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特表2024-529117前臨床アルツハイマー病を検出するための組成物、キットおよび方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-08-01
(54)【発明の名称】前臨床アルツハイマー病を検出するための組成物、キットおよび方法
(51)【国際特許分類】
G01N 33/53 20060101AFI20240725BHJP
【ＦＩ】
G01N33/53 D
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024508404
(86)(22)【出願日】2022-08-08
(85)【翻訳文提出日】2024-04-04
(86)【国際出願番号】 IL2022050865
(87)【国際公開番号】W WO2023017513
(87)【国際公開日】2023-02-16
(31)【優先権主張番号】63/231,034
(32)【優先日】2021-08-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】524052457
【氏名又は名称】ニューロクエスト リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ファン， シン
(72)【発明者】
【氏名】リー， イーハン
(72)【発明者】
【氏名】ドーク， ジェイムズ
(72)【発明者】
【氏名】グ， バイジュン
(57)【要約】
ヒト患者におけるアルツハイマー病（ＡＤ）を診断および予後診断するための組成物およびキットは、フルオロフォア等の検出可能な部分にコンジュゲートされたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体等の結合剤を含み、バイオマーカーは、ＣＤ１６３、ＣＤ９１、ＣＤ５９、ＭｅｒＴＫおよび他の食作用関連分子から選択される。更なる組成物およびキットは、スカベンジャー受容体を含むバイオマーカーに対するフルオロフォアコンジュゲート化モノクローナル抗体のパネルを用いる。バイオマーカーの相対的発現を決定し、ＡＤを診断し、食作用促進剤およびスカベンジャー受容体アゴニスト等のＡＤ治療候補の有効性を決定するための方法も記載される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
キットであって、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
【請求項2】
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項3】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１および２のいずれか一項に記載のキット。
【請求項4】
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
請求項１に記載のキット。
【請求項5】
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
請求項４に記載のキット。
【請求項6】
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、請求項４および５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項7】
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、請求項４および５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項8】
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、請求項４および５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項9】
組成物であって、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
【請求項10】
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項11】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項９および１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項12】
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
請求項９に記載の組成物。
【請求項13】
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
請求項１２に記載の組成物。
【請求項14】
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、請求項１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項15】
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、請求項１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項16】
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、請求項１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項17】
ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤、ＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
【請求項18】
前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１７に記載の使用。
【請求項19】
ＣＤ９１に対する前記結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
１７および１８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項20】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願への相互参照
本出願は、２０２１年８月９日に出願された「アルツハイマー病を検出するための組成物、キットおよび方法」という名称の米国仮特許出願第６３／２３１，０３４号のＰＣＴ第Ｉ章第８条に基づく優先権の利益を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年８月９日に出願された「アルツハイマー病を検出するための組成物、キットおよび方法」という名称の米国仮特許出願第６３／２３１，０３４号のＰＣＴ第Ｉ章第８条に基づく優先権の利益を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
連邦政府の資金提供を受けた研究開発に関する記述
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｕｎｃｉｌ（オーストラリア）によって授与されたＡＰＰ １０４８０８２（２０１３－２０１５）、ＡＰＰ １０６１４１９（２０１４－２０１６）、ＡＰＰ １１２００９５（２０１７－２０１９）の下で政府の支援を受けてなされた。オーストラリア政府は、本発明において一定の権利を有し得る。更なる支援は、Ｂｅｔｈｌｅｈｅｍ Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎによって提供された。
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｕｎｃｉｌ（オーストラリア）によって授与されたＡＰＰ １０４８０８２（２０１３－２０１５）、ＡＰＰ １０６１４１９（２０１４－２０１６）、ＡＰＰ １１２００９５（２０１７－２０１９）の下で政府の支援を受けてなされた。オーストラリア政府は、本発明において一定の権利を有し得る。更なる支援は、Ｂｅｔｈｌｅｈｅｍ Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎによって提供された。
【0003】
発明の分野
本発明は、場合によっては臨床的に有意な症状が現れる前のアルツハイマー病の検出および予後に関する。
本発明は、場合によっては臨床的に有意な症状が現れる前のアルツハイマー病の検出および予後に関する。
【背景技術】
【0004】
発明の背景
アルツハイマー病（ＡＤ）の原因はあまり理解されていないが、この疾患は、その最も進行した段階に罹患している患者の生活の質の劇的な低下および高い介護費用と相関する。ＡＤは典型的には数年にわたって発症する。認知機能正常（ＣＮ）から軽度認知障害（ＭＣＩ）を経て臨床的ＡＤ認知症に進行すると、患者は、感情鈍麻、社会的引きこもり、および孤立の増加と共に、短期記憶、注意力、および抽象的思考の減少を経験する。オリゴマーおよびプラークの形態のアミロイドベータ（Ａβ）タンパク質の蓄積が、ＡＤの家族性および散発性の両方の例において検出されている。
アルツハイマー病（ＡＤ）の原因はあまり理解されていないが、この疾患は、その最も進行した段階に罹患している患者の生活の質の劇的な低下および高い介護費用と相関する。ＡＤは典型的には数年にわたって発症する。認知機能正常（ＣＮ）から軽度認知障害（ＭＣＩ）を経て臨床的ＡＤ認知症に進行すると、患者は、感情鈍麻、社会的引きこもり、および孤立の増加と共に、短期記憶、注意力、および抽象的思考の減少を経験する。オリゴマーおよびプラークの形態のアミロイドベータ（Ａβ）タンパク質の蓄積が、ＡＤの家族性および散発性の両方の例において検出されている。
【0005】
新規な仮説を用いて、本出願人らは、ＡＤの潜在的なバイオマーカーとしての脳Ａβ蓄積との関連についてフローサイトメトリー技術を使用して一連の細胞表面白血球バイオマーカーを調べた。その研究は、ＣＮ、ＭＣＩ、およびＡＤ患者群について、ＡＤの診断および予後を可能にする驚くべき相関をもたらした。出願人らの発見により、本明細書に開示される本発明の組成物および方法が得られた。
【発明の概要】
【0006】
発明の要旨
本発明の特定の実施形態は、以前にＡＤと関連していなかった個々のバイオマーカーの使用を可能にする。本出願人らは、予期せぬことに、本発明の方法、組成物およびキットに適したいくつかのバイオマーカー、例えば、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫを同定した。それらのバイオマーカーは、ＣＮ患者と比較して、ＡＤ患者およびＭＣＩ患者において減少または増加（ダウンレギュレートまたはアップレギュレート）することが分かっており、単独で、または１もしくはそれを超える他のバイオマーカーと組み合わせて、ＡＤの診断および予後診断における有用性を示している。具体的には、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫはＡＤにおいてダウンレギュレーションされ、ＣＤ９１はアップレギュレーションされる。表１を参照されたい。したがって、本発明のいくつかの組成物は、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対する抗体等の結合剤を含み、抗体は、フルオロフォア等の検出可能な部分にカップリングされる。さらに、そのような組成物は、特定の結合剤、例えば、それらおよび他のバイオマーカーに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体の使用を含み得る。組成物は、必要に応じて抗凝固剤、および場合によりヒト全血を含む。例えばバイオマーカーに対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートを含むキットも、本発明の実施形態に記載される。
本発明の特定の実施形態は、以前にＡＤと関連していなかった個々のバイオマーカーの使用を可能にする。本出願人らは、予期せぬことに、本発明の方法、組成物およびキットに適したいくつかのバイオマーカー、例えば、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫを同定した。それらのバイオマーカーは、ＣＮ患者と比較して、ＡＤ患者およびＭＣＩ患者において減少または増加（ダウンレギュレートまたはアップレギュレート）することが分かっており、単独で、または１もしくはそれを超える他のバイオマーカーと組み合わせて、ＡＤの診断および予後診断における有用性を示している。具体的には、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫはＡＤにおいてダウンレギュレーションされ、ＣＤ９１はアップレギュレーションされる。表１を参照されたい。したがって、本発明のいくつかの組成物は、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対する抗体等の結合剤を含み、抗体は、フルオロフォア等の検出可能な部分にカップリングされる。さらに、そのような組成物は、特定の結合剤、例えば、それらおよび他のバイオマーカーに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体の使用を含み得る。組成物は、必要に応じて抗凝固剤、および場合によりヒト全血を含む。例えばバイオマーカーに対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートを含むキットも、本発明の実施形態に記載される。
【0007】
更なる実施形態は、有用な方法においてこれらの抗体－フルオロフォアコンジュゲートを使用する。したがって、出願人らは、例えば、ヒト患者におけるＡＤの診断のための方法における特定のバイオマーカーに対する結合剤の使用を発明した。特定の実施形態は、ヒト患者のＡＤを診断するための方法に関し、そのような１つの方法は、
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、結合したバイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
濃度を健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲と比較することと、
血液試料中のバイオマーカーの濃度変化を観察することと、
それによって、ヒト患者のＡＤを診断することと、を含む。
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、結合したバイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
濃度を健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲と比較することと、
血液試料中のバイオマーカーの濃度変化を観察することと、
それによって、ヒト患者のＡＤを診断することと、を含む。
【0008】
他の態様は、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定するための方法に関し、そのような１つの方法は、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、第２の結合したバイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体と反応させて、第２の結合したバイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0009】
更なる実施形態は、ＡＤの診断およびＡＤの薬物有効性の評価のためのバイオマーカーのパネルに関する。したがって、いくつかの追加の実施形態は、組成物およびキット、例えば、第１の検出可能な部分とコンジュゲートした第１のバイオマーカーに対する第１の結合剤、および第２の検出可能な部分とコンジュゲートした第２のバイオマーカーに対する第２の結合剤を含む組成物またはキットを含む。他の実施形態は、第３の検出可能な部分とコンジュゲートした第３のバイオマーカーに対する第３の結合剤を含む。更に他の実施形態は、各々が検出可能な部分とコンジュゲートしたより多くの結合剤を含有する。理想的には、いくつかのフルオロフォアの発光スペクトルは、有意に重ならないか、そうでなければいくつかのバイオマーカーの存在の定量的評価のために区別することができる。抗体－フルオロフォアコンジュゲートのパネルは、組成物またはキットに現れる場合がある。組成物は単一の混合物中の１またはそれを超える成分を示し、キットは１またはそれを超える組成物を含む。
【0010】
ＡＤの診断およびＡＤの薬物効力の評価のための好適なバイオマーカーとしては、例えば、１つのパネルで、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ１６３が挙げられる。別の例としては、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１８に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートが挙げられる。追加のパネルとしては、例えば、ＣＤ９１、ＣＤ５９およびＣＤ１６３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートが挙げられる。更なるパネルは、１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートを含む。別のパネルは、１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートと、１またはそれを超える白血球ＣＤマーカーに対する１つ以上の抗体－フルオロフォアコンジュゲートとを含む。スカベンジャー受容体およびそれらの調節因子としては、限定されないが、ＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫ、ＣＤ５９、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１８が挙げられる。更なるスカベンジャー受容体は、文献、例えばＭ．ＰｒａｂｈｕＤａｓら、’’Ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｉｎｇ Ｓｃａｖｅｎｇｅｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ，’’Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９２（５），（２０１４）１９９７－２００６において同定されている。白血球ＣＤマーカーとしては、限定されないが、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３が挙げられる。他のパネルとしては、１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥ対する抗体－フルオロフォアコンジュゲート、ならびに１またはそれを超えるＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫが挙げられる。更に別のパネルは、１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ５９、ならびに１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートを含む。更なるパネルには、１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫ、ならびに１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートが含まれる。更に他のパネルとしては、３つの群、例えば、１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫ；１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ５９；ならびに１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲートが挙げられる。
【0011】
本発明の更に他の例は、ヒト患者におけるバイオマーカーの相対的発現を測定する方法に関し、そのような１つの方法は、
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と試料を接触させて、結合バイオマーカーを形成することと、
フルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってバイオマーカーの相対的発現を決定することを含む。
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と試料を接触させて、結合バイオマーカーを形成することと、
フルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってバイオマーカーの相対的発現を決定することを含む。
【0012】
更に追加の実施形態は、ヒト患者のＡＤを診断するための方法に関し、そのような１つの方法は、
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と反応させて、結合バイオマーカーを形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲に対する結合バイオマーカーの各々の濃度の変化を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と反応させて、結合バイオマーカーを形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲に対する結合バイオマーカーの各々の濃度の変化を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
【0013】
更に態様は、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定するための方法に関し、そのような１つの方法は、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第１のアリコートと反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることと、
第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第２のアリコートと反応させて、第２の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第１のアリコートと反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることと、
第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第２のアリコートと反応させて、第２の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0014】
本発明の他の例は、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法に関し、別のこのような方法は、
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するモノクローナル抗体と反応させて、結合スカベンジャー受容体を得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるスカベンジャー受容体の濃度範囲と比較した結合スカベンジャー受容体の濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するモノクローナル抗体と反応させて、結合スカベンジャー受容体を得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるスカベンジャー受容体の濃度範囲と比較した結合スカベンジャー受容体の濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
【0015】
また更なる実施形態は、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定するための方法に関し、そのような１つの方法は、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、
それによって、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合したスカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、
それによって、第２の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、
それによって、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合したスカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、
それによって、第２の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0016】
本発明の更に別の実施形態は、患者のＡＤリスク、ＡＤ薬の有効性、および他の用途を評価するために最適化された組成物、キット、および方法に関する。いくつかの場合、それらの実施形態は、検出可能な部分とコンジュゲートした特定のバイオマーカーに対する結合剤を含む。例えば、これらの実施形態のいくつかは、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
【0017】
別の例では、これらの実施形態の他の実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
【0018】
本発明の更なる例は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットに関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットに関する。
【0019】
他の例は、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キットに関する。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キットに関する。
【0020】
本発明の様々な実施形態では、例えばマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体等の任意の適切な抗体を使用することができる。
【0021】
別の態様は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
【0022】
追加の態様は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。
【0023】
更なる態様は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットに関する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットに関する。
【0024】
特定の追加の態様では、キットは、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含み得る。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含み得る。
【0025】
なお更なる態様は、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ５９およびＣＤ１６３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲート等の結合剤－検出可能部分コンジュゲートを含む組成物およびキットを使用することであって、（１）ヒト患者におけるそれらのバイオマーカーの相対的発現を決定するための、（２）ヒト患者におけるＡＤを診断するための、および（３）ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定するための、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ５９およびＣＤ１６３に対する抗体－フルオロフォアコンジュゲート等の結合剤－検出可能部分コンジュゲートを含む組成物およびキットを使用することに関し、それらの方法が本明細書に記載される。
【0026】
本開示は特定の特定の実施形態を提供するが、本発明はそれらの実施形態に限定されない。当業者は、本明細書の説明から、記載された実施形態に修正を加えることができ、したがって、本明細書が記載された実施形態よりも範囲が広いことを理解するであろう。したがって、全ての例は非限定的である。
【図面の簡単な説明】
【0027】
【発明を実施するための形態】
【0028】
詳細な説明
必要に応じて、本発明の詳細な実施形態を本明細書に開示するが、開示された実施形態は、様々な形態で具体化され得る本発明の単なる例示であることを理解されたい。図面は必ずしも縮尺通りではなく、いくつかの特徴は特定の構成要素の詳細を示すために誇張されている場合がある。したがって、本明細書に開示された特定の構造的および機能的詳細は、限定として解釈されるべきではなく、単に特許請求の範囲の基礎として、および本発明を様々に使用することを当業者に教示するための代表的な基礎として解釈されるべきである。
必要に応じて、本発明の詳細な実施形態を本明細書に開示するが、開示された実施形態は、様々な形態で具体化され得る本発明の単なる例示であることを理解されたい。図面は必ずしも縮尺通りではなく、いくつかの特徴は特定の構成要素の詳細を示すために誇張されている場合がある。したがって、本明細書に開示された特定の構造的および機能的詳細は、限定として解釈されるべきではなく、単に特許請求の範囲の基礎として、および本発明を様々に使用することを当業者に教示するための代表的な基礎として解釈されるべきである。
【0029】
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書の用語に複数の定義がある場合、特に明記しない限り、本開示の定義が優先する。
【0030】
「例えば（ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ）」、「等（ｓｕｃｈ ａｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」等の句が本明細書で使用される場合はいつでも、特に明記しない限り、「限定するものではない」という句が続くと理解される。同様に、「一例」、「例示的」等は非限定的であると理解される。
【0031】
「実質的に」という用語は、意図された目的に悪影響を及ぼさない記述子からの逸脱を可能にする。記述的な用語は、「実質的に」という単語が明示的に列挙されていなくても、「実質的に」という用語によって修飾されると理解される。
【0032】
「約」という用語は、数値に関連して使用される場合、実際の所与の値、およびそのような所与の値に対する実験条件および／または測定条件による近似を含む、当業者によって合理的に推測されるそのような所与の値への近似を指す。
【0033】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」（同様に、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「有する（ｈａｓ）」、および「含む（ｉｎｖｏｌｖｅｓ）」）等の用語は、交換可能に使用され、同じ意味を有する。具体的には、各用語は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という共通の米国特許法の定義と一致して定義され、したがって、「少なくとも以下」を意味するオープンタームであると解釈され、追加の特徴、制限、態様等を排除しないと解釈される。したがって、例えば、「構成要素ａ、ｂ、およびｃを有する装置」は、装置が少なくとも構成要素ａ、ｂおよびｃを含むことを意味する。同様に、「工程ａ、ｂ、およびｃを含む方法」という語句は、方法が少なくとも工程ａ、ｂ、およびｃを含むことを意味する。
【0034】
バイオマーカーは、人体で発現される特定の化学的部分である。抗体は、特定のバイオマーカーに結合するように適合された免疫学的タンパク質である。抗体は、モノマー形態またはポリマー形態で存在することができる。「フルオロフォア」は、検出および定量の目的で、励起波長の光を吸収し、発光波長の蛍光を発する化学種を示す。当技術分野で知られているように、フルオロフォアは、特徴的な吸収スペクトルおよび発光スペクトルを示す。抗体－フルオロフォアコンジュゲートは、抗体と、抗体がバイオマーカーに結合し、連結されたフルオロフォアの蛍光強度によって検出または定量され得るように、互いに化学的に連結された少なくとも１つのフルオロフォアとを含む。
【0035】
キットは、本明細書に記載されるような２またはそれを超える組成物を含む。必要に応じて、キットは、試料調製試薬、収集管、対照試料、使用説明書、またはそのような項目の組み合わせ等の他の有用な項目を含む。
【0036】
本明細書で使用される特定の略語およびその定義には、以下のものが含まれる。
【0037】
Ａβアミロイドβペプチド
【0038】
ＡＤアルツハイマー病
【0039】
ＡＩＢＬ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｉｍａｇｉｎｇ、バイオマーカーおよび生活習慣研究
【0040】
ＡＰＣ アロフィコシアニン
【0041】
ＡＰＯＥ ヒトアポリポタンパク質Ｅ（遺伝子の記号はイタリック体であり、タンパク質の記号はイタリック体ではない）。
【0042】
ＡＰＰ アミロイド前駆体タンパク質
【0043】
ＡＴＮ アミロイド、タウ、神経変性
【0044】
ＡＵＣ 曲線下面積
【0045】
ＣＤＲ 臨床的認知症尺度
【0046】
ＣＮ 認知機能正常
【0047】
ＣＳＦ 脳脊髄液
【0048】
ＦＡＣＳ 蛍光活性化細胞選別
【0049】
ＦＣＩＰ フローサイトメトリー免疫表現型決定
【0050】
ＦＩＴＣ フルオレセインイソチオシアネート
【0051】
ＧＷＡＳ ゲノムワイド関連研究
【0052】
ＩＤＩ 統合識別改善度
【0053】
ｍＡｂ モノクローナル抗体
【0054】
ＭＡＣ 膜侵襲複合体
【0055】
ＭＣＩ 軽度認知障害
【0056】
ＭＦＩ 平均蛍光強度
【0057】
ＭＲＩ 磁気共鳴画像法
【0058】
ＭＭＳＥ ミニメンタルステート検査
【0059】
ＰＡＣＣ 前臨床期アルツハイマー病認知機能複合
【0060】
ＰＥ Ｒ－フィコエリトリン
【0061】
ＰｅｒＣＰ ペリジニン－クロロフィル－タンパク質複合体
【0062】
ＰＥＴ ポジトロン断層法
【0063】
ＲＡＧＥ 高度糖化最終産物に対する受容体
【0064】
ＲＯＣ 受信者動作特性
【0065】
文脈が明らかにそうでないことを要求しない限り、明細書および特許請求の範囲を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」等の単語は、排他的または網羅的な意味ではなく包括的な意味で解釈されるべきであり、すなわち、「～を含むが、限定されない」という意味である。
【0066】
本明細書を通しての先行技術のいかなる議論も、そのような先行技術が広く知られていること、または当分野における共通の一般知識の一部を形成することの承認と決して見なされるべきではない。
【0067】
本発明の目的は、従来技術の少なくとも１つの欠点を克服または改善すること、または有用な代替案を提供することである。
【0068】
Ｉ．個々のバイオマーカー
上記のように、本出願人らは、予期せぬことに、そのような方法および組成物に適したいくつかのバイオマーカー、例えば、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫを同定した。これらのバイオマーカーは、ＣＮ患者と比較して、ＡＤ患者およびＭＣＩ患者において変化していることを見い出した。具体的には、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫはＡＤにおいてダウンレギュレーションされ、ＣＤ９１はＡＤと強い相関を伴ってアップレギュレーションされる。以下の表１を参照されたい。それらは、ＡＤおよび他の用途を診断するために、個別にまたは互いにおよび／または他のバイオマーカーと組み合わせて使用することができる。表１は、実施例に記載のプロトコルに従って得られた結果を含む。
上記のように、本出願人らは、予期せぬことに、そのような方法および組成物に適したいくつかのバイオマーカー、例えば、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫを同定した。これらのバイオマーカーは、ＣＮ患者と比較して、ＡＤ患者およびＭＣＩ患者において変化していることを見い出した。具体的には、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫはＡＤにおいてダウンレギュレーションされ、ＣＤ９１はＡＤと強い相関を伴ってアップレギュレーションされる。以下の表１を参照されたい。それらは、ＡＤおよび他の用途を診断するために、個別にまたは互いにおよび／または他のバイオマーカーと組み合わせて使用することができる。表１は、実施例に記載のプロトコルに従って得られた結果を含む。
【表1-1】
【表1-2】
【0069】
本発明の実施形態は、例えば、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせからのバイオマーカーに対する結合剤を使用する。結合剤は、所望のバイオマーカーに対して十分な選択性および親和性を示すべきである。本発明の実施形態では、任意の適切な抗体を使用することができる。例えば、抗体はモノクローナルであり得、例えばハイブリドーマを介して、マウス、ウマ、ウサギまたはブタに由来し得る。いくつかの場合、抗体は、バイオマーカーに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である。例えばヘパリン等の抗体阻害剤の存在を避けるように注意すべきである。
【0070】
更なる実施形態は、検出可能な部分、例えば、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせを使用する。検出可能な部分は、検出技術を混乱させるそれらのシグナル伝達の重複を回避するように選択されるべきである。例えば、同じ放射性同位体は、同じキット内の異なる結合剤にコンジュゲートされるべきではない。同様に、重複する発光スペクトルを避けるためにフルオロフォアを選択すべきである。本発明の実施形態では、任意の適切なフルオロフォアを使用することができる。適切なフルオロフォアとしては、限定されないが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７等のＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）の商標で販売されているもの；アロフィコシアニン；フルオレセインイソチオシアネート、フルオレセインアミダイト、６－カルボキシフルオレセイン等のフルオレセイン化合物；Ｒ－フィコエリトリン；エリスロシン；ＰｅｒＣＰとして知られているもの等のペリジニン－クロロフィル－タンパク質複合体；カルボキシテトラメチルローダミン、テトラメチルローダミン、スルホローダミン等のローダミン系色素；クマリン；ランタニド蛍光体；量子ドット；および当技術分野で公知の他のフルオロフォアが挙げられる。密接に重なり合う発光スペクトルを有する２つのフルオロフォアの使用を避けるように注意すべきである。例えば、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７は、アロフィコシアニンと共に使用されるべきではない。Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８は、フルオレセインイソチオシアネートと共に使用されるべきではない。また、場合によっては、非特異的結合を排除するために、当技術分野で知られているようなブロッキング／漂白試薬を使用してもよい。
【0071】
フルオロフォアの更なる例としては、限定されないが、Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ（ニュージャージー州フランクリンレイクス）によって販売されている色素のＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ（商標）およびＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ（商標）Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔファミリー、例えば、ＢＵＶ３９５；ＢＵＶ５６３；ＢＵＶ６１５；ＢＵＶ６６１；ＢＵＶ７３７；ＢＵＶ８０５；ＢＶ４２１；ＢＶ４８０；ＢＶ５１０；ＢＶ６０５；ＢＶ６５０；ＢＶ７１１；ＢＶ７５０；およびＢＶ７８６として知られているフルオロフォアが挙げられる。更なるフルオロフォアとしては、ＢＦ Ｈｏｒｉｚｏｎ（商標）タンデムコンジュゲートＰＥ－ＣＦ５９４；Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ（ニュージャージー州フランクリンレイクス）によって提供されるＰｅｒＣＰ－Ｃｙ（商標）５．５として知られるシアニン色素を有するタンデムコンジュゲートＰｅｒＣＰ；Ｒ－フィコエリトリン（ＰＥ）；およびＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ（商標）Ｒｅｄ ７１８；またはこれらの２もしくはそれを超える組み合わせが挙げられる。追加の例としては、現在Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．（マサチューセッツ州ウォルサム）の一部であるＰｈｉｔｏｎｅｘ，Ｉｎｃ．によって提供されるＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）ブランドの蛍光標識、例えば、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ５１０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ５３０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ５５５、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ６１０－３０ Ｓ、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ６１０－７０ Ｓ、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ６６０－１２０ Ｓ、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｂｌｕｅ ６６０－４０ Ｓ、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ５７０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ６１０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ６６０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ６９０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ７００、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｙｅｌｌｏｗ ７２０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｒｅｄ ６６０、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｒｅｄ ６８５、ＮｏｖａＦｌｕｏｒ（商標）Ｒｅｄ ７００、またはそれらの組み合わせとして知られているフルオロフォア等が挙げられる。
【0072】
更に他のフルオロフォアは、ＧＦＰ、ＹＦＰ、ＲＦＰ、ｅＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｔｄｔｏｍａｔｏ、ＦＩＴＣ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ３５０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４０５、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５３２、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５４６、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５５５、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５６８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５９４、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６８０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ７５０、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ、クマリン、ＢＯＤＩＰＹ ＦＬ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｇｒｅｅｎ、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｏｒａｎｇｅ、ＴＲＩＴＣ、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、およびそれらの組み合わせ等の蛍光タンパク質から選択され得る。
【0073】
抗体－フルオロフォアコンジュゲートの具体例としては、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素とコンジュゲートしたマウス抗ヒトＣＤ１６３抗原；フルオレセインイソチオシアネートとコンジュゲートしたマウス抗ヒトＣＤ９１抗原；ＢＤ Ｈｏｒｉｚｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ（商標）Ｂｌｕｅ ７００（Ｂｅｃｋｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ、ニュージャージー州フランクリンレイクス）の商標で販売されている蛍光色素とコンジュゲートしたマウス抗ヒトＭｅｒＴＫ抗原が挙げられる。
【0074】
結合剤を検出可能な部分、例えばフルオロフォアに対する抗体にコンジュゲートさせることは、任意の適切な方法によって達成することができる。例えば、既知の化学は十分に開発され、市販されている。フルオロフォアコンジュゲート化抗体は、例えば、Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能である。１８Ｆ等の放射性同位体および２Ｈ等の安定同位体は、結合剤に、または結合剤に安定に結合する分子に組み込むことができる。例えば、１８Ｆを含むフルオロデオキシグルコースまたは重水素化分子を用いることができる。抗体等の結合剤にコンジュゲートした量子ドットも言及され得る。
【0075】
本発明において有用な組成物は限定されない。特定の例は、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、少なくとも１つの抗凝固剤とを含む組成物を提供する。例えば、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせ等、任意の適切な抗凝固剤を本発明の様々な実施形態で使用することができる。任意の適切な塩が使用されてもよく、例えば、一ナトリウム塩、二ナトリウム塩、三ナトリウム塩、または四ナトリウム塩等のアルカリ金属塩等が言及され得る。他の例は、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせと、ヒト患者の全血と、を含む、組成物に関する。これらの組成物のいずれも、例えばウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウム等の追加の有用な成分を含むことができる。
【0076】
様々な方法が本発明の実施形態に記載される。いくつかの方法は、ヒト患者におけるＡＤの診断に関する。これらの方法いくつかは、ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、冷凍を含むことができる、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３、ＣＤ９１、またはＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と反応させて、結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
濃度を、健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲と比較することと、
血液試料中のバイオマーカーの濃度の変化を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
必要に応じて、冷凍を含むことができる、血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、血液試料を得てから３時間以内に血液試料を試験することと、
血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３、ＣＤ９１、またはＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対するモノクローナル抗体と反応させて、結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することと、
濃度を、健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲と比較することと、
血液試料中のバイオマーカーの濃度の変化を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、を含む。
【0077】
場合によっては、血液試料は、ヒト患者から得られ、必要に応じて氷上または冷蔵で保存される。本明細書で使用される場合、「氷上で保存する」は、保存方法が試料に害を及ぼさない限り、食品を含まない冷蔵庫から氷浴までドライアイスまでの任意の種類の冷蔵を含む。試料は、引き抜かれてから３時間以内等、任意の適切な時間内に試験することができる。試料は、血液試料と、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対する抗体とを反応させて結合バイオマーカーを得、フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合バイオマーカーの濃度を測定することによって試験される。蛍光は、フローサイトメトリー分析等の任意の適切な技術によって測定することができる。
【0078】
特定の例は、問題の患者におけるバイオマーカーの濃度と健康なヒトにおけるバイオマーカーの濃度範囲との比較を可能にする。この比較は、任意の適切な方法で達成することができる。健常者のデータは、文献に見出すことができ、またはそうでなければＡＤもしくはＭＣＩを有しないと判定された多数の健康な人を試験することによって開発することができる。これらの健常者は、例えば、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有する等、健康の任意の適切な指標を示すことができる。濃度は、任意の適切なレベルで比較することができる。場合によっては、全血中の濃度を比較する。他の場合では、濃度を白血球で比較する。更に他の場合では、例えば、白血球が単球、Ｃ１４＋単球、ＣＤ１４＋ＣＤ１６－単球、好中球、ＣＤ１４－好中球、ＣＤ１４－ＣＤ１６＋好中球、リンパ球、Ｂリンパ球、Ｔリンパ球、ナチュラルキラー細胞、およびそれらの組み合わせから選択される等、白血球のサブセットで濃度を比較する。白血球のサブセットは、任意の適切な方法に従って同定することができる。細胞選別を行うことができ、または細胞を、例えばフローサイトメトリーにおいて公知の方法に従ってゲーティングすることができる。
【0079】
検出可能な部分の濃度は、任意の適切な方法によって測定することができる。シンチレーションカウンティング、質量分析および蛍光が言及され得る。結合バイオマーカーの濃度を測定することは、例えば、フルオロフォアにコンジュゲートした結合バイオマーカーの平均蛍光強度を測定することを含む。ＣＤ１６３の場合、血液試料中のＣＤ１６３の濃度の減少を観察することは、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約１１％、少なくとも約１２％、少なくとも約１３％、少なくとも約１４％、少なくとも約１５％、少なくとも約１６％、少なくとも約１７％、少なくとも約１８％、または少なくとも約１９％の平均蛍光強度の減少を測定することを意味し得る。
【0080】
血液試料中のＣＤ９１の濃度の増加を観察することは、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト患者のプールについての結合ＣＤ９１の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約４４％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、または少なくとも約５９％の平均蛍光強度の増加を測定することを意味し得る。
【0081】
血液試料中のＭｅｒＴＫの濃度の減少を観察することは、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト患者のプールについての結合ＭｅｒＴＫの平均蛍光強度と比較して少なくとも約１２％の平均蛍光強度の減少を測定することを含む。
【0082】
他の方法は、ＡＤ治療候補物がＡＤの発症を処置、予防、または遅延させる薬物として有効であるかどうかを調べるためのＡＤ治療候補物の試験に関する。これらの方法のいくつかは、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することとであって、
試験が、第１の血液試料と、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３、ＣＤ９１、またはＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第１のアリコートを反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることによって行われる、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第２のアリコートと反応させて、第２の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫの場合、それらのバイオマーカーはＡＤにおいてダウンレギュレーションされるので、有効なＡＤ治療候補は、ヒト患者におけるそれらのバイオマーカーの濃度をアップレギュレーションまたは増加させるであろう。ＣＤ９１の場合、このバイオマーカーはＡＤにおいてアップレギュレーションされるので、有効なＡＤ治療候補は、ヒト患者におけるそのバイオマーカーの濃度をダウンレギュレーションまたは低下させるであろう。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することとであって、
試験が、第１の血液試料と、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３、ＣＤ９１、またはＭｅｒＴＫ等のバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第１のアリコートを反応させて、第１の結合バイオマーカーを得ることによって行われる、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合バイオマーカーの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたバイオマーカーに対するモノクローナル抗体の第２のアリコートと反応させて、第２の結合バイオマーカーを得ることと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合バイオマーカーの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）第１の結合バイオマーカーの第１の濃度から第２の結合バイオマーカーの第２の濃度への変化を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫの場合、それらのバイオマーカーはＡＤにおいてダウンレギュレーションされるので、有効なＡＤ治療候補は、ヒト患者におけるそれらのバイオマーカーの濃度をアップレギュレーションまたは増加させるであろう。ＣＤ９１の場合、このバイオマーカーはＡＤにおいてアップレギュレーションされるので、有効なＡＤ治療候補は、ヒト患者におけるそのバイオマーカーの濃度をダウンレギュレーションまたは低下させるであろう。
【0083】
任意の適切なＡＤ治療候補を使用することができる。いくつかの場合、ＡＤ治療候補は、食作用促進剤、スカベンジャー受容体アゴニスト、またはその両方である。したがって、候補薬物は食作用を促進するように作用することができる。それはスカベンジャー受容体上のアゴニストとして作用することができるか、または両方の活動が記載される場合がある。もちろん、他の作用機序もこのプロトコルによって試験することができる。適切なＡＤ治療候補は、例えば、方法が特定の患者に対する候補の有効性を調査していることから、治験薬から市販後監視を必要とする承認された治療薬まで、任意の規制上の承認状態を有することができる。ＡＤ治療候補は、任意の適切な経路によって、任意の適切な量で投与することができる。いくつかの場合において、その量は、治療有効量、または疑われる治療有効量である。例えば、ＡＤ治療候補は、１日当たり患者の体重１ｋｇ当たり１ｇ未満の量で患者に投与することができる。別の例では、ＡＤ治療候補は、１日当たり患者の体重１ｋｇ当たり約１ｎｇ超の量で患者に投与することができる。他の場合では、ＡＤ治療候補は、１日当たり約０．１μｇ／ｋｇ以下、約１μｇ／ｋｇ以下、約１０μｇ／ｋｇ以下、または約１００μｇ／ｋｇ以下の量で患者に投与することができる。例えば、１日、５日間、１０日間、３０日間、６０日間、９０日間、１８０日間、３６５日間、または３６５日間もしくはそれを超える等、任意の適切な期間を使用することができる。例えば、経口投与、静脈内または筋肉内経路を介した注射、経皮パッチ、インプラント等を使用することができる。
【0084】
ＩＩ．バイオマーカーの組み合わせ
本出願人らは、バイオマーカーの組み合わせが、ＡＤの診断および予後診断ならびに薬物有効性評価において予測値を保持することを見出した。これらのバイオマーカーは、例えば、食細胞調節分子等の単一の機構の指標を表すことができる。または、それらのバイオマーカーは、例えば、ＣＤ１４（単球）、ＣＤ１６（単球、ＮＫ細胞、好中球）、ＣＤ１５（好中球）、ＣＤ１９（Ｂリンパ球）およびＣＤ３（Ｔリンパ球）を含む１またはそれを超える白血球ＣＤマーカーと組み合わせた１またはそれを超える食作用調節分子等、患者の健康の２つを超える機構または態様を示すことができる。
本出願人らは、バイオマーカーの組み合わせが、ＡＤの診断および予後診断ならびに薬物有効性評価において予測値を保持することを見出した。これらのバイオマーカーは、例えば、食細胞調節分子等の単一の機構の指標を表すことができる。または、それらのバイオマーカーは、例えば、ＣＤ１４（単球）、ＣＤ１６（単球、ＮＫ細胞、好中球）、ＣＤ１５（好中球）、ＣＤ１９（Ｂリンパ球）およびＣＤ３（Ｔリンパ球）を含む１またはそれを超える白血球ＣＤマーカーと組み合わせた１またはそれを超える食作用調節分子等、患者の健康の２つを超える機構または態様を示すことができる。
【0085】
本発明のいくつかの実施形態は、ＡＤを診断または予後診断するための１またはそれを超えるスカベンジャー受容体の発現をプローブする。上記の表１は、スカベンジャー受容体を含む特定のバイオマーカーの予想される活性を記載している。スカベンジャー受容体および他のバイオマーカーの特定のパネルとしては、例えば、
ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ１６３；
ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１８；
ＣＤ９１、ＣＤ５９およびＣＤ１６３；
１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥと、１またはそれを超えるＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫ；
１またはそれを超えるＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫ ＣＤ５９、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１８と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫと、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫと、１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９、ならびに１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３と、を含む。
ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ１６３；
ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１８；
ＣＤ９１、ＣＤ５９およびＣＤ１６３；
１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥと、１またはそれを超えるＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫ；
１またはそれを超えるＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫ ＣＤ５９、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１８と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９と、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫと、１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３；
１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫと、１またはそれを超えるＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８およびＣＤ５９、ならびに１またはそれを超えるＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９およびＣＤ３と、を含む。
【0086】
これらのパネルは、フルオロフォア等の適切な検出可能な部分とコンジュゲートした特定のバイオマーカーに対するモノクローナル抗体等の結合剤の存在によって表される。抗体－フルオロフォアコンジュゲートの任意の組み合わせにおいて、フルオロフォアは、それらの発光スペクトルに有意なまたは分解不可能な重複がないように、または重複するスペクトルの相対強度を容易に決定することができないように選択されるべきであることが理解され得る。場合によっては、定性的情報を得ることができるように、励起パラメータにも注意を払うべきである。全てのフルオロフォアは、使用される励起強度下で十分に照射されるべきであり、その結果、定量的データが記載される。本発明のいくつかの実施形態は、バイオマーカーの相対濃度、または健常者のものに対する患者の試料中の１またはそれを超えるバイオマーカーの濃度に依存する。
【0087】
特定の例は、組成物およびキットに関する。例えば、１つの例は、第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物またはキットに関する。別の例は、第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体とを含む組成物またはキットに関する。更なる例は、第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体とを含む組成物またはキットに関する。適切なフルオロフォアとしては、上記のものが挙げられる。場合によっては、第１のフルオロフォアは、アロフィコシアニンまたはフルオレセインイソチオシアネートであり、第２のフルオロフォアは、Ｒ－フィコエリトリンであり、第３のフルオロフォアは、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である。
【0088】
必要に応じて、組成物またはキットは、少なくとも１つの抗凝固剤を含む。上記のように、任意の適切な抗凝固剤を使用することができる。例えば、ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウム等の任意の適切な追加の成分も現れ得る。
【0089】
本発明による組成物は、ヒト患者由来の全血を含み得る。そのような組成物は、患者からの試料が本発明に従って試験されている場合に記載される。
【0090】
様々な方法が本発明のいくつかの実施形態に記載される。いくつかの方法は、患者における特定のバイオマーカーの相対的発現を測定することに関する。ＭＣＩ患者およびＡＤ患者では、ＣＮ患者と比較して、特定のバイオマーカーは増加するが、他のバイオマーカーは減少することを見い出した。例えば、そのような１つの方法は、ヒト患者におけるＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定することに関し、この方法は、
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて、結合ＣＤ１１ｃ、結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
第１のフルオロフォア、第２のフルオロフォア、および第３のフルオロフォアの蛍光を測定することによって、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９、およびＣＤ１６３の相対的発現を決定することとを含む。上記で説明したように、任意の適切な抗体およびフルオロフォアを使用することができる。表１を参照すると、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１６３がダウンレギュレーションされているように見え、ＣＤ５９がアップレギュレーションされているように見える場合、患者をＭＣＩまたはＡＤについて評価することができ、更なる処置または予防措置をとることができる。
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて、結合ＣＤ１１ｃ、結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
第１のフルオロフォア、第２のフルオロフォア、および第３のフルオロフォアの蛍光を測定することによって、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９、およびＣＤ１６３の相対的発現を決定することとを含む。上記で説明したように、任意の適切な抗体およびフルオロフォアを使用することができる。表１を参照すると、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１６３がダウンレギュレーションされているように見え、ＣＤ５９がアップレギュレーションされているように見える場合、患者をＭＣＩまたはＡＤについて評価することができ、更なる処置または予防措置をとることができる。
【0091】
別のそのような１つの方法は、ヒト患者におけるＣＤ９１、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定することに関し、この方法は、
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて、結合ＣＤ９１、結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
第１のフルオロフォア、第２のフルオロフォア、および第３のフルオロフォアの蛍光を測定することによって、ＣＤ９１、ＣＤ５９、およびＣＤ１６３の相対的発現を決定することとを含む。上記で説明したように、任意の適切な抗体およびフルオロフォアを使用することができる。表１を参照すると、ＣＤ９１およびＣＤ５９がアップレギュレーションされているように見え、ＣＤ１６３がダウンレギュレーションされているように見える場合、患者をＭＣＩまたはＡＤについて評価することができ、更なる処置または予防措置をとることができる。
ヒト患者から全血の試料を得ることと、
試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて、結合ＣＤ９１、結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
第１のフルオロフォア、第２のフルオロフォア、および第３のフルオロフォアの蛍光を測定することによって、ＣＤ９１、ＣＤ５９、およびＣＤ１６３の相対的発現を決定することとを含む。上記で説明したように、任意の適切な抗体およびフルオロフォアを使用することができる。表１を参照すると、ＣＤ９１およびＣＤ５９がアップレギュレーションされているように見え、ＣＤ１６３がダウンレギュレーションされているように見える場合、患者をＭＣＩまたはＡＤについて評価することができ、更なる処置または予防措置をとることができる。
【0092】
ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、患者がＣＮ診断、ＭＣＩ診断、またはＡＤ診断に該当するかどうかを評価することを含み得る方法は、バイオマーカーの組み合わせを使用することもできる。そのような１つの方法は、
患者からの血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、患者からの血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることと、それにより、結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおける対応するスカベンジャー受容体の濃度範囲に対する少なくとも１つの結合スカベンジャー受容体の濃度の減少を観察することと、それによって、ヒト患者のＡＤを診断することと、を含む。いくつかの場合、スカベンジャー受容体は、ＣＤ１６３、ＭｅｒＴＫ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、およびそれらの組み合わせから選択される。
患者からの血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、患者からの血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることと、それにより、結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって血液試料中の結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおける対応するスカベンジャー受容体の濃度範囲に対する少なくとも１つの結合スカベンジャー受容体の濃度の減少を観察することと、それによって、ヒト患者のＡＤを診断することと、を含む。いくつかの場合、スカベンジャー受容体は、ＣＤ１６３、ＭｅｒＴＫ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、およびそれらの組み合わせから選択される。
【0093】
結合バイオマーカーの濃度の測定は、任意の適切な方法で進めることができる。全血、白血球、または白血球のサブセットを検査することができる。例えば、１つのバイオマーカーは白血球の１つのサブセットで検査することができ、別のバイオマーカーは白血球の異なるサブセットで検査することができる。場合によっては、例えば、結合バイオマーカーの濃度を測定することは、結合バイオマーカーの平均蛍光強度を測定することを含む。同様に、結合バイオマーカーの濃度の変化（増加または減少）を観察することは、ヒト患者の結合バイオマーカーについての平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合バイオマーカーの平均蛍光強度と比較することを含み得る。例えば、結合ＣＤ１１ｃの濃度の減少を観察することは、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ１１ｃの平均蛍光強度と比較して、少なくとも約１５％、少なくとも約１９％、少なくとも約２２％、少なくとも約２５％、少なくとも約２８％、少なくとも約３０％、または少なくとも約３４％の平均蛍光強度の減少を測定することを含み得る。別の例では、結合ＣＤ５９の濃度の増加を観察することは、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ５９の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約２７％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、または少なくとも約７８％の平均蛍光強度の増加を測定することを含む。
【0094】
特定の場合には、バイオマーカーの濃度を測定することは、特定の細胞と相関する。例えば、バイオマーカーの濃度は、特定の細胞で測定した場合に、健常者との有意差を示し得る。細胞集団サブセットは、任意の適切な方法で同定することができ、他のバイオマーカーと相関させることができる。例えば、白血球は全血から単離することができ、ＣＤ１６３の濃度は白血球のみで測定することができる。または、白血球またはそのサブセットは、フローサイトメトリーにおいて有用な公知の方法に従ってゲーティングすることができる。例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂリンパ球、Ｔリンパ球、古典的単球、中間単球、非古典的単球および成熟好中球をゲーティングし、ＣＤ１６３、ＣＤ９１およびＭｅｒＴＫ等の１またはそれを超えるバイオマーカーの発現についてプローブすることができる。そのようなゲーティング戦略は、典型的には、例えば、単球（ＣＤ１４＋）、好中球（ＣＤ１５＋またはＣＤ１６＋）、Ｂリンパ球（ＣＤ１９＋）、Ｔリンパ球（ＣＤ３＋）、ナチュラルキラー細胞（ＣＤ１６＋）、およびそれらの組み合わせを含む細胞特異的ＣＤマーカーの表面発現と共に、リンパ球、単球および好中球の前方散乱および側方散乱を含む。本明細書で使用される場合、古典的単球はＣＤ１４＋ＣＤ１６－として説明することができ、非古典的単球はＣＤ１４ｄｉｍＣＤ１６＋であり、中間単球はＣＤ１４＋ＣＤ１６＋である。
【0095】
特定の更なる実施形態は、バイオマーカーの組み合わせを使用して、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することに関する。そのような１つの方法は、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
第１の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、第１の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、それにより、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合スカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
第２の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、それにより、第２の結合スカベンジャー受容体を形成ことと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。例えば、食作用促進剤、スカベンジャー受容体アゴニスト、または両方の機構を示す候補等、任意の適切なＡＤ治療候補を試験することができる。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
第１の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、第１の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、それにより、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合スカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
第２の血液試料を複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、それにより、第２の結合スカベンジャー受容体を形成ことと、
フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。例えば、食作用促進剤、スカベンジャー受容体アゴニスト、または両方の機構を示す候補等、任意の適切なＡＤ治療候補を試験することができる。
【0096】
ＩＩＩ．２つのパネル
本出願人らは、本発明のいくつかの組成物、キット、および方法のうちの特定のものにおいて有用なバイオマーカーの２つの組み合わせを見出した。１つの組み合わせは、バイオマーカーＣＤ１６３、ＣＤ５９、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１４に関する。第２の組み合わせは、バイオマーカーＣＤ１６３、ＣＤ５９、ＣＤ９１およびＣＤ１４に関する。それらの組み合わせは、フルオロフォア等の特有の検出可能な部分とコンジュゲートした、モノクローナル抗体等のバイオマーカーに対する結合剤によって表すことができる。したがって、一実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。別の実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。これらのモノクローナル抗体は、任意の適切な抗体、例えばマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含むことができる。上記のように、例えばハイブリドーマを介して、マウス、ウマ、ウサギまたはブタに由来するモノクローナル抗体を使用することができる。少なくとも１つの抗凝固剤もまた、これらの組成物に記載されることができ、例えば、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせ等である。適切な追加の成分、例えば、ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウム、または別の例では、リン酸緩衝生理食塩水、ゼラチンおよびアジ化ナトリウムが存在し得る。
本出願人らは、本発明のいくつかの組成物、キット、および方法のうちの特定のものにおいて有用なバイオマーカーの２つの組み合わせを見出した。１つの組み合わせは、バイオマーカーＣＤ１６３、ＣＤ５９、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１４に関する。第２の組み合わせは、バイオマーカーＣＤ１６３、ＣＤ５９、ＣＤ９１およびＣＤ１４に関する。それらの組み合わせは、フルオロフォア等の特有の検出可能な部分とコンジュゲートした、モノクローナル抗体等のバイオマーカーに対する結合剤によって表すことができる。したがって、一実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。別の実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含む組成物に関する。これらのモノクローナル抗体は、任意の適切な抗体、例えばマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含むことができる。上記のように、例えばハイブリドーマを介して、マウス、ウマ、ウサギまたはブタに由来するモノクローナル抗体を使用することができる。少なくとも１つの抗凝固剤もまた、これらの組成物に記載されることができ、例えば、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせ等である。適切な追加の成分、例えば、ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウム、または別の例では、リン酸緩衝生理食塩水、ゼラチンおよびアジ化ナトリウムが存在し得る。
【0097】
検出可能な部分としては、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせが挙げられる。密接に重なり合う発光スペクトルを有する２つのフルオロフォアの使用を避けるように注意しながら、任意の適切なフルオロフォアをそれらの結合剤とコンジュゲートさせることができる。場合によっては、第１のフルオロフォアは、フルオレセインイソチオシアネート、アロフィコシアニン、またはそれらの組み合わせである。更なる場合には、第２のフルオロフォアは、ペリジニン－クロロフィル－タンパク質複合体である。更に別の場合では、第３のフルオロフォアは、Ｒ－フィコエリトリンである。追加の事例では、第４のフルオロフォアは、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である。更に別の場合には、組成物は、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない。組成物は、例えば、患者がＡＤについて評価されているときに、ヒト患者からの全血を含み得る。
【0098】
これらの組み合わせを使用するキットも本発明に記載される。したがって、別の実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットを提供する。更なる実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットを提供する。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１１ｃに対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットを提供する。更なる実施形態は、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１４に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第４のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、を含むキットを提供する。
【0099】
それらのキットは、抗体等の結合剤、フルオロフォア等の検出可能な部分、抗凝固剤、および上記の追加の成分を含むことができる。いくつかの例では、組成物およびキットは、特定の抗体、例えば、それらおよび他のバイオマーカーに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体の使用を含み得る。組成物は、必要に応じて抗凝固剤、および場合によりヒト全血を含む。適切な抗凝固剤としては、限定されないが、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせが挙げられる。組成物およびキットは、任意の適切な更なる成分、例えば、ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウム、ならびに別の例としてリン酸緩衝生理食塩水、ゼラチンおよびアジ化ナトリウムを更に含み得る。
【0100】
適切なフルオロフォアとしては、上記のものが挙げられる。場合によっては、第１のフルオロフォアは、フルオレセインイソチオシアネート、アロフィコシアニン、またはそれらの組み合わせである。更なる場合には、第２のフルオロフォアは、ペリジニン－クロロフィル－タンパク質複合体である。追加の場合では、Ｒ－フィコエリトリンが第３のフルオロフォアとして提供される。更に他の場合は、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である第四のフルオロフォアに関する。
【0101】
これらの組み合わせのバイオマーカーを使用する方法も記載される。本明細書に記載の相対的発現を決定し、ヒト患者のＡＤを診断し、ＡＤ治療候補の有効性を決定する方法を使用することができる。
【0102】
図面の詳細な説明
本発明の更なる実施形態は、添付の図面を参照することによって理解することができる。
本発明の更なる実施形態は、添付の図面を参照することによって理解することができる。
【0103】
図１は、提案された機構を示す。理論に束縛されることを望むものではないが、提案された機構は、本発明の特定の実施形態の有用性を説明し得る。更なる説明は、以下の考察に記載される。
【実施例】
【0104】
ＡＤの指標としてのバイオマーカーの試験
本出願人らは、フローサイトメトリー技術を使用して、合計４１８人のヒト患者におけるＡＤの潜在的なバイオマーカーとしての脳アミロイド－β（Ａβ）蓄積との関連について、一連の一般的な細胞表面白血球バイオマーカーを検査した。これらの患者には、２４１人の認知機能正常（ＣＮ）、１０６人の軽度認知障害（ＭＣＩ）および７１人の臨床的ＡＤ認知症患者が含まれた。
本出願人らは、フローサイトメトリー技術を使用して、合計４１８人のヒト患者におけるＡＤの潜在的なバイオマーカーとしての脳アミロイド－β（Ａβ）蓄積との関連について、一連の一般的な細胞表面白血球バイオマーカーを検査した。これらの患者には、２４１人の認知機能正常（ＣＮ）、１０６人の軽度認知障害（ＭＣＩ）および７１人の臨床的ＡＤ認知症患者が含まれた。
【0105】
２．方法：
【0106】
２．１．対象および倫理的承認
【0107】
第Ｉ相、第ＩＩ相および第ＩＩＩ相の参加者は、オーストラリアのイメージング、バイオマーカーおよびライフスタイル研究（ＡＩＢＬ）から募集した。この研究は、神経イメージング、バイオマーカー、生活様式、臨床および神経心理学的分析からのデータを統合する。ＡＩＢＬ研究によって収集された参加者の９９％は、英語が流暢な遺伝的北欧系白人である。ＡＩＢＬ参加者の分類は、Ａβ蓄積の臨床的および神経イメージング／ＣＳＦの両方の証拠に基づく。この試験は、オーストラリア国メルボルンのＳｔ Ｖｉｎｃｅｎｔ’ｓ ＨｏｓｐｉｔａｌのＲｅｓｅａｒｃｈ Ｇｏｖｅｒｎａｎｃｅ ＵｎｉｔのＨｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された（参照番号：ＨＲＥＣ－Ａ ０２８／０６）。全ての参加者および患者の介護者は、参加前に書面によるインフォームドコンセントを完了した。ＡＩＢＬ参加者の全ての臨床情報および人口統計情報を、全ての生物学的測定値の収集までマスクした。第ＩＶ相については、試料を、無症候性アルツハイマー病における抗アミロイド処置（Ａ４）研究に参加している対象からランダムに集めた。この相では、無症候性ＡＤ（Ａ４）臨床試験（例えば、Ａ４ Ｂｉｏｂａｎｋ Ａｄｄｅｎｄｕｍ、ＰＩ Ｒｉｓｓｍａｎ）における抗アミロイドのスクリーニングプロセスの一部として、米国の施設で認められた対象のコホートから盲目的かつ無作為に選択された１１２名の参加者から全血を得た［５２］。
【0108】
２．２．Ａβ－ＰＥＴ画像法およびセンチロイド（ＣＬ）スケール
【0109】
参加者は、以前に記載されたようにＡβ－ＰＥＴ画像法を受けた［１７、１８］。スクリーニングおよびＡβ－ＰＥＴ画像との共位置合わせのために、３Ｄ Ｔ１強調ＭＲＩを得た。血液評価に関与する研究者は、統計分析の報告まで全てのＡβ－ＰＥＴおよび臨床データを盲検化した。Ａβ－ＰＥＴ状態は、センチロイド（ＣＬ）に基づく：陰性＜２５ＣＬ（境界線＞１５ＣＬおよび＜２５ＣＬを含む）および陽性≧２５ＣＬ。閾値は、疾患進行のリスクとの関連に従って選択される。
【0110】
２．３．エピソード記憶および前臨床アルツハイマーの認知複合（ＰＡＣＣ）スコア
【0111】
エピソード記憶複合スコアおよびＰＡＣＣスコアを開発するために使用される方法は、他の場所［１９、２０］で公開されている。
【0112】
２．４．採血
【0113】
第Ｉ～ＩＩＩ相については、一晩絶食後の８：００ａｍ～１０：３０ａｍに末梢全血を静脈穿刺によって採取した。全血をＥＤＴＡ抗凝固剤Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）チューブ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）内に保ち、輸送中は氷上に保った。全血の処理は、採取後３時間以内に完了した。第ＩＶ相については、静脈穿刺による全血を一晩絶食した参加者から採取した。採取した血液を周囲温度のゲルパックで一晩輸送し、分析のために翌朝処理した。
【0114】
２．５．細胞フローサイトメトリー染色
【0115】
細胞表面染色手順を、ＢＤ標準プロトコルを使用して行った：１００μＬの新鮮血液のアリコートを、予め混合した抗体カクテルを含む蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ（登録商標））チューブに添加した。ＦＩＴＣ、ＰＥ、ＰｅｒＣＰおよびＡＰＣチャネルで励起されたフルオロフォアとコンジュゲートしたマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を使用して、白血球を染色した（以下の表Ａ．１）。全血のみを含む自家蛍光チューブおよびＩｇＧアイソタイプ対照（ＢＤ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）チューブを各ＡＩＢＬ試料について調製した。抗体の最適濃度を滴定試験によって決定した。細胞内染色のため、細胞を固定し、透過処理した後、ＢＤ標準プロトコルに従って抗体カクテルと混合した。ＦＡＣＳＣａｌｉｂｒｅ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してフローサイトメトリーによって免疫表現型検査を行った。全てのフローデータをデジタル形式で保存した。
【0116】
２．６．第Ｉ相、第ＩＩ相、第ＩＩＩ相および第ＩＶ相の定義
【0117】
第Ｉ相は、１６個の表面マーカーおよび２個の細胞内マーカーからなる三色サイトメトリーパネルであった。第ＩＩ相は、１８個の表面マーカーを含む四色サイトメトリーパネルであった。第Ｉ相、第ＩＩ相は、いくつかの主要な白血球ＣＤマーカーをカバーした。相ＩＩＩは１９個の表面マーカーを有し、四色サイトメトリーパネルでもあり、先天性免疫の経路がＡＤの病因において重要な役割を果たし得るという新たな証拠を反映するために濃縮された。合計で３４個の白血球マーカーを検査した。抗体－フルオロフォアコンジュゲートパネルを、使用した製品のカタログ番号と共に表Ａ．１に示す。
【0118】
【表A.1.1】
【0119】
【表A.1.2】
【0120】
【表A.1.3】
【0121】
【表A.1.4】
【0122】
ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（Ｖ１０、ＦｌｏｗＪｏ，ＬＬＣ）を使用してフローデータを分析した。出願人らは、前方散乱、側方散乱を使用して、リンパ球、単球および好中球をゲーティングした。次いで、特定のマーカーの蛍光強度に基づいて亜集団をゲーティングした。第ＩＩＩ相では、出願人らは、抗ＣＤ１４および抗ＣＤ１６ ｍＡｂの蛍光強度を使用して、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂリンパ球およびＴリンパ球、古典的単球、中間単球、非古典的単球、成熟好中球、ならびに未成熟好中球をゲーティングした。亜集団の細胞数および頻度を計算した。異なる細胞群上の異なるマーカーの平均蛍光強度（ＭＦＩ）も測定した。
【0123】
２．７．統計分析
【0124】
統計分析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ｆｏｒ Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）（米国カリフォルニア州サンディエゴ、バージョン８．４．２）およびＩＢＭ ＳＰＳＳ（登録商標）Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（バージョン２５．０、ニューヨーク州アーモンク：ＩＢＭ Ｃｏｒｐ）で行った。ｍＡｂの蛍光強度を、一元配置ＡＮＯＶＡを使用してＣＮ、ＭＣＩおよびＡＤ群の間で比較した。ｍＡｂの蛍光強度とＰＥＴ Ａβセンチロイド、エピソード記憶およびＰＡＣＣスコアとの間の関係の強さを調べるために、ピアソン積率相関分析を行った。予測分析のために、受信者動作特性（ＲＯＣ）分析を使用して、感度、特異度および精度の値を定義した。閾値は、ヨーデン指標を介して選択した。ロジスティック回帰後の転帰を予測するために、個々のバイオマーカー、共変量について調整された個々のバイオマーカーおよびバイオマーカーの組み合わせセットについてモデルを計算した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ｆｏｒ Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）（米国カリフォルニア州サンディエゴ、バージョン８．４．２）で図を作成し、Ｒ（バージョン４．０）を用いて統計分析を行った。
【0125】
２．８ バイオマーカー評価
【0126】
ここで、出願人らは、新しいバイオマーカーを追加することが疾患リスクをより良好に予測できるかどうかを発見しようとしている。本出願人らは、ｒｍｓ Ｒパッケージを用いて作成し、ｒａｐ Ｒパッケージを用いて評価したロジスティック回帰モデルにおいてバイオマーカーの性能を評価した。Ｒバージョン４．０．２を使用した。受信者動作特性曲線下面積（ＡＵＣ）の変化、統合識別改善度（ＩＤＩ）メトリック、およびＢｒｉｅｒスキルスコアを使用して、ベースラインモデルに対するバイオマーカーの加算値を評価した。ＡＵＣの変化は、ベースラインモデルおよび新しいモデルの確率のランキングの変化を反映する。ＩＤＩは、関心事象の有無にかかわらず別々に提示される。それらは、事象を有する者（ＩＤＩ事象）の正味の平均リスク増加を表し、事象を有さない者（ＩＤＩ非事象）の平均リスク減少を表す。Ｂｒｉｅｒ改善は、ベースラインモデルからのＢｒｉｅｒスコアの相対的改善である。Ｂｒｉｅｒスコアは、モデルの平均二乗誤差であり、Ｂｒｉｅｒの改善は、バイオマーカーの添加による精度の改善率を与える。
【0127】
モデル作成のプロセスは、簡潔には、対象の脳Ａβ－ＰＥＴ状態を予測するための人工ベースラインロジスティック回帰モデルを構築することであった。まず、変数を、神経心理学的診断を人口統計学（すなわち、年齢、性別、および教育年数）と一緒に縮小することによって変数の数を減少させる変数減少技術、主成分回帰によって選択した。第２に、出願人らは、各バイオマーカーをベースラインモデルに１つずつ追加して、新しいバイオマーカーがベースラインモデルの診断性能を改善したかどうかを評価した。これらが「新モデル」である。最後に、出願人らは、最適な性能を達成するために、最良の性能のバイオマーカーをバイオマーカーのパネルに組み合わせた。ここで、出願人らは、第ＩＩＩ相モデル１について、単にセンチロイド＞２５ＣＬによって疾患状態を定義した。第ＩＩＩ相モデル２では、特定のバイオマーカーが、疾患の初期段階（すなわち、境界線）の分化に役立つ生理学的価値を有するかどうかを探求しようとした。しかしながら、ＡＩＢＬの境界範囲、＞１５ＣＬおよび＜２５ＣＬは、十分な症例を含めるには狭すぎた。したがって、出願人らは、任意に定義したセンチロイド≧２５ＣＬおよび＜１００ＣＬ、ならびにセンチロイド＞１００ＣＬを有する個体によるＡＤの初期段階を削除した。モデル３は、研究コホートを健常対照（ＣＮ＆＜２５ＣＬ）、前臨床（ＣＮ＆≧２５ＣＬ）、または前駆（ＭＣＩ、およびＣＬを考慮しない）およびＡＤ（ＣＬを考慮しない）段階に層別化するために、Ａβ状態と一緒に患者の臨床状態を更に考慮した。次いで、出願人らは、前臨床段階と前駆段階を組み合わせることによって（ＡＤ段階を削除した）モデル３の疾患状態を任意に定義した。コルモゴロフ－スミルノワ（Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ－Ｓｍｉｒｎｏｖａ）およびシャピロ－ウィルク（Ｓｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋ）法によってデータの歪度を検定した。
【0128】
３．結果
【0129】
３．１．人口統計学
【0130】
この横断研究は４つの相を含み、第Ｉ、ＩＩ相は発見データセットとして機能し、第ＩＩＩ、ＩＶ相は検証データセットとして機能した。出願人らは、第Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩ相のＡＩＢＬ試験から７６，１４２人および２００人の参加者を募集し、第ＩＶ相のＡ４試験から１１２人の参加者を募集した。全てのデータセットは、ＣＮ、ＭＣＩおよびＡＤ認知症として臨床的に分類されたバランスのとれた数の個体を含んでいた。全ての試料は、対応するＡβ－ＰＥＴおよび認知データを有していた。研究の人口統計学を、第ＩＩＩ相モデル２および３を除いて、高Ａβ負荷または低Ａβ負荷によって単純に層別化した（方法２．８を参照）。
【0131】
３．２．第Ｉ相および第ＩＩ相の候補バイオマーカー
【0132】
第Ｉ相は、ＣＤ１１ｃおよびＰ２Ｘ７を候補バイオマーカーとして同定した（以下の表Ａ．２．１）。ＣＮ群と比較して、ＣＤ１１ｃのＭＦＩはＭＣＩ群およびＡＤ群で１９～３４％減少し（Ｐ＜０．０５）、Ｐ２Ｘ７は２０～４２％減少した（Ｐ＜０．０１）。それらはまた、Ａβ ＣＬとの負の相関を示し、その結果、より高いＡβ負荷対象は、より低いＣＤ１１ｃおよびＰ２Ｘ７の発現レベルを有した。第ＩＩ相はＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ３３を同定し、候補バイオマーカーとしてＰ２Ｘ７ではない（以下の表Ａ．２．２）。ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ３３のＭＦＩは、ＣＮ群と比較して、ＭＣＩ群およびＡＤ群でそれぞれ１４～２３％（Ｐ＜０．０５）、１４～２１％（Ｐ＜０．０５）および１６～１８％（Ｐ＜０．０５）減少した。しかしながら、ＮＫ細胞上のＣＤ１１ｃのみがＡβ－ＰＥＴデータと相関した。
【0133】
３．３ 第ＩＩＩ相の候補バイオマーカー
【0134】
第ＩＩＩ相で、本出願人らは、ＣＮ、ＭＣＩおよびＡＤ群間で異なり（以下の表Ａ．２．３の上位１０個）、Ａβ負荷量と相関するＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９、ＣＤ９１およびＣＤ１６３のＭＦＩに関連する１０個の候補マーカーを同定した。ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１６３のＭＦＩは、ＣＮ群と比較して、ＭＣＩ群およびＡＤ群でそれぞれ１５～１９％（Ｐ＜０．０１）および１１～１６％（Ｐ＜０．０１）減少したが、ＣＤ５９およびＣＤ９１のＭＦＩは、ＭＣＩ群およびＡＤ群でそれぞれ２７～７８％（Ｐ＜０．０００１）および４４～５９％（Ｐ＜０．００１）増加した。ＭｅｒＴＫ、ＣＤ１８およびＲＡＧＥに関連する表Ａ．２．３の下の４つは、試料サイズが小さいため除外した。それにもかかわらず、ＣＮ群と比較して、ＭＣＩ群およびＡＤ群では、ＣＤ１８およびＭｅｒＴＫのＭＦＩがそれぞれ２０～２６％（Ｐ＜０．０５）および１２％（Ｐ＜０．０５）減少し、ＲＡＧＥのＭＦＩが単球上で３１％（Ｐ＜０．０５）増加した。全ての潜在的なバイオマーカーの変化およびＡＤに対するそれらの関連性を上記の表１に列挙する。
【0135】
全血中のＣＤ１４－リンパ球の絶対パーセンテージは、ＣＮ群（以下の表Ａ．２．４）と比較してＭＣＩ群およびＡＤ群で１１％低下し（Ｐ＜０．０１）、ＣＬ、エピソード記憶およびＰＡＣＣスコアと相関していた。ＣＮ、ＭＣＩおよびＡＤ群間の全血中の単球のパーセンテージの差はごくわずかであったため、出願人は、全単球集団をＣＤ１４＋ＣＤ１６＋、ＣＤ１４＋ＣＤ１６－およびＣＤ１４－ＣＤ１６＋亜集団に分割し、全単球集団からのそれらの相対的パーセンテージを評価した。ＣＤ１４＋ＣＤ１６－単球の相対的パーセンテージは、ＣＮ群と比較してＡＤ群およびＭＣＩ群で１３％増加した（Ｐ＜０．０１）（表Ａ．２．４）。興味深いことに、ＣＤ１４＋ＣＤ１６＋単球の相対的パーセンテージは、ＣＮ群と比較してＭＣＩ群で３０％減少した（Ｐ＝０．０２）が、ＡＤおよびＣＮは群差を示さなかった。また、ＭＣＩ群におけるＣＤ１４－ＣＤ１６＋単球のより低い相対的パーセンテージ（－２９％Ｐ＝０．０２）も、より小さい試料サイズを有する別のチューブにおいて観察された。その後、ＣＤ１４－リンパ球およびＣＤ１４＋ＣＤ１６－単球のパーセンテージを上記１０個に加え、更なる評価のために１２個のバイオマーカーを作製した。
【表A.2.1】
【表A.2.2】
【表A.2.3】
【0136】
【表A.2.4】
【0137】
３．５．バイオマーカー評価
【0138】
表３では、第ＩＩＩ相で選択された１２個のバイオマーカーを、バイオマーカー１（ＢＭ１）、バイオマーカー２（ＢＭ２）、．．．およびバイオマーカー１２（ＢＭ１２）と命名した。分布試験は、バイオマーカー７およびバイオマーカー８がほぼ正規分布に従うことを見出した（表Ａ．６）。その他は自然対数（ｌｎＢＭ）と平方根（ｓｑｒｔＢＭ）の両方を用いて変換した。共線性試験を使用して、独立したバイオマーカーのみをパネルに組み合わせる場合に選択した（表Ａ．７）。
【0139】
【表3.1-1】
【表3.1-2】
【表3.1-3】
【0140】
【表3.2-1】
【表3.2-2】
【表3.2-3】
【0141】
【表3.3-1】
【表3.3-2】
【表3.3-3】
【0142】
【表3.4-1】
【表3.4-2】
【表3.4-3】
【0143】
【表3.5-1】
【表3.5-2】
【0144】
【表A.6.1】
【0145】
【表A.6.2】
【表A.6.3】
【0146】
【表A.7.1】
【0147】
【表A.7.2】
【0148】
モデル１（表３．１）では、ベースライン１は、ＡＵＣ ０．８５（０．７９～０．９１）で＜２５ＣＬと＞２５ＣＬとを識別した。好中球（ｌｎＢＭ８）上のＣＤ１６３のＭＦＩは、０．８９（０．８４～０．９４）の最良の改善されたＡＵＣ、１６％のＢｒｉｅｒ改善、０．０６（０．０２４～０．０９６）の事象を伴うＩＤＩ、および０．０４１（０．０１５～０．０６７）の事象を伴わないＩＤＩを有した。２つの他の実行中バイオマーカー、ＣＤ１４－ＣＤ１６＋単球上のＣＤ５９のＭＦＩ（ｌｎＢＭ５）および全好中球上のＣＤ１１ｃのＭＦＩ（ｌｎＢＭ３）を含めて、バイオマーカーのパネル：新規１を形成した。新規１は、ＡＵＣが０．９１（０．８６～０．９５）、Ｂｒｉｅｒ改善が１７．８％、事象ありおよびなしでそれぞれＩＤＩが０．０８５（０．０４９～０．１２）および０．０５０（０．０１９～０．０８１）であった。新規１は、ヨーデン指標のカットオフ点（表Ａ．８．１）で８９．９％の感度（９５％ＣＩ ８０．２％～９５．８％）、７６．９％の特異度（６６．０％～８５．７％）および８３．０％の全体的な精度を有していた。
【0149】
【表A.8.1】
【0150】
モデル２（上記の表３．２）では、ベースライン２は、ＡＵＣ０．８４（０．７７から０．９１）で＜２５ＣＬと、＞２５ＣＬおよび＜１００ＣＬとを識別した。好中球（ｌｎＢＭ８）上のＣＤ１６３のＭＦＩは、０．９０（０．８４～０．９６）の最良の改善されたＡＵＣ、２０％のＢｒｉｅｒ改善、０．１０６（０．０５０～０．１６２）の事象を伴うＩＤＩおよび０．０５１（０．０２４～０．０７７）の事象を伴わないＩＤＩを有した。注目すべきことに、モデル２は５２症例しか有しておらず、１つのバイオマーカーのみをモデルに適合しないように加えて、新規２を形成した。新規２は、ヨーデン指数のカットオフ点（表Ａ．８．１）で９０．０％の感度（７６．３％～９７．２％）、７６．５％の特異度（６５．８％～８５．３％）および８１．０％の全体的な精度を有していた。
【0151】
モデル３（上記の表３．３）では、全てのＭＣＩ対象が症例として分類されていたため、ベースライン３が過剰に集約された。好中球（ｌｎＢＭ８）上のＣＤ１６３のＭＦＩは、０．９６（０．９３～０．９９）の最良の改善されたＡＵＣ、２４．４％の大幅な改善、０．０４９（０．０１３～０．０８５）の事象を伴うＩＤＩおよび０．０３５（０．００９～０．０６２）の事象を伴わないＩＤＩを有した。２つの他の実行中バイオマーカー、ＣＤ１４－ＣＤ１６－リンパ球上のＣＤ５９のＭＦＩ（ｓｑｒｔＢＭ４）および全血中のＣＤ１４－リンパ球の絶対パーセンテージ（ｓｑｒｔＢＭ１１）もまた、バイオマーカーのパネル：Ｎｅｗ３を形成するために含めた。新規３は、ＡＵＣをベースラインから６％改善した。新規３は、ヨーデン指数のカットオフ点（表Ａ．８．１）で９１．２％の感度（８０．７％～９７．１％）、９３．９％の特異度（８５．２％～９８．３％）および９２．７％の全体的な精度を有していた。
【0152】
全体として、異なるモデルにおいて、異なるバイオマーカー、複合体またはパネルが提案された。３つの候補バイオマーカー：ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ１６３は非常に良好に機能したが、ＣＤ１６３は常に最良の機能を有していた。各バイオマーカーのモデルカットオフ値、感度、特異性および精度は、表Ａ．８．２～４に見出すことができる。
【0153】
【表A.8.2】
【表A.8.3】
【表A.8.4】
【0154】
３．６．第ＩＶ相の結果
【0155】
第ＩＩＩ相は、年齢、性別、教育およびＡＰＯＥε４対立遺伝子状態についての補正後に、ＰＥＴ Ａβ陽性（Ｃｌ＞２５）の個体とＰＥＴ Ａβ陰性（ＣＬ＜２５）の個体とを区別するための潜在的なバイオマーカーとして、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９、ＣＤ９１およびＣＤ１６３を同定した（モデル１、Ｐ＝０．０２１）。次いで、本出願人らは、それらを独立コホート（相ＩＶ、Ｎ＝１１２）で検証した。いくつかの白血球マーカーは、臨床診断との関連または類水晶体との関連を示し、これらは第ＩＩＩ相と一致する。検証コホートの多変量モデルは、ＣＤ５９とＣＤ９１との組み合わせがＡβ状態、ＣＬ＞２５またはＣＬ＜２５を識別し、ＡＵＣは０．９１（ＣＩ：０．８１～０．９９）であることを見出した。ＡＵＣは、０．８１（ＣＩ：０．７２～０．９）ならびに年齢、性別、教育およびＡＰＯＥε４対立遺伝子状態に対する補正後に、平均ベースモデルＡＵＣよりも０．１高かった（ｐ＝０．０７２）。ＣＤ１１ｃ、ＣＤ５９およびＣＤ９１の組み合わせを試みたところ、補正後のＡＵＣはベースモデルより０．９５（ＣＩ：０．８６～１）、０．１４上、ｐ＝０．０５であったが、この値は比較的小さい試料サイズ（表３．５の詳細）のために過剰適合を反映し得る。
【0156】
４．考察：
【0157】
ＣＮ、ＭＣＩおよびＡＤの群間で比較した場合、および／またはＡβ－ＰＥＴデータと関連した場合、白血球表面マーカーは差次的発現を示した。第Ｉ相および第ＩＩ相の設計は、そのスクリーニング能力を制約した様々な主要ＣＤマーカーにおいて最大であった。第ＩＩＩ相における白血球表面マーカーの新しい範囲は、ＧＷＡＳおよびミクログリア／単球経路における食作用／エンドサイトーシスがＡＤの病因において重要な役割を果たし得るという他の証拠を反映するように調整された［７、２１］。正確な分子機構は不明なままであるが、食作用性受容体、ＭｅｒＴＫおよびＰ２Ｘ７；スカベンジャー受容体、ＣＤ３６およびＣＤ１６３；ならびにインテグリン、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃおよびＣＤ１８の発現の減少は、ＡＤ患者における単球食作用機能障害を推測する本発明者らの以前の研究［７］の一部と密接に一致する（表１；図１左）。ＣＤ１８が、補体受容体３および４としても知られるＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８およびＣＤ１１ｃ／ＣＤ１８の共通のサブユニットであることも注目に値する（ＣＲ３、ＣＲ４）。この研究によって、ＣＲ３およびＣＲ４の両方がＡＤにおいてダウンレギュレーションされることが見出された。ＣＤ５９は、膜侵襲複合体（ＭＡＣ）の主要な阻害剤である［２２］。本出願人らが、ＡＤにおけるＣＤ５９のアップレギュレーションが細胞溶解および食作用クリアランスを妨げ得ることを見出した。図１右側を参照されたい。２またはそれを超える経路における調整された変化は、オプソニン化、食作用および病原性因子の除去に関連するＡＤの機能的阻害を表す。
【0158】
この研究では、３つのマーカー、ＣＤ３３、ＣＤ３５／ＣＲ１およびＣＤ９１は、ＧＷＡＳメタ分析［２３、２４］または他の遺伝子関連研究によって報告されたＡＤリスク遺伝子のタンパク質産物である［２５～２７］。ＣＤ３５およびＣＤ９１の両方が、この研究によってＡＤにおいてアップレギュレーションされることが見出された。Ｂｒａｄｓｈａｗら［２８］は、ＣＤ３３リスク対立遺伝子ｒｓ３８６５４４４Ｃが、若齢および高齢個体の単球におけるＣＤ３３のより大きな細胞表面発現に関連することを見出した。しかし、Ａβ４２の内在化の減少、神経突起タウ陽性変化の蓄積および活性化ヒトミクログリアの数の増加に関連していた。ｒｓ３８６５４４４Ｃリスク遺伝子型を有する個体における単球上のＣＤ３３の過剰発現は、その機能喪失を補う機構であり得る。ＣＤ３５／ＣＲ１は補体因子Ｃ３ｂおよびＣ４ｂの受容体であるが［２９］、ＡＤとの関連性は不明である。ＣＤ９１は、ＡｐｏＥに対する受容体であり、分泌されたアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のエンドサイトーシスおよび分解であり［３０］、単一の経路がＡＤの病態生理学にかかわる２つの分子を結びつけることを示唆している。
【0159】
ＣＤ ９１の他に、ＲＡＧＥはＡβの受容体でもある。Ｙａｎら［３１］は、ＲＡＧＥの発現がＡＤにおいて、特にＡβの沈着物および神経原線維変化に近いニューロンにおいて増加したことを報告した。マウスにおいて、Ｄｅａｎｅら［３２］は、ＲＡＧＥが血液脳関門を通過するヒトＡβ４０およびＡβ４２の輸送を媒介し、炎症促進性サイトカインおよびエンドセリン－１の発現をもたらしたことを示した。Ａｒａｎｃｉｏら［３３］は、ＲＡＧＥがＡβ誘導性神経摂動の補因子であり、トランスジェニックマウスにおけるミクログリア細胞活性化に関与することを示した。本研究では、ＲＡＧＥの発現は、Ｙａｎら［３１］と一致してＡＤにおいて増加し、脳常在性ミクログリアにおいて起こることの鏡を提供し得る。ＣＤ３６は、この研究においてＡＤではダウンレギュレーションされることが見出された。ＣＤ３６は、酸化型低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の受容体［３４］およびＡβの受容体［３５］である。固定化Ａβオリゴマー結合ＣＤ３６－Ｆｃタンパク質は、ＲＡＧＥ－ＦｃおよびＴＲＥＭ２－Ｆｃの親和性と同程度の親和性を示した［３６］。
【0160】
血液型分類からの出願人のデータは、リンパ球および単球サブセットのパーセンテージに異常がある可能性があることを示唆している。造血老化は、機能障害を伴う造血幹細胞（ＨＳＣ）の増殖を特徴とし、より多くの骨髄系およびより少ないリンパ系娘細胞が生成され、これは骨髄偏重（ｍｙｅｌｏｉｄ－ｂｉａｓｅｄ）造血［３７、３８］と呼ばれる。血液中の各タイプの白血球のパーセンテージは、主に幹細胞活性の違いによって決定され、したがって、リンパ球の減少は、この骨髄造血に起因する可能性がある［３９］。しかしながら、そのような違いは、反対方向に変化した他の単球サブセットの観察されたパターンを説明しない。ＣＤ１４＋ＣＤ１６＋単球（組織マクロファージに似た高度に食作用性の細胞）が脳内のＡβプラークの部位に滲出し、ＭＣＩの一過性低下およびＡＤの不完全な回復をもたらす可能性があり、これはおそらく走化性機能の不全または閉塞性継代によるものであり、Ｕ字形の応答を表す。ＣＤ１４－ＣＤ１６＋単球のパターンから、これらの２つの小さな単球サブセットは同様の応答を有したが、ＣＤ１４－ＣＤ１６＋単球はＡＤの回復がより低かったことが明らかである。ＣＤ１４＋ＣＤ１６＋のパーセンテージまたはＣＤ１４－ＣＤ１６＋のパーセンテージのいずれも、このＵ字形応答のために、ＣＬ、ＥＭまたはＰＡＣＣのいずれとも相関しなかった。おそらくこのサブセットの不一致のために、血液中の単球のパーセンテージが変化しなかったことに注目することは興味深い。
【0161】
出願人らは、ＣＮ個体のかなりのパーセンテージ（３０％）がＣＳＦにおいて高いＡβ ＰＥＴレベルおよび低いＡβ４２レベルを示すことを見出し、これらの人々は現在、前臨床ＡＤとして分類される。軽度認知障害（ＭＣＩ）はＡＤの前駆期と考えられており、４０～６０％の人々がＭＣＩの基準を満たし、最終的に臨床的ＡＤに進行するか、または１年当たり約５～２５％が臨床的ＡＤに進行する［４０］。診断意思決定は２クラスの予測問題であるため、出願人らは、バイナリ分類因子、すなわち健康および疾患を確立し、分類器境界をロジスティックモデルによって決定した。残念なことに、ＡＤの診断は、臨床的考察、認知、行動、高度なイメージングおよびＣＳＦバイオマーカーを含む多次元基準に基づいており、更に、早期検出のための特定の基準も、前臨床段階の明確な定義もなく、したがって、本出願人らは、モデル１および２の段階を識別するための単純な代用としてＣＬを使用したが、本出願人らは、ＮＩＡ－ＡＡ［１３］およびＩＷＧ［４１］によって行われた最新の動きを反映するためにモデル３に臨床分類を更に追加した。
【0162】
出願人の所見は、神経画像またはＣＳＦバイオマーカーの明らかな変化なしにＡＤの前臨床徴候を監視し、早期介入を開始するために、遺伝的要因（例えばＡＰＯＥ）のリスクが高い個人の早期診断に意味を持ち得る。ＡＤに対する血漿バイオマーカーの使用は、最近、ＮａｋａｍｕｒａらおよびＦｏｓｓａｔｉら［１５、４２］によって実証されているため、ＡＤ診断のために血液ベースのバイオマーカーを使用する理由を正当化し、本出願人の新規な所見は、関連する場合、血液中のＡＤタンパク質症に起因し得る。ＰＵ．１等のこれらのプロセスを調節する際の変化した白血球バイオマーカーまたは血液型分類または転写ネットワーク［２１、４３］の役割は、依然として決定されていないが、ＡＤの分子病理に寄与し得る。
【0163】
４．７．結論として、本出願人の結果は、白血球バイオマーカーがＡＤ進行の客観的で測定可能な指標であり、早期診断に有用であり得ることを示唆している。さらに、白血球バイオマーカーは、コストおよび単純さの点で優れており、診療所で容易に使用することができ、新規の有効な薬物の開発ならびに臨床試験の全ての相の転帰測定のための白血球バイオマーカーの重要性を確認する。
【0164】
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【0165】
条項
項１．組成物であって、
検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する結合剤を含む、組成物。
項１．組成物であって、
検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する結合剤を含む、組成物。
【0166】
項２．ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１に記載の組成物。
【0167】
項３．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１～２のいずれか一項に記載の組成物。
【0168】
項４．組成物であって、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせと、
を含む、組成物。
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせと、
を含む、組成物。
【0169】
項５．組成物であって、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせと、
ヒト患者の全血と、
を含む、組成物。
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせと、
ヒト患者の全血と、
を含む、組成物。
【0170】
項６．組成物であって、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
少なくとも１つの抗凝固剤と、
を含む、組成物。
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
少なくとも１つの抗凝固剤と、
を含む、組成物。
【0171】
項７．前記少なくとも１つの抗凝固剤が、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせから選択される、項６に記載の組成物。
【0172】
項８．前記組成物が、ヘパリンを含有しない、項４～７のいずれか一項に記載の組成物。
【0173】
項９．前記組成物が、アロフィコシアニンを含有しない、項４～８のいずれか一項に記載の組成物。
【0174】
項１０．ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項４～９のいずれか一項に記載の組成物。
【0175】
項１１．前記フルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネート、アロフィコシアニン、またはそれらの組み合わせから選択される、項４～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【0176】
項１２．前記フルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素、商標Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）で販売されている蛍光色素；ＢＵＶ３９５；ＢＵＶ５６３；ＢＵＶ６１５；ＢＵＶ６６１；ＢＵＶ７３７；ＢＵＶ８０５；ＢＶ４２１；ＢＶ４８０；ＢＶ５１０；ＢＶ６０５；ＢＶ６５０；ＢＶ７１１；ＢＶ７５０；ＢＶ７８６；ＦＩＴＣ；ＰＥ；ＰＥ－ＣＦ５９４；ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ（商標）５．５；Ｒ７１８、またはこれらの２もしくはそれを超える組み合わせから選択される、項４～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【0177】
項１３．前記フルオロフォアが、フルオレセイン、ローダミン、ランタニド蛍光体、およびそれらの誘導体から選択される、項４～１０のいずれか一項に記載の組成物。フルオロフォアの例としては、限定されないが、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）（例えば、５－ＦＩＴＣ）、フルオレセインアミダイト（ＦＡＭ）（例えば、５－ＦＡＭ）、エオシン、カルボキシフルオレセイン、エリスロシン、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）（例えば、Ａｌｅｘａ ３５０、４０５、４３０、４８８、５００、５１４、５３２、５４６、５５５、５６８、５９４、６１０、６３３、６４７、６６０、６８０、７００または７５０）、カルボキシテトラメチルローダミン、テトラメチルローダミンおよびスルホローダミンが挙げられる。
【0178】
項１４．前記フルオロフォアが、ＧＦＰ、ＹＦＰ、ＲＦＰ、ｅＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｔｄｔｏｍａｔｏ、ＦＩＴＣ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ３５０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４０５、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５３２、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５４６、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５５５、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５６８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ５９４、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６８０、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ７５０、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ、クマリン、ＢＯＤＩＰＹ ＦＬ、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｇｒｅｅｎ、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ、Ｃｙ ３、Ｃｙ ５、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｏｒａｎｇｅ、ＴＲＩＴＣ、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、Ｒ－フィコエリトリン、アロフィコシアニン、または当技術分野で公知の他のフルオロフォア等の蛍光タンパク質から選択される、項４～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【0179】
項１５．Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項４～１４のいずれか一項に記載の組成物。
【0180】
項１６．前記組成物が、ヘパリンを含有しない、項４～１５のいずれか一項に記載の組成物。
【0181】
項１７．前記組成物が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子のうちの１またはそれを超えるものに対する第２の結合剤を更に含む、項１～１６のいずれか一項に記載の組成物。
【0182】
項１８．前記第２の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１７に記載の組成物。
【0183】
項１９．前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１７～１８のいずれか一項に記載の組成物。
【0184】
項２０．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＣＤ１６３の濃度の減少を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＣＤ１６３の濃度の減少を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0185】
項２１．前記結合ＣＤ１６３の濃度を測定することが、白血球上の結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度を測定する工程を含む、項２０に記載の方法。
【0186】
項２２．前記濃度を比較することが、前記ヒト患者についての結合ＣＤ１６３の前記平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ１６３の前記平均蛍光強度と比較することを含む、項２０～２１のいずれか一項に記載の方法。
【0187】
項２３．前記血液試料中のＣＤ１６３の濃度の減少を観察することが、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約１１％、少なくとも約１２％、少なくとも約１３％、少なくとも約１４％、少なくとも約１５％、少なくとも約１６％、少なくとも約１７％、少なくとも約１８％、または少なくとも約１９％の平均蛍光強度の減少を測定することを含む、項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。
【0188】
項２４．フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する前記マウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素とコンジュゲートしたマウス抗ヒトＣＤ１６３抗原を含む、項２０～２３のいずれか一項に記載の方法。
【0189】
項２５．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の第１の結合ＣＤ１６３の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ１６３の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ１６３の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ１６３の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の第１の結合ＣＤ１６３の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ１６３の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ１６３の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ１６３の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0190】
項２６．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項２５に記載の方法。
【0191】
項２７．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項２５に記載の方法。
【0192】
項２８．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項２５～２７のいずれか一項に記載の方法。
【0193】
項２９．検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する結合剤を含む、組成物。
【0194】
項３０．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項２９に記載の組成物。
【0195】
項３１．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項２９～３０のいずれか一項に記載の組成物。
【0196】
項３２．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
【0197】
項３３．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項３２に記載の使用。
【0198】
項３４．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項３２～３３のいずれか一項に記載の使用。
【0199】
項３５．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項３４に記載の使用。
【0200】
項３６．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ１６３に対する結合剤。
【0201】
項３７．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項３６に記載のＣＤ１６３に対する結合剤。
【0202】
項３８．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項３６～３７のいずれか一項に記載のＣＤ１６３に対する結合剤。
【0203】
項３９．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項３８に記載のＣＤ１６３に対する結合剤。
【0204】
項４０．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＣＤ９１の濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＣＤ９１の濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＣＤ９１の濃度の増加を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＣＤ９１の濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＣＤ９１の濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＣＤ９１の濃度の増加を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0205】
項４１．前記結合ＣＤ９１の濃度を測定することが、白血球上の結合ＣＤ９１の平均蛍光強度を測定する工程を含む、項４０に記載の方法。
【0206】
項４２．前記濃度を比較することが、前記ヒト患者についての結合ＣＤ９１の前記平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ９１の前記平均蛍光強度と比較することを含む、項４０～４１のいずれか一項に記載の方法。
【0207】
項４３．前記血液試料中のＣＤ９１の濃度の増加を観察することが、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ９１の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約４４％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、または少なくとも約５９％の平均蛍光強度の増加を測定することを含む、項４０～４２のいずれか一項に記載の方法。
【0208】
項４４．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ９１の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ９１の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ９１の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ９１の前記第２の濃度への減少を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ９１の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ９１を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ９１の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ９１の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ９１の前記第２の濃度への減少を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0209】
項４５．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項４４に記載の方法。
【0210】
項４６．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項４４に記載の方法。
【0211】
項４７．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項４４～４６のいずれか一項に記載の方法。
【0212】
項４８．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤の使用。
【0213】
項４９．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項４８に記載の使用。
【0214】
項５０．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項４８～４９のいずれか一項に記載の使用。
【0215】
項５１．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項５０に記載の使用。
【0216】
項５２．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤。
【0217】
項５３．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項５２に記載のＣＤ９１に対する結合剤。
【0218】
項５４．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項５１～５３のいずれか一項に記載のＣＤ９１に対する結合剤。
【0219】
項５５．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項５４に記載のＣＤ９１に対する結合剤。
【0220】
項５６．検出可能な部分とコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対する結合剤を含む、組成物。
【0221】
項５７．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項５６に記載の組成物。
【0222】
項５８．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項５６～５７のいずれか一項に記載の組成物。
【0223】
項５９．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＭｅｒＴＫの濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＭｅｒＴＫの濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＭｅｒＴＫの濃度の減少を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の結合ＭｅｒＴＫの濃度を測定することと、
前記濃度を健康なヒトにおけるＭｅｒＴＫの濃度範囲と比較することと、
前記血液試料中のＭｅｒＴＫの濃度の減少を観察することと、
それによって、塩基ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0224】
項６０．前記結合ＭｅｒＴＫの濃度を測定することが、白血球上の結合ＭｅｒＴＫの平均蛍光強度を測定する工程を含む、項５９に記載の方法。
【0225】
項６１．前記濃度を比較することが、前記ヒト患者についての結合ＭｅｒＴＫの前記平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＭｅｒＴＫの前記平均蛍光強度と比較することを含む、項５９～６０のいずれか一項に記載の方法。
【0226】
項６２．前記血液試料中のＭｅｒＴＫの濃度の減少を観察することが、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＭｅｒＴＫの平均蛍光強度と比較して、少なくとも約１２％の平均蛍光強度の減少を測定することを含む、項５９～６１のいずれか一項に記載の方法。
【0227】
項６３．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＭｅｒＴＫの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＭｅｒＴＫの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＭｅｒＴＫの前記第１の濃度から前記第２の結合ＭｅｒＴＫの前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＭｅｒＴＫの第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、フルオロフォアとコンジュゲートしたＭｅｒＴＫに対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＭｅｒＴＫを得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＭｅｒＴＫの第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＭｅｒＴＫの前記第１の濃度から前記第２の結合ＭｅｒＴＫの前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0228】
項６４．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項６３に記載の方法。
【0229】
項６５．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項６３に記載の方法。
【0230】
項６６．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項６３～６５のいずれか一項に記載の方法。
【0231】
項６７．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＭｅｒＴＫに対する結合剤の使用。
【0232】
項６８．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項６７に記載の使用。
【0233】
項６９．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項６７～６８のいずれか一項に記載の使用。
【0234】
項７０．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項６９に記載の使用。
【0235】
項７１．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＭｅｒＴＫに対する結合剤。
【0236】
項７２．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項７１に記載のＭｅｒＴＫに対する結合剤。
【0237】
項７３．前記結合剤が、検出可能な部分とコンジュゲートしている、項８４～８５のいずれか一項に記載のＭｅｒＴＫに対する結合剤。
【0238】
項７４．前記検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項７３に記載のＭｅｒＴＫに対する結合剤。
【0239】
項７５．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、組成物。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、組成物。
【0240】
項７６．前記第１の結合剤および前記第２の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項７５に記載の組成物。
【0241】
項７７．前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項７５～７６のいずれか一項に記載の組成物。
【0242】
項７８．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0243】
項７９．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0244】
項８０．少なくとも１つの抗凝固剤を更に含む、項７８～７９のいずれか一項に記載の組成物。
【0245】
項８１．少なくとも１つの抗凝固剤が、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせを含む、項７８～８０のいずれか一項に記載の組成物。
【0246】
項８２．前記組成物が、ヘパリンを含有しない、項７８～８１のいずれか一項に記載の組成物。
【0247】
項８３．前記組成物が、アロフィコシアニンを含有しない、項７８～８２のいずれか一項に記載の組成物。
【0248】
項８４．前記組成物が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項７８～８３のいずれか一項に記載の組成物。
【0249】
項８５．ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項７８～８４のいずれか一項に記載の組成物。
【0250】
項８６．前記組成物が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項７８～８５のいずれか一項に記載の組成物。
【0251】
項８７．前記第１のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項７８～８６のいずれか一項に記載の組成物。
【0252】
項８８．前記第２のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項７８～８７のいずれか一項に記載の組成物。
【0253】
項８９．ヒト患者由来の全血を更に含む、項７８～８８のいずれか一項に記載の組成物。
【0254】
項９０．キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、キット。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、キット。
【0255】
項９１．前記第１の結合剤および前記第２の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項９０に記載のキット。
【0256】
項９２．前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項９０～９１のいずれか一項に記載のキット。
【0257】
項９３．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0258】
項９４．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0259】
項９５．前記組成物が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項９３～９４のいずれか一項に記載のキット。
【0260】
項９６．前記第１のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項９３～９５のいずれか一項に記載のキット。
【0261】
項９７．前記第２のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項９３～９６のいずれか一項に記載のキット。
【0262】
項９８．ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法であって、
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤、および
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と接触させて、
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分の濃度を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤、および
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と接触させて、
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分の濃度を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
【0263】
項９９．前記濃度を測定することが、白血球上の濃度を測定することを含む、項９８に記載の方法。
【0264】
項１００．ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法であって、
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体、および
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体、および
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と接触させて
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
【0265】
項１０１．ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法であって、
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体、および
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と接触させて
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体、および
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と接触させて
結合ＣＤ５９および結合ＣＤ１６３を形成することと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それにより、ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が決定されることと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現を測定する方法。
【0266】
項１０２．ＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現が、白血球上のＣＤ５９およびＣＤ１６３の相対的発現である、項１００～１０１のいずれか一項に記載の方法。
【0267】
項１０３．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォア、前記第２のフルオロフォアの蛍光によって、前記血液試料中の結合ＣＤ５９の濃度および結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるＣＤ５９の濃度範囲と比較した結合ＣＤ５９の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較した結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォア、前記第２のフルオロフォアの蛍光によって、前記血液試料中の結合ＣＤ５９の濃度および結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるＣＤ５９の濃度範囲と比較した結合ＣＤ５９の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較した結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0268】
項１０４．前記濃度を測定することが、白血球上の濃度を測定することを含む、項１０３に記載の方法。
【0269】
項１０５．前記結合ＣＤ５９の濃度を測定することが、結合ＣＤ５９の平均蛍光強度を測定することを含む、項１０３～１０４のいずれか一項に記載の方法。
【0270】
項１０６．前記結合ＣＤ１６３の濃度を測定することが、結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度を測定することを含む、項１０３～１０５のいずれか一項に記載の方法。
【0271】
項１０７．結合ＣＤ５９の前記濃度の増加を観察することが、前記ヒト患者についての結合ＣＤ５９の平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ５９の平均蛍光強度と比較することを含む、項１０３～１０６のいずれか一項に記載の方法。
【0272】
項１０８．前記結合ＣＤ５９の濃度の増加を観察することが、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜１５ＣＬを有するヒト患者のプールについての結合ＣＤ５９の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約２７％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、または少なくとも約７８％の平均蛍光強度の増加を測定することを含む、項１０７に記載の方法。
【0273】
項１０９．結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することが、前記ヒト患者についての結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度を、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定される＜２５ＣＬを有するヒト参加者のプールについての結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度と比較することを含む、項１０３～１０８のいずれか一項に記載の方法。
【0274】
項１１０．結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することが、アミロイドＰＥＴ画像法によって測定された＜１５ＣＬを有するヒト患者のプールについての結合ＣＤ１６３の平均蛍光強度と比較して、少なくとも約１１％、少なくとも約１２％、少なくとも約１３％、少なくとも約１４％、少なくとも約１５％、少なくとも約１６％、少なくとも約１７％、少なくとも約１８％、または少なくとも約１９％の平均蛍光強度の減少を測定することを含む、項１０９に記載の方法。
【0275】
項１１１．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、前記第１の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光によって、前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ５９の第１の濃度および前記第１の結合ＣＤ１６３の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ５９の第２の濃度および前記第２の結合ＣＤ１６３の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記ヒト患者における第１の結合ＣＤ５９の前記第１の濃度から第２の結合ＣＤ５９の前記第２の濃度への減少を観察することと、
第１の結合ＣＤ１６３の前記第１の濃度から第２の結合ＣＤ１６３の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、前記第１の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光によって、前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ５９の第１の濃度および前記第１の結合ＣＤ１６３の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ５９を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォアおよび前記第２のフルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ５９の第２の濃度および前記第２の結合ＣＤ１６３の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記ヒト患者における第１の結合ＣＤ５９の前記第１の濃度から第２の結合ＣＤ５９の前記第２の濃度への減少を観察することと、
第１の結合ＣＤ１６３の前記第１の濃度から第２の結合ＣＤ１６３の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0276】
項１１２．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項１１１に記載の方法。
【0277】
項１１３．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項１１１に記載の方法。
【0278】
項１１４．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項１１１～１１３のいずれか一項に記載の方法。
【0279】
項１１５．ＡＤの診断を必要とするヒト患者における、ＡＤの診断のためのＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
【0280】
項１１６．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１１５に記載の使用。
【0281】
項１１７．前記ＣＤ５９に対する結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
前記ＣＤ１６３に対する結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項１１５～１１６のいずれか一項に記載の使用。
前記ＣＤ１６３に対する結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項１１５～１１６のいずれか一項に記載の使用。
【0282】
項１１８．前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１１７に記載の使用。
【0283】
項１１９．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合スカベンジャー受容体を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健常ヒトにおけるスカベンジャー受容体の濃度範囲と比較した前記結合スカベンジャー受容体の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合スカベンジャー受容体を得ることと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健常ヒトにおけるスカベンジャー受容体の濃度範囲と比較した前記結合スカベンジャー受容体の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0284】
項１２０．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることであって、前記複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることと、
それによって、結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおける対応するスカベンジャー受容体の濃度範囲に対する少なくとも１つの結合スカベンジャー受容体の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることであって、前記複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートと反応させることと、
それによって、結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合スカベンジャー受容体の濃度を測定することと、
健康なヒトにおける対応するスカベンジャー受容体の濃度範囲に対する少なくとも１つの結合スカベンジャー受容体の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0285】
項１２１．前記スカベンジャー受容体が、ＣＤ１６３、ＭｅｒＴＫ、ＣＤ１８およびそれらの組み合わせから選択される、項１１９～１２０のいずれか一項に記載の方法。
【0286】
項１２２．前記スカベンジャー受容体が、白血球上で発現される、項１１９～１２１のいずれか一項に記載の方法。
【0287】
項１２３．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、
それによって、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合スカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、
それによって、第２の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第１の血液試料を得てから３時間以内に第１の血液試料を試験することと、
第１の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることであって、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートのそれぞれが、フルオロフォアとコンジュゲートしたスカベンジャー受容体に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第１のアリコートと反応させることと、
それによって、第１の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
フルオロフォアの蛍光によって第１の血液試料中の第１の結合スカベンジャー受容体の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、第２の血液試料を得てから３時間以内に第２の血液試料を試験することと、
第２の血液試料を、
複数の抗体－フルオロフォアコンジュゲートの第２のアリコートと反応させることと、
それによって、第２の結合スカベンジャー受容体を形成することと、
前記フルオロフォアの蛍光によって第２の血液試料中の第２の結合スカベンジャー受容体の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）ヒト患者における第１の濃度の第１の結合スカベンジャー受容体から第２の濃度の第２の結合スカベンジャー受容体への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0288】
項１２４．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項１２３に記載の方法。
【0289】
項１２５．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項１２３に記載の方法。
【0290】
項１２６．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項１２３～１２５のいずれか一項に記載の方法。
【0291】
項１２７．前記スカベンジャー受容体が、ＣＤ１６３、ＭｅｒＴＫ、ＣＤ１８およびそれらの組み合わせから選択される、項１２３～１２６のいずれか一項に記載の方法。
項１２８．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１８に対する第１の結合剤を含む、組成物。
項１２８．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１８に対する第１の結合剤を含む、組成物。
【0292】
項１２９．前記第１の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１２８に記載の組成物。
【0293】
項１３０．前記第１の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１２８～１２９のいずれか一項に記載の組成物。
【0294】
項１３１．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体を含む、組成物。
【0295】
項１３２．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、組成物。
【0296】
項１３３．ヒト患者由来の全血を更に含む、項１３１～１３２のいずれか一項に記載の組成物。
【0297】
項１３４．キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１８に対する第１の結合剤を含む、キット。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１８に対する第１の結合剤を含む、キット。
【0298】
項１３５．前記第１の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１３４に記載のキット。
【0299】
項１３６．前記第１の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１３４～１３５のいずれか一項に記載のキット。
【0300】
項１３７．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体を含む、キット。
【0301】
項１３８．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体を含む、キット。
【0302】
項１３９．ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法であって、
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体と接触させて、
結合ＣＤ１８を形成することと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってＣＤ１８の前記相対的発現を決定することと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法。
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するモノクローナル抗体と接触させて、
結合ＣＤ１８を形成することと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってＣＤ１８の前記相対的発現を決定することと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法。
【0303】
項１４０．ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法であって、
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と接触させて、
結合ＣＤ１８を形成することと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってＣＤ１８の前記相対的発現を決定することと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法。
前記ヒト患者から全血の試料を得ることと、
前記試料を
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と接触させて、
結合ＣＤ１８を形成することと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光を測定することと、
それによってＣＤ１８の前記相対的発現を決定することと、
を含む、ヒト患者におけるＣＤ１８の相対的発現を測定する方法。
【0304】
項１４１．ＣＤ１８の前記相対的発現が、白血球上のＣＤ１８の相対的発現である、項１３９～１４０のいずれか一項に記載の方法。
【0305】
項１４２．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合ＣＤ１８の濃度を測定することと、
健常ヒトにおけるＣＤ１８の濃度範囲と比較した前記結合ＣＤ１８の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記血液試料中の前記結合ＣＤ１８の濃度を測定することと、
健常ヒトにおけるＣＤ１８の濃度範囲と比較した前記結合ＣＤ１８の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、前記ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0306】
項１４３．前記濃度を測定することが、白血球上の濃度を測定することを含む、項１４２に記載の方法。
【0307】
項１４４．ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ１８に対する結合剤の使用。
【0308】
項１４５．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１４４に記載の使用。
【0309】
項１４６．
前記ＣＤ１８に対する結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしている、項１４４～１４５のいずれか一項に記載の使用。
前記ＣＤ１８に対する結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしている、項１４４～１４５のいずれか一項に記載の使用。
【0310】
項１４７．前記第１の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１４６に記載の使用。
【0311】
項１４８．ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定する方法であって、
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ１８の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ１８の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ１８の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ１８の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
（Ａ）前記ヒト患者から第１の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第１の血液試料を得てから３時間以内に前記第１の血液試料を試験することと、
前記第１の血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第１の結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記第１の血液試料中の前記第１の結合ＣＤ１８の第１の濃度を測定することと、
（Ｂ）ＡＤ治療候補を前記ヒト患者に投与することと、
（Ｃ）前記ヒト患者から第２の血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記第２の血液試料を得てから３時間以内に前記第２の血液試料を試験することと、
前記第２の血液試料を、第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１８に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、第２の結合ＣＤ１８を得ることと、
前記第１のフルオロフォアの蛍光によって前記第２の血液試料中の前記第２の結合ＣＤ１８の第２の濃度を測定することと、
（Ｄ）前記第１の結合ＣＤ１８の前記第１の濃度から前記第２の結合ＣＤ１８の前記第２の濃度への増加を観察することと、
（Ｅ）それによって、ヒト患者におけるＡＤ治療候補の有効性を決定することと、を含む。
【0312】
項１４９．前記ＡＤ治療候補が食作用促進剤である、項１４８に記載の方法。
【0313】
項１５０．前記ＡＤ治療候補がスカベンジャー受容体アゴニストである、項１４８に記載の方法。
【0314】
項１５１．前記第１の濃度を測定することが、白血球上の前記第１の濃度を測定することを含み、前記第２の濃度を測定することが、白血球上の前記第２の濃度を測定することを含む、項１４８～１５０のいずれか一項に記載の方法。
【0315】
項１５２．組成物であって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、組成物。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、組成物。
【0316】
項１５３．組成物であって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0317】
項１５４．少なくとも１つの抗凝固剤を更に含む、項１５２～１５３のいずれか一項に記載の組成物。
【0318】
項１５５．ヒト患者由来の全血を更に含む、項１５２～１５４のいずれか一項に記載の組成物。
【0319】
項１５６．キットであって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、キット。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、キット。
【0320】
項１５７．キットであって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ３３、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ５９、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７およびＲＡＧＥに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８、ＣＤ１６３およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0321】
項１５８．組成物であって、
異なるフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子ＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫＣＤ５９、ＣＤ１８に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含み、
前記フルオロフォアが、多色フローサイトメトリー分析において、異なるが適合する発光スペクトルおよび励起スペクトルを有する、
組成物。
異なるフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子ＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫＣＤ５９、ＣＤ１８に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含み、
前記フルオロフォアが、多色フローサイトメトリー分析において、異なるが適合する発光スペクトルおよび励起スペクトルを有する、
組成物。
【0322】
項１５９．組成物であって、
異なる第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子ＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫＣＤ５９、ＣＤ１８に対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、組成物。
異なる第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるスカベンジャー受容体およびそれらの調節因子ＣＤ１６３、ＣＤ９１、Ｐ２Ｘ７、ＭｅｒＴＫＣＤ５９、ＣＤ１８に対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、組成物。
【0323】
項１６０．キットであって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含む、キット。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含む、キット。
【0324】
項１６１．キットであって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした、１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、キット。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした、１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、キット。
【0325】
項１６２．組成物であって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含む、組成物。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体を含む、組成物。
【0326】
項１６３．組成物であって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、組成物。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、組成物。
【0327】
項１６４．キットであって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体、を含む、キット。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体、を含む、キット。
【0328】
項１６５．キットであって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、キット。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤を含む、キット。
【0329】
項１６６．組成物であって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0330】
項１６７．組成物であって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、組成物。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、組成物。
【0331】
項１６８．キットであって、
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
１またはそれを超える第１のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
１またはそれを超える第２のフルオロフォアとコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超えるモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0332】
項１６９．キットであって、
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、キット。
１またはそれを超える第１の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ９１、ＣＤ１６３、Ｐ２Ｘ７およびＭｅｒＴＫに対する１またはそれを超える第１の結合剤と、
１またはそれを超える第２の検出可能な部分とコンジュゲートした１またはそれを超えるＣＤ１８およびＣＤ５９に対する１またはそれを超える第２の結合剤と、
を含む、キット。
【0333】
項１７０．キットであって、
第１の検出可能な部分をコンジュゲートした、１またはそれを超えるＣＤ１６３、ＣＤ９１、およびＭｅｒＴＫに対する第１の結合剤を含む、キット。
第１の検出可能な部分をコンジュゲートした、１またはそれを超えるＣＤ１６３、ＣＤ９１、およびＭｅｒＴＫに対する第１の結合剤を含む、キット。
【0334】
項１７１．前記第１の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１７０に記載のキット。
【0335】
項１７２．前記第１の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１７０～１７１のいずれか一項に記載のキット。
【0336】
項１７３．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、組成物。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、組成物。
【0337】
項１７４．前記第１の結合剤および前記第２の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１７３に記載の組成物。
【0338】
項１７５．前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから選択される、項１７３～１７４のいずれか一項に記載の組成物。
【0339】
項１７６．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0340】
項１７７．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0341】
項１７８．少なくとも１つの抗凝固剤を更に含む、項１７６～１７７のいずれか一項に記載の組成物。
【0342】
項１７９．前記少なくとも１つの抗凝固剤が、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせから選択される、項１７６～１７８のいずれか一項に記載の組成物。
【0343】
項１８０．ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項１７６～１７９のいずれか一項に記載の組成物。
【0344】
項１８１．リン酸緩衝生理食塩水、ゼラチンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項１７６～１８０のいずれか一項に記載の組成物。
【0345】
項１８２．前記組成物が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項１７６～１８１のいずれか一項に記載の組成物。
【0346】
項１８３．前記第１のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項１７６～１８２のいずれか一項に記載の組成物。
【0347】
項１８４．前記第２のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項１７６～１８３のいずれか一項に記載の組成物。
【0348】
項１８５．ヒト患者由来の全血を更に含む、項１７６～１８４のいずれか一項に記載の組成物。
【0349】
項１８６．キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、キット。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第２の結合剤と、
を含む、キット。
【0350】
項１８７．前記第１の結合剤および前記第２の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１８６に記載のキット。
【0351】
項１８８．前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１８６～１８７のいずれか一項に記載のキット。
【0352】
項１８９．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0353】
項１９０．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0354】
項１９１．前記キットが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項１８９～１９０のいずれか一項に記載のキット。
【0355】
項１９２．前記第１のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項１８９～１９１のいずれか一項に記載のキット。
【0356】
項１９３．前記第２のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項１８９～１９２のいずれか一項に記載のキット。
【0357】
項１９４．ＡＤの診断を必要とするヒト患者における、ＡＤの診断のためのＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
【0358】
項１９５．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項１９４に記載の使用。
【0359】
項１９６．前記ＣＤ５９に対する結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
前記ＣＤ１６３に対する結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項１９４～１９５のいずれか一項に記載の使用。
前記ＣＤ１６３に対する結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項１９４～１９５のいずれか一項に記載の使用。
【0360】
項１９７．前記第１の検出可能な部分および前記第２の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１９６に記載の使用。
【0361】
項１９８．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
【0362】
項１９９．前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１９８に記載の組成物。
【0363】
項２００．前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項１９８～１９９のいずれか一項に記載の組成物。
【0364】
項２０１．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0365】
項２０２．組成物であって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、組成物。
【0366】
項２０３．少なくとも１つの抗凝固剤を更に含む、項２０１～２０２のいずれか一項に記載の組成物。
【0367】
項２０４．前記少なくとも１つの抗凝固剤が、エチレンジアミン四酢酸、その少なくとも１つの塩、クエン酸、その少なくとも１つの塩、または前述のいずれかの組み合わせから選択される、項２０１～２０３のいずれか一項に記載の組成物。
【0368】
項２０５．ウシ血清アルブミンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項２０１～２０４のいずれか一項に記載の組成物。
【0369】
項２０６．リン酸緩衝生理食塩水、ゼラチンおよびアジ化ナトリウムを更に含む、項２０１～２０５のいずれか一項に記載の組成物。
【0370】
項２０７．前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項２０１～２０６のいずれか一項に記載の組成物。
【0371】
項２０８．前記組成物が、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項２０１～２０７のいずれか一項に記載の組成物。
【0372】
項２０９．前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項２０１～２０８のいずれか一項に記載の組成物。
【0373】
項２１０．前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項２０１～２０９のいずれか一項に記載の組成物。
【0374】
項２１１．ヒト患者由来の全血を更に含む、項２０１～２１０のいずれか一項に記載の組成物。
【0375】
項２１２．キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
【0376】
項２１３．前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項２１２に記載のキット。
【0377】
項２１４．前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項２１２～２１３のいずれか一項に記載のキット。
【0378】
項２１５．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0379】
項２１６．キットであって、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と、
を含む、キット。
【0380】
項２１７．前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項２１５～２１６のいずれか一項に記載のキット。
【0381】
項２１８．前記キットが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素を含まない、項２１５～２１７のいずれか一項に記載のキット。
【0382】
項２１９．前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項２１５～２１８のいずれか一項に記載のキット。
【0383】
項２２０．前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項２１５～２１９のいずれか一項に記載のキット。
【0384】
項２２１．ＡＤの診断を必要とするヒト患者における、ＡＤの診断のためのＣＤ９１に対する結合剤、ＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
【0385】
項２２２．前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項２２１に記載の使用。
【0386】
項２２３．ＣＤ９１に対する前記結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項２２１～２２２のいずれか一項に記載の使用。
ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
項２２１～２２２のいずれか一項に記載の使用。
【0387】
項２２４．前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項２２３に記載の使用。
【0388】
項２２５．組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
【0389】
項２２６．前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項２２５に記載の組成物。
【0390】
項２２７．前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項２２５～２２６のいずれか一項に記載の組成物。
【0391】
項２２８．ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項２２５に記載の組成物。
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項２２５に記載の組成物。
【0392】
項２２９．ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項２２８に記載の組成物。
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項２２８に記載の組成物。
【0393】
項２３０．前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項２２８～２２９のいずれか一項に記載の組成物。
【0394】
項２３１．前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項２２８～２３０のいずれか一項に記載の組成物。
【0395】
項２３２．前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項２２８～２３１のいずれか一項に記載の組成物。
【0396】
項２３３．ヒト患者由来の全血を更に含む、項２２５～２３２のいずれか一項に記載の組成物。
【0397】
項２３４．少なくとも１つの抗凝固剤を更に含む、項２２５～２３３のいずれか一項に記載の組成物。
【0398】
項２３５．ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法であって、前記ヒト患者から血液試料を得ることと、
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ９１を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ５９を得ることと、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォア、前記第２のフルオロフォアおよび前記第３のフルオロフォアの蛍光によって、前記血液試料中の結合ＣＤ９１の濃度、結合ＣＤ５９の濃度および結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるＣＤ９１の濃度範囲と比較した結合ＣＤ９１の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ５９の濃度範囲と比較した結合ＣＤ５９の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較した結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
必要に応じて、前記血液試料を氷に保存することと、
必要に応じて、前記血液試料を得てから３時間以内に前記血液試料を試験することと、
前記血液試料を、
第１のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ９１を得ることと、
第２のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ５９を得ることと、
第３のフルオロフォアとコンジュゲートしたＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体と反応させて、結合ＣＤ１６３を得ることと、
前記第１のフルオロフォア、前記第２のフルオロフォアおよび前記第３のフルオロフォアの蛍光によって、前記血液試料中の結合ＣＤ９１の濃度、結合ＣＤ５９の濃度および結合ＣＤ１６３の濃度を測定することと、
健康なヒトにおけるＣＤ９１の濃度範囲と比較した結合ＣＤ９１の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ５９の濃度範囲と比較した結合ＣＤ５９の前記濃度の増加を観察することと、
健康なヒトにおけるＣＤ１６３の濃度範囲と比較した結合ＣＤ１６３の前記濃度の減少を観察することと、
それによって、ヒト患者におけるＡＤを診断することと、
を含む、ヒト患者におけるＡＤを診断するための方法。
【0399】
前述のように、本発明の詳細な実施形態を本明細書に開示するが、開示された実施形態は、様々な形態で具体化され得る本発明の単なる例示であることを理解されたい。多くの修正および他の変形が、以下に特許請求される本発明の意図された範囲内にあることが理解されよう。さらに、様々な実施形態の前述の説明は、必ずしも除外を意味するものではない。例えば、「いくつかの」実施形態は、本発明の範囲内の「他の」および「更なる」実施形態の全部または一部を含むことができる。また、「ａ」は、「１つだけ」を意味するものではなく、「ａ」は、「１およびそれを超える」を意味することができる。
【図1】
【手続補正書】
【提出日】2024-04-04
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
キットであって、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
【請求項2】
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項3】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１および２のいずれか一項に記載のキット。
【請求項4】
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
請求項１に記載のキット。
【請求項5】
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
請求項４に記載のキット。
【請求項6】
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、請求項５に記載のキット。
【請求項7】
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、請求項５に記載のキット。
【請求項8】
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、請求項５に記載のキット。
【請求項9】
組成物であって、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
【請求項10】
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項11】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項９および１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項12】
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
請求項９に記載の組成物。
【請求項13】
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
請求項１２に記載の組成物。
【請求項14】
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項15】
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項16】
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項17】
ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤、ＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤を含むキット。
【請求項18】
前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１７に記載のキット。
【請求項19】
ＣＤ９１に対する前記結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
請求項１７および１８のいずれか一項に記載のキット。
【請求項20】
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、請求項１９に記載のキット。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0399】
前述のように、本発明の詳細な実施形態を本明細書に開示するが、開示された実施形態は、様々な形態で具体化され得る本発明の単なる例示であることを理解されたい。多くの修正および他の変形が、以下に特許請求される本発明の意図された範囲内にあることが理解されよう。さらに、様々な実施形態の前述の説明は、必ずしも除外を意味するものではない。例えば、「いくつかの」実施形態は、本発明の範囲内の「他の」および「更なる」実施形態の全部または一部を含むことができる。また、「ａ」は、「１つだけ」を意味するものではなく、「ａ」は、「１およびそれを超える」を意味することができる。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
（項目２）
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１に記載のキット。
（項目３）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１および２のいずれか一項に記載のキット。
（項目４）
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項目１に記載のキット。
（項目５）
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項目４に記載のキット。
（項目６）
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目７）
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目８）
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目９）
組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
（項目１０）
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目９に記載の組成物。
（項目１１）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目９および１０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２）
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項目９に記載の組成物。
（項目１３）
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項目１２に記載の組成物。
（項目１４）
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５）
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６）
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７）
ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤、ＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
（項目１８）
前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項目１７に記載の使用。
（項目１９）
ＣＤ９１に対する前記結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
１７および１８のいずれか一項に記載の使用。
（項目２０）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１９に記載の使用。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
キットであって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、キット。
（項目２）
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１に記載のキット。
（項目３）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１および２のいずれか一項に記載のキット。
（項目４）
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項目１に記載のキット。
（項目５）
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項目４に記載のキット。
（項目６）
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目７）
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目８）
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項目４および５のいずれか一項に記載のキット。
（項目９）
組成物であって、
第１の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ９１に対する第１の結合剤と、
第２の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ５９に対する第２の結合剤と、
第３の検出可能な部分とコンジュゲートしたＣＤ１６３に対する第３の結合剤と、
を含む、組成物。
（項目１０）
前記第１の結合剤、前記第２の結合剤、および前記第３の結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目９に記載の組成物。
（項目１１）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目９および１０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２）
ＣＤ９１に対する前記第１の結合剤が、ＣＤ９１に対するモノクローナル抗体であり、前記第１の検出可能な部分が、第１のフルオロフォアであり、
ＣＤ５９に対する前記第２の結合剤が、ＣＤ５９に対するモノクローナル抗体であり、前記第２の検出可能な部分が、第２のフルオロフォアであり、
ＣＤ１６３に対する前記第３の結合剤が、ＣＤ１６３に対するモノクローナル抗体であり、前記第３の検出可能な部分が、第３のフルオロフォアである、
項目９に記載の組成物。
（項目１３）
ＣＤ９１に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ９１に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ５９に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ５９に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体であり、
ＣＤ１６３に対する前記モノクローナル抗体が、ＣＤ１６３に対するマウス抗ヒトＩｇＧモノクローナル抗体である、
項目１２に記載の組成物。
（項目１４）
前記第１のフルオロフォアが、フルオレセインイソチオシアネートである、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５）
前記第２のフルオロフォアが、Ｒ－フィコエリトリンである、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６）
前記第３のフルオロフォアが、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、オレゴン州ユージーン）の商標で販売されている蛍光色素である、項目１２および１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７）
ＡＤの診断を必要とするヒト患者におけるＡＤの診断のための、ＣＤ９１に対する結合剤、ＣＤ５９に対する結合剤およびＣＤ１６３に対する結合剤の使用。
（項目１８）
前記結合剤が、一本鎖可変フラグメント、抗体模倣物、抗体フラグメント、抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、項目１７に記載の使用。
（項目１９）
ＣＤ９１に対する前記結合剤が、第１の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ５９に対する前記結合剤が、第２の検出可能な部分とコンジュゲートしており、
ＣＤ１６３に対する前記結合剤が、第３の検出可能な部分とコンジュゲートしている、
１７および１８のいずれか一項に記載の使用。
（項目２０）
前記第１の検出可能な部分、前記第２の検出可能な部分、および前記第３の検出可能な部分が、放射性同位体、安定同位体、フルオロフォア、およびそれらの組み合わせから独立して選択される、項目１９に記載の使用。
【国際調査報告】