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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-08-21
(54)【発明の名称】新規ＰＬＫ１分解誘導化合物
(51)【国際特許分類】
C07D 487/04 20060101AFI20240814BHJP
A61K 31/551 20060101ALI20240814BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/08 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/24 20060101ALI20240814BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20240814BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240814BHJP
C07D 519/00 20060101ALI20240814BHJP
【ＦＩ】
C07D487/04 157
C07D487/04 CSP
A61K31/551
A61P9/10
A61P25/00
A61P25/08
A61P25/16
A61P25/14
A61P25/24
A61P25/28
A61P43/00 111
C07D519/00 311
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024507883
(86)(22)【出願日】2022-08-10
(85)【翻訳文提出日】2024-02-07
(86)【国際出願番号】 KR2022011962
(87)【国際公開番号】W WO2023018237
(87)【国際公開日】2023-02-16
(31)【優先権主張番号】10-2021-0105358
(32)【優先日】2021-08-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0106488
(32)【優先日】2021-08-12
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0117389
(32)【優先日】2021-09-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0126757
(32)【優先日】2021-09-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0008456
(32)【優先日】2022-01-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0020996
(32)【優先日】2022-02-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0054880
(32)【優先日】2022-05-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0075838
(32)【優先日】2022-06-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】522000784
【氏名又は名称】オップテラ インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110001508
【氏名又は名称】弁理士法人 津国
(72)【発明者】
【氏名】リュ，スーヒー
(72)【発明者】
【氏名】ミン，インスク
(72)【発明者】
【氏名】リ，ハンキョ
(72)【発明者】
【氏名】キム，ソンフン
(72)【発明者】
【氏名】リュ，ヒェグク
(72)【発明者】
【氏名】カン，クムヤン
(72)【発明者】
【氏名】キム，サンヨン
(72)【発明者】
【氏名】チュン，ソヒョン
(72)【発明者】
【氏名】リ，ジョンキョ
(72)【発明者】
【氏名】リ，ギッブム
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB11
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA01
4C086ZA02
4C086ZA06
4C086ZA15
4C086ZA16
4C086ZA36
4C086ZB26
4C086ZB27
4C086ZC20
(57)【要約】
本発明は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物、その製造方法、およびその用途に関するものである。本発明における化合物は、ＰＬＫ１分解を誘導する効果を示す。したがって、本発明における化合物は、ＰＬＫ１関連疾患の予防または治療に効果的に使用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
以下の式Ｉで表される化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩：【化58】
前記式Ｉ中、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
【化59】
ＰＴＭは、以下の式２で表される部分であり；
【化60】
Ｌｉｎｋｅｒは、ＵＬＭとＰＴＭを化学的に連結する基であり；
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は、前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、２、３、または４である｝；
環Ｕは、フェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、またはピリミジニル環の一つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＮＨ２、－ＯＨ、または－ハロであり｛ここで、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
Ｙは、ＣＲ７であり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルまたは３～７員シクロアルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、または－ハロであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキルまたは－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである。
【請求項2】
前記ＵＬＭは、以下の式１－１または式１－２で表される部分であり；【化61】
【化62】
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は、前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、または２である｝；
Ｕ１～Ｕ５は、それぞれ独立して、ＣＲＵまたはＮであり｛ここで、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－ＮＨ２、または－ハロである；
請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項3】
【化63】
【化64】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロである；
請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項4】
【化65】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４ハロアルキルまたは－ハロである；
請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項5】
【化66】
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである；
請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項6】
Ｌｉｎｋｅｒは、－ＬＵ－Ｌ１－Ｌ２－Ｌ３－ＬＰ－であり；ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され［このとき、前記ＬＵがヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭと直接連結される］、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ１は、ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＤ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ３は、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－または－Ｏ－がＰＴＭと連結され、ｐは、０、１、または２である｝；
請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項7】
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－または－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－であり｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され、前記ｘは、０または１である｝；Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子は、ＬＵまたはＵＬＭと直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、または－ハロで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル｛ここで、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－がＰＴＭと連結され、ｐは、０または１である｝；
請求項６に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項8】
前記式Ｉで表される化合物が、次の化合物からなる群より選択されたものである、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩。【表6】
。
【請求項9】
請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物。
【請求項10】
請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩を含む、ＰＬＫ１関連疾患の予防または治療用薬学的組成物。
【請求項11】
前記ＰＬＫ１関連疾患は、癌、良性腫瘍、および神経疾患からなる群より選択された１種以上である、請求項１０に記載の薬学的組成物。
【請求項12】
前記癌または良性腫瘍は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、皮膚癌、皮膚または眼内黒色腫、直腸癌、肛門周囲腺癌、食道癌、小腸癌、内分泌腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、慢性または急性白血病、リンパ球リンパ腫、肝細胞癌、胃腸癌、胃癌、膵臓癌、膠芽腫、頸部癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝腫瘍、乳癌、結腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、頭頸部癌、脳癌、骨肉腫、バレット食道、結腸腺腫およびポリープ、乳房線維腺腫および嚢胞、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、モノクローナルリンパ球増加症、固形癌、血液癌、骨癌、マクロファージリンパ腫、副腎皮質腫瘍、Ｔ細胞性リンパ腫／白血病、神経内分泌癌、神経内分泌腫瘍、胆管癌、神経芽細胞腫、膠芽細胞腫、および神経膠腫からなる群より選択される１種以上である、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項13】
前記神経疾患は、中枢神経系疾患、退行性神経疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、老人性認知症、てんかん、ルー・ゲーリック、脳卒中、および脳または脊髄損傷による神経損傷と軸索変性関連疾患からなる群より選択される１種以上である、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項14】
請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体、またはそれらの薬学的に許容可能な塩の治療的に有効な量を、それを必要とする対象に投与する段階を含む、ＰＬＫ１関連疾患を治療または予防する方法。
【請求項15】
前記化合物、その立体異性体、またはそれらの薬学的に許容可能な塩がＰＬＫ１タンパク質の分解を誘導するものである、請求項１４に記載のＰＬＫ１関連疾患を治療または予防する方法。
【請求項16】
請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体、またはそれらの薬学的に許容可能な塩の用途。
【請求項17】
ＰＬＫ１関連疾患の治療または予防に用いるための薬剤の製造に使用するための、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体、またはその薬学的に許容可能な塩の用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物、その製造方法、並びにその用途に関する。本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を介して異常な細胞などに特異的に作用することができ、様々な疾患の治療に有用に使用することができる。
【背景技術】
【0002】
Ｐｏｌｏ－ｌｉｋｅ ｋｉｎａｓｅ １（ＰＬＫ１）は、セリン／スレオニンキナーゼであって、細胞成長および分裂中にＧ２／Ｍ期への移行に関与するとして知られている。ＰＬＫ１は、Ｓ ｐｈａｓｅからＧ２／Ｍ期にかけてパルス状で発現し、一度活性化し、有糸分裂が終了すると急速に分解する。
【0003】
ＰＬＫ１は、大腸癌、肺癌、膀胱癌、黒色腫などの様々な癌腫で過剰発現する様相を呈しており、ＰＬＫ１が過剰発現している癌細胞は、様々な種類の抗癌剤に対して抵抗性を示す傾向がある。このように、数々の癌腫において、ＰＬＫ１依存性が明らかになったので、ボラセルチブ（ｖｏｌａｓｅｒｔｉｂ；ＢＩ６７２７とも呼ばれている）などのＰＬＫ１阻害剤化合物を開発する試みがなされてきた。
【0004】
しかし、従来のＰＬＫ１阻害剤は、臨床的に安全性が確保された濃度でＰＬＫ１活性を十分に阻害することができず、癌細胞の細胞周期が一時的に遅延されたとしても、結局のところ一部の癌細胞において細胞周期が再開され、十分な臨床的効果が得られなかった問題がある（文献［Ｇｈｅｇｈｉａｎｉ ｅｔ ａｌ．ＣＵＬＭ Ｒｅｐｏｒｔｓ、２０１７］など）。実際、ベーリンガーインゲルハイム、ＧＳＫ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）などの多数の製薬会社が低分子化合物ベースのＰＬＫ１阻害剤の開発を試みたが、ほとんどの場合、臨床試験の段階で失敗したり中断したりして、今日に至るまで商用化されたＰＬＫ１阻害剤は皆無の状態である。このことは、癌細胞のＰＬＫ１活性を抑制することによって抗癌効果を引き出すことを目的とした新薬の開発において、低分子化合物阻害剤のようにＰＬＫ１の活性部位に結合して酵素活性を抑制する方法の薬理学的メカニズムが、十分に効果的ではないことを示している。
【0005】
近来、体内で標的タンパク質のタンパク質分解（ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ）を誘導することができる低分子化合物ベースのプラットフォーム技術として、ＰＲＯＴＡＣ（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒａ）が提示されている。ＰＲＯＴＡＣとは、疾患関連の標的タンパク質に結合されるリガンド分子とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって連結されている二官能性化合物である。理論的には、ＰＲＯＴＡ化合物は、疾患関連の標的タンパク質をＥ３ユビキチンリガーゼの近くに位置させることで、標的タンパク質の分解を誘導することができる。このように従来の阻害剤とは異なる新たなメカニズムに基づいて、多くのＰＲＯＴＡＣ化合物が癌、炎症性疾患などの治療剤として開発されており、様々な拡張性をもって研究されている（例えば、ＡＤＣ（抗体－薬物コンジュゲート）のペイロード）。しかし、全ての範囲の結合部分またはリンカーにおいて、ＰＲＯＴＡＣが活性を示すわけではなく、実際にＰＲＯＴＡＣが所望のレベルの効能を示すためには、各結合部分とリンカーが適切に連結された構造を有する必要があることが数々の研究を通じて知られている（文献［ＵＳ２０２０－０３２５１３０Ａ］）。特に、ＣＲＢＮ（セレブロン）Ｅ３リガーゼを標的とする部分の場合、その結合部分の種類またはそれに結合される化合物の構造に応じてＣＲＢＮのネオ－基質（ｎｅｏ－ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）（ＧＳＰＴ１、ＩＫＺＦ１／３など）を分解するか、それに伴うオフターゲット毒性を示す恐れがある。したがって、ＰＲＯＴＡＣ薬物を開発する時に予期せぬ毒性を示さないように、適切な結合部分を選定し、全化合物の構造を最適化することが重要である。
【0006】
ＰＬＫ１を標的タンパク質とするＰＲＯＴＡＣ化合物の場合、中国公開特許第１０６５４３１８５Ａ号は、ボラセルチブ誘導体化合物とＥ３ユビキチンリガーゼＣＲＢＮ結合部分が化学リンカーによって連結されている二官能性化合物が一部開示されている。しかし、前記先行文献には、単に一部制限された形態のＰＲＯＴＡＣ化合物の合成例が記載されているが、一般的に標的タンパク質部分、Ｅ３ユビキチンリガーゼ結合部分などの選択によってＰＲＯＴＡＣの標的分解活性および選択性は著しく変化し得る（文献［Ｂｕｒｓｌｅｍ ａｎｄ Ｃｒｅｗｓ、２０１７］など）。
【0007】
また、前記文献に記載されたＰＲＯＴＡＣ化合物は、ＰＬＫ１およびＢＲＤ４を同時に分解することに発明の特徴がある化合物であって、ＰＬＫ１以外の他のＰＬＫファミリータンパク質およびＢＲＤ４などの様々なタンパク質分解も誘導するため、医薬品の開発時、オフターゲット毒性による副作用を引き起こす問題がある。特にＢＲＤ４活性を強く抑制すると、薬理学的効果とともに血液毒性や消化管毒性などのオンターゲット毒性（ｏｎ ｔａｒｇｅｔ ｔｏｘｉｃｉｔｙ）が必然的に伴うということが既に知られていることを鑑みると、前記文献に記載されたＰＲＯＴＡＣ化合物がＢＲＤ４を効果的に分解すればするほど、臨床的副作用が大きくなると予想される（文献［Ｂｏｌｄｅｎ ｅｔ ａｌ．ＣＵＬＭ Ｒｅｐｏｒｔｓ、２０１４］など）。
【0008】
さらに、前記文献の発明者によって公開された文献［Ｍｕ ｅｔ ａｌ．ＢＢＲＣ、２０１９］によれば、前記ＰＬＫ１とＢＲＤ４を同時に分解するＰＲＯＴＡＣ化合物は、細胞レベルでのＢＲＤ４分解能力がＰＬＫ１分解能力よりもはるかに強く、細胞周期がほぼＧ１ ｐｈａｓｅに止まるなど、従来のＰＬＫ１阻害剤が薬理学的効果を発揮する方法とは無関係に、実際にはＢＲＤ４阻害剤としてのみ作用することが確認することができる。
【0009】
したがって、副作用（例えば、オフターゲット毒性）が存在しないか、またはそれを最小限に抑える効果的なＰＬＫ１分解誘導化合物に対する未充足ニーズがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
本発明の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物を提供することである。
本発明の他の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の製造方法を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の用途を提供することである。
本発明の他の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の製造方法を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の用途を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0011】
前記した目的を達成するために、本発明者らは、Ｅ３リガーゼバインダー、標的結合部分、リンカーの適切な構造的組み合わせおよび最適化によってＰＬＫ１が過剰発現している異常細胞に特異的に作用し、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導し、副作用を最小限に抑える新規ＰＲＯＴＡＣ化合物を発掘することによって本発明を完成する。
【0012】
ＰＬＫ１選択的分解誘導化合物
本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導する新規化合物を提供する。具体的には、本発明は、ＰＬＫ１結合部分とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって連結された二官能性化合物を提供する。
本発明の一実施態様は、以下の式Ｉで表される化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩である：
前記式Ｉ中、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
ＰＴＭは、以下の式２で表される部分であり；
Ｌｉｎｋｅｒは、ＵＬＭとＰＴＭを化学的に連結する基であり；
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、２、３、または４である｝；
環Ｕは、フェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、またはピリミジニル環の一つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＮＨ２、－ＯＨ、または－ハロであり｛ここで、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
Ｙは、ＣＲ７であり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルまたは３～７員シクロアルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、または－ハロであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキルまたは－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである。
本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導する新規化合物を提供する。具体的には、本発明は、ＰＬＫ１結合部分とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって連結された二官能性化合物を提供する。
本発明の一実施態様は、以下の式Ｉで表される化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容可能な塩である：
【化1】
前記式Ｉ中、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
【化2】
ＰＴＭは、以下の式２で表される部分であり；
【化3】
Ｌｉｎｋｅｒは、ＵＬＭとＰＴＭを化学的に連結する基であり；
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、２、３、または４である｝；
環Ｕは、フェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、またはピリミジニル環の一つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＮＨ２、－ＯＨ、または－ハロであり｛ここで、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記ＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
Ｙは、ＣＲ７であり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルまたは３～７員シクロアルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、または－ハロであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキルまたは－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである。
【0013】
本発明の一実施態様において、
ＵＬＭは、以下の式１－１または式１－２で表される部分であり；
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は、前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、または２である｝；
Ｕ１～Ｕ５は、それぞれ独立して、ＣＲＵまたはＮであり｛ここで、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－ＮＨ２、または－ハロである。
ＵＬＭは、以下の式１－１または式１－２で表される部分であり；
【化4】
【化5】
Ｒｘは、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｖは、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｖ－Ｎ－Ｃ１－４アルキル－、－Ｏ－、または－Ｃ（＝ＮＨ）－であり｛ここで、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子は、前記Ｒｘと連結され、５～６員環を形成することができ、前記ｖは、０、１、または２である｝；
Ｕ１～Ｕ５は、それぞれ独立して、ＣＲＵまたはＮであり｛ここで、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－（ＣＨ２）ｖ－ＮＨ－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができ［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルまたは＝Ｏで置換されてもよい］、前記Ｕ１のＲＵは、前記Ｖ中、－Ｃ（＝ＮＨ）－のＮ原子と連結され、５～６員環を形成することができる［このとき、前記５～６員環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキルで置換されてもよい］｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－ＮＨ２、または－ハロである。
【0014】
本発明の一実施態様において、
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロである。
【化6】
【化7】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロである。
【0015】
本発明の一実施態様において、
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４ハロアルキルまたは－ハロである。
【化8】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４ハロアルキルまたは－ハロである。
【0016】
本発明の一実施態様において、
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである。
【化9】
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルコキシであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである。
【0017】
本発明の一実施態様において、
Ｌｉｎｋｅｒは、－ＬＵ－Ｌ１－Ｌ２－Ｌ３－ＬＰ－であり；
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され［このとき、前記ＬＵがヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭと直接連結される］、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ１は、ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＤ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ３は、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－または－Ｏ－がＰＴＭと連結され、ｐは、０、１、または２である｝である。
Ｌｉｎｋｅｒは、－ＬＵ－Ｌ１－Ｌ２－Ｌ３－ＬＰ－であり；
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され［このとき、前記ＬＵがヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭと直接連結される］、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ１は、ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＤ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ３は、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、またはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接連結され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－または－Ｏ－がＰＴＭと連結され、ｐは、０、１、または２である｝である。
【0018】
本発明の一実施態様において、
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－または－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－であり｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され、前記ｘは、０または１である｝；
Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子はＬＵまたはＵＬＭと直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、または－ハロで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル｛ここで、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；および
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－がＰＴＭと連結され、ｐは、０または１である｝である。
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－または－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－であり｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと連結され、前記ｘは、０または１である｝；
Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたはヌルであり（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１がヌルである場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子はＬＵまたはＵＬＭと直接連結され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、または－ハロで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル｛ここで、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環、またはスピロ（ｓｐｉｒｏ）環であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内の一つ以上のＮ原子を含み、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の一つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；および
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記ＬＰの－（Ｃ＝Ｏ）－がＰＴＭと連結され、ｐは、０または１である｝である。
【0019】
本発明の具体的な実施形態によれば、式Ｉで表される化合物は、化合物１～４４からなる群より選択された化合物である。
【0020】
本発明において薬学的に許容可能な塩とは、患者に対して比較的毒性がなく、無害な有効作用を有する濃度であり、この塩に起因する副作用が、式Ｉで表される化合物の有益な効力を低下させない任意の有機酸または無機酸付加塩を意味する。例えば、薬学的に許容可能な塩は、無機酸としては、塩酸、リン酸、硫酸、または硝酸などであってもよく、有機酸としては、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、シュウ酸、安息香酸、酒石酸、フマル酸、マンデル酸、プロピオン酸、クエン酸、乳酸、グリコール酸、グルコン酸、ガラクツロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グルクロン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、カーボン酸、バニリン酸またはヨウ化水素酸であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0021】
ＰＬＫ１の選択的分解誘導化合物の用途
本発明の一実施態様は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含むＰＬＫ１分解誘導用組成物である。式Ｉは、前記で定義したとおりである。
本発明の一実施態様は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含むＰＬＫ１分解誘導用組成物である。式Ｉは、前記で定義したとおりである。
【0022】
本発明の実験例において、本発明における化合物は、ＰＬＫ１タンパク質分解を効果的に誘導することが確認された。
【0023】
本発明におけるＰＬＫ１分解誘導ＰＲＯＴＡＣ化合物は、作用機序の観点から標的タンパク質であるＰＬＫ１を根本的に分解することができるので、ＰＬＫ１の単純な活性を阻害する従来のＰＬＫ１低分子阻害剤と比べても優れたＰＬＫ１阻害効果を達成する。
したがって、本発明の式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む組成物は、ＰＬＫ１の選択的分解に有用に用いられることができる。
したがって、本発明の式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む組成物は、ＰＬＫ１の選択的分解に有用に用いられることができる。
【0024】
本発明の一実施態様は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含むＰＬＫ１関連疾患の予防または治療用医薬組成物である。本発明のまた他の実施形態は、このような組成物を投与し、ＰＬＫ１関連の疾患を予防または治療する方法である。式Ｉは、前記で定義したとおりである。
【0025】
本発明におけるＰＬＫ１関連疾患とは、ＰＬＫ１の分解誘導または活性阻害から治療、軽減、遅延、阻害または予防することができる任意の疾患または病態を意味する。一実施形態において、ＰＬＫ１関連疾患は、癌（悪性腫瘍）、良性腫瘍、神経疾患、またはその他の過剰な細胞分裂により引き起こされる遺伝的または非遺伝的疾患であってもよい。
【0026】
前記癌は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効果を示すことができるすべての癌を含み、固形癌または血液癌であってもよい。例えば、前記癌は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、皮膚癌、皮膚または眼内黒色腫、直腸癌、肛門周囲腺癌、食道癌、小腸癌、内分泌腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、慢性または急性白血病、リンパ球リンパ腫、肝細胞癌、胃腸癌、胃癌、膵臓癌、膠芽腫、頸部癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝腫瘍、乳癌、結腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、頭頸部癌、脳癌、骨肉腫、固形癌、血液癌、骨癌、マクロファージリンパ腫、副腎皮質腫瘍、Ｔ－細胞性リンパ腫／白血病、神経内分泌癌、神経内分泌腫瘍、胆管癌、神経芽細胞腫、膠芽細胞腫、神経膠腫などからなる群より選択された１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。前記癌は、原発性癌だけでなく、転移性癌も含む。
【0027】
前記良性腫瘍は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効能を奏することができるすべての良性腫瘍、いわゆる癌の前工程の良性腫瘍を含み、固形腫瘍または血液腫瘍であってもよい。例えば、前記腫瘍は、バレット食道、結腸腺腫およびポリープ、乳腺繊維腺腫および嚢胞、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、モノクローナルリンパ球増加症などからなる群から選択される１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0028】
前記神経疾患は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効果を奏することができる全ての神経疾患を含み、具体的には中枢神経系疾患、退行性神経疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、老人性認知症、てんかん、ルー・ゲーリック、脳卒中、および脳または脊髄損傷による神経損傷と軸索変性関連疾患の中から選択された１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0029】
本発明の医薬組成物は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩に加えて、同一または類似の薬効を示す有効成分を１種以上をさらに含むことができる。
【0030】
本発明の一実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩をヒトを含む哺乳類に投与することによりＰＬＫ１タンパク質を分解する方法である。
【0031】
本発明のまた他の実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩をｉｎ ｖｉｔｒｏで試料に投与することにより、ＰＬＫ１タンパク質を分解する方法である。前記試料は、細胞、細胞培養物、ヒトを含む哺乳動物の体液または組織であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【発明の効果】
【0032】
本発明における化合物は、ＰＬＫ１分解を誘導する効果を奏する。したがって、本発明の化合物は、ＰＬＫ１関連疾患の予防または治療に有効に用いられることができる。
【図面の簡単な説明】
【0033】
【図1】本発明における化合物１～４１のルシフェラーゼ解析の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【0034】
特に断りがない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学用語は、本開示が属する技術分野における当業者によって一般的に理解される用語と同じ意味を有する。本明細書にて使用される用語は、特定の実施形態を説明するためのものであり、本開示を限定しようとする意図ではない。
本発明は、次の表に示す化合物１～４４の合成方法を提供する。
本発明は、次の表に示す化合物１～４４の合成方法を提供する。
【0035】
【表1】
【0036】
実施例１．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（化合物１）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）安息香酸（１ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．６３ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ、２．２０ｍＬ）およびＨＡＴＵ（３．２１ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（６９３．７４ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～７０％）を確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相から白色の固体を沈殿させた。混合物をろ過した。ろ過ケーキを減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（０．８ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、５０．８７％収率、９３．１％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８４（ｓ、１Ｈ）、９．６４（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｄ、Ｊ＝８．０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、４．７９－４．７２（ｍ、１Ｈ）、２．８４－２．７５（ｍ、１Ｈ）、２．５６－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．１４－２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。
【化10】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）安息香酸（１ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．６３ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ、２．２０ｍＬ）およびＨＡＴＵ（３．２１ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（６９３．７４ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～７０％）を確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相から白色の固体を沈殿させた。混合物をろ過した。ろ過ケーキを減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（０．８ｇ、２．１４ｍｍｏｌ、５０．８７％収率、９３．１％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８４（ｓ、１Ｈ）、９．６４（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｄ、Ｊ＝８．０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、４．７９－４．７２（ｍ、１Ｈ）、２．８４－２．７５（ｍ、１Ｈ）、２．５６－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．１４－２．０９（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。
【0037】
段階２．４－アミノ－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（０．８ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。混合物を減圧濃縮し、４－アミノ－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（６６０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４８．３
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）カルバメート（０．８ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。混合物を減圧濃縮し、４－アミノ－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（６６０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４８．３
【0038】
段階３．ベンジル（Ｅ）－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－アミノ－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、７０４．９４μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＮａＩ（３１．７０ｍｇ、２１１．４８μｍｏｌ）、ベンジル（Ｅ）－（１－（４－ブロモブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２２．５２ｍｇ、８４５．９３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２７３．３３ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ、３６８．３７μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル：メタノール＝１０：１）により数個の新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％石油エーテル：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（Ｅ）－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．２ｇ、３６５．２３μｍｏｌ、５１．８１％収率）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４８．３
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－アミノ－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、７０４．９４μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＮａＩ（３１．７０ｍｇ、２１１．４８μｍｏｌ）、ベンジル（Ｅ）－（１－（４－ブロモブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２２．５２ｍｇ、８４５．９３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２７３．３３ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ、３６８．３７μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル：メタノール＝１０：１）により数個の新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％石油エーテル：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（Ｅ）－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．２ｇ、３６５．２３μｍｏｌ、５１．８１％収率）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４８．３
【0039】
段階４．４－（（４－（４－アミノピペリジン－１－イル）－４－オキソブチル）アミノ）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１８．２６μｍｏｌ、１０％純度）の混合物にベンジル（Ｅ）－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８２．６１μｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完了したことを確認した。混合物をろ過し、触媒を除去した。ろ過物を減圧濃縮し、４－（（４－（４－アミノピペリジン－１－イル）－４－オキソブチル）アミノ）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（８０ｍｇ、９２．２３μｍｏｌ、５０．５１％収率、４７．９％純度）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１６．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１８．２６μｍｏｌ、１０％純度）の混合物にベンジル（Ｅ）－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタ－２－エノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８２．６１μｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完了したことを確認した。混合物をろ過し、触媒を除去した。ろ過物を減圧濃縮し、４－（（４－（４－アミノピペリジン－１－イル）－４－オキソブチル）アミノ）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（８０ｍｇ、９２．２３μｍｏｌ、５０．５１％収率、４７．９％純度）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１６．２
【0040】
段階５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（化合物１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１７１．８９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９８．０３ｍｇ、２５７．８３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６６．６５ｍｇ、５１５．６６μｍｏｌ、８９．８２μＬ）を添加した。３０分後、混合物に４－［［４－（４－アミノ－１－ピペリジル）－４－オキソ－ブチル］アミノ］－Ｎ－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）ベンズアミド（７８．５６ｍｇ、１８９．０７μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６０％）を確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０ x ２５ｍｍ x １０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、１０分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ x ２５ｍｍ x ５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～６２％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（２５．２ｍｇ、２６．９０μｍｏｌ、１５．６５％収率、９２．１％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６３．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、８．２９－８．２３（ｍ、３Ｈ）、８．０３（ｓ、１Ｈ）、７．９７－７．９５（ｍ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５７（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２５（ｔ、Ｊ＝５．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８５－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．７４－４．６７（ｍ、１Ｈ）、４．３４－４．２９（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９８（ｍ、３Ｈ）、３．９１－３．８４（ｍ、４Ｈ）、３．２７（ｓ、３Ｈ）、３．１３－３．０７（ｍ、３Ｈ）、２．７６－２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．５２（ｓ、３Ｈ）、２．４４－２．４０（ｍ、２Ｈ）、２．１３－２．０３（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．９１（ｍ、３Ｈ）、１．８３－１．７１（ｍ、５Ｈ）、１．６６－１．５７（ｍ、４Ｈ）、１．５０－１．３７（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１７１．８９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９８．０３ｍｇ、２５７．８３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６６．６５ｍｇ、５１５．６６μｍｏｌ、８９．８２μＬ）を添加した。３０分後、混合物に４－［［４－（４－アミノ－１－ピペリジル）－４－オキソ－ブチル］アミノ］－Ｎ－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）ベンズアミド（７８．５６ｍｇ、１８９．０７μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６０％）を確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０ x ２５ｍｍ x １０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、１０分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ x ２５ｍｍ x ５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～６２％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（２５．２ｍｇ、２６．９０μｍｏｌ、１５．６５％収率、９２．１％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６３．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、８．２９－８．２３（ｍ、３Ｈ）、８．０３（ｓ、１Ｈ）、７．９７－７．９５（ｍ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５７（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２５（ｔ、Ｊ＝５．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８５－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．７４－４．６７（ｍ、１Ｈ）、４．３４－４．２９（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９８（ｍ、３Ｈ）、３．９１－３．８４（ｍ、４Ｈ）、３．２７（ｓ、３Ｈ）、３．１３－３．０７（ｍ、３Ｈ）、２．７６－２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．５２（ｓ、３Ｈ）、２．４４－２．４０（ｍ、２Ｈ）、２．１３－２．０３（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．９１（ｍ、３Ｈ）、１．８３－１．７１（ｍ、５Ｈ）、１．６６－１．５７（ｍ、４Ｈ）、１．５０－１．３７（ｍ、２Ｈ）。
【0041】
実施例２．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の４－（４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－１－イル）安息香酸（０．８ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．０９ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６７５．００ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ、９０９．７０μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５１５．７６ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ＤＩＰＥＡ（６７５．００ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ、９０９．７０μＬ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９６％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、多くの白色の固体が沈殿し、白色の固体をろ過によって収集し、真空乾燥させ、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４７０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、４１．９２％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．３
【化11】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の４－（４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－１－イル）安息香酸（０．８ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．０９ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６７５．００ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ、９０９．７０μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５１５．７６ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ＤＩＰＥＡ（６７５．００ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ、９０９．７０μＬ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９６％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、多くの白色の固体が沈殿し、白色の固体をろ過によって収集し、真空乾燥させ、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４７０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、４１．９２％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．３
【0042】
段階２．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４７０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９４％）を確認した。反応混合物を真空濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．４
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４７０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９４％）を確認した。反応混合物を真空濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．４
【0043】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、５６６．８７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（２－クロロアセチル）－４－ピペリジル］カルバメート（１７２．５７ｍｇ、６２３．５６μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２１９．７９ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、２９６．２２μＬ）およびＮａＩ（１６．９９ｍｇ、１１３．３７μｍｏｌ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７４％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１２ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３２０．１３μｍｏｌ、５６．４７％収率、９９％純度）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．３
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、５６６．８７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（２－クロロアセチル）－４－ピペリジル］カルバメート（１７２．５７ｍｇ、６２３．５６μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２１９．７９ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、２９６．２２μＬ）およびＮａＩ（１６．９９ｍｇ、１１３．３７μｍｏｌ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７４％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１２ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３２０．１３μｍｏｌ、５６．４７％収率、９９％純度）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．３
【0044】
段階４．３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（７）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３２３．３６μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、８ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１６０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．４
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３２３．３６μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、８ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１６０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．４
【0045】
段階５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（８０ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７４．７８ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６．２２ｍｇ、３５７．５９μｍｏｌ、６２．２９μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌した後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（９６．９６ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４６．２２ｍｇ、３５７．５９μｍｏｌ、６２．２９μＬ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃でさらに１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６４％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×６）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ x ２５ｍｍ x ５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２４．３ｍｇ、２７．１５μｍｏｌ、１５．１９％収率、９９％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４７（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１４（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９（ｓ、１Ｈ）、７．８１－７．６８（ｍ、３Ｈ）、７．０６－６．９２（ｍ、４Ｈ）、４．８０－４．６４（ｍ、２Ｈ）、４．４７－４．１８（ｍ、１Ｈ）、４．１３－３．８０（ｍ、７Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、７Ｈ）、３．１９－２．９１（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．５７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝４．３ Ｈｚ、５Ｈ）、２．１１（ｄｑ、Ｊ＝４．２、１２．７ Ｈｚ、１Ｈ）、１．９９－１．８５（ｍ、３Ｈ）、１．８２－１．７０（ｍ、２Ｈ）、１．６８（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、１．６２－１．４１（ｍ、６Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（８０ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７４．７８ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６．２２ｍｇ、３５７．５９μｍｏｌ、６２．２９μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌した後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（９６．９６ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４６．２２ｍｇ、３５７．５９μｍｏｌ、６２．２９μＬ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃でさらに１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６４％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×６）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ x ２５ｍｍ x ５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２４．３ｍｇ、２７．１５μｍｏｌ、１５．１９％収率、９９％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４７（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１４（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９（ｓ、１Ｈ）、７．８１－７．６８（ｍ、３Ｈ）、７．０６－６．９２（ｍ、４Ｈ）、４．８０－４．６４（ｍ、２Ｈ）、４．４７－４．１８（ｍ、１Ｈ）、４．１３－３．８０（ｍ、７Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、７Ｈ）、３．１９－２．９１（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．５７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝４．３ Ｈｚ、５Ｈ）、２．１１（ｄｑ、Ｊ＝４．２、１２．７ Ｈｚ、１Ｈ）、１．９９－１．８５（ｍ、３Ｈ）、１．８２－１．７０（ｍ、２Ｈ）、１．６８（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、１．６２－１．４１（ｍ、６Ｈ）。
【0046】
実施例３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
【化12】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
【0047】
トルエン（５０ｍＬ）中のメチル３－ブロモベンゾアート（２ｇ、９．３０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（２．００ｇ、１０．７４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２５０．００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（６００．００ｍｇ、９６３．５９μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６．５０ｇ、１９．９５ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．４ｇ、７．４９ｍｍｏｌ、８０．５５％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．３
【0048】
段階２．３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（３）の合成
メタノール（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．４ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）溶液にＨ２Ｏ（３０ｍＬ）中のＬｉＯＨ（５００ｍｇ、２０．８８ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、０℃でＨＣｌ（１Ｍ）によりｐＨ＝７にゆっくりと調整し、生成された混合物を酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮し、３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（２．２ｇ、粗製）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２５１．２
メタノール（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．４ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）溶液にＨ２Ｏ（３０ｍＬ）中のＬｉＯＨ（５００ｍｇ、２０．８８ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、０℃でＨＣｌ（１Ｍ）によりｐＨ＝７にゆっくりと調整し、生成された混合物を酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮し、３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（２．２ｇ、粗製）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２５１．２
【0049】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（２．１ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（２．１０ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４．９６ｇ、３８．３６ｍｍｏｌ、６．６８ｍＬ）、ＨＯＢｔ（１．１５ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）および３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４０ｇ、８．５１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を２５ｏＣでＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で３０分間粉砕した後、ろ過した。ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ×２）で希釈した後、減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．８ｇ、６．７２ｍｍｏｌ、９８．０８％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝１．１ Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８－７．２８（ｍ、２Ｈ）、７．１７－７．１１（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．６５（ｍ、１Ｈ）、３．５４－３．４１（ｍ、４Ｈ）、３．２２－３．０９（ｍ、４Ｈ）、２．８６－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０７（ｍ、１Ｈ）、２．０２－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（２．１ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（２．１０ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４．９６ｇ、３８．３６ｍｍｏｌ、６．６８ｍＬ）、ＨＯＢｔ（１．１５ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）および３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４０ｇ、８．５１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を２５ｏＣでＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で３０分間粉砕した後、ろ過した。ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ×２）で希釈した後、減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．８ｇ、６．７２ｍｍｏｌ、９８．０８％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝１．１ Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８－７．２８（ｍ、２Ｈ）、７．１７－７．１１（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．６５（ｍ、１Ｈ）、３．５４－３．４１（ｍ、４Ｈ）、３．２２－３．０９（ｍ、４Ｈ）、２．８６－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０７（ｍ、１Ｈ）、２．０２－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）
【0050】
段階４．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（５）の合成
ジオキサン（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．８ｇ、６．７２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２．３０ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、９．４８（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、８．８３（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｓ、１Ｈ）、７．４２－７．３３（ｍ、２Ｈ）、７．２１－７．１５（ｍ １Ｈ）、４．８０－４．７３（ｍ、１Ｈ）、３．４７－３．３８（ｍ、４Ｈ）、３．２７－３．１５（ｍ、４Ｈ）、２．８６－２．７５（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．２１－２．０８（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９３（ｍ、１Ｈ）。
ジオキサン（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．８ｇ、６．７２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２．３０ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、９．４８（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、８．８３（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｓ、１Ｈ）、７．４２－７．３３（ｍ、２Ｈ）、７．２１－７．１５（ｍ １Ｈ）、４．８０－４．７３（ｍ、１Ｈ）、３．４７－３．３８（ｍ、４Ｈ）、３．２７－３．１５（ｍ、４Ｈ）、２．８６－２．７５（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．２１－２．０８（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９３（ｍ、１Ｈ）。
【0051】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＫＩ（４５．００ｍｇ、２７１．０８μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８９０．４０ｍｇ、６．８９ｍｍｏｌ、１．２ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－クロロアセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５６０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５００ｍｇ、８９８．２３μｍｏｌ、７０．４２％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．３４－７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．１５－７．０９（ｍ、１Ｈ）、４．８９－４．６５（ｍ、１Ｈ）、３．９１－３．７４（ｍ、３Ｈ）、３．２３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．９７（ｓ、２Ｈ）、２．８６－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．６４－２．５１（ｍ、６Ｈ）、２．２１－２．０５（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．７１－１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）、１．３７－１．２８（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＫＩ（４５．００ｍｇ、２７１．０８μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８９０．４０ｍｇ、６．８９ｍｍｏｌ、１．２ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－クロロアセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５６０ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５００ｍｇ、８９８．２３μｍｏｌ、７０．４２％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．３４－７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．１５－７．０９（ｍ、１Ｈ）、４．８９－４．６５（ｍ、１Ｈ）、３．９１－３．７４（ｍ、３Ｈ）、３．２３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．９７（ｓ、２Ｈ）、２．８６－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．６４－２．５１（ｍ、６Ｈ）、２．２１－２．０５（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．７１－１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）、１．３７－１．２８（ｍ、２Ｈ）。
【0052】
段階６．３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（７）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２５０ｍｇ、４４９．１１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．５
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２５０ｍｇ、４４９．１１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．５
【0053】
段階７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６ｍｇ、１９９．８８μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０μＬ）および３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（８０ｍｇ、１５１．１０μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７８％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１１％～４１％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２０％～６０％、９分；カラム温度：３０℃）によって再精製した後、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（７３．４ｍｇ、８０．３６μｍｏｌ、５９．９３％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．７
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、８．００（ｓ、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｓ、１Ｈ）、７．３６－７．２７（ｍ、２Ｈ）、７．１６－７．０９（ｍ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．６７（ｍ、２Ｈ）、４．４０－４．１６（ｍ、１Ｈ）、４．１６－４．００（ｍ、２Ｈ）、４．００－３．９０（ｍ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．２０（ｍ、７Ｈ）、３．１３－２．８８（ｍ、４Ｈ）、２．８５－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．６６－２．５９（ｍ、４Ｈ）、２．５８－２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．８８（ｍ、３Ｈ）、１．８７－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．６１－１．４４（ｍ、６Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６ｍｇ、１９９．８８μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０μＬ）および３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（８０ｍｇ、１５１．１０μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７８％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１１％～４１％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２０％～６０％、９分；カラム温度：３０℃）によって再精製した後、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）アセチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（７３．４ｍｇ、８０．３６μｍｏｌ、５９．９３％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．７
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、８．００（ｓ、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｓ、１Ｈ）、７．３６－７．２７（ｍ、２Ｈ）、７．１６－７．０９（ｍ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．６７（ｍ、２Ｈ）、４．４０－４．１６（ｍ、１Ｈ）、４．１６－４．００（ｍ、２Ｈ）、４．００－３．９０（ｍ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．２０（ｍ、７Ｈ）、３．１３－２．８８（ｍ、４Ｈ）、２．８５－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．６６－２．５９（ｍ、４Ｈ）、２．５８－２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．８８（ｍ、３Ｈ）、１．８７－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．６１－１．４４（ｍ、６Ｈ）。
【0054】
実施例４．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４－（４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－１－イル）安息香酸（２ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３．７２ｇ、９．７９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４０ｇ、８．４９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液をＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）とともに添加した。混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発物質が完全に消費されたことと新たなスポットが形成されたことを示した。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）および酢酸エチル（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、減圧濃縮した。粗生成物（粗製）をＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で希釈し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．４８ｇ、５．８４ｍｍｏｌ、８９．３９％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．３
【化13】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４－（４－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピペラジン－１－イル）安息香酸（２ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３．７２ｇ、９．７９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４０ｇ、８．４９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液をＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．０６ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）とともに添加した。混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発物質が完全に消費されたことと新たなスポットが形成されたことを示した。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）および酢酸エチル（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、減圧濃縮した。粗生成物（粗製）をＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で希釈し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．４８ｇ、５．８４ｍｍｏｌ、８９．３９％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．３
【0055】
段階２．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を観測した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（８５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を観測した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（８５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．１
【0056】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（６００ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（３－クロロプロパノイル）－４－ピペリジル］カルバメート（７１６．９６ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（６５９．３７ｍｇ、５．１０ｍｍｏｌ、８８８．６５μＬ）およびＫＩ（６２．９７ｍｇ、３７９．３３μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより２６％のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド残っていることと所望の質量のピーク（４６％）を確認した。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄した。合わせた有機相を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２０ｍｇ、５６０．７４μｍｏｌ、３２．９７％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７１．４
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（６００ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（３－クロロプロパノイル）－４－ピペリジル］カルバメート（７１６．９６ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（６５９．３７ｍｇ、５．１０ｍｍｏｌ、８８８．６５μＬ）およびＫＩ（６２．９７ｍｇ、３７９．３３μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより２６％のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド残っていることと所望の質量のピーク（４６％）を確認した。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄した。合わせた有機相を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２０ｍｇ、５６０．７４μｍｏｌ、３２．９７％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７１．４
【0057】
段階４．４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（６）の合成
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２０ｍｇ、５６０．７４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９ｍＬ）を２５℃で添加した。反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量のピーク（９１％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７１．２
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３２０ｍｇ、５６０．７４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９ｍＬ）を２５℃で添加した。反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量のピーク（９１％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（２８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７１．２
【0058】
段階５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０ｍｇ、１５６．４５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８９．２３ｍｇ、２３４．６７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１５分間攪拌した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１００ｍｇ、１９７．２３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）溶液を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物（粗製）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６３％、９分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２２ｍｇ、２２．９８μｍｏｌ、１４．６９％収率、９４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９００．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４６（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０－８．２５（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｄ、Ｊ＝８．９ Ｈｚ、２Ｈ）、７．５１－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝８．９ Ｈｚ、２Ｈ）、４．８０－４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．４３－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９０（ｍ、７Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２８－３．２４（ｍ、４Ｈ）、３．１８－３．０９（ｍ、１Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．６２－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１７－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９９－１．７８（ｍ、５Ｈ）、１．７３－１．６６（ｍ、１Ｈ）、１．６５－１．３４（ｍ、６Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０ｍｇ、１５６．４５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８９．２３ｍｇ、２３４．６７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１５分間攪拌した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１００ｍｇ、１９７．２３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）溶液を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物（粗製）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６３％、９分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２２ｍｇ、２２．９８μｍｏｌ、１４．６９％収率、９４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９００．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４６（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０－８．２５（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｄ、Ｊ＝８．９ Ｈｚ、２Ｈ）、７．５１－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９８（ｄ、Ｊ＝８．９ Ｈｚ、２Ｈ）、４．８０－４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．４３－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９０（ｍ、７Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２８－３．２４（ｍ、４Ｈ）、３．１８－３．０９（ｍ、１Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．６２－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１７－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９９－１．７８（ｍ、５Ｈ）、１．７３－１．６６（ｍ、１Ｈ）、１．６５－１．３４（ｍ、６Ｈ）。
【0059】
実施例５．４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（化合物５）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル４－ブロモ－２－フルオロベンゾアート（１．５ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１．２０ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ＯＡｃ）２（１４４．５１ｍｇ、６４３．６８μｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（８０１．６１ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６．２９ｇ、１９．３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１００℃でＮ２条件下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳによりメチル４－ブロモ－２－フルオロベンゾアートが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝２０～５０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．８ｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５２．８９％収率、６４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ－５６）＋＝２８３．０
【化14】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル４－ブロモ－２－フルオロベンゾアート（１．５ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１．２０ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ＯＡｃ）２（１４４．５１ｍｇ、６４３．６８μｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（８０１．６１ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６．２９ｇ、１９．３１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１００℃でＮ２条件下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳによりメチル４－ブロモ－２－フルオロベンゾアートが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝２０～５０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．８ｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５２．８９％収率、６４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ－５６）＋＝２８３．０
【0060】
段階２．４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（４）の合成
ＴＨＦ（８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（３５３．８７ｍｇ、１４．７８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物をｐＨ＝５に調節した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（８５０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ、８８．６８％収率）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ－５６）＋＝２６９．１
ＴＨＦ（８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（３５３．８７ｍｇ、１４．７８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物をｐＨ＝５に調節した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（８５０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ、８８．６８％収率）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ－５６）＋＝２６９．１
【0061】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（４００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）および３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１５８．０１ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７０３．３８ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４７８．１７ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ、６４４．４３μＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水２０ｍＬで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水１０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ、８２．３１％収率、９８％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．３
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（４００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）および３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１５８．０１ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７０３．３８ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４７８．１７ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ、６４４．４３μＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水２０ｍＬで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水１０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ、８２．３１％収率、９８％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．３
【0062】
段階４．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（７）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）溶液を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．２
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）溶液を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．２
【0063】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、６１１．１６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２２６．６２ｍｇ、６７７．８１μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２３６．９６ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ、３１９．３６μＬ）およびＫＩ（１０１．４５ｍｇ、６１１．１６μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳによりＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミドが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を水２０ｍＬで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水１０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、１７２．２５μｍｏｌ、２８．１８％収率、７８％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５８９．２
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、６１１．１６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２２６．６２ｍｇ、６７７．８１μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２３６．９６ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ、３１９．３６μＬ）およびＫＩ（１０１．４５ｍｇ、６１１．１６μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳによりＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミドが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を水２０ｍＬで希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水１０ｍＬで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、１７２．２５μｍｏｌ、２８．１８％収率、７８％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５８９．２
【0064】
段階６．４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１０）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）の混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完了したことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミドを明るい黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－３－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）の混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完了したことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミドを明るい黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．３
【0065】
段階７．４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（化合物５）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１３０ｍｇ、２４７．６１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１１０．７９ｍｇ、２４７．６１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１４１．２２ｍｇ、３７１．４２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９６．０１ｍｇ、７４２．８４μｍｏｌ、１２９．３９μＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミドが完全に消費されたことと所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、ろ過物を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）で精製した。次いで残渣を分取ＨＰＬＣ（中性条件：カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（５３．３ｍｇ、５６．９０μｍｏｌ、２２．９８％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ Ｍ Ｈｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、８．３３－８．２５（ｍ、２Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、８．０８－８．０１（ｍ、１Ｈ）、７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｔ、Ｊ＝９．０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．８７－６．７４（ｍ、２Ｈ）、４．８１－４．６９（ｍ、２Ｈ）、４．４１－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０７－４．０３（ｍ、３Ｈ）、４．０２－３．９６（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．３２－３．２８（ｍ、４Ｈ）、３．１５－３．０６（ｍ、１Ｈ）、２．８３－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．６４－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１３－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．８０（ｍ、５Ｈ）、１．７７－１．６６（ｍ、１Ｈ）、１．６５－１．５６（ｍ、４Ｈ）、１．５３－１．３６（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１３０ｍｇ、２４７．６１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１１０．７９ｍｇ、２４７．６１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１４１．２２ｍｇ、３７１．４２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９６．０１ｍｇ、７４２．８４μｍｏｌ、１２９．３９μＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミドが完全に消費されたことと所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、ろ過物を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、メタノール／酢酸エチル＝０～１０％）で精製した。次いで残渣を分取ＨＰＬＣ（中性条件：カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（５３．３ｍｇ、５６．９０μｍｏｌ、２２．９８％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ Ｍ Ｈｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、８．３３－８．２５（ｍ、２Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、８．０８－８．０１（ｍ、１Ｈ）、７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｔ、Ｊ＝９．０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．８７－６．７４（ｍ、２Ｈ）、４．８１－４．６９（ｍ、２Ｈ）、４．４１－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０７－４．０３（ｍ、３Ｈ）、４．０２－３．９６（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．３２－３．２８（ｍ、４Ｈ）、３．１５－３．０６（ｍ、１Ｈ）、２．８３－２．７３（ｍ、１Ｈ）、２．６４－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１３－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．８０（ｍ、５Ｈ）、１．７７－１．６６（ｍ、１Ｈ）、１．６５－１．５６（ｍ、４Ｈ）、１．５３－１．３６（ｍ、２Ｈ）。
【0066】
実施例６．３－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（化合物６）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
トルエン（１５ｍＬ）中のメチル３－ブロモ－２－フルオロベンゾアート（１ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８７９ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（４．１９ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（２６７．２０ｍｇ、４２９．１２μｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（４８．１７ｍｇ、２１４．５６μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたこととワークアップ後、所望の質量７６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．９７ｇ、２．１８ｍｍｏｌ、５０．７７％収率、７６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３８．４
【化15】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
トルエン（１５ｍＬ）中のメチル３－ブロモ－２－フルオロベンゾアート（１ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８７９ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（４．１９ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（２６７．２０ｍｇ、４２９．１２μｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（４８．１７ｍｇ、２１４．５６μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたこととワークアップ後、所望の質量７６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．９７ｇ、２．１８ｍｍｏｌ、５０．７７％収率、７６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３８．４
【0067】
段階２．３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（４）の合成
【0068】
メタノール（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－３－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．９７ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）溶液にＮａＯＨ（３Ｍ、１．４３ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の８５％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（１ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４７．１
【0069】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（１ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５７０．２９ｍｇ、３．４６ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）、ＥＤＣＩ（８３０．２９ｍｇ、４．３３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（７８０．３２ｍｇ、５．７７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．１２ｇ、８．６６ｍｍｏｌ、１．５１ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の８８％ピークを確認した。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．０６ｇ、２．４４ｍｍｏｌ、８４．５０％収率、１００％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３４．８
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－２－フルオロ安息香酸（１ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５７０．２９ｍｇ、３．４６ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）、ＥＤＣＩ（８３０．２９ｍｇ、４．３３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（７８０．３２ｍｇ、５．７７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．１２ｇ、８．６６ｍｍｏｌ、１．５１ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の８８％ピークを確認した。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．０６ｇ、２．４４ｍｍｏｌ、８４．５０％収率、１００％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３４．８
【0070】
段階４．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（７）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の９６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（９１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．０
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の９６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（９１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．０
【0071】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（９１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２７．７１ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（９６４．６０ｍｇ、７．４６ｍｍｏｌ、１．３０ｍＬ）およびＫＩ（２０．４０ｍｇ、１２２．８９μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことを確認した。混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．５３ｇ、９００．３４μｍｏｌ、３６．６９％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５８９．３
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（９１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２７．７１ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（９６４．６０ｍｇ、７．４６ｍｍｏｌ、１．３０ｍＬ）およびＫＩ（２０．４０ｍｇ、１２２．８９μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことを確認した。混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．５３ｇ、９００．３４μｍｏｌ、３６．６９％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５８９．３
【0072】
段階６．３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１０）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．５３ｇ、９００．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、８ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の９６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（４７０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．２
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．５３ｇ、９００．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、８ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量の９６％ピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（４７０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．２
【0073】
段階７．３－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（化合物６）の合成
ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６ｍｇ、１９９．８８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１４．８４ｍｇ、１１４．８２μｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１５分間攪拌した。ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）およびＤＩＰＥＡ（１４．８４ｍｇ、１１４．８２μｍｏｌ、２０μＬ）溶液を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ワークアップ後、ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９４％）が検出されたことを確認した。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３４％～６４％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、３－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（３５．２ｍｇ、３５．２８μｍｏｌ、２６．３１％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、８．６２－８．５６（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５１－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２０－７．１１（ｍ、３Ｈ）、４．８２－４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．４４－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．１０－４．００（ｍ、３Ｈ）、３．９８－３．９１（ｍ、４Ｈ）、３．３１－３．２８（ｓ、３Ｈ）、３．１７－３．０９（ｍ、１Ｈ）、３．０７－２．９７（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７４（ｍ、１Ｈ）、２．７１－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１２－２．０２（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．８０（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５３（ｍ、４Ｈ）、１．５２－１．３３（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６ｍｇ、１９９．８８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１４．８４ｍｇ、１１４．８２μｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１５分間攪拌した。ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（１２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）およびＤＩＰＥＡ（１４．８４ｍｇ、１１４．８２μｍｏｌ、２０μＬ）溶液を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ワークアップ後、ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９４％）が検出されたことを確認した。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３４％～６４％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、３－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンズアミド（３５．２ｍｇ、３５．２８μｍｏｌ、２６．３１％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、８．６２－８．５６（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５１－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２０－７．１１（ｍ、３Ｈ）、４．８２－４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．４４－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．１０－４．００（ｍ、３Ｈ）、３．９８－３．９１（ｍ、４Ｈ）、３．３１－３．２８（ｓ、３Ｈ）、３．１７－３．０９（ｍ、１Ｈ）、３．０７－２．９７（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７４（ｍ、１Ｈ）、２．７１－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１２－２．０２（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．８０（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５３（ｍ、４Ｈ）、１．５２－１．３３（ｍ、２Ｈ）。
【0074】
実施例７．５－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（化合物７）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル５－ブロモピコリネート（１ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８６２．１４ｍｇ、４．６３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１０５．９７ｍｇ、１１５．７２μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（２１６．００ｍｇ、４６２．８９μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．５２ｇ、１３．８９ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．５ｇ、粗製）を黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２２．０
【化16】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル５－ブロモピコリネート（１ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８６２．１４ｍｇ、４．６３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１０５．９７ｍｇ、１１５．７２μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（２１６．００ｍｇ、４６２．８９μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．５２ｇ、１３．８９ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．５ｇ、粗製）を黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２２．０
【0075】
段階２．メチル５－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（３）の合成
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．１１ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（１０ｍＬ）で希釈し、メチル５－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１ｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２１．９
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（６－（メトキシカルボニル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．１１ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（１０ｍＬ）で希釈し、メチル５－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１ｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２１．９
【0076】
段階３．メチル５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（４）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のメチル５－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．３８ｇ、１１．６４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．５０ｇ、１１．６４ｍｍｏｌ、２．０３ｍＬ）およびＮａＩ（５８．１６ｍｇ、３８８．０２μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４５ｍＬ／分）によって精製し、メチル５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、３１．１２％収率、９９％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のメチル５－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．３８ｇ、１１．６４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．５０ｇ、１１．６４ｍｍｏｌ、２．０３ｍＬ）およびＮａＩ（５８．１６ｍｇ、３８８．０２μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４５ｍＬ／分）によって精製し、メチル５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、３１．１２％収率、９９％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．
【0077】
段階４．５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（５）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のメチル５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（３００ｍｇ、６３０．８１μｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（３０．２１ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、混合物を２５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を濃縮し、凍結乾燥し、５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（２８０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得て、直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６２．０
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のメチル５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（３００ｍｇ、６３０．８１μｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（３０．２１ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、混合物を２５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を濃縮し、凍結乾燥し、５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（２８０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得て、直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６２．０
【0078】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（６－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１００ｍｇ、２１３．４５μｍｏｌ Ｌｉ）溶液にＨＡＴＵ（１２１．７４ｍｇ、３２０．１７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８２．７６ｍｇ、６４０．３５μｍｏｌ、１１１．５４μＬ）を添加し、１分間攪拌した後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（４２．１６ｍｇ、２５６．１４μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠２５ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（６－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１５３．９４μｍｏｌ、７２．１２％収率、８０％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．１
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の５－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１００ｍｇ、２１３．４５μｍｏｌ Ｌｉ）溶液にＨＡＴＵ（１２１．７４ｍｇ、３２０．１７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８２．７６ｍｇ、６４０．３５μｍｏｌ、１１１．５４μＬ）を添加し、１分間攪拌した後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（４２．１６ｍｇ、２５６．１４μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠２５ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（６－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１５３．９４μｍｏｌ、７２．１２％収率、８０％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．１
【0079】
段階６．５－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（７）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（６－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１９２．４２μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ、８３．１５）を添加し、反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物を真空濃縮し、５－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．０
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（６－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１９２．４２μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ、８３．１５）を添加し、反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物を真空濃縮し、５－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．０
【0080】
段階７．５－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（化合物７）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６．４８ｍｇ、２０１．１５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５１．９９ｍｇ、４０２．２９μｍｏｌ、７０．０７μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１分間攪拌した後、５－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（６８．１２ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％，７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５８％，８分）によって精製し、凍結乾燥し、５－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（４７．２ｍｇ、５１．５５μｍｏｌ、３８．４４％収率、９８．４％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０１．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１ Ｈ）、８．７３（ｄ、Ｊ＝８．３１ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．３３（ｄ、Ｊ＝２．６９ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．２６－８．３０（ｍ、２ Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．７０ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９７（ｓ、１ Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝８．８０ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．４７－７．５１（ｍ、２ Ｈ）、７．４３（ｄｄ、Ｊ＝８．９３、２．８１ Ｈｚ、１ Ｈ），４．７０－４．８２（ｍ、２ Ｈ），４．４０（ｄ、Ｊ＝１２．２３ Ｈｚ、１ Ｈ）、３．９５－４．１２（ｍ、４ Ｈ）、３．９４（ｓ、３ Ｈ）、３．３４－３．３７（ｍ、４ Ｈ）、３．３１（ｓ、３ Ｈ）、３．１４（ｔ、Ｊ＝１２．２９ Ｈｚ、１ Ｈ）、２．７４－２．８４（ｍ、１ Ｈ）、２．６６－２．７４（ｍ、１ Ｈ）、２．５３－２．６６（ｍ、１０ Ｈ）、２．１２－２．１９（ｍ、１ Ｈ）、１．８７－２．０６（ｍ、４ Ｈ）、１．７２－１．８５（ｍ、２ Ｈ）、１．６１－１．７０（ｍ、２ Ｈ）、１．４９－１．５８（ｍ、２ Ｈ）、１．３６－１．５３（ｍ、２ Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７６．４８ｍｇ、２０１．１５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５１．９９ｍｇ、４０２．２９μｍｏｌ、７０．０７μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１分間攪拌した後、５－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（６８．１２ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％，７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５８％，８分）によって精製し、凍結乾燥し、５－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（４７．２ｍｇ、５１．５５μｍｏｌ、３８．４４％収率、９８．４％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０１．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１ Ｈ）、８．７３（ｄ、Ｊ＝８．３１ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．３３（ｄ、Ｊ＝２．６９ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．２６－８．３０（ｍ、２ Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．７０ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９７（ｓ、１ Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝８．８０ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．４７－７．５１（ｍ、２ Ｈ）、７．４３（ｄｄ、Ｊ＝８．９３、２．８１ Ｈｚ、１ Ｈ），４．７０－４．８２（ｍ、２ Ｈ），４．４０（ｄ、Ｊ＝１２．２３ Ｈｚ、１ Ｈ）、３．９５－４．１２（ｍ、４ Ｈ）、３．９４（ｓ、３ Ｈ）、３．３４－３．３７（ｍ、４ Ｈ）、３．３１（ｓ、３ Ｈ）、３．１４（ｔ、Ｊ＝１２．２９ Ｈｚ、１ Ｈ）、２．７４－２．８４（ｍ、１ Ｈ）、２．６６－２．７４（ｍ、１ Ｈ）、２．５３－２．６６（ｍ、１０ Ｈ）、２．１２－２．１９（ｍ、１ Ｈ）、１．８７－２．０６（ｍ、４ Ｈ）、１．７２－１．８５（ｍ、２ Ｈ）、１．６１－１．７０（ｍ、２ Ｈ）、１．４９－１．５８（ｍ、２ Ｈ）、１．３６－１．５３（ｍ、２ Ｈ）。
【0081】
実施例８．４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（化合物８）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル４－ブロモピコリネート（１ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８６２．１４ｍｇ、４．６３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１０５．９７ｍｇ、１１５．７２μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（２１６．００ｍｇ、４６２．８９μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．５２ｇ、１３．８９ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７８０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、３３．０３％収率、６３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２２．０
【化17】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中のメチル４－ブロモピコリネート（１ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（８６２．１４ｍｇ、４．６３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１０５．９７ｍｇ、１１５．７２μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（２１６．００ｍｇ、４６２．８９μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．５２ｇ、１３．８９ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７８０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、３３．０３％収率、６３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２２．０
【0082】
段階２．メチル４－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（３）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７８０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物をろ過した。ろ過ケーキを濃縮し、メチル４－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５４０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２１．９
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メトキシカルボニル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７８０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。混合物をろ過した。ろ過ケーキを濃縮し、メチル４－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５４０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２１．９
【0083】
段階３．メチル４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（４）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中のメチル４－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５４０ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．８３ｇ、６．２９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８１２．４２ｍｇ、６．２９ｍｍｏｌ、１．０９ｍＬ）およびＫＩ（６９．５７ｍｇ、４１９．０７μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、メチル４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１５０ｍｇ、３１５．４０μｍｏｌ、１５．０５％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．１
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中のメチル４－（ピペラジン－１－イル）ピコリネート（５４０ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．８３ｇ、６．２９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８１２．４２ｍｇ、６．２９ｍｍｏｌ、１．０９ｍＬ）およびＫＩ（６９．５７ｍｇ、４１９．０７μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、メチル４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１５０ｍｇ、３１５．４０μｍｏｌ、１５．０５％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．１
【0084】
段階４．４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（５）の合成
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中のメチル４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１５０ｍｇ、３１５．４０μｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（２６．４７ｍｇ、６３０．８１μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を濃縮し、凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１３０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得て、これを直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６２．１
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中のメチル４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリネート（１５０ｍｇ、３１５．４０μｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ（２６．４７ｍｇ、６３０．８１μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を濃縮し、凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１３０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得て、これを直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６２．１
【0085】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（２－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１３０ｍｇ、２７７．４８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１５８．２６ｍｇ、４１６．２３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１０７．５９ｍｇ、８３２．４５μｍｏｌ、１４５．００μＬ）を添加した後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５４．８１ｍｇ、３３２．９８μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（２－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．１
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（４－（３－（４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）ピコリン酸（１３０ｍｇ、２７７．４８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１５８．２６ｍｇ、４１６．２３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１０７．５９ｍｇ、８３２．４５μｍｏｌ、１４５．００μＬ）を添加した後、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（５４．８１ｍｇ、３３２．９８μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（２－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．１
【0086】
段階６．４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（７）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（２－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２２７．４１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５６．８５μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物を真空濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（１００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．０
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（２－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）ピリジン－４－イル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２２７．４１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５６．８５μＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物を真空濃縮し、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（１００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．０
【0087】
段階７．４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（化合物８）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（８５ｍｇ、１８９．９７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０８．３５ｍｇ、２８４．９６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７３．６６ｍｇ、５６９．９２μｍｏｌ、９９．２７μＬ）を添加した後、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（９６．５１ｍｇ、１８９．９７μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２３％～４３％，７分）、その後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％，８分）で精製した後、凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（３２．９ｍｇ、３６．３３μｍｏｌ、１９．１３％収率、９９．５％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０１．０
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１ Ｈ）、８．９６（ｄ、Ｊ＝８．３１ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．２７－８．３２（ｍ、２ Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ＝５．９９ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．４６ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９８（ｓ、１ Ｈ）、７．４６－７．５２（ｍ、３ Ｈ）、７．０４（ｄｄ、Ｊ＝５．９９、２．５７ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．７１－４．８２（ｍ、２ Ｈ）、４．４１（ｄ、Ｊ＝１３．２０ Ｈｚ、１ Ｈ）、３．９５－４．１３（ｍ、４ Ｈ）、３．９５（ｓ、３ Ｈ）、３．４０（ｄ、Ｊ＝４．６５ Ｈｚ、４ Ｈ）、３．３４（ｓ、３ Ｈ）、３．０６－３．２０（ｍ、１ Ｈ）、２．７５－２．８６（ｍ、１ Ｈ）、２．６９（ｄｄ、Ｊ＝３．６１、１．６５ Ｈｚ、１ Ｈ）、２．５３－２．６７（ｍ、１０ Ｈ）、２．１４－２．２６（ｍ、１ Ｈ）、１．８７－２．０６（ｍ、４ Ｈ）、１．８２－１．７２（ｍ、２ Ｈ）、１．６２－１．６９（ｍ、２ Ｈ）、１．６０－１．６８（ｍ、２ Ｈ）、１．３４－１．５３（ｍ、２ Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（８５ｍｇ、１８９．９７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０８．３５ｍｇ、２８４．９６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７３．６６ｍｇ、５６９．９２μｍｏｌ、９９．２７μＬ）を添加した後、４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（９６．５１ｍｇ、１８９．９７μｍｏｌ、ＨＣｌ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２３％～４３％，７分）、その後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％，８分）で精製した後、凍結乾燥し、４－（４－（３－（４－（４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ピコリンアミド（３２．９ｍｇ、３６．３３μｍｏｌ、１９．１３％収率、９９．５％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０１．０
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１ Ｈ）、８．９６（ｄ、Ｊ＝８．３１ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．２７－８．３２（ｍ、２ Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ＝５．９９ Ｈｚ、１ Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝７．４６ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９８（ｓ、１ Ｈ）、７．４６－７．５２（ｍ、３ Ｈ）、７．０４（ｄｄ、Ｊ＝５．９９、２．５７ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．７１－４．８２（ｍ、２ Ｈ）、４．４１（ｄ、Ｊ＝１３．２０ Ｈｚ、１ Ｈ）、３．９５－４．１３（ｍ、４ Ｈ）、３．９５（ｓ、３ Ｈ）、３．４０（ｄ、Ｊ＝４．６５ Ｈｚ、４ Ｈ）、３．３４（ｓ、３ Ｈ）、３．０６－３．２０（ｍ、１ Ｈ）、２．７５－２．８６（ｍ、１ Ｈ）、２．６９（ｄｄ、Ｊ＝３．６１、１．６５ Ｈｚ、１ Ｈ）、２．５３－２．６７（ｍ、１０ Ｈ）、２．１４－２．２６（ｍ、１ Ｈ）、１．８７－２．０６（ｍ、４ Ｈ）、１．８２－１．７２（ｍ、２ Ｈ）、１．６２－１．６９（ｍ、２ Ｈ）、１．６０－１．６８（ｍ、２ Ｈ）、１．３４－１．５３（ｍ、２ Ｈ）。
【0088】
実施例９．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物９）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（３００ｍｇ、８５０．３０μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７００ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、生成された混合物を２５℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７８％）を確認した。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、０℃で飽和炭酸水素ナトリウムでｐＨ９近くまで調整した後、酢酸エチル６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、３０２．６６μｍｏｌ、３５．５９％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８９（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９８－７．７４（ｍ、１Ｈ）、７．４３－７．３４（ｍ、１Ｈ）、７．３２－７．２２（ｍ、２Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝７．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７３（ｍ、１Ｈ）、３．５６－３．３３（ｍ、４Ｈ）、３．２３－３．１７（ｍ、４Ｈ）、２．９０－２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．８２－２．７４（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．４６－２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．１３（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８６－１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．７３－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、１Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）、１．２１－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
【化18】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（３００ｍｇ、８５０．３０μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７００ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、生成された混合物を２５℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７８％）を確認した。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、０℃で飽和炭酸水素ナトリウムでｐＨ９近くまで調整した後、酢酸エチル６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、３０２．６６μｍｏｌ、３５．５９％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．３
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８９（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９８－７．７４（ｍ、１Ｈ）、７．４３－７．３４（ｍ、１Ｈ）、７．３２－７．２２（ｍ、２Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝７．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７３（ｍ、１Ｈ）、３．５６－３．３３（ｍ、４Ｈ）、３．２３－３．１７（ｍ、４Ｈ）、２．９０－２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．８２－２．７４（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．４６－２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．１３（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８６－１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．７３－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、１Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）、１．２１－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
【0089】
段階２．３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（３）の合成
ＤＣＭ（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８３．７５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（８ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
ＤＣＭ（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８３．７５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（８ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
【0090】
段階３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物９）の合成
【0091】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（５０ｍｇ、２６０．８２μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３０ｍｇ、２２２．０２μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１４８．４０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、２００μＬ）および３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１００ｍｇ、１５２．３１μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５８％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～４７％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（４５．７ｍｇ、４５．６１μｍｏｌ、３４．０１％収率、９７％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ＝８．１６（ｓ、１Ｈ）、８．１３（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝１．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５－７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．４７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．２９－７．２３（ｍ、１Ｈ）、５．１１－５．０３（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．９０（ｍ、１Ｈ）、４．１８（ｔ、Ｊ＝１２．２ Ｈｚ、２Ｈ）、４．０３（ｓ、３Ｈ）、４．００－３．８４（ｍ、２Ｈ）、３．８３－３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．２８－３．１７（ｍ、６Ｈ）、２．８７－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．２７－２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０１（ｍ、３Ｈ）、２．０１－１．８１（ｍ、５Ｈ）、１．８１－１．５５（ｍ、７Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ＝８．１６（ｓ、１Ｈ）、８．１３（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝１．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５－７．５１（ｍ、２Ｈ）、７．４７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．２９－７．２３（ｍ、１Ｈ）、５．１１－５．０３（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．９０（ｍ、１Ｈ）、４．１８（ｔ、Ｊ＝１２．２ Ｈｚ、２Ｈ）、４．０３（ｓ、３Ｈ）、４．００－３．８４（ｍ、２Ｈ）、３．８３－３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．２８－３．１７（ｍ、６Ｈ）、２．８７－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．２７－２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０１（ｍ、３Ｈ）、２．０１－１．８１（ｍ、５Ｈ）、１．８１－１．５５（ｍ、７Ｈ）。
【0092】
実施例１０．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１０）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８９０．４３ｍｇ、６．８９ｍｍｏｌ、１．２０ｍＬ）、ＫＩ（１００ｍｇ、６０２．４０μｍｏｌ）および２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（６００．０２ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３６８．５５μｍｏｌ、３２．５１％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８９（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９－７．７６（ｍ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３４－７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．１７－７．０５（ｍ、１Ｈ）、４．８５－４．６９（ｍ、１Ｈ）、３．３６－３．３５（ｍ、４Ｈ）、３．１９－３．１６（ｍ、４Ｈ）、２．８９－２．７５（ｍ、３Ｈ）、２．５９－２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．４５－２．３８（ｍ、２Ｈ）、２．３６－２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．６８－１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．４４－１．３９（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．２４－１．１５（ｍ、３Ｈ）。
【化19】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（４００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８９０．４３ｍｇ、６．８９ｍｍｏｌ、１．２０ｍＬ）、ＫＩ（１００ｍｇ、６０２．４０μｍｏｌ）および２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（６００．０２ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３６８．５５μｍｏｌ、３２．５１％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８９（ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９－７．７６（ｍ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３４－７．２５（ｍ、２Ｈ）、７．１７－７．０５（ｍ、１Ｈ）、４．８５－４．６９（ｍ、１Ｈ）、３．３６－３．３５（ｍ、４Ｈ）、３．１９－３．１６（ｍ、４Ｈ）、２．８９－２．７５（ｍ、３Ｈ）、２．５９－２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．４５－２．３８（ｍ、２Ｈ）、２．３６－２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．０６（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．６８－１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．４４－１．３９（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．２４－１．１５（ｍ、３Ｈ）。
【0093】
段階２．３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（３）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３３１．６９μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８４％）を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１６０ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、１０．８４－１０．７０（ｍ、１Ｈ）、８．７６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４６（ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝４．９ Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３－７．１７（ｍ、１Ｈ）、４．８０－４．７２（ｍ、１Ｈ）、３．９７－３．７９（ｍ、３Ｈ）、３．２４－２．９９（ｍ、８Ｈ）、２．９１－２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．５９－２．５６（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．１１（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．８７－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．５０－１．２２（ｍ、３Ｈ）。
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、３３１．６９μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８４％）を確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１６０ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、１０．８４－１０．７０（ｍ、１Ｈ）、８．７６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．４６（ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝４．９ Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３－７．１７（ｍ、１Ｈ）、４．８０－４．７２（ｍ、１Ｈ）、３．９７－３．７９（ｍ、３Ｈ）、３．２４－２．９９（ｍ、８Ｈ）、２．９１－２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．５９－２．５６（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．１１（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．８７－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．５０－１．２２（ｍ、３Ｈ）。
【0094】
段階３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１０）の合成
【0095】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７０ｍｇ、１８４．１０μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１１１．３０ｍｇ、８６１．１７μｍｏｌ、１５０μＬ）および３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（８０ｍｇ、１５５．２０μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～６６％、９分；カラム温度：３０℃）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３０．７ｍｇ、３３．８０μｍｏｌ、２５．２０％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．７
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、９．３９－９．１９（ｍ、１Ｈ）、８．７７－８．６０（ｍ、１Ｈ）、８．３６－８．１６（ｍ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．４９－７．３６（ｍ、３Ｈ）、７．３４－７．２７（ｍ、２Ｈ）、７．１５－７．０９（ｍ，１Ｈ）、４．８３－４．７２（ｍ、２Ｈ）、４．１２－４．００（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．３２（ｍ、３Ｈ）、３．２４－３．１７（ｍ ４Ｈ）、３．０６－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、３Ｈ）、２．５８－２．５３（ｍ、５Ｈ）、２．４２－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．０９（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．７６－１．５７（ｍ、８Ｈ）、１．４８－１．２６（ｍ、５Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、９．３９－９．１９（ｍ、１Ｈ）、８．７７－８．６０（ｍ、１Ｈ）、８．３６－８．１６（ｍ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．４９－７．３６（ｍ、３Ｈ）、７．３４－７．２７（ｍ、２Ｈ）、７．１５－７．０９（ｍ，１Ｈ）、４．８３－４．７２（ｍ、２Ｈ）、４．１２－４．００（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．３２（ｍ、３Ｈ）、３．２４－３．１７（ｍ ４Ｈ）、３．０６－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、３Ｈ）、２．５８－２．５３（ｍ、５Ｈ）、２．４２－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．０９（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．７６－１．５７（ｍ、８Ｈ）、１．４８－１．２６（ｍ、５Ｈ）。
【0096】
実施例１１．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１１）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２Ａ）およびｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（２Ｂ）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（５００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＫＩ（６０ｍｇ、３６１．４４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．０４ｇ、８．０４ｍｍｏｌ、１．４ｍＬ）および（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホナート（５００．００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２４５．９１μｍｏｌ、１７．３５％純度）を明るい黄色の固体として得て、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４９１．８３μｍｏｌ、３４．７０％収率）を明るい黄色の固体として得て、２Ｄ ＮＭＲにより確認した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３３－７．２２（ｍ、２Ｈ）、７．１３－７．０７（ｍ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、１Ｈ）、３．４０－３．３５（ｍ、４Ｈ）、３．１９－３．１６（ｍ、４Ｈ）、２．９３（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、２．８７－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．７２（ｍ、１Ｈ）、２．５８－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．４９－２．４４（ｍ、２Ｈ）、２．３５－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．１６－２．０１（ｍ、２Ｈ）、１．９６－１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．５４－１．４６（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．３４－１．２４（ｍ、１Ｈ）。
【化20】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２Ａ）およびｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（２Ｂ）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（５００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＫＩ（６０ｍｇ、３６１．４４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．０４ｇ、８．０４ｍｍｏｌ、１．４ｍＬ）および（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホナート（５００．００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を６０℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：酢酸エチル勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２４５．９１μｍｏｌ、１７．３５％純度）を明るい黄色の固体として得て、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４９１．８３μｍｏｌ、３４．７０％収率）を明るい黄色の固体として得て、２Ｄ ＮＭＲにより確認した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．６９（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３３－７．２２（ｍ、２Ｈ）、７．１３－７．０７（ｍ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、１Ｈ）、３．４０－３．３５（ｍ、４Ｈ）、３．１９－３．１６（ｍ、４Ｈ）、２．９３（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、２．８７－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．７２（ｍ、１Ｈ）、２．５８－２．５３（ｍ、１Ｈ）、２．４９－２．４４（ｍ、２Ｈ）、２．３５－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．１６－２．０１（ｍ、２Ｈ）、１．９６－１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．５４－１．４６（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．３４－１．２４（ｍ、１Ｈ）。
【0097】
段階２．３－（４－（２－（１－アミノピロリジン－３－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８３．７５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピロリジン－３－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１３０ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８３．７５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピロリジン－３－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１３０ｍｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
【0098】
段階３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（６０ｍｇ、３１２．９９μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３０ｍｇ、２２２．０２μｍｏｌ）および３－（４－（２－（１－アミノピロリジン－３－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１００．００ｍｇ、１９９．４３μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５７％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（７８．５ｍｇ、７７．５３μｍｏｌ、４３．３６％収率、９６％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ＝８．２４－８．１１（ｍ、２Ｈ）、７．６１－７．５０（ｍ、３Ｈ）、７．４９－７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．３１－７．２３（ｍ、１Ｈ）、５．１０－５．０１（ｍ、１Ｈ）、４．９８－４．９１（ｍ、１Ｈ）、４．２３－４．１２（ｍ ２Ｈ）、４．０２（ｓ、３Ｈ）、３．９９－３．６１（ｍ、４Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３８－３．３３（ｍ、４Ｈ）、３．３２－３．２６（ｍ、４Ｈ）、３．２５－３．１５（ｍ、２Ｈ）、３．０９－３．００（ｍ、１Ｈ）、２．９２－２．８１（ｍ、１Ｈ）、２．７８－２．７０（ｍ、１Ｈ）、２．５３－２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．３１－２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．０９－１．９７（ｍ、４Ｈ）、１．８９－１．７９（ｍ、２Ｈ）、１．７７－１．６８（ｍ、４Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（６０ｍｇ、３１２．９９μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３０ｍｇ、２２２．０２μｍｏｌ）および３－（４－（２－（１－アミノピロリジン－３－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）ベンズアミド（１００．００ｍｇ、１９９．４３μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５７％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％、７分；カラム温度：３０℃）によって精製し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（２－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）フェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（７８．５ｍｇ、７７．５３μｍｏｌ、４３．３６％収率、９６％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ＝８．２４－８．１１（ｍ、２Ｈ）、７．６１－７．５０（ｍ、３Ｈ）、７．４９－７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．３１－７．２３（ｍ、１Ｈ）、５．１０－５．０１（ｍ、１Ｈ）、４．９８－４．９１（ｍ、１Ｈ）、４．２３－４．１２（ｍ ２Ｈ）、４．０２（ｓ、３Ｈ）、３．９９－３．６１（ｍ、４Ｈ）、３．４２（ｓ、３Ｈ）、３．３８－３．３３（ｍ、４Ｈ）、３．３２－３．２６（ｍ、４Ｈ）、３．２５－３．１５（ｍ、２Ｈ）、３．０９－３．００（ｍ、１Ｈ）、２．９２－２．８１（ｍ、１Ｈ）、２．７８－２．７０（ｍ、１Ｈ）、２．５３－２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．３１－２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．０９－１．９７（ｍ、４Ｈ）、１．８９－１．７９（ｍ、２Ｈ）、１．７７－１．６８（ｍ、４Ｈ）。
【0099】
実施例１２．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１２）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中のメチル３，４－ジフルオロベンゾアート（２ｇ、１１．６２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（２．６０ｇ、１３．９４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．２１ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１０～６５％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、８．６９ｍｍｏｌ、７４．７８％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３８．８
【化21】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中のメチル３，４－ジフルオロベンゾアート（２ｇ、１１．６２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（２．６０ｇ、１３．９４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．２１ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１０～６５％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、８．６９ｍｍｏｌ、７４．７８％収率、９８％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３８．８
【0100】
段階２．４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロ安息香酸（４）の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（７４４．０９ｍｇ、１７．７３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９７％）を確認した。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈した。水相をＨＣｌ（１Ｎ）でｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロ安息香酸（２．８ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２５．１
ＴＨＦ（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）溶液にＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（７４４．０９ｍｇ、１７．７３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９７％）を確認した。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈した。水相をＨＣｌ（１Ｎ）でｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロ安息香酸（２．８ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２５．１
【0101】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロ安息香酸（２．６ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４５ｇ、８．８２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＥＤＣＩ（２．３１ｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．６２ｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．１１ｇ、２４．０５ｍｍｏｌ、４．１９ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で２０ｏＣで１０分間粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、６．７０ｍｍｏｌ、８３．５６％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．２
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロ安息香酸（２．６ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）、３－アミノピペリジン－２，６－ジオン（１．４５ｇ、８．８２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＥＤＣＩ（２．３１ｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．６２ｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．１１ｇ、２４．０５ｍｍｏｌ、４．１９ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で２０ｏＣで１０分間粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３ｇ、６．７０ｍｍｏｌ、８３．５６％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．２
【0102】
段階４．Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（７）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－［４－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）カルバモイル］－２－フルオロ－フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（２００ｍｇ、４６０．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、粗製）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－［４－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）カルバモイル］－２－フルオロ－フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（２００ｍｇ、４６０．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、粗製）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１
【0103】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（９）の合成
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、４０４．５２μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（９２．３５ｍｇ、４０４．５２μｍｏｌ）、ＡｃＯＨ（１２．１５ｍｇ、２０２．２６μｍｏｌ、１１．５７μＬ）の混合物を２０℃で１時間攪拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２５７．２１ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２７％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５～２０％酢酸エチル／メタノール＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、１９５．０１μｍｏｌ、４８．２１％収率、８２％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４７．４
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のＮ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、４０４．５２μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（９２．３５ｍｇ、４０４．５２μｍｏｌ）、ＡｃＯＨ（１２．１５ｍｇ、２０２．２６μｍｏｌ、１１．５７μＬ）の混合物を２０℃で１時間攪拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２５７．２１ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２７％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５～２０％酢酸エチル／メタノール＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、１９５．０１μｍｏｌ、４８．２１％収率、８２％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４７．４
【0104】
段階６．４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロベンズアミド（１０）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２３７．８２μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロベンズアミド（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．３
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１３０ｍｇ、２３７．８２μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロベンズアミド（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．３
【0105】
段階７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１２）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７９．８２ｍｇ、１７８．４０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．７５ｍｇ、２６７．６０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６９．１７ｍｇ、５３５．２０μｍｏｌ、９３．２２μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロベンズアミド（１００ｍｇ、１７８．４０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３７％～６７％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（４１ｍｇ、４２．１３μｍｏｌ、２３．６１％収率、９０％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７６．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、９．３１（ｓ、１Ｈ）、８．６６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１－８．２３（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．６９－７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．４６－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．０９（ｔ、Ｊ＝８．７ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０９（ｍ、４Ｈ）、３．０６－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．８８－２．７２（ｍ、３Ｈ）、２．５８－２．５２（ｍ、５Ｈ）、２．２７－２．１８（ｍ、２Ｈ）、２．１６－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．８８（ｍ、３Ｈ）、１．８２－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．３４－１．１６（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７９．８２ｍｇ、１７８．４０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．７５ｍｇ、２６７．６０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６９．１７ｍｇ、５３５．２０μｍｏｌ、９３．２２μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－フルオロベンズアミド（１００ｍｇ、１７８．４０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３７％～６７％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）カルバモイル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（４１ｍｇ、４２．１３μｍｏｌ、２３．６１％収率、９０％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７６．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、９．３１（ｓ、１Ｈ）、８．６６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１－８．２３（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．６９－７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．４６－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．０９（ｔ、Ｊ＝８．７ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、２Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０９（ｍ、４Ｈ）、３．０６－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．８８－２．７２（ｍ、３Ｈ）、２．５８－２．５２（ｍ、５Ｈ）、２．２７－２．１８（ｍ、２Ｈ）、２．１６－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．０１－１．８８（ｍ、３Ｈ）、１．８２－１．６６（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．３４－１．１６（ｍ、２Ｈ）。
【0106】
実施例１３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１３）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（７６１．５０ｍｇ、３．９７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．９６ｇ、２．０８ｍｍｏｌ、５７．５８％収率、８４％純度）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８８．９
【化22】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（７６１．５０ｍｇ、３．９７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．９６ｇ、２．０８ｍｍｏｌ、５７．５８％収率、８４％純度）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８８．９
【0107】
段階２．３－（（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３）の合成
ジオキサン（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３２１．７８μＬ）を添加し、混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５０ｍｇ、粗製）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８８．９
ジオキサン（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３２１．７８μＬ）を添加し、混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５０ｍｇ、粗製）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８８．９
【0108】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（４）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－（（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５４１．６３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６５６．５５ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、８８４．８４μＬ）およびＫＩ（５６．２２ｍｇ、３３８．６６μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、３５４．５４μｍｏｌ、２０．９４％収率、７４％純度）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．１
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－（（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５４１．６３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６５６．５５ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、８８４．８４μＬ）およびＫＩ（５６．２２ｍｇ、３３８．６６μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）を確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、３５４．５４μｍｏｌ、２０．９４％収率、７４％純度）を褐色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．１
【0109】
段階４．３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４７９．１１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を緑色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．０
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４７９．１１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を緑色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．０
【0110】
段階５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１３）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２２３．５０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１２７．４７ｍｇ、３３５．２４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８６．６６ｍｇ、６７０．４９μｍｏｌ、１１６．７９μＬ）を添加した後、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２８．４７ｍｇ、２６８．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、生成された混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２６％～４６％、７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～５８％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０．４ｍｇ、４４．１５μｍｏｌ、１９．７６％収率、９５．３％純度）を赤色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７４（ｓ、１ Ｈ）、８．３３－８．２０（ｍ、２ Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝６．７５ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９６（ｓ、１ Ｈ）、７．５６－７．４３（ｍ、２ Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝７．７５ Ｈｚ、２ Ｈ）、６．６０（ｄ、Ｊ＝８．１３ Ｈｚ、２ Ｈ）、５．３７（ｄ、Ｊ＝７．００ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．８３－４．７０（ｍ、１ Ｈ）、４．３９（ｄ、Ｊ＝１０．０１ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．１８（ｓ、１ Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８２ Ｈｚ、３ Ｈ）、３．９９－３．９３（ｍ、４ Ｈ）、３．３１（ｓ、３ Ｈ）、３．２２－３．０４（ｍ、２ Ｈ）、２．９８－２．９３（ｍ、４ Ｈ）、２．６９（ｄ、Ｊ＝１２．７６ Ｈｚ、３ Ｈ）、２．６３－２．５６（ｍ、５ Ｈ）、２．１４－２．０６（ｍ、１ Ｈ）、２．００－１．７７（ｍ、６ Ｈ）、１．７６－１．５２（ｍ、７ Ｈ）１．５２－１．３５（ｍ、２ Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２２３．５０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１２７．４７ｍｇ、３３５．２４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８６．６６ｍｇ、６７０．４９μｍｏｌ、１１６．７９μＬ）を添加した後、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２８．４７ｍｇ、２６８．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、生成された混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２６％～４６％、７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～５８％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０．４ｍｇ、４４．１５μｍｏｌ、１９．７６％収率、９５．３％純度）を赤色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７４（ｓ、１ Ｈ）、８．３３－８．２０（ｍ、２ Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝６．７５ Ｈｚ、１ Ｈ）、７．９６（ｓ、１ Ｈ）、７．５６－７．４３（ｍ、２ Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝７．７５ Ｈｚ、２ Ｈ）、６．６０（ｄ、Ｊ＝８．１３ Ｈｚ、２ Ｈ）、５．３７（ｄ、Ｊ＝７．００ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．８３－４．７０（ｍ、１ Ｈ）、４．３９（ｄ、Ｊ＝１０．０１ Ｈｚ、１ Ｈ）、４．１８（ｓ、１ Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８２ Ｈｚ、３ Ｈ）、３．９９－３．９３（ｍ、４ Ｈ）、３．３１（ｓ、３ Ｈ）、３．２２－３．０４（ｍ、２ Ｈ）、２．９８－２．９３（ｍ、４ Ｈ）、２．６９（ｄ、Ｊ＝１２．７６ Ｈｚ、３ Ｈ）、２．６３－２．５６（ｍ、５ Ｈ）、２．１４－２．０６（ｍ、１ Ｈ）、２．００－１．７７（ｍ、６ Ｈ）、１．７６－１．５２（ｍ、７ Ｈ）１．５２－１．３５（ｍ、２ Ｈ）。
【0111】
実施例１４．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１４）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６９２．２８ｍｇ、３．６１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４２％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（４８％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１０～６５％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ、３０．８４％収率、９６％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．０
【化23】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６９２．２８ｍｇ、３．６１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４２％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（４８％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１０～６５％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ、３０．８４％収率、９６％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．０
【0112】
段階２．３－（（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８９．０
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８９．０
【0113】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６１５．７５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６８．５８ｍｇ、９２３．６３μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２３８．７５ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ、３２１．７６μＬ）およびＮａＩ（９．２３ｍｇ、６１．５８μｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１７８．７５μｍｏｌ、２９．０３％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．３
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６１５．７５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２６８．５８ｍｇ、９２３．６３μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２３８．７５ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ、３２１．７６μＬ）およびＮａＩ（９．２３ｍｇ、６１．５８μｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１７８．７５μｍｏｌ、２９．０３％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．３
【0114】
段階４．３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１８４．２７μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８８ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．１
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１８４．２７μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８８ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．１
【0115】
段階５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１４）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７４．７３ｍｇ、１６７．０１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９５．２５ｍｇ、２５０．５１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．７５ｍｇ、５０１．０３μｍｏｌ、８７．２７μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。その後、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１６７．０１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～６２％、８分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０ｍｇ、５５．０５μｍｏｌ、３２．９６％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３１－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１７（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９１（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、６．３１－６．１０（ｍ、３Ｈ）、５．６３（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８４－４．６９（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．２７（ｍ、２Ｈ）、４．１３－４．００（ｍ、３Ｈ）、４．００－３．９０（ｍ、４Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０２（ｍ、５Ｈ）、２．８１－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１５－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．７９（ｍ、５Ｈ）、１．７６－１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．６６－１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．５４－１．３４（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７４．７３ｍｇ、１６７．０１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９５．２５ｍｇ、２５０．５１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．７５ｍｇ、５０１．０３μｍｏｌ、８７．２７μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。その後、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１６７．０１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～６２％、８分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０ｍｇ、５５．０５μｍｏｌ、３２．９６％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３１－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１７（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９１（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、６．３１－６．１０（ｍ、３Ｈ）、５．６３（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８４－４．６９（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．２７（ｍ、２Ｈ）、４．１３－４．００（ｍ、３Ｈ）、４．００－３．９０（ｍ、４Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０２（ｍ、５Ｈ）、２．８１－２．５３（ｍ、１１Ｈ）、２．１５－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．７９（ｍ、５Ｈ）、１．７６－１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．６６－１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．５４－１．３４（ｍ、２Ｈ）。
【0116】
実施例１５．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１５）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．０９ｇ、５．７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、３５．７０％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．３
【化24】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１．４０ｇ、１０．８２ｍｍｏｌ、１．８８ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル４－（３－アミノフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．０９ｇ、５．７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、３５．７０％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．３
【0117】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－メチル－アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＨＣＨＯ（１９３．２４ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ、１７７．２８μＬ、３７％純度）溶液にＨＯＡｃ（７．７３ｍｇ、１２８．７１μｍｏｌ、７．３６μＬ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１２１．３３ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、メタノールを除去した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－メチル－アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、６９３．１９μｍｏｌ、５３．８６％収率、９３％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０３．３
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＨＣＨＯ（１９３．２４ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ、１７７．２８μＬ、３７％純度）溶液にＨＯＡｃ（７．７３ｍｇ、１２８．７１μｍｏｌ、７．３６μＬ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１２１．３３ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、メタノールを除去した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－メチル－アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、６９３．１９μｍｏｌ、５３．８６％収率、９３％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０３．３
【0118】
段階３．３－（メチル（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
【0119】
ジオキサン（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－［３－［（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－メチル－アミノ］フェニル］ピペラジン－１－カルボキシレート（２５０ｍｇ、６２１．１４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０．００ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を濃縮し、３－（メチル（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．３
【0120】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（７）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（メチル（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＩ（９９．１５ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４２７．４３ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ、５７６．０５μＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（３－クロロプロパノイル）－４－ピペリジル］カルバメート（１９２．３４ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８７．４１μｍｏｌ、４３．４５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．１
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（メチル（３－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＩ（９９．１５ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４２７．４３ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ、５７６．０５μＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－［１－（３－クロロプロパノイル）－４－ピペリジル］カルバメート（１９２．３４ｍｇ、６６１．４４μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８７．４１μｍｏｌ、４３．４５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．１
【0121】
段階５．３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．７１μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（２６２．１７ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ、１７０．２４μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．１
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．７１μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（２６２．１７ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ、１７０．２４μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．１
【0122】
段階６．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１５）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、１４２．３６μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液にＨＡＴＵ（６４．９６ｍｇ、１７０．８４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（９２．００ｍｇ、７１１．８１μｍｏｌ、１２３．９９μＬ）および４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６３．７０ｍｇ、１４２．３６μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（３２ｍｇ、３３．９５μｍｏｌ、２３．８５％収率、９４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．６
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．９９（ｔ、Ｊ＝８．１３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．３６－６．２２（ｍ、３Ｈ）、４．９９－４．７２（ｍ、１Ｈ）、４．８１－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．２３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．００ Ｈｚ、３Ｈ）、３．９８－３．９０（ｍ、４Ｈ）、３．２７（ｓ、３Ｈ）、３．１７－３．０８（ｍ、５Ｈ）、２．９１－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．７７－２．５５（ｍ、１３Ｈ）、２．３１－２．２２（ｍ、１Ｈ）、２．０２－１．８１（ｍ、５Ｈ）１．７７－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．５１－１．３３（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、１４２．３６μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液にＨＡＴＵ（６４．９６ｍｇ、１７０．８４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（９２．００ｍｇ、７１１．８１μｍｏｌ、１２３．９９μＬ）および４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６３．７０ｍｇ、１４２．３６μｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（３２ｍｇ、３３．９５μｍｏｌ、２３．８５％収率、９４％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８６．６
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７０ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．９９（ｔ、Ｊ＝８．１３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．３６－６．２２（ｍ、３Ｈ）、４．９９－４．７２（ｍ、１Ｈ）、４．８１－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．２３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．００ Ｈｚ、３Ｈ）、３．９８－３．９０（ｍ、４Ｈ）、３．２７（ｓ、３Ｈ）、３．１７－３．０８（ｍ、５Ｈ）、２．９１－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．７７－２．５５（ｍ、１３Ｈ）、２．３１－２．２２（ｍ、１Ｈ）、２．０２－１．８１（ｍ、５Ｈ）１．７７－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．５１－１．３３（ｍ、２Ｈ）。
【0123】
実施例１６．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１６）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）の攪拌液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．９５ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（２．８４ｇ、３３．８６ｍｍｏｌ、１．３２ｍＬ）を添加し、混合物を８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（６０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（５０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～７０％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６７０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、４６．２５％収率、９５％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０６．９
【化25】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）の攪拌液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．９５ｇ、１０．１６ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（２．８４ｇ、３３．８６ｍｍｏｌ、１．３２ｍＬ）を添加し、混合物を８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（６０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（５０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～７０％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６７０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、４６．２５％収率、９５％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０６．９
【0124】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６２０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（１８５．６８ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ、１７０．３５μＬ、３７％純度）溶液に酢酸（９．１６ｍｇ、１５２．５４μｍｏｌ、８．７２μＬ）を添加し、反応物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（１４３．７９ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。生成された混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～７０％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２００ｍｇ、４３７．６０μｍｏｌ、２８．６９％収率、９２％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２０．８
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６２０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（１８５．６８ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ、１７０．３５μＬ、３７％純度）溶液に酢酸（９．１６ｍｇ、１５２．５４μｍｏｌ、８．７２μＬ）を添加し、反応物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（１４３．７９ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。生成された混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～７０％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２００ｍｇ、４３７．６０μｍｏｌ、２８．６９％収率、９２％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２０．８
【0125】
段階３．３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１００ｍｇ、２３７．８３μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．１
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１００ｍｇ、２３７．８３μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．１
【0126】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、２２４．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９７．７９ｍｇ、３３６．３０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８６．９３ｍｇ、６７２．６０μｍｏｌ、１１７．１６μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１６１．８３μｍｏｌ、７２．１８％収率、９３％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７５．４
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、２２４．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９７．７９ｍｇ、３３６．３０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８６．９３ｍｇ、６７２．６０μｍｏｌ、１１７．１６μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１６１．８３μｍｏｌ、７２．１８％収率、９３％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７５．４
【0127】
段階５．３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１７４．０１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４３．５０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ、８９．９６％収率、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７５．３
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１７４．０１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４３．５０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ、８９．９６％収率、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７５．３
【0128】
段階６．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１６）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０．０４ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８９．２９ｍｇ、２３４．８２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６０．７０ｍｇ、４６９．６４μｍｏｌ、８１．８０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５１．２ｍｇ、５４．９４μｍｏｌ、３５．０９％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０４．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．８８（ｔ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７２－６．６３（ｍ、１Ｈ）、６．５７－６．４８（ｍ、１Ｈ）、４．８５－４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．４３－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、３Ｈ）、３．９８－３．８９（ｍ、４Ｈ）、３．３１（ｓ、３Ｈ）、３．１９－３．０８（ｍ、１Ｈ）、２．９３－２．７７（ｍ、５Ｈ）、２．７３－２．６３（ｍ、５Ｈ）、２．５９－２．５４（ｍ、７Ｈ）、２．３１－２．２０（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．８０（ｍ、５Ｈ）、１．７７－１．５２（ｍ、７Ｈ）、１．５１－１．３４（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０．０４ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８９．２９ｍｇ、２３４．８２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６０．７０ｍｇ、４６９．６４μｍｏｌ、８１．８０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。３－（（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、１５６．５５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５１．２ｍｇ、５４．９４μｍｏｌ、３５．０９％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０４．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．８８（ｔ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７２－６．６３（ｍ、１Ｈ）、６．５７－６．４８（ｍ、１Ｈ）、４．８５－４．７１（ｍ、２Ｈ）、４．４３－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、３Ｈ）、３．９８－３．８９（ｍ、４Ｈ）、３．３１（ｓ、３Ｈ）、３．１９－３．０８（ｍ、１Ｈ）、２．９３－２．７７（ｍ、５Ｈ）、２．７３－２．６３（ｍ、５Ｈ）、２．５９－２．５４（ｍ、７Ｈ）、２．３１－２．２０（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．８０（ｍ、５Ｈ）、１．７７－１．５２（ｍ、７Ｈ）、１．５１－１．３４（ｍ、２Ｈ）。
【0129】
実施例１７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１７）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２ｇ、６．７７ｍｍｏｌ）の混合物に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（２．６０ｇ、１３．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（２．８４ｇ、３３．８６ｍｍｏｌ、１．３２ｍＬ）を添加し、８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１２０ｍＬ）で希釈し、水相を酢酸エチル（１２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、３６．３３％収率、１００％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０７．０
【化26】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２ｇ、６．７７ｍｍｏｌ）の混合物に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（２．６０ｇ、１３．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（２．８４ｇ、３３．８６ｍｍｏｌ、１．３２ｍＬ）を添加し、８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（１２０ｍＬ）で希釈し、水相を酢酸エチル（１２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、３６．３３％収率、１００％純度）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０７．０
【0130】
段階２．３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０６．９
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０６．９
【0131】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（５３２．７７ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）溶液にＮａＯＡｃ（３８２．８９ｍｇ、４．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、ＮａＢＨ３ＣＮ（４３９．９７ｍｇ、７．００ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって２回精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０＊４０ｍｍ＊１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３５０ｍｇ、６６１．３７μｍｏｌ、２８．３４％収率、９８％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１９．４
メタノール（２０ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（５３２．７７ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）溶液にＮａＯＡｃ（３８２．８９ｍｇ、４．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、ＮａＢＨ３ＣＮ（４３９．９７ｍｇ、７．００ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって２回精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０＊４０ｍｍ＊１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３５０ｍｇ、６６１．３７μｍｏｌ、２８．３４％収率、９８％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１９．４
【0132】
段階４．３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３５０ｍｇ、６７４．８６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１９．２
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３５０ｍｇ、６７４．８６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１９．２
【0133】
段階５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１７）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２７６．９６ｍｇ、６５７．２４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３７４．８５ｍｇ、９８５．８６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２５４．８３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、３４３．４４μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８ １５０＊５０ｍｍ＊１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％、１０分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２０７．１ｍｇ、２４９．４６μｍｏｌ、３７．９６％収率、９９％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２２．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．３３－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４８－７．３９（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．４ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４７（ｍ、１Ｈ）、６．４５－６．３９（ｍ、１Ｈ）、５．８０（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９３－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．３１－４．２１（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０５－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．９０－２．８０（ｍ、４Ｈ）、２．８０－２．６８（ｍ、３Ｈ）、２．６０－２．５１（ｍ、５Ｈ）、２．２３－２．１６（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０３（ｍ、１Ｈ）、１．９２－１．８１（ｍ、１Ｈ）、１．８０－１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．６０－１．４６（ｍ、１Ｈ）、１．３１－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２７６．９６ｍｇ、６５７．２４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３７４．８５ｍｇ、９８５．８６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２５４．８３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、３４３．４４μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８ １５０＊５０ｍｍ＊１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％、１０分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２０７．１ｍｇ、２４９．４６μｍｏｌ、３７．９６％収率、９９％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２２．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．３３－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４８－７．３９（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．４ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４７（ｍ、１Ｈ）、６．４５－６．３９（ｍ、１Ｈ）、５．８０（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９３－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．３１－４．２１（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０５－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．９０－２．８０（ｍ、４Ｈ）、２．８０－２．６８（ｍ、３Ｈ）、２．６０－２．５１（ｍ、５Ｈ）、２．２３－２．１６（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０３（ｍ、１Ｈ）、１．９２－１．８１（ｍ、１Ｈ）、１．８０－１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．６０－１．４６（ｍ、１Ｈ）、１．３１－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
【0134】
実施例１８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１８）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＡＣＮ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．２９ｇ、２８．２４ｍｍｏｌ）および１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロベンゼン（５ｇ、２８．２４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（７．８０ｇ、５６．４７ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を１６時間５０℃まで昇温した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を２０ｏＣで１０分間ＭＴＢＥ（４０ｍＬ）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．５ｇ、２７．６７ｍｍｏｌ、９８．００％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８８．０
【化27】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＡＣＮ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．２９ｇ、２８．２４ｍｍｏｌ）および１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロベンゼン（５ｇ、２８．２４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（７．８０ｇ、５６．４７ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を１６時間５０℃まで昇温した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣を２０ｏＣで１０分間ＭＴＢＥ（４０ｍＬ）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．５ｇ、２７．６７ｍｍｏｌ、９８．００％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８８．０
【0135】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
メタノール（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．５ｇ、２７．６７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした。その後、２０℃でＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下、２０時間攪拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたこととより大きい極性の新たな主要なスポットを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（８ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１４．２
メタノール（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．５ｇ、２７．６７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした。その後、２０℃でＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下、２０時間攪拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたこととより大きい極性の新たな主要なスポットを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（８ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１４．２
【0136】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ジオキサン（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．１９ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１．５４ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（３．１２ｇ、９．５７ｍｍｏｌ）の混合物を窒素とともに１５分間脱気した。ＸＰｈｏｓ（１５２．１４ｍｇ、３１９．１４μｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（２９２．２４ｍｇ、３１９．１４μｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素とともに５分間脱気した。生成された混合物をＮ２気体下、１６時間１００℃まで昇温した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．９ｇ、３．０６ｍｍｏｌ、９５．８２％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０３．２
ジオキサン（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、３．１９ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１．５４ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（３．１２ｇ、９．５７ｍｍｏｌ）の混合物を窒素とともに１５分間脱気した。ＸＰｈｏｓ（１５２．１４ｍｇ、３１９．１４μｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（２９２．２４ｍｇ、３１９．１４μｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素とともに５分間脱気した。生成された混合物をＮ２気体下、１６時間１００℃まで昇温した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．９ｇ、３．０６ｍｍｏｌ、９５．８２％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０３．２
【0137】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７）の合成
【0138】
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．９ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物を２０℃でＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．３ｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２５．２
【0139】
段階５．３－（（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０６．８１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２５．１
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０６．８１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２５．１
【0140】
段階６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１０）の合成
メタノール（４ｍＬ）中の３－（（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、６９２．９３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１５８．１９ｍｇ、６９２．９３μｍｏｌ）溶液にＮａＯＡｃ（１１３．６９ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１３０．６４ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１２０．５３μｍｏｌ、１７．３９％収率、９８％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３７．３
メタノール（４ｍＬ）中の３－（（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、６９２．９３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１５８．１９ｍｇ、６９２．９３μｍｏｌ）溶液にＮａＯＡｃ（１１３．６９ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１３０．６４ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１２０．５３μｍｏｌ、１７．３９％収率、９８％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３７．３
【0141】
段階７．３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１２２．９９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３７．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１２２．９９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３７．３
【0142】
段階８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１８）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４９．７５ｍｇ、１１８．０７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．３４ｍｇ、１７７．１１μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５．７８ｍｇ、３５４．２１μｍｏｌ、６１．７０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、１１８．０７μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１６．４ｍｇ、１８．９４μｍｏｌ、１６．０４％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４０．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝８．７３（ｓ、１Ｈ）、８．４７（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．０７（ｓ、１Ｈ）、７．８０－７．６１（ｍ、２Ｈ）、７．４６－７．３０（ｍ、２Ｈ）、６．３３－６．２１（ｍ、２Ｈ）、５．０７－４．８９（ｍ、２Ｈ）、４．１８－４．０９（ｍ、１Ｈ）、４．０２－３．８９（ｍ、５Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１５－３．０８（ｍ、２Ｈ）、３．０６－２．９９（ｍ、４Ｈ）、２．７７－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．５１－２．４２（ｍ、４Ｈ）、２．２７－２．２２（ｍ、３Ｈ）、１．９０－１．８６（ｍ、１Ｈ）、１．８４－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．６４－１．４９（ｍ、１Ｈ）、１．３６－１．２４（ｍ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４９．７５ｍｇ、１１８．０７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．３４ｍｇ、１７７．１１μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５．７８ｍｇ、３５４．２１μｍｏｌ、６１．７０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６５ｍｇ、１１８．０７μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１６．４ｍｇ、１８．９４μｍｏｌ、１６．０４％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４０．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝８．７３（ｓ、１Ｈ）、８．４７（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．０７（ｓ、１Ｈ）、７．８０－７．６１（ｍ、２Ｈ）、７．４６－７．３０（ｍ、２Ｈ）、６．３３－６．２１（ｍ、２Ｈ）、５．０７－４．８９（ｍ、２Ｈ）、４．１８－４．０９（ｍ、１Ｈ）、４．０２－３．８９（ｍ、５Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．１５－３．０８（ｍ、２Ｈ）、３．０６－２．９９（ｍ、４Ｈ）、２．７７－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．５１－２．４２（ｍ、４Ｈ）、２．２７－２．２２（ｍ、３Ｈ）、１．９０－１．８６（ｍ、１Ｈ）、１．８４－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．６４－１．４９（ｍ、１Ｈ）、１．３６－１．２４（ｍ、８Ｈ）。
【0143】
実施例１９．Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物１９）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２－クロロ－１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（５ｇ、２８．４８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（５．８４ｇ、３１．３３ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（７．８７ｇ、５６．９７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより２－クロロ－１－フルオロ－４－ニトロベンゼンが完全に消費されたことと所望の質量８８％を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣を１０分間ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で粉砕し、懸濁液をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．１８ｇ、２６．８６ｍｍｏｌ、９４．３０％収率）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８６．１
【化28】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２－クロロ－１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（５ｇ、２８．４８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（５．８４ｇ、３１．３３ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（７．８７ｇ、５６．９７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより２－クロロ－１－フルオロ－４－ニトロベンゼンが完全に消費されたことと所望の質量８８％を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣を１０分間ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で粉砕し、懸濁液をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．１８ｇ、２６．８６ｍｍｏｌ、９４．３０％収率）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８６．１
【0144】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
メタノール（９０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．１８ｇ、２６．８６ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（７．５０ｇ、１３４．２９ｍｍｏｌ）、ＮＨ４Ｃｌ（７．１８ｇ、１３４．２９ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（９ｍＬ）を添加し、混合物を７０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量９１％を確認した。反応混合物をＨＣｌ溶液（１Ｍ、２００ｍＬ）に注ぎ、生成された混合物にＫ２ＣＯ３を添加し、ｐＨ＞１２に調整し、懸濁液をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を真空濃縮し、メタノールの大部分を除去した。残渣をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．９１ｇ、９．３３ｍｍｏｌ、３４．７５％収率）を黒色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．１
メタノール（９０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９．１８ｇ、２６．８６ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（７．５０ｇ、１３４．２９ｍｍｏｌ）、ＮＨ４Ｃｌ（７．１８ｇ、１３４．２９ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（９ｍＬ）を添加し、混合物を７０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量９１％を確認した。反応混合物をＨＣｌ溶液（１Ｍ、２００ｍＬ）に注ぎ、生成された混合物にＫ２ＣＯ３を添加し、ｐＨ＞１２に調整し、懸濁液をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を真空濃縮し、メタノールの大部分を除去した。残渣をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．９１ｇ、９．３３ｍｍｏｌ、３４．７５％収率）を黒色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．１
【0145】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（９２３．７０ｍｇ、４．８１ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．３５ｇ、１６．０４ｍｍｏｌ、６２３．６６μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３９％のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが残っていることと所望の質量５９％を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５０ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１２～２６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０９．３８μｍｏｌ、４４．２４％収率）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３．２
ＤＭＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５００ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（９２３．７０ｍｇ、４．８１ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．３５ｇ、１６．０４ｍｍｏｌ、６２３．６６μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３９％のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－クロロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが残っていることと所望の質量５９％を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５０ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１２～２６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０９．３８μｍｏｌ、４４．２４％収率）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３．２
【0146】
段階４．３－（（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０９．３８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量８８％を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２３．２
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３００ｍｇ、７０９．３８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量８８％を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、ＨＣｌ塩）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２３．２
【0147】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８）の合成
メタノール（５ｍＬ）中の３－（（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２７０ｍｇ、７５１．５７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０．２０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１８４．９６ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の混合物を１５℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（２８３．３８ｍｇ、４．５１ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量７６％を確認した。反応混合物を他のバッチ（１５０ｍｇスケール）と合わせ、合わせた混合物をろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５５ｍｇ、７１．９５μｍｏｌ、９．５７％収率、７０％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３５．３
メタノール（５ｍＬ）中の３－（（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２７０ｍｇ、７５１．５７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０．２０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１８４．９６ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の混合物を１５℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（２８３．３８ｍｇ、４．５１ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量７６％を確認した。反応混合物を他のバッチ（１５０ｍｇスケール）と合わせ、合わせた混合物をろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５５ｍｇ、７１．９５μｍｏｌ、９．５７％収率、７０％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３５．３
【0148】
段階６．３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０．００ｍｇ、６５．４１μｍｏｌ、７０％純度）溶液にＴＦＡ（７４．５８ｍｇ、６５４．１１μｍｏｌ、４８．４３μＬ）を０℃で添加し、１５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４２％の出発物質が残っていることと所望の質量３２％を確認した。さらにＴＦＡ（７４．５８ｍｇ、６５４．１１μｍｏｌ、４８．４３μＬ）を添加し、生成された混合物を１５℃でさらに４時間攪拌した後、ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．０
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０．００ｍｇ、６５．４１μｍｏｌ、７０％純度）溶液にＴＦＡ（７４．５８ｍｇ、６５４．１１μｍｏｌ、４８．４３μＬ）を０℃で添加し、１５℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４２％の出発物質が残っていることと所望の質量３２％を確認した。さらにＴＦＡ（７４．５８ｍｇ、６５４．１１μｍｏｌ、４８．４３μＬ）を添加し、生成された混合物を１５℃でさらに４時間攪拌した後、ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．０
【0149】
段階７．Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物１９）の合成
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２５ｍｇ、５９．３３μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３３．８４ｍｇ、８８．９９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１１５．０１ｍｇ、８８９．９０μｍｏｌ、１５５．００μＬ）を添加し、混合物を１５℃で１５分間攪拌した後、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、９１．０８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液を添加し、生成された混合物を１５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（１５．０ｍｇ、１６．６４μｍｏｌ、２８．０５％収率、９３％純度）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、９．３４－９．１６（ｍ、１Ｈ）、８．３６－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．３８（ｍ、２Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝２．５ Ｈｚ、１Ｈ）、６．６０（ｄｄ、Ｊ＝２．５、８．６ Ｈｚ、１Ｈ）、５．８６（ｄ、Ｊ＝７．９ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．３６－４．１９（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．４ Ｈｚ、２Ｈ）、２．８４（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．７５（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝５．２、１１．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７２－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５１（ｍ、５Ｈ）、２．２１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０７（ｄｔ、Ｊ＝５．０、８．５ Ｈｚ、１Ｈ）、１．９３－１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．０ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５７－１．４６（ｍ、１Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２５ｍｇ、５９．３３μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３３．８４ｍｇ、８８．９９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１１５．０１ｍｇ、８８９．９０μｍｏｌ、１５５．００μＬ）を添加し、混合物を１５℃で１５分間攪拌した後、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、９１．０８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液を添加し、生成された混合物を１５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（１５．０ｍｇ、１６．６４μｍｏｌ、２８．０５％収率、９３％純度）をオフホワイト（ｏｆｆ－ｗｈｉｔｅ）固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、９．３４－９．１６（ｍ、１Ｈ）、８．３６－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．３８（ｍ、２Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝２．５ Ｈｚ、１Ｈ）、６．６０（ｄｄ、Ｊ＝２．５、８．６ Ｈｚ、１Ｈ）、５．８６（ｄ、Ｊ＝７．９ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．３６－４．１９（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．４ Ｈｚ、２Ｈ）、２．８４（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．７５（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝５．２、１１．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７２－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５１（ｍ、５Ｈ）、２．２１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０７（ｄｔ、Ｊ＝５．０、８．５ Ｈｚ、１Ｈ）、１．９３－１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．０ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５７－１．４６（ｍ、１Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、８Ｈ）。
【0150】
実施例２０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２０）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（５ｇ、２６．７０ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（８．１１ｇ、８０．１１ｍｍｏｌ）およびＴｏｓＣｌ（７．１３ｇ、３７．３９ｍｍｏｌ）を２０℃で添加し、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７６％）を確認した。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（７．５ｇ、２１．７５ｍｍｏｌ、８１．４４％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８６．２
【化29】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（５ｇ、２６．７０ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（８．１１ｇ、８０．１１ｍｍｏｌ）およびＴｏｓＣｌ（７．１３ｇ、３７．３９ｍｍｏｌ）を２０℃で添加し、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７６％）を確認した。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（７．５ｇ、２１．７５ｍｍｏｌ、８１．４４％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２８６．２
【0151】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（５ｇ、１４．６４ｍｍｏｌ）およびベンジルピペリジン－４－イルカルバメート（４．４６ｇ、１９．０４ｍｍｏｌ）溶液にＮａＩ（４３９．０３ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５．６８ｇ、４３．９３ｍｍｏｌ、７．６５ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７８％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：黄色の油状物としてｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（４．９ｇ、１２．１４ｍｍｏｌ、８２．９２％収率）、およびバッチ２：黄色の油状物としてｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１．７ｇ、４．２１ｍｍｏｌ、２８．７７％収率）ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０４．４
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（トシルオキシ）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（５ｇ、１４．６４ｍｍｏｌ）およびベンジルピペリジン－４－イルカルバメート（４．４６ｇ、１９．０４ｍｍｏｌ）溶液にＮａＩ（４３９．０３ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５．６８ｇ、４３．９３ｍｍｏｌ、７．６５ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７８％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：黄色の油状物としてｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（４．９ｇ、１２．１４ｍｍｏｌ、８２．９２％収率）、およびバッチ２：黄色の油状物としてｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１．７ｇ、４．２１ｍｍｏｌ、２８．７７％収率）ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０４．４
【0152】
段階３．ベンジル（１－（アゼチジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（４）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（４．９ｇ、１２．１４ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．１５ｇ、３６．４３ｍｍｏｌ、２．７０ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が確認されないため、ＴＦＡ（５．５４ｇ、４８．５７ｍｍｏｌ、３．６０ｍＬ）をさらに添加し、反応混合物を２０℃でさらに１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより５６％の出発物質が残っていることと所望の質量の２９％ピークを確認し、反応混合物を２０℃でさらに３２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物をワークアップのために、他のバッチ（１．７ｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（１－（アゼチジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３．９ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０４．４
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（４．９ｇ、１２．１４ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．１５ｇ、３６．４３ｍｍｏｌ、２．７０ｍＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が確認されないため、ＴＦＡ（５．５４ｇ、４８．５７ｍｍｏｌ、３．６０ｍＬ）をさらに添加し、反応混合物を２０℃でさらに１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより５６％の出発物質が残っていることと所望の質量の２９％ピークを確認し、反応混合物を２０℃でさらに３２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物をワークアップのために、他のバッチ（１．７ｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（１－（アゼチジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３．９ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０４．４
【0153】
段階４．ベンジル（１－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（１－（アゼチジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．９４ｇ、９．４３ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＫ２ＣＯ３（２．６１ｇ、１８．８６ｍｍｏｌ）および１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（１ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、６９４．４４μＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を４０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼンが残っていることと新たな一つのスポットが形成されることを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（１－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ、３９．５５％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．３
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（１－（アゼチジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．９４ｇ、９．４３ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＫ２ＣＯ３（２．６１ｇ、１８．８６ｍｍｏｌ）および１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（１ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、６９４．４４μＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を４０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼンが残っていることと新たな一つのスポットが形成されることを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（１－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ、３９．５５％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．３
【0154】
段階５．ベンジル（１－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
エタノール（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（８３２．９８ｍｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（７９７．８７ｍｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７０％）を確認した。混合物のｐＨを飽和炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝１０に調整し、生成された混合物を酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、ベンジル（１－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２６ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、９０．３０％収率）をオレンジ色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１３．２
エタノール（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（８３２．９８ｍｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（７９７．８７ｍｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（７０％）を確認した。混合物のｐＨを飽和炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝１０に調整し、生成された混合物を酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、ベンジル（１－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２６ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ、９０．３０％収率）をオレンジ色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１３．２
【0155】
段階６．ベンジル（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（７）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２６ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．２９ｇ、６．７３ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．８９ｇ、２２．４５ｍｍｏｌ、８７３．０７μＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（３９％）を確認した。反応混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５４５ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ、４６．３７％収率）を緑色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２４．２
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（９２６ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．２９ｇ、６．７３ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．８９ｇ、２２．４５ｍｍｏｌ、８７３．０７μＬ）を２０℃で添加し、生成された混合物を８５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（３９％）を確認した。反応混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５４５ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ、４６．３７％収率）を緑色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２４．２
【0156】
段階７．３－（（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３８１．９７μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物を２０℃でＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、３－（（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２０１ｍｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９０．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３８１．９７μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物を２０℃でＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、３－（（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２０１ｍｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９０．２
【0157】
段階８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２０）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１８９．８４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７９．４０ｍｇ、２０８．８３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７３．６１ｍｇ、５６９．５３μｍｏｌ、９９．２０μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１４７．８８ｍｇ、３７９．６９μｍｏｌ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１２ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）の後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（３２ｍｇ、３４．５２μｍｏｌ、１８．１８％収率、８８％純度、０．５ＦＡ塩）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７９３．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７５（ｓ、１Ｈ）、８．３４－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１５－８．１０（ｂｒ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．５２－６．４４（ｍ、１Ｈ）、６．４３－６．３２（ｍ、２Ｈ）、５．５３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．１ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９３－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．２３－４．１４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｂｒ ｔ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、２Ｈ）、３．８２－３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．４２－３．３４（ｍ、５Ｈ）、２．９１－２．７９（ｍ、３Ｈ）、２．７７－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．５８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．１ Ｈｚ、３Ｈ）、２．１２－２．０１（ｍ、３Ｈ）、１．８９－１．７４（ｍ、３Ｈ）、１．６５－１．５２（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１８９．８４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７９．４０ｍｇ、２０８．８３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７３．６１ｍｇ、５６９．５３μｍｏｌ、９９．２０μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１４７．８８ｍｇ、３７９．６９μｍｏｌ）溶液を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１２ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）の後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（３２ｍｇ、３４．５２μｍｏｌ、１８．１８％収率、８８％純度、０．５ＦＡ塩）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７９３．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７５（ｓ、１Ｈ）、８．３４－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１５－８．１０（ｂｒ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．５２－６．４４（ｍ、１Ｈ）、６．４３－６．３２（ｍ、２Ｈ）、５．５３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．１ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９３－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．２３－４．１４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｂｒ ｔ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、２Ｈ）、３．８２－３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．４２－３．３４（ｍ、５Ｈ）、２．９１－２．７９（ｍ、３Ｈ）、２．７７－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．５８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．１ Ｈｚ、３Ｈ）、２．１２－２．０１（ｍ、３Ｈ）、１．８９－１．７４（ｍ、３Ｈ）、１．６５－１．５２（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
【0158】
実施例２１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２１）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の１－フルオロ－４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）ベンゼン（５ｇ、２３．９１ｍｍｏｌ、３．２９ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（４．９０ｇ、２６．３０ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（６．６１ｇ、４７．８２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７．１ｇ、１８．９２ｍｍｏｌ、７９．１１％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３２０．１
【化30】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の１－フルオロ－４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）ベンゼン（５ｇ、２３．９１ｍｍｏｌ、３．２９ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（４．９０ｇ、２６．３０ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（６．６１ｇ、４７．８２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ×５）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７．１ｇ、１８．９２ｍｍｏｌ、７９．１１％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３２０．１
【0159】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７．１ｇ、１８．９２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）をＮ２下で添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を１５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９９％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１００ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．０８ｇ、１７．６０ｍｍｏｌ、９３．０７％収率）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４６．１
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７．１ｇ、１８．９２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）をＮ２下で添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を１５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピーク（９９％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１００ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．０８ｇ、１７．６０ｍｍｏｌ、９３．０７％収率）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４６．１
【0160】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ジオキサン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（８００ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１．１１ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．２６ｇ、６．９５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２１２．１２ｍｇ、２３１．６４μｍｏｌ）およびＸＰｈｏｓ（１１０．４３ｍｇ、２３１．６４μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃でＮ２下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが完全に消費されたことと所望の質量のピーク（５６％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．４３ｇ、２．２５ｍｍｏｌ、９７．２７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６３５．２
ジオキサン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（８００ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１．１１ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．２６ｇ、６．９５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２１２．１２ｍｇ、２３１．６４μｍｏｌ）およびＸＰｈｏｓ（１１０．４３ｍｇ、２３１．６４μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃でＮ２下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが完全に消費されたことと所望の質量のピーク（５６％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１．４３ｇ、２．２５ｍｍｏｌ、９７．２７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６３５．２
【0161】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９３０ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＣＯＯＨ（８．８０ｍｇ、１４６．５３μｍｏｌ、８．３８μＬ）溶液にＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）をＮ２下で添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を１５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（５５％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５９０ｍｇ）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９３０ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＣＯＯＨ（８．８０ｍｇ、１４６．５３μｍｏｌ、８．３８μＬ）溶液にＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）をＮ２下で添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を１５℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（５５％）を確認した。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５９０ｍｇ）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５７．２
【0162】
段階５．３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５９０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６９％）を確認した。残渣を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２３％、１１分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２４０ｍｇ、６１０．９９μｍｏｌ、４７．２７％収率、ＨＣｌ塩）を明るい褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５７．０
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．２２－１０．４１（ｍ、１Ｈ）、８．３３（ｓ、１Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝８．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１－６．７９（ｍ、２Ｈ）、６．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．０ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４３－４．３４（ｍ、１Ｈ）、２．９３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．８４－２．７５（ｍ、４Ｈ）、２．７５－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．５８（ｔｄ、Ｊ＝４．０、１７．４ Ｈｚ、１Ｈ）、２．１３－２．０１（ｍ、１Ｈ）、１．９０（ｄｑ、Ｊ＝４．６、１２．２ Ｈｚ、１Ｈ）。
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５９０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６９％）を確認した。残渣を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２３％、１１分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２４０ｍｇ、６１０．９９μｍｏｌ、４７．２７％収率、ＨＣｌ塩）を明るい褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５７．０
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．２２－１０．４１（ｍ、１Ｈ）、８．３３（ｓ、１Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝８．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１－６．７９（ｍ、２Ｈ）、６．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．０ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４３－４．３４（ｍ、１Ｈ）、２．９３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．８４－２．７５（ｍ、４Ｈ）、２．７５－２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．５８（ｔｄ、Ｊ＝４．０、１７．４ Ｈｚ、１Ｈ）、２．１３－２．０１（ｍ、１Ｈ）、１．９０（ｄｑ、Ｊ＝４．６、１２．２ Ｈｚ、１Ｈ）。
【0163】
段階６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１０）の合成
メタノール（８ｍＬ）中の３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２４０ｍｇ、６１０．９９μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（４８８．１９ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１５０．３７ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）溶液を１５℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１５３．５８ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を真空濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ Ｃ１８ １５０×２５×１０μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２３４．３８μｍｏｌ、３８．３６％収率、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６９．３
メタノール（８ｍＬ）中の３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２４０ｍｇ、６１０．９９μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（４８８．１９ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（１５０．３７ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）溶液を１５℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１５３．５８ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を真空濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ Ｃ１８ １５０×２５×１０μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２３４．３８μｍｏｌ、３８．３６％収率、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６９．３
【0164】
段階７．３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２１９．７３μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＴＦＡ（２５０．５４ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ、１６２．６９μＬ）を添加し、混合物を１５℃で５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（５３％）を確認した。反応混合物をＮ２でバブリングし、ほとんどの溶媒を除去し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６９．２
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２１９．７３μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＴＦＡ（２５０．５４ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ、１６２．６９μＬ）を添加し、混合物を１５℃で５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（５３％）を確認した。反応混合物をＮ２でバブリングし、ほとんどの溶媒を除去し、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６９．２
【0165】
段階８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８５ｍｇ、２０１．７１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１１５．０４ｍｇ、３０２．５６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３３８．９０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ、４５６．７５μＬ）を添加し、混合物を１５℃で１５分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２９．２５ｍｇ、２２１．８８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を１５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６２％）を確認した。混合物にＣＨ３ＣＯＯＨを添加し、ｐＨ＜７に調整し、生成された混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．１ｍｇ、１２．７７μｍｏｌ、６．３３％収率、９３％純度、０．２ＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、９．２９（ｓ、１Ｈ）、８．３４－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．３３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９－６．８４（ｍ、２Ｈ）、６．３５－６．１２（ｍ、１Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３１（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．０３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．９ Ｈｚ、２Ｈ）、２．９０－２．６９（ｍ、７Ｈ）、２．６１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７－２．５２（ｍ、５Ｈ）、２．１１－２．０５（ｍ、１Ｈ）、１．９７－１．８９（ｍ、１Ｈ）、１．７８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．８ Ｈｚ、２Ｈ）、１．６７－１．５０（ｍ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８５ｍｇ、２０１．７１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１１５．０４ｍｇ、３０２．５６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３３８．９０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ、４５６．７５μＬ）を添加し、混合物を１５℃で１５分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２９．２５ｍｇ、２２１．８８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を１５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量のピーク（６２％）を確認した。混合物にＣＨ３ＣＯＯＨを添加し、ｐＨ＜７に調整し、生成された混合物をろ過し、ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．１ｍｇ、１２．７７μｍｏｌ、６．３３％収率、９３％純度、０．２ＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７２．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、９．２９（ｓ、１Ｈ）、８．３４－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．３３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９－６．８４（ｍ、２Ｈ）、６．３５－６．１２（ｍ、１Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３１（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．０３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．９ Ｈｚ、２Ｈ）、２．９０－２．６９（ｍ、７Ｈ）、２．６１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７－２．５２（ｍ、５Ｈ）、２．１１－２．０５（ｍ、１Ｈ）、１．９７－１．８９（ｍ、１Ｈ）、１．７８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．８ Ｈｚ、２Ｈ）、１．６７－１．５０（ｍ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、８Ｈ）。
【0166】
実施例２２．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２２）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．２５ｇ、７２９．３０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２９０．６４ｍｇ、７２９．３０μｍｏｌ）溶液に２５℃でＤＩＰＥＡ（２８２．７６ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ、３８１．０８μＬ）およびＮａＩ（２１．８６ｍｇ、１４５．８６μｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃で加熱し、２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０ｘ４０ｍｍｘ １５ｕｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３％～３５％、９分）で精製した後、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３３．３
【化31】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．２５ｇ、７２９．３０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２９０．６４ｍｇ、７２９．３０μｍｏｌ）溶液に２５℃でＤＩＰＥＡ（２８２．７６ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ、３８１．０８μＬ）およびＮａＩ（２１．８６ｍｇ、１４５．８６μｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃で加熱し、２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０ｘ４０ｍｍｘ １５ｕｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３％～３５％、９分）で精製した後、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３３．３
【0167】
段階２．３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（３）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８７．７４μｍｏｌ）溶液に２５℃でＴＦＡ（１．２６ｇ、１１．０９ｍｍｏｌ、８２１．０７μＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３３．２
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８７．７４μｍｏｌ）溶液に２５℃でＴＦＡ（１．２６ｇ、１１．０９ｍｍｏｌ、８２１．０７μＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３３．２
【0168】
段階３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２２）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（０．１ｇ、２２３．５０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．９８ｍｇ、２６８．２０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１１５．５４ｍｇ、８９３．９９μｍｏｌ、１５５．７１μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌した。次いで、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（９７．７２ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加した後、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物をろ過した。ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０ｘ５０ｍｍｘ３ｕｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ｘ２５ｍｍｘ ５ｕｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３７％～６７％、８分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６ｍｇ、４０．５１μｍｏｌ、１８．１３％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、９．２８（ｓ、１Ｈ）、８．３５－８．２０（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５１－７．３７（ｍ、２Ｈ）、６．９１－６．７７（ｍ、１Ｈ）、６．５２（ｄｄ、Ｊ＝１．８、１５．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４３（ｄｄ、Ｊ＝１．７、８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、５．８０（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．２６（ｔｄ、Ｊ＝５．５、１１．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、２Ｈ）、２．８６（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．８０－２．６６（ｍ、３Ｈ）、２．５９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝４．１ Ｈｚ、５Ｈ）、２．３８－２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．８０（ｍ、３Ｈ）、１．７７－１．５４（ｍ、８Ｈ）、１．４８－１．２１（ｍ、５Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（０．１ｇ、２２３．５０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．９８ｍｇ、２６８．２０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１１５．５４ｍｇ、８９３．９９μｍｏｌ、１５５．７１μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌した。次いで、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（９７．７２ｍｇ、１７８．８０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加した後、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物をろ過した。ろ過物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０ｘ５０ｍｍｘ３ｕｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ｘ２５ｍｍｘ ５ｕｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３７％～６７％、８分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６ｍｇ、４０．５１μｍｏｌ、１８．１３％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、９．２８（ｓ、１Ｈ）、８．３５－８．２０（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５１－７．３７（ｍ、２Ｈ）、６．９１－６．７７（ｍ、１Ｈ）、６．５２（ｄｄ、Ｊ＝１．８、１５．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４３（ｄｄ、Ｊ＝１．７、８．８ Ｈｚ、１Ｈ）、５．８０（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．２６（ｔｄ、Ｊ＝５．５、１１．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、２Ｈ）、２．８６（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．８０－２．６６（ｍ、３Ｈ）、２．５９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝４．１ Ｈｚ、５Ｈ）、２．３８－２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．１４－２．０４（ｍ、１Ｈ）、２．００－１．８０（ｍ、３Ｈ）、１．７７－１．５４（ｍ、８Ｈ）、１．４８－１．２１（ｍ、５Ｈ）。
【0169】
実施例２３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２３）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＳＯ（８０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（６．３ｇ、３９．６０ｍｍｏｌ、４．３７ｍＬ）、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（７．３８ｇ、３９．６０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１６．４２ｇ、１１８．８０ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークが検出された。混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（８０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２６．０
【化32】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＳＯ（８０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（６．３ｇ、３９．６０ｍｍｏｌ、４．３７ｍＬ）、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（７．３８ｇ、３９．６０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１６．４２ｇ、１１８．８０ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークが検出された。混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（８０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２６．０
【0170】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＴＨＦ（３００ｍＬ）およびメタノール（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１３ｇ、３９．９６ｍｍｏｌ）溶液に窒素Ｎ２気体下、２５℃でＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を添加した。反応混合物をＨ２下で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物をセライトパッドでろ過した後、ろ過物を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１２ｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９６．１
ＴＨＦ（３００ｍＬ）およびメタノール（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１３ｇ、３９．９６ｍｍｏｌ）溶液に窒素Ｎ２気体下、２５℃でＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を添加した。反応混合物をＨ２下で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物をセライトパッドでろ過した後、ろ過物を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１２ｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９６．１
【0171】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＡＣＮ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６５０．１１ｍｇ、３．３９ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（７１１．０７ｍｇ、８．４６ｍｍｏｌ、３２９．２０μＬ）の混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより大部分の出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（１４％）が検出された。さらに２５℃で３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（３２５．０５ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２６．６４ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、１９７．５２μＬ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（４４％）が検出された。さらに２５℃で３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４８７．５８ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２６．６４ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、１９７．５２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１２時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（６５％）が検出された。反応混合物をろ過ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ過物を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．５ｇ、粗製）を緑色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０７．２
ＡＣＮ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６５０．１１ｍｇ、３．３９ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（７１１．０７ｍｇ、８．４６ｍｍｏｌ、３２９．２０μＬ）の混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより大部分の出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（１４％）が検出された。さらに２５℃で３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（３２５．０５ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２６．６４ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、１９７．５２μＬ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（４４％）が検出された。さらに２５℃で３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４８７．５８ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２６．６４ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ、１９７．５２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１２時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が依然として残っており、所望の質量のピーク（６５％）が検出された。反応混合物をろ過ケーキを酢酸エチル（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ過物を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．５ｇ、粗製）を緑色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０７．２
【0172】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５）の合成
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．４ｇ、９８４．１３μｍｏｌ）、ＨＣＨＯ（１５９．７３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１４６．５４μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（５９．１０ｍｇ、９８４．１３μｍｏｌ、５６．２８μＬ）の混合物を２５℃で３０分間攪拌した。２５℃でＮａＢＨ３ＣＮ（１８５．５３ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質の質量のピーク（５０％）および所望の質量のピーク（４３％）が検出された。さらに２５℃でＨＣＨＯ（１５９．７３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１４６．５４μＬ、３７％純度）を反応混合物に添加し、さらに１０分間２５℃で攪拌した後 ２５℃でＮａＢＨ３ＣＮ（１２３．６９ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質の質量のピーク（９％）および所望の質量のピーク（８６％）が検出された。反応溶液を濃縮し、有機相を除去した。粗生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した後、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．６ｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２１．０
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．４ｇ、９８４．１３μｍｏｌ）、ＨＣＨＯ（１５９．７３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１４６．５４μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（５９．１０ｍｇ、９８４．１３μｍｏｌ、５６．２８μＬ）の混合物を２５℃で３０分間攪拌した。２５℃でＮａＢＨ３ＣＮ（１８５．５３ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質の質量のピーク（５０％）および所望の質量のピーク（４３％）が検出された。さらに２５℃でＨＣＨＯ（１５９．７３ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１４６．５４μＬ、３７％純度）を反応混合物に添加し、さらに１０分間２５℃で攪拌した後 ２５℃でＮａＢＨ３ＣＮ（１２３．６９ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２５℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質の質量のピーク（９％）および所望の質量のピーク（８６％）が検出された。反応溶液を濃縮し、有機相を除去した。粗生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解した後、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．６ｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２１．０
【0173】
段階５．３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．６ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）溶液に２５℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３６．６２ｍＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．７ｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．４
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．６ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）溶液に２５℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３６．６２ｍＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認した。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．７ｇ、粗製）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．４
【0174】
段階６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５６０．５０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および２－（１－（（ｔｅｒｔ）－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２２３．３７ｍｇ、５６０．５０μｍｏｌ）溶液に２５℃でＤＩＰＥＡ（２１７．３２ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、２９２．８８μＬ）およびＮａＩ（１６．８０ｍｇ、１１２．１０μｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃で加熱し、４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ酢酸エチル（１５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００ｘ２５ｍｍｘ４ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２１％～４１％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４７．４
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５６０．５０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および２－（１－（（ｔｅｒｔ）－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２２３．３７ｍｇ、５６０．５０μｍｏｌ）溶液に２５℃でＤＩＰＥＡ（２１７．３２ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、２９２．８８μＬ）およびＮａＩ（１６．８０ｍｇ、１１２．１０μｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃で加熱し、４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ酢酸エチル（１５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００ｘ２５ｍｍｘ４ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２１％～４１％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、粗製）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４７．４
【0175】
段階７．３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、９１．４６μｍｏｌ）溶液に２５℃でＴＦＡ（６１６．００ｍｇ、５．４０ｍｍｏｌ、０．４ｍＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、９１．４６μｍｏｌ）溶液に２５℃でＴＦＡ（６１６．００ｍｇ、５．４０ｍｍｏｌ、０．４ｍＬ）を添加した。生成された混合物を２５℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．３
【0176】
段階８．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２３）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１１．７５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５０．９９ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５７．７７ｍｇ、４４６．９９μｍｏｌ、７７．８６μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌した。３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０．１２ｍｇ、８９．４０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３４％）が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０ｘ５０ｍｍ×３ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３５．６ｍｇ、３７．３９μｍｏｌ、３３．４６％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７６．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝８．７８－８．６５（ｍ、１Ｈ）、８．４６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．１０（ｓ、１Ｈ）、７．９２－７．７７（ｍ、１Ｈ）、７．７３（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．３０（ｍ、２Ｈ）、７．０１－６．８９（ｍ、１Ｈ）、６．７０－６．５２（ｍ、２Ｈ）、４．９５－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．６０（ｄｄ、Ｊ＝５．１、１２．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３－３．９１（ｍ、５Ｈ）、３．６６－３．４９（ｍ、２Ｈ）、３．４４－３．３５（ｍ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．２１－３．１３（ｍ、５Ｈ）、３．１０－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．７４（ｍ、３Ｈ）、２．７３－２．６４（ｍ、３Ｈ）、２．４０－２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｄｄ、Ｊ＝２．５、５．０、１０．１ Ｈｚ、３Ｈ）、１．８３－１．５５（ｍ、１１Ｈ）、１．５１－１．３３（ｍ、３Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１１．７５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５０．９９ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５７．７７ｍｇ、４４６．９９μｍｏｌ、７７．８６μＬ）を添加した。混合物を２５℃で１０分間攪拌した。３－（（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０．１２ｍｇ、８９．４０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２５℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３４％）が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０ｘ５０ｍｍ×３ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３５．６ｍｇ、３７．３９μｍｏｌ、３３．４６％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７６．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝８．７８－８．６５（ｍ、１Ｈ）、８．４６（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．１０（ｓ、１Ｈ）、７．９２－７．７７（ｍ、１Ｈ）、７．７３（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．３０（ｍ、２Ｈ）、７．０１－６．８９（ｍ、１Ｈ）、６．７０－６．５２（ｍ、２Ｈ）、４．９５－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．６０（ｄｄ、Ｊ＝５．１、１２．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３－３．９１（ｍ、５Ｈ）、３．６６－３．４９（ｍ、２Ｈ）、３．４４－３．３５（ｍ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．２１－３．１３（ｍ、５Ｈ）、３．１０－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．７４（ｍ、３Ｈ）、２．７３－２．６４（ｍ、３Ｈ）、２．４０－２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｄｄ、Ｊ＝２．５、５．０、１０．１ Ｈｚ、３Ｈ）、１．８３－１．５５（ｍ、１１Ｈ）、１．５１－１．３３（ｍ、３Ｈ）。
【0177】
実施例２４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２４）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨＣＯ３（１．０５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ、４８５．４６μＬ）を添加した。それから０℃でＣｂｚＣｌ（９２２．７３ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ、７６８．９４μＬ）を一滴ずつ加え、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、８９．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２７５．４
【化33】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨＣＯ３（１．０５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ、４８５．４６μＬ）を添加した。それから０℃でＣｂｚＣｌ（９２２．７３ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ、７６８．９４μＬ）を一滴ずつ加え、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、８９．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２７５．４
【0178】
段階２．ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（２．１３ｇ、１８．６９ｍｍｏｌ、１．３８ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（７０％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７５．５
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（２．１３ｇ、１８．６９ｍｍｏｌ、１．３８ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（７０％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７５．５
【0179】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２ｇ、５．１５ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（３．３３ｇ、２５．７５ｍｍｏｌ、４．４８ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル４－（ヨードメチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．３４ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（２１％）が検出された。反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（２８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．６ｇ、３．３９ｍｍｏｌ、６５．８８％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．３
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２ｇ、５．１５ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（３．３３ｇ、２５．７５ｍｍｏｌ、４．４８ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル４－（ヨードメチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．３４ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を６０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（２１％）が検出された。反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（２８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．６ｇ、３．３９ｍｍｏｌ、６５．８８％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．３
【0180】
段階４．ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．６ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（１．９３ｇ、１６．９６ｍｍｏｌ、１．２６ｍＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５６％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７２．４
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１．６ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（１．９３ｇ、１６．９６ｍｍｏｌ、１．２６ｍＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５６％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７２．４
【0181】
段階５．ベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロ－ベンゼン（１ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、６９４．４４μＬ）溶液に２０℃でＫ２ＣＯ３（２．６１ｇ、１８．８６ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３．０５ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、ＴＦＡ）を添加し、生成された混合物を４０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１，２－ジフルオロ－４－ニトロ－ベンゼンが残っていることと所望の質量のピーク（５２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：ベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８９６ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ、２５．４０％収率、９１％純度）が黄色の固体として得られ、バッチ２：ベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４９０ｍｇ、９２１．２７μｍｏｌ、１４．６６％収率、９６％純度）が黄色の固体として得られた。カルバメートＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロ－ベンゼン（１ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、６９４．４４μＬ）溶液に２０℃でＫ２ＣＯ３（２．６１ｇ、１８．８６ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３．０５ｇ、６．２９ｍｍｏｌ、ＴＦＡ）を添加し、生成された混合物を４０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１，２－ジフルオロ－４－ニトロ－ベンゼンが残っていることと所望の質量のピーク（５２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：ベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８９６ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ、２５．４０％収率、９１％純度）が黄色の固体として得られ、バッチ２：ベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４９０ｍｇ、９２１．２７μｍｏｌ、１４．６６％収率、９６％純度）が黄色の固体として得られた。カルバメートＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３
【0182】
段階６．ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７）の合成
エタノール（６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４９０ｍｇ、９５９．６６μｍｏｌ）溶液に２０℃でＦｅ（３２１．５５ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（３０８．００ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（９１％）が検出された。反応混合物をワークアップのため、他のバッチ（８９６ｍｇスケール）と合わせた。この反応混合物にＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）を添加し、ｐＨ＝１０に調整した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．１ｇ、粗製）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．４
エタノール（６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４９０ｍｇ、９５９．６６μｍｏｌ）溶液に２０℃でＦｅ（３２１．５５ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（３０８．００ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（９１％）が検出された。反応混合物をワークアップのため、他のバッチ（８９６ｍｇスケール）と合わせた。この反応混合物にＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）を添加し、ｐＨ＝１０に調整した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．１ｇ、粗製）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．４
【0183】
段階７．（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－ブロモ－ピリジン（６００ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９３４．６５ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮ２下、Ｐｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（７８．８２ｍｇ、８１．０３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．５８ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより全部の出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５４％）が検出された。反応混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７４２ｍｇ、９６３．７１μｍｏｌ、５９．４７％収率）を緑色の油状物として得て、バッチ２：（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２４６ｍｇ、３１９．５０μｍｏｌ、１９．７２％収率）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７０．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－ブロモ－ピリジン（６００ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９３４．６５ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮ２下、Ｐｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（７８．８２ｍｇ、８１．０３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．５８ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより全部の出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５４％）が検出された。反応混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、２つのバッチの標題化合物を得た。バッチ１：（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７４２ｍｇ、９６３．７１μｍｏｌ、５９．４７％収率）を緑色の油状物として得て、バッチ２：（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２４６ｍｇ、３１９．５０μｍｏｌ、１９．７２％収率）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７０．１
【0184】
段階８．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４００ｍｇ、５１９．５２μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％純度）を添加した。懸濁液をＨ２下で３回脱気し、パージした。混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をワークアップのため、他のバッチ（２４６ｍｇスケール）と合わせた。反応混合物を酢酸エチル（１５ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２１９ｍｇ、４７８．６０μｍｏｌ、９２．１２％収率）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．１
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４００ｍｇ、５１９．５２μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％純度）を添加した。懸濁液をＨ２下で３回脱気し、パージした。混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をワークアップのため、他のバッチ（２４６ｍｇスケール）と合わせた。反応混合物を酢酸エチル（１５ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２１９ｍｇ、４７８．６０μｍｏｌ、９２．１２％収率）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．１
【0185】
段階９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２４）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９９．２５ｍｇ、２６１．０４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．０１ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ、１２４．００μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌した後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２１７．１７ｍｇ、４７４．６１μｍｏｌ）溶液を添加した後、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（６８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）、次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０＊４０ｍｍ＊ １５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１１９．５ｍｇ、１２６．４２μｍｏｌ、５３．２７％収率、９４％純度、０．６ ＦＡ塩）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６１．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．８２（ｂｒ ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４９（ｄｄ、Ｊ＝２．０、１５．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．７ Ｈｚ、１Ｈ）、５．７７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４７－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．３０－４．１９（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．１０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．１ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７８－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．５４－２．５０（ｍ、２Ｈ）、２．５０－２．２３（ｍ、２Ｈ）、２．２２－２．０３（ｍ、６Ｈ）、１．９０－１．７８（ｍ、３Ｈ）、１．７４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．７ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１９．２ Ｈｚ、５Ｈ）、１．２７－１．１７（ｍ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９９．２５ｍｇ、２６１．０４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．０１ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ、１２４．００μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌した後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２１７．１７ｍｇ、４７４．６１μｍｏｌ）溶液を添加した後、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（６８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）、次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０＊４０ｍｍ＊ １５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１１９．５ｍｇ、１２６．４２μｍｏｌ、５３．２７％収率、９４％純度、０．６ ＦＡ塩）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６１．１
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．８２（ｂｒ ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４９（ｄｄ、Ｊ＝２．０、１５．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．７ Ｈｚ、１Ｈ）、５．７７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４７－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．３０－４．１９（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．１０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．１ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７８－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．５４－２．５０（ｍ、２Ｈ）、２．５０－２．２３（ｍ、２Ｈ）、２．２２－２．０３（ｍ、６Ｈ）、１．９０－１．７８（ｍ、３Ｈ）、１．７４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．７ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１９．２ Ｈｚ、５Ｈ）、１．２７－１．１７（ｍ、８Ｈ）。
【0186】
実施例２５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２５）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨＣＯ３（１．０５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ）を添加した。その後、０℃でＣｂｚＣｌ（９２２．７３ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ）を一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、８９．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２７５．４
【化34】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨＣＯ３（１．０５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ）を添加した。その後、０℃でＣｂｚＣｌ（９２２．７３ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ）を一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、８９．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２７５．４
【0187】
段階２．ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
ジオキサン（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６ｇ、１６．０２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０ｍＬ）を添加した後、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。混合物を真空濃縮した後、ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６ｇ、粗製）を白色の固体として得て、これを次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７５．２
ジオキサン（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６ｇ、１６．０２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０ｍＬ）を添加した後、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。混合物を真空濃縮した後、ベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６ｇ、粗製）を白色の固体として得て、これを次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７５．２
【0188】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＤＣＥ（６０ｍＬ）中のベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５ｇ、１６．０９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（３．４３ｇ、１６．０９ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（９６６．０３ｍｇ、１６．０９ｍｍｏｌ）溶液を２０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６．８２ｇ、３２．１７ｍｍｏｌ）を添加した後、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液（１００ｍＬ）に注いだ。層を分離した。水相をＤＣＭ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．５ｇ、１５．９０ｍｍｏｌ、９８．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．４
ＤＣＥ（６０ｍＬ）中のベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５ｇ、１６．０９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ｔｅｒｔ－ブチル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（３．４３ｇ、１６．０９ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（９６６．０３ｍｇ、１６．０９ｍｍｏｌ）溶液を２０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６．８２ｇ、３２．１７ｍｍｏｌ）を添加した後、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピークが検出された。反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液（１００ｍＬ）に注いだ。層を分離した。水相をＤＣＭ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．５ｇ、１５．９０ｍｍｏｌ、９８．８５％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．４
【0189】
段階４．ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５）の合成
酢酸エチル（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（６ｇ、１２．７２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０．００ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮し、ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７２．２
酢酸エチル（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（６ｇ、１２．７２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０．００ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮し、ベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７２．２
【0190】
段階５．ベンジル（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６）の合成
ＭｅＣＮ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２．５ｇ、５．６３ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）および１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロ－ベンゼン（９９６．１０ｍｇ、５．６３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＥｔ３Ｎ（２．８５ｇ、２８．１３ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～６０％、８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．８９ｍｍｏｌ、３３．６３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．３
ＭｅＣＮ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２．５ｇ、５．６３ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）および１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロ－ベンゼン（９９６．１０ｍｇ、５．６３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＥｔ３Ｎ（２．８５ｇ、２８．１３ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～６０％、８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．８９ｍｍｏｌ、３３．６３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．３
【0191】
段階６．ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７）の合成
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．８９ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（６０７．１８ｍｇ、１１．３５ｍｍｏｌ）の混合物に２０℃でＦｅ（６３３．８９ｍｇ、１１．３５ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物にＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、粗製）を黄色の固体として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．５
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．８９ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（６０７．１８ｍｇ、１１．３５ｍｍｏｌ）の混合物に２０℃でＦｅ（６３３．８９ｍｇ、１１．３５ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物にＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、粗製）を黄色の固体として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．５
【0192】
段階７．ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８）の合成
ジオキサン（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）、２，６－ジベンジルオキシ－３－ブロモ－ピリジン（８０１．９５ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．７６ｇ、５．４２ｍｍｏｌ）の混合物に２０℃でＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（８７．７９ｍｇ、９０．２５μｍｏｌ）を添加した。生成された混合物をＮ２でパージし、脱気した後、１００℃で加熱し、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～４０％、８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、９５９．４７μｍｏｌ、５３．１６％収率、８４％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７８８．８
ジオキサン（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）、２，６－ジベンジルオキシ－３－ブロモ－ピリジン（８０１．９５ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．７６ｇ、５．４２ｍｍｏｌ）の混合物に２０℃でＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（８７．７９ｍｇ、９０．２５μｍｏｌ）を添加した。生成された混合物をＮ２でパージし、脱気した後、１００℃で加熱し、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～４０％、８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９００ｍｇ、９５９．４７μｍｏｌ、５３．１６％収率、８４％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７８８．８
【0193】
段階８．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８００ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮ２下、Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）を添加した。混合物をＨ２で３回パージし、脱気した後、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより大部分の出発物質が残っていることを確認した。反応混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っており、所望の質量が検出された。反応混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物に２０℃でＮ２下、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）を添加した。混合物をＨ２で３回パージし、脱気した後、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応生成物をセライトパッドでろ過し、ＴＨＦ溶液で３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、粗製）を得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．３
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８００ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮ２下、Ｐｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）を添加した。混合物をＨ２で３回パージし、脱気した後、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより大部分の出発物質が残っていることを確認した。反応混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っており、所望の質量が検出された。反応混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物に２０℃でＮ２下、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）を添加した。混合物をＨ２で３回パージし、脱気した後、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応生成物をセライトパッドでろ過し、ＴＨＦ溶液で３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、粗製）を得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．３
【0194】
段階９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２５）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、８４１．０９μｍｏｌ）、４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（２４８．１０ｍｇ、５８８．７６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５４３．５３ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＡＴＵ（３１９．８１ｍｇ、８４１．０９μｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を２０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝３０～１００％、その後、メタノール／酢酸エチル＝１０～２０％、４０ｍＬ／分）によって精製し、粗生成物を得て、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３～１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０＊５０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分）でさらに精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０．６ｍｇ、４５．５４μｍｏｌ、５．４１％収率、９８．６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７９．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．３１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．３ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｔｄ、Ｊ＝６．６、１３．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５－４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．３５－４．２７（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．９８－２．９０（ｍ、４Ｈ）、２．７５－２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．４０－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．２５－２．１５（ｍ、４Ｈ）、２．１０－２．０１（ｍ、２Ｈ）、１．９０－１．８０（ｍ、４Ｈ）、１．７４－１．６３（ｍ、７Ｈ）、１．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、８Ｈ）。
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、８４１．０９μｍｏｌ）、４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（２４８．１０ｍｇ、５８８．７６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５４３．５３ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＡＴＵ（３１９．８１ｍｇ、８４１．０９μｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を２０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ シリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝３０～１００％、その後、メタノール／酢酸エチル＝１０～２０％、４０ｍＬ／分）によって精製し、粗生成物を得て、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３～１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０＊５０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分）でさらに精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０．６ｍｇ、４５．５４μｍｏｌ、５．４１％収率、９８．６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７９．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．３１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．３ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｔｄ、Ｊ＝６．６、１３．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５－４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．３５－４．２７（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．９８－２．９０（ｍ、４Ｈ）、２．７５－２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．４０－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．２５－２．１５（ｍ、４Ｈ）、２．１０－２．０１（ｍ、２Ｈ）、１．９０－１．８０（ｍ、４Ｈ）、１．７４－１．６３（ｍ、７Ｈ）、１．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、８Ｈ）。
【0195】
実施例２６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２６）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５００ｍｇ、６４９．４０μｍｏｌ）溶液にＢｏｃ２Ｏ（５００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ、５２６．３２μＬ）およびＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージし、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３００ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ、８２．８３％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５８．３
【化35】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５００ｍｇ、６４９．４０μｍｏｌ）溶液にＢｏｃ２Ｏ（５００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ、５２６．３２μＬ）およびＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加し、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージし、２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピークを確認した。反応混合物をろ過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３００ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ、８２．８３％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５８．３
【0196】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３００ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（３２．３０ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ、３０．７７μＬ）およびＨＣＨＯ（７５０．００ｍｇ、９．２４ｍｍｏｌ、６８８．０７μＬ、３７％純度）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３７５．００ｍｇ、５．９７ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解した後、飽和炭酸水素ナトリウムを添加し、ｐＨ＝９に調整し、混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２８０ｍｇ、４８９．７５μｍｏｌ、９１．０４％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．３
メタノール（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３００ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（３２．３０ｍｇ、５３７．９３μｍｏｌ、３０．７７μＬ）およびＨＣＨＯ（７５０．００ｍｇ、９．２４ｍｍｏｌ、６８８．０７μＬ、３７％純度）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３７５．００ｍｇ、５．９７ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の一つの主要なピークを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解した後、飽和炭酸水素ナトリウムを添加し、ｐＨ＝９に調整し、混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２８０ｍｇ、４８９．７５μｍｏｌ、９１．０４％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７２．３
【0197】
段階３．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２８０ｍｇ、４８９．７５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．５２ｇ、３９．６７ｍｍｏｌ、２．９４ｍＬ）をＮ２気体下、添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（６５％）を確認した。反応混合物を濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２８６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．３
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２８０ｍｇ、４８９．７５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．５２ｇ、３９．６７ｍｍｏｌ、２．９４ｍＬ）をＮ２気体下、添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（６５％）を確認した。反応混合物を濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２８６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７２．３
【0198】
段階４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２６）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２２０ｍｇ、５２２．０７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２８０ｍｇ、７３６．４０μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５４４．１２ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ、７３３．３２μＬ）および３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２８６ｍｇ、４８８．３６μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を２０℃で添加した。混合物を２０℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（４０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分；カラム温度：３０℃）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０９．６ｍｇ、１２４．０１μｍｏｌ、２３．７５％収率、９９％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７５．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．４４（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．８９（ｔ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７０－６．６２（ｍ、１Ｈ）、６．５６－６．４８（ｍ、１Ｈ）、４．９５－４．８７（ｍ、１Ｈ）、４．８４－４．７６（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．８９－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５６－２．５１（ｍ、６Ｈ）、２．２８－２．１３（ｍ、６Ｈ）、１．８７－１．７８（ｍ、３Ｈ）、１．７８－１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５３（ｍ、５Ｈ）、１．２９－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（２２０ｍｇ、５２２．０７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２８０ｍｇ、７３６．４０μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５４４．１２ｍｇ、４．２１ｍｍｏｌ、７３３．３２μＬ）および３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２８６ｍｇ、４８８．３６μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を２０℃で添加した。混合物を２０℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量のピーク（４０％）を確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分；カラム温度：３０℃）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０９．６ｍｇ、１２４．０１μｍｏｌ、２３．７５％収率、９９％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７５．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．４４（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．８９（ｔ、Ｊ＝９．６ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７０－６．６２（ｍ、１Ｈ）、６．５６－６．４８（ｍ、１Ｈ）、４．９５－４．８７（ｍ、１Ｈ）、４．８４－４．７６（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．８９－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５６－２．５１（ｍ、６Ｈ）、２．２８－２．１３（ｍ、６Ｈ）、１．８７－１．７８（ｍ、３Ｈ）、１．７８－１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．５３（ｍ、５Ｈ）、１．２９－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
【0199】
実施例２７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２７）の合成
段階１．ベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２ｇ、４．９０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＫ２ＣＯ３（２．０３ｇ、１４．７１ｍｍｏｌ）および１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（１．０４ｇ、７．３５ｍｍｏｌ、７８０．１２μＬ）を添加し、２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４５％）を確認した。反応混合物を水（８０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％石油エーテル：（酢酸エチル／エタノール＝２／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．２ｇ、２．４１ｍｍｏｌ、４９．１０％収率、９８．８％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９３．２．
【化36】
段階１．ベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２ｇ、４．９０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＫ２ＣＯ３（２．０３ｇ、１４．７１ｍｍｏｌ）および１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（１．０４ｇ、７．３５ｍｍｏｌ、７８０．１２μＬ）を添加し、２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４５％）を確認した。反応混合物を水（８０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％石油エーテル：（酢酸エチル／エタノール＝２／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．２ｇ、２．４１ｍｍｏｌ、４９．１０％収率、９８．８％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９３．２．
【0200】
段階２．ベンジル（７－（（１－（４－アミノフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
エタノール（８ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．２ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（５４４．１６ｍｇ、９．７４ｍｍｏｌ）とＨ２Ｏ（８ｍＬ）中のＮＨ４Ｃｌ（５２１．２２ｍｇ、９．７４ｍｍｏｌ）溶液を添加した。混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８７％）を確認した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で希釈した後、ろ過し、不溶性固体を除去した。ろ過物を酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．５３ｍｍｏｌ、６２．６５％収率、７０．６％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６３．３．
エタノール（８ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．２ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（５４４．１６ｍｇ、９．７４ｍｍｏｌ）とＨ２Ｏ（８ｍＬ）中のＮＨ４Ｃｌ（５２１．２２ｍｇ、９．７４ｍｍｏｌ）溶液を添加した。混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８７％）を確認した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で希釈した後、ろ過し、不溶性固体を除去した。ろ過物を酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ベンジル（７－（（１－（４－アミノフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、１．５３ｍｍｏｌ、６２．６５％収率、７０．６％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６３．３．
【0201】
段階３．ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－アミノフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）溶液に２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（８８０．３３ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．１１ｇ、６．４８ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２１０．２７ｍｇ、２１６．１６μｍｏｌ）を添加した。混合物を１００℃でＮ２気体下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５４％）を確認した。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％石油エーテル：（酢酸エチル／エタノール＝２／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．４５ｇ、１．９３ｍｍｏｌ、８９．２１％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７５２．４．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝７．５６－７．４９（ｍ、１Ｈ）、７．４２－７．２９（ｍ、１５Ｈ）、６．７９（ｓ、４Ｈ）、６．３４（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、５．３８（ｓ、２Ｈ）、５．２５（ｓ、２Ｈ）、４．９８（ｓ、２Ｈ）、３．９８－３．８９（ｍ、１Ｈ）、３．４５（ｄ、Ｊ＝１１．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．３３－３．２９（ｍ、４Ｈ）、２．５６－２．５２（ｍ、４Ｈ）、２．０－２．０６（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．４４（ｍ、１１Ｈ）、１．２４ － １．２１（ｍ、２Ｈ）。
ジオキサン（１０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－アミノフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）溶液に２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（８８０．３３ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．１１ｇ、６．４８ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２１０．２７ｍｇ、２１６．１６μｍｏｌ）を添加した。混合物を１００℃でＮ２気体下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５４％）を確認した。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％石油エーテル：（酢酸エチル／エタノール＝２／１）勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．４５ｇ、１．９３ｍｍｏｌ、８９．２１％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７５２．４．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝７．５６－７．４９（ｍ、１Ｈ）、７．４２－７．２９（ｍ、１５Ｈ）、６．７９（ｓ、４Ｈ）、６．３４（ｄ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、５．３８（ｓ、２Ｈ）、５．２５（ｓ、２Ｈ）、４．９８（ｓ、２Ｈ）、３．９８－３．８９（ｍ、１Ｈ）、３．４５（ｄ、Ｊ＝１１．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．３３－３．２９（ｍ、４Ｈ）、２．５６－２．５２（ｍ、４Ｈ）、２．０－２．０６（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．４４（ｍ、１１Ｈ）、１．２４ － １．２１（ｍ、２Ｈ）。
【0202】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６）の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（０．５ｇ、６６４．９４μｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４３５．３６ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ、４５８．２７μＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、６６．４９μｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～２０％）を確認した。反応混合物をろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％石油エーテル：（酢酸エチル／メタノール＝１／２）勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２７８．６７μｍｏｌ、４１．９１％収率、９４％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．３
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（０．５ｇ、６６４．９４μｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４３５．３６ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ、４５８．２７μＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、６６．４９μｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～２０％）を確認した。反応混合物をろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％石油エーテル：（酢酸エチル／メタノール＝１／２）勾配＠６０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２７８．６７μｍｏｌ、４１．９１％収率、９４％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．３
【0203】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７）の合成
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ）溶液にＨＣＨＯ（４３３．０４ｍｇ、５．３４ｍｍｏｌ、３９７．２９μＬ、３７％純度）、ＨＯＡｃ（８．９０ｍｇ、１４８．２３μｍｏｌ、８．４８μＬ）を２０℃で添加し、１時間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３３５．３４ｍｇ、５．３４ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９０％）を確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８８．９５μｍｏｌ、９７．４７％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５４．４
メタノール（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ）溶液にＨＣＨＯ（４３３．０４ｍｇ、５．３４ｍｍｏｌ、３９７．２９μＬ、３７％純度）、ＨＯＡｃ（８．９０ｍｇ、１４８．２３μｍｏｌ、８．４８μＬ）を２０℃で添加し、１時間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３３５．３４ｍｇ、５．３４ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９０％）を確認した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８８．９５μｍｏｌ、９７．４７％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５４．４
【0204】
段階６．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８８．９５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１ｍＬ）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（メタノール：ジクロロメタン＝２：１）により出発物質が完全に消費されたことを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１８０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５４．２
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２８８．９５μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１ｍＬ）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（メタノール：ジクロロメタン＝２：１）により出発物質が完全に消費されたことを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１８０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５４．２
【0205】
段階７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２７）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１３３．６３ｍｇ、３１７．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１８０．８６ｍｇ、４７５．６５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．９５ｍｇ、９５１．３０μｍｏｌ、１６５．７０μＬ）を添加し、３０分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１８０ｍｇ、３１７．１０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加した。混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）を確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％石油エーテル／（酢酸エチル／エタノール；ｖ／ｖ＝１：２）勾配＠６０ｍＬ／分）により精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５０％～８０％、１０分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２１．４ｍｇ、２４．１０μｍｏｌ、７．６０％収率、９６．５％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７２（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．８３－６．７８（ｍ、２Ｈ）、６．７３－６．７１（ｍ、２Ｈ）、４．９１－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．７１（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１２．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．４２（ｄ、Ｊ＝１１．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、２．８５－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５７－２．５２（ｍ、３Ｈ）、２．２９－２．０９（ｍ、８Ｈ）、１．８９－１．７１（ｍ、６Ｈ）、１．６３－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２２－１．１４（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１３３．６３ｍｇ、３１７．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１８０．８６ｍｇ、４７５．６５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．９５ｍｇ、９５１．３０μｍｏｌ、１６５．７０μＬ）を添加し、３０分間攪拌した後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１８０ｍｇ、３１７．１０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加した。混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）を確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％石油エーテル／（酢酸エチル／エタノール；ｖ／ｖ＝１：２）勾配＠６０ｍＬ／分）により精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５０％～８０％、１０分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２１．４ｍｇ、２４．１０μｍｏｌ、７．６０％収率、９６．５％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７２（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．８３－６．７８（ｍ、２Ｈ）、６．７３－６．７１（ｍ、２Ｈ）、４．９１－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．７１（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１２．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．４２（ｄ、Ｊ＝１１．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、２．８５－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５７－２．５２（ｍ、３Ｈ）、２．２９－２．０９（ｍ、８Ｈ）、１．８９－１．７１（ｍ、６Ｈ）、１．６３－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２２－１．１４（ｍ、２Ｈ）。
【0206】
実施例２８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２８）の合成
段階１．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３３．８０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ、２１．９５μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（メタノール：ジクロロメタン＝２：１）で新たなスポットが形成されることを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．４．
【化37】
段階１．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（２）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３３．８０ｍｇ、２９６．４６μｍｏｌ、２１．９５μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（メタノール：ジクロロメタン＝２：１）で新たなスポットが形成されることを確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を緑色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．４．
【0207】
段階２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２８）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１６０ｍｇ、３７９．６９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２１６．５５ｍｇ、５６９．５３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２４５．３６ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、３３０．６８μＬ）を添加し、３０分間攪拌した。その後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１９９．６９ｍｇ、３６０．７０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）を確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３％～３３％，１０分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（４１．５ｍｇ、４３．９６μｍｏｌ、１１．５８％収率、８９．３％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．７５ － ６．７３（ｍ、２Ｈ）、６．６０ － ６．５７（ｍ、２Ｈ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９１－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．４２－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．２１－４．１４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．４１－３．４０（ｍ、２Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、２．７５－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６０－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．２７－２．０６（ｍ、８Ｈ）、１．９１－１．６８（ｍ、６Ｈ）、１．６４－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２１－１．１３（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１６０ｍｇ、３７９．６９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２１６．５５ｍｇ、５６９．５３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２４５．３６ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、３３０．６８μＬ）を添加し、３０分間攪拌した。その後、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１９９．６９ｍｇ、３６０．７０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を添加し、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）を確認した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３％～３３％，１０分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（４１．５ｍｇ、４３．９６μｍｏｌ、１１．５８％収率、８９．３％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．７５ － ６．７３（ｍ、２Ｈ）、６．６０ － ６．５７（ｍ、２Ｈ）、５．３６（ｄ、Ｊ＝７．２ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９１－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．４２－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．２１－４．１４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．８ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．４１－３．４０（ｍ、２Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、２．７５－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６０－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．２７－２．０６（ｍ、８Ｈ）、１．９１－１．６８（ｍ、６Ｈ）、１．６４－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２１－１．１３（ｍ、２Ｈ）。
【0208】
実施例２９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２９）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５００ｍｇ、６３４．５７μｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４１５．４８ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。生成された混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージし、懸濁液を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより中間体および所望の質量を確認した。混合物をろ過した。ろ過物にＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）を添加した。生成された混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、さらに１８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより中間体が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、粗製）を暗い緑色の固体として得た。粗生成物を次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７６．５
【化38】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５００ｍｇ、６３４．５７μｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４１５．４８ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加した。生成された混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージし、懸濁液を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより中間体および所望の質量を確認した。混合物をろ過した。ろ過物にＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ、１０％純度）を添加した。生成された混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、さらに１８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより中間体が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、粗製）を暗い緑色の固体として得た。粗生成物を次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７６．５
【0209】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ）、ＨＣＨＯ（１．０１ｇ、１２．５１ｍｍｏｌ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（３７．５５ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ）溶液を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（７８５．９５ｍｇ、１２．５１ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。また他の分量のＨＣＨＯ（５０７．４７ｍｇ、６．２５ｍｍｏｌ、４６５．５７μＬ、３７％純度）を混合物に添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３９２．９７ｍｇ、６．２５ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。反応混合物を濃縮し、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１、Ｒｆ＝０．６）によって精製し、粗生成物を得た。粗生成物をメタノール（６ｍＬ）に溶解させた後、ＨＣＨＯ（４０５．９８ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ、３７２．４６μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（３７．５５ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ、３５．８０μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３１４．３８ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を２０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。反応混合物を濃縮し、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９０．５
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ）、ＨＣＨＯ（１．０１ｇ、１２．５１ｍｍｏｌ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（３７．５５ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ）溶液を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（７８５．９５ｍｇ、１２．５１ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。また他の分量のＨＣＨＯ（５０７．４７ｍｇ、６．２５ｍｍｏｌ、４６５．５７μＬ、３７％純度）を混合物に添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３９２．９７ｍｇ、６．２５ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。反応混合物を濃縮し、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１、Ｒｆ＝０．６）によって精製し、粗生成物を得た。粗生成物をメタノール（６ｍＬ）に溶解させた後、ＨＣＨＯ（４０５．９８ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ、３７２．４６μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（３７．５５ｍｇ、６２５．３４μｍｏｌ、３５．８０μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３１４．３８ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ）を添加した。生成された混合物を２０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量のピークを確認した。反応混合物を濃縮し、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９０．５
【0210】
段階３．３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２５４．３６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された溶液を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９０．４
ＤＣＭ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２５４．３６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された溶液を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を濃縮し、３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９０．４
【0211】
段階４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２９）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、２４８．５０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）、４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（７３．３０ｍｇ、１７３．９５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９２．７０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の混合物にＨＡＴＵ（９４．４９ｍｇ、２４８．５０μｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３～１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．３ｍｇ、９．９３μｍｏｌ、３．９９％収率、９０．５％純度、ＦＡ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．４９（ｓ、１Ｈ）、６．４５（ｓ、１Ｈ）、４．９２－４．８０（ｍ、２Ｈ）、４．４５－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．９８－２．９２（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５８２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．３２－２．２０（ｍ、５Ｈ）、２．１７－２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．８７－１．７７（ｍ、３Ｈ）、１．７４－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．６３－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２０－１．１３（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、２４８．５０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）、４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（７３．３０ｍｇ、１７３．９５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９２．７０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の混合物にＨＡＴＵ（９４．４９ｍｇ、２４８．５０μｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３～１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．３ｍｇ、９．９３μｍｏｌ、３．９９％収率、９０．５％純度、ＦＡ塩）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２６（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．４９（ｓ、１Ｈ）、６．４５（ｓ、１Ｈ）、４．９２－４．８０（ｍ、２Ｈ）、４．４５－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．９８－２．９２（ｍ、４Ｈ）、２．８４－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）、２．５８２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．３２－２．２０（ｍ、５Ｈ）、２．１７－２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．８７－１．７７（ｍ、３Ｈ）、１．７４－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．６３－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２０－１．１３（ｍ、２Ｈ）。
【0212】
実施例３０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３０）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
メタノール（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－シアノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、５．９９ｍｍｏｌ）溶液にＮＨ３．Ｈ２Ｏ（２．７３ｇ、２１．８１ｍｍｏｌ、３ｍＬ、２８％純度）およびＲａｎｅｙ－Ｎｉ（３００．００ｍｇ、３．５０ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、Ｈ２で混合物にバブリングし、混合物を２０℃でＨ２（４５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５５．１．
【化39】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
メタノール（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－シアノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、５．９９ｍｍｏｌ）溶液にＮＨ３．Ｈ２Ｏ（２．７３ｇ、２１．８１ｍｍｏｌ、３ｍＬ、２８％純度）およびＲａｎｅｙ－Ｎｉ（３００．００ｍｇ、３．５０ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、Ｈ２で混合物にバブリングし、混合物を２０℃でＨ２（４５Ｐｓｉ）下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物をろ過し、ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５５．１．
【0213】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＴＨＦ（２８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（７ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、粗製）溶液にＣｂｚＣｌ（１．１３ｇ、６．６０ｍｍｏｌ、９３８．９２μＬ）およびＮａ２ＣＯ３（１．１７ｇ、１１．０１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２．６ｇ、粗製）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．１
ＴＨＦ（２８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（７ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．４ｇ、粗製）溶液にＣｂｚＣｌ（１．１３ｇ、６．６０ｍｍｏｌ、９３８．９２μＬ）およびＮａ２ＣＯ３（１．１７ｇ、１１．０１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２．６ｇ、粗製）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８９．１
【0214】
段階３．ベンジル（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（４）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１００ｍｇ、粗製）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１．００ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量を確認した。混合物を真空濃縮し、ベンジル（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１１０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８９．１
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１００ｍｇ、粗製）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１．００ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が消費されたことと所望の質量を確認した。混合物を真空濃縮し、ベンジル（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１１０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８９．１
【0215】
段階４．４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン（６）の合成
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（５０５．１６ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）溶液に１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロベンゼン（２３０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５３８．５２ｍｇ、３．９０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１５ｍＬ／分）によって精製し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン（４２０ｍｇ、８２２．４９ μｍｏｌ、６３．３２％収率、１００％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．２．
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（５０５．１６ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）溶液に１，２，３－トリフルオロ－５－ニトロベンゼン（２３０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５３８．５２ｍｇ、３．９０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１５ｍＬ／分）によって精製し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン（４２０ｍｇ、８２２．４９ μｍｏｌ、６３．３２％収率、１００％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．２．
【0216】
段階５．（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（７）の合成
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン（４２０ｍｇ、８２２．４９μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（１８７．４０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７３．０
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン（４２０ｍｇ、８２２．４９μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（１８７．４０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７３．０
【0217】
段階６．１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（６ｍＬ）中のＤＭＳＯ（７１７．４５ｍｇ、９．１８ｍｍｏｌ、７１７．４５μＬ）溶液に塩化オキサリル（２３３．１２ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ、１６０．７７μＬ）を－７０℃で添加し、１０分間攪拌し、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ，粗製）溶液を－６５℃で２０分にかけて添加し、ＴＥＡ（４６４．６０ｍｇ、４．５９ｍｍｏｌ、６３９．０７μＬ）を－６５℃で一滴ずつ加えた後、２０℃まで昇温し、３０分間攪拌し、ＴＬＣ（酢酸エチル／石油エーテル＝１／１）により出発物質が消費されたことを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７１．２．
ＤＣＭ（６ｍＬ）中のＤＭＳＯ（７１７．４５ｍｇ、９．１８ｍｍｏｌ、７１７．４５μＬ）溶液に塩化オキサリル（２３３．１２ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ、１６０．７７μＬ）を－７０℃で添加し、１０分間攪拌し、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ，粗製）溶液を－６５℃で２０分にかけて添加し、ＴＥＡ（４６４．６０ｍｇ、４．５９ｍｍｏｌ、６３９．０７μＬ）を－６５℃で一滴ずつ加えた後、２０℃まで昇温し、３０分間攪拌し、ＴＬＣ（酢酸エチル／石油エーテル＝１／１）により出発物質が消費されたことを確認した。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７１．２．
【0218】
段階７．ベンジル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（９）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中のベンジル（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（２００ｍｇ、粗製）溶液に１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（９６．１７ｍｇ、２９６．０４μｍｏｌ、ＨＣｌ）、ＮａＯＡｃ（６０．７１ｍｇ、７４０．１１μｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（４．４４ｍｇ、７４．０１μｍｏｌ、４．２３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１８８．２３ｍｇ、８８８．１３μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１５．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．３．
ＤＣＥ（２ｍＬ）中のベンジル（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（２００ｍｇ、粗製）溶液に１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（９６．１７ｍｇ、２９６．０４μｍｏｌ、ＨＣｌ）、ＮａＯＡｃ（６０．７１ｍｇ、７４０．１１μｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（４．４４ｍｇ、７４．０１μｍｏｌ、４．２３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１８８．２３ｍｇ、８８８．１３μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１５．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４３．３．
【0219】
段階８．（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メタンアミン（１０）の合成
ＴＦＡ（３ｍＬ）中のベンジル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７００ｍｇ、粗製）の混合物を４０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を真空濃縮し、（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メタンアミン（５００ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０９．２．
ＴＦＡ（３ｍＬ）中のベンジル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７００ｍｇ、粗製）の混合物を４０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を真空濃縮し、（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メタンアミン（５００ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０９．２．
【0220】
段階９．ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１１）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メタンアミン（５００ｍｇ、粗製）溶液にＴＥＡ（１．２４ｇ、１２．２４ｍｍｏｌ、１．７０ｍＬ）を添加し、ｐＨを８に調整し、Ｂｏｃ２Ｏ（５３４．２９ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ、５６２．４１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７７％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、２６１．５０μｍｏｌ、２１．３６％収率、９５％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０９．２
ジオキサン（１０ｍＬ）中の（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メタンアミン（５００ｍｇ、粗製）溶液にＴＥＡ（１．２４ｇ、１２．２４ｍｍｏｌ、１．７０ｍＬ）を添加し、ｐＨを８に調整し、Ｂｏｃ２Ｏ（５３４．２９ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ、５６２．４１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７７％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、２６１．５０μｍｏｌ、２１．３６％収率、９５％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０９．２
【0221】
段階１０．ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１２）の合成
エタノール（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、２７５．２７μｍｏｌ）溶液にＦｅ（１５３．７２ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（１４７．２４ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を８０℃で添加し、混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物をＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７９．２
エタノール（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（２，６－ジフルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、２７５．２７μｍｏｌ）溶液にＦｅ（１５３．７２ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（１４７．２４ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を８０℃で添加し、混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物をＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７９．２
【0222】
段階１１．ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１３）の合成
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１２０ｍｇ、粗製）溶液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４８１．４１ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２１．２５ｍｇ、５．０１ｍｍｏｌ、１９５．０２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で７２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（８０ｍｇ、１３５．６６μｍｏｌ、５４．１１％収率、１００％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９０．１
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（１２０ｍｇ、粗製）溶液に３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４８１．４１ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４２１．２５ｍｇ、５．０１ｍｍｏｌ、１９５．０２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で７２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（８０ｍｇ、１３５．６６μｍｏｌ、５４．１１％収率、１００％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９０．１
【0223】
段階１２．３－（（４－（４－（（２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１４）の合成
ＤＣＭ（２．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７０ｍｇ、１１８．７０μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９０．３
ＤＣＭ（２．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）カルバメート（７０ｍｇ、１１８．７０μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９０．３
【0224】
段階１３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３０）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．６７ｍｇ、１７７．９８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６．０１ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ、６２．００μＬ）を添加し、３－（（４－（４－（（２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７１．６２ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加し、混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４６％）を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１５％酢酸エチル／メタノール勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５０％～８０％，８分）によって再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（９．３ｍｇ、９．４８μｍｏｌ、７．９９％収率、９１．０％純度）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３８－８．２８（ｍ、２Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４７（ｍ、２Ｈ）、６．３１（ｄ、Ｊ＝１２．２ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２２（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｔｄ、Ｊ＝６．６、１３．５ Ｈｚ、１Ｈ）、４．３５－４．２７（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．５１－３．４６（ｍ、３Ｈ）、３．３８（ｓ、３Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、４Ｈ）、２．８２－２．７２（ｍ、２Ｈ）、２．３０－２．０２（ｍ、７Ｈ）、１．８８－１．７６（ｍ、３Ｈ）、１．６８（ｄ、Ｊ＝１１．７ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５８－１．４３（ｍ、７Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２０－１．１０（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．６７ｍｇ、１７７．９８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６．０１ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ、６２．００μＬ）を添加し、３－（（４－（４－（（２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７１．６２ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加し、混合物を２５℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４６％）を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１５％酢酸エチル／メタノール勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５０％～８０％，８分）によって再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（９．３ｍｇ、９．４８μｍｏｌ、７．９９％収率、９１．０％純度）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９３．５
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３８－８．２８（ｍ、２Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４７（ｍ、２Ｈ）、６．３１（ｄ、Ｊ＝１２．２ Ｈｚ、２Ｈ）、６．２２（ｄ、Ｊ＝７．８ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｔｄ、Ｊ＝６．６、１３．５ Ｈｚ、１Ｈ）、４．３５－４．２７（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．５１－３．４６（ｍ、３Ｈ）、３．３８（ｓ、３Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、４Ｈ）、２．８２－２．７２（ｍ、２Ｈ）、２．３０－２．０２（ｍ、７Ｈ）、１．８８－１．７６（ｍ、３Ｈ）、１．６８（ｄ、Ｊ＝１１．７ Ｈｚ、２Ｈ）、１．５８－１．４３（ｍ、７Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）、１．２０－１．１０（ｍ、２Ｈ）。
【0225】
実施例３１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３１）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（１ｇ、７．０９ｍｍｏｌ、７５１．８８μＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．５ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（２．７５ｇ、１９．８８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（１００％）が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過ケーキを水（５０ｍＬ）で洗浄して集めて、減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．１ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４８．１
【化40】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中の１－フルオロ－４－ニトロベンゼン（１ｇ、７．０９ｍｍｏｌ、７５１．８８μＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．５ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（２．７５ｇ、１９．８８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（１００％）が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。ろ過ケーキを水（５０ｍＬ）で洗浄して集めて、減圧乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．１ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４８．１
【0226】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（４）の合成
エタノール（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．１ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％純度）を添加した後、混合物をＨ２下、３回脱気しパージし、その後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（１００％）が検出された。混合物をろ過した。ろ過ケーキをメタノール（１００ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．９ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１８．２
エタノール（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．１ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％純度）を添加した後、混合物をＨ２下、３回脱気しパージし、その後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（１００％）が検出された。混合物をろ過した。ろ過ケーキをメタノール（１００ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．９ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１８．２
【0227】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（５）の合成
ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．３１ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．４４ｇ、１７．１１ｍｍｏｌ、６６５．３３μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＨＰＬＣにより所望の質量のピーク（９２％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、５９．２６％収率、８０％純度）を黒褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、３．１５ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．３１ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．４４ｇ、１７．１１ｍｍｏｌ、６６５．３３μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＨＰＬＣにより所望の質量のピーク（９２％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、５９．２６％収率、８０％純度）を黒褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
【0228】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、８０％純度）溶液にＨＣＨＯ（１９６．２０ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ、１８０μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（１０５．００ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ、０．１ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３５２ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）が検出された。さらにＨＣＨＯ（１０９．００ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ、０．１ｍＬ、３７％純度）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３５１．９５ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出され、混合物を２０℃で２時間攪拌した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．４
メタノール（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、８０％純度）溶液にＨＣＨＯ（１９６．２０ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ、１８０μＬ、３７％純度）およびＡｃＯＨ（１０５．００ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ、０．１ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３５２ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間さらに攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）が検出された。さらにＨＣＨＯ（１０９．００ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ、０．１ｍＬ、３７％純度）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（３５１．９５ｍｇ、５．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出され、混合物を２０℃で２時間攪拌した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４３．４
【0229】
段階５．３－（（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（０．１ｇ、２２５．９６μｍｏｌ）溶液に０℃でＴＦＡ（２４６．４０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ、１６０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量が検出された。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黒褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４３．４
ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（０．１ｇ、２２５．９６μｍｏｌ）溶液に０℃でＴＦＡ（２４６．４０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ、１６０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと所望の質量が検出された。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黒褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４３．４
【0230】
段階６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３１）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、６５７．２４μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に０℃でＴＥＡ（３９２．５８ｍｇ、３．８８ｍｍｏｌ、５４０μＬ）および４Ａ ＭＳ（０．３ｇ）に次いで４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、８６９．５２μｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４１７．５９ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２５～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。粗生成物を２０℃でＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で３０分間粉砕した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物をＤＣＭ／メタノール＝１０／１（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、ＤＣＭ／メタノール＝１０／１（１０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。生成物をＡＣＮ（６ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）および脱イオン水（４０ｍＬ）で洗浄した後、凍結乾燥し、生成物（２１４．６ｍｇ、２２１．２２μｍｏｌ、３３．６６％収率、８７％純度）を青色の固体として得た。８０ｍｇの生成水（８７％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４μｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥した。７０ｍｇの生成水（８７％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２０％～４０％、７分）によって精製した。溶出物を合わせて、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１４０．４ｍｇ、１３３．３７μｍｏｌ、７５．０４％収率、９１％純度、２ＴＦＡ）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５－１０．８０（ｍ、１Ｈ）、９．５５－９．４８（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．２０（ｍ、２Ｈ）、８．１４－８．０２（ｍ、１Ｈ）、７．４６－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．３９－７．１５（ｍ、２Ｈ）、６．９４－６．８３（ｍ、２Ｈ）、４．９５－４．８３（ｍ、２Ｈ）、４．１１－４．０４（ｍ、６Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３８－３．３１（ｍ、６Ｈ）、３．１５－３．０７（ｍ、２Ｈ）、２．９３－２．７０（ｍ、５Ｈ）、２．６２－２．５２（ｍ、４Ｈ）、２．２０－２．０４（ｍ、４Ｈ）、２．００－１．８３（ｍ、４Ｈ）、１．５６－１．４２（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、６５７．２４μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に０℃でＴＥＡ（３９２．５８ｍｇ、３．８８ｍｍｏｌ、５４０μＬ）および４Ａ ＭＳ（０．３ｇ）に次いで４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（４５０ｍｇ、８６９．５２μｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４１７．５９ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２５～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。粗生成物を２０℃でＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で３０分間粉砕した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物をＤＣＭ／メタノール＝１０／１（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、ＤＣＭ／メタノール＝１０／１（１０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。生成物をＡＣＮ（６ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）および脱イオン水（４０ｍＬ）で洗浄した後、凍結乾燥し、生成物（２１４．６ｍｇ、２２１．２２μｍｏｌ、３３．６６％収率、８７％純度）を青色の固体として得た。８０ｍｇの生成水（８７％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４μｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、７分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥した。７０ｍｇの生成水（８７％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２０％～４０％、７分）によって精製した。溶出物を合わせて、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）フェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１４０．４ｍｇ、１３３．３７μｍｏｌ、７５．０４％収率、９１％純度、２ＴＦＡ）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５－１０．８０（ｍ、１Ｈ）、９．５５－９．４８（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．２０（ｍ、２Ｈ）、８．１４－８．０２（ｍ、１Ｈ）、７．４６－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．３９－７．１５（ｍ、２Ｈ）、６．９４－６．８３（ｍ、２Ｈ）、４．９５－４．８３（ｍ、２Ｈ）、４．１１－４．０４（ｍ、６Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３８－３．３１（ｍ、６Ｈ）、３．１５－３．０７（ｍ、２Ｈ）、２．９３－２．７０（ｍ、５Ｈ）、２．６２－２．５２（ｍ、４Ｈ）、２．２０－２．０４（ｍ、４Ｈ）、２．００－１．８３（ｍ、４Ｈ）、１．５６－１．４２（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
【0231】
実施例３２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３２）の合成
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（１．５ｇ、９．４３ｍｍｏｌ、１．０４ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．６６ｇ、２６．５１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で５時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１ ｔｏ ０／１）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．９３ｇ、７．３０ｍｍｏｌ、８２．５７％収率、９１％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６６．２
【化41】
段階１．ｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（１．５ｇ、９．４３ｍｍｏｌ、１．０４ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）溶液にＫ２ＣＯ３（３．６６ｇ、２６．５１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で５時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１ ｔｏ ０／１）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．９３ｇ、７．３０ｍｍｏｌ、８２．５７％収率、９１％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６６．２
【0232】
段階２．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（４）の合成
エタノール（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．９３ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（３００ｍｇ、１０％純度）を添加し、反応混合物をＨ２下、３回脱気し、パージし、その後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（９９％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．６ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３６．１
エタノール（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．９３ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（３００ｍｇ、１０％純度）を添加し、反応混合物をＨ２下、３回脱気し、パージし、その後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のメインピーク（９９％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをメタノール（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２．６ｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３６．１
【0233】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（５）の合成
ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．２４ｇ、６．４７ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．３６ｇ、１６．１９ｍｍｏｌ、６２９．６４μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量が検出された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６１０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、４５．３６％収率、９９％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．２
ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１．２４ｇ、６．４７ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（１．３６ｇ、１６．１９ｍｍｏｌ、６２９．６４μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと所望の質量が検出された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６１０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、４５．３６％収率、９９％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４７．２
【0234】
段階４．３－（（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＤＣＭ（１．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（０．３ｇ、６７１．８７μｍｏｌ）溶液に０℃でＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２時間０℃で攪拌した。ＬＣＭＳにより２６％の出発物質が残っていることと５９％の所望の質量が検出された。混合物を０℃で０．５時間攪拌した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黒褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４７．３
ＤＣＭ（１．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（０．３ｇ、６７１．８７μｍｏｌ）溶液に０℃でＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２時間０℃で攪拌した。ＬＣＭＳにより２６％の出発物質が残っていることと５９％の所望の質量が検出された。混合物を０℃で０．５時間攪拌した。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黒褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４７．３
【0235】
段階５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３２）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、６５１．５８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に０℃でＴＥＡ（３９９．８５ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ、５５０μＬ）および４Ａ ＭＳ（０．５ｇ）に次いで４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（０．５ｇ、９６６．１３μｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４１４ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７３％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。生成物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間攪拌した。 混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を集めて減圧乾燥した。生成物をＡＣＮ（５ｍＬ）および脱イオン水（４０ｍＬ）で希釈した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０６．１ｍｇ、４６４．５７μｍｏｌ、７１．３０％収率、９７％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、９．４３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．４０（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４８（ｍ、１Ｈ）、６．４４－６．３９（ｍ、１Ｈ）、５．８３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９２－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．３１－４．２２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．２９（ｍ、８Ｈ）、３．１２－３．０２（ｍ、３Ｈ）、２．８８－２．６６（ｍ、７Ｈ）、２．１２－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９７－１．７９（ｍ、７Ｈ）、１．５２－１．３７（ｍ、２Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、６５１．５８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液に０℃でＴＥＡ（３９９．８５ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ、５５０μＬ）および４Ａ ＭＳ（０．５ｇ）に次いで４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（０．５ｇ、９６６．１３μｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４１４ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７３％）が検出された。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。生成物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間攪拌した。 混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を集めて減圧乾燥した。生成物をＡＣＮ（５ｍＬ）および脱イオン水（４０ｍＬ）で希釈した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（４０６．１ｍｇ、４６４．５７μｍｏｌ、７１．３０％収率、９７％純度）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、９．４３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．４０（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４８（ｍ、１Ｈ）、６．４４－６．３９（ｍ、１Ｈ）、５．８３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７ Ｈｚ、１Ｈ）、４．９２－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．３１－４．２２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３３－３．２９（ｍ、８Ｈ）、３．１２－３．０２（ｍ、３Ｈ）、２．８８－２．６６（ｍ、７Ｈ）、２．１２－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９７－１．７９（ｍ、７Ｈ）、１．５２－１．３７（ｍ、２Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
【0236】
実施例３３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３３）の合成
段階１．ベンジル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．６ｇ、４．０５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（８００．００ｍｇ、５．０３ｍｍｏｌ、５５５．５６μＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（１．６８ｇ、１２．１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠７０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１９ｇ、２．３９ｍｍｏｌ、５９．０３％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９８．３
【化42】
段階１．ベンジル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中のベンジル（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．６ｇ、４．０５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（８００．００ｍｇ、５．０３ｍｍｏｌ、５５５．５６μＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（１．６８ｇ、１２．１５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠７０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１９ｇ、２．３９ｍｍｏｌ、５９．０３％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９８．３
【0237】
段階２．４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－アミン（４）の合成
【0238】
ＴＦＡ（２０ｍＬ）中のベンジル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２．２８ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）溶液を６０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１３％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（６２％）を確認した。混合物を６０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより６％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（６７％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－アミン（２．２ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６４．０
【0239】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－アミン（２．２ｇ、４．６１ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＮａＯＨ（１Ｍ、７ｍＬ）およびＢｏｃ２Ｏ（２．０１ｇ、９．２２ｍｍｏｌ、２．１２ｍＬ）を０℃で添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、残渣Ａを得た。水相を減圧濃縮した。粗生成物を飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈した後、Ｂｏｃ２Ｏ（１．０１ｇ、４．６１ｍｍｏｌ、１．０６ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を真空濃縮し、残渣Ｂを得た。残渣Ａ、Ｂを合わせてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１７ｇ、２．２７ｍｍｏｌ、４９．３０％収率、９０％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝３６４．３
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－アミン（２．２ｇ、４．６１ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液にＮａＯＨ（１Ｍ、７ｍＬ）およびＢｏｃ２Ｏ（２．０１ｇ、９．２２ｍｍｏｌ、２．１２ｍＬ）を０℃で添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、残渣Ａを得た。水相を減圧濃縮した。粗生成物を飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈した後、Ｂｏｃ２Ｏ（１．０１ｇ、４．６１ｍｍｏｌ、１．０６ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ過物を真空濃縮し、残渣Ｂを得た。残渣Ａ、Ｂを合わせてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１７ｇ、２．２７ｍｍｏｌ、４９．３０％収率、９０％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝３６４．３
【0240】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（６）の合成
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１７ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（８４５．８０ｍｇ、１５．１４ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（８１０．０６ｍｇ、１５．１４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＭＦ（２０ｍＬ）およびエタノール（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（４６０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、４２．０４％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３４．３
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１．１７ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（８４５．８０ｍｇ、１５．１４ｍｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（８１０．０６ｍｇ、１５．１４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＭＦ（２０ｍＬ）およびエタノール（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（４６０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、４２．０４％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３４．３
【0241】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８）の合成
ＡＣＮ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（４６０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４４２．０７ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（４８３．７１ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ、２２３．９４μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート残っていることと所望の質量を確認した。さらに３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４０７．４４ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４４５．６５ｍｇ、５．３０ｍｍｏｌ、２０６．３２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメートが完全に消費されたことを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて真空乾燥した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１９０ｍｇ、２８９．５４μｍｏｌ、２７．２９％収率、８３％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．２
ＡＣＮ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（４６０ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）および３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４４２．０７ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）溶液にＮａＨＣＯ３（４８３．７１ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ、２２３．９４μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート残っていることと所望の質量を確認した。さらに３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（４０７．４４ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（４４５．６５ｍｇ、５．３０ｍｍｏｌ、２０６．３２μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメートが完全に消費されたことを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて真空乾燥した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１９０ｍｇ、２８９．５４μｍｏｌ、２７．２９％収率、８３％純度）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．２
【0242】
段階６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（９）の合成
メタノール（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１００．２９ｍｇ、１８４．１４μｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（２１．８０ｍｇ、２６８．６３μｍｏｌ、２０μＬ、３７％純度）溶液にＡｃＯＨ（１０．４１ｍｇ、１７３．３１μｍｏｌ、９．９１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３２．６７ｍｇ、５１９．９４μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．１９μｍｏｌ、８２．６２％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５９．３
メタノール（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１００．２９ｍｇ、１８４．１４μｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（２１．８０ｍｇ、２６８．６３μｍｏｌ、２０μＬ、３７％純度）溶液にＡｃＯＨ（１０．４１ｍｇ、１７３．３１μｍｏｌ、９．９１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３２．６７ｍｇ、５１９．９４μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．１９μｍｏｌ、８２．６２％収率）を褐色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５９．３
【0243】
段階７．３－（（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１０）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．１９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（２４６．４０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ、１６０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１６％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（５４％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５９．１
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４３．１９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（２４６．４０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ、１６０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１６％の出発物質が残っていることと所望の質量のピーク（５４％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、３－（（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５９．１
【0244】
段階８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３３）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５ｍｇ、１０６．７９μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５０．６０ｍｇ、１３３．０７μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２９．７９ｍｇ、２３０．５３μｍｏｌ、４０．１５μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１５分間攪拌した。その後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０．００ｍｇ、１３９．７２μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（１４８．９７ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、２００．７７μＬ）溶液を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％、７分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３１．６ｍｇ、２５．４１μｍｏｌ、２２．９１％収率、９６．８％純度、３ＴＦＡ）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７－１０．７５（ｍ、１Ｈ）、１０．０１－９．６３（ｍ、１Ｈ）、９．５４－９．４２（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．１７（ｍ、２Ｈ）、７．４７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、６．７３－６．６２（ｍ、２Ｈ）、６．５７－６．５０（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．７７－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．１３－４．０２（ｍ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．６９－３．５６（ｍ、２Ｈ）、３．４０－３．１８（ｍ、９Ｈ）、３．１３－３．０５（ｍ、２Ｈ）、２．９０－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．６６（ｓ、３Ｈ）、２．５７－２．５０（ｍ、３Ｈ）、２．３０－２．２０（ｍ、１Ｈ）、２．１７－２．０７（ｍ、３Ｈ）、２．０４－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８９－１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７９－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５ｍｇ、１０６．７９μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５０．６０ｍｇ、１３３．０７μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２９．７９ｍｇ、２３０．５３μｍｏｌ、４０．１５μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１５分間攪拌した。その後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）（メチル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（８０．００ｍｇ、１３９．７２μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（１４８．９７ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、２００．７７μＬ）溶液を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～４８％、７分）によって再精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）（メチル）アミノ）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３１．６ｍｇ、２５．４１μｍｏｌ、２２．９１％収率、９６．８％純度、３ＴＦＡ）を青色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７－１０．７５（ｍ、１Ｈ）、１０．０１－９．６３（ｍ、１Ｈ）、９．５４－９．４２（ｍ、１Ｈ）、８．３１－８．１７（ｍ、２Ｈ）、７．４７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、６．７３－６．６２（ｍ、２Ｈ）、６．５７－６．５０（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．７７－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．１３－４．０２（ｍ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．６９－３．５６（ｍ、２Ｈ）、３．４０－３．１８（ｍ、９Ｈ）、３．１３－３．０５（ｍ、２Ｈ）、２．９０－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．６６（ｓ、３Ｈ）、２．５７－２．５０（ｍ、３Ｈ）、２．３０－２．２０（ｍ、１Ｈ）、２．１７－２．０７（ｍ、３Ｈ）、２．０４－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８９－１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７９－１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７ Ｈｚ、６Ｈ）。
【0245】
実施例３４．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３４）の合成
段階１．ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中のベンジル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、８．０９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）カルバメート（１．７３ｇ、８．０９ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（４８５．６８ｍｇ、８．０９ｍｍｏｌ、４６２．５５μＬ）の混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１．５２ｇ、２４．２６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）でケンチングし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を精製し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．６ｇ、８．０８ｍｍｏｌ、９９．８９％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
【化43】
段階１．ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中のベンジル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、８．０９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）カルバメート（１．７３ｇ、８．０９ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（４８５．６８ｍｇ、８．０９ｍｍｏｌ、４６２．５５μＬ）の混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１．５２ｇ、２４．２６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）でケンチングし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を精製し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．６ｇ、８．０８ｍｍｏｌ、９９．８９％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
【0246】
段階２．ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（４）の合成
メタノール（３０ｍＬ）中のベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．６ｇ、８．０８ｍｍｏｌ）、ホルムアルデヒド（１．３１ｇ、１６．１６ｍｍｏｌ、１．２０ｍＬ、３７％ ｉｎ Ｈ２Ｏ）およびＡｃＯＨ（４８５．１５ｍｇ、８．０８ｍｍｏｌ、４６２．０５μＬ）の混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（１．５２ｇ、２４．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、大部分の溶媒を除去した。混合物をＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）でケンチングし、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．７ｇ、８．０５ｍｍｏｌ、９９．６４％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６０．３
メタノール（３０ｍＬ）中のベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．６ｇ、８．０８ｍｍｏｌ）、ホルムアルデヒド（１．３１ｇ、１６．１６ｍｍｏｌ、１．２０ｍＬ、３７％ ｉｎ Ｈ２Ｏ）およびＡｃＯＨ（４８５．１５ｍｇ、８．０８ｍｍｏｌ、４６２．０５μＬ）の混合物を２０℃で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（１．５２ｇ、２４．２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を真空濃縮し、大部分の溶媒を除去した。混合物をＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）でケンチングし、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．７ｇ、８．０５ｍｍｏｌ、９９．６４％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６０．３
【0247】
段階３．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（メチル（ピペリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５）の合成
メタノール（４０ｍＬ）中のベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．７ｇ、８．０５ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ／Ｃ（３７０ｍｇ、８．０５ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２下で添加し、脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃で４４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（メチル（ピペリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（２．６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２６．２
メタノール（４０ｍＬ）中のベンジル４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３．７ｇ、８．０５ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ／Ｃ（３７０ｍｇ、８．０５ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２下で添加し、脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃で４４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（メチル（ピペリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（２．６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２６．２
【0248】
段階４．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（７）の合成
ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（メチル（ピペリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、粗製）、１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（２４４．３９ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１６９．７１μＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（６３６．９２ｍｇ、４．６１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を塩水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、７０．０６％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６５．３
ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（メチル（ピペリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、粗製）、１，２－ジフルオロ－４－ニトロベンゼン（２４４．３９ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１６９．７１μＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（６３６．９２ｍｇ、４．６１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を塩水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ ２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、７０．０６％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６５．３
【0249】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（８）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２下で添加し、脱気した後、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（４５０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．３
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（２－フルオロ－４－ニトロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（５００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２下で添加し、脱気した後、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下、１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物をセライトパッドでろ過した。ろ過物を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（４５０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３５．３
【0250】
段階６．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（１０）の合成
ＡＣＮ（５ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（３０９．２７ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（３５０ｍｇ、粗製）溶液にＮａＨＣＯ３（３３８．２８ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、１５６．６１μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（４００ｍｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４６．４
ＡＣＮ（５ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（３０９．２７ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－アミノ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（３５０ｍｇ、粗製）溶液にＮａＨＣＯ３（３３８．２８ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、１５６．６１μＬ）を添加し、混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（４００ｍｇ、粗製）を灰色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４６．４
【0251】
段階７．３－（（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（１００ｍｇ、１８３．２６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）カルバメート（１００ｍｇ、１８３．２６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を真空濃縮し、３－（（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
【0252】
段階８．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３４）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７９．９６ｍｇ、１７８．７０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．９２ｍｇ、２６８．０５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１１５．４８ｍｇ、８９３．５０μｍｏｌ、１５５．６３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。３－（（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した後、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）－３－メトキシベンズアミド（３９．９ｍｇ、４４．２３μｍｏｌ、２４．７５％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７５．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３０－８．２１（ｍ、２Ｈ）、８．０６（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４５（ｍ、１Ｈ）、６．４４－６．３７（ｍ、１Ｈ）、５．７７（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．３０－４．２０（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７８－３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．１６－３．０５（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５３（ｍ、３Ｈ）、２．３５－２．３２（ｍ、１Ｈ）、２．２３－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｓ、３Ｈ）、２．１３－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．８１（ｍ、５Ｈ）、１．８０－１．６７（ｍ、６Ｈ）、１．６６－１．５４（ｍ、４Ｈ）、１．５１－１．４２（ｍ、１Ｈ）、１．４１－１．２９（ｍ、４Ｈ）、１．２７－１．１５（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７９．９６ｍｇ、１７８．７０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０１．９２ｍｇ、２６８．０５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１１５．４８ｍｇ、８９３．５０μｍｏｌ、１５５．６３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。３－（（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロへキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）アミノ）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を塩水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した後、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）アミノ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロへキシル）－３－メトキシベンズアミド（３９．９ｍｇ、４４．２３μｍｏｌ、２４．７５％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８７５．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．３０－８．２１（ｍ、２Ｈ）、８．０６（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．４４（ｍ、２Ｈ）、６．８３（ｔ、Ｊ＝９．３ Ｈｚ、１Ｈ）、６．５４－６．４５（ｍ、１Ｈ）、６．４４－６．３７（ｍ、１Ｈ）、５．７７（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８２－４．７０（ｍ、１Ｈ）、４．３０－４．２０（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７８－３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．１６－３．０５（ｍ、２Ｈ）、２．７７－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．６１－２．５３（ｍ、３Ｈ）、２．３５－２．３２（ｍ、１Ｈ）、２．２３－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｓ、３Ｈ）、２．１３－２．０４（ｍ、１Ｈ）、１．９８－１．８１（ｍ、５Ｈ）、１．８０－１．６７（ｍ、６Ｈ）、１．６６－１．５４（ｍ、４Ｈ）、１．５１－１．４２（ｍ、１Ｈ）、１．４１－１．２９（ｍ、４Ｈ）、１．２７－１．１５（ｍ、２Ｈ）。
【0253】
実施例３５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３５）の合成
段階１．４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２）の合成
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中のピペリジン－４－イルメタノール（１０ｇ、８６．８３ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１３．１８ｇ、１３０．２４ｍｍｏｌ、１８．１３ｍＬ）およびＤＭＡＰ（５３０．３７ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ）を添加した後、ｔｅｒｔ－ブチルクロロジフェニルシラン（３５．８０ｇ、１３０．２４ｍｍｏｌ、３３．４６ｍＬ）を一滴ずつ添加した。混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）によりピペリジン－４－イルメタノールが完全に消費されたことと一つの新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を０℃で水（１００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ＭＴＢＥで粉砕し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（９．６ｇ、２７．１５ｍｍｏｌ、３１．２７％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５４．６
【化44】
段階１．４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２）の合成
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中のピペリジン－４－イルメタノール（１０ｇ、８６．８３ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１３．１８ｇ、１３０．２４ｍｍｏｌ、１８．１３ｍＬ）およびＤＭＡＰ（５３０．３７ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ）を添加した後、ｔｅｒｔ－ブチルクロロジフェニルシラン（３５．８０ｇ、１３０．２４ｍｍｏｌ、３３．４６ｍＬ）を一滴ずつ添加した。混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）によりピペリジン－４－イルメタノールが完全に消費されたことと一つの新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を０℃で水（１００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ＭＴＢＥで粉砕し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（９．６ｇ、２７．１５ｍｍｏｌ、３１．２７％収率）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５４．６
【0254】
段階２．４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノール（４）の合成
ジオキサン（１２ｍＬ）中の４－ブロモ－３－フルオロフェノール（５００ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．０２ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）、ＤａｖｅＰｈｏｓ（１６４．８４ｍｇ、４１８．８５μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１４３．８３ｍｇ、１５７．０７μｍｏｌ）およびＮａＯＢｕ－ｔ（２Ｍ、３．９３ｍＬ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３８％の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンが残っていることを確認した。ＬＣＭＳにより数個の新たなピークと所望の化合物のピーク（３１％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノール（４００ｍｇ、８１９．５７μｍｏｌ、３１．３１％収率、９５％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．２
ジオキサン（１２ｍＬ）中の４－ブロモ－３－フルオロフェノール（５００ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．０２ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）、ＤａｖｅＰｈｏｓ（１６４．８４ｍｇ、４１８．８５μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１４３．８３ｍｇ、１５７．０７μｍｏｌ）およびＮａＯＢｕ－ｔ（２Ｍ、３．９３ｍＬ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３８％の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンが残っていることを確認した。ＬＣＭＳにより数個の新たなピークと所望の化合物のピーク（３１％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１６％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノール（４００ｍｇ、８１９．５７μｍｏｌ、３１．３１％収率、９５％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．２
【0255】
段階３．３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノール（２００ｍｇ、４３１．３５μｍｏｌ）溶液にＮａＨ（４３．１４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、６０％純度）を０℃で添加し、混合物を０℃で１時間攪拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（９１．１１ｍｇ、４７４．４９μｍｏｌ）溶液を０℃で一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４０％の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノールが残っていることと所望の質量のピーク（５２％）を確認した。その後、混合物をさらに２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１、Ｒｆ＝０．２３）でより大きい極性の一つの新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物に飽和アンモニウムクロライド水溶液（１５ｍＬ）を０℃で添加し、ケンチングした後、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１９０ｍｇ、３２０．６６μｍｏｌ、７４．３４％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７５．４
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノール（２００ｍｇ、４３１．３５μｍｏｌ）溶液にＮａＨ（４３．１４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、６０％純度）を０℃で添加し、混合物を０℃で１時間攪拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（９１．１１ｍｇ、４７４．４９μｍｏｌ）溶液を０℃で一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４０％の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノールが残っていることと所望の質量のピーク（５２％）を確認した。その後、混合物をさらに２時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１、Ｒｆ＝０．２３）でより大きい極性の一つの新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物に飽和アンモニウムクロライド水溶液（１５ｍＬ）を０℃で添加し、ケンチングした後、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～４５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１９０ｍｇ、３２０．６６μｍｏｌ、７４．３４％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７５．４
【0256】
段階４．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１４０ｍｇ、２４３．５８μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（７４．００ｍｇ、４８７．１６μｍｏｌ、１７．９６μＬ）を添加した。混合物を３０℃で２．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより９％の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが残っていることと所望の質量のピーク（４４％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）を抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、１４８．６５μｍｏｌ、６１．０３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝７．７６（ｓ、１Ｈ）、６．９９－６．８７（ｍ、１Ｈ）、６．８５－６．７４（ｍ、２Ｈ）、４．７７（ｄｄ、Ｊ＝４．４、７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５８（ｄ、Ｊ＝６．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．４４－３．３３（ｍ、２Ｈ）、３．０２－２．９０（ｍ、１Ｈ）、２．７４－２．５８（ｍ、３Ｈ）、２．３８－２．２３（ｍ、２Ｈ）、１．９１－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．６９－１．５９（ｍ、１Ｈ）、１．５１－１．４１（ｍ、２Ｈ）、１．３７－１．２９（ｍ、１Ｈ）。
ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１４０ｍｇ、２４３．５８μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（７４．００ｍｇ、４８７．１６μｍｏｌ、１７．９６μＬ）を添加した。混合物を３０℃で２．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより９％の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが残っていることと所望の質量のピーク（４４％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）を抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、１４８．６５μｍｏｌ、６１．０３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３７．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝７．７６（ｓ、１Ｈ）、６．９９－６．８７（ｍ、１Ｈ）、６．８５－６．７４（ｍ、２Ｈ）、４．７７（ｄｄ、Ｊ＝４．４、７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５８（ｄ、Ｊ＝６．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．４４－３．３３（ｍ、２Ｈ）、３．０２－２．９０（ｍ、１Ｈ）、２．７４－２．５８（ｍ、３Ｈ）、２．３８－２．２３（ｍ、２Ｈ）、１．９１－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．６９－１．５９（ｍ、１Ｈ）、１．５１－１．４１（ｍ、２Ｈ）、１．３７－１．２９（ｍ、１Ｈ）。
【0257】
段階５．１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（７）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、１４８．６５μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（７５．６６ｍｇ、１７８．３８μｍｏｌ、５５．２３μＬ）を添加した。混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンの一部が残っていることを確認した。その後、混合物をさらに２時間攪拌し、ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４９ｍｇ、粗製）を黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋１８）＋ ＝３５３．１
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、１４８．６５μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（７５．６６ｍｇ、１７８．３８μｍｏｌ、５５．２３μＬ）を添加した。混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンの一部が残っていることを確認した。その後、混合物をさらに２時間攪拌し、ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４９ｍｇ、粗製）を黄色の固体として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋１８）＋ ＝３５３．１
【0258】
段階６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３５）の合成
ＤＣＥ（０．５ｍＬ）中の１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４９ｍｇ、１４６．５６μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７６．５１ｍｇ、１３１．９０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＯＡｃ（１８．０３ｍｇ、２１９．８４μｍｏｌ）を２０℃で添加した。添加後、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１５５．３１ｍｇ、７３２．７８μｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことと所望の質量の一つのピーク（５２％）を確認した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）を添加し、０℃でケンチングした後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これを分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝５：１）によって精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、１０分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４４％～７４％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．２ｍｇ、１１．３６μｍｏｌ、７．７５％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．９２（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９６（ｔ、Ｊ＝９．４ Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｄｄ、Ｊ＝２．７、１３．９ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７７－６．７４（ｍ、１Ｈ）、５．１３－５．０９（ｍ １Ｈ）、４．９３－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２１－３．１８（ｍ、２Ｈ）、２．６６－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．５７－２．５６（ｍ、２Ｈ）、２．３２－２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．２６－２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．１９－２．０８（ｍ、６Ｈ）、１．８５－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６４－１．５２（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、８Ｈ）。
ＤＣＥ（０．５ｍＬ）中の１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４９ｍｇ、１４６．５６μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７６．５１ｍｇ、１３１．９０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＯＡｃ（１８．０３ｍｇ、２１９．８４μｍｏｌ）を２０℃で添加した。添加後、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１５５．３１ｍｇ、７３２．７８μｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことと所望の質量の一つのピーク（５２％）を確認した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）を添加し、０℃でケンチングした後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これを分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝５：１）によって精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、１０分）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４４％～７４％、８分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．２ｍｇ、１１．３６μｍｏｌ、７．７５％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．９２（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９６（ｔ、Ｊ＝９．４ Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｄｄ、Ｊ＝２．７、１３．９ Ｈｚ、１Ｈ）、６．７７－６．７４（ｍ、１Ｈ）、５．１３－５．０９（ｍ １Ｈ）、４．９３－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２１－３．１８（ｍ、２Ｈ）、２．６６－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．５７－２．５６（ｍ、２Ｈ）、２．３２－２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．２６－２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．１９－２．０８（ｍ、６Ｈ）、１．８５－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６４－１．５２（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈｚ、８Ｈ）。
【0259】
実施例３６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３６）の合成
段階１．４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４－ブロモフェノール（４５０ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．０１ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）、ＤａｖｅＰｈｏｓ（２０４．７３ｍｇ、５２０．２１μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１４２．９１ｍｇ、１５６．０６μｍｏｌ）およびＮａＯＢｕ－ｔ（２Ｍ、３．９０ｍＬ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１２％の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンが残っていることと所望の化合物のピーク（５４％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（６５０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ、５３．８３％収率、９６％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
【化45】
段階１．４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４－ブロモフェノール（４５０ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．０１ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）、ＤａｖｅＰｈｏｓ（２０４．７３ｍｇ、５２０．２１μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１４２．９１ｍｇ、１５６．０６μｍｏｌ）およびＮａＯＢｕ－ｔ（２Ｍ、３．９０ｍＬ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１２％の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンが残っていることと所望の化合物のピーク（５４％）を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（６５０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ、５３．８３％収率、９６％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
【0260】
段階２．３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（３２０ｍｇ、７１８．０２μｍｏｌ）溶液にＮａＨ（７１．８０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、６０％純度）を０℃で添加した。添加後、混合物を０℃で１時間攪拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１６５．４４ｍｇ、８６１．６３μｍｏｌ）溶液を０℃で一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノールが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃でケンチングし、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、６６２．０４μｍｏｌ、９２．２０％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．３
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノール（３２０ｍｇ、７１８．０２μｍｏｌ）溶液にＮａＨ（７１．８０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、６０％純度）を０℃で添加した。添加後、混合物を０℃で１時間攪拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（１６５．４４ｍｇ、８６１．６３μｍｏｌ）溶液を０℃で一滴ずつ添加し、生成された混合物を２０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノールが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（２０ｍＬ）で０℃でケンチングし、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、６６２．０４μｍｏｌ、９２．２０％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５７．３
【0261】
段階３．３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、６８２．５１μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（２０７．３５ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、５０．３３μＬ）を添加した。混合物を３０℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（１０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、３７６．９２μｍｏｌ、５５．２３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．１
ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（３８０ｍｇ、６８２．５１μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（２０７．３５ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、５０．３３μＬ）を添加した。混合物を３０℃で４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと所望の質量を確認した。反応混合物を飽和アンモニウムクロライド水溶液（１０ｍＬ）で０℃で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、３７６．９２μｍｏｌ、５５．２３％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．１
【0262】
段階４．１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（７）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１８８．４６μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９５．９２ｍｇ、２２６．１５μｍｏｌ、７０．０２μＬ）を添加した。混合物を２０℃で５時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝０：１、Ｒｆ＝０．７）で３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたこととより低い極性の新規スポットが形成されることを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５９ｍｇ、粗製）を赤色の固体として得て、これをさらなる精製なしに次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．４
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１８８．４６μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９５．９２ｍｇ、２２６．１５μｍｏｌ、７０．０２μＬ）を添加した。混合物を２０℃で５時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝０：１、Ｒｆ＝０．７）で３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェノキシ）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたこととより低い極性の新規スポットが形成されることを確認した。反応混合物をろ過し、ろ過物を濃縮し、１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５９ｍｇ、粗製）を赤色の固体として得て、これをさらなる精製なしに次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．４
【0263】
段階５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３６）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５９ｍｇ、１８６．５０μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（９７．３７ｍｇ、１６７．８５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＯＡｃ（２２．９５ｍｇ、２７９．７５μｍｏｌ）を２０℃で添加した。添加後、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２３７．１６ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝５：１）で４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミドが残っていることとより低い極性の数個の新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で０℃で希釈した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これを分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝５：１）後、（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、９分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．０ｍｇ、１０．９０μｍｏｌ、５．８４％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８８（ｓ、１Ｈ）、８．４２－８．４０（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．９２－７．８４（ｍ、１Ｈ）、７．５６－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９９－６．７８（ｍ、４Ｈ）、５．０１－５．０（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．５０（ｄ、Ｊ＝１２．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、２．７３－２．６３（ｍ、２Ｈ）、２．６２－２．５８（ｍ、２Ｈ）、２．３２－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．２４－２．１８（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．０１（ｍ、６Ｈ）、１．８６－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５０（ｍ、５Ｈ）、１．３０－１．１３（ｍ、８Ｈ）。
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５９ｍｇ、１８６．５０μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（９７．３７ｍｇ、１６７．８５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＯＡｃ（２２．９５ｍｇ、２７９．７５μｍｏｌ）を２０℃で添加した。添加後、混合物を２０℃で１時間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２３７．１６ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝５：１）で４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミドが残っていることとより低い極性の数個の新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で０℃で希釈した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得て、これを分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝５：１）後、（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、９分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）オキシ）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．０ｍｇ、１０．９０μｍｏｌ、５．８４％収率、９２％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８８（ｓ、１Ｈ）、８．４２－８．４０（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．９２－７．８４（ｍ、１Ｈ）、７．５６－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９９－６．７８（ｍ、４Ｈ）、５．０１－５．０（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．５０（ｄ、Ｊ＝１２．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、２．７３－２．６３（ｍ、２Ｈ）、２．６２－２．５８（ｍ、２Ｈ）、２．３２－２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．２４－２．１８（ｍ、２Ｈ）、２．１８－２．０１（ｍ、６Ｈ）、１．８６－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５０（ｍ、５Ｈ）、１．３０－１．１３（ｍ、８Ｈ）。
【0264】
実施例３７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３７）の合成
段階１．４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（２）の合成
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中の２－（ピペリジン－４－イル）エタン－１－オール（１０ｇ、７７．４０ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１５．６６ｇ、１５４．８０ｍｍｏｌ、２１．５５ｍＬ）およびＤＭＡＰ（４７２．７９ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）を添加し、ｔｅｒｔ－ブチル－クロロ－ジフェニル－シラン（３１．９１ｇ、１１６．１０ｍｍｏｌ、２９．８２ｍＬ）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）を確認した。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、生成物を得て、これをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で２０℃で３０分間粉砕し、ろ過し、４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（２．５４ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、８．４８％収率、９５％）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６８．２
【化46】
段階１．４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（２）の合成
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中の２－（ピペリジン－４－イル）エタン－１－オール（１０ｇ、７７．４０ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１５．６６ｇ、１５４．８０ｍｍｏｌ、２１．５５ｍＬ）およびＤＭＡＰ（４７２．７９ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）を添加し、ｔｅｒｔ－ブチル－クロロ－ジフェニル－シラン（３１．９１ｇ、１１６．１０ｍｍｏｌ、２９．８２ｍＬ）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）を確認した。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、生成物を得て、これをＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で２０℃で３０分間粉砕し、ろ過し、４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（２．５４ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、８．４８％収率、９５％）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６８．２
【0265】
段階２．３－（４－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（４５０ｍｇ、９８１．８８μｍｏｌ）溶液に４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（３６０．９４ｍｇ、９８１．８８μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（６３９．８３ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（４７．７６ｍｇ、４９．０９μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認し、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（７３０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４５．３
ジオキサン（１０ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（４５０ｍｇ、９８１．８８μｍｏｌ）溶液に４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン（３６０．９４ｍｇ、９８１．８８μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（６３９．８３ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（４７．７６ｍｇ、４９．０９μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃でＮ２気体下、１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認し、混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（７３０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４５．３
【0266】
段階３．３－（４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（７３０ｍｇ、９７９．８８μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（２２３．２７ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ、５４．１９μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～６５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、３６３．２１ μｍｏｌ、３７．０７％収率、９２％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０７．３
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（７３０ｍｇ、９７９．８８μｍｏｌ）溶液にＣｓＦ（２２３．２７ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ、５４．１９μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～６５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、３－（４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、３６３．２１ μｍｏｌ、３７．０７％収率、９２％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０７．３
【0267】
段階４．２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（５）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、３９４．８０μｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１１９．８５ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ、１６４．８５μＬ）、ＴｏｓＣｌ（１１２．９０ｍｇ、５９２．１９μｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．８２ｍｇ、３９．４８μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×２）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２００ｍｇ、２３６．０９μｍｏｌ、５９．８０％収率、７８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６１．２
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、３９４．８０μｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（１１９．８５ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ、１６４．８５μＬ）、ＴｏｓＣｌ（１１２．９０ｍｇ、５９２．１９μｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．８２ｍｇ、３９．４８μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×２）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）によって精製し、２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２００ｍｇ、２３６．０９μｍｏｌ、５９．８０％収率、７８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６１．２
【0268】
段階５．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２００ｍｇ、３０２．６７μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－（４－ピペリジル）カルバメート（９０．９３ｍｇ、４５４．０１μｍｏｌ）溶液にＤＩＥＡ（１１７．３５ｍｇ、９０８．０２μｍｏｌ）およびＮａＩ（４．５４ｍｇ、３０．２７μｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２１０ｍｇ、粗製）を褐色の固体として得た。粗生成物を次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋ ＝６８９．４
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホナート（２００ｍｇ、３０２．６７μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルＮ－（４－ピペリジル）カルバメート（９０．９３ｍｇ、４５４．０１μｍｏｌ）溶液にＤＩＥＡ（１１７．３５ｍｇ、９０８．０２μｍｏｌ）およびＮａＩ（４．５４ｍｇ、３０．２７μｍｏｌ）を２０℃で添加した。生成された混合物を８０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２１０ｍｇ、粗製）を褐色の固体として得た。粗生成物を次の段階にて直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋ ＝６８９．４
【0269】
段階６．３－（４－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
トルエン（９ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、粗製）溶液にＭｓＯＨ（４．０５ｇ、４２．１４ｍｍｏｌ、３ｍＬ）を添加し、混合物を１００℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物をＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）水溶液で希釈し、、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、水相を凍結乾燥により濃縮し、白色の固体を得て、前記固体をＴＨＦ（５０ｍＬ）で粉砕し、２０℃で１時間攪拌し、ろ過し、ろ過物を真空濃縮し、３－（４－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６９．３
トルエン（９ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（２－（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、粗製）溶液にＭｓＯＨ（４．０５ｇ、４２．１４ｍｍｏｌ、３ｍＬ）を添加し、混合物を１００℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認し、混合物をＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）水溶液で希釈し、、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、水相を凍結乾燥により濃縮し、白色の固体を得て、前記固体をＴＨＦ（５０ｍＬ）で粉砕し、２０℃で１時間攪拌し、ろ過し、ろ過物を真空濃縮し、３－（４－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６９．３
【0270】
段階７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３７）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３０ｍｇ、６７．０５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３８．２４ｍｇ、１００．５７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２６．００ｍｇ、２０１．１５μｍｏｌ、３５．０４μＬ）を添加した後、３－（４－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（３８．７９ｍｇ、粗製）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４８％～７８％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ －ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（１－（１－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－３－メチル－２－オキソ－ベンジミダゾール－４－イル）－４－ピペリジル）エチル）－４－ピペリジル－３－メトキシベンズアミド（８．５ｍｇ、８．９９μｍｏｌ、１３．４１％収率、９５％純度）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．１０（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０２－６．８３（ｍ、３Ｈ）、５．３６（ｄｄ、Ｊ＝５．３、１２．５ Ｈｚ、１Ｈ）、４．７７（ｔ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、Ｊ＝１４．２ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８４－３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．１０（ｄ、Ｊ＝９．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝９．７ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７４－２．６０（ｍ、４Ｈ）、２．３７－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．０７－１．８７（ｍ、６Ｈ）、１．９０－１．７８（ｍ、４Ｈ）、１．７６－１．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５２（ｍ、６Ｈ）、１．４９－１．３４（ｍ、５Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３０ｍｇ、６７．０５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３８．２４ｍｇ、１００．５７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２６．００ｍｇ、２０１．１５μｍｏｌ、３５．０４μＬ）を添加した後、３－（４－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（３８．７９ｍｇ、粗製）を添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認し、混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４８％～７８％、８分）によって精製し、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ －ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（２－（１－（１－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）－３－メチル－２－オキソ－ベンジミダゾール－４－イル）－４－ピペリジル）エチル）－４－ピペリジル－３－メトキシベンズアミド（８．５ｍｇ、８．９９μｍｏｌ、１３．４１％収率、９５％純度）を白色のパウダーとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．１０（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０２－６．８３（ｍ、３Ｈ）、５．３６（ｄｄ、Ｊ＝５．３、１２．５ Ｈｚ、１Ｈ）、４．７７（ｔ、Ｊ＝８．３ Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、Ｊ＝１４．２ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８４－３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．１０（ｄ、Ｊ＝９．８ Ｈｚ、２Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝９．７ Ｈｚ、２Ｈ）、２．７４－２．６０（ｍ、４Ｈ）、２．３７－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．０７－１．８７（ｍ、６Ｈ）、１．９０－１．７８（ｍ、４Ｈ）、１．７６－１．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５２（ｍ、６Ｈ）、１．４９－１．３４（ｍ、５Ｈ）。
【0271】
実施例３８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３８）の合成
段階１．５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニルクロリド（２）の合成
５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボン酸（１０ｇ、７６．８６ｍｍｏｌ）にＳＯＣｌ２（２０ｍＬ）を０℃でゆっくりと添加し、混合物を８５℃で２時間攪拌した後、混合物を１５℃で４時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により出発物質が完全に消費されたことを確認し、より低い極性の一つの主要な新たなスポットが形成されることを確認した。混合物を真空濃縮し、５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニルクロリド（１１ｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４９．５
【化47】
５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボン酸（１０ｇ、７６．８６ｍｍｏｌ）にＳＯＣｌ２（２０ｍＬ）を０℃でゆっくりと添加し、混合物を８５℃で２時間攪拌した後、混合物を１５℃で４時間攪拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により出発物質が完全に消費されたことを確認し、より低い極性の一つの主要な新たなスポットが形成されることを確認した。混合物を真空濃縮し、５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニルクロリド（１１ｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４９．５
【0272】
段階２．Ｎ－（４－メトキシベンジル）－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボキサミド（３）の合成
５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニルクロリド（１１ｇ、７４．０５ｍｍｏｌ）をＤｒｙ ＤＣＭ（１００ｍＬ）に０℃でＮ２下で溶解させた。その後、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のＴＥＡ（１４．９９ｇ、１４８．１０ｍｍｏｌ、２０．６１ｍＬ）およびＰＭＢＮＨ２（８．１３ｇ、５９．２４ｍｍｏｌ、７．６７ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を０．５ Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、Ｎ－（４－メトキシベンジル）－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボキサミド（１０ｇ、４０．１２ｍｍｏｌ、５４．１８％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５０．０
５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニルクロリド（１１ｇ、７４．０５ｍｍｏｌ）をＤｒｙ ＤＣＭ（１００ｍＬ）に０℃でＮ２下で溶解させた。その後、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のＴＥＡ（１４．９９ｇ、１４８．１０ｍｍｏｌ、２０．６１ｍＬ）およびＰＭＢＮＨ２（８．１３ｇ、５９．２４ｍｍｏｌ、７．６７ｍＬ）を添加し、混合物を１５℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を０．５ Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、Ｎ－（４－メトキシベンジル）－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボキサミド（１０ｇ、４０．１２ｍｍｏｌ、５４．１８％収率）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５０．０
【0273】
段階３．３－ヒドロキシ－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
【0274】
無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＮ－（４－メトキシベンジル）－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボキサミド（１．５ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）溶液を－７８℃で冷却した。その後、無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液中のｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、６．６２ｍＬ）（１ Ｎ ｉｎ ＴＨＦ）を－７８℃で窒素気体下、一滴ずつ添加した。生成された混合物を－４０℃で１時間攪拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル）で出発物質が完全に消費されたことと２つの新たなスポットが形成されることを確認した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）の添加によりケンチングし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、３－ヒドロキシ－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（９００ｍｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５０．３
【0275】
段階４．１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イルトリフルオロメタンスルホナート（５）の合成
【0276】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の３－ヒドロキシ－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（５００ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）およびＰｙ（３１７．４４ｍｇ、４．０１ｍｍｏｌ、３２３．９２μＬ）溶液にＴｆ２Ｏ（８４８．８４ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ、４９６．４０μＬ）を０℃で一滴ずつ添加した。混合物を－１０℃でＮ２下で１．５時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で出発物質が完全に消費されたこととより低い極性の一つの主要な新たなスポットが形成されることを確認した。混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イルトリフルオロメタンスルホナート（７４０ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ、９６．７４％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８１．３
【0277】
段階５．３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の７－ブロモ－１－メチル－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－オン（３９６．５７ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）溶液にｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、２．３３ｍＬ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。次いで、ＴＨＦ（４ｍＬ）中の１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イルトリフルオロメタンスルホナート（７４０ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）を一滴ずつ添加した。生成された反応混合物を２０℃でＮ２下で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）によって再精製し、３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（６００ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６０．０４％収率、８９％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．０
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の７－ブロモ－１－メチル－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－オン（３９６．５７ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）溶液にｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、２．３３ｍＬ）を添加した。混合物を０℃で３０分間攪拌した。次いで、ＴＨＦ（４ｍＬ）中の１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イルトリフルオロメタンスルホナート（７４０ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）を一滴ずつ添加した。生成された反応混合物を２０℃でＮ２下で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピークを確認した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）によって再精製し、３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（６００ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６０．０４％収率、８９％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．０
【0278】
段階６．ベンジル（７－（（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９）の合成
ジオキサン（３ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、６５４．５９μｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２９１．０９ｍｇ、６５４．９７μｍｏｌ、２ＨＣｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（６３．６８ｍｇ、６５．４６μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．０７ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２０％）を確認した。混合物をセライトパッドでろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって再精製し、ベンジル（７－（（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９３．４７μｍｏｌ、１４．２８％収率、Ｎ／Ａ純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４９．４
ジオキサン（３ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、６５４．５９μｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２９１．０９ｍｇ、６５４．９７μｍｏｌ、２ＨＣｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（６３．６８ｍｇ、６５．４６μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．０７ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２０％）を確認した。混合物をセライトパッドでろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって再精製し、ベンジル（７－（（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９３．４７μｍｏｌ、１４．２８％収率、Ｎ／Ａ純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４９．４
【0279】
段階７．３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１０）の合成
ＴＦＡ（０．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９３．４７μｍｏｌ）溶液にＴｆＯＨ（１．１９ｇ、７．９３ｍｍｏｌ、７００．０１μＬ）を添加し、混合物を１００℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９５．３
ＴＦＡ（０．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９３．４７μｍｏｌ）溶液にＴｆＯＨ（１．１９ｇ、７．９３ｍｍｏｌ、７００．０１μＬ）を添加し、混合物を１００℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９５．３
【0280】
段階８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３８）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３５．５５ｍｇ、８４．３７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４６．８５ｍｇ、１２３．２２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３１．８５ｍｇ、２４６．４５μｍｏｌ、４２．９３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加した。混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３７％）を確認した。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４３％～７３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（８．７ｍｇ、９．３０μｍｏｌ、１１．３２％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０８（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．００－６．９３（ｍ、１Ｈ）、６．９２－６．８３（ｍ、２Ｈ）、５．４１－５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、３．１５－３．０６（ｍ、２Ｈ）、２．９２－２．８４（ｍ、１Ｈ）、２．７２－２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．６５－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．２９－２．１１（ｍ、７Ｈ）、２．０３－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．８６－１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．６６－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．３７－１．１７（ｍ、９Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３５．５５ｍｇ、８４．３７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４６．８５ｍｇ、１２３．２２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３１．８５ｍｇ、２４６．４５μｍｏｌ、４２．９３μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を添加した。混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３７％）を確認した。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４３％～７３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（８．７ｍｇ、９．３０μｍｏｌ、１１．３２％収率、９６％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９８．４
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０８（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．００－６．９３（ｍ、１Ｈ）、６．９２－６．８３（ｍ、２Ｈ）、５．４１－５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、３．１５－３．０６（ｍ、２Ｈ）、２．９２－２．８４（ｍ、１Ｈ）、２．７２－２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．６５－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．２９－２．１１（ｍ、７Ｈ）、２．０３－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．８６－１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．６６－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．３７－１．１７（ｍ、９Ｈ）。
【0281】
実施例３９．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３９）の合成
段階１．６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（２）の合成
アセトン（３０ｍＬ）中の６－ブロモ－３－ヨード－１Ｈ－インダゾール（５ｇ、１５．４８ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（２．１７ｇ、３８．７１ｍｍｏｌ）溶液にＭｅＩ（３．３０ｇ、２３．２２ｍｍｏｌ、１．４５ｍＬ）を一滴ずつ添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）により出発物質が一部残っていることとより低い極性の一つの主要な新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをアセトン（５０ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ×２）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２００ｍＬ／分）によって精製し、６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（５．０４ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、９６．６０％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３６．６
【化48】
段階１．６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（２）の合成
アセトン（３０ｍＬ）中の６－ブロモ－３－ヨード－１Ｈ－インダゾール（５ｇ、１５．４８ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（２．１７ｇ、３８．７１ｍｍｏｌ）溶液にＭｅＩ（３．３０ｇ、２３．２２ｍｍｏｌ、１．４５ｍＬ）を一滴ずつ添加し、混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＴＬＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）により出発物質が一部残っていることとより低い極性の一つの主要な新たなスポットが形成されることを確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをアセトン（５０ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ×２）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２００ｍＬ／分）によって精製し、６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（５．０４ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、９６．６０％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３６．６
【0282】
段階２．３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（４）の合成
ＴＨＦ（３６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（１．３ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．８ｇ、３．４５ｍｍｏｌ、８０％純度）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．２５ｇ、６．９０ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７５．７５ｍｇ、１０３．５２μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃でＮ２気体下、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）を確認した。混合物を水（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（１．６ｇ、３．０１ｍｍｏｌ、８７．１０％収率、９４％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５００．３
ＴＨＦ（３６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の６－ブロモ－３－ヨード－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（１．３ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．８ｇ、３．４５ｍｍｏｌ、８０％純度）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．２５ｇ、６．９０ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７５．７５ｍｇ、１０３．５２μｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃でＮ２気体下、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７０％）を確認した。混合物を水（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（１．６ｇ、３．０１ｍｍｏｌ、８７．１０％収率、９４％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５００．３
【0283】
段階３．エチル１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（７）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（８６０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）およびエチルピペリジン－４－カルボキシレート（３６７．２０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ、３６０μＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．６８ｇ、５．１６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３１．４８ｍｇ、３４．３７μｍｏｌ）およびＸＰｈｏｓ（２４．５８ｍｇ、５１．５６μｍｏｌ）を２０℃で添加し、混合物を１００℃でＮ２気体下、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８７％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、エチル１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（８７０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、８７．７８％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７７．４
ジオキサン（１０ｍＬ）中の３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（８６０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）およびエチルピペリジン－４－カルボキシレート（３６７．２０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ、３６０μＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．６８ｇ、５．１６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３１．４８ｍｇ、３４．３７μｍｏｌ）およびＸＰｈｏｓ（２４．５８ｍｇ、５１．５６μｍｏｌ）を２０℃で添加し、混合物を１００℃でＮ２気体下、１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８７％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、エチル１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（８７０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、８７．７８％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７７．４
【0284】
段階４．（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８）の合成
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のエチル１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（８７０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）溶液にＬＡＨ（８７．００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。混合物を水（５ｍＬ）でケンチングし、２０℃で５分間攪拌した。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メタノール（０．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３５．３
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のエチル１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（８７０ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）溶液にＬＡＨ（８７．００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。混合物を水（５ｍＬ）でケンチングし、２０℃で５分間攪拌した。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メタノール（０．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３５．３
【0285】
段階５．３－（６－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）中の（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メタノール（０．８ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１８４．８０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１２０μＬ）を添加した後、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加し、反応混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをエタノール（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＩＰＥＡを添加し、ｐＨ＝７に調整した。混合物を濃縮し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。生成物をエタノール（２ｍＬ）および石油エーテル（１０ｍＬ）で希釈した。混合物をろ過した。ろ過ケーキを集めて、減圧乾燥し、３－（６－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（３７０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、６７．３０％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５７．４
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）中の（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メタノール（０．８ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１８４．８０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１２０μＬ）を添加した後、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下、添加し、反応混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物を２０℃でＨ２（１５Ｐｓｉ）下で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをエタノール（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＩＰＥＡを添加し、ｐＨ＝７に調整した。混合物を濃縮し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製した。生成物をエタノール（２ｍＬ）および石油エーテル（１０ｍＬ）で希釈した。混合物をろ過した。ろ過ケーキを集めて、減圧乾燥し、３－（６－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（３７０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、６７．３０％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５７．４
【0286】
段階６．１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１０）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（６－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、２８０．５７μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１７９ｍｇ、４２２．０３μｍｏｌ、１３０．６６μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をメタノール（１ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過ケーキをメタノール（１ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を減圧濃縮し、１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５５．１
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（６－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、２８０．５７μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１７９ｍｇ、４２２．０３μｍｏｌ、１３０．６６μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３時間攪拌した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をメタノール（１ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過ケーキをメタノール（１ｍＬ）で洗浄し、ろ過物を減圧濃縮し、１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５５．１
【0287】
段階７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３９）の合成
【0288】
メタノール（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７０ｍｇ、１１５．４９μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＯＡｃ（９．５ｍｇ、１１５．８１μｍｏｌ）を添加した後、メタノール（１ｍＬ）中の１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１００ｍｇ、２８２．１７μｍｏｌ）溶液を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。その後、ＮａＢＨ３ＣＮ（２１．７７ｍｇ、３４６．４７μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１９％）を確認した。混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１８％）を確認した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝９：１）、次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００＊２５ｍｍ＊４ｕｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、９分）によって精製し、溶出物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１４．０ｍｇ、１４．６５μｍｏｌ、１２．６８％収率、９５％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０７．９
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、８．９９－８．８０（ｍ、１Ｈ）、８．５３－８．４５（ｍ、１Ｈ）、８．２９－８．２２（ｍ、２Ｈ）、８．１６－８．１０（ｍ、１Ｈ）、７．５４－７．４７（ｍ、３Ｈ）、６．９５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９１－６．８７（ｍ、１Ｈ）、４．８４－４．７３（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３８（ｍ、１Ｈ）、４．２９－４．２４（ｍ、１Ｈ）、４．０８（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．８７－３．８１（ｍ、２Ｈ）、３．４２－３．３８（ｍ、２Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．０８－２．９４（ｍ、３Ｈ）、２．８８－２．７７（ｍ、３Ｈ）、２．６４－２．６１（ｍ、１Ｈ）、２．４１－２．３６（ｍ、１Ｈ）、２．３０－２．２６（ｍ、１Ｈ）、２．２３－２．１２（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．６９（ｍ、１４Ｈ）、１．６７－１．５２（ｍ、４Ｈ）、１．４３－１．３２（ｍ、２Ｈ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８６（ｓ、１Ｈ）、８．９９－８．８０（ｍ、１Ｈ）、８．５３－８．４５（ｍ、１Ｈ）、８．２９－８．２２（ｍ、２Ｈ）、８．１６－８．１０（ｍ、１Ｈ）、７．５４－７．４７（ｍ、３Ｈ）、６．９５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９１－６．８７（ｍ、１Ｈ）、４．８４－４．７３（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３８（ｍ、１Ｈ）、４．２９－４．２４（ｍ、１Ｈ）、４．０８（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．９ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．８７－３．８１（ｍ、２Ｈ）、３．４２－３．３８（ｍ、２Ｈ）、３．３４（ｓ、３Ｈ）、３．０８－２．９４（ｍ、３Ｈ）、２．８８－２．７７（ｍ、３Ｈ）、２．６４－２．６１（ｍ、１Ｈ）、２．４１－２．３６（ｍ、１Ｈ）、２．３０－２．２６（ｍ、１Ｈ）、２．２３－２．１２（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．６９（ｍ、１４Ｈ）、１．６７－１．５２（ｍ、４Ｈ）、１．４３－１．３２（ｍ、２Ｈ）。
【0289】
実施例４０．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４０）の合成
段階１．３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（２）の合成
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）中のアクリル酸（９５６．２７ｍｇ、１３．２７ｍｍｏｌ、９１０．７３μＬ）および６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－アミン（３ｇ、１３．２７ｍｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１．８９ｇ、３１．４７ｍｍｏｌ、１．８ｍＬ）を添加した。混合物を１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を酢酸エチル（５ｍＬ）、ＭＴＢＥ（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過ケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて減圧乾燥した。ろ過物をＮａ２ＣＯ３の飽和溶液でｐＨ＝９に調整し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を除去した。水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝３に調整し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（１．６７ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９８．２
【化49】
段階１．３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（２）の合成
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）中のアクリル酸（９５６．２７ｍｇ、１３．２７ｍｍｏｌ、９１０．７３μＬ）および６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－アミン（３ｇ、１３．２７ｍｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１．８９ｇ、３１．４７ｍｍｏｌ、１．８ｍＬ）を添加した。混合物を１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量を確認した。混合物を酢酸エチル（５ｍＬ）、ＭＴＢＥ（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ過ケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄した。ろ過ケーキを集めて減圧乾燥した。ろ過物をＮａ２ＣＯ３の飽和溶液でｐＨ＝９に調整し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を除去した。水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝３に調整し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム で乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（１．６７ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９８．２
【0290】
段階２．メチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（３）の合成
トルエン（２ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）中の３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（１．６７ｇ、５．６０ｍｍｏｌ）溶液にＴＭＳＣＨＮ２（２Ｍ、８．４０ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物を他のバッチ（１ｇスケール）と合わせて、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で希釈し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、メチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１．３ｇ、３．８７ｍｍｏｌ、６９．０９％収率、９３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．１
トルエン（２ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）中の３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパン酸（１．６７ｇ、５．６０ｍｍｏｌ）溶液にＴＭＳＣＨＮ２（２Ｍ、８．４０ｍＬ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークを確認した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物を他のバッチ（１ｇスケール）と合わせて、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で希釈し、混合物を２０℃で３０分間攪拌した。混合物をろ過し、ろ過ケーキをＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、メチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１．３ｇ、３．８７ｍｍｏｌ、６９．０９％収率、９３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．１
【0291】
段階３．メチル３－（（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（５）の合成
ジオキサン（１３ｍＬ）中のメチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（０．５ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７３４ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．５７ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（３１．１６ｍｇ、３２．０３μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で２８時間攪拌した。ＬＣＭＳによりメチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエートが残っていることを確認し、さらにＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（３１．１６ｍｇ、３２．０３μｍｏｌ）を２０℃で添加し、混合物を１００℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２８％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１００～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、メチル３－（（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１９０ｍｇ、２７７．３９μｍｏｌ、１７．３２％収率、８８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０３．６
ジオキサン（１３ｍＬ）中のメチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（０．５ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７３４ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．５７ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（３１．１６ｍｇ、３２．０３μｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で２８時間攪拌した。ＬＣＭＳによりメチル３－（（６－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエートが残っていることを確認し、さらにＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（３１．１６ｍｇ、３２．０３μｍｏｌ）を２０℃で添加し、混合物を１００℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２８％）を確認した。混合物をろ過し、ろ過ケーキを酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１００～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、メチル３－（（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１９０ｍｇ、２７７．３９μｍｏｌ、１７．３２％収率、８８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０３．６
【0292】
段階４．メチル３－（１－（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ウレイド）プロパノエート（６）の合成
ＡｃＯＨ（４ｍＬ）中のメチル３－（（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１９０ｍｇ、２７７．３９μｍｏｌ、８８％純度）溶液にＫＯＣＮ（３５ｍｇ、４１１．０６μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６７％）を確認した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をＭｅＣＮ（３ｍＬ）および水（３０ｍＬ）で希釈し、凍結乾燥し、メチル３－（１－（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ウレイド）プロパノエート（０．２ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４６．５
ＡｃＯＨ（４ｍＬ）中のメチル３－（（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）アミノ）プロパノエート（１９０ｍｇ、２７７．３９μｍｏｌ、８８％純度）溶液にＫＯＣＮ（３５ｍｇ、４１１．０６μｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６７％）を確認した。混合物を減圧濃縮した。粗生成物をＭｅＣＮ（３ｍＬ）および水（３０ｍＬ）で希釈し、凍結乾燥し、メチル３－（１－（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ウレイド）プロパノエート（０．２ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４６．５
【0293】
段階５．ベンジル（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７）の合成
ＭｅＣＮ（４ｍＬ）中のメチル３－（１－（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ウレイド）プロパノエート（１９０ｍｇ、２９４．２１μｍｏｌ）溶液にＴｒｉｔｏｎ Ｂ（８２８．００ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ、０．９ｍＬ、４０％純度）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９０％）を確認した。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル／メタノール＝１０／１（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１６１．３０μｍｏｌ、５４．８３％収率、９０％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１４．６
ＭｅＣＮ（４ｍＬ）中のメチル３－（１－（６－（４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ウレイド）プロパノエート（１９０ｍｇ、２９４．２１μｍｏｌ）溶液にＴｒｉｔｏｎ Ｂ（８２８．００ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ、０．９ｍＬ、４０％純度）をゆっくりと添加し、混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９０％）を確認した。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル／メタノール＝１０／１（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１６１．３０μｍｏｌ、５４．８３％収率、９０％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１４．６
【0294】
段階６．１－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８）の合成
ＴＦＡ（１．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９５ｍｇ、１５４．７９μｍｏｌ）溶液を６０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、１－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（９０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８０．５
ＴＦＡ（１．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９５ｍｇ、１５４．７９μｍｏｌ）溶液を６０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要なピーク（９５％）を確認した。混合物を減圧濃縮し、１－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（９０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８０．５
【0295】
段階７．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４０）の合成
ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５６．０９ｍｇ、１４７．５１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２９．６８ｍｇ、２２９．６４μｍｏｌ、４０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１５分間攪拌した。その後、ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の１－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（９０ｍｇ、１５１．６１μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０．００μＬ）溶液を添加し、２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）を確認した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した。生成物をＭｅＣＮ（３ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）および脱イオン化水（３０ｍＬ）で希釈し、混合物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（６１．１ｍｇ、６３．１８μｍｏｌ、４７．１２％収率、９４％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０８．９
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．５０（ｓ、１Ｈ）、８．４８－８．４１（ｍ、１Ｈ）、８．３０－８．２５（ｍ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝９．２ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｓ、１Ｈ）、４．８１－４．７２（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３６（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．２ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．９１－３．８６（ｍ、５Ｈ）、３．８４－３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．７９－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．６３－２．５５（ｍ、３Ｈ）、２．２５－２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．９８－１．９１（ｍ、３Ｈ）、１．８６－１．７７（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．５２（ｍ、１１Ｈ）、１．３４－１．１８（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１３４．１０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５６．０９ｍｇ、１４７．５１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２９．６８ｍｇ、２２９．６４μｍｏｌ、４０μＬ）を添加し、混合物を２０℃で１５分間攪拌した。その後、ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の１－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（９０ｍｇ、１５１．６１μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０．００μＬ）溶液を添加し、２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）を確認した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ過物を減圧濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した。生成物をＭｅＣＮ（３ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）および脱イオン化水（３０ｍＬ）で希釈し、混合物を凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－１－メチル－１Ｈ－インダゾール－６－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（６１．１ｍｇ、６３．１８μｍｏｌ、４７．１２％収率、９４％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９０８．９
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．５０（ｓ、１Ｈ）、８．４８－８．４１（ｍ、１Ｈ）、８．３０－８．２５（ｍ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝９．２ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝９．０ Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｓ、１Ｈ）、４．８１－４．７２（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３６（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．２ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．９１－３．８６（ｍ、５Ｈ）、３．８４－３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．７９－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．６３－２．５５（ｍ、３Ｈ）、２．２５－２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．９８－１．９１（ｍ、３Ｈ）、１．８６－１．７７（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．５２（ｍ、１１Ｈ）、１．３４－１．１８（ｍ、２Ｈ）。
【0296】
実施例４１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４１）の合成
段階１．ベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）
ジオキサン（１５ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（３６０ｍｇ、７８５．５０μｍｏｌ）およびベンジル（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３１０．２３ｍｇ、７８５．５０μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（７６．４１ｍｇ、７８．５５μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．２８ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１９％）を確認した。混合物をセライトパッドでろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって再精製し、ベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１３６．０３μｍｏｌ、１７．３２％収率、９１％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７３６．４
【化50】
段階１．ベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）
ジオキサン（１５ｍＬ）中の３－（４－ブロモ－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）－１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－２，６－ジオン（３６０ｍｇ、７８５．５０μｍｏｌ）およびベンジル（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３１０．２３ｍｇ、７８５．５０μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（７６．４１ｍｇ、７８．５５μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．２８ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１９％）を確認した。混合物をセライトパッドでろ過し、ろ過物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル ｔｏ １０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）によって精製し、分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって再精製し、ベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、１３６．０３μｍｏｌ、１７．３２％収率、９１％純度）を黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７３６．４
【0297】
段階２．３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＴＦＡ（１ｍＬ）中のベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１３５．８９μｍｏｌ）溶液にＴｆＯＨ（３４０．００ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ、０．２ｍＬ）を添加し、１００℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８２．３．
ＴＦＡ（１ｍＬ）中のベンジル（４－（７－（１－（１－（４－メトキシベンジル）－２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１００ｍｇ、１３５．８９μｍｏｌ）溶液にＴｆＯＨ（３４０．００ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ、０．２ｍＬ）を添加し、１００℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）を確認した。混合物を真空濃縮し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得て、これを次の段階に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８２．３．
【0298】
段階３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５６．００ｍｇ、１３２．８９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．０３ｍｇ、１７６．２９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４５．５７ｍｇ、３５２．５８μｍｏｌ、６１．４１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、１１７．５３μｍｏｌ、ＴＦＡ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）を確認した。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．２ｍｇ、１１．１８μｍｏｌ、９．５１％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８５．５．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．１４－１１．０４（ｍ、１Ｈ）、９．２８（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝５．９ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４７－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．００－６．９３（ｍ、１Ｈ）、６．９０－６８５（ｍ、２Ｈ）、５．４１－５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．０８－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０６－２．９２（ｍ、９Ｈ）、２．８１－２．７３（ｍ、３Ｈ）、２．７０－２．６７（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．０９（ｍ、１Ｈ）、２．０３－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９１－１．７９（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．３７－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．２７－１．２１（ｍ、７Ｈ）。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５６．００ｍｇ、１３２．８９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６７．０３ｍｇ、１７６．２９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４５．５７ｍｇ、３５２．５８μｍｏｌ、６１．４１μＬ）を添加し、混合物を２０℃で３０分間攪拌し、３－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、１１７．５３μｍｏｌ、ＴＦＡ）を添加し、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）を確認した。反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）によって精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６３％、９分）によって再精製した。溶出物を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０．２ｍｇ、１１．１８μｍｏｌ、９．５１％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８８５．５．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．１４－１１．０４（ｍ、１Ｈ）、９．２８（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝５．９ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４７－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．００－６．９３（ｍ、１Ｈ）、６．９０－６８５（ｍ、２Ｈ）、５．４１－５．２９（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．０８－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０６－２．９２（ｍ、９Ｈ）、２．８１－２．７３（ｍ、３Ｈ）、２．７０－２．６７（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．０９（ｍ、１Ｈ）、２．０３－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９１－１．７９（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．３７－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．２７－１．２１（ｍ、７Ｈ）。
【0299】
実施例４２．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４２）の合成
段階１．ベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の２－クロロ－６－フルオロ－ピリジン（３００ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６００ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（８８４．３２ｍｇ、６．８４ｍｍｏｌ、１．１９ｍＬ）を添加した後、生成された混合物を６０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク２２％が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４３０ｍｇ、８６３．４８μｍｏｌ、３７．８６％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８３．４
【化51】
段階１．ベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の２－クロロ－６－フルオロ－ピリジン（３００ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）およびベンジル（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６００ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（８８４．３２ｍｇ、６．８４ｍｍｏｌ、１．１９ｍＬ）を添加した後、生成された混合物を６０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク２２％が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４３０ｍｇ、８６３．４８μｍｏｌ、３７．８６％収率、９７％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８３．４
【0300】
段階２．（２－アミノ－２－オキソエチル）トリフェニルホスホニウムクロリド（９）の合成
ＡＣＮ（１００ｍＬ）中の２－クロロアセトアミド（１０ｇ、１０６．９４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＰＰｈ３（２９．４５ｇ、１１２．２８ｍｍｏｌ）を添加した後、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５４％）が検出された。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキを真空乾燥した。粗生成物を２０℃で酢酸エチル（１００ｍＬ）で１５分間粉砕し、ろ過した。ろ過ケーキを真空乾燥し、（２－アミノ－２－オキソエチル）トリフェニルホスホニウムクロリド（２７．２ｇ、８４．９１ｍｍｏｌ、７９．４０％収率、１００％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２０．４
ＡＣＮ（１００ｍＬ）中の２－クロロアセトアミド（１０ｇ、１０６．９４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＰＰｈ３（２９．４５ｇ、１１２．２８ｍｍｏｌ）を添加した後、生成された混合物を８０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（５４％）が検出された。反応混合物をろ過し、ろ過ケーキを真空乾燥した。粗生成物を２０℃で酢酸エチル（１００ｍＬ）で１５分間粉砕し、ろ過した。ろ過ケーキを真空乾燥し、（２－アミノ－２－オキソエチル）トリフェニルホスホニウムクロリド（２７．２ｇ、８４．９１ｍｍｏｌ、７９．４０％収率、１００％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２０．４
【0301】
段階３．３－（トリフェニル－１５－ホスファニリデン）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
メタノール（２００ｍＬ）中の（２－アミノ－２－オキソエチル）トリフェニルホスホニウムクロリド（２０ｇ、６２．４３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮａＯＨ（２．５０ｇ、６２．４３ｍｍｏｌ）およびメチルプロパ－２－エノエート（６．４５ｇ、７４．９２ｍｍｏｌ、６．７５ｍＬ）を添加した後、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３３％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（トリフェニル－１５－ホスファニリデン）ピペリジン－２，６－ジオン（２０ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７４．３
メタノール（２００ｍＬ）中の（２－アミノ－２－オキソエチル）トリフェニルホスホニウムクロリド（２０ｇ、６２．４３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＮａＯＨ（２．５０ｇ、６２．４３ｍｍｏｌ）およびメチルプロパ－２－エノエート（６．４５ｇ、７４．９２ｍｍｏｌ、６．７５ｍＬ）を添加した後、生成された混合物を２０℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（３３％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（トリフェニル－１５－ホスファニリデン）ピペリジン－２，６－ジオン（２０ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７４．３
【0302】
段階４．３－メチレンピペリジン－２，６－ジオン（１２）の合成
ＤＣＥ（２００ｍＬ）中の３－（トリフェニル－１５－ホスファニリデン）ピペリジン－２，６－ジオン（２０ｇ、５３．５６ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でパラホルムアルデヒド（１．９３ｇ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－メチレンピペリジン－２，６－ジオン（６．７ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１２６．１
ＤＣＥ（２００ｍＬ）中の３－（トリフェニル－１５－ホスファニリデン）ピペリジン－２，６－ジオン（２０ｇ、５３．５６ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でパラホルムアルデヒド（１．９３ｇ）を添加し、生成された混合物を８０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－メチレンピペリジン－２，６－ジオン（６．７ｇ、粗製）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１２６．１
【0303】
段階５．２－ベンジル－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（１４）の合成
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の３－メチレンピペリジン－２，６－ジオン（６．７ｇ、５３．５５ｍｍｏｌ）およびＮ－ベンジル－１－メトキシ－Ｎ－（（トリメチルシリル）メチル）メタンアミン（１０．１７ｇ、４２．８４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（３．９７ｇ、３４．８１ｍｍｏｌ、２．５８ｍＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、不純物が混ざった生成物を得て、これを２０℃で混合溶液（２０ｍＬ、ＭＴＢＥ：酢酸エチル＝５：１）で１５分間粉砕後、ろ過した。ろ過物を真空乾燥し、不純物が混ざった生成物Ｂを得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で、および、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって再精製し、２－ベンジル－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（９７６ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ、３２．５３％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５９．１
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の３－メチレンピペリジン－２，６－ジオン（６．７ｇ、５３．５５ｍｍｏｌ）およびＮ－ベンジル－１－メトキシ－Ｎ－（（トリメチルシリル）メチル）メタンアミン（１０．１７ｇ、４２．８４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（３．９７ｇ、３４．８１ｍｍｏｌ、２．５８ｍＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって精製し、不純物が混ざった生成物を得て、これを２０℃で混合溶液（２０ｍＬ、ＭＴＢＥ：酢酸エチル＝５：１）で１５分間粉砕後、ろ過した。ろ過物を真空乾燥し、不純物が混ざった生成物Ｂを得て、これをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で、および、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）によって再精製し、２－ベンジル－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（９７６ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ、３２．５３％収率）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５９．１
【0304】
段階６．２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（４）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の２－ベンジル－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（９７６ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）を添加した。懸濁液をＨ２下、３回脱気し、パージした。その後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。残渣を真空濃縮し、２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（７４２ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１６９．０
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の２－ベンジル－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（９７６ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下、Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）を添加した。懸濁液をＨ２下、３回脱気し、パージした。その後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下、２０℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３０ｍＬ）で希釈した後、ろ過した。残渣を真空濃縮し、２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（７４２ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１６９．０
【0305】
段階７．ベンジル（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（５）の合成
ジオキサン（３ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１００ｍｇ、２０７．０２μｍｏｌ）および２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（１０４．４６ｍｇ、６２１．０６μｍｏｌ）溶液にＮ２下、２０℃でＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（１０．０７ｍｇ、１０．３５μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２０２．３５ｍｇ、６２１．０６μｍｏｌ）を添加し、生成された反応混合物をＮ２下、１００℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１２％のベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメートが残っていることと所望の質量のピーク（７０％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、酢酸エチル：メタノール＝１０：１）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１０１．９９μｍｏｌ、４９．２６％収率、９５％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１５．３
ジオキサン（３ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１００ｍｇ、２０７．０２μｍｏｌ）および２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（１０４．４６ｍｇ、６２１．０６μｍｏｌ）溶液にＮ２下、２０℃でＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（１０．０７ｍｇ、１０．３５μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２０２．３５ｍｇ、６２１．０６μｍｏｌ）を添加し、生成された反応混合物をＮ２下、１００℃で１２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより１２％のベンジル（７－（（１－（６－クロロピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメートが残っていることと所望の質量のピーク（７０％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、酢酸エチル：メタノール＝１０：１）によって精製し、ベンジル（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１０１．９９μｍｏｌ、４９．２６％収率、９５％純度）を白色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１５．３
【0306】
段階８．２－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）ピリジン－２－イル）－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（６）の合成
２０℃でＴＦＡ（２ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１０７．３６μｍｏｌ）の混合物および生成された反応混合物を４０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（７７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、２－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）ピリジン－２－イル）－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（６４ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．３
２０℃でＴＦＡ（２ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６６ｍｇ、１０７．３６μｍｏｌ）の混合物および生成された反応混合物を４０℃で１３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（７７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、２－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）ピリジン－２－イル）－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（６４ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．３
【0307】
段階９．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４２）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１１．７５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４６．７４ｍｇ、１２２．９２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２８．８９ｍｇ、２２３．５０μｍｏｌ、３８．９３μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の２－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）ピリジン－２－イル）－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（６４ｍｇ、１０７．６２μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液およびＤＩＰＥＡ（４３．３３ｍｇ、３３５．２４μｍｏｌ、５８．３９μＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより全部の出発物質が消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（２８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した後、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１６．１ｍｇ、１５．９２μｍｏｌ、１４．２５％収率、９０％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１０．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７３（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．１ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１－８．２１（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、５．９７（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、５．６８（ｄ、Ｊ＝７．９ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８３－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．２８－４．１５（ｍ、２Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．９ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５２－３．４１（ｍ、３Ｈ）、３．３１（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．６６－２．５６（ｍ、４Ｈ）、２．３１－２．２７（ｍ、２Ｈ）、２．２１（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝４．５、６．４ Ｈｚ、２Ｈ）、２．１８－２．１２（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．５ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０４－１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．９７－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８１（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１０．０ Ｈｚ、２Ｈ）、１．７３－１．６８（ｍ、４Ｈ）、１．６３－１．５２（ｍ、８Ｈ）、１．３０－１．１９（ｍ、２Ｈ）、１．１１－０．９６（ｍ、２Ｈ）。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１１．７５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４６．７４ｍｇ、１２２．９２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２８．８９ｍｇ、２２３．５０μｍｏｌ、３８．９３μＬ）を添加した。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の２－（６－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）ピリジン－２－イル）－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－６，８－ジオン（６４ｍｇ、１０７．６２μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液およびＤＩＰＥＡ（４３．３３ｍｇ、３３５．２４μｍｏｌ、５８．３９μＬ）を添加し、生成された混合物を２０℃で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより全部の出発物質が消費されたことを確認し、所望の質量のピーク（２８％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）によって精製した後、凍結乾燥し、４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－２－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１６．１ｍｇ、１５．９２μｍｏｌ、１４．２５％収率、９０％純度）を明るい黄色の固体として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１０．２
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７３（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．１ Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１－８．２１（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｔ、Ｊ＝８．１ Ｈｚ、１Ｈ）、５．９７（ｄ、Ｊ＝８．２ Ｈｚ、１Ｈ）、５．６８（ｄ、Ｊ＝７．９ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８３－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．２８－４．１５（ｍ、２Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１４．１ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．９ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５２－３．４１（ｍ、３Ｈ）、３．３１（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、２．６６－２．５６（ｍ、４Ｈ）、２．３１－２．２７（ｍ、２Ｈ）、２．２１（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝４．５、６．４ Ｈｚ、２Ｈ）、２．１８－２．１２（ｍ、２Ｈ）、２．０９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．５ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０４－１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．９７－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８１（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１０．０ Ｈｚ、２Ｈ）、１．７３－１．６８（ｍ、４Ｈ）、１．６３－１．５２（ｍ、８Ｈ）、１．３０－１．１９（ｍ、２Ｈ）、１．１１－０．９６（ｍ、２Ｈ）。
【0308】
実施例４３．４－（（９－シクロペンチル－７，７－ジフルオロ－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（６－（６，８－ジオキソ－２，７－ジアザスピロ［４．５］デカン－２－イル）ピリジン－３－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４３）の合成
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１１．１．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７２（ｓ、１Ｈ）、８．４６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２９－８．２４（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝２．９ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｄｄ、Ｊ＝２．７、９．２ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４０（ｄ、Ｊ＝９．１ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８３－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｄ、Ｊ＝１０．６ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５１－３．３８（ｍ、５Ｈ）、３．３１（ｓ、３Ｈ）、２．６１－２．５７（ｍ、２Ｈ）、２．２９－２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、２．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１．４ Ｈｚ、１Ｈ）、２．１２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．５ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０５－１．９８（ｍ、３Ｈ）、１．９６－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８５－１．７９（ｍ、２Ｈ）、１．７８－１．６９（ｍ、４Ｈ）、１．６２－１．５４（ｍ、８Ｈ）、１．２８－１．１７（ｍ、６Ｈ）。
【化52】
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝９１１．１．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７２（ｓ、１Ｈ）、８．４６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６ Ｈｚ、１Ｈ）、８．２９－８．２４（ｍ、２Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝２．９ Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｄｄ、Ｊ＝２．７、９．２ Ｈｚ、１Ｈ）、６．４０（ｄ、Ｊ＝９．１ Ｈｚ、１Ｈ）、４．８３－４．７１（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１４．０ Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｄ、Ｊ＝１０．６ Ｈｚ、１Ｈ）、３．５１－３．３８（ｍ、５Ｈ）、３．３１（ｓ、３Ｈ）、２．６１－２．５７（ｍ、２Ｈ）、２．２９－２．１８（ｍ、３Ｈ）、２．１７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、２．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１．４ Ｈｚ、１Ｈ）、２．１２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．５ Ｈｚ、２Ｈ）、２．０５－１．９８（ｍ、３Ｈ）、１．９６－１．９０（ｍ、３Ｈ）、１．８５－１．７９（ｍ、２Ｈ）、１．７８－１．６９（ｍ、４Ｈ）、１．６２－１．５４（ｍ、８Ｈ）、１．２８－１．１７（ｍ、６Ｈ）。
【0309】
実施例４４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メチル－２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－５－イル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４４）の合成
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９９．０．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０６（ｓ、１Ｈ）、８．５２－８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．３４－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９６－６．９１（ｍ、１Ｈ）、６．８６－６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．６９－６．５８（ｍ、１Ｈ）、５．３４－５．２５（ｍ、１Ｈ）、４．９３－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．６９－３．５４（ｍ、２Ｈ）、３．３１－３．２８（ｍ、６Ｈ）、３．０９－２．８３（ｍ、３Ｈ）、２．７２－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．２２－２．０９（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．８６－１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５２（ｍ、２Ｈ）、１．４１－１．１３（ｍ、１３Ｈ）。
【化53】
ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９９．０．
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０６（ｓ、１Ｈ）、８．５２－８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．３４－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９６－６．９１（ｍ、１Ｈ）、６．８６－６．７８（ｍ、１Ｈ）、６．６９－６．５８（ｍ、１Ｈ）、５．３４－５．２５（ｍ、１Ｈ）、４．９３－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．６９－３．５４（ｍ、２Ｈ）、３．３１－３．２８（ｍ、６Ｈ）、３．０９－２．８３（ｍ、３Ｈ）、２．７２－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．２２－２．０９（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．８６－１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．５２（ｍ、２Ｈ）、１．４１－１．１３（ｍ、１３Ｈ）。
【0310】
＜実験例＞
１．ＰＬＫ１ウェスタンブロット分析
（１）ＨｅＬａ細胞株の培養
ＨｅＬａ細胞株を韓国細胞株銀行から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１１５～Ｐ１２５に維持した。
１．ＰＬＫ１ウェスタンブロット分析
（１）ＨｅＬａ細胞株の培養
ＨｅＬａ細胞株を韓国細胞株銀行から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１１５～Ｐ１２５に維持した。
【0311】
セルカウントのために、Ｔｈｅｒｍｏ社のセルカウンター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．、Ｃａｔａｌｏｇ ＃ ＡＭＱＡＸ１０００）および０．４％トリパンブルー（Ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ）溶液を用いた。
【0312】
細胞培養のために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９５－６５；ロット番号２０８５３１８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２０９７５９３）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２０５８８５５）、１００ｍｍ２細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１５０）、１２－ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００１２）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０１９０７２３）を用いた。
【0313】
（２）本発明における化合物の処理
１２－ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に２×１０５個の細胞を播種し、培養培地の総体積を２ｍＬにして細胞を培養した。
１２－ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に２×１０５個の細胞を播種し、培養培地の総体積を２ｍＬにして細胞を培養した。
【0314】
実施例の化合物は、ＤＭＳＯに完全に溶解させて実験に用い、チミジン（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ）は、ＤＷに完全溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。
【0315】
放出（ｒｅｌｅａｓｅ）および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで３回洗浄した。完全培地（ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｅｄｉａ）を入れ、ＣＯ２インキュベーターで４時間インキュベーションした。それぞれの化合物を最高濃度３μＭから最低濃度まで3倍に希釈し、再び６時間インキュベーションした。
【0316】
（３）ウエスタンブロッティング
ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングのため、１Ｘ ＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｒｏｃｋｌａｎｄ、カタログ番号ＭＢ－０３０－００５０；ロット番号３９７５１）、１００Ｘプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｑｕａｒｔｅｔｔ、カタログ番号ＰＰＩ１０１５；ロット番号ＰＣＯ５００３８４２４）、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡプロテインアッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２２５；ロット番号ＵＣ２７６８７６）、アルブミンスタンダード（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２０９；ロット番号ＵＢ２６９５６１）、４～１５％ Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ ＴＧＸ ｓｔａｉｎ－ｆｒｅｅ ｇｅｌ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号４５６８０８５；ロット番号Ｌ００７０４１Ｂ）、１０Ｘ Ｔｒｉｓ／Ｇｌｙｃｉｎｅ／ＳＤＳバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７３２；ロット番号１０００００４４３７５Ｂ）；１０Ｘ ＴＢＳ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１７０６４３５；ロット番号１００００４５１４０Ｂ）、１０％ Ｔｗｅｅｎ ２０溶液（カタログ番号１６１０７８１；ロット番号Ｌ００４１５２Ｂ）、Ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｒｏａｄ ｒａｎｇｅ（ＮＥＢ、カタログ番号Ｐ７７１９Ｓ；ロット番号１００４０３４９）、４Ｘ Ｌａｅｍｍｌｉ ｓａｍｐｌｅバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７４７；ロット番号Ｌ００４１３３Ｂ）、β－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｍ３１４８；ロット番号６０－２４－２）、ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）Ｔ２０（ＴＢＳ）ブロッキングバッファー（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号３７５３６；ロット番号ＵＣ２８２５７８）、１Ｍアジ化ナトリウム溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号０８５９１－１ｍＬ－Ｆ；ロット番号ＢＣＢＶ４９８９）、α－Ｒａｂｂｉｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｍｓ ＩｇＧ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４６；ロット番号ＧＲ３２５２１１５－１）、α－Ｇｏａｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｒｂ ＩｇＧ（ＣＳＴ、カタログ番号７０７４Ｓ；ロット番号２８）、α－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ８２４５；ロット番号ＧＲ３２７５５４２－２）、α－ＰＬＫ１（ＣＳＴ、カタログ番号２０８Ｇ４）、α－ＢＲＤ４（ＣＳＴ、カタログ番号１３４４０Ｓ）、ＥＣＬ（商標）Ｐｒｉｍｅウェスタンブロッティング試薬（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＲＰＮ２２３２；ロット番号１７００１６５５）、Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ 溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｐ７１７０；ロット番号ＳＬＢＶ４１１２）、Ｄｉｆｃｏ（商標）Ｓｋｉｍ ｍｉｌｋ（ＢＤ、カタログ番号２３２１００；ロット番号８３４６７９５）、ｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｒｅｇｕｌａｒ ｓｔａｃｋｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号ＩＢ２３００１；ロット番号２ＮＲ１１０６１９－０２）を用いた。
ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングのため、１Ｘ ＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｒｏｃｋｌａｎｄ、カタログ番号ＭＢ－０３０－００５０；ロット番号３９７５１）、１００Ｘプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｑｕａｒｔｅｔｔ、カタログ番号ＰＰＩ１０１５；ロット番号ＰＣＯ５００３８４２４）、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡプロテインアッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２２５；ロット番号ＵＣ２７６８７６）、アルブミンスタンダード（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２０９；ロット番号ＵＢ２６９５６１）、４～１５％ Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ ＴＧＸ ｓｔａｉｎ－ｆｒｅｅ ｇｅｌ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号４５６８０８５；ロット番号Ｌ００７０４１Ｂ）、１０Ｘ Ｔｒｉｓ／Ｇｌｙｃｉｎｅ／ＳＤＳバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７３２；ロット番号１０００００４４３７５Ｂ）；１０Ｘ ＴＢＳ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１７０６４３５；ロット番号１００００４５１４０Ｂ）、１０％ Ｔｗｅｅｎ ２０溶液（カタログ番号１６１０７８１；ロット番号Ｌ００４１５２Ｂ）、Ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｒｏａｄ ｒａｎｇｅ（ＮＥＢ、カタログ番号Ｐ７７１９Ｓ；ロット番号１００４０３４９）、４Ｘ Ｌａｅｍｍｌｉ ｓａｍｐｌｅバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７４７；ロット番号Ｌ００４１３３Ｂ）、β－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｍ３１４８；ロット番号６０－２４－２）、ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）Ｔ２０（ＴＢＳ）ブロッキングバッファー（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号３７５３６；ロット番号ＵＣ２８２５７８）、１Ｍアジ化ナトリウム溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号０８５９１－１ｍＬ－Ｆ；ロット番号ＢＣＢＶ４９８９）、α－Ｒａｂｂｉｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｍｓ ＩｇＧ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４６；ロット番号ＧＲ３２５２１１５－１）、α－Ｇｏａｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｒｂ ＩｇＧ（ＣＳＴ、カタログ番号７０７４Ｓ；ロット番号２８）、α－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ８２４５；ロット番号ＧＲ３２７５５４２－２）、α－ＰＬＫ１（ＣＳＴ、カタログ番号２０８Ｇ４）、α－ＢＲＤ４（ＣＳＴ、カタログ番号１３４４０Ｓ）、ＥＣＬ（商標）Ｐｒｉｍｅウェスタンブロッティング試薬（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＲＰＮ２２３２；ロット番号１７００１６５５）、Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ 溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｐ７１７０；ロット番号ＳＬＢＶ４１１２）、Ｄｉｆｃｏ（商標）Ｓｋｉｍ ｍｉｌｋ（ＢＤ、カタログ番号２３２１００；ロット番号８３４６７９５）、ｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｒｅｇｕｌａｒ ｓｔａｃｋｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号ＩＢ２３００１；ロット番号２ＮＲ１１０６１９－０２）を用いた。
【0317】
細胞を回収するために、トリプシンを用いて細胞をプレートから分離した後、培地およびＰＢＳで洗浄した。具体的には、培地を吸引した後、１ｍＬのＰＢＳで洗浄し、ＰＢＳを吸引した。０．５ｍＬのＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓを３７℃、７分間で処理し、細胞を分離させた後、０．５ｍＬの完全培地を添加し、１ｍＬの細胞培養液を回収した。その後、１ｍＬの細胞収集液を８，０００ ｒｐｍで１２０秒間遠心分離し、上澄み液を除去した。０．２ｍＬのＰＢＳで洗浄した後、ＰＢＳを除去した。
【0318】
細胞溶解（ｌｙｓｉｓ）のために、溶解緩衝液（ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ）を添加し、細胞破砕片（ｄｅｂｒｉｓ）を除去し、細胞ライセート（ｌｙｓａｔｅ）を得た。具体的に、細胞にプロテアーゼ阻害剤が含有された７０μＬの１Ｘ ＲＩＰＡバッファー処理し、氷上で３０分間インキュベーションした。その後、細胞を４℃１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、細胞ライセートを得た。
【0319】
次に、ＢＣＡアッセイを用いて標準曲線を求めて、これを代入することによりライセート中のタンパク質の質量を定量化した。混合物には２０μＬの標準溶液または試料溶液、２００μＬのＢＣＡまたはブラッドフォード溶液を用いて３７℃で３０分間インキュベートし、５６２ｎｍの吸光度で測定した。サンプルは、各ウェルあたり１５μｇになるように４Ｘ サンプルバッファーを加えて用意した。
【0320】
４～１５％ Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ ＴＧＸ ｓｔａｉｎ－ｆｒｅｅ ｇｅｌ（１５ ｗＵＬＭ）によって１２０Ｖで１００分のランニングタイムを設定し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを行ったｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｍｉｎｉ ｓｔａｃｋｓにＤｒｙ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍのＰ０ ｍｏｄｅを用いて転写した。Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ溶液を用いて染色した後、ブロッキングバッファー（Ｔｈｅｒｍｏ）で１時間ブロッキングした。０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０を含む１Ｘ ＴＢＳで洗浄した後、一次抗体として１Ｘ ＴＢＳ－Ｔ内抗－ＰＬＫ１（ＣＳＴ）抗体（１：５００）、抗－ＢＲＤ４（Ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）抗体（１：１０００）または項－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ）抗体（１：１０，０００）とともに４℃で１６時間反応させた。０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０を含む１Ｘ ＴＢＳで１０分間３回洗浄した後、二次抗体として１Ｘ ＴＢＳ－Ｔ内抗－マウス抗体（ａｂｃａｍ）（１：１０，０００）または抗－ウサギ抗体（ＣＳＴ）（１：５，０００）と一緒に常温で１時間反応させた。次に、０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０を含む１Ｘ ＴＢＳで１０分間３回洗浄した後、ＥＣＬワーキング溶液（１：１）で検出した。
【0321】
結果を分析するために、イメージアナライザー（ＧＥ）を用いて最終プロットデータを得た。その結果、本発明の全ての化合物が優れたＰＬＫ１タンパク質分解能を有することが確認された。
【0322】
２．ＰＬＫ１ルシフェラーゼ解析
（１）ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）細胞株の作製および培養
（１）ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）細胞株の作製および培養
【0323】
ＨｅＬａ細胞株にＬｇＢｉｔベタクーを形質導入し、安定に発現させた細胞株を作製した。次に、細胞内に内在するＰｌｋ１遺伝子Ｃ－末端の後ろにＨｉＢｉｔアミノ酸配列が発現されるようにｇＲＮＡとドナーを作製した後、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９が発現し得るベクターと一緒に細胞内に挿入した。挿入が完了し、ノックインした細胞のみを選別した後、継代として用いた。
【0324】
細胞培養のために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９９５－０６５；ロット番号２４６７１８９）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２４２０１７３Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、１００ｍｍ２細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１５０）、９６－ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ、カタログ番号３０１９６）、ＰＢＳ ｐＨ ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥＴＭ Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
【0325】
（２）本発明における化合物の処理およびルシフェラーゼ解析の実験手法
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
【0326】
ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）の場合、チミジンブロック後に放出した後、化合物を処理し、その過程は以下のとおりである。チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）は、ＤＷに完全に溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。放出および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで洗浄した。ＴｒｙｐＬＥ（商標）を入れ、３７℃のＣＯ２インキュベーターで５分間インキュベーションした。完全培地を入れて、中和した細胞をカウンターでカウントした。９６－ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に３．３×１０４個だけ培地総体積は、１５０μＬとし、播種後、ＣＯ２インキュベーターでインキュベーションした。
【0327】
各細胞株をＣＯ２インキュベーターで１８時間インキュベーションした後、Ｅｎｄｕｒａｚｉｎｅを総体積４％になるように各ウェルに添加した。本発明における化合物の濃度が３００ｎＭになるように、９６－ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ社）にいれた後、プレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、ＣＬＡＲＩＯｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）の波長を４７０～４８０ｎＭで設定した後、吸光度をリアルタイムで測定した。９時間経過した時点で発光値を求めた後、エクセルプログラムを使って棒ブラフを表示した。
結果は、以下の表２、図１のとおりである。
結果は、以下の表２、図１のとおりである。
【表2】
【0328】
表２において、活性度は、各実施例の化合物処理群とＤＭＳＯ処理群の蛍光値の 割合に従って表記した（＋＋＋：＜０．３、＋＋＜０．６、＋＜０．７）。
【0329】
３．Ｈ５２６細胞株における細胞生存能の分析
（１）ＮＣＩ－Ｈ５２６細胞株の培養
（１）ＮＣＩ－Ｈ５２６細胞株の培養
【0330】
ＮＣＩ－Ｈ５２６（以下、Ｈ５２６）細胞株は、韓国細胞株銀行から分譲を受けた。細胞を培養するために ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号２２４００－０８９；ロット番号２２７７０２１）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２３５１１７６Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１０７５）、１７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６－ウェル細胞培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
【0331】
（２）本発明における化合物の処理および細胞生存能の分析の実験手法
【0332】
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全溶解させて実験に用いた。
【0333】
Ｈ５２６細胞株を９６－ウェル細胞培養プレートに各ウェルあたり３×１０４ 個になるように播種し、各ウェルの培地体積は、１５０μＬになるように合わせた。
【0334】
本発明における化合物の細胞内処理容量は、最大濃度３０００ｎＭになるようにし、これを１／３ずつ希釈し、濃度別に処理し、最低濃度は０．４６ｎＭとなるようにした。各ウェル毎に全溶液の体積が２００μＬとなるように化合物を処理した後、５日間ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号４１１１）で培養した。
【0335】
その後、各ウェルにＥＺ－Ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、Ｃａｔ．ＮＯ．ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２１０９）を２０μＬずつ処理した後、ＣＯ２インキュベーターで４時間培養した。プレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、ＣＬＡＲＩＯｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）の波長を４５０ｎＭで設定し、培養が終了したサンプルの吸光度を測定し、測定前にプレートリーダー内で３分間攪拌した後 、測定した。最終測定値は、Ｅｘｃｅｌファイルで整理した後、Ｐｒｉｓｍ－ＧｒａｐｈＰａｄプログラムを通じてグラフで表し、ＩＣ５０値を測定した。
結果は、以下の表３のとおりである。
結果は、以下の表３のとおりである。
【表3】
【0336】
表３において、活性度はＨ５２６細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０値に従って表記した（Ａ：＜３０ｎｍ、Ｂ：＜５０ｎｍ、Ｃ：＜１００ｎｍ、Ｄ：＜２００ｎｍ、Ｅ：＜４００ｎｍ）。
【0337】
４．ＭＲＣ－５細胞株における細胞生存能の分析
（１）ＭＲＣ－５細胞株の培養
ＭＲＣ－５細胞株を韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１５内に維持した。
（１）ＭＲＣ－５細胞株の培養
ＭＲＣ－５細胞株を韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１５内に維持した。
【0338】
細胞培養のために、ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００２４．０１；ロット番号ＡＧ２９６９７６９８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２２３４０１８Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２２１１０９９）、１７５Ｔ 細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６－ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０１９０７２３）を用いた。
【0339】
（２）本発明における化合物の処理
【0340】
１７５Ｔ細胞培養フラスコで培養中のＭＲＣ－５細胞株をＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓを用いてフラスコから細胞を分離した。９６－ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に６×１０３個の細胞を播種し、培養培地の総体積を１５０μＬにして細胞を培養した。
【0341】
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ２４３８－５０ＭＬ、ロット番号ＲＮＢＫ６３８７）に完全溶解させて実験に用い。１００００nｍを最高濃度として１／３ずつ連続して希釈し、最低濃度が１．５２ｎＭになるように計算して処理した。各ウェルには、培地とともに混合して処理し、体積は５０μＬになるように各ウェルの総体積は２００μＬとなるようにした。その後、３７℃のＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号４１１１、ロット番号３００５１２７０９）で５日間培養した。
【0342】
下記の化合物は、比較例として用いられており、実施例の化合物と同様の方法で細胞生存能の分析を行った。
比較例１．Ｍｕ ｅｔ ａｌ．ＢＢＲＣ、２０２０、５２１（４）：８３３文献に記載された例示の化合物（比較化合物１）
比較例２．ＢＩ２５３６（比較化合物２）
比較例３．ボラセルチブ（比較化合物３）
比較例４．ＴＡＫ９６０（比較化合物４）
比較例１．Ｍｕ ｅｔ ａｌ．ＢＢＲＣ、２０２０、５２１（４）：８３３文献に記載された例示の化合物（比較化合物１）
【化54】
比較例２．ＢＩ２５３６（比較化合物２）
【化55】
比較例３．ボラセルチブ（比較化合物３）
【化56】
比較例４．ＴＡＫ９６０（比較化合物４）
【化57】
【0343】
（３）細胞毒性の実験
培養が終了したプレートの各ウェルにＥＺ－ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、カタログ番号ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２０１２）溶液を２０μＬずつ処理後、３７℃のＣＯ２インキュベーターで４時間培養した。９６－ウェルプレートをプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）に入れ、２分間混合した後、４５０ｎＭ波長で吸光度を測定した。データは、Ｐｒｉｓｍ（ｖｅｒ．９）プログラムを用いてグラフに変換した。
結果は、以下の表４および表５のとおりである。
培養が終了したプレートの各ウェルにＥＺ－ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、カタログ番号ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２０１２）溶液を２０μＬずつ処理後、３７℃のＣＯ２インキュベーターで４時間培養した。９６－ウェルプレートをプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）に入れ、２分間混合した後、４５０ｎＭ波長で吸光度を測定した。データは、Ｐｒｉｓｍ（ｖｅｒ．９）プログラムを用いてグラフに変換した。
結果は、以下の表４および表５のとおりである。
【表4】
【0344】
表４において、活性度はＭＲＣ－５細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０値（ｎＭ）に従って表記した。Ｎ．Ｄ．（ｎｏｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ）は、１０μｍまで細胞毒性が示されていないことを意味する。その結果、本発明の全ての化合物が正常細胞株よりも癌細胞株において、高い水準の細胞毒性を特異的に示すことを確認した。
【表5】
【0345】
表５において、活性度はＭＲＣ－５細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０値（ｎＭ）に従って表記した。特に公知のＰＲＯＴＡＣ化合物である比較化合物１は、本発明の実施例の化合物とは異なり、正常細胞株において高いレベルの細胞毒性を示した。
【図1】
【国際調査報告】