特表 2024-527551 非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの組み合わせを用いるがんを処置する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-07-25

(54)【発明の名称】非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの組み合わせを用いるがんを処置する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240718BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240718BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 31/706 20060101ALI20240718BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 31/496 20060101ALI20240718BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20240718BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 T ZNA

A61P35/00

A61P35/02

A61K39/395 Y

A61K39/395 N

A61K31/706

A61P43/00 121

A61K31/496

C12N15/13

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023580682

(86)(22)【出願日】2022-06-28

(85)【翻訳文提出日】2023-12-28

(86)【国際出願番号】 US2022035220

(87)【国際公開番号】W WO2023278377

(87)【国際公開日】2023-01-05

(31)【優先権主張番号】63/216,233

(32)【優先日】2021-06-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/318,920

(32)【優先日】2022-03-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】503188759

【氏名又は名称】シージェン インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002572

【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ディオライティ，ダニエル

(72)【発明者】

【氏名】ガルデイ，シラ

【テーマコード（参考）】

4C085

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085AA27

4C085BB01

4C085BB11

4C085BB36

4C085CC23

4C085DD62

4C085EE03

4C085GG02

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC50

4C086EA16

4C086MA02

4C086MA03

4C086MA04

4C086MA66

4C086NA05

4C086ZB26

4C086ZB27

4C086ZC75

(57)【要約】

本発明は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体をＣＤ４７アンタゴニストと組み合わせて用いて、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む骨髄悪性腫瘍などのがんを処置する方法を提供する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象におけるがんを処置する方法であって、前記方法は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを前記対象に投与することを含み、前記方法は、前記対象におけるがん細胞の枯渇をもたらし、前記方法は、前記対象におけるＣＤ７０＋Ｔ制御性細胞（ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇ）の枯渇をもたらさず、前記抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域及びＦｃドメインを含み、前記重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
を含み、前記軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３
を含み、前記がんは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）からなる群から選択される、前記方法。

【請求項2】

前記抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記抗ＣＤ７０抗体の前記Ｆｃドメインは、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）のうちの１つ以上を媒介する抗体エフェクタードメインである、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

前記抗ＣＤ７０抗体の前記Ｆｃドメインは、ＡＤＣＣを媒介する抗体エフェクタードメインである、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記抗ＣＤ７０抗体の前記Ｆｃドメインは、ヒトＦｃドメインである、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記抗ＣＤ７０抗体は、ボルセツズマブの非フコシル化形態である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記抗ＣＤ７０抗体は、治療剤にコンジュゲートされている、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記治療剤は、化学療法剤または免疫調節剤である、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記治療剤は、化学療法剤である、請求項８に記載の方法。

【請求項11】

前記化学療法剤は、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）またはモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）である、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記治療剤は、免疫調節剤である、請求項８に記載の方法。

【請求項13】

前記方法は、抗ＣＤ７０抗体の集団を投与することを含み、前記抗ＣＤ７０抗体の集団における各抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、前記重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
を含み、前記軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３
を含み、前記抗ＣＤ７０抗体の前記集団における前記抗ＣＤ７０抗体の少なくとも５０％は、コアフコシル化を欠く、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記抗ＣＤ７０抗体の前記集団における前記抗ＣＤ７０抗体の少なくとも７０％は、コアフコシル化を欠く、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記抗ＣＤ７０抗体の前記集団における前記抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９０％は、コアフコシル化を欠く、請求項１３に記載の方法。

【請求項16】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約１～３０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約１０～２０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約１０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１６に記載の方法。

【請求項19】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約１５ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１６に記載の方法。

【請求項20】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約２０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１６に記載の方法。

【請求項21】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約１～４週毎に１回投与される、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記抗ＣＤ７０抗体は、約２週間毎に１回投与される、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７とＳＩＲＰαとの間の相互作用を阻害する、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、腫瘍細胞の貪食を増加させる、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７に結合する抗体、またはその抗原結合断片、及びＳＩＲＰαに結合する抗体またはその抗原結合断片、ならびにＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質からなる群から選択される、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記ＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質は、抗体のＦｃ領域に共有結合的に連結されたＳＩＲＰα、またはその免疫グロブリンＶ様ドメインを含む、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体である、請求項２５に記載の方法。

【請求項28】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブ、ＣＣ－９０００２、ＡＬＸ１４８、ＲＲｘ－００１、ＴＴＩ－６２２、ＴＴＩ－６２１、及びＫＷＡＲ２３からなる群から選択される、請求項２５に記載の方法。

【請求項29】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブである、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、１～５０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項１～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、１～３０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、１ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項３１に記載の方法。

【請求項33】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、１５ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項３１に記載の方法。

【請求項34】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、３０ｍｇ／前記対象の体重のｋｇの用量で投与される、請求項３１に記載の方法。

【請求項35】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、準最適用量で投与される、請求項１～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、約１～４週毎に１回投与される、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、約１週毎に１回投与される、請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、約２週間毎に１回投与される、請求項３６に記載の方法。

【請求項39】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週サイクルの１、４、８、１１、１５、及び２２日目に最初に投与される、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、第２の４週サイクルの１、８、１５、及び２２日目に投与される、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

前記ＣＤ４７アンタゴニストは、３回目の４週サイクルの１及び１５日目に投与される、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記がんは、ＭＤＳである、請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項43】

前記ＭＤＳは、再発性または難治性ＭＤＳである、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

前記対象は、前記ＭＤＳのための先行低メチル化剤（ＨＭＡ）療法後に処置失敗を経験した、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記がんは、ＡＭＬである、請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項46】

前記ＡＭＬは、再発性または難治性ＡＭＬである、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記対象は、前記ＡＭＬを処置するために２つの先行処置レジメンを受けた、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

前記対象は、前記ＡＭＬを処置するために３つの先行処置レジメンを受けた、請求項４６に記載の方法。

【請求項49】

前記がん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ７０を発現する、請求項１～４８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項50】

前記がん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ４７を発現する、請求項１～４９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項51】

前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及び前記ＣＤ４７アンタゴニストを前記対象に投与することは、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを前記対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％がん細胞の枯渇をもたらす、請求項１～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項52】

前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを前記対象に投与することは、脱フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを前記対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約２０％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、約１％、または約０．１％以下のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの枯渇をもたらす、請求項１～５１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

前記対象における１つ以上の治療効果は、ベースラインと比べて前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に改善される、請求項１～５２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項54】

前記１つ以上の治療効果は、客観的反応率、反応の継続期間、反応までの時間、無増悪生存及び全生存からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

前記客観的反応率は、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％である、請求項１～５４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項56】

前記対象は、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の無増悪生存を示す、請求項１～５５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項57】

前記対象は、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の全生存を示す、請求項１～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項58】

前記抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年である、請求項１～５７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項59】

前記抗ＣＤ７０抗体のための投与経路は、静脈内である、請求項１～５８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記ＣＤ４７アンタゴニストのための投与経路は、静脈内である、請求項１～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項61】

前記対象は、ヒトである、請求項１～６０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項62】

アザシチジンの投与をさらに含む、請求項１～６１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項63】

前記アザシチジンは、７５ｍｇ／前記対象の身体表面積のｍ^２の用量で投与される、請求項６２に記載の方法。

【請求項64】

前記アザシチジンは、４週サイクルの１～７日目に投与される、請求項６２または６３に記載の方法。

【請求項65】

前記アザシチジンは、４週サイクルの１～５及び８～９日目に投与される、請求項６２または６３に記載の方法。

【請求項66】

ベネトクラクスの投与をさらに含む、請求項１～６５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項67】

フルオロキノロンの投与をさらに含む、請求項１～６６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項68】

がんの処置のための薬学的組成物であって、前記組成物は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体であって、前記抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、前記重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
を含み、前記軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３
を含む、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び少なくとも１つの薬学的適合性成分を含み、前記薬学的組成物は、ＣＤ４７アンタゴニストと組み合わせて使用するためのものであり、前記組成物は、請求項１～６７のいずれか１項に記載の方法において使用するためのものである、前記薬学的組成物。

【請求項69】

キットであって、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストであって、前記抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、前記重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３
を含み、前記軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３
を含む、前記非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニスト、ならびに請求項１～６７のいずれか１項に記載の方法において前記抗ＣＤ７０抗体を使用するための指示書を含む、前記キット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年６月２９日に出願された米国仮特許出願番号６３／２１６，２３３及び２０２２年３月１１日に出願された米国仮特許出願番号６３／３１８，９２０の利益を主張し、これらの両方は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

配列表に対する言及
配列表は、００７０－００８１２ＰＣ＿ＳＴ２５．ｔｘｔを指定し、１５キロバイトのサイズを有し、参照により組み込まれる。

【0003】

本発明は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体をＣＤ４７アンタゴニストと組み合わせて用いて、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む骨髄悪性腫瘍などのがんを処置する方法に関する。

【背景技術】

【0004】

ＣＤ７０は、多様な正常細胞及び悪性細胞タイプによって発現する細胞膜結合及び分泌分子の腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリーのメンバーである。ＣＤ７０の一次アミノ酸（ＡＡ）配列は、細胞の外側に露出したそのカルボキシル末端及び細胞膜の細胞質側に見られるそのアミノ末端を有する膜貫通ＩＩ型タンパク質を予測する（Ｂｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：１７５６－６１；Ｇｏｏｄｗｉｎ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｃｅｌｌ ７３：４４７－５６）。ヒトＣＤ７０は、２０ＡＡの細胞質ドメイン、１８ＡＡの膜貫通ドメイン、及び２つの潜在的Ｎ－結合型グリコシル化部位を有する１５５ＡＡの細胞質外ドメインから構成される（Ｂｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．（上掲）；Ｇｏｏｄｗｉｎ ｅｔ ａｌ．（上掲））。抗ＣＤ７０抗体による放射性同位体標識ＣＤ７０発現細胞の特異的免疫沈降は、２９ｋＤａ及び５０ｋＤａのポリペプチドをもたらす（Ｇｏｏｄｗｉｎ ｅｔ ａｌ．（上掲）；Ｈｉｎｔｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：１７６２－７３）。特に構造鎖Ｃ、Ｄ、Ｈ及び１における、ＴＮＦ－アルファ及びＴＮＦ－ベータに対するその相同性に基づいて、三量体構造がＣＤ７０について予測されている（Ｐｅｔｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７６１－７２）。

【0005】

最初の免疫組織学的研究は、ＣＤ７０が扁桃腺、皮膚、及び腸において胚中心Ｂ細胞及び希少Ｔ細胞上で発現することを明らかにした（Ｈｉｎｔｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：４７７－８０）。後に、ＣＤ７０は、直近に抗原活性化されたＴ及びＢリンパ球の細胞表面上で発現することが報告され、その発現は、抗原刺激の除去後に薄れる（Ｌｅｎｓ ｅｔ ａｌ，１９９６，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：２９６４－７１；Ｌｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ９０：３８－４５）。リンパ系内で、活性化ナチュラルキラー細胞（Ｏｒｅｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０７：６０８－１３）及びマウス成熟末梢樹状細胞（Ａｋｉｂａ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９１：３７５－８０）もまた、ＣＤ７０を発現する。非リンパ系では、ＣＤ７０は、胸腺髄質上皮細胞上で検出された（Ｈｉｎｔｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４（上掲）；Ｈｉｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ａｍ．Ｊ．Ｓｕｒｇ Ｐａｔｈｏｌ．２４：７４２－４６）。

【0006】

ＣＤ７０は、正常な非造血細胞上で発現しない。ＣＤ７０発現は大抵、生理的条件下で直近に抗原活性化されたＴ及びＢ細胞に制限され、その発現は、抗原刺激が停止された場合に下方制御される。動物モデルからの証拠は、ＣＤ７０が、例えば、関節リウマチ（Ｂｒｕｇｎｏｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．５５：９９－１０４）、乾癬性関節炎（Ｂｒｕｇｎｏｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．５５：９９－１０４）、及びループス（Ｏｅｌｋｅ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．５０：１８５０－６０）などの免疫学的障害に寄与し得ることを示唆している。炎症性反応におけるその潜在的役割に加えて、ＣＤ７０はまた、リンパ腫Ｂ細胞、ホジキン及びリード・スタンバーグ細胞、神経起源の悪性細胞、及び多数のがんを含む多様な形質転換細胞上で発現する。研究は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）及び骨髄異形成疾患（ＭＤＳ）患者からの幹細胞が、ＣＤ７０及びその受容体であるＣＤ２７の両方を発現することを示している。このリガンド－受容体対の間相互作用は、白血病芽球の生存及び増殖を促進し得る。

【0007】

哺乳動物宿主細胞において生成されたモノクローナル抗体は、グリコシル化を含む多様な翻訳後修飾を有し得る。ＩｇＧ１などのモノクローナル抗体は、各重鎖（インタクト抗体当たり２つ）のアスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７）でＮ－結合型グリコシル化部位を有する。抗体上のＡｓｎ２９７に結合したグリカンは、典型的には、少量の末端シアル酸及び可変量のガラクトースを有するバイセクト型Ｎ－アセチルグルコサミン（バイセクト型ＧｌｃＮＡｃ）が極めて少ないまたは全くない複雑なバイアンテナ型構造である。グリカンはまた通常、高レベルのコアフコシル化を有する。抗体におけるコアフコシル化の低減は、Ｆｃエフェクター機能、特にＦｃガンマ受容体結合及びＡＤＣＣ活性を改変することが示されている。この観察は、低減されたコアフコシル化を有する抗体を生成するように細胞株を操作することへの興味につながり得る。

【0008】

コアフコシル化を低減するために細胞株を操作するための方法には、遺伝子ノックアウト、遺伝子ノックイン及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）が含まれる。遺伝子ノックアウトでは、ＦＵＴ８をコードする遺伝子（アルファ１，６－フコシルトランスフェラーゼ酵素）が不活性化される。ＦＵＴ８は、Ｎ－グリカンのＡｓｎ結合型（Ｎ－結合型）ＧｌｃＮａｃの６位にＧＤＰ－フコースからフコシル残基の移行を触媒する。ＦＵＴ８は、Ａｓｎ２９７でＮ－結合型バイアンテナ型炭水化物にフコースを付加することを担う唯一の構造であると報告されている。遺伝子ノックインは、ＧＮＴＩＩＩまたはゴルジアルファマンノシダーゼＩＩなどの酵素をコードする遺伝子を付加する。細胞におけるそのような酵素のレベルの増加は、モノクローナル抗体をフコシル化経路からそらし（低下したコアフコシル化をもたらす）、増加した量のバイセクト型Ｎ－アセチルグルコサミンを有することからそらす。ＲＮＡｉもまた、典型的には、ＦＵＴ８遺伝子発現を標的とし、低下したｍＲＮＡ転写産物レベルまたは遺伝子発現の全体的なノックアウトをもたらす。

【0009】

細胞株を操作するための代替手段には、グリコシル化経路における酵素に対して作用する小分子阻害剤の使用が含まれる。阻害剤、例えば、カタノスペルミンは、グリコシル化経路において早く作用し、未熟グリカン（例えば、高レベルのマンノース）及び低いフコシル化レベルを有する抗体を生成する。そのような方法によって生成された抗体は通常、成熟抗体に関連する複雑のＮ－結合型グリカン構造を欠く。小分子フコースアナログは、Ｎ－結合型グリカンも有するが、低減したコアフコシル化を有する組換え抗体を生成するために使用され得る。

【0010】

インテグリン関連タンパク質（ＩＡＰ）としても知られている分化４７（ＣＤ４７）のクラスターは、タンパク質の免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜貫通受容体である。ＣＤ４７は、細胞上に不変的に発現し、自己認識のためのマーカーとして機能し、「ドントイートミー」シグナルとして機能することによって貪食を防止する。ＣＤ４７は、トロンボスポンジン（ＴＳＰ）及びシグナル制御性タンパク質－アルファ（ＳＩＲＰα）を含むいくつかの他のタンパク質との相互作用を介してその効果を媒介する。食細胞上のＳＩＲＰαと標的細胞上のＣＤ４７との間の相互作用は、標的細胞が飲み込まれないことを確保することを補助する。所定のがんは、がん細胞の細胞表面上のＣＤ４７の発現を増加させることによって細胞のＣＤ４７ベースの免疫回避メカニズムを取り入れ、よって、免疫系によるクリアランスを回避する。

【0011】

ＣＤ７０発現に関連するがんを処置するための改善された療法が必要とされている。本明細書では、抗ＣＤ７０抗体、例えば、特に非ＣＤ７０発現細胞に対する望ましくない効果を発揮せずに、ＣＤ７０発現細胞に対する臨床的に有用な細胞傷害性、細胞増殖抑制性、または免疫調節性効果を発揮し得る低減したコアフコシル化を有する抗ＣＤ７０抗体と、ＣＤ４７に拮抗する薬剤との組み合わせを用いて、がん、例えば、ＣＤ７０を発現するがんを処置する方法が提供される。特に、本明細書では、急性骨髄白血病（ＡＭＬ）、骨髄増殖性障害（ＭＰＤＳ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び骨髄異形成／骨髄増殖性症候群（すべてがクローン性幹細胞（ＨＳＣ）または前駆悪性障害である）（ＴＩＵ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ，ｖｏｌ．２１（８），ｐ：１６４８－５７，２００７）を含む骨髄悪性腫瘍を処置する方法が提供される。

【0012】

ＭＤＳは、単血球系異形成を伴うＭＤＳ、環状鉄芽球環を伴うＭＤＳ、多血球系異形成を伴うＭＤＳ、余剰の芽球を伴うＭＤＳ、孤立欠失（ｉｓｏｌａｔｅｄ ｄｅｌ）（５ｑ）を伴うＭＤＳ、及び分類不可ＭＤＳを含む複数のサブタイプを包含する（ＡＲＢＥＲ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．１２７，ｐ：２３９１－４０５，２０１６）。ＭＤＳは、骨髄系の１つ以上における無効な造血によって特性化される。早期ＭＤＳは大抵、過剰なアポトーシス及び造血細胞異形成を示す（ＣＬＡＥＳＳＥＮＳ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．９９，ｐ：１５９４－６０１，２００２；ＣＬＡＳＥＳＳＥＮＳ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．１０５，ｐ：４０３５－４２，２００５）。ＭＤＳ患者の約３分の１では、この無効な造血は、二次ＡＭＬ（ｓＡＭＬ）への進行に先行する。特定のＭＤＳサブタイプ（ＥＬＢＥＲＴ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．４５１（７１７６），ｐ：３３５－９，２００８）または疾患変化（ＢＲＡＵＮ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．１０７（３），ｐ：１１５６－６５，２００６）に関連するいくつかの分子事象が同定されているが、根底にある分子欠損は、依然として不十分に理解されている。形態学的特徴を除き、現在、早期診断及び予後に利用可能な生物学的マーカーはない。

【0013】

急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、白血球の骨髄系の悪性腫瘍である。この鬱血形成は、処置されないままである場合、通常、数週～数ヶ月以内に致命的な血液及び骨髄疾患となる。米国において３０，０００人のＡＭＬ及び欧州連合において４７，０００人のＡＭＬ推定値が存在する（Ｍａｔｔｓｏｎ－Ｊａｃｋ，２０１０によって確認された２０１０年の有病率データ）。ＡＭＬは、成人急性白血病の中で最も広まっている形態であり（約９０％）、新たな白血病症例の約３３％を含有する。ＡＭＬと診断された患者の年齢中央値は、６７歳である。米国において、ＡＭＬは、およそ１．２％のがん死因を占める。

【0014】

ＡＭＬは、非特異的症状、例えば、体重減少、疲労、発熱及び寝汗を引き起こす。ＡＭＬは、ＡＭＬサブタイプを決定するために及び処置決定を決定するために血液検査、骨髄検査、及び実験室検査によって診断される。

【0015】

特許出願、特許公報、及び科学文献を含む本明細書において引用されるすべての参考文献は、各々の個々の参考文献が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されるかのように、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【発明の概要】

【0016】

本明細書では、対象におけるがんを処置する方法であって、方法は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することを含み、方法は、対象におけるがん細胞の枯渇をもたらし、方法は、対象におけるＣＤ７０＋Ｔ制御性細胞（ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇ）の枯渇をもたらさず、抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域及びＦｃドメインを含み、重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、
軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、がんは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）からなる群から選択される、方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体のＦｃドメインは、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）のうちの１つ以上を媒介する抗体エフェクタードメインである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体のＦｃドメインは、ＡＤＣＣを媒介する抗体エフェクタードメインである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体のＦｃドメインは、ヒトＦｃドメインである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ボルセツズマブの非フコシル化形態である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、治療剤にコンジュゲートされている。いくつかの実施形態では、治療剤は、化学療法剤または免疫調節剤である。いくつかの実施形態では、治療剤は、化学療法剤である。いくつかの実施形態では、化学療法剤は、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）またはモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）である。いくつかの実施形態では、治療剤は、免疫調節剤である。いくつかの実施形態では、方法は、抗ＣＤ７０抗体の集団を投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における各抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、
軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも５０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも７０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約１～３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約１０～２０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約１０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約１５ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約２０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約１～４週毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約２週間毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７とＳＩＲＰαとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、腫瘍細胞の貪食を増加させる。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７に結合する抗体、またはその抗原結合断片、及びＳＩＲＰαに結合する抗体またはその抗原結合断片、ならびにＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質は、抗体のＦｃ領域に共有結合的に連結されたＳＩＲＰα、またはその免疫グロブリンＶ様ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブ、ＣＣ－９０００２、ＡＬＸ１４８、ＲＲｘ－００１、ＴＴＩ－６２２、ＴＴＩ－６２１、及びＫＷＡＲ２３からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１～５０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１～３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１５ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、準最適用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、約１～４週毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、約１週毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、約２週間毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週サイクルの１、４、８、１１、１５、及び２２日目に最初に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、２回目の４週サイクルの１、８、１５、及び２２日目に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、３回目の４週サイクルの１及び１５日目に投与される。いくつかの実施形態では、がんは、ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、ＭＤＳは、再発性または難治性ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、対象は、ＭＤＳのための先行低メチル化剤（ＨＭＡ）療法後に処置失敗を経験した。いくつかの実施形態では、がんは、ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、再発性または難治性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＭＬを処置するために２つの先行処置レジメンを受けた。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＭＬを処置するために３つの先行処置レジメンを受けた。いくつかの実施形態では、がん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、がん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することは、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％がん細胞の枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することは、脱フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約２０％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、約１％、または約０．１％以下のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、対象における１つ以上の治療効果は、ベースラインと比べて非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に改善される。いくつかの実施形態では、１つ以上の治療効果は、客観的反応率、反応の継続期間、反応までの時間、無増悪生存及び全生存からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、対象は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体のための投与経路は、静脈内である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストのための投与経路は、静脈内である。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、方法は、アザシチジンの投与をさらに含む。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、７５ｍｇ／対象の身体表面積のｍ^２の用量で投与される。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、４週サイクルの１～７日目に投与される。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、４週サイクルの１～５及び８～９日目に投与される。いくつかの実施形態では、方法は、ベネトクラクスの投与をさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、フルオロキノロンの投与をさらに含む。

【0017】

また、本明細書では、がんの処置のための薬学的組成物であって、組成物は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体であって、抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、
軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び少なくとも１つの薬学的適合性成分を含み、薬学的組成物は、ＣＤ４７アンタゴニストと組み合わせて使用するためのものであり、組成物は、本明細書における実施形態のいずれかの方法において使用するためのものである、薬学的組成物が提供される。

【0018】

また、本明細書では、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストであって、抗ＣＤ７０抗体は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、重鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み、
軽鎖可変領域は、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニスト、ならびに本明細書における実施形態のいずれかの方法において抗ＣＤ７０抗体を使用するための指示書を含むキットが提供される。

【0019】

本明細書に記載される様々な実施形態の特性のうちの１つ、いくつかまたはすべてを組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成し得ることが理解されるべきである。本発明のこれら及び他の態様は、当業者にとって明らかであろう。本発明のこれら及び他の実施形態は、以下の発明を実施するための形態によってさらに説明される。

【図面の簡単な説明】

【0020】

【図1】ＭＶ４－１１ ＡＭＬ異種移植モデルにおける腫瘍成長に対するＳＥＡ－ＣＤ７０単独、ｈ５Ｆ９－Ｇ４（マグロリマブ）単独、またはｈ５Ｆ９－Ｇ４と組み合わせたＳＥＡ－ＣＤ７０の効果を評価するグラフである。平均腫瘍体積（±ＳＥＭ）は、各処置アームについて報告されている。各処置群について、データは、各群における最初の動物が腫瘍サイズ＞１０００ｍｍ^３に到達した場合に犠牲にさせられるまでプロットされている。

【図2】ＭＶ４１１急性骨髄性白血病異種移植片マウスモデルにおける腫瘍成長に対するｈ５Ｆ９－Ｇ４（マグロリマブ）及びアザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））と組み合わせたＳＥＡ－ＣＤ７０の効果を評価するグラフである。平均腫瘍体積（±ＳＥＭ）は、各処置アームについて報告されている。各単一の処置群について、データは、各群における最初の動物が腫瘍サイズ＞７５０ｍｍ^３に到達した場合に犠牲にさせられるまでプロットされている。

【発明を実施するための形態】

【0021】

Ｉ．定義
別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、記載される方法及び組成物に関する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。商標名が本明細書で使用される場合、出願人は、商標名の製品配合物、ジェネリック薬、及び商標名の製品の活性薬学的成分（複数可）を独立して含むことを意図している。本明細書で使用される場合、以下の用語及び語句は、別途特定されない限り、それらに帰する意味を有する。

【0022】

本明細書で使用される用語「及び／または」は、２つの特定された特徴または成分の各々が、他方の有無にかかわらず具体的に開示されていると解釈されたい。よって、本明細書における「Ａ及び／またはＢ」などの語句において使用される用語「及び／または」は、「Ａ及びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、及び「Ｂ」（単独）を含むことが意図される。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」などの語句において使用される用語「及び／または」は、次の態様：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）の各々を包含することが意図される。

【0023】

本明細書に記載の本発明の態様及び実施形態は、態様及び実施形態を「含む」こと、態様及び実施形態「からなる」こと、ならびに態様及び実施形態「から本質的になる」ことを含むことが理解される。

【0024】

単位、接頭辞、及び記号は、それらの国際単位系（ＳＩ）の認められた形態で示される。数値範囲は、その範囲を定義する数を含む。本明細書で提供される見出しは、本開示の様々な態様を制限するものではなく、明細書全体を参照することによって理解され得る。したがって、以下で直ちに定義される用語は、その全体が本明細書への参照によってより十分に定義される。

【0025】

用語「ＣＤ７０結合剤」及び「抗ＣＤ７０結合剤」は、本明細書で使用される場合、抗ＣＤ７０抗体、抗ＣＤ７０抗体の誘導体もしくは断片、またはＣＤ７０に結合する他の薬剤を意味し、ＣＤ７０結合抗体、またはその誘導体の少なくとも１つのＣＤＲまたは可変領域を含む。

【0026】

用語「ＣＤ４７」は、本明細書で使用される場合、多様な正常細胞及び腫瘍細胞に普遍的に発現する膜貫通タンパク質である細胞表面抗原ＣＤ４７を指す。ＣＤ４７は、免疫グロブリンスーパーファミリー受容体ＳＩＲＰαに対するリガンドである。ＣＤ４７は、「抗原性表面決定基タンパク質ＯＡ３」、「インテグリン関連タンパク質（ＩＡＰ）」及び「タンパク質ＭＥＲ６」とも称される。ＣＤ４７という用語は、本明細書で使用される場合、ＣＤ４７タンパク質のすべての多型バリアントを包含することが意図される。

【0027】

用語「ＳＩＲＰα」は、本明細書で使用される場合、ＳＨＰ基質１（ＳＨＰＳ－１）、チロシンベース活性化モチーフを有する脳Ｉｇ様分子（Ｂｉｔ）、ＣＤ１７２抗原様ファミリーメンバーＡ、阻害性受容体ＳＨＰＳ－１、マクロファージ融合受容体、ＭｙＤ－１抗原、ＳＩＲＰαｌ、ＳＩＲＰα２、ＳＩＲＰα３、ｐ８４、及びＣＤ１７２ａとしても知られている「シグナル制御性タンパク質アルファ」を指す。ＳＩＲＰαは、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーであり、マクロファージ及び樹状細胞を含む食細胞に発現する膜貫通タンパク質である。それは、ＣＤ４７に対する受容体である。ＳＩＲＰαという用語は、本明細書で使用される場合、ＳＩＲＰαタンパク質のすべての多型バリアントを包含することが意図される。

【0028】

用語「ＳＩＲＰα抗体分子融合タンパク質」は、ＳＩＲＰαタンパク質またはその断片及び抗体分子を含む融合タンパク質を意味することが意図される。抗体分子は、本明細書の他の箇所で定義される全長抗体分子、例えば、全長ＩｇＧ抗体であり得る。代替的には、抗体分子は、本明細書の他の箇所で定義される抗体の抗原結合断片であり得る。ＳＩＲＰαタンパク質またはその断片は、抗体分子上の任意の好適な位置で抗体分子に融合され得る。例えば、ＳＩＲＰαタンパク質またはその断片は、抗体分子の重鎖または軽鎖のＮ末端またはＣ末端に融合され得る。所定の実施形態では、ＳＩＲＰα抗体分子融合タンパク質には、全長ＳＩＲＰαタンパク質が含まれないが、その断片、特にＣＤ４７に結合することが可能な断片が含まれるであろう。例えば、ＳＩＲＰα抗体分子融合タンパク質には、ＳＩＲＰα免疫グロブリンＶ様ドメインの１つ以上のコピーが含まれ得る。

【0029】

用語「特異的に結合する」は、結合剤が、その対応する抗原と非常に選択的な様式で反応するが、多数の他の抗原（例えば、非ＣＤ７０分子または非ＣＤ４７分子）と反応しないことを意味する。

【0030】

本明細書で使用される場合、ＣＤ７０結合剤またはＣＤ４７結合剤の文脈における用語「機能的」は、結合剤がＣＤ７０またはＣＤ４７に結合することが可能であることを示す。

【0031】

用語「阻害する」または「の阻害」は、本明細書で使用される場合、測定可能な量低減すること、または全体的に防止することを意味する。

【0032】

ＣＤ７０発現細胞に対するＣＤ７０結合剤の効果の文脈における用語「枯渇する」は、ＣＤ７０発現細胞の数の低減またはその排除を指す。同様に、ＣＤ４７発現細胞に対するＣＤ４７結合剤の効果の文脈における用語「枯渇する」は、ＣＤ４７発現細胞の数の低減またはその排除を指す。

【0033】

「インタクト抗体」及び「インタクト免疫グロブリン」は、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成される、典型的には約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質として本明細書で定義される。各軽鎖は、ヘテロ二量体を形成するためにジスルフィド結合によって重鎖に共有結合的に連結されている。そのヘテロ四量体は、そのようなヘテロ二量体の２つの同一の重鎖間の共有結合性ジスルフィド連結によって形成される。軽鎖及び重鎖は、ジスルフィド結合によって互いに連結されているが、２つの重鎖間のジスルフィド連結の数は、免疫グロブリン（Ｉｇ）アイソタイプによって異なる。各重鎖及び軽鎖はまた、規則的間隔の鎖内ジスルフィド架橋を有する。各重鎖は、アミノ末端で可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）と、それに続く３または４つの定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、Ｃ_Ｈ３、及び／またはＣ_Ｈ４）、ならびにＣ_Ｈ１とＣ_Ｈ２との間のヒンジ（Ｊ）領域を有する。各軽鎖は、２つのドメイン、すなわち、アミノ末端可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）及びカルボキシ末端定常ドメイン（Ｃ_Ｌ）を有する。Ｖ_Ｌドメインは、Ｖ_Ｈドメインと非共有結合的に会合する一方で、Ｃ_Ｌドメインは一般的に、ジスルフィド結合を介してＣ_Ｈ１ドメインに共有結合的に連結されている。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１８６：６５１－６６３）。

【0034】

用語「超可変」は、抗体間の配列が広範に異なり、その特定の抗原決定基に対する各特定の抗体の結合及び特異性に直接的に関与する残基を含有する可変ドメイン内の所定の配列を指す。軽鎖及び重鎖可変ドメインの両方における超可変性は、相補性決定領域（ＣＤＲ）または超可変ループ（ＨＶＬ）として知られている３つのセグメントに集中している。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｉｎ：Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍ．Ｄ．における配列比較によって定義される一方で、ＨＶＬは、Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７によって記載されているように、可変ドメインの三次元構造に従って構造的に定義される。これらの２つの方法がＣＤＲのわずかに異なる同一性をもたらす場合、構造的定義が好ましい。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｐｕｂ．Ｎｏ．９１－３２４２，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．Ｈｅａｌｔｈ ＆ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍ．Ｄ．，１９９１）によって定義されるように、ＣＤＲ－Ｌ１は、軽鎖可変ドメインにおいて、およそ残基２４～３４に位置し、ＣＤＲ－Ｌ２は、およそ残基５０～５６に位置し、ＣＤＲ－Ｌ３は、およそ残基８９～９７に位置し、重鎖可変ドメインにおいて、ＣＤＲ－Ｈ１ではおよそ３１～３５、ＣＤＲ－Ｈ２ではおよそ５０～６５、及びＣＤＲ－Ｈ３ではおよそ９５～１０２に位置する。

【0035】

重鎖及び軽鎖の各々における３つのＣＤＲは、可変性が低い傾向にある配列を含有するフレームワーク領域（ＦＲ）によって隔てられている。重鎖及び軽鎖可変ドメインのアミノ末端からカルボキシ末端まで、ＦＲ及びＣＤＲは、順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４で配置されている。ＦＲの主にβ－シートの構成は、ＣＤＲを鎖の各々内で互いに、及び他方の鎖からのＣＤＲと近接させる。得られるコンフォメーションは、抗原結合部位に寄与するが（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，１９９１，ＮＩＨ Ｐｕｂｌ．Ｎｏ．９１－３２４２，Ｖｏｌ．Ｉ，ｐａｇｅｓ ６４７－６６９を参照されたい）、すべてのＣＤＲ残基が、必ずしも抗原結合に直接的に関与するわけではない。

【0036】

ＦＲ残基及びＩｇ定常ドメインは、典型的には、抗原結合に直接的に関与しないが、抗原結合に寄与し、または抗体エフェクター機能を媒介し得る。いくつかのＦＲ残基は、少なくとも３つの様式：エピトープへの直接的な非共有結合的結合によって、１つ以上のＣＤＲ残基と相互作用することによって、及び重鎖と軽鎖との間の界面に影響を及ぼすことによって、抗原結合に対する有意な効果を有し得る。定常ドメインは、様々なＩｇエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び／または抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）における抗体の関与を媒介する。

【0037】

脊椎動物免疫グロブリンの軽鎖は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、２つの明確に区別されるクラスであるカッパ（ｋ）及びラムダ（λ）に割り当てられる。これに対し、哺乳動物免疫グロブリンの重鎖は、定常ドメインの配列に従って、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭのうちの１つに割り当てられる。ＩｇＧ及びＩｇＡは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２にさらに分けられる。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。ネイティブ免疫グロブリンのクラスのサブユニット構造及び三次元構成は、よく知られている。

【0038】

用語「抗体」、「抗ＣＤ７０抗体」、「ヒト化抗ＣＤ７０抗体」、「バリアントヒト化抗ＣＤ７０抗体」、「抗ＣＤ４７抗体」、「ヒト化抗ＣＤ４７抗体」、及び「バリアントヒト化抗ＣＤ４７抗体」は、最も広い意味で本明細書で使用され、全長及びネイティブ抗体、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異的抗体（例えば、二重特異的抗体）、及び抗体またはその抗原結合断片、例えば、所望の生物学的活性、例えば、ＣＤ７０結合またはＣＤ４７結合を示す抗体の可変ドメイン及び他の部分を具体的に包含する。

【0039】

用語「モノクローナル抗体」（ｍＡｂ）は、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体を指す；すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る天然に存在する変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、エピトープとも称される単一の抗原決定基に対して仕向けられている。修飾語「モノクローナル」は、同一のエピトープに仕向けられた抗体の実質的に均一な集団を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものであると解釈されるべきではない。モノクローナル抗体は、当該技術分野で知られている任意の技術または方法論；例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５によって記載されるハイブリドーマ法、または当該技術分野で知られている組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許番号４，８１６，５６７を参照されたい）によって作製され得る。別の例では、モノクローナル抗体はまた、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８、及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７に記載の技術を使用してファージ抗体ライブラリから単離され得る。

【0040】

対照的に、ポリクローナル抗体の調製物における抗体は、典型的には、免疫グロブリンアイソタイプ及び／またはクラスの異種集団であり、また、多様なエピトープ特異性を示す。

【0041】

用語「キメラ」抗体は、本明細書で使用される場合、重鎖及び／または軽鎖の１つ以上の領域またはドメインにおける完全なアミノ酸配列またはその一部分が、別の種由来の、または別の免疫グロブリンクラスもしくはアイソタイプに属するモノクローナル抗体における対応する配列と同一であり、相同であり、もしくはそのバリアントである、またはコンセンサス配列由来であるモノクローナル抗体の一種である。キメラ抗体には、その親抗体の所望の生物学的活性、例えば、同じエピトープへの結合を示す限り、そのような抗体の断片が含まれる（例えば、米国特許番号４，８１６，５６７；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５を参照されたい）。キメラ抗体を生成するための方法は、当該技術分野で知られている（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９８５．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２；Ｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４；Ｇｉｌｌｉｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １２５：１９１－２０２；米国特許番号５，８０７，７１５；４，８１６，５６７；及び４，８１６，３９７を参照されたい）。

【0042】

用語「抗体断片」、「抗ＣＤ７０抗体断片」、「ヒト化抗ＣＤ７０抗体断片」、「バリアントヒト化抗ＣＤ７０抗体断片」、「抗ＣＤ４７抗体断片」、「ヒト化抗ＣＤ４７抗体断片」、及び「バリアントヒト化抗ＣＤ４７抗体断片」は、可変領域または機能的能力、例えば、特異的ＣＤ７０またはＣＤ４７エピトープ結合が保持された全長抗ＣＤ７０抗体または抗ＣＤ４７抗体の一部分を指す。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ及びｓｃＦｖ－Ｆｃ断片、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、線状抗体、一本鎖抗体、及び抗体断片から形成された他の多重特異的抗体が含まれるがこれらに限定されない。（Ｈｏｌｌｉｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕｄｓｏｎ，２００５，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１１２６－１１３６を参照されたい）。

【0043】

「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、ドメインが単一のポリペプチド鎖に存在し、かつ抗原を認識し、結合させることが可能である、抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌドメインを含む一本鎖Ｆｖバリアントである。ｓｃＦｖポリペプチドは、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の三次元構造を形成することを可能とする、Ｖ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインの間に位置するポリペプチドリンカーを任意に含有する（例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，１９９４，Ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５を参照されたい）。

【0044】

用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を指す。各断片は、Ｖ_Ｈ－Ｖ_ＬまたはＶ_Ｌ－Ｖ_Ｈポリペプチドを形成するために軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）に連結された重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）を含有する。同じ鎖上の２つのドメインの間で対合を可能とするには短すぎるリンカーを使用することによって、連結されたＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられて、２つの抗原結合部位を形成する。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４０９７；ＷＯ９３／１１１６１；及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８においてより十分に記載されている。

【0045】

用語「線状抗体」は、抗原結合領域の対を形成するタンデムＦｄセグメント（Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ１－Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ１）の対を含む抗体を指す。線状抗体は、Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２に記載されているように、二重特異的または単一特異的であり得る。

【0046】

「ヒト化抗体」は、既定の抗原に結合することが可能であり、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有するフレームワーク領域及び非ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有するＣＤＲ（複数可）を有する可変領域ポリペプチド鎖を含む免疫グロブリンアミノ酸配列バリアントまたはその断片を指す。

【0047】

通常、ヒト化抗体は、非ヒトである源からそれに導入された１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、本明細書で「インポート」残基と称され、これは、典型的には、「インポート」抗体ドメイン、特に可変ドメインから得られる。インポート残基、配列、または抗体は、所望の親和性及び／または特異性、または本明細書で論述される他の所望の抗体生物学的活性を有する。

【0048】

通常、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、フレームワーク領域のすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリン配列のもの、例えば、コンセンサスまたは生殖系列配列である。ヒト化抗体はまた、任意に、免疫グロブリンＦｃドメインの少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを含む。例えば、抗体は、軽鎖ならびに重鎖の少なくとも可変ドメインの両方を含有し得る。抗体にはまた、適切な場合、重鎖のＣ_Ｈ１、ヒンジ（Ｊ）、Ｃ_Ｈ２、Ｃ_Ｈ３、及び／またはＣ_Ｈ４領域が含まれ得る。

【0049】

ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＥを含む免疫グロブリンの任意のクラス、ならびにＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３及びｌｇＧ_４を含む任意のアイソタイプから選択され得る。定常領域またはドメインには、例えば、ヒト化抗体が細胞傷害性活性を示すことが所望である場合、補体固定定常ドメインが含まれ得る（例えば、ＩｇＧ_１）。そのような細胞傷害性活性が所望ではない場合、定常ドメインは、別のクラスのものであり得る（例えば、ＩｇＧ_２）。ヒト化抗体は、複数のクラスまたはアイソタイプからの配列を含み得、所望のエフェクター機能を最適化するために特定の定常ドメインを選択することは、当該技術分野の通常の技術の範囲内である。

【0050】

ヒト化抗体のＦＲ及びＣＤＲ領域は、親配列と正確に対応する必要はない。例えば、インポートＣＤＲまたはコンセンサスＦＲは、少なくとも１つの残基の置換、挿入または欠失によって改変され得、これによりその部位におけるＣＤＲまたはＦＲ残基は、コンセンサスまたはインポート抗体のいずれかと対応しなくなる。そのような変異は、典型的には、広範囲ではない。通常、ヒト化抗体残基の少なくとも７５％、よりしばしば少なくとも９０％、ほとんどの場合９５％超は、親ＦＲ及びＣＤＲ配列のものに対応することになる。

【0051】

用語「抗体エフェクター機能（複数可）」は、本明細書で使用される場合、ＩｇのＦｃドメイン（複数可）によって貢献される機能を指す。そのような機能は、例えば、抗体依存性細胞傷害、抗体依存性細胞貪食または補体依存性細胞傷害であり得る。そのような機能は、例えば、食作用もしくは溶解活性を有する免疫細胞上のＦｃ受容体へのＦｃエフェクタードメイン（複数可）の結合または補体系の成分へのＦｃエフェクタードメイン（複数可）の結合によって奏され得る。典型的には、Ｆｃ結合細胞または補体成分によって媒介される効果（複数可）は、ＣＤ７０標的化細胞の阻害及び／または枯渇をもたらす。任意の特定の理論によって縛られることを意図していないが、抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する細胞を動員し、それらを抗体で被覆された標的細胞と並置させ得る。ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）及びＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ６４）を含む、ＩｇＧに対する表面ＦｃＲを発現する細胞は、ＩｇＧ被覆細胞の破壊のためのエフェクター細胞として作用し得る。そのようなエフェクター細胞には、単球、マクロファージ、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球及び好酸球が含まれる。ＩｇＧによるＦｃγＲの係合は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）を活性化する。ＡＤＣＣは、膜細孔形成タンパク質及びプロテアーゼの分泌を介してＣＤ１６^＋エフェクター細胞によって媒介されるのに対し、貪食は、ＣＤ３２^＋及びＣＤ６４^＋エフェクター細胞によって媒介される（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４^ｔｈ ｅｄ．，Ｐａｕｌ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ－Ｒａｖｅｎ，Ｎ．Ｙ．，１９９７，Ｃｈａｐｔｅｒｓ ３，１７ ａｎｄ ３０；Ｕｃｈｉｄａ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９：１６５９－６９；Ａｋｅｗａｎｌｏｐ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１：４０６１－６５；Ｗａｔａｎａｂｅ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．５３：１９９－２０７を参照されたい）。ＡＤＣＣ及びＡＤＣＰに加えて、細胞結合抗体のＦｃ領域はまた、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘発させるために補体古典的経路を活性化し得る。補体系のＣ１ｑは、それらが抗原と複合体化する場合、抗体のＦｃ領域に結合する。細胞結合抗体へのＣ１ｑの結合は、Ｃ３転換酵素を生成するためにＣ４及びＣ２のタンパク質分解活性化を伴う事象のカスケードを開始させ得る。Ｃ３転換酵素によるＣ３ｂへのＣ３の切断は、Ｃ５ｂ、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８及びＣ９を含む最終補体成分の活性化を可能とする。まとめると、これらのタンパク質は、抗体被覆細胞上に膜攻撃複合体細孔を形成する。これらの細孔は、細胞膜全体性を崩壊させ、標的細胞を殺傷する（Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，６^ｔｈ ｅｄ．，Ｊａｎｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．，２００５，Ｃｈａｐｔｅｒ ２を参照されたい）。

【0052】

用語「抗体依存性細胞傷害」、またはＡＤＣＣは、抗体被覆標的細胞と溶解活性を保有する免疫細胞（エフェクター細胞とも称される）との相互作用に依存する細胞死を誘導するためのメカニズムである。そのようなエフェクター細胞には、ナチュラルキラー細胞、単球／マクロファージ及び好中球が含まれる。エフェクター細胞は、それらの抗原結合部位を介して標的細胞に結合したＩｇのＦｃエフェクタードメイン（複数可）に結合する。抗体被覆標的細胞の死は、エフェクター細胞活性の結果として生じる。

【0053】

用語「抗体依存性細胞貪食」、またはＡＤＣＰは、抗体被覆細胞が、ＩｇのＦｃエフェクタードメイン（複数可）に結合する食作用免疫細胞（例えば、マクロファージ、好中球及び樹状細胞）によって全体としてまたは部分的に内在化されるプロセスを指す。

【0054】

用語「補体依存性細胞傷害」、またはＣＤＣは、標的結合抗体のＦｃエフェクタードメイン（複数可）が、標的細胞膜における孔部の形成をもたらす一連の酵素反応を活性化する細胞死を誘導するためのメカニズムを指す。典型的には、抗原－抗体複合体、例えば、抗体被覆標的細胞上のものは、補体成分Ｃ１ｑを結合させ、活性化し、これはひいては、標的細胞死をもたらす補体カスケードを活性化する。補体の活性化はまた、白血球上の補体受容体（例えば、ＣＲ３）を結合させることによってＡＤＣＣを容易化する標的細胞表面上の補体成分の沈着をもたらし得る。

【0055】

「免疫細胞」は、本明細書で使用される場合、免疫反応の制御に関与する造血系の細胞を指す。典型的な実施形態では、免疫細胞は、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ＮＫ細胞、単球／マクロファージ、または樹状細胞である。

【0056】

「エフェクター細胞」は、本明細書で使用される場合、免疫グロブリン（ＦｃＲ）のＦｃドメインに対する表面受容体を発現する細胞を指す。例えば、ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）及びＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ６４）を含むＩｇＧのための表面ＦｃＲを発現する細胞は、エフェクター細胞として作用し得る。そのようなエフェクター細胞には、単球、マクロファージ、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球及び好酸球が含まれる。

【0057】

「治療剤」は、がん細胞、活性化免疫細胞または他の標的細胞集団に対して細胞傷害性、細胞増殖抑制性、及び／または免疫調節性効果を発揮する薬剤である。治療剤の例には、細胞傷害剤、化学療法剤、細胞増殖抑制剤、及び免疫調節剤が含まれる。

【0058】

「細胞傷害性効果」は、標的細胞の枯渇、排除及び／または殺傷を指す。「細胞傷害剤」は、細胞に対する細胞傷害性効果を有する薬剤を指す。その用語は、放射性同位体（例えば、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、及びＲｅ^１８６）、化学療法剤、及び毒素、例えば、細菌、真菌、植物、または動物起源の酵素的に活性な毒素、及びその断片を含むことが意図される。そのような細胞傷害剤は、抗体、例えば、ヒト化抗ＣＤ７０抗体または抗ＣＤ４７抗体に接続され、例えば、抗体での療法が適応される患者を処置するために使用され得る。一実施形態では、「細胞傷害剤」には、モノクローナル抗体、例えば、本明細書に記載のヒト化抗体と組み合わせて使用される抗体が含まれる。

【0059】

「化学療法剤」は、がんの処置において有用な化学的化合物である。化学療法剤の例には、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））；アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドパ、カルボコン、メツレドパ、及びウレドパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド、及びトリメチローロメラミンを含むエチレンイミン及びメチラメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成アナログトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成アナログを含む）及びその誘導体；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン、アウリスタチン（アナログモノメチル－アウリスタチンＥ及びモノメチル－アウリスタチンＦ（例えば、２００５年１０月２７日に公開された米国公開出願番号２００５－０２３８６４９（その全体が本明細書に組み込まれる）を参照されたい）を含む）；デュオカルマイシン（合成アナログＫＷ－２１８９及びＣＢＩ－ＴＭＩを含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビチン、フェネステリン、プレドニマスチン；トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロスウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアミシン、特にカリケアミシンガンマ１Ｉ及びカリケアミシンファイＩ１、例えば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３－１８６を参照されたい；ダイネマイシンＡを含むダイネマイシン；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウトラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン（商標））（モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルブシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えば、メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）；葉酸アナログ、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトトレキサート；プリンアナログ、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗アドラナール、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補給剤、例えば、フォリン酸；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デモコルシン；ジアジコン；エフロルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシン及びアンサマイトシン；ミトグアゾン、ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ－２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミタブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）及びドキセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ－Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（商標））；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金アナログ、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸；カペシタビン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、または誘導体が含まれる。この定義にはまた、腫瘍に対するホルモン作用を制御または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）（例えば、タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（商標）を含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ（商標））を含む）；副腎におけるエストロゲン生成を制御する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール（Ｍｅｇａｃｅ（商標））、エキセメスタン、フォルメスタン、ファドロゾール、ボロゾール（Ｒｉｖｉｓｏｒ（商標））、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ（商標））、及びアナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ（商標））；及び抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド、及びゴセレリン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、または誘導体が含まれる。

【0060】

用語「プロドラッグ」は、本明細書で使用される場合、親薬物と比較して腫瘍細胞に対して細胞傷害性が低く、より活性な親形態へと酵素的に活性化または変換することが可能な薬学的に活性な物質の前駆体または誘導体形態を指す。例えば、Ｗｉｌｍａｎ，１９８６，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ”，Ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ，１４，ｐｐ．３７５－３８２，６１５ｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ｂｅｌｆａｓｔ；及びＳｔｅｌｌａ ｅｔ ａｌ．，１９８５，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｉｎ：“Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ ｅｔ ａｌ．，（ｅｄ．），ｐｐ．２４７－２６７，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓを参照されたい。有用なプロドラッグには、ホスフェート含有プロドラッグ、チオホスフェート含有プロドラッグ、スルフェート含有プロドラッグ、ペプチド含有プロドラッグ、Ｄ－アミノ酸修飾プロドラッグ、グリコシル化プロドラッグ、β－ラクタム含有プロドラッグ、任意に置換されたフェノキシアセトアミド含有プロドラッグ、及び任意に置換されたフェニルアセトアミド含有プロドラッグ、より活性な細胞傷害性遊離薬物に変換され得る５－フルオロシトシン及び他の５－フルオロウリジンプロドラッグが含まれるがこれらに限定されない。プロドラッグ形態に誘導体化され得る細胞傷害性薬物の例には、上述したそれらの化学療法剤が含まれるがこれらに限定されない。

【0061】

「細胞増殖抑制性効果」は、細胞増殖の阻害を指す。「細胞増殖抑制性薬剤」は、細胞に対する細胞増殖抑制性効果を有し、それにより特定のサブセットの細胞の成長及び／または増殖を阻害する薬剤を指す。

【0062】

用語「免疫調節性効果」は、本明細書で使用される場合、免疫学的反応の発達または維持の刺激（免疫刺激性）または阻害（免疫抑制性）を指す。阻害は、例えば、免疫細胞（例えば、ＴまたはＢリンパ球）の排除；他の細胞の機能的能力を調節（例えば、下方制御）し得る免疫細胞の誘導または生成；免疫細胞における非反応性状態（例えば、アネルギー）の誘導；または例えば、これらの細胞によって発現するタンパク質のパターンを改変することを含む、免疫細胞の活性または機能を増加させること、低下させることまたは変化させること（例えば、所定のクラスの分子、例えば、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、転写因子、キナーゼ、共刺激分子または他の細胞表面受容体などの生成及び／または分泌の改変）によって奏され得る。「免疫調節剤」は、細胞に対する免疫調節性効果を有する薬剤を指す。いくつかの実施形態では、免疫調節剤は、免疫反応を促進する免疫細胞に対する細胞傷害性または細胞増殖抑制性効果を有する。

【0063】

用語「標識」は、抗体に直接的にまたは間接的にコンジュゲートされた検出可能な化合物または組成物を指す。標識は、それ自体で検出可能であり（例えば、放射性同位体標識または蛍光標識）または、酵素標識の場合、検出可能である基質化合物または組成物の化学的変化を触媒し得る。標識された抗ＣＤ７０抗体は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ診断を含む様々な用途において調製及び使用され得る。

【0064】

「単離された」核酸分子は、核酸の天然源においてそれが通常関連する少なくとも１つの混入核酸分子から同定及び分離された核酸分子である。単離された核酸分子は、それが天然に見られる形態または状況のもの以外である。そのため、単離された核酸分子は、天然細胞に存在する核酸分子とは区別される。しかしながら、単離された核酸分子には、例えば、核酸分子が天然細胞の染色体位置とは異なる染色体位置にある抗体を通常発現させる細胞に含まれる核酸分子が含まれる。

【0065】

用語「コントロール配列」は、特定の宿主生物において機能可能に連結されたコード配列の発現に必要なポリヌクレオチド配列を指す。原核細胞において使用するのに好適なコントロール配列には、例えば、プロモーター、オペレーター、及びリボソーム結合部位配列が含まれる。真核コントロール配列には、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーが含まれるがこれらに限定されない。これらのコントロール配列は、原核及び真核宿主細胞における抗ＣＤ７０結合剤の発現及び生成のために利用され得る。

【0066】

核酸配列は、別の核酸配列との機能的関係性に置かれた場合、「機能可能に連結」されている。例えば、核酸プレ配列または分泌性リーダーは、ポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現する場合、ポリペプチドをコードする核酸に機能可能に連結されている；プロモーターまたはエンハンサーは、配列の転写に影響を及ぼす場合、機能可能に連結されている；またはリボソーム結合部位は、翻訳を容易化するように配置されている場合、コード配列に機能可能に連結されている。通常、「機能可能に連結された」は、連結されているＤＮＡ配列が近接しており、分泌リーダーの場合、近接しており、リーディングフレームにあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、任意に近接している。連結は、好都合な制限部位でのライゲーションによって達成され得る。そのような部位が存在しない場合、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーが、ＤＮＡ配列を連結させるために使用され得る。

【0067】

用語「ポリペプチド」は、アミノ酸のポリマー及びその同等物を指し、生成物の特定の長さを指さない；よって、「ペプチド」及び「タンパク質」は、ポリペプチドの定義に含まれる。ポリペプチドの定義にはまたは、本明細書で定義される「抗体」が含まれる。「ポリペプチド領域」は、ポリペプチドのセグメントを指し、セグメントは、例えば、１つ以上のドメインまたはモチーフを含有し得る（例えば、抗体のポリペプチド領域は、例えば、１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有し得る）。用語「断片」は、典型的にはポリペプチドの少なくとも２０個の連続アミノ酸または少なくとも５０個の連続アミノ酸を有するポリペプチドの一部分を指す。「誘導体」は、第２のポリペプチドと比べて１つ以上の非保存的または保存的アミノ酸置換を有するポリペプチドもしくはその断片；または第２の分子の共有結合によって、例えば、異種ポリペプチドの結合によって、またはグリコシル化、アセチル化、リン酸化などによって修飾されたポリペプチドもしくはその断片である。「誘導体」の定義には、例えば、アミノ酸の１つ以上のアナログ（例えば、非天然アミノ酸など）を含有するポリペプチド、非置換連結を有するポリペプチド、ならびに当該技術分野で知られている他の改変物（天然に存在するもの及び天然に存在しないものの両方）である。

【0068】

「単離された」ポリペプチドは、その天然環境の成分から同定、分離、及び／または回収されたものである。その天然環境の混入成分は、ポリペプチドの診断的または治療的使用を妨害するであろうで物質であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含み得る。単離されたポリペプチドには、単離された抗体、またはその断片もしくは誘導体が含まれる。「抗体」には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換え細胞内でｉｎ ｓｉｔｕの抗体が含まれる。

【0069】

所定の実施形態では、抗体は、（１）抗体が、例えば、ローリー法によって決定される場合、９５重量％超、他の態様では９９重量％超になるまで、（２）スピニングカップ配列決定装置の使用によってＮ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度になるまで、または（３）クマシーブルー、または、好ましくは、シルバー染色を使用して還元または非還元条件下でＳＤＳ－ＰＡＧＥによる均質性となるまで、精製される。

【0070】

ポリペプチドとの関連で用語「異種」は、２つのポリペプチドが異なるように、別のポリペプチドと比較して異なる源（例えば、細胞、組織、生物、または種）を意味する。典型的には、異種ポリペプチドは、異なる種からのものである。

【0071】

免疫グロブリンポリペプチドまたはその断片との関連で、「保存的置換」は、抗原への免疫グロブリンポリペプチドまたはその断片の特異的結合（例えば、Ｋ_Ｄによって測定される）を実質的に低減しない１つ以上のアミノ酸置換（すなわち、結合親和性を増加させる、結合親和性を有意に改変しない、または標準的な結合アッセイ、例えば、ＥＬＩＳＡなどによって決定される場合、結合親和性を約４０％以下、典型的には約３０％以下、より典型的には約２０％以下、さらにより典型的には約１０％以下、または最も典型的には約５％以下低減する置換）を意味する。

【0072】

２つ以上の核酸またはポリペプチド配列との関連で、用語「同一」または「同一率」は、最大一致のために比較及びアライメントされた場合、同じであるか、または同じヌクレオチドもしくはアミノ酸残基の特定割合を有する２つ以上の配列またはサブ配列を指す。同一率を決定するために、配列は、最適な比較目的のためにアライメントされる（例えば、第２のアミノまたは核酸配列との最適なアライメントのために第１のアミノ酸または核酸配列の配列においてギャップが導入され得る）。次いで対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置におけるアミノ酸残基またはヌクレオチドが比較される。第１の配列における位置が第２の配列における対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占められている場合、そのときは分子は、その位置で同一である。２つの配列間の同一率は、配列によって共有された同一の位置の数の関数である（すなわち、％同一性＝同一の位置の数／位置の総数（例えば、重複位置）ｘ１００）。いくつかの実施形態では、２つの配列は、同じ長さである。

【0073】

２つの核酸またはポリペプチドとの関連で用語「実質的に同一」は、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、または少なくとも６５％の同一性；典型的には少なくとも７０％または少なくとも７５％の同一性；より典型的には少なくとも８０％または少なくとも８５％の同一性；さらにより典型的には少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％の同一性（例えば、以下に示される方法のうちの１つを使用して決定される）を有する２つ以上の配列またはサブ配列を指す。

【0074】

２つ以上のポリペプチド配列との関連で用語「類似性」または「類似率」は、以下に示される方法のうちの１つを使用して測定される場合、最大一致のために比較及びアライメントされた場合、同じであるか、または保存的に置換されたアミノ酸残基の特定割合を有する２つ以上の配列またはサブ配列を指す。例として、第１のアミノ酸配列は、第１のアミノ酸配列が、第１の配列に含有される数と同数のアミノ酸と比較した場合、または例えば、以下に示される方法のうちの１つによってアライメントされたポリペプチドのアライメントと比較した場合、第２のアミノ酸配列と少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、９０％、または９５％同一であるか、または保存的に置換されている場合、第２のアミノ酸配列と類似するとみなされ得る。

【0075】

用語「実質的類似性」または「実質的に類似の」は、ポリペプチド配列との関連で、ポリペプチド領域が、参照配列と少なくとも７０％、典型的には少なくとも８０％、より典型的には少なくとも８５％、または少なくとも９０％または少なくとも９５％の配列類似性を有する配列を有することを示している。例えば、ポリペプチドは、例えば、２つのペプチドが１つ以上の保存的置換（複数可）によって異なる場合、第２のポリペプチドと実質的に同様である。

【0076】

抗ＣＤ７０抗体、またはその誘導体との関連で、抗ＣＤ７０抗体の１つ以上の抗原結合領域（例えば、重鎖または軽鎖可変領域、または重鎖または軽鎖ＣＤＲ）と実質的に同一のまたは実質的に類似する１つ以上のポリペプチド領域を有するタンパク質は、当該技術分野で知られているまたは本明細書で言及される様々な標準的なイムノアッセイのいずれかを使用して決定される場合、抗ＣＤ７０抗体によって認識されるＣＤ７０のエピトープへの特異的結合を保持する。

【0077】

抗ＣＤ４７抗体、またはその誘導体との関連で、抗ＣＤ４７抗体の１つ以上の抗原結合領域（例えば、重鎖または軽鎖可変領域、または重鎖または軽鎖ＣＤＲ）と実質的に同一のまたは実質的に類似する１つ以上のポリペプチド領域を有するタンパク質は、当該技術分野で知られているまたは本明細書で言及される様々な標準的なイムノアッセイのいずれかを使用して決定される場合、抗ＣＤ４７抗体によって認識されるＣＤ４７のエピトープへの特異的結合を保持する。

【0078】

抗ＳＩＲＰα抗体、またはその誘導体との関連で、抗ＳＩＲＰα抗体の１つ以上の抗原結合領域（例えば、重鎖または軽鎖可変領域、または重鎖または軽鎖ＣＤＲ）と実質的に同一のまたは実質的に類似する１つ以上のポリペプチド領域を有するタンパク質は、当該技術分野で知られているまたは本明細書で言及される様々な標準的なイムノアッセイのいずれかを使用して決定される場合、抗ＳＩＲＰα抗体によって認識されるＳＩＲＰαのエピトープへの特異的結合を保持する。

【0079】

２つの配列間の同一率または類似率の決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。２つの配列の比較のために利用される数学的アルゴリズムの好ましい非限定的な例は、Ｋａｒｌｉｎ ａｎｄ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５８７３－５８７７ように改変されたＫａｒｌｉｎ ａｎｄ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，１９９０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：２２６４－２２６８のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０のＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラムに組み込まれる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、対象となるタンパク質をコードする核酸と相同なヌクレオチド配列を得るために、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長さ＝１２で実施され得る。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、対象となるタンパク質と相同なアミノ酸配列を得るために、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長さ＝３で実施され得る。比較目的のためのギャップ付きアライメントを得るために、Ｇａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴが、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２に記載されているように利用され得る。代替的には、分子間の距離的関係性を検出する反復検索を実施するためにＰＳＩ－Ｂｌａｓｔが使用され得る（上掲）。ＢＬＡＳＴ、Ｇａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴ、及びＰＳＩ－Ｂｌａｓｔプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメータが使用され得る。配列の比較のために利用される数学的アルゴリズムの別の非限定的な例は、Ｍｙｅｒｓ ａｎｄ Ｍｉｌｌｅｒ，ＣＡＢＩＯＳ（１９８９）のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、ＧＣＧ配列アライメントソフトウエアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれている。アミノ酸配列を比較するためにＡＬＩＧＮプログラムを利用する場合、ＰＡＭ１２０加重残基表、１２のギャップ長ペナルティ、及び４のギャップペナルティが使用され得る。配列分析のための追加のアルゴリズムは、当該技術分野で知られており、それには、Ｔｏｒｅｌｌｉｓ ａｎｄ Ｒｏｂｏｔｔｉ，１９９４，Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．１０：３－５に記載されるＡＤＶＡＮＣＥ及びＡＤＡＭ；ならびにＰｅａｒｓｏｎ ａｎｄ Ｌｉｐｍａｎ，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４－８に記載されるＦＡＳＴＡが含まれる。ＦＡＳＴＡ内で、ｋｔｕｐは、検索の感度及び速度を設定するコントロールオプションである。ｋｔｕｐ＝２の場合、比較されている２つの配列における類似する領域が、アライメントされた残基の対を調べることによって見出される；ｋｔｕｐ＝１の場合、単一のアライメントされたアミノ酸が調べられる。ｋｔｕｐは、タンパク質配列の場合は２または１に、またはＤＮＡ配列の場合は１～６に設定され得る。デフォルトは、ｋｔｕｐが指定されていない場合、タンパク質について２であり、ＤＮＡについて６である。代替的には、タンパク質配列アライメントは、Ｈｉｇｇｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６６：３８３－４０２によって記載されているように、ＣＬＵＳＴＡＬ Ｗアルゴリズムを使用して行われ得る。

【0080】

本明細書で使用される場合、表現「細胞」、「細胞株」、及び「細胞培養」は、互換的に使用され、すべてのそのような名称には、その子孫が含まれる。よって、「形質転換体」及び「形質転換細胞」には、一次対象細胞及び形質転換の数にかかわらずそれに由来する培養物が含まれる。すべての子孫は、意図的なまたは天然に存在する変異により、ＤＮＡ含有量が正確に同一ではない場合があることが理解される。最初に形質転換された細胞内でスクリーニングされたものと同じ機能または生物学的活性を有する変異子孫が含まれる。明確な名称が意図される場合、それは、文脈から明らかとなる。

【0081】

処置の目的のための用語「対象」は、任意の動物、特に、ヒト、飼いならされた動物及び牧場動物、ならびに動物園、スポーツ、またはペット動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、ウシなどを含む哺乳動物として分類される動物を指す。好ましくは、対象は、ヒトである。

【0082】

本明細書で使用される場合の「障害」、ならびに用語「ＣＤ７０関連障害」及び「ＣＤ７０関連疾患」は、本明細書に記載される抗ＣＤ７０結合剤での処置から利益を受けるであろう任意の病態を指す。「ＣＤ７０関連障害」及び「ＣＤ７０関連疾患」は、典型的には、細胞表面上でＣＤ７０、またはその断片を発現する。これには、哺乳動物を問題となる障害に罹患させやすくするそれらの病理学的病態を含む慢性及び急性の障害または疾患が含まれる。本明細書において処置される非限定的な例または障害には、がん、骨髄悪性腫瘍、血液学的悪性腫瘍、良性及び悪性腫瘍、白血病及びリンパ悪性腫瘍、がん、ならびに炎症性、血管新生性及び免疫学的障害が含まれる。障害の具体的な例は、以下に開示されている。同様に、用語「ＣＤ４７関連障害」及び「ＣＤ４７関連疾患」は、本明細書に記載される抗ＣＤ４７結合剤または他のＣＤ４７アンタゴニストでの処置から利益を受けるであろう任意の病態を指す。「ＣＤ４７関連障害」及び「ＣＤ４７関連疾患」は、典型的には、細胞表面上でＣＤ４７、またはその断片を発現する。これには、哺乳動物を問題となる障害に罹患させやすくするそれらの病理学的病態を含む慢性及び急性の障害または疾患が含まれる。本明細書において処置される非限定的な例または障害には、がん、骨髄悪性腫瘍、血液学的悪性腫瘍、良性及び悪性腫瘍、白血病及びリンパ悪性腫瘍、がん、ならびに炎症性、血管新生性及び免疫学的障害が含まれる。障害の具体的な例は、以下に開示されている。

【0083】

用語「処置」及び「療法」などは、本明細書で使用される場合、１つ以上の症状の軽減または緩和、疾患または障害の進行の退縮、減速または停止を含むがこれらに限定されない、任意の臨床的に所望のまたは有益な効果をもたらす疾患または障害のための治療的ならびに予防的、または抑制的手段を含むことを意味する。よって、例えば、処置という用語には、疾患または障害の症状の発症の前または後に薬剤を投与し、それにより疾患または障害のすべての兆候を予防または除去することが含まれる。別の例として、その用語には、疾患の症状と戦うための疾患の臨床的発症後の薬剤の投与が含まれる。さらに、発症後及び臨床的症状が進行した後の薬剤の投与は、投与が疾患または障害の臨床的パラメータ、例えば、組織傷害の程度または転移の量もしくは程度に影響を及ぼす場合、処置が疾患の改善をもたらすかどうかにかかわらず、本明細書で使用される「処置」または「療法」を含む。

【0084】

本明細書で使用される場合、用語「予防」または「予防する」は、（ａ）ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんもしくは免疫学的障害、またはその臨床的もしくは診断的症状の１つ以上の発生または発症を阻止するために、（ｂ）ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の発症の重症度を阻害するために、または（ｃ）ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の開始の可能性を低下させるために、ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の臨床的または診断的症状の発症前の対象への抗ＣＤ７０結合剤及び／またはＣＤ４７アンタゴニストへの投与（例えば、ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害にかかりやすい素因を有する、または罹患するリスクの高い個体への投与）を指す。

【0085】

用語「静脈内注入」は、およそ１５分、通常はおよそ３０～９０分よりも長い期間にわたる動物またはヒト患者の静脈への薬剤、例えば、治療剤の導入を指す。

【0086】

用語「静脈内ボーラス」または「静脈内プッシュ」は、身体がおよそ１５分以下、通常は５分以下で薬物を摂取するような動物またはヒトの静脈への薬物投与を指す。

【0087】

用語「皮下投与」は、薬物容器からの比較的遅い持続送達による、動物またはヒト患者の皮膚下での、典型的には皮膚と基礎組織との間のポケット内での薬剤、例えば、治療剤の導入を指す。皮膚を基礎組織から離れるように上方につまむことまたは引っ張ることは、ポケットを生成し得る。

【0088】

用語「パッケージ挿入物」は、そのような治療製品の使用に関する適応症、使用法、投与、禁忌及び／または警告に関する情報を含有する、治療製品の商業用パッケージに習慣的に含まれる指示書を指すために使用される。

【0089】

「リポソーム」は、哺乳動物への薬物（例えば、抗体）の送達に有用である様々なタイプの脂質、リン脂質及び／または界面活性剤から構成される小さなベシクルである。リポソームの成分は、一般的に、生物学的膜の脂質配置と同様に、二重層形成で配置される。

【0090】

用語「皮下注入」は、３０分以下、または９０分以下を含むがこれらに限定されない期間の薬物容器からの比較的遅い持続送達による、動物またはヒト患者の皮膚下での、好ましくは皮膚と基礎組織との間のポケット内での薬剤の導入を指す。任意に、注入は、動物またはヒト患者の皮膚下に埋め込まれる薬物送達ポンプの皮下埋込によって行われ得、ポンプは、既定の期間、例えば、３０分、９０分、または処置レジメンの長さにわたる期間、薬物の既定の量を送達する。

【0091】

用語「皮下ボーラス」は、動物またはヒト患者の皮膚下の薬物投与を指し、ボーラス薬物送達は、およそ１５分未満；別の態様では、５分未満、さらに別の態様では、６０秒未満である。またさらに別の態様では、投与は、皮膚と基礎組織との間のポケット内であり、ポケットは、皮膚を基礎組織から離れるように上方につまむことまたは引っ張ることによって生成され得る。

【0092】

用語「有効量」は、対象におけるＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の１つ以上の臨床的または診断的症状の発生を阻害し、またはその症状を改善するために十分な抗ＣＤ７０結合剤（例えば、抗体または誘導体または他の結合剤）またはＣＤ４７アンタゴニストの量を指す。有効量の薬剤は、「有効なレジメン」で本明細書に記載の方法に従って投与される。用語「有効なレジメン」は、ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の処置または予防を達成するために適切な薬剤の量及び投薬頻度の組み合わせを指す。

【0093】

用語「治療的有効量」は、有益な患者アウトカム、例えば、細胞の成長停止効果または消失を有する治療剤の量を指すために使用される。一態様では、治療的有効量は、アポトーシス活性を有し、または細胞死を誘導することが可能である。別の態様では、治療的有効量は、例えば、疾患進行を減速させる際に有効であることが示された標的血清濃度を指す。有効性は、処置される病態に応じて、従来の方法で測定され得る。例えば、ＣＤ７０及び／またはＣＤ４７を発現する細胞によって特性化される新生物疾患または障害において、有効性は、疾患進行への時間（ＴＴＰ）を評価することまたは反応率（ＲＲ）を決定することによって測定され得る。

【0094】

本明細書で使用される場合、「完全反応」または「ＣＲ」は、すべての標的病変の消失を指し、「部分的反応」または「ＰＲ」は、ベースライン最長径和（ＳＬＤ）を基準として、標的病変のＳＬＤが少なくとも３０％減少することを指し、「安定な疾患」または「ＳＤ」は、処置開始以降の最小ＳＬＤを基準として、ＰＲの要件を満たす十分な標的病変の縮小がなく、かつＰＤの要件を満たす十分な増大がないことを指す。

【0095】

本明細書で使用される場合、「無増悪生存」または「ＰＦＳ」は、治療されている疾患（例えば、がん）が悪化しない治療中及び治療後の時間の長さを指す。無増悪生存には、患者が完全応答または部分的応答を経験した時間量、及び患者が安定な疾患を経験した時間量が含まれ得る。

【0096】

本明細書で使用される場合、「全体的反応率」または「ＯＲＲ」は、完全応答（ＣＲ）率及び部分的応答（ＰＲ）率の合計を指す。

【0097】

本明細書で使用される場合、「全生存」または「ＯＳ」は、特定の期間後に生存している可能性が高い群における個体の割合を指す。

【0098】

「有害事象」（ＡＥ）は、本明細書で使用される場合、医学的処置の使用に関連する、任意の好ましくなく一般に意図されていないまたは望ましくない徴候（異常な検査所見を含む）、症状、または疾患である。医学的処置は、１つ以上の関連するＡＥを有し得、各ＡＥは、同じまたは異なるレベルの重症度を有し得る。「有害事象を改変する」ことが可能な方法への言及は、異なる処置レジメンの使用に関連する１つ以上のＡＥの発生率及び／または重症度を低下させる処置レジメンを意味する。

【0099】

「重度有害事象」または「ＳＡＥ」は、本明細書で使用される場合、以下の基準のうちの１つを満たす有害事象である：
・死に至るものまたは生命を脅かすもの（重篤な有害事象の定義で使用される場合、「生命を脅かすもの」とは、その事象の時点で患者が死亡する危険性がある事象を指し、仮により重度であれば死に至ったかもしれないという事象を指すのではない。
・永続的または有意な障害／不能をもたらす
・先天性異常／出生異常を構成する
・医学的に重要であるもの、すなわち、患者を危機にさらす事象または上記に列挙される結果の１つを防ぐために医学的もしくは外科的介入を必要とし得る事象と定義される。ＡＥが「医学的に有意である」かどうかを決定する際には医学的及び科学的判断が発揮されなければならない。
・入院患者の入院期間または既存の入院期間の延長が必要となるもの。以下を除く：１）基礎疾患の日常的な治療またはモニタリングで状態のいかなる悪化も伴わないもの、２）試験下の適応症とは無関係であり、インフォームドコンセントに署名してから悪化していない既往症に対する選択的または事前計画された治療、ならびに３）患者の全身状態のいかなる悪化もない社会的な理由及び休息介護。

【0100】

選択肢（例えば、「または」）の使用は、選択肢のうち１つ、両方、またはその任意の組み合わせのいずれかを意味することが理解されるべきである。本明細書で使用される場合、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は、記述または列挙される任意の要素の「１つ以上」を指すことが理解されるべきである。

【0101】

用語「約」または「本質的に含む」は、当業者によって決定される特定の値または組成の許容誤差範囲内にある値または組成を指し、これは、部分的に、値または組成がどのように測定または決定されるか、すなわち、測定システムの限界に依存する。例えば、「約」または「本質的に含む」は、当該技術分野における実務に従って１以内または１を超える標準偏差を意味し得る。代替的には、「約」または「本質的に含む」は、最大２０％の範囲を意味し得る。さらに、特に生物学的システムまたはプロセスに関して、その用語は、最大１桁または最大５倍の値を意味し得る。特定の値または組成が本出願及び特許請求の範囲で提供される場合、別段記述されない限り、「約」または「本質的に含む」の意味は、その特定の値または組成について許容可能な誤差範囲内にあることが想定されるべきである。

【0102】

用語「薬学的に許容可能な」は、本明細書で使用される場合、連邦政府もしくは州政府の規制機関によって承認されていること、または動物における、より具体的にはヒトにおける使用について米国薬局方もしくは他の一般的に認識されている薬局方に列挙されていることを意味する。用語「薬学的適合性成分」は、抗ＣＤ７０結合剤またはＣＤ４７アンタゴニストと共に投与される薬学的に許容可能な希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを指す。

【0103】

語句「薬学的に許容可能な塩」は、本明細書で使用される場合、抗ＣＤ７０結合剤もしくは治療剤またはＣＤ４７アンタゴニストもしくは治療剤の薬学的に許容可能な有機または無機塩を指す。抗ＣＤ７０結合剤もしくは治療剤またはＣＤ４７アンタゴニストもしくは治療剤は、少なくとも１つのアミノ基を含有し、したがって、酸付加塩は、このアミノ基または他の好適な群を伴って形成され得る。例示的な塩には、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐトルエンスルホン酸塩、及びパモ酸塩（すなわち、１，１’メチレンビス－（２ヒドロキシ３ナフトエート））が含まれるがこれらに限定されない。薬学的に許容可能な塩は、酢酸イオン、コハク酸イオン、または他の対イオンなどの別の分子の包含を伴い得る。対イオンは、親化合物上の電荷を安定化する任意の有機または無機部位であり得る。さらに、薬学的に許容可能な塩は、その構造における複数の荷電原子を有し得る。複数の荷電原子が薬学的に許容可能な塩の一部である例は、複数の対イオンを有し得る。これにより、薬学的に許容可能な塩は、１つ以上の荷電原子及び／または１つ以上の対イオンを有し得る。

【0104】

「薬学的に許容可能な溶媒和物」または「溶媒和物」は、１つ以上の溶媒分子及び抗ＣＤ７０結合剤及び／または治療剤またはＣＤ４７アンタゴニスト及び／または治療剤の会合を指す。薬学的に許容可能な溶媒和物を形成する溶媒の例には、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、及びエタノールアミンが含まれるがこれらに限定されない。

【0105】

略語「ＡＦＰ」は、ジメチルバリン－バリン－ドライソロイイン－ドラプロイン－フェニルアラニン－ｐ－フェニレンジアミンを指す。

【0106】

略語「ＭＭＡＥ」は、モノメチルアウリスタチンＥを指す。

【0107】

略語「ＡＥＢ」は、アウリスタチンＥをパラアセチル安息香酸と反応させることによって生成されるエステルを指す。

【0108】

略語「ＡＥＶＢ」は、アウリスタチンＥをベンゾイル吉草酸と反応させることによって生成されるエステルを指す。

【0109】

略語「ＭＭＡＦ」は、ドバリン－バリン－ドライソロイシン－ドラプロイン－フェニルアラニンを指す。

【0110】

略語「ｆｋ」及び「ｐｈｅ－ｌｙｓ」は、リンカーフェニルアラニン－リジンを指す。

【0111】

用語「Ｔｒｅｇ」または「制御性Ｔ細胞」は、ＣＤ４＋ＣＤ２５^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞増殖及び／またはエフェクター機能を抑制する、またはそうでなければ免疫反応を下方調節するＣＤ４^＋Ｔ細胞を指す。特に、Ｔｒｅｇは、ナチュラルキラー細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及び他の免疫細胞によって媒介される免疫反応を下方制御し得る。

【0112】

用語「制御性Ｔ細胞機能」または「Ｔｒｅｇの機能」は、ＣＤ４＋ＣＤ２５^＋またはＣＤ８^＋Ｔ細胞増殖の低減またはエフェクターＴ細胞媒介免疫反応の低減をもたらすＴｒｅｇの任意の生物学的機能を指すために互換的に使用される。Ｔｒｅｇ機能は、当該技術分野で確立された技術を介して測定され得る。Ｔｒｅｇ機能を測定するための有用なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイの非限定的な例には、トランスウェル抑制アッセイならびにヒト末梢血または臍帯血（またはネズミ脾臓またはリンパ節）から精製された標的通常型Ｔ細胞（Ｔｃｏｎｖ）及びＴｒｅｇが、抗ＣＤ３^＋抗ＣＤ２８被覆ビーズ（または抗原提示細胞（ＡＰＣ）、例えば、照射された脾細胞または精製された樹状細胞（ＤＣ）または照射されたＰＢＭＣ）によって任意に活性化され、それに続いて（例えば、放射性ヌクレオチド（例えば、［Ｈ］－チミジン等）もしくは蛍光ヌクレオチドの組み込みを測定することによって、またはＣａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＭＴＴ細胞増殖アッセイキットによって、またはフローサイトメトリーによる緑色蛍光色素エステルＣＦＳＥまたはセミナフタローダフルオール（Ｓｅｍｉｎａｐｈｔｈａｒｈｏｄａｆｌｕｏｒ）（ＳＮＡＲＦ－１）色素の希釈をモニタリングすることによって）通常型Ｔ細胞増殖をｉｎ ｖｉｔｒｏ検出するｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイが含まれる。他の一般的なアッセイは、Ｔ細胞サイトカイン反応を測定する。Ｔｒｅｇ機能の有用なｉｎ ｖｉｖｏアッセイには、Ｔｒｅｇが、例えば、（１）ホメオスタシスモデル（Ｔｒｅｇによって主に抑制される標的細胞として恒常的に増殖するナイーブＣＤ４^＋Ｔ細胞を使用する）、（２）炎症性腸疾患（ＩＢＤ）回復モデル（Ｔｒｅｇによって主に抑制される標的細胞としてＴｈｌＴ細胞（Ｔｈｌ７）を使用する）、（３）実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデル（Ｔｒｅｇによって主に抑制される標的細胞としてＴｈｌ７及びＴｈｌＴ細胞を使用する）、（４）Ｂ１６黒色腫モデル（抗腫瘍免疫の抑制）（Ｔｒｅｇによって主に抑制される標的細胞としてＣＤ８^＋Ｔ細胞を使用する）、（５）ナイーブＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＢ^ＭＴｃｏｎｖ細胞がＲａｇＶマウスに移入される養子移入大腸炎における結腸炎症の抑制、及び（６）Ｆｏｘｐ３救済モデル（Ｔｒｅｇによって主に抑制される標的細胞としてリンパ球を使用する）を含む重要な役割を果たす疾患の動物モデルにおけるアッセイが含まれる。１つのプロトコルに従って、モデルのすべては、ドナーＴ細胞集団のためのマウスならびにレシピエントのためのＲａｇｌ^－／－またはＦｏｘｐ３マウスを必要とする。様々な有用なアッセイに関するより多くの詳細については、例えば、Ｃｏｌｌｉｓｏｎ ａｎｄ Ｖｉｇｎａｌｉ，Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｔｒｅｇ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ ２ ｉｎ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ Ｃｅｌｌｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｋａｓｓｉｏｔｉｓ ａｎｄ Ｌｉｓｔｏｎ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２０１１，７０７：２１－３７；Ｗｏｒｋｍａｎ ｅｔ ａｌ，Ｉｎ Ｖｉｖｏ Ｔｒｅｇ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ ９ ｉｎ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ Ｃｅｌｌｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｋａｓｓｉｏｔｉｓ ａｎｄ Ｌｉｓｔｏｎ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２０１１，１１９－１５６；Ｔａｋａｈａｓｈｉ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９８，１０：１９６９－１９８０；Ｔｈｏｒｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９８，１８８：２８７－２９６；Ｃｏｌｌｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００９，１８２：６１２１－６１２８；Ｔｈｏｒｎｔｏｎ ａｎｄ Ｓｈｅｖａｃｈ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９８，１８８：２８７－２９６；Ａｓｓｅｍａｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９９，１９０：９９５－１００４；Ｄｉｅｃｋｍａｎｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２００１，１９３：１３０３－１３１０；Ｂｅｌｋａｉｄ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００７，７：８７５－８８８；Ｔａｎｇ ａｎｄ Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ，Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００８，９：２３９－２４４；Ｂｅｔｔｉｎｉ ａｎｄ Ｖｉｇｎａｌｉ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００９，２１ ：６１２－６１８；Ｄａｎｎｕｌｌ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，２００５，１１５（１２）：３６２３－３３；Ｔｓａｋｎａｒｉｄｉｓ，ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ．，２００３，７４：２９６－３０８を参照されたい。

【0113】

本明細書に記載されるように、任意の濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲、または整数範囲は、別段示されない限り、記述される範囲内の任意の整数の値を含み、適切な場合、その分数（整数の１／１０及び１／１００など）を含むことを理解されたい。

【0114】

本開示の様々の態様は、以下のサブセクションにおいてさらに詳細に記載される。

【0115】

ＩＩ．抗ＣＤ７０抗体
本発明は、抗ＣＤ７０抗体、例えば、マウス抗体１Ｆ６に由来するヒト化抗体を提供する。１Ｆ６は、ＣＤ７０に対するネズミ免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）モノクローナル抗体である。１Ｆ６及びヒト化１Ｆ６バリアントは、米国特許第８，０６７，５４６号及び国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、非フコシル化である。

【0116】

マウス１Ｆ６抗体のヒト化形態の結合親和性（すなわち、解離定数、Ｋ_Ｄ）は、好ましくは、ヒトＣＤ７０についてのマウス抗体１Ｆ６のものの５倍または２倍以内である。ヒト化１Ｆ６抗体は、それらの由来となったマウス抗体のように、ネイティブ形態の及び／またはチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から組換え的に発現したヒトＣＤ７０に特異的に結合する。好ましいヒト化１Ｆ６抗体は、ヒトＣＤ７０に対する１Ｆ６のものと同じまたはそれよりも高い（すなわち、測定における誤差の範囲を超えて高い）親和性を有する（すなわち、１Ｆ６の親和性の１．１～５倍、１．１～３倍、１．５～３倍、１．７～２．３倍もしくは１．７～２．１倍または１Ｆ６の親和性の約２倍）。好ましいヒト化１Ｆ６抗体は、ヒトＣＤ７０への結合について１Ｆ６と同じエピトープに結合し、またはそれと競合する。

【0117】

いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、動物モデルまたは臨床試験において、培養中に増殖する細胞で示されるようにがん（例えば、細胞の成長、転移及び／または生物に対する致死性）を阻害する。動物モデルは、ＣＤ７０を発現するヒト腫瘍細胞株を適切な免疫不全げっ歯類株、例えば、無胸腺ヌードマウスまたはＳＣＩＤマウスに移植することによって形成され得る。これらの腫瘍細胞株は、皮下注射による固形腫瘍としてまたは静脈内注射による散在した腫瘍として免疫不全げっ歯類宿主において確立され得る。

【0118】

宿主内で確立されると、これらの腫瘍モデルは、実施例に記載されているように、抗ＣＤ７０抗体、またはそのコンジュゲート形態の治療的有効性を評価するために適用され得る。

【0119】

通常、本開示の抗ＣＤ７０抗体は、ＣＤ７０、例えば、ヒトＣＤ７０を結合させ、悪性細胞、例えば、がん細胞に対する細胞増殖抑制性及び細胞傷害性効果を発揮する。本開示の抗ＣＤ７０抗体は、好ましくはモノクローナルであり、多重特異的、ヒト、ヒト化またはキメラ抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって生成された断片、及び上記のいずれかのＣＤ７０結合断片であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗ＣＤ７０抗体は、ＣＤ７０を特異的に結合させる。本開示の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）またはサブクラスのものであり得る。

【0120】

本開示の所定の実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、本明細書に記載される抗原結合断片（例えば、ヒト抗原結合断片）であり、Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）_２、Ｆｄ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、一本鎖抗体、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）ならびにＶ_ＬまたはＶ_Ｈドメインのいずれかを含む断片を含むがこれらに限定されない。一本鎖抗体を含む抗原結合断片は、可変領域（複数可）を単独で、または次のもの：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＬドメインの全体もしくは一部と組み合わせて含み得る。また、可変領域（複数可）と、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＬドメインとの任意の組み合わせを含む抗原結合断片も本開示に含まれる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体またはその抗原結合断片は、ヒト、ネズミ（例えば、マウス及びラット）、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ科動物、ウマ、またはニワトリである。

【0121】

本開示の抗ＣＤ７０抗体は、単一特異的、二重特異的、三重特異的またはより高い多重特異的のものであり得る。多重特異的抗体は、ＣＤ７０の異なるエピトープに特異的であり得、及びＣＤ７０及び異種タンパク質の両方に特異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９３／１７７１５；ＷＯ９２／０８８０２；ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ，ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０ ６９；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．４，４７４，８９３；４，７１４，６８１；４，９２５，６４８；５，５７３，９２０；５，６０１，８１９；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７ １５５３を参照されたい。

【0122】

本開示の抗ＣＤ７０抗体は、ヒト化抗体であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗ＣＤ７０抗体は、マウス抗体１Ｆ６のヒト化抗体であり得る。１Ｆ６のヒト化バージョンは、米国特許番号８，０６７，５４６に記載されている。ヒト化抗体は、非ヒト「ドナー」抗体からのＣＤＲがヒト「アクセプター」抗体配列にグラフトされた遺伝子的に操作された抗体である（例えば、Ｑｕｅｅｎ、ＵＳ５，５３０，１０１及び５，５８５，０８９；Ｗｉｎｔｅｒ、ＵＳ５，２２５，５３９；Ｃａｒｔｅｒ、ＵＳ ６，４０７，２１３；Ａｄａｉｒ、ＵＳ５，８５９，２０５；及びＦｏｏｔｅ、ＵＳ６，８８１，５５７を参照されたい）。アクセプター抗体配列は、例えば、成熟ヒト抗体配列、そのような配列の複合体、ヒト抗体配列のコンセンサス配列、または生殖系列領域配列であり得る。重鎖のための好ましいアクセプター配列は、生殖系列Ｖ_ＨエクソンＶ_Ｈｌ－２（文献においてＨＶ１－２としても称されている）（Ｓｈｉｎ ｅｔ ａｌ，１９９１，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６４１－３６４５）であり、ヒンジ領域（Ｊ_Ｈ）の場合、エクソンＪ_Ｈ－６である（Ｍａｔｔｉｌａ ｅｔ ａｌ，１９９５，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５：２５７８－２５８２）。軽鎖の場合、好ましいアクセプター配列は、エクソンＶＫ２－３０（文献においてＫＶ２－３０としても言及されている）であり、ヒンジ領域の場合、エクソンＪＫ－４である（Ｈｉｅｔｅｒ ｅｔ ａｌ，１９８２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：１５１６－１５２２）。よって、ヒト化抗体は、ドナー抗体からのいくつかのまたはすべてのＣＤＲを全体的または実質的に、ならびに存在する場合、ヒト抗体配列からの可変領域フレームワーク配列及び定常領域を全体的または実質的に有する抗体である。同様に、ヒト化重鎖は、全体的または実質的にドナー抗体重鎖からの少なくとも１つの、２つの及び通常は３つすべてのＣＤＲ、ならびに存在する場合、実質的にヒト重鎖可変領域フレームワーク及び定常領域配列からの重鎖可変領域フレームワーク配列及び重鎖定常領域を有する。同様にヒト化軽鎖は、全体的または実質的にドナー抗体軽鎖からの少なくとも１つの、２つの及び通常は３つすべてのＣＤＲ、ならびに存在する場合、実質的にヒト軽鎖可変領域フレームワーク及び定常領域配列からの軽鎖可変領域フレームワーク配列及び軽鎖定常領域を有する。ナノボディ及びｄＡｂ以外、ヒト化抗体は、ヒト化重鎖及びヒト化軽鎖を含む。ヒト化抗体におけるＣＤＲは、対応する残基（Ｋａｂａｔによって定義される）の少なくとも６０％、８５％、９０％、９５％または１００％がそれぞれのＣＤＲ間で同一である場合、実質的に非ヒト抗体における対応するＣＤＲからのものである。抗体鎖の可変領域フレームワーク配列または抗体鎖の定常領域は、Ｋａｂａｔによって定義される対応する残基の少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％が同一である場合、それぞれ実質的にヒト可変領域フレームワーク配列またはヒト定常領域からのものである。

【0123】

ヒト化抗体は、しばしば、マウス抗体からの６つすべてのＣＤＲ（好ましくはＫａｂａｔによって定義される）を組み込んでいるが、それらはまた、マウス抗体からのすべてに満たないＣＤＲ（例えば、少なくとも３、４、または５個のＣＤＲ）を伴って作製され得る（例えば、Ｐａｓｃａｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：３０７６，２００２；Ｖａｊｄｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３２０：４１５－４２８，２００２；Ｉｗａｈａｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３６：１０７９－１０９１，１９９９；Ｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１６４：１４３２－１４４１，２０００）。

【0124】

ヒト可変領域フレームワーク残基からの所定のアミノ酸は、ＣＤＲコンフォメーション及び／または抗原への結合に対するそれらの可能性のある影響に基づいて置換のために選択され得る。そのような可能性のある影響の調査は、特定の位置でのアミノ酸の特徴の試験、または特定のアミノ酸の置換または変異誘発の効果の経験的観察をモデリングすることによる。

【0125】

例えば、ネズミ可変領域フレームワーク残基と選択されたヒト可変領域フレームワーク残基との間でアミノ酸が異なる場合、ヒトフレームワークアミノ酸は、アミノ酸が、
（１）抗原を直接的に非共有結合的に結合させる、
（２）ＣＤＲ領域に隣接している、
（３）そうでなければＣＤＲ領域と相互作用する（例えば、ＣＤＲ領域の約６Ａ以内にある）、または
（４）重鎖と軽鎖との間の相互作用を媒介する
と合理的に予測される場合、マウス抗体からの同等のフレームワークアミノ酸によって置換され得る。

【0126】

本開示の抗ＣＤ７０抗体は、それらが含む特定のＣＤＲの観点から記載または特定され得る。所与のＣＤＲまたはＦＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，” ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」付番スキーム）；Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ ２７３，９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」付番スキーム）；ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６），“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｃｏｎｔａｃｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ，” Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２，７３２－７４５．”（「Ｃｏｎｔａｃｔ」付番スキーム）；Ｌｅｆｒａｎｃ ＭＰ ｅｔ ａｌ．，“ＩＭＧＴ ｕｎｉｑｕｅ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ａｎｄ Ｉｇ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ Ｖ－ｌｉｋｅ ｄｏｍａｉｎｓ，” Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３ Ｊａｎ；２７（１）：５５－７７（「ＩＭＧＴ」付番スキーム）；Ｈｏｎｅｇｇｅｒ Ａ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ Ａ，“Ｙｅｔ ａｎｏｔｈｅｒ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｓｃｈｅｍｅ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ：ａｎ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏｏｌ，” Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２００１ Ｊｕｎ ８；３０９（３）：６５７－７０，（「Ａｈｏ」付番スキーム）；及びＭａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｌｏｏｐｓ：ａ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ，” ＰＮＡＳ，１９８９，８６（２３）：９２６８－９２７２，（「ＡｂＭ」付番スキーム）に記載されているものを含む、多数のよく知られているスキームのいずれかを使用して容易に決定され得る。所与のＣＤＲの境界は、同定のために使用されるスキームに応じて様々であり得る。いくつかの実施形態では、所与の抗体またはその領域（例えば、その可変領域）の「ＣＤＲ」もしくは「相補性決定領域」、または個々の特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）は、上記のスキームのいずれかによって定義される１つの（または特定の）ＣＤＲを包含することが理解されるべきである。例えば、特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）が所与のＶ_ＨまたはＶ_Ｌ領域アミノ酸配列中の対応するＣＤＲのアミノ酸配列を含有することが記述されている場合、かかるＣＤＲは、上記のスキームのいずれかによって定義される、可変領域内の対応するＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）の配列を有することが理解される。特定のＣＤＲまたは複数のＣＤＲの同定のためのスキームは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭまたはＩＭＧＴ法によって定義されるＣＤＲのように特定され得る。

【0127】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び抗ＣＤ７０抗体－薬物コンジュゲートのＣＤＲ配列は、別途特定されない限り、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，” ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤに記載されているようにＫａｂａｔ付番スキームに従う。

【0128】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体のいくつかの実施形態では、重鎖可変領域ＣＤＲ配列は、以下：
ａ）ＣＤＲ－Ｈ１：ＮＹＧＭＮ（配列番号８）、
ｂ）ＣＤＲ－Ｈ２：ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＤＡＦＫＧ（配列番号９）、及び
ｃ）ＣＤＲ－Ｈ３：ＤＹＧＤＹＧＭＤＹ（配列番号１０）を含む。

【0129】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体のいくつかの実施形態では、軽鎖可変領域ＣＤＲ配列は、以下：
ａ）ＣＤＲ－Ｌ１：ＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＦＭＨ（配列番号１１）、
ｂ）ＣＤＲ－Ｌ２：ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１２）、及び
ｃ）ＣＤＲ－Ｌ３：ＱＨＳＲＥＶＰＷＴ（配列番号１３）を含む。

【0130】

一態様では、本明細書では、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ７０抗体であって、重鎖可変領域は、（ｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含み；軽鎖可変領域は、（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含み、抗ＣＤ７０抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ付番スキームによって定義される、抗ＣＤ７０抗体が提供される。

【0131】

一態様では、本明細書では、配列番号１の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域及び配列番号２の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ７０抗体が提供され、抗ＣＤ７０抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ付番スキームによって定義される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、Ｆｃドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、非フコシル化である。

【0132】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体は、抗体がＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）を結合させる能力を保持する限り、任意の好適なフレームワーク可変ドメイン配列を含み得る。本明細書で使用される場合、重鎖フレームワーク領域は、「ＨＣ－ＦＲ１－ＦＲ４」と指定され、軽鎖フレームワーク領域は、「ＬＣ－ＦＲ１－ＦＲ４」と指定される。

【0133】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体のいくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＤＡＦＫＧＲＶＴＭＴＲＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＧＤＹＧＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１）のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変ドメインは、ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＬＡＳＮＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＨＳＲＥＶＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２）のアミノ酸配列を含む。

【0134】

本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体のいくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＡＤＡＦＫＧＲＶＴＭＴＲＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＧＤＹＧＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１）のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変ドメインは、ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＬＡＳＮＬＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＨＳＲＥＶＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号７）のアミノ酸配列を含む。

【0135】

一態様では、本明細書では、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含むまたは配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。一態様では、本明細書では、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。

【0136】

一態様では、本明細書では、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む、または配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。一態様では、本明細書では、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。

【0137】

いくつかの実施形態では、本明細書では、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。所定の実施形態では、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインは、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に結合する能力を保持する。所定の実施形態では、合計で１～１０個のアミノ酸が、配列番号１において置換、挿入及び／または欠失されている。所定の実施形態では、置換、挿入、または欠失（例えば、１、２、３、４、または５アミノ酸）は、ＣＤＲ外の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、その配列の翻訳後修飾を含む配列番号１の重鎖可変ドメイン配列を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。

【0138】

いくつかの実施形態では、本明細書では、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。所定の実施形態では、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインは、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に結合する能力を保持する。所定の実施形態では、合計で１～１０個のアミノ酸が、配列番号２において置換、挿入及び／または欠失されている。所定の実施形態では、置換、挿入、または欠失（例えば、１、２、３、４、または５アミノ酸）が、ＣＤＲの外側の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、その配列の翻訳後修飾を含む配列番号２の軽鎖可変ドメイン配列を含む。

【0139】

いくつかの実施形態では、本明細書では、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。所定の実施形態では、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインは、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に結合する能力を保持する。所定の実施形態では、合計で１～１０個のアミノ酸が、配列番号７において置換、挿入及び／または欠失されている。所定の実施形態では、置換、挿入、または欠失（例えば、１、２、３、４、または５アミノ酸）が、ＣＤＲの外側の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、その配列の翻訳後修飾を含む配列番号７の軽鎖可変ドメイン配列を含む。

【0140】

いくつかの実施形態では、本明細書では、アミノ酸配列ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥ ＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶ ＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ ＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡ ＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷ ＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹ ＡＤＡＦＫＧＲＶＴＭ ＴＲＤＴＳＩＳＴＡＹ ＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤ ＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹ ＧＤＹＧＭＤＹＷＧＱ ＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳ ＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡ ＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴ ＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹ ＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮ ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴ ＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ ＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰ ＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩ ＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴ ＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ ＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣ ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳ ＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤ ＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶ ＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥ ＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶ ＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴ ＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴ ＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬ ＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹ ＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰ ＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡ ＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹ ＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴ ＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶ ＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶ ＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮ ＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤ ＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫ ＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱ ＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨ ＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫ ＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号３）と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。所定の実施形態では、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖は、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に結合する能力を保持する。所定の実施形態では、合計で１～１０個のアミノ酸が、配列番号３において置換、挿入及び／または欠失されている。所定の実施形態では、置換、挿入、または欠失（例えば、１、２、３、４、または５アミノ酸）が、ＣＤＲの外側の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、その配列の翻訳後修飾を含む配列番号３の重鎖配列を含む。

【0141】

いくつかの実施形態では、本明細書では、ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳ ＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴ ＩＮＣＲＡＳＫＳＶＳ ＴＳＧＹＳＦＭＨＷＹ ＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬ ＬＩＹＬＡＳＮＬＥＳ ＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧ ＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳ ＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹ ＹＣＱＨＳＲＥＶＰＷ ＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩ ＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦ ＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫ ＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬ ＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶ ＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳ ＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱ ＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳ ＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹ ＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶ ＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴ ＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号４）と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗ＣＤ７０抗体が提供される。所定の実施形態では、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖は、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有し、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に結合する能力を保持する。所定の実施形態では、合計で１～１０個のアミノ酸が、配列番号４において置換、挿入及び／または欠失されている。所定の実施形態では、置換、挿入、または欠失（例えば、１、２、３、４、または５アミノ酸）が、ＣＤＲの外側の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、その配列の翻訳後修飾を含む配列番号４の軽鎖配列を含む。

【0142】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、上記で提供される実施形態のいずれかのような重鎖可変ドメイン、及び上記で提供される実施形態のいずれかのような軽鎖可変ドメインを含む。一実施形態では、抗体は、配列番号１の重鎖可変ドメイン配列及び配列番号２の軽鎖可変ドメイン配列（それらの配列の翻訳後修飾を含む）を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。

【0143】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列、及びｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインのＮ末端グルタミンは、ピログルタミン酸を形成するために環化される。

【0144】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、モノクローナル抗体である。

【0145】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許第８，０６７，５４６号、米国特許第８，５６２，９８７号、米国特許第９，４２８，５８５号、米国特許第９，７０１，７５２号、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載の抗ＣＤ７０抗体の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域または３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許番号８，０６７，５４６、米国特許番号８，５６２，９８７、米国特許番号９，４２８，５８５、米国特許番号９，７０１，７５２、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載の抗ＣＤ７０抗体の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域または３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ付番スキームによって定義される。

【0146】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許番号８，０６７，５４６、米国特許番号８，５６２，９８７、米国特許番号９，４２８，５８５、米国特許番号９，７０１，７５２、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載の抗ＣＤ７０抗体重鎖可変領域または軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許番号８，０６７，５４６、米国特許番号８，５６２，９８７、米国特許番号９，４２８，５８５、米国特許番号９，７０１，７５２、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載の抗ＣＤ７０抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

【0147】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許番号８，０６７，５４６、米国特許番号８，５６２，９８７、米国特許番号９，４２８，５８５、米国特許番号９，７０１，７５２、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載される、ヒト化１Ｆ６バリアントなどの抗ＣＤ７０抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、米国特許番号８，０６７，５４６、米国特許番号８，５６２，９８７、米国特許番号９，４２８，５８５、米国特許番号９，７０１，７５２、ＵＳ２００９／０１４８９４２、ＵＳ２０１２／００４５４３６、ＵＳ２０１４／０１７８９３６、ＵＳ２０１７／００２２２８２または国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９に記載される、ヒト化１Ｆ６バリアントの非フコシル化形態などの抗ＣＤ７０抗体である。

【0148】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、抗ＣＤ７０抗体ボルセツズマブの３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域または３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、抗ＣＤ７０抗体ボルセツズマブの３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域及び３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ付番スキームによって定義される。

【0149】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、抗ＣＤ７０抗体ボルセツズマブの重鎖可変領域または軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、抗ＣＤ７０抗体ボルセツズマブの重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

【0150】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ボルセツズマブの非フコシル化形態である。

【0151】

本発明の抗ＣＤ７０抗体はまた、ＣＤ７０（例えば、ヒトＣＤ７０）に対するそれらの結合親和性の観点から記載または特定され得る。好ましい結合親和性には、５ｘ１０^－２Ｍ、１０^－２Ｍ、５ｘ１０^－３Ｍ、１０^－３Ｍ、５ｘ１０^－４Ｍ、１０^－４Ｍ、５ｘ１０^－５Ｍ、１０^－５Ｍ、５ｘ１０^－６Ｍ、１０^－６Ｍ、５ｘ１０^－７Ｍ、１０^－７Ｍ、５ｘ１０^－８Ｍ、１０^－８Ｍ、５ｘ１０^－９Ｍ、１０^－９Ｍ、５ｘ１０^－１０Ｍ、１０^－１０Ｍ、５ｘ１０^－１１Ｍ、１０^－１１Ｍ、５ｘ１０^－１２Ｍ、１０^－１２Ｍ、５ｘ１０^－１３Ｍ、１０^－１３Ｍ、５ｘ１０^－１４Ｍ、１０^－１４Ｍ、５ｘ１０^－１５Ｍ、または１０^－１５Ｍ未満の解離定数またはＫ_Ｄを有するものが含まれる。

【0152】

５つのクラスの免疫グロブリン：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭが存在し、それぞれ、α、δ、ε、γ及びμと指定された重鎖を有する。γ及びαクラスは、サブクラスにさらに分けられ、例えば、ヒトは、以下のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を発現する。ＩｇＧ１抗体は、アロタイプと呼ばれる複数の多型バリアントが存在し得（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ ２００９．ｍＡｂｓ Ｖｏｌ １ Ｉｓｓｕｅ ４ １－７に概説されている）、そのいずれも、本明細書の実施形態の一部において使用するために好適である。ヒト集団における一般的なアロタイプバリアントは、ａ、ｆ、ｎ、ｚの文字またはそれらの組み合わせによって指定されるものである。本明細書の実施形態のいずれかでは、抗体は、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域を含む重鎖Ｆｃ領域を含み得る。さらなる実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１を含む。

【0153】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、上記で提供される実施形態のいずれかのような重鎖可変ドメイン、及び上記で提供される実施形態のいずれかのような軽鎖可変ドメインを含む。一実施形態では、抗体は、ＡＳ ＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡ ＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴ ＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹ ＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮ ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴ ＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ ＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰ ＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩ ＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴ ＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ ＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣ ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳ ＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤ ＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶ ＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥ ＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶ ＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴ ＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴ ＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬ ＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹ ＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰ ＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡ ＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹ ＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴ ＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶ ＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶ ＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮ ＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤ ＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫ ＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱ ＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨ ＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫ ＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号５）のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域及びＴＶＡＡＰＳＶＦ ＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫ ＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬ ＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶ ＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳ ＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱ ＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳ ＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹ ＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶ ＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴ ＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号６）のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域（それらの配列の翻訳後修飾）を含む。

【0154】

抗体にはまた、修飾された誘導体、すなわち、抗体への任意のタイプの分子の共有結合によって、共有結合が、抗体が、ＣＤ７０に結合すること、または細胞に対する細胞増殖抑制性または細胞傷害性効果を発揮することを防止しないように修飾された誘導体が含まれる。例えば、限定されないが、抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への連結などによって修飾された抗体が含まれる。多数の化学的修飾のいずれかは、特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含むがこれらに限定されない既知の技術によって行われ得る。また、誘導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含有し得る。

【0155】

ＣＤ７０結合剤には、ＣＤ７０を発現する標的細胞に対してＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及び／またはＣＤＣ反応を媒介または刺激する抗体エフェクタードメインが任意に含まれ得る。エフェクタードメイン（複数可）は、例えば、Ｉｇ分子のＦｃドメインまたはドメインであり得る。そのようなＣＤ７０結合剤は、ＣＤ７０を発現するがん細胞に対する細胞傷害性または細胞増殖抑制性効果を発揮し、または例えば、ＣＤ７０を発現するがんまたは免疫学的障害の処置において、それぞれ、活性化リンパ球または樹状細胞に対する細胞傷害性、細胞増殖抑制性、または免疫調節性効果を発揮し得る。典型的には、ＣＤ７０結合剤は、細胞傷害性白血球（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、貪食細胞（例えば、マクロファージ）、及び／または血清補体成分）を動員及び／または活性化する。

【0156】

抗ＣＤ７０抗体は、ヒト化抗体、一本鎖抗体、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、Ｆａｂ、ミニボディ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、Ｆｖなどであり得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０抗原結合領域は、エフェクタードメイン（複数可）、例えば、免疫グロブリンのヒンジ－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３ドメイン、またはエフェクター機能を有するエフェクタードメイン（複数可）の一部分または断片に接続され得る。一本鎖抗体を含む抗原結合抗体断片は、例えば、エフェクタードメインの全体または一部分（例えば、Ｃ_Ｈ２及び／またはＣ_Ｈ３ドメイン単独でまたはＣ_Ｈ１、ヒンジ及び／またはＣ_Ｌドメインとの組み合わせ）と組み合わせて可変領域（複数可）を含み得る。また、抗原結合断片は、エフェクタードメインの任意の組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ヒンジ－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３ドメインに接続されたＣＤ７０結合可変領域を含む一本鎖抗体であり得る。

【0157】

抗ＣＤ７０抗体のエフェクタードメインは、任意の好適なヒト免疫グロブリンアイソタイプからのものであり得る。例えば、ヒト免疫グロブリンがＣＤＣ及びＡＤＣＣ／ＡＤＣＰを媒介する能力は通常、それぞれ、ＩｇＭ≒ＩｇＧ１≒ＩｇＧ３＞ＩｇＧ２＞ＩｇＧ４及びＩｇＧ１≒ＩｇＧ３＞ＩｇＧ２／ＩｇＭ／ＩｇＧ４の順である。ＣＤ７０結合ポリペプチドは、所望のエフェクター機能（複数可）をもたらすために適切な定常ドメインを含む組換え融合タンパク質として発現され得る。標的細胞に結合すると、抗ＣＤ７０抗体または誘導体は、抗体エフェクター機能、例えば、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、及びＡＤＣＰを介してｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ標的細胞破壊を引き起こし得る。

【0158】

ＣＤ７０結合剤は、治療剤、例えば、細胞傷害剤、細胞増殖抑制剤または免疫調節剤に任意にコンジュゲートされ得る。細胞傷害性または免疫調節性薬剤の有用なクラスには、例えば、抗チューブリン剤、アウリスタチン、ＤＮＡマイナーグルーブ結合剤、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤（例えば、白金錯体、例えば、シスプラチン、一（白金）、二（白金）及び三核白金錯体ならびにカルボプラチン）、アントラサイクリン、抗生物質、抗葉酸剤、代謝拮抗剤、化学療法増感剤、デュオカルマイシン、エトポシド、フッ素化ピリミジン、イオノフォア、レキシトロプシン、ニトロソウレア、プラチノール、予備形成化合物、プリン代謝拮抗剤、ピューロマイシン、放射線増感剤、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイドなどが含まれる。いくつかの典型的な実施形態では、治療剤は、細胞傷害剤である。好適な細胞傷害剤には、例えば、ドラスタチン（例えば、アウリスタチンＥ、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ）、ＤＮＡマイナーグルーブ結合剤（例えば、エンジイン及びレキシトロプシン）、デュオカルマイシン、タキサン（例えば、パクリタキセル及びドセタキセル）、ピューロマイシン、ビンカアルカロイド、ＣＣ－１０６５、ＳＮ－３８、トポテカン、モルホリノ－ドキソルビシン、リゾキシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、エチノマイシン、コンブレタスタチン、ネトロプシン、エポチロンＡ及びＢ、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、メイタンシノイド、ディスコデルモライド、エリュテロビン、ならびにミトキサントロンが含まれる。特定の実施形態では、細胞傷害性または細胞増殖抑制性薬剤は、アウリスタチンＥ（当該技術分野でドラスタチン－１０としても知られている）またはその誘導体である。典型的には、アウリスタチンＥ誘導体は、例えば、アウリスタチンＥとケト酸との間で形成されたエステルである。例えば、アウリスタチンＥは、ＡＥＢ及びＡＥＶＢを生成するためにそれぞれパラアセチル安息香酸またはベンゾイル吉草酸と反応させられ得る。他の典型的なアウリスタチン誘導体には、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、及びＭＭＡＥが含まれる。アウリスタチンＥ及びその誘導体の合成及び構造は、米国特許出願公開番号２００３００８３２６３及び２００５０００９７５１）、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０３／２４２０９、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０２／１３４３５、ならびに米国特許番号６，３２３，３１５；６，２３９，１０４；６，０３４，０６５；５，７８０，５８８；５，６６５，８６０；５，６６３，１４９；５，６３５，４８３；５，５９９，９０２；５，５５４，７２５；５，５３０，０９７；５，５２１，２８４；５，５０４，１９１；５，４１０，０２４；５，１３８，０３６；５，０７６，９７３；４，９８６，９８８；４，９７８，７４４；４，８７９，２７８；４，８１６，４４４；及び４，４８６，４１４に記載されている。特定の実施形態では、細胞傷害剤は、ＤＮＡマイナーグルーブ結合剤である。（例えば、米国特許番号６，１３０，２３７を参照されたい）。例えば、いくつかの実施形態では、マイナーグルーブ結合剤は、ＣＢＩ化合物である。他の実施形態では、マイナーグルーブ結合剤は、エンジイン（例えば、カリケアミシン）である。抗チューブリン剤の例には、タキサン（例えば、タキソール（登録商標）（パクリタキセル）、タキソテール（登録商標）（ドセタキセル））、Ｔ６７（Ｔｕｌａｒｉｋ）、ビンカアルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、及びビノレルビン）、及びドラスタチン（例えば、アウリスタチンＥ、ＡＦＰ、ＭＭＡＦ、ＭＭＡＥ、ＡＥＢ、ＡＥＶＢ）が含まれるがこれらに限定されない。他の抗チューブリン剤には、例えば、バッカチン誘導体、タキサンアナログ（例えば、エポチロンＡ及びＢ）、ノコダゾール、コルヒチン及びコルシミド、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、メイタンシノイド、コンブレスタチン、ディスコデルモライド、ならびにエリュテロビンが含まれる。いくつかの実施形態では、細胞傷害剤は、抗チューブリン剤の別の群であるメイタンシノイドである。例えば、特定の実施形態では、メイタンシノイドは、メイタンシンまたはＤＭ－１である（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ，Ｉｎｃ．；Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５２：１２７－１３１も参照されたい）。

【0159】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ヒトもしくは非ヒトＦｃ領域またはその一部分を含むキメラであり得る。例えば、抗体には、非ヒト起源、例えば、げっ歯類（例えば、マウスまたはラット）、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ科動物、ウマ、ニワトリまたはサル（例えば、マカク、アカゲザルなど）のＦｃドメインまたは部分が含まれ得る。

【0160】

抗ＣＤ７０結合剤、例えば、抗体は、単一特異的、二重特異的、三重特異的、またはそれを超える多重特異性であり得る。多重特異的抗体は、ＣＤ７０の異なるエピトープに特異的であり得、及び／またはＣＤ７０及び異種タンパク質の両方に特異的であり得る。（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９３／１７７１５、ＷＯ９２／０８８０２、ＷＯ９１／００３６０、及びＷＯ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０－６９；米国特許番号４，４７４，８９３；４，７１４，６８１；４，９２５，６４８；５，５７３，９２０；及び５，６０１，８１９；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７－１５５３を参照されたい）。本明細書に記載の方法を実施するために有用な二重特異的及び三重特異的抗体を含む多重特異的抗体は、ＣＤ７０（モノクローナル抗体１Ｆ６のＣＤＲを有する抗体を含むがこれらに限定されない）ならびにＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、及び／またはＣＤＣを媒介する第２の細胞表面受容体または受容体複合体、例えば、ＣＤ１６／ＦｃγＲＩＩＩ、ＣＤ６４／ＦｃγＲＩ、殺傷阻害性もしくは活性化性受容体、または補体コントロールタンパク質ＣＤ５９の両方に免疫特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、第２の細胞表面分子または受容体複合体への多重特異的抗体部分の結合は、抗ＣＤ７０抗体または他のＣＤ７０結合剤のエフェクター機能を増強し得る。

【0161】

抗体は、当該技術分野で知られている方法によって生成され得る。例えば、モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ、組換え、及びファージディスプレイ技術、またはそれらの組み合わせの使用を含む、多様な技術を使用して調製され得る。ハイブリドーマ技術は、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．，１９８８）；及びＨａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，ｐｐ．５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）において一般的に論述されている。抗ＣＤ７０抗体を作製するために使用され得るファージディスプレイ法の例には、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１；Ｑｕａｎ ａｎｄ Ｃａｒｔｅｒ，２００２，Ｔｈｅ ｒｉｓｅ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｉｎ Ａｎｔｉ－ＩｇＥ ａｎｄ Ａｌｌｅｒｇｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｊａｒｄｉｅｕ ａｎｄ Ｆｉｃｋ Ｊｒ．，ｅｄｓ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，Ｃｈａｐｔｅｒ ２０，ｐｐ．４２７－４６９；Ｂｒｉｎｋｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８２：４１－５０；Ａｍｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ １８４：１７７－１８６；Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：９５２－９５８；Ｐｅｒｓｉｃ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｇｅｎｅ １８７：９－１８；Ｂｕｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５７：１９１－２８０；ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；ＰＣＴ公開ＷＯ９０／０２８０９、ＷＯ９１／１０７３７、ＷＯ９２／０１０４７、ＷＯ９２／１８６１９、ＷＯ９３／１１２３６、ＷＯ９５／１５９８２、ＷＯ９５／２０４０１、及び米国特許番号５，６９８，４２６；５，２２３，４０９；５，４０３，４８４；５，５８０，７１７；５，４２７，９０８；５，７５０，７５３；５，８２１，０４７；５，５７１，６９８；５，４２７，９０８；５，５１６，６３７；５，７８０，２２５；５，６５８，７２７；５，７３３，７４３及び５，９６９，１０８（その開示は、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているものが含まれる。

【0162】

一本鎖抗体を生成するために使用され得る技術の例には、米国特許４，９４６，７７８及び５，２５８，４９８；Ｈｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ２０３：４６－８８；Ｓｈｕ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：７９９５－７９９９；及びＳｋｅｒｒａ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０３８－１０４０に記載されているものが含まれる。

【0163】

二重特異的抗体を作製するための方法は、当該技術分野で知られている。全長二重特異的抗体の従来の生成は、２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖対（２つの鎖は異なる特異性を有する）の共発現に基づいている（例えば、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｎａｔｕｒｅ ３０５：５３７－３９を参照されたい）。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の無作為の仕分けにより、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０種の異なる抗体分子の潜在的混合物を生成し、その一部は正しい特異的構造を有する。同様の手順は、国際公開番号ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９１，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５－５９に開示されている。

【0164】

異なるアプローチに従って、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体－抗原結合部位）が免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。融合は、典型的には、ヒンジ、Ｃ_Ｈ２、及びＣ_Ｈ３領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖定常ドメインとのものである。いくつかの実施形態では、融合体には、融合体の少なくとも１つに存在する軽鎖結合に必要な部位を含有する第１の重鎖定常領域（Ｃ_Ｈ１）が含まれる。免疫グロブリン重鎖融合体、及び所望の場合、免疫グロブリン軽鎖をコードする配列を有する核酸は、別々の発現ベクターに挿入され、好適な宿主生物にコトランスフェクションされ得る。これにより、構築に使用される３つのポリペプチド鎖の不等比が最適収率をもたらす実施形態において、３つのポリペプチド断片の相互割合の調整において優れた柔軟性が提供される。しかしながら、等比での少なくとも２つのポリペプチド鎖の発現により高収率がもたらされる場合、またはそれらの比率が特に重要ではない場合に、２つまたは３つすべてのポリペプチド鎖のコード配列を１つの発現ベクターに挿入することが可能である。

【0165】

このアプローチの実施形態では、二重特異的抗体は、一方のアームで第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖、及び他方のアームでハイブリッド免疫グロブリン重鎖－軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）を有する。二重特異的分子の一方の半分のみにおける免疫グロブリン軽鎖の存在が、分離の容易な方法を提供するので、この非対称構造は、不要な免疫グロブリン鎖の組み合わせからの所望の二重特異的化合物の分離を容易化する（例えば、国際公開番号ＷＯ９４／０４６９０（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。

【0166】

二重特異的抗体のさらなる論述については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １２１：２１０；Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １５１：６９５４－６１；Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３－６７；Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ ４：４６３－７０；Ｍｅｒｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １６：６７７－８１を参照されたい。そのような技術を使用して、二重特異的抗体は、本明細書で定義される疾患の処置または予防において使用するために調製され得る。

【0167】

２官能性抗体はまた、欧州特許公開番号ＥＰＡ０１０５３６０に記載されている。この参考文献に開示されているように、ハイブリッドまたは２官能性抗体は、生物学的に、すなわち、細胞融合技術によって、または化学的に、特に架橋剤またはジスルフィド架橋形成試薬を用いて誘導され得、完全抗体またはその断片を含み得る。そのようなハイブリッド抗体を得るための方法は、例えば、国際公開ＷＯ８３／０３６７９及び欧州特許公開番号ＥＰＡ０２１７５７７これらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。

【0168】

いくつかの実施形態では、ヒトフレームワーク領域におけるフレームワーク残基は、抗原結合を改変するために、好ましくは改善するためにＣＤＲドナー抗体からの対応する残基で置換される。これらのフレームワーク置換は、当該技術分野でよく知られている方法によって、例えば、抗原結合にとって重要なフレームワーク残基を同定するためのＣＤＲとフレームワーク残基との相互作用のモデリング及び特定の位置で通常ではないフレームワーク残基を同定するための配列比較によって同定される。（例えば、米国特許番号５，５８５，０８９；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３を参照されたい）。抗体は、例えば、ＣＤＲグラフト（例えば、ＥＰ０２３９４００；ＰＣＴ公開ＷＯ９１／０９９６７；米国特許番号５，２２５，５３９；５，５３０，１０１；及び５，５８５，０８９を参照されたい）、ベニアリングまたはリサーフェシング（例えば、ＥＰ０５９２１０６；ＥＰ０５１９５９６；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９－４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５－８１４；Ｒｏｇｕｓｋａ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：９６９－９７３を参照されたい）、及び鎖シャッフル化（例えば、米国特許番号５，５６５，３３２を参照されたい）（これらの参考文献のすべては、参照により本明細書に組み込まれる）を含む当該技術分野で知られている多様な技術を使用してヒト化され得る。

【0169】

ヒト化モノクローナル抗体は、当該技術分野で知られている組換えＤＮＡ技術によって、例えば、国際公開番号ＷＯ８７／０２６７１；欧州特許公開番号０１８４１８７；欧州特許公開番号０１７１４９６；欧州特許公開番号０１７３４９４；国際公開番号ＷＯ８６／０１５３３；米国特許番号４，８１６，５６７；欧州特許公開番号００１２０２３；Ｂｅｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１－４３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：３４３９－４３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１－２６；Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：２１４－１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．４７：９９９－１００５；Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６－４４９；Ｓｈａｗ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８０：１５５３－５９；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２－０７；Ｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．５，２２５，５３９；Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５５２－２５；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４；及びＢｅｉｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：４０５３－６０（これらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法を使用して生成され得る。

【0170】

上に示されるように、ＣＤ７０結合剤は、抗ＣＤ７０抗体の誘導体であり得る。通常、抗ＣＤ７０抗体誘導体は、抗ＣＤ７０抗体（例えば、抗原結合断片または保存的に置換されたポリペプチドを含む）及び抗ＣＤ７０抗体に対して異種の少なくとも１つのポリペプチド領域または他の部位を含む。例えば、抗ＣＤ７０抗体は、例えば、任意のタイプの分子の共有結合によって、修飾され得る。典型的な修飾には、例えば、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞リガンド（例えば、アルブミン結合分子）または他のタンパク質への連結などが含まれる。多数の化学的修飾のいずれかは、特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含むがこれらに限定されない既知の技術によって行われ得る。

【0171】

いくつかの実施形態では、共有結合は、エフェクター機能と干渉せず、例えば、抗体誘導体が、抗原結合領域もしくはそれに由来する領域を介してＣＤ７０に特異的に結合することを防止せず、またはエフェクタードメイン（複数可）がＦｃ受容体と特異的結合することを防止しない。

【0172】

いくつかの実施形態では、例えば、１つ以上の単量体を含む二量体などの多量体であり、各単量体には、抗体誘導体がＣＤ７０に特異的に結合する多量体（例えば、ホモ二量体）を形成するように、（ｉ）抗ＣＤ７０抗体の抗原結合領域、またはそれに由来するポリペプチド領域（例えば、１つ以上のアミノ酸の保存的置換による等）、及び（ｉｉ）多量体化（例えば、二量体化）ポリペプチド領域が含まれる。典型的な実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の抗原結合領域、またはそれに由来するポリペプチド領域は、異種タンパク質と組換え的にまたは化学的に融合され、異種タンパク質は、二量体化または多量体化ドメインを含む。免疫学的障害またはＣＤ７０を発現するがんを処置または予防する目的のための対象への抗体誘導体の投与の前に、誘導体は、ホモ二量体またはヘテロ二量体の形成を可能とする条件に供される。ヘテロ二量体は、本明細書で使用される場合、同一の二量体化ドメインを含むが異なるＣＤ７０抗原結合領域を含み、同一のＣＤ７０抗原結合領域を含むが異なる二量体化ドメインを含み、または異なるＣＤ７０抗原結合領域及び二量体化ドメインを含み得る。

【0173】

典型的な二量体化ドメインは、転写因子を起源とするものである。一実施形態では、二量体化ドメインは、基本領域ロイシンジッパー（「ｂＺＩＰ」）のものである（Ｖｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：９１１－９１６を参照されたい）。有用なロイシンジッパードメインには、例えば、酵母転写因子ＧＣＮ４、哺乳動物転写因子ＣＣＡＡＴ／エンハンサー結合タンパク質Ｃ／ＥＢＰ、及びがん遺伝子産物Ｆｏｓ及びＪｕｎにおける核形質転換のものが含まれる。（例えば、Ｌａｎｄｓｃｈｕｌｔｚ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１７５９－６４；Ｂａｘｅｖａｎｉｓ ａｎｄ Ｖｉｎｓｏｎ，１９９３，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｇｅｎ．Ｄｅｖｅｌ．３：２７８－２８５；Ｏ’Ｓｈｅａ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４３：５３８－５４２を参照されたい）。別の実施形態では、二量体化ドメインは、基本領域ヘリックス－ループ－ヘリックス（「ｂＨＬＨ」）タンパク質のものである。（例えば、Ｍｕｒｒｅ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｃｅｌｌ ５６：７７７－７８３を参照されたい。Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｃｅｌｌ ６０：７３３－７４６；Ｖｏｒｏｎｏｖａ ａｎｄ Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，１９９０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：４７２２－２６も参照されたい）。特に有用なｈＨＬＨタンパク質は、ｍｙｃ、ｍａｘ、及びｍａｃである。

【0174】

さらに他の実施形態では、二量体化ドメインは、免疫グロブリン定常領域、例えば、重鎖定常領域またはそのドメイン（例えば、Ｃ_Ｈ１ドメイン、Ｃ_Ｈ２ドメイン、及び／またはＣ_Ｈ３ドメイン）である。（例えば、米国特許番号５，１５５，０２７；５，３３６，６０３；５，３５９，０４６；及び５，３４９，０５３；ＥＰ ０ ３６７ １６６；及びＷＯ９６／０４３８８を参照されたい）。

【0175】

ヘテロ二量体は、ＦｏｓとＪｕｎの間で（Ｂｏｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１３８６－１３９２）、ＡＴＦ／ＣＲＥＢファミリーのメンバー間で（Ｈａｉ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．３：２０８３－２０９０）、Ｃ／ＥＢＰファミリーのメンバー間で（Ｃａｏ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．５：１５３８－５２；Ｗｉｌｌｉａｍｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．５：１５５３－６７；Ｒｏｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．４：１４０４－１５）、ならびにｂＡＴＦ／ＣＲＥＢ及びＦｏｓ／Ｊｕｎファミリーのメンバー間で（Ｈａｉ ａｎｄ Ｃｕｒｒａｎ，１９９１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８８：３７２０－２４）形成することが知られている。そのため、ＣＤ７０結合タンパク質が、異なる二量体化ドメインを含むヘテロ二量体として対象に投与される場合、前述のものの任意の組み合わせが使用され得る。

【0176】

他の実施形態では、抗ＣＤ７０抗体誘導体は、第２の抗体にコンジュゲートされた抗ＣＤ７０抗体（「抗体ヘテロコンジュゲート」）である（例えば、米国特許番号４，６７６，９８０を参照されたい）。本方法を実施するために有用なヘテロコンジュゲートは、ＣＤ７０に結合する抗体（例えば、モノクローナル抗体１Ｆ６のＣＤＲ及び／または重鎖を有する抗体）及びＡＤＣＣ、貪食、及び／またはＣＤＣを媒介する表面受容体または受容体複合体、例えば、ＣＤ１６／ＦｃｇＲＩＩＩ、ＣＤ６４／ＦｃｇＲＩ、キラー細胞活性化もしくは阻害性受容体、または補体コントロールタンパク質ＣＤ５９に結合する抗体を含む。典型的な実施形態では、第２の細胞表面分子または受容体複合体への多重特異的抗体の一部分の結合は、抗ＣＤ７０抗体のエフェクター機能を増強する。他の実施形態では、抗体は、治療剤であり得る。好適な抗体治療剤は、本明細書に記載されている。

【0177】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体のいずれかは、非フコシル化である。

【0178】

いくつかの実施形態では、本明細書では、本明細書に記載される複数の抗ＣＤ７０抗体を含む抗ＣＤ７０抗体の集団であって、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体は、低減されたコアフコシル化を有する、集団が提供される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも２０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも３０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも４０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも５０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも６０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも７０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも８０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも９０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも９５％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも９８％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも９９％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体の少なくとも９９．５％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体は、コアフコシル化を実質的に有しない（すなわち、０．５％未満である）。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗体のすべては、コアフコシル化を欠く。

【0179】

米国特許番号１０，１９６，４４５に記載されているように、抗体グリコシル化の修飾は、例えば、改変されたグリコシル化機構を有する宿主細胞において抗体を発現させることによって達成され得る。改変されたグリコシル化機構を有する細胞は、記載されており、本開示の組換え抗体を発現し、それにより改変されたグリコシル化を有する抗体を生成する宿主細胞として使用され得る。例えば、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９は、これらの細胞株において発現した抗体がそれらの炭水化物上のフコースを欠くように、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８（α－（１，６）フコシルトランスフェラーゼを欠く（米国特許出願公開番号２００４０１１０７０４；Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４を参照されたい）。別の例として、ＥＰ１１７６１９５はまた、機能的に崩壊したＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株ならびに抗体のＦｃ領域に結合するＮ－アセチルグルコサミンにフコースを付加するための活性をほとんどまたは全く有しない細胞株、例えば、ラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ ＣＲＬ１６６２）を記載している。ＰＣＴ公開ＷＯ０３／０３５８３５は、バリアントＣＨＯ細胞株Ｌｅｃ１３を記載しており、これは、フコースをＡｓｎ（２９７）結合炭水化物に結合させる能力が低減しており、また、その宿主細胞において発現した抗体の低フコシル化をもたらす。Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３も参照されたい。修飾されたグリコシル化プロファイルを有する抗体はまた、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００６／０８９２３１に記載されているように、ニワトリ卵において生成され得る。代替的には、修飾されたグリコシル化プロファイルを有する抗体は、植物細胞、例えば、レムナにおいて生成され得る。例えば、米国公開番号２０１２／０２７６０８６を参照されたい。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９９／５４３４２は、操作された細胞株において発現した抗体が、抗体の増加したＡＤＣＣ活性をもたらす増加したバイセクト型ＧｌｃＮａｃ構造を示すように、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、ベータ（１，４）－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株を記載している。Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６も参照されたい。代替的には、抗体のフコース残基は、フコシダーゼ酵素を使用して切断除去され得る。例えば、酵素アルファ－Ｌ－フコシダーゼは、抗体からフコシル残基を除去する。Ｔａｒｅｎｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．（１９７５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４：５５１６。低減したコアフコシル化を有する抗体は、遺伝子ノックアウト、遺伝子ノックイン、またはＲＮＡｉを使用してコアフコシル化を低減するように操作された細胞株において抗体を生成することによって調製され得る。グリコシル化経路における酵素に対して作用する小分子阻害剤もまた、低減したコアフコシル化を有する抗体を生成するために使用され得る。そのような方法は、米国特許番号８，１６３，５５１に記載されている。いくつかの実施形態では、低減したコアフコシル化を有する本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体は、宿主細胞によって生成された抗体または抗体誘導体の複雑なＮ－グリコシド結合糖鎖へのフコースの組み込みを低減する有効量のフコースアナログを含む培地中で抗体を発現する宿主細胞を培養することによって生成される。米国特許番号８，１６３，５５１を参照されたい。非フコシル化抗体を生成する方法はまた、Ｐｅｒｅｉｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１８）ＭＡｂｓ １０（５）：６９３－７１１に記載されている。

【0180】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体は、競合結合を決定するための当該技術分野で知られている任意の方法（例えば、本明細書に記載のイムノアッセイなど）によって決定される場合、ＣＤ７０へのｍＡｂ １Ｆ６の結合を競合的に阻害する。典型的な実施形態では、抗体は、ＣＤ７０への１Ｆ６の結合を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、または少なくとも７５％競合的に阻害する。他の実施形態では、抗体は、ＣＤ７０への１Ｆ６の結合を少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％競合的に阻害する。

【0181】

抗体は、様々な既知の方法のいずれかによってＣＤ７０への特異的結合のためにアッセイされ得る。使用され得るイムノアッセイには、例えば、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、沈降素反応、ゲル拡散沈降素反応、免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体固定アッセイ、免疫放射アッセイ、蛍光イムノアッセイ、及びプロテインＡイムノアッセイなどの技術を使用する競合及び非競合アッセイシステムが含まれる。そのようなアッセイは、慣用であり、当該技術分野でよく知られている。（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，４ｔｈ ｅｄ．１９９９）；Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，１９９９を参照されたい）。

【0182】

さらに、ＣＤ７０に対する抗体の結合親和性及び抗体ＣＤ７０相互作用のオフ速度は、競合結合アッセイによって決定され得る。競合結合アッセイの１つの例は、増加量の非標識ＣＤ７０の存在下での標識ＣＤ７０（例えば、^３Ｈまたは^１２５Ｉ）と対象となる抗体とのインキュベート、及び標識ＣＤ７０に結合した抗体の検出を含むラジオイムノアッセイである。次いでＣＤ７０に対する抗体の親和性及び結合オフ速度が、スキャッチャードプロット分析によってデータから決定され得る。第２の抗体（例えば、ｍＡｂ １Ｆ６など）との競合も、ラジオイムノアッセイを使用して決定され得る。この場合、ＣＤ７０は、増加量の非標識第２の抗体の存在下で標識化合物（例えば、^３Ｈまたは^１２５Ｉ）にコンジュゲートされた対象となる抗体とインキュベートされる。代替的には、ＣＤ７０に対する抗体の結合親和性及び抗体－ＣＤ７０相互作用のオン及びオフ速度は、表面プラズモン共鳴によって決定され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体は、ＣＤ７０発現細胞の膜に標的化され、その上に蓄積し得る。

【0183】

抗ＣＤ７０抗体及びその誘導体は、タンパク質の合成のために当該技術分野で知られている方法によって、典型的には、例えば、組換え発現技術によって生成され得る。ＣＤ７０に結合する抗体またはその誘導体の組換え発現は、典型的には、抗体またはその誘導体をコードする核酸を含有する発現ベクターの構築が含まれる。タンパク質分子の生成のためのベクターは、当該技術分野で知られている技術を使用して組換えＤＮＡ技術によって生成され得る。標準的な技術、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，３ｒｄ ｅｄ．，２００１）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，２ｎｄ ｅｄ．，１９８９）；Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，４ｔｈ ｅｄ．，１９９９）；及びＧｌｉｃｋ ａｎｄ Ｐａｓｔｅｒｎａｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ（ＡＳＭ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，２ｎｄ ｅｄ．，１９９８）に記載されているものが組換え核酸方法、核酸合成、細胞培養、導入遺伝子組み込み、及び組換えタンパク質発現のために使用され得る。

【0184】

例えば、抗ＣＤ７０抗体の組換え発現のため、発現ベクターは、プロモーターに機能可能に連結されたその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖もしくは軽鎖可変ドメインをコードし得る。発現ベクターには、例えば、抗体分子の定常領域をコードするヌクレオチド配列が含まれ得（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ８６／０５８０７；ＰＣＴ公開ＷＯ８９／０１０３６；及び米国特許番号５，１２２，４６４を参照されたい）、抗体の可変ドメインは、重鎖または軽鎖全体の発現のためのそのようなベクターにクローニングされ得る。発現ベクターは、従来の技術によって宿主細胞に移行させられ、次いでトランスフェクションされた細胞は、抗ＣＤ７０抗体を生成するために従来の技術によって培養される。二重鎖抗体の発現のための典型的な実施形態では、重鎖及び軽鎖の両方をコードするベクターは、免疫グロブリン分子全体の発現のための宿主細胞において共発現され得る。

【0185】

多様な原核及び真核宿主発現ベクターシステムが、抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体を発現させるために利用され得る。典型的には、真核細胞、特に組換え抗ＣＤ７０抗体分子全体のためのものが、組換えタンパク質の発現のために使用される。例えば、ヒトサイトメガロウイルスからの主要中間初期遺伝子プロモーター要素などのベクターと併せられた、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）などの哺乳動物細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びその誘導体のための有効な発現システムである（例えば、Ｆｏｅｃｋｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｇｅｎｅ ４５：１０１；Ｃｏｃｋｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：２を参照されたい）。

【0186】

他の宿主発現システムには、例えば、細菌細胞におけるプラスミドベースの発現システム（例えば、Ｒｕｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８３，ＥＭＢＯ １，２：１７９１；Ｉｎｏｕｙｅ ａｎｄ Ｉｎｏｕｙｅ，１９８５，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３１０１－３１０９；Ｖａｎ Ｈｅｅｋｅ ａｎｄ Ｓｃｈｕｓｔｅｒ，１９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４：５５０３－５５０９を参照されたい）；昆虫システム、例えば、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞におけるＡｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多角体病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）発現ベクターの使用；及び哺乳動物細胞におけるウイルスベースの発現システム、例えば、アデノウイルスベースのシステム（例えば、Ｌｏｇａｎ ａｎｄ Ｓｈｅｎｋ，１９８４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：３５５－３５９；Ｂｉｔｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５３：５１－５４４を参照されたい）が含まれる。

【0187】

また、挿入配列の発現を調節する、または遺伝子産物を所望の特定の様式で修飾し、処理する宿主細胞株が選択され得る。適切な細胞株または宿主システムは、発現したタンパク質の正しい修飾及び処理（例えば、グリコシル化、リン酸化、及び切断）を確保するために選択され得る。この目的のため、一次転写産物及び遺伝子産物の適切な処理のための細胞機構を保有する真核宿主細胞が使用され得る。そのような哺乳動物宿主細胞には、例えば、ＣＨＯ、ＶＥＲＯ、ＢＨＫ、ＨｅＬａ、ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、及びＷ１３８が含まれる。

【0188】

安定な発現システムは、典型的には、組換え抗ＣＤ７０抗体もしくはその誘導体または他のＣＤ７０結合剤の長期の高収率生成のために使用される。例えば、抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体を安定的に発現する細胞株は、適切な発現制御要素（例えば、プロモーター及びエンハンサー配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位）及び選択マーカーによってコントロールされるＤＮＡでの宿主細胞の形質転換と、それに続く選択培地における形質転換細胞の成長によって操作され得る。選択マーカーは、選択に対する耐性を付与し、細胞が、ＤＮＡをそれらの染色体に安定的に組み込み、フォーサイを形成するように成長することを可能とし、これはひいては細胞株内にクローニングされ、増殖され得る。例えば、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、及びアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｔｋ^－、ｈｇｐｒｔ^－またはａｐｒｔ^－細胞においてそれぞれ用いられ得る）を含む多数の選択システムが使用され得る。また、以下の遺伝子についての選択の基礎として代謝拮抗剤耐性が使用され得る：メトトレキサートに対する耐性を付与するｄｈｆｒ；ミコフェノール酸に対する耐性を付与するｇｐｔ；アミノグリコシドＧ－４１８に対する耐性を付与するｎｅｏ；及びハイグロマイシンに対する耐性を付与するｈｙｇｒｏ。組換えＤＮＡ技術の分野で一般的に知られている方法は、所望の組換えクローンを選択するために慣用的に適用され得、そのような方法は、例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９３）；Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９０）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（Ｄｒａｃｏｐｏｌｉ ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９４，Ｃｈａｐｔｅｒｓ １２ ａｎｄ １３）；及びＣｏｌｂｅｒｒｅ－Ｇａｒａｐｉｎ ｅｔ ａｌ．，１９８１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５０：１．に記載されている。

【0189】

抗体または誘導体の発現レベルは、ベクター増幅によって増加し得る。（例えば、Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎ ａｎｄ Ｈｅｎｔｓｃｈｅｌ，Ｔｈｅ Ｕｓｅ ｏｆ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｇｅｎｅ Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｌｏｎｅｄ Ｇｅｎｅｓ ｉｎ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ｖｏｌ．３（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）を一般的に参照されたい）。抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体を発現するベクターシステムにおけるマーカーが増幅可能である場合、宿主細胞培地に存在する阻害剤のレベルの増加は、阻害剤に対する耐性を付与するマーカー遺伝子の増加したコピー数を有する宿主細胞を選択する。関連する抗体遺伝子のコピー数も増加し、それにより抗体またはその誘導体の発現を増加させる（Ｃｒｏｕｓｅ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．３：２５７を参照されたい）。

【0190】

抗ＣＤ７０抗体が重鎖及び軽鎖の両方またはその誘導体を含む場合、宿主細胞は、２つの発現ベクター、すなわち、重鎖タンパク質をコードする第１のベクター及び軽鎖タンパク質をコードする第２のベクターで共トランスフェクションされ得る。２つのベクターは、重鎖及び軽鎖タンパク質の同等の発現を可能とする同一の選択マーカーを含有し得る。代替的には、重鎖及び軽鎖タンパク質の両方をコードし、発現させることが可能な単一のベクターが使用され得る。そのような状況では、軽鎖は、典型的には、余剰の毒性遊離重鎖を回避するために重鎖の前に配置される（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ ３２２：５２；Ｋｏｈｌｅｒ，１９８０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：２１９７を参照されたい）。重鎖及び軽鎖のためのコード配列は、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含み得る。

【0191】

抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体が（例えば、動物、化学的合成、または組換え発現によって）生成されると、それは、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換またはアフィニティークロマトグラフィー（例えば、インタクトＦｃ領域を有する抗体の精製のためのプロテインＡクロマトグラフィーなど））、遠心分離、相違溶解性によるもの、またはタンパク質の精製のための任意の他の標準的な技術によるものを含む、タンパク質の精製のための任意の好適な方法によって精製され得る。抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体は、例えば、アフィニティークロマトグラフィーによる精製を容易化するためにペプチドなどのマーカー配列に融合され得る。好適なマーカーアミノ酸配列には、例えば、ヘキサ－ヒスチジンペプチド、例えば、ｐＱＥベクターにおいて提供されるタグ（ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ，９１３１１）、及びインフルエンザヘマグルチニンタンパク質に由来するエピトープに対応する「ＨＡ」タグ（Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８４，Ｃｅｌｌ ３７：７６７）、及び「ｆｌａｇ」タグが含まれる。

【0192】

抗ＣＤ７０抗体またはその誘導体が生成されると、ＣＤ７０を発現するがん細胞に対する細胞増殖抑制性または細胞傷害性効果またはＣＤ７０を発現する免疫細胞に対する免疫調節性効果を発揮するその能力は、以下に記載される方法によってまたは当該技術分野で知られているように決定される。

【0193】

活性化免疫細胞またはＣＤ７０を発現するがん細胞外での抗ＣＤ７０抗体の活性を最小化するために、抗ＣＤ７０抗体が活性化免疫細胞またはＣＤ７０を発現するがん細胞の細胞表面上で濃縮されるように、細胞膜結合型ＣＤ７０に特異的に結合するが、可溶性ＣＤ７０に特異的に結合しない抗体が使用され得る。

【0194】

典型的には、抗ＣＤ７０抗体または誘導体は、実質的に精製される（例えば、その効果を制限するまたは不要な副作用をもたらす物質を実質的に含まない）。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体または誘導体は、少なくとも約４０％純粋、少なくとも約５０％純粋、または少なくとも約６０％純粋である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体または誘導体は、少なくとも約６０～６５％、６５～７０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～８５％、８５～９０％、９０～９５％、または９５～９８％純粋である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体または誘導体は、およそ９９％純粋である。

【0195】

ＩＩＩ．ＣＤ４７アンタゴニスト
本発明は、ＣＤ４７アンタゴニストを提供する。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７とＳＩＲＰαとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、腫瘍細胞の貪食を増加させる。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７の小分子阻害剤、ＳＩＲＰαの小分子阻害剤、ＣＤ４７に結合する抗体、またはその抗原結合断片、ＳＩＲＰαに結合する抗体またはその抗原結合断片、及びＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７の小分子阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰαの小分子阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＣＤ４７に結合する抗体、またはその抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰαに結合する抗体、またはその抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰα、またはその断片を含む融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、ＳＩＲＰα、またはその断片、及び抗体、またはその断片を含む融合タンパク質は、抗体のＦｃ領域に共有結合的に連結されたＳＩＲＰα、またはその免疫グロブリンＶ様ドメインを含む。

【0196】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、抗体、またはその抗原結合断片である。本開示の抗体は、好ましくはモノクローナルであり、多重特異的、ヒト、ヒト化またはキメラ抗体、一本鎖抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって生成された断片、及び上記のいずれかのＣＤ４７結合断片であり得る。いくつかの実施形態では、本開示のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、ＣＤ４７を特異的に結合させる。いくつかの実施形態では、本開示のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、ＳＩＲＰαを特異的に結合させる。本開示の免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）またはサブクラスのものであり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ４抗体である。本開示の所定の実施形態では、抗体は、本明細書に記載される抗原結合断片（例えば、ヒト抗原結合断片）であり、Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）_２、Ｆｄ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、一本鎖抗体、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）ならびにＶ_ＬまたはＶ_Ｈドメインのいずれかを含む断片を含むがこれらに限定されない。一本鎖抗体を含む抗原結合断片は、可変領域（複数可）を単独で、または次のもの：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＬドメインの全体もしくは一部と組み合わせて含み得る。また、可変領域（複数可）と、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＬドメインとの任意の組み合わせを含む抗原結合断片も本開示に含まれる。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト抗体またはその抗原結合断片は、ヒト、ネズミ（例えば、マウス及びラット）、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ科動物、ウマ、またはニワトリである。

【0197】

本開示のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、単一特異的、二重特異的、三重特異的またはより高い多重特異的のものであり得る。多重特異的抗体は、同じ分子の異なるエピトープに特異的であり得、または異種タンパク質に特異的であり得る。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ９３／１７７１５；ＷＯ９２／０８８０２；ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ，ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０ ６９；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏｓ．４，４７４，８９３；４，７１４，６８１；４，９２５，６４８；５，５７３，９２０；５，６０１，８１９；Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７ １５５３を参照されたい。

【0198】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、キメラ抗体である。

【0199】

本開示のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、それらが含む特定のＣＤＲの観点から記載または特定され得る。所与のＣＤＲまたはＦＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，” ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」付番スキーム）；Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ ２７３，９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」付番スキーム）；ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６），“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｃｏｎｔａｃｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ，” Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２，７３２－７４５．”（「Ｃｏｎｔａｃｔ」付番スキーム）；Ｌｅｆｒａｎｃ ＭＰ ｅｔ ａｌ．，“ＩＭＧＴ ｕｎｉｑｕｅ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ ａｎｄ Ｉｇ ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ Ｖ－ｌｉｋｅ ｄｏｍａｉｎｓ，” Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３ Ｊａｎ；２７（１）：５５－７７（「ＩＭＧＴ」付番スキーム）；Ｈｏｎｅｇｇｅｒ Ａ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ Ａ，“Ｙｅｔ ａｎｏｔｈｅｒ ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ ｓｃｈｅｍｅ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ：ａｎ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏｏｌ，” Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２００１ Ｊｕｎ ８；３０９（３）：６５７－７０，（「Ａｈｏ」付番スキーム）；及びＭａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｌｏｏｐｓ：ａ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ，” ＰＮＡＳ，１９８９，８６（２３）：９２６８－９２７２，（「ＡｂＭ」付番スキーム）に記載されているものを含む、多数のよく知られているスキームのいずれかを使用して容易に決定され得る。所与のＣＤＲの境界は、同定のために使用されるスキームに応じて様々であり得る。いくつかの実施形態では、所与の抗体またはその領域（例えば、その可変領域）の「ＣＤＲ」もしくは「相補性決定領域」、または個々の特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）は、上記のスキームのいずれかによって定義される１つの（または特定の）ＣＤＲを包含することが理解されるべきである。例えば、特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）が所与のＶ_ＨまたはＶ_Ｌ領域アミノ酸配列中の対応するＣＤＲのアミノ酸配列を含有することが記述されている場合、かかるＣＤＲは、上記のスキームのいずれかによって定義される、可変領域内の対応するＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）の配列を有することが理解される。特定のＣＤＲまたは複数のＣＤＲの同定のためのスキームは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭまたはＩＭＧＴ法によって定義されるＣＤＲのように特定され得る。

【0200】

ＣＤ４７アンタゴニスト抗体のＣＤＲ配列は、別途特定されない限り、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，” ５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤに記載されているようにＫａｂａｔ付番スキームに従う。

【0201】

本発明のＣＤ４７アンタゴニスト抗体はまた、それらの結合親和性（例えば、ヒトＣＤ４７またはヒトＳＩＲＰα）の観点から記載または特定され得る。好ましい結合親和性には、５ｘ１０^－２Ｍ、１０^－２Ｍ、５ｘ１０^－３Ｍ、１０^－３Ｍ、５ｘ１０^－４Ｍ、１０^－４Ｍ、５ｘ１０^－５Ｍ、１０^－５Ｍ、５ｘ１０^－６Ｍ、１０^－６Ｍ、５ｘ１０^－７Ｍ、１０^－７Ｍ、５ｘ１０^－８Ｍ、１０^－８Ｍ、５ｘ１０^－９Ｍ、１０^－９Ｍ、５ｘ１０^－１０Ｍ、１０^－１０Ｍ、５ｘ１０^－１１Ｍ、１０^－１１Ｍ、５ｘ１０^－１２Ｍ、１０^－１２Ｍ、５ｘ１０^－１３Ｍ、１０^－１３Ｍ、５ｘ１０^－１４Ｍ、１０^－１４Ｍ、５ｘ１０^－１５Ｍ、または１０^－１５Ｍ未満の解離定数またはＫ_Ｄのものが含まれる。

【0202】

５つのクラスの免疫グロブリン：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭが存在し、それぞれ、α、δ、ε、γ及びμと指定された重鎖を有する。γ及びαクラスは、サブクラスにさらに分けられ、例えば、ヒトは、以下のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を発現する。ＩｇＧ１抗体は、アロタイプと呼ばれる複数の多型バリアントが存在し得（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ ２００９．ｍＡｂｓ Ｖｏｌ １ Ｉｓｓｕｅ ４ １－７に概説されている）、そのいずれも、本明細書の実施形態の一部において使用するために好適である。ヒト集団における一般的なアロタイプバリアントは、ａ、ｆ、ｎ、ｚの文字またはそれらの組み合わせによって指定されるものである。本明細書の実施形態のいずれかでは、抗体は、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域を含む重鎖Ｆｃ領域を含み得る。さらなる実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１を含む。さらなる実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ４を含む。

【0203】

抗体にはまた、修飾された誘導体、すなわち、抗体への任意のタイプの分子の共有結合によって、共有結合が、抗体が、例えば、ＣＤ４７またはＳＩＲＰαに結合すること、または細胞に対する細胞増殖抑制性または細胞傷害性効果を発揮することを防止しないように修飾された誘導体が含まれる。例えば、限定されないが、抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への連結などによって修飾された抗体が含まれる。多数の化学的修飾のいずれかは、特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含むがこれらに限定されない既知の技術によって行われ得る。また、誘導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含有し得る。

【0204】

ＣＤ４７アンタゴニスト抗体には、ＣＤ４７を発現する標的細胞に対してＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及び／またはＣＤＣ反応を媒介または刺激する抗体エフェクタードメインが任意に含まれ得る。エフェクタードメイン（複数可）は、例えば、Ｉｇ分子のＦｃドメインまたはドメインであり得る。そのようなＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、ＣＤ４７を発現するがん細胞に対する細胞傷害性または細胞増殖抑制性効果を発揮し、または例えば、ＣＤ４７を発現するがんまたは免疫学的障害の処置において、それぞれ、活性化リンパ球または樹状細胞に対する細胞傷害性、細胞増殖抑制性、または免疫調節性効果を発揮し得る。典型的には、ＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、細胞傷害性白血球（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、貪食細胞（例えば、マクロファージ）、及び／または血清補体成分）を動員及び／または活性化する。

【0205】

本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、抗ＣＤ７０抗体について本明細書に記載される技術を使用して、標的、例えば、ＣＤ４７またはＳＩＲＰαへの特異的結合について、及び結合親和性についてアッセイされ得る。

【0206】

本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニスト抗体は、抗ＣＤ７０抗体について本明細書に記載される技術を使用して生成され得る。

【0207】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブ（Ｆｏｒｔｙ Ｓｅｖｅｎ，Ｉｎｃ．；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）、ＣＣ－９０００２（Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＡＬＸ１４８（ＡＬＸ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、Ｖｘ－１００４（Ｃｏｒｖｕｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）、ＮＩ－１７０１（Ｎｏｖｉｍｍｕｎｅ Ｓ．Ａ．）、ＮＩ－１８０１（Ｎｏｖｉｍｍｕｎｅ Ｓ．Ａ．）、ＲＣＴ－１９３８（Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、ＫＷＡＲ２３（ＷＯ２０１５１３８６００を参照されたい）、ＦＳＩ－１８９（Ｆｏｒｔｙ Ｓｅｖｅｎ Ｉｎｃ．；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（ＧＳ－０１８９としても知られている））、ＥＳ－００４（Ｅｌｐｉｓｃｉｅｎｃｅ）、ＢＩ７６５０６３（ＯＳＥ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（ＯＳＥ－１７２としても知られている）、ＡＤＵ－１８０５（Ａｄｕｒｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ）、ＣＣ－９５２５１（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＡＬ－００８（Ａｌｅｃｔｏｒ）、ＲＲｘ－００１（ＥｐｉｃｅｎｔＲｘ）、ＣＴＸ－５８６１（Ｃｏｍｐａｓｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＴＴＩ－６２１（Ｔｒｉｌｌｉｕｍ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、及びＴＴＩ－６２２（Ｔｒｉｌｌｉｕｍ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＷＯ２００１４０３０７、ＷＯ２００２０９２７８４、ＷＯ２００７１３３８１１、ＷＯ２００９０４６５４１、ＷＯ２０１００８３２５３、ＷＯ２０１１０７６７８１、ＷＯ２０１３０５６３５２、ＷＯ２０１５１３８６００、ＷＯ２０１６１７９３９９、ＷＯ２０１６２０５０４２、ＷＯ２０１７１７８６５３、ＷＯ２０１８０２６６００、ＷＯ２０１８０５７６６９、ＷＯ２０１８１０７０５８、ＷＯ２０１８１９０７１９、ＷＯ２０１８２１０７９３、ＷＯ２０１９０２３３４７、ＷＯ２０１９０４２４７０、ＷＯ２０１９１７５２１８、ＷＯ２０１９１８３２６６、ＷＯ２０２００１３１７０またはＷＯ２０２００６８７５２に開示されている。

【0208】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４及びｈ５Ｆ９－Ｇ４としても知られているマグロリマブである。米国特許番号９，０１７，６７５を参照されたい。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブの３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブの重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、マグロリマブのバイオシミラーである。

【0209】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、米国特許番号９，０１７，６７５に開示されている抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、米国特許番号９，０１７，６７５に開示されている抗体の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、米国特許番号９，０１７，６７５に開示されている抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、米国特許番号９，０１７，６７５に開示されている抗体のバイオシミラーである。

【0210】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＵＳ２０１９／０１８５５６１に開示されている抗体である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＵＳ２０１９／０１８５５６１に開示されている抗体の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＵＳ２０１９／０１８５５６１に開示されている抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＵＳ２０１９／０１８５５６１に開示されている抗体のバイオシミラーである。

【0211】

典型的には、ＣＤ４７アンタゴニストまたは誘導体は、実質的に精製される（例えば、その効果を制限するまたは不要な副作用をもたらす物質を実質的に含まない）。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストまたは誘導体は、少なくとも約４０％純粋、少なくとも約５０％純粋、または少なくとも約６０％純粋である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストまたは誘導体は、少なくとも約６０～６５％、６５～７０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～８５％、８５～９０％、９０～９５％、または９５～９８％純粋である。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストまたは誘導体は、およそ９９％純粋である。

【0212】

ＩＶ．処置方法
本発明は、対象におけるがん、例えば、骨髄悪性腫瘍を処置する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載されるＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、がんは、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、がんは、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、がんは、ＣＤ７０及びＣＤ４７を発現する。骨髄悪性腫瘍には、急性骨髄白血病（ＡＭＬ）、骨髄増殖性障害（ＭＰＤＳ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び骨髄異形成／骨髄増殖性症候群が含まれ、これらはすべて、クローン性幹細胞（ＨＳＣ）または前駆悪性障害である。いくつかの実施形態では、がんは、ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、がんは、ＡＭＬである。ＭＤＳは、単血球系異形成を伴うＭＤＳ、環状鉄芽球環を伴うＭＤＳ、多血球系異形成を伴うＭＤＳ、余剰の芽球を伴うＭＤＳ、孤立欠失（ｉｓｏｌａｔｅｄ ｄｅｌ）（５ｑ）を伴うＭＤＳ、及び分類不可ＭＤＳを含む複数のサブタイプを包含する。ＭＤＳは、骨髄系の１つ以上における無効な造血によって特性化される。早期ＭＤＳは大抵、過剰なアポトーシス及び造血細胞異形成を示す。ＭＤＳ患者の約３分の１では、この無効な造血は、二次ＡＭＬ（ｓＡＭＬ）への進行に先行する。ＡＭＬは、白血球の骨髄系の悪性腫瘍である。いくつかの実施形態では、方法は、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、配列番号２の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域、及びＦｃドメインを含み、抗ＣＤ７０抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ付番スキームによって定義される。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも３０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも４０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも５０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも６０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも７０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも８０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９０％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９５％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９８％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９９％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、方法は、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体の集団を対象に投与することを含み、抗ＣＤ７０抗体の集団における抗ＣＤ７０抗体の少なくとも９９．５％は、コアフコシル化を欠く。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、低メチル化剤（ＨＭＡ）と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、アザシチジンである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、ＢＨ３模倣体と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、ベネトクラクス（ＶＥＮＣＬＥＸＴＡ（登録商標））と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、ＨＭＡ及びＢＨ３模倣体と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、ＨＭＡ及びベネトクラクスと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、アザシチジン及びＢＨ３模倣体と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニスト及び抗ＣＤ７０抗体は、アザシチジン及びベネトクラクスと組み合わせて投与される。

【0213】

いくつかの実施形態では、本明細書では、対象におけるＭＤＳを処置する方法であって、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＭＤＳのがん細胞は、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、ＭＤＳのがん細胞は、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、ＭＤＳのがん細胞は、ＣＤ７０及びＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、非フコシル化である。いくつかの実施形態では、ＭＤＳは、再発性または難治性ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、ＭＤＳは、再発性ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、ＭＤＳは、難治性ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、対象は、ＭＤＳのための先行低メチル化剤（ＨＭＡ）療法後に処置失敗を経験した。ＨＭＡ（脱メチル化剤としても知られている）は、ＤＮＡメチル化を阻害する薬物である。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、アザシチジンである。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、デシタビンである。

【0214】

いくつかの実施形態では、本明細書では、対象におけるＡＭＬを処置する方法であって、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＡＭＬのがん細胞は、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、ＡＭＬのがん細胞は、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、ＡＭＬのがん細胞は、ＣＤ７０及びＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、非フコシル化である。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、再発性または難治性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、再発性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、ＡＭＬは、難治性ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、治療的有効量である。いくつかの実施形態では、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの量は、準治療的または準最適量である。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＭＬを処置するために１つの先行処置レジメンを受けた。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＭＬを処置するために２つの先行処置レジメンを受けた。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＭＬを処置するために３つの先行処置レジメンを受けた。

【0215】

いくつかの実施形態では、対象からのがん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、対象からのがん細胞の少なくとも０．１％、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、または少なくとも８０％は、ＣＤ７０を発現する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０を発現する細胞の割合は、免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０を発現する細胞の割合は、フローサイトメトリーを使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０を発現する細胞の割合は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を使用して決定される。

【0216】

いくつかの実施形態では、対象からのがん細胞の少なくとも約０．１％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％は、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、対象からのがん細胞の少なくとも０．１％、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、または少なくとも８０％は、ＣＤ４７を発現する。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７を発現する細胞の割合は、免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０を発現する細胞の割合は、フローサイトメトリーを使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７を発現する細胞の割合は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を使用して決定される。

【0217】

一態様では、本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載されるＣＤ４７アンタゴニストでがんを処置する方法は、ベースラインと比べて抗体の投与後に対象において１つ以上の治療効果の改善をもたらす。いくつかの実施形態では、１つ以上の治療効果は、客観的反応率、反応の継続期間、反応までの時間、無増悪生存、全生存、またはそれらの任意の組み合わせである。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、安定な疾患である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、部分的反応である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、完全な反応である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、客観的反応率である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、反応の継続期間である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、反応までの時間である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、無増悪生存である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、全生存である。一実施形態では、１つ以上の治療効果は、がん退縮である。

【0218】

本明細書で提供される方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載されるＣＤ４７アンタゴニストでの処置に対する反応には、以下の基準（Ｃｈｅｓｏｎ基準）が含まれ得る：

【表1-1】

【表1-2】

【0219】

本明細書で提供される方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストでの処置に対する反応には、以下の基準（Ｃｈｅｓｏｎ基準）が含まれ得る：

【表2-1】

【表2-2】

【表2-3】

【表3】

【0220】

本明細書で提供される方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストでの処置の有効性は、客観的反応率を測定することによって評価される。いくつかの実施形態では、客観的反応率は、予め定義された量の腫瘍サイズ低減を最小期間で有する患者の割合である。いくつかの実施形態では、客観的反応率は、Ｃｈｅｓｏｎ基準に基づく。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約２０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約３０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約４０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約５０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約６０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約７０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約８５％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約９０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約９５％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約９８％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも約９９％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、または少なくとも８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも２０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも３０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも４０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも５０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも６０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも７０％～８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも８０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも８５％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも９０％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも９５％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも９８％である。一実施形態では、客観的反応率は、少なくとも９９％である。一実施形態では、客観的反応率は、１００％である。

【0221】

本明細書に記載の方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストでの処置に対する反応は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に無増悪生存の時間を測定することによって評価される。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約６ヶ月の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約２年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約３年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約４年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約５年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、または少なくとも５年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも６ヶ月の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも１年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも２年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも３年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも４年の無増悪生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも５年の無増悪生存を示す。

【0222】

本明細書に記載の方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストでの処置に対する反応は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に全生存時間を測定することによって評価される。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約６ヶ月の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約１年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約２年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約３年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約４年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも約５年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、または少なくとも５年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも６ヶ月の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも１年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも２年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも３年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも４年の全生存を示す。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に少なくとも５年の全生存を示す。

【0223】

本明細書に記載の方法もしくは使用または使用のための生成物の一実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストでの処置に対する反応は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後に本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間を測定することによって評価される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、少なくとも約４年、または少なくとも約５年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約６ヶ月である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約１年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約２年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約３年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約４年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも約５年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、または少なくとも５年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも６ヶ月である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも１年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも２年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも３年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも４年である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストに対する反応の継続期間は、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与後の少なくとも５年である。

【0224】

本明細書に記載の方法もしくは使用または使用のための生成物のいくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することは、対象におけるがん細胞の枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または約１００％がん細胞の枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約５％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約１０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約２０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約３０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約４０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約５０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約６０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約７０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約８０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約９０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約９５％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも約９９％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して約１００％枯渇する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも９５％、または１００％がん細胞の枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも５％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも１０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも２０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも３０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも４０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも５０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも６０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも７０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも８０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも９０％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも９５％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して少なくとも９９％枯渇する。いくつかの実施形態では、がん細胞は、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のがん細胞の量と比較して１００％枯渇する。

【0225】

本明細書に記載の方法もしくは使用または使用のための生成物のいくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することは、対象におけるＣＤ７０＋Ｔ制御性細胞（ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇ）の枯渇をもたらさない。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、約１％、または約０．１％以下のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約５０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約４０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約３０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約２０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約１０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約５％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約１％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して約０．１％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体、例えば、非フコシル化抗ＣＤ７０抗体、及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを投与することは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．１％以下のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの枯渇をもたらす。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して５０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して４０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して３０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して２０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して１０％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して５％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して１％以下枯渇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ７０＋Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ７０抗体及びＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与する前のＣＤ７０＋Ｔｒｅｇの量と比較して０．１％以下枯渇する。

【0226】

いくつかの実施形態では、フコシル化抗ＣＤ７０抗体は、同じ重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗ＣＤ７０抗体の非フコシル化形態よりも高い程度まで対象におけるＣＤ７０＋Ｔｒｅｇを枯渇させる。いくつかの実施形態では、フコシル化抗ＣＤ７０抗体は、同じ重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗ＣＤ７０抗体の非フコシル化形態よりも高い程度まで対象におけるＣＤ７０＋Ｔｒｅｇを枯渇させ、対象は、高親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体（Ｖ／Ｖ１５８）についてホモ接合性である。いくつかの実施形態では、フコシル化抗ＣＤ７０抗体は、同じ重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗ＣＤ７０抗体の非フコシル化形態と同じ程度まで対象におけるＣＤ７０＋Ｔｒｅｇを枯渇させ、対象は、低親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体（Ｆ／Ｆ １５８）についてホモ接合性である。いくつかの実施形態では、対象が高親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体（Ｖ／Ｖ １５８）についてホモ接合性ではない場合、同じ重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗ＣＤ７０抗体のフコシル化抗ＣＤ７０抗体も非フコシル化形態も、ＣＤ８Ｔ細胞を枯渇させない。いくつかの実施形態では、対象が低親和性ＦｃγＲＩＩＩａ受容体（Ｆ／Ｆ１５８）についてホモ接合性である場合、同じ重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗ＣＤ７０抗体のフコシル化抗ＣＤ７０抗体も非フコシル化形態も、ＣＤ８Ｔ細胞を枯渇させない。

【0227】

Ｖ．細胞傷害性、細胞増殖抑制性、及び免疫調節性活性のためのアッセイ
抗体が標的細胞に対してエフェクター機能を媒介するかどうかを決定する方法は、知られている。そのような方法の例示的な例は、以下に記載されている。

【0228】

抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストが活性化免疫細胞、ＣＤ７０を発現するがん細胞、及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞に対して抗体依存性細胞傷害を媒介するかどうかを決定するために、抗体及びエフェクター免疫細胞の存在下で標的細胞死を測定するアッセイが使用され得る。このタイプの細胞傷害性を測定するために使用されるアッセイは、エフェクター細胞及び標的特異的抗体の存在下でのインキュベート後の代謝的に標識された細胞からの^５１Ｃｒ放出の決定に基づき得る（例えば、Ｐｅｒｕｓｓｉａ ａｎｄ Ｌｏｚａ，２０００，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １２１：１７９－９２；及び“^５１Ｃｒ Ｒｅｌｅａｓｅ Ａｓｓａｙ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｃｅｌｌ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ（ＡＤＣＣ）” ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，Ｗｉｌｅｙａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９３を参照されたい）。例えば、Ｎａ_２ ^５１ＣｒＯ_４で標識され、９６ウェルプレートの１ウェル当たり５，０００細胞の密度で播種された活性化免疫細胞（例えば、活性化リンパ球）またはＣＤ７０を発現するがん細胞は、様々な濃度の抗ＣＤ７０抗体で３０分間処置され、次いで正常なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）と４時間混合され得る。標的細胞死に付随する膜破壊は、^５１Ｃｒを培養上清に放出し、これは収集され、細胞傷害性活性の指標として放射能についてアッセイされ得る。ＡＤＣＣを測定するための他のアッセイは、非放射性標識を伴い得、または特定の酵素の誘導された放出に基づき得る。例えば、時間分解蛍光測定に基づく非放射性アッセイは、市販されている（Ｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）。このアッセイは、細胞膜を透過し、次いで加水分解して膜不透過性親水性リガンド（ＴＤＡ）を形成する蛍光増強リガンドのアセトキシメチルエステル（ＢＡＴＤＡ）を標的細胞に負荷することに基づく。標的特異的抗体及びＰＢＭＣエフェクター細胞と混合された場合、ＴＤＡは、溶解した細胞から放出され、ユーロピウムと混合された場合に高度蛍光キレートを形成するために利用可能である。時間分解蛍光光度計で測定されるシグナルは、細胞溶解の量と相関する。同様のアッセイがＣＤ４７アンタゴニストで行われ得る。

【0229】

抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストが、活性化免疫細胞、ＣＤ７０を発現するがん細胞、及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞に対して抗体依存性細胞貪食を媒介するかどうかを決定するために、エフェクター免疫細胞（例えば、新たに培養されたマクロファージまたは樹立されたマクロファージ様細胞株）による標的細胞内在化を測定するアッセイが使用され得る（例えば、Ｍｕｎｎ ａｎｄ Ｃｈｅｕｎｇ，１９９０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７２：２３１－３７；Ｋｅｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：５７４６－５２；Ａｋｅｗａｎｌｏｐ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１：４０６１－６５を参照されたい）。例えば、標的細胞は、脂溶性膜色素、例えば、ＰＫＨ６７（Ｓｉｇｍａ）で標識され、標的特異的抗体で被覆され、エフェクター免疫細胞と４～２４時間混合され得る。次いでエフェクター細胞は、食細胞表面マーカー（例えば、ＣＤ１４）に特異的な蛍光色素標識抗体で対比染色することによって同定され得、細胞は、２色フローサイトメトリーまたは蛍光顕微鏡検査によって分析され得る。二重陽性細胞は、内在化標的細胞を有するエフェクター細胞を表す。これらのアッセイのため、エフェクター細胞は、Ｍ－ＣＳＦまたはＧＭ－ＣＳＦと５～１０日間培養することによってマクロファージに分化したＰＢＭＣに由来する単球であり得る（例えば、Ｍｕｎｎ ａｎｄ Ｃｈｅｕｎｇ（上掲）を参照されたい）。ＡＴＣＣから利用可能なヒトマクロファージ様細胞株Ｕ９３７（Ｌａｒｒｉｃｋ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １２５：６－１２）またはＴＨＰ－１（Ｔｓｕｃｈｉｙａ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ２６：１７１－７６）は、代替的食細胞源として使用され得る。

【0230】

抗体が標的細胞に結合すると補体依存性細胞傷害を媒介するかどうかを決定する方法も知られている。同じ方法は、抗ＣＤ７０抗体が活性化免疫細胞またはＣＤ７０発現がん細胞に対してＣＤＣを媒介するかどうかを決定するために適用され得る。同じ方法はまた、ＣＤ４７アンタゴニストが活性化免疫細胞またはＣＤ４７発現がん細胞に対してＣＤＣを媒介するかどうかを決定するために適用され得る。そのような方法の例示的な例は、以下に記載されている。

【0231】

活性補体源は、正常なヒト血清であり、またはウサギを含む実験動物から精製され得る。標準的なアッセイでは、抗ＣＤ７０抗体は、補体の存在下でＣＤ７０を発現する活性化免疫細胞（例えば、活性化リンパ球）またはＣＤ７０を発現するがん細胞とインキュベートされる。そのような抗ＣＤ７０抗体が細胞溶解を媒介する能力は、いくつかの情報によって決定され得る。一例では、Ｎａ^５１ＣｒＯ_４放出アッセイが使用される。このアッセイでは、標的細胞は、Ｎａ^５１ＣｒＯ_４で標識される。組み込まれていないＮａ^５１ＣｒＯ_４は、洗浄除去され、細胞は、９６ウェルプレートにおいて好適な密度、典型的には５，０００～５０，０００細胞／ウェルで播種される。正常な血清または精製された補体の存在下での抗ＣＤ７０抗体とのインキュベートは、典型的には、３７℃で２～６時間５％ＣＯ_２雰囲気中で継続する。細胞溶解を示す放出された放射能は、ガンマ線カウントによって培養上清のアリコートにおいて決定される。最大細胞溶解は、洗浄剤（０．５～１％のＮＰ－４０またはＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）処置によって組み込まれたＮａ^５１ＣｒＯ_４を放出することによって決定される。自発的バックグラウンド細胞溶解は、いかなる抗ＣＤ７０抗体も伴わずに補体のみが存在するウェルにおいて決定される。細胞溶解の割合は、（抗ＣＤ７０抗体誘導溶解－自発的溶解）／最大細胞溶解）として計算される。第２の情報は、生存細胞による代謝色素、例えば、アラマーブルーの減少である。このアッセイでは、標的細胞は、補体と共に抗ＣＤ７０抗体とインキュベートされ、上述したようにインキュベートされる。インキュベートの最後に、１／１０の体積のアラマーブルー（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）が添加される。インキュベートは、５％ＣＯ_２雰囲気中で３７℃で最大で１６時間継続される。代謝的に活性な生存細胞の指標としてのアラマーブルーの減少は、５３０ｎｍでの励起及び５９０ｎｍでの放出での蛍光分析によって決定される。第３の情報は、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）に対する細胞膜透過性である。補体活性化の形成の結果としての細胞膜における細孔の形成は、細胞内へのＰＩの侵入を容易化し、そこでそれは核内に拡散し、ＤＮＡを結合させる。ＤＮＡに結合すると、６００ｎｍにおけるＰＩ蛍光が有意に増加する。抗ＣＤ７０抗体及び補体での標的細胞の処置は、上述したように行われる。インキュベートの最後に、ＰＩが５μｇ／ｍｌの最終濃度まで添加される。次いで細胞懸濁液は、励起のための４８８ｎｍのアルゴンレーザーを使用してフローサイトメトリーによって検査される。溶解した細胞は、６００ｎｍでの蛍光放出によって検出される。同様のアッセイがＣＤ４７アンタゴニストで行われ得る。

【0232】

ＶＩ．抗ＣＤ７０抗体を含む薬学的組成物及びその投与
抗ＣＤ７０抗体を含む組成物は、がん、例えば、ＣＤ７０を発現するがんを有するまたは有するリスクがある対象に投与され得る。本発明は、がん、例えば、ＣＤ７０を発現するがんの予防または処置のための薬品の製造における抗ＣＤ７０抗体の使用をさらに提供する。用語「対象」は、本明細書で使用される場合、例えば、ヒト及び非ヒト哺乳動物、例えば、霊長類、齧歯類、及びイヌを含む、ＣＤ７０結合剤が投与され得る任意の哺乳動物患者を意味する。本明細書に記載の方法を使用する処置のために具体的に意図される対象には、ヒトが含まれる。抗体は、がん、例えば、ＣＤ７０を発現するがんの予防または処置において単独でまたは他の組成物と組み合わせて投与され得る。

【0233】

ＣＤ４７アンタゴニストを含む組成物は、がん、例えば、ＣＤ４７を発現するがんを有するまたは有するリスクがある対象に投与され得る。本発明は、がん、例えば、ＣＤ４７を発現するがんの予防または処置のための薬品の製造におけるＣＤ４７アンタゴニストの使用をさらに提供する。用語「対象」は、本明細書で使用される場合、例えば、ヒト及び非ヒト哺乳動物、例えば、霊長類、齧歯類、及びイヌを含む、ＣＤ４７アンタゴニストが投与され得る任意の哺乳動物患者を意味する。本明細書に記載の方法を使用する処置のために具体的に意図される対象には、ヒトが含まれる。アンタゴニストは、がん、例えば、ＣＤ４７を発現するがんの予防または処置において単独でまたは他の組成物と組み合わせて投与され得る。

【0234】

様々な送達システムが知られており、抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストを投与するために使用され得る。導入の方法には、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、及び経口経路が含まれるがこれらに限定されない。抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストは、例えば、注入またはボーラス注射（例えば、静脈内または皮下）によって、上皮または皮膚粘膜内層（例えば、経口粘膜、直腸及び腸粘膜など）を介する吸収によって投与され得、他の生物学的活性剤、例えば、化学療法剤と一緒に投与され得る。投与は、全身性または局所的であり得る。一実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体は、非経口で投与される。一実施形態では、本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストは、非経口で投与される。非経口投与は、経腸及び局所投与以外の、通常は注射による投与様式を指し、表皮内、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、腱内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、頭蓋内、胸郭内、硬膜外及び胸骨内注射及び注入が含まれる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体の投与経路は、静脈内注射または注入である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体の投与経路は、静脈内注入である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与経路は、静脈内注射または注入である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの投与経路は、静脈内注入である。

【0235】

特定の実施形態では、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニスト組成物は、注射によって、カテーテルによって、座剤によって、または埋込物によって投与され、埋込物は、膜、例えば、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜、または繊維を含む多孔質、非多孔質、またはゼラチン状物質のものである。典型的には、組成物を投与する場合、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストが吸収しない物質が使用される。

【0236】

抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストは、治療的有効量の抗体及び１つ以上の薬学的適合性成分を含む薬学的組成物として投与され得る。例えば、薬学的組成物には、典型的には、１つ以上の薬学的担体（例えば、滅菌液体、例えば、水及び油（石油、動物、植物または合成起源のもの、例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などを含む））が含まれる。水は、薬学的組成物が静脈内に投与される場合、より典型的な担体である。生理食塩水及び水性デキストロース及びグリセロール溶液も、液体担体として、特に注射可能な溶液のために用いられ得る。好適な薬学的賦形剤には、例えば、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、胡粉、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが含まれる。組成物はまた、所望の場合、少量の浸潤または乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含有し得る。これらの組成物は、溶液、懸濁液、エマルション、錠剤、丸剤、カプセル、粉末、持続放出製剤などの形態をとり得る。組成物は、従来の結合剤及び担体、例えば、トリグリセリドを用いて坐剤として製剤化され得る。経口製剤には、標準的な賦形剤、例えば、薬学的グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどが含まれ得る。好適な薬学的担体の例は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ” ｂｙ Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎに記載されている。そのような組成物は、患者への適切な投与のための形態を提供するように、好適な量の担体と共に、治療的有効量のタンパク質（典型的には精製された形態）を含有することになる。製剤は、投与様式に対応する。

【0237】

典型的な実施形態では、薬学的組成物は、ヒトへの静脈内投与に適した薬学的組成物として慣例の手順に従って製剤化される。典型的には、静脈内投与のための組成物は、滅菌等張性水性緩衝液中の溶液である。必要に応じて、薬学的組成物にはまた、可溶化剤及び注射部位の疼痛を和らげるためのリグノカインなどの局所麻酔剤が含まれ得る。通常、成分は、例えば、活性剤の量を示すアンプルまたはサシェなどの密封された密閉容器中の乾燥凍結乾燥粉末または無水濃縮物として単位投薬形態中で別々に供給され、または一緒に混合される。薬剤が注入によって投与される場合、それは、薬学的グレードの滅菌水または生理食塩水を含有する注入ボトルを用いて調剤され得る。薬剤が注射によって投与される場合、注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが、成分が投与前に混合され得るように提供され得る。

【0238】

さらに、薬学的組成物は、（ａ）凍結乾燥した形態の抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストを含有する容器及び（ｂ）注射のための薬学的に許容可能な希釈剤（例えば、滅菌水）を含有する第２の容器を含む薬学的キットとして提供され得る。薬学的に許容可能な希釈剤は、凍結乾燥した抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストの再構成または希釈のために使用され得る。医薬品または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府当局によって定められた形式の通知が、そのような容器（複数可）に任意に付属し得、この通知は、ヒトのための製造、使用または販売の当局による承認を反映する。

【0239】

がんの処置または予防において有効である抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストの量は、標準的な臨床的技術によって決定され得る。また、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイが、最適な投薬量範囲を特定することを補助するために任意に用いられ得る。製剤において用いられる正確な用量はまた、投与経路、及びがんのステージに依存し、実施者の判断及び各患者の状況に従って決定されるべきである。有効用量は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系に由来する用量反応曲線から外挿され得る。

【0240】

例えば、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストの毒性及び治療的有効性は、ＬＤ_５０（集団の５０％に対して致死的な用量）及びＥＤ_５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定するための標準的な薬学的手順によって細胞培養または実験動物で決定され得る。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指数であり、それは、比ＬＤ_５０／ＥＤ_５０として表され得る。高い治療指数を示す抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストが好ましい。抗ＣＤ７０抗体が毒性副作用を示す場合、抗ＣＤ７０抗体を罹患組織の部位に標的化する送達システムが、非ＣＤ７０発現細胞への潜在的損傷を最小化し、それにより副作用を低減するために使用され得る。ＣＤ４７アンタゴニストが毒性副作用を示す場合、ＣＤ４７アンタゴニストを罹患組織の部位に標的化する送達システムが、非ＣＤ４７発現細胞への潜在的損傷を最小化し、それにより副作用を低減するために使用され得る。

【0241】

細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータは、ヒトにおいて使用するための投薬量の範囲を策定する際に使用され得る。抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、典型的には、毒性がほとんどまたは全くないＥＤ_５０を含む循環濃度の範囲内にある。投薬量は、用いられる投薬形態及び利用される投与経路に応じてこの範囲内で様々であり得る。方法において使用される抗ＣＤ７０抗体またはＣＤ４７アンタゴニストのため、治療的に有効な用量は、細胞培養アッセイから最初に推定され得る。用量は、細胞培養において決定される場合、ＩＣ_５０（すなわち、症状の最大半数阻害を達成する試験化合物の濃度）を含む循環血漿濃度範囲を達成するために動物モデルにおいて製剤化され得る。そのような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために使用され得る。血漿におけるレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定され得る。

【0242】

通常、がんを有する患者に投与される抗ＣＤ７０抗体の投薬量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／対象の体重のｋｇである。より典型的には、対象に投与される抗ＣＤ７０抗体の投薬量は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／対象の体重のｋｇ、さらにより典型的には１ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ～７．５ｍｇ／対象の体重のｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約１．５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約１０ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約１０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の用量は、約２０ｍｇ／ｋｇである。通常、ヒト抗体は、外来タンパク質に対する免疫反応により、ヒト身体内で他の種からの抗体よりも長い半減期を有する。よって、ヒト化またはキメラ抗体を含む抗ＣＤ７０抗体のより少ない投薬量及びより頻繁の少ない投与がしばしば可能である。

【0243】

抗ＣＤ７０抗体の用量は、例えば、毎日、１週当たり１回（毎週）、１週当たり２回、１週当たり３回、１週当たり４回、１週当たり５回、隔週、毎月またはそうでなければ必要に応じて投与され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、約２週間毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、２週間毎に１回投与される。

【0244】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の投薬量は、準最適投薬量（すなわち、抗ＣＤ７０抗体についてのＥＣ_５０未満）に対応する。例えば、抗ＣＤ７０抗体の投薬量は、治療ウインドウの最低２５％、最低１５％、最低１０％または最低５％から選択される投薬量を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「治療ウインドウ」は、安全かつ有効な療法を提供する身体システムにおける薬物の投薬量またはその濃度の範囲を指す。

【0245】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体の投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約０．９ｍｇ／ｋｇ、または約０．１５～約０．７５ｍｇ／対象の体重のｋｇである。そのような投薬量は、１週当たり１～約１５回投与され得る。各用量は、同じまたは異なる場合がある。例えば、抗ＣＤ７０抗体の約０．１５ｍｇ／ｋｇの投薬量は、４日、５日、６日または７日の期間当たり１～１０回投与され得る。

【0246】

通常、がんを有する患者に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／対象の体重のｋｇである。より典型的には、対象に投与されるＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／対象の体重のｋｇ、さらにより典型的には１ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ～７．５ｍｇ／対象の体重のｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１．５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約２０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、約３０ｍｇ／ｋｇである。通常、ヒト抗体は、外来タンパク質に対する免疫反応により、ヒト身体内で他の種からの抗体よりも長い半減期を有する。よって、ヒト化またはキメラ抗体を含む抗ＣＤ４７抗体のより少ない投薬量及びより頻繁の少ない投与がしばしば可能である。

【0247】

ＣＤ４７アンタゴニストの用量は、例えば、毎日、１週当たり１回（毎週）、１週当たり２回、１週当たり３回、１週当たり４回、１週当たり５回、隔週、毎月またはそうでなければ必要に応じて投与され得る。

【0248】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週処置サイクルの１、４、８、１１、１５、及び２２日目に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週処置サイクルの１及び４日目に１ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週処置サイクルの８日目に１５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、１回目の４週処置サイクルの１１、１５及び２２日目に３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、２回目の４週処置サイクルの１、８、１５、及び２２日目に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、２回目の４週処置サイクルの１、８、１５、及び２２日目に３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、３回目の４週処置サイクルの１及び１５日目に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、３回目の４週処置サイクルの１及び１５日目に３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、３回目の４週処置サイクルの後に各４週処置サイクルについての１及び１５日目に３０ｍｇ／対象の体重のｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７は、マグロリマブである。

【0249】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、準最適投薬量（すなわち、ＣＤ４７アンタゴニストについてのＥＣ_５０未満）に対応する。例えば、ＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、治療ウインドウの最低２５％、最低１５％、最低１０％または最低５％から選択される投薬量を含み得る。本明細書で使用される場合、用語「治療ウインドウ」は、安全かつ有効な療法を提供する身体システムにおける薬物の投薬量またはその濃度の範囲を指す。

【0250】

いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストの投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約０．９ｍｇ／ｋｇ、または約０．１５～約０．７５ｍｇ／対象の体重のｋｇである。そのような投薬量は、１週当たり１～約１５回投与され得る。各用量は、同じまたは異なる場合がある。例えば、ＣＤ４７アンタゴニストの約０．１５ｍｇ／ｋｇの投薬量は、４日、５日、６日または７日の期間当たり１～１０回投与され得る。

【0251】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストを含む薬学的組成物は、治療剤（例えば、本明細書に記載のもののいずれかなどの、例えば、非コンジュゲート化細胞傷害または免疫調節剤）をさらに含み得る。抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストはまた、がん、例えば、ＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがんの処置または予防のための１つ以上の治療剤と組み合わせて共投与され得る。例えば、組み合わせ療法には、治療剤（例えば、細胞増殖抑制剤、細胞傷害剤、または免疫調節剤、例えば、コンジュゲートされていない細胞増殖抑制剤、細胞傷害剤、または免疫調節剤、例えば、がんの処置のために従来から使用されているもの）が含まれ得る。組み合わせ療法にはまた、例えば、活性化リンパ球、樹状細胞またはＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞の表面上のＣＤ７０及び／またはＣＤ４７以外の受容体または受容体複合体を標的とする薬剤の投与が含まれ得る。そのような薬剤の例には、活性化リンパ球、樹状細胞、またはＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞の表面でＣＤ７０またはＣＤ４７以外の分子に結合する抗体が含まれる。別の例には、そのような受容体または受容体複合体を標的とするリガンドが含まれる。典型的には、そのような抗体またはリガンドは、活性化リンパ球、樹状細胞、またはＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞上の細胞表面受容体に結合し、活性化リンパ球、樹状細胞またはＣＤ７０を発現する及び／またはＣＤ４７を発現するがん細胞に細胞増殖抑制性または細胞傷害性シグナルを送達することによって抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストの細胞傷害性または細胞増殖抑制性効果を増強する。そのような組み合わせ投与は、疾患パラメータ（例えば、症状の重症度、症状の数、または再燃の頻度）に対する相加または相乗効果を有し得る。別の例には、低メチル化剤（ＨＭＡ）が含まれる。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、アザシチジン（ＶＩＤＡＺＡ（登録商標））である。別の例には、ＢＨ３模倣体が含まれる。いくつかの実施形態では、ＢＨ３模倣体は、ベネトクラクス（ＶＥＮＣＬＥＸＴＡ（登録商標））である。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、ＨＭＡ、及びＢＨ３模倣体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、ＨＭＡ、及びベネトクラクスを含む。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、アザシチジン、及びＢＨ３模倣体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、アザシチジン、及びベネトクラクスを含む。組み合わせ療法にはまた、低メチル化剤（ＨＭＡ）が含まれ得る。いくつかの実施形態では、ＨＭＡは、アザシチジン（ＶＩＤＡＺＡ（登録商標））である。組み合わせ療法にはまた、ＢＨ３模倣体が含まれ得る。いくつかの実施形態では、ＢＨ３模倣体は、ベネトクラクス（ＶＥＮＣＬＥＸＴＡ（登録商標））である。いくつかの実施形態では、組み合わせ療法は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、ＨＭＡ、及びＢＨ３模倣体を含む。いくつかの実施形態では、組み合わせ療法は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、ＨＭＡ、及びベネトクラクスを含む。いくつかの実施形態では、組み合わせ療法は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、アザシチジン、及びＢＨ３模倣体を含む。いくつかの実施形態では、組み合わせ療法は、抗ＣＤ７０抗体、ＣＤ４７アンタゴニスト、アザシチジン、及びベネトクラクスを含む。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、７５ｍｇ／対象の身体表面積のｍ２の用量で投与される。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、各４週処置サイクルの１～７日目に投与される。いくつかの実施形態では、アザシチジンは、各４週処置サイクルの１～５及び８～９日目に投与される。

【0252】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、ＣＤ４７アンタゴニストと同時に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、抗ＣＤ７０抗体の前または後に、抗ＣＤ７０抗体の投与の少なくとも１時間及び最大で数ヶ月、例えば、少なくとも１時間、５時間、１２時間、１日、１週、１ヶ月、または３ヶ月前または後まで投与される。いくつかの実施形態では、対象は、抗ＣＤ７０抗体ＣＤ４７アンタゴニストの投与後にモニタリングされる。

【0253】

ＶＩＩ．製造品及びキット
別の態様では、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び／または本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを含む製造品またはキットが提供される。製造品またはキットは、本発明の方法における本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び／または本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの使用のための指示書をさらに含み得る。よって、所定の実施形態では、製造品またはキットは、本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストを対象に投与することを含む対象におけるがん（例えば、骨髄悪性腫瘍）を処置するための方法における本明細書に記載の抗ＣＤ７０抗体及び／または本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストの使用のための指示書を含む。いくつかの実施形態では、がんは、ＭＤＳである。いくつかの実施形態では、がんは、ＡＭＬである。いくつかの実施形態では、がんは、再発性または難治性がんである。いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。

【0254】

製造品またはキットは、容器をさらに含み得る。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル（例えば、二重チャンバーバイアル）、シリンジ（例えば、単一または二重チャンバーシリンジ）及び試験管が含まれる。いくつかの実施形態では、容器は、バイアルである。容器は、多様な物質、例えば、ガラスまたはプラスチックから形成され得る。容器は、製剤を保持する。

【0255】

製造品またはキットは、製剤の再構成及び／または使用のための指示を示し得る、容器上のまたはそれに付属したラベルまたはパッケージ挿入物をさらに含み得る。ラベルまたはパッケージ挿入物はさらに、製剤が、対象におけるがんを処置するための皮下、静脈内（例えば、静脈内注入）、または他の投与様式のために有用であり、またはそのために意図されることを示し得る。製剤を保持する容器は、再構成された製剤の繰り返し投与を可能とする単一使用バイアルまたは複数使用バイアルであり得る。製造品またはキットは、好適な希釈剤を含む第２の容器をさらに含み得る。製造品またはキットには、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、シリンジ、及び使用のための指示書を備えるパッケージ挿入物を含む、商業的、治療的、及び使用者の観点から望ましい他の材料がさらに含まれ得る。

【0256】

本明細書における製造品またはキットは任意に、さらなる薬品を含む容器をさらに含み、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストは、第１及び／または第２の薬品を含み、製造品またはキットは、対象をさらなる薬品で有効量で処置するためのラベルまたはパッケージ挿入物上の指示書をさらに含む。いくつかの実施形態では、ラベルまたはパッケージ挿入物は、抗ＣＤ７０抗体及び／またはＣＤ４７アンタゴニストが、さらなる薬品と共に順次にまたは同時に投与されることを示す。

【0257】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体及び／または本明細書に記載のＣＤ４７アンタゴニストは、凍結乾燥された粉末として容器に存在する。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された粉末は、活性剤の量を示す、バイアル、アンプルまたはサシェなどの密封容器内にある。薬剤が注射によって投与される場合、注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルは、成分が投与前に混合され得るように、例えば、任意にキットの一部として提供され得る。そのようなキットには、当業者に明らかなように、所望により、例えば、１つ以上の薬学的に許容可能な担体を有する容器、追加の容器等の様々な従来の薬学的成分のうちの１つ以上がさらに含まれ得る。投与される成分の量、投与のためのガイドライン、及び／または成分を混合するためのガイドラインを示す、挿入物としてまたはラベルとしての印刷された指示書も、キットに含められ得る。

【0258】

本発明は、以下の実施例を参照することによってより完全に理解される。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に記載される実施例及び実施形態は、例示のみを目的とするものであり、それらを考慮した様々な変形または変更が当業者に想起され、本出願の趣旨及び範囲ならびに添付の特許請求の範囲内に含まれることが理解される。

【実施例】

【0259】

実施例１．ＭＶ４－１１ ＡＭＬ異種移植片マウスモデルにおける腫瘍成長に対する抗ＣＤ４７抗体クローンｈ５Ｆ９と組み合わせたＳＥＡ－ＣＤ７０（ｈ１Ｆ６ ＳＥＡ）の効果。
ＣＤ４７は、自然免疫系の細胞、例えば、マクロファージ及び樹状細胞によって媒介される貪食の制御因子として機能する細胞表面タンパク質である。ＣＤ４７は、これらの自然免疫細胞上の受容体であるＳＩＲＰ－アルファに対するリガンドであり、ＳＩＲＰ－アルファはひいては貪食のための阻害性シグナルを送達する。ヒト急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞は、ＣＤ４７を発現し、そのため、ＣＤ４７に仕向けられた阻害性モノクローナル抗体は、がん細胞の貪食及び排除を可能とし得る。

【0260】

この研究では、脱フコシル化抗ＣＤ７０抗体ｈ１Ｆ６ ＳＥＡ（ＳＥＡ－ＣＤ７０）単独、抗ＣＤ４７モノクローナル抗体ｈ５Ｆ９－Ｇ４（ｈ５Ｆ９ ｈＩｇＧ４ｋ、マグロリマブ）単独、またはｈ５Ｆ９ ｈＩｇＧ４ｋと組み合わせたＳＥＡ－ＣＤ７０の投与に反応する腫瘍成長を、ＣＤ７０を発現するＡＭＬ異種移植片マウスモデルＭＶ４－１１において評価した。腫瘍成長を体積として報告し、各処置群内の動物にわたる平均として計算した（図１）。０日目にＳＣＩＤマウスに５ｘ１０ｅ６個のＭＶ４－１１細胞を横腹に皮下で移植した。５０ｍｍ^３の平均腫瘍サイズ（式：体積（ｍｍ^３）＝０．５＊長さ＊幅^２（式中、長さは長い方の寸法である）を使用することによって測定した）に達したときに、マウスを１群当たり９匹のマウスの処置群に無作為化した。処置を腹腔内に与えた。ストック濃度の抗体及び化学療法剤を適切な濃度に希釈し、１０μｌ／体重のｇで動物に注射した。腫瘍の長さ及び幅、ならびに動物の重量を研究にわたって毎週２回測定し、腫瘍体積を上記の式を使用して計算した。動物を測定された腫瘍体積が約１０００ｍｍ^３となるまで監視し、その時に動物を安楽死させた。動物を合計で５サイクルについて４日毎（Ｑ４ｄｘ５）にｈ５Ｆ９－Ｇ４を０．３及び１ｍｇ／ｋｇの用量でまたはｈ１Ｆ６ ＳＥＡを１０ｍｇ／ｋｇで処置した。処置の組み合わせを摂取する動物は、各処置を単一の処置と同じ用量及びスケジュールで摂取した。経時的な腫瘍体積変化の分析は、ｈ１Ｆ６ ＳＥＡ及びｈ５Ｆ９－Ｇ４の組み合わせが、各々の単一の薬剤よりも高い抗腫瘍活性を引き起こすことを示している。特に、ｈ１Ｆ６ ＳＥＡと、前臨床モデルで通常使用されるものよりも＞１０倍少ないｈ５Ｆ９－Ｇ４の準効果的用量との組み合わせは、相乗効果を示し、実験タイムライン内で腫瘍の持続可能な完全寛解を誘導する。

【0261】

実施例２．ＭＶ４－１１急性骨髄性白血病マウスモデルにおける腫瘍成長に対する、抗ＣＤ４７クローンｈＵ５Ｆ９－Ｇ４、及び低メチル化剤アザシチジン（ＶＩＤＡＺＡ（登録商標））と組み合わせたＳＥＡ－ＣＤ７０（ｈ１Ｆ６ ＳＥＡ）の効果。
この研究では、単一薬剤抗ＣＤ４７モノクローナル抗体ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４（ｈｕ５Ｆ９ ｈＩｇＧ４ｋ、ｈｕ５Ｆ９ ｈＩｇＧ４カッパ、マグロリマブ）、もしくは単一の低メチル化剤アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））と組み合わせた脱フコシル化抗ＣＤ７０抗体ｈ１Ｆ６ ＳＥＡ（ＳＥＡ－ＣＤ７０）、または両方の組み合わせ（三重の組み合わせ）の投与に反応する腫瘍成長を、ＣＤ７０を発現する細胞異種移植片マウスモデルＭＶ４－１１株において評価した。腫瘍成長を体積（ｍｍ^３）として報告し、各処置群内の動物にわたる平均として計算した（図２）。０日目にＳＣＩＤマウスに５ｘ１０ｅ６個のＭＶ４－１１細胞を横腹に皮下で移植した。５０ｍｍ^３の平均腫瘍サイズ（式：体積（ｍｍ^３）＝０．５＊長さ＊幅^２（式中、長さは長い方の寸法である）を使用することによって測定した）に達したときに、マウスを１群当たり５匹のマウスの処置群に無作為化した。処置を腹腔内に与えた。ストック濃度の抗体及び化学療法剤を適切な濃度に希釈し、１０μｌ／体重のｇで動物に注射した。腫瘍の長さ及び幅、ならびに動物の重量を研究にわたって毎週２回測定し、腫瘍体積を上記の式を使用して計算した。動物を測定された腫瘍体積が約７５０ｍｍ^３となるまで監視し、その時に動物を安楽死させた。薬物併用効果の適切な評価を可能とするために、動物をｈｕ５Ｆ９－Ｇ４（合計３サイクルについて４日毎に０．１ｍｇ／ｋｇ（Ｑ４ｄｘ３））、またはアザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））（３サイクル（合計３週）について５日連続で毎日２ｍｇ／ｋｇ（Ｑ１ｄｘ５））の準効果的用量で処置した。ｈ１Ｆ６－ＳＥＡは、５サイクルについて４日毎に１０ｍｇ／ｋｇで投薬した（Ｑ５ｘ５）。処置の組み合わせを摂取する動物は、各処置を上記で示される単一の処置と同じ用量及びスケジュールで摂取した。経時的な腫瘍体積変化の分析は、ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４及びアザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））の組み合わせへのｈ１Ｆ６－ＳＥＡの追加が良好に忍容され、各々の可能性のある二重組み合わせ（ｈ１Ｆ６－ＳＥＡ＋ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４、ｈ１Ｆ６－ＳＥＡ＋アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標））、またはｈｕ５Ｆ９－Ｇ４＋アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ（登録商標）））よりも高い抗腫瘍活性を引き起こすことを示している。

【図1】

【図2】

【配列表】

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【国際調査報告】