特表 2024-529536 コンパニオンアニマルの鉄欠乏症の治療における皮下使用のための鉄錯体化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-08-06

(54)【発明の名称】コンパニオンアニマルの鉄欠乏症の治療における皮下使用のための鉄錯体化合物

(51)【国際特許分類】

   A61K 33/26 20060101AFI20240730BHJP

   A61K 31/721 20060101ALI20240730BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20240730BHJP

   A61K 47/61 20170101ALI20240730BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20240730BHJP

【ＦＩ】

A61K33/26

A61K31/721

A61P7/06

A61K47/61

A61K47/26

【審査請求】未請求

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2024506697

(86)(22)【出願日】2022-08-03

(85)【翻訳文提出日】2024-03-27

(86)【国際出願番号】 EP2022071875

(87)【国際公開番号】W WO2023012242

(87)【国際公開日】2023-02-09

(31)【優先権主張番号】21189392.0

(32)【優先日】2021-08-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】511228241

【氏名又は名称】ファーマコスモス ホールディング エー／エス

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】アンドレアセン， ハンス ビー．

(72)【発明者】

【氏名】クレステンスン， トビーアス エス．

(72)【発明者】

【氏名】グルベルグ， シモン エム

【テーマコード（参考）】

4C076

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076BB16

4C076CC14

4C076CC41

4C076EE30

4C076EE38

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA01

4C086EA20

4C086HA11

4C086HA28

4C086MA01

4C086MA66

4C086NA14

4C086ZA55

4C086ZC61

(57)【要約】

本発明は、例えばコンパニオンアニマルの鉄欠乏症、特に鉄欠乏性貧血の治療方法における皮下使用のための鉄錯体化合物、並びに鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む皮下投与のための薬学的組成物に関する。本発明は、より具体的には、排他的ではないが、鉄八糖錯体、鉄八糖錯体を含む薬学的組成物、及びヒト又は非ヒト対象の鉄欠乏症、特に鉄欠乏性貧血の治療方法における使用のための鉄八糖錯体に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

コンパニオンアニマルの鉄欠乏症の治療方法における皮下使用のための鉄錯体化合物。

【請求項2】

鉄欠乏症が鉄欠乏性貧血である、請求項１に記載の使用のための鉄錯体化合物。

【請求項3】

コンパニオンアニマルがイヌである、請求項１又は２に記載の使用のための鉄錯体化合物。

【請求項4】

方法が、２０ｍｇ／ｋｇ体重の用量の元素鉄を投与することを含む、請求項１から３の何れか一項に記載の使用のための鉄錯体化合物。

【請求項5】

鉄錯体化合物が、鉄オリゴイソマルトース錯体又は鉄オリゴイソマルトシド錯体である、請求項１から４の何れか一項に記載の使用のための鉄錯体化合物。

【請求項6】

鉄錯体化合物が、八糖と錯体化された鉄を含む鉄八糖錯体であり、（ｉ）八糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である、請求項１から５の何れか一項に記載の使用のための鉄錯体化合物。

【請求項7】

鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む、皮下投与のための薬学的組成物。

【請求項8】

直ぐに使用できる注射可能な組成物である、請求項７に記載の薬学的組成物。

【請求項9】

１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄を含む、請求項７又は８に記載の薬学的組成物。

【請求項10】

鉄錯体化合物が、鉄オリゴイソマルトース錯体又は鉄オリゴイソマルトシド錯体である、請求項７から９の何れか一項に記載の薬学的組成物。

【請求項11】

鉄錯体化合物が、八糖と錯体化された鉄を含む鉄八糖錯体であり、（ｉ）八糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である、請求項７から１０の何れか一項に記載の薬学的組成物。

【請求項12】

八糖と錯体化された鉄を含む鉄八糖錯体であって、（ｉ）八糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である、鉄八糖錯体。

【請求項13】

請求項１２に記載の鉄八糖錯体と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。

【請求項14】

ヒト又は非ヒト対象の鉄欠乏症の治療方法における使用のための、請求項１２に記載の鉄八糖錯体。

【請求項15】

鉄欠乏症が鉄欠乏性貧血である、請求項１４に記載の使用のための鉄八糖錯体。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、コンパニオンアニマルにおける鉄欠乏症の治療方法における皮下使用のための鉄錯体化合物、並びに鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む皮下投与のための薬学的組成物に関する。本発明は、より具体的には、排他的ではないが、鉄八糖錯体、鉄八糖錯体を含む薬学的組成物、並びにヒト又は非ヒト対象における鉄欠乏症の治療方法に使用するための鉄八糖錯体に関する。

【背景技術】

【0002】

貧血は、イヌやその他のコンパニオンアニマルに見られる比較的一般的な臨床徴候及び検査所見の異常である。２００５年に米国バンフィールド病院の臨床現場に運ばれた全てのイヌのうち、３％から１１％が貧血であった（Ｌｕｎｄ，２００７）。これらの貧血のイヌのうち、所定の割合は鉄欠乏（鉄欠乏症；ＩＤ）による貧血であると考えられており、イヌ１００００匹当たり２０～１１０匹のイヌがイヌ科鉄欠乏性貧血（ＩＤＡ）に罹患していると推定されている。米国でのイヌ個体数は約９０００万（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｅｔ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｅｔ Ｏｗｎｅｒｓ Ｓｕｒｖｅｙ ２０１６）で、これは１８００００から９９００００匹のイヌがＩＤＡに罹患していることになる。従って、イヌのＩＤＡはヒトと同様に蔓延しており、重要である。

【0003】

臨床血液学の分野は、コンパニオンアニマルにおける殆どの疾患の鍵であり、失血、溶血、骨髄疾患、出血疾患、造血毒性、感染症、及びがんによって引き起こされる貧血が含まれる。それは、赤血球（ＲＢＣ）、白血球、血小板、凝固因子の日常及び特異診断と、輸血療法を含む貧血の支持及び特異療法に取り組む。

【0004】

赤血球生成の間、ＲＢＣは骨髄内の多能性幹細胞から生成され、成熟ＲＢＣが循環中に放出される前に７～１０日間かけて増殖及び成熟する。赤血球生成は主に、腎低酸素症があるときに合成され腎細胞から放出される、腎ホルモンエリスロポエチンによって調節される。ヘモグロビンは、バースト形成単位及び（メタ）赤血球から網赤血球への赤血球成熟の後期段階中に合成される。ヘモグロビン化が起こるためには、骨髄に鉄が存在している必要がある。

【0005】

例えば、健康なイヌの場合、赤血球は血液量の３６～５８％を占める。それらは核とミトコンドリアを持たないため、寿命は約１００日と有限であり、血管外でマクロファージによって破壊される。ＲＢＣの主な機能は、酸素運搬体として機能することである。各ＲＢＣには、４つのグロビン鎖と鉄を含む一つの中央ヘムで構成されるヘモグロビン（Ｈｂ）が約３３％含まれている。第一鉄（Ｆｅ２＋）形態の鉄は酸素と結合することができ、酸素分圧に応じて（肺）酸素をヘモグロビンに結合し、又は（末梢組織）酸素をＨｂから放出する。組織酸素化は、エネルギー生産と全ての細胞機能に不可欠である。

【0006】

貧血という用語は、ギリシャ語の「ａｎ」（なし）と「ｈｅｉｍａ」（血）に由来している。貧血は動物の臨床徴候又はヒトの臨床症状である。低いＨｂ濃度及び／又は低いヘマトクリット（Ｈｃｔ）／血中血球容積（ＰＣＶ）は、貧血の存在を示す。人間医学ではＨｂ濃度が好まれるが、獣医学ではＨｃｔ／ＰＣＶが最も一般的に使用される（但し、これらのパラメーターの精度はそれほど高くない）。機構的に貧血は、溶血性貧血、失血性貧血、及び赤血球生成低下又は非効率化に分類される。溶血では、溶解したＲＢＣのＨｂ分解生成物がリサイクルされ、一般に大量の鉄が利用可能になる。失血は体内又は体外であり得、裂傷による局所的、又は止血障害による多巣性であり得；慢性的な体外出血により鉄ＩＤＡが起こる。また、赤血球生成の低下又は非効率化には、毒性、感染症、がん、腎臓病、鉄分及びビタミンＢ１２欠乏などの栄養不足など、多くの原因がありうる（Ｇｉｇｅｒ，２００５；Ｗｅｉｓｓ，２０１０）。

【0007】

例えば、イヌは約１０～５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重を有しており、その殆どは赤血球にＨｂとして存在し；実際、血液２ｍＬごとに１ｍｇの鉄が含まれている。加えて、筋肉組織内のミオグロビン及び全細胞内の多くの重要な酵素、例えばエネルギー及び薬物代謝に関与するチトクロムは、ヘムタンパク質に相当し、鉄を含む。鉄は、血液中のトランスフェリンを介して輸送され、存在する鉄の量に応じて、主に脾臓、肝臓、骨髄に可溶性移動画分（フェリチン）及び不溶性画分（ヘモシデリン）として貯蔵される（Ｏｌｖｅｒ等，２０１０；Ｃｏｈｅｎ－Ｓｏｌａｌ等，２０１４）。トランスフェリンは血漿中の鉄輸送体を表し、通常は２０～６０％飽和である。

【0008】

生理学的条件下では、腸、尿、皮膚からの鉄の損失は無視でき、イヌでは１～２ｍｇ／日未満の量である。鉄分は食餌によって摂取され、肉を含むイヌ科の食餌には鉄分が豊富に含まれている。鉄分が多すぎると有毒になる可能性があるため、鉄分バランスは腸からの吸収によって慎重に調節される。十二指腸における鉄吸収のメカニズムは最近解明されており、肝ホルモンのヘプシジンが主な阻害調節因子である。鉄吸収は、鉄貯蔵量の減少及び赤血球生成活性の増加と共に増加し、ヘプシジン濃度の低下と関連している。高血清鉄濃度の存在下では、ヘプシジンが肝臓から放出され、フェロポーチンと錯体を形成して腸の鉄吸収を減少させる（Ｏｌｖｅｒ等，２０１０）。

【0009】

イヌなどのＩＤＡを患うコンパニオンアニマルは、ＩＤＡの原因の改善に加えて、輸血、非経口及び経口の鉄サプリメントによって一般的に管理されるが、イヌ科医学における治療の有効性と安全性に関する詳細な報告はない。安全で効果的な非経口鉄剤の適切な開発と規制当局の承認は、ＩＤＡを患うイヌ及び他のコンパニオンアニマルにとって大きな利益と価値をもたらすであろう。

【0010】

経口鉄剤と鉄食品サプリメントに関する限り、（確かな証拠は殆どないものの）硫酸、グルコン酸若しくはフマル酸第一鉄剤が、ａ）胃腸での鉄の取り込みが正常であること、ｂ）胃腸への副作用（嘔吐及び下痢など）がないか許容できること、及びｃ）一日の投与量が数週間から数か月間遵守されることを条件として、１日当たり５ｍｇ／ｌｂ又は１日当たり１００から３００ｍｇの用量で効果的でありうると要約できる。

【0011】

非経口鉄剤に関しては、現在、米国及び多くの他の国で、イヌのＩＤＡの予防、治療、管理又は制御を目的として承認されたそのような薬剤はない。このような状況にもかかわらず、ヒト又は仔ブタで承認されたデキストラン鉄製品のイヌへの使用が幾つかの情報源で記載されている。様々な推奨事項がこの状況を反映している：
・ Ｐｌｕｍｂ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋ（Ｐｌｕｍｂ，２００８）：「鉄欠乏性貧血に対しては、デキストラン鉄１０～２０ｍｇ／ｋｇを一回投与し、その後硫酸第一鉄による経口療法を行う。」
・ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｇｉｇｅｒ，２００５）：「疾患に続発する鉄欠乏性貧血において鉄貯蔵を補充するために、経口鉄補充が不適切又は不十分であるとみなされる場合、又は胃腸障害により鉄の吸収が妨げられる場合には、非経口鉄が投与されうる。一日最大２ｍＬのデキストラン鉄錯体（５０ｍｇ／ｍＬ）を筋肉注射。」つまり、鉄を一日最大１００ｍｇ、又は５ｋｇ／１１ポンドのイヌで最大２０ｍｇ／ｋｇ、大型犬ではより低い特定用量（ｍｇ／ｋｇ／日）となる。
・ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｎｅｌｓｏｎ及びＣｏｕｔｏ，１９９８）：鉄欠乏性貧血では、「筋肉内投与デキストラン鉄がまた１０ｍｇ／ｋｇの投与量で週一回から二回投与されうる。この形式の鉄療法は、注射部位の痛みとアナフィラキシー反応の可能性を伴う。」
・ Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ’ｓ Ｆｉｖｅ－Ｍｉｎｕｔｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｏｎｓｕｌｔ（Ｗｅｉｓｅｒ，２０１５）：鉄欠乏性貧血では、「鉄注射による鉄療法を開始する。デキストラン鉄－注射可能な鉄のゆっくり放出される形態；一回の注射（１０～２０ｍｇ／ｋｇＩＭ）とそれに続く経口サプリメント。」

【0012】

Ｂｅｌｆｅｒ（登録商標）（デキストラン鉄錯体１００ｍｇ／ｍＬ、ｂｅｌａ－ｐｈａｒｍ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧ）は様々な動物種での使用について承認されているが、Ｂｅｌｆｅｒ（登録商標）の安全性と有効性は、承認されている全ての種において研究されてはいない－特に、ネコ及びイヌではこれまで研究されていなかったようである。それにもかかわらず、幾つかの国でイヌへの使用が承認されている。イヌに対して承認されている投薬量及び投与法は、体重１ｋｇ当たり鉄１～２ｍｇ（つまり、体重１ｋｇ当たり０．０１～０．０２ｍＬ）で筋肉内注射として投与される。これはかなり低く、イヌＩＤＡの治療にはおそらく治療量以下の用量である。

【0013】

適切な用量及び適切な方法で投与されるＩＤＡのイヌのための安全な非経口鉄剤は、鉄貯蔵を補充し、Ｈｂ濃度、ひいてはＨｃｔ／ＰＣＶを上昇させるという治療効果が非常に迅速に現れるという重要な利点を有するであろう。

【0014】

ＩＤＡの治療又は管理のためにイヌに１０から２０ｍｇ／ｋｇの用量でデキストラン鉄を筋肉内注射した症例報告が幾つか発表されている。そのような症例報告の例は次の通りである：
・ ゴールデンレトリバーへのデキストラン鉄１３ｍｇ／ｋｇの単回注射（Ｃｏｏｋ及びＫｖｉｔｋｏ－Ｗｈｉｔｅ，２０１４）。
・ 雑種犬へのデキストラン鉄１５ｍｇ／ｋｇの単回注射（Ｔｈｒａｌｌ及びＧｉｌｌｅｓｐｉｅ，２０１１）。
・ ２匹のイヌへの１週間以内でのデキストラン鉄１０ｍｇ／ｋｇの３回注射（Ｈａｒｖｅｙ等，１９８２）。
・ ７匹のイヌへの６～１３日間隔でのデキストラン鉄２０ｍｇ／ｋｇの１～２回注射（Ｆｒｙ及びＫｉｒｋ，２００６）。

【0015】

別の報告では、健康なイヌへの鉄オリゴ糖の注入について記載されている：
・ ７．１ｍｇ／ｋｇ及び２１．３ｍｇ／ｋｇの用量での水酸化鉄（ＩＩＩ）オリゴ糖の注入（Ｐｒｅｕｓｓｅｒ等，２００５）。

【0016】

しかし、現在、コンパニオンアニマルの鉄欠乏症の治療のために特別に開発された非経口鉄剤は存在しない。

【0017】

本発明は、上記の考察に鑑みて案出されたものである。

【発明の概要】

【0018】

一態様では、本発明は、コンパニオンアニマルの鉄欠乏症の治療方法における皮下使用のための鉄錯体化合物に関する。
前記第一の態様の第一の実施態様では、コンパニオンアニマルはイヌである。
前記第一の態様の第二の実施態様では、本方法は、体重１ｋｇ当たり元素鉄２０ｍｇの用量を投与することを含む。

【0019】

第二の態様では、本発明は、鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む、皮下投与のための薬学的組成物に関する。
前記第二の態様の第一の実施態様では、薬学的組成物は、直ぐに使用できる注射可能な組成物である。
前記第二の態様の第二の実施態様では、薬学的組成物は、１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄を含む。

【0020】

前記第一及び第二の態様の更なる実施態様では、鉄錯体化合物は、鉄オリゴイソマルトース錯体又は鉄オリゴイソマルトシド錯体である。特定の実施態様では、鉄錯体化合物は、オリゴイソマルトシドと錯体化された鉄を含む鉄オリゴ糖錯体であり、（ｉ）オリゴイソマルトシドが、８５０から１１５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が、オリゴイソマルトシドの１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が、オリゴイソマルトシドの３０重量％未満であり；（ｉｖ）少なくとも４０重量％の分子が３～６の単糖単位を有し；（ｖ）錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が、１３００００から１８００００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量がオリゴイソマルトシドの２．５重量％以下である。或いは、好ましくは、皮下投与の内容を考慮した場合、鉄錯体化合物は、八糖と錯体化した鉄を含む鉄八糖錯体であり、（ｉ）八糖は、１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が、八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が、１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である。

【0021】

第三の態様では、本発明は、治療方法における使用のため、より具体的にはヒト又は非ヒト対象における鉄欠乏性貧血などの鉄欠乏症の治療方法における使用のための、前記鉄八糖、前記鉄八糖と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物、及び鉄八糖錯体に関する。

【0022】

本発明は、組み合わせが明らかに許容されないか、又は明示的に回避される場合を除き、記載された態様及び好ましい特徴の組み合わせを含む。

【図面の簡単な説明】

【0023】

以下に、本発明の原理を例証する実施態様及び実験について、次の添付図を参照して検討する。

【図1】図１は、鉄オリゴイソマルトシド錯体の筋肉内（ＩＭ）用量（２０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ４）又は皮下（ＳＣ）用量（２０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ１；６０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ２；及び１００ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ３）の投与後のベースライン補正後の血清鉄濃度（μｍｏｌ／Ｌ；平均＋／－ＳＤ）を示している。

【図2】図２は、鉄オリゴイソマルトシド錯体のＩＭ用量（２０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ４）又はＳＣ用量（２０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ１；６０ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ２；及び１００ｍｇ／ｋｇ＝Ｔ３）の投与後のベースラインフェリチンからの変化（ｎｇ／ｍＬ；平均＋／－ＳＤ）を示している。

【発明の詳細な説明】

【0024】

以下に、本発明の態様及び実施態様について、添付図を参照して検討する。更なる態様及び実施態様は、当業者には明らかであろう。この本文において言及されている全ての文献は、出典明示によりここに援用される。

【0025】

［定義］
本説明をより容易に理解できるようにするために、最初に所定の用語を定義する。追加の定義は、詳細な説明全体にわたって記載する。

【0026】

「治療」とは、疾患若しくは障害に関連する臨床徴候若しくは症状、合併症、状態、又は生化学的徴候の進行、発達、重症度、又は再発を逆転、緩和、改善、阻害、減速、又はその発症を予防することを目的として対象に対して実施される任意のタイプの介入若しくはプロセス、又は対象への活性薬剤の投与を指す。ここで使用される「治療」には、特に、鉄欠乏症又は鉄欠乏性貧血などの疾患又は障害の予防、制御、治療又は管理が含まれる。本発明によれば、ＩＤ、特にＩＤＡの治療又は管理が特定の実施態様を表す。

【0027】

「対象」には、あらゆるヒト又は非ヒト動物が含まれる。「非ヒト動物」という用語には、限定されないが、非ヒト霊長類などの脊椎動物、コンパニオンアニマル、特にイヌ科、ネコ科、ウマ科、及びラクダ科、並びにマウス、ラット及びモルモットなどの齧歯類が含まれる。「非ヒト動物」という用語には、ブタ、ヤギ、ヒツジ、及びウシのような家畜もまた含まれる。「対象」及び「患者」という用語は、ここでは互換的に使用される。

【0028】

「コンパニオンアニマル」という用語は、人間の伴侶となるのに適した動物を指す。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマルは、イヌ科（イヌなど）、ネコ科（ネコなど）、ウマ科（ウマなど）、又はラクダである。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマル種は、イヌ、ネコ、ウサギ、フェレット、モルモット、齧歯類等々のような小型哺乳動物である。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマル種は、ウマ又はラマなどの家畜である。幾つかの実施態様では、コンパニオンアニマル種は、競争に使用される動物、例えば競走犬又は競走馬などの競走動物である。コンパニオンアニマルは、ブタ、ヤギ、ヒツジ、ウシ等々の家畜とは区別されるべきである。

【0029】

薬物又は治療薬の「治療有効量」又は「治療有効用量」は、単独で又は別の治療薬と組み合わせて使用された場合に、対象を疾患の発症から保護するか、又は疾患症状の重症度の減少、疾患症状がない期間の頻度と期間の増加、若しくは疾患の罹患による機能障害及び能力障害の予防によって証明される疾患退行を促進する薬物の任意の量である。疾患退行を促進する治療薬の能力は、臨床試験中のヒト又は動物対象、ヒトにおける有効性を予測する動物モデル系、又はインビトロアッセイでの薬剤活性のアッセイなどにおいて、当業者に知られている様々な方法を使用して評価されうる。

【0030】

「薬学的製剤」及び「薬学的組成物」という用語は、活性成分の生物学的活性が効果的であることを可能にするような形態であり、製剤が投与される対象に対して許容できないほど毒性である追加の成分を含まない調製物を指す。

【0031】

「薬学的に許容される担体」とは、対象への投与のための「薬学的組成物」を一緒に構成する、治療薬と共に使用するための当該技術分野で一般的な非毒性の固体、半固体、又は液体の充填剤、希釈剤、封入材料、製剤補助剤、又は担体を指す。薬学的に許容される担体は、用いられる投薬量及び濃度においてレシピエントに対して非毒性であり、製剤の他の成分と適合性がある。薬学的に許容される担体は、用いられる製剤に適切である。

【0032】

この本文の目的上、文献での慣例に従って鉄錯体化合物の用量をｍｇ又はｇで特定する場合、その値はｍｇ又はｇで提供される元素鉄の量を指す。

【0033】

［治療方法］
ここに記載されるのは、規定された投与計画に従って、及び／又は特定の対象に鉄錯体化合物を投与することを含む、治療方法、つまり鉄欠乏症の治療である。従って、本発明は、前記方法で使用するための鉄錯体化合物、鉄欠乏症の治療のための鉄錯体化合物の使用、及び／又は鉄欠乏症の治療のための医薬の製造における鉄錯体化合物の使用にも関する。

【0034】

本発明の方法は、典型的には、それを必要とする対象に対して実施される。本発明の方法を必要とする対象は、鉄欠乏症（ＩＤ）を患っているか、それと診断されているか、その疑いがあるか、又はそれを発症するリスクがある対象である。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症は鉄欠乏性貧血である。鉄欠乏性貧血（ＩＤＡ）は、鉄貯蔵が枯渇すると発症する。ＩＤを患っている対象はＩＤＡを患っている場合があり；ＩＤＡを患っている対象は必然的にＩＤを患っている。ＩＤ及びＩＤＡを診断する方法は当該技術分野で十分に確立されており、臨床現場で一般的に使用されている。

【0035】

ＩＤ若しくはＩＤＡを患っているか、それと診断されているか、その疑いがあるか、又はそれを発症するリスクがある対象には、例えば（ｉ）経口鉄剤に対して不耐性であるか、又は（ｉｉ）経口鉄剤に対して不満足な反応があるか、又は（ｉｉｉ）必要とされる期間に対して経口鉄剤の使用が現実に完了していない（すなわち、経口鉄剤治療過程へのノンアドヒアランス／ノンコンプライアンス）対象などの対象において、経口鉄剤が許容されないか又は効果的ではないか又は使用できない場合には、鉄錯体化合物の形態で非経口鉄剤が投与される。静脈内、皮下、又は筋肉内鉄剤が必要となる別の状況は、鉄を迅速に送達する必要がある場合、つまり、鉄貯蔵を迅速に充足させる臨床的必要性がある場合である。

【0036】

［治療が施される対象－コンパニオンアニマル］
本発明は特に、イヌ科（イヌなど）、ネコ科（ネコなど）、又はウマ科（ウマなど）などのコンパニオンアニマル、特にイヌ及びネコなどのイヌ科及びネコ科における鉄欠乏症の治療に関する。好ましくは、本発明に係るコンパニオンアニマルはイヌである。

【0037】

本発明はまた、ヒト又は非ヒト対象における鉄欠乏症の治療にも関する。

【0038】

［鉄欠乏症と貧血］
鉄欠乏性貧血状態は、体内の鉄貯蔵が不十分又は枯渇しているため（絶対的ＩＤＡ）、或いは他の十分な体内鉄貯蔵から鉄を動員できないため（機能的ＩＤＡ）、赤血球生成中に鉄が利用できない場合に起こる。

【0039】

機能的鉄欠乏性貧血は、感染症、炎症及びがんと共に観察される（Ｎａｉｇａｍｗａｌｌａ等，２０１２）。ここで、ヘプシジンは、肝臓、脾臓、及び骨髄のマクロファージにおいて、鉄を不溶性の形態のヘモシデリンとして隔離する。従って、鉄は赤血球生成のために動員できず（Ｄｉｇｎａｓｓ，２０１５）、機能的ＩＤＡが続いて起こる。

【0040】

絶対的ＩＤＡでは、慢性的な失血又は食餌による鉄摂取量の低下の何れかの結果として、体内の鉄貯蔵が数週間にわたって枯渇する。慢性的な体外失血はイヌにおける鉄欠乏性貧血の主要な原因である。ノミとあまり一般的ではないダニ及びウジ寄生などの外部寄生、並びに鉤虫とあまり一般的ではない鞭虫などの内部寄生による重度の寄生が、かなりの失血を引き起こす場合がある。慢性かつ間欠性の胃腸（ＧＩ）失血は、慢性又は再発性の体外出血の原因となることが多いため、平滑筋腫／肉腫及びリンパ腫などのＧＩ腫瘍の出血だけでなく、潰瘍形成性薬剤（グルココルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、化学療法剤）によっても鉄喪失が生じる場合がある。加えて、慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）はかなりの失血を伴う場合がある。２３ｋｇを超える献血対象から定期的に約４５０ｍｌの血液を採取するたびに、体内から約２００ｍｇの鉄が除去されるため、小型の対象の過度の献血及び診断目的での頻繁な静脈切開もまた鉄欠乏状態を引き起こす場合がある。

【0041】

上記トリガーは正常な止血にもかかわらず大量出血を引き起こす場合があるが、止血障害は更に慢性的及び／又は再発性の重度の出血を引き起こし、ＩＤＡが続く場合がある。これらには、遺伝性凝固障害、血小板減少症、血小板病症及びフォン・ヴィルブランド病が含まれる。

【0042】

子犬や若い犬など、新生仔から若年期の対象では、急速な成長と赤血球生成に必要な鉄分が、食餌及び体内貯蔵から利用できる供給量を超える場合がある。実際、新生仔の鉄貯蔵量は一般に少なく、母乳も鉄分が少ない。それにもかかわらず、ＩＤＡは、典型的には、内部及び外部寄生からの慢性的な体外失血を伴う子犬でのみ見られる。

【0043】

従って、鉄欠乏性貧血（ＩＤＡ）を引き起こす状態には、限定されないが、内部寄生虫（例えば、鉤虫及び鞭虫）、胃腸新生物（例えば、平滑筋腫／肉腫）、胃潰瘍（例えば、グルココルチコイド、非ステロイド性抗炎症剤、又は化学療法剤などの薬剤によって誘発される）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、又はがんを含む他の重度のＧＩ浸潤によるものでありうる胃腸（ＧＩ）管中への出血；鼻出血（鼻腫瘍、異物、感染症）、出血性膀胱炎などの他の外出血；腎臓／膀胱新生物、献血（特に頻繁に繰り返される場合）、外部寄生虫（ノミ、ダニ、ウジ虫など）、皮膚病変からの出血、手術／外傷、又は子宮及び膣の失血；凝固障害、血小板減少症、血小板症（thrombocytopathia）、血小板病症（thrombopathia）、フォン・ヴィレブランド病、又は血管障害などの止血障害；鉄欠乏食（肉を含まない）又は鉄吸収欠陥（例えば、鉄抵抗性鉄欠乏性貧血）による、例えば授乳中の子犬や離乳した子犬における、食餌鉄分不足；及び慢性腎臓病（ＣＫＤ）などのその他の状態が含まれる。

【0044】

ＩＤＡを引き起こす状態は慢性的又は非慢性的でありうる。ＩＤＡを引き起こしうる慢性的又は進行中の外失血の状態は、対処及び治療が難しい病因によって生じる場合がある。例は、がん、胃腸（ＧＩ）出血（例えば切除不能な腫瘍によって誘導される）、又は炎症性腸疾患（ＩＢＤ）などの炎症状態である。そのような状態は、疾患又は症状を管理又は制御する治療法を用いることによってその影響が遅延又は低減されうるという意味でのみ管理可能又は制御可能でありうる。このような疾患又は状態は、慢性的、継続的、断続的、及び／又は治療不能であると記述される場合がある。所定の実施態様では、慢性疾患又は状態によって引き起こされるＩＤＡは、対象に一を超える用量の鉄錯体化合物を投与することによって（例えば、反復投与によって）管理又は制御される。

【0045】

ＩＤＡは、また、治療可能で非慢性的な一又は複数の基礎疾患又は状態、例えば、外部寄生虫（例えば、ノミ、マダニ、ウジ虫）及び内部寄生虫（例えば、鉤虫及び鞭虫）、胃腸（ＧＩ）出血（例えば、切除可能な腫瘍及び新生物、潰瘍、裂傷、非ステロイド性抗炎症薬誘導性出血により誘導される）、食餌性鉄の吸収不良、不適切な栄養、又は他の外出血（例えば、尿出血、膀胱炎、外傷、外科的失血、献血）によって引き起こされる場合もある。このような状態は治療されうる。このような疾患又は状態は、急性、非慢性、及び／又は治療可能であると記述される場合がある。所定の実施態様では、非慢性疾患又は状態によって引き起こされるＩＤＡは、対象に単回用量の鉄錯体化合物を投与することによって治療される。

【0046】

コンパニオンアニマルにおいて上記状態が発生する頻度は種と共に変動する。例えばネコでは、ＣＫＤはどの年齢においても見られうるが、最も一般的には中乃至高齢のネコ（７歳以上）に見られ、加齢と共にその頻度は益々高くなる。従って、ＣＫＤを有するネコは、本発明に係る治療を受けやすい特定の対象群を代表する。本発明に係る治療を受けやすい他の特定の対象群は、獣医学の当業者には明らかであろう。

【0047】

［鉄欠乏症及び鉄欠乏性貧血の臨床徴候及び症状］
鉄欠乏症及び鉄欠乏性貧血の診断は、血液学的分析と組み合わせた対象の病歴及び提示される臨床徴候又は症状（身体検査）の評価に基づく。

【0048】

ヒトにおける鉄欠乏症の症状は、状態が鉄欠乏性貧血に進行する前に現れうる。鉄欠乏症の症状には、とりわけ、例えば、疲労、めまい、顔面蒼白、脱毛、過敏症、脱力感、異食症、脆い又は溝が入った爪、プラマー・ビンソン症候群（舌、咽頭及び食道を覆う粘膜の痛みを伴う萎縮）、免疫機能障害、嚥下症、下肢静止不能症候群が含まれうる。

【0049】

イヌなどのコンパニオンアニマルでは、鉄欠乏症及び鉄欠乏性貧血は数週間から数か月かけて発症し、しばしば潜行性であるため、動物の顕著な適応が可能になる。腸管を含む外出血の特定の徴候を除いて、臨床徴候はむしろ非特異的であり、貧血の程度よりも進行速度に依存する。ＩＤ又はＩＤＡ動物の一般的な臨床徴候には、限定されないが、顔面蒼白、運動不耐症、嗜眠、脈拍の跳ね上がり、ギャロップリズム、収縮期血流雑音、異食症、心肥大、爪の変化、及び筋活動の低下が含まれる。失血、外部／内部寄生虫症、ＧＩ潰瘍などのＧＩ疾患、新生物、腎疾患、又はＩＤ及びＩＤＡの関連する可能な別の原因の病歴が役立つ指標となる。

【0050】

ここに開示される方法による治療を受けている対象は、鉄欠乏症（ＩＤ）の改善を経験しうる。ここに開示される方法による治療を受けている対象は、鉄欠乏性貧血（ＩＤＡ）の改善を経験しうる。この改善は、ここに開示される鉄錯体化合物の投与を通して、対象の体内の鉄の総量、血中ヘモグロビン濃度、及び／又は血液の酸素運搬能力が増加するにつれて起こりうる。幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、ＩＤ若しくはＩＤＡの一若しくは複数の臨床徴候又は一若しくは複数の症状の減少を経験する。幾つかの実施態様では、減少は一過性のものである。好ましい実施態様では、ＩＤ若しくはＩＤＡの一若しくは複数の臨床徴候又は一若しくは複数の症状の一過性の減少により、対象は鉄錯体化合物の更なる用量を受けることができる。他の実施態様では、減少は永続的である。幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、ＩＤ又はＩＤＡの一若しくは複数の臨床徴候又は症状の除去を経験する。幾つかの実施態様では、ＩＤ又はＩＤＡの一若しくは複数の臨床徴候又は症状は、顔面蒼白、運動不耐症、嗜眠、境界脈拍、ギャロップリズム、収縮期血流雑音、異食症、心肥大、爪の変化、及び筋活動の低下並びに前者の組み合わせから選択される。

【0051】

［鉄貯蔵パラメーター］
鉄欠乏症を患っている対象は、全身の鉄状態が低いか不十分なマーカーで証明される場合がある。これは、そのような対象が適切な鉄レベルを維持するのに十分な鉄をその体内に貯蔵していない可能性があることを意味する。例えば、十分に栄養が与えられた殆どの健康なイヌは、その体内に数グラムの鉄を蓄えている可能性がある。この鉄の一部は、血液を通して酸素を運ぶヘモグロビンに含まれる。残りの鉄の殆どは、全ての細胞中に存在する鉄結合錯体に含まれているが、骨髄及び肝臓、脾臓などの臓器ではより高濃度に濃縮されている。肝臓の鉄貯蔵量は、健康な体の主要な生理学的鉄貯蔵量である。体の総鉄含有量の一部は、酸素貯蔵（ミオグロビン）又はエネルギー生成酸化還元反応（チトクロムタンパク質）の実施などの細胞プロセスに鉄を使用するタンパク質で利用される。貯蔵鉄に加えて、少量の鉄がトランスフェリンと呼ばれるタンパク質に結合して血漿を循環する。

【0052】

鉄欠乏症の対象は、先ず体内に貯蔵されている鉄を使い果たす。体内で利用される鉄の大部分はヘモグロビンに必要とされているため、鉄欠乏性貧血が鉄欠乏症の主要な臨床徴候である。臓器を含む組織への酸素輸送は不可欠であり、重度の貧血は全身の酸素欠乏のため有害であり、死に至る可能性がある。鉄欠乏の対象は、細胞内プロセスに必要な鉄が細胞から枯渇するかなり前に、酸素欠乏によって引き起こされる臓器損傷に苦しみ、場合によっては死亡する可能性がある。

【0053】

対象が適切な健康を維持するのに十分な鉄貯蔵量を持っているかどうかを判定するために測定されうる全身鉄状態のマーカーが幾つかある。これらのマーカーは、循環鉄貯蔵量、鉄結合錯体に貯蔵された鉄、又はその両方であり得、典型的には、鉄貯蔵パラメーターとも呼ばれる。鉄貯蔵パラメーターには、例えば、ヘマトクリット（Ｈｃｔ）、充填細胞容積（ＰＣＶ）、ヘモグロビン濃度（Ｈｂ、ヘモグロビンレベルとも呼ばれる）、総鉄結合能（ＴＩＢＣ）、トランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）、血清鉄レベル、肝臓鉄レベル、脾臓鉄レベル、及び血清フェリチンレベルが含まれうる。これらのうち、Ｈｃｔ、Ｈｂ、ＴＩＢＣ、ＴＳＡＴ、及び血清鉄レベルが、循環鉄貯蔵量を測定するパラメーターとして一般に知られている。肝臓鉄レベル、脾臓鉄レベル、及び血清フェリチンレベルが、一般に、貯蔵鉄又は鉄結合錯体に貯蔵された鉄を測定するパラメーターと呼ばれる。

【0054】

上記の血液パラメーターは血清中で定量されるが、血漿中でも同様に定量できることに留意されたい。血清レベルと血漿レベルは相関しており、互いに変換できる。

【0055】

ＩＤは、典型的には、網赤血球ヘモグロビン含有量又は網赤血球ヘモグロビン等量（使用される分析装置に応じて、それぞれＣＨｒ及びＲＥＴ－Ｈｅと示される）などの鉄の初期指標に基づいて、貧血の前に診断される。最近の研究では、イヌの血液におけるこのパラメーターが調査され、低ＣＨｒ／ＲＥＴ－Ｈｅと鉄欠乏及び／又は鉄欠乏性貧血の他の利用可能な指標との間に良好な相関関係があることが見出された（Ｆｒｙ及びＫｉｒｋ，２００６；Ｐｒｉｎｓ等，２００９；Ｓｃｈａｅｆｅｒ及びＳｔｏｋｏｌ，２０１５；Ｆｕｃｈｓ等，２０１７；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ及びＯｌｖｅｒ，Ｃ．Ｓ ２００５）。幾つかの実施態様では、鉄欠乏対象のＣＨｒ／ＲＥＴ－Ｈｅは２０ｐｇ以下である。ＩＤＡは、典型的には、対象の血液サンプルから測定された全血球数に基づいて診断される。焦点は、Ｈｂ、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）、並びにＨｃｔ／ＰＣＶ及び赤血球（ＲＢＣ）数などの赤血球パラメーターにある；但し、ＩＤＡによる白血球減少症及び血小板増加症の可能性もある。例えばイヌにおける鉄欠乏性貧血の特徴は、赤血球小赤血球症及び血色素減少症を伴うヘモグロビン濃度の低下である（Ｂｏｈｎ，２０１３）。血液塗抹標本は低色素血を確認するために使用される。貧血はＩＤＡで修復される可能性があるが、赤血球生成には効果がない。従って、ＩＤＡでは網赤血球増加症並びに多染性が存在する。

【0056】

簡便には、自動血液分析装置が利用されて、サンプル中のＲＢＣの総数、Ｈｂ、Ｈｃｔ、ＭＣＶ、ＭＣＨＣ、及びフローサイトメトリーによる追加の血液パラメーター（例えば、ＣＨｒ／ＲＥＴ－Ｈｅ）を含む血液パラメーターが報告される。多くの国では、ＩＤＡの有無を判断するために、ＭＣＶ、ＭＣＨＣ、Ｈｂ、ＲＢＣ数の４つのパラメーターのうち少なくとも一つが測定される。一部の国では、ＩＤＡの存在を決定するためにＣＨｒ／ＲＥＴ－Ｈｅが使用される場合がある。Ｈｂには所定の閾値が設定されており、対象のヘモグロビンレベルがその値を下回ると、ＩＤＡと診断されうる。

【0057】

ヘモグロビン濃度又はレベル（Ｈｂ）は、血液の容積当たりのヘモグロビンの総量である。健康な対象では、典型的なＨｂ範囲は次の通りである：女性の場合、Ｈｂ＝１２．０から１５．５ｇ／ｄＬ；男性の場合、Ｈｂ＝１３．５から１７．５ｇ／ｄＬ；イヌの場合、Ｈｂ＝１１．９から１８．９ｇ／ｄＬ、ネコの場合、Ｈｂ＝９．８から１５．４ｇ／ｄＬ；ウマの場合、Ｈｂ＝１０．１から１６．１ｇ／ｄＬ。しかし、鉄欠乏症の対象では、ヘモグロビン濃度が大きく低下する可能性がある。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症のイヌのＨｂは６ｇ／ｄＬ未満（イヌが重度のＩＤＡを患っていることを示す）；６から９ｇ／ｄＬの範囲（イヌが中等度のＩＤＡを患っていることを示す）、又は９から１１ｇ／ｄＬの範囲（イヌが軽度のＩＤＡを患っていることを示す）である。

【0058】

平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）は、赤血球内のヘモグロビンの平均濃度の尺度であり、所定の容積の濃厚赤血球内のヘモグロビンタンパク質の量によって決定される。典型的には、ヘモグロビン濃度をヘマトクリットで割ることによって計算される。健康な対象では、典型的なＭＣＨＣ範囲は次の通りである：女性の場合、ＭＣＨＣ＝３１から３５ｇ／ｄＬ；男性の場合、ＭＣＨＣ＝３１から３５ｇ／ｄＬ；イヌの場合、ＭＣＨＣ＝３２．０から３６．３ｇ／ｄＬ、ネコの場合、ＭＣＨＣ＝３０から３６ｇ／ｄＬ；ウマの場合、ＭＣＨＣ＝３５．３から３９．３ｇ／ｄＬ。しかし、鉄欠乏症の対象では、ＭＣＨＣが大きく低下する可能性がある。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症のイヌのＭＣＨＣは３０ｇ／ｄＬ未満である。

【0059】

平均赤血球容積（ＭＣＶ）は、赤血球の平均容積の尺度である。これは典型的には、血液の容積に細胞性血液の割合（ヘマトクリット）を掛け、その積をその容積中の赤血球の数で割ることによって計算される。健康な対象では、典型的なＭＣＶ範囲は次の通りである：女性の場合、ＭＣＶ＝８０から１００ｇ／ｄＬ；男性の場合、ＭＣＶ＝８０から１００ｆＬ；イヌの場合、ＭＣＶ＝６６から７７ｆＬ、ネコの場合、ＭＣＶ＝３９から５５ｆＬ；ウマの場合、ＭＣＶ＝３７．３から４９．０ｆＬ。しかし、鉄欠乏症の対象では、ＭＣＶが大きく低下する可能性がある。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症のイヌのＭＣＶは６０ｆＬ未満である（イヌが重度のＩＤＡを患っていることを示す）。

【0060】

幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、ヘモグロビン濃度の増加を経験する。幾つかの実施態様では、本開示は、それを必要とする対象におけるヘモグロビン濃度を増加させる方法を提供し、該方法は、鉄錯体化合物を対象に投与することを含み、鉄錯体化合物は、対象におけるヘモグロビン濃度の増加をもたらす。

【0061】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、投与後３週間（２１日）で、０．５ｇ／ｄＬ超、０．６ｇ／ｄＬ超、０．７ｇ／ｄＬ超、０．８ｇ／ｄＬ超、０．９ｇ／ｄＬ超、０１．０ｇ／ｄＬ超、１．１ｇ／ｄＬ超、１．２ｇ／ｄＬ超、１．３ｇ／ｄＬ超、１．４ｇ／ｄＬ超、１．５ｇ／ｄＬ超、１．６ｇ／ｄＬ超、１．７ｇ／ｄＬ超、１．８ｇ／ｄＬ超、又は１．９ｇ／ｄＬ超のヘモグロビン濃度の平均増加をもたらす。

【0062】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、投与後３週間（２１日）で、７．０ｇ／ｄＬ未満、６．０ｇ／ｄＬ未満、５．０ｇ／ｄＬ未満、４．５ｇ／ｄＬ未満、４．０ｇ／ｄＬ未満、又は３．５ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン濃度の平均増加をもたらす。

【0063】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、投与後３週間（２１日）で、０．５から７．０ｇ／ｄＬ、１．０から６．０ｇ／ｄＬ、１．３から５．０ｇ／ｄＬ、１．５から４．５ｇ／ｄＬ、１．７から４．０ｇ／ｄＬ、又は１．９から３．５ｇ／ｄＬのヘモグロビン濃度の平均増加をもたらす。

【0064】

１週間でのヘモグロビン濃度の平均増加は、３週間での平均増加よりも０．５から２．０ｇ／ｄＬ低いと予想される。投与後４週間又は８週間でのヘモグロビン濃度の平均増加は、投与後３週間での平均増加とほぼ同じであると予想される。

【0065】

上述のヘモグロビン濃度の平均増加は、特にコンパニオンアニマル、好ましくはイヌ科及びネコ科、最も好ましくはイヌの治療に適用される。

【0066】

獣医学では、ヒトの医学で主として使用されるＨｂ濃度の代わりに、Ｈｃｔ又はＰＣＶが貧血とその重症度を評価するパラメーターとして伝統的に使用されている（Ｔｖｅｄｔｅｎ，２０１０）。Ｈｃｔ／ＰＣＶは一般にこの点で許容できる信頼性を有しているが、Ｈｂよりも精度が劣る。マイクロヘマトクリットとしても知られるＰＣＶは、抗凝固処理された血液で満たされた毛細管の遠心分離後に直接測定されるが、血液分析装置によって得られるＨｃｔは次のように計算される：Ｈｃｔ＝（ＭＣＶ×ＲＢＣ数）÷１０。それにもかかわらず、殆どの条件下でＨｂとＰＣＶ／Ｈｃｔは、Ｈｂ（ｇ／ｄＬ）≒１／３×Ｈｃｔ（％）のような密接な関係にある。潜在的な不正確性を排除するには、血中Ｈｂ濃度をコンパニオンアニマルの貧血の評価における主要パラメーターとして考慮する必要がある。

【0067】

Ｈｃｔ／ＰＣＶは、血中血球容積又は赤血球容積分率とも呼ばれ、血液中の赤血球の容積パーセンテージである。例えば、健康なイヌでは、Ｈｃｔ／ＰＣＶは典型的には血液量の３５～５７％である。健康なネコでは、Ｈｃｔ／ＰＣＶは典型的には血液量の３０～４５％であり、健康なウマでは典型的には血液量の２７～４３％である。しかし、鉄欠乏症の対象では、鉄の吸収不良及び／又は鉄貯蔵能力の低下により、Ｈｃｔ／ＰＣＶがしばしば大幅に枯渇する。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症のイヌのＨｃｔ／ＰＣＶは、１８％未満（イヌが重度のＩＤＡを患っていることを示す）；１８％から２７％の範囲（イヌが中等度のＩＤＡを患っていることを示す）、又は２７％から３５％の範囲（イヌが軽度のＩＤＡを患っていることを示す）である。

【0068】

ここに開示される鉄錯体化合物は、Ｈｃｔ／ＰＣＶを増加させるために対象に投与されうる。投与の正確なタイミングは、例えば、対象が経験している鉄欠乏症の重症度、対象が経験しているか又はしていない鉄吸収レベル、治療中の健康管理専門家の判断などに応じて、必然的に対象ごとに変わりうる。幾つかの実施態様では、本開示は、それを必要とする対象においてＨｃｔ／ＰＣＶを増加させる方法を提供し、該方法は、鉄錯体化合物を対象に投与することを含み、鉄錯体化合物は対象のＨｃｔ／ＰＣＶの増加をもたらす。幾つかの実施態様では、増加は、１％から３０％、１％から１５％、１％から１２％、１％から１０％、１％から９％、１％から８％、１％から７％、１％から６％、１％から５％、１％から４％、１％から３％、又は１％から２％である。

【0069】

これらのパラメーターに加えて、血清フェリチンの測定はＩＤＡの診断に役立ちうる。肝臓のフェリチン貯蔵は、体内の貯蔵鉄の主要な供給源である。フェリチンは、鉄を貯蔵し、制御された方法で鉄を放出する細胞内タンパク質である。医学的には、血液サンプル及び／又は肝臓組織サンプル中に存在するフェリチンの量は、肝臓に貯蔵されている鉄の量を反映している（但し、フェリチンは遍在しており、肝臓に加えて体内の多くの他の組織にも見出すことができる）。フェリチンは、肝臓に鉄を無毒な形態で貯蔵し、鉄が必要とされる領域に鉄を輸送する働きがある。低いフェリチンレベルは、一般的に鉄欠乏性貧血を示す。しかし、フェリチンは急性期タンパク質でもあるため、基礎をなす炎症性疾患によって上昇する場合があるため、フェリチンレベルが正常であってもＩＤＡを除外することはできない。フェリチン測定は人間の医学では完全に標準化されている一方、幾つかの獣医血液学研究室、例えばカンザス州立大学獣医診断研究所（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｋｓｖｄｌ．ｏｒｇ／ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ／ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ－ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ／－２０１９年９月１０日及び２０２１年７月６日にアクセス）はイヌフェリチンのＥＬＩＳＡベースのアッセイを開発しているが、イヌ血清フェリチンの標準化された基準範囲は存在しない。

【0070】

例えば、健康なヒトでは、基準範囲とも呼ばれる正常フェリチン血清レベルは、成人男性では通常１５から３００ｎｇ／ｍＬ、成人女性では通常１２から２５０ｎｇ／ｍＬである。しかし、鉄欠乏症の対象では、フェリチンへの結合に利用される肝臓に貯蔵される鉄の量が減少するため、血清フェリチンレベルが典型的には著しく低下し、これは、体が鉄を吸収して貯蔵する能力を失うために起こる。

【0071】

ここで使用される「血清フェリチン」（ｓ－フェリチン）という用語は、種特異的二部位免疫酵素（「サンドイッチ」）アッセイ又は別の信頼できる定量的血清フェリチンアッセイを使用して測定される血清中のフェリチンのレベルを指す。フェリチンは体の主要な鉄貯蔵タンパク質である。フェリチンの濃度は体の総鉄貯蔵量に正比例するため、血清フェリチンレベルは鉄の状態を評価する一般的な診断ツールになる。鉄欠乏性貧血の対象は正常対象のおよそ１０分の１の血清フェリチンレベルを有する。フェリチンレベルは、鉄欠乏症を早期段階で検出する高感度の手段をまた提供する。

【0072】

幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、血清フェリチンレベルの増加を経験する。幾つかの実施態様では、本開示は、増加を必要とする対象において血清フェリチンを増加させる方法を提供し、該方法は、鉄錯体化合物を対象に投与することを含み、鉄錯体化合物は血清フェリチンの増加をもたらす。

【0073】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、１００ｎｇ／ｍＬ超、１１０ｎｇ／ｍＬ超、１２０ｎｇ／ｍＬ超、１３０ｎｇ／ｍＬ超、１４０ｎｇ／ｍＬ超、１５０ｎｇ／ｍＬ超、１６０ｎｇ／ｍＬ超、１７０ｎｇ／ｍＬ超、１８０ｎｇ／ｍＬ超、１９０ｎｇ／ｍＬ超、又は２００ｎｇ／ｍＬ超である血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0074】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、４００ｎｇ／ｍＬ未満、３９０ｎｇ／ｍＬ未満、３８０ｎｇ／ｍＬ未満、３７０ｎｇ／ｍＬ未満、３６０ｎｇ／ｍＬ未満、３５０ｎｇ／ｍＬ未満、３４０ｎｇ／ｍＬ未満、３３０ｎｇ／ｍＬ未満、３２０ｎｇ／ｍＬ未満、３１０ｎｇ／ｍＬ未満、３００ｎｇ／ｍＬ未満、２９０ｎｇ／ｍＬ未満、２８０ｎｇ／ｍＬ未満、２７０ｎｇ／ｍＬ未満、２６０ｎｇ／ｍＬ未満、又は２５０ｎｇ／ｍＬ未満から選択される血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0075】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、１００から４００ｎｇ／ｍＬ、１００から３７５ｎｇ／ｍＬ、１００から３５０ｎｇ／ｍＬ、１００から３２５ｎｇ／ｍＬ、１００から３００ｎｇ／ｍＬ、１００から２７５ｎｇ／ｍＬ、又は１５０から３００ｎｇ／ｍＬの血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0076】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で、２００ｎｇ／ｍＬ超、２３０ｎｇ／ｍＬ超、２６０ｎｇ／ｍＬ超、２９０ｎｇ／ｍＬ超、３２０ｎｇ／ｍＬ超、３５０ｎｇ／ｍＬ超、３８０ｎｇ／ｍＬ超、４１０ｎｇ／ｍＬ超、又は４４０ｎｇ／ｍＬ超である血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0077】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で、６００ｎｇ／ｍＬ未満、５９０ｎｇ／ｍＬ未満、５８０ｎｇ／ｍＬ未満、５７０ｎｇ／ｍＬ未満、５６０ｎｇ／ｍＬ未満、５５０ｎｇ／ｍＬ未満、５４０ｎｇ／ｍＬ未満、５３０ｎｇ／ｍＬ未満、５２０ｎｇ／ｍＬ未満、５１０ｎｇ／ｍＬ未満、５００ｎｇ／ｍＬ未満、４９０ｎｇ／ｍＬ未満、４８０ｎｇ／ｍＬ未満、４７０ｎｇ／ｍＬ未満、４６０ｎｇ／ｍＬ未満、又は４５０ｎｇ／ｍＬ未満から選択される血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0078】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で、２００から６００ｎｇ／ｍＬ、２５０から６００ｎｇ／ｍＬ、３００から６００ｎｇ／ｍＬ、３５０から６００ｎｇ／ｍＬ、又は４００から６００ｎｇ／ｍＬの血清フェリチンの平均増加をもたらす。

【0079】

血清フェリチンの平均増加は、特にヒトの治療に当てはまる。同様の値は、コンパニオンアニマル、特にイヌ科及びネコ科、最も好ましくはイヌに当てはまりうる。

【0080】

貯蔵鉄に加えて、少量の鉄が、トランスフェリンと呼ばれるタンパク質に結合して血漿中を循環する。従って、血清鉄（ｓ－鉄）レベルは、タンパク質トランスフェリンに結合した血液中を循環する鉄の量によって表すことができる。トランスフェリンは、一つ又は二つの第二鉄（鉄（ＩＩＩ）又はＦｅ３＋）イオンと結合できる肝臓によって生成される糖タンパク質である。それは血液中で最も広く存在し、鉄の動的なキャリアであり、従って、体全体で使用するために貯蔵鉄を輸送する体の能力の必須の成分である。トランスフェリン飽和度（又はＴＳＡＴ）はパーセンテージとして測定され、血清鉄と総鉄結合能の比率に１００を乗じて計算される。この値により、臨床医は、鉄の結合に利用可能なトランスフェリンの総量に血清鉄が実際にどれだけ結合しているかを知ることができる。例えば、ＴＳＡＴ値３５％は、血液サンプル中のトランスフェリンの利用可能な鉄結合部位の３５％が鉄で占められていることを意味する。例えば、健康なイヌの場合、典型的なＴＳＡＴ値は約１５～５０％である。しかし、鉄欠乏症の対象では、トランスフェリンによる結合に利用可能な鉄の量が減少するため、ＴＳＡＴ値は典型的には著しく低下し、これは、体が鉄を吸収して貯蔵する能力を失うために起こる。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症の対象のＴＳＡＴ値は２０％未満、及び／又はフェリチン濃度は＜１００μｇ／Ｌである。

【0081】

幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、ＴＳＡＴ値の増加を経験する。幾つかの実施態様では、本開示は、増加を必要とする対象においてＴＳＡＴを増加させる方法を提供し、該方法は、鉄錯体化合物を対象に投与することを含み、鉄錯体化合物は、対象においてＴＳＡＴの増加をもたらす。

【0082】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、１％超、１．５％超、２％超、又は２．５％超であるＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0083】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、５％未満、４％未満、又は３％未満のＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0084】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後４週間又は８週間で、１から５％、１．５から４％、又は２から３％のＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0085】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で５％超、６％超、又は７％超であるＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0086】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で、２０％未満、１９％未満、１８％未満、１７％未満、１６％未満、又は１５％未満のＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0087】

幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物は、治療後１週間で、５から２０％、又は５から１５％のＴＳＡＴの平均増加をもたらす。

【0088】

収集した情報で鉄欠乏以外の貧血の原因を完全に除外できない疑わしい状況では、骨髄穿刺が検討される場合がある。骨髄に染色可能な鉄が存在しない場合は、イヌの赤血球生成のための鉄が不足していることを示している場合がある。

【0089】

本発明に係る治療法に特に適したコンパニオンアニマルは、次の一又は複数を有するものである：
－ １１ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン濃度（Ｈｂ）；
－ ３５％未満のヘマトクリット（Ｈｃｔ／ＰＣＶ）；
－ ６０ｆＬ未満の平均赤血球容積（ＭＣＶ）；
－ ２０ｐｇ以下の網赤血球ヘモグロビン含有量（ＣＨｒ）／網赤血球ヘモグロビン当量（ＲＥＴ－Ｈｅ）；及び／又は
－ ３０ｇ／ｄＬ以下の平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）。

【0090】

幾つかの実施態様では、ここに開示される方法による治療を受けている対象は、Ｈｂが閾値レベルを超えて上昇及び／又は維持されるため、鉄欠乏症及び／又は鉄欠乏性貧血の改善を経験する可能性がある。幾つかの実施態様では、鉄欠乏症及び／又は鉄欠乏性貧血の治療方法が開示され、該方法は、鉄錯体化合物を対象に投与することを含み、鉄錯体化合物は次のうちの一又は複数をもたらす：
－ １１ｇ／ｄＬ以上のヘモグロビン濃度（Ｈｂ）；
－ ３５％以上のヘマトクリット（Ｈｃｔ／ＰＣＶ）；
－ ６０ｆＬ以上の平均赤血球容積（ＭＣＶ）；
－ ２０ｐｇ超の網赤血球ヘモグロビン含有量（ＣＨｒ）／網赤血球ヘモグロビン当量（ＲＥＴ－Ｈｅ）；及び／又は
－ ３０ｇ／ｄＬ超の平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）。

【0091】

本開示は、改善を必要とする対象において一つ又は複数の鉄貯蔵パラメーターを改善する方法を提供する。少なくとも一つの鉄貯蔵パラメーターは、血清フェリチンレベル、トランスフェリン飽和度（ＴＳＡＴ）、ヘモグロビン濃度、ヘマトクリット、総鉄結合能、鉄吸収レベル、血清鉄レベル、肝臓鉄レベル、脾臓鉄レベル、及びそれらの組み合わせから選択されうる。

【0092】

一実施態様では、少なくとも一つの鉄貯蔵パラメーターはヘモグロビン濃度であり、改善することは、対象のヘモグロビン濃度を増加させることを含む。他の実施態様では、少なくとも一つの鉄貯蔵パラメーターはトランスフェリン飽和度であり、改善することは、対象のトランスフェリン飽和度を増加させることを含む。更に他の実施態様では、少なくとも一つの鉄貯蔵パラメーターは血清フェリチンレベルであり、改善することは、対象の血清フェリチンレベルを増加させることを含む。

【0093】

［鉄錯体化合物］
ここに記載されるのは、鉄錯体化合物と、追加の薬物との鉄錯体化合物の組み合わせとを投与することを含む治療方法、すなわち鉄欠乏症の治療法であり、鉄錯体化合物は所定の特性を有し、従って治療を受けている対象において所定の効果を発揮する。従って、本発明の方法は、前記特性を共有する錯体に適用可能である。例えば、鉄錯体化合物は比較的安定しているべきであり；優れた吸収特性を持っているべきであり；低い尿中排泄量を示すべきである。

【0094】

更に特定しない限り、ここで使用される「鉄錯体化合物」という用語は、Ｆｅ３＋及び／又はＦｅ２＋と一つ又は複数の配位子を含む鉄イオン又は鉄粒子の任意の錯体を指す。鉄原子は、配位子とのイオン及び配位共有結合を介して、又は多核鉄配位子ナノ分子、好ましくは鉄糖ナノ分子の一部として、配位錯体中で結合している。

【0095】

［配位子］
好都合には、本発明の鉄錯体化合物に使用される配位子及び塩、並びにその組成物の担体及び他の成分は生理学的に許容されるものである。ここで使用される「生理学的に許容される」という用語は、治療有効量の鉄錯体化合物又は配位子、塩、担体若しくは他の成分を含む組成物が対象に投与されるときに、配位子、塩、担体又は他の成分が急性毒性を引き起こさないことを意味する。

【0096】

［糖］
一実施態様群によれば、鉄錯体化合物中の配位子は糖である。

【0097】

更に特定しない限り、ここで使用される「糖」という用語には、ここに記載された、還元され、酸化され、誘導体化され、又はそれらの組み合わせである糖が含まれる。特に、糖は、例えば、糖のヒドロキシル基でエーテル、アミド、エステル及びアミンを形成することによって、又は糖のアルデヒド基をグリコール基に変換してヘプトン酸を形成することによって誘導体化することができる。従って、ここで使用される「糖」という用語は、実験式Ｃ_ｍ(Ｈ_２Ｏ)_ｎを有する化合物に限定されず、ここで、ｍ及びｎは、互いに同じであっても異なっていてもよい整数である。

【0098】

本発明の鉄糖錯体において配位子として使用されうる糖には、例えば、単糖；二糖、例えばスクロース、マルトース又はイソマルトース；オリゴ糖及び多糖、例えばマルトデキストリン、ポリグルコース、デキストラン、オリゴマルトース、オリゴイソマルトース；糖アルコール、例えばソルビトール及びマンニトール；糖酸とその塩、例えばグルコン酸、グルコン酸塩、デキストラングルコヘプトン酸、デキストリングルコヘプトン酸、デキストラングルコヘプトン酸塩及びデキストリングルコヘプトン酸塩、並びにそれらの還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアント、例えばカルボキシマルトース、ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテル、水素化デキストラン、酸化デキストラン、カルボキシアルキル化オリゴ糖及び多糖、酸化オリゴ糖及び多糖、水素化デキストリン、酸化デキストリン、水素化オリゴマルトース、水素化オリゴイソマルトース、水素化オリゴマルトース、ヒドロキシエチルデンプン、ヘプトン酸部分を担持するヒドロキシエチルデンプン、又はそれらの二種以上の混合物が含まれる。オリゴ糖及び多糖が使用される場合、これらは典型的には、様々な鎖長を有するオリゴ糖及び多糖の混合物を含む。従って、これらのオリゴ糖及び多糖は、重量平均分子量又は数平均分子量、及び分子量の範囲にわたるこれらの分子の分布によって簡便に特徴付けることができる。簡単にするために、オリゴ糖又は多糖への言及は、そのような混合物を指すことを意味する。

【0099】

ここで使用される「オリゴ糖」という用語は、一般に、少数、典型的には３～１０の単糖単位を有する糖又はその還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアント、或いは二種以上の糖、又はその還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアントの混合物を指し、ここで、分子の大部分（例えば、少なくとも６０％、少なくとも７０％、又は少なくとも８０％）が少数、典型的には３～１０の単糖単位を有する。

【0100】

ここで使用される「単量体糖」という用語は、単糖又はその還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアント、或いは二種以上の単糖及び／又はそのバリアントの混合物を指す。

【0101】

ここで使用される「二量体糖」という用語は、二つの単糖単位（二糖など）を有する糖、又はその還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアン、或いは二種以上の糖、又はその還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化バリアントの混合物を指し、ここで、分子は二つの単糖単位を有する。

【0102】

糖アルコールは、アルデヒド基がヒドロキシル基に変換された単糖又は二糖誘導体である。

【0103】

糖酸は、カルボキシル基を有する単糖誘導体である。カルボキシル基は、例えば、アルドースのアルデヒド基を酸化してアルドン酸を形成し、２－ケトースの１－ヒドロキシル基を酸化してα－ケト酸（ウロソン酸）を形成し、アルドース又はケトースの末端ヒドロキシル基を酸化してウロン酸を得るか、又はアルドースの両端を酸化してアルダル酸を得ることによって得ることができる。

【0104】

好ましくは、糖中の還元性アルデヒド基の含有量は少なくとも部分的に低下される。これは、水素化、酸化、グリコシル化、又はそれらの組み合わせによって達成できる。水素化及び／又は酸化された糖を含む鉄糖錯体化合物は、例えば、これらの全てが出典明示により援用される国際公開第９９／４８５３３Ａ１号；国際公開第２０１０／１０８４９３Ａ１号又は国際公開第２０１９／０４８６７４Ａ１号に記載されているように調製することができる。還元性糖の量は、ソモジー試薬を使用して定量できる。

【0105】

具体的には、アルデヒド基は、例えば糖を水溶液中の水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤と反応させることによって、又はＰｔ若しくはＰｄなどの水素化触媒の存在下で水素と反応させることによって、水素化によってヒドロキシル基に変換することができる。

【0106】

水素化の代わりに又は水素化に加えて、アルデヒド基を、例えばアルカリ性範囲内のｐＨ、例えばｐＨ８からｐＨ１２、特にｐＨ９からｐＨ１１の範囲内のｐＨで次亜塩素酸塩、亜塩素酸塩又は次亜臭素酸塩の水溶液を使用する糖の酸化によって酸化することができる。適切な次亜塩素酸塩には、例えば、次亜塩素酸ナトリウムなどのアルカリ金属次亜塩素酸塩が含まれ、同じことが亜塩素酸塩及び次亜臭素酸塩にも当てはまる。次亜塩素酸塩、亜塩素酸塩又は次亜臭素酸塩の水溶液は、活性塩素として計算して、例えば少なくとも１３重量％、特に１３から１６重量％の範囲の濃度を有しうる。酸化反応は、例えば１５から４０℃、好ましくは２５から３５℃の範囲の温度で実施されうる。反応時間は、例えば、１０分から４時間、例えば、１から１．５時間の範囲である。例えば臭化ナトリウムなどのアルカリ金属臭化物の形態での、触媒量の臭素イオンの添加により酸化反応を促進しうるが、必須ではない。

【0107】

糖のアルデヒド基は、水素化と酸化の両方によって変換できる。これは、例えば、最初に糖を水素化してアルデヒド基の一部をヒドロキシル基に変換し、次に残りのアルデヒド基の実質的に全てをカルボキシル基に酸化することによって、達成できる。糖がデキストランなどの多糖である場合、それと共に形成される鉄糖錯体の平均分子量は、水素化アルデヒド基と酸化アルデヒド基の比率を調整することによって影響を受ける場合がある。安定した生成物を得るには、酸化前の糖（デキストランなど）中の還元基の量が１５重量％を超えてはいけない。

【0108】

還元及び／又は酸化糖を含む糖は、糖のヒドロキシル基と例えばエーテル、アミド、エステル及びアミンを形成することによって誘導体化することができる。特定の実施態様では、糖は、糖のヒドロキシル基とカルボキシアルキルエーテル、特にカルボキシメチルエーテルを形成することによって誘導体化される。本発明の鉄糖錯体化合物のような生成物におけるカルボキシメチル化糖の使用は、対応する非カルボキシル化糖を含む生成物と比較して、対象に非経口投与した場合の生成物の毒性を低減させることができる。

【0109】

好ましい実施態様では、糖は、カルボキシマルトース、ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテル、デキストラン、水素化デキストラン、デキストラングルコヘプトン酸、デキストラングルコヘプトン酸塩、デキストリン、水素化デキストリン、デキストリングルコヘプトン酸、デキストリングルコヘプトン酸塩、オリゴイソマルトース、水素化オリゴイソマルトース、ヒドロキシエチルデンプン、水素化ヒドロキシエチルデンプン、ヘプトン酸部分を有するヒドロキシエチルデンプン、ヒドロキシプロピルデンプン、水素化ヒドロキシプロピルデンプン、ヘプトン酸部分を有するヒドロキシプロピルデンプン、又はそれらの二種以上の混合物である。

【0110】

このような糖は、典型的には、５００から８００００Ｄａ、例えば８００から４００００Ｄａ又は８００から１００００Ｄａ、特に８００から３０００Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するであろう。特定の実施態様では、糖は、５００から７０００Ｄａ、例えば５００から３０００Ｄａ、７００から１４００Ｄａ、特に８５０から１１５０Ｄａ、例えば約１０００Ｄａ、又は１１５０から１３５０Ｄａ、例えば約１２５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有する多糖若しくはオリゴ糖又はそれらの混合物である。

【0111】

（任意選択的に還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化された）オリゴ糖又は多糖調製物である糖調製物中の二量体（二糖）の量は、それから調製された鉄糖錯体化合物からの生理学的鉄放出速度に関する重要な因子であると考えられる。国際公開第２０１０／１０８４９３Ａ１号を参照。従って、糖が、ここに開示された水素化多糖／オリゴ糖などの（任意選択的に還元及び／又は酸化及び／又は誘導体化された）オリゴ糖又は多糖調製物である場合、前記調製物中の二量体糖の含有量は、糖の全重量に基づいて、好ましくは２．９重量％以下、特に２．５重量％以下、特に２．３重量％以下である。糖調製物中の単量体糖の含有量が、糖の全重量に基づいて０．５重量％以下であることがまた好ましい。これにより、非経口投与後に化合物から放出される遊離鉄イオンによって引き起こされる毒性作用のリスクが低減される。

【0112】

特に好ましい糖配位子を以下に記載する。

【0113】

［オリゴイソマルトース］
特に好ましい実施態様では、糖はオリゴイソマルトース、又は更により好ましくは水素化オリゴイソマルトース（すなわち、オリゴイソマルトシド）である。

【0114】

特定の実施態様では、オリゴイソマルトース（トシド）は、７００から１５００Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有する。８５０から１１５０Ｄａ；好ましくは９５０から１０５０Ｄａ、最も好ましくは９７５から１０２５Ｄａ、例えば約１０００Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）が、一つの特定の実施態様を表す。１１５０から１３５０Ｄａ；好ましくは１２００から１３００Ｄａ、最も好ましくは１２２５から１２７５Ｄａ；例えば、約１２５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）（ここでは「八糖」とも呼ばれる）が、別の特定の実施態様を表す。８５０から１１５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）については、９を超える単糖単位を有する画分が、オリゴ糖の重量の３０％未満、好ましくは２５％未満、最も好ましくは２０％未満；例えば、５％から１５％であることが好ましい。１１５０から１３５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）については、９を超える単糖単位を有する画分が、オリゴ糖の重量の４０％未満、好ましくは３５％未満、最も好ましくは３０％；例えば、２０から３０％であることが好ましい。別の態様によれば、単量体及び二量体（３未満の単糖単位を有する画分）の含有量は、オリゴ糖の重量の１０．０％未満、好ましくは３．０％未満、最も好ましくは１．０％未満；例えば、０．１から０．５％である。

【0115】

分子の主要割合（例えば重量で少なくとも４０％又は好ましくは少なくとも５０％、例えば４０から７０％又は５０から７０％）が３～６の単糖単位を有するオリゴイソマルトース（トシド）が、好ましい一実施態様を表す。これは、８５０から１１５０の重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）に特に当てはまる。従って、本発明の好ましい実施態様では、配位子は、任意選択的に水素化されたオリゴイソマルトース分子の主要割合（例えば、重量で少なくとも４０％、又は好ましくは少なくとも５０％、例えば、４０から７０％、又は５０から７０％）が３～６の単糖単位を有するオリゴイソマルトース（トシド）である。より具体的には、３～６の単糖単位を有する分子の前記割合は、６～１０の単糖単位を有する分子の割合よりも高い。このようなオリゴ糖の例は、イソマルトシド１０００（ＩＮＮ名：デルイソマルトース）である。

【0116】

分子の主要割合（例えば重量で少なくとも４０％又は好ましくは少なくとも４５％、例えば４０から６０％又は４５から５５％）が６～１０の単糖単位を有するオリゴイソマルトース（トシド）（ここでは「八糖」とも呼ばれる）が、別の好ましい実施態様を表す。これは、特に、１１５０から１３５０の重量平均分子量（Ｍ_Ｗ）を有するオリゴイソマルトース（トシド）に当てはまる。従って、本発明の好ましい実施態様では、配位子は、任意選択的に水素化されたオリゴイソマルトース分子の主要割合（例えば、重量で少なくとも４０％、例えば４０から６０％）が６～１０の単糖単位を有するオリゴイソマルトース（トシド）である。より具体的には、６～１０の単糖単位を有する分子の前記割合は、３～６の単糖単位を有する分子の割合よりも重量で多い。このようなオリゴ糖の例は、ここに開示される八糖である。

【0117】

本発明のオリゴイソマルトース（トシド）は、好ましくは水素化オリゴイソマルトース（オリゴイソマルトシド）である。典型的には、このような水素化オリゴイソマルトース（オリゴイソマルトシド）中の還元糖の量は、オリゴ糖の重量の２．５％以下、好ましくは１．０％以下、最も好ましくは０．５％以下；例えば約０．３％である。水素化前、オリゴイソマルトース中の還元糖の量は、オリゴ糖の重量の少なくとも１０％、通常は少なくとも１５％である。しかし、還元糖の量は糖鎖の分子量分布にも依存する。鎖が短いほど還元糖の量が比較的多くなる一方、鎖が長いほど還元糖の量は少なくなる。従って、オリゴイソマルトース中の還元糖の量が、オリゴ糖の重量の３５％未満、好ましくは３０％以下；例えば、１０％から３０％の範囲、好ましくは１５から２５％の範囲であることが本発明の特定の態様である。

【0118】

［グルコン酸誘導体］
この発明で使用するための別の特定の糖配位子は、デキストラン又はデキストリンなどの糖のグルコン酸誘導体である。例には、ベペクテート又はデキストラングルコヘプトン酸が含まれる。ここで使用される「ベペクテート」という用語は、ヒドロキシエチル－アミロペクチン（デンプン）誘導体を指す。ベペクテートはまたポリグルコフェロンとも呼ばれる。ベペクテートは、例えば、その全てが出典明示により援用される国際公開第２０１２／１７５６０８号に開示されている。このようなヒドロキシエチル－アミロペクチン（デンプン）誘導体は、デンプン分子中に存在する末端グルコシル残基の数に応じて、１分子当たり多くのヘプトン酸残基を有する可能性がある。このヘプトン酸残基は、ヒドロキシエチルデンプンの親水性を増大させ、例えば鉄イオンなどの金属イオンのような配位子とこのヒドロキシエチルデンプンによって形成される錯体の安定性を高める。より一般的に言えば、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）は、単一のグルコシル残基のヒドロキシル基の一部がヒドロキシエチル残基で置換されたデンプンである。ヘプトン酸残基による修飾は、ヒドロキシエチルデンプンの末端グルコシル残基をヘプトン酸残基に変換することによって行われる。好ましくは、本方法で使用されるヒドロキシエチルデンプンは、２０００００ｇ／モル未満、特に１３００００ｇ／モル未満、特に１０００００ｇ／モル未満、特に９００００ｇ／モル未満、特に８００００ｇ／モル未満、更に特に７５０００ｇ／モル未満の重量平均分子量（Ｍｗ）を有する。非常に適切な分子量は、５５０００ｇ／モルから８５０００ｇ／モルの範囲にある。このようなヒドロキシエチルデンプンは、現在医療分野で使用されている（未変性）ヒドロキシエチルデンプンに比べて比較的分子量が低い。ヒドロキシエチルデンプンの分子量を定量するのに適した方法は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）である。好ましい実施態様では、ヒドロキシエチルデンプンは、０．４から０．６、特に０．４５から０．５５の平均モル置換度を有する。約０．５０の平均モル置換度が特に好ましい。平均モル置換度は、グルコシル残基当たりのヒドロキシエチル残基によって置換されているヒドロキシル基の量の尺度である。各グルコース単位（又はグルコシル残基）には三つのヒドロキシル基があるため、平均モル置換度は最大３でありうる。０．５の平均モル置換度は、（平均又は統計ベースで）各第二のグルコシル残基において、一つのヒドロキシル基がヒドロキシエチル残基によって置換されていることを示す。好ましい実施態様では、ヒドロキシエチルデンプンは、５５０００から８５０００ｇ／モル、好ましくは約７００００ｇ／モルの重量平均分子量（Ｍｗ）、及び０．４５から０．５５、特に約０．５０の平均モル置換度を有する。７００００ｇ／モル±１５０００ｇ／モルの分子量及び０．５±０．０５の平均モル置換度を有するそのようなヒドロキシエチルデンプンは、またＨＥＳ７０／０．５とも呼ばれうる。

【0119】

デキストラングルコヘプトン酸、デキストラングルコヘプトン酸塩、デキストリングルコヘプトン酸、及びデキストリングルコヘプトン酸塩は、デキストラン又はデキストリンなどの糖がヘプトン酸残基を有するように修飾される適切な糖配位子の更なる例である。

【0120】

［高分子配位子］
別の実施態様群によれば、配位子は、配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物に適した配位子である。適切な配位子には、例えば、カルボン酸、例えば、アジピン酸、グルタル酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、アスパラギン酸、ピメリン酸、クエン酸、グルコン酸、乳酸、及び安息香酸；食品添加物、例えば、マルトール、エチルマルトール及びバニリン；配位子特性を持つアニオン、例えば重炭酸塩、硫酸塩及びリン酸塩；鉱物配位子、例えばケイ酸塩、ホウ酸塩、モリブデン酸塩及びセレン酸塩；アミノ酸、特にトリプトファン、グルタミン、プロリン、バリン、ヒスチジンなどのタンパク質形成アミノ酸；及び葉酸塩、アスコルビン酸塩、ピリドキシン、ナイアシンなどの栄養素ベースの配位子；並びにそれらの二種以上の混合物が含まれる。適切な高分子配位子の特定の例は、米国特許第８７４１６１５Ｂ２号に記載されている生体適合性ポリエチレングリコール系ポリマー、すなわち一般式（Ｉ）

（上式中、Ｒ_１はアルキル、アリール、カルボキシル、又はアミノであり、Ｒ_２はアルキル又はアリールであり、ｎは５から１０００の整数であり、ｍは１から１０の整数である）の生体適合性ポリマーである。Ｒ_１及びＲ_２に適したアルキル基には、Ｃ_１～Ｃ_２０直鎖又は分岐アルキル基が含まれる。一実施態様では、Ｒ_１及びＲ_２のそれぞれは独立して、Ｃ_１～Ｃ_６直鎖又は分岐アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、及びイソヘキシルである。Ｒ_１及びＲ_２に適したアリール基には、Ｃ_６～Ｃ_１２置換又は非置換アリール基、例えばフェニル、ビフェニル、及びナフチルが含まれ、その置換基の例には、ヒドロキシル、ハロアルキル、アルコキシル、シアノ、ニトロ、アミノ、又はアルキルアミノが含まれる。メチレン単位ｍの数は、好ましくは１から１０の整数である。オキシエチレン単位ｎの数は、好ましくは５から１０００の整数であり、２００～５００００ｇ／モルの分子量のＰＥＧに相当する。一実施態様では、ｍは約３であり、ｎは約１５である。

【0121】

生体適合性ポリマーは、酸化鉄ナノ粒子の表面を化学的に修飾して、磁性ナノ粒子と生体適合性ポリマーとを含む生体適合性磁性材料をもたらすことができるという点で有用である。

【0122】

［糖の調製］
ここに開示される糖の殆どの製造には、容易に入手可能な糖からの調製が必要とされる。一般的な出発原料はデキストラン及びデキストリン、つまり、それぞれ主にα－１，６－又はα－１，４－結合グルコース単位を持つポリグルコースである。出発原料として使用されるデキストラン及びデキストリンは典型的には高分子量の多糖であるため、通常、所望の糖の分子量を調整するには、これらを加水分解し、得られた加水分解物を分画する必要がある。

【0123】

本発明のオリゴイソマルトース（トシド）を製造するための典型的なプロセスは、次の工程を含む：
（ａ）デキストランを加水分解して加水分解物を得る工程；
（ｂ）加水分解物を分別してオリゴイソマルトースを得る工程；及び任意選択的に
（ｃ）オリゴイソマルトースを水素化してオリゴイソマルトシドを得る工程。

【0124】

更なる任意選択的工程は、次の通りである：
例えばダイアフィルトレーションによる精製により、オリゴイソマルトシド中の単糖及び二糖のレベルを低下させる工程；
例えばイオン交換による精製により、精製されたオリゴイソマルトース又はオリゴイソマルトシドを得る工程。

【0125】

例えば、本発明の八糖などのオリゴイソマルトース（トシド）は、組み合わせて限外濾過によって分画されるデキストラン画分から製造することができる。デキストラン画分は、５００から２０００ｋＤａの範囲の重量平均分子量（Ｍ_ｗ）を有する中間体デキストランから製造することができ、これを加水分解して２００００から７００００Ｄａの範囲のＭｗを有するようにする。一又は複数の工程では、所望の分子量分布が達成されるまで、出発物質を加水分解して低分子量にし、分別し、濾過することができる。得られたオリゴイソマルトースをついで水素化して、オリゴイソマルトシドを得ることができる。ダイアフィルトレーションによる精製は、単糖及び二糖のレベルを低下させるのに役立ち、得られた生成物は例えばイオン交換により更に精製されうる。例えば、低量の単糖及び二糖は、例えば３４０～８００Ｄａの範囲のカットオフ値を有する膜を使用する膜濾過によって糖調製物から前記より小さい糖分子を除去することによって達成することができる。精製方法によって得られる画分中の単糖及び二糖の濃度は、ゲル浸透クロマトグラフィーによって監視できる。

【0126】

ベペクテートの製造は、例えば国際公開第２０１２／１７５６０８Ａ１号に開示されている。簡単に言えば、ヒドロキシエチルデンプンが水に溶解される。次に、ｐＨ値が８．０から１０．０の値に調整される。その後、シアン化物化合物がヒドロキシエチルデンプン溶液に添加される。次に、溶液が８０から９９℃の温度に加熱され、第一の期間この温度に維持される。最後に、ｐＨ値が２．０から４．０の値に調整され、溶液を５０から９０℃の温度にし、この温度に第二の期間維持される。デキストラン及びデキストリンのグルコン酸誘導体の製造は、例えば米国特許第３６３９５８８号に開示されている。ポリエチレングリコール系ポリマーの製造は、例えば米国特許第８７４１６１５号に開示されている。

【0127】

［鉄調製物］
鉄錯体化合物の作製に使用できる鉄調製物は、水溶性鉄塩、水酸化鉄、及び水酸化酸化鉄から選択される形態の鉄を含む。鉄調製物は、これらの鉄形態の二種以上の混合物を含みうる。

【0128】

特定の実施態様では、鉄調製物は水溶性鉄塩、例えば臭化鉄、硫酸鉄又は塩化鉄、特に塩化第二鉄（ＦｅＣｌ_３）、塩化第一鉄（ＦｅＣｌ_２）又はそれらの混合物を含む。好都合には、水溶性鉄塩は生理学的に許容される塩である。

【0129】

更なる特定の実施態様では、鉄調製物は水酸化鉄、例えば水酸化第二鉄（Ｆｅ(ＯＨ)_３）、水酸化第一鉄（Ｆｅ(ＯＨ)_２）又はそれらの混合物を含む。

【0130】

更なる特定の実施態様では、鉄調製物は水酸化酸化鉄を含む。水酸化酸化鉄は、オキシ水酸化鉄とも呼ばれる場合がある。水酸化酸化鉄は、一つ又は複数の鉄イオン、一つ又は複数のオキソ基、及び一つ又は複数のヒドロキシル基からなる化合物である。特定の水酸化酸化鉄には、例えば、無水（ＦｅＯ(ＯＨ)）形態及び水酸化酸化第二鉄一水和物（ＦｅＯ(ＯＨ)・Ｈ_２Ｏ）などの水和（ＦｅＯ(ＯＨ)・ｎＨ_２Ｏ）形態で存在する水酸化酸化第二鉄が含まれる。水酸化酸化鉄は、例えばＲｏｅｍｐｐ ｌｅｘｉｃｏｎ Ｃｈｅｍｉｅ，１０．Ａｕｆｌａｇｅ，１９９７に記載されているように、加水分解及び沈殿によって鉄（ＩＩＩ）塩水溶液から調製することができる。水酸化酸化鉄は、様々な多形形態で存在しうる。例えば、ＦｅＯ(ＯＨ)の多形には、α－ＦｅＯ(ＯＨ)（針鉄鉱）、β－ＦｅＯ(ＯＨ)（赤金鉱）、γ－ＦｅＯ(ＯＨ)（レピドクロサイト）及びδ－ＦｅＯ(ＯＨ)（フェロキシハイト）が含まれる。

【0131】

特定の実施態様によれば、非鉄金属不純物の少ない鉄調製物が使用される。このような非鉄金属不純物の適切なレベルは、国際公開第２０１９／０４８６７４Ａ１号に記載されている。このような調製物は、
（ａ）ペンタカルボニル鉄から；又は
（ｂ）鉄塩のその水溶液からの再結晶化により；又は
（ｃ）鉄塩水溶液を有機溶媒で抽出することにより；又は
（ｄ）鉄塩水溶液の電気分解中にアノードに沈殿した鉄から；又は
（ｅ）鉄塩水溶液を塩基と接触させて水酸化鉄の沈殿物を形成し、濾過又は遠心分離によって沈殿物を液体から分離することによって；又は
（ｆ）塩化第二鉄と非揮発性不純物を含む混合物から塩化第二鉄を蒸留することによって、得ることができる。

【0132】

好ましい実施態様によれば、鉄調製物は、鉄塩水溶液（例えば、ニッケル製造のための鉄含有ニッケル鉱石の処理中に得られる鉄塩水溶液）を有機溶媒で抽出するプロセスによって得られる。

【0133】

特に好ましい実施態様によれば、本発明の方法で使用される鉄調製物はペンタカルボニル鉄から調製される。

【0134】

（ａ）ペンタカルボニル鉄からの；又は
（ｂ）鉄塩のその水溶液からの再結晶化による；又は
（ｃ）鉄塩水溶液を有機溶媒で抽出することによる；又は
（ｄ）鉄塩水溶液の電気分解中にアノードに沈殿した鉄からの；又は
（ｅ）鉄塩水溶液を塩基と接触させて水酸化鉄の沈殿物を形成し、濾過又は遠心分離によって沈殿物を液体から分離することによる；又は
（ｆ）塩化第二鉄と非揮発性不純物を含む混合物から塩化第二鉄を蒸留することによる、ここに記載される鉄調製物の生成は、必須ではないが、本発明のプロセスの一工程でありうる。

【0135】

ペンタカルボニル鉄から水溶性鉄塩、水酸化鉄又は水酸化酸化鉄を調製するための方法は当該技術分野で知られている。例えば、第一の工程では、例えば米国特許第４０５６３８６号に記載されているように、任意選択的にＨ_２、ＮＯ、ＰＦ_３、ＰＨ_３、ＮＨ_３及び／又はＩ_２などの触媒の存在下で、高温（例えば２００℃以上）でペンタカルボニル鉄を分解して鉄（いわゆるカルボニル鉄）を形成することができる。鉄を（好ましくは過剰の）塩酸と反応させて、ＦｅＣｌ_２を得ることができる。ＦｅＣｌ_２を塩酸及び（好ましくは僅かに不足した）塩素酸ナトリウムと反応させて、ＦｅＣｌ_３を得ることができる。ＦｅＣｌ_２を、塩酸と反応させ、例えば過酸化水素を使用して酸化させて、ＦｅＣｌ_３を形成することができる。この反応を、塩酸及び塩素酸ナトリウムとの反応で残ったＦｅＣｌ_２を酸化させて、ＦｅＣｌ_２からＦｅＣｌ_３へのより完全な変換を達成するために使用することができる。塩素（Ｃｌ_２；ガス）もまた酸化剤として使用できる。

【0136】

カルボニル鉄は、例えば、一酸化炭素を高温の鉄（例えば約２００℃の高温）上に、好ましくは高圧下（例えば１５～２０ＭＰａの高圧）で例えば当てることによって調製することができるペンタカルボニル鉄から製造することができる。ペンタカルボニル鉄を経由するカルボニル鉄のそのような調製法は、例えば、１９２６年６月２６日に公開されたＢａｄｉｓｃｈｅ Ａｎｉｌｉｎ－ ＆ Ｓｏｄａ－Ｆａｂｒｉｋのフランス特許出願第６０７．１３４号に記載されている。

【0137】

鉄塩調製物のその水溶液からの再結晶化によってここに記載された鉄調製物を調製するための方法は、当該技術分野で知られている。この目的のために、水溶性鉄塩調製物の水溶液が提供され、鉄塩（例えば、硝酸第二鉄）が（例えば、溶液の温度を下げることによって）溶液から再結晶化され、鉄塩結晶が液体から分離され、溶解されてその水溶液が形成され、再び再結晶及び分離に供される。溶解、再結晶及び分離の工程は、鉄塩調製物の純度を増加させ、特に非鉄金属不純物の量を低減させるために、一回又は更に数回繰り返すことができる。特定の例によれば、硝酸第二鉄が、硝酸を含むその水溶液から再結晶化される。具体的には、硝酸第二鉄が５０～６０℃において５５～６５％の硝酸水溶液に溶解される。溶液を約１５℃以下の温度に冷却すると、結晶性硝酸第二鉄の沈殿物が形成され、液体から分離できる。溶解、再結晶化及び分離の前記工程は、一回又は更に数回繰り返すことができる。

【0138】

鉄塩水溶液を有機溶媒で抽出することによってここに記載の鉄調製物を調製するための方法は、当該技術分野で知られている。この目的のために、塩化第二鉄水溶液を有機溶媒で処理して、塩化第二鉄を有機溶媒に選択的に溶解させ（抽出）、ついで、選択的に溶解された塩化第二鉄を、塩化第二鉄から有機溶媒を除去することによって回収することができる。有機溶媒の例には、４～２０の炭素原子を有するアルコール、特に６～１０の炭素原子を有するアルコール、例えばｎ－オクタノール、及びトルエン中のトリ－ｎ－ラウリルアミン塩酸塩のようなアミン塩の有機溶液が含まれる。塩化第二鉄水溶液中に塩酸が存在すると、抽出効率を改善することができる。有機溶媒を添加する前に、部分蒸発によって出発水溶液中の塩化第二鉄の濃度を、特に２８０～８５０ｇ／ｌ塩化第二鉄の範囲の濃度まで増加させることが有利である。蒸発及び溶媒抽出の精製サイクルは、所望の純度の塩化第二鉄調製物が得られるまで繰り返すことができる。塩化第一鉄が最初に塩素による酸化によって塩化第二鉄に転換される場合、塩化第一鉄の水溶液もまた精製されうる。有機溶媒による鉄塩の抽出のための具体的な方法は、例えば、カナダ特許出願公開第２３１８８２３Ａ１号及びＭｕｌｌｅｒ等（“Ｌｉｑｕｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒｒｉｃ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｂｙ ｔｒｉ－ｎ－ｌａｕｒｙｌａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ”，ＥＵＲ２２４５．ｅ，Ｅｕｒａｔｏｍ ｒｅｐｏｒｔ，Ｔｒａｎｓｐｌｕｔｏｎｉｕｍ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｅｕｒａｔｏｍ Ｃｏｎｔｒａｃｔ Ｎｏ．００３－６１－２ ＴＰＵＢ，Ｐｒｅｓｓｅｓ Ａｃａｄｅｍｉｑｕｅｓ Ｅｕｒｏｐｅｅｎｎｅｓ，Ｂｒｕｓｓｅｌｓ，１９６５）に記載されている。

【0139】

鉄をアノードで沈殿させる、鉄塩水溶液の電気分解法は、当該技術分野で知られている。例えば、Ｃａｉｎ等（“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｕｒｅ ｉｒｏｎ ａｎｄ ｉｒｏｎ－ｃａｒｂｏｎ ａｌｌｏｙ”ｉｎ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｕｒｅａｕ ｏｆ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，Ｖｏｌ．１３，１９１６）及びＭｏｓｔａｄ等（Ｈｙｄｒｏｍｅｔａｌｌｕｒｇｙ，２００８，９０，２１３－２２０）を参照のこと。電気分解に適した鉄溶液には、塩化鉄溶液、硫酸鉄溶液、及び塩化鉄と硫酸鉄の両方を含む溶液が含まれる。溶液は典型的には中性又は酸性である。

【0140】

ここに記載の鉄調製物は更に、鉄塩水溶液を塩基と接触させて水酸化鉄の沈殿物を形成し、濾過又は遠心分離によって沈殿物を液体から分離することによって得ることができる。水酸化鉄の沈殿に適した塩基には、水酸化ナトリウム又は炭酸ナトリウムが含まれる。或いは、重炭酸ナトリウムを使用することができる。濾過又は遠心分離によって、そのような沈殿物を残りの溶液から分離するための方法は、当該技術分野で知られている。

【0141】

非鉄金属不純物が少ない鉄調製物、例えば本発明の方法で使用される鉄調製物は、塩化第二鉄と非揮発性不純物を含む混合物の蒸留によってもまた調製することができる。蒸留の場合、混合物は、選択された圧力及び温度で混合物がその沸点付近になるように選択された温度及び圧力にさらされる。その条件で、混合物は蒸気相と液体塩化第二鉄中の非揮発性不純物のスラリーに分離する。その蒸気は実質的に純粋な塩化第二鉄であり、これを、スラリーから蒸気を分離することによって回収することができる。特定の実施態様によれば、混合物の沸点付近の温度は、前記沸点から１０℃以内の温度を意味し、好ましくは前記沸点である。蒸留は、例えば、３００℃から７００℃の範囲の温度及び０．１から５．１ＭＰａの範囲、好ましくは０．２から０．４ＭＰａの範囲の圧力で実施することができ、選択された圧力及び温度で混合物はほぼその沸点にある。

【0142】

蒸留中、スラリー中の非揮発性固体の沈降は、スラリーを機械的に（例えば、パドルスターラーなどにより）撹拌することによって、又は好ましくは、ガス（例えば、窒素、ヘリウム、塩素又はそれらの混合物）をスラリーを通してバブリングさせることによって、防止することができる。

【0143】

塩化第二鉄蒸気の分離後、残りのスラリーは、スラリーを加熱して塩化第二鉄を蒸発させ、塩化第二鉄含有蒸気を分離し冷却し、それを蒸留プロセスに再投入することによってリサイクルすることができる。好ましくは、スラリーのリサイクルは、蒸留中にスラリー中に存在する固形物の量が約２０重量％未満、特に約１２重量％未満になるように実施される。

【0144】

蒸留プロセスに投入される塩化第二鉄と非揮発性不純物を含む混合物は、例えば、鉄含有鉱石（例えばイルメナイトなどのチタンを含む鉱石）を塩素化して、塩化第二鉄と非揮発性不純物を含むガス状混合物を生成し、ガスを冷却して塩化第二鉄と非揮発性不純物の固体混合物を沈殿させることによって、得ることができる。ついで、前記固体混合物を蒸留プロセスに投入することができる。塩化第二鉄と非揮発性不純物の固体混合物をガス状混合物から分離する前に、ガス状混合物を任意選択的に塩化第二鉄の露点より高い温度にさらし、この温度ではガス状ではなくなった非揮発性不純物を除去することができる。このように予備精製されたガス状混合物を次に冷却して、蒸留プロセスに投入できる塩化第二鉄と非揮発性不純物の固体混合物を沈殿させることができる。例えば、その全体が出典明示により援用される米国特許第３９０６０７７号を参照のこと。

【0145】

鉄調製物の純度を更に高めるために、鉄調製物を調製し精製するための異なる方法を組み合わせることができる。例えば、鉄塩水溶液の電気分解によって調製された鉄を、水溶性鉄塩に転換し、これをついで、
（１）鉄塩水溶液を形成するための溶解、
（２）水溶液からの鉄塩の再結晶化、及び
（３）残りの溶液からの再結晶化した鉄塩の分離
の一又は複数サイクルに供することができる。

【0146】

［錯体］
鉄イオンが非経口投与に適しているためには、遊離鉄イオンの量が少なくなり、投与後に鉄が制御された形で放出されるように、鉄イオンが配位子と錯体化される必要がある。好都合には、投与前に鉄錯体化合物に含まれる遊離鉄の全量は、０．０１％ｗ／ｖ以下、好ましくは０．００３％ｗ／ｖ未満である（１００ｍｇ／ｍＬ溶液として存在する鉄錯体化合物の場合）。換言すれば、全鉄含量に対する遊離鉄の全量は、全鉄含量の重量で０．１％以下、好ましくは０．０３％未満の遊離鉄である（１００ｍｇ／ｍＬ溶液として存在する鉄錯体化合物の場合）。これには、最終製剤に錯体が加工され、使用されるまで保存されるのに十分な物理的安定性を鉄錯体化合物が有していることが必要である。

【0147】

［鉄糖錯体］
一群の実施態様によれば、鉄錯体化合物は鉄糖錯体化合物であり、すなわち、鉄錯体化合物中の配位子が糖である。

【0148】

本発明の鉄糖錯体化合物には、ここに開示される糖配位子との錯体、例えば、カルボキシマルトース鉄、鉄ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテル錯体、鉄マンニトール錯体、デキストラン鉄、水素化デキストラン鉄、酸化デキストラン鉄、鉄カルボキシアルキル化還元オリゴ及び多糖、スクロース鉄、グルコン酸鉄、デキストリン鉄、水素化デキストリン鉄、酸化デキストリン鉄、オリゴマルトース鉄、オリゴマルトース水素化鉄、水素化オリゴイソマルトース鉄などの水素化オリゴ糖鉄、ヒドロキシエチルデンプン鉄、ソルビトール鉄、デキストラングルコヘプトン酸鉄（例えば、グレプトフェロン）及びそれらの二種以上の混合物が含まれる。特定の実施態様によれば、本発明の鉄糖錯体化合物は、カルボキシマルトース鉄、鉄ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテル錯体、鉄マンニトール錯体、デキストラン鉄、水素化デキストラン鉄、スクロース鉄、グルコン酸鉄、デキストリン鉄、水素化オリゴイソマルトース鉄及びそれらの二種以上の混合物から選択される。より好ましい実施態様では、鉄糖錯体は水素化オリゴイソマルトース鉄（オリゴイソマルトシド鉄）である。

【0149】

本発明の鉄糖錯体化合物中の鉄の量は、乾燥物質について定量して、典型的には糖錯体の重量の１０から５０％、好ましくは１５から３５％、最も好ましくは２０から３０％、例えば２０から２５％の範囲の鉄である。

【0150】

従って、錯体中の元素鉄対糖の重量比は、典型的には、１０：９０から５０：５０、好ましくは１５：８５から４５：５５、最も好ましくは２０：８０から４０：６０、例えば約７０：３０である。

【0151】

本発明の鉄糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍ_ｐ）は、典型的には８００から８０００００Ｄａ、例えば１００００から５０００００Ｄａ、又は２００００から４０００００Ｄａ、又は５００００から３０００００Ｄａ、特に９００００から２０００００Ｄａの範囲にある。「見かけの」ピーク分子量Ｍ_ｐは、例えばデキストラン標準を使用するゲル浸透クロマトグラフィーによって定量することができる。例えば、Ｊａｈｎ等，Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍ ２０１１，７８，４８０－４９１に記載された方法を参照のこと。ここに開示されるオリゴイソマルトース（トシド）鉄錯体では、「見かけの」ピーク分子量（Ｍ_ｐ）は、典型的には１２００００から１９００００Ｄａ、特に１２５０００から１８５０００Ｄａ又は１３００００から１８００００Ｄａの範囲にある。１３５０００から１７５０００Ｄａの範囲、特に１４００００から１５５０００Ｄａの範囲の「見かけの」ピーク分子量（Ｍ_ｐ）は、特にここに開示される八糖第二鉄に関して有利であることが証明された。好ましくは、「見かけの」ピーク分子量（Ｍ_ｐ）は、特にここに開示される八糖第二鉄に関して、１４５０００から１５５０００Ｄａの範囲にある。本発明のオリゴイソマルトース（トシド）鉄は、好ましくは、１．０から１．５、好ましくは１．０５から１．４、より好ましくは１．１から１．３の範囲、例えば約１．２の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）を持つ比較的狭い分子量分布を有する。

【0152】

幾つかの実施態様では、本発明の鉄糖錯体は、有機酸などの安定剤を含みうる。好ましくは、有機酸は有機ヒドロキシ酸である。有機ヒドロキシ酸の適切な例は、グルコン酸及びクエン酸である。クエン酸が好都合な例である。クエン酸が存在する場合、クエン酸の量は典型的には元素鉄の全量の３から２０重量％の範囲である。

【0153】

従って、この発明での使用に特に適した鉄糖錯体は、ここに開示されるような、オリゴイソマルトース（トシド）鉄、例えばイソマルトシド鉄１０００（ＩＮＮ名：デリソマルトース第二鉄）又は八糖第二鉄である。ここで使用される「オリゴイソマルトシド鉄」という用語は、例えば水酸化酸化鉄などの鉄とオリゴイソマルトシドをマトリックス様構造で含むコロイド錯体を指す。

【0154】

オリゴイソマルトシド鉄は、本発明に係る使用のための好ましい鉄糖錯体である。好ましい実施態様では、本発明で使用するための鉄糖錯体は、八糖と安定に結合した水酸化酸化鉄を含む。好ましい実施態様では、鉄糖錯体は八糖第二鉄である。

【0155】

別のオリゴイソマルトシド鉄の例は、Ｍｏｎｏｆｅｒ（登録商標）、Ｍｏｎｏｆｅｒｒｉｃ（登録商標）、又はＤｉａｆｅｒ（登録商標）という商品名で多くの国で市販されている。

【0156】

本発明の鉄オリゴイソマルトシド錯体は、その医療用途になると有利であることが判明した特性を有することが見出された。特に、鉄オリゴイソマルトシド錯体の１００ｍｇ／ｍＬ溶液では、遊離鉄の全量が０．０１％ｗ／ｖ未満、特に好ましくは０．００３％ｗ／ｖ未満であることが見出された。

【0157】

更に、本発明の鉄オリゴイソマルトシド錯体の強度は、ヒト又は非ヒト対象に投与されると、インビボの生理学的条件下で適切な形で鉄を放出するのに十分に高いことが観察された。強度を迅速に評価できるインビトロ試験がある。一つの試験では、錯体を規定の条件下（０．２４ＭのＨＣｌ；０．９％のＮａＣｌ）で塩酸加水分解に供する。次に、このアッセイでは、溶液中の鉄糖錯体の半分がその構成部分（鉄と糖）に解離するまでの経過時間を決定する。これは、２８７．３ｎｍでの光学吸光度を測定することによって行うことができる。インビトロで測定される持続時間（Ｔ１／２）は、インビボ投与後の鉄糖錯体の解離の相対速度の代用尺度、すなわち錯体強度の尺度である。この試験では、本発明の鉄オリゴイソマルトシド錯体は、少なくとも２０時間、好ましくは少なくとも２５時間、より好ましくは少なくとも３０時間の半減期（Ｔ１／２）を有することが見出された。好都合には、本発明での使用に適した錯体はそのような半減期を有する。これにより、鉄錯体化合物からの鉄が吸収される一方で、遊離鉄の毒性が確実に低減される。一方、半減期（Ｔ１／２）が６０時間以下、好ましくは５０時間以下、より好ましくは４０時間以下であることもまた、体内への鉄の適切な摂取を可能にするという点で大きな利点を提供する。２５～３５時間の範囲の半減期が特に好ましい。

【0158】

この発明で使用するための別の特定の鉄糖錯体はベペクテート第二鉄（ＦＢＰ）である。ベペクテート第二鉄は、例えば、その全てが出典明示により援用される国際公開第２０１２／１７５６０８Ａ１号に開示されている。デキストラングルコヘプトン酸との鉄錯体は、この発明で使用するための更なる特定の鉄糖錯体である。これらはグレプトフェロンとしても知られており、ブタ用に市販されている鉄糖錯体である。グレプトフェロンなどのデキストラングルコヘプトン酸第二鉄は、例えば米国特許第３６３９５８８号に開示されている。

【0159】

別の実施態様群によれば、鉄錯体化合物は、高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物である。高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物は、鉄イオン（例えば、Ｆｅ^３＋）、配位子、並びにオキソ基及び／又はヒドロキシル基を含むか、又は基本的にそれらから構成される。鉄イオン、オキソ基及び／又はヒドロキシル基は、ポリオキソ－ヒドロキシ鉄粒子を形成する。配位子は、最初に存在するオキソ基又はヒドロキシル基の一部を置換することによってその中に取り込まれる。この置換は一般に非化学量論的であり、形式的な結合を通じて起こり、オキソ－ヒドロキシ鉄の化学、結晶化度、及び材料特性に明確な変化をもたらす。高分子配位子置換オキソヒドロキシ鉄錯体化合物は、例えば、国際公開第２００８／０９６１３０Ａ１号に記載されている。

【0160】

配位子対鉄の平均モル比は、典型的には１０：１から１：１０の範囲、例えば５：１から１：５、４．１から１：４、３．１から１：３、２：１から１：２の範囲、又は約１：１である。

【0161】

［鉄錯体化合物の調製］
本発明の鉄錯体化合物は、水の存在下で鉄調製物を配位子と接触させることによって調製することができる。水酸化鉄及び／又は水酸化酸化鉄の形態の鉄を含む鉄調製物は、この工程に直接使用することができる。例えば、水溶液中の水酸化鉄（例えば、水酸化第二鉄）及び／又は水酸化酸化鉄の沈殿物を配位子（例えば、糖調製物）と接触させ、続いて加熱し、ｐＨを上昇させて、鉄錯体化合物（例えば、ＦｅＯ(ＯＨ)コアを含む鉄錯体化合物）を形成する。或いは、鉄調製物の水酸化鉄及び／又は水酸化酸化鉄が、鉄調製物を酸と接触させることによって、ここに記載のように水溶性鉄塩に変換される。好都合には、この変換は、反応物（水酸化鉄及び／又は水酸化酸化鉄と酸）を含む水溶液中で実施される。酸の選択は、生成される鉄塩に依存する。例えば、塩化鉄は、鉄調製物の水酸化鉄及び／又は水酸化酸化鉄を塩酸と反応させることによって調製することができる。鉄錯体化合物を調製するための本発明の方法の工程（ｉｉ）において、鉄調製物に加えて使用される試薬は、ヒ素、クロム、鉛、水銀、カドミウム及び／又はアルミニウムなどの非鉄不純物を実質的に含まないことが好都合である。

【0162】

従って、本発明の鉄糖錯体化合物は、
（１）糖と、水溶性鉄塩（例えば、塩化第二鉄）を含むここに記載の鉄調製物とを含む水溶液を提供する工程、
（２）水溶液に塩基を添加して水酸化鉄を形成する工程、及び
（３）次に、水溶液を加熱して鉄糖錯体化合物を形成する工程
によって調製することができる。

【0163】

好ましくは、水酸化鉄の沈殿を防ぐために、工程（１）における水溶液のｐＨは酸性であり、例えば溶液のｐＨは２以下である。工程（２）における塩基の添加は、好ましくは、ｐＨを、例えばｐＨ５以上、例えばｐＨ１１、１２、１３又は１４まで上昇させるように、ゆっくり又は徐々に実施される。このような漸進的な増加は、最初に弱塩基（例えば、アルカリ金属炭酸塩若しくはアルカリ土類金属炭酸塩、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム若しくは重炭酸カリウム、又は炭酸アンモニウム若しくは重炭酸アンモニウム、又はアンモニア）を添加して、ｐＨを、例えば、ｐＨ２～４まで、例えば、２～３まで増加させ、ついで、強塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム又は水酸化マグネシウムなどのアルカリ金属水酸化物又はアルカリ土類金属水酸化物）を添加することによってｐＨを更に増加させることによって、達成することができる。

【0164】

或いは、本発明の鉄糖錯体化合物は、
（１）糖と、水酸化鉄、水酸化酸化鉄又はそれらの混合物を含むここに記載の鉄調製物とを含む水溶液を提供する工程、及び
（２）次に、水溶液を加熱して鉄糖錯体化合物を形成する工程
によって、調製することができる。

【0165】

本発明の鉄糖錯体化合物を調製するための上記の二つの方法の最後の工程における水溶液の加熱は、鉄糖錯体化合物の形成を促進する。例えば、水溶液は、１５℃から沸騰までの範囲の温度まで加熱されうる。好ましくは、温度は徐々に増加させられ、例えば第一工程では水溶液は１５から７０℃の温度に加熱され、ついで沸騰するまで徐々に更に加熱される。反応を終了させるために、例えばＨＣｌ又は塩酸水溶液などの酸を添加することによって、ｐＨを例えばｐＨ５～７に低下させることができる。一実施態様では、前記ｐＨの低下は、溶液が約５０℃に加熱されたとき、更に加熱される前に実施される。

【0166】

加熱後、生成物を濾過により更に処理することができ、そのｐＨを、上記のもののような塩基又は酸を添加することにより中性又は僅かに酸性のｐＨ（例えば、ｐＨ５から７）に調整することができる。更なる任意選択的工程には、限外濾過又は透析によって達成されうる精製、特に塩の除去、並びに滅菌濾過及び／又は加熱処理（例えば、１２１℃以上の温度）によって達成されうる滅菌が含まれる。精製された溶液は、薬学的組成物の調製に直接使用することができる。或いは、固体の鉄糖錯体は、例えばエタノールなどのアルコールを添加して沈殿させることによって、又は乾燥、例えば噴霧乾燥させることによって得ることができる。

【0167】

鉄糖錯体化合物は、クエン酸、クエン酸グルコン酸又はグルコン酸塩などの有機ヒドロキシル酸又はその塩と混合することによって安定化させることができる。

【0168】

従って、オリゴイソマルトース（トシド）鉄を製造するための典型的なプロセスは、次の工程：
（ａ）デキストランを加水分解して加水分解物を得る工程；
（ｂ）加水分解物を分別してオリゴイソマルトースを得る工程；及び
（ｃ）オリゴイソマルトースを水素化してオリゴイソマルトシドを得る工程
（ｄ）鉄錯体の形成工程
を含み、オリゴイソマルトシド鉄を製造するためのプロセスである場合には、水素化工程が含まれる。

【0169】

更なる任意選択工程は次の通りである：
オリゴイソマルトシド中の単糖及び二糖のレベルを低減するための精製、例えばダイアフィルトレーション；
精製されたオリゴイソマルトシドを得るための、例えばイオン交換による精製；
錯体の加熱；
加熱された錯体の濾過；
精製された錯体を得るための膜濾過；
安定化された錯体を得るためのクエン酸塩などの有機酸の添加；
錯体を固体、例えば粉末として得るための噴霧乾燥。

【0170】

例えば、本発明の鉄八糖などのオリゴイソマルトース（トシド）鉄は、開示されたオリゴイソマルトース（トシド）を水中で塩化第二鉄と接触させることによって製造することができる。ついで、Ｎａ_２ＣＯ_３を添加し、続いてＮａＯＨを添加して、約１０．５のｐＨに達する。加熱すると黒色又は暗褐色のコロイド溶液が得られ、これを、ＨＣｌを使用して中和し濾過することができる。未結合の八糖の残基、遊離鉄、無機塩は膜濾過によって除去できる。クエン酸一水和物を添加して、錯体を更に安定化してもよい。中性又は僅かに酸性のｐＨに調整すると、溶液が得られ、これをその後粉末などの固形形態に転換できる。この目的のために、溶液を噴霧乾燥して黒ないしは暗褐色の粉末を得ることができる。

【0171】

オリゴイソマルトシド鉄は、例えば、その全てが出典明示により援用される国際公開第２０１０／１０８４９３Ａ１号及び国際公開第２０１９／０４８６７４Ａ１号に記載されているようにして得ることができる。

【0172】

ベペクテート第二鉄とその製造は、例えば、その全てが出典明示により援用される国際公開第２０１２／１７５６０８Ａ１号に開示されている。簡単に言えば、ヒドロキシエチルデンプンを水に溶解させる。次に、ｐＨ値を８．０から１０．０の値に調整する。その後、シアン化物化合物をヒドロキシエチルデンプン溶液に添加する。次に、溶液を８０から９９℃の温度に加熱し、第一の期間この温度に維持する。最後に、ｐＨ値を２．０から４．０の値に調整し、溶液の温度を５０から９０℃にし、この温度で第二の期間維持する。このヘプトン酸変性ヒドロキシエチルデンプン、ＨＥＳ７０／０．５の製造方法は、その全てが出典明示により援用される国際公開第２０１２／１７５６０８Ａ１号の実施例１に記載され、鉄錯体の形成は実施例２に記載されている。

【0173】

本発明の高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物は、ここに開示される鉄調製物を、第一のｐＨ（Ａ）の水溶液中で配位子と接触させ、ついで、ｐＨ（Ａ）を第二のｐＨ（Ｂ）に変化させて、高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物の固体沈殿物を生じさせることによって調製することができる。固体沈殿物は、粒子状、コロイド状、又はサブコロイド状（ナノ粒子）構造を有しうる。

【0174】

ｐＨ（Ａ）はｐＨ（Ｂ）とは異なる。好ましくは、ｐＨ（Ａ）はｐＨ（Ｂ）よりも酸性である。例えば、ｐＨ（Ａ）はｐＨ２以下であり、ｐＨ（Ｂ）はｐＨ２を超える。オキソ－ヒドロキシ重合が開始されるｐＨから出発して、ｐＨを好ましくは更に上昇させて、反応を完了させ、形成される高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物の沈殿を促進させる。前記ｐＨ変化の間に、更なる配位子及び／又は添加物を添加することができる。前記ｐＨ変化は、好ましくは、徐々に又は段階的な形で、例えば約２４時間にわたって、又は約１時間にわたって、特に２０分間にわたって行われる。ｐＨの変化は、酸又は塩基の添加によってなされる場合がある。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、又は重炭酸ナトリウムを添加することによって、ｐＨを増加させることができる。

【0175】

高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物は、典型的には、鉄イオン及び配位子の濃度が１μＭ以上、特に１ｍＭ以上である水溶液中で生成される。鉄イオンと配位子の比率は、鉄イオンの相対量が、オキソ－ヒドロキシ重合の速度が速すぎて効率的な配位子の取り込みが妨げられないように多過ぎず、また、鉄オキソ－ヒドロキシ重合を防ぐために配位子の相対量が多すぎないように選択される。例えば、鉄濃度は、１ｍＭから３００ｍＭ、例えば２０ｍＭから２００ｍＭの範囲、特に約４０ｍＭである。

【0176】

高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物の形成に使用される配位子は、錯体形成中のｐＨ範囲の安定化に役立つある程度の緩衝能を有していてもよい。緩衝はまた、鉄イオンとの形式的な結合に関与しない無機又は有機緩衝剤を、鉄調製物及び配位子を含む水溶液に添加することによって達成することもできる。典型的には、そのような緩衝液の濃度は、存在する場合、５００ｍＭ未満又は２００ｍＭ未満、特に１００ｍＭ未満である。

【0177】

高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物の形成は、典型的には、２０℃から１２０℃、例えば、２０℃から１００℃、特に２０℃から３０℃の範囲内の温度で起こる。

【0178】

任意選択的に、鉄調製物及び配位子を含む水溶液中のイオン強度は、例えば、１０重量％まで、例えば１２重量％まで、特に１重量％までの量の塩化カリウム又は塩化ナトリウムなどの更なる電解質を添加することによって増加させることができる。

【0179】

高分子配位子置換オキソ－ヒドロキシ鉄錯体化合物の固体沈殿物は、分離することができ、任意選択的に乾燥させ、更なる使用又は配合前に、例えば粉砕によって更に処理することができる。

【0180】

［薬学的組成物］
本発明は更に、本発明の鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物に関する。

【0181】

好ましいのは非経口使用のための薬学的組成物である。これらは、直ぐに使用できる流体（注射又は注入用の流体）；使用前に希釈される流体；又は再構成用の固体とすることができる。理想的には、このような流体は等張性、無菌性であり、発熱物質を含まず、意図された保存期間にわたって適切な物理的及び化学的安定性を維持する。しかし、これらの目的を全て満たすことが常に可能であるとは限らず、しばしば、その意図された目的に適した薬学的組成物の「スイートスポット」を見出すために、相反する作用のバランスをとることが必要となる。

【0182】

特に好ましいのは、直ぐに使用できる注射可能な組成物である。

【0183】

従って、本発明の薬学的組成物には、鉄錯体化合物、注射用水、及び任意選択的に更なる便宜的な添加物を含む、注射又は注入に適した流動性組成物が含まれる。流体には、好ましくは溶液として存在する液体（すなわち、流体、特に鉄錯体化合物が溶解している液体）が含まれる。これらの流体は、投与されることが望ましい鉄錯体化合物の濃度を有しうる。或いは、鉄錯体化合物の濃度を高くすることもでき；そのような濃縮物は、投与前に適切な流体で希釈する必要がある。本発明の薬学的組成物には、投与前に適切な流体で再構成するための、粉末などの固体がまた含まれる。例えば、薬学的組成物は噴霧乾燥又は凍結乾燥の形態で保存することができ、その後、対象への投与前に、典型的には非経口投与に適した水性組成物、好ましくは溶液として再構成することができる。このような組成物は、滅菌注射用水（ＷＦＩ）で再構成することができる。ベンジルアルコール又はフェノールなどの静菌剤が含まれる場合がある。

【0184】

本発明の好ましい実施態様によれば、薬学的組成物は皮下投与に適している。従って、特に好ましいのは、皮下使用のための直ぐに使用できる注射可能な薬学的組成物である。通常、皮下投与は、注射される流体の全容量によって制限される。対象に投与される鉄糖化合物の量が比較的多い場合（例えば、鉄錯体化合物の形態で１０～３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重）、許容可能な注射容量に達するために、比較的高濃度の鉄錯体化合物を用いて流体を処方する必要がある場合がある。一般に、注射容量を最小限に抑えるために、所与の容量の流体にできるだけ多くの鉄が含まれる必要がある。しかし、比較的高濃度の鉄錯体化合物は、注射が困難であり及び／又は痛みを伴う粘性液体を生じる可能性がある。また、ｐＨと浸透圧を考慮すると、より低い鉄濃度が必要になる場合がある。更に、比較的高濃度の鉄錯体化合物は、鉄錯体化合物の物理的安定性を低下させる場合があり、よって、保存寿命が短くなる結果となる。

【0185】

便宜的には、本発明の薬学的組成物は、１から２５％、好ましくは２．５から２０％；最も好ましくは２．５から７．５％、又は７．５から１２．５％、又は１５％から２０％；例えば、約５％又は約１０％又は約２０％（ｗ／ｖ）の元素鉄を含む。換言すると、流動性薬学的組成物中の鉄錯体化合物の濃度は、２５から３００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは５０から２００ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは７５から１５０ｍｇ／ｍＬ、例えば約１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄である。

【0186】

非経口投与、特に皮下投与を考慮すると、流動性薬学的組成物のｐＨは、便宜的には、５．８から７．０、好ましくは５．９から６．８；最も好ましくは５．９から６．６、例えば６．０から６．４の範囲である。一般に、これらの範囲の上限、すなわち中性ｐＨに近いｐＨを選択することが好ましい。従って、注射可能な組成物及び注入可能な組成物は、必要に応じて適切に緩衝化されるべきである。これに関連して、用いることができる滅菌水性媒体は、本開示を考慮すれば当業者には知られている。例えば、注射前に、ある容量の等張性ＮａＣｌ溶液と滅菌水で一回の投与量を調製することができる。皮下注射の場合、組成物は典型的には事前に希釈せずに投与される（動物の大きさにより、投与するには注射量が低すぎる用量が必要な場合を除く）。典型的な皮下注射量は０．５から５ｍＬである。

【0187】

流動性薬学的組成物の濁度は、好都合には、２．０ＮＴＵ未満、好ましくは１．５ＮＴＵ未満、最も好ましくは１．０ＮＴＵ未満、例えば０．５ＮＴＵ未満である。

【0188】

注射針通過可能性及び注射可能性などの流動特性は、評価及び制御すべき特性である。注射針通過可能性は、注射前にバイアルから移す際に組成物が皮下注射針を容易に通過する能力を記述する。これには、引き抜きやすさ、詰まりや泡立ちの傾向、用量測定の精度などの特性が含まれる。粘度及び密度の増加により、組成物の注射針通過可能性が低下する。

【0189】

注射可能性とは、注射中の組成物の性能を指し、注射に必要な圧力又は力、流れの均一性、吸引力、目詰まりのなさなどの要因が含まれる。組成物の注射針通過可能性及び注射可能性は、組成物の粘度に密接に関係している。プランジャーに断続的に圧力を加えながら非常にゆっくりとなされる場合、単なる組成物の空中への排出だけで、組成物に関する所定の情報を得ることができる。注射可能性のために使用される殆どの方法は本質的に定性的なものである。Ｉｎｓｔｒｏｎなどの力監視装置を使用して、排出及び注射圧力を決定でき、試験結果をＸ－Ｙレコーダー上に記録できる。注射可能性を評価する別の機器は、シリンジから針を通して特定された圧力下で溶液又は懸濁液を肉にスムーズに注射するのに必要な時間を測定する。様々なサイズのガラス及びプラスチックシリンジを通して試験溶液を注射すると、様々なゲージの針を使用して、所与のシリンジの種類と直径の回帰式が得られる。これらの式により、所与の注射針系及び所定の粘度の所与のビヒクルに対する予想される注射時間を計算することができる。

【0190】

適切な注射針通過性を有する組成物を提供するために、本発明の流動性薬学的組成物は、好都合には、６０ｃＰ以下の粘度を有する。別の実施態様では、組成物は、５０ｃＰ以下、又は４０ｃＰ以下、又は３０ｃＰ以下、又は２０ｃＰ以下、又は４０ｃＰ以下、又は１５ｃＰ以下の粘度を有する。幾つかの実施態様では、組成物は、２５℃において、１ｃＰと５０ｃＰの間、１ｃＰと４０ｃＰの間、１ｃＰと３０ｃＰの間、１ｃＰと２０ｃＰの間、１ｃＰと１５ｃＰの間、又は１ｃＰと１０ｃＰの間の粘度を有する。幾つかの実施態様では、組成物は、約５０ｃＰ、約４５ｃＰ、約４０ｃＰ、約３５ｃＰ、約３０ｃＰ、約２５ｃＰ、約２０ｃＰ、約１５ｃＰ、又は約１０ｃＰ、又は約５ｃＰの粘度を有する。幾つかの実施態様では、組成物は、１０ｃＰと５０ｃＰの間、１０ｃＰと３０ｃＰの間、１０ｃＰと２０ｃＰの間、又は５ｃＰと１５ｃＰの間の粘度を有する。

【0191】

ここで使用される「粘度」は、「動粘度」又は「絶対粘度」でありうる。「動粘度」は、重力の影響下での流体の抵抗流れの尺度である。同じ容積の二種の流体を同一の毛細管粘度計に入れ、重力によって流すと、粘性のある流体は粘性の低い流体よりも毛細管を流れるのに時間がかかる。ある流体が流れを完了するのに２００秒かかり、別の流体が４００秒かかる場合、動粘度スケールでは第二の流体は第一の流体の二倍の粘性になる。「絶対粘度」は、動的粘度又は単純粘度とも呼ばれ、動粘度と流体密度の積である：絶対粘度＝動粘度×密度。動粘度の次元はＬ^２／Ｔであり、ここで、Ｌは長さ、Ｔは時間である。一般に、動粘度はセンチストークス（ｃＳｔ）で表される。動粘度のＳＩ単位はｍｍ^２／ｓ、つまり１ｃＳｔである。絶対粘度はセンチポアズ（ｃＰ）の単位で表される。絶対粘度のＳＩ単位はミリパスカル－秒（ｍＰａ－ｓ）で、１ｃＰ＝１ｍＰａ－ｓである。

【0192】

保存の理由から、流動性薬学的組成物は、２５℃において少なくとも１年、好ましくは２５℃において少なくとも２年、より好ましくは２５℃において少なくとも３年の保存寿命を有する。

【0193】

［併用療法］
ここに更に記載されるのは、鉄錯体化合物と一又は複数種の追加の薬物との組み合わせである。特定の実施態様によれば、追加の薬物は、次からなる群から選択される：
（１）赤血球生成刺激剤（ＥＳＡ）、例えばエリスロポエチン（Ｅｐｏ）、エポエチンアルファ（Ｐｒｏｃｒｉｔ／Ｅｐｏｇｅｎ）、エポエチンベータ（ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ）、ダルベポエチンアルファ（Ａｒａｎｅｓｐ）、メトキシポリエチレングリコール－エポエチンベータ（Ｍｉｒｃｅｒａ）、又はその全ては出典明示により援用される米国特許出願公開第２０２１００３２３０５Ａ号に開示されているもの；
（２）ヘプシジンアゴニスト又はヘプシジンアンタゴニストなどのヘプシジンモジュレーター
（３）寄生虫駆除薬、外部寄生虫駆除薬、及び内部寄生虫駆除薬などの抗寄生虫薬；
（４）化学療法薬；
（５）抗生物質；
（６）抗ウイルス薬；及び
（７）ワクチン。

【0194】

本発明による鉄欠乏症の治療における使用に適したものは、本発明のこの態様の特定の実施態様を表す。例えば、ＣＫＤを有するネコでは、赤血球生成刺激剤が適応となり、鉄欠乏症、特に鉄欠乏性貧血の治療が必要な場合に、本発明に係る鉄錯体化合物に加えてこれらが投与されるであろう。

【0195】

［投与計画］
本発明に係る対象における鉄欠乏症の治療方法は、そのような治療を必要とする対象に治療有効量の鉄錯体化合物を投与することを含む。従って、本発明の方法は、鉄錯体化合物の前記投与に先立って、前記対象が鉄欠乏性であるかどうかを判定することと、前記対象が鉄欠乏性である場合には前記鉄錯体化合物を投与することを含み得、好ましい実施態様ではこれらを必ず含む。

【0196】

治療される動物の体重に応じて、投与量の多少の変動が必然的に発生する。何れにしても、投与責任者が適切な用量を決定する。鉄錯体化合物の典型的な治療計画は、体重１ｋｇ当たり元素鉄５から１００ｍｇ、例えば１０から６０ｍｇ、特に１５から２５ｍｇ、例えば約２０ｍｇの用量からなるであろう。或いは、鉄錯体化合物の有効量は、最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、特に最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、又は好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重の量である。従って、鉄錯体化合物の典型的な用量は、体重０．５から１４０ｋｇの範囲のイヌなどの対象に対して１０から２８００ｍｇの元素鉄でありうる。

【0197】

累積鉄必要量は、Ｇａｎｚｏｎｉ式を使用して決定することができ、一実施態様によれば、計算された用量が投与される。従って、幾つかの実施態様では、鉄錯体化合物の有効治療量は、累積鉄必要量に等しい。このような累積鉄必要量は、典型的な用量よりも低い場合もあれば、高い場合もある。

【0198】

一般に、用量は単一の設定（来診）で投与されることが好ましい。そのような（単回）用量は、投与容量に応じて、単回（１）投与（例えば、注射）として、或いは、２回、３回、又はそれ以上の投与（例えば、注射）で提供されうる。一般に、投与容量が５ｍＬ、７．５ｍＬ又は１０ｍＬより大きい場合、各投与部位に投与される容量を減らすために、用量を２回、３回、又はそれ以上の投与に分割することが好ましい。これは特に皮下投与の場合に当てはまる。用量を分割し、投与される容量を減らすことの重要性は、対象のサイズ及び対象の皮膚の弛みに応じて変わる。当業者であれば、投与される容量を決定する方法を知っているであろう。

【0199】

別の特定の実施態様では、本発明の治療方法は、例えば、単回用量が不十分である場合、或いはＩＤ又はＩＤＡの臨床徴候が以前に消失した後に再び出現する状況、及び／又は同じ対象でＩＤ又はＩＤＡが新たに診断される状況では、ＩＤ又はＩＤＡの効果的な治療を確実にするために、一定期間にわたって２回、又は３回、又は４回、又は５回、又はそれ以上の用量を投与することを含む。

【0200】

更に特定の実施態様では、本発明の治療方法は、基礎疾患によって引き起こされる慢性失血を有する対象、例えばＣＫＤを有する対象又はＩＢＤを有する対象において、ＩＤ又はＩＤＡを管理するために、時間をかけて数回の反復投与を施すことを含む。このような対象は潜在的に鉄分を継続的に（維持療法として）必要とするため、治療を継続的に定期的に繰り返す必要がある。

【0201】

反復投与の場合、最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、特に最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、又は好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重の初回用量に、最大５０ｍｇの鉄／ｋｇ体重、特に最大３０ｍｇの鉄／ｋｇ体重、又は好ましくは最大２０ｍｇの鉄／ｋｇ体重の二回目用量が続く。二回の連続用量は、１ヶ月以内、２週間以内、又は好ましくは１週間以内に投与することができる。好ましくは、それらは１週間以内に投与される。更なる用量は、最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、特に最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重、又は好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重である。この更なる、例えば三回目の用量は、同じ時間枠内、すなわち、１ヶ月、２週間、又は好ましくは１週間内に投与されうる。これらの複数回投与は、好ましくは少なくとも２日、特に３日の間隔をあけて施される。例えば、１週間以内に３回の用量が投与されるべき場合、これらの用量を１日目、４日目、及び７日目に投与することが好ましい。

【0202】

本発明によれば、鉄錯体化合物は、例えば筋肉内注射、静脈内（ＩＶ）ボーラス注射、又はＩＶ注入によって非経口的に投与することができる。しかし、本発明の好ましい実施態様によれば、鉄錯体化合物の非経口投与は皮下投与である。例えば、皮下投与に好都合の部位は、例えば、イヌなどのコンパニオンアニマルの肋骨上の肩甲骨の後ろの背面の側方上の領域のように、比較的緩い皮膚によって支配される。或いは、背側腰傍領域を注射に使用することもできる。皮下注射のための他の典型的な領域は当業者には知られている。

【0203】

一又は複数種の更なる治療薬と「組み合わせて」の投与には、同時（併用）及び任意の順序での連続的又は逐次的投与が含まれる。「併用」という用語は、ここでは、投与の少なくとも一部が時間的に重複するか、又は一方の治療薬の投与が他方の治療薬の投与と比較して短期間内に収まる、二種以上の治療薬の投与を指すために使用される。例えば、二種以上の治療薬が、およその特定数の分以下の時間間隔で投与される。「逐次」という用語は、ここでは、一又は複数種の他の薬剤の投与を中止した後に一又は複数種の薬剤の投与が継続するか、或いは一又は複数種の他の薬剤の投与前に一又は複数種の薬剤の投与が開始される二種以上の治療薬の投与を指すために使用される。例えば、二種以上の治療薬の投与は、およその特定数の分を超える時間間隔を置いて投与される。ここで使用される場合、「と併用して」とは、別の治療様式に加えての、ある治療様式での投与を指す。而して、「と併用して」とは、動物に他の治療様式での投与前、投与中、又は投与後に、ある治療様式で投与することを指す。

【0204】

［八糖第二鉄］
所定の態様では、本発明は特に八糖第二鉄錯体と八糖第二鉄錯体を含む薬学的組成物とに関する。八糖第二鉄錯体は、ここに記載の治療方法において特に有用である。本発明の八糖第二鉄に関する以下の言及は全て、ここに開示される治療方法における八糖第二鉄の使用に等しく当てはまる。

【0205】

八糖第二鉄は、八糖と錯体化された鉄を含む。好ましくは、八糖第二鉄は、八糖と安定に会合した水酸化酸化鉄を含む。幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は有機酸などの安定剤を含む。好ましくは、有機酸は有機ヒドロキシ酸である。有機ヒドロキシ酸の適切な例は、グルコン酸及びクエン酸である。クエン酸が好都合な例である。クエン酸が存在する場合、その量は典型的には元素鉄の全量の３から２０重量％の範囲である。

【0206】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は、金属塩化物などの塩を含む。金属塩化物は、塩化ナトリウム又は塩化カリウムでありうる。好ましくは、金属塩化物は塩化ナトリウムである。塩化ナトリウムが存在する場合、その量は典型的には元素鉄の全量の３から１１０重量％の範囲である。

【0207】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は水を含む。水が存在する場合、その量は典型的には元素鉄の全量の３から２５重量％の範囲である。

【0208】

特定の実施態様では、八糖第二鉄は、安定剤、塩及び水を含む。好ましい実施態様では、八糖第二鉄は、クエン酸、塩化ナトリウム及び水を含む。

【0209】

本発明の一態様では、任意選択的に安定剤及び／又は金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５である）
を有する、八糖第二鉄が提供される。

【0210】

好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、任意選択的に金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；かつ
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１である）を有する。

【0211】

別の好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、金属塩化物とＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；かつ
金属塩化物は塩化ナトリウム又は塩化カリウム、好ましくは塩化ナトリウムである）を有する。

【0212】

別の好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＭｅＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅはナトリウムイオン又はカリウムイオン等の一価金属イオンであり、好ましくはナトリウムイオンである）を有する。

【0213】

別の好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＭｅＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅはナトリウムイオンである）を有する。

【0214】

別の好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＮａＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは約０．０８５であり；
Ｒは約０．０３１であり；
Ｘは約０．３４であり；かつ
Ｙは約０．１４である）を有する。

【0215】

特に好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ, (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ- (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＭｅＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．２５から０．７５、特に０．３５から０．６５、好ましくは０．４５から０．５５、更により好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは、ナトリウムイオン、カリウムイオン等の一価金属イオンであり、好ましくはナトリウムイオンである）を有する。

【0216】

別の特に好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ, (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ- (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＮａＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．４５から０．５５、好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；かつ
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４である）を有する。

【0217】

別の特に好ましい実施態様では、本発明の八糖第二鉄は、式：
{ＦｅＯＯＨ, (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ- (Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＮａＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは約０．０８５であり；
Ｚは約０．５１であり；
Ｒは約０．０３１であり；
Ｘは約０．３４であり；かつ
Ｙは約０．１４である）を有する。

【0218】

特定の実施態様では、八糖第二鉄は、１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有するオリゴイソマルトシドの混合物を含む。特定の実施態様では、八糖は、１２００から１３００Ｄａ、好ましくは１２２５から１２７５Ｄａの範囲；例えば約１２５０Ｄａの重量平均分子量を有するオリゴイソマルトシドの混合物を含む。

【0219】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は、１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定されるＭｐ）を有する。特定の実施態様では、八糖第二鉄の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定されるＭｐ）は、１３５０００から１７５０００Ｄａ、好ましくは１４００００から１５５０００Ｄａの範囲にある。所定の実施態様では、「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）は、１４５０００から１５５０００Ｄａの範囲にある。

【0220】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は、八糖の１０．０重量％未満の単糖及び二糖含有量を有する。特定の実施態様では、単量体及び二量体の含有量は、八糖の重量の３．０％未満、好ましくは１．０％未満；例えば、０．１から０．５％である。

【0221】

幾つかの実施態様では、９を超える単糖単位を有する八糖第二鉄の画分は、八糖の４０重量％未満である。特定の実施態様では、９を超える単糖単位を有する画分は、八糖の重量の３５％未満、好ましくは３０％未満；例えば、２０から３０％である。

【0222】

八糖第二鉄の幾つかの実施態様では、オリゴイソマルトシド分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有する。特定の実施態様では、６～１０の単糖単位を有する分子の割合は、八糖の重量の少なくとも４５％；例えば、４０から６０％又は４５から５５％である。

【0223】

幾つかの実施態様では、６～１０の単糖単位を有する分子の割合は、３～６の単糖単位を有する分子の割合より重量で多い。

【0224】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）は、１．０５から１．４の範囲内である。特定の実施態様では、分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）は１．１から１．３の範囲；例えば約１．２である。

【0225】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄中の還元糖の量は、八糖の２．５重量％以下である。特定の実施態様では、還元糖の量は、八糖の重量の２．５％以下；好ましくは１．０％以下；より好ましくは０．５％以下；例えば約０．３％である。

【0226】

幾つかの実施態様では、水素化前の八糖第二鉄中の還元糖の量は、八糖の重量の（ｉ）少なくとも１０％又は少なくとも１５％、及び（ｉｉ）３５％未満；好ましくは３０％以下；例えば１０％から３０％、好ましくは１５から２５％である。

【0227】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄は、八糖第二鉄の重量の１０から５０％；好ましくは１５から３５％；最も好ましくは２０から３０％；例えば、２０から２５％の鉄を含む。幾つかの実施態様では、八糖第二鉄中の八糖に対する元素鉄の重量比は、１０：９０から５０：５０；好ましくは１５：８５から４５：５５；最も好ましくは２０：８０から４０：６０；例えば、約７０：３０である。

【0228】

幾つかの実施態様では、八糖第二鉄中の遊離鉄の全量は、１００ｍｇ／ｍＬ溶液の場合、０．０１％ｗ／ｖ以下；好ましくは、０．００３％ｗ／ｖ未満である。

【0229】

本発明の別の態様では、八糖と錯体化された鉄を含む八糖第二鉄であって、（ｉ）八糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である、八糖第二鉄が提供される。

【0230】

上記実施態様の全てが、この態様に等しく適用される。

【0231】

［例示的な実施態様］
１． 鉄錯体化合物を投与することを含む、コンパニオンアニマルにおける鉄欠乏症の治療方法。
２． コンパニオンアニマルがイヌ科、ネコ科又はウマ科である、実施態様１の方法。
３． コンパニオンアニマルがイヌ又はネコである、実施態様１の方法。
４． コンパニオンアニマルがイヌである、実施態様１の方法。
５． コンパニオンアニマルが２０ｐｇ以下の網赤血球ヘモグロビン含量（ＣＨｒ）／網赤血球ヘモグロビン等量（ＲＥＴ－Ｈｅ）を有する、実施態様１～４の何れか一の方法。
６． 鉄欠乏症が鉄欠乏性貧血である、実施態様１～４の何れか一の方法。
７． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、３５％未満のヘマトクリット（ＨＣＴ／ＰＣＶ）を有する、実施態様１～６の何れか一の方法。
８． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、１２ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン濃度（Ｈｂ）を有する、実施態様１～７の何れか一の方法。
９． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、６０ｆＬ未満の平均赤血球容積（ＭＣＶ）を有する、実施態様１～８の何れか一の方法。
１０． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、３０ｇ／ｄＬ以下の平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を有する、実施態様１～９の何れか一の方法。
１１． 用量が体重１ｋｇ当たり５から１００ｍｇ；好ましくは体重１ｋｇ当たり１０から６０ｍｇ；最も好ましくは体重１ｋｇ当たり１５から２５ｍｇ；例えば、体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇである、実施態様１～１０の何れか一の方法。
１２． 用量が最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；好ましくは最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；最も好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重である、実施態様１～１１の何れか一の方法。
１３． 用量が単回用量である、実施態様１～１２の何れか一の方法。
１４． 用量が単回投与、好ましくは注射、特に皮下注射として提供される、実施態様１～１３の何れか一の方法。
１５． 用量が２回、３回、又はそれ以上の投与、好ましくは注射、特に皮下注射として提供される、実施態様１～１３の何れか一の方法。
１６． 一回を超える用量が投与される、実施態様１～１２の何れか一の方法。
１７． 一回を超える用量が最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；好ましくは最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；最も好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重の用量である、実施態様１６の方法。
１８． 二回の逐次用量が１ヶ月以内；好ましくは２週間以内；最も好ましくは１週間以内に投与される、実施態様１６又は１７の方法。
１９． 投与が皮下投与である、実施態様１～１８の何れか一の方法。
２０． 皮下投与の部位が、肋骨の上の肩甲骨の後ろの背面の側方上の領域、又は腰傍背部領域にある、実施態様１９の方法。
２１． 鉄錯体化合物が鉄糖錯体である、実施態様１～２０の何れか一の方法。
２２． 糖がオリゴ糖である、実施態様２１の方法。
２３． オリゴ糖がオリゴイソマルトースである、実施態様２２の方法。
２４． オリゴイソマルトースが水素化オリゴイソマルトース（オリゴイソマルトシド）である、実施態様２３の方法。
２５． オリゴ糖が８５０から１１５０Ｄａ；好ましくは９５０から１０５０Ｄａ；最も好ましくは９７５から１０２５Ｄａの範囲；例えば約１０００Ｄａの重量平均分子量（Ｍｗ）を有する、実施態様２２～２４の何れか一の方法。
２６． ３～６の単糖単位を有する分子の割合が、６～１０の単糖単位を有する分子の割合より重量で多い、実施態様２５の方法。
２７． ３～６の単糖単位を有する分子の割合が、オリゴ糖の重量の少なくとも４０％；好ましくは少なくとも５０％；例えば、４０から７０％、又は５０から７０％である、実施態様２５又は２６の方法。
２８． ９を超える単糖単位を有する画分が、オリゴ糖の重量の３０％未満；好ましくは２５％未満；最も好ましくは２０％未満；例えば、５％から１５％である、実施態様２５から２７の何れか一の方法。
２９． オリゴ糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲；好ましくは１２００から１３００Ｄａ；最も好ましくは１２２５から１２７５Ｄａ；例えば約１２５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍｗ）を有する、実施態様２２～２４の何れか一の方法。
３０． ６～１０の単糖単位を有する分子の割合が、３～６の単糖単位を有する分子の割合より重量で多い、実施態様２９の方法。
３１． ６～１０個の単糖単位を有する分子の割合が、オリゴ糖の重量の少なくとも４０％；好ましくは少なくとも４５％；例えば、４０から６０％、又は４５から５５％である、実施態様２９又は３０の方法。
３２． ９を超える単糖単位を有する画分が、オリゴ糖の重量の４０％未満；好ましくは３５％未満；最も好ましくは３０％未満；例えば、２０％から３０％である、実施態様２９～３１の何れか一の方法。
３３． 単量体及び二量体の含有量が、オリゴ糖の重量の１０．０％未満；好ましくは３．０％未満；最も好ましくは１．０％未満；例えば、０．１から０．５％である、実施態様２２～３２の何れか一の方法。
３４． 還元糖の量が、オリゴ糖の重量の２．５％以下；好ましくは１．０％以下；より好ましくは０．５％以下；例えば、約０．３％である、実施態様２２～３３の何れか一の方法。
３５． 還元糖の量が、オリゴ糖の重量の（ｉ）少なくとも１０％又は少なくとも１５％、及び（ｉｉ）３５％未満；好ましくは３０％以下；例えば１０％から３０％、又は好ましくは１５から２５％である、実施態様２２～３３の何れか一の方法。
３６． 鉄オリゴ糖錯体が、鉄オリゴ糖錯体の重量の、１０から５０％；好ましくは１５から３５；最も好ましくは２０から３０％；例えば、２０から２５％の鉄を含む、実施態様２２～３５の何れか一の方法。
３７． 鉄オリゴ糖錯体中の元素鉄対オリゴ糖の重量比が、１０：９０から５０：５０；好ましくは１５：８５から４５：５５；最も好ましくは２０：８０から４０：６０；例えば、約７０：３０である、実施態様２２～３６の何れか一の方法。
３８． 鉄オリゴ糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定されるＭｐ）が、１２００００から１９００００Ｄａ； 好ましくは１３００００から１８００００Ｄａ；又は好ましくは１２５０００から１８５０００Ｄａ、より好ましくは１３５０００から１７５０００Ｄａ、最も好ましくは１４００００から１５５０００Ｄａの範囲内である、実施態様２２～３７の何れか一の方法。
３９． 鉄オリゴ糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーによって測定されるＭｐ）が１４５０００から１５５０００Ｄａの範囲内である、実施態様２２～３８の何れか一の方法。
４０． 分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０から１．５；好ましくは１．０５から１．４；より好ましくは１．１から１．３の範囲；例えば約１．２である、実施態様２２～３９の何れか一の方法。
４１． 鉄オリゴ糖錯体がクエン酸を含む、実施態様２２～４０の何れか一の方法。
４２． クエン酸の量が、元素鉄の全量の３から２０重量％である、実施態様４１の方法。
４３． 遊離鉄の全量が、鉄オリゴ糖錯体の１００ｍｇ／ｍＬ溶液に対して、０．０１％ｗ／ｖ以下；好ましくは０．００３％ｗ／ｖ未満である、実施態様２２～４２の何れか一の方法。
４４． 鉄オリゴ糖錯体が塩化ナトリウムを含む、実施態様２２～４３の何れか一の方法。
４５． 鉄オリゴ糖錯体が水を含む、実施態様２２～４４の何れか一の方法。
４６． 鉄オリゴ糖錯体が、任意選択的に安定剤及び／又は金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５である）
を有する、実施態様２２～２４又は２９～４５の何れか一の方法。
４７． 鉄オリゴ糖錯体がクエン酸を含む、実施態様４６の方法。
４８． 鉄オリゴ糖錯体が、任意選択的に金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；かつ
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１である）
を有する、実施態様２２～２４又は２９～４７の何れか一の方法。
４９． 鉄オリゴ糖錯体が塩化ナトリウムを含む、実施態様４６から４８の何れか一の方法。
５０． 鉄オリゴ糖錯体がＨ_２Ｏを含む、実施態様４６から４９の何れか一の方法。
５１． 鉄オリゴ糖錯体が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＭｅＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは一価金属イオンである）
を有する、実施態様２２～２４又は２９～５０の何れか一の方法。
５２． 一価金属イオンがナトリウムイオン又はカリウムイオンである、実施態様５１の方法。
５３． 一価金属イオンがナトリウムイオンである、実施態様５２の方法。
５４． Ｑは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり、かつ
Ｍｅはナトリウムイオンである、実施態様５１～５３の何れか一の方法。
５５． 鉄オリゴ糖錯体が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ-(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＭｅＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．２５から０．７５、特に０．３５から０．６５、好ましくは０．４５から０．５５、更により好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは、ナトリウムイオン、カリウムイオン等の一価金属イオンであり、好ましくはナトリウムイオンである）
を有する、実施態様２２～２４又は２９～５４の何れか一の方法。
５６． 鉄オリゴ糖錯体が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ-(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＮａＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．４５から０．５５、好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；かつ
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４である）
を有する、実施態様２２～２４又は２９～５５の何れか一の方法。
５７． 実施態様２１～５６の何れか一の鉄錯体化合物と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
５８． 再構成用の、固体、好ましくは粉末である、実施態様５７の薬学的組成物。
５９． 直ぐに使用できる流体、又は使用前に希釈するための流体である、実施態様５７の薬学的組成物。
６０． 皮下投与に適している、実施態様５７～５９の何れか一の薬学的組成物。
６１． １～２５％；好ましくは２から１５％；最も好ましくは２．５から７．５又は７．５から１２．５；例えば、約５％又は約１０％（ｗ／ｖ）の元素鉄を含む、実施態様５７～６０の何れか一の薬学的組成物。
６２． 鉄錯体化合物の濃度が、２５から３００ｍｇ／ｍＬ；好ましくは５０から２００ｍｇ／ｍＬ；最も好ましくは７５から１５０ｍｇ／ｍＬ；例えば、約１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄である、実施態様５７～６１の何れか一の薬学的組成物。
６３． ｐＨが、５．８から７．０；好ましくは５．９から６．８；最も好ましくは５．９から６．６；例えば、６．０から６．４である、実施態様５７～６２の何れか一の薬学的組成物。
６４． 濁度が、２．０ＮＴＵ未満；好ましくは１．５ＮＴＵ未満；最も好ましくは１．０ＮＴＵ未満；例えば０．５未満である、実施態様５７～６３の何れか一の薬学的組成物。
６５． ６０ｃＰ以下の粘度を有する、実施態様５７～６４の何れか一の薬学的組成物。
６６． ２５℃において少なくとも３年の保存寿命を有する、実施態様５７～６５の何れか一の薬学的組成物。
６７． 八糖と錯体化された鉄を含む八糖第二鉄であり、（ｉ）八糖が１１５０から１３５０Ｄａの範囲の重量平均分子量を有し；（ｉｉ）単糖及び二糖の含有量が八糖の１０．０重量％未満であり；（ｉｉｉ）９を超える単糖単位を有する画分が八糖の４０重量％未満であり；（ｉｖ）分子の少なくとも４０重量％が６～１０の単糖単位を有し；（ｖ）八糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）が１２５０００から１８５０００Ｄａの範囲にあり；（ｖｉ）錯体の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０５から１．４の範囲にあり；かつ（ｖｉｉ）還元糖の量が八糖の２．５重量％以下である、八糖第二鉄。
６８． 八糖が、１２００から１３００Ｄａ；より好ましくは１２２５から１２７５Ｄａの範囲；例えば約１２５０Ｄａの重量平均分子量（Ｍｗ）を有する、実施態様６７の八糖第二鉄。
６９． ６～１０の単糖単位を有する分子の割合が、３～６の単糖単位を有する分子の割合よりも重量で多い、実施態様６７又は６８の八糖第二鉄。
７０． ６～１０の単糖単位を有する分子の割合が、八糖の重量の少なくとも４５％；例えば、４０から６０％又は４５から５５％である、実施態様６７～６９の何れか一の八糖第二鉄。
７１． ９を超える単糖単位を有する画分が、八糖の重量の３５％未満；より好ましくは３０％未満；例えば、２０から３０％である、実施態様６７～７０の何れか一の八糖第二鉄。
７２． 単量体及び二量体の含有量が、八糖の重量の３．０％未満；より好ましくは１．０％未満；例えば、０．１から０．５％である、実施態様６７～７１の何れか一の八糖第二鉄。
７３． 還元糖の量が、八糖の重量の２．５％以下；好ましくは１．０％以下；より好ましくは０．５％以下；例えば約０．３重量％である、実施態様６７～７２の何れか一の八糖第二鉄。
７４． 水素化前の還元糖の量が、八糖の重量の、（ｉ）少なくとも１０％又は少なくとも１５％と、（ｉｉ）３５％未満；好ましくは３０％以下；例えば１０％から３０％、又は好ましくは１５から２５％である、実施態様６７～７３の何れか一の八糖第二鉄。
７５． 八糖第二鉄が、八糖第二鉄の重量の１０から５０％；好ましくは１５から３５；最も好ましくは２０から３０％；例えば、２０から２５％の鉄を含む、実施態様６７～７４の何れか一の八糖第二鉄。
７６． 八糖第二鉄中の八糖に対する元素鉄の重量比が、１０：９０から５０：５０；好ましくは１５：８５から４５：５５；最も好ましくは２０：８０から４０：６０；例えば、約７０：３０である、実施態様６７～７５の何れか一の八糖第二鉄。
７７． 八糖第二鉄の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーにより測定されるＭｐ）が、１３５０００から１７５０００Ｄａ、より好ましくは１４００００から１５５０００Ｄａの範囲内である、実施態様６７～７６の何れか一の八糖第二鉄。
７８． 鉄オリゴ糖錯体の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーにより測定されるＭｐ）が、１４５０００から１５５０００Ｄａの範囲内である、実施態様６７～７７の何れか一の方法。
７９． 分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．１～１．３の範囲内；例えば約１．２である、実施態様６７～７８の何れか一の八糖第二鉄。
８０． 八糖第二鉄がクエン酸を含む、実施態様６７～７９の何れか一の八糖第二鉄。
８１． クエン酸の量が、元素鉄の全量の３から２０重量％である、実施態様８０の八糖第二鉄。
８２． 遊離鉄の全量が、１００ｍｇ／ｍＬ溶液に対して、０．０１％ｗ／ｖ以下；好ましくは、０．００３％ｗ／ｖ未満である、実施態様６７～８１の何れか一の八糖第二鉄。
８３． 八糖第二鉄が塩化ナトリウムを含む、実施態様６７～８２の何れか一の八糖第二鉄。
８４． 八糖第二鉄が水を含む、実施態様６７～８３の何れか一の八糖第二鉄。
８５． 八糖第二鉄が、任意選択的に安定剤及び／又は金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５である）
を有する、実施態様６７～８４の何れか一の八糖第二鉄。
８６． 八糖第二鉄がクエン酸を含む、実施態様８５の八糖第二鉄。
８７． 八糖第二鉄が、任意選択的に金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；かつ
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１である）
を有する、実施態様６７～８６の何れか一の八糖第二鉄。
８８． 八糖第二鉄が塩化ナトリウムを含む、実施態様８５～８７の何れか一の八糖第二鉄。
８９． 八糖第二鉄がＨ_２Ｏを含む、実施態様８５～８８の何れか一の八糖第二鉄。
９０． 八糖第二鉄が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＭｅＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは一価金属イオンである）
を有する、実施態様６７～８９の何れか一の八糖第二鉄。
９１． 一価金属イオンがナトリウムイオン又はカリウムイオンである、実施態様９０の八糖第二鉄。
９２． 一価金属イオンがナトリウムイオンである、実施態様９１の八糖第二鉄。
９３． Ｑは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり、かつ
Ｍｅはナトリウムイオンである、実施態様９０～９２の何れか一の八糖第二鉄。
９４． 八糖第二鉄が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ-(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＭｅＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．２５から０．７５、特に０．３５から０．６５、好ましくは０．４５から０．５５、更により好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは、ナトリウムイオン又はカリウムイオン等の一価金属イオンであり、好ましくはナトリウムイオンである）
を有する、実施態様６７～９３の何れか一の八糖第二鉄。
９５． 八糖第二鉄が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ-(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＮａＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．４５から０．５５、好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；かつ
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４である）
を有する、実施態様６７～９４の何れか一の八糖第二鉄。
９６． 八糖と錯体化された鉄を含む八糖第二鉄であり、八糖第二鉄が、任意選択的に安定剤及び／又は金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５である）
を有する、八糖第二鉄。
９７． Ｑが０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５である、実施態様９６の八糖第二鉄。
９８． 八糖第二鉄がクエン酸を含む、実施態様９６～９８の何れか一の八糖第二鉄。
９９． 八糖第二鉄が、任意選択的に金属塩化物及び／又はＨ_２Ｏを含む、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ}
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；かつ
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１である）
を有する、実施態様９６～９８の何れか一の八糖第二鉄。
１００． Ｒが０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１である、実施態様９９の八糖第二鉄。
１０１． 八糖第二鉄が塩化ナトリウムを含む、実施態様９６～１００の何れか一の八糖第二鉄。
１０２． 八糖第二鉄が水を含む、実施態様９６～１０１の何れか一の八糖第二鉄。
１０３． 八糖第二鉄が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(八糖)_Ｑ,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_Ｒ},(Ｈ_２Ｏ)_Ｘ,(ＭｅＣｌ)_Ｙ
（上式中、
Ｑは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは一価金属イオンである）
を有する、実施態様９６～１０２の何れか一の八糖第二鉄。
１０４． Ｘが０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４である、実施態様１０３の八糖第二鉄。
１０５． Ｙが０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４である、実施態様１０３又は１０４の八糖第二鉄。
１０６． 一価金属イオンがナトリウムイオン又はカリウムイオンである、実施態様１０３～１０５の何れか一の八糖第二鉄。
１０７． 一価金属イオンがナトリウムイオンである、実施態様１０６の八糖第二鉄。
１０８． Ｑは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり、かつ
Ｍｅはナトリウムイオンである、実施態様１０３～１０７の何れか一の八糖第二鉄。
１０９． 八糖第二鉄が、式：
{ＦｅＯＯＨ,(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_６)_Ｔ-(Ｃ_６Ｈ_１０Ｏ_５)_Z-(Ｃ_６Ｈ_１３Ｏ_５)_T,(Ｃ_６Ｈ_８Ｏ_７)_R},(Ｈ_２Ｏ)_X,(ＭｅＣｌ)_Y
（上式中、
Ｔは０．０６から０．１１、特に０．０７から０．１０、好ましくは０．０８から０．０９、より好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．２５から０．７５、特に０．３５から０．６５、好ましくは０．４５から０．５５、更により好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２から０．０４、特に０．０２５から０．０３８、好ましくは０．０２８から０．０３４、より好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．１５から０．５５、特に０．２５から０．４５、好ましくは０．３０から０．４０、より好ましくは約０．３４であり；
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅは、ナトリウムイオン、カリウムイオン等の一価金属イオンであり、好ましくはナトリウムイオンである）
を有する、実施態様９６～１０８の何れか一の八糖第二鉄。
１１０． Ｔは０．０８から０．０９、好ましくは約０．０８５であり；
Ｚは０．４５から０．５５、好ましくは約０．５１であり；
Ｒは０．０２８から０．０３４、好ましくは約０．０３１であり；
Ｘは０．３０から０．４０、好ましくは約０．３４であり；かつ
Ｙは０．０５から１、特に０．０５から０．５０、好ましくは０．０９から０．４０、好ましくは０．０９から０．３０、より好ましくは０．０９から０．２０、更により好ましくは約０．１４であり；かつ
Ｍｅはナトリウムイオンである、実施態様１０９の何れか一の八糖第二鉄。
１１１． １１５０から１３５０Ｄａ、好ましくは１２００から１３００Ｄａ、より好ましくは１２２５から１２７５Ｄａの範囲；例えば約１２５０Ｄａの重量平均分子量を有する、実施態様９６～１１０の何れか一の八糖第二鉄。
１１２． １２５０００から１８５０００Ｄａの範囲、好ましくは１３５０００から１７５０００Ｄａの範囲、より好ましくは１４００００から１５５０００Ｄａ、例えば１４５０００から１５５０００Ｄａの範囲の「見かけの」ピーク分子量（ゲル浸透クロマトグラフィーにより測定されるＭｐ）を有する、実施態様９６～１１１の何れか一の八糖第二鉄。
１１３． 八糖第二鉄が、八糖の１０．０重量％未満、好ましくは八糖の重量の３．０％未満、より好ましくは１．０％未満；例えば、０．１から０．５％の単糖及び二糖含有量を有する、実施態様９６～１１２の何れか一の八糖第二鉄。
１１４． ９を超える単糖単位を有する八糖第二鉄の画分が、八糖の４０重量％未満、好ましくは八糖の重量の３５％未満、より好ましくは３０％未満；例えば、２０から３０％である、実施態様９６～１１３の何れか一の八糖第二鉄。
１１５． ６～１０の単糖単位を有する分子の割合が、八糖の重量の少なくとも４０重量％のオリゴイソマルトシド分子、好ましくは少なくとも４５％；例えば、４０から６０％又は４５から５５％である、実施態様９６～１１４の何れか一の八糖第二鉄。
１１６． ６～１０の単糖単位を有する分子の割合が、３～６の単糖単位を有する分子の割合より重量で多い、実施態様９６～１１５の何れか一の八糖第二鉄。
１１７． 八糖第二鉄の分散度（Ｍｗ／Ｍｎ）が、１．０５から１．４の範囲、好ましくは１．１から１．３の範囲；例えば約１．２である、実施態様９６～１１６の何れか一の八糖第二鉄。
１１８． 八糖第二鉄中の還元糖の量が、八糖の２．５重量％以下、好ましくは八糖の重量の２．５％以下；好ましくは１．０％以下；より好ましくは０．５％以下；例えば約０．３％である、実施態様９６～１１７の何れか一の八糖第二鉄。
１１９． 水素化前の八糖第二鉄中の還元糖の量が、八糖の重量の、（ｉ）少なくとも１０％又は少なくとも１５％と、（ｉｉ）３５％未満；好ましくは３０％以下；例えば、１０％から３０％又は好ましくは１５から２５％である、実施態様９６～１１８の何れか一の八糖第二鉄。
１２０． 八糖第二鉄が、八糖第二鉄の重量の１０から５０％；好ましくは１５から３５；最も好ましくは２０から３０％；例えば、２０から２５％の鉄を含む、実施態様９６～１１９の何れか一の八糖第二鉄。
１２１． 八糖第二鉄中の八糖に対する元素鉄の重量比が、１０：９０から５０：５０；好ましくは１５：８５から４５：５５；最も好ましくは２０：８０から４０：６０；例えば約７０：３０である、実施態様９６～１２０の何れか一の八糖第二鉄。
１２２． 八糖第二鉄中の遊離鉄の全量が、１００ｍｇ／ｍＬ溶液に対して、０．０１％ｗ／ｖ以下；好ましくは０．００３％ｗ／ｖ未満である、実施態様９６～１２１の何れか一の八糖第二鉄。
１２３． 実施態様６７～１２２の何れか一の八糖第二鉄と薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
１２４． 再構成用の固体、好ましくは粉末である、実施態様１２３の薬学的組成物。
１２５． 直ぐに使用できる流体、又は使用前に希釈するための流体である、実施態様１２３の薬学的組成物。
１２６． 皮下投与に適している、実施態様１２３～１２５の何れか一の薬学的組成物。
１２７． １～２５％；好ましくは２から１５％；最も好ましくは２．５から７．５又は７．５から１２．５；例えば、約５％又は約１０％（ｗ／ｖ）の元素鉄を含む、実施態様１２３～１２６の何れか一の薬学的組成物。
１２８． 鉄錯体化合物の濃度が、２５から３００ｍｇ／ｍＬ；好ましくは５０から２００ｍｇ／ｍＬ；最も好ましくは７５から１５０ｍｇ／ｍＬ；例えば約１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄である、実施態様１２３～１２７の何れか一の薬学的組成物。
１２９． ｐＨが５．８から７．０；好ましくは５．９から６．８；最も好ましくは５．９から６．６；例えば６．０から６．４である、実施態様１２３～１２８の何れか一の薬学的組成物。
１３０． 濁度が２．０ＮＴＵ未満；好ましくは１．５ＮＴＵ未満；最も好ましくは１．０ＮＴＵ未満；例えば０．５未満である、実施態様１２３～１２９の何れか一の薬学的組成物。
１３１． ６０ｃＰ以下の粘度を有する、実施態様１２３～１３０の何れか一の薬学的組成物。
１３２． ２５℃において少なくとも３年の保存寿命を有する、実施態様１２３～１３１の何れか一の薬学的組成物。
１３３． ヒト又は非ヒト対象における鉄欠乏症の治療方法に使用するための、実施態様６７～１２２の何れか一の八糖第二鉄、又は実施態様１２３から１３２の何れか一の薬学的組成物。
１３４． 非ヒト対象がコンパニオンアニマルである、実施態様１３３の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１３５． コンパニオンアニマルがイヌ科、ネコ科、又はウマ科である、実施態様１３４の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１３６． コンパニオンアニマルがイヌ又はネコである、実施態様１３４の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１３７． コンパニオンアニマルがイヌである、実施態様１３４の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１３８． コンパニオンアニマルが、２０ｐｇ以下の網赤血球ヘモグロビン含量（ＣＨｒ）／網赤血球ヘモグロビン等量（ＲＥＴ－Ｈｅ）を有する、実施態様１３４～１３７の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１３９． 鉄欠乏症が鉄欠乏性貧血である、実施態様１３４～１３８の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４０． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、３５％未満のヘマトクリット（ＨＣＴ／ＰＣＶ）を有する、実施態様１３４～１３９の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４１． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、１２ｇ／ｄＬ未満のヘモグロビン濃度（Ｈｂ）を有する、実施態様１３４～１４０の何れか一の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４２． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、６０ｆＬ未満の平均赤血球容積（ＭＣＶ）を有する、実施態様１３４～１４１の何れか一の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４３． コンパニオンアニマル、好ましくはイヌ又はネコが、３０ｇ／ｄＬ以下の平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を有する、実施態様１３４～１４２の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４４． 用量が体重１ｋｇ当たり５から１００ｍｇ；好ましくは体重１ｋｇ当たり１０から６０ｍｇ；最も好ましくは体重１ｋｇ当たり１５から２５ｍｇ；例えば、体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇである、実施態様１３４～１４３の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４５． 用量が最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；好ましくは最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；最も好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重である、実施態様１３４～１４４の何れか一の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４６． 単回用量が投与される、実施態様１３４～１４５の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４７． 用量が単回（１）投与、好ましくは注射、特に皮下注射として提供される、実施態様１３４～１４６の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４８． 用量が２、３、又はそれ以上の投与、好ましくは注射、特に皮下注射として提供される、実施態様１３４～１４６の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１４９． 一回を超える用量が投与される、実施態様１３４～１４５の何れか一の八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１５０． 一回を超える用量が、最大５０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；好ましくは最大３０ｍｇ鉄／ｋｇ体重；最も好ましくは最大２０ｍｇ鉄／ｋｇ体重の用量である、実施態様１４９の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１５１． 二回の逐次用量が１ヶ月以内；好ましくは２週間以内；最も好ましくは１週間以内に投与される、実施態様１４９又は１５０の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１５２． 投与が皮下投与である、実施態様１３４～１５１の何れか一の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１５３． 皮下投与の部位が、肋骨の上の肩甲骨の後ろの背面の側方上の領域、又は腰傍背部領域にある、実施態様１５２の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。
１５４． ２０ｍｇ／ｋｇ体重の単回用量がイヌ又はネコに皮下投与される、実施態様１３４の使用のための八糖第二鉄又は薬学的組成物。

【0232】

前述の説明、又は次の特許請求の範囲、又は添付の図面に開示され、その特定の形態で或いは開示された機能又は開示された結果を適切に得るための方法若しくはプロセスを実施するための手段によって表される特徴は、別個に又はそのような特徴の任意の組み合わせで、本発明をその多様な形態で実現するために利用することができる。

【0233】

本発明を上述の例示的な実施態様に関連して説明してきたが、この開示が与えられれば、当業者には多くの均等の修正及び変形が明らかとなるであろう。従って、上述した本発明の例示的な実施態様は、例証的なものであり、限定ではないと考えられる。本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、説明した実施態様に様々な変更を加えることができる。

【0234】

誤解を避けるため、ここに提供されるあらゆる理論的な説明は、読者の理解を向上させる目的で提供されている。発明者は、これらの理論的説明の何れにも拘束されることを望んでいない。

【0235】

ここで使用されているあらゆるセクションの見出しは、整理のみを目的としており、記載されている主題を限定するものとして解釈されるべきではない。

【0236】

続く特許請求の範囲を含むこの明細書全体を通して、文脈上別段の要求がない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」という語と、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの変形語は、指定された整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群を含むことを意味するが、任意の他の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群を除外するものではないことが理解されるであろう。

【0237】

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、文脈上明らかに別段の指示がない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には複数の指示対象が含まれることに留意されたい。ここでは、範囲は、ある特定の値から、及び／又は別の特定の値までとして表すことができる。そのような範囲が表される場合、別の実施態様には、ある特定の値から、及び／又は別の特定の値までが含まれる。当業者であれば、そのような値はその測定に使用される方法と同じくらい精確であることが理解され、従って、ここに開示される値には誤差マージンが付随することが理解されるであろう。同様に、先行詞「約」を使用して値が近似値として表される場合、特定の値が別の実施態様を構成することが理解されるであろう。ここで使用される場合、「約」という用語は、変数の示された値と、その示された値の実験誤差内（例えば、平均値の９５％信頼区間内）又はその示された値の１０％以内の何れか大きい方である変数の全ての値とを指す。

【実施例】

【0238】

実施例１ － オリゴイソマルトシド第二鉄の製造
組み合わせて限外濾過によって分画した様々なデキストラン画分からオリゴイソマルトシド第二鉄を製造した。デキストラン画分は中間体デキストランから生成した。幾つかの段階で、出発物質を加水分解して低分子量にし、所望の分子量分布が達成されるまで限外濾過によって分画し、濾過した。オリゴイソマルトースを最終的に水素化しイオン交換させ、次に塩化第二鉄と反応させて錯体を形成した。

【0239】

［八糖第二鉄の製造］
［糖の分画］
約２ｋＤａから５ｋＤａ（４８７２ｋｇ）と推定される重量平均分子量を有する予め加水分解されたデキストラン画分を、濃ＨＣｌの添加でｐＨ１．５にして加水分解し、クロマトグラフィーのピーク上昇が外部デキストラン標準（Ｍ_ｗ２ｋＤａ未満）のものと一致するまで９０℃において撹拌した。溶液を２８℃まで冷却し、ＮａＯＨで中和した。この溶液を、分子量１１５０から１３５０Ｄａの狭い分布及び約１．２の多分散性が達成されるまで、５１℃において水に対するダイアフィルトレーションによって精製した。ソモギー試薬により定量した還元糖の量は２１％であった。

【0240】

［糖の水素化］
得られた画分（１６５２ｋｇ）を、２８℃においてｐＨ１０．２の水素化ホウ素ナトリウムで処理した。ソモギー試薬によって測定した還元糖のレベルは０．０２％未満であった。溶液を濃ＨＣｌでｐＨ２．０に酸性化し、３時間撹拌し、ついでＮａＯＨでｐＨを４．６に調整した。

【0241】

溶液をイオン交換により脱イオン化して、５００μＳ／ｃｍ未満の導電率を有する八糖を含む生成物溶液を得た。

【0242】

八糖の重量平均分子量（Ｍｗ）は１２３５Ｄａであると定量された。

【0243】

［鉄錯体化］
錯体形成には、５６０ｋｇの八糖と塩化第二鉄からの２４０ｋｇの元素鉄を使用した。７０ｋｇの八糖を含む溶液を錯体化反応器に加えた。注射用水（ＷＦＩ）を撹拌しながら加え、続いて２４０ｋｇの元素鉄に相当するＦｅＣｌ_３,６Ｈ_２Ｏを加えた。ＮａＯＨを添加して約１０．５のｐＨにした後、撹拌しながら６００ｋｇのＮａ_２ＣＯ_３（水性）を加えた。溶液が黒色又は暗褐色のコロイド溶液になるまで、溶液を１００℃以上に加熱した。続いて、溶液をＨＣｌを使用して中和し、濾過した。溶液を膜濾過によって精製して、未結合の八糖、遊離鉄、及び無機塩の残留物を除去した。水酸化ナトリウムに溶解したクエン酸一水和物を加えた。ｐＨを５．６に調整し、得られた溶液を噴霧乾燥して、黒色から暗褐色の粉末を得た。

【0244】

八糖第二鉄錯体の「見かけの」ピーク分子量（Ｍｐ）は１４７１２１Ｄａと定量し、Ｍｗ／Ｍｎ（分散度）は１．１５と計算した。この目的のために、組成物を溶離液中で０．１％鉄（１ｍｇ／ｍＬ）まで希釈し、クロマトグラムをＧＰＣ（＋参照標準、デキストラン及びデキストラン鉄）で測定した。クロマトグラムからＭｐを読み取り、検量線を使用してＭｎ及びＭｗを算出した。

【0245】

［錯体強度］
酸加水分解後の吸光度（２８７．３ｎｍ）は錯体結合鉄の量に比例する。吸光度は経時的に測定される。Ｔ１／２は、元の錯体結合鉄の半分が遊離されるまでの時間である。サンプルを０．０２％＝２００ｍｇ／Ｌの鉄まで希釈した。５ｍＬの希釈サンプルを、０．９ｇのＮａＣｌを含む１００ｍＬの０．２５Ｍ ＨＣｌ中で加水分解した。

【0246】

得られた八糖第二鉄の錯体強度は高いことが見出された。試験条件下で塩酸加水分解に供すると、錯体の半分がその構成部分（鉄と糖）に解離するまでに４０時間かかった。このＴ１／２は、デキストラン鉄及び鉄デキストラングルコヘプトン酸錯体で通常観察される（デキストランと錯体の種類に応じて、典型的には７０から８０時間の範囲である）Ｔ１／２よりも低い。同時に、Ｔ１／２は、スクロース鉄又はグルコン酸鉄など、弱く結合した鉄との錯体で観察されるＴ１／２よりも高い。

【0247】

［遊離鉄］
鉄糖錯体を含む組成物中の遊離鉄（すなわち、サイズが１２～１４ｋＤａ未満のコロイド状鉄）の量は、鉄を清浄水に透析し、透析液中の鉄の量を原子吸光分光法で測定することによって定量した。

【0248】

３ｍＬの天然組成物を、２０ｍＬの水中で２４時間、透析管中で透析した。ついで、透析液中の鉄の量を定量した。遊離鉄％は、組成物３ｍＬ中の鉄の全量に対する透析液中の鉄として計算される。

【0249】

八糖第二鉄の遊離鉄の量は０．００３％ｗ／ｖ未満であると定量され、この生成物が安全であることを示している。

【0250】

［鉄及び糖含有量］
糖含有量を定量するために、鉄糖錯体を含む組成物を希釈し、錯体中の全てのグルコースを遊離させ、アントロン－ＨＣｌと結合させた。グルコースの量は分光光度法により測定した。

【0251】

１０％ｗ／ｖの鉄濃度の八糖第二鉄の組成物中の糖含有量は、２２％ｗ／ｖと多いことが見出された。これは、（デキストラン及び錯体の種類によっては、八糖第二鉄の値の半分ほど低い場合もある）デキストラン鉄及びデキストラン鉄グルコヘプトン酸錯体で通常観察される糖含有量よりも有意に多い。言い換えれば、八糖第二鉄における糖に対する鉄の比率は、典型的なデキストラン鉄及びデキストラン鉄グルコヘプトン酸錯体よりも低いということである。これは、ひいては個々の鉄粒子（赤金鉱粒子）がグルコース単位によって良好に保護され、物理的安定性が向上していることを意味する。

【0252】

［更なるオリゴイソマルトシド鉄の製造］
本質的に同じプロセス工程を使用し、八糖第二鉄とは異なる分子量分布を有するオリゴイソマルトシドと鉄錯体を製造する目的で、更なるオリゴイソマルトシド鉄を製造した。例えば、別のプロセスにおいて、得られたオリゴイソマルトシドが８５０から１１５０Ｄａの範囲のより低い重量平均分子量（ＧＰＣで測定）を有するように分画を行った。例えば、そのようなオリゴイソマルトシドの一つは、１０４７Ｄａの重量平均分子量を有していた。対応する鉄錯体は、八糖第二鉄と同等の錯体強度（Ｔ１／２＝３３から３７時間）を有することが見出されたが、糖含有量（約１８％ｗ／ｖ）は、同じ鉄濃度で測定したとき、八糖第二鉄におけるよりも僅かではあるが有意に低かった。

【0253】

実施例２ － 健康な実験用イヌ（ＩＤ又はＩＤＡではない）に皮下（ＳＣ）及び筋肉内（ＩＭ）注射したオリゴイソマルトシド第二鉄の耐性、安全性、薬物動態（ＰＫ）及び薬力学（ＰＤ）を評価する研究
［研究目的］
このパイロット研究は、オリゴイソマルトシド第二鉄によるイヌの治療を調査するためにデザインされた。具体的な目的には、血清及び尿中の鉄薬物動態プロファイルを決定すること；ヘモグロビン、網状赤血球数、カルシウム、フェリチン、不飽和鉄結合能、総鉄結合能、及びトランスフェリン飽和の薬力学プロファイルを決定すること；日常モニタリングを通じて注射部位反応を評価すること；並びに臨床病理学に基づいて、化合物の注射に対するイヌの耐性と化合物の初期安全性プロファイルを決定することを含めた。

【0254】

このイヌを対象とした単一施設での非臨床実験室研究には、非盲検、ランダム化並行計画において４つの用量群を含めた。１４匹の雄と１４匹の雌を７日間研究条件に順応させ、その間に体重測定、身体検査、血液学及び臨床化学分析のための採血、尿検査のための採尿及び一日二回の臨床観察を行った。

【0255】

順応後、２４匹のビーグル犬（１２匹の雄と１２匹の雌；７．２から１２．４ｋｇの体重）を、それぞれ６匹ずつの４つの性別のバランスの取れた用量群の一つに無作為化した。次の表に従って、イヌにオリゴイソマルトシド第二鉄（実施例１に従って生成した化合物；１００ｍｇ／ｍＬの元素鉄；ｐＨ＝６．３）を一回投与した。意図した１×用量は２０ｍｇ／ｋｇ、つまり０．２ｍＬ／ｋｇである。Ｔ３群では、用量は１００ｍｇ／ｋｇ、つまり１ｍＬ／ｋｇである。例えば、群Ｔ２の体重１０．３ｋｇのイヌには、６．２ｍＬのオリゴイソマルトシド第二鉄を投与した。

【0256】

注射部位位置の評価を定義するために、ＩＭ部位とＳＣ部位の両方を包含する左腰傍腰部の薄い輪郭を０日目の前に剃った。この輪郭により、全ての技師が一貫した領域内で注射部位評価を実施できるようになった。注射部位の剃毛は許可されなかった。オリゴイソマルトシド第二鉄を、ＳＣ（左腰傍腰部）又はＩＭ（左腰傍腰部外軸筋）注射によって投与した。

【0257】

ＳＣ注射の場合（群Ｔ１、Ｔ２、及びＴ３）：
・用量をシリンジに取り込み、空気を全て抜いた；
・イヌを注射中に動かないように拘束した；
・左腰傍腰部の皮膚を探った；
・針をＳＣ空間に挿入し、プランジャーに陰圧を加えて、針が血管領域ではなくＳＣ空間にあることを確認した；
・意図した用量全量を注射し、針を皮膚から抜いた；
・被験物質を注射しながら針を配置した直後に痛みを評価した；
・イヌをその檻に戻し、ハンドラーが各イヌごとに手袋を交換した。

【0258】

ＩＭ注射の場合（群Ｔ４）：
・用量をシリンジに取り込み、空気を全て抜いた；
・イヌを注射中に動かないように拘束した；
・左背側腰傍（心外）筋を特定した；
・針を筋肉に挿入し、プランジャーに陰圧を加えて、針が血管領域ではなく筋肉内にあることを確認した；
・意図した用量全量を注射し、針を筋肉から抜いた；
・被験物質を注射しながら針を配置した直後に痛みを評価した；
・イヌをその檻に戻し、ハンドラーが各イヌごとに手袋を交換した。

【0259】

研究変数を次のように評価した：
・注射に対する耐性を、用量投与中に評価した；
・薬物動態及び薬力学分析のための連続採血を、投与後０^１、０．５、１、２、４、８、２４、４８、７２、１２０、１６８、２４０、３３６、及び５０４時間で実施した；
・薬物動態分析のための尿を、投与後０から８、８から２４、２４から４８、及び４８から７２時間の間隔で採取した；
・臨床観察を、順応初日から研究の最終日まで一日二回（少なくとも６時間あけて）実施した；
・注射部位評価を、投与前の０日目、１、２、及び６時間（全て±１５分）、２４、４８、及び７２時間（±１時間）、及び４、７、１０、１４、及び２１日目（投与後±１時間）に実施した；
・身体検査を、順応中（－６日目）に一回と２１日目に実施した；
・体重を、順応中（－７日目）に一回と、０日目（投与前）、７日目と２１日目に測定した；
（^１ 投与前（０時間）ＰＫ及びＰＤサンプルは全てのイヌについて－１日目に採取した）
・臨床病理学のための血液を、順応中（－５日目）に一回と、２、７、及び２１日目に採取した；
・尿を、順応中（－７日目又は－５日目）に一回と、１日目又は２日目、７日目又は８日目、及び２０日目又は２１日目に尿検査のために採取した；
・食物摂取量を、順応初日から研究終了まで測定した。

【0260】

［結果］
ＡＵＣ_{ｔｌａｓｔ}及びＣ_ｍａｘを決定するために血清鉄濃度をベースライン調整した後、薬物動態学的用量関係を示唆する有意な用量群効果が特定された。ベースライン補正ＡＵＣ_{ｔｌａｓｔ}値は、群Ｔ２及びＴ３と比較して、群Ｔ１及びＴ４で有意に低かった。ベースライン補正Ｃ_ｍａｘ値は、群Ｔ３と比較して群Ｔ１で有意に低かった；他の比較は統計的に有意ではなかった。

【0261】

研究の主な所見は次のように要約される：
・ＳＣ（Ｔ１）注射は、ＩＭ（２０ｍｇ／ｋｇ用量でのＴ４）よりも比較的痛みが少なかった。２０ｍｇ／ｋｇのＳＣ注射（Ｔ１）は、１００ｍｇ／ｋｇのＳＣ注射（Ｔ３）よりも比較的痛みが少なかった。

・研究期間中、どのイヌについても、投与後に注射部位に熱、痛み、腫れが発生したという記録はなく、その他の薬剤関連の有害事象も報告されなかった。
・しかし驚くべきことに、２０ｍｇ／ｋｇＳＣ注射Ｔ１は、２０ｍｇ／ｋｇＩＭ注射Ｔ４と本質的に同じ血清鉄の薬物動態プロファイルを示した。図１を参照のこと。
・そして驚くべきことに、用量に関連したフェリチンの増加が観察され、Ｔ１とＴ４プロファイルは基本的に同じフェリチン応答を示し、Ｔ２とＴ３は比例してより大きな応答を示した；図２を参照のこと。

【0262】

［結論］
全体として、オリゴイソマルトシド第二鉄は、全ての投薬量レベル及び両方の投与経路で忍容性が良好であった。研究過程を通して、イヌの健康状態は良好であった。

【0263】

ＰＫプロファイルにより、イヌにオリゴイソマルトシド第二鉄を注射した後の血清及び尿鉄濃度の両方についてＡＵＣ_{ｔｌａｓｔ}及びＣ_ｍａｘを規定した。血清では、ベースライン調整ＡＵＣ_{ｔｌａｓｔ}及びＣ_ｍａｘパラメーターを使用して、血清鉄に対する統計的に有意な用量効果が検出された。ＡＵＣ_{ｔｌａｓｔ}とＣ_ｍａｘは、Ｔ４（１×ＩＭ）群とＴ１（１×ＳＣ）群で有意な差はなく、オリゴイソマルトシド第二鉄の投与経路がＰＫプロファイルに有意な影響を与えなかったことを示している。Ｔ４（１×ＩＭ）群とＴ１（１×ＳＣ）群の間に有意差は観察されなかったため、投与経路（ＩＭ対ＳＣ）もＰＤパラメーターの何れにも影響しなかった。同等のＰＤプロファイルがＴ４（１×ＩＭ）群とＴ１（１×ＳＣ）群で観察された。

【0264】

尿中では、累積鉄排泄量により短期間の用量効果が実証されたが、この効果はサンプリング期間の終わりまでに消失した。投与経路は尿中の累積鉄排泄量に有意な影響を与えなかった。

【0265】

網状赤血球数とカルシウム、及び殆どのＰＤパラメーターは、一貫した短期間の用量比例効果を示した。フェリチンとＴＳＡＴは用量に比例して増加した。Ｔ１（１×ＳＣ）及びＴ４（１×ＩＭ）治療群でも、フェリチンとＴＳＡＴに対する効果が実証された。

【0266】

フェリチンは用量依存的に増加することが見出されており、鉄欠乏対象を非経口鉄化合物で治療するとフェリチンが増加すると予想されるため、オリゴイソマルトシド第二鉄の皮下注射がイヌ及び他のコンパニオンアニマルにおける鉄欠乏症及び鉄欠乏性貧血の治療に適していると期待するのは合理的である。

【0267】

実施例３－ウサギにおける皮下（ＳＣ）又は筋肉内（ＩＭ）注射後の八糖第二鉄の吸収
［研究目的］
八糖第二鉄を含む１０％（ｗ／ｖ）組成物の０．４ｍＬ／ｋｇ体重をウサギの脚にＩＭ又はＳＣ注射し、もう一方の脚を対照として使用した。ウサギは２４時間後又は７日後に安楽死させた。

【0268】

ＩＭ注射の場合、注射された筋肉にどれだけの鉄が残っているかを、視覚的かつ定量的評価によって、チェックすることで吸収を評価した。定量的評価では、筋肉を均質化し、ＮａＯＨ、続いて１４０℃において２０時間沸騰させながらのＨ２ＳＯ４／ＨＮＯ３による破壊に供した。次に、破壊されたサンプル中の鉄の量を原子吸光分析法（ＡＡＳ；英国薬局方最新版参照：デキストラン鉄注射、「鉄吸収の試験」－修正）によって定量し、注射部位に残っている鉄の画分－つまり注射部位から吸収されなかった鉄分－を計算した。それにより、吸収された鉄の画分は、１００％から注射部位に残っている鉄の画分を引いたものとして計算した。

【0269】

ＳＣ注射の場合、一つの例外を除いてＩＭ注射の場合と同じ手順に従った：筋肉全体及び皮膚を分析した。すなわち、分析前に筋肉の皮を剥がなかった。

【0270】

［結果］
八糖第二鉄は、筋肉内投与又は皮下投与の両方で、注射部位から良好かつ迅速に吸収された。７日後、用量の９８～９９％が注射部位から吸収され、皮下注射と筋肉内注射の間に有意差は観察されなかった。注射後２４時間という短い時間枠内では、筋肉内投与された鉄の吸収は本質的に完全（９９．４％）であることが判明したが、皮下投与された鉄はまだ完全には吸収されていなかった（９６．３％）。

【0271】

［結論］
注射から７日後、八糖第二鉄中の鉄が注射部位から完全に吸収されたことが見出された。皮下注射と筋肉内注射との間に有意差は観察されなかった。驚くべきことに、皮下投与された八糖第二鉄からの最初の２４時間以内の鉄の吸収は、筋肉内投与された場合とほぼ同じ速さであることが観察された（９６．３％対９９．４％）。筋肉内投与は鉄の吸収が比較的速いと予想されるが、皮下投与された鉄錯体化合物からの鉄の吸収は通常有意に遅いと予想される。

【0272】

［参考文献］
本発明及び本発明が関連する技術水準をより完全に説明し開示するために、多くの刊行物が上で引用されている。これらの参考文献に対する完全な引用を以下に提供する。これらの参考文献のそれぞれの全体がここに援用される。

【0273】

Ｂｏｈｎ，Ａ．Ａ．（２０１３）．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｏｆ Ｉｒｏｎ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｉｎ Ｄｏｇｓ ａｎｄ Ｃａｔｓ．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｌｉｎｉｃｓ：Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，４３（６），１３１９－３０。
Ｃｏｈｅｎ－Ｓｏｌａｌ，Ａ．，Ｌｅｃｌｅｒｃｑ，Ｃ．，Ｄｅｒａｙ，Ｇ．，Ｌａｓｏｃｋｉ，Ｓ．，Ｚａｍｂｒｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｊ．，Ｍｅｂａｚａａ，Ａ．，Ｇｒｏｏｔｅ，Ｐ．，Ｄａｍｙ，Ｔ．，及びＧａｌｉｎｉｅｒ，Ｍ．（２０１４）．Ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ：ａｎ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｈｅａｒｔ，１００（１８），１４１４－２０。
Ｃｏｏｋ，Ａ．Ｋ．及びＫｖｉｔｋｏ－Ｗｈｉｔｅ，Ｈ．Ｌ．（２０１４）．ＤＶＭ３６０－Ｃａｓｅ ｒｅｐｏｒｔ Ｊｕｎｅ １ｓｔ ２０１４：Ａ ５－ｙｅａｒ－ｏｌｄ ｇｏｌｄｅｎ ｒｅｔｒｉｅｖｅｒ ｗｉｔｈ ＩＤＡ，ｈｔｔｐ：／／ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅ．ｄｖｍ３６０．ｃｏｍ／ｃａｓｅ－ｒｅｐｏｒｔ－５－ｙｅａｒ－ｏｌｄ－ｇｏｌｄｅｎ－ｒｅｔｒｉｅｖｅｒ－ｗｉｔｈ－ｉｄａ（２０１９年９月３日にアクセス）。
Ｄｉｇｎａｓｓ，Ａ．Ｕ．，Ｇａｓｃｈｅ，Ｃ．，Ｂｅｔｔｅｎｗｏｒｔｈ，Ｄ．，Ｂｉｒｇｅｇａｒｄ，Ｇ．，Ｄａｎｅｓｅ，Ｓ．，Ｇｉｓｂｅｒｔ，Ｊ．Ｐ．，．．．及びＶａｖｒｉｃｋａ，Ｓ．（２０１５）．Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｏｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ ａｎａｅｍｉａ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｏｈｎ’ｓ ａｎｄ Ｃｏｌｉｔｉｓ，９（３），２１１－２２。
Ｆｒｙ，Ｍ．Ｍ．及びＫｉｒｋ，Ｃ．Ａ．（２００６）．Ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｉｎｄｉｃｅｓ ｉｎ ａ ｃａｎｉｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，３５（２），１７２－８１。
Ｆｕｃｈｓ，Ｊ．，Ｍｏｒｉｔｚ，Ａ．，Ｇｒｕｓｅｎｄｏｒｆ，Ｅ．，Ｌｅｃｈｎｅｒ，Ｊ．，Ｎｅｕｅｒｅｒ，Ｆ．，Ｎｉｃｋｅｌ，Ｒ．，Ｒｉｅｋｅｒ，Ｔ．，Ｓｃｈｗｅｄｅ（２０１７）．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ（ＲＥＴ－Ｈｅ）ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｓｉｓ ｉｎ ｄｏｇｓ．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，４６（４），５５８－６８。
Ｇｉｇｅｒ，Ｕ．（２００５）．Ｉｎ Ｅｔｔｉｎｇｅｒ，Ｓ．Ｊ．及びＦｅｌｄｍａｎ，Ｅ．Ｃ．－Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｃｈａｐｔｅｒ ２７０：Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ａｎｅｍｉａｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｂｌｏｏｄ ｌｏｓｓ ｏｒ ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ，１８８８－９０．６版 Ｅｌｓｅｖｉｅｒ。
Ｇｉｇｅｒ，Ｕ．（２０１０）．Ｉｎ Ｗｅｉｓｓ，Ｄ．Ｊ．及びＷａｒｄｒｏｐ，Ｋ，Ｊ．－Ｓｃｈａｌｍ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．Ｃｈａｐｔｅｒ ２８：Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ Ｅｎｚｙｍｅ Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，１８３－５．６版 Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ。
Ｈａｒｖｅｙ，Ｊ．Ｗ．，Ｆｒｅｎｃｈ，Ｔ．Ｗ．，及びＭｅｙｅｒ，Ｄ．Ｊ．（１９８２）．Ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｅｍｉａ ｉｎ ｄｏｇｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｎｉｍａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，１８（６），９４６－６０。
Ｌｕｎｄ，Ｅ．（２００７）．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ａｎｅｍｉａ ｉｎ Ｐｅｔｓ － Ｂａｎｆｉｅｌｄ ＤａｔａＳａｖａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ，２００７．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｂａｎｆｉｅｌｄ．ｃｏｍ／ｇｅｔｍｅｄｉａ／８ｂ７ｂａｂ３２－５５０３－４３ｆ１－ａｅｂｄ－４ｆｄｆ５５８ｅ５ｄ０ｄ／３＿５－Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ－Ａｎａｌｙｓｉｓ－ｏｆ－Ａｎｅｍｉａ－ｉｎ－Ｐｅｔｓ（２０１９年９月３日にアクセス）。
Ｍｅｒｃｋ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｇｕｉｄｅｓ，Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｒａｎｇｅｓ．ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｍｅｒｃｋｖｅｔｍａｎｕａｌ．ｃｏｍ／ｓｐｅｃｉａｌ－ｓｕｂｊｅｃｔｓ／ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ－ｇｕｉｄｅｓ／ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ－ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ－ｒａｎｇｅｓ（２０１９年８月２９日にアクセス）。
Ｎａｉｇａｍｗａｌｌａ，Ｄ．Ｚ．，Ｗｅｂｂ，Ｊ．Ａ．，及びＧｉｇｅｒ，Ｕ．（２０１２）．Ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｅｍｉａ．Ｔｈｅ Ｃａｎａｄｉａｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｊｏｕｒｎａｌ，５３（３），２５０－６。
Ｎｅｌｓｏｎ，Ｒ．Ｗ．及びＣｏｕｔｏ，Ｃ．Ｇ．（１９９８）．Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｃｈａｐｔｅｒ ８５，１１７１－２．２版 Ｅｌｓｅｖｉｅｒ。
Ｏｌｖｅｒ，Ｃ．Ｓ．，Ａｎｄｒｅｗｓ，Ｇ．Ａ．，Ｓｍｉｔｈ，Ｊ．Ｅ．，及びＫａｎｅｋｏ，Ｊ．Ｊ．（２０１０）．Ｉｎ Ｗｅｉｓｓ，Ｄ．Ｊ．及びＷａｒｄｒｏｐ，Ｋ，Ｊ．－Ｓｃｈａｌｍ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．Ｃｈａｐｔｅｒ ２０：Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，１２３－９．６版 Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ。
Ｐｌｕｍｂ，Ｄ．Ｃ．（２００８）．Ｐｌｕｍｂ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋ．Ｐａｇｅｓ ３８２－３ ａｎｄ ４９３－４．６版 Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ。
Ｐｒｅｕｓｓｅｒ，Ｌ．Ｃ．，Ｆｒｙｅｒ Ｆ．Ｍ．，Ｇｅｒｈａｒｄｔ，Ａ．，Ｙａｎｈｕｉ Ｈｕ，Ｄｅｌｇａｄｏ－Ｈｅｒｒｅｒａ Ｌ．，Ｍｅｌｎｉｃｋ，Ｊ．Ｚ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｌ．Ａ．，Ｃｏｘ，Ｂ．Ｆ．，及びＲｅｉｎｈａｒｔ，Ｇ．Ａ．（２００５）．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，３２，１０２０－１０２６
Ｐｒｉｎｓ，Ｍ．，ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎ，Ｍ．Ｗ．，Ｔｅｓｋｅ，Ｅ．（２００９）．Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＡＤＶＩＡ １２０－ｍｅａｓｕｒｅｄ ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｐｌａｔｅｌｅｔ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｉｎ ｄｏｇｓ，ｃａｔｓ，ａｎｄ ｈｏｒｓｅｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｈａｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ（ＣＨｒ） ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｔｉｊｄｓｃｈｒｉｆｔ ｖｏｏｒ Ｄｉｅｒｇｅｎｅｅｓｋｕｎｄｅ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ），１３４（７），２７２－８。
Ｓｃｈａｅｆｅｒ，Ｄ．Ｍ．Ｗ．及びＳｔｏｋｏｌ，Ｔ．（２０１５）．Ｔｈｅ ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｉｎｄｉｃｅｓ ｉｎ ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｉｎｇ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｅｍｉａ ｆｒｏｍ ａｎｅｍｉａ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ，ｐｏｒｔｏｓｙｓｔｅｍｉｃ ｓｈｕｎｔｉｎｇ，ａｎｄ ｂｒｅｅｄ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｉｃｒｏｃｙｔｏｓｉｓ ｉｎ ｄｏｇｓ．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，４４（１），１０９－１９。
Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ，Ｊ．Ｄ．及びＯｌｖｅｒ，Ｃ．Ｓ．（２００５）．Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ（ＣＨｒ）ａｎｄ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｖｏｌｕｍｅ（ｒＭＣＶ）ｉｎ ｄｏｇｓ － Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，３４（１），２３－７。
Ｔｈｒａｌｌ，Ｍ．Ａ．及びＧｉｌｌｅｓｐｉｅ，Ｂ．９（２０１１）．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｉｒｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ Ａｎｅｍｉａ，ＶｅｔＣｏｍ Ｗｉｎｔｅｒ ２０１１
Ｔｖｅｄｔｅｎ，Ｈ．（２０１０）．Ｉｎ Ｗｅｉｓｓ，Ｄ．Ｊ．及びＷａｒｄｒｏｐ，Ｋ，Ｊ．－Ｓｃｈａｌｍ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．Ｃｈａｐｔｅｒ ２４：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ａｎｅｍｉａ，１５２－９．６版 Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ。
Ｗｅｉｓｅｒ，Ｇ．（２０１５）．Ｉｎ Ｔｉｌｌｅｙ，Ｌ．Ｐ．及びＳｍｉｔｈ Ｊｒ，Ｆ．Ｗ．－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ’ｓ Ｆｉｖｅ－Ｍｉｎｕｔｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｃｏｎｓｕｌｔ：Ｃａｎｉｎｅ ａｎｄ ｆｅｌｉｎｅ．Ａｎｅｍｉａ：Ｉｒｏｎ－Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｐａｇｅ ８３．６版 Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ。
Ｗｅｉｓｓ，Ｄ．Ｊ．（２０１０）．Ｉｎ Ｗｅｉｓｓ，Ｄ．Ｊ．及びＷａｒｄｒｏｐ，Ｋ，Ｊ．－Ｓｃｈａｌｍ’ｓ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．Ｃｈａｐｔｅｒ ２６：Ｉｒｏｎ ａｎｄ Ｃｏｐｐｅｒ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ａｎｄ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｏｆ Ｉｒｏｎ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，１６７－７１．６版 Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ。

【図1】

【図2】

【国際調査報告】