特表2024-527978腫瘍の予防または処置のための医薬組成物およびその使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-07-26
(54)【発明の名称】腫瘍の予防または処置のための医薬組成物およびその使用
(51)【国際特許分類】
A61K 45/06 20060101AFI20240719BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240719BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240719BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240719BHJP
A61K 31/444 20060101ALI20240719BHJP
【ＦＩ】
A61K45/06
A61P35/00
A61P43/00 121
A61P43/00 111
A61K39/395 U
A61K39/395 D
A61K31/444
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024504990
(86)(22)【出願日】2022-07-28
(85)【翻訳文提出日】2024-03-21
(86)【国際出願番号】 KR2022011149
(87)【国際公開番号】W WO2023008936
(87)【国際公開日】2023-02-02
(31)【優先権主張番号】10-2021-0099500
(32)【優先日】2021-07-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】517147825
【氏名又は名称】ティウムバイオ カンパニー、リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＴｉｕｍＢｉｏ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100150500
【弁理士】
【氏名又は名称】森本 靖
(74)【代理人】
【識別番号】100176474
【弁理士】
【氏名又は名称】秋山 信彦
(72)【発明者】
【氏名】キム，フンテク
(72)【発明者】
【氏名】ソ，ジョンミン
(72)【発明者】
【氏名】キム，ナムフン
(72)【発明者】
【氏名】キム，スンヒョン
(72)【発明者】
【氏名】イ，ジヒョン
(72)【発明者】
【氏名】ノ，ジヒョン
(72)【発明者】
【氏名】ユ，チャンヒ
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA20
4C084MA02
4C084MA52
4C084NA05
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZC202
4C084ZC411
4C084ZC412
4C084ZC75
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085EE03
4C085GG08
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB05
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA52
4C086NA05
4C086ZB26
4C086ZC20
4C086ZC41
4C086ZC75
(57)【要約】
本出願に開示される技術の態様により、本発明は、トランスフォーミング増殖因子－β(ＴＧＦ－β)のシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含む、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物であって、ＴＧＦ－βシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼの免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個との組み合わせでの投与により、低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤または受容体チロシンキナーゼ阻害剤を単独で投与したときと比較して、腫瘍治療または腫瘍増殖阻害を必要とする患者において、腫瘍治療または腫瘍増殖阻害性効果が優れた、医薬組成物に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
トランスフォーミング増殖因子－β(ＴＧＦ－β)のシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含み、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物。
【請求項2】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が：１)１－[６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－キノキサリン－６－イル－２,３－ジヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－１－イル]－エタノン；
２)６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン；
３)６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノキサリン；
４)６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン；
５)６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノリン；
６)２－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン；
７)６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾチアゾール；
８)５－ベンゾ[ｂ]チオフェン－５－イル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
９)６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジン；
１０)５－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾオキサゾール；
１１)４－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン；
１２)５－ベンゾ[１,３]ジオキソール－５－イル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
１３)５－(２,３－ジヒドロ－ベンゾ[１,４]ジオキシン－６－イル)－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
１４)７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－２－ピラゾール－１－イル－キノキサリン；
１５)ジメチル－(２－{７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン－２－イルオキシ}－エチル)－アミン；
１６)２－メトキシ－７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン；
１７)５－(３,５－ジメトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
１８)Ｎ,Ｎ－ジメチル－４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)アニリン；
１９)４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)ベンゾニトリル；
２０)２－メチル－６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)キノリン；
２１)４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)アニリン；
２２)Ｎ－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)アセトアミド；
２３)Ｎ－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)メタンスルホンアミド；
２４)ｔｅｒｔ－ブチル(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)カルバメート；
２５)５－(４－(４－メチルピペラジン－１－イル)フェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
２６)４－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)モルホリン；
２７)６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(ｍ－トリル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
２８)５－(４－メトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
２９)６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(４－(トリフルオロメチル)フェニル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
３０)６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(４－(メチルチオ)フェニル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
３１)５－(３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
３２)５－(４－フルオロフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール；
３３)１－アセチル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸エチルエステル；
３４)６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸エチルエステル；
３５)[６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル]－メタノール；
３６)１－アセチル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボニトリル；
３７)６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボニトリル；
３８)６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸アミド；
３９)(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル)メタンアミン；および
４０)Ｎ－((６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル)メチル)アセトアミド
からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１の医薬組成物。
【請求項3】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が免疫チェックポイント制御剤と組み合わせて投与される、請求項１の医薬組成物。
【請求項4】
免疫チェックポイント制御剤がプログラム死－リガンド１(ＰＤ－Ｌ１)阻害剤、プログラム細胞死タンパク質１(ＰＤ－１)阻害剤および細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原４(ＣＴＬＡ－４)阻害剤からなる群から選択される少なくとも１個である、請求項１または３の医薬組成物。
【請求項5】
免疫チェックポイント制御剤が１)ＰＤ－Ｌ１タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個；
２)ＰＤ－１タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個；および
３)ＣＴＬＡ－４タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個
から選択される少なくとも１個である、請求項１または３の医薬組成物。
【請求項6】
免疫チェックポイント制御剤が抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合フラグメント；抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合フラグメント；または抗ＣＴＬＡ－４抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１または３の医薬組成物。
【請求項7】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が受容体チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与される、請求項１の医薬組成物。
【請求項8】
受容体チロシンキナーゼ阻害剤がＶＥＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ、ＲＥＴおよびｃ－Ｍｅｔから選択される少なくとも１個のチロシンキナーゼの阻害剤である、請求項１または７の医薬組成物。
【請求項9】
受容体チロシンキナーゼ阻害剤がＶＥＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ、ＲＥＴおよびｃ－Ｍｅｔから選択される少なくとも１個のチロシンキナーゼの機能を阻害する化合物またはチロシンキナーゼタンパク質に特異的に選択するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントから選択される少なくとも１個である、請求項１または７の医薬組成物。
【請求項10】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤がさらに免疫チェックポイント制御剤と組み合わせて投与される、請求項７の医薬組成物。
【請求項11】
腫瘍が黒色腫、肉腫、脳腫瘍、乳癌、副腎癌、甲状腺癌、膵臓癌、下垂体癌、神経膠芽腫、眼癌、膣癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮癌、卵巣癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、胆嚢癌、胆管細胞癌、肺癌、精巣癌、前立腺癌、陰茎癌、口腔癌、基底癌、唾液腺癌、咽頭癌、皮膚癌、腎臓癌、ウィルムス腫瘍、膀胱癌、頭頸部癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、肝細胞癌、虫垂癌、気管支癌、絨毛癌、脊索腫、上衣腫、消化器間質腫瘍(ＧＩＳＴ)、神経内分泌癌および尿道癌からなる群から選択される、請求項１の医薬組成物。
【請求項12】
腫瘍が固形腫瘍である、請求項１の医薬組成物。
【請求項13】
医薬組成物が経口投与のためである、請求項１の医薬組成物。
【請求項14】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と別々にまたは同時に投与される、請求項１の医薬組成物。
【請求項15】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤；および免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個
を含む、腫瘍の予防または処置のための組み合わせ物。
【請求項16】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤；および免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個
を含む、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物。
【請求項17】
対象における腫瘍を予防または処置する方法であって、対象に：ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤；および
免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個
を投与することを含む、方法。
【請求項18】
投与が同時にまたは別々に実施される、請求項１７の方法。
【請求項19】
腫瘍の予防または処置用医薬の製造における、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の使用。
【請求項20】
ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤；およびＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤と免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアル
を含む、腫瘍の予防または処置のためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、トランスフォーミング増殖因子－β(ＴＧＦ－β)のシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物、腫瘍を予防または処置する方法および該医薬組成物の使用に関する。
【背景技術】
【0002】
腫瘍細胞は、腫瘍細胞がＴ細胞を不活性とする物質を分泌し、それにより免疫細胞の攻撃を回避し、腫瘍微小環境を変え、迅速に分割し、そして腫瘍細胞がそれが産生された組織から出て、他の組織に拡散することを可能とすることにより特徴づけられる。一方では、腫瘍細胞は、自身に血管を作り、迅速な増殖および転移に必要な栄養素を得る(腫瘍血管形成)。
【0003】
制御性Ｔ細胞は、腫瘍細胞の免疫回避に関与する主細胞であることが知られ、腫瘍組織における制御性Ｔ細胞数を減らすためのいくつかの処置戦略が開発されている。例えば、Ｔ細胞を減らす方法として、低濃度でシクロホスファミド(ＣＰ)を投与することにより免疫抑制性応答を制御するための化学療法剤、ＣＤ２５、ＣＴＬＡ－４もしくはＰＤ－１などの分子または制御性Ｔ細胞により特異的に発現されるケモカイン受容体をターゲティングする抗体などの免疫チェックポイント制御剤を使用する方法が開発されており、ＣＴＬＡ－４をターゲティングするイピリムマブ(ヤーボイ(登録商標))ならびにプログラム細胞死タンパク質－１(ＰＤ－１)をターゲティングするペムブロリズマブ(キイトルーダ(登録商標))およびニボルマブ(オプジーボＴＭ)が、米国食品医薬品局(ＦＤＡ)により販売を承認されている。
【0004】
一方では、血管内皮細胞増殖因子受容体(ＶＥＧＦＲ)１～３、血小板由来増殖因子受容体(ＰＤＧＦＲ－α)、トランスフェクション中再構成(ＲＥＴ)受容体および線維芽細胞増殖因子受容体(ＦＧＦＲ)１～４は、腫瘍細胞の細胞分裂および血管形成に関与することが知られる受容体チロシンキナーゼである。従って、受容体チロシンキナーゼを選択的に阻害する薬物が開発されており、受容体チロシンキナーゼ選択的阻害剤と免疫チェックポイント制御剤の組み合わせの使用により抗癌処置効果を高めるための方法の研究も活発になされている。さらに、２０２１年、ＦＤＡは受容体チロシンキナーゼ阻害剤であるレンバチニブ(レンビマ(登録商標))と抗ＰＤ－１抗体であるペムブロリズマブの組み合わせの進行型腎臓癌治療および進行型子宮内膜癌治療を承認した。
【0005】
しかしながら、免疫チェックポイント制御剤および／または受容体チロシンキナーゼ阻害剤を使用した処置に応答しない腫瘍患者がいる。免疫チェックポイント制御剤が癌患者の約２０％～３０％にしか有効ではないとの低応答率により、免疫チェックポイント制御剤の応答率を高め、効果を最大にするための組み合わせ治療剤の開発が積極的に実施されている。さらに、先に開発されている腫瘍治療剤が使用されていても、対象の体重減少などの有害作用により、腫瘍患者のクオリティ・オブ・ライフが脅かされる。それ故に、有害作用が少なく、腫瘍増殖抑制に優れた効果を有する新規処置を開発する必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】韓国特許２２２０２７５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
本発明者らは、対象へのＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個と組み合わせた投与が、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、受容体チロシンキナーゼ阻害剤または免疫チェックポイント制御剤単独の投与より、腫瘍増殖を抑制する良好な効果を有し、安全であることを発見し、それにより本発明を完成させた。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明のある実施態様において、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含み、該ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤が免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物を提供する。
【0009】
本発明の他の実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤ならびに免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個を含む、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物が提供される。
【0010】
本発明の他の実施態様において、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤ならびに免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個を含む、腫瘍を予防または処置するための組み合わせを提供する。
【0011】
本発明の他の実施態様において、本発明は、対象にＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤ならびに免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個を投与することを含む、対象における腫瘍を予防または処置する方法を提供する。
【0012】
本発明のある実施態様において、本発明は、腫瘍の予防または処置用医薬の製造における、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の使用を提供する。
【0013】
本発明のある実施態様において、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤およびＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤と免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、腫瘍の予防または処置のためのキットを提供する。
【発明の効果】
【0014】
対象へのＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個と組み合わせた投与は、低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤またはチロシンキナーゼ阻害剤単独の使用に対して、腫瘍増殖抑制に優れた効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】黒色腫マウスモデルにおける化合物１と抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＰＤ－１抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果を示す。
【0016】
【図2】黒色腫マウスモデルにおける対照群(媒体)および試験薬物投与群(化合物１＋抗ＰＤ－１抗体、化合物１および抗ＰＤ－１抗体)の試験期間中の体重変化を示す。
【0017】
【図3】黒色腫マウスモデルにおける対照群(媒体＋抗ＩｇＧ２ｂ抗体)および試験薬物投与群(媒体＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(１５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(３０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、ＬＹ２１５７２９９(７５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体およびＬＹ２１５７２９９(１５０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体)の腫瘍体積を平均±ＳＥＭで示す。
【0018】
【図4】黒色腫マウスモデルにおける、細胞株接種後２２日目の、対照群(媒体＋抗ＩｇＧ２ｂ抗体)および試験薬物投与群(媒体＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(１５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(３０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、ＬＹ２１５７２９９(７５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体およびＬＹ２１５７２９９(１５０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体)における腫瘍体積を示す。
【0019】
【図5】黒色腫マウスモデルにおける対照群(媒体＋抗ＩｇＧ２ｂ抗体)および試験薬物投与群(媒体＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(１５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、化合物１(３０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体、ＬＹ２１５７２９９(７５mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体およびＬＹ２１５７２９９(１５０mg／kg／日)＋抗ＰＤ－Ｌ１抗体)の、試験期間中の体重変化を示す。
【0020】
【図6】黒色腫マウスモデルにおける化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果および薬物投与後１５日目に測定した腫瘍体積の差異を示す。
【0021】
【図7】黒色腫マウスモデルにおける対照群(媒体)、化合物１単独投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群および化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体共投与群の、試験期間中の、体重変化を示す。
【0022】
【図8】結腸直腸癌マウスモデルにおける化合物１と抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＰＤ－１抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果および薬物投与後２６日目に測定した腫瘍重量の差異を示す。
【0023】
【図9】結腸直腸癌マウスモデルにおける化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果および薬物投与後２６日目に測定した腫瘍体積における差異を示す。
【0024】
【図10】結腸直腸癌マウスモデルにおける化合物１、抗ＰＤ－１抗体および抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与、抗ＰＤ－１抗体単独の投与、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の投与および抗ＰＤ－１抗体と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与の腫瘍体積増加を抑制する効果を示す。
【0025】
【図11】結腸直腸癌マウスモデルにおける化合物１とレンバチニブの共投与、化合物１、レンバチニブおよび抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、レンバチニブ単独の投与、抗ＰＤ－１抗体単独の投与、レンバチニブと抗ＰＤ－１抗体の共投与および化合物１単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果を示す。
【0026】
【図12】結腸直腸癌マウスモデルにおける対照群(媒体)および試験薬物投与群(抗ＣＴＬＡ－４抗体、レンバチニブ、レンバチニブ＋抗ＰＤ１抗体、レンバチニブ＋抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１、化合物１＋抗ＣＴＬＡ－４抗体および化合物１＋レンバチニブ＋抗ＣＴＬＡ－４抗体)の、試験期間中の腫瘍体積変化を示す。
【0027】
【図13】結腸直腸癌マウスモデルにおける対照(媒体)および試験薬物投与群(化合物１、レンバチニブ、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗ＰＤ１抗体、化合物１＋抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１＋抗ＰＤ－１抗体、化合物１＋レンバチニブ、レンバチニブ＋抗ＰＤ１抗体、レンバチニブ＋抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗ＰＤ－１抗体＋抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１＋レンバチニブ＋抗ＰＤ－１抗体、化合物１＋レンバチニブ＋抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１＋抗ＰＤ－１抗体＋抗ＣＴＬＡ－４抗体)の、試験期間中の体重変化を示す。
【0028】
【図14】肉腫マウスモデルにおける化合物１と抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＰＤ－１抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果を示す。
【0029】
【図15】肉腫マウスモデルにおける化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１の投与および抗ＣＴＬＡ－４抗体の投与の腫瘍寛解率を示す。
【0030】
【図16】肉腫マウスモデルにおける対照群(媒体)および試験薬物投与群(抗ＰＤ－１抗体、化合物１、抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１＋抗ＰＤ－１抗体および化合物１＋抗ＣＴＬＡ－４抗体)の、試験期間中の体重変化を示す。
【0031】
【図17】乳癌マウスモデルにおける化合物１と抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＰＤ－１抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果および細胞株接種後２３日目に測定した腫瘍体積の差異を示す。
【0032】
【図18】乳癌マウスモデルにおける化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１単独の投与および抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の投与の腫瘍体積増加を抑制する効果および細胞株接種後２３日目に測定した腫瘍体積の差異を示す。
【0033】
【図19】乳癌マウスモデルにおける対照群(媒体)および試験薬物投与群(抗ＰＤ－１抗体、化合物１、抗ＣＴＬＡ－４抗体、化合物１＋抗ＰＤ－１抗体および化合物１＋抗ＣＴＬＡ－４抗体)の試験期間中の体重変化を示す。
【0034】
【図20】膀胱癌マウスモデルにおける化合物１と抗ＰＤ－１抗体の共投与、対照群(媒体)、化合物１の投与および抗ＰＤ－１抗体の投与のマウスの生存率を示す。
【0035】
【図21】膀胱癌マウスモデルの対照群および試験薬物投与群(化合物１、抗ＰＤ－１抗体および化合物１＋抗ＰＤ－１抗体)の試験期間中の体重変化を示す。
【発明を実施するための形態】
【0036】
本発明のある実施態様は、トランスフォーミング増殖因子－β(ＴＧＦ－β)のシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含む、腫瘍の予防または処置のための医薬組成物に関し、ここで、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される。
【0037】
用語「ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤」は、ＴＧＦ型Ｉ受容体キナーゼ阻害剤またはＴＧＦ－βＩ型受容体と血管内皮細胞増殖因子受容体(ＶＥＧＦＲ)－２を二重に阻害するキナーゼ阻害剤などのＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を阻害できる低分子キナーゼ阻害剤をいう。好ましくは、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、韓国特許１９３８３６８に開示する新規２－ピリジル－置換イミダゾール誘導体またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり得る。例えば、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、１－[６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－キノキサリン－６－イル－２,３－ジヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－１－イル]－エタノン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノキサリン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノリン、２－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾチアゾール、５－ベンゾ[ｂ]チオフェン－５－イル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジン、５－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾオキサゾール、４－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン、５－ベンゾ[１,３]ジオキソール－５－イル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、５－(２,３－ジヒドロ－ベンゾ[１,４]ジオキシン－６－イル)－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－２－ピラゾール－１－イル－キノキサリン、ジメチル－(２－{７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン－２－イルオキシ}－エチル)－アミン、２－メトキシ－７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン、５－(３,５－ジメトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、Ｎ,Ｎ－ジメチル－４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)アニリン、４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)ベンゾニトリル、２－メチル－６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)キノリン、４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)アニリン、Ｎ－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)アセトアミド、Ｎ－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)メタンスルホンアミド、ｔｅｒｔ－ブチル(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)カルバメート、５－(４－(４－メチルピペラジン－１－イル)フェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、４－(４－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)フェニル)モルホリン、６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(ｍ－トリル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、５－(４－メトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(４－(トリフルオロメチル)フェニル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(４－(メチルチオ)フェニル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、５－(３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、５－(４－フルオロフェニル)－６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール、１－アセチル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸エチルエステル、６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸エチルエステル、[６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル]－メタノール、１－アセチル－６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボニトリル、６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボニトリル、６－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－カルボン酸アミド、(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル)メタンアミンおよびＮ－((６－(６－メチルピリジン－２－イル)－５－(チエノ[３,２－ｃ]ピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－２－イル)メチル)アセトアミドからなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩であり得る。より好ましくは、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、次の化合物群から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩であり得る：
６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノキサリン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン；２－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾチアゾール；６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジン；およびジメチル－(２－{７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン－２－イルオキシ}－エチル)－アミン。
６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノキサリン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン；２－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン；６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾチアゾール；６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジン；およびジメチル－(２－{７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン－２－イルオキシ}－エチル)－アミン。
【0038】
ここで使用する用語「薬学的に許容される塩」は、ヒトおよび動物組織と接触させて使用するのに適する塩をいう。そのような無機および有機酸を有する適当な塩の例は、酢酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、塩酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタン－スルホン酸、硝酸、リン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、トリフルオロ酢酸などを含むが、これらに限定されない。さらに、薬学的に許容される塩は、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウムまたは水酸化カリウムなどの無機塩基と、モノ－、ジ－、トリ－アルキルおよびアリールアミンまたは置換エタノールアミンなどの有機塩基の反応により形成される酸または塩基付加塩であり得る。
【0039】
本発明のある実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－５,６,７,８－テトラヒドロ－イミダゾ[１,２－ａ]ピリミジン－３－イル]－キノキサリン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノリン、２－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－チエノ[３,２－ｃ]ピリジン、６－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－ベンゾチアゾール、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはジメチル－(２－{７－[２－(６－メチル－ピリジン－２－イル)－６,７－ジヒドロ－５Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－３－イル]－キノキサリン－２－イルオキシ}－エチル)－アミンであり得る。
【0040】
一方では、ＴＧＦ－βは、通常の環境では細胞増殖を阻害し、アポトーシスを誘導するが、高濃度で腫瘍微小環境に存在し、免疫を阻害し、癌細胞転移を促進し、癌ストローマの線維症を介して、腫瘍の密度および硬度を増加し、血管形成を促進し、腫瘍組織への抗癌薬物の送達および免疫細胞の浸潤を遮断し、それにより薬物耐性を引き起こすことが知られている。それ故に、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、癌細胞の免疫回避および転移を阻害するだけでなく、ＴＧＦ－βにより引き起こされる腫瘍ストローマの線維症も阻害し、腫瘍血管機能を正常化し、それにより組み合わせて使用される薬物の腫瘍内送達および腫瘍への免疫細胞の浸潤率を増加し、腫瘍周囲の微小環境における酸素濃度も増加させる。さらに、本発明のＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を、免疫チェックポイント制御剤(例えば、制御性Ｔ細胞を抑制するために免疫チェックポイントタンパク質を阻害する薬物、エフェクターＴ細胞を活性化するために免疫チェックポイントタンパク質に結合する薬物など)、化学療法、標的療法、ナノ粒子および放射線療法などの種々の抗癌治療／抗癌薬物と組み合わせて使用し得る。本発明のＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を免疫チェックポイント制御剤と組み合わせて使用するとき、免疫細胞の腫瘍への浸潤率の増加により抗癌有効性の改善を示すことができ、免疫細胞は免疫チェックポイント制御剤の標的となっている。さらに、本発明のＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を化学療法、標的療法またはナノ粒子と組み合わせて使用するとき、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、薬物送達の効率を増加し、抗癌有効性の改善を示し得て、本発明のＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を放射線療法と組み合わせて使用するとき、低分子キナーゼ阻害剤は、腫瘍微小環境の酸素濃度を増加させ、腫瘍処置／抑制の効果の改善を示し得る。
【0041】
免疫チェックポイントは、免疫細胞により処理されるシグナル分子群をいい、自己耐容性を維持しながら免疫応答の持続を制御および管理し得て、自己耐容性を維持する阻害性経路に関与し、刺激経路が関与する免疫応答およびシグナル分子を助けるシグナル分子を含む。さらに、免疫応答の効果は、共刺激シグナルと共阻害シグナルの間の緻密なバランスにより決定される。
【0042】
免疫チェックポイントタンパク質は、免疫応答を阻害する経路に関与するタンパク質および免疫応答を活性化する経路に関与するタンパク質両方をいう。免疫チェックポイントタンパク質は、制御性Ｔ細胞の活性を阻害するシグナル伝達経路に関与するタンパク質であっても、エフェクターＴ細胞または記憶Ｔ細胞を直接刺激するシグナル伝達経路に関与するタンパク質でもよい。さらに、免疫チェックポイント制御は、免疫寛容阻害または免疫系活性化のためであり得て、抗腫瘍免疫応答を増加させるための免疫寛容に関与する制御性Ｔ細胞を活性化する全シグナル伝達経路の阻害またはエフェクターＴ細胞もしくは記憶Ｔ細胞を活性化するシグナル伝達経路の刺激を含み得る。免疫チェックポイントタンパク質の例はＴ細胞受容体を含み、Ｔ細胞受容体タンパク質は、プログラム細胞死タンパク質リガンド１(ＰＤ－Ｌ１)、プログラム細胞死タンパク質１(ＰＤ－１)、細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原４(ＣＴＬＡ－４)、ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ(ＢＴＬＡ)、キラー細胞免疫グロブリン様受容体(ＫＩＲ)、リンパ球活性化遺伝子３(ＬＡＧ３)、Ｔ細胞膜タンパク質３(Ｔ細胞免疫グロブリンムチン受容体３：ＴＩＭ３に対応)、ＯＸ４０、Ｔ細胞活性化のＶドメイン免疫グロブリンサプレッサー(ＶＩＳＴＡ)、免疫グロブリンおよびＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体(ＴＩＧＩＴ)、４－１ＢＢ(ＣＤ１３７)、グルココルチコイド誘導型腫瘍壊死因子関連タンパク質(ＧＩＴＲ)、アデノシンＡ２ａ受容体(Ａ２ａＲ)などを含むが、これらに限定されない。
【0043】
従って、免疫チェックポイント制御剤は、抗免疫チェックポイントタンパク質抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマー、免疫チェックポイントタンパク質に結合した融合タンパク質または免疫チェックポイントタンパク質に結合する低分子化合物であってよく、またはその阻害もしくは活性化に関連する機構に関与する。
【0044】
さらに、免疫チェックポイント制御剤はシグナル伝達経路を制御する物質であり得て、ここで、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＯＸ４０、ＶＩＳＴＡ、ＴＩＧＩＴ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲおよびＡ２ａＲからなる群から選択される免疫チェックポイントタンパク質が関与する。さらに、免疫チェックポイント制御剤は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＯＸ４０、ＶＩＳＴＡ、ＴＩＧＩＴ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲおよびＡ２ａＲからなる群から選択されるＴ細胞受容体のシグナル伝達を阻害するかまたは発現を低減する物質であり得る。故に、免疫チェックポイント制御剤は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＯＸ４０、ＶＩＳＴＡ、ＴＩＧＩＴ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲ、Ａ２ａＲまたはそれらの組み合わせを介してシグナル伝達を阻害または発現を低減することにより、制御性Ｔ細胞を阻害するかまたはエフェクターＴ細胞もしくは記憶Ｔ細胞を活性化させ得る。さらに、免疫チェックポイント制御剤は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＯＸ４０アゴニストまたはそれらの組み合わせであり得る。
【0045】
具体的に、免疫チェックポイント制御剤は、ＰＤ－Ｌ１タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個；ＰＤ－１タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個；ＯＸ４０タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個；およびＣＴＬＡ－４タンパク質に特異的に結合するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択される少なくとも１個から選択される少なくとも１個であり得る。より具体的に、免疫チェックポイント制御剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合フラグメント；抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合フラグメント；抗ＯＸ４０抗体またはその抗原結合フラグメント；または抗ＣＴＬＡ－４抗体またはその抗原結合フラグメントであり得る。
【0046】
ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１に結合する中和抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマーまたはＰＤ－Ｌ１に結合できる抗体を含む融合タンパク質であり得るかまたはＰＤ－Ｌ１の機能を阻害する低分子化合物であり得るが、これらに限定されない。ＰＤ－Ｌ１阻害剤の例は、ＢＭＳ－９３６５５９(MDX1105, Bristol Myers Squibb)、ＭＥＤＩ４７３６(MedImmune, AstraZeneca)、ＭＰＤＬ３２８０Ａ(Roche)、ＣＫ－３０１(Checkpoint Therapeutica)、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ(Merck)などを含むが、これらに限定されない。
【0047】
ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１に結合する中和抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマーまたはＰＤ－１に結合できる抗体を含む融合タンパク質であり得るかまたはＰＤ－１の機能を阻害する低分子化合物であり得るが、これらに限定されない。ＰＤ－１阻害剤の例は、ＡＭＰ－２２４(Amplimmune, GlaxoSmith Klein)、ＡＭＰ－５１４(MEDI0680, Amplimmune, GlaxoSmith Klein)、ニボルマブ(オプジーボ、Bristol Myers Squibb)、ペムブロリズマブ(キイトルーダ、Merck)、ピディリズマブ(Cure Tech)、ＢＧＢ－Ａ３１７(BeiGene, Celgene)、ＰＦ－０６８０１５９１(Pfizer)、ＰＤＲ００１(Novartis)、ＴＳＲ－０４２(Tesaro, GlaxoSmithKline)、ＭＧＡ０１２(Incyte/MacroGenics)、ＩＢＩ３０８(Innovent, Eli Lilly)、ＢＩ７５４０９１(Boehringer Ingelheim)などを含むが、これらに限定されない。
【0048】
ＣＴＬＡ－４阻害剤は、ＣＴＬＡ－４に結合する中和抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマーまたはＣＴＬＡ－４に結合できる抗体を含む融合タンパク質であり得るかまたはＣＴＬＡ－４の機能を阻害する低分子化合物であり得るが、これらに限定されない。ＣＴＬＡ－４阻害剤の例は、イピリムマブ(ヤーボイ、Bristol Myers Squibb)、トレメリムマブ(Pfizer)などを含むが、これらに限定されない。
【0049】
ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０に結合する中和抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマーまたはＯＸ４０に結合できる抗体を含む融合タンパク質であるかまたはＯＸ４０の機能を活性化する低分子化合物であり得るが、これらに限定されない。ＯＸ４０アゴニストの例は、ＡＢＢＶ－３６８(Abbvie)、ＧＳＫ３１７４９９８(GlaxoSmithKline)、ＭＯＸＲ０９１６(Genentech)、ＩＮＣＡＧＮ０１９４９(Incyte Biosciences International)、ＩＢＩ１０１(Innovent)、ＢＭＳ－９８６１７８(Bristol Myers Squibb)、ＰＦ－０４５１８６００(Pfizer)などを含むが、これらに限定されない。
【0050】
ここで使用する用語「受容体チロシンキナーゼ」は、細胞膜を貫通する膜貫通タンパク質であり、細胞増殖、細胞遊走、細胞周期および細胞分化を制御する細胞シグナル伝達系を担う受容体をいう。さらに、ここで使用する用語「受容体チロシンキナーゼ阻害剤」は、受容体チロシンキナーゼタンパク質に結合する抗受容体チロシンキナーゼ抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマー、融合タンパク質または受容体チロシンキナーゼタンパク質に結合するまたは阻害に関連する機構に関与する低分子化合物であり得る。さらに、受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、ＶＥＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ、ＲＥＴおよびｃ－Ｍｅｔから選択される少なくとも１個のチロシンキナーゼの阻害剤であり得る。具体的に、受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、ＶＥＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ、ＲＥＴおよびｃ－Ｍｅｔから選択される少なくとも１個のチロシンキナーゼに結合する抗体またはその抗原結合フラグメント、アプタマーまたは該チロシンキナーゼに結合できる抗体を含む融合タンパク質であり得るかまたはチロシンキナーゼを選択的に阻害する低分子化合物であり得る。さらに、受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、ＶＥＧＦ受容体、ＦＧＦ受容体、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ、ＲＥＴおよびｃ－Ｍｅｔから選択される少なくとも１個のチロシンキナーゼの機能を阻害する化合物であり得るかまたは該チロシンキナーゼタンパク質に特異的に選択するアプタマー、ペプチド、抗体および抗体の抗原結合フラグメントから選択される少なくとも１個であり得て、カボザンチニブ、レンバチニブ、バンデタニブ、セルペルカチニブ、プラルセチニブなどを含むが、これらに限定されない。
【0051】
一方では、ここで使用する用語「抗体」は、標的タンパク質を中和する能力を有する中和抗体であり得る。
【0052】
ここで使用する用語「医薬組成物」は、直接的または間接的に特定された量で複数成分の組み合わせによりもたらされるあらゆる製品および予定された量または比率で特定の成分を含む製品を包含する。特に、これは、１以上の活性成分および不活性成分を含むあらゆる担体ならびに任意の２以上の成分の組み合わせ、複合体形成もしくは凝集または１以上の成分の分解または１以上の成分の相互作用または他のタイプの反応に直接的または間接的に由来するあらゆる製品を包含する。
【0053】
ここで使用する用語「腫瘍」は、未制御または無調節の細胞増殖、細胞分化の減少、周囲組織に侵襲する不適切な能力および／または異所で新規増殖を確立する能力により特徴づけられる、細胞障害である。さらに、腫瘍は、固形腫瘍および血液伝播性腫瘍を含むが、これらに限定されず、さらに皮膚、組織、臓器、骨、軟骨、血液および血管の疾患または原発および転移腫瘍を含む。
【0054】
さらに、腫瘍は、(１)急性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、例えば骨髄芽球白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性白血病、赤白血病、骨髄異形成症候群、前白血病状態および慢性骨髄単球性白血病(ＣＭＭＬ)を含むが、これらに限定されない白血病、(２)慢性骨髄性(顆粒球性)白血病、慢性リンパ球性白血病およびヘアリー細胞白血病を含むが、これらに限定されない慢性白血病；(３)ホジキン病および非ホジキン病を含むが、これらに限定されないリンパ腫；(４)くすぶり型多発性骨髄腫、非分泌型骨髄腫、骨硬化性骨髄腫、形質細胞白血病、孤立性形質細胞腫および髄外形質細胞腫を含むが、これらに限定されない多発性骨髄腫；(５)骨肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性巨細胞腫瘍、骨の線維肉腫、脊索腫、骨膜肉腫、軟組織肉腫、血管肉腫、線維肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ管肉腫、転移癌、神経鞘腫、横紋筋肉腫および滑膜肉腫を含むが、これらに限定されない骨および結合組織肉腫；(６)神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、脳幹神経膠腫、上衣腫、乏突起神経膠腫、非グリア系腫瘍、聴神経鞘腫、頭蓋咽頭腫、髄芽腫、髄膜腫、松果体細胞腫、松果体芽腫、乏突起神経膠芽細胞腫および原発脳リンパ腫を含むが、これらに限定されない脳腫瘍；(７)腺癌、小葉(小細胞)癌、乳管癌、髄様乳癌、粘液性乳癌、管状乳癌、乳頭乳癌、ページェット病および炎症性乳癌を含むが、これらに限定されない乳癌；(８)褐色細胞腫および副腎皮質癌を含むが、これらに限定されない副腎癌；(９)乳頭または濾胞性甲状腺癌、髄様甲状腺癌および未分化甲状腺癌を含むが、これらに限定されない甲状腺癌；(１０)インスリノーマ、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、ビポーマ、ソマトスタチン分泌型腫瘍およびカルチノイドまたは島細胞腫瘍を含むが、これらに限定されない膵臓癌；(１１)クッシング病、プロラクチン分泌型腫瘍、先端巨大症および尿崩症を含むが、これらに限定されない下垂体癌；(１２)眼黒色腫、例えば虹彩黒色腫、脈絡膜黒色腫および毛様体黒色腫および網膜芽細胞腫を含むが、これらに限定されない眼癌；(１３)扁平上皮細胞癌、腺癌および黒色腫を含むが、これらに限定されない膣癌；(１４)扁平上皮細胞癌、黒色腫、腺癌、基底細胞癌、肉腫およびページェット病を含むが、これらに限定されない外陰癌；(１５)扁平上皮細胞癌および腺癌を含むが、これらに限定されない子宮頸癌；(１６)子宮内膜癌、(１７)子宮肉腫を含むが、これらに限定されない子宮癌；(１８)卵巣上皮癌、境界腫瘍、胚細胞腫瘍および間質腫瘍を含むが、これらに限定されない卵巣癌；(１９)扁平上皮癌、腺癌、腺様嚢胞癌、粘表皮癌、腺扁平上皮癌、肉腫、黒色腫、形質細胞腫、疣状癌および燕麦細胞(小細胞)癌を含むが、これらに限定されない食道癌；(２０)腺癌、菌状発育性(ポリープ状)、潰瘍化、表在拡大型、汎発性拡大型、悪性リンパ腫、脂肪肉腫、線維肉腫および癌肉腫を含むが、これらに限定されない胃癌；(２１)結腸癌；(２２)直腸癌；(２３)肝細胞癌および肝芽腫を含むが、これらに限定されない肝臓癌；(２４)腺癌を含むが、これらに限定されない胆嚢癌；(２５)乳頭、結節性および汎発性を含むが、これらに限定されない胆管細胞癌；(２６)非小細胞肺癌、扁平上皮細胞癌(類表皮癌)、腺癌、大細胞癌および小細胞肺癌を含むが、これらに限定されない肺癌；(２７)胚腫瘍、精巣上皮腫、未分化、古典的(典型的)、精母細胞、非精巣上皮腫、胚性癌、奇形腫癌、絨毛(卵黄嚢腫瘍)を含むが、これらに限定あれない精巣癌；(２８)腺癌、平滑筋肉腫および横紋筋肉腫を含むが、これらに限定されない前立腺癌；(２９)陰茎癌；(３０)喉頭癌、咽頭癌、上咽頭癌、中咽頭癌および扁平上皮細胞癌を含む口腔癌；(３１)基底癌；(３２)腺癌、粘表皮癌および腺様嚢胞癌を含むが、これらに限定されない唾液腺癌；(３３)扁平上皮細胞癌および疣状を含むが、これらに限定されない咽頭癌；(３４)基底細胞癌、扁平上皮細胞癌および黒色腫、表在拡大型黒色腫、結節性黒色腫、黒子悪性黒色腫、末端黒子型黒色腫を含むが、これらに限定されない皮膚癌；(３５)腎臓細胞癌、腺癌、副腎腫、線維肉腫、移行細胞癌(腎盂および／または輸尿管)を含むが、これらに限定されない腎臓癌；(３６)ウィルムス腫瘍；(３７)移行細胞癌、扁平上皮細胞癌、腺癌、癌肉腫を含むが、これらに限定されない膀胱癌；(３８)頭頸部癌(口、鼻、喉、喉頭、副鼻腔または唾液腺癌、頭頸部扁平上皮細胞癌)；(３９)肝細胞癌；および(４０)虫垂癌、気管支癌、絨毛性癌、脊索腫、上衣腫、消化器間質腫瘍(ＧＩＳＴ)、神経内分泌癌(例えば、膵消化管神経内分泌腫瘍(ＧＥＰ－ＮＥＴ)、カルチノイド腫瘍)、悪性末梢神経鞘腫瘍(ＭＰＮＳＴ)および尿道癌だけでなく、そこに含まれない他の癌を含むが、これらに限定されない(Fishman et al., 1985, Medicine, 2nd Ed., J.B. Lippincott Co., Philadelphia and Murphy et al., 1997, Informed Decisions: The Complete Book of Cancer Diagnosis, Treatment, and Recovery, Viking Penguin, Penguin Books U.S.A., Inc., United States of America参照)。一方では、腫瘍は、転移腫瘍、切除不能腫瘍または局所進行型腫瘍であり得る。さらに、腫瘍は、黒色腫、肉腫、脳腫瘍、乳癌、副腎癌、甲状腺癌、膵臓癌、下垂体癌、神経膠芽腫、眼癌、膣癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮癌、卵巣癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、胆嚢癌、胆管細胞癌、肺癌、精巣癌、前立腺癌、陰茎癌、口腔癌、基底癌、唾液腺癌、咽頭癌、皮膚癌、腎臓癌、ウィルムス腫瘍、膀胱癌、頭頸部癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、肝細胞癌、虫垂癌、気管支癌、絨毛癌、脊索腫、上衣腫、消化器間質腫瘍(ＧＩＳＴ)、神経内分泌癌および尿道癌から選択され得る。本発明のある実施態様において、腫瘍は固形腫瘍であり得る。
【0055】
ここで使用する用語「予防」は、癌を阻止するまたは癌の発症を遅延させる全行動をいい、用語「処置」は、癌の症状を改善させるまたは有益に変化させる全行動をいう。
【0056】
ここで使用する用語「対象」は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトをいう。
【0057】
本発明のある実施態様において、腫瘍の処置または腫瘍増殖の阻害を必要とする対象は、腫瘍再発を発症するまたは経験するリスクのある対象であり得るが、これらに限定されない。本発明の他の実施態様において、腫瘍の処置または腫瘍増殖の阻害を必要とする対象は、手術、放射線療法および化学療法から選択されるが、これらに限定されない少なくとも１個の抗癌治療で処置されている対象であり得る。さらに、腫瘍の処置または腫瘍増殖の阻害を必要とする対象は、受容体チロシンキナーゼ阻害剤および免疫チェックポイント制御剤からなる群から選択される少なくとも１個の化学療法を投与されている対象であり得る。
【0058】
用語「組み合わせて」、「組み合わせ」または「組み合わせ投与」がここで使用されるとき、同時にまたは異なる時点に別々にＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を免疫チェックポイント制御剤および／または受容体チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含むことは理解されるべきである。ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および／または受容体チロシンキナーゼ阻害剤が個々に投与されるとき、それらの投与サイクルは互いに異なってよく、それらの投与経路は互いに異なってよい。
【0059】
ここで使用する用語「薬学的に許容される」は、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものではない物質、すなわち、対象に、何ら望ましくない生物学的効果を引き起こさないまたはそれが含まれる医薬組成物のあらゆる他の成分と有害な方法で相互作用せず、組成物で投与し得る物質である。
【0060】
ここで使用する用語「薬学的に許容される担体」は、希釈剤または添加物などの、製剤の他の成分と適合性である担体および補助的物質をいう。薬学的に許容される担体の例は、食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液を含むが、これらに限定されない。担体は、当業者に周知のとおり、活性成分の何らかの分解を最小化し、対象への何らかの有害作用を最小化するよう選択される。溶液のｐＨは好ましくは約５～８、より好ましくは約７～約７.５である。担体は、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透過性マトリクスなどの持続放出製剤を含み、ここで、そのマトリクスは、造形品の形態、例えば、フィルム、リポソームまたは微粒子である。一部担体は、より好ましくは、例えば、投与よすべき組成物の投与する経路および濃度に依存することは、当業者には明らかである。さらに、薬学的に許容される担体は当業者に知られ、その大部分は、典型的に無菌水、食塩水および生理学的ｐＨの緩衝液などの溶液を含み、ヒトに投与する薬物の標準的担体である。
【0061】
また、本発明の他の実施態様において、本発明の医薬組成物は、増粘剤、希釈剤、緩衝液、防腐剤、表面活性剤などを含み得る。
【0062】
非経腸注射用医薬組成物は、薬学的に許容される無菌水溶液または非水溶液、分散剤、懸濁液またはエマルジョンおよび使用直前に無菌注射用溶液または分散剤に再構築するための無菌粉末を含む。適当な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒または媒体の例は、水、エタノール、グリセロール、ポリオール(例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど)、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの適当な混合物、植物油(例えばオリーブ油)およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材の使用により、分散剤の場合、必要な粒子径の維持によりおよび界面活性剤の使用により、維持され得る。これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤も含み得る。微生物活動の予防は、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの種々の抗微生物および抗真菌剤の包含により確実にし得る。糖、塩化ナトリウムなどの等張剤の包含が望ましいこともあり得る。注射用医薬形態の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤の包含により達成され得る。注射用デポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコリド、ポリ(オルトエステル)およびポリ(無水物)などの生分解性ポリマー中の薬物のマイクロカプセル封入マトリクスの形成により、製造する。薬物対ポリマー比および用いる特定のポリマーの性質によって、薬物放出速度は制御され得る。デポー注射用製剤はまた身体組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョンに薬剤を封入することによって、製造される。注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過または使用直前に無菌水またはある他の無菌注射用媒体に溶解され得る無菌固体組成物の形態での滅菌剤の包含により滅菌され得る。
【0063】
経口投与用医薬組成物は、例えば、錠剤、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、顆粒、粉末、エマルジョン、カプセル、シロップまたはエリキシルの形態であり得る。経口投与医薬組成物は、薬学的にのみやすい製剤を提供するために、１以上の任意的薬剤、例えば、フルクトース、アスパルテームまたはサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、ウィンターグリーンオイルまたはサクランボ着色剤などの風味剤および防腐剤を含み得る。さらに、錠剤または丸剤形態において、組成物を、消化管での崩壊および吸収を遅延するようコーティングされ、それにより長期間にわたる持続作用を提供し得る。浸透性活性推進化合物を囲む選択的透過膜は、経口投与される本発明の化合物にも適している。これらの後者のプラットフォームにおいて、カプセルを囲む環境からの流体が駆動化合物により吸収され、膨張して、開口部を介して薬剤または薬剤組成物を押し出す。これらの送達プラットフォームは、即時放出型製剤の鋭いプロファイルとは逆に、本質的にゼロ次送達プロファイルを提供できる。モノステアリン酸グリセロールまたはステアリン酸グリセロールなどの時間遅延物質も使用され得る。経口組成物は、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準媒体を含み得る。このような媒体は、好ましくは医薬グレードである。
【0064】
経口液体医薬組成物について、製剤、例えば、懸濁液、エリキシルおよび溶液、適当な担体、添加物または希釈剤は、水、食塩水、アルキレングリコール(例えば、プロピレングリコール)、ポリアルキレングリコール(例えば、ポリエチレングリコール)油、アルコール、ｐＨ４～ｐＨ６のわずかに酸性の緩衝液(例えば、約５.０mM～約５０.０mMの酢酸、クエン酸、アスコルビン酸)などを含む。さらに、風味剤、防腐剤、着色剤、胆汁酸塩、アシルカルニチンなどを添加し得る。さらに、本発明のある態様において、経口投与用医薬組成物は、慣用法で製剤化された錠剤、カプセル剤などの形態であり得る。
【0065】
本発明において、治療有効量のＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、所望の治療効果の達成に必要な少なくとも最小用量のここに開示する低分子キナーゼ阻害剤をいい、腫瘍症状、腫瘍増殖などの低減に十分な用量を含む。さらに、治療有効量の免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、所望の治療効果の達成に必要な少なくとも最小用量のここに開示する免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤をいい、腫瘍症状、腫瘍増殖などの低減に十分な用量を含む。腫瘍処置における低分子キナーゼ阻害剤とここに開示する免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個の組み合わせの有効性を、状態に関連する１以上の臨床的症状および／または生理学的指標に基づき、対象の改善を観察することにより決定される。腫瘍の改善はまた併用治療の必要性の低減によっても示され得る。
【0066】
本発明の他の実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、１日１回、１日２回または１日３回投与され得るが、これらに限定されない。好ましくは、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、同じ用量または異なる用量で１日２回投与され得る。より好ましくは、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、同じ用量で１日２回投与され得る。
【0067】
本発明のある実施態様において、低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、各々独立して、処置を必要とする対象に、局所、非経腸、経口、静脈内、筋肉内、皮下投与またはエアロゾルを介して投与され得るが、これらに限定されない。
【0068】
本発明のある実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、免疫チェックポイント制御剤と組み合わせて投与され得る。
【0069】
本発明の他の実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与され得る。
【0070】
本発明の他の実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ阻害剤および免疫チェックポイント制御剤と組み合わせて投与され得る。
【0071】
本発明のある実施態様において、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、各々別の製剤に活性成分として含まれ、同時にまたは異なる時点で投与され得る。具体的に、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、別々に異なる時点で投与され得る。
【0072】
さらに、本発明の他の態様において、低分子キナーゼ阻害剤は経口投与され得る。
【0073】
さらに、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明が属する分野における、対応する免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の既知投与方法、投与量および投与サイクルにより投与され得る。
【0074】
本発明の他の実施態様において、本発明は、腫瘍を処置するための医薬組成物に関し、医薬組成物は、免疫チェックポイント制御剤および／または受容体チロシンキナーゼ阻害剤を投与されている腫瘍患者を処置するために、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含む。
【0075】
本発明の他の実施態様において、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤を含む、腫瘍を処置するための医薬組成物であり得て、ここで、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤は、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個と組み合わせて投与され、それにより免疫チェックポイント制御剤および／または受容体チロシンキナーゼ阻害剤の作用を増大するまたはＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の作用を増大する。
【0076】
本発明のある実施態様において、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤ならびに免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個を含む、腫瘍の予防または処置のための組み合わせ物または医薬組成物であり得る。この場合、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は同時に、逐次的にまたは別々に投与され得て、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤のタイプ、腫瘍タイプ、投与方法およびその用量は上に定義するとおりである。
【0077】
ここで使用する用語「組み合わせ物」は、２以上の活性成分の混合または調合により産生される製品をいい、活性成分の固定されたおよび固定されていない両方の組み合わせを含む。用語「固定された組み合わせ物」は、活性成分、例えば、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤および免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個が、全て、単一体または投与量の形態で患者に同時に投与されることを意味する。用語「固定されていない組み合わせ物」は、活性成分、例えば、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤および免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個が、対象に、別々の物として、一緒に、同時にまたは特定の時間制限なく逐次的に投与され、ここで、このような投与が、患者体内で活性成分の治療有効レベルを提供することを意味する。固定されていない組み合わせ物はまたカクテル療法、例えば、３以上の活性成分の投与にも適用される。
【0078】
本発明のある実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、黒色腫、結腸直腸癌、膀胱癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、ＰＤ－１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0079】
本発明のある実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、黒色腫の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、ＰＤ－Ｌ１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0080】
本発明の他の実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、黒色腫、結腸直腸癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、ＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0081】
本発明の他の実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、レンバチニブと組み合わせて投与され得る。
【0082】
本発明のある実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、レンバチニブおよびＰＤ－１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0083】
本発明の他の実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、レンバチニブおよびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0084】
本発明のある実施態様において、本発明の医薬組成物または組み合わせ物は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩を含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬組成物または組み合わせ物であってよく、これは、ＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)およびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与され得る。
【0085】
本発明の他の実施態様において、本発明は、対象にＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤ならびに免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個を投与することを含む、対象における腫瘍を予防または処置する方法であり得る。この場合、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は同時に、逐次的にまたは別々に投与され得て、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤のタイプ、腫瘍タイプ、投与方法およびその用量は上に定義するとおりである。
【0086】
本発明のある実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩およびＰＤ－１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における黒色腫、結腸直腸癌、膀胱癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0087】
本発明のある実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩およびＰＤ－Ｌ１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における黒色腫を予防または処置する方法であり得る。
【0088】
本発明の他の実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩およびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における黒色腫、結腸直腸癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0089】
本発明の他の実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩およびレンバチニブを投与することを含む、対象における結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0090】
本発明のある実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、レンバチニブおよびＰＤ－１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0091】
本発明の他の実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、レンバチニブおよびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0092】
本発明のある実施態様において、本発明は、対象に６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩、ＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)およびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)を投与することを含む、対象における結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌を予防または処置する方法であり得る。
【0093】
さらに、本発明の他の実施態様において、本発明は、腫瘍の予防または処置用医薬の製造における、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤の少なくとも１個と組み合わせて投与される、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤の使用に関する。この場合、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は同時に、逐次的にまたは別々に投与され得て、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤のタイプ、腫瘍タイプ、投与方法およびその用量は上に定義するとおりである。
【0094】
本発明のある実施態様において、本発明は、黒色腫、結腸直腸癌、膀胱癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬の製造のための、ＰＤ－１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0095】
本発明のある実施態様において、本発明は、黒色腫の予防または処置のための医薬の製造のための、ＰＤ－Ｌ１阻害剤(好ましくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0096】
本発明の他の実施態様において、本発明は、黒色腫、結腸直腸癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬の製造のための、ＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0097】
本発明の他の実施態様において、本発明は、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬の製造のための、レンバチニブと組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0098】
本発明のある実施態様において、本発明は、黒色腫の予防または処置、結腸直腸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌のための医薬の製造のための、レンバチニブおよびＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0099】
本発明の他の実施態様において、本発明は、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬の製造のための、レンバチニブおよびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0100】
本発明のある実施態様において、本発明は、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のための医薬の製造のための、ＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)およびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)と組み合わせて投与される、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩の使用であり得る。
【0101】
さらに、本発明は、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤およびＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤と免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤から選択される少なくとも１個の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、腫瘍の予防または処置のためのキットであり得る。この場合、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤は同時に、逐次的にまたは別々に投与され得て、ＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤、免疫チェックポイント制御剤および受容体チロシンキナーゼ阻害剤のタイプ、腫瘍タイプ、投与方法およびその用量は上に定義するとおりである。
【0102】
本発明のある実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、黒色腫、結腸直腸癌、膀胱癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0103】
本発明のある実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とＰＤ－Ｌ１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、黒色腫の予防または処置のためのキットであり得る。
【0104】
本発明の他の実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、黒色腫、結腸直腸癌、肉腫、乳癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0105】
本発明の他の実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とレンバチニブの組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0106】
本発明のある実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とレンバチニブおよびＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0107】
本発明の他の実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とレンバチニブおよびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0108】
本発明のある実施態様において、本発明は、６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩；および６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンまたはその薬学的に許容される塩とＰＤ－１阻害剤(好ましくは、抗ＰＤ－１抗体またはそのフラグメント)およびＣＴＬＡ－４阻害剤(好ましくは、抗ＣＴＬＡ－４抗体またはそのフラグメント)の組み合わせでの投与を指示する指示マニュアルを含む、結腸直腸癌、子宮頸癌、頭頸部扁平上皮細胞癌または肝臓癌の予防または処置のためのキットであり得る。
【0109】
発明の方法
実施例
以後、本発明を、次の実施例を参照して、さらに詳細に記載する。しかしながら、次の実施例において、本発明を説明するために、化合物１(６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンホスフェート)をＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩として使用したが、本発明の範囲は対応する化合物に限定されない。
実施例
以後、本発明を、次の実施例を参照して、さらに詳細に記載する。しかしながら、次の実施例において、本発明を説明するために、化合物１(６－(６－(６－メチルピリジン－２－イル)－２,３－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾ[１,２－ａ]イミダゾール－５－イル)－[１,２,４]トリアゾール[１,５－ａ]ピリジンホスフェート)をＴＧＦ－βのシグナル伝達経路を遮断する低分子キナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩として使用したが、本発明の範囲は対応する化合物に限定されない。
【0110】
実施例１. 黒色腫マウスモデルにおける抗腫瘍効果
実施例１.１. 抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ
実施例１.１.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の４０匹の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、１×１０６ Ｂ１６Ｆ１０細胞株(KCLB, ＃80008)を各マウスの右腹側部に皮下注射し、それにより癌細胞株を移植した。
Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を９日目に測定した。マウスを、９日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＰＤ－１抗体(BioXCell、クローン#RMP1-14)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
実施例１.１. 抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ
実施例１.１.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の４０匹の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、１×１０６ Ｂ１６Ｆ１０細胞株(KCLB, ＃80008)を各マウスの右腹側部に皮下注射し、それにより癌細胞株を移植した。
Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を９日目に測定した。マウスを、９日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＰＤ－１抗体(BioXCell、クローン#RMP1-14)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
【0111】
実施例１.１.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例１.１.１.で分類したマウスを対照群(媒体経口投与)、化合物１経口投与群、抗ＰＤ－１抗体腹腔内投与群または抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群に割り当て、薬物投与をＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から９日目に開始し、試験を薬物投与日から２４日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表１に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与するとき、個体あたりの用量はいずれの場合も５mL／kgである。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。マウス腫瘍体積を、(腫瘍長(Ｌ)×腫瘍幅(Ｗ)×腫瘍幅(Ｗ))÷２として計算し、ここで、腫瘍長(Ｌ)は最長腫瘍寸法であり、腫瘍幅(Ｗ)は、Ｌに垂直の最長腫瘍寸法である。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化を、２元配置分散分析を使用して統計分析した。
実施例１.１.１.で分類したマウスを対照群(媒体経口投与)、化合物１経口投与群、抗ＰＤ－１抗体腹腔内投与群または抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群に割り当て、薬物投与をＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から９日目に開始し、試験を薬物投与日から２４日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表１に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与するとき、個体あたりの用量はいずれの場合も５mL／kgである。
【表1】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。マウス腫瘍体積を、(腫瘍長(Ｌ)×腫瘍幅(Ｗ)×腫瘍幅(Ｗ))÷２として計算し、ここで、腫瘍長(Ｌ)は最長腫瘍寸法であり、腫瘍幅(Ｗ)は、Ｌに垂直の最長腫瘍寸法である。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化を、２元配置分散分析を使用して統計分析した。
【0112】
実施例１.１.３. 腫瘍増殖阻害性効果および体重変化
薬物投与日から１５日目の腫瘍体積を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４５％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４４％低く、一方抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より７４％低いことが判明した。さらに、薬物投与から１５日目の腫瘍体積を試験したとき、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群または化合物１単独投与群と比較して、統計学的に有意な差(すなわち、ｐ＜０.０５およびｐ＜０.００１)であることが判明した(図１参照)。
試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図２参照)。
薬物投与日から１５日目の腫瘍体積を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４５％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４４％低く、一方抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より７４％低いことが判明した。さらに、薬物投与から１５日目の腫瘍体積を試験したとき、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群または化合物１単独投与群と比較して、統計学的に有意な差(すなわち、ｐ＜０.０５およびｐ＜０.００１)であることが判明した(図１参照)。
試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図２参照)。
【0113】
実施例１.２. 抗ＰＤ－Ｌ１抗体と化合物１の組み合わせ
実施例１.２.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
８週齢の９０匹雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、黒色腫マウスモデルを、実施例１.１.１における黒色腫マウスモデルの準備に使用した方法により準備した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を４日目に測定した。マウスを、４日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
実施例１.１.１で使用した媒体およびＰＢＳを、マウス抗ＩｇＧ２ｂ抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤＬ１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液、ＬＹ２１５７２９９(Chembo Pharma)と媒体の混合溶液を調製する担体として使用した。
実施例１.２.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
８週齢の９０匹雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、黒色腫マウスモデルを、実施例１.１.１における黒色腫マウスモデルの準備に使用した方法により準備した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を４日目に測定した。マウスを、４日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
実施例１.１.１で使用した媒体およびＰＢＳを、マウス抗ＩｇＧ２ｂ抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤＬ１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液、ＬＹ２１５７２９９(Chembo Pharma)と媒体の混合溶液を調製する担体として使用した。
【0114】
実施例１.２.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例１.２.１で分類したマウスを、対照群(媒体および抗ＩｇＧ２ｂ抗体およびＰＢＳ混合物の組み合わせ投与)、媒体および抗ＰＤＬ１抗体投与群、抗ＰＤＬ１抗体と化合物１の組み合わせ投与群(低用量：１５mg／kg／日、高用量：３０mg／kg／日)または抗ＰＤＬ１抗体とＬＹ２１５７２９９の組み合わせ投与群(低用量：７５mg／kg／日、高用量：１５０mg／kg／日)に割り当て、薬物をＢ１６Ｆ１０細胞株移植の日から４日目から２１日目まで投与し、試験を２２日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表２に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、個体あたりの用量は両者とも１０mL／kgであった。
マウスの腫瘍体積を、薬物投与の日から２日間隔で測定し、腫瘍体積を、試験の最後に検死により測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。さらに、マウス体重を、Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から４日目、７日目、１１日目、１４日目、１８日目および２１日目に測定した。各群の腫瘍体積変化および体重変化を、ＡＮＯＶＡ検定後のテューキーの多重比較を使用して、統計的に分析した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から２２日目の腫瘍体積を比較するとき、統計的有意差を対照群と比較し、ここで、媒体および抗ＩｇＧ２ｂ抗体を、ＡＮＯＶＡ検定後のダネットの多重比較を使用して、統計的に分析した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から２２日目のマウス抗ＰＤ－Ｌ１抗体、試験薬物、単独投与群および化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群の間の統計的有意差を、スチューデントのｔ検定により分析した。
実施例１.２.１で分類したマウスを、対照群(媒体および抗ＩｇＧ２ｂ抗体およびＰＢＳ混合物の組み合わせ投与)、媒体および抗ＰＤＬ１抗体投与群、抗ＰＤＬ１抗体と化合物１の組み合わせ投与群(低用量：１５mg／kg／日、高用量：３０mg／kg／日)または抗ＰＤＬ１抗体とＬＹ２１５７２９９の組み合わせ投与群(低用量：７５mg／kg／日、高用量：１５０mg／kg／日)に割り当て、薬物をＢ１６Ｆ１０細胞株移植の日から４日目から２１日目まで投与し、試験を２２日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表２に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、個体あたりの用量は両者とも１０mL／kgであった。
【表2】
マウスの腫瘍体積を、薬物投与の日から２日間隔で測定し、腫瘍体積を、試験の最後に検死により測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。さらに、マウス体重を、Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から４日目、７日目、１１日目、１４日目、１８日目および２１日目に測定した。各群の腫瘍体積変化および体重変化を、ＡＮＯＶＡ検定後のテューキーの多重比較を使用して、統計的に分析した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から２２日目の腫瘍体積を比較するとき、統計的有意差を対照群と比較し、ここで、媒体および抗ＩｇＧ２ｂ抗体を、ＡＮＯＶＡ検定後のダネットの多重比較を使用して、統計的に分析した。Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植の日から２２日目のマウス抗ＰＤ－Ｌ１抗体、試験薬物、単独投与群および化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群の間の統計的有意差を、スチューデントのｔ検定により分析した。
【0115】
実施例１.２.３. 腫瘍増殖阻害性効果および体重変化
低用量ＬＹ２１５７２９９と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群以外、抗ＰＤ－Ｌ１抗体単独投与群、低用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体組み合わせ投与群、高用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群および高用量ＬＹ２１５７２９９と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群は、対照群と比較して、薬物投与７日目(すなわち、Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日から１０日目)から１９日目(細胞株移植日から２２日目)まで、有意な腫瘍増殖阻害性効果を有することが判明した(図３参照)。具体的に、対照群の腫瘍体積の差異をＡＮＯＶＡ検定およびテューキーの多重比較を使用して統計的に分析したとき、差異は統計的に有意であったことが判明した(*：ｐ＜０.０５；**：ｐ＜０.０１；***：ｐ＜０.００１)。
特に、試験最後であるＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から２２日目、高用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群のみが、対照群と比較して腫瘍体積の統計的に有意な減少(*、ｐ＜０.０５)を示し(図４参照)、抗ＰＤ－Ｌ１抗体単独投与群と比較して、統計的に有意な減少(＃、ｐ＜０.０５、片側スチューデントのｔ検定)も示した(図３および４参照)。試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図５参照)。
低用量ＬＹ２１５７２９９と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群以外、抗ＰＤ－Ｌ１抗体単独投与群、低用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体組み合わせ投与群、高用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群および高用量ＬＹ２１５７２９９と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群は、対照群と比較して、薬物投与７日目(すなわち、Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日から１０日目)から１９日目(細胞株移植日から２２日目)まで、有意な腫瘍増殖阻害性効果を有することが判明した(図３参照)。具体的に、対照群の腫瘍体積の差異をＡＮＯＶＡ検定およびテューキーの多重比較を使用して統計的に分析したとき、差異は統計的に有意であったことが判明した(*：ｐ＜０.０５；**：ｐ＜０.０１；***：ｐ＜０.００１)。
特に、試験最後であるＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から２２日目、高用量化合物１と抗ＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせ投与群のみが、対照群と比較して腫瘍体積の統計的に有意な減少(*、ｐ＜０.０５)を示し(図４参照)、抗ＰＤ－Ｌ１抗体単独投与群と比較して、統計的に有意な減少(＃、ｐ＜０.０５、片側スチューデントのｔ検定)も示した(図３および４参照)。試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図５参照)。
【0116】
実施例１.３. 抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与
実施例１.３.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の４０匹の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、１×１０６ Ｂ１６Ｆ１０細胞株(KCLB, #80008)を各マウスの右腹側部に皮下注射し、それにより癌細胞株を移植した。
Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を９日目に測定した。マウスを、９日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell、クローン#9D9)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を、試験薬物として調製した。
実施例１.３.１ 黒色腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の４０匹の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスをOrientBioから購入し、１×１０６ Ｂ１６Ｆ１０細胞株(KCLB, #80008)を各マウスの右腹側部に皮下注射し、それにより癌細胞株を移植した。
Ｂ１６Ｆ１０細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を９日目に測定した。マウスを、９日目の腫瘍体積の平均および偏差により分類した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell、クローン#9D9)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を、試験薬物として調製した。
【0117】
実施例１.３.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例１.３.１で分類したマウスを対照群(媒体経口投与)、化合物１経口投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体腹腔内投与群または抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群に割り当て、薬物投与をＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から９日目から２１日目まで開始し、試験を２２日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表３に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与するとき、個体あたりの用量はいずれの場合も５mL／kgである。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化および体重変化を、２元配置分散分析および片側ｔ検定を使用して、統計的に分析した。
実施例１.３.１で分類したマウスを対照群(媒体経口投与)、化合物１経口投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体腹腔内投与群または抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群に割り当て、薬物投与をＢ１６Ｆ１０細胞株移植日から９日目から２１日目まで開始し、試験を２２日目に終了した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表３に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与するとき、個体あたりの用量はいずれの場合も５mL／kgである。
【表3】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化および体重変化を、２元配置分散分析および片側ｔ検定を使用して、統計的に分析した。
【0118】
実施例１.３.３. 腫瘍増殖阻害性効果および体重変化
薬物投与期間中、化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群は、媒体投与群、化合物１単独投与群または抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群と比較して、優れた腫瘍増殖阻害性効果の差があることが判明した(図６(ａ)参照)。
さらに、薬物投与から１５日目の腫瘍体積を試験したとき、化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群または化合物１単独投与群と比較して、統計学的に有意な差(すなわち、ｐ＜０.０１)であることが判明した(図６(ｂ)参照)。
試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図７参照)。
薬物投与期間中、化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群は、媒体投与群、化合物１単独投与群または抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群と比較して、優れた腫瘍増殖阻害性効果の差があることが判明した(図６(ａ)参照)。
さらに、薬物投与から１５日目の腫瘍体積を試験したとき、化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群または化合物１単独投与群と比較して、統計学的に有意な差(すなわち、ｐ＜０.０１)であることが判明した(図６(ｂ)参照)。
試験期間全体にわたり、対照群と薬物投与群の体重変化に統計学的有意差はなかった(図７参照)。
【0119】
実施例２. 結腸直腸癌マウスモデルにおける抗腫瘍効果
実施例２.１ 結腸直腸癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の１７０匹の雌ＢＡＬＢ／ＣマウスをOrientBioから購入し、癌細胞株を、各マウスの右脇腹に７.５×１０５ ＣＴ２６細胞株(マウス結腸癌細胞)を皮下注射することにより移植した。ＣＴ２６細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を７日目に測定した。７日目の平均腫瘍体積は５０mm３であることが判明し、１１０匹のマウスを、腫瘍体積が平均腫瘍体積より顕著に大きいまたは小さい個体を除き、選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＰＤ－１抗体(BioXCell、クローン#RMP1-14)とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell、クローン#9D9)とＰＢＳの混合溶液、レンバチニブと媒体の混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
実施例２.１ 結腸直腸癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の１７０匹の雌ＢＡＬＢ／ＣマウスをOrientBioから購入し、癌細胞株を、各マウスの右脇腹に７.５×１０５ ＣＴ２６細胞株(マウス結腸癌細胞)を皮下注射することにより移植した。ＣＴ２６細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を７日目に測定した。７日目の平均腫瘍体積は５０mm３であることが判明し、１１０匹のマウスを、腫瘍体積が平均腫瘍体積より顕著に大きいまたは小さい個体を除き、選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＰＤ－１抗体(BioXCell、クローン#RMP1-14)とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell、クローン#9D9)とＰＢＳの混合溶液、レンバチニブと媒体の混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
【0120】
実施例２.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例２.１で選択したマウスを下表４に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与日から２７日目に終了した。
経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化および体重変化を、２元配置分散分析、ボンフェローニ検定および片側ｔ検定を使用して、統計的に分析した。
実施例２.１で選択したマウスを下表４に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与日から２７日目に終了した。
【表4】
経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
各群の腫瘍体積変化および体重変化を、２元配置分散分析、ボンフェローニ検定および片側ｔ検定を使用して、統計的に分析した。
【0121】
実施例２.３. 腫瘍増殖阻害性効果
実施例２.３.１. 化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与および化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より低いことが測定された(図８(ａ)参照)。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４.８％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より５９％低く、一方抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より７７％低いことが判明した。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体重(ｇ)を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ群の腫瘍体は最小であることが判明し、化合物１単独投与群および抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍重量の差は統計学的に有意であったことが判明した(図８(ｂ)参照)。
さらに、高用量抗ＣＴＬＡ抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、高用量抗ＣＴＬＡ抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より低く測定された(図９(ａ)参照)。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より２７％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より５９％低く、高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より７７％低いことが判明した(図９(ｂ)参照)。
さらに、抗ＰＤ－１抗体、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体および化合物１の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積は、媒体単独投与群、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、化合物１単独投与群、抗ＰＤ－１抗体と高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および化合物１と低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積より低いことが判明した(図１０参照)。さらに、抗ＰＤ－１抗体、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体および化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より８８％低く、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、化合物１単独投与群、化合物１と低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および抗ＰＤ－１抗体と高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積よりそれぞれ４.８％、２３％、５９％、６０％および６３％低かった(図１０参照)。
実施例２.３.１. 化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与および化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より低いことが測定された(図８(ａ)参照)。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より４.８％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より５９％低く、一方抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群で測定された腫瘍体積より７７％低いことが判明した。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体重(ｇ)を比較したとき、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ群の腫瘍体は最小であることが判明し、化合物１単独投与群および抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍重量の差は統計学的に有意であったことが判明した(図８(ｂ)参照)。
さらに、高用量抗ＣＴＬＡ抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、高用量抗ＣＴＬＡ抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より低く測定された(図９(ａ)参照)。さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より２７％低く、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より５９％低く、高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積より７７％低いことが判明した(図９(ｂ)参照)。
さらに、抗ＰＤ－１抗体、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体および化合物１の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積は、媒体単独投与群、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、化合物１単独投与群、抗ＰＤ－１抗体と高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および化合物１と低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積より低いことが判明した(図１０参照)。さらに、抗ＰＤ－１抗体、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体および化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より８８％低く、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、化合物１単独投与群、化合物１と低用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および抗ＰＤ－１抗体と高用量抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群で観察された腫瘍体積は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積よりそれぞれ４.８％、２３％、５９％、６０％および６３％低かった(図１０参照)。
【0122】
実施例２.３.２. 化合物１とレンバチニブの組み合わせまたは化合物１およびレンバチニブおよび抗ＰＤ－１抗体および／または抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ
レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、レンバチニブ単独投与群、化合物１単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より低く測定され、レンバチニブ、化合物１および抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積より低いことが判明した(図１１参照)。さらに、レンバチニブ、抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、レンバチニブ単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群、レンバチニブと抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および対照群の各々の腫瘍体積より低く測定された(図１２参照)。
さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、化合物１単独投与群、レンバチニブ単独投与群、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ１抗体の組み合わせ投与群およびレンバチニブと抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して、それぞれ５９％、３０％、４.８％、２３％、４１％および５６％であった。
他方で、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群ならびにレンバチニブ、化合物１および抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積の減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して、それぞれ６８％および９０％であることが判明した。さらに、レンバチニブ、化合物１および抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積の減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して８２％であった。
まとめると、レンバチニブ、抗ＰＤ－１抗体および抗ＣＴＬＡ－４抗体から選択される少なくとも１個と組み合わせた化合物１の使用は、レンバチニブ、抗ＰＤ－１抗体または抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の使用または媒体のみ投与の場合より優れた抗癌効果を示すことが確認される。
レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、レンバチニブ単独投与群、化合物１単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積より低く測定され、レンバチニブ、化合物１および抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積より低いことが判明した(図１１参照)。さらに、レンバチニブ、抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は、全試験期間にわたり、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、レンバチニブ単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群、レンバチニブと抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群および対照群の各々の腫瘍体積より低く測定された(図１２参照)。
さらに、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、化合物１単独投与群、レンバチニブ単独投与群、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群、レンバチニブと抗ＰＤ１抗体の組み合わせ投与群およびレンバチニブと抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して、それぞれ５９％、３０％、４.８％、２３％、４１％および５６％であった。
他方で、薬物投与日から２６日目に測定した腫瘍体積を比較したとき、レンバチニブと化合物１の組み合わせ投与群ならびにレンバチニブ、化合物１および抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積の減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して、それぞれ６８％および９０％であることが判明した。さらに、レンバチニブ、化合物１および抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群の腫瘍体積の減少は、媒体のみ投与された対照群の腫瘍体積と比較して８２％であった。
まとめると、レンバチニブ、抗ＰＤ－１抗体および抗ＣＴＬＡ－４抗体から選択される少なくとも１個と組み合わせた化合物１の使用は、レンバチニブ、抗ＰＤ－１抗体または抗ＣＴＬＡ－４抗体単独の使用または媒体のみ投与の場合より優れた抗癌効果を示すことが確認される。
【0123】
実施例２.４. 体重変化
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１３参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１３参照)。
【0124】
実施例２.５. 化合物１およびレンバチニブの作用機序が重複するかを確認するインビトロ試験
化合物１およびレンバチニブの作用機序が重複するかを確認するために、Ｔ細胞の阻害されたＩＦＮ－γ分泌機能の回復を、Ｔ細胞受容体単独刺激の条件下で測定した。ｈＰＢＭＣにおけるＩＦＮ－γ分泌の変化を、ヒト末梢血単核細胞(ｈＰＢＭＣ)を媒体で処理、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体(Ｔ細胞刺激剤)のみで処理、ＴＧＦ－β(Ｔ細胞機能阻害剤)のみで処理またはレンバチニブおよび／または化合物１とＴＧＦ－β、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体で処理することにより測定した。
まず、３７℃、５％二酸化炭素加湿インキュベーターの条件下、ヒト末梢血単核細胞(ｈＰＢＭＣ)を、１０％熱不活性化ＦＢＳ、２mM Ｌ－グルタミン、１mM ピルビン酸ナトリウム、１０mM ＨＥＰＥＳおよび１×ＮＥＡＡ添加ＲＰＭＩ－１６４０培地で培養した。
６ウェルプレートを、抗ＣＤ３モノクローナル抗体(ＯＫＴ３)で４℃で一夜被覆した。６ウェルプレートの各ウェルの抗体溶液を吸引し、ＰＢＳを使用して洗浄した。ｈＰＢＭＣを被覆した６ウェルプレートに播種した。ｈＰＢＭＣの反応性を増加させるために、培養を、５日間、３７℃で、５％二酸化炭素加湿インキュベーターの条件下実施した。５日間培養したｈＰＢＭＣを、９６ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェル濃度で接種した。９６ウェルプレートに接種したｈＰＢＭＣをレンバチニブまたは化合物１で処理し、ｈＰＢＭＣを１時間培養し、次いでＴＧＦ－βをそれに添加し、ｈＰＢＭＣを１時間培養した。ｈＰＢＭＣを抗ＣＤ３抗体／抗ＣＤ２８抗体被覆マイクロビーズを、細胞：ビーズ比が２：１となるよう処理し、ｈＰＢＭＣを７２時間刺激した。７２時間後、上清を回収し、慣用のＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＡを実施した。各群で作製されたＩＦＮ－γ含量を測定した。データ分析をPrism 5(GraphPad Software, Inc.)を使用して実施し、統計分析を１元配置分散分析およびテューキーの多重比較を使用して実施した。
ＥＬＩＳＡ分析の結果、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体での刺激は、ヒトＰＢＭＣＩＦＮγ分泌を増加させ、ＴＧＦ－β処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を阻害した。さらに、レンバチニブと抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を増加させ、化合物１と抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を増加させた。さらに、化合物１およびレンバチニブと抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体での刺激と同様、ＩＦＮγ分泌の増加を示した。それ故に、２種の薬物の作用機序が独立して作用することが確認された。
一方では、レンバチニブは、血管内皮細胞表面で産生されるＶＣＡＭ－１などの結合タンパク質の減少に付随する内皮細胞アネルギー環境で抗癌効果が不十分であることが知られる。それ故に、化合物１と、別の作用機序を有するレンバチニブの組み合わせは、レンバチニブの抗癌効果を補い、改善する。
化合物１およびレンバチニブの作用機序が重複するかを確認するために、Ｔ細胞の阻害されたＩＦＮ－γ分泌機能の回復を、Ｔ細胞受容体単独刺激の条件下で測定した。ｈＰＢＭＣにおけるＩＦＮ－γ分泌の変化を、ヒト末梢血単核細胞(ｈＰＢＭＣ)を媒体で処理、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体(Ｔ細胞刺激剤)のみで処理、ＴＧＦ－β(Ｔ細胞機能阻害剤)のみで処理またはレンバチニブおよび／または化合物１とＴＧＦ－β、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体で処理することにより測定した。
まず、３７℃、５％二酸化炭素加湿インキュベーターの条件下、ヒト末梢血単核細胞(ｈＰＢＭＣ)を、１０％熱不活性化ＦＢＳ、２mM Ｌ－グルタミン、１mM ピルビン酸ナトリウム、１０mM ＨＥＰＥＳおよび１×ＮＥＡＡ添加ＲＰＭＩ－１６４０培地で培養した。
６ウェルプレートを、抗ＣＤ３モノクローナル抗体(ＯＫＴ３)で４℃で一夜被覆した。６ウェルプレートの各ウェルの抗体溶液を吸引し、ＰＢＳを使用して洗浄した。ｈＰＢＭＣを被覆した６ウェルプレートに播種した。ｈＰＢＭＣの反応性を増加させるために、培養を、５日間、３７℃で、５％二酸化炭素加湿インキュベーターの条件下実施した。５日間培養したｈＰＢＭＣを、９６ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェル濃度で接種した。９６ウェルプレートに接種したｈＰＢＭＣをレンバチニブまたは化合物１で処理し、ｈＰＢＭＣを１時間培養し、次いでＴＧＦ－βをそれに添加し、ｈＰＢＭＣを１時間培養した。ｈＰＢＭＣを抗ＣＤ３抗体／抗ＣＤ２８抗体被覆マイクロビーズを、細胞：ビーズ比が２：１となるよう処理し、ｈＰＢＭＣを７２時間刺激した。７２時間後、上清を回収し、慣用のＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＡを実施した。各群で作製されたＩＦＮ－γ含量を測定した。データ分析をPrism 5(GraphPad Software, Inc.)を使用して実施し、統計分析を１元配置分散分析およびテューキーの多重比較を使用して実施した。
ＥＬＩＳＡ分析の結果、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体での刺激は、ヒトＰＢＭＣＩＦＮγ分泌を増加させ、ＴＧＦ－β処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を阻害した。さらに、レンバチニブと抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を増加させ、化合物１と抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、ヒトＰＢＭＣのＩＦＮγ分泌を増加させた。さらに、化合物１およびレンバチニブと抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２８抗体およびＴＧＦ－βでの処理は、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体での刺激と同様、ＩＦＮγ分泌の増加を示した。それ故に、２種の薬物の作用機序が独立して作用することが確認された。
一方では、レンバチニブは、血管内皮細胞表面で産生されるＶＣＡＭ－１などの結合タンパク質の減少に付随する内皮細胞アネルギー環境で抗癌効果が不十分であることが知られる。それ故に、化合物１と、別の作用機序を有するレンバチニブの組み合わせは、レンバチニブの抗癌効果を補い、改善する。
【0125】
実施例３. 肉腫マウスモデルにおける抗腫瘍効果
実施例３.１ 肉腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の６０匹雌ＢＡＬＢ／Ｃマウスを、Vital River Laboratories Research Model and Services Companyから購入した。１×１０６ ＷＥＨＩ－１６４細胞株(マウス肉腫細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。ＷＥＨＩ－１６４細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を７日目に測定した。７日目の平均腫瘍体積は５３mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍体積より顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
実施例３.１ 肉腫マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の６０匹雌ＢＡＬＢ／Ｃマウスを、Vital River Laboratories Research Model and Services Companyから購入した。１×１０６ ＷＥＨＩ－１６４細胞株(マウス肉腫細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。ＷＥＨＩ－１６４細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を７日目に測定した。７日目の平均腫瘍体積は５３mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍体積より顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
【0126】
実施例３.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例３.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体投与群、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物をＷＥＨＩ－１６４細胞株移植日から７日目から２３日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表５に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
薬物投与後試験期間中のマウスの腫瘍体積および体重の変化を週２回測定し、腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
試験期間中の腫瘍体積の差を、片側ｔ検定、ＡＮＯＶＡおよびテューキーの多重比較検定を使用して、統計的に分析した。
実施例３.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体投与群、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物をＷＥＨＩ－１６４細胞株移植日から７日目から２３日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表５に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
【表5】
薬物投与後試験期間中のマウスの腫瘍体積および体重の変化を週２回測定し、腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
試験期間中の腫瘍体積の差を、片側ｔ検定、ＡＮＯＶＡおよびテューキーの多重比較検定を使用して、統計的に分析した。
【0127】
実施例３.３. 腫瘍増殖阻害性効果および寛解率
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より小さいことが示された(図１４参照)。さらに、薬物投与開始日から１６日目に測定された抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は、対照群の腫瘍体積より６４％小さく、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積の７１％小さかった。しかしながら、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の驚異的に腫瘍体積の９８％小さく、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群および化合物１単独投与群または抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積の差は統計的に有意(ｐ＜０.０５)であることが判明した(図１４参照)。
さらに、媒体投与対照群と比較した抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与時の腫瘍完全寛解率は２０％であり、媒体投与対照群と比較した化合物１単独投与時の腫瘍完全寛解率は３０％であり、媒体投与対照群と比較した抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与時の腫瘍完全寛解率は８０％であった。抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群および抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群または化合物１単独投与群の間の腫瘍完全寛解率の差は統計的に有意(ｐ＜０.０５)であり、故に抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与は腫瘍増殖抑制に優れた効果を有する(図１５参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１６参照)。
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より小さいことが示された(図１４参照)。さらに、薬物投与開始日から１６日目に測定された抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は、対照群の腫瘍体積より６４％小さく、化合物１単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積の７１％小さかった。しかしながら、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の驚異的に腫瘍体積の９８％小さく、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群および化合物１単独投与群または抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積の差は統計的に有意(ｐ＜０.０５)であることが判明した(図１４参照)。
さらに、媒体投与対照群と比較した抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与時の腫瘍完全寛解率は２０％であり、媒体投与対照群と比較した化合物１単独投与時の腫瘍完全寛解率は３０％であり、媒体投与対照群と比較した抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与時の腫瘍完全寛解率は８０％であった。抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群および抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与群または化合物１単独投与群の間の腫瘍完全寛解率の差は統計的に有意(ｐ＜０.０５)であり、故に抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与は腫瘍増殖抑制に優れた効果を有する(図１５参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１６参照)。
【0128】
実施例４. 乳癌マウスモデルにおける抗腫瘍効果
実施例４.１ 乳癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の６０匹雌ＢＡＬＢ／Ｃマウスを、Vital River Laboratories Research Model and Services Companyから購入した。３×１０５ ４Ｔ１細胞株(マウス乳癌細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。４Ｔ１細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を６日目に測定した。６日目の平均腫瘍体積は５２mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍サイズより顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
実施例４.１ 乳癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
６～８週齢の６０匹雌ＢＡＬＢ／Ｃマウスを、Vital River Laboratories Research Model and Services Companyから購入した。３×１０５ ４Ｔ１細胞株(マウス乳癌細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。４Ｔ１細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を６日目に測定した。６日目の平均腫瘍体積は５２mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍サイズより顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液、抗ＣＴＬＡ－４抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
【0129】
実施例４.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例４.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体投与群、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物を、４Ｔ１細胞株移植日から６日目から３０日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表６に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
薬物投与後試験期間中のマウスの腫瘍体積および体重の変化を週２回測定し、腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
腫瘍体積の差をＡＮＯＶＡおよびテューキーの多重比較検定を使用して、統計的に分析した。
実施例４.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群、抗ＣＴＬＡ－４抗体投与群、化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群または化合物１と抗ＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物を、４Ｔ１細胞株移植日から６日目から３０日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表６に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も５mL／kgであった。
【表6】
薬物投与後試験期間中のマウスの腫瘍体積および体重の変化を週２回測定し、腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
腫瘍体積の差をＡＮＯＶＡおよびテューキーの多重比較検定を使用して、統計的に分析した。
【0130】
実施例４.３. 腫瘍増殖阻害性効果および寛解率
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より小さいことが示された(図１７(ａ)参照)。さらに、細胞株接種日から２３日目に測定した抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積と比較して２.６％増加し、化合物１単独投与群の腫瘍体積は、対照群の腫瘍体積と比較して１６％減少した(図１７(ｂ)参照)。他方で、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積と比較して、驚異的に３５％減少であることが判明し、対照群および抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の間の腫瘍体積の差異は、２元配置分散分析を使用して分析したとき、ｐ値０.００１未満であることが判明し、１元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して分析したときｐ値０.０１未満であることが判明し、対照群と比較して、腫瘍体積の統計的に有意な減少をもたらした(図１７参照)。
さらに、細胞株接種日から２３日目に測定した媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して、媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与時の腫瘍体積は１７％減少し、化合物１単独投与時の腫瘍体積は１６％減少し、一方抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して驚異的に４６％減少した。細胞株接種日から２３日目に測定した腫瘍体積の観点で、対照群および抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の間の腫瘍体積差異は２元配置分散分析を使用して分析したときおよび１元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して分析したとき、ｐ値０.００１未満であることが判明し、対照群と比較して、腫瘍体積の統計的に有意な減少をもたらした(図１８参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１９参照)。
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より小さいことが示された(図１７(ａ)参照)。さらに、細胞株接種日から２３日目に測定した抗ＰＤ－１抗体単独投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積と比較して２.６％増加し、化合物１単独投与群の腫瘍体積は、対照群の腫瘍体積と比較して１６％減少した(図１７(ｂ)参照)。他方で、抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は対照群の腫瘍体積と比較して、驚異的に３５％減少であることが判明し、対照群および抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群の間の腫瘍体積の差異は、２元配置分散分析を使用して分析したとき、ｐ値０.００１未満であることが判明し、１元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して分析したときｐ値０.０１未満であることが判明し、対照群と比較して、腫瘍体積の統計的に有意な減少をもたらした(図１７参照)。
さらに、細胞株接種日から２３日目に測定した媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して、媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して、抗ＣＴＬＡ－４抗体単独投与時の腫瘍体積は１７％減少し、化合物１単独投与時の腫瘍体積は１６％減少し、一方抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の腫瘍体積は媒体投与対照群の腫瘍体積と比較して驚異的に４６％減少した。細胞株接種日から２３日目に測定した腫瘍体積の観点で、対照群および抗ＣＴＬＡ－４抗体と化合物１の組み合わせ投与群の間の腫瘍体積差異は２元配置分散分析を使用して分析したときおよび１元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して分析したとき、ｐ値０.００１未満であることが判明し、対照群と比較して、腫瘍体積の統計的に有意な減少をもたらした(図１８参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図１９参照)。
【0131】
実施例５. 膀胱癌マウスモデルにおける抗腫瘍効果
実施例５.１ 膀胱癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
７週齢Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ雌マウスをOrientBioから購入した。２.５×１０５ ＭＢＴ２細胞株(マウス膀胱癌細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。ＭＢＴ２細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を６日目に測定した。６日目の平均腫瘍体積は５０mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍サイズより顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
実施例５.１ 膀胱癌マウスモデルおよび試験薬物の準備
７週齢Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ雌マウスをOrientBioから購入した。２.５×１０５ ＭＢＴ２細胞株(マウス膀胱癌細胞)を、各マウスの右脇腹に皮下注射し、癌細胞株を移植した。ＭＢＴ２細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍体積を６日目に測定した。６日目の平均腫瘍体積は５０mm３であることが判明し、マウスを、平均腫瘍サイズより顕著に大きい腫瘍体積または顕著に小さい腫瘍体積を有する個体を除外することにより、各群の一定平均および逸脱を維持するよう選択した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、抗ＰＤ－１抗体(BioXCell)とＰＢＳの混合溶液および化合物１と媒体の混合溶液を試験薬物として調製した。
【0132】
実施例５.２. 試験薬物の投与方法、測定変数および統計分析
実施例５.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群または化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物を、ＭＢＴ２細胞株移植日から６日目から２８日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表７に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も１０mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後試験期間中週３回測定した。腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が１,５００mm３を超えるときまたは健康状態悪化により瀕死状態直前、マウスを屠殺し、試験を終了し、腫瘍体積が屠殺基準の腫瘍体積の１／４未満であったとき、薬物へのレスポンダーとして分類した。生存率を、個々のマウスの死亡日または個々のマウスの腫瘍体積が１,５００mm３を超える屠殺日を使用して計算し、生存率の有意差を、カプラン・マイヤー生存曲線(生存曲線)分析を使用して分析した(Prism 5.0)。
実施例５.１で選択したマウスを、それぞれ対照群、抗ＰＤ－１抗体投与群、化合物１投与群または化合物１と抗ＰＤ－１抗体の組み合わせ投与群に割り当てた。薬物を、ＭＢＴ２細胞株移植日から６日目から２８日目まで投与した。各群に投与した薬物の用量および投与方法を下表７に示し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、用量はいずれの場合も１０mL／kgであった。
【表7】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後試験期間中週３回測定した。腫瘍体積を、実施例１.１.２における腫瘍体積測定法と同じ方法で測定した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が１,５００mm３を超えるときまたは健康状態悪化により瀕死状態直前、マウスを屠殺し、試験を終了し、腫瘍体積が屠殺基準の腫瘍体積の１／４未満であったとき、薬物へのレスポンダーとして分類した。生存率を、個々のマウスの死亡日または個々のマウスの腫瘍体積が１,５００mm３を超える屠殺日を使用して計算し、生存率の有意差を、カプラン・マイヤー生存曲線(生存曲線)分析を使用して分析した(Prism 5.0)。
【0133】
実施例５.３. 生存率および体重変化
細胞株接種日から３０日目に測定した腫瘍体積に基づく薬物へのレスポンダーの割合の測定結果を下表８に示す。
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より高いレスポンダー率を示し(表８、図２０)、生存率はカプラン・マイヤー生存率で媒体対照群と比較して、有意に増加した(ログ・ランク検定、ｐ値＝０.００４２)(図２０参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図２１参照)。
細胞株接種日から３０日目に測定した腫瘍体積に基づく薬物へのレスポンダーの割合の測定結果を下表８に示す。
【表8】
抗ＰＤ－１抗体と化合物１の組み合わせ投与群は、抗ＰＤ－１抗体単独投与群、化合物１単独投与群または媒体投与対照群より高いレスポンダー率を示し(表８、図２０)、生存率はカプラン・マイヤー生存率で媒体対照群と比較して、有意に増加した(ログ・ランク検定、ｐ値＝０.００４２)(図２０参照)。
全試験期間中、薬物投与群および媒体のみ投与された対照群の間で体重変化の統計学的に有意な差はなかった(図２１参照)。
【0134】
実施例６. 子宮頸癌動物モデルにおける抗腫瘍効果
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを購入し、３×１０６ Ｕ１４細胞株を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。Ｕ１４細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表９に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを購入し、３×１０６ Ｕ１４細胞株を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。Ｕ１４細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表９に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
【表9】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
【0135】
実施例７. 頭頸部扁平上皮細胞癌動物モデルにおける抗腫瘍効果
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを購入し、３×１０６ ＭＯＣ１細胞株を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。ＭＯＣ１細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表１０に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを購入し、３×１０６ ＭＯＣ１細胞株を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。ＭＯＣ１細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表１０に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
【表10】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
【0136】
実施例８. 肝臓癌動物モデルにおける抗腫瘍効果
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌ＢＡＬＢ／６マウスを購入し、１×１０６ Ｈ２２細胞株(マウス肝臓癌細胞株)を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。Ｈ２２細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表１１に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
０.９％生理学的食塩水溶液を媒体として調製し、マウス抗ＣＴＬＡ－４抗体とＰＢＳの混合溶液、マウス抗ＰＤ－１抗体とＰＢＳの混合溶液、媒体とレンバチニブの混合溶液、化合物１と媒体の混合溶液を調製した。
６～８週齢の雌ＢＡＬＢ／６マウスを購入し、１×１０６ Ｈ２２細胞株(マウス肝臓癌細胞株)を各マウスの脇腹に皮下注射して、癌細胞株を移植した。Ｈ２２細胞株移植日を０日目と定め、腫瘍サイズを７日目に測定し、マウスを、各群の７日目の平均腫瘍体積の逸脱が５０mm３の差とならないよう分類した。分類したマウスを下表１１に挙げる群に割り当て、媒体または薬物を投与し、薬物投与を細胞株接種日から７日目に開始し、試験を薬物投与開始日から２７日目に終了し、経口(ｐ.ｏ)および腹腔内(ｉ.ｐ.)で投与したとき、投与体積はいずれの場合も５mL／kgであった。
【表11】
マウス腫瘍体積および体重を、薬物投与後の試験期間の間、週２回測定した。この場合、マウス腫瘍体積を、実施例１.１.２の腫瘍体積計算法と同じ方法により計算した。一方では、個々のマウスの腫瘍体積が３,０００mm３を超えたとき、対応するマウスを屠殺し、試験を中止した。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【国際調査報告】