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特表2024-525573加工された甲虫類幼虫を紫外線処理によりビタミンＤ３で富化する改善方法及び関連する食品粉末

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-07-12

(54)【発明の名称】加工された甲虫類幼虫を紫外線処理によりビタミンＤ３で富化する改善方法及び関連する食品粉末

(51)【国際特許分類】

A23L 33/10 20160101AFI20240705BHJP

A23L 33/155 20160101ALI20240705BHJP

A23L 5/30 20160101ALI20240705BHJP

A01K 67/033 20060101ALI20240705BHJP

【ＦＩ】

A23L33/10

A23L33/155

A23L5/30

A01K67/033 502

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024500279

(86)(22)【出願日】2022-06-15

(85)【翻訳文提出日】2024-01-11

(86)【国際出願番号】 FR2022051151

(87)【国際公開番号】W WO2023281177

(87)【国際公開日】2023-01-12

(31)【優先権主張番号】2107438

(32)【優先日】2021-07-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】FR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520420274

【氏名又は名称】ヌートリ’アース

(74)【代理人】

【識別番号】100113033

【弁理士】

【氏名又は名称】平山精孝

(72)【発明者】

【氏名】デフライゼ，ジェレミー

(72)【発明者】

【氏名】ドーミニー，トーマス

(72)【発明者】

【氏名】デスタイルレウアー，シャルル－アントワーヌ

【テーマコード（参考）】

4B018

4B035

【Ｆターム（参考）】

4B018LB10

4B018LE03

4B018MD23

4B018MD76

4B018ME02

4B018MF01

4B018MF04

4B018MF06

4B018MF07

4B018MF14

4B035LC16

4B035LE01

4B035LG41

4B035LP01

4B035LP22

4B035LP59

(57)【要約】

本発明は、少なくとも１つの光源が、加工された甲虫幼虫の方向にＵＶＢ型の紫外線を放射する間の光処理工程プを含む甲虫粉末の製造方法に関し、前記ＵＶＢ型の紫外線が、該粉末において８０μＷ／ｃｍ^２以上の放射照度を有する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

少なくとも1つの光源が、甲虫類幼虫の方向にＵＶＢ型の紫外線を放射する間の光処理工程を含む、甲虫類粉末の製造方法であって、
前記ＵＶＢ型の紫外線が、甲虫類粉末において８０μＷ／ｃｍ^２以上の放射照度を有し、かつ、前記甲虫類幼虫が、４０～２５０℃の間の温度、好ましくは、５０～１５０℃の間の温度で脱水され、それにより、殺虫された幼虫が、
２～１５％の水分、より好ましくは３～８％の水分、及び／又は
０．７未満の水分活性（ＡＷ）
を有し、かつ、殺虫された幼虫が、前記光処理前に粉砕されていてよいことを特徴とする、甲虫類粉末の製造方法。

【請求項2】

放射されるＵＶＢ光線の放射照度が、８０～１，０００μＷ／ｃｍ^２であることを特徴とする、請求項１記載の方法。

【請求項3】

放射されるＵＶＢ光線の放射照度が、好ましくは１５０～２５０μＷ／ｃｍ^２、より好ましくは１７０～２００μＷ／ｃｍ^２であることを特徴とする、請求項１又は２記載の方法。

【請求項4】

加工された幼虫が、１～１００ミリメートルの間の厚さを有する、請求項１～３のいずれか一つに記載の方法。

【請求項5】

加工された幼虫が、５～１５ミリメートルの間の厚さを有する、請求項４記載の方法。

【請求項6】

光処理工程の間に甲虫類幼虫の方向に前記少なくとも一つの光源により放射される紫外線が、
－ＵＶＢ型であり、かつ、波長が２８０ｎｍ～３２０ｎｍの間にある電磁放射線から成る、及び／又は
－ＵＶＡ型であり、かつ、波長が３２０ｎｍ～４００ｎｍの間にある電磁放射線から成る、請求項１～５のいずれか一つに記載の方法。

【請求項7】

光処理工程の間に、前記少なくとも一つの光源が、甲虫類幼虫から１～１００ｃｍ、好ましくは５～２０ｃｍの間の所定の距離に配置される、請求項１～６のいずれか一つに記載の方法。

【請求項8】

光処理工程の間に、前記少なくとも１つの光源が、１０秒間～２４時間の間の処理範囲に従って、加工された甲虫類幼虫の方向に紫外線を放射する、請求項１～７のいずれか一つに記載の方法。

【請求項9】

前記処理範囲が連続的又は累積的に達成される、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

光処理工程の全部又は一部の間に、加工された甲虫類幼虫が、１５～３５℃の間、好ましくは２２～２６℃の間の実質的に一定の温度を有する環境に維持される、請求項１～９のいずれか一つに記載の方法。

【請求項11】

光処理工程の全部又は一部の間に、加工された甲虫類幼虫が、２０～８０％の間の相対湿度の実質的に一定の湿度を有する環境に維持される、請求項１～１０のいずれか一つに記載の方法。

【請求項12】

甲虫類が、次の種、即ち、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ、Ａｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓから選ばれる、請求項１～１１のいずれか一つに記載の方法。

【請求項13】

請求項１～１２のいずれか一つに記載の製造方法の実施により得られることができる甲虫類粉末であって、１３０，０００ＩＵ／ＫｇのビタミンＤ３を含み、かつ、ＰＶ過酸化物価とＡＶアニシジン値とから計算されるＴＯＴＯＸ酸化指数、即ち、ＴＯＴＯＸ酸化指数＝（２×ＰＶ）＋ＡＶが２６以下であることを特徴とする、甲虫類粉末。

【請求項14】

人間又は動物の食品のための、請求項１３記載の甲虫類粉末の使用。

【請求項15】

前記粉末が栄養補助食品として使用される、請求項１４記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は食品産業の分野に関する。

【0002】

本発明の目的は、より正確には、甲虫類を含む食品粉末の製造に関する。

【0003】

本発明の目的の一つは、甲虫類幼虫に由来する粉末のビタミンＤ３での富化（ｒｅｎｒｉｃｈｉｓｓｅｍｅｎｔ）を改善することにある。

【0004】

従って、本発明は、とりわけ、食品産業において、及び、とりわけ、人間の食品、爬虫類の餌、動物の餌（ペットフード／ペットケア／栄養補助食品）又は魚の養殖のために非常に多くの用途を有する。

【背景技術】

【0005】

ビタミンＤ３は体のために重要な特性を有する。

【0006】

ビタミンＤ３は、本明細書においてはコレカルシフェロールを意味する。

【0007】

人間では、このビタミンＤ３は、とりわけ、カルシウム、及び、腸で吸収されるリンの標準血中濃度を維持することに関係している。それは、免疫系を強化し、かつ、認知機能を改善する。

【0008】

ビタミンＤ３は、また、人間及びペット、例えば、犬の骨及び骨格筋の維持にも不可欠な役割を果たしている。

【0009】

ビタミンＤ３は、例えば、高齢者の骨粗鬆症を予防するために、カルシウムに加えて使用される。

【0010】

爬虫類においては、ビタミンＤ３はカルシウムの最適な同化及び骨の石灰化を可能にする。

【0011】

今日、健康な成人の５０％がビタミンＤ３の欠乏に苦しんでいることが知られている。

【0012】

ビタミンＤ３の１日の必要量は、成人のために１５μｇであり、かつ、７０歳を超える人では２０μｇまで上昇し得る。

【0013】

従来、ビタミンＤ３を含む食品源は、とりわけ、魚の油、切り身、肝臓により、実質的に魚から得られている。しかし、魚は減少しつつある資源であり、それ故、ますます高価になりつつある。

【0014】

北方地衣から抽出されたビタミンＤ３又はラノリンから合成されたビタミンＤ３は、また、サプリメントの形態で見いだされ得る。

【0015】

このように、ビタミンＤ３に富んだ食品の量は減少している。ビタミンＤ３の需要に関する限り、それは猛烈に増加しつつある。

【0016】

従って、食品産業の関係者は、持続可能かつ合理的な方法で、このビタミンＤ３を製造することを可能にする解決策を見出すことに多大なエネルギーを注いでいる。

【0017】

本出願人に帰属する特許文献１は、先行技術として公知である。この文献は、甲虫類を含む、ビタミンＤ３に富んだ食品粉末の製造を提案している。

【0018】

この文献においては、より詳細には、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ又はＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓ型の幼虫の成長段階の間の紫外線処理、いわゆるＵＶ処理が提案されている。該幼虫の成長段階の間のこのようなＵＶ処理が、ビタミンＤ３の有意な合成を可能とする。

【0019】

実際、特許文献１において提案された富化技術により得られた結果から、ＵＶ処理なしでは、該幼虫は、ビタミンＤ３を殆ど又は全く含まない（乾燥重量で０～２μｇ／１００ｇ）のに対して、該幼虫の成長段階の間にＵＶ処理を伴うと、該幼虫においてビタミンＤ３の平均最大濃度が、乾燥重量で約５０μｇ／１００ｇで平均的に得られることが明らかにされている。従って、ビタミンＤ３に富んだこれらの生きた幼虫は、加工段階の後に、ビタミンＤ３に富んだ甲虫類粉末又は甲虫類幼虫を得ることを可能とする。

【0020】

しかしながら、本出願人は、産業的水準では、特許文献１で提案された解決策の実施は依然として複雑なままであると主張する。

【0021】

実際、この文献の技術的教示によれば、ＵＶ処理は、これらの幼虫の成長段階の間に生きた幼虫に対して直接実行される。

【0022】

このことは、飼育場の生産性を大きく損ない得る、かつ、ＵＶ処理方法の産業化を困難にし得るいくつかの問題を発生させる。

【0023】

本出願人は、第一に、生きた幼虫に対するＵＶ処理は、とりわけ、光源が生きた幼虫から２５ｃｍ以下の距離に配置されているとき、ＵＶ処理を伴わないときに、幼虫に観察される幼虫の死亡率よりも１０倍大きい幼虫の死亡率を発生させ得ると主張する。

【0024】

実際、試験によれば、光源から２５ｃｍの距離で１０日間ＵＶ処理（２５Ｗランプ、ＵＶＢインデックス２００）を受けた１２週齢の幼虫の死亡率が０．１％であるのに対し、この光処理を伴わないときの死亡率は０．０１％であることを示している。

【0025】

出願人は、第二に、このタイプのＵＶ処理を実行するために必要な表面積は相当なものであると主張する。

【0026】

幼虫の乾燥重量で５０μｇ／１００ｇのビタミンＤ３を合成するためには、２５ＷのＵＶＢランプ（ＵＶＢインデックス２００）を、幼虫が入れられている槽から２５ｃｍの距離に１０日間置かなければならない。この槽は、５６ｃｍ×３８ｃｍ×１７ｃｍの容積を有する。この構成により、ビタミンＤ３の合成率を最大にしながら、死亡率を最小にすることができる。

【0027】

それ故、上記の条件においては、１２５ｃｍ×２００ｃｍ×３０ｃｍの構造では、１０日毎に１０．５キログラムの生きた幼虫（又は３．７５キログラムの粉末）しか生産できない故に、時間に関して、また表面積に関しても、非常にコスト高である。

【0028】

このように、本出願人は、ビタミンＤ３に富んだ甲虫類粉末食品の製造の産業化にとって、先行技術の解決策は現在まで完全には満足できるものではないと主張する。製造コストを低減しつつ、加工された甲虫類幼虫におけるビタミンＤ３濃度を有意に高めることを可能にする信頼性の高い産業的解決策を見出すことは、実に興味深いことである。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0029】

【特許文献1】国際公開第２０１９／２２９３３２号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0030】

本発明は、上記状況を改善することを目的とする。

【0031】

本発明は、より詳細には、産業コストを制限しつつ、甲虫類粉末中のビタミンＤ３濃度を有意に増加させるための、産業レベルでの実施が容易な効率的な解決策を提案することによって、上記の種々の欠点を克服することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0032】

本発明の目的は、第１の態様によれば、少なくとも１つの光源が、加工された甲虫類幼虫の方向にＵＶＢ型の紫外線を放射する間の光処理工程を含む、ビタミンＤ３により富化された甲虫類粉末を製造する方法に関する。

【0033】

本発明によれば、ＵＶＢ型の紫外線は、前記粉末において８０μＷ／ｃｍ^２以上の放射照度を有する。

【0034】

このような８０μＷ／ｃｍ^２以上の放射照度を持つＵＶＢ光線を放射することにより、ＵＶ処理の期間を著しく短縮しでき、かつ、ビタミンＤ３濃度の驚くべき増加を得ることができることが観察された。

【0035】

このように照射時間を短縮することにより、該方法を最適化して、そのコストを低減し、かつ、その産業化を促進することを可能とする。

【0036】

好ましくは、放射されるＵＶＢ光線の放射照度は８０～１，０００μＷ／ｃｍ^２の間である。好ましくは、放射されるＵＶＢ光線の放射照度は、１５０～２５０μＷ／ｃｍ^２の間である。好ましくは、放射されるＵＶＢ光線の放射照度は１７０～２００μＷ／ｃｍ^２の間である。

【0037】

ＵＶ前処理工程（加工）：
ここで、加工された幼虫とは、少なくとも殺虫処置を受けた甲虫類幼虫を意味する。

【0038】

有利には、本発明に従う方法は、光処理工程の前に、前記幼虫の殺虫を含む甲虫類幼虫を加工する工程を含む。好ましくは、該加工工程は、幼虫期の甲虫類に実行される。

【0039】

第１の選択肢によれば、この殺虫は、冷温処理によって実行される。冷温処理とは、例えば、甲虫類幼虫を４℃未満の温度に１０分間を超える時間にて暴露することを意味する。

【0040】

第２の選択肢によれば、この加工工程は、高温処理によって実施される。高温処理とは、例えば、甲虫類幼虫を水中で１５秒間を超える時間にて４０℃を超える温度に暴露すること（湯通し）、又は、加熱空気で３０分間を超える時間にて暴露することを意味する。

【0041】

特定の実施態様においては、殺虫工程の間に、幼虫を５０～１２０℃の間の温度、好ましくは、８５～１１０℃の間の温度、更により好ましくは、９０～１００℃の間の温度を有する水中に置くことができる。これは、また、湯通しとも呼ばれる。

【0042】

このような湯通しによる殺虫技術は効率的であることが分かり、かつ、甲虫類の栄養特性を保持し、かつ、幼虫の細菌負荷を低減できる。

【0043】

好ましくは、この湯通しは、３０秒～１０分の間、好ましくは、１～５分の間の湯通し時間にて実行される。

【0044】

第３の選択肢によれば、殺虫工程は、また、甲虫類幼虫をマイクロ波に、例えば、少なくとも１０秒間曝露することによっても実行されることができる。

【0045】

有利には、加工工程は、殺虫後に、０．７未満の該粉末の水分活性を得ることを目的とする脱水（又は調理）工程を含む。

【0046】

この脱水のために、マイクロ波処理を提供することができる。マイクロ波処理とは、甲虫類幼虫をマイクロ波に、例えば、少なくとも１０秒間暴露することを意味する。

【0047】

この脱水のために、あるいは又は加えて、殺虫された幼虫の熱処理を施すこともまた可能である。

【0048】

この脱水のための幼虫の熱処理の間に、殺虫された幼虫は、従って、４０～２５０℃、好ましくは５０～１５０℃の環境に、好ましくは１時間～２４時間の処理時間で配置され、それにより、殺虫された幼虫は、
－２～１５％の水分、より好ましくは３～８％の水分、及び／又は
－０．７未満の水分活性（ＡＷ）
を有する。

【0049】

好ましくは、熱処理の間、加工された幼虫は、１～１００ミリメートル、好ましくは５～１５ミリメートルの間の厚さに配置される。

【0050】

任意的に、加工された幼虫は、粉砕及び／又は圧搾を受けることができる。

【0051】

好ましくは、加工工程は、殺虫後、甲虫類粉末を得るために幼虫を粉砕することを含む。

【0052】

ここで、脱水後の幼虫の粉砕により、ＵＶ処理後のビタミンＤ３の合成性能を改善することができることに留意されたい。しかしながら、脱水後のこの工程は任意のままである。

【0053】

脱水及び粉砕後、甲虫類粉末が得られる。

【0054】

甲虫類粉末とは、例えば、
－乾燥熱加工及び粉砕を受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの全幼虫；
－又は、乾燥熱加工及び粉砕を受けたＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓの全幼虫；
－又は、乾燥熱加工及び粉砕を受けたこれら２種の幼虫の混合物；
－又は、予め圧搾加工を受け、次いで、乾燥熱加工及び粉砕を受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの全幼虫の画分；
－又は、予め圧搾加工を受け、次いで、乾燥熱加工及び粉砕を受けたＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓの全幼虫の画分；
－又は、予め圧搾加工を受け、次いで、乾燥熱加工及び粉砕を受けたこれら２種の幼虫の画分の混合物；
のいずれかから成る乾燥粉末（ＡＷ＜０．７）を意味する。

【0055】

特定の実施態様において、該加工工程は、排泄物又は可能性のある食物残渣のような残留物を除去するための幼虫の第一のふるい分けを含む。しかし、このようなふるい分けは任意である。これは、殺虫前に幼虫を浄化するという単純な目的を有する。

【0056】

好ましくは、加工工程は２４～４８時間の絶食を含む。このような絶食により、新たな排泄物の出現を回避する。従って、このような絶食は、本発明の文脈において実施することは任意である。

【0057】

任意的に、該絶食工程の後に第２のふるい分けが続けられる。

【0058】

有利には、加工工程は、殺虫の前に、－１８℃～＋４℃の間の低温での気絶処理を含む。

【0059】

好ましくは、低温での気絶処理工程は、１～５分間の気絶処理時間で実施される。殺虫は気絶処理なしで実行され得る。このような気絶処理は、従って、本発明の文脈において実施は任意である。

【0060】

ＵＶ処理工程（ビタミンＤ３の合成）：
有利には、光処理工程の間に少なくとも１つの光源により、加工された甲虫類幼虫の方向に放射される紫外線は：
－ＵＶＢ型であり、かつ、波長が２８０ｎｍ～３２０ｎｍの間にある電磁放射線から成る、及び／又は
－ＵＶＡ型であり、かつ、波長が３２０ｎｍ～４００ｎｍの間にある電磁放射線から成る。

【0061】

好ましくは、光処理工程の間、少なくとも１つの光源が、甲虫類幼虫から約１～１００ｃｍの間、好ましくは約５～２０ｃｍの間の所定の距離に配置されることが意図される。

【0062】

ＵＶ光源の強度は、光源から遠ざかるにつれて減少する。合成されるビタミンＤ３の量は、単位時間当たりに受けたＵＶＢの量に依存する。有利には、少なくとも１つの光源は、１３～１２５ワットの間、好ましくは２０～５０ワットの間の放射電力を有する。

【0063】

有利には、光処理工程の間に、少なくとも1つの光源が、１０秒間～２４時間の間、好ましくは、１～７分間、より好ましくは、２～５分間の処理範囲によって、加工された甲虫類幼虫の方向に紫外線を放射することが意図される。有利には、この処理範囲は連続的又は累積的に達成される。

【0064】

ここで、３分間のＵＶ処理は、例えば、３分間に亘って連続的に、又は、例えば、数分間の停止期間によって間隔を隔てた、各１分間の継続的な３つの期間によって実施され得ることが理解される。有利には、光処理工程の全部又は一部の間、加工された甲虫類幼虫は、１５～３５℃の間、好ましくは２２～２６℃の間の実質的に一定の温度を有する環境に維持されることが意図される。

【0065】

ビタミンＤ３の合成は、２０℃を超える温度の存在下で最適化される。

【0066】

本発明の目的は、第二の態様によれば、上記の製造方法を実施することによって得られる甲虫類粉末に関する。

【0067】

本発明の目的は、第三の態様によれば、上記の甲虫類粉末の人間又は動物の食品への使用に関する。好ましくは、該粉末は原料又は栄養補助食品として使用される。他の有利な用途は、例えば、爬虫類用又は魚類用の餌として可能である。

【0068】

図面
本発明の他の特徴及び利点は、何ら限定性のない、その例示的な実施態様を示す添付された図１から図４Ａ－４Ｄを参照し、下記の説明から明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0069】

【図1】図１は、照射時間８時間のＵＶ光処理を受けた甲虫類幼虫のいくつかの試料のビタミンＤ３濃度を示すグラフである。

【図2】図２は、ＵＶ光処理を受けた甲虫類幼虫のいくつかの試料のビタミンＤ３濃度の変化を時間の関数として示すグラフである。

【図3】図３は、特定のＵＶＢ放射照度を有するＵＶ光源を照射した甲虫類粉末のいくつかの異なる試料のビタミンＤ３濃度の経時変化を示すグラフである。

【図4A】図４Ａは、ＵＶＢ処理時間及びＵＶＢ放射照度レベルの関数としての甲虫類粉末の酸化指標の変化の第１の例示的実施態様を示すグラフを含む。

【図4B】図４Ｂは、ＵＶＢ処理時間及びＵＶＢ照射レベルの関数としての甲虫類粉末の酸化指標の変化の第２の例示的実施態様を示すグラフを含む。

【図4C】図４Ｃは、ＵＶＢ処理時間及びＵＶＢ照射レベルの関数としての甲虫類粉末の酸化指標の変化の第３の例示的実施態様を示すグラフを含む。

【図4D】図４Ｄは、ＵＶＢ処理の持続時間及びＵＶＢ照射レベルの関数としての甲虫類粉末の酸化指標の変化の第４の例示的実施態様を示すグラフを含む。

【発明を実施するための形態】

【0070】

次に、ビタミンＤ３に富む甲虫類粉末の製造の例示的な実施態様を、図１から図４Ａ－４Ｄを併せて参照して以下に説明する。

【0071】

念のため、ここで説明する粉末製造は、甲虫類、そしてとりわけ、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ及び/又はＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓ型の甲虫類を含む粉末中のビタミンＤ３の濃度を有意に増加させる技術を開発することを目的としている。特許文献１で提案されているような、生きた甲虫類（例えば、新鮮な甲虫類幼虫）にＵＶ処理を施す技術とは反対に、本発明の基本概念の１つは、８０μＷ／ｃｍ^２以上の放射照度を有するＵＶＢ光線を加工された幼虫に放射することから成るＵＶ処理を実行することである。

【0072】

ここで、加工された幼虫とは、少なくとも殺虫を受けた甲虫類幼虫を意味する。

【0073】

ここに記載され、かつ、種々の実験で使用された実施例においては、次の種、即ち、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ及び／又はＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓから選ばれた幼虫が使用される。

【0074】

ここに記載されていない他の実験では、他の種を用いて実行され、かつ、同等の結果を示すことを理解されたい。

【0075】

本発明はＵＶ処理（及び付随的に加工段階）に関するものであり、養殖以前の段階は本発明の一部ではない故に、幼虫の成長段階は、本明細書には記載されていないことに留意されたい。

【0076】

加工段階：
本発明の特定の実施態様において、加工段階は以下の手法で実行される。

【0077】

成長６週目から１４週目の間、より好ましくは、成長１０週目から１３週目の間に、幼虫がふるい掛けされて排泄物が除去される。次いで、ふるい掛けされた幼虫は、プラスチック槽に入れられて、２４～４８時間絶食させられる。絶食後、該幼虫は再びふるい掛けされて、排泄物が除去される。該幼虫は８５℃～１００℃の間の水中に入れられ、１～４分間殺虫される。これを高温殺虫と呼ぶ。この加工の間、殺虫の直前に－１８℃～＋４℃の間の低温で数分間、気絶処理する工程が更に行われる。殺虫後、該幼虫は、５０～１５０℃の間の温度で、使用された温度に従って１時間～２４時間の時間で熱処理を受ける。

【0078】

得られた幼虫は、２～１５％の間の水分、より好ましくは３～８％の間の水分、及び、０．９未満、より好ましくは０．７未満の水分活性を備える。

【0079】

粉砕段階が実行され得る。術語粉末は、ここでは、幼虫期又は蛹期において、予め熱処理を受けた昆虫全体、又は、これらの昆虫の形態的部分のみを３ミリメートル未満の要素に縮小したものを含む。ここで、これはこの加工段階の特定の実施態様の説明であることを理解されたい。

【0080】

このような実施形態により、良好な性能を伴う結果を得ることができる。しかしながら、当業者であれば、甲虫類幼虫を加工するための他の実施態様を想定できることを理解されたい。

【0081】

また、粉末製造業者は、必ずしも、この殺虫段階を実施するわけではなく、かつ、既に加工された（即ち、殺虫された）甲虫類幼虫を彼らに納入する供給業者、甲虫類農家から購入することができることにもここで留意されたい。この場合、粉末製造業者は、粉末にビタミンＤ３を富化する富化（即ち、ＵＶ処理）段階を直接実行することになる。

【0082】

これらの理由のために、上記加工の実施例は純粋に例示であり、かつ、本発明の不可欠な部分ではないことを理解されたい。

【0083】

－第１シリーズの試験：
ＵＶ処理段階：

【0084】

この実施例においては、加工された幼虫が利用できる。この実施例では、これらの加工された幼虫は、粉末に粉砕された脱水された幼虫全体、又は、粉砕されていない脱水された幼虫全体の形態である。この実施例においては、これらの加工された幼虫に、本発明の特徴であるＵＶ処理を施すことが意図されている。

【0085】

この実施例においては、このＵＶ処理工程は、特定の部屋で実行される。本発明の例示的な実施態様において、この部屋は、
１５～３５℃、好ましくは２２～２６℃の間の実質的に一定の温度；及び
２０～８０％、好ましくは３０～４０％の相対湿度の実質的に一定の湿度
を有する環境に、加工された甲虫類を維持することを可能にする環境条件に維持されている。

【0086】

該環境パラメーター（温度及び湿度）を制御管理することにより、ビタミンＤ３の合成においてより良好な収率を得ることができる。

【0087】

しかし、当業者であれば、他の同様の環境条件を想定することができる。

【0088】

この実施例においては、ＵＶ処理は、２分～７２時間の間で連続的手法において続けられる。この処理期間を更に短縮することが可能であることに留意されたい。

【0089】

ここに記載された実施例においては、このように、ＵＶ処理によって、加工された甲虫類幼虫をビタミンＤ３で富化することが求められている。

【0090】

このようなＵＶ処理は、加工された甲虫類幼虫の方向に紫外線を放射する紫外線源タイプ（即ち、ＵＶ光源）の少なくとも１つの光源を与える。好ましくは、該ＵＶ光源は、甲虫類粉末又は甲虫類全体の鉛直上方の位置に維持される。

【0091】

この実施例においては、ＵＶ光源によって甲虫類幼虫の方向に放射される紫外線は、
－ＵＶＢ型であり、かつ、波長が２８０ｎｍ～３２０ｎｍの間にある電磁放射から成る、及び／又は
－ＵＶＡ型であり、かつ、波長が３２０ｎｍ～４００ｎｍの間にある電磁放射から成る。

【0092】

ここで、可視域の光の放射は、ビタミンＤ３の合成に影響を及ぼさないことに留意されたい。

【0093】

ここに記載された実施例においては、ＵＶ光源は、光処理段階の間に、甲虫類幼虫から約２ｃｍ～１００ｃｍの間、好ましくは１０ｃｍ～３０ｃｍの間の所定の距離に配置される。

【0094】

この実施例においては、ＵＶ光源は１３～１２５ワットの間、好ましくは２０～５０ワットの間の放射電力を有する。

【0095】

この第一の実施例においては、ＵＶ光源により放射されるＵＶＢ光線は、約７５μＷ／ｃｍ^２に等しい放射照度を有する。

【0096】

任意的に、このＵＶ段階の後、４０～２００℃の間、好ましくは６０～１００℃の間で１時間～２４時間の第２の熱処理が実行されることができる。

【0097】

結果
実行された種々の研究及び試験の情況の中で得られた初期の結果は、特に興味深いものである。

【0098】

【表1】

１生きた幼虫及び加工された幼虫は、光源から２５cmに配置され、かつ、５７ｃｍ×３８ｃｍ×１７ｃｍの寸法を有する槽に入れられる。生きた幼虫及び加工された幼虫の厚さは最大１ｃｍである。

【0099】

これらの結果は、本明細書の残りの部分に詳細に記載されている他のシリーズの試験により確認されかつ詳細に述べられている。これらの追加の試験及びビタミンＤ３濃度に関する分析（図１及び２）は、この第１シリーズの試験が、特許文献１に記載された方法に対して、ビタミンＤ３の合成を１０倍まで増加させ得ることを示している。

【0100】

単位表面積当たり２．５倍の製造量増加
本発明はまた、単位表面積当たりの、加工された幼虫の製造量を増加させることを可能にする。

【0101】

念のため、特許文献１においては、生きている幼虫へのＵＶ処理のための光源は、好ましくは、とりわけ、過度の熱に関係する余りに大きい死亡率を回避するために、幼虫が入れられている槽の上方に２５～３５ｃｍの最適な距離で配置される。

【0102】

本発明により、死亡率への何らの影響を与えることなく、光源が１０～１５cmの間に配置され得る。

【0103】

特許文献１においては、光源及び生きた幼虫が入れられている槽を５日間に亘って収容する１２５ｃｍ×２００ｃｍ×３０ｃｍの寸法を有する構造により、乾燥重量で２４μｇ／１００ｇのビタミンＤ３を含む１０．５ｋｇの生きた幼虫又は３．７５ｋｇの幼虫粉末を製造することを可能にする。本発明では、同等の期間に亘って同一の構造により、照射時間に従って、乾燥重量で５０～５００μｇ／１００ｇのビタミンＤ３を含有する９．５ｋｇ、即ち、２．５倍超の幼虫粉末を製造することを可能にする。これは、光源と加工された幼虫との間の距離を縮めることで可能になったが、予め熱処理を受けた加工された幼虫に直接作用させることができるためでもある。調理又は脱水を受けなければならず、かつ、水の蒸発によって全質量の６５％が失われる生きた幼虫とは対照的に、この幼虫はもはや重量を失わない。

【0104】

光処理時間の１／１００の短縮
特許文献１で提案されている技術によれば、幼虫の乾燥重量で５０μｇ／１００ｇのビタミンに達するためには、１０日間の光処理が必要であった。

【0105】

この第１シリーズの試験後、１～２時間のＵＶ処理で、乾燥重量で５０μｇ／１００ｇの濃度が得られる。

【0106】

これらの結果は、下記で詳細に述べられる第２シリーズの試験で強調される。

【0107】

ビタミンＤ３の定量分析は、コフラック（Ｃｏｆｒａｃ）認定の独立研究所により実行された。定量は、セミ分取ＨＰＬＣに続いて、ＵＶ／ＤＡＤ検出器（２６５ｎｍ）を備えた逆相ＨＰＬＣによって実行された。

【0108】

他の試験もまた、幼虫の後加工ＵＶ処理の有利な効果を強調しかつ最適化するために実行された。

【0109】

－第２シリーズの試験：
この第２シリーズの試験の間では、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ型の幼虫のいくつかの試料Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３及びＳ４が利用可能である。各試料には相違がある（新鮮な幼虫、生きている幼虫、その他）。これらの分析は、ＥＮ１２８２１：２００９－０８規格に従って、コフラック認定の独立研究所により実行された。

【0110】

これらの試験の間、ＵＶ処理が、これらの試料Ｓ1、Ｓ２、Ｓ３及びＳ４の夫々に施され、かつ、これら試料のビタミンＤ３濃度が測定される。

【0111】

試料Ｓ１～Ｓ４のこれらの試験の結果及び分析は、図１に示されている。この図１は、より詳細には、８時間の照射後の夫々の試料Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３及びＳ４のビタミンＤ３濃度を示している。

【0112】

第１の試験（試料Ｓ１）は、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの生きた幼虫へのＵＶ処理に関する。

【0113】

この第１の試験においては、特許文献１で提案されているような、これらの生きた幼虫へのＵＶ処理が施される。唯一の相違は、ここでは、ビタミンＤ３の濃度は、予め冷凍された新鮮な幼虫において直接定量されることである。

【0114】

この第１の実施例においては、生きた幼虫の上方のＵＶランプの距離は２０ｃｍであり、以下の電球の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７４．１μＷ／ｃｍ^２；平均温度：３１．８℃を備える。

【0115】

図1によれば、この濃度は、新鮮な重量で３，６００ＩＵ／ｋｇであり、即ち、乾燥重量で約１０，２６０ＩＵ／ｋｇである。乾燥幼虫の濃度への換算は、新鮮な幼虫の濃度に２．８５を乗じて得られた（Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの幼虫は平均６５％の水分を含む）。ここで、ＩＵは国際単位、即ち、１ＩＵ＝０．０２５μｇのビタミンＤ３である。

【0116】

第２の試験（試料Ｓ２）はまた、生きた幼虫へのＵＶ処理に関する。この第２の試験においては、このように、これらの幼虫へのＵＶ処理が施される。

【0117】

ここで、幼虫の試料Ｓ２の上方のランプの距離は２０ｃｍであり、以下の電球の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７５μＷ／ｃｍ^２；平均温度：２９．４４℃を備える。

【0118】

これらの新鮮な幼虫は、次いで、特許文献１において提案されている技術に従って加工されて、幼虫期の間のＵＶ処理によりビタミンＤ３で富化された乾燥幼虫の粉末を得る。ここで、ビタミンＤ３の濃度は、脱水された乾燥幼虫について測定される。

【0119】

図１によれば、この試料Ｓ２のビタミンＤ３濃度は、乾燥重量で７，２００ＩＵ／ｋｇである。

【0120】

別の試験（試料Ｓ３）は、加工された（死んだ）幼虫、そしてより詳細には、未粉砕の乾燥幼虫へのＵＶ処理に関する。

【0121】

この試験においては、幼虫は予め殺虫されており、そして、次いで、本発明に従って提案されたＵＶ処理が施されることが理解される。従って、この試験は、本発明の特定の例示的な実施態様に相当する。

【0122】

この実施例においては、殺虫は、２分間１００℃の水浴に浸漬することにより実行されることに留意されたい。しかしながら、当業者であれば他の手法も可能である。

【0123】

この実施例においては、加工された幼虫は、６５℃で１４時間脱水された。次いで、加工された（しかし未粉砕の）幼虫が、該未粉砕の乾燥幼虫の上方２０cmの距離に配置されたランプの下に配置される。使用されたランプは、以下の電球の特性、即ち、２５W；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７５μＷ／ｃｍ^２；平均温度：３０℃を備える。

【0124】

図１によれば、この試料Ｓ３についてのビタミンＤ３濃度は、このとき乾燥重量で３６，０００ＩＵ／ｋｇに達し、即ち、ここでは、生きた幼虫（試料Ｓ２及びＳ１）についてのビタミンＤ３濃度より５倍大きい。

【0125】

第４の試験（試料Ｓ４）に関する限りでは、これは、加工された幼虫、そしてより詳細には、粉砕された乾燥幼虫の試料へのＵＶ処理に関する。

【0126】

この実施例においては、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの幼虫が、試料Ｓ３の幼虫と同一の殺虫操作を経たことを理解されたい。殺虫後、これらは更に粉砕された。

【0127】

この実施例においては、本発明が提案するようなＵＶ処理が、殺虫後のこの試料Ｓ４に適用される。

【0128】

ここでは、上記と同一の装置、即ち、粉砕された乾燥幼虫の上方２０ｃｍの距離に配置された、次の電球の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａを持つＵＶランプが使用された。平均放射照度は７５μＷ／ｃｍ^２であり、平均温度は３０℃である。

【0129】

図１によれば、この試料Ｓ４についてビタミンＤ３の濃度は、このとき乾燥重量で７２，０００ＩＵ／ｋｇに達し、即ち、ここでは、生きた幼虫（試料Ｓ１及びＳ２）についてのビタミンＤ３の濃度より１０倍高く、かつ、試料Ｓ３についてのビタミンＤ３の濃度より２倍高い。

【0130】

この第２シリーズの試験は、特許文献１で提案されている生きた幼虫（試料Ｓ１及びＳ２）ではなく、加工された幼虫（殺虫後）（試料Ｓ３及びＳ４）へのＵＶ処理の利点を強調している。

【0131】

本出願人は、ここで、ＵＶＢ照射に直面した際、加工された甲虫類幼虫は、せいぜい生きた幼虫と同程度のビタミンＤ３の合成能力を維持するであろうことを、本発明及び上記試験の前には考えることができたと主張する。

【0132】

幼虫が受けた該加工のために、ビタミンＤ３を合成するその能力が衰えることすら予想され得た。

【0133】

しかしながら、非常に驚くべきかつ予想外の手法において、得られた結果は、その逆を示し、かつ、加工された幼虫へのＵＶＢの照射が、同様の照射時間及び照射条件の下で生きた幼虫へのＵＶＢ照射後に得られる濃度より５～６倍高いビタミンＤ３濃度を伴って、ビタミンＤ３のより強力な合成をもたらすことを明らかにしている。

【0134】

予想外のこれらの結果は、単位表面積あたりの可能な収量に強い影響を与え、そして従って、加工された幼虫でこの方法を産業化することの妥当性に強い影響を与える。このシリーズの試験は、ビタミンＤ３の濃度を更に２倍に増加させる、ＵＶ処理の前に加工された幼虫を粉砕することの利点をまた強調している。

【0135】

- 第３シリーズの試験：
第３シリーズの試験は、ＵＶ－Ｂ照射時間の関数として、ビタミンＤ３濃度の変化を明らかにするために実行された。

【0136】

これらの試験の間に、ここではＳ１’、Ｓ２’、Ｓ３’、Ｓ４’、Ｓ５’及びＳ６’として示される、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒ型の幼虫のいくつかの試料が利用可能である。これらの試料は種々の試験に供される。

【0137】

これらの試料についての種々の試験の結果及び分析が図２に示されている。該分析は、ＥＮ１２８２１：２００９－０８規格に従って、コフラック認定の独立研究所により実行された。

【0138】

この第２シリーズの試験においては、脱脂された甲虫類粉末に相当する試料Ｓ１’が利用可能である。

【0139】

ここでは、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの脱脂された粉末を入手出来て、幼虫Ｓ１’の上方２０ｃｍの距離に配置されたＵＶランプによりＵＶ処理が施された。ＵＶランプは、以下の電球の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７５μＷ／ｃｍ^２；平均温度：３０℃を備える。

【0140】

この実施例においては、幼虫の油性画分の抽出は、まず、１００℃での２分間の湯通し（ｂｌａｎｃｈｉｍｅｎｔ）、次いで、６５℃での１２時間の脱水を予め受けた乾燥幼虫の圧搾により実行される。

【0141】

図２によれば、１０時間の紫外線照射後、試料Ｓ１’のビタミンＤ３濃度は、５，０００～１０，０００ＩＵ／ｋｇの間のビタミンＤ３である。

【0142】

この第２シリーズの試験の間、試料Ｓ２’は、ここでは生きた幼虫を含む。次いで、成長中の生きた幼虫にランプによりＵＶ処理が施される。ランプの電球は以下の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７４．１μＷ／ｃｍ^２；平均温度：３１．８℃を備える。図１の試料Ｓ１と同様に、ビタミンＤ３の濃度分析は冷凍された幼虫に対して実行される。

【0143】

図２によれば、試料Ｓ２’のビタミンD３濃度は、６０時間の照射後、１５，０００～２０，０００ＩＵ／ｋｇの間である。

【0144】

試料Ｓ３’は、成長期の間に、ＵＶ処理が施される生きた幼虫のグループに相当する。照射条件はＳ１’及びＳ２’の条件と同一である。等しい照射時間で、図２によれば、試料Ｓ２’で得られた結果と実質的に同一の結果が得られる。図１の試料Ｓ２と同様に、ビタミンＤ３の濃度分析は、粉末に縮小された脱水された幼虫に対して実行される。

【0145】

試料Ｓ１’、Ｓ２’及びＳ３’において実行された試験は、特許文献１の例示的な実施態様、即ち、生きた幼虫におけるＵＶ処理に対応する。

【0146】

試料Ｓ４’は、乾燥された（殺虫された）幼虫全体に相当する。ＵＶ処理の前に、これらの幼虫は、殺虫により加工（１００℃で２分間の湯通し）され、次いで、脱水された。しかし、これらの幼虫は未粉砕のままである。

【0147】

ＵＶ処理が、次いで、この試験の間、この試料Ｓ４’にランプにより施され、該ランプの電球は以下の特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７５μＷ／ｃｍ^２；平均温度：２９．４４℃を備える。

【0148】

殺虫された幼虫は粉砕されていないという事実にもかかわらず、図２によれば、ビタミンＤ３の濃度は高く、かつ、２４時間のＵＶ－Ｂ照射後に６０，０００ＩＵ／ｋｇを超えるビタミンＤ３であることが分かる。

【0149】

最後に、この第２シリーズの試験においては、粉砕された乾燥幼虫を含む試料Ｓ５’及びＳ６’が利用可能である。

【0150】

試料Ｓ５’は、－１８℃で低温により殺虫された後、１００℃で２分間湯通しされ、次いで、６５℃で１４時間脱水され、最後に粉砕された幼虫に相当する。

【0151】

試料S６’は、１００℃で２分間湯通しすることにより殺虫され、次いで、６５℃で１４時間脱水され、そして、最後に粉砕された幼虫に相当する。試料Ｓ６’の各点は、２つの別個の分析を含む（Ｎ＝２；平均±標準偏差）。

【0152】

これらの試料Ｓ５’及びＳ６’については、ＵＶランプは、生きた幼虫の上方２０ｃｍの距離に配置される。Ｓ４’と同様に、このＵＶランプは、以下の電球特性、即ち、２５Ｗ；１０％ＵＶＢ、ＥｘｏＴｅｒｒａ；平均放射照度：７５μＷ／ｃｍ^２；平均温度：２９．４４℃を有する。

【0153】

図２によれば、試料Ｓ５’の濃度は、２４時間照射後に９０，０００～１００，０００ＩＵ／ｋｇの間のビタミンＤ３である。

【0154】

更に、図２によれば、試料Ｓ６’の濃度は、２４時間の照射後に８０，０００～９０，０００ＩＵ／ｋｇの間のビタミンＤ３である。この濃度は、次いで、７２時間の照射後に９０，０００ＩＵ／ｋｇを超えるビタミンＤ３である。

【0155】

ビタミンＤ３の濃度におけるこの第３シリーズの試験は、本発明が、所定の照射時間に亘って、特許文献１に記載された方法に対して、ビタミンＤ３の合成を４～１０倍増加させることを可能にすることを示している。

【0156】

この第３シリーズの試験は、また、粉砕によりビタミンＤ３の合成を最大化できることを示しているが、反対に粉砕なしで得られた結果は高く評価されたままであることも示している。

【0157】

- 第４シリーズの試験：
上記の実施例（図１及び２）では、放射されるＵＶＢ光線の平均放射照度は７５μＷ／ｃｍ^２である。

【0158】

この第４シリーズの試験の文脈において引き続く実験は、ＵＶＢ光線の放射照度を変化させて、ビタミンＤ３の合成性能におけるこの放射照度の影響を強調することを目的とする。

【0159】

図３は、夫々、Ｓ１’’、Ｓ２’’、Ｓ３’’及びＳ４’’と記した４つの甲虫類粉末試料中のビタミンＤ３濃度の経時変化を示し、それぞれ異なる放射照度を有する光源によるＵＶ処理が施されている。

【0160】

この実施例において、試料Ｓ１’’（黒丸；各時間についてＮ＝２；平均±ｓｄ）は、粉末において６０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ強度（放射照度）を有するＵＶ光源によりＵＶ処理を受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの粉末に相当する。

【0161】

この実施例において、試料Ｓ２’’（黒三角；Ｎ＝２；平均±ｓｄ）は、６０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ強度（放射照度）を有するＵＶ光源により４５分間、該電力でＵＶ処理を施したＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓの粉末に相当する。

【0162】

試料Ｓ３’’（白丸；各時間についてＮ＝２；平均±ｓｄ）は、粉末に対して１９０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ強度（放射照度）を有するＵＶ光源によるＵＶ処理を受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの粉末に相当する。

【0163】

第４の試料Ｓ４’’（白三角；Ｎ＝２；平均±ｓｄ）に関する限りでは、それは、１９０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ強度（放射照度）を有するＵＶ光源によるＵＶ処理を４５分間、該強度で施されたＡｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓｄｉａｐｅｒｉｎｕｓの粉末に相当する。

【0164】

試料Ｓ５’’（灰色の矩形；各時間についてＮ＝２；平均±ｓｄ）は、１２０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ強度（放射照度）を有するＵＶ処理を４５分間施されたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの粉末に相当する。

【0165】

この実施例においては、各試料Ｓ１’’、Ｓ２’’、Ｓ３’’及びＳ４’’の処理条件は同一である。即ち、
各ＵＶ光源は、粉末試料の上方２５cmに設置されている。
ＵＶ処理室の平均温度は２５℃±１、相対湿度は４５％±５である。
ここで、ＩＵは国際単位、即ち、１ＩＵ＝０．０２５μｇのビタミンＤ３である。
試料におけるＵＶＢ強度（放射照度）の測定は、ＵＶＢメーターを用いて測定される。
これらの試料Ｓ１’’、Ｓ２’’、Ｓ３’’、Ｓ４’’及びＳ５’’のビタミンＤ３の分析は、基準とする方法ＥＮ１２８２２：２０１４に従って、規格ＥＮ１２８２１：２００９－０８に従ってコフラック認定の独立研究所により実施された。

【0166】

図３において、８時間のＵＶ処理以降、ＵＶ光源への照射時間を増やしても、第１のＳ１’’試料でも第３のＳ３’’試料でも、甲虫類粉末中のビタミンＤ３濃度の有意な増加にもたらされないことが観察される。

【0167】

実際、この図３において、ビタミンＤ３濃度の安定状態が、８時間の暴露から観察される。

【0168】

本出願人により実行された第１の実験の間に、第１の試料で観察された安定状態は、最大の達成可能な水準に相当するように見えた。

【0169】

この安定状態は、ＵＶ光線に照射されたマトリックスに含まれる７－デヒドロコレステロールの全てが、コレカルシフェロールに加工されたことに対応していると思われた。

【0170】

従って、当業者であれば、その通常の知識に従って、ビタミンＤ３の濃度の増加は光強度の増加に比例し、そしてそれ故、ＵＶＢ光線の光源の強度を増加させれば、ビタミンＤ３の濃度がより迅速に安定状態に達し得ると考えることができる。

【0171】

しかし、それは真実ではなく、予想外の結果であった。

【0172】

実際、この同じ図３によれば、放射照度を３倍増加させることによって、
－得られる最大濃度は、所定の照射時間で５倍増加されること（例えば、ＵＶ処理に対する８時間の同一の照射時間に関して、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの第３の試料Ｓ３’’のための３５２，４００ＩＵ／ｋｇのビタミンＤ３濃度に対して、Ｔｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの第１の試料Ｓ１’’ための７０，０００ＩＵ／ｋｇの濃度）、及び
－２０，０００ＩＵ／ｋｇの濃度に到達するために必要な時間が１０倍を超えて短縮される。例えば、２０，０００ＩＵ／ｋｇのビタミンＤ３の濃度に到達するためにＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの第３の試料Ｓ３’’では３．５分間の照射時間を要するのに対し、第１の試料Ｓ１’’のためには４５分間の照射時間を要すること、
が観察される。

【0173】

従って、本出願人は、ビタミンＤ３の非常に高い濃度が、１０分未満のＵＶＢ照射時間でさえ、迅速に達成されることを観察する。例えば、１９０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射照度を有するＵＶ光源を用いた、５分間の照射後に２６，０００ＩＵ／ｋｇが達成される。

【0174】

第１のＳ１’’試料と第３のＳ３’’試料との間（又は第２のＳ２’’試料と第４のＳ４’’試料との間）のビタミンＤ３濃度における経時変化を比較すると、照射時間とＵＶＢ光線の放射照度との間に上記の予期された比例関係に遭遇しないことを示している。

【0175】

結果として、第１の試料Ｓ１’’において観察されたビタミンＤ３の濃度の安定状態は、それ故、上記の仮説で提唱されたような、ステロールのコレカルシフェロールへの完全な加工処理により引き起こされるものではない。

【0176】

従って、本実験の間に得られた結果は、ＵＶＢ光線の放射照度を増加させることにより、ビタミンＤ３の濃度を増加させることが、期待された結果よりもはるかに大きい、予期せぬ性能を達成することを示している。即ち、加工された甲虫類幼虫に対するＵＶＢ放射照度を３倍増加させることにより、得られる最大濃度は５倍増加され、かつ、所定の濃度に達するのに必要な照射時間は１０分の１に短縮される。

【0177】

- 第５シリーズの試験：
紫外線（とりわけ、ＵＶＢ）は、食品の酸化反応を増幅することで知られている。換言すれば、甲虫類粉末においてＵＶＢ放射照度を有意に増加させることは（短時間の照射であっても）、それが潜在的に消費に適さなくなるまで、その脂肪酸の酸化の水準を有意に増幅することをもたらすに違いない。

【0178】

それ故、食品分野においては、甲虫類粉末の劣化を避けるために、あまり高過ぎる強度で粉末を照射してはならない。

【0179】

それにもかかわらず、本出願人は、これらの方法の性能を改善させる目的で、本件における試験を実行した。

【0180】

このシリーズの試験において、出願人は、従って、甲虫類粉末の酸化に対するＵＶＢ放射照度及び照射時間の有意な増加の影響力を試験した。

【0181】

これらの試験の間、以下のようないくつかの酸化指標が測定された。即ち、
－過酸化物価（ＰＶ）。この値により、脂肪の不飽和脂肪酸の酸化の程度を評価することができる。この値は酸化の開始を示す指標である。過酸化物は、酸化反応の開始段階で生じるフリーラジカルから形成される。
－アニシジン値（ＡＶ）。この値は脂肪の二次酸化生成物の測定に相当する。この値はアルデヒド（主にα、β－不飽和アルデヒド）の量を測定する。
－ＴＯＴＯＸ値［全酸化（ＴＯＴａｌＯＸｉｄａｔｉｏｎ）］。これは、過酸化物価及びアニシジン値に基づいた油の酸化の指標である。ＴＯＴＯＸ値＝（２×ＰＶ）＋ＡＶ。ＴＯＴＯＸ値が２６より大きいなら、製品は有害とみなされる。

【0182】

放射照度と照射時間を変化させることにより、これらの試験の最後に、図４Ａから図４Ｄにおいて読み取ることができる以下の結果が得られる。

【0183】

図４Aは、６０μＷ／ｃｍ^２又は１９０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射照度でＵＶ照射を３つの異なる時間、即ち、１０分間、４５分間又は４８０分間受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの粉末の過酸化物価を示す（各時間についてＮ＝２、平均±ｓｄ）。

【0184】

過酸化物の濃度は、ＵＶ照射時間と共に増加することが観察される。

【0185】

しかしながら、所定の照射時間及び本発明の試験条件においては、放射照度の水準は過酸化物の濃度に影響を及ぼさない。

【0186】

ＵＶＢ放射照度の水準を３倍に増加することにより、過酸化物の濃度は、所定の時間において同様のままである。これはむしろ予想外の結果を構成する。

【0187】

図４Ｂは６０μＷ／ｃｍ^２又は１９０μＷ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射照度でＵＶ照射を３つの異なる時間、即ち、１０分間、４５分間又は４８０分間受けたＴｅｎｅｂｒｉｏｍｏｌｉｔｏｒの粉末のアニシジン値を示す（各時間についてＮ＝２、平均±ｓｄ）。