は放射線療法と組み合わせて、非標的病変の完全寛解又は非ＣＲ／非ＰＤを達成しない癌対象であり、この外科手術及び／又は放射線療法は、可能であれば、多くの場合、抗腫瘍療法と組み合わせて臨床的に必要である。ＲＥＣＩＳＴ １．１基準は、例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ４５：２２８－２４（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下でより詳細に論じられる。失敗した抗腫瘍療法は、例えば、腫瘍の増殖、腫瘍量の増加、及び／又は腫瘍の転移をもたらす。本明細書で使用される失敗した抗腫瘍療法には、用量制限毒性、例えば、抗腫瘍剤による処置の継続若しくは再開を可能にするために解決できないグレードＩＩＩ若しくはグレードＩＶ毒性のために終了した治療計画、又は毒性を引き起こした療法が含まれる。一実施形態では、対象は、１つ又は複数の抗血管新生剤の投与を含む抗腫瘍療法による処置に失敗している。
【0297】
失敗した抗腫瘍療法には、長期間、例えば、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１８ヶ月、又は臨床的に定義される治癒よりも短い任意の期間にわたって、すべての標的及び非標的病変に対して少なくとも疾患の安定が得られない治療計画が含まれる。失敗した抗腫瘍療法には、抗腫瘍剤による処置中に少なくとも１つの標的病変の進行性疾患が生じる治療計画、又は治療計画の終了から２週間未満、１ヶ月未満、２ヶ月未満、３ヶ月未満、４ヶ月未満、５ヶ月未満、６ヶ月未満、１２ヶ月未満、若しくは１８ヶ月未満で、又は臨床的に定義される治癒よりも短い任意の期間未満で進行性疾患が生じる治療計画が含まれる。
【0298】
失敗した抗腫瘍療法には、癌の処置を受けた対象が臨床的に定義される治癒、例えば治療計画の終了から５年間で完全寛解を達成し、その後、対象が、例えば、治療計画の終了から５年超、６年超、７年超、８年超、９年超、１０年超、１１年超、１２年超、１３年超、１４年超、又は１５年超してから異なる癌と診断される治療計画は含まれない。
【0299】
ＲＥＣＩＳＴ基準は、臨床的に認められた評価基準であり、固形腫瘍測定への標準的なアプローチを提供するため、及び臨床試験で使用するための腫瘍サイズの変化の客観的評価の定義を提供するために使用される。このような基準は、固形腫瘍の処置を受けている個人の寛解を監視するためにも使用することができる。ＲＥＣＩＳＴ １．１基準については、参照により本明細書に組み込まれる、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ４５：２２８－２４で詳細に議論されている。標的病変の寛解基準は次の通りである。
【0300】
完全寛解（ＣＲ）：すべての標的病変の消失。あらゆる病理学的リンパ節（標的又は非標的）が、短軸において１０ｍｍ未満まで縮小しなければならない。
【0301】
部分寛解（ＰＲ）：ベースラインの合計直径を基準として、標的病変の直径の合計が少なくとも３０％減少する。
【0302】
進行性疾患（ＰＤ）：試験における最小合計を基準として、標的病変の直径の合計が少なくとも２０％増加する（これには、試験における最小の場合、ベースライン合計が含まれる）。２０％の相対的な増加に加えて、合計は少なくとも５ｍｍの絶対的な増加も示さなければならない（注：１つ又は複数の新しい病変の出現も進行と見なされる）。
【0303】
安定した疾患（ＳＤ）：試験中の最小の合計直径を基準として、ＰＲを満たす十分な収縮もＰＤを満たす十分な増加もない。
【0304】
ＲＥＣＩＳＴ １．１基準では、測定可能であり得るが、測定する必要がなく、所望の時点でのみ定性的に評価する必要がある病変として定義される非標的病変も考慮される。非標的病変の寛解基準は次の通りである。
【0305】
完全寛解（ＣＲ）：すべての非標的病変の消失と腫瘍マーカーレベルの正常化。すべてのリンパ節は、そのサイズが非病理学的でなければならない（短軸で１０ｍｍ未満）。
【0306】
非ＣＲ／非ＰＤ：１つ又は複数の非標的病変の持続及び／又は正常限界を超える腫瘍マーカーレベルの維持。
【0307】
進行性疾患（ＰＤ）：既存の非標的病変の明確な進行。１つ又は複数の新しい病変の出現も進行と見なされる。非標的疾患に基づく「明確な進行」を達成するには、たとえ標的疾患にＳＤ又はＰＲが存在したとしても、治療法の中止に値するのに十分に全腫瘍量が増加するように、非標的疾患の全体的なレベルが大幅に悪化する必要がある。１つ又は複数の非標的病変のサイズの中程度の「増加」は、通常は明確な進行状態を満たすのに十分ではない。従って、標的疾患におけるＳＤ又はＰＲにもかかわらず、非標的疾患の変化のみに基づく全体的な進行の決定は非常にまれである。
【0308】
一部の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物及び併用療法は、難治性癌を有する対象に投与することができる。「難治性癌」とは、外科手術が効果的ではない悪性腫瘍であり、最初から化学療法若しくは放射線療法に反応しないか、又は時間の経過と共に化学療法若しくは放射線療法に反応しなくなるかのいずれかである。
【0309】
本開示はさらに、腫瘍細胞増殖が阻害されるように、本明細書に記載の操作された免疫細胞を投与することを含む、対象における腫瘍細胞増殖を阻害する方法を提供する。特定の実施形態では、癌の処置は、対照、例えば、操作された免疫細胞で処置されていない対象と比較して、生存期間を延長するか、又は腫瘍進行までの時間を延長することを含む。特定の実施形態では、対象は、ヒト対象である。一部の実施形態では、対象は、操作された免疫細胞の初回用量の投与前に、癌（例えば、腫瘍）を有すると特定される。特定の実施形態では、対象は、操作された免疫細胞の初回投与時に、癌（例えば、腫瘍）を有する。
【0310】
一実施形態では、操作された免疫細胞の投与は、以下：癌細胞の増殖の抑制、癌細胞の転移の抑制、腫瘍の新生血管形成の抑制、腫瘍量の減少、腫瘍サイズ、重量若しくは体積の減少、腫瘍成長の阻害、癌の進行までの時間の増加、及び／又は腫瘍性障害を有する対象の生存期間の延長のうちの１つ若しくは複数をもたらす。特定の実施形態では、操作された免疫細胞の投与は、核酸分子、ベクター、細胞又は医薬組成物を投与されていない対応する対照対象と比較して、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％若しくは５００％、癌細胞の増殖を抑制し、癌細胞の転移を抑制し、腫瘍の新生血管形成を抑制し、腫瘍量を減少させ、腫瘍のサイズ、重量若しくは体積を減少させ、進行までの時間を増加させ、腫瘍増殖を阻害し、且つ／又は対象の生存期間を延長する。特定の実施形態では、操作された免疫細胞の投与は、核酸分子、ベクター、細胞又は医薬組成物を投与されていない腫瘍性障害に罹患した対照対象の対応する集団と比較して、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％若しくは５００％、癌細胞の増殖を抑制し、癌細胞の転移を抑制し、腫瘍の新生血管形成を抑制し、腫瘍量を減少させ、腫瘍のサイズ、重量若しくは体積を減少させ、進行までの時間を増加させ、腫瘍増殖を阻害し、且つ／又は腫瘍性障害に罹患した対象の集団の生存期間を延長する。一部の実施形態では、癌細胞の増殖は、対象に施された癌療法から起こる癌細胞の過剰増殖である。一部の実施形態では、操作された免疫細胞の投与は、処置前に進行性の腫瘍性障害を有する対象における腫瘍性障害を安定化させる。
【0311】
本発明の操作された免疫細胞と１つ又は複数の追加の治療薬との併用療法
「組み合わせて投与すること」、「併用療法」、「共投与すること」又は「共投与」という用語は、１つ又は複数の追加の治療薬と組み合わせた、本発明の操作された免疫細胞、即ち、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された、免疫細胞の投与を指し得る。１又は複数種の追加の治療薬は、本発明の操作された免疫細胞の投与の前、それと同時若しくは実質的に同時、その後、又は間を置いて投与され得る。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞の投与前に投与される。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞と同時に投与される。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞の投与後に投与される。
「組み合わせて投与すること」、「併用療法」、「共投与すること」又は「共投与」という用語は、１つ又は複数の追加の治療薬と組み合わせた、本発明の操作された免疫細胞、即ち、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された、免疫細胞の投与を指し得る。１又は複数種の追加の治療薬は、本発明の操作された免疫細胞の投与の前、それと同時若しくは実質的に同時、その後、又は間を置いて投与され得る。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞の投与前に投与される。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞と同時に投与される。特定の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬は、操作された免疫細胞の投与後に投与される。
【0312】
１つ又は複数の追加の治療薬及び本発明の操作された免疫細胞は、相加的又は相乗的に作用する。一実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬及び操作された免疫細胞は相乗的に作用する。一部の実施形態では、相乗効果は、腫瘍性障害又は感染症の処置に際して生じる。例えば、一実施形態では、１又は複数種の追加の治療薬と、操作された免疫細胞との組み合わせは、癌に対する免疫応答の持続性を向上させ、即ち、その持続時間を延長する。一部の実施形態では、１つ又は複数の追加の治療薬及び操作された免疫細胞は、相加的に作用する。
【0313】
１．免疫チェックポイントモジュレーター
一部の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と組み合わせて投与される追加の治療薬は、免疫チェックポイント分子の免疫チェックポイントモジュレーターである。免疫チェックポイント分子の例を以下に挙げる：ＬＡＧ－３（Ｔｒｉｅｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７１：１３９３－１４０５）、ＴＩＭ－３（Ｓａｋｕｉｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０１０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０７：２１８７－２１９４）、ＶＩＳＴＡ（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０８：５７７－５９２）、ＩＣＯＳ（Ｆａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２１１：７１５－７２５）、ＯＸ４０（Ｃｕｒｔｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７３：７１８９－７１９８）及び４－１ＢＢ（Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：６８２－６８５）。
一部の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と組み合わせて投与される追加の治療薬は、免疫チェックポイント分子の免疫チェックポイントモジュレーターである。免疫チェックポイント分子の例を以下に挙げる：ＬＡＧ－３（Ｔｒｉｅｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７１：１３９３－１４０５）、ＴＩＭ－３（Ｓａｋｕｉｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，２０１０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０７：２１８７－２１９４）、ＶＩＳＴＡ（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０８：５７７－５９２）、ＩＣＯＳ（Ｆａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２１１：７１５－７２５）、ＯＸ４０（Ｃｕｒｔｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７３：７１８９－７１９８）及び４－１ＢＢ（Ｍｅｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：６８２－６８５）。
【0314】
免疫チェックポイントは、刺激性免疫チェックポイント（即ち、免疫応答を刺激する分子）又は抑制性免疫チェックポイント（即ち、免疫応答を抑制する分子）であり得る。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、抑制性免疫チェックポイントのアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、刺激性免疫チェックポイントのアゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、免疫チェックポイント結合タンパク質（例えば、抗体、抗体Ｆａｂ断片、二価抗体、抗体薬物コンジュゲート、ｓｃＦｖ、融合タンパク質、二価抗体、又は四価抗体）である。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、２つ以上の免疫チェックポイントに結合するか、又はその活性を調節することができる。刺激性及び抑制性免疫チェックポイントの例、並びに本発明の方法で使用できるこれらの免疫チェックポイントを調節する分子の例が以下に示される。
【0315】
ｉ．刺激性免疫チェックポイント分子
ＣＤ２７は、ナイーブＴ細胞の抗原特異的増殖を支援し、Ｔ細胞記憶の生成に不可欠である（例えば、Ｈｅｎｄｒｉｋｓ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７１（５）：４３３－４０を参照）。ＣＤ２７は、Ｂ細胞の記憶マーカーでもある（例えば、Ａｇｅｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｈｉｓｔｏｌ．Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．１５（２）：５７３－６を参照）。ＣＤ２７活性は、リンパ球及び樹状細胞上のそのリガンドであるＣＤ７０の一時的な有効性によって支配される（例えば、Ｂｏｒｓｔ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７（３）：２７５－８１を参照）。ＣＤ２７に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ２７抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、バリルマブ（ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ）（Ｃｅｌｌｄｅｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。追加のＣＤ２７結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，２４８，１８３号明細書、同第９，１０２，７３７号明細書、同第９，１６９，３２５号明細書、同第９，０２３，９９９号明細書、同第８，４８１，０２９号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０１８５８７０号明細書、同第２０１５／０３３７０４７号明細書、同第２０１５／０２９９３３０号明細書、同第２０１４／０１１２９４２号明細書、同第２０１３／０３３６９７６号明細書、同第２０１３／０２４３７９５号明細書、同第２０１３／０１８３３１６号明細書、同第２０１２／０２１３７７１号明細書、同第２０１２／００９３８０５号明細書、同第２０１１／０２７４６８５号明細書、同第２０１０／０１７３３２４号明細書；並びに国際公開第２０１５／０１６７１８号パンフレット、同第２０１４／１４０３７４号パンフレット、同第２０１３／１３８５８６号パンフレット、同第２０１２／００４３６７号パンフレット、同第２０１１／１３０４３４号パンフレット、同第２０１０／００１９０８号パンフレット、及び同第２００８／０５１４２４号パンフレットに開示されている。
ＣＤ２７は、ナイーブＴ細胞の抗原特異的増殖を支援し、Ｔ細胞記憶の生成に不可欠である（例えば、Ｈｅｎｄｒｉｋｓ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７１（５）：４３３－４０を参照）。ＣＤ２７は、Ｂ細胞の記憶マーカーでもある（例えば、Ａｇｅｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｈｉｓｔｏｌ．Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．１５（２）：５７３－６を参照）。ＣＤ２７活性は、リンパ球及び樹状細胞上のそのリガンドであるＣＤ７０の一時的な有効性によって支配される（例えば、Ｂｏｒｓｔ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７（３）：２７５－８１を参照）。ＣＤ２７に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ２７抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターはＣＤ２７結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、バリルマブ（ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ）（Ｃｅｌｌｄｅｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。追加のＣＤ２７結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，２４８，１８３号明細書、同第９，１０２，７３７号明細書、同第９，１６９，３２５号明細書、同第９，０２３，９９９号明細書、同第８，４８１，０２９号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０１８５８７０号明細書、同第２０１５／０３３７０４７号明細書、同第２０１５／０２９９３３０号明細書、同第２０１４／０１１２９４２号明細書、同第２０１３／０３３６９７６号明細書、同第２０１３／０２４３７９５号明細書、同第２０１３／０１８３３１６号明細書、同第２０１２／０２１３７７１号明細書、同第２０１２／００９３８０５号明細書、同第２０１１／０２７４６８５号明細書、同第２０１０／０１７３３２４号明細書；並びに国際公開第２０１５／０１６７１８号パンフレット、同第２０１４／１４０３７４号パンフレット、同第２０１３／１３８５８６号パンフレット、同第２０１２／００４３６７号パンフレット、同第２０１１／１３０４３４号パンフレット、同第２０１０／００１９０８号パンフレット、及び同第２００８／０５１４２４号パンフレットに開示されている。
【0316】
ＣＤ２８．分化抗原群２８（ＣＤ２８）は、Ｔ細胞の活性化及び生存に必要な共刺激シグナルを提供するＴ細胞で発現するタンパク質の１つである。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）に加えてＣＤ２８を介したＴ細胞刺激は、様々なインターロイキン（特にＩＬ－６）の産生のための強力なシグナルを提供することができる。樹状細胞で発現するその２つのリガンドであるＣＤ８０及びＣＤ８６との結合は、Ｔ細胞の増殖を促進する（例えば、Ｐｒａｓａｄ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１（７）：２８３４－８を参照）。ＣＤ２８に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２８の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２８に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ２８抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２８アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ２８アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｄ２８結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＡＢ０８（ＴｈｅｒａＭａｂ ＬＬＣ）、ルリズマブ（ｌｕｌｉｚｕｍａｂ）（ＢＭＳ－９３１６９９（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）としても知られている）、及びＦＲ１０４（ＯＳＥ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択される。追加のＣＤ２８結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，１１９，８４０号明細書、同第８，７０９，４１４号明細書、同第９，０８５，６２９号明細書、同第８，０３４，５８５号明細書、同第７，９３９，６３８号明細書、同第８，３８９，０１６号明細書、同第７，５８５，９６０号明細書、同第８，４５４，９５９号明細書、同第８，１６８，７５９号明細書、同第８，７８５，６０４号明細書、同第７，７２３，４８２号明細書；米国特許出願公開第２０１６／００１７０３９号明細書、同第２０１５／０２９９３２１号明細書、同第２０１５／０１５０９６８号明細書、同第２０１５／００７１９１６号明細書、同第２０１５／０３７６２７８号明細書、同第２０１３／００７８２５７号明細書、同第２０１３／０２３０５４０号明細書、同第２０１３／００７８２３６号明細書、同第２０１３／０１０９８４６号明細書、同第２０１３／０２６６５７７号明細書、同第２０１２／０２０１８１４号明細書、同第２０１２／００８２６８３号明細書、同第２０１２／０２１９５５３号明細書、同第２０１１／０１８９７３５号明細書、同第２０１１／００９７３３９号明細書、同第２０１０／０２６６６０５号明細書、同第２０１０／０１６８４００号明細書、同第２００９／０２４６２０４号明細書、同第２００８／００３８２７３号明細書；並びに国際公開第２０１５１９８１４７号パンフレット、同第２０１６／０５４２１号パンフレット、同第２０１４／１２０９１６８号パンフレット、同第２０１１／１０１７９１号パンフレット、同第２０１０／００７３７６号パンフレット、同第２０１０／００９３９１号パンフレット、同第２００４／００４７６８号パンフレット、同第２００２／０３０４５９号パンフレット、同第２００２／０５１８７１号パンフレット、及び同第２００２／０４７７２１号パンフレットに開示されている。
【0317】
ＣＤ４０．分化抗原群４０（ＣＤ４０、ＴＮＦＲＳＦ５としても知られている）は、抗原提示細胞を含む様々な免疫系細胞に見られる。別名ＣＤ１５４として知られているＣＤ４０Ｌは、ＣＤ４０のリガンドであり、活性化されたＣＤ４＋ Ｔ細胞の表面に一過性に発現する。ＣＤ４０シグナル伝達は、樹状細胞を「許可（ｌｉｃｅｎｓｅ）して」成熟させ、それによりＴ細胞の活性化及び分化を引き起こすことが知られている（例えば、Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３（１）：８３－１０７を参照）。ＣＤ４０に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ４０の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターはＣＤ４０に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ４０抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ４０アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＤ４０アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ダセツズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｓｅａｔｔｌｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＣＰ－８７０、８９３（Ｐｆｉｚｅｒ）、ブレセルマブ（Ａｓｔｅｌｌａｓ Ｐｈａｒｍａ）、ルカツムマブ（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＣＦＺ５３３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ；例えば、Ｃｏｒｄｏｂａ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．１５（１１）：２８２５－３６を参照）、ＲＧ７８７６（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ Ｉｎｃ．）、ＦＦＰ１０４（ＰａｎＧｅｎｅｔｉｃｓ，Ｂ．Ｖ．）、ＡＰＸ００５（Ａｐｅｘｉｇｅｎ）、ＢＩ６５５０６４（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｃｈｉ Ｌｏｂ ７／４（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＵＫ；例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（６）：１３２１－８を参照）、ＡＤＣ－１０１３（ＢｉｏＩｎｖｅｎｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）、ＳＥＡ－ＣＤ４０（Ｓｅａｔｔｌｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＸｍＡｂ ５４８５（Ｘｅｎｃｏｒ）、ＰＧ１２０（ＰａｎＧｅｎｅｔｉｃｓ Ｂ．Ｖ．）、テネリキシマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；例えば、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ａｍ．Ｊ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．１１（５）：９４７－５７を参照）、及びＡＫＨ３（Ｂｉｏｇｅｎ；例えば、国際公開第２０１６／０２８８１０号パンフレットを参照）からなる群から選択されるＣＤ４０結合タンパク質である。追加のＣＤ４０結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，２３４，０４４号明細書、同第９，２６６，９５６号明細書、同第９，１０９，０１１号明細書、同第９，０９０，６９６号明細書、同第９，０２３，３６０号明細書、同第９，０２３，３６１号明細書、同第９，２２１，９１３号明細書、同第８，９４５，５６４号明細書、同第８，９２６，９７９号明細書、同第８，８２８，３９６号明細書、同第８，６３７，０３２号明細書、同第８，２７７，８１０号明細書、同第８，０８８，３８３号明細書、同第７，８２０，１７０号明細書、同第７，７９０，１６６号明細書、同第７，４４５，７８０号明細書、同第７，３６１，３４５号明細書、同第８，９６１，９９１号明細書、同第８，６６９，３５２号明細書、同第８，９５７，１９３号明細書、同第８，７７８，３４５号明細書、同第８，５９１，９００号明細書、同第８，５５１，４８５号明細書、同第８，４９２，５３１号明細書、同第８，３６２，２１０号明細書、同第８，３８８，９７１号明細書；米国特許出願公開第２０１６／００４５５９７号明細書、同第２０１６／０１５２７１３号明細書、同第２０１６／００７５７９２号明細書、同第２０１５／０２９９３２９号明細書、同第２０１５／００５７４３７号明細書、同第２０１５／０３１５２８２号明細書、同第２０１５／０３０７６１６号明細書、同第２０１４／００９９３１７号明細書、同第２０１４／０１７９９０７号明細書、同第２０１４／０３４９３９５号明細書、同第２０１４／０２３４３４４号明細書、同第２０１４／０３４８８３６号明細書、同第２０１４／０１９３４０５号明細書、同第２０１４／０１２０１０３号明細書、同第２０１４／０１０５９０７号明細書、同第２０１４／０２４８２６６号明細書、同第２０１４／００９３４９７号明細書、同第２０１４／００１０８１２号明細書、同第２０１３／００２４９５６号明細書、同第２０１３／００２３０４７号明細書、同第２０１３／０３１５９００号明細書、同第２０１２／００８７９２７号明細書、同第２０１２／０２６３７３２号明細書、同第２０１２／０３０１４８８号明細書、同第２０１１／００２７２７６号明細書、同第２０１１／０１０４１８２号明細書、同第２０１０／０２３４５７８号明細書、同第２００９／０３０４６８７号明細書、同第２００９／０１８１０１５号明細書、同第２００９／０１３０７１５号明細書、同第２００９／０３１１２５４号明細書、同第２００８／０１９９４７１号明細書、同第２００８／００８５５３１号明細書、同第２０１６／０１５２７２１号明細書、同第２０１５／０１１０７８３号明細書、同第２０１５／００８６９９１号明細書、同第２０１５／００８６５５９号明細書、同第２０１４／０３４１８９８号明細書、同第２０１４／０２０５６０２号明細書、同第２０１４／０００４１３１号明細書、同第２０１３／００１１４０５号明細書、同第２０１２／０１２１５８５号明細書、同第２０１１／００３３４５６号明細書、同第２０１１／０００２９３４号明細書、同第２０１０／０１７２９１２号明細書、同第２００９／００８１２４２号明細書、同第２００９／０１３００９５号明細書、同第２００８／０２５４０２６号明細書、同第２００８／００７５７２７号明細書、同第２００９／０３０４７０６号明細書、同第２００９／０２０２５３１号明細書、同第２００９／０１１７１１１号明細書、同第２００９／００４１７７３号明細書、同第２００８／０２７４１１８号明細書、同第２００８／００５７０７０号明細書、同第２００７／００９８７１７号明細書、同第２００７／０２１８０６０号明細書、同第２００７／００９８７１８号明細書、同第２００７／０１１０７５４号明細書；並びに国際公開第２０１６／０６９９１９号パンフレット、同第２０１６／０２３９６０号パンフレット、同第２０１６／０２３８７５号パンフレット、同第２０１６／０２８８１０号パンフレット、同第２０１５／１３４９８８号パンフレット、同第２０１５／０９１８５３号パンフレット、同第２０１５／０９１６５５号パンフレット、同第２０１４／０６５４０３号パンフレット、同第２０１４／０７０９３４号パンフレット、同第２０１４／０６５４０２号パンフレット、同第２０１４／２０７０６４号パンフレット、同第２０１３／０３４９０４号パンフレット、同第２０１２／１２５５６９号パンフレット、同第２０１２／１４９３５６号パンフレット、同第２０１２／１１１７６２号パンフレット、同第２０１２／１４５６７３号パンフレット、同第２０１１／１２３４８９号パンフレット、同第２０１０／１２３０１２号パンフレット、同第２０１０／１０４７６１号パンフレット、同第２００９／０９４３９１号パンフレット、同第２００８／０９１９５４号パンフレット、同第２００７／１２９８９５号パンフレット、同第２００６／１２８１０３号パンフレット、同第２００５／０６３２８９号パンフレット、同第２００５／０６３９８１号パンフレット、同第２００３／０４０１７０号パンフレット、同第２００２／０１１７６３号パンフレット、同第２０００／０７５３４８号パンフレット、同第２０１３／１６４７８９号パンフレット、同第２０１２／０７５１１１号パンフレット、同第２０１２／０６５９５０号パンフレット、同第２００９／０６２０５４号パンフレット、同第２００７／１２４２９９号パンフレット、同第２００７／０５３６６１号パンフレット、同第２００７／０５３７６７号パンフレット、同第２００５／０４４２９４号パンフレット、同第２００５／０４４３０４号パンフレット、同第２００５／０４４３０６号パンフレット、同第２００５／０４４８５５号パンフレット、同第２００５／０４４８５４号パンフレット、同第２００５／０４４３０５号パンフレット、同第２００３／０４５９７８号パンフレット、同第２００３／０２９２９６号パンフレット、同第２００２／０２８４８１号パンフレット、同第２００２／０２８４８０号パンフレット、同第２００２／０２８９０４号パンフレット、同第２００２／０２８９０５号パンフレット、同第２００２／０８８１８６号パンフレット、及び同第２００１／０２４８２３号パンフレットに開示されている。
【0318】
ＯＸ４０．ＯＸ４０受容体（ＣＤ１３４としても知られている）は、エフェクター及びメモリーＴ細胞の増殖を促進する。ＯＸ４０はまた、Ｔ制御性細胞の分化及び活性を抑制し、サイトカインの産生を調節する（例えば、Ｃｒｏｆｔ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２２９（１）：１７３－９１を参照）。ＯＸ４０に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＯＸ４０の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターはＯＸ４０に結合する薬剤（例えば、抗ＯＸ４０抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＯＸ４０アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＯＸ４０アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＭＥＤＩ６４６９（ＡｇｏｎＯｘ／Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ポガリズマブ（ｐｏｇａｌｉｚｕｍａｂ）（ＭＯＸＲ０９１６及びＲＧ７８８８としても知られている；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、タボリキシズマブ（ｔａｖｏｌｉｘｉｚｕｍａｂ）（ＭＥＤＩ０５６２としても知られている；Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、及びＧＳＫ３１７４９９８（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）からなる群から選択されるＯＸ４０結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＯＸ－４０結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，１６３，０８５号明細書、同第９，０４０，０４８号明細書、同第９，００６，３９６号明細書、同第８，７４８，５８５号明細書、同第８，６１４，２９５号明細書、同第８，５５１，４７７号明細書、同第８，２８３，４５０号明細書、同第７，５５０，１４０号明細書；米国特許出願公開第２０１６／００６８６０４号明細書、同第２０１６／００３１９７４号明細書、同第２０１５／０３１５２８１号明細書、同第２０１５／０１３２２８８号明細書、同第２０１４／０３０８２７６号明細書、同第２０１４／０３７７２８４号明細書、同第２０１４／００４４７０３号明細書、同第２０１４／０２９４８２４号明細書、同第２０１３／０３３０３４４号明細書、同第２０１３／０２８０２７５号明細書、同第２０１３／０２４３７７２号明細書、同第２０１３／０１８３３１５号明細書、同第２０１２／０２６９８２５号明細書、同第２０１２／０２４４０７６号明細書、同第２０１１／０００８３６８号明細書、同第２０１１／０１２３５５２号明細書、同第２０１０／０２５４９７８号明細書、同第２０１０／０１９６３５９号明細書、同第２００６／０２８１０７２号明細書；並びに国際公開第２０１４／１４８８９５号パンフレット、同第２０１３／０６８５６３号パンフレット、同第２０１３／０３８１９１号パンフレット、同第２０１３／０２８２３１号パンフレット、同第２０１０／０９６４１８号パンフレット、同第２００７／０６２２４５号パンフレット、及び同第２００３／１０６４９８号パンフレットに開示されている。
【0319】
ＧＩＴＲ．糖質コルチコイド誘発性ＴＮＦＲファミリー関連遺伝子（ＧＩＴＲ）は、Ｔｒｅｇ、ＣＤ４、及びＣＤ８ Ｔ細胞で構成的又は条件付きで発現する腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーのメンバーである。ＧＩＴＲは、ＴＣＲのライゲーション及び活性化に続いて、エフェクターＴ細胞で急速にアップレギュレートされる。ヒトＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）は、二次リンパ器官及び一部の非リンパ組織のＡＰＣで構成的に発現する。ＧＩＴＲ：ＧＩＴＲＬの相互作用の下流効果は、Ｔｒｅｇ活性の減弱を誘発し、ＣＤ４＋ Ｔ細胞の活性を増強し、結果としてＴｒｅｇを介した免疫抑制が逆転し、免疫刺激が増加する。ＧＩＴＲに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＧＩＴＲの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＧＩＴＲに結合する薬剤（例えば、抗ＧＩＴＲ抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＧＩＴＲアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＧＩＴＲアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＲＸ５１８（Ｌｅａｐ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＭＫ－４１６６（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．）、ＭＥＤＩ－１８７３（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＩＮＣＡＧＮ１８７６（Ａｇｅｎｕｓ／Ｉｎｃｙｔｅ）、及びＦＰＡ１５４（Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択されるＧＩＴＲ結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＧＩＴＲ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，３０９，３２１号明細書、同第９，２５５，１５２号明細書、同第９，２５５，１５１号明細書、同第９，２２８，０１６号明細書、同第９，０２８，８２３号明細書、同第８，７０９，４２４号明細書、同第８，３８８，９６７号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０１４５３４２号明細書、同第２０１５／０３５３６３７号明細書、同第２０１５／００６４２０４号明細書、同第２０１４／０３４８８４１号明細書、同第２０１４／００６５１５２号明細書、同第２０１４／００７２５６６号明細書、同第２０１４／００７２５６５号明細書、同第２０１３／０１８３３２１号明細書、同第２０１３／０１０８６４１号明細書、同第２０１２／０１８９６３９号明細書；並びに国際公開第２０１６／０５４６３８号パンフレット、同第２０１６／０５７８４１号パンフレット、同第２０１６／０５７８４６号パンフレット、同第２０１５／１８７８３５号パンフレット、同第２０１５／１８４０９９号パンフレット、同第２０１５／０３１６６７号パンフレット、同第２０１１／０２８６８３号パンフレット、及び同第２００４／１０７６１８号パンフレットに開示されている。
【0320】
ＩＣＯＳ．誘導性Ｔ細胞共刺激因子（ＩＣＯＳ、ＣＤ２７８としても知られている）は、活性化されたＴ細胞で発現される。そのリガンドはＩＣＯＳＬであり、主にＢ細胞及び樹状細胞で発現される。ＩＣＯＳは、Ｔ細胞エフェクター機能において重要である。ＩＣＯＳの発現は、Ｔ細胞の活性化時にアップレギュレートされる（例えば、Ｆａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２１１（４）：７１５－２５を参照）。ＩＣＯＳに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＩＣＯＳの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＩＣＯＳに結合する薬剤（例えば、抗ＩＣＯＳ抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＩＣＯＳアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＩＣＯＳアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＭＥＤＩ－５７０（ＪＭａｂ－１３６としても知られている、Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＧＳＫ３３５９６０９（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／ＩＮＳＥＲＭ）、及びＪＴＸ－２０１１（Ｊｏｕｎｃｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択されるＩＣＯＳ結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＩＣＯＳ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，３７６，４９３号明細書、同第７，９９８，４７８号明細書、同第７，４６５，４４５号明細書、同第７，４６５，４４４号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０２３９９７８号明細書、同第２０１２／００３９８７４号明細書、同第２００８／０１９９４６６号明細書、同第２００８／０２７９８５１号明細書；並びに国際公開第２００１／０８７９８１号パンフレットに開示されている。
【0321】
４－１ＢＢ．４－１ＢＢ（ＣＤ１３７としても知られている）は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーのメンバーである。４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）は、プライミングされたＣＤ４＋及びＣＤ８＋ Ｔ細胞、活性化ＮＫ細胞、ＤＣ、及び好中球で誘導的に発現されるＩＩ型膜貫通糖タンパク質であり、活性化マクロファージ、Ｂ細胞、及びＤＣに見られる４－１ＢＢリガンド（４－１ＢＢＬ）に結合するとＴ細胞共刺激分子として機能する。４－１ＢＢ受容体のライゲーションは、ＮＦ－κＢ、ｃ－Ｊｕｎ、及びｐ３８シグナル伝達経路の活性化をもたらし、特に、抗アポトーシス遺伝子ＢｃＬ－ｘ（Ｌ）及びＢｆｌ－１の発現をアップレギュレートすることによってＣＤ８＋ Ｔ細胞の生存を促進することが示されている。このように、４－１ＢＢは、最適以下の免疫応答を促進する、又は救済さえもするように機能する。４－１ＢＢに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、４－１ＢＢの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、４－１ＢＢに結合する薬剤（例えば、抗４－１ＢＢ抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターは４－１ＢＢアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターは４－１ＢＢアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ウレルマブ（ＢＭＳ－６６３５１３としても知られている；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）又はウトミルマブ（ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ）（Ｐｆｉｚｅｒ）である４－１ＢＢ結合タンパク質である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、４－１ＢＢ結合タンパク質（例えば、抗体）である。４－１ＢＢ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，３８２，３２８号明細書、同第８，７１６，４５２号明細書、同第８，４７５，７９０号明細書、同第８，１３７，６６７号明細書、同第７，８２９，０８８号明細書、同第７，６５９，３８４号明細書；米国特許出願公開第２０１６／００８３４７４号明細書、同第２０１６／０１５２７２２号明細書、同第２０１４／０１９３４２２号明細書、同第２０１４／０１７８３６８号明細書、同第２０１３／０１４９３０１号明細書、同第２０１２／０２３７４９８号明細書、同第２０１２／０１４１４９４号明細書、同第２０１２／００７６７２２号明細書、同第２０１１／０１７７１０４号明細書、同第２０１１／０１８９１８９号明細書、同第２０１０／０１８３６２１号明細書、同第２００９／００６８１９２号明細書、同第２００９／００４１７６３号明細書、同第２００８／０３０５１１３号明細書、同第２００８／０００８７１６号明細書；及び国際公開第２０１６／０２９０７３号パンフレット、同第２０１５／１８８０４７号パンフレット、同第２０１５／１７９２３６号パンフレット、同第２０１５／１１９９２３号パンフレット、同第２０１２／０３２４３３号パンフレット、同第２０１２／１４５１８３号パンフレット、同第２０１１／０３１０６３号パンフレット、同第２０１０／１３２３８９号パンフレット、同第２０１０／０４２４３３号パンフレット、同第２００６／１２６８３５号パンフレット、同第２００５／０３５５８４号パンフレット、同第２００４／０１０９４７号パンフレット；並びにＭａｒｔｉｎｅｚ－Ｆｏｒｅｒｏ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９０（１２）：６６９４－７０６，ａｎｄ Ｄｕｂｒｏｔ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５９（８）：１２２３－３３に開示されている。
【0322】
ｉｉ．抑制性免疫チェックポイント分子
ＡＤＯＲＡ２Ａ．アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２Ａ４）は、７回膜貫通型アルファヘリックスを有するＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）ファミリーのメンバーであり、癌の治療法における重要なチェックポイントと見なされている。Ａ２Ａ受容体は、過剰反応性免疫細胞を負に調節することができる（例えば、Ｏｈｔａ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１４（６８６６）：９１６－２０を参照）。ＡＤＯＲＡ２Ａに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａに結合する薬剤（例えば、抗ＡＤＯＲＡ２Ａ抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａ結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＡＤＯＲＡ２Ａアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａアンタゴニストである。ＡＤＯＲＡ２Ａ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１４／０３２２２３６号明細書に開示されている。
ＡＤＯＲＡ２Ａ．アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２Ａ４）は、７回膜貫通型アルファヘリックスを有するＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）ファミリーのメンバーであり、癌の治療法における重要なチェックポイントと見なされている。Ａ２Ａ受容体は、過剰反応性免疫細胞を負に調節することができる（例えば、Ｏｈｔａ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１４（６８６６）：９１６－２０を参照）。ＡＤＯＲＡ２Ａに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａに結合する薬剤（例えば、抗ＡＤＯＲＡ２Ａ抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａ結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＡＤＯＲＡ２Ａアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターは、ＡＤＯＲＡ２Ａアンタゴニストである。ＡＤＯＲＡ２Ａ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１４／０３２２２３６号明細書に開示されている。
【0323】
Ｂ７－Ｈ３．Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６としても知られている）は、Ｔ細胞応答を共刺激又は下方調節する分子群であるＢ７スーパーファミリーに属している。Ｂ７－Ｈ３は、ヒトＴ細胞応答を強力且つ一貫して下方調節する（例えば、Ｌｅｉｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３９（７）：１７５４－６４を参照）。Ｂ７－Ｈ３に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ３の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ３に結合する薬剤（例えば、抗Ｂ７－Ｈ３抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢ７－Ｈ３アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢ７－Ｈ３アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＤＳ－５５７３（Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓａｎｋｙｏ，Ｉｎｃ．）、エノブリツズマブ（ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）（ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．）、及び８Ｈ９（Ｓｌｏａｎ Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ；ｓｅｅ，ｅ．ｇ．，Ａｈｍｅｄ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９０（５０）：３００１８－２９）からなる群から選択される抗Ｂ７－Ｈ３結合タンパク質である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ３結合タンパク質（例えば、抗体）である。Ｂ７－Ｈ３結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，３７１，３９５号明細書、同第９，１５０，６５６号明細書、同第９，０６２，１１０号明細書、同第８，８０２，０９１号明細書、同第８，５０１，４７１号明細書、同第８，４１４，８９２号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０３５２２２４号明細書、同第２０１５／０２９７７４８号明細書、同第２０１５／０２５９４３４号明細書、同第２０１５／０２７４８３８号明細書、同第２０１４／０３２８７５号明細書、同第２０１４／０１６１８１４号明細書、同第２０１３／０２８７７９８号明細書、同第２０１３／００７８２３４号明細書、同第２０１３／０１４９２３６号明細書、同第２０１２／０２９４７９６０号明細書、同第２０１０／０１４３２４５号明細書、同第２００２／０１０２２６４号明細書；国際公開第２０１６／１０６００４号パンフレット、同第２０１６／０３３２２５号パンフレット、同第２０１５／１８１２６７号パンフレット、同第２０１４／０５７６８７号パンフレット、同第２０１２／１４７７１３号パンフレット、同第２０１１／１０９４００号パンフレット、同第２００８／１１６２１９号パンフレット、同第２００３／０７５８４６号パンフレット、同第２００２／０３２３７５号パンフレット；並びにＳｈｉ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｒｅｐ．１４（１）：９４３－８に開示されている。
【0324】
Ｂ７－Ｈ４．Ｂ７－Ｈ４（Ｏ８Ｅ、ＯＶ０６４、及びＶセットドメインを含むＴ細胞活性化阻害剤（ＶＴＣＮ１）としても知られている）は、Ｂ７スーパーファミリーに属している。細胞周期を停止させることにより、Ｔ細胞のＢ７－Ｈ４ライゲーションは、増殖、サイトカインの分泌、及び細胞毒性の発生に対して顕著な抑制効果を有する。マウスへのＢ７－Ｈ４Ｉｇの投与は、抗原特異的Ｔ細胞応答を阻害するが、特定のモノクローナル抗体による内因性Ｂ７－Ｈ４の阻害は、Ｔ細胞応答を促進する（例えば、Ｓｉｃａ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １８（６）：８４９－６１を参照）。Ｂ７－Ｈ４に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ４の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ４に結合する薬剤（例えば、抗Ｂ７－Ｈ４抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、Ｂ７－Ｈ４結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢ７－Ｈ４アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢ７－Ｈ４アンタゴニストである。Ｂ７－Ｈ４結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，２９６，８２２号明細書、同第８，６０９，８１６号明細書、同第８，７５９，４９０号明細書、同第８，３２３，６４５号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０１５９９１０号明細書、同第２０１６／００１７０４０号明細書、同第２０１６／０１６８２４９号明細書、同第２０１５／０３１５２７５号明細書、同第２０１４／０１３４１８０号明細書、同第２０１４／０３２２１２９号明細書、同第２０１４／０３５６３６４号明細書、同第２０１４／０３２８７５１号明細書、同第２０１４／０２９４８６１号明細書、同第２０１４／０３０８２５９号明細書、同第２０１３／００５８８６４号明細書、同第２０１１／００８５９７０号明細書、同第２００９／００７４６６０号明細書、同第２００９／０２０８４８９号明細書；並びに国際公開第２０１６／０４０７２４号パンフレット、同第２０１６／０７０００１号パンフレット、同第２０１４／１５９８３５号パンフレット、同第２０１４／１００４８３号パンフレット、同第２０１４／１００４３９号パンフレット、同第２０１３／０６７４９２号パンフレット、同第２０１３／０２５７７９号パンフレット、同第２００９／０７３５３３号パンフレット、同第２００７／０６７９９１号パンフレット、及び同第２００６／１０４６７７号パンフレットに開示されている。
【0325】
ＢＴＬＡ．ＣＤ２７２としても知られているＢ及びＴリンパ球アテニュエーター（ＢＴＬＡ）は、そのリガンドとしてＨＶＥＭ（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ Ｅｎｔｒｙ Ｍｅｄｉａｔｏｒ）を有する。ＢＴＬＡの表面発現は、ヒトＣＤ８＋ Ｔ細胞がナイーブ細胞からエフェクター細胞の表現型に分化する際に徐々にダウンレギュレートされるが、腫瘍特異的なヒトＣＤ８＋ Ｔ細胞は高レベルのＢＴＬＡを発現する（例えば、Ｄｅｒｒｅ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１２０（１）：１５７－６７を参照）。ＢＴＬＡに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＢＴＬＡの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＢＴＬＡに結合する薬剤（例えば、抗ＢＴＬＡ抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＢＴＬＡ結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢＴＬＡアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＢＴＬＡアンタゴニストである。ＢＴＬＡ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，３４６，８８２号明細書、同第８，５８０，２５９号明細書、同第８，５６３，６９４号明細書、同第８，２４７，５３７号明細書；米国特許出願公開第２０１４／００１７２５５号明細書、同第２０１２／０２８８５００号明細書、同第２０１２／０１８３５６５号明細書、同第２０１０／０１７２９００号明細書；並びに国際公開第２０１１／０１４４３８号パンフレット及び同第２００８／０７６５６０号パンフレットに開示されている。
【0326】
ＣＴＬＡ－４．細胞傷害性Ｔリンパ球抗原－４（ＣＴＬＡ－４）は、免疫調節性ＣＤ２８－Ｂ７免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーであり、ナイーブ及び休止Ｔリンパ球に作用して、Ｂ７依存性経路及びＢ７非依存性経路の両方を介して免疫抑制を促進する（例えば、Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．（２０１６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．，１４を参照）。ＣＴＬＡ－４は、ＣＤ１５２とも呼ばれることが知られている。ＣＴＬＡ－４は、Ｔ細胞活性化の閾値を調節する。例えば、Ｇａｊｅｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６（６）：３９００－７を参照されたい。ＣＴＬＡ－４に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＴＬＡ－４の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＴＬＡ－４に結合する薬剤（例えば、抗ＣＴＬＡ－４抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＴＬＡ－４アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＣＴＬＡ－４アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ；Ｍｅｄａｒｅｘ／Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（以前はチシリムマブ；Ｐｆｉｚｅｒ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＪＭＷ－３Ｂ３（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｂｅｒｄｅｅｎ）、及びＡＧＥＮ１８８４（Ａｇｅｎｕｓ）からなる群から選択されるＣＴＬＡ－４結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＣＴＬＡ－４結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，６９７，８４５号明細書；米国特許出願公開第２０１４／０１０５９１４号明細書、同第２０１３／０２６７６８８号明細書、同第２０１２／０１０７３２０号明細書、同第２００９／０１２３４７７号明細書；並びに国際公開第２０１４／２０７０６４号パンフレット、同第２０１２／１２０１２５号パンフレット、同第２０１６／０１５６７５号パンフレット、同第２０１０／０９７５９７号パンフレット、同第２００６／０６６５６８号パンフレット、及び同第２００１／０５４７３２号パンフレットに開示されている。
【0327】
ＫＩＲ．キラー免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の機能を負に調節して、ＮＫを介した細胞溶解から細胞を保護するＭＨＣＩ結合分子の多様なレパートリーを含む。ＫＩＲは、一般的にはＮＫ細胞で発現されるが、腫瘍特異的ＣＴＬでも検出されている。ＫＩＲに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＫＩＲの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＫＩＲに結合する薬剤（例えば、抗ＫＩＲ抗体）である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＫＩＲ結合タンパク質（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＫＩＲアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＫＩＲアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、リリルマブ（ＢＭＳ－９８６０１５としても知られている；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。追加のＫＩＲ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，９８１，０６５号明細書、同第９，０１８，３６６号明細書、同第９，０６７，９９７号明細書、同第８，７０９，４１１号明細書、同第８，６３７，２５８号明細書、同第８，６１４，３０７号明細書、同第８，５５１，４８３号明細書、同第８，３８８，９７０号明細書、同第８，１１９，７７５号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０３４４５７６号明細書、同第２０１５／０３７６２７５号明細書、同第２０１６／００４６７１２号明細書、同第２０１５／０１９１５４７号明細書、同第２０１５／０２９０３１６号明細書、同第２０１５／０２８３２３４号明細書、同第２０１５／０１９７５６９号明細書、同第２０１４／０１９３４３０号明細書、同第２０１３／０１４３２６９号明細書、同第２０１３／０２８７７７０号明細書、同第２０１２／０２０８２３７号明細書、同第２０１１／０２９３６２７号明細書、同第２００９／００８１２４０号明細書、同第２０１０／０１８９７２３号明細書；並びに国際公開第２０１６／０６９５８９号パンフレット、同第２０１５／０６９７８５号パンフレット、同第２０１４／０６６５３２号パンフレット、同第２０１４／０５５６４８号パンフレット、同第２０１２／１６０４４８号パンフレット、同第２０１２／０７１４１１号パンフレット、同第２０１０／０６５９３９号パンフレット、同第２００８／０８４１０６号パンフレット、同第２００６／０７２６２５号パンフレット、同第２００６／０７２６２６号パンフレット、及び同第２００６／００３１７９号パンフレットに開示されている。
【0328】
ＬＡＧ－３．リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ－３、ＣＤ２２３としても知られている）は、ＭＨＣＩＩに競合的に結合して、Ｔ細胞活性化の共阻害チェックポイントとして機能するＣＤ４関連膜貫通タンパク質である（例えば、Ｇｏｌｄｂｅｒｇ ａｎｄ Ｄｒａｋｅ（２０１１）Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３４４：２６９－７８を参照）。ＬＡＧ－３に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＬＡＧ－３の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＬＡＧ－３に結合する薬剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＬＡＧ－３アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＬＡＧ－３アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ；以前はランブロリズマブ；Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．）、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１、ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ＳＨＲ－１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ／Ｊｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４としても知られている；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ Ｉｎｃ．／Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＧＢ－Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ Ｌｔｄ．）、ＴＳＲ－０４２（ＡＮＢ０１１としても知られている；ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．／Ｓａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓ）、及びＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）からなる群から選択されるＬＡＧ－３結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＰＤ－１結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，１８１，３４２号明細書、同第８，９２７，６９７号明細書、同第７，４８８，８０２号明細書、同第７，０２９，６７４号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０１５２１８０号明細書、同第２０１１／０１７１２１５号明細書、同第２０１１／０１７１２２０号明細書；並びに国際公開第２００４／０５６８７５号パンフレット、同第２０１５／０３６３９４号パンフレット、同第２０１０／０２９４３５号パンフレット、同第２０１０／０２９４３４号パンフレット、同第２０１４／１９４３０２号パンフレットに開示されている。
【0329】
ＰＤ－１．プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１、ＣＤ２７９及びＰＤＣＤ１としても知られている）は、免疫系を負に調節する抑制性受容体である。主にナイーブＴ細胞に影響を与えるＣＴＬＡ－４とは対照的に、ＰＤ－１は、免疫細胞でより広く発現され、末梢組織及び腫瘍微小環境で成熟Ｔ細胞活性を調節する。ＰＤ－１は、Ｔ細胞受容体シグナル伝達を妨げることによってＴ細胞応答を阻害する。ＰＤ－１は、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２の２つのリガンドを有する。ＰＤ－１に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－１の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－１に結合する薬剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－１アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－１アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ；以前はランブロリズマブ；Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．）、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１，ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ＳＨＲ－１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ／Ｊｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４としても知られている；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ Ｉｎｃ．／Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＧＢ－Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ Ｌｔｄ．）、ＴＳＲ－０４２（ＡＮＢ０１１としても知られている；ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．／Ｓａｎｏｆｉ－Ａｖｅｎｔｉｓ）、及びＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）からなる群から選択されるＰＤ－１結合タンパク質（例えば、抗体）である。追加のＰＤ－１結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，１８１，３４２号明細書、同第８，９２７，６９７号明細書、同第７，４８８，８０２号明細書、同第７，０２９，６７４号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０１５２１８０号明細書、同第２０１１／０１７１２１５号明細書、同第２０１１／０１７１２２０号明細書；並びに国際公開第２００４／０５６８７５号パンフレット、同第２０１５／０３６３９４号パンフレット、同第２０１０／０２９４３５号パンフレット、同第２０１０／０２９４３４号パンフレット、同第２０１４／１９４３０２号パンフレットに開示されている。
【0330】
ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－Ｌ２．ＰＤリガンド１（ＰＤ－Ｌ１、Ｂ７－Ｈ１としても知られている）及びＰＤリガンド２（ＰＤ－Ｌ２、ＰＤＣＤ１ＬＧ２、ＣＤ２７３、及びＢ７－ＤＣとしても知られている）はＰＤ－１受容体に結合する。両方のリガンドは、ＣＤ２８及びＣＴＬＡ－４と相互作用するＢ７－１及びＢ７－２タンパク質と同じＢ７ファミリーに属している。ＰＤ－Ｌ１は、例えば、上皮細胞、内皮細胞、免疫細胞を含む多くの細胞型で発現し得る。ＰＤＬ－１のライゲーションは、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、及びＩＬ－２の産生を減少させ、Ｔ細胞の反応性及び増殖の低下並びに抗原特異的Ｔ細胞アネルギーに関連する抗炎症性サイトカインであるＩＬ１０の産生を刺激する。ＰＤＬ－２は、主に抗原提示細胞（ＡＰＣ）で発現される。ＰＤＬ２ライゲーションもまたＴ細胞の抑制をもたらすが、ＰＤＬ－１－ＰＤ－１相互作用がＧ１／Ｇ２期での細胞周期停止を介して増殖を阻害する場合、ＰＤＬ２－ＰＤ－１結合は、低い抗原濃度でＢ７：ＣＤ２８シグナルをブロックして、高い抗原濃度でサイトカインの産生を減少させることによって、ＴＣＲを介したシグナル伝達を阻害することが示されている。ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。
【0331】
いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ１の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ１に結合する薬剤（例えば、抗ＰＤ－Ｌ１抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－Ｌ１アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－Ｌ１アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ－４７３６としても知られている；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐ．／Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ；ＭＰＤＬ３２８０Ａ及びＲＧ７４４６としても知られている；Ｇｅｎｅｔｅｃｈ Ｉｎｃ．）、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られている；Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＭＤＸ－１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ／Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ＡＭＰ－２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ，ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＬＹ３３０００５４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏ．）からなる群から選択されるＰＤ－Ｌ１結合タンパク質（例えば、抗体又はＦｃ融合タンパク質）である。追加のＰＤ－Ｌ１結合タンパク質は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１６／００８４８３９号明細書、同第２０１５／０３５５１８４号明細書、同第２０１６／０１７５３９７号明細書、及び国際公開第２０１４／１０００７９号パンフレット、同第２０１６／０３０３５０号パンフレット、同第２０１３１８１６３４号パンフレットに開示されている。
【0332】
いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ２の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ２に結合する薬剤（例えば、抗ＰＤ－Ｌ２抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－Ｌ２アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＰＤ－Ｌ２アンタゴニストである。ＰＤ－Ｌ２結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，２５５，１４７号明細書、同第８，１８８，２３８号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０１２２４３１号明細書、同第２０１３／０２４３７５２号明細書、同第２０１０／０２７８８１６号明細書、同第２０１６／０１３７７３１号明細書、同第２０１５／０１９７５７１号明細書、同第２０１３／０２９１１３６号明細書、同第２０１１／０２７１３５８号明細書；並びに国際公開第２０１４／０２２７５８号パンフレット、及び同第２０１０／０３６９５９号パンフレットに開示されている。
【0333】
ＴＩＭ－３．Ｔ細胞免疫グロブリンムチン３（ＴＩＭ－３、Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体（ＨＡＶＣＲ２）としても知られている）は、Ｓ型レクチンガレクチン－９（Ｇａｌ－９）に結合するＩ型糖タンパク質受容体である。ＴＩＭ－３は、リンパ球、肝臓、小腸、胸腺、腎臓、脾臓、肺、筋肉、網状赤血球、及び脳組織に広く発現されるリガンドである。Ｔｉｍ－３は当初、ＩＦＮ－γを分泌するＴｈ１及びＴｃ１細胞で選択的に発現されるとして同定された（Ｍｏｎｎｅｙ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ ４１５：５３６－４１）。ＴＩＭ－３受容体によるＧａｌ－９の結合は、下流のシグナル伝達を引き起こしてＴ細胞の生存及び機能を負に調節する。ＴＩＭ－３に特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＩＭ－３の活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＩＭ－３に結合する薬剤である（例えば、抗ＴＩＭ－３抗体）。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＴＩＭ－３アゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＴＩＭ－３アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＳＲ－０２２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）及びＭＧＢ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）からなる群から選択される抗ＴＩＭ－３抗体である。追加のＴＩＭ－３結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第９，１０３，８３２号明細書、同第８，５５２，１５６号明細書、同第８，６４７，６２３号明細書、同第８，８４１，４１８号明細書；米国特許出願公開第２０１６／０２００８１５号明細書、同第２０１５／０２８４４６８号明細書、同第２０１４／０１３４６３９号明細書、同第２０１４／００４４７２８号明細書、同第２０１２／０１８９６１７号明細書、同第２０１５／００８６５７４号明細書、同第２０１３／００２２６２３号明細書；並びに国際公開第２０１６／０６８８０２号パンフレット、同第２０１６／０６８８０３号パンフレット、同第２０１６／０７１４４８号パンフレット、同第２０１１／１５５６０７号パンフレット、及び同第２０１３／００６４９０号パンフレットに開示されている。
【0334】
ＶＩＳＴＡ．Ｔ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（ＶＩＳＴＡ、血小板受容体Ｇｉ２４としても知られている）は、Ｔ細胞応答を負に調節するＩｇスーパーファミリーリガンドである。例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０８：５７７－９２を参照されたい。ＡＰＣで発現したＶＩＳＴＡはＣＤ４＋及びＣＤ８＋ Ｔ細胞の増殖及びサイトカインの産生を直接抑制する（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２０８（３）：５７７－９２）。ＶＩＳＴＡに特異的な複数の免疫チェックポイントモジュレーターが開発されており、本明細書に開示されているように使用することができる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＶＩＳＴＡの活性及び／又は発現を調節する薬剤である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＶＩＳＴＡに結合する薬剤（例えば、抗ＶＩＳＴＡ抗体）である。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＶＩＳＴＡアゴニストである。いくつかの実施形態では、チェックポイントモジュレーターはＶＩＳＴＡアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＴＳＲ－０２２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）及びＭＧＢ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）からなる群から選択されるＶＩＳＴＡ結合タンパク質（例えば、抗体）である。ＶＩＳＴＡ結合タンパク質（例えば、抗体）は当技術分野で公知であり、例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１６／００９６８９１号明細書、同第２０１６／００９６８９１号明細書；並びに国際公開第２０１４／１９０３５６号パンフレット、同第２０１４／１９７８４９号パンフレット、同第２０１４／１９０３５６号パンフレット、及び同第２０１６／０９４８３７号パンフレットに開示されている。
【0335】
腫瘍性障害を処置するための方法は、本発明の操作された免疫細胞を少なくとも１つの免疫チェックポイントモジュレーターと組み合わせて対象に投与することによって提供される。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、対象の免疫応答を刺激する。例えば、いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、刺激性免疫チェックポイント（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、又は４－１ＢＢ）の発現若しくは活性を刺激又は増加させる。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、抑制性免疫チェックポイント（例えば、Ａ２Ａ４、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、又はＶＩＳＴＡ）の発現若しくは活性を阻害又は減少させる。
【0336】
特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、Ａ２Ａ４、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡからなる群から選択される免疫チェックポイント分子を標的とする。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、Ａ２Ａ４、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ－３、及びＶＩＳＴＡからなる群から選択される免疫チェックポイント分子を標的とする。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、及びＰＤ－１からなる群から選択される免疫チェックポイント分子を標的とする。さらに特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－１から選択される免疫チェックポイント分子を標的とする。
【0337】
いくつかの実施形態では、２つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、又はそれ以上）の免疫チェックポイントモジュレーターが対象に投与される。２つ以上の免疫チェックポイントモジュレーターが投与される場合、モジュレーターは、それぞれが刺激性免疫チェックポイント分子を標的とするか、又はそれぞれが抑制性免疫チェックポイント分子を標的とすることができる。他の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターには、刺激性免疫チェックポイントを標的とする少なくとも１つのモジュレーター、及び抑制性免疫チェックポイント分子を標的とする少なくとも１つの免疫チェックポイントモジュレーターが含まれる。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、結合タンパク質、例えば抗体である。本明細書で使用される「結合タンパク質」という用語は、標的分子、例えば免疫チェックポイント分子に特異的に結合することができるタンパク質又はポリペプチドを指す。いくつかの実施形態では、結合タンパク質は、抗体又はその抗原結合部分であり、標的分子は、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、結合タンパク質は、標的分子（例えば、免疫チェックポイント分子）に特異的に結合するタンパク質又はポリペプチドである。いくつかの実施形態では、結合タンパク質はリガンドである。いくつかの実施形態では、結合タンパク質は融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、結合タンパク質は受容体である。本発明の方法で使用され得る結合タンパク質の例としては、限定されるものではないが、ヒト化抗体、抗体Ｆａｂ断片、二価抗体、抗体薬物コンジュゲート、ｓｃＦｖ、融合タンパク質、二価抗体、及び四価抗体が挙げられる。
【0338】
本明細書で使用される「抗体」という用語は、４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖から構成される任意の免疫グロブリン（Ｉｇ）分子、又は任意の機能的断片、突然変異体、変異体、若しくはそれらの誘導体を指す。そのような突然変異体、変異体、又は誘導体の抗体型は当技術分野で公知である。完全長抗体では、各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲ又はＶＨと略される）及び重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３の３つのドメインから構成されている。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲ又はＶＬと略される）及び軽鎖定常領域から構成されている。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成されている。ＶＨ及びＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分することができ、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が点在する。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置されている。免疫グロブリン分子は、任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）、又はサブクラスであり得る。いくつかの実施形態では、抗体は完全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体はマウス抗体である。いくつかの実施形態では、抗体はヒト抗体である。いくつかの実施形態では、抗体はヒト化抗体である。他の実施形態では、抗体はキメラ抗体である。キメラ及びヒト化抗体は、ＣＤＲグラフト化アプローチ（例えば、米国特許第５，８４３，７０８号明細書；同第６，１８０，３７０号明細書；同第５，６９３，７６２号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；及び同第５，５３０，１０１号明細書を参照）、チェーンシャッフリング戦略（例えば、米国特許第５，５６５，３３２号明細書；Ｒａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９８）ＰＲＯＣ．ＮＡＴ’Ｌ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．ＵＳＡ ９５：８９１０－８９１５を参照）、及び分子モデリング戦略（米国特許第５，６３９，６４１号明細書）などを含む当業者に周知の方法によって調製することができる。
【0339】
本明細書で使用される抗体の「抗原結合部分」（又は単に「抗体部分」）という用語は、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ又は複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片によって果たされ得ることが示されている。そのような抗体の実施形態はまた、二重特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）、二重特異性（ｄｕａｌ ｓｐｅｃｉｆｉｃ）、又は多重特異性の形態であり得；２つ以上の異なる抗原に特異的に結合する。抗体の「抗原結合部分」という用語に含まれる結合断片の例としては、（ｉ）Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）単一可変ドメインを含むｄＡｂ断片（その内容が参照により本明細書に組み込まれる、Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８９）ＮＡＴＵＲＥ ３４１：５４４－５４６；及び国際公開第９０／０５１４４ Ａ１号パンフレット）；並びに（ｖｉ）分離した相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬとＶＨは、別々の遺伝子によってコードされているが、ＶＬ及びＶＨ領域が対になって一価分子を形成する単一のタンパク質鎖としてこれらを作製できる合成リンカーによって、組換え法を使用して結合することができる（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）ＳＣＩＥＮＣＥ ２４２：４２３－４２６；ａｎｄ Ｈｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）ＰＲＯＣ．ＮＡＴ’Ｌ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照）。このような一本鎖抗体はまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に含まれることを意図している。ダイアボディなどの他の形態の一本鎖抗体も含まれる。抗原結合部分はまた、単一ドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、ナノボディ、イントラボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ－ＮＡＲ、及びｂｉｓ－ｓｃＦｖに組み込むことができる（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３：１１２６－１１３６，２００５を参照）。
【0340】
本明細書で使用される「ＣＤＲ」という用語は、抗体可変配列内の相補性決定領域を指す。重鎖及び軽鎖の各可変領域には３つのＣＤＲがあり、これらは、可変領域ごとにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と呼ばれる。本明細書で使用される「ＣＤＲセット」という用語は、抗原に結合することができる単一可変領域に存在する３つのＣＤＲ群を指す。これらのＣＤＲの正確な境界は、方式によって定義が異なっている。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９８７）ａｎｄ（１９９１））によって記述された方式は、抗体の任意の可変領域に適用可能な明確な残基付番方式を提供するだけではなく、３つのＣＤＲを定義する正確な残基境界も提供する。これらのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲと呼ばれることもある。Ｃｈｏｔｈｉａ及び同僚らは、アミノ酸配列のレベルで大きな多様性があるにもかかわらず、Ｋａｂａｔ ＣＤＲ内の特定の小部分がほぼ同一のペプチド骨格構造を採用していることを見出した（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．１９６：９０１－９１７、及びＣｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８９）ＮＡＴＵＲＥ ３４２：８７７－８８３）。これらの小部分は、Ｌ１、Ｌ２、及びＬ３又はＨ１、Ｈ２、及びＨ３として指定され、「Ｌ」及び「Ｈ」はそれぞれ、軽鎖領域及び重鎖領域を示す。これらの領域は、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲと呼ばれることがあり、Ｋａｂａｔ ＣＤＲと重複する境界を有する。Ｋａｂａｔ ＣＤＲと重複するＣＤＲを定義する他の境界は、Ｐａｄｌａｎ ｅｔ ａｌ．（１９９５）ＦＡＳＥＢ Ｊ．９：１３３－１３９、及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｊ．ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．２６２（５）：７３２－４５に記載されている。さらに他のＣＤＲ境界定義は、上記の方式の１つに厳密には従わない場合もあるが、それでもＫａｂａｔ ＣＤＲと重複する。ただし、Ｋａｂａｔ ＣＤＲは、特定の残基又は残基群、又はＣＤＲ全体でさえも抗原結合に大きな影響を与えないという予測又は実験結果に照らして短縮又は延長することができる。本明細書で使用される方法は、これらの方式のいずれかに従って定義されるＣＤＲを利用できるが、好ましい実施形態は、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａ方式で定義されたＣＤＲを使用する。
【0341】
本明細書で使用される「ヒト化抗体」という用語は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又はそれらの断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、又は他の抗体の抗原結合サブ配列など）である非ヒト（例えば、マウス）抗体を指す。ほとんどの場合、ヒト化抗体及びその抗体断片は、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、又はウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲの残基で置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体又は抗体断片）である。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基に置き換えられる。さらに、ヒト化抗体／抗体断片は、レシピエント抗体にも、移入されたＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見られない残基を含み得る。これらの変更により、抗体又は抗体断片の性能をさらに改善して最適化することができる。一般に、ヒト化抗体又はその抗体断片は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、ＣＤＲ領域のすべて又は実質的にすべてが非ヒト免疫グロブリンの領域に対応し、ＦＲ領域のすべて又は大部分は、ヒト免疫グロブリン配列の領域である。ヒト化抗体又は抗体断片はまた、免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部を含み得る。さらなる詳細については、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．（１９８６）ＮＡＴＵＲＥ ３２１：５２２－５２５；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）ＮＡＴＵＲＥ ３３２：３２３－３２９；ａｎｄ Ｐｒｅｓｔａ（１９９２）ＣＵＲＲ．ＯＰ．ＳＴＲＵＣＴ．ＢＩＯＬ．２：５９３－５９６を参照されたい。
【0342】
本明細書で使用される「免疫コンジュゲート」又は「抗体薬物コンジュゲート」という用語は、抗体又はその抗原結合断片と、化学療法剤、毒素、免疫療法剤、及びイメージングプローブなどの別の薬剤との結合を指す。結合は、共有結合、又は静電力などによる非共有相互作用であり得る。免疫コンジュゲートを形成するために、当技術分野で知られている様々なリンカーを使用することができる。加えて、免疫コンジュゲートは、免疫コンジュゲートをコードするポリヌクレオチドから発現され得る融合タンパク質の形態で提供することができる。
【0343】
本明細書で使用される「融合タンパク質」は、元々は別個のタンパク質（ペプチド及びポリペプチドを含む）をコードする２つ以上の遺伝子又は遺伝子断片の結合によって作製されたタンパク質を指す。融合遺伝子の翻訳により、元のタンパク質のそれぞれに由来する機能特性を備えた単一のタンパク質が生じる。
【0344】
「二価抗体」は、２つの抗原結合部位を含む抗体又はその抗原結合断片を指す。２つの抗原結合部位は、同じ抗原に結合するか、又はそれぞれが異なる抗原に結合することができ、その場合、抗体又は抗原結合断片は、「二重特異性」として特徴づけられる。「四価抗体」は、４つの抗原結合部位を含む抗体又はその抗原結合断片を指す。特定の実施形態では、四価抗体は二重特異性である。特定の実施形態では、四価抗体は、多重特異性、即ち、３つ以上の異なる抗原に結合する。
【0345】
Ｆａｂ（抗原結合断片）抗体断片は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域１（ＣＨ１）部分からなるポリペプチドと、軽鎖可変（ＶＬ）及び軽鎖定数（ＣＬ）部分かなるポリペプチドとから構成される抗体の一価抗原結合ドメインを含む免疫反応性ポリペプチドであり、ＣＬ及びＣＨ１部分は、好ましくはＣｙｓ残基間のジスルフィド結合によって１つに結合される。
【0346】
免疫チェックポイントモジュレーター抗体には、限定されるものではないが、少なくとも４つの主要な種類：（ｉ）Ｔ細胞又はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞における阻害経路を直接ブロックする抗体（例えば、ニボルマブ及びペンブロリズマブなどのＰＤ－１標的抗体、ＴＩＭ－３を標的とする抗体、並びにＬＡＧ－３、２Ｂ４、ＣＤ１６０、Ａ２ａＲ、ＢＴＬＡ、ＣＧＥＮ－１５０４９、及びＫＩＲを標的とする抗体）、（ｉｉ）Ｔ細胞又はＮＫ細胞における直接刺激経路を活性化する抗体（例えば、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、及び４－１ＢＢを標的とする抗体）、（ｉｉｉ）免疫細胞における抑制経路をブロックする抗体、又は抗体依存性細胞毒性に依存して免疫細胞の抑制集団を枯渇させる抗体（例えば、イピリムマブなどのＣＴＬＡ－４標的抗体、ＶＩＳＴＡを標的とする抗体、及びＰＤ－Ｌ２、Ｇｒ１、及びＬｙ６Ｇを標的とする抗体）、並びに（ｉｖ）癌細胞における抑制経路を直接ブロックする抗体、又は抗体依存性細胞毒性に依存して癌細胞に対する細胞毒性を強める抗体（例えば、リツキシマブ、ＰＤ－Ｌ１を標的とする抗体、並びにＢ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｇａｌ－９、及びＭＵＣ１を標的とする抗体）が含まれる。チェックポイント阻害剤の例としては、例えば、イピリムマブ又はトレメリムマブなどのＣＴＬＡ－４の阻害剤；抗ＰＤ－１、抗ＰＤ－Ｌ１、又は抗ＰＤ－Ｌ２抗体などのＰＤ－１経路の阻害剤が挙げられる。例示的な抗ＰＤ－１抗体は、国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレット、同第２００８／１５６７１２号パンフレット、同第２０１２／１４５４９３号パンフレット、同第２００９／０１４７０８号パンフレット、及び同第２００９／１１４３３５号パンフレットに記載されている。例示的な抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレット、同第２０１０／０７７６３４号パンフレット、及び同第２０１１／０６６３８９号パンフレットに記載されており、例示的な抗ＰＤ－Ｌ２抗体は、国際公開第２００４／００７６７９号パンフレットに記載されている。
【0347】
特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、融合タンパク質、例えば、免疫チェックポイントモジュレーターの活性を調節する融合タンパク質である。
【0348】
一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、治療用核酸分子、例えば、免疫チェックポイントタンパク質又はｍＲＮＡの発現を調節する核酸である。核酸治療薬は当技術分野で周知である。核酸治療薬には、細胞内の標的配列に相補的な一本鎖及び二本鎖（即ち、少なくとも１５ヌクレオチド長の相補的領域を有する核酸治療薬）核酸の両方が含まれる。特定の実施形態では、核酸治療薬は、免疫チェックポイントタンパク質をコードする核酸配列を標的とする。
【0349】
アンチセンス核酸治療薬は、典型的には約１６～３０ヌクレオチド長の一本鎖核酸治療薬であり、培養物内又は生物内のいずれかの標的細胞の標的核酸配列に相補的である。
【0350】
別の態様では、薬剤は、一本鎖アンチセンスＲＮＡ分子である。アンチセンスＲＮＡ分子は、標的ｍＲＮＡ内の配列に相補的である。アンチセンスＲＮＡは、ｍＲＮＡと塩基対を形成し、翻訳機構を物理的に妨害することによって化学量論的に翻訳を阻害することができる。Ｄｉａｓ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（２００２）Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ １：３４７－３５５を参照されたい。アンチセンスＲＮＡ分子は、標的ｍＲＮＡに相補的な約１５～３０ヌクレオチドを有し得る。アンチセンス核酸、化学修飾、及び治療用途に関する特許には、例えば：化学修飾されたＲＮＡ含有治療化合物に関する米国特許第５，８９８，０３１号明細書；これらの化合物を治療薬としての使用方法に関する米国特許第６，１０７，０９４号明細書；一本鎖の化学的に修飾されたＲＮＡ様化合物を投与することによって患者を処置する方法に関する米国特許第７，４３２，２５０号明細書；及び一本鎖の化学的に修飾されたＲＮＡ様化合物を含む医薬組成物に関する米国特許第７，４３２，２４９号明細書が含まれる。米国特許第７，６２９，３２１号明細書は、複数のＲＮＡヌクレオシド及び少なくとも１つの化学修飾を有する一本鎖オリゴヌクレオチドを用いて標的ｍＲＮＡを切断する方法に関する。この段落に記載されている各特許の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0351】
本発明の方法で使用するための核酸治療薬には、二本鎖核酸治療薬も含まれる。本明細書で互換的に使用される「ｄｓＲＮＡ剤」、「ｄｓＲＮＡ」、「ｓｉＲＮＡ」、「ｉＲＮＡ剤」とも呼ばれる「ＲＮＡｉ剤」、「二本鎖ＲＮＡｉ剤」、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子は、以下に定義されるように２つの逆平行の実質的に相補的な核酸鎖を含む二本鎖構造を有するリボ核酸分子の複合体を指す。本明細書で使用されるＲＮＡｉ剤はまた、ｄｓｉＲＮＡを含み得る（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００７０１０４６８８号明細書を参照されたい）。一般に、各鎖のヌクレオチドの大部分はリボヌクレオチドであるが、本明細書に記載されるように、各鎖又は両鎖はまた、１つ又は複数の非リボヌクレオチド、例えばデオキシリボヌクレオチド及び／又は修飾ヌクレオチドを含み得る。加えて、本明細書で使用されるように、「ＲＮＡｉ剤」は、化学修飾を有するリボヌクレオチドを含み得；ＲＮＡｉ剤は、複数のヌクレオチドに実質的な修飾を含み得る。そのような修飾は、本明細書に開示される又は当技術分野で公知のあらゆるタイプの修飾を含み得る。ｓｉＲＮＡ型の分子で使用されるいずれの修飾も、本明細書及び特許請求の範囲のために「ＲＮＡｉ剤」に含まれる。本発明の方法で使用されるＲＮＡｉ剤は、例えば、それぞれその全内容が参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第／２０１２／０３７２５４号パンフレット及び同第２００９／０７３８０９号パンフレットに開示されるような化学修飾を有する薬剤を含む。
【0352】
免疫チェックポイントモジュレーターは、例えば標準投与量を使用することによって、腫瘍性障害を処置するために適切な投与量で投与することができる。当業者は、日常的な実験によって、腫瘍性障害を処置する目的で、免疫チェックポイントモジュレーターの効果的で非毒性の量がどの程度であるかを決定することができるであろう。免疫チェックポイントモジュレーターの標準投与量は、当業者に公知であり、例えば、免疫チェックポイントモジュレーターの製造業者によって提供される製品の説明書から得ることができる。免疫チェックポイントモジュレーターの標準投与量の例が以下の表１２に示される。他の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターは、特定の腫瘍性障害の処置のための標準治療の下で腫瘍性障害を処置するために使用される免疫チェックポイントモジュレーターの標準投与量とは異なる（例えば、より低い）投与量で投与される。
【0353】
【表12】
【0354】
特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターの投与量は、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準投与量よりも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％低い。特定の実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターの投与量は、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準投与量の９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、又は５％である。免疫チェックポイントモジュレーターの組み合わせが投与される一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターの少なくとも１つは、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準用量よりも低い用量で投与される。免疫チェックポイントモジュレーターの組み合わせが投与される一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターの少なくとも２つは、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準用量よりも低い用量で投与される。免疫チェックポイントモジュレーターの組み合わせが投与される一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターの少なくとも３つは、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準用量よりも低い用量で投与される。免疫チェックポイントモジュレーターの組み合わせが投与される一実施形態では、免疫チェックポイントモジュレーターのすべては、特定の腫瘍性障害に対する免疫チェックポイントモジュレーターの標準用量よりも低い用量で投与される。
【0355】
本発明の操作された免疫細胞と組み合わせて投与することができる追加の免疫療法として、限定はされないが、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、細胞ベースの治療法、サイトカイン及び癌ワクチンが挙げられる。
【0356】
２．ＴＬＲアゴニスト
ＴＬＲは、微生物に由来する構造的に保存された分子を認識する単回膜貫通非触媒受容体である。ＴＬＲは、インターロイキン１受容体と共に、「インターロイキン１受容体／Ｔｏｌｌ様受容体スーパーファミリー」として知られている受容体スーパーファミリーを形成する。このファミリーのメンバーは、細胞外ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ドメイン、膜近傍システイン残基の保存されたパターン、並びにＭｙＤ８８、ＴＩＲドメイン含有アダプター（ＴＲＡＰ）、及びＩＦＮβを誘導するＴＩＲドメイン含有アダプター（ＴＲＩＦ）を含むＴＩＲドメイン含有アダプターを動員することによって下流シグナル伝達のプラットフォームを形成する細胞質内シグナル伝達ドメインによって構造的に特徴付けられる（Ｏ’Ｎｅｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７，３５３）。
ＴＬＲは、微生物に由来する構造的に保存された分子を認識する単回膜貫通非触媒受容体である。ＴＬＲは、インターロイキン１受容体と共に、「インターロイキン１受容体／Ｔｏｌｌ様受容体スーパーファミリー」として知られている受容体スーパーファミリーを形成する。このファミリーのメンバーは、細胞外ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ドメイン、膜近傍システイン残基の保存されたパターン、並びにＭｙＤ８８、ＴＩＲドメイン含有アダプター（ＴＲＡＰ）、及びＩＦＮβを誘導するＴＩＲドメイン含有アダプター（ＴＲＩＦ）を含むＴＩＲドメイン含有アダプターを動員することによって下流シグナル伝達のプラットフォームを形成する細胞質内シグナル伝達ドメインによって構造的に特徴付けられる（Ｏ’Ｎｅｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７，３５３）。
【0357】
ＴＬＲには、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、及びＴＬＲ１０が含まれる。ＴＬＲ２は、ペプチドグリカン、細菌性リポペプチド、リポテイコ酸、マイコバクテリアリポアラビノマンナン、及び酵母の細胞壁成分を含む多数の微生物産物に対する細胞応答を仲介する。ＴＬＲ４は、パターン認識受容体（ＰＲＲ）ファミリーに属する膜貫通タンパク質である。その活性化は、細胞内シグナル伝達経路ＮＦ－κＢ、及び自然免疫系の活性化に関与する炎症性サイトカインの産生をもたらす。ＴＬＲ５は、移動性細菌の侵入から細菌フラジェリンを認識することが知られており、炎症性腸疾患を含む多くの疾患の発症に関与していることが示されている。
【0358】
ＴＬＲアゴニストは当技術分野で公知であり、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１４／００３０２９４号明細書に記載されている。例示的なＴＬＲ２アゴニストには、マイコバクテリア細胞壁糖脂質、リポアラビノマンナン（ＬＡＭ）及びマンノシル化ホスファチジルイノシトール（ＰＩＩＭ）、ＭＡＬＰ－２、及びＰａｍ３Ｃｙｓ、及びそれらの合成変異体が含まれる。例示的なＴＬＲ４アゴニストには、リポ多糖又はその合成変異体（例えば、ＭＰＬ及びＲＣ５２９）及びリピドＡ又はその合成変異体（例えば、アミノアルキルグルコサミニド４－ホスフェート）が含まれる。例えば、Ｃｌｕｆｆ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，ｐ．３０４４－３０５２：７３；Ｌｅｍｂｏ ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １８０，７５７４－７５８１；及びＥｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ２：２１９－２９を参照されたい。例示的なＴＬＲ５アゴニストには、フラジェリン又はその合成変異体（例えば、ＴＬＲ５活性化に必須ではないフラジェリンの部分を除去することによって作製された、免疫原性が低下した薬理学的に最適化されたＴＬＲ５アゴニスト（ＣＢＬＢ５０２など））が含まれる。
【0359】
追加のＴＬＲアゴニストには、コーリーの毒（Ｃｏｌｅｙ’ｓ ｔｏｘｉｎ）及びカルメット・ゲラン桿菌（Ｂａｃｉｌｌｅ Ｃａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ）（ＢＣＧ）が含まれる。コーリーの毒は、化膿連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）種及びセラチア・マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）種の死滅菌からなる混合物である。Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２６（６Ａ）：３９９７－４００２を参照のこと。ＢＣＧは、弱毒化された生きたウシ結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｏｖｉｓ）の菌株から調製される。Ｖｅｎｋａｔａｓｗａｍｙ ｅｔ ａｌ．，２０１２，Ｖａｃｃｉｎｅ．３０（６）：１０３８－１０４９を参照のこと。
【0360】
３．細胞ベースの治療法
癌処置のための細胞ベースの治療法には、対象への免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ナチュラルキラー細胞、及び樹状細胞）の投与が含まれる。自家細胞ベースの治療法では、免疫細胞は、それらが投与される同じ対象に由来する。同族異系細胞ベースの治療法では、免疫細胞は、ある対象に由来し、別の対象に投与される。免疫細胞は、対象に投与する前に、例えばサイトカインでの処置によって活性化してもよい。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞免疫療法でのように、対象への投与の前に遺伝子組換えされている。
癌処置のための細胞ベースの治療法には、対象への免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ナチュラルキラー細胞、及び樹状細胞）の投与が含まれる。自家細胞ベースの治療法では、免疫細胞は、それらが投与される同じ対象に由来する。同族異系細胞ベースの治療法では、免疫細胞は、ある対象に由来し、別の対象に投与される。免疫細胞は、対象に投与する前に、例えばサイトカインでの処置によって活性化してもよい。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞免疫療法でのように、対象への投与の前に遺伝子組換えされている。
【0361】
いくつかの実施形態では、細胞ベースの治療法は、養子細胞移植（ＡＣＴ）を含む。ＡＣＴは、典型的には３つの部分：リンパ球枯渇、細胞投与、及び高用量のＩＬ－２による治療法から構成される。ＡＣＴで投与することができる細胞の種類には、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）導入Ｔ細胞、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞が含まれる。
【0362】
腫瘍浸潤リンパ球は、乳癌を含む多くの固形腫瘍に観察されている免疫細胞である。腫瘍浸潤リンパ球は、細胞傷害性Ｔ細胞とヘルパーＴ細胞の混合物、並びにＢ細胞、マクロファージ、ナチュラルキラー細胞、及び樹状細胞を含む細胞の集団である。自家ＴＩＬ治療法の一般的な手順は次の通りである：（１）切除された腫瘍を消化して断片にする；（２）各断片をＩＬ－２で増殖させ、リンパ球の増殖によって腫瘍を破壊する；（３）リンパ球の純粋な集団の存在の確認後、これらのリンパ球を増殖させる；及び（４）１０１１個の細胞まで増殖させた後、リンパ球を患者に注入する。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４８（６２３０）：６２－６８を参照されたい。
【0363】
ＴＣＲが形質導入されたＴ細胞は、腫瘍特異的ＴＣＲの遺伝子誘導を介して作製される。これは、多くの場合、特定の抗原特異的ＴＣＲをレトロウイルス骨格にクローニングすることによって行われる。血液を患者から採取し、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を抽出する。ＩＬ－２の存在下、ＰＢＭＣをＣＤ３で刺激し、抗原特異的ＴＣＲをコードするレトロウイルスで形質導入する。これらの形質導入ＰＢＭＣをインビトロでさらに増殖させた後、患者に注入する。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｏｂｂｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２１（５）：１０１９－１０２７を参照されたい。
【0364】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、細胞外抗原認識ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞質シグナル伝達ドメイン（ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、及び４－１ＢＢなど）を含む組換え受容体である。ＣＡＲは、抗原結合機能及びＴ細胞活性化機能の両方を備える。従って、ＣＡＲ発現Ｔ細胞は、糖脂質、炭水化物、及びタンパク質を含む多様な細胞表面抗原を認識し、細胞質共刺激の活性化を介してこれらの抗原を発現する悪性細胞を攻撃することができる。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｐａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ １７：９１を参照されたい。
【0365】
いくつかの実施形態では、細胞ベースの治療法は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞ベースの治療法である。ＮＫ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子の発現の事前のいかなる感作又は制限なしに、腫瘍細胞を殺傷する能力を有する大顆粒リンパ球である。Ｕｐｐｅｎｄａｈｌ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ８：１８２５を参照されたい。高用量ＩＬ－２治療法による自家リンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞の養子移入は、ヒトの臨床試験で評価されている。ＬＡＫ免疫療法と同様に、サイトカイン誘導キラー（ＣＩＫ）細胞は、抗ＣＤ３ ｍＡｂ、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の刺激による末梢血単核細胞培養から生じる。ＣＩＫ細胞は、混合Ｔ－ＮＫ表現型（ＣＤ３＋ＣＤ５６＋）を特徴とし、卵巣癌及び子宮頸癌に対してＬＡＫ細胞と比較して細胞毒性の増強を示す。一次腫瘍減量手術及び補助カルボプラチン／パクリタキセル化学療法後の自家ＣＩＫ細胞の養子移入を調べるヒト臨床試験も行われている。Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ３７（２）：１１６－１２２を参照されたい。
【0366】
いくつかの実施形態では、細胞ベースの治療法は、樹状細胞ベースの免疫療法である。腫瘍溶解物で処置された樹状細胞（ＤＣ）を用いたワクチン接種は、インビトロ及びインビボの両方で治療的抗腫瘍免疫応答を高めることが証明されている。Ｊｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ １１（３）：６８６－６９０を参照されたい。ＤＣは、抗原を捕捉して処理し、リンパ器官に移動し、リンパ球共刺激分子を発現し、免疫応答を開始するサイトカインを分泌する。ＤＣはまた、腫瘍関連抗原に特異的な受容体を発現する免疫エフェクター細胞（Ｔ細胞）を刺激し、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞などの免疫抑制因子の数を減少させる。例えば、腫瘍細胞溶解物－ＤＣハイブリッドに基づく腎細胞癌（ＲＣＣ）のＤＣワクチン接種戦略は、前臨床及び臨床試験において治療可能性を示した。Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ５６：１８１７－１８２９を参照されたい。
【0367】
４．サイトカイン
ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、及びＩＬ－２１を含むいくつかのサイトカインは、ＮＫ細胞及びＴ細胞などの免疫細胞の活性化のための癌の処置に使用されてきた。ＩＬ－２は、抗腫瘍免疫を誘導することを期待して、臨床的に使用された最初のサイトカインの１つであった。高用量の単剤として、ＩＬ－２は、腎細胞癌（ＲＣＣ）及び転移性黒色腫を有する一部の患者に寛解をもたらす。低用量のＩＬ－２も調べられ、生物学的活性を維持しながら毒性を低減するように、ＩＬ－２αβγ受容体（ＩＬ－２Ｒαβγ）を選択的に連結することが目標とされた。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｏｍｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａ，Ｖｏｌｕｍｅ ２０１４，Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ２０５７９６，１８ ｐａｇｅｓを参照されたい。
ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、及びＩＬ－２１を含むいくつかのサイトカインは、ＮＫ細胞及びＴ細胞などの免疫細胞の活性化のための癌の処置に使用されてきた。ＩＬ－２は、抗腫瘍免疫を誘導することを期待して、臨床的に使用された最初のサイトカインの１つであった。高用量の単剤として、ＩＬ－２は、腎細胞癌（ＲＣＣ）及び転移性黒色腫を有する一部の患者に寛解をもたらす。低用量のＩＬ－２も調べられ、生物学的活性を維持しながら毒性を低減するように、ＩＬ－２αβγ受容体（ＩＬ－２Ｒαβγ）を選択的に連結することが目標とされた。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｏｍｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａ，Ｖｏｌｕｍｅ ２０１４，Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ２０５７９６，１８ ｐａｇｅｓを参照されたい。
【0368】
インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）は、インターロイキン－２（ＩＬ－２）と構造的に類似したサイトカインである。ＩＬ－２と同様に、ＩＬ－１５は、ＩＬ－２／ＩＬ－１５受容体ベータ鎖（ＣＤ１２２）及び共通のガンマ鎖（ガンマ－Ｃ、ＣＤ１３２）から構成される複合体に結合し、この複合体を介してシグナルを伝達する。組換えＩＬ－１５は、固形腫瘍（例えば、黒色腫、腎細胞癌）の処置のために、並びに癌患者の養子移入後のＮＫ細胞を支持するために、評価されている。上で引用したＲｏｍｅｅ ｅｔ ａｌ．を参照されたい。
【0369】
ＩＬ－１２は、ｐ３５及びｐ４０サブユニット（ＩＬ－１２α及びβ鎖）から構成されるヘテロ二量体サイトカインであり、ＮＫ細胞の細胞毒性を増強する能力に基づいて、最初は「ＮＫ細胞刺激因子（ＮＫＳＦ）」として同定された。病原体に接触すると、ＩＬ－１２は、活性化樹状細胞及びマクロファージによって放出され、主に活性化Ｔ細胞及びＮＫ細胞で発現するその同族受容体に結合する。多くの前臨床試験により、ＩＬ－１２は抗腫瘍候補であることが示唆されている。上で引用したＲｏｍｅｅ ｅｔ ａｌ．を参照されたい。
【0370】
ＩＬ－１８は、炎症性ＩＬ－１ファミリーのメンバーであり、ＩＬ－１２と同様に、活性化食細胞から分泌される。ＩＬ－１８は、前臨床動物モデルで有意な抗腫瘍活性を示し、ヒトの臨床試験で評価されている。Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２：４２６５－４２７３を参照されたい。
【0371】
ＩＬ－２１は、ＮＫ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞を刺激する能力があるため、抗腫瘍免疫療法に使用されてきた。エクスビボでのＮＫ細胞の増殖では、膜結合型ＩＬ－２１がＫ５６２刺激細胞で発現され、効果的な結果が得られている。Ｄｅｎｍａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ７（１）ｅ３０２６４を参照されたい。組換えヒトＩＬ－２１は、可溶性ＣＤ２５を増加させ、ＣＤ８＋細胞上でのパーフォリン及びグランザイムＢの発現を誘導することも示された。ＩＬ－２１は、固形腫瘍の処置に関するいくつかの臨床試験で評価されている。上で引用したＲｏｍｅｅ ｅｔ ａｌ．を参照されたい。
【0372】
５．癌ワクチン
治療用癌ワクチンは、適切なアジュバントの助けを借りて、癌に対する患者自身の免疫応答、特にＣＤ８＋Ｔ細胞媒介応答を強化することによって癌細胞を除去する。癌ワクチンの治療効果は、正常細胞に対する腫瘍細胞による腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の差次的発現に依存している。ＴＡＡは、細胞タンパク質に由来し、免疫寛容又は自己免疫効果のいずれかを回避するために、主に又は選択的に癌細胞に発現させる必要がある。Ｃｉｒｃｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｖａｃｃｉｎｅｓ ３（３）：５４４－５５５を参照されたい。癌ワクチンには、例えば、樹状細胞（ＤＣ）ベースのワクチン、ペプチド／タンパク質ワクチン、遺伝子ワクチン、及び腫瘍細胞ワクチンが含まれる。Ｙｅ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ９（２）：２６３－２６８を参照されたい。
治療用癌ワクチンは、適切なアジュバントの助けを借りて、癌に対する患者自身の免疫応答、特にＣＤ８＋Ｔ細胞媒介応答を強化することによって癌細胞を除去する。癌ワクチンの治療効果は、正常細胞に対する腫瘍細胞による腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の差次的発現に依存している。ＴＡＡは、細胞タンパク質に由来し、免疫寛容又は自己免疫効果のいずれかを回避するために、主に又は選択的に癌細胞に発現させる必要がある。Ｃｉｒｃｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｖａｃｃｉｎｅｓ ３（３）：５４４－５５５を参照されたい。癌ワクチンには、例えば、樹状細胞（ＤＣ）ベースのワクチン、ペプチド／タンパク質ワクチン、遺伝子ワクチン、及び腫瘍細胞ワクチンが含まれる。Ｙｅ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ９（２）：２６３－２６８を参照されたい。
【0373】
本発明の併用療法は、腫瘍性障害の処置に利用され得る。一部の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と追加の治療薬との併用療法は、腫瘍細胞の増殖を阻害する。従って、本発明はさらに、腫瘍細胞の増殖が阻害されるように、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞、並びに少なくとも１つの追加の治療薬を対象に投与することを含む、対象における腫瘍細胞増殖を阻害する方法を提供する。特定の実施形態では、癌を処置することは、対照と比較して生存期間を延長するか、又は腫瘍進行までの時間を延長することを含む。一部の実施形態では、対照は、追加の治療薬で処置されるが、操作された免疫細胞で処置されない対象である。一部の実施形態では、対照は、操作された免疫細胞で処置されるが、追加の治療薬で処置されない対象である。一部の実施形態では、対照は、追加の治療薬又は操作された免疫細胞で処置されていない対象である。特定の実施形態では、対象は、ヒト対象である。一部の実施形態では、対象は、操作された免疫細胞の初回用量又は追加の治療薬の初回用量の投与前に、腫瘍を有すると特定される。特定の実施形態では、対象は、操作された免疫細胞の初回投与時、又は追加の治療薬の初回投与時に、腫瘍を有する。
【0374】
特定の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と１つ又は複数の追加の治療薬とを含む、少なくとも１、２、３、４、又は５サイクルの併用療法を対象に投与する。対象は、各サイクルの終わりに寛解基準について評価される。対象はまた、治療計画が十分に認容されていることを確認するために、有害事象（例えば、凝固、貧血、肝臓及び腎臓機能など）についてサイクル毎に終始モニターされる。
【0375】
２種以上の追加の治療薬、例えば、２、３、４、５、又はそれ以上の追加の治療薬を、本発明の操作された免疫細胞と組み合わせて投与してもよいことに留意すべきである。
【0376】
一実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と、本明細書に記載の追加の治療薬の投与は、以下：腫瘍のサイズ、重量若しくは体積の減少、進行までの時間の増加、腫瘍成長の阻害、及び／又は腫瘍性障害を有する対象の生存期間の延長のうちの１つ若しくは複数をもたらす。特定の実施形態では、操作された免疫細胞及び追加の治療薬の投与は、核酸分子、ベクター、細胞又は医薬組成物を投与されているが追加の治療薬を投与されていない対応する対照対象と比較して、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％若しくは５００％、腫瘍のサイズ、重量若しくは体積を減少させ、進行までの時間を増加させ、腫瘍増殖を阻害し、且つ／又は対象の生存期間を延長する。特定の実施形態では、操作された免疫細胞及び追加の治療薬の投与は、核酸分子、ベクター、細胞又は医薬組成物を投与されているが追加の治療薬を投与されていない腫瘍性障害に罹患した対照対象の対応する集団と比較して、少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％若しくは５００％、腫瘍のサイズ、重量若しくは体積を減少させ、進行までの時間を増加させ、腫瘍増殖を阻害し、且つ／又は腫瘍性障害に罹患した対象の集団の生存期間を延長する。他の実施形態では、操作された免疫細胞及び追加の治療薬の投与は、処置前に進行性の腫瘍性障害を有する対象における腫瘍性障害を安定化させる。
【0377】
特定の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞と、追加の治療薬（例えば、免疫治療薬）による処置は、例えば、１つ又は複数の抗腫瘍（例えば化学療法薬）剤の標準用量を投与することによって、処置しようとする具体的な癌の処置のための標準治療などのさらに別の抗腫瘍剤と組み合わせる。特定の癌の種類の標準治療は、例えば、癌の種類及び重症度、対象の年齢、体重、性別、及び／若しくは病歴、並びに以前の処置の成功又は失敗に基づいて、当業者によって決定することができる。本発明の特定の実施形態では、標準治療は、外科手術、放射線、ホルモン療法、抗体療法、成長因子による治療法、サイトカイン、及び化学療法のいずれか１つ又はそれらの組み合わせを含む。一実施形態では、追加の抗腫瘍剤は、鉄依存性細胞分解を誘導する薬剤及び／又は免疫チェックポイントモジュレーターでもない。
【0378】
本明細書に開示される方法での使用に適した追加の抗腫瘍剤には、限定されるものではないが、化学療法剤（例えば、アルトレタミン、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、ロムスチン、メルファラン、オキサリプラチン、テモゾロミド、チオテパなどのアルキル化剤；５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）などの代謝拮抗剤；カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、シタラビン（Ａｒａ－Ｃ（登録商標））、フロクスウリジン、フルダラビン、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））、ヒドロキシ尿素、メトトレキサート、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｔａ（登録商標））；アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標））、エピルビシン、イダルビシン）、アクチノマイシン－Ｄ、ブレオマイシン、マイトマイシン－Ｃ、ミトキサントロン（トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としても機能する）などの抗腫瘍抗生物質；トポテカン、イリノテカン（ＣＰＴ－１１）、エトポシド（ＶＰ－１６）、テニポシド、ミトキサントロン（抗腫瘍抗生物質としても機能する）などのトポイソメラーゼ阻害剤；ドセタキセル、エストラムスチン、イクサベピロン、パクリタキセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビンなどの有糸分裂阻害剤；プレドニゾン、メチルプレドニゾロン（Ｓｏｌｕｍｅｄｒｏｌ（登録商標））、デキサメタゾン（Ｄｅｃａｄｒｏｎ（登録商標））などのコルチコステロイド；Ｌ－アスパラギナーゼ及びボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標））などの酵素が含まれる。抗腫瘍剤にはまた、生物学的抗癌剤、例えば、抗ＴＮＦ抗体、例えば、アダリムマブ又はインフリキシマブ；リツキシマブなどの抗ＣＤ２０抗体、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体；トラスツズマブなどの抗ＨＥＲ２抗体；パリビズマブなどの抗ＲＳＶが含まれる。
【0379】
Ｂ．感染病
本明細書に提供されるように、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞は、対象に対して内因性である免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞など）における免疫活性を誘導又は増加させることができ、従って、細菌及び／又はウイルス感染の阻害、及び／又は感染を処置するための免疫監視及び免疫記憶機能の回復などの、免疫細胞機能を強化することができる。従って、一部の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞は、対象における感染症又は感染性疾患、例えば慢性感染症を処置するために使用される。
本明細書に提供されるように、タノトランスミッションを促進するポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞は、対象に対して内因性である免疫細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞など）における免疫活性を誘導又は増加させることができ、従って、細菌及び／又はウイルス感染の阻害、及び／又は感染を処置するための免疫監視及び免疫記憶機能の回復などの、免疫細胞機能を強化することができる。従って、一部の実施形態では、本発明の操作された免疫細胞は、対象における感染症又は感染性疾患、例えば慢性感染症を処置するために使用される。
【0380】
本明細書で使用される「感染」という用語は、生物（即ち、対象）の細胞又は組織が感染因子に感染している（例えば、対象が細胞内病原体感染、例えば慢性細胞内病原体感染を有する）あらゆる状態を指す。本明細書で使用される「感染因子」という用語は、感染した生物の少なくとも１つの細胞内の外来の生物学的実体（即ち、病原体）を指す。例えば、感染因子には、限定されるものではないが、細菌、ウイルス、原生動物、及び真菌が含まれる。細胞内病原体は特に興味深いものである。感染病は、感染因子によって引き起こされる障害である。一部の感染因子は、特定の条件下では認識できる症状も疾患も引き起こさないが、変化した条件下では症状又は疾患を引き起こし得る。主題の方法は、限定されるものではないが、ウイルス感染症、例えば、レトロウイルス、レンチウイルス、ヘパドナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、又はヒトパピローマウイルス；細胞内細菌感染症、例えば、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クラミドフィラ（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ）、エールリヒア（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ）、リケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）、ブルセラ（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、レジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、フランシセラ（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ）、リステリア（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、コクシエラ（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、イェルシニア属（Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｓｐ）、又はヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）；及び細胞内原生動物病原体、例えば、プラスモディウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐ）、トリパノソーマ属（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｓｐ．）、ジアルジア属（Ｇｉａｒｄｉａ ｓｐ．）、トキソプラズマ属（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｓｐ．）、又はリーシュマニア属（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｓｐ．）を含む慢性病原体感染症の処置に使用することができる。
【0381】
本明細書に記載の組成物を使用して処置できる感染病には、限定されるものではないが：ＨＩＶ、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ）、マラリア、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）、ウイルス性肝炎（Ａ型、Ｂ型、又はＣ型）による病原性感染、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ－Ｉ、ＨＡＶ－６、ＨＳＶ－ＩＩ、及びＣＭＶ、エプスタイン・バー・ウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス（ｆｌａｖｉｖｉｒｕｓｅｓ）、エコー・ウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、ＲＳウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デングウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルス、及びアルボウイルス脳炎ウイルス（ａｒｂｏｖｉｒａｌ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ）、細菌であるクラミジア（ｃｈｌａｍｙｄｉａ）、リケッチア細菌（ｒｉｋｅｔｔｓｉａｌ ｂａｃｔｅｒｉａ）、マイコバクテリウム（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ）、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、肺炎球菌（ｐｎｅｕｍｏｎｏｃｏｃｃｉ）、髄膜炎菌（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｉ）、及びコノコッキ（ｃｏｎｏｃｏｃｃｉ）、クレブシエラ（ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス（ｐｒｏｔｅｕｓ）、セラチア（ｓｅｒｒａｔｉａ）、シュードモナス（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、レジオネラ（ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、ジフテリア（ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ）、サルモネラ（ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、バチルス（ｂａｃｉｌｌｉ）、コレラ（ｃｈｏｌｅｒａ）、破傷風（ｔｅｔａｎｕｓ）、ボツリヌス（ｂｏｔｕｌｉｓｍ）、炭疽菌（ａｎｔｈｒａｘ）、ペスト（ｐｌａｇｕｅ）、レプトスピラ（ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ）、及びライム病細菌による病原性感染、真菌であるカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）（アルビカンス（ａｌｂｉｃａｎｓ）、クルセイ（ｋｒｕｓｅｉ）、グラブラタ（ｇｌａｂｒａｔａ）、トロピカリス（ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）など）、クリプトコッカス・ネフォルアマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（フミガーツス（ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、ニゲル（ｎｉｇｅｒ）など）、ケカビ属（Ｇｅｎｕｓ Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ）（ムコール（ｍｕｃｏｒ）、アブシジア（ａｂｓｉｄｉａ）、リゾプス（ｒｈｉｚｏｐｈｕｓ））、スポロトリクス・シェンキイ（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｋｉｉ）、ブラストミセス・デルマティティジス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、パラコクシジオイデス・ブラジリエンシス（Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、コクシジオイデス・イミチス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ）、及びヒストプラスマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）による病原性感染、並びに寄生虫である赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、大腸バランチジウム（Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ ｃｏｌｉ）、ネグレリアフォーレリ（Ｎａｅｇｌｅｒｉａｆｏｗｌｅｒｉ）、アカントアメーバ属（Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ ｓｐ．）、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｉａ）、クリプトスポリジウム属（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｓｐ．）、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ）、三日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｖａｘ）、バベシア・ミクロチ（Ｂａｂｅｓｉａ ｍｉｃｒｏｔｉ）、ブルーストリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ）、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）、ドノバン・リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｄｏｎｏｖａｎｉ）、トキソプラズマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉ）、及び／又はニッポストランジラス・ブラジリエンシス（Ｎｉｐｐｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）による病原性感染が含まれる。
【0382】
「慢性感染症」という用語は、約１ヶ月以上、例えば、少なくとも１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、又は６ヶ月続く感染症を指す。一部の実施形態では、慢性感染症は、感染領域内及び／又はその周辺での抗炎症性ケモカインの産生の増加に関連している。慢性感染症として、限定はされないが、ＨＩＶ感染症、ＨＣＶ感染症、ＨＢＶ感染症、ＨＰＶ感染症、Ｂ型肝炎感染症、Ｃ型肝炎感染症、ＥＢＶ感染症、ＣＭＶ感染症、ＴＢ感染症、及び細胞内細菌又は寄生虫による感染症が挙げられる。一部の実施形態では、慢性感染症は細菌感染症である。一部の実施形態では、慢性感染症はウイルス感染症である。
【0383】
ＩＸ．医薬組成物及び投与方法
特定の態様では、本開示は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を含む医薬組成物に関する。一部の実施形態では、組成物は、標的細胞において生物学的応答を誘導するのに十分な量の免疫細胞を含む。本明細書に記載の医薬組成物は、任意の好適な製剤で対象に投与することができる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途に応じて変わる。
特定の態様では、本開示は、タノトランスミッションを促進する１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド、及び／又はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチドを含むように操作された免疫細胞を含む医薬組成物に関する。一部の実施形態では、組成物は、標的細胞において生物学的応答を誘導するのに十分な量の免疫細胞を含む。本明細書に記載の医薬組成物は、任意の好適な製剤で対象に投与することができる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途に応じて変わる。
【0384】
特定の実施形態において、医薬組成物は経口投与に適している。特定の実施形態では、医薬組成物は、静脈内、腹腔内、筋肉内、及び皮下注射を含む非経口投与に適している。特定の実施形態では、医薬組成物は、静脈内投与に適している。さらに別の特定の実施形態では、医薬組成物は、腫瘍内投与に適している。
【0385】
非経口投与用の医薬組成物には、水溶性形態の活性化合物の水溶液が含まれる。静脈内投与の場合、製剤は水溶液であり得る。水溶液には、ハンクス液、リンゲル液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、生理食塩水緩衝液、又は非経口的に送達される製剤の適切なｐＨ及び浸透圧を達成する他の適切な塩又は組み合わせが含まれ得る。水溶液を使用して、投与用の製剤を所望の濃度に希釈することができる。水溶液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、又はデキストランなどの、溶液の粘度を増加させる物質を含み得る。いくつかの実施形態では、製剤は、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、及び注射用水を含むリン酸緩衝生理食塩水を含む。
【0386】
当業者には容易に明らかであるように、投与される有用なインビボ投与量及び特定の投与方式は、年齢、体重、苦痛の重症度、及び処置される哺乳動物種、利用される特定の化合物、及びこれらの化合物が利用される特定の用途に応じて異なる。有効な投与量レベル、即ち、所望の結果を達成するために必要な投与量レベルの決定は、例えば、ヒト臨床試験、動物モデル、及びインビトロ試験などの日常的な方法を使用して当業者が行うことができる。
【0387】
特定の実施形態では、組成物は非経口的に投与される。特定の実施形態では、組成物は、注射又は注入によって送達される。一実施形態では、本明細書で提供される組成物は、腫瘍に直接注射することによって投与することができる。いくつかの実施形態では、組成物は、静脈内注射又は静脈内注入によって投与することができる。特定の実施形態では、投与は全身性である。特定の実施形態では、投与は局所的である。
【実施例】
【0388】
本発明を以下の実施例によってさらに説明するが、これらを限定するものとして解釈すべきではない。本出願全体を通して引用されたすべての参考文献、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号及び遺伝子番号、並びに公開特許及び特許出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。当業者は、本発明が、開示される構造、材料、組成物及び方法に対する変形と共に実施され得ることを認識され、また、そのような変形は本発明の範囲内とみなされる。
【0389】
実施例１．ＣＡＲ細胞内シグナル伝達ドメインが共刺激ドメイン及びＣＤ３ゼータの細胞内シグナル伝達ドメインを含む、タノトランスミッションを促進するポリペプチドと別途ＣＡＲとを含む操作されたＴ細胞の調製
ベクターの生成
ＣＡＲ構築物をコードする遺伝子が合成され、レンチウイルス発現ベクター（ＣＡＲベクター）にクローニングされる。ＣＡＲは、標的抗原に対するｓｃＦｖ、ヒトＣＤ８ａ由来のヒンジ及び膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン（例えば、ＣＤ２８又は４－１ＢＢ）、並びにヒトＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達ドメインから構成される。ＣＡＲに加えて、構築物は、リボソームスキッピング部位の後に蛍光選択マーカー（ＺＳグリーンなど）を含有する（Ｐ２Ａ、図１Ａに概要を示す構築物）。以下の実施例５～１０に記載されるものなどのタノトランスミッションを促進する遺伝子モジュールを合成し、活性化誘導性Ｔ細胞プロモーター、例えば、ＮＦ－ＡＴ（タノベクター（Ｔｈａｎｏ ｖｅｃｔｏｒ））の下流にある別のレンチウイルスベクターにクローニングする。タノトランスミッションモジュールに加えて、構築物は、リボソームスキッピング部位の後に蛍光選択マーカー（ＤＴ－Ｔｏｍａｔｏなど）を含んでいる（Ｆ２Ａ、図１Ｂに概要を示す構築物）。
ベクターの生成
ＣＡＲ構築物をコードする遺伝子が合成され、レンチウイルス発現ベクター（ＣＡＲベクター）にクローニングされる。ＣＡＲは、標的抗原に対するｓｃＦｖ、ヒトＣＤ８ａ由来のヒンジ及び膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン（例えば、ＣＤ２８又は４－１ＢＢ）、並びにヒトＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達ドメインから構成される。ＣＡＲに加えて、構築物は、リボソームスキッピング部位の後に蛍光選択マーカー（ＺＳグリーンなど）を含有する（Ｐ２Ａ、図１Ａに概要を示す構築物）。以下の実施例５～１０に記載されるものなどのタノトランスミッションを促進する遺伝子モジュールを合成し、活性化誘導性Ｔ細胞プロモーター、例えば、ＮＦ－ＡＴ（タノベクター（Ｔｈａｎｏ ｖｅｃｔｏｒ））の下流にある別のレンチウイルスベクターにクローニングする。タノトランスミッションモジュールに加えて、構築物は、リボソームスキッピング部位の後に蛍光選択マーカー（ＤＴ－Ｔｏｍａｔｏなど）を含んでいる（Ｆ２Ａ、図１Ｂに概要を示す構築物）。
【0390】
レンチウイルスストックの生成
トランスフェクションの前日に、２９３個のＴ細胞をプレーティングする。ＣＡＲの生成用のレンチウイルスストックは、レンチウイルスパッケージングミックスと共にＣＡＲベクターＤＮＡを２９３Ｔ細胞にトランスフェクトすることによって産生される。タノベクター用の個別のレンチウイルスストックは、レンチウイルスパッケージングミックスと共にタノベクターＤＮＡを２９３Ｔ細胞にトランスフェクトすることによって作成される。ウイルスストックをトランスフェクションの２４時間後及び４８時間後に採取し、０．２２μＭフィルターを通して濾過してレンチウイルスストックを作製する。
トランスフェクションの前日に、２９３個のＴ細胞をプレーティングする。ＣＡＲの生成用のレンチウイルスストックは、レンチウイルスパッケージングミックスと共にＣＡＲベクターＤＮＡを２９３Ｔ細胞にトランスフェクトすることによって産生される。タノベクター用の個別のレンチウイルスストックは、レンチウイルスパッケージングミックスと共にタノベクターＤＮＡを２９３Ｔ細胞にトランスフェクトすることによって作成される。ウイルスストックをトランスフェクションの２４時間後及び４８時間後に採取し、０．２２μＭフィルターを通して濾過してレンチウイルスストックを作製する。
【0391】
ＣＡＲ Ｔ細胞の生成
Ｐａｎ Ｔ細胞は、健康なヒトのドナーからのＰＢＭＣから単離される。単離されたＴ細胞は、活性化ビーズで２～３日間活性化され、ビーズが除去される。レンチウイルスストックを活性化されたＴ細胞に加えて、Ｔ細胞に形質導入する。Ｔ細胞にＣＡＲベクター又はタノベクターのいずれか、或いはその両方を形質導入して、それぞれ対照ＣＡＲ Ｔ細胞、対照タノＴ細胞、タノＣＡＲ Ｔ細胞を作製する。形質導入の１～３日後、形質導入されたＴ細胞は、増殖を支持するサイトカイン（例えば、ヒトＩＬ－２）の存在下で大規模増殖培養物に移される。実験のために、細胞を８日目と１２日目の間に採取する。一部の実験では、増殖前又は増殖後の蛍光マーカー又は選択マーカーの発現に基づいて細胞が精製される。
Ｐａｎ Ｔ細胞は、健康なヒトのドナーからのＰＢＭＣから単離される。単離されたＴ細胞は、活性化ビーズで２～３日間活性化され、ビーズが除去される。レンチウイルスストックを活性化されたＴ細胞に加えて、Ｔ細胞に形質導入する。Ｔ細胞にＣＡＲベクター又はタノベクターのいずれか、或いはその両方を形質導入して、それぞれ対照ＣＡＲ Ｔ細胞、対照タノＴ細胞、タノＣＡＲ Ｔ細胞を作製する。形質導入の１～３日後、形質導入されたＴ細胞は、増殖を支持するサイトカイン（例えば、ヒトＩＬ－２）の存在下で大規模増殖培養物に移される。実験のために、細胞を８日目と１２日目の間に採取する。一部の実験では、増殖前又は増殖後の蛍光マーカー又は選択マーカーの発現に基づいて細胞が精製される。
【0392】
実施例２．インビトロでの操作されたＴ細胞機能の評価。
ＣＡＲ Ｔ細胞の表現型
実施例１で上記のように生成されたＣＡＲ Ｔ細胞の表現型を、Ｔ細胞の老化、消耗、及び機能のマーカー、例えば、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、４－１ＢＢ、ＣＤ２７、ＫＬＲＧ１、ＣＤ５７について、フローサイトメトリーによって評価する。ＣＡＲ Ｔ細胞の代謝適応度も、例えばミトコンドリア機能と酸化還元状態のアッセイを使用して、評価される。ＣＡＲ Ｔ細胞の表現型は、標的抗原の存在下又は非存在下で評価される。
ＣＡＲ Ｔ細胞の表現型
実施例１で上記のように生成されたＣＡＲ Ｔ細胞の表現型を、Ｔ細胞の老化、消耗、及び機能のマーカー、例えば、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、４－１ＢＢ、ＣＤ２７、ＫＬＲＧ１、ＣＤ５７について、フローサイトメトリーによって評価する。ＣＡＲ Ｔ細胞の代謝適応度も、例えばミトコンドリア機能と酸化還元状態のアッセイを使用して、評価される。ＣＡＲ Ｔ細胞の表現型は、標的抗原の存在下又は非存在下で評価される。
【0393】
ＣＡＲ Ｔ細胞の機能及びタノトランスミッション
ルシフェラーゼ標識ヒト腫瘍細胞（例えば、ＢＸＰＣ－１、Ｃａｐａｎ－２、ＨＴ－１０８０、ＨＴ－２９）を平底９６ウェルプレートに５０００～１００００細胞／ウェルの密度でプレーティングする。ＣＡＲ Ｔ細胞は、１０：１～０．１：１の範囲のＴ細胞：標的比で添加される。２４時間後、これらの共培養物からの上清を回収し、報告された細胞株とインキュベートして、ＮＦ－Ｋｂ及びＩＲＦ活性に対する効果を測定する。上清中のサイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮγ）のレベルも測定される。標的殺傷の程度は、残りのルシフェラーゼ活性のレベルを測定することによって決定される。他の実験では、標的細胞及びＴ細胞を様々な比率で含有するプレートの連続的生細胞イメージングによって、標的のＴ細胞殺傷の動態が決定される。
ルシフェラーゼ標識ヒト腫瘍細胞（例えば、ＢＸＰＣ－１、Ｃａｐａｎ－２、ＨＴ－１０８０、ＨＴ－２９）を平底９６ウェルプレートに５０００～１００００細胞／ウェルの密度でプレーティングする。ＣＡＲ Ｔ細胞は、１０：１～０．１：１の範囲のＴ細胞：標的比で添加される。２４時間後、これらの共培養物からの上清を回収し、報告された細胞株とインキュベートして、ＮＦ－Ｋｂ及びＩＲＦ活性に対する効果を測定する。上清中のサイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮγ）のレベルも測定される。標的殺傷の程度は、残りのルシフェラーゼ活性のレベルを測定することによって決定される。他の実験では、標的細胞及びＴ細胞を様々な比率で含有するプレートの連続的生細胞イメージングによって、標的のＴ細胞殺傷の動態が決定される。
【0394】
実施例３．癌の免疫不全マウスモデルにおけるＣＡＲ Ｔ細胞機能の評価。
異なるレベルの抗原標的（例えば、ＢＸＰＣ－１、Ｃａｐａｎ－２、ＡＳＣ－１）を発現するヒト腫瘍細胞を、免疫不全ＮＳＧマウスの側腹部に皮下移植する。腫瘍が定着したら、マウス１匹あたり１×１０５～１×１０７個の範囲の異なる用量のＣＡＲ Ｔでマウスを１回処置する。腫瘍増殖動態がモニタリングされ、腫瘍増殖に対する異なるＣＡＲ Ｔ細胞の影響が評価される。いくつかの実験では、抗腫瘍ＣＡＲ Ｔ細胞応答の持続性を評価するために、マウスは、反対側腹部に新しい腫瘍を再投与される。
異なるレベルの抗原標的（例えば、ＢＸＰＣ－１、Ｃａｐａｎ－２、ＡＳＣ－１）を発現するヒト腫瘍細胞を、免疫不全ＮＳＧマウスの側腹部に皮下移植する。腫瘍が定着したら、マウス１匹あたり１×１０５～１×１０７個の範囲の異なる用量のＣＡＲ Ｔでマウスを１回処置する。腫瘍増殖動態がモニタリングされ、腫瘍増殖に対する異なるＣＡＲ Ｔ細胞の影響が評価される。いくつかの実験では、抗腫瘍ＣＡＲ Ｔ細胞応答の持続性を評価するために、マウスは、反対側腹部に新しい腫瘍を再投与される。
【0395】
実施例４．癌の免疫担当マウスモデルにおけるマウス化ＣＡＲ Ｔ細胞の評価。
無傷の免疫系に対するＣＡＲ Ｔ細胞活性の影響を評価する研究では、図１Ａ及び１Ｂに記載のＣＡＲ構築物をマウス化する。この構築物は、ヒト抗原を標的とするＶＨ及びＶＬドメインと、ヒトの代わりにマウスＣＤ２８及びマウスＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインとを備えたレトロウイルス骨格（ＳＦＧなど）にクローニングされるため、マウスＴ細胞が刺激される。これらの構築物は、以前に記載されているように、安定したパッケージング細胞株を生成し、初代マウスＴ細胞を遺伝子改変するために使用される（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１１，７１（８）：２８７１）。マウスＣＡＲ Ｔ細胞は、マウス腫瘍細胞（例えば、ヒト抗原標的（例えば、メソテリン）を発現するように修飾されたＢ１６又はＣＴ２６）と共に培養される。
無傷の免疫系に対するＣＡＲ Ｔ細胞活性の影響を評価する研究では、図１Ａ及び１Ｂに記載のＣＡＲ構築物をマウス化する。この構築物は、ヒト抗原を標的とするＶＨ及びＶＬドメインと、ヒトの代わりにマウスＣＤ２８及びマウスＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインとを備えたレトロウイルス骨格（ＳＦＧなど）にクローニングされるため、マウスＴ細胞が刺激される。これらの構築物は、以前に記載されているように、安定したパッケージング細胞株を生成し、初代マウスＴ細胞を遺伝子改変するために使用される（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１１，７１（８）：２８７１）。マウスＣＡＲ Ｔ細胞は、マウス腫瘍細胞（例えば、ヒト抗原標的（例えば、メソテリン）を発現するように修飾されたＢ１６又はＣＴ２６）と共に培養される。
【0396】
同族抗原を発現するＢ１６又はＣＴ２６腫瘍をＷＴマウスの皮下に移植する。腫瘍が触知できるようになれば、マウスをマウス化ＣＡＲ Ｔで処置し、腫瘍増殖動態をモニタリングする。さらに、ＣＡＲ Ｔの存在下での腫瘍に対する宿主免疫応答がモニタリングされる。一部の実験では、チェックポイント阻害抗体（例えば、抗マウスＰＤ－１）及びＣＡＲ Ｔ細胞も投与され、腫瘍増殖及び宿主免疫応答に対する効果が評価される。
【0397】
実施例５．１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドを発現するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞における細胞死の誘導。
ＣＴ－２６マウス大腸癌細胞（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ－２６３８）を、ｐＬＶＸ－Ｔｅｔ３Ｇベクター（Ｔａｋａｒａ；６３１３５８）由来のレンチウイルスで形質導入し、ヒトＰＧＫプロモーターによる安定したＴｅｔ－Ｏｎトランスアクチベーター発現を達成した。Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、遺伝子発現は、ドキシサイクリンによって誘導可能である。すべてのレンチウイルス形質導入は、２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ－３２１６）及びレンチウイルスパッケージングミックス（Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ Ｐａｃｋａｇｉｎｇ Ｍｉｘ）（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ；ｐＬＶ－ＰＡＣＫ）を使用する標準的な生成プロトコルを用いて実施した。次に、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞を、ｐＬＶＸ－ＴＲＥ３Ｇ（Ｔａｋａｒａ；６３１１９３）においてヒトＴＲＩＦ ＯＲＦ（アクセッション番号：ＮＭ＿１８２９１９）を発現するレンチウイルスで形質導入した。これに代わり、又は加えて、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞は、マウスＲＩＰＫ３ ＯＲＦ（アクセッション番号：ＮＭ＿０１９９５５．２）を発現するベクターを用いて形質導入した；ＲＩＰＫ３発現は、ｐＬＶ－ＥＦ１ａ－ＭＣＳ－ＩＲＥＳ－Ｈｙｇ（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ；ｃＤＮＡ－ｐＬＶ０２）の構成性ＰＧＫプロモーター誘導体によって駆動した。両方のＯＲＦは、Ｂ－Ｂリガンド（Ｔａｋａｒａ；６３５０５９）に結合すると、オリゴマー化する２つのタンデムＤｍｒＢドメインの付加により修飾して、Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（１μＭ）を用いたタンパク質活性化によってオリゴマー化を促進することができるようにした。最初の検査の後、Ｂ／Ｂを用いた二量体化は、ＴＲＩＦ構築物の活性に実質的な影響を及ぼさなかったが、ＲＩＰＫ３発現構築物の活性を促進した。従って、その後のすべての実験において、Ｂ／Ｂ誘導による二量体化は、ＴＲＩＦを含むどの構築物を活性化するためにも使用せず、ＲＩＰＫ３を発現する単一構築物を活性化するためだけに使用した。このように、実験条件がすべての群で同等であることを確実にするために、Ｂ／Ｂ二量体化剤を実験セットアップに含めたが、これは、ＴＲＩＦ誘導による活性に影響を及ぼさなかった。例えば、図３Ｂに示され、且つ実施例６に記載されるように、二量体化剤の添加は、前述した操作ＣＴ－２６細胞からの細胞培養物で処置したマクロファージのＩＲＦ活性にほとんど影響を及ぼさなかった。
ＣＴ－２６マウス大腸癌細胞（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ－２６３８）を、ｐＬＶＸ－Ｔｅｔ３Ｇベクター（Ｔａｋａｒａ；６３１３５８）由来のレンチウイルスで形質導入し、ヒトＰＧＫプロモーターによる安定したＴｅｔ－Ｏｎトランスアクチベーター発現を達成した。Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、遺伝子発現は、ドキシサイクリンによって誘導可能である。すべてのレンチウイルス形質導入は、２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ；ＣＲＬ－３２１６）及びレンチウイルスパッケージングミックス（Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ Ｐａｃｋａｇｉｎｇ Ｍｉｘ）（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ；ｐＬＶ－ＰＡＣＫ）を使用する標準的な生成プロトコルを用いて実施した。次に、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞を、ｐＬＶＸ－ＴＲＥ３Ｇ（Ｔａｋａｒａ；６３１１９３）においてヒトＴＲＩＦ ＯＲＦ（アクセッション番号：ＮＭ＿１８２９１９）を発現するレンチウイルスで形質導入した。これに代わり、又は加えて、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞は、マウスＲＩＰＫ３ ＯＲＦ（アクセッション番号：ＮＭ＿０１９９５５．２）を発現するベクターを用いて形質導入した；ＲＩＰＫ３発現は、ｐＬＶ－ＥＦ１ａ－ＭＣＳ－ＩＲＥＳ－Ｈｙｇ（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ；ｃＤＮＡ－ｐＬＶ０２）の構成性ＰＧＫプロモーター誘導体によって駆動した。両方のＯＲＦは、Ｂ－Ｂリガンド（Ｔａｋａｒａ；６３５０５９）に結合すると、オリゴマー化する２つのタンデムＤｍｒＢドメインの付加により修飾して、Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（１μＭ）を用いたタンパク質活性化によってオリゴマー化を促進することができるようにした。最初の検査の後、Ｂ／Ｂを用いた二量体化は、ＴＲＩＦ構築物の活性に実質的な影響を及ぼさなかったが、ＲＩＰＫ３発現構築物の活性を促進した。従って、その後のすべての実験において、Ｂ／Ｂ誘導による二量体化は、ＴＲＩＦを含むどの構築物を活性化するためにも使用せず、ＲＩＰＫ３を発現する単一構築物を活性化するためだけに使用した。このように、実験条件がすべての群で同等であることを確実にするために、Ｂ／Ｂ二量体化剤を実験セットアップに含めたが、これは、ＴＲＩＦ誘導による活性に影響を及ぼさなかった。例えば、図３Ｂに示され、且つ実施例６に記載されるように、二量体化剤の添加は、前述した操作ＣＴ－２６細胞からの細胞培養物で処置したマクロファージのＩＲＦ活性にほとんど影響を及ぼさなかった。
【0398】
表示されるタノトランスミッションモジュールを発現するＣＴ２６マウス大腸癌細胞を播種し、その後、ドキシサイクリン（１ｍｇ／ｍＬ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、０２１９８９５５２５）及びＢ／Ｂホモ二量体化剤（１μＭ）で２４ｈ処置することにより、オリゴマー化を介して発現及びタンパク質活性化を促進した。相対細胞生存率は、製造業者の指示に従い、ＲｅａｌＴｉｍｅ－Ｇｌｏ ＭＴ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ９７１２）を用いて、処置後２４ｈ時点で決定し、相対発光単位（ＲＬＵ）により測定された相対生存率を示すグラフを作成した。
【0399】
図２Ａに示すように、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ３、又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３の誘導された発現及びオリゴマー化は、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ（Ｔｅｔ３Ｇ）親細胞株と比較して細胞生存率の低下を誘導した。これらの結果は、癌細胞における１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドの発現が癌細胞の生存率を低下させることを実証している。
【0400】
別の実験では、ＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ３、又はＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３を発現する癌細胞におけるガスダーミンＥ（ＧＳＤＭＥ）の発現の影響を調べた。ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞を、ｐＬＶ－ＥＦ１ａ－ＭＣＳ－ＩＲＥＳ－Ｐｕｒｏベクター（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ）にクローニングしたヒトＧＳＤＭＥ（ＮＭ＿００４４０３．３）で形質導入した。また、前述したＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ－ＴＲＩＦ及びＣＴ２６－Ｔｅｔ３Ｇ－ＴＲＩＦ－ＲＩＰＫ３細胞にもＧＳＤＭＥを形質導入した。これらの細胞を播種した後、ドキシサイクリン（１ｍｇ／ｍＬ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、０２１９８９５５２５）で２４ｈ処置することにより、発現を促進した。相対細胞生存率は、製造業者の指示に従い、ＲｅａｌＴｉｍｅ－Ｇｌｏ ＭＴ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ９７１２）を用いて、処置後２４ｈ時点で決定し、相対発光単位（ＲＬＵ）により測定された相対生存率を示すグラフを作成した。これらの実験には、Ｂ／Ｂ二量体化剤を使用しなかった。
【0401】
図２Ｂに示されるように、ＴＲＩＦ、及びＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３の発現は、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ親細胞株と比較して細胞生存率を低下させ、図２Ａに提示される結果が確認された。さらに、ＧＳＤＭＥ発現細胞におけるＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３タンパク質発現の誘導も、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ親細胞と比較して細胞生存率を低下させた。まとめると、これらの結果は、癌細胞におけるＴＲＩＦ、ＲＩＰＫ３及びＧＳＤＭＥなどの１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドの発現が、癌細胞の生存率を低下させることを実証している。
【0402】
実施例６．１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドを発現するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞由来の細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）がマクロファージのインターフェロン刺激遺伝子（ＩＳＧ）レポーターに及ぼす影響
Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ，Ｊ７７４－ＮＦＩＳ）を９６ウェル培養プレートに１００，０００細胞／ウェルで播種した。Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞は、２つの誘導性レポーター構築物の安定な組込みにより、マウスＪ７７４．１マクロファージ様細胞株から誘導した。これらの細胞は、５コピーのＮＦ－κＢ転写応答エレメントと３コピーのｃ－Ｒｅｌ結合部位に融合したＩＦＮ－β最小プロモーターの制御下で分泌された胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポーター遺伝子を発現する。Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞はまた、５つのインターフェロン刺激応答エレメント（ＩＳＲＥ）と一緒にＩＳＧ５４最小プロモーターの制御下で、分泌されたルシフェラーゼをコードするルシア（Ｌｕｃｉａ）ルシフェラーゼ遺伝子も発現する。その結果、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞は、ＳＥＡＰの活性を評価することによりＮＦ－κＢ経路と、ルシア・ルシフェラーゼの活性をモニターすることによりインターフェロン制御因子（ＩＲＦ）経路の同時研究を可能にする。
Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ，Ｊ７７４－ＮＦＩＳ）を９６ウェル培養プレートに１００，０００細胞／ウェルで播種した。Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞は、２つの誘導性レポーター構築物の安定な組込みにより、マウスＪ７７４．１マクロファージ様細胞株から誘導した。これらの細胞は、５コピーのＮＦ－κＢ転写応答エレメントと３コピーのｃ－Ｒｅｌ結合部位に融合したＩＦＮ－β最小プロモーターの制御下で分泌された胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポーター遺伝子を発現する。Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞はまた、５つのインターフェロン刺激応答エレメント（ＩＳＲＥ）と一緒にＩＳＧ５４最小プロモーターの制御下で、分泌されたルシフェラーゼをコードするルシア（Ｌｕｃｉａ）ルシフェラーゼ遺伝子も発現する。その結果、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞は、ＳＥＡＰの活性を評価することによりＮＦ－κＢ経路と、ルシア・ルシフェラーゼの活性をモニターすることによりインターフェロン制御因子（ＩＲＦ）経路の同時研究を可能にする。
【0403】
細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）を含む培養培地は、上記の実施例５に記載したようにＣＴ－２６マウス大腸癌細胞から作製した。実施例５に記載したタノトランスミッションモジュールに加えて、完全Ｔｅｔ誘導性プロモーターを含む追加のＲＩＰＫ３構築物も評価した。このＴｅｔ誘導性ＲＩＰＫ３は、図３Ａで「ＲＩＰＫ３」と称され、ＰＧＫプロモーターを含むＲＩＰＫ３構築物（実施例５に記載）は、図３Ａで「ＰＧＫ＿ＲＩＰＫ３」と称される。
【0404】
また、免疫刺激性タノトランスミッションなしで、細胞死を誘導すると予測される対照も加えた。これらの対照構築物は、ｉ）ヒトＢｉｄのＣ末端カスパーゼ切断（ＮＭ＿１９７９６６．３）、ｉｉ）ヒトＧＳＤＭＤのＮ末端カスパーゼ切断（ＮＭ＿００１１６６２３７．１）、ｉｉｉ）合成により二量体化可能な形態のヒトカスパーゼ－８（ＤｍｒＢ－カスパーゼ－８）、又はｉｖ）ＤｍｒＢ－カスパーゼ－８及びヒトＧＳＤＭＥの両方（ＮＭ＿００４４０３．３）を発現する。次に、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞を、表示されるＣＴＦで２４ｈ刺激した。細胞培地を収集し、ＱＵＡＮＴＩ－Ｌｕｃ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ；ｒｅｐ－ｑｌｃ１）アッセイを用いて、ルシフェラーゼ活性を測定した。インターフェロン刺激応答エレメント（ＩＳＲＥ）プロモーター活性化を、対照細胞株ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇと比較してグラフ化した。
【0405】
図３Ａに示すように、調べたＣＴ－２６細胞株のうち、ＴＲＩＦを発現する細胞から収集した培地（単独で、又はＲＩＰＫ３と組み合わせて）のみが、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞においてＩＳＲＥ／ＩＲＦレポーター遺伝子活性化を誘導した。
【0406】
別の実験では、ガスダーミンＥ（ＧＳＤＭＥ）とＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３との組み合わせ発現の効果を調べた。ＣＴＦを含む培地は、実施例５に記載したように、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３を発現するＣＴ－２６細胞から、さらにはＴＲＩＦ＋ガスダーミンＥ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ガスダーミンＥを発現するＣＴ－２６細胞から作製した。図３Ｂに示すように、ＴＲＩＦ（ｉＴＲＩＦ）、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３（ｉＴＲＩＦ＿ｃＲ３）、ＴＲＩＦ＋ガスダーミンＥ（ｉＴＲＩＦ＿ｃＧＥ）、又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ガスダーミンＥ（ｉＴＲＩＦ＿ｃＲ３＿ｃＧＥ）を発現するＣＴ－２６細胞の培地は各々、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞においてＩＳＲＥ／ＩＲＦレポーター遺伝子活性化を誘導した。実施例５で論じたように、二量体化剤の添加は、ＩＳＲＥ／ＩＲＦレポーター遺伝子活性化にほとんど影響を及ぼさなかった。
【0407】
まとめると、これらの結果は、１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドを発現する癌細胞から産生されるＣＴＦが、免疫細胞における免疫刺激経路（即ち、ＩＲＦ経路）を活性化することを示している。
【0408】
実施例７．１つ又は複数のタノトランスミッションポリペプチドを発現するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞由来の細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）が、骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）に及ぼす影響
骨髄細胞は、ＧＭ－ＣＳＦが十分なＲＰＭＩ培地を用いて、８日にわたり樹状細胞に分化させた。２ｍＬ当たり４００，０００細胞を６ウェルプレートに播種した。８日目に、骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）を採取し、１００，０００細胞／ウェルを９６ウェルプレートに播種した。次いで、ＢＭＤＣを、実施例５に記載した操作ＣＴ－２６細胞由来のＣＴＦを含む培地で刺激した。２４時間時点で、刺激した細胞を採取し、細胞表面マーカーＣＤ８６、ＣＤ４０及びＰＤ－Ｌ１の発現をフローサイトメトリーによって測定し、平均蛍光強度（ＭＦＩ）をＴｅｔ３Ｇ対照と比較してグラフ化した。抗体の供給源は以下の通りであった：ＣＤ８６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０５０４２）；ＣＤ４０（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０２９１０）；ＰＤ－Ｌ１（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２４３１２）。細胞表面マーカーＣＤ８６、ＣＤ４０及びＰＤ－Ｌ１の発現は、樹状細胞の成熟を示す。
骨髄細胞は、ＧＭ－ＣＳＦが十分なＲＰＭＩ培地を用いて、８日にわたり樹状細胞に分化させた。２ｍＬ当たり４００，０００細胞を６ウェルプレートに播種した。８日目に、骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）を採取し、１００，０００細胞／ウェルを９６ウェルプレートに播種した。次いで、ＢＭＤＣを、実施例５に記載した操作ＣＴ－２６細胞由来のＣＴＦを含む培地で刺激した。２４時間時点で、刺激した細胞を採取し、細胞表面マーカーＣＤ８６、ＣＤ４０及びＰＤ－Ｌ１の発現をフローサイトメトリーによって測定し、平均蛍光強度（ＭＦＩ）をＴｅｔ３Ｇ対照と比較してグラフ化した。抗体の供給源は以下の通りであった：ＣＤ８６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０５０４２）；ＣＤ４０（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０２９１０）；ＰＤ－Ｌ１（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２４３１２）。細胞表面マーカーＣＤ８６、ＣＤ４０及びＰＤ－Ｌ１の発現は、樹状細胞の成熟を示す。
【0409】
図４に示すように、調べたＣＴ－２６細胞株のうち、ＴＲＩＦ（単独又はＲＩＰＫ３と組み合わせたいずれでも）を発現するように操作された細胞から採取した培養培地のみが、ＣＤ８６、ＣＤ４０、又はＰＤ－Ｌ１の細胞表面発現を増大した。これらの結果は、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦとＲＩＰＫ３の両方を発現するように操作されたＣＴ－２６細胞からのＣＴＦが、樹状細胞の成熟を誘導したことを示している。樹状細胞におけるＣＤ８６及びＣＤ４０の上方制御は、Ｔ細胞を活性化する能力の増加を示している。従って、結果は、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３を発現するように操作された癌細胞からのＣＴＦが樹状細胞の成熟を誘導し、Ｔ細胞を活性化する能力を高めることを示すものである。
【0410】
実施例８．タノトランスミッションポリペプチド発現が単独で又は抗ＰＤ１抗体との組み合わせで、大腸癌のマウスモデルにおける腫瘍増殖及び生存率に及ぼす影響。
実施例５に記載したＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３タノトランスミッションモジュールを担持するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞をトリプシン処置し、１×１０６細胞／ｍＬの無血清培地に再懸濁した。細胞をＢＡＬＢ／ｃマウスの右側皮下脇腹に注射（１００ｍＬ）した。ＣＴ－２６細胞注入後１１日目から１８日目まで、通常の飲料水にドキシサイクリン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ９８９１）を２ｍｇ／ｍｌで補給して、タノトランスミッションポリペプチド発現を誘導し、１１日目から１８日目まで、Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（Ｔａｋａｒａ、カタログ番号６３２６２２）２ｍｇ／ｋｇを毎日のＩＰ注射により投与した。抗ＰＤ１抗体（ＢｉｏＸｃｅｌｌ、カタログ番号ＢＰ０２７３）及びアイソタイプ対照を１４日目、１７日目及び２１日目に投与した。ＩＡＣＵＣガイドラインに従って腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は実験終了時にマウスを安楽死させた。
実施例５に記載したＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３タノトランスミッションモジュールを担持するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞をトリプシン処置し、１×１０６細胞／ｍＬの無血清培地に再懸濁した。細胞をＢＡＬＢ／ｃマウスの右側皮下脇腹に注射（１００ｍＬ）した。ＣＴ－２６細胞注入後１１日目から１８日目まで、通常の飲料水にドキシサイクリン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ９８９１）を２ｍｇ／ｍｌで補給して、タノトランスミッションポリペプチド発現を誘導し、１１日目から１８日目まで、Ｂ／Ｂホモ二量体化剤（Ｔａｋａｒａ、カタログ番号６３２６２２）２ｍｇ／ｋｇを毎日のＩＰ注射により投与した。抗ＰＤ１抗体（ＢｉｏＸｃｅｌｌ、カタログ番号ＢＰ０２７３）及びアイソタイプ対照を１４日目、１７日目及び２１日目に投与した。ＩＡＣＵＣガイドラインに従って腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は実験終了時にマウスを安楽死させた。
【0411】
図５Ａに示すように、ＴＲＩＦ単独（ＣＴ２６－ＴＦ）の発現は、ＣＴ－２６－Ｔｅｔ３Ｇ対照（Ｔｅｔ３Ｇ－アイソタイプ対照）及びＣＴ２６－ＲＩＰＫ３細胞（ＣＴ２６－Ｐ＿Ｒ３）と比較して生存率を増加させ、ＴＲＩＦとＲＩＰＫ３（Ｔｒｉｆ＿ＲＩＰＫ３－アイソタイプ対照）の組み合わせでさらに大きな利益が観察された。図５Ｂに示すように、ＴＲＩＦを有するＣＴ－２６細胞（ＣＴ２６－ＴＦ）又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３（ＴＲＩＦ＿ＲＩＰＫ３）を有するＣＴ－２６細胞を注射したマウスの生存率は、抗ＰＤ－１抗体による処置によって増強され、これらの処置群はいずれも１００％の生存率を示した（線が重なっている）。
【0412】
別の実験では、実施例６に記載したＴＲＩＦ＋ＧＳＤＭＥ及びＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ＧＳＤＭＥタノトランスミッションモジュールを有するＣＴ－２６マウス大腸癌細胞をトリプシン処置し、１×１０６細胞／ｍＬの無血清培地に再懸濁した。この実験にＢ／Ｂホモ二量体化剤は使用しなかった。細胞をＢＡＬＢ／ｃマウスの右側皮下脇腹に注射（１００ｍＬ）した。ＣＴ－２６細胞注射後１５日目から２１日目まで、マウスに６２５ｍｇ／ｋｇのドキシサイクリン塩酸塩（Ｅｎｖｉｇｏ ＴＤ．０１３０６）を補充したＴｅｋｌａｄ標準飼料を給餌した。ＩＡＣＵＣガイドラインに従って腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は実験終了時にマウスを安楽死させた。
【0413】
図５Ｃに示すように、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３と組み合わせたＧＳＤＭＥの発現は、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ－ＲＩＰＫ３をそれぞれ単独で発現する腫瘍を移植したマウスに比べて生存率をさらに高めた。
【0414】
実施例９．化学カスパーゼ阻害剤が、タノトランスミッションポリペプチドを発現するＵ９３７ヒト骨髄性白血病細胞に及ぼす影響
Ｕ９３７ヒト骨髄性白血病細胞及びＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞は、それぞれＡＴＣＣ及びＩｎｖｉｖｏｇｅｎから取得した。Ｕ９３７は骨髄性白血病細胞株である。ヒトタノトランスミッションポリペプチド（ｔＢｉｄ、Ｃａｓｐａｓｅ ８、ＲＩＰＫ３又はＴＲＩＦ）を発現するＵ９３７細胞を、実施例５及び６に記載の方法、並びに実施例５に記載のドキシサイクリン誘導性発現系を用いて作製した。
Ｕ９３７ヒト骨髄性白血病細胞及びＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞は、それぞれＡＴＣＣ及びＩｎｖｉｖｏｇｅｎから取得した。Ｕ９３７は骨髄性白血病細胞株である。ヒトタノトランスミッションポリペプチド（ｔＢｉｄ、Ｃａｓｐａｓｅ ８、ＲＩＰＫ３又はＴＲＩＦ）を発現するＵ９３７細胞を、実施例５及び６に記載の方法、並びに実施例５に記載のドキシサイクリン誘導性発現系を用いて作製した。
【0415】
ＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞は、ＮＦ－ｋＢ又はＩＲＦ経路いずれかの活性化時にレポータータンパク質を誘導するヒト単球細胞株である。これは、５コピーのＮＦ－κＢコンセンサス転写応答エレメントと３コピーのｃ－Ｒｅｌ結合部位に融合したＩＦＮ－β最小プロモーターによって駆動される分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポーター遺伝子を発現する。ＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞はまた、５つのＩＦＮ刺激応答エレメントと一緒に、ＩＳＧ５４最小プロモーターの制御下にあるＬｕｃｉａ遺伝子、即ち、分泌型ルシフェラーゼレポーター遺伝子を特徴とする。その結果として、ＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞は、ＳＥＡＰの活性のモニタリングによるＮＦ－ｋＢ経路、並びに分泌型ルシフェラーゼ（Ｌｕｃｉａ）の活性の評価によるＩＲＦ経路の同時研究を可能にする。
【0416】
馴化培地を作製するために、５００万個のＵ９３７－ｔｅｔ３Ｇ、Ｕ９３７－ｔＢｉｄ、Ｕ９３７－カスパーゼ８、Ｕ９３７－ＲＩＰＫ３又はＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞を１０ｃｍディッシュ内のＲＰＭＩ中に播種し、その後ドキシサイクリン（１μｇ／ｍＬ）で２４ｈ処置して発現を誘導した。Ｕ９３７－カスパーゼ８、Ｕ９３７－ＲＩＰＫ３、及びＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞培養物にＢ／Ｂホモ二量体化剤（１００ｎＭ）を添加し、オリゴマー化による発現及びタンパク質活性化を促進した。さらには、４μＭ Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ（汎カスパーゼ阻害剤）、１０μＭ ＧＳＫ８７２（ＲＩＰＫ３阻害剤）、又は両方の組み合わせで、Ｕ９３７－ＴＲＩＦ細胞をさらに処置した。細胞を２４時間インキュベートした後、馴化培地を回収し、滅菌濾過した。
【0417】
ＮＦ－ｋＢ又はＩＲＦレポーター発現に対するタノトランスミッションポリペプチドの効果を測定するために、１００，０００個のＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞／ウェルを１００μｌ容積の９６ウェル平底プレートに播種した。タノトランスミッションモジュールを発現するＵ９３７細胞から作製した１００μｌの馴化培地を各ウェルに添加した。２４時間のインキュベーション期間の後、２０μｌのＴＨＰ１－Ｄｕａｌ細胞培養上清を平底９６ウェル白色（不透明）アッセイプレートに移し、プレートリーダーで発光を読み取る直前に、５０μｌのＱＵＡＮＴＩ－Ｌｕｃアッセイ溶液を各ウェルに添加した。ＮＦ－ｋＢ活性を測定するために、２０μｌのＴＨＰ１－Ｄｕａｌ培養上清を平底９６ウェル透明アッセイプレートに移し、１８０μｌの再懸濁ＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ溶液を各ウェルに添加した。プレートを３７℃で１時間インキュベートし、プレートリーダーを用いて６５５ｎｍでＳＥＡＰレベルを測定した。
【0418】
図６Ａ及び６Ｂに示すように、カスパーゼ阻害剤（Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ）単独で、又はＲＩＰＫ３阻害剤（Ｑ－ＶＤ－Ｏｐｈ＋ＧＳＫ８７２）と組み合わせて処置したＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞からの細胞培養物によるＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞の処置は、ＮＦ－ｋＢ活性化及びＩＲＦ活性を大幅に増加させた。（図６Ａ～６Ｃにおいて、＋はドキシサイクリンで処置したＵ９３７細胞を示し、＋＋はドキシサイクリン及びＢ／Ｂホモ二量体で処置したＵ９３７細胞を示す）。ＲＩＰＫ３阻害剤単独で処置したＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞の細胞培地は、ＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞のＮＦ－ｋＢ活性化にほとんど影響を及ぼさなかったため、ＮＦ－ｋＢ活性化の増加が、カスパーゼ阻害によるものであることを示している。図６Ｂ及び６Ｃに示されるように、カスパーゼ阻害剤で処置しなかったＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞からの細胞培養培地によるＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ細胞の処置もまた、カスパーゼ阻害剤で処置したＵ９３７－ＴＲＩＦ細胞よりも程度は低いものの、ＩＲＦ活性を増加した。
【0419】
総合すると、これらの結果は、ＴＲＩＦを発現するヒト癌細胞から産生されるＣＴＦが、免疫細胞の免疫刺激経路（即ち、ＮＦ－ｋＢ経路及びＩＲＦ経路）を活性化すること、並びにカスパーゼ阻害がこの効果を高めることを実証するものである。
【0420】
実施例１０．カスパーゼ阻害剤タンパク質を含む組み合わせタノトランスミッションポリペプチドを発現させることによるＣＴ－２６マウス大腸癌細胞におけるタノトランスミッションの調節。
この実施例に記載される実験では、カスパーゼ阻害剤タンパク質の発現が、ＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３を発現する癌細胞におけるタノトランスミッションに及ぼす影響を調べた。
この実施例に記載される実験では、カスパーゼ阻害剤タンパク質の発現が、ＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３を発現する癌細胞におけるタノトランスミッションに及ぼす影響を調べた。
【0421】
実施例５に記載されるように、タノトランスミッションポリペプチドＴＲＩＦ及びＲＩＰＫ３を発現するＣＴ２６マウス大腸癌細胞を、以下のものをコードする遺伝子で形質導入した：（ｉ）デスドメインを有するヒトＦａｓ関連タンパク質のドミナントネガティブバージョン（ＦＡＤＤ；アクセッション番号ＮＭ＿００３８２４）；（ｉｉ）ヒト細胞ＦＬＩＣＥ様阻害性タンパク質（ｃＦＬＩＰ；アクセッション番号ＮＭ＿００１１２７１８４．４）；又は（ｉｉｉ）カスパーゼ活性を阻害することによりタノトランスミッションを調節することを目的とするカスパーゼのウイルス阻害剤（ｖＩＣＡ、ＨＣＭＶ遺伝子ＵＬ３６；アクセッション番号ＮＣ＿００６２７３．２）。ＦＡＤＤ－ＤＮ、ｃＦＬＩＰｓ及びｖＩＣＡを各々ｐＬＶ－ＥＦ１ａ－ＭＣＳ－ＩＲＥＳ－Ｐｕｒｏベクター（Ｂｉｏｓｅｔｔｉａ）にクローニングし、これを使用して、ＣＴ２６－ＴＲＩＦ－ＲＩＰＫ３発現細胞を形質導入した。
【0422】
これらの細胞を播種した後、発現を促進するために、ドキシサイクリン（１ｍｇ／ｍＬ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、０２１９８９５５２５）で２４ｈ処置した。Ｂ／Ｂホモ二量体化剤は本実験では使用しなかった。相対細胞生存率は、製造業者の指示に従い、ＲｅａｌＴｉｍｅ－Ｇｌｏ ＭＴ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ９７１２）を用いて、処置後２４ｈ時点で決定し、相対発光単位（ＲＬＵ）により測定された相対生存率を示すグラフを作成した。
【0423】
図７Ａに示すように、ＣＴ２６－ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３細胞におけるＦＡＤＤ－ＤＮ、ｃＦＬＩＰｓ又はｖＩＣＡのいずれの発現も、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３発現によって誘導される癌細胞の生存率の低下を減弱させた。しかし、ＣＴ２６細胞におけるｃＦＬＩＰｓ＋ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３又はｖＩＣＡ＋ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３の発現は、親株ＣＴ２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞株と比較して、ＴＲＩＦ－ＲＩＰＫ３単独よりもわずかに低い程度で、依然として癌細胞の生存率を低下させた。図７Ａを参照されたい。
【0424】
次に、上に記載したように、ＣＴ－２６マウス大腸癌細胞からＣＴＦを含む培地を作製した。続いて、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ（商標）細胞を、表示されるＣＴＦで２４ｈ刺激した。細胞培地を収集し、ＱＵＡＮＴＩ－Ｌｕｃ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ；ｒｅｐ－ｑｌｃ１）アッセイを用いて、ルシフェラーゼ活性を測定した。インターフェロン刺激応答エレメント（ＩＳＲＥ）プロモーター活性化を、対照細胞株Ｔｅｔ３Ｇと比較してグラフ化した。図７Ｂに示すように、ＴＲＩＦ又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３を発現するＣＴ２６細胞株から回収した培地は、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ細胞においてＩＲＦレポーター発現を誘導した。さらに、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３に加えてＦＡＤＤ－ＤＮ、ｃＦＬＩＰｓ又はｖＩＣＡを発現するＣＴ２６細胞由来の培地も、Ｊ７７４－Ｄｕａｌ細胞でＩＲＦレポーター活性化を誘導した。
【0425】
上記のＦＡＤＤ－ＤＮ、ｃＦＬＩＰｓ又はｖＩＣＡタノトランスミッションモジュールを有するＣＴ－２６－ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３マウス大腸癌細胞をトリプシン処置し、１×１０６細胞／ｍＬの無血清培地に再懸濁した。この実験では、Ｂ／Ｂホモ二量体化剤を使用しなかった。免疫正常ＢＡＬＢ／ｃマウスの右側皮下脇腹に細胞（１００μＬ）を注射した。ＣＴ－２６細胞注射後１５日目から２１日目まで、マウスに６２５ｍｇ／ｋｇのドキシサイクリン塩酸塩（Ｅｎｖｉｇｏ ＴＤ．０１３０６）を補充したＴｅｋｌａｄ標準飼料を給餌した。ＩＡＣＵＣガイドラインに従って腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は実験終了時にマウスを安楽死させた。
【0426】
図７Ｃに示すように、タノトランスミッションモジュール（即ち、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ＦＡＤＤ－ＤＮ、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ｃＦＬＩＰＳ、又はＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３＋ｖＩＣＡ）を発現するすべての腫瘍の増殖は、対照ＣＴ２６－Ｔｅｔ３Ｇ細胞と比較して低減した。特に、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３と組み合わせたＦＡＤＤ－ＤＮ又はｖＩＣＡの発現は、親ＣＴ２６－ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３細胞と比較して、腫瘍増殖をさらに低減した。興味深いことに、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３に加えてＦＡＤＤ－ＤＮ又はｖＩＣＡを含むタノトランスミッションモジュールは、インビボでの腫瘍増殖の抑制に最も効果的であったが、ＦＡＤＤ－ＤＮ＋ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３は、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３細胞と比較してインビトロでのＣＴ２６癌細胞の生存率にほとんど影響を与えなかったのに対し、ｖＩＣＡ＋ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３共発現は、ＴＲＩＦ＋ＲＩＰＫ３と比較してインビトロでの細胞殺傷を増強した。これらの結果は、タノトランスミッションモジュールによる癌細胞殺傷の規模に加えて、これらのモジュールの発現により癌細胞によって産生される明確な細胞ターンオーバー因子（ＣＴＦ）プロファイルも、インビボでの腫瘍細胞に対する免疫応答に寄与し得ることを示唆している。
【0427】
実施例１１．抗メソテリンＣＡＲ及び／又は誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦを発現するＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞における細胞死経路及び細胞ターンオーバー因子活性の評価
この実験の目的は、細胞死の様式に対する誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ発現の効果、及びｍｉｎｉＴＲＩＦが発現された細胞によって産生される細胞ターンオーバー因子の免疫刺激活性を決定することであった。
この実験の目的は、細胞死の様式に対する誘導性ｍｉｎｉＴＲＩＦ発現の効果、及びｍｉｎｉＴＲＩＦが発現された細胞によって産生される細胞ターンオーバー因子の免疫刺激活性を決定することであった。
【0428】
抗メソテリンＣＡＲ及び／又はｍｉｎｉＴＲＩＦを含む誘導性ペイロードを含有する、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞を、レンチウイルス形質導入アプローチを使用して調製した。ＣＡＲには、抗メソテリンｓｃＦｖ（ＳＳ１）、ＣＤ３ｚ細胞内シグナル伝達ドメイン、及びＣＤ２８又は４－１ＢＢを含む共刺激ドメインが含まれていた。ｍｉｎｉＴＲＩＦは、Ｔ細胞活性化誘導プロモーターＮＦ－ＡＴの転写制御下にあった。ＣＡＲ及びｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物の図を図８に記載する。全てのレンチウイルスは、実施例５に記載したように作製した。製造業者の指示に従い、ＴｒａｎｓＤｕｘ Ｍａｘ（Ｓｙｓｔｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ；ＬＶ６８０Ａ－１）を使用して、ＮＦ－ＡＴ／ｍｉｎｉＴＲＩＦ、４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む抗メソテリンＣＡＲ、又はＣＤ２８共刺激ドメインを含む抗メソテリンＣＡＲのいずれかを発現するレンチウイルスをＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞に形質導入した。ＮＦ－ＡＴ／ｍｉｎｉＴＲＩＦレンチウイルスで形質導入された細胞をピューロマイシンで選択し、安定したＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞を生成した。ＣＡＲメソテリン－ｂｂｚ＋ＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞及びＣＡＲメソテリン－２８ｚ＋ＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞を生成するために、安定したＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞株に、４－１ＢＢを含む抗メソテリンＣＡＲ又はＣＤ２８を含む抗メソテリンＣＡＲを発現するレンチウイルスを形質導入した。
【0429】
以下の細胞株を評価した。
【0430】
【表13】
【0431】
細胞を、９６ウェル平底細胞培養プレートに１００，０００細胞／ウェルで播種した。組換えヒトメソテリン－Ｆｃキメラタンパク質（０、３０、６２、１２５、２５０、５００ｎｇ／ｍｌ、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ Ｃａｔ＃５９３２０２）又はヒトＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーター（２５ｕｌ／ｍｌ、Ｓｔｅｍｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃａｔ＃１０９７１）を各ウェルに添加し、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で２４、４８、又は７２時間インキュベートした。ＣＤ３／ＣＤ２８アクチベーターは内因性Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を活性化するために使用され、一方、組換えメソテリンはＣＡＲを活性化するために使用された。各時点で、ＣＴＦを含有する培地をＴＨＰ１デュアルアッセイ用の細胞培養物から収集し、細胞を採取し、細胞生存率を評価するため、Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標）７８０（１：２０００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ＃６５－０８６５－１４）及びＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ＃８８－８００５－７４）で染色した。Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標）７８０は、死細胞を標識する。従って、ｅＦｌｕｏｒ（商標）７８０標識細胞のパーセンテージは、培養物中の総細胞死のパーセンテージを反映する。アネキシンＶ染色は、アポトーシス細胞死を示す。
【0432】
細胞死の様式に対するＣＡＲ及びｍｉｎｉＴＲＩＦの影響を調べるために、アポトーシス細胞集団に対する壊死細胞集団の比率を、Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ（商標）７８０と組み合わせたアネキシンＶ染色で分析した。壊死細胞集団は、アネキシンＶ－及びＶｉａｂｉｌｉｔｙ ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ７８０＋である細胞として定義され、アポトーシス細胞集団は、アネキシンＶ＋及びＶｉａｂｉｌｉｔｙ ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ７８０＋である細胞として定義される。
【0433】
様々なＣＡＲ Ｊｕｒｋａｔ細胞から収集したＣＴＦサンプルをＴＨＰ１デュアルアッセイで使用して、ＣＴＦの免疫原性を調べた。ＴＨＰ１デュアルレポーター細胞を９６ウェル平底プレートに１００，０００細胞／ウェルで播種した。ＣＴＦサンプルをＴＨＰ１デュアルレポーター細胞に１：１の比率で添加し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。次に、細胞培養培地を収集し、ＱＵＡＮＴＩ－Ｌｕｃアッセイ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を使用してＩＲＦレポーター発現（ルシフェラーゼ活性）を測定した。
【0434】
結果
図９Ａ～９Ｃに示すように、ＣＡＲ発現細胞は標的結合時に用量依存的に死滅し、細胞におけるｍｉｎｉＴＲＩＦペイロードの発現は細胞死の全体量を変化させなかった。
図９Ａ～９Ｃに示すように、ＣＡＲ発現細胞は標的結合時に用量依存的に死滅し、細胞におけるｍｉｎｉＴＲＩＦペイロードの発現は細胞死の全体量を変化させなかった。
【0435】
図１０Ａ～１０Ｃに示すように、ＣＡＲメソテリン－ｂｂｚ＋ＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞では、ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有しない対応する細胞（ＣＡＲメソテリン－ｂｂｚＪｕｒｋａｔ）と比較して、アポトーシス細胞に対する壊死細胞の比率が用量依存的に増加した。これは、ｍｉｎｉＴＲＩＦの誘導性発現がアポトーシスからネクローシスへの細胞死の様式の変化を促進することを示している。さらに、ＣＡＲメソテリン－２８ｚ＋ＴＳｍｉｎｉＴＲＩＦＪｕｒｋａｔ細胞では、４８時間及び７２時間の時点で、ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有しない対応する細胞（ＣＡＲメソテリン－２８ｚＪｕｒｋａｔ）と比較して、同様であるがより小幅な壊死性細胞死の増加が観察された。これらの結果は、ｍｉｎｉＴＲＩＦ発現がアポトーシス細胞死から壊死性細胞死への変化を促進したことをさらに示す。
【0436】
図１１Ａ～１１Ｃに示すように、ｍｉｎｉＴＲＩＦペイロードを発現するＣＡＲ Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞からのＣＴＦは、ＴＨＰ１デュアル細胞におけるＩＲＦレポーター発現を活性化したが、ｍｉｎｉＴＲＩＦ構築物を含有しないＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞からのＣＴＦは、バックグラウンドレベルのみのＩＲＦレポーター発現しか生じなかった。これらの結果は、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞におけるｍｉｎｉＴＲＩＦの発現により、これらの細胞によって産生されるＣＴＦの免疫刺激活性が増加したことを示す。さらに、ＩＲＦ活性に対する効果は、７２時間の時点で採取されたＣＴＦで処置されたＴＨＰ１細胞の方が高く、免疫刺激ＣＴＦのレベルが経時的に増加したことを示唆している。
【0437】
結論
ｍｉｎｉＴＲＩＦの誘導性発現は、アポトーシスから壊死への細胞死様式の変化を促進し、これらの細胞によって産生されるＣＴＦの免疫刺激活性を増加させた。
ｍｉｎｉＴＲＩＦの誘導性発現は、アポトーシスから壊死への細胞死様式の変化を促進し、これらの細胞によって産生されるＣＴＦの免疫刺激活性を増加させた。
【0438】
【表14-1】
【0439】
【表14-2】
【図1A-1B】
【図2A-2B】
【図3A】
【図3B】
【図4】
【図5A】
【図5B-5C】
【図6A】
【図6B-6C】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図8】
【図9A】
【図9B】
【図9C】
【図10A】
【図10B】
【図10C】
【図11A】
【図11B】
【図11C】
【配列表】
【国際調査報告】