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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-08-29
(54)【発明の名称】磁性四酸化三鉄ナノ粒子、その製造方法、及び使用
(51)【国際特許分類】
C01G 49/08 20060101AFI20240822BHJP
H01F 1/00 20060101ALI20240822BHJP
A61B 5/055 20060101ALI20240822BHJP
A61K 49/06 20060101ALI20240822BHJP
A61K 49/12 20060101ALI20240822BHJP
【ＦＩ】
C01G49/08 A
H01F1/00 154
A61B5/055 383
A61K49/06
A61K49/12
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024507014
(86)(22)【出願日】2022-09-16
(85)【翻訳文提出日】2024-02-05
(86)【国際出願番号】 CN2022119469
(87)【国際公開番号】W WO2023138080
(87)【国際公開日】2023-07-27
(31)【優先権主張番号】202210072699.7
(32)【優先日】2022-01-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523295165
【氏名又は名称】蘇州哲磁医薬科技有限公司
(71)【出願人】
【識別番号】522438596
【氏名又は名称】南方医科大学
【氏名又は名称原語表記】ＳＯＵＴＨＥＲＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． １０２３， Ｓｈａｔａｉ Ｓｏｕｔｈ Ｒｏａｄ， Ｂａｉｙｕｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０５１５ Ｃｈｉｎａ
(74)【代理人】
【識別番号】110004163
【氏名又は名称】弁理士法人みなとみらい特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】瀋 折玉
(72)【発明者】
【氏名】盧 旋▲イ▼
【テーマコード（参考）】
4C085
4C096
4G002
5E040
【Ｆターム（参考）】
4C085HH07
4C085JJ20
4C085KB08
4C085KB75
4C085KB76
4C085KB79
4C096AA03
4C096AA11
4C096FC14
4G002AA04
4G002AB02
4G002AB05
4G002AD04
4G002AE02
5E040AB02
5E040BB03
5E040BC05
5E040CA20
5E040HB17
5E040NN06
5E040NN15
(57)【要約】
本発明は、磁性四酸化三鉄ナノ粒子、その製造方法、及び使用を開示する。前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子は、四酸化三鉄と親水性高分子を含有し、前記四酸化三鉄と親水性高分子は互いに、（１）前記親水性高分子は四酸化三鉄の表面に吸着されていること、及び（２）前記四酸化三鉄及び親水性高分子は互いに包埋又は吸蔵されていること、のうちの少なくとも１つの関係で存在する。本発明は、親水性高分子を安定化剤として、二価鉄イオン及び三価鉄イオンを共沈させて磁性四酸化三鉄ナノ粒子を形成するものであり、この磁性四酸化三鉄ナノ粒子は、縦磁気緩和率ｒ１が高く、横縦磁気緩和率の比（ｒ２／ｒ１）が低く、水溶性が良好で、安定性が高く、良好な生体適合性を有し、Ｔ１－強調磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）造影剤としてＭＲＩのコントラスト及び感度を向上させることができる。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
四酸化三鉄と親水性高分子を含有し、前記四酸化三鉄と親水性高分子は互いに、（１）前記親水性高分子は四酸化三鉄の表面に吸着されていること、及び（２）前記四酸化三鉄及び親水性高分子は互いに包埋又は吸蔵されていること、のうちの少なくとも１つの関係で存在し、１）平均粒子径が２ｎｍよりも大きく５ｎｍ未満であること、
２）ゼータ電位が－１０ｍＶ以下であること、
３）流体力学直径が２０ｎｍ以下であること、
４）３．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が５ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きく、１．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が１０ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きいこと、
のうちの複数の特性を同時に有することを特徴とする、磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項2】
前記親水性高分子は、カルボン酸含有系高分子、アミノ含有系高分子、ヒドロキシ含有系高分子、アミド含有系高分子、及び多糖のうちのいずれか１種又は複数種のコポリマー又は混合物を含むことを特徴とする、請求項１に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項3】
前記カルボン酸含有系高分子は、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリマレイン酸、ポリ（２－エチルアクリル酸）、及びポリエポキシコハク酸のうちのいずれか１種又は複数種を含むことを特徴とする、請求項２に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項4】
前記アミノ含有系高分子は、ポリリジン、ポリヒスチジン、ポリアルギニン、及びポリジメチルジアリルアンモニウムクロリドのうちのいずれか１種又は複数種を含むことを特徴とする、請求項２に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項5】
前記ヒドロキシ含有系高分子は、ポリセリン、ポリスレオニン、ポリチロシン、及びタンニン酸のうちのいずれか１種又は複数種を含むことを特徴とする、請求項２に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項6】
前記アミド含有系高分子は、ポリグルタミン、ポリアスパラギン、ポリアクリルアミド、及びポリメタクリルアミドのうちのいずれか１種又は複数種を含むことを特徴とする、請求項２に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項7】
前記多糖は、ヒアルロン酸及びアルギン酸ナトリウムのうちの１種又は２種を含むことを特徴とする、請求項２に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子。
【請求項8】
親水性高分子を安定化剤として、二価鉄イオン及び三価鉄イオンを共沈させて前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子を形成するステップを含むことを特徴とする、請求項１～７のいずれか１項に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造方法。
【請求項9】
親水性高分子溶液を加熱し、その後、前記親水性高分子溶液と二価鉄イオン及び三価鉄イオンを含有する鉄イオン混合溶液とを混合し、配位反応を行った後、アルカリ液を加えて共沈反応を行い、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子を得るステップを含むことを特徴とする、請求項８に記載の製造方法。
【請求項10】
磁気共鳴画像形成用造影剤の製造における請求項１～７のいずれか１項に記載の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の使用。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、生物医薬材料の技術分野に関し、特に、磁性四酸化三鉄ナノ粒子、その製造方法、及び使用に関する。
【背景技術】
【0002】
磁気共鳴画像形成（ＭＲＩ）は、軟部組織に対して比較的に良い画像形成効果があり、病巣と健康組織を有効に区別することができ、臨床診断において広く利用されている。ＭＲＩ造影剤は、ＭＲＩのコントラスト及び感度を向上させることができ、現在４０％超のＭＲＩ臨床診断に造影剤が使用され、ＭＲＩ造影剤は、磁気共鳴画像形成の重要な部分になっている。ＭＲＩ造影剤は、水素プロトンと反応し、プロトンの縦緩和時間（Ｔ１）又は横緩和時間（Ｔ２）を短縮することができる。ＭＲＩ造影剤は、その造影効果からＴ１－強調ＭＲＩ造影剤（陽性造影剤）とＴ２－強調ＭＲＩ造影剤（陰性造影剤）の２種類に分けることができる。Ｔ１－強調ＭＲＩ造影剤（陽性造影剤）は、明るい信号を発生させることができ、Ｔ２－強調ＭＲＩ造影剤（陰性造影剤）は、暗信号を発生させることができる。Ｔ２造影剤と比較して、Ｔ１造影剤は、明るい信号を発生できるので、臨床医師による病巣診断により有利であるため、臨床で使用されるのはほとんどＴ１造影剤である。
ｒ１値及びｒ２／ｒ１比の値は、ＭＲＩ造影剤の造影効果を表すための２つの重要なパラメータであり、Ｔ１造影剤は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低いほどよく、同様に、Ｔ２造影剤は、ｒ２値が高く、ｒ２／ｒ１比が高いほどよい。通常、Ｔ１造影剤は、ガドリニウム系造影剤であり、Ｔ２造影剤は、鉄系造影剤であり、臨床で使用されるＴ１造影剤は、主に小分子薬物であるガドリニウム系キレートであり、マグネビスト（Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（登録商標））、ガダビスト（Ｇａｄａｖｉｓｔ（登録商標））、ドータレム（登録商標）（Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標））、オムニスカン（登録商標）（Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））、バソビスト（登録商標）（Ｖａｓｏｖｉｓｔ（登録商標））などを含む。米国ＦＤＡはガドリニウム系臨床医療用造影剤に対して警告を出しており、それは脳沈着と腎毒性があり、臨床応用に一定のリスクが存在する。
ｒ１値及びｒ２／ｒ１比の値は、ＭＲＩ造影剤の造影効果を表すための２つの重要なパラメータであり、Ｔ１造影剤は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低いほどよく、同様に、Ｔ２造影剤は、ｒ２値が高く、ｒ２／ｒ１比が高いほどよい。通常、Ｔ１造影剤は、ガドリニウム系造影剤であり、Ｔ２造影剤は、鉄系造影剤であり、臨床で使用されるＴ１造影剤は、主に小分子薬物であるガドリニウム系キレートであり、マグネビスト（Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（登録商標））、ガダビスト（Ｇａｄａｖｉｓｔ（登録商標））、ドータレム（登録商標）（Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標））、オムニスカン（登録商標）（Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））、バソビスト（登録商標）（Ｖａｓｏｖｉｓｔ（登録商標））などを含む。米国ＦＤＡはガドリニウム系臨床医療用造影剤に対して警告を出しており、それは脳沈着と腎毒性があり、臨床応用に一定のリスクが存在する。
【0003】
鉄元素は、人体の必須元素の１つであり、四酸化三鉄は、極めて良好な生体適合性を有しており、ガドリニウム系キレートよりもＭＲＩ造影剤として臨床診断に使用する方が安全で信頼性が高い。しかし、四酸化三鉄は主にＴ２造影剤として存在し、暗信号を発生させる特徴は臨床応用に深刻な影響を与える。四酸化三鉄のｒ２値は粒子径と正の相関を示し、粒子径が大きくなるにつれて四酸化三鉄の飽和磁化（Ｍｚ）も大きくなり、ｒ２値も大きくなった。一方、粒子径が５ｎｍ以下の四酸化三鉄（磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＥＳ－ＭＩＯＮ））は飽和磁化が明らかに低下し、ｒ２値が低く、Ｔ１造影剤として用いることができる。そのため、高いｒ１値と低いｒ２値を持つ粒子径５ｎｍ未満の磁性四酸化三鉄ナノ粒子は、安全で信頼性があり、また良好な画像形成効果を持つＴ１造影剤として臨床診断に応用されることが期待される。ＰＶＡ（ポリビニルアルコール）などのポリマーを利用して粒子径が５ｎｍ以下の四酸化三鉄を製造する関連技術があり、この四酸化三鉄は、Ｔ１造影剤の特徴を示すが、分散性が悪く、画像形成効果が限られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
本発明は、従来技術に存在する技術的課題の少なくとも１つを解決することを目的とする。このため、本発明は、高いｒ１値と低いｒ２／ｒ１比の値を持ち、水溶性が良好で、安定性が高く、良好な生体適合性を有する、磁性四酸化三鉄ナノ粒子を提案する。
【0005】
本発明はまた、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造方法、及び使用を提供する。
【課題を解決するための手段】
【0006】
具体的には、本発明が採用する技術案は、以下の通りである。
【0007】
本発明の第１態様は、
四酸化三鉄と親水性高分子を含有し、前記四酸化三鉄と親水性高分子は互いに、（１）前記親水性高分子は四酸化三鉄の表面に吸着されていること、及び（２）前記四酸化三鉄及び親水性高分子は互いに包埋又は吸蔵されていること、のうちの少なくとも１つの関係で存在し、
１）平均粒子径が２ｎｍよりも大きく５ｎｍ未満であること、
２）ゼータ電位が－１０ｍＶ以下であること、
３）流体力学直径が２０ｎｍ以下であること、
４）３．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が５ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きく、１．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が１０ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きいこと、
のうちの複数の特性を同時に有する、磁性四酸化三鉄ナノ粒子を提供する。
四酸化三鉄と親水性高分子を含有し、前記四酸化三鉄と親水性高分子は互いに、（１）前記親水性高分子は四酸化三鉄の表面に吸着されていること、及び（２）前記四酸化三鉄及び親水性高分子は互いに包埋又は吸蔵されていること、のうちの少なくとも１つの関係で存在し、
１）平均粒子径が２ｎｍよりも大きく５ｎｍ未満であること、
２）ゼータ電位が－１０ｍＶ以下であること、
３）流体力学直径が２０ｎｍ以下であること、
４）３．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が５ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きく、１．０Ｔ磁界強度での縦磁気緩和率ｒ１の値が１０ｍＭ－１ ｓ－１よりも大きいこと、
のうちの複数の特性を同時に有する、磁性四酸化三鉄ナノ粒子を提供する。
【0008】
本発明の第１態様に係る磁性四酸化三鉄ナノ粒子によれば、少なくとも以下の有益な効果を有する。
【0009】
本発明は、親水性高分子を安定化剤として、表面吸着、相互包埋又は吸蔵の方式によって四酸化三鉄と磁性四酸化三鉄ナノ粒子（共沈法により合成可能）を形成するものであり、この磁性四酸化三鉄ナノ粒子は、水溶性ナノ薬物で、関連技術において既存の四酸化三鉄を高分子で表面修飾したものや油相法により合成された四酸化三鉄と比べ、水溶性がより良好で、安定性がより高くなり、ｒ１値を大きくし、ｒ２／ｒ１比の値を小さくすることができ、安全で確実なＴ１造影剤として有用である。
【0010】
本発明のいくつかの実施形態では、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子のＺｅｔａ電位は－３０ｍＶ以下、好ましくは、－３５ｍＶ以下、より好ましくは、－６０～－３５ｍＶである。
【0011】
本発明のいくつかの実施形態では、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子の流体力学直径は２０ｎｍ以下、好ましくは、１５ｎｍ以下である。
【0012】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子は、カルボン酸含有系高分子、アミノ含有系高分子、ヒドロキシ含有系高分子、アミド含有系高分子、及び多糖のうちのいずれか１種又は複数種のコポリマー又は混合物を含む。
【0013】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子は、分子量が１０００～１００００であり、具体的な状況に応じて適宜選択してもよい。
【0014】
本発明のいくつかの実施形態では、前記カルボン酸含有系高分子は、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリマレイン酸、ポリ（２－エチルアクリル酸）、及びポリエポキシコハク酸のうちのいずれか１種又は複数種を含む。
【0015】
本発明のいくつかの実施形態では、前記アミノ含有系高分子は、ポリリジン、ポリヒスチジン、ポリアルギニン、及びポリジメチルジアリルアンモニウムクロリドのうちのいずれか１種又は複数種を含む。
【0016】
本発明のいくつかの実施形態では、前記ヒドロキシ含有系高分子は、ポリセリン、ポリスレオニン、ポリチロシン、及びタンニン酸のうちのいずれか１種又は複数種を含む。
【0017】
本発明のいくつかの実施形態では、前記アミド含有系高分子は、ポリグルタミン、ポリアスパラギン、ポリアクリルアミド、及びポリメタクリルアミドのうちのいずれか１種又は複数種を含む。
【0018】
本発明のいくつかの実施形態では、前記多糖は、ヒアルロン酸及びアルギン酸ナトリウムのうちの１種又は２種を含む。
【0019】
本発明の第２態様は、
親水性高分子を安定化剤として、二価鉄イオン及び三価鉄イオンを共沈させて磁性四酸化三鉄ナノ粒子を形成するステップを含む、上記の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造方法を提供する。
親水性高分子を安定化剤として、二価鉄イオン及び三価鉄イオンを共沈させて磁性四酸化三鉄ナノ粒子を形成するステップを含む、上記の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造方法を提供する。
【0020】
共沈後、二価鉄イオン及び三価鉄イオンは反応を起こして四酸化三鉄を形成し、四酸化三鉄及び親水性高分子は、表面吸着、相互包埋又は吸蔵の方式によって磁性四酸化三鉄ナノ粒子を形成する。
【0021】
より具体的には、親水性高分子を安定化剤として、二価鉄イオン及び三価鉄イオンを親水性高分子と配位反応させてから、アルカリ液を加えて共沈反応を行い、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子を得る。
【0022】
本発明のいくつかの実施形態では、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造方法は、
親水性高分子溶液を加熱し、その後、前記親水性高分子溶液と二価鉄イオン及び三価鉄イオンを含有する鉄イオン混合溶液とを混合し、配位反応を行った後、アルカリ液を加えて共沈反応を行い、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子を得るステップを含む。
親水性高分子溶液を加熱し、その後、前記親水性高分子溶液と二価鉄イオン及び三価鉄イオンを含有する鉄イオン混合溶液とを混合し、配位反応を行った後、アルカリ液を加えて共沈反応を行い、前記磁性四酸化三鉄ナノ粒子を得るステップを含む。
【0023】
本発明のいくつかの実施形態では、前記鉄イオン混合溶液において、二価鉄イオンの濃度は、３０～５００ｍＭ、好ましくは、５０～２５０ｍＭ、より好ましくは、１５０～２５０ｍＭ、さらに好ましくは、２００～２５０ｍＭであり、前記三価鉄イオンの濃度は、６０～１０００ｍＭ、好ましくは、１００～５００ｍＭ、より好ましくは、３００～５００ｍＭ、さらに好ましくは、３５０～５００ｍＭである。
【0024】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子溶液の濃度は、０．１～２０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、０．５～５ｍｇ／ｍＬである。
【0025】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子溶液と鉄イオン混合溶液との体積の比は、１～５００：１、好ましくは、１０～５０：１である。
【0026】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子溶液及び鉄イオン混合溶液は、いずれも水溶液である。
【0027】
本発明のいくつかの実施形態では、前記二価鉄イオンは、水溶性二価鉄塩を加水分解することにより得られ、前記水溶性二価鉄塩は、塩化第一鉄、硝酸第一鉄、臭化第一鉄、及び硫酸第一鉄のうちのいずれか１種又は２種以上を含み、好ましくは、硫酸第一鉄である。
【0028】
本発明のいくつかの実施形態では、前記三価鉄イオンは、水溶性三価鉄塩を加水分解することにより得られ、前記水溶性三価鉄塩は、塩化鉄、硝酸鉄、臭化鉄、及び硫酸鉄のうちのいずれか１種又は２種以上を含み、好ましくは、塩化鉄である。
【0029】
本発明のいくつかの実施形態では、前記アルカリのｐＨは、１０～１２、好ましくは、１１．５である。鉄イオン混合溶液と親水性高分子溶液との混合溶液にアルカリを加えた後、反応系のｐＨは、８～１０、好ましくは、９．５である。
【0030】
本発明のいくつかの実施形態では、前記アルカリ液は、水酸化ナトリウム及びその水溶液、水酸化カリウム及びその水溶液、アンモニア水のうちの少なくとも１種を含み、好ましくは、アンモニア水である。好ましくは、前記アンモニア水の質量濃度は、０．５％～５％、好ましくは、１％～４％である。
【0031】
本発明のいくつかの実施形態では、前記アルカリは、溶液の形態であり、前記アルカリと親水性高分子溶液との体積の比は、１：２～１０、好ましくは、１：４～６である。
【0032】
本発明のいくつかの実施形態では、前記親水性高分子溶液を加熱する温度及び共沈反応の温度は、それぞれ独立に、２５～１００℃、好ましくは、１００℃である。
【0033】
本発明のいくつかの実施形態では、前記共沈反応の時間は、５ｍｉｎよりも長く、好ましくは、４０～１００ｍｉｎである。
【0034】
本発明の第３態様は、ＭＲＩ造影剤の製造における上記の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の使用を提供する。
【0035】
本発明のいくつかの実施形態では、前記ＭＲＩ造影剤は、縦緩和造影剤（Ｔ１造影剤）である。
【発明の効果】
【0036】
従来技術と比べて、本発明は、下記有益な効果を有する。
【0037】
本発明の磁性四酸化三鉄ナノ粒子は、ｒ１値が高く（＞５ｍＭ－１ ｓ－１、３．０Ｔ；＞１０ｍＭ－１ ｓ－１、１．０Ｔ）、ｒ２／ｒ１比の値（＜１３．０、３．０Ｔ）が低く、臨床医療用ガドリニウム系キレート造影剤に匹敵する。鉄系ＭＲＩ造影剤である本発明は、親水性高分子を安定化剤として共沈法により合成されるもので、画像形成効果がよく、信号対雑音比が低く、水溶性が良好で、安定性に優れ、流体力学直径が小さく、血液循環に有利であり、しかも、本発明で使用される親水性高分子は生分解性であるので、臨床医療用ガドリニウム系キレート造影剤よりも、生体適合性や安全性により優れる。
【図面の簡単な説明】
【0038】
【図1】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の透過型電子顕微鏡像及び粒子径分布図である。
【図2】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の流体力学直径及びＺｅｔａ電位を示す図である。
【図3】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＭＲＩ緩和率図である。
【図4】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の飽和磁化図である。
【図5】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＸ線エネルギースペクトル及びＸ線回折パターンである。
【図6】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の赤外線吸収スペクトルである。
【図7】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６及び純水のＴ１－強調ＭＲＩ画像形成画像、並びにそれに対応するＭＲＩ信号強度である。
【図8】実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６が担癌マウスの体内に注射された場合のＭＲＩ画像形成画像である。
【図9】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の透過型電子顕微鏡像である。
【図10】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の流体力学直径及びＺｅｔａ電位を示す図である。
【図11】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＭＲＩ緩和率図である。
【図12】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＸ線回折パターン、及びＸ線エネルギースペクトルである。
【図13】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＴ１－強調ＭＲＩ画像形成画像、及びそれに対するＭＲＩ信号強度である。
【図14】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の赤外線吸収スペクトルである。
【図15】実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９が担癌マウスの体内に注射された場合のＭＲＩ画像形成画像である。
【図16】実施例３におけるＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図17】実施例４におけるＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図18】実施例５におけるＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図19】実施例６におけるε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図20】実施例７におけるＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図21】実施例８におけるＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図22】実施例９におけるＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図23】実施例１０におけるＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図24】実施例１１におけるＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図25】実施例１２におけるＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図26】実施例１３におけるＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図27】実施例１４におけるＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図28】実施例１５におけるＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図29】実施例１６におけるＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図30】実施例１７におけるＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図31】実施例１８におけるＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図32】実施例１９におけるＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図33】実施例２０におけるγ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【図34】実施例２１におけるＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮのＭＲＩ緩和率図である。
【発明を実施するための形態】
【0039】
以下に、具体的な実施例を参照して、本発明の技術案をさらに説明する。以下の実施例で使用される原料は、特に断らない限り、通常の商業的経路から入手することができる。採用されるプロセスは、特に断らない場合は、いずれも当該分野の通常の技術を採用する。
実施例１
実施例１
【0040】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
ポリグルタミン酸γ－ＰＧＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコにＦｅＳＯ４とＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。ポリグルタミン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度、並びに対応するサンプルを表１に示す。
実施例１のサンプルについて物性の特性評価を行った。実施例１のサンプルについて算出した鉄回収率は９６％であり、原材料の利用率が高く、効果的なコストダウンが図られることを示した。実施例１のサンプル、市販品のＧａｄａｖｉｓｔ、及びＭａｇｎｅｖｉｓｔをそれぞれ６個の異なる濃度の水溶液に調製し、１．０Ｔ、臨床医療用３．０Ｔ、及び７．０Ｔ ＭＲＩシステムにおいて生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２を得て、下記式（ｃは、造影剤中の磁性物質の濃度、Ｔｉは緩和時間であり、ここでｉ＝１又は２）によって、縦磁気緩和率ｒ１及び横磁気緩和率ｒ２を算出し、その結果を表１に示す。
具体的には、図１は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の透過型電子顕微鏡像（ＴＥＭ）及び粒子径分布図である。図１（ａ）の電子顕微鏡像から明らかに、ナノ粒子は、サイズが均一で、均一に分散している。図１（ａ）から１００個のナノ粒子をランダムに選択して、これらの粒子径分布を統計し、図１（ｂ）の分布図を得るが、分布図から明らかに、サンプルの粒子径が主に３．５ｎｍ程度である。サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６は、平均粒子径が５ｎｍ未満であり、この粒子径からは、Ｔ１造影剤になることが期待できる。図２は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の流体力学直径及びＺｅｔａ電位を示す図であり、流体力学直径は８．７ｎｍであり、分散係数（ＰＤＩ）は０．２６５であり、このことから、分散性が良好であることを明らかにした。サンプルのＺｅｔａ電位は－３７．３ｍＶであり、サンプルの水相分散性は電荷の反発により向上することができ、サンプルの血液循環に有利である。
ポリグルタミン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度がサンプルのＭＲＩ性能に大きな影響を与え、様々な合成条件では、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６は、総合的なＭＲＩ性能が最も良好である。図３は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＭＲＩ緩和率図（γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－１、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－２、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）であり、フィッティング直線の傾きが対応する磁気緩和率である。図３（ａ）又は（ｂ）から分かるように、フィッティング直線の線形適合度はすべて０．９９９以上であり、このことから、サンプルは極めて優れた線形関係を有し、緩和時間がサンプル濃度の変化に応じて線形変化することが示唆された。
表１は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ１－８の様々な磁界強度（７．０Ｔ、３．０Ｔ又は１．０Ｔ）でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示し、また、市販品のＧａｄａｖｉｓｔ及びＭａｇｎｅｖｉｓｔの３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示す。実施例１では、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値が５．７ｍＭ－１ ｓ－１であり、市販品のｒ１値４．６ｍＭ－１ ｓ－１よりも高く、このことから、優れた磁気共鳴画像形成能力が示唆された。図４は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の飽和磁化図であり、図から明らかに、実施例１のサンプルは、常磁性で、磁性四酸化三鉄ナノ粒子の性質と一致する。飽和磁化の大きさは粒子径の大きさと正の相関を有し、図から明らかに、実施例１におけるサンプルの飽和磁化は、１６ｅｍｕ／ｇであり、図１の電子顕微鏡像に示される５ｎｍ未満の粒子径に対応する。造影剤のｒ２値の大きさは、飽和磁化と正の相関を有し、小さな飽和磁化は小さなｒ２値に対応し、これは、表１に示される小さなｒ２値に対応する。
図５は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＸ線エネルギースペクトル、及びＸ線回折パターンである。図５（ａ）のＸＰＳパターンでは、７１１．６ｅＶ及び７２５．１ｅＶを中心とするピークは、それぞれ、Ｆｅ２＋２ｐ及びＦｅ３＋２ｐの結合エネルギーに対応し、三価鉄及び二価鉄の両方の存在が示唆され、実施例１のサンプルが四酸化三鉄であることが実証された。図５（ｂ）のＸＲＤパターンでは、２つの特徴的なピーク（２θ≒３５．６°及び２θ≒６２．９°）は、四酸化三鉄結晶層［（３１１）及び（４４０）］に対応し、実施例１におけるサンプルが結晶構造の四酸化三鉄であることが実証された。ＸＲＤパターン及びＸＰＳパターンの両方により、実施例１の四酸化三鉄の製造が成功したことが実証され、また、図１の電子顕微鏡像から、実施例１の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造が成功したことが実証された。
図６は、実施例１で製造されたγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の赤外線吸収スペクトルであり、γ－ＰＧＡ赤外線吸収曲線、及びγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６赤外線吸収曲線のいずれにも、－ＣＨ２－曲げ振動ピークである吸収ピークａ（１４０４ ｃｍ－１）が現れ、このことから、サンプル中のγ－ＰＧＡの存在が実証された。さらに、Ｆｅ－Ｏの伸縮振動ピークである吸収ピークｂ及びｃがγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６赤外線吸収曲線に現れたが、γ－ＰＧＡ赤外線吸収曲線には現れず、これによっても、磁性四酸化三鉄ナノ粒子γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の製造が成功したことがさらに実証された。
図７は、実施例１における様々な濃度のγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６水溶液のＴ１－強調磁気共鳴画像法による画像、及びそれに対応するＭＲＩ信号強度である。磁界強度は３．０Ｔ、スキャンパラメータは、ＴＥ＝８．６ｍｓ、ＴＲ＝５００ｍｓである。図７（ａ）のＭＲＩ画像から明らかに、純水（鉄濃度０）と比較して、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６を含有する水溶液のＭＲＩ信号は顕著に増強しており、また、サンプル濃度の上昇に応じて勾配的に増強する傾向がある。図７（ｂ）から明らかに、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６溶液中の鉄の濃度が２００μＭである場合、ＭＲＩの信号対雑音比（△ＳＮＲ）は２４０％であり、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６がＭＲＩのコントラスト及び感度を顕著に向上できることが示唆され、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の良好な磁気共鳴画像形成性能が示された。
図８は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６が担癌マウスの体内に注射量５ｍｇ／ｋｇで注射された場合のＭＲＩ画像である。マウスにサンプルを尾静脈注射する前、尾静脈注射後の０ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ及び８ｈに７．０Ｔ磁気共鳴画像形成を行った。図から明らかに、サンプル注射時間が経るに伴い、腫瘍のＭＲＩ信号は、増強してから低下する傾向を示し、注射後３ｈにＭＲＩ信号は最も強かった。生体内画像形成の結果からは、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６がマウス腫瘍に対して良好な磁気共鳴画像形成効果を有することが明らかにされた。
実施例２
ポリグルタミン酸γ－ＰＧＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコにＦｅＳＯ４とＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。ポリグルタミン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度、並びに対応するサンプルを表１に示す。
実施例１のサンプルについて物性の特性評価を行った。実施例１のサンプルについて算出した鉄回収率は９６％であり、原材料の利用率が高く、効果的なコストダウンが図られることを示した。実施例１のサンプル、市販品のＧａｄａｖｉｓｔ、及びＭａｇｎｅｖｉｓｔをそれぞれ６個の異なる濃度の水溶液に調製し、１．０Ｔ、臨床医療用３．０Ｔ、及び７．０Ｔ ＭＲＩシステムにおいて生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２を得て、下記式（ｃは、造影剤中の磁性物質の濃度、Ｔｉは緩和時間であり、ここでｉ＝１又は２）によって、縦磁気緩和率ｒ１及び横磁気緩和率ｒ２を算出し、その結果を表１に示す。
【表1】
ポリグルタミン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度がサンプルのＭＲＩ性能に大きな影響を与え、様々な合成条件では、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６は、総合的なＭＲＩ性能が最も良好である。図３は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＭＲＩ緩和率図（γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－１、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－２、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）であり、フィッティング直線の傾きが対応する磁気緩和率である。図３（ａ）又は（ｂ）から分かるように、フィッティング直線の線形適合度はすべて０．９９９以上であり、このことから、サンプルは極めて優れた線形関係を有し、緩和時間がサンプル濃度の変化に応じて線形変化することが示唆された。
表１は、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ１－８の様々な磁界強度（７．０Ｔ、３．０Ｔ又は１．０Ｔ）でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示し、また、市販品のＧａｄａｖｉｓｔ及びＭａｇｎｅｖｉｓｔの３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示す。実施例１では、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値が５．７ｍＭ－１ ｓ－１であり、市販品のｒ１値４．６ｍＭ－１ ｓ－１よりも高く、このことから、優れた磁気共鳴画像形成能力が示唆された。図４は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の飽和磁化図であり、図から明らかに、実施例１のサンプルは、常磁性で、磁性四酸化三鉄ナノ粒子の性質と一致する。飽和磁化の大きさは粒子径の大きさと正の相関を有し、図から明らかに、実施例１におけるサンプルの飽和磁化は、１６ｅｍｕ／ｇであり、図１の電子顕微鏡像に示される５ｎｍ未満の粒子径に対応する。造影剤のｒ２値の大きさは、飽和磁化と正の相関を有し、小さな飽和磁化は小さなｒ２値に対応し、これは、表１に示される小さなｒ２値に対応する。
図５は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６のＸ線エネルギースペクトル、及びＸ線回折パターンである。図５（ａ）のＸＰＳパターンでは、７１１．６ｅＶ及び７２５．１ｅＶを中心とするピークは、それぞれ、Ｆｅ２＋２ｐ及びＦｅ３＋２ｐの結合エネルギーに対応し、三価鉄及び二価鉄の両方の存在が示唆され、実施例１のサンプルが四酸化三鉄であることが実証された。図５（ｂ）のＸＲＤパターンでは、２つの特徴的なピーク（２θ≒３５．６°及び２θ≒６２．９°）は、四酸化三鉄結晶層［（３１１）及び（４４０）］に対応し、実施例１におけるサンプルが結晶構造の四酸化三鉄であることが実証された。ＸＲＤパターン及びＸＰＳパターンの両方により、実施例１の四酸化三鉄の製造が成功したことが実証され、また、図１の電子顕微鏡像から、実施例１の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造が成功したことが実証された。
図６は、実施例１で製造されたγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の赤外線吸収スペクトルであり、γ－ＰＧＡ赤外線吸収曲線、及びγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６赤外線吸収曲線のいずれにも、－ＣＨ２－曲げ振動ピークである吸収ピークａ（１４０４ ｃｍ－１）が現れ、このことから、サンプル中のγ－ＰＧＡの存在が実証された。さらに、Ｆｅ－Ｏの伸縮振動ピークである吸収ピークｂ及びｃがγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６赤外線吸収曲線に現れたが、γ－ＰＧＡ赤外線吸収曲線には現れず、これによっても、磁性四酸化三鉄ナノ粒子γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の製造が成功したことがさらに実証された。
図７は、実施例１における様々な濃度のγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６水溶液のＴ１－強調磁気共鳴画像法による画像、及びそれに対応するＭＲＩ信号強度である。磁界強度は３．０Ｔ、スキャンパラメータは、ＴＥ＝８．６ｍｓ、ＴＲ＝５００ｍｓである。図７（ａ）のＭＲＩ画像から明らかに、純水（鉄濃度０）と比較して、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６を含有する水溶液のＭＲＩ信号は顕著に増強しており、また、サンプル濃度の上昇に応じて勾配的に増強する傾向がある。図７（ｂ）から明らかに、γ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６溶液中の鉄の濃度が２００μＭである場合、ＭＲＩの信号対雑音比（△ＳＮＲ）は２４０％であり、サンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６がＭＲＩのコントラスト及び感度を顕著に向上できることが示唆され、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６の良好な磁気共鳴画像形成性能が示された。
図８は、実施例１におけるγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６が担癌マウスの体内に注射量５ｍｇ／ｋｇで注射された場合のＭＲＩ画像である。マウスにサンプルを尾静脈注射する前、尾静脈注射後の０ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ及び８ｈに７．０Ｔ磁気共鳴画像形成を行った。図から明らかに、サンプル注射時間が経るに伴い、腫瘍のＭＲＩ信号は、増強してから低下する傾向を示し、注射後３ｈにＭＲＩ信号は最も強かった。生体内画像形成の結果からは、実施例１におけるサンプルγ－ＰＧＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ６がマウス腫瘍に対して良好な磁気共鳴画像形成効果を有することが明らかにされた。
実施例２
【0041】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（Ｍｗ＝７０００－８０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコにＦｅＳＯ４とＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。ポリアスパラギン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度、並びに対応するサンプルを表２に示す。
実施例２のサンプルについて物性の特性評価を行った。実施例２のサンプルについて算出した鉄回収率は８９．６％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、臨床医療用３．０Ｔ ＭＲＩシステムにおいて生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２を得て、縦磁気緩和率ｒ１及び横磁気緩和率ｒ２を計算し、その結果を表２に示す。
図９は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の透過型電子顕微鏡像及び粒子径分布図である。図９（ａ）の電子顕微鏡像から明らかに、ナノ粒子は、サイズが均一で、均一に分散している。図９（ａ）から１００個のナノ粒子をランダムに選択して、これらの粒子径分布を統計し、図９（ｂ）に示す分布図を得るが、分布図から明らかに、サンプル粒子径が主に２．６～５．０ｎｍの間に分布し、平均粒子径が３．７ｎｍであり、Ｔ１造影剤としての四酸化三鉄の粒子径が５ｎｍ未満である要件を満たす。図１０は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の流体力学直径及びＺｅｔａ電位を示す図であり、３つのサンプル（ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９－１、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９－２、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９－３）について測定した結果、流体力学直径の平均値は１４．７ｎｍ、ＰＤＩは０．２２４であり、このことから、その分散性が良好であることを明らかにした。サンプルのＺｅｔａ電位は－５０．７ｍＶであり、サンプルの水相分散性は電荷の反発により向上することができ、サンプルの血液循環に有利である。
ポリアスパラギン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度がサンプルのＭＲＩ性能に大きな影響を与え、様々な合成条件では、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９－１０は、総合的なＭＲＩ性能が良好である。ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９を例として、図１１は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＭＲＩ緩和率図である。図１１（ａ）又は（ｂ）から明らかに、フィッティング直線の線形適合度はすべて０．９９以上であり、このことから、サンプルは優れた線形関係を有することが示された。表２は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示す。実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値が７．３ｍＭ－１ ｓ－１であり、表１における市販品Ｇａｄａｖｉｓｔのｒ１値４．６４ｍＭ－１ ｓ－１よりも高かった。さらに、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ２／ｒ１比の値が４．９しかなかった。その結果、実施例２のサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度では、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が極めて低かった。
図１２は、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＸ線エネルギースペクトル、及びＸ線回折パターンである。図１２（ａ）のＸＰＳパターンでは、７１０．３ｅＶ及び７２３．８ｅＶを中心とするピークは、それぞれ、Ｆｅ２＋２ｐ及びＦｅ３＋２ｐの結合エネルギーに対応し、三価鉄及び二価鉄の両方の存在が示唆され、実施例２のサンプルが四酸化三鉄であることが実証された。図１２（ｂ）のＸＲＤパターンでは、２つの特徴的なピーク（２θ≒３５．３°及び２θ≒６２．４°）は、四酸化三鉄結晶層［（３１１）及び（４４０）］に対応し、実施例２におけるサンプルが結晶構造の四酸化三鉄であることが実証された。ＸＲＤＤパターン及びＸＰＳＤパターンの両方により、実施例２の四酸化三鉄の製造が成功したことが実証された、また、図９の電子顕微鏡像から、実施例２の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造が成功したことが実証された。
図１３は、実施例２で製造されたＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の赤外線吸収スペクトルであり、ＰＡＳＰ赤外線吸収曲線、及びＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９赤外線吸収曲線のいずれにも、－ＣＯＯ－伸縮振動ピークである吸収ピークａ（１４００ｃｍ－１）が現れ、このことから、サンプル中のＰＡＳＰの存在が実証された。さらに、Ｆｅ－Ｏの伸縮振動ピークである吸収ピークｂは、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９赤外線吸収曲線に現れたが、ＰＡＳＰ赤外線吸収曲線には現れず、これによっても、磁性四酸化三鉄ナノ粒子ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の製造が成功したことがさらに実証された。
図１４は、実施例２における様々な濃度のＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９水溶液のＴ１－強調ＭＲＩ画像、及びそれに対応するＭＲＩ信号強度である。磁界強度は３．０Ｔ、スキャンパラメータは、ＴＥ＝８．４ｍｓ、ＴＲ＝２００ｍｓである。（ａ）のＭＲＩ画像から明らかに、純水（鉄濃度０）と比較して、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９を含有する水溶液のＭＲＩ信号は顕著に増強しており、また、サンプル濃度の上昇に応じて勾配的に増強する傾向がある。（ｂ）から明らかに、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９水溶液中の鉄の濃度が１０００μＭである場合、ＭＲＩの△ＳＮＲは１０２５％であり、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９がＭＲＩのコントラスト及び感度を顕著に向上できることが示唆され、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の良好な磁気共鳴画像形成性能が示された。
図１５は、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９が担癌マウスの体内に注射量５ｍｇ／ｋｇで注射された場合のＭＲＩ画像である。マウスにサンプルを尾静脈注射する前、尾静脈注射後の０ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ、及び８ｈに７．０Ｔ磁気共鳴画像形成を行った。図から明らかに、サンプル注射時間が経るに伴い、腫瘍のＭＲＩ信号は、増強してから低下する傾向を示し、注射後３ｈにＭＲＩ信号は最も強かった。体画像形成の結果からは、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９がマウス腫瘍に対して良好な磁気共鳴画像形成効果を有することが明らかにされた。
実施例３
ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（Ｍｗ＝７０００－８０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコにＦｅＳＯ４とＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。ポリアスパラギン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度、並びに対応するサンプルを表２に示す。
実施例２のサンプルについて物性の特性評価を行った。実施例２のサンプルについて算出した鉄回収率は８９．６％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、臨床医療用３．０Ｔ ＭＲＩシステムにおいて生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２を得て、縦磁気緩和率ｒ１及び横磁気緩和率ｒ２を計算し、その結果を表２に示す。
【表2】
ポリアスパラギン酸水溶液、混合水溶液、及びアンモニア水の濃度がサンプルのＭＲＩ性能に大きな影響を与え、様々な合成条件では、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９－１０は、総合的なＭＲＩ性能が良好である。ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９を例として、図１１は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＭＲＩ緩和率図である。図１１（ａ）又は（ｂ）から明らかに、フィッティング直線の線形適合度はすべて０．９９以上であり、このことから、サンプルは優れた線形関係を有することが示された。表２は、実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値、及びｒ２／ｒ１比の値を示す。実施例２におけるサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ１値が７．３ｍＭ－１ ｓ－１であり、表１における市販品Ｇａｄａｖｉｓｔのｒ１値４．６４ｍＭ－１ ｓ－１よりも高かった。さらに、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度でのｒ２／ｒ１比の値が４．９しかなかった。その結果、実施例２のサンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９は、３．０Ｔ磁界強度では、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が極めて低かった。
図１２は、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９のＸ線エネルギースペクトル、及びＸ線回折パターンである。図１２（ａ）のＸＰＳパターンでは、７１０．３ｅＶ及び７２３．８ｅＶを中心とするピークは、それぞれ、Ｆｅ２＋２ｐ及びＦｅ３＋２ｐの結合エネルギーに対応し、三価鉄及び二価鉄の両方の存在が示唆され、実施例２のサンプルが四酸化三鉄であることが実証された。図１２（ｂ）のＸＲＤパターンでは、２つの特徴的なピーク（２θ≒３５．３°及び２θ≒６２．４°）は、四酸化三鉄結晶層［（３１１）及び（４４０）］に対応し、実施例２におけるサンプルが結晶構造の四酸化三鉄であることが実証された。ＸＲＤＤパターン及びＸＰＳＤパターンの両方により、実施例２の四酸化三鉄の製造が成功したことが実証された、また、図９の電子顕微鏡像から、実施例２の磁性四酸化三鉄ナノ粒子の製造が成功したことが実証された。
図１３は、実施例２で製造されたＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の赤外線吸収スペクトルであり、ＰＡＳＰ赤外線吸収曲線、及びＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９赤外線吸収曲線のいずれにも、－ＣＯＯ－伸縮振動ピークである吸収ピークａ（１４００ｃｍ－１）が現れ、このことから、サンプル中のＰＡＳＰの存在が実証された。さらに、Ｆｅ－Ｏの伸縮振動ピークである吸収ピークｂは、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９赤外線吸収曲線に現れたが、ＰＡＳＰ赤外線吸収曲線には現れず、これによっても、磁性四酸化三鉄ナノ粒子ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の製造が成功したことがさらに実証された。
図１４は、実施例２における様々な濃度のＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９水溶液のＴ１－強調ＭＲＩ画像、及びそれに対応するＭＲＩ信号強度である。磁界強度は３．０Ｔ、スキャンパラメータは、ＴＥ＝８．４ｍｓ、ＴＲ＝２００ｍｓである。（ａ）のＭＲＩ画像から明らかに、純水（鉄濃度０）と比較して、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９を含有する水溶液のＭＲＩ信号は顕著に増強しており、また、サンプル濃度の上昇に応じて勾配的に増強する傾向がある。（ｂ）から明らかに、サンプルＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９水溶液中の鉄の濃度が１０００μＭである場合、ＭＲＩの△ＳＮＲは１０２５％であり、ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９がＭＲＩのコントラスト及び感度を顕著に向上できることが示唆され、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９の良好な磁気共鳴画像形成性能が示された。
図１５は、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９が担癌マウスの体内に注射量５ｍｇ／ｋｇで注射された場合のＭＲＩ画像である。マウスにサンプルを尾静脈注射する前、尾静脈注射後の０ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ、及び８ｈに７．０Ｔ磁気共鳴画像形成を行った。図から明らかに、サンプル注射時間が経るに伴い、腫瘍のＭＲＩ信号は、増強してから低下する傾向を示し、注射後３ｈにＭＲＩ信号は最も強かった。体画像形成の結果からは、実施例２におけるＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ９がマウス腫瘍に対して良好な磁気共鳴画像形成効果を有することが明らかにされた。
実施例３
【0042】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリマレイン酸ＨＰＭＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例３のサンプルについて性能試験を行った。実施例３のサンプルについて算出した鉄の回収率は８７．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例３のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１６に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例３のｒ１値は６．９±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は３２．３±１．９ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は４．７±０．４であった。実施例３は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例４
２ｍｇ／ｍＬポリマレイン酸ＨＰＭＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例３のサンプルについて性能試験を行った。実施例３のサンプルについて算出した鉄の回収率は８７．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例３のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＰＭＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１６に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例３のｒ１値は６．９±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は３２．３±１．９ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は４．７±０．４であった。実施例３は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例４
【0043】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリ（２－エチルアクリル酸）ＰＥＡＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例４のサンプルについて性能試験を行った。実施例４のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．１％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例４のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１７に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例４のｒ１値は７．８±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は１９．８±１．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は２．５±０．３であった。その結果、実施例４は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例５
２ｍｇ／ｍＬポリ（２－エチルアクリル酸）ＰＥＡＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例４のサンプルについて性能試験を行った。実施例４のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．１％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例４のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＥＡＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１７に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例４のｒ１値は７．８±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は１９．８±１．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は２．５±０．３であった。その結果、実施例４は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例５
【0044】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリエポキシコハク酸ＰＥＳＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例５のサンプルについて性能試験を行った。実施例５のサンプルについて算出した鉄の回収率は９３．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例５のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１８に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例５のｒ１値は７．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は２６．１±２．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は３．６±０．３であった。その結果、実施例５は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例６
２ｍｇ／ｍＬポリエポキシコハク酸ＰＥＳＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例５のサンプルについて性能試験を行った。実施例５のサンプルについて算出した鉄の回収率は９３．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例５のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＥＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１８に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例５のｒ１値は７．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は２６．１±２．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は３．６±０．３であった。その結果、実施例５は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例６
【0045】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリリジンε－ＰＬ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例６のサンプルについて性能試験を行った。実施例６のサンプルについて算出した鉄の回収率は８２．６％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例６のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１９に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例６のｒ１値は６．２±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は３２．５±３．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は５．３±０．９であった。その結果、実施例６は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が高く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例７
２ｍｇ／ｍＬポリリジンε－ＰＬ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例６のサンプルについて性能試験を行った。実施例６のサンプルについて算出した鉄の回収率は８２．６％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例６のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ε－ＰＬ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図１９に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例６のｒ１値は６．２±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は３２．５±３．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は５．３±０．９であった。その結果、実施例６は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が高く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例７
【0046】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリヒスチジンＰＬＨ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例７のサンプルについて性能試験を行った。実施例７のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例７のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２０に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例７のｒ１値は５．７±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は４６．６±７．０ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．３±１．５であった。その結果、実施例７は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が高く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例８
２ｍｇ／ｍＬポリヒスチジンＰＬＨ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例７のサンプルについて性能試験を行った。実施例７のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例７のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＬＨ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２０に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例７のｒ１値は５．７±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は４６．６±７．０ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．３±１．５であった。その結果、実施例７は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が高く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例８
【0047】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリアルギニンＰＬＲ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例８のサンプルについて性能試験を行った。実施例８のサンプルについて算出した鉄の回収率は８３．９％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例８のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２１に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例８のｒ１値は５．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５５．０±９．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１０．６±１．８であった。その結果、実施例８は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例９
２ｍｇ／ｍＬポリアルギニンＰＬＲ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例８のサンプルについて性能試験を行った。実施例８のサンプルについて算出した鉄の回収率は８３．９％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例８のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＬＲ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２１に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例８のｒ１値は５．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５５．０±９．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１０．６±１．８であった。その結果、実施例８は、ｒ１値が極めて高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例９
【0048】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリジメチルジアリルアンモニウムクロリドＰＤＤＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例９のサンプルについて性能試験を行った。実施例９のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．４％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例９のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２２に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例９のｒ１値は７．１±０．５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は７０．０±９．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．９±１．８であった。その結果、実施例９は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１０
２ｍｇ／ｍＬポリジメチルジアリルアンモニウムクロリドＰＤＤＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例９のサンプルについて性能試験を行った。実施例９のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．４％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例９のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＤＤＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２２に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例９のｒ１値は７．１±０．５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は７０．０±９．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．９±１．８であった。その結果、実施例９は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１０
【0049】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリセリンＰＳｅｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１０のサンプルについて性能試験を行った。実施例１０のサンプルについて算出した鉄の回収率は８８．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１０のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２３に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１０のｒ１値は５．８±０．２５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は６３．４±８．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１１．０±１．３であった。その結果、実施例１０は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１１
２ｍｇ／ｍＬポリセリンＰＳｅｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１０のサンプルについて性能試験を行った。実施例１０のサンプルについて算出した鉄の回収率は８８．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１０のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＳｅｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２３に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１０のｒ１値は５．８±０．２５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は６３．４±８．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１１．０±１．３であった。その結果、実施例１０は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１１
【0050】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリスレオニンＰＴｈｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１１のサンプルについて性能試験を行った。実施例１１のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１１のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２４に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１１のｒ１値は６．６±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５７．２±２．５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．７±０．８であった。その結果、実施例１１は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１２
２ｍｇ／ｍＬポリスレオニンＰＴｈｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１１のサンプルについて性能試験を行った。実施例１１のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１１のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＴｈｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２４に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１１のｒ１値は６．６±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５７．２±２．５ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．７±０．８であった。その結果、実施例１１は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１２
【0051】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリチロシンＰＴｙｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１２のサンプルについて性能試験を行った。実施例１２のサンプルについて算出した鉄の回収率は８３．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１２のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２５に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１２のｒ１値は６．４±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５９．７±５．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．４±１．２であった。その結果、実施例１２は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１３
２ｍｇ／ｍＬポリチロシンＰＴｙｒ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１２のサンプルについて性能試験を行った。実施例１２のサンプルについて算出した鉄の回収率は８３．２％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１２のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＴｙｒ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２５に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１２のｒ１値は６．４±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５９．７±５．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．４±１．２であった。その結果、実施例１２は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１３
【0052】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬタンニン酸ＴＡ（Ｍｗ＝１７００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１３のサンプルについて性能試験を行った。実施例１３のサンプルについて算出した鉄の回収率は９２．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１３のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２６に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１３のｒ１値は７．３±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５８．９±３．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．１±０．８であった。その結果、実施例１３は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１４
２ｍｇ／ｍＬタンニン酸ＴＡ（Ｍｗ＝１７００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１３のサンプルについて性能試験を行った。実施例１３のサンプルについて算出した鉄の回収率は９２．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１３のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＴＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２６に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１３のｒ１値は７．３±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５８．９±３．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．１±０．８であった。その結果、実施例１３は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１４
【0053】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリグルタミンＰｏｌｙＱ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１４のサンプルについて性能試験を行った。実施例１４のサンプルについて算出した鉄の回収率は８７．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１４のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２７に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１４のｒ１値は７．０±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５６．８±０．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．１±０．３であった。その結果、実施例１４は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１５
２ｍｇ／ｍＬポリグルタミンＰｏｌｙＱ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１４のサンプルについて性能試験を行った。実施例１４のサンプルについて算出した鉄の回収率は８７．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１４のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰｏｌｙＱ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２７に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１４のｒ１値は７．０±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５６．８±０．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．１±０．３であった。その結果、実施例１４は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１５
【0054】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリアスパラギンＰＨＥＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１５のサンプルについて性能試験を行った。実施例１５のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．４％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１５のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２８に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１５のｒ１値は６．９±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は４９．２±７．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は７．２±０．８であった。その結果、実施例１５は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１６
２ｍｇ／ｍＬポリアスパラギンＰＨＥＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１５のサンプルについて性能試験を行った。実施例１５のサンプルについて算出した鉄の回収率は８５．４％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１５のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＨＥＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２８に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１５のｒ１値は６．９±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は４９．２±７．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は７．２±０．８であった。その結果、実施例１５は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１６
【0055】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリアクリルアミドＰＡＭ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１６のサンプルについて性能試験を行った。実施例１６のサンプルについて算出した鉄の回収率は８４．３％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１６のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２９に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１６のｒ１値は７．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５０．２±６．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は６．９±０．９であった。その結果、実施例１６は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１７
２ｍｇ／ｍＬポリアクリルアミドＰＡＭ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１６のサンプルについて性能試験を行った。実施例１６のサンプルについて算出した鉄の回収率は８４．３％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１６のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図２９に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１６のｒ１値は７．２±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５０．２±６．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は６．９±０．９であった。その結果、実施例１６は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１７
【0056】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリメタクリルアミドＰＭＡＭ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１７のサンプルについて性能試験を行った。実施例１７のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１７のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３０に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１７のｒ１値は６．５±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５５．８±４．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．５±０．５であった。その結果、実施例１７は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１８
２ｍｇ／ｍＬポリメタクリルアミドＰＭＡＭ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１７のサンプルについて性能試験を行った。実施例１７のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１７のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＰＭＡＭ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３０に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１７のｒ１値は６．５±０．３ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５５．８±４．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．５±０．５であった。その結果、実施例１７は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１８
【0057】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬヒアルロン酸ＨＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１８のサンプルについて性能試験を行った。実施例１８のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１８のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３１に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１８のｒ１値は６．５±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は７１．８±５．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１１．０±０．６であった。その結果、実施例１８は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１９
２ｍｇ／ｍＬヒアルロン酸ＨＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１８のサンプルについて性能試験を行った。実施例１８のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１８のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３１に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１８のｒ１値は６．５±０．２ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は７１．８±５．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は１１．０±０．６であった。その結果、実施例１８は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例１９
【0058】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬアルギン酸ナトリウムＳＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１９のサンプルについて性能試験を行った。実施例１９のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１９のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３２に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１９のｒ１値は７．０±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５７．２±１０．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．２±１．７であった。その結果、実施例１９は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例２０
２ｍｇ／ｍＬアルギン酸ナトリウムＳＡ（Ｍｗ＝２０００）水溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した後、１００℃で還流まで加熱した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例１９のサンプルについて性能試験を行った。実施例１９のサンプルについて算出した鉄の回収率は８９．５％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例１９のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＳＡ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３２に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例１９のｒ１値は７．０±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は５７．２±１０．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は８．２±１．７であった。その結果、実施例１９は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例２０
【0059】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリグルタミン酸γ－ＰＧＡ／ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（ポリグルタミン酸Ｍｗ＝２０００、ポリアスパラギン酸Ｍｗ＝７０００～８０００）混合物（質量比１：１）溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて加熱して還流し、窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをγ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例２０のサンプルについて性能試験を行った。実施例２０のサンプルについて算出した鉄の回収率は９３．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２０のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３３に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例２０のｒ１値は６．７±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は６３．４±８．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．５±０．７であった。その結果、実施例２０は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例２１
２ｍｇ／ｍＬポリグルタミン酸γ－ＰＧＡ／ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（ポリグルタミン酸Ｍｗ＝２０００、ポリアスパラギン酸Ｍｗ＝７０００～８０００）混合物（質量比１：１）溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて加熱して還流し、窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをγ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例２０のサンプルについて性能試験を行った。実施例２０のサンプルについて算出した鉄の回収率は９３．７％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２０のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、γ－ＰＧＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３３に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例２０のｒ１値は６．７±０．４ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は６３．４±８．７ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は９．５±０．７であった。その結果、実施例２０は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
実施例２１
【0060】
磁性四酸化三鉄ナノ粒子（ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ）の製造
２ｍｇ／ｍＬポリマレイン酸ＨＰＭＡ／ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（ポリマレイン酸Ｍｗ＝２０００、ポリアスパラギン酸Ｍｗ＝７０００～８０００）混合物（質量比１：１）溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて加熱して還流し、窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例２１のサンプルについて性能試験を行った。実施例２１のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．１％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２１のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３４に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例２１のｒ１値は６．４±０．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は２６．１±２．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は４．１±０．４であった。その結果、実施例２１は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
２ｍｇ／ｍＬポリマレイン酸ＨＰＭＡ／ポリアスパラギン酸ＰＡＳＰ（ポリマレイン酸Ｍｗ＝２０００、ポリアスパラギン酸Ｍｗ＝７０００～８０００）混合物（質量比１：１）溶液２０ｍＬを三口フラスコにおいて加熱して還流し、窒素でバブリングして１ｈ脱酸素した。フラスコに０．２５Ｍ ＦｅＳＯ４と０．５Ｍ ＦｅＣｌ３を含む混合水溶液０．４ｍＬを加え、続いて、１％アンモニア水６ｍＬを加えた。１００℃で磁気撹拌しながら１ｈ反応させ、静置して冷却した。反応が完了したサンプルを透析により精製し、最終サンプルをＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮと表記した。
実施例２１のサンプルについて性能試験を行った。実施例２１のサンプルについて算出した鉄の回収率は９０．１％であり、このことから、原材料の利用率が高く、コストダウンが図られることが示された。実施例２１のサンプルを６つの異なる濃度の水溶液に調製し、３．０Ｔ臨床用ＭＲＩシステム（Ｐｈｉｌｉｐｓ、Ｉｎｇｅｎｉａ）において生体外画像形成試験を行い、縦緩和時間Ｔ１及び横緩和時間Ｔ２（ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－１、ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－２、ＨＰＭＡ／ＰＡＳＰ－ＥＳ－ＭＩＯＮ－３の３つのサンプルを用いて平行試験を３回行う。）を得た。図３４に示すように、１／Ｔｉの鉄濃度に伴う変化の関係をプロットし、フィッティング直線の傾きをＴｉ磁気緩和率（ｉ＝１又は２）とした。それによって、３．０Ｔ ＭＲＩシステムでは、実施例２１のｒ１値は６．４±０．１ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２値は２６．１±２．８ｍＭ－１ ｓ－１、ｒ２／ｒ１比の値は４．１±０．４であった。その結果、実施例２１は、ｒ１値が高く、ｒ２／ｒ１比の値が低く、生体適合性が良好なＴ１－強調ＭＲＩ造影剤として有用であることが実証された。
【0061】
上記の実施例は本発明の好ましい実施形態であるが、本発明の実施形態は上記の実施例に限定されるものではなく、本発明の精神的本質及び原理から逸脱することなく行われたいかなる変更、修飾、代替、組み合わせ、簡略化も等価な置換形態であり、本発明の保護範囲内に含まれるものとする。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【国際調査報告】