(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-08-01
(54)【発明の名称】前立腺がんのためのリスク予測モデル
(51)【国際特許分類】
G01N 33/53 20060101AFI20240725BHJP
G01N 33/574 20060101ALI20240725BHJP
【ＦＩ】
G01N33/53 D
G01N33/53 X
G01N33/53 P
G01N33/574 A
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024508772
(86)(22)【出願日】2022-08-10
(85)【翻訳文提出日】2024-04-11
(86)【国際出願番号】 EP2022072425
(87)【国際公開番号】W WO2023017072
(87)【国際公開日】2023-02-16
(31)【優先権主張番号】2111635.5
(32)【優先日】2021-08-13
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】512145734
【氏名又は名称】ランドックス ラボラトリーズ リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002860
【氏名又は名称】弁理士法人秀和特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】フィッツジェラルド，ステファン ピーター
(72)【発明者】
【氏名】ラドック，マーク
(72)【発明者】
【氏名】ラモント，ジョン
(72)【発明者】
【氏名】マッケンナ，デクラン
(57)【要約】
単一のマーカーは、高いｔＰＳＡ及び異常なＤＲＥを提示する患者においてＰＣａのリスクを層別化するための感度及び特異性の両方が欠失している。本研究において確認された新規の血清マーカーの組み合わせは、「低」及び「高」リスクカテゴリーへの患者のトリアージを助けることにより、一般開業医（ＧＰ）に一次医療の状況における患者の管理を改善させ、不必要な、侵襲性の、コストのかかる治療への紹介の数を潜在的に低減するのに用いられ得る。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
前立腺がん様症状を有する患者における前立腺がんの診断を補助する方法であって、ｉ）前記患者から得られたエキソビボ血液、血清又は血漿サンプルにおける、総前立腺特異抗原（ｔＰＳＡ）のレベル、並びに、インターロイキン８（ＩＬ－８）、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ－１）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）及びニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）のうちの１つ以上のレベルを決定すること、並びに、ｉｉ）バイオマーカー濃度値のそれぞれを統計的方法に入力して、前記バイオマーカーの濃度の有意性を確立し、前立腺がんを有する又は発症している前記患者のリスクを示す出力を生成することを含む、方法。
【請求項2】
以下のいずれかの組み合わせ：ｉ）ｔＰＳＡ及びＩＬ－８
ｉｉ）ｔＰＳＡ及びＭＣＰ－１
ｉｉｉ）ｔＰＳＡ及びＥＧＦ
ｉｖ）ｔＰＳＡ及びＮＳＥ
ｖ）ｔＰＳＡ、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１
ｖｉ）ｔＰＳＡ、ＩＬ－８及びＥＧＦ
ｖｉｉ）ｔＰＳＡ、ＭＣＰ－１及びＥＧＦ
ｖｉｉｉ）ｔＰＳＡ、ＥＧＦ及びＮＳＥ
ｉｘ）ｔＰＳＡ、ＭＣＰ－１及びＮＳＥ
ｘ）ｔＰＳＡ、ＩＬ－８及びＮＳＥ
ｘｉ）ｔＰＳＡ、ＭＣＰ－１、ＩＬ－８及びＥＧＦ
ｘｉｉ）ｔＰＳＡ、ＭＣＰ－１、ＩＬ－８、ＥＧＦ及びＮＳＥ
のレベルが決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
インターロイキン１０（ＩＬ－１０）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ－１β）、インターロイキン６（ＩＬ－６）、可溶性腫瘍壊死因子受容体１（ｓＴＮＦＲ１）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）又はＤ－ダイマーのうちの１つ以上のレベルも、前記患者サンプルにおいて決定される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項4】
ｔＰＳＡ、ＭＣＰ－１、ＩＬ－８及びＥＧＦのレベルが決定される、請求項２に記載の方法。
【請求項5】
付着した結合分子を含むソリッドステートデバイスであって、前記結合分子が、ｔＰＳＡ、並びに、別々に、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１のうちの少なくとも１つに特異的な親和性を有しており、それぞれについての前記結合分子が支持体材料における個別の箇所にある、前記ソリッドステートデバイス。
【請求項6】
前記結合分子が、別々に、ｔＰＳＡ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びＥＧＦに親和性を有する、請求項５に記載のソリッドステートデバイス。
【請求項7】
非前立腺がん状態と前立腺がんとを区別するための血清ＩＬ－８の使用。
【請求項8】
前記非前立腺がん状態が良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）である、請求項７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
前立腺がん（ＰＣａ）は非常に一般的であり、英国ではほぼ５０，０００人（非特許文献１）、米国ではほぼ２４０，０００人（非特許文献２）の男性が各年において診断されている。ＰＣａは、毎年、米国においてほぼ３５，０００人の男性を死なせている（非特許文献２）。前立腺の腫瘍は、低いグリソンスコアでは限局性である傾向があり、臨床的によく見えない（非特許文献３）。成長が遅いＰＣａは、深刻な危害を引き起こさないことがある（非特許文献４）。しかし、侵襲性の強い前立腺がんは、転移して深刻な疾患を引き起こす可能性がある。
【背景技術】
【0002】
ＰＣａの症状として、排尿の際の痛い感覚又は灼熱感、頻尿（特に夜間（夜間頻尿））、排尿の停止及び開始が困難であること、突発性の勃起機能不全、尿中の血液（血尿症）又は精液中の血液、骨痛、並びに体重減少が挙げられる。
【0003】
ＰＣａのリスク因子として、患者年齢（５０歳超）、民族（アフリカ系アメリカ人民族及び他の少数民族は、白色人種の男性よりも、進行のリスクが大きく、また、侵襲性の強いがんに罹りやすい）、肥満（肥満の患者はＰＣａのリスクがより高い）、及び家族歴（血縁、例えば、親）が挙げられる（非特許文献５）。ＰＣａ及びその後の治療の合併症として、疾患の転移の拡大、尿失禁及び勃起機能不全が挙げられる（非特許文献６）。
【0004】
ＰＣａを診断するための絶対的基準は、経直腸超音波誘導体系（ＴＲＵＳ）針生検によって得られる前立腺組織の組織学的評価である。ＰＣａのグレードを評価するのに使用される最も一般的な尺度はグリソンスコアである（非特許文献７）。グリソンスコアが高いほど、がんが急速に成長且つ拡大する傾向が強い（非特許文献８）。
【0005】
ＰＣａの患者をスクリーニングすることは、過剰治療の可能性に起因して、物議を醸したままであり、推奨されていない（非特許文献９）。ｔｈｅ Ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ， Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｎｄ Ｒｅｓｕｌｔｓ（ＳＥＥＲ）レジストリによって提示されているデータは、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）のみを使用したＰＣａのスクリーニングが、米国において、過剰診断される患者を結果として２８％増加させると見積もっている（非特許文献１０）。さらに、欧州における前立腺がんスクリーニングの無作為化研究（ＥＲＳＰＣ）の試験もまた、ＰＳＡがＰＣａのスクリーニングツールとして単独で使用されるとき、患者のほぼ５０％が過剰診断されると見積もられている（非特許文献１１）。
【0006】
ＰＣａ管理は進展しているが、依然として、通常、ＰＳＡの上昇及び異常な直腸指診（ＤＲＥ）が、調査のための紹介を正当化している。結果として、ＰＳＡが上昇した多くの患者が、侵襲性がありコストがかかる手技の二次医療へと紹介されている（非特許文献１２）。これらは、さらなる調査のために紹介された患者のほぼ７５％が生検陰性を有しているため、多くの場合において不必要である（非特許文献１３）。また、患者の一部２．５％～３％は、深刻な感染（尿路感染及び／又は細菌性前立腺炎）によりＴＲＵＳ手術から１週間以内に入院している。このことは、一次医療におけるより良好な意思決定により回避され得るものであるが、患者の疾患についてのより生物学的な情報を一般開業医（ＧＰ）が利用可能であるようにする必要がある。
【0007】
現在、ＰＳＡに代わる感度及び特異性を有するバイオマーカー又はバイオマーカーの組み合わせは確認されていない（非特許文献１４）。また、ＰＳＡの感度及び特異性は低く
、当該試験は遅発性のがん又は侵襲性の強いがんを区別できないにもかかわらず、新しいバイオマーカーを採用することには抵抗がある（非特許文献１５）。さらに、ＰＳＡのレベルは真の診断とはならない（非特許文献１５）。例えば、患者は、１０ｎｇ／ｍｌ超のＰＳＡを有し且ついずれのがんも有してない可能性があるが、ＰＳＡ１ｎｇ／ｍｌ未満である別の患者は、侵襲性の強いがんを有している可能性がある。したがって、患者を少なくとも層別化し、且つ可能であれば診断ができる新規の検査が急務となっている。しかし、ＰＣａの不均質な性質を考慮すると、単独のバイオマーカーで診断可能となることが判明する可能性は非常に低い。
、当該試験は遅発性のがん又は侵襲性の強いがんを区別できないにもかかわらず、新しいバイオマーカーを採用することには抵抗がある（非特許文献１５）。さらに、ＰＳＡのレベルは真の診断とはならない（非特許文献１５）。例えば、患者は、１０ｎｇ／ｍｌ超のＰＳＡを有し且ついずれのがんも有してない可能性があるが、ＰＳＡ１ｎｇ／ｍｌ未満である別の患者は、侵襲性の強いがんを有している可能性がある。したがって、患者を少なくとも層別化し、且つ可能であれば診断ができる新規の検査が急務となっている。しかし、ＰＣａの不均質な性質を考慮すると、単独のバイオマーカーで診断可能となることが判明する可能性は非常に低い。
【0008】
ＰＣａの有効な管理は、正確な診断を必要とする。しかし、臨床医にとっての課題は、類似の症状を提示する良性状態（良性前立腺肥大症（ＢＰＨ））をＰＣａと区別することである。ＰＳＡ試験は、推定人口を基準として、負の利益対害の比率を示す（非特許文献１１）。したがって、ＰＳＡの感度及び特異性に寄与し得るバイオマーカーは、患者をさらなる調査のための二次医療に紹介するか、又は一次医療において管理するかについて、より情報に基づく管理決定がなされ得るように、臨床医にさらなる情報を提供することができる。
【0009】
本発明は、ＰＣａ様症状を有して一次医療に訪れる患者における、血清バイオマーカーの組み合わせであって、低及び高リスクカテゴリーへの患者のトリアージを改善することにより患者管理を向上するために使用され得る、上記血清バイオマーカーの組み合わせを提示する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0010】
【非特許文献1】Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＵＫ： Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ． ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒｒｅｓｅａｒｃｈｕｋ．ｏｒｇ／ｈｅａｌｔｈ－ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ／ｃａｎｃｅｒ－ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ／ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ－ｂｙ－ｃａｎｃｅｒ－ｔｙｐｅ／ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｃａｎｃｅｒ．
【非特許文献2】Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ： Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｜ Ｃａｎｃｅｒ．Ｎｅｔ． Ｊａｎｕａｒｙ． ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｎｅｔ／ｃａｎｃｅｒ－ｔｙｐｅｓ／ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｃａｎｃｅｒ／ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ． Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ２０１９．
【非特許文献3】Ｐｏｐｉｏｌｅｋ Ｍ， Ｒｉｄｅｒ ＪＲ， Ａｎｄｒｅｎ Ｏ， ｅｔ ａｌ． Ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｅａｒｌｙ， ｌｏｃａｌｉｚｅｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ： Ａ ｆｉｎａｌ ｒｅｐｏｒｔ ｆｒｏｍ ｔｈｒｅｅ ｄｅｃａｄｅｓ ｏｆ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ． Ｅｕｒ Ｕｒｏｌ． ２０１３；６３（３）：４２８－４３５． ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｕｒｕｒｏ．２０１２．１０．００２．
【非特許文献4】Ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ － Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ａｎｄ ｃａｕｓｅｓ － Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎｉｃ． ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｍａｙｏｃｌｉｎｉｃ．ｏｒｇ／ｄｉｓｅａｓｅｓ－ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ／ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｃａｎｃｅｒ／ｓｙｍｐｔｏｍｓ－ｃａｕｓｅｓ／ｓｙｃ－２０３５３０８７． Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊｕｎｅ １０， ２０２１．
【非特許文献5】Ｈａｍｉｌｔｏｎ Ｗ， Ｓｈａｒｐ ＤＪ， Ｐｅｔｅｒｓ ＴＪ， Ｒｏｕｎｄ ＡＰ． Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｅｆｏｒｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ： Ａ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ－ｂａｓｅｄ， ｃａｓｅ－ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ． Ｂｒ Ｊ Ｇｅｎ Ｐｒａｃｔ． ２００６；５６（５３１）：７５６－７６２．
【非特許文献6】Ｓｉｍｏｎｅａｕ ＡＲ． Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ－ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ． Ｒｅｖ Ｕｒｏｌ． ２００６；８ Ｓｕｐｐｌ ２（Ｓｕｐｐｌ ２）： Ｓ５６－６７．
【非特許文献7】Ｒｕｂｉｎ ＭＡ， Ｄｕｎｎ Ｒ， Ｋａｍｂｈａｍ Ｎ， Ｍｉｓｉｃｋ ＣＰ， Ｏ’Ｔｏｏｌｅ ＫＭ． Ｓｈｏｕｌｄ ａ Ｇｌｅａｓｏｎ ｓｃｏｒｅ ｂｅ ａｓｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ａ ｍｉｎｕｔｅ ｆｏｃｕｓ ｏｆ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｂｉｏｐｓｙ？ Ａｍ Ｊ Ｓｕｒｇ Ｐａｔｈｏｌ． ２０００；２４（１２）：１６３４－１６４０． ｄｏｉ：１０．１０９７／０００００４７８－２０００１２０００－００００７．
【非特許文献8】Ｅｐｓｔｅｉｎ ＪＩ． Ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｇｒａｄｉｎｇ： ａ ｄｅｃａｄｅ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ２００５ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｓｙｓｔｅｍ． Ｍｏｄ Ｐａｔｈｏｌ． ２０１８；３１（Ｓ１）：４７－６３． ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｏｄｐａｔｈｏｌ．２０１７．１３３．
【非特許文献9】Ｓｔａｒｋ ＪＲ， Ｍｕｃｃｉ Ｌ， Ｒｏｔｈｍａｎ ＫＪ， Ａｄａｍｉ ＨＯ． Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｍａｉｎｓ ｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓｉａｌ． ＢＭＪ． ２００９；３３９． ｄｏｉ：１０．１１３６／ｂｍｊ．ｂ３６０１．
【非特許文献10】Ｅｔｚｉｏｎｉ Ｒ， Ｇｕｌａｔｉ Ｒ， Ｃｏｏｐｅｒｂｅｒｇ Ｍ， Ｐｅｎｓｏｎ Ｄ， Ｗｅｉｓｓ Ｎ， Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｉ． Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂａｓｉｎｇ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｐｏｌｉｃｉｅｓ ｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｒｉａｌｓ： Ｔｈｅ ＵＳ ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ ｓｅｒｖｉｃｅｓ ｔａｓｋ ｆｏｒｃｅ ａｎｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ． Ｍｅｄ Ｃａｒｅ． ２０１３；５１（４）：２９５－３００． ｄｏｉ：１０．１０９７／ＭＬＲ．０ｂ０１３ｅ３１８２７ｄａ９７９．
【非特許文献11】Ａｌｂｅｒｔｓ ＡＲ， Ｓｃｈｏｏｔｓ ＩＧ， Ｒｏｏｂｏｌ ＭＪ． Ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ－ｂａｓｅｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ： Ｐａｓｔ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ． ２０１５． ｄｏｉ：１０．１１１１／ｉｊｕ．１２７５０．
【非特許文献12】Ｙｏｕｎｇ ＳＭ， Ｂａｎｓａｌ Ｐ， Ｖｅｌｌａ ＥＴ， Ｆｉｎｅｌｌｉ Ａ， Ｌｅｖｉｔｔ Ｃ， Ｌｏｂｌａｗ Ａ． Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｆｏｒ ｒｅｆｅｒｒａｌ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｆａｍｉｌｙ ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｒｉｍａｒｙ ｃａｒｅ ｐｒｏｖｉｄｅｒｓ． Ｃａｎ Ｆａｍ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ． ２０１５；６１（１）：３３－３９．
【非特許文献13】Ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ Ｇｕｉｄａｎｃｅ ＮＩＣＥ． ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎｉｃｅ．ｏｒｇ．ｕｋ／ｇｕｉｄａｎｃｅ／ｎｇ１３１／ｃｈａｐｔｅｒ／Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ＃ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ－ａｎｄ－ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．
【非特許文献14】ＭｃＮａｌｌｙ ＣＪ， Ｒｕｄｄｏｃｋ ＭＷ， Ｍｏｏｒｅ Ｔ， Ｍｃｋｅｎｎａ ＤＪ． Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｔｈａｔ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ Ｂｅｎｉｇｎ Ｐｒｏｓｔａｔｉｃ Ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ｆｒｏｍ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ： Ａ Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗ． ２０２０． ｄｏｉ：１０．２１４７／ＣＭＡＲ．Ｓ２５０８２９．
【非特許文献15】Ｄｕｆｆｙ ＭＪ． Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ： Ｐｒｏｓｔａｔｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ａｎｄ ｂｅｙｏｎｄ． Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ Ｌａｂ Ｍｅｄ． ２０２０；５８（３）：３２６－３３９． ｄｏｉ：１０．１５１５／ｃｃｌｍ－２０１９－０６９３．
【非特許文献16】ＦｉｔｚＧｅｒａｌｄ ＳＰ， Ｌａｍｏｎｔ Ｊ Ｖ．， ＭｃＣｏｎｎｅｌｌ ＲＩ， Ｂｅｎｃｈｉｋｈ ＥＯ． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ａｎａｌｙｚｅｒ ｕｓｉｎｇ ｂｉｏｃｈｉｐ ａｒｒａｙ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ． Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ． ２００５；５１（７）：１１６５－１１７６． ｄｏｉ：１０．１３７３／ｃｌｉｎｃｈｅｍ．２００５．０４９４２９．
【非特許文献17】Ｋｕｒｔｈ ＭＪ， ＭｃＢｒｉｄｅ ＷＴ， ＭｃＬｅａｎ Ｇ， ｅｔ ａｌ． Ａｃｕｔｅ ｋｉｄｎｅｙ ｉｎｊｕｒｙ ｒｉｓｋ ｉｎ ｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃ ｔｒａｕｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｐｒｅ ａｎｄ ｐｏｓｔ－ｓｕｒｇｅｒｙ ｕｓｉｎｇ ａ ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｉｓｋ ｓｃｏｒｅ． Ｓｃｉ Ｒｅｐ． ２０２０；１０（１）：２０００５－２０００５． ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９８－０２０－７６９２９－ｙ．
【非特許文献18】Ｒ Ｃｏｒｅ Ｔｅａｍ． Ｒ： Ａ Ｌａｎｇｕａｇｅ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｆｏｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ． ２０１８．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0011】
本発明の第１態様は、前立腺がん様症状を有する患者における前立腺がんの診断を補助する方法であって、ｉ）患者から得られたエキソビボ血液、血清又は血漿サンプルにおける、総前立腺特異抗原（ｔＰＳＡ）のレベル、並びに、インターロイキン８（ＩＬ－８）、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ－１）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）及びニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）のうちの１つ以上のレベルを決定すること、並びに、ｉｉ）バイオマーカー濃度値のそれぞれを統計的方法に入力して、前記バイオマーカーの濃度の有意性を確立し、前立腺がんを有する又は発症している患者のリスクを示す出力を生成することを含む、方法である。好ましくは、ｔＰＳＡレベルは、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１のうちの１つ又は両方のレベルと併せて決定される。一実施形態において、ｔＰＳＡ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びＥＧＦのレベルが測定される。
【0012】
さらなる実施形態において、インターロイキン１０（ＩＬ－１０）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ－１β）、インターロイキン６（ＩＬ－６）、可溶性腫瘍壊死因子受容体１（ｓＴＮＦＲ１）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）又はＤ－ダイマーのうちの１つ以上のレベルも、患者サンプルにおいて決定され得る。
【0013】
本発明の方法は、基材において、その上に固定化されている活性化表面を、当該活性化表面の個別の領域において有している、当該基材、ｔＰＳＡに特異的な１つ以上の結合分子、並びに、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びＥＧＦのうちの１つ以上を含むソリッドステートデバイスによって可能とされ得る。ＩＬ－１０、ＶＥＧＦ、ＩＬ－１β、ＮＳＥ、ＩＬ－６、ｓＴＮＦＲ１、ＣＲＰ又はＤ－ダイマーに特異的な１つ以上の結合分子は、上記ソリッドステートデバイスの表面に存在していてもよい。
【0014】
本発明のさらなる態様は、非前立腺がん状態と前立腺がんとを区別するための血清ＩＬ－８の使用である。一実施形態において、非前立腺がん状態は良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）である。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】図１は、前立腺がんモデルである。（Ａ）検体モデル（ＡＵＲＯＣ０．８６０）及びｔＰＳＡ（ＡＵＲＯＣ０．７００）についてのＡＵＲＯＣ。モデル（ＥＧＦ、Ｌｏｇ１０ＩＬ－８、Ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１及びＬｏｇ１０ｔＰＳＡ）についてのＡＵＲＯＣをｔＰＳＡについてのＡＵＲＯＣと比較したとき、モデルは、非ＰＣａをＰＣａ患者と区別する際に、ｔＰＳＡ単独（ＤｅＬｏｎｇ ｐ＜０．００１）において有意に改善した。（Ｂ）カットオフ０．０５４でのモデルに関する診断による患者スコアの簡単なボックスプロット（非ＰＣａ（０）及びＰＣａ（１）；平均±ＳＤ）。（Ｃ）マーカーモデルに関する患者スコアによる予測確率についての適合線と簡単な散布図（ｒ＝０．９５）。
【発明を実施するための形態】
【0016】
前立腺生検を経験した男性のほぼ７０％が、ＰＣａに陰性となる。これらの侵襲性生検は、患者を、潜在的に深刻な副作用、すなわち、勃起機能不全及び重篤な敗血症にさせる。しかし、臨床的課題は、生検が必要であるときを決定することである。一次医療において患者を積極的にトリアージすることができるリスクベースのモデルは、生検に紹介する患者の数を有意に低減し得る。この研究において、ＰＣａに潜在的に関与する１９の血清マーカーが調査された。結果は、１１／１６（６８．８％）のサイトカインが、非ＰＣａ対ＰＣａ群間で有意差があったことを示した。これらのマーカーのうちの７つがＰＣａ群において上昇した一方で、４つのマーカーが非ＰＣａ群において上昇した。ＰＣａ群では、２／３（６６．６％）のがんマーカー（遊離ＰＳＡ及び総ＰＳＡ）も上昇した。
【0017】
ＩＬ－１０、ＥＧＦ、ＶＥＧＦ、ＭＣＰ－１、ｓＴＮＦＲ１、ＣＲＰ及びＤ－ダイマーの血清レベルが、ＰＣａ患者において有意により高かった。前立腺がんは炎症性疾患であるが、４／１１（３６．４％）の炎症マーカー（ＩＬ－８、ＩＬ－１β、ＮＳＥ及びＩＬ－６レベル）が、ＰＣａ患者において有意により低かったことが分かった。この研究において、１９／６１（３１．１％）のＰＣａ患者（前立腺生検の組織学的検査によって確認された）が、４．０ｎｇ／ｍｌの絶対的基準未満のｔＰＳＡ値を有した。これらのＰＣａ患者は、一次医療内で誤診されていた可能性があった。
【0018】
本発明は、前立腺がん様症状を有する患者における前立腺がんの診断を補助する方法であって、患者から得られたエキソビボサンプルにおけるｔＰＳＡ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１、ＮＳＥ及びＥＧＦからなるリストから選択される２つ以上のバイオマーカーの濃度を決定すること；並びにバイオマーカーの濃度の有意性を確立することを含む、方法を提供する。これらのバイオマーカーのいずれか２つ、３つ又は４つのマーカーの組み合わせが、前立腺がんの診断を補助する際に有用であり得る。本発明の好ましい実施形態において、２つ以上のバイオマーカーのうちの１つがｔＰＳＡである、なぜなら、これは前立腺がん診断の絶対的基準であるからであり、本発明は、これを改善する方法を提供する。前立腺がんの診断のためのマーカーの好ましい組み合わせとして、ｔＰＳＡ及びＩＬ－８、ｔＰＳＡ及びＭＣＰ－１、ｔＰＳＡ及びＥＧＦ、ｔＰＳＡ及びＮＳＥ、ｔＰＳＡ、ＥＧＦ及びＩＬ－８；ｔＰＳＡ、ＥＧＦ及びＭＣＰ－１；ｔＰＳＡ、ＥＧＦ及びＮＳＥ；ｔＰＳＡ、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１；ｔＰＳＡ、ＩＬ－８及びＮＳＥ；ｔＰＳＡ、ＭＣＰ１及びＮＳＥ；ｔＰＳＡ、ＥＧＦ、ＩＬ－８及びＭＣＰ１；並びにｔＰＳＡ、ＥＧＦ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びＮＳＥが挙げられる。好ましくは、マーカーの組み合わせは、ｔＰＳＡ並びにＩＬ－８及びＭＣＰ－１のうちの１つ又は両方を含み、さらにより好ましくは、マーカーの組み合わせは、ｔＰＳＡ、ＩＬ－８、ＭＣＰ１及びＥＧＦからなる。
【0019】
本発明のさらなる態様は、前記組み合わせに加え、インターロイキン１０（ＩＬ－１０）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ－１β）、インターロイキン６（ＩＬ－６）、可溶性腫瘍壊死因子受容体１（ｓＴＮＦＲ１）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）又はＤ－ダイマーのうちの１つ以上の測定である。
【0020】
用語「バイオマーカー」は、本発明の文脈において、患者の生物学的サンプルにおいて存在する分子を指し、そのレベルは、前立腺がんの指標となり得る。かかる分子は、ペプチド／タンパク質又は核酸及びその誘導体を含んでいてよい。本明細書において使用されているとき、用語「決定する」は、存在する物質、この場合、患者サンプルにおけるバイオマーカーの量について定量的に分析することを意味する。
【0021】
用語「ｔＰＳＡ」は、本明細書において使用されているとき、総前立腺特異抗原（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０７２８８）を指し、遊離及び結合ＰＳＡの両方を含む。
【0022】
用語「ＭＣＰ－１」は、本明細書において使用されているとき、ケモカインＣ－Ｃモチーフリガンド２（ＣＣＬ２）としても知られている、単球走化性タンパク質１（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ１３５００）を指す。
【0023】
用語「ＥＧＦ」は、本明細書において使用されているとき、上皮増殖因子（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０１１３３）を指す。
【0024】
用語「ＩＬ－８」は、本明細書において使用されているとき、インターロイキン８（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ１０１４５）を指す。
【0025】
用語「ＮＳＥ」は、本明細書において使用されているとき、ガンマエノラーゼ及びエノラーゼ２（ＥＮＯ２）としても知られている、ニューロン特異的エノラーゼ（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０９１０４）を指す。
【0026】
本発明の文脈において、「対照」又は「対照値」は、前立腺がんを有していない患者において典型的に見られるバイオマーカーのレベルを意味することが理解される。バイオマーカーの対照レベルは、前立腺がんを有していない人から単離されたサンプルの分析によって決定されてよく、このような人に典型的であると当業者によって理解されるバイオマーカーのレベルであってよい。バイオマーカーの対照値は、当該分野において知られている方法によって決定されてよく、バイオマーカーについての正常値は、バイオマーカーレベルを決定するのに使用されるアッセイの製造者からの文献が参照されてよい。対照は、較正として確立され得、もしくは、較正曲線は、複数の濃度において検体調製物を使用して作成され得る。サンプルから生成されるアッセイシグナル出力は、較正曲線に適用されて、前記サンプルの検体レベルの定量化を可能にする。
【0027】
バイオマーカーの「レベル」は、サンプル内のバイオマーカーの量、発現レベル又は濃度を指す。このレベルは、別のバイオマーカー又は以前のサンプルとの比較における相対的なレベルであり得る。バイオマーカーレベルは、比として、例えば、同じバイオマーカーについての患者レベル及び対照レベル間の、又は、患者サンプル内の異なるバイオマーカーのレベル間の比として表されてよい。
【0028】
本明細書において使用される、用語「サンプル」は、患者又は対象から得られる生物学的サンプルを含み、血液、血漿、血清又は尿を含んでいてよい。本明細書に記載されている本発明の方法は、エキソビボで実施される。誤解を避けるために、用語「エキソビボ」は、当該分野におけるその通常の意味を有しており、サンプルが以前に得られている対象の体外の人工環境において対象から得られるサンプル内で又は上で実施される方法を指している。サンプルは、本発明のバイオマーカーが決定され得る対象から得られたいずれのサンプルであってもよい。好ましいサンプルとして、血液サンプル、血清サンプル及び血漿サンプルが含まれる。最も好ましくは、サンプルは、血清サンプルである。
【0029】
用語「患者」及び「対象」は、本明細書において互換可能に使用され、限定されないが、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ科動物、ネコ科動物、齧歯動物などを含めたあらゆる動物（例えば、哺乳動物）を指す。好ましくは、対象又は患者は、男性ヒトである。より好ましくは、本発明の患者は、排尿の際の痛い感覚又は灼熱感、頻尿（特に夜間（夜間頻尿））、排尿の停止及び開始が困難であること、突発性の勃起機能不全、尿中の血液（血尿症）又は精液中の血液、骨痛、及び体重減少を含めた、１つ以上の前立腺がん様症状を提示している患者である。用語「前立腺がん様症状」は、本明細書において使用されているとき、以前に決定されている総ＰＳＡ結果の上昇又は異常なＤＲＥ所見を含むことも意図される。
【0030】
本発明のバイオマーカーの濃度は、患者から以前に単離されたサンプルにおいて逐次的又は同時のいずれで決定されてもよい。サンプルにおけるバイオマーカーのレベルの決定は、当該分野において知られている常套的な方法、例えば、免疫学的方法、例えば、免疫比濁アッセイ又はＥＬＩＳＡベースのアッセイによって決定されてよい。好ましくは、本発明の方法は、患者から単離されたサンプルにおけるバイオマーカーのレベルを決定するためにソリッドステートデバイスを使用する。ソリッドステートデバイスは、基材において、これに固定化されているバイオマーカーに特異的に結合する抗体を有している、上記基材を含む。かかる抗体は、基材の活性化表面の控えめな領域で固定化されてよい。ソリッドステートデバイスは、患者から単離されたサンプルにおける１つのバイオマーカーのレベルが当該サンプルにおける対象となる１つ以上のさらなるバイオマーカーのレベルと同時に決定され得るようにマルチ検体アッセイを行ってよい。この実施形態において、ソリッドステートデバイスは、基材と共有結合する所望の抗体をそれぞれ持つ多数の個別の反応部位を有しており、かかる反応部位間の基材の表面は、標的バイオマーカーに関して不活性である。ソリッドステートの、マルチ－検体デバイスは、したがって、非特異的結合をほとんど又は全く示さなくてよい。ここで、バイオマーカーのうちの１つ以上は、これらがＥＬＩＳＡ又は免疫比濁アッセイなどの好適なフォーマットを使用して同時に又は実際には別々に決定され得るマルチ検体フォーマットと適合可能ではない。
【0031】
本発明において使用され得るデバイスは、好適な基材の表面を活性化し、当該表面における個別の部位に抗体のアレイをアプライすることによって調製されてよい。所望により、他の活性領域がブロックされてよい。リガンドは、リンカーを介して基材に結合していてよい。特に、活性化表面が、オルガノシラン、二官能性リンカー及び抗体と連続的に反応することが好ましい。好ましい固体支持体材料は、バイオチップの形態である。バイオチップは、典型的には、例えば鉱物又はポリマーベースであってよいが好ましくはセラミックである平面状の基材である。本発明の方法において使用されるソリッドステートデバイスは、例えば、ＧＢ特許番号ＧＢ２３２４８６６に開示されている方法にしたがって製造されてよい。好ましくは、本発明の方法において使用されるソリッドステートデバイスは、Ｂｉｏｃｈｉｐ Ａｒｒａｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙシステム（ＢＡＴ）（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄから入手可能、Ｃｒｕｍｌｉｎ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｉｒｅｌａｎｄ）である。より好ましくは、Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ、Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ及びＭｕｌｔｉｓｔａｔ装置（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからも入手可能）が使用されて、サンプルにおけるバイオマーカーのレベルを決定してよい。
【0032】
ソリッドステートデバイスは、これに付着した結合分子を含み、前記結合分子が、ｔＰＳＡ、並びに、別々に、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１、ＥＧＦ及びＮＳＥのうちの１つ以上に特異的な親和性を有している。好ましくは、結合分子は、ｔＰＳＡ、並びに、別々に、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１のうちの１つ又は両方に親和性を有する。さらにより好ましくは、結合分子は、個別の箇所においてそれぞれ、ｔＰＳＡ、ＩＬ－８、ＭＣＰ１及びＥＧＦに特異的な親和性を有する。
【0033】
ソリッドステートデバイスは、個別の箇所においてそれぞれ、インターロイキン１０（ＩＬ－１０）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ－１β）、インターロイキン６（ＩＬ－６）、可溶性腫瘍壊死因子受容体１（ｓＴＮＦＲ１）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）又はＤ－ダイマーのうちの１つ以上から選択されるさらなるバイオマーカーに特異的な親和性をそれぞれ有している１つ以上の結合分子をさらに含んでいてよい。
【0034】
本発明は、患者における前立腺がんの診断を補助するための方法において記載されているソリッドステートデバイスの使用も提供する。
【0035】
用語「免疫測定法」、「免疫検出」及び免疫学的方法」は、本明細書において互換可能に使用され、サンプルにおけるタンパク質の存在又はレベルを同定するための抗体ベースの技術を指す。かかるアッセイ及び方法の例は、当業者によく知られている。
【0036】
用語「結合分子」は、本明細書において使用されているとき、標的分子が特異的結合の結果として検出され得るように、標的分子、この場合にはバイオマーカーに特異的に結合することが可能であるいずれの分子も指す。本発明において使用され得る結合分子として例えば、抗体、アプタマー、ファージ及びオリゴヌクレオチドが挙げられる。本発明の好ましい実施形態において、結合分子は、抗体である。用語「抗体」、又はその複数形は、重鎖及び軽鎖（ＶＨＳ及びＶＬＳ）の免疫グロブリン可変ドメイン、より具体的には、相補性決定領域（ＣＤＲ）の結合特性によって決定される、標的においてエピトープを特異的に認識する免疫グロブリンを指す。多くの潜在的な抗体形態が当該分野において知られており、限定されないが、複数のインタクトモノクローナル抗体又はポリクローナル混合物（インタクトモノクローナル抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、及びＦｒ断片、線状抗体、単鎖抗体、及び抗体断片を含む多重特異性抗体）、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ’ｓ）、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、並びに標的における所与のエピトープの認識に必要なドメインを含む融合タンパク質を含む）を挙げることができる。好ましくは、本発明の文脈における抗体への言及は、ポリクローナル又はモノクローナル抗体を指す。抗体は、限定されないが、放射性核種、フルオロフォア、又は染料を含めた、診断結果に関する各種レポーター部位にコンジュゲートされていてもよい。
【0037】
用語「特異的に結合する」は、抗体－エピトープ相互作用の文脈において、抗体及びエピトープが、抗体又はエピトープのいずれかが代替分子、例えば無関係のタンパク質に置き換えられているときよりも、より頻繁に若しくは迅速に、又は、より高い持続時間若しくは親和性と、又は、これらのいずれかの組み合わせと関連する相互作用を指す。概して、必ずしもではないが、結合への言及は、特異的認識を意味する。モノクローナル抗体による標的の特異的結合またはその欠失を決定するための、当該分野において知られている技術として、限定されないが、ＦＡＣＳ分析、免疫細胞化学的染色、免疫組織化学、ウエスタンブロッティング／ドットブロッティング、ＥＬＩＳＡ、親和性クロマトグラフィが挙げられる。例として、限定することなく、特異的結合又はその欠失は、上記標的を特異的に認識するために当該分野において知られている抗体を使用することを含む対照、及び／又は、上記標的の非存在、若しくは最小の特異的認識を含む対照（例えば、対照が非特異的抗体の使用を含む）との比較分析によって決定されてよい。上記比較分析は、定性的又は定量的のいずれであってもよい。しかし、所与の標的の特異的認識を実証する抗体又は結合部位は、当該標的への特異性が、例えば当該標的及び相同タンパク質の両方を特異的に認識する抗体と比較したとき、より高いと言われていることが理解される。
【0038】
がんを有する患者から単離されたサンプルに存在するバイオマーカーは、対照のものと異なるレベルを有し得る。しかし、対照と比較して異なるいくつかのバイオマーカーのレベルは、許容可能な精度でがんを診断するのに使用され得るような、がんと強い充分な相関を示さないことがある。２つ以上のバイオマーカーが診断方法において使用されるべきであるときには、好適な数学又は機械学習分類モデル、例えば、ロジスティック回帰式などが導出され得る。かかるモデルは、本明細書に記載されているとき、「統計的方法」と称され得る。バイオマーカーのレベルの有意性は、前記モデルを入力することによって確立され得る。かかる分類モデルは、決定木、人工ニューラルネットワーク、ロジスティック回帰、ランダムフォレスト、サポートベクターマシン、又は、実際には、当該分野にお
いて知られている分類モデルを開発するほかのいずれかの方法のうちの、少なくとも１つから選ばれてよい。本明細書において使用されているモデルの出力は、前立腺がんを有する又は発症している患者のリスクと相関し得る。かかる出力は、数値、例えば、０と１との間の数、オッズ比の値、リスク比／相対リスク値、又は、アルファベット出力、例えば、「イエス（ｙｅｓ）」若しくは「ノー（ｎｏ）」、又は、「高リスク」、「低リスク」などであり得る。
いて知られている分類モデルを開発するほかのいずれかの方法のうちの、少なくとも１つから選ばれてよい。本明細書において使用されているモデルの出力は、前立腺がんを有する又は発症している患者のリスクと相関し得る。かかる出力は、数値、例えば、０と１との間の数、オッズ比の値、リスク比／相対リスク値、又は、アルファベット出力、例えば、「イエス（ｙｅｓ）」若しくは「ノー（ｎｏ）」、又は、「高リスク」、「低リスク」などであり得る。
【0039】
変数は、データが正常に分布していないとき、回帰モデルにおいて対数変換され得る。本発明の一実施形態において、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びｔＰＳＡの値をＥＧＦ、ｌｏｇ１０ＩＬ－８、ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１、及びｌｏｇ１０ｔＰＳＡの組み合わせでｌｏｇ１０変換し、ｔＰＳＡ単独の予測性能を有意に改善してＰＣａを有する患者を同定した。このマーカー組み合わせは、ｔＰＳＡと比較して、増加したＡＵＲＯＣ（０．８６０対０．７００）、感度（７８．７％対６８．９％）、特異性（７６．５％対６７．２％）、陽性的中率（ＰＰＶ）（７６．２％対６６．７％）及び陰性的中率（ＮＰＶ）（７９．０％対６９．４％）を有した。当業者は、所与の集団について生成されたモデルが、異なる集団又は患者コホートから得られるデータセットへの適用のために調整される必要がある場合があることを認識するであろう。
【0040】
診断テストの文脈において使用されている用語「感度」は、真陽性率と称されることがある、バイオマーカー試験によって陽性であるとされた対象のうち、実際に陽性である対象の百分率又は比示す表すものである。診断テストの文脈において使用されている用語「特異性」は、バイオマーカー試験によって陰性とされる対象のうち、実際に陰性の状態にある対象の百分率又は比（真陰性率）を示す。これらの研究において、陽性対象の数については、これらの分析が行われ得るために、試験の現在の絶対的基準（この場合には、生検された腫瘍組織の組織病理）によって予め決定されることが慣例である。
【0041】
臨床試験の診断精度を定量化するための１つの従来の目標は、その性能を単一の数字によって表現することである。最も一般的な世界的尺度は、受信者動作特性（ＲＯＣ）プロットの曲線下面積（ＡＵＣ）である。ＲＯＣ曲線下面積は、認識される測定が状態の正確な同定を可能にする確率の尺度である。慣例により、この面積は、典型的には≧０．５である。値は、１．０（２つの群の試験値の完全な分離）と０．５（２つの群の試験値間に明らかな分布の差が無い）との間の範囲である。面積は、対角線に最も近い点又は９０％の特異性での感度などのプロットの特定の部分のみによって決まるのでは無く、プロット全体によって決まる。これは、ＲＯＣプロットが完全な１（面積＝１．０）にどれだけ近いかの定量的な、描写的表現である。本発明の文脈において、２つの異なる状態は、患者が前立腺がんを有するか否かである。表４は、ｔＰＳＡ単体および他のマーカーとの組み合わせについての曲線下面積を示す。臨床の場においては、１００％の感度で前立腺がんを割り付けることが望ましい。これは、結局はこのカテゴリーの外側となる対象の大部分が、前立腺がんが除外され、不必要な生検を回避することができることを意味する。
【0042】
同定されたマーカー（ＥＧＦ、ＩＬ－８及びＭＣＰ－１）とｔＰＳＡとの組み合わせを使用して、一次医療を受けたＰＣａの疑いがある患者をトリアージするアルゴリズムを開発した。当該ＰＣａモデルは、バイオチップアッセイから生じたデータの統計的分析及び数学モデリングを使用して開発した。ＬＡＳＳＯモデリングを使用して、モデルの過学習を同時に低減しながら精度に寄与する血清マーカーを同定した。ＰＣａモデルは、再サンプリング方法を使用する厳しい試験を経ることにより、この患者コホートにおける実行可能性を求めた。このデータセットでの感度及び特異性を最大にする患者リスクスコア出力となるように、カットオフ値を選択した。バイオマーカーの正常な又は「バックグラウンド」濃度が、例えば、年齢、性別、又は民族的／地理的遺伝子型に起因する僅かな変動を示し得ることが当該分野においてよく理解されている。結果として、本発明の方法におい
て使用されるカットオフ値もまた、標的患者又は集団に応じた最適化に起因して変動し得る。カットオフを調整することもまた、特異性を犠牲にして感度を増加させ得、逆もまた然りである。また、当該モデルを、ＰＣａの患者のリスクを簡潔且つ有効に可視化し得る動的ノモグラムを使用して試験した。各マーカーについてのデータをノモグラムに入れ、Ａｐｐが数字出力を返す；０から１の確率（すなわち、非ＰＣａ、及びＰＣａのリスク）。
て使用されるカットオフ値もまた、標的患者又は集団に応じた最適化に起因して変動し得る。カットオフを調整することもまた、特異性を犠牲にして感度を増加させ得、逆もまた然りである。また、当該モデルを、ＰＣａの患者のリスクを簡潔且つ有効に可視化し得る動的ノモグラムを使用して試験した。各マーカーについてのデータをノモグラムに入れ、Ａｐｐが数字出力を返す；０から１の確率（すなわち、非ＰＣａ、及びＰＣａのリスク）。
【0043】
ＰＣａモデルは、バイオマーカーリスクスコア（ＢＲＳ）に基づいて症候性患者を低及び高リスクカテゴリーに層別化し得る。ＰＣａモデルは、非ＰＣａ患者を、ＰＣａを有する患者から層別化することにおいて、ｔＰＳＡ単独よりも効率が良かった。ＰＣａモデルは、臨床医が、患者管理、すなわち、いつ患者を生検のために二次医療に紹介するかに関してエビデンスに基づく決定をすることを可能にするために臨床的に使用され得ることが提案される。
【0044】
リスク予測モデルを開発するための多変量アプローチ及びモデリングは、単一のマーカーのものと比較して精度において有利である。プロテオーム、ゲノム及び臨床測定を組み合わせることにより、臨床医にエビデンスに基づく意思決定を与える。これらのリスク層別化方法も、ＰＣａについての英国国立医療技術評価機構（ＮＩＣＥ２０１９）ガイドラインによって推奨されている。
【0045】
さらに、本発明の方法を利用することで、臨床的特徴を、単一の「リスクスコア」に組み合わされ又はＢＲＳ及び別個の臨床リスクスコア（ＣＲＳ）として提示され得るバイオマーカー結果に加えて、入力することが可能である。現在、ＰＣａに関するいくつかの臨床的リスク、例えば、年齢、前立腺容量、及びＰＣａの家族歴が同定されている。臨床的リスクをバイオマーカーからの結果と共に組み込むことにより、臨床医が、エビデンスに基づく決定をすることを可能にし、患者管理を支援し得る。本発明者らの研究は、ＰＣａモデルが、臨床的因子、例えば、年齢、ＰＣａの家族歴、ＢＭＩレベル、及び他の臨床的因子の収集によりさらに改善され得ることを示唆している。例えば、バイオマーカーリスクスコア（本明細書に提示されているバイオマーカーの組み合わせのいずれかによって決定される）及び臨床的リスクスコアの両方について陽性である患者が、２つのリスクスコアのうちの１つについてのみ陽性である患者よりも高いリスクのカテゴリーに置かれ得る。したがって、本発明のさらなる実施形態は、前立腺がん様症状を提示する患者をリスク群に分類するためのＢＲＳ及びＣＲＳの組み合わせることである。前記モデルは、ｔＰＳＡに置き換わるように設計されたものではなく、その限界を認識して、どの患者が生検に紹介されるべきかを推奨するときに臨床医にさらなる管理エビデンスを潜在的に提供するものである。
【0046】
循環ＩＬ－８血清レベルは、ＰＣａの診断、悪性度又は予後の有意な予測因子であることはこれまで示されていない。しかし、増加した循環ＩＬ－８血清レベルは、基礎炎症性疾患を有する患者において検出されてきた。本発明者らの研究において、ＩＬ－８を、炎症性疾患、すなわち、ＢＰＨを有する患者を潜在的に同定することによって、非ＰＣａをＰＣａから区別し得るマーカーとして同定した。驚くべきことに、ＩＬ－８レベルは、非前立腺がん対照と比較して前立腺がん患者において有意により低かった。非前立腺対照のほぼ５０％がＢＰＨを有し（３０／６４）、前立腺がん患者におけるＩＬ－８レベルも、０．６７１のＡＵＲＯＣを有するＢＰＨ患者（ＢＰＥ１４３．６０＋２５７．３８ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝３０）対ＰＣａ（ｎ＝６１）２８．３５＋４２．３９ｐｇ／ｍｌ）のみと比較したとき、有意により低かった（信頼区間－０．５５５－０．７８７）。
【0047】
そのため、本発明のさらなる態様は、非前立腺がん状態と前立腺がんとの区別を助けるための血清ＩＬ－８の使用である。好ましくは、非前立腺状態はＢＰＨである。
【実施例】
【0048】
材料及び方法
患者コホート及びサンプル収集
この研究において、１２５の患者が含まれた。患者コホートは、２つの独立した患者サンプルセットからなった。
患者コホート及びサンプル収集
この研究において、１２５の患者が含まれた。患者コホートは、２つの独立した患者サンプルセットからなった。
【0049】
第１の患者セット（Ｎ＝３３；ｎ＝１０ 非ＰＣａ及びｎ＝２３ ＰＣａ）を、２０１５～２０１８の間に、Ｒｏｙａｌ Ｓｕｒｒｅｙ Ｃｏｕｎｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｆｒｉｍｌｅｙ Ｐａｒｋ Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｗｅｘｈａｍ Ｐａｒｋ Ｈｏｓｐｉｔａｌ及びＢａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ ａｎｄ Ｎｏｒｔｈ Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌの泌尿器科の診療所によってリクルートした（ＰｒｏＣｕｒｅ Ｓｔｕｄｙ １７０８５８、Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ；倫理リファレンス：１５／ＬＯ／０２１８）。試験対象患者基準は、異常なＰＳＡ試験の原因を調査するためにＧＰによって紹介された１８歳以上の男性を含んだ。除外基準は、尿一般検査又は途中の尿顕微鏡検査確認された、活動性尿路感染症の、ＰＳＡ４未満及び２０ｎｇ／ｍｌ超を有する男性、ＰＣａであると既に診断されている男性、悪性腫瘍の既往または併発のある男性（皮膚の基底細胞がんは除く）、並びに、インフォームド・コンセントを与えることができない男性を含んだ。血液（２４ｍｌ）及び尿（２０～３０ｍｌ）を前立腺検査後に詳細な病歴と併せて収集した。ヘルシンキ宣言及び記載されているインフォームド・コンセントに適合する研究を全ての参加者から得た。
【0050】
第２の患者コホート（Ｎ＝９２；ｎ＝５４ 非ＰＣａ及びｎ＝３８ ＰＣａ）をＤｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＤＬＳ）、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡから得た。患者サンプルを匿名化して公表し、施設内倫理委員会（ＩＲＢ）の承認の要求が免除された（Ｅｘｅｍｐｔ Ｃａｔｅｇｏｒｙ４、ＩＲＢ／ＥＣ）。しかし、サンプルを、承認されたプロトコル４５ＣＦＲ４６．１１６の下で本人によって提供されたインフォームド・コンセントに従って入手した。病歴を有する血清（１ｍｌ）を各ＤＬＳ患者から得た。サンプルを、前立腺関連状態についてＩＣＤ－１０コードに基づいて治療未経験の患者から選択した。
【0051】
前立腺生検の病理学検査
前立腺がんを、両方のサンプルセットからの前立腺生検の組織学的検査によって確認した。病理学者によって割り付けられたグリソンスコアを表１に記載する。非ＰＣａ群は、良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）と確認された患者を含んだ（ｎ＝３０／６１（４９．２％））。全ての患者が、前立腺生検の時点で治療未経験であった。
前立腺がんを、両方のサンプルセットからの前立腺生検の組織学的検査によって確認した。病理学者によって割り付けられたグリソンスコアを表１に記載する。非ＰＣａ群は、良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）と確認された患者を含んだ（ｎ＝３０／６１（４９．２％））。全ての患者が、前立腺生検の時点で治療未経験であった。
【0052】
両方の患者コホートを合わせ（Ｎ＝１２５）、病理報告書に応じて２つの群に分けた：非ＰＣａ（ｎ＝６４／１２５（５１．２％））及びＰＣａ（ｎ＝６１／１２５（４８．８％））。
【0053】
臨床的因子及び挙動
臨床的因子は、全ての患者に利用可能という訳ではなかった。しかし、データが利用可能であった場合には、最も一般的な主症状には：ＢＰＨ、下部尿路症状（ＬＵＴＳ）、尿閉、尿意切迫、夜間頻尿、腰痛、顕微鏡的血尿、高脂血症、及び高血圧が含まれた。患者の中の多くが、ＰＣａ診断の前に良性疾患の既往歴が無かった。
臨床的因子は、全ての患者に利用可能という訳ではなかった。しかし、データが利用可能であった場合には、最も一般的な主症状には：ＢＰＨ、下部尿路症状（ＬＵＴＳ）、尿閉、尿意切迫、夜間頻尿、腰痛、顕微鏡的血尿、高脂血症、及び高血圧が含まれた。患者の中の多くが、ＰＣａ診断の前に良性疾患の既往歴が無かった。
【0054】
喫煙歴及びアルコール消費量（単位／週）も、限られた数の患者で利用可能であった。多くのＰＣａ患者が喫煙経験者であった。データが利用可能であった場合、１日当たりの
喫煙本数が１０～２５の範囲であった。タバコの箱年データは利用可能で無かった。アルコール消費量は、１～４８単位／週の範囲であった（データが利用可能であった場合）。
喫煙本数が１０～２５の範囲であった。タバコの箱年データは利用可能で無かった。アルコール消費量は、１～４８単位／週の範囲であった（データが利用可能であった場合）。
【0055】
限られた数の患者について薬剤も記述した；データが利用可能であった場合、特許が処方された最も一般的な薬物には：セルトラリン、ロラタジン、オメプラゾール、アスピリン、タムスロシン、シンバスタチン、ロサルタン、アトルバスタチン、インバスタチン、ベンドロフルメチアジド、シタロプラム、シルデナフィル、フルオキセチン、ラニチジン、メトホルミン及びビソプロロール；が含まれた。
【0056】
バイオマーカー分析
患者サンプルを、Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（ＲＣＬＳ）、Ａｎｔｒｉｍ、ＵＫにより、患者データについて二重盲検で科学者によって分析した。合計で１９のバイオマーカーを、製造元の指示にしたがって、Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒアナライザー（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ、Ｃｒｕｍｌｉｎ、ＵＫ）を使用してバイオチップアレイ技術（ＢＡＴ）（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ、Ｃｒｕｍｌｉｎ、ＵＫ）（非特許文献１６）によって調査した。バイオチップアレイにおけるマーカーについての検出限界（ＬＯＤ）は：ＥＧＦ ２．５ｐｇ／ｍｌ、ＩＦＮγ ２．１ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１α ０．９ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１β １．３ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－２ ４．９ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－４ ３．５ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－６ ０．４ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－８ ２．３ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１０ １．１ｐｇ／ｍｌ、ＭＣＰ－１ ２５．５ｐｇ／ｍｌ、ＴＮＦα ３．７ｐｇ／ｍｌ、ＶＥＧＦ １０．８ｐｇ／ｍｌ、ＣＲＰ ０．６７ｍｇ／ｌ、Ｄ－ダイマー ２．１ｎｇ／ｍｌ、ＮＳＥ ０．２６ｎｇ／ｍｌ及びｓＴＮＦＲ１ ０．２４ｎｇ／ｍｌ、ＣＥＡ ０．２９ｎｇ／ｍｌ、ｆＰＳＡ ０．０２ｎｇ／ｍｌ及びｔＰＳＡ ０．０４５ｎｇ／ｍｌであった。ＬＯＤ未満のバイオマーカーをＬＯＤの９０％として記録した（非特許文献１７）。
患者サンプルを、Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（ＲＣＬＳ）、Ａｎｔｒｉｍ、ＵＫにより、患者データについて二重盲検で科学者によって分析した。合計で１９のバイオマーカーを、製造元の指示にしたがって、Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒアナライザー（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ、Ｃｒｕｍｌｉｎ、ＵＫ）を使用してバイオチップアレイ技術（ＢＡＴ）（Ｒａｎｄｏｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ、Ｃｒｕｍｌｉｎ、ＵＫ）（非特許文献１６）によって調査した。バイオチップアレイにおけるマーカーについての検出限界（ＬＯＤ）は：ＥＧＦ ２．５ｐｇ／ｍｌ、ＩＦＮγ ２．１ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１α ０．９ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１β １．３ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－２ ４．９ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－４ ３．５ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－６ ０．４ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－８ ２．３ｐｇ／ｍｌ、ＩＬ－１０ １．１ｐｇ／ｍｌ、ＭＣＰ－１ ２５．５ｐｇ／ｍｌ、ＴＮＦα ３．７ｐｇ／ｍｌ、ＶＥＧＦ １０．８ｐｇ／ｍｌ、ＣＲＰ ０．６７ｍｇ／ｌ、Ｄ－ダイマー ２．１ｎｇ／ｍｌ、ＮＳＥ ０．２６ｎｇ／ｍｌ及びｓＴＮＦＲ１ ０．２４ｎｇ／ｍｌ、ＣＥＡ ０．２９ｎｇ／ｍｌ、ｆＰＳＡ ０．０２ｎｇ／ｍｌ及びｔＰＳＡ ０．０４５ｎｇ／ｍｌであった。ＬＯＤ未満のバイオマーカーをＬＯＤの９０％として記録した（非特許文献１７）。
【0057】
統計解析
Ｒバージョン４．０．５を使用して統計解析に着手した（非特許分析１８）。ウィルコクソンの順位和検定を使用して、差次的に発現されているマーカーを同定した。ｐ＜０．０５のマーカーを有意であるとみなした。マーカーがＰＣａを予測する能力を、ロジスティックＬａｓｓｏ回帰、続いて、いくつかのモデルの交差検証試験を使用してさらに調査した。個々のマーカー及びマーカーの組み合わせについて、受信者操作特性下面積（ＡＵＲＯＣ）（及び９５％ＣＩ）、感度（及び９５％ＣＩ）、特異性（及び９５％ＣＩ）、陽性的中率（ＰＰＶ）並びに陰性的中率（ＮＰＶ）を算出して、２つの診断群間で区別されたモデルを同定した（非ＰＣａ対ＰＣａ）。ＤｅＬｏｎｇ検定を使用してモデルについてのＡＵＲＯＣを比較し、ｔＰＳＡ；ｐ＜０．０５を有意であるとみなした。
Ｒバージョン４．０．５を使用して統計解析に着手した（非特許分析１８）。ウィルコクソンの順位和検定を使用して、差次的に発現されているマーカーを同定した。ｐ＜０．０５のマーカーを有意であるとみなした。マーカーがＰＣａを予測する能力を、ロジスティックＬａｓｓｏ回帰、続いて、いくつかのモデルの交差検証試験を使用してさらに調査した。個々のマーカー及びマーカーの組み合わせについて、受信者操作特性下面積（ＡＵＲＯＣ）（及び９５％ＣＩ）、感度（及び９５％ＣＩ）、特異性（及び９５％ＣＩ）、陽性的中率（ＰＰＶ）並びに陰性的中率（ＮＰＶ）を算出して、２つの診断群間で区別されたモデルを同定した（非ＰＣａ対ＰＣａ）。ＤｅＬｏｎｇ検定を使用してモデルについてのＡＵＲＯＣを比較し、ｔＰＳＡ；ｐ＜０．０５を有意であるとみなした。
【0058】
結果
この研究に関する患者の臨床的及び病理学的特徴を表１に記載する。ｔＰＳＡ及びｆＰＳＡの両方がＰＣａ群において有意に上昇した。しかし、ＣＥＡは、有意差が無かった。
この研究に関する患者の臨床的及び病理学的特徴を表１に記載する。ｔＰＳＡ及びｆＰＳＡの両方がＰＣａ群において有意に上昇した。しかし、ＣＥＡは、有意差が無かった。
【0059】
【表1】
【0060】
バイオチップアレイ技術
バイオチップアレイを使用して得られたマーカー結果から、１１／１６（６８．８％）のマーカーが非ＰＣａ及びＰＣａ患者群間で有意差があった（表２）。これらのうち、ＭＣＰ－１及びＥＧＦを含めた、７／１６（４３．８％）のマーカーが、ＰＣａ患者対非ＰＣａにおいて有意に上昇し；ＩＬ－８を含めた、４／１６（２５％）が、ＰＣａ対非ＰＣａにおいて有意により低く、５／１６（３１．２％）が、いずれの群間でも有意差が無かった。
バイオチップアレイを使用して得られたマーカー結果から、１１／１６（６８．８％）のマーカーが非ＰＣａ及びＰＣａ患者群間で有意差があった（表２）。これらのうち、ＭＣＰ－１及びＥＧＦを含めた、７／１６（４３．８％）のマーカーが、ＰＣａ患者対非ＰＣａにおいて有意に上昇し；ＩＬ－８を含めた、４／１６（２５％）が、ＰＣａ対非ＰＣａにおいて有意により低く、５／１６（３１．２％）が、いずれの群間でも有意差が無かった。
【0061】
【表2】
【0062】
回帰分析
ロジスティックＬａｓｓｏ回帰により、ｔＰＳＡ単独に対してより高い感度及び特異性を実証したマーカーの組み合わせについてのモデルを同定した（表３）。ＰＣａ患者を同定するためにＬａｓｓｏ回帰によって選択された４つのマーカーは、ＥＧＦ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びｔＰＳＡを含んだ（図１Ａ）。データのいくつかが正常に分布していなかったため、ｌｏｇ１０変換をモデルにおけるＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びｔＰＳＡに適用した。
ロジスティックＬａｓｓｏ回帰により、ｔＰＳＡ単独に対してより高い感度及び特異性を実証したマーカーの組み合わせについてのモデルを同定した（表３）。ＰＣａ患者を同定するためにＬａｓｓｏ回帰によって選択された４つのマーカーは、ＥＧＦ、ＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びｔＰＳＡを含んだ（図１Ａ）。データのいくつかが正常に分布していなかったため、ｌｏｇ１０変換をモデルにおけるＩＬ－８、ＭＣＰ－１及びｔＰＳＡに適用した。
【0063】
ｔＰＳＡに対するＬａｓｓｏ（ＥＧＦ＋ｌｏｇ１０ＩＬ－８＋ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１＋ｌｏｇ１０ｔＰＳＡ）によって同定された新しいモデルをそのまま比較すると、偽陽性の数が２１／６４（３２．８％）から１５／６４（２３．４％）に減少した。
【0064】
【表3】
【0065】
患者リスクスコア（ＰＲＳ）の計算
ＰＣａのリスクは、以下のマーカー組み合わせに基づいた：ＥＧＦ、ｌｏｇ１０ＩＬ－８、ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１及びｌｏｇ１０ｔＰＳＡ。ＰＲＳ＝－８．９６１＋（０．０１０＊ＥＧＦ）＋（－１．５２４＊ｌｏｇ１０ＩＬ－８）＋（３．９５８＊ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１）＋（１．３１５＊ｌｏｇ１０ｔＰＳＡ）の式をこのデータセットから導出し、カットオフ０．０５４（図１Ｂに示されている）を適用してＰＣａを有する患者を同定するための最も高い感度及び特異性を達成し；ＰＲＳ＜０．０５４、患者はＰＣａについて陰性である一方で、ＰＲＳ≧０．０５４、患者はＰＣａについて陽性であり得た。ＰＲＳ（バイオマーカーリスクスコアとも称される）が、患者をトリアージするときに、臨床的リスク因子と併用され得ることに注意されるべきである。そのため、陽性のリスクスコア及び陽性の臨床的リスク因子（例えば、排尿の際の痛い感覚又は灼熱感、頻尿、排尿の停止又は開始が困難であること、突発性の勃起機能不全、尿又は精液中の血液）を有する患者を、さらなる調査のために緊急紹介することが優先される。臨床的リスク因子について陽
性であり且つＢＲＳについて陰性であった患者を、潜在的に、一次医療において管理し、又は必要に応じて調査に紹介すること可能性がある。重要なことに、このタイプの組み合わされた測定アプローチは、ＰＣａに関する英国国立医療技術評価機構（ＮＩＣＥ２０１９）ガイドラインによってリスク層別化方法に推奨されている。
ＰＣａのリスクは、以下のマーカー組み合わせに基づいた：ＥＧＦ、ｌｏｇ１０ＩＬ－８、ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１及びｌｏｇ１０ｔＰＳＡ。ＰＲＳ＝－８．９６１＋（０．０１０＊ＥＧＦ）＋（－１．５２４＊ｌｏｇ１０ＩＬ－８）＋（３．９５８＊ｌｏｇ１０ＭＣＰ－１）＋（１．３１５＊ｌｏｇ１０ｔＰＳＡ）の式をこのデータセットから導出し、カットオフ０．０５４（図１Ｂに示されている）を適用してＰＣａを有する患者を同定するための最も高い感度及び特異性を達成し；ＰＲＳ＜０．０５４、患者はＰＣａについて陰性である一方で、ＰＲＳ≧０．０５４、患者はＰＣａについて陽性であり得た。ＰＲＳ（バイオマーカーリスクスコアとも称される）が、患者をトリアージするときに、臨床的リスク因子と併用され得ることに注意されるべきである。そのため、陽性のリスクスコア及び陽性の臨床的リスク因子（例えば、排尿の際の痛い感覚又は灼熱感、頻尿、排尿の停止又は開始が困難であること、突発性の勃起機能不全、尿又は精液中の血液）を有する患者を、さらなる調査のために緊急紹介することが優先される。臨床的リスク因子について陽
性であり且つＢＲＳについて陰性であった患者を、潜在的に、一次医療において管理し、又は必要に応じて調査に紹介すること可能性がある。重要なことに、このタイプの組み合わされた測定アプローチは、ＰＣａに関する英国国立医療技術評価機構（ＮＩＣＥ２０１９）ガイドラインによってリスク層別化方法に推奨されている。
【0066】
モデルの線形性を試験するために、予測確率を患者スコアに対してプロットした（図１Ｃ）。予測確率及び患者スコア間の高い相関（ｒ＝０．９５）は、モデルにおける信頼性を示唆している。
【0067】
【表4】
【図1】
【国際調査報告】